(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｖ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化７】
0003778997.tif 000013
【請求項２】
下記式（ＶＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化８】
0003778997.tif 000014
【請求項３】
下記式（ＶＩＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化９】
0003778997.tif 000015
【請求項４】
下記式（ＶＩＩＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１０】
0003778997.tif 000016
【請求項５】
下記式（ＩＸ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１１】
0003778997.tif 000017
【請求項６】
下記式（Ｘ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１２】
0003778997.tif 000018
【請求項７】
下記式（ＸＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１３】
0003778997.tif 000019
【請求項８】
下記式（ＸＩＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１４】
0003778997.tif 000020
【請求項９】
下記式（ＸＩＩＩ）で表される創傷治療物質を有効成分として含むことを特徴とする創傷治療剤。
【化１５】
0003778997.tif 000021
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は特定の化合物からなる創傷治療物質、及び該物質を有効成分として含む創傷治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
創傷は、外科的切開、消化管潰瘍、火傷、裂傷または皮膚潰瘍（褥瘡など）などの表面組織の損傷である。創傷の治療法としては、受傷部を応急処置したのち、生体の自然の回復力によって受傷部が治癒するのを待つのが常法である。しかしながら、回復までに長期間を要し、痛みをはじめとした患者の苦痛は並大抵のものではない。そこで、自然治癒に頼ることなく、積極的かつ直接的に治癒を促進させることが望まれている。創傷の治癒は一般に細胞増殖による新しい結合組織および上皮組織の形成に依存し、創傷の治癒に関与する細胞の分化、増殖過程を刺激あるいは促進する薬剤が有効であると考えられている。
【０００３】
従来、創傷治癒の促進作用を示すものとしては、幼牛血液抽出物（ソルコセリル）（応用薬理、２２巻、５６５〜５７９頁、１９８１年）やトコレチナート（オルセノン軟膏）（応用薬理、４３巻、１２１〜１２７頁、１９９２年）等が報告されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、上述の創傷（表面組織の損傷）は、概して難治性であり、既存薬では充分な臨床効果が認められないことが多い。
【０００５】
本発明の目的は、この点に鑑み、有効性の高い新規創傷治療物質及び新規創傷治療剤を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成すべく研究を重ねた結果、特定のペプチド化合物、または医薬として許容されるその塩が、後述する薬理試験の結果から分かるように、創傷治療に有効であることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明により、一般式（Ｉ）
【化３】
0003778997.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒ1 は水素、アシル基または置換されたアシル基、アルキル基または置換されたアルキル基、水酸基または置換された水酸基、アミノ基または置換されたアミノ基を、Ｒ2 は水酸基または置換された水酸基を、Ｒ3 はカルボキシル基または保護されたカルボキシル基をそれぞれ示すか、またはＲ3 とＲ2 は互いに結合して−ＣＯＯ−基を示し、Ｒ4 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基を、Ｒ5 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基、水酸基または置換された水酸基を、Ｒ6 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基を、Ｒ7 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基、アミノ基または置換されたアミノ基、水酸基または置換された水酸基をそれぞれ示すか、またはＲ6 とＲ7 はそれらの一部で互いに結合しており、Ｒ8 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基を、Ｒ9 は水素、アルキル基または置換されたアルキル基、水酸基または置換された水酸基を、Ｒ10は水素、アルキル基または置換されたアルキル基を、Ｒ11は水素、アルキル基または置換されたアルキル基、水酸基または置換された水酸基を、Ｒ12は水素、アルキル基または置換されたアルキル基を、Ｒ13は水素、アルキル基または置換されたアルキル基、アミノ基または置換されたアミノ基、水酸基または置換された水酸基をそれぞれ示すか、またはＲ12とＲ13はそれらの一部で互いに結合している）
で表される化合物のうち、下記式（II）
【化４】
0003778997.tif 000003
【０００９】
で表される化合物を除く化合物、または医薬として許容されるその塩からなる創傷治療物質が提供される。
【００１８】
本発明による創傷治療物質としては、公知化合物である、式（Ｖ）で示されるＶｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ(Nishiyamaら、J.Antibiotics 46:921-927,1993)、式（VI）で示されるＡｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ(Maehrら、J.Antibiotics 39:17-25,1986)、式(VII) で示されるＣｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ(Nakagawa ら、J.Antibiotics 43:477-484,1990)、式(VIII)で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、式(IX)で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、式（Ｘ）で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ(Grafeら、J.Antibiotics 48:119-125,1995)、式(XI)で示されるＬ−１５６６０２(Hensen ら、J.Antibiotics 44:249-254,1991)、式(XII) で示されるＬＣ−１０１(Ueno ら、J.Antibiotics 46:1658-1665,1993)、式(XIII)で示されるＧＥ３( 特開平７−２７８１８８号公報）等が挙げられる。これらは、創傷治療作用があることは全く知られていなかった。
【００２１】
【化７】
0003778997.tif 000004
【００２２】
【化８】
0003778997.tif 000005
【００２３】
【化９】
0003778997.tif 000006
【００２４】
【化１０】
0003778997.tif 000007
【００２５】
【化１１】
0003778997.tif 000008
【００２６】
【化１２】
0003778997.tif 000009
【００２７】
【化１３】
0003778997.tif 000010
【００２８】
【化１４】
0003778997.tif 000011
【００２９】
【化１５】
0003778997.tif 000012
【００３０】
本発明化合物（Ｉ）の医薬として許容される適当な塩の種類としては、慣用の無毒性の塩、すなわち各種塩基との塩および酸付加塩を挙げることができる。より具体的には、アルカリ金属塩（例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩やマグネシウム塩等）、アンモニウム塩等の無機塩基との塩、有機アミン塩（トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、エタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ' −ジベンジルエチレンジアミン塩等）のような有機塩基との塩、無機酸付加塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、燐酸塩等）、有機カルボン酸付加塩または有機スルホン酸付加塩（例えば、ギ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等）、塩基性アミノ酸または酸性アミノ酸との塩（例えばアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸等）等が挙げられる。
【００３１】
本発明による創傷治療物質を製剤化するには、通常はこれを製剤用担体とともに製剤組成物の形態とする。担体としては剤形に応じた薬剤を調製するのに通常使用される充填剤、崩壊剤、増量剤、結合剤、着色剤、矯味矯臭剤、ｐＨ調整剤、可溶化剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤、付質剤、界面活性剤、滑沢剤、賦形剤、抗酸化剤、分散剤、噴射剤、溶解剤、溶解補助剤が例示される。また上記の化合物又は医薬として許容されるその塩を適当な溶剤に溶解して、上記の化合物又はその塩をそのままの形態で液剤とする方法によっても製造される。
【００３２】
本発明創傷治療物質を用いて製剤化される創傷治療剤の投与単位形態としては、上記のごとき液剤のほか、錠剤、丸剤、飲用液剤、散剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、エキス剤、細粒剤、シロップ剤、浸剤、煎剤、点眼剤、トローチ剤、パップ剤、リニメント剤、ローション剤、眼軟膏剤、硬膏剤、カプセル剤、坐剤、浣腸剤、注射剤（液剤、懸濁剤など）、貼付剤、軟膏剤、ゼリー剤、パスタ剤、吸入剤、クリーム剤、スプレー剤、点鼻剤、エアゾール剤などが例示される。
【００３３】
創傷治療剤中に含有すべき本発明創傷治療物質の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、好ましくは創傷治療剤中に１０-7〜１０重量％の範囲である。
【００３４】
本発明の創傷治療物質より得られた創傷治療剤は、その使用に際し各種形態に応じた方法で投与される。例えば、外用剤の場合には、皮膚ないしは粘膜などの所要部位に直接噴霧、貼付または塗布され、錠剤、丸剤、飲用液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤およびカプセル剤の場合には経口投与され、注射剤の場合には静脈内、筋肉内、皮内、皮下、関節腔内もしくは腹腔内投与され、坐剤の場合には直腸内投与される。
【００３５】
本発明の創傷治療物質より得られた創傷治療剤の投与量は、使用目的、症状などにより適宜選択されるが、通常は１日当り本発明創傷治療物質として１０ｐｇ〜１ｍｇ／ｋｇ程度の範囲である。また上記製剤組成物を１〜４回／日に分けて投与することも勿論差し支えない。
【００３６】
【実施例】
次に、本発明の実施例を挙げて、上述した効果を実証する。
【００３７】
実施例１
本発明の一般式（１）で示される化合物のうち、前記式（Ｖ）で示されるＶｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ、前記式（VI）で示されるＡｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、前記式(VII) で示されるＣｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、前記式(VIII)で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、前記式(IX)で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、前記式（Ｘ）で示されるＡｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、前記式(XI)で示されるＬ−１５６６０２、前記式(XII) で示されるＬＣ−１０１、及び前記式(XIII)で示されるＧＥ３について、以下のようにして創傷治療作用を調べた。これらの化合物は、それぞれ前述の文献に記載されている方法によって製造した。
【００３８】
薬理試験
試験例１  肉芽増殖作用
Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎを、最終濃度がそれぞれ５μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌおよび５００μｇ／ｍｌになるようにメタノールに溶解した。各濃度のメタノール溶液の２０μｌ（この中に含まれるＶｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ量は、０．１μｇ〜１０μｇとなる）を直径８ｍｍのペーパーディスク（アドバンテック社製の抗生物質検定用濾紙）に２回に分けて染み込ませた後、風乾によりメタノールを除去した。
【００３９】
被験動物としては体重１２０〜２００ｇのウイスター雄性ラットを用いた。
【００４０】
ラットをエーテル麻酔下で剃毛し、背部正中線に沿ってメスで約３ｃｍの切創部を作成した。作成した切創部より上記ペーパーディスクを皮下に埋め込んだ後、切創部を縫合した。１週間後、ラットをエーテル麻酔下にて安楽死させ、皮下からペーパーディスクを取り出し、形成された肉芽の湿重量を測定した。
コントロールとしては、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎを含まないメタノール２０μｌをペーパーディスクに染み込ませ次いで風乾したものを用いた。
【００４１】
本試験はそれぞれ５匹のラットを用いて行い、肉芽湿重量はこれらラットについて得られた値の平均値を取った。
【００４２】
この試験結果を図１に示す。
【００４３】
また、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎの代わりに、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１またはＧＥ３を用い、その他の点は上記操作と同様に行って肉芽増殖能を調べ、これらの試験結果も図１に示す。
【００４４】
図１から判るように、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１またはＧＥ３を１μｇ／ディスク以上の濃度のディスクを埋め込んだ群では、コントロール群に比べて明らかに肉芽湿重量が増加した。従って、本発明創傷治療物質は細胞増殖作用を有することが示された。
【００４５】
試験例２  ラット切創モデルに対する作用
Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎを、最終濃度がそれぞれ５μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌになるように生理食塩水に懸濁し、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎの供試液を調製した。
【００４６】
被験動物としては体重２５０〜３００ｇのウイスター雄性ラットを用いた。
【００４７】
ラットをエーテル麻酔下で剃毛し、背部正中線に垂直な方向にメスで３ｃｍの切創部を作成した。この切創部を等間隔で３ケ所で縫合し、３時間後に上記供試液０．５ｍｌを切創部周辺に皮下投与した。切創翌日より３日間、用時調製した供試液０．５ｍｌを１日１回切創部皮下に投与した。切創４日後にラットをエーテル麻酔下にて安楽死させ、抜糸後、切創中央部２ｃｍを含む短冊状の皮膚切片を切り取った。皮膚切片の結合組織を除去した後、レオメーターを用いて切創部の耐創張力（ｇ／ｃｍ）を測定した。
コントロールとしては、生理食塩水を用いた。
【００４８】
本試験はそれぞれ１５匹のラットを用いて行い、耐創張力（ｇ／ｃｍ）はこれらラットについて得られた値の平均値を取った。
【００４９】
この試験結果を図２に示す。
【００５０】
また、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎの代わりに、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１またはＧＥ３を用い、その他の点は上記操作と同様に行って耐創張力（ｇ／ｃｍ）を求め、これらの試験結果も図２に示す。
【００５１】
図２から判るように、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１またはＧＥ３を投与した群では、コントロール群に比べ、明らかに耐創張力が増加した。従って、本発明創傷治癒物質は強力な創傷治療促進効果を示すことが認められた。
【００５２】
【発明の効果】
本発明によれば、顕著な創傷治療効果を示す創傷治療物質およびこれを含む創傷治療剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  コントロール、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１およびＧＥ３の濃度と肉芽湿重量との関係を示すグラフである。
【図２】  コントロール、Ｖｅｒｕｃｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｚｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ、Ｃｉｔｒｏｐｅｐｔｉｎ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ａ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｂ、Ａｕｒａｎｔｉｍｙｃｉｎ  Ｃ、Ｌ−１５６６０２、ＬＣ−１０１およびＧＥ３の濃度と耐創張力との関係を示すグラフである。
【図１】
0003778997.tif 000022
【図２】
0003778997.tif 000023