(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
0003817263.tif 000011
（式中、Ｒ1は（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ基、（４，５−ジヒドロ−１，３−チアゾール−２−イル）アミノ基、アミジノ基、モルホリノメチル基、ニトロ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、
0003817263.tif 000012
または
0003817263.tif 000013
を表し、
Ｒ3は水素、メトキシ基、水酸基、アセチルアミノ基、モルホリノ基、ピペリジノ基、１−ピロリジニール基またはジメチルアミノ基を表し、
ｍは０〜４を表し、
Ｒ4は水素またはメチル基を表し、
Ｒ2はＮＨ2ＣＯ（ＣＨ2）n−、２−（カルバモイル）ビニル基、またはＲ5ＯＯＣ（ＣＨ2）n−を表し、
Ｒ5はジメチルカルバモイルメチル基、水素または低級アルキル基を表し、
ｎは０〜２を表す。）
で表される化合物あるいは医薬として使用可能なその酸付加塩。
【請求項２】
式（Ｖ）
0003817263.tif 000014
（式中、Ｒ1は（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ基を表し、
Ｒ2はＮＨ2ＣＯ（ＣＨ2）n−、ｎ＝０〜２を表す。）
で表される請求項１に記載の化合物あるいは医薬として使用可能なその酸付加塩。
【請求項３】
請求項１または請求項２に記載の化合物を、単独でまたは製剤上許容され得る担体の一種以上とともに含有する医薬製剤。
【請求項４】
血栓症治療剤である請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
血栓溶解剤である請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項６】
線溶促進剤である請求項３〜５のうちいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項７】
式（II）
0003817263.tif 000015
（式中、Ｒ2はＮＨ2ＣＯ（ＣＨ2）n−、２−（カルバモイル）ビニル基またはＲ5ＯＯＣ（ＣＨ2）n−を表し、
Ｒ5はジメチルカルバモイルメチル基、水素または低級アルキル基をを表し、
ｎは０〜２を表す、但し、Ｒ5＝ＣＨ3、ｎ＝０の場合を除く）
で表される化合物。
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、新規な置換アミジノナフチルエステル誘導体およびそれらを有効成分とする医薬に関する。さらに、本発明は、上記誘導体製造のための中間体に関する。
従来の技術
心臓あるいは血管内において血液が凝固して生じた塊を血栓といい、この血栓の形成に伴う病的現象を血栓症という。血栓症には脳梗塞、心筋梗塞、肺梗塞など、各種の病態が存在する。
血栓症の治療方法は、その作用機序の面から２つに大別される。すなわち、血栓の形成を防ぐ抗血栓療法と、形成した血栓を溶解させる血栓溶解療法である。
これらの治療方法のうち、血栓溶解療法は、血栓溶解剤の投与によって、血液線溶系調節因子の前駆体であるプラスミノーゲンをプラスミンへと活性化させ、このプラスミンが血管内で血栓を形成しているフィブリンを分解する事によって血栓を溶解し、閉塞部位を開通させると考えられている。この血栓溶解療法に用いる薬剤としては、プラスミノーゲンをプラスミンに活性化させるプラスミノーゲン活性化因子である組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）、ウロキナーゼ（ＵＫ）等の生体内物質、スタフィロキナーゼ、ストレプトキナーゼ等の菌体産生物質およびそれらの遺伝子組換え体などが知られている。
発明が解決しようとする課題
しかしながら、上記ｔ−ＰＡ等は、一般に静脈内投与で有効であるとされている。しかし、血中半減期が短く、速やかに肝臓より除去され、かつ生体内に阻害因子が存在するため、血栓の生じている局所において血栓溶解作用を発現させるためには、大量投与を必要とする。この血栓溶解剤の一過性の大量投与は、全身的に血栓溶解作用を著しく高め、閉塞部位を開通させることが期待される一方、重篤な出血性症状が認められることなどが報告されている。更に、血栓溶解剤の投与により一時的に閉塞部位を開通させても、再閉塞を生じ易いということが動物実験および臨床例からも報告されており、大きな問題点となっている。また、注射剤であることから、長期投与する場合には患者の負担が大きいという投与法上の問題もある。
以上のような理由から、患者への負担を軽くするために血栓溶解作用を有する経口投与可能な薬剤の開発が望まれていた。
課題を解決するための手段
本発明者らは、下記式（Ｉ）で表される化合物が線溶促進作用を有し、優れた血栓溶解作用を有することを見出し、上記の課題を解決し、本発明を完成させるに至った。すなわち、本発明は式（Ｉ）
0003817263.tif 000002
（式中、Ｒ1は（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ基、（４，５−ジヒドロ−１，３−チアゾール−２−イル）アミノ基、アミジノ基、モルホリノメチル基、ニトロ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、
0003817263.tif 000003
または
0003817263.tif 000004
を表し、
Ｒ3は水素、メトキシ基、水酸基、アセチルアミノ基、モルホリノ基、ピペリジノ基、１−ピロリジニール基またはジメチルアミノ基を表し、
ｍは０〜４を表し、
Ｒ4は水素およびメチル基を表し、
Ｒ2はＮＨ2ＣＯ（ＣＨ2）n−、２−（カルバモイル）ビニル基、Ｒ5ＯＯＣ（ＣＨ2）n−を表し、
Ｒ5はジメチルカルバモイルメチル基、水素および低級アルキル基を表し、
ｎは０〜２を表す。）
で表される化合物に関する。
また、本発明は前記化合物（Ｉ）を含有する医薬に関する。
さらに、本発明は、前記化合物（Ｉ）の製造中間体として有用な式（II）
0003817263.tif 000005
（式中、Ｒ2はＮＨ2ＣＯ（ＣＨ2）n−、２−（カルバモイル）ビニル基、Ｒ5ＯＯＣ（ＣＨ2）n−を表し、
Ｒ5はジメチルカルバモイルメチル基、水素および低級アルキル基を表し、
ｎは０〜２を表す、但し、Ｒ5＝ＣＨ3、ｎ＝０の場合を除く）
で表される化合物に関する。
本発明化合物（Ｉ）は線溶促進作用を有し、優れた血栓溶解作用を発現するため、血栓に関連して起こる疾患に有効である。すなわち、静脈血栓症、心筋梗塞症、肺塞栓症、脳塞栓症、緩徐に進行する脳血栓症、血管手術および血液体外循環に伴う血栓塞栓の治療並びに血流障害の改善、慢性動脈閉塞症に伴う諸症状の改善、虚血性脳血管障害に伴う血栓・塞栓の治療等、血栓・塞栓症全般の治療薬として使用することができる。
以下に、本発明化合物（Ｉ）およびその中間体の代表的な製法を示す。
置換アミジノナフチルエステル誘導体の製法
0003817263.tif 000006
（式中、Ｒ1、Ｒ2は前記の通りである）
本発明化合物（Ｉ）はスキームＡの式（III）で示されるカルボン酸誘導体またはその反応性中間体と式（II）で示される置換アミジノナフトール誘導体を反応させることにより製造することができる。
ここでいう反応性中間体とは、通常の脱水縮合に用いられる該ハライド（IV）、混合酸無水物および通常脱水縮合剤として用いられるＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）やジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）等とカルボン酸誘導体（III）との反応によって得られる反応中間体を示す。
本発明化合物（Ｉ）の製造方法についてさらに詳細に述べる。
カルボン酸誘導体（III）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ピリジンおよびそれらの混合液等の有機溶媒に溶解または懸濁し、ＤＣＣ、ＥＤＣやＤＰＰＡ等のカルボン酸活性化剤と反応させる。次に、置換アミジノナフトール誘導体（II）を加えることによって、本発明化合物（Ｉ）を製造することができる。
例えば、脱水縮合剤としてＤＣＣを用いた場合、カルボン酸誘導体（III）を無水または含水ピリジン等の適当な溶媒に溶解または懸濁し、置換アミジノナフトール誘導体（II）を加え、冷却下ないし加温下で攪拌する。反応終了後、反応液中のジシクロヘキシルウレア（ＤＣＵ）を除いた後に、通常の処理を行い本発明化合物（Ｉ）を製造することができる。必要に応じ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにてさらに精製する。
また、酸ハライド（IV）を使用する場合、カルボン酸誘導体（III）をチオニルクロライド、チオニルブロマイド若しくは五塩化リンなどの酸ハロゲン化剤と反応させて酸ハロゲン化誘導体とし、これに置換アミジノナフトール誘導体（II）を加えることにより本発明化合物（Ｉ）を製造することができる。この反応溶媒としては、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびピリジン等を使用し、脱ハロゲン化水素剤を用いて、冷却下ないし加温下で反応させる。脱ハロゲン化水素剤としては、例えば炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機塩基を使用することができる。
また、Ｒ2の末端官能基がカルボン酸の場合、対応するアミド体または低級アルキルエステル体を、塩酸若しくは硫酸等の無機酸またはメタンスルホン酸若しくはエタンスルホン酸等の有機酸を用いて加温下で処理することにより製造することができる。
このようにして得られた本発明化合物（Ｉ）は、通常の塩交換処理方法により、相当する酸付加塩にすることができる。使用し得る酸としては、医薬として使用可能な塩であれば特に限定されないが、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸等の無機酸および酢酸、乳酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸等の有機酸があげられる。置換アミジノナフトール誘導体の製法
置換アミジノナフトール誘導体（II）は本発明化合物（Ｉ）を製造するための中間体として有用な化合物である。
0003817263.tif 000007
この置換アミジノナフトール誘導体（II）は、公知の化合物である（１），（２），（３）および（４）を原料として、スキームＢに示すように種々の合成反応により製造することができる。すなわち、エステル体（８）は、化合物（３）および（４）を各種低級アルコールやハロゲン化アルキルを用いてのエステル化反応又は化合物（７）のブロム化により製造することができる。
ラクトン化合物（１０）は、化合物（１）をＡ．Ｆ．Ｈａｒｄｍａｎらの方法（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７０，２１１９（１９４８））により、シアノエチル化合物（５）およびカルボン酸化合物（９）を経由して製造することができる。
ニトリル体（１１）−Ｒ2aは、シアン化銅を用いるＬ．Ｆｒｉｅｄｍａｎらの方法（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２６，２５２２（１９６１））を用いて化合物（８）および（１０）を反応させることにより製造できる。また、ニトリル体（１１）−Ｒ2bは、化合物（２）をパラホルムアルデヒドなどを用いてホルミル化し化合物（６）とした後、ホスホランを用いるＷｉｔｔｉｇ反応により製造することができる。
置換アミジノナフトール誘導体（II）は、Ｐｉｎｎｅｒ法を参考とし、イミダート体（１２）を経由して製造することができる。イミダート体（１２）は、ニトリル体（１１）と等量あるいは大過剰の低級アルコールを塩化水素や臭化水素等のハロゲン化水素の存在下、冷却下ないし加温下で反応させて製造し、さらにこのものを低級アルコール類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドやジメチルスルホキシド等の溶媒中、冷却下ないし加温下でアンモニアを反応させることにより置換アミジノナフトール誘導体（II）を製造することができる。
本発明化合物は、その薬理作用から、哺乳類（ヒト患者を含む）に対し、経口投与剤若しくは直腸投与剤として投与することができる。
また、本発明化合物は１個の治療剤として、あるいは他の治療剤との混合物として投与することができる。それらは単体で投与しても良いが、一般的には医薬組成物の形態で投与する。前記組成物の例としては錠剤、散剤、カプセル剤、シロップあるいは水溶液があげられる。経口組成物には通常の賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤等の添加剤を用いることができる。経口用液剤は、水性または油性懸濁液、溶液、乳濁液、シロップ、エリキシル等の形態であってもよく、あるいは使用前水または他の適当な溶媒で再調製する為のドライシロップとして供されても良い。前記の液剤は、懸濁化剤、香料、希釈剤あるいは乳化剤のような通常の添加剤を含有できる。
直腸内投与する場合は、坐剤として投与することができる。坐剤は、カカオ脂、ラウリン脂、マクロゴール、グリセロゼラチン、ウイテップゾール、ステアリン酸ナトリウムまたはそれらの混合物など、適当な物質を基剤とし、必要に応じて乳化剤、懸濁化剤、保存剤等を加えることができる。
上記組成物で用いられる賦形剤等の具体例を以下にあげる。
賦形剤：リン酸水素カルシウム、合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、水酸化アルミニウム・マグネシウム、ケイ酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム、軽質無水ケイ酸、無水ケイ酸、アビセル、各種デンプン、デキストリン、カルボキシメチルスターチ（ＣＭＳ）、乳糖。
結合剤：エチルセルロース（ＥＣ）、カルボキシメチルセルロースＮａ（ＣＭＣ−Ｎａ）、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ−ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、各種デンプン、デキストリン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）。
崩壊剤：合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、ＣＭＣ−Ｃａ、ＣＭＣ、アビセル、Ｌ−ＨＰＣ、ＨＰＭＣ、ＭＣ、各種デンプン、ＣＭＳ、ヒドロキシプロピルスターチ（ＣＰＳ）。
固化防止剤：軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム。
滑沢剤：合成ケイ酸アルミニウム、無水ケイ酸、タルク、アビセル。
矯味剤：マンニトール、クエン酸、クエン酸Ｎａ、砂糖。
乳化剤：ゼラチン、クエン酸、クエン酸Ｎａ、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、マクロゴール（ＰＥＧ）、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール、ラウリル硫酸Ｎａ、リン脂質。
安定化剤：亜硫酸水素ナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ＰＥＧ、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール、ラウリル硫酸Ｎａ、各種天然・合成シクロデキストリン、リン脂質。
吸収促進剤：ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ＰＥＧ、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール、ラウリル硫酸Ｎａ、各種天然・合成シクロデキストリン、中鎖脂肪酸トリグリセリド。
溶解補助剤：エタノール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ＰＥＧ、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール、ラウリル硫酸Ｎａ、各種天然・合成シクロデキストリン。
懸濁化剤：ＣＭＣ−Ｎａ、ＨＰＭＣ，ＭＣ，ＨＰＣ、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、プロピレングリコール、ラウリル硫酸Ｎａ。
被覆剤：ＥＣ、ケイ酸マグネシウム、タルク、酸化チタン、炭酸カルシウム、トリアセチン、カルボキシメチルエチルセルロース（ＣＭＥＣ）、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）、ＨＰＭＣ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ＭＣ、ＨＰＣ、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリアクリル酸Ｎａ，各種アクリル酸メタクリル酸誘導体のコポリマー、ポリグリコール酸Ｎａ。
着色剤：酸化チタン、タール色素、カラメル。
本発明化合物をヒトに投与する場合の投与量は、１００〜１０００mg／日、好ましくは３００〜９００mg／日、さらに好ましくは４００〜８００mg／日の経口投与量で投与する事ができる。しかしながら、治療の目的でヒトに投与されるときの用量は病気の重症度、年齢あるいは体重等により適宜調節される。
次に、実施例および製剤処方例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
実施例１
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩２．８５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩３ｇ、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（以下、ＤＣＣと略す）２．６５ｇ及び４−ジメチルアミノピリジン（以下、ＤＭＡＰと略す）１３１ｍｇに２０％含水ピリジン４５ｍｌを加え氷冷下２時間ついで水冷下３日間攪拌した。析出物を濾過し、濾液を減圧下濃縮した。その残渣にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦと略す）１５ｍｌを加え少量の不溶物を濾過し、濾液をエーテル・アセトン混液（１０：１）５００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した後析出物を濾取し粗生成物を得た。
ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）の混合液を溶出溶媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。その残渣をメタノール１０ｍｌ及び６Ｎ塩酸３．６ｍｌに溶解させ、エーテル・アセトン混液（３：１）４００ｍｌに氷冷下滴下し、３時間撹拌した後析出物を濾取し目的物９６３ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.74(1H,S)         7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.72(2H,S)          7.54(2H,d,J=8.9Hz)
9.52(2H,S)          7.03(1H,S)
8.80(2H,S)          3.99(2H,S)
8.67(1H,S)          3.73(4H,S)
8.31(1H,d,J=8.9Hz)
8.22(2H,d,J=8.6Hz)
8.09(1H,d,J=9.2Hz)
7.96(1H,d,J=8.9Hz)
7.73(1H,S)
参考例１
メチル  ２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−ナフチルアセテートの製造
２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−ナフチル酢酸１２６．５ｇ、メタノール７００ｍｌ及び濃硫酸２ｍｌを室温下一昼夜撹拌した。ついで減圧下反応液を濃縮後、析出物を濾取し少量のメタノール及び水で洗浄し目的物１２５．５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.01(1H,S)
6.93〜8.36(5H,m)
4.04(2H,S)
3.59(3H,S)
参考例２
２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチル酢酸の製造
メチル  ２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−ナフチルアセテート１７７ｇ及びシアン化第一銅７０．９ｇにＤＭＦ１００ｍｌを加え、窒素気流下３．５時間加熱還流した。温時撹拌下、水、３００ｍｌを加え上澄液をデカンテーションした後、再度この操作を繰り返した。その残渣に４％水酸化ナトリウム水溶液２．３リットルを加え２５℃で１時間撹拌した。不溶物を濾過し、濾液に濃塩酸を加え析出物を濾取した。この濾取物に水２００ｍｌを加え、次に硫酸第一鉄・７水和物５０１ｇ及び濃塩酸６０ｍｌを加え、ついで７０℃で１時間撹拌した。放冷後、析出物を濾取し十分水洗をした後、メタノール３リットルを加え４０℃で溶解させた。不溶物を濾過し濾液に水３リットルを加え粗生成物を得た。ついで１０％含水メタノールで再結晶を繰り返して目的物４２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
12.23(1H,br)
10.50(1H,br)
7.03〜8.82(5H,m)
3.99(2H,S)
参考例３
メチル  ２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチルアセテートの製造
２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチル酢酸１８．２ｇ、メタノール２５０ｍｌ及びメタンスルホン酸３ｇの溶液を４０℃で撹拌し溶解させた後、室温下２日間撹拌した。ついで活性炭５ｇを加え３０分撹拌後、不溶物を濾去し溶媒を減圧留去した。残渣に５０％含水メタノール５０ｍｌを加えた後、析出物を濾取し目的物１３ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.49(1H,S)
8.41(1H,S)
7.49〜8.22(3H,m)
7.34(1H,d,J=8.8Hz)
4.08(2H,S)
3.61(3H,S)
実施例２
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩の製造
メチル  ２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチルアセテート５８ｇに無水メタノール１．２リットルを加え、氷冷下塩化水素ガスを飽和させた後５℃で一昼夜撹拌した。析出物を濾取し少量のエーテルで洗浄した。この濾取物に無水メタノール３．１リットルを加え、水冷撹拌下アンモニアガスを通じて溶解させた後、同温で４日間撹拌した。析出物を濾取し少量のメタノールで洗浄した。この濾取物を水７３０ｍｌに加え、氷冷下濃塩酸２４０ｍｌを加え３０分撹拌した後、析出物を濾取しアセトン２５０ｍｌで洗浄し、目的物４４．２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.63(1H,S)             3.90(2H,S)
8.84〜10.15(4H,br)
6.48〜8.81(7H,m)
実施例３
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−アセチルアミノエチル）イミノメチルアミノメチルアミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（２−アセチルアミノエチル）イミノメチルアミノメチルアミノ］安息香酸・臭化水素酸塩１．４ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．０ｇ、ＤＣＣ８８４ｍｇ及びＤＭＡＰ４３．６ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下４日間撹拌した。析出物を濾過後、濾液をエーテル・アセトン混液（１：１０）２５０ｍｌに滴下し、一昼夜氷冷下撹拌した後析出物を濾取した。この濾取物にＤＭＦ７ｍｌを加え加温溶解し、さらに水冷撹拌下濃塩酸１．４６ｍｌを加えた。この溶液をエーテル・アセトン（１：２０）４００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間ついで水冷下一昼夜撹拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣に再度ＤＭＦ２０ｍｌを加え加温溶解し、さらに水冷撹拌下濃塩酸１．５ｍｌを加えた。この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間ついで水冷下一昼夜撹拌した後析出物を濾取し粗生成物を得た。
ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）の混合液を溶出溶媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め溶媒を減圧留去した。その残渣をＤＭＦ８ｍｌ及び濃塩酸１ｍｌに溶解させ、氷冷下アセトン、２００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間ついで水冷下一昼夜撹拌した後析出物を濾取し目的物９３９．２ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.44(1H,S)           7.78(1H,S)
9.75(2H,S)            7.71(1H,d,J=8.9Hz)
9.53(2H,S)            7.60(2H,d,J=8.9Hz)
8.73(1H,S)            7.12(1H,S)
8.46(2〜3H,br)        4.06(2H,S)
8.38(1H,d,J=8.9Hz)    3.52(2H,brs)
8.28(2H,d,J=8.9Hz)    3.25〜3.47(2H,m)
8.18(1H,d,J=9.2Hz)    3.00(3H,S)
7.94〜8.14(2H,m)      1.99(3H,S)
参考例４
２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−（２−シアノエチル）ナフタレンの製造
６−ブロム−２−ナフトール４４．８ｇにトルエン１２０ｍｌ及び水酸化ナトリウム８．８ｇを加え６５℃で３０分間撹拌し、ついで８０℃でアクリロニトリル１１．４ｇを滴下し同温で３．５時間撹拌した。放冷後トルエン層をデカンテーションした後残渣に水２４０ｍｌを加え少量の不溶物を濾過し、濾液に５％塩酸１４０ｍｌを加え析出物を濾取し十分水洗した。この粗生成物をエタノールより再結晶して目的物３０．７ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.05(1H,S)
7.03〜8.26(5H,m)
2.33〜3.62(4H,m)
参考例５
３−（２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−ナフチル）プロピオン酸の製造
２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−（２−シアノエチル）ナフタレン２７．６ｇに１０％水酸化ナトリウム８８ｇを加え７時間加熱還流した。放冷後希塩酸で酸性とした後析出物を濾取し水洗した。この濾取物に水１．２リットルを加えさらに撹拌下炭酸水素ナトリウム１６８ｇを加え溶解させた。ついで少量の不溶物を濾過し、濾液に濃塩酸を加えて酸性とした後析出物を濾取し水洗して目的物１７．３ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.86〜11.66(2H,brs)
6.71〜8.28(5H,m)
2.08〜3.44(4H,m)
参考例６
４−ブロモベンゾ［１，２−ｆ］−３，４−ジヒドロクマリンの製造
３−（２−ハイドロキシ−６−ブロム−１−ナフチル）プロピオン酸５．９ｇにトルエン３０ｍｌを加え５．５時間加熱還流した。放冷後シクロヘキサン２０ｍｌを加え３０分撹拌した後に析出物を濾取して目的物５．１ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
7.04〜8.44(5H,m)
2.64〜3.65(4H,m)
参考例７
メチル  ３−（２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチル）プロピオネートの製造
４−ブロモベンゾ［１，２−ｆ］−３，４−ジヒドロクマリン８３．１ｇにＤＭＦ２００ｍｌ及びシアン化第一銅３３．１ｇを加え窒素気流下１４０〜１４５℃で７時間撹拌した。一昼夜放冷後ＤＭＦ２８０ｍｌを加え不溶物を濾過し、さらにメタノール２．５リットルで４回洗浄した。この濾液及び洗液を合わせた後不溶物を濾過し、濾液に水１６リットルを加えて一昼夜撹拌した後析出物を濾取し水洗した。ついでこの濾取物をアセトン２．１リットルに溶解した後少量の不溶物を濾過した。この濾液に水１６リットルを加えて２時間撹拌した後析出物を濾取し水洗して目的物３４．５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.34(1H,S)
7.04〜8.67(5H,m)
3.60(3H,S)
2.96〜3.53(2H,m)
2.25〜2.79(2H,m)
実施例４
２−ハイドロキシ−６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）ナフタレン・塩酸塩の製造
メチル  ３−（２−ハイドロキシ−６−シアノ−１−ナフチル）プロピオネート３４．５ｇを塩化水素ガス飽和無水メタノール溶液３６０ｍｌに氷冷撹拌下ゆっくり加え、さらに水冷下一昼夜撹拌した。ついで水冷下塩化水素ガスを２時間通じた後さらに二昼夜撹拌し、析出物を濾取して少量のアセトンで洗浄した。この濾取物をアンモニアガス飽和無水メタノール９６０ｍｌに氷冷撹拌下ゆっくり加え、さらに室温下二昼夜撹拌した。析出物を濾取し少量のアセトンで洗浄後水６０ｍｌに加え室温撹拌下１０％塩酸を少量ずつ滴下して酸性とした後２．５時間撹拌した。析出物を濾取し少量のアセトンで洗浄して目的物２６．１ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.44(4H,brs)
8.46(1H,S)
8.11(1H,d,J=9.2Hz)
7.69〜7.98(2H,m)
7.50(1H,S)
7.41(1H,d,J=8.9Hz)
6.91(1H,S)
3.02〜3.36(2H,m)
2.21〜2.48(2H,m)
実施例５
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩２．７１ｇ、６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフトール・塩酸塩３．０ｇ、ＤＣＣ２．５２ｇ及びＤＭＡＰ１２４．６ｍｇに２０％含水ピリジン４５ｍｌを加え氷冷下２時間ついで水冷下６日間攪拌した。析出物を濾過後、濾液を減圧下濃縮した。その残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え少量の不溶物を濾過し、濾液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間ついで水冷下一昼夜撹拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣にメタノ−ル１５ｍｌを加え、１時間氷冷下撹拌した後析出物を濾取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）の混合液を溶出溶媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め溶媒を減圧留去した。その残渣にＤＭＦ５ｍｌ及び濃塩酸２００μｌに溶解させ、アセトン２００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間ついで水冷下一昼夜撹拌した後析出物を濾取し目的物４９５．４ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6,D2O)δppm:
8.62(1H,d,J=2.0Hz)
8.42(1H,d,J=9.2Hz)
8.35(2H,d,J=8.6Hz)
8.18(1H,d,J=9.2Hz)
8.00(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
7.64(1H,d,J=8.9Hz)
7.56(1H,d,J=8.6Hz)
3.81(4H,S)
3.21〜3.44(2H,m)
2.43〜2.57(2H,m)
実施例６
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ３−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
３−［（４，５ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩６３４．１ｍｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩６７６．７ｍｇ、ＤＣＣ５９８ｍｇ及びＤＭＡＰ２９．５ｍｇに２０％含水ピリジン１５ｍｌを加え氷冷下２時間ついで水冷下一昼夜攪拌した。以下、実施例１と同様に処理し目的物４３９．５ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.39(1H,S)
9.70(2H,S)
9.51(2H,S)
8.66(2H,S)
8.33(1H,d,J=8.9Hz)
7.90〜8.17(5H,m)
7.54〜7.86(3H,m)
7.03(1H,S)
4.03(2H,S)
3.70(4H,S)
実施例７
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−ヒドロキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（２−ヒドロキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・塩酸塩１．０２ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．０ｇ、ＤＣＣ８８４ｍｇ及びＤＭＡＰ４３．６ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。以下、実施例１と同様に処理し目的物１．１７ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.58(1H,S)
9.67(2H,S)
9.45(2H,S)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)
8.42(1H,brs)
7.83〜8.36(8H,m)
7.69(1H,S)
7.64(1H,d,J=8.9Hz)
7.49(2H,d,J=8.6Hzm)
7.03(1H,S)
3.98(2H,S)
3.53〜3.69(2H,m)
3.29〜3.51(2H,m)
実施例８
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−モルホリノメチルベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−モルホリノメチル安息香酸６１２．２ｍｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩７０３．９ｍｇ、ＤＣＣ６２２．６ｍｇ及びＤＭＡＰ３０．７ｍｇに無水ピリジン１５ｍｌを加え氷冷下２時間ついで水冷下３日間攪拌した。以下、実施例１と同様に処理し目的物４４０．７ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
12.15(1H,S)
9.66(2H,S)
9.46(2H,S)
8.64(1H,S)
8.22〜8.52(3H,m)
8.11(1H,d,J=8.9Hz)
7.87〜8.04(3H,m)
7.48〜7.80(2H,m)
7.02(1H,S)
4.49(2H,S)
4.00(2H,S)
3.94(4H,S)
3.08〜3.36(4H,m)
実施例９
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフチル  ４−［（２−ヒドロキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（２−ヒドロキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・塩酸塩１．４５ｇ、６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフトール・塩酸１．５ｇ、ＤＣＣ１．２６ｇ及びＤＭＡＰ６２．３ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。以下、実施例１と同様に処理し目的物１．１７ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.59(1H,S)
9.70(2H,S)
9.48(2H,S)
8.68(1H,S)
7.84〜8.52(7H,m)
7.60(1H,d,J=8.9Hz)
7.34〜7.57(3H,m)
6.84(1H,brs)
3.55〜3.69(2H,m)
3.36〜3.52(2H,m)
3.13〜3.34(2H,m)
2.29〜2.48(2H,m)
実施例１０
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−グアニジノベンゾエート・塩酸  メタンスルホン酸塩の製造
４−グアニジノ安息香酸・メタンスルホン酸塩３．０ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩３．０ｇ及びＤＣＣ４．５ｇに２０％含水ピリジン１００ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下２日間撹拌した。析出物を濾過後、濾液に活性炭１ｇを加え氷冷下３０分攪拌し不溶物を濾過した。その濾液をエーテル４リットルに氷冷下ゆっくり滴下し２時間攪拌した。析出物を濾取しアセトン１００ｍｌで洗浄し粗生成物を得た。ついでその濾取物をメタノール１５０ｍｌに溶解後、活性炭２．５ｇを加え氷冷下３０分攪拌し不溶物を濾過した。その濾液をアセトン１リットルに氷冷下ゆっくり滴下し２時間攪拌した後析出物を濾取し、目的物２．９ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.48(5H,brs)
6.55〜8.72(15H,m)
3.98(2H,S)
2.45(3H,S)
実施例１１
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ニトロベンゾエート・塩酸塩の製造
４−ニトロ安息香酸１．８ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩３．０ｇ、ＤＣＣ２．７ｇ及びＤＭＡＰ１３０．９ｍｇに無水ピリジン３０ｍｌ及びＤＭＦ１０ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。次に析出物を瀘取し、少量のＤＭＦで洗浄した。この瀘取物にＤＭＦ１００ｍｌを加え熱時溶解し、氷冷下２時間攪拌した。次に不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下２０ｍｌまで濃縮した。その残渣をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでクロロホルム−メタノール−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣をメタノール２０ｍｌ及び濃塩酸０．６ｍｌを加えて懸濁させ、この懸濁液をエーテル２００ｍｌ及びアセトン２０ｍｌの混合液に滴下し氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ニトロベンゾエート・塩酸塩１．３５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.66(2H,S)              7.96(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.45(2H,S)              7.71(1H,d,J=8.9Hz)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)      7.70(1H,S)
8.45(4H,S)              7.01(1H,S)
8.36(1H,d,J=8.9Hz)      4.02(2H,S)
8.12(1H,d,J=8.9Hz)
実施例１２
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−アミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ニトロベンゾエート・塩酸塩６００ｍｇに無水ＤＭＦ１０ｍｌ及び１０％パラジウム炭素１００ｍｇを加え、室温下一昼夜接触還元を行った。次に不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール１５ｍｌを加え、氷冷攪拌下さらに濃塩酸３５０μｌを加えた。次いでその溶液をアセトン２００ｍｌに滴下し、氷冷下１時間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物５７２．７ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.64(2H,S)              7.58(2H,d,J=8.9Hz)
9.43(2H,S)              7.04(3H,brs)
8.62(1H,d,J=1.7Hz)      6.96(1H,S)
8.26(1H,d,J=8.9Hz)      6.91(2H,d,J=8.6Hz)
8.06(1H,d,J=8.9Hz)      3.95(2H,S)
7.83〜8.03(3H,m)
実施例１３
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ２−ニトロベンゾエート・塩酸塩の製造
２−ニトロ安息香酸５．０ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩３．０ｇ、ＤＣＣ４．４ｇ及びＤＭＡＰ２１８．２ｍｇに無水ピリジン５０ｍｌ及びＤＭＦ２０ｍｌを加え氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。次に析出物を瀘過し、温ＤＭＦ１００ｍｌで洗浄した。この洗液と瀘液を合わて減圧下溶媒を留去した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、その溶液をアセトン６００ｍｌに滴下し、氷冷下２時間撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでクロロホルム−メタノール−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集めて減圧下溶媒を留去した。その残渣の１／２にメタノール
２０ｍｌ及び濃塩酸１．４ｍｌを加えて懸濁させ、この懸濁液をエーテル２００ｍｌ及びアセトン２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ２−ニトロベンゾエート・塩酸塩２．４２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.65(2H,S)              7.88〜8.09(3H,m)
9.43(2H,S)              7.75(1H,S)
8.63(1H,d,J=1.7Hz)      7.66(1H,d,J=8.9Hz)
8.35(1H,d,J=8.9Hz)      7.08(1H,S)
8.10〜8.30(3H,m)        4.02(2H,S)
実施例１４
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ２−アミノベンゾエート・塩酸塩の製造
上記実施例１３の残り１／２の残渣にメタノール２０ｍｌを加えて懸濁させ、この懸濁液を、エーテル１５０ｍｌ及びアセトン１５０ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後、析出物を瀘取し６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ２−ニトロベンゾエート・酢酸塩１．８０ｇを得た。６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ２−ニトロベンゾエート・酢酸塩１．０ｇに無水ＤＭＦ５０ｍｌ及び１０％パラジウム炭素２００ｍｇを加え、室温下一昼夜接触還元を行った。不溶物を瀘過後、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール２０ｍｌを加え、氷冷攪拌下濃塩酸０．６ｍｌを加えた。次に上記溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下１昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでクロロホルム−メタノール−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集めて減圧下溶媒を留去した。残渣をメタノール２０ｍｌ及び濃塩酸０．６ｍｌに溶解させ、この溶液をアセトン３５０ｍｌに滴下し氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物３４４．６ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.62(2H,S)                  7.26〜7.44(1H,m)
9.41(2H,S)                  7.03(1H,S)
8.61(1H,d,J=1.7Hz)          6.88(1H,d,J=8.6Hz)
8.28(1H,d,J=8.9Hz)          6.79(2H,S)
7.85〜8.14(3H,m)            6.57〜6.71(1H,m)
7.64(1H,S)                  3.95(2H,S)
7.59(1H,d,J=8.9Hz)
実施例１５
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ジメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−ジメチルアミノ安息香酸３．０ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．７７ｇ、ＤＣＣ２．６５ｇ及びＤＭＡＰ１３０．９ｍｇに２０％含水ピリジン４０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。次に析出物を瀘取し少量のピリジンで洗浄した。この瀘取物にＤＭＦ６０ｍｌ及び水２０ｍｌを加え加温溶解し、その後氷冷下２時間攪拌した。不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌ及び水１０ｍｌを加えて溶解させ、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣をメタノール１５ｍｌ、ＤＭＦ５ｍｌ及び濃塩酸０．９ｍｌに懸濁させ、この懸濁液をアセトン２００ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液に滴下し氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．９６ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.67(2H,S)                   7.63(1H,brs)
9.47(2H,S)                   7.58(1H,d,J=8.9Hz)
8.63(1H,d,J=1.7Hz)           7.03(1H,brs)
8.25(1H,d,J=8.9Hz)           6.85(3H,d,J=9.2Hz)
8.06(1H,d,J=8.9Hz)           3.94(2H,S)
8.00(2H,d,J=9.2Hz)           3.06(6H,S)
7.95(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例１６
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−アセチルアミノエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（２−アセチルアミノエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・塩酸塩１．５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．１２ｇ、ＤＣＣ１．５５ｇ及びＤＭＡＰ６１ｍｇに１０％含水ピリジン４０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール１５ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸０．９６ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．２４ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.60(1H,S)                  7.69(1H,S)
9.65(2H,S)                   7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.43(2H,S)                   7.49(2H,d,J=8.6Hz)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)           7.04(1H,S)
8.47(1H,brs)                 3.98(2H,S)
8.17〜8.38(5H,m)             3.17〜3.55(4H,m)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)           1.87(3H,S)
7.96(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例１７
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−ジメチルアミノエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（２−ジメチルアミノエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．０３ｇ、ＤＣＣ１．４４ｇ及びＤＭＡＰ５６ｍｇに２０％含水ピリジン４０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール１５ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸１．４１ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．５２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.97(1H,brs)        7.97(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
10.80(1H,S)          7.72(1H,S)
9.68(2H,S)           7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.46(2H,S)           7.54(2H,d,J=8.6Hz)
8.65(2H,d,J=1.7Hz)   7.04(1H,S)
8.49(1H,brs)         3.98(2H,S)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)   3.72〜3.94(2H,m)
8.22(2H,d,J=8.6Hz)   3.24〜3.49(2H,m)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)   2.84(6H,d,J=3.0Hz)
実施例１８
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−メトキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（２−メトキシエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・塩酸塩１．５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．２２ｇ、ＤＣＣ１．７ｇ及びＤＭＡＰ６７ｍｇに１０％含水ピリジン５０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にエタノール１５ｍｌ及びイソプロパノール１５ｍｌを加え、析出物を瀘取した。瀘取物にＤＭＦ１５ｍｌ及び濃塩酸１．３４ｍｌを加えて溶解させ、さらに活性炭を１ｇ加えて室温下２時間攪拌した。次に不溶物を瀘過し、瀘液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸１．３４ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．２５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.61(1H,brs)        7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.67(2H,S)           7.47(2H,d,J=8.6Hz)
9.45(2H,S)           7.04(1H,S)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)   3.98(2H,S)
8.48(1H,brs)         3.52(4H,S)
7.85〜8.44(7H,m)     3.33(3H,S)
7.70(1H,S)
実施例１９
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−（モルホリノアミノイミノメチルアミノ）ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−モルホリノアミノイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩１．５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．１２ｇ、ＤＣＣ１．５５ｇ及びＤＭＡＰ６１ｍｇに１０％含水ピリジン５５ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール１５ｍｌを加え、この溶液をエーテル４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール２０ｍｌ及び濃塩酸２．０７ｍｌを加え、この溶液をエーテル２００ｍｌ及びアセトン２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．４２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.82(1H,brs)         7.70(1H,S)
9.92(1H,brs)          7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.66(2H,s)            7.49(2H,d,J=8.6Hz)
9.45(2H,S)            7.04(1H,S)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)    3.98(2H,S)
8.18〜8.60(5H,m)      3.74(4H,brs)
8.11(1H,d,J=8.9Hz)    2.89(4H,brs)
7.96(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例２０
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−モルホリノエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（２−モルホリノエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．２ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．７２ｇ、ＤＣＣ１．０６ｇ及びＤＭＡＰ５２．４ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸２．２ｍｌを加え、この溶液をアセトン４５０ｍｌに滴下し、氷冷下１５分間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物８４０ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.59(1H,brs)        8.10(1H,d,J=8.9Hz)
10.77(1H,S)          7.95(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.66(2H,S)           7.69(1H,S)
9.44(2H,S)           7.64(1H,d,J=8.9Hz)
8.68(1H,S)           7.53(2H,d,J=8.6Hz)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)   7.03(1H,S)
8.48(2H,brs)         3.73〜4.14(8H,m)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)   3.00〜3.65(6H,m)
8.22(2H,d,J=8.6Hz)
実施例２１
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（３−モルホリノプロピル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（３−モルホリノプロピル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．２ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．７９ｇ、ＤＣＣ１．０６ｇ及びＤＭＡＰ５２．４ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ３０ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール３０ｍｌ及び濃塩酸７９２μｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．０７ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.57(1H,brs)         7.96(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
10.70(1H,S)           7.70(1H,S)
9.66(2H,S)            7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.44(2H,S)            7.50(2H,d,J=8.6Hz)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)    7.03(1H,S)
8.60(1H,brs)          3.75〜4.09(6H,m)
8.36(1H,brs)          3.34〜3.57(4H,m)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)    2.92〜3.29(4H,m)
8.23(2H,d,J=8.6Hz)    1.92〜2.18(2H,m)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)
実施例２２
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（３−モルホリノプロピル）イミノメチルアミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（３−モルホリノプロピル）イミノメチルアミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸１．１３ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩８００ｍｇ、ＤＣＣ７０８ｍｇ及びＤＭＡＰ３４．９ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。さらにＤＣＣ３５４ｍｇを加え、室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ３０ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にＤＭＦ５ｍｌ及び濃塩酸７１６μｌを加え、この溶液をアセトン２５０ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物９７２．７ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.56(1H,brs)           7.55(2H,d,J=8.6Hz)
10.42(1H,S)             7.04(1H,S)
9.66(2H,S)              3.72〜4.17(6H,m)
9.44(2H,S)              3.28〜3.65(4H,m)
7.84〜8.90(8H,m)        2.80〜3.26(7H,m)
7.71(1H,S)              1.90〜2.22(2H,m)
7.63(1H,d,J=8.9Hz)
実施例２３
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（４−モルホリノブチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（４−モルホリノブチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．０５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩７３５．７ｍｇ、ＤＣＣ６６０ｍｇ及びＤＭＡＰ３２．６ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ５ｍｌを加え、その溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１０ｍｌ及び濃塩酸１．２ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物８８５．３ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.52(1H,brs)           7.96(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
10.66(1H,S)             7.70(1H,S)
9.66(2H,S)              7.64(1H,d,J=8.9Hz)
9.45(2H,S)              7.48(2H,d,J=8.6Hz)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)      7.03(1H,S)
8.61(1H,brs)            3.74〜4.12(6H,m)
8.15〜4.85(5H,m)        2.84〜3.56(8H,m)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)      1.49〜1.97(4H,m)
実施例２４
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［２−（１−ピロリジニル）エチル］アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［２−（１−ピロリジニル）エチル］アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．５１ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．１ｇ、ＤＣＣ９７３ｍｇ及びＤＭＡＰ４８ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール２０ｍｌ及び濃塩酸３．７ｍｌを加え、この溶液をアセトン２００ｍｌに滴下し、氷冷下二時間攪拌した。その後析出物を瀘取後、瀘取物にエタノール５ｍｌついでメタノール１０ｍｌを加え氷冷下１時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物１．２１ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.18(1H,brs)           8.10(1H,d,J=8.9Hz)
10.75(1H,S)             7.97(1H,d,J=8.9Hz)
9.67(2H,S)              7.70(1H,S)
9.45(2H,S)              7.64(1H,d,J=8.6Hz)
8.69(2H,S)              7.53(2H,d,J=8.6Hz)
8.65(1H,S)              7.04(1H,S)
8.48(1H,brs)            3.98(2H,S)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)      2.92〜3.91(8H,m)
8.22(1H,d,J=8.6Hz)      1.73〜2.14(4H,m)
実施例２５
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（２−ピペリジノエチル）アミノイミノメチルアミノ］ベンゾエート・３塩酸塩の製造
４−［（２−ピペリジノエチル）アミノイミノメチルアミノ］安息香酸・２塩酸塩１．７１ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．２ｇ、ＤＣＣ１．０６ｇ及びＤＭＡＰ５２．４ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下４日間撹拌した。析出物を濾過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール２０ｍｌ及び濃塩酸２．１ｍｌを加え、この溶液をアセトン４５０ｍｌに滴下し、氷冷下３０分間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．０８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.86(1H,brs)           8.10(1H,d,J=8.9Hz)
10.79(1H,S)             7.97(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.67(2H,S)              7.70(1H,S)
9.46(2H,S)              7.64(1H,d,J=8.9Hz)
8.71(1H,brs)            7.52(2H,d,J=8.6Hz)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)      7.04(1H,S)
8.48(2H,brs)            3.72〜4.10(4H,m)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)      2.70〜3.60(8H,m)
8.22(2H,d,J=8.6Hz)      1.57〜2.01(4H,m)
実施例２６
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−メチルアミノイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−メチルアミノイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩６００ｍｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩７３０ｍｇ、ＤＣＣ６４６ｍｇ及びＤＭＡＰ３２ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸４４０μｌを加え、この溶液をアセトン３００ｍｌ及びエーテル１００ｍｌの混合液を滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物６６１．１ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.64(1H,brs)            7.63(1H,d,J=8.9Hz)
9.67(2H,S)               7.47(2H,d,J=8.6Hz)
9.46(2H,S)               7.03(1H,S)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)       3.98(2H,S)
7.86〜8.54(8H,m)         2.91(3H,d,J=4.6Hz)
7.69(1H,S)
実施例２７
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−メチルアミノメチルイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−メチルアミノメチルイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩５．７６ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩６．０ｇ、ＤＣＣ５．３ｇ及びＤＭＡＰ２１７ｍｇに２０％含水ピリジン８０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下５日間撹拌した。次に析出物を瀘取し、温ＤＭＦ１２０ｍｌで洗浄した。この瀘取物に水３００ｍｌを加え室温下一昼夜攪拌し、析出物を瀘過した。先に得た反応瀘液、温ＤＭＦ洗液及び水瀘液を各々減圧下濃縮した。これら残渣を合わせ、ＤＭＦ７０ｍｌを加え、その溶液をアセトン７００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール５０ｍｌ及び濃塩酸３．３ｍｌを加え、この溶液をアセトン５００ｍｌ及びエーテル２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物５．７８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.31(1H,S)            7.97(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.69(2H,S)             7.73(1H,S)
9.48(2H,S)             7.63(1H,d,J=8.9Hz)
8.66(1H,d,J=1.7Hz)     7.51(2H,d,J=8.6Hz)
8.40(2H,brs)           7.05(1H,S)
8.30(1H,d,J=8.9Hz)     3.98(2H,S)
8.21(2H,d,J=8.6Hz)     2.94(6H,S)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)
実施例２８
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ｎ−ブチルアミノイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−ｎ−ブチルアミノイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩１．６ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．５ｇ、ＤＣＣ１．３３ｇ及びＤＭＡＰ６５．５ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下４日間撹拌した。次に析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、その溶液をアセトン３００ｍｌ及びエーテル２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール３０ｍｌ及び濃塩酸２．１ｍｌを加え、この溶液をアセトン２５０ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取後、瀘取物にメタノール９ｍｌ、エタノール７ｍｌ及び２−プロパノール６ｍｌを加え氷冷下１時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物１．６８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.59(1H,S)           7.63(1H,d,J=8.9Hz)
9.66(2H,S)            7.46(2H,d,J=8.6Hz)
9.44(2H,S)            7.03(1H,S)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)    3.98(2H,S)
8.53(1H,brs)          3.20〜3.45(2H,m)
7.85〜8.45(7H,m)      1.24〜1.67(4H,m)
7.68(1H,S)            0.92(3H,t,J=7.3Hz)
実施例２９
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−ジメチルアミノイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−ジメチルアミノイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩１．４４ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．５ｇ、ＤＣＣ１．３３ｇ及びＤＭＡＰ６５．５ｍｇに２０％含水ピリジン４０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下３昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２５ｍｌを加え、この溶液をエーテル２００ｍｌ及びアセトン１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下２時間撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸２．８ｍｌを加え、この溶液をアセトン１５０ｍｌに滴下し、氷冷下２時間攪拌した。その後析出物を瀘取し、瀘取物にメタノール１０ｍｌ及びエタノール５ｍｌを加え氷冷下２時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物９６６ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.43(1H,S)          7.97(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.69(2H,S)           7.71(1H,S)
9.48(2H,S)           7.63(1H,d,J=8.9Hz)
8.66(1H,d,J=1.7Hz)   7.48(2H,d,J=8.6Hz)
8.25〜8.40(3H,m)     7.04(1H,S)
8.21(2H,d,J=8.9Hz)   3.98(2H,S)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)   3.14(6H,S)
実施例３０
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−アミノイミノメチル安息香酸・塩酸塩１．０ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．３９ｇ、ＤＣＣ１．２３ｇ及びＤＭＡＰ６０．８ｍｇに２０％含水ピリジン２０ｍｌ及びＤＭＦ６ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−蟻酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１０ｍｌ及び濃塩酸０．９ｍｌを加え、この溶液をアセトン２００ｍｌに滴下し、氷冷下２時間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物８０．２ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.70(2H,S)            8.03〜8.18(3H,m)
9.61(2H,S)            7.90〜8.00(1H,m)
9.48(2H,S)            7.70(1H,d,J=8.9Hz)
9.36(2H,S)            7.65(1H,S)
8.62(1H,S)            7.00(1H,S)
8.28〜8.46(3H,m)      4.01(2H,S)
実施例３１
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロチアゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５−ジヒドロチアゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩１．５ｇ、６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・塩酸塩１．６２ｇ、ＤＣＣ１．４３ｇ及びＤＭＡＰ７０．８ｍｇに２０％含水ピリジン１５ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、この溶液をアセトン２００ｍｌ及びエーテル２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１０ｍｌ及び濃塩酸０．９７ｍｌを加え、この溶液をアセトン１５０ｍｌ及びエーテル５０ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物６５１ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.66(2H,S)            7.94(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.45(2H,S)            7.52〜7.79(4H,m)
8.64(1H,d,J=1.7Hz)    7.04(1H,S)
8.32(1H,d,J=8.9Hz)    3.87〜4.18(4H,m)
8.22(2H,d,J=8.6Hz)    3.45〜3.67(2H,m)
8.09(1H,d,J=8.9Hz)
参考例８
６−シアノ−１−カルボキシ−２−ナフトールの製造
６−シアノ−１−メトキシカルボニル−２−ナフトール２４．０ｇとメタノール４．７ｌの溶液に水酸化カリウム７１ｇを水１．５ｌに溶解させた溶液を加え、５０〜６０℃で一昼夜攪拌した。冷後、その反応溶液に１０％塩酸を加え酸性溶液とした。析出物を瀘取し、少量の水で洗浄して目的物１４．８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
8.49(1H,d,J=1.7Hz)
8.44(1H,d,J=8.9Hz)
8.12(1H,d,J=8.9Hz)
7.82(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
7.36(1H,d,J=8.9Hz)
実施例３２
６−アミジノ−１−カルボキシ−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩の製造
６−シアノ−１−カルボキシ−２−ナフトール１．０ｇに無水メタノール１００ｍｌを加え、氷冷攪拌下乾燥塩化水素ガスを通じ飽和させた後、さらにこの溶液を水冷下３昼夜攪拌した。その溶液を無水エーテル６００ｍｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物に無水メタノール５０ｍｌを加え、氷冷攪拌下乾燥アンモニアガスを通じ飽和させた後、さらにこの溶液を水冷下３昼夜攪拌した。析出物を瀘取し、水２０ｍｌ及びアセトン２０ｍｌの混液で洗浄した。その瀘取物にＤＭＦ１０ｍｌ及びメタンスルホン酸０．８ｍｌを加え、その溶液をエーテル４００ｍｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物１．１９ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.39(2H,S)          7.89(1H,dd,J1=9.2,J2=2.0Hz)
9.14(2H,S)          7.37(1H,d,J=8.9Hz)
8.39〜8.62(2H,m)    2.44(3H,S)
8.15(1H,d,J=8.9Hz)
実施例３３
６−アミジノ−１−カルボキシ−２−ナフチル  ４−［（４，５ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−カルボキシ−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩１．２５ｇに無水ピリジン２０ｍｌを加え、次に４−［（４，５ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸クロリド・塩酸塩１．０ｇを加え、窒素ガス気流氷冷撹拌下２時間ついで水冷下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ６０ｍｌついでメタンスルホン酸１ｍｌを加え、析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をエーテル１００ｍｌ及びアセトン１００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にＤＭＦ１０ｍｌ及びメタンスルホン酸０．５ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物７１５ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.26(1H,S)          8.19(2H,d,J=8.6Hz)
9.60(2H,S)           8.00(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.38(2H,S)           7.76(1H,d,J=8.9Hz)
8.79(2H,S)           7.51(2H,d,J=8.6Hz)
8.68(1H,d,J=1.7Hz)   3.75(4H,S)
8.35(1H,d,J=8.9Hz)   2.41(6H,S)
8.24(1H,d,J=8.9Hz)
実施例３４
６−アミジノ−１−カルボキシ−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−カルボキシ−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩９３０ｍｇに無水ピリジン１０ｍｌを加え、次に４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸クロリド・塩酸塩６６７．５ｍｇを加え、氷冷撹拌下２時間ついで水冷下二昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、少量のピリジンで洗浄した。その瀘取物に温ＤＭＦ２０ｍｌついでメタンスルホン酸０．６ｍｌを加え、その溶液をエーテル６００ｍｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣にメタノール２０ｍｌを加えた。この溶液をアセトン４５０ｍｌに滴下し、氷冷下１５分間攪拌した。その後析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物８６９ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.27(1H,S)          8.18(2H,d,J=8.6Hz)
9.54(2H,S)           7.98(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.27(2H,S)           7.89(4H,S)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)   7.75(1H,d,J=8.9Hz)
8.36(1H,d,J=9.2Hz)   7.47(2H,d,J=8.6Hz)
8.25(1H,d,J=9.2Hz)   2.44(6H,S)
実施例３５
６−アミジノ−１−メトキシカルボニル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・メタンスルホン塩１．０６ｇ、６−アミジノ−１−メトキシカルボニル−２−ナフトール・メタンスルホン塩１．２ｇ、ＤＣＣ８７２ｍｇ及びＤＭＡＰ４３ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。さらにＤＣＣ４３６ｍｇ及びＤＭＦ７ｍｌを加え、室温下３昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン２００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール１５ｍｌ及び濃塩酸２．４ｍｌを加え、この溶液をアセトン１００ｍｌ及びエーテル２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一時間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物６００．６ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.71(1H,S)           8.13〜8.31(3H,m)
9.76(2H,S)            8.04(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.54(2H,S)            7.78(1H,d,J=8.9Hz)
8.80(2H,S)            7.54(2H,d,J=8.6Hz)
8.75(1H,d,J=1.7Hz)    3.86(3H,S)
8.39(1H,d,J=8.9Hz)    3.74(4H,S)
実施例３６
６−アミジノ−１−メトキシカルボニル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸・塩酸塩１．９ｇ、６−アミジノ−１−メトキシカルボニル−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩３．０ｇ及びＤＣＣ２．２ｇに無水ピリジン５０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。次に析出物を瀘取し、少量のピリジンで洗浄した。その瀘取物に水３０ｍｌを加え、一時間撹拌した。不溶物を瀘過し、瀘液を飽和重曹水１００ｍｌに滴下し氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し少量の水及びアセトンで洗浄した。その瀘取物にメタノール１５ｍｌ及びメタンスルホン酸２．２ｍｌを加え、この溶液をエーテル３００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物２．４６ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.28(1H,S)          7.98(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.55(2H,S)           7.90(4H,S)
9.29(2H,S)           7.78(1H,d,J=8.9Hz)
8.67(1H,d,J=1.7Hz)   7.47(2H,d,J=8.6Hz)
8.41(1H,d,J=9.2Hz)   3.87(3H,S)
8.22(1H,d,J=9.2Hz)   2.42(6H,S)
8.17(2H,d,J=8.6Hz)
実施例３７
６−アミジノ−１−カルボキシメチル−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−カルバモイルメチル−２−ナフトール・１２．４ｇに２５％塩酸３７０ｇを加え、７０℃で２．５時間撹拌した。水冷後析出物を瀘取し、１５％塩酸８０ｇで洗浄した。重曹１０ｇに水２００ｍｌを加えて溶解させ、この溶液に先に得た瀘取物を加え、室温下一時間撹拌後、析出物を瀘取し水洗した。水１８０ｍｌ及びメタンスルホン酸１３ｍｌの溶液に先に得た瀘取物を加え、５０℃に加温溶解させた。さらに活性炭１．０ｇを加えて室温下一時間撹拌後、不溶物を瀘過し瀘液を９０ｍｌまで減圧下濃縮し、この溶液を水冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し、少量のアセトン及びエーテルで洗浄して目的物１２．３ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
12.27(1H,br)         7.90(1H,d,J=8.9Hz)
10.41(1H,S)          7.77(1H,dd,J=8.9,J2=1.7Hz)
9.33(2H,S)           7.36(1H,d,J=8.9Hz)
9.04(2H,S)           4.00(2H,S)
8.41(1H,d,J=1.7Hz)   2.42(3H,S)
7.99(1H,d,J=8.9Hz)
実施例３８
６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−カルボキシメチル−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩６．０ｇに無水メタノール２００ｍｌを加え、氷冷攪拌下乾燥塩化水素ガスを通じ飽和させた後、さらにこの溶液を水冷下一昼夜攪拌した。反応溶液を減圧下濃縮後、残渣にエーテル３００ｍｌを加え、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物に０．５％乾燥アンモニアガス含有メタノール１００ｍｌを加え氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量の水及びアセトンで洗浄した。その瀘取物にメタノール１００ｍｌ及びメタンスルホン酸２．０２ｍｌを加え、氷冷撹拌下２時間撹拌した。その溶液を減圧下濃縮後、残渣にアセトン２００ｍｌを加え、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し目的物５．０ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.49(1H,S)         7.78(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.33(2H,S)          7.37(1H,d,J=8.9Hz)
9.05(2H,S)          4.10(2H,S)
8.41(1H,d,J=1.7Hz)  3.60(3H,S)
8.00(1H,d,J=8.9Hz)  2.42(3H,S)
7.92(1H,d,J=8.9Hz)
実施例３９
６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・メタンスルホン酸塩２．８ｇ、６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフト−ル・メタンスルホン酸塩３．０ｇ、ＤＣＣ４．１９ｇ及びＤＭＡＰ１０３．４ｍｇに２０％含水ピリジン６０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン５００ｍｌ及びエーテル３００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にメタノール４０ｍｌ及びメタンスルホン酸０．８３ｍｌを加え、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下３０分間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物１．４ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.02(1H,S)           7.94(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.51(2H,S)            7.69(1H,d,J=8.9Hz)
9.26(2H,S)            7.50(2H,d,J=8.9Hz)
8.76(2H,S)            4.24(2H,S)
8.61(1H,d,J=1.7Hz)    3.76(4H,S)
8.37(1H,d,J=8.9Hz)    3.53(3H,S)
8.23(2H,d,J=8.9Hz)    2.41(6H,S)
8.19(1H,d,J=8.9Hz)
実施例４０
６−アミジノ−１−カルボキシメチル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２メタンスルホン酸塩５００ｍｇに１０％メタンスルホン酸水溶液４５ｍｌを加え、８０℃で５時間攪拌した。放冷後、その反応溶液に活性炭３５０ｍｇを加え室温下３０分間攪拌した。次に不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣に少量の水を加え、その溶液をアセトン１５０ｍｌ及びエーテル５０ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物２３６．１ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.02(1H,brs)        8.16(1H,d,J=8.9Hz)
9.50(2H,S)           7.94(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.25(2H,S)           7.68(1H,d,J=8.9Hz)
8.77(2H,S)           7.50(2H,d,J=8.9Hz)
8.60(1H,d,J=1.7Hz)   4.12(2H,S)
8.35(1H,d,J=8.9Hz)   3.75(4H,S)
8.24(2H,d,J=8.9Hz)   2.43(6H,S)
実施例４１
６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸・メタンスルホン酸塩８．１ｇ、６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフトール・メタンスルホン酸塩１０．０ｇ、ＤＣＣ７１．６ｇ及びＤＭＡＰ１７０ｍｇに無水ピリジン１７０ｍｌ及びをＤＭＦ７２ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、少量のＤＭＦで洗浄した。瀘液と洗液を合わせて減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ５０ｍｌを加え、その溶液をエーテル７００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣にアセトン２００ｍｌを加え、氷冷下一時間攪拌した。析出物を瀘取し粗生成物を得た。その瀘取物にメタノール３００ｍｌを加えて溶解させ、その溶液に活性炭２ｇを加え、室温下３０分間攪拌した。次に不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール１００ｍｌを加え加温溶解させ、この溶液をアセトン３００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物４．２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.27(1H,S)                7.89(4H,S)
9.51(2H,S)                 7.68(1H,d,J=8.9Hz)
9.23(2H,S)                 7.48(2H,d,J=8.6Hz)
8.61(1H,d,J=1.7Hz)         4.23(2H,S)
8.36(1H,d,J=8.9Hz)         3.53(3H,S)
8.13〜8.29(3H,m)           2.44(6H,S)
7.94(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例４２
６−アミジノ−１−カルボキシメチル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
６−アミジノ−１−メトキシカルボニルメチル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩２．５ｇに２０％メタンスルホン酸水溶液３０ｍｌを加え、６０℃で３時間攪拌した。次に、その反応液へ活性炭７００ｍｇを加え、室温下３０分攪拌した後、不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣に水３０ｍｌを加えて溶解させ、その溶液をアセトン１５０ｍｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトンで洗浄して目的物５８０ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
12.53(1H,brs)              8.16(1H,d,J=8.9Hz)
10.26(1H,S)                7.92(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.50(2H,S)                 7.89(4H,S)
9.22(2H,S)                 7.67(1H,d,J=8.9Hz)
8.59(1H,d,J=1.7Hz)         7.47(2H,d,J=8.6Hz)
8.34(1H,d,J=8.9Hz)         4.12(2H,S)
8.23(2H,d,J=8.6Hz)         2.44(6H,S)
実施例４３
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・メタンスルホン酸塩酸塩の製造
４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸・メタンスルホン酸塩３．１６ｇ、６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフトール２．９４ｇ及びＤＣＣ４．５４ｇに２０％含水ピリジン１００ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、その溶液をアセトン５００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。析出物を瀘取し粗生成物を得た。その瀘取物にメタノール１５０ｍｌを加えて溶解させ、その溶液に活性炭３ｇを加え、室温下３０分間攪拌した。次に不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール３０ｍｌを加え加温溶解させ、この溶液をアセトン４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物２．５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.20〜9.90(4H,br)         7.48(2H,d,J=8.6Hz)
8.62(1H,d,J=2.0Hz)        7.41(1H,S)
8.37(1H,d,J=8.9Hz)        6.84(1H,S)
8.28(2H,d,J=8.6Hz)        3.12〜3.37(2H,m)
7.72〜8.17(6H,m)          2.28〜2.47(5H,m)
7.61(1H,d,J=8.9Hz)
実施例４４
６−アミジノ−１−（２−カルボキシエチル）−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・メタンスルホン酸塩酸塩３．３ｇに３．６％塩酸３００ｍｌを加え７５〜８０℃で６時間攪拌後、さらに反応液を氷冷下一昼夜撹拌した。析出物を瀘取し少量の１５％塩酸及びアセトンで洗浄して目的物１．５８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
12.30(1H,brs)             8.27(2H,d,J=8.6Hz)
10.78(1H,brs)             7.81〜8.17(6H,m)
9.66(2H,S)                7.62(1H,d,J=8.9Hz)
9.43(2H,S)                7.49(2H,d,J=8.6Hz)
8.65(1H,d,J=1.7Hz)        3.15〜3.49(2H,m)
8.37(1H,d,J=8.9Hz)        2.42〜2.64(2H,m)
参考例９
１−ホルミル−６−シアノ−２−ナフトールの製造
６−シアノ−２−ナフトール２０ｇ、パラホルムアルデヒド３．６ｇ及びヘキサメチレンテトラミン１６．６ｇに酢酸６５ｍｌを加え、８０℃で４時間攪拌した。さらに６０℃で酢酸５３ｍｌ、水１０．５ｍｌ及び濃硫酸１７．８ｇの溶液を上記反応溶液に加え、８０℃で４時間攪拌した。冷後、その溶液に水９５ｍｌを加えて攪拌後、析出物を瀘取し温水４０ｍｌで洗浄した。瀘取物にクロロホルム３５０ｍｌを加え、一時間加熱還流した。その後析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮して粗生成物を得た。ついでクロロホルムを溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にｎ−ヘキサン１００ｍｌを加え、しばらく攪拌して析出物を瀘取し目的物１１．２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
13.33(1H,S)         8.03(1H,d,J=8.9Hz)
10.80(1H,S)         7.78(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
8.44(1H,d,J=8.9Hz)  7.28(1H,d,J=8.9Hz)
8.18(1H,d,J=1.7Hz)
参考例１０
６−シアノ−１−（２−エトキシカルボニルビニル）−２−ナフトールの製造
無水炭酸カリウム１３．６ｇと無水メタノール２５０ｍｌの溶液に１−ホルミル−６−シアノ−２−ナフトール１９．３ｇ及びエトキシカルボニルメチルトリフェニルホスホニウムブロミド４２．１ｇをＤＭＦ１４０ｍｌに溶解させた溶液を滴下し、窒素ガス気流氷冷下３時間ついで室温下一昼夜攪拌した。析出物を瀘過し、瀘液に水２．７ｌを加え２時間攪拌した。その後析出物を瀘取し、メタノール９０ｍｌで洗浄して目的物１２．６ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.38(1H,brs)
8.46(1H,d,J=1.7Hz)
8.09〜8.30(2H,m)
7.98(1H,d,J=8.9Hz)
7.77(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
7.40(1H,d,J=8.9Hz)
6.84(1H,d,J=15.8Hz)
4.24(2H,q,J=7.3Hz)
1.31(3H,t,J=7.3Hz)
参考例１１
６−シアノ−１−（２−カルバモイルビニル）−２−ナフトールの製造
６−シアノ−１−（２−エトキシカルボニルビニル）−２−ナフトール２５．２ｇに２５％をアンモニア水２．０ｌを加え、４０〜４５℃で３２時間攪拌した。冷後、その反応溶液を３００ｍｌまで減圧下濃縮し、残渣を氷冷下３０分撹拌した。析出物を瀘取し、少量の水及びアセトンで洗浄して目的物９．５５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
8.46(1H,d,J=1.7Hz)
8.22(1H,d,J=8.9Hz)
7.87〜8.07(2H,m)
7.77(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
7.70(1H,S)
7.40(1H,d,J=8.9Hz)
7.16(1H,S)
6.94(1H,d,J=15.8Hz)
実施例４５
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルビニル）−２−ナフトール・塩酸塩の製造
６−シアノ−１−（２−カルバモイルビニル）−２−ナフトール９．０ｇを乾燥塩化水素ガス飽和無水メタノール溶液７５０ｍｌに加え、氷冷下３昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、少量のエーテル及びアセトンで洗浄した。その瀘取物を乾燥アンモニアガス飽和無水メタノール溶液９００ｍｌに加え、室温下５昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、少量のメタノールで洗浄した。その瀘取物にＤＭＦ３５ｍｌを加え、この溶液に２５％塩酸１５ｇを加え、氷冷下３０分間撹拌した。さらにこの溶液にアセトン２００ｍｌを加え、氷冷下３０分間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のアセトン及びエーテルで洗浄して目的物５．５ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
9.53(2H,S)             7.96(1H,d,J=8.9Hz)
9.30(2H,S)             7.90(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
8.50(1H,d,J=1.7Hz)     7.58(1H,d,J=8.9Hz)
8.26(1H,d,J=8.9Hz)     6.99(1H,d,J=15.8Hz)
8.02(1H,d,J=15.8Hz)
実施例４６
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルビニル）−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸・メタンスルホン酸塩５．０８ｇ、６−アミジノ−１−（２−カルバモイルビニル）−２−ナフトール・塩酸塩４．５ｇ、ＤＣＣ６．３４ｇ及びＤＭＡＰ８０．ｍｇに２０％含水ピリジン９０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物を温２０％含水ピリジン１６０ｍｌで２回に分けて洗浄した。先に得た反応瀘液と温含水ピリジン洗液を合わせ、その溶液をアセトン１ｌに加え、氷冷下一昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物に温ＤＭＦ７０ｍｌを加えて溶解させた後、活性炭０．５ｇを加えて室温下３０分間攪拌した。不溶物を瀘過し、瀘液に濃塩酸８．４ｍｌを加え、この溶液をアセトン６００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物６．８ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.78(1H,S)               7.90〜8.14(5H,m)
9.71(2H,S)                7.88(1H,S)
9.46(2H,S)                7.76(1H,d,J=15.8Hz)
8.70(1H,d,J=1.7Hz)        7.70(1H,d,J=8.9Hz)
8.28(1H,d,J=8.9Hz)        7.48(2H,d,J=8.6Hz)
8.23(2H,d,J=8.6Hz)        7.28(1H,S)
8.22(1H,d,J=8.9Hz)        6.65(1H,d,J=15.8Hz)
参考例１２
６−シアノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフトールの製造
６−シアノ−１−カルボキシ−２−ナフトール２８．４ｇにアセトニトリル３５０ｍｌ、トリエチルアミン１８ｍｌ及びジメチルカルバモイルメチルブロミド３３．２ｇを加え７０℃で一昼夜撹拌し、さらに室温下一昼夜撹拌後、析出物を瀘取し水で洗浄して目的物３１．２ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.27(1H,S)                7.36(1H,d,J=8.9Hz)
8.52(1H,S)                 5.23(2H,S)
8.37(1H,d,J=8.9Hz)         3.04(3H,S)
8.10(1H,d,J=8.9Hz)         2.95(3H,S)
7.80(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例４７
６−アミジノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフトール・塩酸塩の製造
６−シアノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフトール２９．８ｇに無水メタノール６００ｍｌを加え、氷冷攪拌下乾燥塩化水素ガスを通じ飽和させた後、さらにこの溶液を水冷下一昼夜攪拌した。反応溶液を無水エーテル３．０ｌに滴下し、氷冷下一時間撹拌し析出物を瀘取した。無水メタノール２４０ｍｌに氷冷攪拌下乾燥アンモニアガスを通じ飽和させた溶液に先に得た瀘取物を加え、水冷下４昼夜攪拌した。析出物を瀘取し、メタノール１５０ｍｌ、水１００ｍｌ及びアセトン１００ｍｌで洗浄した。その瀘取物に乾燥塩化水素ガス飽和メタノール溶液１００ｍｌを加え、氷冷下２時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量のジイソプロピルエーテルで洗浄して粗生成物を得た。この瀘取物を５０％含水メタノール１．２ｌに溶解させ、活性炭１０ｇを加え、室温下一時間撹拌した。不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下２００ｍｌまで濃縮した。析出物を瀘取し、少量の冷メタノール及びアセトンで洗浄して目的物１８．７ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.33(1H,S)          7.89(1H,dd,J=8.9,J2=1.7Hz)
9.53(2H,S)           7.44(1H,d,J=8.9Hz)
9.33(2H,S)           5.22(2H,S)
8.52(1H,d,J=1.7Hz)   3.04(3H,S)
8.43(1H,d,J=8.9Hz)   2.94(3H,S)
8.11(1H,d,J=8.9Hz)
実施例４８
６−アミジノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩１．０ｇ、６−アミジノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフトール・塩酸塩１．３８ｇ、ＤＣＣ１．２８ｇ及びＤＭＡＰ５０．５ｍｇに無水ピリジン１５ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物に温ＤＭＦ５０ｍｌ、１Ｎ−塩酸０．５ｍｌ及び水２ｍｌを加えて溶解させ、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ１５ｍｌを加え、その溶液をアセトン１５０ｍｌ及びエーテル５０ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一時間撹拌した。その後析出物を瀘取し粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にＤＭＦ５ｍｌ及び濃塩酸０．７ｍｌを加え、この溶液をアセトン１５０ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物４４７．８ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.83(1H,brs)        8.07(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.81(2H,S)           7.79(1H,d,J=8.9Hz)
9.61(2H,S)           7.54(2H,d,J=8.6Hz)
8.85(2H,S)           5.12(2H,S)
8.84(1H,d,J=8.9Hz)   3.73(4H,S)
8.78(1H,d,J=1.7Hz)   2.97(3H,S)
8.38(1H,d,J=8.9Hz)   2.89(3H,S)
8.16(2H,d,J=8.6Hz)
実施例４９
６−アミジノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフチル  ４−アミノイミノメチルアミノベンゾエート・２メタンスルホン酸塩の製造
４−アミノイミノメチルアミノ安息香酸・メタンスルホン酸塩４１８ｍｇ、６−アミジノ−１−ジメチルカルバモイルメトキシカルボニル−２−ナフトール・塩酸塩５００ｍｇ、ＤＣＣ４００ｍｇ及びＤＭＡＰ１８ｍｇに無水ピリジン３ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、瀘取物に温ＤＭＦ２０ｍｌを加えて溶解させ、氷冷下一時間撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液をエーテル４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。析出物を瀘取し、その瀘取物に水２０ｍｌを加えて溶解させ、この溶液を飽和重曹水１００ｍｌに滴下し氷冷下二時間撹拌した。析出物を瀘取し、少量の水及びアセトンで洗浄した。その瀘取物をＤＭＦ２０ｍｌ及びメタンスルホン酸０．３６ｍｌの溶液に加えた。この溶液をアセトン４５０ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物３１２．５ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.27(1H,S)               7.89(4H,S)
9.53(2H,S)                7.79(1H,d,J=8.9Hz)
9.27(2H,S)                7.46(2H,d,J=8.6Hz)
8.86(1H,d,J=8.9Hz)        5.11(2H,S)
8.66(1H,d,J=1.7Hz)        2.96(3H,S)
8.42(1H,d,J=8.9Hz)        2.89(3H,S)
8.17(2H,d,J=8.6Hz)        2.42(6H,S)
7.99(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
実施例５０
６−アミジノ−１−（２−エトキシカルボニルエチル）−２−ナフトール・塩酸塩の製造
６−アミジノ−１−（２−カルバモイルエチル）−２−ナフトール・塩酸塩３．６ｇに３．６％塩酸６００ｍｌを加え、９０℃で６時間撹拌した。反応溶液を減圧下濃縮後、残渣にエタノール１００ｍｌを加え一時間撹拌した。不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣に無水エタノール２００ｍｌを加え、氷冷攪拌下乾燥塩化水素ガスを通じ飽和させた後、水冷下一昼夜撹拌した。少量の不溶物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣に水６０ｍｌを加えて溶解させ、この溶液を飽和重曹水１４０ｍｌに滴下し氷冷下３０分間撹拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣に少量の水を加え上澄をデカンテーションした。残渣にエタノール１０ｍｌ及びアセトン５ｍｌを加え、さらに濃塩酸４．３ｍｌを加えて溶解させた。この溶液をエーテル７００ｍｌに滴下し、氷冷下二時間攪拌した。上澄をデカンテーションした後、残渣にアセトン４０ｍｌ及びエーテル２００ｍｌを加えて一時間撹拌した。析出物を瀘取し目的物１．６４ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
10.50(1H,S)           7.44(1H,d,J=8.9Hz)
9.46(2H,S)            4.05(2H,q,J=7.3Hz)
9.25(2H,S)            3.16〜3.37(2H,m)
8.46(1H,d,J=1.7Hz)    2.39〜2.64(2H,m)
8.07(1H,d,J=8.9Hz)    1.15(3H,t,J=7.3Hz)
7.74〜7.92(2H,m)
実施例５１
６−アミジノ−１−（２−エトキシカルボニルエチル）−２−ナフチル  ４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］ベンゾエート・２塩酸塩の製造
４−［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）アミノ］安息香酸・塩酸塩１．１２ｇ、６−アミジノ−１−（２−エトキシカルボニルエチル）−２−ナフトール・塩酸塩１．５ｇ、ＤＣＣ１．４４ｇ及びＤＭＡＰ５６．７ｍｇに２０％含水ピリジン３０ｍｌを加え、氷冷下２時間ついで室温下二昼夜撹拌した。さらにＤＣＣ１．４４ｇ、２０％含水ピリジン５ｍｌ及びＤＭＦ１０ｍｌを加え、室温下一昼夜撹拌した。析出物を瀘過し、瀘液を減圧下濃縮した。残渣にＤＭＦ２０ｍｌを加え、その溶液をエーテル４００ｍｌに滴下し、氷冷下一昼夜撹拌した。上澄をデカンテーションし粗生成物を得た。ついでメチルエチルケトン−水−酢酸（８０：１５：５）を溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、目的とするフラクションを集め減圧下溶媒を留去した。残渣にエタノール１０ｍｌ及び濃塩酸１．５５ｍｌを加え、この溶液をアセトン１００ｍｌ及びエーテル２００ｍｌの混合液に滴下し、氷冷下一時間攪拌した。その後析出物を瀘取し目的物３０７．９ｍｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δppm:
11.71(1H,S)           8.09(1H,d,J=8.9Hz)
9.70(2H,S)            8.01(1H,dd,J1=8.9,J2=1.7Hz)
9.50(2H,S)            7.62(1H,d,J=8.9Hz)
8.79(2H,S)            7.55(2H,d,J=8.6Hz)
8.67(1H,d,J=1.7Hz)    3.98(2H,q,J=6.9Hz)
8.36(1H,d,J=8.9Hz)    3.74(4H,S)
8.25(2H,d,J=8.6Hz)    1.06(3H,t,J=6.9Hz)
製剤処方例  １
本発明化合物              １００mg
乳糖                        ３０mg
アビセル                    ３０mg
カルボキシセルロース        ２０mg
コハク酸                    １８mg
ステアリン酸マグネシウム      ２mg
全量  ２００mgをカプセルに充填するか、または錠剤に打錠する。
製剤処方例  ２
本発明化合物              １００mg
乳糖                        ５０mg
アビセル                    ２０mg
カルボキシセルロース        ２０mg
コハク酸                      ８mg
ステアリン酸マグネシウム      ２mg
全量  ２００mgをカプセルに充填するか、または錠剤に打錠する。
製剤処方例  ３
本発明化合物                      １００mg
乳糖                                ４５mg
とうもろこし澱粉                    ２７mg
低置換ヒドロキシプロピルセルロース  ２７mg
ステアリン酸マグネシウム              １mg
全量  ２００mgをカプセルに充填するか、または錠剤に打錠する。
製剤処方例  ４
本発明化合物            ０．２ｇ
ウィテップゾール        １．１ｇ
以上を常法により坐剤とする。
発明の効果
本発明化合物は経口投与可能で線溶促進作用を有し、優れた血栓溶解作用を発現するため、血栓に関連して起こる疾患に有効である。すなわち、静脈血栓症、心筋梗塞症、肺塞栓症、脳塞栓症、緩徐に進行する脳血栓症、血管手術および血液体外循環に伴う血栓塞栓の治療並びに血流障害の改善、慢性動脈閉塞症に伴う諸症状の改善、虚血性脳血管障害に伴う血栓・塞栓の治療等、血栓、塞栓症全般の治療薬として使用することができる。
本発明化合物が線溶促進作用を有し、血栓溶解作用を発現するため、血栓に関連して起こる種々の疾患に有効であることは、以下に示す実験によって証明された。
（１）マウス肺血栓致死モデルに対する致死改善効果
実験には、６時間絶食したｄｄｙ系雄性マウスを用い、本発明化合物１０mg／kgを経口投与した。陽性対照群には、ヒト経口投与によって血栓溶解作用を発現するメシル酸セピモスタットを投与した。６時間後、尾静脈よりトロンビン１０単位／マウスを静脈内投与して血栓を惹起し、トロンビン惹起１６時間後に生死を判定し、致死改善効果（生存率）を陽性対照投与群の生存率に対する比で示した。結果を表１に示す。
0003817263.tif 000008
上記結果から、本発明化合物は、優れた血栓溶解作用を有する対照化合物に匹敵する効果を有することが証明された。
（２）合成基質を用いた血中プラスミン様活性測定試験
実験には、一晩絶食したＳＤ系雄性ラット（８週令）を用いた。本発明化合物１００mg／kgを経口投与し、下行大動脈より経時的にクエン酸加血として採血し、遠心分離して血漿を得た。対照群には水を経口投与し、同様にして血漿を得た。
得られた血漿は０．１Ｍホウ酸緩衝液（pＨ８．５）およびＢｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＭＣＡを加え３７℃で３０分間インキュベートし、１５％酢酸を加えて反応停止後、蛍光強度を測定し、プラスミン様活性を求めたところ、本発明化合物は血中プラスミン様活性上昇を示した。結果を表２に示す。
0003817263.tif 000009
上記結果から、本発明化合物は血栓溶解作用を発現することがあきらかとなった。
（３）プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター（ＰＡＩ−１）抗原量測定試験
上記試験（２）で得られた血漿を用いてＰＡＩ−１抗原量を測定した。
あらかじめＰＡＩ−１に対するモノクローナル抗体の１０ｍＭ炭酸緩衝液希釈溶液を、９６穴マイクロタイター・プレート上に１００μｌずつ加え、４℃下１６時間放置した。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含む１０ｍＭリン酸緩衝液にて４回洗浄後、標準液および血漿サンプルを添加した。室温にて２時間放置し、再び４回洗浄後、酵素標識したＰＡＩ−１ポリクローナル抗体を１００μｌ添加し、室温で２時間反応させた。余分な抗体を洗浄後、１０mg  Ｏ−フェニレンジアミン、０．１％過酸化水素を含むクエン酸緩衝液を１００μｌ添加し、３０℃で３０分間放置し発色させた。２Ｎ硫酸を５０μｌ添加して反応停止後、マイクロプレートリーダーで４０５ｎｍの吸光度を測定し、血漿サンプル中のＰＡＩ−１抗原量を求めた。結果を表３に示す。
0003817263.tif 000010
血栓溶解の制御機構において、血漿中に放出されたｔ−ＰＡは、ほとんどが速やかにその特異的阻害因子であるＰＡＩ−１によって阻害され、活性を消失するため、ＰＡＩ−１量の減少は結果として血栓溶解作用の亢進をもたらす。本発明化合物投与群はこの血中ＰＡＩ−１抗原量を明らかに低下させた。
なお、本発明化合物の毒性は非常に低いものであり、ヒト若しくは哺乳類に投与しても問題はないものと判断された。