(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
亜鉛化合物，マグネシウム化合物，コバルト化合物，マンガン化合物の中から選ばれる１種もしくは２種以上の金属化合物を添加した培地で培養したサッカロミセス属(Saccharomyces)酵母、又はその酵母をさらに自己消化させた消化物、あるいは蛋白分解酵素で分解処理した酵素分解物、あるいは酸で分解処理した酸分解物の何れかより水性溶媒を用いて得られる抽出物を含有することを特徴とする皮膚美白用化粧料組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、亜鉛(Ｚｎ)，マグネシウム(Ｍｇ)，コバルト(Ｃｏ)，マンガン(Ｍｎ)の何れかを含有する培地を用いて培養した酵母、又はその自己消化物、あるいは酵素又は酸による分解物ｃの何れかより得られる水溶性抽出物の新規な利用法に関するものである。
さらに詳しくは、亜鉛化合物，マグネシウム化合物，コバルト化合物，マンガン化合物の中から選ばれる１種もしくは２種以上の金属化合物を添加した培地で培養処理したサッカロミセス属酵母、又はその酵母をさらに自己消化させた消化物、あるいは蛋白分解酵素で分解処理した酵素分解物、あるいは酸で分解処理した酸分解物の何れかより、水，エタノール，ブチレングリコール，プロピレングリコール，グリセリンなどの水性溶媒の単独もしくはそれらの混液を用いて抽出した抽出物を含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供するものである。
【０００２】
【発明の属する技術分野】
本発明による化粧料組成物は、メラニン生成抑制作用、メラニン色素分解作用といった美白効果に優れている。
よって、例えば、スキンケア，浴用剤といった各種の外用製剤類の形態で用いることによって、シミ，ソバカスなどの予防あるいは軽減といった美容的効果が得られる。
【０００３】
具体的には、化粧水（ローション），乳液，クリーム，オイル，パック，ボディーソープ，あるいは浴用剤（液状，粉末状，顆粒状，固形状など性状は、何れであってもよい），衛生用品，ウエットタイプのティシュペーパーや紙タオルあるいはコットンなどが上げられる。
【０００４】
【従来の技術】
サッカロミセス属(Saccharomyces)に属する酵母、例えば、ビール酵母，清酒酵母，ワイン酵母，パン酵母などは、ヒトの食文化との関わり合いが非常に親密な微生物で、人類がこうした酵母の性質を利用し、その恩恵に浴してきた歴史は極めて古い。
身辺においてこれら酵母による働きが関わってできた食品といえば、例えば、アルコール類，パン，味噌，醤油，漬物などがその代表的なものである。
さて酵母の利用には、このようにその生物的な働きかけ（醗酵作用）によりできた代謝生成物を利用することの他に、菌体中に含まれる成分を利用するという使われ方も知られている。
すなわち、酵母中には核酸やその関連物質（ＲＮＡ，ＡＴＰなど）をはじめ、蛋白質，各種アミノ酸，ビタミン類（特にＢ群），ミネラルなどの栄養素がたいへん豊富にしかもバランスよく含まれていることから、酵母やそのエキスは蛋白資源として用いられたり、滋養強壮，健康回復増進，整腸，強肝などを目的とするような保健薬としても賞用されたりしてきた。
また、近年においては、酵母中のこうした成分が美容にもたいへん良いことが認識されるようになり、これまで食用等に供せられてきた酵母エキスや、あるいは酵母を加水分解して得られたエキスといったものが、各種の化粧品類に応用されるようにもなってきた。
例えば、特開昭53-142515号、特開昭60-24188号、特開昭61-260009号などは、酵母抽出液あるいは酵母の加水分解エキスの有する美容効果に基づき、化粧料への応用が提案された先願の発明である。
【０００５】
一方、亜鉛，マグネシウム，コバルト，マンガンは、生物としての構成および機能に対し、密接かつ重要に関与していることが指摘されている元素である。
【０００６】
例えば、亜鉛は細胞分裂や核酸代謝系への関与が指摘されている元素で、欠乏すれば、生殖力の低下，短身，味覚・臭覚の低下，食欲不振，免疫不全などの症状が現れることが知られている。
又、コバルトはビタミンＢ１２合成系，造血系への関与が指摘され、欠乏においては食欲不振，悪性貧血などの症状を招くと言われている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、酵母の代謝能とその菌体内に含まれる成分に着目しつつ、広くヒトの美容と健康に役立つための、より付加価値の高い酵母の利用法について検討してきた。
その結果、亜鉛化合物，マグネシウム化合物，コバルト化合物，マンガン化合物を添加した培地を用いて培養処理した酵母より水性溶媒を用いて得られる抽出成分は、通常の酵母菌体から抽出したものに比べて、メラニン生成抑制作用、メラニン色素分解作用といった美白効果が格段優れていることや、また酵母特有の臭いがいくらか改善されていることなど化粧料用途としての有用性、使用性が著しく向上していることを見い出した。
また、単純にフレンチプレスなどで菌体を破壊して得られた抽出物だけでなく、酵母をいったん自己消化させた後に抽出した成分や、あるいは酸や蛋白分解酵素などにより加水分解することによって得られた抽出物の、その何れのものであっても同等な効果が得られることを見い出し、本発明を完成した。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明は、亜鉛化合物，マグネシウム化合物，コバルト化合物，マンガン化合物の中から選ばれる１種もしくは２種以上の金属化合物を添加した培地で培養処理したサッカロミセス属酵母、又はその酵母をさらに自己消化させた消化物、あるいは蛋白分解酵素で分解処理した酵素分解物、あるいは酸で分解処理した酸分解物、およびそれら酵母又は酵母分解物より、水，エタノール，ブチレングリコール，プロピレングリコール，グリセリンなどの水性溶媒の単独もしくはそれらの混液を用いて得られた抽出物を含有する、新規な皮膚美白用化粧料組成物を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられる酵母とは、サッカロミセス属(Saccharomyces)に属する酵母、例えば、ビール酵母，清酒酵母，ワイン酵母，パン酵母などである。
また、こうした酵母を培養する際、用いられる培地としては通常使用される培地組成で何等差し支えない。尚、培養の際に用いられる金属化合物は、あらかじめ培地組成中に添加しておいてもよいし、培養過程中に逐次添加してもよい。
【００１０】
使用可能な金属化合物とは、次のようなものである。
【００１１】
[a]亜鉛化合物
塩化亜鉛，臭化亜鉛，硝酸亜鉛，硫酸亜鉛，クエン酸亜鉛，酢酸亜鉛，ギ酸亜鉛，乳酸亜鉛，酸化亜鉛，リン酸亜鉛，セレン化亜鉛，ケイ酸亜鉛，フッ化亜鉛，酒石酸亜鉛など。
【００１２】
削除
【００１３】
[b]マグネシウム化合物
塩化マグネシウム，臭化マグネシウム，フッ化マグネシウム，硝酸マグネシウム，硫酸マグネシウム，亜硫酸マグネシウム，クエン酸マグネシウム，酢酸マグネシウム，ギ酸マグネシウム，アスパラギン酸マグネシウム，乳酸マグネシウム，シュウ酸マグネシウム，リン酸マグネシウムなど。
【００１４】
[c]コバルト化合物
塩化コバルト，塩化コバルトアンモニウム，硫酸コバルト，硫酸コバルトアンモニウム，クエン酸コバルト，酢酸コバルト，アミド硫酸コバルト，安息香酸コバルト，臭化コバルト，塩基性炭酸コバルト，硝酸コバルト，ギ酸コバルト，リン酸コバルト，亜硝酸コバルトカリウム，セレン化コバルト，酒石酸コバルト，チタン酸コバルトなど。
【００１５】
[d]マンガン化合物
塩化マンガン，二酸化マンガン，酸化マンガン，ギ酸マンガン，炭酸マンガン，臭化マンガン，リン酸マンガン，安息香酸マンガン，乳酸マンガン，硫酸マンガン，酒石酸マンガン，リン酸マンガンなど。
【００１６】
培養過程におけるこれら金属化合物の添加量は、総量として10〜1,000ppm程度の範囲で単回もしくは複数回にわたり、あるいは連続的に加えることができる。
その他の培養条件、例えば、温度や時間などについては、一般に行われている条件を適用すればよいが、培養期間は定常期を目安とするのが望ましい。
【００１７】
又、金属化合物含有培地で培養処理した酵母から有効成分を抽出するにあたっては、培養後の菌体を回収し精製水等を用いて十分洗浄した後、例えば、超音波やフレンチプレスで菌体を破壊し、これに、水，エタノール，ブチレングリコール，プロピレングリコール，グリセリンなどの水性溶媒の単独もしくはそれらの混液を湿菌体に対して10〜100倍量程度添加し、遠心分離等の操作を行った後に濾過すれば良い。
また、酵母の自己消化を利用する場合は、洗浄後の湿菌体に対して10〜100倍量程度の精製水を加え、35〜45℃で、24〜72時間ほど自己消化させた後、凍結乾燥または減圧濃縮する。これに前記と同様に水性溶媒を添加し、抽出後、遠心分離等の操作を行い、濾過する。
酵素分解法を利用する場合は、洗浄後の湿菌体に対して10〜100倍量程度の精製水を加え、プロテアーゼを酵母菌体１Kgに対して20〜50万ユニット程度添加し、酵素活性温度で一昼夜反応させる。次いで酵素を失活させた後、水性溶媒を適量加えるか、または加えないで、遠心分離等の操作を行い濾過する。
酸分解法を利用する場合は、洗浄後の湿菌体に対して約10倍量の1〜5％塩酸を加え、40〜60℃にて3〜8時間、時々撹拌しながら加水分解する。その後、アルカリを用いて中和した後、同様に処理する。尚、中和後に、透析処理等により脱塩してもよい。
【００１８】
本発明の化粧料組成物における酵母抽出物の応用量としては、通常 0.01〜10重量％(エキス固形分として)程度がよい。
0.01重量％未満の場合では、本発明による美容効果が十分に発揮されず、また10重量％以上では効果に大差がないばかりでなく、臭い、安定性といった点で化粧料用途としての実用的範囲とはいい難い。
後述する実施例、作用や使用感の評価、安全性といったことから考慮すれば、エキス固形分として、0.01〜１重量％程度が最も好ましい範囲と思料される。
【００１９】
また、本発明の化粧料組成物は、さらに必要に応じて、下記に示されるような医薬品類，医薬部外品類，化粧品類，浴用剤，食品類，飲料類などにおいて使用されている各種成分や添加剤の中から用途に適したものを任意に選択、併用して製することができる。
[1]各種油脂類
アボガド油，アルモンド油，ウイキョウ油，エゴマ油，オリブ油，オレンジ油，オレンジラファー油，ゴマ油，カカオ脂，カミツレ油，カロット油，キューカンバー油，牛脂，牛脂脂肪酸，ククイナッツ油，サフラワー油，大豆油，ツバキ油，トウモロコシ油，ナタネ油，パーシック油，ヒマシ油，綿実油，落花生油，タートル油，ミンク油，卵黄油，カカオ脂，パーム油，パーム核油，モクロウ，ヤシ油，牛脂，豚脂，乳脂，又はこれら油脂類の水素添加物（硬化油等）など。
【００２０】
[2]ロウ類
ミツロウ，カルナバロウ，鯨ロウ，ラノリン，液状ラノリン，還元ラノリン，硬質ラノリン，カンデリラロウ，モンタンロウ，セラックロウなど。
【００２１】
[3]鉱物油
流動パラフィン，ワセリン，パラフィン，オゾケライド，セレシン，マイクロクリスタンワックス，スクワレン，スクワラン，プリスタンなど。
【００２２】
[4]脂肪酸類
ラウリン酸，ミリスチン酸，パルミチン酸，ステアリン酸，ベヘン酸，オレイン酸，１２-ヒドロキシステアリン酸，ウンデシレン酸，トール油，ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸，カプロン酸，２−エチルブタン酸，イソペンタン酸，２−メチルペンタン酸，２−エチルヘキサン酸，イソペンタン酸などの合成脂肪酸。
【００２３】
[5]アルコール類
エタノール，イソピロパノール，ラウリルアルコール，セタノール，ステアリルアルコール，オレイルアルコール，ラノリンアルコール，コレステロール，フィトステロールなどの天然アルコール、２−ヘキシルデカノール，イソステアリルアルコール，２−オクチルドデカノールなどの合成アルコール。
【００２４】
[6]多価アルコール類
酸化エチレン，エチレングリコール，ジエチレングリコール，トリエチレングリコール，エチレングリコールモノエチルエーテル，エチレングリコールモノブチルエーテル，ジエチレングリコールモノメチルエーテル，ジエチレングリコールモノエチルエーテル，ポリエチレングリコール，酸化プロピレン，プロピレングリコール，ポリプロピレングリコール，１，３−ブチレングリコール，グリセリン，ペンタエリトリトール，ソルビトール，マンニトールなど。
【００２５】
[7]エステル類
ミリスチン酸イソプロピル，パルミチン酸イソプロピル，ステアリン酸ブチル，ラウリン酸ヘキシル，ミリスチン酸ミリスチル，オレイン酸オレイル，オレイン酸デシル，ミリスチン酸オクチルドデシル，ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル，乳酸セチル，乳酸ミリスチル，フタル酸ジエチル，フタル酸ジブチル，酢酸ラノリン，モノステアリン酸エチレングリコール，モノステアリン酸プロピレングリコール，ジオレイン酸プロピレングリコールなど。
【００２６】
[8]金属セッケン類
ステアリン酸アルミニウム，ステアリン酸マグネシウム，ステアリン酸亜鉛，ステアリン酸カルシウム，パルミチン酸亜鉛，ミリスチン酸マグネシウム，ラウリン酸亜鉛，ウンデシレン酸亜鉛など。
【００２７】
[9]ガム質、糖類及び水溶性高分子化合物
アラビアゴム，ベンゾインゴム，ダンマルゴム，グアヤク脂，アイルランド苔，カラヤゴム，トラガントゴム，キャロブゴム，クインシード，寒天，カゼイン，乳糖，果糖，ショ糖およびそのエステル，トレハロースおよびその誘導体，デキストリン，ゼラチン，ペクチン，デンプン，カラギーナン，カルボキシメチルキチン又はキトサン，エチレンオキサイド等のアルキレン(C２〜C４)オキサイドが付加されたヒドロキシアルキル(C２〜C４)キチン又はキトサン，低分子キチン又はキトサン，キトサン塩，硫酸化キチンまたはキトサン，リン酸化キチン又はキトサン，アルギン酸及びその塩，ヒアルロン酸及びその塩，コンドロイチン硫酸及びその塩，ヘパリン，エチルセルロース，メチルセルロース，カルボキシメチルセルロース，カルボキシエチルセルロース，カルボキシエチルセルロースナトリウム，ヒドロキシエチルセルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，ニトロセルロース，結晶セルロース，ポリビニルアルコール，ポリビニルメチルエーテル，ポリビニルピロリドン，ポリビニルメタアクリレート，ポリアクリル酸塩，ポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイドなどのポリアルキレンオキサイド又はその架橋重合物，カルボキシビニルポリマー，ポリエチレンイミンなど。
【００２８】
[10]界面活性剤
アニオン界面活性剤（カルボン酸塩，スルホン酸塩，硫酸エステル塩，リン酸エステル塩）、カチオン界面活性剤（アミン塩，四級アンモニウム塩）、両性界面活性剤：カルボン酸型両性界面活性剤（アミノ型，ベタイン型），硫酸エステル型両性界面活性剤，スルホン酸型両性界面活性剤，リン酸エステル型両性界面活性剤、非イオン界面活性剤（エーテル型非イオン界面活性剤，エーテルエステル型非イオン界面活性剤，エステル型非イオン界面活性剤，ブロックポリマー型非イオン界面活性剤，含窒素型非イオン界面活性剤）、その他の界面活性剤（天然界面活性剤，タンパク質加水分解物の誘導体，高分子界面活性剤，チタン・ケイ素を含む界面活性剤，フッ化炭素系界面活性剤）など。
【００２９】
[11]各種ビタミン類
ビタミンＡ群：レチノール，レチナール（ビタミンＡ１），デヒドロレチナール（ビタミンＡ２），カロチン，リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群：チアミン塩酸塩，チアミン硫酸塩（ビタミンＢ１），リボフラビン（ビタミンＢ２），ピリドキシン（ビタミンＢ６），シアノコバラミン（ビタミンＢ１２），葉酸類，ニコチン酸類，パントテン酸類，ビオチン類，コリン，イノシトール類、ビタミンＣ群：アスコルビン酸及びその誘導体、ビタミンＤ群：エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ２），コレカルシフェロール（ビタミンＤ３），ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群：トコフェロール及びその誘導体，ユビキノン類、ビタミンＫ群：フィトナジオン（ビタミンＫ１），メナキノン（ビタミンＫ２），メナジオン（ビタミンＫ３），メナジオール（ビタミンＫ４）など。
【００３０】
[12]各種アミノ酸類
バリン，ロイシン，イソロイシン，トレオニン，メチオニン，フェニルアラニン，トリプトファン，リジン，グリシン，アラニン，アスパラギン，グルタミン，セリン，システイン，シスチン，チロシン，プロリン，ヒドロキシプロリン，アスパラギン酸，グルタミン酸，ヒドロキシリジン，アルギニン，オルニチン，ヒスチジンなどや，それらの硫酸塩，リン酸塩，硝酸塩，クエン酸塩，或いはピロリドンカルボン酸のごときアミノ酸誘導体など。
【００３１】
[13]植物又は動物系原料由来の種々の添加物
これらは、添加しようとする製品種別、形態に応じて常法的に行われる加工（例えば、粉砕，製粉，洗浄，加水分解，醗酵，精製，圧搾，抽出，分画，ろ過，乾燥，粉末化，造粒，溶解，滅菌，ｐＨ調整，脱臭，脱色などを任意に選択、組合わせた処理）を行い、各種の素材から任意に選択して供すればよい。
尚、抽出に用いる溶媒については、供する製品の用法（食用，外用，浴用）や、後に行う加工処理等を考慮した上で選択すれば良いが、通常では、水，水溶性有機溶媒（例えば、エタノール，プロピレングリコール，１,３−ブチレングリコールなど）の中から選ばれる１種もしくは２種以上の混液を用いるのが望ましい。
但し、用途により有機溶媒の含有が好ましくない場合においては、水のみを使用したり、あるいは抽出後に除去しやすいエタノールを採用し、単独又は水との任意の混液で用いたりすれば良い。
【００３２】
尚、植物又は動物系原料由来の添加物を、スキンケア，ヘアケア等の外用製剤や浴用剤に供する場合、皮膚や頭髪の保護をはじめ、保湿，感触・風合いの改善，柔軟性の付与，刺激の緩和，芳香によるストレスの緩和，細胞賦活（細胞老化防止），炎症の抑制，肌質・髪質の改善，肌荒れ防止及びその改善，発毛，育毛，脱毛防止，光沢の付与，清浄効果，疲労の緩和，血流促進，温浴効果などの美容的効果のほか，香付け，増粘，防腐，緩衝などが期待できる。
また、食用製品においては、栄養補給，疲労回復，強壮，細胞賦活（細胞老化防止）等の健身並びに美容的効果をはじめ、味覚の改善，色調や芳香、光沢の付与，安定化，増粘，防腐等の目的で使用することができる。
さらにこの他にも、これまでに知られている各原料素材の様々な美容的、薬剤的効果を期待し、これらを組合わせることによって目的とする効果の増進を図ったり、あるいは多機能的な効果を期待した製品とすることも可能である。
【００３３】
原料とする具体的な植物(生薬)としては、例えば、アイ(藍葉)，アオカズラ(清風藤)，アオツヅラフジ(木防巳)，アカシア，アカスグリ果実，アカブドウ，アカメガシワ(赤芽柏)，アカネ(茜草根)，アカヤジオウ(地黄)，アギ(阿魏)，アキニレ(榔楡皮)，アケビ(木通)，アサ(麻子仁)，アサガオ(牽牛子)，アシタバ(明日葉)，アズキ(赤小豆)，アセンヤク(阿仙薬)，アセロラ，アニス果実，アベマキ果実，アボカド，アマ，アマチャ(甘茶)，アマドコロ(玉竹)，アミガサユリ(貝母)，アーモンド，アルテア，アルニカ，アロエ(蘆薈)，アロエベラ，アンズ(杏仁)，アンソッコウ(安息香)，イガコウゾリナ(地胆頭)，イタドリ(虎杖根)，イチゴ，イチジク(無花果)又はその葉，イチビ(冬葵子)，イトヒメハギ(遠志)，イナゴマメ，イネ種子又は種皮，イノンド種子，イラクサ，イランイラン，イチョウ(銀杏葉，銀杏)，イブキジャコウソウ，ウイキョウ(茴香)，ウキヤガラ(三稜)，ウグイスカグラ果実，ウコン(鬱金)，ウスベニアオイ，ウスベニタチアオイ，ウスバサイシン(細辛)，ウツボグサ(夏枯草)，ウド又はシシウド(羌活，独活，唐独活)，ウメ(烏梅)又はその果肉，ウラジロガシ，ウワウルシ，ウンシュウミカン(陳皮)，エストラゴン，エゾウコギ(蝦夷五加)，エノキ，エビスグサ(決明子)，エルダーベリー果実，エレミ，エンジュ(槐花，槐花米)，オウギ(黄耆)，オウレン(黄連)，オオカラスウリ(カロニン)，オオツヅラフジ(防己)，オオバコ(車前子，車前草)，オオハシバミ(榛子)，オオバナオケラ(白朮)，オオバヤシャブシ果実，オオミサンザシ(山査子)，オオムギ(大麦)，オグルマ(旋覆)，オクラ果実，オケラ(白朮)，オタネニンジン(人参)，オトギリソウ(弟切草)，オドリコソウ(続断)，オナモミ(蒼耳子)，オニグルミ，オニノヤガラ(天麻)，オニユリ(百合)，オニノス，オヒョウ(裂葉楡)，オミナエシ(敗醤)，オランダイチゴ，オランダガラシ，オランダパセリ，オランダミツバ，オリーブ，オレガノ，オレンジ果実又は果皮，カイケイジオウ(熟地黄)，海藻［緑藻，褐藻，紅藻］，カカオ種子，カキ又はその葉(柿蒂)，カギカズラ(釣藤鈎)，カシア，カジノキ果実(楮実)，ガジュツ(莪朮)，カシワ(槲樹，槲葉)，カスカリラ，カニクサ(金沙藤)，カノコソウ(吉草根)，カボチャ，カポックノキ種子，カホクサンショウ(蜀椒)，ガマ(蒲黄)，カミツレ，カミヤツデ(通草)，カラスウリ(王瓜)，カラスムギ，カラスビシャク(半夏)，ガラナ種実，カラヤ，カリン(木瓜)，カワヤナギ，カワラタケ，カワラヨモギ(茵チン蒿)，カンスイ(甘遂)，カンゾウ(甘草)，カンデリラ，カントウ，カンナ，キイチゴ，キウイ果実，キカラスウリ(瓜呂根)，キキョウ(桔梗，桔梗根)，キク(菊花)，キササゲ(梓実)，ギシギシ(羊蹄根)，キズタ，キダチアロエ，キダチハッカ，キナノキ，キハダ(黄柏)，キバナオウギ(黄耆)，ギムネマ・シルベスタ，キラジャ・サポナリア，キラヤ，キャベツ，キャベブ未熟果，キュウリ，キンカン果実，キンマ，キンミズヒキ(仙鶴草)，グアユーレ，クェルクス・インフェクトリア(没食子)，ククイナッツ，クコ(枸杞，枸杞子，枸杞葉，地骨皮)，クサスギカズラ(天門冬)，クズ(葛根)，クスノキ，グースベリー果実，クチナシ(山梔子)，クヌギ(樸ソウ)，クマザサ，クマツヅラ(馬鞭草)，クララ(苦参)，クランベリー果実，クリ又はその渋皮，クルクリゴ・ラチフォリア果実，グレープフルーツ果実，クロウメモドキ，クロガネモチ(救必応)，クロバナヒキオコシ(延命草)，クロレラ，クワ(桑葉，桑白皮)，グワバ果実，ケイガイ(荊芥，荊芥穂)，ケイトウ(鶏冠花，鶏冠子)，ケイリンサイシン(細辛)，月桂樹，ゲンチアナ，ゲンノショウコ(老鸛草)，コエンドロ果実，コウシンバラ(月季花)，コウスイハッカ，コウゾ果実，紅茶，コウホネ(川骨)，コウホン(藁本，唐藁本)，コウリャン，コケモモ(越橘)，コガネバナ(黄ゴン)，コゴメバオトギリソウ，ココヤシ果実，ゴシュユ(呉茱萸)，ゴショイチゴ(覆盆子)，コショウ(胡椒)，コパイババルサム，コーヒー豆，コブシ(辛夷)，ゴボウ(牛蒡，牛蒡子)，コボタンヅル，ゴマ(胡麻)，ゴマノハグサ(玄参)，コムギ(小麦)，米又は米ぬか（赤糠，白糠），コーラ・アクミナタ種子，コーラ・ベラ種子，コロハ果実，コロンボ，コンズランゴ，コンブ，コンフリー(鰭張草)，コンニャク，サキシマボタンズル(威霊仙)，サクラの花・葉・果実・樹皮(桜皮)，ザクロ，ササ，ササユリ(百合)，サザンカ，サジオモダカ(沢瀉)，サツマイモ，サトウキビ，サトウダイコン，サネブトナツメ(酸棗仁)，サフラン(番紅花，西紅花)，ザボン果実，サボンソウ，サーモンベリー果実，サラシナショウマ(升麻)，サルビア，サワギキョウ(山梗菜)，サワグルミ葉，サンキライ(山帰来)，サンザシ(山査子)，サンシチニンジン(三七人参)，サンシュユ(山茱萸)，サンショウ(山椒)，サンズコン(山豆根)，シアノキ果実，シイタケ，ジオウ(地黄)，シオン(紫苑)，ジギタリス，シクンシ(使君子)，シシウド(独活，唐独活)，シソ・アオジソ・チリメンジソ・カタメンジソ(紫蘇葉，紫蘇子)，シダレカンバ(白樺皮)，シタン，シナノキ，シナレンギョウ(連翹)，シマカンギク(菊花)，シモツケソウ，ジャガイモ，シャクヤク(芍薬)，シャジン(沙参)，ジャノヒゲ(麦門冬)，シラカシ種子，シロゴチョウの種子，シロバナイリス，シロバナツタの花，シロミナンテン(南天実)，ジュズダマ，シュロ果実，ショウガ(生姜)，ショウブ(菖蒲，菖蒲根)，ショズク果実，シラカバ，シンコナサクシルブラ，シンナモン，スイカ(西瓜)，スイカズラ(金銀花，忍冬)，スイバ(酸模)，スイムベリー果実，ストロベリー果実，スギナ(問荊)，ステビア，スモモ果実，セイヨウアカマツの球果，セイヨウカラマツ，セイヨウキヅタ，セイヨウグルミ，セイヨウナシ果実，セイヨウナツユキソウ，セイヨウネズ，セイヨウノコギリソウ，セイヨウニワトコ，セイヨウネズ，セイヨウハッカ，セイヨウフウチョウボク，セイヨウヤドリギ，セイヨウヤマハッカ，セイヨウワサビ，セキショウ(石菖根)，ゼニアオイ，セネガ，セリ，セロリ，センキュウ(川キュウ)，センナ果実又は葉，センニンソウ(大蓼)，センブリ(当薬)，ソウカ(草果)，ソバ種実，ソメモノイモ，ダイオウ(大黄)，大根，大豆，ダイダイ(橙皮，枳実)，タイム，タカトウダイ(大戟)，タカワラビ(狗脊)，ダークスィートチェリー果実，タチジャコウソウ(百里香)，タチバナ(橘皮)，タチヤナギ，タマリンド種子，タマネギ，タムシバ(辛夷)，タラノキ又はその根皮，タンジン(丹参)，ダンマル，チェリー果実，チガヤ又はその根(茅根)，チコリ，チョウジ(丁子，丁香)，チョウセンゴミシ(五味子)，チョウセンダイオウ(大黄)，チョウセンニレ(蕪夷)，チョウセンニンジン(人���)，チョウセンヨモギ(艾葉)，チョレイマイタケ(猪苓)，ツキミソウ，ツバキ，ツボクサ，ツメクサ(漆姑草)，ツユクサ(鴨跖草)，ツルアズキ(赤小豆)，ツルドクダミ(何首烏)，ツルナ(蕃杏)，ツルニンジン(四葉参)，ツワブキ，デイコ，テウチグルミ，デュベリー果実，テングサ，テンダイウヤク(烏薬)，トウガ(冬瓜子)，トウガラシ(番椒)，トウキ(当帰)，トウキンセンカ，トウモロコシ又はトウモロコシ毛(南蛮毛)，トウネズミモチ(女貞子)，トウリンドウ(竜胆)，ドクダミ(十薬)，トコン(吐根)，トチバニンジン(竹節人参)，トチュウ(杜仲，杜仲葉)，トマト，トラガント，トリアカンソス種子，トルメンチラ，ドロノキ，トロロアオイ，ナイゼリアベリー果実，ナガイモ(山薬)，ナギイカダ，ナギナタコウジュ，ナズナ，ナツミカン，ナツメ(大棗)，ナニワイバラ(金桜子)，ナルコユリ(黄精)，ナンキンマメ(落花生)，ナンテン(南天実)，ニガキ(苦木)，ニガヨモギ(苦艾)，ニクズク，ニッケイ(桂皮)，ニラ(韮子)，ニワトコ(接骨木)，ニンジン，ニンニク(大蒜)，ヌルデ(五倍子)，ネギ，ノアザミ(大薊)，ノイバラ(営実)，ノコギリソウ，ノダケ(前胡)，ノバラ，ノモモ，パーム，ハイビスカス(ブッソウゲ，フウリンブッソウゲ，ローゼル)，パイナップル果実，ハカタユリ(百合)，ハカマウラボシ(骨砕補)，ハクセン(白蘚皮)，ハクルベリー果実，ハコベ(繁縷)，ハシバミ(榛子)，ハシリドコロ(ロート根)，バジル，ハス(蓮肉，蓮子)，パセリ，バタタ，ハチク(竹茹)，パチョリー，ハッカ(薄荷，薄荷葉)，ハトムギ(ヨクイニン)，ハナスゲ(知母)，バナナ，ハナハッカ，バニラビンズ，パパイヤ，ハハコグサ(鼠麹草)，ハブ草，パプリカ，ハマゴウ(蔓荊子)，ハマスゲ(香附子)，ハマビシ(シツ莉子)，ハマナス(マイ瑰花)，ハマボウフウ(浜防風)，ハマメリス，バラ(薔薇)，パリエタリア，ハルニレ(楡皮，楡白皮，楡葉)，パンノキ，ヒオウギ(射干)，ヒカゲツルニンジン(党参)，ピーカンナッツ，ヒガンバナ(石蒜，蔓珠沙華)，ヒキオコシ(延命草)，ヒシ(菱実)，ピスタチオ，ビート，ヒトツバ(石葦)，ヒナタイノコズチ(牛膝)，ヒバ，ヒマシ，ヒマワリ，ピーマン，ヒメガマ(香蒲)，ヒメマツタケ，ピメンタ果実，ヒユ果実，ビロウドアオイ，ヒロハオキナグサ(白頭翁)，ヒロハセネガ(セネガ)，ビワ(枇杷，枇杷葉)，ビンロウ(大腹皮，檳榔子)，フウトウカズラ(南藤)，フキ(款冬花)，フキタンポポ(款冬花，款冬葉)，フジバカマ(蘭草)，フジマメ(扁豆)，ブッチャーブルーム，ブドウ果皮又は果実，ブナ，フユムシナツクサタケ(冬虫夏草)，ブラジルカンゾウ，ブラックカーラント果実，ブラックベリー果実，プラム果実，フルセラリア，ブルーベリー果実，プルーン，ブロンドサイリウム，ブンドウ(緑豆)，ヘチマ，ベニバナ(紅花)，ベラドンナ，ベリー果実，ボイセンベリー果実，ボウフウ(防風)，ホウレンソウ，ホオズキ(登呂根)，ホオノキ(厚朴，和厚朴)，ボケ(木瓜)，ホソバオケラ(蒼朮)，ホソババレンギク，ボダイジュ，ボタン(牡丹皮)，ホップ，ホホバ，ホワートルベリー果実，ホンアンズ(杏仁)，ホンシメジ，マイズルテンナンショウ(天南星)，マオウ(麻黄)，マカデミアナッツ，マクリ(海人草)，マグワ(桑葉，桑白皮)，マダケ(竹茹)，マタタビ(木天蓼)，マツカサ，マツホド(茯苓)，マリーゴールド，マルバノジャジン(杏参)，マルベリー果実，マルメロ，マロニエ，マンゴー，マンゴスチン，マンシュウグルミ，マンダリン果実，マンネンタケ(霊芝)，マンネンロウ，ミカン属植物果実(枳実)，ミシマサイコ(柴胡)，ミゾカクシ(半辺蓮)，ミソハギ(千屈菜)，ミツガシワ，ミツバ，ミツバハマゴウ(蔓荊子)，ミドリハッカ，ミモザ，ミョウガ，ミラクルフルーツ果実，ミルラ，ミロバラン，ムクゲ(木槿)，ムクノキ，ムクロジ，ムラサキ(紫根)，ムラサキトウモロコシ，メハジキ(益母草)，メボウキ，メラロイカ，メリッサ，メリロート，メロン果実，モウコヨモギ，モウソウチク，モクレン(辛夷)，モッコウ(木香)，モミジバダイオウ，モモの果実，種(桃仁)又は葉(桃葉)，モヤシ，モレロチェリー果実，モロヘイヤ，ヤカワムラサキイモ，ヤクチ(益智)，ヤグルマギク，ヤグルマソウ，ヤグルマハッカ，ヤシャブシ（矢車），ヤチヤナギ，ヤツデ(八角金盤)，ヤドリギ(柳寄生)，ヤナギタデの葉，ヤブガラシ，ヤブコウジ(紫金牛)，ヤマゴボウ(商陸)，ヤマノイモ(山薬)，ヤマハンノキ(山榛)，ヤマモモ(楊梅皮)，ユーカリ，ユッカ・ブレビフォリア，ユキノシタ(虎耳草)，ユズ果実，ユリ，ヨモギ(艾葉)，ヨロイグサ，ライム果実，落花生，ラカンカ果実，ラズベリー果実，ラベンダー，リュウガン(竜眼肉)，緑茶，リンゴ果実，ルバス・スアビシムス(甜涼)，レタス，レッドカーラント果実，レモン果実，レモングラス，レンギョウ(連翹)，レンゲソウ，ロウヤシ，ローガンベリー果実，ローズヒップ，ローズマリー，ローマカミツレ，ワカメ，ワサビ，ワレモコウ(地楡)などがある。
【００３４】
また動物系原料由来の素材としては、鶏冠抽出物，牛・人の胎盤抽出物，豚・牛の胃や十二指腸あるいは腸の抽出物若しくはその分解物，水溶性コラーゲン，アシル化コラーゲン等のコラーゲン誘導体，コラーゲン加水分解物，エラスチン，エラスチン加水分解物，水溶性エラスチン誘導体，ケラチン及びその分解物，シルク蛋白およびその分解物，豚・牛血球蛋白分解物（グロビンペプチド），豚・牛ヘモグロビン分解物（ヘミン，ヘマチン，ヘム，プロトヘム，ヘム鉄等），牛乳，カゼイン分解物，脱脂粉乳およびその分解物，鶏卵，魚肉およびその分解物など。
【００３５】
[14]微生物培養代謝物
酵母代謝物，酵母菌抽出エキス，米発酵エキス，米糠発酵エキス，ユーグレナ抽出物，脱脂粉乳の乳酸発酵物など。
【００３６】
[15]α−ヒドロキシ酸
グリコール酸，クエン酸，リンゴ酸，酒石酸，乳酸など。
【００３７】
[16]無機顔料
無水ケイ酸，ケイ酸マグネシウム，タルク，カオリン，ベントナイト，マイカ，雲母チタン，オキシ塩化ビスマス，酸化ジルコニウム，酸化マグネシウム，酸化亜鉛，酸化チタン，炭酸カルシウム，炭酸マグネシウム，黄酸化鉄，ベンガラ，黒酸化鉄，グンジョウ，酸化クロム，水酸化クロム，カーボンブラック，カラミンなど。
【００３８】
[17]紫外線吸収剤
ｐ−アミノ安息香酸誘導体，サルチル酸誘導体，アントラニル酸誘導体，クマリン誘導体，アミノ酸系化合物，ベンゾトリアゾール誘導体，テトラゾール誘導体，イミダゾリン誘導体，ピリミジン誘導体，ジオキサン誘導体，カンファー誘導体，フラン誘導体，ピロン誘導体，核酸誘導体，アラントイン誘導体，ニコチン酸誘導体，ビタミンＢ６誘導体，オキシベンゾン，ベンゾフェノン，グアイアズレン，シコニン，バイカリン，バイカレイン，ベルベリンなど。
【００３９】
[18]収斂剤
乳酸，酒石酸，コハク酸，クエン酸，アラントイン，塩化亜鉛，硫酸亜鉛，酸化亜鉛，カラミン，ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛，硫酸アルミニウムカリウム，レソルシン，塩化第二鉄，タンニン酸など。
【００４０】
[19]抗酸化剤
アスコルビン酸及びその塩，ステアリン酸エステル，トコフェロール及びそのエステル誘導体，ノルジヒドログアセレテン酸，ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ），ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ），パラヒドロキシアニソール，没食子酸プロピル，セサモール，セサモリン，ゴシポールなど。
【００４１】
[20]抗炎症剤
イクタモール，インドメタシン，カオリン，サリチル酸，サリチル酸ナトリウム，サリチル酸メチル，アセチルサリチル酸，塩酸ジフェンヒドラミン，ｄ又はｄｌ−カンフル，ヒドロコルチゾン，グアイアズレン，カマズレン，マレイン酸クロルフェニラミン，グリチルリチン酸及びその塩，グリチルレチン酸及びその塩など。
【００４２】
[21]殺菌・消毒薬
アクリノール，イオウ，塩化ベンザルコニウム，塩化ベンゼトニウム，塩化メチルロザニリン，クレゾール，グルコン酸カルシウム，グルコン酸クロルヘキシジン，スルファミン，マーキュロクロム，ラクトフェリン又はその加水分解物など。
【００４３】
[22]香料
ジャコウ，シベット，カストリウム，アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精油，アンゲリカ精油，イランイラン精油，イリス精油，ウイキョウ精油，オレンジ精油，カナンガ精油，カラウェー精油，カルダモン精油，グアヤクウッド精油，クミン精油，黒文字精油，ケイ皮精油，シンナモン精油，ゲラニウム精油，コパイババルサム精油，コリアンデル精油，シソ精油，シダーウッド精油，シトロネラ精油，ジャスミン精油，ジンジャーグラス精油，杉精油，スペアミント精油，西洋ハッカ精油，大茴香精油，チュベローズ精油，丁字精油，橙花精油，冬緑精油，トルーバルサム精油，バチュリー精油，バラ精油，パルマローザ精油，桧精油，ヒバ精油，白檀精油，プチグレン精油，ベイ精油，ベチバ精油，ベルガモット精油，ペルーバルサム精油，ボアドローズ精油，芳樟精油，マンダリン精油，ユーカリ精油，ライム精油，ラベンダー精油，リナロエ精油，レモングラス精油，レモン精油，ローズマリー精油，和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成香料など。
【００４４】
[23]色素・着色剤
赤キャベツ色素，赤米色素，アカネ色素，アナトー色素，イカスミ色素，ウコン色素，エンジュ色素，オキアミ色素，柿色素，カラメル，金，銀，クチナシ色素，コーン色素，タマネギ色素，タマリンド色素，スピルリナ色素，ソバ全草色素，チェリー色素，海苔色素，ハイビスカス色素，ブドウ果汁色素，マリーゴールド色素，紫イモ色素，紫ヤマイモ色素，ラック色素，ルチンなど。
【００４５】
[24]甘味料
砂糖，甘茶，果糖，アラビノース，ガラクトース，キシロース，ステビア，マンノース，麦芽糖，蜂蜜，ブドウ糖，ミラクリン，モネリン，甘草抽出物など。
【００４６】
[25]栄養強化剤
貝殻焼成カルシウム，シアノコラバミン，酵母，小麦胚芽，卵黄粉末，ヘミセルロースなど）
【００４７】
[26]その他
保湿剤、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質及びその分解物、動・植物性多糖類及びその分解物、動・植物性糖蛋白質及びその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが上げられ、これらとの併用によって、相加的及び相乗的な効果が期待できる。
【００４８】
【実施例】
酵母の培養例１
下記の培地を用い、塩酸にてｐＨを６に調整する。これに金属化合物（0.01g）を適量の精製水及び／又はＤＭＳＯに溶解又は分散させ（必要ならばフィルター等で滅菌処理し）たものを添加する。次いで、この培地に酵母（ここでは、Saccharomyces cerevisiae，１白金耳）を添加し、28〜35℃で４日間振とう培養してから培養液を遠心分離して菌体を回収し、精製水で十分洗浄する。
尚、培養時間（日数）については、例えば、培地の濁度等を指標にして定常期となるまでを目安とすればよい。また、培養の速度を上げる目的で、培養途中にグルコースなどの炭素源を加えてもよい。
《培地》    グルコース                ４     ｇ
リン酸２カリウム          ０.５  ｇ
塩化ナトリウム            ０.０５ｇ
硫酸マグネシウム          ０.１  ｇ
塩化カルシウム            ０.０５ｇ
硫酸アンモニウム          ０.２  ｇ
精製水                １００     ｍＬ
【００４９】
【実施例】
酵母の培養例２
前記と同じ培地を用い、塩酸にてｐＨを６に調整する。これに酵母（１白金耳）を添加し、２日間（定常期まで）振とう培養する。次いで、この培養液中に金属化合物（0.01g）を適量の精製水及び／又はＤＭＳＯに溶解又は分散させ（必要ならばフィルター等で滅菌処理し）たものを添加して、さらに２日間振とう培養する。この培養液を遠心分離し、菌体を回収して同様に洗浄する。
【００５０】
【実施例】
酵母の抽出例１
前記培養例１または２の方法で得られた酵母（0.1〜1.0kg）を、30％エタノール溶液（10L）に懸濁させ、この懸濁液をホモミキサーにて十分ホモジネート処理した後、遠心分離して濾過する。
【００５１】
【実施例】
酵母の抽出例２
前記培養例１または２の方法で得られた酵母（0.1〜1.0kg）を、精製水（10L）に懸濁させ、45℃で、48時間程度自己消化させる。次いで、これを凍結乾燥または減圧濃縮し、30％1,3-ブチレングリコール溶液（10L）を添加して十分撹拌抽出した後、遠心分離して濾過する。
【００５２】
【実施例】
酵母の抽出例３
前記培養例１または２の方法で得られた酵母（0.1〜1.0kg）を、精製水（10L）に懸濁させ、さらにプロテアーゼ（例えば、科研製薬製：アクチナーゼＡまたはＢ、あるいは天野製薬製プロテアーゼアマノＰ，3〜50万ユニット）を添加し、37℃前後で、一昼夜反応させる。
次いで、酵素を失活させた後、30％濃度になるようにプロピレングリコールを添加し、遠心分離して濾過する。
【００５３】
【実施例】
酵母の抽出例４
前記培養例１または２の方法で得られた酵母（0.1〜1.0kg）を、3％塩酸（10L）に懸濁させ、温度40〜60℃にて3〜8時間、時々撹拌しながら加水分解する。分解終了後、アルカリを用いて中和し、遠心分離して濾過する。
【００５４】
抽出例１〜４で得られた酵母抽出物に含まれる金属の含量は、エキス固形分に対しておよそ0.5〜4.5重量％であった。
【００５５】
【実施例】
チロジナーゼ活性抑制作用
《試    料》
前記抽出例１〜４で得られた酵母抽出物。
比較対照として金属化合物を添加しないで培養処理した通常の酵母の抽出物を供試した。
《反 応 液》
L-Tyrosine溶液(1.0mg／mL)                        1.0mL
Mcllvain Buffer(pH6.8)                                 1.0mL
試料                                                       1.0mL
マッシュルームチロジナーゼ(2,500unit/mL)      0.2mL
《方    法》
反応液を37℃で、20分間反応させ、吸光度475nmにて生成したドーパクロム量を測定する。尚、阻害率（％）は、次式（数１）により算出した。
【数１】
0003810836.tif 000002
《結    果》
次表（表１）の通りであった。本発明の酵母抽出物には、低濃度でメラニン生成抑制作用が認められ、シミ，ソバカス等の防止効果が期待できると示唆された。また、通常の酵母抽出物に比べ、その効果が高いことを確認した。
【表１】
0003810836.tif 000003
【００５６】
【実施例】
メラニン色素分解作用
《試    料》
前記抽出例１〜４で得られた酵母抽出物。
比較対照として金属化合物を添加しないで培養処理した通常の酵母の抽出物を供試した。
《寒天平板》
下記を加温溶解し、平板を作成する。
L-Tyrosine溶液                      20mg
寒天                               0.26g
精製水                              20mL
《方    法》
寒天平板に、マッシュルームチロジナーゼ100μL(2,500unit/mL)を塗り広げ、37℃で４時間放置し黒化させる。
黒化した平板に直径８mmのペーパーディスクを置き、試料を30μL添加した後、37℃で３日間放置し、黒色が薄くなった部分の直径を測定する。
《結    果》
次表（表２）の通りであった。
本発明の酵母抽出物には、美白作用があると認められ、シミ、ソバカス等を低減する可能性が示唆された。
【表２】
0003810836.tif 000004
【００５７】
削除
【００５８】
削除
【００５９】
削除
【００６０】
【実施例】
安全性試験
1)皮膚一次刺激性試験
抽出例１〜４によって得られた酵母抽出物を、固形分中の金属含量で各濃度に調整し、背部を除毛したハートレー系モルモット（１群５匹，体重320ｇ前後）の皮膚に貼付した。判定は、貼付後24時間に一次刺激性の評点法により紅斑および浮腫を指標として行った。
その結果は次表（表３）の通りで、すべての動物において、何等、紅斑および浮腫を認めず陰性と判定された。
【表３】
0003810836.tif 000005
【００６１】
【実施例】
安全性試験
2)皮膚累積刺激性試験
抽出例１〜４によって得られた酵母抽出物を、固形分として１Ｗ/Ｖ％濃度の水溶液に調整し、側腹部を除毛したハートレー系モルモット（雌性，１群５匹，体重320ｇ前後）の皮膚に１日１回の頻度で、週５回，0.5mL／動物当りを塗布した。
塗布は、４週にわたって、また除毛は各週の最終塗布日に行った。
判定は、各週の最終日の翌日に一次刺激性の評点法により、紅斑および浮腫を指標として行った。
その結果、すべての動物において、塗布後１〜４週目にわたって、何等紅斑および浮腫を認めず陰性と判定された。
【００６２】
【実施例】
安全性試験
3)急性毒性試験
抽出例１〜４によって得られた酵母抽出物を減圧濃縮した後、乾燥する。試験前、４時間絶食させたddy系マウス（雌性，１群５匹，体重28ｇ）に2,000mg／kg量経口投与し、毒性症状の発現、程度などを経時的に観察した。
その結果、すべてのマウスにおいて14日間何等異常を認めず、また解剖の結果も異常がなかった。LD５０は2,000mg／kg以上と判定された。
【００６３】
【実施例】
安全性試験
4)変異原性試験
(a)供試菌株および保存
Salmonella typhimurium TA100 および TA98
菌株の保存は、Difco社製Nutrient broth(0.8g)，塩化ナトリウム(0.5g)，および精製水(100mL)の割合の溶液（ニュートリエントプロス液）を調整、試験管に8mL分注、高圧蒸気滅菌した液に接種、37℃で15時間培養後、DMSO(0.7mL)を加え急速凍結後、-80℃で保存した。
(b)最少グルコース寒天平板培地の調整
(1)Vogel-Bonner最小培地Eを調整し、高圧蒸気滅菌した液(100mL)に蒸留水(100mL)を加えた。（Vogel-Bonner最少培地Eの組成：硫酸マグネシウム・７水塩(2g)，クエン酸・１水塩(20g)，リン酸二カリウム・無水塩(100g)，リン酸水素アンモニウムナトリウム・４水塩(35g)を蒸留水に混合し１Lとする。）
(2)グルコース(20g)に蒸留水(100mL)を加えた。
(3)寒天(15g)に蒸留水(700mL)を加えた。
(4)上記(1)，(2)及び(3)を高圧蒸気滅菌した後、約60℃まで放冷し、(1)，(2)を(3)に移し混合する。
(5)上記(4)をシャーレに30mLずつ分注する。
(c)トップアガーの調整
寒天0.6%および塩化ナトリウム0.5%割合の水溶液を調整し、高圧滅菌後保存、使用時、予めろ過滅菌した1/10溶液の0.5mM−L-ヒスチジンおよび0.5mM-ビオチンを加え45℃に保温した。
(d)Ｓ９ Ｍｉｘの調整
オリエンタル酵母社製Ｓ９およびＳ９Ｍｉｘ用Cofactor-Ｉを使用法に従い調整した。
(e)菌の前培養
(a)のニュートリエントプロス液(5mL)に凍結保存菌をかきとって接種し、37℃，15時間培養後、氷中水に保存した。
(f)供試品の調整
前記抽出例１〜４によって得られた酵母抽出物を乾燥させ、DMSOに溶解した。
(g)試験操作
試験液(0.1mL)，Ｓ９Ｍｉｘ（代謝活性化による場合）又は、0.1M−Naリン酸緩衝液pH7.4（代謝活性によらない場合）(0.5mL)，および前培養菌(0.1mL)を順次試験管に加え、37℃，20分間振とう後、トップアガー(2mL)を加え、混合して最少グルコース寒天平板上に重層固化させた。既知変異原物質を用いた陽性対照試験も同様に行った。
37℃，48時間の培養後、復帰突然変異により生じたコロニー数をカウントした。結果を次表（表４および５）に示す。これより、本発明の酵母抽出物の突然変異誘起性は陰性と認められた。
【表４】
0003810836.tif 000006
【表５】
0003810836.tif 000007
【００６４】
【実施例】
各種化粧料組成物の製造
本発明による酵母抽出物を使用し、各種化粧料組成物を製造した。
以下にその処方例を示すが、本発明による皮膚美白用化粧料組成物は、これらに限定されるわけではない。
【００６５】
1)ローションの製造例
次の処方によりローションを製造した。
重量％
１．ソルビット                                        ２
２．１,３−ブチレングリコール                        ２
３．ポリエチレングリコール1000                      １
４．ポリオキシエチレンオレイルエーテル（25E.O.）    ２
５．エタノール                                      １０
６．抽出例１の酵母抽出液(固形分1.0％)              １０
７．植物抽出液（アロエ，ハマメリス）                  ３
８．pH調整剤                                        適量
９．防腐剤                                          適量
10．精製水                                １００とする残余
【００６６】
2)乳液の製造例
次の処方により乳液を製造した。
重量％
１．スクワラン                                        ３
２．ワセリン                                          １
３．ステアリルアルコール
０.３
４．ソルビタンモノステアレート
１.５
５．ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレート      ３
６．１,３−ブチレングリコール                         ５
７．抽出例２の酵母抽出液(固形分1.6％)                 ８
８．水溶性コラーゲン                                  １
９．防腐剤                                          適量
10．精製水                              １００とする残余
【００６７】
3)クリームの製造例
次の処方によりクリームを製造した。
重量％
１．スクワラン                                      ２０
２．ミツロウ                                          ５
３．精製ホホバ油                                      ５
４．グリセリンモノステアレート                        ２
５．ソルビタンモノステアレート                        ２
６．ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート  ２
７．グリセリン                                        ５
８．抽出例３の酵母抽出液(固形分2.0％)                 ５
９．牛胎盤エキス                                      ２
10．防腐剤                                          適量
11．精製水                              １００とする残余
【００６８】
4)ボディーソープの製造例
次の処方によりボディーソープを製造した。
重量％
１．ラウリン酸カリウム                              １５
２．ミリスチン酸カリウム                              ５
３．プロピレングリコール                              ５
４．抽出例２の酵母抽出液(固形分1.5％)               １５
５．pH調整剤                                        適量
６．防腐剤                                          適量
７．精製水                              １００とする残余
【００６９】
削除
【００７０】
削除
【００７１】
削除
【００７２】
5)浴用剤（Ａタイプ）の製造例
次の処方により浴用剤を製造した。
重量％
１．炭酸水素ナトリウム                              ５６
２．無水硫酸ナトリウム                              ３０
３．ホウ砂                                            ２
４．抽出例４の酵母抽出物の乾燥粉末                  １０
５．植物抽出末（カミツレ，トウキ）                    ２
【００７３】
6)浴用剤（Ｂタイプ）の製造例
次の処方により浴用剤を製造した。
重量％
１．精製ホホバ油                                      ５
２．ポルオキシエチレンソルビタンモノラウレート      ２０
３．グリセリンモノステアレート                        ５
４．流動パラフィン                                    ２
５．ラウリン酸ジエタノールアミド                      ３
６．抽出例２の酵母抽出液(固形分1.4％)               ２５
７．植物抽出液（シャクヤク，アロエベラ，チンピ）    １０
８．精製水                              １００とする残余
【００７４】
【実施例】
各種外用製剤の使用試験
実施例で製造したローションおよび浴用剤Ａと、抽出例１〜４の酵母抽出物の代わりに、通常の酵母より同操作により得た抽出物を添加したものとを男女パネラー（全15名）に１カ月間づつ自由に使用してもらい、それぞれを比較した使用感についてのアンケート調査を求めた。
その結果は、次表（表６）の通りである。
【表６】
0003810836.tif 000008
【００７５】
【発明の効果】
本発明による皮膚美白用化粧料組成物は、メラニン生成抑制作用、メラニン色素分解作用といった美白効果に優れ、しかも安全性が極めて高い。
こうした効果は、従来、化粧料に用いられてきた通常の酵母やその抽出物に比べて格段優ているものであり、その用途における有用性は非常に高い。
本発明による皮膚美白用化粧料組成物は繰り返し使用することによって、肌に潤いを与え肌質を改善するとともに、美白効果が得られる。
本発明による皮膚美白用化粧料組成物は、極めて日常的な手段をもって人の美容のために大きく貢献できるものと考える。
【図面の簡単な説明】
【図１】ラウリル硫酸ナトリウム含有ワセリンを塗布することにより肌荒れを作成したハートレー系モルモットに、金属化合物含有培地で培養した酵母の抽出物を飼料として与え、３日後の肌荒れ度を判定基準に基づき評価した結果を表す。
尚、グラフ値は、各試料毎に供試したモルモット５匹の評価点の合計値を表す。