(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
口腔又は肺に投与される混合ミセルエアロゾル薬剤調製物であって、i) ミセル形態の蛋白質性薬剤、ii) 水、iii) 濃度が調製物全体の１〜２０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、iv) 少なくとも３種のミセル生成化合物であって、該化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され、各ミセル生成化合物は、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在し、合計濃度が調製物の５０wt./wt.％未満であるミセル生成化合物、v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全体の１〜１０wt./wt.％であるフェノール化合物、並びに、vi) Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フルオロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群から選択される噴射剤を含んでいる薬剤調製物。
【請求項２】
アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートの濃度は、調製物全体の２−５wt./wt.％である請求項１に記載の調製物。
【請求項３】
アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである請求項１又は２に記載の調製物。
【請求項４】
レシチンは、飽和ホスファチジルコリン、不飽和ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びライソレシチンからなる群から選択される請求項１乃至３の何れかに記載の調整物。
【請求項５】
ミセル生成化合物の１種は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ポリドカノールアルキルエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、ポリオキシエチレンエーテル、ケノデオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され、そのミセル生成化合物の濃度は、調製物全体の約１〜約５wt./wt.％である請求項１乃至４の何れかに記載の調製物。
【請求項６】
噴射剤は、テトラフルオロエタン、テトラフルオロプロパン、ジメチルフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、ジメチルエーテル、ｎ−ブタン及びイソブタンからなる群から選択される請求項１乃至５の何れかに記載の調製物。
【請求項７】
調製物は、ｉ) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、オキソコラニルグリシンナトリウム及びレシチン、ii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ホスファチジルコリン及びオレイン酸、iii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ヒアルロン酸ナトリウム及びレシチン、iv) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール９ラウリルエーテル、トリオレイン及びポリリジン、v) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン及びレシチン、vi) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール２０ラウリルエーテル、マツヨイグサ油及びレシチン、並びに、vii) ラウリル硫酸ナトリウム、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレートからなる群から選択される組合せを含んでいる請求項１乃至６の何れかに記載の調製物。
【請求項８】
薬剤はインスリンである請求項１乃至７の何れかに記載の調製物。
【請求項９】
蛋白質性薬剤対噴射剤の比は、５：９５乃至２５：７５である請求項１乃至８の何れかに記載の調製物。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れかに記載の調製物が入れられた定量供給式器具。
【請求項１１】
口腔又は肺に投与される薬学的組成物を調製する方法であって：
ａ）蛋白質性薬剤組成物を、水性媒体中で、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、及び少なくとも３種のミセル生成化合物と混合して、ミセル蛋白質性薬剤組成物を生成するステップを有しており、前記ミセル生成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され、
ｂ）フェノール、ｍ−クレゾール及びその混合物からなる群から選択されるフェノール化合物を加えるステップを有しており、
ｃ）調製物をエアロゾルディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップを有しており、
ミセル生成化合物は各々が、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在し、アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル生成化合物の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％未満である、方法。
【請求項１２】
前記ステップａにおいて、蛋白質性薬剤組成物に対し、水性媒体中で、少なくとも３種のミセル生成化合物のうちの２種が加えられた後で、前記２種以外のミセル生成化合物が加えられる請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
アルカリ金属アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
噴射剤は、テトラフルオロエタン、テトラフルオロプロパン、ジメチルフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、ジメチルエーテル、ｎ−ブタン及びイソブタンからなる群から選択される請求項１１乃至１３の何れかに記載の方法。
【請求項１５】
調製物は、ｉ) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、オキソコラニルグリシンナトリウム及びレシチン、ii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ホスファチジルコリン及びオレイン酸、iii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ヒアルロン酸ナトリウム及びレシチン、iv) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール９ラウリルエーテル、トリオレイン及びポリリジン、v) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン及びレシチン、vi) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール２０ラウリルエーテル、マツヨイグサ油及びレシチン  並びに、vii) ラウリル硫酸ナトリウム、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレートからなる群から選択される組合せを含んでいる請求項１１乃至１４の何れかに記載の方法。
【請求項１６】
蛋白質性薬剤は、インスリンである請求項１１乃至１５の何れかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００２】
【発明の分野】
本発明は、ペプチド薬物、ワクチン及びホルモンなどの大分子(高分子)の薬剤を投与するための送達システムの改良に関する。特に、本発明は、口腔又は肺に適用される薬剤であって、エアロゾルの手段によって口の中へ投与される薬剤に関する。
【０００３】
【発明の背景】
経口ペプチド及び蛋白質調製物については、大学や企業の研究所において多大な努力が払われているにも拘わらず、大きな躍進は成し遂げられていない。ペプチド及び蛋白質に関して、安全で効果的な経口調製物を得るという目標については、ほとんど進展がないといってもよい。蛋白質及びペプチドの経口調製物を発展させる上で大きな障壁となっているものに、固有透過性(intrinsic permeability)の不足、ルーメン及び細胞の酵素分解、クリアランスの速さ及び、胃腸(gastrointestinal: GI)管の化学的安定性などがある。これらの障壁に取り組むための薬学的アプローチは、従来の小さな有機薬剤分子に対しては成功しているが、有効ペプチドや蛋白質調製物では成功していない。挑戦することは有意義であるけれども、特にインスリンを使用する糖尿病治療の分野において、潜在的な治療的利益は依然として大きい。
【０００４】
科学者らは、蛋白質やペプチドについては、注射よりも他の様々な投与ルートを研究してきた。口腔及び鼻腔は、科学者にとって大いに関心のある箇所である。口膜と鼻膜は両方とも、その他の投与ルートと比べて利点がある。例えば、これらの膜を通じて投与された薬剤は、作用の発現が速く、治療的血漿レベルをもたらし、肝代謝の第１パス効果を回避し、好ましくないＧＩ環境へ薬剤が曝露されないようにすることができる。また、膜部位へのアクセスが容易なので、薬剤の適用、位置決め、取出しを容易に行なえる追加の利点がある。さらに、大分子のものが時間をかけてこれら膜の中を送達される利点がある。
【０００５】
経口ルートは、その他のルートよりも多く注目されてきた。舌下粘膜には、舌下面の膜と、口腔底部があり、頬粘膜(口腔粘膜)は頬のライニングを構成している。舌下粘膜は比較的透過性にすぐれるから、多くの薬剤に関して吸収が速く、生物学的利用能(bioavailability)についても許容される。さらに、薬剤を舌下粘膜の所へもっていくことが容易であるので、都合が良い。このルートは、大量の薬剤を送達させるために、臨床的に研究されてきた。
【０００６】
分子が口腔粘膜を浸透する能力は、分子の大きさ、脂質溶解性及びペプチド蛋白質のイオン化と関係があると考えられる。１０００ダルトンより小さい分子は、粘膜を速やかに通過すると考えられる。分子サイズが増すにつれて、透過性は急激に低下する。脂質溶解性化合物は、脂質非溶解性分子よりも透過しやすい。吸収が最大となるのは、イオン化されていないか、電荷がニュートラルのときである。それゆえ、荷電分子は、口粘膜を通じて吸収する際の最大の課題となる。
【０００７】
多くの蛋白質性薬剤(proteinic drug)は、分子量が６０００ダルトンを越える非常に大きな分子である。これらの大分子は、脂質溶解性が大変乏しく、事実上、不浸透性である。大分子(＞２０００ダルトン)の生体膜への吸収又は運搬を容易にする物質は、エンハンサー(enhancers)として知られている [Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic drug Carrier Systems, 8, 115, 1991, 1992]。エンハンサーは、キレート化剤、胆汁酸塩、脂肪酸、合成親水性化合物、合成疎水性化合物、及び生物分解性のポリマー化合物として特徴づけられている。
【０００８】
エンハンサーの作用に関しては、様々なメカニズムが提案されている。作用のこれらメカニズムには、少なくとも蛋白質及びペプチド薬剤については、(１)粘膜層の粘性及び／又は弾性を低下させること、(２)膜の脂質二重層の流動性を増すことにより、経細胞輸送(transcellular transport)を容易にすること、(３)薬剤の熱力学的活性を高めること、が挙げられる [Critical Rev, 117-125, 1991, 1992]。
【０００９】
これまでにも、多くのエンハンサーが試験されてきた。その中には、大分子の薬剤の粘膜投与を容易にすることに効果的なものもあることがわかった。しかしながら、浸透促進効果が市場要求レベルに達したものは殆んどなかった。この理由として、刺激(irritation)に関して満足し得る安全プロファイルの欠如、バリヤー機能の低下、粘膜毛様体クリアランス保護メカニズムの欠陥などが挙げられる。特に、胆汁酸塩及び幾つかの蛋白質溶解剤は、極端に苦く、味が不快なことが知られている。このため、ヒトが毎日それらを摂取することは殆ど不可能である。胆汁酸塩ベースの送達システムの味を改良するために、幾つかの方法が行われたが、どれ１つとして、ヒトが経口消費する上で商業的に満足し得るものはこれまでなかった。これまでの方法では、口腔粘膜用パッチ、二層タブレット、制御放出タブレット、プロテアーゼ阻害剤が用いられたり、口腔に適用されるフィルムパッチデバイス、及び種々のポリマーマトリックスが使用されている。
【００１０】
上記技術に関する基本的な問題は、膜の中を大分子が移動し易くするのに、パッチやタブレットなどの局部的送達システムの形態で、大量の胆汁酸及びその塩を使用することである。プロテアーゼ阻害剤及びポリマーコーティングを使用しているけれども、その技術では、蛋白質性薬剤を所望の治療濃度で送達させることができなかった。さらにまた、パッチの局部的作用により、口の中に組織損傷を生じる問題があった。これまでは、胆汁酸又はエンハンサーのどちらか一方を、プロテアーゼ阻害剤及び生体分解性ポリマー物質と組み合わせて使用し、大分子を、口、鼻、直腸又は膣のルートを経て送達しようとするものが殆んどであった。しかしながら、これら調製物を用いた場合、蛋白質性薬剤を治療レベルに到達させることは極めて難しい。１種類のエンハンサーでは、大分子がさらに分解することなく粘膜を通過できるようにするために、所定の時間内にて、口、鼻、直腸及び膣などの腔内で強固な細胞結合を分離させることはできない。この問題があるため、上記システムを商業的規模で用いることができない。
【００１１】
経口送達は、組織への薬剤送達に様々な利益をもたらす。例えば、浸透性粘膜へのアクセスが簡単で、かつ侵襲(invasive)することなく行われ、これは、急速な薬剤吸収と薬剤作用の速やかな発現を促進する。ＧＩ管や他の器官に較べて、口腔環境は酵素活性が低く、ｐＨは中性である。
【００１２】
味が苦いとか、刺激があるといった前記の問題を解消し、舌下、口腔及びＧＩ管の粘膜ライニングに大分子を浸透させるために、現在では、エンハンサーとの組合せから成る混合ミセル(mixed micelles)の中に蛋白質性薬剤が包み込まれたシステムが作り出されている。
【００１３】
上記の不都合を実質的に克服する方法を見い出したものである。本発明の組成物中における生理学的ペプチド又は蛋白質の量は、典型的には、投与されるペプチド又は蛋白質が生理学的活性(治療的血漿レベル)を作り出すのに有効な量の薬剤又は薬物を提供できる量である。活性物質の生物学的利用能が１００％であり得ないことを考慮すると、所定投薬量より若干多い量を含めることが望ましい。
【００１４】
混合ミセル調製物の浸透(penetration)と吸収は、噴射剤と共に混合ミセル調製物を投与することによって改善されるものと考えられる。この噴射剤として、例えば、テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロエタン、ジメチルフルオロプロパン、テトラフルオロプロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル、その他の非ＣＦＣ及びＣＦＣ噴射剤が挙げられる。
これらは、定量スプレー器具を通じて送達されることが望ましい。定量インヘラー(定量噴霧式吸入器;Metered dose inhaler; ＭＤＩ)は知られており、幾種類かの薬物について、肺への薬物送達の一般的な形態である。本発明の調製物は噴射剤を含んでおり、多くの調製物の吸収、安定性及び性能に関する品質の改良を企図している。組成物は、ポアへの浸透を高めると共に、血漿が治療レベルに達するように薬剤の吸収を促進できるように選択される。アトマイザー又はインヘラーを用いることの利点の１つとして、器具は自己収納式であるので汚染の可能性が最少に抑えられることを挙げることができる。
【００１５】
【発明の要旨】
本発明は、混合ミセル薬学的調製物及び噴射剤を提供するもので、該調製物及び噴射剤は、i) ミセル形態の蛋白質性薬剤、ii) 水、iii) 濃度が調製物全体の１〜２０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、iv) 少なくとも３種のミセル生成化合物であって、該化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ポリドカノールアルキルエーテル、ポリドカノールアルキルエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され、各ミセル生成化合物の量は、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在し、合計濃度が調製物の５０wt./wt.％未満であるミセル生成化合物、v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全体の１〜１０wt./wt.％であるるフェノール化合物、並びに、vi) 噴射剤であって、Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フルオロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群から選択される噴射剤を含んでいる。
【００１６】
一実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートの濃度は、調製物全体の２〜５wt./wt.％である。
他の実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである。
【００１７】
他の実施例において、レシチンは、飽和又は不飽和のどちらでもよく、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びライソレシチンからなる群から選択されることが望ましい。
【００１８】
さらに他の実施例において、ミセル生成化合物の少なくとも１種は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ポリドカノールアルキルエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ポリオキシエチレンエーテル、トリオレイン、及びその混合物からなる群から選択され、そのミセル生成化合物の濃度は、約１〜約５wt./wt.％である。
蛋白質性薬剤(例えばインスリン)対噴射剤の比は、５：９５乃至２５：７５である。
【００１９】
他の実施例において、噴射剤は、テトラフルオロエタン、テトラフルオロプロパン、ジメチルフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、ジメチルエーテル、ｎ−ブタン及びイソブタンからなる群から選択される。
【００２０】
さらに他の実施例において、混合ミセル薬剤調製物及び噴射剤は、エアロゾルディスペンサーに容れられる。
インスリンを含有するその他組成物については、胃腸管のチャンネルを開く少なくとも一種の無機塩を含んでもよく、インスリンを放出するために追加の刺激を与えることもできる。無機塩の例として、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩及び亜鉛塩などを挙げることができ、特に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛及び炭酸水素ナトリウムなどを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００２１】
当該分野の専門家であれば、多くの薬学的組成物について、薬学的活性成分の分解と酸化を防止するために、通常は、少なくとも一種の抗酸化剤を加えられることは理解されるであろう。当該分野の専門家であれば、着色剤、着香剤、及びその他の化合物でも治療的作用をもたらさない量であれば、調製物の中に含まれてもよいことは理解されるであろう。代表的な着香剤として、メントール、ソルビトール及び果実香料を挙げることができる。
【００２２】
一実施例において、抗酸化剤は、トコフェロール、デテルオキシムメシレート(deteroxime mesylate)、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びその混合物からなる群から選択される。望ましい抗酸化剤はトコフェロールである。
【００２３】
望ましい実施例において、蛋白質分解酵素の作用による薬剤の分解を抑えるために、少なくとも一種のプロテアーゼ阻害剤が調製物に加えられる。既知のプロテアーゼ抑制剤では、調製物の１〜３wt./wr.％の濃度が最も効果的である。
【００２４】
有効なプロテアーゼ阻害剤の例として、バシトラシン、大豆トリプシン、アプロチニン、及び、例えばバシトラシンメチレンジサリシレートなどのバシトラシン誘導体を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。これらの中でバシトラシンは、濃度１.５〜２wt./wt.％で用いられるときに、最も有効である。大豆トリプシンとアプロチニンはまた、調製物の約１〜２wt./wt.％濃度で使用される。
【００２５】
薬剤は、処置される疾患に応じて、広範囲に亘る高分子量剤から選択される。選択される分子量は、一般的には、約１０００以上であり、特に約１０００〜２００００００である。望ましい薬剤として、インスリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルログ(hirulog)、ヒルゲン(hirugen)、ヒルジン(huridine)、インターフェロン、インターロイキン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、イムノグロビン、化学療法剤、ワクチン、糖蛋白、細菌性トキソイド、ホルモン、カルシトニン、インスリン様成長因子(ＩＧＦ)、グルガゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１)、大分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、オピオイド、麻酔剤、催眠剤、ステロイド及び鎮痛剤が挙げられる。
【００２６】
本発明はまた、経皮膜を経た送達に適した薬学的組成物を調製する方法であって：
ａ）蛋白質性薬剤組成物を、水性媒体中で、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、少なくとも３種のミセル生成化合物と混合して、ミセル蛋白質性薬剤組成物を生成するステップを有しており、前記ミセル化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ポリドカノールアルキルエーテル、ポリドカノールアルキルエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され；
ｂ）フェノール化合物を加えるステップを有し、該フェノール化合物は、フェノール、ｍ−クレゾール及びその混合物からなる群から選択され、フェノール化合物の添加は、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートを加える前、又はアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートを加えている間、又はアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートを加えた後、又は少なくとも１種のミセル生成化合物を加える前、又は少なくとも１種のミセル生成化合物を加えている間、又は少なくとも１種のミセル生成化合物を加えた後に行われ、次に、
ｄ）調製物をエアロゾルディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップ、を有しており、
組成物は、少なくとも３種のミセル生成化合物を有しており、各々のミセル生成化合物の量は、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在しており、アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル生成化合物の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％未満である。
【００２７】
本発明の一実施例にかかる方法は、
ａ）水性媒体中で、蛋白質性薬剤組成物を、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート及び少なくとも１種のミセル生成化合物と混合して、ミセル蛋白質性薬剤組成物を生成するステップを有し、前記ミセル生成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ポリドカノールアルキルエーテル、ポリドカノールアルキルエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され；
ｂ）ステップａの間又はステップａの後に、ステップａで加えられた化合物とは異なるミセル生成化合物を少なくとも１種加えるステップと；
ｃ）ステップａの間又はステップａの後に、フェノール、ｍ−クレゾール及びその混合物からなる群から選択されるフェノール化合物を加えるステップと；次に、
ｄ）調製物をエアロゾルディスペンサーの中に入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップと、を有しており、
組成物は少なくとも３種のミセル生成化合物を含み、ミセル生成化合物は、各々が、調製物全体の１−２０wt./wt.％の濃度で存在し、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル生成化合物の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％未満である。
【００２８】
本発明の他の実施例にかかる方法は、
ａ'）水性媒体中で、蛋白質性薬剤組成物を、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートと、所望により少なくとも１種のミセル生成化合物とを混合して、ミセル形態の蛋白質性薬剤組成物を生成するステップと、
ｂ'）ステップａ'で加えられた化合物とは異なる少なくとも１種のミセル生成化合物を、ゆっくりした速度で加え、激しく混合することにより、混合ミセル組成物を生成するステップと、
ｃ'）ステップａ'及びｂ'で生じた混合ミセル組成物をフェノール化合物と混合するステップと、次に、
ｄ'）調製物をエアロゾルディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップ、を有している。
【００２９】
本発明のさらなる実施例にかかる方法は、
ａ"）水性媒体中で、蛋白質性薬剤組成物を、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートと、所望により少なくとも１種のミセル生成化合物とを混合し、激しく混合することにより、混合ミセル組成物を生成するステップと、
ｂ"）ステップａ"で得られた混合ミセル組成物をフェノール化合物と混合するステップと、次に、
ｃ"）調製物をエアロゾルディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップ、を有している。
【００３０】
他の実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである。
さらに他の実施例において、調製物は、ミセル生成化合物の組合せを含んでおり、該組合せは、ｉ) ヒアルロン酸ナトリウム、モノオレイン及び飽和リン脂質、ii) 飽和リン脂質、モノオレイン及びグリコール酸、iii) ヒアルロン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル及びレシチン、iv) ポリオキシエチレンエーテル、トリヒドロキシオキソコラニル及びレシチン、v) ポリドカノール９ラウリルエーテル、ポリリジン及びトリオレイン、vi) 飽和リン脂質、ポリオキシエチレンエーテル及びグリコール酸、並びに、vii) トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレートからなる群から選択される。
激しい混合は、例えば、磁気攪拌機又はプロペラ攪拌機などの高速攪拌機や、超音波処理(sonication)によって行なうことができる。
【００３１】
一実施例において、混合ミセル状調製物の生成は、水性ミセル薬剤組成物を超音波処理することにより行われ、ミセル生成化合物のうちの１種はレシチンである。
【００３２】
本発明はまた、本発明の組成物が入れられた定量エアロゾルディスペンサーを提供するものであり、蛋白質性薬剤が入れられた水溶液と噴射剤は、単一の相である。
【００３３】
本発明はまた、定量スプレー器具を用いて、本発明の混合ミセル薬学的調製物を口の中へスプレーすることにより前記調製物を投与する方法を提供するものである。
【００３４】
本発明はまた、定量スプレーディスペンサーから、混合ミセル薬剤調製物及び噴射剤を、ヒトの口腔内へスプレーすることにより、吸入することなく、口腔内へ蛋白質性薬剤を投与する方法を提供するものであって、混合ミセル薬剤調製物及び噴射剤は、
i) ミセル形態の蛋白質性薬剤、ii) 水、iii) 濃度が調製物全体の１〜２０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、iv) 少なくとも３種のミセル生成化合物であって、該化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ポリドカノールアルキルエーテル、ポリドカノールアルキルエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、及びその混合物からなる群から選択され、各ミセル生成化合物の量は、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在し、合計濃度が調製物の５０wt./wt.％未満であるミセル生成化合物、v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全体の１〜１０wt./wt.％であるるフェノール化合物、並びに、vi) Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フルオロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群から選択される噴射剤、を含んでいる。
【００３５】
一実施例において、ディスペンサーは、薬剤調製物及び噴射剤を口腔内にスプレーする前に、振るようにする。
【００３６】
【望ましい実施例の詳細な説明】
本発明は、巨大分子(高分子量)の薬剤を、特に、口又は肺の膜を経て送達するための改良された方法を提供するものである。薬剤とは、蛋白質、ペプチド、ホルモン、ワクチン及び薬物等を広範囲に含むものである。巨大分子薬剤の分子量は、１０００以上、特に１０００〜２００００００の範囲が望ましい。
【００３７】
本発明で投与されることのできるホルモンとして、例えば、チロイド、アンドロゲン、エストロゲン、プロスタグランジン、ソマトトロピン、ゴナドトロピン、エリトロポエチン、インターフェロン、インターロイキン、ステロイド及びサイトカインを挙げることができる。本発明で投与されることのできるワクチンとして、細菌性ワクチンとウイルス性ワクチンがあり、例えば、肝炎、インフルエンザ、結核、カナリア痘、水疱瘡、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹、肺炎、ＢＣＧ、ＨＩＶ及びＡＩＤＳに対するワクチンがある。本発明を用いて投与されることのできる細菌トキソイドには、ジフテリア、破傷風、シュードモナス及びミコバクテリウム結核が挙げられる。特異的な心臓血管又は血栓溶解剤の例として、ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス及びヒルジンを挙げることができる。本発明において有効に投与されることのできる大分子には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体及びイムノグロビンがある。
【００３８】
薬剤の濃度は、疾病の治療又は予防に効果があって、また、動物又はヒトの生理学的状態を調整するのに十分な量であればよいことは、理解されるべきである。投与される薬剤の濃度又は量は、薬剤毎に決められているパラメータと、例えば鼻、口、肺等への投与方法に依存する。例えば、鼻へ投与される調製物では、鼻孔の刺激は炎症を回避するために、成分によってはかなり低い濃度を要求される傾向がある。鼻へ投与される適当な調製物の場合、経口調製物を１０〜１００倍に希釈することが望ましい場合がときどきある。
【００３９】
混合ミセル調製物は、薬剤の水溶液、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルスルフェート、少なくとも３種のミセル生成化合物、及び、所望によるフェノール化合物を混合することにより調製される。ミセル生成化合物は、アルカリ金属アルキルスルフェートの添加と同時又は添加した後に加えられる。混合ミセルは、成分をどのように混合しても生成されるが、より小さいサイズのミセルを生成するために激しく混合することが望ましい。
【００４０】
１つの方法において、薬学的に活性な薬剤及び少なくともアルカリ金属アルキルスルフェートを含む第１ミセル組成物が作られる。第１ミセル組成物は次に、少なくとも３種のミセル生成化合物と混合され、混合ミセル組成物が生成される。
他の方法において、ミセル組成物は、薬学的に活性な薬剤、アルカリ金属アルキルスルフェート及び少なくとも１種のミセル生成化合物を混合し、次に、残りのミセル生成化合物を加え、激しく混合することにより調製される。
【００４１】
フェノール及び／又はｍ−クレゾールは、調製物を安定化させ、バクテリアの増殖から保護するために加えられる。或いはまた、フェノール及び／又はｍ−クレゾールは、ミセル生成成分と共に加えてもよい。グリセリンのような等張剤もまた、混合ミセル状組成物の調製後に加えられる。調製物は、次に、エアロゾルディスペンサーに入れられ、ディスペンサーには噴射剤が充填される。
噴射剤は、圧力下にあり、ディスペンサー内で液体状である。本発明では、本発明の組成物がディスペンサーの中にあるとき、水性相は、噴射剤の相と分離している。しかしながら、成分の割合は、水成相と噴射剤の相が一つの相になるように、簡単な実験によって調節されるのが望ましい。２相である場合、内容物の一部を例えば定量弁を介して分配する前に、ディスペンサーを振る必要がある。分配量の薬剤は、定量弁から微細なスプレー状態で噴射される。
【００４２】
望ましい噴射剤は、水素含有クロロフルオロカーボン、水素含有フルオロカーボン、ジメチルエーテル及びジエチルエーテルである。さらに望ましい噴射剤は、ＨＦＡ１３４ａ(１,１,１,２テトラフルオロエタン)である。
【００４３】
本発明は幅広い適用可能性を有しているが、以下では、糖尿病治療に使用されるインスリンとそのアナローグについて説明する。
前述したように、本発明の組成物は、薬剤調製物は混合ミセルの形態であることが要求される。
【００４４】
インスリンの場合、口腔を通じて投与されるものであるが、第１ミセル溶液は、粉末インスリンに、水、次に塩酸(典型的には５Ｍ)を添加し、粉末が溶けて、透明な溶液が得られるまで撹拌することによって作ることができる。溶液は、次に水酸化ナトリウムで中和される。アルキル硫酸ナトリウムは、低速で攪拌しながら、単独で或いは少なくとも１種のミセル生成化合物と共に加えられる。アルキル硫酸ナトリウムとしてのアルキル硫酸ナトリウムの水溶液における典型的濃度は、溶液の約３〜２０wt./wt.％である。一般的に、インスリンはミセル溶液中に存在し、その量は、最終調製物の約２〜４wt./wt.％の濃度である。
【００４５】
このように生成されたミセル溶液は、次に、超音波処理又は高速攪拌等によって激しく混合され、混合ミセルリポソーム溶液が生成される。他のミセル生成化合物が加えられてもよい。１種又は２種以上のミセル生成化合物が加えられる。ミセル生成化合物として、例えば、レシチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、グリセリン、ポリグリセリン、リシン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ポリドカノールアルキルエーテル、ポリドカノールアルキルエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート、及びデオキシコレートからなる群から選択されるものを挙げることができる。混合は、高速ミキサー又は超音波処理機を用いて行なうことにより、調製物の中に均一なミセル粒子サイズ分布を確実に得ることができる。
【００４６】
混合ミセル調製物の生成後、フェノール及び／又はｍ−クレゾールが、組成物のエアロゾルディスペンサーへの充填前に加えられる。前述したように、例えば等張剤、着香剤、抗酸化剤、塩、プロテアーゼ阻害剤、その他の薬学的に許容される化合物などのその他成分を加えることもできる。調製物がエアロゾルディスペンサーに入れられた後、ディスペンサーには、既知の方法で噴射剤が充填される。
【００４７】
ミセル生成化合物の各々は、存在する場合には、調製物全体の１〜２０wt./wt.％の濃度で存在する。
【００４８】
ヒアルロン酸の望ましい塩は、ヒアルロン酸アルカリ金属、ヒアルロン酸アルカリ土類金属及びヒアルロン酸アルミニウムである。望ましい塩は、ヒアルロン酸ナトリウムである。ヒアルロン酸又はヒアルロン酸の薬学的に許容される塩の濃度は、調製物全体の１〜５wt./wt.％である。より望ましい範囲は、調製物全体の１.５〜３.５wt./wt.％である。
【００４９】
必須成分の具体的な濃度は、比較的簡単な方法によって決めることができる。スプレーされる時、微細な霧状ではなく泡状となる組成物を回避するために、特定の成分の量を限定する必要があることは理解されるであろう。口腔を通じて吸収させる場合、注射による投与又は消化管経由の投与に通常必要とされる投与量の２倍又は３倍に増やすのが望ましいことがある。
【００５０】
調製物の各成分の量は、薬剤及び適用部位によって異なることは理解されるべきである。口腔に適用される調製物の望ましい組合せは次の通りである：ｉ) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、オキソコラニルグリシンナトリウム及びレシチン、ii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ホスファチジルコリン及びオレイン酸、iii) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ヒアルロン酸ナトリウム及びレシチン、iv) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール９ラウリルエーテル、トリオレイン及びポリリジン、v) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン及びレシチン、vi) ラウリル硫酸ナトリウム、ポリドカノール２０ラウリルエーテル、マツヨイグサ油及びレシチン、並びに、vii) ラウリル硫酸ナトリウム、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレート。
【００５１】
本発明の治療用組成物は、室温又は低温で保存することができる。蛋白質性薬物は、薬物の劣化を防止し、貯蔵寿命を延ばすために、低温で保存することが望ましい。
【００５２】
本発明の混合ミセルは、高い割合(＞９０％の被包)で、分子を被包するものと考えられている。一般的に、混合ミセル組成物中のミセル粒子のサイズは、約１〜１０ｎｍ又はそれより小さく、１〜５ｎｍが望ましい。このような混合ミセルは、口腔又はＧＩ管内の膜のポアより小さい傾向にある。このように、混合ミセルのサイズが極めて小さくなると、被包された分子は口腔の粘膜を通じて透過し易くなると考えられている。
【００５３】
エアロゾルディスペンサーからスプレーされるエアロゾル液滴の望ましいサイズは、薬剤が沈着(deposition)する場所に部分的に依存する。例えば、肺の中に沈着する場合、望ましい粒子サイズは約５μｍより小さく、口腔で吸収する場合、望ましい粒子サイズは約６〜１０μｍである。
【００５４】
本発明の組成物における生理学的ペプチド又は蛋白質の量は、一般的には、投与されるペプチド又は蛋白質が生理学的活性(治療的血漿レベル)を作り出すのに有効な薬剤及び薬物の量である。どんな活性物質も生物学的利用能が１００％になることはあり得ず、投与された活性薬物が完全に吸収されるものでないことを考慮すると、所望の投与量より若干多くの量を含めることが望ましい。
【００５５】
混合ミセル調製物の浸透及び吸収は、混合ミセル調製物を噴射剤と混合することによって改善される。この噴射剤として、例えば、テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロエタン、ジメチルフルオロプロパン、テトラフルオロプロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル、その他の非ＣＦＣ及びＣＦＣ噴射剤が挙げられる。これらは、定量スプレー器具を通じて送達されることが望ましい。定量インヘラーは知られており、幾つかの薬物にとっては、肺への薬物送達形態として一般的である。器具自体は自己収納式であるので、アトマイザー又はインヘラーを使用する利点の１つとして、汚染の可能性が最少に抑えられることを挙げることができる。
【００５６】
前記のように、調製物中の成分の濃度に合わせて調節することにより、エアロゾル容器内の調製物は単一相になることができ、噴射剤と、調製物の残部は、互いによく混じり合っている。この場合において、単一相は、一般的に何か月も安定した状態に維持される。他の組合せでは、調製物は２相になっていてもよく、一方の相が噴射剤、他方の相が調製物の残部である。調製物が口の中にスプレーされる前に、調製物を激しく振ることにより、定量供給式アプリケータ(エアロゾル容器)から送達されるショット毎の薬剤量は均一になる。
【００５７】
噴射剤を含んだ本発明の調製物は、多くの調製物の吸収、安定性及び性能の品質を改良することが企図される。また、ポアを通る浸透が向上し、薬物の吸収が促進されて、血漿が治療レベルに達するように、組成物が選択される。
【００５８】
調製物の口腔への投与は、調製物を吸入することなく口の中へスプレーすることによって行われるので、液滴は肺の中へ引き込まれることなく、口の中にとどまっている。
【００５９】
以下の実施例を参照して、本発明を説明する。
実験１
第１の実験は、比較目的のデータを得るために実施した。この実験例は、本発明の範囲に含まれない。
【００６０】
攪拌器付きガラスビーカに粉末インスリンを入れた。蒸留水を加えて、溶液を低速で攪拌した。インスリンが完全に溶解するまで、この溶液に５Ｍ  ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下した。この溶液を、ｐＨが７〜８になるまで５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を滴下して中和した。この溶液に、フェノール７ｍｇとｍ−クレゾール７ｍｇを加えて、十分に混合した。溶液１ミリリットル当たり、２００ユニットのインスリンになるまで、溶液を蒸留水で希釈した。次に、その１ミリリットルをガラス製バイアルへ移し、Pamasol(商標名)２００８の半自動式ガス充填装置を用いて、ＨＦＡ１３４ａ噴射剤を１０.８ｇ充填した。
【００６１】
１０人の糖尿病患者に対して、投与前夜から絶食し、投与前に朝食をとらないようにしてもらった。第１日目、患者に１０ユニットのインスリン(エリ・リリー(Eli Lilly)から入手可能で、効き目の速い標準のインスリン)を注射した。第２日目、患者は、この実験のインスリン６０ユニットを、吸入なしで、口の中に投与した(６ユニットを１０パフ)。バイヤー社(Bayer)のグルコメータ・エリート(Elite)を用いて、血糖値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたり血糖値の状態をモニターした。平均結果(ミリモル／リットルで表す)を表１に示している。
【００６２】
【表１】
0003818851.tif 000002
【００６３】
この実験から明らかなように、アルカリ金属アルキルサルフェート及び本発明の吸収促進剤を含まない調製物をスプレーしても、注射法とは異なり、糖尿病患者の血糖値を下げることはできなかった。このように、前記調製物とスプレー法による投与との組合せは、代謝効果を全くもたらさなかった。
【００６４】
実験２
攪拌器付きガラスビーカの中に粉末インスリンを入れた。蒸留水を加えて、溶液を低速で攪拌した。インスリンが完全に溶解するまで、５Ｍ  ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下した。この溶液をゆっくりと撹拌しながら、ｐＨが７〜８になるまで５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を滴下して中和した。次に、この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)７ｍｇ及びトリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇを加えて、完全に溶かした。次に、水アルコール溶液にレシチン７ｍｇを溶解した液(７ｍｇ／ｍＬ)を、高速(例えば２０００ｒｐｍ)で撹拌しながら加えた。溶液は３０分間撹拌した後、１０℃で保存した。得られた混合ミセル溶液は約２００ユニットのインスリンを含んでいた。この混合物にフェノール５ｍｇ、ｍ−クレゾール５ｍｇ及びグリセリン１０ｍｇを加えた。
【００６５】
溶液をピペット(１ｍＬ／バイアル)にて１０ｍＬ容量のガラス製バイアルに入れた。次にPamasol２００８自動ガス充填装置を用いて、ＨＦＡ１３４ａ噴射剤をバイアルに充填した。エアロゾルバイアルの１回の操作(actuation)で２ユニットのインスリンが送達されるように、噴射剤の量を９ｍＬのショットサイズに調節した。バイアルの弁は、１回の操作で１００μＬ(２ユニットのインスリンが含まれる)噴霧されるように設計されている。ガラスバイアルの中で噴射剤を含む調製物は、単一の相であり、均質であった。
【００６６】
空気力学的な粒子サイズは、８ステージのＵＳＰアンダーソンのカスケードインパクター・マークII(商標名)により求めた。インパクターは、メタノールで洗浄し、３０℃で空気乾燥した。グラスファイバーフィルターを収集プレートに載置した。アクチュエータをインパクターのマウスピースに取り付けて、ＵＳＰの導入ポート及びジェットステージの上で組み立てた。真空ポンプを接続し、空気流量を毎分２８.３リットルに設定した。バイアルは、使用前に１０秒間振り動かし、２回の操作で廃棄する。ショットの送達は、アクチュエータをマウスピースの中に投入し、２５回繰り返すことによって行なった。１０ｍＬ中に０.６ｍＬのＥＤＴＡを含有するｐＨ８.７の水でマウスピースを洗って、沈着したインスリンを集めた。フィルターを取り除いて、シンチレーションバイアルの中に入れ、１５分間超音波処理が施された。次に、インスリンの量をＲＰ−ＨＰＬＣを用いて分析した。結果を表２(１回の操作で２ユニット)及び表３(１回の操作で４ユニット)に示している。
【００６７】
【表２】
0003818851.tif 000003
【００６８】
【表３】
0003818851.tif 000004
【００６９】
これらの試験結果に基づいて、粒子サイズは、約７μｍであると決定された。ステージ３〜８ではインスリンの沈着は認められなかった。これは、大部分の粒子が約６μｍより大きいことを意味する。これにより、深肺部には調製物の沈着なく、調製物の大部分は口腔に沈着されるであろうことが示唆される。
【００７０】
ショットサイズの精度を判定するために、さらなる試験を行ない、複数のティール管(thiel tubes)にショットを放ち、サンプル収集の前と後に、管の重さを測定した。操作１回当たり２ユニットのショットの重量は、０.０７５〜０.０８３グラムであり、約±５％以内であった。操作１回当たり４ユニットのショットの重量は０.０７６〜０.０８３グラムであり、約±５％以内であった。操作１回当たり６ユニットのショットの重量は０.０７０〜０.０８２グラムであり、約±８％以内であった。
ＨＰＬＣ分析では、送達された量は、１回の操作につき２ユニットのショットは２.０１〜２.０７ユニットであり、１回の操作につき４ユニットのショットは３.９〜４.４ユニットであり、１回の操作につき６ユニットのショットは５.８〜６.３ユニットであった。
【００７１】
１０人の糖尿病患者に対して、投与前夜から絶食し、投与前に朝食をとらないようにしてもらった。第１日目、患者に１０ユニットのインスリン(エリ・リリーから入手可能で、効き目の速い標準のインスリン)を注射した。第２日目、患者は、この実験のインスリン６０ユニットを、吸入なしで、口の中に投与した(６ユニットを１０パフ)。ＲＩＡ法により、血漿インスリン値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたりモニターした。平均結果(マイクロモル／ミリリットルで表す)を表４に示している。また、バイヤー社のグルコメータ・エリートを用いて、血糖値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたり血糖値の状態をモニターした。平均結果(ミリモル／リットルで表す)を表５に示している。
【００７２】
【表４】
0003818851.tif 000005
【００７３】
この試験結果では、注射法とスプレー法は同等であった。
【００７４】
【表５】
0003818851.tif 000006
【００７５】
この試験結果では、注射法とスプレー法は、グルコース値に関して同等であった。
さらに実験を行ない、４０ユニットをスプレー投与(４ユニットを１０パフ)した場合と、１０ユニットを注射した場合とについて、前述の血漿値と血糖値を測定した。その結果を表６(血漿値)と、表７(血糖値)に示した。
【００７６】
【表６】
0003818851.tif 000007
【００７７】
この試験結果では、注射法とスプレー法は、血漿インスリン値に関して同等であった。
【００７８】
【表７】
0003818851.tif 000008
【００７９】
この試験結果では、注射法とスプレー法は、血糖値に関して同等であった。
【００８０】
実験３
攪拌器付きガラスビーカに粉末インスリンを入れた。蒸留水を加えて、溶液を低速で攪拌した。インスリンが完全に溶解するまで、この溶液に５Ｍ  ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下した。この溶液を、ゆっくりと撹拌しながら、ｐＨが７〜８になるまで５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を滴下して中和した。この溶液に、インスリン溶液１ミリリットルにつきラウリル硫酸ナトリウム３０.４ｍｇ、インスリン溶液１ミリリットルにつきポリドカノール９ラウリルエーテル３０.４ｍｇ及びインスリン溶液１ミリリットルにつきポリリジン１０.０ｍｇを加えて、十分に混合した。次に、インスリン溶液１ミリリットルにつきトリオレイン１５.２ｍｇを、高速(例えば２０００ｒｐｍ)で撹拌しながら加えた。溶液は３０分間撹拌した後、１０℃で保存した。得られた溶液は、混合ミセル溶液である。この混合物に、インスリン溶液１ミリリットルにつきｍ−クレゾール１５.２ｍｇを加えた。
【００８１】
溶液をピペット(１ｍＬ)にてガラス製バイアルに入れた。次にPamasol２００８自動ガス充填装置を用いて、各バイアルにＨＦＡ１３４ａ噴射剤１０.８ｇを充填した。バイアルの弁は、１回の操作で１００μＬ(インスリン６ユニットが含まれる)噴霧されるように設計されている。ガラスバイアルの中で噴射剤を含む調製物は、単一の相であり、均質であった。
【００８２】
１０人の糖尿病患者に対して、投与前夜から絶食し、投与前に朝食をとらないようにしてもらった。第１日目、患者に１０ユニットのインスリン(エリ・リリーから入手可能で、効き目の速い標準のインスリン)を注射した。第２日目、患者は、この実験のインスリン６０ユニットを、吸入なしで、口の中に投与した(６ユニットを１０パフ)。ＲＩＡ法により、血漿インスリン値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたりモニターした。平均結果は、マイクロモル／ミリリットルで表わされ、表８に示している。また、バイヤー社のグルコメータ・エリートを用いて、血糖値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたり血糖値の状態をモニターした。平均結果は、ミリモル／リットルで表わされ、表９に示している。
【００８３】
【表８】
0003818851.tif 000009
【００８４】
この試験結果では、注射法とスプレー法は同等であった。
【００８５】
【表９】
0003818851.tif 000010
【００８６】
この試験結果では、注射法とスプレー法は、血糖値に関して同等であった。
【００８７】
実験４
比較目的のデータを得るためにさらなる実験を実施した。
【００８８】
攪拌器付きガラスビーカに粉末インスリンを入れた。蒸留水を加えて、溶液を低速で攪拌した。インスリンが完全に溶解するまで、この溶液に５Ｍ  ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下した。この溶液を、ｐＨが７〜８になるまで５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を滴下して中和した。溶液１ミリリットルにつきインスリン６００ユニットとなるまで、この溶液を蒸留水で希釈した。１ミリリットル分を、１０ｍＬ容量のガラスバイアルに移し、次に、Pamasol(商標名)２００８半自動式ガス充填装置を用いて、ＨＦＡ１３４ａ噴射剤１０.８ｇを充填した。この調製物は本発明の範囲外である。
【００８９】
気相と水相がはっきりと分離しているのが観察された。バイアルを振っても、組成物は均質にならなかった。
【００９０】
ショットサイズの精度を判定するために、さらなる試験を行ない、複数のティール管(thiel tubes)にショットを放ち、サンプル収集の前と後に管の重さを測定した。操作１回当たり６ユニットの場合について、ショットを５回続けて行ない、重量を測定したところ、０.０９４ｇ、０.１１０ｇ、０.２００ｇ、０.１５０ｇ及び０.０５０ｇであり、平均の約±６０％以内であった。これは、実験２(本発明の範囲内のもの)の±８％と比較される。
【００９１】
ＨＰＬＣ分析では、ショット５〜１０の平均送達量は操作１回当たり５.４ユニット、ショット４５〜５０の平均送達量は操作１回当たり７.１ユニット、ショット８５〜９０の平均送達量は操作１回当たり８.６ユニットであった。
これらの試験結果によれば、ミセル生成成分を含まない組成物は不均一な送達を示した。
【００９２】
実験５
１ミリリットルにつき１００００ユニットが含まれる濃縮インスリン１０ミリリットルを、ガラスビーカに入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル７ｍｇ(１０ラウリル)、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇ及びレシチン７ｍｇを加えた。これらが完全に溶けるまで、撹拌した。溶液に、フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを加え、十分に混合した。
【００９３】
溶液の１ミリリットル分を、ピペットにより、１０ｍＬ容量のガラスバイアルに移した。バイアルには、定量供給弁が設けられている。バイアルには、次に、Pamasol(商標名)２００８ガス充填装置を用いて、ＨＦＡ１３４ａ噴射剤を充填した。
噴射剤の量は、１回の操作につきインスリン１０ユニット(操作１回につき１００μＬのショット)が送達されるように、１個のバイアルにつき９ｍＬに調節された。ガラスバイアルの中に噴射剤を含む調製物は、単一の相であり、均質であった。
【００９４】
１０人の糖尿病患者に対して、投与前夜から絶食し、投与前に朝食をとらないようにしてもらった。第１日目、各患者に７ユニットのインスリン(エリ・リリーから入手可能で、効き目の速い標準のインスリン)を注射した。第２日目、各患者は、この実験のインスリン７０ユニットを、吸入なしで、口の中に投与した(１０ユニットを７パフ)。血液サンプルを集めて、バイヤー社のグルコメータ・エリートを用いて、血漿グルコース値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたりモニターした。平均結果は、ミリモル／ミリリットルで表わされ、表１０に示している。また、ＲＩＡ法により、インスリン値を所定時間間隔で測定し、３時間にわたりモニターした。平均結果は、マイクロモル／リットルで表わされ、表１１に示している。
【００９５】
【表１０】
0003818851.tif 000011
【００９６】
【表１１】
0003818851.tif 000012
【００９７】
この試験結果では、注射法とスプレー法は同等であった。
【００９８】
実験６
１ミリリットル当たり１００００ユニットを含む濃縮インスリン１０ミリリットルをガラスビーカの中に入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム１５ｍｇ、ケノデオキシコレート１５ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン１５ｍｇ及びレシチン７ｍｇを加えた。これらは完全に溶解するまで攪拌した。フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを溶液に加えて十分に混合した。
【００９９】
ピペットを用いて、溶液の１ミリリットル分を１０ｍＬ容量のガラスバイアルに移した。バイアルには、定量供給弁が設けられている。次に、Pamasol(商標名)２００８ガス充填装置を用いて、ＨＦＡ１３４ａ噴射剤をバイアルに充填した。弁の操作１回につきインスリン１０ユニット(操作１回につき１００μＬのショット)が送達されるように、噴射剤の量は、１個のバイアルにつき９ｍＬに調節された。ガラスバイアルの中の噴射剤を含む調製物は、単一の相であり、均質であった。
【０１００】
１０人の糖尿病患者に対して、投与前夜から絶食し、投与前に朝食をとらないようにしてもらった。第１日目、各患者に７ユニットのインスリン(エリ・リリーから入手可能で、効き目の速い標準のインスリン)を注射した。
インスリンを投与してから１５分経過後、各患者に２５０カロリーのSustacal(商標名)飲料を与え、１０分以内に飲んでもらった。第２日目、各患者に対し、この実験のインスリン７０ユニット(１０ユニットを７パフ)を口の中へ、吸入することなく投与した。インスリンを投与してから１５分経過後、各患者に２５０カロリーのSustacal(商標名)飲料を与え、１０分以内に飲んでもらった。
血液サンプルを集め、バイヤー社のグルコメーター・エリートを用いて、血漿グルコース値を所定時間間隔で測定し、４時間にわたりモニターした。平均結果は、ミリモル／ミリリットルで表わされ、表１２に示している。
【０１０１】
【表１２】
0003818851.tif 000013
【０１０２】
これらの試験結果では、注射法とスプレー法は同等であった。