(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヤハズグサ属（Ｄｉｃｔｙｏｐｔｅｒｉｓ），フクリンアミジ属（Ｄｉｌｏｐｈｕｓ），カイメンソウ属（Ｃｅｒａｔｏｄｉｃｔｙｏｎ），ガラガラ属（Ｇａｌａｘａｕｒａ）から選択される１種又は２種以上の海藻の抽出物を含有することを特徴とする線維芽細胞賦活剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定の海藻抽出物を含有してなる、真皮線維芽細胞の代謝を活性化する線維芽細胞賦活剤、及びこれを含有して成る、加齢や紫外線などの種々のストレスによるしわ，シミの発生、皮膚弾性の低下といった皮膚老化症状の防止或いは改善に有効で、抗炎症作用，創傷治癒促進作用をも有する皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加齢や紫外線等外来ストレスにより生じるしわ，シミの発生、皮膚弾性の低下といった皮膚の老化症状には、皮膚真皮の線維芽細胞の機能低下やマトリックス線維の減少又は分解が重要な要因となっている。従って、皮膚の老化防止，改善作用を有する皮膚外用剤を得るため、線維芽細胞の賦活或いは増殖促進作用を有する成分の検索と配合が試みられている。
【０００３】
例えば、ビワ抽出物（特公平５−１７２０６号公報），α−ヒドロキシ酢酸（特開平５−１１２４２２号公報），α−ヒドロキシ酸のステロールエステル（特開平８−１０４６３２号公報），6-ベンジルアミノプリン（特開平７−２３３０３７号公報），特定のリボヌクレアーゼ（特開平７−３０９７７８号公報），L-リシル-L-グリシル-L-ヒスチジン（特開平７−３１６１９２号公報），乳汁由来線維芽細胞増殖因子（特開平８−１１９８６７号公報），酸化型コエンザイムＡ（特開平８−１７５９６１号公報）等が開示されている。
【０００４】
しかしながら、上記した真皮線維芽細胞賦活効果を有する成分等の中には、作用効果が不十分であったり、安定性が悪かったりして、皮膚外用剤基剤中に含有させた場合、有効な効果を得るにはかなりの量を含有させなければならないものも存在していた。また、好ましくない副作用や刺激性などを有していたり、製剤安定性に悪影響を及ぼすものや、臭いや色の点で外用剤に配合しにくいもの、一定の作用，品質を維持することの困難なものも多かった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明においては、真皮線維芽細胞の代謝活性を向上させる細胞賦活作用に優れる新規成分を探求し、それを皮膚外用剤に含有させることにより、紫外線などの外来ストレスにより生じる皮膚の傷害や老化を有効に防止或いは改善する作用に優れる皮膚外用剤を得ることを目的とした。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記の課題を解決するため、本発明者は真皮線維芽細胞の代謝活性促進効果を指標として、有効な活性化作用を有する物質のスクリーニングを行った。その結果、ヤハズグサ属（Dictyopteris），ホンダワラ属（Sargassum），フクリンアミジ属（Dilophus），フクロノリ属（Colpomenia），コンブ属（Laminaria），カイメンソウ属（Ceratodictyon），カギケノリ属（Asparagopsis），イトグサ属（Polysiphonia），ヤナギノリ属（Chondria），ソゾ属（Laurencia），ガラガラ属（Galaxaura）から選択される１種又は２種以上の海藻の抽出物に、高い真皮線維芽細胞の代謝促進効果を見いだした。これらの海藻抽出物においては、皮膚刺激性，接触感作性といった皮膚への悪影響もなく、また皮膚外用剤に配合したときも、真皮線維芽細胞賦活効果の不活化は起こらずに、品質も安定していた。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられるヤハズグサ属（Dictyopteris）の海藻は、褐藻類アミジグサ目アミジグサ科の藻類の一種である。ヤハズグサ属の海藻としては、ヤハズグサ（Dictyopteris latiuscula），シワヤハズ（Dictyopteris undulata），ヘラヤハズ（Dictyopteris prolifera），スジヤハズ（Dictyopteris plagiogramma），ヒメヤハズ（Dictyopteris repens），エゾヤハズ（Dictyopteris divaricata），ウラボシヤハズ（Dictyopteris polypodioides）等が例示される。これらのヤハズグサ属藻類の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、ウラボシヤハズ（Dictyopteris polypodioides）の抽出物が好ましく用いられる。
【０００８】
本発明で用いられるホンダワラ属（Sargassum）の海藻は、褐藻類ヒバマタ目ホンダワラ科の藻類の一種である。ホンダワラ（Sargassum fulvellum）の抽出物を美白化粧料に配合することは、特開平１−２２４３０８号公報、及び特開平２−１２４８１０号公報にてすでに開示されている。しかしながら、ホンダワラ属の海藻抽出物が真皮線維芽細胞賦活作用を有すること、及びこの抽出物を含有する皮膚外用剤が老化防止作用を発揮することは、知られていない。
【０００９】
ホンダワラ属（Sargassum）の海藻としては、ホンダワラ（Sargassum fulvellum），エンドウモク（Sargassum yendoi），マメタワラ（Sargassum piluriferum）,ヤツマタモク（Sargassum patens），アカモク（Sargassum horneri），ノコギリモク（Sargassum serratifolium），オオバノコギリモク（Sargassum giganteifolium），ヨレモク（Sargassum tortile），ヤナギモク（オオバモク：Sargassum ringgoldianum），ネジモク（Sargassum sagamianum），ハハキモク（Sargassum kjellmanianum），ウミトラノオ（Sargassum thunbergii），フシスジモク（Sargassum confusum），イソモク（Sargassum hemiphyllum），ナラサモ（Sargassum nigrifolium），トゲモク（Sargassum micracanthum），タマナシモク（Sargassum nipponicum），ジンメソウ（Sargassum vulgare），フタエモク（ヒイラギモク：Sargassum duplicatum），エゾノネジモク（Sargassum yezoense）等が例示される。これらのホンダワラ属藻類の中でも真皮線維芽細胞賦活作用の点から、エンドウモク（Sargassum yendoi），エゾノネジモク（Sargassum yezoense），及びヤツマタモク（Sargassum patens）から選択される１種又は２種以上の抽出物を用いることが好ましい。
【００１０】
本発明で用いられるフクリンアミジ属（Dilophus）の海藻は、褐藻類アミジグサ目アミジグサ科の藻類の一種である。フクリンアミジ属の海藻としては、フクリンアミジ（Dilophus okamurai，Dilophus marginata）が例示される。
【００１１】
本発明で用いられるフクロノリ属（Colpomenia）の海藻は、褐藻類カヤモノリ目カヤモノリ科の藻類の一種である。フクロノリ属の海藻としては、フクロノリ（Colpomenia sinuosa），ワタモ（Colpomenia bullosa）が例示される。これらの海藻の中でも真皮線維芽細胞賦活作用の点から、フクロノリ（Colpomenia sinuosa）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１２】
本発明で用いられるコンブ属（Laminaria）の海藻は、褐藻類コンブ目コンブ科の藻類の一種である。コンブ属の海藻としては、マコンブ（Laminaria japonica），ホソメコンブ（Laminaria religiosa），ミツイシコンブ（Laminaria angusta），チジミコンブ（Laminaria cichorioides），ヒメコンブ（Laminaria longipes）等が例示される。これらのコンブ属藻類の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、ホソメコンブ（Laminaria religiosa）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１３】
本発明で用いられるカイメンソウ属（Ceratodictyon）の海藻は、紅藻類スギノリ目オゴノリ科の藻類の一種であり、カイメンソウ（Ceratodictyon spongiosum）が例示される。
【００１４】
本発明で用いられるカギケノリ属（Asparagopsis）の海藻は、紅藻類カギケノリ目カギケノリ科の藻類の一種であり、カギケノリ（Asparagopsis taxiformis），カギノリ（Asparagopsis hamifera）等が例示される。これらの中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、カギケノリ（Asparagopsis taxiformis）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１５】
本発明で用いられるイトグサ属（Polysiphonia）の海藻は、紅藻類イギス目フジマツモ科の藻類の一種である。イトグサ属の海藻としては、モロイトグサ（Polysiphonia morrowii），ショウジョウケノリ（Polysiphonia urceolata），ムツイトグサ（Polysiphonia senticulosa），キブリイトグサ（Polysiphonia japonica），クロイトグサ（Polysiphonia forcipata），フトイトグサ（Polysiphonia crassa）等が例示される。これらのイトグサ属の海藻の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、モロイトグサ（Polysiphonia morrowii）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１６】
本発明で用いられるヤナギノリ属（Chondria）の海藻は、紅藻類イギス目フジマツモ科の藻類の一種である。ヤナギノリ属の海藻としては、ユナ（Chondria crassicaulis），ヤナギノリ（Chondria dasyphylla），アカユナ（Chondria atropurpurea），モツレユナ（Chondria intricata），ハナヤナギ（Chondria armata），ベニヤナギノリ（Chondria ryukyuensis）等が例示される。これらのヤナギノリ属の海藻の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、ユナ（Chondria crassicaulis）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１７】
本発明で用いられるソゾ属（Laurencia）の海藻は、紅藻類イギス目フジマツモ科の藻類の一種である。ソゾ属の海藻としては、ソゾsp.（Laurencia sp.），クロソゾ（Laurencia intermedia），ミツデソゾ（Laurencia okamurai），ソゾノハナ（Laurencia grevilleana），オオソゾ（Laurencia glandulifera），ハネソゾ（Laurencia pinnata），コブソゾ（Laurencia undulata）等が例示される。これらのソゾ属藻類の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、コブソゾ（Laurencia undulata）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１８】
本発明で用いられるガラガラ属（Galaxaura）の海藻は、紅藻類カギケノリ目ガラガラ科の藻類の一種である。ガラガラ属の海藻としては、ガラガラ（Galaxaura fastigiata），ヒラガラガラ（Galaxaura falcata），ジュズガラガラ（Galaxaura obtusata）等が例示される。これらの海藻の中でも、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、ヒラガラガラ（Galaxaura falcata）の抽出物を用いることが好ましい。
【００１９】
これらの海藻の抽出物を得る抽出溶媒としては、水、エタノール，メタノール，イソプロパノール，イソブタノール，n-ヘキサノール，メチルアミルアルコール，2-エチルブタノール，n-オクチルアルコールなどのアルコール類、グリセリン，エチレングリコール，エチレングリコールモノメチルエーテル，エチレングリコールモノエチルエーテル，プロピレングリコール，プロピレングリコールモノメチルエーテル，プロピレングリコールモノエチルエーテル，トリエチレングリコール，1,3-ブチレングリコール，ヘキシレングリコール等の多価アルコール又はその誘導体、アセトン，メチルエチルケトン，メチルイソブチルケトン，メチル-n-プロピルケトンなどのケトン類、酢酸エチル，酢酸イソプロピルなどのエステル類、エチルエーテル，イソプロピルエーテル，n-ブチルエーテル等のエーテル類などの極性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒が好適に使用でき、また、リン酸緩衝生理食塩水を用いることができるが、特に限定はされない。或いは、石油エーテル，n-ヘキサン，n-ペンタン，n-ブタン，n-オクタン，シクロヘキサン等の炭化水素類、四塩化炭素，クロロホルム，ジクロロメタン，トリクロロエチレン，ベンゼン，トルエンなどの低極性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒も好適に使用することができる。
【００２０】
本発明の目的には、真皮線維芽細胞賦活作用の点から、極性溶媒が好ましく、さらには、エタノール，メタノール，1,3-ブチレングリコール，水から選択される１種又は２種以上の混合溶媒若しくはリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）が好ましい。
【００２１】
本発明で用いられる藻類は、水中から採取したものをそのまま、若しくは乾燥させたものを用いることができる。また、使用部位も特に限定されず、藻類の全体を用いても、体部，枝部，根部など一部のみを用いてもよい。
【００２２】
さらに、抽出方法としては、室温，冷却又は加温した状態で含浸させて抽出する方法、水蒸気蒸留等の蒸留法を用いて抽出する方法、生の藻類から圧搾して抽出物を得る圧搾法等が例示され、これらの方法を単独で又は２種以上を組み合わせて抽出を行う。
【００２３】
抽出の際の植物と溶媒との比率は特に限定されるものではないが、植物１に対して溶媒０．５〜１０００重量倍、特に抽出操作、効率の点で０．５〜１００重量倍が好ましい。また、抽出温度は、常圧下で室温から溶剤の沸点以下の範囲とするのが便利であり、抽出時間は抽出温度などによって異なるが、２時間〜２週間の範囲とするのが好ましい。
【００２４】
また、このようにして得られた海藻抽出物は、抽出物をそのまま用いることもできるが、線維芽細胞賦活作用を失わない範囲内で脱臭，脱色，濃縮等の精製操作を加えたり、さらにはカラムクロマトグラフィー等を用いて分画物として用いてもよい。これらの抽出物や精製物、分画物は、これらから溶媒を除去することによって乾燥物とすることもでき、さらにアルコールなどの溶媒に可溶化した形態、或いは乳剤の形態で線維芽細胞賦活剤として提供することができる。
【００２５】
これらの線維芽細胞賦活剤の皮膚外用剤への配合量は、その効果や添加した際の香り，色調の点から考え、０．００１〜２０重量％の濃度範囲とすることが望ましい。配合量が０．００１重量％未満であると、十分な老化防止効果が得られないが、真皮線維芽細胞賦活作用がかなり強いため、あまり多量に配合する必要もなく、２０重量％を超えると皮膚外用剤の安定性等に影響を及ぼすこともある。
【００２６】
本発明においては、上記の真皮線維芽細胞賦活剤を含有させて皮膚外用剤を提供し得るが、皮膚外用剤としては、ローション，乳剤，クリーム，軟膏等の形態をとることができる。またさらに、柔軟性化粧水，収れん性化粧水，洗浄用化粧水等の化粧水類、エモリエントクリーム，モイスチュアクリーム，マッサージクリーム，クレンジングクリーム，メイクアップクリーム等のクリーム類、エモリエント乳液，モイスチュア乳液，ナリシング乳液，クレンジング乳液等の乳液類、ゼリー状パック，ピールオフパック，洗い流しパック，粉末パック等のパック類、美容液、及び洗顔料といった種々の製剤形態の老化防止用化粧料としても提供することができる。
【００２７】
本発明においてはさらに、他の細胞賦活剤や美白成分，保湿剤，抗炎症剤，紫外線吸収剤等、他の有効成分を併用することもでき、日焼け止め化粧料、皮膚保護用化粧料、美白剤等の薬用化粧料或いは医薬部外品等として提供することもできる。
【００２８】
【実施例】
さらに本発明の特徴について、実施例により詳細に説明する。
【００２９】
［実施例１〜実施例１３］線維芽細胞賦活剤
表１に示した海藻及び溶媒を用いて、線維芽細胞賦活剤を調製し、実施例１〜実施例１３とした。抽出方法は、海から採取した海藻を、水洗した後細切し、等重量の溶媒に分散後ブレンダーミルで攪拌し、遠心分離を行い上清を線維芽細胞賦活剤とした。なお抽出溶媒として用いたリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）は、塩化ナトリウム８．０ｇ，塩化カリウム０．２ｇ，リン酸水素二ナトリウム１．１５ｇ，リン酸二水素カリウム０．２ｇ，塩化カルシウム０．１ｇ，塩化マグネシウム・六水和物０．１ｇを蒸留水に溶解して１０００ｍｌとすることにより調製した。
【００３０】
【表１】
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【００３１】
［線維芽細胞代謝活性化作用］
ヒト由来線維芽細胞を１ウェルあたり２．０×１０4個となるように９６穴マイクロプレートに播種し、２４時間後に実施例１〜１３に示した線維芽細胞賦活剤を含有する１．０容量％牛胎仔血清添加ダルベッコ最小必須培地にて、３７℃で２４時間培養した。次いで2-(4,5-ジメチル-2-チアゾリル)-3,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を２０μｇ／ｍｌ含有する前記培地に交換して３７℃で２４時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを５６０ｎｍにおける吸光度により測定した。なお、１．０容量％牛胎仔血清添加ダルベッコ最小必須培地のみで培養した系を対照とし、５．０容量％牛胎仔血清添加ダルベッコ最小必須培地で培養した系を陽性対照とした。結果は対照における吸光度を１００．０％として表した活性化指数により表２に示した。
【００３２】
【表２】
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【００３３】
その結果、表２に示したとおり、特定の海藻抽出物を添加して線維芽細胞を培養することにより、活性化指数の上昇が認められ、有意な線維芽細胞代謝活性化が認められていた。特に、実施例１のウラボシヤハズ抽出物，実施例３のエゾノネジモク抽出物，実施例５のフクリンアミジ抽出物，実施例１１のユナ抽出物，実施例１２のコブソゾ抽出物においては、１容量％以下のきわめて低濃度で有意な活性化指数の上昇が認められ、高い線維芽細胞賦活作用を有することが示された。
【００３４】
［実施例１４〜２６］Ｏ／Ｗ乳化型美容液
表３に示した線維芽細胞賦活剤を用いて、下記の処方によりＯ／Ｗ乳化型美容液を調製した。
（処方）
(１)スクワラン                                   ５．０(重量％)
(２)白色ワセリン                                 ２．０
(３)ミツロウ                                     ０．５
(４)ソルビタンセスキオレエート                   ０．８
(５)ポリオキシエチレンオレイルエーテル(20EO)     １．２
(６)パラオキシ安息香酸メチル                     ０．１
(７)プロピレングリコール                         ５．０
(８)精製水                                     ５９．１
(９)カルボキシビニルポリマー1.0重量％水溶液    ２０．０
(10)水酸化カリウム                               ０．１
(11)エタノール                                   ５．０
(12)線維芽細胞賦活剤                             １．０
(13)香料                                         ０．２
製法：(１)〜(５)の油相成分を混合し７５℃に加熱して溶解，均一化する。一方(６)〜(８)の水相成分を混合，溶解して７５℃に加熱し、油相成分を添加して予備乳化する。(９)を添加した後ホモミキサーにて均一に乳化し、(10)を加えてｐＨを調整する。冷却後４０℃にて(11)〜(13)を添加，混合，均一化する。
【００３５】
【表３】
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【００３６】
上記実施例１４〜実施例２６を用いて、紫外線によるしわの発生に対する防止効果を評価した。なお、線維芽細胞賦活剤を精製水に代替したものを比較例１とした。しわ発生防止効果は、ヘアレスマウス５匹を１群とし、各群について実施例及び比較例をそれぞれ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／ｃｍ2／週の長波長紫外線（ＵＶＡ）を５０週間照射し、ヘアレスマウスにおけるしわの発生状況を観察し、表４に示す判定基準に従って点数化して行った。この際、精製水のみを塗布した群を対照とした。結果は各群の平均値を算出し、ＵＶＡ照射日数との関係により表５に示した。
【００３７】
【表４】
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【００３８】
【表５】
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【００３９】
表５に示されるように、対照群においては、ＵＶＡ照射日数が４０週を越える頃には形成されたしわの深さが中程度にまで達し、５０週後には深いしわの発生が認められていた。これに対し、本発明の実施例塗布群では、いずれにおいても５０週後に微小ないし軽微なしわが認められた程度で、しわの発生は顕著に抑制されていた。一方比較例塗布群では、有意なしわの発生抑制或いは軽減は認められなかった。
【００４０】
続いて、本発明の実施例１４〜実施例２６及び比較例１について、抗炎症作用及び創傷治癒促進効果を評価した。人工的に炎症又は創傷を形成した１群５匹のマウスを用い、各群に実施例及び比較例をそれぞれ０．５ｇずつ１日２回７日間塗布し、７日目に炎症部位及び創傷部位の状態を観察した。抗炎症作用については「有効」，「やや有効」，「無効」、創傷治癒促進効果については「完全治癒」，「ほぼ治癒」，「治癒不完全」の３段階でそれぞれ評価し、各評価を得たマウスの数にて表６に示した。
【００４１】
【表６】
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【００４２】
表６より明らかなように、抗炎症作用については、本発明の実施例塗布群ではいずれにおいても無効と評価されたマウスは見られず、３例以上のマウスにおいて有効な抗炎症作用が認められていた。また創傷治癒促進効果についても、本発明の実施例塗布群では創傷治癒の不完全なマウスはいずれにおいても認められておらず、２例以上のマウスで完全な治癒を認めていた。これに対し比較例１塗布群では、やや有効な抗炎症作用の認められたマウスが１例見られたが、残り４例では炎症の改善は全く認められなかった。また比較例１塗布群すべてにおいて、創傷治癒は不完全であった。
【００４３】
次に本発明の実施例１４〜実施例２６及び比較例１について、６ヶ月間の実使用試験を行った。パネラーとして、顕著なしわの発生等の皮膚症状を有する４０歳〜６０歳代の女性を用い、１群２０名とした。使用試験は、各群に実施例及び比較例のそれぞれをブラインドにて使用させて行った。使用試験前および使用試験終了後の皮膚の状態を観察し、しわの改善状況について、「改善」，「やや改善」，「変化なし」の３段階にて評価した。なお、しわの程度については写真撮影及びレプリカにより評価した。結果は、各評価を得たパネラー数にて表７に示した。
【００４４】
【表７】
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【００４５】
表７に示されるように、しわの改善状況については、本発明の実施例使用群ではすべてにおいて改善傾向が認められていた。特に、実施例１４，実施例１６，実施例１８，実施例２４，実施例２５使用群では、７５％以上のパネラーで明確な改善を認めていた。これに対し、比較例使用群では、明確な改善を認めたパネラーは見られず、７０％以上のパネラーで症状の改善を認めなかった。
【００４６】
なお、本発明の実施例１４〜２６については、上記使用試験期間中に含有成分の析出，分離，凝集，変臭，変色といった状態変化は全く見られなかった。また、各実施例使用群において、皮膚刺激性反応や皮膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。
【００４７】
続いて本発明の他の実施例の処方を示す。
［実施例２７］皮膚用ローション
(１)エタノール                                        １０．０(重量％)
(２)ヒドロキシエチルセルロース                          １．０
(３)線維芽細胞賦活剤(実施例１)                          ０．５
(４)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(５)精製水                                            ８８．４
製法：(１)〜(５)を混合し均一とする。
【００４８】
［実施例２８］皮膚用乳剤
(１)ステアリン酸                                        ０．２(重量％)
(２)セタノール                                          １．５
(３)ワセリン                                            ３．０
(４)流動パラフィン                                      ７．０
(５)ポリオキシエチレン(10EO)モノオレイン酸エステル      １．５
(６)酢酸トコフェロール                                  ５．０
(７)グリセリン                                          ５．０
(８)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(９)トリエタノールアミン                                １．０
(10)精製水                                            ７４．７
(11)線維芽細胞賦活剤(実施例２)                          １．０
製法：(１)〜(６)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解し、７０℃に保つ。一方、(７)〜(10)の水相成分を混合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に前記油相成分を攪拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。
【００４９】
［実施例２９］皮膚用ゲル剤
(１)精製水                                            ８７．８(重量％)
(２)カルボキシビニルポリマー                            ０．５
(３)ジプロピレングリコール                            １０．０
(４)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(５)水酸化カリウム                                      ０．１
(６)線維芽細胞賦活剤(実施例３)                          １．５
製法：(１)に(２)を均一に溶解した後、(３)に(４)を溶解して添加し、次いで(５)を加えて増粘させ、(６)を添加する。
【００５０】
0003825882.tif 000009
製法：(１)〜(７)の油相成分を混合，溶解して７５℃に加熱する。一方、(８)〜(10)の水相成分を混合，溶解して７５℃に加熱する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(11)，(12)を添加，混合する。
【００５１】
［実施例３１］水中油型乳剤性軟膏
(１)白色ワセリン                                      ２５．０(重量％)
(２)ステアリルアルコール                              ２５．０
(３)グリセリン                                        １２．０
(４)ラウリル硫酸ナトリウム                              １．０
(５)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(６)精製水                                            ３５．４
(７)線維芽細胞賦活剤(実施例６)                          １．５
製法：(１)〜(４)の油相成分を混合，溶解して均一とし、７５℃に加熱する。一方、(５)を(６)に溶解して７５℃に加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後４０℃にて(７)を添加，混合する。
【００５２】
［実施例３１］化粧水
(１)エタノール                                        １０．０(重量％)
(２)1,3-ブチレングリコール                              ５．０
(３)線維芽細胞賦活剤(実施例１２)                        ０．２
(４)香料                                                ０．１
(５)精製水                                            ８４．７
製法：(１)〜(４)を順次(５)に添加して均一に混合，溶解する。
【００５３】
［実施例３２］エモリエントクリーム(油中水型)
(１)流動パラフィン                                    ３０．０(重量％)
(２)マイクロクリスタリンワックス                        ２．０
(３)ワセリン                                            ５．０
(４)ジグリセリルオレイン酸エステル                      ５．０
(５)L-グルタミン酸ナトリウム                            １．６
(６)L-セリン                                            ０．４
(７)プロピレングリコール                                ３．０
(８)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(９)精製水                                            ５２．３
(10)香料                                                ０．１
(11)線維芽細胞賦活剤(実施例７)                          ０．５
製法：(５)，(６)を(９)の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した(４)に攪拌しながら徐々に添加する。これをあらかじめ混合し７０℃に加熱溶解した(１)〜(３)に均一に分散し、これに(７)，(８)を(９)の残部に溶解して７０℃に加熱したものを攪拌しながら添加し、ホモミキサーにて乳化する。冷却後、４０℃にて(10)，(11)を添加，混合する。
【００５４】
［実施例３３］メイクアップベースクリーム
(１)ステアリン酸                                      １２．０(重量％)
(２)セタノール                                          ２．０
(３)グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル            ２．５
(４)自己乳化型グリセリルモノステアリン酸エステル        ２．０
(５)プロピレングリコール                              １０．０
(６)水酸化カリウム                                      ０．３
(７)精製水                                            ６８．６
(８)酸化チタン                                          １．０
(９)ベンガラ                                            ０．１
(10)黄酸化鉄                                            ０．４
(11)香料                                                ０．１
(12)線維芽細胞賦活剤(実施例８)                          ０．５
(13)線維芽細胞賦活剤(実施例９)                          ０．５
製法：(１)〜(４)の油相成分を混合し、７５℃に加熱して均一とする。一方(５)〜(７)の水相成分を混合し、７５℃に加熱，溶解して均一とし、これに(８)〜(10)の顔料を添加し、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を添加し、ホモミキサーにて乳化した後冷却し、４０℃にて(11)〜(13)を添加，混合する。
【００５５】
［実施例３４］乳液状ファンデーション
(１)ステアリン酸                                        ２．０(重量％)
(２)スクワラン                                          ５．０
(３)ミリスチン酸オクチルドデシル                        ５．０
(４)セタノール                                          １．０
(５)デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル          ９．０
(６)1,3-ブチレングリコール                              ６．０
(７)水酸化カリウム                                      ０．１
(８)パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１
(９)精製水                                            ５３．３
(10)酸化チタン                                          ９．０
(11)タルク                                              ７．４
(12)ベンガラ                                            ０．５
(13)黄酸化鉄                                            １．１
(14)黒酸化鉄                                            ０．１
(15)香料                                                ０．１
(16)線維芽細胞賦活剤(実施例１０)                        ０．３
製法：(１)〜(５)の油相成分を混合し、７５℃に加熱して均一とする。一方(６)〜(９)の水相成分を混合し、７５℃に加熱，溶解して均一とし、これに(10)〜(14)の顔料を添加しホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を添加し、ホモミキサーにて均一に乳化した後冷却し、４０℃にて(15)，(16)を添加，混合する。
【００５６】
0003825882.tif 000010
製法：(１)〜(６)の油相成分を混合，溶解して７５℃に加熱する。一方、(７)〜(９)の水相成分を混合，溶解して７５℃に加熱する。ついで、この水相成分に油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化して冷却し、４０℃にて(10)を添加，混合する。
【００５７】
【発明の効果】
以上詳述したように、  ヤハズグサ属（Dictyopteris），ホンダワラ属（Sargassum），フクリンアミジ属（Dilophus），フクロノリ属（Colpomenia），コンブ属（Laminaria），カイメンソウ属（Ceratodictyon），カギケノリ属（Asparagopsis），イトグサ属（Polysiphonia），ヤナギノリ属（Chondria），ソゾ属（Laurencia），ガラガラ属（Galaxaura）から選択される１種又は２種以上の海藻の抽出物を含有する本発明の線維芽細胞賦活剤は、真皮線維芽細胞の代謝活性を活性化する線維芽細胞賦活作用を有し、さらにこれを線維芽細胞賦活剤として含有する皮膚外用剤は、加齢や紫外線などの種々のストレスによるしわ，シミの発生、皮膚弾性の低下といった皮膚老化症状の防止或いは改善に有効で、抗炎症作用，創傷治癒促進作用をも有し、さらに安定性，安全性も良好である。