(57)【要約】  ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
2020090321.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える、熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項２】
前記熱ショックタンパク質遺伝子がＨＳＰＡ１Ａ遺伝子及びＨＳＰＢ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＨＳＰＡ１Ａ遺伝子及びＨＳＰＢ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進する、請求項１に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項３】
セラミダーゼ遺伝子、脂質合成酵素遺伝子、ライソゾーム加水分解酵素遺伝子、タイトジャンクション生合成因子遺伝子、及び細胞間接着因子遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項４】
前記セラミダーゼ遺伝子がＡＳＡＨ１遺伝子であり、ＡＳＡＨ１遺伝子の発現を抑制し、
前記脂質合成酵素遺伝子がＤＧＡＴ１遺伝子であり、ＤＧＡＴ１遺伝子の発現を促進し、
前記ライソゾーム加水分解酵素遺伝子がＧＢＡ遺伝子であり、ＧＢＡ遺伝子の発現を促進し、
前記タイトジャンクション生合成因子遺伝子が、ＣＬＤＮ１遺伝子及びＯＣＬＮ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＣＬＤＮ１遺伝子及びＯＣＬＮ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進し、
前記細胞間接着因子遺伝子が、ＩＴＧＡ２遺伝子、ＣＤＨ１遺伝子、及びＣＤ４４遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＩＴＧＡ２遺伝子、ＣＤＨ１遺伝子、及びＣＤ４４遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進する、
請求項３に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項５】
抗微生物分子遺伝子の発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項６】
前記抗微生物分子遺伝子が、ＴＬＲ２遺伝子、ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＴＬＲ２遺伝子、ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進する、請求項５に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項７】
サーチュイン遺伝子及びテロメラーゼ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項８】
前記サーチュイン遺伝子がＳＩＲＴ４遺伝子であり、ＳＩＲＴ４遺伝子の発現を促進し、
前記テロメラーゼ遺伝子が、ＴＥＲＴ遺伝子及びＴＥＲＣ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＴＥＲＴ遺伝子及びＴＥＲＣ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進する、
請求項７に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項９】
エネルギー代謝因子遺伝子の発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１０】
前記エネルギー代謝因子遺伝子がＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子であり、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子の発現を促進する、請求項９に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１１】
ヒアルロン酸生合成因子遺伝子及びヒアルロン酸分解因子遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１２】
前記ヒアルロン酸生合成因子遺伝子が、ＨＡＳ１遺伝子、ＨＡＳ２遺伝子、及びＨＡＳ３遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＨＡＳ１遺伝子、ＨＡＳ２遺伝子、及びＨＡＳ３遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進し、
前記ヒアルロン酸分解因子遺伝子がＨＹＡＬ２遺伝子及びＣＥＭＩＰ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＨＹＡＬ２遺伝子及びＣＥＭＩＰ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を抑制する、
請求項１１に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１３】
基底膜生合成因子遺伝子の発現を調整する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１４】
前記基底膜生合成因子遺伝子が、ＬＡＭＡ１遺伝子、ＬＡＭＡ５遺伝子、ＣＯＬ４Ａ１遺伝子、及びＣＯＬ７Ａ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであり、ＬＡＭＡ１遺伝子、ＬＡＭＡ５遺伝子、ＣＯＬ４Ａ１遺伝子、及びＣＯＬ７Ａ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進する、請求項１３に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１５】
Ｉ型コラーゲンの産生を促進する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１６】
前記明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備え、熱ショックタンパク質４７の産生を促進する、請求項１又は２に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１７】
前記ヨモギ又は明日葉由来の発酵液をさらに備える、請求項１から１６のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１８】
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１から１７のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項１９】
前記ラクトバシラス属が死菌である、請求項１から１８のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項２０】
前記ラクトバシラス属が加熱処理されている、請求項１から１９のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項２１】
前記ラクトバシラス属が菌体乾燥物である、請求項１から２０のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤。
【請求項２２】
請求項１から２１のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤を備える医薬品。
【請求項２３】
抗しわ用医薬品である、請求項２２に記載の医薬品。
【請求項２４】
抗老化用医薬品である、請求項２２に記載の医薬品。
【請求項２５】
請求項１から２１のいずれか１項に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤を備える化粧品。
【請求項２６】
抗しわ用化粧品である、請求項２５に記載の化粧品。
【請求項２７】
抗老化用化粧品である、請求項２５に記載の化粧品。
【請求項２８】
ヨモギ又は明日葉からラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を得ることを含む、熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法。
【請求項２９】
前記ヨモギ又は明日葉を発酵して発酵液を得ることをさらに含む、請求項２８に記載の熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、化粧品、及び熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、ヒトの皮膚の構造やその新陳代謝のメカニズムなどに関する研究が進むにつれて、加齢にともないヒトの皮膚にしわ、小じわ、しみ、及びたるみなどの変化が現れる原因や機構が徐々に明らかになりつつある。皮膚は、外側の薄い表皮（上皮組織）とその下層の厚い真皮（結合組織）とから構成されている。表皮は、体の最外層として、外界から生体を保護するとともに、内部の水分や栄養分が外界に漏出するのを防ぐ。真皮は、主に線維芽細胞、膠原線維（コラーゲン）、弾性繊維（エラスチン）、及びプロテオグリカンなどが複合的に三次元状に広がった構造を持つ結合組織であり、皮膚に強度、伸展性、及び弾力性をもたらす役割を担っている。加齢とともに皮膚における皮脂や水分の量が減少すると、皮膚表面の角質層の保湿力が失われ、乾燥などによる小ジワや肌のかさつきが生じやすくなる。これに対し、発酵品を用いて、皮膚機能の改善を行うことが提案されている（例えば、特許文献１から７参照。）。また、アルニカ等の抽出物を投与することによって熱ショックタンパク質の発現を誘導し、美白効果をもたらすことが提案されている（例えば、特許文献８参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第２０１８／１２３８２８号
【特許文献２】特許第５４６８１８３号公報
【特許文献３】特開２０１５−１５６８３２号公報
【特許文献４】特許第５４６７１０６号公報
【特許文献５】特許第４９９０２９７号公報
【特許文献６】特開２００９−２４９３６６号公報
【特許文献７】特開２００９−２４９３６５号公報
【特許文献８】特許第５６９７８７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、天然由来成分を有効成分とし、幅広い効果を奏する熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、化粧品、及び熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の一側面に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。本発明の一側面に係る医薬品は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。本発明の一側面に係る化粧品は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。本発明の一側面に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法は、ヨモギ又は明日葉からラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を得ることを含む。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、天然由来成分を有効成分とし、幅広い効果を奏する熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、化粧品、及び熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤の製造方法を提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】実施例１に係る発酵液に含まれる菌の解析結果を示すグラフと表である。
【図２】実施例２に係る発酵液に含まれる菌の解析結果を示すグラフと表である。
【図３】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図４】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図５】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図６】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図７】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図８】実施例４に係る遺伝子発現の解析結果を示す表である。
【図９】実施例５に係る発酵液を投与されたヒトの写真である。
【図１０】実施例６に係る発酵液の抗菌効果を示すグラフである。
【図１１】実施例７に係る発酵液の抗真菌効果を示すグラフである。
【図１２】実施例８に係る発酵液の抗ウイルス効果を示すグラフである。
【図１３】実施例８に係る発酵液の抗ウイルス効果を示すグラフである。
【図１４】実施例９に係る発酵液の抗白癬菌効果を示すグラフである。
【図１５】実施例１０に係るＩ型コラーゲンの産生量を示す表である。
【図１６】実施例１０に係るＨＳＰ４７の産生量を示す表である。
【図１７】実施例１１に係るＳＡ−β−Ｇａｌ染色した細胞の顕微鏡画像である。
【図１８】実施例１１に係るＳＡ−β−Ｇａｌ染色した細胞の顕微鏡画像である。
【図１９】実施例１１に係るＳＡ−β−Ｇａｌ染色の度合いを示す表である。
【図２０】実施例１２に係る細胞生存率を示す表である。
【図２１】実施例１２に係るＨＳＰ７０の産生量を示す表である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。なお以下の示す実施の形態は、この発明の技術的思想を具体化するための装置や方法を例示するものであって、この発明の技術的思想は構成部材の組み合わせ等を下記のものに特定するものではない。この発明の技術的思想は、特許請求の範囲において種々の変更を加えることができる。
【０００９】
実施形態に係る熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）遺伝子発現調整剤は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、特に、抗老化機能を向上させる熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）７０遺伝子の発現を促進する。ラクトバシラス属は、乳酸桿菌の一種であり、グラム陽性の通性嫌気性菌である。ラクトバシラス属は、糖を発酵して乳酸を産生する。ラクトバシラス属は、ヒトを含む動物の体内にも生息しているが、実施形態に係るラクトバシラス属は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属である。
【００１０】
例えば、実施形態に係るラクトバシラス属は、ヨモギ又は明日葉を発酵させて、抽出される。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ヨモギ又は明日葉の発酵液をさらに備えていてもよい。
【００１１】
ヨモギ由来のラクトバシラス属は、例えば、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、及びｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種等を含む。明日葉由来のラクトバシラス属は、例えば、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種を含む。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ラクトバシラス属の複数の種を含んでいてもよい。
【００１２】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、熱ショックタンパク質遺伝子の発現を促進する。熱ショックタンパク質遺伝子の例としては、ＨＳＰ７０をコードするＨＳＰＡ１Ａ遺伝子及びＨＳＰ２７をコードするＨＳＰＢ１遺伝子が挙げられる。ＨＳＰ７０は、美白促進機能、抗しみ機能、抗しわ機能、抗ストレス機能、抗細胞死機能、抗炎症機能、細胞保護機能、胃粘膜保護機能、及び抗ＤＮＡ障害機能を有する。ＨＳＰ２７は、抗ストレス機能及び創傷治癒機能を有する。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備え、ＨＳＰ４７の産生を促進する。ＨＳＰ４７はコラーゲンの生合成に関与する分子シャペロンである。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗ストレス機能、抗細胞死機能、抗炎症機能、細胞保護機能、胃粘膜保護機能、抗ＤＮＡ障害機能、及び創傷治癒機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、熱ショックタンパク質発現促進、美白促進機能向上、抗しみ機能向上、抗しわ機能向上、抗ストレス機能向上、抗細胞死機能向上、抗炎症機能向上、細胞保護機能向上、胃粘膜保護機能向上、抗ＤＮＡ障害機能向上、及び創傷治癒からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。なお、しわは小じわを含む。
【００１３】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、熱ショックタンパク質遺伝子以外の発現も調整する。例えば、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、酸性セラミド分解酵素（セラミダーゼ）遺伝子の発現を抑制する。酸性セラミダーゼ遺伝子の例としては、ＡＳＡＨ１遺伝子が挙げられる。酸性セラミダーゼの発現を抑制するため、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、セラミド生合成を促進し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、セラミダーゼ発現抑制、セラミド生合成促進、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１４】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、脂質合成酵素遺伝子の発現を促進する。脂質合成酵素遺伝子の例としては、ＤＧＡＴ１遺伝子が挙げられる。ＤＧＡＴ１（Ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ  Ｏ−ａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  １）は、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）から中性脂肪（ＴＡＧ）を合成する。ＤＧＡＴ１欠損マウスは、皮膚のバリア機能に異常が生じる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、脂質合成を促進し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、脂質合成促進、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１５】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ライソゾーム加水分解酵素遺伝子の発現を促進する。ライソゾームは、細胞の中で糖質や糖脂質の分解を行っている。ライソゾームの機能発揮には、ライソゾーム加水分解酵素が必要である。ライソゾーム加水分解酵素遺伝子の例としては、酸性β−グルコシダーゼ（ＧＢＡ）遺伝子が挙げられる。ライソゾーム病の患者においては、ＧＢＡの活性が低下又は欠損している。また、ＧＢＡの活性化は、皮膚のバリア機能を向上させる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ライソゾーム病を予防及び治療し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ライソゾーム加水分解酵素発現促進、ライソゾーム機能向上、ライソゾーム病予防、ライソゾーム病治療、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１６】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、タイトジャンクション生合成因子遺伝子の発現を促進する。タイトジャンクション生合成因子遺伝子の例としては、クローディン１（ＣＬＤＮ１）遺伝子及びオクルディン（ＯＣＬＮ）遺伝子が挙げられる。クローディン及びオクルディンはタイトジャンクションの構成要素である。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、タイトジャンクションの生合成を促進し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、タイトジャンクション生合成因子発現促進、クローディン発現促進、オクルディン発現促進、タイトジャンクション生合成促進、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１７】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、細胞間接着因子遺伝子の発現を促進する。細胞間接着因子遺伝子の例としては、インテグリンα２（ＩＴＧＡ２）遺伝子、Ｅカドヘリン（ＣＤＨ１）遺伝子、及びヒアルロン酸受容体（ＣＤ４４）遺伝子が挙げられる。インテグリン、カドヘリン、及びＣＤ４４は細胞間接着に寄与する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、細胞間接着因子の生合成を促進し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、細胞間接着因子生合成促進、インテグリン発現促進、カドヘリン発現促進、ヒアルロン酸受容体発現促進、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１８】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、温度感受性ＴＲＰ（Ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）チャネル遺伝子の発現を促進する。ＴＲＰチャネル遺伝子の例としては、ＴＲＰＶ３遺伝子が挙げられる。ＴＲＰＶ３は、表皮バリア機能を維持するケラチノサイトの増殖及び分化に関与する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ケラチノサイトの生合成を促進し、皮膚のバリア機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ＴＲＰチャネル発現促進、ケラチノサイト生合成促進、及びバリア機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００１９】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、抗微生物分子遺伝子の発現を促進する。抗微生物分子遺伝子の例としては、Ｔｏｌｌ様受容体２（ＴＬＲ２）遺伝子が挙げられる。Ｔｏｌｌ様受容体は、微生物を感知して免疫を作動させる機能がある。また、抗微生物分子遺伝子の例としては、ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子が挙げられる。ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子は、抗微生物ペプチドであるＤＥＦＢ１、ＤＥＦＢ２、及びＤＥＦＢ１０３等のβディフェンシンをコードする。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗微生物機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、Ｔｏｌｌ様受容体発現促進、βディフェンシン発現促進、及び抗微生物機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２０】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、サーチュイン遺伝子の発現を促進する。サーチュイン遺伝子の例としては、ＳＩＲＴ４遺伝子が挙げられる。サーチュイン遺伝子の活性は、抗老化機能を向上させる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗老化機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、サーチュイン発現促進及び抗老化機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２１】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、テロメラーゼ遺伝子の発現を促進する。テロメラーゼ遺伝子の例としては、ＴＥＲＴ遺伝子及びＴＥＲＣ遺伝子が挙げられる。テロメラーゼの活性を促進すると、細胞の寿命が長くなる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗老化機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、テロメラーゼ発現促進及び抗老化機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２２】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、エネルギー代謝因子遺伝子の発現を促進する。エネルギー代謝因子遺伝子の例としては、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子が挙げられる。ＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子は、ＰＧＣ−１（Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇａｍｍａ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ  １）をコードする。ＰＧＣ−１は、エネルギー代謝を促進する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、エネルギー代謝機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、エネルギー代謝因子発現促進、ＰＧＣ−１発現促進、及びエネルギー代謝機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２３】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ヒアルロン酸生合成因子遺伝子の発現を促進する。ヒアルロン酸生合成因子遺伝子の例としては、ヒアルロン酸合成酵素１（ＨＡＳ１）遺伝子、ヒアルロン酸合成酵素２（ＨＡＳ２）遺伝子、及びヒアルロン酸合成酵素３（ＨＡＳ３）遺伝子が挙げられる。
【００２４】
また、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ヒアルロン酸分解因子遺伝子の発現を抑制する。ヒアルロン酸分解因子遺伝子の例としては、ヒアルロン酸分解酵素２（ＨＹＡＬ２）遺伝子及びＣｅｌｌ  ｍｉｇｒａｔｉｏｎ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ  ａｎｄ  ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ（ＣＥＭＩＰ、ＫＩＡＡ１１９９）遺伝子が挙げられる。
【００２５】
したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ヒアルロン酸生合成機能を向上させることが可能である。ヒアルロン酸は、変形性関節症の予防及び治療、保湿機能向上、たるみの解消及びしわの減少に有効である。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、変形性関節症を予防及び治療し、保湿機能を向上させ、たるみ及びしわを減少させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ヒアルロン酸合成酵素発現促進、ヒアルロン酸分解因子発現抑制、ヒアルロン酸生合成促進、変形性関節症予防、変形性関節症治療、保湿機能向上、抗たるみ機能向上、及び抗しわ機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２６】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、基底膜生合成因子遺伝子の発現を促進する。基底膜生合成因子遺伝子の例としては、ラミニンα１（ＬＡＭＡ１）遺伝子、ラミニンα５（ＬＡＭＡ５）遺伝子、ＩＶ型コラーゲンα１（ＣＯＬ４Ａ１）遺伝子、及びＶＩＩ型コラーゲンα１（ＣＯＬ７Ａ１）が挙げられる。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ラミニン及びコラーゲンの生合成を促進し、基底膜の生合成を促進することが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、基底膜生合成因子発現促進、ラミニン発現促進、コラーゲン発現促進、及び基底膜生合成促進からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２７】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、Ｉ型コラーゲンの発現を促進する。Ｉ型コラーゲンは、骨に弾力性を与える。Ｉ型コラーゲンは、皮膚に強さを与える。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、Ｉ型コラーゲンの発現を促進するための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２８】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害因子遺伝子の発現を促進する。マトリックスメタロプロテアーゼ阻害因子遺伝子の例としては、ＴＩＭＰ１遺伝子が挙げられる。マトリックスメタロプロテアーゼ阻害因子は、マトリックスメタロプロテアーゼを阻害し、細胞外マトリックスの分解を抑制する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、細胞外マトリックスの分解を抑制可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害因子発現促進及び細胞外マトリックス分解抑制からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００２９】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、抗酸化因子遺伝子の発現を促進する。抗酸化因子遺伝子の例としては、スーパーオキシドディスムターゼ３（ＳＯＤ３）遺伝子、カタラーゼ（ＣＡＴ）遺伝子、グルタチオン還元酵素（ＧＳＲ）遺伝子、グルタチオンペルオキシダーゼ１（ＧＰＸ１）遺伝子、メタロチオネイン１Ｆ（ＭＴ１Ｆ）遺伝子が挙げられる。ＳＯＤは、活性酸素を分解する酵素である。ＣＡＴは、過酸化水素を分解する酵素である。ＧＳＲは、酸化型グルタチオンを還元する酵素である。ＧＰＸ１は、過酸化水素を分解する酵素である。ＭＴ１Ｆは抗酸化タンパク質である。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗酸化機能を向上可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、抗酸化因子遺伝子発現促進、ＳＯＤ発現促進、ＣＡＴ発現促進、ＧＳＲ発現促進、ＧＰＸ１発現促進、ＭＴ１Ｆ発現促進、及び抗酸化機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３０】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、インターロイキン１受容体拮抗分子（ＩＬ１ＲＮ）遺伝子の発現を促進する。インターロイキン１受容体拮抗分子が欠損すると、インターロイキン１受容体拮抗分子欠損症（ＤＩＲＡ）が生じる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ＤＩＲＡを予防及び治療することが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、インターロイキン１受容体拮抗分子発現促進、ＤＩＲＡ予防、及びＤＩＲＡ治療からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３１】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、セマフォリンイン遺伝子の発現を促進する。セマフォリンイン遺伝子の例としては、ＳＥＭＡ３Ａ遺伝子が挙げられる。セマフォリンインは、神経軸索伸長に対して反発作用を示す反発性ガイダンス因子である。セマフォリンは、血管新生を抑制する。セマフォリンは骨量を制御する。また、セマフォリンインは、痒みを抑制する。セマフォリンは、アトピー性皮膚炎に予防及び治療効果がある。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、神経軸索伸長を反発的にガイドしたり、血管新生を抑制したり、骨量を制御したり、痒みを抑制したり、アトピー性皮膚炎を予防及び治療したりすることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、セマフォリンイン発現促進、神経軸索伸長抑制、血管新生抑制、骨量制御、痒み抑制、アトピー性皮膚炎予防、及びアトピー性皮膚炎治療からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３２】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、神経成長因子（ＮＧＦ）遺伝子及び神経成長因子受容体（ＮＧＦＲ）の発現を促進する。神経成長因子は、神経の成長及び維持を促進し、脳神経の機能回復を促進し、アルツハイマー病及び痴ほう症の予防及び治療に有効である。神経成長因子は、神経成長因子受容体を介して作用を発現する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、神経成長因子の発現を促進し、神経の成長及び維持を促進し、脳神経の機能回復を促進し、アルツハイマー病及び痴ほう症を予防及び治療することが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、神経成長因子発現促進、神経成長及び維持促進、脳神経機能回復促進、アルツハイマー病予防、アルツハイマー病治療、痴ほう症予防、及び痴ほう症治療からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３３】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、核内因子κＢ（ＮＦκＢ）の阻害因子遺伝子の発現を促進する。ＮＦκＢの阻害因子遺伝子と例としては、ＮＦＫＢＩＡ遺伝子が挙げられる。ＩκＢα等のＮＦκＢの阻害因子は、ＮＦκＢの活性を阻害し、ガンを予防及び治療する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ガンを予防及び治療することが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ＮＦκＢ阻害因子発現促進、ガン予防、及びガン治療からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３４】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、カルパイン（ＣＡＰＮ）阻害タンパク質であるカルパスタチン（ＣＡＳＴ）遺伝子の発現を促進する。老化細胞においては、ＣＡＰＮが活性化し、ＣＡＳＴが消失する。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、老化を抑制することが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ＣＡＰＮ阻害タンパク質発現促進、及び抗老化機能向上からなる群から選択される用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３５】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、シトルリン化タンパク質活性化因子遺伝子の発現を促進する。シトルリン化タンパク質活性化因子遺伝子の例としては、ペプチジルアルギニンデイミナーゼ３（ＰＡＤ３）が挙げられる。ＰＡＤはシトルリン化タンパク質を活性化させ、正常な表皮の角化を進行させる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、正常な皮膚の角化を進行させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、シトルリン化タンパク質活性化因子発現促進、及び正常な皮膚の角化進行からなる群から選択される用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３６】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、トランスグルタミナーゼ遺伝子の発現を促進する。トランスグルタミナーゼ遺伝子の例としては、ＴＧＭ１遺伝子が挙げられる。トランスグルタミナーゼは、皮膚表面の物理的強度を高めたり、保湿機能を高めたりする。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、皮膚表面の強度を高めたり、皮膚の保湿機能を向上させたりすることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、トランスグルタミナーゼ発現促進、皮膚表面強度向上、皮膚のはり向上、及び皮膚の保湿機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３７】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、インボルクリン（ＩＶＬ）遺伝子の発現を促進する。ＩＶＬはコーニファイドエンベロープの成熟を促し、皮膚の保湿機能を向上させる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、コーニファイドエンベロープの成熟を促し、皮膚の保湿機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ＩＶＬ発現促進、コーニファイドエンベロープ成熟化促進、及び皮膚の保湿機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３８】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、アクアポリン遺伝子の発現を促進する。アクアポリン遺伝子の例としては、ＡＱＰ３遺伝子が挙げられる。アクアポリンは、ケラチノサイトの遊走に関与し、皮膚の保湿機能を向上させる。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ケラチノサイト遊走機能を向上させ、皮膚の保湿機能を向上させることが可能である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、アクアポリン発現促進、ケラチノサイト遊走機能向上、及び皮膚の保湿機能向上からなる群から選択される少なくとも一つの用途のための医薬品、化粧品、及び／又は食品として使用可能である。
【００３９】
また、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、真菌（カビ）を減少させる機能も有する。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、真菌を、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。真菌としては、白癬菌、カンジダ、クリプトコックス、及びアスペルギルス等が挙げられるが、これらに限定されない。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、真菌症の治療効果も有する。真菌症としては、白癬、カンジダ症、クリプトコックス症、及びアスペルギルス症等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、グラム陰性菌及びグラム陽性菌を減少させる機能も有する。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、グラム陰性菌及びグラム陽性菌を、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。グラム陰性菌としては、大腸菌、サルモネラ菌、腸炎ビブリオ菌、肺炎桿菌、及び緑膿菌等が挙げられるが、これらに限定されない。グラム陽性菌としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、芽胞を形成するセレウス菌、及び枯草菌等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ウイルスを減少させる機能も有する。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ウイルスを、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。ウイルスは、エンベロープを有するウイルスであるエンベロープウイルス、及びエンベロープを有さないウイルスであるノンエンベロープウイルスを含む。また、ウイルスは、ＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスを含む。
【００４２】
エンベロープを有するＤＮＡウイルスとしては、ヒトヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、及びＢ型肝炎ウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４３】
エンベロープを有するＲＮＡウイルスとしては、インフルエンザウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス、ＲＳウイルス、ムンプスウイルス、ラッサウイルス、デングウイルス、風疹ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、麻疹ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、及び日本脳炎ウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
エンベロープを有さないＤＮＡウイルスとしては、アデノウイルス、Ｂ１９ウイルス、パポバウイルス、及びヒトパピローマウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
エンベロープを有さないＲＮＡウイルスとしては、ノロウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、アストロウイルス、ロタウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、及びサポウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４６】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、有効量のラクトバシラス属を含む。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ラクトバシラス属を、水等の溶媒中に含んでいてもよいし、植物の発酵液中に含んでいてもよい。発酵液を得るための植物としては、ラクトバシラス属と同様に、ヨモギ及び明日葉が挙げられる。
【００４７】
有効量とは、遺伝子発現調整効果を奏するために必要な量であり、対象とする遺伝子によって適宜決定される。一般に、ラクトバシラス属の濃度が濃く、溶媒が植物の発酵液を含むほうが、遺伝子発現調整効果を奏するが、例えば、対象遺伝子がＧＢＡ遺伝子の場合はラクトバシラス属の濃度が薄いほうが、遺伝子発現調整効果が奏される。また、例えば、対象遺伝子がＴＬＲ２遺伝子である場合は、溶媒が植物の発酵液を含まないほうが、遺伝子発現調整効果が奏される。
【００４８】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤に含まれるラクトバシラス属は、生菌であってもよいし、例えば加熱処理された死菌であってもよい。したがって、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ラクトバシラス属の死菌を含んでいてもよい。ラクトバシラス属は、菌体乾燥物であってもよい。ラクトバシラス属の死菌、あるいは菌体乾燥物も、遺伝子発現調整効果及び抗菌抗ウイルス効果を奏する。また、ラクトバシラス属の死菌、あるいは菌体乾燥物は、運搬や、長期にわたる保管が容易である。
【００４９】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、液体、クリーム、軟膏、硬膏、ジェル、ワックス、及びスプレーであってもよい。
【００５０】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、整肌用化粧品であってもよい。整肌用化粧品の例としては、化粧水、美容液、及びパックが挙げられる。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、保護用化粧品であってもよい。保護用化粧品の例としては、保護用乳液及び保護用クリームが挙げられる。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ベースメークアップ化粧品であってもよい。ベースメークアップ化粧品の例としては、ファンデーション、白粉、及び化粧下地が挙げられる。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、ポイントメークアップ化粧品であってもよい。ポイントメークアップ化粧品の例としては、口紅、アイメークアップ、頬紅、及びネイルエナメルが挙げられる。
【００５１】
また、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、消毒薬、塗布治療薬等の皮膚外用薬、点眼剤、及び内服薬として供される。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、例えば、手足指を含む人体の皮膚、毛、口腔、及び眼球等に投与される。
【００５２】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ラクトバシラス属の他に、液体油脂、固体油脂、ロウ、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子、増粘剤、被膜剤、金属イオン封鎖剤、低級アルコール、多価アルコール、糖類、アミノ酸類、有機アミン類、ｐＨ調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン類、酸化防止剤、香料、粉体、色材、及び水等の化粧品及び医薬品の配合成分を目的に応じて適宜含んでいてもよい。
【００５３】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤が油性成分を含む場合、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤における油性成分の濃度は、特に限定されないが、例えば、０．１質量％以上９０質量％以下、あるいは、０．５質量％以上９０質量％以下である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤が水性成分を含む場合、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤における水性成分の濃度は、特に限定されないが、例えば、０．１質量％以上９０質量％以下、あるいは、０．５質量％以上９０質量％以下である。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤における油性成分と水性成分の比は、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤がオイルインウォーター（Ｏ／Ｗ）型か、ウォーターインオイル（Ｗ／Ｏ）型かによって、適宜設定される。実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤が界面活性剤を含む場合、実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤における界面活性剤の濃度は、特に限定されないが、例えば２質量％以上１０質量％以下である。
【００５４】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、ラクトバシラス属の他に、抗菌性物質あるいは抗ウイルス性物質を目的に応じて適宜含んでいてもよい。
【００５５】
実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤は、植物を発酵させ、ラクトバシラス属を含む発酵液を得ることにより製造される。植物を発酵させる際には、塩、及び糖蜜等の糖が植物に添加される。発酵温度は、例えば３０℃である。得られる発酵液の水素イオン指数（ｐＨ）は、４．０前後である。発酵液から、ラクトバシラス属の分泌物を抽出してもよい。
【００５６】
得られた発酵液を加熱し、発酵液に含まれるラクトバシラス属を死菌にしてもよい。また、発酵液を噴霧乾燥し、ラクトバシラス属の菌体乾燥物を得てもよい。菌体乾燥物は、凍結乾燥法及び熱風乾燥法等によっても作製可能である。
【００５７】
さらに、得られた発酵液、ラクトバシラス属の菌体、あるいはラクトバシラス属の菌体乾燥物を豆乳に添加し、豆乳を発酵させて豆乳発酵液を得てもよい。豆乳発酵液も、遺伝子発現調整効果を奏する。
【００５８】
以上のとおり、本発明の各実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤等は、上述したいずれか１つ又は複数の組み合わせによる以下の例による構成及び作用効果を有する。
【００５９】
本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品は、ヨモギ又は明日葉由来の発酵液をさらに備えていてもよい。医薬品が、抗しわ用医薬品又は抗老化用医薬品であってもよい。化粧品が、抗しわ用化粧品又は抗老化用化粧品であってもよい。
【００６０】
本実施形態は、熱ショックタンパク質遺伝子発現の調整に使用するヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属を含む。本実施形態は、熱ショックタンパク質遺伝子発現の調整に使用する、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液を含む。
【００６１】
本実施形態は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属の、熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品を製造するのための使用を含む。本実施形態は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液の、熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品を製造するのための使用を含む。
【００６２】
本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物にヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属を投与することを含む、熱ショックタンパク質遺伝子発現の調整方法、治療方法、又は美容方法を含む。本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物にヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液を投与することを含む、熱ショックタンパク質遺伝子発現の調整方法、治療方法、又は美容方法を含む。治療方法が、抗しわ機能向上のための治療方法又は抗老化機能向上のための治療方法であってもよい。美容方法が、抗しわ機能向上のための美容方法又は抗老化機能向上のための美容方法であってもよい。
【００６３】
熱ショックタンパク質遺伝子がＨＳＰＡ１Ａ遺伝子及びＨＳＰＢ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＨＳＰＡ１Ａ遺伝子及びＨＳＰＢ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００６４】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属は、熱ショックタンパク質遺伝子以外の遺伝子の発現を調整することが可能である。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、セラミダーゼ遺伝子、脂質合成酵素遺伝子、ライソゾーム加水分解酵素遺伝子、タイトジャンクション生合成因子遺伝子、及び細胞間接着因子遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
【００６５】
セラミダーゼ遺伝子がＡＳＡＨ１遺伝子であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＡＳＡＨ１遺伝子の発現を抑制してもよい。
【００６６】
脂質合成酵素遺伝子がＤＧＡＴ１遺伝子であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＤＧＡＴ１遺伝子の発現を促進してもよい。
【００６７】
ライソゾーム加水分解酵素遺伝子がＧＢＡ遺伝子であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＧＢＡ遺伝子の発現を促進してもよい。
【００６８】
タイトジャンクション生合成因子遺伝子が、ＣＬＤＮ１遺伝子及びＯＣＬＮ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＣＬＤＮ１遺伝子及びＯＣＬＮ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００６９】
細胞間接着因子遺伝子が、ＩＴＧＡ２遺伝子、ＣＤＨ１遺伝子、及びＣＤ４４遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＩＴＧＡ２遺伝子、ＣＤＨ１遺伝子、及びＣＤ４４遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００７０】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、抗微生物分子遺伝子であってもよい。抗微生物分子遺伝子が、ＴＬＲ２遺伝子、ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＴＬＲ２遺伝子、ＤＥＦＢ１遺伝子、ＤＥＦＢ４Ａ遺伝子、及びＤＥＦＢ１０３Ａ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００７１】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、サーチュイン遺伝子及びテロメラーゼ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
【００７２】
サーチュイン遺伝子がＳＩＲＴ４遺伝子であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＳＩＲＴ４遺伝子の発現を促進してもよい。
【００７３】
テロメラーゼ遺伝子が、ＴＥＲＴ遺伝子及びＴＥＲＣ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＴＥＲＴ遺伝子及びＴＥＲＣ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００７４】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、エネルギー代謝因子遺伝子であってもよい。エネルギー代謝因子遺伝子がＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ遺伝子の発現を促進してもよい。
【００７５】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、ヒアルロン酸生合成因子遺伝子及びヒアルロン酸分解因子遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
【００７６】
ヒアルロン酸生合成因子遺伝子が、ＨＡＳ１遺伝子、ＨＡＳ２遺伝子、及びＨＡＳ３遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＨＡＳ１遺伝子、ＨＡＳ２遺伝子、及びＨＡＳ３遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００７７】
ヒアルロン酸分解因子遺伝子が、ＨＹＡＬ２遺伝子及びＣＥＭＩＰ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＨＹＡＬ２遺伝子及びＣＥＭＩＰ遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を抑制してもよい。
【００７８】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属で発現が調整される遺伝子が、基底膜生合成因子遺伝子であってもよい。基底膜生合成因子遺伝子が、ＬＡＭＡ１遺伝子、ＬＡＭＡ５遺伝子、ＣＯＬ４Ａ１遺伝子、及びＣＯＬ７Ａ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、ＬＡＭＡ１遺伝子、ＬＡＭＡ５遺伝子、ＣＯＬ４Ａ１遺伝子、及びＣＯＬ７Ａ１遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの発現を促進してもよい。
【００７９】
本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品は、Ｉ型コラーゲンの産生を促進する。本実施形態に係るＩ型コラーゲンの産生促進剤は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属を備える。本実施形態に係るＩ型コラーゲンの産生促進剤は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液を備える。
【００８０】
本実施形態は、Ｉ型コラーゲンの産生の促進に使用するヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属を含む。本実施形態は、Ｉ型コラーゲンの産生の促進に使用するヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液を含む。
【００８１】
本実施形態は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属の、Ｉ型コラーゲンの産生促進剤を製造するのための使用を含む。本実施形態は、ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液の、Ｉ型コラーゲンの産生促進剤を製造するのための使用を含む。
【００８２】
本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物にヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属を投与することを含む、Ｉ型コラーゲンの産生の促進方法を含む。本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物にヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属とヨモギ又は明日葉由来の発酵液を投与することを含む、Ｉ型コラーゲンの産生の促進方法を含む。
【００８３】
本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品は、ＨＳＰ４７の産生を促進する。本実施形態に係るＨＳＰ４７の産生促進剤は、明日葉由来のラクトバシラス属を備える。本実施形態に係るＨＳＰ４７の産生促進剤は、明日葉由来のラクトバシラス属と明日葉由来の発酵液を備える。
【００８４】
本実施形態は、ＨＳＰ４７の産生の促進に使用する明日葉由来のラクトバシラス属を含む。本実施形態は、ＨＳＰ４７の産生の促進に使用する明日葉由来のラクトバシラス属と明日葉由来の発酵液を含む。
【００８５】
本実施形態は、明日葉由来のラクトバシラス属の、ＨＳＰ４７の産生促進剤を製造するのための使用を含む。本実施形態は、明日葉由来のラクトバシラス属と明日葉由来の発酵液の、ＨＳＰ４７の産生促進剤を製造するのための使用を含む。
【００８６】
本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物に明日葉由来のラクトバシラス属を投与することを含む、ＨＳＰ４７の産生の促進方法を含む。本実施形態は、ヒト又は非ヒト動物に明日葉由来のラクトバシラス属と明日葉由来の発酵液を投与することを含む、ＨＳＰ４７の産生の促進方法を含む。
【００８７】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
【００８８】
本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、死菌であってもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、加熱処理されていてもよい。本実施形態に係るヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス属が、菌体乾燥物であってもよい。
【００８９】
本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品の製造方法は、ヨモギ又は明日葉からラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を得ることを含む。本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品の製造方法が、ヨモギ又は明日葉を発酵して発酵液を得ることをさらに含んでいてもよい。本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品の製造方法が、得られたラクトバシラス属を死菌にすることをさらに含んでいてもよい。本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品の製造方法が、得られたラクトバシラス属を加熱処理することをさらに含んでいてもよい。本実施形態に係る熱ショックタンパク質遺伝子発現調整剤、医薬品、又は化粧品の製造方法が、得られたラクトバシラス属を乾燥することをさらに含んでいてもよい。
【実施例】
【００９０】
以下に本発明の実施例を説明する。ただし、本発明は以下の実施例に限定されないことはもちろんである。【００９１】
（実施例１：ヨモギ由来のラクトバシラス属）
ヨモギの葉においては、一日のうち、日の出時間を挟む前後１時間、合計２時間の間に、乳酸菌の数が最大化するとされている。また、この時間帯以外においては、乳酸菌が減少し、光合成菌が増加するとされている。したがって、この２時間の間に、ヨモギの葉の先端から約２０ｃｍの部分を採取した。採取した６．３ｋｇのヨモギの葉を、すぐさま、中にビニールの袋を敷いた第１の漬物樽に入れ、ヨモギの葉に、３．２ｋｇの糖蜜と０．６ｋｇの粗塩を振りかけた後、ビニール袋の口を閉じて密封した。ビニール袋の上から、重石を載せ、ヨモギの葉を漬け込んだ。【００９２】
漬け汁がヨモギの葉の上まで上がった数日後、重石を外した。次に、第２の漬物樽に、すすぎ洗い出し用の塩素を含まない１０Ｌの水を入れ、水の中に、ヨモギの葉の漬物と、１０ｋｇの漬け汁を入れた。さらに、第３の漬物樽を用意し、第３の漬物樽の開口上に金網フィルタを載せた。第２の漬物樽から、手でもみ洗いしながら少しずつヨモギの葉を取り出し、第３の漬物樽の開口上の金網フィルタにヨモギの葉を軽く掌で押さえて、漬け汁を絞った。【００９３】
ヨモギの葉を全て絞った後、第２の漬物汁に残っていた漬け汁を金網フィルタに通してろ過した。次に、第３の漬物樽の中の漬け汁に、糖蜜（波照間黒糖）を終濃度が１０重量％となるよう、また粗塩を終濃度が３重量％となるよう溶かし入れた。その後、第３の漬物樽の周囲温度を約３０℃にすることにより、発酵を開始させた。最初に大きな泡の発泡が確認され、徐々に細かい泡の発泡に変わっていき、最後に発泡が収まった。約１週間後、発泡が収まった時のｐＨは、３．８付近であった。このときの漬け汁を、ヨモギ発酵液とした。得られたヨモギ発酵液の一部を７０℃で３０分間加熱し、菌を死滅させた熱処理ヨモギ発酵液を得た。【００９４】
熱処理をしていないヨモギ発酵液を次世代シーケンサ（ＭｉＳｅｑ、Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）で解析したところ、図１に示すように、ヨモギ発酵液は、ラクトバシラス属のｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、及びｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種等を含んでいた。なお、次世代シーケンサは、ハイスループットシーケンサとも呼ばれる。また、図１の表中の数値は、ヨモギ発酵液に含まれていた菌種の菌数を反映している。【００９５】
（実施例２：明日葉由来のラクトバシラス属）
明日葉においては、一日のうち、日の出時間を挟む前後１時間、合計２時間の間に、乳酸菌の数が最大化するとされている。また、この時間帯以外においては、乳酸菌が減少し、光合成菌が増加するとされている。したがって、この２時間の間に、明日葉の新芽の葉茎を採取した。採取した６．３ｋｇの明日葉を、すぐさま、中にビニールの袋を敷いた第１の漬物樽に入れ、明日葉に、３．２ｋｇの糖蜜と０．６ｋｇの粗塩を振りかけた後、ビニール袋の口を閉じて密封した。ビニール袋の上から、重石を載せ、明日葉を漬け込んだ。【００９６】
漬け汁が明日葉の上まで上がった数日後、重石を外した。次に、第２の漬物樽に、すすぎ洗い出し用の塩素を含まない１０Ｌの水を入れ、水の中に、明日葉の漬物と、１０ｋｇの漬け汁を入れた。さらに、第３の漬物樽を用意し、第３の漬物樽の開口上に金網フィルタを載せた。第２の漬物樽から、手でもみ洗いしながら少しずつ明日葉を取り出し、第３の漬物樽の開口上の金網フィルタに明日葉を軽く掌で押さえて、漬け汁を絞った。【００９７】
明日葉を全て絞った後、第２の漬物汁に残っていた漬け汁を金網フィルタに通してろ過した。次に、第３の漬物樽の中の漬け汁に、糖蜜を終濃度が１０重量％となるよう、また粗塩を終濃度が３重量％となるよう溶かし入れた。その後、第３の漬物樽の周囲温度を約３０℃にすることにより、発酵を開始させた。最初に大きな泡の発泡が確認され、徐々に細かい泡の発泡に変わっていき、最後に発泡が収まった。約１週間後、発泡が収まった時のｐＨは、４．０付近であった。このときの漬け汁を、明日葉発酵液とした。得られた明日葉発酵液の一部を７０℃で３０分間加熱し、菌を死滅させた熱処理明日葉発酵液を得た。【００９８】
熱処理していない明日葉発酵液を次世代シーケンサ（ＭｉＳｅｑ、Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）で解析したところ、図２に示すように、明日葉発酵液は、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種等を含んでいた。なお、図２の表中の数値は、明日葉発酵液に含まれていた菌種の菌数を反映している。【００９９】
（実施例３：ラクトバシラス属を用いた豆乳発酵液）
豆乳を７０℃に加熱し、約３０分間過熱滅菌処理を行った。加熱滅菌処理した豆乳に、実施例１で用意した熱処理していないヨモギ発酵液を、終濃度が約１０ｗｔ％となるよう加え、十分攪拌した。その後、熱処理していないヨモギ発酵液を添加した豆乳を、３７℃で２４時間発酵させた。発酵させた後、濾過によって固形分を除去し、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液を得た。【０１００】
（実施例４：遺伝子発現検査）
実施例１で得られたヨモギ発酵液から生きているラクトバシラス属を単離し、０．０５ｇ／Ｌの濃度で純水に分散させ、サンプル１とした。また、単離した生きているラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で純水に分散させ、サンプル２とした。生きているラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液をサンプル３とした。【０１０１】
増殖培地（Ｇｒｏｗｔｈ  Ｍｅｄｉｕｍ：１８  ＳＧＭ  ０８２、ＥＰＩＳＫＩＮ社）を用いて、三次元培養表皮モデル（ＳｋｉｎＥｔｃｈｉｃ  ＲＨＥ：１８  ＲＨＥ  ０９８、ＥＰＩＳＫＩＮ社）を一晩馴化した。次いで、増殖培地を分注した６ウェルプレートのトランズウェルインサート（コーニング）に三次元培養表皮モデルを移し、ウェル内の三次元培養表皮モデルの角層側に、サンプル１から３のいずれかを５０μＬ適用した。２４時間後、ウェルからサンプルを添加された培地を除去し、カルシウム及びマグネシウムを含まないリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ（−））で三次元培養表皮モデルを洗浄した。【０１０２】
トランズウェルインサートより三次元培養表皮モデルをメンブレンごとメスにて切り取り、三次元培養表皮モデルを溶解液（ＱＩＡｚｏｌ、登録商標、ＱＩＡＧＥＮ）に浸漬させた後、破砕装置（Ｔｉｓｓｕｅ  Ｌｙｓｅｒ、ＱＩＡＧＥＮ）を用いて細胞を破砕して破砕液を得た。破砕液からＲＮＡ精製キット（ｍｉＲＮｅａｓｙ    Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ、登録商標、ＱＩＡＧＥＮ）を用いてＲＮＡを精製し、精製したＲＮＡを回収した。回収したＲＮＡを受託解析サービスを提供している三菱ケミカル株式会社に送付し、ｍＲＮＡ発現解析チップを用いて、サンプルで処理された細胞における遺伝子発現を解析した。サンプルで処理されなかった細胞（コントロール）における遺伝子発現が１．００になるよう規格化し、コントロールにおける遺伝子発現に対するサンプルで処理された細胞における遺伝子発現の比を算出した。また、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ検定を用いて、有意差検定を行った。【０１０３】
結果を図３から図８に示す。１．００より大きい値は、コントロールより遺伝子発現が促進されたことを示す。１．００より小さい値は、コントロールより遺伝子発現が抑制されたことを示す。【０１０４】
（実施例５：抗しわ効果）
４６才の女性の顔のほほに５か月間、毎日２回、実施例１で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液を塗布した。その結果、図９に示すように、老化に伴うしわの減少が確認された。なお、炎症反応及びタンニング等は確認されなかった。実施例１で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液は、実施例４で示したように、ＨＳＰ７０遺伝子の発現促進効果が極めて高いため、ＨＳＰ７０の抗炎症効果及び美白効果が、炎症関連遺伝子及びタンニング関連遺伝子の発現促進効果を上回っていたものと考えられる。【０１０５】
（実施例６：ラクトバシラス属の抗菌効果）
グラム陽性球菌として黄色ブドウ球菌及びＭＲＳＡを用意し、グラム陽性桿菌として枯草菌及びセレウス菌を用意し、グラム陰性球菌として大腸菌、サルモネラ菌、腸炎ビブリオ菌、及び肺炎桿菌を用意し、グラム陰性桿菌として緑膿菌を用意した。【０１０６】
実施例３で用意した１０ｍＬのラクトバシラス属を含む豆乳発酵液に、上記の菌のいずれかを１０7個／ｍＬの濃度で含む０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。また、コントロールとして、濃度が１／１５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．２の１０ｍＬのリン酸緩衝液に０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。その結果、図１０に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、用意した全ての種類の細菌を２４時間以内に減少させた。【０１０７】
（実施例７：ラクトバシラス属の抗真菌効果）
真菌として、白癬菌及びカンジダを用意した。実施例３で用意した１０ｍＬのラクトバシラス属を含む豆乳発酵液に、白癬菌又はカンジダを１０7個／ｍＬの濃度で含む０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。また、コントロールとして、濃度が１／１５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．２の１０ｍＬのリン酸緩衝液に０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。その結果、図１１に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、用意した白癬菌及びカンジダを２４時間以内に減少させた。【０１０８】
（実施例８：ラクトバシラス属の抗ウイルス効果）
エンベロープウイルスとして、インフルエンザウイルスＡ型（Ｈ１Ｎ１）の培養液を用意した。また、ノンエンベロープウイルスとして、ノロウイルス（ネコカリシウイルス）の培養液を用意した。ウイルスの培養液は、精製水で、１０倍ずつ段階希釈した。その後、５０％組織培養感染量（ＴＣＩＤ５０：５０％  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｏｓｅ）に従い、実施例３で用意したラクトバシラス属を含む豆乳発酵液による抗ウイルス試験を室温で実施した。抗ウイルス試験は、日本食品分析センターで実施された。【０１０９】
その結果、図１２に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、１時間以内でインフルエンザウイルスの感染価を減少させた。また、図１３に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、２４時間以内でノロウイルスの感染価を減少させた。【０１１０】
（実施例９：ラクトバシラス属の抗白癬菌効果）
実施例１で得られた熱処理していないヨモギ発酵液を噴霧乾燥して、ラクトバシラス属の乾燥菌体を得た。菌体乾燥物が１０重量部になるように、得られた菌体乾燥物を水とグリセリンに懸濁し、実施例９に係るラクトバシラス属の懸濁液を得た。ラクトバシラス属の懸濁液を白癬菌に添加し、白癬菌のコロニー形成単位（ＣＦＵ）を計測したところ、図１４に示すように、ラクトバシラス属の懸濁液は、２４時間以内に白癬菌を死滅させた。【０１１１】
（実施例１０：ラクトバシラス属のＩ型コラーゲン及びＨＳＰ４７産生促進効果）
正常ヒト真皮線維芽細胞をＤＭＥＭ培地（＋５％ＦＢＳ）を用いて培養器中でコンフルエントな状態になるまで維持した。コンフルエントに達した後、培養器から培地を除去し、６００μｍｏｌ／Ｌの過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）を含有するＤＭＥＭ（０％ＦＢＳ）を培養器に添加し、３７℃にて細胞を１時間培養した。１時間培養後、Ｈ２Ｏ２含有ＤＭＥＭ（０％ＦＢＳ）を培養器から除去し、ＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）を培養器に添加した。この操作を、４日間繰返した後、ＤＭＥＭ（１０％ＦＢＳ）でさらに３日間細胞を培養し、得られた細胞を老化誘導処理細胞とした。【０１１２】
細胞が老化誘導されたことは、老化マーカーである、ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｂｅｔａ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ（ＳＡ−β−Ｇａｌ）染色にて確認した。【０１１３】
老化誘導処理細胞を、ＤＭＥＭ培地（＋５％ＦＢＳ）を用いて、５．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度にて４８穴プレートに播種した。播種２４時間後、培地を、１．０％及び１０．０％の濃度で実施例１で用意した熱処理をしていないヨモギ発酵液を含むＤＭＥＭ培地（＋０．５％ＦＢＳ）、１．０％及び１０．０％の濃度で実施例２で用意した熱処理をしていない明日葉発酵液を含むＤＭＥＭ培地（＋０．５％ＦＢＳ）、２５μｍｏｌ／ＬでビタミンＣリン酸マグネシウムを含むＤＭＥＭ培地（＋０．５％ＦＢＳ）、２５μｍｏｌ／ＬでビタミンＣを含むＤＭＥＭ培地（＋０．５％ＦＢＳ）、並びにＤＭＥＭ培地（＋０．５％ＦＢＳ）のそれぞれと交換した。その後、４８時間細胞を培養した後、培地を回収した。また、細胞をＰＢＳ（−）で洗浄した後、細胞をトリプシン処理して、細胞をプレートから回収した。回収した細胞を超音波で破砕して得られた細胞溶解液を１５０００ｒｐｍで遠心分離し、上清を回収した。【０１１４】
回収した培地中のＩ型コラーゲン量をＥＬＩＳＡ法（Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｔｙｐｅ  Ｉ抗体（Ｒａｂｂｉｔ）を用いた直接法）で定量した。その結果、図１５に示すように、ビタミンＣリン酸マグネシウム又はビタミンＣを含む培地（陽性コントロール）で細胞を培養すると、Ｉ型コラーゲンの産生が促進されたことが示された。また、ヨモギ発酵液及び明日葉発酵液のそれぞれを添加された培地で細胞を培養した場合も、Ｉ型コラーゲンの産生が促進されたことが示された。【０１１５】
また、細胞溶解液の上清中のＨＳＰ４７を、市販のＥＬＩＳＡキット（ａｂｃａｍ）を使用して定量した。その結果、図１６に示すように、明日葉発酵液を添加された培地で細胞を培養した場合、ＨＳＰ４７の産生が促進されたことが示された。【０１１６】
（実施例１１：ラクトバシラス属の抗老化効果）
正常ヒト真皮線維芽細胞をＤＭＥＭ培地（＋５％ＦＢＳ）を用いて、５．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度にて６穴プレートに播種し、２４時間細胞を培養した。【０１１７】
各ウェルの培地を除去し、６００μｍｏｌ／Ｌの過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）を含有するＤＭＥＭ（０％ＦＢＳ）をウェルに添加し、３７℃にて細胞を１時間培養して、細胞を老化誘導した。１時間培養後、Ｈ２Ｏ２含有ＤＭＥＭ（０％ＦＢＳ）をウェルから除去し、実施例１で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液を１．０％含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、実施例２で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含む明日葉発酵液を１．０％含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、陽性コントロールとして抗酸化作用を有するレスベラトールを１０μｍｏｌ／Ｌ含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、及び陰性コントロールとしてＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）のそれぞれをウェルに添加した。これらの操作を、４日間繰り返した。【０１１８】
その後、実施例１で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液を１．０％含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、実施例２で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含む明日葉発酵液を１．０％含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、陽性コントロールとして抗酸化作用を有するレスベラトールを１０μｍｏｌ／Ｌ含有するＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）、及び陰性コントロールとしてＤＭＥＭ培地（＋１０％ＦＢＳ）のそれぞれをウェルに添加し、３日間、細胞を培養した。【０１１９】
その後、それぞれの条件で培養された細胞を、５．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で４８穴プレートに播種し、細胞を２４時間培養した。その後、細胞を３％ホルムアルデヒドを含有するＰＢＳで固定した。次に、ウェル内の溶液を１ｍｇ／ｍＬの５−ｂｒｏｍｏ−４−ｃｈｌｏｒｏ−３−ｉｎｄｏｌｙｌ−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ（Ｘ−Ｇａｌ）を含有するｐＨ６の反応液に交換し、１２時間から１６時間静置した。その後、顕微鏡観察を行い、老化マーカーであるｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｂｅｔａ−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ（ＳＡ−β−Ｇａｌ）染色を観察した。【０１２０】
その結果、図１７、図１８及び図１９に示すように、老化誘導されたのみの細胞は、ＳＡ−β−Ｇａｌ染色の度合いが強かった。これに対し、老化誘導され、ヨモギ発酵液又は明日葉発酵液で処理された細胞は、老化誘導され、レスベラトロールで処理された細胞と同様に、ＳＡ−β−Ｇａｌ染色の度合いを低減させた。よって、ヨモギ発酵液及び明日葉発酵液は、抗老化作用を有することが示された。【０１２１】
（実施例１２：ラクトバシラス属のＨＳＰ７０産生促進効果）
三次元培養表皮モデル（ＳｋｉｎＥｔｈｉｃ  ＲＨＥ：１９ＲＨＥ  ００８、ＥＰＩＳＫＩＮ社）を、増殖培地（Ｇｒｏｗｔｈ  Ｍｅｄｉｕｍ：１９ＳＧＭ  ００５、ＥＰＩＳＫＩＮ社）にて一晩馴化した。馴化後、増殖培地を１ｍＬ分注した６穴プレートに表皮モデルを移し、表皮モデルの角層側に、実施例１で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含むヨモギ発酵液５０μＬ、及び実施例２で用意したラクトバシラス属を５．０ｇ／Ｌの濃度で含む明日葉発酵液５０μＬのそれぞれを適用した。【０１２２】
表皮モデルを２４時間培養した後、発酵液を除去して、表皮モデルをＰＢＳ（−）で洗浄した。表皮モデルの生存率を、アラマーブルー法を用いて評価した。１０％アラマーブルー試薬（ａｌａｍａｒＢｌｕｅ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ、登録商標、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を含有した維持培地を、２４穴プレートに分注した。表皮モデルをプレートに移し、２時間培養した後に、培養上清の蛍光強度を測定した。細胞生存率は、発酵液の代わりにＰＢＳ（−）を適用したコントロール群の蛍光強度に対するインデックス（％）として算出した。得られた結果は、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ検定を用いて有意差検定を行った。その結果、図２０に示すように、ヨモギ発酵液又は明日葉発酵液を適用したことによる細胞生存率の有意な低下は認められれなかった。【０１２３】
蛍光強度を測定後、表皮モデルをＰＢＳに浸漬し、サンプル破砕装置（Ｔｉｓｓｕｅ  Ｌｙｓｅｒ）を用いて、表皮モデルを破砕した。細胞溶解液を１５０００ｒｐｍにて遠心分離し、上清を回収した。回収溶液中のＨＳＰ７０を市販のＥＬＩＳＡキット（Ｅｎｚｏｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して定量した。得られた結果は、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ検定を用いて有意差検定を行った。その結果、図２１に示すように、ヨモギ発酵液又は明日葉発酵液を適用したことにより、ＨＳＰ７０の産生量が有意に増加した。【０１２４】
以上説明した各実施形態及び実施例は、本発明の理解を容易にするためのものであり、本発明を限定して解釈するためのものではない。本発明は、その趣旨を逸脱することなく、変更／改良され得るとともに、本発明にはその等価物も含まれる。すなわち、各実施形態及び実施例に当業者が適宜設計変更を加えたものも、本発明の特徴を備えている限り、本発明の範囲に包含される。例えば、各実施形態及び実施例が備える各要素などは、例示したものに限定されるわけではなく適宜変更することができる。また、各実施形態及び実施例は例示であり、異なる実施形態で示した構成の部分的な置換又は組み合わせが可能であることはいうまでもなく、これらも本発明の特徴を含む限り本発明の範囲に包含される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【国際調査報告】
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