(57)【要約】  本発明の課題は、びまん性胃がんに対して有効な分子標的薬を提供することである。本発明によれば、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む、患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物が提供される。本発明によれば、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、上記医薬組成物が提供される。本発明によれば、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程を含む、患者のびまん性胃がんの治療方法が提供される。
2020100969.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む、患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
【請求項２】
抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ＥＧＦ受容体阻害剤がアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブからなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、請求項１から３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４およびオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）からなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、請求項１から４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗ＶＥＧＦ受容体２抗体がラムシルマブである、請求項２から５の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ｃＭＥＴ阻害剤がサボリチニブである、請求項２から６の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記びまん性胃がんが、スキルス胃がんである、請求項１から７の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記患者が、がん性腹膜炎を患っている、請求項１から８の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程を含む、患者のびまん性胃がんの治療方法。
【請求項１１】
前記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤を、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体と同時投与または逐次投与することを含む、請求項１０に記載の治療方法。
【請求項１２】
前記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤と抗ＶＥＧＦ受容体２抗体を、ｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することを含む、請求項１１に記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＥＧＦ受容体阻害剤を含むびまん性胃がんを治療するための医薬組成物に関する。本発明は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、ＥＧＦ受容体阻害剤を含むびまん性胃がんを治療するための医薬組成物に関する。
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年１１月１４日出願の日本特願２０１８−２１３４９６の優先権を主張し、その全記載は、ここに特に開示として援用される。
【背景技術】
【０００２】
びまん性胃がんは、低分化腺がんや印環細胞がん等からなり、高分化型腺がんからなる非びまん性胃がんに比べて、進行が速く、予後が悪い傾向がある。特に、びまん性胃がんに含まれるスキルス胃がんは、高度の間質線維化、がん細胞のびまん性浸潤およびしばしば未分化の腺がん細胞を有することを特徴とする（非特許文献１）。スキルス胃がんは、がん細胞の腹膜播種と大量の腹水からなる腹膜がん腫症を高頻度で発症し、それにより予後が極めて悪い（非特許文献１および２）。【０００３】
切除不能進行再発胃がんの標準治療としては、Ｓ−１（テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤）とシスプラチン（ＣＤＤＰ）によるＳＰ療法が標準治療として行われている（非特許文献３）。一方、胃がん治療においても、抗ＨＥＲ２療法の登場により、抗ＨＥＲ２療法薬を中心とした個別化医療が注目されている。ＨＥＲ２陽性胃がんについては、トラスツズマブの生存改善効果が国際共同試験（ＴｏＧＡ）で明らかになったものの、胃がん全体のうちＨＥＲ２陽性胃がんの割合は多くはない（約１０〜２０％）。そのため、ＨＥＲ２陽性胃がん以外の胃がんについても、個別化医療に資する、より有用な新たな分子標的薬の探索が行われている。【０００４】
胃がんはその深達度から「早期胃がん」と「進行胃がん」に分けられ、がんが固有筋層よりも深く浸潤している進行胃がんの５０〜６０％がびまん性胃がん、そのうち２０％前後がスキルス胃がんと言われている。しかしながら、進行したびまん性胃がんに対する有効な分子標的薬は知られていない。例えば、進行再発胃がんに対する化学療法にベバシズマブの上乗せ効果を検証する国際共同試験（ＡＶＡＧＡＳＴ）が行われたが、その有効性は確認されなかった。また、進行胃がんに対する、パニツムマブまたはセツキシマブの化学療法への上乗せ効果を検証する試験でも、その有効性は確認されなかった（ＲＥＡＬ３試験、ＥＸＰＡＮＤ試験）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Zhao L. et al., Cancer Science, December 2013, vol.104, No12, pp.1640-1646.
【非特許文献２】Yasumoto K. et al., Clin Cancer Res 2011; 17: 3619-3630.
【非特許文献３】Koizumi W. et al., Lancet Oncol.9(3):215-21(2008).
【非特許文献４】Zhang et al. Journal of Hematology & Oncology 2014, 7:22
【非特許文献５】Hua Xie et al.011, PLoS ONE 6(7): e21487. doi:10.1371/journal.pone.0021487
【非特許文献６】James W.T.Yates et al., 2016,Mol Cancer Ther; 15(10);2378-87
【非特許文献７】Nicolas Floc'h et al., 2018, Mol Cancer Ther; 17(5); 885-96
【非特許文献８】Cross D.A.E. et al., Cancer Discov. 2014 Sep; 4(9): 1046-1061
【非特許文献９】Modjtahedi H., et al., 2014. Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol., 387:505-52
【非特許文献１０】Cha MY et al., 2012, Int. J. Cancer:130, 2445-2454
【非特許文献１１】Engelman J.A. et al., Cancer Res 2007;67(24):11924-32
【非特許文献１２】Traxler p. et al., CANCER RESEARCH 64, 4931-4941, July 15, 2004
【非特許文献１３】Wong T. W. et al., Clin Cancer Res 2006;12(20) October 15, 2006
【非特許文献１４】Doi T. et al., British Journal of Cancer (2012) 106, 666-672
【非特許文献１５】Amemiya et al., Oncology 2002; 63: 286-96、 Park et al., APMIS 2000; 108: 195-200
【非特許文献１６】Olayioye MA et al., EMBO J 2000;19:3159-67
【非特許文献１７】Nakashio T et al., Int J Cancer 1997;70:612-8
【非特許文献１８】Nakajima M et al., Cancer 1999;85:1894-1902
【非特許文献１９】Kalluri R et al., Nat Rev Cancer 2006;6:392-401        非特許文献１〜１９の全記載は、ここに特に開示として援用される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
がん性腹膜炎を伴う、スキルス胃がんを含むびまん性胃がんは、再発・進行胃がんの約半数を占めるが、有効な分子標的薬は知られていないという問題がある。スキルス胃がんは、短期間にがん性腹膜炎を起こすため、予後が極めて悪いが、有効な療法は今のところ提供されていないという問題もある。【０００７】
これまでに、ＨＥＲ２陽性胃がんに対する個別化療法は提供されているが、ＨＥＲ２陽性胃がんには該当しないびまん性胃がんに対して有効な分子標的薬は知られていない。そのため、びまん性胃がんに対して有効な分子標的薬を提供することが課題としてある。本発明は、びまん性胃がんの新たな治療方法およびそれに用いられる医薬組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、特定のＥＧＦ受容体阻害剤がびまん性胃がん細胞に対して抗がん作用を有することを見出した。本発明はこの知見に基づくものである。
本発明によれば以下の発明が提供される。
［１］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む、患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、［１］に記載の医薬組成物。
［３］  併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与される、［２］に記載の医薬組成物。
［４］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブからなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１］から［３］の何れか一に記載の医薬組成物。
［５］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４およびオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）からなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１］から［４］の何れか一に記載の医薬組成物。
［６］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体がラムシルマブである、［２］から［５］の何れか一に記載の医薬組成物。
［７］  ｃＭＥＴ阻害剤がサボリチニブである、［２］から［６］の何れか一に記載の医薬組成物。
［８］  上記びまん性胃がんが、スキルス胃がんである、［１］から［７］の何れか一に記載の医薬組成物。
［９］  上記患者が、がん性腹膜炎を患っている、［１］から［８］の何れか一に記載の医薬組成物。【０００９】
［１０］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程を含む、患者のびまん性胃がんの治療方法。
［１１］  上記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤を、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体と同時投与または逐次投与することを含む、［１０］に記載の治療方法。
［１２］  上記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤と抗ＶＥＧＦ受容体２抗体を、ｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することを含む、［１１］に記載の治療方法。
［１３］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブからなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１０］から［１２］の何れか一に記載の治療方法。
［１４］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４およびオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）からなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１０］から［１３］の何れか一に記載の治療方法。【００１０】
［１５］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体がラムシルマブである、［１１］から［１４］の何れか一に記載の治療方法。
［１６］  ｃＭＥＴ阻害剤がサボリチニブである、［１２］から［１５］の何れか一に記載の治療方法。
［１７］  上記びまん性胃がんが、スキルス胃がんである、［１０］から［１６］の何れか一に記載の治療方法。
［１８］  上記患者が、がん性腹膜炎を患っている、［１０］から［１７］の何れか一に記載の治療方法。【００１１】
［１９］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体との併用療法に用いるための、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２０］  ｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２１］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体およびｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２２］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤との併用療法に用いるための、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２３］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤およびｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。【００１２】
［２４］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤との併用療法に用いるための、ｃＭＥＴ阻害剤を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２５］  ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤および抗ＶＥＧＦ受容体２抗体との併用療法に用いるための、ｃＭＥＴ阻害剤を含む患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
［２６］  併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与される、［１９］から［２５］の何れか一に記載の医薬組成物。
［２７］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブからなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１９］から［２６］の何れか一に記載の医薬組成物。
［２８］  上記ＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４およびオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）からなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、［１９］から［２７］の何れか一に記載の医薬組成物。【００１３】
［２９］  抗ＶＥＧＦ受容体２抗体がラムシルマブである、［１９］から［２８］の何れか一に記載の医薬組成物。
［３０］  ｃＭＥＴ阻害剤がサボリチニブである、［１９］から［２９］の何れか一に記載の医薬組成物。
［３１］  上記びまん性胃がんが、スキルス胃がんである、［１９］から［３０］の何れか一に記載の医薬組成物。
［３２］  上記患者が、がん性腹膜炎を患っている、［１９］から［３１］の何れか一に記載の医薬組成物。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、ＥＧＦ受容体阻害剤（１）ＡＳＴ１３０６および（２）ＡＺ５１０４による、びまん性胃がん細胞株ＮＵＧＣ４およびＧＣＩＹにおける細胞増殖抑制試験の結果を示す。「ＡＰ」は、アンフィレグリンおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＢ-ＥＧＦ」は、ＨＢ-ＥＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＧＦ」は、ＨＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「Ｍｅｄｉｕｍ」は、ＡＰ、ＨＢ-ＥＧＦおよびＨＧＦを何れも加えず、ＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。
【図２】図２は、ＥＧＦ受容体阻害剤（１）ＡＳＴ１３０６および（２）ＡＺ５１０４による、非びまん性胃がん細胞株ＧＣＲ−１およびＭＫＮ７における細胞増殖抑制試験の結果を示す。「ＡＰ」は、アンフィレグリンおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＢ-ＥＧＦ」は、ＨＢ-ＥＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＧＦ」は、ＨＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「Ｍｅｄｉｕｍ」は、ＡＰ、ＨＢ-ＥＧＦおよびＨＧＦを何れも加えず、ＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。
【図３】図３は、ＥＧＦ受容体阻害剤（１）ＡＳＴ１３０６および（２）ＡＺ５１０４による、ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株ＭＫＮ４５における細胞増殖抑制試験の結果を示す。「ＡＰ」は、アンフィレグリンおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＢ-ＥＧＦ」は、ＨＢ-ＥＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「ＨＧＦ」は、ＨＧＦおよびＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。「Ｍｅｄｉｕｍ」は、ＡＰ、ＨＢ-ＥＧＦおよびＨＧＦを何れも加えず、ＥＧＦ受容体阻害剤の存在下で培養した胃がん細胞株を示す。
【図４】図４は、ＥＧＦ受容体阻害剤ＡＳＴ１３０６およびＡＺ５１０４による、正常ヒト胃線維芽細胞に対するインビトロ増殖抑制試験の結果を示す。「ＨＢ−ＥＧＦ  １０ｎｇ／ｍｌ」は、ヒトＨＢ−ＥＧＦの存在下（＋）または非存在下（−）での線維芽細胞の培養を示す。「ＣＯＮＴ−ＩｇＧ  １μｇ／ｍｌ」は、ヒトｎｏｒｍａｌ  ＩｇＧの存在下（＋）または非存在下（−）での線維芽細胞の培養を示す。「αＨＢ−ＥＧＦ  １μｇ／ｍｌ」は、抗ヒトＨＢ−ＥＧＦ抗体の存在下（＋）または非存在下（−）での線維芽細胞の培養を示す。「ＡＺ５１０４  １μＭ」は、ＡＺ５１０４の存在下（＋）または非存在下（−）での線維芽細胞の培養を示す。「ＡＳＴ１３０６  １μＭ」はＡＳＴ１３０６の存在下（＋）または非存在下（−）での線維芽細胞の培養を示す。
【図５】図５は、実施例３のin vivo試験を行った８群とコントコール群についての生存曲線を示す。縦軸は生存率であり、横軸に日数を示す。生存曲線はKaplan-Meier法により作成し、log rank検定を行った。＊P<0.05はコントロール群との比較である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下に記載する本発明の説明は、代表的な実施形態や具体例に基づいてなされることがあるが、本発明はそのような実施形態に限定されるものではない。なお、本明細書において「〜」を用いて表される数値範囲は「〜」の前後に記載される数値を下限値および上限値として含む範囲を意味する。
【００１６】
（医薬組成物）
本発明は、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む、患者のびまん性胃がんを治療するための医薬組成物を提供する。上記患者は、ヒトを含む哺乳動物であってもよい。
【００１７】
胃がんは、その形態を肉眼で見たときの分類法（ボールマン分類）により、１から４型に分けられる。１から４型に分類できないものを５型とする場合もある。本明細書において「びまん性胃がん」は、３型（潰瘍浸潤型）と４型（びまん浸潤型）を指し、スキルス胃がんは４型（びまん浸潤型）を指す。本明細書において、特に明記しない場合は「びまん性胃がん」は、スキルス胃がんを含む。
【００１８】
ＥＧＦ受容体阻害剤（本明細書中、ＥＧＦＲ阻害剤とも記載する）は、一般的にＥＧＦ受容体の発現および／または活性を低下させるかまたは防止する。適切なＥＧＦ受容体阻害剤は、ＥＧＦ受容体発現および／または活性に対する阻害効果についてアッセイすることにより特定することができる。阻害剤は、発現または活性を適切なアッセイにおいて少なくとも検出可能な量を低下させる。阻害剤は、例えば、発現または活性を少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０または少なくとも９０％低下させることができる。任意の適切なＥＧＦ受容体阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害活性を有するか、および／またはＥＧＦ受容体からのシグナル伝達を阻害するものであってもよい。
【００１９】
ＥＧＦ受容体はチロシンキナーゼ型受容体であり、特にＥｒｂＢファミリーとよばれる型の受容体に属する。ＥｒｂＢファミリーには、ＥｒｂＢ１（ＥＧＦＲ）、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥｒｂＢ３（ＨＥＲ３）、ＥｒｂＢ４（ＨＥＲ４）の４つが属する。
【００２０】
上記ＥＧＦ受容体阻害剤は、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するものを選択することができる。上記ＥＧＦ受容体阻害剤は、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性の他に、ＥｒｂＢ２阻害活性を有するものであってもよいし、ＥｒｂＢ２阻害活性を有しないものであってもよい。
【００２１】
上記ＥＧＦ受容体阻害剤としては、ＡＳＴ１３０６、アファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラート、ラパチニブ等が例示できる。阻害剤は、これら列挙したものの医薬的に許容される塩であって後述するものを含むことができる。
【００２２】
ＡＳＴ１３０６（アリチニブ）は、2-プロペンアミド、N- [4-[[3-クロロ-4-[（3-フルオロフェニル）メトキシ]フェニル]アミノ] -6-キナゾリニル]-、4-メチルベンゼンスルホネート（1：1）（CAS登録番号：1050500-29-2）である。ＡＺ５１０４は、N-（5-（4-（1H-インドール-3-イル）ピリミジン-2-イルアミノ）-2-（（2-（ジメチルアミノ）エチル）（メチル）アミノ）-4-メトキシフェニル）アクリルアミド（CAS登録番号：1421373-98-9）である。オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）は、2-プロペンアミド、N- [2-[[2-（ジメチルアミノ）エチル]メチルアミノ] -4-メトキシ-5-[[4-（1-メチル- 1H-インドール-3-イル）-2-ピリミジニル]アミノ]フェニル]- （CAS登録番号：1421373-65-0）である。ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）は、1-（4-（4-（3,4-ジクロロ-2-フルオロフェニルアミノ）-7-メトキシキナゾリン-6-イルオキシ）ピペリジン-1-イル）プロプ-2-エン-1-オン（CAS登録番号：1092364-38-9）である。ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）は、（R）-6-（4-（（4-エチルピペラジン-1-イル）メチル）フェニル）-N-（1-フェニルエチル）-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン（CAS登録番号：497839-62-0）である。ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）は、（S）-モルホリン-3-イルメチル4-（1-（3-フルオロベンジル）-1H-インダゾール-5-イルアミノ）-5-メチルピロロ[1,2-f] [1,2,4]トリアジン-6-カルバミン酸（CAS登録番号：714971-09-2）である。ＴＡＫ−２８５は、N-（2-（4-（3-クロロ-4-（3-（トリフルオロメチル）フェノキシ）フェニルアミノ）-5H-ピロロ[3,2-d]ピリミジン-5-イル）エチル）-3-ヒドロキシ-3 -メチルブタンアミド（CAS登録番号：871026-44-7）である。
【００２３】
一実施態様において、ＥＧＦ受容体阻害剤はＡＳＴ１３０６、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）である。ＥＧＦ受容体阻害剤は、Selleck Chemicals社、Santa Cruz Biotechnology社等から入手可能である。
【００２４】
医薬的に許容される塩は、例えば十分に塩基性である酸付加塩、例えば無機または有機酸との酸付加塩であってもよいが、これらに限定されない。上記酸付加塩としては、フマル酸塩、ステアリン酸塩、安息香酸塩、酢酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸およびマレイン酸塩、ならびにリンおよび硫酸と形成される塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
医薬的に許容される塩は、例えば十分に酸性である塩、例えばアルカリまたはアルカリ土類金属塩であってもよいが、これらに限定されない。上記アルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、アルカリ金属塩（例えばナトリウムもしくはカリウム）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウムもしくはマグネシウム）、アンモニウム塩、または有機アミン塩（例えばトリエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミン）、もしくはアミノ酸（例えばリシン）との塩類等が挙げられるが、これらに限定されない。塩は、例えばメシル酸塩またはトシル酸塩であってもよい。
【００２６】
ＥＧＦ受容体阻害剤として例示するＡＳＴ１３０６は、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）およびＨＥＲ４（ＥｒｂＢ４）シグナル伝達の不可逆的な阻害剤である（Zhang et al. Journal of Hematology & Oncology 2014, 7:22）。Hua Xie et al.（011, PLoS ONE 6(7): e21487. doi:10.1371/journal.pone.0021487)は、ＡＳＴ１３０６は、アニリノ−キナゾリン化合物であり、選択的で不可逆的なＥｒｂＢ２およびＥＧＦＲ阻害剤であるが、その増殖阻害効果はＥｒｂＢ２過剰発現細胞においてより強力であること、インビボでは、ＥｒｂＢ２過剰発現腺がん異種移植マウスおよびＦＶＢ−２／Ｎｎｅｕトランスジェニック乳がんマウスにおいて腫瘍増殖を強力に抑制したが、ＥＧＦＲ過剰発現腫瘍異種移植マウスにおいて腫瘍増殖を弱く阻害したことを報告している。また、ＡＳＴ１３０６を用いた第Ｉ相オープンラベル用量漸増試験では、試験に参加し評価可能であったがん患者５５名のうち、７名の部分寛解および７名の安定（６か月以上の安定）が得られている（Zhang et al. Journal of Hematology & Oncology 2014, 7:22）。
【００２７】
また、ＥＧＦ受容体阻害剤として例示するオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）は、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を有する進行非小細胞肺がんの治療薬として、米国、欧州および日本等において販売が承認されている。ＥＧＦ受容体阻害剤として例示するＡＺ５１０４は、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）の活性代謝物である（James W.T.Yates et al., 2016,Mol Cancer Ther; 15(10);2378-87）。オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）およびＡＺ５１０４は、ＥＧＦＲ  ＥＸ２０Ｉｎｓ変異を有する非小細胞肺がんを移植したマウスにおいて腫瘍増殖を阻害することも報告されている(Nicolas Floc'h et al., 2018, Mol Cancer Ther; 17(5); 885-96)。オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）およびＡＺ５１０４は、変異型ＥＧＦＲに対する阻害活性の他に、野生型ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２、およびＥｒｂＢ４についても阻害活性を有することが報告されている（Cross D.A.E. et al., Cancer Discov. 2014 Sep; 4(9): 1046-1061.）
【００２８】
ＥＧＦ受容体阻害剤として例示するアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブは何れもＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２およびＥｒｂＢ４を阻害することが報告されている(Modjtahedi H., et al., 2014. Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol., 387:505-52； Cha MY et al., 2012, Int. J. Cancer:130, 2445-2454.；Engelman J.A. et al., Cancer Res 2007;67(24):11924-32.；Traxler p. et al., CANCER RESEARCH 64, 4931-4941, July 15, 2004; Wong T. W. et al., Clin Cancer Res 2006;12(20) October 15, 2006; Doi T. et al., British Journal of Cancer (2012) 106, 666-672）。
【００２９】
上記ＥＧＦ受容体阻害剤が、びまん性胃がんに対して抗がん作用を有するかどうかは、インビトロの細胞増殖阻害試験やびまん性胃がんモデルにおける治療効果評価試験等により、確認することができる。インビトロの細胞増殖阻害試験では、例えば、胃がん細胞株をＥＧＦ受容体阻害剤と共に培養して、がん細胞の増殖が阻害されるかどうかを評価することができる。また、サイトカインや増殖因子と共に培養してがん細胞を増殖させた胃がん細胞株を、更にＥＧＦ受容体阻害剤と共に培養して、がん細胞の増殖が阻害されるかどうかを評価することができる。上記サイトカインや増殖因子は、例えば、びまん性胃がん患者のがん性腹水中において、非がん性腹水に比して高濃度に存在することが確認されている種類を用いることができる。びまん性胃がん患者が合併するがん性腹水中には、非がん性腹水に比して２〜５倍以上の高濃度のアンフィレグリン、ＨＢ−ＥＧＦ（heparin binding-epidermal growth factor-like growth factor）、ＨＧＦ（hepatocyte growth factor）等が存在することが報告されている（非特許文献２）。
【００３０】
びまん性胃がんモデルにおける治療効果評価試験等は、胃がん細胞を移植したマウス等の動物に、ＥＧＦ受容体阻害剤を投与して、治療効果を評価することにより実施することができる。評価は、安楽死させたマウスを解剖し、腹部腫瘍の数や大きさ、腹水の量、腹膜における結節の状態を観察することにより実施することができる。治療効果については、移植と同時にＥＧＦ受容体阻害剤の投与を行って評価してもよいし、５日程度、腫瘍の成長を確認してからＥＧＦ受容体阻害剤の投与を行い評価してもよい。モデル動物としては、マウスの他に、ラット等のげっ歯類、ウサギ、ミニブタ、カニクイザル等の霊長類を用いることができる。ヒトがん細胞を用いた異種移植（ゼノグラフト）モデルの他に、同種移植モデル、同所性移植モデル、化学発がんモデル、遺伝子改変動物モデルを用いることができる。がん細胞移植モデルを用いる場合、異所性移植でも、同所性移植でもよい。
【００３１】
胃がん細胞株としては、ＮＵＧＣ４、ＯＣＵＭ−１、ＭＫＮ４５、ＭＫＮ７、ＭＫＮ２８、ＴＭＫ−１、ＮＫＰＳ、ＫａｔｏＩＩＩ、ＮＵＧＣ３、ＧＣＩＹ、Ｈ−１１１−ＴＣ、ＳＨ−１０−ＴＣ、ＫＫＬＳ、ＧＣＲ１等を例示することができる。胃がん細胞株は、ヒューマンサイエンス振興財団研究資源バンク（大阪、日本）等から入手可能である。
【００３２】
胃がん細胞株ＭＫＮ４５、ＮＵＧＣ４、ＧＣＩＹ、ＧＣＲ１、ＭＫＮ７およびＯＣＵＭ−１を、１０〜２００ｎｇ／ｍＬのＨＧＦ（肝細胞増殖因子）と共に７２時間培養したところ、びまん性胃がん細胞株ＮＵＧＣ４およびＧＣＩＹにおいて、ベースライン増殖の２倍以上の細胞増殖が確認されたが、非びまん性胃がん細胞株ＭＫＮ４５、ＧＣＲ１、ＭＫＮ７およびＯＣＵＭ−１では細胞増殖が確認されなかったことが報告されている（非特許文献１）。ＨＧＦは、多くの胃がんで過剰発現していることおよび血清ＨＧＦの増加は予後の悪さと関連していることが報告されている(Amemiya et al., Oncology 2002; 63: 286-96、Park et al., APMIS 2000; 108: 195-200.)。本明細書中、ベースライン増殖は、サイトカインおよび増殖因子等の非存在下で培養したがん細胞株の増殖を指す。
【００３３】
びまん性胃がん細胞株ＮＵＧＣ４を、１００ｎｇ／ｍＬのアンフィレグリンと共に７２時間培養したところ、ベースライン増殖から２倍程度の細胞増殖が確認されたこと、および１ｎｇ／ｍＬのＨＢ−ＥＧＦと共に７２時間培養したところ、わずかな細胞増殖の誘導が確認されたことが報告されている（非特許文献２）。アンフィレグリンは、ＥｒｂＢ１（ＥＧＦＲ）に結合し、ＨＢ−ＥＧＦは、ＥｒｂＢ１（ＥＧＦＲ）とＥｒｂＢ４の両方に結合する(Olayioye MA et al., EMBO J 2000;19:3159-67)。また、ＮＵＧＣ４細胞株は、腹腔内への注入により、ヌードマウスの腹腔内に迅速に播種し、血性腹水を形成する(Nakashio T et al., Int J Cancer 1997;70:612-8)。
【００３４】
びまん性胃がんに特異的に豊富ながん間質線維芽細胞よりＨＧＦが高産生することが明らかとなっている（非特許文献１）。これらがん間質由来ＨＧＦは、唯一のレセプターであるｃＭｅｔを介してびまん性胃がん細胞の運動性亢進に加えて強力な細胞増殖作用を引き起こす（非特許文献１）。さらにこれらパラクリン誘導性ＨＧＦは、ＨＧＦ同様に著明な細胞増殖活性を有するＥＧＦＲリガンドの一つであるアンフィレグリン（非特許文献３）を、びまん性胃がん細胞より大量に産生誘導する（非特許文献１）。びまん性胃がんが合併するがん性腹水中には、非がん性腹水に比して２〜５倍以上の高濃度のＨＧＦならびにアンフィレグリンが存在する（非特許文献２）。ＨＧＦ誘導性ならびに自己産生性アンフィレグリンは、オートクリン機序でびまん性胃がん細胞を強力に細胞増殖する。
【００３５】
一方、非びまん性胃がんでは、びまん性胃がんのがん間質にみられるようながん間質線維芽細胞からのＨＧＦ産生誘導は認められない。また、非びまん性胃がん細胞にはＨＧＦならびにアンフィレグリン刺激による細胞増殖誘導作用はなく、これらのことが、びまん性胃がん細胞との大きな違いとなっている（非特許文献１）。びまん性胃がんにおいては、がん間質誘導性パラクリンＨＧＦがｃＭｅｔレセプターを介して活性化される（ＨＧＦ／ｃＭｅｔ  ａｘｉｓ経路）ことが重要な役割を果たしていると考えられ（非特許文献１）、ｃＭｅｔ遺伝子増幅のある胃がん細胞でもスキルス胃がんやびまん性胃がん発症との関連が報告されている（Nakajima M et al., Cancer 1999;85:1894-1902）。
【００３６】
ｃＭｅｔ阻害剤は、ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がんやスキルス胃がん細胞を用いたマウスがん性腹膜炎モデルで高い抗腫瘍効果を示した（非特許文献１）。しかしながら、胃がん全体を対象としたｃＭｅｔ受容体を標的としたＴＫＩや抗体によるいくつかの臨床試験が行われたが、いずれの試験においても十分な臨床的有用性は確認されていない。ここで、全胃がんの２％を占めるｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がんは、肉眼形態的にはびまん性胃がんに分類され難い場合があるが、進展発育の分子機構の観点からはびまん性胃がんの特徴を有していることが分かっている（Nakajima M et al., Cancer 1999;85:1894-1902）。
【００３７】
本発明の医薬組成物は、患者のびまん性胃がんを治療するために用いることができる。本発明の医薬組成物は、別の態様では、患者のスキルス胃がんを治療するために用いることができる。上記びまん性胃がんの患者が、がん性腹膜炎を発症している場合には、がん性腹膜炎の症状の悪化を抑制するために、または症状を緩解または治癒するために用いることができる。また、本発明の医薬組成物は、上記びまん性胃がんの患者が、がん性腹膜炎を発症していない場合には、がん性腹膜炎の発症を予防するために用いることができる。本明細書において、がん性腹膜炎は、腹膜にがんが転移した病態を指し、がん細胞が腹腔内に播種して腹膜上に多数のがん細胞の小結節を形成すること（腹膜播種）により生じる。がん性腹膜炎は、腹膜播種が増加すると、悪性腹水を伴うことが多い。がん性腹膜炎は、腹膜がん腫症とも呼ばれる。本発明の医薬組成物は、がん性腹膜炎を患っている胃がん患者を治療するために用いることができる。
【００３８】
更に、上記ＥＧＦ受容体阻害剤は胃組織における線維芽細胞の増殖について阻害活性を有することができる。腫瘍細胞と間質細胞の相互作用は、腫瘍の発達および進行において重要な役割を果たし、間質線維芽細胞は、しばしばがんの進行と関連することが知られている(Kalluri R et al., Nat Rev Cancer 2006;6:392-401)。スキルス胃がんは、急速ながん細胞のびまん性浸潤と増殖のほか、高度の間質線維化を特徴とする。非特許文献２は、スキルス胃がんでは、胃および腹腔の腫瘍微小環境に存在する正常ヒト線維芽細胞が高レベルのＥＧＦＲタンパク質を発現していること、およびＨＢ−ＥＧＦが間質に存在する線維芽細胞の移動と増殖を誘導することを報告している。したがって、腹腔内で産生されたＨＢ−ＥＧＦは、線維芽細胞の蓄積および増殖を促進する可能性があり、スキルス胃がん患者における腹膜がん腫症に関連する線維化を誘導する可能性がある。
【００３９】
本発明の医薬組成物は、公知の臨床実績に従って投与することができる。本発明の医薬組成物を経口投与する場合、ＥＧＦ受容体阻害剤の投与量が成人（体重６０ｋｇ）に対して、１日あたり１００μｇ〜１０ｇ、５００μｇ〜１０ｇ、または１ｍｇ〜１ｇとなるように投与してもよい。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤がオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）である場合、その投与量の一態様は、１日あたり８０ｍｇである。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤がＡＳＴ１３０６である場合、その投与量の一態様は、１日あたり１０００〜１２００ｍｇである。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤は、１日１〜３回に分けて投与することができる。
【００４０】
本発明により提供される医薬組成物は、投与経路に応じて最適な剤形で処方される。医薬組成物は、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉剤、カプセル剤等の固形製剤または液剤、ゼリー剤、シロップ剤等の経口投与用製剤であってもよく、注射剤、坐剤、軟膏剤、パップ剤等の非経口投与用製剤であってもよい。
【００４１】
本発明により提供される医薬組成物は、医薬として許容される添加物を含むことができる。医薬として許容される添加物としては、例えば等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、凍結保護剤、抗生物質等を例示できる。具体的には、水、エタノール、塩化ナトリウム、ブドウ糖、アルブミン等が挙げられる。また、医薬として許容される添加物の別の例としては、賦形剤、結合剤、滑沢剤等を例示できる。賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビトール、結晶セルロース、二酸化ケイ素等が挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ等が挙げられる。
【００４２】
本発明の医薬組成物の製造は、医薬品および医薬部外品の製造管理および品質管理規則に適合した条件（ｇｏｏｄ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  ｐｒａｃｔｉｃｅ、ＧＭＰ）で実施されることが好ましい。
【００４３】
本発明により提供される医薬組成物は抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いることができる。一実施態様では、本発明の医薬組成物は抗ＶＥＧＦ受容体２抗体との併用療法に用いることができる。別の実施態様では、本発明の医薬組成物はｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いることができる。更に別の実施態様では、本発明の医薬組成物は抗ＶＥＧＦ受容体２抗体とｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いることができる。
【００４４】
ＶＥＧＦ受容体２（本明細書中、ＶＥＧＦＲ２とも記載する）は、血管内皮細胞増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ(vascular epidermal growth factor receptor）２を意味する。ＶＥＧＦ受容体２はＫＤＲとしても知られている。抗ＶＥＧＦ受容体２抗体は、ＶＥＧＦ受容体２に結合する任意の抗体を使用することができる。一実施態様では、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体は、ラムシルマブである。ラムシルマブは、サイラムザ（登録商標）として販売されており、IMC-1121bまたはCAS登録番号947687-13-0としても知られている。抗ＶＥＧＦ受容体２抗体ＤＣ１０１は、マウスにおいて抗ＶＥＧＦ受容体２抗体、好ましくはラムシルマブの代用物として実験で用いられ得るマウスＶＥＧＦ受容体２に対するラットモノクローナル抗体である（Witte L., et al Cancer Metastasis Rev., 17, 155-161, 1998）。
【００４５】
上記ｃＭＥＴ阻害剤としては、クリゾチニブ（ＰＦ−０２３４１０６６）、ＴＡＳ−１１５、カボザンチニブ（ＸＬ１８４、ＢＭＳ−９０７３５１）、フォレチニブ、ＰＨＡ−６６５７５２、ＳＵ１１２７４、ＳＧＸ−５２３、ＢＭＳ−７７７６０７、ＪＮＪ−３８８７７６０５、チバンチニブ（ＡＲＱ１９７）、ＰＦ−０４２１７９０３、Ｇｌｅｓａｔｉｎｉｂ（ＭＧＣＤ２６５）、カプマチニブ（ＩＮＣＢ２８０６０）、ＢＭＳ−７５４８０７、ＢＭＳ−７９４８３３、ＡＭＧ−２０８、ＭＫ−２４６１、ゴルバチニブ（Ｅ７０５０）、ＡＭＧ−４５８、ＮＶＰ−ＢＶＵ９７２、ノルカンタリジン、ＡＭＧ３３７、ＨＭＰＬ−５０４（ＡＺＤ６０９４、サボリチニブ）、Ｓ４９０７６、ＮＰＳ−１０３４、Ｍｅｒｅｓｔｉｎｉｂ（ＬＹ２８０１６５３）が例示できる。阻害剤は、これら列挙したものの医薬的に許容される塩を含み得る。本発明の一実施態様では、ｃＭＥＴ阻害剤は、サボリチニブである。
【００４６】
併用療法において、２種以上の薬剤は、同時にまたは逐次に投与することができる。２種以上の薬剤を同時または逐次に投与する場合、全ての薬剤を同じ経路で投与してもよいし、または異なる径路で投与してもよい。
【００４７】
本明細書において、同時投与は２種以上の薬剤が数分から数秒以下の時間を隔てて投与されることを意味する。例えば、２種類の薬剤が約１５分から１分以下の時間を隔てて投与される。本明細書において、逐次投与は、数分、数時間、数日間、数週の時間を隔てて投与されることを意味する。例えば、２種類の薬剤が、１５分以上、３０分以上、６０分以上、または１日、２日、３日、４日、５日、６日若しくは７日、または２週、３週若しくは４週の時間を経て投与される。
【００４８】
併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は抗ＶＥＧＦ受容体２抗体と同時投与または逐次投与することができる。併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤はｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することができる。併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は抗ＶＥＧＦ受容体２抗体およびｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することができる。
【００４９】
一実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４であり、サボリチニブとの併用療法に用いることができる。別の実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がオシメルチニブであり、サボリチニブとの併用療法に用いることができる。
【００５０】
一実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４であり、ラムシルマブとの併用療法に用いることができる。別の実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がオシメルチニブであり、ラムシルマブとの併用療法に用いることができる。
【００５１】
一実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４であり、サボリチニブおよびラムシルマブとの併用療法に用いることができる。別の実施態様において、本発明の医薬組成物に含有されるＥＧＦ受容体阻害剤がオシメルチニブであり、サボリチニブおよびラムシルマブとの併用療法に用いることができる。
【００５２】
ＥＧＦ受容体阻害剤は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用において、成人（体重６０ｋｇ）に対して、１日あたり１００μｇ〜１０ｇ、５００μｇ〜１０ｇ、または１ｍｇ〜１ｇとなるように投与してもよい。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤がオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）である場合、その投与量の一態様は、１日あたり８０ｍｇである。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤がＡＳＴ１３０６である場合、その投与量の一態様は、１日あたり１０００〜１２００ｍｇである。本発明のＥＧＦ受容体阻害剤は、１日１〜３回に分けて投与することができる。
【００５３】
ラムシルマブは、ＥＧＦ受容体阻害剤および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用において、成人には２〜３週間に１回、ラムシルマブとして１回８ｍｇ／ｋｇ（体重）〜１回１０ｍｇ／ｋｇ（体重）を投与することができるが、患者の状態により適宜減量することができる。例えば、１回８ｍｇ／ｋｇ（体重）〜１回１０ｍｇ／ｋｇ（体重）をおよそ６０分かけて点滴静注することができる。
サボリチニブは、ＥＧＦ受容体阻害剤および／または抗ＶＥＧＦ受容体２抗体との併用において、成人には１日あたり３００ｍｇ〜１２００ｍｇ、好ましくは６００ｍｇを経口投与することができ、１日１〜３回に分けて投与することができる。
【００５４】
(治療方法)
本発明は、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程を含む、患者のびまん性胃がんの治療方法を提供する。本発明の医薬組成物を用いた治療方法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、任意の適切な手段によって、経口投与、胃内投与、鼻腔内投与、病巣内投与、または局所投与することができる。本発明の医薬は非経口注入により投与されてもよく、非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、または腹腔内への注入、または皮下注射等が含まれる。投与レジュメは、投与が短期間かまたは長期であるかによって適切に計画される。医療従事者の知識に基づいて治療に最適且つ臨床的に妥当な投与経路、投与方法、投与量および投与スケジュールが決定される。
【００５５】
本発明の治療方法は、患者由来の胃がん細胞サンプルにおけるＥｒｂＢ１および／またはＥｒｂＢ４タンパク質の発現レベルが、予め決定されたコントロールレベルと統計学的に同程度であるか、それよりも高い患者に対して実施することができる。該コントロールレベルは、ＥＧＦ受容体阻害剤に対して感受性であるびまん性胃がんを有する複数検体におけるＥｒｂＢ１および／またはＥｒｂＢ４タンパク質の発現レベルの平均値であってもよい。
【００５６】
本発明の治療方法は、患者由来の胃がん細胞サンプルにおけるＥｒｂＢ１および／またはＥｒｂＢ４タンパク質がリン酸化されているか、またはリン酸化されていない患者に対して実施することができる。一実施態様では、本発明の治療方法は、患者由来の胃がん細胞サンプルにおけるＥｒｂＢ１および／またはＥｒｂＢ４タンパク質がリン酸化されている患者に対して、選択的に実施することができる。上記ＥＧＦ受容体阻害剤は、リン酸化ＥｒｂＢ１および／またはＥｒｂＢ４タンパク質に対して、阻害活性を有するものであってもよい。
【００５７】
本発明の治療方法は、ＥＧＦ受容体阻害剤を単独の療法として患者に適用してもよいし、ＥＧＦ受容体阻害剤に加え、従来の手術または放射線療法、化学療法、抗体薬、免疫療法を伴ってもよい。このような化学療法や抗体薬は、ＥＧＦ受容体阻害剤を用いた治療と共に、同時に、逐次的に、または別個に投与することができる。
【００５８】
本発明の治療方法において、ＥＧＦ受容体阻害剤と併用される化学療法としては、オキサリプラチン、カペシタビン、フルオロウラシル、イリノテカン、シスプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、テガフール、ドキシフルリジン、テガフール・ウラシル合剤、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合等の抗がん剤から選択することができる。
【００５９】
本発明の治療方法において、ＥＧＦ受容体阻害剤と併用される抗体薬としては、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体ラムシルマブ、抗ＰＤ−１抗体ニボルマブ、抗ＰＤ−１抗体ペムブロリズマブ、抗ＰＤ−Ｌ１抗体アベルマブ、抗ＨＥＲ２抗体ベルツズマブ等の抗がん剤から選択することができるが、これらに限定されない。
【００６０】
本発明の治療方法において、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤を、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体と同時投与または逐次投与することを含むことができる。一実施態様では、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体は、ラムシルマブである。
【００６１】
本発明の治療方法において、ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤を、ｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することを含むことができる。すなわち、本発明の患者のびまん性胃がんの治療方法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、ｃＭＥＴ阻害剤を併用することができる。ｃＭＥＴは、チロシンキナーゼ型受容体であり、ＨＧＦ（肝細胞増殖因子）の結合により活性化される。ＨＧＦ／ｃＭＥＴシグナル伝達経路の活性化は、細胞の増殖、遊走、形態形成および血管新生などを誘導し、その持続的活性化は腫瘍増殖に関わると考えられている。上記ｃＭＥＴ阻害剤は、一般的にＨＧＦ−ｃＭｅｔシグナル伝達経路を阻害する活性を有する。任意の適切なｃＭＥＴ受容体阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害活性を有するか、および／またはｃＭＥＴ受容体からのシグナル伝達を阻害するものであってもよい。
【００６２】
上記ｃＭＥＴ阻害剤としては、クリゾチニブ（ＰＦ−０２３４１０６６）、ＴＡＳ−１１５、カボザンチニブ（ＸＬ１８４、ＢＭＳ−９０７３５１）、フォレチニブ、ＰＨＡ−６６５７５２、ＳＵ１１２７４、ＳＧＸ−５２３、ＢＭＳ−７７７６０７、ＪＮＪ−３８８７７６０５、チバンチニブ（ＡＲＱ１９７）、ＰＦ−０４２１７９０３、Ｇｌｅｓａｔｉｎｉｂ（ＭＧＣＤ２６５）、カプマチニブ（ＩＮＣＢ２８０６０）、ＢＭＳ−７５４８０７、ＢＭＳ−７９４８３３、ＡＭＧ−２０８、ＭＫ−２４６１、ゴルバチニブ（Ｅ７０５０）、ＡＭＧ−４５８、ＮＶＰ−ＢＶＵ９７２、ノルカンタリジン、ＡＭＧ３３７、ＨＭＰＬ−５０４（ＡＺＤ６０９４、サボリチニブ）、Ｓ４９０７６、ＮＰＳ−１０３４、Ｍｅｒｅｓｔｉｎｉｂ（ＬＹ２８０１６５３）が例示できる。阻害剤は、これら列挙したものの医薬的に許容される塩を含み得る。本発明の一実施態様では、ｃＭＥＴ阻害剤は、サボリチニブである。
【００６３】
クリゾチニブ（ＰＦ−０２３４１０６６）は、3-（（R）-1-（2,6-ジクロロ-3-フルオロフェニル）エトキシ）-5-（1-（ピペリジン-4-イル）-1H-ピラゾール-4-イル）ピリジン-2-アミン（CAS登録番号：877399-52-5）である。カボザンチニブ（ＸＬ１８４、ＢＭＳ−９０７３５１）は、N-（4-（6,7-ジメトキシキノリン-4-イルオキシ）フェニル）-N-（4-フルオロフェニル）シクロプロパン-1,1-ジカルボキサミド（CAS登録番号：849217-68-1）である。フォレチニブは、N-（3-フルオロ-4-（（6-メトキシ-7-（3-モルホリノプロポキシ）キノリン-4-イル）-オキシ）フェニル）-N-（4-フルオロフェニル）シクロプロパン-1,1-ジカルボキサミド（CAS登録番号：849217-64-7）である。ＴＡＳ−１１５のCAS登録番号は 1190836-34-0である。ＰＨＡ−６６５７５２は、（R、Z）-5-（2,6-ジクロロベンジルスルホニル）-3-（（3,5-ジメチル-4-（2-（ピロリジン-1-イルメチル）ピロリジン-1-カルボニル）-1H-ピロール-2 -イル）メチレン）インドリン-2-オン（CAS登録番号：477575-56-7）である。ＳＵ１１２７４は、（Z）-N-（3-クロロフェニル）-3-（（3,5-ジメチル-4-（1-メチルピペラジン-4-カルボニル）-1H-ピロール-2-イル）メチレン）-N-メチル-2 -オキソインドリン-5-スルホンアミド（CAS登録番号：658084-23-2）である。ＳＧＸ−５２３は、6-（6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン-3-イルチオ）キノリン（CAS登録番号：1022150-57-7）である。
【００６４】
ＢＭＳ−７７７６０７は、N-（4-（2-アミノ-3-クロロピリジン-4-イルオキシ）-3-フルオロフェニル）-4-エトキシ-1-（4-フルオロフェニル）-2-オキソ-1,2-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド（CAS登録番号：1025720-94-8）である。ＪＮＪ−３８８７７６０５は、6-（ジフルオロ（6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン-3-イル）メチル）キノリン（CAS登録番号：943540-75-8）である。チバンチニブ（ＡＲＱ１９７）は、（3R、4R）-3-（2,3-ジヒドロ-1H-ピロロ[3,2,1-ij]キノリン-6-イル）-4-（1H-インドール-3-イル）ピロリジン-2,5 -ジオン（CAS登録番号：905854-02-6）である。ＰＦ−０４２１７９０３は、2-（4-（3-（キノリン-6-イルメチル）-3H- [1,2,3]トリアゾロ[4,5-b]ピラジン-5-イル）-1H-ピラゾール-1-イル）エタノール（CAS登録番号：956905-27-4）である。Ｇｌｅｓａｔｉｎｉｂ（ＭＧＣＤ２６５）のCAS登録番号は936694-12-1である。カプマチニブ（ＩＮＣＢ２８０６０）は、2-フルオロ-N-メチル-4-（7-（キノリン-6-イルメチル）イミダゾ[1,2-b] [1,2,4]トリアジン-2-イル）ベンズアミド（CAS登録番号：1029712-80-8）である。ＢＭＳ−７５４８０７は、（S）-1-（4-（5-シクロプロピル-1H-ピラゾール-3-イルアミノ）ピロロ[1,2-f] [1,2,4]トリアジン-2-イル）-N-（6-フルオロピリジン-3-イル）-2-メチルピロリジン-2-カルボキサミド（CAS登録番号：1001350-96-4）である。ＢＭＳ−７９４８３３は、N-（4-（2-アミノ-3-クロロピリジン-4-イルオキシ）-3-フルオロフェニル）-5-（4-フルオロフェニル）-4-オキソ-1,4-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド（CAS登録番号：1174046-72-0）である。
【００６５】
ＡＭＧ−２０８は、7-メトキシ-4-（（6-フェニル-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン-3-イル）メトキシ）キノリン（CAS登録番号：1002304-34-8）である。ＭＫ−２４６１は、N-（（2R）-1,4-ジオキサン-2-イルメチル）-N-メチル-N '-[3-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-5-オキソ-5H-ベンゾ[ 4,5]シクロヘプタ[1,2-b]ピリジン-7-イル]スルファミド（CAS登録番号：917879-39-1）である。ゴルバチニブ（Ｅ７０５０）は、1,1-シクロプロパンジカルボキサミド、N- [2-フルオロ-4-[[2-[[[4-（4-メチル-1-ピペラジニル）-1-ピペリジニル]カルボニル]アミノ] -4-ピリジニル]オキシ]フェニル] -N '-（4-フルオロフェニル）-（CAS登録番号：928037-13-2）である。ＡＭＧ−４５８は、1-（2-ヒドロキシ-2-メチルプロピル）-N-（5-（7-メトキシキノリン-4-イルオキシ）ピリジン-2-イル）-5-メチル-3-オキソ-2-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ピラゾール-4-カルボキサミド（CAS登録番号：913376-83-7）である。ＮＶＰ−ＢＶＵ９７２は、6-（（6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）イミダゾ[1,2-b]ピリダジン-3-イル）メチル）キノリン（CAS登録番号：1185763-69-2）である。ノルカンタリジンは、exo-3,6-エポキシヘキサヒドロフタル酸無水物（CAS登録番号：29745-04-8）である。
【００６６】
ＡＭＧ３３７は、1,6-ナフチリジン-5（6H）-オン、6-[(1R）-1-[8-フルオロ- 6-（1- メチル- 1H-ピラゾール-4-イル）-1,2,4-トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル]エチル] -3-（ 2-メトキシエトキシ）-（CAS登録番号：1173699-31-4）である。
ＨＭＰＬ−５０４（ＡＺＤ６０９４、サボリチニブ）は、1H- 1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピラジン、1-[(1S）-1-イミダゾ[1,2-a]ピリジン-6-イルエチル]-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- （CAS登録番号：1313725-88-0）である。Ｓ４９０７６は、2,4-チアゾリジンジオン、3-[[2,3-ジヒドロ-3-[[4-（4-モルホリニルメチル）-1H-ピロール-2-イル]メチレン]-2-オキソ-1H-インドール-5-イル]メチル]-（CAS登録番号：1265965-22-7）である。ＮＰＳ−１０３４は、N-（3-フルオロ-4-（3-フェニル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-4-イルオキシ）フェニル）-2-（4-フルオロフェニル）-1,5-ジメチル-3-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-ピラゾール-4-カルボキサミド（CAS登録番号：1221713-92-3）である。Ｍｅｒｅｓｔｉｎｉｂ（ＬＹ２８０１６５３）は、3-ピリジンカルボキサミド、N-[3-フルオロ-4-[[1-メチル-6-（1H-ピラゾール-4-イル）-1H-インダゾール-5-イル]オキシ]フェニル]-1-（4-フルオロフェニル）-1,2-ジヒドロ-6-メチル-2-オキソ-（CAS登録番号：1206799-15-6）である。
【００６７】
以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。本発明の趣旨を逸脱しないことを条件として、本発明の変更、例えば、本発明の構成要件の追加、削除および置換を行うことができる。
【実施例】
【００６８】
（実施例１）
胃がん細胞株に対するインビトロ細胞増殖抑制実験
ＥＧＦＲ阻害剤ＡＳＴ１３０６およびＡＺ５１０４の胃がん細胞株の増殖に与える効果を検討した。
インビトロ細胞増殖抑制実験には、以下の細胞株を使用した。
（１）びまん性胃がん細胞株
ＮＵＧＣ４（ヒューマンサイエンス振興財団研究資源バンク（大阪、日本）より入手）
ＧＣＩＹ（理化学研究所バイオソースセンター（筑波、日本）より入手）【００６９】
（２）ヒト非びまん性高分化型胃がん細胞株
ＭＫＮ７（ヒューマンサイエンス振興財団研究資源バンク（大阪、日本）より入手）
ＧＣＲ１（金沢大学がん進展制御研究所より入手）
（３）ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株
ＭＫＮ４５（ヒューマンサイエンス振興財団研究資源バンク（大阪、日本）より入手）【００７０】
また、使用したＥＧＦＲ阻害剤は以下のとおりである。
ＡＳＴ１３０６（Selleck Chemicals社より入手）
ＡＺ５１０４（Selleck Chemicals社より入手）【００７１】
５つの細胞株（ＮＵＧＣ４、ＧＣＩＹ、ＭＫＮ７、ＧＣＲ１およびＭＫＮ４５）を、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ濃度のペニシリンならびに１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ濃度のストレプトマイシン抗生剤を含む胎児ウシ血清１０％濃度のＲＰＭＩ１６４０培養液で培養継代して以下の実験に用いた。細胞は、マイコプラズマ感染の有無を定期的にMycoAlert Mycoplasma Detection kit (Lonza)を用いて検査した。【００７２】
細胞増殖測定は、Cell Counting Kit-8 (CCK-8)（同仁化学研究所，熊本，日本）を用いて行った（M. Ishiyama, et al. Talenta 44;1299:1997）。細胞を、１ウエルに５×１０４個／ｍＬの濃度で１００μＬずつ撒き、３７℃にて２４時間インキュベーター内で培養した後、３種の細胞増殖因子の何れか一つ（アンフィレグリン（ＡＰ）（R&D Systems、Minneapolis, MN）（１００ｎｇ／ｍＬ）、ヘパリン結合性ＥＧＦ様増殖因子（ＨＢ−ＥＧＦ）、および肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）（R&Dsystems）（５０ｎｇ／ｍＬ））および２種のＥＧＦＲ阻害剤の何れか一つ（ＡＺ５１０４（０．００１〜１０μＭ）およびＡＳＴ１３０６（０．００１〜１０μＭ））を各ウエルに加え、さらに３７℃７２時間インキュベーター内で培養した。なお、コントロール用のウエルには、３種の細胞増殖因子の何れか一つを加えたが、ＥＧＦＲ阻害剤は加えなかった。更に、１０μＬのＷＳＴ−８溶液を各ウエルに加え、３７℃で４時間培養した。マイクロプレートリーダー(BIO-RAD Laboratories, Inc.)を用いて、４５０ｎｍの波長で吸光度を測定した。すべて３連で、同様の実験を３度繰り返した。【００７３】
結果を図１〜３に示す。
（びまん性胃がん細胞株）
びまん性胃がん細胞株ＮＵＧＣ４およびＧＣＩＹにおける細胞増殖抑制試験の結果を図１に示す。【００７４】
びまん性胃がん細胞株のＮＵＧＣ４において、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖が観察された。びまん性胃がん細胞株のＧＣＩＹにおいて、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖が観察されたが、増幅の割合はＮＵＧＣ４に比較して少なかった。【００７５】
（１）ＡＳＴ１３０６
ＡＳＴ１３０６は、びまん性胃がん細胞株のＮＵＧＣ４において、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖を、用量依存的に抑制した。【００７６】
ＡＳＴ１３０６は、びまん性胃がん細胞株のＧＣＩＹにおいて、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖を、用量依存的に抑制した。加えてＡＳＴ１３０６は、びまん性胃がん細胞株ＧＣＩＹのベースライン細胞増殖を抑制した。【００７７】
（２）ＡＺ５１０４
ＡＺ５１０４は、びまん性胃がん細胞株のＮＵＧＣ４において、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖を、用量依存的に抑制した。【００７８】
ＡＺ５１０４は、びまん性胃がん細胞株のＧＣＩＹにおいて、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖、およびＨＧＦ誘導性細胞増殖を、用量依存的に抑制した。加えて、ＡＺ５１０４は、びまん性胃がん細胞株ＧＣＩＹのベースライン細胞増殖を抑制した。【００７９】
（非びまん性胃がん細胞株）
非びまん性胃がん細胞株ＧＣＲ−１およびＭＫＮ７における細胞増殖抑制試験の結果を図２に示す。
非びまん性胃がん細胞株のＧＣＲ−１およびＭＫＮ７において、アンフィレグリン誘導性細胞増殖およびＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖はほとんど観察されず、ＨＧＦ誘導性細胞増殖はわずかに観察された。【００８０】
（１）ＡＳＴ１３０６
ＡＳＴ１３０６は、非びまん性胃がん細胞株のＧＣＲ−１およびＭＫＮ７において、０．１または０．３μＭ以上の濃度で細胞増殖を抑制した。またＡＳＴ１３０６は、非びまん性胃がん細胞株のＧＣＲ−１およびＭＫＮ７において、０．３μＭ以上の濃度でＨＧＦ誘導性細胞増殖を抑制した。【００８１】
（２）ＡＺ５１０４
ＡＺ５１０４は、非びまん性胃がん細胞株のＧＣＲ−１およびＭＫＮ７において、０．１または０．３μＭ以上の濃度で細胞増殖を抑制した。またＡＺ５１０４は、非びまん性胃がん細胞株のＧＣＲ−１およびＭＫＮ７において、０．３μＭ以上の濃度でＨＧＦ誘導性細胞増殖を抑制した。【００８２】
（ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株）
ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株のＭＫＮ４５における細胞増殖抑制試験の結果を図３に示す。
ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株のＭＫＮ４５において、アンフィレグリン誘導性細胞増殖、ＨＢ−ＥＧＦ誘導性細胞増殖およびＨＧＦ誘導性細胞増殖はほぼ観察されなかった。
（１）ＡＳＴ１３０６
ＡＳＴ１３０６は、ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株のＭＫＮ４５において、１μＭ以上の濃度で細胞増殖を抑制した。
（２）ＡＺ５１０４
ＡＺ５１０４は、ｃＭｅｔ遺伝子増幅胃がん細胞株のＭＫＮ４５において、１μＭ以上の濃度で細胞増殖を抑制した。【００８３】
（実施例２）
線維芽細胞に対するインビトロ増殖抑制試験
ＡＺ５１０４およびＡＳＴ１３０６のヒト線維芽細胞の増殖に与える効果を検討した。
金沢医科大学腫瘍内科において樹立した正常ヒト胃線維芽細胞を、２種類の抗生物質（１００Ｕ／ｍＬ濃度のペニシリン（Life Technologies, Carlsbad, CA USA）および１００Ｕ／ｍＬ濃度のストレプトマイシン（Life Technologies, Carlsbad, CA USA））を含むＲＰＭＩ１６４０培養液（胎児ウシ血清１０％濃度）で培養継代し、実験に用いた。細胞は、マイコプラズマ感染の有無を定期的にMycoAlert Mycoplasma Detection kit (Lonza)を用いて検査した。【００８４】
細胞培養用６穴プレートを用いて、１ウエルあたりヒト線維芽細胞５．５×１０４個を含む上記と同様の２種類の抗生物質を含むＲＰＭＩ１６４０培養液（胎児ウシ血清１％濃度）２ｍＬずつ撒き、３７℃で一晩ＣＯ２インキュベーター内にて培養した後、それぞれ１μｇ／ｍＬ濃度のヒトｎｏｒｍａｌ  ＩｇＧあるいは抗ヒトＨＢ−ＥＧＦ抗体（R&D systems , Minneapolis, MN）を加え、さらに３７℃で２４時間ＣＯ２インキュベーター内で培養した。その後、ヒトＨＢ-ＥＧＦ（R&D Systems, Minneapolis, MN）は１０ｎｇ／ｍＬ濃度で、ＥＧＦ受容体阻害剤ＡＺ５１０４またはＡＳＴ１３０６は１μＭの濃度となるよう各ウエルに添加し、さらに３７℃で９６時間ＣＯ２インキュベーター内で培養した。上記処理後、０．２５％トリプシン・ＥＤＴＡ溶液（Life Technologies, Carlsbad, CA USA）で処理し、細胞をカウントした。３回同様の実験を繰り返し行った。【００８５】
結果を図４に示す。
正常ヒト胃線維芽細胞は、ＨＢ-ＥＧＦにより細胞増殖が誘導された。ＡＳＴ１３０６、ＡＺ５１０４、および抗ヒトＨＢ-ＥＧＦ抗体の何れかの投与により、ＨＢ-ＥＧＦ誘導性細胞増殖が抑制された。コントロールとして使用したヒトｎｏｒｍａｌ  ＩｇＧの投与では、ＨＢ-ＥＧＦ誘導性細胞増殖は抑制されなかった。【００８６】
（実施例３）
Ｉｎ  ｖｉｖｏ  試験
ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、およびサボリチニブ（ＨＭＰＬ−５０４、ＡＺＤ６０９４）はSelleck Chemicals社より入手した。用いた抗ＶＥＧＦ受容体２抗体は、抗マウスＶＥＧＦ受容体２抗体ＤＣ１０１（GeneTex社）である。【００８７】
Ｂａｌｂ／ｃ  ｎｕ／ｎｕマウス（６週齢）にびまん性胃がん細胞（ＮＵＧＣ４細胞）を一匹あたりリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）２００μＬに２ｘ１０６個に調整し腹腔内投与により移植した。移植後２１日目に、腹水貯留を確認し、治療を開始した。治療は、以下の８つの療法で行い、各療法で８匹のマウスを用いた。
（１）ＡＺ５１０４単剤療法：ＡＺ５１０４  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与、
（２）オシメルチニブ単剤療法：オシメルチニブ  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与、
（３）サボリチニブ単剤療法：サボリチニブ  単回用量２．５ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与、
（４）抗ＶＥＧＦ受容体２抗体単剤療法：抗ＶＥＧＦ受容体２抗体  単回用量４０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を週２回投与、
（５）ＡＺ５１０４とサボリチニブの併用療法：ＡＺ５１０４  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与とサボリチニブ  単回用量２．５ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与の組合せ、
（６）オシメルチニブとサボリチニブの併用療法：オシメルチニブ  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与とサボリチニブ  単回用量２．５ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与の組合せ、【００８８】
（７）ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法：ＡＺ５１０４  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与とサボリチニブ  単回用量２．５ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与と抗ＶＥＧＦ受容体２抗体  ４０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を週２回投与の組合せ、
（８）オシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法：オシメルチニブ  単回用量１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与、サボリチニブ  単回用量２．５ｍｇ／Ｋｇ（体重）を１日１回投与と抗ＶＥＧＦ受容体２抗体  ４０ｍｇ／Ｋｇ（体重）を週２回投与の組合せ。
ＡＺ５１０４、オシメルチニブ、およびサボリチニブは経口経路で、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体は腹腔内に投与した。
コントロール群（ビヒクル対照）には、薬剤溶解なしの溶液のみを週１回投与した。投与は４週間継続し、その後さらに４週間投与した。【００８９】
結果：コントロール群は胃がん細胞移植後５週間以内に全てのマウスが腹水形成されて死亡した。
胃がん細胞移植後１１週間後に生存していたマウスは、オシメルチニブとサボリチニブの併用療法群で３匹、ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群で２匹、オシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群で２匹、オシメルチニブ単剤療法群で２匹、ＡＺ５１０４とサボリチニブの併用療法群で１匹であった。【００９０】
胃がん細胞移植後７週間後に、ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群で７匹、オシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群で８匹のマウスが生存していたが、単剤療法群および２剤併用療法群で生存していたマウスは３匹以下であった。
胃がん細胞移植後７週間後に、ＡＺ５１０４単剤療法群では１匹、サボリチニブ単剤療法群では２匹、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体単剤療法群では３匹のマウスが生存していたが、胃がん細胞移植後１１週間経過前に全て死亡した。
胃がん細胞移植後１１週間後に生存していたマウスの数についてｔ検定を行ったところ、コントロール群に対してサボリチニブ単剤療法群は有意差がなかったが、その他の療法群、すなわちはＡＺ５１０４単剤療法群、オシメルチニブ単剤療法群、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体単剤療法群、各２剤併用療法群、及び各３剤併用療法群では有意差があった（ｐ＜０．０５）。【００９１】
図５に生存曲線を示す。生存曲線はKaplan-Meier法で作成し、生存曲線の二群間の差はlog rank検定で検定した。生存率について、コントロール群に対するlog rank検定を行った結果、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体単剤療法群、ＡＺ５１０４とサボリチニブの併用療法群、ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群、及びオシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群で、有意差があった（P<0.05）。各単剤療法群に対するlogrank検定を行った結果、ＡＺ５１０４単剤療法群、サボリチニブ単剤療法群、及び抗ＶＥＧＦ受容体２抗体単剤療法群のそれぞれに対して、各３剤併用療法群（ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群、及びオシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群）で、有意差があった（P<0.05）。特に、ＡＺ５１０４とサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群、及びオシメルチニブとサボリチニブと抗ＶＥＧＦ受容体２抗体の併用療法群において、生存率の向上が有意差をもって観察された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年9月11日(2020.9.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を含む、患者のがん性腹膜炎を有する進行したびまん性胃がんを治療するための医薬組成物。
【請求項２】
抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤との併用療法に用いるための、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
併用療法において、ＥＧＦ受容体阻害剤は、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体および／またはｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ＥＧＦ受容体阻害剤がアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）、ＡＺ５１０４、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、ポジオチニブ（ＨＭ７８１−３６Ｂ）、ダコミチニブ（ＰＦ２９９８０４、ＰＦ２９９）、ＡＥＥ７８８（ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８）、ＡＣ４８０（ＢＭＳ−５９９６２６）、ＴＡＫ−２８５、ラパチニブ（ＧＷ−５７２０１６）ジトシラートおよびラパチニブからなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、請求項１から３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＥＧＦ受容体阻害剤がＡＺ５１０４およびオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）からなる群から選択されるいずれかであるか、またはその医薬的に許容される塩である、請求項１から４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗ＶＥＧＦ受容体２抗体がラムシルマブである、請求項２から５の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ｃＭＥＴ阻害剤がサボリチニブである、請求項２から６の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記びまん性胃がんが、スキルス胃がんである、請求項１から７の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
（削除）
【請求項１０】
ＥｒｂＢ１阻害活性およびＥｒｂＢ４阻害活性を有するＥＧＦ受容体阻害剤を患者に投与する工程を含む、患者のがん性腹膜炎を有する進行したびまん性胃がんの治療方法。
【請求項１１】
前記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤を、抗ＶＥＧＦ受容体２抗体と同時投与または逐次投与することを含む、請求項１０に記載の治療方法。
【請求項１２】
前記投与する工程が、前記ＥＧＦ受容体阻害剤と抗ＶＥＧＦ受容体２抗体を、ｃＭＥＴ阻害剤と同時投与または逐次投与することを含む、請求項１１に記載の治療方法。
【国際調査報告】
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