(57)【要約】  本発明は、新規な脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物を提供する。より詳細には、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを含んでなる、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを含んでなる、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物。
【請求項２】
前記カロテノイドが、微生物、動物もしくは植物由来物または化学合成品である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記微生物が、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記脳腫瘍が、神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、および転移性脳腫瘍からなる群から選択される少なくとも一種である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
脳内移行のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ヒトのための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物が飲食品または食品添加物である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が機能性食品である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が医薬品である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物の製造における、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの使用。
【請求項１１】
対象の脳腫瘍またはそれに起因する症状を抑制または治療する方法であって、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法。
【請求項１２】
脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイド。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の参照】
【０００１】
本特許出願は、２０１８年９月２０日に出願された日本国特許出願２０１８−１７６５８０号および２０１８年１１月５日に出願された日本国特許出願２０１８−２０８４０２号に基づく優先権の主張を伴うものであり、かかる先の特許出願における全開示内容は、引用することにより本明細書の一部とされる。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
脳腫瘍は、頭蓋内組織に発生する腫瘍の総称であり、脳細胞だけでなく、硬膜、クモ膜、頭蓋内の血管や末梢神経等の頭蓋内のあらゆる組織に発生する。脳内の腫瘍は、周囲の正常組織にできるだけ損傷を与えないように治療する必要がある。しかしながら、脳腫瘍の多くは周囲の脳組織や脊髄組織に浸潤し、腫瘍細胞と正常脳組織が混在する領域が生じるため、外科的に切除するのが困難である。放射線治療も、周囲の正常組織に損傷を与えやすい。【０００４】
脳腫瘍の約１／４を占める神経膠腫（グリオーマ）も、周囲の正常脳組織に浸潤性に発育するため、脳機能を温存しようとすれば手術による全摘出は困難である。更に、術後には放射線治療や抗癌剤治療を併用することが多いが、治癒率は低い。【０００５】
これらの点から、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物が求められている。【０００６】
一方、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、およびゼアキサンチンはカロテノイドの一種であり、動物、植物、微生物に広く分布している。アスタキサンチン、アドニルビンまたはアドニキサンチンには抗不安の効果があることが知られている(特許文献１）。【０００７】
また、アスタキサンチンには種々の効果があることが報告されている。例えば、特許文献２には、アスタキサンチンを主成分とするカロテノイド混合物が網膜障害予防に有用であり得ると記載されている。【０００８】
また、特許文献３には、リコペン誘導体が乳癌細胞系や前立腺癌細胞系における細胞の増殖を抑制することが記載されている。【０００９】
しかしながら、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよび／またはゼアキサンチンと、脳腫瘍との関係については何ら報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２０１２−０２５７１２号公報
【特許文献２】特開２０１５−１４０３４６号公報
【特許文献３】特表２００９−５１１５７０号公報
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、効果的に脳腫瘍またはそれに起因する症状を抑制または治療するための新たな技術的手段を提供する。
【００１２】
本発明者らは、今般、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドが、脳腫瘍の増殖を効果的に抑制することを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものである。
【００１３】
本発明には、以下の発明が包含される。
［１］  アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを含んでなる、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物。
［２］  前記カロテノイドが、微生物、動物もしくは植物由来物または化学合成品である、［１］に記載の組成物。
［３］  前記微生物が、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)である、［２］に記載の組成物。
［４］  前記脳腫瘍が、神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、および転移性脳腫瘍からなる群から選択される少なくとも一種である、［１］〜［３］のいずれか一つに記載の組成物。
［５］  脳内移行のための、［１］〜［４］のいずれか一つに記載の組成物。
［６］  ヒトのための、［１］〜［５］のいずれか一つに記載の組成物。
［７］  前記組成物が飲食品または食品添加物である、［１］〜［６］のいずれか一つに記載の組成物。
［８］  前記組成物が機能性食品である、［１］〜［７］のいずれか一つに記載の組成物。
［９］  前記組成物が医薬品である、［１］〜［８］のいずれか一つに記載の組成物。
［１０］  脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物の製造における、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの使用。
［１１］  対象の脳腫瘍またはそれに起因する症状を抑制または治療する方法であって、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法。
［１２］  脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイド。
【００１４】
本発明によれば、効果的に対象の脳腫瘍またはそれに起因する症状を抑制または治療することができる。本発明によれば、さらに、効果的に本発明のカロテノイドを脳内に移行させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】対照群、テモゾロミド群、アスタキサンチン群、またはアドニキサンチン群における、ヒト由来グリオーマ細胞株Ｕ２５１ＭＧの９６時間後の細胞生存率を示すグラフである。
【図２】対照群、テモゾロミド群、アスタキサンチン群、またはアドニキサンチン群における、マウス由来グリオーマ細胞株ＧＬ２６１の９６時間後の細胞生存率を示すグラフである。
【図３】対照群、テモゾロミド群、またはゼアキサンチン群における、ヒト由来グリオーマ細胞株Ｕ２５１ＭＧの７２時間後の細胞生存率を示すグラフである。
【図４】対照群、テモゾロミド群、またはアドニルビン群における、マウス由来グリオーマ細胞株ＧＬ２６１の７２時間後の細胞生存率を示すグラフである。
【図５】アスタキサンチン投与ザルまたはアドニキサンチン投与ザルにおける、カニクイザル脳の各器官におけるアスタキサンチンまたはアドニキサンチンの濃度を示すグラフである。
【発明の具体的説明】
【００１６】
本発明の脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物は、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを含んでなることを特徴としている。上述のようなカロテノイドが後述の試験例１〜２に示される通り、脳腫瘍に関与する神経膠腫の増殖を顕著に抑制しうることは意外な事実である。
【００１７】
カロテノイド
本発明におけるカロテノイドとしては、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のものであり、好ましくは、アドニキサンチン、ゼアキサンチンである。かかるカロテノイドとしては、例えば、アスタキサンチン、アドニルビン、およびアドニキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチン、アドニキサンチン、およびゼアキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチン、アドニルビン、およびゼアキサンチンの組み合わせ、アドニルビン、アドニキサンチン、およびゼアキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、およびゼアキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチンおよびアドニキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチンおよびゼアキサンチンの組み合わせ、アスタキサンチンおよびアドニルビンの組み合わせ、アドニルビンおよびアドニキサンチンの組み合わせ、アドニキサンチンおよびゼアキサンチンの組み合わせ、または、アドニルビンおよびゼアキサンチンの組み合わせであってもよい。また、カロテノイドとしては、遊離体、脂肪酸エステル体であってもよい。上記カロテノイドは、吸収性の観点から、遊離体を使用することが好ましい。また、カロテノイドは、光学異性体、シス-トランス異性体等の立体異性体であってもよい。さらに、これらカロテノイドは有効成分として用いることが好ましい。
【００１８】
アスタキサンチンは、赤色の色素でカロテノイドの一種キサントフィルに属しており、その化学式は3,3’-dihydroxy-β,β-carotene-4,4’-dione （C40H5204、分子量596.852）であり、構造式は下記式で表される。
【化１】
2020059745.tif 000003
アスタキサンチンの光学異性体としては、例えば、３Ｓ，３’Ｓ−体、３Ｓ，３’Ｒ−体（ｍｅｓｏ−体）、３Ｒ，３’Ｒ−体からなる群から選ばれる少なくとも１つを挙げることができ、好ましくは、３Ｓ，３’Ｓ−体である。また、アスタキサンチンは分子中央の共役二重結合のシス体、トランス体の異性体またはそれら組み合わせであってもよい。シス体としては、例えば、９−シス体、１３−シス体、１５−シス体、ジシス体またはそれらの組み合わせが挙げられる。アスタキサンチンは、好ましくは、シス体、トランス体の異性体の組み合わせである。
【００１９】
アドニルビンの化学式は3-hydroxy-β,β-carotene-4,4’-dione （C40H5203、分子量580.853）であり、構造式は下記式で表される。
【化２】
2020059745.tif 000004
アドニルビンのシス-トランス異性体としては、シス体、トランス体またはそれらの組み合わせであってもよく、シス体としては１３−シス体を挙げることができる。
【００２０】
アドニキサンチンの化学式は3,3’-dihydroxy-β,β-carotene-4-one （C40H5403、分子量582.869）であり、構造式は下記式で表される。
【化３】
2020059745.tif 000005
アドニキサンチンの光学異性体としては、３Ｓ，３’Ｒ−体、３Ｓ，３’Ｓ−体、３Ｒ，３’Ｓ−体および３Ｒ，３’Ｒ−体からなる群から選ばれる少なくとも１つを挙げることができ、好ましくは、３Ｓ，３’Ｒ−体である。また、アドニキサンチンのシス-トランス異性体としては、シス体、トランス体またはそれらの組み合わせであってもよい。アドニキサンチンのシス-トランス異性体として、好ましくは、シス体およびトランス体の組み合わせである。
【００２１】
ゼアキサンチンの化学式はβ,β-carotene-3,3’-diol （C40H5602、分子量568.87〜568.89）であり、構造式は下記式で表される。
【化４】
2020059745.tif 000006
ゼアキサンチンの光学異性体としては、例えば、３Ｓ，３’Ｓ−体、３Ｒ，３’Ｓ−体、３Ｒ，３’Ｒ−体からなる群から選ばれる少なくとも１つを挙げることができ、好ましくは、３Ｒ，３’Ｒ−体である。また、ゼアキサンチンのシス-トランス異性体としては、シス体、トランス体またはそれらの組み合わせであってもよい。シス-トランス異性体としては、例えば、全トランス体、９−シス体、１３−シス体またはそれらの組み合わせが挙げられる。また、立体異性体の好ましい例としては、３Ｒ，３’Ｒ−全トランス体、３Ｒ，３’Ｒ−９シス体、３Ｒ，３’Ｒ−１３シス体またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２２】
本発明において、カロテノイドは、薬学的に許容可能な塩の形態であってもよく、これらの塩も本発明におけるカロテノイドに含まれる。本発明において、カロテノイドは、酸または塩基と塩を形成する場合もある。本発明において、薬学的に許容可能な塩は、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよび／またはゼアキサンチンと薬学的に許容可能な塩を形成するものであれば特に限定されない。具体的には、例えば、ハロゲン化水素酸塩（例えばフッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等）、無機酸塩（例えば硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等）、有機カルボン酸塩（例えば酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩等）、有機スルホン酸塩（例えばメタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩等）、アミノ酸塩（例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等）、四級アミン塩、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばマグネシウム塩、カルシウム塩等）等が挙げられるが、これに限定されない。
【００２３】
本発明のカロテノイドは、市販品であってもよく、あるいは従来の化学合成法により製造された化学合成品、微生物による発酵法、または微生物、動物もしくは植物等からの抽出および精製等により製造された微生物、動物または植物由来物（天然由来）を使用することができる。かかる微生物は、細菌、藻類、酵母を含む。ここで、微生物、動物または植物由来物とは、微生物、動物または植物から得られる産生物であり、好ましくは、パラコッカス属微生物由来物、より好ましくは、パラコッカス・カロティニファシエンス（Paracoccus carotinifaciens）由来物であってよい。
【００２４】
例えば、微生物からのアスタキサンチン、アドニルビン、およびアドニキサンチンの抽出および精製方法として下記の方法が挙げられる。パラコッカス・カロティニファシエンスの乾燥菌体を、アセトンを使用する室温抽出に供し、抽出液をエバポレーターで濃縮し、濃縮液が二層に分離したところで濃縮物にヘキサン−クロロホルム（１：１）混合液を加えて良く混和した後、分液操作により有機溶媒層を得る。前記有機溶媒層をエバポレーターで濃縮乾固する。濃縮乾固物をクロロホルムに溶解し、シリカゲルカラムにて各カロテノイドを分離する。例えばアセトン：ヘキサン（３：７）で溶出する画分をさらにＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＰＲＣ−ＳＩＬ（株式会社島津製作所）、アセトン：ヘキサン（３：７））で精製することでアドニルビン遊離体を得ることができる。また、アセトン：ヘキサン（５：５）で溶出する画分を濃縮し、４℃で放置することで、アスタキサンチン遊離体を結晶として得ることができる。さらに、アセトンで溶出する画分をさらにＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＰＲＣ−ＳＩＬ、アセトン：ヘキサン（４：６））で精製することで、アドニキサンチン遊離体を得ることができる。
【００２５】
また、微生物からのゼアキサンチンの抽出および精製方法として下記の方法が挙げられる。パラコッカス属微生物の沈殿培養物または沈殿乾燥物からアセトン等の水溶性有機溶媒を用いてゼアキサンチンを抽出できる。さらに、得られた水溶性有機溶媒抽出液に非極性有機溶媒および／または水を加え、液液抽出を行うことによりゼアキサンチンをさらに精製することもできる。
また、ゼアキサンチンの抽出および精製方法として、米国特許出願公開第２０１４／０１１３３５４号明細書に記載の手順に従って抽出および精製することができる。例えば、培養物をアセトン等の溶媒で抽出し、該アセトン抽出物を酢酸エチル−ヘキサン（３：７）混合液を用いたシリカゲルカラムにて溶出することにより、ゼアキサンチンを得ることができる。
【００２６】
さらに、本発明の組成物においては、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよびゼアキサンチンを含むカロテノイド混合物、またはアスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンを含むカロテノイド混合物を使用してもよい。かかるカロテノイド混合物は、カンタキサンチン、アステロイデノン、β−カロテン、エキネノンおよび３−ヒドロキシエキネノンをさらに含むことが好ましい。例えば、特開２００７−２６１９７２号公報、特開２００９−５０２３７号公報に記載の方法に準じてパラコッカス・カロティニファシエンスの乾燥菌体から抽出したカロテノイド混合物は、アスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンを含み、好ましくはカンタキサンチン、アステロイデノン、β−カロテン、エキネノン、３−ヒドロキシエキネノンおよびゼアキサンチンからなる群から選択される少なくとも一つをさらに含む。
【００２７】
本発明の組成物におけるカロテノイドの含有量は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、組成物全体に対し、例えば、０．００１〜９９質量％が挙げられ、好ましくは０．０１〜９９質量％、より好ましくは０．０５〜５０質量％、さらに好ましくは０．０７〜３０質量％、さらに好ましくは０．１〜２０質量％である。本発明の組成物におけるアスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンの含有量は、ＨＰＬＣ法により、Toxicol Rep. 2014 Aug 25;1:582-588.に記載の手順に従って測定することができる。また、本発明の組成物におけるゼアキサンチンの含有量は、ＨＰＬＣ法により、特許第６１３２９０５号の［実施例］に記載の手順に従って測定することができる。
【００２８】
本発明の組成物は、上記カロテノイドと共に、所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を配合した組成物として提供することができる。上記添加剤として、溶剤、溶解補助剤、溶解剤、滑沢剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤、保存剤、防腐剤、界面活性剤、調整剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、賦形剤、増粘剤、着色剤、芳香剤または香料等が挙げられる。
【００２９】
本発明の組成物は、上記カロテノイドおよび所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を混合、溶解、分散、懸濁する等の公知の手法により、調製することができる。また、本発明の組成物の調製においては、本発明の効果を妨げない限り、上記手法により調製された混合物、溶解物、分散物、懸濁物等に、均質化処理や殺菌処理を施してもよい。
【００３０】
また、本発明の組成物の形態は、本発明の効果を妨げない限り、特に制限されず、固形状、半固形状（ペースト、ゲルを含む）または液状（油状、スラリー状を含む）であってもよいが、固形状または液状であることが好ましい。
【００３１】
また、本発明の組成物の剤形は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、注射剤、錠剤（例えば、裸錠、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶錠、徐放錠、口腔内崩壊錠、舌下錠、チュアブル錠等）、カプセル剤（例えば、硬カプセル、軟カプセル）、エリキシル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、水剤、トローチ剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、乳剤、懸濁剤、液剤、吸入剤、エアロゾル剤、粉末吸入剤、坐剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤、バップ剤、ローション剤、点滴剤、眼軟膏剤、点眼剤、点鼻剤等が挙げられる。本発明の組成物の剤形は、経口摂取または投与用の剤形であることが好ましく、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、乳剤、液剤、懸濁剤、水剤、トローチ剤等が挙げられる。
【００３２】
本発明の組成物の投与または摂取方法としては、特に限定されないが、点滴、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮内注射等の注射、経口、経粘膜、経皮、鼻腔内、口腔内等による投与または摂取が挙げられ、好ましくは、経口摂取または投与である。
【００３３】
本発明の組成物としては、食品もしくは飲料等の飲食品、食品添加物、飼料、医薬品、医薬部外品、または化粧料が挙げられ、摂取の簡便性の観点から飲食品が好ましい。
【００３４】
本発明の飲食品は、本発明の組成物をそのまま飲食品として調製したもの、各種タンパク質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、植物エキス、他の有効成分（例えば、乳酸菌、バチルス属菌（Bacillus）等の細菌、酵母等の真菌、食物繊維、ＤＨＡまたはＥＰＡ）等を更に配合したもの、本発明の組成物を溶液状等の液状、半液体状または固体状にしたものでよく、また、本発明の組成物を一般の飲食品へ添加したものであってもよい。
【００３５】
上記飲食品としては、具体的には、例えば、即席麺、レトルト食品、缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・みそ汁類、フリーズドライ食品等の即席食品類；清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、アルコール飲料、ゼリー飲料等の飲料類；栄養ドリンク；パン、パスタ、麺、ケーキミックス、パン粉等の小麦粉製品；飴、グミ、ゼリー、キャラメル、チューイングガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、デザート菓子等の菓子類；栄養バー；スポーツバー；ソース、トマト加工調味料、風味調味料、調理ミックス、たれ類、ドレッシング類、つゆ類、カレー・シチューの素類等の調味料；加工油脂、バター、マーガリン、マヨネーズ等の油脂類；乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、アイスクリーム類、クリーム類等の乳製品；農産缶詰、ジャム・マーマレード類、シリアル等の農産加工品；ハム、ベーコン、ソーセージ、焼き豚等の畜肉加工食品：冷凍食品等を例示することができるが、これらに限定されない。
【００３６】
本発明の飲食品には、健康食品、サプリメント、機能性食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品または機能性表示食品を含む）、特別用途食品（例えば、病者用食品、乳児用調製粉乳、妊産婦、授乳婦用粉乳またはえん下困難者・咀嚼困難者用食品を含む）または乳児用液体調製乳（乳児用液体ミルクともいう）も包含される。後述のように、本発明の組成物は脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療作用を有することから、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための飲食品が提供される。すなわち、本発明の飲食品は、頭痛があるヒトのため、吐き気があるヒトのため、視野が欠けるもしくは二重になるヒトのため、手足や顔にしびれもしくはまひがあるヒトのため、ふらつきがあるヒトのため、または、ろれつが回らないもしくは言葉が出ないヒトのための飲食品として提供できる。さらに、機能性食品等の飲食品において、「頭痛がある方に」、「吐き気がある方に」、「視野が欠けるまたは二重になる方に」、「手足や顔にしびれ、まひがある方に」、「ふらつきがある方に」、「ろれつが回らない、または言葉が出ない方に」等の表示を付して提供してもよい。
【００３７】
本発明の組成物の摂取量または投与量は、特に限定されず、組成物の処方、カロテノイドの種類、純度、対象の種類、対象の年齢または体重、症状、摂取または投与時間、組成物の形態、摂取または投与方法、本発明のカロテノイド以外のカロテノイドまたは薬剤の組み合わせ等に依存して決定できる。また、本発明の組成物は、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための有効量となるように、１日の摂取量単位の形態から構成されることが好ましい。例えば、本発明の組成物を経口摂取する場合、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドが体重６０ｋｇの成人１人１日当たり０．０１〜１００００ｍｇ、好ましくは０．０５〜１０００ｍｇ、より好ましくは０．１〜１００ｍｇの範囲の摂取量または投与量となるように該カロテノイドを組成物に配合することができる。本発明のカロテノイドと組み合わせて用いる本発明のカロテノイド以外のカロテノイドまたは薬剤も、それぞれ臨床上用いられる摂取量または投与量を基準として適宜決定できる。
【００３８】
また、本発明の組成物の１日の摂取量または投与量は、上述の組成物の摂取量または投与量と同様、組成物の処方等に応じて適宜選択されるものである。本発明の組成物の１日の摂取量または投与量は、例えば１回または複数回で対象に摂取させるかまたは投与してもよいが、１回で対象に摂取させるかまたは投与することが好ましい。したがって、本発明の組成物の１日の摂取または投与回数は、１日に１〜５回が挙げられ、好ましくは、１日に１〜３回であり、より好ましくは、１日に１回である。
【００３９】
一つの態様によれば、本発明の組成物を適用する対象は、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されないが、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒト等の霊長類、犬、猫である。当該対象は健常者（健常動物）であっても患者（患者動物）であってもよい。
【００４０】
本発明の組成物によれば、脳腫瘍、好ましくは神経膠腫の増殖を抑制することができる。したがって、本発明の組成物によれば、脳腫瘍またはそれに起因する症状を抑制または治療することが可能である。したがって、本発明の一つの態様によれば、本発明の組成物は、脳腫瘍またはそれに起因する症状の抑制または治療のための組成物として提供される。ここで、本明細書における疾病またはそれに起因する症状の「抑制」とは、疾病またはそれに起因する症状を非医療行為により改善するとともに、想定される悪化に対して事前に備え、疾病またはそれに起因する症状の発生または再発を未然に非医療行為または医療行為により防ぐという「予防」の意味を含む。また、「治療」は、疾病またはそれに起因する症状を医療行為により改善することをいう。ここで、改善は、疾病またはそれに起因する症状の進展もしくは悪化を止める、緩和するもしくは遅延させることを包含する。
【００４１】
上記脳腫瘍としては、特に限定されないが、例えば、神経膠腫（グリオーマ）、髄膜腫、下垂体腺腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、転移性脳腫瘍が挙げられ、好ましくは、神経膠腫である。さらに、神経膠腫としては、好適には星細胞腫、乏突起神経膠腫、神経膠芽腫、退形成星細胞腫、退形成乏突起神経膠腫が挙げられる。また、脳腫瘍に起因する症状としては、局所症状および頭蓋内圧亢進症状が挙げられ、局所症状としては運動麻痺、言葉の障害、記憶障害、食べ物を飲み込みにくい、性格の変化等が挙げられ、頭蓋内圧亢進症状としては、頭痛、嘔吐、意識障害、視野・視力障害等が挙げられる。
【００４２】
本発明の組成物は、脳内に移行し滞留することができる。したがって、本発明の別の態様によれば、脳内移行および／または脳内滞留のための組成物が提供される。かかる脳の具体的な器官としては、大脳（例えば、大脳皮質、大脳髄質）、小脳、中脳、線条体（例えば、線条体被膜、線条体尾状体）、海馬、延髄、間脳等が挙げられる。本発明の組成物は、脳内に移行および／または滞留できることから、脳に関連する疾患またはそれに起因する症状を抑制または治療する上で有利である。かかる脳に関連する疾患としては、脳腫瘍（例えば、神経膠腫（グリオーマ）、髄膜腫、下垂体腺腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、転移性脳腫瘍）、脳卒中、脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、認知症等が挙げられる。  
【００４３】
本発明の別の態様によれば、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象の脳腫瘍もしくはそれに起因する症状を抑制もしくは治療する方法または上記カロテノイドを脳内に移行させる方法が提供される。本発明のさらに別の態様によれば、対象の脳腫瘍もしくはそれに起因する症状を抑制もしくは治療する方法であって、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。発明のさらに別の態様によれば、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを脳内に移行させる方法であって、上記カロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。ここで、「有効量」とは、１日の摂取量単位における、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの含有量等と同様に設定することができる。上記脳腫瘍としては、神経膠腫（グリオーマ）、髄膜腫が挙げられ、神経膠腫が好ましい。また、上記方法は非医療行為のみにより対象に適用することもできる。したがって、本発明の別の態様によれば、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象の脳腫瘍もしくはそれに起因する症状を抑制する方法または上記カロテノイドを脳内に移行させる方法（医療行為、例えば、ヒトに対する医療行為を除く）が提供される。本発明のさらに別の態様によれば、対象の脳腫瘍もしくはそれに起因する症状を抑制もしくは治療する方法であって、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法（医療行為、例えば、ヒトに対する医療行為を除く）が提供される。本発明のさらに別の態様によれば、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドを脳内に移行させる方法であって、上記カロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法（医療行為、例えば、ヒトに対する医療行為を除く）が提供される。本発明の上記方法は、本発明の組成物において本明細書に記載された内容に従って実施することができる。
【００４４】
また、本発明の別の態様によれば、脳腫瘍もしくはそれに起因する症状の抑制もしくは治療または上記カロテノイドの脳内移行のための、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの使用が提供される。
【００４５】
また、本発明の別の態様によれば、脳腫瘍もしくはそれに起因する症状の抑制もしくは治療または上記カロテノイドの脳内移行のための組成物としての、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの使用が提供される。
【００４６】
また、本発明の別の態様によれば、脳腫瘍もしくはそれに起因する症状の抑制もしくは治療または上記カロテノイドの脳内移行のための組成物の製造における、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドの使用が提供される。
【００４７】
また、本発明の別の態様によれば、脳腫瘍もしくはそれに起因する症状の抑制もしくは治療または上記カロテノイドの脳内移行のための、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチン、ゼアキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドが提供される。
【００４８】
上記の使用、化合物（カロテノイド）の態様は何れも、本発明の組成物または方法に関する記載に準じて実施することができる。
【実施例】
【００４９】
以下、調製例、試験例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術範囲は、これらの例示に限定されるものではない。なお、特に記載しない限り、本発明で用いられる全部のパーセンテージや比率は質量による。また、特に記載しない限り、本明細書に記載の単位や測定方法はJIS規格による。【００５０】
調製例１：アドニキサンチン、アドニルビンおよびアスタキサンチンの調製
特開２０１２−１５８５６９号公報に記載の方法に準じて、アスタキサンチン遊離体、アドニルビン遊離体およびアドニキサンチン遊離体の調製を行った。以下に簡単に記載する。
パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)の乾燥菌体を、アセトンを使用する室温抽出に供した。得られた抽出液をエバポレーターで濃縮し、濃縮液が二層に分離したところで濃縮物にヘキサン-クロロホルム（１：１）混合液を加えて良く混和した後、分液操作により有機溶媒層を得た。
得られた有機溶媒層をエバポレーターで濃縮乾固した。濃縮乾固物をクロロホルムに溶解し、シリカゲルカラムにて各カロテノイドを分離した。具体的には、アセトン：ヘキサン（３：７）３００ｍＬで溶出する画分をさらにＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＰＲＣ−ＳＩＬ（株式会社島津製作所）、アセトン：ヘキサン（３：７））で精製し、アドニルビン遊離体（以下、単にアドニルビンともいう）を得た。また、アセトン：ヘキサン（５：５）で溶出する画分を濃縮し、４℃で放置することで、アスタキサンチン遊離体を結晶として得た（以下、単にアスタキサンチンともいう）。アセトンで溶出する画分をさらにＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＰＲＣ−ＳＩＬ、アセトン：ヘキサン（４：６））で精製し、アドニキサンチン遊離体（以下、単にアドニキサンチンともいう）を得た。【００５１】
試験例１：アスタキサンチンまたはアドニキサンチンの、ヒトまたはマウス由来グリオーマ細胞株の増殖能への影響の検討
グリオーマ細胞株はマウス由来グリオーマ細胞株ＧＬ２６１（群馬大学大学院保健学研究科より譲渡）、ヒト由来グリオーマ細胞株Ｕ２５１ＭＧ（ＤＳファーマバイオメディカル社）を用いた。
まず、グリオーマ細胞株を９６ウェルプレート（ＦＡＬＣＯＮ社）に２０００細胞／ウェルで播種した。１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）（ＶＡＬＥＡＮＴ社）、１００Ｕ／ｍＬペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａファルマ社）を含有したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）（ナカライテスク社）を用い、３７℃、５％  ＣＯ２中にて播種した細胞を２４時間培養した。その後９０μＬ／ウェルとなるように１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭで培地交換を行った。培地交換後に、各試験群に応じて試験液をさらに添加した。具体的には、対照群では、０．１％ＤＭＳＯ（ナカライテスク社）含有ＰＢＳを１０μＬ添加した（ｎ＝６）。テモゾロミド群では、テモゾロミド（Ｔｏｋｙｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ．）を０．１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳに溶解し、テモゾロミド溶液を得た。その後、テモゾロミドの最終濃度が３００μＭとなるようにテモゾロミド溶液を１０μＬ添加した（ｎ＝６）。アスタキサンチン、アドニキサンチン群では、アスタキサンチンまたはアドニキサンチンを０．１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳに溶解し、アスタキサンチンまたはアドニキサンチン溶液を得た。その後、アスタキサンチンまたはアドニキサンチンの最終濃度が０．１、１．０、５または１０μＭとなるようにアスタキサンチンまたはアドニキサンチン溶液を、それぞれ１０μＬ添加した（ｎ＝６）。
なお、アスタキサンチンおよびアドニキサンチンの濃度は、ＨＰＬＣ法により、Toxicol Rep. 2014 Aug 25;1:582-588.に記載の手順に従って測定した。【００５２】
各試験液を添加して７２時間後および９６時間後に、ｃｅｌｌ  ｃｏｕｎｔｉｎｇ  ｋｉｔ-８（ＣＣＫ-８）（同仁化学研究所）を用いて、ＧＬ２６１およびＵ２５１ＭＧの生細胞数を測定した。具体的には、ＣＣＫ-８の添加時および添加２時間後にマイクロプレートリーダー（Ｖａｒｉｏｓｃａｎ  Ｆｌａｓｈ  ２．４、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を使用し、４５０ｎｍにて吸光度を測定し、６５０ｎｍでの吸光度を参照として生細胞数を測定した。例えば、７２時間処置の場合、試験液を添加してから７０時間後にＣＣＫ-８を添加し、吸光度を測定した。ＣＣＫ-８添加２時間後に再び吸光度を測定した。ＣＣＫ-８添加２時間後の吸光度からＣＣＫ-８添加直後の吸光度をバックグラウンドとして差し引いた値をデータとして用いた。【００５３】
Ｕ２５１ＭＧの９６時間後の細胞生存率（対照群の生細胞数に対する各群の生細胞数の割合（％））を図１に示す。ここで、細胞増殖能は、細胞生存率に基づき評価した。測定値は平均値および標準誤差で表した。図１に示される通り、アスタキサンチン群およびアドニキサンチン群はいずれの濃度においても対照群と比較して有意に増殖を抑制した（＃＃：p<0.01 vs 対照群（スチューデントのｔ検定）、＊＊：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定）、††：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定））。特に、アドニキサンチン群では、アスタキサンチン群に比して高レベルで増殖を抑制した。
なお、Ｕ２５１ＭＧの７２時間後の細胞増殖能についても評価した結果、アスタキサンチン群およびアドニキサンチン群では対照群と比較して濃度依存的に増殖を抑制する傾向が確認された。特に、１、５および１０μＭアドニキサンチン群は対照群と比較して有意に増殖を抑制しており高レベルでの増殖抑制効果が確認された。【００５４】
ＧＬ２６１の９６時間後の細胞生存率を図２に示す。測定値は平均値および標準誤差で表した。図２に示される通り、アスタキサンチン群およびアドニキサンチン群はいずれの濃度においても対照群と比較して有意に増殖を抑制した（＃＃：p<0.01 vs 対照群（スチューデントのｔ検定）、＊＊：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定）、††：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定））。特に、アドニキサンチン群では、アスタキサンチン群に比して高レベルで増殖を抑制した。
なお、ＧＬ２６１の７２時間後の細胞増殖能についても評価した結果、アスタキサンチン群およびアドニキサンチン群では濃度依存的に細胞生存率の平均値が低下する傾向が確認された。特に、１０μＭのアスタキサンチン群および全ての濃度のアドニキサンチン群は対照群と比較して有意に増殖を抑制しており高レベルでの増殖抑制効果が確認された。  【００５５】
試験例２：アドニルビンまたはゼアキサンチンの、ヒトまたはマウス由来グリオーマ細胞株の細胞増殖能への影響の検討
試験例１と同様に、アドニルビンまたはゼアキサンチンの、ヒトまたはマウス由来グリオーマ細胞株の７２時間後の細胞増殖能への影響を検討した。アドニルビンとしては調製例１で得られたアドニルビンを用い、ゼアキサンチンとしては、ゼアキサンチン（Zeaxanthin, 製造元コードASB-00026504、ChromaDex社）を用いた。
具体的には、グリオーマ細胞株を９６ウェルプレートに２０００細胞／ウェルで播種した。１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含有したＤＭＥＭを用い、３７℃、５％  ＣＯ２中にて播種した細胞を２４時間培養した。その後９０μＬ／ウェルとなるように１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭで培地交換を行った。培地交換後に、各試験群に応じてさらに試験液を添加した。具体的には、対照群では、０．１％ＤＭＳＯ（ナカライテスク社）含有ＰＢＳを１０μＬ添加した（ｎ＝６）。テモゾロミド群では、テモゾロミドを０．１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳに溶解し、テモゾロミド溶液を得た。その後、テモゾロミドの最終濃度が３００μＭとなるようにテモゾロミド溶液を１０μＬ添加した（ｎ＝６）。アドニルビン、ゼアキサンチン群では、アドニルビンまたはゼアキサンチンを０．１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳに溶解し、アドニルビンまたはゼアキサンチン溶液を得た。その後、アドニルビンまたはゼアキサンチンの最終濃度０．１、１．０、５または１０μＭとなるようにアドニルビンまたはゼアキサンチン溶液を、それぞれ１０μＬ添加した（ｎ＝６）。
なお、アドニルビンの濃度は、ＨＰＬＣ法により、Toxicol Rep. 2014 Aug 25;1:582-588.に記載の手順に従って測定した。ゼアキサンチンの濃度は、ＨＰＬＣ法により、特許第６１３２９０５号の［実施例］に記載の手順に従って測定した。【００５６】
各試験液を添加して７２時間後に、試験例１と同様にＣＣＫ-８を用いて、ＧＬ２６１およびＵ２５１ＭＧの細胞増殖能を評価した。【００５７】
Ｕ２５１ＭＧの７２時間後の細胞生存率を図３に示す。測定値は平均値および標準誤差で表した。図３に示される通り、ゼアキサンチン群はいずれの濃度においても対照群と比較して有意に増殖を抑制した（＃＃：p<0.01 vs 対照群（スチューデントのｔ検定）、＊＊：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定））。
なお、アドニルビン群はいずれの濃度においても対照群と比較して増殖を抑制する傾向が確認された。
特に、ゼアキサンチン群では、アドニルビン群に比して高レベルで増殖を抑制した。【００５８】
ＧＬ２６１の７２時間後の細胞生存率を図４に示す。測定値は平均値および標準誤差で表した。図４に示される通り、アドニルビン群はいずれの濃度においても対照群と比較して有意に増殖を抑制した（＃＃：p<0.01 vs 対照群（スチューデントのｔ検定）、＊＊：p<0.01 vs 対照群（ダネットの検定））。
なお、ゼアキサンチン群はいずれの濃度においても対照群と比較して増殖を抑制する傾向が確認された。特に、１０μＭゼアキサンチン群は対照群と比較して有意に増殖を抑制しており高レベルでの増殖抑制効果が確認された。
さらに、アドニルビン群では、ゼアキサンチン群に比して高レベルで増殖を抑制した。  【００５９】
図１〜４に示されるように、１０μＭのアスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよびゼアキサンチン（本発明１０μＭ群）は、既存薬のテモゾロミドの１／３０の濃度である。しかしながら、テモゾロミド群の細胞生存率を１とした場合の本発明１０μＭ群の細胞生存率は約０．９６〜１．２７であり、テモゾロミド群とほぼ同等の細胞増殖抑制効果を示した。この結果から、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよびゼアキサンチンは既存薬テモゾロミドと比較して神経膠腫の増殖を顕著に抑制しうることが確認された。【００６０】
調製例２：アスタキサンチン含有組成物（投与液）およびアドニキサンチン含有組成物（投与液）の調製
調製例１で得られたアスタキサンチンおよびアドニキサンチンをそれぞれ秤量してオリーブオイル（製品番号150-00276、和光純薬工業株式会社製）を加えて懸濁し、それぞれ１０ｍｇ／ｍＬの濃度となるように調製し、アスタキサンチン投与液およびアドニキサンチン投与液を得た。なお、各投与液は用時調製し、投与まで遮光・氷上で保存した。【００６１】
試験例３：カニクイザルにおけるアスタキサンチンまたはアドニキサンチンの脳内分布の確認
実験動物には、カニクイザルを用いた。カニクイザルは２頭用い、１頭にはアスタキサンチン投与液を投与し（アスタキサンチン投与ザル）、別の１頭にはアドニキサンチン投与液を投与した（アドニキサンチン投与ザル）。投与液は、調製例２で得られた投与液を用い、アスタキサンチンまたはアドニキサンチンとして５０ｍｇ／ｋｇ体重となる用量で１日１回、１０日間（投与液の投与開始日を１日目と起算）にわたり投与した。投与方法としては、ディスポーザブルカテーテルを鼻腔から胃内に挿入し、注射筒を用いて投与液を胃内に注入した。なお、投与液を注射筒に採取する際には、投与液をスターラーで撹拌しながら採取した。また、各投与における投与量は、各投与時点での最新の体重（馴化開始日、終了日、投与開始日および投与８日目の投与前に、電子天秤（ＨＰ−４０ＫまたはＧＰ−４０Ｋ、いずれも株式会社エー・アンド・デイ）を用いてそれぞれ体重を測定した）を基に算出した。投与時刻は８：３０〜１３：３０とした。
投与液の投与期間中、各カニクイザルには、固形飼料約１０８ｇ（約１２ｇ×９個）を１日１回１４：００〜１６：００に与え，翌日の給餌（投与日は投与前）までに残った餌を回収した。また、各カニクイザルには水道水を自由に摂取させ、１２時間明暗周期、２３±３℃、相対湿度５０±２０％で飼育した。
投与液の最終投与４時間後に採血を行い、その後ペントバルビタールナトリウム（東京化成工業株式会社）水溶液（６４．８ｍｇ／ｍＬ）を０．４ｍＬ／ｋｇとなる用量で橈側皮静脈内投与して麻酔を行った。体重を測定後、放血安楽死させ、大脳皮質、大脳髄質、小脳、中脳、線状体被膜、線状体尾状体、海馬、延髄、および間脳を採取した。採取した各器官は直ちに液体窒素で凍結させ、超低温フリーザー（−７０℃以下）で保存した。
アドニキサンチン投与ザルから採取した各器官におけるアドニキサンチンの濃度（各器官の重量に対する濃度）、およびアスタキサンチン投与ザルから採取した各器官におけるアスタキサンチンの濃度（各器官の重量に対する濃度）をそれぞれ測定した。具体的には、各器官をホモジナイズし、アセトンで色が出なくなるまで抽出を繰り返した。その後、フィルター濾過し、アセトンを蒸発させ、その液にジエチルエーテル：ヘキサン（２：８，ｖ／ｖ）を添加し、カロテノイドを抽出した。さらに、蒸発乾固し、残留物をアセトン：ヘキサン（２：８，ｖ／ｖ）に溶解させ、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣ機器はＨｉｔａｃｈｉ Ｌ−６０００ ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ ｐｕｍｐ、Ｌ−４２５０ ＵＶ−ＶＩＳ ｄｅｔｅｃｔｏｒを用いた。測定波長は４５０ｎｍとし、カラムは５μｍ Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５ＳＬ−ＩＩ（２５０ｘ４．６ ｍｍ内径）（ナカライテスク社、日本）を用いた。移動相はアセトン：ヘキサン（２：８，ｖ／ｖ）を用い、流速１．０ｍＬ／分で測定した。【００６２】
各器官におけるアスタサンチン、アドニキサンチンの濃度を図５に示す。図５に示される通り、アドニキサンチンおよびアスタキサンチンは高濃度で脳に移行し、滞留した。特に、アドニキサンチンはアスタキサンチンに比べ、より高濃度で脳に移行し、滞留した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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