(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
2-O-（2-ジエチルアミノエチル）カルバモイル-1,3-O-ジオレオイルグリセロール及びリン脂質を必須構成成分として形成される薬物担体と、平均鎖長が100〜500bpの範囲内にあるpoly(I)・poly(C)との複合体を含有することを特徴とするC型肝炎治療剤又は予防剤。
【請求項２】
リン脂質がレシチンである、請求項２記載のC型肝炎治療剤又は予防剤。
【発明の詳細な説明】
技  術  分  野
本発明は、肝炎治療剤に関するものである。
ここで「Ｉ」とはイノシン酸を、「Ｃ」とはシチジル酸を、「Ａ」とはアデニル酸を、「Ｕ」とはウリジル酸を、それぞれ意味する。
ミスマッチドｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）、ミスマッチドｐｏｌｙ（Ａ）・ｐｏｌｙ（Ｕ）とは、当業者に周知の用語であるが、二本鎖を構成する核酸塩基の中に一部相補的でない塩基を含むｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）、ｐｏｌｙ（Ａ）・ｐｏｌｙ（Ｕ）を意味する。
背  景  技  術
ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）は、ポリイノシン酸とポリシチジル酸とからなる二本鎖ＲＮＡであり、インターフェロン誘導能や免疫賦活作用を有する薬物として広く知られている。
インターフェロンそのものは、現在、Ｃ型肝炎の治療に有効であると報告されている（例、肝胆膵、９（４），６１１（１９８４）、同１３（１），１２３（１９８６）、同１２（５），８０９（１９８６）、同２３（５），１０６５（１９９１））。しかし、かかるインターフェロンを誘導することができる上記ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）を通常の手法によって投与することにより、肝炎を治療しようとしても、その誘導量の程度や毒性等から困難であると考えられている。
一方、いわゆるカチオン性リポソームと一般に呼ばれる、リポフェクチン（登録商標）なる薬物担体や下記の構造式〔Ｉ〕に係る２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロール等のグリセロール誘導体とリン脂質とを必須構成成分として形成される薬物担体等が知られている（例、ＰＣＴ  ＷＯ９１／１７４２４号公報、ＰＣＴ  ＷＯ９４／１９３１４号公報）。
0003804452.tif 000002
上記カチオン性リポソームは、脂質二分子膜からなる、水溶液中で正電荷を持った小胞体であると考えられている。かかるカチオン性リポソームは水溶液中で正電荷を帯び、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡは水溶液中で負電荷を帯びることから、常法により分散処理することによって、カチオン性リポソームとｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等とは容易に複合体を形成することができる。
このような薬物担体とｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡとの複合体が肝炎の治療等に有効であることは全く知られていない。
発  明  の  開  示
本発明の目的は、肝炎の治療や予防に有効な新規な薬剤を提供することにある。
本発明者らは、カチオン性リポソームのような薬物担体とｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡとの複合体が、肝臓や脾臓に特異的に集まり、そこで肝炎の治療等に有効なインターフェロンを長時間誘導し得ることを初めて見いだし、本発明を完成した。
本発明は、一つには、カチオン性リポソームとｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡとの複合体（以下「本複合体」という）を含有することを特徴とする肝炎治療剤又は予防剤（以下「本発明製剤」という）である。
以下、本発明を詳述する。
本発明に適用しうる「カチオン性リポソーム」としては、リポフェクチン（登録商標）、リポフェクトアミン（登録商標）、リポフェクトエース（登録商標）、ＤＭＲＩＥ−Ｃ（登録商標）の他に、ＰＣＴ  ＷＯ９４／１９３１４号公報に開示されている薬物担体、例えば、前記化学式〔Ｉ〕の２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロール（以下「化合物Ａ」という）及びリン脂質を必須構成成分として形成される薬物担体などを挙げることができる。
本発明において好ましいカチオン性リポソームとしては、化合物Ａ及びリン脂質を必須構成成分として形成される薬物担体（以下、この薬物担体を「本担体」という）を挙げることができる。
本発明に適用しうる二本鎖ＲＮＡとしては、例えば、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）、ミスマッチドｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）、ｐｏｌｙ（Ａ）・ｐｏｌｙ（Ｕ）、ミスマッチドｐｏｌｙ（Ａ）・ｐｏｌｙ（Ｕ）を挙げることができる。この中、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）が適当である。
上記二本鎖ＲＮＡの鎖長は、特に制限されないが、５０〜２，０００ｂｐ（ｂｐ：ベースペアー、塩基対数）の範囲内にあるものが適当であり、１００〜５００ｂｐの範囲内にあるものが好ましく、２００〜４００ｂｐの範囲内にあるものがより好ましい。５０ｂｐ未満であると有効性に問題が生じるおそれがあり、２，０００ｂｐより長いと安全性に問題が生じるおそれがある。１００〜５００ｂｐの範囲内にあるものは、本発明において有効性と安全性とのバランスがとれている鎖長領域であると考えられる。ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）についても１００〜５００ｂｐの範囲内にあるものが好ましく、２００〜４００ｂｐの範囲内にあるものがより好ましい。なお、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡは、通常様々な鎖長からなる一定の分布をもって存在するので、前記各鎖長は最大分布の塩基対数を意味し、ここでは「平均鎖長」という。
本担体中のリン脂質としては、医薬上許容されるリン脂質であれば特に制限されず、具体例としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、レシチン等を挙げることができる。また、水素添加されたリン脂質も挙げることができる。好ましいリン脂質としては、卵黄ホスファチジルコリン、卵黄レシチン、大豆レシチン、卵黄ホスファチドを挙げることができる。２種以上のリン脂質を用いることもできる。なお、化合物Ａにおいては、ホスファチジルコリン又はレシチンの方が、カチオン性リポソームにおいて一般的に用いられるホスファチジルエタノールアミンよりも優れている。
好ましい本発明としては、従って、リン脂質がレシチンである本担体と、平均鎖長が１００〜５００ｂｐ（特に２００〜４００ｂｐ）の範囲内にあるｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）との複合体に係る本発明製剤を挙げることができる。
カチオン性リポソームと二本鎖ＲＮＡとの構成比率は、カチオン性リポソームや二本鎖ＲＮＡの種類や鎖長、肝炎の種類や程度等によって異なるが、カチオン性リポソーム１０重量部に対して、二本鎖ＲＮＡ０．０５〜１０重量部が適当であり、０．１〜４重量部が好ましく、０．５〜２重量部がより好ましい。本担体とｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）との構成比率も同様に、本担体１０重量部に対して、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）０．０５〜１０重量部が適当であり、０．１〜４重量部が好ましく、０．５〜２重量部がより好ましい。
本担体中の、化合物Ａとリン脂質との構成比率は、二本鎖ＲＮＡの種類や鎖長、使用量、またリン脂質によって異なるが、化合物Ａ１重量部に対して、リン脂質０．１〜１０重量部が適当であり、０．５〜５重量部が好ましく、１〜２重量部がより好ましい。
本発明製剤は、例えば、本複合体が水溶液中に分散している液剤（注射剤、点滴剤等）やその凍結乾燥製剤の形態をとることができる。液剤の場合、本複合体が、０．００１〜２５％（ｗ／ｖ）の濃度範囲内で存在しているものが適当であり、０．０１〜５％（ｗ／ｖ）の濃度範囲内で存在しているものが好ましく、０．１〜１％（ｗ／ｖ）の濃度範囲内で存在しているものがより好ましい。
本発明製剤は、医薬上許容される任意の添加剤、例えば、乳化補助剤、安定化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤を適当量含有していてもよい。具体的には、炭素数６〜２２の脂肪酸（例、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸）やその医薬上許容される塩（例、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩）、アルブミン、デキストラン等の乳化補助剤、コレステロール、ホスファチジン酸等の安定化剤、塩化ナトリウム、グルコース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース等の等張化剤、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミン等のｐＨ調整剤などを挙げることができる。
本発明製剤は、例えば、リポソームの一般的な製法と同様にして製造することができる。例えば、カチオン性リポソーム又はその原料（例えば、化合物Ａとリン脂質）とｐｏｌｙ（Ｉ）：ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡとを水溶液中で分散処理することにより製造することができる。水溶液としては、注射用水、注射用蒸留水、生理食塩水等の電解質液、ブドウ糖液等を挙げることができる。分散処理は、適当な分散機、例えば、ホモミキサー、ホモジナイザー、超音波分散器、超音波ホモジナイザー、高圧乳化分散機、マイクロフルイダイザー（商品名）、ナノマイザー（商品名）、アルティマイザー（商品名）、マントン−ガウリン型高圧ホモジナイザーを用いて行うことができる。また、当該分散処理は、粗分散を経るなど数段階に分けて行うこともできる。
カチオン性リポソームは、市販のものをそのまま又は適当に加工して用いることができる。
カチオン性リポソームの原料から本発明製剤を製造する場合は、当該原料にｐｏｌｙ（Ｉ）：ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡを加え、一緒に分散処理することができる他、当該原料をまず分散処理してカチオン性リポソームを形成させ、続いてｐｏｌｙ（Ｉ）：ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡを加え再度分散処理して本発明製剤を製造することもできる。
医薬上許容される任意の添加剤は、分散前でも分散後でも適当な工程で添加することができる。
次いで、上記分散処理して得られた本発明製剤を凍結乾燥処理すれば、本発明製剤の凍結乾燥製剤を調製することができる。凍結乾燥処理は、常法により行なうことができる。例えば、上記分散処理して得られた本発明製剤を滅菌後、所定量をバイアル瓶に分注する。約−４０〜−２０℃の条件で予備凍結を約２時間程度行い、約０〜１０℃で減圧下に一次乾燥を行い、次いで、約１５〜２５℃で減圧下に二次乾燥して凍結乾燥する。そして、一般的にはバイアル内部を窒素ガスで置換し、打栓して本発明製剤の凍結乾燥製剤を得ることができる。
本発明製剤の凍結乾燥製剤は、一般には任意の適当な溶液（再溶解液）の添加によって再溶解し使用することができる。このような再溶解液としては、注射用水、生理食塩水等の電解質液、ブドウ精液、その他一般輸液を挙げることができる。この再溶解液の液量は、用途等によって異なり特に制限されないが、凍結乾燥前の液量の０．５〜２倍量、又は５００ｍＬ以下が適当である。
本発明製剤は、ｐｏｌｙ（Ｉ）：ｐｏｌｙ（Ｃ）等の二本鎖ＲＮＡを単独で投与するよりも肝臓や脾臓で特異的に集まり、そこでβインターフェロンを長時間多量に誘導することができるので、ヒトを含む動物の肝炎の治療又は予防に有効である。また、リン脂質がレシチンである本担体と、平均鎖長が１００〜５００ｂｐ（特に２００〜４００ｂｐ）の範囲内にあるｐｏｌｙ（Ｉ）：ｐｏｌｙ（Ｃ）との複合体に係る本発明製剤は、有効性を保持しつつ毒性が極めて低いので、とりわけ優れている。
本発明製剤は、例えば、静脈内投与、経粘膜投与、肝動脈内投与することができる。
本発明製剤の肝炎治療のための投与量は、二本鎖ＲＮＡやリン脂質の種類、肝炎の種類や進行状況、患者の年齢、動物種差、投与経路、投与方法等によって異なるが、二本鎖ＲＮＡの投与量として、１回当たり通常１μｇ〜５０ｍｇ／ヒトが適当であり、１０μｇ〜１０ｍｇ／ヒトが好ましい。ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）の投与量としても、１回当たり通常１μｇ〜５０ｍｇ／ヒトが適当であり、１０μｇ〜１０ｍｇ／ヒトが好ましい。本発明製剤は、１日１〜３回を、連日、隔日、１週毎、２週毎等に１ショット投与や点滴投与等することができる。
発明を実施するための最良の形態
以下、実施例及び試験例を掲げて、本発明を更に詳しく説明する。各実施例及び各試験例において、本発明製剤の濃度は、すべて本発明製剤中の当該ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）の濃度で表している。
実施例１
化合物Ａ２ｇと精製卵黄レシチン２ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したマルトース４０ｇを加え攪拌混合し、ホモジナイザーを用いて５分間分散処理して本担体の粗分散液を得た。かかる粗分散液を更に実験用小型乳化分散機を用いて１時間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに５００ｍｇのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）〔平均鎖長は、約２００ｂｐ〕を含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、更に１時間実験用小型乳化分散機を用いて分散処理し本発明製剤を得た。その後、本発明製剤を１ｍＬづつバイアルに分注し常法に従って凍結乾燥製剤とした。
実施例２
化合物Ａ５０ｇと卵黄ホスファチド３０ｇに１０Ｌの注射用水に溶解したスクロース４ｋｇを加えマントン−ガウリン型高圧ホモジナイザーを用いて１０分間分散処理し、注射用水で２５Ｌに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２０Ｌに１０ｇのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）〔平均鎖長は、約２００ｂｐ〕を含む１２Ｌの水溶液を攪拌しながら添加し、塩酸を用いてｐＨを５．５に調整し、さらに３０分マントン−ガウリン型高圧ホモジナイザーを用いて分散処理して本発明製剤を得た。その後、本発明製剤を２０ｍＬづつバイアルに分注し常法に従って凍結乾燥製剤とした。当該凍結乾燥製剤に市販の５％ブドウ糖輸液（５００ｍＬ）を加えて溶解した。
実施例３
化合物Ａ２ｇと大豆レシチン２ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したブドウ糖２０ｇを加え攪拌混合し、ホモジナイザーを用いて５分間分散処理して本担体の粗分散液を得た。かかる粗分散液を更に実験用小型高圧乳化分散機を用いて１時間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに５０ｍｇのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）〔平均鎖長は、約２００ｂｐ〕を含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、さらに１時間実験用小型高圧乳化分散機を用いて分散処理して本発明製剤を得た。
実施例４
化合物Ａ１．２ｇと精製卵黄レシチン２．０ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したマルトース４０ｇを加え攪拌混合し、実験用小型乳化分散機を用いて３０分間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに２００ｍｇのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）〔平均鎖長は、約２００ｂｐ〕を含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、さらに２時間実験用小型乳化分散機を用いて分散処理して本発明製剤を得た。
実施例５
化合物Ａ１．２ｇと精製卵黄レシチン２．０ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したマルトース４０ｇを加え攪拌混合し、実験用小型乳化分散機を用いて３０分間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに、平均鎖長が３６０ベースのｐｏｌｙ（Ｉ）１００ｍｇと３１８ベースのｐｏｌｙ（Ｃ）１００ｍｇを含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、さらに２時間実験用小型乳化分散機を用いて分散処理して本発明製剤を得た。
実施例６
化合物Ａ２ｇと精製卵黄レシチン２ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したマルトース４０ｇを加え攪拌混合し、ホモジナイザーを用いて５分間分散処理して本担体の粗分散液を得た。かかる粗分散液を更に実験用小型乳化分散機を用いて１時間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに、平均鎖長が１４１９ベースのｐｏｌｙ（Ｉ）２５０ｍｇと１４９１ベースのｐｏｌｙ（Ｃ）２５０ｍｇを含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、更に１時間実験用小型乳化分散機を用いて分散処理し本発明製剤を得た。その後、本発明製剤を１ｍＬづつバイアルに分注し常法に従って凍結乾燥製剤とした。
実施例７
化合物Ａ１．２ｇと精製卵黄レシチン２．０ｇに１００ｍＬの注射用水に溶解したマルトース４０ｇを加え攪拌混合し、実験用小型乳化分散機を用いて３０分間分散処理し、注射用水で２５０ｍＬに定容して本担体分散液を回収した。本担体分散液２５０ｍＬに、平均鎖長が８４ベースのｐｏｌｙ（Ｉ）Ｉ００ｍｇと７６ベースのｐｏｌｙ（Ｃ）１００ｍｇを含む１５０ｍＬの水溶液を攪拌しながら添加し、さらに２時間実験用小型乳化分散機を用いて分散処理して本発明製剤を得た。
実施例８
実施例４と同様にして、平均鎖長が約３５０ｂｐのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）を含む本発明製剤を得た。
実施例９
実施例４と同様にして、平均鎖長が約１４５０ｂｐのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）を含む本発明製剤を得た。
実施例１０
実施例４と同様にして、平均鎖長が約８０ｂｐのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）を含む本発明製剤を得た。
試験例１  マウスの肝臓におけるβインターフェロン誘導効果（ｉｎ  ｖｉｖｏ）
雄性マウス（Ｂａｌｂ／ｃ，５週齢）一群３匹に実施例４に係る本発明製剤又は対照としてのｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独製剤を静脈内に投与し、３時間後に肝臓を摘出した。そして、ＡＧＰＣ法（Ｔｈｅ  ａｃｉｄ−ｇｕａｎｉｄｉｎｅ−ｐｈｅｎｏｌ−ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ法）により全ＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲ法でβインターフェロンのｍＲＮＡ発現量を調べた。その結果を図１に示す。
図１から明らかなように、いずれも濃度依存的にβインターフェロンｍＲＮＡを発現し、βインターフェロンを誘導しているが、その量は、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独投与に比べて本発明製剤の方がより多かった。
試験例２  肝臓以外の臓器でのβインターフェロン誘導効果（ｉｎ  ｖｉｖｏ）
試験例１と同様にして肝臓以外の臓器でのβインターフェロンのｍＲＮＡ発現量を調べた。その結果を図２に示す。
図２から明らかなように、本発明製剤は、腎臓、肺、及び脳においてβインターフェロンｍＲＮＡを発現せず、βインターフェロンをあまり誘導しなかった。
上記試験例１及び２の結果から、ｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独投与では、臓器特異性は見られなかったが、本発明製剤では、肝臓及び脾臓でβインターフェロンを強く誘導した。
試験例３  マウス血清中のインターフェロン量（ｉｎ  ｖｉｖｏ）
雄性マウス（Ｂａｌｂ／ｃ，５週齢）一群３匹に実施例４に係る本発明製剤又は対照としてｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独製剤を静脈内投与し、３時間後に採血して血清を得た。そして、Ｌ９２９細胞のウイルス（ＶＳＶ）感染による変性阻止によって血清中のインターフェロン量を測定した。その結果を表１に示す。
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表１から明らかなように、いずれも投与量依存的に血清中のインターフェロンが検出されたが、本発明製剤を投与した方がより多くのインターフェロンが検出された。
本発明製剤の１００μｇ／ｋｇ投与群の３時間のインターフェロン量は６３Ｉ．Ｕ．／ｍｌであり、２４時間後でも３０Ｉ．Ｕ．／ｍｌあった。これは、ヒト臨床において３ｘ１０８Ｉ．Ｕ．のβインターフェロンを投与した場合、投与直後の血中濃度は６７Ｉ．Ｕ．／ｍｌであり、４５分後には検出されなくなることが報告されていることから、本発明製剤が臨床的にも十分量のインターフェロンを持続的に誘導できることが示唆された。
試験例４  毒性試験
（１）ラット単回投与による肝毒性の発現（急性毒性試験）
６週齢ＳＤ雄性ラット８匹について実施例４に係る本発明製剤の単回静脈内投与を行い、２０時間後の血清アミノアシルトランスフェラーゼ活性を測定した。その結果、５ｍｇ／ｋｇまで死亡例は見られず、５ｍｇ／ｋｇで軽度の血清アミノアシルトランスフェラーゼの上昇が見られた程度であった。１ｍｇ／ｋｇでは血清アミノアシルトランスフェラーゼの上昇はほとんどなかった。
（２）ラット２週間限定亜急性毒性試験
実施例４に係る本発明製剤について、ＳＤ雄性ラット６匹（６週齢）に１４日間連日静脈内投与したところ、１ｍｇ／ｋｇ以下では特に問題となる毒性は見られなかった。
（３）抗原性試験
実施例４に係る本発明製剤について、雄性モルモット（ｈａｒｔｌｅｙ，５週齢）を用い抗原性試験を実施したところ、５０μｇ／モルモットで抗原性は認められなかった。
（４）簡易変異原性試験
実施例４に係る本発明製剤について、簡易復帰突然変異試験および簡易染色体異常試験を実施したところ、１０μｇ／ｍｌで変異原性は認められなかった。
【図面の簡単な説明】
図１は、マウスの肝臓におけるβインターフェロンのｍＲＮＡの発現量を示す。左端の１カラムはコントロールを表す。中央の３カラムは実施例４に係る本発明製剤の投与結果を表し、左から順に１０μｇ／ｋｇ，３０μｇ／ｋｇ，１００μｇ／ｋｇ投与群を表す。右端の３カラムはｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独投与結果を表し、左から順に１０μｇ／ｋｇ，３０μｇ／ｋｇ，１００μｇ／ｋｇ投与群を表す。縦軸は、コントロールに対する薬物投与群のβインターフェロンｍＲＮＡの発現量比を表す。
図２は、マウスの各臓器（上から順に脾臓、腎臓、肺、脳）におけるβインターフェロンのｍＲＮＡの発現量を示す。左端の各１カラムはコントロールを表す。中央の各３カラムは実施例４に係る本発明製剤の投与結果を表し、左から順に１０μｇ／ｋｇ，３０μｇ／ｋｇ，１００μｇ／ｋｇ投与群を表す。右端の各３カラムはｐｏｌｙ（Ｉ）・ｐｏｌｙ（Ｃ）単独投与結果を表し、左から順に１０μｇ／ｋｇ，３０μｇ／ｋｇ，１００μｇ／ｋｇ投与群を表す。縦軸は、コントロールに対する薬物投与群のβインターフェロンｍＲＮＡの発現量比を表す。
【図１】
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【図２】
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