(57)【要約】本発明は、熱に安定で、種々の微生物に対し抗菌作用を有する物質を有効成分とする、微生物増殖抑制剤、微生物汚染防止方法、及び、飲料を提供することを目的とする。本発明は、有効成分としてイソキサントフモールを含む微生物増殖抑制剤、これを用いた微生物汚染防止方法、及び、飲料に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてイソキサントフモールを含む微生物増殖抑制剤。
【請求項２】
飲料用である請求項１に記載の微生物増殖抑制剤。
【請求項３】
微生物がアリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌である請求項１又は２に記載の微生物増殖抑制剤。
【請求項４】
微生物がＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、及び、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからなる群より選択される少なくとも１種である請求項１〜３のいずれか１項に記載の微生物増殖抑制剤。
【請求項５】
イソキサントフモールを２５質量ｐｐｍ以上となるように添加する飲料の微生物汚染防止方法。
【請求項６】
イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍ以上となるように添加する請求項５に記載の微生物汚染防止方法。
【請求項７】
飲料のｐＨを４．６以下に調整する請求項５又は６に記載の微生物汚染防止方法。
【請求項８】
微生物がアリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌である請求項５〜７のいずれか１項に記載の微生物汚染防止方法。
【請求項９】
微生物がＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、及び、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからなる群より選択される少なくとも１種である請求項５〜８のいずれか１項に記載の微生物汚染防止方法。
【請求項１０】
イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍより多く１８０質量ｐｐｍ以下の範囲で含有し、ｐＨが４．６以下である飲料。
【請求項１１】
イソキサントフモールを６０質量ｐｐｍ以上含有する請求項１０に記載の飲料。
【請求項１２】
飲料がアルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料である請求項１０又は１１に記載の飲料。
【請求項１３】
飲料がノンアルコールビールテイスト飲料、機能性飲料、炭酸飲料又は果実・野菜系飲料である請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の飲料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イソキサントフモールを含む微生物増殖抑制剤、イソキサントフモールを用いた微生物汚染防止方法、及び、飲料に関する。
【背景技術】
【０００２】
市販の飲料にとって、酵母、細菌（バクテリア）、カビ等の微生物汚染を防止し、保存性を高めることは重要である。代表的な微生物汚染防止のための方法としては、ｐＨを酸性に下げる、乾燥等により水分活性を低くする、加熱処理を行う、低温で保管する、保存料を添加する、無菌包装を行う、窒素充填包装を行う等が挙げられる。また、飲料の殺菌方法及びその耐菌性は、含有成分（例えば、糖分、果汁、アルコール、ビタミン又は微量栄養素分）、炭酸、水質、ｐＨ等の飲料の性質と、殺菌対象とする微生物の種類とに影響され得る。このため種々の微生物に対して抗菌作用を有し、安全な天然成分の探索に関して、精力的な研究が行われている。【０００３】
アサ科の植物であり、ビールの原料として使用されるホップ（学名：Ｈｕｍｕｌｕｓ  ｌｕｐｕｌｕｓ）に含まれる成分としてキサントフモールが知られている。キサントフモールは分子式がＣ２１Ｈ２２Ｏ５で表されるポリフェノールの一種であり、特にポリフェノールの中では「プレニルカルコン」に分類される。キサントフモールの生理活性としては発がん抑制作用、抗炎症作用、抗肥満作用、骨吸収抑制作用及び抗菌作用等が報告されている。【０００４】
例えば、特許文献１には、ホップ毬花成分のキサントフモールを有効成分とする食品用保存剤が記載されており、キサントフモールが特定の腐敗細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ等）に対して抗菌作用を有することが開示されている。しかしながら、その他の腐敗細菌に対して抗菌作用を有するか否かは不明であり、耐熱性好酸性菌に対する抗菌作用については一切開示されていない。【０００５】
キサントフモールは、加熱に伴い不可逆的にイソキサントフモールに構造変換される。特に、ビールの製造過程においてはその大部分がイソキサントフモールに変化することが報告されている。【０００６】
キサントフモールとイソキサントフモールはともにプレニル基を有するものの、前者はカルコン骨格を、後者はフラバノン骨格を部分構造として含み、互いに異なる物理化学的性質及び生理活性を示すことが報告されている。特許文献２には、抗がん作用が、キサントフモールでは非常に有効であるものの、イソキサントフモールでは非常に少ないことが記載されている。従って、キサントフモールの生理活性に関する情報に基づいてイソキサントフモールの生理活性を類推することは容易ではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許第４３７４１２３号公報
【特許文献２】特開２００７−２８９１８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
特許文献１により、食品に対してキサントフモールが抗菌作用を示したことが報告されている。しかしながら、キサントフモールが加熱に伴い不可逆的に構造変換した結果産生するイソキサントフモールに関しては、このような抗菌作用を示すことは報告されていない。
また、例えば、飲料の製造においては食品衛生法に基づいた殺菌条件による加熱が必要であるため、熱安定性を有し、なおかつ飲食品の抗菌作用に資する物質が求められている。【０００９】
本発明は、熱に安定で、種々の微生物に対し抗菌作用を有する物質を有効成分とする、微生物増殖抑制剤、微生物汚染防止方法、及び、飲料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題を解決するべく鋭意検討した結果、イソキサントフモールが種々の微生物に対して抗菌作用を示すことを初めて見出した。また、イソキサントフモールが耐熱性を有することから、イソキサントフモールがキサントフモールと比較して飲料適性の観点で優れ、様々な飲料等に応用できることに想到し、本発明の完成に至った。
イソキサントフモールは、ホップ（Ｈｕｍｕｌｕｓ  ｌｕｐｕｌｕｓ  Ｌ）にも微量に含まれる物質であり、抗菌作用を示しかつ飲料適性に優れる。このためイソキサントフモールを配合することにより、安全性が高く、保存安定性の高い飲料等の開発が可能となる。【００１１】
すなわち、本発明は、以下の微生物増殖抑制剤、飲料の微生物汚染防止方法、及び、飲料に関する。
［１］有効成分としてイソキサントフモールを含む微生物増殖抑制剤。
［２］飲料用である上記［１］に記載の微生物増殖抑制剤。
［３］微生物がアリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌である上記［１］又は［２］に記載の微生物増殖抑制剤。
［４］微生物がＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、及び、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからなる群より選択される少なくとも１種である上記［１］〜［３］のいずれかに記載の微生物増殖抑制剤。
［５］イソキサントフモールを２５質量ｐｐｍ以上となるように添加する飲料の微生物汚染防止方法。
［６］イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍ以上となるように添加する上記［５］記載の微生物汚染防止方法。
［７］飲料のｐＨを４．６以下に調整する上記［５］又は［６］に記載の微生物汚染防止方法。
［８］微生物がアリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌である上記［５］〜［７］のいずれかに記載の微生物汚染防止方法。
［９］微生物がＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、及び、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからなる群より選択される少なくとも１種である上記［５］〜［８］のいずれかに記載の微生物汚染防止方法。
［１０］イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍより多く１８０質量ｐｐｍ以下の範囲で含有し、ｐＨが４．６以下である飲料。
［１１］イソキサントフモールを６０質量ｐｐｍ以上含有する上記［１０］に記載の飲料。
［１２］飲料がアルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料である上記［１０］又は［１１］に記載の飲料。
［１３］飲料がノンアルコールビールテイスト飲料、機能性飲料、炭酸飲料又は果実・野菜系飲料である上記［１０］〜［１２］のいずれかに記載の飲料。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、熱に安定で、種々の微生物に対し抗菌作用を有する物質を有効成分とする、微生物増殖抑制剤、微生物汚染防止方法、及び、飲料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の微生物増殖抑制剤は、有効成分としてイソキサントフモールを含む。
イソキサントフモールは、熱に対して安定であり、抗菌作用を示す。そのため、製造にあたり食品衛生法に基づいた殺菌条件による加熱が必要な飲料に配合された場合であっても、微生物の増殖抑制効果を示すため、本発明の微生物増殖抑制剤は、製造工程で加熱が必要な飲食品に対し好適に使用される。なかでも、飲料に対し好適に使用される。
従って、本発明の微生物増殖抑制剤は、飲料用であることが好ましい。
【００１４】
イソキサントフモールは、例えば、ホップ（Ｈｕｍｕｌｕｓ  ｌｕｐｕｌｕｓ）抽出物から加熱等のプロセスを経て調製することができる。ホップ抽出物を加熱することにより、該抽出物中にイソキサントフモールを生成させることができる。ホップ抽出物は、通常、ホップの毬花を溶媒で抽出し、必要に応じて精製に係るプロセスを介して調製され、公知のホップ抽出物の調製方法により得ることができる。抽出方法として、例えば、ビール醸造に用いられるホップ抽出物の調製法として用いられる、エタノール溶媒による抽出法が挙げられる。ホップ抽出物は市販されており、市販のホップ抽出物を使用することもできる。イソキサントフモールを生成させるためのホップ抽出物の加熱は、８０〜１４０℃（より好ましくは８５〜１００℃）で１５分〜５時間（より好ましくは２０分〜３時間）行うことが好ましい。イソキサントフモールを調製するためのホップ抽出物の精製は、公知の方法で実施される。精製方法として、例えば、ＨＰＬＣや吸着カラム等の使用や、溶解度の変化を利用した析出などの方法が挙げられる。また、イソキサントフモールは、キサントフモールを加熱することによって製造することもできる。この際の加熱温度は、好ましくは８０〜１４０℃（より好ましくは８５〜１００℃）で１５分〜５時間（より好ましくは２０分〜３時間）を採用することができる。
【００１５】
イソキサントフモールは、例えば１００℃の高温条件でも安定であることが報告されている。食品衛生法においては清涼飲料水等の規格基準として殺菌条件が定められているが、例えばｐＨ４．０以上のもの（ｐＨ４．６以上で、かつ、水分活性が０．９４を超えるものを除く）においては８５℃において３０分間の加熱が必要である。このような殺菌工程においても、イソキサントフモールは安定的に飲料中に含まれるため、飲料に配合しやすいという利点もある。従って本発明によれば、安全であって、種々の微生物に対し抗菌作用を有する微生物増殖抑制剤を用いた飲料を提供することが可能となる。
【００１６】
学術的な定義として、微生物には細菌（バクテリア）のみならず、菌類（キノコ、カビ、酵母菌等）、ウイルス、微細藻類等が含まれるが、本明細書において、微生物とは、細菌（バクテリア）を指すものである。
【００１７】
本発明の微生物増殖抑制剤では、微生物が、アリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌であることが好ましい。
また、微生物が、アリシクロバチルス・アシドテレストリス（Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、及び、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）からなる群より選択される少なくとも１種であることがより好ましい。
イソキサントフモールは上記微生物に対して抗菌作用を示す。
【００１８】
Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓは、グラム陽性の有芽胞細菌であるアリシクロバチルス（Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属に属する細菌であって、耐熱性好酸性菌である。耐熱性好酸性菌は、ｐＨ６．５以下の酸性条件下においても通常の加熱殺菌では容易に死滅せず、果汁中のフェルラ酸を異臭原因物質となるグアイアコールに変換させる作用を持つ。そのため、増殖した場合、飲食品の品質劣化をもたらすことが知られている。主な防止策として基準よりも高温条件での殺菌や安息香酸の使用などが挙げられるが、前者は飲料の風味が損なわれる、後者は合成保存料のため忌避されるといった課題がある。
【００１９】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属に属するグラム陽性通性嫌気性桿菌であり、芽胞を形成する。土壌や汚水など自然界に多く存在する食中毒菌である。
【００２０】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓは、一般名「ウェルシュ菌」であり、クロストリジウム属に属する偏性嫌気性桿菌である。ヒトや動物の腸管内の常在菌であり、土壌等の自然環境中に広く分布する。ウェルシュ菌のうち、エンテロトキシンを産生するものが食中毒原因菌となる。
【００２１】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅは、土壌、干し草、砂などの自然環境やヒトや動物の腸管及び糞に棲息する。本菌は亜端在性に芽胞を形成するため、酸、アルカリ、好気状態、高温、低栄養状態など過酷な環境でも安定である。
【００２２】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓは、グラム陽性通性嫌気性球菌である。この菌は、人体の皮膚表面、毛孔に存在する常在菌である。エンテロトキシン産生性の菌株が、食品中で増殖するときに毒素を産生する。食品とともにエンテロトキシンを摂取することにより、ブドウ球菌食中毒が発生する。エンテロトキシンの性質は、耐熱性であり（１００℃、３０分）、通常の加熱調理では不活化されず、冷凍下でも安定している。ヒトの皮膚に常在するブドウ球菌の中では毒性が高い。
【００２３】
上記微生物は、飲食品有害菌として検査対象に挙げられており、特に耐熱性好酸性菌（Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）は、その増殖が酸性飲料において問題となるリスクを有する細菌である。
【００２４】
また、本発明は、イソキサントフモールを２５質量ｐｐｍ以上となるように添加する飲料の微生物汚染防止方法でもある。
イソキサントフモールを飲料に２５質量ｐｐｍ以上添加すると、耐熱性好酸性菌を含む微生物に対する増殖抑制効果を充分に得ることができる。
なお、イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍ以上となるように添加することがより好ましい。種々の微生物に対する増殖抑制効果、すなわち抗菌活性を充分に得ることができるためである。
イソキサントフモールの添加量は多ければ多いほど、微生物汚染防止効果を期待できるが、その飲料が本来持つ香味を維持する観点から、本発明の飲料の微生物汚染防止方法において、イソキサントフモールを、飲料に対し、５００質量ｐｐｍ以下となるように添加することが好ましい。
イソキサントフモールを飲料に対し、２５〜５００質量ｐｐｍとなるように添加することが好ましく、５０〜５００質量ｐｐｍとなるように添加することがより好ましい。
【００２５】
なお、イソキサントフモールは、特有の酸味及び苦味を有し、飲料に対し多量に配合されると苦味及び酸味を呈する物質である。
ここで、苦味や酸味は、５つの基本味である甘味、酸味、苦味、塩味（鹹味）及び旨味に含まれるものであり、舌にある味蕾の刺激によって生じる感覚である。飲食品の味やおいしさは、種々の要素によって構成されており、上述のように味蕾で感知された基本味の他に、口腔内の皮膚を直接刺激する痛覚、温度感覚、及び、嗅覚で知覚する匂いも影響し、様々な情報が相まって感じられるものである。
ここで、飲料等の酸味や苦味の改善方法としては、一般的に甘味を有する糖類やアミノ酸、核酸などを添加する方法が知られている。これは、酸味や苦味そのものを消去するのではなく、強い甘味で、酸味及び苦味をカバーするものである。
しかしながら、甘味は、人肌程度の温度（３７℃）帯で一番知覚されやすいが、低温領域（５℃以下）及び高温領域（５５℃以上）では、温度刺激が加わることにより知覚されにくくなる傾向にある。一方、苦味や酸味は、低温領域においても知覚されやすく、また、酸味については高温領域においても知覚されやすい傾向にある。そのため、室温（２５℃）の飲料と、低温（５℃以下）の飲料とでは、同じ成分が含まれていても低温の飲料の方は、甘味が知覚されにくく、苦味及び酸味が知覚されやすい。一方、室温の飲料の方は、甘みが知覚されやすく、苦味及び酸味は甘味にマスキングされ知覚されにくい。
【００２６】
固形の食品と飲料とでは、その状態が固体と液体とで異なっており、液体である飲料の方が摂取後すぐに口腔内に拡散し、舌にある味蕾の多くと接触するため、飲料の方が味が強く知覚されやすい傾向にある。
このように、ヒトが飲食品の味やおいしさを知覚するにあたっては、飲食品に含まれる成分及び成分量に加え、飲食品の温度や状態も影響している。
【００２７】
飲料の香味の観点から、飲料に対しイソキサントフモールを２００質量ｐｐｍ以下となるように添加することがより好ましく、１８０質量ｐｐｍ以下となるように添加することが更に好ましい。本発明の一実施形態に係る飲料については、キサントフモールを２００質量ｐｐｍ以下含有することが好ましく、１８０質量ｐｐｍ以下含有することがより好ましい。
【００２８】
本発明の微生物増殖抑制剤、及び、飲料の微生物汚染防止方法は、ｐＨ４．６以下の飲料に用いられることが好ましく、ｐＨ４．０以下の飲料に用いられることがより好ましい。食品衛生法に記載された製造基準に従うと、ｐＨ４．０未満のものは６５℃、１０分間又はこれと同等以上の条件で、ｐＨ４．０以上４．６未満のものは８５℃、３０分間又はこれと同等以上の条件で加熱殺菌される必要があるが、このような加熱殺菌処理では、耐熱性好酸性菌による微生物汚染のリスクが残存する可能性があるためである。
【００２９】
一態様において、本発明の飲料の微生物汚染防止方法は、飲料のｐＨを４．６以下に調整する工程を有することが好ましい。上述の通り、本発明の飲料の微生物汚染防止方法は、飲料における耐熱性好酸性菌の汚染防止に好適に使用されるためである。また、本発明の方法は、飲料のｐＨを４．０以下に調整する工程を有することがより好ましい。食品衛生法に記載された製造基準に従うと、ｐＨ４．０未満のものは６５℃、１０分間又はこれと同等以上の条件で、ｐＨ４．０以上４．６未満のものは８５℃、３０分間又はこれと同等以上の条件で加熱殺菌される必要があるが、このような加熱殺菌処理では、耐熱性好酸性菌による微生物汚染のリスクが残存する可能性があるためである。
なお、飲料のｐＨを４．６未満に調整してもよく、４．０未満に調整してもよい。
なお、飲料のｐＨは、最終的に上記に記載のｐＨとなっていればよい。
ｐＨの調整は、例えば、必要に応じてｐＨ調整剤を添加する等の公知の方法で行うことができる。ｐＨは、市販のｐＨメーターで測定することができる。
【００３０】
また、飲料の微生物汚染防止方法において、微生物が、アリシクロバチルス属細菌、バチルス属細菌、クロストリジウム属細菌及びブドウ球菌属細菌からなる群より選択される少なくとも一種の細菌であることが好ましい。
また、微生物が、Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、及び、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓからなる群より選択される少なくとも１種であることがより好ましい。イソキサントフモールは飲料における上記微生物の汚染防止に有効である。
【００３１】
本発明の微生物増殖抑制剤、及び、微生物汚染防止方法が用いられる飲料としては、以下に詳細に記載するが、アルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料であることが好ましい。上述の飲料は、ｐＨが４．６以下であり、酸性飲料に有害な耐熱性好酸性菌であるＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓや、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属に属する細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、クロストリジウム属及びブドウ球菌属由来の種々の微生物に対し、抗菌作用を有することが望まれているためである。なかでも、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料に対して用いられることがより好ましく、その中でも機能性飲料又は果実・野菜系飲料に対して用いられることがさらに好ましい。耐熱性好酸性菌の増殖可能性が高い為である。
【００３２】
また、本発明は、イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍより多く１８０質量ｐｐｍ以下の範囲で含有し、ｐＨが４．６以下である飲料でもある。
ｐＨ４．６以下の飲料に対して、イソキサントフモールを５０質量ｐｐｍより多く含有させることで、種々の微生物に対し充分な抗菌活性、すなわち微生物の増殖抑制効果を得ることができるためである。さらに、イソキサントフモールの含有量が、１８０質量ｐｐｍ以下であることにより、ｐＨ４．６以下の飲料の風味を損なうことなく、充分な微生物の増殖抑制効果を得ることができる。
食品衛生法に記載された製造基準に従うと、ｐＨ４．０未満のものは６５℃、１０分間又はこれと同等以上の条件で、ｐＨ４．０以上４．６未満のものは８５℃、３０分間又はこれと同等以上の条件で加熱殺菌される必要があるが、このような加熱殺菌処理では、耐熱性好酸性菌による汚染問題を生じる可能性があるためである。例えば、Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ属の生菌数を１／１０に減少させるために必要な殺菌温度と時間について、９０℃の加熱温度の場合、１０分間以上と報告されている（『食品と容器  ２０１５  ＶＯＬ．５６  ＮＯ．３』）。これによると、食品衛生法に記載された条件で殺菌を行った場合、ｐＨ４．６未満の清涼飲料においては、耐熱性好酸性菌を死滅させるには充分とは言い切れない可能性がある。
【００３３】
なお、本発明の飲料は、イソキサントフモールを６０質量ｐｐｍ以上含有することが好ましい。
イソキサントフモールの含有量は、例えば、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）やＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム（ＴＳＱ  Ｑｕａｎｔｉｖａ、サーモフィッシャーサイエンティフィック社）を用いて定量解析することで測定することができる。高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を用いたイソキサントフモールの測定方法としては、例えば、以下の条件が挙げられる。
（基本条件）
装置：ＳＨＩＭＡＤＺＵ  ＬＣ−２０ＡＤ（株式会社島津製作所製）
流速：１．０ｍＬ/分
分析時間：２５分/サンプル
カラム：ＮＯＭＵＲＡ  ＣＨＥＭＩＣＡＬＳ  Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  Ｃ３０−ＵＧ−５，４．６ｍｍΦ×１５０ｍｍ  
カラム温度：４０℃
検出器：ＳＰＤ−２０Ａ
検出波長：２８０ｎｍ
（移動相）
Ａ相：０．１％ ギ酸水溶液
Ｂ相：０．１％ ギ酸含有アセトニトリル
（グラジェント条件）
下記表１にグラジェント条件を示す。Ｂ相の比率（％）はｖ／ｖ％である。
【００３４】
【表１】
2020031953.tif 000002
【００３５】
また、本発明の飲料は、アルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料であることが好ましい。
【００３６】
上記アルコール飲料としては、ビール、ビール系飲料、ビール及びビール系飲料以外のアルコール飲料が挙げられる。
本発明の飲料がビール系飲料である場合、発泡酒又は第三のビールであることが好ましい。
本発明の飲料がビール及びビール系飲料以外のアルコール飲料である場合、焼酎、チューハイ、リキュール、カクテル、スピリッツ、ウイスキーであることが好ましい。
【００３７】
本明細書における「ノンアルコールビールテイスト飲料」とは、ビール様の風味をもつ炭酸飲料を意味し、非発酵のノンアルコールタイプのものであり、これはアルコールを実質的に含まない。ここで、ノンアルコールビールテイスト飲料は、検出できない程度の極微量のアルコールを含有する飲料を除くものではない。
【００３８】
本発明の飲料が炭酸飲料である場合、コーラフレーバー飲料、透明炭酸飲料、ジンジャエール、果汁系炭酸飲料、乳類入炭酸飲料又は無糖炭酸飲料であることが好ましい。
本発明の飲料が機能性飲料である場合、スポーツドリンク、エナジードリンク、健康サポート飲料又はパウチゼリー飲料であることが好ましい。
【００３９】
本発明の飲料が果実・野菜系飲料である場合、１００％果実飲料、果実入飲料、低果汁入清涼飲料、果粒含有果実飲料又は果肉飲料であることが好ましい。
【００４０】
本発明の飲料は、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料又は果実・野菜系飲料であることが好ましく、その中でも機能性飲料又は果実・野菜系飲料がより好ましい。この場合、飲料のｐＨは４．６以下であり、４．６未満であってもよい。また、ｐＨは、３．０以上であることが好ましい。
【００４１】
好ましい態様において、本発明の飲料は、種々の微生物に対し抗菌作用を有するものであり、微生物による汚染が抑制された飲料として有用である。なかでも、耐熱性好酸性菌に対して抗菌作用を有するものであるため、耐熱性好酸性菌による汚染が抑制された飲料として特に有用である。
【００４２】
また、本発明の飲料は、５℃以下（例えば４〜５℃）の低温領域又は５５℃以上（例えば、５５〜９５℃）の高温領域で提供される飲料であることが好ましい。本発明の飲料は、抗菌活性を有するイソキサントフモールが含まれているが、飲料の風味が損なわれない程度の特定の濃度で含まれているため、苦味及び酸味が知覚されやすい低温領域や、酸味が知覚されやすい高温領域においても飲料の風味が損なわれないためである。
【００４３】
飲料の形態は特に限定されず、容器詰飲料とすることができる。容器詰飲料の容器は特に限定されず、いずれの形態及び材質の容器を用いてもよく、例えば、アルミ缶、スチール缶等の金属製容器；ペットボトル等の樹脂製容器；紙パック等の紙容器；ガラス瓶等のガラス製容器；樽等の木製容器等の通常用いられる容器のいずれも用いることができる。このような容器に飲料を充填及び密閉することにより、容器詰飲料が得られる。
【００４４】
飲料は、例えば、イソキサントフモールを、飲料の製造に使用される物質（例えば、任意の食品原料や食品添加物）に配合して調製することができる。
【実施例】
【００４５】
以下、本発明をより具体的に説明する実施例を示す。なお、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。【００４６】
＜調整例１＞
イソキサントフモールの調製
ホップ抽出物（アサマ化成社製）から、以下の方法でイソキサントフモールを単離精製した。すなわち、順相カラムクロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、分取ＨＰＬＣ精製によりホップ抽出物を原料にイソキサントフモールを精製し、ＨＰＬＣ分析により純度が９５％以上であることを確認した。なおＨＰＬＣ分析においては、カラムとしてＤｅｖｅｌｏｓｉｌ  Ｃ３０−ＵＧ−５（野村化学社）を使用し、検出器の紫外線吸収測定波長は２８０ｎｍとした。得られたイソキサントフモールを、標品（純度９５％以上）として以下の実験で使用した。【００４７】
＜実施例１＞
試験菌として、以下の微生物（細菌、バクテリア）について、前培養を行い、試験菌液を得た。なお、前培養の条件は、それぞれ以下の通りとした。耐熱性好酸性菌は、ＹＳＧ  ｂｒｏｔｈを用いて、５０±１℃で２日間好気培養を行った。セレウス菌と黄色ブドウ球菌はＭｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  Ｂｒｏｔｈ（Ｄｉｆｃｏ  日本ベクトン・ディッキンソン社製）を用いて、３７±１℃で１８〜２０時間好気培養を行った。ウェルシュ菌はＧＡＭブイヨン（日水製薬株式会社）を用いて、３５±１℃で１８〜２０時間嫌気培養を行った。クロストリジウム  ディフィシル（芽胞）は、タウロコール酸添加ＢＨＩＡ培地を用いて、３７±１℃で７日間嫌気培養を行った。
（試験菌）
・耐熱性好酸性菌（Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ  ＡＴＣＣ  ４９０２５）
・セレウス菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＩＦＯ  １３４９４）
・ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ  ＪＣＭ  １２９０）
・クロストリジウム・ディフィシル（芽胞）（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ  ＡＴＣＣ  ９６８９）
・黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ｓｕｂｓｐ．  ａｕｒｅｕｓ  ＮＢＲＣ  １２７３２）【００４８】
９９．５％エタノールを用いて１０ｍｇ／ｍＬイソキサントフモール溶液及びその２倍段階希釈濃度の溶液をそれぞれ調製した。次に滅菌、溶解後５０±１℃に保った所定の培地（下記表２に示す）に各溶液を１／９９量（イソキサントフモール溶液体積／培地溶液体積）添加し、充分に混合後、シャーレに分注、固化させ寒天平板培地を作製した。
次に上記寒天平板培地に、前培養を行った試験菌液を塗抹し、下記表２に記載の所定の培養条件で培養後、微生物の発育が阻止された最低濃度をもって最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）とした。得られた結果を下記表３に示す。【００４９】
＜培養条件＞
【表２】
2020031953.tif 000003
【００５０】
【表３】
2020031953.tif 000004
【００５１】
イソキサントフモールは上記の種々の微生物の発育を阻止し、抗菌作用、すなわち微生物増殖抑制作用を有することが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明の微生物増殖抑制剤、飲料の微生物汚染防止方法、及び、飲料は、飲食品分野において有用である。
【国際調査報告】
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