(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）：
Ｒ−ＣＯＯ-   Ｒ'Ｒ''2Ｎ+−（ＣＨ2)n−ＯＨ        （Ｉ）：
〔式中、
ＲはＣ20−Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸のアルケニル基、
Ｒ'は水素原子またはＣ1 −Ｃ2 アルキル基、
Ｒ''は前記定義のＲ'であるかまたは（ＣＨ2)n −ＯＨヒドロキシアルキル基、ただしｎは２または３である。〕
を有する、活性成分としてのＣ20−Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸とアミノアルコールとからなる水溶性塩を含有し、そして水性媒体中で単相である、または水性媒体により単相に再構成される、経口用または注射用の医薬組成物。
【請求項２】
高度不飽和酸が４，７，１０，１３，１６，１９−シス−ドコサヘキサエン酸（以下、ＤＨＡと称する）または５，８，１１，１４，１７−シス−エイコサペンタエン酸（以下、ＥＰＡと称する）、またはそれらの混合物である、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
アミノアルコールがエタノールアミン、Ｎ−メチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタノールアミン（以下、コリンと称する）、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、プロパノールアミン、ジプロパノールアミンまたはそれらの混合物である請求項２記載の組成物。
【請求項４】
ＤＨＡ、コリン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項５】
ＤＨＡ、エタノールアミン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項６】
ＥＰＡ、コリン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項７】
ＥＰＡ、エタノールアミン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項８】
ＤＨＡ、コリンおよびエタノールアミン混合塩である請求項３記載の組成物。
【請求項９】
コリンのエタノールアミンに対する割合が、分子基準で２：８と８：２の間の範囲である請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
ＤＨＡおよびＥＰＡ混合コリン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項１１】
ＤＨＡおよびＥＰＡ混合エタノールアミン塩である請求項３記載の組成物。
【請求項１２】
ＤＨＡのＥＰＡに対する割合が、分子基準で２：８と８：２の間の範囲である請求項１０および１１記載の組成物。
【請求項１３】
上記不飽和酸の体内吸収性を高めて、よってそのプラズマレベルを高くするために用いる、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリンの形態で赤血球および血小板の細胞膜中のDHAまたはEPAの含量を増加させるために用いる、請求項３記載の組成物。
【請求項１５】
抗血栓作用または血栓溶解作用のために用いる、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
上記不飽和酸の少なくとも１つを上記アミノアルコールの少なくとも１つと反応させ、生成した塩を通常の技術により回収することを含む、請求項１記載の医薬組成物の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明はオメガ−３高度不飽和脂肪酸の塩およびこれを含有する医薬処方物に関する。特に、本発明は、以下の一般式（Ｉ）：
0003801225.tif 000002
〔式中、ＲはＣ20−Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸のアルケニル基、Ｒ’は水素原子またはＣ1 −Ｃ2 アルキル基、Ｒ”は前記定義のＲ’であるかまたは（ＣＨ2)n −ＯＨヒドロキシアルキル基（ただしｎは２または３）である。〕
を有するＣ20−Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸のアミノアルコールとの塩に関する。
【０００２】
【従来の技術】
長鎖高度不飽和脂肪酸、特にオメガ−３高度不飽和酸は、種々の疾患、特に心循環系に関連する疾患（血小板の抗凝集作用、血栓溶解作用、抗アテローム作用など）（A. Leaf and P. C. Weber, New England J. Medicine, 318, 549, 1988参照）、炎症性疾患（S. M. Prescott, J. Biol. Chem., 259, 7615, 1984 参照 )およびある種の癌状態（H.O.Bang et al., Acta Med. Scand., 220, 69, 1976）の予防および治療において非常に重要であることが判明している。高トリグリセライド血症および高コレステロール血症、乾癬、免疫病、学習および記憶障害、中枢神経および末梢神経系疾患等の治療において著しい有効性が示されている。これらの活性は、生化学的レベルで、シクロオキシゲナーゼおよびリポキシゲナーゼ酵素（プロスタグランジン、プロスタサイクリン、トロンボキサンおよびロイコトリエン）の効果を通して、問題となる酸と、アラキドン酸およびこれ由来の代謝物との競合により刺激されることが多い。別の場合においては、効果は単に種々の器官および細胞域（血漿、血小板およびＲＢＣ膜、神経系など）で飽和酸または若干の不飽和を有する酸に置き換わって、高度不飽和酸が蓄積することによるものである。
【０００３】
前記高度不飽和酸のうち、４，７，１０，１３，１６，１９−シス−ドコサヘキサエン酸（以下、ＤＨＡと称する）および５，８，１１，１４，１７−シス−エイコサペンタエン酸（以下、ＥＰＡと称する）は非常に重要である。これらの酸は、海藻類ならびに種々の微生物においても見られるが、とりわけ魚油中に存在し、魚油は現在、市販されている、これらの高度不飽和物質源である。魚油は、トリグリセリドの形態で、飽和および不飽和度の低い酸との混合物中にＤＨＡおよびＥＰＡを含有することが知られており、この形態が、現在のところ食用または治療的用途で商業的に入手できる形態である（例えば、MaxepaR , Seven Seas Health Care Ltd., Hull, England; R. I. Sterling et al., J. Immunol., 139, 4186, 1987 参照) 。これらのグリセリド中のＥＰＡおよびＤＨＡの含量は２成分の合計で表わすと約３０％である。
【０００４】
ＤＨＡおよびＥＰＡの他の食用または治療用調製物（W. S. Harris, J. Lipid Res., 30, 785, 1989）はトリグリセリドのエタノールとのエステル交換、およびこれに続く異なる技術による濃縮によりえられ、したがってＥＰＡエチルエステルおよびＤＨＡエチルエステルの濃縮混合物として用いられる。調剤上の観点から、前記長鎖高度不飽和脂肪酸ならびに、一般的にいって、エチルエステルを含むそれらのすべての誘導体はすべて非常に水に不溶性の油であり、ソフトゼラチンカプセルの投与形態に調製されることが多く、医薬上適した処方物のいくつかは調製出来ない。
【０００５】
トリグリセリドおよびエステルを水性相中に混合するための有機溶媒の使用は、毒性学的観点から推奨できないし、いずれにしても、その結果油性層が分離するので水中に調製物を希釈することはできない。特に、アルカリおよびアルカリ土類金属塩は強塩基性溶液になるので、許容性が低く、また濃度に関連するｐＨも欠点があり、不必要な金属イオンが出来る。
Ｃ20〜Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸、たとえばＤＨＡおよびＥＰＡ、およびそれらの混合物のアミノアルコールとの下記一般式（Ｉ）を有する塩を用いることにより、調剤技術ならびに生物学的および薬理学的レベルでの予期せぬ大きな利点が得られることが判明した。
一般式（Ｉ）：
0003801225.tif 000003
〔式中、ＲはＣ20−Ｃ22オメガ−３高度不飽和酸のアルケニル基、Ｒ’は水素原子またはＣ1 −Ｃ2 アルキル基、Ｒ”は前記定義のＲ’であるかまたは（ＣＨ2)n −ＯＨヒドロキシアルキル基（ただしｎは２または３）である。〕
【０００６】
この様な化合物は粘稠な油または低融点で結晶しにくい水溶性の高い固体として存在することが多い。
本発明の対象となる塩の代表例は、食物とともに摂取され、したがって、完全に薬理学的許容性がある生理学的塩基である
0003801225.tif 000004
およびエタノールアミン  ＮＨ2 −ＣＨ2 −ＣＨ2 ＯＨとのＤＨＡおよびＥＰＡの塩である。
【０００７】
本発明の塩は、例えば、水性媒体中前記高度不飽和酸を前記アミノアルコールの少なくとも１つと接触させ、最後に、低温低圧での蒸発乾固または凍結乾燥などの通常の技術により所望の塩を回収することにより調製される。本発明の塩は、前記酸の濃縮アルコール性溶液を等モル量の前記アミノアルコールと接触させ、続いて溶液を蒸発乾固するかまたは適当な溶媒、例えば石油エーテルで希釈して沈澱させることにより調製する。
【０００８】
酸のナトリウム塩および例えば塩基の塩酸塩間の二重交換反応はそれほど容易ではない。他の塩形成は、冷却しながら直接接触させて、２つの液体油性成分が、反応の進行にともない徐々に濃厚になり、迅速に所望の塩を形成するようにする。
調剤技術の観点から、得られた水溶性のために、公知のトリグリセリド、エチルエステルおよびその遊離酸（全て非常に水に難溶）を用いた場合では不可能であった、数種の医薬処方物の調製が可能になる。特に、水性媒体中単相処方物、例えば経口用途用の液体形態、飲用バイアル、シロップなど、他の方法によっては得ることが不可能であったものが容易に得られる。
【０００９】
問題の水溶性塩の使用は、同じ理由から、その場で溶解した後経口投与により使用する顆粒剤（各用量毎の薬袋中の場合も）の調製に適している：該化合物を実際種々の固体、水溶性賦形剤（例えばショ糖）中に配合するかまたはシクロデキストリン中に封入してから顆粒化して浮遊形態などにして含ましめ、水中に溶解した後用いるが、上清に油性相が分離することはない。
水溶性塩はまた、ローションなどの局所用途用処方物、並びに非経口経路用の注射可能な調製物としても適当な注意を払って用いることができる。さらに、後者の場合、ＤＨＡおよびＥＰＡのアミノアルコールとの塩形成により、ｐＨが中性の水溶液が得られ、これは薬物の局所および全身的許容性の観点から特に都合がよい。
流動性の、水に不溶の油であり、しばしばソフトゼラチンカプセルの投与形態に調製される市販のトリグリセリドおよびエチルエステルと同様に明らかに、問題のＤＨＡおよびＥＰＡ塩は処方される。
【００１０】
本発明のアミノアルコール塩は実際にソフトゼラチンカプセルの調製技術において用いられる、トリアセチン、種々のポリエチレングリコール（ＰＥＧ２００〜６００＋ＰＥＧ４０００）、ＴｗｅｅｎまたはＴｗｅｅｎ／エタノール混合物、プロピレングリコールなどの通常の希釈剤の少量で容易に希釈および溶解できる。これらの場合すべてにおいて、得られる混合物を次に通常の油性物質同様に扱い、ソフトカプセル中に処方することができる。
調剤技術による向上した処方物の特性に関する前記記載事項と別に、前記ＤＨＡおよびＥＰＡなどの高度不飽和酸のアミノアルコールとの塩により、トリグリセリド、エチルエステルおよびナトリウム塩の形態で用いた場合の同じ化合物と比べて生物学的、生化学的および薬理学的な重要な利点が得られる。
【００１１】
驚くべきことに、比較製品と比べて、これらは経口経路により良く吸収され、その結果、例えば等モル用量の対応するエチルエステルよりも高いプラズマレベルが得られる。例えば、エステルよりも高い高度不飽和酸塩の吸収率は、エステルが胃および腸レベルで局所的マイクロエマルジョンを形成した後だけ水性相に分散可能である油滴として存在するのに対して、水溶性塩は、分子形態で分散可能であり、非解離平衡形態で素早く吸収可能であることに起因する。高いプラズマレベルおよびその結果として器官の他の部分での拡散により、脳、神経系、網膜および他の沈着および蓄積部位中において高度不飽和酸の濃度が高くなる。
【００１２】
特に重要なことは、赤血球および血小板の膜中にそれぞれ重要な血流学的（血液中の粘度の減少、赤血球変形能の増大など）および抗凝集性を付与する高度不飽和酸ＤＨＡおよびＥＰＡが多くなることである。
エタノールアミンおよびコリンなどの特定のアミノアルコールとの塩形成により、新規塩に他の好ましい性質が賦与される：これらの物質はホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコリンの形態で実際に例えば赤血球および血小板などの膜リン脂質の基本的構成成分であり、酸および塩基の両方が吸収され、それにより、相乗的に前記の２種の対応するリン脂質を増加させることが見い出された。更に、エタノールアミンは、内因性メチル化システムにより、メチル化してコリンにすることができ、これにより、前記リン脂質の両方に含まれる。
【００１３】
ホスファチジルセリンおよびホスファチジルイノシトールは、本発明の塩の投与により著しい影響を受けない。
アシル鎖の不飽和度に関して、赤血球膜のリン脂質が赤血球の変形能および血液の粘性を決定することを考慮して、以下に記載する問題の塩の赤血球リン脂質組成物への影響を確かめる実験を行なった。８人の健康な被験者を選択し、４群に分け、３週間一日量のＤＨＡ１．０ｇをエチルエステル（１．１ｇ）、ナトリウム塩（１．１ｇ）、コリン塩（１．３ｇ）およびエタノールアミン（１．２ｇ）の形態で経口投与する。処置の前後に、静脈血のサンプルを集め、クエン酸ナトリウムを添加し、赤血球を単離し、０℃で食塩溶液（０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で３回洗浄し、食塩溶液中に再び懸濁する。赤血球懸濁液のサンプル１ｍｌを５ｍｌのメタノールで１０分間処理し、次に２ｍｇ／１００ｍｌの酸化防止剤（２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルフェノール（ＢＨＴ））を含有するクロロホルム５ｍｌで処理する。３回の抽出に由来する有機溶媒を蒸発乾固させ、赤血球リン脂質により形成される残さをTurner J.D.and Rouser G. Anal. Biochem. (Part 1-Erythrocyte lipids), 38, 423, 1970に従って二次元クロマトグラフィーにかけて、異なる種類のリン脂質を分離する（シリカゲル６０Ｈ（９０ｇ、Merk) ＋Fluorisil （７．２ｇ、BDH Chemicals)プレートを用いる；溶媒系：クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア：水（９０：５４：５．５：５．５）およびクロロホルム：メタノール：アセトン：酢酸：水（６０：２０：８０：２０：１０）。種々のクラスを標準的リン脂質（Sigma Chemical) に対して同定する。全リン脂質のサンプルおよび単離された種々の展開スポットを１．５ｍｌの三フッ化ホウ素／メタノールで１時間、６５℃、窒素雰囲気下で処理して、リン脂質中に含まれる酸のメチルエステルを調製し、ガスクロマトグラフィーにかける。このために、イオン化炎検出器およびＨＰ１カラム（長さ：２５ｍ、内径：０．３１ｍｍ）を備えたHewlet-Packard  ５８９０ガスクロマトグラフを用い、キャリアガスとして、ヘリウムを用い、注入口温度は３２０℃、検出器温度は３４０℃にする。チャンバー温度を１７０℃で１分、次に４℃／分で２５０℃まで昇温し、この温度で１５分間維持するようプログラムする。このように、少量を基準条件（処置前）と比較するだけで、ホスファチジルセリンおよびホスファチジルイノシトールのＤＨＡ含量が異なることが判明し、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンおよび全リン脂質に関する実験値を表１に示す。
【００１４】
【表１】
0003801225.tif 000005
【００１５】
前記データから、コリンおよびエタノールアミンによるＤＨＡの塩形成によりＤＨＡの生体内利用効率ならびに赤血球膜のリン脂質中へ（血漿、血小板、神経系などの他の器官の部位へも）の包含が増加することがわかる。特に、前記塩基による塩形成は、主に対応するリン脂質、例えばホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを増加させる。
問題の塩の、吸収性および種々のリン脂質系への包含力というこれらの好ましい特徴によっても、薬理活性に関する驚異的な結果が得られる。たとえばin vitroおよび ex vivoで、公知の実験モデルにより示される血小板凝集阻害に関して予期せぬ強い作用が見られる。しかし、この作用が薬物の可能な治療効果を十分に示していないことを考慮して、本発明者らは、例えばハムスターの細静脈系において公知の凝集剤（アデノシン二燐酸；ＡＤＰ）により起こる血栓の生長速度に関する影響（in vivo 抗血栓作用）を測定することにより、新規塩のin vivo 効果を測定した。
【００１６】
異なるin vivo 実験モデルによっても、血栓形成および分解に関する影響を電気刺激により起こる血管損傷によりハムスターにおいて評価した（血栓溶解作用）。
典型的な実験において、Mesocricetus auratus種のオスハムスター（体重９５〜１１５ｇ）を実験開始前１週間実験室内で馴化させ、半慢性的に連続して１０日間経口経路により薬剤で処置した。より詳細には、動物を４群に分ける。Ｉ群はビヒクルのみを与え、ＩＩ群はＤＮＡエチルエステル１００ｍｇ／ｋｇ（ＤＨＡ９２ｍｇ／ｋｇに相当）、ＩＩＩ群およびＩＶ群はそれぞれエタノールアミン塩の形態（５９．３ｍｇ／ｋｇ）およびコリン塩の形態（６５．７ｍｇ／ｋｇ）のＤＨＡ５０ｍｇ／ｋｇを与えた。最終投与の１時間後、動物をペントバルビタールナトリウム（９０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）で麻酔し、綿棒で頬袋を反転させ、上層および下部無血管結合組織を眼科用鋏で切り取って、下部血管層を露出させ、これを次に食塩溶液に漬け、Leitz Dialux顕微鏡で調べた（倍率×２５０）。
【００１７】
抗血栓症活性の評価のために、血管壁を通してマイクロピペットからのＡＤＰのイオン導入法により起こる微小循環中の血栓（白塊）生長速度を測定する。直径１〜２ミクロンのマイクロピペットに１０-2Ｍ  ＡＤＰ溶液を満たし、動物の口内の銀／塩化銀基準電極につなぎ、直径１６〜４０ミクロンの細静脈に適用する。負の電位をマイクロピペットに附加することにより、ＡＤＰ（２×１０-14 モル／秒）を注入して、白塊（血小板血栓）を細静脈壁からゆっくり形成させる。血栓の生長速度を白塊が３０％、５０％、および９０％形成するのに要した時間により測定する（１００％は血管が完全に閉塞することを意味する）。電流を切ると白塊は急速に堆積し、再び電流をかけるまで、新しい白塊は形成されない。血栓生長速度の抑制は、対照群の測定値と処置した動物の測定値を比較することにより計算した（表２）。
【００１８】
血栓溶解活性の評価のために、マイクロピペットに１．０Ｍの塩化カリウムを満たし、直径４０〜６０ミクロンの細動脈に適用し、動物の口内の基準電極につなぐ。負電位をＧｒａｓｓ  Ｓ４８刺激装置を用いて５秒間加え、２０〜３０マイクロアンペアの電流を起こす。別の１０-2Ｍ  ＡＤＰ溶液を満たしたマイクロピペットを電気的損傷部位に適用し、負電位を３秒間かける。電流を切った後、血栓の形成および解離に要した時間（約４０秒）をストップウォッチを用いて記録する。細動脈損傷部位のＡＤＰ刺激のプロセスを数回繰り返し、１時間にわたってえられた値の平均を記録し、対照動物の値と比較する。
処置および未処置動物における損傷部位に付着した血栓の持続性の変化率は、したがって薬物の血栓溶解活性の指標である（表３）。
【００１９】
【表２】
0003801225.tif 000006
【００２０】
【表３】
0003801225.tif 000007
【００２１】
前記データは、ＤＨＡエチルエステルが採用した実験モデルにおいて抗血栓症剤として中低度に活性であり、一方ＤＨＡコリンおよびエタノールアミン塩は高度に活性であることを示すものであり（表１）、ＡＤＰによる血栓生長速度の減少率は、最大３３〜４５％程度である。
反対に、ＤＨＡエチルエステルは、血栓溶解剤として高度に活性であり、細動脈血栓溶解時間の減少率は３６．２％である（表２）。しかし、ＤＨＡコリンおよびエタノールアミン塩は少量の投与の後同程度に分解時間を減少させ（３７〜３８％）、したがってこの実験においても同じ用量を投与した場合には明らかにより活性であると考えられる。
【００２２】
前記の全データから、本発明の対象となるオメガ−３高度不飽和酸のアミノアルコール塩はまちがいなくその高度不飽和成分に関するかぎり、文献に既に報告されているあらゆる治療上適用を有する薬物（脂肪低下、コレステロール低下、抗高血圧、抗炎症、および抗腫瘍作用；乾癬、網膜の病気、記憶、学習および免疫学的障害の治療、および種々の中枢および末梢神経系疾患の治療）として用いることができるが、特に、血小板凝集阻害剤（抗血栓作用および血栓溶解作用）として、関連する病気の治療において用いられる。
【００２３】
目的の、既に一部記載した種々の医薬処方物において、本発明の化合物は、個々の活性成分またはそれらの混合物、あるいは他の薬物との組合せとして用いられるが、高度不飽和成分に関して、５０ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１００ｍｇ〜５００ｍｇの範囲の用量で用いられ、１日につき１回以上投与する。
投与は局所および非経口経路を含むいかなる経路によっても可能であるが、経口経路が最も多い。本発明の塩は、従って、通常の調剤技術の指示にしたがって、個々にまたは適当なビヒクルまたは賦形剤で希釈して、ソフトゼラチンカプセル中に配合するか、または種々の物質に吸着させた後カプセル、顆粒、錠剤またはシロップにするか、または滴剤および他の液体形体、または局所用途に関してはローションおよびクリームにしてもよい。
【００２４】
以下に化学調製物および種々の処方の例を挙げて、本発明を更に詳細に記載するが、これはなんら本発明を限定するものではない。
【００２５】
【実施例１】
３２．８ｇの４，７，１０，１３，１６，１９−シス−ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、純度＞９０％）を１４０ｍｌの蒸留水中に懸濁し、撹拌しながら室温に維持する。２４．２ｇの５０％ｗ／ｗコリンヒドロキシド水溶液を次に冷却下に添加し、撹拌を１０分間溶解が完了するまで続ける。溶液を５０ｍｌの石油エーテルで洗浄し、減圧下、低温で蒸発乾固させる。このようにして理論的収率に近いＤＨＡコリン塩を得る。
生成物の元素分析（Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ）および酸および塩基純度は予想値と一致する。
ＩＲスペクトル：カルボキシレートイオンピーク１５６０ｃｍ-1および１３９５ｃｍ-1
1H-NMRスペクトル(DMSO-d6) ：δ5.32 (m, 12H, オレフィン性H)、3.40 (m,2H, CH2N+ ) 、3.10 (s, 9H, (CH3)3N+ ) 、2.80 (m, 12H, 6-, 9-, 12-, 15-, 18-CH2; CH2-O)、 2.14 (m, 2H, 3-CH2)、2.02 (m 2H, 21-CH2) 、1.91 (t, 2H, 2-CH2) 、 0.90 (t, 3H, 22-CH3)
【００２６】
【実施例２】
エタノール性溶液中ＤＨＡ１６．４ｇを、１２．１ｇの５０％ｗ／ｗコリンヒドロキシドエタノール溶液で撹拌しながら室温で処理し、次に溶液を活性炭で脱色し、低温および減圧下に蒸発乾固させる。
残さを５０ｍｌの石油エーテル（沸点４０〜７０℃）で洗浄し、真空乾燥し、理論的収率に近いＤＨＡコリン塩を得る。
生成物の物理化学的および分析的特性は、実施例１で得られたものに相当する。
【００２７】
【実施例３】
ＤＨＡ１６．４ｇを撹拌しながら６．０ｇのコリンヒドロキシドで０℃に冷却しながら処理する。反応混合物は塩形成が進むに連れゆっくり濃厚になり、１０分後、ＤＨＡコリン塩が析出する。前記実施例で得られた生成物と同じ性質を示す。
【００２８】
【実施例４】
３２．８ｇのＤＨＡ（純度＞９０％）を１６０ｍｌの蒸留水中に懸濁し、撹拌しながら６．１ｇのエタノールアミンで処理する。溶液を１０分間撹拌し、次に５０ｍｌの石油エーテルで洗浄し、減圧下、低温で蒸発乾固させる。３８．５ｇのＤＨＡエタノールアミンを得る。
生成物の元素分析および酸および塩基純度は予想値と一致する。
ＩＲスペクトル：カルボキシレートイオンピーク１５５０ｃｍ-1および１４００ｃｍ-1
1H-NMRスペクトル(DMSO-d6) ：δ5.32 (m, 12H, オレフィン性H)、3.48 (t,2H, CH2N+ ) 、2.80/2.71 (m, 12H, 6-, 9-, 12-, 15-, 18-CH2; CH2O)、 2.18 (m, 2H, 3-CH2)、2.00(m, 4H, 2-CH2 および21-CH2) 、0.90 (t, 3H, 22-CH3)
【００２９】
【実施例５】
３８．２ｇのＤＨＡを、ゆっくり撹拌しながら、６．１ｇのエタノールアミンを滴下し、０℃に冷却する。油性混合物はゆっくり濃厚になり、対応する塩が形成される。撹拌下に１０分後、均質反応物は水溶性で、分析したかぎりでは、実施例４に記載のＤＨＡエタノールアミン塩と同一である。
【００３０】
【実施例６】
３０．２ｇの５，８，１１，１４，１７−シス−エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ、純度＞９０％）を実施例１〜３に記載した方法にしたがって１２．１ｇのコリンヒドロキシドで処理する。活性炭で処理した後、理論的収率に近いＥＰＡコリン塩を得る。生成物は水溶性で、物理化学的および分析的特性は、予想値と一致する。
【００３１】
【実施例７】
３０．２ｇのＥＰＡを実施例４および５に記載した方法にしたがって６．１ｇのエタノールアミンで処理する。３６．２ｇのＥＰＡエタノールアミン塩を得、これは非常に水溶性で、分析ではかなり純度が高い。
【００３２】
【実施例８】
０．１モルのＤＨＡを、前記実施例にしたがってコリンヒドロキシド（０．０５モル）およびエタノールアミン（０．０５モル）で処理する。ＤＨＡのコリンおよびエタノールアミンの塩混合物を高収率で得る。
【００３３】
【実施例９】
０．０５モルのＤＨＡおよび０．０５モルのＥＰＡを、前記実施例にしたがって０．１モルのコリンと反応させる。高収率のＤＨＡおよびＥＰＡのコリン塩混合物を得る。
【００３４】
【実施例１０】
適当な酸および塩基を用いたことを除いて前記実施例に記載した方法にしたがって操作して、以下の塩を得る：ＤＨＡ  プロパノールアミン塩
ＤＨＡ  Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン塩
ＤＨＡ  ジエタノールアミン塩
ＤＨＡ  トリエタノールアミン塩
ＥＰＡ  Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン塩
ＥＰＡ  ジエタノールアミン塩
ＥＰＡ  トリエタノールアミン塩
【００３５】
【実施例１１】
ゼラチンカプセルの処方
ＤＨＡ  コリン塩（３９４．２ｇ）ＤＨＡ換算        ３００        ｍｇ
トリアセチン                                      １００        ｍｇ
ゼラチン                                          １２７        ｍｇ
グリセロール                                        ６２        ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                ０．５８  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム              ０．２９  ｍｇ
ビタミンＥ                                            １        ｍｇ
【００３６】
【実施例１２】
ゼラチンカプセルの処方
ＤＨＡ  コリン塩（１３１．４ｇ）ＤＨＡ換算        １００        ｍｇ
トリアセチン                                        ４０        ｍｇ
ゼラチン                                            ６５        ｍｇ
グリセロール                                        ３２        ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                ０．３    ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム              ０．１５  ｍｇ
ビタミンＥ                                            ０．５    ｍｇ
【００３７】
【実施例１３】
ゼラチンカプセルの処方
ＥＰＡ  コリン塩（４０２．３ｍｇ）ＥＰＡ換算      ３００        ｍｇ
トリアセチン                                        ９０        ｍｇ
ゼラチン                                          １２７        ｍｇ
グリセロール                                        ６２        ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                ０．５８  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム              ０．２９  ｍｇ
ビタミンＥ                                            ３．００  ｍｇ
【００３８】
【実施例１４】
ゼラチンカプセルの処方
ＤＨＡエタノールアミン塩（５９２．９ｍｇ）ＤＨＡ換算５００      ｍｇ
ポリエチレングリコール３００                        ２００      ｍｇ
ゼラチン                                            １７０      ｍｇ
グリセロール                                          ８３      ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                  １      ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム                ０．５  ｍｇ
ビタミンＥ                                              １      ｍｇ
アスコルビルパルミタート                                ２．５  ｍｇ
【００３９】
【実施例１５】
ゼラチンカプセルの処方
ＥＰＡ  エタノールアミン塩（３６０．６）ＥＰＡ換算      ３００  ｍｇ
ポリエチレングリコール  ３００                          １３０  ｍｇ
ゼラチン                                                １２７  ｍｇ
グリセロール                                              ６２  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                ０．５８  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム              ０．２９  ｍｇ
ビタミンＥ                                                  １  ｍｇ
【００４０】
【実施例１６】
ゼラチンカプセルの処方
ＤＨＡコリン塩（１９７．１ｍｇ）ＤＨＡ換算              １５０  ｍｇ
ＤＨＡエタノールアミン塩（１９７．１ｍｇ）ＤＨＡ換算    １５０  ｍｇ
ポリエチレングリコール  ３００                          １２０  ｍｇ
ゼラチン                                                １３０  ｍｇ
グリセロール                                              ６４  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                  ０．６  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム                ０．３  ｍｇ
ビタミンＥ                                                  １  ｍｇ
【００４１】
【実施例１７】
ゼラチンカプセルの処方
ＤＨＡエタノールアミン塩（１７７．９ｍｇ）ＤＨＡ換算    １５０  ｍｇ
ＥＰＡエタノールアミン塩（１８０．３ｍｇ）ＥＰＡ換算    １５０  ｍｇ
プロピレングリコール                                    １３０  ｍｇ
ゼラチン                                                １３０  ｍｇ
グリセロール                                              ６４  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルナトリウム                  ０．６  ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルナトリウム                ０．３  ｍｇ
ビタミンＥ                                              ０．３  ｍｇ
ＢＨＴ                                                ０．１５  ｍｇ
【００４２】
【実施例１８】
シロップの処方
ＤＨＡ  コリン塩（３．９４ｇ）ＤＨＡ換算                      ３  ｇ
サッカロース                                                ５０  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル                          ０．０７５  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル                          ０．０２９  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル                        ０．０２１  ｇ
アスコルビン酸ナトリウム                              ０．１００  ｇ
オレンジ香料                                          ０．２５０  ｇ
精製水                                            ｑ．ｓ．１００ｍｌ
【００４３】
【実施例１９】
滴剤の処方
ＤＨＡエタノールアミン塩（３５．５８ｇ）ＤＨＡ換算          ３０  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル                          ０．０９０  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル                          ０．０３５  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル                        ０．０２５  ｇ
メタ亜硫酸水素ナトリウム                              ０．３００  ｇ
オレンジ香料                                                  ２  ｇ
精製水                                            ｑ．ｓ．１００ｍｌ
【００４４】
【実施例２０】
ローションの処方
ＤＨＡ  コリン塩（１３．１４ｇ）                            １０  ｇ
エタノール                                                  ３０  ｇ
メタ亜硫酸水素ナトリウム                                  ０．３  ｇ
Pouce 香料                                                ０．６  ｇ
精製水                                            ｑ．ｓ．１００ｍｌ
【００４５】
【実施例２１】
経口個別用量顆粒剤の処方（即時溶解）
ＤＨＡ  エタノールアミン塩（1185.8mg）ＤＨＡ換算      １０００  ｍｇ
沈降シリカ                                                ５０  ｍｇ
レモン香料                                              １００  ｍｇ
ソルビトール                                          ｑ．ｓ．５  ｇ
【００４６】
【実施例２２】
経口錠剤の処方
ＤＨＡ  エタノールアミン塩（２９６．５）ＤＨＡ換算      ２５０  ｍｇ
沈降シリカ                                                ５０  ｍｇ
微結晶性セルロース                                      １００  ｍｇ
タルク                                                    １０  ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                                    ５  ｍｇ
ラクトース                                          １３５．５  ｍｇ