(57)【要約】対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法は、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルを判定することを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法であって、
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルを測定することを含む方法。
【請求項２】
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値よりも高い場合、前記対象における疾患の治療に当該免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定すること
を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｓＣＤ１６３を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するためのバイオマーカー。
【請求項４】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗体結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するための診断薬。
【請求項５】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定用キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１８年１１月１６日に出願された、日本国特許出願第２０１８−２１５８８０号明細書（その開示全体が参照により本明細書中に援用される）に基づく優先権を主張する。本発明は、免疫チェックポイント阻害薬又はその抗原結合断片の治療効果を判定する方法、バイオマーカー、診断薬、及びキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
がん細胞は、がん細胞を攻撃する免疫細胞の活性を下げることにより、免疫細胞の攻撃を阻止している。この仕組みは「免疫チェックポイント」と呼ばれている。したがって、この「免疫チェックポイント」を阻害することにより、免疫細胞の働きを再び活発にしてがん細胞を攻撃することができる。免疫チェックポイント阻害薬は、がん細胞により活性の下げられた免疫細胞を活性化させ、がん細胞を攻撃させる薬である。【０００３】
免疫チェックポイント阻害薬として具体的には、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体等が挙げられる。抗ＰＤ−１抗体であるニボルマブ及びペムブロリズマブは、悪性黒色腫の治療に有用であることが知られており、また、非小細胞肺癌及び腎細胞癌に対する治療効果も報告されている（特許文献１、非特許文献１）。【０００４】
ニボルマブ、ペムブロリズマブ等の免疫チェックポイント阻害薬は非常に高額であるため、免疫チェックポイント阻害薬療法の有効性を評価するためのバイオマーカーが必要とされている。日本におけるニボルマブ及びペムブロリズマブの有効性はそれぞれ３４．１％及び２４．１％と報告されており（非特許文献２，３）、悪性黒色腫における抗腫瘍免疫応答を高める別の薬剤が必要であることが示唆されている。【０００５】
そこで、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の高い患者を事前に選別して、該抗体を投与できれば有益である。【０００６】
また、イピリムマブは、細胞性Ｔリンパ球抗原（ＣＴＬＡ４）をブロックする完全ヒト型ＩｇＧ１モノクローナル抗体であり、ニボルマブと併用される進行期悪性黒色腫の患者の抗腫瘍免疫応答を高める有望な薬剤の一つである。進行期悪性黒色腫におけるニボルマブとイピリムマブの併用療法の有効性は５７．８％と報告されており、ニボルマブとイピリムマブの同時投与に加えて、ニボルマブとイピリムマブとの適切な時期での切り替えによる連続投与も、進行期悪性黒色腫の治療における有効性が高いとされている。従って、当該適切な時期を決めるために、ニボルマブ等の免疫チェックポイント阻害薬を投与後に、その有効性を評価することが重要である。【０００７】
特許文献２は上記課題に取り組んだものであり、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体及びそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取されたＣＤ１６３及びＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することにより、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測する方法を開示している。しかし、特許文献２には、これらのマーカーを用いて該抗体医薬の抗腫瘍効果自体を評価することは開示されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２０１６−０６４９８９号公報
【特許文献２】国際公開第２０１８／００３９９５号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】N Engl J Med (2015)373: 23-34
【非特許文献２】Cancer Sci. (2017)108:1223-1230
【非特許文献３】Cancer Chemother Pharmacol. (2017) 79:651-660
【非特許文献４】N Engl J Med. (2015) 373:23-34
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、免疫チェックポイント阻害薬の投与後に、対象における当該免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を精度よく判定できる方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、対象の生体試料中の種々のケモカインと免疫チェックポイント阻害薬の治療効果との関係を鋭意研究したところ、ｓＣＤ１６３のレベルが高い対象において、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果が高いことを見いだし、本発明を完成するに至った。【００１２】
すなわち本発明は、例えば以下の実施形態を包含する。【００１３】
項１．対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法であって、
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルを測定することを含む方法。【００１４】
項２．対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値よりも高い場合、前記対象における疾患の治療に免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定すること
を含む項１に記載の方法。【００１５】
項３．ｓＣＤ１６３を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するためのバイオマーカー。【００１６】
項４．抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗体結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するための診断薬。【００１７】
項５．抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定用キット。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の新たな判定方法が提供される。すなわち、本発明の判定方法は、ｓＣＤ１６３のレベルに基づいて、免疫チェックポイント阻害薬に対して顕著に感受性を示すがん患者を判定することができる。これにより、疾患治療における対象への適切な薬剤の選択ができ、又は無用な投薬を回避することができ、適切な投与計画の立案及び適切な投与計画への変更が可能となる。本発明において、治療効果の判定とは、治療効果の有無及び／又は有効性の程度を評価することを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】皮膚黒色腫におけるsCD163の血清レベルとROC曲線（第１コホート）  42日目の各患者におけるsCD163の血清レベル変化（n = 59）（Ａ）。ROC曲線を適用して、sCD163血清レベルおよびAUCについてのカットオフを計算した（Ｂ）。カットオフは、Youdenのインデックスを使用して、奏功者と非奏功者を区別するために決定した。
【図２】皮膚黒色腫におけるsCD163のROC曲線（第２コホート）  図１で確認したカットオフを新たな症例で再確認した（n=25）。ROC曲線を適用して、sCD163血清レベルおよびAUCについてのカットオフを計算した。
【図３】非皮膚黒色腫におけるsCD163の血清レベルとROC曲線  42日目の各患者におけるsCD163の血清レベル変化（n = 29）（A）。ROC曲線を適用して、sCD163血清レベルおよびAUCのカットオフを計算した（Ｂ）。カットオフは、Youdenのインデックスを使用して、奏功者と非奏功者を区別するために決定した。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明の第一態様によれば、対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法であって、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルを測定することを含む方法が提供される。
【００２１】
かかる方法によれば、ｓＣＤ１６３のレベルに基づいて、対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定することができる。
【００２２】
本明細書において、「ＣＤ１６３」は、１本鎖の膜貫通型タンパク質で、スカベンジャーレセプターシステイン−リッチファミリーのメンバーであり、「Ｍ１３０」と相互に使用される。また、「ｓＣＤ１６３（可溶型ＣＤ１６３）」は、ＣＤ１６３が切断されて可溶型となったものである。本発明における「ｓＣＤ１６３」は、ｓＣＤ１６３の改変体、アイソフォーム、および種ホモログを含んでよい。
【００２３】
ｓＣＤ１６３のレベルとは、例えば、生体試料におけるｓＣＤ１６３の濃度又は量であり、好ましくは、生体試料におけるｓＣＤ１６３の濃度である。測定するｓＣＤ１６３の濃度としては、例えば、１０ｐｇ／ｍＬ〜５００００ｐｇ／ｍＬ、１０ｐｇ／ｍＬ〜１０００００ｐｇ／ｍＬの範囲の濃度が挙げられる。
【００２４】
本発明において免疫チェックポイント阻害薬として、具体的には、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体等が挙げられ、抗ＰＤ−１抗体が好ましい。抗ＰＤ−１抗体としては、ニボルマブ、ペムブロリズマブ等が、悪性黒色腫の治療に有用であることが知られており、好ましい。本発明の好ましい実施形態においては、最初にある抗ＰＤ−１抗体による治療を行い、ｓＣＤ１６３を指標にその治療効果を判定する。その結果、当該抗ＰＤ−１抗体による治療が有効であると判定された場合は当該治療を継続し、当該抗ＰＤ−１抗体による治療が有効でないと判定された場合に、当該抗ＰＤ−１抗体とは別の抗ＰＤ−１抗体による治療を行うか、又は抗ＣＴＬＡ４抗体による治療を行うことができる。
【００２５】
本明細書において、「抗体」は、全長抗体であって、ジスルフィド結合で連結された少なくとも２個の重鎖（Ｈ）と２個の軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（以下、ＶＨと略すこともある。）と重鎖定常領域とから構成されている。重鎖定常領域は、３個のドメインＣＨ1、Ｃ Ｈ2及びＣＨ3から構成されている。各軽鎖は、軽鎖可変領域（以下、ＶＬと略すこともある。）と軽鎖定常領域から構成されている。軽鎖定常領域は、１個のドメインＣＬで構成されている。ＶＨ及びＶＬ領域はさらに、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される変異性の高い領域に小分割され、それらには、フレームワーク領域（ＦＲ）と称され、より保存性の高い領域が散在している。上記重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含んでいる。
【００２６】
かかる「抗体」としては、例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、低分子化抗体、ドメイン抗体、合成抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体複合体、一本鎖抗体、抗体誘導体、抗体類似体、及びそのそれぞれの抗原結合断片が挙げられる。
【００２７】
本明細書において、抗体の「抗原結合断片」（又は、単に「抗体断片」ともいう）とは、特異的に抗原（例えば、ＰＤ−１）に結合する能力を保持する抗体の１個以上の断片を示すものである。抗体の「抗原結合断片」に含まれる結合断片の例として、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ1ドメインから構成される１価の断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域中ジスルフィド架橋で結合した２個のＦａｂ断片を含む２価の断片であるＦ（ａｂ´）2断片、（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ1ドメインから構成されるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬ及びＶＨドメインで構成されるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインから構成されるｄＡｂ断片、又は（ｖｉ）単離相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２個のドメインであるＶＬ及びＶＨは別々の遺伝子によりコードされているが、それらは、組み換え技術を用いてそれらを単一タンパク質鎖として作製できる合成リンカーにより連結でき、この鎖中では、ＶＬ及びＶＨ領域が対となって１価の分子を形成できる（単一鎖のＦｖ（ｓｃＦｖ））。このような単一鎖の抗体も、抗体の「抗原結合断片」に含まれる。
【００２８】
本明細書において、「ＰＤ−１」は、免疫応答調節のシグナルを介する免疫レセプターであって、ＣＤ２８／ＣＴＬＡ−４ファミリーに属するＩ型膜タンパク質である。本発明における「ＰＤ−１」は、「ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＤｅａｔｈ１」、「ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ１」、「タンパク質ＰＤ−１」、「ＰＤ１」、「ＰＤＣＤ１」、及び「ｈＰＤ−１」と相互に使用され、ＰＤ−１の改変体、アイソフォーム、種ホモログ、及びＰＤ−１と少なくとも１個の共通エピトープを有するアナログを含んでよい。
【００２９】
本明細書において、「抗ＰＤ−１抗体」は、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されず、ＰＤ−１に特異的に結合する任意の抗体であってよい。かかる抗体は、アミノ酸配列の構造の一部を特異的に認識する抗体でもあってもよく、全体構造を特異的に認識する抗体でもよい。また、上記抗体としては、特に限定されるものではないが、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、又はラムブロリズマブが挙げられ、好ましくはニボルマブ又はペムブロリズマブである。なお、抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片である抗体医薬を、以下、単に抗体医薬と称する場合がある。
【００３０】
本明細書において、対象（被験対象とも称する）は、哺乳動物、例えば、げっ歯類、イヌ、ネコ、ウシ、霊長類等であり、好ましくはヒトであり、より好ましくは、免疫チェックポイント阻害薬の投与により治療されうる疾患に罹患しているか、又は該疾患に罹患する可能性のあるヒトであり、さらにより好ましくは、癌、肉腫、又は悪性中皮腫に罹患したヒトである。ここで「治療」には、確立された病態を治療することだけでなく、将来確立される可能性のある病態を予防することをも含む。対象は、好ましくは、免疫チェックポイント阻害薬の投与経験がない対象である。
【００３１】
癌、肉腫、又は悪性中皮腫としては、具体的には、悪性黒色腫（メラノーマ）（例えば、転移性悪性黒色腫、根治切除不能悪性黒色腫）、皮膚有棘細胞癌、乳房外パジェット病、又はメルケル細胞癌等の皮膚癌；腎癌（例えば、腎細胞癌、透明細胞カルシノーマ）；前立腺癌（例えば、ホルモン難治性前立腺アデノカルシノーマ）；乳癌；結腸癌；肺癌（例えば、非小細胞肺癌）；骨癌；膵癌；頭頚部癌；皮膚若しくは眼窩内悪性メラノーマ；子宮癌；卵巣癌；直腸癌；肛門部癌；胃癌；精巣癌；子宮癌；卵管のカルシノーマ；子宮内膜カルシノーマ；子宮頚部カルシノーマ；膣カルシノーマ；外陰部カルシノーマ；食道癌；小腸癌；大腸癌；内分泌系癌；甲状腺癌；副甲状腺癌；副腎癌；柔組織肉腫；多発性骨髄腫；尿道癌；陰茎癌；慢性若しくは急性白血病（例えば、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病）；小児固形癌；進行性固形癌；膀胱癌；腎臓若しくは尿管の癌；腎盂カルシノーマ；尿路上皮癌；中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍；リンパ腫（例えば、リンパ球性リンパ腫、原発性ＣＮＳリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫（ホジキン病）、Ｔ細胞リンパ腫）；胸膜悪性中皮腫；心膜悪性中皮腫；腹膜悪性中皮腫；腫瘍新脈管形成；脊椎腫瘍；脳幹グリオーム；下垂体アデノーマ；カポシ肉腫；扁平上皮癌；扁平細胞癌；アスベスト誘発癌を含む環境誘発癌；又はそれらの組み合わせが挙げられ、好ましくは、皮膚癌、より好ましくは、悪性黒色腫、皮膚有棘細胞癌、乳房外パジェット病、又はメルケル細胞癌である。
【００３２】
生体試料としては、あらゆる体液、例えば、血清、血漿、血液、リンパ液、組織液、体腔液、消化液又は尿等が挙げられ、好ましくは血清である。
免疫チェックポイント阻害薬の投与方法としては、特に限定されるものではないが、静脈投与が好ましい。
【００３３】
生体試料の採取時期は、好ましくは、対象への免疫チェックポイント阻害薬の投与後が挙げられる。
【００３４】
ｓＣＤ１６３のレベルの測定は、ｓＣＤ１６３レベルを定量的又は半定量的に測定できるものであれば特に制限はなく、公知のあらゆる方法を採用することができる。例えば、免疫測定法、電気泳動法、ウエスタンブロッティング法、質量分析法等が挙げられ、好ましくは免疫測定法である。
【００３５】
免疫測定法としては、例えば、免疫比濁測定法、酵素免疫測定法等が挙げられる。免疫測定法は、タンパク質等を抗原として測定する免疫測定法であって、抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を用いることができ、好ましくはそのポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体を用いることができる。抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片は、市販品の抗体であることもできるし、また、周知の方法により製造することもできる。
【００３６】
免疫比濁測定法としては、生物学的試料におけるｓＣＤ１６３と、抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片とを反応させて抗原抗体反応させ、その結果、発生する濁りの度合いからｓＣＤ１６３のレベルを測定するものであれば、とくに限定されない。そのような方法として、ＴＩＡ法、ラテックス免疫比濁法、ネフェロメトリー法を例示することができる。ＴＩＡ法は、免疫比濁測定法において濁りの度合いを特定の吸光度において測定する方法である。また、ラテックス免疫比濁法は、免疫比濁測定法において、抗体として抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片をラテックス粒子に結合させたものを用いて測定する方法である。さらに、ネフェロメトリー法は、免疫比濁測定法において濁りの度合いを、一定角度以上の大きさに散乱した光を集めて散乱光として測定する方法である。
【００３７】
酵素免疫測定法としては、プレートを支持体とした、ＥＬＩＳＡ法等のＥＩＡ法を挙げることが出来る。はじめに固相に直接又は間接的に抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を一次抗体として結合させる。ｓＣＤ１６３を酵素免疫測定法で測定する場合には、例えば、固相に結合した一次抗体に、ｓＣＤ１６３を測定するための生物学的試料を加えて反応させる。一定時間反応させた後、固相を洗浄し二次標識抗体を加えて二次反応させる。固相を再度洗浄し、固相に結合した標識部分を測定する。
【００３８】
上記二次標識抗体を用いる免疫測定法において、標識物質としては西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）アルカリホスファターゼ等の酵素を用いることができる。例えば、ＨＲＰ標識抗体を利用した場合には基質に既知のＤＡＢ、ＴＭＢ、ＯＰＤ等を用いることができる。また、標識物質には、ＨＲＰのような酵素だけではなく、金コロイド、ユーロピウム等の標識金属、ＦＩＴＣ、ローダミン、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ａｌｅｘａ、ＧＦＰ等の化学的、生物的各種蛍光物質、 32Ｐ、 51Ｃｒ等の放射性物質等標識可能なあらゆる物質が挙げられる。また、本発明で標識物質を用いる場合、アビジン−ビオチン系又はストレプトアビジン−ビオチン系を用いることもできる。その場合には、例えば、ビオチンで標識された二次標識抗体とともに、ＨＲＰ等の酵素で標識されたストレプトアビジン又はアビジンを用いることができる。また、ルシフェラーゼ標識抗体による化学発光イムノアッセイ、蛍光色素標識抗体による蛍光イムノアッセイ、フローサイトメトリー法等を挙げることができる。
【００３９】
電気泳動法としては、一般的にはＳＤＳ−ＰＡＧＥ法を挙げることができる。そのほかにもセルロース・アセテートを支持体としたもの等がある。タンパク質の染色にはクマシー・ブリリアント・ブルー、ポンソーＳ染色、アミドブラック染色、直接酵素活性を利用する方法等がある。
【００４０】
また、ウエスタンブロッティング法による検出も有効である。すなわち、電気泳動をしたゲルをニトロセルロース膜、ＰＶＤＦ膜等に転写し、次いで、一次抗体である抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片、さらに、二次標識抗体であるＨＲＰ標識抗ＩｇＧ等を反応させ、次いで、ＨＲＰ発色試薬で発色させ、ｓＣＤ１６３に相当するバンドの発色度合いによりｓＣＤ１６３を測定することができる。
【００４１】
質量分析法としては、例えば、質量分析器を使用した分析方法を挙げることができる。例えば、表面増強レーザー脱離イオン化（Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）飛行時間型質量分析計（ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法）、マトリックス支援レーザーイオン化（Ｍａｔｒｉｘ−Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）飛行時間型質量分析計（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法）、ＥＳＩ法（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ  Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）を用いる方法を例示できる。ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法は、チップ表面の官能基に目的物質を均一に捕捉したまま不純物を除去し、レーザー光でイオン化するため、再現性のあるＳ／Ｎ比の高いイオンスペクトルが得られるので好ましい。
【００４２】
上述の測定により得られたｓＣＤ１６３のレベルのデータを用いて、対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定することができる。
【００４３】
かかる判定としては、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値よりも高い場合、対象における疾患の治療に免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性（蓋然性）が高いと判定することが挙げられる。或いは、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値以下である場合、対象における疾患の治療に免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が低いと判定することが挙げられる。
【００４４】
カットオフ値（閾値）は、薬物に対する奏功者と非奏功者とを区別する値であるが、測定対象、測定方法の種類等の諸条件により変動するものであるため、条件に合わせて予め設定する必要がある。カットオフ値は、測定対象（患者の数、年齢、性別、体重、健康状態、疾患の状態）、測定条件（例えば測定する抗体の種類及び感度）、統計的手法等により変動するため、本発明は、これらの諸条件により変動し得る任意のカットオフ値を用いた発明を広く包含し、特定の値に限定されない。本発明の一実施形態において、例えば、免疫チェックポイント阻害薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが、投与前の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルに比べて好ましくは１．０倍を超え、より好ましくは１．１倍以上高い場合、当該免疫チェックポイント阻害薬が当該対照の治療に有効である可能性が高いと判定することができる。また、本発明の一実施形態においては、免疫チェックポイント阻害薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度が、例えば、投与前の対象の生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度に比べて３ｎｇ／ｍＬ以上高い場合、当該免疫チェックポイント阻害薬が当該対照の治療に有効である可能性が高いと判定することができる。また、任意選択で副作用の観点から上記とは別のカットオフ値を設け、対象の生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが、当該別のカットオフ値以上の場合に、副作用が発生している可能性が高いと判定をしてもよい。当該カットオフ値も限定されないが、例えば、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが、投与前の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルに比べて好ましくは１．２倍以上、より好ましくは１．５倍以上、さらに好ましくは１．６倍以上、さらにより好ましくは１．８倍以上、さらにより一層好ましくは２倍以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと判定することができる。また、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度が、投与前の対象の生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度に比べて好ましくは１０ｎｇ／ｍＬ、より好ましくは１５ｎｇ／ｍＬ、さらに好ましくは２０ｎｇ／ｍＬ、さらにより好ましくは４０ｎｇ／ｍＬ以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと判定することができる。
【００４５】
当業者はカットオフ値を、予め測定しておいたｓＣＤ１６３のレベルから種々の統計解析手法により求めることができる。例えば、カットオフ値としては、免疫チェックポイント阻害薬を投与された対象におけるｓＣＤ１６３のレベルの平均値又は中央値；免疫チェックポイント阻害薬を投与された対象のｓＣＤ１６３のレベルと、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果（腫瘍縮小効果、生存期間延長効果等）との関係から感度と特異度の和が最大となるようＲＯＣ（Ｒｅｃｅｉｖｅｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）分析に基づき求められる値；免疫チェックポイント阻害薬を投与された対象におけるｓＣＤ１６３のレベルと、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果（腫瘍縮小効果、生存期間延長効果等）との関係から、カイ二乗検定に基づき求められる値（このうちログランク検定でＰ値が最小となる値、Ｐ値がある水準以下になる値（例えばＰ値が０．０５以下になる値、Ｐ値が０．０１以下になる値）等））；が挙げられる。
【００４６】
カットオフ値は１つであってもよいし、治療効果の種類、投与する抗体医薬の種類、抗体医薬を投与する対象の状態、又はそれらの組合せに応じて複数設定することもできる。
【００４７】
上記判定工程により、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値よりも高く、対象における疾患の治療に免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定された場合、かかる対象には免疫チェックポイント阻害薬を投与するよう決定し得る。
【００４８】
免疫チェックポイント阻害薬の有効量は、特に限定されず、薬剤の種類、純度、副作用の程度、対象の種類、性質、性別、年齢、症状、併用薬剤の有無、前治療歴等に応じて当業者によって、適宜決定される。例えば、かかる有効量としては、０．１〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日、好ましくは１．０〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日を１回又は数回等が挙げられる。
【００４９】
なお、上記抗体医薬による治療は、その実施期間中、又は実施期間の前後に腫瘍を切除する手術の有無を問わない。主に延命効果を目的とした腫瘍の摘出を伴わない治療であっても、上記抗体医薬による治療の後に小さくなった腫瘍の摘出を行ってもよいし、再発・転移抑制効果を目的とした腫瘍の摘出の後に予防的に上記抗体医薬による治療を行ってもよい。
【００５０】
本明細書において「治療効果」は「有効性」と互換的に使用することができ、腫瘍縮小効果、再発・転移抑制効果、延命効果等により評価することができる。「対象における疾患の治療に免疫チェックポイント阻害薬が有効である」とは、ｓＣＤ１６３のレベルがカットオフ値を超える患者における治療効果が、ｓＣＤ１６３のレベルがカットオフ値以下である患者における治療効果と比較して統計上有意な程度の差をもって顕著に優れていることをいう。
【００５１】
上記判定工程により、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値以下である場合、かかる対象へは免疫チェックポイント阻害薬を投与しないよう決定し得る。
【００５２】
例えば、進行性黒色腫の患者の治療の場合、ある免疫チェックポイント阻害薬を投与した後に、患者のｓＣＤ１６３のレベルを測定し、当該免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定されている間は当該免疫チェックポイント阻害薬（例えば、ニボルマブ、又はペムブロリズマブ）を投与し、否定判定の患者（初回投与後から否定判定である患者、及び初回投与後は有効判定であったが複数回投与後に否定判定となった患者を含む）には別のイピリムマブ等の免疫チェックポイント阻害薬を投与すれば、より効果的な治療を行うことができる。
【００５３】
このように、本発明の第一態様の対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法によれば、ｓＣＤ１６３のレベルに基づいて対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定することができ、疾患治療における対象ごとの適切な薬剤の選択ができ、無用な投薬による副作用の発生等を未然に回避することができる。このため、適切な投与計画の立案及び適切な投与計画への変更が可能となる。
【００５４】
本発明の第一態様の対象は、疾患の治療における治療薬選択のための補助方法と見ることもできる。
【００５５】
本発明の第二態様によれば、ｓＣＤ１６３を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するためのバイオマーカーが提供される。
【００５６】
本発明の第三態様によれば、抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗体結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するための診断薬が提供される。
【００５７】
上記診断薬はｓＣＤ１６３のレベルの測定に使用することができるため、上記に説明した各種の測定方法を行うことができる。上記測定方法としては、例えば、免疫測定法、電気泳動法、ウエスタンブロッティング法、質量分析法等が挙げられ、好ましくは免疫測定法である。
【００５８】
かかる診断薬の態様は、第一態様の治療効果を判定する方法に関する記載に準じて実施することができる。
【００５９】
本発明の第四態様によれば、抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定用キットが提供される。
【００６０】
かかるキットは、本発明の第一態様の判定方法を実施するために好適に用いられる。
【００６１】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片は、対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３タンパク質のレベルを測定することができる。
【００６２】
上記キットは、上記抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片からなる一次抗体以外に、当該一次抗体に対する二次抗体をさらに含んでもよい。二次抗体は、ルシフェラーゼ標識、放射性標識、蛍光標識、酵素標識等によって標識されていることが好ましい。
【００６３】
上記キットは、本発明の第一実施形態の判定方法を実施するための手順等を記載した取扱説明書をさらに含んでよい。
【００６４】
本発明の第五態様によれば、上記第一態様の判定方法により抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片が有効である可能性が高いと判定された対象に、該抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片を投与することを含む対象の治療方法が提供される。
【００６５】
対象は、哺乳動物、例えば、げっ歯類、イヌ、ネコ、ウシ、霊長類等であり、好ましくはヒトであり、より好ましくは、抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片の投与により治療されうる疾患に罹患しているか、又は該疾患に罹患する可能性のあるヒトであり、さらにより好ましくは、癌、肉腫、又は悪性中皮腫に罹患したヒトである。疾患の例、抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片の投与量及び投薬形式については第一実施形態について説明した通りである。
【実施例】
【００６６】
以下、本発明を実施例に基づきより詳細に説明するが、本発明がこれら実施例に限定されないことはいうまでもない。【００６７】
＜イントロダクション＞
PD-1／PD-L1経路は、腫瘍免疫応答において重要な役割を果たす。したがって、ニボルマブ、ペンブロリズマブ等の抗PD-1抗体は、進行した黒色腫を含むさまざまな癌の治療に広く使用されている。ニボルマブは転移性メラノーマの患者の生存期間を有意に長くし、イピリムマブとの併用投与の効果も改善させる。イピリムマブは、細胞傷害性Tリンパ球抗原（CTLA-4）をブロックしてT細胞を活性化し増加させ、制御性T細胞（Treg）の機能を抑制する完全ヒト化免疫グロブリン（Ig）G1モノクローナル抗体である。以前の報告では、イピリムマブが、特に他の抗メラノーマ試薬と併用すると、進行性メラノーマの治療に有用であることを示唆した。さらに、ニボルマブとイピリムマブを用いた併用療法は、メラノーマの脳への未治療の転移に対する奏功率が増加したとしている。しかし、ニボルマブ耐性黒色腫患者におけるイピリムマブの有効性は、目的の腫瘍が進行した後では非常に低い。進行性メラノーマの患者では、ニボルマブとイピリムマブの同時投与と計画的切り替えによるニボルマブとイピリムマブの連続投与のいずれも、免疫関連有害事象（irAE）が高頻度に生ずるため、ニボルマブからイピリムマブへ計画的に切り替える前に、ニボルマブ単剤療法の有効性を決めることが重要である。【００６８】
腫瘍関連マクロファージ（TAM）は、その不均一性と可塑性が特徴であり、癌関連因子、間質性因子、または感染への曝露により分極化した表現型に機能的リプログラムされ、腫瘍の微小環境を維持するのに重要な役割を果たす様々なケモカインを産生させる。TAMにおけるPD-1の発現は、M2マクロファージの分極化における重要な因子の1つであるので、抗PD1抗体を投与するとTAMを再び分極化させ、メラノーマ患者のTAMを活性化させ得る。皮膚癌におけるTAMの主要集団はCD163 + M2マクロファージであり、かつ、可溶性分化クラスター163（sCD163）はタンパク質分解による放出の結果として血清中に現れるTAMマーカーなので、本発明者らは血清sCD163が疾患の初期段階でのニボルマブの有効性のための判定マーカーとなり得ると仮定した。本研究では、ニボルマブで治療した、進行皮膚黒色腫59例および進行粘膜黒色腫16例についてsCD163の血清レベルを分析した。【００６９】
＜患者および方法＞
＜ヒト実験におけるエシクスステートメント＞
このヒトにおける研究のプロトコルは、日本の仙台市にある東北大学大学院医学研究科倫理委員会によって承認された（許可番号：2017-1-064）。すべての方法は関連する指針および規制に従って行われた。全患者が書面によるインフォームドコンセントを提供した。【００７０】
＜患者＞
ニボルマブで治療した患者のデータは日本の8つの臨床現場から集めた。対象となる患者は、切除不能なステージIIIの黒色腫、切除可能であったが切除可能を辞退した患者、またはアクセシブルな皮膚、皮下および/または結節病変を伴うステージIVの黒色腫とした（ステージはAJCCステージングマニュアル、第7版、2011に従って行った）。全患者は、2 mg / kgのニボルマブとそれに続く3週間の休薬期間、または3 mg / kgのニボルマブとそれに続く2週間の休薬期間を受けた。どちらも日本で承認された投与スケジュールである。患者の血清は、0日目および42日目に採取した。ニボルマブの奏功は、固形腫瘍における反応評価基準（RECIST）に従って評価した。【００７１】
＜sCD163の血清レベル＞
ニボルマブ投与後0日目および42日目に、血清を保存し、製造者（カタログ番号DY1607; R&D Systems、ミネソタ州、ミネアポリス）により提供されたプロトコルに従って酵素結合イムノアッセイ（ELISA）により可溶性sCD163の血清レベルを分析した。各ドナーからのデータは、デュプリケートのアッセイの平均とした。42日目の血清レベルをベースライン（0日目）と比較し、統計的に分析した。【００７２】
＜統計学的方法＞
受信者動作特性（ROC）曲線を用いて、sCD163の血清レベルおよび曲線下面積（AUC）でのカットオフ値を計算した。最大インデックス値のポイントを決定するために、Youdenのインデックス（感度+特異度-1）を使用してカットオフを決定した。ROC曲線を確立し、ニボルマブを投与された患者のsCD163の血清レベルを評価した。２群を単一比較するために、マン-ホイットニーＵ検定を使用した。有意水準はp <0.01に設定した。全ての統計分析は、JMPバージョン14.1ソフトウェア（SAS Institute、Tokyo、Japan）を用いて行った。【００７３】
＜結果＞
＜患者＞
59人の皮膚黒色腫患者（表１）および16人の非皮膚（例えば、消化管、膣、鼻腔）黒色腫患者（表２）を含む、75人のニボルマブ治療を受けた黒色腫患者からデータを収集した。平均患者年齢は、皮膚黒色腫で68.0歳（31〜93歳の範囲）、非皮膚黒色腫で66.0歳（54〜82歳の範囲）であった。皮膚黒色腫および非皮膚黒色腫の男性患者の割合は、それぞれ57.6％および56.3％であった。最も一般的な原発腫瘍部位は四肢（55.9％）であり、続いて頭頸部（15.3％）、体幹（11.9％）、粘膜起源（8.5％）、および起源不明（8.5％）であった。【００７４】
【表１】
2020101039.tif 000002
【００７５】
【表２】
2020101039.tif 000003
【００７６】
＜初回投与後3ヶ月間のニボルマブの有効性＞
皮膚黒色腫患者では、完全奏功（CR）が患者1人（1.7％; 95％信頼区間[CI]、0-3.4％）に見られ、部分奏功（PR）が患者12人（20.3％; 95％CI, 0〜40.6％）、安定（SD）が患者16人（27.1％； 95％CI、0〜54.2％）、進行性疾患（PD）が患者29人（49.2％； 95％CI、0〜98.4％）に見られた。よって、初回投与後3ヶ月の奏効率（ORR）は22.0％（95％CI、0〜44.0％）であった。個々の患者の腫瘍奏功を表１に示す。粘膜黒色腫を有する患者において、PRは患者4人（25.0%、95%CI、0〜50.0%）に見られ、SDは患者5人（31.3%; 95%CI、0-62.6%）、PDは患者7人（43.8％; 95％CI、0-87.6％）に見られた。よって、初回投与後3ヶ月目のORRは25.0％（95％CI、0〜50.0％）であった。個々の患者の腫瘍奏功を表２に示す。【００７７】
＜sCD163の血清レベル＞
sCD163の血清中濃度を用いて、ニボルマブを使って治療したメラノーマ患者の早期奏功を判定できるかどうかを決定するために、ニボルマブで治療された進行性メラノーマ患者75人のレベルを評価した。ベースライン（０日目）と比較して、42日目のsCD163の血清レベルは、進行性皮膚黒色腫患者のうち奏功を示す群において有意に増加した（p <0.0001；図１ａ）が、進行粘膜黒色腫患者では、血清sCD163レベルの有意差は見られなかった。（図3ａ）。各患者におけるニボルマブの初回投与後３ヶ月における血清sCD163の増加および有効性を前記表１および２に示す。非奏功者と奏功者を区別するため、42日目と０日目との間のsCD163の閾値変化をみたところ、皮膚黒色腫および非皮膚黒色腫において、それぞれ3.07±0.07ng/mLおよび0.47±0.05 ng / mLであった。皮膚メラノーマコホートにおいて、sCD163血清レベルの平均変化率は、無奏功者の101.0％に対し、奏功を示した患者は144.6％であった（表1）。粘膜黒色腫コホートでは、sCD163血清レベルの平均変化率は、奏功を示した患者で84.1％、無奏功者で122.3％であった（表2）。皮膚黒色腫における増加した血清sCD163の閾値は3.07±0.07ng / mLであったが、非皮膚黒色腫における血清sCD163の閾値は0.47±0.05ng / mLであった。皮膚黒色腫における血清sCD163の感度および特異性はそれぞれ84.6%および87.0%であり（p = 0.0030；図１ｂ）、一方、非皮膚黒色腫における血清sCD163の感度および特異性はそれぞれ100%および78.4%であった（p = 0.0507；図3ｂ）。【００７８】
＜考察＞
ニボルマブは、他の抗メラノーマ薬（例えばイピリムマブおよびダカルバジン）よりも高い有効性を示し、BRAF / MEK阻害薬（例えばベムラフェニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ）よりも抗腫瘍反応を長期間誘導する。腫瘍専門医は、転移性黒色腫患者の抗腫瘍免疫反応を増強する薬剤とニボルマブの併用に特に興味を持っていた。ニボルマブの有効性は、イピリムマブ（57.7％）と組み合わせると有意に増加するように見えるが、残念ながら、この特定の組み合わせ（59.0％）では、重度の治療関連AEの発生率も有意に増加する。イピリムマブによる重篤な有害事象を回避し、ニボルマブからイピリムマブへの計画的切り替えを準備するためには、判定バイオマーカーを用いて、初回投与後2〜3ヵ月後にニボルマブ単独療法の有効性を評価する必要がある。【００７９】
CD163は、スカベンジャー受容体のシステインリッチファミリーの一員であり、単球/マクロファージ系譜の細胞でのみ発現する。以前報告されたように、転移性メラノーマでは、かなりの数のCD163 + TAMが転移性メラノーマに存在し、間質性因子により活性化され、タンパク質分解放出の結果としてsCD163の血清レベルの上昇が引き起こされる。さらに、Jensen et al.は、以前に、sCD163およびCD163 + TAMを早期の皮膚黒色腫の予後マーカーとして報告している。特に、Gordonらが報告したように、PD-1発現はM2-分極化としてのTAMを維持する重要な因子であり、PD-1 / PD-L1の遮断はTAMのM1-分極化活性化マクロファージへの変換をもたらす。メラノーマのTAMは、不均一な、主に免疫抑制性の集団を構成するため、また、免疫調節薬によるTAMの活性化サブタイプへのリポラリゼーションは、自然発生のマウスメラノーマモデルにおいてメラノーマ増殖を有意に抑制すると報告されているため、本発明者らは黒色腫におけるニボルマブの標的のひとつがCD163 + TAMを活性化しているという仮説を立てた。【００８０】
本発明者らの仮説を証明するために、ニボルマブで治療した進行皮膚黒色腫59例および進行粘膜黒色腫16例におけるsCD163の血清レベルを分析した。sCD163の血清レベルは、皮膚メラノーマの非奏功群と比較して、奏功群のニボルマブ初回投与後6週間で有意に増加した。対照的に、非皮膚黒色腫については、ニボルマブ奏功者と非奏功者との間に有意差は見られなかった。興味深いことに、非皮膚黒色腫では、非奏功者におけるsCD163の血清レベルは奏功者における血清レベルよりもさらに高い傾向があった。この矛盾は、各臓器の腫瘍微小環境においてTAMを刺激する可能性がある癌間質の違いによって説明されるかもしれず、そのような研究が今後期待される。【００８１】
本結果によって、進行性皮膚黒色腫において最初の投与後３ヶ月でニボルマブの有効性を評価するための判定バイオマーカーsCD163が示された。メラノーマがニボルマブに対する耐性を発現する前であれば、イピリムマブとその後のニボルマブの連続投与は進行したメラノーマに対してのみ有効であり、かつ、イピリムマブの投与はニボルマブよりも頻繁にirAEの発症をもたらすので、最初の腫瘍評価前のニボルマブの有効性の判定をすれば、患者がニボルマブからイピリムマブ療法への計画的切り替えにうまく適応するかどうかを決定することができる。本研究は、sCD163が、ニボルマブおよびイピリムマブを使用する抗黒色腫免疫療法から効果が得られる可能性が最も高いこれらの皮膚黒色腫患者の選択のための有用なバイオマーカーであり得ることを示唆した。【００８２】
【表３−１】
2020101039.tif 000004
【００８３】
【表３−２】
2020101039.tif 000005
【００８４】
［まとめ］
ニボルマブ、ペムブロリズマブ等のPD-1に対する抗体は、進行性黒色腫を含むさまざまな癌の治療に広く使用されている。ニボルマブは転移性黒色腫患者の生存期間を有意に長くし、リピリムマブの連続投与は適切な時期に切り替えると効果を改善できる。したがって、初回投与後すぐにニボルマブの有効性を評価するためにバイオマーカーが必要である。本研究では、ニボルマブを用いて治療した、59例の進行性皮膚黒色腫および16例の進行性粘膜黒色腫における可溶性分化クラスター163（sCD163）の血清レベルを分析した。皮膚メラノーマにニボルマブを初回投与した後の非奏功者と奏功者を比較すると、奏功者では6週間後にsCD163の血清レベルが有意に増加した。これに対し、非皮膚メラノーマ患者では、奏功者と非奏功者との間に有意差は見られなかった。これらの結果は、sCD163が、抗黒色腫免疫療法の効果が表れる可能性が最も高い進行性皮膚黒色腫を有する患者を選別するためのバイオマーカーとして有用であろうことを示唆している。
【図１】
2020101039.tif 000006
【図２】
2020101039.tif 000007
【図３】
2020101039.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月10日(2020.9.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法であって、
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルを測定することを含む方法（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認する方法を除く）。
【請求項２】
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが予め設定されたカットオフ値よりも高い場合、前記対象における疾患の治療に当該免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定すること
を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｓＣＤ１６３を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するためのバイオマーカー（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するためのバイオマーカーを除く）。
【請求項４】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗体結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するための診断薬（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するための診断薬を除く）。
【請求項５】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定用キット（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するためのキットを除く）。
【手続補正書】
【提出日】令和3年5月14日(2021.5.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定する方法であって、
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３の濃度又は量を測定することを含み、かつ
対象から採取された生体試料におけるｓＣＤ１６３の濃度又は量が予め設定されたカットオフ値よりも高い場合、前記対象における疾患の治療に当該免疫チェックポイント阻害薬が有効である可能性が高いと判定することを含む方法（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認する方法を除く）。
【請求項２】
治療効果が腫瘍縮小効果、再発・転移抑制効果又は延命効果により評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｓＣＤ１６３を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するためのバイオマーカーであって、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定が請求項１に記載の方法により行われる、バイオマーカー（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するためのバイオマーカーを除く）。
【請求項４】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗体結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果を判定するための診断薬であって、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定が請求項１に記載の方法により行われる、診断薬（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するための診断薬を除く）。
【請求項５】
抗ｓＣＤ１６３抗体又はその抗原結合断片を含む、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定用キットであって、免疫チェックポイント阻害薬の治療効果の判定が請求項１に記載の方法により行われる、キット（ただし、免疫チェックポイント阻害薬による副作用の発症、抑制、保持、遅延又は改善を予測又は確認するためのキットを除く）。
【国際調査報告】
2020101039.tif 000009
2020101039.tif 000010
2020101039.tif 000011
2020101039.tif 000012
2020101039.tif 000013