(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0003770246.tif 000020
〔式中、ｐは０、ｑは０または１である。〕
で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、一般式（２）
【化２】
0003770246.tif 000021
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合開始剤の存在下に重合することを特徴とする一般式（３）
【化３】
0003770246.tif 000022
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
【請求項２】
一般式（１）
【化４】
0003770246.tif 000023
〔式中、ｐは０、ｑは０または１である。〕
で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、一般式（２）
【化５】
0003770246.tif 000024
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合開始剤の存在下に重合し、一般式（３）
【化６】
0003770246.tif 000025
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合体を得、この重合体を化学修飾することを特徴とする一般式（４）
【化７】
0003770246.tif 000026
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ｍは０または１、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1およびＹ2はそれぞれ炭素数１〜６のアルキレン基を示し、同一でも異なっていてもよい。ｍが０の場合、Ｒ2は水素原子、ｍが１の場合、Ｒ2は保護された水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
【請求項３】
一般式（１）
【化８】
0003770246.tif 000027
〔式中、ｐは０、ｑは０または１である。〕
で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、一般式（２）
【化９】
0003770246.tif 000028
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合開始剤の存在下に重合し、一般式（３）
【化１０】
0003770246.tif 000029
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合体を得、この重合体を水または弱酸で処理することを特徴とする一般式（５）
【化１１】
0003770246.tif 000030
〔式中、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、ポリオキシアルキレンの製造方法に関し、さらに詳しくは両末端に種類の異なる官能基を有するポリオキシアルキレン誘導体の中間体となるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ポリアルキレンオキシドのなかで、特にポリエチレンオキシドは水溶性、非免疫原性といった特性をもち、タンパク質や薬物などの生理活性物質の修飾剤としての利用をはじめ、生物学、医用工学分野への応用が注目されている。
【０００３】
一般に、タンパク質の表面にはカルボキシル基、アミノ基、水酸基、メルカプト基など、さまざまな官能基が存在する。このようなタンパク質分子とポリエチレンオキシドとを化学的に結合させる際には、どのような官能基を選ぶか、どの程度結合させるかなどが、合成されるポリエチレンオキシド−タンパク質結合体の性質に大きな影響を及ぼす。このため、修飾しようとするタンパク質の表面に存在する官能基に応じて、ポリエチレンオキシド側の官能基を選択する必要がある。
【０００４】
工業的に合成されているポリエチレンオキシド誘導体は、一方の末端にメトキシ基などの非反応性の基、他方の末端に水酸基を有するもの、あるいは両末端に水酸基を有するものが殆どである。水酸基はアルデヒド基やアミノ基等に比べると反応性が小さいので、上記のようなタンパク質の修飾剤として利用するために、ポリエチレンオキシドの片末端（一方の末端）の水酸基をより反応性の高い他の官能基に変換する試みが行われている(Synth. Commun., 22(16), 2417-2424(1992))。また、両末端に水酸基を有するポリエチレンオキシドを反応性の高い官能基に変換する試みも行われている(J. Bioact. Compat. Polym., 5(2)227-231(1990))。
【０００５】
ポリエチレンオキシド誘導体の両端に種類の異なるタンパク質等の物質を選択的に結合させる場合には、両末端に相異なる官能基を有するポリエチレンオキシド誘導体が必要となる（ＤＥ４００４２９６（１９９１））。
しかしながら、上記のような両末端に水酸基を有するポリエチレンオキシド誘導体を修飾する方法では、未反応の水酸基末端が残る可能性があり、また反応生成物は、両末端に同一の官能基を有するものと、両末端に相異なる官能基を有するものとの混合物として得られるため、カラムクロマトグラフィーなどの方法により精製する必要があり、収率や純度の面で問題がある。
【０００６】
一方、重合開始剤としてトリメチルシリル基で保護されたアミノ基のカリウム塩を用いて、エチレンオキシドの重合を行った例がある(Bioconjugate Chem., 3（５）, 275-276(1992))。この方法では、α−アミノ−ω−ヒドロキシポリエチレンオキシドが選択的に得られているが、他の相異なる官能基を選択的に導入した例はまだない。
【０００７】
このように、両末端に反応性の高い相異なる官能基を有するポリエチレンオキシド誘導体を選択的に製造する方法は確立されていない。このため、両末端に反応性の高い相異なる官能基を有するポリエチレンオキシドの選択的な製造方法の確立が望まれている。
【０００８】
ところで、高反応性の官能基の中で、アルデヒド基は温和な条件下でタンパク質のアミノ酸と選択的に反応するため、可溶性または不溶性ポリマー表面へのポリエチレングリコール修飾((J. Polym. Sci. Polym. Chem. Ed., 22, 341(1984)）や、タンパク質へのポリエチレングリコール修飾（Bioorg. Chem., 19, 133(1991)）に用いられている。アルデヒド基と１級アミノ基との反応では２級アミンが形成されるため、溶液中においてタンパク質の荷電があまり変わらず、このためタンパク質の活性が低下したり、あるいはコンフォメーションが変化するなどの問題が生じにくいという利点がある。
しかし、反応性の高い官能基としてアルデヒド基のみを有するポリエチレンオキシド誘導体の製造方法は知られているが、アルデヒド基とアルデヒド基以外の官能基とを有するポリエチレンオキシド誘導体の製造方法は知られていない。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、一方の末端にアルデヒド基、他方の末端にアルデヒド基以外の反応性の高い官能基を有するポリオキシアルキレン誘導体の製造に必要な中間体となるポリオキシアルキレン誘導体を選択的に、しかも容易に効率よく製造することができる製造方法を提案することである。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は次のポリオキシアルキレン誘導体の製造方法である。
（１）一般式（１）
【化１２】
0003770246.tif 000002
〔式中、ｐは０、ｑは０または１である。〕
で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、一般式（２）
【化１３】
0003770246.tif 000003
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表される重合開始剤の存在下に重合することを特徴とする一般式（３）
【化１４】
0003770246.tif 000004
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｍはアルカリ金属を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
（２）  前記一般式（１）で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、前記一般式（２）で表される重合開始剤の存在下に重合し、前記一般式（３）で表される重合体を得、この重合体を化学修飾することを特徴とする一般式（４）
【化１５】
0003770246.tif 000005
〔式中、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基、ｎは５〜１００００の数、ｍは０または１、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1およびＹ2はそれぞれ炭素数１〜６のアルキレン基を示し、同一でも異なっていてもよい。ｍが０の場合、Ｒ2は水素原子、ｍが１の場合、Ｒ2は保護された水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
（３）  前記一般式（１）で表される環状オキシアルキレン化合物の１種または２種以上を、前記一般式（２）で表される重合開始剤の存在下に重合し、前記一般式（３）で表される重合体を得、この重合体を水または弱酸で処理することを特徴とする一般式（５）
【化１６】
0003770246.tif 000006
〔式中、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基、Ｒ1は炭素数１〜８のアルキル基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。
【００１１】
本発明のポリオキシアルキレン誘導体の製造方法では、一般式（１）および（２）で表される化合物を出発原料にして、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造し、あるいは一般式（１）および（２）で表される化合物を出発原料にして、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を経由して、一般式（４）または（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造する。
一般式（３）、（４）または（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体は、一方の末端にアルデヒド基、他方の末端にアルデヒド基以外の反応性の高い官能基を有するポリオキシアルキレン誘導体の製造に必要な中間体として有用である。
【００１２】
一般式（６）
【化１７】
0003770246.tif 000007
〔式中、ｎは５〜１００００の数、ｍは０または１、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1およびＹ2はそれぞれ炭素数１〜６のアルキレン基を示し、同一でも異なっていてもよい。ｍが０の場合、Ｘ1は水素原子、ｍが１の場合、Ｘ1は水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体は、一般式（１）および（２）で表される化合物を出発原料にして、中間体を経由して製造することができる。この際、一般式（６）において、ｍが１のポリオキシアルキレン誘導体は、一般式（３）および（４）で表される中間体を経由して製造することができる。
【００１３】
一方、一般式（６）において、ｍが０の最終目的物、すなわち一般式（７）
【化１８】
0003770246.tif 000008
〔式中、ｎは５〜１００００の数、ＡＯは炭素数２〜３のオキシアルキレン基を示す。オキシアルキレン基は同一でも異なっていてもよく、またランダムに付加していても、ブロック状に付加していてもよい。Ｙ1は炭素数１〜６のアルキレン基を示す。〕
で表されるポリオキシアルキレン誘導体は、一般式（３）で表される中間体を経由して、あるいは一般式（３）および（５）で表される中間体を経由して製造することができる。
【００１４】
一般式（２）、（３）、（４）および（５）においてＲ1で示される炭素数１〜８のアルキル基としてはメチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、アリル基などがあげられる。Ｒ1がメチル基、エチル基またはプロピル基である場合、酸の存在下に加水分解した際、（Ｒ1−Ｏ−）2ＣＨ末端がアルデヒド基に変換されやすいので、これらの基が好ましい。
【００１５】
一般式（２）〜（７）においてＹ1またはＹ2で示される炭素数１〜６のアルキレン基としては、それぞれメチレン基、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、メチルエチレン基、ジメチルエチレン基などがあげられる。Ｙ1およびＹ2が１分子中に存在する場合、これらは同一でも異なっていてもよい。最終目的物のポリオキシアルキレン誘導体を生理活性物質の修飾剤として利用する場合は、Ｙ1またはＹ2がエチレン基、トリメチレン基、特にエチレン基であるのが好ましい。
一般式（２）または（３）においてＭで示されるアルカリ金属としては、カリウムまたはナトリウムなどがあげられる。
【００１６】
一般式（３）〜（７）においてＡＯで示される炭素数２〜３のオキシアルキレン基としては、オキシエチレン基、オキシプロピレン基などがあげられる。
一般式（３）〜（７）においてｎは５〜１００００であり、最終目的物のポリオキシアルキレン誘導体を生理活性物質の修飾剤として利用する場合は、好ましくは５〜２０００、さらに好ましくは５〜１０００である。
【００１７】
一般式（６）におけるＸ1は、ｍが０の場合は水素原子であり、ｍが１の場合は水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基である。
一般式（４）におけるＲ2は保護された水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基を示す。ここで保護された基とは、後述の方法で酸の存在下に加水分解することにより水酸基、カルボキシル基、メルカプト基またはアミノ基に変換される基である。
【００１８】
Ｒ2で示される保護された水酸基の具体的なものとしては、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ｐ−クロロフェニルオキシ基、ｐ−メトキシフェニルオキシ基、２，４−ジニトロフェニルオキシ基、ベンジルオキシ基、ｐ−メトキシベンジルオキシ基、３，４−ジメトキシベンジルオキシ基、トリメチルシリルオキシ基、トリエチルシリルオキシ基などがあげられる。
【００１９】
Ｒ2で示される保護されたカルボキシル基の具体的なものとしては、カルボエトキシ基、カルボ−ｔｅｒｔ−ブトキシ基、カルボフェニル基、カルボベンジル基、カルボジフェニルメトキシ基、カルボトリフェニルメトキシ基、３−エトキシ−３−オキソプロピル基などがあげられる。
【００２０】
Ｒ2で示される保護されたメルカプト基の具体的なものとしては、アセチルチオ基、プロピオニルチオ基、ベンジルチオ基、ｐ−メトキシベンジルチオ基、ｐ−ニトロベンジルチオ基、ジフェニルメチルチオ基、トリフェニルメチルチオ基などがあげられる。
【００２１】
Ｒ2で示される保護されたアミノ基の具体的なものとしては、ジベンジルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ基、ビストリメチルシリルアミノ基、フタルイミド基などがあげられる。
【００２２】
まず、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法について説明する。
一般式（３）で表される中間体は、一般式（２）で表されるアルコキシ基を有するアルコールのアルカリ金属塩を重合開始剤として用いて、この重合開始剤の存在下に一般式（１）で表される化合物を重合することにより製造することができる。
【００２３】
一般式（１）で表される環状オキシアルキレン化合物の具体的なものとしては、エチレンオキシド、プロピレンオキシドなどがあげられる。これらは単独で、または２種以上の混合物として用いられる。
【００２４】
一般式（２）で表される重合開始剤の具体的なものとしては、２，２−ジメトキシ−１−エタノ−ル、２，２−ジエトキシ−１−エタノ−ル、３，３−ジメトキシ−１−プロパノール、３，３−ジエトキシ−１−プロパノール、４，４−ジメトキシ−１−ブタノール、４，４−ジエトキシ−１−ブタノール、３，３−ジメトキシ−ｓｅｃ−ブタノール、３，３−ジエトキシ−ｓｅｃ−ブタノールなどのアルコキシ基を有するアルコールのカリウムまたはナトリウム塩などのアルカリ金属塩があげられる。これらの化合物は金属塩の形態で使用するほかにも、前記アルコールと水素化アルカリ金属とを別々に反応液に添加する形態で使用することもできる。これらの化合物は重合開始剤として作用するため、すべてのポリマー末端に存在することとなる。
【００２５】
重合開始剤はそのまま反応系に添加することもできるが、有機溶媒に溶解させた溶液状態で添加するのが好ましい。このような有機溶媒としては溶液として活性水素基を有しない有機溶媒であれば特に制限されず、例えばベンゼン、トルエン、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミドなどがあげられる。重合開始剤溶液の濃度としては、０．１〜９０重量％、好ましくは１．０〜５０重量％とするのが望ましい。
【００２６】
一般式（１）で表される環状オキシアルキレン化合物と一般式（２）で表される重合開始剤との使用割合は、環状オキシアルキレン化合物：重合開始剤のモル比で通常１：０．００００１〜１：０．５、好ましくは１：０．０００１〜１：０．２とするのが望ましい。
【００２７】
重合反応は、一般式（１）の化合物と一般式（２）の重合開始剤または重合開始剤溶液とを、非溶媒中または有機溶媒中で混合して行われる。有機溶媒は重合反応を妨害しないものであれば特に限定されず、例えばベンゼン、トルエン、ジメチルスルホキシド、アセトニトリルなどがあげられる。重合反応は、封管ガラス管中またはオートクレーブ中で、不活性ガス雰囲気下に行うのが好ましい。反応溶液の濃度としては、０．１〜９０重量％、好ましくは１．０〜５０重量％とするのが望ましい。
反応条件は、温度が０〜１８０℃、好ましくは１０〜１５０℃、圧力が通常８〜０ｋｇｆ／ｃｍ2Ｇ、時間が通常０．５〜１２０時間とするのが望ましい。
【００２８】
次に、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法について説明する。一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体は、上記のようにして得られた一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、導入する官能基の種類に応じて次のような方法により化学修飾することにより、製造することができる。
【００２９】
ω−末端に水酸基を導入する場合は、次のようにして化学修飾を行い、保護された水酸基を導入する。すなわち、一般式（３）の重合体に、求電子試薬として１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−ブロモエタン、１−ベンジルオキシ−３−ブロモプロパン、２−トリメチルシリルオキシ−２−ブロモエタンなどの化合物を反応させ、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を得る。
【００３０】
ω−末端にカルボキシル基を導入する場合には、次のようにして化学修飾を行い、保護されたカルボキシル基を導入する。すなわち、一般式（３）のポリオキシアルキレン誘導体に、求電子試薬としてｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート、ｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモプロピオネート、ｔｅｒｔ−ブチル−３−ブロモブチレート、ｔｅｒｔ−ブチル−４−ブロモバレラート、エチルブロモアセテート、エチル−２−ブロモプロピオネート、エチル−３−ブロモプロピオネート、エチル−３−ブロモブチレート、エチル−４−ブロモバレラート等のハロゲン化アルキルカルボン酸エステルなどを反応させ、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を得る。
【００３１】
ω−末端にメルカプト基を導入する場合には、次のようにして化学修飾を行い、保護されたメルカプト基を導入する。すなわち、一般式（３）のポリオキシアルキレン誘導体に、求電子試薬として、ｔｅｒｔ−ブチル−２−クロロメチルスルフィド、フェニルクロロメチルスルフィド、ベンジルクロロメチルスルフィド、４−メトキシベンジルクロロメチルスルフィド等のハロゲン化アルキルスルフィドなどを反応させ、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を得る。
【００３２】
ω−末端にアミノ基を導入する場合には、次のようにして化学修飾を行い、保護されたアミノ基を導入する。すなわち、一般式（３）のポリオキシアルキレン誘導体に、求電子試薬としてＮ−（２−ブロモエチル）フタルイミド、Ｎ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド、１−ブロモ−２−（ベンジルアミノ）エタン、Ｎ−（２−ブロモエチル）カルバミン酸ベンジルなどを反応させ、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を得る。
【００３３】
次に、このようにして得られた一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、酸の存在下に加水分解することにより、前記一般式（６）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造することができる。加水分解に使用する酸の試薬としては塩酸、硫酸、蟻酸、トリフルオロ酢酸またはフッ化水素などがあげられるが、塩酸が好ましい。
【００３４】
加水分解の方法としては、一般式（４）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、上記の酸を含む水溶液または水系溶液中で撹拌するなどの方法が採用できる。このときの反応系の酸の濃度は０．５〜１０Ｎ、好ましくは０．５〜５Ｎとするのが望ましい。反応温度は０〜１００℃、好ましくは２０〜８０℃、反応時間は１０分間〜２００時間、好ましくは３０分間〜１００時間とするのが望ましい。
【００３５】
このようにして加水分解することにより、一方の末端がアルデヒド基、他方の末端が他の官能基である一般式（６）で表されるポリオキシアルキレン誘導体が選択的に得られる。
反応終了後には、ジエチルエーテル、イソプロパノール、ヘキサン等のポリオキシアルキレン誘導体を溶解しない液中に反応液を投入することにより、沈殿物として目的とするポリオキシアルキレン誘導体を単離することができる。また、カラムクロマトグラムによる方法、透析、限外濾過、吸着剤処理などの方法によっても単離精製することができる。
【００３６】
次に一般式（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造する方法について説明する。
まず前記と同様にして、一般式（２）で表される重合開始剤の存在下に一般式（１）で表される化合物を重合して一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造する。次に、この一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を水または弱酸で処理して、一般式（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造する。弱酸処理に使用する酸としては、塩酸、酢酸などが使用できる。弱酸処理の方法としては、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、上記酸を含む水溶液または水系溶液中で撹拌するなどの方法が採用できる。このときの反応系の酸の濃度は０．００１〜０．１Ｎ、好ましくは０．０１〜０．０５Ｎとするのが望ましい。
【００３７】
このようにして得られた一般式（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、前記と同様にして酸の存在下に加水分解することにより、一般式（７）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を製造することができる。
【００３８】
また一般式（７）で表されるポリオキシアルキレン誘導体は、一般式（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を経由することなく、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体から一工程で製造することもできる。この場合は、一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を、直接前記と同様にして酸の存在下に加水分解する。一般式（３）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を加水分解すると、一般式（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体の生成反応と、この中間体が加水分解する反応とが同時に進行し、一般式（７）で表されるポリオキシアルキレン誘導体が直接得られる。加水分解の方法および条件は前記加水分解の場合と同様である。
【００３９】
このようにして得られた一般式（６）および（７）で表されるポリオキシアルキレン誘導体はタンパク質や薬物などの生理活性物質の修飾剤として利用でき、修飾した生理活性物質に水溶性や非免疫原性などの特性を付与することができる。
【００４０】
【発明の効果】
本発明の製造方法によれば、一般式（１）で表される化合物および一般式（２）で表される重合開始剤を出発原料にして、両末端に種類の異なる官能基を有する一般式（６）または（７）のポリオキシアルキレン誘導体の製造に必要な、一般式（３）、（４）または（５）で表されるポリオキシアルキレン誘導体を容易に効率よく、しかも選択的に製造することができ、このようなポリオキシアルキレン誘導体を中間体として用いることにより、一般式（６）または（７）のポリオキシアルキレン誘導体を容易に効率よく、しかも選択的に製造することができる。
【００４１】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を何ら制限するものではない。
実施例１−１
窒素雰囲気下、０℃の条件下で２２ｇ（０．５ｍｏｌ）のエチレンオキシドをジメチルスルホキシド２０ｍｌに添加後、重合開始剤として３，３−ジエトキシプロパノール１．４８ｇ（０．０１ｍｏｌ）および水素化カリウム（ＫＨ）０．４ｇ（０．０１ｍｏｌ）を溶解したジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、２０℃で３日間攪拌しながら重合し、次式（８）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）ポリ（オキシエチレン）＝カリウム塩を得た。
【化１９】
0003770246.tif 000009
【００４２】
上記反応液に、エチル−３−ブロモプロピオネート１０ｍｍｏｌを含むジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、室温で２４時間反応させて化学修飾した。この反応液を５００ｍｌのジエチルエーテルに滴下して再沈し、真空乾燥して、次式（９）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）−ω−（３−エトキシ−３−オキソプロピル）ポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２０】
0003770246.tif 000010
【００４３】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、ポリエチレンオキシドの標準サンプルから求めた平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
１．２１（ａ，ｋ；９Ｈ）
１．９３（ｄ；２Ｈ）
２．３２（ｉ；２Ｈ）
３．３８〜３．９０（ｂ，ｅ，ｆ，ｇ，ｈ，ｊ；約２２０Ｈ）
４．６４（ｃ；１Ｈ）
【００４４】
上記で得られたポリオキシアルキレン誘導体を１Ｎ塩酸水溶液中で２４時間攪拌しながら加水分解した。次に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、８０℃で減圧下に水を留去した後、析出物をろ過して、次式（１０）で示されるα−（３−オキソプロポキシ）−ω−（カルボキシエチル）ポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２１】
0003770246.tif 000011
【００４５】
ゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
２．３２〜２．５４（ｂ，ｇ；４Ｈ）
３．３８〜３．７３（ｃ，ｄ，ｅ，ｆ；約２２０Ｈ）
９．８２（ａ；１Ｈ）
【００４６】
実施例１−２
窒素雰囲気下、０℃の条件下で２２ｇ（０．５ｍｏｌ）のエチレンオキシドをジメチルスルホキシド２０ｍｌに添加後、重合開始剤として３，３−ジエトキシプロパノール１．４８ｇ（０．０１ｍｏｌ）および水素化カリウム（ＫＨ）０．４ｇ（０．０１ｍｏｌ）を溶解したジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、２０℃で３日間攪拌しながら重合し、次式（１１）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）ポリ（オキシエチレン）＝カリウム塩を得た。
【化２２】
0003770246.tif 000012
【００４７】
上記反応液に、Ｎ−（２−ブロモエチル）フタルイミド１０ｍｍｏｌを含むジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、室温で２４時間反応させて化学修飾した。この反応液を５００ｍｌのジエチルエーテルに滴下して再沈し、真空乾燥して、次式（１２）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）−ω−（２−フタルイミドエチル）ポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２３】
0003770246.tif 000013
【００４８】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、ポリエチレンオキシドの標準サンプルから求めた平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
１．２０（ａ；９Ｈ）
１．９１（ｄ；２Ｈ）
３．３８〜３．９０（ｂ，ｅ，ｆ，ｇ，ｈ，ｉ；約２２０Ｈ）
４．６４（ｃ；１Ｈ）
【００４９】
上記で得られたポリオキシアルキレン誘導体を１Ｎ塩酸水溶液中で２４時間攪拌しながら加水分解した。次に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、８０℃で減圧下に水を留去した後、析出物をろ過して、次式（１３）で示されるα−（３−オキソプロポキシ）−ω−（アミノエチル）ポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２４】
0003770246.tif 000014
【００５０】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、平均分子量が２１００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
２．７５（ｇ；２Ｈ）
３．０６（ｈ；２Ｈ）
３．３８〜３．９０（ｃ，ｄ，ｅ，ｆ；約２２０Ｈ）
９．８２（ａ；１Ｈ）
【００５１】
実施例２−１
窒素雰囲気下、０℃の条件下で２２ｇ（０．５ｍｏｌ）のエチレンオキシドをジメチルスルホキシド２０ｍｌに添加後、重合開始剤として３，３−ジエトキシプロパノール１．４８ｇ（０．０１ｍｏｌ）および水素化カリウム（ＫＨ）０．４ｇ（０．０１ｍｏｌ）を溶解したジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、２０℃で３日間攪拌しながら重合し、次式（１４）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）ポリ（オキシエチレン）＝カリウム塩を得た。
【化２５】
0003770246.tif 000015
【００５２】
その後、０．１Ｎ塩酸水溶液を２ｍｌ添加し、反応の停止および弱酸処理を行った。この溶液を０℃のジエチルエーテル５００ｍｌに滴下して再沈し、沈殿物を真空で乾燥して、次式（１５）で示されるα−（３，３−ジエトキシプロポキシ）−ω−ヒドロポリ（オキシエチレン）を得ることができた（収率９２％）。
【化２６】
0003770246.tif 000016
【００５３】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、ポリエチレンオキシドの標準サンプルから求めた平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。この平均分子量はエチレンオキシドおよび３，３−ジエトキシプロパノールのカリウム塩のモル比から計算される分子量２４００に極めて近いものであることから、重合開始剤あたり１本のポリマー鎖が設計通り得られていることがわかった。
【００５４】
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
１．２０（ａ；６Ｈ）
１．９１（ｄ；２Ｈ）
２．８０（ｈ；１Ｈ）
３．４８〜３．７２（ｂ，ｅ，ｆ，ｇ；約２２０Ｈ）
４．６４（ｃ；１Ｈ）
【００５５】
上記で得られたポリオキシアルキレン誘導体を１Ｎ塩酸水溶液中で２４時間攪拌しながら加水分解した。次に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、８０℃で減圧下に水を留去した後、析出物をろ過して、次式（１６）で示されるα−（３−オキソプロポキシ）−ω−ヒドロポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２７】
0003770246.tif 000017
【００５６】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
２．４８（ｂ；２Ｈ）
２．８０（ｆ；１Ｈ）
３．５９〜３．７１（ｃ，ｄ，ｅ；約２２０Ｈ）
９．７２（ａ，１Ｈ）
【００５７】
実施例３−１
窒素雰囲気下、０℃の条件下で２２ｇ（０．５ｍｏｌ）のエチレンオキシドをジメチルスルホキシド２０ｍｌに添加後、重合開始剤として３，３−ジエトキシプロパノール１．４８ｇ（０．０１ｍｏｌ）および水素化カリウム（ＫＨ）０．４ｇ（０．０１ｍｏｌ）を溶解したジメチルスルホキシド溶液１０ｍｌを添加し、２０℃で３日間攪拌しながら重合した後、溶媒を留去し、次式（１７）で示されるα−（３−オキソプロポキシ）ポリ（オキシエチレン）＝カリウム塩を得た。
【化２８】
0003770246.tif 000018
【００５８】
その後、得られた重合体を１Ｎ塩酸水溶液中で２４時間撹拌しながら加水分解した。次に、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、８０℃で減圧下に水を留去した後、析出物をろ過し、次式（１８）で示されるα−（３−オキソプロポキシ）−ω−ヒドロポリ（オキシエチレン）を得ることができた。
【化２９】
0003770246.tif 000019
【００５９】
得られたポリオキシアルキレン誘導体をゲルろ過タイプの高速液体クロマトグラフィーで分析した結果は、平均分子量が２３００、重量平均分子量／数平均分子量＝１．１であった。
1Ｈ−ＮＭＲの分析結果は次の通りである。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3），δ（ｐｐｍ）：
２．４８（ｂ；２Ｈ）
２．８０（ｆ；１Ｈ）
３．５９〜３．７１（ｃ，ｄ，ｅ；２２０Ｈ）
９．７２（ａ，１Ｈ）