(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003858279.tif 000008
〔式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して、水素原子または炭素数１〜６のアルキルを、Ｘはハロゲン原子、シアノまたは水素原子を、Ｙはハロゲン原子、トリフルオロメチルまたは水素原子を、Ａは水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜８のアルキレンを示す。〕
で表されるピリダジノン化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する糖尿病性腎炎または糖尿病性神経障害の予防・治療剤。
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ水素原子、Ｒ３は水素原子または炭素数１〜４のアルキル、Ｘはハロゲン原子、Ｙはハロゲン原子または水素原子、Ａは水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜５のアルキレンであるピリダジノン化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する請求項１記載の予防・治療剤。
【請求項３】
一般式（Ｉ）で表されるピリダジノン化合物が、４−ブロモ−６−（３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−（３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）プロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）プロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−（２，２−ジメチル−３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−（２，２−ジメチル−３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノンまたは４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノンである請求項１記載の予防・治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、ピリダジノン化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するトロンボキサンＡ2 関与疾患の予防・治療剤、特にトロンボキサンＡ2 合成酵素阻害剤に関する。
【０００２】
【従来技術・発明が解決しようとする課題】
トロンボキサンＡ2 （ＴＸＡ2 ）は、主に血小板から産生遊離され、強力な血小板凝集作用と血管収縮作用を示す物質であり、その病態生理学的役割についても多くの報告がなされている。また、動脈硬化症、糖尿病、虚血性心疾患、肺疾患、高血圧症、ショック、川崎病およびアルコール性肝障害といった病態において、ＴＸＡ2 産生亢進が認められており、ＴＸＡ2 がこれら病態の発症あるいは増悪に関与している可能性が高い。これら疾患の改善薬として、イミダゾール誘導体、ピリジン誘導体、イミダゾピリジン誘導体といったＴＸＡ2 合成酵素阻害剤やＴＸＡ2 拮抗剤の開発が行われている。しかし、さらに優れた効果を有するＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療剤が望まれている。
【０００３】
ところで、ピリダジノン化合物は、血小板凝集阻害作用、強心作用、血管拡張作用、抗ＳＲＳ−Ａ（Slow Reacting Substances of Anaphylaxis)作用を有することが既に知られている（ＷＯ９１／１６３１４号公報、米国特許５２０２３２３号公報、欧州特許４８２２０８号公開公報）。
【０００４】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、このピリダジノン化合物およびその薬理学的に許容される塩が、従来知られていなかった作用、即ちＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療作用、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害作用を有することを見出した。
【０００５】
本発明の目的は、ピリダジノン化合物を用いたＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療剤、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害剤を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明は、一般式（Ｉ）
【０００７】
【化２】
0003858279.tif 000002
【０００８】
〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 およびＲ3 はそれぞれ独立して、水素原子または低級アルキルを、Ｘはハロゲン原子、シアノまたは水素原子を、Ｙはハロゲン原子、トリフルオロメチルまたは水素原子を、Ａは水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜８のアルキレンを示す。〕
で表されるピリダジノン化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療剤であり、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害剤である。
【０００９】
本明細書中で用いられている各記号について以下に説明する。
Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 における低級アルキルとは、炭素数１〜６であって直鎖状でも分枝鎖状でもよく、具体的にはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec-ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。
【００１０】
好ましいＲ1 およびＲ2 としてそれぞれ、水素原子、好ましいＲ3 として、水素原子および炭素数１〜４のアルキル基が挙げられる。
【００１１】
Ｒ3 における炭素数１〜４のアルキルとは、具体的にはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec-ブチル、ｔ−ブチル等が挙げられる。
【００１２】
Ｘ、Ｙにおけるハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子を意味する。
好ましいＸとしてハロゲン原子、好ましいＹとしてハロゲン原子および水素原子が挙げられる。
【００１３】
Ａにおける水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜８のアルキレンとは、直鎖状でも分枝鎖状でもよく、具体的にはメチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、２，２−ジメチルエチレン、２，２−ジエチルエチレン、２，２−ジ−ｎ−プロピルエチレン、ヒドロキシメチレン、１−ヒドロキシエチレン、２−ヒドロキシエチレン、３−ヒドロキシプロピレン等が挙げられる。
好ましいＡとして、水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜５のアルキレンが挙げられる。
【００１４】
一般式（Ｉ）において、メチレン基とピリジン環の結合位置は特に限定されないが、好ましくはピリジン環の窒素原子に対して３位である。
また、Ｙはベンゼン環上のいずれの位置で置換されていてもよいが、好ましくは４位である。
【００１５】
特に一般式（Ｉ）において、Ｒ1 およびＲ2 が水素原子、Ｒ3 が水素原子または炭素数１〜４のアルキル、Ｘがハロゲン原子、Ｙがハロゲン原子または水素原子、Ａが水酸基で置換されていてもよい炭素数１〜５のアルキレンであるピリダジノン化合物が好ましい。
【００１６】
さらに、より好ましいピリダジノン化合物（Ｉ）として、４−ブロモ−６−（３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−（３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）プロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）プロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−（２，２−ジメチル−３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−（２，２−ジメチル−３−フェニルプロポキシ）−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２，２−ジメチルプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン、４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノンおよび４−クロロ−６−〔３−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノンが挙げられる。
【００１７】
本発明におけるピリダジノン化合物（Ｉ）には、立体および光学異性体も包含される。
【００１８】
ピリダジノン化合物（Ｉ）は、例えば、ＷＯ９１／１６３１４号公報、米国特許５２０２３２３号公報、欧州特許４８２２０８号公開公報、国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ９５／６９号に開示の方法等により製造することができる。
【００１９】
ピリダジノン化合物（Ｉ）の薬理学的に許容される塩としては、例えば無機酸との塩（塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩等）、有機酸との塩（酢酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマール酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩等）等が挙げられる。
また、ピリダジノン化合物（Ｉ）は、公知の手段により上記の塩とすることができる。
【００２０】
本発明に係る作用の確認方法については特に制限はなく、公知の方法によって行える。
【００２１】
本発明の有効成分であるピリダジノン化合物（Ｉ）およびその薬理学的に許容される塩は、極めて低毒性であり、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ウサギ、マウス、ラット等の哺乳動物に対して、ＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療作用、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害作用を有する。即ち、ＴＸＡ2 が関与する疾患、例えば脳梗塞症、脳血栓症、気管支喘息、脳卒中、心筋梗塞、急性心不全、狭心症、高血圧、閉塞性動脈硬化症、閉塞性血栓血管症、糖尿病性腎炎、糖尿病性性神経障害、糖尿病による高トリグリセリド血症等に対する予防・治療効果を有する。
【００２２】
当該ピリダジノン化合物（Ｉ）およびその薬理学的に許容される塩の投与形態としては、注射剤（皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内注射）、軟膏剤、坐剤、エアゾール剤等による非経口投与、または錠剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤、シロップ剤、液剤、乳剤、懸濁液剤等による経口投与を挙げることができる。
【００２３】
当該ピリダジノン化合物（Ｉ）およびその塩は、製薬の慣用手段によって投与用に製剤化される。
経口投与用の錠剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤は、賦形剤（例えば白糖、乳糖、ブドウ糖、澱粉、マンニット等）、結合剤（例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビット、トラガント、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（例えば澱粉、カルボキシメチルセルロースまたはそのカルシウム塩、微結晶セルロース、ポリエチレングリコール等）、滑沢剤（例えばタルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、シリカ等）、潤滑剤（例えばラウリル酸ナトリウム、グリセロール等）等を使用して調製される。
【００２４】
また、注射剤、エアゾール剤、シロップ剤、液剤、乳剤、懸濁液剤は、活性成分の溶剤（例えば水、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール等）、界面活性剤（例えばソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、水素添加ヒマシ油のポリオキシエチレンエーテル、レシチン等）、懸濁剤（例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム塩、メチルセルロース等のセルロース誘導体、トラガント、アラビアゴム等の天然ゴム類等）、保存剤（例えばパラオキシ安息香酸のエステル、塩化ベンザルコニウム、ソルビン酸塩等）等を使用して調製される。坐剤は、例えばポリエチレングリコール、ラノリン、ココナット油等を使用して調製される。
【００２５】
当該ピリダジノン化合物（Ｉ）およびその塩の投与量は、患者の年齢、体重、症状の程度等によって適宜選択すればよく、通常、ヒト成人に対しては０．００１〜５００ｍｇ／日、好ましくは０．００５〜１００ｍｇ／日であり、これを１日１〜数回に分けて投与する。
【００２６】
【実施例】
以下、本発明を詳細に説明するため実施例および実験例を挙げるが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。
【００２７】
下記薬剤等を用い、以下の実験例１〜４を行った。
試薬として、常法に従って製造された化合物Ａ（４−ブロモ−６−〔３−（４−クロロフェニル）プロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン塩酸塩）、化合物Ｂ（４−ブロモ−６−〔３（Ｓ）−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン塩酸塩）、化合物Ｃ（４−ブロモ−６−〔３（Ｒ）−（４−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロポキシ〕−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−３（２Ｈ）−ピリダジノン塩酸塩）を用い、これを１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、用時ＤＭＳＯで希釈して用いた。
また、インドメタシン（Sigma Chemical Co.製）は、生理食塩溶液に懸濁した後、２．５％炭酸ナトリウム溶液を滴下（約ｐＨ８．０）して溶解した。コラーゲン（Collagen Reagent Horm ；二光バイオサイエンス製）は、用時専用希釈液で希釈して用いた。プロスタグランジンＨ2 （ＰＧＨ2 ；フナコシ製）は、使用時にＮ2 ガス下でアセトンを除去し、エタノールに再溶解して用いた。
【００２８】
実験例１〔家兎血小板からのＴＸＡ2 遊離実験〕
正常ウサギ頚動脈よりエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ；77mM EDTA, 1/10vol）採血を行った。この血液を1800rpm で８分間遠心後、上清の多血小板血漿を採取し、さらに3200rpm で８分間遠心した。沈渣（血小板）をTyrode-HEPES-EDTA bufferで洗浄し、3200rpm で８分間遠心した後、この沈渣をTyrode-HEPES buffer に懸濁して５×１０8 platelets/mlの洗浄血小板を調製した。
洗浄血小板２７０μｌに、１００％ＤＭＳＯまたは試薬（化合物Ａ）を１．５μｌ添加し、３７℃で２分間加温した後、コラーゲン１０μg/mlと１mM  Ｃａ2+を添加（無刺激の血小板からの遊離をみる場合は１mM  Ｃａ2+のみを添加）して、実験を開始した。３７℃で８分間加温した後、１０-3Ｍインドメタシンを添加し、キュベットを氷中に移して反応を停止した。10000rpmで１０分間遠心後、上清を採取し、ＴＸＡ2 の測定まで−２０℃で保存した。
【００２９】
実験例２〔家兎血小板ミクロソームを用いたＴＸＡ2 合成酵素阻害活性の測定〕
正常ウサギ頚動脈よりＥＤＴＡ（77mM EDTA, 1/10vol）採血を行った。この血液を1300rpm で１０分間遠心後、上清の多血小板血漿を採取し、さらに3400rpm で１５分間遠心した。沈渣を生理食塩溶液（original volume)で洗浄し、3400rpm で１５分間遠心した後、沈渣に０．０５Ｍ  Tris-HCl buffer (1mM EDTA, pH7.5）（血小板湿重量の３倍量）を加え、polytronを用いてホモジナイズした（２分間、full speed）。これを8300rpm で１５分間遠心（Tomy RD-20III, No.3N）した後、上清を1,000,000rpmで１時間遠心（Beckman TL-100, TLA100.3）し、その沈渣を０．０５Ｍ  Tris-HCl buffer (1mM EDTA, pH7.5）（血小板湿重量の１／３倍量）で懸濁し、ミクロソーム画分とした。実験に使用するまで−８０℃で保存した。
【００３０】
次に、０．０５Ｍ  Tris-HCl buffer (pH7.5) ８９０μｌ、上記ミクロソーム（８５μｇのプロテイン）１００μｌ、１００％ＤＭＳＯまたは試薬（化合物Ａ）を５μｌ添加し、２２℃で３分間プレインキュベーションした後、ＰＧＨ2 （５nmol）５μｌを添加し、反応を開始した。２２℃で３分間インキュベーションした後、１Ｎ塩酸５０μｌを添加して反応を停止した。１Ｍ  Tris base ５５μｌで反応液を中和した後、10000rpmで５分間遠心し、その上清を採取し、ＴＸＡ2 の測定まで−２０℃で保存した。
【００３１】
上記実験例におけるＴＸＡ2 量は、その安定体であるＴＸＢ2 量として測定した。なお、ＴＸＢ2 測定キット（アマシャム）を用いてＥＩＡ法で測定した。
実験例１〜２の結果を表１に示す。
【００３２】
【表１】
0003858279.tif 000003
【００３３】
実験例３〔ヒト血小板ミクロソームを用いたＴＸＡ2 合成酵素阻害活性の測定〕
家兎血小板ミクロソームの代わりにヒト血小板ミクロソームを用いた以外は、実験例２と同様にして実験を行った。また、試薬としては、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃを用いた。
その結果、ヒト血小板ミクロソームを用いた場合のＴＸＡ2 合成酵素阻害作用のＩＣ50（ＴＸＡ2 合成を５０％阻害するのに必要な量）は、化合物Ａの場合は０．０１０μＭ、化合物Ｂの場合は０．０２０μＭ、化合物Ｃの場合は０．０３０μＭであった。
【００３４】
実験例４
化合物（Ａ）の急性毒性（ＬＤ50）は、ラット、イヌへの経口投与において２g/kg以上であり、極めて低毒性であることが判明した。
【００３５】
上記実験結果から、ピリダジノン化合物（Ｉ）およびその塩は、優れたＴＸＡ2 遊離抑制作用およびＴＸＡ2 合成酵素阻害作用を有し、かつ低毒性であることがわかる。
【００３６】
実施例１（錠剤）
下記成分を常法により混合した後、１錠中に５０ｍｇの活性成分を含有する糖衣錠とした。
0003858279.tif 000004
【００３７】
実施例２（カプセル剤）
下記成分を常法により混合した後、ゼラチンカプセルに充填し、１カプセル中に５０ｍｇの活性成分を含有するカプセル剤とした。
0003858279.tif 000005
【００３８】
実施例３（軟膏）
下記成分を常法により混合し、１重量％軟膏とした。
0003858279.tif 000006
【００３９】
実施例４（エアゾル懸濁液）
下記成分（Ａ）を混合し、得られた混合液をバルブを備えた容器に仕込み、噴射剤（Ｂ）を２０℃で約２．４６〜２．８１mg／cm2 ゲージ圧までバルブノズから圧入し、エアゾル懸濁液とした。
0003858279.tif 000007
【００４０】
【発明の効果】
本発明におけるピリダジノン化合物（Ｉ）およびその薬理学的に許容される塩は、ＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療作用、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害作用を有しており、ＴＸＡ2 関与疾患の予防・治療剤、特にＴＸＡ2 合成酵素阻害剤として有用である。従って、ＴＸＡ2 が関与する疾患、例えば脳梗塞症、脳血栓症、気管支喘息、脳卒中、心筋梗塞、急性心不全、狭心症、高血圧、閉塞性動脈硬化症、閉塞性血栓血管症、糖尿病性腎炎、糖尿病性性神経障害、糖尿病による高トリグリセリド血症等に対する予防・治療効果を有する。