(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記のペプチドであるペプチド化合物：
【化２０】
0003787242.tif 000091
【化２１】
0003787242.tif 000092
【化２２】
0003787242.tif 000093
【化２３】
0003787242.tif 000094
【化２４】
0003787242.tif 000095
または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項２】
下記のペプチドであるペプチド化合物：
【化１１８】
0003787242.tif 000096
【化１１９】
0003787242.tif 000097
または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項３】
下記のペプチド化合物：
【化１２０】
0003787242.tif 000098
または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のペプチド化合物の製造法であって、保護されたアミノ酸から出発する固相逐次合成、溶液中でのペプチドフラグメントから出発する合成、あるいは場合によりこれら二つの手法の組合わせによってペプチド化合物を得、必要であれば、製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩へと転換することを特徴とする製造法。
【請求項５】
活性成分として、請求項１〜３のいずれか１項に記載の少なくとも１の化合物を、単独で、または製薬上許容され得る１もしくはそれ以上の不活性で無害の賦形剤もしくは担体と組合わせて含む製剤組成物。
【請求項６】
t(ＧＬＰ−１）が関与する病理学的状態の治療におけるt(ＧＬＰ−１）のアゴニスト用の、請求項１〜３のいずれか１項に記載の少なくとも１の化合物を活性成分として含む請求項５記載の製剤組成物。
【請求項７】
インスリン非依存性II型糖尿病、肥満、および／またはＩ型糖尿病の治療用の、請求項１〜３のいずれか１項に記載の少なくとも１の化合物を活性成分として含む請求項６記載の製剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、グルカゴン様ペプチド−１（７‐３７）の類似体である新規ペプチド化合物、それらの製造法、およびそれらを含有する製剤組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
グルカゴン様ペプチド−１（７‐３７）、および（７−３６）ＮＨ2（tＧＬＰ−１）は、糖のホメオスタシスの制御に深く関与する腸起源のペプチドである。これらのペプチドは、「腸島軸（entero-insular axis）」の主要メディエーターであり、特定の受容体に結合することによって作用する。
【０００３】
tＧＬＰ−１は、主として膵臓で作用し、β細胞によるインスリンの分泌に対して、グルコース依存型方式で強力な刺激効果を発揮する〔S. Mojsov et al., J. Clin. Invest. 1987, 79, 619；およびJ.J. Holst, F.E.B.S. Letters, 1987, 211, 169〕。この刺激は、ソマトスタチンの放出の刺激と、グルカゴンの放出の阻害とを伴う。
【０００４】
膵臓に対する上記の効果と並んで、tＧＬＰ−１は、胃内容物の排出を遅らせ、胃酸分泌を低下させ、筋、肝臓および脂肪細胞におけるグルコースの末梢利用を刺激する〔M.L. Vellanueva et al., Diabetologia, 1994, 37, 1163; D.J. Drucker, Diabetes, 1998, 47, 159〕。
【０００５】
最近の研究では、tＧＬＰ−１が、飽満中枢に対する作用の結果として、食物および飲料の摂取を阻害することによって、摂食行動に対して効果を有し得ることも立証された〔M.D. Turton et al., Nature, 1996, 379, 69〕。
【０００６】
こうして、tＧＬＰ−１は、特に非インスリン依存性II型糖尿病、肥満およびＩ型糖尿病の治療における多くの潜在的治療用途を有する。
【０００７】
しかし、多くのホルモン性ペプチドと同様に、それは、２分未満という非常に短い血漿中半減期を有し〔T.J. Kieffer et al., Endocrinology, 1995, 136, 3585〕、そのことが、その用途を限定している。
【０００８】
そのインスリン刺激特性のために、天然ペプチドであるＧＬＰ1（７−３７）は、それ自体であれ、塩、エステルまたはアミドの形態であれ〔米国特許第５，６１６，４９２号明細書、国際公開第８７０６９４１号および第９０１１２９６号〕、リン脂質を伴うか〔国際公開第９３１８７８５号〕、または他の血糖降下性物質を伴う〔国際公開第９３１８７８６号〕ものであれ、その使用が広く記載されている。天然配列のいくつかの位置で修飾した類似体も、より良く吸収されるＧＬＰ１（７‐３７）と同様に強力な化合物を案出するという目的で研究されている〔ヨーロッパ特許第７３３  ６４４号、第７０８  １７９号、第６５８  ５６８号および国際公開第９１  １１４５７号〕。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の化合物は、いくつかの残基に対する修飾、および／または第３６位のアルギニンの抑制によってtＧＬＰ−１のそれから誘導される新規な構造を有する。新規であることに加え、これらの化合物は、tＧＬＰ−１受容体に関係するアゴニスト特性の結果として、有用な薬理学的特性を有する。この修飾により、本発明の化合物の代謝安定性が実質的に増大され、こうして、天然ペプチドのそれより優れた作用持続性を有するという追加の利点を有する。これらの特性によって、本化合物は、tＧＬＰ−１が関与する病理学的状態の治療、特に非インスリン依存性II型糖尿病、肥満およびＩ型糖尿病の治療に、特に有用である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、一般式（Ｉ）：
【００１１】
【化３２】
0003787242.tif 000002
【００１２】
〔式中、Ｚ1は、式（Ｉ）のペプチドの末端アミノ基の置換基であって、水素原子、アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アシル基、または場合により置換されたアリールカルボニル、場合により置換されたヘテロアリールカルボニル、場合により置換されたアリールアルキルカルボニル、場合により置換されたヘテロアリールアルキルカルボニル、場合により置換されたアリールオキシカルボニル、場合により置換されたアリールアルコキシカルボニル、または場合により置換されたアルコキシカルボニル基を表わし、
【００１３】
Ｚ2は、式（Ｉ）のペプチドの末端カルボニル基の置換基であって、ヒドロキシ基、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ基、またはアミノ基（直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリールカルボニル、場合により置換されたヘテロアリールカルボニル、場合により置換されたアリールアルキルカルボニル、および場合により置換されたヘテロアリールアルキルカルボニルから選ばれる、１個もしくは２個の同一であるか、または異なる基によってか、あるいは窒素原子とともに５ないし７員の飽和環を形成する２個の基によって場合により置換されている）を表わし、
Ｘ1〜Ｘ14は、それぞれ、互いに独立に、
・式：
【００１４】
【化３３】
0003787242.tif 000003
【００１５】
〔式中、
−Ｒ1は、水素原子を表わし、Ｒ2は、水素原子、またはアルキル、アミノアルキル（場合により、窒素原子において１または２個のアルキル、フェニル、ベンジル、シクロアルキル、場合により置換されたアリールオキシカルボニル、場合により置換されたアリールアルコキシカルボニルおよび／もしくは場合により置換されたアルコキシカルボニル基によって置換されている）、チオアルキル（場合により、硫黄原子においてアルキル、フェニル、ベンジルまたはシクロアルキル基によって置換されている）、ヒドロキシアルキル（場合により、酸素原子においてアルキル、フェニル、ベンジルまたはシクロアルキル基によって置換されている）、カルボキシアルキル、カルバモイルアルキル、グアニジノアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、場合により置換された縮合シクロアルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わすか、あるいは
−Ｒ1およびＲ2は、それらと結合している炭素原子とともにシクロアルキルまたは縮合シクロアルキル基を形成する〕
で示される、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基、あるいは
・式：
【００１６】
【化３４】
0003787242.tif 000004
【００１７】
（式中、Ａは、それが結合している窒素および炭素原子とともに、飽和されているか、部分的に不飽和であるか、または不飽和であり、場合により置換されている、５ないし１１員の単環または二環式の基を形成する）
で示される、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然環状アミノ酸残基、あるいは
・３−アミノ−３−（２−フリル）プロパン酸残基
を表わし、そして
Ｘ15は、結合またはアルギニン残基（Ａｒｇ）を表わすが、
ただし、Ｘ1が、チロシン（Ｔｙｒ）、アルギニン（Ａｒｇ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、プロリン（Ｐｒｏ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、バリン（Ｖａｌ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、アラニン（Ａｌａ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）およびヒスチジン（Ｈｉｓ）から選ばれる、ＬもしくはＤ立体配置を有する残基であるとき、および／または
Ｘ2が、セリン（Ｓｅｒ）、グリシン（Ｇｌｙ）、システイン（Ｃｙｓ）、サルコシン（Ｓａｒ）、アラニン（Ａｌａ）、プロリン（Ｐｒｏ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）およびトレオニン（Ｔｈｒ）から選ばれる、ＬもしくはＤ立体配置を有する残基を表わすとき、および／または
Ｘ3が、グルタミン（Ｇｌｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ）およびグルタミン酸（Ｇｌｕ）から選ばれる、ＬもしくはＤ立体配置を有するアミノ酸残基を表わすとき、および／または
Ｘ5が、チロシン残基（Ｔｙｒ）を表わすとき、および／または
Ｘ6が、リシン残基（Ｌｙｓ）を表わすとき、および／または
Ｘ10が、グルタミン（Ｇｌｎ）、アラニン（Ａｌａ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、セリン（Ｓｅｒ）およびグリシン（Ｇｌｙ）から選ばれるアミノ酸残基を表わすとき、および／または
Ｘ13が、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、アラニン（Ａｌａ）およびチロシン（Ｔｙｒ）から選ばれるアミノ酸残基を表わすとき、Ｘ15は、結合を表わし、ここで
【００１８】
−残基Ｘ1〜Ｘ15は、得られるペプチドが天然ペプチドと同一であるように選ばれてはならず、
−用語「アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖を意味し、
−用語「シクロアルキル」は、３ないし８員の飽和環状炭化水素基を意味し、
−表現「縮合シクロアルキル」は、窒素、酸素および硫黄から選ばれる１または２個のヘテロ原子を場合により含む、飽和もしくは不飽和環と縮合した炭素含有飽和環で構成される８ないし１１員の二環式の基（例えば、インダン、テトラヒドロナフタレンまたはテトラヒドロキノリン基）を意味し、
−用語「アリール」は、フェニル、ナフチルまたはビフェニル基を意味し、
−用語「へテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄から選ばれる１〜４個のヘテロ原子を含む、５ないし１１員の単環または二環式の基（例えば、フリル、ピリジル、チエニルまたはインドリル基）を意味し、
−用語「アリールカルボニル」は、Ｒa−ＣＯ−基を意味し、用語「アリールアルキルカルボニル」は、Ｒa−Ｒb−ＣＯ−基を意味し、用語「ヘテロアリールカルボニル」は、Ｒc−ＣＯ−基を意味し、用語「ヘテロアリールアルキルカルボニル」は、Ｒc−Ｒb−ＣＯ−基を意味し、用語「アリールオキシカルボニル」は、Ｒa−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、用語「アリールアルコキシカルボニル」は、Ｒa−Ｒb−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、用語「アルコキシカルボニル」は、Ｒb−Ｏ−ＣＯ−基を意味するが、ここでＲaは、上記に定義のアリール基を表わし、Ｒbは、上記に定義のアルキル基を表わし、Ｒcは、上記に定義のヘテロアリール基を表わし、
【００１９】
−上記に定義された用語に適用される用語「置換されている」は、問題の基が、１個もしくはそれ以上のハロゲン原子、または直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、ヒドロキシル、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、または直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）ペルハロアルキル基によって置換されていることを意味し、
−各ペプチド結合−ＣＯ−ＮＨ−は、場合により、−ＣＨ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｎ（ＣＨ3）−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＯ−、−ＣＨ2−Ｓ−、−ＣＨ2−ＳＯ−、−ＣＨ2−ＳＯ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−および−ＣＯ−ＣＨ2−ＮＨ−から選ばれる擬ペプチド結合で置き換えられていてもよい
と理解される〕
で示されるペプチド化合物、および製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩に関する。
【００２０】
製薬上許容され得る酸のうちでは、塩酸、臭化水素酸、硫酸、ホスホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸、ショウノウ酸等が挙げられる。
【００２１】
製薬上許容され得る塩基のうちでは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエチルアミン、tert−ブチルアミン等が挙げられる。
【００２２】
本発明は、特に、残基Ｘ1〜Ｘ14が、芳香族性または脂肪族性であることができ、水素結合型の相互作用を確立できるか、またはイオン性相互作用を確立できるか、あるいは環状の特性であることができる、その側鎖の性質の機能として選ばれる式（Ｉ）のペプチド化合物に関する。
【００２３】
芳香族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基は、下式：
【００２４】
【化３５】
0003787242.tif 000005
【００２５】
〔式中、Ｒ1aは、水素原子を表わし、Ｒ2aは、上記に定義の不飽和環と縮合し、かつ場合により置換されたシクロアルキル基、または場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わす〕で示されるが、芳香族性の側鎖を有する残基のうち、より具体的には、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｏｆ）、ハロフェニルアラニン（例えば４−クロロフェニルアラニン（４−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、ジハロフェニルアラニン（例えば３，４−ジクロロフェニルアラニン（３，４−ジ−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、アルキルフェニルアラニン（例えば４−メチルフェニルアラニン（４−Ｍｅ−Ｐｈｅ））、ニトロフェニルアラニン（例えば４−ニトロフェニルアラニン（４−ＮＯ2−Ｐｈｅ））、３−ピリジルアラニン（３−Ｐｙａ）、２−チエニルアラニン（Ｔｈａ）、２−フリルアラニン（Ｆｕａ）、１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）、２−ナフチルアラニン（２−Ｎａｌ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）および３−ニトロチロシン（３−ＮＯ2−Ｔｙｒ）残基が挙げられる。
【００２６】
・脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基は、下式：
【００２７】
【化３６】
0003787242.tif 000006
【００２８】
〔式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす〕
で示され、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられる。
【００２９】
・水素結合型の相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基は、下式：
【００３０】
【化３７】
0003787242.tif 000007
【００３１】
〔式中、Ｒ1cは、水素原子を表わし、Ｒ2cは、アミノアルキル（場合により、窒素原子においてアルキル、フェニル、ベンジルまたはシクロアルキルによって置換されている）、チオアルキル（場合により、硫黄原子においてアルキル、フェニル、ベンジルまたはシクロアルキル基によって置換されている）、ヒドロキシアルキル（場合により、酸素原子においてアルキル、フェニル、ベンジルまたはシクロアルキル基によって置換されている）、カルボキシアルキル、カルバモイルアルキルまたはグアニジノアルキル基を表わす〕
で示され、
これらの残基のうち、より具体的には、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびベンジルシステイン（Ｂｃｙ）残基が挙げられる。
【００３２】
・イオン型の相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基は、下式：
【００３３】
【化３８】
0003787242.tif 000008
【００３４】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示され、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられる。
【００３５】
・環状性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する非天然アミノ酸残基は、下式：
【００３６】
【化３９】
0003787242.tif 000009
【００３７】
〔式中、Ｒ1eおよびＲ2eは、一体となって、シクロアルキルまたは縮合シクロアルキル基を形成する〕
で示され、
これらの残基のうち、より具体的には、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（Ａｃｙ）、２−アミノインダン−２−カルボン酸（Ａｉｃ）および２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ａｔｃ）残基が挙げられる。
【００３８】
Ｘ1は、好ましくは、芳香族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ａ）で表わされる。
【００３９】
Ｘ2は、好ましくは、脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４０】
Ｘ3は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされる。
【００４１】
Ｘ4は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされるか、あるいは脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４２】
Ｘ5は、好ましくは、脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４３】
Ｘ6は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされる。
【００４４】
Ｘ7は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされるか、あるいは脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４５】
Ｘ8は、好ましくは、脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４６】
Ｘ9は、好ましくは、脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４７】
Ｘ10は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされるか、あるいは脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００４８】
Ｘ11は、好ましくは、芳香族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ａ）で表わされる。
【００４９】
Ｘ12は、好ましくは、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｄ）で表わされるか、あるいは脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００５０】
Ｘ13は、好ましくは、芳香族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ａ）で表わされる。
【００５１】
Ｘ14は、好ましくは、脂肪族性の側鎖を有する、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、式（ｂ）で表わされる。
【００５２】
Ｘ15は、好ましくは、結合を表わす。
【００５３】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物において、Ｚ1は、水素原子を表わす。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物において、Ｚ2は、好ましくは、ヒドロキシル、直鎖または分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、およびアミノから選ばれる基を表わす。より具体的には、Ｚ2は、アミノ基を表わす。
【００５５】
本発明の好都合な態様は、式（Ｉ）の化合物であって、
Ｚ1が、水素原子を表わし、
Ｚ2が、ヒドロキシル、直鎖または分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、およびアミノから選ばれる基を表わし、
Ｘ1およびＸ11が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００５６】
【化４０】
0003787242.tif 000010
【００５７】
〔式中、Ｒ1aは、水素原子を表わし、Ｒ2aは、上記に定義の不飽和環と縮合し、かつ場合により置換されたシクロアルキル基、または場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される芳香族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
芳香族性の側鎖を有する残基のうち、より具体的には、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｏｆ）、ハロフェニルアラニン（例えば４−クロロフェニルアラニン（４−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、ジハロフェニルアラニン（例えば３，４−ジクロロフェニルアラニン（３，４−ジ−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、アルキルフェニルアラニン（例えば４−メチルフェニルアラニン（４−Ｍｅ−Ｐｈｅ））、ニトロフェニルアラニン（例えば４−ニトロフェニルアラニン（４−ＮＯ2−Ｐｈｅ））、３−ピリジルアラニン（３−Ｐｙａ）、２−チエニルアラニン（Ｔｈａ）、２−フリルアラニン（Ｆｕａ）、１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）、２−ナフチルアラニン（２−Ｎａｌ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）および３−ニトロチロシン（３−ＮＯ2−Ｔｙｒ）残基が挙げられ、
Ｘ2およびＸ9が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００５８】
【化４１】
0003787242.tif 000011
【００５９】
〔式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす〕
で示される脂肪族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられ、
Ｘ3およびＸ6が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００６０】
【化４２】
0003787242.tif 000012
【００６１】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられ、
Ｘ4、Ｘ7、Ｘ10およびＸ12が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００６２】
【化４３】
0003787242.tif 000013
【００６３】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられるか、あるいは、
独立に、下式：
【００６４】
【化４４】
0003787242.tif 000014
【００６５】
〔式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす〕
で示される脂肪族性の側鎖を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられ、
Ｘ5が、バリン残基（Ｖａｌ）を表わし、
Ｘ8およびＸ14が、独立に、ＤまたはＬ立体配置を有するロイシン残基（Ｌｅｕ）を表わし、
Ｘ13が、トリプトファン残基（Ｔｒｐ）を表わし、そして
Ｘ15が、結合またはアルギニン残基（Ａｒｇ）（特に、結合）を表わす化合物、ならびに
製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩に関する。
【００６６】
本発明のもう一つの好都合な態様は、式（Ｉ）の化合物であって、
Ｚ1が、水素原子を表わし、
Ｚ2が、ヒドロキシル、直鎖または分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、およびアミノから選ばれる基を表わし、
Ｘ1およびＸ11が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００６７】
【化４５】
0003787242.tif 000015
【００６８】
〔式中、Ｒ1aは、水素原子を表わし、Ｒ2aは、上記に定義の不飽和環と縮合し、かつ場合により置換されたシクロアルキル基、または場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される芳香族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
芳香族性の側鎖を有する残基のうち、より具体的には、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｏｆ）、ハロフェニルアラニン（例えば４−クロロフェニルアラニン（４−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、ジハロフェニルアラニン（例えば３，４−ジクロロフェニルアラニン（３，４−ジ−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、アルキルフェニルアラニン（例えば４−メチルフェニルアラニン（４−Ｍｅ−Ｐｈｅ））、ニトロフェニルアラニン（例えば４−ニトロフェニルアラニン（４−ＮＯ2−Ｐｈｅ））、３−ピリジルアラニン（３−Ｐｙａ）、２−チエニルアラニン（Ｔｈａ）、２−フリルアラニン（Ｆｕａ）、１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）、２−ナフチルアラニン（２−Ｎａｌ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）および３−ニトロチロシン（３−ＮＯ2−Ｔｙｒ）残基が挙げられ、
Ｘ2およびＸ9が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００６９】
【化４６】
0003787242.tif 000016
【００７０】
〔式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす〕
で示される脂肪族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられ、
Ｘ3およびＸ6が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００７１】
【化４７】
0003787242.tif 000017
【００７２】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられ、
Ｘ4、Ｘ7およびＸ10が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００７３】
【化４８】
0003787242.tif 000018
【００７４】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられ、
Ｘ5が、バリン残基（Ｖａｌ）を表わし、
Ｘ8およびＸ14が、独立に、ＤまたはＬ立体配置を有するロイシン残基（Ｌｅｕ）を表わし、
Ｘ12が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、下式：
【００７５】
【化４９】
0003787242.tif 000019
【００７６】
〔式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす〕
で示される、脂肪族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられ、
Ｘ13が、トリプトファン残基（Ｔｒｐ）を表わし、そして
Ｘ15が、結合またはアルギニン残基（Ａｒｇ）（特に、結合）を表わす化合物、ならびに
製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩に関する。
【００７７】
本発明のもう一つの好都合な態様は、式（Ｉ）の化合物であって、
Ｚ1が、水素原子を表わし、
Ｚ2が、ヒドロキシル、直鎖または分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、およびアミノから選ばれる基を表わし、
Ｘ1およびＸ11が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００７８】
【化５０】
0003787242.tif 000020
【００７９】
〔式中、Ｒ1aは、水素原子を表わし、Ｒ2aは、上記に定義の不飽和環と縮合し、かつ場合により置換されたシクロアルキル基、または場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される芳香族性の側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
芳香族性の側鎖を有する残基のうち、より具体的には、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｏｆ）、ハロフェニルアラニン（例えば４−クロロフェニルアラニン（４−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、ジハロフェニルアラニン（例えば３，４−ジクロロフェニルアラニン（３，４−ジ−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、アルキルフェニルアラニン（例えば４−メチルフェニルアラニン（４−Ｍｅ−Ｐｈｅ））、ニトロフェニルアラニン（例えば４−ニトロフェニルアラニン（４−ＮＯ2−Ｐｈｅ））、３−ピリジルアラニン（３−Ｐｙａ）、２−チエニルアラニン（Ｔｈａ）、２−フリルアラニン（Ｆｕａ）、１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）、２−ナフチルアラニン（２−Ｎａｌ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）および３−ニトロチロシン（３−ＮＯ2−Ｔｙｒ）残基が挙げられ、
Ｘ2およびＸ9が、独立に、ＤまたはＬ立体配置を有するアラニン残基（Ａｌａ）を表わし、
Ｘ3およびＸ6が、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わし、独立に、下式：
【００８０】
【化５１】
0003787242.tif 000021
【００８１】
〔式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす〕
で示される、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有するアミノ酸残基から選ばれるが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられ、
Ｘ4が、アスパラギン酸残基（Ａｓｐ）を表わし、
Ｘ5が、バリン残基（Ｖａｌ）を表わし、
Ｘ7が、チロシン残基（Ｔｙｒ）を表わし、
Ｘ8およびＸ14が、独立に、ＤまたはＬ立体配置を有するロイシン残基（Ｌｅｕ）を表わし、
Ｘ10が、グルタミン残基（Ｇｌｕ）を表わし、
Ｘ12が、イソロイシン残基（Ｉｌｅ）を表わし、
Ｘ13が、トリプトファン残基（Ｔｒｐ）を表わし、
Ｘ15が、結合またはアルギニン残基（Ａｒｇ）（特に、結合）を表わす化合物、ならびに
製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩に関する。
【００８２】
本発明は、より特別には、式（II）：
【００８３】
【化５２】
0003787242.tif 000022
【００８４】
〔式中、Ｚ1は、式（II）のペプチドの末端アミノ基の置換基であって、水素原子を表わし、
Ｚ2は、式（II）のペプチドの末端カルボニル基の置換基であって、ヒドロキシル、直鎖もしくは分枝鎖（Ｃ1〜Ｃ6）アルコキシ、またはアミノ基を表わし、
Ｘ1は、芳香族性の側鎖を有し、かつ下式：
【００８５】
【化５３】
0003787242.tif 000023
【００８６】
（式中、Ｒ1aは、水素原子を表わし、Ｒ2aは、上記に定義の不飽和環と縮合し、かつ場合により置換されたシクロアルキル基、または場合により置換されたアリール、場合により置換されたアリールアルキル、場合により置換されたヘテロアリールもしくは場合により置換されたヘテロアリールアルキル基、またはイミダゾリルもしくはイミダゾリルアルキル基を表わす）
で示される、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わすが、
芳香族性の側鎖を有する残基のうち、より具体的には、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホモフェニルアラニン（Ｈｏｆ）、ハロフェニルアラニン（例えば４−クロロフェニルアラニン（４−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、ジハロフェニルアラニン（例えば３，４−ジクロロフェニルアラニン（３，４−ジ−Ｃｌ−Ｐｈｅ））、アルキルフェニルアラニン（例えば４−メチルフェニルアラニン（４−Ｍｅ−Ｐｈｅ））、ニトロフェニルアラニン（例えば４−ニトロフェニルアラニン（４−ＮＯ2−Ｐｈｅ））、３−ピリジルアラニン（３−Ｐｙａ）、２−チエニルアラニン（Ｔｈａ）、２−フリルアラニン（Ｆｕａ）、１−ナフチルアラニン（１−Ｎａｌ）、２−ナフチルアラニン（２−Ｎａｌ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）および３−ニトロチロシン（３−ＮＯ2−Ｔｙｒ）残基が挙げられ、
Ｘ2は、脂肪族性の側鎖を有し、かつ下式：
【００８７】
【化５４】
0003787242.tif 000024
【００８８】
（式中、Ｒ1bは、水素原子を表わし、Ｒ2bは、水素原子、またはアルキルもしくはシクロアルキル基を表わす）
で示される、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わすが、
これらの残基のうち、より具体的には、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、ホモロイシン（Ｈｏｌ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）およびtert−ロイシン（Ｔｌｅ）残基が挙げられ、
Ｘ3は、イオン性相互作用を確立できる側鎖を有し、かつ下式：
【００８９】
【化５５】
0003787242.tif 000025
【００９０】
（式中、Ｒ1dは、水素原子を表わし、Ｒ2dは、アミノアルキル、チオアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、グアニジノアルキル、イミダゾリルまたはイミダゾリルアルキル基を表わす）
で示される、ＤまたはＬ立体配置を有する天然もしくは非天然アミノ酸残基を表わすが、
これらの残基のうち、より具体的には、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、ジアミノ酢酸（ＮＨ‐Ｇｌｙ）、ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）残基が挙げられ、
Ｘ15は、結合またはアルギニン残基を表わし、ここで
式（Ｉ）で定義された化合物に関連する制限は、式（II）の化合物にも適用されると理解される〕
で示されるペプチド化合物に関する。
【００９１】
より具体的には、式（II）の化合物において、Ｘ15は、結合を表わす。
【００９２】
式（II）の化合物のうち、Ｘ2が、ＤまたはＬ立体配置を有するアラニン残基（Ａｌａ）を表わし、Ｘ15が、結合を表わす化合物が好ましい。
【００９３】
本発明の好適な化合物のうち、より具体的には、下記のペプチドが挙げられる：
【００９４】
【化５６】
0003787242.tif 000026
【００９５】
【化５７】
0003787242.tif 000027
【００９６】
【化５８】
0003787242.tif 000028
【００９７】
【化５９】
0003787242.tif 000029
【００９８】
本発明は、様々な方法、例えば、固相逐次合成、溶液中での合成、およびフラグメントのカップリング、酵素による合成によってか、または分子生物学の手法を用いることによって得られる、式（Ｉ）の化合物の製造法にも及ぶ。
【００９９】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の製造法であって、保護されたアミノ酸から出発する固相逐次合成、溶液中でのペプチドフラグメントから出発する合成、あるいは場合によりこれら二つの手法の組合わせによって、そして所望であれば、有機化学における慣用の手法に従って、ペプチド配列の合成の際の何らかの時点での１個またはそれ以上の擬ペプチド結合の導入によって得、該式（Ｉ）の化合物を、必要であれば、製薬上許容され得る酸または塩基とのその付加塩へと転換することを特徴とする製造法にも関する。
【０１００】
固相ペプチド合成の一般的な方法は、B.W. EricksonおよびR.B. Merrifieldによって記載されている（「The Proteins」、固相ペプチド合成、第３版、1976、257ページ）。
【０１０１】
固相合成は、ペプチド鎖へのアミノ酸の逐次導入に必要な脱保護、カップリングおよび洗浄のサイクルを反復的かつプログラミング可能な方式で実行する、自動的装置を用いて実施される。
【０１０２】
Ｃ末端アミノ酸を、ポリペプチドの調製に慣用的に用いられる樹脂、好ましくは、０．５〜３．０％のジビニルベンゼンで架橋結合され、最初のアミノ酸を共有結合で樹脂に固定するのを可能にする活性化された基を備えた、ポリスチレンに固定する。樹脂を適切に選択することによって、合成後のＣ末端のカルボン酸、アミド、アルコールまたはエステルの官能基の形成が可能になる。
【０１０３】
次いで、アミノ酸を、操作員が決定した順に１個ずつ導入する。アミノ酸の導入に対応する合成の各サイクルは、ペプチド鎖のＮ末端での脱保護、試薬を除去するか、または樹脂を膨潤させるよう設計された逐次洗浄、アミノ酸の活性化を伴うカップリング、およびその後の洗浄を含む。これらの操作のそれぞれの後に、合成を実施する反応器に組み込んだガラスフィルターにより、濾過を実施する。
【０１０４】
用いるカップリング試薬は、ペプチド合成のための慣用の試薬、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）もしくはベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム＝ヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、またはジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）である。
【０１０５】
混合または対称性無水物の形成による活性化も、可能である。
【０１０６】
アミノ酸は、それぞれ、樹脂の置換の程度に対してほぼ６倍過剰量とし、かつカップリング試薬に対してはほぼ等量として反応器に導入する。カップリング反応は、合成の各段階ごとに、E. Kaiserら（Anal. Biochem., 34, 595, 1970）が記載したニンヒドリン反応の試験によって確認し得る。
【０１０７】
樹脂上でペプチド鎖を組み立てた後、例えば、アニソール、エタンジオールまたは２−メチルインドールの存在下で、トリフルオロ酢酸またはフッ化水素酸のような強酸を用いて適当な処理を行って、ペプチドを樹脂から分離し、ペプチドをその保護基からも遊離させる。次いで、化合物を、慣用の精製手法、特にクロマトグラフィーの手法によって精製する。
【０１０８】
本発明のペプチドは、それ自体は固相または溶液のいずれとして調製してもよい、選択的に保護されたペプチドフラグメントを溶液中でカップリングさせることによって得てもよい。保護基の使用、および安定性の相違の活用は、樹脂へのペプチド鎖の付着以外は、固相法に類似する。Ｃ末端カルボキシル基は、例えば、メチルエステルまたはアミドの官能基によって保護する。カップリングの際の活性化の方法は、同様に、固相合成に用いたのに類似する。
【０１０９】
本発明のペプチドは、これらのペプチドをコードする核酸配列を用いる、分子生物学の手法を用いて得てもよい。これらの配列は、ＲＮＡまたはＤＮＡであってよく、調節配列を伴い、かつ／またはベクターに挿入してよい。次いで、後者を、宿主細胞、例えば細菌にトランスフェクションする。ベクターの調製と、宿主細胞内でのそれらの生産および発現は、慣用の分子生物学および遺伝子工学の手法によって行う。
【０１１０】
擬ペプチド結合を有するペプチドの合成は、有機化学の慣用の方法を用いて、溶液での方法、または固相合成と併用した方法のいずれによって実施してもよい。こうして、例えば、FehrentzおよびCastro（Synthesis, 676-678, 1983）が記載した手法に従って、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＨＯのアルデヒドを溶液中で調製し、SasakiおよびCoy（Peptides, 8, 119-121, 1988）が記載した手法に従って固相または溶液中でのいずれかで、成長するペプチド鎖とそれとを縮合させることによって、−ＣＨ2−ＮＨ結合の導入を行う。
【０１１１】
本発明は、活性成分として、一般式（Ｉ）の少なくとも１の化合物、または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩を、単独で、または製薬上許容され得る１もしくはそれ以上の不活性で無害の賦形剤もしくは担体と組合わせて含む製剤組成物にも関する。
【０１１２】
本発明は、特にt(ＧＬＰ−１）が関与する病理学的状態の治療におけるt(ＧＬＰ−１）のアゴニスト用の、一般式（Ｉ）の少なくとも１の化合物、または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩を活性成分として含む製剤組成物；およびインスリン非依存性II型糖尿病、肥満、および／またはＩ型糖尿病の治療用の、一般式（Ｉ）の少なくとも１の化合物、または製薬上許容され得る酸もしくは塩基とのその付加塩を活性成分として含む製剤組成物に関する。
【０１１３】
本発明による製剤組成物のうち、より具体的には、経口、非経口または経鼻投与に適したもの、錠剤または糖衣錠、舌下錠、サシェット、パケット、軟ゼラチンカプセル、坐剤、クリーム剤、軟膏剤、皮膚用ゲル剤、経皮装置、エアゾル剤、飲用および注射用アンプル剤などが挙げられる。
【０１１４】
用量は、患者の年齢や体重、疾患の性質や重篤度、および投与経路に応じて変動する。
【０１１５】
投与経路は、経口（吸入、歯肉および舌下の経路を包含）、経鼻、経直腸、非経口または経皮であることができる。一般的には、用量は、投与経路、および用いる剤型に応じて１０μg〜５００mgの範囲であり、これを２４時間当たり１回または数回に分けて投与することができる。
【０１１６】
【実施例】
下記の実施例は、いかなる限定も含意することなく、本発明を例示する。
慣習により、下記の実施例中では、略号が、他のいかなる指示もなく大文字で始まるアミノ酸は、Ｌ立体配置を有する。Ｄ立体配置を有するアミノ酸の前には、記号：（Ｄ）が記される。
【０１１７】
実施例１
【０１１８】
【化６０】
0003787242.tif 000030
【０１１９】
実施例１の化合物は、下記の反復のプロトコルに従って連続流装置を用い、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂から出発して、０．１ミリモルの規模で合成した。
【０１２０】
【表１】
0003787242.tif 000031
【０１２１】
操作は、それぞれ、環境温度で実施し、合成を実施しようとするガラスセル（反応器）に組み込んだガラスフィルターによる濾過を続けて行った。フィルターには、樹脂を保持させ、成長するペプチド鎖をこれに固定した。
カップリング剤として、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下でジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＤＩ）を用いて、各アミノ酸（６当量）を組み立てた。
最後のアミノ酸を組み込んだ後に、保護された側鎖を有し、樹脂に固定されたペプチドが得られた。次いで、支持体を、高真空下で３時間乾燥した。その後、試薬Ｋ（トリフルオロ酢酸８２．５％、フェノール５％、水５％、チオアニソール５％、エタンジチオール２．５％）５０mlでこれを処理した。次いで、混合物を、ときおり撹拌しつつ、環境温度で１２時間放置し、その後、エチルエーテル約２００mlを含むエーレンマイヤーフラスコに濾し入れた。ペプチドは、沈澱し、濾過または遠心分離によって単離された。次いで、水酸化カリウムペレットの存在下で、高真空下で１２時間乾燥し、その後、水／アセトニトリル勾配を用いた、逆相カラム（Ｃ18）での分取ＨＰＬＣによって精製した。ペプチドを含有する分画を捕集し、次いで、凍結乾燥した。
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３５６
【０１２２】
下記の実施例化合物は、所望のアミノ酸を用い、実施例１に記載した手順を用いて調製した。
【０１２３】
実施例２：
【０１２４】
【化６１】
0003787242.tif 000032
【０１２５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３４０４
【０１２６】
実施例３：
【０１２７】
【化６２】
0003787242.tif 000033
【０１２８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３４０４
【０１２９】
実施例４：
【０１３０】
【化６３】
0003787242.tif 000034
【０１３１】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２９０
【０１３２】
実施例５：
【０１３３】
【化６４】
0003787242.tif 000035
【０１３４】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２９９
【０１３５】
実施例６：
【０１３６】
【化６５】
0003787242.tif 000036
【０１３７】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８４
【０１３８】
実施例７：
【０１３９】
【化６６】
0003787242.tif 000037
【０１４０】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８８
【０１４１】
実施例８：
【０１４２】
【化６７】
0003787242.tif 000038
【０１４３】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８６
【０１４４】
実施例９：
【０１４５】
【化６８】
0003787242.tif 000039
【０１４６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２４１
【０１４７】
実施例１０：
【０１４８】
【化６９】
0003787242.tif 000040
【０１４９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２２７
【０１５０】
実施例１１：
【０１５１】
【化７０】
0003787242.tif 000041
【０１５２】
ここで、Ａｆｐは、
【０１５３】
【化７１】
0003787242.tif 000042
【０１５４】
を表わし、これは、３−アミノ−３−（２−フリル）プロパン酸に対応する残基である。
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９６
【０１５５】
実施例１２：
【０１５６】
【化７２】
0003787242.tif 000043
【０１５７】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８０
【０１５８】
実施例１３：
【０１５９】
【化７３】
0003787242.tif 000044
【０１６０】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１５２
【０１６１】
実施例１４：
【０１６２】
【化７４】
0003787242.tif 000045
【０１６３】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９４
【０１６４】
実施例１５：
【０１６５】
【化７５】
0003787242.tif 000046
【０１６６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２７４
【０１６７】
実施例１６：
【０１６８】
【化７６】
0003787242.tif 000047
【０１６９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１３８
【０１７０】
実施例１７：
【０１７１】
【化７７】
0003787242.tif 000048
【０１７２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１７８
【０１７３】
実施例１８：
【０１７４】
【化７８】
0003787242.tif 000049
【０１７５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２０１
【０１７６】
実施例１９：
【０１７７】
【化７９】
0003787242.tif 000050
【０１７８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３４
【０１７９】
実施例２０：
【０１８０】
【化８０】
0003787242.tif 000051
【０１８１】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１６２
【０１８２】
実施例２１：
【０１８３】
【化８１】
0003787242.tif 000052
【０１８４】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１４６
【０１８５】
実施例２２：
【０１８６】
【化８２】
0003787242.tif 000053
【０１８７】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８４
【０１８８】
実施例２３：
【０１８９】
【化８３】
0003787242.tif 000054
【０１９０】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１６２
【０１９１】
実施例２４：
【０１９２】
【化８４】
0003787242.tif 000055
【０１９３】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９４
【０１９４】
実施例２５：
【０１９５】
【化８５】
0003787242.tif 000056
【０１９６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８０
【０１９７】
実施例２６：
【０１９８】
【化８６】
0003787242.tif 000057
【０１９９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２４５
【０２００】
実施例２７：
【０２０１】
【化８７】
0003787242.tif 000058
【０２０２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３８
【０２０３】
実施例２８：
【０２０４】
【化８８】
0003787242.tif 000059
【０２０５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２１０
【０２０６】
実施例２９：
【０２０７】
【化８９】
0003787242.tif 000060
【０２０８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２０６
【０２０９】
実施例３０：
【０２１０】
【化９０】
0003787242.tif 000061
【０２１１】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２５５
【０２１２】
実施例３１：
【０２１３】
【化９１】
0003787242.tif 000062
【０２１４】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３５４
【０２１５】
実施例３２：
【０２１６】
【化９２】
0003787242.tif 000063
【０２１７】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３３４
【０２１８】
実施例３３：
【０２１９】
【化９３】
0003787242.tif 000064
【０２２０】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３１２
【０２２１】
実施例３４：
【０２２２】
【化９４】
0003787242.tif 000065
【０２２３】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３５１
【０２２４】
実施例３５：
【０２２５】
【化９５】
0003787242.tif 000066
【０２２６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３１６
【０２２７】
実施例３６：
【０２２８】
【化９６】
0003787242.tif 000067
【０２２９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１６５
【０２３０】
実施例３７：
【０２３１】
【化９７】
0003787242.tif 000068
【０２３２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８０
【０２３３】
実施例３８：
【０２３４】
【化９８】
0003787242.tif 000069
【０２３５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１５２
【０２３６】
実施例３９：
【０２３７】
【化９９】
0003787242.tif 000070
【０２３８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３０
実施例４０：
【０２３９】
【化１００】
0003787242.tif 000071
【０２４０】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３１
【０２４１】
実施例４１：
【０２４２】
【化１０１】
0003787242.tif 000072
【０２４３】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８３
【０２４４】
実施例４２：
【０２４５】
【化１０２】
0003787242.tif 000073
【０２４６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８０
【０２４７】
実施例４３：
【０２４８】
【化１０３】
0003787242.tif 000074
【０２４９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１１５
【０２５０】
実施例４４：
【０２５１】
【化１０４】
0003787242.tif 000075
【０２５２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１５８
【０２５３】
実施例１に記載した方法を用いるが、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂をＭｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂に置き換えて、実施例４５〜４９の化合物を得た。
【０２５４】
実施例４５：
【０２５５】
【化１０５】
0003787242.tif 000076
【０２５６】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９２
【０２５７】
実施例４６：
【０２５８】
【化１０６】
0003787242.tif 000077
【０２５９】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９４
【０２６０】
実施例４７：
【０２６１】
【化１０７】
0003787242.tif 000078
【０２６２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８０
【０２６３】
実施例４８：
【０２６４】
【化１０８】
0003787242.tif 000079
【０２６５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２０６
【０２６６】
実施例４９：
【０２６７】
【化１０９】
0003787242.tif 000080
【０２６８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９８
【０２６９】
実施例１に記載した方法を用いるが、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂をＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂に置き換え、試薬Ｋをトリエチルアミン／メタノール混合物に置き換えて、実施例５０〜５４の化合物を得た。
【０２７０】
実施例５０：
【０２７１】
【化１１０】
0003787242.tif 000081
【０２７２】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２１０
【０２７３】
実施例５１：
【０２７４】
【化１１１】
0003787242.tif 000082
【０２７５】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２１２
【０２７６】
実施例５２：
【０２７７】
【化１１２】
0003787242.tif 000083
【０２７８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２０９
【０２７９】
実施例５３：
【０２８０】
【化１１３】
0003787242.tif 000084
【０２８１】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１９７
【０２８２】
実施例５４：
【０２８３】
【化１１４】
0003787242.tif 000085
【０２８４】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２２０
【０２８５】
実施例１に記載した方法を用いるが、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂をＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂に置き換え、試薬Ｋをトリエチルアミン／イソプロパノール混合物に置き換えて、実施例５５〜５７の化合物を得た。
【０２８６】
実施例５５：
【０２８７】
【化１１５】
0003787242.tif 000086
【０２８８】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２４０
【０２８９】
実施例５６：
【０２９０】
【化１１６】
0003787242.tif 000087
【０２９１】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３８
【０２９２】
実施例５７：
【０２９３】
【化１１７】
0003787242.tif 000088
【０２９４】
質量スペクトル：ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３２３７
【０２９５】
薬理学的研究
実施例Ａ：ＧＬＰ−１受容体結合の研究
４％ＢＳＡと７５０μg/mlのバシトラシンとを含有する６０mMトリスＨＣｌ緩衝液、pH７．５中でのＲＩＮ−Ｔ３膜を用いて、ＧＬＰ−１受容体結合の研究を実施した。膜（２０〜３０μg）を、〔１２５Ｉ〕−ＧＬＰ−１（５０，０００cpm）約１５fmol、および非放射性競合物質とともに、５００μlの最終体積として３７℃で４５分間インキュベーションした。３％ＢＳＡを含有する７５０μlの非放射性ＫＲＰ緩衝液、pH７．５の添加によって、反応を停止させた。混合物を１２，０００ｘｇ（４℃、５分）で遠心分離した。残渣を非放射性ＫＲＰ緩衝液１mlに再懸濁させ、更に遠心分離して沈澱させ、放射能を測定した。結果をＩＣ50として表わす。
【０２９６】
結果：
得られた結果は、本発明の化合物が、ＧＬＰ−１受容体に対して非常に高い親和性を有することを示す。
このことは、特に実施例７の化合物について該当し、実施例７の化合物は、３．３×１０-10Mという親和性を有していた。
【０２９７】
実施例Ｂ：アゴニストまたはアンタゴニスト特性の決定
本発明の化合物のアゴニスト特性は、試験しようとする異なる化合物による受容体の活性化の後に、環状ＡＭＰの産生を測定することによって決定した。
ＲＩＮ−Ｔ３細胞を６日間培養し、実験の１日前に培地を変えた。細胞（１ウェルあたり３×１０5個）をＤＭＥＭで２回洗浄してから、１％ＢＳＡ、ＩＢＭＸ０．２ml、および試験しようとするペプチドを含有するＤＭＥＭ０．５mlを加えた。２５℃で２０分間インキュベーションした後、細胞内ｃＡＭＰを抽出し、スクシニル化し、ラジオイムノアッセイによって定量した。
１００％の参照値は、１０-8Mの濃度のＧＬＰ−１が誘導するｃＡＭＰの産生に相当し、０％の値は、ＧＬＰ−１の不在下での産生基底値に相当する。
結果をＥＣ50として表わす。これは、１０-8MのＧＬＰ−１の濃度を用いて得られるｃＡＭＰの産生の５０％を誘導する濃度である。
【０２９８】
結果：
本発明の化合物は、アゴニスト特性を示す。それらは、ｃＡＭＰの産生を増大させ、ナノモルまたはナノモル下レベルのＥＣ50値を有する。例として、実施例７の化合物は、１．０２×１０-9MというＥＣ50を有していた。
【０２９９】
実施例Ｃ：培養中の細胞におけるインスリン産生の刺激の研究
本発明の化合物が誘導するインスリン産生の刺激を、Ｍｉｎ６細胞（培地０．５ml中に１ウェルあたり５×１０5個の細胞）を用いて研究した。実験の１８時間前に、培地をピペットで計り取り、０．１％ＢＳＡを含有するＤＲＢ、pH７．５で細胞を２回洗浄した。次いで、細胞を、１mMグルコースを含有するＤＲＢ−ＢＳＡ中で１時間、プレインキュベーションし、その後、異なる濃度のグルコースと、試験しようとする化合物とを含有するＤＲＢ−ＢＳＡ中でインキュベーションした。インキュベーション後、混合物を捕集し、５分間遠心分離し、−２０℃で保存した。インスリンの分泌を、ヨウ素１２５で標識したブタインスリンと、モルモットのKervran抗インスリン抗体とを用いたラジオイムノアッセイによって決定した。
【０３００】
結果：
本発明の化合物は、インスリン分泌をtＧＬＰ−１より実質的に刺激することができた。
【０３０１】
実施例Ｄ：代謝安定性の研究
各化合物を、１％トリフルオロ酢酸水溶液中の５０mg/mlのＢＳＡに溶解して、１mg/mlの濃度とした。
調べようとするペプチドを含有する溶液の５０μg/mlのアリコートを、ヒト血漿中で３７℃でインキュベーションした。ＨＰＬＣ線形解析法により、時間Ｔ0、次いでインキュベーション５、１０、１５、３０および６０分後でのペプチドの量の測定を行うことができた。
１mg/mlのペプチドを含有する上記に調製した溶液の５０μlのサンプルを、９４０μlの０．１Mトリス、pH８．０に加えた。ＨＰＬＣによって溶液を分析して、ペプチドの量を決定した後、４８ミリ単位のジペプチジルペプチダーゼIV（ＤＰＰIV）を含有する水溶液１０μlを加え、サンプルを、時間Ｔ０、および３７℃で１０分間のインキュベーション後にＨＰＬＣによって分析する。
測定結果から、残留ペプチドの量を評価し、Ｔ０に対する百分率として表わした。
【０３０２】
結果：
本発明の化合物は、天然ペプチドのそれより優れた安定性を示すと考えられた。
例として、tＧＬＰ−１と実施例７の化合物とで得られた結果を、下表にまとめる。
【０３０３】
【表２】
0003787242.tif 000089
【０３０４】
【表３】
0003787242.tif 000090
【０３０５】
実施例Ｅ：抗高血糖活性
体重約２５０ｇの３ヶ月齢の正常なウィスター系雄ラットで、本発明の化合物の抗高血糖活性を調べた。グルコース耐容性試験によって、ホメオスタシスを評価した。
【０３０６】
・静脈内グルコース耐容性試験（ＩＶＧＴＴ）
グルコースを０．９％ＮａＣｌ水溶液に溶かし、ペントバルビタール（６０mg・kg-1、腹腔内）で麻酔したラットに、伏在静脈の経路で投与した。グルコース注射の前と、２、５、１０、１５、２０および３０分後とに、尾の血管から血液サンプルを逐次採取した。次いで、遠心分離し、血漿を取り出した。血漿中グルコース濃度を、１０μlのアリコート中で直ちに決定し、残余の血漿を−２０℃に保っておき、ラジオイムノアッセイによって、インスリン濃度を決定した。
Hendrickら〔Metabolism, 1993, 42, 1〕が記載したプロトコルに従い、グルコース負荷の直後にペントバルビタールで麻酔した絶食中のラットに、試験しようとする化合物を１回静脈内注射した。
【０３０７】
・分析法
グルコース分析装置（Beckman Inc., Fullerton, CA）を用いて、血漿中グルコース濃度を決定した。二つのパラメータ：ΔＧおよびＫと関連付けて、グルコース耐容性を測定した。
ΔＧは、１g/kgの用量でのグルコースの過負荷後の３０分の期間にわたって積分した、基線を超える血糖の増加を表わす。
Ｋは、グルコース投与後５〜３０分間のグルコース消失の速度である。
本発明の化合物は、tＧＬＰ1のそれと同等であるか、またはそれより優れたインスリン分泌および抗高血糖活性を有し、より優れた作用の持続、ならびにより高いin vivoでの代謝安定性を有すると考えられた。
【０３０８】
実施例Ｆ：製剤組成物：注射用溶液
実施例７の化合物…………………………………１０mg
注射用製剤用蒸留水………………………………２５ml