(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、シソ科メンタ（Mentha）属植物の水蒸気蒸留残渣の溶媒抽出物を含有することを特徴とする抗炎症、抗かゆみ剤。
【請求項２】
シソ科メンタ属植物がミズハッカ(Mentha aquatica L.)、セイヨウハッカ(Mentha piperita L.)、ペニロイアルハッカ(Mentha pulegium L.)、マルバハッカ(Mentha rotundifolia (L.) Huds.)、オランダハッカ(Mentha spicata L)またはベルガモットハッカ(Mentha citrata（Ehrh.）Briq.)およびこれらの変種等である請求項１記載の抗炎症、抗かゆみ剤。
【請求項３】
溶媒が、水、塩化メチレン、酢酸エチル、酢酸ブチル、アセトン、メタノール、エタノール、ブタノールおよび１,３−ブチレングリコールから選ばれる１種または２種以上の溶媒である請求項１記載の抗炎症、抗かゆみ剤。
【請求項４】
組成物全量に基づいて、該成分を抽出物固形物換算で０．０１〜１０．０重量％含有してなる請求項１記載の抗炎症、抗かゆみ剤。
【請求項５】
化粧料である請求項１記載の抗炎症、抗かゆみ剤。
【請求項６】
該抽出物が以下の物性を有する請求項１記載の抗炎症、抗かゆみ剤。
（ａ）赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）νｍａｘ：３４００，２９３０，１６５０，１０６０ｃｍ−１
（ｂ）紫外吸収スペクトル（Ｈ２Ｏ）λｍａｘ：２６０，２８０ｎｍ
（ｃ）溶解性：水に易溶、ベンゼン、エーテル、クロロホルムに不溶。
（ｄ）呈色反応：ＴＬＣ板上硫酸噴霧後、加熱すると黄褐色を示す。金属マグネシウムと塩酸とで赤く呈色する。塩化第二鉄で褐色に呈色し、アルカリを加えると濃黄色を示す。
（ｅ）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：クロロホルム：メタノール＝２：１の展開溶媒でＲｆ値０．２５を示す。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、抗炎症、抗かゆみ剤、さらに詳しくは、シソ科メンタ（Mentha）属植物から得られたある種の成分を有効成分とする、抗炎症、かゆみの防止、抑制、創傷治癒や、肌あれ防止、肌あれの改善等に優れた化粧料、医薬、医薬部外品として有用な外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術および課題】
かゆみを伴う疾患はアトピー性皮膚炎、老人性掻痒症などの乾燥性掻痒症が挙げられるが、このような皮膚疾患は患者に精神的苦痛を与えると共に掻くことにより症状を悪化させる。これら皮膚疾患を予防または治療すべく、従来より各種の外用剤が提案されている。このうち、特に、皮膚に対する緩和な作用を考慮して、生薬を主成分とするものが注目されている（例えば、特開平１−３１９４２４号）。しかし、生薬成分といえども皮膚に作用する上で好ましいものばかりとは限らない。このような観点からすると、今までのところ、かゆみを伴う疾患に対して満足すべき効果の得られる外用剤は見当たらない。
このような現状に鑑み、本発明者らは、炎症に対して強い活性を有し、しかも安全性の点でも心配のない天然物系の抗炎症、抗かゆみ剤を提供すべく、鋭意研究を重ねた。
【０００３】
すなわち、かゆみは皮膚上層に刺激を加えることにより起こり、その刺激となる化学物質ではヒスタミンがよく知られている。ヒスタミンは肥満細胞からの脱顆粒により組織内に遊離し、かゆみを起こし、これは炎症が起こる初期反応であることから（久保田淳ほか編集：現代皮膚科学体系３Ｃ、石橋康正ほか編集：痒みの強い皮膚疾患）、本発明者らは、種々の植物エキスについてヒスタミン遊離抑制作用(in vitro)および起炎剤(compound 48/80) に対する抗炎症作用(in vivo)を指標にして探索した。その結果、シソ科メンタ（Mentha）属植物（以下、ミント草という）の精油採取に際する水蒸気蒸留で生じる残渣のうちに強い抗炎症作用を有する成分があることを見いだし、本発明を完成するに至った。
ミント葉はその精油成分にメントールを含有し、化粧用、歯科用、料理用として、ハッカの風味で幅広く用いられている。また、全草や油は芳香性興奮薬、駆風、防腐、鎮痙薬として利用されてきた。しかし、精油成分を除いた部分、すなわち、水蒸気蒸留残渣については、消臭物質の製造方法（特開昭５９−６０５６〜６０５８号、特公昭６４−１１４５号）および口腔用組成物（特開昭６２−１５５２１０号）が知られている程度であり、その生理活性や抗炎症、抗かゆみ作用については未だ報告されていない。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、有効成分として、シソ科メンタ（Mentha）属植物の水蒸気蒸留残渣の溶媒抽出物を含有することを特徴とする抗炎症、抗かゆみ剤を提供するものである。また、本発明は、かかる抗炎症、抗かゆみ剤の有効成分として有用な、ある種のシソ科メンタ属植物の水蒸気蒸留残渣の溶媒抽出エキスも提供する。
【０００５】
水蒸気蒸留に供するミント草としては、特に限定するものではなく、化粧料、医薬、食品用等の精油の採取に通常用いられる、例えば、ミズハッカ(Mentha aquatica L.)、セイヨウハッカ(Mentha piperita L.)、ペニロイアルハッカ(Mentha pulegium L.)、マルバハッカ(Mentha rotundifolia (L.) Huds.)、オランダハッカ(Mentha spicata L.)またはベルガモットハッカ(Mentha citrata (Ehrh.) Briq.)およびこれらの変種等が挙げられる。
また、ミント草の水蒸気蒸留も特に限定するものではなく、精油採取に採用されるものでよく、残渣はそのまま、あるいは乾燥等して用いることができる。
【０００６】
本発明の有効成分は、かかるミント草の水蒸気蒸留残渣を溶媒抽出し、抽出液から溶媒を留去することによって得ることができる。
抽出溶媒としては、例えば、水、ベンゼン、ジエチルエーテル、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル、酢酸ブチル、アセトン、メタノール、エタノール、ブタノールおよび１,３−ブチレングリコールから選ばれる溶媒が挙げられ、これらは単独でも２種以上を混合してもよい。好ましい溶媒としては、水、メタノール、エタノールおよびこれらの混合溶媒が挙げられ、特に、エタノール抽出エキスおよびその精製物に強い抗炎症作用を有する成分が含有されるので、好ましい。
【０００７】
抽出条件は任意に定めることができる。例えば、ミント草の水蒸気蒸留残渣を約１〜３０倍程度の容量の抽出溶媒に常温または加熱下に浸漬するだけで抽出を行うことができる。抽出液は、濾過または遠心分離により固形物を除去した後、自体公知の適当な方法で抽出溶媒を留去し、そのまま使用してもよく、また、濃縮し、または乾燥して使用することができる。
所望により、上記の抽出液を活性炭で脱色したり、合成高分子吸着体等の樹脂処理等により精製してもよい。しかし、該有効成分の抗炎症、抗かゆみ作用は抽出物のままでも強く現れるので、色、臭い、安定性等の点で不都合がない限り、高度の精製は通常要しない。
【０００８】
本発明の抗炎症、抗かゆみ剤における有効成分の配合量は、その製剤形、期待される炎症、かゆみ抑制効果の程度などによって異なるが、通常、製剤全量に基づいて、該成分を抽出物固形物換算で０．０１〜１０．０重量％、好ましくは０．１〜５．０重量％が適当である。
【０００９】
本発明の抗炎症、抗かゆみ剤には、上記有効成分の他、所望により、基剤（例：ワセリン、流動パラフィン等）、増粘剤（例：カルボキシエチルセルロース、ヒアルロン酸等）、界面活性剤（例：ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ラウリル硫酸ナトリウム等）、希釈剤（例：水、エタノール等）、香料等の製剤化用担体、賦形剤、添加剤のごとき補助成分を配合することができる。
本発明の抗炎症、抗かゆみ剤は、自体公知の方法により、軟膏、乳化剤、クリーム、ローション、パウダー、パック等の外用剤の製剤形とすることができ、化粧料、医薬、医薬部外品として炎症やかゆみの防止、抑制、創傷治癒、肌あれ防止、肌あれ改善に使用できる。
【００１０】
【実施例】
以下、参考例、試験例および実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（１）ミント草抽出物の作製
参考例１
ミント草（セイヨウハッカ）の水蒸気蒸留残渣乾燥品５００ｇを４リットルのエタノールで２回抽出した。ついで、２回の抽出液の合液を、減圧濃縮したのち乾固し、抽出エキス２３ｇを得た（収率４．６％）。
【００１１】
参考例２
ミント草（セイヨウハッカ）の水蒸気蒸留残渣乾燥品５００ｇを４リットルのメタノールで２回抽出した。ついで、２回の抽出液の合液を、減圧濃縮したのち乾固し、抽出エキス３０ｇを得た（収率６％）。
【００１２】
参考例３
ミント草（セイヨウハッカ）の水蒸気蒸留残渣乾燥品４００ｇを４リットルの５０％エタノールで２回抽出した。ついで、２回の抽出液の合液を、減圧濃縮したのち乾固し、抽出エキス１０８ｇを得た（収率２７％）。
【００１３】
参考例４
ミント草（ミズハッカ）の水蒸気蒸留残渣乾燥品４００ｇを４リットルの水で２回抽出した。ついで、２回の抽出液の合液を、減圧濃縮したのち乾固し、抽出エキス１１３ｇを得た（収率２８．３％）。
【００１４】
（２）ヒスタミン遊離抑制試験
試験例１
試験法：ラット(Wistar/ST系、体重約２５０ｇ）を用い、腹腔内に０．１％ＢＳＡリン酸緩衝液を注入し、常法に従って肥満細胞を分取し、細胞浮遊液を調製した。この浮遊液（２ｍｌ）に被験物質を添加し、１０分後に起炎剤（compound 48/80）を添加し、１０分間の遊離および細胞内ヒスタミン量を蛍光法で定量し、数１で示される式に従って遊離抑制率（％）を算出した。
【数１】
0003828163.tif 000002
結果：結果を表１に示す。起炎剤のみの遊離率は５１．９％であり、ミント草水抽出物の遊離率は50μｇ／ｍｌで２５．２％、１００μｇ／ｍｌで３．５％であり、それぞれ５１．４％、９３．３％の遊離抑制率を示した。また、他の溶媒による抽出エキスにおいても遊離抑制効果が認められた。
【００１５】
【表１】
0003828163.tif 000003
【００１６】
（３）起炎剤による足浮腫抑制試験
試験例２
試験物質：マクロゴール軟膏（丸石製薬株式会社）にミント草抽出物（参考例１〜４）５％を均一に分散した軟膏
陽性対照物質：レスタミンコーワ軟膏（興和株式会社）
試験法：ラット（Wister/ST系、体重１５０ｇ前後）右後足に被験物質５％配合軟膏を塗布し、４時間後に被験物質を拭き取り右足蹠皮下に生理食塩水に溶解した起炎剤（compound 48/80）（１００μｇ／ｍｌ)を０．１ｍｌ皮下投与した。起炎剤投与６０分後に足容積測定装置により測定し、つぎの数２で示される式に従って浮腫率を算出した。また、対照群（プラセボ）との比較により数３で示される式に従って抑制率を算出した。
【００１７】
【数２】
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【数３】
0003828163.tif 000005
【００１８】
結果：結果を表２に示した。例えば、対照群では、浮腫率５１．８％を示し、ミント草エタノール抽出物の浮腫率は２９．３％あり、４３．４％の浮腫抑制作用がみられた。また、他の溶媒による抽出エキスにおいても浮腫抑制作用がみられた。陽性対照に用いたレスタミンコーワ軟膏では１４．９％の抑制率であった。よって、ミント草エタノール抽出物には浮腫抑制効果が認められた。
【００１９】
【表２】
0003828163.tif 000006
【００２０】
（４）有効成分の分析
試験例３
参考例１で得られたミント草エタノール抽出物１５０ｇをヘキサン／含水エタノール（各４リットル）で液−液分配し、含水エタノール層を集めて減圧濃縮し、９０ｇのエキスを得た。このエキスをダイヤイオン（三菱化成（株）製、ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０）のカラムクロマトグラフィー（３９０ｇ：φ５０×３００ｍｍ）に付し、水、５０％エタノール、エタノール、アセトン（各３．５リットル）で順次溶出し、５０％エタノール溶出画分を集めて減圧濃縮し、３０ｇのエキスを得た。このエキスをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２５０ｇ：φ３８×５１０ｍｍ）に付し、クロロホルム−メタノール（９：１、８リットル）〜メタノール（０．５リットル）の直線グラジエントを用いて溶出し、１００ｍｌずつのフラクションに分画した。４１番目〜５１番目のフラクションを集めて濃縮し、再度、同じシリカゲルカラムカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム−メタノール（７：１、１リットル）〜クロロホルム−メタノール（４：１、１リットル）の直線グラジエントを用いて溶出し、５０ｍｌずつのフラクションに分画した。１１番目〜１４番目のフラクションを集め、減圧乾固して１．２ｇの粉末を得た。
この粉末の、上記試験例１に従ったヒスタミン遊離抑制試験の結果は、濃度１００μｇ／ｍｌの遊離率３４．０％（抑制率３４．５％）であり、強い抗炎症、抗かゆみ作用を示した。
この活性成分は、以下の物性を有していた。
【００２１】
（ａ）赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）νmax：３４００，２９３０，  １６５０，１０６０ｃｍ-1（図１参照）
（ｂ）紫外吸収スペクトル（Ｈ2Ｏ）λmax：２６０，２８０ｎｍ（図２参照）
（ｃ）溶解性：水に易溶、ベンゼン、エーテル、クロロホルムに不溶。
（ｄ）呈色反応：ＴＬＣ板上硫酸噴霧後、加熱すると黄褐色を示す。金属マグネシウムと塩酸とで赤く呈色する。塩化第二鉄で褐色に呈色し、アルカリを加えると濃黄色を示す。
（ｅ）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：クロロホルム：メタノール＝２：１の展開溶媒でＲｆ値０．２５を示す。
【００２２】
実施例１：軟膏
【表３】
0003828163.tif 000007
参考例１で得た抽出エキスをプロピレングリコール#400に均一に分散させた後、マクロゴール軟膏を加えて混合し、軟膏を得た。
【００２３】
実施例２：化粧水
【表４】
0003828163.tif 000008
精製水にグリセリン、クエン酸、クエン酸ナトリウム、参考例４で得た抽出エキスを溶解した。個別にエタノールにポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０．Ｅ．Ｏ．）、メチルパラベン、香料を溶解し、前記の水溶液に加えて可溶化し、濾過して化粧水を得た。
【００２４】
実施例３：化粧用油
【表５】
0003828163.tif 000009
スクワランに他の成分を均一に溶解して、化粧用油を得た。
【００２５】
実施例４：クリーム
【表６】
0003828163.tif 000010
成分（Ａ）を加熱溶解し、８０℃にする。別に香料を除く成分（Ｂ）を加熱溶解して８０℃に保ち、これに前記成分（Ａ）を撹拌しながら加えて、充分混合した。さらに、撹拌しながら冷却を行い香料を加え、さらに冷却してクリームを得た。
【００２６】
実施例５：乳液
【表７】
0003828163.tif 000011
成分（Ａ）を８０℃にて加熱溶解し、別に加温（８０℃）溶解した香料を除く成分（Ｂ）に撹拌しながら冷却を行い、香料を加え、さらに冷却して乳液を得た。
【００２７】
実施例６：パック
【表８】
0003828163.tif 000012
参考例２で得た抽出エキス、エチルパラベン、香料およびエタノールを均一に溶解した。これを酢酸ビニル・スチレン共重合体、ポリビニルアルコール、ソルビットを混合したものに加え、パックを得た。
【００２８】
実施例７：パウダー
【表９】
0003828163.tif 000013
参考例４で得た抽出エキスおよびステアリン酸デカグルセリルを加熱溶解し、これをデキストリンおよびタルク混合物に撹拌しながら徐々に加えてパウダーを得た。
【００２９】
【発明の効果】
本発明の抗炎症、抗かゆみ用外用組成物を適用することにより、抗炎症、かゆみの防止、抑制、創傷治癒のほかに肌荒れ防止、肌荒れの改善に優れた効果を発揮する。
【図面の簡単な説明】
【図１】  活性成分の赤外吸収スペクトルである。
【図２】  活性成分の紫外部吸収スペクトルである。
【図１】
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【図２】
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