(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるコラーゲン産生促進作用物質を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られる活性酸素消去作用物質を有効成分として含むことを特徴とする活性酸素消去剤。
【請求項３】
イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるラジカル消去作用物質を有効成分として含むことを特徴とするラジカル消去剤。
【請求項４】
イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるヒアルロニダーゼ活性阻害作用物質を有効成分として含むことを特徴とするヒアルロニダーゼ阻害剤。
【請求項５】
親水性有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロパノール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン及びプロピレングリコールから選ばれる請求項１乃至４のいずれかに記載のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、又はヒアルロニダーゼ阻害剤。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれかに記載のイラクサ科霧水葛から抽出される有効成分を含有することを特徴とする皮膚化粧料。
【請求項７】
更に、アスコルビン酸及びその誘導体、プラセンタエキス、コウジ酸、ルシノール、アルブチン、エラグ酸並びにカミツレエキスからなる群より選ばれる１種又は２種以上の美白剤を配合した請求項６に記載の皮膚化粧料。
【請求項８】
請求項１乃至５のいずれかに記載のイラクサ科霧水葛から抽出される有効成分を含有することを特徴とする美容用飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、イラクサ科霧水葛から抽出されるコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、ヒアルロニダーゼ阻害剤、及びこれらを配合した高い皮膚の老化を防止・改善効果を有する皮膚化粧料並びに美容用飲食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
活性酸素とは、通常の酸素よりも活性化された酸素とその関連化合物を意味し、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサイド（即ち、酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン）（・Ｏ２−）、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、ヒドロキシラジカル（・ＯＨ）、一重項酸素の４種類が活性酸素と呼ばれる。
【０００３】
これら活性酸素は、食細胞の殺菌機構にとって必須であり、ウイルスや癌細胞の除去に重要な役割を果たしているが、活性酸素の過剰な生成は生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、コラーゲン等の生体組織を分解、変性又は架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成すると考えられており、活性酸素によって引き起こされるこれらの障害が、皮膚のシワ形成や皮膚の弾力低下等の老化の原因になるものと考えられている。
【０００４】
この場合、過剰のスーパーオキサイドは、細胞内のスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）の触媒作用により逐次消去されるが、このＳＯＤ作用の低下が問題となり、ＳＯＤやＳＯＤ様物質を飲食品、皮膚化粧料、医薬品に添加し摂取、投与することが試みられている。
【０００５】
このような活性酸素消去作用を有する物質としては、グルタチオン、ビタミンＣ，Ｅ，Ｂ６、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニリン等が有効であることが確認されたが、いずれも皮膚化粧料に配合した場合の安定性及び安全性の点に問題がある。また、ＳＯＤ様物質として、種々の天然物が見出されている（特開昭６４−５０８７７号公報、特開平３−８３５４８号公報等参照）。
【０００６】
また、生体内で発生するフリーラジカルは脂質、核酸、タンパク質などと反応し、細胞に傷害を与え、炎症、老化、発癌、心筋梗塞などの様々な疾患の原因となることが知られている。このようなラジカルに起因する疾患の予防を目的として、ラジカル消去物質の開発が試みられている。そのうち天然物に由来するラジカル消去物質として、緑茶葉（特許第２０８５０６１号）、ゴマ種子（特許第３０３１８４４号）などが知られている。
【０００７】
一方、皮膚の表皮及び真皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスにより構成されている。若い皮膚においては、これら皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００８】
近年、この変化を誘導する因子として、特にマトリックス系プロテアーゼの関与が指摘されている。マトリックス系プロテアーゼの中でも、コラゲナーゼ、即ち、ＭＭＰ−１（マトリックスメタロプロテアーゼ）は、皮膚の真皮マトリックスの主な構成成分であるタイプＩ，ＩＩＩコラーゲンを分解する酵素として知られているが、その発現は紫外線の照射により大きく増加し、紫外線によるコラーゲンの減少・変性の一因となり、皮膚のシワの形成等の大きな要因となることが考えられる。
従って、コラーゲン産生の促進は、皮膚の老化を防止・改善する上で重要である。
【０００９】
また、ヒアルロニダーゼは、ヒアルロン酸を加水分解する酵素であるが、このヒアルロン酸は主に真皮の線維芽細胞により産生され、皮膚のみずみずしさ、しなやかさ、艶をよくするためには欠かせない糖タンパクであるが、加齢に代表される皮膚老化の過程で減少する。従って、ヒアルロン酸産生促進を高め、ヒアルロン酸の減少を補うことができれば、皮膚老化の防止が可能になると考えられる。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、安全性、及び生産性に優れ、かつ安価でありながら、高い皮膚の老化を防止・改善効果し得るコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤に対する需要者の要望は極めて強く、未だ十分満足し得るものが提供されていないのが現状である。
【００１１】
本発明は、このような状況下、従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。
即ち、本発明は、真皮層線維芽細胞におけるコラーゲンの産生を促進して皮膚の老化を防止及び／又は改善し得るコラーゲン産生促進剤、スーパーオキサイドを過酸化水素に変換する触媒酵素である活性酸素消去作用、ラジカル消去作用を有するラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有するヒアルロニダーゼ阻害剤、並びにこれら有効成分を含有し、高い皮膚の老化予防・改善作用を備えた皮膚化粧料並びに美容用飲食品を提供することを目的とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、イラクサ科霧水葛の抽出物が、コラーゲン産生促進作用、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を兼ね備えており、これら有効成分を含有する皮膚化粧料及び美容用飲食品が、高い安全性と優れた皮膚の老化を防止及び／又は改善し得ることを見出し、本発明をなすに至った。
【００１３】
従って、本発明は、下記のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、ヒアルロニダーゼ阻害剤、及び皮膚化粧料並びに美容用食品を提供する。
【００１４】
請求項１の発明は、イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるコラーゲン産生促進作用物質を有効成分として含むことを特徴とするコラーゲン産生促進剤である。
請求項２の発明は、イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られる活性酸素消去作用物質を有効成分として含むことを特徴とする活性酸素消去剤である。
請求項３の発明は、イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるラジカル消去作用物質を有効成分として含むことを特徴とするラジカル消去剤である。
請求項４の発明は、イラクサ科霧水葛を、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒で抽出して得られるヒアルロニダーゼ活性阻害作用物質を有効成分として含むことを特徴とするヒアルロニダーゼ阻害剤である。
請求項５の発明は、親水性有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロパノール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン及びプロピレングリコールから選ばれる請求項１乃至４のいずれかに記載のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、又はヒアルロニダーゼ阻害剤である。
請求項６の発明は、請求項１乃至５のいずれかに記載のイラクサ科霧水葛から抽出される有効成分を含有することを特徴とする皮膚化粧料である。
請求項７の発明は、更に、アスコルビン酸及びその誘導体、プラセンタエキス、コウジ酸、ルシノール、アルブチン、エラグ酸並びにカミツレエキスからなる群より選ばれる１種又は２種以上の美白剤を配合した請求項６に記載の皮膚化粧料である。
請求項８の発明は、請求項１乃至５のいずれかに記載のイラクサ科霧水葛から抽出される有効成分を含有することを特徴とする美容用飲食品である。
【００１５】
なお、前記イラクサ科霧水葛の抽出物が、コラーゲン産生促進作用、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を兼ね備え、安全性に優れ、皮膚の老化を防止及び／又は改善に有効であることは全く知られておらず、このことは本発明者らの新知見である。
【００１６】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について更に詳しく説明する。
本発明のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤及びヒアルロニダーゼ阻害剤は、イラクサ科霧水葛（ムスイカツ）から抽出されるコラーゲン産生促進作用物質、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、及びヒアルロニダーゼ阻害物質を有効成分として含むものである。
【００１７】
前記霧水葛（ムスイカツ）は、イラクサ科植物であり、別名オオバヒメマオとも呼ばれ、多年生草本で、茎は無毛か又は疎毛がある。この霧水葛は日本、中国、インドなどにおいて野原、道端などに自生しており、容易に入手することができる。本発明においては、霧水葛の葉部、茎部などの地上部を抽出原料として使用する。
【００１８】
前記イラクサ科霧水葛が含有するコラーゲン産生促進作用物質、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、及びヒアルロニダーゼ活性阻害物質の詳細については不明であるが、上記抽出原料を用いて、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法により得ることができる。なお、抽出液、該抽出液の希釈液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１９】
例えば、イラクサ科霧水葛の地上部を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用い粉砕して溶媒抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、霧水葛の地上部は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、抽出処理を効率よく行うことができる。
【００２０】
前記抽出に用いる溶媒としては、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合液を室温乃至溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。
【００２１】
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、前記抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２２】
前記親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、イソプロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコールなどが挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。なお、水と親水性有機溶媒との混合系溶媒を使用する場合には、低級アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜９０質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水１０質量部に対して１〜４０質量部、多価アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜９０質量部添加することが好ましい。
【００２３】
本発明において、イラクサ科霧水葛からコラーゲン産生促進作用物質、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、及びヒアルロニダーゼ活性阻害物質を抽出するにあたり特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温乃至還流加熱下で、任意の装置を用いて抽出することができる。
【００２４】
具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽に、イラクサ科霧水葛の地上部を投入し、必要に応じて時々攪拌しながら、３０分〜２時間静置して可溶性成分を溶出した後、濾過して固形物を除去し、得られた抽出液から抽出溶媒を溜去し、乾燥することにより抽出物が得られる。抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）であり、抽出条件は、抽出溶媒として水を用いた場合には、通常５０〜９５℃で１〜４時間程度である。また、抽出溶媒として水とエタノールとの混合溶媒を用いた場合には、通常４０〜８０℃で３０分〜４時間程度である。
なお、溶媒で抽出することにより得られる抽出液は、抽出溶媒が安全性の高いものであればそのまま配合して本発明の各種有効成分として用いることができるが、濃縮液又はその乾燥物としたもののほうが利用しやすい。
【００２５】
得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、その生理活性の低下を招かない範囲で常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。なお、精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。
【００２６】
得られた抽出液はそのままでもコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすく、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアー、その他任意の助剤を添加することができる。また、前記霧水葛抽出物は、常法に従って製剤化して粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができる。
【００２７】
＜皮膚化粧料＞
前記霧水葛抽出物から得られるコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤は、皮膚の老化を防止及び／又は改善することができると共に、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているため、皮膚化粧料に配合するのが好適である。前記コラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤の皮膚化粧料への配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、好適な配合率は標準的な霧水葛抽出物に換算して皮膚化粧料全量に対し約０．０１〜１０質量％である。
【００２８】
また、本発明の皮膚化粧料には、更に、美白剤を皮膚化粧料全量に対し０．０００１〜１０質量％、特に０．１〜５質量％配合することが好ましい。
【００２９】
前記美白剤としては、例えば、アスコルビン酸又はその誘導体、イオウ、胎盤加水分解物、エラグ酸又はその誘導体、コウジ酸又はその誘導体、グルコサミン又はその誘導体、アルブチン又はその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸又はその誘導体、グルタチオン、カミツレエキス、プラセンタエキス、ルシノール、アルニカエキス、オウゴンエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物又はその抽出物、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、油溶性カンゾウエキス（カンゾウ疎水性フラボン、グラブリジン、グラブレン、リコカルコンＡ）などが挙げられ、これらの中でも、美白効果を向上させる観点から、アスコルビン酸及びその誘導体、プラセンタエキス、コウジ酸、ルシノール、アルブチン、エラグ酸並びにカミツレエキスから選ばれる１種又は２種以上を用いることが好ましい。
【００３０】
本発明の皮膚化粧料において、前記コラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤、更には美白剤と共に任意成分として利用可能なものとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選定されるが、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料などが用いられる。これらの任意成分は、前記コラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤と併用した場合、相乗的に作用して、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらす場合がある。
【００３１】
前記収斂剤としては、例えば、クエン酸又はその塩類、酒石酸又はその塩類、乳酸又はその塩類、塩化アルミニウム、硫酸アルミニウム・カリウム、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、パラフェノールスルホン酸亜鉛、硫酸亜鉛、ジユエキス、エイジツエキス、ハマメリスエキス、ゲンノショウコエキス、チャカテキン類、オドリコソウエキス、オトギリソウエキス、ダイオウエキス、ヤグルマソウエキス、キズタエキス、キューカンバーエキス、マロニエエキス、サルビアエキス、メリッサエキスなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３２】
前記殺菌・抗菌剤としては、例えば、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ジステアリルメチルアンモニウム、塩化ベンゼトニウム、塩酸クロルヘキシジン、感光素１０１号、感光素２０１号、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン酸、ハロカルバン、レゾルシン、パラクロロフェノール、フェノキシエタノール、ビサボロール、ヒノキチオール、メントール、キトサン、キトサン分解物、ジユエキス、クジンエキス、エンメイソウエキス、ビワエキス、ユッカエキス、アロエエキス、ケイヒエキス、ガジュツエキスなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３３】
前記紫外線吸収剤としては、例えば、β−イソプロピルフラノン誘導体、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、オキシベンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシベンゾフェノン、シノキサート、ジイソプロピルケイヒ酸メチル、メトキシケイヒ酸オクチル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラジメチルアミノ安息香酸アミル、パラジメチル安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、酸化チタン、β−カロチン、γ−オリザノール、コメヌカエキス、アロエエキス、カバノキエキス、シラカンバエキス、カミツレエキス、ヘンナエキス、チョウチグルミエキス、イチョウ葉エキス、カミツレエキス、セイヨウサンザシエキス、油溶性カンゾウエキスなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３４】
前記保湿剤としては、例えば、セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸又はそのエステル類、エイコサペンタエン酸又はそのエステル類、ペクチン、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物又はその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ−オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３５】
前記細胞賦活剤としては、例えば、リボフラビン又はその誘導体、ピリドキシン又はその誘導体、ニコチン酸又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体、α−トコフェロール又はその誘導体、アルニカエキス、ニンジンエキス、ナタネニンジンエキス、ヘチマエキス（サポニン）、シコンエキス、オウバクエキス、ボタンピエキス、シャクヤクエキス、ムクロジエキス、ベニバナエキス、アシタバエキス、ビワ葉エキス、ヒキオコシエキス、ユキノシタエキス、黄杞エキス、サルビアエキス、ニンニクエキス、マンネンロウエキスなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３６】
前記消炎・抗アレルギー剤としては、例えば、アズレン、アラントイン、アミノカプロン酸、インドメタシン、塩化リゾチーム、イプシロンアミノカプロン酸、オキシベンゾン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、感光素３０１号、感光素４０１号、塩酸ジフェンヒドラミン、トラネキサム酸又はその誘導体、アデノシンリン酸、エストラジオール、エスロン、エチニルエストラジオール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プロゲステロン、コルチコステロン、アルニカエキス、インチンコウエキス、サンシシエキス、ジュウヤクエキス、カンゾウエキス、トウキエキス、ヨモギエキス、ワレモコウエキス、リンドウエキス、サイコエキス、センキュウエキス、セイヨウノコギリソウエキス、オウレンエキス、シソエキスなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３７】
前記油脂類としては、例えば、大豆油、アマニ油、ゴマ油、ヌカ油、綿実油、ナタネ油、サフラワー油、トウモロコシ油、オリーブ油、ツバキ油、アーモンド油、ヒマシ油、落花生油、カカオ油、パーム核油、牛脂、ミンク油、ホホバ油、月見草油、馬油などが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３８】
前記ロウ類としては、例えば、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、蜜ロウ、サラシ蜜ロウ、鯨ロウ、セラックス、ラノリン類などが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００３９】
前記炭化水素類としては、例えば、流動パラフィン、ワセリン、マイクロスリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ポリエチレン末などが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４０】
前記脂肪酸類としては、例えば、ステアリン酸、リノール酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ヘベニン酸、ラノリン酸、オレイン酸、ウンデシレン酸、イソステアリン酸などが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４１】
前記アルコール類としては、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ラノリンアルコール、水添ラノリンアルコール、オレイルアルコール、ヘキサデシルアルコール、２−オクチルドデカノール、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコール又はその重合体、ブドウ糖、白糖、コレステロール、フィトステロール、セトステアリルアルコールなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４２】
前記エステル類としては、例えば、オレイン酸デシル、ステアリン酸ブチル、ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキシル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、ジオレイン酸プロピレングリコール、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸グリセリン、トリミリスチン酸グリセリン、乳酸セチルなどが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４３】
前記界面活性剤としては、例えば、ノニオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤などを使用することができるが、中でも皮膚疾患の発生のない、又は軽微な化粧品原料基準に収載された界面活性剤が好ましい。
具体的には、大豆レシチン、卵黄レシチン、サポニン、オリゴ配糖体、リン脂質系バイオサーファクタント、アシルペプチド系バイオサーファクタント、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンセチルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブチルエーテル、ポリオキシエチレンヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルリン酸、ポリオキシエチレンラウリルエーテルリン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラノリン、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシプロピレンブチルエーテル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリリン酸ナトリウム、モノオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸ソルビタン、モノステアリン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、モノラウリン酸ポリエチレングリコール、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビット、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミドなどの界面活性剤が挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４４】
前記香料としては、例えば、メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミント油、ユーカリ油、アニス油などが挙げられ、これらの１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００４５】
なお、本発明の皮膚化粧料は、優れた皮膚の老化防止及び／又は改善効果を有しており、例えば、軟膏、クリーム、乳液、化粧水、ローション、パック、口紅、リップクリーム、入浴剤等として幅広く用いることができる。
【００４６】
＜美容用飲食品＞
前記霧水葛抽出物の有効成分であるコラーゲン産生促進作用物質、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、及びヒアルロニダーゼ阻害物質は、消化管で消化されないことが確認できているので、任意の飲食品や栄養補助食品に配合して、これらを摂取した際のコラーゲン産生促進作用、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を通じて皮膚の老化を防止及び／又は改善することができる。なお、本発明において、「美容用飲食品」とは、皮膚の老化防止・改善を図ることを目的とした幅広い飲食物を意味する。
【００４７】
前記美容用飲食品は、前記本発明のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤をその活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、前記本発明のコラーゲン産生促進作用物質、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、及びヒアルロニダーゼ阻害物質を主成分とする顆粒状又は錠剤状栄養補助食品であってもよい。
【００４８】
本発明のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤を配合して美容用飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等の任意の助剤を添加して任意の剤形に製剤化することができる。
【００４９】
本発明の美容用飲食品におけるコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤の配合量は、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して成人一日当たり抽出物の摂取量が１日当たり約１〜１０００ｍｇ程度となるように調整することが好ましい。
【００５０】
前記美容用飲食品については、特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これら飲料の濃縮液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、天ぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；錠剤状、顆粒状等の種々の形態の健康・栄養補助食品類；その他スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物などに配合し得る。
【００５１】
なお、本発明のコラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、ヒアルロニダーゼ阻害剤、及びこれらを配合した皮膚化粧料並びに美容用飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、特に制限はなく、ヒト以外の動物に対しても適用することができる。
【００５２】
【実施例】
以下、製造例及び実施例を示して本発明を更に具体的に説明するが、本発明は、下記実施例に何ら限定されるものではない。
【００５３】
〔製造例１〕
霧水葛の地上部の乾燥物３００ｇを、表１に示したＮｏ．１〜３の抽出溶媒２０００ｍＬに投入し、穏やかに攪拌しながら３時間、７０℃に保った後、ろ過し、ろ液を４０℃で減圧下にて濃縮し、減圧乾燥機で乾燥して試料Ｎｏ．１〜３の霧水葛抽出物を得た。各抽出物の収率は表１に示した通りであった。
【００５４】
【表１】
0003827581.tif 000002
【００５５】
〔実施例１〕  コラーゲン産生促進作用試験
製造例１の試料Ｎｏ．１〜３について、Ｗｅｂｓｔｅｒらの方法（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．９６，２２０，１９７９）に準拠して試験を行った。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【００５６】
まず、ヒトの線維芽細胞を２４ウエルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの下にて、各試料添加培地（試料濃度：５０ｐｐｍ、１２．５ｐｐｍ）で数日間培養した後、β−アミノプロピオニトリルと〔３Ｈ〕−プロリンとを添加し、更に２４時間培養した。当該培養液全体にペプシン／酢酸溶液を加えて４℃下で１６時間消化した。
次いで、この消化液にキャリアーを加えて０．７ｍｏｌ／Ｌ食塩水溶液で沈殿させ、更に中性条件下で再溶解させて、４．２ｍｏｌ／Ｌ食塩水溶液で再沈殿させた。得られた沈殿物を２０％エタノールで洗浄した後、その沈殿物の放射活性を測定した。
コラーゲン産生促進率は、試料無添加時の放射活性を１００％として算出した。各試料のコラーゲン産生促進率（％）を表２に示す。
【００５７】
【表２】
0003827581.tif 000003
表２の結果から、霧水葛の抽出物が線維芽細胞のコラーゲン産生を促進する作用を有することが確認できた。
【００５８】
〔実施例２〕  スーパーオキサイド様活性作用試験（ＮＢＴ法）
製造例１の試料Ｎｏ．１〜３について、スーパーオキサイド消去作用を試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【００５９】
３ｍｍｏｌ／Ｌ キサンチン、０．０５ｍｏｌ／Ｌ Ｎａ２ＣＯ３緩衝液（ｐＨ１０．２）、３ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ、ＢＳＡ溶液、及び０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＢＴ各０．１ｍＬを試験管にとり、これに各試料溶液（溶媒：ＤＭＳＯ＋水）０．１ｍＬを添加し、２５℃で１０分間放置した。
次いで、キサンチンオキシダーゼ溶液（酵素溶液）を加えて素早く攪拌し、２５℃で２０分間静置した。その後、６ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化銅０．１ｍＬを加えて反応を停止させ、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。同様の操作と吸光度の測定を、酵素溶液を添加せずに行った。更に、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。
【００６０】
以上の測定結果から、下記数式１によりスーパーオキサイド消去率（％）を求めた。
＜数式１＞
スーパーオキサイド消去率（％）＝〔１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）〕×１００
但し、Ａは酵素溶液添加、試料溶液添加時の吸光度を意味し、Ｂは酵素溶液無添加、試料溶液添加時の吸光度を意味し、Ｃは酵素溶液添加、試料溶液無添加時の吸光度を意味し、Ｄは酵素溶液無添加、試料溶液無添加時の吸光度を意味する。
【００６１】
次に、試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、スーパーオキサイドの消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（ｐｐｍ）を内挿法により求めた（ＩＣ５０値が小さいほどスーパーオキサイド消去作用が強い）。結果を表３に示す。
【００６２】
【表３】
0003827581.tif 000004
表３の結果から、霧水葛抽出物が強いＳＯＤ様活性作用を有することが確認できた。
【００６３】
〔実施例３〕  ＤＰＰＨ消去作用試験
製造例１の試料Ｎｏ．１〜３について、ＤＰＰＨ消去作用を試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【００６４】
１．５×１０−４ｍｏｌ／Ｌ ＤＰＰＨ（１，１−Ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｈｙｄｒａｚｙｌ）エタノール溶液３ｍＬに各試料溶液３ｍＬを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、３０分間静置した。その後、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。
コントロールとして、試料溶液の代わりに試料溶液を溶解した溶媒を用いて同様に操作し、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。また、ブランクとして、エタノールに試料溶液３ｍＬを加えた後、直ちに波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。
【００６５】
以上の測定した各吸光度から、下記数式２によりラジカル消去率を算出した。
＜数式２＞
ＤＰＰＨ消去率（％）＝{１−（Ｂ−Ｃ）／Ａ}×１００
但し、Ａはコントロールの吸光度を意味し、Ｂは試料溶液を添加した場合の吸光度を意味し、Ｃはブランクの吸光度を意味する。
【００６６】
次に、試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、ＤＰＰＨ系ラジカルの消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（ｐｐｍ）を内挿法により求めた（ＩＣ５０値が小さいほどＤＰＰＨ消去作用が強い）。結果を表４に示す。
【００６７】
【表４】
0003827581.tif 000005
表４の結果から、霧水葛抽出物がＤＰＰＨ系ラジカルの消去作用を有することが確認できた。
【００６８】
〔実施例５〕  ヒアルロニダーゼ阻害作用試験
製造例１の試料Ｎｏ．１〜３について、ヒアルロニダーゼ阻害作用を試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【００６９】
ヒアルロニダーゼ溶液（４００ユニット／ｍＬ，ｐＨ３．５酢酸緩衝液）０．１ｍＬと、各試料溶液０．２ｍＬを混合し、３７℃に２０分間加温した後、活性化剤溶液（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２）０．２ｍＬを加え、３７℃に２０分間加温して酵素を活性化した。ヒアルロン酸カリウム緩衝液０．５ｍＬを加え、３７℃で４０分間反応させた後、０．４Ｎ 水酸化ナトリウム０．２ｍＬを加えると共に氷冷して反応を停止させた。
【００７０】
次いで、０．８ｍｏｌ／Ｌ ホウ酸溶液（ｐＨ９．１）０．２ｍＬを加え、沸騰湯浴中で３分間加熱後、直ちに１０分間氷冷した。ＤＭＡＢ試薬（ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド１０ｇを１０Ｎ 塩酸１２．５ｍＬと酢酸８７．５ｍＬの混合液に溶解し、酢酸で１０倍に希釈したもの）６．０ｍＬを加えて３７℃に２０分間保つことにより、上記酵素反応で遊離したＮ−アセチルグルコサミンを発色させ、波長５８５ｎｍの吸光度を測定した。
コントロールとして、試料溶液の代わりに水を加えた場合について、同様の操作と吸光度測定を行った。
以上の測定結果から、下記数式３によりヒアルロニダーゼ活性阻害率（％）を算出した。
＜数式３＞
0003827581.tif 000006
但し、Ａは試料溶液添加，酵素添加時の吸光度を意味し、Ｂは試料溶液添加，酵素無添加時の吸光度を意味し、Ｃは試料無添加，酵素添加時（コントロール）の吸光度を意味し、Ｄは試料無添加，酵素無添加時（コントロール）の吸光度を意味する。
【００７１】
次に、試料溶液の濃度を段階的に変更して上記ヒアルロニダーゼ活性阻害率を測定し、阻害率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０を内挿法により求めた（ＩＣ５０値が小さいほどヒアルロニダーゼ活性阻害作用が強い）。結果を表５に示す。
【００７２】
【表５】
0003827581.tif 000007
表５の結果から、霧水葛抽出物が、ヒアルロニダーゼ阻害作用を有することが確認できた。
【００７３】
〔実施例６〕  肌荒れ改善作用（皮膚の老化防止・改善作用）試験
製造例１の霧水葛抽出物（試料Ｎｏ．１）を配合した下記組成の乳液（以下、「本発明乳液」という）を常法に従って調製した。
【００７４】
<本発明乳液>
霧水葛抽出物（試料Ｎｏ．１）                                      １ｇ
セチルアルコール                                              ０．５ｇ
ミツロウ                                                      ２．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（１０Ｅ.Ｏ）          １．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                    １．０ｇ
ヒアルロン酸                                                  ０．１ｇ
プロピレングリコール                                          ５．０ｇ
エタノール                                                    ３．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．３ｇ
香料                                                        ０．０３ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｍＬとする）
【００７５】
上記本発明乳液と、霧水葛抽出物を含まない以外は本発明乳液と同じ組成からなる比較乳液とについて、下記の評価試験を行った。
【００７６】
<評価試験>
被験者：２２〜４３歳の女性多数の中から、皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれている（表６に示す評価が１）、又は皮溝・皮丘が不鮮明で、角質が部分的にめくれている（表６に示す評価が２）、肌荒れと判定された２０名を選抜して被験者とした。
【００７７】
<塗布試験>
各被験者に、顔の右半分には本発明乳液を、左半分には比較乳液を、朝夕各１回、３０日間塗布させた。
【００７８】
〔判定１：肌荒れ改善効果〕
塗布試験終了後、シルフロ（ＦＬＥＸＩＣＬ  ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＳ  ＬＴＤ製）によるレプリカ法を用いて顔のレプリカをとり、５０倍の顕微鏡で皮紋の状態及び角質剥離の状態を観察し、表６に示す評価基準で肌の状態を判定した。判定結果を表７に示す。
【００７９】
【表６】
0003827581.tif 000008
【００８０】
【表７】
0003827581.tif 000009
表７の結果から、本発明乳液を塗布した領域は、比較乳液を塗布した領域に比べて顕著に肌荒れ（皮膚の老化）が改善されることが確認できた。
【００８１】
〔判定２・官能評価〕
使用感と肌への効果について、本発明乳液と比較乳液とを比較した場合の優劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果を表８に示す。
【００８２】
【表８】
0003827581.tif 000010
表８の結果から、官能評価によっても、上記判定１と同様の効果と、優れた使用感とが確認できた。
【００８３】
従って、判定１及び２の結果から、霧水葛抽出物を配合した皮膚化粧料が皮膚の老化防止・改善作用（肌荒れ改善作用）を有すると共に、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れていることが確認できた。
【００８４】
〔実施例７〕  乳液
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル                                                      ４ｇ
オリーブオイル                                                    ２ｇ
スクワラン                                                        ２ｇ
セタノール                                                        ２ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                        ２ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ）                ２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.Ｏ)                ２ｇ
１，３−ブチレングリコール                                        ３ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１５ｇ
香料                                                        ０．０５ｇ
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．１）                            １ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００８５】
〔実施例８〕  化粧水
下記の組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン                                                        ３ｇ
１，３−ブチレングリコール                                        ３ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.Ｏ)            ０．５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１５ｇ
クエン酸                                                      ０．１ｇ
クエン酸ソーダ                                                ０．１ｇ
香料                                                        ０．０５ｇ
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．２）                            ２ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００８６】
〔実施例９〕  クリーム
下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン                                                    ５ｇ
サラシミツロウ                                                    ４ｇ
セタノール                                                        ３ｇ
スクワラン                                                      １０ｇ
ラノリン                                                          ２ｇ
ステアリン酸                                                      １ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.Ｏ)            １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                        ３ｇ
１，３−ブチレングリコール                                        ６ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                      １．５ｇ
香料                                                          ０．１ｇ
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．３）                            １ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００８７】
〔実施例１０〕  パック
下記の組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール                                            １５ｇ
ポリエチレングリコール                                            ３ｇ
プロピレングリコール                                              ７ｇ
エタノール                                                      １０ｇ
パラオキシ安息香酸エチル                                    ０．０５ｇ
香料                                                        ０．０５ｇ
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．１）                            ５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００８８】
〔実施例１１〕  飴
下記の原料から常法により飴を製造した。
ショ糖                                                      ７０質量部
水飴                                                        ３０質量部
クエン酸                                                      １質量部
香料                                                      ０．１質量部
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．１）                        １質量部
【００８９】
〔実施例１２〕  チューインガム
下記の原料から常法によりチューインガムを製造した。
チューインガムベース                                        ７０質量部
ショ糖                                                      ５４質量部
水飴                                                        ２０質量部
軟化剤                                                        ４質量部
香料（ハッカ油）                                              １質量部
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．３）                        １質量部
【００９０】
〔実施例１３〕  錠剤状栄養補助食品
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．２）                      ５０質量部
粉糖（ショ糖）                                            １８８質量部
グリセリン脂肪酸エステル                                    １２質量部
【００９１】
〔実施例１４〕  顆粒状栄養補助食品
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
霧水葛抽出物（製造例１の試料Ｎｏ．１）                      ３０質量部
ビートオリゴ糖                                          １０００質量部
ビタミンＣ                                                １６７質量部
ステビア抽出物                                              １０質量部
【００９２】
実施例７〜１４の皮膚化粧料及び美容用飲食品は、いずれも優れたコラーゲン産生促進作用、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を兼ね備えており、皮膚の老化の防止及び／又は改善に有用なものであった。
【００９３】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によれば、真皮層線維芽細胞におけるコラーゲンの産生を促進して皮膚の老化を防止及び／又は改善し得るコラーゲン産生促進剤、スーパーオキサイドを過酸化水素に変換する触媒酵素である活性酸素消去作用を有する活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有するヒアルロニダーゼ阻害剤が得られる。
【００９４】
また、本発明によれば、前記コラーゲン産生促進剤、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤、及びヒアルロニダーゼ阻害剤が配合された皮膚の老化を防止及び／又は改善するのに極めて有用な皮膚化粧料及び美容用飲食品が得られる。