(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種以上の栄養の栄養上有効量を含む栄養組成物；および
ＧＬＰ−１、エキセンジン、これらの欠失配列、これらの天然および非天然アミノ酸置換体、これらのＣ−末端カルボキシアミド、これらのＣ−末端ケトン、これらのＮ−末端修飾体、およびこれらのいずれかの混合物からなる群から選択される１種以上の向インシュリン性ペプチド
を含む、非食事性栄養摂取を必要とする非糖尿病患者における非食事性栄養摂取のための医薬組成物。
【請求項２】
１種以上の栄養の栄養上有効量を含む栄養組成物；および
ＧＬＰ−１、エキセンジン、これらの欠失配列、これらの天然および非天然アミノ酸置換体、これらのＣ−末端カルボキシアミド、これらのＣ−末端ケトン、これらのＮ−末端修飾体、およびこれらのいずれかの混合物からなる群から選択される１種以上の向インシュリン性ペプチド
を含む、栄養の代謝の増強を必要とする患者において該栄養の代謝の増強をするための医薬組成物であって、
該医薬組成物が経口投与用に処方され、
該患者がグルコース代謝の障害を有する患者、手術患者、昏睡状態の患者、ショック患者、胃腸病患者、消化ホルモン疾患患者、肥満患者、アテローム性動脈硬化症患者、血管疾患患者、妊娠性糖尿病の患者、肝臓疾患を有する患者、肝硬変を有する患者、グルココルチコイド過剰の患者、クッシング症候群の患者、外傷、事故もしくは手術後に起こる活性化反調節ホルモンを有する患者、高トリグリセリド血症の患者、または慢性膵炎の患者である、医薬組成物。
【請求項３】
栄養が、グルコースまたはその等価物である請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項４】
グルコースの栄養上有効量が栄養組成物全量に基づいて２〜５０重量％のグルコースまたはその等価物である、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
向インシュリン性ペプチドがＧＬＰ−１である、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項６】
ＧＬＰ−１がＧＬＰ−１（１−３６）、ＧＬＰ−１（１−３７）アミド、ＧＬＰ−１（７−３４）、ＧＬＰ−１（７−３５）、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、ＧＬＰ−１（７−３６）メチルエステル、ＧＬＰ−１（７−３４）Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ａｌａまたはデス（Ｌｙｓ）ＧＬＰ−１（７−３７）アミドである、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項７】
向インシュリン性ペプチドがＧＬＰ−１（７−３６）アミドである、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項８】
向インシュリン性ペプチドがエキセンジンである、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項９】
グルコースの等価物がフルクトース、ガラクトース、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、ヘキソース、ペントース、ペントースアルコール、ヘキソースアルコール、またはこれらのいずれかの組み合わせである、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１０】
グルコースの等価物が脂質、脂肪酸、ジグリセリド、モノグリセリド、グリセロール、アミノ酸、およびこれらのいずれかの組み合わせである、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１１】
栄養組成物が、さらに、１種以上のアミノ酸、脂質、遊離脂肪酸、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、グリセロール、電解質、塩類、ミネラル、ビタミンまたはこれらのいずれかの組み合わせを含む、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１２】
向インシュリン性ペプチドが、１分当り、患者の体重１ｋｇ当り０．０１〜５０ピコモルの速度で点滴により投与される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１３】
栄養組成物が第１の水性媒体中にあり、向インシュリン性ペプチドが第２の水性媒体中または医薬上許容される固体もしくはゲル錠剤または徐放性マトリックス中にある、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
向インシュリン性ペプチドが、患者の血中向インシュリン性ペプチドのプラトーレベルをもたらすのに十分な標準化した濃度で投与される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１５】
栄養組成物および向インシュリン性ペプチドが連続投与される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１６】
栄養組成物および向インシュリン性ペプチドが一緒に静脈内投与される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１７】
栄養組成物および向インシュリン性ペプチドが別々に静脈内投与される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項１８】
栄養組成物の投与が血液１デシリットル当りグルコース６０〜１８０ミリグラムの患者の血中グルコースレベルをもたらし、投与速度が、１日当り、患者につき１０００ｇまでのグルコースまたはその等価物を輸送するように算出される、請求項１または２記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
種々の病気の患者が、しばしば、栄養を消化管以外の経路で摂取する必要がある。手術の必要な患者、昏睡状態の患者、消化管疾患の患者、卒中の患者および治療処置を受けている患者は、しばしば、脂質、電解質、ミネラルおよびアミノ酸との種々の組み合わせで炭水化物の非経口投与を受ける。典型的には、この投与は、静脈内注射または点滴により行われるが、皮下、筋肉内、腹腔内または他の経路も使用できる。
ヘルスケアーの専門家が、非経口栄養を患者に与える場合、彼等は、血糖の過剰負荷（高血糖）を避けることに注意する。多くの場合、たとえ健康な代謝を有する患者でも、非経口栄養が行われ、インシュリンの共投与により血糖レベルを適当に維持する。しかし、この投与は、インシュリンの半減期が短く、血糖レベルの著しい変動を起こすので、重大な欠点を有する。その結果、患者が大量のグルコース負荷を受ける重篤な場合は、通常、患者の血中グルコースレベルを滴定し、患者は相当するインシュリンの点滴を受けて血中グルコースレベルをバランスさせる。インシュリンの点滴は、継続することが好ましく、連続した血糖測定により調節しなければならないので、この滴定操作は、時間がかかり、かつ非常に経費がかかる。
栄養失調の患者は、大量の栄養を速やかに送ることより多大の恩恵を受けることが確立されている。通常、そのような栄養摂取のために経口経路が使用され、患者の消化プロセスの健康および機能が維持される。非経口経路での栄養摂取を使用しなければならない場合、たとえインシュリンの共投与を行っても、高血糖およびそれに伴う浸透性、腎臓組織、網膜組織、血管および心臓血管系に対する悪影響の虞れが大きい。その結果、伝統的な栄養療法は、しばしば、インシュリンを使用せず、非常に低速度の栄養非経口投与を要求する。そのような非経口栄養を受ける典型的な患者の場合、投与速度を低く維持して血糖（グルコース）レベルを、デシリットル当たり約６０〜１５０ｍｇの正常な生理学的範囲を超えないようにしている。これらの低投与速度は、高血糖症を避けるための１つの適当な安全性のファクターとなる。通常、５〜４０ｗｔ／ｗｔ％のグルコース溶液で、１時間当たり５０〜１５０ｍｌの範囲である。
にもかかわらず、栄養供給は、患者が回復し、暮らしていくための基本的な要件である。伝統的な非経口栄養で何回も起こっているように、患者が適当な栄養を受けられない場合は、治癒、回復に長時間がかかり、患者の主要な悪症状に伴って付属的な問題がしばしば起こる。したがって、高血糖の悪影響と、繰り返しまたは連続的なインシュリンの投与および滴定の必要性とを避けつつ、できるだけ速い速度で患者に非経口栄養を送る（delivery）必要性が存在する。
発明の概要
これら、およびその他の目的は、実質的に急性または慢性の高血糖症なしに最大の非経口栄養摂取を行うための組成物および方法についての本発明によって達成される。本発明の方法における該組成物の使用は、患者の治療組織のカロリー要求を満たしつつ、同時に適当な血中グルコースレベルを維持して必要な栄養を送ることを可能にする。
本発明の組成物は、栄養源および向インシュリン性（insulinotropic）ペプチドを含む。栄養源は、投与後、直接的または間接的に炭水化物を与えるものである。好ましくは、栄養源は、ヘキソース、ペントース、それらのアルコールなど、特に、水性媒体によく溶解するものである。その例としては、グルコース、フルクトース、ガラクトース、ソルビトール、マンニトール、キシリトールまたはこれらのいずれかの組み合わせである。所望により、アミノ酸、脂質、遊離脂肪酸、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、グリセロールおよびミネラルを含有することができる。向インシュリン性ペプチドには、ＧＩＰ（gastric inhibitory peptide）およびその誘導体、ＧＬＰ−１（１−３７）およびＧＬＰ−１（７−３６）のようなグルカゴン様ペプチド、ならびにＧＬＰ−１（１−３７）アミド、ＧＬＰ−１（７−３６）アミドおよびＧＬＰ−１（７−３６）メチルエステルのような官能基修飾体、ＧＬＰ−１（７−３４）、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３５）のようそれらのペプチド配列フラグメント、ＧＬＰ−１（７−３４）Ａla Ｐhe Ａlaのようなそれらのペプチド配列置換体、デス（Ｌys）ＧＬＰ−１（７−３７）アミドのようなそれらのペプチド配列欠失体、非天然アミノ酸残基を有する物も含め、それらのペプチド配列アナログおよびそれらの小有機分子模倣体を包含する向インシュリン性活性を有するそれらの誘導体が包含される。向インシュリン性ペプチドは、精製単一化合物、半精製単一化合物またはＧＬＰ−１とＧＩＰとの混合物のような化合物のいずれかの混合物であってよい。栄養源および向インシュリン性ペプチドは、単一の水性媒体中で組み合わせることができ、また、好ましくは、キットとして別々の水性媒体に含有させることができる。別法として、向インシュリン性ペプチドは、口内、皮下または他の吸収経路にて送るための錠剤または徐放性マトリックスに個別に処方することもできる。組成物における栄養および向インシュリン性ペプチドの濃度は、以下に記載する。
本発明の方法は、栄養源および向インシュリン性ペプチドの非経口投与によって達成される。投与は、予め栄養源とペプチドを合することにより、別々の源からのそれらの共投与により、それらの別々の、ただし同時の投与により、または、向インシュリン性ペプチドを先にする、別々かつ逐次の投与により行うことができる。上記した個々のペプチド化合物およびペプチド化合物の混合物は、向インシュリン性ペプチドとして投与できる。栄養源の投与経路は、腹腔内または静脈内のようないずれかの非経口経路とすることができ、向インシュリン性ペプチドの経路は、栄養源と同じ、または異なる経路とすることができる。用いる向インシュリン性ペプチドの濃度は、本発明の栄養源を受ける患者に正常な血中グルコース濃度を与え、および／または維持できるいずれのものでよい。栄養源における栄養濃度は、少なくとも、非経口食供給に典型的な濃度とし、投与速度は、少なくとも、好ましくは患者１日当たり、１０００ｇまでのグルコースの供給またはそれと同等のような典型的な療法と同じか、好ましくは、より高い速度とする。向インシュリン性ペプチドの適当な用量は、その血中グルコースレベルに関するＳ字状用量−応答カーブによって決定される。その結果、向インシュリン性ペプチドの投与は、閾値／増加レベル／プラトー療法に従い、向インシュリン性ペプチドが同様に存在しない場合の正常な範囲を超える血中グルコースレベルを生じさせる投与速度で栄養源を供給しつつ、栄養源の投与速度とバランスさせて、正常グルコース血中レベルを達成または維持する。好ましくは、栄養源中の炭水化物濃度は、栄養源全量に基づいて２〜５０重量％のグルコースまたはその等価物である。好ましくは、向インシュリン性ペプチドの投与速度は、血漿１リットル当たり、少なくとも間欠的に０．１ピコモル〜０．１ミリモルのペプチド血中レベルを供給および／または維持するように計算する。
発明の詳細な説明
本発明は、患者の血中グルコースレベルに有害な変動を起こすことなく、患者へ非経口栄養、特に、炭水化物栄養を与えるための組成物および方法に関する。伝統的な非経口栄養と比べて、本発明によれば、実質的に、より迅速に栄養を送ることができ、患者の回復細胞のカロリー要求を、ほぼいつも満たすことができ、かつ患者の血糖レベルを実質的に変動させない。これらの予期せぬ重要な医薬効果は、向インシュリン性ペプチド、および、炭水化物、アミノ酸、脂質、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、脂肪酸、塩類、電解質および／またはミネラルのような栄養を含む組成物を使用することにより達成される。
ＧＬＰ−１、ＧＩＰのような向インシュリン性ペプチドおよび少なくとも、それらのフラグメント、アナログ、誘導体および同様な化合物のいくつかが知られており、それらは、単独では糖尿病の患者に使用されてきた。しかし、非糖尿病のヒトにおけるそれらの適用および効果は、これまで示唆されていない。事実、これまで示唆された糖尿病患者の治療用の向インシュリン性ペプチドの使用は、向インシュリン性ペプチドが、これらの患者の通常のグルコース血中レベルにおいてインシュリン刺激効果を有することを示している。この示唆に基づくと、インシュリンの栄養的投与によって起こる問題が、向インシュリン性ペプチドの栄養的使用でも起こるように考えられる。そのような使用は、血中グルコースレベルの滴定と、ペプチド輸送の継続的モニターを必要とすることになる。
本発明によれば、驚くべきことに、向インシュリン性ペプチドの外因性投与は、患者が正常（非糖尿性）な血中グルコースレベルを有する場合、そのような通常の患者においてインシュリンの放出を実質的に高めないことが見いだされた。さらに、本発明によれば、正常（非糖尿性）な患者に、非食事性経路でグルコースを投与する場合、内因性向インシュリン性ペプチドの産生、放出、受容体相互作用および／または経受容体事象の正常な調節経路およびメカニズムは生じないか、側路へそらされることが見いだされた。グルコースの非食事性投与によるごとく、非糖尿病患者が、正常値を超えて血中グルコースレベルの変化を受ける場合、向インシュリン性ペプチドの外因性投与によって起こるインシュリン刺激効果は、血中グルコースレベルの正常値への低下を起こさせることを見いだした。本発明によれば、これらの知見が、高血糖を避けつつ、多すぎるインシュリンと、少なすぎる血中グルコースに起因する低血糖の危険を避けて、高い、かつ迅速な栄養供給の方法がもたらされる。
向インシュリン性ペプチドは、本発明による非経口栄養を与えるための栄養媒体と組み合わせて使用される。血中グルコースレベルの安定化は、向インシュリン性ペプチドの外因性非経口輸送により、容易に、有意義に達成される。特に、栄養の非経口投与の間に分泌されるインシュリンは、この方法において非常に調節され、血中グルコースの増加が、向インシュリン性ペプチドの存在しない場合よりも、著しく少ない。非糖尿病患者は、血中グルコースレベルが患者の正常な血中グルコースレベルを超えるまで、向インシュリン性ペプチドの刺激に反応しないため、また、血中グルコースレベルおよび血中向インシュリン性ペプチドレベルがプラトーまでの増加につれ、血中インシュリンレベルの増加が続くことが見いだされているため、また、血中インシュリンレベルは、血中向インシュリン性ペプチドレベルがプラトーレベルで保持されても、血中グルコースレベルの増加に従って、増加を続けるため、投与すべき向インシュリン性ペプチドの量は、好ましくは、輸送すべきグルコースの量と関係なく、標準化することができる。したがって、向インシュリン性ペプチドを使用しない栄養療法と比較して、より多くのグルコースまたはその等価物を、短時間で患者に送ることができ、本発明の実施により、患者のカロリー欠損を、より迅速に、十分に満たすことができる。これらの結果が、本発明により、高または低血糖症からの対応するいずれの副作用もなしに得られる。
本発明によれば、投与すべき組成物は、ヘキソースまたはペントース、具体的な例としては、グルコース（デキストロース）、フルクトース、ガラクトース、キシリトール、マンニトール、ソルビトールなどのような炭水化物を単独で含有することができる。あるいは、該組成物は、脂質、脂肪酸、ジグリセリド、モノグリセリド、グリセロールおよび／またはアミノ酸のような、糖新生によってグルコースに変換される間接的グルコース源を含むことができる。塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、グルコン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、重リン酸カリウム、酢酸カリウムのような電解質およびミネラル、複合ビタミン、クロムのような微量元素も存在させることができる。好ましくは、該組成物は、グルコースまたは身体により容易にグルコースに変換されるような可溶性炭水化物源を含有する。好ましくは、本発明の組成物は、ヒト血清アルブミンのような担体物質および塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウムのような電解質、緩衝剤、安定化剤および保存剤を含有する。
組成物は、注射または点滴、ならびに、筋肉内、皮下、静脈内、関節内、腹腔内、口腔内（ペプチドのみ）、鼻粘膜（ペプチドのみ）および他の非消化管経路によって送られる。栄養および向インシュリン性ペプチドは、同一または異なる経路で送ることができる。特に有利には、組成物は、静脈内経路で送られるか、栄養を静脈内経路、向インシュリン性ペプチドを口腔内経路で送ることである。
組成物中に存在する栄養の濃度は、それらの輸送速度は、２４時間にわってグルコース溶液単独で可能なカロリーよりも多く輸送できるように設計される。よく知られた静脈内栄養補給用の典型的な、標準デキストロースまたはグルコース溶液は、いくらかの電解質を含有する５〜４０ｗｔ／ｗｔ％水性グルコース溶液である。通常、この標準溶液を、１デシリットル当たり１００〜１５０ｍｇの正常な血中グルコースレベルを維持するために、１時間当たり、５０〜１００ｍｌの速度で送る。本発明の方法でも、この同じ血中グルコースレベルを維持するが、より濃縮された栄養溶液を使用し、より速い速度で送ることが今や可能となる。特に、本発明の組成物は、約５０重量％ものグルコースまたはその等価物を含有することができる。輸送速度も、グルコースまたはその等価物の２重量％、５重量％、１０重量％、１５重量％、２５重量％、４０重量％または５０重量％溶液を輸送して患者１日当たり約１０００ｇまでのグルコースまたはその等価物を与えるように増加させるこができる。もちろん、非常に高濃度の溶液を送ることによる注射部位での組織ショックが生じないないように注意が必要である。
本発明に従い、向インシュリン性ペプチドの共投与により、血中グルコースレベルの正常な値が維持される。これらのペプチドは、個々の精製または半精製化合物あるいはそれぞれの混合物として投与できる。その結果、本明細書で使用する「向インシュリン性ペプチド」なる用語は、単数形及び複数形を包含し、全ての精製度合のペプチド類ならびにペプチド類の個々の形態およびいずれものそれらの組み合わせを意味する。典型的には、ペプチドは、１リットル当たり、ピコモル〜ミリモルのオーダーの血中濃度を与えるように送られる。向インシュリン性ペプチドは、投与直前に栄養源と組み合わせても、患者への共通の投与ラインまたは別の投与ラインへ導かれる、ペプチドについての別の容器を使用する栄養源との共投与でも、あるいは、ペプチドの保全性を維持する適当な条件下で製造および貯蔵して栄養源と組み合わせてもよい。別法として、向インシュリン性ペプチドは、医薬上許容される吸収タブもしくは錠剤、またはポリラクチド−グリコリドマトリックス中のような徐放性マトリックスに処方することができる。これらの固体の剤形は、ペプチドの短期から中期の放出および吸収用にデザインされ、ＷＯ／９６／０７３９８、ＤＥ３８２２４５９およびDrug Development and Industrial Pharmacy，21(17),2013-201(1995)のごとき文献で公知であり、それらの記載を、引用し、ここに組み込む。
向インシュリン性ペプチドまたはペプチド類の個々の療法および量は、担当する医師および患者の具体的な症状による。ガイドラインとして、患者に、１日当たり、約１０００ｇまでのグルコースを提供するように、より速い速度でグルコースまたはその栄養的等価物を送る場合、対応する大量の１種以上の向インシュリン性ペプチドを、１分当たり、患者の体重１ｋｇ当たり、約３ピコモルのプラトーレベルまで送る。向インシュリン性ペプチドにちてのこのＳ字状用量−応答カーブは、閾値を有し、ついで、用量カーブが上記レベルのプラトーまで増加する。この用量−応答カーブは、投与されるグルコースの量および患者の血中グルコースレベルに依存する。患者は、血中グルコースレベルが、彼の正常レベルにある場合、向インシュリン性ペプチド効果に耐える。Ｓ字状用量−応答カーブは、血中グルコースレベルが非糖尿病患者についての正常範囲を超える場合に生じる。プラトーレベルおよびそれより上では、インシュリン刺激が継続し、血中インシュリンレベルの増加をもたらすが、この増加は、向インシュリン性ペプチドレベルではなく、血中グルコースレベルに従う。
好ましくは、向インシュリン性ペプチド類は、それらを使用する少し前まで、別の滅菌した固体状態で保持される。使用するには、固体の向インシュリン性ペプチドを、好ましくは、滅菌緩衝水性媒体と合し、１リットル当たり、ナノモルないしミリモルレベルの範囲の向インシュリン性ペプチドの濃度を形成する。別法として、ペプチド類は、ペプチドの徐放性を与えることが知られているポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ヒドロゲル、微孔性ポリウレタン、ポリビニリデンアセテートなどのような徐放性マトリックスと合してもよい。これらの処方は、ペプチドの短期または中期の放出を与えるように操作することができる。例えば、米国特許第５,３６４,８３８号、米国特許第５,３８３,８４８号、ＷＯ／９６／０７３９８、ＤＥ３８２２４５９、米国特許第５,４８７,８９８号、Drug Development and Industrial Pharmacy，21(17)，2013-2019（1995）、Diabetes Care，Vol．19(8)，843-848（1996）、Journal of Medical Chemistry，(Vol．38，p 4257-4269)およびＷＯ／９３／１８７８５参照。それらの記載を引用し、ここに組み込む。
本発明に従って使用する向インシュリン性ペプチド類は、ＧＬＰ−１(glucagon-like peptide-1)およびＧＩＰならびにそれらの誘導体である。本発明によれば、特に、ＧＬＰ−１、ならびにＧＬＰ−１（１−３６）、ＧＬＰ−１（１−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３４）、ＧＬＰ−１（７−３５）、ＧＬＰ−１（７−３４）Ａla Ｐhe Ａlaのようなアミノ酸置換、デス(Ｌys)ＧＬＰ−１（７−３６）アミドのような欠失配列、非天然アミノ酸残基（例、タウリン残基、βおよびγアミノ酸残基およびＤ−アミノ酸残基）を有するアナログ、アミド、エステルのようなＣ−末端官能基修飾体、Ｃ−末端ケトン修飾体およびアシル化アミンのようなＮ−末端修飾体を含む同様な変形、シッフ塩基などを包含するその誘導体、ならびにエキセンジン、グリセンチン、アミリン拮抗剤およびＥＰ５１２０４２（Derwent91-252609/34）、ＷＯ９３２５５７９Ａ１（Derwent94-007457/01）、ＷＯ９３１８７８６（Derwent93-93220451/40）、ＷＯ９０１１２９６(Derwent90-320226/42)、米国特許第５,５４５,６１８号、特開昭６３−１５９３２３号（Derwent88-224231/32）、米国特許第５,１１８,６６６号、米国特許第５,１２０,７１２号、米国特許第５,５１２,５４９号、ＷＯ９６／０６６２８およびＥＰ６５８５６８に記載されているような他の誘導体が使用できる。これらの記載を引用し、ここに組み込む。また、向インシュリン性（insulinotropin）受容体部位に適合する向インシュリン性ペプチドの伝統的な、小さな有機分子模造体も包含される。
これらの向インシュリン性ペプチドは、公知であり、文献に記載されている。それらは、天然源から得られ、また、組換技術または自動もしくは古典的な合成技術を用いて製造することにより得られる。特に、ＧＬＰ−１（７−３６）アミドの組換バイオテクノロジーによる合成を記載しているＰＣＴ出願９４／０８１２５を参照のこと。向インシュリン性ペプチド類の純度は、半精製から高度の精製まで変動してよい。それらの種々の純度状態における活性は、例えば、Diabetologia（1985）28: 704-707においてＳchmitが教示しているように、生理グルコース溶液中でラット膵臓の単離したＢ−細胞からのインシュリン放出を定量する分析に従って滴定することにより得ることができる。滴定は、精製向インシュリン性ペプチド量に相当する投与すべき半精製向インシュリン性ペプチドの等価な量を決定するための基礎として使用する活性単位指数を与える。
本発明の実施に有用な向インシュリン性ペプチドのストック溶液は、ヒト血清アルブミンのような担体物質０．１〜５％（ｖ／ｖ）を含有する０．９％塩化ナトリウムのような等張化塩溶液を、１リットル当り１ナノモル〜１ミリモルのＧＬＰ−１（７−３６）アミドのような向インシュリン性ペプチドと共に含む。このストック溶液は、栄養溶液と共に２０倍に希釈して点滴に使用される。向インシュリン性ペプチドの適当な点滴速度は、１分当り、患者の体重１ｋｇ当りペプチド０．０１〜５０ピコモルで変動し、好ましくは、１分当り、体重１ｋｇ当りペプチド０．２〜２．５ピコモルである。向インシュリン性ペプチドと共投与されるグルコースの投与速度は、特に好ましくは、１日当り、グルコース１０００ｇまでの範囲またはそれと均等な範囲および／または１日当り約１０〜約８００ｇのアミノ酸混合物でよい。
本発明の処置に特に適した患者には、インシュリン抵抗性であるが、明らかな糖尿病のないグルコース代謝の障害を有する患者ならびに何らかの理由で消化管から栄養を受けることができない患者が包含される。そのような患者には、手術患者、昏睡状態の患者、ショック患者、胃腸病患者、消化ホルモン疾患患者などが包含される。特に、肥満患者、アテローム性動脈硬化症患者、血管疾患患者、妊娠性糖尿病の患者、肝硬変のような肝臓疾患を有する患者、先端巨大症の患者、コルチゾール治療またはクッシング症候群のようなグルココルチコイド過剰の患者、外傷、事故および手術後に起こる活性化反調節ホルモンを有する患者、高トリグリセリド血症の患者および慢性膵炎の患者は、本発明により、低または高血糖症になることなく、容易に、かつ適当に栄養供給できる。特に、かかる患者への投与は、患者の血漿グルコースを、血液１デシリットル当りのグルコース約１６０〜１８０ミリグラムの、いわゆる腎閾値以下に維持しつつ、栄養およびカロリー必要物を患者にできるだけ速やかに送るための療法を提供することを目指している。腎閾値未満のグルコースレベルではない正常な患者も、上記と同様に、本発明によって治療することができ、高血糖症患者のような、血漿レベルが腎閾値より高いグルコース代謝障害の患者もこの治療条件に適している。特に、高血糖症の度合いが、断続的間隔で腎閾値よりも低い患者は、以下の療法のいずれかに従う栄養プラス向インシュリン性ペプチドの組み合わせ治療を受けることができる。そのような高血糖症でない患者も、以下の療法のいずれかに従って治療することができる。
療法Ａ
患者は、１分当り、体重１ｋｇ当り１〜２ピコモルの、決められた量のＧＬＰ−１のような向インシュリン性ペプチドの静脈内（ｉｖ）投与を受ける。共ｉｖ投与される栄養は、１デシリットル当り、約１５０ｍｇまたは患者の腎閾値以下の一定下状態の血漿グルコースレベルに達するように、患者に滴下される。向インシュリン性ペプチドおよび栄養組成物は、共通のｉｖラインを通じて別々に投与される。
療法Ｂ
患者は、患者の栄養要求に従って、決められた量の栄養ｉｖ投与を受け、ＧＬＰ−１（７−３７）のような向インシュリン性ペプチドを、１分当り体重１ｋｇ当り、約０．４ピコモルから始め、最大、１分当り体重１ｋｇ当り、約３ピコモル未満の点滴速度まで滴下する。
療法Ｃ
患者は、栄養組成物中の決められた量の栄養（１日当りグルコース１０００ｇまでのような）を、決められた量の向インシュリン性ペプチド（１分当り、体重１ｋｇ当り２ピコモルの点滴速度のＧＬＰ−１（７−３４）のような）と組み合わせて受ける。これらは、別々または共通のｉｖ点滴ラインを通じて投与される。
開始段階の間および本発明の組成物を使用する治療の間、滴定し、その他、患者の進展を見るために、患者は、つぎの仕上げ処理を受けることができる。第１日は、ほぼ２時間毎に、以後６時間毎に、患者の血糖を測定する。治療前および中に、患者の血中インシュリンおよびグルカゴンレベルを滴定し、患者における所望の血中インシュリンおよびグルカゴンレベルを決める。所望により、患者の栄養要求と、患者のカロリーレベル要求を増加、減少または維持すべきか否かを決めるため、患者は、間接熱量測定を受け、患者のグルコース酸化速度と、エネルギー消費を測定できる。
以上、本発明の特徴を十分に記載した。以下の実施例およびプロトコールに、本発明の幾つかの態様の詳細な具体例を示す。しかし、本発明は、これらの具体例および態様に限定されるものではない。
プロトコール
非経口栄養供給の間の外因性ＧＬＰ−１（７−３６）アミドによるインシュリン分泌のインクレチン刺激の提供
このプロトコールの目的は、非経口栄養供給にともなう問題を改善することである。たとえ健常な代謝を有するヒトでも、高血糖症を引き起こすことなく、所望の量のグルコースを点滴することは、非常にしばしば不可能である（１）。したがって、非糖尿病のヒトでも、インシュリンを加える必要がある。その結果、非常に時間と金のかかる調節テストと、グルコース摂取制限をもたらす。
不十分な内因性インシュリン分泌についての可能な理由は、インクレチン刺激の欠如である。インクレチンは、経口グルコース摂取後に放出される腸ホルモンの作用を通じてインシュリンの分泌を刺激する。この刺激は、グルコースおよびアミノ酸単独のような基質の血漿濃度増加によって起こるインシュリン増加よりも非常に良好である。腸からのこれらインクレチンホルモンの２つであるＧＬＰ−１（７−３７）（すなわち、酸）およびＧＬＰ−１（７−３６）アミドは、非常に強力なグルコース依存性向インシュリン性およびグルカゴン抑制（glucagonostatic）効果を有する。これらのインクレチンは、動物テストにおいて、正常（通常の）血漿グルコース値におけるインシュリン分泌にほとんど何の影響もあたえないことが判明しており、これらのインクレチンの高用量は、健常なヒトを高血糖症に導くことはない。
ＧＬＰ−１（７−３６）アミドの存在下での非経口栄養供給の間のインシュリン分泌は、血漿グルコース増加が、ＧＬＰ−１のない場合よりも少なく調節することができる。したがって、より多くのグルコースを、他の場合よりも、２４時間にわたって輸送することができる。非経口栄養供給患者に見られるカロリー不足を、より良く満たすことができる。
パートＡ
研究を以下のとおり行う。１８才から７５才までの、非経口栄養供給に依存する両方の性のヒトを患者とする。急性疾患（すなわち、発熱）、インシュリン依存性糖尿病、肝および腎機能制限（クレアチニン＞１．２ｍｇ／ｄｌ）、妊娠、貧血（ヘモグロビン＜１０ｇ／ｄｌ）のヒト、機械的呼吸支持およびカテコールアミンの治療を受けているヒトは、患者から除外する。各患者が１研究日に参加する。
研究を開始するに当り、トリグリセリド懸濁液の点滴なしに、グルコース／アミノ酸混合物（Aminomix，Frescnius AG）の一定した中心静脈点滴を用いて、既に進行している非経口栄養供給を継続する。用量は、臨床的に決定した患者のカロリー要求に相当する。自然に存在するグルコース、遊離脂肪酸、トリグリセリド、アミノ酸、インシュリン、Ｃ−ペプチドおよびＧＬＰ−１（７−３６アミド）レベルの血漿濃度を、つぎの４時間にわたり、１時間毎に、「定常状態」で測定する。この「定常状態」のグルコース濃度が、１５０ｍｇ／ｄｌより上であれば、ＧＬＰ−１（７−３６アミド）の滅菌パイロジェンフリー溶液（１．２ピコモル／ｋｇ／分）を、つぎの４時間点滴し、上記の全ての値を、再び１時間毎に測定する。この用量は、インクレチンホルモンＧＬＰ−１（７−３６）アミド（０．３〜０．４ピコモル／ｋｇ／分）（２）および１．２ピコモル／ｋｇ／分（７，８）のタイプ２糖尿病用に必要な薬理学的用量に対する正常な「代用用量」に相当する。この治療は、インシュリン分泌を刺激し、ついで、血漿グルコースを正常化するのもと期待される。この研究の補足は、間接熱量測定（Deltratrak，Datex，Finland）である。したがって、開始時、４時間後および８時間のＧＬＰ−１（７−３６）アミド点滴期間の最後に、２０分の測定期間が必要である。また、これらの測定から、基質利用（グルコースおよび脂質酸化、エネルギー消費）における変化を測定することが可能である。
パートＢ
各患者は、３研究日参加する。
研究を開始するに当り、トリグリセリド懸濁液の点滴なしに、グルコース／アミノ酸混合物（Aminomix，Frescnius AG）の一定した中心静脈点滴を用いて、既に進行している非経口栄養供給を継続する。プラセボ、研究Ａの結果に従って１．２ピコモル／ｋｇ／分間で変動可能なＧＬＰ−１（７−３６）アミド（０．６ピコモル／ｋｇ／分）およびインシュリン（２Ｕ／時間）を、ランダムな日の順序で点滴する。血漿グルコース濃度を、つぎの６時間にわたって、３０分毎に測定する。グルコース点滴を、非常に速やかに１５０ｍｇ／ｄｌの「定常状態」グルコース濃度に達するように増加し、このレベルを保持する。この研究を捕足するため、１時間毎に、グルコース、遊離脂肪酸、トリグリセリド、アミノ酸、インシュリン、Ｃ−ペプチドおよびＧＬＰ−１（７−３６）アミドを測定する。間接熱量測定を、開始時および６時間期間の最後に行う。
血液試料を採取するため、中心静脈カテーテルのそばに１つの抹消静脈カテーテルを付ける必要がある。生理ＮａＣｌをゆっくりと点滴して、静脈を「オープン」に保持する。
ＧＬＰ−１（７−３６）アミドは、ＧＭＰ製品として受け、−３０℃に、滅菌ストック溶液（１％ヒト血清アルブミンを含む０．９％ＮａＣｌ中）として保存する。点滴前に試料を採取し、滅菌濾過し、細菌増殖およびリムルス分析によるエンドトキシンのテストをする。
血液試料は、つぎの時点で採取する。０、６０、１２０、１８０、２４０、３００、３６０、４２０、４８０（研究Ａ）および０、６０、１２０、１８０、２４０、３００、３６０、４２０、４８０、５４０、６６０および７２０（研究Ｂ）。
一方向ＡＮＯＶＡおよびｔ−テストにより分散補足して測定分析を繰り返すことにより、統計的分析を行うことができる。
実施例
６０才の患者を、炎症性腸疾患のため、非経口栄養供給した。彼は体重７５ｋｇであった。非経口栄養は、中央静脈カテーテルを通じてインフソメート（infusomate）により送り、２４時間で約６００ｇのグルコースを送る４０％グルコース溶液１．５リットルおよび１０％市販アミノ酸混合物１リットルからなるものであった。ＧＬＰ−１（７−３６）アミドなしで達成される血糖値は、１６０〜１９０ｍｇ／ｄｌであった。ついで、ＧＬＰ−１（７−３６）アミドを投与し、患者への高速グルコース投与を継続しても、血中グルコース値は、約１００ｍｇ／ｄｌに減少した。
ＧＬＰ−１またはＧＩＰは、随伴投薬（companion medication）として使用できる。向インシュリン性ペプチド薬剤は、ストック溶液を生理食塩水で２０：１に希釈して調製した。５０μｇ／ｍｌを含み、ヒト血清アルブミン（終濃度１％ｖ／ｖ）を添加した０．９％ＮａＣｌに溶解したＧＬＰ−１のストック溶液を調製した。溶液を、細菌汚染およびパイロジェンについてテストしたところ、３カ月間保存できる（−３０℃にて）。