(57)【要約】  加工適正が高く、各種製品の一成分として有用性に優れた微生物の乾燥粉末を提供する。明度５５以上及び彩度１８以下を示す、微生物の乾燥粉末と、微生物の乾燥粉末を製造する乾燥粉末の製造方法であって、微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理行うこと、前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末を得ること、を含む、製造方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
明度５５以上及び彩度１８以下を示す、微生物の乾燥粉末。
【請求項２】
明度５８以上及び彩度１８以下を示す請求項１記載の乾燥粉末。
【請求項３】
明度５８以上及び彩度１７以下を示す請求項１記載の乾燥粉末。
【請求項４】
明度６０以上及び彩度１５以下を示す請求項１記載の乾燥粉末。
【請求項５】
前記微生物が、油生産性微生物である請求項１〜請求項４のいずれか１項記載の乾燥粉末。
【請求項６】
前記微生物が、ストラメノパイル（Ｓｔｒａｍｅｎｏｐｉｌｅｓ）に属する微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物である請求項１〜請求項５のいずれか１項記載の乾燥粉末。
【請求項７】
前記微生物が、ラビリンチュラ類（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｅａ）に属する微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物である請求項１〜請求項６のいずれか１項記載の乾燥粉末。
【請求項８】
微生物の乾燥粉末を製造する乾燥粉末の製造方法であって、
微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理を行うこと、
前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末を得ること、
を含む、製造方法。
【請求項９】
更に、オートクレーブ工程を含む請求項８記載の製造方法。
【請求項１０】
前記オートクレーブ工程を前記洗浄処理の後に含む請求項９記載の製造方法。
【請求項１１】
前記洗浄処理を１回〜３回行う請求項８〜請求項１０のいずれか１項記載の製造方法。
【請求項１２】
前記微生物が、培養後の微生物であり、前記洗浄処理の前に、微生物を培養する培養工程を更に含む請求項８〜請求項１１のいずれか１項記載の製造方法。
【請求項１３】
前記微生物が、油生産性微生物である請求項８〜請求項１２のいずれか１項記載の製造方法。
【請求項１４】
請求項１〜請求項７のいずれか１項記載の乾燥粉末を含む、粉末製品。
【請求項１５】
請求項１〜請求項７のいずれか１項記載の乾燥粉末を用意すること、
用意された乾燥粉末から、微生物由来成分含有組成物を得ること、
を含む微生物由来成分含有組成物の製造方法。
【請求項１６】
請求項１５記載の製造方法により得られる微生物由来成分含有組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、微生物の乾燥粉末及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
古来より、特定の微生物には有用な成分が多く含まれていることが知られており、この有用成分は各種の用途に利用されている。微生物由来の有用成分を利用する場合には、微生物から抽出又は分離された単離成分として利用する他に、単離成分ではなく、微生物内の成分として利用されることがある。微生物内の成分として利用される形態のひとつに、微生物の乾燥粉末が挙げられる。【０００３】
微生物の乾燥粉末は、微生物個体をそのまま乾燥することによって得ることができる。乾燥粉末化した微生物は、微生物中の有用成分に応じた用途にそのまま利用可能であり、例えば、化粧品、飲食品、医薬品等の各種製品の一成分として広く使用されている。【０００４】
乾燥粉末化した微生物、すなわち、微生物の乾燥粉末は、保存性、取扱性等が高いという利点を有する。また、微生物の乾燥粉末は、液体又は、粉末などの固体状の他の成分と容易に混合可能であるため、加工性が高いという利点を有する。
このため、微生物に限らず、生物が有する有効成分を、有効に利用するため、生物の個体全体を粉末化した乾燥粉末が種々提案されている。【０００５】
例えば、特許文献１には、水溶性アルギン分及び不溶性成分を含む粉末褐藻と、この粉末褐藻を含む沈殿防止剤又は食品改良剤が開示されている。特許文献１に記載の粉末褐藻は、粉砕、洗浄及び乾燥して得られ、色の明度を示すＬ値が４５以上であると記載されている。また、特許文献１には、この粉末褐藻を含む食品改良剤を他の原料と混合して、パン類、ゲル化食品などの食品を製造することが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１３／０５４８１２号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、食品等の製品の一成分として微生物の乾燥粉末を利用するにあたり、明度の低い色又は彩度が高い色を示す乾燥粉末では、製品の色に対する印象を損なう場合がある。このような明度の低い色又は彩度が高い色を示す乾燥粉末は、培養後の微生物などから得られた乾燥粉末、特に、加熱滅菌処理を行った微生物の乾燥粉末で確認されることが多い。このような色を示す乾燥粉末では、食品等の製品の一成分として用いると、製品の色の印象を損なうことがあった。
このため、このような明度が低い又は彩度が高い色を示す乾燥粉末は、色に対する嗜好性が高い製品、例えば飲食品、パーソナルケア製品、医薬品、医薬部外品、飼料等の一成分として利用しにくく、加工適正が低い。
したがって本開示の目的は、加工適正が高く、各種製品の一成分として有用性に優れた微生物の乾燥粉末を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は以下を含む。
［１］  明度５５以上及び彩度１８以下を示す、微生物の乾燥粉末。
［２］  明度５８以上及び彩度１８以下を示す［１］に記載の乾燥粉末。
［３］  明度５８以上及び彩度１７以下を示す［１］に記載の乾燥粉末。
［４］  明度６０以上及び彩度１５以下を示す［１］に記載の乾燥粉末。
［５］  前記微生物が、油生産性微生物である［１］〜［４］のいずれか１に記載の乾燥粉末。
［６］  前記微生物が、ストラメノパイル（Ｓｔｒａｍｅｎｏｐｉｌｅｓ）に属する微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物である［１］〜［５］のいずれか１に記載の乾燥粉末。
［７］  前記微生物が、ラビリンチュラ類（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｅａ）に属する微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物である［１］〜［６］のいずれか１に記載の乾燥粉末。
［８］  微生物の乾燥粉末を製造する乾燥粉末の製造方法であって、微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理を行うこと、前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末を得ること、を含む、製造方法。
［９］  更に、オートクレーブ工程を含む［８］に記載の製造方法。
［１０］  前記オートクレーブ工程を前記洗浄処理の後に含む［９］に記載の製造方法。
［１１］  前記洗浄処理を１回〜３回行う［８］〜［１０］のいずれか１に記載の製造方法。
［１２］  前記微生物が、培養後の微生物であり、前記洗浄処理の前に、微生物を培養する培養工程を更に含む［８］〜［１１］のいずれか１に記載の製造方法。
［１３］  前記微生物が、油生産性微生物である［８］〜［１２］のいずれか１に記載の製造方法。
［１４］  ［１］〜［７］のいずれか１に記載の乾燥粉末を含む、粉末製品。
［１５］  ［１］〜［７］のいずれか１に記載の乾燥粉末を用意すること、用意された乾燥粉末から、微生物由来成分含有組成物を得ること、を含む微生物由来成分含有組成物の製造方法。
［１６］  ［１５］に記載の製造方法により得られる微生物由来成分含有組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本開示によれば、加工適正が高く、各種製品の一成分として有用性に優れた微生物の乾燥粉末を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本開示の乾燥粉末は、明度５５以上及び彩度１８以下を示す、微生物の乾燥粉末である。
本開示の乾燥粉末の製造方法は、微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理を行うこと、前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末を得ること、を含む、製造方法である。
【００１１】
本開示によれば、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末、換言すれば明るく無彩色を示す微生物乾燥粉末が提供されるので、加工適正が高く、各種製品の一成分として有用性に優れた微生物の乾燥粉末を提供することができる。
これを更に説明すれば、本開示は、微生物乾燥粉末の明度及び彩度が微生物乾燥粉末の製造工程において容易に調整可能であるとの知見に基づく。明るく無彩色の微生物乾燥粉末の印象は良好であり、特定の製品を製造する場合に他の成分と組み合わせても、製品全体の色の印象を損なわない傾向が高い。このため本乾燥粉末は、有用性に優れた微生物の乾燥粉末であり、且つ、飲食品、パーソナルケア製品、医薬品、医薬部外品、飼料等の幅広い製品の一成分として利用しやすい、すなわち、加工適正が高い。
【００１２】
本明細書において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。
本明細書において「〜」を用いて示された数値範囲は、その前後に記載される数値をそれぞれ最小値及び最大値として含む範囲を示すものとする。
【００１３】
本明細書において、混合物中の各成分の量又は含有率は、混合物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合、特に断らない限り、混合物中に存在する当該複数の物質の合計の量又は含有率を意味する。本明細書において、パーセントに関して「以下」又は「未満」との用語は、下限値を特に記載しない限り０％、即ち「含有しない」場合を含み、又は、現状の手段では検出不可の値を含む範囲を意味する。
【００１４】
本明細書において使用される「有効量」という用語は、有益な結果又は所望の結果をもたらすのに十分な組成物の量を指す。有効量は、１つ以上の投与、適用若しくは投与量で投与することが可能であり、場合によって別の物質と組み合わせることができ、特定の配合又は投与経路に限定されない量として定義することができる。
以下、本開示について説明する。
【００１５】
［乾燥粉末］
本開示に係る乾燥粉末は、微生物の乾燥粉末であって、明度５５以上及び彩度１８以下を示す。
本明細書において「微生物の乾燥粉末」とは、微生物の菌体を所定の乾燥方法に供して粉末化したものを称する。
【００１６】
乾燥粉末の明度及び彩度は、色彩色素計による値、特には、ＬＣｈ表色系に従った色彩色素計による値を意味する。色彩色素計については特に制限はなく、例えば、色彩色素計「ＣＲ−３００」（コニカミノルタ株式会社）を用いることができる。測定は、製品説明書にしたがって行うことができる。具体的には、乾燥粉末を一定の大きさ、例えば粒径１ｍｍ以下の大きさに揃えて一定の厚みに配置し、白色校正板による白色校正を行った後、測定ヘッド部を試料に垂直にあて、測定する。このとき、乾燥粉末の水分含有率が大きく変化しないように相対湿度を３０％以下とし、１５℃〜３０℃の温度条件で測定を行う。
【００１７】
ＬＣｈ表色系における明度は０〜１００の範囲を有する。明度については、０が最も低い値であって、この場合には最も暗い状態、すなわち完全な黒色を示し、１００が最も高い値であって、この場合には最も明るい状態、すなわち完全な白色を示す。ＬＣｈ表色系における彩度は０〜６０の範囲を有する。彩度については、６０が最も高い値であって、この場合には最も鮮やかな状態を示し、０が最も低い値であって、この場合には最もくすんだ状態を示す。
【００１８】
乾燥粉末の明度は、５５以上とすることができ、明度の値が高くなれば明るさが増す。例えば乾燥粉末における明度は、５８以上、６０以上、６２以上、６４以上、又は６５以上であってもよい。明度の上限値については、特に制限はない。本開示の一態様では、明度の上限値は、他の配合成分の色に対する調和の観点から、例えば７０以下、又は６８以下とすることができる。
【００１９】
乾燥粉末の彩度は、１９以下とすることができ、彩度の値が低くなれば、より無彩色（黒、白、グレー）に近くなる。例えば乾燥粉末における彩度は、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、又は１４以下であってもよい。彩度の下限値については、特に制限はない。本開示の一態様では、彩度の下限値は、他の配合成分の色空間又は色の鮮やかさに対する調和の観点から、例えば１以上、又は５以上とすることができる。
上述したような明度及び彩度を共に満たす乾燥粉末は、明るく無彩色の印象を比較的強く示すことができ、良好な印象を与えるものであり、また、加工適正に優れる。
【００２０】
乾燥粉末の色相については、特に制限はない。乾燥粉末の色相は、乾燥粉末を構成する微生物菌体に固有の色に依存する場合が多い。乾燥粉末の色相については、例えば、５５〜１２０、６０〜１１０、又は７０〜９０とすることができる。
【００２１】
本乾燥粉末における明度及び彩度は、上述した明度及び彩度の如何なる組み合わせであってもよく、例えば、本開示の各態様は以下のいずれかの乾燥粉末を含む：
（１）  明度５８以上及び彩度１８以下を示す乾燥粉末、
（２）  明度５８以上及び彩度１７以下を示す乾燥粉末、
（３）  明度６０以上及び彩度１５以下を示す乾燥粉末、及び
（４）  明度５５以上及び彩度１８以下を示す乾燥粉末。
上記（１）〜（４）の明度は、それぞれ７０以下とすることができ、これとは独立に又は組み合わせて、上記（１）〜（４）の彩度は、それぞれ１以上とすることができる。
【００２２】
上記（１）〜（４）の乾燥粉末は、いずれも明るく無彩色の乾燥粉末である。本開示の他の態様は（１）〜（４）以外の組み合わせの明度及び彩度を有するものであってもよい。
【００２３】
ＬＣｈ表色系に従った色彩色素計による明度、彩度及び色相は、他の表色系、Ｌａ＊ｂ＊系に換算することができる。
【００２４】
本開示により乾燥粉末を提供しうる微生物としては、微生物の内部に有用成分を有する微生物であれば特に制限はない。微生物としては培養可能な微生物とすることができ、培養可能な微生物であれば、天然採取後の微生物であってもよく、培養後の微生物であってもよい。これらの微生物は１種単独で用いてもよく、２種以上の組み合わせであってもよい。
適用可能な微生物としては、例えば、菌類（ｆｕｎｇｉ）に属する微生物、緑藻類（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｃｅａ）の微生物、ユーグレナ藻類（Ｅｕｇｌｅｎｉｄａ）の微生物、ＳＡＲの微生物からなる群より選択される少なくとも１種を挙げることができる。
【００２５】
菌類としては、酵母（Ｙｅａｓｔ）、糸状菌（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ  ｆｕｎｇｉ）等を挙げることができる。酵母としては、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属微生物、サッカロミケス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属微生物、クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属微生物、及びトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｎ）属微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物を挙げることができる。糸状菌としては、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属微生物、フィチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属微生物及びフィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物を挙げることができる。なかでも、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属に属する微生物が更に好ましい。モルティエレラ属に属する微生物としては、例えば、モルティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ  ｅｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ  ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ  ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ) 、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ  ａｌｐｉｎａ）を挙げることができる。
【００２６】
緑藻類の微生物としては、例えばボトリオコッカス（Ｂｏｔｒｙｏｃｏｃｃｕｓ）属、シュードコリシスティス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｏｒｉｃｙｓｔｉｓ）、イカダモ（Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓ及びＤｅｓｍｏｄｅｓｍｕｓ）に属する微生物を挙げることができる。
【００２７】
ユーグレナ藻類の微生物としては、ミドリムシ（Ｅｕｇｌｅｎａｃｅａｅ）科に属する微生物等を挙げることができる。ミドリムシ科に属する微生物としては、例えば、ミドリムシ（Ｅｕｇｌｅｎａ）属に属する微生物を挙げることができる。
【００２８】
ＳＡＲは、Ａｄｌらの提唱する分類体系（Adl et. al.,The Journal of Eukaryotic Microbiology.59(5):429-493(2012)）におけるＳＰＲを意味し、具体的には、ストラメノパイル、アルベオラータ及びリザリア（Ｒｈｉｚａｒｉａ）の微生物が該当する。なかでも、ストラメノパイルに属する微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物が好ましい。ストラメノパイルとしては、ビコソエカ類（Ｂｉｃｏｓｏｅｃｉｄａ）、ラビリンチュラ類（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｅａ）、ブラストシスチス（Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ）、無殻太陽虫（Ａｃｔｉｎｏｐｈｙｉｄａ）、オパリナ類（Ｏｐａｌｉｎａｔａ）、プラシディア類（Ｐｌａｃｉｄｉｄａ）、卵菌類（Ｏｏｍｙｃｅｔｅｓ）、サカゲツボカビ類（Ｈｙｐｈｏｃｈｙｔｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）、ヴェロパイエラ（Ｄｅｖｅｌｏｐａｙｅｌｌａ）、黄金色藻（Ｃｈｒｙｓｏｐｈｙｃｅａｅ）、真正眼点藻（Ｅｕｓｔｉｇｍａｔｏｐｈｙｃｅａｅ）、ファエオタムニオン藻（Ｐｈａｅｏｔｈａｍｎｉｏｐｈｙｃｅａｅ）、ピングイオ藻（Ｐｉｎｇｕｉｏｐｈｙｃｅａｅ）、ラフィド藻（Ｒａｐｈｉｄｏｐｈｙｃｅａｅ）、シヌラ藻（Ｓｙｎｕｒｏｐｈｙｃｅａｅ）、黄緑藻（Ｘａｎｔｅｘｙｏｐｈｙｃｅａｅ）、褐藻（Ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）、シゾクラディア藻（Ｓｃｈｉｚｏｃｌａｄｉｏｐｈｙｃｅａｅ）、クリソメリス藻（Ｃｈｒｙｓｏｍｅｒｏｐｈｙｃｅａｅ）、ディクチオカ藻（Ｄｉｃｔｙｏｃｈｏｐｈｙｃｅａｅ）、ボリド藻（Ｂｏｌｉｄｏｐｈｉｃｅａｅ）、ペラゴ藻（Ｐｅｌａｇｏｐｈｙｃｅａｅ）及び珪藻（Ｂａｃｉｌｌａｒｉｏｐｈｙｃｅａｅ）微生物からなる群より選択される少なくとも１種の微生物を挙げることができる。
【００２９】
アルベオラータとしては、繊毛虫（Ｃｉｌｉｏｐｈｏｒａ）、アピコンプレクサ（Ａｐｉｃｏｍｐｌｅｘａ）、渦鞭毛藻類（Ｄｉｎｏｆｌａｇｅｌｌａｔｅ）に属する微生物を挙げることができる。渦鞭毛藻類としては、例えばクリプテコデニィウム（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ）属に属する微生物を挙げることができる。クリプテコデニィウム属に属する微生物としては、例えば、クリプテコディニウム・コーニイ（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ  ｃｏｈｎｉｉ）を挙げることができる。
【００３０】
なかでも微生物としては、ラビリンチュラ類に属する微生物が好ましく、その中でも、ヤブレツボカビ科（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｔｒｉｄ）に属する微生物が特に好ましい。ヤブレツボカビ科に属する微生物としては、例えば、アプラノキトリウム属（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、イァポノキトリウム属（Ｊａｐｏｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、ラビリンチュロイデス属（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｏｉｄｅｓ）、シゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｙｔｒｉｕｍ）、ヤブレツボカビ属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、ウルケニア属（Ｕｌｋｅｎｉａ）、アウランティオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オブロンギキトリウム属（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）、ボトリオキトリウム属（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、パリエティキトリウム属（Ｐａｒｉｅｔｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）、シクヨイドキトリウム属（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）に属する微生物が好ましく、その中でも特に好ましくは、アウランティオキトリウム属微生物からなる群より選択された少なくとも１種の微生物を選択することができる。
【００３１】
上述した微生物は、主として油を生成可能な微生物であり、油生産性微生物として好ましく適用することができる。本開示の乾燥粉末を提供可能な微生物としては、上述した微生物以外も適用可能であり、多糖類、抗酸化物質、ペプチド、アミノ酸、ビタミンなどを生成し得る微生物を挙げることができる。例えば、アスタキサンチンを生成し得るシアノバクテリア、紅藻、褐藻、緑藻、ケイ藻、真正眼点藻等の微細藻、特に、ヘマトコッカス属に属する微細藻、及び酵母、例えばファフィア酵母；多糖類を生成し得るユーグレナ属、ブラシノコッカス属等に属する微細藻類、ペスタロチオプシス属、ペスタロチア属等に属する糸状菌；プルランを生成し得る黒酵母；マンノプロテインを生成し得る酵母なども挙げることができる。
【００３２】
前記微生物は、有用成分を微生物の一菌体内に有することができる。ここでの有用成分は、微生物の一菌体内で生産可能なものであれば特に制限はなく、アミノ酸、タンパク質、脂質、ビタミン類等を挙げることができる。本開示の一態様では、微生物は、油生産微生物とすることができる。本明細書において「油」とは主として脂肪酸で構成され、常温常圧下で水に不溶の有機物の混合物を意味する。微生物を起源とする油を本明細書では「微生物油」と称する。微生物油には、飽和又は不飽和脂肪酸、リン脂質、ステロール、グリセロール、セラミド、スフィンゴ脂質、テルペノイド、フラボノイド、トコフェロール等の油性成分が含まれ、飽和又は不飽和脂肪酸は、他の油性成分における構成脂肪酸として存在する場合もある。
【００３３】
本明細書において用語「脂肪酸」には、遊離の飽和若しくは不飽和脂肪酸それら自体だけでなく、遊離の飽和若しくは不飽和脂肪酸、飽和若しくは不飽和脂肪酸アルキルエステル、トリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、リン脂質、ステリルエステル等中に含まれる構成単位としての脂肪酸も含まれ、構成脂肪酸とも言い換えられ得る。本明細書において、特に断らない限り、脂肪酸を含む化合物の形態については省略する場合がある。脂肪酸を含む化合物の形態としては、遊離脂肪酸形態、脂肪酸アルキルエステル形態、グリセリルエステル形態、リン脂質の形態、ステリルエステル形態等を挙げることができる。同一の脂肪酸を含む化合物は、油中、単一の形態で含まれていてもよく、２つ以上の形態の混合物として含まれていてもよい。
【００３４】
微生物乾燥粉末に含まれうる有用成分としての脂肪酸としては、例えば、不飽和脂肪酸が挙げられ、中でも高度多価不飽和脂肪酸が挙げられる。本明細書における「高度多価不飽和脂肪酸」とは、炭素数２０以上の二価以上の不飽和脂肪酸を意味する。炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸としては、例えば、炭素数２０以上２２以下の多価不飽和脂肪酸を挙げることができ、具体的には、エイコサジエン酸（Ｃ２０：２，ｎ−９、ＥＤＡ）、ジホモ−γ−リノレン酸（Ｃ２０：３，ｎ−６、ＤＧＬＡ）、ミード酸（Ｃ２０：３，ｎ−９、ＭＡ）、エイコサテトラエン酸（Ｃ２０：４，ｎ−３、ＥＴＡ）、アラキドン酸（Ｃ２０：４，ｎ−６、ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５，ｎ−３、ＥＰＡ）、ドコサテトラエン酸（Ｃ２２：４，ｎ−６、ＥＴＡ）、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５，ｎ−３、ｎ−３ＤＰＡ）、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５，ｎ−６、ｎ−６ＤＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６，ｎ−３、ＤＨＡ）等を挙げることができる。
【００３５】
また、微生物乾燥粉末に含まれうる他の有用成分としては、多糖類、抗酸化物質、ペプチド、アミノ酸、ビタミン、炭化水素、及びこれらいずれかが代謝された化合物等などを挙げることができ、例えば、カロテノイド、キサントフィル、ユビキノン、イソプレノイド誘導化合物、及びこれらいずれかが代謝された化合物等を挙げることができる。
【００３６】
微生物の乾燥粉末の大きさについては特に制限はなく、粉末化する際の微生物破砕方法などによって適宜設定可能である。微生物の乾燥粉末については、一般に、３００μｍ〜２５０μｍ、２５０μｍ〜１５０μｍ、又は１５０μｍ〜２０μｍの粒径を有することができる。ここでの粒径は、篩による分類を意味する。微生物の乾燥粉末の粒度分布については、特に制限はなく、粉末化された微生物の種類などによって適宜設定可能である。
【００３７】
［乾燥粉末の製造方法］
本開示による乾燥粉末の製造方法は、微生物の乾燥粉末を製造する乾燥粉末の製造方法であって、微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理を行うこと、前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す、微生物の乾燥粉末を得ることを含み、必要に応じて他の工程を含む。
本製造方法では、所定の浸透圧の液体を用いて微生物を少なくとも１回洗浄処理を行うので、粉末化工程後に得られる乾燥粉末の明度及び彩度を所定範囲に調整することができる。
【００３８】
培養可能な微生物に対して、所定の浸透圧の液体を用いて少なくとも１回、洗浄処理を行う工程を、本明細書では、「色調整処理工程」と称する場合がある。色調整処理工程における洗浄で使用される所定の浸透圧を有する液体を、本明細書では、「処理用洗浄液」と称する場合がある。色調整処理工程後に回収された微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末を得る工程を、本明細書では、「粉末化工程」と称する場合がある。
【００３９】
色調整処理工程では、微生物に対して、該微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する液体を用いて、少なくとも１回、洗浄処理が行われる。
【００４０】
色調整処理工程に供される微生物については、特に制限はない。微生物としては培養可能な微生物とすることができ、培養可能な微生物であれば、天然採取後の微生物であってよく、培養後の微生物であってもよい。これらの微生物は１種単独で用いてもよく、２種以上の組み合わせであってもよい。
色調整処理工程に適用可能な微生物としては、例えば、菌類（ｆｕｎｇｉ）に属する微生物、緑藻類（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｃｅａ）の微生物、ユーグレナ藻類（Ｅｕｇｌｅｎｉｄａ）の微生物、及びＳＡＲの微生物からなる群より選択される少なくとも１種を挙げることができる。これらは、主として油を生成可能な微生物であり、油生産性微生物として好ましく適用することができる。更に、多糖類、抗酸化物質、ペプチド、アミノ酸、ビタミンなどを生成し得る微生物、例えば、アスタキサンチンを生成し得るシアノバクテリア、紅藻、褐藻、緑藻、ケイ藻、真正眼点藻等の微細藻、特に、ヘマトコッカス属に属する微細藻、及び酵母、例えばファフィア酵母；多糖類を生成し得るユーグレナ属、ブラシノコッカス属等に属する微細藻類、ペスタロチオプシス属、ペスタロチア属等に属する糸状菌；プルランを生成し得る黒酵母；マンノプロテインを生成し得る酵母なども挙げることができる。色調整処理工程に供されるこれらの微生物については、乾燥粉末に関する微生物として上述した事項をそのまま適用する。
【００４１】
色調整処理工程に供される微生物が培養後の微生物である場合、本開示の一態様による製造方法は、色調整処理工程の前に、微生物を培養する培養工程を更に含むことができる。
微生物の培養工程で適用される培養培地、培養条件等については、当該微生物について従来から適用されている培養培地、培養条件等をそのまま適用することができる。培養工程では、微生物を培養し、所定の培養期間後に、培養環境から微生物を回収することができる。培養環境下から微生物を回収する方法としては、当該微生物について従来から適用されている回収方法をそのまま適用することができる。例えば、液体培地中で培養されている微生物の場合には、遠心分離、濾過などの方法により、微生物を回収することができる。
【００４２】
遠心分離により微生物を回収する場合に適用される温度条件としては、例えば、５〜４０℃、１０〜３５℃、又は１５〜３０℃の温度を選択することができる。このときの遠心条件としては、例えば、６００×ｇ〜８０００×ｇ、８００×ｇ〜５０００×ｇ、又は８００×ｇ〜３０００×ｇを選択することができ、この条件による遠心を、５〜１０分間、実施することができる。微生物は、遠心分離を行った後に、上清を除去した後に得られる残渣として回収することができる。回収後の微生物は、色調整処理工程で用いられる処理用洗浄液に懸濁して、色調整処理工程に供することができる。
【００４３】
処理用洗浄液は、微生物の培養用液体培地の浸透圧よりも低い浸透圧を有する。「培養用液体培地」とは、色調整処理工程に供される微生物の培養に通常用いられるものを意味し、洗浄の対象となる微生物について実際に使用していた培養用液体培地であっても、使用していない培養用液体培地であってもよい。
培養用液体培地は、微生物の生育環境と同等又は生育に適した浸透圧を一般に有している。色調製工程における処理用洗浄液が培養用液体培地よりも低い浸透圧を備えるため、生育環境に適した浸透圧よりも低い環境に微生物が曝されて、微生物菌体の表面、場合によっては内部にまで、処理用洗浄液が作用して、乾燥粉末の明度向上及び無彩色化が生じると推測されるが、この推測に限定されない。
【００４４】
処理用洗浄液の浸透圧は、２以上の微生物を色調整処理工程に供する場合には、それぞれの微生物の培養に用いられる各液体培地の浸透圧を比較して、最も高い浸透圧よりも低い浸透圧とすることができ、又は、乾燥処理後の得られる乾燥粉末の明度及び彩度をより良好なものにするなどの観点から、最も低い浸透圧よりも低い浸透圧とすることができる。
【００４５】
本開示の一態様によれば、色調整処理工程で使用される処理用洗浄液の浸透圧は、微生物の種類に応じて、５００ｍＯｓｍ／Ｌ未満とすることができ、又は、４５０ｍＯｓｍ／Ｌ以下、１００ｍＯｓｍ／Ｌ以下、１０ｍＯｓｍ／Ｌ以下、若しくは１ｍＯｓｍ／Ｌ以下とすることができる。処理用洗浄液の浸透圧は、塩化ナトリウムの濃度から算出された値（オスモル濃度）とし、第十七改正日本薬局方、一般試験法、「２．４７．浸透圧測定法（オスモル濃度測定法）」にしたがって得られた値とする。処理用洗浄液の浸透圧の下限値は、例えば０ｍＯｓｍ／Ｌとすることができる。
【００４６】
処理用洗浄液の組成は、上述した浸透圧を満たすことができるものであれば特に制限はなく、例えば、精製水、蒸留水、希釈海水、生理食塩水を挙げることができ、精製水又は蒸留水であってもよい。
【００４７】
色調整処理工程における洗浄とは、処理用洗浄液を微生物と組み合わせて懸濁することを意味する。微生物に対して組み合わされる処理用洗浄液の量については、用いる処理用洗浄液の組成によって異なるが、基本的には制限はない。洗浄は、５℃〜３５℃、１５℃〜３０℃、又は室温（２５℃）の温度条件で実施することができる。懸濁後、微生物は、処理用洗浄液から分離することができる。分離には、例えば、遠心分離を適用することができる。遠心分離の条件としては、この用途で通常用いられる条件であればよく、例えば、６００×ｇ〜８０００×ｇ、８００×ｇ〜５０００×ｇ、又は８００×ｇ〜３０００×ｇを選択することができる。具体的には、例えば、遠心分離器を使用し、室温にて、２３００×ｇで、５〜１０分間の条件による遠心分離を適用することができる。
【００４８】
色調整処理工程における洗浄処理は、少なくとも１回行えばよく、２回以上、３回以上、又は４回以上行うことができる。得られる乾燥粉末の明度を高くする観点から、２回以上、又は３回以上行うことができる。洗浄処理の回数の上限については特に制限はない。本開示の一態様では、洗浄処理の回数の上限値は、他の配合成分の色に対する調和の観点から、例えば６回以下、５回以下、４回以下、又は３回以下とすることができる。本開示の一態様では、他の配合成分の色に調和可能な明度及び彩度を得る観点から、洗浄処理は１〜４回、１〜３回、２〜４回、又は２〜３回とすることができる。
【００４９】
色調整処理工程における洗浄処理を複数回行う場合には、処理用洗浄液の種類は同一であっても異なっていてもよい。各洗浄処理に用いられる処理用洗浄液が異なる場合には、使用する洗浄液が互いに同一の浸透圧を有する液体であってもよく、異なる浸透圧を有する液体であってもよい。
【００５０】
本製造方法は、更にオートクレーブ工程を含むことができる。本明細書におけるオートクレーブとは、湿式の常圧又は加圧下での加熱処理を意味し、オートクレーブ工程とは、このようなオートクレーブ処理を行う工程を意味する。通常、微生物乾燥粉末を食品等の製品の一成分として用いる場合には、粉末化処理の前又は後で滅菌処理を行うことがある。オートクレーブ処理は、微生物の滅菌目的のために通常用いられている条件であればよく、例えば、常温から１２１℃に昇温後、１２１℃２０分間保持する条件を適用することができる。オートクレーブ処理の条件は、滅菌目的で適用される他の条件であってもよい。微生物をオートクレーブ処理に供する際には、培養培地中の微生物をオートクレーブ処理に供してもよく、培養培地から分離した微生物を、そのまま又は他の溶液に懸濁してから、オートクレーブ処理してもよい。オートクレーブ工程を経て得られた微生物乾燥粉末は、着色する、すなわち、明度が低く且つ彩度が高くなる傾向があるが、本開示による製造方法を適用すれば、明度が高く且つ彩度が低い乾燥粉末を得ることができる。
【００５１】
オートクレーブ工程は、少なくとも１回行えばよく、例えば色調整処理工程の洗浄処理の前又は洗浄処理の後で実施することができる。本開示に一態様では、彩度を効率よく低くする観点から、オートクレーブ工程を洗浄処理の後に実施することができる。
【００５２】
本製造方法は、更に、色調整処理工程後又はオートクレーブ工程後に、微生物を回収する回収工程を含むことができる。微生物の回収方法は、この目的のために通常用いられている微生物の回収方法を適用することができる。例えば、処理用洗浄液に懸濁されている微生物の場合には、遠心分離、濾過などの方法により、微生物を回収することができる。
【００５３】
遠心分離により微生物を回収する場合に適用される温度条件としては、例えば、５〜４０℃、１０〜３５℃、又は１５〜３０℃の温度を選択することができる。このときの遠心条件としては、例えば、６００×ｇ〜８０００×ｇ、８００×ｇ〜５０００×ｇ、又は８００×ｇ〜３０００×ｇを選択することができ、この条件による遠心を、５〜１０分間、実施することができる。この場合、遠心分離を行った後に、上清を除去した後に得られる残渣として、微生物を回収することができる。回収後の微生物は、残渣として回収された状態で、又は、更に他の液体に懸濁して、他の処理に供することができる。
【００５４】
粉末化工程では、前記洗浄処理後の微生物を加熱乾燥して、明度５５以上及び彩度１８以下を示す微生物の乾燥粉末が得られる。粉末化工程で適用される加熱乾燥の方法としては、一般に、微生物を粉末化するために適用される加熱乾燥方法であればよく、例えば、６０℃〜１５０℃、７０℃〜１２０℃、又は８０℃〜１００℃の温度で、２時間〜６時間、又は３時間〜４時間、無風又は送風条件下で行うことができる。あるいは、本開示の一態様では、減圧乾燥、凍結乾燥等を用いてもよい。
得られた乾燥粉末は、上述した乾燥条件で得られる水分含有量を有することができる。本開示の一態様における乾燥粉末の水分含有量は、１５重量％以下、例えば、１０重量％以下であってもよい。乾燥粉末の水分含有量は、第十七改正日本薬局方、一般試験法、「２．４８．水分測定法（カールフィッシャー法）」にしたがって測定することができる。
【００５５】
本開示の一形態に係る微生物の乾燥粉末の製造方法は、粉末化工程後に他の工程を含むことができる。追加可能な他の任意の工程としては、乾燥粉末を回収する工程、回収された乾燥粉末に対してオートクレーブ処理を行うオートクレーブ工程等を挙げることができる。
【００５６】
本開示に係る乾燥粉末は、微生物に含まれる有用な成分を乾燥粉末として保持することができる。したがって、本開示に係る微生物乾燥粉末及びその製造方法は、微生物乾燥粉末に含まれる有用な微生物由来成分を、利用する場合、保存する場合、活用する場合などに、特に有用である。本開示に係る乾燥粉末は、水などの液状の担体と適当な重量比で組み合わせて再構成し、微生物由来成分を含む液状の再構成組成物としてもよい。得られた再構成組成物は、特定の製品として、また特定製品中の一成分として利用することができる。
【００５７】
［用途］
本開示の一態様は、上述した微生物の乾燥粉末を含む粉末製品を提供することができる。
本開示に係る微生物乾燥粉末は、所定の明度及び彩度を有し、明るく無彩色の微生物乾燥粉末であるため、本粉末製品は、製品全体の色の印象を損なわずに微生物の乾燥粉末を含むことができる。
【００５８】
本開示による微生物の乾燥粉末を含む粉末製品としては、飲食品、パーソナルケア製品、医薬品、医薬部外品、飼料等の各種製品を挙げることができる。
また、本開示による粉末製品は、更に、水などの液状の担体と適当な重量比で混合して、液状の製品としてもよく、液状の製品とした後に更に固形化して固形の製品としてもよい。
【００５９】
飲食品としては、アイスクリーム、アイスミルク、氷菓等の冷菓類；乳飲料、乳酸菌飲料、清涼飲料、炭酸飲料、スポーツ飲料、サプリメント飲料等の飲料類；プリン類、ゼリー、ババロア及びヨーグルト等のデザート類；ガム、チョコレート、ソフトキャンディー、ハードビスケット、クッキー等の菓子類；スープ類；ハム、ソーセージ、焼き豚等の畜肉加工品；魚肉ハム、魚肉ソーセージ、魚肉すり身、蒲鉾等の水産練り製品；バター、マーガリン、チーズ等の酪農油脂製品類などを挙げることができる。
【００６０】
パーソナルケア製品としては、ローション、乳液、クリーム等のスキンケア化粧料、口紅、日焼け止め化粧料、メークアップ化粧料などの化粧品、固形石けん、液体石けん、シャンプー、コンディショナー等を挙げることができる。医薬品としては各種錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、トローチ剤、うがい薬等を挙げることができる。医薬部外品としては歯磨き剤、口中清涼剤、口臭予防剤等を挙げることができる。飼料としてはキャットフードやドッグフード等の各種ペットフード、観賞魚又は養殖魚の餌、家禽等の家畜類の餌等を挙げることができる。
【００６１】
本開示による粉末製品は、上述した微生物乾燥粉末を、製品の種類や目的などに応じた配合量で含むことができ、製品１００重量％における微生物乾燥粉末の配合量は、特に制限されず、通常０．０１〜１０重量％の範囲から、又はそれ以外の範囲から、適宜選択することができる。
【００６２】
本開示による粉末製品は、担体成分を含むことができる。担体成分は、固定成分及び液体成分のいずれであってもよく、医薬として許容可能な担体成分、飲食品として許容可能な担体、化粧品として許容可能な担体、飼料として許容可能な担体など、製品の用途に応じて適宜選択することができる。
【００６３】
本開示による粉末製品は、必要に応じて、各種用途で通常用いられる各種添加剤を含むことができる。各種添加剤としては、賦刑剤、結合剤、防腐剤、安定剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味剤等を挙げることができる。
【００６４】
本開示による粉末製品は、上述した乾燥粉末を得ること、得られた乾燥粉末を、担体成分を配合して、粉末製品を得ることを含む製造方法により得ることができる。本製造方法は、更に各種添加剤を乾燥粉末に配合する工程を含んでもよい。
本開示に係る微生物乾燥粉末は、所定の明度及び彩度を有し、明るく無彩色の微生物乾燥粉末であるため、製品全体の色の印象を損なわずに、微生物が有する有用成分を含む粉末製品を得ることができる。
【００６５】
粉末製品の製造方法は、更に、乾燥粉末を製剤化する工程を含むことができる。製剤化する方法としては、液体化、ペレット化、カプセル化、錠剤化等を挙げることができる。これらの製剤化のために必要な処理及び方法は、当業者には公知である。
【００６６】
本開示による粉末製品は、各用途に応じた使用量又は有効量で使用することができる。例えば、医薬用途の場合には、微生物由来成分の種類、投与形態、投与の目的、投与対象者の状況、例えば性別、年齢、体重等によって、使用量又は有効量を適宜設定することができる。
【００６７】
本開示の一態様では、例えば、微生物由来成分を、脂肪酸、例えばドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）とし、成人に対して経口投与の場合には、有効量を、構造脂質としてのＤＨＡの総量として、１日あたり０．０１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜２ｇ、更に好ましくは１ｍｇ〜２００ｍｇの範囲で、また非経口投与の場合、構造脂質としてのＤＨＡの総量として、１日あたり０．００１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜２００ｍｇ、更に好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇの範囲で適宜調節することができる。
【００６８】
本開示による乾燥粉末は、微生物中に含まれる有用な成分、すなわち、微生物由来成分を保持しているので、微生物由来成分を所定の期間にわたって保存すること等に有用である。
【００６９】
本開示の一態様による微生物由来成分含有組成物の製造方法は、上述した微生物の乾燥粉末を用意すること、用意された乾燥粉末から、微生物由来成分含有組成物を得ることを含む。本明細書において、上述した微生物の乾燥粉末を用意する工程を、単に、乾燥粉末取得工程と称する場合があり、用意された乾燥粉末から、微生物由来成分含有組成物を得る工程を、単に分離工程と称する場合がある。
本製造方法によれば、微生物中の有用成分を微生物由来成分含有組成物として、上述した微生物の乾燥粉末から得ることができる。
【００７０】
乾燥粉末取得工程では、上述した微生物の乾燥粉末の製造方法によって微生物の乾燥粉末が得られる。乾燥粉末の製造方法について記述した事項をそのまま適用することができる。
【００７１】
分離工程では、乾燥粉末取得工程で得られた乾燥粉末から、微生物由来成分を分離して、微生物由来成分含有組成物が得られる。微生物由来成分の分離方法は、分離対象となる微生物由来成分の種類によって、物理的に又は化学的に適宜選択可能である。例えば、抽出溶媒等を用いて微生物由来成分を抽出する方法、ガスクロマトグラフィー等のクロマトグラフィーを用いて分離する方法などを挙げることができる。
【００７２】
得られる微生物由来成分としては、特に制限はなく、上述したように、アミノ酸、タンパク質、脂質、ビタミン類等を挙げることができる。微生物由来成分含有組成物は、微生物由来成分を単独で又は複数の組み合わせとして含み、必要に応じて他の担体成分を含む組成物を意味する。微生物由来成分含有組成物に含まれうる担体成分としては、固体成分であってもよく、液体成分であってもよい。
【００７３】
例えば、微生物として油生産性微生物を用いた場合には、微生物由来成分を含む油、すなわち微生物油を得ることができる。微生物油は、単数又は複数の脂肪酸を含み得る脂肪酸含有組成物である。得られた脂肪酸含有組成物は、微生物中に含まれる有用な脂肪酸成分を含むため、脂肪酸の機能性に基づいた種々の用途、例えば、飲食品、医薬品、医薬部外品、パーソナルケア製品、飼料等に用いることができる。
【実施例】
【００７４】
以下、本開示を実施例にて詳細に説明する。しかしながら、本発明はそれらに何ら限定されるものではない。なお、特に断りのない限り、「部」又は「％」は質量基準である。【００７５】
［実施例１〜６］
（１）微生物の培養
未同定ヤブレツボカビ科であるスラウストキトリウム属（Thraustochytrim sp.）ＡＲ２−１  ＡＢ８１０９５９の類縁種である「ＳＥＫ  ７０４  ＡＢ９７３５６０株」（Aquat. Microb. Ecol., 2015, Vol.74, pp.187-204）を、独立行政法人製品評価技術基盤機構  バイオテクノロジーセンターより入手し、後述する５０％人工海水に懸濁後、この微生物懸濁液０．１ｍｌを、以下の組成のヤブレツボカビ用液体培地（４６９ｍＯｓｍ／Ｌ）１００ｍｌを含有する無菌の５００ｍｌひだ付き振盪フラスコ中に接種した。培養器には、Ｂｉｏ−Ｓｈａｋｅｒ  ＢＲ−３００ＬＦ（タイテック株式会社）を使用し、このフラスコを２〜３日間、２８℃、１２０ｒｐｍで振とうした。得られた細胞懸濁液を、ジャーファメンターに植菌するための前培養液とした。【００７６】
【表１】
2019151452.tif 000002
【００７７】
【表２】
2019151452.tif 000003
【００７８】
【表３】
2019151452.tif 000004
【００７９】
３０ｇのグルコース、１０ｇの酵母エキス、１５ｇのＮａＣｌ、０．３５ｇのＫＣｌ、５．４ｇのＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ、２．７ｇのＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．５ｇのＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、１．０ｍＬのビタミン溶液、１．０ｍＬの金属塩溶液を含み１．０Ｌに調製した培地を１Ｌ容量の発酵槽に０．５Ｌを入れ、そこに１％量（ｖ／ｖ）の前培養液を植菌した。【００８０】
培養温度２０℃、２６℃又は３２℃、撹拌速度６００ｒｐｍ、通気量１ｖｖｍ、庫内ゲージ圧０ＭＰａ、ｐＨ６．８±０．２の条件で、１〜４日間培養を行った。培養中、多量の発泡が生じた場合は、適宜、発泡抑制剤を添加した。発泡抑制剤としては、大豆油、ＫＭ−７２Ｆ等が使用できる。【００８１】
（２）色調整処理工程及び粉末化工程
培養後の培養細胞懸濁液４０ｍＬを、秤量した５０ｍＬ遠心チューブに採取した。遠心チューブに採取された微生物を、それぞれ微生物試料Ａ〜Ｆとした。各微生物試料に対して、表５に示す順序で、以下の各工程を行った。【００８２】
なお、表５では、表左側から右側に向かって処理を時系列で示し、チェックマークは、表に示す段階における当該処理を実施したことを意味する。表５中、「−」は、表に示す段階における当該処理を実施しなかったことを意味する。表５中、「＊」は、表に示す段階における当該処理の実施が不明であることを示す。表５中、「ＡＣ」はオートクレーブ工程を意味する。表５中、「ＤＷ」は精製水を意味する。【００８３】
＜遠心分離工程＞
微生物試料を含む遠心チューブについて、微量高速冷却遠心機を用いて、室温で、５０００ｒｐｍ（２３００×ｇ）５分間の遠心分離を行った。微量高速冷却遠心機としては、「ＭＸ−３００」（株式会社トミー精工）を使用した。
なお、遠心分離工程後の粉末化工程を実施する場合には、遠心分離を行って上清を除去し、得られた残渣としての微生物試料を続けて、粉末化工程に用いた。【００８４】
＜洗浄工程＞
遠心分離工程後の微生物試料を含む遠心チューブについて、上清を廃棄し、上清廃棄後の残渣に対して、処理用洗浄液４０ｍＬを添加し、軽く懸濁した。洗浄工程を繰り返し実施する場合には、処理用洗浄液に微生物試料を懸濁した後に、遠心分離工程での条件と同じ条件で遠心分離を行って上清を除去し、残渣に対して処理用洗浄液を添加した。実施例１〜実施例６で使用した処理用洗浄液は、精製水（浸透圧：０ｍＯｓｍ／Ｌ）であった。【００８５】
＜オートクレーブ工程＞
微生物試料を含む遠心チューブをオートクレーブ（ＬＳＸ−７００、株式会社トミー精工）に入れ、１２１℃まで昇温させ、１２１℃に到達後２０分間の保持時間として、オートクレーブ処理を行った。
なお、遠心分離工程後にオートクレーブ工程を実施する場合には、上清除去後の残渣としての微生物試料に対してオートクレーブ処理を実施し、洗浄処理工程後に続けてオートクレーブ工程を実施する場合には、処理用洗浄液に懸濁された微生物試料に対してオートクレーブ処理を実施した。【００８６】
＜粉末化工程＞
微生物試料を含む遠心チューブを、１０５℃で３時間、加熱乾燥させ、乾燥粉末を得る。加熱乾燥には、送風低温乾燥機（東京理化器械株式会社）を使用した。得られた乾燥粉末の水分含有量は、１５重量％以下である。【００８７】
＜測定＞
微生物の乾燥粉末０．５ｇ〜１．０ｇを透明袋（「ユニパック（登録商標）」０．０４タイプ  Ｂ−４、チャック下８５ｍｍ×袋巾６０ｍｍ×厚み０．０４ｍｍ、株式会社生産日本社）に入れた。微生物の乾燥粉末の粒が１ｍｍ以上の大きい塊である場合には、つぶして均一化した。その後、袋内で約１ｍｍの厚みの層となるように乾燥粉末を集めて測定試料とし、袋の上から色彩色差計ＣＲ−３００の測定ヘッド部を試料に垂直にあて、色彩色差を測定した。
なお試料測定前には、白色校正板による校正チャンネル００の校正を行った。また測定温度は、室温下（２０〜２５℃）及び相対湿度２０％〜３０％で行った。結果を表５に示す。【００８８】
［比較例１〜５］
培養後に遠心チューブに採取した微生物を、それぞれ微生物試料Ｇ〜Ｈとし、実施例１〜６と同様に、表５に示す順序に従って、各工程を実施し、乾燥粉末を得た。得られた乾燥粉末の明度及び彩度を、実施例１〜６と同様にして測定した。結果を表５に示す。【００８９】
ただし比較例３及び４では、処理用洗浄液として蒸留水の代わりに、表４に示すＨｅｒｂｓｔ処方物と精製水との体積比１：１溶液（以下、「５０％人工海水」と称する）を使用した。この５０％人工海水の浸透圧は、４６９ｍＯｓｍ／Ｌであり、この浸透圧は、ヤブレツボカビ用液体培地の浸透圧と同値である。【００９０】
【表４】
2019151452.tif 000005
【００９１】
比較例５では、処理用洗浄液として精製水の代わりに、３重量％のグリセロール、１重量％の酵母エキス、５０％人工海水を含有する液体（以下、「培地成分」と称する）を用いた。この培地成分の浸透圧は、４６９ｍＯｓｍ／Ｌであった。【００９２】
［比較例６］
シドキトリウムの粉末、「バイオクロミス  パウダー」（クロレラ工業株式会社）を入手して、微生物試料Ｌとし、実施例１と同様に、明度及び彩度を実施例１と同様に測定した。結果を表５に示す。なお、表５中、「＊」は不明であることを意味する。【００９３】
【表５】
2019151452.tif 000006
【００９４】
表５に示されるように、処理用洗浄液として精製水を用いた微生物試料Ａ〜Ｆは、洗浄処理を行わない、又は培地成分と同じ浸透圧、４６９ｍＯｓｍ／Ｌの処理用洗浄液を用いた微生物試料Ｇ〜Ｋと比較して、乾燥粉末としたときの明度及び彩度のバランスが良好で、特に、彩度が有意に低くなることがわかった。したがって、微生物試料Ａ〜Ｆは、乾燥粉末として、明度が比較的高く、且つ無彩色に近いことから、粉末製品の一成分として使用しやすく、加工適正に優れることは明らかである。
これに対して、微生物の乾燥粉末の市販品である比較例６の微生物試料Ｌは、明度が７０を超える程に高い一方で、彩度も３７．２と顕著に高く、黄色方向に濃く鮮やかな色を示すものであった。この微生物試料Ｌを、粉末製品に一成分として他の配合成分と混合した場合、黄色方向に濃く鮮やかな色が他の成分との一体感を損なう可能性がある。【００９５】
また、実施例１、４〜６に示されるように、処理用洗浄液として浸透圧４５０ｍＯｓｍ／Ｌ以下の精製水を用いた場合、洗浄の回数を増やすことによって、明度及び彩度を調整可能であることがわかる。特に明度については、洗浄の回数を増やすことによって、得られた乾燥粉末はより高い明度を示すことがわかった。微生物試料Ａ〜Ｆの乾燥粉末を１月保管したところ、明度、彩度は変わらなかった。【００９６】
このように本開示の係る乾燥粉末は、加工適正が高く、各種製品の一成分として有用性に優れた微生物の乾燥粉末であることがわかる。
またこのような乾燥粉末を用いることによって、微生物由来成分を含む有用性に優れた粉末製品を提供することができることがわかる。
【国際調査報告】
2019151452.tif 000007
2019151452.tif 000008
2019151452.tif 000009
2019151452.tif 000010