(57)【要約】  抗がん剤治療開始後早期感受性判定マーカーの提供。２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子からなる、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカー。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｄｉｓｕｌｐｈｉｄｅ（ＣＳＳＧ）、２−ａｍｉｎｏａｄｉｐｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＭＡＤ）、ｂｅｔｏｎｉｃｉｎｅ（ＢＥＴＮＣ）、Ｎ６−ｍｅｔｈｙｌ−２’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ（Ｎ６ＭＤＡ）、ｒｉｂｕｌｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＲＩＢ５Ｐ）、６−ａｍｉｎｏｈｅｘａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（６ＡＨＸＡ）、ａｓｐａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＡＳＰ）、ｈｙｐｏｔａｕｒｉｎｅ（ＨＹＰＴ）、２−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＢＡ）、ｄｏｐａｍｉｎｅ（ＤＯＰＭ）、ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＭＥＴＳＦ）、ｐｒｏｌｉｎｅ（ＰＲＯ）、ｇａｍｍａ−ｇｌｕｔａｍｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ（ＧＧＬＣＹ）、ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ（ＧＳＳＧ）、Ｎ−ｏｍｅｇａ−ｍｅｔｈｙｌｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ（ＮＯＭＴＲ）、ｐｈｅｎｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＰＨＥＰ）、２−ｃｙａｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ（２ＣＹＰＲ）、ｃａｒｂａｃｈｏｌ（ＣＡＲＢ）、５−ｏｘｏｐｒｏｌｉｎｅ（５ＯＰＲＯ）及びａｄｅｎｏｓｉｎｅ（ＡＤＥＮ）から選ばれる１以上の分子からなる、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカー。
【請求項２】
抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む請求項１記載のマーカー。
【請求項３】
少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中のＣＳＳＧ、２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、Ｎ６ＭＤＡ、ＲＩＢ５Ｐ、６ＡＨＸＡ、ＡＳＰ、ＨＹＰＴ、２ＡＢＡ、ＤＯＰＭ、ＭＥＴＳＦ、ＰＲＯ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、２ＣＹＰＲ、ＣＡＲＢ、５ＯＰＲＯ及びＡＤＥＮから選ばれる１以上の分子の量を測定する工程を含む、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定方法。
【請求項４】
さらに、前記測定結果を対照レベルと比較することにより、当該がん患者の抗がん剤に対する感受性を判定する工程を含む請求項３記載の判定方法。
【請求項５】
当該がん患者が１サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量を測定するものであり、前記対照レベルがレスポンダーのカットオフ値であって、該カットオフ値が２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2≦であり、２ＣＹＰＲの場合に３．４４４×１０-3≦であり、６ＡＨＸＡの場合に７．１７５×１０-3≦であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2≦であり、ＣＡＲＢの場合に≦８．４７２×１０-3であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2≦であり、ＧＧＬＣＹの場合に７．３８９×１０-3≦であり、ＧＳＳＧの場合に５．６０６×１０-4≦であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に≦１．２０８×１０-3であり、ＮＯＭＴＲの場合に≦７．００６×１０-2であり、ＰＨＥＰの場合に≦１．８０１×１０-2であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に≦３．００５×１０-3である請求項４記載の判定方法。
【請求項６】
当該がん患者が１サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、さらに、次式（１）により、レスポンダーである確率（ｐ）を算出し、当該がん患者がレスポンダーであるか否かを判定する工程を含む請求項３記載の判定方法。
【数１】
2020067228.tif 000013
（式中、２ＡＭＡＤは、２ＡＭＡＤの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１６．２６８８を、カットオフ値未満であった場合に１６．２６８８を示し、ＢＥＴＮＣは、ＢＥＴＮＣの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−８．６５６０を、カットオフ値未満であった場合に８．６５６０を示し、ＣＳＳＧは、ＣＳＳＧの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．４３７２を、カットオフ値未満であった場合に１．４３７２を示し、Ｎ６ＭＤＡは、Ｎ６ＭＤＡの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−８．６６５８を、カットオフ値を超えた場合に８．６６５８を示し、ＲＩＢ５Ｐは、ＲＩＢ５Ｐの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．３４５１を、カットオフ値を超えた場合に１．３４５１を示し、該カットオフ値は、２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に１．２０８×１０-3であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に３．００５×１０-3である。）
【請求項７】
当該がん患者が２サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯから選ばれる１以上の分子の量を測定するものであり、前記対照レベルがレスポンダーのカットオフ値であって、該カットオフ値が２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1≦であり、５ＯＰＲＯの場合に１．８４３×１０-1≦であり、６ＡＨＸＡの場合に４．５６８×１０-3≦であり、ＡＤＥＮの場合に２．３０５×１０-2≦であり、ＡＳＰの場合に≦１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4≦であり、ＨＹＰＴの場合に≦１．７６８×１０-2であり、ＭＥＴＳＦの場合に３．８３６×１０-2≦であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６≦である請求項４記載の判定方法。
【請求項８】
当該がん患者が２サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、さらに、次式（２）により、レスポンダーである確率（ｐ）を算出し、当該がん患者がレスポンダーであるか否かを判定する工程を含む請求項３記載の判定方法。
【数２】
2020067228.tif 000014
（式中、２ＡＢＡは、２ＡＢＡの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−２．３０５９を、カットオフ値未満であった場合に２．３０５９を示し、ＡＳＰは、ＡＳＰの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．８１５４を、カットオフ値を超えた場合に１．８１５４を示し、ＤＯＰＭは、ＤＯＰＭの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．６３４５を、カットオフ値未満であった場合に１．６３４５を示し、ＨＹＰＴは、ＨＹＰＴの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−２．４１１３を、カットオフ値を超えた場合に２．４１１３を示し、ＭＥＴＳＦは、ＭＥＴＳＦの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．５５５５を、カットオフ値未満であった場合に１．５５５５を示し、ＰＲＯは、ＰＲＯの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−９．０７９４を、カットオフ値未満であった場合に９．０７９４を示し、該カットオフ値は、２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1であり、ＡＳＰの場合に１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4であり、ＨＹＰＴの場合に１．７６８×１０-2であり、ＭＥＴＳＦの場合に３．８３６×１０-2であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６である。）
【請求項９】
抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む請求項３〜８のいずれか１項に記載の判定方法。
【請求項１０】
ＣＳＳＧ、ｇｌｙｃｅｒｏｌ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＧＬＣ３Ｐ）、ｑｕｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＱＵＩＮＡ）、ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ（ＢＥＺＩＺ）、ｇｌｙｃｙｌｌｅｕｃｉｎｅ（ＧＬＹＬＥ）、ＧＧＬＣＹ、ｄｏｄｅｃａｎｅｄｉｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＤＤＮＡ）、ｇｕａｎｉｄｉｎｏｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＵＳＡ）、ｏｃｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＯＣＴＡ）、１０−ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｃａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（１０ＨＤＡ）、２ＡＭＡＤ、ａｌａｎｉｎｅ（ＡＬＡ）、ｃｈｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＣＨＯＡ）、ｇｌｕｃｏｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＣＯＡ）、ｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＵ）、ｇｌｕｔａｒｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＴＡ）、ｌｅｕｃｉｎｅ（ＬＥＵ）、ｌｙｓｉｎｅ（ＬＹＳ）、Ｎ６−ａｃｅｔｙｌｌｙｓｉｎｅ（Ｎ６ＡＬＹ）、ｐｉｐｅｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＰＩＰＥＣ）、ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ（ＴＨＲ）及びｖａｌｉｎｅ（ＶＡＬ）から選ばれる１以上の分子からなる、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカー。
【請求項１１】
抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む請求項１０記載のマーカー。
【請求項１２】
少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中のＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＱＵＩＮＡ、ＢＥＺＩＺ、ＧＬＹＬＥ、ＧＧＬＣＹ、ＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ、ＯＣＴＡ、１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＣＨＯＡ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＰＩＰＥＣ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量を測定する工程を含む、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測方法。
【請求項１３】
抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む請求項１２記載の予後予測方法。
【請求項１４】
少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中のＣＳＳＧ、２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、Ｎ６ＭＤＡ、ＲＩＢ５Ｐ、６ＡＨＸＡ、ＡＳＰ、ＨＹＰＴ、２ＡＢＡ、ＤＯＰＭ、ＭＥＴＳＦ、ＰＲＯ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、２ＣＹＰＲ、ＣＡＲＢ、５ＯＰＲＯ及びＡＤＥＮから選ばれる１以上の分子の量を測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする請求項３〜９のいずれか１項に記載の判定方法を実施するためのキット。
【請求項１５】
少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中のＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＱＵＩＮＡ、ＢＥＺＩＺ、ＧＬＹＬＥ、ＧＧＬＣＹ、ＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ、ＯＣＴＡ、１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＣＨＯＡ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＰＩＰＥＣ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量を測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする請求項１２又は１３記載の予後予測方法を実施するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、対象となる患者のがんが、使用する抗がん剤に治療反応性を有するか否かを抗がん剤治療開始後早期に判定するために用いる抗がん剤感受性判定マーカー及びその利用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗がん剤には、アルキル化剤、白金製剤、代謝拮抗剤、抗がん性抗生物質、抗がん性植物アルカロイド等の種類がある。そしてこれらの抗がん剤には、がんの種類によって効果を示す場合と効果を示さない場合がある。しかし、有効であると認められている種類のがんであっても、個々の患者によって効果を示す場合と効果を示さない場合があることが知られている。このような個々の患者のがんに対して抗がん剤が効果を示すか否かを抗がん剤感受性という。【０００３】
オキサリプラチン（ＳＰ−４−２）−［（１Ｒ，２Ｒ）−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ−１，２−ｄｉａｍｉｎｅ−κＮ，κＮ’］［ｅｔｈａｎｅｄｉｏａｔｏ（２−）−κＯ1，κＯ2］ｐｌａｔｉｎｕｍ（ＩＵＰＡＣ）は第三世代白金錯体系抗悪性腫瘍薬である。作用機序は先行薬剤であるシスプラチン（ＣＤＤＰ）やカルボプラチン（ＣＢＤＣＡ）と同様、ＤＮＡ塩基との架橋形成によるＤＮＡ合成阻害、蛋白合成阻害と考えられているが、ＣＤＤＰやＣＢＤＣＡが無効な大腸癌に対してもオキサリプラチン（Ｌ−ＯＨＰ）は抗腫瘍効果を示し、従来の白金錯体系抗悪性腫瘍薬とは異なる抗腫瘍スペクトルを示す。アメリカでは２００４年１月にフルオロウラシル（５−ＦＵ）／レボホリナート（ＬＶ）との併用で転移性結腸・直腸癌のファーストライン治療として承認されており、日本においても２００５年４月、「治癒切除不能な進行・再発の結腸・直腸癌」に対して他の抗悪性腫瘍剤との併用（本剤はレボホリナート及びフルオロウラシルの静脈内持続投与法等との併用の場合に有用性が認められている）にて薬価収載された。進行再発大腸癌の治療は、１９９０年代前半まで行われていた５−ＦＵ／ＬＶ療法での生存率は１０〜１２ヶ月であったのに対し、オキサリプラチンを加えたＦＯＬＦＯＸ療法での生存期間は１９．５ヶ月とほぼ２倍にまで到達している。さらに２００９年８月には、同じくレボホリナート及びフルオロウラシルの静脈内持続投与法との併用による「結腸癌における術後補助化学療法」が効能・効果として追加され、大腸癌患者での使用拡大と有益性が期待できる薬剤である。大腸癌以外でも、２００９年８月には治癒切除不能な膵癌で、２０１５年３月には胃癌で、いずれも他の化学療法剤との併用で効能・効果が追加されている。【０００４】
しかし、それでもなお進行再発大腸癌に対するＦＯＬＦＯＸ療法の奏効率は５０％程度であり、換言すれば治療を受けた患者の半数は効果が得られていないことを意味する。また、オキサリプラチンの使用により好中球減少症のほか高頻度の末梢神経障害を呈し、これは致死的副作用ではないものの治療継続を困難にする因子ともなっている。したがって、治療開始前に効果の期待できる患者（レスポンダー）と、効果の期待できない患者（ノンレスポンダー）を予測し、治療反応性を早期に診断できるバイオマーカーにより、有効性と安全性の高い化学療法が実現する。【０００５】
さらに、一般にがん化学療法の治療スケジュールは長期に渡るため、治療継続中における抗がん剤に対する感受性の経時的モニターは治療継続の可否の判定を可能とし、患者負担や副作用軽減につながるのみならず医療経済の観点からも有用であると考えられる。個々の患者における治療反応性を予測、そして早期に診断して適切な薬剤や治療レジメンを選択する「個別化治療」実現のためには、オキサリプラチン等の抗がん剤の効果予測もしくは治療応答性の早期診断を可能とするバイオマーカーの確立は急務である。【０００６】
かかる観点から本発明者らは、薬剤感受性の異なる複数のヒトがん細胞株あるいは当該細胞株を移植した担癌マウスに薬剤を曝露し、薬剤曝露後の細胞内代謝変動についてキャピラリー電気泳動−飛行時間型質量分析計（ＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳ）を用いて網羅的に解析し、薬剤感受性と比較解析することにより、抗がん剤感受性判定マーカーの探索を行い、いくつかのマーカーを報告した（特許文献１〜４）。しかしながら、これらのマーカーは、いまだ実用化には至っていない。また、近年では、ＦＯＬＦＯＸ療法にベバシズマブ、セツキシマブやパニツムマブ等の抗体医薬を加えた併用療法も確立されていることから、ＦＯＬＦＯＸ療法の効果予測もしくは治療応答性の早期診断を可能とするバイオマーカーの重要性は益々増大している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２００９／０９６１８９号
【特許文献２】国際公開第２０１１／０５２７５０号
【特許文献３】国際公開第２０１２／１２７９８４号
【特許文献４】国際公開第２０１３／１２５６７５号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、個々の患者の治療反応性を治療開始後早期に判別できる抗がん剤感受性判定マーカーを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
そこで本発明者らは、結腸・直腸がん患者の血液検体を対象とし、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法１サイクル実施後又は２サイクル実施後の血中代謝物をＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ及びＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて網羅的に測定し、得られた代謝物の濃度を説明変数とし、臨床効果を目的変数としたロジスティック解析を行った。その結果、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法に対する治療反応性の高いレスポンダー群の患者と治療反応性の低いノンレスポンダー群の患者との間で、特定の物質の濃度が相違すること、また、これらの物質が抗がん剤の治療開始後早期の感受性判定マーカーとして有用であることを見出した。また、本発明者らは、当該がん患者の１サイクル実施後の血中代謝物と残余の全生存期間、又は２サイクル実施後の血中代謝物と残余の全生存期間について、比例ハザードモデル解析を行った。その結果、特定の物質の血中濃度が高いほど生存期間が長いこと、別の特定の物質の血中濃度が高いほど生存期間が短いこと、また、これらの物質が抗がん剤の治療開始後早期の予後予測マーカーとして有用であることを見出し、本発明を完成した。【００１０】
すなわち、本発明は、次の〔１〕〜〔１５〕の発明を提供するものである。
〔１〕２−ａｍｉｎｏａｄｉｐｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＭＡＤ）、２−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＢＡ）、２−ｃｙａｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ（２ＣＹＰＲ）、５−ｏｘｏｐｒｏｌｉｎｅ（５ＯＰＲＯ）、６−ａｍｉｎｏｈｅｘａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（６ＡＨＸＡ）、ａｄｅｎｏｓｉｎｅ（ＡＤＥＮ）、ａｓｐａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＡＳＰ）、ｂｅｔｏｎｉｃｉｎｅ（ＢＥＴＮＣ）、ｃａｒｂａｃｈｏｌ（ＣＡＲＢ）、ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｄｉｓｕｌｐｈｉｄｅ（ＣＳＳＧ）、ｄｏｐａｍｉｎｅ（ＤＯＰＭ）、ｇａｍｍａ−ｇｌｕｔａｍｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ（ＧＧＬＣＹ）、ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ（ＧＳＳＧ）、ｈｙｐｏｔａｕｒｉｎｅ（ＨＹＰＴ）、ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＭＥＴＳＦ）、Ｎ６−ｍｅｔｈｙｌ−２’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ（Ｎ６ＭＤＡ）、Ｎ−ｏｍｅｇａ−ｍｅｔｈｙｌｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ（ＮＯＭＴＲ）、ｐｈｅｎｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＰＨＥＰ）、ｐｒｏｌｉｎｅ（ＰＲＯ）及びｒｉｂｕｌｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＲＩＢ５Ｐ）から選ばれる１以上の分子からなる、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカー。
〔２〕抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む〔１〕記載のマーカー。
〔３〕少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中の２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量を測定する工程を含む、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定方法。
〔４〕さらに、前記測定結果を対照レベルと比較することにより、当該がん患者の抗がん剤に対する感受性を判定する工程を含む〔３〕記載の判定方法。
〔５〕当該がん患者が１サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量を測定するものであり、前記対照レベルがレスポンダーのカットオフ値であって、該カットオフ値が２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2≦であり、２ＣＹＰＲの場合に３．４４４×１０-3≦であり、６ＡＨＸＡの場合に７．１７５×１０-3≦であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2≦であり、ＣＡＲＢの場合に≦８．４７２×１０-3であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2≦であり、ＧＧＬＣＹの場合に７．３８９×１０-3≦であり、ＧＳＳＧの場合に５．６０６×１０-4≦であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に≦１．２０８×１０-3であり、ＮＯＭＴＲの場合に≦７．００６×１０-2であり、ＰＨＥＰの場合に≦１．８０１×１０-2であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に≦３．００５×１０-3である〔４〕記載の判定方法。
〔６〕当該がん患者が１サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、さらに、次式（１）により、レスポンダーである確率（ｐ）を算出し、当該がん患者がレスポンダーであるか否かを判定する工程を含む〔３〕記載の判定方法。
【数１】
2020067228.tif 000002
（式中、２ＡＭＡＤは、２ＡＭＡＤの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１６．２６８８を、カットオフ値未満であった場合に１６．２６８８を示し、ＢＥＴＮＣは、ＢＥＴＮＣの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−８．６５６０を、カットオフ値未満であった場合に８．６５６０を示し、ＣＳＳＧは、ＣＳＳＧの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．４３７２を、カットオフ値未満であった場合に１．４３７２を示し、Ｎ６ＭＤＡは、Ｎ６ＭＤＡの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−８．６６５８を、カットオフ値を超えた場合に８．６６５８を示し、ＲＩＢ５Ｐは、ＲＩＢ５Ｐの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．３４５１を、カットオフ値を超えた場合に１．３４５１を示し、該カットオフ値は、２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に１．２０８×１０-3であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に３．００５×１０-3である。）
〔７〕当該がん患者が２サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯから選ばれる１以上の分子の量を測定するものであり、前記対照レベルがレスポンダーのカットオフ値であって、該カットオフ値が２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1≦であり、５ＯＰＲＯの場合に１．８４３×１０-1≦であり、６ＡＨＸＡの場合に４．５６８×１０-3≦であり、ＡＤＥＮの場合に２．３０５×１０-2≦であり、ＡＳＰの場合に≦１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4≦であり、ＨＹＰＴの場合に≦１．７６８×１０-2であり、ＭＥＴＳＦの場合に３．８３６×１０-2≦であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６≦である〔４〕記載の判定方法。
〔８〕当該がん患者が２サイクルの抗がん剤治療を受けた患者であり、さらに、次式（２）により、レスポンダーである確率（ｐ）を算出し、当該がん患者がレスポンダーであるか否かを判定する工程を含む〔３〕記載の判定方法。
【数２】
2020067228.tif 000003
（式中、２ＡＢＡは、２ＡＢＡの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−２．３０５９を、カットオフ値未満であった場合に２．３０５９を示し、ＡＳＰは、ＡＳＰの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．８１５４を、カットオフ値を超えた場合に１．８１５４を示し、ＤＯＰＭは、ＤＯＰＭの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．６３４５を、カットオフ値未満であった場合に１．６３４５を示し、ＨＹＰＴは、ＨＹＰＴの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−２．４１１３を、カットオフ値を超えた場合に２．４１１３を示し、ＭＥＴＳＦは、ＭＥＴＳＦの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．５５５５を、カットオフ値未満であった場合に１．５５５５を示し、ＰＲＯは、ＰＲＯの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−９．０７９４を、カットオフ値未満であった場合に９．０７９４を示し、該カットオフ値は、２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1であり、ＡＳＰの場合に１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4であり、ＨＹＰＴの場合に１．７６８×１０-2であり、ＭＥＳＦの場合に３．８３６×１０-2であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６である。）
〔９〕抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む〔３〕〜〔８〕のいずれかに記載の判定方法。
〔１０〕１０−ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｃａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（１０ＨＤＡ）、２ＡＭＡＤ、ａｌａｎｉｎｅ（ＡＬＡ）、ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ（ＢＥＺＩＺ）、ｃｈｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＣＨＯＡ）、ＣＳＳＧ、ｄｏｄｅｃａｎｅｄｉｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＤＤＮＡ）、ＧＧＬＣＹ、ｇｌｕｃｏｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＣＯＡ）、ｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＵ）、ｇｌｕｔａｒｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＴＡ）、ｇｌｙｃｅｒｏｌ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＧＬＣ３Ｐ）、ｇｌｙｃｙｌｌｅｕｃｉｎｅ（ＧＬＹＬＥ）、ｇｕａｎｉｄｉｎｏｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＵＳＡ）、ｌｅｕｃｉｎｅ（ＬＥＵ）、ｌｙｓｉｎｅ（ＬＹＳ）、Ｎ６−ａｃｅｔｙｌｌｙｓｉｎｅ（Ｎ６ＡＬＹ）、ｏｃｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＯＣＴＡ）、ｐｉｐｅｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＰＩＰＥＣ）、ｑｕｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＱＵＩＮＡ）、ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ（ＴＨＲ）及びｖａｌｉｎｅ（ＶＡＬ）から選ばれる１以上の分子からなる、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカー。
〔１１〕抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む〔１０〕記載のマーカー。
〔１２〕少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中の１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＣＳＳＧ、ＤＤＮＡ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＯＣＴＡ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量を測定する工程を含む、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測方法。
〔１３〕抗がん剤が、さらにベバシズマブを含む〔１２〕記載の予後予測方法。
〔１４〕少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中の２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量を測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする〔３〕〜〔９〕のいずれかに記載の判定方法を実施するためのキット。
〔１５〕少なくとも１サイクルのオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療を受けたがん患者由来の生体試料中の１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ａｌａｎｉｎｅ（ＡＬＡ）、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＣＳＳＧ、ＤＤＮＡ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＯＣＴＡ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量を測定するためのプロトコールを含むことを特徴とする〔１２〕又は〔１３〕記載の予後予測方法を実施するためのキット。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカー又は抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーを用いれば、個々の患者の抗がん剤感受性又は予後を治療開始後早期に評価することが可能となり、治療を継続すべきか否かの判定ができる。その結果、治療効果の高い抗がん剤については、継続投与の判断が可能となる一方、治療効果の得られない抗がん剤については、継続投与を回避できるため、継続投与していた場合に想定されるがんの進行、副作用の増大を防止でき、患者の負担軽減、医療費の削減にもつながる。本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカー又は抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーの測定試薬は、抗がん剤の治療開始後早期感受性判定試薬又は抗がん剤の治療開始後早期予後予測試薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法に対する治療反応性の異なるレスポンダー（Ｒ）群とノンレスポンダー（Ｎ−Ｒ）群で治療１サイクル実施後の濃度に有意差が見られた物質を示す図である。
【図２】ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法に対する治療反応性の異なるレスポンダー（Ｒ）群とノンレスポンダー（Ｎ−Ｒ）群で治療２サイクル実施後の濃度に有意差が見られた物質を示す図である。
【図３】（ａ）式（１）の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定モデルのＲＯＣ曲線を示す図である。（ｂ）式（２）の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定モデルのＲＯＣ曲線を示す図である。
【図４】（ａ）式（１）により治療１サイクル実施後の代謝物を元にＲ群とＮ−Ｒ群に分けた上で、カプラン・マイアー曲線を描いた図である。（ｂ）式（２）により治療２サイクル実施後の代謝物を元にＲ群とＮ−Ｒ群に分けた上で、カプラン・マイアー曲線を描いた図である。
【図５】（ａ）治療１サイクル実施後の代謝物濃度と残余のＯＳの関係をＣＯＸの比例ハザードモデルで解析した際に有意差を示した代謝物のハザード比とその９５％信頼区間の図である。（ｂ）治療２サイクル実施後の代謝物濃度と残余のＯＳの関係をＣＯＸの比例ハザードモデルで解析した際に有意差を示した代謝物のハザード比とその９５％信頼区間の図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、２−ａｍｉｎｏａｄｉｐｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＭＡＤ）、２−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ（２ＡＢＡ）、２−ｃｙａｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ（２ＣＹＰＲ）、５−ｏｘｏｐｒｏｌｉｎｅ（５ＯＰＲＯ）、６−ａｍｉｎｏｈｅｘａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（６ＡＨＸＡ）、ａｄｅｎｏｓｉｎｅ（ＡＤＥＮ）、ａｓｐａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＡＳＰ）、ｂｅｔｏｎｉｃｉｎｅ（ＢＥＴＮＣ）、ｃａｒｂａｃｈｏｌ（ＣＡＲＢ）、ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｄｉｓｕｌｐｈｉｄｅ（ＣＳＳＧ）、ｄｏｐａｍｉｎｅ（ＤＯＰＭ）、ｇａｍｍａ−ｇｌｕｔａｍｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ（ＧＧＬＣＹ）、ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ（ＧＳＳＧ）、ｈｙｐｏｔａｕｒｉｎｅ（ＨＹＰＴ）、ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＭＥＴＳＦ）、Ｎ６−ｍｅｔｈｙｌ−２’−ｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ（Ｎ６ＭＤＡ）、Ｎ−ｏｍｅｇａ−ｍｅｔｈｙｌｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ（ＮＯＭＴＲ）、ｐｈｅｎｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＰＨＥＰ）、ｐｒｏｌｉｎｅ（ＰＲＯ）及びｒｉｂｕｌｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＲＩＢ５Ｐ）の２０種の代謝物質である。
後記実施例に示すように、結腸・直腸がん患者由来の血液検体を対象とし、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法１サイクル実施後の血中代謝物の量をＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ及びＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて網羅的に解析した結果、２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ及びＧＳＳＧについては、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法に対する治療反応性の高いレスポンダー群の患者で、治療反応性の低いノンレスポンダー群の患者に比して濃度が高いことが判明した。また、ＣＡＲＢ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐについては、レスポンダー群の患者で、ノンレスポンダー群の患者に比して濃度が低いことが判明した。したがって、これら１２物質は、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤に対する治療開始後早期感受性判定マーカー、特にオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩とベバシズマブを含む抗がん剤に対する治療開始後早期感受性判定マーカーとして有用である。中でも、２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ及びＲＩＢ５Ｐの５物質の組み合わせは特に有用であり、これらを用いることで対象とするがん患者がレスポンダーであるか否かをより高い精度で判定することが可能となる。
さらに、後記実施例に示すように、結腸・直腸がん患者由来の血液検体を対象とし、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法２サイクル実施後の血中代謝物の量をＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ及びＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて網羅的に解析した結果、２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＤＯＰＭ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯについては、レスポンダー群の患者で、ノンレスポンダー群の患者に比して濃度が高いことが判明した。また、ＡＳＰ及びＨＹＰＴについては、レスポンダー群の患者で、ノンレスポンダー群の患者に比して濃度が低いことが判明した。したがって、これら９物質は、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤に対する治療開始後早期感受性判定マーカー、特にオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩とベバシズマブを含む抗がん剤に対する治療開始後早期感受性判定マーカーとして有用である。中でも、２ＡＢＡ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯの６物質の組み合わせは特に有用であり、これらを用いることで対象とするがん患者がレスポンダーであるか否かをより高い精度で判定することが可能となる。
【００１４】
本発明における抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーは、１０−ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｃａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（１０ＨＤＡ）、２ＡＭＡＤ、ａｌａｎｉｎｅ（ＡＬＡ）、ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ（ＢＥＺＩＺ）、ｃｈｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＣＨＯＡ）、ＣＳＳＧ、ｄｏｄｅｃａｎｅｄｉｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＤＤＮＡ）、ＧＧＬＣＹ、ｇｌｕｃｏｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＣＯＡ）、ｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＵ）、ｇｌｕｔａｒｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＬＴＡ）、ｇｌｙｃｅｒｏｌ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＧＬＣ３Ｐ）、ｇｌｙｃｙｌｌｅｕｃｉｎｅ（ＧＬＹＬＥ）、ｇｕａｎｉｄｉｎｏｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＧＵＳＡ）、ｌｅｕｃｉｎｅ（ＬＥＵ）、ｌｙｓｉｎｅ（ＬＹＳ）、Ｎ６−ａｃｅｔｙｌｌｙｓｉｎｅ（Ｎ６ＡＬＹ）、ｏｃｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＯＣＴＡ）、ｐｉｐｅｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ（ＰＩＰＥＣ）、ｑｕｉｎｉｃ  ａｃｉｄ（ＱＵＩＮＡ）、ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ（ＴＨＲ）及びｖａｌｉｎｅ（ＶＡＬ）の２２種の代謝物質である。
後記実施例に示すように、結腸・直腸がん患者由来の血液検体を対象とし、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法１サイクル実施後の血中代謝物の量と残余の全生存期間（ＯＳ）をＣＯＸの比例ハザードモデルで解析した結果、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ及びＱＵＩＮＡは、血中の濃度が高いほど生存期間が長いこと、また、ＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ及びＯＣＴＡは血中濃度が高いほど生存期間が短いことが判明した。
加えて、後記実施例に示すように、結腸・直腸がん患者由来の血液検体を対象とし、ベバシズマブ併用ｍＦＯＬＦＯＸ６療法２サイクル実施後の血中代謝物の量と残余の全生存期間をＣＯＸの比例ハザードモデルで解析した結果、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬは、血中の濃度が高いほど生存期間が長いこと、また、１０ＨＤＡ、ＣＨＯＡ及びＰＩＰＥＣは血中濃度が高いほど生存期間が短いことが判明した。したがって、これら２２物質は、単独で、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤、特にオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩とベバシズマブを含む抗がん剤の治療開始後早期の予後予測マーカー、特に、二次治療以降も含めたＯＳの長短の予測マーカーとして有用である。
【００１５】
ここで、「レスポンダー」とは、ＲＥＣＩＳＴ基準（Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．２０００  Ｆｅｂ  ２；９２（３）：２０５−１６）に従い放射線診断医による画像診断の結果、試験治療期間中の最大の効果がｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅあるいはｐａｒｔｉａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅを示した患者のことをさし、「ノンレスポンダー」とは、ＲＥＣＩＳＴ基準に従い放射線診断医による画像診断の結果、試験治療期間中の最大の効果がｓｔａｂｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅあるいはｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅの患者をさす。
本明細書において、「抗がん剤治療開始後早期」とは、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤、特にオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩とベバシズマブを含む抗がん剤による治療を少なくとも１サイクル、好ましくは１サイクル以上４サイクル以下、より好ましくは１サイクル以上３サイクル以下、さらに好ましくは１サイクル又は２サイクル受けた状態を指す。
【００１６】
２ＡＭＡＤは、リシンの代謝経路上の代謝物である。しかし、２ＡＭＡＤがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
さらに、２ＡＭＡＤがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００１７】
２ＡＢＡは、システイン・メチオニン代謝経路上の代謝物であるが、２ＡＢＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００１８】
２ＣＹＰＲは、ピリジン誘導体の一種である。しかし、２ＣＹＰＲがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００１９】
５ＯＰＲＯは、グルタミン酸から生成されるアミノ酸の一種である。しかし、５ＯＰＲＯがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２０】
６ＡＨＸＡは、カプロラクタム代謝物であり、フィブリンに拮抗してプラスミノーゲンに結合することでフィブリンの分解を抑制し出血を抑制することが知られており、止血剤として用いられることがある。しかし、６ＡＨＸＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル又は２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２１】
ＡＤＥＮは、生体内でＤＮＡ等の塩基として用いられている。しかし、ＡＤＥＮがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２２】
ＡＳＰはアミノ酸の一つであり、一般的には生体内の窒素処理で中心的な役割を持つことが知られている。すでに、ＡＳＰがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩を含む抗がん剤の感受性判定マーカーとして使用でき、オキサリプラチン高感受性の細胞株で低感受性の細胞株と比較して高濃度となることが知られている（国際公開第２０１３／１２５６７５号）。しかし、ＡＳＰがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２３】
ＢＥＴＮＣは、プロリン関連化合物である。しかし、ＢＥＴＮＣがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２４】
ＣＡＲＢは、副交感神経を刺激する物質として知られている。しかし、ＣＡＲＢがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２５】
ＣＳＳＧとＧＳＳＧは共に、薬物の解毒化に関与する物質として知られるＧＳＨの代謝物である。ＣＳＳＧは、ＧＳＨとＣｙｓが結合したものであり、ＧＳＳＧはＧＳＨが酸化されることにより形成されるＧＳＨの２量体である。血中のＧＳＨは採血後速やかに酸化されＧＳＳＧになること、ＧＳＨは採血後速やかに血中にＧＳＨより豊富に存在するＣｙｓとより多くが結合し数分でＣＳＳＧを形成する等の知見が知られているが、薬効とＣＳＳＧ、ＧＳＳＧに注目した報告は、がんと関連した報告も含めてない。ＣＳＳＧ又はＧＳＳＧがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
さらに、ＣＳＳＧがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル又は２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００２６】
ＤＯＰＭは、中枢神経系に存在する神経伝達物質で、運動調節、ホルモン調節、感情、意欲、学習などに関与する物質であるが、ＤＯＰＭがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２７】
ＧＧＬＣＹは、グルタチオン代謝経路上の代謝物である。しかし、ＧＧＬＣＹがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
さらに、ＧＧＬＣＹがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００２８】
ＨＹＰＴは、システインからタウリンの生合成における中間産物であり、３−ｓｕｌｆｉｎｏ−Ｌ−ａｌａｎｉｎｅやｃｙｓｔｅａｍｉｎｅの酸化により合成される。ＨＹＰＴは、抗炎症作用（特開２０１７−７９８０号公報）や抗酸化作用（特開２０１７−１４１６７号公報）が知られている。しかし、ＨＹＰＴがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００２９】
ＭＥＴＳＦは、ＣＹＳ及びｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ代謝経路上の物質として知られており、前立腺がんもしくは酸化ストレスのバイオマーカー又はうつ病を診断するためのバイオマーカーとしても知られている。しかし、ＭＥＴＳＦがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３０】
Ｎ６ＭＤＡは、ヌクレオシドの類似体として知られている。しかし、Ｎ６ＭＤＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３１】
ＮＯＭＴＲは、様々な種類の植物の樹皮、新芽、葉などに存在することが知られており、セロトニン４レセプター（５−ＨＴ４）レセプターアゴニストであり、自閉症やてんかん患者の尿から検出されることが知られている。しかし、ＮＯＭＴＲがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３２】
ＰＨＥＰは、アミノベンゾエート代謝系路上の産物として知られている。しかし、ＰＨＥＰがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３３】
ＰＲＯは、アミノ酸の一種である。しかし、ＰＲＯがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３４】
ＲＩＢ５Ｐは、ペントースリン酸経路の最終産物の一つである。しかし、ＲＩＢ５Ｐがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーとして使用できること、治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が低いときにレスポンダーと判定できることは全く知られていない。
【００３５】
１０ＨＤＡは、ローヤルゼリーに含まれている化合物である。しかし、１０ＨＤＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００３６】
ＡＬＡは、アミノ酸の一種で、ＡＬＡ、ａｓｐａｒｔａｔｅ及びｇｌｕｔａｍａｔｅ代謝経路、ＣＹＳ及びｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ代謝経路、Ｔａｕｒｉｎｅ及びｈｙｐｏｔａｕｒｉｎｅ代謝経路だけでなく様々な代謝経路上の物質として知られている。また、うつ病を診断するためのバイオマーカー又は前立腺がんのバイオマーカーとしても知られている。しかし、ＡＬＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００３７】
ＢＥＺＩＺは、ベンゼン環とイミダゾール環からなる複素環式化合物である。しかし、ＢＥＺＩＺがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル又は２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００３８】
ＣＨＯＡは、胆汁酸の一種である。しかし、ＣＨＯＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００３９】
ＤＤＮＡは、ジカルボン酸であり脂肪と炭水化物の中間体であることが知られており、また肝臓ｃａｒｎｉｔｉｎｅ  ｐａｌｍｉｔｏｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  Ｉ欠損症の指標として知られている。しかし、ＤＤＮＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００４０】
ＧＬＣＯＡは、グルコースの１位の炭素を酸化することにより生成するカルボン酸である。しかし、ＧＬＣＯＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４１】
ＧＬＵは、アミノ酸の一種である。しかし、ＧＬＵがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４２】
ＧＬＴＡは、生体内でクエン酸回路に関与している物質である。しかし、ＧＬＴＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４３】
ＧＬＣ３Ｐは、グリセロ脂質やグリセロリン酸代謝経路やがんにおけるコリン代謝経路上の代謝物である。しかし、ＧＬＣ３Ｐがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル又は２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４４】
ＧＬＹＬＥは、アミノカルボン酸の一種である。しかし、ＧＬＹＬＥがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４５】
ＧＵＳＡは、尿毒症起因物質の一つと考えられている化合物である。さらに血小板機能障害，とくに血小板第3因子能および血小板凝集能を阻害することが指摘されている。しかし、ＧＵＳＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００４６】
ＬＥＵは、必須アミノ酸の一つであり、ＶＡＬ、ＬＥＵ及びＩＬＥ合成並びに代謝経路上の物質であることが知られている。また、癌の血中バイオマーカー又はうつ病を診断するためのバイオマーカーとしても知られている。しかし、ＬＥＵがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４７】
ＬＹＳは、アミノ酸の一つであり、ＬＹＳ合成及び代謝経路上の物質であることが知られている。また、口腔癌検出用の癌用唾液バイオマーカー又はうつ病を診断するためのバイオマーカーとしても知られている。しかし、ＬＹＳがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４８】
Ｎ６ＡＬＹは、ＬＹＳ代謝経路上の物質として知られている。しかし、Ｎ６ＡＬＹがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００４９】
ＯＣＴＡは、脂肪酸合成経路上の代謝物として知られている。しかし、ＯＣＴＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００５０】
ＰＩＰＥＣは、リジン代謝系路上の物質であり、生体内でリジンを原料として生成される。慢性肝障害時に血漿中濃度が上昇することが知られている。しかし、ＰＩＰＥＣがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が短いと判定できることは全く知られていない。
【００５１】
ＱＵＩＮＡは、フェニルアラニン・チロシン・トリプトファン合成経路上の代謝物である。しかし、ＱＵＩＮＡがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に１サイクル又は２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００５２】
ＴＨＲは、アミノ酸の一つであり、Ｇｌｙｃｉｎｅ、ＳＥＲ及びＴＨＲ代謝経路上の物質であること、ＶＡＬ、ＬＥＵ及びＩＬＥ合成並びに代謝経路上の物質であることが知られている。すでに、ＴＨＲがうつ病を診断するためのバイオマーカーであることが知られている。しかし、ＴＨＲがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００５３】
ＶＡＬは、必須アミノ酸の一つであり、ＶＡＬ、ＬＥＵ及びＩＬＥ合成並びに代謝経路上の物質であることが知られている。また、癌の血中バイオマーカー又はうつ病を診断するためのバイオマーカーとして知られている。しかし、ＶＡＬがオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーとして使用できること、抗がん剤治療開始後早期、特に２サイクル実施後の濃度が高いほど生存期間が長いと判定できることは全く知られていない。
【００５４】
本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーの対象となる抗がん剤はオキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤であるが、体内で代謝されてオキサリプラチン、フルオロウラシル又はレボホリナートに変換される抗がん剤も同様に対象となる。具体的には、テガフール（ｔｅｇａｆｕｌ）やカペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）は体内で代謝されてフルオロウラシルに変換されることが明らかになっているため、オキサリプラチン又はその塩とテガフール又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤、オキサリプラチン又はその塩とカペシタビン又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤も対象となる。
【００５５】
オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤と組み合わせて使用する他の抗がん剤としては特に限定されないが、例えばシクロフォスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、チオテパ（ｔｈｉｏｔｅｐａ）、メルファラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）、ブスルファン（ｂｕｓｕｌｆａｎ）、ニムスチン（ｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、ラニムスチン（ｒａｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、ダカルバジン（ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ）、プロカルバジン（ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ）、テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、ネダプラチン（ｎｅｄａｐｌａｔｉｎ）、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、ペメトレキセド（ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）、テガフール／ウラシル（ｔｅｇａｆｕｌ・ｕｒａｃｉｌ）、ドキシフルリジン（ｄｏｘｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ）、テガフール／ギメラシル／オテラシル（ｔｅｇａｆｕｌ・ｇｉｍｅｒａｃｉｌ・ｏｔｅｒａｃｉｌ）、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、シタラビン（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、エノシタビン（ｅｎｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、６−メルカプトプリン（６−ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ）、フルダラビン（ｆｕｌｕｄａｒａｂｉｎ）、ペントスタチン（ｐｅｎｔｏｓｔａｔｉｎ）、クラドリビン（ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）、ヒドロキシウレア（ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ）、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、エピルビシン（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、ダウノルビシン（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン（ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎｅ）、ピラルビシン（ｐｉｒａｒｕｂｉｃｉｎ）、ミトキサントロン（ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、アムルビシン（ａｍｕｒｕｂｉｃｉｎ）、アクチノマイシンＤ（ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ  Ｄ）、ブレオマイシン（ｂｌｅｏｍｙｃｉｎｅ）、ペプレオマイシン（ｐｅｐｌｅｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシンＣ（ｍｙｔｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、アクラルビシン（ａｃｌａｒｕｂｉｃｉｎ）、ジノスタチン（ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）、ビンデシン（ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ）、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）、イリノテカン活性代謝物（ＳＮ−３８）、ノギテカン（ｎｏｇｉｔｅｃａｎ、ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、プレドニゾロン（ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）、デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）、タモキシフェン（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）、トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）、メドロキシプロゲステロン（ｍｅｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）、アナストロゾール（ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）、エキセメスタン（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）、レトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）、リツキシマブ（ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、イマチニブ（ｉｍａｔｉｎｉｂ）、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉ��ｉｂ）、ゲムツズマブ・オゾガマイシン（ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ  ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、ボルテゾミブ（ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、ベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、ダサチニブ（ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、パニツムマブ（ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、アスパラギナーゼ（ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ）、トレチノイン（ｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）、三酸化ヒ素（ａｒｓｅｎｉｃ  ｔｒｉｏｘｉｄｅ）、又はそれらの塩、又はそれらの活性代謝物等が挙げられる。このうち、イリノテカン、ＳＮ−３８若しくはそれらの塩又はベバシズマブが好ましく、特にベバシズマブが好ましい。
【００５６】
本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーを用いて抗がん剤感受性を判定するには、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療開始後早期のがん患者由来の生体試料（検体）中の２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおける濃度範囲、レスポンダーにおけるカットオフ値（以下、カットオフ値はＬＣ／ＭＳ用内部標準溶液の濃度を１とした場合の相対濃度を意味する）等）と比較することにより行うことができる。
【００５７】
具体的には、本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーのうち、２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子を用いて抗がん剤感受性を判定するには、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤を含む抗がん剤による治療１サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の当該分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおける濃度範囲、レスポンダーにおけるカットオフ値等）と比較することにより行うことができる。あるいは、抗がん剤治療１サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ及びＲＩＢ５Ｐの量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を各物質のレスポンダーのカットオフ値と比較して数値化し、特定の算出式に代入することにより行うことができる。
【００５８】
また、本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーのうち、２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯから選ばれる１以上の分子を用いて抗がん剤感受性を判定するには、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤を含む抗がん剤による治療２サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の当該分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおける濃度範囲、レスポンダーにおけるカットオフ値等）と比較することにより行うことができる。あるいは、抗がん剤治療２サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の２ＡＢＡ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯの量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を各物質のレスポンダーのカットオフ値と比較して数値化し、特定の算出式に代入することにより行うことができる。
【００５９】
本発明の抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーを用いた抗がん剤治療時の長期予後の予測方法は、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療開始後早期のがん患者由来の生体試料（検体）中の１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＣＳＳＧ、ＤＤＮＡ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＯＣＴＡ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおけるカットオフ値等）と比較することにより行うことができる。
【００６０】
具体的には、本発明の抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーのうち、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＤＤＮＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＯＣＴＡ及びＱＵＩＮＡから選ばれる１以上の分子を用いた予後予測方法は、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療１サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の当該分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおけるカットオフ値等）と比較することにより行うことができる。
【００６１】
また、本発明の抗がん剤の治療開始後早期予後予測マーカーのうち、１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子を用いた予後予測方法は、オキサリプラチン又はその塩とフルオロウラシル又はその塩とレボホリナート又はその塩を含む抗がん剤による治療２サイクル実施後のがん患者由来の生体試料（検体）中の当該分子の量を測定すること、詳細にはさらに当該測定結果を対照レベル（標準濃度、レスポンダーにおけるカットオフ値等）と比較することにより行うことができる。
【００６２】
ここで、がん患者としては、がんを有する被験者又はがんを有していた被験者が包含される。生体試料としては、例えば血液、血清、血漿、がん組織生検検体、がん摘出手術標本、便、尿、腹水、胸水、脳脊髄液、喀痰等が挙げられるが、血清が特に好ましい。
【００６３】
また、本発明の対象となるがんとしては、咽頭がんを代表とする口唇、口腔及び咽頭がん、食道がん、胃がん、結腸・直腸がんなどを代表とする消化器がん、肺がんを代表とする呼吸器及び胸腔内臓器がん、骨及び関節軟骨がん、皮膚の悪性黒色腫、有棘細胞がん及びその他の皮膚のがん、中皮腫を代表とする中皮及び軟部組織がん、乳房がん、子宮がん、卵巣がんを代表とする女性性器がん、前立腺がんを代表とする男性性器がん、膀胱がんを代表とする尿路がん、脳腫瘍を代表とする眼、脳及び中枢神経系がん、甲状腺及びその他の内分泌腺がん、非ホジキンリンパ腫やリンパ性白血病を代表とするリンパ組織、造血組織及び関連組織がん、及びこれらを原発巣とする転移組織のがん等が挙げられ、結腸・直腸がん（大腸がん）に対して好適に利用できるが、化学療法未治療がんが特に好ましい。
【００６４】
検体中の２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ、ＲＩＢ５Ｐ、１０ＨＤＡ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＤＤＮＡ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＯＣＴＡ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる分子の測定手段は、被測定対象物質により適宜決定すればよく、例えばＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ、ＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳ、Ｇａｓ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ−ＭＳ）等の各種質量分析装置、ＨＰＬＣ、免疫学的測定法、生化学的測定法等により測定可能である。
【００６５】
２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ及びＧＳＳＧから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療１サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の２ＡＭＡＤ、２ＣＹＰＲ、６ＡＨＸＡ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ及びＧＳＳＧから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性であると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることになり、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、治療効果の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
対照レベルとしては、例えば、カットオフ値が挙げられ、カットオフ値としては、２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2≦、２ＣＹＰＲの場合に３．４４４×１０-3≦、６ＡＨＸＡの場合に７．１７５×１０-3≦、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2≦、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2≦、ＧＧＬＣＹの場合に７．３８９×１０-3≦、ＧＳＳＧの場合に５．６０６×１０-4≦が挙げられる。
【００６６】
ＣＡＲＢ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療１サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中のＣＡＲＢ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性であると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることにより、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、治療効果の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
対照レベルとしては、例えば、カットオフ値が挙げられ、カットオフ値としては、ＣＡＲＢの場合に≦８．４７２×１０-3、Ｎ６ＭＤＡの場合に≦１．２０８×１０-3、ＮＯＭＴＲの場合に≦７．００６×１０-2、ＰＨＥＰの場合に≦１．８０１×１０-2、ＲＩＢ５Ｐの場合に≦３．００５×１０-3が挙げられる。
【００６７】
２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ及びＲＩＢ５Ｐにより、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療１サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ及びＲＩＢ５Ｐの量、例えば濃度を測定し、測定結果に応じて所定の数値を式（１）に代入すればよい。
【数３】
2020067228.tif 000004
（式中、２ＡＭＡＤは、２ＡＭＡＤの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１６．２６８８を、カットオフ値未満であった場合に１６．２６８８を示し、ＢＥＴＮＣは、ＢＥＴＮＣの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−８．６５６０を、カットオフ値未満であった場合に８．６５６０を示し、ＣＳＳＧは、ＣＳＳＧの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．４３７２を、カットオフ値未満であった場合に１．４３７２を示し、Ｎ６ＭＤＡは、Ｎ６ＭＤＡの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−８．６６５８を、カットオフ値を超えた場合に８．６６５８を示し、ＲＩＢ５Ｐは、ＲＩＢ５Ｐの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．３４５１を、カットオフ値を超えた場合に１．３４５１を示す。）
各物質のカットオフ値は、以下の通りである。２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に１．２０８×１０-3であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に３．００５×１０-3。
式（１）により算出されるｐは、対象とするがん患者がレスポンダーである確率を示す。ｐが０．５を超えれば、該がん患者のがんは対象とする抗がん剤に対して感受性である、すなわち該がん患者はレスポンダーであると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、ｐが０.５以下であれば、該がん患者のがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではない、すなわち該がん患者はノンレスポンダーであると判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることにより、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
【００６８】
２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＤＯＰＭ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療２サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の２ＡＢＡ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＤＯＰＭ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性であると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることにより、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
対照レベルとしては、例えば、カットオフ値が挙げられ、カットオフ値としては、２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1≦、５ＯＰＲＯの場合に１．８４３×１０-1≦、６ＡＨＸＡの場合に４．５６８×１０-3≦、ＡＤＥＮの場合に２．３０５×１０-2≦、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4≦、ＭＥＴＳＦの場合に３．８３６×１０-2≦、ＰＲＯの場合に２．９８７６≦が挙げられる。
【００６９】
ＡＳＰ及びＨＹＰＴから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療２サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中のＡＳＰ及びＨＹＰＴから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性であると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、そのがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではないと判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることにより、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
対照レベルとしては、例えば、カットオフ値が挙げられ、カットオフ値としては、ＡＳＰの場合に≦１．１７０×１０-1、ＨＹＰＴの場合に≦１．７６８×１０-2が挙げられる。
【００７０】
２ＡＢＡ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯにより、対象とする抗がん剤に対する感受性を判定するには、抗がん剤治療２サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の２ＡＢＡ、ＡＳＰ、ＤＯＰＭ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ及びＰＲＯの量、例えば濃度を測定し、測定結果に応じて所定の数値を式（２）に代入すればよい。
【数４】
2020067228.tif 000005
（式中、２ＡＢＡは、２ＡＢＡの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−２．３０５９を、カットオフ値未満であった場合に２．３０５９を示し、ＡＳＰは、ＡＳＰの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−１．８１５４を、カットオフ値を超えた場合に１．８１５４を示し、ＤＯＰＭは、ＤＯＰＭの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．６３４５を、カットオフ値未満であった場合に１．６３４５を示し、ＨＹＰＴは、ＨＹＰＴの測定結果がカットオフ値以下であった場合に−２．４１１３を、カットオフ値を超えた場合に２．４１１３を示し、ＭＥＴＳＦは、ＭＥＴＳＦの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．５５５５を、カットオフ値未満であった場合に１．５５５５を示し、ＰＲＯは、ＰＲＯの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−９．０７９４を、カットオフ値未満であった場合に９．０７９４を示す。）
各物質のカットオフ値は、以下の通りである。２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1であり、ＡＳＰの場合に１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4であり、ＨＹＰＴの場合に１．７６８×１０-2であり、ＭＥＳＦの場合に３．８３６×１０-2であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６である。
式（２）により算出されるｐは、対象とするがん患者がレスポンダーである確率を示す。ｐが０．５を超えれば、該がん患者のがんは対象とする抗がん剤に対して感受性である、すなわち該がん患者はレスポンダーであると判定できるため、これら抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できる。一方、ｐが０.５以下であれば、該がん患者のがんは対象とする抗がん剤に対して感受性ではない、すなわち該がん患者はノンレスポンダーであると判定できる。対象とする抗がん剤に対して感受性を有さない場合は、治療効果の期待できない抗がん剤の投与が継続されることにより、がんの進行、副作用が危惧される。このように、本発明における抗がん剤の治療開始後早期感受性判定マーカーは、治療効果を期待出来る患者に対して積極的に治療を継続するためのマーカーとして使用できるのに加え、薬効の期待できない抗がん剤の継続投与に伴うがんの進行や副作用を回避するためのマーカーとしても使用できる。
【００７１】
ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ及びＱＵＩＮＡから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤による治療時の予後を予測するには、抗がん剤治療１サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中のＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ及びＱＵＩＮＡから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、低いと判断される濃度を有する場合と比較して、予後がよいと予測できる。
【００７２】
ＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ及びＯＣＴＡから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤による治療時の予後を予測するには、抗がん剤治療１サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中のＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ及びＯＣＴＡから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、高いと判断される濃度を有する場合と比較して、予後がよいと予測できる。
【００７３】
２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤による治療時の予後を予測するには、抗がん剤治療２サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより高いと判断される濃度を有する場合は、低いと判断される濃度を有する場合と比較して、予後がよいと予測できる。
【００７４】
１０ＨＤＡ、ＣＨＯＡ及びＰＩＰＥＣから選ばれる１以上の分子により、対象とする抗がん剤による治療時の予後を予測するには、抗がん剤治療２サイクル実施後において、がん患者由来の生体試料中の１０ＨＤＡ、ＣＨＯＡ及びＰＩＰＥＣから選ばれる１以上の分子の量、例えば濃度を測定すればよい。濃度が所定の対照レベルより低いと判断される濃度を有する場合は、高いと判断される濃度を有する場合と比較して、予後がよいと予測できる。
【００７５】
本発明の抗がん剤の治療開始後早期感受性判定方法を実施するには、検体中の２ＡＭＡＤ、２ＡＢＡ、２ＣＹＰＲ、５ＯＰＲＯ、６ＡＨＸＡ、ＡＤＥＮ、ＡＳＰ、ＢＥＴＮＣ、ＣＡＲＢ、ＣＳＳＧ、ＤＯＰＭ、ＧＧＬＣＹ、ＧＳＳＧ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、Ｎ６ＭＤＡ、ＮＯＭＴＲ、ＰＨＥＰ、ＰＲＯ及びＲＩＢ５Ｐから選ばれる１以上の分子を測定するためのプロトコールを含むキットを用いるのが好ましい。また、本発明の抗がん剤の治療開始後早期予後予測方法を実施するには、検体中の１０ＨＤＡ、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＨＯＡ、ＣＳＳＧ、ＤＤＮＡ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＧＵＳＡ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＯＣＴＡ、ＰＩＰＥＣ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ及びＶＡＬから選ばれる１以上の分子を測定するためのプロトコールを含むキットを用いるのが好ましい。当該キットには、これら代謝物質の測定試薬、及びプロトコール（測定試薬の使用方法、及び抗がん剤感受性の有無を判定するための基準等）が含まれる。当該基準には、これら代謝物質の標準濃度、高いと判断される濃度、低いと判断される濃度、測定結果に影響を与える要因とその影響の程度等が含まれ、これらの濃度は対象とする抗がん剤ごとに設定することが可能である。当該基準を用いて、前記のように判定又は予測することができる。
【実施例】
【００７６】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は何らこれらに限定されるものではない。【００７７】
（１）方法
（ａ）試薬
ＬＣ／ＭＳ用メタノール（和光純薬工業製）、ＨＰＬＣ用クロロホルム（和光純薬工業製）、逆浸透水（Ｄｉｒｅｃｔ−Ｑ  ＵＶ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ製）を溶解およびサンプル調製に用いた。
ＬＣ／ＭＳ用内部標準溶液（カチオン）として、Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｃ１（ＩＳＣ１）およびＩｎｔｅｒｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｃ２（ＩＳＣ２）を使用した。ＩＳＣ１は、水溶液中に１０ｍＭのＬ−ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｎｅ（Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）を含み、ＩＳＣ２は、水溶液中に１０ｍＭのＬ−Ａｒｇｉｎｉｎｅ−13Ｃ6  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製）、Ｌ−Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ−15Ｎ2  ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）、β−Ａｌａｎｉｎｅ−13Ｃ3，15Ｎ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製）とＴｕｂｅｒｃｉｄｉｎ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製）を含む。
ＬＣ／ＭＳ用内部標準溶液（アニオン）として、Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ１（ＩＳＡ１）およびＩｎｔｅｒｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ２（ＩＳＡ２）を使用した。ＩＳＡ１は、水溶液中に１０ｍＭのＤ−ｃａｍｐｈｏｒ−１０−ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｏｄｉｕｍ  ｓａｌｔ（Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）を含み、ＩＳＡ２は、水溶液中に１０ｍＭのｃｈｌｏｒａｎｉｌｉｃ  ａｃｉｄ（東京化成工業製）を含む。
これらの内部標準溶液は、信号強度を標準化し、遊走時間を調整するのに用いた。また、ＩＳＣ１およびＩＳＡ１は得られた各代謝物の相対的な濃度を算出するためにも用いた。【００７８】
（ｂ）臨床サンプル
（ｂ−１）患者背景
組織学的に確認された進行結腸・直腸癌（ＡＣＲＣ）患者で、標準的な化学療法の一次治療を行う対象として適格な合計６８名の患者から、前向きに血清サンプルを採取した。本研究の登録基準（適格性）は以下の通りである。
・登録時の年齢が２０歳以上
・Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）のＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｓｔａｔｕｓ（ＰＳ）が０あるいは１
・結腸・直腸癌であることが組織病理学的に確認されている
・治癒切除不能で化学療法未治療の進行性あるいは再発性疾患（ただし、５−ＦＵ系薬剤による術後補助化学療法に限り、再発確認日から６ヶ月前に終了していれば登録可能とする）
・予測生存期間が３ヵ月以上
・主要臓器に重大な機能障害がない
・本試験登録前に、遺伝子多型検査やプロテオーム・メタボローム分析を含む試験の参加について、患者本人による署名、日付が記載された同意書が得られている。【００７９】
（ｂ−２）患者への治療
全ての患者は一次化学療法として、ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ（ＢＶ）  ５ｍｇ／ｋｇを３０〜９０分にわたって静脈内に投与され、引き続きｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ（Ｌ−ＯＨＰ）  ８５ｍｇ／ｍ2とｌｅｖｏｆｏｌｉｎａｔｅ（ｌ−ＬＶ）  ２００ｍｇ／ｍ2を１２０分で静脈内に投与された。その後、５−ＦＵ  ４００ｍｇ／ｍ2を静脈内にｂｏｌｕｓ投与され、引き続き５−ＦＵ  ２４００ｍｇ／ｍ2を４６時間で静脈内に持続点滴投与された（ｍＦＯＬＦＯＸ６療法）。この治療は、２週ごとに繰り返された。
Ｌ−ＯＨＰの治療が中断された後でも、必要な場合ＢＶ処置の有無にかかわらず簡略化されたｌ−ＬＶと５−ＦＵの併用投与（ｓＬＶ５ＦＵ２）は試験治療と認められた。
疾患進行、更なる試験治療を中止しなければならない有害事象の出現、医師の判断、患者からの試験治療継続の拒否、腫瘍の治癒切除手術に移行などがない限り、試験治療として最長２４サイクル継続した。【００８０】
（ｂ−３）抗腫瘍効果の評価
抗腫瘍効果は、独立外部レビュー・ボードによってｔｈｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  １．０（ＲＥＣＩＳＴ）に基づき評価した。
治療前の腫瘍径の総和は、登録前１ヵ月以内のコンピューター断層装置または磁気共鳴画像によって撮影された画像を用いて計測した、そして、治療開始後は治療前と同様の方法で８週ごと繰り返し撮影された画像を用いて計測した。【００８１】
（ｂ−４）サンプルの採取
血液サンプルは、化学療法開始前２週間以内と化学療法開始後からｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎによる治療が中止されるまでの間、各治療サイクルの化学療法実施後２週後に採取した。
採取した血液検体は、室温で１５分の間放置し凝固させた後、４℃で３０分間、３０００ｒｐｍで遠心した。その後、血清は４つのポリプロピレン管に等しい量ずつ移し、液体窒素で直ちに凍結した。全てのこれらの手順は、採血から１時間以内で終了した。血清サンプルは、分析までの間−８０℃で保管した。【００８２】
（ｂ−５）サンプルの調製
サンプル調製は、既報告の方法（Ｊ  Ｐｒｏｔｅｏｍｅ  Ｒｅｓ．２００３  Ｓｅｐ−Ｏｃｔ；２（５）：４８８−９４，Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ．２０１０  Ｍａｒ；６（１）：７８−９５，Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ．２０１３  Ａｐｒ；９（２）：４４４−４５３）に準じて行った。血清サンプルは氷上で解凍し、１８００μＬのメタノールを入れた遠沈管に２００μＬの血清と内部標準（ＩＳＡ１あるいはＩＳＣ１  １０μＭ）とクロロホルム２０００μＬおよび逆浸透水８００μＬを入れ混合した。ｖｏｒｔｅｘｉｎｇしたあと、混合物は４℃、５分間、４６００ｇで遠心分離した。その後、上層の１５００μＬをタンパク質の除去のため５ｋＤａフィルタ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ製）に移し、４℃、９１００ｇで２〜４時間遠心ろ過した。濾過液は、減圧遠心分離機によって乾燥した。ＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳ分析の直前に、乾燥した濾過液は氷の上でＩＳＣ２あるいはＩＳＡ２を終濃度０．１ｍＭで含む逆浸透水５０μＬに溶解し、分析バイアルに入れ４℃、１０分間、１０００ｇで遠心し、分析に供した。【００８３】
（ｃ）ＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳによるサンプル中の代謝物質測定
全てのサンプルは、ｄｕｐｌｉｃａｔｅで測定した。ＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて陽イオン測定条件で、また、ＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳを用いて陰イオン測定条件で、質量数１０００以下の代謝物質を網羅的に測定した。【００８４】
（ｃ−１）カチオン性代謝物質測定条件
１）測定機器
カチオン性代謝物質の測定には、Ａｇｉｌｅｎｔ  ７１００  ＣＥ  ｓｙｓｔｅｍを装備したＡｇｉｌｅｎｔ  ６５３０  Ａｃｃｕｒａｔｅ−Ｍａｓｓ  Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ  ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）を使用した。キャピラリーには、Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．（ＨＭＴ）のｃａｔａｌｏｇｕｅ  ｎｕｍｂｅｒ（Ｃａｔ．Ｎｏ．）Ｈ３３０５−２００２のフュ−ズドシリカキャピラリー（内径５０μｍ、全長８０ｃｍ）を用いた。緩衝液には、ＨＭＴのＣａｔ．Ｎｏ．３３０１−１００１の緩衝液を用いた。印加電圧は＋２７ｋｖ、キャピラリー温度は２０℃で測定した。試料は加圧法を用いて５０ｍｂａｒで１０秒間注入した。【００８５】
２）飛行時間型質量分析計（Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ）の分析条件
カチオンモードを用い、イオン化電圧は４ｋｖ、フラグメンター電圧は８０ｖ、スキマー電圧は５０ｖ、ｏｃｔＲＦＶ電圧は６５０ｖに設定した。乾燥ガスには窒素を使用し、温度３００℃、圧力５ｐｓｉｇに設定した。シース液はＨＭＴのＣａｔ．Ｎｏ．Ｈ３３０１−１０２０のシース液を使用した。ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｍａｓｓはｍ／ｚ  ６５．０５９７０６およびｍ／ｚ  ６２２．０８９６３に設定した。【００８６】
（ｃ−２）アニオン性代謝物質測定条件
１）測定機器
アニオン性代謝物質の測定には、Ａｇｉｌｅｎｔ  １６００  ＣＥ  ｓｙｓｔｅｍを装備したＡｇｉｌｅｎｔ  ６２１０  ＴＯＦ  ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）を使用し、キャピラリーおよびその温度はカチオンと同じ設定のものを使用した。緩衝液には、ＨＭＴのＣａｔ．Ｎｏ．Ｈ３３０２−１０２１の緩衝液を用いた。印加電圧は３０ｋｖ、試料は加圧法を用いて５０ｍＢａｒで２５秒間で注入した。【００８７】
２）飛行時間型質量分析計（ＴＯＦ  ＭＳ）の分析条件
ニューアニオンモードを用い、イオン化電圧は３．５ｋｖ、フラグメンター電圧は１２５ｖ、スキマー電圧は５０ｖ、ｏｃｔＲＦＶ電圧は１７５ｖに設定した。乾燥ガス及びシース液は、陽イオンと同じものを同じ条件で使用した。ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｍａｓｓはｍ／ｚ  ５１．０１３８５４およびｍ／ｚ  ６８０．０３５５４１に設定した。【００８８】
（ｃ−３）データ処理
ｍ／ｚ、遊走時間（ＭＴ）とピークの領域を含むピークの情報を得るために、ＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ  あるいはＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳによって見つけられたピークの生データはＭａｓｔｅｒ  Ｈａｎｄｓ自動統合ソフトウェア  ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０（慶應義塾大学製）によって処理した。当該ソフトウェアにより、全てのピークを見つけ、ノイズを除去し、代謝物の注釈と相対的なピーク面積を含むデータマトリクスを生成した。ピークは、ＣＥから得られるｍ／ｚとＴＯＦ  ＭＳから得られるＭＴを元に、ＨＭＴのメタボライト・データベースから推定される代謝物名を注釈としてつけた。アニオンのピークに注釈をつけるＭＴ、ｍ／ｚ、最小限のＳ／Ｎ比の条件は各々１．５分、５０ｐｐｍ、２０に設定した、そして、カチオンのそれは各々０．５分、５０ｐｐｍ、２０に設定した。
注釈がつけられた各代謝物の相対濃度は、ＩＳＣ１（カチオン）あるいはＩＳＡ１（アニオン）の面積で、各々の代謝物のピークの面積を除することで算出した。
ＣＥ−Ｑ−ＴＯＦ  ＭＳ  およびＣＥ−ＴＯＦ  ＭＳ分析において、個々の患者の抗腫瘍効果は、分析者にマスキングした。
処理されたピークのリストは、更なる統計解析のために外部に出力された。統計解析では、ｄｕｐｌｉｃａｔｅで測定したアノテートされた各代謝物の相対濃度の平均をとった。【００８９】
（ｄ）統計解析
臨床およびメタボロミクス・データ処理と統計解析は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｗｉｎｄｏｗｓ  ７上でＪＭＰ  ６４ビット版バージョン１２（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ製）を用いた。
本試験では、６８例の患者で本試験治療開始前、サイクル１実施後、サイクル２実施後のそれぞれ６８の血清サンプルが得られた。治療効果予測因子の検討のために、サイクル１実施後、サイクル２実施後のそれぞれ６８の血清サンプルから得られた代謝物のデータを使用した。
本試験では、試験治療期間中の最大の抗腫瘍効果を把握し、治療反応群（レスポンダー）と治療無反応群（ノンレスポンダー）を以下のように定義した。
・レスポンダー（Ｒ）：ＲＥＣＩＳＴ基準に従い放射線診断医による画像診断の結果、試験治療期間中の最大の効果がｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅあるいはｐａｒｔｉａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅを示した患者。
・ノンレスポンダー（Ｎ−Ｒ）：ＲＥＣＩＳＴ基準に従い放射線診断医による画像診断の結果、試験治療期間中の最大の効果がｓｔａｂｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅあるいはｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅの患者。
患者背景の違いを確認するのにχ二乗テストを用いた。
各代謝物のＮ−Ｒ群とＲ群の差異を検討するために、測定した代謝物について網羅的に名義ロジスティック解析を行い、モデル全体で有意となったものを抗がん剤治療開始後早期感受性判定マーカーの候補物質とした。
次に、抗がん剤治療開始後早期感受性判定マーカーの候補物質を基に効果予測モデルを確立するため、単変量で有意になった各代謝物についてＲＯＣ曲線からカットオフ値を求め、その値を元に二値化した。その二値化した値を用いてＳＴＥＰ  ＷＩＳＥ法でベイズ情報量基準（ＢＩＣ）を指標にして変数増加法にて変数を選択した。そこで選択された変数を用い、多変量名義ロジスティック回帰分析を行った。抗がん剤治療開始後早期感受性判定マーカーの候補物質の効果の予測力を評価するために受信者動作特性（ＲＯＣ）を用いた。
実際の臨床効果と予測モデルに基づく効果予測の性能を評価するため、Ｃｏｎｆｕｓｉｏｎ  ｍａｔｒｉｘを作成し、レスポンダーの予測性能を感度、特異度、精度から評価した。
効果予測モデルの予後予測の性能を検討する目的で、残余の全生存期間をカプラン・マイアー法を用いて推定し、レスポンダーとノンレスポンダーの差異をログランク検定を用いて検討した。
さらに、治療開始後早期の血中代謝物の濃度と各患者の残余の全生存期間から、予後を予測する代謝物をＣＯＸの比例ハザードモデルで解析した。以上の統計解析については、ｐ値＜０．０５を有意とした。【００９０】
（２）結果
（ａ）Ｒ群とＮ−Ｒ群で有意差が見られた物質
表１に示すように、２９人の患者はＮ−Ｒと定義され、３９人の患者はＲと定義された。Ｒ群とＮ−Ｒ群の間で患者背景に差は見られなかった。【００９１】
【表１】
2020067228.tif 000006
【００９２】
本試験治療の前に得られた血清サンプルで発現が見られた４８０の代謝物のうち検出率が２５％以上の代謝物について網羅的に治療への反応（レスポンダーかノンレスポンダーか）を目的変数とする名義ロジスティック解析を行った。その結果、表２に示すようにサイクル１では１２代謝物が有意となり、またサイクル２では９代謝物が有意となった。各代謝物のレスポンダーとノンレスポンダーの分布を図１及び図２に示した。【００９３】
【表２】
2020067228.tif 000007
【００９４】
２５％以上の患者で検出された代謝物のうち、サイクルごとに網羅的に名義ロジスティック解析を行った結果、有意になった代謝物についてレスポンダーとノンレスポンダーの閾値を求め、それに基づき二値化したときの予測性能を、ＲＯＣ  ＡＵＣ、レスポンダー／ノンレスポンダーの予測精度、感度、特異度および精度を求めた。それぞれの結果を表３に示した。各物質のカットオフ値は、以下の通りであった。サイクル１の代謝物として、２ＡＭＡＤ（２．０９１×１０-2≦）；２ＣＹＰＲ（３．４４４×１０-3≦）；６ＡＨＸＡ（７．１７５×１０-3≦）；ＢＥＴＮＣ（１．５８９×１０-2≦）；ＣＡＲＢ（≦８．４７２×１０-3）；ＣＳＳＧ（２．１９８×１０-2≦）；ＧＧＬＣＹ（７．３８９×１０-3≦）；ＧＳＳＧ（５．６０６×１０-4≦）；Ｎ６ＭＤＡ（≦１．２０８×１０-3）；ＮＯＭＴＲ（≦７．００６×１０-2）；ＰＨＥＰ（≦１．８０１×１０-2）；ＲＩＢ５Ｐ（≦３．００５×１０-3）であった。また、サイクル２の代謝物として、２ＡＢＡ（２．５０７×１０-1≦）；５ＯＰＲＯ（１．８４３×１０-1≦）；６ＡＨＸＡ（４．５６８×１０-3≦）；ＡＤＥＮ（２．３０５×１０-2≦）；ＡＳＰ（≦１．１７０×１０-1）；ＤＯＰＭ（５．６０６×１０-4≦）；ＨＹＰＴ（≦１．７６８×１０-2）；ＭＥＴＳＦ（３．８３６×１０-2≦）；ＰＲＯ（２．９８７６≦）であった。そして、サイクル１ではＣＳＳＧが特に良好なＡＵＣ（０．７≦）を示した。さらに、サイクル１の２ＡＢＡとサイクル２のＰＲＯは、特異性と陽性的中率が単独で１００％であった。【００９５】
【表３】
2020067228.tif 000008
【００９６】
（ｂ）抗がん剤感受性判定モデルの算出
抗がん剤感受性判定モデルを、ステップワイズ法を用いて説明変数を取捨選択し、作成した。その結果は表４に示すように、サイクル１では２ＡＭＡＤ、ＢＥＴＮＣ、ＣＳＳＧ、Ｎ６ＭＤＡ、ＲＩＢ５Ｐの５代謝物でモデル形成され、サイクル２では２ＡＢＡ、ＡＳＰ、ＤＰＭＮ、ＨＹＰＴ、ＭＥＴＳＦ、ＰＲＯの６代謝物でモデル形成された。【００９７】
【表４】
2020067228.tif 000009
【００９８】
抗がん剤感受性判定モデル（サイクル１モデル及びサイクル２モデル）は、それぞれ下記式（１）および（２）に示す通りである。
【数５】
2020067228.tif 000010
（式中、２ＡＭＡＤは、２ＡＭＡＤの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１６．２６８８を、カットオフ値未満であった場合に１６．２６８８を示し、ＢＥＴＮＣは、ＢＥＴＮＣの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−８．６５６０を、カットオフ値未満であった場合に８．６５６０を示し、ＣＳＳＧは、ＣＳＳＧの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．４３７２を、カットオフ値未満であった場合に１．４３７２を示し、Ｎ６ＭＤＡは、Ｎ６ＭＤＡの測定結果がカットオフ値を超えた場合に８．６６５８を、カットオフ値以下であった場合に−８．６６５８を示し、ＲＩＢ５Ｐは、ＲＩＢ５Ｐの測定結果がカットオフ値を超えた場合に１．３４５１を、カットオフ値以下であった場合に−１．３４５１を示し、該カットオフ値は、２ＡＭＡＤの場合に２．０９１×１０-2であり、ＢＥＴＮＣの場合に１．５８９×１０-2であり、ＣＳＳＧの場合に２．１９８×１０-2であり、Ｎ６ＭＤＡの場合に１．２０８×１０-3であり、ＲＩＢ５Ｐの場合に３．００５×１０-3である。）【００９９】
【数６】
2020067228.tif 000011
（式中、２ＡＢＡは、ＣＳＳＧの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−２．３０５９を、カットオフ値未満であった場合に２．３０５９を示し、ＡＳＰは、ＡＳＰの測定結果がカットオフ値を超えた場合に１．８１５４を、カットオフ値以下であった場合に−１．８１５４を示し、ＤＯＰＭは、ＤＯＰＭの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．６３４５を、カットオフ値未満であった場合に１．６３４５を示し、ＨＹＰＴは、ＨＹＰＴの測定結果がカットオフ値を超えた場合に２．４１１３を、カットオフ値以下であった場合に−２．４１１３を示し、ＭＥＴＳＦは、ＭＥＴＳＦの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−１．５５５５を、カットオフ値未満であった場合に１．５５５５を示し、ＰＲＯは、ＰＲＯの測定結果がカットオフ値以上であった場合に−９．０７９４を、カットオフ値未満であった場合に９．０７９４を示し、該カットオフ値は、２ＡＢＡの場合に２．５０７×１０-1であり、ＡＳＰの場合に１．１７０×１０-1であり、ＤＯＰＭの場合に５．６０６×１０-4であり、ＨＹＰＴの場合に１．７６８×１０-2であり、ＭＥＳＦの場合に３．８３６×１０-2であり、ＰＲＯの場合に２．９８７６である。）【０１００】
上記サイクル１モデル及びサイクル２モデルは、患者がレスポンダーであるか否かを判定する式である。ｐ値は患者がレスポンダーである確率を表し、ｐ値が０.５を超えた場合にレスポンダーと判断する。
サイクル１モデルのＲＯＣ曲線のＡＵＣは０．９４であった（図３ａ）。その感度、特異度、陽性的中率および陰性的中率は、表５に示したとおり、各々１００％、６５．５％、７９．６％、１００％であった。
また、サイクル２モデルのＲＯＣ曲線のＡＵＣは０．９７であった（図３ｂ）。その感度、特異度、陽性的中率および陰性的中率は、表５に示したとおり、各々９２．３％、８５．７％、９０．０％、８８．９％であった。【０１０１】
【表５】
2020067228.tif 000012
【０１０２】
（ｃ）サイクル１モデル及びサイクル２モデルにおけるＯＳの予測性能
上記サイクル１モデル及びサイクル２モデルのＯＳについての予測可能性を検証するために、上記モデルにより治療開始前の代謝物を元にレスポンダーと判断された群（Ｒ群）とノンレスポンダーと判断された群（Ｎ−Ｒ群）に分けた上で、カプラン・マイアー曲線を描き、Ｒ群とＮ−Ｒ群でＯＳに差が出るか確認した。Ｒ群とＮ−Ｒ群のＯＳは、ログランク検定で比較した。
その結果、サイクル１モデル及びサイクル２モデルの両方において、Ｒ群はＮ−Ｒ群に比べ有意にＯＳが長く（それぞれ、ｐ＝０．０００８、ｐ＝０．００２０）、本代謝物モデルの有用性を示す結果となった（図４ａ及び図４ｂ）。【０１０３】
（ｄ）代謝物のＣＯＸ比例ハザードモデルによるＯＳの解析
サイクル１およびサイクル２の投与日からの生存期間を元に代謝物を網羅的にＣＯＸの比例ハザードモデルで解析し、その結果有意となった代謝物のハザード比とその９５％信頼区間を図５ａ及び図５ｂに示した。サイクル１では、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＬＣ３Ｐ、ＧＬＹＬＥ、ＱＵＩＮＡは、血中の濃度が高いほど生存期間が長いこと、また、ＤＤＮＡ、ＧＵＳＡ、ＯＣＴＡは、血中濃度が高いほど生存期間が短いことが見出された。
また、サイクル２では、２ＡＭＡＤ、ＡＬＡ、ＢＥＺＩＺ、ＣＳＳＧ、ＧＧＬＣＹ、ＧＬＣＯＡ、ＧＬＵ、ＧＬＴＡ、ＧＬＣ３Ｐ、ＬＥＵ、ＬＹＳ、Ｎ６ＡＬＹ、ＱＵＩＮＡ、ＴＨＲ、ＶＡＬは、血中の濃度が高いほど生存期間が長いこと、また１０ＨＤＡ、ＣＨＯＡ、ＰＩＰＥＣは、血中濃度が高いほど生存期間が短いことが見出された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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