(57)【要約】眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬を提供する。本発明者らは、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬について検討し、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストが眼内血管新生抑制作用及び眼内血管透過性抑制作用を有することを確認し、本発明を完成した。本発明のS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストである化合物又はその製薬学的に許容される塩は眼内血管新生及び眼内血管透過性抑制作用を有し、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は血管新生緑内障等の予防及び／又は治療剤として使用しうる。
2019151470.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストを有効成分とする眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬組成物。
【請求項２】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の治療の為に、眼内注射又は硝子体内注射される請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の治療の為に、硝子体内注射される請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストの有効量を対象に投与することからなる眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療方法。
【請求項１１】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１０記載の予防又は治療方法。
【請求項１２】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１０記載の予防又は治療方法。
【請求項１３】
選択的S1P受容体アゴニストが5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である請求項１０〜１２のいずれかに記載の予防又は治療方法。
【請求項１４】
選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である請求項１３記載の予防又は治療方法。
【請求項１５】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である請求項１０〜１４のいずれかに記載の予防又は治療方法。
【請求項１６】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である請求項１０〜１４のいずれかに記載の予防又は治療方法。
【請求項１７】
投与方法が眼内注射又は硝子体内注射である、請求項１０〜１６のいずれかに記載の予防又は治療方法。
【請求項１８】
投与方法が硝子体内注射である、請求項１７に記載の予防又は治療方法。
【請求項１９】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療に使用するためのS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２０】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１９記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２１】
選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、請求項１９記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２２】
選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である請求項１９〜２１のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２３】
選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である請求項２２記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２４】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である請求項１９〜２３のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２５】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である請求項１９〜２３のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２６】
眼内注射又は硝子体内注射に使用するための請求項１９〜２５のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【請求項２７】
硝子体内注射に使用するための請求項２６に記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬に関する。【０００２】
本出願は、参照によりここに援用されるところの日本出願特願２０１８−０１６９１１号に基づき優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
眼内血管新生或いは眼内血管透過性亢進を伴う種々の眼科疾患が知られている。例えば、加齢黄斑変性は、加齢に伴う網膜黄斑部の変性疾患で、重度の視力低下を伴う難治性眼科疾患である。加齢黄斑変性は、望ましくない脈絡膜新生血管の形成を伴い急速に視力低下が起こる「滲出型」と脈絡膜新生血管の形成を伴わず視細胞の萎縮が徐々に進行して視力が低下する「萎縮型」に分類される。この滲出型加齢黄斑変性における新生血管はもろく破れやすいため、出血や血液中の水分（滲出液）の漏出が生じて組織内に溜り、浮腫が生じて網膜や黄斑の機能を障害する。また、糖尿病網膜症や糖尿病黄斑浮腫では、高血糖状態が長く続くことにより、網膜の血管から血液成分が浸出したり、望ましくない新生血管が形成され、当該新生血管からの出血や血液中の水分（滲出液）が漏出したりすることにより、眼底出血や網膜浮腫などを生じ、網膜や黄斑の機能を障害する。【０００４】
従来、血管内皮増殖因子（Vascular Endothelial Growth Factor、以下「VEGF」という。）が、脈絡膜新生血管の発生や血管透過性の亢進に重要な役割を果たすことから、VEGFを標的とした治療薬が提案されている。例えば、抗VEGF抗体（WO2008/063932）、抗VEGF薬と特定の低分子化合物の組み合わせ（WO2011/087066、WO2012/105610）などが挙げられる。そして、加齢黄斑変性用として、臨床的にペガプタニブナトリウム（商品名：マクジェン）、ラニビズマブ（商品名：ルセンティス）、アフリベルセプト（商品名：アイリーア）などのVEGF阻害薬を用いた治療が行われている。しかしながら、治療に使用されているVEGF阻害薬は、硝子体内への注射剤として使用されるため、投与回数が重なると患者や診療側に大きな精神的、肉体的負担がかかる。【０００５】
また、抗VEGF抗体は、網膜静脈閉塞症（Retinal vein occlusion：RVO）モデルにおいて、網膜静脈を閉塞した直後に投与すると、無灌流領域は減少したのに対し、抗VEGF抗体を、閉塞の7日後に投与すると、無灌流領域が逆に増加したことから、抗VEGF抗体を用いる際には、投与タイミングが重要であるとする報告がある（Scientific Reports, 2017年, vol.7, p.43509）。【０００６】
一方、スフィンゴシン−１−リン酸（Sphingosine-1-phosphate、以下「S1P」という。）のレベル上昇に関連する加齢黄斑変性、脈絡膜血管新生、未熟児網膜症、網膜症などの眼科疾患に対して、抗S1P抗体によりリガンド分子とS1P1〜S1P5受容体の結合を阻害して異常な新生血管形成などを抑制する方法が提案されている（WO2008/055072、WO2007/053447）。しかしながら、抗体を有効成分とするため眼内注射剤としての使用に限られる。【０００７】
また、S1P受容体に対してアゴニスト（Agonist）活性を有する低分子化合物により、血管透過性障害による糖尿病網膜症などの眼科疾患を治療することが提案されている。例えば、S1P1受容体からS1P5受容体の１つ又は複数の受容体に対するアゴニスト活性を有するS1P受容体アゴニスト、特に、FTY720（Fingolimod）を血管透過障害及び望ましくない血管内皮細胞アポトーシスならびに新生血管の成長の治療薬として使用することが提案されている（特許文献１）。【０００８】
その他、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する新規な低分子化合物が数多く提案されている（特許文献２、特許文献３）。例えば、S1PとS1P1受容体との結合阻害作用を有する化合物（WO2006/013948、WO2007/089018、WO2007/091570、WO2009/017219）、S1P1受容体からS1P5受容体までのS1P受容体に対してアゴニストとしてシグナリングする化合物（WO2006/094705）、血中の循環リンパ球を減少させるS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物（WO2008/152149、WO2012/145236、WO2011/066184、WO2012/071186、WO2012/071184、WO2011/050054、WO2011/066179、WO2012/074921、US2011/0257232、WO2012/142268、WO2014/130565、WO2014/078209、WO2014/078208、WO2014/071342）などが報告されている。そして、その用途として多くの疾患が例示されているが、具体的にS1P受容体アゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩を用い、加齢黄斑変性症や糖尿病網膜症などの眼内血管新生或いは眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患に対する効果を確認した結果を記載するものはない。【０００９】
また、S1P受容体アゴニストの血管内皮細胞間のバリア機能亢進作用に着目して眼科疾患に使用することを提案する報告はない。本発明者らの一部は、先に、S1P受容体アゴニストを脳動脈瘤の治療に使用する発明を提案した（特許文献４）。その作用として、S1P受容体アゴニストが血管内皮細胞の透過性を抑制することによって脳動脈瘤壁に浸潤するマクロファージ数が減少したためであることを示したが、眼科疾患に適用し得ることについての記載はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開WO2005/002559号
【特許文献２】国際公開WO2007/116866号
【特許文献３】国際公開WO2010/064707号
【特許文献４】国際公開WO2014/175287号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療に有用な医薬を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者は、特に血管内皮細胞間のバリア機能を亢進させることに着目して、S1P受容体アゴニストを眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療に使用し得るかについて検討した結果、特定のS1P受容体アゴニスト活性プロファイルを有する化合物によって所望の目的が達成されることを見出した。【００１３】
すなわち、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストについて鋭意検討した結果、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患に有効であることを知見して本発明を完成した。【００１４】
本発明は、選択的S1P受容体アゴニスト、即ち、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有し、更にS1P4受容体及びS1P5受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有していてもよい化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬に関する。【００１５】
また、本発明は、選択的S1P受容体アゴニストと製薬学的に許容される賦形剤を含有する眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療用医薬組成物に関する。なお、当該医薬組成物は、選択的S1P受容体アゴニストを含有する眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療剤を包含する。【００１６】
また、本発明は、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療用医薬組成物の製造のための選択的S1P受容体アゴニストの使用、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための選択的S1P受容体アゴニストの使用、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療の使用のための選択的S1P受容体アゴニスト、及び、選択的S1P受容体アゴニストの有効量を対象に投与することからなる眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療方法に関する。なお、「対象」とは、その予防又は治療を必要とするヒト又はその他の動物であり、ある態様としては、その予防又は治療を必要とするヒトである。【００１７】
すなわち本発明は以下よりなる。
(1) S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストを有効成分とする眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬組成物。
(2) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(1)記載の医薬組成物。
(3) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(1)記載の医薬組成物。
(4) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である(1)〜(3)のいずれかに記載の医薬組成物。
(5) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である(4)記載の医薬組成物。
(6) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である(1)〜(5)のいずれかに記載の医薬組成物。
(7) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である(1)〜(5)のいずれかに記載の医薬組成物。
(8) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の治療の為に、眼内注射又は硝子体内注射される(1）〜(7)のいずれかに記載の医薬組成物。
(9) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の治療の為に、硝子体内注射される(8)に記載の医薬組成物。【００１８】
(10) S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストの有効量を対象に投与することからなる眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療方法。
(11) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である(10)記載の予防又は治療方法。
(12) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(10)記載の予防又は治療方法。
(13) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である(10)〜(12)のいずれかに記載の予防又は治療方法。
(14) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である(13)記載の予防又は治療方法。
(15) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である(10)〜(14)のいずれかに記載の予防又は治療方法。
(16) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である(10)〜(14)のいずれかに記載の予防又は治療方法。
(17) 投与方法が眼内注射又は硝子体内注射である、(10)〜(16)のいずれかに記載の予防又は治療方法。
(18) 投与方法が硝子体内注射である、(17)に記載の予防又は治療方法。【００１９】
(19) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療に使用するためのS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニスト。
(20) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体及びS1P4受容体の一方もしくは両方に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(19)記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(21) 選択的S1P受容体アゴニストが、S1P1受容体アゴニスト活性を有し、更にS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(19)記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(22) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である(19)〜(21)のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(23) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である(22)記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(24) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である(19)〜(23)のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(25) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である(19)〜(23)のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(26) 眼内注射又は硝子体内注射に使用するための(19)〜(25)のいずれかに記載の選択的S1P受容体アゴニスト。
(27) 硝子体内注射に使用するための(26)に記載の選択的S1P受容体アゴニスト。【００２０】
(28) S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストを有効成分とする眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患の予防又は治療のための医薬組成物の製造のための選択的S1P受容体アゴニストの使用。
(29) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫である(28)に記載の使用。
(30) 眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患が、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、近視性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、又は、血管新生緑内障である(29)に記載の使用。
(31) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩、からなる群より選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩である、(30)記載の使用。
(32) 選択的S1P受容体アゴニストが、5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩である、(31)記載の使用。
(33) 眼内注射又は硝子体内注射に使用するための(31)又は(32)に記載の選択的S1P受容体アゴニストの使用。
(34) 硝子体内注射に使用するための(33)に記載の選択的S1P受容体アゴニストの使用。【００２１】
（Ａ）5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫の予防又は治療のための医薬組成物。
（Ｂ）硝子体内注射される、（Ａ）に記載の医薬組成物。
（Ｃ）5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩の有効量を対象に投与することからなる滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫の予防又は治療方法。
（Ｄ）投与方法が硝子体内注射である、（Ｃ）に記載の予防又は治療方法。
（Ｅ）滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫の予防又は治療に使用するための5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩。
（Ｆ）硝子体内注射に使用するための、（Ｅ）に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
（Ｇ）（Ａ）記載の医薬組成物の製造のための5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩の使用。
（Ｈ）硝子体内注射に使用するための、（Ｇ）に記載の使用。
【発明の効果】
【００２２】
本願に記載の選択的S1P受容体アゴニストは、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患、具体的には、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫等の予防又は治療剤として使用できる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１（ａ）は、実施例１の蛍光眼底撮影画像であり、画像中の数字はフルオレセイン蛍光眼底造影（fluorescein angiography：FA）グレードを示す。図１（ｂ）は、実施例１の蛍光眼底撮影画像のFAグレードをグラフに表したものであり、縦軸は１〜４のFAグレードの割合を示し、横軸は化合物１の投与量（mg/kg）を示す。
【図２】図２（ａ）は、実施例１の脈絡膜フラットマウント標本（Flat mount specimen）の画像である。図２（ｂ）は、脈絡膜フラットマウント標本の脈絡膜新生血管（Choroidal neovascularization：CNV）面積をグラフに表したものであり、縦軸はCNV面積（×104μm2）を、横軸は化合物１の投与量（mg/kg）を示す。
【図３】図３（ａ）は、実施例２の組織染色図である。図３（ｂ）は、実施例２の網膜内顆粒層（Retinal inner nuclear layer：INL）厚の測定結果を示す図であり、縦軸はINLの厚さ（μm）、横軸は視神経乳頭中心からの距離（μm）を示す。
【図４】図４（ａ）は、参考例１のC57BL/6J系統マウスに化合物１を投与した際のリンパ球濃度をグラフに表したものであり、縦軸にリンパ球濃度（×104個/mL）、横軸に化合物１の投与量（mg/kg）を示す。図４（ｂ）は参考例１のddy系統マウスに化合物１を投与した際のリンパ球の濃度をグラフに表したものであり、縦軸にリンパ球濃度（×104個/mL）、横軸に化合物１の投与量（mg/kg）を示す。
【図５】図５（ａ）は、実施例３のウエスタンブロットの画像である。図５（ｂ）は、実施例３のβアクチンに対するVEGFの発現量をグラフに表したものであり、縦軸はNormalを基準としたVEGF発現量の相対値（倍）を示す。
【図６】図６は、実施例４の網膜静脈閉塞症（RVO）モデルの無灌流領域に対する効果を示す。図６（ａ）は、モデル作製後早期に化合物１を投与したときの結果を示し、図６（ｂ）は、モデル作製後後期に化合物１を投与したときの結果を示す。化合物１は早期投与及び後期投与の両方において、無灌流領域の増大を有意に抑制した結果を示す。
【図７】図７は、実施例５の化合物１によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。縦軸は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を蛍光強度（fluorescence intensity）で示したものであり、化合物１は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図８】図８は、実施例６の化合物２によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物２は、下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図９】図９は、実施例７の化合物３によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物３は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図１０】図１０は、実施例８の化合物４によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物４は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図１１】図１１は、実施例９の化合物５によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物５は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図１２】図１２は、実施例１０の化合物６によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物６は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図１３】図１３は、実施例１１の化合物７によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用の結果を示す。化合物７は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させたことを示す。
【図１４】図１４（ａ）は、比較例１としてFTY720を投与したときの蛍光眼底撮影画像である。図１４（ｂ）は、比較例１の蛍光眼底撮影画像のFAグレードをグラフに表したものであり、縦軸は１〜４のFAグレードの割合を示す。
【図１５】図１５（ａ）は、比較例１としてFTY720を投与したときの脈絡膜フラットマウント標本の画像である。図１５（ｂ）は脈絡膜フラットマウント標本の脈絡膜新生血管（CNV）面積をグラフに表したものである。
【図１６】図１６（ａ）は、実施例１２の組織染色図である。図１６（ｂ）は実施例１２のINL厚の測定結果を示す図であり、縦軸はINLの厚さ（μm）、横軸は視神経乳頭中心からの距離（μm）を示す。図１６（ｃ）は実施例１２のINLの厚さの平均値を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書において、以下の略称又は略号を用いることがある。
化合物１＝ 5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール 一塩酸塩（特許文献２）。
化合物２＝ 1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸 一塩酸塩（特許文献３）。
化合物３＝ 1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸（別名：Siponimod又はBAF312、CAS番号:1230487-00-9）。
化合物４＝ 5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル（別名：Ozanimod、CAS番号：1306760-87-1）。
化合物５＝ (2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン(別名：Ponesimod、CAS番号:854107-55-4)。
化合物６＝ [(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸（別名：Etrasimod、CAS番号：1206123-37-6）。
化合物７＝ リン酸=二水素=2-アミノ-4-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)-2-(ヒドロキシメチル)ブチル(別名：KRP-203-P、CAS番号：749262-82-6）。
KRP-203＝ 2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール 一塩酸塩（CAS番号：509088-69-1）。
FTY720＝ 2-アミノ-2-[2-(4-オクチルフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール 一塩酸塩（別名：Fingolimod 塩酸塩、CAS番号：162359-56-0)。
FTY720-P＝ リン酸=二水素=2-アミノ-2-(ヒドロキシメチル)-4-(4-オクチルフェニル)ブチル（別名：FTY720 リン酸モノエステル、又は、Fingolimod リン酸モノエステル、CAS番号：402615-91-2）。
【００２５】
本明細書において、「アゴニスト」とは、生体内のリガンドと同様に受容体と結合することで作用を促進する化合物又はその製薬学的に許容される塩を意味する。
【００２６】
本明細書において、「S1P受容体アゴニスト」とは、例えばS1P受容体に結合して、S1P受容体へのGTP[γ35S]結合を促進させる化合物又はその製薬学的に許容される塩を意味する。
【００２７】
本明細書において、「インバースアゴニスト（Inverse agonist）」とは、アゴニストと同様に受容体に結合するが、アゴニストとは反対の作用を及ぼす化合物又はその製薬学的に許容される塩を意味する。すなわち、受容体逆作動薬のことであり、アゴニストとは異なる。
【００２８】
本明細書において、「選択的S1P受容体アゴニスト」とは、選択的にS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する、化合物又はその製薬学的に許容される塩をいう。選択的とは、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有し、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上の値を示すことを意味する。ある態様としては、20倍以上、ある態様としては50倍以上、ある態様としては100倍以上の値であることが挙げられる。また、S1P3受容体に対しては、アゴニスト活性ではなくインバースアゴニスト活性を有していてもよい。なお、選択的S1P受容体アゴニストには、薬理学的に許容されるいわゆるプロドラッグも包含される。薬理学的に許容されるいわゆるプロドラッグとは、加溶媒分解により、もしくは生理的条件下で、化合物の水酸基等に変換しうる基を有する化合物である。例えばKRP-203が挙げられる。KRP-203は、生体内でリン酸化されてKRP-203-Pとなる。
【００２９】
化合物１〜６のGTP[γ35S]結合アッセイによるS1P1、S1P2、S1P3、S1P4、及び、S1P5受容体アゴニスト活性のEC50値は以下のとおりである。
【００３０】
化合物１のGTP[γ35S]結合アッセイによるS1P1受容体及びS1P5受容体アゴニスト活性のEC50値は7.4 nM及び7.5 nMであり、一方、S1P2、S1P3及びS1P4各受容体のアゴニスト活性のEC50値はS1P1受容体と比して100倍以上の値を有することが報告されている（PLoS One、2014年、9(10)、e110819）。
【００３１】
化合物２のGTP[γ35S]結合アッセイによるS1P1受容体アゴニスト活性のEC50値は13.4 nMである一方、S1P3受容体アゴニスト活性のEC50値は1.76 μMであり、S1P1受容体と比して100倍以上の値を有する。
【００３２】
化合物３〜６のS1P1、S1P2、S1P3、S1P4、及び、S1P5受容体アゴニスト活性のEC50値は、それぞれ以下の文献に記載されている。
化合物３、化合物４(Ozanimod)、及び化合物７(KRP-203-P)：British Journal of Pharmacology、2016年、173、p.1778-1792。 
化合物５(Ponesimod)：The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics、2011年、337、p.547-556。
化合物６(Etrasimod)：ACS Medicinal Chemistry Letters、2014年、5、p.1313-1317。
【００３３】
本明細書において、「非選択的S1P受容体アゴニスト」とは、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有し、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、差がない、又は、3倍未満であることを意味する。例えば、FTY720又はFTY720-Pが挙げられる。
【００３４】
FTY720-PのGTP[γ35S]結合アッセイによるS1P1、S1P3、S1P4及びS1P5受容体アゴニスト活性のEC50値はそれぞれ1.4 nM、2.9 nM、2.2 nM、0.86 nMであり、S1P3受容体に対してアゴニスト活性を有することが報告されている（PLoS One、2014年、9(10)、e110819）。
【００３５】
本明細書において、「S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩」、「S1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩」及び「S1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩」とは、それぞれ、S1P1受容体、S1P4受容体又はS1P5受容体に結合して、受容体へのGTP[γ35S]結合を促進させる化合物又はその製薬学的に許容される塩をいう。例えば、S1P1受容体に対するアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩としては、ある態様としては、GTP[γ35S]結合アッセイによるS1P1受容体アゴニスト作用のEC50値が100 μM〜1 pMの化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、ある態様としては、EC50値が100 nM〜10 pMの化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、ある態様としては、EC50値が10 nM〜0.1 nMの化合物又はその製薬学的に許容される塩が挙げられる。「S1P4受容体に対するアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩」及び「S1P5受容体に対するアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩」についても同様である。なお、GTP[γ35S]結合アッセイによるS1P受容体アゴニスト作用のEC50値の測定方法は、PLoS One, 2014年, 9(10)、e110819等に記載される当業者に公知の方法を使用できる。
【００３６】
本願に記載の選択的S1P受容体アゴニストには、
ａ）S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩、
ｂ）S1P1受容体及びS1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩、
ｃ）S1P1受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩、及び
ｄ）S1P1受容体、S1P4受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩、が包含される。ある態様としては、上記各アゴニスト活性を有する化合物とは、GTP[γ35S]結合アッセイによる各S1P受容体アゴニスト作用のEC50値が100 μM〜1 pMの値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩である。
【００３７】
S1P2受容体及びS1P3受容体（以下、「その他のS1P受容体」と記載する）に対するアゴニスト活性に関しては、ある態様としては、その他のS1P受容体に対するアゴニスト活性がいずれも、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上、ある態様としては20倍以上、またある態様としては50倍以上、更にある態様としては100倍以上の値を示す。
「その他のS1P受容体」とは、S1P2受容体及びS1P3受容体であるが、ある態様としてはS1P3受容体である。
【００３８】
本願に記載の選択的S1P受容体アゴニストのある態様を以下に記載する。
１）S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
２）S1P1受容体及びS1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
３）S1P1受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
４）S1P1受容体、S1P4受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
５）S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、その他のS1P受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、100倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
６）S1P1受容体とS1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、その他のS1P受容体に対するアゴニスト活性がいずれも、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、100倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
７）S1P1受容体とS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、その他のS1P受容体に対するアゴニスト活性がいずれも、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、100倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
８）S1P1受容体、S1P4受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、その他のS1P受容体に対するアゴニスト活性がいずれも、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、100倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
９）５）〜８）において、EC50値による比較において、10倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【００３９】
１０）S1P3受容体と比較して、S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１１）S1P3受容体と比較して、S1P1受容体及びS1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１２）S1P3受容体と比較して、S1P1受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１３）S1P3受容体と比較して、S1P1受容体、S1P4受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１４）S1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上の値を示す、化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１５）S1P1受容体及びS1P4受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上の値を示す、化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１６）S1P1受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上の値を示す、化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１７）S1P1受容体、S1P4受容体及びS1P5受容体に対してアゴニスト活性を有する化合物又はその製薬学的に許容される塩であり、S1P3受容体に対するアゴニスト活性が、S1P1受容体に対するアゴニスト活性より、GTP[γ35S]結合アッセイによるEC50値による比較において、10倍以上の値を示す、化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１８）１４）〜１７）において、EC50値による比較において、50倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
１９）１４）〜１７）において、EC50値による比較において、100倍以上の値を示す化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【００４０】
本願発明における選択的S1P受容体アゴニストのある態様としては、以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩が挙げられる。
２０）5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸又はその製薬学的に許容される塩、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル又はその製薬学的に許容される塩、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン又はその製薬学的に許容される塩、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸又はその製薬学的に許容される塩、及び、2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン1,3-ジオール又はその製薬学的に許容される塩。
【００４１】
２１）5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール 一塩酸塩、1-[(7-{[4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-2H-1-ベンゾピラン-3-イル)メチル]ピペリジン-4-カルボン酸 一塩酸塩、1-({4-[(1E)-N-{[4-シクロヘキシル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}エタンイミドイル]-2-エチルフェニル}メチル)アゼチジン-3-カルボン酸（Siponimod）、5-(3-{(1S)-1-[(2-ヒドロキシエチル)アミノ]-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-4-イル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-2-[(プロパン-2-イル)オキシ]ベンゾニトリル（Ozanimod）、(2Z,5Z)-5-({3-クロロ-4-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]フェニル}メチリデン)-3-(2-メチルフェニル)-2-(プロピルイミノ)-1,3-チアゾリジン-4-オン（Ponesimod）、[(3R)-7-{[4-シクロペンチル-3-(トリフルオロメチル)フェニル]メトキシ}-1,2,3,4-テトラヒドロシクロペンタ[b]インドール-3-イル]酢酸（Etrasimod）、及び、2-アミノ-2-[2-(4-{[3-(ベンジルオキシ)フェニル]スルファニル}-2-クロロフェニル)エチル]プロパン-1,3-ジオール 一塩酸塩（KRP-203）。
【００４２】
２２）5-{5-[3-(トリフルオロメチル)-4-{[(2S)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル]オキシ}フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル}-1H-ベンゾイミダゾール又はその製薬学的に許容される塩。
【００４３】
本明細書において、「製薬学的に許容される塩」としては、化合物の製薬学的に許容される塩であり、置換基の種類によって、酸付加塩又は塩基との塩を形成する場合がある。具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基、メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン、リシン、オルニチン等の有機塩基との塩、アセチルロイシン等の各種アミノ酸及びアミノ酸誘導体との塩やアンモニウム塩等が挙げられる。
【００４４】
本発明の医薬の組成物は、通常、製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、或いは、静注、筋注、硝子体内注、テノン嚢下注等の注射剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。ある態様としては、経口投与である。ある態様としては、眼内投与である。ある態様としては、硝子体内投与である。ある態様としては眼内注射又は硝子体内注射である。ある態様としては眼内注射である。ある態様としては硝子体内注射である。
【００４５】
投与量は症状、投与対象の年齢、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常、経口投与の場合、成人1日当たり0.0001〜100 mg/kg、好ましくは0.001〜0.3 mg/kgの範囲から選ばれ、この量を1回で、或いは、2〜4回に分けて投与することができる。また、症状によって静脈投与される場合は、通常、成人1回当たり0.0001〜10 mg/kg、好ましくは0.001〜0.3 mg/kgの範囲で1日に1回〜複数回投与される。
【００４６】
硝子体内投与の場合の投与量は、通常、成人1回当たり0.1 ng〜5 mg、好ましくは20 ng〜1 mgの範囲で、単回投与又は複数回（すなわち、2、3、4、5、6回以上）投与される。複数回投与は、一定間隔、又は、不規則な間隔でもよい。投与時期は、発症前でも発症後でもよい。発症前投与のある態様としては、発症の12時間前が挙げられる。ある態様としては発症の1日前が挙げられる。発症後投与のある態様としては、発症直後、発症から約1週間後、発症から2週間後、発症から1カ月後、発症から6週間後、発症から3カ月後、及び発症から3カ月よりも長い期間後からなる群から選択される。ある態様として、一定間隔は、約3カ月である。ある態様として発症後6カ月連続で1カ月ごとである。
【００４７】
本発明による経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、一つ又はそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な賦形剤等と混合してもよい。組成物は常法に従って、不活性な添加剤、例えば滑沢剤、崩壊剤、溶解補助剤を含んでいてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性もしくは腸溶性コーティング剤で被覆してもよい。
【００４８】
経口投与のための液体組成物としては、乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等が用いられる。一般的に用いられる不活性な溶剤、例えば精製水、エタノールを含む。この組成物は不活性な溶剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁化剤のような補助剤、甘味剤、矯味剤、芳香剤、防腐剤を含んでいてもよい。
【００４９】
本発明の眼科疾患の予防又は治療のための医薬は、非経口で投与することができる。投与剤型としては、眼軟膏、注射剤等が挙げられる。
【００５０】
非経口投与のための注射剤は、無菌の水性又は非水性の溶液剤、懸濁剤又は乳濁剤を含有する。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水又は生理食塩液が含まれる。非水性の溶剤としては、例えばエタノールのようなアルコール類がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤を含んでいてもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解、懸濁して使用することもできる。
【００５１】
本発明が対象とする疾患は、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患である。具体的には、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫等に適用することが挙げられる。また具体的には、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫等に適用するのがよい。
【００５２】
本発明の薬剤は、他の治療薬とともに投与することができる。例えば他の薬剤は、鎮痛薬、麻酔薬、免疫抑制薬、又は抗炎症薬とすることができる。具体的には抗VEGF薬、より具体的には抗VEGF抗体とともに投与することができる。他の薬剤との併用投与は、１つの組成物として一緒に投与してよいが、併用療法の一環として別々の組成物として投与してもよい。
【実施例】
【００５３】
本発明の理解を深めるために、本発明に至る実験結果を各参考例に示し、具体的な発明内容を実施例に示し、詳細に説明する。本発明はこれら参考例、実施例に示す事項に限定されるものではない。【００５４】
（実施例１）レーザー誘発脈絡膜新生血管（choroidal neovascularization、CNV）モデルに対する効果
（１）フルオレセイン蛍光眼底造影（FA）グレードの評価
ミドリンP点眼液（参天製薬、ミドリンは登録商標）を8週齢のマウス（日本SLC社、C56BL/6J系統）の右眼に点眼し散瞳させた。ケタミン及びキシラジンの７：１混合麻酔液を生理食塩水で10倍希釈した溶液10 mL/kgを大腿筋肉内へ投与した。その後、眼球が乾燥しないようにヒアレイン（登録商標）点眼液0.1 %（参天製薬）を点眼した。
次いで、カバーガラスを右眼に宛てがいながら眼底を覗き、レーザー光凝固装置（MC500; NIDEK CO. LTD, Aichi, Japan）を用いて、視神経乳頭の周囲円周上に等間隔に６箇所レーザー照射（波長: 647 nm、スポットサイズ: 50μm、照射時間: 100 msec、レーザー出力: 120 mW）を行った。
化合物１は、溶媒（0.5%メチルセルロース（Methylcellulose: MC）溶液）で懸濁し、0.03又は0.3 mg/kg（フリー体換算）の用量で、レーザー照射前日よりサンプリングを行う前日まで、1日1回、経口投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。化合物１投与群はそれぞれ16例、Vehicle群は15例を用いて実験を行った。
レーザー照射後14日目にサンプリングを行った。ケタミン及びキシラジンの７：１混合麻酔液を生理食塩水で10倍希釈した溶液10 mL/kgで麻酔した後、マウス尾静脈内にフルオレセイン（日本アルコン）を10倍希釈したものを0.1 mL投与し、Micron4（Phoenix Research Laboratories, Inc. Pleasanton, CA, USA）を用いて、蛍光眼底撮影を行った。【００５５】
その結果を図１（ａ）に示した。図中、Day 0はレーザー照射当日の画像を示し、Day 14は14日目の画像を示す。また、Day 14の各群の画像について、表１のグレード基準に従い、レーザー照射部位ごとにFAグレードを判定し、新生血管部位からの蛍光色素の漏出の評価を行った。その結果を図１（ｂ）に示した。
図１（ｂ）から明らかなように、化合物１を投与した群において、Vehicle群に比べて有意なFAグレードの低下が認められ、新生血管からの血液漏出の抑制効果が確認された。これは化合物１が新生血管の透過性抑制作用を有することを示す。【００５６】
【表１】
2019151470.tif 000003
【００５７】
（２）CNV面積の評価
上記（１）で蛍光眼底撮影を行った後、マウス尾静脈内にfluorescein isothiocyanate dextran（FITC-dextran; 20 mg/mL, Sigma-Aldrich）を0.5 mL投与した。頸椎脱臼にてマウスを安楽死させ、眼球を摘出した。摘出した眼球は、4 %パラホルムアルデヒドリン酸緩衝液中で12時間固定した。その後、顕微鏡下で角膜及び水晶体を切除し、ピンセットで残存する硝子体動脈を除去した。さらに網膜を除去し、脈絡膜に８箇所切れ込みを入れ、平面状態にしてFluoromount（Diagnostic BioSystems社）で包埋し、脈絡膜フラットマウント標本を作製した。脈絡膜フラットマウントは、共焦点レーザー走査型顕微鏡（FLUOVIEW FV10i; Olympus, Tokyo, Japan）を用いて撮影した。その画像を図２（ａ）に示した。【００５８】
次に、撮影した画像を元に、解析ソフトOLYMPUS FLUOVIEW FV10i（Olympus）を用いてCNVの周囲を囲み、その面積をCNV面積（μm2）として求めた。すべての解析は盲検下において行った。その結果を図２（ｂ）に示した。
化合物１の0.03 mg/kg投与群において新生血管を示すCNV面積の減少が認められ、特に化合物１の0.3 mg/kg投与群において有意な減少が認められた。0.3 mg/kg投与群のCNV面積の抑制率は34 %であった。【００５９】
以上の結果から、化合物１は、本モデルにおいて血管新生を抑制することが確認された。【００６０】
なお、実施例１において、サンプリング前における各群間の体重の有意な変化は認められなかった。FA評価前に眼に傷が入り白濁してFAができなかったものやCNV面積評価時にCNVがつながってしまったものに関しては解析から除外し、各群11〜12例の平均値として上記結果を算出した。【００６１】
（実施例２）網膜静脈閉塞症（RVO）モデルに対する効果
8週齢のマウス（日本SLC社、ddy系統）に、ケタミン（120 mg/kg）及びキシラジン（6 mg/kg）となるように希釈した混合麻酔液10 mL/kgを筋肉内投与し麻酔を施した。その後、ローズベンガル（20 mg/kg; WAKO）を0.15 mL尾静脈内投与し、マウスの右眼の視神経乳頭から3乳頭系離れた静脈にレーザーを照射することによって網膜静脈を閉塞させた。なお、閉塞には、一本の静脈に対して10回から15回のレーザー照射を行った。レーザー照射には、眼底撮影装置であるMicron4（Phoenix Research Laboratories, Inc., Pleasanton, CA, USA）のアタッチメントを用いた（波長: 532 nm、スポットサイズ: 50μm、照射時間: 5000 ms、レーザー出力: 50 mW）。一眼につき静脈3本を閉塞させ、眼底写真によって、レーザー照射した静脈が完全に閉塞していることを確認した。【００６２】
化合物１は、溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁し、0.03又は0.3 mg/kg（フリー体換算）の用量でレーザー照射12時間前及び照射直後に経口投与した。対照は、未処理（Normal群）と溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。化合物１投与群、Normal群及びVehicle群は、それぞれ10例を用いて実験を行った。【００６３】
レーザー照射の24時間後に頸椎脱臼によりマウスを安楽死させ、眼球を摘出し、ヘマトキシリン・エオジン染色法により組織評価を行った。また、視神経乳頭中心から耳側と鼻側の両側において、240μm間隔で網膜内顆粒層（Inner nuclear layer：INL）の厚さを測定した。なお、すべての解析は盲検下において行った。組織評価における染色図を図３（ａ）に示した。また、INL厚の測定結果を図３（ｂ）に示した。【００６４】
図３（ｂ）の結果から明らかなように、化合物１により、少なくとも0.03 mg/kg以上の投与量でINLの肥厚化が改善されることが示された。このことから、化合物１は、網膜静脈閉塞症モデルにおいて形成される網膜浮腫を改善することが分かった。即ち、化合物１は網膜血管内皮の透過性抑制作用を有することが確認された。【００６５】
（参考例１）リンパ球減少作用との関連性
7週齢のマウス（日本エスエルシー社、C57BL/6J系統）に溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁した化合物１を、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3又は1 mg/kg（フリー体換算）の用量で、実施例１と同様に、1日1回、14日間反復経口投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。それぞれ5例を用いて実験を行った。【００６６】
最終投与後24時間に、イソフルラン麻酔下、ヘパリン処理したシリンジを用いて腹部大静脈より血液を採取し、エチレンジアミン四酢酸二カリウム塩（EDTA・2K）（1 mg）と混和した。採取した血液中のリンパ球数は、XT-2000iv（シスメックス社）を用いて測定した。その結果を図４（ａ）に示した。化合物１は、0.1 mg/kg以上で有意に末梢血中のリンパ球を減少させたが、0.03 mg/kgにおいては有意な作用は認められなかった。【００６７】
つぎに、7週齢のマウス（日本エスエルシー社、ddy系統）に溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁した化合物１を、0.03又は0.3 mg/kg（フリー体換算）の用量で、実施例２と同様に、12時間間隔で2回経口投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。それぞれ6例を用いて実験を行った。
2回目の投与から24時間後に、イソフルラン麻酔下、ヘパリン処理したシリンジを用いて腹部大静脈より血液を採取し、EDTA・2K （1 mg）と混和した。採取した血液中のリンパ球数は、XT-2000iv（シスメックス社）を用いて測定した。その結果を図４（ｂ）に示した。【００６８】
図４（ａ）及び図４（ｂ）に示す通り、化合物１の0.03 mg/kg投与群は有意な末梢血中のリンパ球減少を引き起こさなかった。
一方、上記とそれぞれ同じ方法で化合物１を投与した、実施例１の新生血管からの血液の漏洩抑制作用を示す図１（ｂ）、及び、実施例２の網膜浮腫改善作用を示す図３（ｂ）によれば、化合物１の0.03 mg/kg投与群においてもそれぞれ効果が見られた。
以上の結果は、化合物１の新生血管透過性抑制作用及び網膜血管内皮の透過性抑制作用はリンパ球減少効果に依拠するものではないことを示唆する。【００６９】
（実施例３）CNVモデルにおけるVEGF産生抑制効果
実施例１と同様の方法にて作製したCNVモデルに、溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁した化合物１を0.3 mg/kg（フリー体換算）の用量で、レーザー照射前日よりサンプリングの日まで、1日1回経口投与した。対象は、未処理群（Normal群）と溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。化合物１投与群6例、Normal群8例、Vehicle群7例を用いて実験した。【００７０】
レーザー照射から5日後に、頚椎脱臼によりマウスを安楽死させ、眼球を摘出した。眼球から脈絡膜-網膜色素上皮を単離し、VEGFタンパク質の発現量を、抗VEGF抗体（Merck Millipore社製）を用いたウエスタンブロット法により測定した。そのウエスタンブロッティングの結果を図５（ａ）に示した。また、βアクチンに対するVEGFの発現量を、Normal群を基準として算出した結果を図５（ｂ）に示した。【００７１】
図５（ａ）及び図５（ｂ）に示す通り、化合物１はVehicle群より有意にVEGFの発現を抑制することが確認された。このことから、化合物１は、内皮細胞上のS1P1受容体に対する作用に加え、脈絡膜新生血管の発生や血管透過性の亢進に重要な役割を果たすVEGFの発現を抑制する作用を併せ持つことで、実施例１の結果に示される血管新生の抑制や新生血管からの血液漏出を抑制しているものと推察された。【００７２】
（実施例４）網膜静脈閉塞症（RVO）モデルの無灌流領域に対する効果
8週齢のマウス（日本SLC社、ddy系統）に、ケタミン（120 mg/kg）及びキシラジン（6 mg/kg）となるように希釈した混合麻酔液10 mL/kgを筋肉内投与し麻酔を施した。その後、ローズベンガル（20 mg/kg; WAKO）を0.15 mL尾静脈内投与し、マウスの右眼の視神経乳頭から3乳頭系離れた静脈にレーザーを照射することによって網膜静脈を閉塞させ、網膜無潅流領域を作製した。なお、閉塞には、一本の静脈に対して10回から15回のレーザー照射を行った。レーザー照射には、眼底撮影装置であるMicron4（Phoenix Research Laboratories, Inc., Pleasanton, CA, USA）のアタッチメントを用いた（波長: 532 nm、スポットサイズ: 50μm、照射時間: 5000 ms、レーザー出力: 50 mW）。一眼につき静脈3本を閉塞させ、眼底写真によって、レーザー照射した静脈が完全に閉塞していることを確認した 。【００７３】
化合物１は溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁し、0.3 mg/kg（フリー体換算）の用量で、レーザー照射12時間前及び照射直後の2回（早期投与）、又はレーザー照射後7日目に12時間間隔をおいて2回（後期投与）、いずれも経口投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。化合物１早期投与群、化合物１後期投与群、及びVehicle群は、それぞれ10例を用いて実験を行った。【００７４】
2回目の投与から1日後及び7日後に、ケタミン（120 mg/kg）及びキシラジン（6 mg/kg）の混合麻酔液を10 mg/kg筋肉内投与し麻酔を施した。0.01 Mリン酸緩衝生理食塩水で溶解した、分子量2×106のフルオレセインイソチオシアナート（FITC）- デキストラン溶液を尾静脈内に1 mL投与した（FITC-デキストラン20 mg相当）。5分後、眼球を摘出し、4 %パラホルムアルデヒド含有0.1 Mリン酸緩衝液（pH7.4）中で7時間固定した。固定した眼球は、リン酸緩衝生理食塩水に浸しながら顕微鏡下で角膜及び水晶体を切除し、色素上皮から網膜を分離し、網膜を強膜から完全に剥離した。その後、網膜を四分円に切り、平面状態にしてFluoromount（Diagnostic BioSystems, Pleasanton, CA, USA）で封入し、網膜フラットマウント標本を作製した。【００７５】
網膜フラットマウント標本を、蛍光顕微鏡（BX50, Olympus）の下、イメージングソフトウェアMetamorph（Universal Imaging Corp., Downingtown, PA, USA）を介した高感度冷却CCDカメラ（DP30BW, Olympus）でXY電動ステージ（Sigma Koki Co., Ltd., Tokyo, Japan）を用いて撮影した。網膜全体像は13枚の画像から作成した。各画像は網膜血管の表層から下層までを14.2μm間隔で連続撮影した。網膜無灌流領域の割合は、Metamorph内の解析ソフトウェアを用いて定量した。すべての解析は盲検下において行った。早期投与における結果を図６（ａ）に、後期投与における結果を図６（ｂ）に示した。縦軸には網膜無潅流領域の割合を、横軸には閉塞後日数（Time after occlusions (days)）を示した。【００７６】
図６（ａ）及び図６（ｂ）に示すとおり、化合物１は早期投与及び後期投与の両方において、無灌流領域（Non perfusion area）の増大を有意に抑制した。このことは、化合物１はRVOモデルの病態の早期、又は後期に関わらず、虚血改善作用を有することを示している。【００７７】
（実施例５）化合物１によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
コラーゲン及びフィブロネクチンでコートしたトランスウェル（直径6.5mm、孔径0.4μm：コーニング社）の上室に、ヒト網膜血管内皮細胞HRMEC（Cell Systems 社）を細胞密度が5×104個／ウェルとなるように播種し、Endothelial Cell Growth Medium MV 2（PromoCell社）中で5 % CO2雰囲気下、37℃で6日間培養した。次いで当該トランスウェルの上室及び下室に0.001 %ジメチルスルホキシド含有Endothelial Cell Growth Medium MV 2を溶媒として調製した最終濃度が0、0.3、3、30 nMの化合物１を添加し、引き続き培養した。 対照は、溶媒のみを添加したウェルとした。培養60分後、当該トランスウェルの上室に1 mg/mLのフルオレセインイソチオシアナート（FITC）-デキストラン（40 kDa：シグマアルドリッチ社）を添加し、60分後に下室の培地の蛍光強度（fluorescence intensity）を測定することで下室に透過してくるFITC-デキストランの量を測定した。その結果を図７に示した。化合物１は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物１が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００７８】
（実施例６）化合物２によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物２のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図８に示した。化合物２は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物２が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００７９】
（実施例７）化合物３によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物３のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図９に示した。化合物３は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物３が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００８０】
（実施例８）化合物４によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物４のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図１０に示した。化合物４は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物４が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００８１】
（実施例９）化合物５によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物５のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図１１に示した。化合物５は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物５が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００８２】
（実施例１０）化合物６によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物６のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図１２に示した。化合物６は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物６が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００８３】
（実施例１１）化合物７によるヒト網膜血管内皮細胞の透過性抑制作用
実施例５と同様に、化合物７のヒト網膜血管内皮細胞に対する透過性抑制作用を測定した。その結果を図１３に示した。化合物７は下室に透過してくるFITC-デキストランの量を有意に減少させた。
これは、化合物７が網膜血管内皮細胞間の透過性を抑制していることを示している。【００８４】
（比較例１）FTY720のCNVモデルに対する効果
（１）フルオレセイン蛍光眼底造影（FA）グレードの評価
ミドリンP点眼液（参天製薬、ミドリンは登録商標）を8週齢のマウス（日本SLC社、C56BL/6J系統）の片眼に点眼し散瞳させた後、実施例１と同様の方法で視神経乳頭の周囲円周上に等間隔に６箇所レーザー照射を行った。
FTY720は、溶媒（0.5% MC溶液）で懸濁し、0.3 mg/kgの用量で、レーザー照射前日よりサンプリングを行う前日まで、1日1回、経口投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。FTY720投与群、Vehicle群は、それぞれ16例を用いて実験を行った。
レーザー照射後14日目にサンプリングを行ったのち、実施例１と同様の方法で、蛍光眼底撮影を行った。【００８５】
その結果を図１４（ａ）に示した。図中、Day 0はレーザー照射当日の画像を示し、Day 14は14日目の画像を示す。また、Day 14の各群の画像について、実施例１と同様の方法で評価を行った。その結果を図１４（ｂ）に示した。
非選択的S1P受容体アゴニストであるFTY720を投与した群において、Vehicle群に比べて有意なFAグレードの低下は認められなかった。【００８６】
（２）CNV面積の評価
上記（１）で蛍光眼底撮影を行った後、実施例１と同様の方法で脈絡膜フラットマウント標本を作製した。脈絡膜フラットマウントは、オールインワン蛍光顕微鏡（BZ-X710; Keyence, Osaka, Japan）を用いて撮影した。その画像を図１５（ａ）に示した。【００８７】
次に、撮影した画像を元に、画像編集ソフトImage Jを用いてCNVの周囲を囲み、その面積をCNV面積（μm2）として求めた。すべての解析は盲検下において行った。その結果を図１５（ｂ）に示した。
FTY720の投与により新生血管を示すCNV面積の有意な減少は認められなかった。【００８８】
以上の結果から、非選択的S1P受容体アゴニストであるFTY720は、本モデルにおいて血管新生を抑制しないことが確認された。【００８９】
なお、比較例１において、サンプリング前における各群間の体重の有意な変化は認められなかった。FA評価前に眼に傷が入り白濁してFAができなかったものやCNV面積評価時にCNVがつながってしまったものに関しては解析から除外し、各群12例の平均値として上記結果を算出した。【００９０】
（実施例１２）RVOモデルにおける硝子体内投与による効果
8週齢のマウス（日本SLC社、ddy系統）に、ケタミン（120 mg/kg）及びキシラジン（6 mg/kg）となるように希釈した混合麻酔液10 mL/kgを筋肉内投与し麻酔を施した。その後、ローズベンガル（20 mg/kg; WAKO）を0.15 mL尾静脈内投与し、マウスの右眼の視神経乳頭から3乳頭系離れた静脈にレーザーを照射することによって網膜静脈を閉塞させた。なお、閉塞には、一本の静脈に対して10回から15回のレーザー照射を行った。レーザー照射には、眼底撮影装置であるMicron4（Phoenix Research Laboratories, Inc., Pleasanton, CA, USA）のアタッチメントを用いた（波長: 532 nm、スポットサイズ: 50μm、照射時間: 5000 ms、レーザー出力: 50 mW）。一眼につき静脈3本を閉塞させ、眼底写真によって、レーザー照射した静脈が完全に閉塞していることを確認した。【００９１】
化合物１は、溶媒（4重量%ポリエチレングリコール400、0.1重量%ポリソルベート80、0.01重量%ジメチルスルホキシド含有リン酸緩衝生理食塩水）に溶解し、レーザー照射直後に、化合物１を一眼あたり0.8、8、80 ng（フリー体換算）の用量で右眼の硝子体内に投与した。対照は、溶媒のみ投与（Vehicle群）とした。また、右眼に溶媒のみ投与したマウスの左眼（レーザー非照射、投与物質なし）をNormal群とした。化合物１投与群、Normal群及びVehicle群は、それぞれ6例を用いて実験を行った。【００９２】
レーザー照射の1日後に、頸椎脱臼によりマウスを安楽死させ、眼球を摘出し、ヘマトキシリン・エオジン染色法により組織評価を行った。また、視神経乳頭中心から耳側と鼻側の両側において、240μm間隔で網膜内顆粒層（Inner nuclear layer：INL）の厚さを測定した。なお、すべての解析は盲検下において行った。組織評価における染色図を図１６（ａ）に、INL厚の測定結果を図１６（ｂ）に、INLの厚さの平均値を図１６（ｃ）に示した。
図１６（ａ）〜（ｃ）に示すとおり、化合物１は硝子体内投与によっても、INLの肥厚化を改善し、網膜浮腫を改善することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００９３】
本願に記載のS1P1受容体に対してアゴニスト活性を有する選択的S1P受容体アゴニストは、眼内血管新生及び／又は眼内血管透過性亢進を伴う眼科疾患、具体的には、滲出型加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、未熟児網膜症、近視性脈絡膜新生血管、続発性脈絡膜新生血管、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、血管新生緑内障、網膜色素変性、又は、網膜光凝固法による浮腫等の予防又は治療剤として使用できる。
【図１】
2019151470.tif 000004
【図２】
2019151470.tif 000005
【図３】
2019151470.tif 000006
【図４】
2019151470.tif 000007
【図５】
2019151470.tif 000008
【図６】
2019151470.tif 000009
【図７】
2019151470.tif 000010
【図８】
2019151470.tif 000011
【図９】
2019151470.tif 000012
【図１０】
2019151470.tif 000013
【図１１】
2019151470.tif 000014
【図１２】
2019151470.tif 000015
【図１３】
2019151470.tif 000016
【図１４】
2019151470.tif 000017
【図１５】
2019151470.tif 000018
【図１６】
2019151470.tif 000019
【国際調査報告】
2019151470.tif 000020
2019151470.tif 000021
2019151470.tif 000022
2019151470.tif 000023