(57)【要約】  線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる発現抑制剤を提供する。  本発明の発現抑制剤は、下記式（Ｉ）で表される化合物またはその塩を含む。【化１】2020090967.tif 000023
2020090967.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表される化合物またはその塩を含む、線維化誘導遺伝子の発現抑制剤：
【化１】
2020090967.tif 000019
前記式（Ｉ）中、
Ｒ、Ｒ０およびＲ１は、同じでも異なってもよく、独立して水素原子であるか；または
ＲとＲ０とは、隣接した炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と合体してナフタレン環を形成してもよく；
Ｒ２は、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、シアノ−フェニル基、トリフルオロメチル−フェニル基、ハロゲン化フェニル基、低級アルコキシ−フェニル基、ヒドロキシ−フェニル基、低級アルキル−フェニル基、フェニル−低級アルキル基、ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基、シアノ−フェニル−低級アルキル基、ピリジル基もしくはチエニル基であるか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、低級アルキリデン基もしくはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］−低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基もしくはオルトフェニレン架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基を表し、それらに結合している炭素原子と共に、対応する場合によりベンゾ縮合された５−、６−もしくは７員環を形成してもよく；
Ｗは、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であるか；または
Ｗは、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり、その場合には、下記式（Ｉ′）：
【化２】
2020090967.tif 000020
で表される基は、式（Ｉ）の−Ｃ≡Ｎ基に関してフェニル環の４位に結合している。
【請求項２】
下記式（II）で表される化合物を含む、請求項１記載の発現抑制剤：
【化３】
2020090967.tif 000021
前記式（II）中、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、ピリジル基、チエニル基もしくはベンジル基であり；または、
Ｒ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であるか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、低級アルキリデン基またはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基を表し；
Ｒ３が、水素原子である。
【請求項３】
前記式（II）において、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基もしくはピリジル基であり；または
Ｒ２′が、非置換またはフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、もしくはハロゲン基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であり；
Ｒ３が、水素原子である、請求項２記載の発現抑制剤。
【請求項４】
前記式（II）において、
Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；
Ｒ２′が、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基である、請求項２または３記載の発現抑制剤。
【請求項５】
下記式（III）で表される化合物を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の発現抑制剤：
【化４】
2020090967.tif 000022
前記式（III）中、
Ｒ２′は、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基である。
【請求項６】
レトロゾールまたはその塩を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の発現抑制剤。
【請求項７】
前記線維化誘導遺伝子は、ＴＧＦ−β（Transforming Growth Factor-β）、ＣＴＧＦ（Connective Tissue Growth Factor）、α−ＳＭＡ（α-Smooth Muscle Actin）、およびＹＡＰ１（Yes-associated Protein 1）からなる群から選択された少なくとも一つを含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の発現抑制剤。
【請求項８】
請求項１から７のいずれか一項に記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、線維症用医薬。
【請求項９】
前記線維症は、肺線維症、骨髄線維症、皮膚硬化症、および動脈硬化症からなる群から選択された少なくとも一つである、請求項８記載の線維症用医薬。
【請求項１０】
請求項１から７のいずれか一項に記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、非アルコール性脂肪肝炎用医薬。
【請求項１１】
請求項１から７のいずれか一項に記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、線維化抑制剤。
【請求項１２】
前記線維化抑制剤は、非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展抑制剤である、請求項１１の線維化抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、線維化誘導遺伝子の発現抑制剤およびその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
肝硬変の発症には、多数の遺伝子群が関与するため、有効な予防および治療方法が確立されていない。このため肝硬変に対しては、対症療法が行われている。【０００３】
また、肝硬変に至る肝臓病の一形態として、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）が知られている。ＮＡＦＬＤでは、非アルコール性の脂肪肝（ＮＡＦＬ）から非アルコール性の脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）に進行し、最終的に肝硬変に至る。ただし、ＮＡＦＬＤの各段階における有効な治療薬は存在しない（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Soo Ryang Kim et.al., “An Overview of NAFLD/NASH in Japan”, YAKUGAKU ZASSHI, The Pharmaceutical Society of Japan, 2016, vol. 136, No. 4, pages 565-572
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、本発明は、新たな非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）用医薬の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
前記目的を達成するために、本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤（以下、「発現抑制剤ともいう）は、下記式（Ｉ）で表される化合物、その塩、またはそれらの溶媒和物を含む：
【化１】
2020090967.tif 000003
前記式（Ｉ）中、
Ｒ、Ｒ０およびＲ１は、同じでも異なってもよく、独立して水素原子であるか；または
ＲとＲ０とは、隣接した炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と合体してナフタレン環を形成してもよく；
Ｒ２は、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、シアノ−フェニル基、トリフルオロメチル−フェニル基、ハロゲン化フェニル基、低級アルコキシ−フェニル基、ヒドロキシ−フェニル基、低級アルキル−フェニル基、フェニル−低級アルキル基、ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基、シアノ−フェニル−低級アルキル基、ピリジル基もしくはチエニル基であるか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、低級アルキリデン基もしくはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］−低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基もしくはオルトフェニレン架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基を表し、それらに結合している炭素原子と共に、対応する場合によりベンゾ縮合された５−、６−もしくは７員環を形成してもよく；
Ｗは、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であるか；または
Ｗは、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり、その場合には、下記式（Ｉ′）：
【化２】
2020090967.tif 000004
で表される基は、式（Ｉ）の−Ｃ≡Ｎ基に関してフェニル環の４位に結合している。【０００７】
本発明の線維症用医薬は、前記本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む。【０００８】
本発明の非アルコール性脂肪肝炎用医薬（以下、「ＮＡＳＨ用医薬」ともいう）は、前記本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む。【０００９】
本発明の線維化抑制剤（以下、「線維化抑制剤」ともいう）は、前記本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、前記式（Ｉ）の化合物、その塩、またはそれらの溶媒和物を含むことにより、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる。すなわち、本発明によれば、前記線維化誘導遺伝子の発現を抑制できることから、例えば、肝組織等の生体組織の線維化が抑制でき、線維症の治療に用いることができる。また、ＮＡＳＨにおいては、線維化が進行する。このため、本発明によれば、ＮＡＳＨ用医薬を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、実施例１における線維化誘導遺伝子の発現を示すグラフである。
【図２】図２は、実施例２における組織染色の写真であり、（Ａ）は、ＨＥ染色の写真を示し、（Ｂ）は、シリウスレッド染色の写真を示す。
【図３】図３は、実施例２における線維化指数およびヒドロキシプロリンの量を示すグラフである。
【図４】図４は、実施例２における血清中の線維化マーカーの濃度を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
＜線維化誘導遺伝子の発現抑制剤＞
本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤は、前述のように、下記式（Ｉ）で表される化合物、その塩、またはそれらの溶媒和物（以下、「本発明の化合物またはその塩等」ともいう）を含む。
【化１】
2020090967.tif 000005
前記式（Ｉ）中、
Ｒ、Ｒ０およびＲ１は、同じでも異なってもよく、独立して水素原子であるか；または
ＲとＲ０とは、隣接した炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と合体してナフタレン環を形成してもよく；
Ｒ２は、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、シアノ−フェニル基、トリフルオロメチル−フェニル基、ハロゲン化フェニル基、低級アルコキシ−フェニル基、ヒドロキシ−フェニル基、低級アルキル−フェニル基、フェニル−低級アルキル基、ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基、シアノ−フェニル−低級アルキル基、ピリジル基もしくはチエニル基であるか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、低級アルキリデン基もしくはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］−低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基もしくはオルトフェニレン架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基を表し、それらに結合している炭素原子と共に、対応する場合によりベンゾ縮合された５−、６−もしくは７員環を形成してもよく；
Ｗは、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であるか；または
Ｗは、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり、その場合には、下記式（Ｉ′）：
【化２】
2020090967.tif 000006
で表される基は、式（Ｉ）の−Ｃ≡Ｎ基に関してフェニル環の４位に結合している。
【００１３】
本発明の発現抑制剤は、前記式（Ｉ）で表される化合物（以下、「本発明の化合物」ともいう）、その塩、またはそれらの溶媒和物を含むことが特徴であって、その他の構成および条件は、特に制限されない。本発明の化合物またはその塩等は、線維化誘導遺伝子の発現を抑制でき、これにより、例えば、生体組織の線維化を抑制できる。以下の説明において、特に言及しない限り、本発明の化合物の説明は、本発明の化合物の塩またはそれらの溶媒和物の説明に援用できる。
【００１４】
本発明の発現抑制剤は、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる。本発明において、「発現抑制」とは、例えば、対象遺伝子からの転写の抑制でもよいし、前記対象遺伝子からの転写産物の生成量の抑制、前記転写産物の活性の抑制、または前記対象遺伝子のｍＲＮＡからの翻訳の抑制でもよいし、前記対象遺伝子からの翻訳産物の生成量の抑制でもよいし、前記翻訳産物の活性の抑制でもよい。前記「発現抑制」は、例えば、機能的な転写産物の転写の抑制でもよいし、機能的な翻訳産物の翻訳の抑制でもよい。前記タンパク質は、例えば、成熟タンパク質、または、プロセシングもしくは翻訳後修飾を受ける前の前駆体タンパク質があげられる。前記発現抑制は、例えば、前記転写産物の生成量、前記転写産物の活性、前記翻訳産物の生成量、または前記翻訳産物の活性を測定することにより、確認できる。
【００１５】
本発明において、「発現抑制」は、前記本発明の発現抑制剤の非存在下（非投与条件）と比較して、線維化誘導遺伝子の発現量が（有意に）減少していることを意味し、開始時（投与開始時）と比較して、線維化誘導遺伝子の発現量が上昇していてもよい。この場合、前記「発現抑制」は、例えば、「発現量の維持」、「発現量の上昇の抑制」等ということもできる。
【００１６】
本発明において、前記線維化誘導遺伝子は、例えば、ＴＧＦ−β（Transforming Growth Factor-β）、ＣＴＧＦ（Connective Tissue Growth Factor）、α−ＳＭＡ（α-Smooth Muscle Actin）およびＹＡＰ１（Yes-associated Protein 1）等があげられる。ＴＧＦ−βは、例えば、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β４、ＴＧＦ−β５等があげられ、好ましくは、ＴＧＦ−β１またはＴＧＦ−β２である。
【００１７】
本発明の化合物は、不斉炭素原子を有する。このため、本発明の化合物は、例えば、ラセミ体、そのＲおよびＳのエナンチオマー、またはＲおよびＳの任意の割合の混合物として存在してもよい。本発明の化合物は、２以上の不斉中心を有してもよい。この場合、本発明の化合物は、ジアステレオマーおよびその混合物を含んでもよい。本発明の化合物が分子中に２重結合を有する場合、本発明の化合物は、例えば、シスおよびトランス異性体の幾何異性体の形態を含んでもよい。
【００１８】
本発明において、有機基または化合物における「低級」とは、例えば、炭素数（炭素原子数）が７以下、４以下、または１もしくは２のものをいう。低級アルキル基は、例えば、炭素原子１〜４個を含むアルキル基であり、具体例として、メチル基、エチル基、プロピル基またはブチル基であり、好ましくは、メチル基である。
【００１９】
シアノ−フェニル基において、シアノ基の修飾位置およびその置換数は、特に制限されず、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、または３つ以上である。
【００２０】
トリフルオロメチル−フェニル基において、トリフルオロメチル基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２１】
ハロゲン化フェニル基（ハロゲン−フェニル基）において、ハロゲン基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２２】
ハロゲン基は、例えば、塩素原子、臭素原子、フッ素原子、またはヨウ素原子であり、好ましくは、塩素原子である。
【００２３】
低級アルコキシ−フェニル基において、低級アルコキシ基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２４】
低級アルコキシ基は、例えば、炭素原子１〜４個を含むアルコキシ基であり、具体例として、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、またはｔｅｒｔ−ブトキシ基であり、好ましくは、メトキシ基またはエトキシ基である。
【００２５】
ヒドロキシ−フェニル基において、ヒドロキシ基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２６】
低級アルキル−フェニル基において、低級アルキル基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２７】
ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基において、ヒドロキシ基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２８】
シアノフェニル−低級アルキル基において、シアノ基の修飾位置は、例えば、フェニル環の２位、３位、４位、５位、および６位のうちいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つである。
【００２９】
ピリジル基は、２−、３−または４−ピリジル基であり、好ましくは、３−または４−ピリジル基であり、より好ましくは、３−ピリジル基である。
【００３０】
チエニル基は、例えば、２−または３−チエニル基であり、好ましくは、２−チエニル基である。
【００３１】
低級アルキリデン基は、好ましくは、直鎖低級アルキリデン基であり、より好ましくは、メチリデン基またはエチリデン基である。
【００３２】
炭素数４〜６のアルキレン基は、好ましくは、ブチレン基またはペンチレン基である。
【００３３】
オルト−フェニレンで架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基は、好ましくは、オルト−フェニレンで架橋されたＣＨ２ＣＨ２である。
【００３４】
前記式（Ｉ）で表される化合物において、例えば、ＲおよびＲ０が、水素原子もしくは低級アルキル基であるか；またはＲおよびＲ０が、一緒になって、それらが結合するベンゼン環と共にナフタレン環を形成してもよい。
【００３５】
前記式（Ｉ）で表される化合物において、Ｒ２における置換基−フェニル基（置換フェニル基）は、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、トリフルオロメチル基、またはシアノ基で置換されたフェニル基が好ましい。
【００３６】
前記式（Ｉ）で表される化合物は、例えば、Ｗが、１−イミダゾリル（イミダゾール）基または低級アルキルで置換された１−イミダゾリル（イミダゾール）基である化合物であってもよいし、Ｗが、１−（1,2,4または1,3,4）−トリアゾリル基である化合物であってもよいし、Ｗが、３−ピリジル基である化合物であってもよい。
【００３７】
また、前記式（Ｉ）で表される化合物において、ＲおよびＲ０が、独立して水素原子であるか；またはＲおよびＲ０が、隣接する炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と共に、ナフタレン環を形成し；Ｒ１が、水素原子であり；Ｒ２が、水素原子、低級アルキル基、置換もしくは非置換のフェニル基、または置換もしくは非置換のフェニル−低級アルキル基、チエニル基、またはピリジル基であり；またはＲ１およびＲ２が、一緒になって、低級アルキリデン基もしくは炭素数４〜６のアルキレン基であり；Ｗが、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であり；前記置換フェニル基が、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、トリフルオロメチル基、およびシアノ基から選ばれた１の置換基で置換されたフェニル基であることが好ましい。
【００３８】
具体例として、本発明の発現抑制剤は、例えば、下記式（II）で表される化合物を含むことが好ましい。
【化３】
2020090967.tif 000007
前記式（II）中、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、ピリジル基、チエニル基もしくはベンジル基であり；または、
Ｒ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であるか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、低級アルキリデン基またはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基を表し；
Ｒ３が、水素原子である。
【００３９】
前記式（II）の化合物において、Ｒ１′が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基もしくはピリジル基であり；またはＲ２′が、非置換またはフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、もしくはハロゲン基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であり；Ｒ３が、水素原子であることがより好ましい。
【００４０】
前記式（II）の化合物において、Ｒ１′が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、ベンジル基、フェニル基または３−もしくは４−ピリジル基であり；またはＲ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、ハロゲン基、低級アルコキシ基、低級アルキル基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であり；Ｒ３が、水素原子であることがさらに好ましい。
【００４１】
前記式（II）の化合物において、Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；Ｒ２′が、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基であることが最も好ましい。
【００４２】
具体例として、本発明の発現抑制剤は、例えば、下記式（III）で表される化合物を含むことが好ましい。
【化４】
2020090967.tif 000008
前記式（III）中、
Ｒ２′は、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基もしくはｐ−シアノフェニル基である。
【００４３】
本発明の発現抑制剤は、例えば、前記線維化誘導遺伝子の発現抑制能が高いことから、レトロゾール（4,4'-(1,2,4-triazol-1-yl-methyl)dibenzonitrile、例えば、PubChem（CID:3902））またはその塩を含むことが好ましい。レトロゾールは、下記式（IV）で表される化合物であり、前記式（III）において、Ｒ２′がｐ−シアノフェニル基である化合物である。
【化５】
2020090967.tif 000009
【００４４】
また、前記式（Ｉ）で表される化合物において、ＲおよびＲ０が、独立して水素原子であるか；またはＲおよびＲ０が、隣接する炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と共に、ナフタレン環を形成し；Ｒ１が、水素原子であり；Ｒ２が、水素原子、低級アルキル基、置換もしくは非置換のフェニル基、または置換もしくは非置換のフェニル−低級アルキル基、チエニル基、またはピリジル基であり；またはＲ１およびＲ２が、一緒になって、低級アルキリデン基もしくは炭素数４〜６のアルキレン基であり；Ｗが、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり；前記置換フェニル基が、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、トリフルオロメチル基、およびシアノ基から選ばれた１の置換基で置換されたフェニル基であることが好ましい。
【００４５】
具体例として、本発明の発現抑制剤は、例えば、下記式（Ｖ）で表される化合物を含むことが好ましい。
【化６】
2020090967.tif 000010
前記式（Ｖ）において、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、ピリジル基、チエニル基、ベンジル基；シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基；または、フェニル環上でシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基（それぞれ、シアノ−フェニル−メチル基、ヒドロキシ−フェニル−メチル基）であり；または
Ｒ１′とＲ２′とは、一緒になって低級アルキリデン基を形成し；または
Ｒ１′とＲ２′とが一緒になって炭素数４〜６の直鎖アルキレン基を表し；
Ｒ３が、水素原子または低級アルキル基である。
【００４６】
前記式（Ｖ）で表される化合物において、Ｒ１′が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、ベンジル基、フェニル基、３−もしくは４−ピリジル基；シアノ基、ハロゲン基、低級アルコキシ基、低級アルキル基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基；またはフェニル環上でシアノ基によってモノ置換されたベンジル基であり；Ｒ３が、４−位もしくは５−位の水素原子または低級アルキル基であることが好ましい。
【００４７】
前記式（Ｖ）で表される化合物において、Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、ベンジル基、フェニル基、３−もしくは４−ピリジル基；シアノ基、ハロゲン基、低級アルコキシ基、低級アルキル基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基；またはフェニル環上でシアノ基によってモノ置換されたベンジル基であることが好ましい。
【００４８】
具体例として、本発明の発現抑制剤は、例えば、下記式（VI）で表される化合物を含むことが好ましい。
【化７】
2020090967.tif 000011
前記式（VI）中、
Ｒ２′は、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基もしくはｐ−シアノフェニル基である。
【００４９】
本発明の発現抑制剤は、例えば、下記式（VII）で表される化合物を含むことが好ましい。
【化８】
2020090967.tif 000012
前記式（VII）中、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、ピリジル基、チエニル基、もしくはベンジル基であり；または
Ｒ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であり；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、低級アルキリデン基またはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基を表し；
Ｒ３が、水素原子である。
【００５０】
前記式（VII）で表される化合物において、Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、もしくはピリジル基であり；またはＲ２′が、非置換、または、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であることがより好ましい。
【００５１】
前記式（VII）で表される化合物において、Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、ベンジル基、フェニル基、または３−もしくは４−ピリジル基であり；または、Ｒ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、ハロゲン基、低級アルコキシ基、低級アルキル基、もしくはトルフルオロメチル基で置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であることがさらに好ましい。
【００５２】
前記式（VII）で表される化合物において、Ｒ１′およびＲ３が、水素原子を表し；Ｒ２′が、３−もしくは４−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基であることが最も好ましい。
【００５３】
本発明の化合物は、例えば、異性体でもよい。前記異性体は、例えば、互変異性体または立体異性体があげられる。前記互変異性体または立体異性体は、例えば、理論上可能なすべての互変異性体もしくは立体異性体があげられる。また、本発明において、各置換基の立体配置は、特に制限されない。本発明の化合物は、例えば、前記式（Ｉ）で表される化合物またはその塩の水和物等の溶媒和物でもよい。本発明の化合物は、例えば、前記式（Ｉ）〜（VII）で表わされ、具体例として、レトロゾールがあげられる。本発明の化合物は、例えば、溶媒和物でもよい。以下、本発明の化合物の説明は、本発明の化合物の塩またはそれらの溶媒和物の説明に援用できる。
【００５４】
本発明において、本発明の化合物の塩は、特に制限されず、例えば、薬学的に許容される塩である。前記薬学的に許容される塩は、特に制限されず、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩；トリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩等の脂肪族アミン塩；Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン等のアラルキルアミン塩；ピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノリン塩等の複素環芳香族アミン塩；テトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等の第４級アンモニウム塩；アルギニン塩、リジン塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等のアミノ酸塩；塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、過塩素酸塩等の無機酸塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、グリコール酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、フマール酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、ピルビン酸塩、フェニル酢酸塩、安息香酸塩、４−アミノ安息香酸塩、アントラニル酸塩、４−ヒドロキシ安息香酸塩、サリチル酸塩、４−アミノサリチル酸塩、パモ酸塩、グルコン酸塩、ニコチン酸塩等の脂肪族有機酸または芳香族有機酸塩；メタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ハロベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、スルファニル酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩等のスルホン酸塩；等があげられる。
【００５５】
本発明の発現抑制剤は、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏで使用してもよいし、ｉｎ ｖｉｔｒｏで使用してもよい。本発明の発現抑制剤は、例えば、研究用試薬として使用することもでき、医薬品として使用することもできる。後者の場合、本発明の発現抑制剤は、線維化誘導遺伝子の発現抑制用の医薬または医薬組成物ということもできる。
【００５６】
本発明の発現抑制剤の投与対象は、特に制限されない。本発明の発現抑制剤をｉｎ ｖｉｖｏで使用する場合、前記投与対象は、例えば、ヒト、またはヒトを除く非ヒト動物があげられる。前記非ヒト動物としては、例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ウマ、ネコ、ヤギ、サル、モルモット等の哺乳類、鳥類、魚類等があげられる。前記本発明の発現抑制剤をｉｎ ｖｉｔｒｏで使用する場合、前記投与対象は、例えば、細胞、組織、器官等があげられ、前記細胞は、例えば、生体から採取した細胞、培養細胞等があげられ、前記組織または器官は、例えば、生体から採取した組織（生体組織）または器官等があげられる。前記細胞は、例えば、肝細胞、iPS細胞（induced pluripotent stem cells）、幹細胞等があげられる。前記肝細胞は、例えば、肝臓を構成する細胞を意味する。
【００５７】
本発明の発現抑制剤の使用条件（投与条件）は、特に制限されず、例えば、投与対象の種類等に応じて、投与形態、投与時期、投与量等を適宜設定できる。
【００５８】
本発明の発現抑制剤の投与量は、特に制限されない。本発明の発現抑制剤をｉｎ ｖｉｖｏで使用する場合、例えば、投与対象の種類、症状、年齢、投与方法等により適宜決定できる。具体例として、ヒトに投与する場合、１日あたりの化合物の投与量は、合計が、例えば、０．００１〜３０ｍｇ/ｋｇであり、好ましくは、０．０５〜５ｍｇ/ｋｇであり、１日あたりの投与回数は、例えば、１〜５回、１〜３回であり、好ましくは、１回である。また、成人のヒトに経口投与する場合、１日あたりの化合物の投与量は、例えば、２．５ｍｇであり、１日あたりの投与回数は、例えば、１回である。前記発現抑制剤における化合物の含有量は、特に制限されず、例えば、前述の一日当たりの投与量に応じて適宜設定できる。
【００５９】
本発明の発現抑制剤の投与形態は、特に制限されない。本発明の発現抑制剤をｉｎ ｖｉｖｏで投与する場合、経口投与でもよいし、非経口投与でもよい。前記非経口投与は、例えば、静脈注射（静脈内投与）、筋肉注射（筋肉内投与）、経皮投与、皮下投与、皮内投与、経腸投与、直腸投与、経膣投与、経鼻投与、経肺投与、腹腔内投与、局所投与等があげられる。
【００６０】
本発明の発現抑制剤の剤型は、特に制限されず、例えば、前記投与形態に応じて適宜決定できる。前記剤型は、例えば、液体状、固体状があげられる。具体例として、前記剤型は、放出調節製剤（腸溶性製剤、徐放性製剤等）、カプセル剤、経口液剤（エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、芳香水剤、リモナーデ剤等）、シロップ剤（シロップ用剤等）、顆粒剤（発泡顆粒剤、細粒等）、散剤、錠剤（口腔内崩壊錠、チュアブル錠、発泡錠、分散錠、溶解剤、被覆錠剤等）、丸剤、経口ゼリー剤等の経口投与用製剤；口腔用錠剤（ガム剤、舌下剤、トローチ剤、ドロップ剤、バッカル錠、付着錠等）、口腔用スプレー剤、口腔用半固形剤、含嗽剤等の口腔内適用製剤；注射剤（埋め込み注射、持続性注射剤、輸液剤（点滴用製剤等）、凍結乾燥注射剤、粉末注射剤、充填済シリンジ剤、カートリッジ剤等）等の注射投与用製剤；透析用剤（腹膜透析用剤、血液透析用剤）等の透析用製剤；吸入剤（吸入エアゾール剤、吸入液剤、吸入粉末剤等）等の気管支・肺適用製剤；眼軟膏剤、点眼剤等の目投与用製剤；点耳剤等の耳投与製剤；点鼻剤（点鼻液剤、点鼻粉末剤等）等の鼻適用製剤；坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤等の直腸適用製剤；膣用坐剤、膣錠等の膣適用製剤；外用液剤（酒精剤、リニメント剤、ローション剤等）、クリーム剤、ゲル剤、外用固形剤（外用散剤等）、スプレー剤（外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤等）、貼付剤（テープ剤、パップ剤等）、軟膏剤等の皮膚適用剤；等があげられる。本発明の発現抑制剤を経口投与する場合、前記剤型は、例えば、錠剤、被覆錠剤、丸剤、細粒剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等があげられる。本発明の発現抑制剤を非経口投与する場合、前記剤型は、例えば、注射投与用製剤、点滴用製剤等があげられる。本発明の発現抑制剤を経皮投与する場合、前記剤型は、例えば、貼付剤、塗布剤、軟膏、クリーム、ローション等の外用薬があげられる。
【００６１】
本発明の発現抑制剤は、例えば、必要に応じて、添加剤を含んでもよく、本発明の発現抑制剤を医薬または医薬組成物として使用する場合、前記添加剤は、薬学的に許容可能な添加剤または薬学的に許容可能な担体を含むことが好ましい。前記添加剤は、特に制限されず、例えば、基剤原料、賦形剤、着色剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、安定化剤、コーティング剤、保存剤、香料等の矯味矯臭剤等があげられる。本発明において、前記添加剤の配合量は、前記化合物の機能を妨げるものでなければ、特に制限されない。
【００６２】
前記賦形剤は、例えば、乳糖、乳糖水和物、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビトール等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、αデンプン、デキストリン等のデンプン誘導体；結晶セルロース等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン等の有機系賦形剤；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、珪酸カルシウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等のケイ酸塩誘導体；リン酸水素カルシウム等のリン酸塩；炭酸カルシウム等の炭酸塩；硫酸カルシウム等の硫酸塩等の無機系賦形剤があげられる。前記着色剤は、例えば、黄色三二酸化鉄等があげられる。前記滑沢剤は、例えば、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；タルク；ポリエチレングリコール；シリカ；硬化植物油等があげられる。前記矯味矯臭剤は、例えば、ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末等の香料、甘味料、酸味料等があげられる。前記結合剤は、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール等があげられる。前記崩壊剤は、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウム等の化学修飾デンプンおよび化学修飾セルロース類等があげられる。前記安定剤は、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾール等のフェノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；ソルビン酸等があげられる。前記コーティング剤は、例えば、ヒプロメロース、マクロゴール6000等のマクロゴール、タルク、酸化チタン等があげられる。
【００６３】
前記式（Ｉ）〜（VII）で表される化合物（例えば、レトロゾール）は、公知の方法で製造でき、例えば、特開昭６２−２１２３６９号公報（米国特許第４７４９７１３号明細書）の説明を参照でき、本明細書の一部として援用できる。
【００６４】
本発明の発現抑制剤によれば、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる。本発明の発現抑制剤は、例えば、後述するように、線維症用医薬、非アルコール性脂肪肝炎用医薬、または非アルコール性脂肪肝炎等における線維化抑制剤としても使用できる。
【００６５】
＜線維症用医薬＞
本発明の線維症用医薬は、前述のように、本発明の発現抑制剤を含む。本発明の線維症用医薬は、前記本発明の発現抑制剤を含むこと、すなわち、前記式（Ｉ）で表される化合物またはその塩を含むことが特徴であって、その他の構成および条件は、特に制限されない。本発明の線維症用医薬は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の説明を援用できる。本発明の線維症用医薬によれば、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できるため、線維症を治療できる。
【００６６】
本発明の線維症用医薬において、「治療」は、線維症の治療、予防、改善、症状の進展の抑制、および／または症状の進展の停止のいずれの意味で用いてもよい。このため、本発明の線維症用医薬は、例えば、線維症の治療薬、予防薬、改善薬、進展抑制薬および／または進展停止薬ということもできる。また、本発明の線維症用医薬は、前記本発明の線維症用医薬の非存在下（非投与条件）と比較して、生体組織または細胞等の線維症が（有意に）抑制されていればよく、開始時（投与開始時）と比較して、線維症が進行していてもよい。
【００６７】
前記線維症は、特に制限されず、例えば、肺線維症、骨髄線維症、皮膚硬化症、動脈硬化症等があげられる。前記線維症は、例えば、肝線維症を除く。
【００６８】
本発明の線維症用医薬の投与条件は、特に制限されず、例えば、投与対象の種類等に応じて、投与形態、投与時期、投与量等を適宜設定できる。本発明の線維症用医薬の投与対象および投与条件は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００６９】
＜ＮＡＳＨ用医薬＞
本発明の非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）用医薬は、前述のように、本発明の発現抑制剤を含む。本発明のＮＡＳＨ用医薬は、前記本発明の発現抑制剤を含むこと、すなわち、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物を含むことが特徴であり、その他の構成および条件は、特に制限されない。本発明のＮＡＳＨ用医薬は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の説明を援用できる。本発明のＮＡＳＨ用医薬によれば、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制することで、ＮＡＳＨにおいて進行する肝組織の線維化を抑制できるため、ＮＡＳＨを治療できる。
【００７０】
本発明のＮＡＳＨ用医薬において、「治療」は、線維症の治療、予防、改善、症状の進展の抑制、および／または症状の進展の停止のいずれの意味で用いてもよい。このため、本発明のＮＡＳＨ用医薬は、例えば、ＮＡＳＨの治療薬、予防薬、改善薬、進展抑制薬および／または進展停止薬ということもできる。前記症状の進展抑制は、例えば、非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展抑制を意味する。また、本発明のＮＡＳＨ用医薬は、前記本発明のＮＡＳＨ医薬の非存在下（非投与条件）と比較して、生体組織（例えば、肝臓）または細胞（例えば、肝細胞）等のＮＡＳＨの進行が（有意に）抑制されていればよく、開始時（投与開始時）と比較して、ＮＡＳＨが進行していてもよい。
【００７１】
本発明のＮＡＳＨ用医薬の投与条件は、特に制限されず、例えば、投与対象の種類等に応じて、投与形態、投与時期、投与量等を適宜設定できる。本発明のＮＡＳＨ用医薬の投与対象および投与条件は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００７２】
＜線維化抑制剤＞
本発明の線維化抑制剤は、前述のように、本発明の発現抑制剤を含む。本発明の線維化抑制剤は、前記本発明の発現抑制剤を含むこと、すなわち、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物を含むことが特徴であり、その他の構成および条件は、特に制限されない。本発明の線維化抑制剤は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の説明を援用できる。本発明の線維化抑制剤は、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できるため、線維化を抑制できる。
【００７３】
本発明の線維化抑制剤は、線維化の抑制、より具体的には、線維化の治療、予防、改善、線維化の進展の抑制、および／または線維化の進展の停止に使用できる。このため、本発明の線維化抑制剤は、例えば、線維化の治療薬、予防薬、改善薬、進展抑制薬および／または進展停止薬ということもできる。本発明の線維化抑制剤によれば、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制することで、ＮＡＳＨにおいて進行する肝組織の線維化を抑制できる。このため、本発明の線維化抑制剤は、例えば、非アルコール性脂肪肝炎における線維化抑制剤、または非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展抑制剤ともいうこともできる。
【００７４】
本発明において、「線維化抑制」は、前記本発明の線維化抑制剤の非存在下（非投与条件）と比較して、生体組織または細胞等の線維化が（有意に）抑制されていればよく、開始時（投与開始時）と比較して、線維化が進行していてもよい。この場合、前記「線維化抑制」は、例えば、「線維化の進行の抑制」等ということもできる。前記線維化は、例えば、コラーゲンタンパク質の量を直接または間接的に測定することにより、評価できる。前記間接的な測定は、例えば、ヒドロキシプロリンの測定があげられる。
【００７５】
本発明の線維化抑制剤の投与条件は、特に制限されず、例えば、投与対象の種類等に応じて、投与形態、投与時期、投与量等を適宜設定できる。本発明の線維化抑制剤の投与対象および投与条件は、例えば、前記本発明の発現抑制剤の投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００７６】
＜線維化誘導遺伝子の発現抑制方法＞
本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制方法は、対象に、前記本発明の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を投与する投与工程を含む。本発明の発現抑制方法は、前記本発明の発現抑制剤を投与することが特徴であり、その他の工程および条件は、特に制限されない。本発明の発現抑制剤は、前述の説明を援用できる。本発明の発現抑制方法によれば、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる。前記線維化誘導遺伝子は、例えば、前述の説明を援用できる。
【００７７】
本発明の発現抑制方法は、例えば、前記発現抑制剤を投与する投与工程を含み、具体的には、投与対象に、前記発現抑制剤を投与する投与工程を含む。前記発現抑制剤は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで投与されてもよいし、ｉｎ ｖｉｖｏで投与してもよい。本発明の発現抑制剤の投与対象および投与条件は、例えば、本発明の発現抑制剤における投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００７８】
＜線維症の治療方法＞
本発明の線維症の治療方法は、前述のように、対象に、本発明の線維症用医薬を投与する投与工程を含む。本発明の線維症の治療方法は、前記本発明の線維症用医薬を投与することが特徴であり、その他の工程および条件は特に制限されない。本発明の治療方法は、前記本発明の発現抑制剤、線維症用医薬、および発現抑制方法の説明を援用できる。前記線維症は、特に制限されず、例えば、肺線維症、骨髄線維症、皮膚硬化症、動脈硬化症等があげられる。
【００７９】
本発明の線維症の治療方法は、例えば、前記線維症用医薬を投与する投与工程を含み、具体的には、投与対象に、前記線維症用医薬を投与する投与工程を含む。前記線維症用医薬は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで投与されてもよいし、ｉｎ ｖｉｖｏで投与してもよい。本発明の線維症用医薬の投与対象および投与条件は、例えば、本発明の発現抑制剤における投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００８０】
＜ＮＡＳＨの治療方法＞
本発明の非アルコール性脂肪肝炎の治療方法は、前述のように、対象に、本発明の非アルコール性脂肪肝炎用医薬を投与する投与工程を含む。本発明のＮＡＳＨの治療方法は、前記本発明のＮＡＳＨ用医薬を投与することが特徴であり、その他の工程および条件は特に制限されない。本発明の治療方法は、前記本発明の発現抑制剤、ＮＡＳＨ用医薬、および発現抑制方法の説明を援用できる。
【００８１】
本発明のＮＡＳＨの治療方法は、例えば、前記ＮＡＳＨ用医薬を投与する投与工程を含み、具体的には、投与対象に、前記ＮＡＳＨ用医薬を投与する投与工程を含む。前記ＮＡＳＨ用医薬は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで投与されてもよいし、ｉｎ ｖｉｖｏで投与してもよい。本発明のＮＡＳＨ用医薬の投与対象および投与条件は、例えば、本発明の発現抑制剤における投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００８２】
＜線維化の抑制方法＞
本発明の線維化の抑制方法（以下、「線維化抑制方法」ともいう）は、前述のように、対象に、本発明の線維化抑制剤を投与する投与工程を含む。本発明の線維化抑制方法は、前記本発明の線維化抑制剤を投与することが特徴であり、その他の工程および条件は特に制限されない。本発明の線維化抑制方法は、前記本発明の発現抑制剤、線維化抑制剤、および発現抑制方法の説明を援用できる。本発明の線維化抑制方法によれば、前述のように、線維化誘導遺伝子の発現を抑制することで、ＮＡＳＨにおいて進行する肝組織の線維化を抑制できる。このため、本発明の線維化抑制方法は、例えば、非アルコール性脂肪肝炎における線維化抑制方法、または非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展抑制方法ともいうこともできる。
【００８３】
本発明の線維化抑制方法は、例えば、前記線維化抑制剤を投与する投与工程を含み、具体的には、投与対象に、前記線維化抑制剤を投与する投与工程を含む。前記線維化抑制剤は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで投与されてもよいし、ｉｎ ｖｉｖｏで投与してもよい。本発明の線維化抑制方法において、前記線維化抑制剤の投与対象および投与条件は、例えば、本発明の発現抑制剤における投与対象および投与条件の説明を援用できる。
【００８４】
＜化合物またはその塩の使用＞
本発明は、線維化誘導遺伝子の発現抑制に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩もしくはそれらの溶媒和物、またはその使用であり、線維症の治療に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩もしくはそれらの溶媒和物、またはその使用であり、非アルコール性脂肪肝炎の治療に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩もしくはそれらの溶媒和物、またはその使用であり、線維化の抑制に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩もしくはそれらの溶媒和物、またはその使用である。また、本発明は、線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を製造するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物の使用であり、線維症の治療用医薬を製造するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物の使用であり、非アルコール性脂肪肝炎の治療用医薬を製造するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物の使用であり、線維化抑制剤を製造するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物の使用である。本発明は、例えば、前記本発明の発現抑制剤、線維症用医薬、ＮＡＳＨ用医薬、および線維化抑制剤の説明を援用できる。
【実施例】
【００８５】
つぎに、本発明の実施例について説明する。ただし、本発明は、以下の実施例により制限されない。市販の試薬は、特に示さない限り、それらのプロトコールに基づいて使用した。【００８６】
［実施例１］
本発明の発現抑制剤が、線維化誘導遺伝子の発現を抑制することを確認した。【００８７】
（１）マウスの準備
ＮＡＳＨおよびそれに伴う線維化は、メチオニン・コリン欠乏飼料（ＭＣＤ飼料）モデルにより誘導した。具体的には、１０週齢の野生型マウス（BALB/C、オス）に、粉末状のＭＣＤ飼料（EPS益新株式会社製：A02082002B）またはコントロール飼料（ＭＣＳ飼料、EPS益新株式会社製：A02082003B）を与えて、４週間飼育した。前者をＭＣＤ群、後者をネガティブコントロール群とした。【００８８】
（２）薬剤投与
つぎに、前記ＭＣＤ群のマウスの半数に、前記ＭＣＤ飼料に代えて、本発明の発現抑制剤であるレトロゾールを一日の摂餌量当たり０．１ｍｇ／ｋｇ相当量となるように添加したＭＣＤ飼料（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）を与え、５週間飼育し、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）とした。また、前記ＭＣＤ群のマウスのうち、ＭＣＤ飼料（ＭＣＤ）を与え続けた以外は同様にして５週間飼育したマウスを、ＮＡＳＨモデルのマウス（ＭＣＤ）とし、コントロールとした。そして、前記コントロール飼料（ＣＴＬ）を与え続けたネガティブコントロール群のマウスを同様に５週間飼育し、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）とした。試験開始から試験終了までの間は、隔週で一般状態（外観、呼吸および行動）、体重、残余飼料の量を測定し、レトロゾール投与開始前、開始後２週間後、開始後５週間後に採血してアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ （ＡＬＴ）、ビリルビン・総コレステロール（ＴＣ）、および中性脂肪（ＴＧ）を測定した（オリエンタル酵母工業株式会社に測定を委託）。【００８９】
（３）線維化誘導遺伝子の発現量確認
前記各マウスを、５週間の時点で屠殺し、肝組織を摘出した。摘出した前記肝組織からＲＮＡ調製キット（RNeasy Mini kit、QIAGEN社製）を用いてＲＮＡを抽出した。つぎに、得られたＲＮＡについて、ｃＤＮＡ調製キット（QuantiTect（登録商標）Reverse Transcription Kit、QIAGEN社製）を用いてｃＤＮＡを合成した。そして、得られたｃＤＮＡについて、ＲＴ−ＰＣＲ試薬（QuantiTect（登録商標）SYBR（登録商標）Green PCR kits (QIAGEN）)およびＰＣＲ装置（Step One Plus（商標）-01、Applied Biosystems社製）を用いて、線維化誘導遺伝子である、ＴＧＦ−β１（Transforming Growth Factor-β1）、ＣＴＧＦ（Connective Tissue Growth Factor）、α−ＳＭＡ（α-Smooth Muscle Actin）およびＹＡＰ１（Yes-associated Protein 1）、ならびに内部標準遺伝子のＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定し、ＧＡＰＤＨ遺伝子の発現量に対する相対的発現量を算出した。さらに、５週間の時点で屠殺したネガティブコントロールのマウスにおける各ｍＲＮＡの相対的発現量を同様に測定し、各遺伝子のｍＲＮＡの相対的発現量の平均値をキャリブレーターとして、比較Ｃｔ法（ΔΔＣｔ法）を用いて各遺伝子の発現量の相対値を算出した。なお、前記ＲＴ−ＰＣＲでは、下記プライマー（QuantiTect（登録商標）Primer Assay、QIAGEN社製）を用いた。
ＴＧＦ−β１用プライマー：Mm_Tgfb1_1_SG（Cat no:QT00145250）
ＣＴＧＦ用プライマー：Mm_Ctgf_1_SG（Cat no:QT00096131）
α−ＳＭＡ用プライマー：Mm_Acta2_1_SG（Cat no:QT140119）
ＹＡＰ１用プライマー：Mm_Yap1_1_SG（Cat no:QT01061130）
ＧＡＰＤＨ用プライマー：Mm_Gapdh_3_SG(Cat no:QT01658692)【００９０】
この結果を図１に示す。図１において、（Ａ）は、ＴＧＦ−β１、（Ｂ）は、ＣＴＧＦ、（Ｃ）は、α−ＳＭＡ、（Ｄ）は、ＹＡＰ１の結果を示す。図１において、縦軸は、各遺伝子の発現量の相対値を示し、横軸は、レトロゾール投与開始後の期間を示す。図１に示すように、コントロールのマウス（ＭＣＤ）は、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）と比較して、線維化誘導遺伝子の発現が上昇しており、ＮＡＳＨにおける線維化が引き起こされているのがわかった。また、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）は、コントロールのマウス（ＭＣＤ）に比べ、レトロゾール投与開始後５週間において、ＴＧＦ−β１、ＣＴＧＦ、α−ＳＭＡ、およびＹＡＰ１の発現が顕著に抑制されていた。以上のことから、本発明の発現抑制剤により、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できることがわかった。【００９１】
［実施例２］
本発明の発現抑制剤が、ＮＡＳＨにおける肝組織の線維化を抑制すること、すなわち、ＮＡＳＨを治療できることを確認した。【００９２】
（１）肝組織の測定
前記実施例１（３）で摘出した５週目のマウス由来の各肝組織をパラフィンに包埋し、包埋した前記組織を１０μｍ切片に切断した。得られた切片について、常法によりＨＥ染色を行なった。また、前記切片をシリウスレッドで染色し、染色後の前記組織を、正立顕微鏡（Axio Imager 1 microscope、Carl Zeiss社製）により観察した。さらに、各マウスの肝組織について、１匹あたり１０×１０倍で１０視野を観察し、１視野におけるシリウスレッドの染色領域の平均割合を測定し、各肝組織の線維化指数を算出した。そして、各マウスの肝組織について、ヒドロキシプロリン測定キット（Quickzyme hydroxyproline kit、QuickZime Biosciences社製）を用いて、ヒドロキシプロリンの量を測定した。【００９３】
組織染色の結果を図２に示す。図２は、染色した前記肝組織の顕微鏡観察写真であり、（Ａ）は、ＨＥ染色の写真を示し、（Ｂ）は、シリウスレッド染色の写真を示す。図２（Ａ）および（Ｂ）において、各写真は、左から、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）、コントロールのマウス（ＭＣＤ）、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）の結果である。【００９４】
図２に示すように、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）と比較して、コントロールのマウス（ＭＣＤ）は、矢印で示す囲った領域において、線維化領域が多数存在し、特に、血管周囲からの典型的な線維化が生じており、肝組織の線維化が進行していた。これに対し、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）は、コントロールのマウス（ＭＣＤ）と比較して、血管周囲からの線維化が抑制されており、有意に肝組織の線維化が抑制されていた。【００９５】
つぎに、線維化指数およびヒドロキシプロリンの量の結果を図３に示す。図３は、（Ａ）が、線維化指数を示すグラフであり、（Ｂ）が、ヒドロキシプロリンの量を示すグラフである。図３（Ａ）および（Ｂ）において、横軸は、レトロゾール投与開始後の期間を示し、（Ａ）において、縦軸は、線維化指数を示し、（Ｂ）において、縦軸は、ヒドロキシプロリンの量を示す。【００９６】
図３（Ａ）に示すように、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）と比較して、コントロールのマウス（ＭＣＤ）は、肝組織の線維化が進行していた。これに対し、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）は、コントロールのマウス（ＭＣＤ）と比較して、有意に肝組織の線維化が抑制されていた。また、図３（Ｂ）に示すように、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）と比較して、コントロールのマウス（ＭＣＤ）は、有意にヒドロキシプロリンの量が上昇しており、肝組織におけるコラーゲン量が増加していること、すなわち、肝組織の線維化が進行していることがわかった。これに対して、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）は、コントロールのマウス（ＭＣＤ）と比較して、有意にヒドロキシプロリンの量が減少しており、コラーゲン量が減少していること、すなわち、肝組織の線維化の進行が抑制されていることがわかった。【００９７】
（２）血中マーカーの測定
前記実施例１（２）の各マウスを５週間飼育後、採血し、血清中の線維化マーカー２種（Mac-2 Binding Protein（M2BP）およびヒアルロン酸）の濃度を測定した。なお、M2BPは、M2BP測定キット（mouse mac-2 BP assay kit、Immuno-Biological Laboratories社製）を用いて測定した。また、ヒアルロン酸は、ヒアルロン酸測定キット（hyaluronan immunoassay kit、R&D systems社製）を用いて測定した。これらの結果を図４に示す。【００９８】
図４において、（Ａ）は、Ｍ２ＢＰの結果を示し、（Ｂ）は、ヒアルロン酸の結果を示す。図４において、縦軸は、各血清マーカーの濃度を示す。図４に示すように、ネガティブコントロールのマウス（ＣＴＬ）と比較して、コントロールのマウス（ＭＣＤ）では、血清中の線維化マーカー２種（Mac-2 Binding Protein（M2BP）およびヒアルロン酸）濃度が増加し、線維化が生じているのが確認できた。他方、実施例のマウス（ＭＣＤ＋ＬＥＴ）は、コントロール（ＭＣＤ）のマウスに比べ、血清中の線維化マーカー２種（Mac-2 Binding Protein（M2BP）およびヒアルロン酸）濃度が減少していた。本発明の発現抑制剤は、肝組織の線維化を抑制できることがわかった。【００９９】
以上のことから、本発明の発現抑制剤は、ＮＡＳＨにおける肝組織の線維化を抑制できること、すなわち、ＮＡＳＨを治療できることがわかった。【０１００】
［実施例３］
本発明の発現抑制剤が、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて、ヒト肝細胞における線維化誘導遺伝子の発現を抑制できることを確認した。【０１０１】
（１）キメラマウスの作製
ヒト肝細胞から構成される肝臓を有するキメラマウスの作製には、ＰＸＢ（登録商標）マウスを用いた。具体的には、生後２〜３週間のuPA/SCIDマウス（uPAトランスジェニックとSCIDの両方の形質を持つ、重度免疫不全肝障害マウス）に正常ヒト肝細胞を脾臓経由で移植した。【０１０２】
（２）薬剤投与
得られたキメラマウスに対して、レトロゾールを、２００ｍｇ／ｋｇ／日となるように、３日間経口投与した。前記経口投与は、午前中に実施した。レトロゾールの最終投与後、２４時間において、キメラマウスから肝臓を摘出し、T-LEX（登録商標）法を用いて、ＴＧＦ−β２、ＣＴＧＦ、α−ＳＭＡ、およびＹＡＰ１の発現を測定した。具体的には、前記肝臓からＴｏｔａｌ  ＲＮＡを調製後、前記Ｔｏｔａｌ  ＲＮＡからｃＲＮＡを調製した。そして、前記ｃＲＮＡについて、ＤＮＡチップを用いて、各遺伝子の発現量を測定した。また、コントロールは、レトロゾールを投与しなかった以外は同様に測定した。そして、コントロールにおける各遺伝子の発現量を１として、相対的な発現量を算出した。この結果、ＴＧＦ−β２の発現量は、０．８７、ＣＴＧＦの発現量は、０．１６、α−ＳＭＡは、０．５７、ＹＡＰ−１は、０．６４であり、各遺伝子とも発現が抑制されていた。これらの結果から、本発明の発現抑制剤が、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて、ヒト肝細胞における線維化誘導遺伝子の発現を抑制できることが分かった。【０１０３】
以上、実施形態および実施例を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態および実施例に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本願発明のスコープ内で当業者が理解しうる様々な変更をすることができる。【０１０４】
この出願は、２０１８年１０月３１日に出願された日本出願特願２０１８−２０５６３２を基礎とする優先権を主張し、その開示のすべてをここに取り込む。【０１０５】
＜付記＞
上記の実施形態および実施例の一部または全部は、以下の付記のように記載されうるが、以下には限られない。
（付記１）
下記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物を含む、線維化誘導遺伝子の発現抑制剤：
【化１】
2020090967.tif 000013
前記式（Ｉ）中、
Ｒ、Ｒ０およびＲ１は、同じでも異なってもよく、独立して水素原子であるか；または
ＲとＲ０とは、隣接した炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と合体してナフタレン環を形成してもよく；
Ｒ２は、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、シアノ−フェニル基、トリフルオロメチル−フェニル基、ハロゲン化フェニル基、低級アルコキシ−フェニル基、ヒドロキシ−フェニル基、低級アルキル−フェニル基、フェニル−低級アルキル基、ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基、シアノ−フェニル−低級アルキル基、ピリジル基もしくはチエニル基であるか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、低級アルキリデン基もしくはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］−低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基もしくはオルトフェニレン架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基を表し、それらに結合している炭素原子と共に、対応する場合によりベンゾ縮合された５−、６−もしくは７員環を形成してもよく；
Ｗは、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であるか；または
Ｗは、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり、その場合には、下記式（Ｉ′）：
【化２】
2020090967.tif 000014
で表される基は、式（Ｉ）の−Ｃ≡Ｎ基に関してフェニル環の４位に結合している。
（付記２）
下記式（II）で表される化合物を含む、付記１記載の発現抑制剤：
【化３】
2020090967.tif 000015
前記式（II）中、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、ピリジル基、チエニル基もしくはベンジル基であり；または、
Ｒ２′が、そのフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン基、もしくはトリフルオロメチル基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であるか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、低級アルキリデン基またはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１′およびＲ２′が、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基を表し；
Ｒ３が、水素原子である。
（付記３）
前記式（II）において、
Ｒ１′が、水素原子であり；
Ｒ２′が、水素原子、低級アルキル基もしくはピリジル基であり；または
Ｒ２′が、非置換またはフェニル環上で、それぞれ、シアノ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、もしくはハロゲン基でモノ置換されたフェニル基、またはシアノ基もしくはヒドロキシ基でモノ置換されたベンジル基であり；
Ｒ３が、水素原子である、付記２記載の発現抑制剤。
（付記４）
前記式（II）において、
Ｒ１′およびＲ３が、水素原子であり；
Ｒ２′が、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基である、付記２または３記載の発現抑制剤。
（付記５）
下記式（III）で表される化合物を含む、付記１から４のいずれかに記載の発現抑制剤：
【化４】
2020090967.tif 000016
前記式（III）中、
Ｒ２′は、３−ピリジル基、ｐ−シアノベンジル基、またはｐ−シアノフェニル基である。
（付記６）
レトロゾール、その塩またはそれらの溶媒和物を含む、付記１から５のいずれかに記載の発現抑制剤。
（付記７）
前記線維化誘導遺伝子は、ＴＧＦ−β（Transforming Growth Factor-β）、ＣＴＧＦ（Connective Tissue Growth Factor）、α−ＳＭＡ（α-Smooth Muscle Actin）およびＹＡＰ１（Yes-associated Protein 1）からなる群から選択された少なくとも一つを含む、付記１から６のいずれかに記載の発現抑制剤。
（付記８）
付記１から７のいずれかに記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、線維症用医薬。
（付記９）
前記線維症は、肺線維症、骨髄線維症、皮膚硬化症、および動脈硬化症からなる群から選択された少なくとも一つである、付記８記載の線維症用医薬。
（付記１０）
付記１から７のいずれかに記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、非アルコール性脂肪肝炎用医薬。
（付記１１）
付記１から７のいずれかに記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を含む、線維化抑制剤。
（付記１２）
前記線維化抑制剤は、非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展抑制剤である、付記１１の線維化抑制剤。
（付記１３）
対象に、付記１から７のいずれかに記載の線維化誘導遺伝子の発現抑制剤を投与する投与工程を含む、線維化誘導遺伝子の発現抑制方法。
（付記１４）
前記線維化誘導遺伝子は、ＴＧＦ−β（Transforming Growth Factor-β）、ＣＴＧＦ（Connective Tissue Growth Factor）、α−ＳＭＡ（α-Smooth Muscle Actin）およびＹＡＰ１（Yes-associated Protein 1）からなる群から選択された少なくとも一つを含む、付記１３記載の発現抑制方法。
（付記１５）
前記発現抑制剤を、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで投与する、付記１３または１４記載の発現抑制方法。
（付記１６）
対象に、付記８または９記載の線維症用医薬を投与する投与工程を含む、線維症の治療方法。
（付記１７）
前記線維症は、肺線維症、骨髄線維症、皮膚硬化症、および動脈硬化症からなる群から選択された少なくとも一つである、付記１６記載の線維症の治療方法。
（付記１８）
対象に、付記１０記載の非アルコール性脂肪肝炎用医薬を投与する投与工程を含む、非アルコール性脂肪肝炎の治療方法。
（付記１９）
対象に、付記１１または１２記載の線維化抑制剤を投与する投与工程を含む、線維化の抑制方法。
（付記２０）
前記対象は、非アルコール性脂肪肝炎の患者であり、
前記投与工程において、前記患者に、前記線維化抑制剤を投与することにより、前記非アルコール性脂肪肝炎における線維化を抑制する、付記１９記載の線維化の抑制方法。
（付記２１）
前記対象は、非アルコール性脂肪肝炎の患者であり、
前記投与工程において、前記患者に、前記線維化抑制剤を投与することにより、前記非アルコール性脂肪肝炎から肝硬変への進展を抑制する、付記１９または２０記載の線維化の抑制方法。
（付記２２）
線維化誘導遺伝子の発現抑制に使用するための、下記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物：
【化１】
2020090967.tif 000017
前記式（Ｉ）中、
Ｒ、Ｒ０およびＲ１は、同じでも異なってもよく、独立して水素原子であるか；または
ＲとＲ０とは、隣接した炭素原子上に存在し、一緒になって、それらが結合しているベンゼン環と合体してナフタレン環を形成してもよく；
Ｒ２は、水素原子、低級アルキル基、フェニル基、シアノ−フェニル基、トリフルオロメチル−フェニル基、ハロゲン化フェニル基、低級アルコキシ−フェニル基、ヒドロキシ−フェニル基、低級アルキル−フェニル基、フェニル−低級アルキル基、ヒドロキシ−フェニル−低級アルキル基、シアノ−フェニル−低級アルキル基、ピリジル基もしくはチエニル基であるか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、低級アルキリデン基もしくはジ−［（低級アルコキシもしくはヒドロキシ）−フェニル］−低級アルキリデン基を表すか；または
Ｒ１とＲ２とが、一緒になって、炭素数４〜６の直鎖アルキレン基もしくはオルトフェニレン架橋された炭素数２〜４の直鎖アルキレン基を表し、それらに結合している炭素原子と共に、対応する場合によりベンゾ縮合された５−、６−もしくは７員環を形成してもよく；
Ｗは、１−（1,2,4もしくは1,3,4）−トリアゾリル基または３−ピリジル基であるか；または
Ｗは、１−イミダゾリル基または低級アルキル置換−１−イミダゾリル基であり、その場合には、下記式（Ｉ′）：
【化２】
2020090967.tif 000018
で表される基は、式（Ｉ）の−Ｃ≡Ｎ基に関してフェニル環の４位に結合している。
（付記２３）
線維症の治療に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物。
（付記２４）
非アルコール性脂肪肝炎の治療に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物。
（付記２５）
線維化の抑制に使用するための、前記式（Ｉ）で表される化合物、その塩またはそれらの溶媒和物。
【産業上の利用可能性】
【０１０６】
以上のように、本発明の発現抑制剤は、前記式（Ｉ）の化合物、その塩、またはそれらの溶媒和物を含むことにより、線維化誘導遺伝子の発現を抑制できる。すなわち、本発明によれば、前記線維化誘導遺伝子の発現を抑制できることから、例えば、肝組織等の生体組織の線維化が抑制でき、線維症の治療に用いることができる。また、ＮＡＳＨにおいては、線維化が進行する。このため、本発明によれば、ＮＡＳＨ用医薬を提供できる。したがって、本発明は、医薬等の分野において、極めて有用といえる。
【図１】
2020090967.tif 000024
【図２】
2020090967.tif 000025
【図３】
2020090967.tif 000026
【図４】
2020090967.tif 000027
【国際調査報告】
2020090967.tif 000028
2020090967.tif 000029
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