(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0003739916.tif 000028
［式中、Ｒ1は直鎖または分岐のＣ1-6アルキル基、又は（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ1-6アルキルフェニル基を示し；
Ｒ5はフェニル基又はＣ1-6アルコキシフェニル基を示し；
Ｒ7はハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ1-6アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ1-6アルコキシル基、又は１もしくは２のＣ1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基を示し；
Ｘは水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｚは炭素原子又は窒素原子で表わされる部分構造を示す。ただし、Ｚが窒素原子で表わされる部分構造のとき、Ｒ7は１もしくは２のＣ1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基である。］
で表わされる化合物またはその塩を有効成分とするＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害剤。
【請求項２】
一般式（１）で表わされる化合物が次の式（４）で表わされるものである請求項１記載のＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害剤。
【化２】
0003739916.tif 000029
【請求項３】
一般式（１）で表わされる化合物が次の式（５）で表わされるものである請求項１記載のＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害剤。
【化３】
0003739916.tif 000030
【請求項４】
一般式（１）で表わされる化合物が次の式（６）で表わされるものである請求項１記載のＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害剤。
【化４】
0003739916.tif 000031
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、細胞の分化・活性化、各種免疫応答反応、腫瘍、ウイルス感染等において種々の反応に関与しているサイトカインの産生を阻害する薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
サイトカインは、細胞から放出され、細胞間相互作用を媒介するタンパク質性因子であり、免疫応答の制御作用、抗腫瘍作用、抗ウイルス作用、細胞増殖・分化の調節作用などを示す物質の総称である。かかるサイトカインは、細菌膜成分であるＬｉｐｉｄ  Ａ、ＭＤＰ、ＦＭＬＰや、細菌毒素であるＳＥＡ、ＴＳＳＴ−１、あるいはマイトジェンであるＣｏｎ  Ａ、ＰＨＡ等の刺激により細胞から産生され、それらのサイトカインはさらに他の細胞を刺激することにより新たなサイトカインを細胞から産生する、いわゆるサイトカインネットワークを構成する。
【０００３】
このようにサイトカインの異常産生により発生する疾病は極めて多く、サイトカインの産生を阻害する薬物はサイトカインが関与する種々の疾患の予防薬および／または治療薬となり得ると考えられている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的はサイトカインの関与する疾患の予防薬および／または治療薬として有用なサイトカイン産生阻害剤を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
かかる実状に鑑み、本発明者らは上記目的を達成すべく鋭意研究した結果、次の一般式（１）で表わされる化合物またはその塩が、阻害することを見出し、本発明を完成させた。
【０００６】
すなわち本発明は、一般式（１）
【０００７】
【化５】
0003739916.tif 000002
【０００８】
［式中、Ｒ1は直鎖または分岐のＣ1-6アルキル基、又は（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ1-6アルキルフェニル基を示し；
Ｒ5はフェニル基又はＣ1-6アルコキシフェニル基を示し；
Ｒ7はハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ1-6アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ1-6アルコキシル基、又は１もしくは２のＣ1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基を示し；
Ｘは水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｚは炭素原子又は窒素原子で表わされる部分構造を示す。ただし、Ｚが窒素原子で表わされる部分構造のとき、Ｒ7は１もしくは２のＣ1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基である。］
で表わされる化合物またはその塩を有効成分とするＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害剤を提供するものである。
【００２０】
【発明の実施の形態】
本発明のサイトカイン産生阻害剤の有効成分である、一般式（１）で表わされる化合物の置換基について以下に述べる。なお、本願明細書において、例えば、「Ｃ1-6」とは、炭素数が１から６であることを示している。
【００２１】
置換基Ｒ1は、直鎖または分岐鎖のＣ1-6アルキル基、又は（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ1-6アルキルフェニル基を示す。ここで、アルキル基としてはメチル基およびエチル基が好ましい。（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ1-6アルキル基において各置換部分はアルキル基のいずれの炭素原子上にあってもよいが、アルキル基の末端の炭素原子上にある場合がより好ましい。またこれらの置換基のアルキル部分はメチル基が最も好ましい。
【００３２】
一般式（１）中、Ｒ5は、フェニル基又はＣ1-6アルコキシフェニル基を示す。また、フェニル基上においてはそのいずれの位置にこの置換基があってもよい。
【００３４】
Ｘは、ハロゲン原子または水素原子であるが、ハロゲン原子の場合はフッ素原子が好ましく、Ｘとしてはこれらのうち、フッ素原子または水素原子が好ましい。
【００３７】
Ｒ7で示されるハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ1-6アルキル基またはＣ1-6アルコキシル基におけるハロゲン原子としてはフッ素原子または塩素原子が好ましく、特にフッ素原子が好ましい。フッ素原子を置換基として有するアルキル基またはアルコキシル基としては、直鎖状のアルキル基またはアルコキシル基が好ましい。かかるアルキル基またはアルコキシル基上のフッ素原子の数は特に限定はないが、モノ置換からパーフルオロ置換でよい。具体的には、モノフルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基等のフルオロアルキル基；モノフルオロメトキシ基、ジフルオロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基等のフルオロアルコキシ基が挙げられる。
【００４２】
またＺは炭素原子または窒素原子のいずれかである。
【００４３】
本発明のサイトカイン産生阻害剤において有効成分として用いられる式（１）で表わされる化合物の好ましい具体例としては、次の式（４）〜（６）で表わされる化合物またはその塩が挙げられる。
【００４４】
【化１２】
0003739916.tif 000003
【００４５】
式（１）の化合物は、例えば次の反応式にしたがって製造することができる。
【００４６】
【化６】
0003739916.tif 000004
【００４７】
［式中、Ｘ′は、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ1-3アルキルスルホニル基、またはベンゼンスルホニル基、トルエンスルホニル基等のアリールスルホニル基等の、脱離基としての機能を有する置換基であり、Ｙ′は、水酸基、Ｃ1-6アルコキシ基、または式（９）：
【００４８】
【化１４】
0003739916.tif 000005
【００４９】
（式中、Ｒ9およびＲ10は、フッ素原子または低級アルキルカルボニルオキシ基を示す。）
で表わされるホウ素含有置換基であり、Ｒ1、Ｒ5、Ｒ7、ＸおよびＺは、前記と同じ］
【００５０】
すなわち、一般式（７）で表わされる化合物を式（８）で表わされる化合物あるいはその酸付加塩と反応させることによって製造することができる。
【００５１】
Ｙ′がＣ1-6アルコキシ基のとき、相当するカルボン酸への変換は、通常のカルボン酸エステルの加水分解に用いられる酸または塩基の存在下で行い、脱保護が必要な場合は保護基に対応した適当な条件で保護基を除去して式（１）で示される目的化合物を得ることができる。
【００５２】
式（７）の化合物において、Ｙ′が式（９）で表わされる化合物の場合には、式（８）の化合物と反応を行った後に酸性または塩基性化合物で処理することにより相当するカルボン酸に変換することができる。
【００５３】
式（７）の化合物と式（８）の化合物との反応は、無溶媒または不活性溶媒中行うことができる。ここで不活性溶媒としては例えばジメチルスルホキシド、ピリジン、アセトニトリル、トリエチルアミン、エタノール、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、水、３−メトキシブタノール等を挙げることができる。またはこれらの溶媒は混合物として使用してもよい。
【００５４】
反応温度は、通常、室温〜２００℃の範囲であり、好ましくは２５℃〜１５０℃の範囲である。反応時間は３０分〜４８時間で、通常は３０分〜２時間程度で完結する。
【００５５】
反応は、無機塩基または有機塩基のような酸受容体、例えば、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属炭酸塩または炭酸水素塩、あるいはトリエチルアミン、ピリジン、１，８−ジアザビシクロウンデセン等の有機塩基性化合物の存在下で行うのが有利である。
【００５６】
式（１）の化合物はエナンチオマーまたはジアステレオマーの存在する場合があるが、本発明化合物をヒトや動物に投与する際は単一のエナンチオマーまたはジアステレオマーからなるものを投与することが好ましい。なお、この「単一のエナンチオマーまたはジアステレオマーからなる」とは、他のエナンチオマーまたはジアステレオマーを全く含有しない場合だけではなく、物理定数や、生理活性に対して影響がない程度であれば他のエナンチオマーまたはジアステレオマーが含まれていてもよいという意味である。
【００５７】
化合物（１）は、遊離体のままでもよいが、無機酸または有機酸の酸付加塩としてあるいはカルボキシル基の塩としてもよい。酸付加塩とする場合の例としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩等の無機酸塩類、あるいは酢酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩等の有機酸塩類を挙げることができる。
【００５８】
またカルボキシル基の塩としては、例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、またトリエチルアミン塩やＮ−メチルグルカミン塩、トリス−（ヒドロキシルメチル）アミノメタン塩等を挙げることができる。
【００５９】
またこれらの化合物（１）の遊離体、酸付加塩およびカルボキシル基の塩は、それぞれ水和物として存在することもある。
【００６０】
一方、カルボン酸部分がエステルである本発明化合物は、合成中間体やプロドラッグとして有用である。ここで合成中間体として用いる場合、例えば、アルキルエステル類やベンジルエステル類、アルコキシアルキルエステル類、フェニルアルキルエステル類およびフェニルエステル類等が好ましい。
【００６１】
また、プロドラッグとして用いる場合は、生体内で容易に切断されてカルボン酸の遊離体を生成するようなエステルが好ましく、例えば、アセトキシメチルエステル、ピバロイルオキシメチルエステル、エトキシカルボニルエステル、コリンエステル、ジメチルアミノエチルエステル、５−インダニルエステル、フタリジニルエステル、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチルエステル、３−アセトキシ−２−オキソブチルエステル等のオキソアルキルエステル等が好ましい。
【００６２】
化合物（１）は、ＴＮＦ−α及びＩＬ−６から選ばれるサイトカイン産生阻害作用を有しており、これらのサイトカインが関与する種々の疾患の予防薬および／または治療薬として有用である。これらのサイトカインが関与する疾患としては、免疫系、造血系から神経系におよぶ生体防御ネットワークの中核に関わる多くの疾患、例えば、急性炎症性疾患として、ウイルス感染症、外科的手術侵襲、火傷、心筋梗塞等が、また、慢性炎症性疾患として、慢性リンパ節炎、Ｃａｓｔｌｅｍａｎ病等が、また腫瘍として、多発性骨髄腫、心房粘液腫、Ｇｒａｗｉｔｚ腫瘍、子宮頚癌等が、また、その他として、肝硬変、ＨＴＬＶ−１ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｙｅｌｏｐａｔｈｙ（ＨＡＭ）、多発性硬化症（ＭＳ）等が挙げられる。
【００６３】
化合物（１）をサイトカイン産生阻害剤として使用する場合、投与量は、患者の年齢、性別、症状等により異なるが、成人一日当たり５mg〜２ｇ、好ましくは５０mg〜１０００mgの範囲とするのが好ましい。
この場合、一日量を一日１回、あるいは２〜３回に分けて投与すればよく、また一日量は必要によっては上記の量を超えてもよい。
【００６４】
化合物（１）を含有するサイトカイン産生阻害剤は、その投与法、剤型に特に制限はなく、通常用いられている各種製剤の調製法にてその投与法にあった剤型にすればよい。
【００６５】
経口用製剤としては例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤や、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤または油性もしくは水性の懸濁液等を挙げることができる。
【００６６】
注射剤としては溶液を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としても良く、必要に応じて安定剤、防腐剤、溶解補助剤を使用してもよい。また一投与量毎に容器に収納してもよく、また多投与量を同一の容器に収納してもよい。
【００６７】
また外用製剤として溶液剤、懸濁液、乳濁液、軟膏、ゲル、クリーム、ローション、スプレー等が挙げられる。
【００６８】
固形製剤としては活性化合物とともに製剤学上許容されている添加物を含み、例えば充填剤類や増量剤類、結合剤類、崩壊剤類、溶解促進剤類、湿潤剤類、潤滑剤類等を必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
【００６９】
液体製剤としては溶液、懸濁液、乳液剤等を挙げることができ、添加剤として懸濁化剤、乳化剤等を含んでいてもよい。
【００７０】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００７１】
参考例１
３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（Ａ−９）の合成
【００７２】
【化１５】
0003739916.tif 000006
【００７３】
４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン（４９７mg，２．８０mmol）をトルエン（５０ml）に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８００mg，４．２１mmol）を加え、２３時間加熱環流して脱水した。反応液を減圧乾固し、残留物に１規定水酸化ナトリウム水溶液（５０ml）を加えてクロロホルムで抽出（２×５０ml）した。有機層を飽和食塩水（２×５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去して４４７mg（定量的）の標記化合物（Ａ−９）を淡黄色油状物として得た。得られた化合物（Ａ−９）の物性は以下の通りである。
【００７４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：２．４７（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），３．１１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，−ＣＨ2−），３．５３（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），６．１４（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ−），７．２２−７．４０（Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃＨ）
【００７５】
参考例２
４−フェニルピペリジン（Ｂ−９）の合成
【００７６】
【化１６】
0003739916.tif 000007
【００７７】
３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（４４７mg，２．８１mmol）、エタノール（５０ml）、５％パラジウム炭素（３２５mg）を混合し、１気圧水素雰囲気下、室温で１５時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧乾固して４２５mg（９４％）の標記化合物（Ｂ−９）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｂ−９）の物性は以下の通りである。
【００７８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．６０−１．７５（２Ｈ，ｍ），２．５８−２．６６（１Ｈ，ｍ），２．７２−２．７８（２Ｈ，ｍ），３．１８−３．２１（２Ｈ，ｍ），７．１８−７．３２（５Ｈ，ｍ）
【００７９】
実施例１
７−（３，４−デヒドロ−４−フェニル−１−ピペリジニル）−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−１−メチル−８−トリフルオロメチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（４）の合成
【００８０】
【化１７】
0003739916.tif 000008
【００８１】
６，７−ジフルオロ−１−メチル−４−オキソ−８−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（２−８）（９０mg，０．２９３mmol），３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（Ａ−９）（７０mg，０．４４mmol）、トリエチルアミン（０．０８ml）、アセトニトリル（５ml）を混合し、１２時間加熱環流した。反応液を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）にて精製後、得られた粗結晶をエタノールから再結晶して１５mg（１１％）の標記化合物（４）を淡黄色結晶として得た。得られた化合物（４）の物性は以下の通りである。
【００８２】
融点：２２７．５−２２９℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：２．７９（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ2−），３．７８（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ2−），４．０３（３Ｈ，ｓ，−ＣＨ3），４．２０（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ2−），６．１２（１Ｈ，ｂｓ），７．２５−７．４５（５Ｈ，ｍ，Ａｒ），８．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），１４．６（１Ｈ，ｓ，ＣＯＯＨ）
ＩＲ：νmax(KBr)：１７６２，１７３４，１６２０，１５６２（cm-1）
元素分析値：Ｃ23Ｈ18Ｆ4Ｎ2Ｏ3として
計算値：Ｃ，６１．８８；Ｈ，４．０６；Ｎ，６．２８
分析値：Ｃ，６１．７４；Ｈ，４．１４；Ｎ，６．２４
【００８３】
実施例２
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−（４−フェニル−１−ピペリジニル）−１−［４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）メチルフェニル］−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（５）の合成
【００８４】
【化１８】
0003739916.tif 000009
【００８５】
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６，７−ジフルオロ−１−［４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）メチルフェニル］−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（４−８）（８１．１mg，０．１８１mmol；ＤＥ−Ａ−４４２５６５９号）、４−フェニルピペリジン（Ｂ−９）（４３．７mg，０．２７１mmol）、トリエチルアミン（５０ml，０．３６２mmol）、アセトニトリル（３ml）を混合し、２４時間加熱環流した。反応液を氷冷し、析出した結晶を濾取した。濾液を濃縮して残留物をエタノールで結晶化し、濾取した。濾取した結晶を合わせてエタノールから再結晶して３８．６mg（３５％）の標記化合物（５）を無色結晶として得た。得られた化合物（５）の物性は以下の通りである。
【００８６】
融点：１８０−１８３℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．８０（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），１．９３（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），２．６９（１Ｈ，ｍ，−ＣＨＰｈ−），３．２６（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），３．４４（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−），５．４８（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ2−），６．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７５Ｈｚ，−ＯＣＨＦ2），７．２１−７．２６（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．３１−７．３６（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．４３（１Ｈ，ｄ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），８．０３（１Ｈ，ｓ，ｔｒｉａｚｏｌｅ  Ｈ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．１４（１Ｈ，ｓ，ｔｒｉａｚｏｌｅ  Ｈ），８．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
ＩＲ：νmax(KBr)：１７３０，１６２２，１６００，１５０４（cm-1）
元素分析値：Ｃ31Ｈ26Ｆ3Ｎ5Ｏ4・３／４Ｈ2Ｏとして
計算値：Ｃ，６１．７４；Ｈ，４．５８；Ｎ，１１．６１
分析値：Ｃ，６１．７８；Ｈ，４．８７；Ｎ，１１．０１
【００８７】
参考例３
メチル ３−エテニル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｃ）の合成
【００８８】
【化１９】
0003739916.tif 000010
【００８９】
テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（６．１８ｇ）、塩化リチウム（２５．９ｇ）、無水ジオキサン（５００ml）の混合物にメチル  ２，４，５−トリフルオロ−３−トリフルオルメタンスルホニルオキシベンゾアート（Ｃ′）（５７．３７ｇ，０．１７０mmol）、テトラビニルスズ（３３．６ml）の無水ジオキサン（５００ml）溶液を窒素雰囲気下１５分間で滴下した後、１５時間加熱環流した。
反応液を減圧濃縮し、残留物にフッ化カリウム水溶液（１リットル）を加えてエーテル抽出（３×５００ml）した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（９８：２）で溶出して目的物を含むフラクションを得た。減圧蒸留し、沸点：８２℃／２mmHgの無色油状物（Ｃ）２１．８ｇ（５９％）を得た。得られた化合物（Ｃ）の物性は以下の通りである。
【００９０】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．９３（３Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣＨ3），５．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨｃｉｓＨ），６．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨｔｒａｎｓＨ），６．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１，１８Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨ2），７．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６，９，１０Ｈｚ，Ｈ−６）
【００９１】
参考例４
メチル ３−ホルミル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｄ）の合成
【００９２】
【化２０】
0003739916.tif 000011
【００９３】
メチル  ３−エテニル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｃ）（２１．８ｇ，０．１０１mol）をメタノール（５００ml）に溶解し、−７８℃に冷却してオゾンを２時間吹き込んだ。過剰のオゾンを窒素ガスをバブルして除き、ジメチルスルフィド（１４ml）を加えて室温まで昇温した。さらにジメチルスルフィド（１４ml）を追加して３０分間撹拌した後、反応液を減圧濃縮した。残留物に水（５００ml）を加えてエーテル抽出（５００ml）した。抽出液を水（３００ml）、飽和食塩水（２×３００ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去し、２１．４ｇの化合物（Ｄ）を含む淡黄色油状物を得た。これは、−ＣＨＯ＋−ＯＴｆ（３：２）の混合物である。得られた混合物の物性は以下の通りである。
【００９４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．９８（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），８．０４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，９，９Ｈｚ，Ｈ−６），１０．３５（１Ｈ，ｓ，−ＣＨＯ）
【００９５】
参考例５
２，３，６−トリフルオロ−５−メトキシカルボニル安息香酸（Ｅ）の合成
【００９６】
【化２１】
0003739916.tif 000012
【００９７】
メチル  ３−ホルミル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｄ）（２１．２ｇ）、２−メチル−２−ブテン（１５６ml）を第三級ブタノール（５００ml）に溶解し、ＮａＣｌＯ2（１５．６ｇ）、りん酸二水素ナトリウム（１５．６ｇ）の水溶液（２００ml）を２０分間で滴下した後、さらに室温で１時間撹拌した。反応液中の２−メチル−２−ブテンを減圧留去し、第三級ブタノールを真空ポンプで減圧下留去した。残留物に飽和重曹水（２００ml）を加え、ジクロロメタン（３×２００ml）で洗浄した。水層を濃塩酸でpH２とし、酢酸エチル（３００ml＋２００ml）で抽出した。有機層を５％チオ硫酸ナトリウム（Ｎａ2Ｓ2Ｏ3，２×２５０ml）、水（２×２５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去し、９．３１ｇの標記化合物（Ｅ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｅ）の物性は以下の通りである。
【００９８】
融点：９４−９９℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．９６（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），７．９４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６．３５，８．７９，９．７６Ｈｚ，Ｈ−６）
【００９９】
参考例６
３−カルバモイル−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｆ）の合成
【０１００】
【化２２】
0003739916.tif 000013
【０１０１】
２，３，６−トリフルオロ−５−メトキシカルボニル安息香酸（Ｅ）（２．２１ｇ，９．７７mmol）、ジメチルホルムアミド（触媒量，２滴）をジクロロメタン（４０ml）に溶解し、オキザリルクロリド（２．５６ml，２９．３mmol）を５分間で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残留物をエーテル（３０ml）に溶解した。エーテル溶液に、氷冷下、２８％アンモニア水（５ml）を加えて１０分間撹拌した（結晶析出）。反応液を減圧濃縮し、結晶を濾取した。結晶をジクロロメタンに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去した。残留した結晶をイソプロピルエーテルで洗い、１．７４ｇ（７６％）の標記化合物（Ｆ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｆ）の物性は以下の通りである。
【０１０２】
融点：１４５−１４７℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．９５（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），６．００（ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＯＮＨ2），７．８８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，９，９Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１０３】
参考例７
３−シアノ−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｇ）の合成
【０１０４】
【化２３】
0003739916.tif 000014
【０１０５】
３−カルバモイル−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｆ）（１．７２ｇ，７．３８mmol）、ピリジン（１．４９ml，１８．４mmol）を１，４−ジオキサン（２０ml）に溶解し、氷冷下、無水トリフルオロ酢酸（１．１５ml，８．１１mmol）を加えた。室温で４時間撹拌した後、ピリジン（１．４９ml，１８．４mmol）、無水トリフルオロ酢酸（１．１５ml，８．１１mmol）を加え、さらに１３時間撹拌した。反応液を２規定塩酸（２×５０ml）、水（５０ml）、飽和重曹水（５０ml）、水（５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去して１．０４ｇ（６６％）の標記化合物（Ｇ）を淡黄色固体として得た。得られた化合物（Ｇ）の物性は以下の通りである。
【０１０６】
融点：４２−４４℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．９８（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），８．０８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６，９，１０Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１０７】
参考例８
３−シアノ−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｈ）の合成
【０１０８】
【化２４】
0003739916.tif 000015
【０１０９】
３−シアノ−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｇ）（３．１１ｇ，１４．５mmol）、１−（２−メトキシフェニル）ピペラジン（２．９８ｇ，１５．５mmol）、トリエチルアミン（３．２９ml，２１．７mmol）をジメチルスルホキシド（１５ml）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応液に水（３００ml）を加えて酢酸エチル（２００ml＋２×１００ml）で抽出した。有機層を水洗（３×１５０ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残留物をイソプロピルエーテルで洗い、５．１８ｇ（９２％）の標記化合物（Ｈ）を淡黄色結晶として得た。得られた化合物（Ｈ）の物性は以下の通りである。
【０１１０】
融点：１３０−１３４℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．２２−３．２４（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−×２），３．７３−３．７５（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），３．９３（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），６．９４−６．９８（３Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．０２−７．０６（１Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１３Ｈｚ，Ｈ−６）
ＩＲ：νmax(KBr)：１７３０，１７１０（cm-1）
元素分析値：Ｃ20Ｈ19Ｆ2Ｎ3Ｏ3として
計算値：Ｃ，６２．０１；Ｈ，４．９４；Ｎ，１０．８９
分析値：Ｃ，６１．７７；Ｈ，５．００；Ｎ，１０．６５
【０１１１】
参考例９
３−アミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｉ）の合成
【０１１２】
【化２５】
0003739916.tif 000016
【０１１３】
３−シアノ−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｈ）（５．１８ｇ，１３．４mmol）、ラネーニッケル（２０ml）、エタノール（２００ml）を混合し、１気圧水素雰囲気下で２３時間撹拌した。触媒を濾別して濾液を減圧濃縮し、残留物をイソプロピルエーテルで洗い、４．０８ｇ（７８％）の無色結晶を得た。母液を減圧乾固して６８３mg（１３％）の標記化合物（Ｉ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｉ）の物性は以下の通りである。
【０１１４】
融点：１１５−１１６℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：３．２０（４Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2−×２），３．３８（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ2−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），３．９２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），４．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，−ＣＨ2ＮＨ2），６．８８−７．０３（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１１５】
参考例１０
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｊ）の合成
【０１１６】
【化２６】
0003739916.tif 000017
【０１１７】
３−アミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｉ）（４．７１ｇ，１２．０mmol）をテトラヒドロフラン（１５０ml）に溶解し、Ｂｏｃ2Ｏ（２．６３ｇ，１２．０mmol）のテトラヒドロフラン溶液（３０ml）を滴下した後、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムで溶出して６．０１ｇ（定量的）の標記化合物（Ｊ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｊ）の物性は以下の通りである。
【０１１８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．４３（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3）３．２３（４Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2−×２），３．３４（４Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），３．９２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ3），４．５５（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ2ＮＨＢｏｃ），５．０６（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨＢｏｃ），６．８８−７．０５（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１１９】
参考例１１
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸（Ｋ）の合成
【０１２０】
【化２７】
0003739916.tif 000018
【０１２１】
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｊ）（６．０１ｇ，１２．２mmol）をメタノール（２００ml）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム水溶液（１８．３ml）を加え、  室温で１７時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残留物を水（１００ml）に溶解した。１０％クエン酸水溶液で酸性とし、酢酸エチル（２００ml）で抽出した。有機層を水洗（２×２００ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して５．５７ｇ（９７％）の標記化合物（Ｋ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｋ）の物性は以下の通りである。
【０１２２】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．４４（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3），３．２２（４Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2−×２），３．３８（４Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），４．５５（２Ｈ，ｂｒｏａｄ  ｓ，−ＣＨ2ＮＨＢｏｃ），５．１０（１Ｈ，ｂｒｏａｄｓ，−ＮＨＢｏｃ），６．８８−７．０５（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１２３】
参考例１２
エチル ３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイルアセタアート（Ｌ）の合成
【０１２４】
【化２８】
0003739916.tif 000019
【０１２５】
マグネシウム（０．３４０ｇ，１４．０mmol）とエタノール（５０ml）を混合し、四塩化炭素（０．５ml）を加えて室温で１時間撹拌した。これにエチル  水素  マロナート（１．８５ｇ，１４．０mmol）のテトラヒドロフラン溶液（２０ml）を滴下して室温で２時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物をテトラヒドロフラン（１５０ml）に溶解した。
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸（Ｋ）（５．５７ｇ，１１．７mmol）をテトラヒドロフラン（８０ml）に溶解し、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（２．０８ｇ，１２．８mmol）を加えて室温で６時間撹拌した。これにエチル  水素  マロナート  マグネシウム塩のテトラヒドロフラン溶液を滴下し、室温で１６時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物にクロロホルム（２００ml）、１０％クエン酸水溶液（２００ml）を加え撹拌した。有機層を分取し、水層をクロロホルム（１００ml）抽出した。合わせた有機層を水洗（２００ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）で溶出して３．５８ｇ（５６％）の標記化合物（Ｌ）を淡黄色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｌ）の物性は以下の通りである。
【０１２６】
0003739916.tif 000020
【０１２７】
参考例１３
エチル ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）の合成
【０１２８】
【化２９】
0003739916.tif 000021
【０１２９】
エチル  ３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイルアセタアート（Ｌ）（７０３mg，１．２８mmol）をベンゼン（３０ml）に溶解し、ジメチルホルムアミド  ジメチルアセタール（０．８５２ml，６．４２mmol）を加えて１時間加熱環流した。ジメチルホルムアミド  ジメチルアセタール（０．８５２ml，６．４２mmol）を追加し、さらに２．５時間加熱環流した後、溶媒を留去した。残留物をトルエンに溶解し、メチルアミン塩酸塩（４０２mg，４．９３mmol）、トリエチルアミン（１．０３ml，７．３９ml）を加えて室温で１７時間撹拌した。反応液を水洗（５０ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）で溶出して６４３mg（８６％）の標記化合物（Ｍ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｍ）の物性は以下の通りである。
【０１３０】
0003739916.tif 000022
【０１３１】
実施例３
エチル ８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（５−１）の合成
【０１３２】
【化３０】
0003739916.tif 000023
【０１３３】
Ａ）
エチル  ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）（６４３mg，１．０９mmol）をジメチルホルムアミド（１０ml）に溶解し、６０％水素化ナトリウム（８８mg，２．２０mmol）を加えて２０分間撹拌した。反応液を氷水（１００ml）に注加し、析出した結晶を濾取した。析出物をクロロホルムに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付してクロロホルムで溶出し、２４８mgの黄色アモルファスを得た（構造不明）。クロロホルム−メタノール（９５：５）で溶出し、１８７mg（３０％）の標記化合物（５−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（５−１）の物性は以下の通りである。
【０１３４】
融点：１７８−１８１℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．４３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），１．５６（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3），２．９−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ2−×４），３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），４．０６（３Ｈ，ｓ，Ｎ1−ＣＨ3），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），４．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，−ＣＨ2ＮＨＢｏｃ），４．９０（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨＢｏｃ），６．９０−７．０４（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），８．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）（ＡＸ０２５６３Ａ）
ＩＲ：νmax(KBr)：３２８０，３０７２，１７２８，１６９８，１６２０（cm-1）
元素分析値：Ｃ30Ｈ37ＦＮ4Ｏ6として
計算値：Ｃ，６３．３７；Ｈ，６．５６；Ｎ，９．８５
分析値：Ｃ，６２．９５；Ｈ，６．５９；Ｎ，９．４３
【０１３５】
Ｂ）
エチル  ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）（１．０４ｇ，１．７７mmol）をジメチルホルムアミド（３０ml）に溶解し、炭酸カリウム（４８８mg，３．５３mmol）を加えて室温で２０時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物に１０％クエン酸水溶液（７０ml）を加え酢酸エチル（２００ml）で抽出した。有機層を水（２×５０ml）、飽和食塩水（５０ml）で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を留去した。残留物をイソプロピルエーテルで洗い９３６mg（９３％）の標記化合物（５−１）を無色結晶として得た。
【０１３６】
実施例４
エチル ８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（８−１）の合成
【０１３７】
【化３１】
0003739916.tif 000024
【０１３８】
エチル  ８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（５−１）（７５．５mg，０．１３２mmol）にトリフルオロ酢酸（５ml）を加えて室温で１５分間撹拌した後、減圧乾固した。残留物に飽和重曹水（５０ml）を加えクロロホルム抽出（３×５０ml）した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去し、７０．１mgの標記化合物（８−１）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（８−１）の物性は以下の通りである。
【０１３９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．４２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），２．８−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ2−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），４．２６（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ2ＮＨ2），４．２９（３Ｈ，ｓ，Ｎ1−ＣＨ3），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），６．９０−７．０６（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
【０１４０】
実施例５
エチル ８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラートの（９−１）の合成
【０１４１】
【化３２】
0003739916.tif 000025
【０１４２】
エチル  ８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（８−１）（７０．１mg）、パラホルムアルデヒド（３０mg）、５％パラジウム炭素（１００mg）、エタノール（３０ml）を混合し、１気圧水素雰囲気下、２日間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧濃縮した。残留物をプレパラティブＴＬＣ（展開溶媒；クロロホルム−メタノール９５：５）で精製し、３０．０mgの標記化合物（９−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（９−１）の物性は以下の通りである。
【０１４３】
融点：１８７−１９０℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），２．０１（６Ｈ，ｓ，−Ｎ（ＣＨ3）2），３．０−３．５（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ2−×４），３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），４．１２（５Ｈ，ｓ，−ＣＨ2ＮＨ2，Ｎ1−ＣＨ3），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ2ＣＨ3），６．９０−７．０３（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），８．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．３９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
【０１４４】
実施例６
８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（６）の合成
【０１４５】
【化３３】
0003739916.tif 000026
【０１４６】
エチル  ８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（９−１）（６５．４mg，０．１３２mmol）をエタノール（２０ml）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム水溶液（０．２６３ml）を加え、１６時間加熱環流した。反応液を減圧乾固し、残留物を水（１０ml）に溶解して１規定塩酸（０．２６３ml）を加え、クロロホルムで抽出（２×５０ml）した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をイソプロパノールから再結晶し、４０．８mg（６６％）の標記化合物（６）を無色結晶として得た。得られた化合物（６）の物性は以下の通りである。
【０１４７】
融点：２７４−２７９℃
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．９９（６Ｈ，ｓ，−Ｎ（ＣＨ3）2），３．１−３．６（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ2−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ3），４．０４（３Ｈ，ｓ，Ｎ1−ＣＨ3），６．９１−７．０７（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ  Ｈ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）１４．８７（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＨ）
ＩＲ：νmax(KBr)：１７３２，１６１６，１４３６（cm-1）
元素分析値：Ｃ25Ｈ29ＦＮ4Ｏ4として
計算値：Ｃ，６３．４２；Ｈ，５．９９；Ｎ，１２．３３
分析値：Ｃ，６３．３９；Ｈ，６．０１；Ｎ，１２．１８
【０１４８】
試験例１
実施例１、２および６で製造した化合物（４）、（５）および（６）を用いて、phytohemagglutinin（ＰＨＡ）刺激でヒト末梢単核球からのＴＮＦ−αおよびＩＬ−６産生に対する作用を検討した。
健康成人より分離した末梢単核球を、５×１０5 cells／mlに調製後、種々の濃度の薬剤で２時間前処理した。次にＰＨＡ（１０μｇ／ml）で刺激後、さらに２４時間培養し、生細胞数をＭＴＴ法（J. Virol. Methods, 20, 309-321(1988)）で測定するとともに、培養上清中のＴＮＦ−αおよびＩＬ−６量をＥＬＩＳＡ法にて測定した。結果を表１に示す。
【０１４９】
【表１】
0003739916.tif 000027
【０１５０】
表１から明らかなように本発明化合物は、ＰＨＡ刺激で末梢単核球から産生されるＴＮＦ−αおよびＩＬ−６産生を低濃度で阻害した。なかでも、化合物（５）が最も阻害活性が強く０．０３２μＭでＴＮＦ−αおよびＩＬ−６産生阻害活性が認められた。また、表に示す濃度においては、いずれの薬剤も生細胞数にほとんど影響を与えなかった。
【０１５１】
【発明の効果】
本発明によれば、サイトカインが関与する各種疾患に対して有効な治療剤が提供される。