(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
0003806456.tif 000039
〔式中、Ｒはトリクロロアセタミド基またはグアニジノ基である〕で示される(3S,4S,5R,6R)−6−(トリクロロアセタミド)−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸あるいは(3S,4S,5R,6R)−6−グアニジノ−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸またはそれらの塩。
【請求項２】
請求項１において一般式（Ｉ）のＲがトリクロロアセタミド基である次式（Ｉａ）
0003806456.tif 000040
で示される (3S,4S,5R,6R)−6−(トリクロロアセタミド)−4,5−ジヒドロキシピペリ ジン−3−カルボン酸またはその塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１において一般式（Ｉ）のＲがグアニジノ基である次式（Ｉｂ）
0003806456.tif 000041
で示される(3S,4S,5R,6R)−6−グアニジノ−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸あるいはその塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
一般式（II）
0003806456.tif 000042
〔式中、Ｒ1はイミノ基保護基としてのアルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基またはアラルキルオキシカルボニル基であり、Ｘ1とＸ2は夫々に１価のヒドロキシル基保護基としてのトリアルキルシリル基であるか、あるいはＸ1とＸ2の両者は共同して次式
0003806456.tif 000043
（但しＲaおよびＲbは、互いに同じ又は異なってもよく、水素原子、アルキル基又はアリール基である）で示される２価のヒドロキシル基保護基１個を示し、あるいはベンジリデン基、シクロアルキリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基を示す〕で表される（3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンまたはその塩。
【請求項５】
一般式（III−１）
0003806456.tif 000044
〔式中、Ｒ1は請求項４に記載の一般式（II）におけるＲ1と同じ意味をもつイミノ基保護基である〕のN−保護−シアスタチンＢの４位および５位のヒドロキシル基を１価または２価のヒドロキシル基保護基で保護して次の一般式（III−２）
0003806456.tif 000045
〔式中、Ｒ1はイミノ基保護基としてのアルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基またはアラルキルオキシカルボニル基であり、Ｘ1とＸ2は夫々に１価のヒドロキシル基保護基としてのトリアルキルシリル基であるか、あるいはＸ1とＸ2の両者は共同して次式
0003806456.tif 000046
（但しＲaおよびＲbは、互いに同じ又は異なってもよく、水素原子、アルキル基又はアリール基である）で示される２価のヒドロキシル基保護基１個を示し、あるいはベンジリデン基、シクロアルキリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基を示す〕で表されるN−保護−4,5−ジ−O−保護−シアスタチンＢを生成し、この式（III−２）の化合物の３位のカルボキシル基をエステル化剤と反応させて次の一般式（III−３）
0003806456.tif 000047
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもち、Ｒ2はエステル形成基である〕で示されるシアスタチンＢ保護誘導体を生成し、続いて式(III−３）の化合物の３位の基-ＣＯ2Ｒ2を還元によりヒドロキシメチル基に転化して次の一般式(III−４)
0003806456.tif 000048
〔式中、Ｒ1、Ｘ1及びＸ2は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6S)−6−アセタミド−N−保護−3−ヒドロキシメチル−4,5−O−ジ保護−4,5−ピペリジンジオールを生成し、さらに一般式（III−４）の化合物の６位のアセタミド基から脱アセチル化により遊離のアミノ基を形成することを特徴とする、次の一般式（II）
0003806456.tif 000049
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンの製造法。
【請求項６】
次の一般式（II）
0003806456.tif 000050
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は請求項５に記載したと同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンの６位アミノ基をトリクロロアセチル化させて次の一般式（IV−１）
0003806456.tif 000051
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもち、Ｒ3はトリクロロアセタミド基であり、６位の立体化学はＲ1が基Ｒ3よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位が低いイミノ基保護基である場合には(R)−配置であるが、Ｒ1が基Ｒ3より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には(S)−配置である〕で示される（3R,4S,5R,6R又は6S)−N−保護−6−(トリクロロアセタミド)−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンを生成し、次にこの式（IV−１）の化合物の３位ヒドロキシメチル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−１）
0003806456.tif 000052
〔式中、Ｒ1、Ｒ3、Ｘ1、Ｘ2，及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6R又は6S)−N−保護−6−(トリクロロアセタミド)−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジン−3−カルボン酸を生成し、次にこの式（Ｖ−１）の化合物からイミノ基保護基（Ｒ1）及びヒドロキシル基保護基（Ｘ1、Ｘ2）を脱離することを特徴とする、次式（Ｉａ）
0003806456.tif 000053
で示される(3S,4S,5R,6R)−6−(トリクロロアセタミド)−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸またはその塩の製造法。
【請求項７】
次の一般式（II）
0003806456.tif 000054
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は請求項５に記載したと同じ意味をもつ〕で示される(3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンの６位アミノ基をアミジノ化反応にかけて次の一般式（IV−２）
0003806456.tif 000055
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもち、Ｒ4はN,N´−保護された又は未保護のグアニジノ基であり、６位の立体化学はＲ1が基Ｒ4よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位が低いイミノ基保護基である場合には(R)−配置であるが、Ｒ1が基Ｒ4より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には(S)−配置である〕で示される(3R,4S,5R,6R又は6S)−N−保護−6−保護−又は未保護−グアニジノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンを生成し、次にこの式（IV−２）の化合物の３位ヒドロキシメチル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−２）
0003806456.tif 000056
〔式中、Ｒ1，Ｒ4，Ｘ1，Ｘ2，及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される(3S,4S,5R,6R又は6S)−N−保護−6−グアニジノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジン−3−カルボン酸を生成し、次にこの式(Ｖ−２)の化合物からイミノ基保護基（Ｒ1）及びヒドロキシル基保護基（Ｘ1、Ｘ2)、ならびにグアニジル基上の保護基を脱離することを特徴とする、次式（Ｉｂ）
0003806456.tif 000057
で示される（3S,4S,5R,6R)−6−グアニジノ−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸またはその塩の製造法。
【請求項８】
次の一般式（II）
0003806456.tif 000058
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は請求項５に記載したと同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンの６位アミノ基をトリフルオロアセチル化して次の一般式（IV−３）
0003806456.tif 000059
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもち、Ｒ5はトリフルオロアセタミド基であり、６位の立体化学はＲ1が基Ｒ5よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位が低いイミノ基保護基である場合には（R)−配置であるが、Ｒ1が基Ｒ5より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には（S)−配置である〕で示される（3R,4S,5R,6R又は6S）−N−保護−6−(トリフルオロアセタミド)−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護-ピペリジンを生成し、次にこの式（IV−３）の化合物の３位ヒドロキシメチル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−３）
0003806456.tif 000060
〔式中、Ｒ1、Ｒ5、Ｘ1、Ｘ2及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3S,4S,5R,6R又は6S)−N−保護−6−(トリフルオロアセタミド)−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジン−3−カルボン酸を生成し、次にこの式（Ｖ−３）の化合物からイミノ基保護基（Ｒ1）及びヒドロキシル基保護基（Ｘ1、Ｘ2）を脱離することを特徴とする、次式（Ｉｃ）
0003806456.tif 000061
で示される（3S,4S,5R,6R)−6−(トリフルオロアセタミド)−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸またはその塩の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、癌細胞転移抑制活性をもつ新規物質である(3S,4S,5R,6R)-6-(トリ クロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸と(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸とその関連物質ある いはそれらの塩に関する。また、本発明はそれらの新規物質の製造方法にも関するものである。
【０００２】
さらに、本発明は、先に本発明者らによって発明された毒性が低く且つ水溶性を有してしかも癌転移抑制作用の強い化合物であって癌の治療ならびに予防に有効である(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸またはその塩(特開平6-157458号公報、特願平4-332143号の公開、参照)を、シアスタチンＢから製造する新規な方法も包含するものである。
【０００３】
【従来の技術】
従来では次式（Ｉｃ）
0003806456.tif 000002
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペ リジン-3-カルボン酸またはその塩を製造する方法として、西村らの方法〔「Bull. Chem. Soc. Jpn.」65巻、978−986頁(1992年)、ならびに「J.Antibiotics」 45巻、954−962頁および963−970頁(1992年)参照〕によりリボースから製造される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-3,4,5-トリヒドロキシピペリジ ンを出発化合物として用い、これを一連の反応工程で化学的に変換することから成る方法が本発明者らにより発明され、特開平6-157458号明細書に記載されて知られていた。しかるにこの既知の方法は、原料として高価なＬ−リボースを使用し、多数の工程を要すること、およびその目的生成物である(3S,4S,5R,6R)-6-  (トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸の収率が約１％と低いこと等の欠点を有し、実用化には困難を伴うものであった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
癌の制圧のための現行の薬物治療、外科手術或いは放射線による癌の治療法等は、そられの有効性が癌細胞の転移を抑制できることで更に高められると期待されている。しかし、癌細胞の転移を抑制する活性を作用の主体とする活性物質は数少なく、臨床で用いられているものは未だない。従って、毒性が低く且つ水溶性を有し、しかも癌転移抑制作用の強い化合物であって癌の治療ならびに予防に有効な新しい化合物を提供することが強く要望されている。
【０００５】
また、前記の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシ ピペリジン-3-カルボン酸を効率よく製造できる新規な方法を開発することも望 まれている。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
そこで本発明者らは、種々研究を行った。その研究の一環として、放線菌であるストレプトミセス・パーチシラス・バリニタス・クインツム（Streptomyces  verticillus var. quintum)（微工研菌寄第507号)の培養で製造できる次式(Ａ）
0003806456.tif 000003
で示されるシアスタチンＢ(特公昭55-46714号明細書)から１位のイミノ基の保護のための１工程で次の一般式(III−１)
0003806456.tif 000004
〔式中、Ｒ1 はイミノ基保護基、例えばターシャリーブトキシカルボニル基である〕で示されるN-保護-シアスタチンＢを合成し、この式(III−１)の化合物を原料として用い、これから数工程で新規な中間体化合物として次の一般式(II)
0003806456.tif 000005
〔式中、Ｒ1 はイミノ基保護基、例えばターシャリーブトキシカルボニル基であり、Ｘ1 とＸ2 は夫々に１価のヒドロキシル基保護基であるか、あるいはＸ1 Ｘ2 の両者は共同して次式
0003806456.tif 000006
（但し、Ｒa およびＲb は、互いに同じ又は異なってもよく、それぞれが水素原子、アルキル基又はアリール基、特にフェニル基である）で示される２価のヒドロキシル基保護基１個を示し、あるいはベンジリデン基、シクロアルキリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基を示す〕で表される(3R,4S,5R,6S)-N-保護-6-アミノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンを 合成し、さらにこの一般式(II)の中間体化合物を経て前記の(3S,4S,5R,6R)-6-  (トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸またはそれの塩類を高収率で製造できる新規な方法を開発することに成功した。
【０００７】
さらに本発明者らは、新規な癌細胞転移抑制物質を得る目的で研究を進めた。その結果、前記の合成方法で作成した一般式(II)の中間体化合物を利用して、数工程を経て、次式（Ｉａ）
0003806456.tif 000007
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸と、次式（Ｉｂ）
0003806456.tif 000008
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸とを新規化合物として合成することに成功した。
【０００８】
本発明者らは、癌細胞の転移の抑制作用を評価する実験評価系により、上記の式(Ｉａ)の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸と式（Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸、およびそれらの塩が極めて優れた癌細胞転移抑制 活性を有することを見出した。これらの知見に基づいて本発明を完成した。
【０００９】
従って第一の本発明は、新規な癌細胞転移抑制物質として、次の一般式（Ｉ）
0003806456.tif 000009
〔式中、Ｒはトリクロロアセタミド基またはグアニジノ基である〕で示される(3S,4S,5R,6R)−6−(トリクロロアセタミド)−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸あるいは(3S,4S,5R,6R)−6−グアニジノ−4,5−ジヒドロキシピペリジン−3−カルボン酸またはそれらの塩を提供する。
【００１０】
上記の一般式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉａ）
0003806456.tif 000010
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸および式（Ｉｂ）
0003806456.tif 000011
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸を包含する。一般式(Ｉ)の化合物の塩には、それのカルボン酸基における製薬学的に許容できる金属との塩、例えばアルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、あるいはアルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩ならびにアンモニウム塩がある。また(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジ ン-3-カルボン酸および(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸のイミノ基における酸付加塩も包含され、特に製薬学的に許容 できる鉱酸、例えば塩酸、硫酸、あるいは有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、等との製薬学的に許容できる酸付加塩がある。
【００１１】
第一の本発明による式(Ｉａ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸および式（Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6- グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸およびそれらの塩が癌細胞転移抑制活性を有することを下記の試験例により例証する。
【００１２】
試験例１
第一の本発明による式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物の癌細胞転移抑制作用の評価はキジマ−スダ(Kijima-Suda)らの方法(「Cancer Research」46巻、858−862頁、1986年）に準じて行なった。
【００１３】
試験法：マウスの腫瘍であるメラノーマＢ16株よりフィドラー(Fidler)の方法（「Method in Cancer Research」15巻、399−439頁、1978年）に準じてメラノ ーマＢ16高転移株を選択し、使用した。
【００１４】
そのように選択されたメラノーマＢ16高転移株を牛胎児血清を加えたダルベコ培地に植え、24時間、５％ＣＯ2 の存在下37℃で先づ培養した。その後、式(Ｉａ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸または(Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキ シピペリジン-3-カルボン酸を後記の表Ｉに示す濃度で加え、72時間、５％ＣＯ2の存在下に37℃で培養した。このようにして増殖した細胞をトリプシンとEDTA溶液で培養容器より剥がした。この細胞を平衡塩類溶液で生細胞として１ml当たり１×106 個の細胞の濃度になるように懸濁した。
【００１５】
この細胞懸濁液の0.1mlをＢＤＦ1 マウス（雌、７週令）の尾静脈に投与して 移植した。14日間飼育した後、開腹して肺を摘出し、肺表面及び内部に形成されたＢ16高転移株のコロニーを計数し、薬剤処理をしなかった対照試験群と比較した。その結果を次の表１に示した。
【００１６】
0003806456.tif 000012
【００１７】
表１に示した試験結果より明らかな通り、第１の本発明による式（Ｉａ）の  (3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸および式（Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペ リジン-3-カルボン酸は、投与した薬剤濃度を上げるのに従って、肺に転移形成 される癌細胞コロニーの数を減少させており、肺への転移を強く抑制していることを示す。従って、既存の制癌剤と同時に投与して、また、外科手術療法或いは放射線療法時に本発明の一般式（Ｉ）の化合物を投与することで制癌効果を著しく高め得ることができるものであり、癌の治療法に極めて有用な薬剤である。
【００１８】
また、前記した一般式(II)で示される(3R,4S,5R,6S)-N-アミノ-3-ヒドロキシ メチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンは、既知の癌細胞転移抑制 物質として前記の式（Ｉｃ）で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタ ミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸のみならず、今回合成された 新規な癌細胞転移抑制物質として式（Ｉａ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロア セタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸および式（Ｉｂ）の（3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸の合成に有用である新規な中間体化合物である。
【００１９】
従って第二の本発明においては、一般式（II）
0003806456.tif 000013
〔式中、Ｒ1はイミノ基保護基としてのアルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基またはアラルキルオキシカルボニル基であり、Ｘ1とＸ2は夫々に１価のヒドロキシル基保護基としてのトリアルキルシリル基であるか、あるいはＸ1とＸ2の両者は共同して次式
0003806456.tif 000014
（但しＲaおよびＲbは、互いに同じ又は異なってもよく、それぞれが水素原子、アルキル基又はアリール基である）で示される２価のヒドロキシル基保護基１個を示し、あるいはベンジリデン基、シクロアルキリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基を示す〕で表される（3R,4S,5R,6S)−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−ジヒドロキシ−4,5−O−ジ保護−ピペリジンまたはその塩が提供される。
【００２０】
さらに、上記の一般式(II)のピペリジン誘導体は、前記の式（Ａ）のシアスタチンＢの１位のイミノ基に常法でイミノ基保護基、好ましくはアルコキシカルボニル基型のイミノ基保護基を導入して得られた前記の一般式(III−１)のシアス タチンＢのイミノ基保護誘導体から出発すると、後記される４工程を経て製造できるものである。
【００２１】
従って、第三の本発明においては、一般式（III−１)
0003806456.tif 000015
〔式中、Ｒ1は先に記載の一般式（II）におけるＲ1と同じ意味をもつイミノ基保護基である〕のN−保護−シアスタチンＢの４位および５位のヒドロキシル基を１価または２価のヒドロキシル基保護基で保護して次の一般式（III−２）
0003806456.tif 000016
〔式中、Ｒ1はイミノ基保護基としてのアルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基またはアラルキルオキシカルボニル基であり、Ｘ1とＸ2は夫々に１価のヒドロキシル基保護基としてのトリアルキルシリル基であるか、あるいはＸ1とＸ2の両者は共同して次式
0003806456.tif 000017
（但し、ＲaおよびＲbは、互いに同じ又は異なってもよく、水素原子、アルキル基又はアリール基である）で示される２価のヒドロキシル基保護基１個を示し、あるいはベンジリデン基、シクロアルキリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基を示す〕で表されるN−保護−4,5−ジ−O−保護−シアスタチンＢを生成し、この式（III−２）の化合物の３位のカルボキシル基をエステル化剤と反応させて次の一般式（III−３）
0003806456.tif 000018
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもち、Ｒ2はエステル形成基である〕で示されるシアスタチンＢ保護誘導体を生成し、続いて式（III−３）化合物の３位の基−ＣＯ2Ｒ2を還元によりヒドロキシメチル基に転化して次の一般式（III−４）
0003806456.tif 000019
〔式中、Ｒ1、Ｘ1及びＸ2は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6Rまたは6S)−6−アセタアミド−N−保護−3−ヒドロキシメチル−4,5−O−ジ保護−4,5−ピペリジンジオールを生成し、さらに一般式（III−４）の化合物の６位のアセタミド基から脱アセチル化により遊離のアミノ基を形成することを特徴とする、次の一般式（II）
0003806456.tif 000020
〔式中、Ｒ1、Ｘ1、Ｘ2は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R,6S）−N−保護−6−アミノ−3−ヒドロキシメチル−4,5−O−ジ保護−ピペリジンの製造法が提供される。
【００２２】
第二の本発明による前記の一般式(II)の(3R,4S,5R,6S)-N-保護-6-アミノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-ジ保護ピペリジンにおいて、またこの化合物(II)を合成する第三の本発明の方法で原料として用いる前記の一般式(III−１)で示されるN-保護-シアスタチンＢにおいて、Ｒ1 であるイミノ基保護基はターシャリーブトキシカルボニル基（ＣＨ3)3ＣＯ-ＣＯ-（略号：Ｂｏｃ）である のが便利である。
【００２３】
上記の化合物におけるイミノ基保護基（Ｒ1 ）としては、Ｂｏｃ基に代えて、一般の常用のイミノ基保護基が糖化学で知られる保護法により導入して利用できる。
【００２４】
Ｂｏｃ基に代え、例えば適当なイミノ基保護基（Ｒ1 ）はアルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基又はアラルキルオキシカルボニル基であることができる。
【００２５】
一般式(II)の化合物、ならびに一般式(III−１0)、(III−２)、(III−３)および(III−４)の化合物の４位及び５位のヒドロキシル基を保護する適当なヒドロ キシル基保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）はイソプロピリデン基であるのが便利であるが、一般的にはその他の各種の基を利用できる。すなわち、次式
0003806456.tif 000021
〔但しＲa 及びＲb は、互いに同じ又は異なってもよく、それぞれが水素、アルキル基(好ましくは炭素数１〜４の低級アルキル基)又はアリール基(好ましく はフェニル基又は置換フェニル基、例えばパラ−メトキシフェニル基)である〕 で表される２価のヒドロキシル基保護基(イソプロピリデン基を包含）を利用で き、またこれに代えてベンジリデン基により、あるいはシクロアルキリデン基、例ばシクロヘキシリデン基またはテトラヒドロピラニリデン基により４位および５位のヒロドキシル基を保護することも便利である。
【００２６】
このような２価のヒドロキシル基保護基の導入は、糖の化学において、隣接する２個の炭素原子に夫々、結合するヒドロキシル基２個を同時に保護するための慣用のヒドロキシル基保護の技術に従って行なわれる。また別に適当な１価のヒドロキシル基保護基としてトリアルキルシリル基、特にターシャリーブチルジメチルシリル基を用いて糖化学で知られる常用の技術で導入できる。
【００２７】
第三の本発明の方法において、式(III−１)のN-保護-シアスタチンＢの４位および５位のヒドロキシル基を保護する反応では、保護基として4,5-O-イソプロピリデン基を導入する場合で例示すると、式(III−１)の化合物を例えばN,N-ジメ チルホルムアミドなどの有機溶媒に溶解し、その溶液に例えば2,2-ジメトキシプロパン（イソプロピリデン基の導入剤として使用）を加え、さらにクロロトリメチルシランの如き塩化アルキルシラン、またはパラトルエンスルホン酸などの酸触媒を加えて室温で数時間反応させることにより、式(III−２）の4,5-O-ジ-保 護-シアスタチンＢ（但し、Ｘ1 およびＸ2 が共同してイソプロピリデン基を示 す場合）を得る。
【００２８】
なお、上記のヒドロキシル基保護反応に用いられた2,2-ジメトキシプロパンに代えて、ベンツアルデヒドジメチルアセタール又は1,1-ジメトキシシクロヘキサンあるいはその他の各種アセタールおよびケタール試薬を用いると4,5-O-ベンジリデン基又はシクロヘキシリデン基を導入された又はその他のアセタールおよびケタール化された一般式(III−２)の化合物が得られる。
【００２９】
つぎに、一般式（III−２）の化合物の３位カルボキシル基にエステル形成基 を導入するため、該化合物を、N,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶剤に溶解し、その溶液にジイソプロピルアミンやトリエチルアミンなどの塩基を加え、この塩基の存在下にエステル化剤として例えばメトキシエトキシメチルクロリドを加える。得られる反応混合物を室温で数時間反応させることにより一般式(III−３)のエステル化化合物（但しＲ2 がメトキシエトキシメチル基である場合）を 得る。
【００３０】
なお、上記のエステル化反応にエステル化剤として用いられたメトキシエトキシメチルクロリドに代えて、アルキルクロリド、アリールクロリド、アラルキルクロリドや、低級（Ｃ1〜Ｃ6 )アルコキシメチルクロリド、アラルキルオキシメチルクロリド、又はメトキシメチルクロリド等の如きアルコキシ置換−低級アルコキシメチルクロリドをエステル形成基(Ｒ2 )の導入剤として用いると、式(III−３)の化合物におけるエステル形成基Ｒ2 が夫々に、アルキル基、アリール基 、アラルキル基、低級アルコキシメチル基、アラルキルオキシメチル基、又はアルコキシ置換−低級アルコキシメチル基である場合の化合物が生成される。
【００３１】
次に、一般式(III−３)の化合物の３位のカルボキシレート基(-ＣＯ2Ｒ2 ）を還元するために、該化合物をトラヒドロフラン等の単一の有機溶剤、あるいはこれらの混合有機溶剤に溶解し、この溶液に水素化ホウ素ナトリウム、水素化リチウムアルミニウムまたは水素化ジイソブチルアルミニウムなどの還元剤を加え、室温で数時間反応させると、３位のカルボキシレート基-ＣＯ2Ｒ2 が還元によりヒドロキシメチル基に転化される。これにより、一般式(III−４)のアルコール 化合物を得る。
【００３２】
つぎに、一般式(III−４)の化合物の６位のアセタミド基を遊離したアミノ基 に転化させるため、該化合物をヒドラジン水和物に溶解し、例えば50〜100℃で ７〜14日間反応させるとアセタミド基からアセチル基が脱離されて遊離したアミノ基を有する一般式(II)の化合物を得る。
【００３３】
上述した第三の本発明の方法により合成された一般式(II)のピペリジン誘導体は、これを用いると、後に説明するように、数工程を経て、新規な癌細胞転移抑制物質として式（Ｉａ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒ ドロキシピペリジン-3-カルボン酸および式（Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6-グアニ ジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボンを合成できる。また既知の癌細胞転移抑制物質として式（Ｉｃ）の (3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸を合成できる。
【００３４】
従って、第四の本発明においては、次の一般式(II)
0003806456.tif 000022
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 前記と同じ意味をもつ〕で示される(3R,4S,5R,6S)-N-保護-6-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンの６位アミノ基をトリクロロアセチル化させて次の一般式（IV−１）
0003806456.tif 000023
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 は前記と同じ意味をもちＲ3 はトリクロロアセタミド基であり、６位の立体化学はＲ1 がＲ3 よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位が低いイミノ基保護基である場合には(R)-配置であるが、Ｒ1 がＲ3 より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には(S)-配置である〕示される（3R,4S,5R, 6R又は6S)-N-保護-6-(トリクロロアセタミド)-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-ジ保 護-ピペリジンを生成し、次にこの式（IV−１）の化合物の３位ヒドロキシメチ ル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−１）
0003806456.tif 000024
〔式中、Ｒ1 、Ｒ3 、Ｘ1、Ｘ2及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される(3S,4S,5R,6R又は6S)-N-保護-6-(トリクロロアセタミド)-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-ジ保護-ピペリジン-3-カルボン酸を生成し、次にこの式（Ｖ− １）の化合物からイミノ基保護基(Ｒ1 )及びヒドロキシル基保護基(Ｘ1、Ｘ2 ）を脱離することを特徴とする、次式（Ｉａ）
0003806456.tif 000025
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸またはその塩の製造法が提供される。
【００３５】
第四の本発明の方法において、式(II)の化合物の６位アミノ基をトリクロロアセチル化する反応は、式(II)の化合物を塩化メチレン等の有機溶剤に溶解し、この溶液にピリジンやトリエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下に塩化トリクロロアセチル（トリクロロアセチル化剤）を加え、０℃で数十分間反応させることにより、式（IV−１）のトリクロロアセチル化化合物を得る。なお、上記のトリクロロアセチル化反応に用いられた塩化トリクロロアセチルに代えて、トリクロロ酢酸無水物を用いても同様に式（IV−１）のトリクロロアセチル化合物が得られる。
【００３６】
つぎに、得られた式（IV−１）の化合物を四塩化炭素とアセトニトリルの混合溶剤に溶解し、この溶液にメタ過ヨウ素酸ナトリウムの水溶液を加え、さらに酸化ルテニウムを加えて、室温で激しく攪拌して数時間反応させる。これにより、式（IV−１）の化合物の３位ヒドロキシメチル基がカルボキシル基に酸化されるから、式（Ｖ−１）のカルボン酸化合物を得る。なお、上記のヒドロキシメチル基の酸化は、一般的にはアルコールを酸化してカルボン酸に変換させる既知の各種の酸化方法でも行なえる。
【００３７】
その後、酸化工程で得られた一般式（Ｖ−１）の化合物からイミノ基保護基  （Ｒ1 ）とヒドロキシル基保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）を脱離する工程は、それぞれの保護基の種類に応じて適当な慣用な脱保護技術により実施できる。
【００３８】
例えば一般式（Ｖ−１）の化合物から残留するイミノ基保護基（Ｒ1 ）としてのターシャリーブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）を脱離し、またヒドロキシル保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）としてのイソプロピリデン基を脱離する。これらの脱保護反応のためには、好ましくは、１〜４規定の塩化水素−ジオキサンなどの塩化水素を含む有機溶媒に式（Ｖ−１）の化合物を溶解し、室温に４〜15時間放置してイミノ基保護基（Ｒ1 ）ならびにヒドロキシル保護（Ｘ1 、Ｘ2 ）を除去するのがよい。このようにして、目的の新規物質として式（Ｉａ）の化合物が塩酸付加塩として生成する。
【００３９】
また、第五の本発明においては、次の一般式(II)
0003806456.tif 000026
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 は前記と同じ意味をもつ〕で示される（3R,4S,5R, 6S)-N-保護-6-アミノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピ ペリジンの６位アミノ基をアミジノ化反応にかけて次の一般式（IV−２）
0003806456.tif 000027
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 は前記と同じ意味をもち、Ｒ4 はN,N'-保護された 又は未保護のグアニジノ基であり、６位の立体化学はＲ1 がＲ4よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位で低いイミノ基保護基である場合には(R)-配置であるが、 Ｒ1 がＲ4 より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には（Ｓ）−配置である〕で示される(3R,4S,5R,6R又は6S)-N-保護-6-保護-又は未保護-グアニジノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンを生成し、次に この式（IV−２）の化合物の３位ヒドロキシメチル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−２）
0003806456.tif 000028
〔式中、Ｒ1 、Ｒ4 、Ｘ1、Ｘ2及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される(3S,4S,5R,6R又は6S)-N-保護-6-グアニジノ-3-ヒドロキシメチル-4, 5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジン-3-カルボン酸を生成し、次にこの式 (Ｖ−２)の化合物からイミノ基保護基(Ｒ1 )及びヒドロキシル基保護基（Ｘ1、 Ｘ2 ）、ならびにグアニジル基上の保護基を脱離することを特徴とする、次式  （Ｉｂ）
0003806456.tif 000029
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸またはその塩の製造法が提供される。
【００４０】
第五の本発明の方法において、第１の工程として、式(II)の化合物の６位アミノ基をアミジノ化させる反応は、６位アミノ基にアミジノ基〔H2N(HN=)C-〕を導入する既知の方法により行うことができ、これにより６位置換基としてグアニジノ基が形成される。
【００４１】
このアミジノ化反応のためには、式(II)の化合物をN,N-ジメチルホルムアミド等の有機溶剤に溶解し、この溶解にトリエチルアミンやジイソプロピルエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下にN,N-ジ-(ターシャリーブトキシカルボニル)チオ尿素と塩化第二水銀を加え、０℃で数時間反応させることにより、式 (IV−２)のグアニジノ化合物を得る。なお、前記のようにアミジノ化剤として、N,N-ジ-(ターシャリーブトキシカルボニル)チオ尿素を用いる場合、式(II)の化 合物から生成される式(IV−２)のグアニジノ化合物は、より正確に表示すると、次式
0003806456.tif 000030
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 は前記と同じ意味をもち、Ｂｏｃはターシャリーブトキシカルボニル基を示す〕で表わされるN,N'-保護されたグアニジノ基をもつ 化合物である。しかしながら、この式（IV−２）の化合物はそのまま次段の３位ヒドロキシメチル基の酸化反応の工程にかけることができ、またその次後の工程として式（Ｖ−２）のカルボン酸化合物からイミノ基保護基（Ｒ1 ）およびヒドロキシル基保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）を脱離させる反応の工程を行う時にはグアニジノ基上の保護基も同時に脱離できる。従って、式（IV−２）の化合物のグアニジノ基上にある保護基の存在は簡略化して表示される。しかも、前記のN,N-ジ-(ターシャリーブトキシカルボニル)チオ尿素に代えて、一般的には、N,N-ジ-(アル コキシカルボニル)チオ尿素も使用できる。
【００４２】
さらに、上記の式(II)の化合物の６位のアミノ基をグアニジノ基に転化する反応は、一般的にアミノ基をグアニジノ基に変換させる既知の各種のグアニジノ化方法でも行い得る。
【００４３】
第五の本発明の方法においても、第２の工程として、式（IV−２）の化合物の３位ヒドロキシメチル基をカルボキシル基に転化させる酸化反応は、第四の本発明の方法において式（IV−１）の化合物を酸化する工程と全く同じ要領で行い得る。さらに、第３工程として、式（Ｖ−２）の化合物から保護基（Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 ）、ならびにグアニジノ基上の保護基を脱離する反応も、第四の本発明の方法で式（Ｖ−１）の化合物を脱保護反応にかける工程と同様に行い得る。これによって、目的の新規物質である式（Ｉｂ）の化合物またはその塩酸付加塩が生成する。
【００４４】
さらにまた、第六の本発明においては、前記の既知の癌細胞転移抑制物質である式（Ｉｃ）の化合物の新規で効率がよい製造法として、次の一般式(II)
0003806456.tif 000031
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2は前記と同じ意味をもつ〕で示される(3R,4S,5R,6S)-N-保護-6-アミノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンの６位アミノ基をトリフルオロアセチル化して次の一般式（IV−３）
0003806456.tif 000032
〔式中、Ｒ1 、Ｘ1 、Ｘ2 は前記と同じ意味をもち、Ｒ5 はトリフルオロアセタミド基であり、６位の立体化学はＲ1 がＲ5 よりCahn-Ingold-Prelog則で優先順位が低いイミノ基保護基である場合には(R)-配置であるが、Ｒ1 がＲ5 より優先順位が高いイミノ基保護基である場合には、(S)-配置である〕で示される(3R,4S,5R,6R又は6S)-N-保護-6-(トリフルオロアセタミド)-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジンを生成し、次のこの式（IV−３）の化 合物の３位ヒドロキシメチル基を酸化によりカルボキシル基に転化して次の一般式（Ｖ−３）
0003806456.tif 000033
〔式中、Ｒ1 、Ｒ5 、Ｘ1、Ｘ2及び６位の立体化学は前記と同じ意味をもつ〕で示される(3S,4S,5R,6R又は6S)-N-保護-6-(トリフルオロアセタミド)-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-ジ保護-ピペリジン-3-カルボン酸を生成し、次にこの式（Ｖ−３）の化合物からイミノ基保護基（Ｒ1 ）及びヒドロキシル基保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）を脱離することを特徴とする、次式（Ｉｃ）
0003806456.tif 000034
で示される(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペ リジン-3-カルボン酸またはその塩の製造法が提供される。
【００４５】
第六の本発明の方法において、第１工程として、(II)の化合物の６位アミノ基をトリフルオロアセチル化する反応は、式(II)の化合物をN,N-ジメチルホルムアミド等の有機溶剤に溶解し、この溶液にジイソプロピルエチルアミンやトリエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下にトリフルオロ酢酸エチルを加え、40〜80℃で数日間反応させることにより、式（IV−３）のトリフルオロアセチル化合物を得る。なお、上記のトリフルオロアセチル化反応に用いられたトリフルオロ酢酸エチルに代えて、トリフルオロアセチルクロリドやトリフルオロ酢酸無水物を用いても、同様にトリフルオロアセチル化反応を行い得る。
【００４６】
次の第２工程として、式（IV−３）のフルオロアセチル化合物の３位ヒドロキシメチル基をカルボキシル基に転化させる反応は、第四の本発明の方法における対応する工程と同様な要領で実施できる。また、生成された式（Ｖ−３）のカルボン酸化合物からイミノ基保護基（Ｒ1 ）とヒドロキシル保護基（Ｘ1 、Ｘ2 ）を第３工程として脱離させる反応も、第四の本発明の方法の対応する工程と同じ要領で実施できる。こうして、既知である式（Ｉｃ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリ フルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシビペリジン-3-カルボン酸が高収率で収 得できる。
【００４７】
次に、第二の本発明による一般式(II)の(3R,4S,5R,6S)-N-保護-6-アミノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-ジヒドロキシ-4,5-ジ保護ピペリジンの一例である(3R,4S, 5R,6S)-6-アミノ-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-イソプロピリデン-3,4-ピペリジンジオールを式（Ａ）のシアスタンチンＢ から出発して第三の本発明の方法により製造する場合の複数の工程からなる反応経路を次の反応チャート（１）を参照して説明する。
【００４８】
但し後記の反応チャートではＢｏｃはイミノ基保護基としてのターシャリーブトキシカルボニル基（ＣＨ3)3ＣＯ-ＣＯ-を示し、ＭＥＭはメトキシエトキシメ チル基を示す。
【００４９】
0003806456.tif 000035
【００５０】
すなわち、上記の反応チャート(１)について実施される反応工程を簡略に説明すると、式(Ａ)のシアスタチンＢを一工程の方法［西村ら；「Natural Product Lett.」１巻、39−44頁(1992年)参照］によって、式(IIIａ)で示されるN-(ター シャリーブトキシカルボニル)-シアスタチンＢ［mp.145〜146℃，［α］D 24＋19.6°(ｃ0.24，水）］を製造できる。この式(IIIａ)の化合物を出発物質として用い、この化合物を例えばN,N-ジメチルホルムアミドなどの各種有機溶剤に溶解し、その溶液に２，２−ジメトキシプロパンを加え、またクロロトリメチルシランやクロロトリエチルシラン等の塩化アルキルシラン、またはパラトルエンスルホン酸などの酸触媒を加えて室温で数時間ケタール化の反応をさせることにより式(IIIｂ)の4,5-O-イソプロピリデン化化合物を得る（反応工程ａ）。
【００５１】
つぎに、式（IIIｂ)の化合物をN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶剤に溶解し、その溶液にジイソプロピルアミンやトリエチルアミンなどの塩基を加え、この塩基の存在下にメトキシエトキシメチルクロリドを加え室温で数時間エステル化の反応をさせることにより式（IIIｃ）のエステル化合物を得る（反応工程 ｂ)。
【００５２】
つぎに、式(IIIｃ)の化合物をテトラヒドロフラン等の単一の有機溶剤、およ びこれらの混合有機溶剤に溶解し、この溶液に水素化ホウ素ナトリウムや水素化リチウムアルミニウム、水素化ジイソブチルアルミニウムなどの還元剤を加え、室温で数時間還元反応させることにより式(IIａ)のアルコール化合物を得る(反 応工程ｃ）。
【００５３】
つぎに、式(IIａ)の化合物をヒドラジン水和物に溶解し、50〜100℃で７〜14 日間反応させると、アセチル基の脱離が起き、この脱アセチル化により、式(II ｂ)で示されるアミノ基が遊離した化合物を得る(反応工程ｄ)。この式（IIｂ） の化合物が第二の本発明による一般式(II)の化合物の一例である。
【００５４】
さらに、上記の式（IIｂ）の化合物から出発して第四の本発明の方法により、第１の本発明による式(Ｉａ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸を製造する反応経路を次の反応チャート （２）について示す。
【００５５】
0003806456.tif 000036
【００５６】
反応チャート(２)について説明するに、式（IIｂ）の化合物を塩化メチレン等の有機溶剤に溶解し、この溶液にピリジンやトリエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下に塩化トリクロロアセチルを加え、０℃で数十分間反応させることにより、式（IVａ）のトリクロロアセタミド化合物を得る(反応工程ｅ)。なお、前記の塩化トリクロロアセチルに代えて、トリクロロ酢酸無水物を用いても同様に式（IVａ）の化合物が得られる。
【００５７】
つぎに、式(IVａ)化合物を四塩化炭素とアセトニトリルの混合溶剤に溶解し、この溶液にメタ過ヨウ素酸ナトリウムの水溶液を加え、さらに酸化ルテニウムを加えて、室温で激しく攪拌して数時間反応して酸化させることにより式（Ｖａ）のカルボン酸化合物を得る(反応工程ｆ)。
【００５８】
つぎに、式（Ｖａ）の化合物から、残留するイミノ基保護基としてのターシャリーブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）を脱離し、またヒドロキシル保護基としてのイソプロピリデン基を脱離する(反応工程ｇ)。このためには、１〜４規定の塩化水素−ジオキサンなどの塩化水素を含む有機溶媒に化合物（Ｖａ）を溶解し、室温に４〜15時間放置してイミノ基保護基（Ｂｏｃ）ならびにイソプロピリデン基を除去するのがよい。このようにすると、式（Ｉａ）の化合物が塩酸塩として生成する。
【００５９】
さらにまた、前記の式（IIｂ）の化合物から出発して、第五の本発明の方法により、第１の本発明による式（Ｉｂ）の(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒ ドロキシピペリジン-3-カルボン酸を製造する反応経路を次の反応チャート(３）について示す。
【００６０】
0003806456.tif 000037
【００６１】
反応チャート（３）について説明するに、式（IIｂ）の化合物をN,N-ジメチルホルムアミド等の有機溶剤に溶解し、この溶液にトリエチルアミンやジイソプロピルエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下にN,N-ジ-(ターシャリーブトキシカルボニル)チオ尿素と塩化第二水銀を加え、０℃で数時間反応させるこ とにより、Ｂｏｃ基２個で保護されたグアニジノ基を有する式（IVｂ）のグアニジノ化合物を得る(反応工程ｈ)。
【００６２】
つぎに、式（IVｂ）の化合物を四塩化炭素とアセトニトリルの混合溶剤に溶解し、この溶液に反応チャート（２）の反応工程（ｆ）と同様にして、メタ過ヨウ素酸ナトリウムの水溶液を加え、さらに酸化ルテニウムを加えて、室温で激しく攪拌して数時間反応して酸化させることにより式（Ｖｂ）のカルボン酸化合物を得る(反応工程ｉ)。
【００６３】
つぎに、式（Ｖｂ）の化合物から、残留するイミノ基保護基としてのターシャリーブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）、ならびにグアニジノ基上の保護基であるＢｏｃ基２個を脱離し、またヒドロキシル保護基としてのイソプロピリデン基を脱離する（反応工程ｊ）。このためには、反応チャート（２）の反応工程（ｇ）と同様に、１〜４規定の塩化水素−ジオキサンなどの塩化水素を含む有機溶媒に化合物（Ｖｂ）を溶解し、室温に４〜15時間放置してイミノ基保護基(Ｂｏｃ)ならびにイソプロピリデン基を除去するのがよい。このようにすると、式（Ｉｂ）の化合物が塩酸塩として生成する。
【００６４】
次いて、前記の式(IIｂ)の化合物から出発して、第六の本発明の方法により、式（Ｉｃ）の(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピ ペリジン-3-カルボン酸を製造する反応経路を次の反応チャート（４）について 示す。
【００６５】
0003806456.tif 000038
【００６６】
反応チャート（４）について説明するに、式（IIｂ）の化合物をN,N-ジメチルホルムアミド等の有機溶剤に溶解し、この溶液にジイソプロピルエチルアミンやトリエチルアミン等の塩基を加え、この塩基の存在下にトリフルオロ酢酸エチルを加え、40〜80℃で数日間反応させることにより、式（IVｃ）のトリフルオロアセタミド化合物を得る(反応工程ｋ)。なお、前記のトリフルオロ酢酸エチルに代えて、トリフルオロアセチルクロリドやトリフルオロ酢酸無水物を用いても同様に式（IVｃ）の化合物が得られる。
【００６７】
つぎに、式（IVｃ）の化合物を四塩化炭素とアセトニトリルの混合溶剤に溶解し、この溶液に反応チャート（２）の反応工程（ｆ）と同様にして、メタ過ヨウ素酸ナトリウムの水溶液を加え、さらに酸化ルテニウムを加えて、室温で激しく攪拌して数時間反応して酸化させることにより式（Ｖｃ）のカルボン酸化合物を得る（反応工程ｌ）。
【００６８】
つぎに、式（Ｖｃ）の化合物から、残留するイミノ基保護基としてのターシャリーブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）を脱離し、またヒドロキシル保護基としてのイソプロピリデン基を脱離する（反応工程ｍ）。このためには、反応チャート（２）の反応工程（ｇ）と同様に、１〜４規定の塩化水素−ジオキサンなどの塩化水素を含む有機溶媒に化合物（Ｖｃ）を溶解し、室温に４〜15時間放置してイミノ基保護基（Ｂｏｃ）ならびにイソプロピリデン基を除去するのがよい。このようにすると、式（Ｉｃ）の化合物が塩酸塩として生成する。
【００６９】
前記の反応チャート（１）〜（４）に示された式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）および（Ｉｃ）の各化合物の製造の反応経路では、式（IIｂ）の出発化合物のイミノ基保護基がＢｏｃ基であり且つヒドロキシル基保護基がイソプロピリデン基である場合について説明したけれども、式（IIｂ）の化合物におけるＢｏｃ基及びイソプロピリデン基に代えて、それぞれに、一般の常用のイミノ基保護基及び常用のヒドロキシル基保護基を糖化学で知られる保護法により導入して利用できることは自明である。
【００７０】
更に、イミノ基保護基とヒドロキシル基保護基を脱離する工程は、反応チャート（２）の反応工程（ｇ）について説明した方法に準じて、またそれぞれの保護基の種類に応じて適当な慣用な脱保護技術により実施できる。
【００７１】
前記の第四、第五および第六の本発明の方法でそれぞれに得られた式（Ｉａ）の化合物および式（Ｉｂ）の化合物ならびに式（Ｉｃ）の化合物が上記のごとき塩酸塩などの酸付加塩の形で収得された場合には、その酸付加塩の形の化合物の水溶液を常法により陽イオン交換樹脂、例えばダウエックス50Ｗ（米国ダウケミカル社製）Ｈ型で処理することにより、またはアンモニアを含有する溶媒系によるクロマトグラフィーで精製することにより、遊離のイミノ塩基の形の化合物  (Ｉａ)および化合物(Ｉｂ)ならびに化合物(Ｉｃ）が得られる。また、式(Ｉａ）の化合物および式（Ｉｂ）の化合物ならびに式（Ｉｃ）の化合物が遊離のカルボン酸の形である場合には、常法で無機塩基で処理することによりカルボン酸塩の形に転化できる。
【００７２】
【発明の実施の形態】
以下に、前出の反応チャート（１）〜（４）に示された各反応工程を例示する本発明の実施例を示すが、これらは単に例示であって本発明を限定するものではない。本発明を逸脱しない範囲で種々の変形および修正が可能であることは言うまでもない。
【００７３】
実施例１
（ａ）N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-4,5-O-イソプロピリデンシアス タチンＢ［式(IIIｂ)の化合物］の製造
式(IIIａ)の化合物、すなわちN-(ターシャリーブトキシカルボニル)-シアスタチンＢ(0.955ｇ，３mmol)をN,N-ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)(15ml）に懸濁させ、これに2,2-ジメトキシプロパン(3.69ml，30mmol）およびクロロトリメチル シラン(1.90ml，15mmol)を加えた。得られた混合物を室温で２時間攪拌した後、ピリジン(1.5ml)を加えて反応を停止させた。
【００７４】
反応液をクロロホルムで希釈し、これに水を加えて抽出した後、水相をクロロホルム−メタノール（９：１）の混合溶媒で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、残留物をトルエンで３回共沸した後、展開溶媒としてクロロホルム−メタノール−濃アンモニア水（２：１：0.3）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、 無色泡末状の固体として表題の化合物を1.05ｇ（98％）得た。
【００７５】
比旋光度： [α]D23 ＋29°(ｃ0.88，メタノール）
1Ｈ-ＮＭＲスペクトル(270MHz，ＣＤ3ＯＤ)，δppm：1.32，1.38(each ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン)，1.46（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），1.94（３Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ3 ），2.96（１Ｈ，ｄｄｄ，ｊ＝12.5, 5.1, 2.6Hz，３−Ｈ），  3.43（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.5Hz，２−Ｈax），3.60（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.5， 5.1Hz，２−Ｈoq），4.47（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.6, 2.3Hz，５−Ｈ），4.80（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝7.6, 2.6Hz，４−Ｈ），5.78（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝2.3Hz，６−Ｈ）．
【００７６】
（ｂ）N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-4,5-"-イソプロピリデンシアス タチンＢの２−メトキシエトキシメチルエステル［式(IIIｃ)の化合物］の製造 前項（ａ）で得た式(IIIｂ)の化合物(2.51ｇ，７mmol）をＤＭＦ（50ml）に溶解し、これにジイソプロピルエチルアミン(4.88ml，28mmol）および塩化2-メトキ シエトキシメチル（1.60ml，14mmol）を加えた。得られた混合物を室温で２時間攪拌した後、水(0.2ml)を加えて反応を停止させた。反応液をクロロホルムで希 釈し、これに水を加えて抽出した後、水相をクロロホルムで３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、残留物をトルエンで３回共沸した後、展開溶媒としてクロロメタン−メタノール（20：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、無色シロップとして表題化合物を2.61ｇ（83％）得た。
【００７７】
比旋光度： [α]D25 −18.7°（ｃ0.91，クロロホルム）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（400MHz，ＣＤＣｌ3 ），δppm ：1.32，1.44(each  ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.47（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 )，1.98  (３Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ3 )，2.99（１Ｈ，broad ｍ，３−Ｈ），3.37（１Ｈ，ｔ，Ｊ=12.7Hz，２−Ｈax），3.39（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3 ），3.56（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝ 4.4Hz，ＯＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3 )，3.76−3.82（３Ｈ，ｍ，Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3 ，２−Ｈeq），4.69（１Ｈ，broad ｄ，Ｊ＝７Hz，５−Ｈ），4.82  (１Ｈ，broad ｄｄ，Ｊ＝７，３Hz，４−Ｈ)，5.40(２Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣＨ2Ｏ），5.59（１Ｈ，broad ｓ，６−Ｈ），5.91（１Ｈ，broad ｓ，ＮＨ）．
【００７８】
（ｃ）(3R,4S,5R,6S)-6-アセタミド-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-イソプロピリデン-4,5-ピペリジンオール〔式（IIａ）の化合物〕の製造
前項（ｂ）で得た式(IIIｃ)の化合物 (2.59ｇ，5.8mmol)をテトラヒドロフラ ン（50ml）と2,2,2-トリフルオロエタノール（５ml）の混合溶媒に溶かし、これに水素化ホウ素ナトリウム(0.685ｇ，17.4mmol)を加えた。その得られた混合物 を室温で１時間攪拌して還元反応を行った。その後、水(1.5ml)を加えて反応を 停止させ、さらに室温で30分間攪拌した。反応液を減圧濃縮した後、残留物に水を加え、クロロホルムで３回抽出した。有機相(クロロホルム抽出液)を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮した後、残留物を展開溶媒としてジクロロメタン−メタノール(12：１)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、無色泡末状固体として表題化合物を1.98ｇ（99％）得た。
【００７９】
比旋光度： [α]D25 ＋27°（ｃ0.95，クロロホルム）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（400MHz，ＣＤＣｌ3 ），δppm ：1.33，1.45(each  ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.46（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），1.98 (３Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ3 ），2.06（１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），2.22（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝ 5.6Hz，ＯＨ)，3.16（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.4Hz，６−Ｈeq），3.50（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.4， 3.7Hz，６−Ｈeq），3.72−3.80（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2ＯＨ），4.52 (１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3， 2.4Hz，３−Ｈ)，4.59（１Ｈ，broad ｄ，Ｊ＝7.3Hz，４−Ｈ），5.73（１Ｈ，broad ｓ，２−Ｈ），5.84（１Ｈ，broad ｓ，ＮＨ）．
【００８０】
（ｄ）(3R,4S,5R,6S)-6-アミノ-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-イソプロピリデン-3,4-ピペリジンジオール［式（IIｂ）の化合物］の製造
前項（ｃ）で得た式（IIａ）の化合物（1.03ｇ，３mmol）をヒドラジン水和物（Ｈ2ＮＮＨ2・ｘＨ2Ｏ，20ml)に溶かし、70℃で10日間攪拌した。式（IIａ）の化合物の６位のアセタミド基からアセチル基が脱離される反応が起きた。その反応液を室温まで冷却した後、反応液を減圧濃縮した。残留物に水を加え、クロロホルムで３回抽出した。有機相（クロロホルム抽出液）を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、残留物を展開溶媒として酢酸エチル−メタノール（50：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーおよび展開溶媒として酢酸エチル−メタノール（10：１）を用いるシリカゲル分取薄相クロマトグラフィーで精製し、無色シロップとして第二の本発明による表題化合物を0.488ｇ（54％）得た。また、このとき、未反応である式（IIａ） の化合物を0.332ｇ（32％）回収した。
【００８１】
比旋光度： [α]D26 −14.4°（ｃ0.99，クロロホルム）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（400MHz，ＣＤＣｌ3 ），δppm ：1.35，1.45（each ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.48（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），2.40 (１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），3.19（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.2Hz，６−Ｈax），3.46(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.2， 3.9Hz，６−Ｈoq)，3.71−3.80（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2ＯＨ），4.35（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3， 2.9Hz，３−Ｈ），4.57（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3，2.0Hz，４−Ｈ），5.08（１Ｈ，broad ｓ，２−Ｈ）．
【００８２】
実施例２
（ａ）(3R,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-3-ヒドロキシメ チル-4,5-O-イソプロピリデン-6-トリクロロアセタアミド-4,5-ピペリジンジオ ール［式（IVａ)の化合物］の製造
実施例１(ｄ）で得た式(IIｂ)の化合物(124mg，0.41mmol)をジクロロメタ(2.5ml)に溶かし、０℃に冷却した。これにピリジン（0.13ml，1.65mmol）、塩化ト リクロロアセチル（0.10ml，0.91mmol）を加え、０℃で10分間攪拌して化合物  （IIｂ）の６位のアミノ基のトリクロロアセチル化反応を行った。その反応溶液をクロロホルムで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回、水で２回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、綿栓ろ過した。ろ液の溶媒を減圧留去した後、残留物をトルエンで３回共沸し、淡黄色固体を得た。
【００８３】
この固体を飽和炭酸カリウムメタノール溶液(３ml)に溶かし、室温で10分間攪拌した後、溶媒を減圧留去した。残留物をクロロホルムに溶かし、飽和塩化アンモニウム水溶液で２回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、綿栓ろ過した。ろ液の溶媒を減圧留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：トルエン−アセトン、５：１）で精製し、無色泡状固体として表題化合物を162mg（88％）得た。
【００８４】
比旋光度： [α]D25 ＋16.8°(ｃ3.82，メタノール）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ)，δppm ：1.36（３Ｈ，ｓ，イソプロピ リデン)，1.48（12Ｈ，ｓ，イソプロピリデン，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），1.95(１Ｈ，ｔ，Ｊ＝5.6Hz，ＯＨ），2.01（１Ｈ，broad ｍ，５−Ｈ），3.16（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.2Hz，６−Ｈax），3.59（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.2 and 4.4Hz，６−Ｈeq），3.79（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝5.6Hz，−ＣＨ2ＯＨ），4.58（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.4Hz，３−Ｈ），4.62（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.0Hz，４−Ｈ），5.73（１Ｈ，broad ｓ，６−Ｈ），6.81（１Ｈ，−ＮＨＣＯ−）．
【００８５】
（ｂ） (3S,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-イソプロピリデン-6-トリクロロアセタミド-3-ピペリジンカルボン酸 ［式（Ｖａ）の化合物］の製造
前項（ａ）で得た式（IVａ)の化合物(152mg，0.34mmol)を四塩化炭素（２ml）−アセトニトリル（２ml）の混合溶媒に溶かし、これにメタ過ヨウ素酸ナトリウム(218mg，1.02mmol)を水（３ml）に溶かして加えた。この二相溶液に二酸化テ ニウム(IV)(8.0mg）を加え、室温で30分間激しく攪拌した。式（IVａ）の化合物３位のヒドロキシメチル基が酸化によりカルボキシル基に転化される反応が起きた。その反応液から有機相と水相を分液し、水相を酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、2-プロパノール(0.5ml)を加えて室温で１時間攪拌した。析出 した固体を減圧ろ過して除いた後、ろ液を水で１回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、綿栓ろ過した。ろ液の溶媒を減圧留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム−メタノール−濃アンモニア水、50：10：１）で精製し、無色不定形固体として表題化合物を119mg（76％）得た。
【００８６】
比旋光度： [α]D24 ＋3.6°(ｃ0.87，メタノール）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3 ＯＤ），δppm ：1.35 and 1.41 (３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.48（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），3.06（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝12.7， 4.9 and 2.9Hz，３−Ｈ），3.44（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.5Hz，２−Ｈax），3.66（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.2 and 4.9Hz，２−Ｈeq），4.53（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.0Hz，５−Ｈ），4.84（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.0Hz，４−Ｈ），5.76（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝ 2.0Hz，６−Ｈ）．
【００８７】
（ｃ）(3S,4S,5R,6R)-6-(トリクロロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリジ ン-3-カルボン酸［式（Ｉａ）の化合物］の製造
前項（ｂ）で得た式（Ｖａ）の化合物（32mg，70μmol)を４Ｍ塩酸−ジオキサン溶液(１ml)に溶かし、室温で一晩攪拌した。保護基の脱離反応が起きた。白色固体が析出して懸濁した反応溶液にジエチルエーテルを加えてよく攪拌した後、析出した白色固体を遠心分離によって沈澱させ、上澄みを除いた。この後、沈殿をジエチルエーテルに懸濁させ、遠心分離した後、上澄みを除く操作を２回繰り返した。得られた沈殿を風乾した後、減圧下に乾燥させ、無色固体として第一の本発明による式（Ｉａ）の表題化合物を26mg(105％）得た。
【００８８】
比旋光度： [α]D26 ＋31.0°(ｃ0.71，水）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル(Ｄ2Ｏ)，δppm ：3.15(１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝9.8， 8.3and 2.1Hz，３−Ｈ），3.56（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝8.3Hz，２−Ｈａ），3.56（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝9.8Hz，２−Ｈｂ)，4.22(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝10.3 and 2.4Hz，５−Ｈ)，4.62(１Ｈ，ｔ，Ｊ＝2.4Hz，４−Ｈ)，5.16（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝10.3Hz，６−Ｈ)．
【００８９】
実施例３
（ａ）(3R,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-6-[N,N'-ジ(ターシャリーブトキシカルボニル)]グアニジノ-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-イソプロピリデン-4,5-ピペリジンジオール［式（IVｂ)の化合物］の製造
実施例１(ｄ)で得た式（IIｂ）の化合物(109mg，0.36mmol)をＤＭＦ(２ml）に溶かし、０℃に冷却した。これにトリエチルアミン(0.20ml，1.44mmol) 、N,N'-ジ-(ターシャリーブトキシカルボニル)チオ尿素(199mg，0.72mmol) 、塩化第二 水銀(II)(196mg，0.72mmol)を加え、０℃で２時間攪拌して反応を行った。黄土 色の固体が析出した反応溶液に酢酸エチルを加え、遠心分離して固体を沈殿させた後、上澄みを別に移した。この後、沈殿を酢酸エチルに懸濁させ、遠心分離した後、上澄みを別に移す操作を２回繰り返した。上澄みを合わせ、水で２回、少量の飽和塩化ナトリウム水溶液で１回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、綿栓ろ過した。ろ液の溶媒を減圧留去した。残留物をトルエンで３回共沸した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム−メタノール、100：１）で精製し、無色不定形固体として表題化合物を184mg(94％)得た。
【００９０】
比旋光度： [α]D24 ＋45.6°(ｃ0.83，クロロホルム）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3 ），δppm ：1.34 and 1.45（３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.45，1.47 and 1.49（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），2.08（１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），3.21（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.2Hz，６−Ｈax），3.50  (１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.2 and 4.4Hz，６−Ｈeq)，3.77（１Ｈ，ＡＢq ，Ｊ＝11.2and 6.4Hz，−ＣＨ2ＯＨ），3.81（１Ｈ，ＡＢq ，Ｊ＝11.2 and 4.9Hz，−ＣＨ2ＯＨ），4.56（２Ｈ，ｓ，３−Ｈ，４−Ｈ），6.19（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝6.4Hz，２−Ｈ），8.35（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝6.4Hz，−ＮＨ−），11.37 （１Ｈ，ｓ， −ＮＨ−）．
【００９１】
（ｂ） (3S,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-6-[N,N'-ジ(タ ーシャリーブトキシカルボニル)]グアニジノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-イソプロピリデン-3-ピペリジンカルボン酸〔式（Ｖｂ）の化合物〕の製造
前項（ａ）で得た式（IVｂ）の化合物(155mg，0.29mmol) を四塩化炭素（２ml−アセトニトリル（２ml）の混合溶媒に溶かし、これにメタ過ヨウ素酸ナトリウム(183mg，0.86mmol) を水（３ml）に溶かして加えた。この二相溶液に二酸化ルテニウム(IV)(8.0mg)を加え、室温で30分間激しく攪拌して酸化反応を行った。 その反応溶液から有機相と水相を分液し、水相を酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、２−プロパノール(0.5ml) を加えて室温で２時間攪拌した。析出した固体を減圧ろ過して除いた後、ろ液を水で１回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、綿栓ろ過した。ろ液の溶媒を減圧留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム−メタノール−濃アンモニア水、70：10：１）で精製し、無色不定形固体として表題化合物を109mg（69％）得た。
【００９２】
比旋光度： [α]D25 ＋41.3°(ｃ0.67，メタノール）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ），δppm ：1.35 and 1.41 （３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン)，1.46，1.50（27Ｈ，broad ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ×３），2.84（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝12.7，4.6 and  2.4Hz，３−Ｈ)，3.46（１Ｈ，broadｔ，Ｊ＝12.7Hz，２−Ｈax），3.68（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.7 and 4.6Hz，２− Ｈeq），4.61（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.0Hz，５−Ｈ)，4.86（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.3 and 2.4Hz，４−Ｈ），6.04（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝2.0Hz，６−Ｈ）．
【００９３】
（ｃ）(3S,4S,5R,6R)-6-グアニジノ-4,5-ジヒドロキシピペリジン-3-カルボン酸〔式（Ｉｂ）の化合物〕の製造
前項（ｂ）で得た式（Ｖｂ）の化合物（39mg，70μmol)をジクロロメタン(0.6ml) に溶かし、その溶液にトリフルオロ酢酸(0.6ml) を加え、室温で８時間攪拌した。保護基であるＢｏｃ基を脱離する反応が起きた。その反応液から溶媒を減圧留去し、残留物をトルエンで３回、水で１回共沸した後、吸着樹脂ダイヤイオンＨＰ20（Ｈ2Ｏ）で精製した。精製物をメタノールで３回共沸して無色不定形 固体とした後、極小量のメタノールに溶かした。その溶液に４Ｍ塩酸−ジオキサン溶液（１ml）を加え、さらにジエチルエーテルを加えてよく攪拌して反応させた。イソプロピリデン基の脱離する反応が起きた。反応液中に無色固体が析出した。析出した固体を遠心分離によって沈殿させ、上澄みを除いた。この後、沈殿をジエチルエーテルに懸濁させ、遠心分離した後、上澄みを除く操作を２回繰り返した。得られた沈殿を風乾した後、減圧下に乾燥させ、無色固体として第一の本発明による式（Ｉｂ）の表題化合物を19mg（94％）得た。
【００９４】
比旋光度： [α]D26 ＋26.6°(ｃ0.39，水）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（Ｄ2Ｏ），δppm ：3.10（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝8.8 and 2.0Hz，３−Ｈ），3.54（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝8.8Hz，２−Ｈ），4.01（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝9.8 and 2.5Hz，５−Ｈ），4.60（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝2.2Hz，４−Ｈ），5.04  （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝9.8Hz，６−Ｈ）．
【００９５】
実施例４
（ａ）(3R,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-6-トリフルオロ アセタミド-3-ヒドロキシメチル-4,5-O-イソプロピリデン-4,5-ピペリジンジオ ール〔式（IVｃ）の化合物〕の製造
実施例１(ｄ)で得た式(IIｂ）の化合物(0.407ｇ，1.35mmol）をＤＭＦ(８ml）に溶かし、これにジイソプロピルエチルアミン（2.35ml，13.5mmol）およびトリフルオロ酢酸エチル（1.61ml，13.5mmol）を加え、60℃で36時間攪拌した。式  （IIｂ）の化合物の６位のアミノ基がトリフルオロアセチル化される反応が起きた。その反応液を室温まで冷却した後、クロロホルムで希釈し、これを水で３回洗浄した。このとき、水相は１回毎にクロロホルムで逆抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、残留物をトルエンで３回共沸した後、展開溶媒としてトルエン−アセトン（５：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、無色シロップとして表題化合物を0.434ｇ（81％）得た。
【００９６】
比旋光度： [α]D25 ＋26°(ｃ0.94，クロロホルム）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（400MHz，ＣＤＣｌ3 ），δppm ：1.35，1.47(each  ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.46（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），2.02 (１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），2.15（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝5.6Hz，ＯＨ），3.14（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝12.5Hz，６−Ｈax），3.57（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝12.5， 4.2Hz，６−Ｈeq），3.73−3.82（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ2ＯＨ），4.56（２Ｈ，broad ｓ，３−Ｈ，４− Ｈ），5.78（１Ｈ，broad ｓ，２−Ｈ），6.72（１Ｈ，broad ｓ，ＮＨ）．
【００９７】
（ｂ）(3S,4S,5R,6S)-N-(ターシャリーブトキシカルボニル)-6-トリフルオロ アセタミド-4,5-ジヒドロキシ-4,5-O-イソプロピリデンピペリジン-3-カルボン 酸〔式（Ｖｃ）の化合物〕の製造
前項(ａ)で得た式（IVｃ）の化合物(0.398ｇ，１mmol）を四塩化炭素（６ml）とアセトニトリル(６ml)の混合溶媒に溶かし、これにメタ過ヨウ素酸ナトリウム(0.642ｇ，３mmol）を水（９ml）に溶かしたものを加えた。この２相溶液に酸化ルテニウム(IV)(４mg）を加え、室温で激しく攪拌して２時間反応を行った。そ の後、反応溶液から有機相と水相を分離し、水相を酢酸エチルで３回抽出した。有機相と酢酸エチル抽出液とを合わせ、これに2-プロパノール(0.5ml) を加えて室温で１時間攪拌した後、析出した固体をろ過して除去した後、ろ液を水で１回洗浄した。この有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮した後、残留物を展開溶媒としてクロロホルム−メタノール−濃アンモニア水（３：１：0.1)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、無色不定形固体として表題化合物を0.306ｇ（74％）を得た。
【００９８】
比旋光度： [α]D23 ＋29°(ｃ0.90，メタノール）
融点： 200℃（分解）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（400MHz，ＣＤ3ＯＤ），δppm ：1.34，1.40 (each  ３Ｈ，ｓ，イソプロピリデン），1.47（９Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣ(ＣＨ3)3 ），2.96 （１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝11.7，4.2, 2.4Hz，３−Ｈ），3.41（１Ｈ，broad ｔ，Ｊ＝11.7Hz，２−Ｈax），3.64（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝11.7， 4.2Hz，２−Ｈeq），4.50（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.8, 2.0Hz，５−Ｈ），4.83（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝7.8,  2.4Hz，４−Ｈ），5.78（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝2.0Hz，６−Ｈ）．
【００９９】
（ｃ）(3S,4S,5R,6R)-6-(トリフルオロアセタミド)-4,5-ジヒドロキシピペリ ジン-3-カルボン酸〔式（Ｉｂ）の化合物〕の製造
前項（ｂ）で得た式（Ｖｃ）の化合物 153mgを４規定の塩化水素を含むジオキサン 4.5mlに溶解し、室温で一晩攪拌すると化合物（Ｖｃ）から保護基が脱離される反応が起き、そしてその反応液から固体が析出した。析出した固体をジオキサンで洗浄し、乾燥して無色固体として第六の本発明で目的とされる式（Ｉｃ）の表題化合物 110mg（96％）を得た。
【０１００】
比施光度： [α]D31 ＋27°(ｃ0.22，水）
融点： 130℃（分解）
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（270MHz，Ｄ2Ｏ），δppm ：2.92（１Ｈ，ｄｄｄ，  Ｊ＝10.8， 2.3Hz，３−Ｈ)，3.32−3.39（２Ｈ，ｍ，２−Ｈ2 )，3.96（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝10.6， 2.6Hz，５−Ｈ），4.42（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝2.3Hz，４−Ｈ）， 5.01（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝10.6Hz，６−Ｈ）．