(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
重水素ランプからの光を回折格子にて分光し、その光をカラムで分離された液体試料が流れるフローセルに照射し、このフローセルを通過した光をホト検出器で検出することにより試料の分析を行う液体クロマトグラフにおいて、前記重水素ランプをシースルー重水素ランプで構成するとともに、このシースルー重水素ランプの前段に低圧水銀ランプ及び前記低圧水銀ランプからの光を前記シースルー重水素ランプに導く光学系を設け、波長の正確さをチェックするバリデーションを行う時に前記低圧水銀ランプからの光をシースルー重水素ランプ中を透光させ、前記シースルー重水素ランプの光路を経て前記ホト検出器に入射し得るように構成したことを特徴とする液体クロマトグラフ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は液体クロマトグラフに係わり、特にその分光光度計検出器に関する。
【０００２】
【従来の技術】
液体クロマトグラフをはじめ各種分析装置においては、分析の信頼性を上げるために、分析装置の正確さのチェックいわゆるバリデーションが行われている。特に紫外可視光による分光光度計検出器（ＵＶ検出器）を使用する液体クロマトグラフにおいては、このＵＶ検出器の正確さを示す指標の一つとしてＵＶ検出器の波長の正確さ、すなわちＵＶ検出器が所要の正確な波長で検出しているか否かを簡便かつ正確に測定する必要がある。
【０００３】
すなわち、従来における液体クロマトグラフの分光光度計検出器の構成は図２に示すとおりであるが、図において、１は検出器の光源である重水素ランプで、この光はレンズ２で集光され、スリット３を経て回折格子４に入射される。そして回折格子４によって分光され、さらに集光された光はフローセル６に入射されるようになっている。フローセル６は筒状の光路が形成されているとともに、図示されていない液体クロマトグラフのカラムで分離された検出成分の流出液が流れる流路６１が前記光路上に設けられている。したがって、フローセル６に照射された光は液体試料中を透過する。そしてフローセル６を通過した光はホトダイオード７で検出されるのである。
【０００４】
以上の構成において、バリデーションを行うときには、ホルミウムフィルタ５を光路内に挿入し、光の吸収極大が得られる波長を測定し、波長の正確さのチェックを行っている。すなわち、ホルミウムフィルタ５を挿入したときに、ホルミウムフィルタ５と同じ３６０ｎｍの波長域に光の吸収極大が得られるか否かで検出器の精度をチェックする。
また、ホルミウムフィルタ５を用いずに、カフェインなど吸収極大波長が既知の実サンプルをフローセル６の流路６１に送液して吸収極大波長を測定し、波長の正確さをチェックする方法も行われている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、このホルミウムフィルタ５を挿入する方法は、簡易ではあるがその吸収極大値が３６０ｎｍ付近にあり、通常液体クロマトグラフの測定に使用する波長範囲２００〜２５０ｎｍとはかけ離れているので、この確認したい波長域で波長の正確さをチェックできない欠点があった。
【０００６】
また、カフェインなどの実サンプルをフローセル６の流路６１に送液する方法は、実用の波長範囲に近い部分での測定が可能であるが、サンプルの調整や、送液に手数を要する。さらに、一般的に吸収スペクトルがシャープでなくブロードになるので波長の正確さのチェックに誤差を生じる欠点があった。
【０００７】
本発明は以上ような問題を解決し、ＵＶ検出器の波長の正確さを簡便にチェックできる液体クロマトグラフを提供しようとするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記課題を解決するために、本発明の液体クロマトグラフにおいては、重水素ランプをシースルー重水素ランプで構成するとともに、このシースルー重水素ランプの前段に低圧水銀ランプ及び前記低圧水銀ランプからの光を前記シースルー重水素ランプに導く光学系を設け、波長の正確さをチェックするバリデーションを行う時にこの低圧水銀ランプからの光を重水素ランプの中を透光させ、前記シースルー重水素ランプの光路を経て前記ホト検出器に入射し得るように構成したものである。この低圧水銀ランプの光は波長２５４ｎｍに強い輝線があり、液体クロマトグラフの測定に使用する光の波長範囲に近いので、波長の正確さのチェックが容易となる。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明による高速液体クロマトグラフ特にその分光光度計検出器の構成を、図１に示す一実施例にしたがって説明する。
１１は検出器の光源である重水素ランプであり、２はレンズである。光源１１からの光はレンズ２で集められ、スリット３を経て回折格子４に入射する。そして回折格子４によって分光され集光された光はフローセル６に照射される。フローセル６は筒状の光路が形成されているとともに、この光路には図示していない液体クロマトグラフのカラムで分離された検出成分の液体が流される流路６１を有している。フローセル６に照射された光はこの液体試料を透過し、フローセル６を通過した光はホトダイオード７で検出される。
【００１０】
以上の構成は従来と同様であるが、本発明はこの光源の重水素ランプ１１の内方中央に孔１０を設け、その中を光が通過することができるシースルー重水素ランプを構成するとともに、光源１１の光学系の前段に低圧水銀ランプ８とレンズ９からなる光学系が設けられている。
【００１１】
以上の構成において、波長の正確さを求めるバリデーションを行うときには、シースルー重水素ランプ１１の電源は切られており、低圧水銀ランプ８から出た光は、レンズ９で収束されシースルー重水素ランプ１１の孔１０の中央に焦点が結ばれる。そしてシースルー重水素ランプ１１の孔１０を通過した光はレンズ２で集められてスリット３を経て回折格子４に入射し、さらに回折格子４によって分光され集光された光はフローセル６に入射される。フローセル６を通過した光はホトダイオード７で検出される。低圧水銀ランプ８は波長２５４ｎｍの所に強い輝線があり、液体クロマトグラフの測定に実際に使う波長は２００〜２５０ｎｍであり、両者の波長が接近した値にあるので、波長の正確さのチェックをより正確に行うことができる。通常の測定時においては、低圧水銀ランプ８の電源は切られてシースルー重水素ランプ１１の電源が入っており、このシースルー重水素ランプ１１からの発光により分析が行われる。
【００１２】
本発明の特徴は以上のとおりであるが、上記ならびに図示例に限定されるものではなく、たとえば低圧水銀ランプ８およびレンズ９は固設しないで着脱可能な構造にすることもできる。たとえばソケットを設けておき、バリデーションの際にランプを差し込む構造にすることも可能である。また低圧水銀ランプ８については、要は液体クロマトグラフの測定に使用する波長域（２００〜２５０ｎｍ）で強い輝線を有する光源であれば良く、本発明の特許請求範囲における「低圧水銀ランプ」はこれらの光源を含むものである。さらに、図示例では高速液体クロマトグラフを例にして説明したが、通常の液体クロマトグラフにも同様に適用可能である。
【００１３】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明によれば信頼性の高い低圧水銀ランプ８で、波長の正確さを簡便にかつ精度良く測定することが出来る。また、低圧水銀ランプ８の輝線は２５４ｎｍであり、重水素ランプ１１の輝線は４８６ｎｍと６５６ｎｍであるので、低圧水銀ランプ８と重水素ランプ１１を組み合わせることにより、測定波長範囲全域で検出器の波長の正確さをチェックすることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明実施例装置の構成を概略的に示す図である。
【図２】従来装置の構成を概略的に示す図である。
【符号の説明】
１……光源（重水素ランプ）
２……レンズ
３……スリット
４……回折格子
５……ホルミウムフィルタ
６……フローセル
７……ホトダイオード
８……低圧水銀ランプ
９……レンズ
１０……孔
１１……光源（シースルー重水素ランプ）
６１……流路
【図１】
0003755997.tif 000002
【図２】
0003755997.tif 000003