(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イヌリンに室温下で、塩酸、燐酸、メタ燐酸、クエン酸、マレイン酸、安息香酸、炭酸、酒石酸および酢酸から選ばれる酸、これらの酸のカリウム塩、ナトリウム塩並びにアミン類から選ばれる緩衝作用を有する化合物を溶解した溶液を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、ｐＨ５．５〜７に調整し、６０〜１１０℃まで１０分以上をかけて徐々に昇温して溶解することを特徴とするイヌリン含有製剤の製造方法。
【請求項２】
昇温してイヌリンを溶解後、該溶液を２０〜７０℃まで冷却する請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
イヌリンに、塩酸、燐酸、メタ燐酸、クエン酸、マレイン酸、安息香酸、炭酸、酒石酸および酢酸から選ばれる酸、これらの酸のカリウム塩、ナトリウム塩並びにアミン類から選ばれる緩衝作用を有する化合物を溶解してｐＨ５．５〜７に調整した６０〜１１０℃の熱水を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、溶解し、５〜−４０℃まで冷却することを特徴とするイヌリン含有製剤の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項記載の方法により得られるイヌリン含有製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、診断薬として有用なイヌリンを含有する安定な医薬製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
腎疾患患者の症状の進行確認のために行われる糸球体濾過量の測定には、イヌリン製剤が用いられるが、当該イヌリン製剤は、再溶解性及び安定性に大きな改善点を有する。再溶解性に関する欠陥によって製造効率及び医療現場での使用勝手が極めて悪いため、イギリスにおいてBP 1968 Addendum 1969に収載され、アメリカにおいてもUSPXXI 1985に収載されて、早くから有用で普遍的な製剤となっていたにも拘わらず、現在まで、その使用量は必要量を大きく下回っている。また安定性についても未だ改善が加えられず、アメリカでの製剤を含めて、世界で製造されているイヌリン製剤の安定な期間は、適切な保存を行っても１年ほどであり、上記の期間を経過すると製剤が黄変を来たすことが多々あるため、製造会社での製造スケジュールに従って製造した製剤は、製造会社、販売会社、医療機関での保存が充分に行えず、使用にも制限が加えられているのが現状であった。
我国では、イヌリンは医薬品として認められておらず、イヌリン製剤は有用であることが認識されているにも拘わらず、現在まで開発する企業がなく、医薬品として登録されている国でも殆ど使用されていないのが現状である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、安定性に優れ、製造現場においても、また医療現場においても取り扱い性の改善された安全なイヌリン製剤を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
かかる実情において、本発明者等はまず、医療現場での医師等医療関係者、患者等の負担を軽減すべく、イヌリンの再溶解性について鋭意研究を加え、再溶解性及び安定性に優れたイヌリン含有製剤の製造に成功し、先に特許出願した（特願2000-266849号）。
本発明者等は更にイヌリンの安定性について鋭意研究を継続した結果、イヌリンを溶解又は懸濁する液剤は、ｐＨ５.５未満ではイヌリンの分解が促進され、ｐＨ７を超えると黄変を来たす傾向があり、イヌリンを含有する液剤に無機又は／及び有機の緩衝作用を有する化合物を存在させることにより、更に安定性に優れた製剤が得られることを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
本発明は、イヌリンに室温下で、塩酸、燐酸、メタ燐酸、クエン酸、マレイン酸、安息香酸、炭酸、酒石酸および酢酸から選ばれる酸、これらの酸のカリウム塩、ナトリウム塩並びにアミン類から選ばれる緩衝作用を有する化合物を溶解した溶液を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、ｐＨ５．５〜７に調整し、６０〜１１０℃まで１０分以上をかけて徐々に昇温して溶解することを特徴とするイヌリン含有製剤の製造方法を提供するものである。
【０００７】
また、本発明は、イヌリンに、塩酸、燐酸、メタ燐酸、クエン酸、マレイン酸、安息香酸、炭酸、酒石酸および酢酸から選ばれる酸、これらの酸のカリウム塩、ナトリウム塩並びにアミン類から選ばれる緩衝作用を有する化合物を溶解してｐＨ５．５〜７に調整した６０〜１００℃の熱水を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、溶解し、５〜−４０℃まで冷却することを特徴とするイヌリン含有製剤の製造方法を提供するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明で用いるイヌリンとしては、現在イヌリンを医薬品として認めている国がごく少数であり、医薬品原料としてのイヌリンが入手困難であるため、食品用として市販されているイヌリン又はこれを精製して用いることができる。食品用イヌリンは、通常、平均分子量３０００〜７０００であり、このいずれをも使用することができる。
また、イヌリンとしては、発熱物質を含有しないものが好ましいが、発熱物質を含有するイヌリンを用いた場合には、イヌリンを加温して溶解した溶液を熱時パイロジェンフリーの活性炭で処理して発熱物質を除去して使用することもできる。
【０００９】
精製イヌリンは、例えば食品用イヌリンを温湯に溶解し、熱時に活性炭及びメンブランフィルターで処理して冷却した後、濾液から採取することができる。
ここで、温湯の温度はイヌリンを効率よく溶解できればよいが、６０〜９０℃の範囲が好ましい。また、用いる温湯の量は、温度、攪拌の強さ等の条件により異なるが、イヌリンの約３〜１０重量倍、特に３〜５重量倍が好ましい。また、活性炭としては、パイロジェンフリーの活性炭が好ましく、日本薬局方第２部収載の薬用炭を使用できる。活性炭の種類は特に限定されないが、発熱物質のほか、着色性物質除去の能力を有する注射用グレードの活性炭を、イヌリンに対して１〜２０重量％用いるのが好ましい。次いで、メンブランフィルターで濾過滅菌して得られる濾液から、通常、平均分子量約５０００のイヌリンが得られる。また、この濾液にアセトンを加えて攪拌し、生じた沈澱を濾取すれば、平均分子量約４０００のイヌリンを得ることができる。アセトンは、濾液に対して５〜２０重量倍、好ましくは５〜１０重量倍添加するのが好ましい。
なお、平均分子量はＧＰＣクロマトグラフィーを用いて既知標準品プルランとの比較から求めた値である。
【００１０】
無機又は／及び有機の緩衝作用を有する化合物（以下、「緩衝作用を有する化合物」という）としては、安全性が確立されていてかつ人体への適用によってイヌリンクリアランス及びイヌリンクリアランスの測定に影響を及ぼさない化合物で、ｐＨ５.５〜７に調整が可能であれば、通常緩衝剤として用いられるものを使用することができる。具体的には、例えば塩酸、燐酸、メタ燐酸等の無機化合物、クエン酸、マレイン酸、安息香酸、炭酸、酒石酸、酢酸等の有機化合物、さらにこれらのカリウム、ナトリウム等の塩類の１又は２以上の組み合わせ及び各種アミン類を使用することができる。
【００１１】
本発明の製剤は、例えばイヌリンを含有する溶液又は懸濁液に、緩衝作用を有する化合物を存在させてｐＨを５.５〜７、好ましくはｐＨ６〜７に調整することにより製造することができる。ｐＨ５.５未満ではイヌリンの分解が促進され、ｐＨ７を超えると黄変を来たす傾向がある。ｐＨの調整は、緩衝剤として使用した酸性成分もしくは塩基性成分、又は水酸化ナトリウム等により行うことができる。
【００１２】
本発明の医薬製剤には、必要に応じて等張化の薬剤を配合することができ、かかる等張化の薬剤としては、糖類以外の無機塩類及び有機酸類等が挙げられ、特に塩化ナトリウムが好ましい。塩化ナトリウムを用いる場合、その濃度は０〜５重量％であるのが好ましく、特に、製剤を直接人体に適用する場合には、体液の浸透圧比に近い０.９重量％が好ましい。
イヌリンを含有する溶液は水性溶液、特に水溶液であるのが好ましく、生理食塩水を用いることもできる。
【００１３】
また、本発明の製剤は、例えばイヌリンに室温下で緩衝作用を有する化合物を溶解した溶液を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、ｐＨ５．５〜７に調整し、６０〜１１０℃まで１０分以上をかけて徐々に昇温して溶解することにより、製造することができる。
ここで用いられる水の量は、イヌリンに対して５〜２００重量倍であるのが好ましい。このとき、必要に応じて等張化の薬剤を加えることもできる。また、室温とは、１〜３０℃の温度をいう。
次に、これを６０〜１１０℃まで、好ましくは７０〜８０℃まで１０分以上、好ましくは２０分以上をかけて徐々に昇温する。昇温速度は、前記の範囲になれば特に制限されないが、１〜４℃／分、特に１〜３℃／分であるのが好ましい。本発明においては、このように徐々に昇温してイヌリンを溶解することが好ましく、それにより、再溶解性に優れたイヌリン含有製剤を得ることができる。
【００１４】
昇温してイヌリンを溶解した後、該溶液は、２０〜７０℃、特に２０〜６０℃に冷却するのが好ましい。
また、冷却した溶液は、必要に応じて濃度及びｐＨの調整、滅菌処理を行なった後、容器に充填し、更に５〜−４０℃まで、特に−５〜−４０℃に冷却するのが好ましい。滅菌処理は、通常の方法により行なうことができ、例えばメンブランフィルターにより濾過すればよい。滅菌後、溶液を１時間以上放置してイヌリンを析出させて懸濁液とした後、容器に充填することもできる。容器としては、バイアル、アンプル等が挙げられ、充填後、常法により打栓又は熔閉すればよい。冷却速度は、−０．５〜−４℃／分、特に−０．５〜−２℃／分で、目的温度まで０．５〜１時間であるのが好ましい。冷却後の温度で、１０時間程度、特に１〜２時間程度保持するのが好ましい。
【００１５】
また、本発明の製剤は、イヌリンに、緩衝作用を有する化合物を溶解してｐＨ５．５〜７に調整した６０〜１００℃の熱水を加え、必要に応じて等張化の薬剤を加えた後、攪拌溶解することにより、製造することができる。
熱水は、イヌリンに対して５〜２００重量倍であるのが好ましい。等張化の薬剤としては、前記と同様のものを同様にして用いることができる。また、等張化の薬剤は、熱水中に溶解しておくことも可能である。
溶解後の溶液は、５〜−４０℃、特に−５〜−４０℃に冷却するのが好ましい。冷却速度は、−０．５〜−４℃／分、特に−０．５〜−２℃／分で、目的温度まで０．５〜１時間であるのが好ましい。冷却後の温度で、１０時間程度、特に１〜２時間程度保持するのが好ましい。
また、イヌリンに熱水を加えて溶解した後に、該溶液を２０〜７０℃に冷却し、必要に応じて濃度及びｐＨの調整、滅菌処理を行ない、容器に充填した後、５〜−４０℃に冷却することもできる。滅菌処理、容器への充填は、前記と同様に行なうことができる。
【００１６】
いずれの方法の場合にも、容器に充填した後の製剤は、凍結乾燥することができる。凍結乾燥は、常法により行えば良く、例えばイヌリン等を含有する溶液を充填した容器を、−１０℃以下に冷却して溶液を凍結させた後、０．２mbar以下の減圧条件下で徐々に加温し、内容水分を昇華させて乾燥することにより、凍結乾燥製剤を得ることができる。なお、イヌリンを溶解した後の溶液を５〜−４０℃に冷却した場合には、これを凍結乾燥に代えることができ、これにより、凍結乾燥製剤を得ることができる。
【００１７】
このようにして得られる本発明の製剤は、腎機能を把握するための、糸球体濾過量の測定に用いる診断薬として有用である。すなわち、本発明のイヌリン含有製剤は、人体に適用された後、定時に血液、尿を採取し、通常、これらの検体について遊離のグルコース、フルクトースを除去後、検体中のイヌリンを酸性加水分解又はイヌリナーゼもしくはβ−フルクトシダーゼ等で酵素的に分解して生じたフルクトースを、ジフェニルアミン、レゾルシン又はアンスロンなどで処理した発色体を定量し、糸球体濾過値を算出するための試薬として使用することができる。
【００１８】
【実施例】
以下、実施例によって本発明をさらに説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。なお、後記実施例２〜４は、特許請求の範囲外の参考例である。
【００１９】
参考例１（精製イヌリンの製造）
食品用イヌリン（平均分子量５０００；オラフティー社製）１００ｇに８０℃の温湯５００mLを加えて１０分間攪拌し、溶解を確認後、熱時にパイロジェンフリーの活性炭（白鷺Ｐ、武田薬品工業社製）１０ｇを投入し、更に液温を保持して１０分間攪拌を継続した。この溶液を熱時に０．２〜０．５μｍのメンブランフィルター（米国ミリポア社製）により濾過滅菌した後、４０℃に冷却し、濾液に１０重量倍のアセトンを加えて攪拌した。生じた沈殿を濾取し、風乾後４０℃で減圧乾燥して、９０ｇの精製イヌリンを得た。
得られた精製イヌリンは平均分子量約４０００、白色の結晶性粉末で無味無臭、パイロジェン試験に陰性であった。
【００２０】
参考例２（精製イヌリンの製造）
アセトンを添加しない以外は参考例１と同様に操作して、沈殿物８５ｇを得た。得られた精製イヌリンはパイロジェンフリーであり、平均分子量は約５０００であった。
【００２１】
参考例３（精製イヌリンの製造）
食品用イヌリン（平均分子量５０００；オラフティー社製）１００ｇに８０℃の温湯５００mLを加えて１０分間攪拌し、溶解を確認後、熱時にパイロジェンフリーの活性炭１０ｇを投入して、更に液温を保持して１０分間攪拌を継続した。この溶液を熱時に０．２〜０．５μｍのメンブランフィルターにより濾過後、熱時、スプレードライヤーにより乾燥した。得られた精製イヌリンはパイロジェンフリーであり、平均分子量は約５０００であった。
【００２２】
実施例１
精製イヌリン（平均分子量５０００）１０ｇに、室温下、燐酸一水素ナトリウム１２水和物０．４９ｇと燐酸二水素カリウム０．２２ｇを溶解した注射用水７０mL及び塩化ナトリウム０．５３ｇを加えてｐＨ６.５の溶液を調製し、３０分で８０℃まで徐々に加温して溶解した。溶解を確認後、溶液を６０℃に冷却し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.８及び０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌した後、その２０mLをバイアルに充填し、打栓してイヌリンを２ｇ含有する製剤を得た。
【００２３】
実施例２
８０℃の注射用水７０mLに、燐酸一水素ナトリウム１２水和物０．４９ｇ、燐酸二水素カリウム０．２２ｇ及び塩化ナトリウム０．５３ｇを加えて溶かし、ｐＨ６.５の溶液を調製する。この溶液に精製イヌリン（平均分子量５０００）１０ｇを加えて溶解した。溶解を確認後、溶液を６０℃に冷却し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.８及び０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌した後、その２０mLをバイアルに充填し、打栓してイヌリンを２ｇ含有する製剤を得た。
【００２４】
実施例３
精製イヌリン（平均分子量５０００）１０ｇに、燐酸一水素ナトリウム１２水和物０．４９ｇと燐酸二水素カリウム０．２２ｇを溶解した７０℃の注射用水７０mL及び塩化ナトリウム０．５３ｇを加えて溶解する。この溶液を４０℃に冷却後、ｐＨ６.５であることを確認し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌後、その２０mLをバイアルに充填し、常法により凍結乾燥し、ゴム打栓、アルミ締めを行い、イヌリン２ｇを含有する凍結乾燥製剤を得た。
【００２５】
実施例４
８０℃の注射用水７０mLに、クエン酸０．２１ｇ及び塩化ナトリウム０．７３ｇを加えて溶かし、０．１mol／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を加えてｐＨを６．５に調整した。この溶液に精製イヌリン（平均分子量５０００）１０ｇを加えて溶解した。溶解確認後、溶液を６０℃に冷却し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.８及び０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌した後、その２０mLをバイアルに充填し、打栓してイヌリンを２ｇ含有する製剤を得た。
【００２６】
実施例５
精製イヌリン１０ｇに、クエン酸０．２１ｇを溶解した８０℃の注射用水９０mLを加えて溶解した後、塩化ナトリウム０．７３ｇを加えてから溶液を６０℃に冷却し、０．０１モル／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ６．５に調整し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌した後、その２０mLをバイアルに充填し、ゴム打栓、アルミ締めによりバイアル密栓した。
このバイアルを直ちに冷凍機により−１０℃／１０分の速度で−１０℃まで冷却し、この温度で１時間保持した後、１０℃／１０分の速度で２０℃まで加温して、イヌリンを２ｇ含有する製剤を得た。
【００２７】
比較例１
精製イヌリン（平均分子量５０００）１０ｇに、室温下、注射用水７０mL及び塩化ナトリウム０.９ｇを加えてｐH６.５に調整し、８０℃まで加温して溶解した。溶解を確認後、溶液を冷却し、注射用水を加えて１００mLとした。これを０.８及び０.２２μｍのメンブランフィルターでろ過滅菌した後、その２０mLをバイアルに充填し、打栓してイヌリンを２ｇ含有する製剤を得た。
【００２８】
試験例１
実施例１及び比較例１で得られた製剤について、安定性試験を行った。
すなわち、各製剤を４０℃、５０℃及び６０℃で保存したときの外観、ｐＨ及び還元糖含有量を評価した。結果を表１〜表６に示す。
【００２９】
【表１】
0003776334.tif 000002
【００３０】
【表２】
0003776334.tif 000003
【００３１】
【表３】
0003776334.tif 000004
【００３２】
【表４】
0003776334.tif 000005
【００３３】
【表５】
0003776334.tif 000006
【００３４】
【表６】
0003776334.tif 000007
【００３５】
【発明の効果】
本発明のイヌリン含有製剤は、イヌリンが分解したり、製剤が黄変することもなく、イヌリンの安定性が著しく改善されたものである。腎機能の把握に用いられる糸球体濾過量の測定に有用である。