(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）有効成分として遊離バルネムリン塩基と、（ｂ）場合により酸化作用から保護するための安定剤と、（ｃ）同じく場合により微生物侵入から保護するための安定剤を含む非水性注射製剤の製造方法であって、生理的に許容可能な非水性溶媒又は溶媒混合物（ｉ）中の塩形態から遊離バルネムリン塩基をｉｎ ｓｉｔｕ製造し、別溶媒（ｉｉ）を加えて安定化させる前記方法。
【請求項２】
（ｃ）において、０．５〜３０重量％のバルネムリン塩を、５０〜９９重量％の濃度範囲の非水性溶媒（ｉ）中に懸濁し、５０〜８０℃の温度範囲で、攪拌し、温和に加熱しながら、懸濁液にアルカリ添加剤を加えて、溶媒（ｉ）中に遊離塩基がすぐに溶解するようにバルネムリン塩基をｉｎ ｓｉｔｕ遊離させる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ミリスチン酸イソプロピル及び、グリセロール、エチレングリコール又はプロピレングリコールと短鎖〜中鎖モノ又はジカルボン酸、中鎖〜長鎖カルボン酸と１価アルコールの半合成及び合成エステルから選択される１種以上の溶媒を非水性溶媒又は溶媒混合物（ｉ）として使用する請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
５０〜９９重量％の濃度範囲の溶媒にバルネムリン塩を懸濁し、温和に加熱撹拌しながらアルカリ添加剤を使用してバルネムリンの遊離塩基をｉｎ ｓｉｔｕ製造する請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
バルネムリン塩基を物理的に安定化させるために、中鎖〜長鎖カルボン酸と１価アルコールのエステル、１，２−Ｏ−イソプロピリデングリセロール、グリセロール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、安息香酸ベンジル又はテトラエチレングリコールを安定化溶媒（ｉｉ）として加える請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
バルネムリン塩を溶媒又は溶媒混合物（ｉ）に懸濁し、５０〜８０℃の温度範囲で加熱撹拌しながらアルカリおよびアルカリ土類炭酸塩、炭酸水素塩または水酸化物、および有機アミンからなるグループから選択されるアルカリ添加剤を懸濁液に加えて、この工程の完了後、相互に非混和性の水相と油相の２相を５０〜８０℃の温度で相互に分離し、遊離バルネムリン塩基を含む分離後の油相を室温で多数回水洗し、５０〜８０℃の温度で再び相分離し、次いで油相を乾燥し、揮発物を除去し、群（ｉｉ）からの溶媒又は溶媒混合物と混合して安定化させる請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
塩形態からｉｎ  ｓｉｔｕ製造された遊離バルネムリン塩基を有効成分として含む、油性安定化注射製剤。
【請求項８】
畜産動物又は家畜の感染性疾患の治療方法における、塩形態からｉｎ  ｓｉｔｕ製造された遊離バルネムリン塩基を有効成分として含む油性安定化注射製剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は良好な耐容性と貯蔵安定性を特徴とするバルネムリンの改善薬剤送達形態の製造に関する。この新規送達形態は非水性又は油性注射製剤であり、有効成分の比較的不安定な遊離塩基をｉｎ−ｓｉｔｕ製造した後に安定化させることにより獲得可能である。本発明の別の側面は前記油性注射製剤自体と、畜産動物又は家畜の感染性疾患の治療方法におけるその使用に関する。
【０００２】
本発明の関連では、バルネムリンは下式Ｉ
【０００３】
【化１】
0003864090.tif 000002
で示される化合物とする。
【０００４】
バルネムリンはＥＰ−０，１５３，２７７から公知であり、特に実施例１２に記載されている。バルネムリンは商品名Ｅｃｏｎｏｒ（登録商標）でも知られている。
【０００５】
一般に知られているように、この化合物は例えば経口又は非経口投与後に殺菌性があり、動物保健分野で一連の細菌感染の予防又は治療に使用されている。広域活性スペクトルはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｒｏｎｓｏｎ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ａｒｔｈｒｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｂｏｖｉｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｂｏｖｉｍａｓｔｉｔｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｂｏｖｉｒｈｉｎｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ種、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｃａｎｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｆｅｌｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ａ．ｇｒａｎｕｌａｒｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｙｏｒｈｉｎｉｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌａｉｄｌａｗｉｉ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｍｅｌｅａｇｒｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｎｅｕｒｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ及びＭｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅを含む。
【０００６】
ＷＯ９８／０１１２７は動物が例えば輸送目的で非常に狭いスペース（高収容密度）に収容され、多大なストレスを受ける場合に常に生じる恐れのある症候群に対するその優れた作用について記載している。この場合に決定的な役割を果たす病原体として最も頻度が高いのはＭｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ（旧名Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）  ｈｙｏｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ  ｐｉｌｏｓｉｃｏｌｉ、Ｌａｗｓｏｎｉａ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ及びＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｐａｒａｓｕｉｓであり、呼吸器疾患や他の感染を併発することが多く、複合病像となる。例えばウシ、ヒツジ及びブタ等の全群生動物のみならず家禽も発症する。
【０００７】
バルネムリンは遊離形態（バルネムリン塩基）では比較的不安定であるため、主に塩形態、特に塩酸塩として使用されている。動物保健分野で現在行われている抗生物質投与方法は注射であり、これは単一制御用量即ち個体の必要に合わせた量を投与するのに適しているためである。この点は獣医学分野で多くの感染性疾患を有効に防除するのに多くの場合に極めて重要である。他方、経口投与は決して十分に制御できるとは言えず、人体医療で一般的である。
【０００８】
しかし、バルネムリン塩の水性注射溶液や更には油性注射懸濁液も大半の家畜、特にブタで耐容性がよくないことが分かっている。弱い皮膚刺激から治癒しにくい壊死に至る障害が観察されている。バルネムリンが今日まで主に経口使用されているのはこのためでもある。更に、水溶液は通常は所望デポー作用を示さない。バルネムリンは所謂バルネムリン塩基として遊離形態で工業的量を生産することができず、塩として存在するため、塩として治療に使用されているという問題もある。
【０００９】
しかし、商業用途に非常に望ましいのは安定で貯蔵性があり、油性であると共に耐容性の注射製剤である。
【００１０】
驚くべきことに、バルネムリンの化学的に安定な非水性注射製剤をｉｎ  ｓｉｔｕ製造し、非水性又は油性溶媒で安定化できることが今般判明した。
【００１１】
本発明の関連でバルネムリン遊離塩基のｉｎ  ｓｉｔｕ製造に利用可能な非水性又は油性溶媒（ｉ）はミリスチン酸イソプロピル、グリセロール、エチレングリコール又はプロピレングリコールと短鎖〜中鎖モノ又はジカルボン酸の半合成及び合成エステル、例えばモノ、ジ及びトリグリセリド（例えば中性油又はミグリオール）である。
【００１２】
遊離塩基を安定化するためには、例えば中鎖〜長鎖カルボン酸（例えば乳酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸等）と１価アルコール（例えばエタノール、ｎ−プロパノール、２−プロパノール等）のエステル、１，２−Ｏ−イソプロピリデングリセロール、グリセロール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、安息香酸ベンジル又はテトラエチレングリコール等の他の溶媒（ｉｉ）をこれらの溶媒（ｉ）に加え、溶媒（ｉ）と溶媒（ｉｉ）の混合物（ｉｉｉ）が最終製剤に存在するようにする。溶媒（ｉｉ）を加えると、薬剤性質を改善することができる。溶媒（ｉ）としてミリスチン酸イソプロピルに溶媒（ｉｉ）として安息香酸ベンジル又はエタノールを加えると特に好ましい。
【００１３】
本発明の好ましい態様は溶媒（ｉ）及び（ｉｉ）が最終製剤中に約７０：１５の比で存在することを特徴とする。
【００１４】
上述のように、バルネムリンの遊離塩基はこれまで大規模に獲得することができなかった。従って、この遊離塩基をｉｎ  ｓｉｔｕ製造し、安定な形態で処方する新規な驚くべき方法を以下に示す。
【００１５】
この目的のために、５０〜９９重量％の濃度範囲の非水性溶媒（ｉ）にバルネムリン塩０．５〜３０重量％、好ましくは５〜１０重量％を懸濁する。約５０〜約８０℃の温度範囲で温和に加熱撹拌しながら適当なアルカリ添加剤を懸濁液に加えてバルネムリン塩基をｉｎ  ｓｉｔｕ遊離させ、遊離塩基を溶媒（ｉ）に直接溶解させる。
【００１６】
遊離バルネムリン塩基のｉｎ  ｓｉｔｕ遊離に利用可能なアルカリ添加剤は例えばアルカリ及びアルカリ土類炭酸塩、炭酸水素塩及び水酸化物、又はトリエチルアミン等の有機アミン類である。
【００１７】
この工程の完了後、相互に非混和性の水相と非水相の２相を約５０〜約８０℃の温度で相互に分離する。この相分離は遠心分離により助長してもよい。（Ｉ）の遊離塩基が加わった分離後の非水相を室温で多数回水洗し、約５０〜約８０℃の温度で再び相分離する。その後、例えば減圧を使用して非水相を乾燥し、残留水と揮発物（例えば有機アミン）を除去し、群（ｉｉ）からの溶媒又は溶媒混合物と混合して安定化させる。このように（ｉｉ）を加えると製剤の薬剤性質が改善される。
【００１８】
酸化作用に対して安定化させるために、得られた溶液に生理的に許容可能な酸化防止剤（例えばアスコルビン酸エステル、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル、トコフェロール又はトコフェロール誘導体等）を加えてもよく、微生物侵入に対して安定化させるために、生理的に許容可能な防腐剤（例えばベンジルアルコール、クロロクレゾール、クロロブタノール、パラヒドロキシ安息香酸エステル、フェノキシエタノール、フェノール及びフェノール誘導体、ソルビン酸等）を加えてもよい。
【００１９】
最終溶液を滅菌濾過又は滅菌して最終容器（例えばアンプル）に充填する。
【００２０】
従って、本発明は主に以下の好ましい側面を含む。
【００２１】
有効成分として遊離バルネムリン塩基と、場合により酸化作用から保護するための安定剤と、同じく場合により微生物侵入から保護するための安定剤を含む非水性注射製剤の製造方法として、上記分類（ｉ）からの生理的に許容可能な非水性溶媒又は溶媒混合物中の塩形態から遊離バルネムリン塩基をｉｎ  ｓｉｔｕ製造し、上記分類（ｉｉ）からの別溶媒を加えて安定化させる方法。
【００２２】
１好適態様は温和に加熱しながら適当なアルカリ添加剤を加えて上記分類（ｉ）の生理的に許容可能な非水性溶媒又は溶媒混合物中０．５〜３０重量％のバルネムリン塩をｉｎ  ｓｉｔｕ遊離させることを特徴とする。
【００２３】
ミリスチン酸イソプロピル、グリセロール、エチレングリコール又はプロピレングリコールと短鎖〜中鎖モノ又はジカルボン酸、中鎖〜長鎖カルボン酸と１価アルコールの半合成及び合成エステルから選択される１種以上の溶媒を上記分類（ｉ）の非水性溶媒又は溶媒混合物として使用することが好ましい。
【００２４】
別の有利な態様は５０〜９９重量％の濃度範囲の溶媒にバルネムリン塩を懸濁し、温和に加熱撹拌しながら適当なアルカリ添加剤を使用してバルネムリンの遊離塩基をｉｎ  ｓｉｔｕ製造することを特徴とする。
【００２５】
本方法の１好適変形例では、バルネムリン塩基を物理的に安定化させるために、中鎖〜長鎖カルボン酸と１価アルコールのエステル、１，２−Ｏ−イソプロピリデングリセロール、グリセロール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、安息香酸ベンジル又はテトラエチレングリコールを上記分類（ｉｉ）の安定化溶媒として加える。
【００２６】
これらの好適態様において、溶媒（ｉ）及び（ｉｉ）は最終製剤中に約７０：１５の比で存在する。
【００２７】
本方法の特に好ましい変形例はバルネムリン塩を溶媒又は溶媒混合物（ｉ）に懸濁し、約５０〜約８０℃の温度範囲で温和に加熱撹拌しながら適当なアルカリ添加剤を懸濁液に加えてバルネムリン塩基をｉｎ  ｓｉｔｕ遊離させ、得られた遊離塩基をこの溶媒（ｉ）に吸収させ、この工程の完了後、相互に非混和性の水相と非水相の２相を約５０〜約８０℃の温度で相互に分離し、（Ｉ）の遊離塩基が加わった分離後の非水相を室温で多数回水洗し、約５０〜約８０℃の温度で再び相分離し、次いで非水相を乾燥し、揮発物を除去し、群（ｉｉ）からの溶媒又は溶媒混合物と混合して安定化させることを特徴とする。
【００２８】
本発明は遊離バルネムリン塩基を有効成分として含み、上記の特徴をもつ遊離及び安定化方法の１種により獲得可能な油性安定化注射製剤にも関する。本発明は畜産動物又は家畜の感染性疾患の治療方法における前記油性注射製剤の使用にも関する。
【００２９】
処方例
実施例１：注射製剤
調合注射製剤は１００ｍｌ中にバルネムリン塩基５ｇを含有する。括弧の前に示すグラム値（処方１：９０．０ｇ、処方２：８５．０ｇ及び処方３：８６．０ｇ）はミリスチン酸イソプロピル、エタノール及び安息香酸ベンジルの混合物の濃度を変えた結果である。２種類の数字を示した理由は製法にあり、成分はグラムで計量するが、容量（ｍｌ）で配量するからである。
【００３０】
【表１】
0003864090.tif 000003
【００３１】
化学安定性データ
【００３２】
【表２】
0003864090.tif 000004
【００３３】
全３種の処方は化学的に安定であることが判明した。
【００３４】
【表３】
0003864090.tif 000005
【００３５】
耐容性データ
注射製剤をブタに筋肉内注射し、隣接組織への影響を評価することにより耐容性を調べた。
【００３６】
【表４】
0003864090.tif 000006
【００３７】
各処方をプラセボに比較した。２種の処方はプラセボに比較して耐容性がさほど悪くないことが判明した。