(57)【要約】  骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物を提供する。ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）属細菌を有効成分として含有する、組成物。
2020203792.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、骨格筋遅筋化用組成物：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項２】
下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、持久力向上用組成物：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項３】
下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用組成物：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項４】
前記組成物が、医薬組成物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、飲食品組成物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記成分（Ａ）が、前記細菌である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記成分（Ａ）が、前記細菌の死菌体を含有する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
下記成分（Ａ）を対象に投与する工程を含む、骨格筋を遅筋化する方法：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項１１】
下記成分（Ａ）を対象に投与する工程を含む、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を予防、改善、および／または治療する方法：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項１２】
筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療のための、下記成分（Ａ）の使用：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項１３】
骨格筋の遅筋化のための、下記成分（Ａ）の使用：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【請求項１４】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物の製造のための、下記成分（Ａ）の使用：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
筋肉は、立つ、歩く、姿勢を維持する等の日常の動作の基盤となっている。よって、生活の質を維持するために、できるだけ筋肉量を維持し、可能であれば筋肉を増量させたいという要望が老若男女を問わずある。また、積極的に運動を好むヒトやアスリート（例えば、運動選手、スポーツ愛好家、競技者等）は、運動成績を上げるため、できるだけ筋肉を増量させたいという要望がある。【０００３】
さらに、健康志向が強まるなか、クオリティ・オブ・ライフ（quality of life；ＱＯＬ）の向上、フレイル（健常な状態と要介護状態との中間の状態）の改善、または運動器症候群（ロコモティブシンドローム；locomotive syndrome）の対策において、いかにして持久力や筋力の低下を維持するかが課題となる。【０００４】
筋肉は、筋線維の束から構成されている。筋線維は、収縮張力、収縮速度、疲労耐性等の性質に基づいて、遅筋線維（Type I）と速筋線維（Type II）とに分類される。遅筋線維の多い筋肉は、収縮力や収縮速度は低いが疲労しにくいという性質を有し、持久力に貢献している。一方、速筋線維の多い筋肉は、収縮力や収縮速度は大きいが疲労しやすい。また、遅筋線維の多い筋肉は抗重力筋として作用している。廃用性筋萎縮の患者では、筋肉が遅筋優位から速筋優位に変化し、且つ速筋は遅筋に比較し不活動により萎縮し易いため、歩行困難や寝たきりなどの日常生活に支障をきたす状態に至る。遅筋を維持または増強すれば、持久力と筋力を保つことにより、運動不足や日常動作の困難を予防または改善することができる。【０００５】
骨格筋の遅筋化を促進し得る物質としては、ショウガ抽出物等が知られている（特許文献１）。【０００６】
また、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）B-3の投与により筋肉量が増大することが報告されている（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開2014-101346
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Minami J et al. Biosci Microbiota Food Health. 2018;37(3):67-75.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者等は、鋭意研究を進めた結果、ビフィドバクテリウム属細菌の投与により骨格筋を遅筋化する効果等が得られることを見出し、本発明を完成させた。【００１１】
すなわち、本発明は、以下の通り例示できる。
本発明の一態様は、下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、骨格筋遅筋化用組成物である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、持久力向上用組成物である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、下記成分（Ａ）を有効成分として含有する、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用組成物である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
前記組成物は、医薬組成物であることを好ましい態様としている。
前記組成物は、飲食品組成物であることを好ましい態様としている。
前記組成物は、前記成分（Ａ）が、前記細菌であることを好ましい態様としている。
前記組成物は、前記成分（Ａ）が、前記細菌の死菌体を含有することを好ましい態様としている。
前記組成物は、前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）であることを好ましい態様としている。
前記組成物は、前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175であることを好ましい態様としている。
本発明の一態様は、下記成分（Ａ）を対象に投与する工程を含む、骨格筋を遅筋化する方法である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、下記成分（Ａ）を対象に投与する工程を含む、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を予防、改善、および／または治療する方法である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療のための、下記成分（Ａ）の使用である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、骨格筋の遅筋化のための、下記成分（Ａ）の使用である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
本発明の一態様は、前記組成物の製造のための、下記成分（Ａ）の使用である：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】各群における遅筋繊維割合（％）を示す図。データは各群７匹のラットから取得し、平均値±標準誤差として示した。アスタリスク（＊）はDunnett法にて有意差があること（P<0.05）を示す。
【図２】コントロール群における遅筋繊維染色画像（写真）。
【図３】ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の生菌体投与群における遅筋繊維染色画像（写真）。
【図４】ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の加熱殺菌体投与群における遅筋繊維染色画像（写真）。
【図５】各群におけるPGC-1α発現量の相対値を示す図。データは各群１２匹または１３匹のラットから取得し、平均値±標準誤差として示した。アスタリスク（＊）はDunnett法にて有意差があること（P<0.05）を示す。
【図６】各群におけるリン酸化AMPK量の相対値を示す図。データは各群６匹のラットから取得し、平均値±標準誤差として示した。アスタリスク（＊）はDunnett法にて有意差があること（P<0.05）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。なお、本発明に関する下記の説明は、特記しない限り、いずれも単独で採用してもよく、適宜組み合わせて採用してもよい。
【００１４】
＜１＞有効成分
本発明においては、下記成分（Ａ）を有効成分として利用する：
（Ａ）ビフィドバクテリウム属細菌（Bifidobacterium）および／または該細菌による生産物。
【００１５】
すなわち、上記成分（Ａ）を「有効成分」ともいう。
【００１６】
有効成分を利用することにより、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象において骨格筋を遅筋化することができる、すなわち、当該対象において骨格筋を遅筋化する効果が得られる。同効果を、「骨格筋遅筋化効果」ともいう。骨格筋としては、体幹筋（すなわち、体幹の骨格筋）や体肢筋（すなわち、上肢および下肢の骨格筋）が挙げられる。下肢の骨格筋としては、腓腹筋（Gastrocnemius muscle）やヒラメ筋（Soleus muscle）が挙げられる。骨格筋遅筋化効果は、全部の骨格筋（すなわち、全身の骨格筋）において得られてもよく、一部の骨格筋において得られてもよい。骨格筋遅筋化効果は、例えば、遅筋の比率が高い部位において得られてもよく、速筋の比率が高い部位において得られてもよく、それらの両方において得られてもよい。骨格筋遅筋化効果は、例えば、少なくとも、腓腹筋および／またはヒラメ筋において得られてもよい。「骨格筋の遅筋化」とは、骨格筋における遅筋の量の増大を意味する。言い換えると、「骨格筋の遅筋化」とは、有効成分の非投与時と比較して、有効成分の投与時において骨格筋における遅筋の量が大きいことを意味する。「有効成分の投与時」とは、有効成分の投与を十分に実施した後を意味してよく、具体的には、後述する本発明の方法に記載の条件で有効成分の投与を実施した後を意味してよい。「有効成分の非投与時」とは、簡便には、有効成分の投与前を意味してよい。しかし、「有効成分の非投与時」とは、正確には、有効成分を投与せずに有効成分の投与期間と同じ期間が経過した後という仮定条件を意味してよい。すなわち、例えば、有効成分の非投与により骨格筋における遅筋の量が低下する場合にあっては、「骨格筋の遅筋化」とは、有効成分の投与により当該低下の程度が軽減されていれば足り、有効成分の投与前と比較して有効成分の投与後において骨格筋における遅筋の量が大きいことを要しない。そのような場合としては、遅筋の筋萎縮の発症または進行が有効成分の投与により軽減される場合が挙げられる。「骨格筋における遅筋の量」とは、骨格筋中の遅筋の絶対量を意味してもよく、骨格筋中の遅筋の相対量（すなわち、骨格筋の量に対する遅筋の量の比率）を意味してもよく、それらの両方を意味してもよい。すなわち、有効成分の利用により、遅筋の絶対量および／または相対量が増大してよい。有効成分の利用により、少なくとも、遅筋の相対量が増大してもよい。遅筋の量の増大に伴って骨格筋の総量が増大してもよい。遅筋の量としては、遅筋繊維の数、遅筋繊維の断面積、遅筋繊維の体積が挙げられる。すなわち、例えば、骨格筋中の遅筋の相対量としては、骨格筋における筋繊維の数に対する遅筋繊維の数の比率、骨格筋の断面積に対する遅筋繊維の断面積の比率、骨格筋の体積に対する遅筋繊維の体積の比率が挙げられる。「遅筋繊維」とは、Type I筋線維を意味する。有効成分の利用により、例えば、これらのパラメータの１つまたはそれ以上が増大してよい。有効成分の利用により、例えば、少なくとも、遅筋繊維の数が増大してもよい。遅筋の量は、例えば、公知の手法により測定することができる。遅筋の量を測定する手法としては、筋生検、磁気共鳴画像法（Magnetic Resonance Imaging；MRI）、フィールド・テスト���挙げられる。骨格筋における筋繊維の数に対する遅筋繊維の数の比率は、具体的には、例えば、実施例に記載の手法により測定することができる。有効成分の投与時における骨格筋における遅筋の量は、例えば、有効成分の非投与時を１００％とした場合に、１０１％以上、１０３％以上、１０５％以上、１１０％以上、１１５％以上、１２０％以上、１２５％以上、または１３０％以上であってよい。また、骨格筋の遅筋化は、例えば、疲労耐性の向上、骨格筋における酸化酵素活性の向上、または骨格筋におけるミトコンドリア数の向上を指標として測定することもできる。
【００１７】
また、有効成分を利用することにより、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象においてAMP活性化プロテインキナーゼ（AMP-activated protein kinase；AMPK）の活性化が促進されてよい、すなわち、当該対象においてAMPKの活性化が促進される効果が得られてよい。同効果を、「AMPK活性化促進効果」ともいう。AMPKの活性化は、特に、骨格筋において促進されてよい。AMPKの活性化の促進により骨格筋遅筋化効果が得られてもよい。「AMPKの活性化の促進」とは、活性型AMPK（すなわち、リン酸化AMPK）の量の増大を意味する。言い換えると、「AMPKの活性化の促進」とは、有効成分の非投与時と比較して、有効成分の投与時において活性型AMPKの量が大きいことを意味する。「活性型AMPKの量」とは、特記しない限り、全AMPK量に基づいて標準化した値を意味してよい。活性型AMPKの量は、例えば、公知の手法により測定することができる。活性型AMPKの量を測定する手法としては、ウェスタンブロッティングが挙げられる。活性型AMPKの量は、具体的には、例えば、実施例に記載の手法により測定することができる。有効成分の投与時における活性型AMPKの量は、例えば、有効成分の非投与時を１００％とした場合に、１０１％以上、１０３％以上、１０５％以上、１１０％以上、１１５％以上、１２０％以上、１２５％以上、または１３０％以上であってよい。
【００１８】
また、有効成分を利用することにより、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象においてペルオキシソーム増殖因子活性化レセプターγ共役因子−１α（PGC-1α）の発現が促進されてよい、すなわち、当該対象においてPGC-1αの発現が促進される効果が得られてよい。同効果を、「PGC-1α発現促進効果」ともいう。PGC-1αの発現は、特に、骨格筋において促進されてよい。PGC-1αの発現の促進により骨格筋遅筋化効果が得られてもよい。「PGC-1αの発現の促進」とは、PGC-1αの発現量の増大を意味する。言い換えると、「PGC-1αの発現の促進」とは、有効成分の非投与時と比較して、有効成分の投与時においてPGC-1αの発現量が大きいことを意味する。「PGC-1αの発現量」とは、特記しない限り、GAPDH等のハウスキーピング遺伝子の発現量に基づいて標準化した値を意味してよい。PGC-1αの発現量は、例えば、遺伝子の発現量を測定する公知の手法により測定することができる。遺伝子の発現量を測定する手法としては、mRNA量を測定する手法やタンパク質量を測定する手法が挙げられる。遺伝子の発現量を測定する手法として、具体的には、ノーザンハイブリダイゼーション、マイクロアレイ、RT-PCR、RNA-seq、ウェスタンブロッティングが挙げられる。PGC-1αの発現量は、具体的には、例えば、実施例に記載の手法により測定することができる。有効成分の投与時におけるPGC-1αの発現量は、例えば、有効成分の非投与時を１００％とした場合に、１０１％以上、１０３％以上、１０５％以上、１１０％以上、１１５％以上、１２０％以上、１２５％以上、または１３０％以上であってよい。
【００１９】
また、有効成分を利用することにより、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象において骨格筋の遅筋化に基づく効果が得られてよい。
【００２０】
骨格筋の遅筋化により、例えば、対象の持久力を向上させることができると期待される。すなわち、骨格筋の遅筋化に基づく効果としては、対象の持久力を向上させる効果（持久力向上効果）が挙げられる。「持久力」とは、身体運動に対する持久力を意味する。すなわち、「持久力」とは、具体的には、身体運動を持続する能力を意味してよい。身体運動は、筋肉に負荷のかかる動作であれば、特に制限されない。身体運動としては、スポーツ、フィジカルトレーニング、肉体労働、日常の動作が挙げられる。
【００２１】
骨格筋の遅筋化により、例えば、対象の筋力を向上させることができると期待される。具体的には、例えば、遅筋の量の増大に伴って骨格筋の総量が増大した場合に、対象の筋力を向上させることができると期待される。すなわち、骨格筋の遅筋化に基づく効果としては、対象の筋力を向上させる効果（筋力向上効果）が挙げられる。
【００２２】
骨格筋の遅筋化により、例えば、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を予防、改善、および／または治療することができると期待される。すなわち、骨格筋の遅筋化に基づく効果としては、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を予防、改善、および／または治療する効果が挙げられる。筋萎縮とは、筋肉量の低下をいう。筋萎縮としては、骨格筋の委縮が挙げられる。筋萎縮として、具体的には、遅筋および／または速筋の委縮が挙げられる。筋萎縮としては、特に、遅筋の委縮が挙げられる。筋萎縮により、例えば、筋力が低下してよい。言い換えると、筋力低下は、例えば、筋萎縮によるものであってよい。筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状は、疾患であってもよく、そうでなくてもよい。筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状は、遺伝的要因、後天的要因、加齢等のいずれの原因で発症または進行するものであってもよい。筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状としては、筋萎縮および／または筋力低下に起因する症状や筋萎縮および／または筋力低下を伴う症状が挙げられる。なお、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状には、筋萎縮そのものや筋力低下そのものも包含される。筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状として、具体的には、廃用性筋萎縮、神経原性筋萎縮、筋原性筋萎縮が挙げられる。廃用性筋萎縮としては、加齢による筋萎縮（サルコペニア；sarcopenia）や、筋肉の使用不足による筋萎縮が挙げられる。筋肉の使用不足としては、寝たきり、無運動、無重力飛行、身体の固定等の理由によるものが挙げられる。身体の固定としては、怪我の治療等で実施される四肢の固定が挙げられる。神経原性筋萎縮としては、筋萎縮性側索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis；ALS）、原発性側索硬化症（primary lateral sclerosis；PLS）、脊髄性筋萎縮症（spinal muscular atrophy；SMA）、球脊髄性筋萎縮症（spinal and bulbar muscular atrophy；SBMA）、急性灰白髄炎（poliomyelitis；ポリオ）、ギランバレー症候群（Guillain-Barre syndrome；GBS）が挙げられる。筋原性筋萎縮としては、筋ジストロフィー（muscular dystrophy）や多発性筋炎（polymyositis；PM）が挙げられる。また、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状として、具体的には、重症筋無力症（myasthenia gravis；MG）、悪液質（cachexia）、フレイル（frailty）、運動器症候群（ロコモティブシンドローム；locomotive syndrome）も挙げられる。
【００２３】
有効成分は、骨格筋遅筋化効果等の上記例示したような効果が得られる他の技術と併用されてもよく、されなくてもよい。そのような技術としては、日常の動作以外の身体運動の実施が挙げられる。日常の動作以外の身体運動としては、スポーツやフィジカルトレーニングが挙げられる。有効成分をそのような技術と併用することにより、そのような技術による骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が増強されると期待される。
【００２４】
また、本発明は、骨格筋遅筋化効果等の上記例示したような効果に伴う用途での有効成分の使用を提供する。すなわち、本発明は、例えば、骨格筋の遅筋化のための有効成分の使用、AMPKの活性化の促進のための有効成分の使用、PGC-1αの発現の促進のための有効成分の使用、持久力の向上のための有効成分の使用、筋力の向上のための有効成分の使用、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療のための有効成分の使用を提供してよい。また、本発明は、例えば、骨格筋遅筋化用組成物、AMPK活性化促進用組成物、PGC-1α発現促進用組成物、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用の組成物等の本発明の組成物の製造のための有効成分の使用を提供してよい。
【００２５】
また、本発明は、骨格筋遅筋化効果等の上記例示したような効果に伴う用途に用いるための有効成分を提供する。すなわち、本発明は、例えば、骨格筋の遅筋化に用いるための有効成分、AMPKの活性化の促進に用いるための有効成分、PGC-1αの発現の促進に用いるための有効成分、持久力の向上に用いるための有効成分、筋力の向上に用いるための有効成分、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療に用いるための有効成分を提供してよい。また、本発明は、例えば、骨格筋遅筋化用組成物、AMPK活性化促進用組成物、PGC-1α発現促進用組成物、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用の組成物等の本発明の組成物の製造に用いるための有効成分を提供してよい。
【００２６】
有効成分は、治療目的で利用されてもよく、非治療目的で利用されてもよい。すなわち、上記例示したような効果は、いずれも、特記しない限り、治療目的で得られてもよく、非治療目的で得られてもよい。「治療目的」とは、例えば、治療のための人体への処置行為を含むことを意味してよく、特に、医療行為として実施されることを意味してもよい。「非治療目的」とは、例えば、治療のための人体への処置行為を含まないことを意味してよく、特に、非医療行為として実施されることを意味してもよい。非治療目的としては、健康増進や美容等の目的が挙げられる。
【００２７】
「症状の予防」とは、例えば、症状の発症の防止もしくは遅延、または症状の発症の可能性の低下を意味してよい。「症状の改善」または「症状の治療」とは、例えば、症状の好転、症状の悪化の防止もしくは遅延、または症状の進行の防止もしくは遅延を意味してよい。「症状の改善」とは、特に、これらの事象であって、且つ治療目的でないものを総称してもよい。「症状の治療」とは、特に、これらの事象であって、且つ治療目的であるものを総称してもよい。
【００２８】
ビフィドバクテリウム属細菌は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られる限り、特に制限されない。ビフィドバクテリウム属細菌としては、１種の細菌を用いてもよく、２種またはそれ以上の細菌を組み合わせて用いてもよい。
【００２９】
ビフィドバクテリウム属細菌としては、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・アンギュラツム（Bifidobacterium angulatum）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラータム（Bifidobacterium pseudocatenulatum）、ビフィドバクテリウム・アニマリス（Bifidobacterium animalis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum）、ビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）が挙げられる。
【００３０】
ビフィドバクテリウム属細菌としては、特に、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）、ビフィドバクテリウム・アニマリス（Bifidobacterium animalis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum）、ビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）が挙げられる。ビフィドバクテリウム属細菌として、さらに特には、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）やビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）が挙げられる。ビフィドバクテリウム属細菌として、さらに特には、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）が挙げられる。
【００３１】
ビフィドバクテリウム・ロンガムには、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（B. longum subsp. longum）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス（B. longum subsp. infantis）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・スイス（B. longum subsp. suis）等の、ビフィドバクテリウム・ロンガムのいずれの亜種に分類される株も包含される。ビフィドバクテリウム・アニマリスには、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（B. animalis subsp. lactis）等の、ビフィドバクテリウム・アニマリスのいずれの亜種に分類される株も包含される。ビフィドバクテリウム・シュードロンガムには、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（B. pseudolongum subsp. globosum）やビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（B. pseudolongum subsp. pseudolongum）等の、ビフィドバクテリウム・シュードロンガムのいずれの亜種に分類される株も包含される。
【００３２】
ビフィドバクテリウム・ブレーベとして、具体的には、M-16V（NITE BP-02622）、MCC1274（FERM BP-11175）、ATCC 15700、B632（DSM 24706）、Bb99（DSM 13692）、ATCC 15698、DSM 24732、UCC2003、YIT4010、YIT4064、BBG-001、BR-03、C50、R0070が挙げられる。ビフィドバクテリウム・ブレーベとしては、特に、FERM BP-11175が挙げられる。
【００３３】
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175は、2009年8月25日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（現  独立行政法人製品評価技術基盤機構特許生物寄託センター（NITE-IPOD）、郵便番号：292-0818、住所：日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室）に、FERM BP-11175の受託番号で、ブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている。
【００３４】
ビフィドバクテリウム・ロンガムとして、具体的には、BB536（NITE BP-02621）、ATCC 15697、ATCC 15707、ATCC 25962、ATCC 15702、ATCC 27533、M-63、BG7、DSM 24736、SBT 2928、NCC 490（CNCM I-2170）、NCC 2705（CNCM I-2618）が挙げられる。
【００３５】
ビフィドバクテリウム・ビフィダムとして、具体的には、ATCC 29521、OLB6378、BF-1が挙げられる。ビフィドバクテリウム・アドレセンティスとして、具体的には、ATCC 15703が挙げられる。ビフィドバクテリウム・デンティウムとして、具体的には、DSM 20436が挙げられる。ビフィドバクテリウム・アニマリスとして、具体的には、DSM 10140、Bb-12、DN-173 010、GCL2505、CNCM I-3446が挙げられる。ビフィドバクテリウム・シュードロンガムとして、具体的には、JCM 5820やATCC 25526が挙げられる。ビフィドバクテリウム・サーモフィラムとして、具体的には、ATCC 25525が挙げられる。
【００３６】
これらの菌株は、例えば、American Type Culture Collection（ATCC, Address: 10801 University Boulevard Manassas, VA 20110, United States of America）、Belgian Coordinated Collections of Microorganisms（BCCM, Address: Rue de la Science 8, 1000 Brussels, Belgium）、German Collection of Microorganisms and Cell Cultures（DSMZ, Address: Inhoffenstr.7B, D38124 Braunschweig, Germany）、Japan Collection of Microorganisms（JCM, 郵便番号：305-0074、住所：日本国茨城県つくば市高野台3-1-1 理化学研究所バイオリソース研究センター微生物材料開発室）、または各菌株が寄託された寄託機関から入手することができる。
【００３７】
なお、上記例示した菌株名で特定される菌株には、当該菌株名で所定の機関に寄託や登録がなされている株そのもの（以下、説明の便宜上、「寄託株」ともいう）に限られず、それと実質的に同等な株（「派生株」または「誘導株」ともいう）も包含される。すなわち、例えば、「ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175」には、FERM BP-11175の寄託番号で上記寄託機関に寄託されている株そのものに限られず、それと実質的に同等な株も包含される。各菌株について、「上記寄託株と実質的に同等の株」とは、上記寄託株と同一の種に属し、その利用により骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られ、さらにその１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記寄託株の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に対して、好ましくは９９．８６％以上、より好ましくは９９．９３％以上、さらに好ましくは１００％の同一性を有し、且つ、好ましくは上記寄託株と同一の菌学的性質を有する株をいう。各菌株について、上記寄託株と実質的に同等の株は、当該寄託株と同等以上の骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られるものであってよい。「上記寄託株と同等以上の効果」とは、当該寄託株の利用により得られる効果の、８０％以上、９０％以上、９５％以上、または１００％以上の効果を意味してよい。各菌株について、上記寄託株と実質的に同等の株は、例えば、当該寄託株を親株とする派生株であってよい。派生株としては、寄託株から育種された株や寄託株から自然に生じた株が挙げられる。育種方法としては、遺伝子工学的手法による改変や、突然変異処理による改変が挙げられる。突然変異処理としては、Ｘ線の照射、紫外線の照射、ならびにＮ−メチル−Ｎ'−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）、エチルメタンスルフォネート（ＥＭＳ）、およびメチルメタンスルフォネート（ＭＭＳ）等の変異剤による処理が挙げられる。寄託株から自然に生じた株としては、寄託株の使用の際に自然に生じた株が挙げられる。そのような株としては、寄託株の培養（例えば継代培養）により自然に生じた変異株が挙げられる。派生株は、１種の改変により構築されてもよく、２種またはそれ以上の改変により構築されてもよい。
【００３８】
有効成分としての「ビフィドバクテリウム属細菌」とは、ビフィドバクテリウム属細菌の菌体を意味してよい。
【００３９】
有効成分としての「ビフィドバクテリウム属細菌による生産物」とは、ビフィドバクテリウム属細菌の培養により生成する成分を意味してよい。ビフィドバクテリウム属細菌による生産物は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られるものであれば、特に制限されない。ビフィドバクテリウム属細菌による生産物としては、同細菌の培養の際に培地中に蓄積する成分、同細菌の培養の際に菌体内に蓄積する成分、同細菌の菌体を構成する成分が挙げられる。菌体を構成する成分としては、細胞壁やペプチドグリカンが挙げられる。なお、ビフィドバクテリウム属細菌の菌体そのものは、「ビフィドバクテリウム属細菌による生産物」には該当しなくてよい。
【００４０】
有効成分としては、市販品を用いてもよく、適宜製造して取得したものを用いてもよい。例えば、ビフィドバクテリウム属細菌の市販品としては、森永乳業社製のビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175が挙げられる。また、有効成分は、ビフィドバクテリウム属細菌を培養することにより容易に取得することができる。培養方法は、ビフィドバクテリウム属細菌が増殖できる限り、特に制限されない。培養方法としては、例えば、ビフィドバクテリウム属細菌の培養に通常用いられる方法を、そのまま、あるいは適宜修正して、用いることができる。培養温度は、例えば、２５〜５０℃であってよく、好ましくは３５〜４２℃であってよい。培養は、好ましくは嫌気条件下で実施することができ、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら実施することができる。また、培養は、液体静置培養等の微好気条件下で実施することもできる。培養は、例えば、ビフィドバクテリウム属細菌が所望の程度に増殖するまで実施することができる。
【００４１】
培養に用いる培地は、ビフィドバクテリウム属細菌が増殖できる限り、特に制限されない。培地としては、例えば、ビフィドバクテリウム属細菌の培養に通常用いられる培地を、そのまま、あるいは適宜修正して、用いることができる。培地は、例えば、炭素源、窒素源、無機塩、有機成分、乳成分、またはそれらの組み合わせを含有してよい。炭素源としては、例えば、グルコース、ガラクトース、ラクトース、アラビノース、マンノース、スクロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて用いることができる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を用いることができる。また、無機塩としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、有機成分としては、例えば、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等を用いることができる。また、乳成分としては、例えば、乳タンパク質等を用いることができる。乳タンパク質としては、カゼイン、ホエイ、それらの分解物が挙げられる。これらの成分は、単独で、あるいは適宜組み合わせて利用してよい。また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養に通常用いられる培地として、具体的には、強化クロストリジア培地（Reinforced Clostridial medium）、ＭＲＳ培地（de Man, Rogosa, and Sharpe medium）、ｍＭＲＳ培地（modified MRS medium）、ＴＯＳＰ培地（TOS propionate medium）、ＴＯＳＰ  Ｍｕｐ培地（TOS propionate mupirocin medium）が挙げられる。
【００４２】
有効成分としては、有効成分そのものまたはそれを含有する画分を、特に制限されず用いることができる。すなわち、ビフィドバクテリウム属細菌としては、ビフィドバクテリウム属細菌の菌体またはそれを含有する画分を、特に制限されず用いることができる。ビフィドバクテリウム属細菌の菌体を含有する画分には、当該菌体に加えて、ビフィドバクテリウム属細菌による生産物が含有されていてもよい。また、ビフィドバクテリウム属細菌による生産物としては、ビフィドバクテリウム属細菌の培養により生成する成分またはそれを含有する画分を、特に制限されず用いることができる。ビフィドバクテリウム属細菌の培養により生成する成分を含有する画分には、当該成分に加えて、ビフィドバクテリウム属細菌が含有されていてもよい。有効成分としては、例えば、培養により得られた培養物をそのまま用いてもよく、培養物から回収した菌体または培養上清を用いてもよく、それらを適宜処理して用いてもよい。すなわち、有効成分として、具体的には、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、同培養物から回収した菌体、同培養物から回収した培養上清、それらの処理物が挙げられる。処理は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果を損なわない限り、特に制限されない。処理としては、濃縮、希釈、乾燥、殺菌、破砕、分画が挙げられる。これらの処理は、単独で、あるいは適宜組み合わせて実施してよい。これらの処理は、いずれも、例えば、公知の手法により実施できる。乾燥は、例えば、凍結乾燥により実施することができる。
【００４３】
例えば、菌体を破砕して、菌体破砕物を有効成分として用いてよい。菌体を破砕する手法としては、超音波処理やホモジナイズ処理が挙げられる。菌体破砕物は、そのまま、あるいは適宜上記のような処理に供してから、有効成分として用いてよい。
【００４４】
また、例えば、上述したような培養物、菌体、培養上清、またはそれらの処理物（例えば菌体破砕物）から、有効成分を含有する画分を分画して有効成分として用いてよい。具体的には、例えば、菌体破砕物から、上清画分や沈殿画分等の画分を分画して有効成分として用いてもよい。また、例えば、上述したような培養物、菌体、培養上清、またはそれらの処理物（例えば菌体破砕物）から、有効成分を分画（すなわち分離精製）して用いてよい。有効成分の分離精製は、所望の程度に実施してよい。有効成分の分離精製は、例えば、化合物の分離精製に用いられる公知の手法により実施できる。そのような手法としては、遠心分離、塩析、溶媒抽出、ゲルろ過、ＨＰＬＣ、膜分離が挙げられる。溶媒抽出には、例えば、極性溶媒、非極性溶媒、またはそれらの混合溶媒を用いてよい。
【００４５】
有効成分としては、特に、ビフィドバクテリウム属細菌（具体的には、ビフィドバクテリウム属細菌の菌体またはそれを含有する画分）を用いてよい。言い換えると、有効成分は、特に、ビフィドバクテリウム属細菌（具体的には、ビフィドバクテリウム属細菌の菌体またはそれを含有する画分）であってよい。ビフィドバクテリウム属細菌として、具体的には、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、同培養物から回収した菌体、それらの希釈物、濃縮物、乾燥物、殺菌物等の処理物が挙げられる。菌体は、生菌体であってもよく、死菌体であってもよい。菌体は、特に、死菌体を含有する形態で使用されてよい。菌体は、例えば、死菌体からなるものであってもよく、死菌体と生菌体の混合物であってもよい。菌体中の死菌体の比率は、菌数基準で、例えば、５０％以上、７０％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、または９９％以上であってよい。死菌体は、例えば、生菌体を殺菌処理に供することにより調製することができる。殺菌処理としては、加熱処理、噴霧乾燥法（スプレードライ法）、レトルト殺菌法、凍結乾燥法、ＵＨＴ殺菌法、加圧殺菌法、高圧蒸気滅菌法、乾熱滅菌法、流通蒸気消毒法、電磁波殺菌法、電子線滅菌法、高周波滅菌法、放射線滅菌法、紫外線殺菌法、酸化エチレンガス滅菌法、過酸化水素ガスプラズマ滅菌法、アルコール殺菌法、ホルマリン固定法、電解水処理法が挙げられる。加熱処理としては、７０〜１００℃で１０〜６０分の加熱が挙げられる。
【００４６】
＜２＞本発明の組成物
本発明の組成物は、上記の有効成分を含有する組成物である。
【００４７】
すなわち、本発明の組成物は、ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）属細菌および／または該細菌による生産物を含有する組成物である。
【００４８】
本発明の組成物は、対象に投与して利用できる。本発明の組成物は、具体的には、後述する本発明の方法に記載の態様で対象に投与することができる。本発明の組成物は、例えば、上記例示したような効果を得るために利用することができる。
【００４９】
本発明の組成物を利用することにより、具体的には本発明の組成物を対象に投与することにより、当該対象において骨格筋を遅筋化することができる、すなわち、骨格筋遅筋化効果が得られる。すなわち、本発明の組成物は、骨格筋遅筋化用組成物であってよい。
【００５０】
また、本発明の組成物を利用することにより、具体的には本発明の組成物を対象に投与することにより、当該対象においてAMPKの活性化が促進されてよい、すなわち、AMPK活性化促進効果が得られてよい。すなわち、本発明の組成物は、AMPK活性化促進用組成物であってもよい。AMPK活性化促進用組成物の一態様は、例えば、骨格筋遅筋化用組成物であってもよい。
【００５１】
また、本発明の組成物を利用することにより、具体的には本発明の組成物を対象に投与することにより、当該対象においてPGC-1αの発現が促進されてよい、すなわち、PGC-1α発現促進効果が得られてよい。すなわち、本発明の組成物は、PGC-1α発現促進用組成物であってもよい。PGC-1α発現促進用組成物の一態様は、例えば、骨格筋遅筋化用組成物であってもよい。
【００５２】
また、本発明の組成物を利用することにより、具体的には本発明の組成物を対象に投与することにより、当該対象において上記例示したような骨格筋の遅筋化に基づく効果が得られてよい。すなわち、本発明の組成物は、持久力向上用組成物であってもよい。また、本発明の組成物は、筋力向上用組成物であってもよい。また、本発明の組成物は、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用の組成物であってもよい。これらの組成物は、いずれも、例えば、骨格筋遅筋化用組成物の一態様であってもよい。
【００５３】
本発明の組成物が投与される対象については、「本発明の方法」における有効成分が投与される対象についての記載を準用できる。
【００５４】
本発明の組成物は、例えば、飲食品組成物、医薬組成物、または飼料組成物であってよい。本発明の組成物は、特に、飲食品組成物または医薬組成物であってもよい。すなわち、本発明は、例えば、骨格筋遅筋化用等の上記例示した用途の飲食品組成物、骨格筋遅筋化用等の上記例示した用途の医薬組成物、または骨格筋遅筋化用等の上記例示した用途の飼料組成物を提供してよい。飲食品組成物、医薬組成物、または飼料組成物である本発明の組成物を、それぞれ、「本発明の飲食品組成物」、「本発明の医薬組成物」、および「本発明の飼料組成物」ともいう。
【００５５】
本発明の組成物は、有効成分からなるものであってもよく、有効成分以外の成分を含有していてもよい。
【００５６】
有効成分以外の成分は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果を損なわない限り、特に制限されない。有効成分以外の成分としては、本発明の組成物の利用態様に応じて許容可能なものを利用できる。有効成分以外の成分としては、例えば、飲食品、医薬品、または飼料に配合して利用される成分を利用できる。有効成分以外の成分として、具体的には、後述する飲食品組成物、医薬組成物、または飼料組成物について例示するような成分が挙げられる。有効成分以外の成分としては、１種の成分を用いてもよく、２種またはそれ以上の成分を組み合わせて用いてもよい。
【００５７】
有効成分以外の成分として、具体的には、筋肉増量作用を有する成分や筋肉増量作用を補助する成分が挙げられる。そのような成分として、具体的には、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、大豆タンパク質、エンドウ豆タンパク質（ピープロテイン）等のタンパク質類、それらの混合物、それらの分解物；ロイシン、バリン、イソロイシン、グルタミン等のアミノ酸類；ビタミンＢ６やビタミンＣ等のビタミン類；クレアチン；クエン酸；フィッシュオイルが挙げられる。
【００５８】
本発明の組成物における各成分（すなわち、有効成分および任意でその他の成分）の含有量や含有量比は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られる限り、特に制限されない。本発明の組成物における各成分の含有量や含有量比は、有効成分の種類、その他の成分の種類、組成物の種類、形状（剤形）、および用法、投与対象の種類、年齢、および健康状態等の諸条件に応じて適宜設定することができる。
【００５９】
本発明の組成物における有効成分の含有量は、例えば、菌体の含有量に換算して、１×１０４ｃｅｌｌｓ／ｇ以上、１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｇ以上、１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｇ以上、１×１０７ｃｅｌｌｓ／ｇ以上、または１×１０８ｃｅｌｌｓ／ｇ以上であってもよく、１０１３ｃｅｌｌｓ／ｇ以下、１０１２ｃｅｌｌｓ／ｇ以下、または１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｇ以下であってもよく、それらの組み合わせの範囲であってもよい。また、本発明の組成物における有効成分の含有量は、例えば、菌体の含有量に換算して、１×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以上、１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以上、１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以上、１×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以上、または１×１０８ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以上であってもよく、１０１３ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以下、１０１２ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以下、または１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｍＬ以下であってもよく、それらの組み合わせの範囲であってもよい。本発明の組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、菌体の含有量に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｍＬであってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。「ｃｆｕ」は、colony forming unit（コロニー形成単位）を表す。
【００６０】
本発明の組成物における有効成分の含有量は、例えば、元の培養物の含有量に換算して、０．０１％（ｗ／ｗ）以上、０．１％（ｗ／ｗ）以上、１％（ｗ／ｗ）以上、５％（ｗ／ｗ）以上、または１０％（ｗ／ｗ）以上であってもよく、１００００％（ｗ／ｗ）以下、５０００％（ｗ／ｗ）以下、１０００％（ｗ／ｗ）以下、５００％（ｗ／ｗ）以下、３００％（ｗ／ｗ）以下、２００％（ｗ／ｗ）以下、１５０％（ｗ／ｗ）以下、１００％（ｗ／ｗ）以下、７０％（ｗ／ｗ）以下、５０％（ｗ／ｗ）以下、３０％（ｗ／ｗ）以下、１０％（ｗ／ｗ）以下、５％（ｗ／ｗ）以下、または１％（ｗ／ｗ）以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。本発明の組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、元の培養物の含有量に換算して、１〜１００００％（ｗ／ｗ）、好ましくは１０〜１０００％（ｗ／ｗ）であってもよい。すなわち、例えば、本発明の組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物またはその由来物（培養上清等）を上記例示したような含有量で含有していてもよい。「元の培養物」とは、培養後に濃縮や希釈等の濃度変化が生じていない培養物をいい、具体的には、培養直後の培養物（すなわち、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物そのもの）であってよい。そのような培養物は、例えば、上記例示したような培地を用いてビフィドバクテリウム属細菌が１×１０７〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬ、好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとなるように培養した培養物であってもよい。なお、１００％（ｗ／ｗ）を超える含有量は、培養物またはその由来物（培養上清等）が濃縮されて本発明の組成物に含有されていることを意味する。すなわち、例えば、１０００％（ｗ／ｗ）という含有量は、培養物またはその由来物（培養上清等）が１０倍に濃縮されて本発明の組成物に含有されていることを意味する。
【００６１】
また、本発明の組成物における有効成分の含有量は、例えば、後述するような有効成分の投与量が得られるように設定することができる。すなわち、本発明の組成物の投与量は、例えば、有効成分の投与量（菌体基準）に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日であってよい。また、本発明の組成物の投与量は、例えば、有効成分の投与量（菌体基準）に換算して、１×１０７〜１×１０１４ｃｅｌｌｓ／日／個体、好ましくは１×１０８〜１×１０１３ｃｅｌｌｓ／日／個体、より好ましくは１×１０９〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／日／個体であってよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。また、本発明の組成物の投与量は、例えば、有効成分の投与量（元の培養物基準）に換算して、０．０１〜１００ｍＬ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．１〜１０ｍＬ／ｋｇ体重／日であってよい。
【００６２】
本発明の組成物の形状は特に制限されない。本発明の組成物の形状としては、本発明の組成物の利用態様に応じて許容可能なものを採用できる。本発明の組成物の形状として、具体的には、後述する飲食品組成物、医薬組成物、または飼料組成物について例示するような形状が挙げられる。
【００６３】
＜飲食品組成物＞
本発明の飲食品組成物は、有効成分を含有する限り特に制限されない。本発明の飲食品組成物は、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の任意の形状で提供されてよい。
【００６４】
飲食品組成物は、例えば、飲食品そのものであってもよく、飲食品の製造に利用される素材であってもよい。そのような素材としては、調味料、食品添加物、その他の飲食品原料が挙げられる。飲食品組成物として、具体的には、小麦粉製品、即席食品、農産加工品、水産加工品、畜産加工品、乳製品（発酵乳、チーズ、育児用調製粉乳等）、油脂類、基礎調味料、複合調味料、冷凍食品、菓子類、飲料、これら以外の市販の飲食品が挙げられる。また、飲食品組成物として、具体的には、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、等）、栄養補助食品、医薬用部外品も挙げられる。また、飲食品組成物は、例えば、サプリメントであってもよく、具体的には、タブレット状のサプリメントであってもよい。
【００６５】
本発明の飲食品組成物は、有効成分を他の成分と組み合わせることにより製造できる。有効成分を他の成分と組み合わせる操作を、「有効成分の添加」ともいう。本発明の飲食品組成物の製造方法は、特に制限されない。本発明の飲食品組成物は、有効成分を添加すること以外は、例えば、通常の飲食品と同様の原料を用いて通常の飲食品と同様の方法により製造することができる。本発明の飲食品組成物が、調味料、食品添加物、その他の飲食品原料等の飲食品の製造に利用される素材として製造される場合も同様である。有効成分の添加は、飲食品組成物の製造工程のいずれの段階で実施してもよい。有効成分の添加は、例えば、飲食品組成物の製造途中または製造後に実施してよい。すなわち、例えば、予め調製された飲食品に有効成分を添加して本発明の飲食品組成物としてもよい。また、添加した有効成分（特にビフィドバクテリウム属細菌）による発酵工程を経て、飲食品組成物が製造されてもよい。発酵工程を経て製造される飲食品組成物としては、乳酸菌飲料や発酵乳等の発酵製品が挙げられる。すなわち、有効成分（特にビフィドバクテリウム属細菌）は、例えば、発酵製品の製造用のスターターとして使用してもよい。また、有効成分は、製造された発酵製品に後から添加することもできる。
【００６６】
また、本発明の飲食品組成物を用いて、さらに別の飲食品組成物を製造することもできる。すなわち、例えば、本発明の飲食品組成物が、調味料、食品添加物、その他の飲食品原料等の飲食品の製造に利用される素材として提供される場合、飲食品の原料に本発明の飲食品組成物を添加することにより別の飲食品組成物を製造することができる。このようにして製造される別の飲食品組成物も、本発明の飲食品組成物の一態様である。本発明の飲食品組成物の添加については、飲食品組成物の製造における有効成分の添加についての記載を準用できる。
【００６７】
本発明の飲食品組成物は、骨格筋遅筋化用、AMPK活性化促進用、PGC-1α発現促進用、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状の予防、改善、および／または治療用等の用途（保健用途を含む）が表示された飲食品として提供および販売することが可能である。また、本発明の飲食品組成物は、その摂取対象として、「アスリートの方」、「筋肉を増やしたい方」、「運動不足に伴う筋力の衰えが気になる方」、「加齢によって衰える筋肉が気になる方」、「年齢とともに衰える筋力が気になる方」、「フレイルを改善したい方」等と表示して提供および販売することが可能である。
【００６８】
「表示」には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起または類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物および媒体等の如何に拘わらず、全て「表示」に該当する。表示は、特に、需要者が前記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。
【００６９】
表示として、具体的には、具体的には、本発明の飲食品組成物に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。表示としては、特に、包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等への表示が挙げられる。
【００７０】
また、表示としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等）が好ましい。また、表示としては、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）、栄養補助食品、医薬用部外品等としての表示が挙げられる。行政等によって認可された表示としては、消費者庁によって認可される表示が挙げられる。消費者庁によって認可される表示としては、特定保健用食品やそれに類似する制度にて認可される表示が挙げられる。消費者庁によって認可される表示としては、具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク減少表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等が挙げられ、より具体的には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）及びこれに類する表示が挙げられる。
【００７１】
本発明の飲食品組成物における有効成分の含有量は、例えば、上述の範囲であってよい。すなわち、本発明の飲食品組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、菌体の含有量に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｍＬであってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。また、本発明の飲食品組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、元の培養物の含有量に換算して、１〜１００００％（ｗ／ｗ）、好ましくは１０〜１０００％（ｗ／ｗ）であってもよい。
【００７２】
本発明の飲食品組成物の投与量は、例えば、上述の範囲であってよい。すなわち、本発明の飲食品組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（菌体の量を基準とする）に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日であってもよい。また、本発明の飲食品組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（菌体の量を基準とする）に換算して、１×１０７〜１×１０１４ｃｅｌｌｓ／日／個体、好ましくは１×１０８〜１×１０１３ｃｅｌｌｓ／日／個体、より好ましくは１×１０９〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／日／個体であってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。また、本発明の飲食品組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（元の培養物の量を基準とする）に換算して、０．０１〜１００ｍＬ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．１〜１０ｍＬ／ｋｇ体重／日であってもよい。
【００７３】
＜医薬組成物＞
本発明の医薬組成物は、有効成分を含有する限り特に制限されない。本発明の医薬組成物としては、例えば、有効成分をそのまま使用してもよく、有効成分を適宜製剤化して使用してもよい。
【００７４】
本発明の医薬組成物の剤形は、特に制限されない。本発明の医薬組成物の剤形は、例えば、投与方法等の諸条件に応じて適宜選択することができる。本発明の医薬組成物は、経口投与用であってもよく、非経口投与用であってもよい。本発明の医薬組成物は、特に、経口投与用であってよい。経口投与の場合、剤形として、具体的には、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形剤や、溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤が挙げられる。非経口投与の場合、剤形として、具体的には、座剤や軟膏剤が挙げられる。製剤化にあたっては、生理的に許容される添加剤を使用することができる。添加剤としては、各種の有機成分および無機成分が挙げられる。添加剤として、具体的には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、溶剤が挙げられる。これら添加剤は、例えば、剤形等の諸条件に応じて適宜選択することができる。
【００７５】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α‐デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
【００７６】
結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等が挙げられる。
【００７７】
崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
【００７８】
滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。
【００７９】
安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。
【００８０】
矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
【００８１】
本発明の医薬組成物における有効成分の含有量は、例えば、上述の範囲であってよい。すなわち、本発明の医薬組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、菌体の含有量に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｍＬ、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｇまたは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｍＬであってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。また、本発明の医薬組成物における有効成分の含有量は、具体的には、例えば、元の培養物の含有量に換算して、１〜１００００％（ｗ／ｗ）、好ましくは１０〜１０００％（ｗ／ｗ）であってもよい。
【００８２】
本発明の医薬組成物の投与量は、例えば、上述の範囲であってよい。すなわち、本発明の医薬組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（菌体の量を基準とする）に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日であってもよい。また、本発明の医薬組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（菌体の量を基準とする）に換算して、１×１０７〜１×１０１４ｃｅｌｌｓ／日／個体、好ましくは１×１０８〜１×１０１３ｃｅｌｌｓ／日／個体、より好ましくは１×１０９〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／日／個体であってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。また、本発明の医薬組成物の投与量は、具体的には、例えば、有効成分の投与量（元の培養物の量を基準とする）に換算して、０．０１〜１００ｍＬ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．１〜１０ｍＬ／ｋｇ体重／日であってもよい。
【００８３】
＜飼料組成物＞
本発明の飼料組成物は、有効成分を含有する限り特に制限されない。飼料組成物としては、ペットフードや家畜飼料が挙げられる。本発明の飼料は、粉末状、顆粒状、クランブル状、ペレット状、キューブ状、ペースト状、液状等の任意の形状で提供されてよい。
【００８４】
本発明の飼料組成物は、有効成分を他の成分と組み合わせることにより製造できる。有効成分を他の成分と組み合わせる操作を、「有効成分の添加」ともいう。本発明の飼料組成物の製造方法は、特に制限されない。本発明の飼料組成物は、有効成分を添加すること以外は、例えば、通常の飼料と同様の原料を用いて通常の飼料と同様の方法により製造することができる。有効成分の添加は、飼料組成物の製造工程のいずれの段階で実施してもよい。有効成分の添加は、例えば、飼料組成物の製造途中または製造後に実施してよい。すなわち、例えば、予め調製された飼料に有効成分を添加して本発明の飼料組成物としてもよい。また、添加した有効成分（特にビフィドバクテリウム属細菌）による発酵工程を経て、飼料組成物が製造されてもよい。発酵工程を経て製造される飼料組成物としては、サイレージが挙げられる。
【００８５】
＜３＞本発明の方法
本発明の方法は、上記の有効成分を対象に投与する工程を含む方法である。同工程を、「投与工程」ともいう。
【００８６】
すなわち、本発明の方法は、ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）属細菌および／または該細菌による生産物を対象に投与する工程を含む方法である。
【００８７】
本発明の方法により、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象において骨格筋を遅筋化することができる、すなわち、骨格筋遅筋化効果が得られる。すなわち、本発明の方法は、骨格筋を遅筋化する方法であってよい。
【００８８】
また、本発明の方法により、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象においてAMPKの活性化が促進されてよい、すなわち、AMPK活性化促進効果が得られてよい。すなわち、本発明の方法は、AMPKの活性化を促進する方法であってもよい。AMPKの活性化を促進する方法の一態様は、例えば、骨格筋を遅筋化する方法であってもよい。
【００８９】
また、本発明の方法により、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象においてPGC-1αの発現が促進されてよい、すなわち、PGC-1α発現促進効果が得られてよい。すなわち、本発明の方法は、PGC-1αの発現を促進する方法であってもよい。PGC-1αの発現を促進する方法の一態様は、例えば、骨格筋を遅筋化する方法であってもよい。
【００９０】
また、本発明の方法により、具体的には有効成分を対象に投与することにより、当該対象において上記例示したような骨格筋の遅筋化に基づく効果が得られてよい。すなわち、本発明の方法は、持久力を向上させる方法であってもよい。また、本発明の方法は、筋力を向上させる方法であってもよい。また、本発明の方法は、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を予防、改善、および／または治療する方法であってもよい。これらの方法は、いずれも、例えば、骨格筋を遅筋化する方法の一態様であってもよい。
【００９１】
なお、「有効成分を対象に投与すること」は、「対象に有効成分を摂取させること」と同義であってよい。摂取は、自発的なもの（自由摂取）であってもよく、強制的なもの（強制摂取）であってもよい。すなわち、投与工程は、具体的には、例えば、有効成分を飲食品や飼料に配合して対象に供給し、以て対象に有効成分を自由摂取させる工程であってもよい。投与は、経口投与であってもよく、非経口投与であってもよい。投与は、通常は、経口投与であってよい。非経口投与としては、経管投与や直腸内投与が挙げられる。
【００９２】
有効成分の投与態様（例えば、投与対象、投与時期、投与期間、投与回数、投与量、その他投与に係る条件）は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られる限り、特に制限されない。有効成分の投与態様は、有効成分の種類や、投与対象の種類、年齢、および健康状態等の諸条件に応じて適宜設定することができる。
【００９３】
有効成分が投与される対象は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られる限り、特に制限されない。有効成分が投与される対象としては、哺乳動物が挙げられる。哺乳動物としては、ヒトやペットが挙げられる。ペットとしては、イヌやネコが挙げられる。哺乳動物としては、特に、ヒトが挙げられる。哺乳動物は、オスであってもよく、メスであってもよい。有効成分が投与されるヒトの条件は、特に制限されない。有効成分は、例えば、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果を希望するいずれのヒトに投与されてもよい。ヒトは、例えば、乳幼児、小児、大人、中高年、高齢者等のいずれの年代の者であってもよい。ヒトは、例えば、健常者であってもよく、非健常者であってもよい。非健常者としては、筋萎縮および／または筋力低下に関連する症状を呈する者が挙げられる。ヒトは、例えば、アスリートやスポーツ愛好家等の、日常の動作以外の身体運動を実施する者であってもよく、そうでなくてもよい。
【００９４】
有効成分の投与量は、例えば、菌体の投与量に換算して、１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以上、１×１０７ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以上、または１×１０８ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以上であってもよく、１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以下、１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以下、または１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日以下であってもよく、それらの組み合わせの範囲であってもよい。有効成分の投与量は、具体的には、例えば、菌体の投与量に換算して、１×１０６〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、好ましくは１×１０７〜１×１０１１ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１×１０８〜１×１０１０ｃｅｌｌｓ／ｋｇ体重／日であってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。
【００９５】
有効成分の投与量は、例えば、菌体の投与量に換算して、１×１０７ｃｅｌｌｓ／日／個体以上、１×１０８ｃｅｌｌｓ／日／個体以上、または１×１０９ｃｅｌｌｓ／日／個体以上であってもよく、１×１０１４ｃｅｌｌｓ／日／個体以下、１×１０１３ｃｅｌｌｓ／日／個体以下、または１×１０１２ｃｅｌｌｓ／日／個体以下であってもよく、それらの組み合わせの範囲であってもよい。有効成分の投与量は、具体的には、例えば、菌体の投与量に換算して、１×１０７〜１×１０１４ｃｅｌｌｓ／日／個体、好ましくは１×１０８〜１×１０１３ｃｅｌｌｓ／日／個体、より好ましくは１×１０９〜１×１０１２ｃｅｌｌｓ／日／個体であってもよい。有効成分が生菌体である場合、「ｃｅｌｌｓ」は「ｃｆｕ」と読み替えてもよい。
【００９６】
有効成分の投与量は、例えば、元の培養物の投与量に換算して、０．０１ｍＬ／ｋｇ体重／日以上、または０．１ｍＬ／ｋｇ体重／日以上であってもよく、１００ｍＬ／ｋｇ体重／日以下、または１０ｍＬ／ｋｇ体重／日以下であってもよく、それらの組み合わせの範囲であってもよい。有効成分の投与量は、具体的には、例えば、元の培養物の投与量に換算して、０．０１〜１００ｍＬ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．１〜１０ｍＬ／ｋｇ体重／日であってもよい。すなわち、例えば、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物またはその由来物（培養上清等）を上記例示したような投与量で投与してもよい。
【００９７】
有効成分の投与期間は、例えば、４週間以上、好ましくは８週間以上、より好ましくは１２週間以上であってよい。有効成分は、例えば、１日当たり１回投与してもよく、１日当たり複数回に分けて投与してもよい。また、有効成分は、例えば、毎日投与してもよく、数日に１回投与してもよい。有効成分は、特に、毎日投与してよい。各投与時の有効成分の投与量は、一定であってもよく、そうでなくてもよい。
【００９８】
有効成分は、例えば、そのまま対象に投与されてもよく、有効成分を含有する、飲食品組成物、医薬組成物、飼料組成物等の組成物として調製され、対象に投与されてもよい。有効成分を含有する組成物については、本発明の組成物の記載を準用できる。また、有効成分は、単独で投与されてもよく、他の成分と併用投与されてもよい。他の成分としては、医薬や医薬組成物、飲食品や飲食品組成物、飼料や飼料組成物、それらに含有される成分が挙げられる。これら他の成分は、骨格筋遅筋化用等の上記例示した用途に用いるためのものであってもよく、そうでなくてもよい。
【００９９】
有効成分は、例えば、本発明の組成物を利用して（すなわち本発明の組成物を投与することにより）、対象に投与することもできる。すなわち、本発明の方法の一態様は、本発明の組成物を対象に投与する工程を含む方法であってよい。すなわち、「有効成分の投与」には、本発明の組成物の投与も包含される。本発明の組成物の投与態様（例えば、投与対象、投与時期、投与期間、投与回数、投与量、その他投与に係る条件）は、骨格筋遅筋化効果等の所望の効果が得られる限り、特に制限されない。本発明の組成物の投与態様は、有効成分の種類や含有量、その他の成分の種類や含有量、組成物の種類や形状（剤形）、投与対象の種類、年齢、および健康状態等の諸条件に応じて適宜設定することができる。上述したような有効成分の投与態様に関する記載は、本発明の組成物を対象に投与する場合にも準用できる。すなわち、本発明の組成物は、例えば、上記例示したような対象に投与することができる。また、本発明の組成物の投与量は、例えば、上記例示したような有効成分の投与量が得られるように設定することができる。また、本発明の組成物は、単独で投与されてもよく、医薬や医薬組成物、飲食品や飲食品組成物、飼料や飼料組成物、それらに含有される成分等の、他の成分と併用投与されてもよい。
【実施例】
【０１００】
以下、非限定的な実施例を参照して、本発明をさらに具体的に説明する。【０１０１】
［製造例１］
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、ホエイタンパク質濃縮物（Whey protein concentrate；ＷＰＣ）とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物20 gを200 gの水に溶かし、骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物を得る。同組成物は、例えば、飲食品として摂取可能である。同組成物の摂取により、骨格筋遅筋化効果等の上記例示したような効果が期待できる。【０１０２】
［製造例２］
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、乳タンパク質濃縮物の乾燥粉末（MPC480、フォンテラ社製、タンパク質含量80質量％、カゼインタンパク質：ホエイタンパク質＝約８：２）とを均一に混合して、組成物を得る。当該組成物20 gを200 gの水に溶かし、骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物を得る。同組成物は、例えば、飲食品として摂取可能である。同組成物の摂取により、骨格筋遅筋化効果等の上記例示したような効果が期待できる。【０１０３】
［実施例］
＜投与品の調製＞
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の凍結乾燥粉末を生理食塩水により５×１０８ｃｆｕ／ｍＬの濃度に希釈し、生菌体投与品を得た。ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の生菌体投与品を９０℃で３０分間加熱し、加熱殺菌体投与品を得た。【０１０４】
＜動物試験＞
Crl:CD(SD)ラット（日本チャールズ・リバー社：健常ラット）を実験動物として用い、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の生菌体投与品及び加熱殺菌体投与品の４週間継続摂取による筋肉組織中の筋繊維タイプへの影響を評価した。【０１０５】
実験動物は、７週齢で購入後、ラボＭＲストック飼料（ノーサン工業社製）および水道水を自由摂取させた。１週間の馴化後、実験動物をコントロール群（生理食塩水を５ｍＬ／ｋｇ体重／日投与する群）、ビフィドバクテリウム生菌体投与群（生菌体投与品を２ｍＬ／日／匹（菌数換算で１×１０９ｃｆｕ／日／匹）投与する群）、ビフィドバクテリウム加熱殺菌体投与群（加熱殺菌体投与品を２ｍＬ／日／匹（菌数換算で１×１０９ｃｅｌｌｓ／日／匹）投与する群）に分け、各マウスに１日１回経口ゾンデを用いた投与品の経口投与を４週間継続した。最後の経口投与が終了した１時間後に実験動物をセボフルラン麻酔下で処置して、ヒラメ筋および腓腹筋を摘出した。【０１０６】
腓腹筋は、以下の手順により、遅筋繊維割合の測定に用いた。すなわち、摘出した腓腹筋を薄切し、Anti-SERCA2 ATPase抗体（アブカム社）を用いて免疫組織染色法により遅筋繊維を染色した。各群について、顕微鏡下で腓腹筋内側頭中央部の３視野を観察し、合計４５０本の繊維について染色率（遅筋繊維割合）を計測した。【０１０７】
各群の遅筋繊維割合を図１に示す。各群の遅筋繊維染色画像を図２〜４に示す。図２〜４中、暗い領域が遅筋繊維、明るい領域が速筋繊維である。ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の投与により、コントロールに比べて遅筋繊維割合が増加した。特に、生菌体投与群より加熱殺菌体投与群で遅筋繊維割合の顕著な増加が確認された。具体的には、コントロールに比して、生菌体投与群では遅筋繊維割合が３．８０％増加し、加熱殺菌体投与群では遅筋繊維割合が１２．７０％増加した。以上のとおり、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の投与による骨格筋の遅筋化が確認された。【０１０８】
ヒラメ筋は、以下の手順により、骨格筋の遅筋化に関わるシグナル経路（Zhang et al., Int J Biol Sci, 13(9), 1152-1162(2017)；Suwa et al., J. Appl. Physiol, 95, 960-968(2003)）の評価に用いた。骨格筋の遅筋化に関わるシグナル経路としては、活性型AMP-activated protein kinase（AMPK）量をウェスタンブロッティング法により測定し、ペルオキシソーム増殖因子活性化レセプターγ共役因子−１α（PGC-1α）の発現量をリアルタイムPCR法により測定した。【０１０９】
摘出したヒラメ筋の一部よりRNeasy Mini Kit（キアゲン社）を用いてRNAを抽出し、PrimeScript RT Reagent Kit（タカラバイオ社）により相補的DNA（cDNA）ライブラリーを調製した。得られたcDNAライブラリーを鋳型として、SYBR Premix Ex Taq2（タカラバイオ社）と、PGC-1α用プライマー（配列番号１および２）または内因性コントロールGAPDH用プライマー（配列番号３および４）を用いてPCRを実施し、PGC-1αのmRNAレベルでの発現量を定量した。この際、PGC-1αの発現量は、GAPDHの発現量に基づいて標準化し、コントロールに対する相対値として算出した。【０１１０】
【表１】
2020203792.tif 000003
【０１１１】
PGC-1αの発現量を図５に示す。ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の投与により、コントロールに比べてPGC-1αの発現量が増加した。特に、生菌体投与群より加熱殺菌体投与群でPGC-1αの発現量の顕著な増加が確認された。具体的には、コントロールに比して、生菌体投与群ではPGC-1αの発現量が１．３１倍に増加し、加熱殺菌体ではPGC-1αの発現量が１．９０倍に増加した。【０１１２】
摘出したヒラメ筋の一部よりRIPAバッファー（CST社）を用いてタンパク質を抽出し、ウェスタンブロッティング法によってリン酸化AMPK（活性型AMPK）量を定量した。この際、リン酸化AMPK量は、全AMPK量に基づいて標準化し、コントロールに対する相対値として算出した。【０１１３】
リン酸化AMPK量を図６に示す。ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の投与により、コントロールに比べて活性型AMPK量が増加した。具体的には、コントロールに比して、生菌体投与群では活性型AMPK量が１．４２倍に増加し、加熱殺菌体投与群では活性型AMPK量が１．４８倍に増加した。【０１１４】
上記の結果から、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の投与により遅筋化促進に関わるシグナル経路が活性化され、その結果、骨格筋の遅筋割合が向上することが示唆された。この現象は、生菌体投与群より加熱殺菌体投与群で顕著であった。【０１１５】
＜配列表の説明＞
配列番号１〜４：プライマー
【産業上の利用可能性】
【０１１６】
本発明によれば、骨格筋遅筋化用組成物等の特定の用途に利用できる組成物を提供できる。
【図１】
2020203792.tif 000004
【図２】
2020203792.tif 000005
【図３】
2020203792.tif 000006
【図４】
2020203792.tif 000007
【図５】
2020203792.tif 000008
【図６】
2020203792.tif 000009
【配列表】
2020203792000001.app
【国際調査報告】
2020203792.tif 000010
2020203792.tif 000011
2020203792.tif 000012
2020203792.tif 000013
2020203792.tif 000014
2020203792.tif 000015