(57)【要約】  本発明の課題は、マイクロニードルアレイの針先端に薬物を集中できるマイクロニードルアレイの製造方法を提供することである。本発明によれば、疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する工程と、形成された針部先端部を含む上記モールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する工程を含む、マイクロニードルアレイの製造方法であって、上記薬物含有液が０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含有する方法が提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する工程と、形成された針部先端部を含む前記モールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する工程を含む、マイクロニードルアレイの製造方法であって、前記薬物含有液が０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含有する方法。
【請求項２】
界面活性剤がノニオン性界面活性剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
針部先端部を含む領域であって、針部全体の高さの２／３または５７５／８００の長さに相当する高さを有する針部先端領域における薬物の質量が、モールドに充填した薬物の全質量の８０％以上である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記薬物がペプチドまたはワクチンを含む、請求項１から３の何れか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記モールドが、ケイ素原子または炭素原子を含む、請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マイクロニードルアレイの製造方法、特に薬物を含有する自己溶解型マイクロニードルアレイの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
適量の薬物を投与し、かつ十分な薬効を達成するための薬物の投与方法として、薬物を含有する高アスペクト比のマイクロニードル（針部）が形成されたマイクロニードルアレイを用いて、マイクロニードルによって角質バリア層を貫通して、苦痛を伴わずに薬物を皮膚内に注入する方法が注目されている。例えば、生体内溶解性を有する物質を基材とした自己溶解型マイクロニードルアレイが報告されている。自己溶解型マイクロニードルアレイにおいては、その基材に薬物を保持させておき、マイクロニードルが皮膚に挿入された際に基材が自己溶解することにより、薬物を皮内に投与することができる。【０００３】
特許文献１には、支持体上に、第１の経皮吸収材料を含有する下層と、薬剤と第２の経皮吸収材料を含有し下層よりも低粘度の上層とを形成して、粘度差を持った複数層膜を形成する積層工程と、針状凸部が反転した針状凹部が２次元配列で配列されたモールドを、支持体に支持された複数層膜の表面に押し付けて複数層膜を流動させることにより、針条凹部に経皮吸収材料の溶液を充填する充填工程と、モールドを複数層膜の表面に押し付けたままの状態で複数層膜を固化する固化工程と、固化した複数層膜をモールドから剥離する剥離工程と、を含む経皮吸収シートの製造方法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２０１４/０７７２４４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
薬物を含有する自己溶解型マイクロニードルアレイを製造するためには、薬物をマイクロニードルアレイに混入させる必要があるが、薬物は高価なものが多いことから、針先端部に薬物を集中させることが必要になる。針部先端部に薬物を集中させるための方法として、特許文献１に記載されているように、疎水性材料を含むモールドに多段階の充填を行う方法が知られている。一方、薬物の多くは疎水性材料の表面に吸着しやすいことから、針部先端部に薬物を集中させることが妨げられることがある。【０００６】
本発明は、マイクロニードルアレイの針部先端部に薬物を集中できるマイクロニードルアレイの製造方法を提供することを解決すべき課題とした。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する工程と、形成された針部先端部を含む上記モールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する工程を含む、マイクロニードルアレイの製造方法において、上記薬物含有液に０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含有させることによって、マイクロニードルアレイの針部先端部に薬物を集中できるマイクロニードルアレイを製造できることを見出した。本発明は、これらの知見に基づいて完成したものである。【０００８】
即ち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
（１）  疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する工程と、形成された針部先端部を含む上記モールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する工程を含む、マイクロニードルアレイの製造方法であって、上記薬物含有液が０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含有する方法。
（２）  界面活性剤がノニオン性界面活性剤である、（１）に記載の方法。
（３）  針部先端部を含む領域であって、針部全体の高さの２／３または５７５／８００の長さに相当する高さを有する針部先端領域における薬物の質量が、モールドに充填した薬物の全質量の８０％以上である、（１）または（２）に記載の方法。
（４）  上記薬物がペプチドまたはワクチンを含む、（１）から（３）の何れか一に記載の方法。
（５）  上記モールドが、ケイ素原子または炭素原子を含む、（１）から（４）の何れか一に記載の方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、マイクロニードルアレイの針部先端部に薬物を集中できるマイクロニードルアレイを製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１Ａは、円錐状のマイクロニードルの斜視図であり、図１Ｂは、角錐状のマイクロニードルの斜視図であり、図１Ｃは、円錐状及び角錐状のマイクロニードルの断面図である。
【図２】図２は、別の形状のマイクロニードルの斜視図である。
【図３】図３は、別の形状のマイクロニードルの斜視図である。
【図４】図４は、図２、図３に示すマイクロニードルの断面図である。
【図５】図５は、別の形状のマイクロニードルの斜視図である。
【図６】図６は、別の形状のマイクロニードルの斜視図である。
【図７】図７は、図５、図６に示すマイクロニードルの断面図である。
【図８】図８は、針部側面の傾き（角度）が連続的に変化した別の形状のマイクロニードルの断面図である。
【図９】図９Ａ〜Ｃは、モールドの製造方法の工程図である。
【図１０】図１０は、モールドの拡大図である。
【図１１】図１１は、別の形態のモールドを示す断面図である。
【図１２】図１２Ａ〜Ｃは、薬物含有液をモールドに充填する工程を示す概略図である。
【図１３】図１３は、ノズルの先端を示す斜視図である。
【図１４】図１４は、充填中のノズルの先端とモールドとの部分拡大図である。
【図１５】図１５は、移動中のノズルの先端とモールドとの部分拡大図である。
【図１６】図１６Ａ〜Ｄは、別のマイクロニードルアレイの形成工程を示す説明図である。
【図１７】図１７Ａ〜Ｃは、別のマイクロニードルアレイの形成工程を示す説明図である。
【図１８】図１８は、剥離工程を示す説明図である。
【図１９】図１９は、別の剥離工程を示す説明図である。
【図２０】図２０は、マイクロニードルアレイを示す説明図である。
【図２１】図２１の（Ａ）及び（Ｂ）は、原版の平面図及び側面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
本明細書において、「薬物を含む」とは、体表に穿刺する際に、薬効が発揮される量の薬物を含むことを意味する。「薬物を含まない」とは、薬効が発揮される量の薬物を含んでいないことを意味し、薬物の量の範囲が、薬物を全く含まない場合から、薬効が発揮されない量までの範囲を含む。
【００１２】
[マイクロニードルアレイの構成]
本発明の方法で製造されるマイクロニードルアレイは、シート部と、シート部の上面に存在する複数の針部とを有するマイクロニードルアレイである。
【００１３】
本発明において複数とは、１つ以上のことを意味する。
マイクロニードルアレイは、薬物を効率的に皮膚中に投与するために、シート部及び針部を少なくとも含み、針部に薬物を担持させている。
【００１４】
マイクロニードルアレイとは、シート部の上面側に、複数の針部がアレイ状に配置されているデバイスである。針部は、シート部の上面側に配置されていることが好ましい。針部は、シート部の上面に直接配置されていてもよいし、あるいは針部は、シート部の上面に配置された錐台部の上面に配置されていてもよい。
【００１５】
好ましくは、針部は、シート部の上面に配置された錐台部の上面に配置されているが、この場合、本発明のマイクロニードルアレイは、シート部と複数の針部との間に複数の錐台部とを有するものとなる。この態様においては、針部先端部が、水溶性高分子および二糖類のうちの少なくとも一種、薬物、および界面活性剤を含み、針部基部、錐台部及びシート部が、水溶性高分子および二糖類のうちの少なくとも一種を含むことが好ましい。針部およびシート部に含まれる水溶性高分子は同一でも異なるものでもよい。水溶性高分子については後述する。
【００１６】
シート部は、針部を支持するための土台であり、図１〜図８に示すシート部１１６のような平面状の形状を有する。このとき、シート部の上面とは、面上に複数の針部がアレイ状に配置された面を指す。
シート部の面積は、特に限定されないが、０．００５〜１０００ｍｍ2であることが好ましく、０．０５〜５００ｍｍ2であることがより好ましく、０．１〜４００ｍｍ2であることがさらに好ましい。
【００１７】
シート部の厚さは、錐台部又は針部と接している面と、反対側の面の間の距離で表す。シート部の厚さとしては、１μｍ以上２０００μｍ以下であることが好ましく、３μｍ以上１５００μｍ以下であることがより好ましく、５μｍ以上１０００μｍ以下であることがさらに好ましい。
シート部は、水溶性高分子および二糖類のうちの少なくとも一種を含む。シート部には、それ以外の添加物を含んでいてもよい。なお、シート部には薬物を含まないことが好ましい。
【００１８】
シート部に含まれる水溶性高分子としては、特に限定されないが、多糖類、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、タンパク質（例えば、ゼラチンなど）を挙げることができる。上記の多糖類としては、例えば、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、プルラン、デキストラン、デキストリン、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン硫酸ナトリウム、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの、セルロースを部分的に変性した水溶性セルロース誘導体）、ヒドロキシエチルスターチ、アラビアゴム等が挙げられる。上記の成分は、１種単独で用いてもよいし、２種以上の混合物として用いてもよい。
【００１９】
上記の中でも、シート部に含まれる水溶性高分子は、ヒドロキシエチルスターチ、デキストラン、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリエチレングリコール及びポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、コンドロイチン硫酸が特に好ましい。
【００２０】
シート部に含まれる水溶性高分子の重量平均分子量は５，０００以上２００，０００以下であることが好ましく、１０,０００以上１５０，０００以下であることがより好ましく、３０,０００以上１２０，０００以下であることがさらに好ましい。
【００２１】
シート部には、二糖類を添加してもよく、二糖類としては、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース又はセロビオースなどが挙げられ、特にスクロース、マルトース、トレハロースが好ましい。
【００２２】
マイクロニードルアレイは、シート部の上面側に、アレイ状に配置された複数の針部から構成される。針部は、先端を有する凸状構造物であって、鋭い先端を有する針形状に限定されるものではなく、先の尖っていない形状でもよい。
針部の形状の例としては、円錐状、多角錐状（四角錐状など）、又は紡錘状などが挙げられる。例えば、図１〜図８に示す針部１１２のような形状を有し、針部の全体の形状が、円錐状又は多角錐状（四角錐状など）であってもよいし、針部側面の傾き（角度）を連続的に変化させた構造であってもよい。また、針部側面の傾き（角度）が非連続的に変化する、二層又はそれ以上の多層構造をとることもできる。
本発明のマイクロニードルアレイを皮膚に適用した場合、針部が皮膚に挿入され、シート部の上面又はその一部が皮膚に接するようになることが好ましい。
【００２３】
針部の高さ（長さ）は、針部の先端から、錐台部又はシート部（錐台部が存在しない場合）へ下ろした垂線の長さで表す。針部の高さ（長さ）は特に限定されないが、好ましくは５０μｍ以上３０００μｍ以下であり、より好ましくは１００μｍ以上１５００μｍ以下であり、さらに好ましくは１００μｍ以上１０００μｍ以下である。針部の長さが５０μｍ以上であれば、薬物の経皮投与を行うことができ、また針部の長さが３０００μｍ以下とすることで、針部が神経に接触することによる痛みの発生を防止し、また出血を回避できるため、好ましい。
【００２４】
錐台部（ただし、錐台部が存在しない場合には針部）とシート部の界面を基底部と呼ぶ。１つの針部の基底における最も遠い点間の距離が、５０μｍ以上２０００μｍ以下であることが好ましく、１００μｍ以上１５００μｍ以下であることがより好ましく、２００μｍ以上１０００μｍ以下であることがさらに好ましい。
【００２５】
針部は、１つのマイクロニードルアレイあたり１〜２０００本配置されることが好ましく、３〜１０００本配置されることがより好ましく、５〜５００本配置されることがさらに好ましい。１つのマイクロニードルアレイあたり２本の針部を含む場合、針部の間隔は、針部の先端から錐台部又はシート部（錐台部が存在しない場合）へ下ろした垂線の足の間の距離で表す。１つのマイクロニードルあたり３本以上の針部を含む場合、配列される針部の間隔は、全ての針部においてそれぞれ最も近接した針部に対して先端から錐台部又はシート部（錐台部が存在しない場合）へ下ろした垂線の足の間の距離を求め、その平均値で表す。針部の間隔は、０．１ｍｍ以上１０ｍｍ以下であることが好ましく、０．２ｍｍ以上５ｍｍ以下であることがより好ましく、０．３ｍｍ以上３ｍｍ以下であることがさらに好ましい。
【００２６】
針部は、水溶性高分子および二糖類のうちの少なくとも一種、薬物、および界面活性剤を含む。
針部が皮膚内に残留しても人体に支障が生じないように、水溶性高分子は生体溶解性物質であることが好ましい。
【００２７】
針部に含まれる水溶性高分子としては、特に限定されないが、多糖類、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、タンパク質（例えば、ゼラチンなど）を挙げることができる。上記の多糖類としては、例えば、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、プルラン、デキストラン、デキストリン、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン硫酸ナトリウム、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの、セルロースを部分的に変性した水溶性セルロース誘導体）、ヒドロキシエチルスターチ、アラビアゴム等が挙げられる。上記の成分は、１種単独で用いてもよいし、２種以上の混合物として用いてもよい。
【００２８】
上記の中でも、針部に含まれる水溶性高分子は、ヒドロキシエチルスターチ、デキストラン、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリエチレングリコール及びポリビニルアルコールからなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、ヒドロキシエチルスターチが特に好ましい。更に、薬物との混合時に凝集しにくくするため、電気的に中性である水溶性高分子がより好ましい。針部に含まれる水溶性高分子は、シート部に含まれる水溶性高分子と同一であってもよいし、異なっていてもよい。
【００２９】
針部に含まれる水溶性高分子の重量平均分子量は１，０００以上３００，０００以下であることが好ましく、３,０００以上２００，０００以下であることがより好ましく、５,０００以上１００，０００以下であることがさらに好ましい。
【００３０】
針部（特に、針部先端部）に含まれる二糖類としては、特に限定されないが、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース又はセロビオースなどが挙げられ、特にスクロース、マルトース、トレハロースが好ましい。
【００３１】
本発明においては、針部の全固形分の５０質量％以上が、水溶性高分子または二糖類である。好ましくは針部の全固形分の５５質量％以上、より好ましくは６０質量％以上、さらに好ましくは６５質量％以上が水溶性高分子または二糖類である。
上限は特に限定されないが、好ましくは、針部の全固形分の９９．９９質量％以下が水溶性高分子または二糖類であり、より好ましくは、針部の全固形分の９９．９質量％以下が水溶性高分子または二糖類であり、さらに好ましくは、針部の全固形分の９９質量％以下が水溶性高分子または二糖類である。
針部の全固形分の５０質量％以上を水溶性高分子または二糖類とすることによって、良好な穿刺性及び良好な薬効を達成することができる。
【００３２】
針部の全固形分における水溶性高分子または二糖類の比率は、以下の方法により測定することができるが、特に限定されない。測定方法としては、たとえば、作製したマイクロニードルアレイの針部を切断し、針部を緩衝液（リン酸緩衝生理食塩水（PBS）など、針部を構成する水溶性高分子を溶解するのに適した緩衝液）中に溶解させ、溶液中の水溶性高分子または二糖類の量を高速液体クロマトグラフィー法にて測定することができる。
【００３３】
針部は、薬物を含有する。
薬物とは、人体に対して作用を及ぼす効能を有する物質である。薬物は、ペプチド（ペプチドホルモンなどを含む）またはその誘導体、タンパク質、核酸、多糖類、ワクチン、アジュバント、水溶性低分子化合物に属する医薬化合物、又は化粧品成分から選択することが好ましい。薬物の分子量は特には限定されないが、タンパク質の場合には分子量５００以上のものが好ましい。
【００３４】
ペプチドまたはその誘導体及びタンパク質としては、例えば、カルシトニン、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、ヒトＰＴＨ（１→３４）、インスリン、エキセンディン、セクレチン、オキシトシン、アンギオテンシン、β−エンドルフィン、グルカゴン、バソプレッシン、ソマトスタチン、ガストリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、エンケファリン、ニューロテンシン、心房性ナトリウム利尿ペプチド、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、ブラジキニン、サブスタンスＰ、ダイノルフィン、甲状腺刺激ホルモン、プロラクチン、インターフェロン、インターロイキン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、グルタチオンパーオキシダーゼ、スーパーオキシドディスムターゼ、デスモプレシン、ソマトメジン、エンドセリン、及びこれらの塩等が挙げられる。
【００３５】
ワクチンとしては、インフルエンザ抗原（インフルエンザワクチン）、ＨＢｓ抗原（Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原）、ＨＢｅ抗原（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂｅ抗原）、ＢＣＧ（Ｂａｃｉｌｌｅ  ｄｅ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ  ｅｔ  Ｇｕeｒｉｎ）抗原、麻疹抗原、風疹抗原、水痘抗原、黄熱抗原、帯状疱疹抗原、ロタウイルス抗原、Ｈｉｂ（インフルエンザ桿菌ｂ型）抗原、狂犬病抗原、コレラ抗原、ジフテリア抗原、百日咳抗原、破傷風抗原、不活化ポリオ抗原、日本脳炎抗原、ヒトパピローマ抗原、あるいはこれらの２〜４種の混合抗原等が挙げられる。
【００３６】
アジュバントとしては、リン酸アルミニウム、塩化アルミニウム、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩、ＭＦ５９（商標）、ＡＳ０３（商品名）などのエマルジョン、あるいは、リポソーム、植物由来成分、核酸、バイオポリマー、サイトカイン、ペプチド、タンパク、糖鎖等が挙げられる。
【００３７】
上記の中でも、薬物としては、ペプチドホルモン、ワクチン及びアジュバントからなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、ペプチドホルモンまたはワクチンが特に好ましい。ペプチドホルモンとしては成長ホルモンが特に好ましい。ワクチンとしてはインフルエンザワクチンが特に好ましい。
【００３８】
針部全体における薬物の含有量は、特に限定されないが、針部の固形分質量に対して、好ましくは０．００１〜２０質量％であり、より好ましくは０．００３〜１０質量％であり、特に好ましくは０．００５〜５質量％である。
【００３９】
本発明においては、針部先端部を含む領域であって、針部全体の高さの２／３、５７５／８００または１／２の長さに相当する高さを有する針部先端領域における薬物の質量が、モールドに充填した薬物の全質量の８０％以上であることが好ましく、８５％以上であることがより好ましく、９０％以上であることがさらに好ましい。
【００４０】
針部先端領域における薬物の質量の比率は、以下の方法で測定することができるが、特に限定されない。
測定方法としては、たとえば、針部先端部を含む領域であって、針部全体の高さの２／３、５７５／８００または１／２の長さに相当する高さを有する針部先端領域を、シート部と並行に切断し、切断した針部先端領域を、緩衝液（Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシメチルアミノメタン）緩衝液など、針部を構成する薬物を溶解するのに適した緩衝液）中に溶解させる。溶解液中の薬物量をＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ  ＩｍｍｕｎｏＳｏｒｂｅｎｔ  Ａｓｓａｙ）法などにより測定することができる。
【００４１】
針部は、界面活性剤を含む。
界面活性剤としては、ノニオン性界面活性剤（電気的に中性である界面活性剤）、カチオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、または両性界面活性剤のいずれでもよいが、好ましくはノニオン性界面活性剤（電気的に中性である界面活性剤）である。
【００４２】
ノニオン性界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル等の糖アルコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン/ポリオキシプロピレン共重合ポリマー、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、オクチルフェノールエトキシレート等が挙げられる。上記の中でも、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン/ポリオキシプロピレン共重合ポリマー、またはポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が特に好ましい。ノニオン性界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８、ＨＣＯ−６０、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）−Ｘなどの市販品を使用することもできる。
【００４３】
カチオン性界面活性剤としては、例えば、第４級アンモニウム化合物（塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウムおよび臭化セチルトリメチルアンモニウムなど）またはその他のトリメチルアルキルアンモニウム塩が挙げられる。
【００４４】
アニオン性界面活性剤としては、例えば、過フッ化カルボン酸および過フッ化スルホン酸の塩、アルキル硫酸塩（ドデシル硫酸ナトリウムおよびラウリル硫酸アンモニウムなど）、硫酸エーテル（ラウリルエーテル硫酸ナトリウムなど）、およびアルキルベンゼンスルホン酸塩が挙げられる。
【００４５】
両性界面活性剤としては、例えば、ドデシルベタイン、ココアンホグリシネート、およびコカミドプロピルベタインが挙げられる。
【００４６】
界面活性剤の添加量は、特に限定されないが、マイクロニードルアレイ１枚（面積は１ｃｍ2）あたり０．０１μｇ以上であることが好ましく、０．０５μｇ以上であることがより好ましい。
【００４７】
以下、添付の図面に従って、本発明の好ましい実施の形態について説明するが、本発明はこれに限定されない。
【００４８】
図１〜図８は、マイクロニードルアレイの一部拡大図であるマイクロニードル１１０を示している。本発明のマイクロニードルアレイは、シート部１１６の表面に複数個の針部１１２が形成されることで、構成される（図においては、シート部１１６上に１つの針部１１２のみ、あるいは１つの錐台部１１３と１つの針部１１２を表示し、これをマイクロニードル１１０と称する）。
【００４９】
図１Ａにおいて、針部１１２は円錐状の形状を有し、図１Ｂにおいて、針部１１２は四角錐状の形状を有している。図１Ｃにおいて、Ｈは針部１１２の高さを、Ｗは針部１１２の直径（幅）を、Ｔはシート部１１６の高さ（厚み）を示す。
【００５０】
図２及び図３は、シート部１１６の表面に、錐台部１１３及び針部１１２が形成された別の形状を有するマイクロニードル１１０を示している。図２において、錐台部１１３は、円錐台の形状を有し、針部１１２は円錐の形状を有している。また、図３において、錐台部１１３は、四角錐台の形状を有し、針部１１２は四角錐の形状を有している。ただし、針部の形状は、これらの形状に限定されるものではない。
【００５１】
図４は、図２及び図３に示されるマイクロニードル１１０の断面図である。図４において、Ｈは針部１１２の高さを、Ｗは基底部の直径（幅）を、Ｔはシート部１１６の高さ（厚み）を示す。
【００５２】
本発明のマイクロニードルアレイは、図１Ｃのマイクロニードル１１０の形状より、図４のマイクロニードル１１０の形状とすることが好ましい。このような構造をとることで、針部全体の体積が大きくなり、マイクロニードルアレイの製造時において、より多くの薬物を針部の上端に集中させることができる。
【００５３】
図５及び図６は、さらに別の形状を有するマイクロニードル１１０を示している。
【００５４】
図５に示される針部第１層１１２Ａは円錐状の形状を有し、針部第２層１１２Ｂは円柱状の形状を有している。図６に示される針部第１層１１２Ａは四角錐状の形状を有し、針部第２層１１２Ｂは四角柱状の形状を有している。ただし、針部の形状は、これらの形状に限定されるものではない。
【００５５】
図７は、図５及び図６に示されるマイクロニードル１１０の断面図である。図７において、Ｈは針部１１２の高さを、Ｗは基底部の直径（幅）を、Ｔはシート部１１６の高さ（厚み）を示す。
【００５６】
図８は、針部１１２の側面の傾き（角度）が連続的に変化した別の形状のマイクロニードルの断面図である。図８において、Ｈは針部１１２の高さを、Ｔはシート部１１６の高さ（厚み）を示す。
【００５７】
マイクロニードルアレイにおいて、針部は、横列について１ｍｍ当たり約０．１〜１０本の間隔で配置されていることが好ましい。マイクロニードルアレイは、１ｃｍ2当たり１〜１００００本のマイクロニードルを有することがより好ましい。マイクロニードルの密度を１本／ｃｍ2以上とすることにより効率良く皮膚を穿孔することができ、またマイクロニードルの密度を１００００本／ｃｍ2以下とすることにより、マイクロニードルアレイが十分に穿刺することが可能になる。針部の密度は、好ましくは１０〜５０００本／ｃｍ2であり、さらに好ましくは２５〜１０００本／ｃｍ2であり、特に好ましくは２５〜４００本／ｃｍ2である。
【００５８】
マイクロニードルアレイは、乾燥剤と一緒に密閉保存されている形態で供給することができる。乾燥剤としては、公知の乾燥剤（例えば、シリカゲル、生石灰、塩化カルシウム、シリカアルミナ、シート状乾燥剤など）を使用することができる。
【００５９】
[マイクロニードルアレイの製造方法]
本発明は、疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する工程と、形成された針部先端部を含む上記モールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する工程を含む、マイクロニードルアレイの製造方法であって、上記薬物含有液が０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含有する方法に関する。
本発明においては、例えば、特開２０１３−１５３８６６号公報又は国際公開ＷＯ２０１４／０７７２４２号公報に記載の方法に準じて以下の方法によりマイクロニードルアレイを製造することができる。
【００６０】
（モールドの作製）
本発明において使用するモールドは、疎水性モールドである。好ましくは、モールドはケイ素原子または炭素原子を含むモールドである。
図９Ａから９Ｃは、モールド（型）の作製の工程図である。図９Ａに示すように、モールドを作製するための原版を先ず作製する。この原版１１の作製方法は２種類ある。
【００６１】
１番目の方法は、Ｓｉ基板上にフォトレジストを塗布した後、露光、現像を行う。そして、ＲＩＥ（リアクティブイオンエッチング）等によるエッチングを行うことにより、原版１１の表面に円錐の形状部（凸部）１２のアレイを作製する。尚、原版１１の表面に円錐の形状部を形成するようにＲＩＥ等のエッチングを行う際には、Ｓｉ基板を回転させながら斜め方向からのエッチングを行うことにより、円錐の形状を形成することが可能である。２番目の方法は、Ｎｉ等の金属基板に、ダイヤモンドバイト等の切削工具を用いた加工により、原版１１の表面に四角錘などの形状部１２のアレイを形成する方法がある。
【００６２】
次に、モールドの作製を行う。具体的には、図９Ｂに示すように、原版１１よりモールド１３を作製する。方法としては以下の４つの方法が考えられる。
１番目の方法は、原版１１にＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン、例えば、ダウコーニング社製のシルガード１８４（登録商標））に硬化剤を添加したシリコーン樹脂を流し込み、１００℃で加熱処理し硬化した後に、原版１１より剥離する方法である。２番目の方法は、紫外線を照射することにより硬化するＵＶ(Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ)硬化樹脂を原版１１に流し込み、窒素雰囲気中で紫外線を照射した後に、原版１１より剥離する方法である。３番目の方法は、ポリスチレンやＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）等のプラスチック樹脂を有機溶剤に溶解させた溶液を剥離剤の塗布された原版１１に流し込み、乾燥させることにより有機溶剤を揮発させて硬化させた後に、原版１１より剥離する方法である。４番目の方法は、Ｎｉ電鋳により反転品を作成する方法である。
【００６３】
これにより、原版１１の円錐形又は角錐形の反転形状である針状凹部１５が２次元配列で配列されたモールド１３が作製される。このようにして作製されたモールド１３を図９Ｃに示す。
【００６４】
図１０は他の好ましいモールド１３の態様を示したものである。針状凹部１５は、モールド１３の表面から深さ方向に狭くなるテーパ状の入口部１５Ａと、深さ方向に先細りの先端凹部１５Ｂとを備えている。入口部１５Ａをテーパ形状とすることで、溶液を針状凹部１５に充填しやすくなる。
【００６５】
図１１は、マイクロニードルアレイの製造を行う上で、より好ましいモールド複合体１８の態様を示したものである。図１１中、（Ａ）部はモールド複合体１８を示す。図１１中、（Ｂ）部は、（Ａ）部のうち、円で囲まれた部分の拡大図である。
【００６６】
図１１の（Ａ）部に示すように、モールド複合体１８は、針状凹部１５の先端（底）に空気抜き孔１５Ｃが形成されたモールド１３、及び、モールド１３の裏面に貼り合わされ、気体は透過するが液体は透過しない材料で形成された気体透過シート１９と、を備える。空気抜き孔１５Ｃは、モールド１３の裏面を貫通する貫通孔として形成される。ここで、モールド１３の裏面とは、空気抜き孔１５Ｃが形成された側の面を言う。これにより、針状凹部１５の先端は空気抜き孔１５Ｃ、及び気体透過シート１９を介して大気と連通する。
このようなモールド複合体１８を使用することで、針状凹部１５に充填される溶液は透過せず、針状凹部１５に存在する空気のみを針状凹部１５から追い出すことができる。これにより、針状凹部１５の形状を高分子に転写する転写性が良くなり、よりシャープな針部を形成することができる。
【００６７】
空気抜き孔１５Ｃの径Ｄ（直径）としては、１〜５０μｍの範囲が好ましい。空気抜き孔１５Ｃの径Ｄが１μｍ未満の場合、空気抜き孔としての役目を十分に果たせない。また、空気抜き孔１５Ｃの径Ｄが５０μｍを超える場合、成形されたマイクロニードルの先端部のシャープ性が損なわれる。
【００６８】
気体は透過するが液体は透過しない材料で形成された気体透過シート１９としては、例えば気体透過性フィルム（住友電気工業社製、ポアフロン（登録商標）、ＦＰ−０１０）を好適に使用できる。
【００６９】
モールド１３に用いる材料としては、疎水性材料であればよく、例えば、弾性素材又は金属製素材を用いることができ、弾性素材が好ましく、気体透過性の高い素材が更に好ましい。気体透過性の代表である酸素透過性は、１×１０-12（ｍＬ／ｓ・ｍ2・Ｐａ）以上が好ましく、１×１０-10（ｍＬ／ｓ・ｍ2・Ｐａ）以上がさらに好ましい。なお、１ｍＬは、１０-6  ｍ3である。気体透過性を上記範囲とすることにより、モールド１３の凹部に存在する空気を型側から追い出すことができ、欠陥の少ないマイクロニードルアレイを製造することができる。このような材料として、具体的には、シリコーン樹脂（例えば、ダウコーニング社製のシルガード１８４（登録商標）、信越化学工業株式会社のＫＥ−１３１０ＳＴ（品番））、紫外線硬化樹脂、プラスチック樹脂（例えば、ポリスチレン、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート））を溶融、又は溶剤に溶解させたものなどを挙げることができる。これらの中でもシリコーンゴム系の素材は、繰り返し加圧による転写に耐久性があり、かつ素材との剥離性がよいため好ましい。また、金属製素材としては、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｃｒ、Ｍｏ、Ｗ、Ｉｒ、Ｔｒ、Ｆｅ、Ｃｏ、ＭｇＯ、Ｔｉ、Ｚｒ、Ｈｆ、Ｖ、Ｎｂ、Ｔａ、α−酸化アルミニウム，酸化ジルコニウム、ステンレス（例えば、ボーラー・ウッデホルム社（Bohler-Uddeholm KK）のスタバックス材(STAVAX)（商標））などやその合金を挙げることができる。
【００７０】
（溶液）
本発明においては、
（ｉ）針部の一部である針部先端部を形成するための、薬物含有液（好ましくは、水溶性高分子および二糖類のうちの少なくとも一種、薬物、および界面活性剤を含む液）、並びに、
（ｉｉ）針部のうちの針部基部およびシート部（又は針部基部と、錐台部と、シート部）を形成するための、水溶性高分子または二糖類を含有する液、
を準備することが好ましい。
【００７１】
水溶性高分子、二糖類、薬物および界面活性剤の種類は、本明細書で上記した通りである。
薬物含有液における界面活性剤の含有量は、０．０１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬであり、好ましくは、０．０５ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬである。界面活性剤の含有量を０．０１ｍｇ／ｍＬ以上にすることにより、薬物を針部先端部に集中することができる。また、界面活性剤の含有量を５ｍｇ／ｍＬ以下にすることにより、針故障の発生を抑制することができる。
【００７２】
上記溶液中の、水溶性高分子または二糖類の濃度は、使用する物質の種類によっても異なるが、一般的には１〜５０質量％であることが好ましい。また、溶解に用いる溶媒は、水以外であっても揮発性を有するものであればよく、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）、アルコールなどを用いることができる。
【００７３】
（針部先端部の形成）
本発明においては、疎水性モールドに薬物含有液を充填して、針部先端部を形成する。
図１２Ａに示すように、２次元配列された針状凹部１５を有するモールド１３が、基台２０の上に配置される。モールド１３には、５×５の２次元配列された、２組の複数の針状凹部１５が形成されている。薬物含有液２２を収容するタンク３０、タンクに接続される配管３２、及び、配管３２の先端に接続されたノズル３４、を有する液供給装置３６が準備される。なお、本例では、針状凹部１５が５×５で２次元配列されている場合を例示しているが、針状凹部１５の個数は５×５に限定されるものではなく、Ｍ×Ｎ（Ｍ及びＮはそれぞれ独立に１以上の任意の整数を示し、好ましくは２〜３０、より好ましくは３〜２５、さらに好ましくは３〜２０である）で２次元配列されていればよい。
【００７４】
図１３はノズルの先端部の概略斜視図を示している。図１３に示すように、ノズル３４の先端には平坦面であるリップ部３４Ａ及びスリット形状の開口部３４Ｂを備えている。スリット形状の開口部３４Ｂにより、例えば、１列を構成する複数の針状凹部１５に同時に、薬物含有液２２を充填することが可能となる。開口部３４Ｂの大きさ（長さと幅）は、一度に充填すべき針状凹部１５の数に応じて適宜選択される。開口部３４Ｂの長さを長くすることで、より多くの針状凹部１５に一度に薬物含有液２２を充填することができる。これにより、生産性を向上させることが可能となる。
【００７５】
ノズル３４に用いる材料としては、弾性素材又は金属製素材を用いることができる。例えば、テフロン（登録商標）、ステンレス鋼（ＳＵＳ(Steel Use Stainless)）、チタン等が挙げられる。
【００７６】
図１２Ｂに示すように、ノズル３４の開口部３４Ｂが針状凹部１５の上に位置調整される。ノズル３４のリップ部３４Ａとモールド１３の表面とは接触している。液供給装置３６から薬物含有液２２がモールド１３に供給され、ノズル３４の開口部３４Ｂから薬物含有液２２が針状凹部１５に充填される。本実施形態では、１列を構成する複数の針状凹部１５に薬物含有液２２が同時に充填される。ただし、これに限定されず、針状凹部１５に一つずつ充填するようにすることもできる。
【００７７】
モールド１３が気体透過性を有する素材で構成される場合、モールド１３の裏面から吸引することで薬物含有液２２を吸引でき、針状凹部１５内への薬物含有液２２の充填を促進させることができる。
【００７８】
図１２Ｂを参照して充填工程に次いで、図１２Ｃに示すように、ノズル３４のリップ部３４Ａとモールド１３の表面とを接触させながら、開口部３４Ｂの長さ方向と垂直方向に液供給装置３６を相対的に移動し、ノズル３４を、薬物含有液２２が充填されていない針状凹部１５に移動する。ノズル３４の開口部３４Ｂが針状凹部１５の上に位置調整される。本実施の形態では、ノズル３４を移動させる例で説明したが、モールド１３を移動させてもよい。
【００７９】
ノズル３４のリップ部３４Ａとモールド１３の表面とを接触させて移動しているので、ノズル３４がモールド１３の針状凹部１５以外の表面に残る薬物含有液２２を掻き取ることができる。薬物含有液２２をモールド１３の針状凹部１５以外に残らないようにすることができる。
【００８０】
モールド１３へのダメージを減らすことと、モールド１３の圧縮による変形をできるだけ抑制するため、移動する際のノズル３４のモールド１３への押付け圧はできる限り小さい方が好ましい。また、薬物含有液２２がモールド１３の針状凹部１５以外に残らないようにするため、モールド１３もしくはノズル３４の少なくとも一方がフレキシブルな弾性変形する素材であることが望ましい。
【００８１】
図１２Ｂの充填工程と、図１２Ｃの移動工程とを繰り返すことで、５×５の２次元配列された針状凹部１５に薬物含有液２２が充填される。５×５の２次元配列された針状凹部１５に薬物含有液２２が充填されると、隣接する５×５の２次元配列された針状凹部１５に液供給装置３６を移動し、図１２Ｂの充填工程と、図１２Ｃの移動工程とを繰り返す。隣接する５×５の２次元配列された針状凹部１５にも薬物含有液２２が充填される。
【００８２】
上述の充填工程と移動工程について、（１）ノズル３４を移動しながら薬物含有液２２を針状凹部１５に充填する態様でもよいし、（２）ノズル３４の移動中に針状凹部１５の上でノズル３４を一旦静止して薬物含有液２２を充填し、充填後にノズル３４を再度移動させる態様でもよい。充填工程と移動工程との間、ノズル３４のリップ部３４Ａがモールド１３の表面に接触している。
【００８３】
図１４は、薬物含有液２２を針状凹部１５に充填中におけるノズル３４の先端とモールド１３との部分拡大図である。図１４に示すように、ノズル３４内に加圧力Ｐ１を加えることで、針状凹部１５内へ薬物含有液２２を充填するのを促進することができる。さらに、針状凹部１５内へ薬物含有液２２を充填する際、ノズル３４をモールド１３の表面に接触させる押付け力Ｐ２を、ノズル３４内の加圧力Ｐ１以上とすることが好ましい。押付け力Ｐ２≧加圧力Ｐ１とすることにより、薬物含有液２２が針状凹部１５からモールド１３の表面に漏れ出すのを抑制することができる。
【００８４】
図１５は、ノズル３４の移動中における、ノズル３４の先端とモールド１３との部分拡大図である。ノズル３４をモールド１３に対して相対的に移動する際、ノズル３４をモールド１３の表面に接触させる押付け力Ｐ３を、充填中のノズル３４をモールド１３の表面に接触させる押付け力Ｐ２より小さくすることが好ましい。モールド１３へのダメージを減らし、モールド１３の圧縮による変形を抑制するためである。
【００８５】
５×５で構成される複数の針状凹部１５への充填が完了すると、ノズル３４は、隣接する５×５で構成される複数の針状凹部１５へ移動される。液供給に関して、隣接する５×５で構成される複数の針状凹部１５へ移動する際、薬物含有液２２の供給を停止するのが好ましい。５列目の針状凹部１５から次の１列目の針状凹部１５までは距離がある。その間をノズル３４が移動する間、薬物含有液２２を供給し続けると、ノズル３４内の液圧が高くなりすぎる場合がある。その結果、ノズル３４から薬物含有液２２がモールド１３の針状凹部１５以外に流れ出る場合があり、これを抑制するため、ノズル３４内の液圧を検出し、液圧が高くなりすぎると判定した際には薬物含有液２２の供給を停止するのが好ましい。
【００８６】
なお、上記においてはノズルを有するディスペンサーを用いて薬物含有液を供給する方法を説明したが、ディスペンサーによる塗布に加えて、バー塗布、スピン塗布、スプレーなどによる塗布などを適用することもできる。
【００８７】
本発明においては、薬物含有液を針状凹部に供給した後、乾燥処理を実施することが好ましい。
好ましくは、マイクロニードルアレイは、薬物含有液を充填した針部形成用モールドを、乾燥することによって針部先端部を形成する工程；及び、水溶性高分子または二糖類を含有する液を、上記で形成された針部先端部の上面に充填して乾燥する工程によって製造することができる。
【００８８】
薬物含有液を充填した針部形成用モールドを乾燥する際の条件としては、乾燥開始後３０分から３００分間経過してから、上記溶液の含水率が２０％以下に到達する条件であることが好ましい。
特に好ましくは、上記の乾燥は、薬物が失効しない温度以下に保ち、かつ乾燥開始後６０分以上経過してから、溶液の含水率が２０％以下に到達するように制御することができる。
【００８９】
上記した乾燥速度の制御の方法としては、例えば、温度、湿度、乾燥風量、容器の使用、容器の容積及び／又は形状など、乾燥を遅らすことが可能な任意の手段を取ることができる。
【００９０】
乾燥は、好ましくは、薬物含有液を充填した針部形成用モールドを、容器を被せた状態又は容器に収容した状態で、行うことができる。
乾燥の際の温度は、好ましくは１〜４５℃であり、より好ましくは１〜４０℃である。
乾燥の際の相対湿度は、好ましくは１０〜９５％であり、より好ましくは２０〜９５％であり、さらに好ましくは３０〜９５％である。
【００９１】
（針部基部及びシート部の形成）
本発明においては、上記で形成された針部先端部を含むモールドに水溶性高分子または二糖類を含有する液を充填して針部基部及びシート部を形成する。
針部基部およびシート部を形成する工程について、いくつかの態様を説明する。
シート部を形成する工程について、第１の態様について図１６Ａから図１６Ｄを参照して説明する。モールド１３の針状凹部１５に薬物含有液２２をノズル３４から充填する。次いで、図１６Ｂに示すように、薬物含有液２２を乾燥固化させることで、針状凹部１５内に薬物を含む層１２０が形成される。次いで、図１６Ｃに示すように、薬物を含む層１２０が形成されたモールド１３に、水溶性高分子または二糖類を含む液２４をディスペンサーにより塗布する。ディスペンサーによる塗布に加えて、バー塗布、スピン塗布、スプレーなどによる塗布などを適用することができる。薬物を含む層１２０は固化されているので、薬物が、上記液２４に拡散するのを抑制することができる。次いで、図１６Ｄに示すように、上記液２４を乾燥固化させることで、複数の針部１１２、錐台部１１３及び、シート部１１６から構成されるマイクロニードルアレイ１が形成される。
【００９２】
第１の態様において、薬物含有液２２、及び水溶性高分子または二糖類を含む液２４の針状凹部１５内への充填を促進させるために、モールド１３の表面からの加圧、及び、モールド１３の裏面からの減圧吸引を行うことも好ましい。
【００９３】
次に、第２の態様について図１７Ａから１７Ｃを参照して説明する。図１７Ａに示すように、モールド１３の針状凹部１５に薬物含有液２２をノズル３４から充填する。次いで、図１６Ｂと同様に、薬物含有液２２を乾燥固化させることで、薬物を含む層１２０が針状凹部１５内に形成される。次に、図１７Ｂに示すように、別の支持体２９の上に、水溶性高分子または二糖類を含む液２４を塗布する。支持体２９は限定されるものではないが、例えば、ポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネート、ポリプロピレン、アクリル樹脂、トリアセチルセルロース、ガラス等を使用することができる。次に、図１７Ｃに示すように、針状凹部１５に薬物を含む層１２０が形成されたモールド１３に、支持体２９の上に形成された上記液２４を重ねる。これにより、上記液２４を針状凹部１５の内部に充填させる。薬物を含む層は固化されているので、薬物が、上記液２４に拡散するのを抑制することができる。次に、上記液２４を乾燥固化させることで、複数の針部１１２、錐台部１１３及びシート部１１６から構成されるマイクロニードルアレイが形成される。
【００９４】
第２の態様において、水溶性高分子または二糖類を含む液２４の針状凹部１５内への充填を促進させるために、モールド１３の表面からの加圧及びモールド１３の裏面からの減圧吸引を行うことも好ましい。
【００９５】
水溶性高分子または二糖類を含む液２４を乾燥させる方法として、溶液中の溶媒を揮発させる工程であればよい。その方法は特に限定するものではなく、例えば加熱、送風、減圧等の方法が用いられる。乾燥処理は、１〜５０℃で１〜７２時間の条件で行うことができる。送風の場合には、０．１〜１０ｍ／秒の温風を吹き付ける方法が挙げられる。乾燥温度は、薬物含有液２２内の薬物を熱劣化させない温度であることが好ましい。
【００９６】
（剥離）
マイクロニードルアレイをモールド１３から剥離する方法は特に限定されない。剥離の際に針部が曲がったり折れたりしないことが好ましい。具体的には、図１８に示すように、マイクロニードルアレイの上に、粘着性の粘着層が形成されているシート状の基材４０を付着させた後、端部から基材４０をめくるように剥離を行うことができる。ただし、この方法では針部が曲がる可能性がある。そのため、図１９に示すように、マイクロニードルアレイの上の基材４０に吸盤（図示せず）を設置し、エアーで吸引しながら垂直に引き上げる方法を適用することができる。なお、基材４０として支持体２９を使用してもよい。
【００９７】
図２０はモールド１３から剥離されたマイクロニードルアレイ２を示している。マイクロニードルアレイ２は、基材４０、基材４０の上に形成された針部１１２、錐台部１１３及びシート部１１６で構成される。針部１１２は、円錐形状又は多角錐形状を少なくとも先端に有しているが、針部１１２はこの形状に限定されるものではない。
【００９８】
本発明のマイクロニードルアレイの製造法としては、特に限定されないが、（１）モールドの製造工程、（２）水溶性高分子または二糖類のうちの少なくとも一種、薬物、および界面活性剤を含む液を調製する工程、（３）（２）で得た液をモールドに充填し、針部先端領域を形成する工程、（４）水溶性高分子または二糖類を含む液をモールドに充填し、針部の残部、（所望により錐台部）、及びシート部を形成する工程、（５）モールドから剥離する工程、を含む製造法によって得ることが好ましい。
【００９９】
以下に、本発明の実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する。なお、以下の実施例に示される材料、使用量、割合、処理内容、処理手順等は、本発明の趣旨を逸脱しない限り適宜変更することができる。したがって、本発明の範囲は以下に示す具体例により限定的に解釈されるべきものではない。
【実施例】
【０１００】
実施例における略号、商品名は以下を意味する。
ＨＥＳ：ヒドロキシエチルスターチ７００００（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｋａｂｉ株式会社）（重量平均分子量は７００００）
ＣＳ：コンドロイチン硫酸ナトリウム（マルハニチロ株式会社）（重量平均分子量は９００００）
スクロース：ショ糖（和光純薬株式会社）
Ｔｗ：Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（Ｓｅｐｐｉｃ株式会社）
ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム  （和光純薬株式会社）
Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ−６８（日本油脂株式会社）
Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）−Ｘ  （Alfa Aesar株式会社）【０１０１】
＜モールドの製造＞
一辺４０ｍｍの平滑なＮｉ板の表面に、図２１に示すような、底面が５００μｍの直径Ｄ１で、１５０μｍの高さＨ１の円錐台５０上に、３００μｍの直径Ｄ２で、５００μｍの高さＨ２の円錐５２が形成された針状構造の形状部１２を、１０００μｍのピッチＬ１０にて四角形状に１００本の針を２次元正方配列に研削加工することで、原版１１を作製した。この原版１１の上に、シリコンゴム（ダウ・コーニング社製SILASTIC MDX4-4210）の膜を０．６ｍｍの厚みで形成し、膜面から原版１１の円錐先端部５０μｍを突出させた状態で熱硬化させ、剥離した。これにより、約３０μｍの直径の貫通孔を有するシリコンゴムの反転品を作製した。このシリコンゴム反転品の、中央部に１０列×１０行の２次元配列された針状凹部が形成された、一辺３０ｍｍの平面部外を切り落としたものをモールドとして用いた。針状凹部の開口部が広い方をモールドの表面とし、３０μｍの直径の貫通孔（空気抜き孔）を有する面をモールドの裏面とした。【０１０２】
＜ヒト血清アルブミンを用いた実験＞
（針部先端部を形成するヒト血清アルブミンを含む水溶液の調製）
凍結乾燥されたヒト血清アルブミン(和光純薬株式会社)を注射用水に溶解した後、ヒドロキシエチルスターチ７００００（ＨＥＳ、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｋａｂｉ株式会社、重量平均分子量７００００）、スクロース(和光純薬株式会社)、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（Ｓｅｐｐｉｃ）（実施例の場合）と混合した。ヒト血清アルブミン、ＨＥＳ、スクロース、界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０）の量は表１に示す通りに調整した。【０１０３】
（針部基部およびシート部を形成する水溶性高分子溶解液の調製）
コンドロイチン硫酸ナトリウム（ＣＳ、マルハニチロ株式会社）を水に溶解して、ＣＳの３９質量％水溶液を調製した。【０１０４】
（ヒト血清アルブミンを含む水溶液のモールドへの充填）
上記で調製したヒト血清アルブミンを含む水溶液を、上記で製造したモールドに充填した。続けて、上記モールドを２３℃、相対湿度４５％の環境下でフタ(箱)内に収め、乾燥した。このとき、ヒト血清アルブミンを含む水溶液は、徐々に乾燥され、１８０分以上経過した後に、含水率が２０％以下となる。また乾燥の手段は、フタに限定されるものではなく、温湿度制御や風量制御などの他の手段を用いても良い。【０１０５】
（針部基部およびシート部の形成及び乾燥）
シート部を形成するための支持体としては、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）シート（１７５μｍ）をクラウドリムーバー（Ｖｉｃｔｏｒ  ｊｖｃ社）を用いて、以下条件（使用ガス：Ｏ2、ガス圧：１３Ｐａ、高周波（ＲＦ）電力：１００Ｗ、照射時間：３分、Ｏ2流量：ＳＶ２５０、目標真空度（ＣＣＧ）：２．０×１０-4Ｐａ）にて親水化プラズマ処理したものを用いる。処理を施したＰＥＴ上に、水溶性高分子溶解液を、表裏面を７５μｍの膜厚で塗布した。一方で、薬物を含む高分子溶解液を充填したモールドを吸引台に吸引固定した。水溶性高分子溶解液を塗布したＰＥＴの表面側を、モールド表面を向かい合わせに配置し、更にＰＥＴとモールド間の空隙、また、ＰＥＴのモールドと反対側の空間を２分間減圧した。減圧後、ＰＥＴのモールドと反対側の空間のみ大気圧開放することで、水溶性高分子溶解液を塗布したＰＥＴと、モールドを貼り合せた。１０分間接触状態を維持した後、ＰＥＴとモールドが貼り合わさって一体となったものを２３℃、４５ＲＨ％(相対湿度％)の環境下で乾燥させた。【０１０６】
（剥離工程）
乾燥固化したマイクロニードルアレイをモールドから慎重に剥離することで、ヒト血清アルブミンを内包したマイクロニードルアレイが形成された。
本マイクロニードルは、錐台部と針部から構成されており、針状凸部の長さＬが高さ：約６００μｍ、基底部の幅：約２７０μｍ、錐台部が、高さ約１４０μｍ、上底面直径約２７０μｍ、下底面直径約５００μｍの円錐台構造であり、針本数１００本、針の間隔約１ｍｍで配置されている。【０１０７】
（評価１：マイクロニードルアレイの形状確認）
作製したマイクロニードルアレイをマイクロスコープ（ＶＨＸ−５０００、キーエンス株式会社）で観察した。観察結果を表１に示す。表１において、マイクロニードルアレイの形状に異常（ヒビや白濁）が観察されたものをＢ、上記異常が観察されなかったものをＡとした。【０１０８】
（評価２：針先端充填率の評価）
作製したマイクロニードルアレイの針部先端から約４００μｍまでの針部先端領域を、シート部と並行に切断し、切断した針部先端領域を純水に溶解させた（サンプル１）。同様にして、切断後に残ったマイクロニードルアレイも純水に溶解させた（サンプル２）。溶解液中のヒト血清アルブミン量をＢｒａｄｆｏｒｄ法で測定した。以下の式により、針先端充填率を求めた。針先端充填率が８０％以上の場合をＡ、針先端充填率が８０％未満の場合をＢとした。
針先端充填率＝サンプル１のワクチン量÷（サンプル１のワクチン量＋サンプル２のワクチン量）【０１０９】
【表１】
2019163805.tif 000003
【０１１０】
＜インフルエンザワクチンを用いた実験＞
（針部先端部を形成するインフルエンザワクチンを含む水溶液の調製）
インフルエンザワクチンを遠心濃縮した後、表２に示す基剤および界面活性剤(実施例の場合)と混合した。インフルエンザワクチン、基剤および界面活性剤の種類および量は表２に示す通りに調整した。【０１１１】
（針部基部およびシート部を形成する水溶性高分子溶解液の調製）
コンドロイチン硫酸ナトリウム（ＣＳ、マルハニチロ株式会社、重量平均分子量は９００００）を水に溶解して、ＣＳの３９質量％水溶液を調製した。【０１１２】
（インフルエンザワクチンを含む水溶液のモールドへの充填）
上記で調製したインフルエンザワクチンを含む水溶液を、上記で製造したモールドに充填した。続けて、上記モールドを２３℃、相対湿度４５％の環境下でフタ(箱)内に収め、乾燥した。このとき、インフルエンザワクチンを含む水溶液は、徐々に乾燥され、１８０分以上経過した後に、含水率が２０％以下となる。また乾燥の手段は、フタに限定されるものではなく、温湿度制御や風量制御などの他の手段を用いても良い。【０１１３】
（針部基部およびシート部の形成及び乾燥）
上記水溶液を充填したモールド上に、ステンレス製（ＳＵＳ３０４）の型枠（厚み０．２ｍｍ、直径１５ｍｍ）を置いた。ここに、上記ＣＳの３９質量％水溶液を直接塗布し、針状凹部に充填した後、乾燥させた（温度２３℃、相対湿度４５％）。【０１１４】
（剥離工程）
乾燥固化したマイクロニードルアレイをモールドから慎重に剥離することで、インフルエンザワクチンを内包したマイクロニードルアレイが形成された。本マイクロニードルは、錐台部と針部から構成されており、針状凸部の長さＬが高さ：約８００μｍ、基底部の幅：約３６０μｍ、錐台部が、高さ約１７０μｍ、上底面直径約３６０μｍ、下底面直径約７５０μｍの円錐台構造であり、針本数１０９本、針の間隔約１ｍｍで配置されている。【０１１５】
（評価１：マイクロニードルアレイ（ＭＮＡ）の形状確認）
作製したマイクロニードルアレイをマイクロスコープ（ＶＨＸ−５０００、キーエンス株式会社）で観察した。観察結果を表２に示す。表２において、マイクロニードルアレイの形状に異常（ヒビや白濁）が観察されたものをＢ、上記異常が観察されなかったものをＡとした。【０１１６】
（評価２：針先端充填率評価）
作製したマイクロニードルアレイの針部先端から約５７５μｍまでの針部先端領域を、シート部と並行に切断し、切断した針部先端領域をＢｕｆｆｅｒ液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０（Ｍｅｒｃｋ）、ウシ血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ）を含有するＴｒｉｓ緩衝液）中に溶解させた（サンプル１）。同様にして、切断後に残ったマイクロニードルアレイもＢｕｆｆｅｒ液に溶解させた（サンプル２）。溶解液中のワクチン量をELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)法にて測定した。以下の式により、針先端充填率を求めた。針先端充填率が８０％以上の場合をＡ、針先端充填率が８０％未満の場合をＢとした。
針先端充填率＝サンプル１のワクチン量÷（サンプル１のワクチン量＋サンプル２のワクチン量）【０１１７】
【表２】
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【符号の説明】
【０１１８】
１  マイクロニードルアレイ
２  マイクロニードルアレイ
１１０  マイクロニードル
１１２  針部
１１２Ａ  針部第１層
１１２Ｂ  針部第２層
１１３  錐台部
１１６  シート部
１２０  薬物を含む層
１２２  薬物を含まない層
Ｗ  直径（幅）
Ｈ  高さ
Ｔ  高さ（厚み）
１１  原版
１２  形状部
１３  モールド
１５  針状凹部
１５Ａ  入口部
１５Ｂ  先端凹部
１５Ｃ  空気抜き孔
Ｄ  径（直径）
１８  モールド複合体
１９  気体透過シート
２０  基台
２２  薬物含有液
２４  水溶性高分子または二糖類を含む液
２９  支持体
３０  タンク
３２  配管
３４  ノズル
３４Ａ  リップ部
３４Ｂ  開口部
３６  液供給装置
Ｐ１  加圧力
Ｐ２  押付け力
Ｐ３  押付け力
４０  基材
５０  円錐台
５２  円錐
Ｄ１  直径
Ｄ２  直径
Ｌ１０  ピッチ
Ｈ１  高さ
Ｈ２  高さ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【国際調査報告】
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