(57)【要約】本発明は、より効果的でより高い生物学的利用能を有し臨床適用により適した、新規ＮＦ−κＢ阻害剤を提供することを目的とする。より具体的には本発明は、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８及び隣接アミノ酸の配列を含むドメインを認識する非エポキシ化合物であって、ＮＦ−κＢ阻害能を有し、臨床応用可能な化合物を見出すことを目的とする。本発明は、優れたＮＦ−κＢ阻害作用を有する、新規ジエタシン誘導体を提供するものである。すなわち、本発明は、新規で有用な骨格を有するＮＦ−κＢ阻害剤のクラスとして、アゾキシモチーフを提供するものである。より具体的には、本発明は、以下の一般式で表される化合物及び当該化合物を有効成分として含有するＮＦ−κＢ阻害剤等に関する。2019059132.tif 000038【選択図】なし
2019059132.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
【化１】
2019059132.tif 000030
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）；及び
Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；
５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩：
【化２】
2019059132.tif 000031
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］、
ただし、以下の式で表される、ジエタシンＡ、Ｂ、Ｃ及びＤを除く。
【化３】
2019059132.tif 000032
【化４】
2019059132.tif 000033
【化５】
2019059132.tif 000034
【化６】
2019059132.tif 000035
【請求項２】
Ｒ１又はＲ３が、以下から選択される置換基で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルキル基、又はＣ２〜１２アルキニル基である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
オキソ基；ヒドロキシ基；アミノ基（Ｃ１〜４アルキル基及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）；ＣＨ３ＳＯ３基；アジ（Ｎ３）基；ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；Ｃ１〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基；フェニル基；Ｃ１〜４アルコキシ基（Ｃ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基、塩素原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は６〜１４員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜６員の複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））。
【請求項３】
Ｒ１又はＲ３が、以下から選択される置換基で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルキル基、又はＣ２〜１２アルキニル基である、請求項２に記載の化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
オキソ基、フェニル基、ヒドロキシ基、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、ピリジル基、及び／又は、ジアゾリル基（Ｃ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）。
【請求項４】
下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含有するＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化７】
2019059132.tif 000036
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい、アミノ基；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
ＣＣｌ３Ｃ（ＮＨ）Ｏ−基；
Ｃ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい、アミノカルボニルオキシ基；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
アミノ基で置換されていても良いＣ６〜１４アリール基；及び
Ｃ１〜１２アルコキシ基（該アルコキシ基はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルコキシ基；
Ｃ１〜１２アルキル基（該アルキル基は、シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、
Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩を有効成分として含有する、ＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化８】
2019059132.tif 000037
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］。
【請求項５】
ＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害が、がん、ＡＴＬ、炎症性疾患、移植時拒絶反応、自己免疫疾患、又はアレルギーである、請求項４に記載の治療薬又は予防薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のＮＦ−κＢ阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＮＦ−κＢは、１９８６年に免疫グロブリンκ鎖のプロモーター領域に結合する分子として報告された転写因子である。後の研究から、多くの異なる生物学的現象（例えば、炎症、免疫応答、血管再生、骨代謝、細胞増殖、及びアポトーシス）に関与する、炎症性サイトカイン、成長因子、及び病原体を含む様々な刺激によってＮＦ−κＢが誘導されることが明らかとされてきた（非特許文献１）。【０００３】
ＮＦ−κＢは、ＲｅｌＡ（ｐ６５）、ｃ−Ｒｅｌ、ＲｅｌＢ、ｐ５０／ｐ１０５、及びｐ５２／ｐ１００の５つのメンバーからなるファミリータンパク質であり、ホモ二量体又はヘテロ二量体を形成する。ＮＦ−κＢの調節因子であるＩκＢの分解の阻害剤は、細胞質内にＮＦ−κＢを局在化させる。ｐ１０５とｐ１００はＮＦ−κＢとＩκＢとの複合体であり、これらは刺激によりＩκＢドメインが分解され、ＮＦ−κＢ  ｐ５０とｐ５２とにプロセシングされる。細胞外刺激はＩκＢをリン酸化するＩκＢキナーゼ（ＩＫＫ）に収束し、ＩκＢの分解によりＮＦ−κＢが放出される。ＮＦ−κＢは核に入り、標的遺伝子のプロモーター領域内のコンセンサス配列ＧＧＧＲＮＮＹＹＣＣ（Ｒはプリン；Ｙはピリミジン；Ｎは任意の塩基）に結合して、標的遺伝子の発現を促進する。主要なＮＦ−κＢ経路は、古典的及び非古典的経路からなる（図１参照）。【０００４】
化学療法剤及び放射線を含む様々な刺激によって引き起こされるＤＮＡ損傷は、毛細血管拡張性運動失調症変異分子（ＡＴＭ）の発現誘導を引き起こし、ＩＫＫのユビキチン化を介してＩＫＫ複合体を活性化させる。この誘導性ＮＦ−κＢは、化学療法の効果を鈍らせ、細胞をアポトーシスから保護する（図１参照）。癌細胞に関与する多様なシグナル伝達経路は、高頻度でＮＦ−κＢと関連する。ＮＦ−κＢは、増殖、抗アポトーシス、血管再生、転移、及び浸潤と関与することから、癌生物学において中心的な役割を果たす。構成的ＮＦ−κＢ活性化は、造血系及び固形器官に由来する様々な種類の癌の特徴である（非特許文献２及び非特許文献３）。【０００５】
図２に示すように、ＮＦ−κＢ阻害剤の標的は以下に分類される：（ａ）ユビキチン化（すなわち、Ｋ６３型ユビキチン化又は直鎖ユビキチン化）、（ｂ）ＩκＢのリン酸化を媒介してその分解を引き起こすキナーゼ、特にＩＫＫ、（ｃ）Ｋ４８型ユビキチン化で修飾されたＩκＢの分解を阻害するプロテアソーム、（ｄ）ＮＦ−κＢの核移行、（ｅ）ＮＦ−κＢのＤＮＡ結合、（ｆ）ＮＦ−κＢのアセチル化又はメチル化。７８５種類以上のＮＦ−κＢ阻害剤が知られているが、これらの阻害剤のほとんどは、ヒト毒性又は薬理学的問題のために試薬としてしか使用できない（非特許文献４）。いくつかのＮＦ−κＢ阻害剤は、臨床診療において既に使用されており、最近になって弱い阻害特性を有することが判明した。一方、他のものは、新規ＮＦ−κＢ阻害剤として意図的に開発されている。これまでのところ、これらの新規ＮＦ−κＢ阻害剤のうち、臨床医療において成功を収め一般的に使用されるに至ったものはない。【０００６】
２０００年代に製薬企業はＩＫＫ阻害剤の開発を試みたが、その多くはＩＫＫβを標的として、キナーゼドメイン内のＣｙｓ−１７９との相互作用を利用するか、又はキナーゼ活性のアロステリック効果を利用するものであった（非特許文献５〜非特許文献８）。しかし、後の研究により、ＩＫＫが他の経路の活性化に関与すること、それによってＩＫＫβ阻害剤の特異性及びオフターゲット効果の問題を引き起こすことが明らかとなった（非特許文献９及び非特許文献１０）。プロテアソームを標的とするＮＦ−κＢ阻害剤は、プロテアソームがＮＦ−κＢ経路に無関係の多くの他のタンパク質を分解するためＮＦ−κＢに特異的ではないが、当初ＰＳ−３４１と呼ばれたボルテゾミブ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）は、多発性骨髄腫などの薬として臨床的に用いられている（非特許文献１１）。【０００７】
ＮＦ−κＢ阻害剤の理想的な標的は、ＮＦ−κＢの核移行又はＮＦ−κＢのＤＮＡ結合である。これまで、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８を標的とする、エポキシキノン（Ｅｐｏｘｙｑｕｉｎｏｎｅ）Ａモノマー（ＥｑＭ）及びエポキシキノイド−ジェステロンダイマー（ＪＤ）が、ＮＦ−κＢのＤＮＡ結合を阻害することが報告されている（非特許文献１２）。しかし、これらの薬剤はＩＫＫβのＣｙｓ−１７９も標的であることから、ＩＫＫの阻害をもたらす。ＩＫＫはＮＦ−κＢ以外の経路に関与するため、これらの薬剤はＮＦ−κＢ特異的阻害剤として理想的ではないと考えられる。ＳＮ−５０は、ＮＦ−κＢ  ｐ５０の核移行シグナル（ＮＬＳ）を含む２６個のアミノ酸からなるペプチドであり、ＮＦ−κＢの核移行と競合する（非特許文献１３）。しかし、ＳＮ−５０は、ＮＬＳのアミノ酸配列における類似性のために、ＡＰ−１のような他の転写因子を阻害することも報告されている。【０００８】
Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ  ｓｐ．から単離されたエポキシキノマイシンＣの５−デヒドロキシメチル誘導体であるＤＨＭＥＱは、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８を標的とし、ＤＮＡ結合レベルで作用するＮＦ−κＢ阻害剤である（非特許文献１４）。ＤＨＭＥＱはＩＫＫを阻害しないと考えられている（非特許文献１５）。本発明者らは以前、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）、及び原発性体腔液性リンパ腫（ＰＥＬ）などの、強力で構成的なＮＦ−κＢ活性化がみられる様々なリンパ系腫瘍へのＤＨＭＥＱの効果を示した（非特許文献１６〜非特許文献２０）。本発明者らはまた、ＤＨＭＥＱが、Ｅｐｓｔａｉｎ−Ｂａｒｒウイルスで形質転換したＢリンパ球及びヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の感染の制御に有効であることを示した（非特許文献２１及び非特許文献２２）。ＤＨＭＥＱはまた、ｃＨＬ細胞における化学療法剤の効果を高める（非特許文献１９）。更に、本発明者らは、化学療法剤に対して耐性のある腫瘍細胞の増殖をＤＨＭＥＱが阻害することも見出してきた（非特許文献２３）。ＤＨＭＥＱは、特に他の分子標的化剤と組み合わせることにより、固形腫瘍細胞の増殖を阻害した（非特許文献２４及び非特許文献２５）。ＤＨＭＥＱは造血器腫瘍及び固形腫瘍の治療のみならず、炎症、免疫反応及びサイトカインを制御することによって様々な疾患の治療にＮＦ−κＢ阻害が有用であることを示した（非特許文献２６）。【０００９】
ＤＨＭＥＱは、ＮＦ−κＢ経路の極めて下流を標的とする薬剤が、ＮＦ−κＢ活性化に関連する様々な疾患に有効であることを明らかに示している。しかし、その低い生物学的利用能のため、ＤＨＭＥＱの臨床的有用性は限定的であると考えられている。本発明者らにより、ＤＨＭＥＱがＲｅｌＡのＣｙｓ−３８を直接標的とすることにより、ＮＦ−κＢの核移行及びＤＮＡ結合を阻害することが示されている（非特許文献２７）。しかし、ＤＨＭＥＱはむしろＮＦ−κＢの核移行の阻害ではなく、核から細胞質への輸送を促進するとの報告もある（非特許文献１４）。【００１０】
ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）種ＫＰ−１９７の培養ブロスから単離されたアゾキシ抗生物質である天然のジエタシン類（Ｊｉｅｔａｃｉｎｓ）は、ビニルアゾキシ基及び分岐又は非分岐の長い非環式脂肪族鎖を含む独特の構造モチーフからなる。本発明者らは、天然のジエタシン類が市販の抗寄生虫剤であるアベルメクチンＢ１ａよりもマツノザイセンチュウＢｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ  ｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓに対して１０倍高い殺線虫活性を示したことを報告している（非特許文献２８）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｈａｙｄｅｎ  ＭＳら，Ｃｅｌｌ．  ２００８；１３２（３）：３４４−３６２．
【非特許文献２】Ｋａｒｉｎ  Ｍら，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２００２；２（４）：３０１−３１０．
【非特許文献３】Ｋａｒｉｎ  Ｍら，Ｎａｔｕｒｅ．  ２００６；４４１（７０９２）：４３１−４３６．
【非特許文献４】Ｇｉｌｍｏｒｅ  ＴＤら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．  ２００６；２５（５１）：６８８７−６８９９．
【非特許文献５】Ｃａｓｔｒｏ  ＡＣら，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．  ２００３；１３（１４）：２４１９−２４２２．
【非特許文献６】Ｐａｌａｎｋｉ  ＭＳら，  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．  ２００２；１２（１８）：２５７３−２５７７．
【非特許文献７】Ｓａｎｄａ  Ｔら，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２００５；１１（５）：１９７４−１９８２．
【非特許文献８】Ｂｕｒｋｅ  ＪＲら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２００３；２７８（３）：１４５０−１４５６．
【非特許文献９】Ｃｈａｒｉｏｔ  Ａら，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２００９；１９（８）：４０４−４１３．
【非特許文献１０】Ｐｅｒｋｉｎｓ  ＮＤ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２０１２；１２（２）：１２１−１３２．
【非特許文献１１】Ｈｉｄｅｓｈｉｍａ  Ｔら，Ｂｌｏｏｄ．  ２００９；１１４（５）：１０４６−１０５２．
【非特許文献１２】Ｌｉａｎｇ  ＭＣら，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００３；６４（１）：１２３−１３１．
【非特許文献１３】Ｌｉｎ  ＹＺら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  １９９５；２７０（２４）：１４２５５−１４２５８．
【非特許文献１４】Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｍら，  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．  ２００８；５１（１８）：５７８０−５７８８．
【非特許文献１５】Ａｒｉｇａ  Ａら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２００２；２７７（２７）：２４６２５−２４６３０．
【非特許文献１６】Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍら，  Ｂｌｏｏｄ．  ２００５；１０６（７）：２４６２−２４７１．
【非特許文献１７】Ｈｏｒｉｅ  Ｒら，  Ｌｅｕｋｅｍｉａ．  ２００６；２０（５）：８００−８０６．
【非特許文献１８】Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍら，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２００５；１１４（１）：３２−３８．
【非特許文献１９】Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍら，  Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００７；８７（４）：３７２−３８２．
【非特許文献２０】Ｄａｂａｇｈｍａｎｅｓｈ  Ｎら，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．  ２００９；１００（４）：７３７−７４６．
【非特許文献２１】Ｍｉｙａｋｅ  Ａら，  Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  Ｉｎｆｅｃｔ．  ２００８；１０（７）：７４８−７５６．
【非特許文献２２】Ｍｉｙａｋｅ  Ａら，  Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  Ｉｎｆｅｃｔ．  ２０１０；１２（５）：４００−４０８．
【非特許文献２３】Ｔｏｇａｎｏ  Ｔら，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２００９；３９０（１）：６０−６４．
【非特許文献２４】Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍら，  Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｓ．  ２０１３；２１（４）：１７３−１８０．
【非特許文献２５】Ｔｏｇａｎｏ  Ｔら，  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２０１４；８３（２）：１３９−１４５．
【非特許文献２６】Ｕｍｅｚａｗａ  Ｋ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．  ２００６；９７（１０）：９９０−９９５．
【非特許文献２７】Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍら，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２００８；３７６（２）：３１０−３１４．
【非特許文献２８】Ｙ．  Ｔａｋａｈａｓｈｉら，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  ３２  （１９９１）  １０６７−１０６８．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、ＤＨＭＥＱを含む様々なＮＦ−κＢ阻害剤を用いた実験の経験に基づいて、より効果的でより高い生物学的利用能を有し臨床適用により適した、新規ＮＦ−κＢ阻害剤を提供することを目的とする。以前の報告から、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８がＮＦ−κＢのＤＮＡ結合を阻止する薬剤にとって重要な標的であることが示されている。システインのチオール側鎖は頻繁に酵素反応に関与するため、ＮＦ−κＢの修飾に関与する薬剤の標的となる。特に、ＤＨＭＥＱは、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８及び隣接アミノ酸の配列を含むドメインを認識することによってＮＦ−κＢに直接結合し、それにより、当該配列を含まず活性化ドメインを持たないＮＦ−κＢ（すなわち、ｐ５０及びｐ５２）よりも、当該配列を有し活性化ドメインを持つＮＦ−κＢ（すなわち、ＲｅｌＡ、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢ）に対してより強力な効果を奏する。他方、ＤＨＭＥＱ及びＥｑＭのようなエポキシドを含む化合物は反応性が高く、その不安定性のために医薬品として開発するのが困難である。よって、より具体的には本発明は、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８及び隣接アミノ酸の配列を含むドメインを認識する非エポキシ化合物であって、ＮＦ−κＢ阻害能を有し、臨床応用可能な化合物を見出すことを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
これらの点を考慮して、本発明者らは、ＤＨＭＥＱと同様の作用機序を有する新規なＮＦ−κＢ阻害剤を見出すために鋭意検討を行った。その結果、天然のジエタシン類及びその誘導体が、ＮＦ−κＢとインポーチンとの結合を阻害することにより、遊離ＮＦ−κＢの核局在化を阻害することを見出し、本発明を完成させた。特に、本発明者らは、優れたＮＦ−κＢ阻害作用を有する、新規ジエタシン誘導体の設計及び合成に成功し、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、新規で有用な骨格を有するＮＦ−κＢ阻害剤のクラスとして、アゾキシモチーフが使用できることを発見したことに基づくものである。【００１４】
よって、本発明は、ＪｉｅｔａｃｉｎＡ（ジエタシンＡ）及びその既知又は新規誘導体が優れたＮＦ−κＢ阻害作用を有することを見出したことに基づくものである。具体的には、本発明は以下の発明に関する：
（１）  下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
【化１】
2019059132.tif 000003
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又は、Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）；
Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び
５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩：
【化２】
2019059132.tif 000004
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］、
ただし、以下の式で表される、ジエタシンＡ、Ｂ、Ｃ及びＤを除く。
【化３】
2019059132.tif 000005
【化４】
2019059132.tif 000006
【化５】
2019059132.tif 000007
【化６】
2019059132.tif 000008
（２）  下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含有するＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化７】
2019059132.tif 000009
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）；
Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び
５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩を有効成分として含有する、ＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化８】
2019059132.tif 000010
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］。
（３）  ＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害が、がん、ＡＴＬ、炎症性疾患、移植時拒絶反応、自己免疫疾患、又はアレルギーである、（２）に記載の治療薬又は予防薬。【００１５】
「Ｃ１〜１２アルキル基」とは、直鎖、分岐、又は環状の炭素数が１〜１２個の１価の飽和炭化水素基を意味する。直鎖又は分岐状のＣ１〜１２アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、シクロプロピルメチル基、シクロブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、２，３−ジメチルプロピル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシル基、ヘプチル基、シクロヘキシルメチル基、シクロヘプチル基、オクチル基、シクロオクチル基、ノニル基、シクロノニル基、デシル基、シクロデシル基、ウンデシル基、シクロウンデシル基、ドデシル基、及びシクロドデシル基などが挙げられる。【００１６】
「Ｃ２〜１２アルケニル基」とは、１以上の炭素−炭素間の二重結合を有する直鎖、分岐、又は環状の炭素原子数が２〜１２個の不飽和炭化水素の任意の炭素原子から、１個の水素原子を除去してなる１価の基を意味する。Ｃ２〜１２アルケニル基としては、例えば、ビニル基、プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、１−メチル−１−プロペニル基、２−メチル−１−プロペニル基、１−メチル−２−プロペニル基、２−メチル−２−プロペニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１−ヘキセニル基、２−ヘキセニル基、３−ヘキセニル基、４−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、１−ヘプテニル基、２−ヘプテニル基、３−ヘプテニル基、４−ヘプテニル基、５−ヘプテニル基、７−ヘプテニル基、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、ウンデセニル基、及びドデセニル基などが挙げられる。【００１７】
「Ｃ２〜１２アルキニル基」とは、１以上の炭素−炭素間の三重重結合を有する直鎖、分岐、及び環状の不飽和炭化水素の任意の炭素原子から一個の水素原子を除去してなる炭素原子数が２〜１２個の一価の基を意味する。Ｃ２〜１２アルキニル基としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基、ヘプチニル基、オクチニル基、ノニニル基、デシニル基、ウンデシニル基、及びドデシニル基等を挙げることができる。【００１８】
「Ｃ６〜１４アリール基」とは、６〜１４個の炭素原子を有する芳香族炭化水素基のことであり、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、及びフェナントレンを包含する。【００１９】
「５〜１４員の複素環基」とは、窒素原子、酸素原子、及び硫黄原子から選択される１種類以上のヘテロ原子を含む５〜１４員の単環式複素環基又は５〜１４員の縮合複素環基を意味する。５〜１４員の複素環基が含有するヘテロ原子の数は、例えば、１〜５個、１〜４個、１〜３個、又は１〜２個であってよい。５〜１４員の複素環基は、芳香族性であっても、非芳香族性であってもよい。単環式複素環基は、好ましくは、５〜６員環である。縮合複素環基は、好ましくは、８〜１０員環である。５〜１４員の複素環基としては、例えば、ピペリジル、ピペラジル、モルホリル、キヌクリジル、ピロリジル、アゼチジル、オキセチル、アゼチジン−２−オン−イル、アジリジニル、トロパニル、フリル、テトラヒドロフリル、チエニル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、ジオキソラニル、オキサゾリル、オキサゾリニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、オキサジアゾリル、フラザニル、チアジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、テトラゾリル、ピラニル、ピリジル、ピペリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、オキサジニル、モルホリニル、チアジニル、トリアジニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロイソベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イソベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロイソベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾチエニル、キノリル、イソキノリル、キナゾリニル、フタラジニル、プテリジニル、クマリル、クロモニル、１，４−ベンゾジアゼピニル、インドリル、イソインドリル、ベンズイミダゾイル、ベンゾフリル、プリニル、アクリジニル、フェノキサジニル、フェノチアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキソラニル、ベンゾジオキサニルクロメニル、クロマニル、イソクロマニル、クロマノニル、シンノリニル、キノキサリニル、インドリジニル、キノリジニル、イミダゾピリジル、ナフチリジニル、ジヒドロベンゾオキサジニル、ジヒドロベンゾオキサゾリノニル、ジヒドロベンゾオキサジノニル、ベンゾチオキサニル、オキサシクロテトラデカンを挙げることができる。【００２０】
「Ｃ１〜１２アルコキシ基」とは、直鎖、分岐、又は環状の炭素数が１〜１２個の１価の飽和炭化水素基と酸素原子（オキシ基）を介して結合する基を意味する。直鎖又は分岐状のＣ１〜１２アルキル基としては、例えば、前記Ｃ１〜１２アルキル基とオキシ基を介して結合する基が挙げられ、具体的には、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、シクロプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、イソブトキシ基、シクロプロピルメトキシ基、シクロブトキシ基、ペントキシ基、イソペントキシ基、２，３−ジメチルプロポキシ基、シクロブチルメトキシ基、シクロペチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、ヘプトキシ基、シクロヘキシルメトキシ基、シクロヘプチルオキシ基、オクチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基、ノニルオキシ基、シクロノニルオキシ基、デシルオキシ基、シクロデシルオキシ基、ウンデシルオキシ基、シクロウンデシルオキシ基、ドデシルオキシ基、及びシクロドデシルオキシ基などが挙げられる。【００２１】
「Ｃ１〜１２アルキル基及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい、アミノ基」として好ましくは、Ｃ１〜４アルキル基及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい、アミノ基である。【００２２】
「オキソ基」とは＝Ｏで示される基である。「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、及びヨウ素原子を意味し、好ましくは、フッ素原子、塩素原子、及び臭素原子であり、より好ましくは、フッ素原子、又は塩素原子である。「カルボニル」とは、−Ｃ（＝Ｏ）−で表される基であり、「アミノカルボニルオキシ基」とは、ＮＨ２−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−で表される基である。【００２３】
「Ｃ２〜１２アルカノイル基」は、Ｃ１〜１１アルキル基とカルボニル基を介して結合する基であり、（Ｃ１〜１１アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−で表される。該アルキル基部分は、上述のアルキル基の定義に従い、直鎖、分岐、及び環状であってもよい。Ｃ２〜１２アルカノイル基としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、バレリル基、イソバレリル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、オクタノイル基、ノナノイル基、デカノイル基、ウンデカノイル基、ドデカノイル基を包含する。【００２４】
「Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基」は、上述のＣ２〜１２アルカノイル基とオキソ基を介して結合する基であり、（Ｃ１〜１１アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−で表される。該アルキル基部分は、上述のアルキル基の定義に従い、直鎖、分岐、及び環状であってもよい。Ｃ２〜１２アルカノイル基としては、例えば、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、イソブチリルオキシ基、バレリルオキシ基、イソバレリルオキシ基、ピバロイルオキシ基、バレリルオキシ基、イソバレリルオキシ基、ヘキサノイルオキシ基、ヘプタノイルオキシ基、オクタノイルオキシ基、ノナノイルオキシ基、デカノイルオキシ基、ウンデカノイルオキシ基、ドデカノイルオキシ基を包含する。【００２５】
「Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基」は、Ｃ１〜１２アルコキシ基とカルボニル基を介して結合する基であり、（Ｃ１〜１２アルキル）−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−で表される。該アルキル基部分は、上述のアルキル基の定義に従い、直鎖、分岐、及び環状であってもよい。Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｎ−プロポキシカルボニル基、ｉ−プロポキシカルボニル基、シクロプロポキシカルボニル基、ｎ−ブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、シクロプロピルメトキシカルボニル基、シクロブトキシカルボニル基、ペントキシカルボニル基、イソペントキシカルボニル基、２，３−ジメチルプロポキシカルボニル基、シクロブチルメトキシカルボニル基、シクロペチルオキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル基、シクロヘキシルオキシカルボニル基、ヘプトキシカルボニル基、シクロヘキシルメトキシカルボニル基、シクロヘプチルオキシカルボニル基、オクチルオキシカルボニル基、シクロオクチルオキシカルボニル基、ノニルオキシカルボニル基、シクロノニルオキシカルボニル基、デシルオキシカルボニル基、シクロデシルオキシカルボニル基、ウンデシルオキシカルボニル基、シクロウンデシルオキシカルボニル基、ドデシルオキシカルボニル基、及びシクロドデシルオキシカルボニル基などが挙げられる。【００２６】
本発明の一般式（Ｉ）又は一般式（ＩＩ）であらわされる化合物におけるＲ１又はＲ３は、置換されていても良いＣ１〜１２の直鎖又は分岐状のアルキル基、置換されていても良いＣ２〜１２の直鎖又は分岐状のアルケニル基、置換されていても良いＣ２〜１２の直鎖又は分岐状のアルキニル基、置換されていても良いＣ６〜１４アリール基、及び置換されていても良い５〜１４員の複素環基から選択され、好ましくは、置換されていても良いＣ１〜１２の直鎖又は分岐状のアルキル基、置換されていても良いＣ２〜１２の直鎖又は分岐状のアルケニル基、及び置換されていても良いＣ２〜１２の直鎖又は分岐状のアルキニル基から選択される。より好ましくは、Ｒ１又はＲ３は、本明細書において、「Ｃ」とは炭素原子数を表し、例えば、「Ｃ１〜１２」は炭素原子の数が１〜１２個の範囲内であることを意味する。【００２７】
Ｒ１又はＲ３における置換されていても良いＣ１〜１２アルキル基、置換されていても良いＣ２〜１２アルケニル基、置換されていても良いＣ２〜１２アルキニル基、置換されていても良いＣ６〜１４アリール基、及び、置換されていても良い５〜１４員の複素環基が有する「置換基」としては、オキソ基；シアノ基；ヒドロキシ基；アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）；ハロゲン原子；トリメチルシリル基；ＣＨ３ＳＯ３基；アジ（Ｎ３）基；ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）；Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）；Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び、５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））である。【００２８】
前記置換基において、アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）として好ましくは、アミノ基（Ｃ１〜４アルキル基及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜４アルキル（Ｃ１〜４アルコキシ）アミノ基、メチル（メトキシ）アミノ基を挙げることができる。【００２９】
前記置換基において、アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）として好ましくは、アミノカルボニルオキシ基、Ｃ１〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基、Ｃ３〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基である。【００３０】
前記置換基において、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基として、好ましくはＣ１〜４アルカノイルオキシ基、アセチルオキシ基である。【００３１】
前記置換基において、Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）として、好ましくは、フェニル基、ナフチル基、及びアントラセニル基である。【００３２】
前記置換基において、Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）として、好ましくは、Ｃ１〜４アルコキシ基（Ｃ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基、塩素原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）であり、より好ましくは、Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシ基、Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシ基、Ｃ１〜４アルコキシ基、及び塩素原子及び／又はイミノ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基であり、より更に好ましくは、メトキシメトキシ基、メトキシエトキシメトキシ基、及び２−トリクロロ−１−イミノエチル基である。【００３３】
前記置換基において、５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）として好ましくは、窒素原子を１個以上含有する５〜６員の芳香族複素環基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、及び／又は６〜１４員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜６アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、トリメチルシリル基、及び／又は５〜６員の複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）であり、更に好ましくは、窒素原子を２個以上含有する５〜６員の芳香族複素環基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、及び／又は窒素原子を１個以上含有する５〜６員の芳香族複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）であり、より更に好ましくは、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、ピリジル基、及び／又は、ジアゾリル基（Ｃ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）である。【００３４】
前記置換基として、好ましくは、オキソ基；ヒドロキシ基；アミノ基（Ｃ１〜４アルキル基及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）；ＣＨ３ＳＯ３基；アジ（Ｎ３）基；ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；Ｃ１〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基；フェニル基；Ｃ１〜４アルコキシ基（Ｃ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基、塩素原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は６〜１４員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜６員の複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））である。【００３５】
前記置換基として、更に好ましくは、オキソ基；ヒドロキシ基；Ｃ１〜４アルキル（Ｃ１〜４アルコキシ）アミノ基；ＣＨ３ＳＯ３基；アジ（Ｎ３）基；ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；Ｃ１〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基；フェニル基；Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシ基；Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜４アルコキシ基；Ｃ１〜４アルコキシ基；塩素原子及び／又はイミノ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基；及び、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよいピペラジル基、及び／又はオキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜６員の複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））である。【００３６】
前記置換基として、特に好ましくは、オキソ基、フェニル基、ヒドロキシ基、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、ピリジル基、及び／又は、ジアゾリル基（Ｃ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）である。【００３７】
Ｒ１又はＲ３における置換されていても良いＣ１〜１２アルキル基、置換されていても良いＣ２〜１２アルケニル基、置換されていても良いＣ２〜１２アルキニル基、置換されていても良いＣ６〜１４アリール基、及び、置換されていても良い５〜１４員の複素環基が有する「置換基」の数としては、特に限定されるものではないが、例えば、１〜５個、１〜４個、１〜３個、１〜２個とすることができる。【００３８】
Ｒ１又はＲ３として好ましくは、置換されていても良いＣ１〜１２アルキル基、又は置換されていても良いＣ２〜１２アルキニル基であり、より好ましくは、置換されていても良いＣ２〜１２アルキニル基である。【００３９】
例えば、Ｒ１又はＲ３として、以上のいずれかの置換基又は以下の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルキル基、又はＣ２〜１２アルキニル基が挙げられる：オキソ基、フェニル基、ヒドロキシ基、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、ピリジル基、及び／又は、ジアゾリル基（Ｃ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）。【００４０】
Ｒ２は、ビニル基又はヒドロキシエチル基である。ヒドロキシエチル基は、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基のいずれでもよく、好ましくは、２−ヒドロキシエチル基である。【００４１】
Ｒ４は水素原子又はＣ１〜４アルキル基であり、好ましくは、水素原子、メチル基、又はエチル基であり、より好ましくは、水素原子である。【００４２】
一般式Ｉ（Ｉ’）で表される化合物と一般式ＩＩ（ＩＩ’）で表される化合物は互いに位置異性体の関係にあり、一般式Ｉで表される化合物の構造が好ましい。なお、本発明の化合物は不斉炭素を有することがあり、この場合には光学異性体が存在することがある。また、本発明の化合物は幾何異性体や互変異性体が存在することがある。本発明の化合物としては、単離された何れかの異性体（例えば、Ｅ体、Ｚ体、又はＲ体、Ｓ体）であってもよいし、ラセミ体、ジアステレオマーなどを含む、２以上の異性体を任意の割合で含有する混合物であってもよい。【００４３】
例えば、本発明の化合物として、以下の化合物を挙げることができる：【００４４】
【表１】
2019059132.tif 000011
【００４５】
【表２】
2019059132.tif 000012
【００４６】
【表３】
2019059132.tif 000013
【００４７】
【表４】
2019059132.tif 000014
【００４８】
本発明は、上記化合物の他、これらの化合物の薬理上許容されるエステルを包含する。ここで、「薬理上許容されるエステル」は、生体内において代謝されて、本願発明の化合物を与える基を含む化合物であって、医薬として体内に投与することが許容可能なエステルのことである。本明細書において、エステルは、エステル結合した化合物の他、アミド結合した化合物を含む。エステルは、生体内のエステラーゼにより分解されて活性型の化合物を与えてもよい。例えば、エステルとしては、置換され又は置換されていない、Ｃ１〜４アルキルエステル、Ｃ１〜４アルケニルエステル、Ｃ１〜４アルキルアミノＣ１〜４アルキルエステル、アシルアミノＣ１〜４アルキルエステル、アシルオキシＣ１〜４アルキルエステル、アリールエステル、アリールＣ１〜４アルキルエステル、アミド、Ｃ１〜４アルキルアミド、水酸化アミドを挙げることができる。エステルとして、好ましくは、プロピオオン酸エステル又はアシルエステルである。【００４９】
「薬理学的に許容される塩」とは、本発明の化合物が、無機又は有機の塩基又は酸と結合して形成した塩であって、医薬として体内に投与することが許容可能な塩のことである。このような塩は、例えば、Ｂｅｒｇｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９（１９７７）等に記載されている。塩としては、例えば、カルボキシ基等の酸性基が存在する場合には、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等のアルカリ金属及びアルカリ土類金属塩；アンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、Ｎ，Ｎ−ビス（ヒドロキシエチル）ピペラジン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、Ｌ−グルカミン等のアミンの塩；又はリジン、δ−ヒドロキシリジン、アルギニンなどの塩基性アミノ酸との塩を形成することができる。塩基性基が存在する場合には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸の塩；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸塩、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、ケイ皮酸、乳酸、グリコール酸、グルクロン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、サリチル酸等の有機酸との塩；又はアスパラギン酸、グルタミン酸などの酸性アミノ酸との塩などを挙げることができる。なお、本発明の化合物の水和物又は溶媒和物及び本発明の化合物の薬理学的に許容される塩の水和物又は溶媒和物も本発明の化合物に包含される。また、本明細書において「本発明の化合物」とは、それが明らかに適さない場合を除き、明示されていない場合にも、本発明の化合物の薬理学的に許容される塩、水和物及び溶媒和物、並びに本発明の化合物の薬理学的に許容される塩の水和物又は溶媒和物をも含む。また、本発明の化合物又はその塩、あるいはその水和物又は溶媒和物は結晶であってもよいし、非晶体であってもよい。【００５０】
本明細書において「式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物等」とは、式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物の他、上述のエステル、円、水和物、及び溶媒和物も含む。
好ましくは、本発明の化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物はＲｅｌＡのＣｙｓ−３８に結合する。【００５１】
「ＮＦ−κＢ阻害剤」又は「ＮＦ−κＢの核移行阻害剤」とは、ＮＦ−κＢの機能を阻害し、又は、ＮＦ−κＢの核への移行を阻害する薬剤を意味する。ＮＦ−κＢ阻害剤により阻害されるＮＦ−κＢの機能としては、増殖促進、抗アポトーシス、血管再生、転移、及び浸潤を挙げることができる。【００５２】
一態様において、本発明は前記式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物等を有効成分として含有する組成物、特には医薬組成物に関する。医薬組成物として、好ましくは、ＮＦ−κＢの活性化又は発現が発症又は増悪化に関係し又は寄与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬である。前記式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物等は、医薬組成物中に単一の成分として含有させることもできるし、他の薬剤を含有して２種類以上の有効成分を含むこともできる。本発明は、ＮＦ−κＢ又はＮＦ−κＢの核移行阻害による治療のための前記式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物等であってもよい。【００５３】
「ＮＦ−κＢの活性化又は発現が発症又は増悪化に関係し又は寄与する疾患又は障害」とは、ＮＦ−κＢの活性化や発現が発症や増悪化を引き起こす要因の一つであることが知られている疾患や障害であり、例えば、がん、炎症性疾患、ＡＴＬ、移植時拒絶反応、気管支喘息、炎症性腸疾患、関節炎、敗血症、自己免疫疾患、又はアレルギーなどが挙げられる。よって、本発明の医薬組成物はＮＦ−κＢ又はＮＦ−κＢの核移行を阻害することによる、がん、炎症性疾患、ＡＴＬ、移植時拒絶反応、気管支喘息、炎症性腸疾患、関節炎、敗血症、自己免疫疾患、又はアレルギーの治療薬又は予防薬を含む。
【発明の効果】
【００５４】
本発明の化合物は、ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８及び隣接アミノ酸のアラインメントを含むドメインを認識することによってＮＦ−κＢと直接結合し、活性化ドメインを持たないＮＦ−κＢ（すなわち、ｐ５０及びｐ５２）よりも、当該アライメントを有し、活性化ドメインを持つＮＦ−κＢ（すなわち、ＲｅｌＡ、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢ）に対してより強力な効果を奏する。また、ＤＨＭＥＱ及びＥｑＭのようなエポキシドを含まないことから、反応性が穏やかで安定であり、臨床応用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】主要なＮＦ−κＢ経路である、古典的及び非古典的ＮＦ−κＢ経路を示す模式図である。
【図２】ＮＦ−κＢ経路のうち、ＮＦ−κＢ阻害剤として開発される可能性のある標的を示す模式図である。
【図３】陰性対照を１００とした場合の、ジエタシンＡ（１０μｇ／ｍｌ）処理ｃＨＬ細胞株（Ｌ５４０）の生存率を示すグラフである。縦軸は、陰性対照（ビヒクル処理）を１００とした場合のＬ５４０細胞の生存率を示し、横軸は陰性対照（ｃｏｎｔｒｏｌ）又は投与化合物名（ジエタシンＡ）を示す。データは、クアドルプリケートの実験の平均±Ｓ．Ｄ．を示す。「２４ｈ」及び「４８ｈ」は、それぞれ、化合物処理時間が２４時間及び４８時間であることを示す。アスタリスクは、陰性対照に対してジエタシンＡが統計学的に有意に生存率を抑制すること（Ｐ＜０．０５）を示す。
【図４】ジエタシンＡによるＮＦ−κＢ核移行阻害効果を試験した結果を示す図である。ＮＦ−κＢのファミリー分子であるＲｅｌＡが活性化すると露出するＮＬＳを認識する抗体（活性化型ＲｅｌＡに対する抗体）（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）によるＬ５４０細胞の蛍光免疫染色を示す。ｃｏｎｔｒｏｌはジエタシンＡ未処理（ビヒクル処理）を示す。「５ｈ」及び「２４ｈ」は、それぞれ、化合物処理時間が５時間及び２４時間であることを示す。
【図５】ジエタシンＡ、ジエタシンＢ，ＫＪＥＴ−１、ＫＪＥＴ−５８、ＫＪＥＴ−６３、ＫＪＥＴ−７０、ＫＪＥＴ−８６、及びＫＪＥＴ−１２４によるＮＦ−κＢ核移行阻害効果を試験した結果を示す図である。活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）による蛍光免疫染色を示す。ｃｏｎｔｒｏｌのＫ５６２は強力で構成的ＮＦ−κＢ活性化を認めない細胞、Ｌ５４０は強力で構成的ＮＦ−κＢ活性化を認める細胞で薬剤未処理（ビヒクル処理）のものを示す
【図６】ジエタシンＡ、ジエタシンＣ，ジエタシンＤ、及びＫＪＥＴ−１２４のＴＮＦαによるＮＦ−κＢ活性誘導に対する阻害効果をレポーター遺伝子アッセイによって調べた結果を示すグラフである。実験に用いた細胞はＦＬ細胞で、縦軸は、３×κＢルシフェラーゼレポーターによるホタルルシフェラーゼ活性を、ＮＦ−κＢ活性（ＮＦ−κＢ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）として示す。アスタリスクは、ＴＮＦαのみで処置した試料に対して各化合物が統計的に有意にＮＦ−κＢ活性を抑制すること（Ｐ  ＜０．０５）を示す。
【図７】各種濃度のＫＪＥＴ−１２４によるＴＮＦα媒介性のＮＦ−κＢ活性誘導に対する阻害効果をレポーター遺伝子アッセイによって調べた結果を示すグラフである。実験に用いた細胞はＦＬ細胞で、縦軸は、未処理のＦＬ細胞のＮＦ−κＢ活性を１００％としたもの（左端）に対する相対的な活性を示す。アスタリスクは、ＴＮＦαのみで処置したものに対してＫＪＥＴ−１２４が統計学的に有意にＮＦ−κＢ活性を抑制すること（Ｐ＜０．０５）を示す。
【図８】（Ａ）ＫＪＥＴ−１２４はＮＦ−κＢとインポーチンαの結合を阻害することを示す図である。実験には強力で構成的ＮＦ−κＢ活性化を示すＫＭＨ２細胞を用いた。上段の矢印はＫＪＥＴ−１２４の処理の有り（＋）、無し（−）の条件下でＲｅｌＡに対する抗体、抗ＮＦ−κＢ  ｐ６５マウス抗体（Ｆ−６）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚｕ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄａｌｌａｓ、ＴＸ）で免疫沈降してくるインポーチンα３を示す。中段の矢印は同じ条件でＲｅｌＡに対する抗体で免疫沈降したＲｅｌＡを示す。下段の矢印は処理した検体中のインポーチンα３を示す。（Ｂ）ＫＭＨ２細胞において、ＫＪＥＴ−１２４の処理の有り（ＫＪＥＴ−１２４）、無し（ｃｏｎｔｒｏｌ）におけるインポーチンα３の分布を示す。上段は抗インポーチンα３／ＫＰＮＡ４  ＮＢ１００−１３７４抗体（ＮＯＶＵＳ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、Ｌｉｔｔｌｅｔｏｎ、ＣＯ）による蛍光免疫染色、下段はＤＡＰＩによる核染色を示す。
【図９】（Ａ）ＮＦ−κＢファミリータンパク質のアミノ酸配列である。ＲｅｌＡとは異なるアミノ酸を、枠で囲んだ。矢印で示されるＲｅｌＡのＮ末端からの３８番目のシステインは、ＮＦ−κＢファミリータンパク質の間で保存されている。（Ｂ）ＲｅｌＡの３８番目のシステインがＲｅｌＡに対するＫＪＥＴ−１２４の作用に重要であることを示した図である。左にＨｅＬａ細胞に導入した蛍光タンパク質ＧＦＰと融合した構築物（ＲｅｌＡ  ＷＴ：野生型ＲｅｌＡ；ＲｅｌＡ  Ｃ３８Ｓ：３８番目のシステインをセリンに変換した変異型ＲｅｌＡ）の名称を示す。
【図１０】（Ａ）ＮＦ−κＢファミリータンパク質に対するＫＪＥＴ−１２４の作用を示す蛍光分析写真である。写真の左に蛍光タンパク質ＧＦＰと融合した各ＮＦ−κＢファミリータンパク質の名称を示す。（Ｂ）ＮＦ−κＢファミリータンパク質のアミノ酸配列の比較を示す。ＲｅｌＡとは異なるアミノ酸を、枠で囲んだ。矢印で示されるＲｅｌＡのＮ末端からの３８番目のシステインは、ＮＦ−κＢファミリータンパク質の間で保存されている。アスタリスクで示されるＲｅｌＡのＲＳＡＧＳＩ（４１〜４６番目のアミノ酸）は、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢと間で保存され、ｐ５０のＰＳＨＧＧＬ（６５〜７０番目のアミノ酸）はｐ５２と間で保存される。左の数字は、表示したアミノ酸領域の左末端（Ｎ末端側）のアミノ酸番号を示している。
【図１１】強力で構成的ＮＦ−κＢ活性化を示す各細胞の生存率に対するＫＪＥＴ−１２４の効果を示すグラフである。黒棒はＫＪＥＴ−１２４処理２４時間、灰色棒はＫＪＥＴ−１２４処理４８時間の結果を示す。データは、３回の独立したトリプリケートの実験の平均±Ｓ．Ｄ．を示す。使用された細胞株の名前を各グラフの上部に示す。Ｋ５６２は強力で構成的ＮＦ−κＢ活性化を示さないコントロール細胞である。横軸は使用したＫ−ＪＥＴ１２４の濃度を示す。アスタリスクは、ビヒクル単独で同じ時間処理した細胞に対する減少の統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５）。
【図１２】ＡＴＮ−１細胞の生存率に対するＫＪＥＴ−１２４類似体の効果を示すグラフである。黒棒は薬剤処理２４時間、灰色棒は薬剤処理４８時間の結果を示す。データは、３回の独立したトリプリケートの実験の平均値±Ｓ．Ｄ．を示す。アスタリスクは、ビヒクル単独で同じ時間に処理した細胞に対する減少の統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５）。
【図１３】ＡＴＮ−１細胞の生存率に対するＫＪＥＴ−２０３の効果を示すグラフである。黒棒は薬剤処理２４時間、灰色棒は薬剤処理４８時間の結果を示す。データは、３回の独立したトリプリケートの実験の平均値±Ｓ．Ｄ．を示す。アスタリスクは、ビヒクル単独で同じ時間に処理した細胞に対する減少の統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５）。
【図１４】ＫＪＥＴ−１２４類似体によるＮＦ−κＢ核移行阻害効果を試験した結果を示す図である。活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）による免疫染色を示す。使用した化合物の名称を各々の図の上に示す。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
（アゾキシ部分の導入）
化合物へのアゾキシ部分の導入は、本分野周知の様々な方法を用いて行うことができるが、例えば、本発明者らが既に報告した方法（Ａ．Ｓｕｇａｗａｒａら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，７１（２０１５）  ２１４９−２１５７）を用いて行うことができる。本方法は、まず、１）アルデヒドＡをＣｂｚヒドラジンエタノール１０によりヒドラジン化して、対応するヒドラジンＢを得るステップ；２）酸化してアゾ化合物Ｃを得るステップ；３）アゾ化合物Ｃを位置選択的に酸化してアゾキシ化合物Ｄを得るステップ；４）ビニルアゾキシ化合物Ｅを製造するステップからなる。
【００５７】
【化９】
2019059132.tif 000015
【００５８】
（トリアゾール誘導体の合成）
本発明の式（Ｉ）で表される化合物において、Ｒ１が（置換）トリアゾール基の場合、トリアゾール誘導体５は以下の方法で製造することができる。様々な官能基が導入されたトリアゾール誘導体５は、最終ステップとして、一段階でアジドおよびアルキンを用いた銅触媒トリアゾール反応を、反応の後期に行うことによって合成することができる。モノ−ＴＢＳアルコール化合物１１のスワン酸化（ＤＭＳＯ、（ＣＯＣｌ）２、Ｅｔ３Ｎ、ＤＣＭ）により、対応するアルデヒド（示さず）を得て、直後にＣｂｚヒドラジンエタノール１０を用いて還元的ヒドラジン化（ＮａＣＮＢＨ３、ＡｃＯＨ、ＣＨＣｌ３）することにより、対応するヒドラジン１２を得ることができる。アゾ化合物１３は、ヒドラジン１２のＣｂｚ基の除去後、対応するヒドラジンの空気酸化により形成される。アゾ化合物１３を位置選択的酸化［３３，３４］することにより、アゾキシ１４が得られる。ＴＢＳ基を除去することにより化合物１５が得られる。ビニル基を構築するため、化合物１５をビス−メシル化（示さず）することにより対応するメシル化化合物が得られ、続いて２つのプロトンの酸性度の差を用いて化学選択的β脱離を行い、化合物１６を得ることができる。次いで、ＮａＮ３との置換反応によりトリアゾール前駆体８を生じさせる。アジドが得られたら、１６種類の−タイプアセチレンを用いた銅触媒トリアゾール反応［３５−４２］を利用した、ビニルアゾキシ部分の存在下で後期の多様化（Ｌａｔｅ−ｓｔａｇｅ  ｄｉｖｅｒｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）により、芳香族、脂肪族、または親水性基を置換基として有する対応するトリアゾール化合物５を得ることができる。
【００５９】
【化１０】
2019059132.tif 000016
【００６０】
（アシル誘導体の合成）
本発明の式（Ｉ）で表される化合物がアシル誘導体６である場合、以前に全合成によって開発した添加剤であるＬａＣｌ３・２ＬｉＣｌ（Ａ．Ｋｒａｓｏｖｓｋｉｙら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４５  （２００６）４９７−５００）の存在下でグリニャール試薬によりケトン結合を有するアシル誘導体を製造することができる。ＬａＣｌ３・２ＬｉＣｌの存在下、グリニャール試薬を用いることにより多様な基を導入することができる。
【００６１】
【化１１】
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【００６２】
（アルキル誘導体の合成）
アルキル誘導体は、ａ）所望のアルキル鎖を有するアルデヒドをＣｂｚヒドラジンエタノール１０でヒドラジン化するステップ；ｂ）Ｈ２，Ｐｄ（ＯＨ）２，ＭｅＯＨで反応させた後、室温で空気酸化させるステップ；ｃ）位置選択的に酸化して，アゾキシ化合物を得るステップ；ｄ））ビニルアゾキシ化合物Ｅを製造するステップにより得ることができる。
【００６３】
【化１２】
2019059132.tif 000018
【００６４】
また，本発明は，前記化合物を含有することを特徴とする医薬組成物に関する。本発明の医薬組成物は、経口投与用又は非経口投与用とすることができる。例えば，注射剤又は局所適用製剤とすることができる。該医薬組成物は常法に従って調製することができる。本発明の医薬組成物は，薬理学的に許容される担体（製剤用添加物）を含有していてもよい。医薬組成物の製造に用いられる製剤用添加物の種類，有効成分に対する製剤用添加物の割合，又は医薬組成物の製造方法は，組成物の形態に応じて当業者が適宜選択することが可能である。製剤用添加物としては無機又は有機物質，或いは固体又は液体の物質を用いることができ，一般的には，有効成分重量に対して１重量％から９０重量％の間で配合することができる。
【００６５】
一態様において本発明は、ＮＦ−κＢの活性化又は発現が発症又は増悪化に関係し又は寄与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬を製造するための、式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物若しくはそのエステル誘導体又はそれらの塩若しくは水和物の使用に関する。または、ＮＦ−κＢの活性化又は発現が発症又は増悪化に関係し又は寄与する疾患又は障害を治療又は予防するための、前記式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＩ）又は（ＩＩ’）で表される化合物等に関する。あるいは、本発明は、それを必要とする患者に有効量の本発明の化合物若しくはそのエステル誘導体又はそれらの塩若しくは水和物を投与することを備える、ＮＦ−κＢの活性化又は発現が発症又は増悪化に関係し又は寄与する疾患又は障害の治療方法又は予防方法に関する。例えば、本発明の化合物を治療又は予防目的で使用する場合、本発明の化合物を有効成分として含有する医薬組成物を、経口投与形態、又は注射剤、点滴剤等の非経口投与形態で投与することができる。本発明の化合物等を哺乳動物等に投与する場合、錠剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤等として経口投与してもよいし、又は、注射剤、点滴剤として非経口的に投与してもよい。投与量は、症状、年齢、性別、体重、投与形態等により異なるが、例えば成人に経口的に投与する場合には、通常１日量は０．１〜１０００ｍｇである。
【実施例】
【００６６】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、本願全体を通して引用される全文献は参照によりそのまま本願に組み込まれる。【００６７】
［実施例１］一般的方法
（１）一般的測定・分取方法
蛍光インジケーター（Ｍｅｒｃｋ  ６０  Ｆ２５４）を備えた、プレコートシリカゲルプレートを、分析及び分取のための薄層クロマトグラフィーに使用した。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、関東化学シリカゲル（関東化学株式会社製、シリカゲル６０Ｎ、球状中性、４０−５０μｍ、カタログ番号３７５６３−８４）又はメルクシリカゲル２３０−４００メッシュＡＳＴＭ（６０Ｎ、４０〜６３μｍ、カタログ番号１０９３８５）を用いた。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを５００ＭＨｚにより記録し、１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルをＪＥＯＬ  ＥＣＡ−５００（５００ＭＨｚ）により１２５ＭＨｚで記録した。化学シフトは、内部溶媒ピークＣＤＣｌ３（７．２６ｐｐｍ、１Ｈ  ＮＭＲ）、ＣＤＣｌ３（７７．１６ｐｐｍ、１３Ｃ  ＮＭＲ）、ＣＤ３ＯＤ（３．３１ｐｐｍ、１Ｈ  ＮＭＲ）からのｐｐｍダウンフィールドで示し、カップリング定数（Ｊ値）は、ヘルツで示した。カップリングパターンは、ｓ（ｓｉｎｇｌｅｔ），ｄ（ｄｏｕｂｌｅｔ），ｄｄ（ｄｏｕｂｌｅ  ｄｏｕｂｌｅｔ），ｄｄｄ（ｄｏｕｂｌｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｄｏｕｂｌｅｔ），ｄｔ  （ｄｏｕｂｌｅ  ｔｒｉｐｌｅｔ），ｔ（ｔｒｉｐｌｅｔ），ｑ（ｑｕａｒｔｅｔ），ｄｑ（ｄｏｕｂｌｅ  ｑｕａｒｔｅｔ），ｍ（ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ），ｂｒ（ｂｒｏａｄｅｎｅｄ），及びａｐｐ  （ａｐｐｅａｒａｎｃｅ）で表した。赤外スペクトルは全て、Ｈｏｒｉｂａ  ＦＴ−２１０分光計で測定した。高分解能及び低分解能マススペクトルは、ＪＥＯＬ  ＪＭＳ−７００  ＭＳｔａｔｉｏｎ及びＪＥＯＬ  ＪＭＳ−Ｔ１００ＬＰで測定した。旋光度は、Ｊａｓｃｏ  Ｐ−１０１０偏光計で測定した。融点は、ａ  Ｙａｎａｃｏ  Ｍｉｃｒｏ  Ｍｅｌｔｉｎｇ  Ｐｏｉｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ＭＰ−５００Ｐで測定した。【００６８】
（２）アゾ生成の一般的手順
ＭｅＯＨ溶液（０．１Ｍ）に、０℃、Ｎ２雰囲気下で１０％Ｐｄ（ＯＨ）２（２．０当量）を加えた。得られた懸濁液に、ＭｅＯＨ（０．５Ｍ）中のＣｂｚ−ヒドラジン（１．０当量）の溶液を添加した。溶液を水素雰囲気に供し、室温で２時間撹拌した。出発物質が消費された後、混合物をセライトパッドで濾過し、ＭｅＯＨとＣＨＣｌ３の混合物（１／１０、ｖ／ｖ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。粗生成物を、ヒドラジンが消費されるまで室温で空気に曝すことによって直ちに酸化させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、アゾ化合物を得た。【００６９】
（３）アゾキシ化の一般的な手順
ＤＣＭ（０．１Ｍ）中のアゾ化合物（１．０当量）及びＶＯ（ａｃａｃ）２（０．１当量）の溶液に、０℃、Ｎ２雰囲気下でＴＢＨＰ（デカン中５．５Ｍ、１．２当量）を添加した。同じ温度で出発物質が消費されるまで撹拌した後、得られた混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で反応停止し、ＣＨＣｌ３で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、アゾキシ化合物及びその位置異性体を得た。【００７０】
（４）トリアゾール反応の一般的手順
室温のＭｅＯＨ（０．２Ｍ）中のアジド化合物８の溶液に、アセチレン（１．２当量）、テトラキス（アセトニトリル）銅（Ｉ）ヘキサフルオロホスフェート（Ｃｕ（ＭｅＣＮ）４ＰＦ６，０．０５当量）及びトリス［（１−ベンジル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メチル］アミン（ＴＢＴＡ、０．０５当量）を加えた。反応混合物を、出発物質が消費されるまで室温で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝５／１〜ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製して、所望のトリアゾール化合物を得た。【００７１】
（４）グリニャール反応の一般手順
ＴＨＦ（２．０Ｍ）中のＬａＣｌ３・２ＬｉＣｌ（４．０当量）溶液に、グリニャール試薬（４．０当量）を滴下した。０℃で３０分間撹拌した後、グリニャール試薬とＬａＣｌ３・２ＬｉＣｌの混合物を、別のフラスコ中で−４０℃にしたワインレブアミド（１．０当量）のＴＨＦ（０．５Ｍ）溶液に加え、混合物を１０分間撹拌した。次いで、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。残渣を分取用ＰＬＣにより精製してケトン類似体を得た。【００７２】
（５）還元的ヒドラジン化の一般的手順
ＭｅＯＨ（０．１Ｍ）中の化合物１０（１．０当量）の溶液に、アルデヒド（１．０当量）を０℃で滴下して加えた。室温で３０分間撹拌した後、混合物にＡｃＯＨ（２．０当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（６．０当量）を０℃で加えた。この混合物を出発物質が消費されるまで室温で攪拌しながら室温まで温めた。得られた混合物をＣＨＣｌ３で希釈し、ｐＨ７．２リン酸緩衝液及びＨ２Ｏ、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、対応するＣｂｚ−ヒドラジンを得た。【００７３】
（６）ビニルアゾキシ基の一般的な製造手順
ＤＣＭ（０．１Ｍ）中のアゾキシエチルアルコール（１．０当量）の溶液に、室温でＥｔ３Ｎ（２．０当量）及びＭｓＣｌ（１．２当量）を添加した。１０分間撹拌した後、混合物にＤＢＵ（２．０当量）を加え、３５℃で３分間攪拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液及びＨ２Ｏ、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を分取ＴＬＣで精製してビニルアゾキシ化合物を得た。【００７４】
［実施例２］トリアゾール誘導体５ａ〜５ｑの合成【００７５】
【化１３】
2019059132.tif 000019
（各ステップの反応条件）
ａ）ＤＭＳＯ，（ＣＯＣｌ）２，Ｅｔ３Ｎ，ＤＣＭ，−７８℃，その後、１０，ＡｃＯＨ，ＮａＢＨ３ＣＮ，ＣＨＣｌ３，０℃（収率：２ステップで８２％）
ｂ）Ｈ２，Ｐｄ（ＯＨ）２，ＭｅＯＨ，その後、空気［Ｏ］，室温（収率：８２％）
ｃ）ＴＢＨＰ，ＶＯ（ａｃａｃ）２，ＤＣＭ，０℃（収率：７２％）
ｄ）ＡｃＯＨ，Ｈ２Ｏ，ＴＨＦ，室温（収率：ｑｕａｎｔ．）
ｅ）ＭｓＣｌ，Ｅｔ３Ｎ，ＤＣＭ，室温、その後、ＤＢＵ，３５℃（収率：８１％）
ｆ）ＮａＮ３，ＤＭＦ，５０℃（収率８５％）
ｇ）Ｒ−Ｎ３，Ｃｕ（ＭｅＣＮ）４ＰＦ６，ＴＢＴＡ（Ｔ．Ｒ．Ｃｈａｎら，Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．６（２００４）２８５３−２８５５），ＭｅＯＨ，室温（収率：ＫＪＥＴ−５７；８５％，５ｂ；９６％，５ｃ；８９％，ＫＪＥＴ−５４；８４％，ＫＪＥＴ−５９；９１％，ＫＪＥＴ−６１；９３％，ＫＪＥＴ−６７；８３％，ＫＪＥＴ−５８；９１％，ＫＪＥＴ−７１；８４％，ＫＪＥＴ−６５；９１％，ＫＪＥＴ−６８；９７％，ＫＪＥＴ−６２；９６％，ＫＪＥＴ−７０；５１％，ＫＪＥＴ−６９；３５％，ＫＪＥＴ−５５；７３％，ＫＪＥＴ−６６；８９％，ＫＪＥＴ−６０；６１％）【００７６】
（１）８  −  ［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］オクタン−１−オール（化合物１１）
ＭｅＯＨ（３４０ｍＬ）中の１，８−オクタジオール（１０．０ｇ、６８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（４７．８ｍＬ、３４２ｍｍｏｌ）、ＴＢＳＣｌ（９．７９ｇ、６５．０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（０．４１８ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を０℃、窒素雰囲気下で攪拌した。１時間撹拌した後、反応混合物にＣＨＣｌ３（６００ｍＬ）を添加し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（９００ｍＬ）、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（９００ｍＬ、２回）、及びブライン（９００ｍＬ）で洗浄したた。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１５／１〜５／１）により精製して、化合物１１（９．０６ｇ、５１％）を無色油状物として得た。
IR (Diamond Prism) ν (cm-1) : 3349, 2931, 2858, 1471, 1387, 1362, 1255, 1099, 1059, 837, 775, 665; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 3.63 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.59 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 1.58-1.46 (complex m, 4H), 1.35-1.30 (complex m, 8H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 63.3, 62.9, 32.8, 32.7, 29.4 (2C), 25.9 (3C), 25.69, 25.66, 18.3, -5.3 (2C); 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 261.2250 [M+H]+, calcd for C14H33O2Si : 261.2242.【００７７】
（２）ベンジル２−｛８−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］オクチル｝−１−（２−ヒドロキシエチル）−ヒドラジン−１−カルボキシラート（化合物１２）
ＤＭＳＯ（４．４６ｍＬ、６２．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９６．０ｍＬ）溶液に、−７８℃、窒素雰囲気下、シリンジで塩化オキサリル（２．６５ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を滴下した。３０分間撹拌した後、反応混合物にシリンジで化合物１１（５．０３ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）を滴下し、−７８℃でさらに３０分間撹拌し、その後Ｅｔ３Ｎ（１６．１ｍＬ、３７７ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で１０分間撹拌した後、反応混合物を０℃まで加温し、１時間撹拌し、次いで、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（９０ｍＬ）、１０％ＮａＨＳＯ３水溶液（９０ｍＬ、２回）、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（９０ｍＬ）、飽和食塩水（９０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を精製することなく次の工程に用いた。０℃のＣＨＣｌ３（１９０ｍＬ）中の化合物１０（４．８７ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、粗アルデヒドを加え、次いで反応混合物を室温まで温め、撹拌した。４５分間撹拌した後、反応混合物を０℃まで冷却し、ＡｃＯＨ（２．４ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）を加えた。１０分間撹拌した後、０℃で混合物にＮａＢＨ３ＣＮ（７．２８ｇ、３７７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応混合物を水中のリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．２，１９０ｍＬ）、飽和食塩水（１９０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝５／１〜３／１）で精製して化合物１２（７．１９ｇ、８２％）を無色油状物として得た。
IR (Diamond Prism) ν (cm-1) : 3995, 2931, 2854, 1697, 1458, 1404, 1350, 1250, 1095, 833, 771, 694; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 7.36 (m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.62 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.59 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.88 (m, 2H), 1.51-1.45 (complex m, 4H), 1.28 (complex m, 8H), 0.89 (s, 9H), 0.04 (s, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 156.5, 135.9, 128.2 (2C), 127.9, 127.7 (2C), 67.3, 62.9, 61.3, 49.9, 32.5, 29.2, 29.0, 28.9 27.5, 26.8, 25.7 (3C), 25.4, 18.1, -5.5 (2C); 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 451.3144 [M+H]+, calcd for C24H45N2O4Si : 453.3149.【００７８】
（３）（Ｅ）−２  −（｛８−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］オクチル｝ジアゼニル）エタン−１−オール（化合物１３）
化合物１２（８．８０ｇ、１９．４ｍｍｏｌ）を実施例１（２）アゾ生成の一般的手順に従って、黄色の油状物である化合物１３（５．０４ｇ、８２％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν (cm-1) : 3316, 3224, 2931, 2854, 1511, 1462, 1427, 1334, 1257, 1203, 1057, 972, 872, 833, 764,717, 617; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 4.04 (m, 2H), 3.99 (m, 2H), 3.81 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.59 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.79 (dt, J = 14.4, 6.9 Hz, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.36-1.31 (complex m, 8H), 0.89 (s, 9H), 0.04 (s, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 69.9, 69.6, 63.3, 60.3, 32.8, 29.3, 29.2, 27.5, 27.2, 26.0 (3C), 25.7, 18.3, -5.3 (2C); 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 317.2617 [M+H]+, calcd for C16H37N2O2Si : 317.2624【００７９】
（４）（Ｚ）−２−｛８−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］オクチル｝−１−（２−ヒドロキシエチル）ジアゼン  １−オキシド（化合物１４）
化合物１３（１．００ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）を実施例１（３）アゾキシ化の一般的手順に従って、黄色の油状物である化合物１４（７５１ｍｇ、７２％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3396, 2931, 2854, 1504, 1466, 1419, 1311, 1250, 1195, 1095, 833, 771, 663; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 4.31 (m, 2H), 4.04 (m, 2H), 3.59 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.71 (dt, J = 14.4, 6.9 Hz, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.41-1.31 (complex m, 8H), 0.89 (s, 9H), 0.04 (s, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 70.4, 63.3, 59.5, 52.1, 32.8, 29.3 (2C), 27.7, 27.0, 26.0 (3C), 25.7, 18.4, -5.3 (2C); 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 333.2569 [M+H]+, calcd for C16H37N2O3Si : 333.2573.【００８０】
（５）（Ｚ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−２−（８−ヒドロキシオクチル）ジアゼン  １−オキシド（化合物１５）
０℃のＴＨＦ（５１ｍＬ）中の化合物１４（５．８８ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水（５１ｍＬ）、ＡｃＯＨ（７６ｍＬ）を加え、混合物を室温まで温めた。２時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１８０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ、２回）で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１／２）で精製して、化合物１５（３．８６ｇ、ｑｕａｎｔ）を無色固体として得た。
ｍｐ  ４７．５  ℃；  
IR (Diamond Prism) ν (cm-1): 3314, 3224, 2931, 2854, 1512, 1469, 1427, 1336, 1257, 1203, 1057, 972, 872, 833, 764, 717, 617; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 4.31 (m, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.64 (dt, J = 5.4, 1.2 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.71 (dt, J = 14.4, 6.9 Hz, 2H), 1.55 (dt, J = 13.8, 6.9 Hz, 2H) 1.41-1.32 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 70.5, 62.8, 59.3, 52.1, 32.6, 29.2, 29.1, 27.6, 26.9, 25.6; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 219.1713 [M+H]+, calcd for C10H23N2O3 : 219.1709.【００８１】
（６）（Ｚ）−２−｛８−［（メチルスルホニル）オキシ］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（化合物１６）
化合物１５（０．５０２ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２３ｍＬ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（０．９５０ｍＬ、６．８９ｍｍｏｌ）及びＭｓＣｌ（０．４３０ｍＬ、５．５１ｍｍｏｌ）を加えた。５分間撹拌した後、対応するビス−メシラートをＴＬＣで観察した。反応物にＤＢＵ（１．０３ｍＬ、６．８９ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で３分間攪拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ、２回）、飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２／１）で精製して、化合物１６（０．４４７ｇ、７０％）を無色固体として得た。
ｍｐ  ５２．１  ℃；  
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3124, 3039, 2931, 2854, 2190, 1466, 1419, 1327, 1265, 1184, 1041, 941, 825, 733, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.10 (dd, J = 15.0, 8.0 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.00 (s, 3H), 1.76-1.73 (complex m, 4H), 1.42-1.35 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 143.4, 115.3, 70.1, 52.5, 37.3, 29.1 (2C), 28.9, 27.6, 27.0, 25.3; 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 279.1383 [M+H]+, calcd for C11H23N2O4S : 279.1379.【００８２】
（７）（Ｚ）−２−（８−アジドオクチル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（化合物８）
ＤＭＦ（５６ｍＬ）中の化合物１６（１．５２ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、５０℃でＮａＮ３（０．５２６ｇ、８．１９ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間撹拌した後、反応混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１／１（２５ｍＬ／２５ｍＬ、ｖ／ｖ）の混合物で抽出した。有機層を分離し、水層をヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１／１（２５ｍＬ／２５ｍＬ、ｖ／ｖ）の混合物で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２／１）により精製して、化合物８（１．０５ｇ、８５％）を黄色油状物として得た。
IR (Diamond Prism) ν (cm-1) : 3112, 3089, 2931, 2858, 2096, 1732, 1506, 1473, 1419, 1373, 1348, 1311, 1265, 1052, 953, 773, 723, 654; 
1H NMR (500 MHz, CD3OD)δ(ppm) : 7.21 (dd, J = 15.0, 7.5 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 5.57 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.52 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.28 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.59 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.45-1.38 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CD3OD)δ(ppm) : 144.9, 116.0, 53.6, 52.5, 30.4 (2C), 30.0, 29.0, 28.3, 27.9; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 226.1671 [M+H]+, calcd for C10H20N5O : 226.1668.【００８３】
（８）（Ｚ）−２−［８−（４−ブチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル］−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５７）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．９ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）を１−ヘキシン（５０μＬ、０．４３１ｍｍｏｌ）と反応させることにより、無色固体である化合物５ａ（ＫＪＥＴ−５７）（９３．７ｍｇ、８５％）に変換した。
ｍｐ  ６２．２  ℃；  
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3214, 3078, 2924, 2854, 1643, 1550, 1466,1411, 1342, 1265, 1157,1057, 957, 749, 779, 725, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.24 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.71 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 1.88 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.74 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.43-1.29 (complex m, 10H), 0.93 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 148.3, 143.4, 120.3, 115.2, 52.4, 50.1, 31.5, 30.3, 29.0, 28.8, 27.6, 26.9, 26.4, 25.3, 22.3, 13.8; 
HRMS (ESI) m/z: 330.2269 [M+Na]+, calcd for C16H29N5NaO : 330.2270【００８４】
（９）（Ｚ）−２−｛８−［４−（４−ヒドロキシブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝  −１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６３）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．２ｍｇ、０．３５６ｍｍｏｌ）を５−ヘキシン−１−オール（５０μＬ、０．４２７ｍｍｏｌ）と反応させて、ＫＪＥＴ−６３（９３．１ｍｇ、８１％）を無色の固体として得た。
mp 69.9 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν (cm-1) : 3448, 3402, 3116, 3062, 2924, 2854, 1550, 1465, 1342, 1255, 1211, 1165, 1049, 997, 949, 864, 787, 648; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 7.28 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.76 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.98 (brs, 1H), 1.88 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.81-1.73 (complex m 4H), 1.64 (m, 2H), 1.43-1.34 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 147.8, 143.2, 120.4, 115.2, 61.9, 52.3, 50.0, 32.0, 30.1, 28.9, 28.7, 27.4, 26.8, 26.2, 25.5, 25.1; 
HRMS (ESI) m/z: 346.2221 [M+Na]+, calcd for C16H29N5NaO2 : 346.2219【００８５】
（１０）（Ｚ）−２−｛８−［４−（４−シアノブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６４）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．９ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）を６−ヘプチンニトリル（５０μＬ、０．４３１ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−６４（１０６．７ｍｇ、８９％）に変換した。
mp 50.5 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3109, 3070, 2924, 2854, 2244, 2209, 2185, 2013, 1643, 1550, 1465, 1408, 1319, 1273, 1219, 1157, 1049, 964, 841, 771, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.29 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 7.2Hz, 2H), 2.38 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.87 (m, 4H), 1.74 (m, 4H), 1.42-1.29 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ (ppm) : 146.6, 143.2, 120.4, 119.3, 115.0, 52.2, 49.9 , 30.0, 28.7, 28.6, 28.1, 27.4, 26.7, 26.1, 24.49, 24.45, 16,6; 
HRMS (ESI) m/z: 355.2230 [M+Na]+, calcd for C17H28N6NaO : 355.2222.【００８６】
（１１）（Ｚ）−２−［８−（４−イソブチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル］−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５４）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．５ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）を４−メチル−１−ペンチン（５０μＬ、０．４２６ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−５４（９２．０ｍｇ、８４％）に変換した。
mp 49.9 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3116, 3062, 2924, 2854, 1550, 1466, 1365, 1327, 1273, 1219, 1157, 1049, 957, 856, 771, 717, 663; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.29 (s, 1H), 7.11 (dd, J = 14.9, 8.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.56 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.61 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.98 (m, 1H), 1.91 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.76 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.45-1.35 (complex m, 8H), 0.96 (d, J = 6.9 Hz, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 147.1, 143.5, 120.9, 115.3, 52.5, 50.1, 34.8, 30.3, 29.1, 28.9, 28.7, 27.6, 27.0, 26.4, 22.3 (2C); 
HRMS (ESI) m/z: 330.2275 [M+Na]+, calcd for C16H29N5NaO : 330.2270【００８７】
（１２）（Ｚ）−２−  ｛８−  ［４−（２−ブロモエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５９）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．８ｍｇ、０．３５８ｍｍｏｌ）を１−ヘキシン（４０μＬ、０．４３３ｍｍｏｌ）と反応させることにより、無色固体であるＫＪＥＴ−５９（１１６．８ｍｇ、９１％）に変換した。
mp 55.3 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3162, 3124, 2924, 2854, 1550, 1466, 1419, 1319, 1257, 1219, 1142, 1057, 957, 883, 764, 725, 671; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.43 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.65 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.30 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.90 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.74 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.43-1.31 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 144.5, 143.3, 121.4, 115.2, 52.3, 50.1, 31.6, 30.1, 29.3, 28.9, 28.7, 27.5, 26.8, 26.2; 
HRMS (ESI) m/z: 380.1059 [M+Na]+, calcd for C14H24N5BrNaO : 380.1062【００８８】
（１３）（Ｚ）−２−［８−（４−イソプロピル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル］−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６１）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．８ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）を３−メチル−１−ブチン（４０μＬ、０．４３１ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−６１（９７．８ｍｇ、９３％）に変換した。
mp 51.3 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3109, 3062, 2924, 2854, 1550, 1466, 1365, 1327, 1265, 1211, 1173, 1103, 1049, 949, 849, 764, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.22 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 8.0 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.52 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.08 (m, 1H), 1.88 (dt, J = 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.74 (dt, J = 14.6, 7.3 Hz, 2H), 1.43-1.29 (complex m, 8H), 1.30 (d, J = 7.0 Hz, 6H),; 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm): 154.3, 143.3, 118.8, 115.1, 52.3, 49.9, 30.1, 28.9, 28.7, 27.5, 26.8, 26.3, 25.7, 22.4 (2C); 
HRMS (ESI) m/z: 316.2123 [M+Na]+, calcd for C15H27N5NaO : 316.2113【００８９】
（１４）（Ｚ）−２−｛８−［４−（プロプ−１−エン−２−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６７）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．０ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）を２−メチル−１−ブテン−１−イン（８６．２ｍｇ、０．４２６ｍｍｏｌ）と反応させて、ＫＪＥＴ−６７（８５．０ｍｇ、８３％）を無色アモルファスとして得た。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3008, 2931, 2854, 1643, 1466, 1373, 1319, 1219, 1111, 1049, 949, 895, 748, 663; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.46 (s, 1H), 7.03 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 5.43 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.01 (m, 1H), 4.26 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.46 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.83 (dt, J = 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.66 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.35-1.25 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 148.4, 143.2, 133.5, 119.3, 115.1, 112.0, 52.3, 50.0, 30.1, 28.9, 28.7, 27.4, 26.8, 26.2, 20.5; 
HRMS (ESI) m/z: 314.1962 [M+Na]+, calcd for C15H25N5NaO : 314.1957【００９０】
（１５）（Ｚ）−２−｛８−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５８）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．６ｍｇ、０．３５８ｍｍｏｌ）を３，３−ジメチル−１−ブチン（５０μＬ、０．４３０ｍｍｏｌ）と反応させて、ＫＪＥＴ−５８（９９．５ｍｇ、９１％）を無色アモルファスとして得た。
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3124, 3070, 2931, 2854, 1643, 1542, 1466, 1365, 1275, 1218, 1126, 1049, 949, 841, 764, 717, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.22 (s, 1H), 7.10 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.88 (dt, J = 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.75 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.44-1.32 (complex m, 8H), 1.35 (s, 9H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 157.3, 143.3, 118.1, 115.1, 52.2, 49.9, 30.5, 30.2 (3C), 30.1, 28.8, 28.7, 27.4, 26.8, 26.3; 
HRMS (ESI) m/z : 330.2271 [M+Na]+, calcd for C16H29N5NaO : 330.2270【００９１】
（１６）（Ｚ）−２−｛８−［４−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−７１）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８２．８ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）を２−メチル−３−ブチン−２−オール（４０μＬ、０．４４１ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−７１（１０３．６ｍｇ、９５％）に変換した。
mp 71.0 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3309, 3124, 2970, 2924, 2854, 1543, 1466, 1365, 1265, 1211, 1192, 1134, 1049, 964, 489, 764, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.42 (s, 1H), 7.08 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.51 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.80 (s, 1H), 1.87 (dt, J = 13.8, 6.9 Hz, 2H), 1.72 (dt, J = 15.0, 7.5 Hz, 2H), 1.61 (s, 6H), 1.41-1.30 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 155.5, 143.3, 118.9, 115.3, 68.3, 52.3, 50.1, 30.3 (2C), 30.1, 28.9, 28.7, 27.5, 26.8, 26.3; 
HRMS (ESI) m/z : 332.2064 [M+Na]+, calcd for C15H27N5NaO2 : 332.2062【００９２】
（１７）（Ｚ）−２−［８−（４−シクロプロピル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル］−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６５）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８２．２ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）をシクロプロピルアセチレン（４０μＬ、０．４３８ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−６５（９７ｍｇ、９１％）に変換した。
mp 66.1 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3132, 3100, 2924, 2854, 2021, 1558, 1466, 1412, 1327, 1265, 1211, 1157, 1049, 957, 895, 802, 764, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.20 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 8.0 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H,), 5.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.94 (m, 1H), 1.86 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.74 (dt, J = 7.5, 14.9, 2H), 1.43-1.30 (complex m, 8H), 0.94 (m, 2H), 0.83 (m, 2H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 150.1, 143.4, 119.4, 115.3, 52.5, 50.2, 30.3, 29.0, 28.9, 27.6, 27.0, 26.4, 7.7 (2C), 6.7; 
HRMS (ESI) m/z: 314.1956 [M+Na]+, calcd for C15H25N5NaO : 314.1957【００９３】
（１８）（Ｚ）−２−｛８−［４−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン−１−オキシド（ＫＪＥＴ−６８）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８０．０ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）を１−エチニル−１−シクロヘキサノール（５３．２ｍｇ、０．４２７ｍｍｏｌ）と反応させて、無色固体であるＫＪＥＴ−６８（１２４．０ｍｇ、９７％）に変換した。
mp 88.4 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3224, 3101, 3055, 2931, 2854, 1466, 1415, 1358, 1319, 1257, 1173, 1049, 949, 902, 849, 764, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.42 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.13 (brs, 1H), 2.00-1.86 (complex m, 7H), 1.79-1.70 (complex m, 4H), 1.65-1.52 (complex m, 3H), 1.43-1.32 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 155.5, 143.3, 119.3, 115.3, 69.4, 52.4, 50.1, 38.0 (2C), 30.1, 28.9, 28.7, 27.5, 26.8, 26.3, 25.3, 21.9 (2C); 
HRMS (ESI) m/z: 372.2377 [M+Na]+, calcd for C18H31N5NaO2 : 372.2375.【００９４】
（１９）（Ｚ）−２−｛８−［４−（アセトキシメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン−１−オキシド（ＫＪＥＴ−６２）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８２．４ｍｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）をプロパルギルアセテート（４０μＬ、０．４３９ｍｍｏｌ）と反応させて、ＫＪＥＴ−６２（１１４．１ｍｇ、９７％）を黄色固体として得た。
mp 56.0 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3124, 2924, 2013, 1736, 1466, 1365, 1227, 1149, 1034, 957, 849, 787, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.58 (s, 1H), 7.10 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.34 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.90 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.75 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2 H), 1.42-1.31 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 170.6, 143.2, 142.5, 123.3, 115.1, 57.5, 52.2, 50.1, 30.0, 28.8, 28.6, 27.4, 26.7, 26.2, 20.6; 
HRMS (ESI) m/z: 346.1860 [M+Na]+, calcd for C15H25N5NaO3 : 346.1855【００９５】
（２０）（Ｚ）−２−｛８−［４−（トリメチルシリル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−７０）、及び、
（Ｚ）−２−［８−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル］−１−ビニルジアゼン−１−オキシド（ＫＪＥＴ−６９）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８３．１ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）をトリメチルシリルアセチレン（６０μＬ、０．４４２ｍｍｏｌ）と反応させることにより、ＫＪＥＴ−７０（３０．９ｍｇ、５１％）及びＫＪＥＴ−６９（３２．０ｍｇ、３５％）を無色固体として得た。
ＫＪＥＴ−７０：
mp 55.6 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3093, 2931, 2854, 1643, 1466, 1365, 1327, 1250, 1196, 1126, 1049, 949, 841, 756, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.48 (s, 1H), 7.08 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.35 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.51 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.89 (dt, J = 13.7, 6.9 Hz, 2H), 1.73 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.42-1.33 (complex m, 8H), 0.30 (s, 9H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 146.3, 143.3, 128.6, 115.2, 52.4, 49.6, 30.3, 28.9, 28.8, 27.6, 26.9, 26.4, -1.2 (3C); 
HRMS (ESI) m/z: 346.2042 [M+Na]+, calcd for C15H29N5NaOSi: 346.2039
ＫＪＥＴ−６９：
mp 54.2 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3111, 2952, 2927, 2856, 2102, 1722, 1487, 1468, 1325, 1271, 1217, 1122, 1084, 1049, 960, 949, 827, 761, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.71 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.10 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.92 (dt, J = 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.75 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.44-1.35 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 143.3, 133.7, 123.1, 115.3, 52.4, 50.1, 30.2, 29.0, 28.8, 27.6, 26.9, 26.3; 
HRMS (ESI) m/z: 274.1647 [M+Na]+calcd for C12H21N5NaO : 274.1644.【００９６】
（２１）（Ｚ）−２−（８−（４−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５５）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８２．８ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）をエチニルベンゼン（５０μＬ、０．４４２ｍｍｏｌ）と反応させて、KJET-55(88.0mg、73%)を無色固体として得た。
mp 95.2 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3116, 2923, 2854, 1466, 1345, 1305, 1265, 1093, 1049, 949, 841, 764, 701, 654; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.83 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.74 (s, 1H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H,), 5.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.95 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.74 (dt, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H), 1.44-1.33 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 147.7, 143.4, 130.7, 128.8 (2C), 128.0, 125.7 (2C), 119.3, 115.3, 52.4, 50.4, 30.3, 29.0, 28.9, 27.6, 26.9, 26.4; 
HRMS (ESI) m/z: 350.1959 [M+Na]+, calcd for C18H25N5NaO : 350.1957.【００９７】
（２２）（Ｚ）−２−｛８−［４−（ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］オクチル｝−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６６）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８１．０ｍｇ、０．３６０ｍｍｏｌ）と１−ヘキシン（４３．９ｍｇ、０．４２７ｍｍｏｌ）を無色固体のＫＪＥＴ−６６（１０５ｍｇ、８９％）に変換した。
mp 73.3 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3116, 2924, 2854, 1574, 1466, 1342, 1219, 1049, 957, 810, 710, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 9.01 (s, 1H), 8.58 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.26 (m, 1H), 7.86 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.4 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.97 (dt, J = 14.9, 7.4 Hz, 2H), 1.75 (dt, J = 14.9, 7.4 Hz, 2H), 1.45-1.34 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 148.9, 146.8, 144.4, 143.2, 132.7, 126.7, 123.5, 119.8, 115.1, 52.2, 50.3, 30.1, 28.8, 28.6, 27.4, 26.7, 26.2; 
HRMS (ESI) m/z : 351.1909 [M+Na]+, calcd for C17H24N6NaO : 351.1909.【００９８】
（２３）（Ｚ）−２−（８−（４−（フェナントレン−９−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）オクチル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−６０）
実施例１（４）トリアゾール反応の一般的手順に従って、化合物８（８１．０ｍｇ、０．３６０ｍｍｏｌ）と９−エチニル−フェナントレン（８６．２ｍｇ、０．４２７ｍｍｏｌ）を無色固体のＫＪＥＴ−６０（９４．０ｍｇ、６１％）に変換した。
mp 97.4 ℃; 
IR (Diamond Prism)ν(cm-1) : 3147, 2931, 2854, 1466, 1373, 1273, 1219, 1049, 957, 903, 825, 764, 725, 663; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 8.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.71 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.92 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.71-7.60 (complex m, 4H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.50 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.55 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.04 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.77 (dt, J = 14.9, 7.5 Hz, 2H), 1.47-1.35 (complex m, 8H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 146.5, 143.3, 131.2, 130.6, 130.2, 130.0, 128.7, 128.1, 126.9, 126.79, 126.76, 126.7, 126. 6, 126.1, 122.8, 122.6, 122.4, 115.2, 52.3, 50.3, 30.2, 28.9, 28.8, 27.5, 26.8, 26.4; 
HRMS (ESI) m/z : 450.2262 [M+Na]+, calcd for C26H29N5NaO : 450.2270.【００９９】
［実施例２］アシル誘導体の合成【０１００】
【化１４】
2019059132.tif 000020
（各ステップの反応条件）
ａ）Ｒ−ＭｇＢｒ，ＬａＣｌ３・２ＬｉＣｌ，ＴＨＦ（収率：ＫＪＥＴ−１１１；８４％，ＫＪＥＴ−１００；５８％，ＫＪＥＴ−１０２；５３％，ＫＪＥＴ−１０６；５３％，ＫＪＥＴ−１１２；６０％，ＫＪＥＴ−１２４；６４％，ＫＪＥＴ−１２５；４７％）【０１０１】
（１）（Ｚ）−２−（８−オキソノニル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１１１）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（４２ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）を黄色油状物であるＫＪＥＴ−１１１（２９ｍｇ、８４％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2931, 2858, 1662, 1466, 1415, 1381, 1315, 1265, 1176, 1115, 1053, 995, 953, 764, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.75 (tt, 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.58 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 1.38-1.27 (complex m, 4H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 209.1, 143.3, 115.2, 52.4, 43.5, 29.7, 28.95, 28.88, 27.5, 26.8, 23.6; 
HRMS (ESI) m/z : 213.1604 [M+H]+, calcd for C11H21N2O2 : 213.1603.【０１０２】
（２）（Ｚ）−２−（８−オキソデシル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１００）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、に従って、化合物９（５０ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）を黄色の油状物であるＫＪＥＴ−１００（１６ｍｇ、５８％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2931, 2854, 1712, 1466, 1373, 1219, 949, 761, 656 ; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.52 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.40 (complex m, 4H), 1.74 (m, 2H), 1.57 (m, 2H), 1.43-1.29 (complex m, 6H), 1.04 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 211.9, 143.4, 115.3, 52.5, 42.3, 35.8, 29.11, 29.09, 27.6, 27.0, 23.8, 7.82; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 227.1759 [M+H]+, calcd for C12H23N2O2 : 227.1760.【０１０３】
（３）（Ｚ）−２−（８−オキソドデシル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１０２）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（５０ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）を黄色の油状物であるＫＪＥＴ−１０２（２６ｍｇ、５３％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2931, 2870, 1704, 1458, 1373, 1211, 962, 778, 648; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.57-1.51 (complex m, 4H), 1.43-1.26 (complex m, 8H), 0.89 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 211.6, 143.4, 115.3, 52.5, 42.7, 42.5, 29.1 (2C), 27.6, 27.0, 26.0, 23.7, 22.3, 13.8; 
HRMS (FAB, NBA) : m/z 255.2072 [M+H]+, calcd for C14H27N2O2 : 255.2073.【０１０４】
（４）（Ｚ）−２−（８−オキソトリコシル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１０６）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（５０ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）をＫＪＥＴ−１０６（４１ｍｇ、５３％）に無色固体として変換した。
mp 67.7 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2916, 2846, 1704, 1473, 1380, 1265, 1419, 1381, 1331, 1265, 1053, 937, 714, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.37 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.56 (complex m, 4H), 1.43-1.20 (complex m, 30H), 0.87 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 211.6, 143.4, 115.3, 52.5, 42.8, 42.7, 31.9, 29.7 (6C), 29.5 (2C), 29.4, 29.35, 29.26, 29.1, 27.6, 27.0, 23.9, 23.7, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 409.3794 [M+H]+, calcd for C25H49N2O2 : 409.3794.【０１０５】
（５）（Ｚ）−２−（１１−メチル−８−オキソドデシル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１１２）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（１０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）を黄色油状物であるＫＪＥＴ−１１２（６．７ｍｇ、６０％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1): 2931, 2862, 1709, 1469, 1369, 1319, 1265, 1053, 953, 771, 725, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.39 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.38 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.60-1.28 (complex m, 11H), 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 211.6, 143.4, 115.2, 52.4, 42.6, 40.8, 32.6, 29.1 (2C), 27.65, 27.56, 26.9, 23.7, 22.3 (2C);  
HRMS (FAB, NBA) m/z: 269.2229 [M+H]+, calcd for C15H29N2O2 : 269.2229.【０１０６】
（６）（Ｚ）−２−（８−オキソデカン−９−イン−１−イル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１２４）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（１０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を黄色固体であるＫＪＥＴ−１２４（５．８ｍｇ、６４％）に変換した。
mp 43.8 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3224, 2927, 2858, 2087, 1673, 1466, 1404, 1327, 1257, 1126, 1049, 945, 760, 717, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.54 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.20 (s, 1H), 2.59 (t, J = 7.5 Hz, 2H) 1.76 (tt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.69 (tt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.46-1.32 (complex m, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 187.4, 143.4, 115.2, 81.4, 78.3, 52.4, 45.3, 28.9, 28.7, 27.5, 26.9, 23.6; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 223.1446 [M+H]+, calcd for C12H19N2O2 : 223.1447.【０１０７】
（７）（Ｚ）−２−（８−オキソ−１０−フェニルデシル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１２５）
実施例１（４）グリニャール反応の一般手順に従って、化合物９（９０ｍｇ、０．３５０ｍｍｏｌ）を黄色の油状物であるＫＪＥＴ−１２５（４９．７ｍｇ、４７％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3031, 2927, 2854, 2333, 2198, 1967, 1709, 1604, 1469, 1412, 1369, 1327, 1265, 1057, 949, 744, 652; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.29-7.25 (m, 2H), 7.20-7.16 (m, 3H), 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.37 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.74 (tt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.56 (tt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.41 (m, 2H), 1.36-1.23 (complex m, 4H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 210.3, 143.4, 141.1, 128.4 (2C), 128.3 (2C), 126.0, 115.3, 52.5, 44.2, 43.0, 29.8, 29.1, 29.0, 27.6, 27.0, 23.7; 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 303.2067 [M+H]+, calcd for C18H27N2O2 : 303.2073. 【０１０８】
［実施例４］アルキル誘導体の合成【０１０９】
【化１５】
2019059132.tif 000021
Ａ）アルキル鎖誘導体の合成
Ｂ）ＫＪＥＴ−５２のアゾキシ部分の位置異性体であるＫＪＥＴ−５３の合成
（各ステップの反応条件）
ａ）化合物１０，ＡｃＯＨ，ＮａＢＨ３ＣＮ，ＣＨＣｌ３，０℃（収率：１８ａ；７７％，１８ｂ；８１％，１８ｃ；６６％（２ｓｔｅｐｓ））
ｂ）Ｈ２，Ｐｄ（ＯＨ）２，ＭｅＯＨ，その後、空気［Ｏ］，室温（収率：１９ａ；  ８５％，１９ｂ；７２％，１９ｃ；８２％）
ｃ）ＴＢＨＰ，ＶＯ（ａｃａｃ）２，ＤＣＭ，０℃，（収率：２０ａ；５５％，２０ｂ；７２％，２０ｃ；５０％）
ｄ）ＭｓＣｌ，Ｅｔ３Ｎ，ＤＣＭ，室温，その後、ＤＢＵ，３５℃（収率：ＫＪＥＴ−１１６；９１％，ＫＪＥＴ−５２；７１％，ＫＪＥＴ−１２０；７７％，ＫＪＥＴ−５３；７３％、２０ｂ；７２％，２１；７２％）【０１１０】
（１）ベンジル−２−ヘキシル−１−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジン−１−カルボキシラート（化合物１８ａ）
実施例１（５）還元的ヒドラジン化の一般的手順に従って、化合物１０（７．８５ｇ、３７．４ｍｍｏｌ）と化合物１７ａ（４．１５ｍＬ、３４．０ｍｍｏｌ）を無色油状物質である化合物１８ａ（７．６５ｇ、７７％）に変換させた。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2927, 2858, 2337, 1971, 1689, 1450, 1404, 1350, 1215, 1119, 1057, 980, 864, 752, 698; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.39-7.31 (complex m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.81 (brs, 2H), 3.62 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 2.88 (brs, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.36-1.18 (complex m, 6H), 0.87 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 156.5, 136.0, 128.4 (2C), 128.1 (2C), 127.8, 67.6, 61.9, 49.8 (2C), 31.5, 27.6, 26.6, 22.4, 13.9; 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 295.2021 [M+H]+, calcd for C16H27N2O3 : 295.2022.【０１１１】
（２）ベンジル−２−ドデシル−１−（２−ヒドロキシエチル）ヒドラジン−１−カルボキシラート（化合物１８ｂ）
実施例１（５）還元的ヒドラジン化の一般的手順に従って、化合物１０（１００ｍｇ、０．４７６ｍｍｏｌ）と化合物１７ｂ（１１２μＬ、０．４７６ｍｍｏｌ）を無色油状物である化合物１８ｂ（１４７ｍｇ、８１％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3410, 2924, 2854, 1697, 1450, 1350, 1119; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm):7.38-7.32 (complex m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.80 (brt, 2H), 3.60 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.43 (m, 2H), 1.31-1.25 (complex m, 18H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm):156.6, 136.0, 128.5 (2C), 128.2 (2C), 128.0, 67.7, 62.5, 49.8 (2C), 31.9, 29.6 (2C), 29.54, 29.46, 29.4, 29.3, 27.7, 27.0, 22.6, 14.1; HRMS (FAB, NBA) m/z 379.2963 [M+H]+, calcd for C22H39N2O3 : 379.2961.【０１１２】
（３）ベンジル−１−（２−ヒドロキシエチル）−２−オクタデシルヒドラジン−１−カルボキシラート（化合物１８ｃ）
ＤＭＳＯ（４２７μＬ、６．０１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（２５４μＬ、２．９６ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、−７８℃でシリンジにより滴下した。３０分間撹拌した後、反応混合物に、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の１−オクタデカノール（５００ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）溶液をシリンジで滴下して加え、混合物を−７８℃でさらに３０分間撹拌し、その後、Ｅｔ３Ｎ（１．５４ｍｌ、１１．１ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を０℃に加温し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５ｍＬ）で反応停止し、ＣＨＣｌ３（５ｍＬ、×２）で抽出した。２回分の抽出液を合わせた有機層を１０％ＮａＨＳＯ３水溶液（１０ｍＬ、×２）、Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１５ｍＬ）及び飽和食塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物１７ｃを精製することなく次の工程に用いた。０℃のＣＨＣｌ３（１５ｍｌ）中の化合物１０（４６６ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、粗生成物１７ｃのＣＨＣｌ３溶液（４ｍＬ）を添加し、次いで反応混合物を室温に温め、撹拌した。３０分間撹拌した後、混合物を０℃に冷却し、ＡｃＯＨ（２１０μＬ、３．７０ｍｍｏｌ）及びＮａＢＨ３ＣＮ（５８０ｍｇ、９．２４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌した後、反応混合物を溶液中のリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．２，２５ｍＬ）及び飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２／１）で精製して、ヒドラジン化合物18cを無色固体として得た(563mg、66%)。
mp 45.7 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2927, 2858, 2337, 1971, 1689, 1450, 1404, 1350, 1215, 1119, 1057, 980, 864, 752, 698; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.39-7.31 (complex m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.80 (brs, 2H), 3.61 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.44 (m, 2H), 1.37-1.18 (complex m, 30H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 156.6, 136.1, 128.6 (2C), 128.3 (2C), 128.0, 67.8, 62.6, 49.9 (2C), 31.9, 29.7 (7C), 29.63, 29.56, 29.49, 29.45, 29.3, 27.7, 27.0, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 463.3895 [M+H]+, calcd for C28H51N2O3 : 463.3900.【０１１３】
（４）（Ｅ）−２−（ヘキシルジアゼニル）エタン−１−オール（化合物１９ａ）
実施例１（２）アゾ生成の一般的手順に従って、化合物１８ａ（２．００ｇ、６．７９ｍｍｏｌ）を黄色油状物として化合物１９ａ（９１８ｍｇ、８５％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3417, 2927, 2862, 1508, 1435, 1415, 1319, 1192, 1061, 856, 756, 729; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 4.03 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.98 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.81 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.12 (brs, 1H), 1.79 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.39-1.26 (complex m, 6H), 0.88 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 69.9, 69.6, 60.2, 31.5, 27.5, 27.0, 22.5, 14.0; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 159.1502 [M+H]+, calcd for C8H19N2O : 159.1497.【０１１４】
（５）（Ｅ）−２−（ドデシルジアゼニル）エタン−１−オール（化合物１９ｂ）
実施例１（２）アゾ生成の一般的手順に従って、化合物１８ｂ（１．００ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を黄色の油状物として化合物１９ｂ（４６７ｍｇ、７３％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3456, 2924, 2854, 1743, 1458, 1373, 1219, 1057;
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm):4.03 (t, J = 4.0 Hz, 2H), 3.98 (t, J = 4.0 Hz, 2H) 3.81 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.21 (br, 1H) 1.79 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.33-1.25 (complex m, 18H), 0.87 (t, J = 7.0 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm):69.9, 69.6, 60.3, 31.9, 29.60 (2C), 29.57, 29.5, 29.4, 29.3, 27.6, 27.3, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z 243.2439 [M+H]+, calcd for C14H31N2O : 243.2436【０１１５】
（６）（Ｅ）−２−（オクタデシルジアゼニル）エタン−１−オール（化合物１９ｃ）
実施例１（２）アゾ生成の一般的手順に従って、化合物１８ｃ（５６０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を黄色固体として化合物１９ｃ（３２６ｍｇ、８２％）に変換した。
mp 51.8 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3390, 2916, 2846, 1462, 1057, 845, 725; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm): 4.04-3.99 (complex m, 4H), 3.81 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.80 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.38-1.20 (complex m, 30H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm): 69.8, 69.7, 60.4, 31.9, 29.69 (6C), 29.65 (2C), 29.6, 29.5, 29.38, 29.36, 27.6, 27.3, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z: 327.3372 [M+H]+, calcd for C20H43N2O : 327.3375.【０１１６】
（７）（Ｚ）−２−ヘキシル−１−（２−ヒドロキシエチル）ジアゼン  １−オキシド（化合物２０ａ）
化合物１９ａ（３４８ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）を、実施例１（３）アゾキシ化の一般的な手順に従って、黄色油状物として化合物２０ａ（２１０ｍｇ、５５％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3356, 2916, 2846, 2249, 2148, 1982, 1655, 1504, 1462, 1412, 1319, 1200, 1115, 1065, 1022, 876, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 4.31 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.71 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.39 (m, 2H), 1.34-1.28 (complex m, 4H), 0.89 (t, J = 7.5 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 70.5, 59.1, 52.0, 31.3, 27.2, 26.8, 22.4, 13.8; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 175.1447 [M+H]+, calcd for C8H19N2O2: 175.1447.【０１１７】
（８）（Ｚ）−２−ドデシル−１−（２−ヒドロキシエチル）ジアゼン  １−オキシド（化合物２０ｂ）及び（Ｚ）−１−ドデシル−２−（２−ヒドロキシエチル）ジアゼン  １−オキシド（化合物２１）
実施例１（３）アゾキシ化の一般的な手順に従って、化合物１９ｂ（１００ｍｇ、０．４１３ｍｍｏｌ）を無色固体である化合物２０ｂ（７６．８ｍｇ、７２％）及び黄色油状物である位置異性体２１（２３．５ｍｇ、２２％）に変換した。
化合物２０ｂ
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3371, 2916, 2846, 1743, 1540, 1373, 1196; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm):4.30 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 4.03 (m, 2H) 3.43 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.19 (t, J = 6.3Hz, 1H), 1.70 (dt, 7.5 Hz, 6.9 Hz, 2H), 1.33-1.20 (complex m, 18H), 0.86 (t, J = 7.0 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm):70.5, 59.6, 52.3, 32.0, 29.74 (3C), 29.65, 29.5 (2C), 27.9, 27.1, 22.8, 14.2; 
HRMS (FAB, NBA) m/z 259.2387[M+H]+, calcd for C14H31N2O2 : 259.2386
化合物２１
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3386, 2954, 2915, 2854, 1511, 1466, 1311, 1049; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm):4.20 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.95 (m, 2H) 3.58 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 1.96 (m, 2H),  1.89 (s, 1H), 1.3 3-1.25 (complex m, 18H), 0.88 (t, J = 7.3 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm):69.7, 56.0, 54.2, 31.8, 29.5 (2C), 29.4, 29.3, 29.2, 28.9, 27.7, 26.2, 22.6, 14.0; HRMS (FAB, NBA) m/z 259.2386 [M+H]+, calcd for C14H31N2O2 : 259.2386.【０１１８】
（９）（Ｚ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−２−オクタデシルジアゼン  １−オキシド（化合物２０ｃ）
化合物１９ｃ（１４０ｍｇ、０．４２９ｍｍｏｌ）を、実施例１（３）アゾキシ化の一般的な手順に従って無色固体の２０ｃ（７５ｍｇ、５０％）に変換した。
mp 62.3 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 3356, 2916, 2846, 2249, 2148, 1982, 1655, 1504, 1462, 1412, 1319, 1200, 1115, 1065, 1022, 876, 656; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 4.32 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.72 (dt, J = 7.5 Hz, 6.9 Hz, 2H), 1.39 (m, 2H), 1.38-1.20 (complex m, 28H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm): 70.3, 59.5, 52.2, 31.9, 29.70 (6C), 29.65 (2C), 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 27.8, 27.0, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 343.3319 [M+H]+, calcd for C20H43N2O2 : 343.3325.【０１１９】
（１０）（Ｚ）−２−ヘキシル−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１１６）
実施例１（６）ビニルアゾキシ基の一般的な製造手順に従って、化合物２０ａ（２００ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を黄色油状物であるＫＪＥＴ−１１６（１６３ｍｇ、９１％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2954, 2927, 2858, 1469, 1419, 1377, 1323, 1265, 1053, 953, 771, 729, 652; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 7.09 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.54 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.76 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.42 (m, 2H), 1.35-1.30 (complex m, 4H), 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 143.4, 115.3, 52.6, 31.5, 27.5, 27.0, 22.5, 14.0; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 157.1336 [M+H]+, calcd for C8H17N2O : 157.1341.【０１２０】
（１１）（Ｚ）−２−ドデシル−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−５２）
化合物２０ｂ（３０．０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を、実施例１（６）ビニルアゾキシ基の一般的な製造手順に従って、無色油状物であるＫＪＥＴ−５２（１９．８ｍｇ、７１％）に変換した。
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2924, 2854, 1745, 1466, 1365, 1219; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm):7.08 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 14.9 Hz, 1H) 5.47 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.52 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.40 (m, 2H) 1.35-1.16 (complex m, 16H), 0.86 (t, J = 7.2 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm):143.6, 115.3, 52.7, 32.0, 29.8, 29.75 (2C), 29.67, 29.5 (2C), 28.0, 27.2, 22.8, 14.2; 
HRMS (FAB, NBA) m/z 241.2280 [M+H]+, calcd for C14H29N2O : 241.2280.【０１２１】
（１２）（Ｚ）−２−オクタデシル−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−１２０）
実施例１（６）ビニルアゾキシ基の一般的な製造手順に従って、化合物２０ｃ（７０ｍｇ、０．２０４ｍｍｏｌ）を黄色固体であるＫＪＥＴ−１２０（５１ｍｇ、７７％）に変換した。
mp 46.3 ℃; 
IR (Diamond Prism) ν(cm-1) : 2954, 2927, 1469, 953, 792; 
1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm) : 7.10 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.54 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.76 (dt, J = 7.5, 6.9 Hz, 2H), 1.42 (m, 2H), 1.37-1.17 (complex m, 28H), 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 143.4, 115.3, 52.6, 31.9, 29.69 (6C), 29.65 (2C), 29.6, 29.5, 29.4 (2C), 27.8, 27.1, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 325.3223 [M+H]+, calcd for C20H41N2O : 325.3219.【０１２２】
（１３）（Ｚ）−２−ドデシル−１−ビニルジアゼン  ２−オキシド（ＫＪＥＴ−５３）
ビニルアゾキシ基の一般的な製造法に従って、化合物２１（１０ｍｇ、０．０３８７ｍｍｏｌ）を黄色油状物であるＫＪＥＴ−５３（６．７ｍｇ、７３％）に変換した。
IR (NaCl) ν (cm-1) : 2931, 2870, 1732, 1466, 1346, 1269, 1161, 976, 906, 725;  
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm) : 7.71 (dd, J = 15.5, 8.0 Hz, 1H), 5.71 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.16 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.97 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 1.39-1.25 (complex m, 20H), 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm) : 137.7, 117.5, 69.6, 31.9, 29.6 (2C), 29.5, 29.34, 29.32, 29.0, 27.9, 26.4, 22.7, 14.1; 
HRMS (FAB, NBA) m/z : 241.2270 [M+H]+, calcd for C14H29N2O : 241.2280.【０１２３】
［実施例５］その他の誘導体の合成
ＴＨＦ（０．５Ｍ）中のワインレブアミドの溶液に、０℃でＴＨＦ（０．５Ｍ）中の臭化エチニルマグネシウム溶液を添加した。反応物を同じ温度で１５〜３０分間撹拌した。０℃で飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応を停止させた。混合物をＣＨＣｌ３で３回抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルで精製して、所望の化合物を得た。【０１２４】
（１）（Ｚ）-１-（ヒドロキシエチル）-２-（８-オキソデカン-９-インー１-イル）-ジアゼン  １-オキシド（ＫＪＥＴ−２００）
8.9 mg, 49%, oil
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 4.31 (m, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.44 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.21 (s, 1H), 2.58 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.74-1.65 (complex m, 4H), 1.43-1.31 (complex m, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 187.5, 81.4, 78.3, 70.4, 59.5, 52.0, 45.3, 28.9, 28.7, 27.5, 26.8, 23.6; 
HRMS (ESI) m/z : 263.1365 [M+Na]+, calcd. for C12H20N2NaO3 : 263.1372. 【０１２５】
（２）（Ｚ）-１-（ヒドロキシエチル）-２-（８-オキソデカン-９-インー１-イル）-ジアゼン  ２-オキシド（ＫＪＥＴ−２０１）
67.5 mg, 78%, oil
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm) : 4.18 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.56 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.22 (s, 1H), 3.57 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.06 (brs, 1H), 1.95 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.36-1.28 (complex m, 6H); 
13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 187.4, 81.4, 78.5, 69.6, 60.2, 54.2, 45.2, 28.6, 28.5, 27.6, 26.0, 23.5; 
HRMS (ESI) m/z : 263.1365 [M+Na]+, calcd. for C12H20N2NaO3 : 263.1372.【０１２６】
（３）（Ｚ）-２-（８-オキソデカン-９-インー１-イル）-ビニルジアゼン  ２-オキシド（ＫＪＥＴ−２０２）
23.0 mg, 61%, oil
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ(ppm) : 
HRMS (ESI) m/z : 245.1270 [M+Na]+, calcd. for C12H18N2NaO2 : 245.1266. 【０１２７】
（４）（Ｚ）-２-（８-ヒドロキシデカン-９-インー１-イル）-ビニルジアゼン-２-オキシド（ＫＪＥＴ−２０３）
メタノール（５３０μＬ）中のＫＪＥＴ−１２４（５．９ｍｇ、２６．５μモル）の溶液に、０℃でＣｅＣｌ３・７Ｈ２Ｏ（１５．９ｍｇ、４２．７μｍｏｌ）を加えた。０℃で１０分間撹拌した後、反応混合物に０℃でＮａＢＨ４（２．７ｍｇ、７１．４μｍｏｌ）を添加した。さらに１０分間撹拌した後、反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１．０ｍＬ）でクエンチし、得られた混合物をＣＨＣｌ３（１．０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製して、ＫＪＥＴ−２０３（６．０ｍｇ、２６．５μｍｏｌ）を無色油状物として得た。
HRMS (FAB, NBS) m/z : [M+H]+ calcd for C12H21O2N2 : 225.1603 ; found, 225.1601.【０１２８】
（６）Ｚ）−２−（４−オキソヘキサン−５−イン−１−イル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−２０４）及び（Ｅ）−２−（４−オキソヘキサン−５−イン−１−イル）−１−ビニルジアゼン  ２−オキシド（ＫＪＥＴ−２０５）
（６−１）４-ヒドロキシ−Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルブタナミドの合成【０１２９】
【化１６】
2019059132.tif 000022
【０１３０】
ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）中のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシアミン（１０．２ｇ、１０４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でトリメチルアルミニウム（ｎ−ヘキサン中１．０７Ｍ、９７．７ｍＬ、１０４．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌した後、混合物にＣＨ２Ｃｌ２（３２ｍＬ）中のγ−ブチロラクトン（２．０ｇ、２３．２３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で１時間さらに撹拌し、１．０Ｍ  ＨＣｌ水溶液（８０ｍＬ）で反応を停止させた。得られた混合物をＣＨＣｌ３（２００ｍＬ）で６回抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗４-ヒドロキシ−Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルブタナミドを、さらに精製することなく次の反応に使用した。分析データは、文献（Ａｄｖ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃａｔａｌ．２００７，３４９，１５７−１６０）と同一と同定された。【０１３１】
（６−２）ベンジル-１-（２-ヒドロキシエチル）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］-４-オキシブチル）-ヒドラジン-１-カルボキシラート【０１３２】
【化１７】
2019059132.tif 000023
【０１３３】
ＣＨ２Ｃｌ２（８９ｍＬ）中の４-ヒドロキシ−Ｎ-メトキシ-Ｎ-メチルブタナミド（１．３１ｇ、８．９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＳＯ（６．３ｍＬ、８８．７ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（７．８ｍＬ、４４．８ｍｍｏｌ）および三酸化硫黄−ピリジン錯体（７．１ｇ、４４．６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で１時間撹拌した後、反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）で終了させた。得られた混合物をヘキサン／酢酸エチル（１／１，２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を０．５Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）、飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、透明な黄色の油状物として粗アルデヒドを得た。この粗物質をさらに精製することなく次の反応に使用した。
ＣＨＣｌ３（９０ｍＬ）中の化合物１０（２．２ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で粗アルデヒド（８．９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌後、混合物にＡｃＯＨ（１．０ｍＬ、２５．０ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ３ＣＮ（２．２ｇ、３５．０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。反応混合物を水中のリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．２，１９０ｍＬ）、飽和食塩水（１９０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ  ＝５０：１）で精製して、ベンジル-１-（２-ヒドロキシエチル）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−４−オキシブチル）−ヒドラジン−１−カルボキシラート（２．１２ｇ、７０％）を無色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 7.34 (m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.61 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.35 (brs, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.95 (m, 2H), 2.50 (m, 2H), 1.80 (m, 2H). 
HRMS (ESI) m/z : [M+Na]+ calcd for C16H25O5N3Na : 362.16919 ; found, 362.16947.【０１３４】
（６−３）（Ｅ）-４-［（２-ヒドロキシエチル）ジアゼニル］-Ｎ-メトキシ-Ｎ-メチルブタナミド【０１３５】
【化１８】
2019059132.tif 000024
【０１３６】
メタノール溶液（５．７ｍＬ）に、０℃で１０％Ｐｄ（ＯＨ）２（７４．９ｍｇ、０．５３５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。得られた懸濁液にＣｂｚ−ヒドラジン（３６３ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）のメタノール（５．０ｍＬ）溶液を加えた。溶液を水素雰囲気に供し、室温で２時間撹拌した。出発物質が消費された後、混合物をセライトパッドで濾過し、メタノールとＣＨＣｌ３の混合物（１／１０、ｖ／ｖ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。粗生成物を、ヒドラジンが消費されるまで空気に曝すことによって室温で直ちに酸化させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３：メタノール＝５０：１）で精製して（Ｅ）-４-［（２-ヒドロキシエチル）ジアゼニル］−Ｎ−メトキシ−Ｎ-メチルブタナミド（１４８．３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を黄色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 4.05 (m, 2H), 4.01 (m, 2H), 3.88 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 2.54 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.25 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.29 (q, J = 6.9 Hz, 2H). 
HRMS (FAB, NBS) m/z : [M+H]+ calcd for C8H18O3N3 : 204.1348 ; found, 204.1349.【０１３７】
（６−４）（Ｚ）-１-（２-ヒドロキシエチル）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ジアゼン  １-オキシド及び（Ｚ）-１-（２-ヒドロキシエチル）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ジアゼン  ２-オキシド【０１３８】
【化１９】
2019059132.tif 000025
【０１３９】
ＣＨ２Ｃｌ２（２．７ｍＬ）中のアゾ化合物（５４．１ｍｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｔｉ（Ｏ−ｉＰｒ）４（４０μＬ、０．１３７ｍｍｏｌ）およびｔ−ＢｕＯＯＨ（デカン中５．５Ｍ、１２０μＬ、０．６６０  ｍｍｏｌ）を０℃、Ｎ２雰囲気下で加えた。０℃で１９時間撹拌した後、反応混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３．０ｍＬ）に添加し、得られた溶液をＣＨＣｌ３（２ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３：メタノール＝５０：１）により精製して、アゾキシ化合物（４３．０ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）を位置異性体混合物として得た。
Ｍａｊｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 4.31 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.58 (m, 2H), 2.10 (q, J = 6.9 Hz, 2H). 
HRMS (ESI) m/z : [M+Na]+ calcd for C8H17O4N3Na : 242.11168 ; found, 242.11115. 
Ｍｉｎｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 4.31 (m, 2H), 3.94 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.59 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.55 (m, 2H), 2.31 (q, J = 6.9 Hz, 2H). 【０１４０】
（６−５）（Ｚ）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ビニルジアゼン  １-オキシド及び（Ｚ）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ビニルジアゼン  ２-オキシド【０１４１】
【化２０】
2019059132.tif 000026
【０１４２】
ＣＨ２Ｃｌ２（１．７ｍＬ）中のアゾキシエチルアルコール（３７．５ｍｇ、１７１μｍｏｌ）の溶液に、０℃でＥｔ３Ｎ（５０μＬ、３５９μｍｏｌ）およびＭｓＣｌ（２０μＬ、２５８μｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、混合物をＤＢＵ（８０μＬ、５３５μｍｏｌ）に加え、３５℃で３分間攪拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２．０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２．０ｍＬ）、飽和食塩水（２．０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３：メタノール＝１００：１）で精製して、（Ｚ）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ビニルジアゼン  １-オキシド及び（Ｚ）-２-［４-（Ｎ-メトキシ−Ｎ-メチルアミノ）-４-オキソブチル］-ビニルジアゼン  ２-オキシド（２３．７ｍｇ、１１８μｍｏｌ、６９％）を位置異性体混合物として得た。
Ｍａｊｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 7.10 (dd, J = 14.9, 8.0 Hz, 1H), 6.42 (J = 14.9 Hz, 1H), 5.50 (J = 7.5 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.60 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.58 (m, 2H), 2.12 (q, J = 6.9 Hz, 2H). 
HRMS (ESI) m/z : [M+Na]+ calcd for C8H17O4N3Na : 242.11168 ; found, 242.11115. 
Ｍｉｎｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ  ：
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 7.71 (dd, J = 15.5, 8.0 Hz, 1H), 5.72 (J = 15.5 Hz, 1H), 5.37 (J = 8.0 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.55 (m, 2H), 2.31 (q, J = 6.9 Hz, 2H).【０１４３】
（６−６）（Ｚ）−２−（４−オキソヘキサ−５−イン−１−イル）−１−ビニルジアゼン  １−オキシド（ＫＪＥＴ−２０４）及び（Ｅ）−２−（４−オキソヘキサ−５−イン−１−イル）−１−ビニルジアゼン  ２−オキシド（ＫＪＥＴ−２０５）【０１４４】
【化２１】
2019059132.tif 000027
【０１４５】
ＴＨＦ（１．２ｍＬ）中のビニルアゾキシ化合物（２３．７ｍｇ、１１８μｍｏｌ）の溶液に、０℃で臭化エチニルマグネシウム（７１０μＬ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１．０ｍＬ）で反応停止させた。得られた混合物をＣＨＣｌ３（１．０ｍＬで３回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製して、位置異性体混合物としてＫＪＥＴ−２０４及びＫＪＥＴ−２０５（１０．２ｍｇ、６１．４μｍｏｌ）を得た。
Ｍａｊｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 7.10 (dd, J = 15.2, 7.5 Hz, 1H), 6.42 (J = 15.5 Hz, 1H), 5.52 (J = 7.5 Hz, 1H), 3.58 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.27 (s, 1H), 2.76 (m, 2H), 2.16 (q, J = 6.9 Hz, 2H). 
HRMS (FAB, NBS) m/z : [M+H]+ calcd for C8H11O2N2 : 167.0821 ; found, 167.0819.
Ｍｉｎｏｒ  ｉｓｏｍｅｒ
1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ) : 7.70 (dd, J = 15.5, 8.0 Hz, 1H), 5.74 (J = 15.5 Hz, 1H), 5.40 (J = 8.0 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.23 (s, 1H), 2.76 (m, 2H), 2.32 (q, J = 6.9 Hz, 2H).【０１４６】
［試験例１］各種生物学的アッセイ方法
（統計分析）
本実施例において、平均値間の差は、両側ｔ検定によって評価した。０．０５未満のＰ値を統計的に有意であるとした。【０１４７】
（１）細胞と培養
ＲＩＫＥＮ  ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅ  ｃｅｎｔｅｒ（茨城、日本）及び長崎大学（長崎、日本）から、それぞれＡＴＮ−１及びＫＫ−１（成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫細胞株）を入手した。ＫＭＭ−１及びＵ２６６（多発性骨髄腫細胞株）、Ｋ−５６２（慢性骨髄性白血病細胞株）、ＦＬ（羊膜由来細胞株）、及びＨｅＬａ（子宮頸癌細胞株）は、国立研究開発法人  医薬基盤・健康・栄養研究所  ＪＣＲＢ細胞バンク又は林原生物化学研究所・藤崎細胞センター（岡山、日本）から入手した。古典的ホジキン病（ｃＨＬ）細胞株（Ｌ５４０及びＫＭＨ２）は、Ｇｅｒｍａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ＧｍｂＨ（Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツ）から購入した。ＦＬ細胞及びＨｅＬａ細胞は、それぞれ１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）あるいは最小必須培地（ＭＥＮ）中に、抗生物質を添加して、３７℃、５％ＣＯ２で培養した。他の細胞は、２０％ＦＢＳの濃度で培養したＬ５４０以外は１０％ＦＢＳを添加した、抗生物質を含むＲＰＭＩ１６４０中、３７℃、５％ＣＯ２で培養した。ＡＴＮ−１及びＫＫ−１は、それぞれ、１×非必須アミノ酸及び１０ｎｇ／ｍｌの組換えヒトＩＬ−２と共に培養した。【０１４８】
（２）化合物の調製
各化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して用いた。これらの化合物は、それぞれの実験において示された濃度で使用した。腫瘍壊死因子（ＴＮＦα）は、Ｐｅｐｒｏ  Ｔｅｃｈ  ＩＮＣ．（Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ、ＮＪ）から購入し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ（−））で溶解し、示された濃度で使用した。【０１４９】
（３）プラスミド及び突然変異誘発
野生型ヒトＲｅｌＡ  ｃＤＮＡをｐＥＧＦＰ−Ｎ１発現ベクター（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）に挿入した。ｐ５０、ｐ５２、及びｃ−Ｒｅｌの野生型ヒトｃＤＮＡをＫＭＨ２細胞からクローニングし、それぞれ、ｐＥＧＦＰ−Ｎ１発現ベクター（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）に挿入した。また、ヒトＩκＢ及びＲｅｌＢ  ｃＤＮＡの発現ベクターは、東京大学のＪ．Ｉｎｏｕｅ博士から提供いただいたベクターを用いた。クローニング領域のアミノ酸番号、及びＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）のアクセッション番号は、以下のとおりである：ＲｅｌＡ（アミノ酸１−５５１、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＭ＿０２１９７５）、ｃ−Ｒｅｌ（アミノ酸１−６１９、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＭ＿００２９０８）、ｐ５０（アミノ酸１−４３６、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＭ＿００３９９８）、及びｐ５２（アミノ酸１−４０５、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＭ＿００１０７７４９４）。Ｋｕｎｋｅｌらによる突然変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ  ＴＡら，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  １９９１；２０４：１２５−１３９．）を使用して、ＲｅｌＡ（Ｃ３８Ｓ）（ＲｅｌＡの３８−システインがセリンで置換されている）の変異タンパク質の発現ベクターを得た。【０１５０】
（４）免疫染色
サイトスピン（Ｃｙｔｏ−Ｔｅｋ、ＳＡＫＵＲＡ、東京、日本）により塗抹された細胞を冷メタノールで１０分間固定した。ＰＢＳ（−）で３分間の洗浄を３回行った後、サンプルを５％正常ヤギ血清で１時間ブロックし、活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）または抗インポーチンα３  ／  ＫＰＮＡ４  ＮＢ１００−１３７４  ヤギ抗体  （ＮＯＶＵＳ、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）と共に４℃で一晩インキュベートした。次いで、サンプルをＰＢＳ（−）で３分間の洗浄を３回行い、二次抗体であるＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）またはＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８ロバ抗ヤギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）と共に室温で１時間インキュベートした。核染色はＤＡＰＩ溶液（同仁科学、熊本、日本）を用いた。ＰＢＳ（−）で３分間の洗浄を３回行った後、ＯＬＹＭＰＵＳ  ＢＸ６１免疫蛍光顕微鏡（オリンパス株式会社、東京、日本）を用いて倍率４００倍で蛍光シグナルを検出した。【０１５１】
（５）蛍光によるＮＦ−κＢタンパク質の可視化
ＮＦ−κＢ阻害剤で処理した後のＮＦ−κＢファミリータンパク質の局在を調べるために、（３）において構築した各緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）融合ベクタープラスミド１μｇとＩκＢα発現ベクター１μｇをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して製造業者の指示に従ってＨｅＬａ細胞（１×１０５細胞）に導入した。ＨｅＬａ細胞をポリ−Ｌ−リジンコートカルチャーカバーグラス（松浪硝子工業株式会社、大阪、日本）に播種し、トランスフェクションに使用した。さらに１８時間培養した後、０．２μｇ／ｍｌのＫＪＥＴ−１２４及びその誘導体で２時間前処理した細胞と、前処理しなかった細胞とを用意し、得られた細胞を２０ｎｇ／ｍｌのＴＮＦαで２０分間刺激した。その後、細胞をＰＢＳ（−）で３回洗浄し、４％パラホルムアルデヒドリン酸緩衝液（Ｗａｋｏ、大阪、日本）で１０分間固定し、さらにＰＢＳ（−）で３回洗浄した。続いて、Ｐｅｒｍａ  Ｆｌｕｏｒｏ  ａｎｔｉｆａｄｅ試薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｓｈａｎｄｏｎ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ）を用いてスライド上に載せた。蛍光シグナルは、ＯＬＹＭＰＵＳ  ＢＸ６１免疫蛍光顕微鏡を用いて検出した。【０１５２】
（６）レポーター遺伝子アッセイ
ＮＦ−κＢ活性を検出するためのデュアルルシフェラーゼアッセイを、以前に記載した方法に従って、κＢ部位依存性ルシフェラーゼ構築物ｐ３×［κＢ］−Ｌｕｃを用いて行った（Ｈｏｒｉｅ  Ｒら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２００２；２１（１６）：２４９３−２５０３）。合計０．２μｇのプラスミドを、１×１０５個の細胞にＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ  ２０００  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて導入した。１６時間後、導入された細胞を、示された濃度のＮＦ−κＢ阻害剤で処理し、又は当該処理を行わない細胞をコントールとし、次いでＴＮＦαで処理した。ルシフェラーゼ活性は、デュアルルシフェラーゼアッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を用いて、製造者の指示に従って測定した。【０１５３】
（７）細胞生存率アッセイ
細胞生存率に対するＮＦ−κＢ阻害剤の効果を、以前に記載された方法に従ってＭＴＴ法によってアッセイした（Ｈｏｒｉｅ  Ｒら（２００２）前掲）。示された濃度及び時点でＮＦ−κＢ阻害剤又はビヒクル（ＤＭＳＯ）（対照）と共にインキュベートした後、１．５×１０４個の細胞を３−（４，５ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラナトリウムブロミド（ＭＴＴ）溶液で処理し、マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、ＣＡ）を用いて、参照波長５７０ｎｍ、及び試験波長４５０ｎｍで測定した。細胞生存度は、ビヒクル処理対照試料に対するパーセンテージとして表した。【０１５４】
（８）免疫沈降
ｃＨＬ細胞株（ＫＭＨ２）（０．７５Ｘ１０７／１５ｍｌ）に対してＫＪＥＴ−１２４を０．２μｇ／ｍｌの濃度で加え、５％  ＣＯ２、３７℃で６時間培養を行った。細胞を回収後、氷上で冷やしたＰＢＳ（−）１０ｍｌで２回洗浄、冷やしたＴＮＥ  バッファー１ｍｌで細胞を溶解、氷に１５分置いた後、４℃で１時間、ゆっくりと混和した。そこにＴＮＥバッファーで洗浄したプロテインＧ−セファロース  （Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ、英国）を５０μｌ添加、４℃で一晩ゆっくりと混和したあと遠心して上清を回収した。これに抗ＮＦ−κＢ  ｐ６５マウス抗体（Ｆ−６）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚｕ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）３μｇを添加し４℃で１時間、ゆっくりと混和した。その後ＴＮＥバッファーで洗浄したプロテインＧ−セファロース（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を２０μｌ添加し４℃で１時間ゆっくりと混和し遠心した。上清を除去後プロテインＧ−セファロース（Ａｍｅｒｓｈａｍ）にＴＮＥバッファー１ｍｌを加え洗浄（計６回）後、５ｘＳＤＳ−ＰＡＧＥサンプルバッファーを添加した。【０１５５】
（９）ウエスタンブロット
１０％ＳＤＳページゲル（ＴＥＦＣＯ、東京、日本）を使用してサンプルを泳動後、セミドライブロット（日本エイドー）を用い、１８０ｍＡで３時間かけてＰＶＤＦメンブレン（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に転写した。ＰＶＤＦメンブレンを水で軽く３回洗浄後、ＴＢＳＴに溶解した５％ＢＳＡを用いて室温で１時間以上ブロッキングを行った。一次抗体反応は４℃で一晩行った。使用した一次抗体は以下の通りである。抗インポーチンα３／ＫＰＮＡ４  ＮＢ１００−１３７４ヤギ抗体（ＮＯＶＵＳ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）、抗ＮＦ−κＢ  ｐ６５（Ｃ−２０）ウサギ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚｕ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）。ＰＶＤＦメンブレンをＴＢＳＴバッファーで１０分３回洗浄後、二次抗体反応を室温で一時間以上おこなった。使用した二次抗体は以下の通りである。
抗ヤギＩｇＧ  ＡＬＰ標識ロバ抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、抗ウサギＩｇＧ  ＡＬＰ  標識ロバ抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）。ＰＶＤＦメンブレンをＴＢＳＴバッファーで１０分３回洗浄後、ＴＢＳバッファーで３分２回軽く洗浄、さらに水で軽く１回洗浄後、ウエスタンブルーアルカリフォスファターゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて発色反応を行った。【０１５６】
［試験例２］ｃＨＬ細胞株（Ｌ５４０）に対する反応性を有する化合物のスクリーニング
新規ＮＦ−κＢ阻害剤候補をスクリーニングするために、強力で構成的なＮＦ−κＢ活性を有するｃＨＬ細胞株（Ｌ５４０）の生存率へ影響を与える候補物質を探索した。ホジキンリンパ腫細胞株Ｌ５４０を、１０μｇ／ｍｌの濃度で候補化合物の存在下又は非存在下で２４時間又は４８時間処理し、ＭＴＴアッセイに供した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を対照として用いた。複数回同じ実験を行い、結果の再現性を確認した。細胞生存に影響を与える化合物としてジエタシンＡが見つかった。対照を１００としたジエタシンＡ処理ｃＨＬ細胞株の生存率を図３に棒グラフで示す。【０１５７】
次いで、ジエタシンＡのＮＦ−κＢに対する阻害効果を試験した。Ｌ５４０をジエタシンＡで処理した後、免疫染色を行った。Ｌ５４０をジエタシンＡ（１０μｇ／ｍｌ）で５時間又は２４時間処理した。細胞をガラススライド上にサイトスピンし、活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（ＲｅｌＡのＮＬＳを認識する）（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を用いて免疫染色することにより分析した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を陰性対照として用いた。オリジナルの倍率は４００倍とした。図４に示すとおり、ジエタシンＡは、遊離ＮＦ−κＢの核局在化を阻害することを示唆するパターンを示した。強力で構成的なＮＦ−κＢ活性化を有するＬ５４０において、ＩκＢはＩＫＫによるリン酸化によりプロテアソームで常に分解されており、そのため通常はＬ５４０内のＮＦ−κＢ（ＲｅｌＡ）のＮＬＳは露出されている。Ｌ５４０においてＩＫＫを阻害すればＩκＢの分解が抑制され、その結果、ＮＦ−κＢ（ＲｅｌＡ）のＮＬＳは露出されず、ＲｅｌＡのＮＬＳを認識する活性化ＲｅｌＡに対する抗体では染色されないはずである。よって、図４が示す、ジエタシン処理したＬ５４０細胞のＲｅｌＡのＮＬＳに対する抗体（活性化ＲｅｌＡに対する抗体）による免疫染色の結果は、ジエタシンがＩＫＫを阻害することなく、ＮＬＳが露出した状態でＮＦ−κＢ（ＲｅｌＡ）の核内への移行が阻害されていること、さらにＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡとインポーチンの結合を阻害している可能性を示唆する。よって、本実施例により本発明の化合物がＩＫＫによるＩκＢの分解を阻害することなく、ＮＦ−κＢの核移行を阻害することが示された。【０１５８】
［試験例３］ジエタシンＡの誘導体のＮＦ−κＢ阻害活性
ジエタシンＡの既知の誘導体、すなわちジエタシンＢ、及びジエタシンＣ、並びに新たに合成されたジエタシンＡの６８種類の誘導体のＡＴＬに由来し、強力かつ構成的なＮＦ−κＢ活性を有するＡＴＮ−１細胞への影響を調べた。ＡＴＮ−１細胞を、種々の濃度のジエタシンＡ又はその誘導体化合物の存在下又は非存在下で、２４時間又は４８時間処理し、ＭＴＴアッセイに供した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を陰性対照として用いた。陰性対照を１００とした生存率から、各化合物の有効用量（ＥＤ５０）を計算した。そのうち、ＡＴＮ−１細胞に対する抑制効果が陰性対照と比較して５０％以上である３１種の化合物を選択した。これらの化合物は、強力かつ構成的なＮＦ−κＢ活性化を伴わないＫ５６２細胞の生存率に対して顕著な抑制効果を示さなかった。Ｋ５６２細胞に対する抑制効果は、ビヒクル処理陰性対照と比較して、２４時間時点で２０％未満であった。これらの化合物の化学構造及び有効用量（ＥＤ５０）を表５に示す。【０１５９】
【表５】
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【０１６０】
ジエタシンＡ、ジエタシンＢ，ＫＪＥＴ−１、ＫＪＥＴ−５８、ＫＪＥＴ−６３、ＫＪＥＴ−７０、ＫＪＥＴ−８６、及びＫＪＥＴ−１２４でＬ５４０を処理した後、強力で構成的なＮＦ−κＢ活性化を有するｃＨＬ細胞株（Ｌ５４０）において活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）用いての免疫染色を行った。Ｌ５４０細胞をジエタシンＡ又はその誘導体化合物で５時間処理し、採取した。細胞をガラススライド上にサイトスピンし、活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を用いて免疫染色することにより分析した。使用した各化合物の濃度は以下の通りである。ジエタシンＡ：１０μｇ／  ｍｌ、ジエタシンＢ：６μｇ／ｍｌ、ＫＪＥＴ−１：５μｇ／ｍｌ、ＫＪＥＴ−５８：３μｇ／ｍｌ、ＫＪＥＴ−６３：３μｇ／  ｍｌ、ＫＪＥＴ−７０：３μｇ／ｍｌ、ＫＪＥＴ−８６：１．５μｇ／ｍｌ、ＫＪＥＴ−１２４：０．２μｇ／ｍｌ。強力で構成的なＮＦ−κＢ活性を持たないＫ５６２細胞及びビヒクル単独で処理したＬ５４０細胞を対照として用いた。オリジナル倍率は４００倍とした。試験したすべての化合物は、ジエタシンＡと同様に、遊離ＮＦ−κＢの核局在を阻害することを示唆するパターンを示した（図５）。使用した各化合物の濃度を考慮すると、ＫＪＥＴ−１２４は試験した化合物の中で最も強力なＮＦ−κＢ阻害効果を示した。【０１６１】
［試験例４］ジエタシン及びその誘導体の、ＴＮＦαによるＮＦ−κＢ誘導活性阻害
ＴＮＦαによるＮＦ−κＢ活性誘導に対するジエタシンＡ、Ｃ、Ｄ及びＫＪＥＴ−１２４の効果を、レポーター遺伝子アッセイによって調べた。ＦＬ細胞（０．８×１０５細胞）に３×κＢルシフェラーゼレポーターをトランスフェクションし、一晩培養した。ジエタシンＡ又はその誘導体を５又は１０μｇ／ｍｌの濃度で培地に添加した。４時間培養後、ＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）又は等量のＰＢＳ（−）を加え、３時間培養し、細胞を回収してルシフェラーゼアッセイに供した。その結果、ジエタシンＡ、Ｃ、Ｄ及びＫＪＥＴ−１２４は、ＴＮＦαによるＮＦ−κＢ活性誘導をほぼ完全に阻害した（図６）。【０１６２】
［試験例５］ＫＪＥＴ−１２４によるＴＮＦα媒介性ＮＦ−κＢ活性誘導の用量依存的阻害
ＦＬ細胞（０．６×１０５細胞）に３×κＢルシフェラーゼレポーターをトランスフェクションし、一晩培養した。ＫＪＥＴ−１２４を０（非添加）、０．５、１．０、２．５、５．０、７．５、１０μｇ／ｍｌで培地に添加した。２時間培養後、ＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）又は等量のＰＢＳ（−）を加え、さらに３時間培養し、細胞を回収してルシフェラーゼアッセイに供した。ＫＪＥＴ−１２４には、ＴＮＦα媒介性のＮＦ−κＢ活性誘導を用量依存的に阻害する効果が示された（図７）。【０１６３】
［試験例６］ＫＪＥＴ−１２４によるＮＦ−κＢとインポーチンαの結合の阻害。
ＮＦ−κＢ  はＩκＢと遊離した後インポーチンαと結合し、さらにインポーチンβとも複合体を形成して核内に移行する。ＫＪＥＴ−１２４（０．２μｇ／ｍｌ）で処理あるいはコントロールとしてビヒクルで処理したｃＨＬ細胞株（ＫＭＨ２）を用い、ＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡ（ｐ６５）に対する抗体で免疫沈降を行なった後、インポーチンα３に対するウエスタンブロットでＮＦ−κＢ  ｐ６５と会合するインポーチンαの量の差を検討した。（＋）はＫＪＥＴ−１２４処理あり、（−）はＫＪＥＴ−１２４処理なし（ビヒクル処理）を示す。図８Ａ上段に示すようにＫＪＥＴ−１２４処理によりＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡと会合するインポーチンα３の量は減少している。中段のＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡのウエスタンブロットは免疫沈降されたＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡ量がＫＪＥＴ−１２４処理の有無でほぼ同量である事を示す。Ｉｍａｇｅ  Ｊ  １．５０ｉを用いて２段目のパネルの免疫沈降しているＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡ全体で補正して、上段で示した免疫沈降されたインポーチンα３の量を反映するシグナルの強さを計算すると、ＫＪＥＴ−１２４処理なしのコントロールを１００％としたときＫＪＥＴ−１２４処理ありは６５．１％であった。以上のことはジエタシンＡおよびその誘導体のＮＦ−κＢ核移行阻害機序がＮＦ−κＢとインポーチンαの結合阻害という、核移行の初期の段階で起きていることを示す。阻害時にＮＦ−κＢ  ＲｅｌＡが細胞質にび漫性に分布することも本阻害剤が核移行の初期段階での阻害を示しており（図４）、実験結果に合致するものである。一方図８Ｂに示すように細胞内のインポーチンα３の分布はＫＪＥＴ−１２４の処理の有無により影響を受けない。このことはＫＪＥＴ−１２４はインポーチンα３全体を阻害するのではなく、あくまでＮＦ−κＢのインポーチンα３を介した核内への輸送のみを特異的に阻害していることを示す。【０１６４】
［試験例７］ＫＪＥＴ−１２４の標的ドメインの同定
ＫＪＥＴ−１２４を用いてジエタシンとその誘導体の分子標的を確認した。ＲｅｌＡのＣｙｓ−３８は、ＮＦ−κＢファミリータンパク質の全てで保存されている（図９Ａ）。ＨｅＬａ細胞に、ＧＦＰに融合した野生型（ＷＴ）又はＲｅｌＡ  Ｃ３８Ｓ変異体（ＲｅｌＡの３８番目のシステインがセリンに置換された変異体）のｃＤＮＡ発現ベクター及びＩκＢαの発現ベクターと共にトランスフェクションした。【０１６５】
（５）に記載された方法に準じてＨｅＬａ細胞を処理し、ＲｅｌＡ分布のＴＮＦ−α依存性変化を観察した。オリジナル倍率は４００倍とした。ＲｅｌＡ  Ｃ３８Ｓ変異体では、ＫＪＥＴ−１２４のＲｅｌＡに対する効果が失われた（図９Ｂ）。この結果から、ＫＪＥＴ−１２４によるＲｅｌＡ核局在化の阻害には、ＲｅｌＡのＮ末端からの３８番目のシステインが関与することが示された。ＩＫＫの阻害剤はＮＦ−κＢとＩκＢとの結合を維持させることにより、ＲｅｌＡのＮ末端からの３８番目のシステインの変異にかかわらずＮＦ−κＢの核内移行を阻害するのに対し、ＫＪＥＴ−１２４によるＲｅｌＡの核局在化の阻害は、ＲｅｌＡのＮ末端から３８番目のシステインに依存して変化することから、本結果によりＫＪＥＴ−１２４が、ＩＫＫによるＩκＢの分解を阻害することなく、ＲｅｌＡのＮ末端からの３８番目のシステインを介して、ＲｅｌＡとインポーチンαの結合を阻害することによりＲｅｌＡの核内局在化を阻害することが示された。【０１６６】
［試験例８］ＫＪＥＴ−１２４のＮＦ−κＢファミリータンパク質（転写促進タンパク質（ＲｅｌＡ、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢ）及び転写抑制タンパク質（ｐ５０及びｐ５２））に対する効果
ＨｅＬａ細胞に、ＧＦＰ融合ｃ−Ｒｅｌ、ＲｅｌＢ、ｐ５０又はｐ５２の発現プラスミドをＩκＢαの発現プラスミドと共にトランスフェクトションした。【０１６７】
（５）に記載された方法に準じてＨｅＬａ細胞を処理し、ＮＦ−κＢ分布のＴＮＦα依存性変化を観察した。オリジナルの倍率は４００倍とした。
ＫＪＥＴ−１２４処理は、ＲｅｌＡ、ｃ−Ｒｅｌ及びＲｅｌＢのＴＮＦ−α依存性核局在を効率的に阻害したが、ｐ５０及びｐ５２のＴＮＦ−α依存性核局在は阻害しなかった（図１０Ａ）。この結果はＲｅｌＡの３８番目のシステインから３アミノ酸下流に存在するＲＳＡＧＳＩ配列（アミノ酸４１-４６）（配列番号１）は、ＲｅｌＡ、ｃ−Ｒｅｌ、及びＲｅｌＢの間で共有され、一方、ｐ５０のＰＳＨＧＧＬ配列（アミノ酸６５-７０）（配列番号２）はｐ５２と共有されることを反映していると考えられる（図１０Ｂ）。
これまでの結果は、ＫＪＥＴ−１２４がＮＦ−κＢの古典的経路に関与するｐ５０／ＲｅｌＡ及び非古典的経路に関与するｐ５２／ＲｅｌＢの核内移行を阻害することを示している。ｐ５０／ＲｅｌＡ経路だけでなくｐ５２／ＲｅｌＢ経路も癌細胞の生存に関与していることが報告されており、両方のＮＦ−κＢ経路に対するＫＪＥＴ−１２４の阻害効果はその強力な生物学的効果を高めると考えられる。
これらの結果から、ＫＪＥＴ−１２４は、ＲＳＡＧＳＩ構造（アミノ酸４１-４６）（配列番号１）を認識してＣＥＧＲＳＡＧＳＩドメイン（アミノ酸３８-４６）（配列番号３）にアクセスし、配列の最初に位置するＣ（システイン）に直接結合すると考えられる。ＣＥＧＲＳＡＧＳＩ（アミノ酸３８-４６）の配列の相同性検索から、この標的ドメインが哺乳動物タンパク質間において特有であることが示された。【０１６８】
［試験例９］強力で構成的なＮＦ−κＢ活性化を有する癌細胞に対するＫＪＥＴ−１２４の効果
ＮＦ−κＢの強力かつ構成的な活性化を伴う様々な癌細胞株、すなわち、ＡＴＬ細胞株（ＫＫ−１及びＡＴＮ−１）、ＭＭ細胞株（ＫＭＭ−１及びＵ２６６）、及びｃＨＬ細胞株（ＫＭＨ２及びＬ５４０）の生存率に与えるＫＪＥＴ−１２４の影響を調べた。対照細胞として、強力で構成的なＮＦ−κＢ活性化を示さないＫ５６２細胞を使用した。細胞を２５，５０，１００ｎｇ／ｍｌのＫＪＥＴ−１２４の存在下又は非存在下で２４時間又は４８時間処理し、回収し、ＭＴＴアッセイに供した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を対照として用いた。対照を１００として比較した生存率を計算した。３回の独立した実験の平均値±Ｓ．Ｄ．を求めた。
ＫＪＥＴ−１２４は、２５〜１００ｎｇ／ｍｌの濃度で、強力かつ構成的なＮＦ−κＢ活性化を有する癌細胞株の生存率を低下させたが、その効果は対照細胞株Ｋ５６２に対しては見られなかった。代表的な結果（ＫＫ−１、ＫＭＭ−１、ＫＭＨ２及びＫ５６２）を図１１に示す。【０１６９】
［試験例１０］ＫＪＥＴ−１２４の類似体の生物活性
ＫＪＥＴ−１２４は、特有の構造である、イノンとビニルアゾキシ基から構成されている。ＫＪＥＴ−１２４の構造活性相関を明らかにするために、新たに以下の５つの化合物について試験した。【０１７０】
【化２２】
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強力で構成的なＮＦ−κＢ活性を有する細胞の生存率に対するＫＪＥＴ−１２４類似体の効果は次のように調べた。ＡＴＮ−１細胞を、２５，５０，１００ｎｇ／ｍｌのＫＪＥＴ−１２４、２００、２０１、２０２及び２０４と共に２４時間又は４８時間処理した後、ＭＴＴアッセイに供した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を対照として用いた。対照を１００として比較した生存率を求め図１２に結果を示す。
ＫＪＥＴ−２００，ＫＪＥＴ−２０１及びＫＪＥＴ−２０２は、ビニルアゾキシ部分修飾類似体として試験した。その結果、ＫＪＥＴ−１２４と比較して、アゾキシアルコールであるＫＪＥＴ−２００は弱い活性を示した。また、アゾキシ基の位置異性体であるＫＪＥＴ−２０１，ＫＪＥＴ−２０２も同様に弱い活性を示した。
短鎖脂肪族炭素鎖類似体ＫＪＥＴ−２０４は、ＫＪＥＴ−１２４と同様に強力な生物活性を維持した。【０１７１】
［試験例１１］ＫＪＥＴ−２０３の生物活性
試験例１０の方法に準じて、ＫＪＥＴ−２０３の化合物について試験した。イノン部分を調べたところ、プロパルギルアルコールＫＪＥＴ−２０３は、より高い濃度で強い活性を示した（図１３）。【０１７２】
［試験例１２］強力な構成的Ｎ Ｆ−κＢ活性を有するＬ５４０細胞に対する活性
Ｌ５４０細胞の強力な構成的ＮＦ−κＢ活性に対するＫＪＥＴ−１２４類似体の阻害効果は次のように試験した。Ｌ５４０細胞をＫＪＥＴ−１２４又はその類似体２００ｎｇ／ｍｌで５時間処理し、回収した。細胞をガラススライド上にサイトスピンし、ＮＦ−κＢの構成成分である活性化型ＲｅｌＡに対する抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を用いて免疫染色することにより核移行を分析した。ビヒクルのみで処理し、同じ時間培養した細胞を対照として用いた。オリジナル倍率は４００倍とした。図１４に結果を示す。ビヒクルのみの対照（ｃｏｎｔｒｏｌ）に対して何も阻害効果を示したが、阻害の程度は図１２、図１３の生存抑制結果を反映していた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
2019059132.tif 000052
【配列表】
2019059132000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成31年2月12日(2019.2.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
【化１】
2019059132.tif 000053
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基又は窒素原子を１個以上含有する５〜６員の芳香族複素環基で置換されたＣ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、窒素原子を１個以上含有する５〜６員の芳香族複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
アミノ基（Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
アミノカルボニルオキシ基（Ｃ１〜２０アルキル基で置換されていてもよい）；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
Ｃ６〜１４アリール基（アミノ基で置換されていても良い）；及び
Ｃ１〜１２アルコキシ基（Ｃ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜１２アルコキシ基、ハロゲン原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；
５〜１４員の複素環基（Ｃ１〜１２アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩：
【化２】
2019059132.tif 000054
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］、
ただし、以下の式で表される、ジエタシンＡ、Ｂ、Ｃ及びＤを除く。
【化３】
2019059132.tif 000055
【化４】
2019059132.tif 000056
【化５】
2019059132.tif 000057
【化６】
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【請求項２】
Ｒ１又はＲ３が、以下から選択される置換基で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルキル基、又はＣ２〜１２アルキニル基である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
オキソ基；ヒドロキシ基；アミノ基（Ｃ１〜４アルキル基及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）；ＣＨ３ＳＯ３基；アジ（Ｎ３）基；ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；Ｃ１〜１８アルキルアミノカルボニルオキシ基；フェニル基；Ｃ１〜４アルコキシ基（Ｃ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１〜４アルコキシ基、塩素原子、及び／又はイミノ基で置換されていてもよい）；及び、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は６〜１４員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜６員の複素環基（該複素環基はＣ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い））。
【請求項３】
Ｒ１又はＲ３が、以下から選択される置換基で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルキル基、又はＣ２〜１２アルキニル基である、請求項２に記載の化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物：
オキソ基、フェニル基、ヒドロキシ基、トリアゾリル基（Ｃ１〜６アルキル基（シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜４アルカノイルオキシ基、ピペラジル基（ｔ−ブトキシカルボニル基で置換されていてもよい）、及び／又は、オキサシクロテトラデカン基（ヒドロキシ基、Ｃ１〜４アルキル基、及び／又はＣ１〜４アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜４アルケニル基、フェニル基（Ｃ１〜６アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、アントラセニル基、トリメチルシリル基、ピリジル基、及び／又は、ジアゾリル基（Ｃ１〜４アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い）。
【請求項４】
下記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩、水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含有するＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化７】
2019059132.tif 000059
［式中、Ｒ１は、
置換されていても良い、Ｃ１〜１２アルキル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルケニル基、
置換されていても良い、Ｃ２〜１２アルキニル基、
置換されていても良い、Ｃ６〜１４アリール基
置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
を示し、
ここで、置換されていても良い場合の置換基は、それぞれ同一又は異なって、以下から選択される基であり：
オキソ基；
シアノ基；
ヒドロキシ基；
Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい、アミノ基；
ハロゲン原子；
トリメチルシリル基；
ＣＨ３ＳＯ３基；
アジ（Ｎ３）基；
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ（ＴＢＳＯ）基；
ＣＣｌ３Ｃ（ＮＨ）Ｏ−基；
Ｃ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい、アミノカルボニルオキシ基；
Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基；
アミノ基で置換されていても良いＣ６〜１４アリール基；及び
Ｃ１〜１２アルコキシ基（該アルコキシ基はＣ１〜１２アルコキシ基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい、Ｃ１〜１２アルコキシ基；
Ｃ１〜１２アルキル基（該アルキル基は、シアノ基、ヒドロキシ基、アミノ基、ハロゲン原子、Ｃ２〜１２アルカノイル基、Ｃ１〜１２アルコキシ基、Ｃ２〜１２アルカノイルオキシ基、及び／又は５〜１７員の複素環基（該複素環基は、ヒドロキシ基、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はＣ１〜１２アルコキシカルボニル基で置換されていてもよい）で置換されていてもよい）、Ｃ２〜１２アルケニル基、Ｃ６〜１４アリール基（該アリール基は、Ｃ１〜１２アルキル基、及び／又はアミノ基で置換されていてもよい）、
Ｃ１〜１２アルコキシカルボニル基、トリメチルシリル基、及び／又は５〜１４員の複素環基（該複素環基はＣ１〜１２アルキル基で置換されていてもよい）で置換されていても良い、５〜１４員の複素環基、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表す］、
あるいは、
下記一般式（Ｉ’）又は（ＩＩ’）で表される化合物、その薬学的に許容されるエステル誘導体、又は、それらの塩を有効成分として含有する、ＮＦ−κＢ阻害剤又はＮＦ−κＢの核移行阻害剤、あるいはＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害の治療薬又は予防薬：
【化８】
2019059132.tif 000060
［式中、ｎは１〜３の整数を表し、ｍは０〜２の整数を表し、かつ、ｎ＋ｍ＝３であり、
Ｒ２は、ビニル基（−ＣＨ＝ＣＨ２）又はヒドロキシエチル基を表し、
Ｒ３は、前記式（Ｉ）の定義におけるＲ１から水素原子を一つ除去して得られる２価の基を表し、
Ｒ４は、水素原子、又はＣ１〜６アルキル基を表す］。
【請求項５】
ＮＦ−κＢの活性化又は発現が増悪化又は発症に関与する疾患又は障害が、がん、ＡＴＬ、炎症性疾患、移植時拒絶反応、自己免疫疾患、又はアレルギーである、請求項４に記載の治療薬又は予防薬。
【国際調査報告】
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