(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物の不安症又は精神障害の治療に有効な選択的ＰＤＥ１０阻害剤を同定する方法であって、
ａ．ＰＤＥ１０酵素のサンプルを環状ヌクレオチド基質と接触させ、前記ヌクレオチドの加水分解を測定し、
ｂ．ＰＤＥ１０酵素のサンプルを適当な量の試験化合物の存在下にて環状ヌクレオチド基質と接触させ、前記ヌクレオチドの加水分解を測定し、
ｃ．環状ヌクレオチド基質の加水分解が試験化合物により阻害されたか否かを決定するために、ａ工程とｂ工程での結果を比較し、
ｄ．工程ｃにて阻害活性を示した試験化合物がＰＤＥ１０の阻害についてのＫｉが他のＰＤＥ酵素に付いてのＫｉの約１／１０またはそれ以下であるかを決定し、そして、
ｅ．工程ｄにおいてポジティブな結果が得られた化合物を、臨床的抗精神障害活性の予測としてのインビボ非ヒトアッセイ試験を行う、
各工程を含む、前記方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法であって、工程ｅが脳底神経節の出力の変化を測定するものである、前記方法。
【請求項３】
請求項２記載の方法であって、非ヒト哺乳動物におけるハロペリドール誘導のカタレプシーの増加を測定する、前記方法。
【請求項４】
請求項１記載の方法であって、インビボ試験が齧歯動物で実施される、前記方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法であって、フェンシクリジン刺激運動の減少を測定する、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
本発明は、中枢神経系の障害の治療に関する。更に特定的には、本発明は、神経的及び精神医学的障害、例えば精神病及び症状として認識力の欠如を含む障害の治療に関する。本発明は、更にＰＤＥ１０の阻害に関する。
【０００２】
環状ヌクレオチド、サイクリック−アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）及びサイクリック−グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）は、中枢神経系のニューロンを含む細胞内プロセスの膨大な系列を調節する細胞内の第２のメッセンジャーとして機能する。ｃＡＭＰは、膜結合酵素のファミリー、アデニリルシクラーゼによって合成される。幅広い範囲のセルピン（ｓｅｒｐｉｎ）ファミリ−の受容体が、ヘテロな三量体のＧ−タンパク質によって媒介されるカップリング機構によって、これらの酵素を調節する。細胞内ｃＡＭＰの増加は、他のシグナル化キナーゼ、転写因子、及び酵素の活性化を、これらのホスホリル化によって調節する、ｃＡＭＰ依存プロテインキナーゼの活性化に導く。サイクリックＡＭＰは、更に環状ヌクレオチドにより調節されるイオンチャンネル、ホスホジエステラーゼ、又はグアニンヌクレオチド交換因子の活性に直接影響する。最近の研究は、更に細胞内ｃＡＭＰが、ニューロモジュレーター、アデノシンに対して、その細胞からの輸送に続いて、前駆体として機能することができることを示唆している。
【０００３】
ｃＧＭＰを合成するグアニリルシクラーゼは、膜結合及び細胞質の形で存在する。膜結合型は、ＡＮＰ（心房性ナトリウム利尿ペプチド）のそれのようにＧ−タンパク質に結合した受容体にカップリングし、一方可溶性グアニリルシクラーゼは、酸化窒素によって活性化される（Ｗａｎｇ，Ｘ．ａｎｄ  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｐ．Ｊ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６８（２）：４４３−４５６，１９９７）。ｃＡＭＰと同様に、中枢神経系中のｃＧＭＰシグナル化の下流の媒介体は、ｃＧＭＰゲートイオンチャンネル、ｃＧＭＰ調節ホスホジエステラーゼ及びｃＧＭＰ依存プロテインキナーゼを含む。環状ヌクレオチドは、中枢神経系内の信号伝達において重要な役割を有するので、環状ヌクレオチドのシグナル化の調節に影響する化合物の使用によって治療的利益が得られる。
【０００４】
環状ヌクレオチドのシグナル化を調節するための主要な機構は、ホスホジエステラーゼ触媒の環状ヌクレオチドの異化作用による。２１種の異なった遺伝子によってコードされた１１種のホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）の既知のファミリーが存在する。それぞれの遺伝子は、典型的にはアイソザイムの多様性に更に寄与する複数のスプライス変異体を与える。ＰＤＥのファミリーは、環状ヌクレオチド基質の特異性、調節の機構、及び阻害の感度に基づいて機能的に識別される。更に、ＰＤＥは、中枢神経系中を含む器官中で特異的に発現する。これらの独特な酵素活性及び局在化の結果として、異なったＰＤＥアイソザイムが、独特の生理上の機能を果たすことができる。更に、独特のＰＤＥファミリー又はアイソザイムを選択的に阻害することができる化合物は、特別な治療効果、少ない副作用又はその両方を提供することができる。
【０００５】
ＰＤＥ１０は、第一アミノ酸配列及び独特の酵素活性に基づき独特のファミリーとして同定される。ＥＳＴデータベースの相同性スクリーニングは、マウスＰＤＥ１０ＡをホスホジエステラーゼのＰＤＥ１０ファミリーの最初の一員として明らかにした（Ｆｕｊｉｓｈｉｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：１８４３８−１８４４５，１９９９；Ｌｏｕｇｈｎｅｙ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ２３４：１０９−１１７，１９９９）。マウスの同族体が更にクローン化され（Ｓｏｄｅｒｌｉｎｇ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９６：７０７１−７０７６，１９９９）、そしてラット及びヒト遺伝子の両方のＮ−末端スプライス変異体が同定された（Ｋｏｔｅｒａ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２６１：５５１−５５７，１９９９；Ｆｕｊｉｓｈｉｇｅ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６６：１１１８−１１２７，１９９９）。種間にわたって高度の相同性が存在する。マウスのＰＤＥ１０Ａ１は、７７９個のアミノ酸のタンパク質であり、これはｃＡＭＰ及びｃＧＭＰをそれぞれＡＭＰ及びＧＭＰに加水分解する。ＰＤＥ１０のｃＡＭＰに対する親和性（Ｋm＝０．０５μＭ）は、ｃＧＭＰに対するそれ（Ｋm＝３μＭ）より高い。然しながら、ｃＡＭＰに対するよりｃＧＭＰの概略５倍大きいＶmaxは、ＰＤＥ１０が独特なｃＡＭＰ阻害ｃＧＭＰアーゼであるという示唆に導く（Ｆｕｊｉｓｈｉｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：１８４３８−１８４４５，１９９９）。
【０００６】
ＰＤＥ１０は、更に他のＰＤＥファミリーと比較して哺乳動物中に独特に局在する。ＰＤＥに対するｍＲＮＡは、精巣及び脳のみで高度に発現する（Ｆｕｊｉｓｈｉｇｅ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６６：１１１８−１１２７，１９９９；Ｓｏｄｅｒｌｉｎｇ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９６：７０７１−７０７６，１９９９；Ｌｏｕｇｈｎｅｙ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ２３４：１０９−１１７，１９９９）。これらの最初の研究は、脳内のＰＤＥ１０の発現が線条体（尾状核及び被殻）、側座核、及び嗅結節において最高であることを示した。更に最近では、げっ歯類動物の脳におけるＰＤＥ１０のｍＲＮＡの発現パターンの詳細な分析が行われた（Ｓｅｅｇｅｒ，Ｔ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｂｓｔ．Ｓｏｃ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２６：３４５．１０，２０００）。
【０００７】
発明の概要
本発明は、ヒトを含む哺乳動物の不安症又は精神障害を治療する方法を提供し、これは、前記哺乳動物に前記不安症又は精神障害を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【０００８】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の不安症又は精神障害を治療する方法を提供し、これは、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【０００９】
本発明によって治療することができる精神障害の例は、制約されるものではないが、偏執型、分裂型、緊張型、未分化型、又は残留型の精神分裂病；精神分裂型障害；例えば妄想型又は抑鬱型の分裂型感情障害；妄想型障害；物質誘導精神障害、例えばアルコール、アンフェタミン、タイマ、コカイン、幻覚薬、吸入剤、オピオイド、又はフェンシクリジンによって誘導される精神病；偏執病型の人格障害；及び分裂病型の人格障害；を含む。
【００１０】
本発明によって治療することができる不安症性障害の例は、制約されるものではないが、パニック障害；広場恐怖症；特異的恐怖症；対人恐怖症；強迫障害；外傷後ストレス性障害；急性ストレス性障害；及び一般的不安症障害を含む。
【００１１】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物のドーパミンアゴニスト治療に伴なうハンチントン病及び運動障害から選択される運動障害を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物に前記障害を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１２】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物のドーパミンアゴニスト治療に伴なうハンチントン病及び運動障害から選択される運動障害を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１３】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物のパーキンソン病及び下肢不安症候群から選択される運動障害を治療する方法を提供し、前記哺乳動物に前記障害を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１４】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物のパーキンソン病及び下肢不安症候群から選択される運動障害を治療する方法を提供し、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１５】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の薬物中毒、例えばアルコール、アンフェタミン、コカイン、又はアヘン薬中毒を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物に薬物中毒を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１６】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の薬物中毒、例えばアルコール、アンフェタミン、コカイン、又はアヘン薬中毒を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１７】
本明細書中で使用される“薬物中毒”は、薬物に対する異常な欲求を意味し、そして一般的に所望する薬物を摂取することに対する強迫及び強度の薬物渇望の症状の発現のような動機付け障害によって特徴付けられる。
【００１８】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の、症状として認識力の欠如を含む障害を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物に認識力欠如を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００１９】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の、症状として認識力の欠如を含む障害を治療する方法を提供し、この方法は、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００２０】
本明細書中で“症状として認識力の欠如を含む障害”において使用される“認識力の欠如”の語句は、同一の一般的年齢の集団中の、特定の個人の他の個人と比較した、記憶、知力、又は学習及び論理的能力のような一つ又はそれ以上の認識の側面における正常以下の機能を示す。“認識力の欠如”は、更に例えば年齢に関連する認識力の減退として起こるような、一つ又はそれ以上の認識の側面における、いかなる特定の個人の機能の低下をも指す。
【００２１】
本発明によって治療することができる、症状として認識力の欠如を含む障害の例は、痴呆、例えばアルツハイマー病、多発性梗塞性痴呆、アルコール性痴呆又は他の薬物関連痴呆、頭蓋内腫瘍又は脳外傷に伴なう痴呆、ハンチントン病又はパーキンソン病に伴なう痴呆、又はＡＩＤＳ関連の痴呆；譫妄、健忘症性障害；外傷後ストレス性障害；精神遅滞；学習障害、例えば読力障害、計算力障害、又は筆記表現力の障害；注意力欠如／機能高進障害；及び年齢関連認識力減退である。
【００２２】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の気分障害又は気分性症状の発現を治療する方法を提供し、前記哺乳動物に前記障害又は症状の発現を治療することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００２３】
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物の気分障害又は気分性症状の発現を治療する方法を提供し、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量の選択的ＰＤＥ１０阻害剤を投与することを含む。
【００２４】
本発明によって治療することができる気分障害又は気分性症状の発現の例は、制約されるものではないが、気分障害又は気分性症状の発現が、軽度、中度又は重度型の重度の抑鬱性症状の発現、躁病性又は混合型気分性の症状の発現、軽躁病性気分症状の発現；非定型的徴候の抑鬱性気分症状の発現；憂鬱性徴候の抑鬱性症状の発現；緊張病性徴候の抑鬱性症状の発現；分娩後に始まる気分性症状の発現；発作後の抑鬱症；重度の抑鬱性障害；気分変調性障害；軽度の抑鬱症性障害；月経前期不快性障害；精神分裂病の精神病後性の抑鬱性障害；妄想性障害又は精神分裂病のような精神病性障害と重複する重度の抑鬱性障害；躁鬱性障害、例えば躁鬱性Ｉ障害、躁鬱性ＩＩ障害、及び循環性障害を含む。
【００２５】
本明細書中で使用される“選択的ＰＤＥ１０阻害剤”の用語は、物質、例えば有機分子を指し、これは、いかなる他のＰＤＥ酵素、特にいかなるＰＤＥ１−９ファミリーからの酵素又はいかなるＰＤＥ１１酵素より大きい程度に、ＰＤＥ１０ファミリーからの酵素を効果的に阻害する。一つの態様において、選択的ＰＤＥ１０阻害剤は、物質、例えば有機分子であり、その物質は、いかなる他のＰＤＥ酵素の阻害に対しても有するＫiの、約１０分の１またはそれ以下のＰＤＥ１０阻害に対するＫiを有する。言い換えれば、その物質は、いかなる他の酵素に対しても必要とする濃度の、約１０分の１又はそれ以下の濃度で、同じ程度にＰＤＥ１０活性を阻害する。
【００２６】
一般的に、物質は、これが約１０μＭ又はそれ以下、好ましくは約０．１μＭ又はそれ以下のＩＣ50を有する場合、ＰＤＥ１０活性を有効に阻害すると考えられる。
【００２７】
“選択的ＰＤＥ１０阻害剤”は、例えばＰＤＥ１０活性を阻害する物質の能力を、他のＰＤＥファミリーからのＰＤＥ酵素を阻害するその能力と比較することによって同定することができる。例えば、物質は、ＰＤＥ１０活性、並びにＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３Ａ、ＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ４Ｃ、ＰＤＥ４Ｄ、ＰＤＥ５、ＰＤＥ６、ＰＤＥ７、ＰＤＥ８、ＰＤＥ９、及びＰＤＥ１１を阻害するその能力に対して分析することができる。
【００２８】
先に記載した本発明の治療方法の一つの態様において、選択的ＰＤＥ１０阻害剤は、パパベリンである。
本発明は、更にヒトを含む哺乳動物のＰＤＥ１０を選択的に阻害する方法を提供し、前記哺乳動物にＰＤＥ１０を阻害することにおいて有効な量のパパベリンを投与することを含む。
【００２９】
“障害の治療の方法”における“治療”の用語は、このような用語が適用される障害、或いは一つ又はそれ以上の障害の症状の発現の進行を逆転、緩和又は阻害することを指す。本明細書中の使用において、この用語は、更に患者の症状にもよるが、障害の発症又はそれに伴なういかなる症状の発現を予防することを含み、障害を予防すること、並びに障害又は開始以前のその症状の発現のいずれもの重篤度を軽減することをも包含する。本明細書中で使用される“治療”は、障害の再発の予防をも指す。
【００３０】
例えば、本明細書中で使用される“分裂病、或いは分裂型又は分裂型感情障害の治療”は、更に前記障害の一つ又はそれ以上の症状の発現（陽性、陰性、及び他の付随する徴候）の治療、例えばこれらに付随する妄想及び／又は幻覚の治療を包含する。分裂病、並びに分裂型及び分裂型感情障害の症状の発現は、無秩序な会話、感情の平坦化、寡語症、無快感症、不適当な感情、不快な気分（例えば、鬱病、不安又は怒りの形態で）、及び認識機能障害のいくつかの徴候を含む。
【００３１】
本明細書中で使用される“哺乳動物”は、“哺乳類”綱のいかなる一員をも示し、制約されるものではないが、ヒト、イヌ、及びネコを含む。
発明の詳細な説明
ヒトＰＤＥを含むＰＤＥ２、３及び５のアイソザイムは、例えば海綿体から；ヒトを含むＰＤＥ１のアイソザイムは、心室から；そしてヒトを含むＰＤＥ４のアイソザイムは、骨格筋から調製することができる。ＰＤＥ６は、例えばイヌの網膜から調製することができる。天然の組織からの酵素の調製の記述は、例えば本明細書中に参考文献として援用される、Ｂｏｏｌｅｌｌ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｉｍｐｏｔｅｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８：７−５２，１９９６に記載されている。
【００３２】
ＰＤＥ７−１１は、同様に天然の組織から調製することができる。ＰＤＥ７−９及び１１のファミリーからのアイソザイムは、別の方法として、Ｆｉｓｈｅｒ，Ｄ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２４６，５７０−５７７，１９９８；Ｓｏｄｅｒｌｉｎｇ，Ｓ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９６：７０７１−７０７６，１９９９；Ｆｉｓｈｅｒ，Ｄ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３，１５５５９−１５５６４，１９９８ｂ；及びＦａｗｃｅｔｔ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９７：３７０２−３７０７，２０００にそれぞれ記載されているように、例えばＳＦ９細胞にトランスフェクトされた全長ヒト組み換えクローンから生成することができる。ＰＤＥ１０は、更にＳＦ９細胞にトランスフェクトされたラットの組み換えクローンから生成することができる（Ｆｕｊｉｓｈｉｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２６６，１１１８−１１２７（１９９９））。次いで酵素は、ＰＤＥ６に対して記載するように細胞溶解物の可溶性画分からＦＰＬＣによって調製される。先に記載した参考文献は、本明細書中に参考文献としてその全てを援用する。
【００３３】
一つのアッセイにおいて、物質は、ＰＤＥ１０及び他の遺伝子ファミリーからのＰＤＥによる環状ヌクレオチドの加水分解の阻害に対してスクリーニングされる。それぞれの個々のＰＤＥのアッセイにおいて使用される環状ヌクレオチド基質の濃度は、Ｋm濃度の１／３であり、異なった酵素間のＩＣ50値の比較を可能にする。ＰＤＥ活性は、以前に記載（Ｆａｗｃｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）したようなシンチレーション近接分析（ＳＰＡ）に基づく方法を使用して測定される。ＰＤＥ阻害剤の効果は、一定量の酵素（ＰＤＥ１−１１）を、変化する濃度の物質及びＩＣ50がＫiに近づくような低濃度の基質の存在中で分析することによって測定される（Ｋmの１／３の濃度において、非標識と［3Ｈ］標識の比が３：１のｃＧＭＰ又はｃＡＭＰ）。最終的なアッセイの体積はアッセイ緩衝液［２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、５ｍＭのＭｇＣｌ2、１ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン］で１００μｌにされる。反応は、酵素で開始され、３０℃で３０−６０分間インキュベートして、＜３０％の基質の転換を得て、そして５０μｌのケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）（ＰＤＥ９及び１１に対してそれぞれ３ｍＭの非標識環状ヌクレオチドを含む）により停止される。プレートを再びシールし、そして２０分間震盪し、その後ビーズを３０分間暗所で沈降させ、そして次いでＴｏｐＣｏｕｎｔプレート読み取り器（Ｐａｃｋａｒｄ，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）で計数する。放射能単位を非阻害の対照（１００％）の活性のパーセントに転換し、阻害剤の濃度に対してプロットすることができ、そして阻害剤のＩＣ50値は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌの‘Ｆｉｔ  Ｃｕｒｖｅ’エクステンションを使用して得ることができる。
【００３４】
選択的ＰＤＥ１０阻害剤の一つの例は、パパベリン（１−［（３，４−ジメトキシフェニル）メチル］−６，７−ジメトキシイソキノリン）である。パパベリンは、脳及び冠動脈血管痙攣、並びに拡張機能障害の治療において使用される既知の有効な平滑筋弛緩剤である。これらの治療活性の基本は充分に理解されていないが、これらは一般的に非選択的ホスホジエステラーゼ阻害剤としてのパパベリンの活性に起因する（Ｔｈｅ  Ｐｈｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ａ．Ｇ．Ｇｉｌｍａｎ，Ｌ．Ｓ．Ｇｏｏｄｍａｎ，Ａ．Ｇｉｌｍａｎ（ｅｄｓ．）Ｍａｃｍｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８０，ｐ．８３０）。パパベリンは、天然に存在する植物アルカロイドであるが、その完全な生合成は、例えば、本明細書中に参考文献として援用される、Ｂｒｏｃｈｍａｎｎ−Ｈａｎｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６０：１６７２，１９７１に記載されている。
【００３５】
選択的ＰＤＥ１０阻害剤は、本発明によって、単独で又は医薬的に受容可能な担体との組み合わせのいずれかで、一回又は多数回投与のいずれかによって投与することができる。適当な医薬的担体は、不活性の固体希釈剤又は充填剤、滅菌水溶液及び各種の有機溶媒を含む。次いでこのようにして形成された医薬組成物は、錠剤、散薬、ロゼンジ剤、シロップ剤、注射用溶液、等のような各種の投与剤形で容易に投与することができる。これらの医薬組成物は、所望する場合、芳香剤、結合剤、賦形剤、等のような更なる成分を含むことができる。従って、経口投与の目的に対して、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム及びリン酸カルシウムのような各種の賦形剤を含む錠剤は、デンプン、メチルセルロース、アルギン酸及びある種の複合ケイ酸塩のような各種の崩壊剤を伴なって、ポリビニルピロリドン、スクロース、ゼラチン及びアラビアゴムのような結合剤と共に使用することができる。更に、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ラウリルナトリウム及びタルクのような滑剤は、錠剤化の目的にしばしば有用である。同様な種類の固体組成物は、更に軟質及び硬質の充填されたゼラチンカプセルの充填物として使用することができる。このために好ましい物質は、ラクトース又は乳糖及び高分子量のポリエチレングリコールを含む。経口投与に対して水性懸濁液又はエリキシル剤が所望される場合、その中の本質的な活性成分は、各種の甘味又は芳香剤、着色物質又は染料、そして所望する場合、乳化又は懸濁剤と、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン及びこれらの組み合わせのような希釈剤と共に混合することができる。
【００３６】
非経口投与に対して、ゴマ又はピーナッツ油、プロピレングリコール水溶液、又は滅菌水溶液中の、選択的ＰＤＥ１０阻害剤を含む溶液を使用することができる。このような水溶液は、必要な場合適当に緩衝されなければならず、そして液体希釈剤は、最初に充分な生理食塩水又はグルコースで等張にされなければならない。これらの特別の水溶液は、静脈、筋肉内、皮下及び腹膜内投与に特に適している。使用される滅菌水性媒体は、当業者にとって既知の標準的技術によって全て容易に入手可能である。
【００３７】
選択的ＰＤＥ１０阻害剤は、本発明の治療方法において経口的、経皮的（例えば貼布の使用により）、非経口的（例えば静脈的）、直腸的、又は局所的に投与することができる。一般的に、本明細書中に記載した方法によって障害又は症状を治療するためのＰＤＥ１０阻害剤の一日当たり投与量は、一般的に約０．０１ないし約１００ｍｇ／治療される患者の体重ｋｇ、の範囲であるものである。例として、選択的ＰＤＥ１０阻害剤は、例えば精神障害の治療に対して平均体重（約７０ｋｇ）のヒトの成人に、一日当たり約１ｍｇないし約７０００ｍｇまで、好ましくは一日当たり約１ｍｇないし約１０００ｍｇの範囲の投与量で、一回又は分割（即ち多数回）部分で投与することができる。先に記載した投与量の範囲に基づいた変更は、治療される患者の体重、年齢、及び症状、苦痛の程度、並びに選択される特定の投与経路のような既知の条件を考慮して、通常の技術の医師によって行うことができる。
【００３８】
以下の実施例は、本発明を例示する。然しながら、本明細書中で完全に説明され、そして特許請求の範囲に記載される本発明が、以下の実施例の詳細によって制約される意図はないことは了解されることである。
【００３９】
実施例
実施例１．選択的ＰＤＥ１０阻害剤：パパベリン：
パパベリンを、ＰＤＥ１０及び他の遺伝子ファミリーからのＰＤＥの一群による環状ヌクレオチドの加水分解の阻害に対してスクリーニングした。それぞれの個々のＰＤＥのアッセイに使用した環状ヌクレオチド基質の濃度は、Ｋｍ濃度の１／３であった。これは、異なった酵素間のＩＣ50値の比較を可能にした。
【００４０】
ＰＤＥ活性を、詳細な説明の部で先に記載したケイ酸イットリウムＳＰＡビーズによるアッセイを使用して測定した。放射能単位を、非阻害の対照（１００％）の活性のパーセントに転換し、阻害剤の濃度に対してプロットし、そして阻害剤のＩＣ50値をＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌの‘Ｆｉｔ  Ｃｕｒｖｅ’エクステンションを使用して得た。
【００４１】
パパベリンが、１８ｎＭ（表１）のＩＣ50値を持つ、例外的に強力な、ＰＤＥ１０の競合的阻害剤であることが観察された。パパベリンは、試験された全ての他のＰＤＥに対してはそれほど強力ではなかった。ＰＤＥ１０に続いて、パパベリンによって最も強力に阻害された酵素は、ＰＤＥ１０に対するそれより１９倍低い３２０ｎＭのＩＣ50を持つＰＤＥ４Ｄであった。従って、これらのデータは、パパベリンが選択的ＰＤＥ１０阻害剤であり、そしてこの化合物が、この酵素の生理学の研究において使用することができることを初めて明らかにする。
【００４２】
表１．記載したＰＤＥのパパベリン阻害に対するＩＣ50値。ＩＣ50は、それぞれの酵素に対して、Ｋｍ値の１／３の基質濃度で測定されて、酵素間の比較を可能にした。ＰＤＥ１０選択性比は、与えられたＰＤＥに対するＩＣ50値をＰＤＥ１０に対するＩＣ50値で割ったものである。
【００４３】
【表１】
0003839343.tif 000002
実施例２．ミディアムスピニーニューロン（Ｍｅｄｉｕｍ  Ｓｐｉｎｙ  Ｎｅｕｒｏｎ）における環状ヌクレオチド代謝の選択的ＰＤＥ１０阻害剤の効果：
実施例１において測定したように、選択的ＰＤＥ１０阻害剤であるパパベリンの効果を、ラットのミディアムスピニーニューロン中の、環状ヌクレオチドの代謝について、初代培養で試験した。
【００４４】
Ｅ１７ラットの胚線条体からＢＤＮＦの存在中で培養したニューロンは、前に記載したそれと非常に似た表現型を示した（Ｖｅｎｔｉｍｉｇｌｉａ  ｅｔａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．７（１９９５）２１３−２２２）。約５０％のこれらのニューロンは、ＧＡＢＡ免疫反応力に対して陽性に染色し、培養物中のミディアムスピニーニューロンの存在を確認した。５ＤＩＶにおけるこれらの培養物中のＰＤＥ１０発現のメッセージは、ＲＮアーゼ保護アッセイによって確認された。
【００４５】
線条体の培養物は、前に記載したように調製した（Ｖｅｎｔｉｍｉｇｌｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．７：２１３−２２２，１９９５）。簡単には、Ｅ１７ラットから切除された線条体（尾条核及び被殻）を分離して、単一細胞の懸濁液を製造し、そして５×１０4ニューロン／ウェルの密度でポリ−Ｌ−オルニチン／ラミニンで被覆された多穴プレートに置いた。細胞をＢ２７補充物及びＢＤＮＦ（１００ｎｇ／ｍＬ）を含むＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地に置いた。実験は、典型的には４日間ｉｎ  ｖｉｔｒｏに置いた後行った。ミディアムスピニーニューロンは、これらの培養物の主要な細胞を構成（５０ないし６０％、ＧＡＢＡ免疫反応力によって確認）した。
【００４６】
ＲＮアーゼ保護アッセイにおいて、ＲＮＡを、ラットミディアムスピニーニューロンの初代培養から、前（Ｉｒｅｄａｌｅ，ＰＡ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５０：１１０３−１１１０，１９９６）に記載したように、５．７Ｍの塩化セシウムの勾配により、１５０，０００×ｇで、２０℃で２１時間の遠心によって調製した。ＲＮＡペレットを、ｐＨ５．２の０．３Ｍの酢酸ナトリウム中に再懸濁し、エタノール中で沈殿させ、そして濃度を分光測光法によって測定した。ＰＤＥ１０リボプローブ（ｒｉｂｏｐｒｏｂｅ）を、マウスのｃＤＮＡから単離された９１４ｂｐの断片（ｂｐ３８０−ｂｐ１２９４に相当）のＰＣＲ増幅によって調製した。次いでこの断片を、ｐＧＥＮ３Ｚｆにクローン化した。ベクターを直線化し、そしてＴ７  ＲＮＡポリメラーゼを使用して、［32Ｐ］標識アンチセンスリボプローブを合成した。ＲＮアーゼ保護アッセイを、ＲＰＡＩＩキット（Ａｍｂｉｏｎ）を使用して行った。簡単には、５μｇの全細胞ＲＮＡを、［32Ｐ］標識ＰＤＥ１０リボプローブ（約１０５ｃｐｍ／試料）と、４２℃で一晩ハイブリッド形成した。翌日、試料をＲＮアーゼＡ及びＴ１と、３７℃で３０分間インキュベートし、そして次いで保護された二重らせんＲＮＡ断片を沈殿させ、そして尿素を含む６％ポリアクリルアミドゲルにかけた。
【００４７】
パパベリンの環状ヌクレオチドに対する効果を分析するために、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで４日後の、線条体細胞培養物を、Ｃａ2+／Ｍｇ+を含まないリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、そしてＣａ2+／Ｍｇ+を含まないリン酸緩衝生理食塩水、３０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１ｍＭのＣａＣｌ2、１ｍｇ／ｍＬのデキストロース、及び５ｍＭのＭｇＣｌ2を含む緩衝液中で１時間予備インキュベートした。線条体細胞をホスホジエステラーゼ阻害剤にさらし、そして摂氏３７度で２０分間インキュベートした。ｃＧＭＰを測定する場合、ニューロンを、化合物との２０分間のインキュベーションに続いて、酸化窒素源であるニトロプルシドナトリウムで２分間刺激した。ｃＡＭＰを測定する場合、ニューロンを、２０分間の化合物とのインキュベーション中に、アデニル酸シクラーゼの活性化剤であるフォルスコリンで刺激した。細胞を、ｃＡＭＰ  ＳＰＡ直接スクリーニングアッセイ緩衝液（０．０５Ｍの酢酸塩と０．０１％のナトリウムアジド）及び緩衝液Ａ（１３３ｍｇ／ｍＬの臭化ドデシルトリメチルアンモニウム）の９：１の混合物を使用して溶解し、そして溶解物をドライアイスで冷凍した。ｃＧＭＰ［Ｉ１２５］又はｃＡＭＰ［Ｉ１２５］シンチレーション近接分析（ＳＰＡ）系（それぞれＡｍｅｒｓｈａｍ  ｃｏｄｅ  ＲＰＡ  ５４０及びＲＰＡ  ５５９）を使用して、細胞溶解物中のそれぞれの環状ヌクレオチドの濃度を検出した。
【００４８】
パパベリン単独では、線条体培養物中のｃＡＭＰ又はｃＧＭＰのいずれの低基底濃度にも影響しなかった。従って、ｃＡＭＰ又はｃＧＭＰの合成が、それぞれフォルスコリン又はＮＯ供与体であるニトロプルシドナトリウム（ＳＮＰ）で刺激される条件下の効果を実験した。２０分間のフォルスコリン（０．１−１０μＭ）による培養物の刺激は、ｃＡＭＰ濃度の濃度依存性増加を示した。同様に、培養物のＳＮＰ（３−１０００μＭ）に対する２分間の短時間の暴露は、ｃＧＭＰ濃度の濃度依存性増加を示した。フォルスコリン単独（１０μＭ）は、ｃＧＭＰの濃度を変化させず、そしてＳＮＰ（３００μＭ）も、ｃＡＭＰ濃度を増加させなかった。ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰ代謝に対するパパベリンの効果を測定するために、線条体培養物を各種の濃度の化合物とインキュベートし、そして次いで最大有効濃度以下のフォルスコリン（１μＭ）又はＳＮＰ（１００μＭ）のいずれかで刺激した。これらの濃度のフォルスコリン又はＳＮＰは、ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの基底に対してそれぞれ２−３倍の増加を起こした。パパベリンは、ＳＮＰ誘導のｃＧＭＰ蓄積において１１．７μＭのＥＣ200（２倍の増加を得る阻害剤の濃度）値を持つ濃度依存の増加を起こした（表２）。最大の効果は１００μＭにおいて観察され、この点でｃＧＭＰ濃度は、ＳＮＰ単独で刺激された培養物のそれに対して５倍に上昇した。パパベリンは、更にフォルスコリン刺激の培養物中のｃＡＭＰ蓄積の増加を起こした。然しながら、化合物は、ｃＡＭＰの増加を促進することにおいて、ｃＧＭＰより３．３倍強力でなかった。線条体培養物中のパパベリンの効果を、異なった選択性を持つ他のＰＤＥ阻害剤と比較した（表２）。非選択的阻害剤であるＩＢＭＸは、ＳＮＰ−又はフォルスコリン刺激の培養物中の、それぞれ１９及び３０μＭのＥＣ200を持つｃＧＭＰ及びｃＡＭＰ蓄積の両方に濃度依存（３−１００μＭ）の増加を起こした。選択的ＰＤＥ４阻害剤ロリプラム（ｒｏｌｉｐｒａｍ）は、２．５μＭのＥＣ200値でフォルスコリン刺激ｃＡＭＰの蓄積を増加し、そしてｃＧＭＰ蓄積の速度を２倍にするために１０倍高い濃度を必要とした。ＰＤＥを選択するｃＧＭＰの阻害剤であるザプリナスト（ｚａｐｒｉｎａｓｔ）は、９８μＭの濃度においてこれらのニューロン中のｃＡＭＰ濃度を２倍にした。然しながら、１００μＭのこの化合物は、ｃＧＭＰの濃度を完全に２倍にはしなかった。これらのデータは、パパベリンが、ミディアムスピニーニューロン中の環状ヌクレオチドの調節に独特の効果を有し、そしてこの効果は、ＰＤＥ１０に対する選択性によるものであることを、初めて明らかにする。
【００４９】
表２．ラット線条体ニューロンの初代培養中のｃＧＭＰ又はｃＡＭＰの上昇に対するＥＣ200値。ＥＣ200値は、それぞれＳＮＰ−又はフォルスコリン刺激培養物中のｃＧＭＰ又はｃＡＭＰの２００％の増加を生ずる濃度を指す。それぞれの値は、示した実験数（ｎ）からの平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．である。それぞれの実験は、３−６の姉妹培養物で反復された。
【００５０】
【表２】
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実施例３．脳底神経節機能の動物モデルにおける選択的ＰＤＥ１０阻害剤の効果：
ヒト及びヒト以外の哺乳動物の研究は、脳底神経節がある範囲の運動性、並びに認識及び感情的／食欲的行動を調節していることを示す（Ｇｒａｙｂｉｅｌ，Ａ．Ｍ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １０（１４）：Ｒ５０９−１１，２０００）。ネズミによる実験モデルが開発され、これは、化合物の脳底神経節機能に対する効果を評価するために使用することができる。パパベリンが、このような二つのモデルにおいて、行動的効果の予期しなかった独特の側面を有することが見出される。
【００５１】
パパベリン単独及びハロペリドールとの組み合わせにおける効果を、オスのＣＤラットのカタレプシーを誘導する能力に対して試験した。この動物モデルを、脳底神経節の出力に対する化合物の効果を分析するために使用した。パパベリン（１．０、３．２、１０、又は３２ｍｇ／ｋｇ）又はベヒクルを皮下的に投与した。いくつかの実験において、これに続いて直ちに１．０ｍｇ／ｋｇのハロペリドール（ｓ．ｃ．０．３％の酒石酸中）を投与した。薬物投与の３０分後、カタレプシーの程度を、ラットの前足を持ち上げられた（１０ｃｍ）棒（直径１ｃｍ）の上に置き、そして両方の前足を棒から外すまでの潜時を、潜時の切り捨てを３０秒として測定することによって定量した。潜時は、Ｋｒｕｓｋａｌｌ−Ｗａｌｌａｃｅ分散分析による比較のために、それぞれの治療群に分類した。事後分析は、Ｍａｎｎ  Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ試験によった。
【００５２】
抗精神病剤ハロペリドールは、前に記載（Ｃｈａｒｔｏｆｆ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９１：５３１−５３７，１９９９）しているように、このモデルで強いカタレプシーを生じる。ハロペリドールの最大有効投与量は、１ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．であることが見出された。対照的に、パパベリンは、単独で３２ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．（ｐ＝０．８６）までの投与量で投与された場合、カタレプシーを誘導しなかった。然しながら図１に示すように、パパベリンは、ハロペリドールの最大以下の（０．３２ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．）投与量のカタレプシー効果を増加した（ｐ＜０．００１）。ハロペリドール誘導のカタレプシーの増加に対するパパベリンの最小有効投与量は３．２ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．である。この実験は、パパベリンが、脳底神経節の出力を、抗精神病活性と一致した方向で変化させることができることを証明した。
【００５３】
実施例４．精神病に対する動物モデルにおける選択的ＰＤＥ１０阻害剤の効果：
次に、シャトルボックス内で測定されるラットの運動活性に対するパパベリンの効果を実験した。ネズミのＰＣＰ刺激の運動の減少は、新規な抗精神病剤の探求の第１次スクリーニングとして受容されている。より新しい非定型的抗精神病剤は、一般的にアンフェタミン刺激の運動活性に対するＰＣＰのそれの選択的阻害を証明する。成長したオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（２５０−３００ｇ）を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から入手した。運動活性を、商業的に入手可能なシャトルボックス（Ｃｏｕｌｂｏｕｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ａｌｌｅｎｔｏｗｎ，ＰＡ）内の交差行動を使用して評価した。薬物の投与後、データを５分間隔で１時間収集した。ラットは、ベヒクル（５％のＤＭＳＯ、５％のエムルホア（Ｅｍｕｌｐｈｏｒ）、９０％生理食塩水）、フェンシクリジン（ＰＣＰ、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．，）又は硫酸アンフェタミン（ＲＢＩ）のいづれかを受け、続いて直ぐにベヒクル又は試験化合物のいずれかを受けた。統計的分析は、ｔ−検定を使用して行った。
【００５４】
精神刺激剤アンフェタミン及びフェンシクリジン（ＰＣＰ）の両方は、このモデルにおいて運動活性の強い増加を生じた。パパベリン単独（３２ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）は、運動活性に僅かな減少を生じ、これはある研究では統計的に有意であった（図２）。然しながら、パパベリンのこの同一の投与量は、アンフェタミンの行動的に当量の投与量（１ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）によって生じるそれに影響することなく、３．２ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．のフェンシクリジンによって刺激された運動活性に有意な減少を生じた。
【００５５】
検討
先に記載したように、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリッド形成を使用した、線条体、側座核及び嗅結節におけるＰＤＥ１０のｍＲＮＡの高い発現は、既に報告されている（Ｓｅｅｇｅｒ，Ｔ．Ｆ．Ｅｔ  ａｌ．，前出）。本出願人は、更にＰＤＥ１０タンパク質に対するモノクローナル抗体を使用して、これらの脳の領域に、対応する高い濃度のＰＤＥ１０タンパク質を見出した。本出願人は、線条体及び側座核中で、ミディアムスピニーニューロン中に高い濃度で発現するＰＤＥ１０のｍＲＮＡを見出した。ミディアムスピニーニューロンは、線条体、側座核、及び嗅結節の出力ニューロンであり；そしてこれらの脳構造体の全てのニューロンの約９５％である。更に、高い濃度のＰＤＥ１０タンパク質が、線条体、側座核、及び嗅結節から淡蒼球及び黒質を含む他の脳領域に突き出す、ミディアムスピニーニューロンの突起（軸索及び末端）において観察された。これらの後者の脳の領域は、それら自体低い又は検出不可能な濃度のＰＤＥ１０のｍＲＮＡを有する。従って、これらの領域のＰＤＥ１０の高い濃度は、ミディアムスピニーニューロンの軸索及び末端に起因する。更に本出願人の研究は、他の脳の領域、即ち皮質、海馬及び小脳のニューロンで、低い濃度で発現したＰＤＥ１０のｍＲＮＡ及びタンパク質を証明した。
【００５６】
線条体及び側座核における高い濃度のＰＤＥ１０の発現は、これらが、脳底神経節の主要な皮質の入力核、並びに中脳のドーパミン作用性突起に対する主要な末端領域であるとすれば、特に興味あるものである。線条体及びその腹側の延長である側座核は、実質的に大脳皮質のそれぞれの領域からグルタミン酸作用性の求心物質を受領し、そして広範囲の皮質性活性の皮質下部の同化部位として機能する。背側の線条体は、一般的に運動性行動の調節に関係し、一方側座を含む腹側領域は、感情的／食欲的行動の調節における機能に関係する。従って、本出願人は、ＰＤＥ１０が、多くのこれらの基本的生理的過程を調節する、シグナル経路に関係する可能性があると信じる。
【００５７】
線条体に対する皮質性の入力は、線条体のニューロンの９５％を構成する、ＧＡＢＡ作用性ミディアムスピニー突起ニューロン（ＭＳＮ）に対する主要な刺激性の推進力を与える。ＭＳＮのグルタミン酸作用性の活性化は、今度は中脳からの大量のドーパミン作用性入力によって調節される。これらの二つの求心性系のアンタゴニスト性の特質は、多くの研究において証明されている。例えば、研究室の動物における運動刺激剤活性は、グルタミン酸受容体のＮＭＤＡサブタイプのドーパミン受容体アゴニスト又はアンタゴニストのいずれかによって得ることができる（Ｃａｒｌｓｓｏｎ，Ｍ．Ｌ．ａｎｄ  Ｃａｒｌｓｓｏｎ，Ａ．Ｔｒｅｎｄ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１３：２７２−２７６，１９９０）。ハロペリドールのようなＤ2ドーパミン受容体アンタゴニストのカタレプシー的効果は、ハロペリドール誘導の遺伝子発現のように、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストによって減少される（Ｃｈａｒｔｏｆｆ，Ｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９１：５３１−５３７，１９９９）。更に最近になって、Ｄ2ドーパミン受容体の遮断が、線条体のＮＭＤＡ受容体のホスホリル化又は活性化状態を増加させることになることが証明されている（Ｌｅｖｅｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ２０（１１）：４０１１−４０２０，２０００）。
【００５８】
全ての臨床的に有効な抗精神病剤が、強力なＤ2アンタゴニスト活性を保有するという認識は、精神分裂病の症状の発現が中央大脳辺縁系のドーパミン系の過剰な活性の結果であるという本来の仮説に導く。直接又は間接的なドーパミンアゴニストの刺激特性を減少する化学化合物の能力評価は、新しい抗精神病剤に対する探求における重要な実験室的試験となった。更に最近になって、ヒトの精神分裂病の陽性、陰性及び認識症状の発現を忠実に再現する、ＰＣＰのようなＮＭＤＡ受容体アンタゴニストの能力（Ｌｕｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９５９；Ｒｏｓｅｎｂａｕｍ  ｅｔ  ａｌ，１９５９；Ｋｒｙｓｔａｌ  ｅｔ  ａｌ．１９９４）は、精神分裂病の前頭下部理論の開発に導いた。簡単に言えば、この仮説は、線条体媒介的な行動の阻害が、グルタミン酸作用性の、そして特定的にはＮＭＤＡ受容体媒介の神経伝達物質の減少の結果として、精神分裂病において不充分であることを提案している。この仮説は、線条体に対する皮質入力（先に記載したように）を直接又は間接的に脱阻害するこれらの能力を仮定すれば、Ｄ2ドーパミン受容体アンタゴニストの既知の抗神経病効果と完全に一致する。ＰＣＰがヒトの精神分裂病の症状の発現を複写する忠実度は、ネズミのＰＣＰ刺激の運動を、新奇な抗精神病剤の探求における第１次スクリーニングとしての使用に導いた。より新しい、そして恐らく更に効力のある非定型の抗精神病剤が、アンフェタミン刺激の運動活性よりＰＣＰのそれに対する選択的活性を示す証明は、この方法を支持することが明白となるものである（Ｇｌｅａｓｏｎ  Ｓ．Ｄ．ａｎｄ  Ｓｈａｎｎｏｎ  Ｈ．Ｅ．Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２９：７９−８４，１９９７）。
【００５９】
抗精神病的治療の現時点における方法は、一般的に膜受容体を目標としているが、本出願人は、ＭＳＮ中のＮＭＤＡ受容体を増加し、又はドーパミンＤ2受容体効果を減少するものであるＰＤＥ１０の細胞内の操作は、更に抗精神病的効果を生じることができることをここに提案する。ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰ活性の増加は、線条体ニューロンの、ＮＭＤＡを含むグルタミン酸アゴニストに対する反応を促進することは既知である（Ｃｏｌｗｅｌｌ，Ｃ．Ｓ．ａｎｄ  Ｍ．Ｓ．Ｌｅｖｉｎｅ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １５（３）１７０４−１７１３，１９９５）。ハロペリドールの神経緩和作用は、更にｃＡＭＰ濃度（Ｗａｒｄ，Ｒ．Ｐ．ａｎｄ  Ｄ．Ｍ．Ｄｏｒｓａ，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ８９（３）：９２７−９３８，１９９９）及びＰＫＡの活性化（Ａｄａｍｓ，Ｍ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９４：１２１５７−１２１６１，１９９７）に依存する。線条体のｃＧＭＰ濃度は、更にＤ2受容体の遮断後に増加し（Ａｌｔａｒ，Ｃ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１８１：１７−２１，１９９０）、そしてＰＫＧは、プロテインホスファターゼＩの内因性阻害剤ＤＡＲＰを含む、ＰＫＡのような同じ下流の基質のあるものをホスホリル化することで知られている（Ｇｒｅｅｎｇａｒｄ  Ｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．２６：２７４−２８４，１９９８）。従って、本出願人は、線条体内のＭＳＮ中の環状ヌクレオチド濃度を選択的に増加することが可能な薬剤は、線条体の機能を、得られる抗精神病的効果を伴なって増加することを合理的に期待することができ、そしてＰＤＥ１０阻害剤は、このような化合物が、ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰのＰＤＥ１０触媒の代謝を、これらの環状ヌクレオチドのＭＳＮ中の濃度を増加させて阻害するものであるために、精神病の治療において治療的効力を有するものであるという仮説を設ける。
【００６０】
先に記載したパパベリンによる実験は、選択的ＰＤＥ１０阻害剤が、脳底神経節の線条体においてＭＳＮ中の環状ヌクレオチド濃度を増加させることができることを明らかにする。先に記載した動物モデルによる研究は、選択的ＰＤＥ１０阻害剤が、脳底神経節の機能に独特な、そして予期しなかった変化を生じることができることを示す。
【００６１】
精神病に加えて、脳底神経節の異常な機能は、注意力欠如／機能昂進障害（ＡＤＨＤ）並びに関連する注意力障害（Ｓｅｅｍａｎ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ３：３８６−９６，１９９８）、鬱病（Ｋａｐｕｒ，Ｓ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ３２：１−１７，１９９２；Ｗｉｌｌｎｅｒ，Ｐ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．２８７：２２５−２３６，１９８３）、及び物質乱用（Ｓｅｌｆ，Ｄ．Ｗ．Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｍｅｄ．３０：３７９−３８９，１９９８）を含む各種の神経精神医学的症状に関係する。パーキンソン病、下肢不安症候群（Ｈｅｎｉｎｇ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｌｅｅｐ  ２２：９７０−９９９，１９９９）及びハンチントン病を含むいくつかの神経学的障害は、更に脳底神経節の機能障害に結びついている。従って、本明細書中に記載した本出願人の研究に基づき、本出願人は、ＰＤＥ１０阻害剤が、このような障害に治療的影響力を有するものであると信じる。
【００６２】
上記に開示したように、本出願人は、ＰＤＥ１０のｍＲＮＡ及びタンパク質が海馬及び皮質のニューロン中でもまた発現することを見出した。認識の過程が海馬及び皮質の機能に依存するため、本出願人は、ＰＤＥ１０は、更に認識の過程において役割を演じ、そしてＰＤＥ１０阻害剤は、アルツハイマー病及び年齢に関係する認識力の減退（ＡＲＣＤ）のような、不充分な認識機能の特徴的成分を有する障害の治療に対して使用することができることを信じる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、パパベリンの投与量の増加に対する動物のカタレプシーを示す棒グラフである。灰色の棒は、ハロペリドールとの組み合わせにおけるパパベリンを示し、そしてハロペリドール誘導のカタレプシーの、パパベリンによる相乗効果を示す。黒色の棒は、パパベリン単独を示す。これらの黒色の棒は、３２ｍｇ／ｋｇまでの投与量において、パパベリンは、単独ではカタレプシーを誘導しなかったことを示す。更に特定的には、パパベリンは、示された投与量で、単独で又はハロペリドール（０．３２ｍｇ／ｋｇ）と共にのいずれかで、試験の３０分前に投与された。それぞれの棒は、同様に治療された６匹の動物の持ち上げられた棒から両前足を外す平均潜時である。Ｋｒｕｓｋａｌｌ−Ｗａｌｌａｃｅの分散分析を、ハロペリドールを加えた場合に対するパパベリン単独の分類された潜時を比較するために使用した。事後分析は、３．２、１０、及び３２ｍｇ／ｋｇのパパベリン及びハロペリドールを投与された動物は、ハロペリドール単独で治療された動物より有意（**）に長い潜時を有していたことを示す。
【図２】  図２は、それぞれシャトルボックス試験における、物質の投与に続く最初の６０分間の動物の交差回数の平均＋ＳＥＭを示す二つの棒グラフである。上部のグラフ（訳注図２Ａ）は、運動に対するパパベリン単独の効果を、アンフェタミン誘導の運動に対するパパベリンの効果とを比較している。下部のグラフ（訳注図２Ｂ）は、運動に対するパパベリン単独の効果を、ＰＣＰ誘導の運動に対するパパベリンの効果とを比較している。アンフェタミンは、１ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．で投与された。ＰＣＰは、３．２ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．で投与された。パパベリンは、３２ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．の投与量でいずれかの薬剤と共同投与された。データは、ｎ−＝８ラット／群に対する薬剤投与に続く最初の６０分間に対する平均＋ＳＥＭ交差回数を示す。
**ベヒクル／ベヒクル対照に対するｐ＜０．０１；*ベヒクル／ｔ−検定によるＰＣＰに対するｐ＜０．０５。
【図１】
0003839343.tif 000004
【図２】
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