(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（Ｉ）；
【化１】
0003816146.tif 000003
（式中、符号Ｒ1及びＲ2はそれぞれ別個に水素原子、アルキル基またはアルケニル基を示す）
で示されるゲラニルゲラニルアミン誘導体を有効成分として含有する制癌剤。
【請求項２】
式（I）における符号Ｒ1およびＲ2が水素原子である請求項１に記載の制癌剤。
【請求項３】
肝癌の治療・予防に用いることを特徴とする請求項１又は２に記載の制癌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はゲラニルゲラニルアミン誘導体を有効成分として含有する制癌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
癌遺伝子として知られているｒａｓ遺伝子の遺伝子産物であるｐ２１（ｒａｓ）の活性制御については、蛋白質・蛋白質相互作用を介したシグナル伝達によるものの外、遺伝子レベルならびに翻訳後修飾レベルの２つのレベルのｐ２１（ｒａｓ）の活性制御機構が知られている。ｒａｓ遺伝子の点突然変異は、ヒト腫瘍における各種の癌で認められているが、ヒト肝癌では少ない。点突然変異により、ｐ２１（ｒａｓ）の活性型から不活性型への転換が抑制され、細胞の増殖を刺激してしまうと考えられている。
一方、遺伝子産物であるｐ２１（ｒａｓ）の活性制御機構には、翻訳後修飾として、ファルネシル基が形質転換能に必須であることが明らかとなり、蛋白質ファルネシル基転移酵素（ＦＰＴ）の酵素活性を阻害しうる物質の抗腫瘍効果が検討されており、このｐ２１（ｒａｓ）の活性制御により、ｒａｓ遺伝子の変異の有無にかかわらず、癌の増殖・進展の抑制が期待できる。
最近、カナダの Carrollらのグル−プにより、ＦＰＴの基質となるファルネシルピロリン酸の類縁体であるファルネシルアミンがＦＰＴを特異的に阻害するとともに、ｒａｓ変異細胞の増殖を抑制することが見出され（Farnesylamine：An Inhibitor of Farnesylation and Growth of Ras-transformed Cells， LIPIDS，28，969−973）、発癌過程の細胞のクロ−ン増殖を抑制する化合物の有力な候補の一つとして注目されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、制癌剤としてファルネシルアミンの活性は不十分であり、より高活性の物質の開発が望まれている。
しかして、本発明の目的は、制癌剤として有用な、より高活性な物質を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは前記課題を解決するため、種々のテルペン誘導体の抗腫瘍活性を評価したところ、ファルネシルアミンの官能基（ＣＨ2ＮＨ2）をＣＯＮＨ2（ファルネソイン酸アミド）、ＣＯＯＨ（ファルネソイン酸）、ＣＨ2ＯＨ（ファルネソ−ル）に置換したものでは、いずれもファルネシルアミンに比し明らかにその効果は弱かったが、ゲラニルゲラニルアミン誘導体が特異的に高い活性を有することを見出し本発明に至った。
すなわち、本発明の要旨は、下記の式（Ｉ）；
【０００５】
【化２】
0003816146.tif 000002
（式中、符号Ｒ1及びＲ2はそれぞれ別個に水素原子、アルキル基またはアルケニル基を示す）
で示されるゲラニルゲラニルアミン誘導体を有効成分として含有する制癌剤である。
【０００６】
【発明の実施の形態】
以下に本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるゲラニルゲラニルアミン誘導体は、ゲラニルゲラニルクロリドを常法に従ってアミノ化することにより得ることができる。また、Ｎ−アルキルあるいはアルケニル誘導体類は、対応する第１級あるいは第２級のアルキルあるいはアルケニルアミン類を用いたアミノ化反応で同様に得ることができる。アルキルアミン類あるいはアルケニルアミン類におけるアルキル基あるいはアルケニル基としては、特に制限されないが、炭素数１〜２０の直鎖状あるいは分枝状のアルキル基あるいはアルケニル基が好ましく、その内でも特に、メチル基、エチル基、プロピル基のような低級アルキル基や、アリル基、ブテニル基、イソペンテニル基、ゲラニル基、ファルネシル基、ゲラニルゲラニル基のようなアルケニル基が好ましい。
【０００７】  本発明で用いるゲラニルゲラニルアミン誘導体は、マウス肝より調製した初代培養肝細胞に対しては殺細胞効果を示さず、ヒト肝癌由来細胞株に対して腫瘍特異的な殺細胞効果を示した。また、急性毒性試験においても低毒性であったことから、副作用の少ない制癌剤として、癌の治療、再発予防に有用である。
【０００８】
上記の式（Ｉ）で示されるゲラニルゲラニルアミン誘導体を有効成分とする本発明の制癌剤は、適当な剤型の医薬組成物として経口、または非経口的に投与することができる。投与量は年令、症状、投与ル−トなどによって異なり得る。例えば成人の癌の治療、再発防止のために投与する場合、通常成人１日あたり０．０５ｇから５ｇを、好ましくは０．１から２ｇを１ないし３回に分けて投与することが好都合であるが、医者の診断に応じて上記範囲を越えて投与することももちろん可能である。
【０００９】
本発明の制癌剤は、有効成分である上記の式（I）で示される化合物と薬学的に許容される担体もしくは賦形剤とを含む組成物であってもよい。このような組成物は経口または非経口投与に適する剤型として提供される。
【００１０】
即ち、経口投与のための組成物としては、固体もしくは液体の剤型、具体的には錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤などである。このような組成物は公知の方法によって製造され、製剤分野において通常用いられる担体もしくは賦形剤を含有するものである。例えば錠剤用の担体、賦形剤としては、乳糖、でんぷん、蔗糖、ステアリン酸マグネシウムなどである。
【００１１】
非経口投与のための組成物としては、例えば注射剤であれば、公知の方法に従い、通常注射剤に用いられる無菌の水性ないし生理食塩水、ブドウ糖などやその他の補助液を含む等張液などがあり、これらは適当な溶解補助剤などと併用してもよい。
【００１２】
このような本発明の制癌剤は、上記の式（I）で示される化合物との配合により好ましくない相互作用を生じないかぎり、他の活性成分を含んでいてもよい。
【００１３】
【実施例】
〈実施例１〉
ヒト肝癌由来細胞株として、がん研究振興財団細胞バンク（東京）より入手したＨｕＨ−７(ｒａｓ野生型)を、１０％牛胎仔血清（Gibco Labo，NY）を含んだα−ＭＥＭ（Gibco Labo，NY）に、ペニシリン（Gibco Labo，NY）５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ、ストレプトマイシン（Gibco Labo，NY）５０ｍｇ／ｍｌの濃度になるように添加し、３７℃で５％ＣＯ2存在下で培養した。
各種イソプレノイドの効果を観察するために、上記細胞を５×１０4個／ｍｌの濃度に懸濁した後、イソプレノイドのエタノ−ル溶液を最終濃度１〜５００μＭになるように添加した。
イソプレノイド処理２４時間後に、培地を捨て、細胞表面をα−ＭＥＭにて洗浄した後、トリプシンＥＤＴＡ溶液（０.２５％トリプシン，１ｍＭ ＥＤＴＡ４Ｎａ，Gibco Labo，NY）処理により細胞をプレ−ト基質より剥離し、トリパンブル−溶液中にて色素に染色されない細胞を生細胞として、血算板により計数した。４回計測しその平均値を測定値とした。さらに同じ実験を３回繰り返し、その平均値±標準偏差を求めた。
アミン基を導入したいろいろの鎖長のイソプレノイドのＨｕＨ−７細胞に対する殺細胞効果を第１図に示す。
第１図から明らかなとおり、イソペンテニルアミン（Ｃ5）、ゲラニルアミン（Ｃ10）は２００μＭでも全く殺細胞効果を示さなかった。ファルネシルアミン（Ｃ15）よりイソプレン１単位長いゲラニルゲラニルアミン（Ｃ20）は、濃度依存性に殺細胞効果を示し、４０μＭで生細胞数はほぼ０（５０％ lethal dose ;ＬＤ50＝１２．５μＭ）となり、ファルネシルアミン（ＬＤ50＝２８μＭ）より強い殺細胞効果を示した。
【００１４】
【発明の効果】
本発明は、実施例の記載からも明らかなとおり、点突然変異のないＨｕＨ−７細胞に対し、ファルネシルアミンよりも高い殺細胞効果をもち、ｒａｓ遺伝子の変異の有無にかかわらず、癌の増殖・進展に対する高い抑制効果を持ったゲラニルゲラニルアミン類を有効成分とした制癌剤を提供するものであり、ヒト癌制圧に大きく寄与するものである。
また、本発明においてゲラニルゲラニルアミン類が奏する効果を作用機序で制限する意図はないが、本発明の発明者らは、ファルネシルアミンよりもゲラニルゲラニルアミンの方がｐ２１（ｒａｓ）のファルネシル化阻害作用が弱い事実も確認しており、ゲラニルゲラニルアミンが示す強い殺癌細胞効果は、ｐ２１（ｒａｓ）のイソプレニル化阻害のみに基づくものでない可能性もある。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＨｕＨ−７細胞における各種イソプレニルアミンの殺細胞効果を示す。
【図１】
0003816146.tif 000004