(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
キレート化剤、非ステロイド性抗炎症薬（NSAID）、プロスタシクリン産生を促進する抗酸化剤、およびヒアルロン酸およびその塩から選択される１つの形のヒアルロン酸の各々の有効非毒性量を含む静脈内投与に適したアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物であって、該キレート化剤の有効非毒性量が1−3g/70kg(体重)であることを特徴とするアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項２】
キレート化剤、非ステロイド性抗炎症薬（NSAID）、プロスタシクリン産生を促進する抗酸化剤、およびヒアルロン酸およびその塩から選択される１つの形のヒアルロン酸の各々の有効非毒性量を含む静脈内投与に適したアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物であって、該キレート化剤がEDTAおよびメタンスルホン酸デフェロキサミンから選択されることを特徴とするアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項３】
上記ヒアルロン酸の形が分子量750,000ダルトン未満のヒアルロン酸ナトリウムである請求項１または2記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項４】
キレート化剤がEDTAである請求項1記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項５】
NSAIDが、ジクロフェナク、ケトララクのトロメタミン塩、インドメタシン、ピロキシカム、およびイブプロフェンから選択される請求項３記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項６】
抗酸化剤がアスコルビン酸である請求項３記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項７】
(i)1−3gのキレート化剤/70kg(体重);
(ii)15-30mgのNSAID；
(iii)12−50gの抗酸化剤；
(iv)50mg−1000mg又はそれ以上の量のヒアルロン酸；
を滅菌水中に溶解させてなる請求項３記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項８】
キレート化剤がEDTAである請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項９】
NSAIDが、ジクロフェナクナトリウムおよびケトララクのトロメタミン塩から選択される請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１０】
抗酸化剤がアスコルビン酸又はアスコルビン酸ナトリウムである請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１１】
ヒアルロン酸ナトリウムの量が200mgを超える請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１２】
ヒアルロン酸ナトリウムの量が100mg−120mgであり、かつ、その分子量が150,000-225,000ダルトンである請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１３】
該薬剤組成物が更に滅菌水を含む請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１４】
単位用量が更に有効量の局所麻酔薬を含む請求項７記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１５】
単位用量が更に有効量の重炭酸ナトリウムを含む請求項１４記載のアテローム動脈硬化治療用薬剤組成物。
【請求項１６】
アテローム動脈硬化治療用薬剤組成物の製造方法であって、キレート化剤、非ステロイド性抗炎症薬（NSAID）、プロスタシクリン産生を促進する抗酸化剤、およびヒアルロン酸およびその塩から選択される１つのヒアルロン酸の各々の有効非毒性量を混合することからなることを特徴とする製造方法。
【請求項１７】
該薬剤組成物の単位用量を静脈内投与に適した形にする請求項１６記載の製造方法。
【請求項１８】
上記ヒアルロン酸の形が分子量750,000ダルトン未満のヒアルロン酸ナトリウムである請求項１６又は１７記載の製造方法。
【請求項１９】
キレート化剤がEDTAである請求項1８記載の製造方法。
【請求項２０】
NSAIDが、ジクロフェナク、ケトララクのトロメタミン塩、インドメタシン、ピロキシカム、およびイブプロフェンから選択される請求項１８記載の製造方法。
【請求項２１】
抗酸化剤がアスコルビン酸又はアスコルビン酸ナトリウムである請求項１８記載の製造方法。
【請求項２２】
(i)1−3gのキレート化剤/70kg(体重);
(ii)15-30mgのNSAID；
(iii)12−50gの抗酸化剤；
(iv)50mg−1000mg又はそれ以上の量のヒアルロン酸；
を滅菌水中に溶解させてなる請求項１８記載の製造方法。
【請求項２３】
キレート化剤がEDTAである請求項２２記載の製造方法。
【請求項２４】
NSAIDが、ジクロフェナクナトリウムおよびケトララクのトロメタミン塩から選択される請求項２２記載の製造方法。
【請求項２５】
抗酸化剤が12.5−25gのアスコルビン酸又はアスコルビン酸ナトリウムである請求項２２記載の製造方法。
【請求項２６】
ヒアルロン酸ナトリウムの量が200mgを超える請求項２２記載の製造方法。
【請求項２７】
ヒアルロン酸ナトリウムの量が100mg−120mgであり、かつ、その分子量が150,000-225,000ダルトンである請求項２２記載の製造方法。
【請求項２８】
該薬剤組成物に更に滅菌水を混合する請求項２２記載の製造方法。
【請求項２９】
単位用量が更に有効量の局所麻酔薬を含む請求項２２記載の製造方法。
【請求項３０】
単位用量が更に有効量の重炭酸ナトリウムを含む請求項２９記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
発明の分野
本発明は、動脈疾患の治療及びそのような用途に適した薬剤組成物に関する。とりわけ本発明は、アテローム動脈硬化の除去に関する。
発明の背景
コレステロールに富んだ食物が一因となっていると考えられているアテローム動脈硬化は、北アメリカの住民に多い。長年にわたる、例えば、コレステロール、他の類脂質物質、清掃細胞（lipophages）及び／又は他の物質を含有する黄変する斑（アテローマ（atheromos））の沈着は、ヒトの動脈の内壁（例えば、サイズの大きな動脈及び中程度の動脈の内膜内）に蓄積して、動脈の狭窄を引き起こして血液の自由な流れを阻害する。したがって、そのような人は心臓発作及び／又は心臓発症の犠牲者になるリスクが増大する。
バルーン血管形成術は、冠状動脈における封鎖を開く、広く容認された方法である。しかし、幾人かの患者ではバルーン血管形成術による治療が成功した後、動脈の再狭窄が起こる。しかし、この時の動脈の内径（ＩＤ）の狭窄は、バルーン血管形成術による刺激領域の内皮細胞の成長（増殖）により引き起こされる。即ち、再封鎖は、コレステロールの蓄積によってではなく、動脈の内壁の内皮細胞の蓄積により起こり、動脈の内径（ＩＤ）を低下させて、梗塞を引き起こす。しかし、この管状壁の内径（ＩＤ）の狭窄又は細胞の増殖は、冠状動脈に制限又は限定されたことではない。これは、術後にも起こって、例えば、末梢血管系において再狭窄を引き起こしうる。
したがって、本発明の目的は、アテローム動脈硬化を除去する新規な方法を提供することである。
本発明の更なる目的は、例えば、コレステロール、他の類脂質物質、清掃細胞及び／又は他の物質を含有するアテローマの動脈を除去する新規な方法を提供することである。
本発明の更なる目的は、このような治療方法における使用に適した薬剤組成物を提供することである。
本発明の更に別の目的は、このような治療方法における使用に適した薬剤組成物の単位用量を提供することである。
本発明の更に他の目的は、当業者であれば下記により十分に理解できるであろう。
本発明により、出願人らは、コレステロール、他の類脂質物質、清掃細胞及び他の物質を含有する斑（アテローマ）の沈着が、患者の動脈壁（例えば、サイズの大きな動脈及び中程度の動脈の内膜内）に蓄積する、アテローム動脈硬化を除去する新規な治療法を提供する。この治療方法は、本発明の実施態様により処方した薬剤組成物の少なくとも１つの単位用量を、患者に、例えば、静脈内投与することを含んでなる。各単位用量の投与の回数とタイミングは、患者によって変わるが、投与から次の投与まで、例えば２〜３日の間隔で、数週間（例えば、２〜１２週間）にわたって投与される単位用量が適している。ある患者は、等間隔で５〜６週間にわたり４５回の治療を受けた。別の患者は、わずか２回の治療しか必要としなかった。更に別の患者には、１週間に２回の単位用量で１２週間にわたり単位用量を静脈内投与した。この単位用量は、キレート化剤（例えば、好適にはＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸の一般名））、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）（例えば、ジクロフェナク、ケトララク（ketoralac）のトロメタミン塩（トラドール（Toradol）の商標で販売されている）、インドメタシン、ピロキシカム、イブプロフェン）、抗酸化剤（例えば、好適にはビタミンＣ）、及びヒアルロン酸、その塩（例えば、ナトリウム塩）、同族体、類似体、誘導体、エステル、複合体、断片及びサブユニットから選択される、１つの形のヒアルロン酸の各々の有効非毒性量を含んでなる。ヒアルロン酸の形は、好適には約７５０，０００ダルトン未満の分子量、例えば、約１５０，０００〜２２５，０００ダルトンの分子量を有するヒアルロン酸ナトリウムである。
適切な単位用量は、滅菌水（例えば、静脈投与用の滅菌水２００ml）中に、
（ｉ）約１〜３ｇのキレート化剤／７０kgのヒト（例えば、３ｇのＥＤＴＡ）；
（ii）約１５〜３０mgのＮＳＡＩＤ（例えば、３０mgのジクロフェナクナトリウム又はケトララクのトロメタミン塩（トラドール））；
（iii）約１２〜５０ｇの抗酸化剤（例えば、ある実施態様において１２．５ｇのビタミンＣ、そして別の実施態様において２５ｇのビタミンＣ）；及び
（iv）約５０mgから１０００mgをかなり超える量の、ある形のヒアルロン酸（例えば、ヒアルロン酸ナトリウムには、例えば、毒性がないため）、例えば、ある単位用量では単位用量当り２００mgを超える量（そして、別の単位用量では、約１５０，０００〜２２５，０００ダルトンの分子量を有する１００〜１２０mgのヒアルロン酸ナトリウム）；
を各々含んでよい。
他の適切な単位用量は、患者により選択することができる。治療法も変化してよく、ある場合には毎日、１日間隔で投与することができ、又は別の場合には１日おきに投与することができる。治療した患者６名では、平均１０〜１５回の治療を行った。全ての患者で、機能の主観的改善、患部血管のドプラー法による動脈血流の改善、及び血管造影による閉塞の除去が得られた。
ヒアルロン酸ナトリウムの適切な形は、ヒアルロン酸ナトリウム２０mg/mlの１５mlバイアル（３００mg／バイアル；ロット２Ｆ３）で供給されるヒアル製薬会社（Hyal Pharmaceutical Corporation）により供給される画分を含んでよい。このヒアルロン酸ナトリウム画分は、約２２５，０００の平均分子量を有する２％溶液である。この画分はまた、注射処方についての米国薬局方に従って３回蒸留滅菌した十分な量（q.s.）の水を含有する。ヒアルロン酸及び／又はその塩のバイアルは、バイアルの内容物と反応しないブチル栓で栓をした１型ホウ硅酸塩ガラスバイアルに入れて運ぶことができる。
ヒアルロン酸及び／又はその塩（例えば、ナトリウム塩）の画分及びヒアルロン酸の同族体、類似体、誘導体、複合体、エステル、断片、及びサブユニット、好適にはヒアルロン酸及びその塩は、以下の特徴を有するヒアルロン酸及び／又はその塩を含んでよい：
下記よりなる群から選択される少なくとも１つの特徴（及び好適には全ての特徴）を有する。天然の供給源から得られたヒアルロン酸の、精製された、実質的に発熱物質を含まない画分：
ｉ）１５０，０００〜２２５，０００の範囲の分子量；
ii）全重量に対して約１．２５％未満の硫酸化ムコ多糖類；
iii）全重量に対して約０．６％未満の蛋白；
iv）全重量に対して約１５０ppm未満の鉄；
ｖ）全重量に対して約１５ppm未満の鉛；
vi）０．００２５％未満のグルコサミン；
vii）０．０２５％未満のグルクロン酸；
viii）０．０２５％未満のＮ−アセチルグルコサミン；
ix）０．００２５％未満のアミノ酸；
ｘ）約０．２７５未満の２５７nmのＵＶ吸光係数；
xi）約０．２５未満の２８０nmのＵＶ吸光係数；及び
xii）７．３〜７．９の範囲のｐＨ。好適には、このヒアルロン酸は水と混合されて、このヒアルロン酸の画分は、１５０，０００〜２２５，０００の範囲の平均分子量を有する。更に好適には、このヒアルロン酸の画分は、下記の特徴よりなる群から選択される少なくとも１つの特徴（及び好適には全ての特徴）を含んでよい：
ｉ）全重量に対して約１％未満の硫酸化ムコ多糖類；
ii）全重量に対して約０．４％未満の蛋白；
iii）全重量に対して約１００ppm未満の鉄；
iv）全重量に対して約１０ppm未満の鉛；
ｖ）０．００１６６％未満のグルコサミン；
vi）０．０１６６％未満のグルクロン酸；
vii）０．０１６６％未満のＮ−アセチルグルコサミン；
viii）０．００１６６％未満のアミノ酸；
ｘ）約０．２３未満の２５７nmのＵＶ吸光係数；
xi）０．１９未満の２８０nmのＵＶ吸光係数；及び
xii）７．５〜７．７の範囲のｐＨ。
出願人らはまた、以下の仕様を有するライフコア（商標）バイオメディカル社（LifeCore Biomedical,Inc.）により製造され、供給されるヒアルロン酸ナトリウムの使用を提案する：
特徴 仕様
外観                        白色〜クリーム色の粒子
臭い                        知覚できる臭いなし
粘度平均分子量              ＜７５０，０００ダルトン
ＵＶ／可視スキャン          対照のスキャンに一致
１９０〜８２０nm
ＯＤ、２６０nm              ＜０．２５ＯＤ単位
ヒアルロン酸感度            陽性応答
赤外吸収スキャン            対照に一致
ｐＨ、１０mg/g溶液          ６．２〜７．８
水                          最大８％
蛋白                        ＜０．３μg/mg  ＮａＨｙ
酢酸塩                      ＜１０．０μg/mg  ＮａＨｙ
重金属、最大ppm
Ａｓ  Ｃｄ  Ｃｒ  Ｃｏ  Ｃｕ  Ｆｅ  Ｐｂ  Ｈｇ  Ｎｉ
2.0   5.0   5.0   10.0  10.0  25.0  10.0  10.0  5.0
汚染微生物数                観察されない
エンドトキシン              ＜０．０７EU/mg ＮａＨｙ
生物学的安全性試験          ウサギ眼毒性試験に合格
以下の仕様を有するヒアルロン酸ナトリウムの別の形は、ヒアルロナン（Hyaluronan）ＨＡ−Ｍ５０７０の名称でスカイマート・エンタープライズ社（Skymart Enterprises,Inc.）により販売されている：
仕様の試験                  結果
ロット番号                  ＨＧ１００４
ｐＨ                        ６．１２
コンドロイチン硫酸          検出されない
蛋白                        ０．０５％
重金属                      ２０ppm以下
砒素                        ２ppm以下
乾燥減量                    ２．０７％
強熱残分                    １６．６９％
固有粘度                    １２．７５dl/s（XW:679,000）
窒素                        ３．１４％
検定                        １０４．１％
微生物数                    ８０/g
大腸菌（E.coli）            陰性
糸状菌と酵母                ５０/g以下
他の形のヒアルロン酸及び／又はその塩、及びヒアルロン酸の類似体、同族体、誘導体、複合体、エステル、断片及びサブユニットは、選択されるヒアルロン酸の形が医薬の体内輸送に適しているならば、例えば、先行技術の文献に記載されている他の販売会社から選択することができる。
以下の参考文献は、適切であることが証明されるであろう、ヒアルロン酸、その供給源、及びその製造及び回収の方法を教示する。
米国特許第4,141,973号は、
「（ａ）約７５０，０００以上、好適には約１２，０００，０００以上の平均分子量、即ち、約１４００cm3/gを超える、好適には約２０００cm3/gを超える固有粘度数；
（ｂ）０．５重量％未満の蛋白含量；
（ｃ）２５７nmの波長で３．０未満かつ２８０nmの波長で２．０未満の、ヒアルロン酸ナトリウムの１％溶液の紫外線吸光度；
（ｄ）約１０００センチストークスを超える、好適には１０，０００センチストークスを超える、生理学的緩衝液中のヒアルロン酸ナトリウムの１％溶液の動粘性率；
（ｅ）２２０nmで測定された、−１１×１０3度cm2/mol（二糖）未満の、生理学的緩衝液中の０．１〜０．２％ヒアルロン酸ナトリウム溶液のモル旋光度；
（ｆ）生理学的緩衝液中に溶解したヒアルロン酸ナトリウムの１％溶液１mlをヨザル（owl monkey）の硝子体に注入して、存在する硝子液の約半分を置換する時、硝子体及び前房の細胞浸潤を認めず、房水中にフレアなし、硝子体に濁りやフレアなし、及び角膜、水晶体、虹彩、網膜、及び脈絡膜に病的変化なし；このＨＵＡは、以下のものである
（ｇ）無菌性かつ発熱物質不含及び
（ｈ）非抗原性」
を有するヒアルロン酸画分（ナトリウム塩を含む）を教示する。
カナダ特許証第1,205,031号（米国特許第4,141,973号を先行技術として引用している）は、５０，０００〜１００，０００；２５０，０００〜３５０，０００；及び５００，０００〜７３０，０００の平均分子量を有するヒアルロン酸画分に言及しており、これらの製造方法を記載している。
ＥＤＴＡは好適なキレート化剤であるが、メタンスルホン酸デフェロキサミンであるデスフェラル（Desferal）（商標）のような、他の適切なキレート化剤も使用できる。デスフェラルは、５００mgと２ｇのバイアルであると出願人らは信じている。
ＮＳＡＩＤは、プロスタグランジンIIとトロンボキサンの産生をブロックすると出願人らは考えている。抗酸化剤は、プロスタサイクリン産生を促進すると出願人らは考えている。したがって、ポスタサイクリン産生を進する任意の物質は、抗酸化剤として適しているであろう。
静脈内投与される単位用量の注入の間、患者の静脈の痛みを低下／防止するために、５〜２０ccの局所麻酔薬（例えば、キシロカイン（２％））を単位用量に添加してもよい。２０ccの５％重炭酸ナトリウムも単位用量に添加することができる。
本発明の別の面により、アテローム動脈硬化除去（アテローマ除去）の新規な治療法は、単位用量中の治療薬の新規な組合せ（その新規な単位用量は、適切な担体（例えば、静脈内使用のための滅菌水）中に、キレート化剤、ＮＳＡＩＤ、抗酸化剤、及びヒアルロン酸、その塩（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム）、同族体、類似体、誘導体、複合体、エステル、断片及びサブユニットから選択される１つの形のヒアルロン酸を各々含む）を利用する。この単位用量は、好適には患者への単回用量投与のための静脈内投与用袋に包装される。適切な量の治療薬は、前述のもの、又は当業者が本明細書を読んで理解しうるものを含んでよい。即ち、治療薬は、滅菌水（例えば、２００ml）中に、
（ｉ）約１〜３ｇのキレート化剤／７０kgのヒト（例えば、３ｇのＥＤＴＡ）；
（ii）約１５〜３０mgのＮＳＡＩＤ（例えば、３０mgのジクロフェナクナトリウム）；
（iii）約１２〜５０ｇの抗酸化剤（例えば、１２．５ｇのアスコルビン酸ナトリウム）；及び
（iv）約５０mg〜１０００mgを超える量（毒性がないため）の、ある形のヒアルロン酸（例えば、約１５０，０００〜２２５，０００ダルトンの分子量を有する１００〜１２０mgのヒアルロン酸ナトリウム）；
を含んでよい。
本発明の別の面により、動脈壁からのコレステロールと他の物質（斑）を含むアテローマ除去のためのアテローム動脈硬化の治療のための、
（ｉ）約１〜３ｇのキレート化剤／７０kgのヒト（例えば、３ｇのＥＤＴＡ）；
（ii）約１５〜３０mgのＮＳＡＩＤ（例えば、３０mgのジクロフェナクナトリウム）；
（iii）約１２〜５０ｇの抗酸化剤（例えば、１２．５ｇのアスコルビン酸ナトリウム）；及び
（iv）約５０mgから１０００mgを超える量（毒性がないため）の、ある形のヒアルロン酸（例えば、約１５０，０００〜２２５，０００ダルトンの分子量を有する１００〜１２０mgのヒアルロン酸ナトリウム）；
の用途が提供される。
本発明の別の面により、アテローム動脈硬化の治療のための全身性（好適には静脈内）投与のための薬剤組成物の製造において、
（ｉ）約１〜３ｇのキレート化剤／７０kgのヒト（例えば、３ｇのＥＤＴＡ）；
（ii）約１５〜３０mgのＮＳＡＩＤ（例えば、３０mgのジクロフェナクナトリウム）；
（iii）約１２〜５０ｇの抗酸化剤（例えば、１２．５ｇのアスコルビン酸ナトリウム）；及び
（iv）約５０mg〜１０００mgを超える量（毒性がないため）の、ある形のヒアルロン酸（例えば、約１５０，０００〜２２５，０００ダルトンの分子量を有する１００〜１２０mgのヒアルロン酸ナトリウム）；
の用途が提供される。
長年にわたり進行した動脈疾患の患者にこの単位用量を投与すると、患者は有意な症状の改善を示した。可能であれば患者を、血管造影と血流（ドプラー法による）により評価した。例えば患者は、静脈内投与により２〜４日間、滅菌水中の下記の薬剤の組合せ：
３ｇのＥＤＴＡ
１５mgのトラドール又はジクロフェナク
１２．５ｇのアスコルビン酸ナトリウム
５０mgのヒアルロン酸ナトリウム（約７５０，０００ダルトン未満、通常２２５，０００ダルトン未満の分子量）
の１５〜３０回の治療を受けた。
２名の患者では、閉塞が消失して、患者は正常な血管造影像に戻った。
狭心症に罹っていた１名の患者では、５〜６週間で４５回の治療を受けた後、患者はもはや狭心症の症状を何も示さなかった。
週に２回投与で、２５回の治療を受けた別の患者は、脚の痛みがなくなった。気管支感染によって心不全になりかけた別の患者は、治療後症状がなくなった。
抗酸化剤が、アスコルビン酸ナトリウム（ビタミンＣ）である場合、ビタミンＣは、その形のヒアルロン酸のサイズ（長さ）を低下させ（切って整え）て、分子量を低下させると考えられる。
本発明の範囲から逸脱することなしに、治療方法、薬剤組成物、及び使用される薬剤組成物の単位用量に多くの変化を加えることができるため、本明細書に含まれる全ての材料は、本発明を説明するものとして解釈されるべきであり、本発明を限定する意味で解釈されるべきでない。