(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における加齢またはアルツハイマー症に関連する認識障害の治療を目的としてコリン作用治療法を実施するための医薬において、
患者の体重1kg当り0.001g以上、1g以下の有効量のフェンセリン、またはその薬理学的に許容できる塩を含むことを特徴とする上記の医薬
【請求項２】
哺乳動物がヒトである、請求項1に記載の医薬。
【請求項３】
薬学的に許容できる塩が、酒石酸塩、燐酸塩、およびフマル酸塩からなる群より選択される、請求項1又は2に記載の医薬。
【請求項４】
哺乳動物におけるアルツハイマー症の治療のための医薬において、フェンセリン、またはその薬理学的に許容できる塩を含むことを特徴とする上記の医薬。
【請求項５】
哺乳動物がヒトである、請求項4に記載の医薬。
【請求項６】
薬学的に許容できる塩が、酒石酸塩、燐酸塩、およびフマル酸塩からなる群より選択される、少なくとも一つの塩である請求項4又は5に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
この出願は継続中の出願番号07/861,329（1992年3月31日出願）とその継続中の親出願の07/765,746（1991年9月26日出願）に関連する。
技術分野
この発明は認識障害の治療方法の改良に関する。さらに詳しくは、フィゾスチグミン誘導体、すなわちフェンセリンとその塩に関する。それらは長期に渡って作用するコリンエステラーゼ抑制剤であり、そしてスコポラミンにより引き起こさせれる14ユニットＴ−迷路（14-unit t-maze）中でのラットの学習障害を広範囲の投与量で減衰する。
背景技術
フィゾスチグミンはエセリンともよばれ、コリンエステラーゼ抑制剤として知られる。これらの化合物はまた緑内障、無筋力症、アルツハイマーの治療や有機燐の解毒剤として有用である。
フィゾスチグミンの自然異性体は神経筋ＡＣｈＲの作用薬としての性質と遮断作用を有することが分かってきた。対照的に、（＋）−フィゾスチグミンのコリンエステラーゼ（ＣｈＥ）の抑制は無視できる程度である。（Brossi et al., FEBS Lett., vol.201, p190-192(1986)）
（＋）−フィゾスチグミンのＣｈＥ抑制活性は無視できる程度ではあるが、致死量のサリンの防護的予備治療剤としては効果的である（Albuquerque et al, Fundam. Appl. Caltoxicol., vol.5 p182-203(1985)）。この保護効果はカルバメートが直接的にシナプス後部のニコチニックＡＣｈＲと相互作用をするためと考えられる。有機燐化合物に対するカルバメートの保護効果は、ニュートロトラナミッター（neutrotranamitter）の蓄積による超活性化をカルバメートが減少させる直接的能力に関係している。
上記の情報はコリン作用障害、例えば無筋力症、アルツハイマー症の治療に対する新薬の評価に重要である。新薬は電気ウナギやヒト赤血球アセチルコリンエステラーゼやヒト血漿ブチリルコリンエステラーゼ（ＢＣｈＥ）でインビトロでテストすることにより評価できる。
コリン作用の欠失は老化による認識障害やアルツハイマー症の原因と思われるが（Bartus et al., Science 217: 408-417(1982); Fischer et al., Neurobiol Aging 13: 9-23(1992)）、これらの障害の新しい治療法としてコリン作用の置き換えに更なる研究の焦点があてられてきた。これらの中で、フィゾスチグミン（Ｐｈｙ）とテトラヒドロアミノアクリジン（ＴＨＡ）のようなコリンエステラーゼ抑制剤が動物（Rupniak et al., Neurobiol. Aging 11: 609-613 (1990); Murray et bal. Psychopharmacology 105: 134-136(1991)）のヒトの患者（Mohs et al., J. Am. Geriatr. Soc. 33: 749-757(1985); Summers et al., N. Engl. J. Med. 315: 1241-1245(1986)）における記憶増強作用に関して研究された。
しかしながら、フィゾスチグミンの治療薬としての有用性は持続時間が短いこと、治療範囲が狭いこと、抹消のコリン作用による制限される（Pomponi et al., Aging 2: 125-153(1990)）。ＴＨＡの経口投与が臨床上望ましいが、投与量に関連する肝臓毒が臨床的価値を制限しており（Marks, Science 238: 1041-1042(1987)）、より安全な少量の投与量では肝臓毒となるような高投与量よりも効果が少ない（Gauthier et al., N. Engl. J. Med. 322: 1272-1276(1990)）。
さらに、他のコリンエステラーゼ抑制剤としてフィゾスチグミンのカバーメート誘導体であるヘプチルフィゾスチグミン（ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ）が認識障害のコリン作用治療薬の候補として考えられた（Brufani et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 26: 625-629-(1987); Dawson et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 39: 865-871 (1991); De Sarno et al., Neurochem. Res. 14: 971-977(1989)）。この化合物は親化合物に比べて、毒性が低く、より脂質親和性で、コリンエステラーゼに対してより長い抑制期間を有し、脳中でより長くアセチルコリンを増大させる（Brufani et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 26: 625-629 (1987)）。
さらにまた、ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙはマウスのパッシブ・アボイダンス・テスト（passive avoidance test）における記憶力の強化を助長する（Brufani et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 26: 625-629 (1987)）。そして、げっし動物の長期間の行動テストと記憶力のスコポラミンによって引き起こされる行動欠陥を逆転させる（Dawson et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 39: 865-871 (1991);）。最近の研究によればｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙはスコポラコミンにより引き起こされる14ユニットＴ−迷路（14-unit t-maze）中でのラットの認識障害を減衰する。しかしながらｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙの治療上の範囲は臨床の用途には不十分である。
この技術分野においては、インボビで活性な高度に選択的な薬剤に関しては受容できる治療範囲に関して大きな問題がある。臨床ではコリン作用薬剤を扱うに関して患者間で違いがある（すなわち、個々の患者の吸収、代謝、排泄や病気の過程に基づくコリン作用の機能不全である）。それらは薬効に強い影響を与え、特にアルツハイマー症にかかっている人口割合が多い老人に使用される薬剤で問題である。
かかる問題は比較的狭い治療範囲の薬剤に関しては複雑になる。というのは最適投与量を定めるのが困難だからである。特に老人の場合そうである。それは薬剤の面で個人差が大きく、また患者の他の疾患のための薬剤との複合投与に影響されるからである。コリン作用治療を必要とす患者の多くは老人で、他の疾患を持っているため、この問題は特に大きい。
従って、コリン作用の置き換え療法とこれらの障害の治療のための受容できる治療範囲を有し、動物とヒトの両方で記憶強化作用があり、副作用が少なく、インビボで活性な高度に選択的な薬剤が必要とされる。
発明の要約
本発明の目的は老化とアルツハイマー症による認識障害に対する改良されたコリン作用治療（cholnomimetic therapy）の提供を目的とし、有効量のフェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）またはその薬理学的に許容できる塩を患者に投与することからなる。
本発明の他の目的はフェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）の新規な薬理学的に許容できる塩と該塩の有効量からなる医薬組成物を提供することである。
本発明のさらに他の目的はフェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）またはそ薬理学的に許容できる塩よりなる医薬組成物を提供することである。
上記及び他の目的に従って、本発明はフェンセリンとその塩の有効量からなる医薬組成物、および有効量のフェンセリンまたはその薬理学的に許容できる塩で患者を治療することからなる老化とアルツハイマー症による認識障害の治療方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
出願に添付した図を説明する。
第１図は後記のように、Ｆｉｓｈｅｒ−３４４ラットの血漿の一連の試料におけるフィゾスチグミンとフエンセリンのｉ．ｖ．によるインビボのＡＣｈＥ抑制を表した図である。
第２図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのエラー数を、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムの説明は後記する。
第３図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのエラーの比を、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムの説明は後記する。
第４図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル単位当たり走行時間を秒数で、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムの説明は後記する。
第５図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのショック数を、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムの説明は後記する。
第６図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、各ブロック５回の試行単位当たりのショックの持続時間を秒数で、平均と標準エラーで表したものである。各部ブロックの８つのヒストグラムの説明は後記する。
第７図は各ブロック３回のトライアル当たりの平均エラーを表した図であり、ＳＣＯＰで処理されたラットはＳＡＬ群に比較し障害ある行動を示し、2.0−ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ群はＳＣＯＰ群に比べてエラー行動が少ない。
第８図は15回トライアル当たりの平均（±ＳＥ）エラーを表した図である。2.0−ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ群はＳＣＯＰ群より遥かに（Ｐ＜0.05）優れた行動を示す。
第９図は各ブロック３回の試行当たり他のエラーを犯す機会に対するその他のエラーの平均割合を表した図であり、ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ処理はＳＣＯＰ処理ラットが別の戦略によるエラーを犯す傾向に何の影響も与えない。
発明の説明
本発明は老化とアルツハイマー症による認識障害に対する改良されたコリン作用治療法（cholnomimetic therapy）を提供する。この方法は、有効量のフェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）活性体またはその薬理学的に許容できる塩を患者に投与することからなる。塩または遊離塩基は等しく有効である。特に好ましいフェンセリンの塩は酒石酸塩、燐酸塩及びフマル酸塩である。「有効量」とは患者の病状を改善するのに効果のある活性体の投与量を意味する。
本発明はまたフェンセリン（（−）−ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）の新規な薬理学的に許容できる塩を提供する。すなわち、フェンセリンの酒石酸塩、燐酸塩及びフマル酸塩である。有効量の塩からなる医薬組成物が特に好ましい。
本発明はまたフェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）またはそ薬理学的に許容できる塩および薬理学的に許容できる担体または賦形剤よりなる医薬組成物を提供することである。
フェンセリン（（−）−Ｎ−フェニルカルバモイル  エセロリン）は長期のコリンエステラーゼ抑制作用を有するフィゾスチグミン（Ｐｈｙ）のカーバメイト類似体である。フェンセリンはPolonovskiにより初めて製造された（Bull. Soc. Chim. 19, 46-59(1916)）。技術データはBeilstein, Handbuch der Organischen Chem, 4th edn. vol 23. Springer Verlag, Berlin, pp 333 (1954)に纏められている。文献には実用的用途は記載されていない。
本発明のフェンセリン化合物は前に述べられているように（−）−エセロリンとフェニルイソシアネートから製造される。（Brzostowska et al., Med. Chem. Res.（印刷中 1992））
製造法は次のとおりである。
（−）−エセロリン（１），0.9ｇ，4.12ｍｍｏｌを無水エチルエーテル（90ｍｌ）に溶解し、金属Ｎａの小片数個（約31ｍｇ）を加える。窒素雰囲気下に室温で５分撹拌した後、フェニルイソシアネート（569ｍｇ，5.03ｍｍｏｌ）を滴下する。完全に加えたら、直ちに溶剤を蒸留しフォームとする（１．２５ｇ重）。ついでこれを酢酸エチルから再結晶し、0.9ｇの結晶フェンセリン（２）を得る。
フッシャー−ジョーンズ装置による融点（補正なし）は142−143℃。
パーキン−エルマー−２４１ＭＣ自動ポーラリメーターによる光学旋光度（［α］D，ＣＨＣｌ3）は［α］D−74.2°。
ベックマン−ＩＲ−４２３０装置によるＩＲスペクトル（ｃｍ-1，ＣＨＣｌ3）は（ｃ＝0.5，ＣＨＣｌ3）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル  ＧＨＬＦ，250μ）、溶剤系ＣＨ2Ｃｌ2／５％ＭｅＯＨはシングルスポットを生じる。
さらに通常相の狭い口径（normal phase narrow bore  ２×30mm）の予備カラムと分析カラム（２×220mm，アプライド−バイオシステム）を用い、52％  0.01Ｍギ酸、27％  アセトニトリルおよび21％  0.05Ｍ  トリスバッファによる移動相（流速  0.5ｍｌ／ｍｉｎ）および蛍光による検出（250ｎｍの励起と345の放射波長にセット）を使用したＨＰＬＣの分析は、同様にシングルピークを示した。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3中、内部標準  Ｍｅ4Ｓｉ,δｐｐｍ,Ｊ  Ｈｚ）による測定はバリアン  ＸＬ−３００ＭＨｚによれば  δ  7.01−7.34（ｍ,５Ｈ）であった。
最後にＦｉｎｎｉｇａｎ−１０１５Ｄ  マス−スペクトロメーターによる化学イオン化（ＣＩ−ＭＳ）はｍ／ｚ（Ｍ+＋１）が338であった。
反応は次のとおりである。
0003778363.tif 000002
本発明は老化とアルツハイマー症に起因する認識障害のコリン作用治療に対するフェンセリンとその塩の臨床的価値に関する。以下述べるように、フェンセリンはラット血漿アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）、それは脳のＡＣｈＥのマーカーであるが、に対するインボビ活性の持続時間、および若齢ラットのスコポラミンにより生起されるショックによって起こる14−ユニットＴ−迷路（shock-motivated 14-unit T maze）での学習行動の障害に対する影響で評価された。これはげっし動物の認識強化薬の評価モデルとして受け入れられているものである（D.K. Ingram, Neurobiology of Aging, vol. 9, p 475-485, 1988）。フェンセリンは５分で73.5％の最大ＡＣｈＥ抑制を達成し、８時間以上にわたり高くて比較的一定の抑制を維持する。学習行動を分析するために、69匹の３月齢の雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４マウスに電気による足ショックを避けるように直線走行を訓練した。次の日に各動物を14−ユニットＴ−迷路を15回トライアルさせた。迷路訓練の60分前に、各ラットに担体（Ｔｗｅｅｎ80，エタノールおよび0.9％Ｎａｃｌ）またはフェンセリン1.5，3.0，4.0，5.0，7.5または10.0ｍｇ／ｋｇの最初のｉ．ｐ．注射をした。ついで訓練の30分前に各動物は0.9％Ｎａｃｌまたはスコポラミンハイドロクロライド（0.75ｍｇ／ｋｇ；ＳＣＯＰ）の２回目の注射をした。
担体−ＳＣＯＰ群に比べ、７．５ｍｇ／ｋｇ投与を除くフェンセリンは全て、３トライアルの最後のブロックにおいてＳＣＯＰ処理ラットに比べてエラー行動、走行時間、ショック頻度及びショック持続時間の改善が認められた。長時間の効果持続性と広範囲の治療域に見られるように、フェンセリンは認識強化剤として非常に有用と思える。
フェンセリンはヒトアセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）に対してその親化合物であるフィゾスティグミン（Ｐｈｙ）と同様の効能を有する。ＩＣ５０値は24.0±6.0対27.9±2.4 ｎＭである。しかし、ヒトブチリルコリンエステラーゼ（ＢＣｈＥ）活性はフィゾスティグミン比較して低い。ＩＣ５０値は1300.0±8.5 ｎＭ対16.0±2.9 ｎＭである（Brzostowska et al, 1992）。従って、フェンセリンはアセチルコリンエステラーゼに対して高い選択性を有する。このことは中心的な作用薬としては非常に有用な性質である。
ＡＣｈＥとＢＣｈＥは脳とその抹消組織に共存するが、ＡＣｈＥはＡＣｈの加水分解に関与し、コリン作用系の神経要素に関連している。脳ではＢＣｈＥは主として組み合わせられたグリア細胞に関連し、神経系のニューロン要素と限定された様式で存在する。ＢＣｈＥの役割は大部分は未知であるが、次のことに関与しているいう証拠がある。
（１）大脳の代謝で形成されるいくつかのコリンエステルの除去において保護的役割を有する。それらのコリンエステルはＡＣｈＥとコリン作用系に悪影響を与える。
（２）ＢＣｈＥは緩慢な神経伝達プロセスに関与しているようである。
（３）脂質およびりん脂質代謝において役割を有している。
（４）イオンの膜透過と輸送の制限に関与している。
フェンセリンのようなＡＣｈＥの長期的且つ選択的な抑制剤の使用は従来の技術に比して副作用が少なく治療範囲がより広いはっきりしたコリン作用強化剤である。
フィゾスチグミンのＬＤ50は抹消抑制剤（peripheral inhibitor）非存在で0.6ｍｇ／ｋｇである（Marta et al, Life Sciences 43:1921-1925, 1988）。この薬剤の治療範囲は低く、大きな副作用が生じるレベルでコリンエステラーゼ抑制を生じるだけである。これはヒトに対する治療価値を大幅に減じる。しかし、フェンセリンの毒性は劇的に小さい。抹消抑制剤非存在で20ｍｇ／ｋｇ投与しても毒性を示したり死に至るようなことはない。このような高投与量でわずかな中枢神経系の震えがある。げっし動物に対して20ｍｇ／ｋｇ以上の投与はされていないので、フェンセリンのＬＤ50は未知であるが、フィゾスチグミンよりはるかに大きい。
我々は以前に脳と血漿のＡＣｈＥおよびＢＣｈＥのＩＣ50の値（抑制）はフィゾスチグミンとその類似体で類似していることを示し、ついで酵素の抑制の時間依存性をプラズマからの連続したサンプリングで示した（Atack et al, Journ. Pham. Exp. Ther. 249:194-202, 1989）。
以下に述べるテストはインビボ活性の持続時間とスコポラミンで生起された若齢マウスの14ユニットＴ迷路における学習行動障害の減少を評価することにより（Spangler et al, Pharmacol. Biochem. Behav. 25:673-679(1986)）、フェンセリンのコリン作用強化剤としての価値を最初に明らかにしたものである。
このモデルはコリン強化作用の評価手段としてよく認められているものであり、従来他のフィゾスチグミン類似体の価値をテストするのに用いられてきた。比較テストはこれらの中で最良のものでも（ヘプチル−フィゾスチグミン，Merk, Rahway, N.J.）フェンセリンより劣っていることを示している。加えて、フィゾスチグミン自体は薬理作用が短いために、このモデルではほとんど活性を示さない。
実施例１
コリンエステラーゼ抑制
目的と方法    ３月齢の雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットをハロセン（Ayerst New York, NY）で麻酔した。ヘパリン化した等張生理食塩水を満たしたＰＥ５０カテーテルを右大腿動脈と静脈に結んだ。ついで動物は頭と前４半部だけを動かせるようにして石膏型に固定し、温度制御雰囲気下で麻酔から覚めさせた。未処理レベルのＡＣｈＥ活性を測定するために血漿を採取した。手術から90分後にヘキサメトニンブロマイド（５ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内に投与し、ついで10分後にアトロピンメチルブロマイド（４ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射した。これら４級のニコチンおよびムスカリンの遮断剤は血中脳障壁（blood brain barrier）を越えず、ＡＣｈＥ抑制による抹消のコリン作用の暴走、これらは有害なものであるが、を抑制する。手術の２時間後にフィゾスチグミン２ｍｇ／ｋｇまたはフェンセリン１ｍｇ／ｋｇを静脈に投与した。両者は静脈内ボーラス注射に適するように調剤した。血漿サンプルを抑制剤の静脈投与直前および２分から８時間の間数回採取し、直ちに−70℃で凍結した。
実施例２
ＡＣｈＥの分析
サンプルはEllmanのスペクトロ分析法（Eillman et al., Biochem. Pharmacol., 7 88-95(1961)）を用い、Atackの方法（Atack et al., J. Pharm. Exp. Ther. 249: 194-202(1989)）でＡＣｈＥを分析した。しかし、ヒト血漿と違い、ラット血漿中にはＡＣｈＥとＢＣｈＥの両者が存在する。そこで、特定のＢＣｈＥ抑制剤であるＩｓｏ−ＯＭＰＡ（１×100−４Ｍ）を全てのＡＣｈＥ抑制の同定において使用した。
実施例３
行動テスト
目的    ６９匹の３月齢雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラット（Harlan Splague-Dawley, Indianapolis, IN）を使用した。それらは22℃に保たれた12時間−明／１２時間−暗の光サイクルの飼育場の二重のプラスチックケージ中で飼育された。水と餌は自由に与えられた。ラットはテストの前に飼育場で３週間順化された。
実施例４
装置
以前に述べられた（Spangler et. a;., Pharmacol. Biochem. Behav. 25: 673-679(1986)）２ｍ長の直線走行路が一方通行活動回避（one-way active avoidance）の予備訓練のために用いられた。走行路は床がステンレスの格子の透明プラスチックからなり、格子には電気ショックが与えられるように一定の電流が流れる電線が繋がれている（Model E13-08, Coulbourn Instruments, Lehigh Valley, PA）。スタートとゴールはギロチンドアを有する互換可能な黒いプラスチックボックスで、走行路の両側に置けるようになっている。
以前詳細に述べたように（Spangler et al.,1986)、床がショック源（Model E13-08, Coulbourn Instruments, Lehigh Valley, PA）に繋がっているステンレスの格子（２×２ｍ）の自動１４−ユニットＴ−迷路を迷路訓練に使用した。迷路はギロチンドアを有する５つの小部屋に分かれており、ラットが前の小部屋に戻れないようになっている。
迷路中に設けられた赤外線センサーがマイクロプロセッサーに繋がれ、エラーと走行時間を電気的に記録するようになっている。直線走行路においては互換可能な黒のプラスチックボックスがスタートとゴールボックスとして使用されている。視覚的手掛かりを少なくするよう４つの灰色の壁が迷路を囲んでいる。無関係な音をマスキングするために床下に取り付けられた４個のオーディオスピーカーからラジオ音楽が絶えず流れている。迷路全体はテスト中床をきれいに保って臭いを除くように、高くおかれている。
実施例５
予備訓練（１日目）
最初のトライアルとして、各ラットをホームケージから取り出し、互換可能なスタート／ゴールボックスにいれ、ボックスからそっと直線走行路に押し出した。スタートからゴールまで10秒以下で移動するとショックが避けられる。10秒の回避時間を越えると、動物がゴールに逃げ込むまで足にショック（0.8ｍＡ）が与えられる。ゴールボックスに入ると、ギロチンドアが降下し、ボックスは保持部からスタート部へと移動する。
２分間隔（ＩＴＩ）で次のトライアルが始まる。直線走行予備訓練の合格判定は最大30回のトライアルで15回のうち13回成功（ショックなし）で、全てのラットが合格した。
実施例６
薬剤処理（２日目）
注射の45分前に動物をホームケージから試験室に取り出した。動物はランダムに８つ処理グループのうちの１つに割り当てて、２回のｉ．ｐ．注射をした。迷路訓練の60分前に、各ラットに担体またはフェンセリンを1.5から10ｍｇ／ｋｇを最初にｉ．ｐ．注射をした。次に訓練の30分前に各動物に0.9％Ｎａｃｌ（ＳＡＬ）またはスコポラミンハイドロクロライド（0.75ｍｇ／ｋｇ；ＳＣＯＰ）を第２回ｉ．ｐ．注射した。
フェンセリンはＴｗｅｅｎ６０／エタノール（３：１  ｖ：ｖ，最終体積の15％）に溶解し、0.9％Ｎａｃｌで希釈した。全ての注射は１ｍｌ／ｋｇ体積で打った。最終グループの組成は次のようになっている。
（ａ）ＳＡＬグループ（ｎ＝１０）  （最初の注射で）担体＋（２回目の注射で）ＳＡＬ  （このグループは第２−６図において黒の最初のヒストグラムカラムで表す）。
（ｂ）ＳＣＯＰグループ（ｎ＝14），担体＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において斜線でハッチした２番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｃ）1.5−ＰＨＥグループ（ｎ＝６），フェンセリン（1.5ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において点線の逆斜線の３番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｄ）3.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝９），フェンセリン（3.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において点模様の３番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｅ）4.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝10），フェンセリン（4.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において白抜きの５番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｆ）5.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝10），フェンセリン（5.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において黒地に白抜きの斜線の６番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｇ）7.5−ＰＨＥグループ（ｎ＝４），フェンセリン（7.5ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において横線ハッチの７番目のヒストグラムカラムで表す）。
（ｈ）10.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝６），フェンセリン（10.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ（このグループは第２−６図において実線と一点鎖線の斜線ハッチの８番目のヒストグラムカラムで表す）。
この研究ではフィゾスチグミンの場合のように抹消コリン作用抑制剤は与えず、毒性副作用なしに大用量投与ができた。
実施例７
１４−ユニット−Ｔ迷路での訓練（２日目）
以前に述べられた（Spangler et. a;., Pharmacol. Biochem. Behav. 25: 673-679(1986)）ように、14−ユニット−Ｔ迷路の訓練では、ラットがスタート点からゴールボックスまで途中の14の標識を学習することにより足にショックを受けることなく移動することを要求する。要約すれば、今回の方法は次のとおりである。予備訓練として、第１回目トライアルでラットをホームケージから取り出してスタートボックスに入れる。動物はそっと迷路に押し出され、ショックを避けるための標識が機械的にセットされる。ギロチンドアで隔てられた各小部屋では、足へのショックを避けるためには動物は10秒以内に小部屋を通ってドアの向こう側に移動しなければならない。10秒の時間制限を越えると、自動的に足に電気ショック（0.8ｍＡ）が与えられ始め、ギロチンドアを通り抜けるまで続く。ついでこのギロチンドアが降下し、次の小部屋にショックを避けるための標識が再セットされる。トライアルは動物がゴールボックスに入って完了する。動物が入っているゴールボックスは保持部からスタート部へと移動する。２分のＩＴＩ後に次のトライアルが始まる。各動物は14−ユニット−Ｔ迷路で15トライアルで１セッションの訓練を受けた。全ての訓練は９：００ａｍから５：００ｐｍの間に行われた。
実施例８
静的分析
14−ユニット−Ｔ迷路で得られたデータは５つの測定値からなる。エラー（正しい経路からのずれ）、他のエラー、走行時間、ショックの頻度、そして前に定義されたショック継続時間（Fischer et al., Neurobiol. Aging 13: 9-23(1988); Mandel et al., Psychopharmacology 96: 421-425(1988)）。他のエラーとは他の戦略に起因するエラーのことである（すなわち、Ｌ−Ｒ−ＬまたはＲ−Ｌ−Ｒ旋回のような一連の不正確な行動）。各ブロック（３回のトライアル）の訓練の行動変化に対する変動値（ＡＮＯＶＡ）を解析することにより、満足すべき発見が得られた。コントロールであるＳＣＯＰグループに対してＳＡＬグループと各ＰＨＥグループを比較するために、Ｄｕｎｎｅｔｔテストを行った（ｐ＜0.05）。
実施例９
コリンエステラーゼ抑制の結果
第１図に示すようにフィゾスチグミンは血漿ＡＣｈＥを２分以内に約50％抑制する。その後フィゾスチグミンの酵素抑制は急速に減少し60分では無視できる程度である。一方、フェンセリンは５分で73.5％抑制という最大値を示し、研究を通てじ高くて比較的一定の抑制を示し、８時間で48.0％に減少する。
実施例１０
行動
ＳＡＬグループに比べてＳＣＯＰグループはトライアルの５ブロックのほとんど全てにおいて、５つの全ての迷路試験測定値で非常に悪い結果を示した（第２−５図）。ブロック５ではフェンセリンは7.5ｍｇ／ｋｇ投与以外の全てで、スコポラミン処理ラットのエラー行動、走行時間、ショック頻度およびショック持続時間においてＳＣＯＰグループに比較し遥かに優れていた（第２，４，５，６図）。ブロック４でのエラー数もフェンセリンは7.5ｍｇ／ｋｇ投与以外の全てで大きく減少した。しかしＰＨＥグループとＳＡＬグループを比較すると５つの全ての測定値で改良の余地があった。他のエラーについてはフェンセリン10.0と1.5ｍｇ／ｋ投与ｇだけがブロック４と５およびブロック５において減少の比率が大きかった（第３図）。フェンセリンの高投与（7.5および10.0ｍｇ／ｋｇ）を受けたラットは噛んだり、グルーミング（grooming）をしたり、濡れた犬が身震いするような動作（wet dog shake）というような副作用を示した。5.0ｍｇ／ｋｇ投与では、動物は他の投与量よりも活動的でなくなった。10.0ｍｇ／ｋｇ投与では動物は非常に攻撃的で扱うのが難しかった。しかしどの投与量でも、流ぜん症や下痢というような抹消コリンの影響は見られなかった。
実施例１１
ｉ．ｖ．ボーラス投与による血漿ＡＣｈＥ抑制は８時間以上継続した。一方、その親化合物であるフィゾスチグミンの抑制は急速に減少し、60分で無視できるほどであった。14−ユニット−Ｔ迷路での学習行動の改良はフェンセリンのｉ．ｐ．投与後１時間以上観察され、フィゾスチグミンが行動テストの10−15分前に投与しなければならないのとは対照的である（Mandel and Thal, Psychopharmacology 96: 421-425(1988); Murray et al., Psychopharmacology 105: 134-136(1991)）。このフェンセリンの長い作用維持時間は臨床の用途としてフィゾスチグミンより有利と思われる。フィゾスチグミンは患者中での薬理学的半減期が短いためにコリン作用強化剤としての価値が限られている（Badker E. Glacobini, Drug Dev. Res. 12: 163-195, 1988およびBeller et al, J. Clin. Psychiat. 49: 400-404, 1988）。
実施例１２
（−）フェンセリン（100ｍｇ）をエーテル（２ｍｌ）に溶解し、フマル酸（36ｍｇ）のアセトン（２ｍｌ）溶液を加えた。12時間静置後、フマル酸塩を濾別した（90ｍｇ）。ｍ．ｐ．166−166℃、［α］D＝74.1°（ｃ＝0.80，ＭｅＯＨ）。
遊離の塩基を得るためにフマル酸塩（90ｍｇ）を水（10ｍｌ）に溶解し、アンモニア水溶液を加えてアルカリとし、エーテル（２×10ｍｌ）で抽出した。エーテル抽出物は一緒にして、溶剤を流去した後、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、（−）−フェニルカルバモイルエセロリン、すなわちフェンセリンを白色針状で得た（62ｍｇ）。ｍ．ｐ．147−148℃、［α］D−80.1°（ｃ＝１，ＭｅＯＨ）。
実施例１３
燐酸塩を（−）フェニルカルバモイルエセロリンと燐酸からエタノール中で製造し、エーテルを加えて得た。ｍ．ｐ．140−142℃、［α］D−72.6°（ｃ＝0.85，ＭｅＯＨ）。
実施例１４
（−）フェニルカルバモイルエセロリンの酒石酸塩とエーテル中の遊離塩基にＬ−（＋）−酒石酸のエタノール溶液を加えて製造した。ｍ．ｐ．143−145℃、［α］D−58.7°（ｃ＝0.75，ＭｅＯＨ）。
さらに、フェンセリンはフィゾスチグミンに比べて低投与量でＡＣｈＥを劇的に高抑制する（第１図）。
かくして、フェンセリンはＳＣＯＰで生起させる14−ユニツト−Ｔ−迷路でのラットの学習障害を、1.5から10.0ｍｇ／ｋｇに渡る広範囲の投与量で著しく改良する。7.5ｍｇ／ｋｇ投与で満足すべき結果でないのはこのグループのサンプル数の少なさによるものとおもわれる（ｎ＝４）。このムスカリン様の拮抗作用で引き起こされる本研究での認識障害は、本研究のげっし動物にみられる強い年齢に関連した障害に似ている（Ingram et al. 1988）。同じ迷路で、迷路訓練の１時間前に投与された2.0ｍｇ／ｋｇのヘプチル−フィゾスチグミンだけがエラー数を著しく減少したが、ヘプチル−フィゾスチグミンの他の投与量（1.0，1.5，3.0ｍｇ／ｋｇ）ではＳＣＯＰで処理ラットの学習障害を改良できなかった（Iijima et al., Neurosci Lett（印刷中1992））。基底核の大型細胞が損傷したラットでは0.06と0.19ｍｇ／ｋｇのフィゾスチグミンが水迷路の行動を改善した。しかし、0.32ｍｇ／ｋｇフィゾスチグミンでは行動を悪化させた（Mandel et al., Phycho-Pharmachlogy 96: 421-425(1988)）。１ｍｇ／ｋｇ投与で、ＴＨＡは位置行動に対する非適合を遅延されたオペラント（operant delayed non-matching to position task）においてＳＣＯＰで生起された記憶欠損を逆転する。一方、ＴＨＡ0.5ｍｇ／ｋｇ投与ではＳＣＯＰで生起された記憶欠損を改善せず、2.5ｍｇ／ｋｇでは非処理ラットの行動を害させる（Murray et al. 1991)。フェンセリンで見られた広い治療範囲は、現在使用されている他のコリンエステラーゼ抑制剤に比べて臨床用途にはるかに有利である。これらはヘプチル−フィゾスチグミンとタクリンであり、その比較データは示されている。ＴＨＡは同様のモデルでは活性を示さず、アルツハイマー症患者に肝機能障害を生ずる。これは治療上の可能性を制限する（Gauthier et al N. Engl. J. Med. 322: 1272-1276, 1990; Food and Drug Administration, N Engl. J. Med. 324: 349-352, 1991）。それは治療範囲が狭く、個々に対する最適投与量の多様性が大きい。
7.5ｍｇ／ｋｇを除いてフェンセリンの投与は全て迷路訓練のブロック４と５でエラー行動が改善された。しかし、フェンセリン10.0と1.5ｍｇ／ｋｇ投与だけがブロック４と５およびブロック５のそれぞれで他のエラー行動を改善した。フェンセリン処理動物の大部分は迷路を解く別の戦略を使い続けた。脳弓采（fimbria-fornix）損傷ラットまたは海馬損傷ラットはＳＣＯＰ投与ラットと同様この迷路で別の戦略を頻繁に使用した（Bresnahan et al., Pyschobioloby 16: 243-250(1988); Spangler et al Pharmacol. Biochem. Behav. 25: 673-679(1986)）。フェンセリンがエラー行動の改良に比べて他のエラー行動を改良する作用があまりないと言うことは我々がｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙで得られた結果と似ている（Iijima et al.,（印刷中1992））。ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ処理ラットで認識障害という点での改善が見られないと言うことは、ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ海馬よりも新皮質におけるコリンエステラーゼ抑制により臨床効果を発揮している可能性を示している。
上記の結果はフェンセリンが長期に作用する効果と広い治療範囲を有することを示している。かくして、本発明は老化とアルツハイマー症による認識障害のコリン作用治療に対して、有効量のフェンセリンとその塩を使用することによる改良された方法を提供するものである。
比較例
比較研究として、フェンセリンのＡＣｈＥ抑制の維持時間と量をＴＨＡ（タクリン）と比較した。後者は認識障害強化剤として臨床試験に用いられてきたものでアルツハイマー症患者で認識改善を示すことが報告されている（Summers et al., Bio. Psychiatry 16: 145-143, 1981）。同様のテクニックがここで論ずる前の研究でも用いられた。ＴＨＡをＴｗｅｅｎ／エタノールに溶解し、0.1ｍ  Ｎａ3ＰＯ4（ｐＨ8.0）バッファーで希釈した。ＡＣｈＥの最大抑制は２分で約３３％であった。これは急速に減衰し、５分間２０％以下に保たれたままだった。このわずかのＡＣｈＥ抑制はＴＨＡ10ｍｇ／ｋｇという高投与量で得られただけである。低投与量（ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｖ．）では測定できるようなラットのＡＣｈＥ抑制は得られなかった。一方、高投与量では（20ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｖ．）５０％以上の動物が死亡した。
従って、ＡＣｈＥ抑制と抑制の維持時間の点で、フェンセリンはＴＨＡよりはるかに好ましい。フェンセリンは非常に低い無害な投与量で長期間一定のＡＣｈＥ抑制を生じる。最近のアルツハイマー症患者の研究で、ＡＣｈＥ抑制剤として必要なＴＨＡの投与量は毒性を引き起こすことが示されている（Food & Drug Administration. N Engl. J. Med. 324: 349-352, 1991）。
驚くべきことに、本発明のカルバメートは高い効能を示す。かくして、本発明のフェニルカルバメートとその誘導体塩は、この技術の他のカルバメート類似体に比して長期に持続し毒性が少ないと考えられる。従って、本発明の化合物を使用した認識障害の治療法は従来の技術に比べて極めて有利である。
本発明の範囲の組成物は活性成分がその目的を達成できる程度の有効量含まれる組成物を含む。有効濃度は0.001重量％から1.0重量％である。これらの化合物は薬理学的に許容できるいかなる量も投与できる。例えば体重１ｋｇ当たり0.001ｇから約１ｇである。ここに開示された情報に基づき、有効量の決定は当業者の技術の範囲である。
これらの化合物は一般的には、活性成分と約0.1から99重量％、好ましくは約25−85重量％の担体または賦型剤からなる医薬組成物（重量％）として使用される。これらの化合物は、非経口、経口、注射または坐剤を含むあらゆる形態で投与できるであろう。
経口投与に対しては液体または固体の投与形態が容易に提供できる。例えば、活性成分を、ジカルシウムフォスフェイト、マグネシウムアルミニウムシリケート、マグシウムステアレート、硫酸カルシウム、澱粉、タルク、ラクトース、アラビアゴム、メチルセルロースおよび薬理学的賦型剤または担体としての機能的類似物質のような通常の成分と混合できる。徐放処方が適宜使用できる。老齢のあるいは支離滅裂な患者には徐放処方が好ましい。カプセルはこれらの化合物を不活性な薬理学的希釈剤と混合し、ついで適当なサイズの固いゼラチンカプセルに詰めることにより作ることができる。ソフトカプセルが必要なときは、これらの化合物と許容できる植物軽油（vegetable light oil）または他の不活性油のスラリーをゼラチンカプセルに詰め込めばよい。
分散剤、シロップ剤およびエレキシル剤は液状の投与形態で経口投与される。油を含む液剤は油溶形態で使用される。例えば、コーンオイル、ピーナツオイルまたはひまわり油のような植物油と香料、甘味剤および保存剤を併用して許容できる液剤を得ることができる。液体投与用シロップとするのに水に界面活性剤を加えてもよい。（砂糖、サッカリンあるいはバイオ甘味料のような）許容できる甘味剤と香料を含む水−アルコール医薬組成物をエレキシル剤として使用してよい。
非経口と坐剤の医薬組成物は本技術分野の標準的方法で得ることができる。
本発明の化合物の好ましい用途は経口投与に適した薬剤である。他の好ましい用途は非経口経皮剤であり、これは緑内障、無筋力症、アルツハイマー症および有機燐中毒のようなコリン作用性疾患に特に有用である。従って、これらの分野で投与するのに適した組成物は特に本発明の範囲内である。上記の非経口溶液または分散液は経皮的に皮膚を通して投与してよい。必要ならばゴマ油の様な適当な担体を用いて注射してもよい。
従って、活性化合物と徐放剤の併用は経皮投与に適したものである。これらの化合物は組成物中約0.01から99％、好ましくは担体または賦型剤中活性成分約25−85重量％の量が経皮的に投与される。
経皮治療システムは自動投与形態であり、真皮に適用されると薬剤はコントロールされた速度で全身循環にまわる。経皮投与を使用することの利点は次のようなものである。治療効率を高める、投与頻度を減少できる、時間対血中濃度プロフィルの最適化を図ることによる副作用を軽減できる、多数回投与がなくなるので患者の同意が得易い、肝初回通過による代謝をバイパスできる、胃腸不適合を避けられるそして活性が推測でき維持時間が長い。しかし、皮膚の主たる機能は化学物質が入ることに対するバリアとして作用することである。従って、経皮療法は皮膚のバリアを通って拡散することに関して望ましい物理化学的性質を有する限られた数の薬剤において好ましい。皮膚のバリア機能を克服する一つの効果的方法は経皮療法システムに浸透強化剤を使用することである。
浸透強化剤は製剤中に含まれ、一時的に薬の皮膚浸透性を増大し、より多くの薬が短時間に吸収されるようにする化学物質である。数種の異なった浸透強化剤が報告されており、ジメチルスルホキシド、Ｎ−デシルメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホミアミド、１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン（アゾン）、プロピレングリコール、エタノール、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）のようなピロリドン類および界面活性剤のようなものが挙げられる。
上記化合物はレバーザー中で単独でまたは他の薬理学的担体とともに存在する。本発明で受容できる薬理学的担体とは薬剤、ホストまたは薬剤添加装置に逆影響を及ぼさない公知の担体である。適当な薬理学的担体は次のようなものである。滅菌水、生理食塩水、デキストローズ、デキストローズの水溶液または生理食塩水溶液；１モルのひまし油当たり30−35モルのエチレンオキサイドが結合したひまし油とエチレンオキサイドの縮合物、液体酸、低級アルカノール、コーンオイル、ピーナツオイル、ゴマ油の様なオイル類と脂肪酸のモノ−またはジ−グリセライドの混合物；レクチンのような燐脂質；グリコール、ポリアルキレングリコール、懸濁剤例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドンのようなもののが存在する水性媒体の単独またはレクチン、ポリエチレンステアレート等の適当な分散剤との併用。担体はまた浸透強化剤と本発明の化合物とともに、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤のような補助剤を含んでいてもよい。
哺乳動物に対する有効投与量は年齢、体重、治療対象の活動レベルや状態のような因子により異なる。本発明の化合物の典型的投与量は、１日１から３回経口または直腸投与の場合で約１から800ｍｇである。これは１日体重当たり約0.002から50ｍｇ／ｋｇである。好ましくは、ヒト成人に対し１日１から３回経口または直腸投与で約10から300ｍｇ投与される。非経口の場合必要投与量はかなり低い。好ましくは、ヒト成人に対し１日１から２回約0.01から約150ｍｇが筋肉内にまたは経皮的に投与されてよい。
本発明の化合物は、典型的には組成物中約0.01から99重量％、好ましくは25から85重量％の量で投与されてよい。本発明の化合物は、緑内障、筋無力症、アルツハイマー症のようなコリン作用疾患の治療や有機燐中毒の解毒剤としても有用である。本発明に従った治療法は本発明の化合物の有効量または本発明の医薬組成物の有効量をそのような治療が必要な哺乳動物に投与することよりなる。
図面の詳細な説明
第１図はＦｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットのｉ．ｖ．フィゾスチグミンとフェンセリンのインビボの一連の血漿サンプルのＡＣｈＥ抑制を示したものである。フィゾスチグミンは血漿ＡＣｈＥを直ちに２分以内に約50％抑制する。その後フィゾスチグミンの酵素抑制は急速に減少し60分では無視できる程度である。一方、フェンセリンは５分で73.5％抑制という最大値を示し、８時間以上高くて比較的一定の抑制を示す。
第２図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのエラー数を、平均と標準エラーで表したものである。各部ブロックの８つのヒストグラムは右から左に８つの処理の組成を表す。すなわち、
（ａ）ＳＡＬグループ（ｎ＝10）  （最初の注射で）担体＋（２回目の注射で）ＳＡＬ、（ｂ）ＳＣＯＰグループ（ｎ＝14），担体＋ＳＣＯＰ、
（ｃ）1.5−ＰＨＥグループ（ｎ＝６），フェンセリン（1.5ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ、（ｄ）3.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝９），フェンセリン（3.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ、（ｅ）4.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝10），フェンセリン（4.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ、（ｆ）5.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝10），フェンセリン（5.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ、（ｇ）7.5−ＰＨＥグループ（ｎ＝４），フェンセリン（7.5ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ、（ｈ）10.0−ＰＨＥグループ（ｎ＝６），フェンセリン（10.0ｍｇ／ｋｇ）＋ＳＣＯＰ。
第３図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのエラーの比を、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムは第２図と同様である。
第４図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアルユニット当たり走行時間を数秒で、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムは第２図と同様である。
第５図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、５ブロックのトライアル当たりのショック数を、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムは第２図と同様である。
第６図は雄性Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラットの14ユニット迷路における特定の行動に関して、各ブロック５回の試行単位当たりのショックの持続時間を秒数で、平均と標準エラーで表したものである。各ブロックの８つのヒストグラムは第２図と同様である。
第７図は各ブロック３回のトライアル当たりの平均エラーを表した図であり、ＳＣＯＰで処理されたラットはＳＡＬ群に比較し障害ある行動を示し、2.0−ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ群はＳＣＯＰ群に比べてエラー行動が少ない。
第８図は１５回試行当たりの平均（±ＳＥ）エラーを表した図である。2.0−ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ群はＳＣＯＰ群より遥かに（Ｐ＜0.05）優れた行動を示す。
第９図は各ブロック３回の試行当たり他ののエラーを犯す機会に対するその他のエラーの平均割合を表した図であり、ｈｅｐｔｙｌ−Ｐｈｙ処理はＳＣＯＰ処理ラットが別のストラテジーによるエラーを犯す傾向に何の影響も与えない。
以上の特定の態様に関する説明は本発明の一般的特徴を詳細に説明しており、通常の知識により本発明の一般的概念から離れることなくかかる特定の態様の様々な変形や応用を速やかに考えつくことができる。従って、かかる応用は開示された態様の均等の範囲に包含される。ここでの言葉や用語の使い方は説明の目的のためだけであり、限定するためのものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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