(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0003843012.tif 000021
［式中、Ｒ3は式II
【化２】
0003843012.tif 000022
（式中、Ｄは−Ｃ(Ｏ)−であり、
Ｒ7は水素であり、
Ｒ8は１. −(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して、
1.1 ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは１−、２−または３−ピロリル、４−または５−フェニル−２−ピロリル、２−フリル、２−チエニル、４−イミダゾリル、１−メチル−２−、−４−または−５−イミダゾリル、１,３−チアゾール−２−イル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−、３−または４−ピリジル−Ｎ−オキシド、２−ピラジニル、２−、４−または５−ピリミジニル、２−、３−または５−インドリル、１−メチル−、５−メチル−、５−メトキシ−、５−ベンジルオキシ−、５−クロロ−または４,５−ジメチル−２−インドリル、１−ベンジル−２−または−３−インドリル、４,５,６,７−テトラヒドロ−２−インドリル、シクロヘプタ［ｂ］−５−ピロリル、２−、３−または４−キノリル、１−、３−または４−イソキノリル、１−オキソ−１,２−ジヒドロ−３−イソキノリル、２−キノキサリニル、２−ベンゾフラニル、２−ベンゾチエニル、２−ベンゾキサゾリルまたはベンゾチアゾリルまたはジヒドロピリジル、２−または３−（Ｎ−メチルピロリジニル）、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、テトラヒドロチエニルまたはベンゾジオキソラニルからなる群より選択される）、
1.2 −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、
1.3 −Ｎ(Ｒ10)2、
の基により一または二置換されている）、または
２. グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、トリプトファン、トレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リシン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、２−アミノアジピン酸、２−アミノイソ酪酸、２−アミノ酪酸、２,３−ジアミノプロピオン酸、２,４−ジアミノ酪酸、１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸、１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、２−アミノピメリン酸、フェニルグリシン、３−（２−チエニル）アラニン、３−（３−チエニル）アラニン、２−（２−チエニル）グリシン、２−アミノヘプタン酸、ピペコリン酸、ヒドロキシリシン、サルコシン、Ｎ−メチルイソロイシン、６−Ｎ−メチルリシン、Ｎ−メチルバリン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチン、アロ−イソロイシン、アロ−トレオニン、アロ−ヒドロキシリシン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシプロリン、３−（２−ナフチル）アラニン、３−（１−ナフチル）アラニン、ホモフェニルアラニン、ホモシステイン、ホモシステイン酸、ホモトリプトファン、システイン酸、３−（２−ピリジル）アラニン、３−（３−ピリジル）アラニン、３−（４−ピリジル）アラニン、２−アミノ−３−フェニルアミノプロピオン酸、２−アミノ−３−フェニルアミノエチルプロピオン酸、ホスフィノトリシン、４−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、２−フルオロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニン、シトルリン、シクロヘキシルアラニン、５−フルオロトリプトファン、５−メトキシトリプトファン、メチオニンスルホン、およびメチオニンスルホキシドからなる群より選択されるアミノ酸の特性基であり、
Ｒ9は１. Ｒ8
２． アリール（ここで、アリールは未置換またはハロゲンで置換されたフェニルである）、または
３．水素であり、
Ｒ10はａ) 水素、
ｂ) −(Ｃ1〜Ｃ6)−アルキル（ここで、アルキルは、直鎖状または分枝状であり、未置換または１〜３個のハロゲンで置換されたアルキルである）
ｃ) アリール（ここで、アリールは上記で定義された通りである）、または
ｄ) ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは上記で定義された通りである）であり、
(Ｒ10)2の場合、Ｒ10は互いに独立してａ）〜ｄ）の意味を有し、
Ｚは −Ｃ(Ｏ)−Ｒ11であり（ここで、Ｒ11は
１. −Ｏ−Ｒ10または
２. −Ｎ(Ｒ10)2である）
Ｒ1、Ｒ2、およびＲ4はそれぞれ水素であり、
Ｒ5は水素であり、そして
Ｒ6は１. フェニルまたは互いに独立して
1.1 −ＣＮ、
1.2 −ＣＦ3、
1.3 ハロゲン、
1.4 −Ｏ−Ｒ10、
1.5 −Ｎ(Ｒ10)2、
1.6 −ＮＨ−Ｃ(Ｏ)−Ｒ11、
1.7 −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、
1.8 −Ｃ(Ｏ)−Ｒ11、または
1.9 −(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル−ＮＨ2
により一または二置換されているフェニル、または
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは上記で定義された通りであり、そして未置換であるか、または互いに独立して上記１.１〜１.９で定義された置換基により一、二または三置換されている））である］
の化合物、その立体異性体、またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項２】
Ｒ8は、１. −(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して、
1.1 ピロール、
1.２ −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘおよびＲ10は前記で定義された通りである）、または
1.３ −Ｎ(Ｒ10)2（ここで、Ｒ10は前記で定義された通りである）、
の基により一または二置換されている）、または、
２．前記アミノ酸の特性基であり、
Ｒ9は−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、未置換または１〜３個のハロゲンで置換されたアルキルである）、アリールまたは水素であり、そして、
Ｒ6はフェニルまたはピリジンである、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
式IV
【化３】
0003843012.tif 000023
（式中、Ｐｇは適当な保護基、アミド基またはヒドロキシル基であり、そしてＺ、Ｒ7およびＲ8は式Ｉで定義された通りである）の化合物を式III
【化４】
0003843012.tif 000024
（式中、Ｄ１は−ＣＯＯＨまたはスルホニルハロゲンであり、そしてＲ5、Ｒ6およびＲ9は式Ｉで定義された通りである）の化合物の塩化アシルまたは活性エステルと塩基または適当ならば脱水剤の存在下、溶液中で反応させ、保護基を除去した後、式Ｉの化合物に変換する、ことからなる、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の製造法。
【請求項４】
有効量の少なくとも１種の請求項１または２に記載の式Ｉの化合物を、薬学的に好適で生理学的に許容しうる賦形剤、添加剤および／または他の活性化合物および補助剤と共に含有する薬剤。
【請求項５】
その過程でＮＦκＢの増大した活性が関与する疾患の予防および治療のための薬剤の製造における少なくとも１種の請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項６】
薬学的に好適で生理学的に許容しうる賦形剤、さらに適当ならば好適な活性化合物、添加剤または補助剤を使用して少なくとも１種の請求項１または２に記載の式Ｉの化合物を好適な投与形態にすることからなる、薬剤の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は新規な置換インドール、それらの製造法およびそれらの薬剤としての使用に関する。
ＷＯ ９４／１２４７８の出願はとりわけ血小板の凝集を阻害するインドール誘導体を開示している。ＷＯ ９４／０８９６２はフィブリノーゲン結合および血小板凝集を阻害するフィブリノーゲン受容体アンタゴニストを開示している。
【０００２】
ＮＦκＢはとりわけＩＬ−１、ＩＬ−２、ＴＮＦαまたはＩＬ−６のようなプロ炎症性（proinflammatory）サイトカインをコードする多数の遺伝子を活性化することができるヘテロダイマー転写因子である。ＮＦκＢはその天然に存在する阻害物質ＩκＢと複合体を形成する、細胞の細胞質ゾルに存在する。例えばサイトカインによる細胞の刺激はＩκＢのリン酸化、その後のタンパク質加水分解をひき起こす。このタンパク質分解はＮＦκＢを活性化し、続いてそれは細胞の核内に入り、そこで多数の炎症性遺伝子を活性化する。
【０００３】
リウマチ性関節炎（炎症症状を伴う）、骨関節炎、喘息、心筋梗塞、アルツハイマー病またはアテローム性動脈硬化症のような疾患において、ＮＦκＢは通常の程度よりも多く活性化される。ＮＦκＢの阻害は細胞増殖抑制治療の強化に使用されるため、ガン治療においても有益である。リウマチ治療において使用されるグルココルチコイド、サリチル酸塩または金塩のような薬剤はＮＦκＢが活性化するシグナル鎖の様々な点で阻害作用する、または遺伝子の転写を直接的に妨害することを証明できた。
【０００４】
上記のシグナルカスケードの最初の段階はＩκＢの分解である。このリン酸化は特異的なＩκＢキナーゼにより調整される。これまで、ＩκＢキナーゼを特異的に阻害する阻害物資は知られていない。
【０００５】
リウマチ性関節炎（炎症症状を伴う）、骨関節炎、喘息、心筋梗塞、アルツハイマー病、癌性疾患（細胞毒性治療の増強）またはアテローム性動脈硬化症の治療のための活性化合物を得ようと試みた結果、本発明のインドール誘導体はＩκＢキナーゼの強力で非常に特異的な阻害剤であることを見い出した。
【０００６】
したがって、本発明は式Ｉ
【化１４】
0003843012.tif 000002
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基の１つは式II
【化１５】
0003843012.tif 000003
（式中、Ｄは−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)2−であり、
Ｒ7は水素または−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、
Ｒ8はＲ9またはアミノ酸の特性基であり、
Ｒ9は１. アリール（ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）、
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
３. ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、または
【０００７】
４. −(Ｃ1〜Ｃ6)−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、未置換であるか、互いに独立して
4.1 アリール（ここでアリールは未置換であるか、または置換されている）、
4.2 ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
4.3 ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、
4.4 −Ｏ−Ｒ10、
4.5 ＝Ｏ、
4.6 ハロゲン、
4.7 −ＣＮ、
4.8 −ＣＦ3、
4.9 −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、
4.10 −Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ10、
4.11 −Ｃ(Ｏ)−Ｎ（Ｒ10)2、
4.12 −Ｎ(Ｒ10)2、
4.13 −(Ｃ3〜Ｃ6)−シクロアルキル、
4.14 式
【化１６】
0003843012.tif 000004
の基、または
4.15 式
【化１７】
0003843012.tif 000005
の基
により一、二または三置換されている）であり、
【０００８】
Ｒ10はａ) 水素、
ｂ) −（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキル（ここで、アルキルは未置換であるか、互いに独立して
１. アリール、
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール、
３. ５〜１２個の環構成員を有する複素環、
４. ハロゲン、
５. −Ｎ−(Ｃ1〜Ｃ6)n−アルキル（ここで、ｎは０、１または２の整数であり、アルキルは未置換であるか、互いに独立してハロゲンまたは−Ｃ(Ｏ)−ＯＨにより一、二または三置換されている）、または
６. −Ｃ(Ｏ)−ＯＨ
により一〜三置換されている）、
ｃ) アリール、
ｄ) ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール、または
ｅ) ５〜１２個の環構成員を有する複素環
であり、（Ｒ10)2の場合、Ｒ10は互いに独立してａ）〜ｅ）の意味を有し、
Ｚは１. アリール（ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）、
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
３. ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、または
４. −Ｃ(Ｏ)−Ｒ11（ここで、Ｒ11は
１. −Ｏ−Ｒ10または
２. −Ｎ（Ｒ10)2である）
であり、あるいは
【０００９】
Ｒ7およびＲ8はそれらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒になって式IIａ
【化１８】
0003843012.tif 000006
（式中、Ｄ、ＺおよびＲ11は式IIで定義された通りであり、
Ａは窒素原子または−ＣＨ2−基であり、
Ｂは酸素原子、硫黄原子、窒素原子または−ＣＨ2−基であり、
Ｘは酸素原子、硫黄原子、窒素原子または−ＣＨ2−基であり、
Ｙは存在しないか、または酸素原子、硫黄原子、スルホ原子または−ＣＨ2−基であり、あるいは
ＸおよびＹは一緒になってフェニル、１,２−ジアジン、１,３−ジアジンまたは１,４−ジアジン基を形成し、ここでＮ、Ａ、Ｘ、Ｙ、Ｂおよび炭素原子により形成される環系は１個以下の酸素原子を含有し、Ａが窒素原子である場合、Ｘは酸素原子、硫黄原子または窒素原子ではなく、１個以下の硫黄原子を含有し、１、２、３または４個の窒素原子を含有し、そして酸素および硫黄原子は同時に存在せず、Ｎ、Ａ、Ｘ、Ｙ、Ｂおよび炭素原子により形成される環系は未置換であるか、互いに独立して未置換の、または
1.1 −ＯＨ、
1.2 (Ｃ1〜Ｃ8)−アルコキシ、
1.3 ハロゲン、
1.4 −ＮＯ2、
1.5 −ＮＨ2、
1.6 −ＣＦ3、
1.7 メチレンジオキシ、
1.8 −Ｃ(Ｏ)−ＣＨ3、
1.9 −ＣＨ(Ｏ)、
1.10 −ＣＮ、
1.11 −Ｃ(Ｏ)−ＯＨ、
1.12 −Ｃ(Ｏ)−ＮＨ2、
1.13 (Ｃ1〜Ｃ4)−アルコキシカルボニル、
1.14 フェニル、
1.15 フェノキシ、
1.16 ベンジル、
1.17 ベンジルオキシ、
1.18 テトラゾリル、または
1.19 −ＯＨ
により一〜二置換されている−（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキルにより一〜三置換されている）の複素環式環を形成し、あるいは
【００１０】
Ｒ8およびＺはそれらがそれぞれ結合している炭素原子と一緒になって式IIｃ
【化１９】
0003843012.tif 000007
（式中、Ｄ、Ｒ7およびＲ10は式IIで定義された通りであり、
Ｔは酸素原子、硫黄原子、窒素原子または−ＣＨ2−基であり、
Ｗは酸素原子、硫黄原子、窒素原子または−ＣＨ2−基であり、
Ｖは存在しないか、または酸素原子、硫黄原子、窒素原子または−ＣＨ2−基であり、あるいは
ＴおよびＶ、またはＶおよびＷは一緒になってフェニル、１,２−ジアジン、１,３−ジアジンまたは１,４−ジアジン基を形成し、ここで、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｗおよび２個の炭素原子により形成される環系は１個以下の酸素原子、１個以下の硫黄原子および１、２、３または４個の窒素原子を含有し、酸素原子および硫黄原子は同時に存在せず、Ｎ、Ｔ、Ｖ、Ｗおよび２個の炭素原子により形成される環系は未置換であるか、または互いに独立して上記１.１〜１.１９で定義された置換基により一〜三置換されている）の複素環式環を形成する）の基であり、そして
【００１１】
他のＲ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基はそれぞれ互いに独立して
１. 水素、
２. ハロゲン、
３. アリール(ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている)、
４. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
５. ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、
６. −(Ｃ1〜Ｃ6)−アルキル、
７. −ＣＮ、
８. −Ｏ−Ｒ10、
９. −Ｎ(Ｒ10)2、
10. −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、または
11. −ＣＦ3
であり、
Ｒ5は１. 水素、
２. −ＯＨまたは
３. ＝Ｏ
であり、そして
Ｒ6は１. アリール（ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）、
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または一〜三置換されている）、または
３. ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または一〜三置換されている）
である］の化合物および／または式Ｉの化合物の立体異性体および／または式Ｉの化合物の生理学的に許容しうる塩に関する。
【００１２】
好ましい式Ｉの化合物は、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基の１つは式II（式中、Ｄは−Ｃ(Ｏ)−であり、
Ｒ7は水素または−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、
Ｒ8は１. −（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して
1.1 ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
1.2 ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、
1.3 −Ｏ−Ｒ10、
1.4 −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、
1.5 −Ｎ(Ｒ10)2、
1.6 式
【化２０】
0003843012.tif 000008
の基、または
1.7 式
【化２１】
0003843012.tif 000009
の基
により一または二置換されている）、または
２. アミノ酸の特性基であり、
Ｒ9は１. Ｒ8、
２. −(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して
2.1 アリール（ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）、
2.2 ハロゲン、
2.3 −ＣＮまたは
2.4 −ＣＦ3
により一、二または三置換されている）、または
３. アリール(ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）であり、
【００１３】
Ｒ10はａ) 水素、
ｂ) −（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキル（ここで、アルキルは未置換であるか、互いに独立して
１. アリール、
２. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール、
３. ５〜１２個の環構成員を有する複素環、
４. ハロゲン、
５. −Ｎ−（Ｃ1〜Ｃ6)n−アルキル（ここで、ｎは０、１または２の整数であり、アルキルは未置換であるか、互いに独立してハロゲンまたは−Ｃ(Ｏ)−ＯＨにより一、二または三置換されている）、または
６. −Ｃ(Ｏ)−ＯＨ
により一〜三置換されている）、
ｃ) アリール、
ｄ) ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール、または
ｅ) ５〜１２個の環構成員を有する複素環
であり、（Ｒ10)2の場合、Ｒ10は互いに独立してａ）〜ｅ）の意味を有し、
【００１４】
Ｚは１. １,３,４−オキサジアゾール（ここで、１,３,４−オキサジアゾールは未置換であるか、または−ＮＨ2、ＯＨまたは−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより一〜三置換されている）、または
２. −Ｃ(Ｏ)−Ｒ11（ここで、Ｒ11は
１. −Ｏ−Ｒ10または
２. −Ｎ(Ｒ10)2である）
であり、あるいは
Ｒ7およびＲ8はそれらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒になってピロール、ピロリン、インドール、ピロリジン、ピリジン、ピペリジン、ピペリレン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピペラジン、ピラゾール、イミダゾール、ピラゾリン、イミダゾリン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、オキサゾール、プリン、イソキサゾール、２−イソキサゾリジン、イソキサゾリジン、モルホリン、イソチアゾール、チアゾール、チアジアゾール、ベンズイミダゾール、チオモルホリン、イソチアゾリジン、インダゾール、キノリン、トリアゾール、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、プテリジン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、１,２,３,５−オキサチアジアゾール ２−オキシド、テトラゾール、オキサジアゾロン、イソキサゾロン、トリアゾロン、オキサジアゾリジンジオン；Ｆ、−ＣＮ、−ＣＦ3またはＣ(Ｏ)−Ｏ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより置換されるトリアゾール、３−ヒドロキシピロール−２,４−ジオン、５−オキソ−１,２,４−チアジアゾールおよびテトラヒドロイソキノリンからなる群より選択される式IIａの環を形成し、あるいは
【００１５】
Ｒ8およびＺはそれらがそれぞれ結合している炭素原子と一緒になってピロール、ピロリン、ピロリジン、ピリジン、ピペリジン、ピペリレン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピペラジン、ピラゾール、イミダゾール、ピラゾリン、１,３,４−オキサジアゾール、イミダゾリン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、オキサゾール、イソキサゾール、２−イソキサゾリジン、イソキサゾリジン、モルホリン、イソチアゾール、チアゾール、イソチアゾリジン、テトラゾール、チオモルホリン、インダゾール、チアジアゾール、ベンズイミダゾール、キノリン、トリアゾール、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、プリン、プテリジン、インドール、テトラヒドロキノリン、トリアゾロン、テトラヒドロイソキノリン、１,２,３,５−オキサチアジアゾール ２−オキシド、オキサジアゾロン、イソキサゾロン、オキサジアゾリジンジオン；Ｆ、−ＣＮ、−ＣＦ3またはＣ(Ｏ)−Ｏ−(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキルにより置換されるトリアゾール、３−ヒドロキシピロール−２,４−ジオン、５−オキソ−１,２,４−チアジアゾールおよびイソキノリンからなる群より選択される式IIｃの環を形成する）の基であり、そして
【００１６】
他のＲ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基はそれぞれ互いに独立して
１. 水素、
２. ハロゲン、
３. アリール（ここで、アリールは未置換であるか、または置換されている）、
４. ５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または置換されている）、
５. ５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または置換されている）、
６. −(Ｃ1〜Ｃ6)−アルキル、
７. −ＣＮ、
８. −ＣＦ3、
９. −Ｏ−Ｒ10、
10. −Ｎ(Ｒ10)2、または
11. −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10(ここで、ｘは０、１または２の整数である）であり、
Ｒ5は水素であり、そして
【００１７】
Ｒ6は１. 互いに独立して
1.1 −ＣＮ、
1.2 −ＣＦ3、
1.3 ハロゲン、
1.4 −Ｏ−Ｒ10、
1.5 −Ｎ(Ｒ10)2、
1.6 −ＮＨ−Ｃ(Ｏ)−Ｒ11、
1.7 −Ｓ(Ｏ)x−Ｒ10（ここで、ｘは０、１または２の整数である）、
1.8 −Ｃ(Ｏ)−Ｒ11、または
1.9 −(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル−ＮＨ2
により一または二置換されているフェニル、
２．５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールは未置換であるか、または互いに独立して上記１.１〜１.９で定義された置換基により一、二または三置換されている）、または
３．５〜１２個の環構成員を有する複素環（ここで、複素環は未置換であるか、または互いに独立して上記１.１〜１.９で定義された置換基により一、二または三置換されている）である化合物である。
【００１８】
特に好ましい式Ｉの化合物は、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基の１つは式II（式中、Ｄは−Ｃ(Ｏ)−であり、
Ｒ7は水素であり、
Ｚは−Ｃ(Ｏ)−ＯＨまたは−Ｃ(Ｏ)−ＮＨ2であり、
Ｒ8は１. −（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して
1.1 −Ｓ(Ｏ)−Ｒ10（ここで、Ｒ10は下記で定義される通りである）、
1.2 −Ｎ(Ｒ10)2（ここで、Ｒ10は下記で定義される通りである）、または    1.3 ピロール
により一または二置換されている）、または
２．アミノ酸の特性基であり、
Ｒ10はａ) 水素、
ｂ) −（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキル（ここで、アルキルは未置換であるか、互いに独立してハロゲンにより一〜三置換されている）、
ｃ) フェニル（ここで、フェニルは未置換であるか、互いに独立してハロゲンまたは−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより一〜三置換されている）であり、
（Ｒ10)2の場合、Ｒ10は互いに独立してａ）〜ｃ）の意味を有する）の基であり、
他のＲ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基はそれぞれ水素であり、
Ｒ5は水素であり、
Ｒ6はフェニルまたはピリジンであり、そして
Ｒ9は１. 水素、
２. −（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル（ここで、アルキルは直鎖状または分枝状であり、互いに独立して−Ｃ(Ｏ)−ＯＨ、−ＯＨまたは−Ｃ(Ｏ)−ＮＨ2により一、二または三置換されている）、または
３. フェニル（ここで、フェニルは未置換であるか、互いに独立してハロゲンまたは−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより一〜三置換されている）である化合物である。
【００１９】
「ハロゲン」なる用語はフッ素、塩素、臭素または沃素を意味する。「（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル」、「（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキル」または「（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル」なる用語はその炭素鎖が直鎖状または分枝状であり、それぞれ１〜８個、１〜６個および１〜４個の炭素原子を含有する炭化水素基を意味する。環状アルキル基は例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルのような３〜６員の単環である。
【００２０】
「Ｒ7およびＲ8はそれらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒になって式IIａの複素環式環を形成する」なる表現はピロール、ピロリン、ピロリジン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、テトラゾール、イソキサゾリン、イソキサゾリジン、モルホリン、チアゾール、イソチアゾール、イソチアゾリン、プリン、イソチアゾリジン、チオモルホリン、ピリジン、ピペリジン、ピラジン、ピペラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドール、イソインドール、インダゾール、ベンズイミダゾール、フタラジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、トリアゾロン、テトラゾール、１,２,３,５−オキサチアジアゾール２−オキシド、オキサジアゾロン、イソキサゾロン、オキサジアゾリジンジオン；Ｆ、−ＣＮ、−ＣＦ3またはＣ(Ｏ)−Ｏ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより置換されるトリアゾール、３−ヒドロキシピロール−２,４−ジオン、５−オキソ−１,２,４−チアジアゾール、イミダゾリジン、カルボリンおよびこれらの複素環のベンゾ−縮合誘導体から誘導される基を意味する。
【００２１】
「アリール」なる用語は環に６〜１４個の炭素原子を有する芳香族炭化水素基を意味する。（Ｃ6〜Ｃ14）−アリール基は例えばフェニル、ナフチル、例えば１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニリル、例えば２−ビフェニリル、３−ビフェニリルおよび４−ビフェニリル、アントリルまたはフルオレニルである。ビフェニリル基、ナフチル基、特にフェニル基が好ましいアリール基である。アリール基、特にフェニル基は同一または異なる基により、好ましくは（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、（Ｃ1〜Ｃ8）−アルコキシ、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、例えばヒドロキシメチルまたは１−ヒドロキシエチルまたは２−ヒドロキシエチル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシカルボニル、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、テトラゾリルからなる群より選択される基により一置換または多置換、好ましくは一置換、二置換または三置換されうる。このことは例えばアリールアルキルまたはアリールカルボニルのような基にもあてはまる。アリールアルキル基は特にベンジル、さらに１−および２−ナフチルメチル、２−、３−および４−ビフェニリルメチル、および９−フルオレニルメチルである。置換アリールアルキル基は例えばアリール部分が１個以上の（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル基、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル基により置換されるベンジル基およびナフチルメチル基、例えば２−、３−および４−メチルベンジル、４−イソブチルベンジル、４−ｔ−ブチルベンジル、４−オクチルベンジル、３,５−ジメチルベンジル、ペンタメチルベンジル、２−、３−、４−、５−、６−、７−および８−メチル−１−ナフチルメチル、１−、３−、４−、５−、６−、７−および８−メチル−２−ナフチルメチル；アリール部分が１個以上の（Ｃ1〜Ｃ8）−アルコキシ基、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ基により置換されるベンジル基およびナフチルメチル基、例えば４−メトキシベンジル、４−ネオペンチルオキシベンジル、３,５−ジメトキシベンジル、３,４−メチレンジオキシベンジル、２,３,４−トリメトキシベンジル、ニトロベンジル基、例えば２−、３−および４−ニトロベンジル、ハロベンジル基、例えば２−、３−および４−クロロ−および２−、３−および４−フルオロベンジル、３,４−ジクロロベンジル、ペンタフルオロベンジル、トリフルオロメチルベンジル基、例えば３−および４−トリフルオロメチルベンジルまたは３,５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジルである。
【００２２】
一置換フェニル基において、その置換基は２位、３位または４位に存在することができる。二置換フェニルは２,３−位、２,４−位、２,５−位、２,６−位、３,４−位または３,５−位で置換されうる。三置換フェニル基において、その置換基は２,３,４−位、２,３,５−位、２,４,５−位、２,４,６−位、２,３,６−位または３,４,５−位に存在することができる。
【００２３】
アリール基についての説明は２価のアリーレン基、例えば１,４−フェニレンまたは１,３−フェニレンとして存在することができるフェニレン基にもあてはまる。
【００２４】
フェニレン−（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキルは特にフェニレンメチル（−Ｃ6Ｈ4−ＣＨ2−）およびフェニレンエチルであり、（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキレンフェニルは特にメチレンフェニル（−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−）である。フェニレン−（Ｃ2〜Ｃ6)−アルケニルは特にフェニレンエテニルおよびフェニレンプロペニルである。
【００２５】
「５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリール」なる表現は５〜１４個の環構成員を有し、その環構成員として１、２、３、４または５個のヘテロ原子を含有する単環式または多環式芳香族系の基を意味する。ヘテロ原子の例はＮ、ＯおよびＳである。幾つかのヘテロ原子が含まれる場合、これらは同一であるか、または異なる。ヘテロアリール基もまた、（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、（Ｃ1〜Ｃ8）−アルコキシ、特に（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、−Ｎ(Ｒ10)2、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、例えばヒドロキシメチルまたは１−ヒドロキシエチルまたは２−ヒドロキシエチル、メチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシカルボニル、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、テトラゾリルからなる群より選択される同一または異なる基により一置換または多置換、好ましくは一置換、二置換または三置換されうる。５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリールは好ましくはＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１、２、３または４個、特に１、２または３個の同一または異なるヘテロ原子を含有し、（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキル、（Ｃ1〜Ｃ6）−アルコキシ、フッ素、塩素、ニトロ、−Ｎ(Ｒ10)2、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシカルボニル、フェニル、フェノキシ、ベンジルオキシおよびベンジルからなる群より選択される１、２、３または４個、特に１〜３個の同一または異なる置換基により置換されうる単環式または二環式芳香族基である。ヘテロアリールは特に好ましくは５〜１０個の環構成員を有する単環式または二環式芳香族基、特にＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１、２または３個、特に１または２個の同一または異なるヘテロ原子を含有し、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、−Ｎ(Ｒ10)2、（Ｃ1〜Ｃ4)−アルコキシ、フェニル、フェノキシ、ベンジルオキシおよびベンジルからなる群より選択される１または２個の同一または異なる置換基により置換されうる５員または６員の単環式芳香族基である。
【００２６】
「５〜１２個の環構成員を有する複素環」なる表現は部分的に飽和または完全に飽和の単環式または二環式の５員〜１２員の複素環式環を意味する。ヘテロ原子の例はＮ、ＯおよびＳである。複素環は未置換であるか、１個以上の炭素原子上または１個以上のヘテロ原子上で同一または異なる置換基により置換される。これらの置換基はヘテロアリール基について上記で定義された通りである。特に、複素環式環は炭素原子上で（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル、例えば（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、（Ｃ1〜Ｃ8）−アルコキシ、例えばメトキシのような（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、フェニル−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、例えばベンジルオキシ、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ニトロ、アミノまたはトリフルオロメチルからなる群より選択される同一または異なる基により一置換または多置換、例えば一置換、二置換、三置換または四置換され、そして／または複素環式環の環窒素原子（複数可）上で（Ｃ1〜Ｃ8）−アルキル、例えばメチルまたはエチルのような（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、場合により置換フェニルまたはフェニル−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、例えばベンジルにより置換される。窒素複素環はＮ−オキシドまたは第四塩として存在することもできる。
【００２７】
５〜１４個の環構成員を有するヘテロアリールまたは５〜１２個の環構成員を有する複素環の例はピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、１,２,３,５−オキサチアジアゾール２−オキシド、トリアゾロン、オキサジアゾロン、イソキサゾロン、オキサジアゾリジンジオン；Ｆ、−ＣＮ、−ＣＦ3または−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルにより置換されるトリアゾール、３−ヒドロキシピロール−２,４−ジオン、５−オキソ−１,２,４−チアジアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、インダゾール、フタラジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、カルボリン、およびこれらの複素環のベンゾ−縮合、シクロペンタ−、シクロヘキサ−またはシクロヘプタ−縮合誘導体から誘導される基である。特に好ましい基は２−または３−ピロリル、４−または５−フェニル−２−ピロリルのようなフェニルピロリル、２−フリル、２−チエニル、４−イミダゾリル、メチルイミダゾリル、例えば１−メチル−２−、−４−または−５−イミダゾリル、１,３−チアゾール−２−イル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−、３−または４−ピリジル−Ｎ−オキシド、２−ピラジニル、２−、４−または５−ピリミジニル、２−、３−または５−インドリル、置換２−インドリル、例えば１−メチル−、５−メチル−、５−メトキシ−、５−ベンジルオキシ−、５−クロロ−または４,５−ジメチル−２−インドリル、１−ベンジル−２−または−３−インドリル、４,５,６,７−テトラヒドロ−２−インドリル、シクロヘプタ［ｂ］−５−ピロリル、２−、３−または４−キノリル、１−、３−または４−イソキノリル、１−オキソ−１,２−ジヒドロ−３−イソキノリル、２−キノキサリニル、２−ベンゾフラニル、２−ベンゾチエニル、２−ベンゾキサゾリルまたはベンゾチアゾリルまたはジヒドロピリジニル、ピロリジニル、例えば２−または３−（Ｎ−メチルピロリジニル）、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、テトラヒドロチエニルまたはベンゾジオキソラニルである。
【００２８】
α−アミノ酸の構造式は次の通りである：
【化２２】
0003843012.tif 000010
α−アミノ酸はＲ基により互いに異なり、それは本明細書ではアミノ酸の「特性基」として表されている。
【００２９】
Ｒ8がアミノ酸の特性基である場合、使用される特性基は好ましくは次の天然に存在するα−アミノ酸：グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、トレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リシン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸およびアスパラギン酸である。特に好ましくはヒスチジン、トリプトファン、セリン、トレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リシン、アルギニン、グルタミン酸およびアスパラギン酸である。さらにＲ8基として使用される好ましいアミノ酸の特性基はまた、天然に存在しないアミノ酸、例えば２−アミノアジピン酸、２−アミノ酪酸、２−アミノイソ酪酸、２,３−ジアミノプロピオン酸、２,４−ジアミノ酪酸、１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸、１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、２−アミノピメリン酸、フェニルグリシン、３−（２−チエニル）アラニン、３−（３−チエニル）アラニン、２−(２−チエニル)グリシン、２−アミノヘプタン酸、ピペコリン酸、ヒドロキシリシン、サルコシン、Ｎ−メチルイソロイシン、６−Ｎ−メチルリシン、Ｎ−メチルバリン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチン、アロ−イソロイシン、アロ−トレオニン、アロ−ヒドロキシリシン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシプロリン、３−（２−ナフチル）アラニン、３−（１−ナフチルアラニン）、ホモフェニルアラニン、ホモシステイン、ホモシステイン酸、ホモトリプトファン、システイン酸、３−（２−ピリジル）アラニン、３−（３−ピリジル）アラニン、３−（４−ピリジル）アラニン、２−アミノ−３−フェニルアミノプロピオン酸、２−アミノ−３−フェニルアミノエチルプロピオン酸、ホスフィノトリシン、４−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、４−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、３−フルオロフェニルアラニン、２−フルオロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、４−アミノフェニルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シトルリン、５−フルオロトリプトファン、５−メトキシトリプトファン、メチオニンスルホン、メチオニンスルホキシドまたは−ＮＨ−ＮＲ10−ＣＯＮ(Ｒ10)2であり、これらは場合により置換される。アミノ、ヒドロキシル、カルボキシル、メルカプト、グアニジル、イミダゾリルまたはインドリルのような官能基を有する天然に存在する、または存在しないアミノ酸の場合、この基を保護することもできる。
【００３０】
これに適した保護基は好ましくはペプチド化学で慣用的に使用されるＮ−保護基、例えばウレタン型の保護基、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、９−フルオレニル−オキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｏｃ）または酸アミド型の保護基、特にホルミル、アセチルまたはトリフルオロアセチル、およびアルキル型の保護基、例えばベンジルである。Ｒ8のイミダゾール基の場合、例えばスルホンアミド生成に使用される式IVのスルホン酸誘導体がイミダゾール窒素の保護基として使用され、それは特に水酸化ナトリウム水溶液のような塩基の存在下で除去することができる。
【００３１】
化学反応の出発物質は知られているか、または文献既知の方法により容易に製造することができる。
本発明はさらに、ａ) 式IV
【化２３】
0003843012.tif 000011
（式中、Ｐｇは適当な保護基（例えばメチルエステル）、アミド基またはヒドロキシル基であり、そしてＺ、Ｒ7およびＲ8は式Ｉで定義された通りである）の化合物を式III
【化２４】
0003843012.tif 000012
（式中、Ｄ１は−ＣＯＯＨまたはスルホニルハロゲンであり、そしてＲ5、Ｒ6およびＲ9は式Ｉで定義された通りである）の化合物の塩化アシルまたは活性エステルと塩基または適当ならば脱水剤の存在下、溶液中で反応させ、保護基を除去した後、式Ｉの化合物に変換する、あるいは
【００３２】
ｂ) 式IVａ
【化２５】
0003843012.tif 000013
（式中、Ｒ7およびＲ8は式Ｉで定義された通りであり、そしてＥはＮ−アミノ保護基である）の化合物を反応させ、そのカルボニル基を中間鎖Ｌを介して式ＰＳのポリマー樹脂と結合させて式Ｖ
【化２６】
0003843012.tif 000014
の化合物を得、それを保護基Ｅの選択的除去後に式III（式中、Ｒ5、Ｒ6およびＲ9は式Ｉで定義された通りである）の化合物と塩基または適当ならば脱水剤の存在下で反応させて式VI
【化２７】
0003843012.tif 000015
の化合物を得、支持物質から分離した後、式VIの化合物を式Ｉの化合物に変換する、あるいは
【００３３】
ｃ) 式Ｉの化合物を生理学的に許容しうる塩に変換する
ことからなる、式Ｉの化合物および／または式Ｉの化合物の立体異性体および／または式Ｉの化合物の生理学的に許容しうる塩の製造法に関する。
【００３４】
工程ａ）において、式IVａの化合物の酸官能基に保護基Ｐｇが付与される；この選択的なカルボン酸の誘導はHouben-Weylの 「Methoden der Org. Chemie」第１５／１巻に記載されているような方法に従って行われる。工程ｂ）において、式IVａの出発化合物のアミノ官能基に保護基Ｅが付与される；この選択的なアミノ基の誘導はHouben-Weylの「Methoden der Org. Chemie」，第１５／１巻に記載されているような方法に従って行われる。
【００３５】
このために好ましく使用される適当な保護基Ｐｇはペプチド化学で慣用のカルボキシル保護基、例えばメチル、エチル、ｔ−ブチル、イソプロピル、ベンジル、フルオレニルメチル、アリルのようなアルキルエステル型、フェニルのようなアリールエステル型、アミドまたはベンズヒドリルアミンのようなアミド型の保護基である。このために使用される適当な保護基Ｅは好ましくはペプチド化学で慣用のＮ−保護基、例えばベンジルオキシカルボニル(Ｚ)、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）およびアリルオキシカルボニル（Ａｌｏｃ）のようなウレタン型、特にホルミル、アセチルまたはトリフルオロアセチルのような酸アミド型、ベンジルのようなアルキル型の保護基である。（トリメチルシリル）エトキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）基もまた、このために特に適していることがわかった（P. Kocienskiの「Protecting  Groups」，Thieme Verlag 1994）。
【００３６】
インドールカルボン酸誘導体はHouben-Weylの「Methoden der Org. Chemie」，Ｅ６−２ＡおよびＥ６−２Ｂの巻に記載の方法に従って製造した。したがって、式IIIのインドールカルボン酸誘導体を製造する場合、好ましくはヒドラジノ安息香酸およびアリールケトンまたはヘテロアリールケトンを溶媒としてポリリン酸の存在下、１４５℃で反応させる。必要なヒドラジノ安息香酸は当業者に知られている方法により、例えば相当する安息香酸アニリンから製造される。アリールケトンまたはヘテロアリールケトンもまた、当業者に知られている方法により、例えば相当する塩化アシルまたはニトリルを例えば有機金属化合物と反応させることにより製造される。
【００３７】
式IVの化合物を式IIIの化合物と縮合させる場合、当業者に良く知られているカップリング方法が有利に使用される（例えばHouben-Weyl の「Methoden der Org. Chemie」，第１５／１および１５／２巻，Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974を参照）。適当な縮合剤またはカップリング試薬はカルボニルジイミダゾール、カルボジイミド、例えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、Ｏ−（（シアノ（エトキシカルボニル）メチレン）アミノ）−Ｎ,Ｎ,Ｎ′,Ｎ′−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）またはプロパン−無水ホスホン酸（ＰＰＡ）のような化合物である。
【００３８】
縮合は標準条件下で行なうことができる。一般に、縮合の間、存在する非反応性アミノ基を除去可能な保護基により保護する必要がある。このことは反応に関与しないカルボキシル基にもあてはまり、反応の間、縮合物は好ましくは（Ｃ1〜Ｃ6）−アルキルエステル、ベンジルエステルまたはｔ−ブチルエステルとして存在する。アミノ基がニトロ基またはシアノ基のような前駆体の形態のままで存在し、縮合後の水素化により生成するにすぎない場合、アミノ基の保護は不必要である。縮合後、存在する保護基は適当な方法で除去される。例えば、ＮＯ2基（アミノ酸のグアニジノ保護）、ベンジルオキシカルボニル基、およびベンジルエステルのベンジル基は水素化により除去することができる。ｔ−ブチル型の保護基は酸性条件下で除去され、また９−フルオレニルメトキシカルボニル基は第２アミンにより除去される。
【００３９】
式ＶおよびVIでＰＳと表示されるポリマー支持体は中間鎖Ｌと表示されるリンカーを有する架橋ポリスチレン樹脂である。このリンカーは適当な官能基、例えばリンクアミド樹脂として知られているアミン、あるいは例えばワング樹脂またはカイザーオキシム樹脂として知られているＯＨ基を有する。別法として、種々の中間鎖Ｌを有するガラス、綿またはセルロースのような他のポリマー支持体を使用することができる。
【００４０】
Ｌと表示される中間鎖はポリマー支持体と共有結合により結合し、式IVａの化合物とのアミド様またはエステル様の可逆結合を可能にする。その結合は結合した式IVａの化合物上で次の反応の間も安定しているが、強力な酸性反応条件下で、例えばトリフルオロ酢酸と混合してリンカーに存在する基を再び分離する。
所望の式Ｉの化合物のリンカーからの分離は連続反応の適当な段階で行なうことができる。
【００４１】
Ａ．式IVａの保護されたアミノカルボン酸を固体支持体に結合させるための一般手順
合成はそれぞれ１５mlの反応容量を有する反応容器で行った。それぞれの反応容器に０.１７９ｇのリンクアミドＡＭ樹脂（Ｆｍｏｃ−リンクアミドＡＭ／Nova-Biochem；添加量０.５６ミリモル／ｇ；すなわち０.１ミリモル／反応容器）を入れた。Ｆｍｏｃ保護基を樹脂から除去するために、３０％濃度のピペリジン／ＤＭＦ溶液を計量してそれぞれの反応容器に入れ、その混合物を４５分間振盪した。次に、それを濾過し、樹脂をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で３回洗浄した。保護されたアミノ酸を結合させる場合、このようにして調製した樹脂に相当するＦｍｏｃ−アミノ酸の０.５モル溶液（０.３ミリモル、ＤＭＦ中）、ＨｏＢｔ溶液（０.３３ミリモル、ＤＭＦ中）およびＤＩＣ溶液（０.３３ミリモル、ＤＭＦ中）をそれぞれ加え、その混合物を３５℃で１６時間振盪した。次に、樹脂をＤＭＦで数回洗浄した。結合をチェックするために、幾つかの樹脂ビーズを取り出し、ＫＡＩＳＥＲ試験に付した；すべての場合において、試験結果は陰性であった。
Ｆｍｏｃ保護基の除去は上記のように３０％濃度のピペリジン／ＤＭＦ溶液を使用して行った。
【００４２】
ベンズイミダゾールカルボン酸を結合させる場合、相当する４−または５−置換酸の０.１モル溶液（０.４ミリモル、ＤＭＦ中）、カップリング試薬ＴＯＴＵの０.５モル溶液（０.４４ミリモル、ＤＭＦ中）およびＤＩＰＥＡの０.５モル溶液（０.６ミリモル、ＤＭＦ中）を加え、その混合物を４０℃で１６時間振盪した。次に、それをＤＭＦで数回洗浄した。
反応をチェックするために、幾つかの樹脂ビーズを取り出し、ＫＡＩＳＥＲ試験に付した。
【００４３】
所望の物質を固体支持体から分離するために、樹脂をジクロロメタンで数回洗浄した。次に、分解溶液（５０％のジクロロメタンおよび５０％の混合物（９５％のＴＦＡ、２％のＨ2Ｏ、３％のトリイソプロピルシラン））を加え、その混合物を室温で１時間振盪した。混合物を濾過し、濾液を濃縮乾固した。その残留物をジエチルエーテルで沈殿させ、濾過した。
【００４４】
固体残留物は通常、所望の生成物を高純度で含み、例えば分取用高速液体クロマトグラフィーを使用して逆相で処理（溶離剤：Ａ：Ｈ2Ｏ／０.１％ＴＦＡ、Ｂ：アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ）することにより分別した。得られたフラクションを凍結乾燥して所望の生成物を得た。
【００４５】
それらの立体異性体を含む、塩生成が可能な式Ｉの化合物の生理学的に許容しうる塩の製造は知られている方法で行われる。カルボン酸は水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩、アルコキシド、さらにアンモニアのような塩基性試薬、あるいは有機塩基、例えばトリメチル−またはトリエチルアミン、エタノールアミンまたはトリエタノールアミン、あるいは塩基性アミノ酸、例えばリシン、オルニチンまたはアルギニンと共に安定なアルカリ金属、アルカリ土類金属または場合により置換されたアンモニウム塩を生成する。式Ｉの化合物が塩基性基を含有する場合、強酸を使用して安定な酸付加塩を製造することもできる。このためには、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、４−ブロモベンゼンスルホン酸、シクロヘキシルアミドスルホン酸、トリフルオロメチルスルホン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸またはトリフルオロ酢酸のような無機および有機酸が好適である。
【００４６】
本発明はまた、有効量の少なくとも１種の式Ｉの化合物および／または式Ｉの化合物の生理学的に許容しうる塩および／または場合により式Ｉの化合物の立体異性体を薬学的に好適で生理学的に許容しうる賦形剤、添加剤および／または他の活性化合物および補助剤と一緒に含有する薬剤に関する。
【００４７】
その薬理学的性質のため、本発明の化合物はその過程でＩκＢキナーゼの増大した活性が関与する疾患の予防および治療に適している。これらの疾患には例えば運動器官の慢性疾患、例えば炎症性、免疫性または代謝性の急性および慢性関節炎、関節症、リウマチ性関節炎、あるいは変性関節障害、例えば骨関節症、脊椎症、関節外傷または半月もしくはひざがしらの損傷後の関節の長期固定による軟骨破壊、あるいは連結組織の靭帯断裂または障害、例えば膠原症および歯周病、筋肉痛および骨代謝の障害、あるいは腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）の過剰発現またはＴＮＦα濃度の増加により起こる疾患、例えば悪液質、多発性硬化症、頭蓋−脳外傷、クローン病および腸腫瘍、あるいはアテローム性動脈硬化症、狭窄症、潰瘍形成、アルツハイマー病、筋肉疲労、癌性疾患（細胞毒性化合物を用いた治療の増強）、心筋梗塞、痛風、敗血症、敗血症性ショック、内毒素性ショック、ウイルス感染症、例えばインフルエンザ、肝炎、ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳのような疾患、あるいはアデノウイルスまたはヘルペスウイルスにより起こる疾患、寄生虫感染症、例えばマラリアまたは癩病、真菌感染症または酵母菌感染症、髄膜炎、慢性の炎症性肺疾患、例えば慢性気管支炎または喘息、急性呼吸障害症候群、急性滑膜炎、結核、乾癬、糖尿病、移植した臓器に対する被移植者の急性または慢性拒絶反応、慢性の対宿主移植片反応および炎症性血管障害が含まれる。
【００４８】
本発明の薬剤は一般に経口的または非経口的に投与される。経腸または経皮投与もまた可能である。
本発明はまた、薬学的に好適で生理学的に許容しうる賦形剤、さらに適当ならば好適な活性化合物、添加剤または補助剤を使用して少なくとも１種の式Ｉの化合物を好適な投与形態にすることからなる、薬剤の製造法に関する。
【００４９】
適当な固体または製剤形態は例えば顆粒剤、散剤、コーチング剤、錠剤、（マイクロ）カプセル剤、坐剤、シロップ剤、ジュース剤、懸濁剤、乳剤、滴剤、または注射剤、および活性化合物の放出を長引かせる製剤であり、これらの製剤において慣用の補助剤、例えば賦形剤、崩壊剤、結合剤、コーチング剤、膨潤剤、滑沢剤または潤滑剤、芳香剤、甘味剤および可溶化剤が使用される。よく使用される補助剤の例としては炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトールおよび他の糖、タルク、ラクトプロテイン、ゼラチン、デンプン、セルロースおよびその誘導体、動物および植物油、例えばタラ肝油、ヒマワリ油、落花生油またはゴマ油、ポリエチレングリコールおよび溶剤、例えば滅菌水および一価または多価アルコール、例えばグリセロールが挙げられる。製剤は好ましくはそれぞれの単位が活性成分として所定量の本発明の式Ｉの化合物を含有する投与単位で製造および投与される。錠剤、カプセル剤、コーチング錠または坐剤のような固体投与単位の場合、この用量は約１０００mg以下、好ましくは約５０mg〜３００mgであり、アンプル形態の注射剤の場合は約３００mg以下、好ましくは約１０mg〜１００mgである。体重が約７０kgの成人患者を治療する場合、式Ｉの化合物の効力に応じて、１日の投与量は約２０mg〜１０００mg、好ましくは約１００mg〜５００mgの活性化合物である。しかしながら、特定の状況下では１日の投与量は高めまたは低めが適当である。１日量の投与は個別投与単位または幾つかの小形投与単位の形態で１回投与することにより、または分割した投与量を一定の間隔で多数回投与することにより行なうことができる。
【００５０】
一般に、最終生成物は質量−分光分析法（ＦＡＢ−、ＥＳＩ−ＭＳ）により確認される。温度は摂氏度で表され、ＲＴは室温（２２〜２６℃）を意味する。使用した略語は説明しているか、または慣習上の決まり事である。
【００５１】
【実施例】
置換インドールカルボン酸の製造
工程Ａ) ２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸：
１.９６ｇ（１０ミリモル）のデオキシベンゾインおよび１.５２ｇの４−ヒドラジノ安息香酸を乳鉢中で粉砕し、１６０℃のオープンフラスコ中で１５分間溶融させた。冷却した溶融物を１００mlの酢酸および３０mlの濃塩酸と混合し、３時間加熱還流した。冷却した溶液を水と混合すると、生成物の２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸が沈殿した。生成物を吸引ろ過し、残留物を水で洗浄し、乾燥した。精製するために、粗生成物を温トルエンと一緒に攪拌し、吸引ろ過し、再び乾燥した。これにより２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸を得た。
【００５２】
工程Ｂ) ２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸：
２０ｇのＰ2Ｏ5を１２.５mlのＨ3ＰＯ4（８５％）と混合すると、反応混合物の温度がかなり上昇した。反応混合物を６０℃まで冷却し、８.９０ｇ（６５.８４ミリモル）の４−プロピオニルピリジンおよび４.２０ｇ（２７.６０ミリモル）の４−ヒドラジノ安息香酸を加えた。次に、混合物を１４５℃で４５分間攪拌した。反応混合物を水に注ぐと、黄色い生成物の２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸が沈殿した。この沈殿物を吸引ろ過し、水で洗浄して中和した。この方法により定量的収率で得られた２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸をさらに精製することなくアミノ酸誘導体とのカップリングに使用した。
【００５３】
アミノ酸誘導体と置換インドールカルボン酸誘導体のカップリング
工程Ｃ）
実施例１
Ｎ−（１−カルバモイル−３−フェニルプロピル）−２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド：
０.１６ｇ（０.５ミリモル）の２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（工程Ａを参照）を室温で１０mlの乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、連続して０.１１ｇ（０.５ミリモル）のＬ−ホモフェニル−アラニンアミド塩酸塩、０.１６ｇのＴＯＴＵ（Ｏ−［（シアノ（エトキシカルボニル）メチリデン）アミノ−１,１,３,３−テトラメチル］ウロニウムテトラフルオロボレート）および０.１４ml（１ミリモル）のジイソプロピルアミンと混合した。反応混合物を室温で６時間攪拌し、減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチルに溶解した。有機相を連続して水、飽和炭酸ナトリウム溶液、水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。これにより融点１２０℃〜１２５℃のＮ−（１−カルバモイル−３−フェニルプロピル）−２,３−ジフェニル−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミドを得た。
【００５４】
実施例７
Ｎ−（１−カルバモイル−３−ピロール−１−イルプロピル）−３−メチル−２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド
０.１３ｇ（０.５ミリモル）の３−メチル−２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（工程Ａを参照）を室温で１０mlの乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、連続して０.０８３ｇ（０.５ミリモル）の４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノブチルアミド、０.１６ｇ（０.５ミリモル）のＴＯＴＵ（Ｏ−［（シアノ（エトキシカルボニル）メチリデン）アミノ−１,１,３,３−テトラメチル］ウロニウムテトラフルオロボレート）および０.１４ml（１ミリモル）のエチルジイソプロピルアミンと混合した。反応混合物を室温で６時間攪拌し、減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチルに溶解した。有機相を連続して水、飽和炭酸ナトリウム溶液、水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。分取用ＨＰＬＣにより精製を行なった。
【００５５】
ａ：４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ酪酸
アルゴンでフラッシした、６０mlの水中における１.２５ｇ（５.０ミリモル）のＮα−Ｚ−Ｌ−２,４−ジアミノ酪酸の溶液を０.６６ｇ（５.０ミリモル）の２,５−ジメトキシテトラヒドロフランと混合し、次に１.７mlの氷酢酸を加え、混合物を２０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで繰り返し抽出し、有機相を合一し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／ＣＨ3ＣＯＯＨ：１００／５／１）により精製した。移動相を除去して１.３ｇ（８７％）の４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ酪酸を得た。
【００５６】
ｂ：４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノブチルアミド
１.２ｇ（４.０ミリモル）の４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ酪酸および０.６１ｇ（４.０ミリモル）のＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールアンモニウム塩を一緒に１０mlのＤＭＦに溶解し、０℃で０.８２ｇ（４.０ミリモル）のＮ,Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび０.６８ml（４.０ミリモル）のＮ−エチルジイソプロピルアミンと混合し、その混合物を０℃で３０分間、２０℃で３時間攪拌した。沈殿した尿素を吸引ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮乾固した。
粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ／ＣＨ3ＣＯＯＨ：１００／５／１）により精製した。収量：０.８９ｇ（７４％）。
【００５７】
ｃ：４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−アミノブチルアミド
不活性気体下、２０mlのメタノールに溶解した０.８０ｇ（２.６５ミリモル）の４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−ベンジルオキシカルボニルアミノブチルアミドを８０mgの触媒（１０％Ｐｄ−Ｃ）と混合し、次に水素を導入してＺ保護基を完全に除去した。触媒をろ去し、ろ液を濃縮して０.４ｇ（９０.５％）の４−（１−ピロリル）−Ｌ−２−アミノブチルアミドを得た。
【００５８】
２．工程Ｄ）
実施例３
Ｎ−（１−カルバモイル−２−フェニルスルファニルエチル）−２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド
０.２０ｇ（０.８４ミリモル）の２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸を４０mlのＤＭＦ中で０.２１ｇ（１.０７ミリモル）の２−アミノ−３−フェニルスルファニルプロピオン酸と混合し、０℃で０.６６ｇ（１.２７ミリモル）のベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートおよび０.３７ml（２.１２ミリモル）のＮ−エチル−Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミンを加え、溶液を２０℃で２時間攪拌した。溶液を減圧下で濃縮し、中圧カラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ：９：１）により精製した。これにより０.１９ｇ（５４％）のＮ−（１−カルバモイル−２−フェニルスルファニルエチル）−２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミドを得た。
【００５９】
実施例９
３−フェニルアミノエチル−２−［（２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボニル）−アミノ］プロピオンアミド
【化２８】
0003843012.tif 000016
ａ) Ｌ−２−アミノ−３−フェニルアミノエチルプロピオン酸
５４.８ｇ（０.２０９モル）のトリフェニルホスフィンを６００mlのアセトニトリル中で懸濁し、湿気を除去して−３５℃〜−４５℃まで冷却した。この温度で３６.４ｇ（０.２０９モル）のジエチルアゾジカルボキシレートを５０分にわたって滴加した。混合物を−３５℃でさらに１５分間攪拌した。温度を−３５℃以下に維持しながら５００mlのアセトニトリル中における５０ｇ（０.２０９モル）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−セリンの溶液をこの混合物に滴加した。次に、混合物を５℃でさらに１２時間反応させ、室温まで加温した。反応溶液の溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をシリカゲル上の中圧クロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＡｃＣＮ：２５／１）により精製した。溶媒を除去して２０.８ｇ（収率４５％）の純粋なＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−セリン−β−ラクトン（Org. Synth. 70, 1頁以降 (1991年) を参照）を微細な針状結晶として得た。実験式Ｃ11Ｈ11ＮＯ4；分子量＝２２１.２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２２２.１。
【００６０】
アルゴンの保護雰囲気下で１５.５ml（６３.５１ミリモル）のＮ,Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドを２５０mlのアセトニトリル中で７.３ml（５７.３６ミリモル）のＮ−エチルアニリンに加え、混合物を５０℃で３時間攪拌した。次に、２５０mlのアセトニトリルに溶解した上記ラクトン（１０.７ｇ、４８.３７ミリモル）の溶液を２０℃で加え、混合物を１７時間加熱還流した。溶媒を除去し、溶液のｐＨを９以下に維持しながら残留物を飽和炭酸ナトリウム溶液と混合した。水性懸濁液を少量のジエチルエーテルで洗浄し、濃塩酸を使用してｐＨを６〜７まで酸性にし、ＮａＨＰＯ4緩衝液を使用してｐＨを５に調整した。次に、水溶液を酢酸エチルで繰り返し抽出した。溶媒を蒸発させて所望の生成物を４５％（７.４ｇ）の収率で得た。実験式Ｃ19Ｈ22Ｎ2Ｏ4；分子量＝３４２.４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）３４３.２。
【００６１】
−１０℃で６.５ml（８９.１ミリモル）の塩化チオニルを７５mlのメタノールに滴加し、その混合物を３０分間攪拌した。次に、７５mlのメタノールに溶解した８.６ｇ（２５.１２ミリモル）のＬ−２−アミノエチル−３−フェニルアミノプロピオン酸を加え、その混合物を−１０℃で３０分間、室温でさらに３時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチルに取り、炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。溶媒を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン／酢酸エチル ７：３）により精製して４.４３ｇ（収率５０％）のメチルＬ−２−アミノエチル−３−フェニルアミノプロピオン酸を得た。実験式Ｃ20Ｈ24Ｎ2Ｏ4；分子量＝３５６.４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）３５７.３。
【００６２】
保護基を除去するために、４.４ｇ（１２.３５ミリモル）のＺ−保護誘導体を５００mlのメタノールに溶解し、不活性気体下で１００mgの触媒（１０％Ｐｄ(ＯＨ)2−Ｃ）を加え、水素を導入してＺ保護基を完全に分解した。触媒をろ去し、ろ液を濃縮して２.８ｇのＬ−２−アミノエチル−３−フェニルアミノプロピオン酸を得た（定量的）。実験式Ｃ12Ｈ18Ｎ2Ｏ2；分子量＝２２３.３；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２２３.１。
【００６３】
段階ｂ）
工程Ｂ）のようにして製造した０.６３ｇ（２.６４ミリモル）の２−ピリジン−４−イル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸を１５０mlのＤＭＦ中で懸濁し、連続して１.０１ｇ（３.０８ミリモル）のＴＯＴＵおよび０.６３ml（３.７１ミリモル）のエチルジイソプロピルアミンと混合した。混合物を室温で２０分間攪拌し、ａ）に従って製造した０.７３ｇ（３.２８ミリモル）の（Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルアミノエチルプロピオン酸メチルを得られた透明な溶液に加えた。混合物を減圧下で１５時間攪拌し、表題化合物のメチルエステルをシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１９：１）により単離した。収量：０.４４ｇ、実験式Ｃ26Ｈ26Ｎ4Ｏ3；分子量＝４４２.２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４４３.３。
【００６４】
０.２２ｇ（０.４９７ミリモル）の得られたメチルエステルを１００mlのメタノールに溶解し、０℃まで冷却し、次にアンモニアを１.５時間導入した。溶液を室温で一晩放置し、次にメタノールを蒸発させた。粗生成物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１９：１）により精製した。収量：０.０９６ｇ（４５.２％）、Ｃ25Ｈ25Ｎ5Ｏ2；分子量＝４２７.２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４２８.３。
次の表１の化合物を工程Ａ）〜Ｄ）と同様にして製造した。
【００６５】
【表１】
0003843012.tif 000017
【００６６】
【表２】
0003843012.tif 000018
【００６７】
【表３】
0003843012.tif 000019
【００６８】
薬理試験
ＩκＢキナーゼＥＬＩＳＡ：
ＩκＢキナーゼの活性はタンパク質ＩκＢにおいてセリン３２〜３６のアミノ酸配列を含有するビオチン化基質ペプチドおよびペプチドＩκＢのリン酸化形態とだけ結合する特異的多クローン性または単クローン性抗体（例えばNew England Biolabs(米国)，カタログ番号9240）からなるＥＬＩＳＡを使用して測定した。この複合体を（プロテインＡで被覆した）抗体と結合するプレート上で固定し、ビオチン結合性タンパク質およびＨＲＰ（例えばストレプトアビジンＨＲＰ）の抱合体を使用して分析した。活性は基質リンペプチドを用いた標準曲線を使用して定量することができる。
【００６９】
手順：
キナーゼ複合体を得るために、１０mlのＨｅＬａ Ｓ３細胞抽出物Ｓ１００を４０mlの５０mMヘペス（ｐＨ７.５）で希釈し、４０％硫酸アンモニウムで調製し、氷上で３０分間インキュベートした。沈殿したペレットを５mlのＳＥＣ緩衝液（５０mMのヘペス（ｐＨ７.５）、１mMのＤＴＴ、０.５mMのＥＤＴＡ、１０mMの２−グリセロホスフェート）に溶解し、２０,０００×ｇで１５分間遠心し、０.２２μmのフィルターを通して濾過した。試料をＳＥＣ緩衝液で平衡させた３２０mlのSuperose−６ ＦＰＬＣカラム（Amersham Pharmacia Biotech AB, スウェーデン）に付し、４℃において２ml／分の流量で操作した。分子量が６７０kDaの標準の溶離時間に相当するフラクションを合一して活性化した。活性化は３７℃で１００nMのＭＥＫＫ１△、２５０μMのＭｇＡＴＰ、１０mMのＭｇＣｌ2、５mMのジチオトレイトール（ＤＴＴ）、１０mMの２−グリセロホスフェート、２.５μMのミクロシスチンＬＲと一緒に４５分間インキュベートすることにより行った。活性化した酵素を−８０℃で保存した。
【００７０】
ＤＭＳＯ（２μl）に溶解した試験物質を予め２５℃で４３μlの活性化酵素（反応緩衝液：５０mMのヘペス（ｐＨ７.５）、１０mMのＭｇＣｌ2、５mMのＤＴＴ、１０mMのβ−グリセロホスフェート、２.５μMのミクロシスチンＬＲで１：２５に希釈した）と一緒に３０分間インキュベートした。５μlの基質ペプチド（ビオチン−(ＣＨ2)6−DRHDSGLDSMKD−CONH2）（２００μM）を加え、その混合物を１時間インキュベートし、１５０μlの５０mMヘペス（ｐＨ７.５）、０.１％ＢＳＡ、５０mMのＥＤＴＡ、抗体［１：２００］を使用して反応を急冷した。次に、１００μlの急冷した反応混合物または標準リンペプチド希釈液（ビオチン−(ＣＨ2)6−DRHDS[PO3]GLDSMKD-CONH2）をプロテインＡプレート（Pierce Chemical社, 米国）に移し、２時間振盪しながらインキュベートした。
【００７１】
ＰＢＳで３回洗浄した後、１００μlの０.５μg／mlのストレプトアビジンＨＲＰ（セイヨウワサビペルオキシダーゼ（５０mMヘペス／０.１％ＢＳＡで希釈した）を３０分間加えた。ＰＢＳで５回洗浄した後、１００μlのＴＭＢ基質（Kirkegaard & Perry Laboratories, 米国）を加え、１００μlの０.１８Ｍ硫酸の添加により発色を停止した。吸収を４５０nmで測定した。４つのパラメーターの用量−活性関係に従って一次回帰により標準曲線を作成した。この標準曲線を使用して、試験物質による酵素活性またはそれらの阻害を定量した。
【００７２】
方法ＰＫＡ、ＰＫＣ、ＣＫII
ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）およびカゼインキナーゼII（ＣＫII）はUpstate Biotechnologie社の相当する試験キットを使用して製造業者の取扱説明書に従って５０μMのＡＴＰ濃度で測定した。しかしながら、ホスホセルロースフィルターの代わりに、相当する吸引装置を備えたマルチスクリーンプレート（Millipore; ホスホセルロースＭＳ−ＰＨ、カタログ番号：MAPHNOB10）を使用した。次に、プレートをWallac MicroBetaシンチレーションカウンターで測定した。それぞれの場合において、１００μMの試験物質を使用した。
【００７３】
それぞれの物質について二重反復試験を行った。ブランク（酵素を含まない）の平均値を（試験物質を含む、および含まない酵素）の平均値から引き、阻害率（％）を計算した。ＩＣ50値の計算はソフトウェアパッケージGraFit ３.０を使用して行った。その結果を下記の表２に示す。
【００７４】
【表４】
0003843012.tif 000020