(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
エステルまたはその薬学的に受容可能な塩を薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアとの混合物中に含む、エストロゲン依存性腫瘍を処置するための薬学的組成物であって、該エステルは、下式のホスホネートエステルであり、
【化１０１】
0003786855.tif 000029
ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、およびアリールから選択され；
ＸはＰであり；
ＹはＯＨであり；そして
−Ｏ−多環基が多環式アルコールの残基であり；ここで、該多環式アルコールは、ステロイド環構造であり、
該多環式アルコール上の該ホスホネート基が、スルフェート多環式アルコールを形成するためにスルフェート基と置換され、そしてｐＨ７．４および３７℃にてステロイドスルファターゼ酵素（Ｅ．Ｃ．  ３．１．６．２）とインキュベートされた場合、５０μＭ未満のＫｍ値を提供し；
ただし、Ｒはメチルではない、薬学的組成物。
【請求項２】
ホスホネートエステルまたはその薬学的に受容可能な塩であって、
該エステルは、下式のホスホネートエステルであり：
【化１０２】
0003786855.tif 000030
ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、およびアリールから選択され；
ＸはＰであり；
ＹはＯＨであり；そして
−Ｏ−多環基が多環式アルコールの残基であり；ここで、該多環式アルコールは、ステロイド環構造であり、
該多環式アルコール上のホスホネート基が、スルフェート多環式アルコールを形成するためにスルフェート基と置換され、そしてｐＨ７．４および３７℃にてステロイドスルファターゼ酵素（Ｅ．Ｃ．  ３．１．６．２）とインキュベートされた場合、５０μＭ未満のＫｍ値を提供し、ここで、
Ｒはメチルではなく、そして該エステルは、コレスト−５−ｎ−３−オール（３β−水素ホスホネート）ではない、
ホスホネートエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項３】
エステルまたはその薬学的に受容可能な塩を薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアとの混合物中に含む、エストロゲン依存性腫瘍を処置するための薬学的組成物であって、該エステルは、下式のスルホネートエステルであり、
【化１０３】
0003786855.tif 000031
ここで、Ｒは、Ｈまたはアルケニルであり；
ＸはＳであり；
ＹはＯであり；そして
−Ｏ−多環基が多環式アルコールの残基であり；ここで、該多環式アルコールは、ステロイド環構造であり、
該多環式アルコール上の該スルホネート基またはホスホネート基が、スルフェート多環式アルコールを形成するためにスルフェート基と置換され、そしてｐＨ７．４および３７℃にてステロイドスルファターゼ酵素（Ｅ．Ｃ．  ３．１．６．２）とインキュベートされた場合、５０μＭ未満のＫｍ値を提供する、
薬学的組成物。
【請求項４】
スルホネートエステルまたはその薬学的に受容可能な塩であって、
該エステルは、下式のスルホネートエステルであり：
【化１０４】
0003786855.tif 000032
ここで、Ｒは、独立して、Ｈまたはアルケニルであり；
ＸはＳであり；
ＹはＯであり；そして
−Ｏ−多環基が多環式アルコールの残基であり；ここで、該多環式アルコールは、ステロイド環構造であり、
該多環式アルコール上の該スルホネート基またはホスホネート基が、スルフェート多環式アルコールを形成するためにスルフェート基と置換され、そしてｐＨ７．４および３７℃にてステロイドスルファターゼ酵素（Ｅ．Ｃ．  ３．１．６．２）とインキュベートされた場合、５０μＭ未満のＫｍ値を提供する、
スルホネートエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項５】
前記多環式アルコールがステロールまたは置換ステロールを表す、請求項１または３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記ステロールが３−ステロールまたは置換３−ステロールである、請求項５に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記ステロールが、エストロン、デヒドロエピアンドロステロン、置換エストロン、および置換デヒドロエピアンドロステロンからなる群より選択される、請求項６に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記Ｒが、Ｈ、または１０炭素原子までを含む、アルキル、シクロアルキルもしくはアリールである、請求項１、３および５〜７のいずれか１つに記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記Ｒが、ＨまたはＣ１−Ｃ５アルキル、フェニルまたはトリルである、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記Ｒが、Ｈまたはメチルである、請求項９に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記ステロールが１つ以上のアルキルまたはアルコキシで置換されている、請求項５〜１０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記アルキルは、メチルまたはエチルである、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記アルコキシはメトキシである、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記エステルがエストロン−３−スルホネート、エストロン−３−メチルスルホネート、エストロン−３−エチルスルホネート、エストロン−３−ｎ−ブチルスルホネート、エストロン−３−ｐ−トリルスルホネート、エストロン−３−カムホリルスルホネート、エストロン−３−ホスホネート、エストロン−３−フェニルホスホネート、エストロン−３−メチルホスホネート、またはエストロン−３−エチルホスホネートである請求項１、３および５〜１３のいずれか１つに記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
２−メトキシエストロン、２−メトキシ−１７β−エストラジオールおよび２−メトキシエストリオールからなる群より選択されるエステル、またはその薬学的に受容可能な塩を薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアとの混合物中に含む、エストロゲン依存性腫瘍を処置するための薬学的組成物。
【請求項１６】
前記多環式アルコールがステロールまたは置換ステロールを表す、請求項２または４のいずれか１項に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項１７】
前記ステロールが３−ステロールまたは置換３−ステロールである、請求項１６に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項１８】
前記ステロールが、エストロン、デヒドロエピアンドロステロン、置換エストロン、および置換デヒドロエピアンドロステロンからなる群より選択される、請求項１７に記載の薬学的組成物またはエステル。
【請求項１９】
前記Ｒが、Ｈ、または１０炭素原子までを含む、アルキル、シクロアルキルもしくはアリールである、請求項２、４、１６〜１８のいずれか１つに記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２０】
前記Ｒが、ＨまたはＣ１−Ｃ５アルキル、フェニルまたはトリルである、請求項１９に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２１】
前記Ｒが、Ｈまたはメチルである、請求項２０に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２２】
前記ステロールが１つ以上のアルキルまたはアルコキシで置換されている、請求項１６〜２１のいずれか１項に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２３】
前記アルキルは、メチルまたはエチルである、請求項２２に記載の薬学的組成物またはエステル。
【請求項２４】
前記アルコキシはメトキシである、請求項２２に記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２５】
前記エステルがエストロン−３−スルホネート、エストロン−３−メチルスルホネート、エストロン−３−エチルスルホネート、エストロン−３−ｎ−ブチルスルホネート、エストロン−３−ｐ−トリルスルホネート、エストロン−３−カムホリルスルホネート、エストロン−３−ホスホネート、エストロン−３−フェニルホスホネート、エストロン−３−メチルホスホネート、またはエストロン−３−エチルホスホネートである請求項２、４および１６〜２４のいずれか１つに記載のエステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２６】
２−メトキシエストロン、２−メトキシ−１７β−エストラジオールおよび２−メトキシエストリオールのいずれか１つである、エステルまたはその薬学的に受容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
（発明の分野）
本発明は、ステロイドスルファターゼインヒビターとして用いられる新規化合物、および該化合物を含有する薬学的組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
（背景および先行技術）
ステロイド核の３−位にスルフェート基を有するステロイド前駆体、またはプロホルモン（本明細書中で以後ステロイドスルフェートという）は、ヒト体内におけるステロイド代謝の中間体として重要な役割を果たすことが知られている。例えば、エストロンスルフェートおよびデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＡ）スルフェートは、体内においてエストロンおよびエストラジオールのようなエストロゲンの生成における中間体として重要な役割を果たすことが知られている。例えば、エストロンスルフェートは、特に、閉経後の女性に特有な主要な循環エストロゲン前駆体の一つを表し、そして乳房の腫瘍におけるエストロンスルファターゼ活性は、エストロゲン形成に関わる他の酵素より１００〜１０００倍大きい（Ｊａｍｅｓら，Ｓｔｅｒｏｉｄｓ，５０，２６９−２７９（１９８７））。
【０００３】
これだけでなく、エストロンおよびエストラジオールのようなエストロゲン、特にそれらの過剰生成は、乳ガンのような悪性状態に強く関係しており（Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ：Ｒ．Ａ．Ｓｔｏｌｌ編，ｐｐ．１５６−１７２，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ（１９８６）を参照のこと）、そしてエストロゲン生成のコントロールは、多くの抗癌治療、例えば、化学療法および手術（例えば、卵巣摘出および副腎摘出）の特定の標的である。内分泌治療に関心が持たれる限りは、これまでの努力は、アロマターゼインヒビターに集中する傾向があった。すなわち、このアロマターゼインヒビターはアロマターゼ活性を阻害する化合物であり、この活性は、添付のエストロゲン代謝経路図（図１）に示すように、アンドロゲンの変換、例えば、アンドロステンジオンおよびテストステロンからエストロンおよびエストラジオールヘのそれぞれの変換に関わっている。
【０００４】
最近出版された国際出願第ＷＯ９１／１３０８３号では、エストロゲン代謝経路で異なる箇所、というよりはむしろ、２つの異なる箇所を標的とすることが提案されてきた。すなわち、ステロイドスルファターゼ活性により、そしてステロイドスルファターゼインビターとしての３−モノアルキルチオホスホネート、より詳細には、エストロン−３−モノメチルチオホスホネートを用いて、ＤＨＡスルフェートおよびエストロンスルフェートのそれぞれＤＨＡおよびエストロンヘの変換の箇所を標的とすることが提案されてきた。
【０００５】
次式のステロイドエノールエステルもまた、抗腫瘍剤として提案されている（米国特許第４  １５０  １２６号を参照のこと）。
【０００６】
【化１】
0003786855.tif 000002
【０００７】
ここで、Ｒ1は、（Ｃ2−Ｃ4）β−またはγ−ハロアルキルであり；
Ｒ2は、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシまたは
ハロゲンであり；
Ａは、
【０００８】
【化２】
0003786855.tif 000003
【０００９】
とＸの間にＣ1−Ｃ4炭化水素鎖を提供し；
Ｘは、ＯまたはＳであり；
ｋおよびｍ＝０または１、ただしｍ＝１のとき、
ｋ＝１であり；そして
Ｓｔは、エステル基が３−位に結合し、そしてこ
のステロイドＡ環に二重結合が隣接するステロイ
ド骨格である。
【００１０】
しかしながら、これらの化合物の抗腫瘍活性に対して、メカニズムの説明は行われていない。この開示では、そのようなステロイドおよびエステルは、特に次式のステロイド−３−スルホネートのエステル交換により調製され得ることが簡単に述べられている。
【００１１】
【化３】
0003786855.tif 000004
【００１２】
ここで、Ｓｔは、上記で定義されたステロイド核であり、そしてＲ3は、クロロまたはフルオロ置換基を必要に応じて含有する低級アルキル、またはクロロ、フルオロまたは低級アルキルで必要に応じて置換されるフェニルである。しかしながら、本特許に記載のステロイドエノールエステルの調製において、そのようなステロイド−３−スルホネートを中間体として使用する例は全く提供されておらず、さらに、そのようなステロイド−３−スルホネート自身がステロイドスルファターゼ活性を阻害し得、それゆえエストロゲン依存性腫瘍の治療において潜在的に価値があることは、何の示唆もされていない。
【００１３】
【発明が解決しようとする課題】
（本発明の目的）
本発明の第１の目的は、インビトロおよびインビボでステロイドスルファターゼ活性を阻害し得る新規化合物を提供することである。
【００１４】
本発明の第２の目的は、インビトロおよびインビボの両方でステロイドスルファターゼインヒビターとして改善された活性を有する新規化合物を提供することである。
【００１５】
本発明の第３の目的は、エステロゲン依存性腫瘍の治療において有効な薬学的組成物を提供することである。
【００１６】
本発明の第４の目的は、乳ガンの治療において有効な薬学的組成物を提供することである。
【００１７】
本発明の第５の目的は、哺乳動物、特にヒトのエステロゲン依存性腫瘍を治療する方法を提供することである。
【００１８】
本発明の第６の目的は、哺乳動物、特に女性の乳ガンを治療する方法を提供することである。
【００１９】
【課題を解決するための手段】
本発明により、次式のスルホネートエステルおよびホスホネートエステルおよびそれらの薬学的に受容可能な塩が提供される：
【００２０】
【化４】
0003786855.tif 000005
【００２１】
ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリールから選択され；Ｘは、ＰまたはＳであり；Ｙは、ＸがＰであるとき、ＯＨであり；そしてＸがＳであるとき、Ｏである；そして−Ｏ−多環基は、多環式アルコールの残基を表し、該多環式アルコールは、そのスルフェートが、ステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である多環式アルコールである。
【００２２】
１つの実施形態では、前記多環式アルコールがステロールである、スルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２３】
１つの実施形態では、ステロールが３−ステロールである、スルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２４】
１つの実施形態では、前記ステロールが、エストロン、デヒドロエピアンドロステロン、置換エストロンおよび置換デヒドロエピアンドロステロンからなる群より選択される、スルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２５】
１つの実施形態では、Ｒが、１０個までの炭素原子を含有するアルキル、シクロアルキルまたはアリールである、上記のいずれかに記載のスルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２６】
１つの実施形態ではＲが、Ｃl−Ｃ5アルキル、フェニルまたはトリルである、スルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２７】
１つの実施形態では、Ｒがメチルである、スルホネートおよびホスホネートが提供される。
【００２８】
１つの実施形態では、本発明は以下を提供する：
エストロン−３−スルホネート；
エストロン−３−メチルスルホネート；
エストロン−３−エチルスルホネート；
エストロン−３−ｎ−ブチルスルホネート；
エストロン−３−ｐ−トリルスルホネート；
エストロン−３−カンフォリルスルホネート；
エストロン−３−ホスホネート；
エストロン−３−フェニルホスホネート；
エストロン−３−メチルホスホネート；または
エストロン−３−エチルホスホネート。
【００２９】
本発明は、エストロゲン依存性腫瘍の治療のための薬学的調製物を提供する。この薬学的調製物は、薬学的に受容可能な希釈剤または担体と混合されるステロイドスルファターゼインヒビターを含有し、該ステロイドスルファターゼインヒビターが、本発明の有効量のスルホネート、ホスホネートまたはホスホネート塩であるか、またはそれらを包含し得る。
【００３０】
本発明は、哺乳動物のエストロゲン依存性腫瘍を治療する方法を提供する。この方法は、該哺乳動物に、インビボでのステロイドスルファターゼ活性のインヒビターを、必要に応じて併用治療レジメの一部として１つまたはそれ以上の他の化学療法剤または他の薬学的活性化合物と混合または同時に投与し、その改善方法が、ステロイドスルファターゼインヒビターとして有効量の以下の式の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩の使用を包含し得る：
【００３１】
【化５】
0003786855.tif 000006
【００３２】
ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリールから選択され；
Ｘは、ＰまたはＳであり；
Ｙは、ＸがＰであるとき、ＯＨであり、そしてＸがＳであるとき、Ｏである；
そして−Ｏ−多環基は多環式アルコールの残基を表し、該多環式アルコールは、そのスルフェートが、ステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である多環式アルコールである。
【００３３】
１つの実施形態において、本発明のステロイドスルファターゼインヒビターの式において、Ｏ−多環基は３−ステロール残基を表す。
【００３４】
１つの実施形態において、前記３−ステロール残基は、３−エストロンおよび３−デヒドロエピアンドロステロン残基から選択される。
【００３５】
１つの実施形態において、前記ステロイドスルファターゼインヒビターは、エストロン−３−スルホネートおよびエストロン−３−ホスホネート、エストロン−３−（Ｃ1−Ｃ5）アルキルスルホネートおよびエストロン−３−（Ｃ1−Ｃ5）アルキルホスホネート、デヒドロエピアンドロステロン−３−スルホネートおよびデヒドロエピアンドロステロン−３−ホスホネート、およびデヒドロエピアンドロステロン−３−（Ｃ1−Ｃ5）アルキルスルホネートおよびデヒドロエピアンドロステロン−３−（Ｃ1−Ｃ5）アルキルホスホネートからなる群より選択される、請求項１９に記載の方法。
２３．前記ステロイドスルファターゼインヒビターが、エストロン−３−ホスホネート、エストロン−３−メチルホスホネート、エストロン−３−エチルホスホネート、エストロン−３−フェニルホスホネート、エストロン−３−メチルスルホネートおよびエストロン−３−トリルスルホネートからなる群より選択される。
【００３６】
【発明の実施の形態】
（発明の要旨）
本発明は、ステロイドスルファターゼ阻害活性を有する新規化合物の発見に基づいている。これらの化合物は、多環式アルコールのスルホネートエステルおよびホスホネートエステルであり、多環式アルコールのスルフェートはステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である。
【００３７】
広く言えば、本発明の新規化合物は、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩であり：
【００３８】
【化６】
0003786855.tif 000007
【００３９】
ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニル
およびアリールから選択され；
Ｘは、ＰまたはＳであり；
ＸがＰであるとき、Ｙは−ＯＨであり、そしてＸが
Ｓであるとき、Ｙは＝Ｏである；そして
Ｏ−多環基は多環式アルコールの残基を表し、そのスルフェートは、ステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である。
【００４０】
本明細書中で用いられるとき、そのスルフェートがステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である多環式アルコールとは、そのスルフェートが、以下のものである多環式アルコールに言及している。すなわち、そのスルフェートは、次式の誘導体であり、ステロイドスルファターゼＥＣ３．１．６．２とｐＨ７．４および３７℃でインキュベートされるときに、５０μｍｏｌより小さいＫｍ値を提供する。
【００４１】
【化７】
0003786855.tif 000008
【００４２】
（詳細な説明）
１つの局面では、本発明は、新規化合物として、多環式アルコールのスルホン酸エステルおよびホスホン酸エステルを提供し、その多環式アルコールは、そのスルフェートが、既に与えられた定義に従って、ステロイドスルファターゼ活性を有する酵素の基質である多環式アルコールである。これらの化合物は上記で示された式Ｉである。
【００４３】
好ましくは、この多環基は、最大約４０個の炭素原子、より通常には約３０個以下の炭素原子を含む全ての置換基を含有する。好ましい多環式化合物は、ステロイド環構造、すなわち、シクロペンタノフェナントレン骨格を含有する化合物である。好ましくは、このホスホネート基またはスルホネート基または置換ホスホネート基または置換スルホネート基は、その骨格の３−位に結合され、すなわち、式ＩＩの化合物である。
【００４４】
【化８】
0003786855.tif 000009
【００４５】
ここで、Ｒ、ＸおよびＹは、上記で定義されたものであり、そしてこの環系ＡＢＣＤは、置換または非置換、飽和または不飽和のステロイド核を表し、好適には、エストロンまたはデヒドロエピアンドロステロンを表す。
【００４６】
他の適切なステロイド環系は以下の通りである：
置換エストロン、すなわち：
２−ＯＨ−エストロン
２−メトキシ−エストロン
４−ＯＨ−エストロン
６α−ＯＨ−エストロン
７α−ＯＨ−エストロン
１６α−ＯＨ−エストロン
１６β−ＯＨ−エストロン
エストラジオールおよび置換エストラジオール、すなわち：
２−ＯＨ−１７β−エストラジオール
２−メトキシ−１７β−エストラジオール
４−ＯＨ−１７β−エストラジオール
６α−ＯＨ−１７β−エストラジオール
７α−ＯＨ−１７β−エストラジオール
１６α−ＯＨ−１７ａ−エストラジオール
１６β−ＯＨ−１７ａ−エストラジオール
１６β−ＯＨ−１７β−エストラジオール
１７α−エストラジオール
１７β−エストラジオール
１７α−エチニル−１７β−エストラジオール
エストリオールおよび置換エストリオール、すなわち：
エストリオール
２−ＯＨ−エストリオール
２−メトキシ−エストリオール
４−ＯＨ−エストリオール
６α−ＯＨ−エストリオール
７α−ＯＨ−エストリオール
置換デヒドロエピアンドロステロン、すなわち：
６α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
７α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
１６α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
１６β−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
一般的な用語では、ステロイド環系ＡＢＣＤは、種々の非妨害性置換基を含有し得る。特に、この環系ＡＢＣＤは、１つまたはそれ以上の以下の置換基を含有し得る：ヒドロキシ、アルキル、特に低級（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよび他のペンチル異性体、およびｎ−ヘキシルおよび他のヘキシル異性体、アルコキシ、特に低級（Ｃ1−Ｃ6）アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシなど、アルキニル、例えば、エチニル、またはハロゲン、例えば、フルオロである。
【００４７】
他の適切な非ステロイド環系は、ジエチルスチルボエストロール、スチルボエストロールおよびステロイドスルファターゼＥＣ３．１．６．２を用いて５０μｍｏｌより小さいＫｍ値を有するスルフェートを提供する他の環系を包含する。
【００４８】
本発明の化合物では、Ｒは、好ましくは、最大１０個の炭素原子を含有する。Ｒがアルキルであるとき、好ましいのは、１〜５個の炭素原子を含有する低級アルキル基、すなわち、メチル、エチル、プロピルなどである。Ｒは、好ましくは、Ｈまたはメチルである。Ｒがアリールであるとき、代表的なのは、フェニルまたはトリル（ｐ−ＰｈＣＨ3）である。
【００４９】
これらのアルキル、シクロアルキルおよびアリールの中では、置換アルキル、置換シクロアルキルおよび置換アリール、すなわち、当該化合物のスルファターゼ阻害活性を妨害しない１つまたはそれ以上の置換基を含有するアルキル、シクロアルキルまたはアリールが挙げられる。非妨害性置換基の例としては、ヒドロキシ、カルボキシ、ケト、アミノ、ハロ、アルコキシ、アルキルおよびアリールが挙げられる。Ｒに適切な置換シクロアルキル基の例は、カンフォリル（ｃａｍｐｈｏｒｙｌ）である。
【００５０】
それら化合物の薬学的に受容可能な塩、例えば、ＹがＯＨである場合の塩、例えば、非毒性金属塩、アンモニウム塩およびアミン塩もまた、本発明の範囲内に包含される。
【００５１】
最も好ましくは、式ＩＩＩおよびＩＶの化合物である：
【００５２】
【化９】
0003786855.tif 000010
【００５３】
【化１０】
0003786855.tif 000011
【００５４】
ここで、Ｒは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ5アルキル、またはアリール、例えば、フェニルまたはトリルであり、すなわち、エストロン−３−スルホネートおよびエストロン−３−ホスホネートおよびデヒドロエピアンドロステロン−３−スルホネートおよびデヒドロエピアンドロステロン−３−ホスホネートであり、そして特に、Ｒが、Ｈ、メチル、エチルまたはフェニルであり、ＸがＰであり、そしてＹが−〇Ｈである化合物であり、そしてＲがメチル、エチル、フェニルまたはトリルであり、ＸがＳであり、そしてＹが＝Ｏである化合物である。
【００５５】
本発明の化合物は、対応する多環式アルコール（ステロール）のエステル化を含み、そして可能ならば、１つまたはそれ以上の予備工程でもって、この多環式アルコール内の他の官能基を保護するのに適切な保護基を導入し、そして反応終了時に保護基が除去されることを含む種々の異なる反応により得られ得る。
【００５６】
ホスホネートの場合には、広く言えば、２つの調製経路がある。その経路の１つは、式（ＩＩ）のＲがアルキルまたはアリールである場合のホスホネートの合成に適しており、アルキルまたはアリールホスホン酸クロライドまたはジクロライドなどの五価リン含有試薬を用いている。例えば、反応スキームＩ：
【００５７】
【化１１】
0003786855.tif 000012
【００５８】
であり、そして他の経路としては、三価リン試薬を用いて、Ｒ＝Ｈの場合の合成に適している。例えば、反応スキームＩＩ：
【００５９】
【化１２】
0003786855.tif 000013
【００６０】
である。
【００６１】
スルホネートは、この場合、以下の反応スキームＩＩＩに従って、多環式アルコール（ステロール）をアルキルまたはアリールスルホニルクロライドＲＳＯ2Ｃｌと反応させること以外は、反応スキームＩと類似の方法で得られる。
【００６２】
【化１３】
0003786855.tif 000014
【００６３】
反応スキームＩを行うための条件は以下の通りである：
ホスホン酸ジクロライドを０℃でエストロンの無水ピリジン溶液に攪拌しながら滴下して加える。次に、反応液を室温まで加温し、そしてさらに２４時間攪拌し続ける。反応混合物を氷に注ぎ、得られた水溶液を酢酸エチルで抽出する。併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥する。濾過後、溶媒を減圧下蒸発させ、そしてトルエンと共蒸発させてガム状粗生成物が得られる。この残渣にＫ2ＨＰＯ4を加え、この混合物をゆっくりと暖めて白濁した溶液を得る。水溶液を酢酸エチルで洗浄し、そして２Ｍの塩酸（水）溶液を加えて酸性にする。そうすると、溶液からに固形物が沈澱し、これを吸引濾過で集める。次に、生成物を乾燥し、そして最後に再結晶により精製する。
【００６４】
反応スキームＩＩを行うための条件は以下の通りである：
イミダゾールを乾燥アセトニトリルに溶解し、そして氷浴中で０℃まで冷却する。三塩化リンをこの溶液に加え、そして混合物を１５分間攪拌する。トリエチルアミンをこの反応液に加え、次いでさらに１５分間攪拌したままにする。最後に、エストロンの乾燥アセトニトリルの懸濁液を加え、そして反応混合物を室温まで加温し、さらに２０時間攪拌し続ける。次に、この反応液に蒸留水を０℃で注意深く加え、そして溶液を室温で１時間攪拌したままにする。その後、この混合物をまずトリメチルアミンと、次いでトルエンと共蒸発させて、油状残渣が得られ、この残渣は放置して固体となる。この残渣をクロロホルムに溶解し、そして水で洗浄する。次に、この水層をクロクホルムで再抽出し、併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥する。溶媒を減圧下蒸発させて、白色でガラス状の固形物が得られる。この固形物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、無色の粘性油として所望の化合物を得る。
【００６５】
反応スキームＩＩＩを行うための条件は以下の通りである：
スルホニルクロライドを０℃でエストロンの無水ピリジン溶液に攪拌しながら滴下して加える。次に、反応液を室温まで加温し、そしてさらに２４時間攪拌し続ける。反応混合物を氷に注ぎ、得られた水溶液を酢酸エチルで抽出する。併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥する。濾過後、溶媒を減圧下蒸発させ、さらにトルエンと共蒸発させて粗結晶物質を得、これは再結晶により精製される。
【００６６】
必要な場合には、多環式アルコール（ステロール）内の官能基は、周知の方法で保護され得、そしてその保護基または保護基群は反応終了時に除去される。
【００６７】
本発明のステロイドスルファターゼインヒビターは、薬剤として投与するために、従来の薬学的製剤技術および薬学的担体、賦形剤、希釈剤などを用いて、通常、非経口投与に適切ないかなる方法でも製剤化され得る。有効なおよその投与量は、当該化合物のそれぞれの活性に依存して、平均体重（７０ｋｇ）の患者に対して、１００〜８００ｍｇ／日の範囲内である。好適でより活性な化合物に対するより通常の投与量は、２００〜８００ｍｇ／日、さらに好ましくは、２００〜５００ｍｇ／日、最も好ましくは、２００〜２５０ｍｇ／日の範囲内である。それらは、１回投与レジメ、分割投与レジメおよび／または数日間にわたる多回投与レジメで投与され得る。経口投与には、それらは、単位投与量当たり１００〜５００ｍｇの化合物を含有する錠剤、カプセル、溶液または懸濁液として製剤化され得る。あるいは、そして好ましくは、これらの化合物は、適切な非経口投与可能な担体内に非経口投与用に製剤化され、そして１日投与量を２００〜８００ｍｇ、好ましくは２００〜５００ｍｇ、より好ましくは２００〜２５０ｍｇの範囲で提供するために製剤化される。しかしながら、そのような有効な１日投与量は、活性成分の固有の活性および患者の体重に依存して変わり、そのような変化は、医者の技術と判断の範囲内にある。
【００６８】
特定の用途としては、本発明のステロイドスルファターゼインヒビターは、別のスルファターゼインヒビターと、または、例えば、４−ヒドロキシアンドロステンジオン（４−ＯＨＡ）のようなアロマターゼインヒビターとの組合せのいずれかとの併用治療に用いられ得る。
【００６９】
以下の調製の実施例および試験データにより本発明を例示する。
【００７０】
【実施例】
（実施例１）
（エストロン−３−ヒドロゲンホスホネートの調製）
イミダゾール（１．７９ｇ；２６．３４  ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（１７  ｍｌ）に溶解し、氷浴中で０℃まで冷却した。三塩化リン（０．６０  ｍｌ；７．９５  ｍｍｏｌ）をこの溶液に加え、そして混合物を１５分間攪拌した。トリエチルアミン（３．８８  ｍｌ；２７．８４  ｍｍｏｌ）をこの反応液に加え、その後さらに１５分間攪拌したままにした。最後に、エストロンの乾燥アセトニトリル（１７  ｍｌ）の懸濁液（０．５  ｇ；１．８５  ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を室温まで加温し、さらに２０時間攪拌し続けた。
【００７１】
次に、０℃で反応液に蒸留水（１２．５  ｍｌ）を注意深く加え、そしてその溶液を室温で１時間攪拌したままにした。次に、この混合物を、まずトリエチルアミン（５０  ｍｌ）と、次いでトルエン（３×３０  ｍｌ）と共蒸発させ、油状残渣を得、これは放置して固体となる。この残渣をクロロホルム（２０  ｍｌ）に溶解し、そして水（２０  ｍｌ）で洗浄した。次に、水層をクロロホルム（３×２０  ｍｌ）で再抽出し、そして併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶媒を減圧下蒸発させて、白色でガラス状の固形物を得た。この固形物をフラッシュクロマトグラフィー（８９：１０：１、クロロホルム：メタノール：トリエチルアミン）により精製して、無色の粘性油として所望の化合物（０．５５  ｇ；６８％）を得た。この生成物の分析結果は以下の通りであった：
融点：２０８−２１０℃
【００７２】
【数１】
0003786855.tif 000015
【００７３】
（実施例２）
（エストロン−３−エチルホスホネートの調製）
エチルホスホニルジクロライド（３当量）を０℃でエストロン（１当量）の無水ピリジン溶液に攪拌しながら滴下して加えた。次に、この反応液を室温まで加温し、そしてさらに２４時間攪拌し続けた。
【００７４】
反応混合物を氷に注ぎ、得られた水溶液を酢酸エチルで抽出した。併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過後、溶媒を減圧下蒸発させ、そしてトルエンと共蒸発させて、ガム状粗生成物が得られた。
【００７５】
この残渣にＫ2ＨＰＯ4緩衝液（０．２５  Ｍ；ｐＨ８．６９）を加え、この混合物をゆっくり暖めて白色で濁った溶液が得られた。水溶液を酢酸エチルで洗浄し、そして２Ｍの塩酸（水）溶液を加えることにより酸性（ｐＨ  ２）にした。そうすると、溶液から固形物が沈澱し、これを吸引濾過で集めた。次に、生成物を乾燥し、そして最後に再結晶により精製した。この生成物の分析結果は以下の通りであった：
融点：２０８−２１０℃
【００７６】
【数２】
0003786855.tif 000016
【００７７】
（実施例３）
（エストロン−３−メチルスルホネート（エストロン−３−メシレート）の調製）
メチルスルホニルクロライド（２当量）を０℃でエストロン（１当量）の無水ピリジン溶液に攪拌しながら滴下して加えた。次に、この反応液を室温までに加温し、そしてさらに２４時間攪拌し続けた。
【００７８】
反応混合物を氷に注ぎ、得られた水溶液を酢酸エチルで抽出した。併せた有機抽出物を無水ＭｇＳＯ4上で乾燥した。濾過後、溶媒を減圧下蒸発させ、そしてトルエンと共蒸発させて粗結晶物質を得た。この物質を再結晶により精製した。この生成物の分析結果は以下の通りであった：
融点：１５２−１５４℃
【００７９】
【数３】
0003786855.tif 000017
【００８０】
（実施例４）
（ＭＣＦ−７細胞におけるエストロン−３−ホスホネートによるステロイドスルファターゼ活性の阻害）
ステロイドスルファターゼは、ステリルスルファターゼＥＣ３．１．６．２として定義されている。
【００８１】
活性ＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞を用いてインビトロでステロイドスルファターゼ活性を測定する。このホルモン依存性細胞系は、ヒト乳ガン細胞の成長のコントロールを研究するために広く使用されている。その細胞は、著しいステロイドスルファターゼ活性を有し（ＭａｃＩｎｄｏｅら，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１２３，１２８１−１２８７（１９８８）；Ｐｕｒｏｈｉｔ  ＆  Ｒｅｅｄ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５０，９０１−９０５（１９９２））、そして米国では、アメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ  ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ））により、および英国では、例えば、インペリアルキャンサーリサーチファンド（Ｔｈｅ  Ｉｍｐｅｒｉａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｆｕｎｄ）により入手可能である。２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，５％ウシ胎児血清、２ｍＭ  グルタミン、非必須アミノ酸および０．０７５％重炭酸ナトリウムを含有する最小必須培地（ＭＥＭ）（Ｆｌｏｗ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｉｒｖｉｎｅ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ）中で細胞を維持した。３０個までのレプリケートの２５ｃｍ2組織培養フラスコに上記培地を用いてフラスコ１個当り約１×１０5個の細胞を接種した。細胞を８０％集密度まで生育させ、そして培地を３日目毎に交換した。
【００８２】
トリプリケートの２５ｃｍ2組織培養フラスコ中のＭＣＦ−７細胞の無損傷の単層をイーグルの平衡塩類溶液（Ｅａｒｌｅ’ｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  ＳａｌｔＳｏｌｕｔｉｏｎ）（ＥＢＳＳ，ＩＣＮ  Ｆｌｏｗ製，Ｈｉｇｈ  Ｗｙｃｏｍｂｅ，Ｕ．Ｋ．）で洗浄し、そして無血清ＭＥＭ（２．５ｍｌ）において５ｐｍｏｌ（７×１０5 ｄｐｍ）の［６，７−3Ｈ］エストロン−３−スルフェート（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，Ｍａｓｓ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．から市販され、比活性６０  Ｃｉ／ｍｍｏｌである）および１０μＭの以下の４つのエストロン−３−ホスホネートのそれぞれとを一緒に３７℃で３−４時間インキュベートした。
【００８３】
【表１】
0003786855.tif 000018
【００８４】
インキュベートした後、各フラスコを冷却し、そして培地（１ｍｌ）を［14Ｃ］エストロン（７×１０3 ｄｐｍ）（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ，Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｕ．Ｋ．から市販され、比活性９７  Ｃｉ／ｍｍｏｌである）を含有する別々の試験管にピペットで移した。この混合物をトルエン（５ｍｌ）と共に３０秒間充分に振盪した。実験は、この処理により９０％より多い［14Ｃ］エストロンおよび０．１％より少ない［3Ｈ］エストロン−３−スルフェートが水相から除去されることを示した。有機相の一部（２ｍｌ）を除去し、蒸発させて、そして残渣の3Ｈおよび14Ｈ含有量をシンチレーション分光計で測定した。得られた3Ｈのカウント数（用いられた培地および有機相の容量、および加えられた［14Ｃ］エストロンの回収量に対して補正された）および基質の比活性から、加水分解されたエストロン−３−スルフェートの量を計算した。実験の各バッチには、スルファターゼ陽性のヒト胎盤から調製されたミクロソーム（陽性コントロール）および（基質の見かけの非酵素的加水分解を評価するために）細胞のないフラスコのインキュベーションが含まれた。細胞単層をザポニン（Ｚａｐｏｎｉｎ）で処理した後、コウルターカウンター（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｃｏｕｎｔｅｒ）を用いてフラスコ１個当りの細胞核数を測定した。トリパンブルー排除法（Ｔｒｙｐａｎ  Ｂｌｕｅ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，  Ｈ．Ｊ．（１９７３）著：Ｔｉｓｓｕｅ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．［Ｋｒｕｓｅ，Ｄ．Ｆ．＆Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ｋ．編］；ｐｐ．４０６−，４０８；  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）を用いて、細胞膜状態および生存率を評価するために、各バッチにおいて１個のフラスコを使用した。
【００８５】
エストロン−３−ホスホネートに関する結果を表Ｉおよび図２に示す。結果は、１０6個の細胞に対しては、インキュベーション期間（２０時間）中に形成された全生成物（エストロン＋エストラジオール）の計算された平均±１Ｓ．Ｄ．として表され、そして統計的有意を示す値に対しては、エストロン−３−ホスホネートを含まないインキュベーションに対する減少（阻害）の百分率で表される。結果の統計的有意を検定するために、対応のないスチューデントのｔ−検定（ｕｎｐａｉｒｅｄ  Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ）を用いた。
【００８６】
【表２】
0003786855.tif 000019
【００８７】
（実施例５）
（ＭＣＦ−７細胞におけるエストロン−３−スルホネートによるステロイドスルファターゼ活性の阻害）
インキュベーションが、エストロン−３−ホスホネートの代わりに以下の５つのエストロン−３−スルホネートのそれぞれを含むこと以外は、実施例４に記載の同一の実験プロトコールを用いてエストロン−３−スルホネートに関する実験を得た。
【００８８】
【表３】
0003786855.tif 000020
【００８９】
エストロン−３−スルホネートに関する結果は、表ＩＩおよび図３に示され、そして表Ｉおよび図２と同じ方浩によりそれぞれ表される。
【００９０】
【表４】
0003786855.tif 000021
【００９１】
（実施例６）
（胎盤ミクロソームにおけるエストロン−３−ホスホネートによるステロイドスルファターぜ活性の阻害）
正常妊娠期のスルファターゼ陽性のヒト胎盤（Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃ  Ｗａｒｄ，Ｓｔ．Ｍａｒｙ’ｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｌｏｎｄｏｎ）をはさみで充分に切り刻み、そして冷リン酸緩衝液（ｐＨ７．４，５０  ｍＭ）で一回洗浄し、次いで冷リン酸緩衝液（５  ｍｌ／ｇ組織）に再懸濁させた。氷中に２分間の冷却時間によって分離された３つの１０秒バースト（ｂｕｒｓｔ）を用いて、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘホモゲナイザーによってホモゲナイゼーションを行った。核および細胞破片を３０分間、２０００ｇ回転で遠心分離（４℃）することにより除去し、そして上清の部分（２ｍｌ）を−２０℃で保存した。この上清のタンパク濃度をＢｒａｄｆｏｒｄの方法（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，７２，２４８−２５４（１９７６））によって測定した。
【００９２】
１００μｇ／ｍｌのタンパク濃度、２０μＭ［６，７−3Ｈ］エストロン−３−スルフェート（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，Ｍａｓｓ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．から市販され、比活性６０  Ｃｉ／ｍｍｏｌである）の基質濃度を用いて３７℃で２０分間のインキュベーション時間によりインキュベーション（１ｍｌ）を行った。以下のエストロン−３−ホスホネートを５０％阻害レベルに及ぶように各々調節された濃度範囲で別々のサンプルに加えた。
【００９３】
【表５】
0003786855.tif 000022
【００９４】
インキュベーション後、各サンプルを冷却し、そして培地（１ｍｌ）を［14Ｃ］エストロン（７×１０3ｄｐｍ）（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ，Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｕ．Ｋ．から市販され、比活性９７  Ｃｉ／ｍｍｏｌである）を含有する別々の試験管にピペットで移した。この混合物をトルエン（５ｍｌ）と共に３０秒間充分に振盪した。実験は、この処理により、９０％より多い［14Ｃ］エストロンおよび０．１％より少ない［3Ｈ］エストロン−３−スルフェートが水相から除去されることを示した。有機相の一部（２ｍｌ）を除去し、蒸発させて、そして残渣の3Ｈおよび14Ｃ含有量をシンチレーション分光計で測定した。得られた3Ｈのカウント数（用いられた培地および有機相の容量、および加えられた［14Ｃ］エストロンの回収量に対して補正された）および基質の比活性から、加水分解されたエストロン−３−スルファターゼの量を計算した。
【００９５】
ステロイドスルファターゼ活性に関する結果は、ＩＣ50の計算値として表ＩＩＩに（すなわち、コントロールに対して５０％阻害を生じるエストロン−３−ホスホネート濃度）で表される。
【００９６】
【表６】
0003786855.tif 000023
【００９７】
（実施例７）
（胎盤ミクロソームにおけるエストロン−３−スルホネートによるステロイドスルファターゼ活性の阻害）
インキュベーションが、エストロン−３−ホスホネートの代わりに以下の２種の代表的エストロン−３−スルホネートを含むこと以外は、実施例６の記載と同一の実験プロトコールを用いてエストロン−３−スルホネートに関する結果を得た。
【００９８】
【表７】
0003786855.tif 000024
【００９９】
ステロイドスルファターゼ活性に関する結果は、ＩＣ50の計算値として表ＩＶ（すなわち、コントロールに対して５０％阻害を生じるエストロン−３−スルホネート濃度）で表される。
【０１００】
【表８】
0003786855.tif 000025
【０１０１】
（実施例８）
本明細書中、実施例４〜７で既に言及され、そしてステロイドスルファターゼ活性を阻害することが示される次の化合物を実施例２の一般的方法により調製した。
【０１０２】
（エストロン−３−トシレート（エストロン−３−ｐ−トルエンスルホネート））
分析データ：
【０１０３】
【数４】
0003786855.tif 000026
【０１０４】
（エストロン−３−フェニルホスホネート）
分析データ：
【０１０５】
【数５】
0003786855.tif 000027
【０１０６】
（エストロン−３−メチルホスホネート）
分析データ：
【０１０７】
【数６】
0003786855.tif 000028
【０１０８】
【発明の効果】
本発明により、インビトロおよびインビボでステロイドスルファターゼ活性を阻害し得る新規化合物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、代謝経路、酵素およびインビボでのエストラジオールの生成に関連するステロイド中間体を示す図式化した図である。ステロイドスルファターゼインヒビターとしての本化合物の活性は添付の図面に示されている：
【図２】図２は、インビトロでヒトＭＣＦ−７細胞のステロイドスルファターゼ活性に関するエストロン−３−ホスホネートの阻害効果を示すヒストグラムである。
【図３】図３は、インビトロでヒトＭＣＦ−７細胞のステロイドスルファターゼ活性に関するエストロン−３−スルホネートの阻害効果を示すヒストグラムである。
【図１】
0003786855.tif 000033
【図２】
0003786855.tif 000034
【図３】
0003786855.tif 000035