(57)【要約】  ４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩または二ベンゼンスルホン酸塩またはそれらの結晶形態は、吸湿性が低く、保存安定性に優れるため、有用な医薬品原薬となり得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩。
【請求項２】
結晶形態である、請求項２記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも2つ以上の回折ピークを有する、請求項２記載の結晶。
【請求項４】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度の回折角（２θ）に回折ピークを有する、請求項２記載の結晶。
【請求項５】
図１に示される粉末X線回折スペクトルチャートを特徴とする請求項２に記載の結晶。
【請求項６】
示差走査熱量測定において、オンセット温度が約２１６℃または吸熱ピーク温度が約２２８℃である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の結晶。
【請求項７】
図５に示される示差走査熱量測定チャートを特徴とする請求項６記載の結晶。
【請求項８】
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩。
【請求項９】
結晶形態である、請求項８記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩。
【請求項１０】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも2つ以上の回折ピークを有する、請求項９記載の結晶。
【請求項１１】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度の回折角（２θ）に回折ピークを有する、請求項９記載の結晶。
【請求項１２】
図２に示される粉末X線回折スペクトルチャートを特徴とする請求項９記載の結晶。
【請求項１３】
示差走査熱量測定において、オンセット温度が約２０３℃または吸熱ピーク温度が約２１３℃である、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の結晶。
【請求項１４】
図６に示される示差走査熱量測定チャートを特徴とする請求項１３記載の結晶。
【請求項１５】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩を含有する医薬組成物。
【請求項１６】
請求項８〜１４のいずれか一項に記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩を含有する医薬組成物。
【請求項１７】
血液凝固第ＸＩａ因子阻害剤である請求項１５または１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
血液凝固第ＸＩａ因子関連疾患の予防および／または治療薬である請求項１５または１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
血液凝固第ＸＩａ因子関連疾患が血栓塞栓疾患である請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
血栓塞栓疾患が、急性冠症候群、播種性血管内凝固障害（ＤＩＣ）または脳梗塞である、請求項１９記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸（以下、化合物Aと略記することがある。）の新規な塩形態およびその新規結晶形態に関する。
【背景技術】
【０００２】
血栓塞栓症は、血栓症およびその合併症である血栓塞栓症の総称である。血栓塞栓症は癌と並んで成人における死亡原因の上位を占め、近年重要な問題となっている。血栓塞栓症は、血栓が血管傷害部位で形成されることにより、もしくはその血栓が遊離して血流に乗って別の血管内に運ばれ血管を閉塞することにより発生する。血栓塞栓症には、例えば深部静脈血栓症と肺塞栓症の総称である静脈血栓塞栓症、脳卒中、狭心症、心筋梗塞、その他種々の動脈および静脈血栓症等が含まれる。【０００３】
血管の損傷などで血管壁に発現した組織因子は、血液凝固カスケードの起点となり、血中に微量に存在する血液凝固第ＶＩＩ因子と複合体を形成する。本複合体は血液凝固第ＩＸ因子および血液凝固第Ｘ因子を活性化し、活性化血液凝固第Ｘ因子がプロトロンビンをトロンビンへ変換する。トロンビンはフィブリノーゲンをフィブリンへ変換し、最終的に不溶性フィブリンが形成する（開始期）。この過程で産生されたトロンビンは、開始期の血栓形成を促すと考えられ、止血に重要と考えられる一方で、血液凝固第ＸＩ因子を活性化し、活性化血液凝固第ＸＩ因子を介して爆発的なトロンビン産生を引き起こし（増幅期）、その結果、血栓が増大することが報告されている（非特許文献１−３参照）。【０００４】
血栓塞栓疾患の治療および／または予防には一般的に抗凝固剤が用いられているが、既存の抗凝固薬は、優れた抗血栓作用を示す一方で、出血合併症という重篤な副作用が問題となっているか、あるいは出血合併症を引き起こさないために、投与量が制限され、十分な抗血栓作用を発揮していない可能性が考えられる。このような状況下で、病的血栓の成長あるいは増大を抑制し、かつ止血血栓の形成に影響しない、新しい作用機序を有する血栓症や血栓塞栓症の治療剤および／または予防剤が必要とされている。その標的の一つとして、近年、血液凝固第ＸＩａ因子が注目されている。血液凝固第ＸＩ因子は、血液凝固の調節に関与する血漿中セリンプロテアーゼの一つであり、活性化血液凝固第ＸＩＩ因子、トロンビン、または自身によって活性化型の血液凝固第ＸＩａ因子となる。血液凝固第ＸＩａ因子は、古典的血液凝固カスケードにおいては内因系あるいは接触系と呼ばれる血液凝固経路の構成因子の一つであり、Ａｒｇ−ＡｌａとＡｒｇ−Ｖａｌ間のペプチド結合を選択的に切断することにより、血液凝固第ＩＸ因子を活性化する。血液凝固第ＸＩａ因子の安全性は、血友病Ｃと呼ばれるヒトの血液凝固第ＸＩ欠損症において、主に術後または外傷後の軽度から中程度の出血を特徴とした観察結果から支持されている。さらに、血液凝固第ＸＩａ因子の効果と安全性の高さについては、ヒトの血液凝固第ＸＩａ因子欠損症の観察結果に加えて、血液凝固第ＸＩ欠損マウスを用いた実験的血栓症および出血モデルにおける実験結果およびサルまたはウサギを用いた実験的血栓症および出血モデルにおける抗血液凝固第ＸＩ中和抗体またはアンチセンスの実験結果から証明されている（非特許文献４−８参照）。【０００５】
以上の結果から、血液凝固第ＸＩａ因子は抗血栓治療剤および／または予防剤を開発する上で、出血という副作用の無い非常に魅力的な標的であり、血液凝固第ＸＩａ因子阻害剤は出血等の望ましくない副作用を持たない、非常に強力且つ安全な抗血栓治療剤または予防剤になることが期待されている。【０００６】
ところで、特許文献１および２には化合物Aのトリフルオロ酢酸塩を含む化合物群が選択的な血液凝固第ＸＩａ因子阻害剤であり、血栓塞栓疾患等の治療薬として有用であることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２０１３／１７４９３７号パンフレット
【特許文献２】特開２０１５−１２０６８５
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】ブラッド・コアグレーション・アンド・フィブリノリシス（Blood Coagulation and Fibrinolysis）、２００６年、第１７巻、２５１−２５７頁
【非特許文献２】サイエンス（Science）、１９９１年、第２５３巻、９０９−９１２頁
【非特許文献３】ブラッド（Blood）、２００３年、第１０２巻、９５３−９５５頁
【非特許文献４】ジャーナル・オブ・トロンボシス・アンド・ヘモスタシス（Journal of Thrombosis and Haemostasis）、２００５年、第３巻、６９５−７０２頁
【非特許文献５】ジャーナル・オブ・トロンボシス・アンド・ヘモスタシス（Journal of Thrombosis and Haemostasis）、２００６年、第４巻、１９８２−１９８８頁
【非特許文献６】ブラッド（Blood）、２０１２年、第１１９巻、２４０１−２４０８頁
【非特許文献７】ブラッド（Blood）、２００９年、第１１３巻、９３６−９４４頁
【非特許文献８】ジャーナル・オブ・トロンボシス・アンド・ヘモスタシス（Journal of Thrombosis and Haemostasis）、２００６年、第４巻、１４９６−１５０１頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
特許文献１および２に記載の化合物Aのトリフルオロ酢酸塩は非晶質であったことから、医薬品として取り扱いに優れた新たな結晶塩等の取得が望まれた。したがって、本発明の課題は、化合物Aの各種酸付加塩の中でも結晶を形成し、さらには低吸湿性および／または保存安定性に優れる塩を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記の課題を解決するために検討を行い、５水和物と１酢酸塩が結晶を形成することを見出した。しかしながら、こられは保存安定性や吸湿性に課題があったため、更なる検討を重ねた結果、化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩が結晶を形成し、低吸湿でかつ保存安定性に優れることを見出し、本発明を完成させた。
本発明は、例えば下記の実施態様を提供する。
［１］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩；
［２］前記[１]記載の塩の結晶（結晶形態である、前記[１]記載の塩）；
［３］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも２つ以上の回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［４］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも３つ以上の回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［４−１］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも４つ以上の回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［４−２］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも５つ以上の回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［４−３］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１５．６、約１６．０、約１７．１、約１８．６および約２２．４度から選択される回折角（２θ）に、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上の回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［５］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度の回折角（２θ）に回折ピークを有する、前記［２］記載の結晶；
［６］図１に示される粉末X線回折スペクトルチャートを特徴とする前記［２］に記載の結晶；
［７］示差走査熱量測定において、オンセット温度が約２１６℃または吸熱ピーク温度が約２２８℃である、前記［２］、［３］、［４］、［４−１］、［４−２］、［４−３］、［５］および[６]のいずれかに記載の結晶；
［８］図５に示される示差走査熱量測定チャートを特徴とする前記[７]に記載の結晶；
［９］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩；
［１０］前記[９]記載の塩の結晶（結晶形態である、前記[９]記載の塩）；
［１１］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも２つ以上の回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１２］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも３つ以上の回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１２−１］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも４つ以上の回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１２−２］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも５つ以上の回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１２−３］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７および約２１．５度から選択される回折角（２θ）に、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上の回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１３］粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度の回折角（２θ）に回折ピークを有する、前記［１０］記載の結晶；
［１４］図２に示される粉末X線回折スペクトルチャートを特徴とする前記［１０］に記載の結晶；
［１５］示差走査熱量測定において、オンセット温度が約２０３℃または吸熱ピーク温度が約２１３℃である、前記［１０］、［１１］、［１２］、［１２−１］、［１２−２］、［１２−３］、［１３］および[１４]のいずれかに記載の結晶；
［１６］図６に示される示差走査熱量測定チャートを特徴とする前記[１５]に記載の結晶；
［１７］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩、または前記［２］〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物（前記[１]〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物）；
［１８］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩、または前記［１０］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物（前記［９］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］いずれかに記載の４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物）；
［１９］血液凝固第ＸＩａ因子阻害剤である前記［１７］または[１８]に記載の医薬組成物；
［２０］血液凝固第ＸＩａ因子関連疾患の予防および／または治療薬である前記［１７］または[１８]に記載の医薬組成物；
［２１］血液凝固第ＸＩａ因子関連疾患が血栓塞栓疾患である前記［２０］に記載の医薬組成物；
［２２］血栓塞栓疾患が、急性冠症候群、播種性血管内凝固障害（ＤＩＣ）または脳梗塞である、前記［２１］に記載の医薬組成物；
［２３］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩、または前記［２］〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の結晶を含有する、血栓塞栓疾患の予防および／または治療剤；
［２４］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩、または前記［２］〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、血栓塞栓疾患の予防および／または治療方法；
［２５］血栓塞栓疾患の予防および／または治療に使用される、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩、または前記［２］〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の結晶；
［２６］血栓塞栓疾患の予防および／または治療剤の製造のための、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩、または前記［２］〜［４］、［４−１］〜［４−３］および［５］〜［８］のいずれかに記載の結晶の使用；
［２７］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩、または前記［１０］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］いずれかに記載の結晶を含有する、血栓塞栓疾患の予防および／または治療剤；
［２８］４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩、または前記［１０］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］いずれかに記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、血栓塞栓疾患の予防および／または治療方法；
［２９］血栓塞栓疾患の予防および／または治療に使用される、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩、または前記［１０］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］いずれかに記載の結晶；
［３０］血栓塞栓疾患の予防および／または治療剤の製造のための、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩、または前記［１０］〜［１２］、［１２−１］〜［１２−３］および［１３］〜［１６］いずれかに記載の結晶の使用；
［３１］製造工程においてテトラヒドロフランを用いることを特徴とする、前記[２]に記載の結晶の製造方法；
［３２］製造工程においてテトラヒドロフランを用いることを特徴とする、前記[１０]に記載の結晶の製造方法。
【発明の効果】
【００１１】
化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は結晶を形成し、かつ吸湿性が低く保存安定性に優れた医薬品原薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】化合物Ａの２トシル酸塩の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図２】化合物Ａの２ベシル酸塩の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図３】化合物Ａの１酢酸塩の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図４】化合物Ａの５水和物の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図５】化合物Ａの２トシル酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）チャートを表す（縦軸は熱流束（W/ｇ）を表し、横軸は温度（℃）を表す。）。
【図６】化合物Ａの２ベシル酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）チャートを表す（縦軸は熱流束（W/ｇ）を表し、横軸は温度（℃）を表す。）。
【図７】化合物Ａの１酢酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）チャートを表す（縦軸は熱流束（W/ｇ）を表し、横軸は温度（℃）を表す。）。
【図８】化合物Ａの５水和物の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）チャートを表す（縦軸は熱流束（W/ｇ）を表し、横軸は温度（℃）を表す。）。
【図９】化合物Ａの２トシル酸塩の等温吸着曲線を表す（縦軸は乾燥質量の変化（％）を表し、横軸は相対湿度（ＲＨ）（％）を表す。）。
【図１０】化合物Ａの２ベシル酸塩の等温吸着曲線を表す（縦軸は乾燥質量の変化（％）を表し、横軸は相対湿度（ＲＨ）（％）を表す。）。
【図１１】化合物Ａの１酢酸塩の等温吸着曲線を表す（縦軸は乾燥質量の変化（％）を表し、横軸は相対湿度（ＲＨ）（％）を表す。）。
【図１２】化合物Ａの５水和物の等温吸着曲線を表す（縦軸は乾燥質量の変化（％）を表し、横軸は相対湿度（ＲＨ）（％）を表す。）。
【図１３】化合物Ａの１酢酸塩の２５℃６０％ＲＨ条件下で２か月保存後の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図１４】化合物Ａの２トシル酸塩の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【図１５】化合物Ａの２トシル酸塩の２５℃６０％ＲＨ条件下で２か月保存後の粉末Ｘ線回折スペクトルチャートを表す（縦軸は強度（counts）を表し、横軸は２θ（度）を表す。）。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明において、４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸（化合物Ａ）とは、以下の構造式
【００１４】
【化１】
2020059812.tif 000002
【００１５】
（式中、記号
【００１６】
【化２】
2020059812.tif 000003
【００１７】
は、α配置を表し、
【００１８】
【化３】
2020059812.tif 000004
【００１９】
は、β配置を表す。）で表される化合物を意味する。
【００２０】
また、上記の構造式で表される化合物は、４−［（｛（２Ｓ，４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−２−ピロリジニル｝カルボニル）アミノ］安息香酸と命名することもできる。
【００２１】
化合物Ａの２トシル酸塩の結晶は、以下の（a）および（b）の少なくとも一つの物理化学データによって特徴づけられる。好ましくは、（a）および（b）の両方の物理化学データによって特徴づけられる。（a）図１に示される回折角（２θ）もしくは表２に示される回折角（２θ）と実質的に同じ回折角（２θ）を有する、または表２に示される回折角（２θ）と実質的に同じ回折角（２θ）から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは５つ超のピークを有する、粉末Ｘ線回折スペクトル、（ｂ）図５に示される示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、またはオンセット温度が約２１６℃または吸熱ピーク温度が約２２８℃である吸熱ピークを有する。
【００２２】
化合物Ａの２トシル酸塩の結晶のある態様としては、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１５．６、約１６．０、約１７．１、約１８．６および約２２．４度から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上のピークを有する結晶であり、また別の態様としては、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１５．６、約１６．０、約１７．１、約１８．６および約２２．４度に回折角（２θ）ピークを有する結晶である。化合物Ａの２トシル酸塩の結晶のさらに別の態様としては、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに別の態様としては、約６．２、約７．８、約９．４、約１１．７、約１５．６、約１６．０、約１６．３、約１７．１、約１８．６、約２０．０、約２０．３、約２１．３、約２２．４、約２３．０、約２３．５、約２３．８、約２４．１、約２４．７、約２５．９および約２７．２度にピークを有する結晶である。
【００２３】
化合物Ａの２ベシル酸塩の結晶は、以下の（ｃ）および（ｄ）の少なくとも一つの物理化学データによって特徴づけられる。好ましくは、（ｃ）および（ｄ）の両方の物理化学データによって特徴づけられる。（ｃ）図２に示される回折角（２θ）もしくは表３に示される回折角（２θ）と実質的に同じ回折角（２θ）を有する、または以下の表３に示される回折角（２θ）と実質的に同じ回折角（２θ）から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは５つ超のピークを有する、粉末Ｘ線回折スペクトル、（ｄ）以下の図６に示される示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、またはオンセット温度が約２０３℃または吸熱ピーク温度が約２１３℃である吸熱ピークを有する。
【００２４】
化合物Ａの２ベシル酸塩の結晶のある態様としては、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７および約２１．５度から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上のピークを有する結晶であり、また別の態様としては、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、約６．２、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７および約２１．５度に回折角（２θ）ピークを有する結晶である。化合物Ａの２ベシル酸塩の結晶のさらに別の態様としては、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度から選択される回折角（２θ）に少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに別の態様としては、約６．２、約７．７、約１２．０、約１２.５、約１６.２、約１７.２、約１７．７、約１８．６、約１８．８、約１９．０、約２０．３、約２０．８、約２１．５、約２２．５、約２２．９および約２３．１度にピークを有する結晶である。
【００２５】
［同位体標識化］
化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は、１つ以上の原子を同位元素で置換されていてもよく、同位体標識された化合物Ａ、例えば放射性同位体を組み込んだ化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は、薬物および／または基質の組織分布研究等において有用である。上記同位元素としては、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉ、１２５Ｉ等が挙げられる。
【００２６】
［毒性］
化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩の毒性は低いものであるため、安全に使用することができる。
【００２７】
［医薬品への適用］
化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は、血液凝固第ＸＩａ因子（第ＸＩａ因子）阻害活性を有するので、哺乳動物、特にヒトにおいて、第ＸＩａ因子関連疾患、例えば、血栓塞栓疾患の予防および／または治療剤として使用することができる。
【００２８】
血栓塞栓疾患としては、例えば、動脈性心血管血栓塞栓性疾患、静脈性心血管血栓塞栓性疾患、動脈性脳血管血栓塞栓性疾患、静脈性脳血管血栓塞栓性疾患、および心房内または末梢循環における血栓塞栓性疾患等が挙げられる。
【００２９】
動脈性心血管血栓塞栓性疾患としては、例えば、冠動脈疾患、虚血性心筋症、急性冠症候群、冠状動脈血栓症、不安定狭心症および非Ｑ波心筋梗塞の虚血性合併症、医学的に管理されるか、又は経皮的冠インターベンションを伴うＳＴ上昇型および／または非ＳＴ上昇型急性心筋梗塞、安定（労作性）狭心症等の狭心症、異型狭心症、不安定狭心症、心筋梗塞（最初の心筋梗塞または再発性心筋梗塞等）、急性心筋梗塞、冠動脈バイパス手術後の血管再閉塞および狭窄、経皮経管的血管形成術、心臓／経冠動脈ステント留置手術後や冠動脈のための血栓溶解療法後の再閉塞および狭窄または虚血性突然死等が挙げられる。
【００３０】
静脈性心血管血栓塞栓性疾患としては、例えば、主要な一般外科手術、腹部手術、人工股関節置換術、膝関節置換術、股関節骨折手術、多発骨折、多発外傷、外傷、脊髄損傷、火傷における，または重症管理室入室時における深部静脈血栓症（DVT）および／または肺塞栓症（PE）、身体活動が著しく制限された急性疾患患者におけるＤＶＴおよび／またはＰＥ、癌化学療法施行患者におけるＤＶＴおよび／またはＰＥ、脳卒中患者におけるＤＶＴおよび／またはＰＥ、ＰＥの有無にかかわらない症候性または無症候性のＤＶＴ等が挙げられる。
【００３１】
動脈性脳血管血栓塞栓性疾患としては、脳卒中、虚血性脳卒中、脳梗塞急性期、非弁膜症性心房細動または弁膜症性心房細動患者における脳卒中、大脳動脈血栓症、脳梗塞、一過性脳虚血発作（TIA）、ラクナ梗塞、アテローム性血栓性脳梗塞、大脳動脈塞栓症、脳血栓症、脳血管障害または無症候性脳梗塞等が挙げられる。
【００３２】
静脈性脳血管血栓塞栓性疾患としては、頭蓋内静脈血栓症、脳塞栓症、脳血栓症、静脈洞血栓症、頭蓋内静脈洞血栓症または海綿静脈洞血栓症等が挙げられる。
【００３３】
心房内または末梢循環における血栓塞栓性疾患としては、静脈血栓症、全身性静脈血栓塞栓症、血栓性静脈炎、非弁膜症および弁膜症性心房細動、心原性塞栓症、播種性血管内凝固症候群（DIC）、敗血症、急性呼吸窮迫症候群（ARDS）、急性肺損傷（ALI）、抗リン脂質抗体症候群、腎臓塞栓症、アテローム性動脈硬化症、アテローム血栓症、末梢動脈閉塞性疾患（PAOD）、末梢動脈疾患、動脈塞栓症、または医療用インプラント、デバイス、または血栓症を促進するような人工物（カテーテル、ステント、人工心臓弁または血液透析器等）の表面に曝露するような治療により起こる血栓症等が挙げられる。
【００３４】
血栓塞栓疾患として好ましくは、不安定狭心症、急性冠症候群、心房細動、心筋梗塞（最初の心筋梗塞または再発性心筋梗塞等）、虚血性突然死、一過性脳虚血発作、脳卒中、アテローム性動脈硬化症、末梢閉塞性動脈疾患、静脈血栓症、深部静脈血栓症、血栓性静脈炎、動脈塞栓症、冠状動脈血栓症、大脳動脈血栓症、脳塞栓症、腎臓塞栓症、門脈血栓症、肺塞栓症、肺梗塞、肝塞栓症、播種性血管内凝固症候群（DIC）、敗血症、急性呼吸窮迫症候群（ARDS）、急性肺損傷（ALI）、抗リン脂質抗体症候群、冠動脈バイパス移植（グラフト）手術に起因する血栓症または医療用インプラント、デバイス、または血栓症を促進するような人工物（カテーテル、ステント、人工心肺または血液透析器等）の表面に曝露するような治療により起こる血栓症等（例えば、血液透析・人工心肺その他の体外循環装置使用時の血液凝固）が挙げられる。
【００３５】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩を医薬適用するにあたっては、化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩を単剤として用いられるだけではなく、例えば、
（１）その予防、治療および／または症状改善効果の補完および／または増強、
（２）その動態・吸収改善、投与量の低減、および／または
（３）その副作用の軽減のために、他の有効成分、例えば、以下に列挙するような薬剤等と組み合わせ、併用剤として用いてもよい。
【００３６】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩を血栓塞栓疾患の予防および／または治療に用いる場合、化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩と組み合わせて用いられる併用薬剤としては、例えば、抗凝固剤、抗血小板剤、血栓溶解剤、線維素溶解剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、エラスターゼ阻害剤、ステロイドまたはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００３７】
抗凝固剤として、トロンビン阻害剤、アンチトロンビンＩＩＩ活性化剤、ヘパリン補因子ＩＩ活性化剤、他の第ＸＩａ因子阻害剤、血漿および／または組織カリクレイン阻害剤、プラスミノゲン活性化抑制因子（PAI-1）阻害剤、トロンビン活性化線溶阻害剤（ＴＡＦＩ）阻害剤、第ＶＩＩａ因子阻害剤、第ＶＩＩＩａ因子阻害剤、第ＩＸａ因子阻害剤、第Ｘａ因子阻害剤、第ＸＩＩａ因子阻害剤、またはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００３８】
抗血小板剤として、ＧＰＩＩ／ＩＩＩａ遮断薬、プロテアーゼ活性化受容体（PAR-1）アンタゴニスト、ＰＡＲ−４アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼＩＩＩ阻害剤、他のホスホジエステラーゼ阻害剤、Ｐ２Ｘ１アンタゴニスト、Ｐ２Ｙ１受容体アンタゴニスト、Ｐ２Ｙ１２アンタゴニスト、トロンボキサン受容体拮抗剤、トロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤、シクロオキシゲナーゼ−１阻害剤、ホスホリパーゼＤ１阻害剤、ホスホリパーゼＤ２阻害剤、ホスホリパーゼＤ阻害剤、糖タンパク質ＶＩ（ＧＰＶＩ）アンタゴニスト、糖タンパク質Ｉｂ（ＧＰＩＢ）アンタゴニスト、ＧＡＳ６アンタゴニスト、アスピリン、またはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００３９】
併用薬として好ましくは、抗血小板剤である。
抗血小板剤として、好ましくは、クロピドグレル、プラスグレル、チカグレロール、カングレロール、エリノグレル、シロスタゾール、サルポグレラート、イロプロスト、ベラプロスト、リマプロストおよび／またはアスピリン、またはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００４０】
併用薬として、好ましくは、ワルファリン、未分画ヘパリン、低分子量ヘパリン、エノキサパリン、ダルテパリン、ベミパリン、チンザパリン、セミュロパリン  ナトリウム（ＡＶＥ−５０２６）、ダナパロイド、合成五糖、フォンダパリヌクス、ヒルジン、ジスルファトヒルジン、レピルジン、ビバリルジン、デシルジン、アルガトロバン、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、スリンダク、インドメタシン、メフェナマート、ドロキシカム、ジクロフェナク、スルフィンピラゾン、ピロキシカム、チクロピジン、クロピドグレル、プラスグレル、チカグレロール、カングレロール、エリノグレル、シロスタゾール、サルポグレラート、イロプロスト、ベラプロスト、リマプロスト、チロフィバン、エプチフィバチド、アブシキシマブ、メラガトラン、キシメラガトラン、ダビガトラン、リバロキサバン、アピキサバン、エドキサバン、ダレキサバン、ベトリキサバン、TAK−442、組織プラスミノゲン活性化因子、改変型組織プラスミノゲン活性化因子、アニストレプラーゼ、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ガベキサート、メシル酸ガベキサート、ナファモスタット、シベレスタット、シベレスタットナトリウム水和物、アルベレスタット（ＡＺＤ−９６６８）、ＺＤ−８３２１/０８９２、ＩＣＩ−２００８８０、ヒトエラフィン（ｔｉｐｒｅｌｅｓｔａｔ）、エラフィン、α１−アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）、コルチゾン、ベタメタゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロンおよびトリアムシノロン、またはそれらの組み合わせである。
【００４１】
別の実施形態において、本発明における併用薬剤としては、例えば、カリウムチャネル開口薬、カリウムチャネル遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、水素ナトリウム交換輸送体阻害剤、抗不整脈剤、抗動脈硬化剤、抗凝固剤、抗血小板剤、抗血栓剤、血栓溶解剤、フィブリノーゲン拮抗剤、利尿降圧剤、ＡＴＰアーゼ阻害剤、電解質コルチコイド受容体アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、抗糖尿病剤、プロテアーゼ阻害剤、エラスターゼ阻害剤、抗炎症剤、抗酸化剤、血管新生モジュレーター、骨粗鬆症治療剤、ホルモン補充療法、ホルモン受容体モジュレーター、経口避妊薬、抗肥満薬、抗うつ薬、抗不安剤、抗精神病剤、抗増殖剤、抗腫瘍剤、抗潰瘍および胃食道逆流症剤、成長ホルモン剤および／または成長ホルモン分泌促進物質、甲状腺模倣薬、抗感染剤、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗真菌剤、コレステロール／脂質異常症治療薬および脂質プロフィール改善療法、および模擬的虚血性のプレコンディショニングおよび／または気絶心筋剤、またはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００４２】
好ましい実施形態において、本発明における併用薬剤としては、抗血小板剤またはそれらの組み合わせである。
【００４３】
別の実施形態において、本発明における併用薬剤としては、例えば、さらに抗不整脈剤、抗高血圧剤、抗凝固剤、抗血小板剤、血栓溶解剤、線維素溶解剤、カルシウムチャネル遮断薬、カリウムチャネル遮断薬、コレステロール／脂質低下剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、エラスターゼ阻害剤、抗炎症剤、またはそれらの組み合わせ等が挙げられる。
【００４４】
抗不整脈剤としは、ＩＫｕｒ阻害薬、エラスターゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、ステロイド等が挙げられる。
【００４５】
抗高血圧剤としは、ＡＣＥ阻害薬、ＡＴ−１受容体拮抗薬、β−アドレナリン受容体アンタゴニスト、ＥＴＡ受容体アンタゴニスト、デュアルＥＴＡ／ＡＴ−１受容体拮抗薬、バソペプチダーゼ阻害剤等が挙げられる。
【００４６】
好ましい実施形態において、本発明における併用薬剤としては、抗血小板剤またはそれらの組み合わせである。
【００４７】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩とこれら他の薬剤の併用剤は、１つの製剤中に両成分を配合した配合剤の形態で投与してもよく、別々の製剤を同一投与経路または別投与系路で投与する形態をとってもよい。別々の製剤を投与する場合は、必ずしも同時投与である必要はなく、必要に応じて投与に時間差を設けてもよい。また、投与に時間差を設ける場合、投与の順序に特に制限はなく、望む薬効が得られるように適宜調節すればよい。
【００４８】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩と組み合わせて用いられるこれら他の薬剤の投与量は、その薬剤もしくは類似薬の臨床上用いられている用量を基準に適宜増減することができる。また、化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩と他の薬剤との配合比は、投与対象の年齢や体重、投与方法、投与時間、対象疾患、症状等を考慮して適宜調節することができる。おおむね、１重量部の化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩に対して、他の薬剤を０．０１乃至１００重量部組み合わせればよい。他の薬剤は複数のものを用いてもよい。また、他の薬剤は、上に列挙したもののほか、それと同一メカニズムを有する薬物であってもよい。このような薬物には、現在までに見出されているものだけでなく、今後見出されるものも含まれる。
【００４９】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩の投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人１人当たり、１回につき、１ｍｇから３００ｍｇの範囲で１日１回から数回経口投与するか、または成人１人当たり、１回につき、０．１ｍｇから３０ｍｇの範囲で１日１回から数回非経口投与するか、または１日１時間から２４時間の範囲で静脈内に持続投与すればよい。
【００５０】
もちろん前記したように、投与量は種々の条件により変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また範囲を越えて投与の必要な場合もある。
【００５１】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩を単剤として、あるいは他の薬剤を組み合わせて併用剤として、上記の疾患の予防および／または治療の目的に用いるには、有効成分である当該物質を、通常、各種の添加剤または溶媒等の薬学的に許容される担体とともに製剤化したうえで、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。ここで、薬学的に許容される担体とは、一般的に医薬品の製剤に用いられる、有効成分以外の物質を意味する。薬学的に許容される担体は、その製剤の投与量において薬理作用を示さず、無害で、有効成分の治療効果を妨げないものが好ましい。また、薬学的に許容される担体は、有効成分および製剤の有用性を高める、製剤化を容易にする、品質の安定化を図る、または使用性を向上させる等の目的で用いることもできる。具体的には、薬事日報社２０００年刊「医薬品添加物事典」（日本医薬品添加剤協会編集）等に記載されているような物質を、適宜目的に応じて選択すればよい。
【００５２】
化合物Ａの２トシル酸塩または２ベシル酸塩は、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。経口剤としては、例えば、内服用液剤（例えば、エリキシル剤、シロップ剤、薬剤的に許容される水剤、懸濁剤、乳剤）、内服用固形剤（例えば、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、丸剤、カプセル剤（ハードカプセル、ソフトカプセル、ゼラチンカプセル、マイクロカプセルを含む）、散剤、顆粒剤、トローチ剤）等が挙げられる。非経口剤としては、例えば、液剤（例えば、注射剤（硝子体内注射剤、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤、点滴剤等）、点眼剤（例えば、水性点眼剤（水性点眼液、水性懸濁点眼液、粘性点眼液、可溶化点眼液等）、非水性点眼剤（非水性点眼液、非水性懸濁点眼液等））等）、外用剤（例えば、軟膏（眼軟膏等））、点耳剤等が挙げられる。これらの製剤は、速放性製剤、徐放性製剤などの放出制御剤であってもよい。これらの製剤は公知の方法、例えば、日本薬局方に記載の方法等により製造することができる。
【００５３】
経口剤としての内服用液剤は、例えば、有効成分を一般的に用いられる希釈剤（例えば、精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化されることにより製造される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。
【００５４】
経口剤としての内服用固形剤は、例えば、有効成分を賦形剤（例えば、ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（例えば、繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム等）、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸等）等と混合し、常法に従って製剤化される。また、必要によりコーティング剤（例えば、白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。
【００５５】
非経口剤としての外用剤は公知の方法または通常使用されている処方により製造される。例えば、軟膏剤は有効成分を基剤に研和または溶融させて製造される。軟膏基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、高級脂肪酸または高級脂肪酸エステル（例えば、アジピン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アジピン酸エステル、ミリスチン酸エステル、パルミチン酸エステル、ステアリン酸エステル、オレイン酸エステル等）、ロウ類（例えば、ミツロウ、鯨ロウ、セレシン等）、界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテルリン酸エステル等）、高級アルコール（例えば、セタノール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコール等）、シリコン油（例えば、ジメチルポリシロキサン等）、炭化水素類（例えば、親水ワセリン、白色ワセリン、精製ラノリン、流動パラフィン等）、グリコール類（例えば、エチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、マクロゴール等）、植物油（例えば、ヒマシ油、オリーブ油、ごま油、テレピン油等）、動物油（例えば、ミンク油、卵黄油、スクワラン、スクワレン等）、水、吸収促進剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保湿剤、保存剤、安定化剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
【００５６】
非経口剤としての注射剤には溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含される。注射剤は、例えば有効成分を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定剤、溶解補助剤（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリソルベート８０（登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって製造される。また無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。
【００５７】
本発明において、化合物Ａ、または化合物Ａの各種酸付加塩は、例えば後記する実施例、これらに準ずる方法に従って製造することが出来る。なお、再結晶を行う際、種晶は、使用しても、または使用しなくてもよい。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例および生物学的実施例によって本発明を詳述するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００５９】
本発明の化合物名および実施例に示す化合物名は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ（バージョン６．００、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｉｎｃ．社製）、もしくはＣｈｅｍｄｒａｗ  Ｕｌｔｒａ（バージョン１２．０、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｓｏｆｔ社製）によって命名した。【００６０】
反応、抽出、乾燥、カラムクロマトグラフィーおよび１Ｈ−ＮＭＲスペクトル測定の各操作において使用されたほぼ全ての化学薬品は特記なき限り市販品のものを使用した。【００６１】
１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ−ＮＭＲスペクトル）における化学シフト値のδ値はｐｐｍで表示した。基準物質にはテトラメチルシラン（ＴＭＳ）を用いた。シグナル分裂様式のｓ、ｄ、ｔ、ｑ、ｑｕｉｎ．、ｍ、ｂｒ、ｄｄの略号はそれぞれ一重線、二重線、三重線、四重線、五重線、多重線、幅広線、複合二重線を意味するものとした。【００６２】
質量スペクトルおよびＬＣＭＳ分析は、ウォーターズ社製  ウルトラ  パフォーマンス  ＬＣおよびＡＣＱＵＩＴＹ  ＳＱＤ  ＥＳＩ質量分析計を用いて行った。【００６３】
クロマトグラフィーによる分離の箇所は、使用した溶出溶媒を示す。【００６４】
ＮＭＲの箇所に示されているカッコ内の溶媒は、測定に使用した溶媒を示している。【００６５】
ＬＣ−ＭＳ／ＥＬＳＤは、｛カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  Ｃ１８（２）
ｃｏｌｕｍｎ（粒子径：１．７ x 10-6 m；カラム長：３０ x 2.1 mm I.D.）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；移動相（Ａ）：０．１％ギ酸水溶液；移動相（Ｂ）：０．１％ギ酸−アセトニトリル溶液；グラジエント（移動相（Ａ）：移動相（Ｂ）の比率を記載）：［０分］９５：５；［０．１分］９５：５；［１．２分］５：９５；［１．４分］５：９５；［１．４１分］９５：５；［１．５分］９５：５；検出器：ＵＶ（検出波長：254 nm）という条件で行った。【００６６】
実施例１：
１−ベンジル  ２−メチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−１，２−ピロリジンジカルボキシレート【００６７】
【化４】
2020059812.tif 000005
【００６８】
（２Ｓ，４Ｒ）−メチル−ヒドロキシピロリジン−２−カルボキシレート  塩酸塩（132 g）、水（675 mL）および１，４−ジオキサン（675 mL）を加えて、溶液を０℃になるまで冷却した後、炭酸水素ナトリウム（81.3 g）を３０分間かけて添加した。その後、ベンジルクロロホルメート（122 mL）を４５分間かけて反応溶液に添加した。反応溶液を０℃で２時間撹拌した後、反応溶液を室温に戻して、さらに室温で１７時間撹拌した。反応溶液中のジオキサンを真空下で除去して、残りの水溶液をジクロロメタンで抽出した。混合した有機層を１Ｎ塩酸および飽和食塩水で洗浄した。得られた溶液を、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、ろ液を濃縮した。得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝９８：２）にて精製することによって、以下の物性値を有する標題化合物（158 g, 78％）を得た。
性状：無色油状物；
1H NMR (CD3OD, 500 MHz)：δ  7.36-7.30 (m, 5H), 5.17 (d，0.5H), 5.12 (s, 1H), 5.00 (d, 0.5H), 4.50-4.42 (m, 1H), 4.43-4.48 (m, 1H), 3.60-3.30 (m, 2H), 3.56 (s, 3H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.12-1.98 (m, 1H)。【００６９】
実施例２：
（２Ｓ，４Ｒ）−１−ベンジル−２−メチル−４−（トリフルオロメチルスルホニルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート【００７０】
【化５】
2020059812.tif 000006
【００７１】
実施例１で製造した化合物（138 g）、ピリジン（80 mL）および無水ジクロロメタン（1.30 L）を加えた。溶液が−７８℃になるまで冷却した後、溶液の温度が−６５℃以下になるよう、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（125 mL）を４５分間かけて滴下した。反応溶液を１時間かけて−５℃まで加温して、その温度で２時間撹拌した。反応溶液が半分の容量になるまで真空下で濃縮した後、反応溶液をメチル  ｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出して、ジクロロメタンで希釈した。合わせた有機層を１０％硫酸銅・５水和物水溶液、飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水で洗浄した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、ろ液を濃縮して、以下の物性値を有する標題化合物（189 g, 93％）を得た。
性状：黄色油状物；
1H NMR (CD3OD, 500 MHz；回転異性体が存在)：δ  7.40-7.25 (m, 5H), 5.69 (s, 1H), 5.22-4.95 (m, 2H), 4.58-4.50 (m, 1H), 4.08-3.42 (m, 4H), 2.84-2.68 (m, 1H), 2.50-2.36 (m, 1H), 2.33-2.24 (m, 1H)。【００７２】
実施例２（１）：
１−ベンジル  ２−メチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−ニトロフェニル）スルホニル］オキシ｝ピロリジン−１,２−ジカルボキシレート【００７３】
【化６】
2020059812.tif 000007
【００７４】
実施例１で製造した化合物（288 g）、トリエチルアミン（287 mL）および酢酸エチル（720 mL）を加えた。内温２０〜４０℃の範囲で４−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（274 g）の酢酸エチル溶液（720 mL）を滴下した。その後、反応溶液を終夜撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（860 mL）を加えた後、１０％炭酸ナトリウム水溶液（1.44 L）で反応を停止した。分液後、有機層を１０％炭酸ナトリウム水溶液、２０％食塩水で洗浄した。有機層にn−ヘプタン（580 mL）を加えて１時間撹拌した後、さらにn−ヘプタン（2.88 L）を加えた。１時間撹拌した後、沈殿物をろ過した。湿結晶を１２時間６０℃で真空乾燥して、以下の物性値を有する標題化合物（376 g, 82％）を得た。
性状：白色固体；
1H NMR (CDCl3, 400 MHz；回転異性体が存在)：δ  8.41-8.35 (m, 2H), 8.10-8.06 (m, 2H), 7.39-7.27 (m, 5H), 5.22-4.99 (m, 3H), 4.52-4.44 (m, 1H), 3.82-3.67 (m, 3.5H), 3.55 (s, 1.5H), 2.65-2.51 (m, 1H), 2.29-2.20 (m, 1H)。
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ４６５ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００７５】
実施例３：
１−ベンジル  ２−メチル  （２Ｓ，４Ｓ）−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−１,２−ピロリジンジカルボキシレート【００７６】
【化７】
2020059812.tif 000008
【００７７】
実施例２で製造した化合物（189 g）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（160 mL）および乾燥したｔｅｒｔ−ブタノール（1.45 L）を加えて、アルゴン雰囲気下、１−メタンスルホニルピペラジン（226 g）を室温で加え、撹拌した。その後、反応溶液を１６時間還流した。冷却後、橙色油状物になるまで濃縮した。この油状物をジクロロメタン（2.0 L）で希釈して、水で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出して、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過をした。ろ液を濃縮して、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝９８：２）にて精製することによって、以下の物性値を有する標題化合物（145 g, 74％）を得た。
また、標題化合物は実施例２（１）で製造した化合物を用いて得ることもできる。実施例２（１）で製造した化合物（150 g）を使用した場合、炭酸水素ナトリウム（41 g）、アセトニトリル（300 mL）、１−メタンスルホニルピペラジン（80 g）を加え、終夜還流することで標題化合物を得ることができる。
性状：オフ−ホワイト色の固体；
1H NMR (CDCl3, 500 MHz；約20％のジアステレオマー体（２Ｒ，４Ｓ）体を含み、回転異性体が存在)：δ  7.37-7.28 (m, 5H), 5.18 (d, 1H), 5.11-5.07 (m, 0.5H), 5.02-4.98 (m, 0.5H), 4.41-4.30 (m, 1H), 3.98-3.94 (m, 0.5H), 3.88-3.84 (m, 0.5H), 3.75 (s, 1.5H), 3.55 (s, 1.5H), 3.32-3.28 (m, 1H), 3.27-3.20 (m, 4H), 2.90-2.80 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.65-2.45 (m, 5H), 1.92-1.81 (m, 1H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ４２６ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００７８】
実施例４：
（２Ｓ，４Ｓ）−１−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−２−ピロリジンカルボン酸【００７９】
【化８】
2020059812.tif 000009
【００８０】
実施例３で製造した化合物（145 g）およびテトラヒドロフラン（790 mL）を加え、−３℃になるまで溶液を冷却した後、水酸化リチウム（32.6 g）の水溶液（790 mL）を溶液の温度が０℃以下になるよう、１時間以上かけて滴下した。反応溶液を室温に戻して、さらに室温で１５時間撹拌した。反応溶液のテトラヒドロフランを真空下で除去して、水（1 L）を加えた。残りの溶液をメチル  ｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄し、２Ｎの塩酸（275 mL）を加えてｐＨを３−４にした。水層にジクロロメタンを加え、抽出した。また、抽出中に形成された沈殿物をろ取した。ジクロロメタンの半量を除去した後、より多く沈殿物が発生したため、沈殿物を炉取した。炉取した沈殿物を合わせて、１７時間室温で真空乾燥して、以下の物性値を有する標題化合物（82.1 g, 59％）を得た。
性状：白色固体（ジアステレオマー体（２Ｒ，４Ｓ）体を含んでいない）；
1H NMR (CDCl3, 400 MHz；回転異性体が存在)：δ  7.36-7.33 (m, 5H), 5.18-5.12 (m, 2H), 4.43-4.36 (m, 1H), 3.98-3.82 (m, 2H), 3.37-3.17 (m, 4H), 3.00-2.91 (m, 1H), 2.82-2.71 (m, 6H), 2.64-2.49 (m, 2H), 2.24-2.12 (m, 1H), 1.97-1.85 (m, 1H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ４１２ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００８１】
実施例５：
ベンジル  （２Ｓ，４Ｓ）−２−［（４−｛［（２−メチル−２−プロパノイル）オキシ］カルボニル｝フェニル）カルバモイル］−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−１−ピロリジンカルボキシレート【００８２】
【化９】
2020059812.tif 000010
【００８３】
実施例４で製造した化合物（82.1 g）、ｔｅｒｔ−ブチル−４−アミノベンゾエート（77.2 g）および無水ピリジン（1.50 L）を加えた。窒素ガス雰囲気下、−４℃になるまで溶液を冷却した後、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド  塩酸塩（306 g）を１５分間かけて添加した。反応溶液を室温に戻して、さらに室温で１５時間撹拌した。反応溶液を真空下で除去して、ジクロロメタン（2 L）を加えた。反応溶液を１０％硫酸銅・５水和物水溶液で洗浄した。ろ液を水、飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水で洗浄した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過をした。ろ液を暗黄色油状物になるまで濃縮した。得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１００：０→９７.５：２.５）にて精製することによって、以下の物性値を有する標題化合物（108 g）を得た。
性状：黄色固体；
1H NMR (CDCl3, 500 MHz)：δ  7.90 (d, 2H), 7.56-7.10 (m, 3H), 7.26-7.21 (m, 3H), 7.16-7.13 (m, 2H), 5.29-5.01 (m, 2H), 4.52-4.40 (m, 1H), 3.87-3.78 (m, 1H), 3.18-3.01 (m, 4H), 2.85 (quin, 1H), 2.82-2.50 (m, 7H), 2.35 (s, 3H), 1.66 (s, 9H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ５８７ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００８４】
実施例６：
２−メチル−２−プロパノイル  ４−［（｛（２Ｓ，４Ｓ）−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−２−ピロリジニル｝カルボニル）アミノ］ベンゾエート【００８５】
【化１０】
2020059812.tif 000011
【００８６】
窒素ガス雰囲気下、実施例５で製造した化合物（21.7 g）のエタノール溶液（200 mL）に１０％パラジウム炭素（ca.50% wet；4.82 g）を加えた後、水素加圧下（40 psi）で１．５時間撹拌した。反応溶液をジクロロメタン（300 mL）で希釈して、ろ過をして、ろ液を濃縮して、以下の物性値を有する標題化合物（16.6 g, 99%）を得た。
性状：灰色固体；
1H NMR (CDCl3, 500 MHz)：δ  9.59 (s, 1H), 7.94 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 3.94 (t，Hz, 1H), 3.28-3.23 (m, 1H), 3.16-3.11 (m, 4H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.83-2.77 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.62-2.57 (m, 2H), 2.54-2.50 (m, 2H), 2.51-2.47 (m, 1H), 2.03-1.97 (m, 1H), 1.58 (s, 9H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ４５３ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００８７】
実施例７：
２−メチル−２−プロパノイル  ４−［（｛（２Ｓ，４Ｓ）−１−［４−（Ｎ−｛［（２−メチル−２−プロパノイル）オキシ］カルボニル｝カルバムイミドイル）ベンゾイル］−４−［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］−２−ピロリジニル｝カルボニル）アミノ］ベンゾエート【００８８】
【化１１】
2020059812.tif 000012
【００８９】
乾燥したアセトニトリル（250 mL）およびジクロロメタン（100 mL）の混合溶液に実施例６で製造した化合物（10.0 g）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（11.5 mL）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アミジノ安息香酸（6.42 g；米国特許第5973188号明細書  参考例12 d）記載の製造方法に従い、製造した）を加え、窒素ガス雰囲気下、−４５℃まで冷却して、ＨＡＴＵ （O−(7−アザベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート；10.1 g）を１０分間掛けて添加した。反応溶液を室温に戻して、さらに室温で１時間撹拌した。反応溶液を真空下で除去して、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：イソプロパノール＝１００：０→９０：１０）にて精製することによって、以下の物性値を有する標題化合物（9.00 g, 58%）を得た。
性状：オフ−ホワイト色の固体；
1H NMR (CDCl3, 500 MHz)：δ  9.45 (s, 1H), 7.95-7.85 (m, 4H), 7.62-7.54 (m, 4H), 5.00-4.90 (m, 1H), 3.71-3.62 (m, 1H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.28-3.16 (m, 5H), 2.89-2.80 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.70-2.54 (m, 4H), 2.50-2.32 (m, 3H), 1.58 (s, 9H), 1.54 (s, 9H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ６９９ （Ｍ＋Ｈ）＋。【００９０】
実施例８：
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二塩酸塩【００９１】
【化１２】
2020059812.tif 000013
【００９２】
実施例７で製造した化合物（36.2 g）を無水ジクロロメタン（510 mL）に溶解させて、０℃でトリフルオロ酢酸（118.1 g）を滴下した。反応溶液を２２時間室温で撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を粘性の橙色油状物になるまでジクロロメタンおよびアセトニトリルで共沸した。この油状物をアセトニトリル（650 mL）に溶解させて、塩化水素ガスを５分間バブリングさせた。３０分間撹拌した後、白色沈殿物が形成された。反応溶液が約半分の容量になるまで濃縮した。この反応溶液にアセトニトリル（330 mL）を加えて、再度、反応溶液が約半分の容量になるまで濃縮した。白色沈殿物をろ別して、アセトニトリルで洗浄した。残りの溶液を４日間凍結乾燥して、以下の物性値を有する標題化合物（23.9 g, 79%）を得た。
性状：非晶質の白色固体；
1H NMR (D2O, 500 MHz，回転異性体が存在)：δ  7.99 (1H), 7.86 (t，2H), 7.78 (d, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.63-7.60 (m, 2H), 7.17 (dd, 1H), 4.83 (dd, 0.5H), 4.77 (dd, 0.5H), 4.45 (dd, 0.5H), 4.17-4.08 (m, 1H), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.85 (dd, 0.5H), 3.59-3.42 (m, 7H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.07-2.97 (m, 4H), 2.37-2.30 (m, 1H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ５４３ （Ｍ＋Ｈ）＋。
純度（ＨＰＬＣ）：９９％以上  （保持時間：6.5分）。【００９３】
実施例９：
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  五水和物【００９４】
【化１３】
2020059812.tif 000014
【００９５】
実施例８で製造した化合物（37.0 g）を水（740 mL）に溶解させて、２５℃で２８％アンモニウム水溶液（10.6 mL）を加え、１分間撹拌した。白色の結晶が析出した後、反応溶液を３０分間、４℃で撹拌した。析出した結晶を、ろ別して、水（74 mL）で洗浄した。ろ別した結晶に水（185 mL）を加え、懸濁溶液を４０分間、４℃で撹拌した。懸濁溶液をろ別して、析出した結晶を水（74 mL）で洗浄した。結晶を室温で１４時間減圧乾燥した後、湿度７４％の環境下で７時間放置して、以下の物性値を有する標題化合物（32.2 g, 85%）を得た。
形状：結晶性の白色固体；
1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz, 回転異性体が存在)：δ  10.22 (br. s, 1H), 9.54-8.30 (br, 2H), 7.98-7.46 (m, 8H), 6.98-6.81 (m, 1H), 4.75-4.54 (m, 1H), 3.73-3.48 (m, 2H), 3.41-2.29 (m, 13H), 1.88-1.60 (m, 1H)。【００９６】
実施例１０：
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  一酢酸塩【００９７】
【化１４】
2020059812.tif 000015
【００９８】
実施例９で製造した化合物（0.12 g）を１％酢酸−酢酸エチル溶液（3.75 mL）に懸濁させて、２５℃で酢酸（0.25 mL）を徐々に加え、30分間撹拌した。更に酢酸(2.3 mL)を加えた後、懸濁している結晶を、ろ別した。結晶を60℃で１6時間減圧乾燥して、以下の物性値を有する標題化合物（0.11 g, 100%）を得た。
形状：結晶性の白色固体；
1H NMR (D2O, 300 MHz, 回転異性体が存在)：δ  7.93 (dd, 2H), 7.83-7.75 (m，3H), 7.66 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.32 (dd, 0.5H), 4.13 (dd, 0.5H), 3.90 (m, 1H), 3.68 (dd, 0.5H), 3.58 (dd, 1H) 3.48-3.16 (m, 5H), 3.04 (s, 1.5H), 3.00 (s, 1.5H), 2.98-2.63 (m, 5H), 2.98-2.63 (m, 5H), 2.15-2.05 (m, 1.5H), 2.03 (s, 3H)；
ＭＡＳＳ(FAB, Pos.)： ５４３  (M + H -AcOH)＋ 。【００９９】
[化合物Ａの結晶化検討]
（１）自動結晶化装置での結晶化検討：
実施例９で製造した化合物を用いて、化合物Ａの塩の結晶化の可能性を検討した。
１２種類の酸性カウンター（塩酸（１当量）、硫酸（１当量）、クエン酸（１当量）、酒石酸（１当量）、リン酸（１当量）、フマル酸（１当量）、メタンスルホン酸（１当量）、４−トルエンスルホン酸（以下、ｐ−トルエンスルホン酸またはトシル酸と略記することがある；２当量）、ベンゼンスルホン酸（ベシル酸；１当量）、ベシル酸（２当量）、エタンジスルホン酸（１／２当量）、イセチオン酸（１当量））を用い、８種類の溶媒（アセトン、アセトニトリル、酢酸エチル、メタノール、７０％エタノール水溶液、トルエン、ヘプタン、メチル  tert-ブチルエーテル（ＭＴＢＥ））を用い、自動結晶化装置（Freeslate製Core Module(X)）を用いて、化合物Ａの塩の結晶化を検討した。結晶化方法として、スラリー法（５５℃〜室温まで自然放冷）、冷却法（５５℃〜１０℃、−１０℃／ｈ）、沈殿法（５５℃溶解、室温析出）、蒸発濃縮法（５５℃溶解、室温蒸発）の４条件を設定し、溶媒・結晶化方法を組み合せて、各塩に対して２８８通りの結晶化条件を設定した。
その結果、トシル酸（２当量）およびベシル酸（２当量）の塩から、わずかながら結晶性の反射ピークが観察された。しかしながら、これら両塩について結晶が得られた条件で結晶の再取得を試みたところ、再現性がなく結晶を得ることができなかった。従って、手動による、より網羅的な結晶化検討を実施した。【０１００】
（２）手動による結晶化検討：
１２種類の酸性カウンター（塩酸（１当量）、硫酸（０．５当量、１当量、２当量）、リン酸（１当量、２当量）、メシル酸（１当量、２当量）、エタンスルホン酸（１当量、２当量）、ベシル酸（１当量、２当量）、トシル酸（１当量、２当量）、イセチオン酸（１当量、２当量）、エタンジスルホン酸（０．５当量、１当量）、（＋）−１０−カンファースルホン酸（１当量）、（−）−１０−カンファースルホン酸（１当量）、臭化水素酸（1当量））を用い、１７種類の溶媒（水、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、メタノール：水＝９：１、エタノール：水＝９：１、１−プロパノール：水＝９：１、２−プロパノール：水＝９：１、アセトニトリル、アセトン、アセトニトリル：水＝９：１、アセトン：水＝９：１、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、ＭＴＢＥ、トルエン）を用い、以下の手順に従いマニュアルでの結晶化検討を実施した。
１）ディスポーサブルカルチャーチューブ（旭ガラス社製、10×75mm、カタログ番号：9830-1007）に実施例９で製造した化合物１０ｍｇ（必要に応じて5 mg）秤量する。
２）外温を８０℃（アセトンを溶媒に用いた場合のみ50℃）とし、該化合物が溶解するまで溶媒を加えた。溶解しない場合は、最大８０ｖ/ｗ（volume/weight;容積重量）まで溶媒を加える。
３）室温で一晩静置する。
４）析出しなかったものは冷蔵庫（7 ℃）で静置する。
５）析出しなかったものは蓋を外して、溶媒を自然蒸発させる。
その結果、酸性カウンターにトシル酸（２当量）およびベシル酸（２当量）を用いて、溶媒にテトラヒドロフランを用いた場合のみ、結晶性の反射ピークが観察された。
その他の酸性カウンターの検討結果については、塩を形成することなく前述する実施例９で製造した化合物（５水和物）の粉末Ｘ線回折スペクトルと一致するか、または塩を形成するが非晶質形態を示すのみであった。
次に酸性カウンターをトシル酸（２当量）およびベシル酸（２当量）として、アルコールを含有する混合溶媒で結晶化を検討した。【０１０１】
上記手順に従い、酸性カウンターをトシル酸（２当量）にした場合の検討結果を以下の表１に示す。【０１０２】
【表１】
2020059812.tif 000016
【０１０３】
検討の結果、化合物Aの２トシル酸塩と２ベシル酸塩は、テトラヒドロフランを含む溶媒を用いた場合のみ結晶形態を示すことがわかった。詳細な結晶化工程を実施例１１および１２に記載する。【０１０４】
実施例１１：
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩【０１０５】
【化１５】
2020059812.tif 000017
【０１０６】
実施例９で製造した化合物（31.5 g）および４−トルエンスルホン酸  一水和物（18.9 g）をエタノール（110 mL）に溶解させて、５０℃で１０分間撹拌した。さらにエタノール（15.8 mL）を加え、５０℃で５分間撹拌した。溶液をろ過して、ろ過した溶液にエタノール（15.8 mL）を加え、５分間かけて、４５℃まで加温した後、テトラヒドロフラン（536 mL）を３分間かけて加えた。５０℃で１０分間撹拌した後、２５℃で終夜撹拌した。析出した結晶をろ別して、テトラヒドロフラン（158 mL）で洗浄した。結晶の表面が露出した時に、結晶の表面をアルゴンガスでフローして、得られた結晶をデシケーター内で３時間、室温で乾燥した。さらに得られた結晶を検体乾燥器にて内温５５℃で４８時間、内温６０℃で１２時間、内温７５℃で３６時間減圧乾燥して、以下の物性値を有する標題化合物（41.1 g, 90%）を得た。
性状：結晶性の白色固体；
1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz, 回転異性体が存在)：δ  10.63 (br. s, 1H), 9.41 (br. s, 2H), 9.03 (br. s, 2H), 7.96-7.87 (m, 4H), 7.82-7.70 (m, 4H), 7.62-7.54 (m, 4H), 7.35-7.26 (m, 5H), 4.71 (t, 1H), 4.24-2.62 (m, 15H), 2.21-1.94 (m, 1H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ５４３ （Ｍ＋Ｈ）＋。【０１０７】
実施例１２：
４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二ベンゼンスルホン酸塩【０１０８】
【化１６】
2020059812.tif 000018
【０１０９】
実施例９で製造した化合物（0.150 g）を用いて、４−トルエンスルホン酸・一水和物の代わりに、ベシル酸（0.075 g）を用いて、エタノールおよびテトラヒドロフランをそれぞれ2.1 mLおよび3.9 mL用いて、実施例１１と同様の操作をすることにより、以下の物性値を有する標題化合物（0.189 g, 93%）を得た。
性状：結晶性の白色固体
1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz, 回転異性体が存在)：δ  10.63 (br. s, 1H), 9.41 (br. s, 2H), 9.03 (br. s, 2H), 7.96-7.87 (m, 4H), 7.82-7.70 (m, 4H), 7.62-7.54 (m, 4H), 7.35-7.26 (m, 5H), 4.71 (t, 1H), 4.24-2.62 (m, 15H), 2.21-1.94 (m, 1H)；
ＭＡＳＳ（ESI， Pos.）： ５４３ （Ｍ＋Ｈ）＋。【０１１０】
[物性データの測定]
結晶が取得できた化合物Aの２トシル酸塩、２ベシル酸塩、１酢酸塩および５水和物について、下記の条件で物性データを測定した。
（１）粉末Ｘ線回折スペクトル：
２トシル酸塩および２ベシル酸塩は条件１で、１酢酸塩および５水和物は条件２で測定を行った。
条件１
装置： Ｒｉｇａｋｕ製  ＳｍａｒｔＬａｂ
ターゲット： Cｕ
電圧： ４５ｋＶ
電流： ２００ｍＡ
条件２
装置：BRUKER  axs製  Ｄ８  DISCOVER  with  GADDS、
ターゲット：Ｃｕ、
電圧：４０ｋＶ、
電流：４０ｍＡ。
（２）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）：
装置：メトラー・トレド製  DSC822e  示差走査熱量分析装置、
試料量：５．７５ｍｇ（２トシル酸塩）、０．８６ｍｇ（２ベシル酸塩）、２．４１ｍｇ（１酢酸塩）、２．９１ｍｇ（５水和物）
試料セル：アルミパン４０μＬ、
窒素ガス流量：４０ｍｌ／ｍｉｎ、
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ（２５〜２８０℃）。【０１１１】
本発明において、化合物Ａ、または化合物Ａの各種酸付加塩の各結晶形は、本明細書に記載された物理化学データによって特定されるものであるが、各スペクトルデータは、その性質上多少変わり得るものであるから、厳密に解されるべきではない。例えば、粉末Ｘ線回折スペクトルデータは、その性質上、結晶の同一性の認定においては、回折角（２θ）や全体的なパターンが重要であり、相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わり得る。  また、ＤＳＣデータにおいても、結晶の同一性の認定においては、全体的なパターンが重要であり、測定条件によって多少変わり得る。  したがって、本発明化合物において、粉末Ｘ線回折スペクトルまたはＤＳＣとパターンが、それぞれ全体的に類似するものは、本発明化合物に含まれるものである。【０１１２】
本明細書中、粉末Ｘ線回折パターンにおける回折角（２θ（度））およびＤＳＣ分析における温度（℃）の記載は、当該データ測定法において通常許容される誤差範囲を含むことを意味し、おおよそその回折角およびその温度であることを意味する。例えば、粉末Ｘ線回折における回折角（２θ（度））の「約」あるいは「実質的に同じ」は、ある態様としては±０．２度であり、さらに別の態様としては、±０．１度である。ＤＳＣ分析におけるオンセット温度（℃）および吸熱ピーク温度（℃）の「約」は、ある態様としては±５℃であり、別の態様としては±２℃であり、さらに別の態様としては±１℃である。【０１１３】
化合物Ａの２トシル酸塩の結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、図１に示される粉末Ｘ線回析スペクトル、表２に示される回折角（２θ）および相対強度を示した。また、化合物Ａの２トシル酸塩の結晶は、ＤＳＣにおいて、図５に示すチャートのとおり、約２１６℃からの吸熱開始を示し、約２２８℃で吸熱ピークを示した。約２２８℃における吸熱ピークは、該結晶の融解に対応する。【０１１４】
【表２】
2020059812.tif 000019
【０１１５】
化合物Ａの２ベシル酸塩の結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、図２に示される粉末Ｘ線回析スペクトル、表３に示される回折角（２θ）もしくは相対強度を示した。また、化合物Ａの２ベシル酸塩の結晶は、ＤＳＣにおいて、図６に示すチャートのとおり、約２０３℃からの吸熱開始を示し、約２１３℃で吸熱ピークを示した。約２１３℃における吸熱ピークは、該結晶の融解に対応する。【０１１６】
【表３】
2020059812.tif 000020
【０１１７】
化合物Ａの一酢酸塩の結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、図３に示される粉末Ｘ線回析スペクトル、表４に示される回折角（２θ）および相対強度を示した。また、化合物Ａの１酢酸塩の結晶は、ＤＳＣにおいて図７に示すチャートを示した。【０１１８】
【表４】
2020059812.tif 000021
【０１１９】
化合物Ａの５水和物の結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、図４に示される粉末Ｘ線回析スペクトル、表５に示される回折角（２θ）および相対強度を示した。また、化合物Ａの５水和物の結晶は、ＤＳＣにおいて図８に示すチャートを示した。【０１２０】
【表５】
2020059812.tif 000022
【０１２１】
本発明の一実施形態において、化合物Ａ、または化合物Ａの各種酸付加塩の各結晶形は実質的に純粋である。「実質的に純粋である」への言及は、特定の結晶形が、存在する化合物のうちの少なくとも５０％を占めることを意味する。また、別の一実施形態において、各結晶形は、存在する化合物Ａのうちの少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または約９４％〜９８％を占める。【０１２２】
化合物Ａの各種酸付加塩は、溶媒和していない形態で存在してもよいし、水、エタノールなどの薬学的に許容できる溶媒と溶媒和した形態で存在してもよい。
化合物Ａの各種酸付加塩は、公知の方法で溶媒和物に変換することもできる。溶媒和物は低毒性かつ水溶性であることが好ましい。適当な溶媒和物としては、例えば、水との溶媒和物（水和物）、アルコール系の溶媒（例えば、エタノール等）との溶媒和物が挙げられる。【０１２３】
物理化学的実施例１：吸湿性評価
以下の条件で等温吸着曲線測定を実施した。化合物Ａの２トシル酸塩、１酢酸塩および５水和物は条件１で測定し、化合物Ｂのベシル酸塩は条件２で測定した。
（条件１）
装置：ＶＴＩ  ＳＧＡ−１００
測定温度：２５℃
測定範囲：相対湿度５〜９５％
測定間隔：相対湿度５％
（条件２）
装置： ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ
測定温度： ２５℃
測定範囲： 相対湿度０〜９５％
測定間隔： 相対湿度５％
化合物Ａの２トシル酸塩は、相対湿度５％から７０％の範囲においてほとんど吸湿性を示さず、重量増加は１．５ｗｔ％であった（図９参照）。
さらに、化合物Ａの２ベシル酸塩についても、相対湿度５％から７０％の範囲においてほとんど吸湿性を示さず、重量増加は１．９ｗｔ％であった（図１０参照）。
化合物Aの１酢酸塩は、相対湿度５％から７０％の範囲において吸湿性を示し、重量増加は６．４ｗｔ％であった（図１１参照）。
化合物Ａの５水和物は、相対湿度５％から７０％の範囲において吸湿性を示し、重量増加は１２．２ｗｔ％であった（図１２参照）。
以上の結果から、化合物Ａの１酢酸塩および５水和物と比較して、化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は、極めて吸湿性が低いことが確認された。【０１２４】
物理化学的実施例２：化学的安定性試験
（１）残存率測定
化合物Ａの２トシル酸塩、２べシル酸塩、５水和物および１酢酸塩の結晶に関する化学的安定性を、以下の方法および条件で測定した。
＜方法＞
被験化合物をラボチューブに約１．５〜３ｍｇ秤量し、以下の条件で保存した。
保存後、ＨＰＬＣで−２０℃保存サンプルの主薬の面積百分率に対する各条件下保存サンプルの残存率（％）を算出した。また、外観を目視で観察し、−２０℃で保存しているサンプルと比較した。
＜保存条件およびサンプリングタイム＞
６０℃：１か月
４０℃：２か月
４０℃−７５％ＲＨ（開封）：２か月
２５００Ｌｕｘ：１０Ｄ, ２０Ｄ
各サンプルの比較対象は−２０℃で保存した。
＜ＨＰＬＣ分析＞
・サンプル調製
評価サンプル０．８ ｍｇをアセトニトリル／１００ｍＭ ＮａＣｌＯ４ (1/3) 約０．８ｍＬ （試料濃度として1.0mg/mL）アセトニトリル／１００ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌＯ４ ａｑ. (pH3.0) 混液（3/1）で溶解し、１．０ｍｇ／ｍＬ（塩としての濃度）溶液を調製した。
＜分析条件＞
検出器：紫外吸光光度計 (測定波長：265 nm)
カラム：ＳＰＥＬＣＯ Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ (150 mm×4.6 mm，S-2.7μm)
カラム温度：２５℃
移動相：Ａ液：１００ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌＯ４ ａｑ.(pH 3.0)、Ｂ液：アセトニトリル
グラジエント条件：Ａ／Ｂ＝９５／５（0-10 min）→８０／２０（10-40 min）→２０／８０（40-60 min）→２０／８０（60-65 min）
流速：１ ｍＬ/ｍｉｎ
面積測定範囲：３４．６分
注入量：５μＬ
＜結果＞
化合物Ａの２トシル酸塩、２ベシル酸塩、５水和物および１酢酸塩の結晶の残存率を以下の表５に示す。【０１２５】
【表６】
2020059812.tif 000023
【０１２６】
上記結果より、化合物Ａの５水和物および１酢酸塩の結晶は４０℃−７５％条件下で残存率が低下しており、化学的安定性に欠けている。一方、化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩の結晶は、いずれの条件化でも残存率は９９％以上を示し、非常に化学的安定性に優れていた。【０１２７】
（２）粉末Ｘ線測定
化合物Ａの１酢酸塩および２トシル酸塩に関する物理的安定性を、以下の方法および条件で測定した。
＜方法＞
被験化合物をラボチューブに１酢酸塩は約２０ｍｇ，２トシル酸塩は約４０ｍｇ秤量し、以下の条件で保存した。
＜保存条件＞
２５℃―６０％ＲＨ：２か月
＜測定条件＞
装置：BRUKER  axs製  Ｄ８  DISCOVER  with  GADDS
ターゲット：Ｃｕ
電圧：４０ｋＶ
電流：４０ｍＡ
＜結果＞
化合物Ａの１酢酸塩および２トシル酸塩について、保存前後の粉末Ｘ線回折スペクトルを測定したところ、１酢酸塩は保存前後でスペクトルの変化が認められたのに対し（図３および１３）、２トシル酸塩は大きなピークの変化が認められなかった（図１４および１５）。なお、１酢酸塩の２５℃―６０％ＲＨ２か月保存後のスペクトルは化合物Ａの５水和物のスペクトルに類似していたことから、脱塩していることが示唆される。【０１２８】
［製剤例］
製剤例１：
化合物Ａの２トシル酸塩  ５ｍｇ含有錠
以下の各成分を常法により混合した後打錠して、一錠中に５ｍｇの活性成分を含有する錠剤１万錠を得る。
・４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩：５０ｇ
・カルボキシメチルセルロースカルシウム（崩壊剤）：２０ｇ
・ステアリン酸マグネシウム（潤滑剤）：１０ｇ
・微結晶セルロース：９２０ｇ【０１２９】
製剤例２：
化合物Ａの２トシル酸塩  ２０ｍｇ含有注射剤
以下の各成分を常法により混合した後、溶液を常法により滅菌し、５ｍＬずつアンプルに充填し、常法により凍結乾燥し、１アンプル中２０ｍｇの活性成分を含有するアンプル１万本を得る。
・４−（｛（４Ｓ）−１−（４−カルバムイミドイルベンゾイル）−４−［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］−Ｌ−プロリル｝アミノ）安息香酸  二（４−トルエンスルホン酸）塩：２００ｇ
・マンニトール：２０ｇ
・蒸留水：５０Ｌ
【産業上の利用可能性】
【０１３０】
化合物Ａの２トシル酸塩および２ベシル酸塩は、非常に強力な血液凝固第ＸＩａ因子阻害活性を有することに加え、湿度安定性に優れ、保存安定性にも優れており、医薬品の原薬として大変有用である。
【図１】
2020059812.tif 000024
【図２】
2020059812.tif 000025
【図３】
2020059812.tif 000026
【図４】
2020059812.tif 000027
【図５】
2020059812.tif 000028
【図６】
2020059812.tif 000029
【図７】
2020059812.tif 000030
【図８】
2020059812.tif 000031
【図９】
2020059812.tif 000032
【図１０】
2020059812.tif 000033
【図１１】
2020059812.tif 000034
【図１２】
2020059812.tif 000035
【図１３】
2020059812.tif 000036
【図１４】
2020059812.tif 000037
【図１５】
2020059812.tif 000038
【国際調査報告】
2020059812.tif 000039
2020059812.tif 000040
2020059812.tif 000041
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