(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シコン、コウボク、ショウガ、ゼンコ、オウゴン及びセンキュウからなる群から選ばれる植物または生薬の抽出物の一種又は二種以上を有効成分として含有することを特徴とする、柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤。
【請求項２】
夏胞子の胞子発芽に対し阻害活性を有する請求項１記載の柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤に関する。詳しくは、環境に対する安全性が高く、また長期間効果を持続し、さび病の原因である柄生さび菌科のさび菌胞子の発芽を特異的に阻害するさび菌胞子発芽阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
さび菌(rust)は植物にさび病害を引き起こす病原菌であり、分類学上、担子菌類・さび菌目に属する。さび菌は全世界で約150属約6000種が報告されている、膨大な菌群であり、いずれもが植物に寄生すること無しには生育することが出来ないため、すべてが植物病原菌である。
【０００３】
さび菌のうち、柄生さび菌科に属するソラマメ・エンドウのさび病菌（ウロマイセス  ファバエ）、インゲンのさび病菌（ウロマイセス  アッペンディキュラタス）、スズメノテッポウさび菌（ウロマイセイス  アロペキュウリ）、ナシの赤星病菌（ギムノスポランギュウム  ハラエアヌム）、リンゴの赤星病菌（ギムノスポランギュウム  ヤマダイ）、コムギの赤さび病（プッキニア  トゥリティシナ）、コムギの黄さび病・オオムギの黄さび病菌（プッキニア  グルマルム）、コムギ・オオムギ・エンバクの黒さび病菌（プッキニア  グラミニス）、エンバクの冠さび病菌（プッキニア  コロナータ）、ライムギの褐色さび病菌（プッキニア  ディスパーサ）、トウモロコシのさび病菌（プッキニア  ソルギー）、ネギ・タマネギのさび病菌（プッキニア  アリ）、ネギの赤渋病菌（プッキニアポリ）、キクの黒さび病菌（プッキニア  クリサンテミ）、キク白さび病菌（プッキニア  オルディアーナ）、セリさび病菌（プッキニア  トキェンシス）、ハッカのさび病菌（プッキニア  メンタ）は、重要な作物及び花卉に病害を起こすことが知られている。
【０００４】
かかるさび菌の生活環は非常に複雑であり、多形成性の菌で、宿主輪廻が行われる。この特性より、さび菌の防除には、２種類の宿主のうちで経済価値の少ない方（中間宿主）を排除して、さび菌の生活環を断ちきるという方法が実施されている。
【０００５】
一方、柄生さび菌科に属するさび菌は、さび胞子、夏胞子、担子胞子、小生子および冬胞子と呼ばれる胞子を形成して病気を伝播するが、これらの胞子のうち、夏胞子およびさび胞子は耐性が強く、長距離の飛散が可能である。
これに対し、担子胞子は耐性が弱く、長距離の飛散中に死滅する。従って、経済的に有用な作物に感染する胞子の型が担子胞子や小生子である場合に、上述のように栽培地近郊の中間宿主を除くことによってさび病の発生を抑えることが有効である。実際に、ナシ赤星病・リンゴ赤星病を防除するため、畑の近くに、これらの原因菌の中間宿主であるビャクシンを植えない措置がとられている。
【０００６】
しかし、さび胞子および夏胞子が感染する作物に関しては上記の方法は効果が薄い。例えば、コムギさび病の防除のために、中間宿主であるメギ属植物撲滅の法令が出されたが（ルアン1660年、 マサチューセッツ1755年）、この方法は冬期に夏胞子が生き残れない地域でのみ有効である。また、この方法の効果を減じる他の原因として、夏胞子の移動距離が非常に長いことが挙げられる。例えば、米国では夏胞子が2000マイルに達する距離を移動しながら、ミシシッピー三角州から米国北部やカナダまでさび病害を広げてきた。
【０００７】
また、他の防除の方法として、当然、殺菌剤の使用が挙げられる。さび菌は発芽した後、宿主の組織内に侵入し寄生関係を確立するため、さび菌の防除に有効な殺菌剤としては、浸透性の高いものが考えられる。しかし、これらの殺菌剤は当然残留性が高いことが考えられ、農薬を散布する部位、即ち、さび菌が寄生感染をする部位である葉や茎を食用に供するような農作物に対しては使用が困難である。
【０００８】
さらに、品種改良による抵抗性品種の育成があげられるが、さび菌に抵抗性の遺伝子を有する植物は、品種改良の進んでいるコムギ等の一部に限られ、多くの作物においては未だそのような遺伝子は発見されていない。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
以上の経緯より、安全性の高い、柄生さび菌科に属するさび病菌の防除剤の開発が望まれていたが、未だ有効なものが見出されていないのが現状である。
そこで本発明の目的は、環境に対する安全性が高く、長期間効果を持続し、さび病の原因の一つである柄生さび菌科のさび菌胞子の発芽を特異的に阻害するさび菌胞子発芽阻害剤を提供することにある。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、柄生さび菌科に属するさび菌の胞子発芽阻害活性を有する植物または生薬抽出物の散布により、該さび菌が宿主との寄生関係を結ぶ以前の過程を阻止し、さび病の防除を可能にすべく鋭意検討を行ったところ、各種植物または生薬のうち、シコン、コウボク、ショウガ、ゼンコ、オウゴンおよびセンキュウの抽出物に、柄生さび菌科に属するさび菌の、特に夏胞子の胞子発芽を阻害する活性を認め、本発明を完成するに至った。
【００１１】
すなわち、本発明は、以下の通りである。
（１）シコン、コウボク、ショウガ、ゼンコ、オウゴン及びセンキュウからなる群から選ばれる植物または生薬の抽出物の一種又は二種以上を有効成分として含有することを特徴とする、柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤である。
【００１２】
（２）前記（１）記載のさび菌胞子発芽阻害剤において、夏胞子の胞子発芽に対し阻害活性を有する、柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤である。
【００１３】
以下、（１）、（２）記載の本発明の、柄生さび菌科に属するさび菌胞子発芽阻害剤を単に「さび菌胞子発芽阻害剤」と略称する。
【００１４】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明のさび菌胞子発芽阻害剤に用いるシコン、コウボク、ショウガ、ゼンコ、オウゴン及びセンキュウからなる群から得られる植物または生薬の抽出物の製造法は、特に限定されるべきものではない。しかし、植物または生薬を抽出するための好ましい方法としては、水；メチルアルコール、エチルアルコール等の低級アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の多価アルコール；酢酸エチル等の低級アルキルエステル；ベンゼン、ヘキサン等の炭化水素；ジエチルエーテル等のエーテル類等を溶剤として用いる方法が例示され、その一種又は二種以上を用いることができる。
【００１５】
また、抽出条件としては、植物または生薬に対し容量比で１〜１０００倍量の溶剤を使用するのがよく、特に５〜１００倍量が好ましい。
【００１６】
以上のような条件で得られる植物または生薬の抽出物は、抽出された溶液のまま本発明のさび菌胞子発芽阻害剤として使用してもよいが、この抽出液を濃縮、濾過等の処理を施して得られたものを適宜使い分けて使用することもできる。また、さび菌胞子発芽阻害作用に悪影響のない範囲で、脱臭、脱色等のための精製処理を施してもよい。さらに、液液分配抽出、各種クロマトグラフィー、イオン交換膜分離等の分離精製処理を施して、より活性の強いさび菌胞子発芽阻害剤として使用することができる。
【００１７】
また、本発明のさび菌胞子発芽阻害剤は、植物または生薬の抽出物それ自体として用いてもよいが、通常は必要に応じて本発明のさび菌胞子発芽阻害作用を損なわない範囲で担体、界面活性剤、分散剤、または補助剤等を適宜配合して、常法により、例えば、水和剤、乳剤、粉剤または粒剤に製剤して用いることができる。これらの製剤は適切な濃度に希釈して散布するか、または直接使用する。
【００１８】
本発明のさび菌胞子発芽阻害剤は、上記の植物または生薬の抽出物を配合したものであるが、その配合量は、上記製剤の剤形に応じて適宜に決定され、特に制限はないが、通常固形分（乾固物）として０．００１〜１重量％、特に０．０１〜０．１重量％の範囲内とすることが好ましい。また、本発明において、植物または生薬の抽出液をそのまま、または適度に濃縮、希釈して使用してもかまわない。
【００１９】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２０】
本発明のさび菌胞子発芽阻害剤としての植物または生薬の抽出物を以下のようにして製造した。
実施例１
シコン粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
実施例２
コウボク粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
実施例３
ショウキョウ粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
実施例４
ゼンコ粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
実施例５
オウゴン粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
実施例６
センキュウ粉砕物１ｇにメタノール１０ｍｌを加え２３℃で３０分間超音波抽出することにより抽出物を得た。
【００２１】
（試験例１）
前記実施例１〜６の抽出物を用いて、ネギさび菌の夏胞子発芽に対する発芽阻害試験を行った。
ネギさび菌夏胞子の採取
ネギ栽培畑において、さび病菌が発生しているネギ植物葉の病害発生部位の上位近傍の葉を採集し、流水下で良く洗浄し、表面に付着している雑菌を除いた。これを、９０ｍｍシャーレに入れ、２０℃、１６時間光照射の条件下で培養した。培養開始３日後に、葉表面にネギさび菌に起因する夏胞子堆が出現し、夏胞子が得られた。この夏胞子を以後の試験に供した。
【００２２】
発芽阻害試験
滅菌カバーグラス上に、１／２濃度のツァペック無機塩類（ｐＨ６．０）に終濃度０．６％の低融点アガロースを含む試験液を、それぞれ１０μｌずつ滴下し、常温にて固化させた。以下、この培養基を発芽床と称する。次いで、各々の試験区においては、実施例１〜６の各生薬抽出物（終濃度０．５％（ｖ／ｖ）を添加した発芽床を使用した。
【００２３】
さらにこれらの発芽床上に、上記方法を用いて作成したネギさび菌の夏胞子１００〜２００個を筆を用いて接種した。これらの操作が終了した後、発芽床ごとにカバーグラスを下向きにして、パラフィンでミニシャーレ（直径１８ｍｍ）  の口に固着させ、１８℃の暗黒下で培養を行なった。
培養１７時間後に検鏡して、カウンターを用いて発芽胞子数と未発芽胞子数を計数した。胞子の長径以上の長さの発芽管を伸長したものを発芽胞子とみなした。
【００２４】
おのおのの試験区において、無作為に約１００〜２００個の胞子について観察を行ない、生薬抽出物を含まない発芽床を用いて培養したものと比較対照し、次式にしたがって発芽阻害率を算出した。
発芽阻害率（％）＝｛（Ａ−Ｂ）／Ａ  ｝×１００
Ａ：生薬抽出物無添加で培養した試験区における発芽率
Ｂ：生薬抽出物添加で培養した試験区における発芽率
得られた結果を下記の表１に示す。
【００２５】
【表１】
0003809678.tif 000002
【００２６】
表１から明らかなように、本発明の胞子発芽阻害剤はいずれもネギさび菌の夏胞子の発芽を阻害している。
【００２７】
（試験例２）
前記実施例１〜６の抽出物を用いて、スズメノテッポウさび菌の夏胞子に対する発芽阻害試験を行った。
スズメノテッポウさび菌の夏胞子の採集
圃場路地にて生育している、スズメノテッポウ植物のうち同さび病罹病株の葉を採集し、流水下で良く洗浄して葉表面上に附着している雑菌を取り除いた。この検体を９０ｍｍシャーレに入れ、２０℃、１６時間光照射下で培養した。培養開始３日以降に葉裏面に夏胞子堆が出現し、夏胞子が得られた。以後、この夏胞子を試験に使用した。
【００２８】
発芽阻害試験
試験例１に示した方法と同様の方法を用いて、発芽阻害試験を行った。各試験区の発芽床には、それぞれ１００〜２００個のスズメノテッポウさび菌の夏胞子を接種した。得られた結果を下記の表２に示す。
【００２９】
【表２】
0003809678.tif 000003
【００３０】
表２から明らかなように、本発明のさび菌胞子発芽阻害剤はいずれもスズメノテッポウさび菌の夏胞子の発芽を阻害している。
【００３１】
本発明のさび菌胞子発芽阻害剤は、発芽阻害率に違いはあるものの、その他の柄生さび菌科に属するさび菌、例えば、ソラマメ・エンドウのさび病菌、インゲンのさび病菌、ナシの赤星病菌、リンゴの赤星病菌、コムギの赤さび病、コムギの黄さび病・オオムギの黄さび病菌、コムギ・オオムギ・エンバクの黒さび病菌、エンバクの冠さび病菌、ライムギの褐色さび病菌、トウモロコシのさび病菌、ネギの赤渋病菌、キクの黒さび病菌、キク白さび病菌、セリさび病菌、ハッカのさび病菌についても同様の効果を期待することができる。
【００３２】
（試験例３）
前記実施例１〜６の抽出物を用いて、さび菌と同じ担子菌類に属する、ひらたけ（プロイロータス  オストレアートス）及びえのきだけ（フラムリナ  ベルティペス）の担子胞子発芽に対する発芽試験を行った。
ひらたけ・えのきだけの担子胞子の採集
市販のひらたけ・えのきだけの子実体（キノコ）を用いて、柄の部分を切り取った傘をヒダが下になる方向で、滅菌シャーレにうつ伏せに置き、湿った濾紙を用いて加湿した後に、シャーレの蓋をかぶせて室温で一昼夜培養することにより、成熟した担子胞子を回収した。以後、この担子胞子を試験に使用した。
【００３３】
発芽阻害試験
試験例１に示した方法と同様の方法を用いて、発芽阻害試験を行った。それぞれ１００〜２００個のひらたけ、またはえのきだけの担子胞子を接種した。得られた結果を下記の表３に示す。
【００３４】
【表３】
0003809678.tif 000004
【００３５】
表３に示す結果から、コウボクを除く本発明のさび菌夏胞子発芽阻害剤は、ひらたけ・えのきだけの胞子発芽を阻害することは認められず、活性はさび菌の胞子に特異的であり、他の菌類に影響を及ぼさない安全なものであることが明らかになった。尚、コウボクについては、これを単独で用いた場合、ひらたけ・えのきだけの胞子発芽を阻害することが認められたが、他の植物または生薬の抽出物と併用することにより、安全性の高いさび菌胞子発芽阻害剤を得ることができる。
【００３６】
【発明の効果】
以上説明してきたように、本発明のさび菌胞子発芽阻害剤は、特定の植物または生薬からの抽出物を有効成分としていることから、環境に対する安全性が極めて高く、効果が長時間持続し、しかも柄生さび菌科に属するさび菌のさび胞子、夏胞子、担子胞子、小生子および冬胞子、特には夏胞子の発芽に対して優れた阻害活性を有する。