(57)【要約】  本発明は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む慢性腎臓病における腎保護用医薬組成物であって、錠剤である、医薬組成物に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む慢性腎臓病における腎保護用医薬組成物であって、錠剤である、医薬組成物。
【請求項２】
腎組織を保護する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
腎機能を維持又は改善する、請求項１又は請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
尿細管組織を保護する、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
尿細管機能を維持又は改善する、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
尿濃縮能を維持又は改善する、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
腎臓における酸化ストレスを抑制する、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物を含む、高血圧を伴う慢性腎臓病におけるアシドーシスの治療又は予防用、又は酸性尿の改善用医薬組成物。
【請求項９】
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物が、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物である、請求項１〜８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
さらに、無水クエン酸を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜3g／日で投与される、請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜1.5g／日で投与される、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ステージＧ２以上Ｇ３ｂ以下の慢性腎臓病患者に投与される、請求項１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が６週間以上投与される、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎保護用医薬組成物及び腎機能診断用医薬組成物に関する。
また、本発明は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎内レニン・アンジオテンシン系活性化を抑制すると共に、慢性腎臓病患者のアシドーシスを抑制する、又は酸性尿を改善するための医薬組成物に関する。
本願は、２０１８年１０月１７日に、日本に出願された特願２０１８−１９５５６８号、２０１８年１０月１７日に、日本に出願された特願２０１８−１９５８１０号、２０１９年２月２５日に、日本に出願された特願２０１９−３２１２６号、２０１９年４月２８日に、日本に出願された特願２０１９−８６９４５号、及び２０１９年６月２７日に、日本に出願された特願２０１９−１１９２９７号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【背景技術】
【０００２】
透析や移植を必要とする末期腎不全（end-stage Kidney disease：ESKD）患者は世界的に増加している。日本においても増加傾向にあり、2014年末の透析患者数は32万人となっている。
このESKDの予備軍として認識されているのが慢性腎臓病（CKD）である。CKDは、原疾患を問わず、慢性に経過する腎臓病を包括する概念であり、糸球体濾過量（GFR）で表される腎機能の低下があるか、又は腎臓の障害を示唆する所見が慢性的（３ヶ月以上）に持続する病態全てを包含する概念である。CKDはESKDへの進行リスクであるばかりではなく、心血管疾患（CVD）等の強力な発症リスクであることから、CKDを早期に発見し適切な治療を行うことは非常に重要である。これまでに多くのCKD治療法が確立されているが、まだ不十分で、さらに腎保護剤の開発が求められている。【０００３】
進行したCKD患者では血中の重炭酸イオン（HCO3-）濃度が低くなり、代謝性アシドーシスを発症することから、炭酸水素ナトリウムやクエン酸製剤等のアルカリ性化剤が投与される。そして、アルカリ性化剤である炭酸水素ナトリウムの投与によりCKDの進行が抑制されることが報告されている（非特許文献１）。また、蛋白質過負荷により惹起されるネフローゼ動物モデルにおいて、炭酸水素ナトリウムの経口投与が、酸性尿による尿細管細胞障害を抑制することが報告されている（非特許文献２）。また、早期のCKD患者にアルカリ性化剤を投与することによって、腎障害の進行を抑制すること、及び尿毒症物質の血中濃度を低下させることが知られている（特許文献１及び２）。
しかしながら、クエン酸製剤等のアルカリ化剤を用いて腎機能が評価可能であることは知られていない。【０００４】
一方、近年、CKD及び急性腎障害（AKI）における腎障害マーカーが数多く報告されている。【０００５】
腎臓内におけるレニン・アンジオテンシン系（reninangiotensin system;RASと略す場合がある）の活性化は高血圧だけでなく腎障害の進展にも深く関与していることが知られている。腎臓内におけるアンジオテンシノーゲンが高血圧や腎障害の発症進展機序に関与している。また、尿中に排泄されたアンジオテンシノーゲンが腎臓で発現しているアンジオテンシノーゲンと正の相関を示すことが報告されている（非特許文献３）。【０００６】
8-hydroxy-2’-deoxyguanosine（8-OHdG）は、現在最も広く用いられている酸化ストレスマーカーの１つであり、腎障害によって8-OHdG産生が増加することが知られている。【０００７】
しかしながら、CKD又はAKIの患者にアルカリ性化剤を投与することによって、尿中アンジオテンシノーゲン濃度の抑制又は酸化ストレス抑制が可能であることは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２０１８／１９３６４８号
【特許文献２】国際公開第２０１８／１９３７５２号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Brito-Ashurst, I.D., et al.: Bicarbonate supplementation slows progression of CKD and improves nutritional status. J. Am. Soc. Nephrol., 20: 2075-2084, 2009.
【非特許文献２】Souma T., et al.: Luminal alkalinization attenuates proteinuria-induced oxidative damage in proximal tubular cells. J. Am. Soc. Nephrol., 22: 635-648, 2011.
【非特許文献３】J. Am. Soc. Nephrol, 18: pp.1558-1565, 2007
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の課題の一つは、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎保護用医薬組成物を提供することである。本発明の他の一つの課題は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む腎機能診断用医薬組成物を提供することである。本発明の他の１つの課題は、腎内RAS活性化を抑制し、慢性腎臓病患者のアシドーシスの治療若しくは予防、又は腎内RAS活性化を抑制し、慢性腎臓病患者の賛成尿の改善に有用な医薬を提供することである。本発明の他の１つの課題は、腎における酸化ストレス抑制に有用な医薬を提供することである。本発明の他の１つの課題は、腎保護用又は酸化ストレス抑制用の食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を達成するために鋭意検討を行ったところ、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む組成物が腎保護及び腎機能の評価に有用であることを見出し、本発明を完成させた。
また、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む組成物が、炭酸水素ナトリウムに比較した尿中アンジオテンシノーゲン濃度の増加抑制又は尿中8-OHdG濃度の抑制に有用であることを見出し、当該薬剤が、腎内RAS活性化を抑制すると同時に慢性腎臓病患者のアシドーシスを抑制するため、腎内RAS活性化を抑制すると同時に慢性腎臓病患者の酸性尿を改善するため、又は腎臓における酸化ストレスを抑制するために有用であることを見出し、本発明を完成させた。【００１２】
本発明は１つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、慢性腎臓病における腎保護用医薬組成物を提供する。
本発明は１つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む腎機能診断用医薬組成物を提供する。
本発明は１つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物を被検者に投与すること、投与後の被検者の随時尿のｐＨを測定することを含む、腎機能の判定方法を提供する。
本発明は１つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物を被検者に投与すること、投与前の被検者の早朝尿のｐＨ及び投与後の被検者の随時尿のｐＨを測定することを含む、腎機能の判定方法を提供する。
本発明は一つの実施態様において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、高血圧を伴う慢性腎臓病患者のアシドーシス抑制用又は酸性尿の改善用医薬組成物を提供する。
本発明は一つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎臓における酸化ストレス抑制用医薬組成物を提供する。
本発明は一つの側面において、慢性腎臓病の進展に伴う、尿中8-OHdG濃度の増加抑制用、尿中β２−マイクログロブリン濃度の増加抑制用、尿中アルブミン濃度増加抑制用又は随時尿中の蛋白濃度増加抑制用医薬組成物であって、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物含む医薬組成物を提供する。
本発明は一つの側面において、慢性腎臓病における尿細管機能の維持又は改善、又は慢性腎臓病における尿細管機能の低下抑制に有用な医薬組成物であって、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物を提供する。
本発明は１つの側面において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎保護用又は腎における酸化ストレス抑制に有用な食品を提供する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明が提供する医薬組成物又は食品組成物により、慢性腎臓病における腎臓が保護される。本発明が提供する医薬組成物により、腎機能の評価が可能である。
本発明が提供する医薬組成物又は食品組成物等により、慢性腎臓病患者において、腎内レニン・アンジオテンシン系活性化を抑制すると同時にアシドーシスを抑制すること、慢性腎臓病患者において、腎内レニン・アンジオテンシン系活性化を抑制すると同時に酸性尿を改善することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】コントロール群における随時尿のｐＨと、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【図２】クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群における随時尿のｐＨと、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【図３】炭酸水素ナトリウム製剤投与群における随時尿のｐＨと、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【図４】コントロール群における随時尿と早朝尿とのｐＨの差と、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【図５】クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群における随時尿と早朝尿とのｐＨの差と、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【図６】炭酸水素ナトリウム製剤投与群における随時尿と早朝尿とのｐＨの差と、ｅＧＦＲとの相関を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
１．医薬組成物
本発明が提供する医薬組成物は、有効成分として、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含むことができる。
クエン酸の薬学的に許容可能な塩の例としては、クエン酸アルカリ金属塩が挙げられる。クエン酸アルカリ金属塩の例としては、クエン酸カリウム及びクエン酸ナトリウムが挙げられ、それぞれ安定なクエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）等の水和物であってもよい。
【００１６】
本発明が提供する医薬組成物に含まれる、好ましい有効成分の例としては、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム若しくはその水和物又はそれらの混合物が挙げられ、例えば、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）の混合物であってもよい。クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）の混合比は、当業者が適宜設定でき、例えば、クエン酸カリウムの一水和物とクエン酸ナトリウムの二水和物のモル比を、クエン酸カリウムの一水和物1に対してクエン酸ナトリウムの二水和物を0.01〜100とすることができる。クエン酸カリウム（例えば、クエン酸カリウムの一水和物）とクエン酸ナトリウム（例えば、クエン酸ナトリウムの二水和物）のモル比は当業者が適宜設定でき、例えば、０．８５：１．１５〜１．１５：０．８５、０．９０：１．１０〜１．１０：０．９０、０．９５：１．０５〜１．０５：０．９５、又は０．９９：１．０１〜１．０１：０．９９としてもよく、１：１が好ましい。
。
また、本発明が提供する医薬組成物に含まれる有効成分の他の例には、クエン酸ナトリウム又はその水和物が挙げられ、例えば、クエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）であってもよい。
【００１７】
また、本発明が提供する医薬組成物に含まれる有効成分の他の例には、クエン酸カリウム又はその水和物が挙げられ、例えば、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）であってもよい。
一つの実施態様において、本発明の医薬組成物に含まれる有効成分は、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物を含んでいてもよい。
一つの実施態様において、本発明の医薬組成物に含まれる有効成分は、クエン酸カリウム、クエン酸ナトリウム及びクエン酸（例えば、無水クエン酸）の混合物であってもよい。その場合、クエン酸（例えば、無水クエン酸）、クエン酸カリウム及びクエン酸ナトリウムの混合比は、当業者が適宜設定でき、例えば、１：１．７〜２．３：１．７〜２．３、１：１．９〜２．１：１．９〜２．１又は１：１．９５〜２．０５：１．９５〜２．０５としてもよく、１：２：２が好ましい。
一つの実施態様において、本発明の医薬組成物に含まれる有効成分は、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）、クエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）及び無水クエン酸の混合物であってもよい。その場合、無水クエン酸、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）の混合比は、当業者が適宜設定でき、例えば、１：１．７〜２．３：１．７〜２．３、１：１．９〜２．１：１．９〜２．１又は１：１．９５〜２．０５：１．９５〜２．０５としてもよく、１：２：２が好ましい。
一つの実施態様において、本発明の医薬組成物に含まれる有効成分は、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物のみから構成されていてもよい。
本明細書において、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物（例えば、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及び、クエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O））の重量について言及する時は、その重量は乾燥重量であり得る。
【００１８】
本発明が提供する医薬組成物は、腎機能の診断に用いることができる。本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、有効成分として、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物（例えば、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物（例えば、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）の混合物））を含むことができる。
よって、一つの実施態様において、本発明は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む腎機能診断用医薬組成物を提供する。
また、一つの実施態様において、本発明は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む腎機能診断用医薬組成物を被検者に投与すること、投与後の被検者の尿のｐＨを測定することを含む、被検者の腎機能の判定方法を提供する。
本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物における有効成分の配合量は、特に限定されないが、例えば腎機能診断用医薬組成物が錠剤の場合、１錠中にクエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0mgを含んでもよい。
本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、糸球体ろ過機能診断用であり得、eGFRの改善又は悪化や、eGFRの指標となり得る。
本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、腎機能の評価が必要な対象に投与されることができ、例えば、慢性腎臓病患者、急性腎臓病患者に投与することができる。
一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を、尿のｐＨを測定する為の機器、試薬（例えば、ｐＨ試験紙）等と一緒に含むキットが提供される。
本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、腎機能の評価が必要な対象（例えば、ヒト）に投与され、投与後該対象の尿のｐＨを測定することにより、腎機能が評価され得る。投与は、朝、昼、夜のいつでもよく、投与回数にも特に制限はないが、好ましくは単回投与である。投与後、尿のｐＨを測定するタイミングも適宜設定され得、例えば、投与１時間後、投与２時間後、投与３時間後、投与４時間後、投与５時間後、投与６時間後であってもよい。尿のｐＨの測定は、当技術分野で公知の測定法で測定でき、例えば、ｐＨ試験紙で測定してもよい。好ましくは、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与後、最初の尿のｐＨを測定することで、投与対象の腎機能が判定され得る。
一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防を施された患者（例えば、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）を投与された患者）の腎機能の判定又は上記治療又は予防の効果の判定に用いることもできる。例えば、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬の投与する）前において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＡ値とする）、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＢ値とする）、Ｂ値がＡ値より高値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が改善されたと判定できる。逆に、例えば、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬を投与する）前において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＡ値とする）、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＢ値とする）、Ｂ値がＡ値より低値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が悪化したと判定できる。この実施態様において、上記治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）は、連続投与されていてもよく（例えば、６週間、１２週間、２４週間、４８週間、７２週間連続投与されていてもよく）、連続投与の前後に、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し、腎機能の改善、悪化を判定してもよい。また、この実施態様において、投与された慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬と本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物が同じ薬剤である場合、尿のｐＨ測定の直前に投与された薬剤が、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物であり得る。
【００１９】
一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物の投与に関係なく、腎機能の評価が必要な対象（例えば、ヒト）の早朝尿のｐＨを測定することにより、腎機能が評価され得る。この実施態様において、腎機能が評価される被験者は、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防を施された患者（例えば、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）を投与された患者）であってもよい。慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）は、単回投与でも連続投与でも良いが、ｐＨを測定する早朝尿は、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）の投与前日及び／又は投与翌日の早朝尿であり得る。
一つの実施態様において、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防を施された患者（例えば、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）を投与された患者）の腎機能の判定又は上記治療又は予防の効果の判定の為に、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬の投与する）前の早朝尿（例えば、上記治療又は予防を施す前最後の早朝尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＡ値とする）、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後の早朝尿（例えば、上記治療又は予防を施した後最初の早朝尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＢ値とする）、Ｂ値がＡ値より高値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が改善されたと判定できる。逆に、例えば、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬を投与する）前において、早朝尿（例えば、上記治療又は予防を施す前最後の早朝尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＡ値とする）、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後において、早朝尿（例えば、上記治療又は予防を施した後最初の早朝尿）のｐＨを測定し（このｐＨ値をＢ値とする）、Ｂ値がＡ値より低値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が悪化したと判定できる。この実施態様において、上記治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）は、連続投与されていてもよく（例えば、６週間、１２週間、２４週間、４８週間、７２週間連続投与されていてもよく）、連続投与の前後に、早朝尿のｐＨを測定し、腎機能の改善、悪化を判定してもよい。
【００２０】
また、一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、腎機能の評価が必要な対象（例えば、ヒト）に投与され、投与前の該対象の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ及び投与後該対象の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定することにより、腎機能が評価され得る。投与は、朝、昼、夜のいつでもよいが好ましくは朝であり、投与回数にも特に制限はないが、好ましくは単回投与である。本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物の投与後、尿のｐＨを測定するタイミングも適宜設定され得、例えば、投与１時間後、投与２時間後、投与３時間後、投与４時間後、投与５時間後、投与６時間後であってもよく、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与後最初の尿（随時尿）のｐＨを測定してもよい。早朝尿は、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物の投与前の最後の早朝尿であり得る。例えば、早朝尿は、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物の投与の１時間前までに、２時間前までに、３時間前までに、４時間前までに、５時間前までに、又は６時間前までに採取した早朝尿であってもよい。また、例えば、ｐＨを測定する本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与後最初の尿（随時尿）と本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物の投与前の最後の早朝尿は、同日の尿であり得る。
一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＡ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＢ値とする）の差（Ａ値−Ｂ値）が−１以下であるとき、被検者のｅＧＦＲ値は５０未満と判定できる。
また、一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＡ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＢ値とする）の差（Ａ値−Ｂ値）が１以上であるとき、被検者のｅＧＦＲ値は５０以上と判定できる。
また、一つの実施態様において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物は、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防を施された患者（例えば、慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）を投与された患者）の腎機能の判定又は上記治療又は予防の効果の判定に用いることもできる。例えば、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬の投与する）前において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＡ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＢ値とする）の差（Ａ値−Ｂ値）を求め、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＣ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＤ値とする）の差（Ｃ値−Ｄ値）を求め、（Ｃ値−Ｄ値）が（Ａ値−Ｂ値）より高値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が改善されたと判定できる。逆に、例えば、上記治療又は予防を施す（例えば、治療又は予防用医薬を投与する）前において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＡ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＢ値とする）の差（Ａ値−Ｂ値）を求め、上記治療又は予防を施した（例えば、治療又は予防用医薬を投与した）後において、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、投与後の被検者の尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＣ値とする）と投与前の被検者の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨ値（このｐＨ値をＤ値とする）の差（Ｃ値−Ｄ値）を求め、（Ｃ値−Ｄ値）が（Ａ値−Ｂ値）より低値であれば、上記治療又は予防（例えば、治療又は予防用医薬の投与）により、腎機能が悪化したと判定できる。この実施態様において、上記治療又は予防用医薬（例えば、尿アルカリ化剤）は、連続投与されていてもよく（例えば、６週間、１２週間、２４週間、４８週間、７２週間連続投与されていてもよく）、連続投与の前後に、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物を投与し、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与前の早朝尿（例えば、投与前最後の早朝尿）のｐＨと本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与後に尿（例えば、投与後最初の随時尿）のｐＨを測定し、腎機能の改善、悪化を判定してもよい。この実施態様において、ｐＨを測定する本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与前の早朝尿と本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物投与後の随時尿は、同日の尿であり得る。また、この実施態様において、投与された慢性腎臓病又は急性腎臓病の治療又は予防用医薬と本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物が同じ薬剤である場合、尿のｐＨ測定の直前に投与された薬剤が、本発明が提供する腎機能診断用医薬組成物であり得る。
【００２１】
本発明が提供する医薬組成物は、また、慢性腎臓病における腎保護に用いることができる。腎保護には、腎組織の保護、及び腎機能の保護が含まれる。
例えば、本発明が提供する医薬組成物は、慢性腎臓病における腎組織の保護用医薬組成物、慢性腎臓病の進展に伴う腎組織障害の抑制用医薬組成物、慢性腎臓病における腎機能の維持又は改善用医薬組成物、又は慢性腎臓病の進展に伴う腎機能の低下抑制用医薬組成物であり得る。
本発明が提供する医薬組成物によって保護される腎組織の例には、尿細管（例えば、近位尿細管）が挙げられる。
また、本発明が提供する医薬組成物によって維持又は改善される腎機能の例には、尿細管機能（例えば、近位尿細管機能）が挙げられ、尿細管機能の例としては、尿濃縮能が挙げられる。
よって、本発明が提供する医薬組成物は、慢性腎臓病における尿細管機能の維持又は改善用医薬組成物、慢性腎臓病の進展に伴う尿細管機能の低下抑制用医薬組成物、慢性腎臓病における尿濃縮能の維持又は改善用医薬組成物、又は慢性腎臓病の進展に伴う尿濃縮能の低下抑制用医薬組成物であり得る。
このような本発明が提供する医薬組成物の効果は、本発明が提供する医薬組成物を投与した慢性腎臓病患者における、早朝尿中の8-OHdG濃度、早朝尿中のβ２−マイクログロブリン濃度、早朝尿中アルブミン濃度、随時尿中のアルブミン濃度、随時尿中のタンパク質濃度及び／又は早朝尿浸透圧を、本分野で公知の方法で測定することにより評価することができる。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を慢性腎臓病患者に投与することにより、投与前に比較し、慢性腎臓病患者の早朝尿中の8-OHdG濃度が低下する場合、本発明が提供する医薬組成物により腎組織が保護されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を投与した慢性腎臓病患者が、本発明が提供する医薬組成物を投与しない慢性腎臓病患者に比較し、早朝尿中の8-OHdG濃度が低値である場合、本発明が提供する医薬組成物により慢性腎臓病の進展に伴う腎組織障害が抑制されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を慢性腎臓病患者に投与することにより、投与前に比較し、慢性腎臓病患者の早朝尿中のβ２−マイクログロブリン濃度が低下する場合、本発明が提供する医薬組成物により尿細管組織が保護されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を投与した慢性腎臓病患者が、本発明が提供する医薬組成物を投与しない慢性腎臓病患者に比較し、早朝尿中のβ２−マイクログロブリン濃度が低値である場合、本発明が提供する医薬組成物により慢性腎臓病の進展に伴う尿細管組織障害が抑制されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を慢性腎臓病患者に投与することにより、投与前に比較し、慢性腎臓病患者の早朝尿中アルブミン濃度、随時尿中のアルブミン濃度及び／又は随時尿中のタンパク質濃度が増加しない場合、本発明が提供する医薬組成物により腎機能が維持又は改善されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を投与した慢性腎臓病患者が、本発明が提供する医薬組成物を投与しない慢性腎臓病患者に比較し、早朝尿中アルブミン濃度、随時尿中のアルブミン濃度及び／又は随時尿中のタンパク質濃度が低値である場合、本発明が提供する医薬組成物により慢性腎臓病の進展に伴う腎機能低下が抑制されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を慢性腎臓病患者に投与することにより、投与前に比較し、慢性腎臓病患者の早朝尿の浸透圧が低下しない場合、本発明が提供する医薬組成物により尿細管機能の維持又は改善されたと評価してもよく、本発明が提供する医薬組成物により尿濃縮能の維持又は改善されたと評価してもよい。
例えば、本発明が提供する医薬組成物を投与した慢性腎臓病患者が、本発明が提供する医薬組成物を投与しない慢性腎臓病患者に比較し、早朝尿の浸透圧が高い場合、本発明が提供する医薬組成物により慢性腎臓病の進展に伴う尿細管機能の低下が抑制されたと評価してもよく、本発明が提供する医薬組成物により慢性腎臓病の進展に伴う尿濃縮能の低下が抑制されたと評価してもよい。
【００２２】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、腎臓の酸化ストレスの指標となる8-OHdGの尿中濃度を低下させることから、慢性腎臓病患者の腎臓における酸化ストレス抑制用医薬組成物であり得る。8-OHdGの尿中濃度の低下は、本発明が提供する医薬組成物の投与前と投与後の比較、又は本発明が提供する医薬組成物の投与と非投与の比較において評価され得る。
【００２３】
また、一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物の投与により、腎内レニン・アンジオテンシン系の活性化が抑制されて、慢性腎臓病患者のアシドーシスが治療又は予防され得、酸性尿が改善され得ることから、本発明が提供する医薬組成物は、高血圧を伴う慢性腎臓病患者のアシドーシスの治療又は予防用医薬組成物又は高血圧を伴う慢性腎臓病患者の酸性尿の改善用医薬組成物であり得る。
「腎内レニン・アンジオテンシン系活性化の抑制」とは、本発明が提供する医薬組成物の投与前の尿中アンジオテンシノーゲン濃度に比較して、投与後の尿中アンジオテンシノーゲン濃度の増加が抑制されることで評価され得るか、又は、本発明が提供する医薬組成物の投与により、プラセボ投与若しくはコントロールに比較して、尿中アンジオテンシノーゲン濃度の増加が抑制されることで評価され得る。
また、一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物の投与により、尿中（例えば、早朝尿中）8-OHdG濃度の増加、尿中（例えば、早朝尿中）アンジオテンシノーゲン濃度の増加、尿中（例えば、早朝尿中）β２−マイクログロブリンの増加、尿中（例えば、早朝尿中）アルブミン濃度の増加、尿中（例えば、随時尿中）アルブミン濃度の増加、尿中（例えば、随時尿中）タンパク質濃度の増加又は尿（例えば、早朝尿）浸透圧の低下が抑制されるので、本発明が提供する医薬組成物は、尿中（例えば、早朝尿中）8-OHdG濃度の増加抑制用、尿中（例えば、早朝尿中）アンジオテンシノーゲン濃度の増加抑制用、尿中（例えば、早朝尿中）β２−マイクログロブリンの増加抑制用、尿中（例えば、早朝尿中）アルブミン濃度の増加抑制用、尿中（例えば、随時尿中）アルブミン濃度の増加抑制用、尿中（例えば、随時尿中）タンパク質濃度の増加抑制用又は尿（例えば、早朝尿）浸透圧の低下抑制用医薬組成物であり得る。これらの効果も、本発明が提供する医薬組成物の投与前後の比較、本発明が提供する医薬組成物の投与群とプラセボもしくはコントロール群との比較において評価され得る。
【００２４】
本明細書において、「抑制」とは、症状、状態又は疾患の悪化又は進行を、停止又は減速させること、及びそのためのことを含み、また、前記症状、状態又は疾患を改善すること、又はそのためのことを含む概念である。ここで、「改善」とは、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患を、「健常な」又は「正常な」状態に近づけること又はそのためのこと、及び「健常な」又は「正常な」状態にすること又はそのためのことを含む概念である。したがって、一つの実施態様において、「改善」とは、「病的な」又は「異常な」症状又は状態の指標となる数値が、前記「改善」に従って、小さくなるか、又は大きくなって、正常な値に近づくか、又は正常な値となることを含む。前記「症状、状態又は疾患の悪化又は進行」は、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患の悪化又は進行、及び「健常な」又は「正常な」状態から、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患への悪化又は進行を含む。一つの実施態様において、「抑制」とは、症状、状態又は疾患の悪化又は進行を、停止又は減速させること、又はそのためのことである。別の実施態様において、「抑制」とは、症状、状態又は疾患の悪化又は進行を、停止又は減速させることである。
【００２５】
本明細書において、「健常」とは、急性若しくは慢性の疾患又は障害がない状態を表し、「正常」とは、健常な対象が、通常発現する状態にあることを表す。
ここで、前記症状、状態又は疾患は、本発明が提供する医薬組成物の投与前と投与後で比較されるか、又は本発明が提供する医薬組成物を投与したときと、コントロール若しくはプラセボを投与したときが比較される。
【００２６】
本明細書において、「治療」とは、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患を、消失、完治、治癒又は寛解させること、及びそのためのことを含み、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患の悪化を「抑制」すること、及びそのためのことを含み、また、「改善」を含む概念である。ここで、「抑制」及び「改善」とは前記の意味を有する。一つの実施態様において、「治療」とは、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患を、消失、完治、治癒又は寛解させること、及びそのためのことである。別の実施態様において、「治療」とは、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患を、消失、完治、治癒又は寛解させることである。
【００２７】
本明細書において、「予防」とは、「病的な」又は「異常な」症状、状態又は疾患の発症を未然に防止すること、及びそのためのことを含む概念である。
【００２８】
本明細書において、「早朝尿」とは、起床して最初の尿を表し、「随時尿」とは、前記「早朝尿」以外の尿を表す。
【００２９】
本発明が提供する医薬組成物は、ヒト又はその他の哺乳動物に経口又は非経口で投与され、非経口投与の例には、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、関節内投与、経粘膜投与、経皮投与、経鼻投与、直腸投与、髄腔内投与、腹腔内投与、局所投与が挙げられる。
【００３０】
本発明が提供する医薬組成物は、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を、そのまま、又は薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤（例えば、乳糖、Ｄ−マンニトール、結晶セルロース、ブドウ糖）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク）、崩壊剤（例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム（ＣＭＣ−Ｃａ））、希釈剤（例えば、注射用水、生理食塩水）、及び必要な場合はその他の添加剤（例えば、ｐＨ調整剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤）と混合して調製されてもよく、錠剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、坐薬等の製剤であり得る。例えば、錠剤とするには、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を、賦形剤（例えば、乳糖、Ｄ−マンニトール、結晶セルロース、ブドウ糖）、崩壊剤（例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム（ＣＭＣ−Ｃａ））、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク）等と混合して製剤化してもよい。
【００３１】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は錠剤である。本発明が提供する錠剤は、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物（例えば、クエン酸カリウム又はその水和物；クエン酸ナトリウム又はその水和物；クエン酸カリウムの一水和物及びクエン酸ナトリウムの二水和物の混合物；又は炭酸水素ナトリウム）の他、製薬分野において慣用の、薬学的に許容される添加剤を含んでもよい。このような添加剤の例としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、矯味剤、滑沢剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、安定化剤及び香料が挙げられる。
本発明が提供する錠剤における有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の含量は、錠剤に対し１０〜９５重量％、好ましくは３０〜９０重量％であってもよく、より好ましくは６０〜８５重量％であってもよい。
【００３２】
本発明が提供する医薬組成物は、製薬分野において公知の方法により製造することができる。
一つの実施態様において、得られる錠剤の硬度は、１０〜２００Ｎ、好ましくは３０〜１５０Ｎであり得る。
【００３３】
本発明が提供する医薬組成物中の有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の量は適宜設定され得る。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物中の有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の量は、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の投与量がヒトに投与することにより痛風又は高尿酸血症における酸性尿が改善される量、又は、それより少ない量となるように設定されてもよく、例えば、痛風又は高尿酸血症における酸性尿の改善について日本で認可されている１日用量（例えば、１錠中にクエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0mgを含む錠剤を1回2錠、1日3回経口投与、アルカリ性化剤が炭酸水素ナトリウムの場合：1日3〜5g経口投与）の１〜５０％、又は１０〜２０％となるように設定されてもよい。
【００３４】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は錠剤であり、１錠剤中に、クエン酸カリウム一水和物又はクエン酸ナトリウム二水和物を10mg〜1g、好ましくは、100mg〜500mg、より好ましくは、400mg〜500mgを含んでもよい。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は錠剤であり、１錠剤中に、クエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物を、それぞれ10mg〜300mgで、合計20mg〜600mg含んでもよく、好ましくは、それぞれ150〜250mgで、合計400〜500mg、より好ましくは、それぞれ190〜240mgで、合計400〜450mgを含んでもよい。
【００３５】
一つの実施態様として、本発明が提供する医薬組成物は錠剤であり、クエン酸カリウム一水和物 231.5mg及びクエン酸ナトリウム二水和物 195.0mgを含み、添加剤として、無水クエン酸、結晶セルロース、部分アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、ヒプロメロース、マクロゴール6000、酸化チタン及びカルナウバロウを含んでもよい。
【００３６】
一つの実施態様として、クエン酸カリウム一水和物 231.5mg及びクエン酸ナトリウム二水和物 195.0mgを含む錠剤を１投与単位としてもよい。
本明細書において、「投与単位」とは、製剤の単位を表し、「１投与単位」とは、製剤の最小単位を表す。したがって、例えば、錠剤であれば、投与単位は各錠剤であり、１投与単位は、１つの錠剤を表す。注射剤であれば、投与単位は、アンプル又はバイアル等の密封容器に入れられた注射剤であり、１投与単位は、１つのアンプル又はバイアル等の密封容器に入れられた注射剤を表す。
本発明が提供する医薬組成物が、ヒト又はその他の哺乳動物に投与される場合、１回あたり、１又は２以上の前記投与単位が投与されてもよく、前記１投与単位が分割されて投与されてもよい。
【００３７】
有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の投与量は、投与方法、投与対象の年齢、体重、性別、症状、薬剤への感受性等に応じて適宜決定されるが、症状の改善の状況に応じて投与量を調節してよい。
一つの実施態様において、クエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物の混合物をヒトに経口投与する場合は、痛風並びに高尿酸血症における酸性尿の改善の為に日本で認可されている１日の投与量（例えば、クエン酸製剤の場合：１錠中にクエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0mgを含む錠剤を1回2錠、1日3回経口投与）の半分量を１日の投与量としてもよい。
【００３８】
一つの実施態様において、クエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物の混合物をヒトに経口投与する場合は、痛風並びに高尿酸血症における酸性尿の改善の為に日本で認可されている１日の投与量（例えば、クエン酸製剤の場合：１錠中にクエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0mgを含む錠剤を1回2錠、1日3回経口投与）を１日の投与量としてもよい。
【００３９】
一つの実施態様において、クエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物の混合物をヒトに経口投与する場合は、痛風並びに高尿酸血症における酸性尿の改善の為に日本で認可されている１日の投与量（例えば、クエン酸製剤の場合：１錠中にクエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0mgを含む錠剤を1回2錠、1日3回経口投与）の半分量を１日の投与量として投与を開始し、その後投与量を痛風並びに高尿酸血症における酸性尿の改善の為に日本で認可されている１日の投与量まで増量してもよい。
【００４０】
一つの実施態様において、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の投与量は、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を経口投与することによりヒトの尿（例えば、早朝尿）のｐＨが、ｐＨ5.2〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.5〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.5、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.2、ｐＨ5.8以上ｐＨ6.2未満、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.5、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.4、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.3、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.2、ｐＨ6.0以上ｐＨ6.2未満、ｐＨ6.1〜ｐＨ6.3、ｐＨ6.2〜6.8、ｐＨ6.2〜ｐＨ6.5又はｐＨ6.5〜6.8となるような投与量であってもよい。
【００４１】
一つの実施態様において、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の投与量は、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を経口投与することによりヒトの尿（例えば、早朝尿）のｐＨが、投与６週、１２週又は２４週後で、ｐＨ5.2〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.5〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.8、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.5、ｐＨ5.8〜ｐＨ6.2、ｐＨ5.8以上ｐＨ6.2未満、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.5、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.4、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.3、ｐＨ6.0〜ｐＨ6.2、ｐＨ6.0以上ｐＨ6.2未満、ｐＨ6.1〜ｐＨ6.3、ｐＨ6.2〜6.8、ｐＨ6.2〜ｐＨ6.5又はｐＨ6.5〜6.8となるような投与量であってもよい。
【００４２】
一つの実施態様において、有効成分としてクエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物の混合物をヒトに経口投与する場合は、クエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物を、それぞれ0.1〜5g／日で合計0.2〜10g／日、それぞれ0.1〜3g／日で合計0.2〜6g／日、それぞれ0.5〜3g／日で合計1〜6g／日、好ましくは、それぞれ0.5〜1.5g／日で合計1〜3g／日、それぞれ1〜1.5g／日で合計2〜3g／日、又はそれぞれ0.5〜1g／日で合計1〜2g／日を投与してもよく、１日１〜５回、好ましくは１日３回に分けて投与してもよい。
【００４３】
一つの実施態様において、有効成分としてクエン酸カリウム一水和物又はクエン酸ナトリウム二水和物をヒトに経口投与する場合は、1〜10g／日、1〜6g／日、2〜5.5g／日、1〜3g／日、2〜3g／日又は1〜1.5g／日を投与してもよく、１日１〜５回、好ましくは１日３回に分けて投与してもよい。
【００４４】
一つの実施態様において、有効成分である、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物は、長期に投与されてもよく、例えば、１週間、２週間、３週間、６週間、８週間、１０週間、１２週間、２４週間、４０週間、６０週間、８０週間、１００週間、１２０週間、１週間以上、２週間以上、３週間以上、６週間以上、８週間以上、１０週間以上、１２週間以上、２４週間以上、４０週間以上、６０週間以上、８０週間以上、１００週間以上、１２０週間以上、６週間以上２４週間以下、１２週間以上２４週間以下、６週間以上３０週間以下、１２週間以上３０週間以下、６週間以上４０週間以下、１２週間以上４０週間以下、６週間以上６０週間以下、１２週間以上６０週間以下、６週間以上８０週間以下、１２週間以上８０週間以下、６週間以上１００週間以下、１２週間以上１００週間以下、６週間以上１２０週間以下又は１２週間以上１２０週間以下で投与される。
【００４５】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、６週間の連続投与、１２週間の連続投与、及び／又は２４週間の連続投与により、慢性腎臓病の患者に有益な効果（例えば、腎保護効果）が検出され得る。
【００４６】
慢性腎臓病（CKD）は、原疾患を問わず、慢性に経過する腎臓病を包括する概念であり、糸球体濾過量（GFR）で表される腎機能の低下があるか、又は腎臓の障害を示唆する所見が慢性的（３ヶ月以上）に持続する病態全てを包含する概念である。
【００４７】
ＣＫＤ診療ガイド2012（日腎会誌2012）によれば、慢性腎臓病の重症度は原因（Cause:C）、腎機能（GFR:G）、蛋白尿（アルブミン尿:A）による分類で評価される。
ＧＦＲの区分は、以下のようである。
Ｇ１：ＧＦＲが正常又は高値（≧90 mL／分／1.73 m2）
Ｇ２：ＧＦＲが正常又は軽度低下（60〜89 mL／分／1.73 m2）
Ｇ３ａ：ＧＦＲが軽度〜中程度低下（45〜59 mL／分／1.73 m2）
Ｇ３ｂ：ＧＦＲが中等度〜高度低下（30〜44 mL／分／1.73 m2）
Ｇ４：ＧＦＲが高度低下（15〜29 mL／分／1.73 m2）
Ｇ５：末期腎不全（ESKD）（＜15 mL／分／1.73 m2）
【００４８】
蛋白尿（アルブミン尿:A）による区分は、原疾患が糖尿病である場合、尿アルブミン／クレアチニン（Cr）比を用いて以下のように分類される。
Ａ１：正常（30 mg／gCr未満）
Ａ２：微量アルブミン尿（30〜299 mg／gCr）
Ａ３：顕性アルブミン尿（300 mg／gCr以上）
また、蛋白尿（アルブミン尿:A）による区分は、原疾患が糖尿病以外の高血圧、腎炎、多発性嚢胞腎、移植腎、その他である場合、尿蛋白／クレアチニン（Cr）比を用いて以下のように分類される。
Ａ１：正常（0.15 g／gCr未満）
Ａ２：軽度蛋白尿（0.15〜0.49 g／gCr）
Ａ３：高度蛋白尿（0.50 g／gCr以上）
【００４９】
ＣＫＤ診療ガイド2012（日腎会誌2012）によれば、慢性腎臓病（CKD）の重症度分類は、上記Ｃ、Ｇ及びＡを用いて、例えば、糖尿病Ｇ２Ａ３、慢性腎炎Ｇ３ｂＡ１等と表記される。
しかしながら、従来、慢性腎臓病の重症度は、GFRで区分されるステージのみで表記されていたことが考慮され、慢性腎臓病の重症度を従来のように、Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３ａ、Ｇ３ｂ、Ｇ４及びＧ５というステージで表記することも可能としている。
【００５０】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、重症度の低い、早期の慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ３ｂ以下、好ましくは、ステージＧ２又はそれ以下の慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ２以上ステージＧ３ｂ以下（例えば、ステージＧ２及びステージＧ３ａ；又はステージＧ２、ステージＧ３ａ及びステージＧ３ｂ）である慢性腎臓病患者に投与される。
【００５１】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ３ｂ以下であって、微量アルブミン尿である慢性腎臓病患者、好ましくは、ステージＧ２であって、微量アルブミン尿である慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ２以上ステージＧ３ｂ以下（例えば、ステージＧ２及びステージＧ３ａ；又はステージＧ２、ステージＧ３ａ及びステージＧ３ｂ）であって、微量アルブミン尿である慢性腎臓病患者に投与される。
【００５２】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ３ｂ以下であって、尿中蛋白排泄量が3.5g/gCr未満である慢性腎臓病患者、好ましくは、ステージＧ２であって、尿中蛋白排泄量が3.5g/gCr未満である慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ステージＧ２以上ステージＧ３ｂ以下（例えば、ステージＧ２及びステージＧ３ａ；又はステージＧ２、ステージＧ３ａ及びステージＧ３ｂ）であって、尿中蛋白排泄量が3.5g/gCr未満である慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、進行性の慢性腎臓病患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、高血圧を伴う慢性腎臓病患者に投与される。
【００５３】
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、ＣＫＤ診療ガイドに従った治療を施す患者に投与される。例えば、ＣＫＤ診療ガイドに従った血圧管理（ＡＲＢやＡＣＥ阻害薬などのＲＡ系抑制薬、利尿薬、Ｃａ拮抗薬の投与等）、蛋白尿対策（ＲＡ系抑制薬の投与等）、血糖値管理（αグルコシダーゼ阻害剤の投与等）、脂質管理（スタチン、フィブラートの投与等）、貧血管理（エリスロポエチンの投与等）及び／又は骨・ミネラル対策（ビスホスホネートの投与等）を施す患者に投与される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、血圧降下薬（例えば、ＡＲＢ、ＡＣＥ阻害薬、利尿薬、Ｃａ拮抗薬）と併用される。
一つの実施態様において、本発明が提供する医薬組成物は、石油系炭化水素由来の球形微粒多孔質炭素を高温にて酸化及び還元処理して得た球形吸着炭（クレメジン（登録商標）として日本で販売されている）と併用される。
【００５４】
本発明の実施の他の形態の例としては以下が挙げられる。
１−１）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）における腎保護方法であって、腎保護が必要な対象に有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を投与することを含む、方法；
１−２）哺乳類対象（例えば、ヒト）における慢性腎臓病に伴うアシドーシスの抑制又は酸性尿の改善方法であって、慢性腎臓病に伴うアシドーシスの抑制が必要な対象に有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を投与することを含み、該対象の腎内でRAS活性化が抑制される、方法；
１−３）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）の腎臓における酸化ストレスの抑制方法であって、酸化ストレスの抑制が必要な対象に有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を投与することを含む方法；
１−４）哺乳類対象（例えば、ヒト）における糸球体ろ過機能を判定する方法であって、該糸球体ろ過機能の判定が必要な対象に有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物を投与すること、該当予前及び該投与後の尿のｐＨを測定すること、該投与後の尿のｐＨと該投与前の尿のｐＨの差を算出することを含む方法（例えば、該差が−１以下の時、ｅＧＦＲは５０未満と判定し、１以上の時、ｅＧＦＲは５０以上と判定する）；
【００５５】
２−１）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）における腎保護に使用するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物；
２−２）腎内RAS活性化を抑制し、慢性腎臓病に伴うアシドーシスの抑制又は酸性尿の改善に使用するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物；
２−３）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）の腎臓における酸化ストレスの抑制に使用するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物；
２−４）糸球体ろ過機能の判定に使用するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む医薬組成物；
【００５６】
３−１）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）における腎保護用医薬組成物を製造するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の使用；
３−２）腎内RAS活性化を抑制し、慢性腎臓病に伴うアシドーシスの抑制又は酸性尿の改善用医薬組成物を製造するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の使用；
３−３）慢性腎臓病に罹患している哺乳類対象（例えば、ヒト）の腎臓における酸化ストレスの抑制用医薬組成物を製造するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の使用；及び
３−４）糸球体ろ過機能の判定用医薬組成物を製造するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の使用。
【００５７】
２．食品組成物
一つの実施態様において、本発明が提供する食品組成物は、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含み、腎臓の保護又は健康維持の効果を奏する。
一つの実施態様において、本発明が提供する食品組成物は、腎における酸化ストレスの抑制の効果を奏する。
有効成分については、上記「１．医薬組成物」で記載した有効成分を適用することができる。例えば、本発明が提供する食品組成物は、クエン酸アルカリ金属塩若しくはその水和物又はそれらの混合物、好ましくは、クエン酸カリウムの一水和物（C6H5K3O7・H2O）及びクエン酸ナトリウムの二水和物（C6H5Na3O7・2H2O）の混合物を含む食品組成物であり得る。
【００５８】
本発明が提供する食品組成物中のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の含量は、食品の種類により、適宜決定され得る。食品組成物の例には、特定保健用食品、機能性表示食品、病院患者用食品、サプリメントが挙げられる。これら、食品組成物の形態としては、前記効果を奏するための有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含み、経口的に摂取可能な形態であれば特に限定されるものではなく、通常の飲食品の形態であってもよいし、前記医薬組成物に適用され得る製剤のうち、経口投与に適した製剤、例えば、錠剤、カプセル剤、懸濁剤等の製剤として提供されてもよい。これらの製剤の構成及び製造方法については、本明細書において、上記「１．医薬組成物」で記載した医薬製剤の構成及び製造方法がそのまま適用できる他、医薬の製剤技術の分野において、それ自体公知の製剤技術を適用することができる。
【００５９】
例えば、特定保健用食品、機能性表示食品、病院患者用食品又はサプリメントの場合、１食分の食品あたり、有効成分としてクエン酸カリウム一水和物及びクエン酸ナトリウム二水和物を合計で1〜3gの１／３量含むか、又は有効成分として炭酸水素ナトリウムを1〜6gの１／３量含んでいてもよい。特定保健用食品、機能性表示食品、病院患者用食品又はサプリメントが錠剤として提供される場合、例えば、１錠あたり、300mg〜600mg の錠剤に、70〜80重量％のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含んでいてもよい。
【００６０】
本発明が提供する食品組成物が製剤化されず、通常の飲食品の形態として提供される場合、当該食品の種類により、当業者が適宜製造でき、例えば、食品素材にクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を配合することにより製造され得る。
前記飲食品の形態としては、飲料、醤油、牛乳、ヨーグルト、味噌等の液状又は乳状又はペースト状食品；ゼリー、グミ等の半固形状食品；飴、ガム、豆腐、サプリメント等の固形状食品；又は粉末状食品等が挙げられる。
飲料としては、果汁・果実飲料、コーヒー飲料、烏龍茶飲料、緑茶飲料、紅茶飲料、麦茶飲料、野菜飲料、ソフトドリンクである炭酸飲料、果実エキス入り飲料、野菜エキス入りジュース、ニアウオーター、スポーツ飲料、ダイエット飲料等が挙げられる。
【００６１】
飲料には、酸化防止剤、香料、各種エステル類、有機酸類、有機酸塩類、無機酸類、無機酸塩類、無機塩類、色素類、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、酸味料、果汁エキス類、野菜エキス類、花蜜エキス類、ｐＨ調整剤、品質安定剤等の添加剤を、単独又は組み合わせて配合することができる。
【００６２】
上記「１．医薬組成物」で記載した、「投与」という用語は、本発明に係る「食品組成物」にも適用することができ、さらに、本発明に係る「食品組成物」については、用語「投与」を、「摂取」と読み替えることができる。したがって、例えば、用語「投与する」、「投与される」等は、「摂取させる」、「摂取する」、「摂取される」等と文脈に応じて語形変化させて読み替えることができる。
したがって、本発明に係る食品組成物の実施の形態としては以下が挙げられる。
【００６３】
＜１＞クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む、腎臓の健康維持用の食品組成物；
＜１１＞腎臓の健康を維持する方法であって、腎臓の健康維持が必要な対象に、有効量のクエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む食品組成物を摂取させる方法；
＜１１１＞腎臓の健康維持用の食品組成物を製造するための、クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物の使用。
本発明に係る食品組成物は、その包装、容器、又は説明書に、腎臓の健康維持等の効果が表示されていることが好ましい。
【００６４】
本発明の実施態様の他の例としては以下：
（１）
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む慢性腎臓病における腎保護用医薬組成物；
（２）
腎組織を保護する、（１）に記載の医薬組成物；
（３）
腎機能を維持又は改善する、（１）又は（２）に記載の医薬組成物；
（４）
尿細管組織を保護する、（１）〜（３）のいずれかに記載の医薬組成物；
（５）
尿細管機能を維持又は改善する、（１）〜（４）のいずれかに記載の医薬組成物；
（６）
尿濃縮能を維持又は改善する、（１）〜（５）のいずれかに記載の医薬組成物；
（７）
腎臓における酸化ストレスを抑制する、（１）〜（６）のいずれかに記載の医薬組成物；
（８）
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物を含む、高血圧を伴う慢性腎臓病におけるアシドーシスの治療又は予防用、又は酸性尿の改善用医薬組成物；
（９）
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物が、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物である、（１）〜（８）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１０）
さらに、無水クエン酸を含む、（１）〜（９）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１１）
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜3g／日で投与される、（１）〜（１０）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１２）
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜1.5g／日で投与される、（１）〜（１１）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１３）
ステージＧ２以上Ｇ３ｂ以下の慢性腎臓病患者に投与される、（１）〜（１２）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１４）
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が６週間以上投与される、（１）〜（１３）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１５）
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物を含む腎機能診断用医薬組成物；
（１６）
腎機能が、糸球体ろ過機能である、（１５）に記載の医薬組成物；
（１７）
慢性腎臓病患者に投与され、慢性腎臓病患者の腎機能診断用医薬組成物である、（１５）又は（１６）に記載の医薬組成物；
（１８）
クエン酸、クエン酸の薬学的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物又はそれらの混合物が、クエン酸ナトリウム又はその水和物と、クエン酸カリウム又はその水和物との混合物である、（１５）〜（１７）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１９）
さらに、無水クエン酸を含む、（１５）〜（１８）のいずれかに記載の医薬組成物；
（２０）
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜3g／日で投与される、（１５）〜（１９）のいずれかに記載の医薬組成物；
（２１）
クエン酸、クエン酸の医薬的に許容可能な塩、若しくはその水和物又はそれらの混合物が1〜1.5g／日で投与される、（１５）〜（２０）のいずれかに記載の医薬組成物；
（２２）
ステージＧ２以上Ｇ３ｂ以下の慢性腎臓病患者に投与される、（１５）〜（２１）のいずれかに記載の医薬組成物；
（２３）
（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物及びヒト尿のｐＨを測定する為の試験紙を含む、腎機能診断用医薬キット；
（２４）
（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物を被検者に投与すること、投与後の被検者の尿のｐＨを測定することを含む、腎機能の判定方法；
（２５）
投与後の被検者の尿が、投与後の最初の被検者の尿である、（２４）に記載の方法；
（２６）
投与後の被検者の尿が、投与２〜５時間後の被検者の尿である、（２４）又は（２５）に記載の方法；
（２７）
被検者が、アルカリ性化剤を含む医薬組成物を連続投与された慢性腎臓病患者である、（２４）〜（２６）のいずれかに記載の方法；
（２８）
被検者が、アルカリ性化剤を含む医薬組成物を連続投与された慢性腎臓病患者であり、アルカリ性化剤の連続投与前に、（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物を投与して、その後採取した被検者の尿のｐＨ値に比較して、アルカリ性化剤の連続投与後に（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物を投与して、その後採取した被検者の尿のｐＨ値が高い場合に被検者の腎機能が改善されたと判定する、（２４）〜（２７）のいずれかに記載の方法；
（２９）
（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物を被検者に投与すること、投与前の被検者の早朝尿のｐＨ及び投与後の被検者の尿のｐＨを測定することを含む、腎機能の判定方法；
（３０）
投与前の被検者の早朝尿が、投与前の最後の被検者の早朝尿である、（２９）に記載の方法；
（３１）
投与前の被検者の尿が、投与３時間前までの被検者の早朝尿である、（２９）又は（３０）に記載の方法；
（３２）
投与後の被検者の尿が、投与後の最初の被検者の尿である、（２９）〜（３１）のいずれかに記載の方法；
（３３）
投与後の被検者の尿が、投与２〜５時間後の被検者の尿である、（２９）〜（３２）のいずれかに記載の方法；
（３４）
被検者が、アルカリ性化剤を含む医薬組成物を連続投与された慢性腎臓病患者である、（２９）〜（３３）のいずれかに記載の方法；
（３５）
被検者が、アルカリ性化剤を含む医薬組成物を連続投与された慢性腎臓病患者であり、連続投与後と連続投与前を比較して、（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与後の被検者の尿のｐＨから（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与前の被検者の早朝尿のｐＨを引き算した差が大きい場合に被検者の腎機能が改善されたと判定する、（２９）〜（３４）のいずれかに記載の方法；
（３６）
（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与後の被検者の尿のｐＨから（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与前の被検者の早朝尿のｐＨを引き算した差が−１以下である場合ｅＧＦＲが５０未満と判定する、（２９）〜（３５）のいずれかに記載の方法；及び
（３７）
（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与後の被検者の尿のｐＨから（１５）〜（２２）のいずれかに記載の医薬組成物の投与前の被検者の早朝尿のｐＨを引き算した差が１以上である場合ｅＧＦＲが５０以上と判定する、（２９）〜（３６）のいずれかに記載の方法、
が挙げられる。
【００６５】
以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００６６】
経口アルカリ性化剤であるクエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤及び重曹製剤の経口投与による効果を検討する為に、ヒト臨床試験を実施した。【００６７】
１．方法
ステージＧ２〜Ｇ３ｂの慢性腎臓病患者（eGFR：30〜89 ml/min/1.73m2）47名をクエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群（Ａ群：16名）、重曹（炭酸水素ナトリウム）製剤投与群（Ｂ群：16名）及びコントロール群（Ｃ群：15名）に無作為に分けた。各群に、年齢、性別、糖尿病の有無、eGFRが偏らないように患者を割り付けした。各群には、「ＣＫＤ診療ガイド−治療のまとめ」に基づく治療（以下、標準治療と称す）を行った。【００６８】
コントロール群にはアルカリ性化剤を投与しなかった。Ａ群には、クエン酸カリウム（C6H5K3O7・H2O）231.5 mg及びクエン酸ナトリウム水和物（C6H5Na3O7・2H2O）195.0 mgを含有する錠剤を1日3錠、1日3回（朝、昼、夕）、24週間経口投与した。なお、経時的に早朝尿のｐＨ管理を行い、早朝尿がpH6.5未満の症例には、適宜、医師の判断で1日6錠、1日3回（朝、昼、夕）まで増量できることとした。Ｂ群には、炭酸水素ナトリウム500 mgを含む錠剤を1日3錠、1日3回（朝、昼、夕）、24週間経口投与した。なお、経時的に早朝尿のｐＨ管理を行い、早朝尿がpH6.5未満の症例には、適宜、医師の判断で1日6錠、1日3回（朝、昼、夕）まで増量できることとした。【００６９】
投与開始前、投与開始後6週、12週、24週の早朝尿、随時尿及び血液を採取し、各検体は−80℃で保存した。
尿中の8-OHdG濃度、アンジオテンシノーゲン濃度は、ELISA法で測定した。
血清の鉄濃度はニトロソ-PSAP法で、フェリチン濃度はCLEIA（化学発光酵素免疫測定法）法で測定した。
尿中のβ２−マイクログロブリン量を、ＬＺテスト‘栄研’β２−Ｍ及びＬＺ−β２−Ｍ標準Ｕ‘栄研’（栄研化学、東京、日本）を用いたラテックス凝集免疫法で測定した。
尿の浸透圧は氷点降下法を用いて測定した。
尿中のアルブミン濃度、タンパク質濃度は、免疫比濁法、比色法を用いて測定した。
尿中のクレアチニン濃度は、酵素法により測定した。
統計解析は、群間比較にはMann-Whitney検定を使用し、経時変化の比較にはWilcoxon検定を使用した。また、相関性に関してはPearson検定を使用した。【００７０】
２．結果
測定結果から、Ａ群（クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）、Ｂ群（炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（コントロール群）の各患者について、以下を算出した：
（ｉ）投与開始前の早朝尿中の8-OHdG及びアンジオテンシノーゲンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｉｉ）投与開始後6週、12週、24週の早朝尿中の8-OHdG及びアンジオテンシノーゲンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｉｉｉ）投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中の8-OHdGの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値と、投与開始前の早朝尿中の8-OHdGの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値の比（投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中の8-OHdGの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値／投与開始前の早朝尿中の8-OHdGの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値）【００７１】
（ｉｖ）投与開始前の早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｖ）投与開始後6週、12週、24週の早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｖｉ）投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値−投与開始前の早朝尿中のβ２-マイクログロブリン及びアルブミンの各濃度を尿中クレアチニン濃度で引き算した値）
（ｖｉｉ）投与開始前の随時尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｖｉｉｉ）投与開始後6週、12週、24週の早朝尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値
（ｉｘ）投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の早朝尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値−投与開始前の早朝尿中のアルブミン及びタンパク質の各濃度を尿中クレアチニン濃度で引き算した値）
（ｘ）投与開始前の早朝尿の浸透圧値
（ｘｉ）投与開始後6週、12週、24週の早朝尿の各浸透圧値【００７２】
そして、上記（ｉ）〜（ｘｉｉ）につき、各群の平均値とＳＤを算出した。
結果を以下の表に示した。なお、表中及び図中では、Ａ群：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群を“Citrate”、Ｂ群：炭酸水素ナトリウム製剤投与群を“Bicarbonate”と記載した。【００７３】
表１に、投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中の8-OHdGの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値と、投与開始前の早朝尿中の8-OHdGの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値との比（％）を示す。【００７４】
【表１】
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【００７５】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）に比較し、投与６、１２及び２４週後の早朝尿中の8-OHdGの濃度が低値であった（表１参照）。Ａ群では、Ｂ群、Ｃ群に比較し、投与６〜２４週における早朝尿中8-OHdGの濃度は有意に低下した（表１参照）。尿中の8-OHdG濃度は、組織障害の指標である8-OHdGの腎における蓄積を反映する。上記結果より、クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与が、慢性腎臓病患者の腎臓での酸化ストレスの抑制に有用であること、クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与により、腎組織保護効果が発揮されることが示された。【００７６】
表２に、投与開始前、投与後６、１２、２４週及び６〜２４週における、早朝尿中のアンジオテンシノーゲン量を尿中クレアチニン濃度で割り算した値（μｇ／ｇＣｒ）を示す。【００７７】
【表２】
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【００７８】
Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）では、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）に比較し、、投与６〜２４週における早朝尿中アンジオテンシノーゲンの濃度が有意に高値であった（表２参照）。炭酸水素ナトリウム投与は、腎内レニン・アンジオテンシン系を亢進させる方向に作用する一方、クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与は、そのような作用が無いことが示された。【００７９】
表３に、投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中のβ２−マイクログロブリンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の早朝尿中のβ２−マイクログロブリンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（μｇ／ｇＣｒ）を示す。【００８０】
【表３】
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【００８１】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、Ｃ群（Control：コントロール群）に比較し、投与６〜２４週の早朝尿中のβ２マイクログロブリンの濃度が低値である傾向が認められた（表３参照）。このような傾向はＢ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）では認められなかった（表３参照）。クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与は、コントロール群に比較して、尿細管組織保護効果を発揮することが示唆された。【００８２】
表４に、投与開始後6週、12週、24週における早朝尿中アルブミンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の早朝尿中のアルブミンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（ｍｇ／ｇＣｒ）を示す。【００８３】
【表４】
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【００８４】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、投与開始前に比較し投与後の早朝尿中のアルブミン濃度が低値となる傾向が認められた。このような傾向は、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）では認められなかった（表４参照）。
また、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）に比較し、投与６〜２４週の早朝尿中のアルブミンの濃度が有意に低値であった（表４参照）。クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与により腎機能が保護されることが示された。【００８５】
表５に、投与開始後6週、12週、24週における随時尿中アルブミンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の随時尿中のアルブミンの濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（ｍｇ／ｇＣｒ）を示す。【００８６】
【表５】
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【００８７】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、投与開始前に比較し投与後の随時尿中のアルブミン濃度が低値となる傾向が認められた。このような傾向は、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）では認められなかった（表５参照）。
また、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）に比較し、投与６〜２４週の早朝尿中のアルブミンの濃度が低値であった（表５参照）。クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与により、腎機能が保護されることが示された。
クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与により、早朝尿においても（表４参照）、随時尿においても（表５参照）、Ｃ群（Control：コントロール群）に比較し尿中アルブミン濃度の低下が認められたことから、クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤は、１日を通して腎機能保護効果を発揮することが示された。【００８８】
表６に、投与開始後6週、12週、24週における随時尿中のタンパク質の濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値から、投与開始前の随時尿中のタンパク質の濃度を尿中クレアチニン濃度で割り算した値を差し引いた差（ｍｇ／ｇＣｒ）を示す。【００８９】
【表６】
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【００９０】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、投与開始前に比較し投与後の随時尿中のタンパク質濃度が低値となる傾向が認められた。このような傾向は、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）では認められなかった（表６参照）。
また、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）に比較し、投与６〜２４週の早朝尿中のタンパク質の濃度が低値であり、腎機能が保護されることが示された。【００９１】
表７に、投与開始後6週、12週、24週における早朝尿の浸透圧値（ｍＯｓｍ／ｋｇ Ｈ２Ｏ）を示す。【００９２】
【表７】
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【００９３】
Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）では、投与開始前に比較し投与後の早朝尿の浸透圧が維持又は高くなる傾向が認められた。Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）においても、投与開始前に比較し投与後の早朝尿の浸透圧が維持される傾向が認められたが、Ｃ群（Control：コントロール群）では投与開始前に比較し投与後の早朝尿の浸透圧が低下する傾向が認められた（表７参照）。
クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤の投与により、尿細管機能としての尿濃縮能が維持又は改善することが示唆された。【００９４】
また、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）、Ｂ群（Bicarbonate：炭酸水素ナトリウム製剤投与群）及びＣ群（Control：コントロール群）のそれぞれについて、朝の薬剤服用２〜５時間後に採取した尿（随時尿：図１〜３中のSpot）のｐＨを測定し、ｅＧＦＲの関係をプロットした（図１〜３）。また、朝の薬剤服用２〜５時間後に採取した尿（随時尿）のｐＨと早朝尿のｐＨを測定し、その差（随時尿のｐＨ−早朝尿のｐＨ：図４〜６中のSpot-Morning）とｅＧＦＲの関係をプロットした（図４〜６）。その結果、Ａ群（Citrate：クエン酸カリウム・クエン酸ナトリウム水和物配合製剤投与群）でのみ、「随時尿のｐＨ」の値とｅＧＦＲとの関係に有意な相関関係が認められ（図２）、「随時尿のｐＨ−早朝尿のｐＨ」の値とｅＧＦＲとの関係に有意な相関関係が認められた（図５）。
【産業上の利用可能性】
【００９５】
本発明が提供する医薬組成物により、腎が保護され、尿細管機能が維持又は改善する。また、本発明が提供する医薬組成物により、腎臓の機能が評価される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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