(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式
【化１】
0003782507.tif 000016
式中、
Ａは水素原子又は
【化２】
0003782507.tif 000017
を表わし、ここで
Ｙは水素原子又は−ＣＯＲ1を表わし、
Ｒ1はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アラルキルオキシ基又は
【化３】
0003782507.tif 000018
（ここで、Ｒ2及びＲ3は同一もしくは相異なり、それぞれ水素原子、低級アルキル基、フェニル基又はＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基を表わすか、或いは
Ｒ2とＲ3はそれらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環を形成していてもよい）を表わし、
Ｂは場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基を表わす、
で示されるＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。
【請求項２】
Ａが水素原子を表わし、Ｂが場合によりハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を表わす請求項１記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。
【請求項３】
ハロゲン原子がフッ素原子である請求項２記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。
【請求項４】
Ａが場合によりＮ−低級アルキルカルバモイル基で置換されていてもよい２−チアゾリル基を表わし、Ｂが未置換のフェニル基を表わす請求項１記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は新規なペプチド化合物に関する。本発明の化合物は細胞成長抑制作用及び／又は抗新生物作用を有しており、抗癌、抗腫瘍剤として有用である。
【０００２】
【従来の技術】
海の軟体動物であるアメフラシ類縁のタツナミガイ（Dolabella auricularia）から細胞生長抑制作用及び／又は抗新生物作用を有する化合物の単離は今までにいくつかなされており、それらの化合物はドラスタチン１〜１５と称されている。このうち、ドラスタチン１０は、１９８７年ペチット等によりインド洋産のタツナミガイから抽出された下記構造式をもつペンタペプチドで、既知の化合物の中で最強の細胞生長抑制作用を有する化合物として知られている（ペチット等，ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサイアティー，１０９巻，６８８３頁，１９８７年及び特開平２−１６７２７８号公報参照）。
【０００３】
【化４】
0003782507.tif 000002
【０００４】
また、最近になって、ドラスタチン１０の全合成についても報告された（アメリカ特許第４９７８７４４号明細書参照）。
【０００５】
一方、本発明者らは先に、ある種のドラスタチン１０誘導体について開示した（国際公開ＷＯ９３／０３０５４号パンフレット参照）。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するための手段】
今回、本発明者らは、ドラスタチン１０のＮ末端のドラバリン（Ｎ，Ｎ−ジメチルバリン）をＮ−メチルプロリンに代替したある種のドラスタチン１０誘導体が、ドラスタチン１０に比べてはるかに強い抗腫瘍作用を有することを見いだした。
【０００７】
しかして、本発明によれば、一般式（Ｉ）
【０００８】
【化５】
0003782507.tif 000003
【０００９】
式中、
Ａは水素原子又は
【００１０】
【化６】
0003782507.tif 000004
【００１１】
を表わし、ここで
Ｙは水素原子又は−ＣＯＲ1を表わし、
Ｒ1はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アラルキルオキシ基又は
【００１２】
【化７】
0003782507.tif 000005
【００１３】
（ここで、Ｒ2及びＲ3は同一もしくは相異なり、それぞれ水素原子、低級アルキル基、フェニル基又はＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基を表わすか、或いはＲ2とＲ3はそれらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環を形成していてもよい）
を表わし、
Ｂは場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基を表わす、
で示されるＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩が提供される。
【００１４】
本明細書において「低級」なる語は、この語が付された基又は化合物の炭素原子数が６個以下、好ましくは４個以下であることを意味する。
【００１５】
前記式（Ｉ）において、「低級アルキル基」としては、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル基等が挙げられ、「低級アルコキシ基」としては、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ基等を挙げることができる。また、「アラルキルオキシ基」はアリール−低級アルキルオキシ基を意味し、例えばベンジルオキシ、フェネチルオキシ基等を包含し、「ハロゲン原子」にはフッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子が包含される。
【００１６】
Ｒ2又はＲ3が「Ｓ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基」を表わす場合の該複素環式基の例としては、アゼチジニル、フリル、チエニル、ピリジル、ピペリジニル、アゼピニル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、ピリミジニル、ピリダジニル基等が挙げられ、一方、Ｒ2とＲ3が「それらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環」を表わす場合の該複素環式環の例としては、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、１−パーヒドロアゼピニル、ピペラジノ、モルホリノ、チオモルホリノ基等を挙げることができる。
【００１７】
しかして、
【００１８】
【化８】
0003782507.tif 000006
【００１９】
の基の例としては、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、フェニルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ、フリルアミノ、ピリジルアミノ、２−チアゾリルアミノ、イミダゾリルアミノ、ピリミジニルアミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ基等を挙げることができる。
【００２０】
記号Ｂによって表される「場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基」とは、未置換のフェニル基又は１個のハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されているフェニル基を意味し、例えばフェニル、２−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−フルオロフェニル、３−ヨードフェニル、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、４−ブロモフェニル、２−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２−メチルフェニル、４−エチルフェニル、２−メトキシフェニル、４−エトキシフェニル基等を挙げることができる。
【００２１】
本発明の好ましい一群の化合物は、Ａが水素原子を表わし、Ｂが場合によりハロゲン原子、特にフッ素原子で置換されていてもよいフェニル基を表わす場合の前記式（Ｉ）の化合物である。
【００２２】
また、本発明の好ましい別の一群の化合物は、Ａが場合によりＮ−低級アルキルカルバモイルで置換されていてもよい２−チアゾリル基を表わし、Ｂが未置換のフェニル基を表わす場合の前記式（Ｉ）の化合物である。
【００２３】
なお、本発明の前記式（Ｉ）の化合物において、イソプロピル基、ｓｅｃ−ブチル基、メトキシ基及びメチル基がそれぞれ結合している炭素原子は不整炭素原子であるので、それらは任意の（Ｒ）−又は（Ｓ）−の立体配置を有することができ、それらは全て本発明の範囲に包含されるが、薬理活性の点からみると、ドラスタチン１０と同じ立体配置を有する化合物が好ましい。
【００２４】
前記式（Ｉ）のペプチド化合物は、また、塩として存在することができ、そのような塩の例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酢酸塩等を挙げることができる。
【００２５】
本発明によれば、前記式（Ｉ）のペプチド化合物は、例えばペプチド化学の分野で周知の液相合成法（イー・シュレーダー及びケイ・リュブケ著「ザ・ペプタイズ」第１巻、７６〜１３６頁、１９６５年アカデミック・プレス発行参照）に従って、各アミノ酸又はペプチドフラグメントを縮合させることにより製造することができる。
【００２６】
例えば、縮合時におけるラセミ化を避けるためには、下記式（ＩＩ）
【００２７】
【化９】
0003782507.tif 000007
【００２８】
のトリペプチドフラグメントと、下記式（ＩＩＩ）
【００２９】
【化１０】
0003782507.tif 000008
【００３０】
式中、Ａ及びＢは前記の意味を有する、
のフラグメントとを縮合させることにより合成するのが好適である。
【００３１】
また、数多くの本発明化合物を効率よく合成するには、下記式（ＩＶ）
【００３２】
【化１１】
0003782507.tif 000009
【００３３】
のテトラペプチドフラグメントと、下記式（Ｖ）
【００３４】
【化１２】
0003782507.tif 000010
【００３５】
式中、Ａ及びＢは前記の意味を有する、
のフラグメントとを縮合させることにより行うのが好ましい。
【００３６】
縮合反応は、一般に、不活性溶媒、例えばクロロホルム、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の中で、必要に応じて有機塩基、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）等の存在下に、縮合剤、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、シアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）、ＢＯＰ試薬等で処理することにより行うことができる。
【００３７】
反応温度は、通常−１０℃乃至室温、好ましくは０℃前後であり、式（ＩＩ）の化合物に対する式（ＩＩＩ）の化合物、有機塩基及び縮合剤の各々の使用割合は、式（ＩＩ）の化合物１モル当り、式（ＩＩＩ）の化合は少なくとも１モル、好ましくは１．０〜１．１モル程度、有機塩基は１〜２モル程度、そして縮合剤は等モル程度用いるのが有利である。
【００３８】
また、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）の化合物との反応も、上記の式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との反応と同様の条件下に行なうことができる。
【００３９】
なお、Ｙがカルボキシ基を表わす場合の式（Ｉ）の化合物は、Ｙが低級アルコキシカルボニル基を表わす場合の式（Ｉ）の化合物をアルカリで加水分解することにより製造することもできる。
【００４０】
かくして得られる式（Ｉ）のペプチド化合物の、反応混合物からの単離、精製は、再結晶、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過、高速液体クロマトグラフィー等により行うことができる。
【００４１】
なお、前記反応において出発原料として使用される前記式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は従来の文献に未載の新規な化合物であるが、その構成成分である各アミノ酸を液相合成法で縮合することにより容易に製造することができる。
【００４２】
本発明の式（Ｉ）のペプチド化合物は、ドラスタチン１０よりも強い抗腫瘍作用を有しており、また治療比も大きく、例えば、白血病、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、大腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、胃癌、膀胱癌などの処置又は治療に有用である。
【００４３】
本発明の式（Ｉ）の化合物の抗腫瘍作用は次のようにして測定することができる。
【００４４】
７週齢のＣＤＦ１マウスの腹腔内に、マウス白血病Ｐ３８８細胞を０．１ｍｌ（１０6cells／マウス）ずつ移植した。移植第一日目（移植翌日）及び第五日目に薬物を腹腔内に投与し、マウスの生死を６０日間観察した結果から下記式により延命率（ＩＬＳ，％）を算出した。なお、下記式中、Ｔは薬物投与群のメディアン生存日数、Ｃはコントロール群のメディアン生存日数を意味している。
【００４５】
【数１】
0003782507.tif 000011
【００４６】
その結果を下記表に示す。なお、抗腫瘍作用は、ドラスタチン１０の延命率を１とした場合の相対比で表わした。
【００４７】
0003782507.tif 000012
本発明に係る化合物は、薬剤として用いる場合、その用途に応じて、固体形態（例えば錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、丸剤、トローチ錠など）、半固体形態（例えば坐剤、軟膏など）又は液体形態（注射剤、乳剤、懸濁液、ローション、スプレーなど）のいずれかの製剤形態に調製して用いることができる。しかして、上記製剤に使用し得る無毒性の添加物としては、例えばでん粉、ゼラチン、ブドウ糖、乳糖、果糖、マルトース、炭酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はその塩、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸アルキルエステル、シロップ、エタノール、
プロピレングリコール、ワセリン、カーボワックス、グリセリン、塩化ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸等が挙げられる。該薬剤はまた、治療学的に有用な他の薬剤を含有することもできる。
【００４８】
該薬剤中における本発明の化合物の含有量はその剤形に応じて異なるが、一般に固体及び半固体形態の場合には０．１〜５０重量％の濃度で、そして液体形態の場合には０．０５〜１０重量％の濃度で含有していることが望ましい。
【００４９】
本発明の化合物の投与量は、対象とする人間をはじめとする温血動物の種類、投与経路、症状の軽重、医者の診断等により広範に変えることができるが、一般に１日当たり、０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ程度とすることができる。しかし、患者の症状の軽重、医者の診断に応じて上記範囲の下限よりも少ない量又は上限よりも多い量を投与することはもちろん可能である。上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与することができる。
【００５０】
【実施例】
以下、参考例及び実施例により本発明をさらに説明する。
【００５１】
なお、参考例及び実施例において用いる化合物番号に対応する化合物の構造については、以下のフローシート１及び２を参照されたい。ここで、Ｂｕtはｔｅｒｔ−ブチル基、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基、Ｚはベンジルオキシカルボニル基、Ｍｅはメチル基を表わし、Ｂ及びＹは前記の意味を有する。
【００５２】
【化１３】
0003782507.tif 000013
【００５３】
【化１４】
0003782507.tif 000014
【００５４】
【化１５】
0003782507.tif 000015
【００５５】
参考例１
化合物１  ０．８５ｇ（１．７３ミリモル）をｔ−ブタノール−水（９：１）１５ｍｌに溶かし５％パラジウム炭素０．１ｇを加え、水素気流下で撹拌する。３時間反応したのち触媒を濾去洗浄し、濾洗液を減圧乾固する。残渣をベンゼン２０ｍｌに溶かし減圧乾固し、更にこの操作をもう一度繰り返して油状物を得る。この油状物をＺ−プロリン０．４８ｇ（１．９３ミリモル）及びシアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）０．３１ｇ（１．９０ミリモル）と共にジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１０ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下トリエチルアミン０．１９ｇ（１．８８ミリモル）をＤＭＦ１ｍｌに溶かした液を滴下する。
【００５６】
その後０゜で４時間、室温で一夜撹拌を続けたのち澄明な反応液を酢酸エチルで充分にうすめ、氷冷２Ｎ塩酸および飽和重曹水で洗い、乾燥し、溶媒を減圧で留去して油状物１．０１ｇを得る。シリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：酢酸エチル−ヘキサン（２：１））で精製して、目的の化合物２を無色泡状物として得た。０．９７ｇ（収率９５．１％）。
【００５７】
［α］27D−81.7゜(c=1.025、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.75-1.05(12H, m)、1.46(9H, s)、1.8-2.2(4H, m)、2.3-2.4(2H, m)、2.96(3H, s)、3.34(3H, s)、3.4-3.6(2H, m)、3.8-4.0(1H, m)、4.2-4.4(1H, m)、4.73(1H, dd, J=8.9Hz, 6.3Hz)、5.17(2H, br. s)、7.32(5H, s)。
【００５８】
参考例２
化合物２  ０．５０ｇ（０．８５ミリモル）をメタノール２０ｍｌに溶かし３７％ホルマリン１．０ｇと５％パラジウム炭素０．４ｇを加え、水素気流下にて４８時間撹拌を続ける。触媒を濾別し、メタノールで洗い、濾洗液を減圧乾固して得た油状物を酢酸エチル−ヘキサン（１：１）に溶かし不溶物を濾別する。濾液を減圧乾固し、残渣の油状物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：酢酸エチル−ヘキサン（２：１））で精製して、目的の化合物３を無色油状物として得た。０．３６ｇ（収率９０．０％）。
【００５９】
［α］25D−76.2゜(c=1.10、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.05(12H, m)、1.46(9H, s)、1.6-1.9(4H, m)、2.31(3H, s)、2.3-2.45(2H, m)、2.99(3H, s)、3.36(3H, s)、3.75-4.0(1H, m)、4.73(1H, dd, J=9.8Hz, 7.1Hz)、7.81(1H, br. d)。
【００６０】
参考例３
化合物３  ３１０ｍｇ（０．６６ミリモル）を０゜にて５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタンに溶かし、室温で１時間撹拌したのち減圧乾固する。
【００６１】
一方、化合物４  ２６３ｍｇ（０．７０ミリモル）を０゜にて４Ｎ塩化水素／ジオキサンに溶かし、室温で１時間撹拌したのち減圧乾固する。残渣をＤＭＦ３ｍｌに溶かし、氷冷下トリエチルアミン０．９ｍｌを加えたのち減圧乾固する。残渣をＤＭＦ３ｍｌに溶かし、氷冷下ＤＥＰＣ１３６ｍｇ（０．８３ミリモル）とトリエチルアミン０．１１ｍｌ（０．７９ミリモル）とを加え、そのまま一夜撹拌を続ける。
【００６２】
反応液を酢酸エチル−ベンゼン（４：１）混液でうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥し、溶媒を減圧で留去して油状物４４９ｍｇを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：ジクロルメタン−メタノール（３０：１→１０：１）で精製して、目的の化合物５を無色油状物として得た。１８５ｍｇ（収率４１．５％）。
【００６３】
［α］D  n.d.
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.27(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.3(m)、2.34(3H, s)、2.3-2.9(m)、3.00(3H, s)、3.30(3H, s)、3.35(3H, s)、3.85-4.3(m)、4.68(1H, dd, J=8.7Hz, 4.9Hz)、5.13(2H, s)、7.34(5H, s)。
【００６４】
参考例４
化合物５  １８５ｍｇをｔ−ブタノール−水（９：１）３ｍｌに溶かし５％パラジウム炭素４０ｍｇを加え、水素気流下５時間撹拌する。触媒を濾去洗浄し、濾洗液を減圧乾固して、目的の化合物６を無色油状物として得た。１５５ｍｇ（収率９７．１％）。
【００６５】
［α］D−83.3゜(c=0.365、MeOH)
実施例１
化合物６  ２３．４ｍｇ（４０マイクロモル）とフェネチルアミン１２．１ｍｇ（１００マイクロモル）とをＤＭＦ０．５ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下ＤＥＰＣ９．６ｍｇ（５９マイクロモル）とトリエチルアミン８μｌとを加えそのまま一夜撹拌を続ける。反応液をジクロルメタンでうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥し、溶媒を留去して残渣２３．０ｍｇを得る。これをセファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィ（溶出液：ヘキサン−メタノール−ジクロルメタン（４：５：１５））で精製して、目的の化合物７−Ａ（化合物７においてＢがフェニル基である化合物）を無色ワックス状物として得た。１８．８ｍｇ（収率６８．６％）。
【００６６】
［α］25D−61.0゜(c=0.39、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.21(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.38(3H, s)、2.83(2H, t, J=7.0Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H,s)、3.36(3H, s)、3.2-3.6(m)、3.84(1H, dd, J=7.9Hz, 2.2Hz)、3.9-4.2(m)、4.71(1H, dd, J=9.2Hz, 7.0Hz)、6.3-6.6(1H, m)、7.23(5H, s)、7.7-8.1(1H, m)。
【００６７】
実施例１と同様にして化合物６とフェネチルアミン誘導体とを反応させて実施例２〜４の化合物を得た。
【００６８】
実施例２
化合物７−Ｂ（化合物７においてＢが２−フルオロフェニル基である化合物）
ワックス状物（収率７３．０％）
［α］28D−61.7゜(c=0.326、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.21(3H, d, J=7.1Hz)、1.5-2.3(m)、2.33(3H, s)、2.3-2.6(m)、2.88(2H, t, J=7.3Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H, s)、3.37(3H, s)、3.2-3.7(m)、3.84(1H, dd,J=8.0Hz, 2.5Hz)、3.9-4.2(br)、4.5-4.9(1H, m)、6.4-6.6(1H, m)、6.8-7.3(4H, m)、7.6-8.1(1H, m)。
【００６９】
実施例３
化合物７−Ｃ（化合物７においてＢが３−フルオロフェニル基である化合物）
無定形粉末（収率７０．９％）
［α］28D−56.4゜(c=0.287、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.22(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H, s)、2.3-2.7(m)、2.84(2H, t, J=6.8Hz)、3.02(3H, s)、3.32(3H, s)、3.36(3H, s)、3.3-3.6(m)、3.83(1H, dd, J=8.4Hz, 2.2Hz)、3.9-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.5-6.7(1H,m)、6.8-7.2(4H, m)、7.7-8.1(1H, m)。
【００７０】
実施例４
化合物７−Ｄ（化合物７においてＢが４−フルオロフェニル基である化合物）
無定形粉末（収率７２．７％）
［α］28D−55.9゜(c=0.285、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.22(3H, d, J=7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H, br. s)、2.80(2H, t, J=7.0Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H, s)、3.36(3H, s)、3.2-3.6(m)、3.75-3.95(1H, m)、3.95-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.4-6.6(1H, m)、6.8-7.2(4H, m)。
【００７１】
実施例５
化合物３  １４．８ｍｇ（３２マイクロモル）に氷冷下５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタン０．４ｍｌを加え、室温にて４時間撹拌したのち窒素ガスをフラッシュして乾固する。一方、化合物８−Ａ（化合物８においてＹが水素原子である化合物）１４．３ｍｇ（３０マイクロモル）を同様に５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタン０．４ｍｌで処理しついで乾固する。両方を合わせてＤＭＦ１ｍｌに溶かし、氷冷下トリエチルアミン８５μｌを加えたのち減圧乾固する。これを再びＤＭＦ０．４ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下ＤＥＰＣ６．７ｍｇ（４１マイクロモル）とトリエチルアミン１０μｌ（７２マイクロモル）とを加え、そのまま一夜撹拌を続ける。
【００７２】
反応液を減圧乾固し、残渣をジクロルメタンに溶かし、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥する。溶媒を留去して得た残渣を分取ＴＬＣ（展開溶媒：ジクロルメタン−メタノール（１０：１））で精製して、目的の化合物９−Ａ（化合物９においてＹが水素原子である化合物）を白色粉末として得た。１４．５ｍｇ（収率６２．０％）。
【００７３】
［α］25D−92.4゜(c=0.218、MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.2(m)、1.22(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.0(m)、2.35(3H, s)、3.01(3H, s)、3.33(3H, s)、3.36(3H, s)、3.89(1H, dd, J=7.0Hz, 2.2Hz)、4.0-4.3(1H, m)、4.66(1H, dd, J=7.9Hz, 6.6Hz)、5.5-5.7(1H, m)、7.21(5H, s)、7.73(1H, d, J=3.3Hz)。
【００７４】
実施例６
実施例５と同様にして化合物３と化合物８−Ｂ（化合物８においてＹがメトキシカルボニル基である化合物）とを反応させて、化合物９−Ｂ（化合物９においてＹがメトキシカルボニル基である化合物）を無定形固体として得た（収率７８．２％）。
【００７５】
［α］D  n.d.
1H-NMR(CDCl3,δ)  0.7-1.1(m)、1.11(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.1(m)、2.35(3H, s)、3.02(3H, s)、3.32(3H, s)、3.33(3H, s)、3.95(3H, s)、3.8-4.3(m)、4.70(1H, dd, J=7.5Hz, 6.8Hz)、5.4-5.8(1H, m)、7.23(5H, s)、8.05(1H, s)。
【００７６】
実施例７
化合物９−Ｂ  ３８．７ｍｇ（４７マイクロモル）に氷冷下７０％エチルアミン水溶液を加え、溶解したら室温に一夜放置し、ついで減圧、乾固する。残渣を分取ＴＬＣ（展開溶媒：ジクロルメタン−メタノール（１０：１））、ついでヘキサン−メタノール−ジクロルメタン（４：５：１５）を溶出液とするセファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィで精製し、目的の化合物９−Ｃ（化合物９においてＹがＮ−エチルカルバモイル基である化合物）を無定形固体として得た。３４．８ｍｇ（収率８８．５％）。
【００７７】
［α］28D−81.4゜(C=0.309, MeOH)
1H-NMR(CDCl3,δ) 0.7-1.1(m)、1.11(3H, d, J=7.3Hz)、1.26(3H, t, J=7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.36(3H, s)、3.02(3H, s)、3.33(6H, s)、3.2-3.7(m)、3.8-4.0(1H, br. dd)、4.0-4.3(m)、4.69(1H, dd, J=8.8Hz, 6.8Hz)、5.3-5.7(1H, m)、7.24(5H, s)、7.95(1H, s)。