(57)【要約】本明細書は、抗ＥｐｏＲペプチドを提供する。式（Ｉ）：Ｘ１−ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）−Ｘ２［式中、Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側であり、Ａ１はＭ、あるいはハロゲン原子もしくはヒドロキシル基で置換非置換のＦ、フェニルグリシンまたはフェネチルグリシンであり、Ａ２はＡ、ｄ−アラニンまたはＧであり、Ａ３はＰ、ホモプロリンまたはＡであり、Ａ４はＭ、Ｌ、ＡまたはＩであり、Ａ５は、ＴまたはＡであり、Ａ６はＭ、あるいはメチルもしくはハロゲン原子で置換非置換のＷ、Ｆ、Ｙ、β−ホモトリプトファン、α−ナフチルアラニン、β−ナフチルアラニンまたはキノリルアラニンであり、Ａ７はＣ、ホモシステインまたはペニシラミンであり、Ａ８はＫ、Ｒ、または非存在である］の構造を有するペプチドが提供される。
2020054813.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２の構造を有するペプチドより改善された少なくとも１つの特性を有する、−［ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ］−の構造を有するペプチドに基づく修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩（アルファベットはアミノ酸の１文字表示を示す）。
【請求項２】
式（Ｉ）：
Ｘ１−ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）−Ｘ２
［式中、
Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側であり
Ａ１は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、ここで、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有し、
Ａ２は、Ａｌａ、Ｄ−アラニンまたはＧｌｙであり、
Ａ３は、Ｐｒｏ、ホモプロリンまたはＡｌａであり、
Ａ４は、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＩｌｅであり、
Ａ５は、ＴｈｒまたはＡｌａであり、
Ａ６は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、ここで、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有し、
Ａ７は、Ｃｙｓ、ホモシステインまたはペニシラミンであり、
Ａ８は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または非存在であり、
ペプチド中の２つの硫黄原子はジスルフィド結合を形成していてもよく、
Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、
Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、
各Ｒ１は、独立に、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル基、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、
各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される］
の構造を有するか、または
式（ＩＩ）：
Ｘ１−ｋｃｖｗｔｌ（Ｂ１）Ｇｆｈｃｓ−Ｘ２
［式中、Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側であり
Ｂ１は、ＧｌｙまたはＤ−プロリンであり、ｋ、ｃ、ｖ、ｗ、ｔ、ｌ、Ｇ、ｆ、ｈ、ｃ、およびｓは、それぞれアミノ酸を示し、大文字はＬ体または光学異性体がないことを示し、小文字はＤ体を示し、
ペプチド中の２つの硫黄原子はジスルフィド結合を形成していてもよく、
Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、
Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、
各Ｒ１は、独立に、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、
各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される］
の構造を有する、修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項３】
Ａ２がＧｌｙであること、
Ａ３がＰｈｅであること、
Ａ５がＴｈｒであること、
Ａ７がＣｙｓであること、および
Ａ８がＬｙｓであること、
の少なくとも１つの条件を満たす、
請求項２に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項４】
Ａ１は、Ｔｙｒ、ｐ−フルオロフェニルアラニン、またはフェネチルグリシンである、請求項２または３に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項５】
Ａ１は、Ｔｙｒである、請求項２または３に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項６】
Ａ４は、ＬｅｕまたはＭｅｔである、請求項２〜５のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項７】
Ａ４は、Ｍｅｔである、請求項２〜５のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項８】
Ａ６は、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、８−ナフチルアラニン、２−キノリルアラニン、５−クロロ−Ｔｒｐ、または２−ベンゾチアゾリルアラニンである、請求項２〜７のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項９】
Ａ６は、２−ベンゾチアゾリルアラニンである、請求項２〜７のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項１０】
Ａ２がＧｌｙであり、
Ａ３がＰｈｅであり、
Ａ５がＴｈｒであり、
Ａ７がＣｙｓであり、
Ａ８がＬｙｓである、
請求項２〜９のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項１１】
Ｘ１が、−ＣＯＯＨ、ベンゾイル基、プロピオニル基またはｐ−フルオロフェニルアセチル基である、請求項２〜１０のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項１２】
Ｘ２がＮＨ２である、請求項２〜１１のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
【請求項１３】
増殖性疾患または糖尿病網膜症を処置または予防するための、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩を含む組成物。
【請求項１４】
前記増殖性疾患が、子宮腺筋症、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頸がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺がん、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、小児固形癌、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、または白血病である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記増殖性疾患が、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病である、請求項１３に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、新規の抗エリスロポエチン受容体（以下、「ＥｐｏＲ」ともいう）ペプチドおよびこれを含む組成物、その使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
エリスロポエチンは、赤血球の分化と増殖に関与し、他のサイトカインとは異なり血球では産生されず、腎臓または肝臓で産生され血液中に放出される。エリスロポエチンは赤血球前駆細胞のうち赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）と赤芽球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｅ）に作用し、その分化と増殖を促進し、赤血球の産生を誘導していると考えられている（Ｋｒａｎｔｚ  Ｓ．Ｂ．，  Ｂｌｏｏｄ，  Ｖｏｌ．７７，  ｐｐ４１９−４３４（１９９１））。エリスロポエチンが前駆細胞の細胞膜に存在するエリスロポエチン受容体と結合すると、シグナルが細胞核内に伝達され、赤血球の分化、即ちグロビンｍＲＮＡの細胞内集積、ヘモグロビンの産生、赤血球の増殖が起こるとされている（Ｄ’Ａｎｄｒｅａ  Ａ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ，  Ｖｏｌ．５７，  ｐｐ２７７−２８５（１９８９））。しかし、そのメカニズムの詳細についてはまだ解明されておらず、今後解決すべき点が多い。【０００３】
エリスロポエチンが赤芽球に関する部位以外の組織でその遺伝子を発現している部位として、着床直後の胚体（Ｙａｓｕｄａ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｅｖｅｌｏｐ．  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，Ｖｏｌ．３５，  ｐｐ７１１−７２２（１９９３））、ヒト、サル、およびマウスの脳（Ｍａｒｔｉ  Ｈ．Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ．Ｊ．ＮｅｕｒｏＳｃｉ．，  Ｖｏｌ．８，  ｐｐ６６６−６７６（１９９６））およびマウス子宮（Ｙａｓｕｄａ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  Ｖｏｌ．２７３，  ｐｐ２５３８１−２５３８７（１９９８））が知られている。
エリスロポエチンは、エリスロポエチン受容体に結合して作用し得る。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｋｒａｎｔｚ  Ｓ．Ｂ．，  Ｂｌｏｏｄ，  Ｖｏｌ．７７，  ｐｐ４１９−４３４  （１９９１）
【非特許文献２】Ｄ’Ａｎｄｒｅａ  Ａ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ，  Ｖｏｌ．５７，  ｐｐ２７７−２８５  （１９８９）
【非特許文献３】Ｙａｓｕｄａ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｅｖｅｌｏｐ．  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，Ｖｏｌ．３５，  ｐｐ７１１−７２２  （１９９３）
【非特許文献４】Ｍａｒｔｉ  Ｈ．Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ．Ｊ．ＮｅｕｒｏＳｃｉ．，  Ｖｏｌ．８，  ｐｐ６６６−６７６  （１９９６）
【非特許文献５】Ｙａｓｕｄａ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  Ｖｏｌ．２７３，  ｐｐ２５３８１−２５３８７  （１９９８）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本開示は、以下で詳細に記載される本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグを提供する。一つの実施形態では、本開示は、これらを含む組成物、製剤またはキットを提供し、別の実施形態では、本開示は、本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグの使用または使用するための方法を提供する。特定の実施形態では、本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグは、強いＥｐｏＲ阻害能、高いがん細胞殺傷能、低い正常細胞殺傷能、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効の改善、副作用の低減、特定の部位に対する特異的な移行能、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーの改善、および高い安定性のうちの１つ以上の特性を有する。一つの実施形態では、本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグは、増殖性疾患、子宮腺筋症または糖尿病網膜症の治療または予防に使用され得る。【０００６】
したがって、本開示は以下を提供する。
（項目１）
ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２の構造を有するペプチドより改善された少なくとも１つの特性を有する、−［ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ］−の構造を有するペプチドに基づく修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩（アルファベットはアミノ酸の１文字表示を示す）。
（項目２）
式（Ｉ）：
Ｘ１−ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）−Ｘ２
［式中、
Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側であり
Ａ１は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、ここで、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有し、
Ａ２は、Ａｌａ、Ｄ−アラニンまたはＧｌｙであり、
Ａ３は、Ｐｒｏ、ホモプロリンまたはＡｌａであり、
Ａ４は、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＩｌｅであり、
Ａ５は、ＴｈｒまたはＡｌａであり、
Ａ６は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、ここで、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有し、
Ａ７は、Ｃｙｓ、ホモシステインまたはペニシラミンであり、
Ａ８は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または非存在であり、
ペプチド中の２つの硫黄原子はジスルフィド結合を形成していてもよく、
Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、
Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、
各Ｒ１は、独立に、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル基、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、
各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される］
の構造を有するか、または
式（ＩＩ）：
Ｘ１−ｋｃｖｗｔｌ（Ｂ１）Ｇｆｈｃｓ−Ｘ２
［式中、Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側であり
Ｂ１は、ＧｌｙまたはＤ−プロリンであり、ｋ、ｃ、ｖ、ｗ、ｔ、ｌ、Ｇ、ｆ、ｈ、ｃ、およびｓは、それぞれアミノ酸を示し、大文字はＬ体または光学異性体がないことを示し、小文字はＤ体を示し、
ペプチド中の２つの硫黄原子はジスルフィド結合を形成していてもよく、
Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、
Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、
各Ｒ１は、独立に、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、
各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される］
の構造を有する、修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目３）
Ａ２がＧｌｙであること、
Ａ３がＰｈｅであること、
Ａ５がＴｈｒであること、
Ａ７がＣｙｓであること、および
Ａ８がＬｙｓであること、
の少なくとも１つの条件を満たす、
項目２に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目４）
Ａ１は、Ｔｙｒ、ｐ−フルオロフェニルアラニン、またはフェネチルグリシンである、項目２または３に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目５）
Ａ１は、Ｔｙｒである、項目２または３に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目６）
Ａ４は、ＬｅｕまたはＭｅｔである、項目２〜５のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目７）
Ａ４は、Ｍｅｔである、項目２〜５のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目８）
Ａ６は、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、８−ナフチルアラニン、２−キノリルアラニン、５−クロロ−Ｔｒｐ、または２−ベンゾチアゾリルアラニンである、項目２〜７のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目９）
Ａ６は、２−ベンゾチアゾリルアラニンである、項目２〜７のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１０）
Ａ２がＧｌｙであり、
Ａ３がＰｈｅであり、
Ａ５がＴｈｒであり、
Ａ７がＣｙｓであり、
Ａ８がＬｙｓである、
項目２〜９のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１１）
Ｘ１が、−ＣＯＯＨ、ベンゾイル基、プロピオニル基またはｐ−フルオロフェニルアセチル基である、項目２〜１０のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１２）
Ｘ２がＮＨ２である、項目２〜１１のいずれか一項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１３）
増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための、項目１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩を含む組成物。
（項目１４）
前記増殖性疾患が、子宮腺筋症、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頸がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺がん、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、小児固形癌、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、または白血病である、項目１３に記載の組成物。
（項目１５）
前記増殖性疾患が、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病である、項目１３に記載の組成物。
（項目１６）
増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための、項目１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１７）
前記増殖性疾患が、子宮腺筋症、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頸がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺がん、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、小児固形癌、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、または白血病である、項目１６に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１８）
前記増殖性疾患が、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病である、項目１６に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩。
（項目１９）
被験体における増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための方法であって、項目１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩の有効量を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目２０）
前記増殖性疾患が、子宮腺筋症、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頸がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺がん、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、小児固形癌、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、または白血病である、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記増殖性疾患が、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病である、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための医薬の製造における、項目１〜１２のいずれか１項に記載の修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩の使用。
（項目２３）
前記増殖性疾患が、子宮腺筋症、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頸がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺がん、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、小児固形癌、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、または白血病である、項目２２に記載の使用。
（項目２４）
前記増殖性疾患が、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病である、項目２２に記載の使用。【０００７】
本開示において、上記の１つまたは複数の特徴は、明示された組み合わせに加え、さらに組み合わせて提供され得ることが意図される。本開示のなおさらなる実施形態および利点は、必要に応じて以下の詳細な説明を読んで理解すれば、当業者に認識される。
【発明の効果】
【０００８】
本開示のペプチドは、強いＥｐｏＲ阻害能、高いがん細胞殺傷能、低い正常細胞殺傷能、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効の改善、副作用の低減、特定の部位に対する特異的な移行能、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーの改善、および高い安定性のうちの１つ以上の有利な特性を有し得る。このような特性を有するペプチドを提供することによって、例えば、増殖性疾患、子宮腺筋症または糖尿病網膜症が治療または予防され得る。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】合成ペプチド：（ベンゾイル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５５）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２】合成ペプチド：（ｐ−フルオロフェニルアセチル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５６）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３】合成ペプチド：（プロピオニル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５７）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図４】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５８）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図５】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５９）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図６】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６０）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図７】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６１）（配列番号１０）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図８】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（フェニルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６２）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図９】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（フェネチルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６３）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１０】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６４）（配列番号１１）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１１】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦａＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６５）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１２】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６６）（配列番号１２）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１３】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧ（ホモプロリン）ＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６７）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１４】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６８）（配列番号１３）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１５】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６９）（配列番号１４）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１６】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７０）（配列番号１５）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１７】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ホモトリプトファン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７１）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１８】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（α−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７２）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図１９】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７３）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２０】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７４）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２１】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（６−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７５）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２２】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（５−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７６）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２３】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ホモシステイン）Ｋ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７７）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２４】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ペニシラミン）Ｋ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７８）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２５】合成ペプチド：Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌｐＧｆｈｃｓ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７９）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２６】合成ペプチド：Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌＧＧｆｈｃｓ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２８０）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２７】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０３）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２８】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０４）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図２９】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０５）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３０】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０６）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３１】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０７）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３２】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０８）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３３】合成ペプチド：Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１３０９）の質量分析の結果を示す。上段はＥＳＩ−ＭＳ測定値からのデコンボリューション値を示し、下段はＥＳＩ−ＭＳ測定値を示す。
【図３４】実施例２における各ペプチドの１２０μＭの濃度におけるヒト肝臓がん由来ＨｅｐＧ２細胞殺傷効果を示す。横軸は、それぞれ、ＹＳ１２、ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８、ＧＴ−１１３０９、ＰＢＳ（−）処置および無処置を示す。縦軸は、１ｍｍ２の区画内で観察された死細胞の数の平均および標準偏差（ｎ＝３の場合）を示す。
【図３５】実施例２における各ペプチドの６０μＭの濃度におけるヒト肝臓がん由来ＨｅｐＧ２細胞殺傷効果を示す。横軸は、それぞれ、ＹＳ１２、ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８、ＧＴ−１１３０９、ＰＢＳ（−）処置および無処置を示す。縦軸は、１ｍｍ２の区画内で観察された死細胞の数の平均および標準偏差（ｎ＝３の場合）を示す。
【図３６】実施例２における各ペプチドの３０μＭの濃度におけるヒト肝臓がん由来ＨｅｐＧ２細胞殺傷効果を示す。横軸は、それぞれ、ＹＳ１２、ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８、ＧＴ−１１３０９、ＰＢＳ（−）処置および無処置を示す。縦軸は、１ｍｍ２の区画内で観察された死細胞の数の平均および標準偏差（ｎ＝３の場合）を示す。
【図３７】実施例２における各ペプチドの１５μＭの濃度におけるヒト肝臓がん由来ＨｅｐＧ２細胞殺傷効果を示す。横軸は、それぞれ、ＹＳ１２、ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８、ＧＴ−１１３０９、ＰＢＳ（−）処置および無処置を示す。縦軸は、１ｍｍ２の区画内で観察された死細胞の数の平均および標準偏差（ｎ＝３の場合）を示す。
【図３８】種々の合成ペプチドのヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞増殖に対する影響をＷＳＴ法によって評価した結果を示す。縦軸は、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を示す。横軸は、試験した薬剤を示す。結果は、３つのウェルの平均±標準誤差で示す。
【図３９】種々の合成ペプチドのヒト白血病由来ＡＴＬ−２細胞増殖に対する影響をＷＳＴ法によって評価した結果を示す。縦軸は、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を示す。横軸は、試験した薬剤を示す。結果は、３つのウェルの平均±標準誤差で示す。
【図４０】種々の合成ペプチドのヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。各パネルにおいて、縦軸は、試験開始時の腫瘍体積を１００％とした場合の各時点における相対腫瘍体積を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。対照は、生理食塩水投与である。結果は、マウス３〜５匹の平均±標準誤差で示す。
【図４１】各化合物のＣＦＵ−Ｅ形成に対する影響を評価した結果を示す。縦軸は、形成されたＣＦＵ−Ｅ数を示し、横軸は、それぞれ、（−）Ｅｐｏ：Ｅｐｏ添加なし、Ｃｏｎｔｒｏｌ：Ｅｐｏのみ添加、ＧＴ−１１２６９：Ｅｐｏ＋ＧＴ−１１２６９（１００μＭ）添加、ＧＴ−１１３０９：Ｅｐｏ＋ＧＴ−１１３０９（１００μＭ）添加を示す。結果は、２つのウェル（１０箇所／ウェル）から計測して作成した箱ひげ図で示す。
【図４２】ＧＴ−１１３０９のＥｐｏ依存性がん細胞増殖に対する影響をＷＳＴ法によって評価した結果を示す。左のパネルは、０〜１０Ｕ／ｍＬのＥｐｏ存在下におけるヒト白血病由来ＵＴ−７細胞の増殖性を示し、縦軸は、４５０ｎｍにおける吸光度を示す。右のパネルは、１Ｕ／ｍＬのＥｐｏ存在下における抗Ｅｐｏ抗体（クローンＲ６）、抗ＥｐｏＲ抗体（クローン７１３２１０）もしくはＧＴ−１１３０９（各抗体は１〜１００μｇ／ｍＬ、ＧＴ−１１３０９は１０〜１００μＭ）の添加によるＵＴ−７細胞増殖に対する阻害率を示す。横軸は、試験した薬剤を示す。結果は、３つのウェルの平均±標準偏差で示す。
【図４３】ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９およびＧＴ−１１３５０のヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞増殖に対する影響をＷＳＴ法によって評価した結果を示す。縦軸は、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を示す。横軸は、試験した薬剤およびその濃度（μＭ）を示す。結果は、３つのウェルの平均±標準誤差で示す。
【図４４】ＧＴ−１１３５０のヒト乳がん細胞増殖に対する影響をＡＴＰ量を指標に評価した結果を示す。それぞれのパネルはＨＣＣ１３９５（左）およびＨＣＣ１８０６（右）の結果を示す。各パネルにおいて、縦軸は、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各濃度における阻害率を示し、横軸は、試験した濃度（μＭ）を示す。結果は、３つのウェルの平均±標準誤差で示す。
【図４５】合成ペプチドのヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。上のパネルにおいて、縦軸は、試験開始時の腫瘍体積を１００％とした場合の各時点における相対腫瘍体積を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。下のパネルにおいて、縦軸は、各時点における体重を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。対照は、生理食塩水投与である。結果は、マウス４〜５匹の平均±標準誤差で示す。
【図４６】合成ペプチドのヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。縦軸は、腫瘍組織体積あたりのＦＶＩＩＩ陽性細胞数を細胞サイズに分けて示し、横軸は、それぞれ、φ（細胞径）＞５０μｍ（large）、５０μｍ＞φ＞１０μｍ（medium）、１０μｍ＞φ（capillary）の細胞サイズを示す。結果は、マウス３〜４匹の平均±標準誤差で示す。
【図４７】合成ペプチドのヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。縦軸は、ヘマトクリット値（上パネル）および血中ヘモグロビン濃度（下パネル）を示し、横軸は、被験化合物を示す。結果は、マウス３〜５匹の平均±標準誤差で示す。
【図４８】ＧＴ−１１３５０のＣＦＵ−Ｅ形成に対する影響を評価した結果を示す。縦軸は、形成されたＣＦＵ−Ｅ数を示し、横軸は、被験化合物を示す。結果は、２つのウェル（１０箇所／ウェル）から計測して作成した箱ひげ図で示す。
【図４９】各用量（０．１ｍｇ、０．２ｍｇおよび０．４ｍｇ／日）のＧＴ−１１３５０のヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。上のパネルにおいて、縦軸は、試験開始時の腫瘍体積を１００％とした場合の各時点における相対腫瘍体積を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。下のパネルにおいて、縦軸は、各時点における体重を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。対照は、生理食塩水投与である。結果は、マウス６匹の平均±標準誤差で示す。
【図５０】ＧＴ−１１３５０のヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。縦軸は、ヘマトクリット値（上パネル）および血中ヘモグロビン濃度（下パネル）を示し、横軸は、被験化合物を示す。結果は、マウス６匹の平均±標準誤差で示す。
【図５１】１日３回および１日１回のＧＴ−１１３５０のヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１担がんマウスに対する影響を評価した結果を示す。上のパネルにおいて、縦軸は、試験開始時の腫瘍体積を１００％とした場合の各時点における相対腫瘍体積を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。下のパネルにおいて、縦軸は、各時点における体重を示し、横軸は、投与開始日からの経過日数を示す。対照は、生理食塩水投与である。結果は、マウス６匹の平均±標準誤差で示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本開示を最良の形態を示しながら説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本開示の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。
【００１１】
（定義）
以下に本明細書において特に使用される用語の定義および／または基本的技術内容を適宜説明する。
【００１２】
本明細書において「ペプチド」とは、当該技術分野における通常の意味で使用され、複数のアミノ酸がペプチド結合によって連結された重合体およびその修飾体である化合物を指す。本明細書においてペプチドの配列を記載する場合、特に断らない限り、Ｎ末端（アミノ末端）を左に、Ｃ末端（カルボキシ末端）を右に配置する。例えば、ＡＧＴＣＩ（アラニン−グリシン−トレオニン−システイン−イソロイシン）の配列で表されるペプチドにおいて、アラニンのアミノ基は遊離の状態であり、アラニンのカルボキシル基はグリシンのアミノ基とペプチド結合を形成しており、イソロイシンのアミノ基はシステインのカルボキシル基とペプチド結合を形成しており、イソロイシンのカルボキシル基は遊離の状態である。ペプチドの配列の末端に化学基が存在する場合、ペプチド配列の末端アミノ酸のアミノ基またはカルボキシル基とその化学基が結合を形成していることを示し、例えば、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２の構造において、Ｎ末端のセリンのアミノ基はＣＨ３−ＣＯ−基と結合を形成しており、Ｃ末端のリジンのカルボキシル基は−ＮＨ２基と結合を形成している。修飾としては、例えばアセチル化、アルキル（例えば、メチル）化、ハロゲン（例えば、フルオロ、クロロ）置換アルキル（例えば、フルオロメチル）化、アルコキシル（例えば、メトキシル）化、ヒロドキシル化、ハロゲン化、ベンゾチアゾリル化、二環（例えば、ナフチル）化およびヘテロ環化（例えば、キノリル化）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１３】
本明細書において「エリスロポエチン」とは、当該技術分野における通常の意味で使用され、赤血球系幹細胞（前駆細胞）に作用して分化誘導を刺激し、赤血球産生を促進する分子量３４，０００〜４６，０００の糖蛋白ホルモンを指す。本明細書においてエリスロポエチンは、ＥＰＯまたはＥｐｏとも表記され得る。
【００１４】
本明細書において「エリスロポエチン受容体」とは、当該技術分野における通常の意味で使用され、エリスロポエチンが結合する受容体を指し、赤血球の他に、骨髄細胞、白血球、末梢・中枢神経上で発現され、ＥＰＯが赤血球上のエリスロポエチン受容体に結合すると、ヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２）を活性化する。本明細書においてエリスロポエチン受容体は、ＥｐｏＲとも表記され得る。
【００１５】
本明細書において、単独または別の基の一部としての「アルキル基」は、炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖飽和ヒドロカルビル基を指す。アルキル基は、代表的には、１〜１０個の炭素原子を有し得、いくつかの実施形態において、１〜８個の炭素原子、１〜６個の炭素原子、１〜４個の炭素原子、または１〜３個の炭素原子を有し得る。Ｃ１〜３アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、およびイソプロピル基が挙げられる。Ｃ１〜４アルキル基の例としては、前述のＣ１〜３アルキル基、ならびにブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、およびｔｅｒｔ−ブチル基が挙げられる。Ｃ１〜６アルキル基の例としては、前述のＣ１〜４アルキル基、ならびにペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ヘキシル基等が挙げられる。アルキル基の追加の例としては、ヘプチル基、オクチル基等が挙げられる。
【００１６】
本明細書において使用される場合、「アルキレン基」は、「アルキル基」からさらに水素を１個取ることにより生じる２価基である。アルキレン基の具体例としては、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−（ＣＨ２）４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−（ＣＨ２）５−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、−（ＣＨ２）８−、−（ＣＨ２）９−、および−（ＣＨ２）１０−などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１７】
本明細書において、単独または別の基の一部としての「アルケニル基」は、炭素原子および１つ以上の炭素−炭素二重結合を有する直鎖もしくは分枝鎖ヒドロカルビル基を指す。アルケニル基は、代表的には、２〜１０個の炭素原子を有し得、いくつかの実施形態において、２〜８個の炭素原子、２〜６個の炭素原子または２〜４個の炭素原子を有し得る。１つ以上の炭素−炭素二重結合は、内部（例えば、２−ブテニルにおける二重結合）であっても、末端（例えば、１−ブテニルにおける二重結合）であってもよい。Ｃ２〜４アルケニル基の例としては、エテニル基（ビニル基）、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、ブタジエニル基等が挙げられる。Ｃ２〜６アルケニル基の例としては、前述のＣ２〜４アルケニル基、ならびにペンテニル基、ペンタジエニル基、ヘキセニル基等が挙げられる。アルケニル基の追加の例としては、ヘプテニル基、オクテニル基、オクタトリエニル基等が挙げられる。
【００１８】
本明細書において使用される場合、「アルケニレン基」は、「アルケニル基」からさらに水素を１個取ることにより生じる２価基である。アルケニレン基の具体例としては、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）２−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）３−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）４−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）５−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）６−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）７−、および−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）８−などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
本明細書において使用される場合、「アルコキシル基」は、−Ｏ−アルキルの一価基である。アルコキシル基の好ましい例としては、Ｃ１〜６アルコキシル基（即ち、Ｃ１〜６アルキル−Ｏ−）、Ｃ１〜４アルコキシル基（即ち、Ｃ１〜４アルキル−Ｏ−）等が挙げられる。Ｃ１〜４アルコキシル基の具体例としては、メトキシル基（ＣＨ３Ｏ−）、エトキシル基（ＣＨ３ＣＨ２Ｏ−）、ｎ−プロポキシル基（ＣＨ３（ＣＨ２）２Ｏ−）、イソプロポキシル基（（ＣＨ３）２ＣＨＯ−）、ｎ−ブトキシル基（ＣＨ３（ＣＨ２）３Ｏ−）、イソブトキシル基（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２Ｏ−）、ｔｅｒｔ−ブトキシル基（（ＣＨ３）３ＣＯ−）、ｓｅｃ−ブトキシル基（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ−）等が挙げられる。Ｃ１〜６アルコキシル基の具体例としては、Ｃ１〜４アルコキシル基、ｎ−ペンチルオキシル基（ＣＨ３（ＣＨ２）４Ｏ−）、イソペンチルオキシル基（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）、ネオペンチルオキシル基（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２Ｏ−）、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシル基（ＣＨ３ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｏ−）、１，２−ジメチルプロポキシル基（ＣＨ３ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ−）等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
本明細書で使用される場合、「脂肪族基」は、アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基を指し、環状炭化水素基は含まない。
【００２１】
本明細書で使用される場合、「ヘテロ脂肪族基」は、脂肪族基中の一部がヘテロ原子（例えば、窒素原子、酸素原子、硫黄原子など）に置き換わった基を指す。
【００２２】
本明細書で使用される場合、用語「アリール基」は、環の少なくとも１つが芳香族であり、全ての環原子が炭素である、単一芳香環または縮合多環系を指す。例えば、アリール基は、６〜２６個の炭素原子（６〜２６員）、６〜２０個の炭素原子（６〜２０員）、６〜１４個の炭素原子（６〜１４員）、または６〜１２個の炭素原子（６〜１２員）を有することができる。アリール基は、フェニル基を含む。またアリール基は、少なくとも１つの環が芳香族であり、他の環は芳香族であっても芳香族でなくてもよい、８〜２０個の炭素原子を有する縮合多環系（例えば、２、３または４つの環を含む環系）を含む。このような縮合多環系は、縮合多環系の任意の炭素環部分において、１つまたは複数（例えば、１、２または３つ）のオキソ基により任意選択で置換されていてもよい。縮合多環系の環は、価数の要件が許す場合、縮合、スピロおよび架橋結合を介して互いに接続され得る。典型的なアリール基として、フェニル基、インデニル基、ナフチル基、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル基、アントリル基、ピレニル基等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
本明細書中で使用される場合、用語「ヘテロアリール基」は、環中に少なくとも１個のヘテロ原子を有する、単一芳香環または縮合多環系を指し、そのヘテロ原子は、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される。ヘテロアリール基は、代表的には、５〜２６員であり得、いくつかの実施形態において、５〜２０員、５〜１４員、５〜１２員、または５〜１０員であり得る。ヘテロアリール基は、環中に約１〜６個の炭素原子、ならびに酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される約１〜４個のヘテロ原子を有する単一芳香環を含む。このような環として、ピリジル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、オキサゾリル基、フリル基等が挙げられるが、これらに限定されない。硫黄および窒素原子はまた、環が芳香族であるならば、酸化形態で存在することができる。ヘテロアリール基はまた、先に定義のヘテロアリール基が、ヘテロアリール（例えばナフチリジニル、例えば１，８−ナフチリジニルを形成する）、複素環（例えば１，２，３，４−テトラヒドロナフチリジニル、例えば１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジニルを形成する）、炭素環（例えば５，６，７，８−テトラヒドロキノリルを形成する）およびアリール（例えばインダゾリルを形成する）から選択される１つまたは複数の環と縮合して、縮合多環系を形成することができる、縮合多環系（例えば、２、３または４つの環を含む環系）を含む。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基（単一芳香環または縮合多環系）は、ヘテロアリール環中に約１〜２０個の炭素原子および約１〜６個のヘテロ原子を有する。このような縮合多環系は、縮合環の炭素環または複素環部分において、１つまたは複数（例えば、１、２、３または４つ）のオキソ基により置換されていてもよい。縮合多環系の環は、価数の要件が許す場合、縮合、スピロおよび架橋結合を介して互いに結合され得る。縮合多環系の個々の環は、互いに対して任意の順序で結合され得ることを理解されたい。上記縮合多環系の結合点は、縮合多環系のヘテロアリール、複素環、アリールまたは炭素環部分を含めた縮合多環系の任意の位置、ならびに炭素原子およびヘテロ原子（例えば、窒素）を含めた縮合多環系の任意の適切な原子に存在し得ることも理解されたい。例示的なヘテロアリール基として、キノリル基、ベンゾチアゾリル基、ピリジル基、ピロリル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、ピラゾリル基、チエニル基、インドリル基、イミダゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、フリル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、イソキノリル基、ベンゾオキサゾリル基、インダゾリル基、キノキサリル基、キナゾリル基、５，６，７，８−テトラヒドロイソキノリニルベンゾフラニル基、ベンゾイミダゾリル基、チアナフテニル基、ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル基、キナゾリニル−４（３Ｈ）−オン基、トリアゾリル基、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インダゾール基および３ｂ，４，４ａ，５−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロプロパ［３，４］シクロペンタ［１，２−ｃ］ピラゾール基等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２４】
別途指定がない限り、本明細書において使用される場合、単独または別の基の一部としての「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素（フルオロ）、塩素（クロロ）、臭素（ブロモ）、またはヨウ素（ヨード）を指す。
【００２５】
別途指定がない限り、本明細書において使用される場合、単独または別の基の一部としての「ハロアルキル基」は、水素原子のうちの１つ以上がそれぞれ独立してハロで置換されているアルキル基を指す。ハロアルキル基の例としては、−ＣＣｌ３、−ＣＦＣｌ２、−ＣＦ２Ｃｌ、−ＣＣｌ２ＣＣｌ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２Ｂｒ、−ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ２Ｂｒ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ２Ｃｌ等が挙げられる。「ハロアルケニル基」、「ハロアルキニル基」および「ハロ脂肪族基」なども、前述の「ハロアルキル基」と同様に定義される。
【００２６】
本明細書において使用される場合、単独または別の基の一部としての「炭素環」または「炭素環式基」とは、完全に飽和しているかまたは１つ以上の不飽和単位を含むが、芳香族ではない単環式、二環式、三環式またはそれを超える多環式の炭化水素基を指す。一つの実施形態において、炭素環式基は、単環式のＣ３〜９炭化水素基、二環式のＣ８〜１２炭化水素基、または三環式のＣ１０〜１６炭化水素基であり得る。上記炭素環式基における任意の個別の環は、３〜７個の環原子を有し得る。炭素環式基の例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、シクロノニル基などのシクロアルキル基、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基、シクロオクテニル基、シクロノネニル基などのシクロアルケニル基およびシクロプロピニル基、シクロブチニル基、シクロペンチニル基、シクロヘキシニル基、シクロヘプチニル基、シクロオクチニル基、シクロノニル基などのシクロアルキニル基、ならびに、アダマンチル基などが挙げられるが、これらに限定されない。炭素環式基においては、可能である場合、いずれの環原子が分子の残りの部分と結合してもよい。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、単独または別の基の一部としての「複素環」、「複素環基」または「複素環式基」は、その環系における少なくとも１つの環が、同じかまたは異なる１つ以上のヘテロ原子を含み、完全に飽和しているかまたは１つ以上の不飽和単位を含むが芳香族ではない、単環式、二環式、三環式またはそれを超える多環式の環系を指す。いくつかの実施形態において、「複素環」または「複素環式基」は、３〜１４個の環原子を有し、ここで、１つ以上の環原子は、酸素、硫黄、窒素またはリンから独立して選択されるヘテロ原子であり、その環系における各環は、３〜８個の環原子を含む。
【００２８】
複素環式基の例としては、２−テトラヒドロフラニル基、３−テトラヒドロフラニル基、２−テトラヒドロチオフェニル基、３−テトラヒドロチオフェニル基、２−モルホリノ基、３−モルホリノ基、４−モルホリノ基、２−チオモルホリノ基、３−チオモルホリノ基、４−チオモルホリノ基、１−ピロリジニル基、２−ピロリジニル基、３−ピロリジニル基、１−テトラヒドロピペラジニル基、２−テトラヒドロピペラジニル基、３−テトラヒドロピペラジニル基、１−ピペリジニル基、２−ピペリジニル基、３−ピペリジニル基、１−ピラゾリニル基、３−ピラゾリニル基、４−ピラゾリニル基、５−ピラゾリニル基、１−ピペリジニル基、２−ピペリジニル基、３−ピペリジニル基、４−ピペリジニル基、２−チアゾリジニル基、３−チアゾリジニル基、４−チアゾリジニル基、１−イミダゾリジニル基、２−イミダゾリジニル基、４−イミダゾリジニル基、５−イミダゾリジニル基などの単環、ならびに３−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−オン基、３−（１−アルキル）−ベンゾイミダゾール−２−オン基、インドリニル基、テトラヒドロキノリニル基、テトラヒドロイソキノリニル基、ベンゾチオラン基、ベンゾジチアン基および１，３−ジヒドロ−イミダゾール−２−オン基などの二環が挙げられるが、これらに限定されない。複素環式基においては、可能である場合、いずれの環原子が分子の残りの部分と結合してもよい。
【００２９】
本明細書中で使用される場合、用語「不飽和」は、ある部分が、１つ以上の不飽和単位を有することを意味する。
【００３０】
「ヘテロ脂肪族基」、「複素環」、「複素環式基」、「ヘテロアリール基」、および「アリーレン基」が置換されている場合、置換可能であるならば、ヘテロ原子上に置換基を有していてもよい。
【００３１】
ある基が「置換されている」場合、その基は、少なくとも一つの水素が水素以外の基（置換基）で置き換えられており、その置換基の数は、置換可能であれば特に制限はなく、１または複数である。また、特に指示した場合を除き、各々の基の説明はその基が他の基の一部分または置換基である場合にも該当する。なお、例えば、Ｃ１〜６アルキル基がある置換基で置換されている場合、その置換基の炭素の数は、そのアルキル基の炭素の数に含めない。他の基でも同様である。
【００３２】
本明細書において「アミノ酸」とは、当該技術分野における通常の意味で使用され、カルボキシル基およびアミノ基を一つの分子内に有する化合物を指す。代表的には、アミノ酸は、αアミノ酸であるが、本明細書では、βアミノ酸およびγアミノ酸などのカルボキシル基とアミノ基との距離がより離れたアミノ酸であってもよい。さらに、本明細書において、特段示さなければ、アミン酸は、Ｌ体の光学異性体を示し、Ｄ体である場合には、最初にＤ（もしくは、ｄ）を付す（例えば、Ｄ−Ａｌａ（もしくは、ｄ−Ａｌａ））か、または小文字のアルファベット（例えば、ａ）で示す。以下にアミノ酸の代表的な例を示すが、その他のアミノ酸も本明細書において企図される。
【表１】
2020054813.tif 000003
【００３３】
上記表１に記載されるもの以外の例示的アミノ酸として、ホモプロリン、フェニルグリシン、フェネチルグリシン、α-ナフチルアラニン、β-ナフチルアラニン、β−ホモトリプトファン、キノリルアラニン、ホモシステイン、ペニシラミン、サルコシン、オルニチン、シトルリン、ヒドロキシプロリン、ならびに上記天然型アミノ酸の修飾体（修飾アミノ酸）、および非天然型アミノ酸の修飾体(修飾アミノ酸）が挙げられるが、これらに限定されない。
【表２】
2020054813.tif 000004
【００３４】
さらなるアミノ酸として、以下の修飾アミノ酸も挙げられる。
・ＮＨ２−ＣＨ（Ｒ’）−ＣＯＯＨ［式中、Ｒ’は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基（例えば、Ｃ１〜５））−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基（例えば、Ｃ１〜３）、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基（例えば、Ｃ１〜３）、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基（例えば、５〜１８員環、および／または単環、二環もしくは三環式））の構造を有する］
・ＮＨ２−ＣＨ（Ｒ’）−ＣＯＯＨ［式中、Ｒ’は、−（直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基（例えば、Ｃ１〜５））である］
・
【化１】
2020054813.tif 000005
［式中、Ｒ’は、直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基（例えば、Ｃ３〜８）である］
・ＮＨ２−ＣＨ（Ｒ’）−ＣＯＯＨ［式中、Ｒ’は、−（直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基（例えば、Ｃ１〜８））であり、ここで、前記アルキル基またはアルケニル基中のいずれか１つの炭素原子は硫黄原子で置き換えられていてもよく、さらに−ＳＨを有してもよい］
・ＮＨ２−ＣＨ（Ｒ’）−ＣＯＯＨ［式中、Ｒ’は、−（直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基（例えば、Ｃ１〜１０））であり、ここで、任意の１、２または３つの炭素原子は窒素原子で置き換えられていてもよい］
【００３５】
本明細書において「保存的置換」とは、ペプチドにおけるアミノ酸を別の性質の類似したアミノ酸に置き換えることを指し、ペプチドの性質は保存的置換の前後で類似であることが予測され得る。
【００３６】
一つの実施形態において、保存的置換は、以下のアミノ酸の群におけるアミノ酸を同じ群内のアミノ酸で置き換えることである。
・群１：グリシン、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシン
・群２：セリンおよびトレオニン
・群３：フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンおよびホモトリプトファン、フェニルグリシン、フェネチルグリシン、ベンゾチアゾリルアラニン、α−ナフチルアラニン、β−ナフチルアラニン、キノリルアラニン、ピリジルアラニン、ベンゾピラゾリルアラニン、およびその芳香環上の１つまたは２つの水素原子がメチル基、メトキシル基、ヒドロキシル基もしくはハロゲン原子で置き換えられたアミノ酸
・群４：リジン、アルギニン、ヒスチジンおよびオルニチン
・群５：システイン、メチオニン、ホモシステインおよびペニシラミン
・群６：プロリンおよびホモプロリン
・群７：グルタミン酸およびアスパラギン酸
・群８：グルタミンおよびアスパラギン
【００３７】
一つの実施形態において、保存的置換は、元のアミノ酸に含まれるいずれか１つの−ＣＨ２−部分の除去、アミノ酸のいずれか１つの部分に対する−ＣＨ２−または−ＣＨ３部分の付加、元のアミノ酸のいずれか１つの水素原子のアルキル基（例えば、メチル基）、アルコキシル基（例えば、メトキシル基）、ヒドロキシル基もしくはハロゲン原子による置換、または元のアミノ酸中の芳香環のいずれかの位置における炭素原子１つの除去または付加による環の縮小または拡大のうちのいずれかの修飾を含むアミノ酸により置き換えることである。
【００３８】
保存的置換を含む本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグにおいても、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの１つ以上の特性が元のペプチドと同様に保持され得る。
【００３９】
本明細書において、ペプチドについて「ジスルフィド結合」とは、１つのペプチド分子内に形成されるＳ−Ｓ結合を指す。典型的には、ジスルフィド結合は、２つのシステイン残基にそれぞれ存在する硫黄原子同士の間に形成されるが、本明細書では、ペプチド分子内に存在する任意の硫黄原子間の結合がジスルフィド結合と称される。一つの実施形態では、ペプチド分子内のジスルフィド結合は、ペプチドの側鎖に存在する硫黄原子間で形成される。
【００４０】
本明細書において「医薬成分」とは、医薬を構成し得る任意の成分を意味し、例えば、有効成分（それ自体が薬効を示すもの）、添加成分（それ自体は、薬効を期待されていないが、医薬として含まれる場合一定の役割（例えば、賦形剤、滑沢剤、界面活性剤等）を果たすことが期待される成分）、アジュバント（有効成分の薬効を増強するもの）等を例示することができる。医薬成分は、単独の物質であってもよく、複数の物質や剤の組み合わせであってもよい。有効成分と添加成分との組み合わせ、アジュバントと有効成分との組み合わせなどの任意の組み合わせも含まれ得る。
【００４１】
本明細書では、「有効成分」は、意図される薬効を発揮する成分をいい、単独または複数の成分が該当し得る。
【００４２】
本明細書において「添加成分」とは、薬効を期待されていないが、医薬として含まれる場合一定の役割を果たす任意の成分をいい、例えば、薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、賦形剤、緩衝剤、結合剤、爆破剤、希釈剤、香味料、潤滑剤を挙げることができる。
【００４３】
本明細書において、使用される医薬成分は精製されたものでありうる。本明細書中で使用される用語「精製された」は、好ましくは少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも８５重量％、よりさらに好ましくは少なくとも９５重量％、そして最も好ましくは少なくとも９８重量％の、同型の生物学的因子が存在することを意味する。
【００４４】
本明細書において「被験体（者）」とは、本開示の治療等の対象となる対象をいう。
【００４５】
本明細書において「薬剤」、「剤」または「因子」（いずれも英語ではａｇｅｎｔに相当する）は、広義には、交換可能に使用され、意図する目的を達成することができる限りどのような物質または他の要素（例えば、光、放射能、熱、電気などのエネルギー）でもあってもよい。そのような物質としては、例えば、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、ペプチド、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡのようなＤＮＡ、ｍＲＮＡのようなＲＮＡを含む）、ポリサッカリド、オリゴサッカリド、脂質、有機低分子（例えば、ホルモン、リガンド、情報伝達物質、有機低分子、コンビナトリアルケミストリで合成された分子、医薬品として利用され得る低分子（例えば、低分子リガンドなど）など）、これらの複合分子が挙げられるがそれらに限定されない。
【００４６】
本明細書において「治療」とは、ある疾患または障害について、そのような状態になった場合に、そのような疾患または障害の悪化を防止、好ましくは、現状維持、より好ましくは、軽減、さらに好ましくは消退させることをいい、患者の疾患、もしくは疾患に伴う1つ以上の症状の、症状改善効果あるいは予防効果を発揮しうることを含む。事前に診断を行って適切な治療を行うことは「コンパニオン治療」といい、そのための診断薬を「コンパニオン診断薬」ということがある。
【００４７】
本明細書において「治療薬（剤）」とは、広義には、目的の状態を治療できるあらゆる薬剤をいう。本開示の一実施形態において「治療薬」は、有効成分と、薬理学的に許容される1つもしくはそれ以上の担体とを含む医薬組成物であってもよい。医薬組成物は、例えば有効成分と上記担体とを混合し、製剤学の技術分野において知られる任意の方法により製造することができる。また治療薬は、治療のために用いられる物であれば使用形態は限定されず、有効成分単独であってもよいし、有効成分と任意の成分との混合物であってもよい。また上記担体の形状は特に限定されず、例えば、固体または液体（例えば、緩衝液）であってもよい。
【００４８】
本明細書において「予防」とは、ある疾患または障害について、そのような状態になる前に、そのような状態にならないようにすることをいう。本開示の薬剤を用いて、診断を行い、必要に応じて本開示の薬剤を用いて疾患または障害の予防をするか、あるいは予防のための対策を講じることができる。
【００４９】
本明細書において「予防薬（剤）」とは、広義には、目的の状態を予防できるあらゆる薬剤をいう。
【００５０】
本明細書において「キット」とは、通常2つ以上の区画に分けて、提供されるべき部分（例えば、検査薬、診断薬、治療薬、標識、説明書など）が提供されるユニットをいう。安定性等のため、混合されて提供されるべきでなく、使用直前に混合して使用することが好ましいような組成物の提供を目的とするときに、このキットの形態は好ましい。そのようなキットは、好ましくは、提供される部分（例えば、検査薬、診断薬、治療薬）をどのように使用するか、あるいは、試薬をどのように処理すべきかを記載する指示書または説明書を備えていることが有利である。
【００５１】
本明細書において「指示書」は、本開示を使用する方法を医師または他の使用者に対する説明を記載したものである。この指示書は、本開示の医薬などを投与することを指示する文言が記載されている。また、指示書には、投与形態（例えば、経口、注射などに）を指示する文言が記載されていてもよい。この指示書は、本開示が実施される国の監督官庁（例えば、日本であれば厚生労働省、米国であれば食品医薬品局（FDA）など）が規定した様式に従って作成され、その監督官庁により承認を受けた旨が明記される。指示書は、いわゆる添付文書（package  insert）であり、通常は紙媒体で提供されるが、それに限定されず、例えば、電子媒体（例えば、インターネットで提供されるホームページ、電子メール）のような形態でも提供され得る。
【００５２】
本明細書において「診断」とは、被験体における疾患、障害、状態などに関連する種々のパラメータを同定し、そのような疾患、障害、状態の現状または未来を判定することをいう。本明細書において、狭義には、「診断」は、現状を診断することをいうが、広義には「早期診断」、「予測診断」、「事前診断」等を含む。
【００５３】
本開示の医薬等としての処方手順は、当該分野において公知であり、例えば、日本薬局方、米国薬局方、他の国の薬局方などに記載されている。従って、当業者は、本明細書の記載があれば、過度な実験を行うことなく、使用すべき量を決定することができる。
【００５４】
（好ましい実施形態の説明）
以下に本開示の好ましい実施形態を説明する。以下に提供される実施形態は、本開示のよりよい理解のために提供されるものであり、本開示の範囲は以下の記載に限定されるべきでないことが理解される。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本開示の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。これらの実施形態について、当業者は適宜、任意の実施形態を組み合わせ得る。
【００５５】
＜抗ＥｐｏＲペプチドの構造＞
１つの局面において、本開示は、抗ＥｐｏＲペプチドを提供する。特定の実施形態では、本開示のペプチドは、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）と比較して１つ以上の改善された特性を有する。このような特性として、例えば、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性などが挙げられるがこれらに限定されない。
【００５６】
本開示は、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）に基づく修飾ペプチドに関する。修飾ペプチドは、−［ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ］−という基本構造を有し、その構造を有するペプチドに基づく修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩であり得る。例えば、この修飾ペプチドまたはそのプロドラッグあるいはその塩は、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）の任意の部分（ペプチドのアミノ末端およびカルボキシ末端を含む）に少なくとも１つの修飾を含み、好ましくは２つの修飾、あるいは３つの修飾または４つの修飾あるいは修飾の修飾を含む。好ましい実施形態では、本開示のペプチドは、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）におけるアミノ末端、カルボキシ末端、ＦおよびＷに対応する部分のうちの１つ、２つ、３つまたは全部に修飾を含む。
【００５７】
別の局面では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは以下の式（Ｉ）で表される構造を有する。
式（Ｉ）：
Ｘ１−ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）−Ｘ２（配列番号１）
［式中、Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側である］
【００５８】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖メトキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有する。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ１は、−（結合、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルコキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい５〜１８員の単環、二環もしくは三環式アリール基またはヘテロアリール基）であり、ここで、任意の位置で任意の数の前記置換基がアリール基またはヘテロアリール基上に存在してもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ１）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ１は、（結合、あるいはＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（Ｃ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基（例えば、メチル基）、Ｃ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルコキシル基（例えば、メトキシル基）、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい単環もしくは二環式アリール基またはヘテロアリール基（例えば、ベンゼン、ナフタレン、ピリジン、チオフェンまたはベンゾチオフェン））である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１は、Ｍｅｔ、あるいはメチル基、メトキシル基、ハロゲン原子もしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいＰｈｅ、Ｔｙｒ、フェニルグリシンまたはフェネチルグリシンであり、ここで、任意の位置かつ任意の数のメチル基、メトキシル基、ハロゲン原子もしくはヒドロキシル基が芳香環上に存在してもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１における芳香環上のメチル基、メトキシル基、ハロゲン原子もしくはヒドロキシル基は、メタ位（ｍ−）、パラ位（ｐ−）またはこれらの組み合わせ（３，４−）上に存在してもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ１は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ、ｐ−クロロ−Ｐｈｅ、ｍ−クロロ−Ｐｈｅ、３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ、フェニルグリシンまたはフェネチルグリシンである。いずれの理論に束縛されることを望むものでもないが、抗ＥｐｏＲペプチドがＥｐｏＲに結合したとき、Ａ１の残基はＥｐｏＲの脂溶性ポケットに相当する位置に存在する可能性があると考えられる。抗ＥｐｏＲペプチドにおいて、Ａ１が、ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、フェネチルグリシンまたはクロロ置換Ｐｈｅである場合に比較的高い活性が観察された。Ａ１の残基とＥｐｏＲとの間で水素結合が形成されている可能性も考えられる。Ａ１において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００５９】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ２は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ２）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ２は、−（Ｈ、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基）である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ２は、Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである。Ａ２において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６０】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ３は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ３）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ３は、−（Ｈ、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基）である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ３は、
【化２】
2020054813.tif 000006
であり、ここで、のＲＡ３は、Ｃ３〜８の直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ３は、Ｐｒｏ、ホモプロリンまたはＡｌａである。Ａ３において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。好ましくは、式（Ｉ）のペプチドは、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）の構造を有するペプチドより改善された少なくとも１つの特性を有する。
【００６１】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ４は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ４）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ４は、−（Ｈ、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基）であり、ここで、１つの実施形態では、前記アルキル基またはアルケニル基中のいずれか１つの炭素原子は硫黄原子で置き換えられていてもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ４は、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＩｌｅである。式（Ｉ）の特定の実施形態では、Ａ４は、ＭｅｔまたはＬｅｕである。Ａ４において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６２】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ５は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ５）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ５は、−（Ｈ、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基）であり、ここで、１つの実施形態では、前記アルキル基またはアルケニル基中のいずれか１つの水素原子はヒドロキシル基で置き換えられていてもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ５は、ＴｈｒまたはＡｌａである。Ａ５において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、強いＥｐｏＲ阻害能、高いがん細胞殺傷能、低い正常細胞殺傷能、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効の改善、副作用の低減、特定の部位に対する特異的な移行能、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーの改善、および高い安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６３】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ６は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ６）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ１は、（結合、あるいは直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖アルコキシル基（例えば、メトキシル基）、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアリール基またはヘテロアリール基）の構造を有する。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ６は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ６）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ６は、−（結合、あるいはＣ１〜５の直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基またはアルケニレン基）−（ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルコキシル基、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい５〜１８員の単環、二環もしくは三環式アリール基またはヘテロアリール基）であり、任意の位置で任意の数の前記置換基がアリール基またはヘテロアリール基上に存在してもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ６は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ６）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ６は、−（結合、あるいはＣ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキレン基）−（Ｃ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基（例えば、メチル基）、Ｃ１〜３の直鎖もしくは分枝鎖アルコキシル基（例えば、メトキシル基）、ハロゲン原子およびヒドロキシル基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい５〜１８員の単環もしくは二環式アリール基またはヘテロアリール基（例えば、ベンゼン、インドール、ナフタレン、ベンゾチアゾールおよびキノリン））である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ６は、Ｍｅｔ、あるいはメチル基、メトキシル基、ヒドロキシル基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよいＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、β−ホモトリプトファン、ベンゾチアゾリルアラニン、α−ナフチルアラニン、β−ナフチルアラニンまたはキノリルアラニンであり、ここで、任意の位置かつ任意の数のメチル基、メトキシル基、ヒドロキシル基もしくはハロゲン原子が芳香環上に存在してもよく、ベンゾチアゾリルアラニンは、２−ベンゾチアゾリルアラニン、４−ベンゾチアゾリルアラニン、５−ベンゾチアゾリルアラニン、６−ベンゾチアゾリルアラニン、または７−ベンゾチアゾリルアラニンのいずれであってもよく、キノリルアラニンは、２−キノリルアラニン、３−キノリルアラニン、４−キノリルアラニン、５−キノリルアラニン、６−キノリルアラニン、７−キノリルアラニン、または８−キノリルアラニンのいずれであってもよい。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ６は、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、β−ホモトリプトファン、２−ベンゾチアゾリルアラニン、α−ナフチルアラニン、β−ナフチルアラニン、６−クロロ−Ｔｒｐ、５−クロロ−Ｔｒｐ、２−キノリルアラニンまたは８−キノリルアラニンである。式（Ｉ）の特定の実施形態では、Ａ６は、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、８−ナフチルアラニン、２−キノリルアラニン、５−クロロ−Ｔｒｐ、または２−ベンゾチアゾリルアラニンであり、より具体的な実施形態では、Ａ６は、２−ベンゾチアゾリルアラニンであり得る。Ａ６において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６４】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ７は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ７）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ７は、−（Ｈ、あるいはＣ１〜８の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基）であり、ここで、１つの実施形態では、前記アルキル基またはアルケニル基中のいずれか１つの炭素原子は硫黄原子で置き換えられていてもよく、１つの実施形態では、−ＳＨ基を有する。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ７は、Ｃｙｓ、ホモシステインまたはペニシラミンである。Ａ７において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６５】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ８は、−ＮＨ−ＣＨ（ＲＡ８）−ＣＯ−であり、式中、ＲＡ８は、−（Ｃ１〜１０の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基またはアルケニル基［式中、任意の１、２または３つの炭素原子は窒素原子で置き換えられていてもよい］）である。式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ａ８は、Ｌｙｓ、Ａｒｇまたは非存在である。Ａ８において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６６】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、ここで、Ｒ１は、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル基、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択され、ここで、各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される。１つの実施形態では、Ｘ１は、−ＣＯＯＨ、プロピオニル基、またはハロゲンで置換されていてもよいベンゾイル基もしくはフェニルアセチル基である。１つの実施形態では、Ｘ１は、Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ、Ｔｈｒ−Ｔｙｒ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｔｒｐまたはこれらのアミノ末端が直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜５アシル基で置換された部分である。１つの実施形態では、Ｘ１は、ベンゾイル基またはｐ−フルオロフェニルアセチル基である。Ｘ１において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６７】
式（Ｉ）の１つの実施形態では、Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、ここで、各Ｒ１は、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される。１つの実施形態では、Ｘ２は、Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｇｌｎ、Ｐｒｏまたはこれらのカルボキシ末端がアミドに置換された部分である。１つの実施形態では、Ｘ２は、ＮＨ２である。Ｘ２において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００６８】
式（Ｉ）の実施形態において、ペプチド中の任意の２つの硫黄原子はジスルフィド結合を形成していてもよい。１つの実施形態では、Ａ８中の硫黄原子が他の硫黄原子（例えば、アミノ末端から２番目のＣｙｓ中の硫黄原子）とジスルフィド結合を形成している。
【００６９】
式（Ｉ）の実施形態では、Ａ１〜Ａ８、Ｘ１およびＸ２の任意の組み合わせで表される化合物が企図される。
【００７０】
１つの実施形態では、式（Ｉ）におけるＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）（配列番号１）の部分は、ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ（配列番号２）の構造から１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つまたは８つのアミノ酸だけ置き換わった構造を有し、より具体的な実施形態では、ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ（配列番号２）の構造から１つ、２つまたは３つのアミノ酸だけ置き換わった構造を有する。１つの実施形態では、式（Ｉ）におけるＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）の部分は、ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ（配列番号２）の構造からＡ１、Ａ６またはこれらの組み合わせだけが置き換わった構造を有する。１つの実施形態では、式（Ｉ）におけるＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）の部分は、ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ（配列番号２）ではない。
【００７１】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）の構造における−Ａｃ、−ＮＨ２、ＦおよびＷのうちの１つ、２つ、３つまたは全部に修飾を含む。１つの実施形態では、当該Ｆおよび／またはＷにおける修飾を含む本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドより改善された活性（例えば、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能）を有し得る。１つの実施形態では、当該−Ａｃおよび／または−ＮＨ２における修飾を含む本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、当該修飾を含まないペプチドの活性（例えば、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能）を保持し得る。１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、前記−Ａｃ、−ＮＨ２、ＦおよびＷの修飾とは独立して、Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）の構造における−Ａｃ、−ＮＨ２、ＦおよびＷ以外のアミノ酸に修飾を含み、これらの修飾は、当該修飾を含まないペプチドの活性（例えば、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能）を保持したまま可能であり得、例えば、配列番号９におけるＬをＡに変更するように修飾するとペプチドの親水性が向上し得る。
【００７２】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、上記式（Ｉ）におけるＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）（配列番号１）の部分の各アミノ酸が、全てＤ−アミノ酸に置き換わっており、かつアミノ酸の順序が逆になった構造を有し、Ｘ１およびＸ２は上記と同じ定義であるペプチドである。このようなペプチドは、例えば、代謝において異なる挙動を示し得る。
【００７３】
一つの具体的な式（Ｉ）の実施形態では、Ａ２はＧｌｙであり、Ａ３はＰｈｅであり、Ａ５はＴｈｒであり、Ａ７はＣｙｓであり、かつ／またはＡ８はＬｙｓであり得る。一つの具体的な式（Ｉ）の実施形態では、Ａ１は、Ｔｙｒ、ｐ−フルオロフェニルアラニン、またはフェネチルグリシンであり得、より具体的な実施形態では、Ｔｙｒであり得る。一つの具体的な式（Ｉ）の実施形態では、Ａ４は、ＬｅｕまたはＭｅｔであり得、より具体的な実施形態では、Ｍｅｔであり得る。一つの具体的な式（Ｉ）の実施形態では、Ａ６は、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、８−ナフチルアラニン、２−キノリルアラニン、５−クロロ−Ｔｒｐ、または２−ベンゾチアゾリルアラニンであり得る。一つのより具体的な式（Ｉ）の実施形態では、Ａ６は、２−ベンゾチアゾリルアラニンであり得る。
【００７４】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは以下の式（ＩＩ）で表される構造を有する。
式（ＩＩ）：
Ｘ１−ｋｃｖｗｔｌ（Ｂ１）Ｇｆｈｃｓ−Ｘ２
［式中、Ｘ１はペプチドのアミノ末端側であり、Ｘ２はペプチドのカルボキシ末端側である］
【００７５】
式（ＩＩ）の１つの実施形態では、Ｂ１は、ＧｌｙまたはＤ−プロリンである。Ｂ１において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００７６】
式（ＩＩ）の１つの実施形態では、Ｘ１は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１であり、ここで、Ｒ１は、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル基、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択され、ここで、各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル基、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される。１つの実施形態では、Ｘ１は、−ＣＯＯＨ、プロピオニル基、またはハロゲンで置換されていてもよいベンゾイル基もしくはフェニルアセチル基である。１つの実施形態では、Ｘ１は、Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ、Ｔｈｒ−Ｔｙｒ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｔｒｐまたはこれらのアミノ末端が直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜５アシル基で置換された部分である。１つの実施形態では、Ｘは、ベンゾイル基またはｐ−フルオロフェニルアセチル基である。Ｘ１において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００７７】
式（ＩＩ）の１つの実施形態では、Ｘ２は、水素、１〜３の任意のアミノ酸からなるペプチドまたは−ＮＲ１２であり、ここで、各Ｒ１は、水素、ヒドロキシル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルケニル基、Ｒ２で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝鎖Ｃ１〜１０アルキニル基、Ｒ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環、−ＯＲ２および−ＮＲ２２からなる群から選択されるか、同一の原子に結合した２つのＲ１は一緒になってＲ２で置換されていてもよい芳香族もしくは非芳香族５〜１０員環を形成し、各Ｒ２は、独立に、水素、ヒドロキシル基、ハロゲン、ハロゲンもしくはヒドロキシル基で置換されていてもよいベンジル、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、＝Ｏ、−ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される。１つの実施形態では、Ｘ２は、Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｇｌｎ、Ｐｒｏまたはこれらのカルボキシ末端がアミドに置換された部分である。１つの実施形態では、Ｘ２は、ＮＨ２である。Ｘ２において上記範囲の構造を有する抗ＥｐｏＲペプチドは、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの少なくとも１つの特性が良好に保持されると予測される。
【００７８】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、上記で特定される構造を有するペプチドにおける任意の数（例えば、１、２、３、４、５または６個）のアミノ酸がＬ体からＤ体に置き換えられたペプチドである。１つの実施形態では、Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）におけるＦおよびＷ以外に対応するアミノ酸がＤ体である。いずれの理論に束縛されることを望むものではないが、一部のアミノ酸をＬ体からＤ体に置き換えることによりペプチドが形成するシート構造が変わる場合もあり得るので、Ｄ体アミノ酸はこのシート構造を保持するように導入され得る。このようなＬ体がＤ体に置き換えられたペプチドも、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、および安定性のうちの１つ以上の特性が元のペプチドと同様に保持され得る。１つの実施形態では、Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）におけるＦおよびＷに対応するアミノ酸がＤ体であり得、この実施形態においては、ペプチドの活性が変化し得る。
【００７９】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、上記で特定される構造を有するペプチドにおける任意の数（例えば、１、２、３、４、５または６個）のアミノ酸が保存的置換されたペプチドである。このような保存的置換を含むペプチドも、ＥｐｏＲ阻害能、がん細胞殺傷能、正常細胞殺傷能の低減、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効、副作用、特定の部位に対する移行能、吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーおよび安定性のうちの１つ以上の特性が元のペプチドと同様に保持され得る。
【００８０】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは以下の構造のいずれかを有する化合物である（式中、Ｘ１およびＸ２は上記定義と同じである）。
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号２］
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｍ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号３］
Ｘ１−ＳＣＨ（フェニルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（フェネチルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号４］
Ｘ１−ＳＣＨＦａＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号５］
Ｘ１−ＳＣＨＦＧ（ホモプロリン）ＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号６］
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−Ｘ２［配列番号７］
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−Ｘ２［配列番号８］
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（６−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（５−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ホモトリプトファン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（α−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ホモシステイン）Ｋ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ペニシラミン）Ｋ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ｋｃｖｗｔｌｐＧｆｈｃｓ−Ｘ２
Ｘ１−ｋｃｖｗｔｌＧＧｆｈｃｓ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（４−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（３−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｐ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｍ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（ｍ−ヒドロキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（１−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨ（２−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（３−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＭＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−Ｘ２
【００８１】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは以下の構造のいずれかを有する化合物である（式中、Ａｃはアセチル基である）。
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号９］
（ベンゾイル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
（ｐ−フルオロフェニルアセチル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
（プロピオニル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１０］
Ａｃ−ＳＣＨ（フェニルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（フェネチルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１１］
Ａｃ−ＳＣＨＦａＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１２］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧ（ホモプロリン）ＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１３］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１４］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−ＮＨ２［配列番号１５］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（６−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（５−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ホモトリプトファン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（α−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ホモシステイン）Ｋ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ペニシラミン）Ｋ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌｐＧｆｈｃｓ−ＮＨ２
Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌＧＧｆｈｃｓ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（４−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（３−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−ヒドロキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（１−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨ（２−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（３−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＭＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２
【００８２】
１つの実施形態では、本開示のペプチドは、保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されており、例えば、保護基は、分子内のアミノ酸の側鎖上のＯＨ、ＮＨ２、ＳＨなどに導入されている。１つの実施形態では、本開示のペプチドには、糖鎖またはＰＥＧ鎖が結合していてもよい。
【００８３】
本開示のペプチドは、塩の形態で提供されてもよい。塩としては、塩基付加塩および酸付加塩のいずれであってもよいが、好ましくは生理学的に許容される酸付加塩である。酸付加塩として、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、シュウ酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸など）との塩などが挙げられる。塩基付加塩として、例えば、無機塩基（例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム、アンモニウムなど）との塩、有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６−ルチジン、エタノ−ルアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジンなど）との塩が挙げられる。
【００８４】
本開示のペプチドは溶媒和物の形態であってもよい。溶媒は、薬学的に許容されるものであれば特に限定されず、例えば水、エタノール、グリセロール、酢酸等が挙げられる。
【００８５】
本開示のペプチドは、プロドラッグ化されていてもよい。プロドラッグとしては、生体内の生理条件下で酵素的反応（酸化、還元、加水分解など）、または胃酸等との反応を起こして本開示のペプチドに変換される化合物などが用いられる。一つの実施形態では、本開示のプロドラッグの例として、本開示のペプチドのアミノ基がアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例えば、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５ーメチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化された化合物等）；および本開示のペプチドの水酸基がアシル化、アルキル化、リン酸化、ホウ酸化された化合物（例えば、アセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、スクシニル化、フマリル化、アラニル化、ジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物等）等が挙げられる。これらの化合物は公知の方法によって本開示のペプチドから製造することができる。
【００８６】
本開示のペプチドは、公知のペプチドの合成法に従って製造することができる。ペプチドの合成法としては、例えば、固相合成法、液相合成法のいずれによってもよい。すなわち、本開示のペプチドを構成し得る部分ペプチドもしくはアミノ酸と残余部分とを縮合させ、生成物が保護基を有する場合は保護基を脱離することにより目的のペプチドを製造することができる。公知の縮合方法や保護基の脱離としては、例えば、以下の（１）〜（３）に記載された方法が挙げられる。
（１）  泉屋信夫他、ペプチド合成の基礎と実験、丸善（株）  （１９８５年）
（２）  実験化学講座第５版、高分子化学、２６巻、丸善（株）  （２００７年）
（３）  野上靖純著  パートナー薬品製造学、第２版、南江堂（２０１２年）
【００８７】
より具体的には、本開示のペプチドの合成には、通常市販のペプチド合成用樹脂を用いることができる。例えばポリスチレンを基材とした樹脂を用いることができる。Ｃ末端がアミド化されているペプチドを得るには出発原料の樹脂として、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＳＡＬ樹脂（Ｒｉｎｋ  ａｍｉｄｅ樹脂）、ＭＢＨＡ樹脂、Ｓｉｅｂｅｒ  ａｍｉｄｅ樹脂、ＰＡＬ樹脂、Ｒａｍａｇｅ  ａｍｉｄｅ樹脂ならびにそれらのアミノ官能基とポリスチレンとの間にポリエチレングリコールなどの膨潤剤やリンカーを導入した樹脂等を用いることができる。このような樹脂と、α−アミノ基と側鎖官能基を適当な保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ）で保護したアミノ酸を原料として用い、目的とするペプチドの配列通りに、公知の各種縮合方法に従い樹脂上で縮合させる。反応の最後に樹脂からペプチドを切り出すと同時に各種保護基を除去し、必要に応じてさらに高希釈溶液中で分子内ジスルフィド結合形成反応を実施し、目的のペプチドを取得する。保護基の除去（脱離）や樹脂からのペプチドの切り離しは、公知の方法（例えば、トリフルオロ酢酸による酸処理）により行うことができる。なお、Ｎ末端がアシル化されているペプチドは、無水酢酸などと反応させることで調製することができる。樹脂から切り離された粗ペプチドは公知の各種精製手段を使用して精製することができる。
【００８８】
ペプチド合成に使用するアミノ酸
ペプチド合成に使用するアミノ酸（天然アミノ酸および非天然アミノ酸）は、任意の好適な供給源（例えば、メルク、渡辺化学、Enamine  Ltd.、Bienta、ChemSpace、Sundia  MediTech  Company,Ltd.、Combi-Blocks.Inc、AnalytiCon  Discovery  GmbH、PharmaBlock(Nanjing)  R&D  Co.,Ltd、Chemexpress  Co.,Ltd.、J&W  Pharmlab,LLC、SAI  Life  Sciences  Ltd、AstaTech、UkrOrgSyntez、Selleck  Chemicals、WuXi  AppTec、Vitas-M  Laboratory,LTD.、Bepharm、Life  Chemicals  Inc、Accela  ChemBio  Co.,Ltd.、Apollo  Scientific  Ltd、NovoChemy  Ltd、Key  Organics  Ltd(Bionet  Research)、Matrix  Scientific、Toronto  Reserch  chemicals  Inc.、MAYBRIDGE、Chem-Impex  International,Inc.、Allychem、Pharmeks  Ltd.、Biorelevant、AOBChem、ACRO  Biosystems、Maison  Chemical、Advanced  ChemBlocks,Inc.、Bellen、Microsource  Discovery  Systems,Inc.、Taros  Chemicals  GmbH&Co.KG、Senn  Chemicals  AG、Sinocompound  Catalysts  Co.,Ltd.、Syngene  International  Ltd.、BroadPharm、EDASA  Scientific、Hi-tech  chemistry  corp.等）から入手可能である。また、ペプチド合成に使用するアミノ酸（天然アミノ酸および非天然アミノ酸）は、当業者であれば任意の公知の合成法（例えば、ストレッカー反応（Strecker,A.(1850年).  Ueber  die  kunstliche  Bildung  der  Milchsaure  und  einen  neuen,dem  Glycocoll  homologen  Korper”.Ann.75:27-45.、Strecker,A.(1854年).“Ueber  einen  neuen  aus  Aldehyd-Ammoniak  und  Blausaure  entstehenden  Korper”.Ann.91:349-351.））を使用して容易に合成することができる。また、ペプチド合成のために、所与のアミノ酸に保護基（例えば、ＢｏｃまたはＦｍｏｃ）および／または標識（例えば、放射性原子またはビオチン）を導入する方法も公知であり、当業者であればこのようなアミノ酸の修飾を容易に実施することができる。
【００８９】
＜抗ＥｐｏＲペプチドの性能＞
本開示のペプチドの性質
一つの実施形態では、本開示のペプチドまたはその塩もしくは溶媒和物、またはそのプロドラッグは、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）と比較して１つ以上の改善された特性を有する。このような特性として、例えば、ヒトＥｐｏＲに対するより低いＩＣ５０、がん細胞（例えば、ＨｅｐＧ２などのがん細胞株）をより低濃度で殺傷する能力、正常細胞の殺傷により高濃度が必要となる能力、がん細胞をより低い投与頻度で殺傷する能力、特定の部位（例えば、がん組織）により多く移行する能力、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、保管時のより高い安定性などが挙げられる。
【００９０】
上記の性質の確認のための試験は、本明細書の記載を参考にして、培養細胞との接触試験、動物モデルにおける投与試験、血中動態の試験、毒性評価など当業者が容易に実施することができるものである。また、当業者は、上記の構造を有する任意のペプチドを作製して、作製したペプチドについてこの試験を実施することで、上で記載されるような特性の少なくともいずれかを有する本開示の抗ＥｐｏＲペプチドを特定することができる。
【００９１】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、１２０μＭ、６０μＭ、３０μＭまたは１５μＭの当該ペプチドを含む溶液４００μＬ中で１．０〜１．５ｘ１０３個のＨｅｐＧ２細胞を２４時間反応させた場合に、１ｍｍ２の区画内のＴＢ（Ｔｒｙｐａｎ  ｂｌｕｅ）染色陽性細胞数の平均（例えば、１０区画の平均。必要に応じて、ｎ＝２、３またはより多くのレプリケート間の平均）が、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドにおける結果と同等か、またはこれを上回るＨｅｐＧ２細胞殺傷能力を有する。
【００９２】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、ＷＳＴ法によって評価した場合に、少なくとも１種のヒトがん細胞株（例えば、肝臓がん、膵臓がん、白血病の細胞株）をＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドより強力に阻害（例えば、殺傷）する能力を有することができ、例えば、ヒトがん細胞株と１５０μＭで７２時間接触させ、ＷＳＴ法によって評価した場合に、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドより強力に阻害効果を示す。
【００９３】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、ＡＴＰ量を指標に細胞増殖能を評価した場合に、少なくとも１種のヒトがん細胞株（例えば、乳がんの細胞株）をＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドより強力に阻害（例えば、殺傷）する能力を有することができ、例えば、ヒトがん細胞株と３０または１００μＭで７２時間接触させ、ＡＴＰ量を指標に細胞増殖能を評価した場合に、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチドより強力に阻害効果を示す。
【００９４】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、プレートに播種した骨髄細胞（例えば、マウス）を終濃度１００μＭの抗ＥｐｏＲペプチドおよび組換えヒトエリスロポエチン（１Ｕ／ｍＬ）と７２時間接触させた場合に、組換えヒトエリスロポエチン（１Ｕ／ｍＬ）のみの対照の結果と比較して、ＣＦＵ−Ｅ（Ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ  Ｃｏｌｏｎｙ  Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔ）の数が有意に異ならないという能力を有し得る。
【００９５】
１つの実施形態では、本開示の抗ＥｐｏＲペプチドは、約５ｘ１０６細胞のヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞（ＥＣＡＣＣ、９６０２０９３０）を右背部皮下に移植した６週齢の雄性ヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）が、腫瘍体積（Ｖ）＝腫瘍の長径（Ｌ）ｘ腫瘍の短径（Ｗ）２／２＝約１５０〜２００ｍｍ３に達した時にこの抗ＥｐｏＲペプチドを腹腔内に０．２ｍｇ／日で週２あるいは３回のレジメンで２あるいは４週間投与した場合に、以下：
・非処置対照と比較して腫瘍体積減少が観察される時期が、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチド投与時より（例えば、１日以上、２日以上、３日以上、４日以上、５日以上、６日以上、または７日以上）早い、
・投与開始２１日目の腫瘍体積が、ＣＨ３−ＣＯ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（配列番号９）のペプチド投与時より（例えば、約１０％以上、約２０％以上、約３０％以上、約４０％以上、または約５０％以上）小さい、
・投与開始２１日目のマウス体重が、非処置対照と比較して異ならない（例えば、対照との差が、１０％未満、７％未満、５％未満、３％未満、２％未満または１％未満）、
・投与開始２１日目のヘマトクリット値が、非処置対照と比較して異ならない（例えば、対照との差が、３０％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、または５％未満）、
・投与開始２１日目の血中ヘモグロビン濃度が、非処置対照と比較して異ならない（例えば、対照との差が、３０％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、または５％未満）、
のうちの少なくとも１つを達成する能力を有し得る。
【００９６】
実施例において具体的に記載するように、本開示のペプチドは、腫瘍細胞殺傷効果が確認され、これら以外の知見も含め考察した結果、種々の疾患（例えば、増殖性疾患、子宮腺筋症または糖尿病網膜症）に有用に使用できることが予測される。
【００９７】
＜組成物＞
１つの局面において、本開示は、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグを含む組成物を提供する。特定の実施形態では、本開示の組成物は、強いＥｐｏＲ阻害能、高いがん細胞殺傷能、低い正常細胞殺傷能、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効の改善、副作用の低減、特定の部位に対する特異的な移行能、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーの改善、および高い安定性のうちの１つ以上の特性を有する。一つの実施形態では、本開示の組成物は、増殖性疾患、子宮腺筋症または糖尿病網膜症の治療または予防に使用され得る。
【００９８】
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグを含む組成物には、任意の添加成分が含まれていてもよい。添加成分の例として、例えば、キャリア、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、香味料、吸着剤、湿潤剤が挙げられる。
【００９９】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、コーンスターチ、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸などが挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。結合剤としては、例えば、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デンプン、ショ糖、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリワム等が挙げられる。崩壊剤としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、Ｌ−ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【０１００】
溶剤としては、例えば、注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油等が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄーマンニト−ル、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン、等の界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子等が挙げられる。等張化剤としては、例えば、ブドウ糖、Ｄ−ソルビトール、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール等が挙げられる。緩衝剤としては、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等の緩衝液等が挙げられる。無痛化剤としては、例えば、ベンジルアルコール等が挙げられる。防腐剤としては、例えば、パラヒドロキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。抗酸化剤としては、例えば、亜硫酸塩、アスコルビン酸、α−トコフェロール等が挙げられる。
【０１０１】
調製された注射液は通常、適当なアンプルに充填される。投与の際には、注射用組成物を慣用の水性希釈剤中に溶解し、液剤として用いることができる。水性希釈剤としてはブドウ糖水溶液、生理食塩水、リンゲル液、栄養補給剤液などが挙げられる。
【０１０２】
注射剤にリン酸またはその塩が含まれる場合、その注射剤中のリン酸ナトリウムあるいはリン酸カリウムの濃度は約０．１ｍＭ〜５００ｍＭであり、好ましくは約１ｍＭ〜１００ｍＭであり得る。無菌製剤にするために使用できる方法として、製造全工程を無菌にする方法、ガンマ線で滅菌する方法、防腐剤を添加する方法等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０３】
一つの実施形態では、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物は、キットとして提供され得る。一つの具体的な実施形態では、キットは、（ａ）本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物を溶液形状または凍結乾燥形状で含む容器と、任意選択で、（ｂ）希釈剤または再構成液を含む第２の容器と、任意選択で、（ｃ）説明書とを有する。一つの実施形態では、キットは、（ｉｉｉ）緩衝剤、（ｉｖ）希釈剤、（ｖ）フィルター、（ｖｉ）針、および（ｖ）シリンジのうちの１つもしくはそれより多くを含んでもよい。
【０１０４】
一つの実施形態では、本開示のキットは、本開示のキットを使用するための説明書を含む。適切な容器として、例えば、瓶、バイアル瓶（例えばデュアルチャンババイアル）、シリンジ（デュアルチャンパシリンジなど）、および試験管が挙げられる。この容器は、ガラスまたはプラスチックのような様々な材料から形成することができる。一つの実施形態では、本開示のキットは、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグとは異なる構成要素を含む別の容器を含むことができる。
【０１０５】
＜用途＞
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物は、任意の好適な用途に使用することができる。一つの実施形態では、この用途は、増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）、リウマチ、ケロイドまたは糖尿病網膜症の予防または治療であり得る。一つの実施形態では、増殖性疾患は、子宮腺筋症、悪性腫瘍や良性腫瘍（例えば、原発性、転移性または再発性、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、大腸がん（結腸がん、直腸がん、肛門がん）、食道がん、十二指腸がん、頭頚部がん（舌がん、咽頭がん、喉頭がん、甲状腺がん）、脳腫瘍、神経鞘腫、神経芽腫、神経膠腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胆管がん、子宮がん（子宮体がん、子宮頚がん）、卵巣がん、膀胱がん、皮膚がん、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、骨腫瘍、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎がん、小児固形がん、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、子宮筋腫、骨芽細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、がん性の中皮腫瘍、白血病などの腫瘍など）であり得る。一つの実施形態では、増殖性疾患は、肺がん、肝臓がん、卵巣がん、膵臓がん、腎臓がん、大腸がん、黒色腫、脳腫瘍、胃がん、および乳がんであり得る。一つの具体的な実施形態では、増殖性疾患は、乳がん、膵臓がん、肝臓がん、悪性リンパ腫、または白血病（または、その任意の選択肢からなる下位集団）であり得る。
【０１０６】
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物は、任意の対象に使用することができ、例えば、鳥類、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、ブタ、サル、ヒトなど）に使用することができる。
【０１０７】
＜使用＞
一つの実施形態では、本開示は、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物もしくはキットの使用または任意の好適な用途における使用の方法を提供する。特定の実施形態では、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグまたはこれを含む組成物もしくはキットは、強いＥｐｏＲ阻害能、高いがん細胞殺傷能、低い正常細胞殺傷能、低い投与頻度におけるがん細胞殺傷能などの薬効の改善、副作用の低減、特定の部位に対する特異的な移行能、改善された吸収・分布・代謝・排泄動態、バイオアベイラビリティーの改善、および高い安定性のうちの１つ以上の特性を有し得るため、増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症の治療または予防に使用され得る。したがって、一つの実施形態では、本開示は、被験体における増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための方法であって、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグの有効量を該被験体に投与する工程を含む、方法を提供する。また、別の実施形態では、本開示は、増殖性疾患（例えば、子宮腺筋症）または糖尿病網膜症を処置または予防するための医薬の製造における、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグの使用を提供する。
【０１０８】
含有量
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグを含む組成物において、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグの含有量は、組成物の形態によって相違し得るが、例えば、組成物全体に対して約０．１〜１００重量％、約０．５〜５０重量％、約１〜３０重量％、約５〜２０重量％、約１０〜９９．９重量％、約２０〜９０重量％、約０．１重量％、約０．２重量％、約０．５重量％、約１重量％、約２重量％、約５重量％、約１０重量％、約２０重量％、約５０重量％であり得る。本開示の組成物において、本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグ以外の成分の含有量は、組成物の形態によって相違し得るが、例えば、組成物全体に対して約１０〜９９．９重量％、または約２０〜９０重量％であり得る。
【０１０９】
投与レジメン
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグ、あるいはそれを含む組成物は、例えば、１日当たり体重１ｋｇあたりの本開示のペプチドとして約０．００５〜５０ｍｇ、約０．０５〜１０ｍｇ、または約０．２〜４ｍｇの用量において単回または複数回で投与することができる。本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグ、あるいはそれを含む組成物は、任意の好適な投与頻度で投与することができ、例えば、１日３回、１日２回、１日１回、隔日、３日に１回、４日に１回、５日に１回、隔週、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、２カ月に１回、３カ月に１回、４カ月に１回、５カ月に１回、６カ月に１回、または１年に１回の頻度で投与することができる。
【０１１０】
投与経路
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグを含む組成物は、任意の好適な投与経路で投与することができ、例えば、静脈内、局所、筋肉内、皮下、皮内、経皮、直腸、経膣、経口腔粘膜、経肺粘膜、経鼻、経眼または経口(経腸)などの経路によって投与することができる。
【０１１１】
剤形
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグを含む組成物は、任意の好適な剤形に製剤化することができ、例えば液剤、注射剤、パッチ剤、マイクロニードル、坐剤、徐放剤、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠を含む）、散剤、顆粒剤、カプセル剤（ソフトカプセルを含む）などの剤型にすることができる。
【０１１２】
組み合わせ
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグは、任意の好適な薬剤と組み合わせて使用され得る。このような薬剤の例として、例えば、内分泌療法薬、化学療法剤、免疫療法剤（ＢＲＭ）、細胞増殖因子、細胞増殖因子の作用を阻害する薬剤などが挙げられる。
【０１１３】
内分泌療法薬としては、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、クロロトリアニセリン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、アリルエストレノール、ゲストリノン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキフェン、レボルメロキシフェン、抗エストロゲン（例、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェンなど）、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、ＬＨ−ＲＨアゴニスト（例、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリンなど）、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、アロマターゼ阻害薬（例、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタンなど）、抗アンドロゲン（例、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミドなど）、５α-レダクターゼ阻害薬（例、フィナステリド、エプリステリドなど）、副腎皮質ホルモン系薬剤（例、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロンなど）、アンドロゲン合成阻害薬（例、アビラテロンなど）、レチノイドおよびレチノイドの代謝を遅らせる薬剤（例、リアロゾールなど）などが挙げられる。
【０１１４】
化学療法剤としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗癌性抗生物質、植物由来抗癌剤などが挙げられる。
【０１１５】
アルキル化剤としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード−Ｎ−オキシド、クロラムブチル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ピポブロマン、エトグルシド、カルボプラチン、シスプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、カルボコン、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシンなどが挙げられる。
【０１１６】
代謝拮抗剤としては、例えば、メルカプトプリン、６−メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、エノシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５−ＦＵ系薬剤（例、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフールなど）、アミノプテリン、ロイコボリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチンなどが挙げられる。
【０１１７】
抗癌性抗生物質としては、例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ネオカルチノスタチン、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシンなどが挙げられる。
【０１１８】
植物由来抗癌剤としては、例えば、エトポシド、リン酸エトポシド、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビンなどが挙げられる。
【０１１９】
免疫療法剤（ＢＲＭ）としては、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾールなどが挙げられる。
【０１２０】
細胞増殖因子としては、代表的には、分子量が２０,０００以下のペプチドで、受容体との結合により低濃度で作用が発揮される因子が挙げられ、例えば、（１）ＥＧＦまたはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、ＥＧＦ（上皮増殖因子）、ヘレグリン（ＨＥＲ３およびＨＥＲ４リガンド）など）、（２）インスリンまたはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、インスリン、ＩＧＦ（インスリン様増殖因子）−１、ＩＧＦ−２など〕、（３）ＦＧＦ（線維芽細胞増殖因子）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例、酸性ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、ＫＧＦ（ケラチノサイト増殖因子）、ＦＧＦ−１０など〕、（４）その他の細胞増殖因子（例、ＣＳＦ（コロニー刺激因子）、ＩＬ−２、ＮＧＦ（神経成長因子）、ＰＤＧＦ（血小板由来成長因子）、ＴＧＦ−β（トランスフォーミング増殖因子β）、ＨＧＦ（肝細胞増殖因子）、ＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）など）などが挙げられる。
【０１２１】
細胞増殖因子の作用を阻害する薬剤としては、ハーセプチン（ＨＥＲ２レセプター抗体）などが挙げられる。
【０１２２】
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグと組み合わせて使用され得る他の薬剤の例として、例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ、アセグラトン、塩酸プロカルバジン、プロトポルフィリン・コバルト錯塩、水銀ヘマトポルフィリン・ナトリウム、トポイソメラーゼＩ阻害薬（例、イリノテカン、トポテカンなど）、トポイソメラーゼＩＩ阻害薬（例えば、ソブゾキサンなど）、リアーゼ阻害薬、エンドセリン拮抗薬（例、ＡＢＴ−６２７など）、分化誘導剤（例、レチノイド、ビタミンＤ類など）、血管新生阻害薬、α−ブロッカー（例、塩酸タムスロシンなど）、インスリン抵抗性改善薬（例、塩酸ピオグリタゾン、（マレイン酸）ロシグリタゾン、ＧＩ−２６２５７０、ＪＴＴ−５０１、ＭＣＣ−５５５、ＹＭ−４４０、ＫＲＰ−２９７、ＣＳ−０１１、ＦＫ−６１４、（Ｅ）−４−［４−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリルメトキシ）ベンジルオキシイミノ］−４−フェニル酪酸、アンジオテンシンＩＩ拮抗薬（例、ロサルタン、エプロサルタン、カンデサルタン、シレキセチル、バルサルタン、テルミサルタン、イルベサルタン、タソサルタン、オルメサルタンおよびこれらの活性代謝物（カンデサルタンなど）など）、がん抗原、ＤＮＡ、レクチン、糖質、脂質などが挙げられる。
【０１２３】
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグと、組み合わせて使用される薬剤との使用に際しては、それらの投与時期は限定されず、対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。本開示のペプチドまたはその塩もしくはプロドラッグの投薬量は、投与対象、投与ルート、疾患、組み合わせ等により適宜選択することができる。
【０１２４】
本開示のペプチドもしくはその塩、その溶媒和物またはそのプロドラッグと、組み合わせて使用される薬剤との投与形態は、特に限定されず、例えば、共に製剤化して得られる単一の製剤の投与、別々に製剤化して得られる２種以上の製剤の同一または異なる投与経路での同時または時間差をおいての投与などが挙げられる。
【０１２５】
本明細書において「または」は、文章中に列挙されている事項の「少なくとも１つ以上」を採用できるときに使用される。「もしくは」も同様である。本明細書において「２つの値」の「範囲内」と明記した場合、その範囲には２つの値自体も含む。
【０１２６】
（一般技術）
本明細書において用いられる分子生物学的手法、生化学的手法、微生物学的手法、バイオインフォマティクスは、当該分野において公知であり、周知でありまたは慣用される任意のものが使用され得る。
【０１２７】
本明細書において引用された、科学文献、特許、特許出願などの参考文献は、その全体が、各々具体的に記載されたのと同じ程度に本明細書において参考として援用される。
【０１２８】
以上、本開示を、理解の容易のために好ましい実施形態を示して説明してきた。以下に、実施例に基づいて本開示を説明するが、上述の説明および以下の実施例は、例示の目的のみに提供され、本開示を限定する目的で提供したのではない。従って、本発明の範囲は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、特許請求の範囲によってのみ限定される。
【実施例】
【０１２９】
以下に実施例を記載する。試薬類は具体的には実施例中に記載した製品を使用したが、他メーカー（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、富士フイルム和光純薬、ナカライ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＣＮ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｃ．等）の同等品でも代用可能である。【０１３０】
（実施例１：ペプチドの合成）
以下のペプチドを合成した。（括弧内は各化合物の呼称を示す）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＹＳ１２）［配列番号９］
（ベンゾイル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ１１２５５）
（ｐ−フルオロフェニルアセチル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５６）
（プロピオニル）−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５７）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５８）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２５９）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−クロロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６０）
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ１１２６１）［配列番号１０］
Ａｃ−ＳＣＨ（フェニルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６２）
Ａｃ−ＳＣＨ（フェネチルグリシン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６３）
Ａｃ−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６４）［配列番号１１］
Ａｃ−ＳＣＨＦａＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６５）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６６）［配列番号１２］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧ（ホモプロリン）ＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６７）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６８）［配列番号１３］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６９）［配列番号１４］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７０）［配列番号１５］
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ホモトリプトファン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７１）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（α−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７２）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（β−ナフチルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７３）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７４）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（６−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７５）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（５−クロロ−Ｔｒｐ）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７６）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ホモシステイン）Ｋ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７７）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶ（ペニシラミン）Ｋ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７８）
Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌｐＧｆｈｃｓ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７９）
Ａｃ−ｋｃｖｗｔｌＧＧｆｈｃｓ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２８０）
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（８−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０３）
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０４）
Ａｃ−ＳＣＨ（３，４−ジフルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０５）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０６）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−フルオロ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０７）
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−キノリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０８）
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３０９）【０１３１】
上記ペプチドの合成、精製および確認は、糖鎖工学研究所（大阪）に依頼した。天然アミノ酸はメルク（ドイツ）（Novabiochem（登録商標））等から購入し、非天然アミノ酸は渡辺化学等から購入した。上記ペプチド合成のためのアミノ酸（非天然アミノ酸を含む）およびその保護アミノ酸は任意の適当な供給源から入手することができる。Rink  Amide  ChemMatrix（Biotage、スウェーデン）を出発原料として使用し、ペプチド自動合成機（Prelude（Gyros  Protein  Technologies））によってプログラムに従って、この樹脂から上記配列に従ってアミノ酸を縮合反応により順次延長して、目的の保護ペプチド樹脂を合成した。樹脂上へのペプチドの構築が終了した後、保護ペプチド樹脂を乾燥した。得られた保護ペプチドをトリフルオロ酢酸で処理して、保護基および樹脂担体を切り離した。樹脂担体から分離して得られた粗ペプチドをＨＰＬＣシステム；Prominence  UFLC（島津製作所、京都）もしくはLaChrom  Elite（日立ハイテクノロジーズ、東京）により精製した。このとき、移動相Ａ：０．１％ＴＦＡ水溶液、移動相Ｂ：０．０９％ＴＦＡ／１０％Ｈ２Ｏ／９０％ＭｅＣＮでＡ／Ｂグラジエントの溶媒条件を使用した。精製ペプチド（還元型）はヨウ素処理により粗ペプチド（酸化型）に変換しジスルフィド結合を形成させた。【０１３２】
合成した各ペプチドについて質量分析測定を行い、所望の構造が得られていることを確認した（図１〜３３）。ＭＳによる質量分析測定は、Synapt  HDMS(Waters、米国)を使用してインフュージョンで実施した。【０１３３】
上記で合成したペプチドをヒト肝臓がんＨｅｐＧ２細胞に接触させ、顕微鏡観察下で顆粒の漏出を確認したところ、ＧＴ−１１２５９およびＧＴ−１１２６０では比較的低度の顆粒漏出が観察された一方、ＧＴ−１１２５８、ＧＴ−１１２６１およびＧＴ−１１２７４では多くの顆粒漏出が観察された。このことから、ＧＴ−１１２５８、ＧＴ−１１２６１およびＧＴ−１１２７４のペプチドは、比較的に活性が強いことが期待された。【０１３４】
（実施例２：ヒト肝臓がん細胞におけるインビトロ性能評価）
合成したペプチドの性能を以下の方法で測定した。【０１３５】
ヒト肝臓がん由来ＨｅｐＧ２細胞を用いた合成ペプチドによる致死効果
以下の被験化合物について試験を行った；ＹＳ１２、ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８およびＧＴ−１１３０９。
ＨｅｐＧ２細胞（ＡＴＣＣ、ＨＢ−８０６５）を８ウェルチャンバースライド（Ｎｕｎｃ）)に撒き、被験化合物の４つの濃度において致死効果を調べた。
培養条件；１０％牛胎児血清を含むＤ−ＭＥＭ培地（富士フイルム和光純薬、０４５−３０２８５）を用いて、３７℃、５％ＣＯ２−９５％空気条件下で培養した。
試験濃度；１２０μＭ、６０μＭ、３０μＭおよび１５μＭの被験化合物、さらに対照としてＰＢＳ（−）を使用した。
細胞数；３５０μＬ／ｗｅｌｌの培地中に１．０〜１．５ｘ１０３の細胞数を播種した。
培養開始１６〜２４時間後に各被験化合物（５０μＬ／ｗｅｌｌ）を添加し、２４時間反応させた。【０１３６】
致死効果は、０．１％ Ｔｒｙｐａｎ  ｂｌｕｅ溶液（ＴＢ溶液）によって陽性染色を示した細胞数を計数し、面積当たりの値に変換することで試験した。具体的には、以下の手順１〜７の通りに行った。
１．ｗｅｌｌから培養液を除去した。
２．ＴＢ溶液１００ｕＬをｗｅｌｌ内に注入して、３分間反応させた。
３．２のＴＢ溶液を除去した。
４．Ｂｏｕｉｎ液（ピクリン酸飽和溶液１５ｍＬ、ホルマリン原液５ｍＬ、氷酢酸１ｍＬ）１０ｕＬを注ぎ、ミキサー上で、１０分間反応させた。
５．ＰＢＳ（−）１００ｕＬで４の反応を弱め、Ｂｏｕｉｎ液を除去した。
６．ＰＢＳ（−）を、各ｗｅｌｌに１００ｕＬ入れた。
７．顕微鏡（倒立位相差顕微鏡、Ｎｉｋｏｎ）で１区画（１ｍｍ２）内のＴＢ陽性細胞を計数し、１０区画の平均を求めた。【０１３７】
その結果、図３４〜３７に示すような結果が得られた。ＧＴ−１１２６８、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２７４、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１２６０、ＧＴ−１１２８０、ＧＴ−１１３０３、ＧＴ−１１３０４、ＧＴ−１１３０５、ＧＴ−１１３０６、ＧＴ−１１３０７、ＧＴ−１１３０８およびＧＴ−１１３０９のペプチドは、いずれもＹＳ１２と同等かまたはこれを上回るＨｅｐＧ２細胞殺傷効果を示した。特に、ＧＴ−１１２６１、ＧＴ−１１２５９、ＧＴ−１１３０３〜ＧＴ−１１３０８のペプチドの効果は、強力であった。このことから、これらのペプチドは、例えば、増殖性疾患（例えば、がん、子宮腺筋症）および糖尿病網膜症の治療用途において有利に使用され得ると期待される。【０１３８】
（実施例３：ヒト膵臓がん細胞におけるインビトロ性能評価）
合成したペプチドのヒト膵臓がん細胞に対するインビトロ性能を以下の方法で評価した。【０１３９】
ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞（ＥＣＡＣＣ、９６０２０９３０）は、１０％牛胎児血清（ｂｉｏｗｅｓｔ，Ｓ１８２Ｈ−５００）及び１ｍＭピルビン酸ナトリウム（ｇｉｂｃｏ，１１３６０−０７０）を含むＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｓｉｇｍａ，Ｒ８７５８−５００ＭＬ）を用いて、３７℃、５％  ＣＯ２−９５％空気条件下で継代培養した（２回／週）。このＡｓＰＣ−１細胞を０．０５％トリプシン−０．０２％ＥＤＴＡ溶液（Ｓｉｇｍａ，Ｔ４１７４−１００ＭＬ）を用いて培養ディッシュより回収し、上記培地に懸濁後、９６ウェルマイクロプレートに播種した（３ｘ１０３／０．０５ｍＬ／ウェル）。一晩培養した後、被験化合物（計４３化合物、終濃度１５０μＭ）を含む培地を添加した（０．０５ｍＬ／ウェル、３ウェル／被験化合物）。７２時間後、各ウェルの細胞増殖能をＷＳＴ法（同仁化学研究所、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８）により測定し、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を算出した。【０１４０】
ＷＳＴ法は、水溶性テトラゾリウム塩ＷＳＴ−８を発色試薬として使用する生細胞数測定法であり、ＷＳＴ−８の還元により生じる水溶性ホルマザンを生細胞数の指標とする。細胞中の脱水素酵素により生産されるＮＡＤＨがＷＳＴ−８を水溶性ホルマザンに変換する。生じた水溶性ホルマザンは、約４５０ｎｍに極大吸収を有するので、この波長領域における吸収を測定することで生細胞数が示される。ＷＳＴ法において、４５０ｎｍの吸収を観察した。【０１４１】
また、ここでは、実施例１と同様の方法で合成したさらなる候補化合物ＧＴ−１１３３２〜ＧＴ−１１３４０（以下にそれぞれの構造を示す）を調製し、これらの化合物の活性も評価した。
Ａｃ−ＳＣＨ（４−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３２）
Ａｃ−ＳＣＨ（３−ピリジルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３３）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｐ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３４）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−メトキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３５）
Ａｃ−ＳＣＨ（ｍ−ヒドロキシ−Ｐｈｅ）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３６）
Ａｃ−ＳＣＨ（１−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３７）
Ａｃ−ＳＣＨ（２−ナフチルアラニン）ＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３８）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３３９）
Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴ（３−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１３４０）【０１４２】
その結果、図３８に示すような結果が得られた。ＧＴ−１１２５７を含む計１２個の被験化合物が、ＡｓＰＣ−１細胞に対して強い増殖阻害作用を示した。【０１４３】
（実施例４：ヒト白血病細胞におけるインビトロ性能評価）
合成したペプチドのヒト白血病細胞に対するインビトロ性能を以下の方法で評価した。【０１４４】
ヒトＴ細胞白血病由来ＡＴＬ−２細胞（京都大学前田博士から供与）は、１０％牛胎児血清（ｂｉｏｗｅｓｔ，Ｓ１８２Ｈ−５００）を含むＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｓｉｇｍａ，Ｒ８７５８−５００ｍＬ）を用いて、３７℃、５％  ＣＯ２−９５％空気条件下で継代培養した（２回／週）。このＡＴＬ−２細胞を培養フラスコより回収し、上記培地に懸濁後、９６ウェルマイクロプレートに播種した（３ｘ１０３／０．０５ｍＬ／ウェル）。一晩培養した後、被験化合物（計３２化合物、終濃度１５０μＭ）を含む培地を添加した（０．０５ｍＬ／ウェル、３ウェル／被験化合物）。７２時間後、各ウェルの細胞増殖能をＷＳＴ法（同仁化学研究所、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８）により測定し、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を算出した。【０１４５】
その結果、図３９に示すような結果が得られた。特に、ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０８およびＧＴ−１１３０９などが、ＡＴＬ−２細胞に対して強い増殖阻害作用を示した。【０１４６】
（実施例５：インビボにおけるペプチド性能評価）
合成したペプチドのインビボ性能をマウス担がんモデルにおいて評価した。【０１４７】
ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞（ＥＣＡＣＣ、９６０２０９３０）を、実施例３と同様に培養および回収し、１０％マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，３５４２３４）を含む上記ＲＰＭＩ−１６４０培地に懸濁させ、６週齢の雄性ヌードマウス（エスエルシー、ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）の右背部皮下に移植した（５ｘ１０６／０．１ｍＬ／匹）。デジタルキャリパーを用いて腫瘍の長径（Ｌ）及び短径（Ｗ）を計測し、Ｖ＝ＬｘＷ２／２の式で求めた腫瘍体積（Ｖ）が１５０〜２００ｍｍ３前後に達した時、群分けして被験化合物（ＧＴ−１１２６３を含む計８化合物）を投与した。コントロール群は、生理食塩水を投与した。投与は腹腔内（０．１ｍＬ／匹、３〜５匹／被験化合物）とし、１日３回（１時間間隔、計０．２ｍｇ／日）、週３回として２週間投与した。腫瘍径と体重を週２回計測して腫瘍増殖の状態と被験化合物投与に対する影響をモニターした。【０１４８】
その結果、図４０に示すような結果が得られた。ＧＴ−１１２６３を含む計３種の被験化合物は、マウス担がんモデルにおいて強い抗腫瘍効果を示した。また、いずれの被験化合物も体重には影響を及ぼさなかった。特に、ＧＴ−１１２６９およびＧＴ−１１３０９は、効果の発現が早く、強力であった。【０１４９】
（実施例６：候補化合物のＣＦＵ−Ｅ形成に対する影響）
ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９が特に有用であることが期待されたので、これらの化合物のＣＦＵ−Ｅ形成に対する影響を試験した。【０１５０】
マウス（エスエルシー、ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）の大腿骨から骨髄細胞を採取し、１．２％メチルセルロース（Ｓｉｇｍａ，Ｍ０５１２）、３０％牛胎児血清（ｂｉｏｗｅｓｔ，Ｓ１８２Ｈ−５００）、１％ウシ血清アルブミン（富士フイルム和光純薬、０１７−２５７７１）、０．１ｍＭ  ２−メルカプトエタノール（富士フイルム和光純薬、１３１−１４５７２）、Ｌ−グルタミン（Ｓｉｇｍａ、Ｇ７５１３）、ペニシリン／ストレプトマイシン（富士フイルム和光純薬、１６８−２３１９１）を含むα−ＭＥＭ培地（富士フイルム和光純薬、１３０−１８６２１）に懸濁後、６ウェルマイクロプレートに播種した（３．２ｘ１０５／２ｍＬ／ウェル、２ウェル／被験化合物）。被験化合物（ＧＴ−１１２６９またはＧＴ−１１３０９、終濃度１００μＭ）および組換えヒトエリスロポエチン（Ｅｐｏ、１Ｕ／ｍＬ）を添加して７２時間インキュベーションした。ＤＡＢ（ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ  ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｈｒｏｌｉｄｅ、同仁化学研究所、Ｄ００６）染色後、ヘモグロビン陽性細胞をＣＦＵ−Ｅ（Ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ  Ｃｏｌｏｎｙ  Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔ）として顕微鏡下に計測した。【０１５１】
結果を図４１に示す。組換えヒトエリスロポエチンにより、ＣＦＵ−Ｅ形成が促進された。この条件下において、被験化合物（ＧＴ−１１２６９およびＧＴ−１１３０９）はいずれもＣＦＵ−Ｅ形成に影響を及ぼさないことが確認された。【０１５２】
（実施例７：候補化合物のＥｐｏ依存性がん細胞増殖に対する影響）
有効であることが予測されたＧＴ−１１３０９について、Ｅｐｏ依存性がん細胞増殖に対する影響を以下の方法で評価した。【０１５３】
ヒト白血病由来ＵＴ−７細胞（北海道大学藤田博士から供与）は、組換えヒトエリスロポエチン（Ｅｐｏ、２Ｕ／ｍＬ）および１０％牛胎児血清（ｂｉｏｗｅｓｔ，Ｓ１８２−Ｈ−５００）を含むＤ−ＭＥＭ培地（Ｓｉｇｍａ，Ｄ５７９６−５００ＭＬ）を用いて、３７℃、５％  ＣＯ２−９５％空気条件下で継代培養し（2回／週）、計９週間培養した。このＥｐｏ処置ＵＴ−７細胞を３回洗浄し、９６ウェルマイクロプレートに播種した（１ｘ１０４／ウェル）。Ｅｐｏ（０〜１０Ｕ／ｍＬ）またはＥｐｏ（１Ｕ／ｍＬ）存在下における抗Ｅｐｏモノクローナル抗体（クローンＲ６、京都大学増田博士から供与、１〜１００μｇ／ｍＬ）、抗ＥｐｏＲモノクローナル抗体（クローン７１３２１０、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＭＡＢ３０７３、１〜１００μｇ／ｍＬ）もしくはＧＴ−１１３０９（１〜１００μＭ）を添加した。４日間培養した後、各ウェルの細胞増殖能をＷＳＴ法（同仁化学研究所、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８）において４５０ｎｍの吸収を測定した。【０１５４】
結果を図４２に示す。ＧＴ−１１３０９は、抗Ｅｐｏ抗体および抗ＥｐｏＲ抗体と同様にＥｐｏ依存性がん細胞増殖を抑制した。【０１５５】
以上の知見から、式（Ｉ）
Ｘ１−ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）−Ｘ２
の構造において、Ａ１の変異（例えば、Ｔｙｒ）、Ａ４の変異（例えば、Ｍｅｔ）、Ａ６の変異（例えば、２−ベンゾチアゾリルアラニン）が、特に有用であり得ることが見出された。【０１５６】
（実施例８：さらなる候補化合物）
ＧＴ−１１２６９およびＧＴ−１１３０９が特に有用であることが予測されたので、これらの変異を組み合わせて実施例１と同様の手法で以下の構造を有するＧＴ−１１３５０を作製した。
Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＭＴ（２−ベンゾチアゾリルアラニン）ＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ１１３５０）【０１５７】
（実施例８−１：各用量におけるペプチドのインビトロ性能）
ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９およびＧＴ−１１３５０について、濃度を変えてインビトロ性能を試験した。【０１５８】
実施例３と同様に、ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞（ＥＣＡＣＣ、９６０２０９３０）を培養および回収し、９６ウェルマイクロプレートに播種した（３ｘ１０３／０．０５ｍＬ／ウェル）。一晩培養した後、被験化合物（１０、３０または１００μＭ）を含む培地を添加した（０．０５ｍＬ／ウェル、３ウェル／被験化合物）。７２時間後、各ウェルの細胞増殖能をＷＳＴ法（同仁化学研究所、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８）により測定し、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する各被験化合物の阻害率を算出した。【０１５９】
結果を図４３に示す。ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９およびＧＴ−１１３５０は、ＡｓＰＣ−１細胞に対して強い増殖阻害作用を示した。【０１６０】
さらに、ＧＴ−１１３５０の乳がん細胞株に対する増殖抑制能も試験した。【０１６１】
ヒト乳がん由来ＨＣＣ１３９５細胞（ＡＴＣＣ，ＣＲＬ−２３２７）およびＨＣＣ１８０６（ＡＴＣＣ，ＣＲＬ−２３３５）を培養および回収し、３８４ウェルマイクロプレートに播種した（１ｘ１０３および３ｘ１０３／０．０４ｍＬ／ウェル）。一晩培養した後、ＧＴ−１１３５０（０〜１００μＭ）を含む培地を添加した（０．０１ｍＬ／ウェル）。７２時間後、各ウェルの細胞増殖能をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  ２．０（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｇ９２４２）を用いて測定したＡＴＰ量を指標に、コントロール（被験化合物を含まないウェル）に対する細胞増殖能を算出した。【０１６２】
結果を図４４に示す。ＧＴ−１１３５０は、乳がん細胞株に対しても増殖抑制能を示した。【０１６３】
（実施例８−２：インビボ性能）
合成ペプチドのインビボ性能をマウス担がんモデルにおいて評価した。【０１６４】
実施例５と同様に、ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞を６週齢の雄性ヌードマウス（エスエルシー、ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）の右背部皮下に移植した（５ｘ１０６／０．１ｍＬ／匹）。デジタルキャリパーを用いて腫瘍の長径（Ｌ）及び短径（Ｗ）を計測し、Ｖ＝ＬｘＷ２／２の式で求めた腫瘍体積（Ｖ）が１５０〜２００ｍｍ３前後に達した時、群分けして被験化合物（ＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９およびＧＴ−１１３５０）を投与した。コントロール群は、生理食塩水を投与した。投与は腹腔内（０．１ｍＬ／匹、５匹／被験化合物）とし、１日３回（１時間間隔、計０．５ｍｇ／日）、週２回として４週間投与した。腫瘍径と体重を週２回計測して被験化合物投与の影響をモニターした（図４５）。【０１６５】
同様のプロトコルでＧＴ−１１３０９またはＧＴ−１１３５０を投与したＡｓＰＣ−１担がんマウスについて、最終投与６日目に腫瘍組織を摘出し、その一部をＺａｍｂｏｎｉ液で固定後、凍結切片を作製した。抗第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）関連抗原抗体を用いた免疫組織化学法にて陽性細胞数を測定し、腫瘍組織内の血管形成に対する被験化合物の作用を検討した（図４６）。【０１６６】
同様のプロトコルでＧＴ−１１２６９、ＧＴ−１１３０９またはＧＴ−１１３５０を投与したＡｓＰＣ−１担がんマウスについて、最終投与６日目に採血し、高速遠心機による毛細管法にてヘマトクリット値を測定した。また、血中ヘモグロビン濃度を市販の測定キット（BioAssay  Systems、DIHB-250）を用いて測定した（図４７）。【０１６７】
さらに、ＣＦＵ−Ｅ形成について評価した。ＧＴ−１１３５０を１日３回（１時間間隔、計０．４ｍｇ／日）、週２回として４週間投与したＡｓＰＣ−１担癌マウスの大腿骨から骨髄細胞を採取した。コントロール群は、生理食塩水を投与した。実施例６と同様に、マウスから採取した骨髄細胞を懸濁させ、６ウェルマイクロプレートに播種した（３．２ｘ１０５／２ｍＬ／ウェル）。プレートに組換えヒトエリスロポエチン（Ｅｐｏ、１Ｕ／ｍＬ）を添加して２日間インキュベーションした。ＤＡＢ（ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ  ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｈｒｏｌｉｄｅ、同仁化学研究所、Ｄ００６）染色後、ヘモグロビン陽性細胞をＣＦＵ−Ｅ（Ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ  Ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔ）として顕微鏡下に計測した（図４８）。【０１６８】
図４５について、いずれの被験化合物も、マウス担がんモデルにおいて抗腫瘍効果を示したが、体重には影響を及ぼさなかった。図４６について、被験化合物投与群のＦＶＩＩＩ陽性細胞数はいずれもコントロール群のＦＶＩＩＩ陽性細胞数に比較して減少しており、被験化合物はいずれも血管形成抑制作用を示した。図４７について、いずれの被験化合物もヘマトクリット値及び血中ヘモグロビン濃度に影響を及ぼさなかった。図４８について、ＧＴ−１１３５０を投与したマウスにおいてＣＦＵ−Ｅ形成は阻害されていなかった。【０１６９】
（実施例９：用法・用量検討）
ＧＴ−１１３５０の用法・用量を検討した。【０１７０】
実施例５と同様に、ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞を６週齢の雄性ヌードマウス（エスエルシー、ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）の右背部皮下に移植し、腫瘍体積（Ｖ）が１５０〜２００  ｍｍ３前後に達した時、群分けして被験化合物（ＧＴ−１１３５０）を投与した。コントロール群は、生理食塩水を投与した。投与は腹腔内（０．１ｍＬ／匹）とし、１日３回（１時間間隔、計０．１ｍｇ、０．２ｍｇ、０．４ｍｇ／日）、週２回として４週間投与した。腫瘍径と体重を週２回計測して被験化合物投与の用量による影響をモニターした（図４９）。【０１７１】
同様のプロトコルでＧＴ−１１３５０を投与したＡｓＰＣ−１担がんマウスについて、最終投与４日後に採血し、高速遠心機による毛細管法にてヘマトクリット値を測定した。また、血中ヘモグロビン濃度を市販の測定キット（BioAssay  Systems、DIHB-250）を用いて測定した（図５０）。【０１７２】
図４９について、ＧＴ−１１３５０は、用量依存的な抗腫瘍効果を示したが、体重には影響を及ぼさなかった。図５０について、いずれの用量においてもヘマトクリット値及び血中ヘモグロビン濃度に対する影響はなかった。【０１７３】
実施例５と同様に、ヒト膵臓がん由来ＡｓＰＣ−１細胞を６週齢の雄性ヌードマウス（エスエルシー、ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）の右背部皮下に移植し、腫瘍体積（Ｖ）が１５０〜２００  ｍｍ３前後に達した時、群分けして被験化合物（ＧＴ−１１３５０）を投与した。コントロール群は、生理食塩水を投与した。投与は腹腔内（０．１ｍＬ／匹）とし、１日３回（１時間間隔、計０．２ｍｇ／日）または１日１回（０．２ｍｇ／日）、週２回として４週間投与した。腫瘍径と体重を週２回計測して被験化合物投与の用法による影響をモニターした。【０１７４】
結果を図５１に示す。ＧＴ−１１３５０は、１日３回および１日１回のいずれの投与法においても同様の抗腫瘍効果を示した。【０１７５】
（実施例１０：さらなるペプチド）
以下のペプチドを合成する。
Ａｃ−ＳＣＨ（Ａ１）ＧＰＬＴ（Ａ６）ＶＣＫ−ＮＨ２
式中、Ａ１およびＡ６は、それぞれ独立に以下の表３から選択される。
【表３】
2020054813.tif 000007
上記修飾アミノ酸は、例えば、アルデヒドを出発材料としたストレッカー反応などの公知の方法を使用して合成することができる。【０１７６】
合成したペプチドを精製して純粋な光学異性体を取得し、これを性能試験に使用する。【０１７７】
実施例１と同様に、質量分析測定によりこれらのペプチドの合成・精製を確認する。【０１７８】
（実施例１１：さらなる試験）
合成したペプチドについて実施例３と同様の試験を行う。
その結果、表３に示す１つ以上の化合物が、ＡｓＰＣ−１細胞殺傷効果を示すと期待される。表３の中にも特に強力にＡｓＰＣ−１細胞殺傷効果を発揮するものがありうることが理解される。このことから、これらのペプチドは、例えば、増殖性疾患（例えば、がん）、子宮腺筋症および糖尿病網膜症の治療用途において有利に使用され得ると期待される。【０１７９】
（注釈）
以上のように、本開示の好ましい実施形態を用いて本開示を例示してきたが、上述の説明および実施例は、例示の目的のみに提供され、本開示を限定する目的で提供したのではない。従って、本発明は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。本出願は、日本国特許庁に２０１８年９月１４日に出願された特願２０１８−１７２４７９に対して優先権主張を行うものであり、その内容はその全体が本出願において参考として援用される。
【産業上の利用可能性】
【０１８０】
本開示のペプチドは、顕著な抗がん活性が見いだされ、医薬品としての用途を有することから、製薬業やその原薬メーカーに属する産業において有用性が見いだされる。
【配列表フリーテキスト】
【０１８１】
配列番号１：ＳＣＨ（Ａ１）（Ａ２）（Ａ３）（Ａ４）（Ａ５）（Ａ６）Ｖ（Ａ７）（Ａ８）
配列番号２：ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ
配列番号３：Ｘ１−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
配列番号４：Ｘ１−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
配列番号５：Ｘ１−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−Ｘ２
配列番号６：Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−Ｘ２
配列番号７：Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−Ｘ２
配列番号８：Ｘ１−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−Ｘ２
配列番号９：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＹＳ１２）
配列番号１０：Ａｃ−ＳＣＨＹＧＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６１）
配列番号１１：Ａｃ−ＳＣＨＦＡＰＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６４）
配列番号１２：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＡＬＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６６）
配列番号１３：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＡＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６８）
配列番号１４：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＭＴＷＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２６９）
配列番号１５：Ａｃ−ＳＣＨＦＧＰＬＴＭＶＣＫ−ＮＨ２（ＧＴ−１１２７０）
【図１】
2020054813.tif 000008
【図２】
2020054813.tif 000009
【図３】
2020054813.tif 000010
【図４】
2020054813.tif 000011
【図５】
2020054813.tif 000012
【図６】
2020054813.tif 000013
【図７】
2020054813.tif 000014
【図８】
2020054813.tif 000015
【図９】
2020054813.tif 000016
【図１０】
2020054813.tif 000017
【図１１】
2020054813.tif 000018
【図１２】
2020054813.tif 000019
【図１３】
2020054813.tif 000020
【図１４】
2020054813.tif 000021
【図１５】
2020054813.tif 000022
【図１６】
2020054813.tif 000023
【図１７】
2020054813.tif 000024
【図１８】
2020054813.tif 000025
【図１９】
2020054813.tif 000026
【図２０】
2020054813.tif 000027
【図２１】
2020054813.tif 000028
【図２２】
2020054813.tif 000029
【図２３】
2020054813.tif 000030
【図２４】
2020054813.tif 000031
【図２５】
2020054813.tif 000032
【図２６】
2020054813.tif 000033
【図２７】
2020054813.tif 000034
【図２８】
2020054813.tif 000035
【図２９】
2020054813.tif 000036
【図３０】
2020054813.tif 000037
【図３１】
2020054813.tif 000038
【図３２】
2020054813.tif 000039
【図３３】
2020054813.tif 000040
【図３４】
2020054813.tif 000041
【図３５】
2020054813.tif 000042
【図３６】
2020054813.tif 000043
【図３７】
2020054813.tif 000044
【図３８】
2020054813.tif 000045
【図３９】
2020054813.tif 000046
【図４０】
2020054813.tif 000047
【図４１】
2020054813.tif 000048
【図４２】
2020054813.tif 000049
【図４３】
2020054813.tif 000050
【図４４】
2020054813.tif 000051
【図４５】
2020054813.tif 000052
【図４６】
2020054813.tif 000053
【図４７】
2020054813.tif 000054
【図４８】
2020054813.tif 000055
【図４９】
2020054813.tif 000056
【図５０】
2020054813.tif 000057
【図５１】
2020054813.tif 000058
【配列表】
2020054813000001.app
【国際調査報告】
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