(57)【要約】  口腔内の歯周病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、菌叢バランスを改善する口腔内菌叢改善剤及びこれを含有する口腔用組成物を提供する。  （Ａ）スペルミン、スペルミジン、シアル酸及びラクトフェリンから選ばれる１種以上と、（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上とを含有する口腔内菌叢改善剤、及びこれを有効成分として含有する口腔用組成物。  （Ａ）成分としてスペルミン、スペルミジン及びシアル酸から選ばれる１種以上と上記（Ｂ）成分とを含有する口腔用組成物、（Ａ）成分としてラクトフェリンと、（Ｂ）成分として（Ｂ−３）シアル酸含有二糖とを含有する口腔用組成物、（Ａ）成分としてラクトフェリンと、（Ｂ）成分として（Ｂ−１）ラクチュロース及びオリゴ糖から選ばれる１種以上とを含有する口腔用組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）スペルミン、スペルミジン、シアル酸及びラクトフェリンから選ばれる１種以上と、
（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上と
を含有する口腔内菌叢改善剤。
【請求項２】
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖及びラフィノースから選ばれる請求項１記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項３】
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる請求項２記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項４】
（Ａ）成分のシアル酸が、Ｎ−アセチルノイラミン酸である請求項１〜３のいずれか１項記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項５】
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、（Ａ−１）／（Ｂ）が質量比として０．０００５〜２であり、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、（Ａ−２）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜１であり、（Ａ−３）ラクトフェリンを含有する場合、（Ａ−３）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜６である請求項１〜４のいずれか１項記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項６】
（Ａ）成分が、スペルミン、スペルミジン及びシアル酸から選ばれる請求項１〜５のいずれか１項記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項７】
口腔内の病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比を改善する請求項１〜６のいずれか１項記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項８】
口腔内の病原性細菌が、フゾバクテリウム  ヌクレアタム、プレボテラ  インターメディア及びポルフィロモナス  ジンジバリスから選ばれる１種以上である請求項７記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項９】
非病原性細菌が、ストレプトコッカス属細菌及びアクチノマイセス  ビスコーサスから選ばれる１種以上である請求項７又は８記載の口腔内菌叢改善剤。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項記載の口腔内菌叢改善剤を有効成分として含有する口腔用組成物。
【請求項１１】
（Ａ）成分としてスペルミン、スペルミジン及びシアル酸から選ばれる１種以上と、
（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上と
を含有する口腔用組成物。
【請求項１２】
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖及びラフィノースから選ばれる請求項１１記載の口腔用組成物。
【請求項１３】
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる請求項１２記載の口腔用組成物。
【請求項１４】
（Ａ）成分のシアル酸が、Ｎ−アセチルノイラミン酸である請求項１１〜１３のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項１５】
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、（Ａ−１）／（Ｂ）が質量比として０．０００５〜２であり、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、（Ａ−２）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜１である請求項１１〜１４のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項１６】
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、その含有量が０．００１〜１質量％、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、その含有量が０．０１〜１質量％であり、（Ｂ）成分の含有量が０．１〜１０質量％である請求項１１〜１５のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項１７】
（Ａ）成分として（Ａ−３）ラクトフェリンと、
（Ｂ）成分として（Ｂ−３）シアル酸含有二糖
を含有する口腔用組成物。
【請求項１８】
（Ａ−３）ラクトフェリンの含有量が０．０１〜１０質量％であり、（Ｂ−３）シアル酸含有二糖の含有量が０．１〜１０質量％である請求項１７記載の口腔用組成物。
【請求項１９】
（Ａ）成分として（Ａ−３）ラクトフェリンと、
（Ｂ）成分として（Ｂ−１）ラクチュロース及び（Ｂ−２）オリゴ糖から選ばれる１種以上と
を含有し、（Ａ−３）ラクトフェリンの含有量が０．０１〜１０質量％である口腔用組成物。
【請求項２０】
（Ｂ−１）ラクチュロース及び（Ｂ−２）オリゴ糖から選ばれる成分の含有量が０．１〜１０質量％である請求項１９記載の口腔用組成物。
【請求項２１】
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖である請求項１９又は２０記載の口腔用組成物。
【請求項２２】
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる請求項２１記載の口腔用組成物。
【請求項２３】
（Ａ−３）／（Ｂ）が、質量比として０．００５〜６である請求項１７〜２２のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項２４】
歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用製剤である請求項１１〜２３のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項２５】
チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルム、トローチ及び飲料から選ばれる飲食品製剤である請求項１１〜２３のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【請求項２６】
口腔内の病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比を改善する菌叢改善用である請求項１１〜２５のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、口腔内の病原性細菌の生育を抑制し、かつ非病原性細菌の生育を促進し、菌叢バランスを改善する口腔内菌叢改善剤及びこれを含有する口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの口腔内には様々な細菌が共生しており、細菌叢と呼ばれる細菌集団を形成している。この細菌叢には、いわゆる非病原性の常在菌と、病原性を示す細菌とが混在しているが、通常は細菌叢のバランスが保たれている、いわゆる健康な状態であり、病原性細菌を原因とする疾患は抑制されている。【０００３】
しかし、食生活や抗生剤の摂取、ストレス、加齢、清掃不良などが原因となって細菌叢のバランスが崩れると、病原性を有する病原菌や日和見感染菌が増加し疾患となる。このため、疾患の制御には、病原性細菌を抑制するだけではなく、非病原性の常在菌との細菌叢バランスを健康な状態に保つことが重要である。【０００４】
口腔内に生育する数百種類もの細菌の中で、病原性を示す細菌は、歯周病や口臭の原因菌であるポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ  インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、フゾバクテリウム  ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、う蝕の原因菌であるストレプトコッカス  ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）を代表とする数種類の細菌に過ぎない。残りのほとんどは、通常、ヒトへの病原性を示さないストレプトコッカス  ゴルドニアイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ）、ストレプトコッカス  ミティス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ）、ストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）を代表とするミティス（Ｍｉｔｉｓ）グループなどのストレプトコッカス（連鎖球菌）属細菌や、ナイセリア  サブフラバ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｕｂｆｌａｂａ）等のナイセリア属細菌、アクチノマイセス  ビスコーサス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｓｃｏｓｕｓ）等のアクチノマイセス属細菌等の非病原性の常在菌である。
従って、口腔疾患の予防には、口腔内において、これら非病原性の常在菌からなる細菌叢をバランス良く健康な状態に維持、形成することが重要となる。【０００５】
しかしながら、口腔用組成物において、病原性細菌に対する殺菌力に優れたものは数多く報告されている一方で、上記のように非病原性細菌に着目し、口腔内細菌叢のバランス制御効果に優れたものは数少ない。プレバイオティクスに着目し、特定乳酸菌を有効成分とする口腔疾患の予防又は治療剤（特許文献１：特許第５９８２３７６号公報）、シソ属植物を含む植物等によるプレバイオティクス技術（特許文献２：特許第６２３５１３８号公報）、カフェインを用いて口腔細菌叢を改善する技術（特許文献３；特開２０１２−７７０５３号公報）等が提案されているが、これら技術による効果は、口腔内細菌叢のバランス制御の点では十分ではなかった。
また、口腔内細菌叢のバランス保持に関する技術として、プテロスチルベンや、カンカニクジュヨウ等の植物抽出物を用いた口腔用抗菌剤（特許文献４、５：特開２０１７−８１８３１号公報、特開２０１６−１１３４６０号公報）、ヤマブシタケ等のキノコの乾燥粉末又はその抽出物を用いた口腔内の菌叢改善剤（特許文献６：国際公開第２０１６／０４３１０３号）が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第５９８２３７６号公報
【特許文献２】特許第６２３５１３８号公報
【特許文献３】特開２０１２−７７０５３号公報
【特許文献４】特開２０１７−８１８３１号公報
【特許文献５】特開２０１６−１１３４６０号公報
【特許文献６】国際公開第２０１６／０４３１０３号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、口腔内の病原性細菌、特に歯周病や口臭の原因となる病原性細菌の生育を抑制し、かつ非病原性細菌の生育を促進し、菌叢バランスを改善する口腔内菌叢改善剤及びこれを含有する口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を行った結果、スペルミン、スペルミジン、シアル酸又はラクトフェリンと、特定の糖類とを併用すると、口腔内の病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、口腔内の細菌叢バランスを非病原性の常在菌主体に改善する優れた菌叢改善作用を奏すること、更に、上記併用系を口腔内菌叢改善の有効成分として口腔用組成物に配合することで、優れた菌叢改善効果を付与できることを見出し、本発明をなすに至った。【０００９】
本発明では、（Ａ）スペルミン、スペルミジン、シアル酸及びラクトフェリンから選ばれる１種以上と、（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上の糖類とを併用すると、（Ａ）成分が、口腔内の非病原性細菌の生育を抑制することなく病原性細菌の生育を選択的に抑制し、同時に（Ｂ）成分が、病原性細菌の生育を促進することなく非病原性常在菌の生育を選択的に促進するという、特異的な作用を奏した。この場合、（Ａ）及び（Ｂ）成分の併用系によって、病原性細菌であるフゾバクテリウム  ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、プレボテラ  インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、ポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）の生育を選択的に抑制し、口腔内に常在する非病原性細菌、特にストレプトコッカス  ゴルドニアイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ）等のストレプトコッカス属細菌、アクチノマイセス  ビスコーサス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｓｃｏｓｕｓ）の生育を選択的に促進し、これにより、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比のバランスを非病原性細菌主体に改善することができた。従って、本発明によれば、口腔内の細菌叢を非病原性の常在菌主体に改善することで、歯周病や口臭を予防することができる。
後述の比較例にも示すように（Ａ）成分には菌叢改善効果がほとんど認められず、（Ｂ）成分にも菌叢改善効果がほとんど認められなかったが、本発明では、（Ａ）及び（Ｂ）成分を併用すると、非病原性細菌の存在割合が増えて細菌構成比を改善する優れた菌叢改善効果を奏し、格別顕著な作用効果を特異的に付与することができた（後述の実施例参照）。【００１０】
従って、本発明は、下記の口腔内菌叢改善剤及び口腔用組成物を提供する。
〔１〕
（Ａ）スペルミン、スペルミジン、シアル酸及びラクトフェリンから選ばれる１種以上と、
（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上と
を含有する口腔内菌叢改善剤。
〔２〕
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖及びラフィノースから選ばれる〔１〕に記載の口腔内菌叢改善剤。
〔３〕
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる〔２〕に記載の口腔内菌叢改善剤。
〔４〕
（Ａ）成分のシアル酸が、Ｎ−アセチルノイラミン酸である〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の口腔内菌叢改善剤。
〔５〕
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、（Ａ−１）／（Ｂ）が質量比として０．０００５〜２であり、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、（Ａ−２）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜１であり、（Ａ−３）ラクトフェリンを含有する場合、（Ａ−３）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜６である〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の口腔内菌叢改善剤。
〔６〕
（Ａ）成分が、スペルミン、スペルミジン及びシアル酸から選ばれる〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の口腔内菌叢改善剤。
〔７〕
口腔内の病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比を改善する〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の口腔内菌叢改善剤。
〔８〕
口腔内の病原性細菌が、フゾバクテリウム  ヌクレアタム、プレボテラ  インターメディア及びポルフィロモナス  ジンジバリスから選ばれる１種以上である〔７〕に記載の口腔内菌叢改善剤。
〔９〕
非病原性細菌が、ストレプトコッカス属細菌及びアクチノマイセス  ビスコーサスから選ばれる１種以上である〔７〕又は〔８〕に記載の口腔内菌叢改善剤。
〔１０〕
〔１〕〜〔９〕のいずれかに記載の口腔内菌叢改善剤を有効成分として含有する口腔用組成物。
〔１１〕
（Ａ）成分としてスペルミン、スペルミジン及びシアル酸から選ばれる１種以上と、
（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上と
を含有する口腔用組成物。
〔１２〕
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖及びラフィノースから選ばれる〔１１〕に記載の口腔用組成物。
〔１３〕
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる〔１２〕に記載の口腔用組成物。
〔１４〕
（Ａ）成分のシアル酸が、Ｎ−アセチルノイラミン酸である〔１１〕〜〔１３〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔１５〕
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、（Ａ−１）／（Ｂ）が質量比として０．０００５〜２であり、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、（Ａ−２）／（Ｂ）が質量比として０．００５〜１である〔１１〕〜〔１４〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔１６〕
（Ａ）成分として、（Ａ−１）スペルミン及びスペルミジンから選ばれる１種以上を含有する場合、その含有量が０．００１〜１質量％、（Ａ−２）シアル酸を含有する場合、その含有量が０．０１〜１質量％であり、（Ｂ）成分の含有量が０．１〜１０質量％である〔１１〕〜〔１５〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔１７〕
（Ａ）成分として（Ａ−３）ラクトフェリンと、
（Ｂ）成分として（Ｂ−３）シアル酸含有二糖
を含有する口腔用組成物。
〔１８〕
（Ａ−３）ラクトフェリンの含有量が０．０１〜１０質量％であり、（Ｂ−３）シアル酸含有二糖の含有量が０．１〜１０質量％である〔１７〕に記載の口腔用組成物。
〔１９〕
（Ａ）成分として（Ａ−３）ラクトフェリンと、
（Ｂ）成分として（Ｂ−１）ラクチュロース及び（Ｂ−２）オリゴ糖から選ばれる１種以上と
を含有し、（Ａ−３）ラクトフェリンの含有量が０．０１〜１０質量％である口腔用組成物。
〔２０〕
（Ｂ−１）ラクチュロース及び（Ｂ−２）オリゴ糖から選ばれる成分の含有量が０．１〜１０質量％である〔１９〕に記載の口腔用組成物。
〔２１〕
オリゴ糖が、ミルクオリゴ糖である〔１９〕又は〔２０〕に記載の口腔用組成物。
〔２２〕
ミルクオリゴ糖が、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース及びラクト−Ｎ−フコペンタオースＩから選ばれる〔２１〕に記載の口腔用組成物。
〔２３〕
（Ａ−３）／（Ｂ）が、質量比として０．００５〜６である〔１７〕〜〔２２〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔２４〕
歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用製剤である〔１１〕〜〔２３〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔２５〕
チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルム、トローチ及び飲料から選ばれる飲食品製剤である〔１１〕〜〔２３〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
〔２６〕
口腔内の病原性細菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比を改善する菌叢改善用である〔１１〕〜〔２５〕のいずれかに記載の口腔用組成物。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、口腔内の病原性細菌、特に歯周病と口臭の原因菌の生育を選択的に抑制し、かつ非病原性細菌の生育を選択的に促進し、菌叢バランスを改善する口腔内菌叢改善剤及びこれを含有する口腔用組成物を提供できる。この口腔用組成物は、歯周病と口臭の予防又は抑制用として好適に使用し得る。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明につき更に詳述する。本発明の口腔内菌叢改善剤は、（Ａ）スペルミン、スペルミジン、シアル酸及びラクトフェリンから選ばれる１種以上と、（Ｂ）ラクチュロース、オリゴ糖及びシアル酸含有二糖から選ばれる１種以上とからなり、上記（Ａ）及び（Ｂ）成分が、口腔内菌叢改善の有効成分である。この場合、（Ａ）成分は口腔内の病原性細菌、特に歯周病や口臭の原因となる病原性細菌の生育を選択的に抑制し、（Ｂ）成分は非病原性細菌の生育を選択的に促進することで、非病原性細菌の存在割合を増やして細菌構成比を改善する作用を奏する。
ここで、口腔内菌叢改善とは、処置後の口腔内の非病原性細菌（常在菌）の存在割合が処置前よりも増えており、常在菌主体の健康的な状態のバランスに改善していることである。
【００１３】
＜（Ａ）成分＞
（Ａ）成分は、スペルミン、スペルミジン、シアル酸、ラクトフェリンから選ばれる１種又は２種以上である。（Ａ）成分としては、特に口腔内菌叢改善の点で、シアル酸、ラクトフェリンが好ましく、シアル酸が特に好ましい。
（Ａ）成分は、口腔内の非病原性細菌（常在菌）の生育を抑制することなく、病原性細菌の生育を抑制する選択的な生育抑制作用を奏する。病原性細菌としては、歯周病や口臭の原因となる細菌が挙げられ、例えば、フゾバクテリウム  ヌクレアタム、プレボテラ  インターメディア、ポルフィロモナス  ジンジバリス等であり、これらは１種単独でも２種以上でもよい。
【００１４】
（Ａ−１）スペルミン及び／又はスペルミジン
スペルミン、スペルミジンは、それぞれポリアミンに分類される低分子有機化合物である。これらは１種単独でも２種を併用してもよい。これらは市販品を使用できる。
【００１５】
（Ａ−２）シアル酸
シアル酸は、アミノ基やカルボキシル基を持つノイラミン酸のアミノ基やヒドロキシ基が置換された物質を総称するファミリー名である。
シアル酸の例としては、Ｎ−アセチルノイラミン酸、Ｎ−グリコリルノイラミン酸等が挙げられ、特にＮ−アセチルノイラミン酸が好ましい。これらは市販品を使用できる。
【００１６】
（Ａ−３）ラクトフェリン
ラクトフェリンは、動物の体内で広く分布している分子量約８万の鉄結合性の糖タンパク質である。ラクトフェリンの由来、製法は限定されない。例えば、哺乳類（例えばヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマなど）の初乳、移行乳、常乳、末期乳等、又はこれらの乳の処理物（例えば、脱脂乳、ホエーなど）から常法（例えば、イオン交換クロマトグラフィーなど）によって分離したラクトフェリン、植物（例えば、トマト、イネ、タバコなど）から生産されたラクトフェリンが挙げられ、これらを使用し得る。ラクトフェリンは、市販品を使用してもよく、また、公知の方法によって調製したものを使用してもよい。
ラクトフェリンとしてはウシ由来のものが好ましく使用される。由来や分離条件の異なる２種類以上のラクトフェリンを組み合わせて用いてもよい。
【００１７】
＜（Ｂ）成分＞
（Ｂ）成分は、ラクチュロース、オリゴ糖、シアル酸含有二糖から選ばれる１種又は２種以上である。（Ｂ）成分としては、特に口腔内菌叢改善の点で、ラクチュロース、オリゴ糖が好ましい。
（Ｂ）成分は、口腔内の病原性細菌の生育を促進することなく、非病原性細菌（常在菌）の生育を促進する選択的な生育促進作用を奏する。非病原性細菌（常在菌）としては、代表的なものとして、例えばストレプトコッカス  ゴルドニアイ、ストレプトコッカス  ミティス、ストレプトコッカス  オラリス、ストレプトコッカス  パーオリス等のストレプトコッカス属細菌、ナイセリア  サブフラバ、アクチノマイセス  ビスコーサス等が挙げられ、これらは１種単独でも２種以上でもよい。
【００１８】
（Ｂ−１）ラクチュロース
ラクチュロースは、ガラクトースとフルクトースがβ−１，４−グリコシド結合した二糖である。
【００１９】
（Ｂ−２）オリゴ糖
オリゴ糖は、３〜１０糖からなる糖類であり、グルコース（ブドウ糖）、フルクトース、ガラクトース、マンノース、イドース、アルトース、グロース、タロース、アロース、キシロース、アラビノース、リキソース、リボース、トレオース、エリトロース、エリトルロース、キシルロース、リブロース、プシコース、ソルボース、タガトース、Ｄ−２−デオキシリボース、Ｌ−ラムノース、Ｌ−フコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチルノイラミン酸、グルクロン酸、マンヌロン酸、ガラクツロン酸、イズロン酸、Ｄ−グルシトール、Ｄ−マンニトール、リビトール、ガラクチトール等の単糖類を組み合わせて得られる。
オリゴ糖の例として、ラフィノース、フラクトオリゴ糖、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、グルコサミノオリゴ糖、マンナンオリゴ糖、キシロオリゴ糖、アガロオリゴ糖、ミルクオリゴ糖等が挙げられる。特にミルクオリゴ糖、ラフィノース、とりわけミルクオリゴ糖が好ましい。
【００２０】
ミルクオリゴ糖とは、遊離ラクトース単位を還元末端側にもち、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース（Ｇａｌ）、フコース（Ｆｕｃ）、Ｎ−アセチルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ａｃ）が付加したものである。ミルクオリゴ糖の例として、２’−フコシルラクトース、３−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース、ラクト−Ｎ−ネオテトラオース、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩ、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩＩ、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩＩＩ、ラクト−Ｎ−ジフコヘキサオースＩ、ラクト−Ｎ−ジフコヘキサオースＩＩ、ラクト−Ｎ−ヘキサオース、ラクト−Ｎ−ネオヘキサオース、６’−Ｎ−アセチルノイラミニルラクトース、３’−Ｎ−アセチルノイラミニルラクトース等が挙げられる。特に、２’−フコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩが好ましい。
【００２１】
（Ｂ−３）シアル酸含有二糖
シアル酸含有二糖の例としては、シアリルガラクトース、シアリルグルコース、シアリルマンノース等が挙げられ、特にシアリルガラクトースが好ましい。
（Ｂ）成分は、市販品を使用し得る。
【００２２】
本発明の口腔内菌叢改善剤は、有効成分として（Ａ）及び（Ｂ）成分を併用し、これら成分を配合することで得ることができる。また、上記有効成分のみからなる口腔内菌叢改善剤として使用できるが、必要に応じて、その他の口腔用として公知の任意成分を更に含有してもよく、この場合、任意成分は本発明の効果を妨げない範囲で配合し得る。
この場合、口腔内菌叢改善の有効成分である（Ａ）及び（Ｂ）成分は、特に口腔用組成物に応用する場合は、口腔内菌叢改善の点から、（Ａ）及び（Ｂ）成分の配合量がそれぞれ後述の範囲が好ましく、これらを満たす濃度で両成分を使用することが好ましい。
【００２３】
（Ａ）成分の配合量は、下記範囲が好ましい。
（Ａ−１）スペルミン及び／又はスペルミジンを配合する場合、その配合量は、口腔内の菌叢改善の点から、組成物全体の０．００１〜１％（質量％、以下同様）が好ましく、より好ましくは０．００２〜０．５％、特に好ましくは０．００５〜０．２５％である。配合量が０．００１％以上であると、十分に病原菌を抑制し菌叢改善できる。１％以下であると、菌叢改善効果を十分に維持できる。１％を超えると、非病原性常在菌の生育が抑制されるおそれがある。
（Ａ−２）シアル酸を配合する場合、その配合量は、口腔内の菌叢改善の点から、組成物全体の０．０１〜１％が好ましく、より好ましくは０．０２〜０．３％、特に好ましくは０．０５〜０．２％である。配合量が０．０１％以上であると、十分に病原菌を抑制し菌叢改善できる。１％以下であると、菌叢改善効果を十分に維持できる。１％を超えると、非病原性常在菌の生育が抑制されるおそれがある。
（Ａ−３）ラクトフェリンを配合する場合、その配合量は、口腔内の菌叢改善の点から、組成物全体の０．０１〜１０％が好ましく、より好ましくは０．０３〜３％、特に好ましくは０．０５〜１％である。配合量が０．０１％以上であると、十分に病原菌を抑制し菌叢改善できる。１０％以下であると、菌叢改善効果を十分に維持できる。１０％を超えると、非病原性常在菌の生育が抑制されるおそれがある。
【００２４】
（Ｂ）成分の配合量は、口腔内の菌叢改善の点から、組成物全体の０．１％以上が好ましく、より好ましくは０．５％以上、特に好ましくは１％以上である。配合量が０．１％以上であると、十分に非病原性常在菌の生育を促進し菌叢改善できる。配合量の上限は特に制限されないが、組成物全体の１０％以下とすることが好ましい。
なお、上記（Ｂ）成分の配合量の範囲内において、（Ｂ）成分として（Ｂ−１）ラクチュロース、（Ｂ−２）オリゴ糖又は（Ｂ−３）シアル酸含有二糖を配合する場合、それぞれの配合量は、口腔内の菌叢改善の点から、組成物全体の０．１％以上が好ましく、より好ましくは０．５％以上、特に好ましくは１％以上である。配合量が０．１％以上であると、十分に非病原性常在菌の生育を促進し菌叢改善できる。配合量の上限は特に制限されないが、組成物全体の１０％以下とすることが好ましい。
【００２５】
また、（Ａ）成分と（Ｂ）成分との配合比率は、上記各成分の配合量から算出し得る範囲がよいが、下記範囲であると口腔内の菌叢改善効果がより向上し、更に好ましい。
（Ａ−１）スペルミン及び／又はスペルミジンを配合する場合、（Ａ−１）成分と（Ｂ）成分との配合比率を示す（Ａ−１）／（Ｂ）は、質量比として０．０００５〜２、特に０．０００１〜０．４、とりわけ０．００２５〜０．２が好ましい。
（Ａ−２）シアル酸を配合する場合、（Ａ−２）成分と（Ｂ）成分との配合比率を示す（Ａ−２）／（Ｂ）は、質量比として０．００５〜１、特に０．０１〜０．２、とりわけ０．０２５〜０．１が好ましい。
（Ａ−３）ラクトフェリンを配合する場合、（Ａ−３）成分と（Ｂ）成分との配合比率を示す（Ａ−３）／（Ｂ）は、質量比として０．００５〜６、特に０．０１５〜１．５、とりわけ０．０２５〜０．６が好ましい。なお、（Ｂ）成分として（Ｂ−１）及び／又は（Ｂ−２）を配合する場合は、（Ａ−３）成分と（Ｂ−１）及び／又は（Ｂ−２）との配合比率を示す（Ａ−３）／｛（Ｂ−１）及び／又は（Ｂ−２）｝が上記範囲内であることが好ましく、また、（Ｂ）成分として（Ｂ−３）成分を配合する場合は、（Ａ−３）成分と（Ｂ−３）成分との配合比率を示す（Ａ−３）／（Ｂ−３）が上記範囲内であることが好ましい。
【００２６】
本発明の口腔用組成物は、液状（液体、液状）、ペースト状、固体（固体、固形状）といった各種形状に調製でき、剤型は特に限定されない。例えば、歯磨剤（練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、粉歯磨等）、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、舌ケア剤、口中清涼剤、義歯ケア剤等の一般的な口腔用製剤、更には、口腔内に含んで使用するチューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルム、トローチや、水に溶かして飲む粉末飲料等の飲食品として好適であり、それぞれ常法によって調製できる。なお、飲食品の形態は、いつでもどこでも使用可能な簡便性、携帯性の点から、チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルムのいずれかが好ましい。
本発明において、口腔用組成物とは、主として口腔内で使用することを目的にするものであり、使用後は口腔内から排出される口腔用製剤だけでなく、摂取可能な飲食品でもよく、上記に示したように、歯磨剤、洗口剤等の口腔用製剤に加えて、チューインガム、錠菓、キャンディ等の飲食品も含まれる。
【００２７】
本発明の口腔用組成物は、必要に応じて、その他の公知成分を任意に含んでもよい。任意の成分としては、例えば、界面活性剤、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、着色剤、甘味料、防腐剤、香料、有効成分、更には、ｐＨ調整剤、光沢剤、流動化剤、除電剤、結合剤、酸味料、滑沢剤、保存料、崩壊剤、賦形剤、溶剤等が挙げられ、これらの配合量は、本発明の効果を損なわない範囲で適宜調整すればよく、常用量でもよい。
口腔用製剤、例えば歯磨剤、洗口剤では、界面活性剤、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、着色剤、甘味料、防腐剤、香料、有効成分、ｐＨ調整剤等を配合できる。
飲食品、例えばチューインガム、錠菓、キャンディ、グミでは、ガムベース、着色剤、甘味料、香料、光沢剤、流動化剤、結合剤、酸味料、滑沢剤、保存料、崩壊剤、賦形剤等を配合できる。
【００２８】
界面活性剤は、口腔用として一般的なアニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤を配合できる。アニオン性界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、ノニオン性界面活性剤は、糖脂肪酸エステル、糖アルコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル又は高級アルコールエステルが挙げられる。カチオン性界面活性剤はアルキルアンモニウム塩、両性界面活性剤はベタイン系やイミダゾリン系が挙げられる。界面活性剤の配合量は、通常、０〜１０％、特に０．０１〜５％である。
【００２９】
研磨剤は、シリカ系研磨剤、リン酸カルシウム系研磨剤、炭酸カルシウム系研磨剤が挙げられ、その配合量は、通常、練歯磨等の歯磨剤では２〜５０％である。
【００３０】
粘稠剤は、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコールが挙げられ、その配合量は、通常、５〜５０％である。
粘結剤は、有機粘結剤としてカルボキシメチルセルロースナトリウム等のセルロール誘導体、ガム類等、無機粘結剤としてゲル化性シリカ等が挙げられる。その配合量は、通常、０．５〜１０％である。
【００３１】
着色剤は赤色２号、青色１号等、甘味料はサッカリンナトリウム等が挙げられ、防腐剤はパラオキシ安息香酸エステル等が挙げられる。
【００３２】
香料は、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、グレープフルーツ油、スウィーティー油、柚油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及びこれら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、及び、メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３−ｌ−メントキシプロパン−１，２−ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ−置換−パラメンタン−３−カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、ブタノール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等が挙げられ、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を使用できる。
これら香料の配合量は、通常、歯磨剤、洗口剤では０．００００１〜１％であり、また、錠菓、グミ、チューインガムでは０．００１〜５０％であり、上記香料素材を使用した賦香用香料は、組成物中に０．１〜１０％使用するのが好ましい。
【００３３】
有効成分としては、口腔用組成物に通常配合される公知のものを配合できる。例えば、イソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤、塩化セチルピリジニウム等のカチオン性殺菌剤、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸等の抗炎症剤、デキストラナーゼ等の酵素、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ化物、水溶性リン酸化合物、銅化合物、硝酸カリウム、乳酸アルミニウム、各種ビタミン類、植物抽出物が挙げられる。なお、上記有効成分の配合量は、本発明の効果を妨げない範囲で設定できる。
なお、本発明では、口腔内の病原性細菌と共に非病原性細菌をも殺菌する非選択的殺菌剤の配合は制限することが好ましい。前記非選択的殺菌剤は、従来から広く口腔用製剤に使用されている殺菌剤に多く見られ、例えば塩化セチルピリジニウム等のカチオン性殺菌剤、イソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤が挙げられる。これら非選択的殺菌剤は、本発明の効果が発揮される範囲で配合できるが、配合する場合は組成物全体の０．１％以下、特に０．０５％以下が好ましく、配合しないことが最も好ましい。これらの非選択的殺菌剤は、病原性細菌と共に非病原性の口腔内常在菌をも殺菌してしまう、非選択的な殺菌作用を奏するため、これら殺菌剤が配合されていると、口腔内の菌叢バランスが崩れて制御できなくなる場合がある。従って、本発明においては、上記非選択的殺菌剤が配合されていないほうが、選択的な口腔内菌叢の改善、バランス制御にはより好適である。
【実施例】
【００３４】
以下、実施例及び比較例、処方例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記例中の％はいずれも質量百分率を示す。【００３５】
［実施例、比較例］
＜口腔細菌叢改善効果の評価＞
表１〜９に示す組成を下記方法で評価した。結果を表に併記した。【００３６】
使用した主原料を下記に示す。
（Ａ）成分
スペルミン：和光純薬工業（株）製
スペルミジン：和光純薬工業（株）製
Ｎ−アセチルノイラミン酸（シアル酸）：和光純薬工業（株）製
ラクトフェリン：森永乳業（株）製
（Ｂ）成分
ラクチュロース：和光純薬工業（株）製
シアリルガラクトース（シアル酸含有二糖）：長良サイエンス（株）
製
ラフィノース（オリゴ糖）：和光純薬工業（株）製
３’−シアリルラクトース（オリゴ糖）：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
６’−シアリルラクトース（オリゴ糖）：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
２’−フコシルラクトース（オリゴ糖）：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
ラクト−Ｎ−テトラオース（オリゴ糖）：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩ（オリゴ糖）：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔ
ｈ社製【００３７】
使用菌株
下記に示す各細菌をＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎより購入し、使用した。
非病原性細菌（口腔内の常在菌）
〈Ｐ〉ストレプトコッカス  ゴルドニアイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  
ｇｏｒｄｏｎｉｉ：以下、Ｓ．ｇｏｒｄｏｎｉｉと略記。）
ＡＴＣＣ１０５５８
〈Ｑ〉アクチノマイセス  ビスコーサス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｓ
ｃｏｓｕｓ：以下、Ａ．ｖｉｓｃｏｓｕｓと略記。）
ＡＴＣＣ４３１４６
病原性細菌（歯周病と口臭の原因菌）
〈Ｒ〉フゾバクテリウム  ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎ
ｕｃｌｅａｔｕｍ：以下、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍと略記。）
ＡＴＣＣ２３７２６
〈Ｓ〉プレボテラ  インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｉｎｔｅｒ
ｍｅｄｉａ：以下、Ｐ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａと略記。）
ＡＴＣＣ４９０４６
〈Ｔ〉ポルフィロモナス  ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇ
ｉｎｇｉｖａｌｉｓ：以下、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓと略記。）
ＡＴＣＣ３３２７７【００３８】
細菌のプレカルチャー
上記各種細菌の凍結菌液を、馬脱繊血を含有するトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ  Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）寒天培地に白金耳にて植菌し、３７℃で７２時間嫌気培養（８０体積％窒素、１０体積％二酸化炭素、１０体積％水素）にて起菌した。続いて、増殖したコロニーを５ｍｇ／Ｌのヘミン（シグマ社製）及び１ｍｇ／ＬのビタミンＫ（和光純薬工業（株）製）を含むトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ  Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）〔ＴＨＢＨＭ〕４ｍＬに懸濁し、３７℃で２４時間嫌気培養した。更に、この培養液を２０ｍＬのＴＨＢＨＭに１％接種し、３７℃で２４時間嫌気培養した。【００３９】
混合菌液の調製
上記培養後の菌液を遠心にて回収し、下記組成の培地を用いて、〈Ｐ〉〜〈Ｔ〉の細菌が各々２×１０8ｃｆｕ／ｍＬになるように混合菌液を調製した。
培地組成
プロテオースペプトン（Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）
１０．０ｇ／Ｌ（最終濃度１．０％）
トリプトン（Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）
５．０ｇ／Ｌ（最終濃度０．５％）
イーストエキス（Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）
５．０ｇ／Ｌ（最終濃度０．５％）
ムチン（シグマ社製）    １２．５ｇ／Ｌ（最終濃度１．２５％）
ヘミン（シグマ社製）      １．０ｍｇ／Ｌ（最終濃度０．０００１％）
ビタミンＫ（和光純薬工業（株）製）
０．２ｍｇ／Ｌ（最終濃度０．００００２％）
ＫＣｌ（和光純薬工業（株）製）
２．５ｇ／Ｌ（最終濃度０．２５％）
システイン（和光純薬工業（株）製）
０．５ｇ／Ｌ（最終濃度０．０５％）
グルコース                １．０ｇ／Ｌ（最終濃度０．１％）
蒸留水                    残                                        
合計                １００．０％【００４０】
評価サンプルの調製
表１〜９に示す各組成を常法により調製し、評価サンプルとした。【００４１】
バイオフィルムの細菌構成比の評価
２４穴マルチプレート（住友ベークライト（株）製）に上記評価サンプルを０．５ｍＬずつ添加した。コントロールは、評価サンプルの代わりに精製水を０．５ｍＬ添加した。続いて、上記混合菌液を０．５ｍＬ接種し、３７℃で２４時間嫌気培養し、プレート底部にバイオフィルムを形成させた。その後、１ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水ＰＢＳで４回洗浄後、再び１ｍＬのＰＢＳを添加し、バイオフィルムをチップの先端で掻き取った。超音波処理（２００μＡ、１０秒間）によってバイオフィルムを分散し、トリプチックソイブロス（Ｔｒｙｐｔｉｃ  Ｓｏｙ  Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）を用いて１０倍希釈系列を作製した。１０-3、１０-4、１０-5希釈液を５０μＬずつ、各細菌を選択的に生育する選択培地に塗抹し、培養後、生えてくる細菌コロニー数を計測することにより、各細菌の生菌数及び細菌構成比を算出した。
なお、馬脱繊血を含有するトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ  Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）寒天培地を好気培養することで生えてくる〈Ｐ〉Ｓ．ｇｏｒｄｏｎｉｉと〈Ｑ〉Ａ．ｖｉｓｃｏｓｕｓを、下記記載のＣＶＥ寒天培地で嫌気培養することで生えてくる〈Ｒ〉Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍを、馬脱繊血を含有するカナマイシン入りトリプチックソイ寒天培地（Ｔｏｄｄ  Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ  ａｎｄ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）で嫌気培養することで生えてくる〈Ｓ〉Ｐ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ、〈Ｔ〉Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを、それぞれコロニー形態で判別した。【００４２】
ＣＶＥ寒天培地（１リットル中組成）
トリプティケース  ペプトン（日本ベクトン・ディッキンソン（株）製）
１０ｇ
酵母エキス（日本ベクトン・ディッキンソン（株）製）      ５ｇ
塩化ナトリウム（和光純薬工業（株）製）                  ５ｇ
グルコース（和光純薬工業（株）製）                      ２ｇ
Ｌ−トリプトファン（和光純薬工業（株）製）              ０．２ｇ
寒天（和光純薬工業（株）製）                          １５ｇ
馬脱繊血                                              ５０ｍＬ
エリスロマイシン（シグマ社製、４ｍｇ／ｍＬ）            １ｍＬ
クリスタルバイオレット（和光純薬工業（株）製、５ｍｇ／ｍＬ）
１ｍＬ【００４３】
バイオフィルムの細菌叢改善の評価基準
評価サンプルを処置したバイオフィルム中における病原性細菌の〈Ｒ〉Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、〈Ｓ〉Ｐ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ及び〈Ｔ〉Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ合計の割合をａ（％）、評価サンプルを処置していないコントロールのバイオフィルム中における〈Ｒ〉Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、〈Ｓ〉Ｐ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ及び〈Ｔ〉Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ合計の割合をｂ（％）とし、〈Ｒ〉Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、〈Ｓ〉Ｐ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ及び〈Ｔ〉Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓのバイオフィルム中の割合の減少率を、下記の計算式にて算出した。コントロールのｂは６０％であった。
なお、各評価サンプルについて、バイオフィルム中の〈Ｐ〉＋〈Ｑ〉（％）、〈Ｒ〉＋〈Ｓ〉＋〈Ｔ〉（％）をそれぞれ併記した。コントロールは、〈Ｐ〉＋〈Ｑ〉＝４０％、〈Ｒ〉＋〈Ｓ〉＋〈Ｔ〉＝６０％であった。
コントロールのバイオフィルム中の総細菌数は１×１０8個程度で、実施例に示す評価サンプルを処置したバイオフィルムにおいてもほとんど変わらなかった。【００４４】
コントロールと比較した時の病原性細菌の割合の減少率Ｘ（％）を下記式にて算出し、下記基準によって口腔細菌叢改善効果を評価した。
Ｘ（％）＝１００−｛（ａ／ｂ）×１００｝
評価基準
Ａ：Ｘが７０％以上
Ｂ：Ｘが５０％以上７０％未満
Ｃ：Ｘが２０％以上５０％未満
Ｄ：Ｘが２０％未満【００４５】
【表１】
2019208699.tif 000002
【００４６】
【表２】
2019208699.tif 000003
【００４７】
【表３】
2019208699.tif 000004
【００４８】
【表４】
2019208699.tif 000005
【００４９】
【表５】
2019208699.tif 000006
【００５０】
【表６】
2019208699.tif 000007
【００５１】
【表７】
2019208699.tif 000008
【００５２】
【表８】
2019208699.tif 000009
【００５３】
【表９】
2019208699.tif 000010
【００５４】
以下に処方例を示す。なお、使用原料は上記と同様であり、シアル酸はＮ−アセチルノイラミン酸である。【００５５】
［処方例１］チューインガム
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
キシリトール                                            ４５．９
マルチトール                                            ２０
ガムベース                                              ２０
アラビアガム                                              ９
香料                                                      １    
合計                                                  １００％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００５６】
［処方例２］チューインガム
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
キシリトール                                            ４５．９
マルチトール                                            ２０
ガムベース                                              ２０
アラビアガム                                              ９
香料                                                      １    
合計                                                  １００％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００５７】
［処方例３］チューインガム
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
キシリトール                                            ４５．９
マルチトール                                            ２０
ガムベース                                              ２０
アラビアガム                                              ９
香料                                                      １    
合計                                                  １００％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００５８】
［処方例４］チューインガム
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
キシリトール                                            ４５．９
マルチトール                                            ２０
ガムベース                                              ２０
アラビアガム                                              ９
香料                                                      １    
合計                                                  １００％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００５９】
［処方例５］錠菓
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
ソルビトール                                            ７７．９
キシリトール                                            １０
ショ糖脂肪酸エステル                                      ３
香料                                                      ４．５
微粒二酸化ケイ素                                          ０．５  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６０】
［処方例６］錠菓
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
ソルビトール                                            ７７．９
キシリトール                                            １０
ショ糖脂肪酸エステル                                      ３
香料                                                      ４．５
微粒二酸化ケイ素                                          ０．５  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６１】
［処方例７］錠菓
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
ソルビトール                                            ７７．９
キシリトール                                            １０
ショ糖脂肪酸エステル                                      ３
香料                                                      ４．５
微粒二酸化ケイ素                                          ０．５  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６２】
［処方例８］錠菓
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
ソルビトール                                            ７７．９
キシリトール                                            １０
ショ糖脂肪酸エステル                                      ３
香料                                                      ４．５
微粒二酸化ケイ素                                          ０．５  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６３】
［処方例９］グミ
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
砂糖                                                    ４０
水飴                                                    ３０
ブドウ糖液糖                                            １０
グリセリン                                                ５
ゼラチン                                                  ５
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６４】
［処方例１０］グミ
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
砂糖                                                    ４０
水飴                                                    ３０
ブドウ糖液糖                                            １０
グリセリン                                                ５
ゼラチン                                                  ５
香料                                                  ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６５】
［処方例１１］グミ
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
砂糖                                                    ４０
水飴                                                    ３０
ブドウ糖液糖                                            １０
グリセリン                                                ５
ゼラチン                                                  ５
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６６】
［処方例１２］グミ
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
砂糖                                                    ４０
水飴                                                    ３０
ブドウ糖液糖                                            １０
グリセリン                                                ５
ゼラチン                                                  ５
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６７】
［処方例１３］キャンディ
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
砂糖                                                    ５０
水飴                                                    ３３
クエン酸                                                  ２．０
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６８】
［処方例１４］キャンディ
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
砂糖                                                    ５０
水飴                                                    ３３
クエン酸                                                  ２
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００６９】
［処方例１５］キャンディ
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
砂糖                                                    ５０
水飴                                                    ３３
クエン酸                                                  ２
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７０】
［処方例１６］キャンディ
（Ａ）ラクトフェリン                                      ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
砂糖                                                    ５０
水飴                                                    ３３
クエン酸                                                  ２
香料                                                      ０．２
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７１】
［処方例１７］歯磨剤
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
無水ケイ酸                                              １０
ラウリル硫酸ナトリウム                                    １
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      １．５
サッカリンナトリウム                                      ０．１
ソルビトール                                            ２５
香料                                                      １
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７２】
［処方例１８］歯磨剤
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
無水ケイ酸                                              １０
ラウリル硫酸ナトリウム                                    １
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      １．５
サッカリンナトリウム                                      ０．１
ソルビトール                                            ２５
香料                                                      １
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７３】
［処方例１９］歯磨剤
（Ａ）スペルミン                                          ０．０２
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
無水ケイ酸                                              １０
ラウリル硫酸ナトリウム                                    １
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      １．５
サッカリンナトリウム                                      ０．１
ソルビトール                                            ２５
香料                                                      １
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．００５【００７４】
［処方例２０］歯磨剤
（Ａ）スペルミン                                          ０．０２
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
無水ケイ酸                                              １０
ラウリル硫酸ナトリウム                                    １
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      １．５
サッカリンナトリウム                                      ０．１
ソルビトール                                            ２５
香料                                                      １
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．００５【００７５】
［処方例２１］洗口剤
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
プロピレングリコール                                      ５
グリセリン                                                ５
クエン酸                                                  ０．０３
クエン酸ナトリウム                                        ０．２５
香料                                                      ０．８
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７６】
［処方例２２］洗口剤
（Ａ）シアル酸                                            ０．１
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
プロピレングリコール                                      ５
グリセリン                                                ５
クエン酸                                                  ０．０３
クエン酸ナトリウム                                        ０．２５
香料                                                      ０．８
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．０２５【００７７】
［処方例２３］洗口剤
（Ａ）スペルミン                                          ０．０２
（Ｂ）ラクチュロース                                      ４
プロピレングリコール                                      ５
グリセリン                                                ５
クエン酸                                                  ０．０３
クエン酸ナトリウム                                        ０．２５
香料                                                      ０．８
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．００５【００７８】
［処方例２４］洗口剤
（Ａ）スペルミン                                          ０．０２
（Ｂ）３’−シアリルラクトース                            ４
プロピレングリコール                                      ５．０
グリセリン                                                ５
クエン酸                                                  ０．０３
クエン酸ナトリウム                                        ０．２５
香料                                                      ０．８
水                                                      バランス  
合計                                                  １００．０％
（Ａ）／（Ｂ）の質量比＝０．００５
【国際調査報告】
2019208699.tif 000011
2019208699.tif 000012
2019208699.tif 000013
2019208699.tif 000014
2019208699.tif 000015
2019208699.tif 000016