(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビタミンＫ2を有効成分とする抗動脈硬化治療剤。
【請求項２】
動脈硬化が冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動  脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症から選ばれた１種以上である請求項１記載の  抗動脈硬化治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症等の動脈硬化の治療・改善剤に関する。
【０００２】
【発明の背景】
循環器疾患は、血栓と動脈壁における硬化性変化が相互に影響し合って進展する。その速度は一般に遅く、徐々に動脈壁の肥厚が進み、局所的に動脈硬化が生成する。生成した動脈硬化は、さらに石灰化に進展する。したがって動脈壁の石灰化は、動脈硬化の終末像であり、その有効な治療方法は、いまだ見い出されていなかった。
【０００３】
前述のように、動脈硬化症は徐々に進展するため、最初は自覚症状も発現せず、他覚所見も認められない。しかし、やがて病態の進展と共に、動悸・息切れ、四肢の冷感・痛み、一過性発作、むくみ等の症状が発現し、ついには心臓発作、脳出血、四肢の壊死、腎不全、歩行障害、知覚・運動障害等の重篤な病状を呈し、ついには死にも至る重篤な疾患である。日本国内では、死因統計の筆頭は癌に譲るものの、心疾患および脳疾患の大半は動脈硬化に起因することを考慮すると、動脈硬化症は死因として最も多いと言える。
【０００４】
このように動脈硬化は体内多部位にわたり、かつ重篤あるいは予後不良な疾患であり、臨床上有用性の高い治療・改善薬が求められていた。
【０００５】
【従来技術】
従来、動脈硬化症に対して直接有効な薬剤はなく、血清コレステロール低下剤（脂質低下剤）あるいは血小板凝集抑制剤（抗血栓剤）を投与して、間接的に動脈硬化の危険因子（リスク・ファクター）を取り除く療法のみであった。
【０００６】
【本発明が解決しようとする問題点】
しかし、動脈硬化の危険因子は血清コレステロールや血栓に限らず、中性脂肪、肥満、糖尿病、高尿酸血症、免疫疾患、加齢、高血圧、ストレス、刺激物摂取、遺伝、性差、民族差など極めて多岐に亘っており、脂質低下剤や抗血栓剤の投与で全ての危険因子を取り除くことは、実際には不可能である。
【０００７】
従って実際には、各種の動脈硬化症に対して直接的な治療・改善効果を有し、かつ安全性にも優れた薬剤がないのが現状であり、新規な医薬品の開発が強く望まれていた。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、ヒトを死にも至らす動脈硬化の研究に永年取り組み、また臨床上有用な動脈硬化症の治療・改善薬についても探索してきた。その結果、意外にも下記一般式で表されるメナテトレノン誘導体が、抗動脈硬化治療剤として所期の目的を達成できることを見い出し本発明を完成した。
【０００９】
【化３】
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【００１０】
従って本発明の目的は、従来臨床上有効な薬剤のなかった冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症等の各種動脈硬化症に対する臨床上の有用性が高く、かつ安全性に優れた、新規な治療・改善剤を提供することにある。さらに具体的には、メナテトレノン誘導体を有効成分とする、抗動脈硬化症治療剤に関する。
【００１１】
ここで、本発明にかかるメナテトレノン誘導体は、下記一般式で表される。
【００１２】
【化４】
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【００１３】
式中、下記化学式で表される結合は、単結合(C-C)または二重結合(C=C)を意味する。
【００１４】
【化５】
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【００１５】
さらに、本発明にかかるメナテトレノン誘導体は、分子内に二重結合あるいは不斉炭素原子を有し、幾何異性体あるいは光学異性体が存在することがあるが、本発明においては限定されず、いずれか単一の異性体であってもよいし、２種類以上の混合物であってもよい。メナテトレノン誘導体としてさらに具体的には、例えば以下の化合物を挙げることができるが、本発明がこれらに限定されないことは言うまでもない。
(1) ２−メチル−３−［（２Ｅ，６Ｅ，１０Ｅ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２，６，１０，１４−ヘキサデカテトラエニル］ナフトキノン、（一般名；ビタミンK2）
(2) ２−メチル−３−［（２Ｅ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２−ヘキサデカエニル］ナフトキノン、（一般名；ビタミンK1）
(3) ２−メチル−３−［（２Ｚ，６Ｅ，１０Ｅ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２，６，１０，１４−ヘキサデカテトラエニル］ナフトキノン、（一般名；シス−ビタミンK2）
(4) ２−メチル−３−［（２Ｚ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２−ヘキサデカエニル］ナフトキノン、（一般名；シス−ビタミンK1）
【００１６】
なお、本発明化合物は血液凝固系活性化作用を有する化合物として、既に新生児低プロトロンビン血症・分娩時出血・抗生物質投与中に起こる低プロトロンビン血症・胆道閉塞あるいは胆汁分泌不全による低プロトロンビン血症・クマリン系抗凝血薬投与中に起こる低プロトロンビン血症等に対して広く臨床使用されている化合物であり、長期間投与した際の安全性は確認されている。またマウス・ラット・イヌを用いた毒性試験においても、毒性が極めて低いことが確認されている。
【００１７】
次に本発明にかかる代表化合物として、２−メチル−３−［（２Ｅ，６Ｅ，１０Ｅ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２，６，１０，１４−ヘキサデカテトラエニル］ナフトキノン、（一般名；ビタミンK2）の急性毒性試験結果を示す。
【００１８】
【急性毒性試験】
（方法）
7〜8週齢のSD系ラット、ICR系マウスおよびビーグル犬をそれぞれ雌雄各5匹用い、経口・皮下・腹腔内投与による単回投与毒性試験を実施した。（媒体；5%アラビアゴム）
【００１９】
（結果）
LD50値(mg/Kg)を下表にまとめる。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
表１から、本発明化合物のLD50値は高く、安全性が極めて高いことが明らかである。
【００２２】
次に本発明化合物の投与剤型としては、例えば散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤などの経口製剤、軟膏、貼付剤等の外用剤、坐剤および注射用製剤等が挙げられる。製剤化の際には、通常の製剤担体を用いて常法により製造することができる。
【００２３】
すなわち経口製剤を製造するには、メナテトレノン誘導体と賦形剤、さらに必要に応じて酸化防止剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤等とする。
【００２４】
賦形剤としては、例えば乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素などが、結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコール・ポリオキシエチレン・ブロックポリマー、メグルミンなどが、崩壊剤としては、例えば澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、カルボキシメチルセルロース・カルシウム等が、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤・顆粒剤には糖衣、その他必要により適宜コーティングすることはもちろん差支えない。
【００２５】
また注射用製剤を製造する際には、メナテトレノン誘導体にpH調整剤、溶解剤、等張化剤などと、必要に応じて溶解補助剤、安定化剤、酸化防止剤などを加えて、常法により製剤化する。
【００２６】
外用剤を製造する際の方法は限定されず、常法により製造することができる。すなわち製剤化にあたり使用する基剤原料としては、医薬品、医薬部外品、化粧品等に通常使用される各種原料を用いることが可能である。
【００２７】
使用する基剤原料として具体的には、例えば動植物油、鉱物油、エステル油、ワックス類、高級アルコール類、脂肪酸類、シリコン油、界面活性剤、リン脂質類、アルコール類、多価アルコール類、水溶性高分子類、粘土鉱物類、精製水などの原料が挙げられ、さらに必要に応じ、pH調整剤、酸化防止剤、キレート剤、防腐防黴剤、着色料、香料などを添加することができるが、本発明にかかる外用剤の基剤原料はこれらに限定されない。また必要に応じて血流促進剤、殺菌剤、消炎剤、細胞賦活剤、ビタミン類、アミノ酸、保湿剤、角質溶解剤等の成分を配合することもできる。なお上記基剤原料の添加量は、通常外用剤の製造にあたり設定される濃度になる量である。
【００２８】
本発明におけるメナテトレノン誘導体の臨床投与量は、症状、重症度、年齢、合併症などによって異なり限定されず、また塩の種類・投与経路などによっても異なるが、通常成人１日あたり1mg〜2000mgであり、好ましくは10mg〜1500mgであり、さらに好ましくは50mg〜1000mgであり、これを経口、静脈内、筋肉内、経直腸または経皮投与する。
【００２９】
【発明の効果】
次に本発明化合物の動脈硬化症治療・改善剤としての有用性を示すため、以下に効果例として薬理実験例を掲げるが、本発明化合物あるいは用途がこれらに限定されないことは言うまでもない。
【００３０】
本発明化合物の代表例として、２−メチル−３−［（２Ｅ，６Ｅ，１０Ｅ）−３，７，１１，１５−テトラメチル−２，６，１０，１４−ヘキサデカテトラエニル］ナフトキノン、（一般名；ビタミンK2）を評価対象・被験化合物とした。
【００３１】
実験１ 閉経後の婦人における腹部大動脈硬化とビタミンK2摂取量の評価
（方法）
(1) 大動脈硬化の評価
60〜79才の婦人を対象に無作為抽出し、lumbara spine (T12-S1) の lateral Ｘ線撮影で、腹部大動脈における石灰化の有無を、専門家２名がブラインドで判定した。これらの石灰化は内膜での粥状動脈硬化の存在を示す。
【００３２】
(2) ビタミンK2摂取量の評価
毎日のビタミンK2摂取量は、ビタミンK2を多く含有する素材に重点をおいた食事内容調査を行い、摂取した食物中のビタミンK2含有量を各種栄養表に基づいて決定した。
【００３３】
（結果）
動脈硬化の有無とビタミンK2摂取量（平均±標準誤差、μg/日）との関係を、年齢層別に表２および図１に示した。これらから、ビタミンK2の摂取量が少ない群では、動脈硬化の発生頻度が統計的にも有意に高いことが明らかである。
【００３４】
【表２】
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【００３５】
実験２ 動脈硬化ラットモデルにおけるビタミンK2の効果
（方法）
７週齢雄性SDラットを下表のように７群に分け、Ａ群にはビタミンD2を、Ｂ群にはビタミンD2とビタミンK2(低用量)を、Ｃ群にはビタミンD2とビタミンK2(高用量)を、それぞれ投与した。
【００３６】
【表３】
0003860849.tif 000007
【００３７】
５週間飼育後、各群の20時間尿を採取し、尿中カルシウム、リンおよびクレアチニン濃度を測定した。
また、６週間飼育後、各群とも脱血死させ、血液、大動脈（弓部から胸部）と腎臓を採取した。
血液からは血清を分離し、血清カルシウムおよびリン濃度を測定した。
大動脈および腎臓は脱脂・脱水・灰化し、カルシウムおよびリン含量を測定した。
【００３８】
なお、カルシウム濃度の測定は原子吸光法により、無機リン濃度の測定はゴールデンバーグ(Goldenberg)法により、クレアチニンは酵素法により、それぞれ測定した。
【００３９】
（結果）
測定結果を下表に示す。（対照群に対する各群の結果をt-検定にて比較検定した）
【００４０】
【表４】
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【００４１】
表４から明らかなように、ビタミンD2を投与したＡ群では、大動脈中のカルシウムおよびリン含量が有意に増加し動脈硬化が生成したが、ビタミンK2(低用量)を投与したＢ群、さらにビタミンK2(高用量)を投与したＣ群では、用量依存的に。動脈のカルシウムおよびリン含量の増加が抑制され、特にＣ群においては有意な差が認められた。
【００４２】
腎臓のカルシウムおよびリン含量も有意に増加し腎動脈硬化が生成したが、ビタミンK2(低用量)を投与したＢ群、さらにビタミンK2(高用量)を投与したＣ群では、大動脈と同様用量依存的に、腎臓のカルシウムおよびリン含量の増加抑制が認められた。
【００４３】
一方、血清中のカルシウムおよびリン濃度、および尿中のカルシウム、リンおよびクレアチニン濃度には、各群間において差は認められなかった。
【００４４】
実験３ コレステロール負荷ウサギモデルにおけるビタミンK2の効果
（方法）
４ヶ月齢ニュージーランド・ホワイト(NZW)系雄性ウサギ（体重、2.5-2.8Kg）60匹を、ウサギ固形飼料RM-4(船橋農場製)で１ヶ月飼育した後、コレステロールを0.5%負荷したRM-4で３日間飼育した(100g/匹/日)。耳介動脈から採血して血清総コレステロール値（以下、TC値）を測定し、値が極端に高い個体あるいは極端に低い個体を除外して、40匹を選んだ。TC値の平均および分散が各群間で均等になるように、一群８匹の計５群(Ａ〜Ｅ群)に分けた。
【００４５】
これらのウサギをすべてコレステロール無添加のRM-4で３週間飼育した後、下表に従って、被験化合物(ビタミンK2)添加あるいは無添加のRM-4で10週間飼育した(100g/匹/日)。
【００４６】
【表５】
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【００４７】
表６および図２に、各群における、投与開始前、１、２、４、６、８および10週後のTC値を平均±標準誤差で示す。
【００４８】
【表６】
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【００４９】
表６および図２から、0.5%コレステロール負荷群では、対照群と比較して、TC値が経時的に増加しているのに対し、本発明化合物であるビタミンK2を同時に投与したＣ〜Ｅ群では、TC値の増加が有意に抑制されたことが明らかである。［0.5%コレステロール負荷群(Ｂ群)に対するＣ〜Ｅ各群の結果を、対応のあるt-検定にて比較検定した］
【００５０】
以上の結果から、ビタミンK2を代表とするメナテトレノン誘導体が各部位における動脈硬化と密接な関連があり、かつ抑制効果を有し、さらに血清コレステロール低下作用をも有していることが明らかであり、またこれらメナテトレノン誘導体の安全性の高さも併せて考えると、本発明にかかるメナテトレノン誘導体は、抗動脈硬化剤として臨床上極めて優れた有用性を期待できることが明らかである。
【００５１】
【図面の簡単な説明】
【図１】  閉経後の婦人における、腹部大動脈硬化の有無とビタミンK2摂取量との関係を、年齢層別に示した図である。（平均±標準誤差で示す）
【図２】  コレステロール負荷ウサギモデルにおける、ビタミンK2の血清総コレステロール増加抑制効果を示した図である。（平均±標準誤差で示す）
【図１】
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【図２】
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