(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
0003857353.tif 000011
（式中、Ｒ1は水素原子または低級アルキルを示し、Ｒ2はメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ピバロイル、トリイソプロピルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、またはｔ−ブチルジフェニルシリルを示し、Ｒ3は水素原子、低級アルキル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはアセチルを示す）
で表わされる化合物。
【請求項２】
Ｒ1がメチル、Ｒ2がメトキシカルボニル、Ｒ3が水素原子である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
一般式（ＩＩ）：
【化２】
0003857353.tif 000012
（式中、Ｒ1は水素原子または低級アルキルを示し、Ｒ3は水素原子、低級アルキル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはアセチルを示し、Ｒ４はハロゲンまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシを示す。）
で表わされる化合物を、有機金属触媒を用いた分子内環化反応に付し、一般式（ＩＩＩ）：
【化３】
0003857353.tif 000013
（式中、Ｒ1、Ｒ3は、前記と同意義である。）
で表わされる化合物とした後、水酸基を保護することによる、一般式（Ｉ）：
【化４】
0003857353.tif 000014
（式中、Ｒ1、Ｒ２、Ｒ3は、前記と同意義である。）
で表わされる化合物の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、デュオカルマイシンＳＡ（Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  ＳＡ）およびその誘導体の合成中間体である一般式（Ｉ）：
【化５】
0003857353.tif 000002
（式中、Ｒ1は水素原子または低級アルキルを示し、Ｒ2は水酸基の保護基を示し、Ｒ3は水素原子、低級アルキル、またはアミノ保護基を示す）
で表わされる化合物、および一般式（ＩＩ）：
【化６】
0003857353.tif 000003
（式中、Ｒ1は水素原子または低級アルキルを示し、Ｒ3は水素原子、低級アルキルまたはアミノ保護基を示し、Ｒ4はハロゲンまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシを示す。）
で表わされる化合物を、有機金属触媒を用いた分子内環化反応に付し、一般式（ＩＩＩ）：
【化７】
0003857353.tif 000004
（式中、Ｒ1、Ｒ3は、前記と同意義である。）
で表わされる化合物とした後、水酸基を保護することによる、一般式（Ｉ）：
【化８】
0003857353.tif 000005
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3は、前記と同意義である。）
で表わされる化合物の製造法を提供するものである。
【０００２】
デュオカルマイシンＳＡは、強力な殺細胞性の制癌作用を有し医薬品として極めて有用である。
【０００３】
【従来の技術】
デュオカルマイシンＳＡは、式（ＩＶ）：
【化９】
0003857353.tif 000006
で表わされる物質であり、優れた抗腫瘍作用を示す抗生物質として既に公知の物質である（特開平２−１７７８９０）。
【０００４】
この物質は、当初、土壌から分離した微生物（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）により産生される物質として取得されたものである。その後、この物質およびその類縁物質の理化学的性質も次第に明らかになってきた（ＴＨＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＡＮＴＩＢＩＯＴＩＣＳ，ＶＯＬ．４３，Ｎｏ．８，ＰＡＧＥ１０３７（１９９０）；ＴＨＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＡＮＴＩＢＩＯＴＩＣＳ，ＶＯＬ．４４，Ｎｏ．４，ＰＡＧＥ  ４４５（１９９１）；ＴＨＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＡＮＴＩＢＩＯＴＩＣＳ，ＶＯＬ．４４，Ｎｏ．１０，ＰＡＧＥ  １０４５（１９９１））。
【０００５】
しかしこの物質は、微生物の産生量が著しく少ないため、優れた抗腫瘍作用を有し医薬品として極めて有用であることを期待されているにもかかわらず、十分な検討がなされていない。また、化学的に合成することも試みられているが、これまでその基本骨格であるシクロプロパノインドリノン環を合成することが困難であったことから、化学的合成により取得することも実用的ではなかった。
【０００６】
デュオカルマイシンＳＡの全合成については、三例の報告がある（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｖｏｌ．１１４，Ｎｏ．２５，ＰＡＧＥ  １００５６（１９９２），Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，Ｖｏｌ．４３，Ｎｏ．６，ＰＡＧＥ  １０６４（１９９５），特開平７−５３５５８）。しかしながら、これらによってデュオカルマイシンＳＡは取得されるものの、これらの合成法は多段階工程を要し、収率も悪いものであった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
上記に鑑み、本発明者らは、化学的合成手段によって、収率の良いデュオカルマイシンＳＡの合成方法を確立すべく研究を行ってきた。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは鋭意検討の結果、デュオカルマイシンＳＡ （ＩＶ）を短工程でかつ収率よく化学的に取得するための、合成中間体（Ｉ）を見出した。以下本発明につき詳細に説明する。
【０００９】
本発明化合物の合成法としては、まず一般式（ＩＩ）：
【化１０】
0003857353.tif 000007
（式中、Ｒ1は水素原子または低級アルキルを示し、Ｒ3は水素原子、低級アルキルまたはアミノ保護基を示し、Ｒ4はハロゲンまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシを示す。）
で表わされる原料化合物（一般式ＩＩａおよびＩＩｂで表示）を下記の式に従って合成する。
【化１１】
0003857353.tif 000008
（式中、Ｈａｌはハロゲンを示し、Ｒ4′はトリフルオロメタンスルホニルオキシを示す）
すなわち、出発原料であるピロール誘導体（Ｖ）に対して２−ハロ−３−トリメチルスズピリジン（ＶＩ）をパラジウム触媒の存在下カップリング反応に付し、Ｒ4がハロゲンである化合物（ＩＩａ）とするか、さらに塩酸、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ2Ｏ）で処理することにより、Ｒ4がトリフルオロメタンスルホニルオキシである化合物（ＩＩｂ）を好収率で得ることができる。
【００１０】
次に、上記により得た化合物（ＩＩ）を下記の式に従って三工程で化合物（Ｉ）へ導くことができる。
【化１２】
0003857353.tif 000009
すなわち、化合物（ＩＩ）の５位アセチル部分をシリルエノール体へと変換後、有機金属を用いたクロスカップリングによる分子内環化反応に付し、三環性ピロロキノリン誘導体とした後、生じた水酸基を保護することにより、本発明化合物である（Ｉ）を得る。
【００１１】
本発明化合物（Ｉ）はさらに、下記の式に従って、デュオカルマイシンＳＡの前駆体として既知である、シクロプロパノインドリノン誘導体（ＶＩＩＩ）へと変換することができる。
【化１３】
0003857353.tif 000010
【００１２】
上記のシクロプロパノインドリノン誘導体（ＶＩＩＩ）は、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，Ｖｏｌ．４３，Ｎｏ．６，ＰＡＧＥ  １０６４（１９９５）あるいは特開平７−５３５５８記載の方法によりデュオカルマイシンＳＡ（ＩＶ）へと変換することができる。
【００１３】
本発明において、「ハロゲン」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、よう素が挙げられるが、特にフッ素が好ましい。
本発明において、「アミノ保護基」としては、例えば、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、アセチル等が挙げられる。
本発明において、「水酸基の保護基」としては、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ピバロイル、トリイソプロピルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル等が挙げられるが、特にメトキシカルボニルが好ましい。
本発明において、「低級アルキル」とは、炭素数１〜５のアルキルを意味し、分枝状のものであってもよい。例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル等を挙げることができるが、特にメチルが好ましい。
【００１４】
【実施例】
以下に本発明の実施例を示して、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１５】
参考例１
２−フルオロ−３−トリメチルスズピリジンの調製
ジイソプロピルアミン（５．２３ｍｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）を−２０℃に冷却し、アルゴン雰囲気下１．６９Ｍブチルリチウムのヘキサン溶液（２０．３ｍｌ）を滴下して２０分間攪拌した。この溶液を−７８℃に冷却後、２−フルオロピリジン（３．０２ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（５ｍｌ）を滴下し、−７０℃まで昇温しながら２．５時間攪拌した。さらに、トリメチルスズクロリド（６．５０ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（１０ｍｌ）を滴下した後、−６０℃まで昇温しながら４５分間攪拌した。この反応液をさらに０℃に昇温し、４５分間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）で精製し、標記化合物（７．２７ｇ、収率８９％）を無色油状化合物として得た。
精密質量分析：Ｃ8Ｈ12ＦＮＳｎとして
理論値；２６０．９９７４
実測値；２６０．９９７４
赤外吸収スペクトル（ｎｅａｔ）：νmax（ｃｍ-1）；１５７７，１３８４
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：０．３６（９Ｈ，ｓ），７．１２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，５，３．５Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，７，２Ｈｚ），８．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５，２Ｈｚ）
【００１６】
参考例２
５−アセチル−４−（２−フルオロピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチルの調製
５−アセチル−４−ブロモピロール−２−カルボン酸メチル（２２９ｍｇ）、２−フルオロ−３−トリメチルスズピリジン（３６５ｍｇ）、ビス（トリトリルホスフィン）パラジウム（II）クロリド（４５mg）のトルエン懸濁液（１０ml）をアルゴン雰囲気下１４時間加熱還流した。放冷後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン：酢酸エチル＝４：１）で精製し、得られた粗結晶をジクロロメタン−メタノールから再結晶して、無色プリズム状の標記化合物（２０６ｍｇ，収率６５％）を得た。
融点：１２１〜１２２℃
元素分析値：Ｃ13Ｈ11ＦＮ2Ｏ3として
理論値（％）；Ｃ：５９．５４，Ｈ：４．２３，Ｎ：１０．６９
実測値（％）；Ｃ：５９．４５，Ｈ：４．２８，Ｎ：１０．８９
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）：νmax（ｃｍ-1）；１７０８，１６５３
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．１７（３Ｈ，ｓ），３．９３（３Ｈ，ｓ），６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，重水添加でｓ），７．３１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５，２Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝９，７．５，２Ｈｚ），８．３１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝５，２，１Ｈｚ），１０．３３（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失）
【００１６】
参考例３
５−アセチル−４−[１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３−ピリジル]−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチルの調製
参考例２で得た化合物（１８０ｍｇ）の１，２−ジメトキシエタン溶液（２ｍｌ）へ１０％塩酸水（２ｍｌ）を加え、６０℃にて２時間加熱攪拌した。放冷後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、食塩で飽和後１０％メタノール−ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して得られた粗結晶をジクロロメタン−メタノールから再結晶して、淡黄色プリズム状の標記化合物（１７１ｍｇ，収率９６％）を得た。
融点：２２７〜２２９℃
元素分析値：Ｃ13Ｈ12Ｎ2Ｏ4として
理論値（％）；Ｃ：５９．９９，Ｈ：４．６５，Ｎ：１０．７７
実測値（％）；Ｃ：５９．５７，Ｈ：４．７８，Ｎ：１０．８８
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）：νmax（ｃｍ-1）；１７１５，１６０９
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，１０％ＣＤ3ＯＤ−ＣＤＣｌ3）δ：２．３０（３Ｈ，ｓ），３．８８（３Ｈ，ｓ），６．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７，６．５Ｈｚ），６．８６（１Ｈ，ｓ），７．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，２Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７，２Ｈｚ）
【００１７】
参考例４
５−アセチル−４−[２−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）ピリジン−３−イル]−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチルの調製
参考例３で得た化合物（１１１ｍｇ）のジクロロメタン（３．６ｍｌ）／ピリジン（０．４ｍｌ）溶液を０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１７９μｌ）を加えて５分間攪拌後、さらに室温にて２時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ヘキサン：ジクロロメタン＝１：４）で精製し、得られた粗結晶をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶して、無色プリズム状の標記化合物（１５９ｍｇ，収率９５％）を得た。
融点：１１９〜１２０℃（ｄｅｃ．）
元素分析値：Ｃ14Ｈ11Ｆ3Ｎ2Ｏ6Ｓとして
理論値（％）；Ｃ：４２．８６，Ｈ：２．８３，Ｎ：７．１４
実測値（％）；Ｃ：４２．６２，Ｈ：２．９１，Ｎ：７．０９
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）：νmax（ｃｍ-1）；１７０７，１６５３
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．１０（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，重水添加でｓ），７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，５Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，２Ｈｚ），８．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５，２Ｈｚ），１０．１３（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失）
【００１８】
実施例
４−（メトキシカルボニル）オキシ−３Ｈ−ピロロ[３，２−ｆ]キノリン−２−カルボン酸メチルの調製
参考例４で得た化合物（２３０ｍｇ）のジクロロメタン（４ｍｌ）溶液に、アルゴン雰囲気下０℃にて、トリエチルアミン（０．３３ｍｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸ブチルジメチルシリルエステル（０．３０ｍｌ）を加えて1時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査（４３８ｍｇ）をキシレン（６ｍｌ）に溶解し、トリブチルスズフロリド（２３６ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（II）クロリド（１２ｍｇ）、リチウムクロリド（７５ｍｇ）を加えて1時間加熱還流した。減圧下キシレンを留去し、乾燥後残査をピリジン（２ｍｌ）に溶解し、−２０℃に冷却した。クロロぎ酸メチル（２７２μｌ）を徐々に加え、３０分間攪拌した後、２０℃まで昇温し、さらに3時間攪拌した。減圧下濃縮した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩末を加えジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン）で精製し、得られた粗結晶をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶して、無色針状の標記化合物（１５７ｍｇ，収率８９％）を得た。
融点：１６６〜１６７℃
元素分析値：Ｃ15Ｈ12Ｎ2Ｏ5として
理論値（％）；Ｃ：６０．００，Ｈ：４．０３，Ｎ：９．３３
実測値（％）；Ｃ：５９．９０，Ｈ：３．９６，Ｎ：９．５４
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）：νmax（ｃｍ-1）；１７４７，１７１６
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：３．９０（３Ｈ，ｓ），３．９６（３Ｈ，ｓ），７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，４．５Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９２（１Ｈ，ｓ），８．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．５Ｈｚ），８．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．５，１．５Ｈｚ），１０．３３（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失）
【００１９】
参考例５
（±）−６，７，８，９−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−４−（メトキシカルボニル）オキシ−３Ｈ−ピロロ[３，２−ｆ]キノリン−２−カルボン酸メチルの調製
実施例で得た化合物（１１８ｍｇ）のテトラヒドロフラン（３ｍｌ）／２−プロパノール（６ｍｌ）溶液に０℃にて、クロロぎ酸メチル（３０４μｌ）と水素化ホウ素ナトリウム（１５０ｍｇ）を加え１５分間攪拌後、２２℃に昇温し１７時間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出し、有機層を水洗、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残査（１５６ｍｇ）とトリメチルアミンオキシド２水和物（５２ｍｇ）をアセトン（４．５ｍｌ）、水（０．５ｍｌ）に溶解し、四酸化オスミウム（２ｍｇ）を加え、０℃にて15分、室温にて１．５時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、五酸化リン上1時間乾燥した後、残査をジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。アルゴン雰囲気下０℃にて、トリエチルシラン（０．３８ｍｌ）を添加後、三フッ化ホウ素・エチルエーテル（０．１５ｍｌ）を徐々に滴下した。０℃にて３０分、室温にて６時間攪拌後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶媒を留去した。残査をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ジクロロメタン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、無色アメ状の標記化合物（８６ｍｇ，収率５８％）を得た。
精密質量分析：Ｃ17Ｈ18Ｎ2Ｏ8として
理論値；３７８．１０６２
実測値；３７８．１０５８
赤外吸収スペクトル（ＣＨＣｌ3）：νmax（ｃｍ-1）；１７６８，１７１３，１７００
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７，５Ｈｚ），２．９１（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失），３．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７，５．５Ｈｚ），３．６９〜４．０１（２Ｈ，ｍ），３．８０（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．９２（３Ｈ，ｓ），４．１８〜４．４８（１Ｈ，ｍ），７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，重水添加でｓ），７．６０（１Ｈ，ｓ），９．５９（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失）
【００２０】
参考例６
（±）−６，７，８，９−テトラヒドロ−８−（メタンスルホニル）オキシ−６−（メトキシカルボニル）−４−（メトキシカルボニル）オキシ−３Ｈ−ピロロ[３，２−ｆ]キノリン−２−カルボン酸メチルの調製
参考例５で得た化合物（３６ｍｇ）、トリエチルアミン（５３μｌ）のジクロロメタン（３ｍｌ）溶液に、０℃にてメタンスルホン酸クロリド（１５μｌ）を加え、３０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出後、有機層を飽和硫酸銅水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、さらに水洗した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去した。残査をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ベンゼン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、無色アメ状の標記化合物（４２ｍｇ，収率９７％）を得た。
精密質量分析：Ｃ18Ｈ20Ｎ2Ｏ10Ｓとして
理論値；４５６．０８３７
実測値；４５６．０８３１
赤外吸収スペクトル（ＣＨＣｌ3）：νmax（ｃｍ-1）；１７６８，１７１０
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：３．０６（３Ｈ，ｓ），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１８，４Ｈｚ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１８，５Ｈｚ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，３Ｈｚ），３．９５（６Ｈ，ｓ），４．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，５．５Ｈｚ），５．２０〜５．４６（１Ｈ，ｍ），７．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，重水添加でｓ），７．６１（１Ｈ，ｓ），９．４３（１Ｈ，ｂｒｓ，重水添加で消失）
【００２１】
参考例７
（７ｂＲ*，８ａＳ*）−１，２，４，５，８，８ａ―ヘキサヒドロ―４―オキソシクロプロパ[ｃ]ピロロ[３，２−ｅ]インドール―６―カルボン酸メチルの調製参考例６で得た化合物（４２ｍｇ）のメタノール（４ｍｌ）溶液に室温にて、無水炭酸カリウム（４５ｍｇ）を加え、3時間攪拌する。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、１０％メタノール−ジクロロメタンで抽出後、有機層を水洗、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去した。残査をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（５％メタノール−ジクロロメタン）で精製し、無色粉末状の標記化合物（２１ｍｇ，収率９３％）を得た。
精密質量分析：Ｃ13Ｈ12Ｎ2Ｏ3として
理論値；２４４．０８４７
実測値；２４４．０８５０
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）：νmax（ｃｍ-1）；１６８７
1ＨＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3−ＣＤ3ＯＤ（９：１））δ：１．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．５，４Ｈｚ），１．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，４Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，４．５，４．５Ｈｚ），３．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），３．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，４．５Ｈｚ），３．８９（３Ｈ，ｓ），５．５４（１Ｈ，ｓ），６．５４（１Ｈ，ｓ）
【００２２】
参考例８
デュオカルマイシンＳＡの調製
参考例７で得た化合物（８．５ｍｇ）をテトラヒドロフラン（１ｍｌ）とジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）に溶解し、アルゴン雰囲気下０℃に冷却した。６０％水素化ナトリウム（７ｍｇ）を加えて２０分間攪拌し、さらに２−（イミダゾール−１−イル−カルボニル）−５，６，７−トリメトキシインドール（２１ｍｇ）を加えた。０℃にて４時間攪拌後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残査をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ベンゼン：酢酸エチル＝３：４）で精製し、淡黄色無晶型粉末状のデュオカルマイシンＳＡ（１０ｍｇ，収率６０％）を得た。
精密質量分析：Ｃ25Ｈ23Ｎ3Ｏ7として
理論値；４７７．１５３４
実測値；４７７．１５３３
赤外吸収スペクトル（ＣＨＣｌ3）：νmax（ｃｍ-1）；３４５５，１７１４，１６４２，１６２０
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：１．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．５，４．５Ｈｚ），１．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，４．５Ｈｚ），２．７９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５，４．５Ｈｚ），３．８９（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），４．０７（３Ｈ，ｓ），４．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），４．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，５Ｈｚ），６．６１（１Ｈ，ｂｒｓ），６．７８（１Ｈ，ｓ），６．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．０３（１Ｈ，ｓ），９．３０（１Ｈ，ｂｒｓ），９．９５（１Ｈ，ｂｒｓ）
【００２３】
【発明の効果】
本発明は、強力な殺細胞性の制癌作用を有し医薬品として極めて有用であるデュオカルマイシンＳＡを、微生物によらずに純化学的方法により、しかも温和な条件下に、短工程かつ高収率で取得できる方法の合成中間体およびその製造法である。