(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）；
【化１】
0003759207.tif 000016
〔式中、Ｒ1 は水素又は炭素数１〜６のアルキルを表し、Ｒ2 およびＲ3 はそれぞれ独立して、水素、置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル、又は置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアシルを表し、Ｒ4 は置換又は非置換の炭素数１〜１２のアルキルを表し、Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 、Ｘ4 およびＸ5 はそれぞれ独立して、水素又はハロゲンを表す。〕で表される化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項２】
請求項１記載の化合物を有効成分とすることを特徴とする医薬組成物。
【請求項３】
請求項１記載の化合物を有効成分とすることを特徴とする抗菌剤。
【請求項４】
請求項１記載の化合物の生産能を有するストレプトマイセスエスピー．ＰＡ−４８４２４。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、下記式（Ｉ）；
【０００２】
【化２】
0003759207.tif 000002
【０００３】
〔式中、Ｒ1 は水素又は炭素数１〜６のアルキルを表し、Ｒ2 およびＲ3 はそれぞれ独立して、水素、置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル、又は置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアシルを表し、Ｒ4 は置換又は非置換の炭素数１〜１２のアルキルを表し、Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 、Ｘ4 およびＸ5 はそれぞれ独立して、水素又はハロゲンを表す。〕で表される化合物及びその製薬上許容される塩に関する。
【０００４】
式（Ｉ）で表される化合物は、文献未記載の新規化合物であり、従来公知の抗菌剤に比較して広範な抗菌スペクトルを有しており、抗菌剤として有用である。また、グルタミン酸輸送体（以下「グルタミン酸トランスポーター」という）の活性を阻害する作用を有しており、従って、上記式（Ｉ）で表される化合物は、グルタミン酸取り込み阻害剤としても有用である。
【０００５】
【従来の技術】
放線菌の一種が産生する物質として、２位ベンジル置換ピロールを基本骨格として有する各種誘導体及びその類縁化合物が取得され、これらが各種の抗菌活性を有することが知られていた。例えば、ピロロマイシンＢ（Ｐｙｒｒｏｌｏｍｙｃｉｎ  Ｂ）、ピロロマイシンＣ（Ｐｙｒｒｏｌｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、ピロロマイシンＤ（Ｐｙｒｒｏｌｏｍｙｃｉｎ  Ｄ）、ピロロマイシンＥ（Ｐｙｒｒｏｌｏｍｙｃｉｎ  Ｅ）等は、日本特許第８２５６４９２号明細書等で公知であり、ピオルテオリン（Ｐｙｏｌｕｔｅｏｒｉｎ）は、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）８０巻、４７４９頁（１９５８）等で公知になっている。
【０００６】
しかしながら、これら公知の抗菌剤よりも更に広範な抗菌スペクトルを有する優れた抗菌剤の開発が強く求められていた。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記状況に鑑み、広範な抗菌スペクトルを有する抗菌剤として使用することができ、かつ、グルタミン酸取り込み阻害剤としても有用であり、それゆえにシナプス伝達の長期増強活性をも有している化合物を提供することを目的とするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、放線菌の一種であるストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４が産生する物質が上記目的を達成するために有用であることをつきとめ、本発明を完成した。
本発明の要旨は、上記式（Ｉ）で表される新規化合物そのものにある。また、本発明の要旨は、この新規化合物を有効成分とする医薬組成物さらに詳しくは抗菌剤及びグルタミン酸取り込み阻害剤そのもの、この新規化合物の生産能を有するストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４、及び、この新規化合物の製造方法にもある。
【０００９】
本発明に係る上記医薬組成物は、優れた抗菌剤としてヒトを含む動物に適用することができるものである。本発明に係る抗菌剤は、グラム陰性菌、グラム陽性菌を含む広範囲の抗菌スペクトルを有しており、特にグラム陽性菌等に有効に作用することができる。
【００１０】
また、上記医薬組成物は、グルタミン酸取り込み阻害剤として活用することができる。グルタミン酸取り込み阻害活性は、神経細胞膜に存在するグルタミン酸トランスポーターに対する阻害に基づくものであり、シナプシスにおける神経伝達物質であるグルタミン酸の取り込みを抑制する。これによりグルタミン酸の不活性化を抑制し、グルタミン酸受容体の賦活化を持続するものである。このため、学習・記憶の増強作用等を発揮することが期待できる。
後に詳述するように、本発明の化合物は、毒性が極めて弱いので、これら医薬として適用するのに好適である。
【００１１】
以下に、本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物について詳述する。
上記式中、Ｒ1 は水素又は炭素数１〜６のアルキルを表し、Ｒ2 およびＲ3 はそれぞれ独立して、水素、置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル、又は置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアシルを表し、Ｒ4 は置換又は非置換の炭素数１〜１２のアルキルを表し、Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 、Ｘ4 およびＸ5 はそれぞれ独立して、水素又はハロゲンを表す。
【００１２】
上記「置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖状又は分枝鎖状のアルキルであって、置換又は非置換のものを意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、イソペンチル、ヘキシル、及び、これらの置換体等を挙げることができ、上記置換体の置換基としては、例えば、メルカプト、スルフィノ、スルフォ、アミノ、イミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン等を挙げることができる。上記「置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル」のうち、メチルが好ましい。
【００１３】
上記「置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアシル」としては、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、マロニル、アクリロイル、イソブチリル、ブチリル、バレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、アジポイル、グルタリル、メトキサリル、及び、これらの置換体等を挙げることができ、上記置換体の置換基としては、例えば、メルカプト、スルフィノ、スルフォ、アミノ、イミノ、ヒドロキシ、ハロゲン等を挙げることができる。上記「置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアシル」のうち、アセチルが好ましい。
上記「置換又は非置換の炭素数１〜１２のアルキル」とは、炭素数１〜１２の直鎖状又は分枝鎖状のアルキルであって、置換又は非置換のものを意味し、例えば、上に例示した「置換若しくは非置換の炭素数１〜６のアルキル」に加えて、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、及び、これらの置換体等を挙げることができ、上記置換体の置換基としては、例えば、メルカプト、スルフィノ、スルフォ、アミノ、イミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン等を挙げることができる。上記「置換又は非置換の炭素数１〜１２のアルキル」のうち、ヘキシル、４−メチルペンチル、４−メチルヘキシル、５−メチルヘキシルが好ましい。
上記ハロゲンとしては、ふっ素、塩素、臭素、よう素等を挙げることができる。好ましくは、塩素又は臭素である。
【００１４】
上記式（Ｉ）で表される化合物の製薬上許容される塩としては、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸等の鉱酸の塩；ギ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマール酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸等の有機酸の塩；ナトリウム、カリウム、カルシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩等を挙げることができる。
【００１５】
本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物のうち、下記式（Ｉ−ａ）〜（Ｉ−ｅ）で表される化合物、及び、それらのアルキル化物、アシル化物、ハロゲン化物、水素置換体等の誘導体が、抗菌活性、グルタミン酸取り込み阻害活性等の生物活性に優れているので好ましい。
【００１６】
【化３】
0003759207.tif 000003
【００１７】
上記Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄ、Ｉ−ｅ等の化合物は、放線菌の一種であるストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４を用いて産生させることができる。
上記ストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４は、文献未記載の新規な放線菌であり、本発明者らによってはじめて記載されるものである。本菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１４９４５号として寄託されている（受託日：平成７年５月２６日）。以下、上記ストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４の菌学的性質を詳述する。
【００１８】
１．形態学的性質
イースト・麦芽寒天培地、オートミール寒天培地、スターチ・無機塩寒天培地及びグリセリン・アスパラギン寒天培地のそれぞれの培地上で培養した場合、これらの全ての培地で良好に生育し、豊富に気菌糸を形成する。気菌糸の分枝様式は、単純分枝であって、車軸状分枝は観察されない。胞子は気菌糸上に着生し、鎖状に連なって直状又は波状を呈する。１胞子鎖あたりの胞子数は１０〜５０個である。電子顕微鏡下での胞子の表面構造は平滑である。菌核、胞子のう、基生菌糸の分断は認められない。
２．培養的性質
上述の各培地上における培養的諸性状を下記の表１に示す。
【００１９】
【表１】
0003759207.tif 000004
【００２０】
３．生理学的性質
メラニン様色素は産生しない。
生育温度は１４〜３８℃であり、至適生育温度は２２〜２８℃である。
至適ｐＨは、ｐＨ５〜９である。
炭素源としてＤ−グルコース、Ｄ−フルクトース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−マニトールを利用するが、Ｌ−アラビノース、キシロース、スクロース、イノシトール、ラフィノースは利用できない。
４．化学分類学的性質
菌体中のジアミノピメリン酸はＬＬ型である。
イソプレノイド・キノンの型はＭＫ−９（Ｈ6 ，Ｈ8 ）である。
【００２１】
上記諸性状から、本菌株はストレプトマイセス属に属する株であると判断することができる。ストレプトマイセス属の既知種の諸性状と比較したところ、炭素源の利用能において一致する種は見当たらないことから、本菌株を文献未記載の新規な放線菌であると判断した。
【００２２】
本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物は、このものの生産能を有する微生物を培地に培養し、得られた培養物から式（Ｉ）で表される化合物の粗抽出物を分離した後、精製することによって製造することができる。また、本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物が、このようにして製造された化合物の誘導体に相当する場合には、必要に応じて、上記精製の後、化学修飾することにより製造することができる。
【００２３】
上記微生物としては式（Ｉ）で表される化合物の生産能を有するものであれば特に限定されず、例えば、上記ストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４株、その変異株等を挙げることができる。
【００２４】
上記培養は、本発明化合物の生産能を有する微生物を公知の常法に従って行なうことができる。使用する培地としては、炭素源、窒素源、無機物及びその他栄養素を適当量含有するものであれば合成培地または天然培地のいずれでも好適に用いることができる。例えば、炭素源としてグルコース、マルトース、フルクトース、デンプン等の糖類、グリセロール、マンニトール、エタノール等のアルコール類、グリシン、アラニン、アスパラギン等のアミノ酸類、グルコン酸、ピルビン酸、酢酸等の脂肪酸類等一般的な炭素源より微生物の資化性を考慮して１種または２種以上を適宜選択して用いればよい。窒素源としては、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、各種アミノ酸等の有機窒素化合物またはアンモニウム塩、硝酸塩、無機窒素化合物等より微生物の資化性を考慮して１種または２種以上を適宜選択して用いればよい。さらに、リン酸マグネシウム、炭酸カルシウム、亜鉛、銅、鉄等の金属塩類や、消泡剤、例えばポリプロピレングリコール等は必要に応じて添加することができる。
【００２５】
培養温度は微生物が発育し、本発明化合物を生産する範囲で適宜変更できるが、特に好ましいのは２２〜２８℃である。ｐＨは６〜８付近が好ましく、培養時間は普通７２〜９６時間程度であって、本発明化合物が最高力価に達する時間を見計らって適当な時間に培養を終了する。培養方法は回分培養、連続培養、振盪培養、通気攪拌培養等の通常用いられる方法であれば何でも好適に用いることができるが、始めに振盪培養し、その後、ジャーファーメンター等により通気攪拌培養する方法が好ましい。
【００２６】
上記分離は、微生物工業の分野で通常用いられている方法等により行うことができ、例えば、上述の方法に従って培養した培養液から遠心分離法等により得られた培養物をアセトン、酢酸エチル等で抽出し、硫酸ナトリウムを加えて濾過して減圧濃縮する手法；培養液にアセトン等の有機溶媒を加え、吸引濾過した後、更に、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出する手法等を好適に採用することができる。
【００２７】
上記精製における処理方法は特に限定されず、例えば、上記分離工程で得られた粗抽出物をｎ−ヘキサン等で抽出した後、シリカゲル等の担体を用いるクロマトグラフィーおよび分取高速液体クロマトグラフィー等の組み合わせにより精製することができる。得られた精製物質をさらに酢酸エチル等の有機溶媒で抽出した後、減圧濃縮してｎ−ヘキサン、アセトン等の有機溶媒中で再び結晶化させる手法等により結晶を得ることができる。
【００２８】
本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物が、このようにして製造された化合物の誘導体に相当する場合には、必要に応じて、上記精製の後、化学修飾することにより製造することができる。上記化学修飾としては、メチル化等のアルキル化、アセチル化等のアシル化、ハロゲン化、接触還元等の水素置換等を挙げることができる。
上記メチル化は、公知の方法等により行うことができ、例えば、トリメチルシリルジアゾメタン処理等の手法を好適に採用することができる。
上記アセチル化は、公知の方法等により行うことができ、例えば、無水酢酸処理等の手法を好適に採用することができる。
上記接触還元は、公知の方法等により行うことができ、例えば、Ｐｄ−Ｃ等の触媒の存在下に水素添加を行う手法等を好適に採用することができる。
【００２９】
本発明の化合物又はその製薬上許容される塩は、これを有効成分として用いることにより、各種の医薬組成物とすることができる。上記医薬組成物としては、上述の抗菌活性及びグルタミン酸取り込み阻害活性に基づいて、例えば、抗菌剤、グルタミン酸取り込み阻害剤等を挙げることができる。抗菌剤は医薬、動物薬のいずれにも用いることができる。
【００３０】
本発明の化合物又はその製薬上許容される塩を医薬又は動物薬として投与する場合、そのまま又は医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体中に、例えば０．１〜９９．５％、好ましくは、０．５〜９０％含有する医薬組成物として、ヒトを含む動物に投与される。
【００３１】
上記担体としては、固形、半固形又は液状の希釈剤、充填剤、及び、その他の処方用の助剤一種以上が用いられる。本発明の化合物又はその製薬上許容される塩は、投与単位形態で投与することが望ましい。本発明の化合物又はその製薬上許容される塩は、経口的又は非経口的に安全に投与することができる。非経口の投与形態として、組織内投与等の局所投与、皮下投与、筋肉内投与、動・静脈内投与等が挙げられる。
【００３２】
経口投与は、通常の方法に従って調製した固形又は液状の用量単位、例えば、末剤、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤、舌下錠その他の剤型によって行うことができる。
必要に応じて、経口投与のための用量単位処方はマイクロカプセル化してもよい。この処方はまた被覆をしたり、高分子・ワックス等中に埋めこんだりすることにより作用時間の延長や持続放出をもたらすこともできる。
【００３３】
非経口投与は、通常の方法によって調製された液状用量単位形態、例えば溶液や懸濁液の形態の注射剤を用いることによって行うことができる。
これらの投与方法のうち、経口投与、注射による静脈内投与が好ましい。投与に際してはこれらの投与方法に適した剤型で投与されるのはもちろんである。
【００３４】
本発明の化合物の投与量は年齢、体重等の患者の状態、病気の性質と程度等を考慮した上で設定することが望ましいが、抗菌剤としてヒトへ経口的に投与する場合は、成人に対して０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ／日を１回〜数回に分けて投与すればよく、非経口的に投与する場合は、投与方法により大きく異なるが、通常０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日を１回〜数回に分けて投与すればよい。グルタミン酸取り込み阻害剤としては、経口的に投与する場合は０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｋｇ／日を１回〜数回に分けて投与すればよく、非経口的に投与する場合は、通常０．００１〜１ｍｇ／ｋｇ／日を１回〜数回に分けて投与すればよい。
【００３５】
ヒト以外の動物、例えば、ニワトリ、豚、牛等の家禽及び家畜動物並びに魚類に対しても、経口的または非経口的に投与することができる。経口投与する場合、一般的には通常使用されている担体（例えば、脱脂米糠、脱脂大豆粉、ふすま、乳糖、水等）を混合した物を投与するか、あるいはこの様にして混合物したもの、もしくは本発明化合物単独を動物飼料もしくは水と混合して投与する方法が好ましい。該動物飼料としては、動物の飼料として一般に使用されるものであればいずれでもよく、例えば、とうもろこし、ふすま、米、麦、綿実粕、マイロ、大豆粕、魚粉、脱脂米糠、油脂、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、塩化ナトリウム、ビタミン剤、硫酸マグネシウム、硫酸鉄等が挙げられ、これらの一部または全部が混合して使用される。
【００３６】
本発明化合物の飼料中の含有量は、１日あたり５０〜２０００ｐｐｍの範囲が適当である。
非経口投与する場合は、上記医薬として非経口投与する場合と同様の方法で用いることができる。
本発明化合物の投与量は、通常、経口投与の場合、１０〜４００ｍｇ／ｋｇ／日であり、非経口投与の場合、５〜２００ｍｇ／ｋｇ／日であり、これを数日間連続投与する。
【実施例】
以下に実施例、試験例及び製剤例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例、試験例及び製剤例のみに限定されるものではない。
【００３７】
実施例１  Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄの単離
（１）産生菌
産生菌としては、ストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４を使用した。
（２）発酵工程
ソルブルスターチ０．５％、グルコース０．５％、ポリペプトン（日本製薬社製）０．５％、牛肉エキス（ディフコ社製）０．５％、酵母エキス（ディフコ社製）０．２５％、塩化ナトリウム０．２５％、水道水よりなる培地８００ｍｌ（２Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ７．０に調整）を含む２Ｌ容三角フラスコにスラント培養したストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４を接種し、振幅７０ｍｍ、毎分１８０回転で、２８℃、７２時間振盪培養した。この培養液８００ｍｌを、グルコース１．０％、ソルブルスターチ３．０％、廃糖蜜２．０％、乾燥酵母１．０％、総合アミノ酸粉末Ｆ（味の素社製）１．０％、硫酸亜鉛７水塩０．００１％、りん酸第一カリウム０．００５％、消泡剤（ハイプロックスＤＰ−２０００、大日本インキ化学工業社製）０．０５％、水道水よりなる培地３５Ｌ（２Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ７．０に調整）を含む５０Ｌ容ジャーファーメンターに接種し、通気量２４．５Ｌ／分、内圧０．３５ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、攪拌回転数３００ｒｐｍ、培養温度２８℃で９６時間培養した。
【００３８】
（３）分離工程
上記工程を繰り返して得た培養液１４０Ｌを、６Ｎ塩酸でｐＨ３．５に調整し、シャープレス型遠心分離機を用いて湿菌体７ｋｇを得た。水道水３Ｌを加えた後、アセトン１２Ｌで２回抽出し、得られた抽出液を減圧濃縮し、水相５Ｌを得た。次に、酢酸エチル６Ｌで抽出した後、脱イオン水７Ｌで水洗し、Ｎａ2 ＳＯ4 ５００ｇを加えて濾過して、減圧濃縮し、粗抽出物を１２３ｇ得た。
【００３９】
（４）精製工程
上記工程で得られた１２３ｇの粗抽出物のうち、６５ｇを２０ｍｌの脱イオン水を含む６２０ｍｌのメタノールに溶解し、ｎ−ヘキサン２００ｍｌで２回分配し、ｎ−ヘキサン可溶化物を除き、粗抽出物を２４ｇ得た。この粗抽出物（２４ｇ）を塩化メチレン５０ｍｌに溶解し、内径５ｃｍ、長さ５０ｃｍのシリカゲル（ＭＥＲＣＫ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０、７０〜２３０メッシュ）のカラムを用いて塩化メチレンでクロマトグラフィーを行い、抽出混合物の分画として８５０ｍｌを得、減圧濃縮後、ｎ−ヘキサンから結晶化を行い、１．１８ｇの粉末を得た。次に、上記粉末を６分割し、その各々を４ｍｌのメタノールに溶解し、ＹＭＣ  ＯＤＳカラム（Ｓ−１５／３０μ、５．０ｉ．ｄ．×５０ｃｍ、ＣＨ3 ＣＮ：０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −Ｈ2 Ｏ＝６５：３５、５０ｍｌ／分、２２０ｎｍ）を用いて、分取高速液体クロマトグラフィーを繰り返し行い、Ｉ−ａを主成分とする分画（計１．７Ｌ）を得た。分取液は、アセトニトリルを留去後、酢酸エチル５００ｍｌで抽出し、脱イオン水３００ｍｌで水洗した後、Ｎａ2 ＳＯ4 ５０ｇを加え濾過して、減圧濃縮し、ｎ−ヘキサンから結晶化を行い、７５１ｍｇのＩ−ａを得た。また、分取高速液体クロマトグラフィー工程で、副成分として、Ｉ−ｂを主成分とする分画（２５０ｍｌ）、Ｉ−ｃを主成分とする分画（５５０ｍｌ）、Ｉ−ｄを主成分とする分画（３００ｍｌ）を得、これらについても同様の処理を行い、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄをそれぞれ３５ｍｇ、４１ｍｇ、１５ｍｇを得た。
【００４０】
得られたＩ−ａ〜Ｉ−ｄの化合物名及び物理化学的性状を下記に示した。
Ｉ−ａ
１．化合物名
（３−クロロ−５−ヘキシル−２，６−ジヒドロキシ−フェニル）−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−ピロール−２−イル）−メタノン
２．物理化学的性状
外観：淡黄色の粉末
溶解性：ＣＨＣｌ3 、ジエチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、メタノールに可溶。ｎ−ヘキサンに僅かに溶解。水に不溶。
融点：１４５〜１４７℃
［α］D 23.5＝±０℃（ｃ＝１．００５、メタノール）
元素分析値（Ｃ17Ｈ18ＮＯ3 Ｃｌ3 ）；
理論値；Ｃ：５２．２６  Ｈ：４．６４  Ｎ：３．５９  Ｃｌ：２７．２２
実測値；Ｃ：５１．９６  Ｈ：４．７５  Ｎ：３．６９  Ｃｌ：２６．９３
【００４１】
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ17Ｈ19ＮＯ3 Ｃｌ3 ）；３９０．０４３０
実測値；３９０．０４３３（ＭＨ+ ）
ＥＩ−ＭＳ、ｍ／ｚ：１８３（ベースピーク）、２５４、３８９（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５１３、３４１９、２９５７、２９２８、２８５８、１６１３、１６００、１５７１、１４６９、１４２１、１３９３、１２４９、１１３７、１０６４、１０２４、８４８
ＵＶ（メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１４５００）、３１０（１００００）、３５８（１０７００）
（希塩酸−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１３０００）、２６０（５２００）、３１０（１５０００）、３４０（ｓｈ，８８００）
（希ＮａＯＨ−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２３３（ｓｈ，１３８００）、２８０（６４００）、３６９（２１３００）
【００４２】
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３５（２Ｈ，ｍ）、１．５６（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｍ）、６．０８（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ）、７．２２（１Ｈ，ｓ）、９．７４（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、９．９４（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．１４（ｑ）、２２．６５（ｔ）、２９．１０（ｔ）、２９．２７（ｔ）、２９．４４（ｔ）、３１．７２（ｔ）、１１０．３１（ｓ）（×２）、１１２．６１（ｓ）、１１９．７６（ｄ）、１２１．６２（ｓ）、１２４．８１（ｓ）、１２８．９３（ｓ）、１３３．７７（ｄ）、１４７．８９（ｓ）、１５７．３１（ｓ）、１８２．７７（ｓ）
【００４３】
Ｉ−ａの赤外線スペクトルを図１に、紫外線スペクトルを図２に、 1ＨＮＭＲを図３に、13ＣＮＭＲを図４に示した。
【００４４】
Ｉ−ｂ
１．化合物名
［３−クロロ−２，６−ジヒドロキシ−５−（４−メチル−ペンチル）−フェニル］−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−ピロール−２−イル）−メタノン
２．物理化学的性状
外観：淡黄色の粉末
溶解性：ＣＨＣｌ3 、ジエチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、メタノールに可溶。ｎ−ヘキサンに僅かに溶解。水に不溶。
融点：１４８〜１５０℃
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ17Ｈ19ＮＯ3 Ｃｌ3 ）；３９０．０４３０
実測値；３９０．０４２９（ＭＨ+ ）
ＥＩ−ＭＳ、ｍ／ｚ：３８９（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５１３、３４１９、２９５６、２９２８、２８６９、１６１３、１６０１、１５７１、１４６９、１４２１、１３９４、１３３８、１２５２、１１３８、１０６５、１０２４
ＵＶ（メタノール中）、ｎｍ（ε）：２５５（ｓｈ，１４３００）、３１０（１０４００）、３５８（１０３００）
（希塩酸−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１３１００）、２６０（５３００）、３１０（１４９００）、３４０（ｓｈ，８３００）
（希ＮａＯＨ−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２３３（ｓｈ，１３５００）、２８０（６３００）、３７０（２０７００）
【００４５】
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．２３（２Ｈ，ｍ）、１．５６（２Ｈ，ｍ）、１．５７（２Ｈ，ｍ）、２．５３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．０７（１Ｈ，ｓ）、７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ）、７．２２（１Ｈ，ｓ）、１０．０１（１Ｈ，ｓ）、９．５５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：２２．６０（ｑ）（×２）、２７．３１（ｔ）、２７．８８（ｄ）、２９．５０（ｔ）、３８．６６（ｔ）、１１０．２３（ｓ）（×２）、１１２．５５（ｓ）、１１９．５８（ｄ）、１２１．３７（ｓ）、１２４．８０（ｓ）、１２８．９１（ｓ）、１３３．７３（ｄ）、１４７．８４（ｓ）、１５７．３６（ｓ）、１８２．７０（ｓ）
【００４６】
Ｉ−ｂの赤外線スペクトルを図５に、紫外線スペクトルを図６に、 1ＨＮＭＲを図７に、13ＣＮＭＲを図８に示した。
【００４７】
Ｉ−ｃ
１．化合物名
［３−クロロ−２，６−ジヒドロキシ−５−（４−メチル−ヘキシル）−フェニル］−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−ピロール−２−イル）−メタノン
２．物理化学的性状
外観：淡黄色の粉末
溶解性：ＣＨＣｌ3 、ジエチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、メタノールに可溶。ｎ−ヘキサンに僅かに溶解。水に不溶。
融点：１３８〜１４０℃
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ18Ｈ21ＮＯ3 Ｃｌ3 ）；４０４．０５８７
実測値；４０４．０５８７（ＭＨ+ ）
ＥＩ−ＭＳ、ｍ／ｚ：１８３（ベースピーク）、２６８、４０３（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５１３、３４２０、３２２６、２９６０、２９２８、２８７２、１６１３、１６００、１５７０、１４６３、１４２１、１３９３、１２５０、１１３８、１０６５、１０２４、９４３、９２９、８９４、８４０ＵＶ（メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１５１００）、３１０（９８００）、３５７（９８００）
（希塩酸−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１３６００）、２５８（４９００）、３１０（１４２００）、３４０（ｓｈ，７９００）
（希ＮａＯＨ−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２３３（ｓｈ，１３２００）、２８１（６１００）、３７１（１９７００）
【００４８】
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、１．１４（１Ｈ，ｍ）、１．１７（１Ｈ，ｍ）、１．３５（２Ｈ，ｍ）、１．３６（１Ｈ，ｍ）、１．５５（２Ｈ，ｍ）、２．５１（１Ｈ，ｄ，ｄ，ｄ，Ｊ＝６．７，８．８，１４．０Ｈｚ）、２．５５（１Ｈ，ｄ，ｄ，ｄ，Ｊ＝６．７，８．８，１４．０Ｈｚ）、６．０８（１Ｈ，ｓ）、７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ）、７．２３（１Ｈ，ｓ）、９．５８（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、１０．００（１Ｈ，ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１１．４１（ｑ）、１９．１７（ｑ）、２７．００（ｔ）、２９．４３（ｔ）、２９．５７（ｔ）、３４．２６（ｄ）、３６．３３（ｔ）、１１０．２３（ｓ）（×２）、１１２．５４（ｓ）、１１９．５８（ｄ）、１２１．３８（ｓ）、１２４．８１（ｓ）、１２８．９１（ｓ）、１３３．７２（ｄ）、１４７．８４（ｓ）、１５７．３４（ｓ）、１８２．７０（ｓ）
【００４９】
Ｉ−ｃの赤外線スペクトルを図９に、紫外線スペクトルを図１０に、 1ＨＮＭＲを図１１に、13ＣＮＭＲを図１２に示した。
【００５０】
Ｉ−ｄ
１．化合物名
［３−クロロ−２，６−ジヒドロキシ−５−（５−メチル−ヘキシル）−フェニル］−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−ピロール−２−イル）−メタノン
２．物理化学的性状
外観：淡黄色の粉末
溶解性：ＣＨＣｌ3 、ジエチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、メタノールに可溶。ｎ−ヘキサンに僅かに溶解。水に不溶。
融点：１５３〜１５５℃
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ18Ｈ21ＮＯ3 Ｃｌ3 ）；４０４．０５８７
実測値；４０４．０５８５（ＭＨ+ ）
ＥＩ−ＭＳ、ｍ／ｚ：１８３（ベースピーク）、２６８、４０３（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５１３、３４１９、３２２２、２９５５、２９２８、２８５８、１６１３、１６０１、１５７１、１４６８、１４２１、１３９３、１２５０、１１３８、１０６５、１０２３、９４３、８４８
ＵＶ（メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１３９００）、３１０（９３００）、３５８（１００００）
（希塩酸−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１３１００）、２６０（４８００）、３１０（１４１００）、３４０（ｓｈ，８０００）
（希ＮａＯＨ−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２３３（ｓｈ，１３１００）、２７９（６１００）、３７０（１９６００）
【００５１】
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、１．２１（２Ｈ，ｍ）、１．３４（２Ｈ，ｍ）、１．５３（３Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）、６．０８（１Ｈ，ｓ）、７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）、７．２２（１Ｈ，ｓ）、９．５８（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、１０．００（１Ｈ，ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：２２．６５（ｑ）（×２）、２７．１９（ｔ）、２７．９２（ｄ）、２９．２８（ｔ）、２９．６９（ｔ）、３８．７７（ｔ）、１１０．２４（ｓ）（×２）、１１２．５４（ｓ）、１１９．５８（ｄ）、１２１．３８（ｓ）、１２４．７８（ｓ）、１２８．９１（ｓ）、１３３．７２（ｄ）、１４７．８５（ｓ）、１５７．３３（ｓ）、１８２．７０（ｓ）
【００５２】
Ｉ−ｄの赤外線スペクトルを図１３に、紫外線スペクトルを図１４に、 1ＨＮＭＲを図１５に、13ＣＮＭＲを図１６に示した。
【００５３】
得られたＩ−ａ〜Ｉ〜ｄの薄層クロマトグラフィー（以下「ＴＬＣ」という）及び高速液体クロマトグラフィー（以下「ＨＰＬＣ」という）の結果を下記に示した。
ＴＬＣのＲｆ値（濃硫酸で検出）：
（ＣＨ2 Ｃｌ2 ）Ｉ−ａ＝Ｉ−ｂ＝Ｉ−ｃ＝Ｉ−ｄ＝０．２８
（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）Ｉ−ａ＝Ｉ−ｂ＝Ｉ−ｃ＝Ｉ−ｄ＝０．４０
ＨＰＬＣ分析：
保持時間；Ｉ−ａ＝８．４０分、Ｉ−ｂ＝７．７３分、Ｉ−ｃ＝１０．２１分、Ｉ−ｄ＝１０．６１分
ＨＰＬＣ分析の分析条件：
カラム；Ｕｌｔｒｏｎ  ＶＸ−ＯＤＳ、５μｍ、４．６ｉ．ｄ．×１５０ｍｍ（信和化工社製）
移動相；０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −ＣＨ3 ＣＮ：０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −水＝７５：２５
流速；１ｍｌ／分
検出波長；２２０ｎｍ
【００５４】
実施例２  Ｉ−ｅの単離
（１）産生菌
産生菌としては、ストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４を使用した。
（２）発酵工程
ソルブルスターチ０．５％、グルコース０．５％、ポリペプトン（日本製薬社製）０．５％、牛肉エキス（ディフコ社製）０．５％、酵母エキス（ディフコ社製）０．２５％、塩化ナトリウム０．２５％、水道水よりなる培地１００ｍｌ（２Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ７．０に調整）を含む５００ｍｌ容三角フラスコにスラント培養したストレプトマイセス  エスピー．ＰＡ−４８４２４の保存菌液（−８０℃に凍結保存）１ｍｌを接種し、振幅７０ｍｍ、毎分１８０回転で、２８℃、７２時間培養した。この培養液４ｍｌを、グルコース１．０％、ソルブルスターチ３．０％、廃糖蜜１．０％、臭化ナトリウム１．０％、乾燥酵母１．０％、総合アミノ酸粉末Ｆ（味の素社製）１．０％、硫酸亜鉛７水塩０．００１％、りん酸第一カリウム０．００５％、水道水よりなる培地１００ｍｌ（２Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ７．０に調整）を含む５００ｍｌ容三角フラスコに接種し、振幅７０ｍｍ、毎分１８０回転で、２８℃、９６時間培養した。
【００５５】
（３）分離工程
上記工程により得た培養液５Ｌにアセトン５Ｌを加え、２時間攪拌した後、セライト３００ｇを用いて吸引濾過して得られたろ液から、減圧下アセトンを留去後、水層を酢酸エチル（３Ｌ）抽出し、粗抽出物（１．２ｇ）を得た。
【００５６】
（４）精製工程
上記工程で得られた粗抽出物１．２ｇを（メタノール：水＝９：１）１００ｍｌに溶解し、ｎ−ヘキサン１００ｍｌで２回抽出し、残渣のメタノール層から減圧下溶媒留去後、粗分画（７００ｍｇ）を得た。この粗分画（７００ｍｇ）をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、シリカゲル（ＭＥＲＣＫ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０、７０〜２３０メッシュ、１．９ｇ）に吸着、乾固させた後、内径３ｃｍ、長さ５０ｃｍのシリカゲル（ＭＥＲＣＫ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０、７０〜２３０メッシュ、８０ｇ）カラムに積層し、トルエン：酢酸エチル＝９８：２を用いたクロマトグラフィーを行い、Ｉ−ｅを主成分とする分画（５０ｍｇ）を得た。次に、この分画（５０ｍｇ）をメタノール（１．２５ｍｌ）に溶解し、分取高速液体クロマトグラフィー（カラム：ＵＬＴＲＯＮ  ＶＸ−ＯＤＳ  ２０ｉ．ｄ．×２５０ｍｍ（信和化工社製））を繰り返し行い、Ｉ−ｅ溶出分画（１２０ｍｌ）を得た。クロマトグラフィーの条件は、溶出液としてアセトニトリル：０．１％ＴＦＡａｑ．＝７０：３０、流速８ｍｌ／分、試料注入量２５０ｍｌ／回とし、検出は２３０ｎｍで行った。分取液は、アセトニトリルを留去後、酢酸エチル（５０ｍｌ）で抽出した後、飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ2 ＳＯ4 を加えて濾過して、減圧濃縮し、ｎ−ヘキサン−アセトンから結晶化を行い、１３．７ｍｇのＩ−ｅを得た。
【００５７】
得られたＩ−ｅの化合物名及び物理化学的性状を下記に示した。
Ｉ−ｅ
１．化合物名
（３−ブロモ−５−ヘキシル−２，６−ジヒドロキシ−フェニル）−（４，５−ジブロモ−１Ｈ−ピロール−２−イル）−メタノン
２．物理化学的性状
外観：淡褐色の粉末
融点：１２８〜１３０℃
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ17Ｈ19ＮＯ3 Ｂｒ3 ）；５２１．８９１６
実測値；５２１．８９１４（ＭＨ+ ）
Ｌ−ＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：５２２（ＭＨ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３４９３、３４１７、３０２１、３０１７、２９５７、２９２８、２８５７、１６１１、１５９６、１５６６、１４６３、１４２１、１４０３、１３８２、１２４０、１２２３、１２１３、１２０４、１１３２、１０５７、９８１、９３９、８９５、８３６
ＵＶ（メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２４（ｓｈ，１７７００）、３１３．７（１１１００）、３５７．２（１０８００）
（希塩酸−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２５（ｓｈ，１５６００）、３１３．０（１５４００）
（希ＮａＯＨ−メタノール中）、ｎｍ（ε）：２２０（ｓｈ，２１９００）、２４０（ｓｈ，１３０００）、２８１．４（７０００）、３７０．３（２２４００）
【００５８】
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，３００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）、１．３１（６Ｈ，ｍ）、１．５９（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、６．０５（１Ｈ，ｓ）、７．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）、７．３５（１Ｈ，ｓ）、９．７２（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、９．９３（１Ｈ，ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，７５ＭＨｚ）δ：１４．１１、２２．６１、２９．０９、２９．２４、２９．４５、３１．６９、１００．００、１０１．７６、１１０．２３、１１０．９３、１２２．２５、１２５．３７、１３２．４５、１３６．５５、１４８．７８、１５７．９６、１８２．５８
【００５９】
Ｉ−ｅの赤外線スペクトルを図１７に、紫外線スペクトルを図１８に、 1ＨＮＭＲを図１９に、13ＣＮＭＲを図２０に示した。
【００６０】
得られたＩ−ｅのＴＬＣ及びＨＰＬＣの結果を下記に示した。
ＴＬＣのＲｆ値（濃硫酸で検出）：
（ＣＨ2 Ｃｌ2 ）Ｉ−ｅ＝０．３２（Ｉ−ａ＝０．２７）
（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）Ｉ−ｅ＝０．４０（Ｉ−ａ＝０．３８）ＨＰＬＣ分析：
保持時間；Ｉ−ｅ＝１０．２２分（Ｉ−ａ＝８．１２分）
ＨＰＬＣ分析の分析条件：
カラム；Ｕｌｔｒｏｎ  ＶＸ−ＯＤＳ、５μｍ、４．６ｉ．ｄ．×１５０ｍｍ（信和化工社製）
移動相；０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −ＣＨ3 ＣＮ：０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −水＝７５：２５
流速；１ｍｌ／分
検出波長；２２０ｎｍ
【００６１】
実施例３  Ｉ−ａのアセチル化
Ｉ−ａ（８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）のピリジン（０．５ｍｌ）溶液に無水酢酸（０．２５ｍｌ）を加え１０分間攪拌した。反応液にトルエンを加え減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０、７０〜２３０メッシュ、１ｇ）に付し、ＣＨ2 Ｃｌ2 ：メタノール＝５０：１の混合溶媒で溶出し、Ｉ−ａのジアセチル化物（以下このものを「Ｉ−ａ1 」という）（９ｍｇ）を得た。
【００６２】
このものの物理化学的性状を下記に示した。
ＨＲ−ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：
理論値（Ｃ21Ｈ23ＮＯ5 Ｃｌ3 ）；４７４．０６４２
実測値；４７４．０６４１（ＭＨ+ ）
ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：４７４（ＭＨ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３４１８、２９５８、２９３０、２８５９、１７７２、１６３８、１４５３、１４２４、１３９０、１３７０、１３２３、１１８３、１１３９、１１００、１０５９、１０４３、１０２３、８９５
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３５（２Ｈ，ｍ）、１．５８（２Ｈ，ｍ）、２．０９（３Ｈ，ｓ）、２．１３（３Ｈ，ｓ）、２．４６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．６６（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、７．４４（１Ｈ，ｓ）、９．５０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．０６、２０．２６、２０．３５、２２．５３、２９．１１、２９．２７、２９．７８、３１．５１、１１２．８３、１１９．３０、１２２．２４、１２５．４８、１２６．９７、１２８．３９、１３２．０２、１３５．５５、１４２．６０、１４４．８７、１６７．５８、１６８．３４、１７７．８２
【００６３】
得られたＩ−ａ1 の化学構造式を下記に示した。下記式中、Ａｃはアセチル基を表す。
【００６４】
【化４】
0003759207.tif 000005
【００６５】
実施例４  Ｉ−ａのメチル化（１）
Ｉ−ａ（４０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のメタノール：ベンゼン（１：１）混合溶液（１ｍｌ）に過剰のトリメチルシリルジアゾメタン（１０％ｎ−ヘキサン溶液、ナカライテスク社製）を加え１２時間室温下に放置した。減圧下溶媒を留去し、残渣を薄層クロマトグラフィー（Ｐｒｅ−Ｃｏａｔｅｄ  ＴＬＣ  Ｐｌａｔｅｓ、ＳＩＬＩＣＡ  ＧＥＬ  Ｆ−２５４、Ｅ．Ｍｅｒｃｋ社製）に付し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１５：１の混合溶媒で分離精製し、Ｉ−ａのトリメチル化物（以下このものを「Ｉ−ａ2 」という）（２０ｍｇ）を得た。
【００６６】
このものの物理化学的性状を下記に示した。
ＬＳＩＭＳ、ｍ／ｚ：４３２（ＭＨ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：２９５７、２９３０、２８５８、１６４２、１５８６、１５６９、１４６９、１４１６、１３８０、１３４２、１２５６、１１７３、１１４３、１１０４、１０７８、１００２、９７９、９４４、８８５、８６１ 1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．２９（４Ｈ，ｍ）、１．３４（２Ｈ，ｍ）、１．５８（２Ｈ，ｍ）、２．５４（２Ｈ，ｍ）、３．６５（３Ｈ，ｓ）、３．７５（３Ｈ，ｓ）、４．０５（３Ｈ，ｓ）、６．３７（１Ｈ，ｓ）、７．２４（１Ｈ，ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．３３、２２．８３、２９．２６、３０．５４、３４．５６（×２）、６２．６４、６３．２０、１１１．０５、１２０．９８、１２３．０６、１２６．００、１２９．８２、１３０．０４、１３２．０５、１３３．８２、１５１．５５、１５４．４８、１８２．１５
【００６７】
得られたＩ−ａ2 の化学構造式を下記に示した。
【００６８】
【化５】
0003759207.tif 000006
【００６９】
実施例５  Ｉ−ａのメチル化（２）
Ｉ−ａ（１０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）のベンゼン溶液（１ｍｌ）に過剰のトリメチルシリルジアゾメタン（１０％ｎ−ヘキサン溶液、ナカライテスク社製）を加え１２時間室温下に放置した。減圧下溶媒を留去し、残渣を薄層クロマトグラフィー（Ｐｒｅ−Ｃｏａｔｅｄ  ＴＬＣ  Ｐｌａｔｅｓ、ＳＩＬＩＣＡ  ＧＥＬ  Ｆ−２５４、Ｅ．Ｍｅｒｃｋ社製）に付し、ＣＨ2 Ｃｌ2 溶媒で分離精製し、Ｉ−ａのジメチル化物（以下このものを「Ｉ−ａ3 」という）（３．６ｍｇ）を得た。
【００７０】
このものの物理化学的性状を下記に示した。
ＥＩＭＳ、ｍ／ｚ：１９７（ベースピーク）、２６８、４１７（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：２９５７、２９２９、２８５８、１６００、１５７１、１５２３、１４６８、１４５５、１３９９、１３４４、１２７３、１１７９、１１４６、１１０４、１０７３、１００８、９６６、８９４、８５４
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３６（２Ｈ，ｍ）、１．５８（２Ｈ，ｍ）、２．５７（２Ｈ，ｍ）、３．６３（３Ｈ，ｓ）、４．００（３Ｈ，ｂｒ．ｓ）、６．７３（１Ｈ，ｓ）、７．２４（１Ｈ，ｓ）、８．４８（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．１１、２２．６０、２９．１２、２９．３４、２９．４１、３１．６７、３４．５１、６２．２２、１１０．９１、１１７．７９、１１８．２５、１２１．６３、１２５．８１、１２８．１２、１２９．６４、１３４．０１、１５２．１６、１５４．８３、１８４．０９
【００７１】
得られたＩ−ａ3 の化学構造式を下記に示した。
【００７２】
【化６】
0003759207.tif 000007
【００７３】
実施例６  Ｉ−ａのメチル化（３）
Ｉ−ａ（１０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）のベンゼン溶液（１ｍｌ）を５〜１０℃に保ち、トリメチルシリルジアゾメタン（１０％ｎ−ヘキサン溶液、ナカライテスク社製）を加え２０分間放置した。減圧下溶媒を留去し、残渣を薄層クロマトグラフィー（Ｐｒｅ−Ｃｏａｔｅｄ  ＴＬＣ  Ｐｌａｔｅｓ、ＳＩＬＩＣＡＧＥＬ  Ｆ−２５４、Ｅ．Ｍｅｒｃｋ社製）に付し、ＣＨ2 Ｃｌ2 溶媒で分離精製し、Ｉ−ａのモノメチル化物（以下このものを「Ｉ−ａ4 」という）（６ｍｇ）を得た。
【００７４】
このものの物理化学的性状を下記に示した。
ＥＩＭＳ、ｍ／ｚ：１９７（ベースピーク）、２６８、４０３（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３４１８、３２４９、２９５７、２９２９、２８５８、１５９４、１５６２、１５０６、１４６７、１４２３、１３２９、１２６４、１１３９、１１０１、１０７３、１０２３、９８０、９３７、８９８、８５０、８４４
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，４００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３４（２Ｈ，ｍ）、１．５８（２Ｈ，ｍ）、２．５６（２Ｈ，ｍ）、３．６７（３Ｈ，ｓ）、７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ）、７．２８（１Ｈ，ｓ）、９．６９（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、９．９７（１Ｈ，ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１００ＭＨｚ）δ：１４．１２、２２．６１、２９．１２、２９．２５、２９．５３、３１．６８、６２．６３、１１３．０１、１１５．７２、１１７．２３、１２０．３７、１２１．６３、１２８．７０、１２９．０８、１３５．０３、１５１．８９、１５６．９５、１８２．７７
【００７５】
得られたＩ−ａ4 の化学構造式を下記に示した。
【００７６】
【化７】
0003759207.tif 000008
【００７７】
実施例７  Ｉ−ａの接触還元
Ｉ−ａ（４０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（２ｍｌ）に１０％Ｐｄ−Ｃ（２８ｍｇ、５０％湿重量、日本エンゲルハルド社製）を加え室温下中圧（３ｋｇ／ｃｍ3 水素ガス圧）水素添加を１７時間行う。触媒濾去後、減圧下に溶媒を留去し、残渣を高速液体クロマトグラフィー（Ｕｌｔｒｏｎ  ＶＸ−ＯＤＳ、２．０ｉ．ｄ．×２５ｃｍ、アセトニトリル：０．１％Ｈ3 ＰＯ4 −水＝（６６：３４）から（８０：２０）へ３３分間のリニアグラジエント）に付し、Ｉ−ａの３種類の水素置換体（以下、これらのものをそれぞれ「Ｉ−ａ5 」、「Ｉ−ａ6 」、「Ｉ−ａ7 」という）及びＩ−ａをそれぞれ分離精製した。各フラクションは減圧下に溶媒を留去し、残渣の水層を酢酸エチルで抽出し、Ｉ−ａ5 （１．３ｍｇ）、Ｉ−ａ6 （４．４ｍｇ）、Ｉ−ａ7 （３．１ｍｇ）及びＩ−ａ（２．２ｍｇ）をそれぞれ得た。
【００７８】
得られたＩ−ａ5 、Ｉ−ａ6 、Ｉ−ａ7 の物理化学的性状を下記に示した。
【００７９】
Ｉ−ａ5 
ＥＩＭＳ、ｍ／ｚ：１８３（ベースピーク）、２５４、３５５（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５１５、３４３７、３１４１、２９５７、２９２８、２８５７、１６１３、１６０１、１５７３、１４５４、１４２１、１３８３、１３４１、１２４８、１１３４、１１０９、１０６４、１０２３、９４０、８９５、８４７
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，４００ＭＨｚ）δ：０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３４（２Ｈ，ｍ）、１．５７（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｍ）、６．３８（１Ｈ，ｔ，ｄ，Ｊ＝２．３，４．０Ｈｚ）、６．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．１４（１Ｈ，ｍ）、７．１８（１Ｈ，ｍ）、７．４０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、８．８２（１Ｈ，ｓ）、９．５５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．１３、２２．６３、２９．１０、２９．２８、２９．４５、３１．７２、１１０．３１、１１０．７２、１１５．０２、１１８．９４、１２２．９０、１２４．６１、１３０．８６、１３３．６０、１４８．０５、１５７．０５、１８３．７５
【００８０】
得られたＩ−ａ5 の化学構造式を下記に示した。
【００８１】
【化８】
0003759207.tif 000009
【００８２】
Ｉ−ａ6 
ＥＩＭＳ、ｍ／ｚ：１４９（ベースピーク）、２２０、３２１（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５２８、３４３７、３１４１、２９５７、２９２８、２８５７、１６２４、１５９４、１５７６、１４５４、１４２２、１３８５、１３４０、１２４５、１１７７、１１０８、１０３８、９８８、９３９、８３８
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、１．３２（６Ｈ，ｍ）、１．５７（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、６．９８（１Ｈ，ｓ）、７．０７（２Ｈ，ｍ）、７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、８．７７（１Ｈ，ｓ）、９．５２（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．１４、２２．６６、２９．１５、２９．３８、２９．６８、３１．７４、１０７．８０、１１０．１８、１１５．３１、１１７．９７、１２２．４３、１２３．２６、１３０．４９、１３５．７４、１５４．８１、１５６．４１、１８４．０７
【００８３】
得られたＩ−ａ6 の化学構造式を下記に示した。
【００８４】
【化９】
0003759207.tif 000010
【００８５】
Ｉ−ａ7 
ＥＩＭＳ、ｍ／ｚ：１４９（ベースピーク）、２２０、２８７（Ｍ+ ）
ＩＲ、λmax CHCl3 ｃｍ-1：３５２３、３４４５、２９５６、２９２７、２８５６、１６２６、１５９３、１５７５、１５３９、１４７２、１４２４、１４００、１３４０、１１７６、１１１８、１１０３、１０９２、１０４６、９９３
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，６００ＭＨｚ）δ：０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、１．３１（４Ｈ，ｍ）、１．３５（２Ｈ，ｍ）、１．５７（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｍ）、６．３８（１Ｈ，ｔ，ｄ，Ｊ＝２．３，４．０Ｈｚ）、６．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．１４（１Ｈ，ｍ）、７．１８（１Ｈ，ｍ）、７．４０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）、８．８２（１Ｈ，ｓ）、９．５５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ，１５０ＭＨｚ）δ：１４．１１、２２．６０、２９．１２、２９．３４、２９．４１、３１．６７、３４．５１、６２．２２、１１０．９１、１１７．７９、１１８．２５、１２１．６３、１２５．８１、１２８．１２、１２９．６４、１３４．０１、１５２．１６、１５４．８３、１８４．０９
【００８６】
得られたＩ−ａ7 の化学構造式を下記に示した。
【００８７】
【化１０】
0003759207.tif 000011
【００８８】
試験例１  抗菌活性
Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄ、Ｉ−ｅのグラム陰性菌、グラム陽性菌に対する抗菌活性を測定して抗菌スペクトルを調べた。結果を表２に示した。
【００８９】
【表２】
0003759207.tif 000012
【００９０】
表２中、菌名は、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＮＩＨＪ  ＪＣ−２はＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＩＨＪ  ＪＣ−２を、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ２５６１９はＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ  ２５６１９を、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＡＴＣＣ  ２７７３６はＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＡＴＣＣ  ２７７３６を、Ａ．ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＮＢ−００１はＡｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＮＢ−００１を、Ｐ．ｍｕｌｔｏｃｉｄａ  Ｄ−６はＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ  Ｄ−６を、Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ  Ｎｏ．２はＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｐｉｓｃｉｃｉｄａ  Ｎｏ．２を、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ  ＡＴＣＣ  ４３６２９はＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ＡＴＣＣ  ４３６２９を、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＦＤＡ  ２０９ＰはＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＦＤＡ  ２０９Ｐを、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  １７００４  （ＭＲＳＡ）はＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  １７００４  （ＭＲＳＡ）を、Ｃ．ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ  ＡＴＣＣ１３１２４はＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ  ＡＴＣＣ  １３１２４を、Ｅ．ｓｅｒｉｏｌｉｃｉｄａ  ＳＮ８６１１９はＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｅｒｉｏｌｉｃｉｄａ  ＳＮ８６１１９をそれぞれ示す。
【００９１】
表２中、最小阻止濃度（以下「ＭＩＣ」ともいう）は、表３に示す供試培地を接種源用培地及びＭＩＣ測定用培地とし、表３に示す培養条件の下で測定した。接種源濃度は、いずれも１０6 ＣＦＵ／ｍｌとした。
【００９２】
【表３】
0003759207.tif 000013
【００９３】
表３中、供試培地は、（１）がＭｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  Ｂｒｏｔｈ（ディフコ社製）を、（２）がＭｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  Ａｇａｒ（ディフコ社製）を、（３）が０．０５％β−ＮＡＤ添加Ｃｏｌｏｍｂｉａ  Ｂｒｏｔｈ（ディフコ社製）を、（４）が２％ＮａＣｌ添加Ｂｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ  Ｂｒｏｔｈ（ディフコ社製）を、（５）が７％ウマ血液添加Ｂｌｌｏｄ  Ａｇａｒ  Ｂａｓｅ  Ｎｏ．２（ディフコ社製）を、（６）がＣｏｏｃｋｅｄ  Ｍｅａｔ  Ｍｅｄｉｕｍ（ディフコ社製）を、（７）がＧＡＭ  Ａｇａｒ（ディフコ社製）を、（８）がＴｒｙｐｔｏ−Ｓｏｙａ  Ｂｒｏｔｈ（ニッスイ社製）を、（９）がＳｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  Ｄｉｓｋ  Ａｇａｒ−Ｎ（ニッスイ社製）をそれぞれ示す。菌名は上記と同様である。
【００９４】
表２から明らかなように、本発明の物質は、グラム陰性菌、グラム陽性菌等に対する広範な抗菌活性を有している。グラム陰性菌の中では特にＰ．ｍｕｌｔｏｃｉｄａ，Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ及びＨ．ｐｙｌｏｒｉに強い活性を示した。また、グラム陽性菌に対しては全体的に顕著な抗菌活性を示し、ＭＲＳＡに対しても有効であった。特にＩ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｅは、広い範囲の抗菌スペクトルを有することが明らかとなった。
【００９５】
試験例２  小脳顆粒細胞におけるグルタミン酸トランスポーター阻害活性
下記の化合物について、小脳顆粒細胞におけるグルタミン酸トランスポーター阻害活性を調べた。
Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄ、Ｉ−ｅ、Ｉ−ａ1 、Ｉ−ａ3 、Ｉ−ａ4 、Ｉ−ａ5 、Ｉ−ａ6 、Ｉ−ａ7 
（１）検体の調製
検体は、すべてジメチルスルフォキサイド（ＤＭＳＯ）を用いて１０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した。活性測定のために持ち込むＤＭＳＯ濃度は４％以下とした。
【００９６】
（２）小脳顆粒細胞の調製
８日令のＳＤ系ラットの小脳を２０匹分摘出し、１％トリプシン液で１０分間３７℃で処理、ピペッティングにより細胞を分散させた。ナイロンメッシュを通し、大きな組織塊を除去した。ポリ−Ｌ−リジンを使用して表面をコーティングした２４ウェルディッシュ２０枚に分散した細胞を分注した。培地はα−ＭＥＭ培地に１０％ウシ血清、２５ｍＭ  ＫＣｌを添加したものを用いた。細胞を２４ウェルディッシュに分注後２４〜４８時間に終濃度１０μＭシトシンβ−Ｄ−アラビノフラノシドを添加し、増殖性細胞を除去した。その後、３日置きに培地交換を行い、１〜２週目の細胞を実験に用いた（Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ、２０３〜２０６頁（１９８９年）、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ）。
【００９７】
（３）グルタミン酸トランスポーター活性の測定
上記の細胞をクレブス−リンゲル液（ＫＲＢ）で２回洗浄し、検体を含むＫＲＢを添加して３７℃１０分間処理した。更に［3Ｈ］ラベル体を含む１μＭグルタミン酸を添加して１０分間３７℃で反応させた。グルタミン酸取り込みの終了は細胞を１ｍｌの冷却ＫＲＢで２回洗浄した。そして、０．０５％のドデシル硫酸ナトリウムを含む０．０１％デオキシコール酸ナトリウムで細胞を溶解し、液体シンチレーションカウンターで［3Ｈ］の放射活性を測定した。
【００９８】
（４）スクリーニング方法
天然物培養液抽出物中から得られる神経細胞のグルタミン酸取り込み活性を阻害する検体を選択した。
更に、同じ細胞でＧＡＢＡの取り込み阻害活性を持たないものを選択した。
以上の操作により、グルタミン酸トランスポーター特異性の高い成分を選択した。
グルタミン酸取り込み阻害活性を指標に活性成分を分画精製した。
【００９９】
（５）結果
上記の１１の化合物に関して、そのグルタミン酸取り込み阻害活性の５０％阻害濃度（以下「ＩＣ50」という）を表４に示した。
【０１００】
【表４】
0003759207.tif 000014
【０１０１】
表４の結果、Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄは、グルタミン酸取り込み阻害のＩＣ50値が０．８μＭで、Ｉ−ｅは、０．４μＭであった。更に、その阻害活性は、グルタミン酸取り込みを最大限６５％抑制するという部分的なものであった。
Ｉ−ａのグルタミン酸取り込み阻害様式は、Ｌｉｎｅ−Ｗｅａｖｅｒ  Ｐｌｏｔ解析により非拮抗阻害型であることが認められた。
Ｉ−ａのＣｌ基、ＯＨ基を修飾した化合物では、グルタミン酸取り込み阻害活性がＩ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ、Ｉ−ｄ等よりも弱くなる傾向が認められた。
Ｉ−ａ1 、Ｉ−ａ7 では、グルタミン酸取り込み阻害活性の最大値が９５％となった。
【０１０２】
0003759207.tif 000015
ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びステアリン酸マグネシウムを除く上記処方成分を均一に混合した後、ヒドロキシプロピルメチルセルロース８％（ｗ／ｗ）水溶液を結合剤として湿式造粒法にて打錠用顆粒を製造した。これにステアリン酸マグネシウムを混合した後、打錠機を用いて直径７ｍｍ、１錠重量１３０ｍｇに形成し、内服錠とした。
【０１０３】
製剤例２
Ｉ−ａ                                  ３０ｍｇ
生理食塩水                            ２００ｍｌ
Ｉ−ａを生理食塩水に溶解し、点滴剤とした。
【０１０４】
【発明の効果】
本発明により、広範な抗菌スペクトルを有する抗菌剤として使用することができるものを得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】Ｉ−ａの赤外線スペクトルを示す図。
【図２】Ｉ−ａの紫外線スペクトルを示す図。
【図３】Ｉ−ａの 1ＨＮＭＲスペクトルを示す図。
【図４】Ｉ−ａの13ＣＮＭＲスペクトルを示す図。
【図５】Ｉ−ｂの赤外線スペクトルを示す図。
【図６】Ｉ−ｂの紫外線スペクトルを示す図。
【図７】Ｉ−ｂの 1ＨＮＭＲスペクトルを示す図。
【図８】Ｉ−ｂの13ＣＮＭＲスペクトルを示す図。
【図９】Ｉ−ｃの赤外線スペクトルを示す図。
【図１０】Ｉ−ｃの紫外線スペクトルを示す図。
【図１１】Ｉ−ｃの 1ＨＮＭＲスペクトルを示す図。
【図１２】Ｉ−ｃの13ＣＮＭＲスペクトルを示す図。
【図１３】Ｉ−ｄの赤外線スペクトルを示す図。
【図１４】Ｉ−ｄの紫外線スペクトルを示す図。
【図１５】Ｉ−ｄの 1ＨＮＭＲスペクトルを示す図。
【図１６】Ｉ−ｄの13ＣＮＭＲスペクトルを示す図。
【図１７】Ｉ−ｅの赤外線スペクトルを示す図。
【図１８】Ｉ−ｅの紫外線スペクトルを示す図。
【図１９】Ｉ−ｅの 1ＨＮＭＲスペクトルを示す図。
【図２０】Ｉ−ｅの13ＣＮＭＲスペクトルを示す図。
【図２１】試験例２の各種細胞によるグルタミン酸取り込み阻害活性を示す図。白丸は大脳皮質細胞を、黒丸はＣ６グリオーマ細胞を、白四角はアストログリアを、黒四角は小脳顆粒細胞をそれぞれ示す。縦軸はグルタミン酸取り込み率（対照に対する百分率）を、横軸はＩ−ａの濃度（μＭ）を表す。
【図１】
0003759207.tif 000017
【図２】
0003759207.tif 000018
【図３】
0003759207.tif 000019
【図４】
0003759207.tif 000020
【図５】
0003759207.tif 000021
【図６】
0003759207.tif 000022
【図７】
0003759207.tif 000023
【図８】
0003759207.tif 000024
【図９】
0003759207.tif 000025
【図１０】
0003759207.tif 000026
【図１１】
0003759207.tif 000027
【図１２】
0003759207.tif 000028
【図１３】
0003759207.tif 000029
【図１４】
0003759207.tif 000030
【図１５】
0003759207.tif 000031
【図１６】
0003759207.tif 000032
【図１７】
0003759207.tif 000033
【図１８】
0003759207.tif 000034
【図１９】
0003759207.tif 000035
【図２０】
0003759207.tif 000036
【図２１】
0003759207.tif 000037