(57)【要約】  本発明は、新規な架橋型人工核酸、およびそれをモノマーとして含むオリゴマーを提供する。本発明は、より具体的には、一般式（Ｉ）（式中の各記号は明細書中に定義する通りである）で示される化合物またはその塩；および、一般式（Ｉ’）（式中の各記号は明細書中に定義する通りである）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。2020100826.tif 000089
2020100826.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉ：
【化１】
2020100826.tif 000083
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
Ｒ５およびＲ６は各々独立して、水素原子、水酸基の保護基、または置換されてもよいリン酸基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）：
【化２】
2020100826.tif 000084
で示される基であり；
式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）中に記載の記号：
【化３】
2020100826.tif 000085
は、２’−アミノ基との結合点を示し；
Ｒ７およびＲ８は各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルキニル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基であり；
Ａは芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示される化合物、またはその塩。
【請求項２】
Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、請求項１記載の化合物、またはその塩。
【請求項３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり；
ｍが、１である、
請求項１または２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４】
Ｘが、式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、
請求項１〜３のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
【請求項５】
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基である、請求項４に記載の化合物、またはその塩。
【請求項６】
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、請求項５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７】
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、請求項５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項８】
Ｘが、式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、
請求項１〜３のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
【請求項９】
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、請求項８記載の化合物、またはその塩。
【請求項１０】
５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、請求項９記載の化合物、またはその塩。
【請求項１１】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾリル基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、請求項１０記載の化合物、またはその塩。
【請求項１２】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、請求項１０記載の化合物、またはその塩。
【請求項１３】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾール基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、請求項１０記載の化合物、またはその塩。
【請求項１４】
Ｘが、式（ＩＩ−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換されたスルホニル基である、
請求項１〜３のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
【請求項１５】
Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、請求項１４記載の化合物、またはその塩。
【請求項１６】
Ｒ６が水素原子またはＤＭＴｒ基であり、そしてＲ５が水素原子または−Ｐ（Ｏ(ＣＨ２)２ＣＮ）（Ｎ(ｉＰｒ)２）である、請求項１〜１５のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
【請求項１７】
以下の化合物：
３−［［（１Ｒ，４Ｒ，６Ｒ，７Ｓ）−４−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−６−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−メチルスルホニル−５−オキサ−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート；
Ｎ−［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−プリン−６−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロニルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル）オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（メチルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（イソプロピルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−６−ホルムアミジン；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアンエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミン）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［（６−ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド;
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４―イル］ジヒドロピリミジン−２−オン；
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジン；
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド；および
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド、
からなる群から選ばれる化合物。
【請求項１８】
一般式（Ｉ’）：
【化４】
2020100826.tif 000086
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）：
【化５】
2020100826.tif 000087
で示される基であり；
式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）中に記載の記号：
【化６】
2020100826.tif 000088
は２’−アミノ基との結合点を示し；
Ａは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示されるヌクレオシドを１つ以上有しているオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項１９】
Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、請求項１８記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２０】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり；
ｍが、１である、
請求項１８または１９に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２１】
Ｘが、式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、
請求項１８〜２０のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２２】
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基である、請求項２１に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２３】
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、請求項２２に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２４】
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、請求項２３に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２５】
Ｘが、式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、
請求項１８〜２０のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２６】
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、請求項２５記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２７】
５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、請求項２６記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２８】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾリル基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、請求項２７記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項２９】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、請求項２７記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項３０】
１つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾリル基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、請求項２７記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項３１】
Ｘが、式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換されたスルホニル基である、
請求項１８〜２０のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
【請求項３２】
Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、請求項１８〜３１のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
【請求項３３】
ヌクレオチド間のリン酸結合の少なくとも１つ以上が、ホスホロチオエート結合である、硫黄化された請求項１〜３２のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、またはその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミノＬＮＡのモノマー、およびそれを含むオリゴマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
核酸医薬による疾患の治療法として、アンチセンス法、アンチジーン法、アプタマーを用いる方法、ｓｉＲＮＡを用いる方法などがある。このうち、アンチセンス法は、疾病に関わるｍＲＮＡや非翻訳ＲＮＡと相補的なオリゴヌクレオチド（アンチセンス鎖）を外部から導入し、二重鎖を形成させることにより、疾病に関わるＲＮＡの機能を調整し、疾患の治療や予防を行う手法である。【０００３】
こうした核酸医薬の素材として、種々の人工核酸が開発されているが、全身投与後の肝臓や腎臓といった核酸医薬が蓄積しやすい臓器での毒性回避や、十分な薬効の発現といった課題が残されており、いまだ切り札となるべき分子が存在していない。１９９８年にＷｅｎｇｅｌらにより開発された２’−ａｍｉｎｏＬＮＡ（Locked nucleic acid）（以下、「ＡＬＮＡ」と表記）（特許文献１、および非特許文献１）は、２’位からの置換基修飾により多様な人工核酸の合成が可能であり、アルキル、アシルを中心に、これまでに多くのＡＬＮＡ誘導体が合成され（特許文献２〜４、および非特許文献２〜１１）、全身投与後の特徴的な組織分布が報告されてはいるものの（非特許文献１２）、薬理活性の面で不十分であり、これまで医薬品への応用はされてこなかった。【０００４】
我々は、先に見出したＧｕＮＡの効率的合成法を応用して（特許文献５、および非特許文献１３）、さらなる多種多様な新規ＡＬＮＡ誘導体の合成を行うとともに、薬理活性評価に特化したスクリーニングを広く実施することにより、既存のＡＬＮＡと比較して優れたＩｎ ｖｉｔｒｏ、及びＩｎ ｖｉｖｏ薬理活性を有する新規人工核酸を見出し、本発明を完成させた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第９９／０１４２２６号
【特許文献２】国際公開第２０１３／０１３０６８号
【特許文献３】国際公開第２０１４／１２４９５２号
【特許文献４】国際公開第２０１６／１２８５８３号
【特許文献５】国際公開第２０１７／０４７８１６号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】S.K. Singhら、J. Org. Chem. 1998年, 63巻, 6078-6079頁
【非特許文献２】M. D. Sorensenら、Chem. Commun. 2003年, 2130頁
【非特許文献３】B. R. Babuら、Chem. Commun. 2005年, 13巻, 1705-1707頁
【非特許文献４】T. Bryldら、Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids 2007年, 26巻, 1645-1647頁
【非特許文献５】M. Kalekら、J. Am. Chem. Soc. 2007年, 129巻, 9392-9400頁.
【非特許文献６】T. Umemotoら、Org. Biomol. Chem. 2009年, 7巻, 1793-1797頁
【非特許文献７】M. W. Johannsenら、Org. Biomol. Chem. 2011年, 9巻, 243-252頁
【非特許文献８】A. S. Jφrgensenら、Chem. Commun. 2013年, 49巻, 10751-10753頁
【非特許文献９】I. K. Astakhovaら、Acc. Chem. Res. 2014年, 47巻, 1768-1777頁
【非特許文献１０】C. Louら、Chem. Commun. 2015年, 51巻, 4024-4027頁
【非特許文献１１】A. Riesら、J. Org. Chem. 2016年, 81巻, 10845-10856頁
【非特許文献１２】K. Fluiterら、Chem. Bio. Chem. 2005年, 6巻, 1104-1109頁
【非特許文献１３】H. Sawamotoら、Org. Lett. 2018年, 20巻, 1928-1931頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規な架橋型人工核酸、並びにそれをモノマーとして含むオリゴマーに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題を解決するために本発明者等は鋭意研究の結果、下記に示す通り、新規な２’−アミノＬＮＡおよびその塩、並びにそれをモノマーとして含むオリゴマーを見出し、本発明を完成した。【０００９】
すなわち、本発明は、以下の項〔１〕〜〔３３］に関するものであるが、これらに限定されるものではない。
項〔１〕  一般式（Ｉ）：
【化１】
2020100826.tif 000003
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
Ｒ５およびＲ６は各々独立して、水素原子、水酸基の保護基、または置換されてもよいリン酸基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）：
【化２】
2020100826.tif 000004
で示される基であり；
式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）中に記載の記号：
【化３】
2020100826.tif 000005
は、２’−アミノ基との結合点を示し；
Ｒ７およびＲ８は各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルキニル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基であり；
Ａは芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示される化合物、またはその塩。
（以下、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を、「本発明化合物」と呼称する）。
［２］  Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、［１］記載の化合物、またはその塩。
［３］  Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり；
ｍが、１である、［１］または［２］に記載の化合物、またはその塩。
［４］  Ｘが、式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、［１］〜［３］のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
［５］  Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基である、［４］に記載の化合物、またはその塩。
［６］  Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、［５］に記載の化合物、またはその塩。
［７］  Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、［５］に記載の化合物、またはその塩。
［８］  Ｘが、式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、［１］〜［３］のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
［９］  Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、［８］記載の化合物、またはその塩。
［１０］  ５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、［９］記載の化合物、またはその塩。
［１１］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾリル基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、［１０］記載の化合物、またはその塩。
［１２］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、［１０］記載の化合物、またはその塩。
［１３］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾリル基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、［１０］記載の化合物、またはその塩。
［１４］  Ｘが、式（ＩＩ−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換されたスルホニル基である、［１］〜［３］のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
［１５］  Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、［１４］記載の化合物、またはその塩。
［１６］  Ｒ６が水素原子またはＤＭＴｒ基であり、そしてＲ５が水素原子または−Ｐ（Ｏ(ＣＨ２)２ＣＮ）（Ｎ(ｉＰｒ)２）である、［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
［１７］  以下の化合物：
３−［［（１Ｒ，４Ｒ，６Ｒ，７Ｓ）−４−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−６−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−メチルスルホニル−５−オキサ−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２）；
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物３）；
Ｎ−［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物４）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロニルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物５）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル）オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物６）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物７）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物８）；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（メチルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物９）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１０）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１１）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１２）；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（イソプロピルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物１３）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１４）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１５）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１６）；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１７）；
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物１８）；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−６−ホルムアミジン（本発明化合物１９）；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物２０）；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２２）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２３）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアンエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２４）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２５）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２６））；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミン）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２７）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［（６−ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２８）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）オキシプロパンニトリル（本発明化合物２９）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３０）；
３−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３２）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３３）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３４）；
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン（本発明化合物３５）；
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物３６）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３７）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３８）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３９）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物４０）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４―イル］ジヒドロピリミジン−２−オン（本発明化合物４１）
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジン（本発明化合物４２）；
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド（本発明化合物４３）；および
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド（本発明化合物４４）、
からなる群から選ばれる化合物。【００１０】
（オリゴヌクレオチド）
［１８］  一般式（Ｉ’）：
【化４】
2020100826.tif 000006
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）：
【化５】
2020100826.tif 000007
で示される基であり；
式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）中に記載の記号：
【化６】
2020100826.tif 000008
は２’−アミノ基との結合点を示し；
Ａは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示されるヌクレオシドを１つ以上有しているオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩
（以下、式（Ｉ’）で示される化合物またはその塩を、「本発明オリゴヌクレオチド化合物」と呼称する）。
［１９］  Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、［１８］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２０］  Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり；
ｍが、１である、［１８］または［１９］に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２１］（ウレア型化合物）
Ｘが、式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、［１８］〜［２０］のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２２］  Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基である、［２１］に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２３］  Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、［２２］に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２４］  Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、［２３］に記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２５］（アリール型化合物）
Ｘが、式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、［１８］〜［２０］のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２６］  Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、［２５］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２７］  ５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、［２６］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２８］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾリル基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、［２７］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［２９］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、［２７］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［３０］  １つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾリル基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、［２７］記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［３１］（スルホンアミド型化合物）
Ｘが、式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換されたスルホニル基である、［１８］〜［２０］のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド化合物、またはその塩。
［３２］  Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、［１８］〜［３１］のいずれか１つに記載の化合物、またはその塩。
［３３］  ヌクレオチド間のリン酸結合の少なくとも１つ以上が、ホスホロチオエート結合である、硫黄化された［１８］〜［３２］のいずれか１つに記載のオリゴヌクレオチド、またはその塩。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により、新規な２’−アミノＬＮＡ（以下、ＡＬＮＡと略す）、およびこれらＡＬＮＡをモノマーとして含むオリゴマー（以下ＡＬＮＡオリゴマーと略す）を製造することができる。本発明のＡＬＮＡオリゴマーは、Ｉｎ  ｖｉｔｒｏで標的マイクロＲＮＡの機能阻害や、強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有しており、また、生体に投与した場合には多くの臓器（例えば、筋肉など）において強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有しており、よって、新規な核酸医薬としての使用が期待できる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下に、本発明をさらに詳細に説明する。なお、本明細書において引用された全ての刊行物は、参照として本明細書に組み込まれる。
（定義）
まず、本明細書中で用いられる用語を定義する。
【００１３】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基」とは、炭素数１から６（Ｃ１−６）、好ましくは炭素数１から４（Ｃ１−４）、より好ましくは炭素数１から３（Ｃ１−３）の任意の直鎖アルキル基、同一のまたは異なる分岐鎖を有する炭素数３から６の任意の分岐鎖アルキル基、炭素数３から６の任意の環状アルキル基、および炭素数４から６のこれらの組み合わせを包含する。例えば、炭素数１から６の任意の直鎖アルキル基の具体例としては、メチル、エチル、ノルマル（「ｎ」と略す）プロピル、イソ（「ｉ」と略す）プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどが挙げられ、同一のまたは異なる分枝鎖を有する炭素数３から６の任意の分枝鎖アルキル基の具体例としては、ｉ−プロピル、ｉ−ブチル、ｔｅｒｔ（「ｔ」と略す）−ブチル、ｓｅｃ（「ｓ」と略す）−ブチル、ネオペンチル、イソペンチルなどが挙げられ、そして、炭素数３から６の任意の環状アルキル基としては、３−６員単環式シクロアルキル基が好ましく、具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等が挙げられるが、これらに限定されない。置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリール基、アリールオキシ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、オキソ基、チオキソ基、および１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられるが、オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
【００１４】
本明細書において、用語「１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基」とは、前記用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基」に定義する、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよい、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはｉ−プロピルを意味する。具体例としては、ペルフルオロアルキル（例えば、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、へプタフルオロプロピル）等が挙げられる。
【００１５】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルケニル」とは、炭素数２から６（Ｃ２−６）、好ましくは炭素数２から４（Ｃ２−４）、より好ましくは炭素数２から３（Ｃ２−３）の任意の直鎖アルケニル基、同一または異なる分枝鎖を有する炭素数３から６任意の分枝鎖アルケニル基、炭素数３から６の任意の環状アルケニル基、および炭素数４から６のこれらの組み合わせを包含する。例えば、炭素数２から６の任意の直鎖アルケニル基の具体例としては、エテニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１−ヘキセニル基などが挙げられ、同一のまたは異なる分岐鎖を有する炭素数３から６の任意の分岐鎖アルケニル基の具体例としては、イソプロペニル基、１−メチル−１−プロペニル基、１−メチル−２−プロペニル基、２−メチル−１−プロペニル基、２−メチル−２−プロペニル基、１−メチル−２−ブテニル基などが挙げられ、そして炭素数３から６の任意の環状アルケニル基としては、３−６員単環式シクロアルケニル基が好ましく、具体例としては、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリール基、アリールオキシ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、オキソ基、チオキソ基、および１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられるが、オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
【００１６】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルキニル」とは、炭素数２から６（Ｃ２−６）、好ましくは炭素数２から４（Ｃ２−４）、より好ましくは炭素数２から３（Ｃ２−３）の任意の直鎖アルキニル基、同一または異なる分枝鎖を有する炭素数３から６の任意の分枝鎖アルキニル基、炭素数３から６の任意の環状アルキニル基、および炭素数４から６のこれらの組み合わせを包含する。例えば、炭素数２から６の任意の直鎖アルキニル基の具体例としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、１−ペンチニル基、２−ペンチニル基、３−ペンチニル基、４−ペンチニル基、１−ヘキシニル基などが挙げられ、同一のまたは異なる分岐鎖を有する炭素数３から６の任意の分岐鎖アルキニル基の具体例としては、イソプロピニル基、１−メチル−１−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−メチル−１−プロピニル基、２−メチル−２−プロピニル基、１−メチル−２−ブチニル基などが挙げられ、そして炭素数３から６の任意の環状アルキニル基としては、３−６員単環式シクロアルキニル基が好ましく、具体例としては、シクロブチニル基、シクロペンチニル基、シクロヘキシニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリール基、アリールオキシ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、オキソ基、チオキソ基、および１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられるが、オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
【００１７】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基」とは、アリール基およびヘテロアリール基の両方を包含することを意味する。当該アリール基およびヘテロアリール基は各々独立して、１つ以上の置換基で置換されていてもよい。置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルキニル基、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、およびアリール基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられ、好ましくは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、およびハロゲン原子が挙げられ、より好ましくは、トリフルオロメチル基、ジメチルアミノ基、およびクロロ原子等が挙げられる。オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
【００１８】
本明細書において、用語「アリール基」とは、芳香族炭化水素から誘導された官能基または置換基であり、複数の環からなるものも含み、具体的には芳香族炭化水素基から水素原子１個を除いた、１つ以上の５員環および／または６員環からなる炭素数６から１４の１価の基を意味し、好ましくは５員環または６員環のアリールが挙げられる。アリール基の具体例としては、フェニル、インデニル、ナフチル、フェナンスレニル、アントラセニルなどが挙げられる。また、アリール基の置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、、およびアリール基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられ、好ましくは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、およびハロゲン原子が挙げられ、より好ましくは、トリフルオロメチル基、ジメチルアミノ基、およびクロロ原子等が挙げられるが、オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基の具体例としては、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２，６−ジメチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、２−ブロモフェニル、４−メトキシフェニル、４−クロロ−２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２−ニトロフェニル、２，４−ジニトロフェニル、２−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、２−ジメチルアミノフェニル、３−ジメチルアミノフェニル、４−ジメチルアミノフェニル、ビフェニルなどが挙げられる。
【００１９】
本明細書において、用語「ヘテロアリール基」とは環構造に１つ以上のヘテロ原子（例えば、窒素原子、酸素原子、および／または硫黄原子）を含む、１つ以上の５員環および／または６員環からなる炭素数５〜１２の任意の複素芳香族化合物から水素原子１個を除いた１価の基を意味し、好ましくは、５員環または６員環のヘテロアリールが挙げられる。ヘテロアリール基の具体例としては、ピロリル基、フリル基、チエニル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、オキサジアゾリル基、またはチアジアゾリル基から選ばれる５員環ヘテロアリール基；および、ピリジル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、またはピラジニル基から選ばれる６員環ヘテロアリール基が挙げられ、好ましくはトリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、またはピラジニル基が挙げられる。また、ヘテロアリール基の置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、およびアリール基からなる群から選ばれる同一または異なる１つ以上（または１〜３個が好ましい）の基が挙げられ、好ましくは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、およびハロゲン原子が挙げられ、より好ましくは、トリフルオロメチル基、ジメチルアミノ基、およびクロロ原子等が挙げられるが、オリゴマー化の反応条件によって影響を受けない基が好ましい。
１つ以上の置換基で置換されていてもよいヘテロアリール基の具体例としては、１,２,４−トリアゾリル基、１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾリル基、１,２,４−オキサジアゾリル基、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基、１,２,４−チアジアゾリル基、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基、１,３−ピリミジニル基、１,５−ピリミジニル基、４−トリフルオロメチル−１,５−ピリミジニル基、４−ジメチルアミノ−２,４−ピリミジニル基、３−ジメチルアミノ−２,４−ピリミジニル基、３−クロロ−１,５−ピリミジニル基、および１,４−ピリダジニル基が挙げられ、好ましくは、１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル基、１,２,４−オキサジアゾリル基、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基、１,５−ピリミジニル基、４−トリフルオロメチル−１,５−ピリミジニル基、４−ジメチルアミノ−２,４−ピリミジニル基、３−ジメチルアミノ−２,４−ピリミジニル基、３−クロロ−１,５−ピリミジニル基、および１,４−ピリダジニル基が挙げられ、より好ましくは、１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル基、１,２,４−オキサジアゾ−ル−３−イル基、および３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基が挙げられる。
【００２０】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基」とは、前記用語「ヘテロアリール基」に定義する、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、５員環または６員環のヘテロアリールが挙げられる。
【００２１】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基」とは、前記用語「ヘテロアリール基」に定義する、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピリダジニル基等を意味する。
【００２２】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基」とは、かかる１つの置換基で置換されたスルホニル（Ｓ(Ｏ)２）基を意味する。１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基は、それぞれ前記に定義する通りであり、置換基の具体例としては、メチル基、トリフルオロメチル基、フェニル基、および４−メチルフェニル基等が挙げられ、好ましくは、メチル基およびフェニル基が挙げられる。
【００２３】
本明細書において、用語「Ｃ１−６アルコキシ基」とは、Ｃ１−６アルキルが酸素原子と結合した１価基をいい、Ｃ１−６アルキル−Ｏ基を意味する。具体例としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、および３−メチルブトキシ基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２４】
本明細書において、用語「アリールオキシ基」とは、アリールが酸素原子と結合した１価基をいう。具体例としては、フェノキシ基、およびｐ−トリルオキシ基等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
本明細書において、用語「１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基」とは、アミノ基上の１つ以上の水素原子がＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基をいう。具体例としては、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルエチルアミノなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
本明細書において、用語「ハロゲン（原子）」としては、例えば、フッ素原子（フルオロ）、塩素原子（クロロ）、臭素原子（ブロモ）、またはヨウ素原子（ヨード）が挙げられ、フッ素原子または塩素原子が好ましい。
【００２７】
本明細書において、本発明化合物、中間体化合物、原料化合物等に官能基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシル基等）を有する場合は、Theodora W. Greene， Peter G. M. Wuts， "Protective Groups in Organic Synthesis" 4th. ed.， John Wiley & Sons， Inc.， 1999に記載の方法に準じて、有機合成化学において通常用いる保護基で保護し、反応後、当該保護基を除去することにより、目的とする化合物を得ることができる。保護基としては、同書に記載された有機合成化学において通常用いる保護基が挙げられ、官能基毎の保護基については、下記に記載する。
【００２８】
本明細書において、「水酸基の保護基」、「アミノ基の保護基」、「リン酸基の保護基」、「メルカプト基の保護基」内に記載される用語「保護基」とは、核酸合成の際に安定してアミノ基、水酸基、リン酸基またはメルカプト基を保護し得るものであれば、特に制限されない。具体的には、酸性または中性条件で安定であり、加水素分解、加水分解、電気分解、および光分解のような化学的方法により開裂し得る保護基のことをいう。このような保護基としては、例えば、炭素数１から６のアルキル基；炭素数２から６のアルケニル基；炭素数２から６のアルキニル基；アシル基；テトラヒドロピラニル基またはテトラヒドロチオピラニル基；テトラヒドロフラニル基またはテトラヒドロチオフラニル基；シリル基；炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたメチル基；炭素数１から６のアルコキシ基で置換された炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたメチル基；ハロゲン原子で置換された炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたメチル基；炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたエチル基；ハロゲン原子で置換されたエチル基；１から３個のアリール基で置換されたメチル基；炭素数１から６のアルキル基、炭素数２から６のアルケニル基、炭素数２から６のアルキニル基、炭素数１から６のアルコキシ基、ハロゲン原子および／またはシアノ基で置換された１から３個のアリール基で置換されたメチル基；炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたカルボニル基；ハロゲン原子、炭素数１から６のアルコキシ基および／またはニトロ基で置換されたアリール基；ハロゲン原子および／または炭素数１から６の３個のアルキル基で置換されたシリル基で置換された炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたカルボニル基；アルケニルオキシカルボニル基；炭素数１から６のアルコキシ基および／またはニトロ基で置換されたアリール基で置換されてもよいアラルキルオキシカルボニル基；などが挙げられる。
【００２９】
「水酸基の保護基」としては、有機合成化学（特に、核酸合成）において通常用いる保護基をいい、例えば、脂肪族アシル基；芳香族アシル基；置換されていてよいアミノカルボニル基；置換されていてよいアルコキシカルボニル基；脂肪族スルホニル基；芳香族スルホニル基；１から３個のアリール基で置換されたメチル基；炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、ハロゲン原子および／またはシアノ基で置換された１から３個のアリール基で置換されたメチル基；またはシリル基；が挙げられる。具体例としては、ベンジル（Ｂｎ）、４，４'−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、４−メトキシトリチル、トリフェニルメチル、２−ナフチルメチル、ジフェニルアミノカルボニル（ＤＰＣ）、シアノエトキシカルボニル、テトラヒドロピラニル、トリメチルシリル、トリエチルシリル、トリイソプロピルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリフェニルシリル、４−メトキシベンジル（p-メトキシベンジル）、３，４−ジメトキシベンジル、２，６−ジメトキシベンジル、ｐ−フェニルベンジル、メタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、メトキシメチル、ベンゾイル（Ｂｚ）、フェノキシアセチル、またはアセチル等が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、ベンジル（Ｂｎ）、４，４'−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ジフェニルアミノカルボニル（ＤＰＣ）、メタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニルが好ましく、４，４'−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）がより好ましい。
【００３０】
本明細書において、用語「置換されてもよいリン酸基」とは、置換基（これは、保護基を含む）を有していてもよいリン酸、亜リン酸、または次亜リン酸を包含する。例えば、式−Ｐ（ＲＰ１）ＲＰ２で表されるリン酸基を包含し、式中、ＲＰ１およびＲＰ２は、それぞれ独立して、水酸基、核酸合成の保護基で保護された水酸基、メルカプト基、核酸合成の保護基で保護されたメルカプト基、アミノ基、炭素数１から５のアルコキシ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、炭素数１から６のシアノアルコキシ基、または炭素数１から６のアルキル基で置換されたアミノ基を表す。ここで、上記式中、ＲＰ１がＯＲＰ１ａそしてＲＰ２がＮＲＰ２ａとして表すことができる基は「ホスホロアミダイト基」と呼称され、好ましい例である。ＲＰ１ａとは炭素数１から５のアルキル基、炭素数１から６のシアノアルキル基であり、ＲＰ２ａとは炭素数１から６のアルキル基を表し、「ホスホロアミダイト基」の具体例としては、式−Ｐ（Ｏ（ＣＨ２）２ＣＮ）（Ｎ（ｉＰｒ）２）で表される基、または式−Ｐ（ＯＣＨ３）（Ｎ（ｉＰｒ）２）で表される基などが挙げられるが、これらに限定されない。式−Ｐ（Ｏ（ＣＨ２）２ＣＮ）（Ｎ（ｉＰｒ）２）で表される基が好ましい。ここで、ｉＰｒはイソプロピル基を表す。
【００３１】
本明細書において、用語「置換されてもよいリン酸基」は、リンを含むキラル補助基を形成していてもよい。リンを含むキラル補助基の具体例としては、非特許文献 N. Okaら、J. AM. CHEM. SOC. 2008, 130, 16031に記載の光学活性二環式オキサザホスホリジンや、非特許文献 K. W. Knouseら、Science 10.1126/science.aau3369 (2018)に記載の５価リン原子を含む光学活性２−チオ−１，３，２−オキサチアホスフォランなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
「アミノ基の保護基」としては、有機合成化学（特に、核酸合成）において通常用いる保護基をいい、例えば、脂肪族アシル基；芳香族アシル基；置換されていてよいアルコキシカルボニル基；１から３個のアリール基で置換されたメチル基；ハロゲン原子および／またはシアノ基で置換された１から３個のアリール基で置換されたメチル基が挙げられる。具体例としては、アセチル（Ａｃ）、フェノキシアセチル（Ｐａｃ）、ｔ−ブチルフェノキシアセチル（Ｔａｃ）、ｐ−イソプロピルフェノキシアセチル（ｉＰｒ−Ｐａｃ）、トリフルオロアセチル、プロピオニル、イソブチリル、ベンゾイル（Ｂｚ）、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、トリメチルシリルエトキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、シアノエトキシカルボニル（Ｃｅｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ジメチルアミノメチレニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ｔ−アミルオキシカルボニル、４−メトキシベンジル、トリフェニルメチル、２−ニトロベンゼンスルホニル、２，４−ジニトロベンゼンスルホニルまたは２−（トリメチルシリル）エトキシメチル等が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、イソブチリル、ベンゾイル（Ｂｚ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、トリメチルシリルエトキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）が好ましい。
【００３３】
「リン酸基の保護基」としては、有機合成化学（特に、核酸合成）において通常用いる保護基をいい、例えば、炭素数１から６のアルキル基および／またはシアノ基で置換された炭素数１から６のアルキル基；アラルキル基；ニトロ基および／またはハロゲン原子で置換されたアリール基で置換されたアラルキル基；炭素数１から６のアルキル基、ハロゲン原子、またはニトロ基で置換されたアリール基；２−シアノエチル基；２，２，２−トリクロロエチル基；ベンジル基；２−クロロフェニル基；または４−クロロフェニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
「メルカプト基の保護基」としては、有機合成化学（特に、核酸合成）において通常用いる保護基をいい、例えば、脂肪族アシル基または芳香族アシル基、ベンゾイル基（Ｂｚ）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３５】
本明細書において、用語「脱離基」とは、反応の間にヘテロリシスでの開裂により切断される場合の、電子対を持つ方の基質分子の一部をいい、例えばハロゲン原子（例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子）、「水酸基の脱離基」を包含する。水酸基の脱離基の例としては、スルホニルオキシ基（例えば、パラトルエンスルホニルオキシ基、メシルオキシ基、トリフルオロメタンスルホニルオキシ基など）、アシロキシ基（好ましくは炭素数１〜８の、飽和もしくは不飽和アシロキシ基であり、例えばＲＬ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−で表され、式中のＲＬはアルキル基で置換されていてもよいアリール基（好ましい総炭素数が６〜８であり、例えばフェニル基、ｐ−トリル基など）、アルキル基で置換されていてもよいアリールオキシ基（好ましい総炭素数が６〜８であり、例えばフェノキシ基、ｐ−トリルオキシ基など）、アラルキル基（好ましい総炭素数が７〜９であり、例えばベンジル基など）、アリールアルケニル基（好ましい総炭素数が８または９であり、例えばシンナミル基など）、アラルキルオキシ基（総炭素数７〜１５、例えばベンジルオキシ基、９−フルオレニルメチルオキシ基など）、アルコキシ基（炭素数１〜８の直鎖状または分岐鎖状のアルコキシ基、たとえばメトキシ、エトキシ、ｔ−ブトキシなど）で表される基が挙げられ、具体例としては、ヨード、ブロモ、クロロ、フルオロ、メシルオキシ、メタンスルホニルオキシ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、エタンスルホニルオキシ、２，２，２−トリフルオロ−エタンスルホニルオキシ、プロパンスルホニルオキシ、イソ−プロパンスルオニルオキシ、ブタンスルホニルオキシ、ノナフルオロブタンスルホニルオキシ、ヘプタフルオロプロパン−１−スルホニルオキシ、ペンタンスルホニルオキシ、ペンタフルオロエタンスルホニルオキシ、ペンタンスルホニルオキシ、シクロペンタンスルホニルオキシ、ヘキサンスルホニルオキシ、シクロヘキサンスルホニルオキシ、ｏ−トルエンスルホニルオキシ、ｍ−トルエンスルホニルオキシ、ｐ−トルエンスルホニルオキシ、ベンゼンスルホニルオキシ、ｏ−ブロモベンゼンスルホニルオキシ、ｍ−ブロモベンゼンスルホニルオキシ、ｐ−ブロモ−ベンゼンスルホニルオキシ、ｏ−ニトロベンゼンスルホニルオキシ、ｍ−ニトロベンゼンスルホニルオキシ、およびｐ−ニトロベンゼンスルホニルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい脱離基の例として、メタンスルホニルオキシ（メシルオキシ；Ｍｓ−Ｏ−）、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、ｐ−トルエンスルホニルオキシが挙げられる。
【００３６】
本明細書において、用語「アシル基」の例としては、脂肪族アシル基および芳香族アシル基が挙げられる。具体的には、脂肪族アシル基の例としては、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ペンタノイル基、ピバロイル基、バレリル基、イソバレリル基、オクタノイル基、ノナノイル基、デカノイル基、３−メチルノナノイル基、８−メチルノナノイル基、３−エチルオクタノイル基、３，７−ジメチルオクタノイル基、ウンデカノイル基、ドデカノイル基、トリデカノイル基、テトラデカノイル基、ペンタデカノイル基、ヘキサデカノイル基、１−メチルペンタデカノイル基、１４−メチルペンタデカノイル基、１３，１３−ジメチルテトラデカノイル基、ヘプタデカノイル基、１５−メチルヘキサデカノイル基、オクタデカノイル基、１−メチルヘプタデカノイル基、ノナデカノイル基、アイコサノイル基およびヘナイコサノイル基のようなアルキルカルボニル基；フェノキシアセチル（Ｐａｃ）基のようなアリールオキシアルキルカルボニル基；スクシノイル基、グルタロイル基、アジポイル基のようなカルボキシ化アルキルカルボニル基；クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基のようなハロゲン原子で置換された炭素数１から６のアルキル基で置換されたカルボニル基；メトキシアセチル基のような炭素数１から６のアルコキシアルキルカルボニル基；（Ｅ）−２−メチル−２−ブテノイル基のような不飽和アルキルカルボニル基が挙げられる。また、芳香族アシル基の例としては、ベンゾイル基、α−ナフトイル基、β−ナフトイル基のようなアリールカルボニル基；２−ブロモベンゾイル基、４−クロロベンゾイル基のようなハロゲノアリールカルボニル基；２，４，６−トリメチルベンゾイル基、４−トルオイル基のような炭素数１から６のアルキル基で置換されたアリールカルボニル基；４−アニソイル基のような炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたアリールカルボニル基；２−カルボキシベンゾイル基、３−カルボキシベンゾイル基、４−カルボキシベンゾイル基のようなカルボキシ化アリールカルボニル基；４−ニトロベンゾイル基、２−ニトロベンゾイル基のようなニトロ化アリールカルボニル基；２−（メトキシカルボニル）ベンゾイル基のような炭素数１から６のアルコキシ基で置換されたカルボニル化アリールカルボニル基；４−フェニルベンゾイル基のようなアリール化アリールカルボニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
本明細書において、用語「アラルキル基」とは、芳香族炭化水素基（例えば、６〜１４員の単環式、二環式または三環式の芳香族炭化水素基を挙げられる）で置換された、炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜４、より好ましくは炭素数１〜３のアルキル基をいう。具体例としては、ベンジル、フェネチル、１−ナフチルメチル、および２−ナフチルメチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
本明細書において、用語「シリル基」の例としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、イソプロピルジメチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メチルジイソプロピルシリル基、メチルジ−ｔ−ブチルシリル基、トリイソプロピルシリル基のような炭素数１から６のアルキル基で置換されたシリル基；ｔ−ブチルジフェニルシリル基、ジフェニルメチルシリル基、ブチルジフェニルブチルシリル基、ジフェニルイソプロピルシリル基、フェニルジイソプロピルシリル基のような１から２個のアリール基で置換された炭素数１から６の３つのアルキル基で置換されたシリル基、トリフェニルシリル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
本明細書において、用語「β体」とは、核酸のリボース部位の１’位に置換した核酸の塩基部分が置換する方向と、核酸のリボース４’位に置換した５’位側鎖が置換する方向が同一の方向に置換された立体化学を持つものをいう。架橋型人工核酸２’，４’−ＬＮＡの場合、核酸のリボース部位の１’位に置換した核酸の塩基部分が置換する方向と、核酸のリボース４’位に置換した架橋には用いられていない５’位側鎖が置換する方向が同一の方向に置換された立体配置を持つ化合物をいう。
【００４０】
本明細書において、用語「β選択的」とはβ体を選択的に得ることができることをいう。
【００４１】
本明細書において、用語「１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分」における「核酸の塩基部分」とは、天然の核酸の塩基部分、及び非天然の核酸の塩基部分を含み、芳香族ヘテロ環式基を含み、例えば、単環基、二環基、三環基などを包含する。当該分野の当業者にとって、これまで「非天然」であると考えられてきた様々な核酸の塩基部分がその後に天然において見出されることは、明らかであるべきである。従って、「核酸塩基」とは、公知のプリンおよびピリミジンのヘテロ環だけでなく、そのヘテロ環アナログおよび互変異性体を含む。核酸の塩基部分の具体例としては、アデニン、グアニン、チミン、シトシン、ウラシル、プリン、キサンチン、ジアミノプリン、８−オキソ−Ｎ６−メチルアデニン、７−デアザキサンチン、７−デアザグアニン、Ｎ４，Ｎ４−エタノシトシン、Ｎ６，Ｎ６−エタノ−２，６−ジアミノプリン、５−メチルシトシン、５−（Ｃ３〜Ｃ６）−アルキニルシトシン、５−フルオロシトシン、５−ブロモウラシル、シュードイソシトシン、２−ヒドロキシ−５−メチル−４−トリアゾロピリジン、イソシトシン、イソグアニン、イノシン、Ｎ６−アリルプリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ベンジルプリン、Ｎ６−ハロプリン、Ｎ６−ビニルプリン、Ｎ６−アセチレン性プリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ４−アルキルピリミジン、Ｎ４−アシルピリミジン、Ｎ４−ベンジルプリン、Ｎ４−ハロピリミジン、Ｎ４−ビニルピリミジン、Ｎ４−アセレン性ピリミジン、Ｎ４−アセチルピリミジン、Ｎ４−ヒドロキシアルキルピリミジン、Ｎ６−チオアルキルピリミジン、６−アザピリミジン、６−アザシトシン、２−および／または４−メルカプトピリミジン、ウラシル、Ｃ５−アルキルピリミジン、Ｃ５−ベンジルピリミジン、Ｃ５−ハロピリミジン、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレン性ピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジン、Ｃ５−アミノピリミジン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、５−シチジニル、５−アザウラシリル、トラゾロピリジニル、イミダゾロピリジニル、ピロロピリミジニル、およびピラゾロピリミジニルなどを挙げられるが、これらに限定されない。好ましい核酸の塩基部分としては例えば、アデニン、グアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、２−チオチミン、シトシン、５−メチルシトシン、ウラシル、５−フルオロシトシン、キサンチン、６−アミノプリン、２−アミノプリン、６−クロロ−２−アミノ−プリン、および６−クロロプリンが挙げられ、特に好ましい核酸塩基部分としては例えば、アデニン、グアニン、シトシン、５−メチルシトシン、チミンまたはウラシルが挙げられる。これらの核酸の塩基部分は、１つ以上の置換基で置換されていてもよく、該置換基としては、水酸基、Ｃ１−６のアルコキシ基、メル力プ卜基、Ｃ１−６のアルキルチオ基、アミノ基、Ｃ１−６のアルキル基で置換されたアミノ基、Ｃ１−６のアルキル基、Ｃ１−６のアルキニル基および、オキソ基、チオキソ基、ハロゲン原子が挙げられる。該塩基部分上の官能性の酸素、硫黄および窒素基は、必要ならばまたは所望するならば、保護しおよび／または脱保護することができる。適当な保護基は当該分野の当業者にとってよく知られており、例えば、前記した水酸基の保護基、アミノ基の保護基を含み、ジフェニルアミノカルボニル基、シリル基（例えば、トリメチルシリル基、ジメチルへキシルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、およびｔ−ブチルジフェニルシリル基）、トリチル基、アルキル基、アシル基（例えば、アセチル基、プロピオニル基、イソブチリル基、ベンゾイル基（Ｂｚ）、フェノキシアセチル基（Ｐａｃ））、アルコキシカルボニル基（例えば、ｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）、ベンジロキシカルボニル基（Ｃｂｚ）、ジフェニルアミノカルボニル基（ＤＰＣ）、シアノエトキシカルボニル基（Ｃｅｏｃ））、スルホニル基（例えば、メタンスルホニル基、およびｐ−トルエンスルホニル基）、ジメチルアミノメチレニル基などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本明細書において、用語「人工核酸」とは、人工ヌクレオシド、人工ヌクレオチド（本明細書では１個のヌクレオシドまたはヌクレオチドをモノマーと記載する場合もある。）、または人工オリゴヌクレオチドを包含する。これらの人工核酸は天然の核酸ではなく、かつ人為的にのみ製造することができる核酸である。これらの人工核酸には核酸塩基部分が非天然の塩基を有するもの、糖部分が修飾された糖を有するもの、及び／またはリン酸部分が非天然のリン酸基を有するものがあげられるが、本発明では糖部分が非天然の糖を有するもの、特に２’位と４’位の炭素原子が架橋されている（デオキシ）リボースを有するものをいう。
【００４３】
本明細書において、用語「人工オリゴヌクレオチド」とは、同一または異なる「人工ヌクレオチド」がリン酸ジエステル結合やチオリン酸ジエステル結合等で２個以上結合したものをいい、好ましくは２から１００個までの、より好ましくは５から５０個までの、最も好ましくは１０から３０個までの人工ヌクレオチドが結合したもの、またはこれらの相補鎖と２重鎖を形成したものをいう。本明細書では２個以上のヌクレオチドが結合したオリゴヌクレオチドをオリゴマーと記載する場合もある。
【００４４】
本発明の化合物の態様について記載する。
【００４５】
一般式Ｉで示される化合物
一態様によれば、
一般式（Ｉ）：
【化７】
2020100826.tif 000009
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
Ｒ５およびＲ６は各々独立して、水素原子、水酸基の保護基、または置換されてもよいリン酸基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）：
【化８】
2020100826.tif 000010
で示される基であり；
式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）中に記載の記号：
【化９】
2020100826.tif 000011
は、２’−アミノ基との結合点を示し；
Ｒ７およびＲ８は各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルケニル基、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ２−６アルキニル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基であり；
Ａは芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示される化合物、またはその塩、
を提供する。
【００４６】
一実施態様において、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩は、一般式Ｉ−ａ：
【化１０】
2020100826.tif 000012
で表される化合物またはその塩であることが好ましい（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｂ、Ｘおよびｍは、一般式（Ｉ）と同義である。）。
【００４７】
一実施態様において、式（Ｉ）における環Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００４８】
一実施態様において、式（Ｉ）における環Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有していてもよい５−ウラシリル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００４９】
一実施態様において、式（Ｉ）における、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり、ｍが１である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５０】
一実施態様において、式（Ｉ）における、Ｒ６が水素原子またはＤＭＴｒ基であり、そしてＲ５が水素原子または−Ｐ（Ｏ(ＣＨ２)２ＣＮ）（Ｎ(ｉＰｒ)２）である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５１】
一実施態様において、式（Ｉ）における、Ｒ６がＤＭＴｒ基であり、そしてＲ５が−Ｐ（Ｏ(ＣＨ２)２ＣＮ）（Ｎ(ｉＰｒ)２）である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５２】
式（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）、または（ＩＩ−３）と記載する使用される一実施態様に大別される。
まず、式（Ｉ）におけるＸが式（ＩＩ−１）で示される基である化合物（以下、本願明細書中、「ウレア型化合物」とも呼称することがある）を挙げることができる。
【００５３】
一実施態様において、Ｘが、式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５４】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５５】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、メチル基、イソプロピル基、またはフェニル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５６】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の組み合わせが、Ｒ７およびＲ８がともに水素原子である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８がともにメチル基である組み合わせ、Ｒ７が水素原子でありそしてＲ８がメチル基である組み合わせ、Ｒ７が水素原子でありそしてＲ８がイソプロピル基である組み合わせ、またはＲ７が水素原子でありそしてＲ８がフェニル基である組み合わせ、である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５７】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の組み合わせが、Ｒ７およびＲ８がともに水素原子である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８がともにメチル基である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である組み合わせ、またはＲ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がフェニル基である組み合わせ、である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５８】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００５９】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６０】
また、式（Ｉ）におけるＸが式（ＩＩ−２）で示される基である化合物（以下、本願明細書中、「ヘテロアリール型化合物」とも呼称することがある）を挙げることができる。
【００６１】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６２】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６３】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６４】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６５】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６６】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾリル基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６７】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６８】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾリル基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００６９】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００７０】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいメチル基、および１つ以上の置換基で置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００７１】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を提供する。
【００７２】
一実施態様において、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩の具体的な例として、以下に示す化合物からなる群から選ばれる１つ以上の化合物またはその塩を提供する。
以下の化合物：
３−［［（１Ｒ，４Ｒ，６Ｒ，７Ｓ）−４−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−６−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−メチルスルホニル−５−オキサ−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２）；
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物３）；
Ｎ−［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物４）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロニルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物５）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル）オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物６）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物７）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物８）；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（メチルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物９）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１０）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１１）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１２）；
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（イソプロピルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物１３）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１４）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１５）；
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１６）；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１７）；
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物１８）；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−６−ホルムアミジン（本発明化合物１９）；
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物２０）；
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２２）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２３）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアンエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２４）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２５）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２６））；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミン）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２７）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［（６−ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２８）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）オキシプロパンニトリル（本発明化合物２９）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３０）；
３−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３１）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３２）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３３）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３４）；
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン（本発明化合物３５）；
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物３６）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３７）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３８）；
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３９）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物４０）；
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４―イル］ジヒドロピリミジン−２−オン（本発明化合物４１）
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジン（本発明化合物４２）；
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド（本発明化合物４３）；および
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド（本発明化合物４４）、からなる群から選ばれる化合物。
【００７３】
オリゴヌクレオチド
一般式（Ｉ’）で示される化合物
一態様によれば、
一般式（Ｉ’）：
【化１１】
2020100826.tif 000013
［式中、
Ｂは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい核酸の塩基部分であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して、水素原子、または１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基であり；
ｍは、１または２であり；
Ｘは、下記式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）：
【化１２】
2020100826.tif 000014
で示される基であり；
式（ＩＩ’−１）、（ＩＩ’−２）、または（ＩＩ’−３）中に記載の記号：
【化１３】
2020100826.tif 000015
は２’−アミノ基との結合点を示し；
Ａは、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、芳香族基であり；
Ｍは、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である。］
で示されるヌクレオシドを１つ以上有しているオリゴヌクレオチド、またはその塩、を提供する。
【００７４】
一実施態様において、式（Ｉ’）における環Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよいアデニニル、１つ以上の保護基を有してもよいグアニニル、１つ以上の保護基を有してもよいシトシニル、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有してもよいウラシリルである、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００７５】
一実施態様において、式（Ｉ’）における環Ｂが、１つ以上の保護基を有してもよい５−メチルシトシニルまたは１つ以上の保護基を有していてもよい５−ウラシリル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００７６】
一実施態様において、式（Ｉ’）における、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が各々独立して、水素原子であり、ｍが１である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００７７】
一実施態様において、式（Ｉ’）における、ヌクレオチド間の少なくとも１つ以上が、ホスホロチオエート結合である、硫黄化された、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００７８】
式（Ｉ’）におけるＸが式（ＩＩ’−１）で示される基である化合物（以下、本願明細書中、「ウレア型化合物」とも呼称することがある）を挙げることができる。
【００７９】
一実施態様において、式（Ｉ’）において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である。式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８０】
一実施態様において、Ｘが、式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−６アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８１】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ１−３アルキル基、または１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８２】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８が各々独立して、水素原子、メチル基、イソプロピル基、またはフェニル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８３】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の組み合わせが、Ｒ７およびＲ８がともに水素原子である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８がともにメチル基である組み合わせ、Ｒ７が水素原子でありそしてＲ８がメチル基である組み合わせ、Ｒ７が水素原子でありそしてＲ８がイソプロピル基である組み合わせ、またはＲ７が水素原子でありそしてＲ８がフェニル基である組み合わせ、である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８４】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の組み合わせが、Ｒ７およびＲ８がともに水素原子である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８がともにメチル基である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である組み合わせ、Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である組み合わせ、またはＲ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がフェニル基である組み合わせ、である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８５】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がメチル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８６】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−１）で示される基であり；そして、
Ｒ７およびＲ８の一方が水素原子であり、他方がイソプロピル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８７】
また、式（Ｉ’）におけるＸが式（ＩＩ’−２）で示される基である化合物（以下、本願明細書中、「ヘテロアリール型化合物」とも呼称することがある）を挙げることができる。
【００８８】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００８９】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた２または３つのヘテロ原子を含む５または６員環のヘテロアリール基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９０】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９１】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａが、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、窒素原子、酸素原子および硫黄原子からなる群から選ばれる少なくとも２つの窒素原子を含めた１つ以上のヘテロ原子を含む、５または６員環のヘテロアリール基であって、該置換基が各々独立して、１つ以上のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１−３アルキル基、ハロゲン原子、および１つ以上のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよいアミノ基からなる群から選ばれる、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９２】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての５または６員環のヘテロアリール基が、１つ以上の置換基で置換されていてもよい、トリアゾリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピリミジニル基、およびピラジニル基からなる群から選ばれる、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９３】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいトリアゾール基が、１，５−ジメチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９４】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいオキサジアゾリル基が、５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９５】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−２）で示される基であり；そして、
Ａとしての１つ以上の置換基で置換されていてもよいチアジアゾリル基が、３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−イル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９６】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基および１つ以上の置換基で置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９７】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、１つ以上の置換基で置換されていてもよいメチル基、および１つ以上の置換基で置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９８】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【００９９】
一実施態様において、Ｘが式（ＩＩ’−３）で示される基であり；そして、
Ｍが、メチル基およびフェニル基からなる群から選ばれる１つの置換基で置換された、スルホニル基である、式（Ｉ’）で示されるオリゴヌクレオチド化合物またはその塩を提供する。
【０１００】
一実施態様において、当該オリゴヌクレオチドまたはその塩は当該ヌクレオチドを２個以上結合したものであり、２から１００個までのヌクレオチドを含むものであることが好ましく、５から５０個までのヌクレオチドを含むものであることがより好ましく、最も好ましくは１０から３０個までの人工ヌクレオチドが結合したもの、またはこれらの相補鎖と２重鎖を形成したものである。
【０１０１】
本明細書において、用語「化合物の塩」における「塩」とは、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などの金属塩；アンモニウム塩のような無機塩、ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ヘキシルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機塩等のアミン塩；フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩のようなハロゲン原子化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような炭素数１から６のアルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリールスルホン酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩；および、グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩などを挙げられるが、これらに限定されない。薬理的に許容し得る塩を包含する。
【０１０２】
本明細書で記載する一般式（Ｉ）で表される各化合物は、エナンチオマーもしくはジアステレオマーの形態またはこれらの混合物を包含する。例えば、各化合物の構造における、糖部分の立体配置がα体およびβ体を包含するが、β体が好ましい。前記一般式（Ｉ）で表される化合物がジアステレオマーまたはエナンチオマーの形態で得られる場合、これらを有機合成（例えば、糖合成）の分野で周知の慣用の方法、例えばクロマトグラフィーまたは分別結晶法等で分離することができる。例えば、下記式：
【化１４】
2020100826.tif 000016
で表される２Ｔｄの化合物は、糖部分の立体配置がβ体である。
【０１０３】
本明細書で記載する一般式Ｉで表される各化合物は、同位元素（例えば、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３２Ｐ、３５Ｓ、１２５Ｉ等）等で標識された化合物および重水素変換体を包含する。
【０１０４】
本明細書で記載するオリゴヌクレオチドおよびその類縁体は、例えば、賦形剤、結合剤、防腐剤、酸化安定剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味剤などの医薬の製剤技術分野において通常用いられる補助剤を配合して、非経口投与製剤またはリポソーム製剤とすることができる。また、例えば、当該技術分野で通常用いられる医薬用担体を配合して、液剤、クリーム剤、軟膏剤などの局所用の製剤を調製できる。
【０１０５】
（製造方法）
以下に、本発明の化合物の製造方法を記載する。
なお、下記に記載する出発化合物および中間体化合物の各化合物において、絶対配置を有する光学活性体は、出発原料に光学活性体のものを用いるかまたは合成の途中段階で生じる異性体を分離することによっても製造することができる。また、以下で記載する核酸塩基を置換する核酸塩基交換反応は、β選択的トランスグリコシル化が効率よく進行し、得られる一般式Ｉで表される化合物は、所望するβ体を選択的に得ることができる。
【０１０６】
本発明化合物またはその薬理的に許容し得る塩は、以下の方法で製造することができるが、これらに限定されるものではない。
原料化合物については、それらの具体的な製法が述べられていない場合には、市販されているものを用いることができるか、または公知の方法もしくはこれに準じる方法に従って製造することができる。
【０１０７】
なお、本明細書において使用される略号は、それぞれ以下の意味を表す。
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＭｓＣｌ：メタンスルホニルクロリド
ＤＭＡＰ：Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン
ｉＰｒ２ＮＥｔ、及びＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＢＳＡ：Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド
ＴＭＳＯＴｆ：トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル
ＴＢＳＯＴｆ： t-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホン酸
Ｂｎ：ベンジル
ＴＭＳ：トリメチルシリル
ＴＢＤＰＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
Ａｃ：アセチル
ＭＯＥ：メトキシエチル
ＣＨ２Ｃｌ２：ジクロロエタン
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ＤＭＴｒ：４，４’−ジメトキシトリチル
【０１０８】
まず、本発明化合物（モノマー）の製造方法の概略を記載する。
【０１０９】
（スルホンアミド系統化合物）
一般式ＩにおけるＸが式（ＩＩ−３）で表される基である、いわゆるスルホンアミド系統の本発明化合物の製造方法を記載する。製造スキームの典型的な例は以下の反応スキーム１に示す通りであるが、これらに限定されるものではない。
反応スキーム１
【化１５】
2020100826.tif 000017
【０１１０】
（工程１）
出発物質として糖化合物である出発化合物１（例えば、国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の製法に従って製造することができる）を用い、公知の方法により、一般式（Ｉ）中のＲ５基として水酸基の保護基を導入して、中間体化合物２を製造する。あるいは、出発化合物１中の核酸塩基部分（略語Ｂで表す）を別の保護されていてもよい核酸塩基部分（略語Ｂ’で表す）で核酸塩基交換反応を行うと同時に、水酸基の保護基を導入して、中間体化合物２を製造する。
本水酸基の保護基の導入は、保護基の種類に応じて有機合成化学（例えば、核酸合成）でよく知られる反応条件下、実施することができる。例えば、水酸基の保護基がシリル型保護基（例えば、ＴＭＳ）である場合には、シリル化剤（例えば、ＢＳＡ、ヘキサメチルジシラザン、ＴＭＳクロリド）を使用することができる。この際、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ、塩化スズ）を添加してもよい。
反応基質に対して、シリル化剤は約１〜約２０モル当量数で、ルイス酸は触媒量（約０．０５モル当量数）〜２モル当量数で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（例えば、ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、トルエンなどの炭化系水素類、アセトニトリル、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温、とりわけ室温〜約６０℃で好適に進行する。
【０１１１】
また、核酸塩基交換反応（トランスグリコシル反応）により、チミン（Ｔ）、ウラシル（Ｕ）等の核酸塩基のピリミジン塩基部分を、別の保護されていてもよい核酸塩基部分（例えば、アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、または５−メチルシトシン（ＭｅＣ））に置換することによって、核酸塩基部分が交換された中間体化合物２を製造することができる。該塩基交換反応は、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ）の存在下で実施することができ、シリル化剤を反応させることによって反応を促進することができる。
【０１１２】
（工程２）
次に、中間体化合物２を出発物質として用いて、公知の方法により、アルキルスルホニルハライドまたは芳香族スルホニルハライドを、中間体化合物２と反応させることにより、イミノ窒素原子上をスルホンアミド化して、中間体化合物３を製造する。
スルホンアミド化反応に用いられるスルホンアミド化試薬としては、アルキニルスルホニルハライド試薬（例えば、メタンスルホニルクロリド（ＭｓＣｌ））、アルキルスルホン酸無水物（例えば、メタンスルホン酸無水物）、芳香族スルホニルハライド試薬（例えば、ベンゼンスルホニルクロリド）、または芳香族スルホン酸無水物（例えば、ベンゼンスルホン酸無水物）が挙げられ、塩基（例えば、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡ）の存在下、使用することができる。
反応基質に対して、スルホンアミド化試薬はほぼ当量モル数〜いくらか過剰当量モル数（例えば、約１．０モル当量）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、トルエンなどの炭化系水素類、アセトニトリル、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜室温、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１１３】
（工程３）
次に、中間体化合物３を出発物質として用いて、公知の方法により、工程１において導入された水酸基の保護基を脱保護することにより、中間化合物４を製造する。
本脱保護反応は、保護基の種類に応じて適当な反応条件（例えば、試薬等）下で行うことができる。例えば、水酸基の保護基（略語ＲＰＲＯ）がシリル型保護基（例えば、ＴＭＳ）であるときは、酸性条件下での加水分解（例えば、酢酸−ＴＨＦ−水）またはフッ化物イオン供与試薬（例えば、ＴＢＡＦ）を用いて処理することにより、実施することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（例えば、ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜１００℃、とりわけ０℃〜５０℃で好適に進行する。
【０１１４】
（工程４）
更に、中間体化合物４を出発物質として用いて、有機合成（特に、核酸合成）上一般的に知られる反応条件（例えば、試薬）下で、ホスホロアミダイト化して、所望するスルホンアミド系統の本発明化合物を製造する。
ホスホロアミダイト化試薬としては、例えば、下記式：
【化１６】
2020100826.tif 000018
が挙げられるが、これに限定されない。当該ホスホロアミダイト化反応は、適宜塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）または適宜酸（例えば、ジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド、４，５−ジシアノイミダゾール）の存在下で行ってもよい。
反応基質に対して、ホスホロアミダイト化試薬は１モル当量数〜１０モル当量数、好ましくは１モル当量数〜５モル当量数（例えば、３モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、アセトニトリル、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜６０℃、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１１５】
なお、上記工程１の実施前から工程４の実施後のいずれかの段階で、適宜、核酸塩基の環上の置換基を修飾（例えば、シトシン環のアミノ置換基のベンゾイル化、もしくはアセチル化）してもよい。
【０１１６】
また、上記の工程（１）〜工程（４）のうち、複数の工程（例えば、工程（１）と工程（２）、および工程（２）と工程（３））を連続して行ってもよい。
【０１１７】
（ウレア系統化合物）
一般式ＩにおけるＸが式（ＩＩ−１）で表される基である、いわゆるウレア系統の本発明化合物の製造方法を記載する。製造スキームの典型的な例は以下の反応スキーム２に示す通りであるが、これらに限定されるものではない。
反応スキーム２
【化１７】
2020100826.tif 000019
【０１１８】
（工程１）
出発物質として前記の出発化合物１を用いて、公知の方法によるウレア化反応を行う前に、前記反応スキーム１の工程１と同様に、出発化合物１中の核酸塩基部分（略語Ｂで表す）を別の保護されていてもよい核酸塩基部分（略語Ｂ’で表す）で核酸塩基交換反応を行った後に、ウレア化反応を行ってもよい。また、前記反応スキームと同様に、この核酸塩基交換反応を行った後に、適宜、水酸基の保護基を導入してもよい。
核酸塩基交換反応（トランスグリコシル反応）は、公知の方法により、チミン（Ｔ）、ウラシル（Ｕ）等の核酸塩基のピリミジン塩基部分を、別の保護されていてもよい核酸塩基部分（例えば、アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、または５−メチルシトシン（ＭｅＣ））に置換することによって、核酸塩基部分が交換された中間体化合物５を製造することができる。該塩基交換反応は、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ）の存在下で実施することができ、シリル化剤（例えば、ＢＳＡ）を反応させることによって反応を促進することができる。
また、この水酸基の保護基の導入は、保護基の種類に応じて有機合成化学（例えば、核酸合成）でよく知られる反応条件下、実施することができる。例えば、水酸基の保護基がシリル型保護基（例えば、ＴＭＳ）である場合には、シリル化剤（例えば、ＢＳＡ、ヘキサメチルジシラザン、ＴＭＳクロリド）を使用することができる。この際、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ、塩化スズ）を添加してもよい。
反応基質に対して、シリル化剤は約１〜約２０モル当量数で、ルイス酸は触媒量（約０．０５モル当量数）〜２モル当量数で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（例えば、ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、トルエンなどの炭化系水素類、アセトニトリル、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温、とりわけ室温〜約６０℃で好適に進行する。
【０１１９】
（工程２）
次に、出発化合物１または中間体化合物５を出発物質として用いて、公知の方法により、ウレア化試薬を、出発化合物１または中間体化合物５と反応させることにより、イミノ窒素原子上でウレア化して、中間体化合物６を製造する。
ウレア化反応に用いられるウレア化試薬としては、イソシアナートや、Ｎ−アルキルカルバモイルハライド試薬（例えば、Ｎ−メチルカルバモイルクロリド）またはＮ,Ｎ−ジアルキルカルバモイルハライド試薬（例えば、Ｎ,Ｎ−ジメチルカルバモイルクロリド）が挙げられ、塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）の存在下、もしくは非存在下、使用することができる。
反応基質に対して、ウレア化試薬は、ほぼ当量モル数〜いくらか過剰当量モル数（例えば、約１．０モル当量）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜室温、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１２０】
（工程３）
次に、適宜、前記工程１において水酸基の保護基を導入した場合には、中間体化合物６を出発物質として用いて、公知の方法により、導入された水酸基の保護基を脱保護することにより、中間体化合物７を製造する。
この脱保護反応は、前記反応スキーム１の工程３と同様に、保護基の種類に応じて適当な反応条件（例えば、試薬等）下で行うことができる。例えば、水酸基の保護基（略語ＲＰＲＯ）がシリル型保護基（例えば、ＴＭＳ）であるときは、酸性条件下での加水分解（例えば、酢酸−ＴＨＦ−水）またはフッ化物イオン供与試薬（例えば、ＴＢＡＦ）を用いて処理することにより、実施することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（例えば、ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜１００℃、とりわけ０℃〜５０℃で好適に進行する。
【０１２１】
（工程４）
更に、前記反応スキーム１の工程４と同様に、中間体化合物６または中間体化合物７を出発物質として用いて、公知の方法により、ホスホロアミダイト化して、所望するウレア系統（例えば、メチルウレア系統、およびイソプロピルウレア系統）の本発明化合物を製造する。
ホスホロアミダイト化試薬としては、例えば、２−シアノエチル−Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミダイトが挙げられ、塩基（例えば、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡ）の存在下、使用することができる。
反応基質に対して、ホスホロアミダイト化試薬は１モル当量数〜１０モル当量数、好ましくは１モル当量数〜５モル当量数（例えば、３モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、アセトニトリル、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜６０℃、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１２２】
また、上記の工程（１）〜工程（４）のうち、複数の工程（例えば、工程（１）と工程（２）、工程（２）と工程（３）、および工程（１）〜工程（３））を連続して行ってもよい。
【０１２３】
なお、上記工程１の実施前から工程４の実施後のいずれかの段階で、適宜、核酸塩基の環上の置換基を修飾（例えば、シトシン環のアミノ置換基のベンゾイル化、もしくはアセチル化）してもよい。
【０１２４】
（アリール系統化合物）
一般式ＩにおけるＸが式（ＩＩ−２）で表される基である、いわゆるアリール系統の本発明化合物の製造方法を記載する。製造スキームの例は以下の反応スキーム３に示す通りである。
反応スキーム３
【化１８】
2020100826.tif 000020
【０１２５】
（工程１）
出発物質として前記の出発化合物１を用いて、公知の方法によるアリール化反応を行う前に、前記反応スキーム１の工程１と同様に、出発化合物１中の核酸塩基部分（略語Ｂで表す）を別の保護されていてもよい核酸塩基部分（略語Ｂ’で表す）で核酸塩基交換反応を行った後に、アリール化反応を行ってもよい。
核酸塩基交換反応（トランスグリコシル反応）は、公知の方法により、チミン（Ｔ）、ウラシル（Ｕ）等の核酸塩基のピリミジン塩基部分を、別の保護されていてもよい核酸塩基部分（例えば、アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、または５−メチルシトシン（ＭｅＣ））に置換することによって、核酸塩基部分が交換された中間体化合物８を製造することができる。該塩基交換反応は、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ）の存在下で実施することができ、シリル化剤（例えば、ＢＳＡ）を反応させることによって反応を促進することができる。
また、この水酸基の保護基の導入は、保護基の種類に応じて有機合成化学（例えば、核酸合成）でよく知られる反応条件下、実施することができる。例えば、水酸基の保護基がシリル型保護基（例えば、ＴＭＳ）である場合には、シリル化剤（例えば、ＢＳＡ、ヘキサメチルジシラザン、ＴＭＳクロリド）を使用することができる。この際、ルイス酸（例えば、ＴＭＳＯＴｆ、ＴＢＳＯＴｆ、塩化スズ）を添加してもよい。
反応基質に対して、シリル化剤は約１〜約２０モル当量数で、ルイス酸は触媒量（約０．０５モル当量数）〜２モル当量数で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（例えば、ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、トルエンなどの炭化系水素類、アセトニトリル、水またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温、とりわけ室温〜約６０℃で好適に進行する。
【０１２６】
（工程２）
次に、出発化合物１または中間体化合物８を出発物質として用いて、公知の方法により、アリール化試薬を、出発物質化合物１または中間体化合物８と反応させることにより、イミノ窒素原子上で芳香族化して、中間体化合物９を製造する。
芳香族化反応に用いられるアリール化試薬としては、所望するアリールのハライド化合物（例えば、クロロピリミジン、ジクロロピリミジン、フルオロピラジン、クロロトリアゾール、クロロオキサジアゾール、またはクロロチアジアゾール）が挙げられ、塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）の存在下、使用することができる。
反応基質に対して、アリール化試薬は、約１〜約１０モル当量数、好ましくは約１〜約５モル当量数（例えば、約３モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ＤＭＳＯ等の非プロトン性極性溶媒、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、室温〜高温、とりわけ高温（例えば、１２０〜１３０℃）で好適に進行する。
【０１２７】
（工程３）
更に、前記反応スキーム１の工程４と同様に、中間体化合物９または中間体化合物８を出発物質として用いて、公知の方法により、ホスホロアミダイト化して、所望するアリール系統（例えば、芳香族系統、およびヘテロアリール系統）の本発明化合物を製造する。
ホスホロアミダイト化試薬としては、例えば、２−シアノエチル−Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミダイトが挙げられ、塩基（例えば、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡ）の存在下、使用することができる。
反応基質に対して、ホスホロアミダイト化試薬は１モル当量数〜１０モル当量数、好ましくは１モル当量数〜５モル当量数（例えば、３モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、アセトニトリル、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜６０℃、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１２８】
また、上記の工程（１）〜工程（３）のうち、複数の工程（例えば、工程（１）と工程（２））を連続して行ってもよい
【０１２９】
なお、上記工程１の実施前から工程３の実施後のいずれかの段階で、適宜、核酸塩基の環上の置換基を修飾（例えば、シトシン環のアミノ置換基のベンゾイル化、もしくはアセチル化）してもよく、または、導入されたアリール基の芳香環上の置換基を修飾（例えば、クロロ基のアミノ基への変換）してもよく、あるいは、これらの両方の修飾を行ってもよい。
【０１３０】
（核酸塩基交換の別製法）
工程１に記載する核酸塩基交換反応の代わりに、以下の反応スキーム４に示す一連の反応を用いて核酸塩基の部分的返還を行ってもよい。かかる一連の反応は、文献（例えば、Ｃ.Ｈ.Ｋｉｍら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８７，３０，８６２.）に記載の方法に従って実施することができる。
反応スキーム４
【化１９】
2020100826.tif 000021
【０１３１】
（工程Ａ）
核酸塩基部分がチミンである中間体化合物９'（例えば、上記工程２で得られた中間体化合物２）を出発物質として用いて、アセチル化試薬（例えば、無水酢酸）を塩基（例えば、ピリジン）の存在下で反応させることにより、水酸基がアシル化された中間体化合物Ａを製造する。適宜、反応活性化試薬として、触媒量のＤＭＡＰを加えてもよい。
反応基質に対して、アセチル化試薬は、約１〜３モル当量数（例えば、約１．５モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、または塩基として使用するピリジン等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温（例えば、室温）で好適に進行する。
【０１３２】
（工程Ｂ）
次に、中間体化合物Ａを出発物質として用いて、チミン部をオキシ塩化リンなどのクロロ化剤にて活性化した後、１,２,４−トリアゾールを、塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）の存在下で反応させることにより、核酸塩基部分が１,２,４−トリアゾール基に置換された中間体化合物Ｂを製造する。
反応基質に対して、１,２,４−トリアゾールは、過剰モル当量（約５〜約２０モル当量数（例えば、約９〜１０モル当量数））で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、アセトニトリル、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、−２５℃〜室温、とりわけ０℃〜室温で好適に進行する。
【０１３３】
（工程Ｃ）
また、中間体化合物Ｂを出発物質として用いて、塩基（例えば、アンモニア水）を反応させて、上記工程Ａで導入したアセチル基および工程Ｂで修飾された１,２,４−トリアゾール基を除去して、核酸塩基部分が５−メチルシトシンである中間体化合物Ｃを製造する。
反応基質に対して、アンモニア水（例えば、２８％アンモニア水）は、過剰モル当量で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、アセトニトリル、またはそれらの混合溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜室温、とりわけ室温で好適に進行する。
【０１３４】
得られた中間体化合物Ｃを出発物質として用いて、適宜、核酸塩基の環上の置換基を修飾（例えば、シトシン環のアミノ置換基のベンゾイル化、もしくはアセチル化）、または、導入されたアリール基の芳香環上の置換基を修飾（例えば、クロロ基のアミノ基への変換）し、その後に、ホスホロアミダイト化して、所望するアリール系統（例えば、芳香族系統、およびヘテロアリール系統）の本発明化合物を製造する。
【０１３５】
（芳香族化の別製法１）
更に、工程２に記載する、アリール化試薬による芳香族化の代わりに、以下の反応スキーム５に示す一連の反応を用いて芳香族化を行ってもよい。
反応スキーム５
【化２０】
2020100826.tif 000022
【０１３６】
（工程Ｄ）
前記出発化合物１を用いて、チオウレア化試薬（例えば、１,１−チオカルボニルジイミダゾール）を反応させ、アンモニア水で処理することにより、イミノ窒素原子上でチオウレア化された中間体化合物Ｄを製造する。
反応基質に対して、チオウレア化試薬は、約１〜５モル当量数、とりわけ約２モル当量数で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜室温（例えば、室温）で好適に進行する。
【０１３７】
（工程Ｅ）
次に、中間体化合物Ｄを出発物質として用いて、メチル化試薬（例えば、ヨウ化メチル）と反応させることにより、Ｓ−メチル化され且つカルボイミド化された中間体化合物Ｅを製造する。
反応基質に対して、メチル化試薬は、約１〜５モル当量数、とりわけ３モル当量数で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜室温（例えば、室温）で好適に進行する。
【０１３８】
（工程Ｆ）
また、中間体化合物Ｅを出発物質として用いて、アセチル化試薬（例えば、無水酢酸）と塩基（例えば、ピリジン）の存在下で反応させることにより、カルボイミド基および水酸基がアシル化された中間体化合物Ｆを製造する。適宜、反応活性化試薬として、触媒量のＤＭＡＰを加えてもよい。
反応基質に対して、アセチル化試薬は、約１〜５モル当量数（例えば、約３モル当量数）で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（ＴＨＦ等のエーテル類、または塩基として使用するピリジン等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温（例えば、室温）で好適に進行する。
【０１３９】
（工程Ｇ）
また、中間体化合物Ｆを出発物質として用いて、メチルヒドラジンとの閉環反応により、１,２,４−トリアゾール環が形成した中間体化合物Ｇを製造する。
反応基質に対して、メチルヒドラジンは、過剰モル当量（約５〜２０モル当量数（例えば、約１０モル当量数））で使用することができる。
溶媒としては反応に影響を与えないものであればよく、適当な溶媒（エタノール等のアルコール溶媒等）中、実施することができる。反応温度は、０℃〜高温（例えば、室温）で好適に進行する。
【０１４０】
得られた中間体化合物Ｇを出発物質として用いて、適宜、核酸塩基の環上の置換基を修飾（例えば、シトシン環のアミノ置換基のベンゾイル化、もしくは）、または、導入されたアリール基の芳香環上の置換基を修飾（例えば、クロロ基のアミノ基への変換）し、その後に、ホスホロアミダイト化して、所望するアリール系統（例えば、芳香族系統、およびヘテロアリール系統）の本発明化合物を製造する。
【０１４１】
（オリゴマーの製法）
【化２１】
2020100826.tif 000023
【０１４２】
本発明化合物またはその塩は、オリゴヌクレオチドを製造するための、モノマー出発原料として使用することができる。オリゴヌクレオチドは、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩を用いてオリゴマー化反応をした後、必要に応じてアミノ保護基、および水酸基保護基を脱保護することで合成することができる。
オリゴマー化反応は例えば、合成化学（特に、核酸合成）上一般的に知られる方法であれば限定されるものではないが、例えばホスホロアミダイトホスホロアミダイト法により行うことができる。ホスホロアミダイトホスホロアミダイト法としては、例えばＷＯ  ２０１４／０４６２１２Ａ１に記載の方法に準じる方法に従って行うことができる。
本オリゴマー化反応により、一般式（Ｉ）で表されるヌクレオチドを１つ以上有しているオリゴヌクレオチドを製造することができる。
【０１４３】
すなわち、一般式（Ｉ’）で表されるオリゴヌクレオチドの製造方法は、以下の工程を含む：
a）一般式（Ｉ）で表される化合物、またはその塩を用いてオリゴマー化反応をした後、必要に応じてアミノ保護基、および水酸基保護基を脱保護する。
【０１４４】
また、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩の製造方法は、本明細書に記載する工程のうち、以下の少なくとも１つの工程を含んでいてもよい。
本発明化合物またはその塩を製造する工程。
例えば前記中間体化合物４、７または９で表される化合物またはその塩をホスホロアミダイト化反応させて、一般式（Ｉ’）で表される化合物またはその塩を製造する工程。
例えば前記中間体化合物３、または６で表される化合物の水酸基の保護基を脱保護することにより、前記中間体化合物４、７または９で表される化合物を製造する工程。
【０１４５】
（ホスホロチオエートオリゴマーの製法）
ホスホロアミダイト法によるオリゴヌクレオチドの合成では、亜リン酸基をリン酸基に変換する際に酸化剤が用いられる。このときに用いられる酸化剤の代わりにＤＤＴＴ（（（ジメチルアミノ−メチリデン）アミノ）−３Ｈ−１，２，４−ジチアザオリン−３−チオン）や、Ｂｅａｕｃａｇｅ試薬（３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン−１，１−ジオキシド）を用いると、リン酸基のＰ＝Ｏにおける酸素原子がＰ＝Ｓのように硫黄に置換されてチオリン酸基となった、保護基を有するホスホロチオエートオリゴマーが得られる。
【実施例】
【０１４６】
以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。なお、化合物の同定はマス・スペクトル、高速液体クロマト質量分析計；ＬＣＭＳ、ＮＭＲスペクトル、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等により行った。ＮＭＲにおいて水素核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）では共鳴周波数が４００ＭＨｚのものを、リン核磁気共鳴（３１Ｐ−ＮＭＲ）では共鳴周波数が１６１．８ＭＨｚのものを用いた。ＮＭＲに用いられる記号としては、ｓは一重線、ｄは二重線、ｄｄは二重の二重線、ｔは三重線、ｔｄは三重の二重線、ｑは四重線、quinは五重線、septは七重線、ｍは多重線、ｂｒは幅広い、ｂｒｓは幅広い一重線、ｂｒｄは幅広い二重線、ｂｒｔは幅広い三重線及びＪは結合定数を意味する。【０１４７】
各人工核酸の構造と略称（本明細書中で適宜、略称で記す）を、下記構造式に示した。
各人工核酸の構造と略称
【化２２】
2020100826.tif 000024
【０１４８】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｔの合成
【化２３】
2020100826.tif 000025
【０１４９】
実施例１  化合物２Ｔａの合成
１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２，４−ジオン
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２，４−ジオン（１ａ）（１２．３５ｇ， ２１．６１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６１ｍＬ）混合溶液にＢＳＡ（１３ｍＬ，５３．１７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温にて８時間撹拌した。そこにＢＳＡ（５．２ｍＬ，２１ｍｍｏｌ）、ＴＭＳＯＴｆ（２００μＬ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、再度室温にて混合物を１５時間撹拌した。反応液に５％重曹水（５０ｍＬ）を添加して撹拌し、ジクロロメタンで抽出した。水層をジクロロメタン（６１ｍＬ）で混合し、抽出して、ジクロロメタンの有機層を合液し混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９８／２）にて精製することで、化合物２Ｔａ（１０．４９ｇ， 収率７５％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 644 （M＋H）＋【０１５０】
実施例２  化合物２Ｔｂの合成
１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−メチルスルホニル−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２，４−ジオン
化合物２Ｔａ（１０．１９ｇ， １５．８３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）混合溶液にＤＩＰＥＡ（５．４ｍＬ，３１ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴下でメシルクロリド（１．４ｍＬ，１８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を氷浴下で１．５時間撹拌した。反応液に５％重曹水（２０ｍＬ）を添加して撹拌し、ジクロロメタンで抽出した。水層をジクロロメタン（２０ｍＬ）で混合し、抽出して、ジクロロメタンの有機層を合液し混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９８／２）にて精製することで、化合物２Ｔｂ（６．５６ｇ， 収率５７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 720 （M−H）−【０１５１】
実施例３  化合物２Ｔｃの合成
１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２，４−ジオン
化合物２Ｔｂ（３．０２ｇ， ４．１３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）混合液に氷浴下でＴＢＡＦ（１．３５ｍＬ，４．５８ｍｍｏｌ，１Ｍ  テトラヒドロフラン溶液）を添加し、混合物を３０分間撹拌した。反応液に１０％塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）、ジクロロメタン（２０ｍＬ）を添加して撹拌し、ジクロロメタンで抽出した。水層をジクロロメタン（２０ｍＬ）で混合し、抽出して、ジクロロメタンの有機層を混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９８／２）にて精製することで、化合物２Ｔｃ（２．４７ｇ， 収率９２％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 648 （M−H）−【０１５２】
実施例４  化合物２Ｔｄ
３−［［（１Ｒ，４Ｒ，６Ｒ，７Ｓ）−４−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−６−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−メチルスルホニル−５−オキサ−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１）
化合物２Ｔｃ（２．４７ｇ， ３．８０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１２．５ｍＬ）溶液に氷冷下にてＤＩＰＥＡ（２．００ｍＬ， １２．０ｍｍｏｌ）、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ジイソプロピルクロロホスホロアミダイト（２．１０ｍＬ， ９．４０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて５時間撹拌した。そこに氷冷下にて５％炭酸水素ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）を加えて室温にて撹拌した後、ジクロロメタンで抽出した。水層をジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出し、ジクロロメタンの有機層を合液し混合した。これを減圧下、溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、６０／４０〜４０／６０）を行うことで、本発明化合物１としての化合物２Ｔｄ（２．１３ｇ， 収率６６％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 850 （M＋H）＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 150.30， 149.12【０１５３】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−ｍＣの合成
【化２４】
2020100826.tif 000026
【０１５４】
実施例５  化合物２ｍＣｃの合成
Ｎ−[１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１ａ（１０．３３ｇ，１８．１ｍｍｏｌ）とＮ−（５−メチル−２−オキソ−１Ｈ−ピリミジン−４−イル）ベンズアミド（１２．４２ｇ，５４．２ｍｍｏｌ）のトルエン（１８０ｍＬ）懸濁液にＢＳＡ（４４ｍＬ，１８０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて１５分間撹拌した。そこにＴＭＳＯＴｆ（０．５２ｍＬ，２．７１ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間撹拌した。反応液をＩＰＥ（１００ｍＬ）と飽和重曹水（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）の混合液中に加え、混合物を１０分間撹拌し、不溶物をセライトろ去した。ろ液から水層を除き、有機層を水（５０ｍＬ）、飽和食塩水（５０ｍＬ）にて順次洗浄した。フェーズセパレーターに通し、溶媒留去した。残渣にジクロロメタン（９０ｍＬ）を加えて溶解し、トリエチルアミン（５．０ｍＬ，３６．０ｍｍｏｌ）、メタンスルホン酸無水物（３４６３ｍｇ，１９．９ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて４０分間撹拌した。メタンスルホン酸無水物（９４４ｍｇ，５．４２ｍｍｏｌ）を追加して、混合物を室温にて３０分間撹拌した。さらにメタンスルホン酸無水物（９４４ｍｇ，５．４２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．３ｍＬ，９．０６ｍｍｏｌ）を追加して、混合物を室温にて２０分間撹拌した。酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、水（４０ｍＬ）および飽和重曹水（４０ｍＬ）を加えて、混合物を撹拌した。水層を除き、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した後、フェーズセパレーターに通して溶媒留去し、真空乾燥した。残渣にＴＨＦ（９０ｍＬ）を加えて溶液とし、氷冷下にてＴＢＡＦ（０．１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２１．７ｍＬ，２１．７ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を氷冷下にて１５分間撹拌した。酢酸エチル（９０ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（４０ｍＬ）、および水（４０ｍＬ）を加えて撹拌した。水層を除き、フェーズセパレーターに通して溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９５／５）にて精製することで、化合物２ｍＣｃ（５７０２ｍｇ，３工程での収率３８％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 753（M＋H）＋【０１５５】
実施例６  化合物２ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２）
実施例４と同様にして化合物２ｍＣｃ（８０９９ｍｇ， ９．８９ｍｍｏｌ）から、本発明化合物２としての化合物２ｍＣｄ（６８０９ｍｇ，収率７２％）を得た。
MS（APCI）: m/z = 954（M＋H）＋【０１５６】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｇの合成
【化２５】
2020100826.tif 000027
【０１５７】
実施例７  化合物２Ｇａの合成
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート
化合物１ａ（５０４０ｍｇ， ８．８１７ｍｍｏｌ）と［２−（２−メチルプロパノイルアミノ）−９Ｈ−プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（５４００ｍｇ，１２．９７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（２４．７ｍＬ）溶液にＢＳＡ（１４．８ｍＬ，６０．４６ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を６４℃にて１時間撹拌した。続いて、そこにＴＭＳＯＴｆ（０．１６７ｍＬ，０．８６４ｍｍｏｌ）を内温６０℃で維持しながら徐々に加えて、混合物を１時間撹拌した。放冷後、反応液を別途調整したクロロホルム（４０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（４０ｍＬ）の混合溶液に徐々に加えて、混合物を撹拌した。不溶物を吸引ろ過後、ろ液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）にて洗浄した後、硫酸ナトリウムにて乾燥した。続いて、ろ液を減圧留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）にて精製することで、化合物２Ｇａ（６３５０ｍｇ， 収率７９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 935 （M＋H）＋【０１５８】
実施例８  化合物２Ｇｂの合成
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−メチルスルホニル−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート
化合物２Ｇａ（２３７０ｍｇ， ２．５３７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２４．９ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（０．６９２ｍＬ，４．９８４ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて５分間撹拌した。続いて、そこに氷冷下、メタンスルホニルクロライド（０．１９３ｍＬ，２．４８８ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を１時間撹拌した。氷冷下にて反応液に塩化メチレン（３０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を加えて撹拌し、分液した。有機層を飽和食塩水（３０ｍＬ）にて洗浄した後、硫酸ナトリウムにて乾燥した。続いて、ろ液を減圧留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、６７／３３〜５０／５０）にて精製することで、化合物２Ｇｂ（２２１０ｍｇ， 収率８８％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 1013 （M＋H）＋【０１５９】
実施例９  化合物２Ｇｃの合成 ［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート
化合物２Ｇｂ（２２００ｍｇ， ２．１７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１１ｍＬ）溶液に、氷冷下、ＴＢＡＦ（２．４ｍＬ，３．４０７ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて５時間撹拌した。氷冷下にて反応液に酢酸エチル（３０ｍＬ）と飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）を加えて撹拌し、分液した。有機層を飽和食塩水（３０ｍＬ）にて洗浄した後、硫酸ナトリウムにて乾燥した。続いて、ろ液を減圧留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、６０／４０〜５０／５０）にて精製した。原料を除くために再度、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）にて精製することで、化合物２Ｇｃ（１０７０ｍｇ， 収率５２％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 941 （M＋H）＋【０１６０】
実施例１０  化合物２Ｇｄの合成
［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物３）
化合物２Ｇｃ（１０７０ｍｇ， １．１３９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５．６９０ｍＬ）溶液に氷冷下、ＤＩＰＥＡ（０．５９０ｍＬ，３．４０７ｍｍｏｌ）と２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミダイト（０．５１０ｍＬ，２．２８２ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて２２時間撹拌した。氷冷下にて反応液にジクロロメタン（２０ｍＬ）と飽和重曹水（２０ｍＬ）を加えて撹拌し、分液した。水層を除き、有機層をフェーズセパレーターに通した。ろ液を減圧留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜４０／６０）にて精製することで、本発明化合物３としての化合物２Ｇｄ（５４８ｍｇ， 収率４２％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 1141（M＋H）＋【０１６１】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ａの合成
【化２６】
2020100826.tif 000028
【０１６２】
実施例１１  化合物２Ａｃの合成
Ｎ−［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−プリン−６−イル］ベンズアミド
化合物１ａ（１０．０ｇ， １７．６ｍｍｏｌ）とＮ−（９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（５．０４ｇ，２１．１ｍｍｏｌ）のトルエン（１７６ｍＬ）懸濁液にＢＳＡ（３０ｍＬ，１２３ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を６０℃に昇温し、３０分撹拌した。そこにＴＭＳＯＴｆ（１．０３ｍＬ，５．３４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１５分間撹拌した。氷冷下、撹拌しながら、ＩＰＥ（１００ｍＬ）と飽和重曹水（１００ｍＬ）の混合液中に反応液を加え、混合物を２０分間撹拌し、不溶物をろ去した。ろ残をＥｔ２Ｏ（２０ｍL）で２度洗浄した後、ろ液を分液し、飽和食塩水（５０ｍＬ）にて洗浄した。フェーズセパレーターに通した後、減圧下濃縮した。残渣にジクロロメタン（２４．９ｍＬ）を加えて溶解し、ピリジン（４．５７ｍＬ，５６．５ｍｍｏｌ）、メタンスルホン酸無水物（３６１４ｍｇ，２０．７５ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて３０分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加えて撹拌し、分液した。有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）にて洗浄した後、フェーズセパレーターに通し、減圧下溶媒留去した。残渣にＴＨＦ（８８ｍＬ）を加えて溶液とし、氷冷下にてＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２１．１ｍＬ，２１．１ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を氷冷下にて３０分間撹拌した。酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加えて、混合物を室温にて撹拌した。分液し、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した後、フェーズセパレーターに通して溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９５／５）にて精製することで、化合物２Ａｃ（１０．６ｇ，３工程での収率７５％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 763（M＋H）＋【０１６３】
実施例１２  化合物２Ａｄの合成
Ｎ−［９−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物４）
化合物２Ａｃ（５．６０ｍｇ， ７．０１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液に氷冷下、ＤＩＰＥＡ（４．８ｍＬ，２８．０ｍｍｏｌ）と２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミダイト（４．７ｍＬ，２１．０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて４時間撹拌した。氷冷下にてエタノール（１．２ｍＬ，２１．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて５分間撹拌した。再び氷冷下とし、そこに飽和重曹水（２０ｍＬ）、および飽和食塩水（２０ｍＬ）を加えて撹拌し、有機層をフェーズセパレーターに通した。ろ液を減圧留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、６７／３３〜１０／９０）にて精製することで、本発明化合物４としての化合物２Ａｄ（５．４４ｇ， 収率７７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 964 （M＋H）＋【０１６４】
ＡＬＮＡ［Ｂｓ］−Ｔの合成
【化２７】
2020100826.tif 000029
【０１６５】
実施例１３  化合物３Ｔｂの合成
１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２，４−ジオン
化合物２Ｔａ（１．００ｇ， １．５６ｍｍｏｌ）にトルエンを加えて共沸した。残渣にジクロロメタン（５ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．４３ｍＬ，３．１ｍｍｏｌ）を添加し、完溶させた。混合溶液を氷冷し、ベンゼンスルホニルクロリド（０．２１ｍＬ，１．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を氷冷下にて４時間撹拌した。反応液に５％炭酸カリウム水溶液（２０ｍＬ）を添加して撹拌し、ジクロロメタン（５ｍＬ）で抽出した。水層をジクロロメタン（５ｍＬ）で混合し、抽出して、ジクロロメタンの有機層を合液し混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、４０／６０〜２０／８０）にて精製することで、化合物３Ｔｂ（０．７８ｇ， 収率６４％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 782 （M−H）−【０１６６】
実施例１４  化合物３Ｔｃの合成
１−[(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２，４−ジオン
実施例３と同様にして、化合物３Ｔｂ（０．７８ｇ， ０．９９ｍｍｏｌ）から化合物３Ｔｃ（０．５９ｇ， 収率８４％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 710 （M−H）−【０１６７】
実施例１５  化合物３Ｔｄの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロニルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物５）
化合物３Ｔｃ（５９９ｍｇ， ０．７６５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルアンモニウム  テトラゾリド（１７１ｍｇ, ０．９９６ｍｍｏｌ）、３−ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスファニロキシプロパンニトリル（０．３６ ｍＬ, １．１ ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温にて１９時間撹拌した。反応液に酢酸エチル（１０ｍＬ）、水（５ｍＬ）を添加し、撹拌後に水層を分離した。水層に酢酸エチル（１０ｍＬ）を添加し、混合後に有機層を分離した。有機層を合液し混合し、４０℃にて減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、６７／３３〜１０／９０）にて精製することで、本発明化合物５としての化合物３Ｔｄ（０．６５ｇ， 収率８６％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 912（M＋H）＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.68， 149.22【０１６８】
ＡＬＮＡ［Ｂｓ］−ｍＣの合成
【化２８】
2020100826.tif 000030
【０１６９】
実施例１６  化合物３Ｃｂの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
実施例１３と同様にして、国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した化合物１ｂ（１．００ｇ， １．３４ｍｍｏｌ）から化合物３ｍＣｂ（０．８５ｇ， 収率７１％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 887 （M＋H）＋【０１７０】
実施例１７  化合物３ｍＣｂの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
実施例１４と同様にして、化合物３ｍＣｂ（０．８５ｇ， ０．９６ｍｍｏｌ）から化合物３ｍＣｃ（０．７８ｇ， 収率９９％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 813 （M＋H）＋【０１７１】
実施例１８  化合物３ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（ベンゼンスルホニル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル）オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物６）
実施例１５と同様にして、化合物３ｍＣｃ（０．７８ｇ， ０．８９ｍｍｏｌ）から、本発明化合物６としての化合物３ｍＣｄ（０．５３ｇ， 収率５５％）を合成した。
MS（ESI）: m/z =1015（M＋H）＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.94， 149.34【０１７２】
ＡＬＮＡ［ｍＵ］−Ｔの合成
【化２９】
2020100826.tif 000031
【０１７３】
実施例１９  化合物４Ｔｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物１ａ（１．２０ｇ， ２．１０ｍｍｏｌ）をトルエン共沸し、残渣のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）混合溶液にＮ−ジイソプロピル−Ｎ−エチルアミン（０．６１ｍＬ，３．５ｍｍｏｌ）を添加し、そこに、氷浴下でＮ−メチルカルバモイルクロリド（０．２０ｇ，２．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１ｍＬ）を添加し、混合物を氷浴下で３時間撹拌した。反応液に５％重曹水（２０ｍＬ）、酢酸エチル（１０ｍＬ）を添加して撹拌し、酢酸エチルで抽出した。水層を酢酸エチル（１０ｍＬ）で２度抽出して、有機層を合液し混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）にて精製することで、化合物４Ｔｃ（１．２８ｇ， 収率９７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 627 （M−H）−【０１７４】
実施例２０  化合物４Ｔｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物７）
実施例１５と同様にして、化合物４Ｔｃ（１．１６ｇ， １．８ｍｍｏｌ）から、本発明化合物７としての化合物４Ｔｄ（０．５６ｇ， 収率３７％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 828（M−H）−
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.31， 147.44【０１７５】
ＡＬＮＡ［ｍＵ］−ｍＣの合成
【化３０】
2020100826.tif 000032
【０１７６】
実施例２１  化合物４ｍＣａの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１ａ（１０５．０ｇ，１８４ｍｍｏｌ）、５−メチルシトシン（６９．０ｇ，５５１ｍｍｏｌ）、および１，２−ジクロロエタン（９１８ｍL）の混合液に、ＢＳＡ（５８４ｍL，２３９０ｍｍｏｌ）を１８分間かけて滴下した。混合物を６０℃に昇温し、２０分間撹拌した。氷冷し内温を１９．５度まで冷却した後、そこにＴＭＳＯＴｆ（１０ｍL，５５．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃に昇温した。４０分間撹拌した後、反応液を氷冷し、５％炭酸水素ナトリウム水溶液（５２５ｍL）を滴下した。次いで、そこにクロロホルム（１０５０ｍＬ）、１５％塩化ナトリウム水溶液（５２５ｍＬ）を加えた。得られたスラリーをセライトろ過した後、ろ残をクロロホルム（５２５ｍL）にて洗浄することで、残渣１とろ液１を得た。残渣１に酢酸エチル（２１００ｍＬ）、水（２１００ｍＬ）を加え、混合物を１時間撹拌した。これをセライトろ過した後、残渣を酢酸エチル（１０５０ｍＬ）にて洗浄し、ろ液２を得た。ろ液２を分液し、有機層を水（５２５ｍＬ）にて２回洗浄した。一方、ろ液１は分液し、水層をクロロホルム（５２５ｍＬ）にて抽出した。有機層を合液し、水１０５０ｍＬにて２回洗浄した。得られた有機層を減圧下濃縮し、淡黄色固体（１２５．６ｇ）を得た。これにＴＨＦ（５５０ｍＬ）を加えて撹拌し、１M  ＴＢＡＦ／ＴＨＦ溶液（２７６ｍＬ，２７６ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて３時間撹拌した後、反応液に水（５５０ｍＬ）を加えてクエンチし、さらにクロロホルム（５５０ｍＬ）を加えて分液した。水層を再度クロロホルム（２７５ｍＬ）にて抽出し、有機層を合液した。有機層を水で洗浄した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、２０／１〜４／１）にて精製することで、化合物４ｍＣａ（６９．６２ｇ， 収率６２％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 593（M＋Na）＋【０１７７】
実施例２２  化合物４ｍＣｂの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−アミノ−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物４ｍＣａ（１．００ｇ， １．７５ｍｍｏｌ）をトルエン共沸し、残渣のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）混合溶液にトリエチルアミン（０．４９ｍＬ，３．５ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴下でＮ−メチルカルバモイルクロリド（０．１７ｇ，１．８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１ｍＬ）を添加し、混合物を氷浴下で３時間撹拌した。反応液に水道水（１５ｍＬ）、酢酸エチル（１ｍＬ）、クロロホルム（１５ｍＬ）を添加して撹拌し、有機溶媒で抽出した。水層をクロロホルム（５ｍＬ）で抽出して、有機層を合液し混合した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、固体をろ過した。ろ液を溶媒留去により、化合物４ｍＣｂ（１．１８ｇ，収率ｑｕａｎｔ．）を得た。残渣は精製せずに次反応に用いた。
MS（ESI）: m/z = 627 （M−H）−【０１７８】
実施例２３  化合物４ｍＣｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物４ｍＣｂ（１．１８ｇ）をトルエン共沸し、残渣のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）混合溶液に室温にて安息香酸無水物（０．５１ｇ，２．２７ｍｍｏｌ）、メタノール（０．０１ｍＬ，０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を外浴７０℃で４時間撹拌した。そこに、５％重曹水（１０ｍＬ）、酢酸エチル（１０ｍＬ）を添加して撹拌し、有機溶媒で抽出した。水層を酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出して、有機層を合液し混合した。有機層を溶媒留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）にて精製することで、化合物４ｍＣｃ（０．９９ｇ， 収率７７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 731 （M−H）−【０１７９】
実施例２４  化合物４ｍＣｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物８）
実施例１５と同様にして、化合物４ｍＣｃ（０．９８ｇ， １．３４ｍｍｏｌ）から本発明化合物８としての化合物４ｍＣｄ（０．９６ｇ， 収率７７％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 933 （M＋H）＋【０１８０】
ＡＬＮＡ［ｍＵ］−Ｇの合成
【化３１】
2020100826.tif 000033
【０１８１】
実施例２５  化合物４Ｇａの合成
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート  化合物１ａ（３０．５ｇ， ５３．４ｍｍｏｌ）と［２−（２−メチルプロパノイルアミノ）−９Ｈ−プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（２６．７ｇ，６４．１ｍｍｏｌ）のトルエン（２６７ｍＬ）懸濁液にＢＳＡ（９１ｍＬ，３７２ｍｍｏｌ）を２０分間ほどかけて滴下し、混合物を６０℃に昇温し、５分間撹拌した。トルエン（１００ｍL）を追加して、混合物をさらに６０℃にて１０分間撹拌した。そこにＴＭＳＯＴｆ（１．０３ｍＬ，５．３４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて２０分間撹拌した。氷冷下、撹拌しながら、ＩＰＥ（１００ｍＬ）と飽和重曹水（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）の混合液中に反応液を加え、混合物を２時間撹拌し、不溶物をろ去した。残渣をＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で２度洗浄した後、ろ液を分液し、有機層を水（５０ｍＬ）、飽和食塩水（５０ｍＬ）にて順次洗浄した。フェーズセパレーターに通し、減圧下、濃縮し、真空乾燥することで、粗成績体として４Ｇａ（４８．６７ｇ）を得た。
MS（ESI）: m/z = 954（M＋H）＋【０１８２】
実施例２６  化合物４Ｇｃの合成
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート
化合物４Ｇａ（１７．４ｇ，１８．６ｍｍｏｌ）にＴＨＦ（１００ｍＬ）を加えて溶解し、氷冷下にてＤＩＰＥＡ（４．８７ｍＬ，２８．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルカルバモイルクロリド（１８３０ｍｇ，１９．６ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を３０分間撹拌した。そこに、飽和重曹水（１００ｍＬ）、酢酸エチル（１００ｍＬ）を順次加え、混合物を室温として５分間撹拌した。分液した後、有機層を水（５０ｍＬ）、飽和食塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、フェーズセパレーターに通して溶媒留去し、真空乾燥した。残渣にＴＨＦ（９０ｍＬ）を加えて溶液とし、氷冷下にてＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、４．５４ｍＬ，４．５４ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を氷冷下にて２０分間撹拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加えて、混合物を室温として５分間撹拌した。分液し、有機層をフェーズセパレーターに通して溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９５／５）にて精製することで、化合物４Ｇｃ（９０３０ｍｇ，３工程での収率５４％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 919（M＋H）＋【０１８３】
実施例２７  化合物４Ｇｄの合成
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（メチルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物９）
実施例１２と同様にして、化合物４Ｇｃ（９０２０ｍｇ， ９．８２ｍｍｏｌ）から、本発明化合物９としての化合物４Ｃｄ（８７００ｍｇ， 収率７９％）を合成した。
MS（ESI）: m/z = 1197 （M＋H）＋【０１８４】
ＡＬＮＡ［ｍＵ］−Ａの合成
【化３２】
2020100826.tif 000034
【０１８５】
実施例２８  化合物４Ａａの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド  化合物１ａ（３０．０ｇ， ５２．５ｍｍｏｌ）とＮ−（９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（１５．０ｇ，６２．７ｍｍｏｌ）のトルエン（５００ｍＬ）懸濁液にＢＳＡ（９０ｍＬ，３６８ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を８０℃に昇温し、２０分間撹拌した。そこに、氷冷下にて、ＴＭＳＯＴｆ（１．０ｍＬ，５．１７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて２０分間撹拌した。氷冷下、撹拌しているＩＰＥ（２００ｍＬ）と飽和重曹水（２００ｍＬ）の混合液中に反応液を加え、混合物を２０分間撹拌し、不溶物をろ去した。ろ残をＥｔ２Ｏ（４０ｍＬ）で２度洗浄した後、ろ液を分液し、飽和食塩水にて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥した後、不溶物をろ去し、減圧下、濃縮し、真空乾燥することで粗成績体として４Ａａ（４０．５ｇ）を得た。
MS（ESI）: m/z = 757（M＋H）＋【０１８６】
実施例２９  化合物４Ａｂの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−Ｎ−メチル−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
粗成績体４Ａａ（８．２０ｇ）にＴＨＦ（８７ｍＬ）を加えて溶解し、そこに室温にてＤＩＰＥＡ（３．００ｍＬ，１７．２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルカルバモイルクロリド （９７０ｍｇ，１０．４ｍｍｏｌ）を順次加えて、混合物を３０分間撹拌した。そこに、酢酸エチル（１００ｍＬ）、飽和重曹水（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）を加え、分液した後、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、フェーズセパレーターに通して溶媒留去し、真空乾燥することで、粗成績体４Ａｂ（８．７０ｇ）を得た。
MS（ESI）: m/z = 813（M-H）−【０１８７】
実施例３０  化合物４Ａｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
粗成績体４Ａｂ（８．００ｇ）にＴＨＦ（１００ｍＬ）を加えて溶液とし、氷冷下にてＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、５．００ｍＬ，５．００ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を氷冷下にて１時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加えて、室温にて撹拌した。分液し、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した後、フェーズセパレーターに通して溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）にて精製することで、化合物４Ａｃ（６１００ｍｇ，３工程での収率８４％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 742（M＋H）＋【０１８８】
実施例３１  化合物４Ａｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−メチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１０）
実施例１２と同様にして４Ａｃ（６１００ｍｇ， ８．２０ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１０としての４Ａｄ（３８３０ｍｇ，収率４８％）を得た。
MS（APCI）: m/z = 942（M＋H）＋【０１８９】
ＡＬＮＡ［ｉｐＵ］−Ｔの合成
【化３３】
2020100826.tif 000035
【０１９０】
実施例３２  化合物５Ｔｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物１ａ（１５００ｍｇ， ２．６２４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２６ｍＬ）溶液に、氷冷下で２−イソシアナートプロパン（０．２７ｍｌ, ２.７ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温で１時間撹拌した。そこに、酢酸エチル（1０ｍＬ）、飽和重層水（２０ｍＬ）の混合液を加えて、分液後、水層を酢酸エチル１０ｍＬで２回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水１０ｍＬで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜０／１００）を行うことで、化合物５Ｔｃ（１９０４ｍｇ，収率ｑｕａｎｔ.）を得た。
MS（ESI）: m/z = 656（M-H）−【０１９１】
実施例３３  化合物５Ｔｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１１）
実施例４と同様にして化合物５Ｔｃ（２０２０ｍｇ， ２．８５ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１１としての化合物５Ｔｄ（１２７２．９ｍｇ， 収率５２％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 855（M-H）−【０１９２】
ＡＬＮＡ［ｉｐＵ］−ｍＣの合成
【化３４】
2020100826.tif 000036
【０１９３】
実施例３４  化合物５ｍＣｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した化合物１ｃ（１３００ｍｇ， １．６５７ｍｍｏｌ）から化合物５ｍＣｃ（１１６８ｍｇ， 収率９３％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 761（M+H）＋【０１９４】
実施例３５  化合物５ｍＣｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１２）
実施例４と同様にして化合物５ｍＣｃ（１１６８ｍｇ， １．３７８ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１２としての化合物５ｍＣｄ（１００２．８ｍｇ， 収率７５％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 961（M+H）＋【０１９５】
ＡＬＮＡ［ｉｐＵ］−Ｇの合成
【化３５】
2020100826.tif 000037
【０１９６】
実施例３６  化合物５Ｇｃの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（イソプロピルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート
国際公開第２０１７／０４７８１６号の実施例に記載の方法に従って合成した化合物１ｄ（２．４２ｇ， ２．８１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２８ｍＬ）溶液に、氷冷下でイソシアン酸イソプロピル（０．３１ｍＬ，３．０９ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温で３時間撹拌した。反応液に飽和重曹水を加えて撹拌し、フェーズセパレーターを通した後、溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜２０／８０）にて精製することで、化合物５Ｇｃ（１．４１ｇ，収率５３％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 948（M＋H）＋【０１９７】
実施例３７  化合物５Ｇｄの合成
［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（イソプロピルカルバモイル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−２−（２−メチルプロパノイルアミノ）プリン−６−イル］Ｎ，Ｎ−ジフェニルカルバメート（本発明化合物１３）
実施例４と同様にして化合物５Ｇｃ（１．４１ｇ，１．４９ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１３としての化合物５Ｇｄ（１．２０ｇ， 収率７０％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 1148（M＋H）＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.42, 149.39【０１９８】
ＡＬＮＡ［ｉｐＵ］−Ａの合成
【化３６】
2020100826.tif 000038
【０１９９】
実施例３８  化合物５Ａｃの合成
(１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−カルボキサミド
化合物１ａ（1０．０ｇ， １７．５ｍｍｏｌ）とＮ−（９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（５．０ｇ，２１．０ｍｍｏｌ）のトルエン（１７５ｍＬ）懸濁液にＢＳＡ（３０ｍＬ，１２２ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を６０℃に昇温し１０分撹拌したのち、そこにＴＭＳＯＴｆ（０．３４ｍＬ，１．８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で１５分間撹拌した。氷冷下、撹拌しながらＩＰＥ（１００ｍＬ）と飽和重曹水（１００ｍＬ）の混合液中に反応液を加え、混合物を２０分間撹拌し、不溶物をろ去した。ろ残をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄した後、ろ液を分液し、飽和食塩水にて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥した後、不溶物をろ去し、減圧下、濃縮した。残渣にジクロロメタン（１６２ｍＬ）を加えて溶解し、室温にてイソシアン酸イソプロピル（１．８ｍＬ，１８ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を６０分間撹拌した。そこに、酢酸エチル（１００ｍＬ）、飽和重曹水（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）を加え、分液した後、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、溶媒留去した。残渣にＴＨＦ（１６２ｍＬ）を加えて溶液とし、氷冷下にてＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２．３９ｍＬ，８．１１ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて２４時間撹拌した。酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加えて、混合物を室温にて撹拌した。分液し、有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜０／１００）にて精製することで、化合物５Ａｃ（１０．１ｇ，３工程での収率７７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 770（M＋H）＋【０２００】
実施例３９  化合物５Ａｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−ベンズアミドプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ−イソプロピル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１４）
実施例４と同様にして化合物５ｃ（７．０ｇ，９．０９ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１４としての化合物５ｄ（４．６ｇ， 収率５１％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 970（M＋H）＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.4【０２０１】
ＡＬＮＡ［ｄｍＵ］−Ｔの合成
【化３７】
2020100826.tif 000039
【０２０２】
実施例４０  化合物６Ｔｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物１ａ（１５１２ｍｇ， ２．６４５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２６ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．４８３ｍｌ, ２．７７３ｍｍｏｌ）を加えて氷冷したのち、そこにＮ，Ｎ−ジメチルカルバモイルクロリド（０．２５５ｍＬ， ２．７７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に昇温したのち、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ， １２．９ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を４時間撹拌した。そこに、酢酸エチル（１０ｍＬ）、飽和重層水（２０ｍＬ）の混合液を加えて撹拌し、分液後、水層を酢酸エチル１０ｍＬで２回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水１０ｍＬで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜０／１００）を行うことで、化合物６Ｔｃ1（１７０５ｍｇ， 収率ｑｕａｎｔ．）を得た。
MS（ESI）: m/z = 642（M-H）−【０２０３】
実施例４１  化合物６Ｔｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１５）
実施例４と同様にして化合物６Ｔｃ（１７５８ｍｇ， ２．７３５ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１５としての化合物６Ｔｄ（１５６５ｍｇ， 収率６８％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 842（M-H）−【０２０４】
ＡＬＮＡ［ｄｍＵ］−ｍＣの合成
【化３８】
2020100826.tif 000040
【０２０５】
実施例４２  化合物６ｍＣｃの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド
化合物１ｃ（１３００ｍｇ， １．６５７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１６．６ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．３１７ｍＬ, １.８２０ｍｍｏｌ）を加えて氷冷したのち、そこにＮ，Ｎ−ジメチルカルバモイルクロリド（０．１６８ｍＬ， １．８３ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温にて１０分間撹拌した。混合物を２時間加熱還流したのち、室温で酢酸エチル（1０ｍＬ）、飽和重層水（２０ｍＬ）の混合液に加え、分液後、水層を酢酸エチル１０ｍＬで２回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水１０ｍＬで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、７０／３０〜３０／７０）を行うことで、化合物６ｍＣｃ（１７０５ｍｇ， 収率７９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 747（M+H）＋【０２０６】
実施例４３  化合物６ｍＣｄの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（４−ベンズアミド−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−１−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキサミド（本発明化合物１６）
実施例４と同様にして化合物６ｍＣｃ（１０１９ｍｇ， １．３１２ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１６としての化合物６ｍＣｄ（９３６．５ｍｇ， 収率７６％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 947（M+H）＋【０２０７】
ＡＬＮＡ［２Ｐｙｍ］−Ｔの合成
【化３９】
2020100826.tif 000041
【０２０８】
実施例４４  化合物７Ｔｃの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２，４−ジオン
化合物１ａ（２．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、２−クロロピリミジン（１．２０ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．０５ｍＬ，１７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（１７．５ｍＬ）の混合物を、窒素雰囲気下１３０℃で６時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物７Ｔｃ（１．７４  ｇ，収率７７％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３５Ｎ５Ｏ７での計算値[M+Na]+: 672.2429, 実測値: 672.2427【０２０９】
実施例４５  化合物７Ｔｄの合成
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物１７）
化合物７Ｔｃ（１．７３ｇ，２．６６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１３ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（１．３９ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下にて２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミミド（１．１９ｍＬ，５．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、減圧下溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝６０／４０〜１０／９０、Ｄｉｏｌ：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０、ＮＨ：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、本発明化合物１７としての化合物７Ｔｄ（１．５３ｇ，収率６８％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４５Ｈ５２Ｎ７Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 850.3693, 実測値: 850.3699
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.72， 148.83【０２１０】
ＡＬＮＡ［２Ｐｙｍ］−ｍＣの合成
【化４０】
2020100826.tif 000042
【０２１１】
実施例４６  化合物７ｍＣａの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物７Ｔａ（３．６８ｇ，５．６７ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６９．３ｍｇ，０．５６７ｍｍｏｌ）、ピリジン（２８ｍＬ）の混合物に、無水酢酸（０．８０４ｍＬ，８．５１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去、減圧下濃縮した。酢酸エチルでピリジンを共沸後、ジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、化合物７ｍＣａ（３．４９ｇ，収率８９％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３８Ｈ３８Ｎ５Ｏ８での計算値 [M+H]+: 692.2720, 実測値: 692.2713【０２１２】
実施例４７  化合物７ｍＣｂの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−［５−メチル−２−オキソ−４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル］−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物７ｍＣａ（３．４６ｇ，５．００ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（３．１１ｇ，４５．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８．７１ｍＬ，５０．０ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（５０ｍＬ）の混合物に、氷冷下、オキシ塩化リン（０．７９２ｍＬ，８．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去、減圧下濃縮した。ジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、化合物７ｍＣｂ1（３．４０ｇ，収率９２％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４０Ｈ３８Ｎ８Ｏ７での計算値 [M+H]+: 743.2942, 実測値: 743.2945【０２１３】
実施例４８  化合物７ｍＣｃの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２−オン
化合物７ｍＣｂ（３．４０ｇ，４．５８ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（４６ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（３１ｍＬ）を加え、混合物を室温で３日間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去、減圧下濃縮した。ジイソプロピルエーテルと少量の酢酸エチルでトリチュレートし、化合物７ｍＣｃ（２．６５ｇ，収率８９％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３６Ｎ６Ｏ６での計算値 [M+H]+: 649.2775, 実測値: 649.2766【０２１４】
実施例４９  化合物７ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物７ｍＣｃ（２．６２ｇ，４．０４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（９５９ｍｇ，４．２４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物７ｍＣｄ（１．４２ｇ，収率４７％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４３Ｈ４０Ｎ６Ｏ７での計算値 [M+H]+:753.3037, 実測値: 753.3035【０２１５】
実施例５０  化合物７ｍＣｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物１８）
化合物７ｍＣｄ（１．４０ｇ，１．８６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（９ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．９７２ｍＬ，５．５８ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（０．８３０ｍＬ，３．７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０〜３０／７０、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物１８としての化合物７ｍＣｅ（１．０１ｇ，収率５７％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ５２Ｈ５７Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値 [M+Na]+: 975.3935, 実測値: 975.3931
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.17， 149.23【０２１６】
ＡＬＮＡ［２Ｐｙｍ］−Ｇの合成
【化４１】
2020100826.tif 000043
【０２１７】
実施例５１  化合物７Ｇｃの合成
Ｎ’−[９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン
化合物１ｄ（３．００ｇ， ３．５０ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）、およびＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に２８％アンモニア水（４０ｍＬ）を加えた。メタノール（２０ｍＬ）、およびＴＨＦ（２０ｍＬ）を加えて、混合物を室温にて１６時間静置した。４０％メチルアミンのメタノール溶液（４０ｍＬ）を加えて、混合物を室温に４時間静置した。溶媒留去した後、トルエンで共沸し、減圧乾燥した。残渣にＤＭＳＯ（３５ｍＬ）を加えて溶解し、そこにＤＩＰＥＡ（４．８ｍＬ，２８．０ｍｍｏｌ）、および２−フルオロピリミジン（０．６６ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を８０℃にて２時間撹拌した後、１００℃にて２時間撹拌した。そこに２−フルオロピリミジン（０．６６ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）を追加して、混合物をさらに１００℃にて２時間撹拌した。そこに２−フルオロピリミジン（０．２２ｍＬ，３．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．６ｍＬ，９．３ｍｍｏｌ）を再度追加して、混合物を１００℃にて２時間撹拌した。反応液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（２．３ｍＬ，１７．０ｍｍｏｌ）を加えて室温にて撹拌した。１時間後、酢酸エチル（２００ｍＬ）、飽和重曹水（２０ｍＬ）、水（８０ｍＬ）を加えて分液した。有機層を水（５０ｍＬ）にて３回洗浄した後、飽和食塩水にて洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、不溶物をろ去して減圧下溶媒留去した。さらに分液時の水層をクロロホルム（１００ｍＬ）にて３回抽出し、水（１００ｍＬ）、飽和食塩水にて洗浄した。クロロホルム層を硫酸ナトリウムにて乾燥した後、不溶物をろ去して減圧下溶媒留去し、先の抽出物と合わせてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９２／８）にて精製することで化合物７Ｇｃ（１．６６ｇ，３工程での収率６５％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 731（M＋H）+【０２１８】
実施例５２  化合物７Ｇｄの合成
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−６−ホルムアミジン（本発明化合物１９）
実施例４と同様にして化合物７Ｇｃ（１．５８ｇ，２．１６ｍｍｏｌ）から、本発明化合物１９としての化合物７Ｇｄ（１．０７ｇ，収率５３％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 931（M＋H）+【０２１９】
ＡＬＮＡ［２Ｐｙｍ］−Ａの合成
【化４２】
2020100826.tif 000044
【０２２０】
実施例５３  化合物７Ａａの合成
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した化合物１ｅ（５００ｍｇ，０．７３０ｍｍｏｌ）、２−フルオロピリミジン（２１５ｍｇ，２．１９ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．５０９ｍＬ，２．９２ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（７ｍＬ）の混合物を、窒素雰囲気下１３０℃で７時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去して減圧下溶媒留去し濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、化合物７Ａａ（２０７ｍｇ，収率３７％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４３Ｈ３８Ｎ８Ｏ６での計算値[M+Na]+: 785.2807, 実測値: 785.2807【０２２１】
実施例５４  化合物７Ａｂの合成
Ｎ’−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物２０）
化合物７Ａａ（１２６ｍｇ，０．１６５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（３ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（８６．２μＬ，０．４９５ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（７３．６μＬ，０．３３０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で５時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝６０／４０〜１０／９０）にて精製し、本発明化合物２０としての化合物７Ａｂ（１１０ｍｇ，収率６９％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５２Ｈ５５Ｎ１０Ｏ７Ｐでの計算値 [M+Na]+: 985.3885,実測値: 985.3878
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.33， 149.47【０２２２】
ＡＬＮＡ［４Ｐｙｍ］−Ｔの合成
【化４３】
2020100826.tif 000045
【０２２３】
実施例５５  化合物８Ｔａの合成１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ベンジルオキシ−１−（ベンジルオキシメチル）−５−（６−クロロピリミジン−４−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した化合物１ｆ（１．００ｇ，２．２２ｍｍｏｌ）、４，６−ジクロロピリミジン（３９８ｍｇ，２．６６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．１６ｍＬ，６．６６ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）の混合物（２バッチ）を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で各バッチ毎に５時間撹拌した。バッチを合液し反応液の不溶物をろ取し、ＥｔＯＨで洗浄することで、化合物８Ｔａ（１．５４ｇ，収率６２％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ２９Ｈ２８ＣｌＮ５Ｏ５での計算値 [M+H]+: 562.1857, 実測値: 562.1859【０２２４】
実施例５６  化合物８Ｔｂの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（６−クロロピリミジン−４−イル）−７−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物８Ｔａ（３．４９ｇ，６．２１ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（６２ｍＬ）の混合物に、窒素雰囲気下−７８℃でトリクロロボラン（１．０ｍｏｌ／Ｌ  ジクロロメタン溶液、６２ｍＬ，６２．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を徐々に室温まで昇温しながら終夜撹拌した。氷冷下、反応液にＭｅＯＨ（６２ｍＬ）をゆっくり加え、室温でしばらく撹拌した。反応液を濃縮後、酢酸エチルでトリチュレートし、化合物８Ｔｂ（３．２７ｇ）を粗体として得た。
HRMS(FAB): Ｃ１５Ｈ１６ＣｌＮ５Ｏ５での計算値[M+H]+: 382.0918, 実測値: 382.0919【０２２５】
実施例５７  化合物８Ｔｃの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物８Ｔｂ（３．２７ｇ，６．２１ｍｍｏｌ，粗体）、ＭｅＯＨ（６２ｍＬ）に２０％水酸化パラジウム（６５４ｍｇ，２０ｗｔ％）を加え、混合物を水素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に水（３１ｍＬ）を加えて不溶物を溶解させ、パラジウムをセライトろ過した。ろ液を濃縮し、水をトルエンで共沸した。残渣をＭｅＯＨでトリチュレートすることで、化合物８Ｔｃ（１．７５ｇ，２工程での収率８１％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ１５Ｈ１７Ｎ５Ｏ５での計算値[M+H]+: 348.1302, 実測値: 348.1308【０２２６】
実施例５８  化合物８Ｔｄの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物８Ｔｃ（４４４ｍｇ，１．２８ｍｍｏｌ）、ピリジン（１３ｍＬ）の混合物に、４，４−ジメトキシトリチルクロリド（５２０ｍｇ，１．５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。氷冷下、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に反応液を滴下し、そこに酢酸エチルを加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。ピリジンを酢酸エチルで共沸除去し、残渣をジイソプロピルエーテルでトリチュレートすることで、化合物８Ｔｄ（６５２ｍｇ，収率７８％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３５Ｎ５Ｏ７での計算値[M+H]+: 650.2609, 実測値: 650.2600【０２２７】
実施例５９  化合物８Ｔｅの合成
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２１）
化合物８Ｔｄ（３００ｍｇ，０．４６２ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３２２μＬ，１．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３０９μＬ，１．３９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物２１としての化合物８Ｔｅ（２６３ｍｇ，収率６７％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４５Ｈ５２Ｎ７Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 850.3693, 実測値: 850.3685
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.93， 149.47【０２２８】
ＡＬＮＡ［４Ｐｙｍ］−ｍＣの合成
【化４４】
2020100826.tif 000046
【０２２９】
実施例６０  化合物８Ｃａの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物８Ｔｄ（２３４ｍｇ，０．３６０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（４．４ｍｇ，０．０３６０ｍｍｏｌ）、ピリジン（３．６ｍＬ）の混合物に無水酢酸（５１．１μＬ，０．５４０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸銅水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、化合物８Ｃａ（２１９ｍｇ，収率８８％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３８Ｈ３７Ｎ５Ｏ８での計算値[M+H]+: 692.2720, 実測値: 692.2720【０２３０】
実施例６１  化合物８Ｃｂの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−［５−メチル−２−オキソ−４−（１,２,４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル）−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物８Ｃａ（２０１ｍｇ，０．２９１ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（１８１ｍｇ，２．６２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５０７μＬ，２．９１ｍｍｏｌ）アセトニトリル（３ｍＬ）の混合物に、氷冷下オキシ塩化リン（４６．１μＬ，０．４９４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。ジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、化合物８Ｃｂ（２１１ｍｇ，収率９８％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４０Ｈ３８Ｎ８Ｏ７での計算値[M+H]+: 743.2942,実測値: 743.2939【０２３１】
実施例６２  化合物８Ｃｃの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物８Ｃｂ（６１３ｍｇ，０．８２５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（８．３ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（５．５ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液のアセトニトリルを濃縮した。不溶物をろ取し、水で洗浄した。粗体を酢酸エチルで再度トリチュレートすることで、化合物８Ｃｃ（３８０ｍｇ，収率７１％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３６Ｎ６Ｏ６での計算値[M+H]+: 649.2775,実測値: 649.2773【０２３２】
実施例６３  化合物８Ｃｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物８Ｃｃ（３７８ｍｇ，０．５８３ｍｍｏｌ）、ピリジン（６ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（１９８ｍｇ，０．８７５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３日間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ジオール：０．５％トリエチルアミン−クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０、ＳｉＯ２：０．５％トリエチルアミン−クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物８Ｃｄ（２４７ｍｇ，収率５６％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４３Ｈ４０Ｎ６Ｏ７での計算値[M+H]+: 753.3037, 実測値: 753.3040【０２３３】
実施例６４  化合物８Ｃｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピリミジン−４−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２２）
化合物８Ｃｄ（１３５ｍｇ，０．１７９ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（２ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（１２５μＬ，０．７１６ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（１２０μＬ，０．５３７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で２日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝６０／４０〜１０／９０、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物２２としての化合物８Ｃｅ（６１．９ｍｇ，収率３６％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ５２Ｈ５７Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 953.4115, 実測値: 953.4109
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.65， 150.24【０２３４】
ＡＬＮＡ［４−ＣＦ３−２Ｐｙｍ］−Ｔの合成
【化４５】
2020100826.tif 000047
【０２３５】
実施例６５  化合物９Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（５００ｍｇ，０．８７５ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４−トリフルオロピリミジン（２３９ｍｇ，１．３１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５７μＬ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（４．４ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で３０分間撹拌した。反応液に２−クロロ−４−トリフルオロピリミジン（２３９ｍｇ，１．３１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５７μＬ，２．６３ｍｍｏｌ）を追加し、混合物をマイクロウェーブ照射下１２０℃で１時間撹拌した。反応液を濃縮し、酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物９Ｔａ（５４５ｍｇ，収率８７％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３７Ｈ３４Ｆ３Ｎ５Ｏ７での計算値[M+H]+: 718.2489, 実測値: 718.2491【０２３６】
実施例６６  化合物９Ｔｂの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２３）
化合物９Ｔａ（５２７ｍｇ，０．７３４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（７ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３８４μＬ，２．２０ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３２８μＬ，１．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０〜３０／７０、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０）にて精製し、本発明化合物２３としての化合物９Ｔｂ（５３０ｍｇ，収率７９％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４６Ｈ５１Ｆ３Ｎ７Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 918.3567, 実測値: 918.3568
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.04, 149.12, 149.20, 149.47【０２３７】
ＡＬＮＡ［４−ＣＦ３−２Ｐｙｍ］−Ｇの合成
【化４６】
2020100826.tif 000048
【０２３８】
実施例６７  化合物９Ｃａの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物４Ｃａ（５００ｍｇ，０．８７６ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４−トリフルオロピリミジン（３１７μＬ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６１０μＬ，３．５０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（４．４ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１５０℃で１時間撹拌した。反応液を濃縮し、酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物９Ｃａ（１８６ｍｇ，収率３０％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３７Ｈ３５Ｆ３Ｎ６Ｏ６での計算値[M+H]+: 717.2648, 実測値: 717.2651【０２３９】
実施例６８  化合物９Ｃｂの合成Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物９Ｃａ（３９５ｍｇ，０．５５１ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５．５ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（１３１ｍｇ，０．５７９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／１５）にて精製し、化合物９Ｃｂ（３３５ｍｇ，収率７４％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４４Ｈ３９Ｆ３Ｎ６Ｏ７での計算値[M+H]+: 821.2911, 実測値: 821.2932【０２４０】
実施例６９  化合物９Ｃｃの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアンエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２４）
化合物９Ｃｂ（３１６ｍｇ，０．３８５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（４ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（２０１μＬ，１．１６ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（１７２μＬ，０．７７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０〜５０／５０、Ｄｉｏｌ：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０〜５０／５０）にて精製し、本発明化合物２４としての化合物９Ｃｃ（２２７ｍｇ，収率５８％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ５３Ｈ５６Ｆ３Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 1021.3989, 実測値: 1021.3993
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.15, 149.28, 149.36, 149.60【０２４１】
ＡＬＮＡ［５−Ｃｌ−２Ｐｙｍ］−Ｇの合成
【化４７】
2020100826.tif 000049
【０２４２】
実施例７０  化合物１０Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（５００ｍｇ，０．８７５ｍｍｏｌ）、２，５−ジクロロピリミジン（１９６ｍｇ，１．３１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５７μＬ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（４．４ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１５０℃で１時間撹拌した。反応液の不溶物をクロロホルムで溶解させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１０Ｔａ（２６３ｍｇ，収率４４％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３４ＣｌＮ５Ｏ７での計算値[M+H]+: 684.2225, 実測値: 684.2226【０２４３】
実施例７１  化合物１０Ｔｂの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２５）
化合物１０Ｔａ（２４０ｍｇ，０．３５１ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（３．５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（１８３μＬ，１．０５ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（１５７μＬ，０．７０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で４日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０）にて精製し、本発明化合物２５としての化合物１０Ｔｂ（２０１ｍｇ，収率６５％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４５Ｈ５１ＣｌＮ７Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 884.3304, 実測値: 884.3303
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.12【０２４４】
ＡＬＮＡ［５−Ｃｌ−２Ｐｙｍ］−ｍＣの合成
【化４８】
2020100826.tif 000050
【０２４５】
実施例７２  化合物１０ｍＣａの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物４Ｃａ（５００ｍｇ，０．８７６ｍｍｏｌ）、２，５−ジクロロピリミジン（３９１ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６１０μＬ，３．５０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（４．４ｍＬ）の混合物（２バッチ）を、各バッチ毎にマイクロウェーブ照射下１５０℃で１時間撹拌した。反応液を濃縮し、水を加え、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１０ｍＣａ（３８１ｍｇ，収率３２％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３５ＣｌＮ６Ｏ６での計算値[M+H]+: 683.2385, 実測値: 683.2389【０２４６】
実施例７３  化合物１０ｍＣｂの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１０ｍＣａ（３７５ｍｇ，０．５４９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５．５ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（１３０ｍｇ，０．５７６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に無水安息香酸（２４．８ｍｇ，０．１１０ｍｍｏｌ）を追加し、さらに室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１０ｍＣｂ（４２２ｍｇ，収率９８％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４３Ｈ３９ＣｌＮ６Ｏ７での計算値[M+Na]+: 809.2461, 実測値: 809.2463【０２４７】
実施例７４  化合物１０ｍＣｃの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（５−クロロピリミジン−２−イル）−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２６）
化合物１０ｍＣｂ（４０９ｍｇ，０．５２０ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（２７２μＬ，１．５６ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（２３２μＬ，１．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０〜５０／５０、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０〜５０／５０）にて精製し、本発明化合物２６としての化合物１０ｍＣｃ（２６４ｍｇ，収率５１％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５２Ｈ５６ＣｌＮ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+Na]+: 1009.3540, 実測値: 1009.3521 
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.28【０２４８】
ＡＬＮＡ［６−ＮＭｅ２−４Ｐｙｍ］−Ｔの合成
【化４９】
2020100826.tif 000051
【０２４９】
実施例７５  化合物１１Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（６−クロロピリミジン−４−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（１．００ｇ，１．７５ｍｍｏｌ）、４，６−２−ジクロロピリミジン（３９１ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（９１４μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１８ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で１時間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１１Ｔａ（１．００ｇ，収率８４％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３４ＣｌＮ５Ｏ７での計算値[M+H]+: 684.2225, 実測値: 684.2214【０２５０】
実施例７６  化合物１１Ｔｂの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１１Ｔａ（５００ｍｇ，０．７３１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６３７μＬ，３．６６ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（５ｍＬ）の混合物に、ジメチルアミン塩酸塩（１７９ｍｇ，２．１９ｍｍｏｌ）を加え、マイクロウェーブ照射下１５０℃で３０分間撹拌した。不溶物をろ取することで、化合物１１Ｔｂ（３８６ｍｇ，収率７６％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３８Ｈ４０Ｎ６Ｏ７での計算値[M+H]+: 693.3037, 実測値: 693.3030【０２５１】
実施例７７  化合物１１Ｔｃの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミン）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物２７）
化合物１１Ｔｂ（３３５ｍｇ，０．４８４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（２５３μＬ，１．４５ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（２１６μＬ，０．９６８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液にＤＭＦ（２ｍＬ）を加え、窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液にＤＩＰＥＡ（２５３μＬ，１．４５ｍｍｏｌ）、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（２１６μＬ，０．９６８ｍｍｏｌ）を追加し、混合物を窒素雰囲気下室温で２日間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０、Ｄｉｏｌ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物２７としての化合物１１Ｔｃ（１８９ｍｇ，収率４４％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４７Ｈ５７Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 893.4115, 実測値: 893.4115
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.83, 148.99【０２５２】
ＡＬＮＡ［６−ＮＭｅ２−４Ｐｙｍ］−ｍＣの合成
【化５０】
2020100826.tif 000052
【０２５３】
実施例７８  化合物１１ｍＣａの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（６−クロロピリミジン−４−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物４ｍＣａ1（２．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、４，６−ジクロロピリミジン（６２６ｍｇ，４．２０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．８３ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１７．５ｍＬ）の混合物を、１００℃で４時間撹拌した。反応液を濃縮し、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１１ｍＣａ（１．３４ｇ，収率５６％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３５ＣｌＮ６Ｏ６での計算値[M+H]+: 683.2385, 実測値: 683.2384【０２５４】
実施例７９  化合物１１ｍＣｂの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１１ｍＣａ（１．１２ｇ，１．６４ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン（５０％水溶液，  ８６３μＬ，８．２０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１１ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１５０℃で３０分間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨ：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１１ｍＣｂ（１．０９ｇ，収率９６％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３８Ｈ４１Ｎ７Ｏ６での計算値[M+Na]+: 714.3011, 実測値: 714.3003【０２５５】
実施例８０  化合物１１ｍＣｃの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［６−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１１ｍＣｂ（１．０８ｇ，１．５６ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（８ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（３８９ｍｇ，１．７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１１ｍＣｃ（１．０２ｇ，収率８２％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４５Ｈ４５Ｎ７Ｏ７での計算値[M+H]+: 796.3453, 実測値: 796.3466【０２５６】
実施例８１  化合物１１ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［（６−ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物２８）
化合物１１ｍＣｃ（９７２ｍｇ，１．２２ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１２  ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（６３７μＬ，３．６６ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（５４５μＬ，２．４４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物２８としての化合物１１ｍＣｄ（７８８ｍｇ，収率６５％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５４Ｈ６２Ｎ９Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 996.4532, 実測値: 996.4513 
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.06, 149.17【０２５７】
ＡＬＮＡ［２−ＮＭｅ２−４Ｐｙｍ］−Ｔの合成
【化５１】
2020100826.tif 000053
【０２５８】
実施例８２  化合物１２Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（２−クロロピリミジン−４−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（２．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、２，４−ジクロロピリミジン（７８２ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．８３ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１７．５ｍＬ）の混合物を、１００℃で４．５時間撹拌した。反応液を濃縮し、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１２Ｔａ（１．８６ｇ，収率７８％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ３６Ｈ３４ＣｌＮ５Ｏ７での計算値[M+H]+: 684.2225, 実測値: 684.2223【０２５９】
実施例８３  化合物１２Ｔｂの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１２Ｔａ（５００ｍｇ，０．７３１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６３７μＬ，３．６６ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（５ｍＬ）の混合物に、ジメチルアミン塩酸塩（１７９ｍｇ，２．１９ｍｍｏｌ）を加え、マイクロウェーブ照射下１５０℃で３０分間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製した。ジイソプロピルエーテルでトリチレートし、化合物１２Ｔｂ（６４８ｍｇ）を粗体として得た。
HRMS(FAB): Ｃ３８Ｈ４０Ｎ６Ｏ７での計算値[M+H]+: 693.3037,実測値: 693.3041【０２６０】
実施例８４  化合物１２Ｔｃの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）オキシプロパンニトリル（本発明化合物２９）
化合物１２Ｔｂ（６３８ｍｇ，０．７３１ｍｍｏｌ，粗体）、ジクロロメタン（７ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３８２μＬ，２．１９ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３２６μＬ，１．４６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で５日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物２９としての化合物１２Ｔｃ（３０４ｍｇ，２工程での収率４７％）を得た。
HRMS(FAB): Ｃ４７Ｈ５７Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 893.4115,実測値: 893.4128
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.91, 149.33【０２６１】
ＡＬＮＡ［２−ＮＭｅ２−４Ｐｙｍ］−ｍＣの合成
【化５２】
2020100826.tif 000054
【０２６２】
実施例８５  化合物１２ｍＣａの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（２−クロロピリミジン−４−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物４ｍＣａ（２．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、２，４−ジクロロピリミジン（６２７ｍｇ，４．２０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．８３ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１７．５ｍＬ）の混合物を、１００℃で３時間撹拌した。反応液を濃縮し、水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１２ｍＣａ（１．２８ｇ，収率５４％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３５ＣｌＮ６Ｏ６での計算値[M+Na]+: 705.2199,実測値: 705.2194【０２６３】
実施例８６  化合物１２ｍＣｂの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１２ｍＣａ（９４１ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン（５０％水溶液，７２５μＬ，６．９０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１４ｍＬ，０．１Ｍ）の混合物を、マイクロウェーブ照射下１５０℃で３０分間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨ：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１２ｍＣｂ（７８４ｍｇ，収率８２％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３８Ｈ４１Ｎ７Ｏ６での計算値[M+H]+: 692.3191,実測値: 692.3167【０２６４】
実施例８７  化合物１２ｍＣｃの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１２ｍＣｂ（７５４ｍｇ，１．０９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５．５ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（２７１ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１２ｍＣｃ（７３１ｍｇ，収率８４％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４５Ｈ４５Ｎ７Ｏ７での計算値[M+H]+:796.3453,実測値: 796.3440【０２６５】
実施例８８  化合物１２ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）ピリミジン−４−イル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３０）
化合物１２ｍＣｃ（７０９ｍｇ，０．８９１ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（９ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（４６６μＬ，２．６７ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３９７μＬ，１．７８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物３０としての化合物１２ｍＣｄ（４８２ｍｇ，収率５４％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５４Ｈ６２Ｎ９Ｏ８Ｐでの計算値[M+H]+: 996.4532, 実測値: 996.4526
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.19, 149.46, 149.65【０２６６】
ＡＬＮＡ［Ｐｒｚ］−Ｔの合成
【化５３】
2020100826.tif 000055
【０２６７】
実施例８９  化合物１３Ｔａの合成
［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（５００ｍｇ，０．８７５ｍｍｏｌ）、２−フルオロピラジン（２０１μＬ，２．６３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６１０μＬ，３．５０ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（８．８ｍＬ）の混合物を、窒素雰囲気下１４０℃で１．５時間、１５０℃で４．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０、ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、化合物１３Ｔａ（２２７ｍｇ，収率４０％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３５Ｎ５Ｏ７での計算値[M+Na]+: 672.2429, 実測値: 672.2409【０２６８】
実施例９０  化合物１３Ｔｂの合成
３−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３１）
化合物１３Ｔａ（２１４ｍｇ，０．３２９ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（６．６ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（１７２μＬ，０．９８７ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（１４７μＬ，０．６５８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ＮＨ：酢酸エチル／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、本発明化合物３１としての化合物１３Ｔｂ（２０４ｍｇ，収率７３％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４５Ｈ５２Ｎ７Ｏ８Ｐでの計算値[M+Na]+: 872.3507, 実測値: 872.3507
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.12, 149.31【０２６９】
ＡＬＮＡ［Ｐｒｚ］−ｍＣの合成
【化５４】
2020100826.tif 000056
【０２７０】
実施例９１  化合物１３ｍＣｂの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１３Ｔａ（７４６ｍｇ，１．１５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１４．０ｍｇ，０．１１５ｍｍｏｌ）、ピリジン（５．８ｍＬ）の混合物に無水酢酸（１６３μＬ，１．７３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。ピリジンを酢酸エチルで共沸除去し、残渣をジイソプロピルエーテルでトリチュレートし、化合物１３ｍＣｂ（７１２ｍｇ，収率９０％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３８Ｈ３７Ｎ５Ｏ８での計算値[M+Na]+: 714.2534, 実測値: 714.2520【０２７１】
実施例９２  化合物１３ｍＣｃの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２−オキソ−（４−１,２,４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル］−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１３ｍＣｂ（６９２ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（６２２ｍｇ，９．００ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．７４ｍＬ，１０．０ｍｍｏｌ）アセトニトリル（１０ｍＬ）の混合物に、氷冷下オキシ塩化リン（１５８μＬ，１．７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で１時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮することで、化合物１３ｍＣｃ（７５３  ｍｇ）を粗体として得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４０Ｈ３８Ｎ８Ｏ７での計算値[M+Na]+: 765.2756, 実測値: 765.2750【０２７２】
実施例９３  化合物１３ｍＣｄの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１３ｍＣｃ（７４４ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ，粗体）、アセトニトリル（１０ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（６．７ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮することで、化合物１３ｍＣｄ（６３８ｍｇ，収率９８％，２工程）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３６Ｎ６Ｏ６での計算値[M+Na]+: 671.2589, 実測値: 671.2591【０２７３】
実施例９４  化合物１３ｍＣｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１３ｍＣｄ（６２５ｍｇ，０．９６３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（４．８ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（３２７ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１３ｍＣｅ（２４５ｍｇ，収率３４％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４３Ｈ４０Ｎ６Ｏ７での計算値[M+Na]+: 775.2851, 実測値: 775.2845【０２７４】
実施例９５  化合物１３ｍＣｆの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−ピラジン−２−イル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３２）
化合物１３ｍＣｅ（５６５ｍｇ，０．７５１ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（７．５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３９２μＬ，２．２５ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３３５μＬ，１．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物３２としての化合物１３ｍＣｆ（３６９ｍｇ，収率５２％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５０Ｈ４４Ｎ６Ｏ８での計算値[M+Na]+: 975.3929, 実測値: 975.3923
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.25, 149.49【０２７５】
ＡＬＮＡ［Ｔｒｚ］−Ｔの合成
【化５５】
2020100826.tif 000057
【０２７６】
実施例９６  化合物１４Ｔａの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボチオアミド
化合物１ａ（２．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１７．５ｍＬ）の混合物に、１，１−チオカルボニルジイミダゾール（１．２５ｇ，７．００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に２８％アンモニア水（１７．５ｍＬ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し、不溶物をろ取した。不溶物を水で洗浄することで、化合物１４Ｔａ（２．３５ｇ）を粗体として得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３３Ｈ３４Ｎ４Ｏ７での計算値[M+Na]+: 653.2040, 実測値: 653.2026【０２７７】
実施例９７  化合物１４Ｔｂの合成
メチル  （１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキシミドチオエート
化合物１４Ｔａ（２．３５ｇ，３．５０ｍｍｏｌ，粗体）、ＴＨＦ（１７．５ｍＬ）の混合物に、ヨウ化メチル（６５４μＬ，１０．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜８０／２０）にて精製し、化合物１４Ｔｂ（１．８８ｇ，２工程での収率８３％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３４Ｈ３６Ｎ４Ｏ７での計算値[M+H]+: 645.2377, 実測値: 645.2374【０２７８】
実施例９８  化合物１４Ｔｃの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−［（Ｚ）−Ｎ−アセチル−Ｃ−メチルスルファニル−カルボイミドリル］−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１４Ｔｂ（１．８７ｇ，２．９０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３５．４ｍｇ，０．２９０ｍｍｏｌ）、ピリジン（１４．５ｍＬ）の混合物に無水酢酸（８２２μＬ，８．７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸銅水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することにより、化合物１４Ｔｃ（２．１１ｇ，収率１００％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３８Ｈ４０Ｎ４Ｏ９Ｓでの計算値[M+Na]+: 751.2408, 実測値: 751.2398【０２７９】
実施例９９  化合物１４Ｔｄの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１４Ｔｃ（１．６６ｇ，２．２８ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（２３ｍＬ）の混合物に、メチルヒドラジン（１．２０ｍＬ，２２．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１４Ｔｄ（９８５ｍｇ，収率６５％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３８Ｎ６Ｏ７での計算値[M+Na]+: 689.2694, 実測値: 689.2684【０２８０】
実施例１００  化合物１４Ｔｅの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３３）
化合物１４Ｔｄ（５７６ｍｇ，０．８６４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（８．６ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（４５１μＬ，２．５９ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３８５μＬ，１．７３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で２日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ジオール：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物３３としての化合物１４Ｔｅ（５１７ｍｇ，収率６９％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４５Ｈ５５Ｎ８Ｏ８Ｐでの計算値[M+Na]+:889.3773 , 実測値: 889.3778
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.40, 148.45【０２８１】
ＡＬＮＡ［Ｔｒｚ］−ｍＣの合成
【化５６】
2020100826.tif 000058
【０２８２】
実施例１０１  化合物１４Ｃａの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１４Ｔｄ（９１８ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１６．９ｍｇ，０．１３８ｍｍｏｌ）、ピリジン（６．９ｍＬ）の混合物に無水酢酸（１９６μＬ，２．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、化合物１４Ｃａ（９５５ｍｇ，収率９８％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３８Ｈ４０Ｎ６Ｏ８での計算値[M+Na]+: 731.2800, 実測値: 731.2791【０２８３】
実施例１０２  化合物１４Ｃｂの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−３−（５−メチル−２−オキソ−４−（１,２,４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１４Ｃａ（９１５ｍｇ，１．２９ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（８０２ｍｇ，１１．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．２５ｍＬ，１２．９ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１２．９ｍＬ）の混合物に、氷冷下オキシ塩化リン（２０４μＬ，２．１９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、化合物１４Ｃｂ（１．０８ｇ）を粗体として得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４０Ｈ４１Ｎ９Ｏ７での計算値[M+Na]+: 782.3021, 実測値: 782.3019【０２８４】
実施例１０３  化合物１４Ｃｃの合成
４−アミノ−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１４Ｃｂ（１．０７ｇ，１．２９ｍｍｏｌ，粗体）、アセトニトリル（１２．９ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（８．６ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、濃縮することで、化合物１４Ｃｃ（７４８ｍｇ，２工程での収率８７％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３６Ｈ３９Ｎ７Ｏ６での計算値[M+Na]+: 688.2854, 実測値: 688.2857【０２８５】
実施例１０４  化合物１４Ｃｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１４Ｃｃ（７３３ｍｇ，１．１０ｍｍｏｌ）、ピリジン（５．５ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（３７４ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に２規定水酸化ナトリウム水溶液（５．５ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１４Ｃｄ（７４４ｍｇ，収率８８％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４３Ｈ４３Ｎ７Ｏ７での計算値[M+Na]+: 792.3116, 実測値: 792.3111【０２８６】
実施例１０５  化合物１４Ｃｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３４）
化合物１４Ｃｄ（７３０ｍｇ，０．９４８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（９．５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．４９５ｍＬ，２．８４ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（０．４２３ｍＬ，１．９０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物３４としての化合物１４Ｃｅ（６７２ｍｇ，収率７３％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５２Ｈ６０Ｎ９Ｏ８Ｐでの計算値[M+Na]+: 992.4195, 実測値: 992.4186
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.50, 148.58【０２８７】
ＡＬＮＡ［Ｔｒｚ］−Ｇの合成
【化５７】
2020100826.tif 000059
【０２８８】
実施例１０６  化合物１４Ｇａの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（２−アミノ−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボチオアミド
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した化合物１ｇ（５５．０ｇ，５８．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２７０ｍＬ）溶液に、１，１−チオカルボニルジイミダゾール（２１．０ｇ，１１８ｍｍｏｌ）を投入し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応液に２８％アンモニア水（２７０ｍＬ）を加え、混合物を室温で３０分撹拌後に５０℃にて４６時間撹拌した。反応液にクロロホルム（７００ｍＬ）を加え、しばらく撹拌後に有機層を分液し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。不溶物をろ去後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて粗精製した。得られた残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）に溶解しトルエン（２５０ｍＬ）を加えた。溶媒を約３００ｍＬ減圧留去し（固形物析出）、得られた懸濁液にジイソプロピルエーテル（ＩＰＥ）（５０ｍＬ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。析出物を濾取し、濾取体をＩＰＥ（５０ｍＬ）で洗浄後、減圧乾燥することにより、化合物１４Ｇａ（２７．９ｇ，収率７２％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝６５６［Ｍ＋Ｈ］＋【０２８９】
実施例１０７  化合物１４Ｇｂの合成
メチル  （１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（２−アミノ−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−５−カルボキシイミドチオエート
化合物１４Ｇａ（２７．９ｇ，４２．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液に氷冷下にてヨウ化メチル（４．２４ｍＬ，６８．１ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で２４時間撹拌した。反応液を、重曹水（飽和重曹水（４００ｍＬ）および水（４００ｍＬ）より調製）およびクロロホルム（１４００ｍＬ）の混液に撹拌しながら加えた。しばらく撹拌後に有機層を分液し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。セライト濾過し、濾液を減圧濃縮後にトルエン共沸することにより化合物１４Ｇｂ（２６．９ｇ，収率８２％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝６７０［Ｍ＋Ｈ］＋【０２９０】
実施例１０８  化合物１４Ｇｃの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−５−（Ｎ−アセチル−Ｃ−メチルスルファニル−カルボンイミドイル）−３−（２−アミノ−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１４Ｇｂ（２６．９ｇ，３４．７ｍｍｏｌ）のピリジン（１００ｍＬ）溶液に無水酢酸（９．８３ｍＬ，１０４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４２４ｍｇ，３．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で４時間撹拌した。反応液に酢酸エチル（４００ｍＬ）および飽和重曹水（２００ｍＬ）を加え、２０分激しく撹拌後に有機層を分液した。有機層を水（２×２００ｍＬ）および飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥した。不溶物をろ去後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をトルエン共沸することにより、化合物１４Ｇｃ（３０．５ｇ）を得た。精製は行わず、このまま次工程に供した。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７５４［Ｍ＋Ｈ］＋【０２９１】
実施例１０９  化合物１４Ｇｄの合成
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン
化合物１４Ｇｃ（３０．５ｇ，３５．９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（３００ｍＬ）溶液にメチルヒドラジン（１８．９ｍＬ，３５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌し、さらに５０℃で３時間撹拌した。反応液に水（１００ｍＬ）を加え、減圧留去した。クロロホルム（２５０ｍＬ）を加え、しばらく緩やかに撹拌後にフェーズセパレーターに通し有機層を分液した。溶媒を減圧留去後にトルエン共沸した。得られた残渣をＩＰＥ（１００ｍＬ）で懸濁し、超音波漕に２０分間付けた後に析出物を濾取し、風乾後減圧乾燥した。
得られた残渣のＤＭＦ（７５ｍＬ，９７０ｍｍｏｌ）溶液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド  ジメチルアセタール（５０ｍＬ，３７５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて２時間撹拌した。反応溶媒を減圧留去し、得られた濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０，ＳｉＯ２：酢酸エチル／メタノール＝９０／１０〜７２／２８）にて精製し、粗精製した。粗成績体を酢酸エチル（２００ｍＬ）で懸洗し、ろ取した後、減圧乾燥することで化合物１４Ｇｄ（１１．２ｇ，収率４０％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７４８［Ｍ＋Ｈ］＋【０２９２】
実施例１１０  化合物１４Ｇｅの合成
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−ホルムアミジン（本発明化合物３５）
化合物１４Ｇｄ（６．００ｇ，７．６０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液に氷冷下にてＤＩＰＥＡ（５．３０ｍＬ，３０．６ｍｍｏｌ）を加え、続いて２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（５．１２ｍＬ，２３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で６時間撹拌した。反応液を氷冷し、飽和重曹水（１２０ｍＬ）およびクロロホルム（１６０ｍＬ）を加え１５分激しく撹拌後に有機層を分液し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。不溶物をろ去後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：酢酸エチル／メタノール＝１００／０〜８４／１６）にて精製し、本発明化合物３５としての化合物１４Ｇｅ（５．５９ｇ，収率７４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝９４８［Ｍ＋Ｈ］＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.52, 148.59【０２９３】
ＡＬＮＡ［Ｔｒｚ］−Ａの合成
【化５８】
2020100826.tif 000060
【０２９４】
実施例１１１  化合物１４Ａａの合成
ベンゾトリアゾール−１−イル（ベンゾトリアゾール−２−イル）メタンイミン
【化５９】
2020100826.tif 000061
ベンゾトリアゾール（７．７０ｇ，６４．６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１３５ｍＬ）溶液に氷冷下にて臭化シアン（３．４１ｇ，３２．２ｍｍｏｌ）のアセトン（１５ｍＬ）溶液をゆっくり滴下し、続いて２規定水酸化ナトリウム水溶液（１６．２ｍＬ，３２．４ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下した。氷冷下で３０分撹拌後に析出物を濾取し、濾取体を冷エタノール（８０ｍＬ）で洗浄した。風乾後に減圧乾燥することにより、化合物１４Ａａ（５．１４ｇ，収率６１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 6.92 - 6.98 (m, 1 H) 7.46 - 7.55 (m, 2 H) 7.58 - 7.65 (m, 1 H) 7.77 (ddd, J=8.35, 7.06, 1.03 Hz, 1 H) 8.17 - 8.22 (m, 1 H) 8.22 - 8.27 (m, 1 H) 8.31 - 8.37 (m, 1 H) 9.67 (s, 1 H)
ＭＳ（ＥＳＩ）：未検出【０２９５】
実施例１１２  化合物１４Ａｅの合成
（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−３−（６−アミノプリン−９−イル）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−オール
Ｎ−（９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド（５．１５ｇ，２１．５ｍｍｏｌ）のトルエン（２００ｍＬ）懸濁液に化合物１ａ（１０．３ｇ，１７．９ｍｍｏｌ）を少しずつ投入し、続いてＢＳＡ（３８ｍＬ，１２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて３０分間激しく撹拌した。同温度でＴＭＳＯＴｆ（０．３２４ｍＬ，１．７９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１５分間撹拌した。反応液を氷水で冷却し、次いで氷冷したＩＰＥ（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）および飽和重曹水（１００ｍＬ）の混液に、激しく撹拌下にて反応液を加えた。２０分間激しく撹拌後に不溶物をセライト濾去した。濾液の有機層を分液し、飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去して粗化合物１４Ｇｂの残渣を得た。
得られた残渣のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に化合物１４Ａａ（４．７２ｇ，１７．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で９２時間撹拌し、さらに５０℃で９時間撹拌した。反応液に酢酸エチル（４００ｍＬ）および飽和重曹水（２００ｍＬ）を加え２０分撹拌後に有機層を分液した。有機層を水（３００ｍＬ）および飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、不溶物をろ去後、溶媒を留去して、粗化合物１４Ｇｃの残渣を得た。
得られた残渣のピリジン（６５ｍＬ）溶液に無水酢酸（５．０８ｍＬ，５３．８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２１９ｍｇ，１．７９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。反応液に酢酸エチル（４００ｍＬ）および飽和重曹水（２００ｍＬ）を加え、２０分撹拌後に有機層を分液した。有機層を水（３００ｍＬ）および飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥した。不溶物をろ去後、溶媒を減圧留去した後にトルエン共沸して、粗化合物１４Ｇｄの残渣を得た。
得られた残渣の１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）溶液に冷水で冷却下にてメチルヒドラジン（９．４４ｍＬ，１７９ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で３時間撹拌した。５０℃に昇温し、１０時間撹拌した。反応液に水（１００ｍＬ）を加えた後、減圧留去し、残渣をクロロホルム（２×１５０ｍＬ）で分液抽出した。有機層を併せ、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄後に無水硫酸ナトリウムで乾燥した。不溶物をろ去した後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカ：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９９／１）にて精製し、化合物１４Ａｅ（４．９１ｇ，収率４１％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝６７５［Ｍ−Ｈ］−【０２９６】
実施例１１３  化合物１４Ａｆの合成
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−７−ヒドロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド
化合物１４Ａｅ（４．８０ｇ，７．１０ｍｍｏｌ）、ピリジン（１０ｍＬ）の混合物に、氷冷下塩化ベンゾイル（２．４８ｍＬ，２１．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を氷冷下で３時間撹拌した。反応液に２規定水酸化ナトリウム水溶液（２５ｍＬ，５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。反応液をクロロホルム（５０ｍＬ）で４回抽出し、有機層をフェーズセパレーターに通した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をセライトろ過後、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９３／７）にて精製し、化合物１４Ａｆ（４．６０ｇ，収率８３％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７８１［Ｍ＋Ｈ］＋【０２９７】
実施例１１４  化合物１４Ａｇの合成
Ｎ−［９−（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（１,５−ジメチル−１,２,４−トリアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］プリン−６−イル］ベンズアミド（本発明化合物３６）
化合物１４Ａｆ（４．２６ｇ，５．４６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５０ｍＬ）の混合物に、氷冷下ＤＩＰＥＡ（３．７８ｍＬ，２１．８ｍｍｏｌ）、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（３．６６ｍＬ，１６．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。反応液を氷冷し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、クロロホルム（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物をろ去して溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：酢酸エチル／メタノール＝１００／０〜９４／６、ＮＨシリカ：酢酸エチル／メタノール＝１００／０〜９３／７）にて精製し、本発明化合物３６としての化合物１４Ａｇ（３．８８ｇ，収率６７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝９８０［Ｍ＋Ｈ］＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.84, 149.04【０２９８】
ＡＬＮＡ［Ｏｘｚ］−Ｔの合成
【化６０】
2020100826.tif 000062
【０２９９】
実施例１１５  化合物１５Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１４Ｔｃ（２．１０ｇ，２．８８ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１４．４ｍＬ）の混合物に、ヒドロキシルアミン（５０％水溶液，１．９０ｍＬ，２８．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２日間撹拌した。反応液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１５Ｔａ（１．３４ｇ，収率７１％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３５Ｈ３５Ｎ５Ｏ８での計算値[M+Na]+: 676.2378, 実測値: 676.2363【０３００】
実施例１１６  化合物１５Ｔｂの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３７）
化合物１５Ｔａ（３００ｍｇ，０．４５９ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（４．６ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（２４０μＬ，１．３８ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（２０５μＬ，０．９１８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で５日間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝６０／４０〜１０／９０、Ｄｉｏｌ：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０、ＮＨ：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、本発明化合物３７としての化合物１５Ｔｂ（２１４ｍｇ，収率５５％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４４Ｈ５２Ｎ７Ｏ９Ｐでの計算値[M+Na]+: 876.3456, 実測値: 876.3441
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.83, 149.09【０３０１】
ＡＬＮＡ［Ｏｘｚ］−ｍＣの合成
【化６１】
2020100826.tif 000063
【０３０２】
実施例１１７  化合物１５Ｃａの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２，４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１５Ｔａ（９９９ｍｇ，１．５３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１８．７ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）、ピリジン（７．７ｍＬ）の混合物に無水酢酸（２１７μＬ，２．３０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２日間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、化合物１５Ｃａ（１．１０ｇ，定量的に進行）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３７Ｈ３７Ｎ５Ｏ９での計算値[M+Na]+: 718.2483, 実測値: 718.2470【０３０３】
実施例１１８  化合物１５Ｃｂの合成
［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−３−［５−メチル−２−オキソ−４−（１,２,４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル］−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１５Ｃａ（１．０５ｇ，１．５１ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（９３９ｍｇ，１３．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．６３ｍＬ，１５．１ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１５ｍＬ）の混合物に、氷冷下オキシ塩化リン（２３９μＬ，２．５７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、化合物１５Ｃｂ（１．３２ｇ）を粗体として得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３９Ｈ３８Ｎ８Ｏ８での計算値[M+Na]+: 769.2705, 実測値: 769.2707【０３０４】
実施例１１９  化合物１５Ｃｃの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１５Ｃｂ（１．３０ｇ，１．５１ｍｍｏｌ，粗体）、アセトニトリル（１５．１ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（１０．１ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、濃縮することで、化合物１５Ｃｃ（０．９６ｇ，２工程での収率９７％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ３５Ｈ３６Ｎ６Ｏ７での計算値[M+Na]+: 675.2538, 実測値: 675.2539【０３０５】
実施例１２０  化合物１５Ｃｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１５Ｃｃ（０．９３ｇ，１．４２ｍｍｏｌ）、ピリジン（７．１ｍＬ）の混合物に、無水安息香酸（４８２ｍｇ，２．１３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に２規定水酸化ナトリウム水溶液（７．１ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１５Ｃｄ（９５８ｍｇ，収率８９％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ４２Ｈ４０Ｎ６Ｏ８での計算値[M+Na]+: 779.2800, 実測値: 779.2794【０３０６】
実施例１２１  化合物１５Ｃｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニルメトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（５−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物３８）
化合物１５Ｃｄ（９４９ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１２．５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．６５３ｍＬ，３．７５ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（０．５５９ｍＬ，２．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０〜３０／７０、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００）にて精製し、本発明化合物３８としての化合物１５Ｃｅ（８３４ｍｇ，収率７０％）を得た。
HRMS(MALDI): Ｃ５１Ｈ５７Ｎ８Ｏ９Ｐでの計算値[M+Na]+: 979.3878, 実測値: 979.3876
31P-NMR （CDCl3） δ: 148.98, 149.27【０３０７】
ＡＬＮＡ［Ｔｄｚ］−Ｔの合成
【化６２】
2020100826.tif 000064
【０３０８】
実施例１２２  化合物１６Ｔａの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２,４−ジオン
化合物１ａ（３．００ｇ，５．２５ｍｍｏｌ）、５−クロロ−３−メチル−１，２，４−チアジアゾール（８４８ｍｇ，６．３０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．７２ｍＬ，１５．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（２６ｍＬ）の混合物を１２０℃で２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９５／５）にて精製し、化合物１６ＴａAB37420-001（３．３０ｇ，収率９４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝６７０［Ｍ＋Ｈ］＋【０３０９】
実施例１２３  化合物１６Ｔｂの合成
３−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］オキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシプロパンニトリル（本発明化合物３９）
化合物１６Ｔａ（２．２６ｇ，３．３７ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１７ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（１．７５ｍＬ，１０．１ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（１．５１ｍＬ，６．７７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０、Ｄｉｏｌ：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０）にて精製し、本発明化合物３９としての化合物１６Ｔｂ（２．４５ｇ，収率８４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝８７０［Ｍ＋Ｈ］＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.23， 149.51【０３１０】
ＡＬＮＡ［Ｔｄｚ］−ｍＣの合成
【化６３】
2020100826.tif 000065
【０３１１】
実施例１２４  化合物１６ｍＣａの合成
［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−（５−メチル−２,４−ジオキソ−ピリミジン−１−イル）−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１６Ｔａ（５．９２ｇ，８．８４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２０ｍｇ，０．９８２ｍｍｏｌ）、ピリジン（１８ｍＬ）の混合物に無水酢酸（１．２５ｍＬ，１３．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し、残渣に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、化合物１６ｍＣａ（５．６９ｇ，収率９０％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７１２［Ｍ＋Ｈ］＋【０３１２】
実施例１２５  化合物１６ｍＣｂの合成
［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−３−［５−メチル−２−オキソ−４−（１,２,４−チアジアゾール−１−イル）ピリミジン−１−イル］−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−７−イル］アセテート
化合物１６ｍＣａ（５．５２ｇ，７．７５ｍｍｏｌ）、１，２，４−トリアゾール（４．８２ｇ，６９．８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３．４ｍＬ，７７．５ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（３９ｍＬ）の混合物に、氷冷下オキシ塩化リン（１．２３ｍＬ，１３．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮することで、粗成績体として化合物１６ｍＣｂ（６．１８ｇ，不純物含む）を得た。【０３１３】
実施例１２６  化合物１６ｍＣｃの合成
４−アミノ−１−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物１６ｍＣｂ（６．１８ｇ，７．７５ｍｍｏｌ，不純物含む）、アセトニトリル（３９ｍＬ）の混合物に、２８％アンモニア水（３９ｍＬ）を加え、混合物を室温で４日間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１６ｍＣｃ（４．５０ｇ，２工程での収率８７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝６６７［Ｍ−Ｈ］−【０３１４】
実施例１２７  化合物１６ｍＣｄの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド
化合物１６ｍＣｃ（４．３７ｇ，６．５３ｍｍｏｌ）、無水安息香酸（２．２２ｇ，９．８１ｍｍｏｌ）、ピリジン（１３ｍＬ）の混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に２規定水酸化ナトリウム水溶液（１３ｍＬ，２６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、不溶物をろ去した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：クロロホルム／メタノール＝１００／０〜９０／１０）にて精製し、化合物１６ｍＣｄAB37471-001（４．７６ｇ，収率９４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７７３［Ｍ＋Ｈ］＋【０３１５】
実施例１２８  化合物１６ｍＣｅの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−（３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４−イル］ベンズアミド（本発明化合物４０）
化合物１６ｍＣｄ（４．６２ｇ，５．９８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１２ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３．１０ｍＬ，１７．９ｍｍｏｌ）の混合物に、２−シアノエチル  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミド（２．６７ｍＬ，１２．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素雰囲気下室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２：ヘキサン／酢酸エチル＝８０／２０〜３０／７０、ＮＨ：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜２０／８０）にて精製し、本発明化合物４０としての化合物１６ｍＣｅ（３．５７ｇ，収率６１％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝９７４［Ｍ＋Ｈ］＋
31P-NMR （CDCl3） δ: 149.45， 149.78【０３１６】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−ｍＣは、次のようにＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｔヌクレオシドの核酸塩基部を変換することでも合成することができる。
化合物２Ｃｆの合成
【化６４】
2020100826.tif 000066
【０３１７】
実施例１２９  化合物２Ｃｄの合成
３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−メチルスルホニル−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−６−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１，６−ジヒドロピリミジン−２−オン
２Ｔｂ（１４．１ｇ，０．０１９ｍｏｌ）をアセトニトリル（３１０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（９７．２９ｍＬ，０．９６１ｍｏｌ）を加えて０℃にて１５分撹拌した。反応溶液に１，２，４−トリアゾール（３０．３６ｇ，０．４３９ｍｏｌ）を加えて０℃にて１５分撹拌した後、オキシ塩化リン（４．４４ｍＬ，０．０２８ｍｏｌ）を加えて０℃で１５分撹拌し、室温に昇温して２時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えて分液した。有機層を炭酸ナトリウム（１００ｍＬ）で２度洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮することで粗成績体２Ｃｄ（１１．８ｇ）を得た。【０３１８】
実施例１３０  化合物２Ｃｅの合成
６−アミノ−３−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
粗成績体２Ｃｄ（１１．８ｇ）を１，４−ジオキサン（１１８ｍＬ）に溶解し、２５％アンモニア水（１１８ｍＬ）を加えて室温にて終夜撹拌した。反応溶液を減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール、９５／５〜９４／６）にて精製した。これをジクロロメタン／ヘキサン（１０／９０）の混合液中で撹拌し、析出物をろ取することで化合物２Ｃｅ（８．３ｇ， ２工程収率６４％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 649.3（M＋H）+【０３１９】
実施例１３１  化合物２Ｃｆの合成
Ｎ−［１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−２−オキソ−ピリミジン−４―イル］ジヒドロピリミジン−２−オン
化合物２Ｃｅ（８．３ｇ，０．０１２ｍｏｌ）のＤＭＦ（６３ｍＬ）溶液に安息香酸無水物（２．５７ｇ，０．０１１ｍｏｌ）を加えて室温にて２４時間撹拌した。反応液に酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えて希釈し、水（１００ｍＬ）で２度洗浄した。有機層を炭酸ナトリウム水（１００ｍＬ）、及び飽和食塩水（１００ｍＬ）にて順次洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥した。これを減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール、９９．５／０．５〜９９／１）にて精製した。これをジクロロメタン／ヘキサン（１０／９０）の混合液中で撹拌し、析出物をろ取することで化合物２Ｃｆ（４．０ｇ， 収率４７％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 753.1（M＋H）+【０３２０】
また、ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−ｍＣヌクレオシドは次のようにしても合成することができる。
化合物２Ｃｊの合成
【化６５】
2020100826.tif 000067
【０３２１】
実施例１３２  化合物２Ｃｇの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ベンジロキシ−１−（ベンジロキシメチル）−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２，４−ジオン
国際公開第２０１７／０４７８１６号に記載の方法にて合成した１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ベンジロキシ−１−（ベンジロキシメチル）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］へプタン−３−イル］−５−メチルピリミジン−２，４−ジオン（１ｈ）（２０．００ｇ， ２１．６１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）混合溶液にトリエチルアミン（１５．５ｍＬ，１１１ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴下でメシルクロリド（４．１５ｍＬ，５３．４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を氷浴下で４．５時間撹拌した。反応液に５％重曹水（６０ｍＬ）を添加して撹拌し、分液した。水層をジクロロメタン（４０ｍＬ）で抽出し、ジクロロメタンの有機層を合液し混合した。有機層を１５％食塩水（６０ｍL）にて洗浄した後、溶媒留去した。濃縮残渣にメタノール（９０ｍL）を加え、懸洗した。生じた析出物をろ取し、真空乾燥することで、化合物２Ｃｇ（２１．９４ｇ， 収率９４％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 528 （M+H）+【０３２２】
実施例１３３  化合物２Ｃｈの合成
１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ベンジロキシ−１−（ベンジロキシメチル）−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリミジン−２−オン
実施例１２９と同様にして、２Ｃｇ（３．０ｇ，５．６ｍｍｏｌ）から化合物２Ｃｈ（３．４ｇ）を粗成績体として得た。【０３２３】
実施例１３４  化合物２Ｃｉの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ベンジロキシ−１−（ベンジロキシメチル）−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
実施例１３０と同様にして、化合物２Ｃｈ（３．４ｇ，５．８ｍｍｏｌ）から化合物２Ｃｉ（２．６ｇ，８７％収率）を得た。
MS（ESI）: m/z = 527.2（M＋H）+【０３２４】
実施例１３５  化合物２Ｃｊの合成
４−アミノ−１−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−７−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−５−メチル−ピリミジン−２−オン
化合物２Ｃｉ（２．６ｇ，４．９ｍｍｏｌ）を酢酸（２８．６ｍＬ）に溶解し、２０％水酸化パラジウム／炭素（０．３５ｇ）を加え、水素雰囲気下として室温にて１６時間撹拌した。不溶物をろ去した後、減圧下にて濃縮した。残渣に１−ブタノールとＩＰＥを加えて撹拌し、析出物をろ取した。得られた固体をメタノールにて再結晶することで、化合物２Ｃｊ（１．０ｇ，５８％収率）を得た。
MS（ESI）: m/z = 346.9（M＋H）+【０３２５】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｇは次のようにしてグアニン部位がジメチルアミノメチレニル基で保護されたモノマーを合成することができる。なお、この保護様式を持つモノマーをオリゴマー合成に用いた場合には、グアニンの６位がＤＰＣ保護された２Ｇｄを用いてオリゴマー合成する場合に生じうる副生物の生成を制御することが可能となる。
【化６６】
2020100826.tif 000068
【０３２６】
実施例１３６  化合物２Ｇｅの合成
２−アミノ−９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−１Ｈ−プリン−６−オン
化合物２Ｇｃ（１０００ｍｇ， １．１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液に室温にて、２８％アンモニア水（５ｍｌ）を加えて室温で終夜攪拌した。さらに、２８％アンモニア水（１５ｍｌ）を加え、７０℃で８時間攪拌した。室温で水、ジクロロメタンを加え、攪拌後、有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣をろ過し、溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール、９７／３〜９２／８）を行うことで化合物２Ｇｅ（６２０ｍｇ， 収率８６％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 675（M+H）+【０３２７】
実施例１３７  化合物２Ｇｆの合成
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジン
化合物２Ｇｅ(１５０ｍｇ, ０．２２ｍｍｏｌ)をテトラヒドロフラン（２．２２ ｍＬ）に溶解し、室温にてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１３２ ｍｇ，１．１１ ｍｍｏｌ）、を加え時間撹拌した。室温で加え、酢酸エチル(２ ｍＬ)で１回抽出した。得られた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣を濾過し、溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール=９９／１、クロロホルム／メタノール＝９３／７）を行うことで化合物２Ｇｆ（１４５ ｍｇ， 収率８９ ％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 728 （M-H）-【０３２８】
実施例１３８  化合物２Ｇｇの合成
Ｎ’−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］  −６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジン
化合物２Ｇｆ（９００ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、室温にてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７４７ｍｇ，５．８ｍｍｏｌ）、２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロアミジド（１０６１ｍｇ, ４．５ｍｍｏｌ）を加え終夜撹拌した。室温で飽和重層水とジクロロメタンを加え、有機層を分離した。得られた有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥し、残渣を濾過した。溶媒留去した後、アミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）、ジオールシリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９７／３）、を行うことで化合物２Ｇｇ（６９０ｍｇ， 収率６０％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 930 （M+H）+【０３２９】
ＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｇは次のようにしてグアニン部位がイソブチロイル基のみで保護されたモノマーを合成することができる。なお、この保護様式を持つモノマーをオリゴマー合成に用いた場合には、グアニンの６位がＤＰＣ保護された２Ｇｄを用いてオリゴマー合成する場合に生じうる副生物の生成を制御することが可能となる。
【化６７】
2020100826.tif 000069
【０３３０】
実施例１３９  化合物２Ｇｈの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
化合物２Ｇｅ（１００ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）をピリジン（１．４ｍＬ）に溶解し、室温にてＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（２９ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）、２−メチルプロパノイル２−メチルプロパノエート（１００μＬ，０．６ｍｍｏｌ）を加え１００℃で４時間撹拌した。さらに、２−メチルプロパノイル  ２−メチルプロパノエート（１００μＬ，０．６ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で２時間撹拌した。室温で飽和重層水と酢酸ナトリウムを加え、有機層を分離した。得られた有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣を濾過し、溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜２０／８０）を行った。さらに、化合物をテトラヒドロフラン（１ｍＬ）に溶解し、０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を加え０℃で４０分攪拌した。反応液に水、酢酸エチルを加え、有機層を分離したのちに、飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、再び有機層を分離した。硫酸ナトリウムで乾燥後、残渣をろ過し、溶媒留去することで化合物２Ｇｈ（５６ｍｇ， 収率５０％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 745 （M+H）+【０３３１】
実施例１４０  化合物２Ｇｉの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−［２−シアオノエトキシ−（ジイソプロピルアミノ）ホスファニル］オキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
ジクロロメタン（３．６ｍＬ）にモレキュラーシーブ３Ａを加え１時間攪拌後、室温にて化合物２Ｇｈ（５００ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）、１−メチルイミダゾール（１０．９ｍｇ，０．１ｍｏｌ）、テトラゾール（８４ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）、３−ビス（ジイソプロピルアミノ）フォスファニルオキシプロパンニトリル（９４９ｍｇ， ３．１ｍｍｏｌ）を加え、６時間攪拌した。室温で飽和重層水を加えジクロロメタンで二回抽出した。得られた有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥し、残渣を濾過した。溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／酢酸エチル、５０／５０〜２５／７５）を行うことで化合物２Ｇｉ（５００ｍｇ， 収率７９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 946 （M+H）+【０３３２】
また、グアニン部位がイソブチロイル基のみで保護されたＡＬＮＡ［Ｍｓ］−Ｇモノマーは、次のようにして化合物１ａからトランスグリコシル化により直接的にも合成することが可能である。
【化６８】
2020100826.tif 000070
【０３３３】
実施例１４１  化合物２Ｇｊの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
化合物１ａ（５.０ｇ， ８．７５ｍｍｏｌ）、２−メチル−Ｎ−（６−オキソ−１，９−ジヒドロプリン−２−イル）プロパンアミド（３．８７ｇ， １７．５ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（３０ｍＬ）混合液にＢＳＡ（２１．４ｍＬ，８７．５ｍｍｏｌ）を加えて６０℃にて３０分撹拌した。続いて、ＴＭＳＯＴｆ（０．２５４ｍＬ，１．３１ｍｍｏｌ）を加えて1時間半撹拌した。放冷後、反応液にクロロホルム（５０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え撹拌した。不溶物を吸引ろ過後、有機層を水、飽和食塩水にて洗浄し、硫酸マグネシウムにて乾燥し、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９０／１０）にて精製することで化合物２Ｇｊ（３．８３ｇ， 収率５９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = ７３９．５ （M＋H）+【０３３４】
実施例１４２  化合物２Ｇｋの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−５−メチルスルホニル−７−トリメチルシリロキシ−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
化合物２Ｇｊ（１．０ｇ， １．３５ｍｍｏｌ）、ピリジン（０．３２７ｍＬ，４．０６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７ｍＬ）溶液に、氷冷下メタンスルホン酸無水物（２８４ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）を加えて、氷冷下で４５分撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層をフェーズセパレーターに通した後、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９０／１０）にて精製することで化合物２Ｇｋ（６５７ｍｇ， 収率５９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 817.4 （M＋H）+【０３３５】
実施例１４３  化合物２Ｇｈの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
化合物２Ｇｋ（３．１６ｇ， ３．８７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）溶液にＴＢＡＦ（１ｍｏｌ／Ｌ  ＴＨＦ溶液，４．６ｍＬ，４．６ｍｍｏｌ）を加えて室温にて１時間撹拌した。反応液を濃縮し、酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和食塩水にて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムにて乾燥し、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９０／１０）にて精製することで化合物２Ｇｈ（２．５７ｇ， 収率８９％）を得た。
MS（ESI）: m/z = 745.5（M＋H）+【０３３６】
また、化合物２Ｇｈは、次のようにして化合物２Ｇｂから合成することも可能である。
【化６９】
2020100826.tif 000071
【０３３７】
実施例１４４  化合物２Ｇｈの合成
Ｎ−［９−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，７Ｓ）−１−［［ビス（４−メトキシフェニル）−フェニル−メトキシ］メチル］−７−ヒドロキシ−５−メチルスルホニル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−イル］−６−オキソ−１Ｈ−プリン−２−イル］−２−メチル−プロパンアミド
化合物２Ｇｂ（１０１０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、室温にてテトラブチルアンモニウムフルオリド（１ｍｏｌ／Ｌ  テトラヒドロフラン溶液，３ｍＬ，３．０ｍｍｏｌ）を加え７０℃で２４時間撹拌した。さらに、室温にてテトラブチルアンモニウムフルオリド（１ｍｏｌ／Ｌ  テトラヒドロフラン溶液，９ｍＬ，９．０ｍｍｏｌ）を加え８０℃で８時間撹拌した。溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール、９８／２〜９３／７）を行った。さらに、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製（クロロホルム／メタノール、１００／０〜９４／６）を行うことで化合物２Ｇｈ（５７０ｍｇ，  収率７７％）を得た。
MS(ESI): m/z = 745 （M＋H）+【０３３８】
実施例１４５  オリゴヌクレオチド類縁体の合成および精製 (ｉｎ  ｖｉｔｒｏ)
上記の実施例で得られた各種アミダイト（本発明化合物１〜４４）を用いて、下表１から４に記載したオリゴヌクレオチド類縁体化合物を、ＤＮＡ／ＲＮＡオリゴヌクレオチド自動合成機ｎｓ−８ＩＩ(株式会社ジーンデザイン製)により０．２または１．０μｍｏｌスケールにてＣＰＧまたはポリスチレン担体を用いて合成した。アミダイトは全て０．１Ｍのアセトニトリル溶液に調整し、非天然型ヌクレオシドにおけるカップリング時間は１０分間で行い、それ以外の工程はｎｓ−８ＩＩの標準条件にて行った。活性化剤はＡｃｔｉｖａｔｏｒ４２（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、チオ化にはＳｕｌｆｕｒｉｚｉｎｇ  ＲｅａｇｅｎｔＩＩ（Ｇｒｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用した。合成したオリゴヌクレオチドは２８％アンモニア水溶液を加えて６０−６５℃にて８時間反応させることで担体からの切り出しと塩基部の脱保護を行った。アンモニアを濃縮留去したのち、逆相ＨＰＬＣ精製を行った。【０３３９】
実施例１４６  オリゴヌクレオチド類縁体の合成および精製 (ｉｎ  ｖｉｖｏ)
上記の実施例で得られた各種アミダイト（本発明化合物１〜４４）を用いて、下表５に記載したオリゴヌクレオチド類縁体化合物を、ＤＮＡ／ＲＮＡオリゴヌクレオチド自動合成機ＡＫＴＡ  ｏｌｉｇｏｐｉｌｏｔ  ｐｌｕｓ  １０ (ＧＥヘルスケアジャパン株式会社製)により２０μｍｏｌスケールにてポリスチレン担体を用いて合成した。ＤＮＡアミダイトは０．１Ｍ、非天然型アミダイトは０．０５Ｍのアセトニトリル溶液に調整し、非天然型ヌクレオシドにおけるカップリングリサイクル時間は２０分間で行い、ユニバーサル担体への１塩基目の導入の際は、カップリング、チオ化、キャッピング工程をそれぞれ２回連続で実施した。それ以外の工程はＡＫＴＡ  ｏｌｉｇｏｐｉｌｏｔ  ｐｌｕｓ１０の標準条件にて行った。活性化剤はＡｃｔｉｖａｔｏｒ４２（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、チオ化にはＳｕｌｆｕｒｉｚｉｎｇ  ＲｅａｇｅｎｔＩＩ（Ｇｒｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用した。合成したオリゴヌクレオチドは２８％アンモニア水溶液を加えて６０−６５℃にて８時間反応させることで担体からの切り出しと塩基部の脱保護を行った。アンモニアを濃縮留去したのち、陰イオン交換カラムで精製を行った。陰イオン交換後に含まれる余剰塩を脱塩カラムにより除去した。【０３４０】
合成したオリゴヌクレオチド類縁体の精製および純度確認は、逆相ＨＰＬＣにより以下の条件で行った。
逆相ＨＰＬＣ
移動相：
Ａ液： ２０ｍＭ 酢酸ヘキシルアミン水溶液
Ｂ液： アセトニトリル
グラジエント： Ａ：Ｂ  ＝９０：１０→５０：５０（４０ｍｉｎ）もしくはＡ：Ｂ  ＝９０：１０→４０：６０（４５ｍｉｎ）
使用カラム：
分析  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ@  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８  Ｃｏｌｕｍｎ，  １３０Å，  ２．５μｍ，  ４．６ｍｍ＊５０ｍｍ
分取  Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ@  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ＯＢＤＴＭ  Ｐｒｅｐ  Ｃｏｌｕｍｎ，１３０Å, ２．５μｍ， １０ｍｍ＊５０ｍｍ 【０３４１】
流速：
分析  １ｍｌ/ｍｉｎ
分取  ４ｍｌ/ｍｉｎ
カラム温度： ６０℃
検出： ＵＶ（２６０ｎｍ）【０３４２】
陰イオン交換精製
移動相：
Ａ液：２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）水溶液
Ｂ液：２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１Ｍ  ＮａＢｒ水溶液
使用カラム：
ＧＥ  ＨｉＴｒａｐ  ＣａｐｔＱ  ＩｍｐＲｅｓ（Ａｎｉｏｎ  ｅｘｃｈａｎｇｅ）  ５ｍｌ
流速：５ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：室温
検出：ＵＶ（２６０ｎｍ）【０３４３】
脱塩カラム
移動相：
Ａ液：Ｈ２Ｏ
Ｂ液：Ｈ２Ｏ
使用カラム：
ＧＥ  ＨｉＰｒｅｐ  ２６／１０  Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ
流速：１０ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：室温【０３４４】
合成したオリゴヌクレオチド類縁体の分子量は、Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱを用いて以下の条件で行った。
移動相：
Ａ液：４００ｍＭ ヘキサフルオロイソプロパノール、１５ｍＭ トリエチルアミン水溶液
Ｂ液：メタノール
グラジエント：Ａ：Ｂ  ＝８０：２０→７０：３０（２．５ｍｉｎ）もしくはＡ：Ｂ  ＝９０：１０→４０：６０（４５ｍｉｎ）
使用カラム：
分析  Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ@  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８  Ｃｏｌｕｍｎ，  １３０Åｍ  １．７μｍ，  ２．１ｍｍ＊１００ｍｍ
流速：０．２ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：６０℃
検出：ＵＶ（２６０ｎｍ）【０３４５】
表１  各Ｔｍ配列のマススペクトル測定結果
gcgttT(X)tttgct（配列番号１）
（ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)はチミンを有する各人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホジエステルである）
【表１】
2020100826.tif 000072
【０３４６】
表２  各ＳＲＢ１（2-10-2）配列のマススペクトル測定結果 
T(X)C(X)agtcatgactT(X)C(X)（配列番号２）
（ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)およびC(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、および５−メチルシトシンを有する各人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである）
【表２】
2020100826.tif 000073
【０３４７】
表３  各ＳＲＢ１（3-10-3）配列のマススペクトル測定結果
T(X)T(X)C(X)agtcatgactT(X)C(X)C(X)（配列番号３）
（ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)およびC(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、および５−メチルシトシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである）
【表３】
2020100826.tif 000074
【０３４８】
表４  各ａｎｔｉｍｉＲ−２１配列のマススペクトル測定結果
A(m)C(X)atC(X)agtC(X)tgaT(X)aagC(X)tA(m)（配列番号４）
（ここで、A(m)は２’−MOEアデノシンを、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)およびC(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、および５−メチルシトシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである）
【表４】
2020100826.tif 000075
【０３４９】
表５  各Ｍａｌａｔ１配列のマススペクトル測定結果 
G(X)T(X)T(X)cactgaatG(X)C(X)G(X)（配列番号５）
（ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)、C(X)およびG(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、５−メチルシトシンを有する人工核酸種、およびグアニンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである）
【表５】
2020100826.tif 000076
【０３５０】
実施例１４７  標的鎖への結合能とミスマッチ選択性評価
各種人工核酸種を含むアンチセンス鎖（ここで、配列はgcgttT(X)tttgct（前記配列番号１）を、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)はチミンを有する各人工核酸種を示す）と、センス鎖、即ち、アンチセンス鎖に対して相補的配列を有するＤＮＡ鎖（ここで、配列はagcaaaaaacgc（配列番号６）を、小文字はDNAの各核酸塩基を示す）、相補的配列を有するＲＮＡ鎖（ここで、配列はAGCAAAAAACGC（配列番号７）を、大文字はRNAの各核酸塩基を示す）、および１塩基ミスマッチを含む３種の相補的配列を有するＲＮＡ鎖（ここで、配列はAGCAAANAACGC（配列番号８）を、大文字はRNAの各核酸塩基を、Nはそれぞれウラシル（Ｕ）、グアニン（Ｇ）、シトシン（Ｃ）を示す）のそれぞれをアニーリング処理して二重鎖を形成させた後、二重鎖の50％が乖離する温度であるＴｍ値を測定することにより、オリゴヌクレオチドの二重鎖形成能を調べた。具体的には、塩化ナトリウム水溶液100mmol/L、リン酸ナトリウム緩衝液（pH 7.4）10mmol/L、アンチセンス鎖4μmol/L、センス鎖4μmol/Lを含むサンプル溶液(150μL)を95℃まで昇温させた後、4時間かけて室温まで冷却させた。分光光度計（JASCO、V-730、PAC-743R）のセル室内に結露防止のため窒素気流を通し、サンプル溶液を10℃まで徐々に冷却し、さらに1分間10℃に保った後、測定を開始した。毎分0.5℃の速度で80℃まで昇温させ、0.5℃毎に260nmにおける吸光度を測定した。なお、温度上昇による濃度変化を防止するため、セルは蓋付きのものを用いた。結果を表６に示す。【０３５１】
表６  各Ｔｍ値測定結果
【表６】
2020100826.tif 000077
【０３５２】
表６から明らかなように、各種人工核酸を含むアンチセンス鎖は、天然型DNAや既知のALNAであるALNA[Me]を含むアンチセンス鎖と比較して、同等以上のセンス鎖結合能、およびミスマッチ選択能を有していた。【０３５３】
実施例１４７  In vitroSR-B1ノックダウン活性試験
Hepa 1c1c7細胞を1ウェル当たり2.5 ×103個播種し、24時間培養した後、SRB1に相補的配列を有する各種修飾化されたアンチセンスオリゴ核酸を終濃度100、20、4 nmol/Lで添加し、48時間後に定量PCRを行った。同条件を3ウェルずつで実施した。アンチセンス活性は陰性対照でのSRB1のGAPDHに対する量比を元に、アンチセンス化合物を添加した場合のSRB1発現の阻害率を100分率で示した。その結果を表７に示した。【０３５４】
表７  In vitro SRB1ノックダウン活性
【表７】
2020100826.tif 000078
3-10-3, 2-10-2の２つの配列パターンでの各人工核酸を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドのGymnosis 100nMでの標的遺伝子(SRB1)ノックダウン活性を示した。
２つの配列パターンはそれぞれ次の通りである。
3-10-3: T(X)T(X)C(X)agtcatgactT(X)C(X)C(X)（前記表３の配列番号３と同じ）
2-10-2: T(X)C(X)agtcatgactT(X)C(X)（前記表２の配列番号２と同じ）
なお、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)およびC(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、および５−メチルシトシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである。【０３５５】
表７から明らかなように、ALNA[Ms]、ALNA[ipU]、ALNA[2Pym]、ALNA[Prz],ALNA[Trz]、ALNA[Oxz]は、既知のALNAであるALNA[Me]と比較して、強力なIn vitroでの標的遺伝子ノックダウン活性を有していた。【０３５６】
実施例１４８   In vitro miRNA-21阻害活性試験
3.0×106 cells/mlのHEK293細胞を10 cm dishに播種し、細胞をCO2インキュベーターで一晩培養した。翌日、FuGENE HD Transfection Reagentを用いて、miR-21の相補配列をpsiCHECK-2 vector (Promega)のマルチクローニングサイトにクローニングしたレポータープラスミド10 μgを細胞にトランスフェクションし、CO2インキュベーターで24時間程度培養した。この細胞を回収し、96 well plateに2.0×104 cells/wellの細胞を再播種するとともに、各人工核酸を導入したmiR-21阻害剤を添加した。細胞をCO2インキュベーターで96時間培養した後、Dual-Glo Luciferase Assay Systemを用いて，細胞内のfirefly luciferaseとRenilla luciferase発光値をプレートリーダーで検出した。Renillaルシフェラーゼ活性による発光値からトランスフェクション効率や細胞数の影響を補正するために，fireflyルシフェラーゼ活性による発光値との比を算出した。さらに，算出した比から、psiCHECK-2 vectorを導入した細胞での比を阻害率100%、miR-21相補配列をクローニングしたpsiCHECK-2 vectorを導入した細胞の比を阻害率0%として、各阻害率を算出し、阻害活性を求めた。その結果を表８に示した。【０３５７】
表８  In vitro miRNA-21阻害活性
【表８】
2020100826.tif 000079
用いたアンチセンスオリゴの配列は次の通りである。
A(m)C(X)atC(X)agtC(X)tgaT(X)aagC(X)tA(m)（前記表４の配列番号４と同じ）
なお、ここで、A(m)は２’−MOEアデノシンを、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)およびC(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、および５−メチルシトシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである。【０３５８】
表８から明らかなように、ALNA[mU]、ALNA[ipU]、ALNA[dmU]、ALNA[Trz]、ALNA[Oxz]は、既知のALNAであるALNA[Me]と比較して、強力なIn vitroでのマイクロRNA阻害活性を有していた。【０３５９】
実施例１４９  In vivo  MALAT１ノックダウン活性試験
6週齢のC５７BL／６Jマウス（雄性、日本チャールズリバー）にMALAT1を標的としたアンチセンスオリゴヌクレオチド（１０ｍｇ／ｋｇ、および５０ｍｇ／ｋｇ）を１０ｍｇ／ｍLとなるようにPBSで調製し、５ｍL／ｋｇとなるようにPBSで希釈して尾静脈内投与した。７２時間後にイソフルラン（日本薬局方  ファイザー(株)）麻酔下にてマウスの腹部大静脈より血液を採取し、放血致死させた。血液は凝固後遠心分離して血清を調製し、測定時まで冷凍保存（-80℃設定）した。放血致死後、肝、腎、脂肪、骨格筋（大腿四頭筋、腓腹筋）、肺、心臓、胃、空腸、精巣、皮膚、脾臓、脳を採取し、液体窒素で凍結した。凍結組織にMaxwell RSC simplyRNA Tissue Kitのホモジェネーションバッファーを加えてマルチビーズショッカーを用いて破砕し、キット記載のプロトコールに従ってRNAを精製した。RT反応以降はduplicateで行い、1反応当たりのRNA量は、50〜500 ngで実施した。ノックダウン活性はvehicle群でのMalat1のGAPDHに対する量比を元に、Malat1発現の阻害率を100分率で示した。標準誤差はduplicateの平均により個体別の値を求め、その値を元に算出した。その結果を表９および１０に示した。【０３６０】
表９  50mg/kg投与した際の各臓器でのMalat1ノックダウン率（%）
【表９】
2020100826.tif 000080
表１０  10mg/kg投与した際の各臓器でのMalat1ノックダウン率（%）
【表１０】
2020100826.tif 000081
用いたアンチセンスオリゴヌクレオチドの配列は次の通りである。
G(X)T(X)T(X)cactgaatG(X)（前記表５の配列番号５と同じ）
なお、ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)、C(X)およびG(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、５−メチルシトシンを有する人工核酸種、およびグアノシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである。【０３６１】
表９、１０から明らかなように、ALNA[Ms]は、既知のALNAであるALNA[Me]と比較して、多くの臓器（肝臓、腎臓、骨格筋、肺、心臓、胃、空腸、精巣、脂肪）において強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有していた。また、ALNA[2Pym]は、既知のALNAであるALNA[Me]と比較して、特定の臓器（心臓、空腸、精巣、脂肪）において強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有していた。また、ALNA[ipU]は、肝臓での標的遺伝子ノックダウン作用は、ALNA[Me]と比較して同程度でありながら、肺や脾臓ではALNA[Me]をはるかに上回る強力な標的遺伝子ノックダウン作用を有していた。脾臓には種々の免疫細胞が集積していることから、ALNA[ipU]を含むアンチセンスオリゴは、通常の核酸医薬では移行性が低いと考えられる免疫細胞への作用が期待できる。また、ALNA[ipU]は、肝臓での毒性を低減しながら、肺や免疫系への強力な薬効が期待できる。【０３６２】
実施例１５０  脳室内投与での中枢各組織、及び肝、腎におけるMALAT1ノックダウン活性試験
7週齢のC57BL/6J（雄性、日本チャールズリバー）をイソフルラン（ファイザー(株）麻酔下で脳定位固定装置に固定し、保温マット上に寝かせた状態で頭皮を切開して頭蓋骨を露出させた。ブレグマの位置を確認後、左側脳室上部（ブレグマより左に1.0 mm, 後方に0.4 mm）周辺1〜2 mmの頭蓋骨に歯科用電気ドリルで穴を開けた。左側脳室（ブレグマより左に1.0 mm, 後方に0.4 mm、深さ2.3 mmの位置）に27ゲージの針を挿入し、針に装着したマイクロインフュージョンポンプを用いて生理食塩水で5μg/10μLになるよう調製したMALAT1を標的としたアンチセンスオリゴ（5μg/10μL/head）を2μL/minの流速で5分間、単回投与した。その後、医療用セメントのベルファースト（睦化学工業）で頭蓋骨の穴を塞ぎ、切開部を縫合して感染症防止のためゲンタシン軟膏0.1 %（高田製薬）を塗布した。投与から72時間後にイソフルラン麻酔下にてマウスの腹部大静脈より血液を採取し、放血致死させた。血液は凝固後遠心分離して血清を取得し、測定時まで冷凍保存（-30℃設定）した。放血致死後、脳、脊髄、腎臓、肝臓を採取した。脳については安楽死後に頭蓋骨と脊椎を切り離してから脳を取り出し、矢状断面作製用スライサーであるBrain Matrices（RBM-2000S、バイオリサーチセンター株式会社）を用いて正中線から左脳側に厚さ約2 mmになるよう薄切後、切片から嗅球、大脳皮質、海馬、線条体、小脳を取り出した。5部位を取り除いた切片の残りの部分についても脳幹等複合部位として採取した。脊髄についてはT13を境に切り分け、T13より脳側（以下、脊髄近位）と、T13からL5まで（以下、脊髄遠位）の2ヶ所を採取した。採取した臓器はRNA later（Invitrogen）に浸漬して-30℃で保管した。チューブに臓器とQIAzol Lysis Reagent（QIAGEN）を加えてマルチビーズショッカーを用いて破砕し、クロロホルム（純正化学）を加えて混和した。この混和物から遠心機分離により水層部分を回収し，この水層からRNeasy 96 Universal Tissue Kit（QIAGEN）のキット記載のプロトコールに従ってRNAを精製した。RT反応以降、1反応当たりのRNA量は2 〜 7 ngで実施した。ノックダウン活性はvehicle群でのMALAT1のGAPDHに対する量比を基に、MALAT1発現の阻害率を100分率で示した。標準誤差は個体別の値を基に算出した。
表１１  5μg/head投与した際の各中枢組織、及び肝、腎でのMALAT1ノックダウン率（%）
【表１１】
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用いたアンチセンスオリゴヌクレオチドの配列は次の通りである。
G(X)T(X)T(X)cactgaatG(X)C(X)（前記表５の配列番号５と同じ）
なお、ここで、小文字はDNAの各核酸塩基を、T(X)、C(X)およびG(X)はそれぞれ、チミンを有する各人工核酸種、５−メチルシトシンを有する人工核酸種、およびグアノシンを有する人工核酸種を示し、すべてのリン酸結合はホスホロチオエートである。【０３６３】
表１１から明らかなように、ALNA[Ms]、ALNA[mU]、及びALNA[Oxz]は、既知のALNAであるALNA[Me]と比較して、各中枢組織において強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有していた。
【産業上の利用可能性】
【０３６４】
本発明のアミノ架橋型人工核酸（ＡＬＮＡ）は、新規な人工核酸オリゴマーの製造に使用することができる。また、本発明のアミノ架橋型人工核酸を含むオリゴマーは、特定の臓器において強力な標的遺伝子ノックダウン活性を有しており、核酸医薬として使用することができる。
【配列表フリーテキスト】
【０３６５】
配列番号１〜６は、ＤＮＡオリゴヌクレオチドを示す。
配列番号７〜８は、ＲＮＡオリゴヌクレオチドを示す。
【配列表】
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【国際調査報告】
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