【手続補正書】
【提出日】平成21年7月3日(2009.7.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱安定性タンパク質と融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む単離された抗原であって、
該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含む、
単離された抗原。
【請求項２】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０および配列番号２４からなる群より選択される少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインからなる、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項３】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項４】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１または配列番号３から選択される完全長血球凝集素（ＨＡ）からなる、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項５】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２または配列番号４から選択される完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）からなる、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項６】
前記熱安定性タンパク質が修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項７】
前記リケナーゼのコード配列が植物におけるタンパク質発現のために最適化されている、請求項６に記載の単離された抗原。
【請求項８】
前記リケナーゼタンパク質の配列が、リケナーゼＬｉｃＢのＮ末端ドメイン、Ｃ末端ドメインおよび表面ループドメインを含む、請求項６に記載の単離された抗原。
【請求項９】
前記リケナーゼに融合させた内在性膜タンパク質成分が、Ｎ末端融合タンパク質、Ｃ末端融合タンパク質または表面ループ挿入融合タンパク質のいずれか１つである、請求項８に記載の単離された抗原。
【請求項１０】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも２つのドメインを含む、請求項１に記載の単離された抗原。
【請求項１１】
前記内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項１０に記載の単離された抗原。
【請求項１２】
熱安定性タンパク質に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む抗原、および薬学的に許容され得る担体を含むワクチン組成物であって、
該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含む、
被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、ワクチン組成物。
【請求項１３】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０および配列番号２４からなる群より選択される少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインからなる、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１または配列番号３から選択される完全長血球凝集素（ＨＡ）からなる、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２または配列番号４から選択される完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）からなる、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
前記熱安定性タンパク質が修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１８】
前記熱安定性タンパク質が、クロストリディウム・サーモセラム由来の修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項１９】
前記リケナーゼのコード配列が植物におけるタンパク質発現のために最適化されている、請求項１７に記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
前記リケナーゼタンパク質の配列が、リケナーゼのＮ末端ドメイン、Ｃ末端ドメインおよび表面ループドメインを含む、請求項１７に記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
前記リケナーゼに融合させた内在性膜タンパク質成分が、Ｎ末端融合タンパク質、Ｃ末端融合タンパク質または表面ループ挿入融合タンパク質のいずれか１つである、請求項２０に記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２、４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも２つのドメインを含み、被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
前記内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項２２に記載のワクチン組成物。
【請求項２４】
前記内在性膜タンパク質成分が、完全長血球凝集素（ＨＡ）および完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）を含む、請求項２２に記載のワクチン組成物。
【請求項２５】
さらに第２の抗原を含み、動物に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項２６】
前記第２の抗原が、熱安定性タンパク質および薬学的に許容され得る担体に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含み、
第１の抗原の内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含み、前記第２の抗原の内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される該第１の抗原とは異なる少なくとも１つのドメインを含む、
被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項２５に記載のワクチン組成物。
【請求項２７】
前記第１の抗原の内在性膜タンパク質成分が血球凝集素（ＨＡ）ドメインを含み、前記第２の抗原の内在性膜タンパク質成分がノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項２６に記載のワクチン組成物。
【請求項２８】
前記抗原が、トランスジェニック植物および該抗原を一過的に発現する植物から選択される植物において産生される、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項２９】
植物細胞、植物、種子、果実またはその抽出物から精製された、一部精製された、または未精製の抗原を含む、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項３０】
さらに少なくとも１種類のワクチンアジュバントを含む、請求項１２に記載のワクチン組成物。
【請求項３１】
前記アジュバントが、ミョウバン、ＭＦ５９、サポニンおよびＭＡＬＰ２からなる群より選択される、請求項３０に記載のワクチン組成物。
【請求項３２】
各々がＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む少なくとも２種類の抗原を含むワクチン組成物であって、該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含み、少なくとも１種類の抗原が、熱安定性タンパク質および薬学的に許容され得る担体に融合され、被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、ワクチン組成物。
【請求項３３】
少なくとも１種類の内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０および配列番号２４からなる群より選択される少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインを含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３４】
少なくとも１種類の内在性膜タンパク質成分が、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３５】
少なくとも１種類の内在性膜タンパク質成分が、配列番号１または配列番号３から選択される完全長血球凝集素（ＨＡ）からなる、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３６】
少なくとも１種類の内在性膜タンパク質成分が、配列番号２または配列番号４から選択される完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）からなる、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３７】
前記熱安定性タンパク質が修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３８】
前記熱安定性タンパク質が、クロストリディウム・サーモセラム由来の修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項３９】
前記リケナーゼのコード配列が植物におけるタンパク質発現のために最適化されている、請求項３７に記載のワクチン組成物。
【請求項４０】
前記リケナーゼタンパク質の配列が、リケナーゼのＮ末端ドメイン、Ｃ末端ドメインおよび表面ループドメインを含む、請求項３７に記載のワクチン組成物。
【請求項４１】
前記リケナーゼに融合させた内在性膜タンパク質成分が、Ｎ末端融合タンパク質、Ｃ末端融合タンパク質または表面ループ挿入融合タンパク質のいずれか１つである、請求項４０に記載のワクチン組成物。
【請求項４２】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも２つのドメインを含み、被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項４３】
前記内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項４２に記載のワクチン組成物。
【請求項４４】
前記内在性膜タンパク質成分が、完全長血球凝集素（ＨＡ）および完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）を含む、請求項４２に記載のワクチン組成物。
【請求項４５】
さらに第３の抗原を含み、動物に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項４６】
前記第３の抗原が、熱安定性タンパク質および薬学的に許容され得る担体に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含み、
第１の抗原の内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含み、前記第２の抗原の内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される該第１の抗原とは異なる少なくとも１つのドメインを含み、
被験体に投与されると免疫応答を惹起し得る、請求項４５に記載のワクチン組成物。
【請求項４７】
前記抗原が、トランスジェニック植物および該抗原を一過的に発現する植物から選択される植物において産生される、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項４８】
植物細胞、植物、種子、果実またはその抽出物から精製された、一部精製された、または未精製の抗原を含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項４９】
さらに少なくとも１種類のワクチンアジュバントを含む、請求項３２に記載のワクチン組成物。
【請求項５０】
前記アジュバントが、ミョウバン、ＭＦ５９、サポニンおよびＭＡＬＰ２からなる群より選択される、請求項４９に記載のワクチン組成物。
【請求項５１】
有効量の抗Ａ型インフルエンザワクチン組成物を含む、Ａ型インフルエンザ感染に対する保護免疫応答を誘導するための組成物であって、該組成物は、被験体に、抗原特異的抗体の産生を刺激するのに充分であるか、または該被験体による細胞性免疫応答を刺激するのに充分である量で投与され、それにより防御的免疫応答が誘導されることを特徴とし、
該ワクチン組成物が、熱安定性タンパク質に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む抗原を含み；かつ
該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメイン、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインおよびＭ２ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含む、
組成物。
【請求項５２】
経口、鼻腔内、皮下、静脈内、腹腔内または筋肉内投与されることを特徴とする、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
植物細胞を摂食することによって前記被験体に経口投与されることを特徴とする、請求項５２に記載の組成物。
【請求項５４】
前記被験体がヒトである、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５５】
前記被験体が、トリ、ブタおよびウマからなる群より選択される、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５６】
熱安定性タンパク質に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む抗原タンパク質を生成するための方法であって、該方法が、
ａ．熱安定性タンパク質に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分を含む抗原をコードする核酸構築物を調製する工程；
ｂ．工程ａの核酸を細胞内に導入する工程；および
ｃ．該細胞を、該抗原タンパク質の発現に有利な条件下でインキュベートし、それにより該抗原タンパク質を産生させる工程、
を包含し、
該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含む、
方法。
【請求項５７】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０および配列番号２４からなる群より選択される少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインからなる、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる、請求項５６に記載の方法。
【請求項５９】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号１または配列番号３から選択される完全長血球凝集素（ＨＡ）からなる、請求項５６に記載の方法。
【請求項６０】
前記内在性膜タンパク質成分が、配列番号２または配列番号４から選択される完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）からなる、請求項５６に記載の方法。
【請求項６１】
前記熱安定性タンパク質が修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項６２】
前記リケナーゼのコード配列が植物におけるタンパク質発現のために最適化されている、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記リケナーゼタンパク質の配列が、リケナーゼのＮ末端ドメイン、Ｃ末端ドメインおよび表面ループドメインを含む、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記リケナーゼに融合させた内在性膜タンパク質成分が、Ｎ末端融合タンパク質、Ｃ末端融合タンパク質または表面ループ挿入融合タンパク質のいずれか１つである、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
前記内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる群より選択される少なくとも２つのドメインを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項６６】
前記内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項６７】
前記抗原タンパク質の発現がウイルスプロモーターの制御下にある、請求項５６に記載の方法。
【請求項６８】
前記核酸構築物が、さらにベクター核酸配列を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項６９】
前記ベクターがバイナリーベクターである、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記核酸構築物が、さらに、ウイルスタンパク質をコードする配列を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項７１】
前記細胞が植物細胞である、請求項５６に記載の方法。
【請求項７２】
前記植物細胞が、アルファルファ、ラディッシュ、カラシ、緑豆、ブロッコリー、オランダカラシ、大豆、小麦  ヒマワリ、キャベツ、クローバー、ペチュニア、トマト、ジャガイモ、ニコチン（ｎｉｃｏｔｉｎｅ）、ホウレンソウ、およびレンズマメの細胞からなる群より選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記抗原タンパク質がクローン根細胞において産生される、請求項５６に記載の方法。
【請求項７４】
前記抗原タンパク質が発芽種苗において産生される、請求項５６に記載の方法。
【請求項７５】
さらに、産生された一部精製または精製抗原タンパク質を回収する工程を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項７６】
熱安定性タンパク質に融合させたＡ型インフルエンザ内在性膜タンパク質成分をコードする核酸配列を含む単離された核酸構築物であって、
該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる群より選択される少なくとも１つのドメインを含む、核酸構築物。
【請求項７７】
前記内在性膜成分が、配列番号１、配列番号３、配列番号７、配列番号８、配列番号３３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号２０および配列番号２４からなる群より選択される少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインを含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項７８】
前記内在性膜成分が、少なくとも１つのノイラミニダーゼドメインを含み、該内在性膜タンパク質成分が、配列番号２、配列番号４、配列番号１６および配列番号１８からなる群より選択される少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項７９】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、該内在性膜タンパク質成分が、配列番号１または配列番号３から選択される完全長血球凝集素（ＨＡ）からなる、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８０】
前記内在性膜成分が、少なくとも１つのノイラミニダーゼドメインを含み、該内在性膜タンパク質成分が、配列番号２または配列番号４から選択される完全長ノイラミニダーゼ（ＮＡ）からなる、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８１】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、前記熱安定性タンパク質が修飾リケナーゼタンパク質の配列を含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８２】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、前記リケナーゼのコード配列が植物におけるタンパク質発現のために最適化されている、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８３】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、前記リケナーゼタンパク質の配列が、リケナーゼのＮ末端ドメイン、Ｃ末端ドメインおよび表面ループドメインを含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８４】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、前記リケナーゼに融合させた内在性膜タンパク質成分が、Ｎ末端融合タンパク質、Ｃ末端融合タンパク質または表面ループ挿入融合タンパク質のいずれか１つである、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８５】
前記内在性膜成分が少なくとも１つの血球凝集素ドメインを含み、該内在性膜タンパク質成分が、血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインからなる群より選択される少なくとも２つのドメインを含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８６】
前記内在性膜タンパク質成分が、少なくとも１つの血球凝集素（ＨＡ）ドメインおよび少なくとも１つのノイラミニダーゼ（ＮＡ）ドメインを含む、請求項８５に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８７】
さらにベクター核酸配列を含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８８】
さらにウイルスプロモーター核酸配列を含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項８９】
前記ベクターがバイナリーベクターである、請求項８７に記載の単離された核酸構築物。
【請求項９０】
さらに、ウイルスタンパク質をコードする核酸配列を含む、請求項７６に記載の単離された核酸構築物。
【請求項９１】
請求項７６に記載の核酸構築物を含む宿主細胞。
【請求項９２】
植物細胞である、請求項９１に記載の宿主細胞。
【請求項９３】
アルファルファ、ラディッシュ、カラシ、緑豆、ブロッコリー、オランダカラシ、大豆、小麦  ヒマワリ、キャベツ、クローバー、ペチュニア、トマト、ジャガイモ、ニコチン（ｎｉｃｏｔｉｎｅ）、ホウレンソウ、およびレンズマメからなる群より選択される、請求項９１に記載の宿主細胞を含む植物。
【請求項９４】
アブラナ属、ニコチアナ（Ｎｉｃｏｔａｎａ）属、およびペチュニア属から選択される属のものである、請求項９１に記載の宿主細胞を含む植物。