【手続補正書】
【提出日】平成21年3月9日(2009.3.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌細胞においてアポトーシスを誘発する方法であって：
ＭＹＣ発現およびＤＲ５発現癌細胞と：
(ｉ)ＤＲ５アゴニスト；および
(ii)グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３β(ＧＳＫ３β)アンタゴニストまたはｈＣＤＣ４アンタゴニスト
を接触させることを含む、方法。
【請求項２】
癌細胞が動物内にあり、そして接触段階が、アゴニスト(ｉ)およびアンタゴニスト(ii)を該動物に投与することを含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
動物がヒトである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
動物がヒトではない、請求項２記載の方法。
【請求項５】
接触段階が細胞とＧＳＫ３βアンタゴニストの接触を含む、請求項１記載の方法。
【請求項６】
接触段階が細胞とｈＣＤＣ４アンタゴニストの接触を含む、請求項１記載の方法。
【請求項７】
ＤＲ５アゴニストが抗体である、請求項１記載の方法。
【請求項８】
ＤＲ５アゴニストがＴＲＡＩＬである、請求項１記載の方法。
【請求項９】
治療的有効量の：
(ｉ)ＤＲ５アゴニスト；および
(ii)グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３β(ＧＳＫ３β)アンタゴニストまたはｈＣＤＣ４アンタゴニスト
を含む、組成物。
【請求項１０】
ＧＳＫ３βアンタゴニストを含む、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
ｈＣＤＣ４アンタゴニストを含む、請求項９記載の組成物。
【請求項１２】
ＤＲ５アゴニストが抗体である、請求項９記載の組成物。
【請求項１３】
ＤＲ５アゴニストがＴＲＡＩＬである、請求項９記載の組成物。
【請求項１４】
癌細胞におけるアポトーシスを誘発する薬剤を同定するための方法であって：
(ｉ)ｈＣＤＣ４ポリペプチドのホスホデグロン(phosphodegron)結合性フラグメントを含むポリペプチドに１種以上の薬剤を接触させ(ここで、ホスホデグロンはＬＰＴＰＰ(配列番号２)を含み、配列番号２中のスレオニンはリン酸化されている)；
(ii)ホスホデグロンのポリペプチド結合を阻害する１種以上の薬剤を選択し、それにより、癌細胞におけるアポトーシスを誘発する薬剤を同定する
ことを含む、方法。
【請求項１５】
ホスホデグロンがＫＫＦＥＬＬＰＴＰＰＬＳＰＳＲＲ(配列番号１)を含む、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
(iii)選択した１種以上の薬剤を、ＭＹＣを発現する癌細胞とＤＲ５アゴニスト存在下で接触させ；そして
(iv)癌細胞において、該細胞を該薬剤の非存在下でＤＲ５アゴニストと接触させたときよりもさらにアポトーシスを誘発する薬剤を選択する
ことをさらに含む、請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
ポリペプチドが固体支持体に結合している、請求項１４記載の方法。
【請求項１８】
ポリペプチドが第一蛍光標識と会合（associated with）しており、そしてホスホデグロンが第二蛍光標識と会合（associated with）しており、該ポリペプチドが該ホスホデグロンと結合したときに、該第一および第二標識が相互作用して蛍光シグナルを発し、ここで、薬剤の存在下での蛍光シグナルの減少が、該薬剤が該ポリペプチドの該ホスホデグロンへの結合を阻害することを示す、請求項１４記載の方法。
【請求項１９】
第一蛍光標識がユウロピウムであり、そして第一蛍光標識が、該ポリペプチドに結合する抗体に結合しており；そして
第二蛍光標識がアロフィコシアニン(ＡＰＣ)およびＣ−フィコシアニン(ＣＰＣ)から成る群から選択される、
請求項１４記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
ここで使用する用語“癌”は、患者体内の細胞が異常な、制御されない増殖を受けている状態を意味するために使用する。この異常な細胞は増殖して固形腫瘍を形成し得るか、または多数の細胞を形成し得る(例えば、白血病)。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
２個またはそれ以上の核酸またはポリペプチド配列に関する用語“同一”または“同一性”割合は、同じ配列である２個以上の配列または部分配列を意味する。２個の配列は、比較ウィンド、または下記配列比較アルゴリズムの１個を使用して測定した指定領域にわたり比較し、最大対応のために配置したときまたは手動アラインメントおよび目視により、２個の配列が、同じであるアミノ酸残基またはヌクレオチドを明記する割合で有するならば(すなわち、特定領域、または特記しないとき、全配列にわたり６０％同一性、所望により６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％同一性)、“実質的に同一”である。本発明は、図１および図２に例示するポリペプチドと実質的に同一の配列を含むポリペプチドを提供する。所望により、本同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド長である領域にわたり、またはより好ましくは１００から５００または１０００またはそれ以上のヌクレオチド長の領域にわたり、存在する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
本発明の組成物の投与は、処置すべき組織と最終的に接触させるために化学療法化合物を挿入するために通常使用される経路のいずれかにより行い得る。抗体および薬剤は適当な方法で、所望により薬学的に許容される担体と共に投与する。このような抗体および薬剤の適当な投与法は利用可能であり、当業者に既知であり、１個以上の経路を特定の組成物の投与に使用できるが、特定の経路が、他の経路よりしばしばより速くより有効な応答を提供し得る。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１００】
同様に、ＦＢＷ７に天然に存在するヘテロ接合性変異を担持する結腸癌腫細胞株ＨＴ１１５はＤＲ５−Ａに非常に感受性であった。顕著なことに、ＤＲ５−Ａに対する感受性は、ＨＴ１１５細胞におけるｗｔ  ＦＢＷ７  ｃＤＮＡの安定な過剰発現により救済できた。ＨＴ１１５に存在する変異であるＣ１１５３Ｔは、結腸癌において見られる最も頻繁に起こるＦＢＷ７変異の一つであり(Rajagopalan, H., Jallepalli, P.V., Rago, C., Velculescu, V.E., Kinzler, K.W., Vogelstein, B. and Lengauer, C., (2004)Nature 428, 77-81.;Rajagopalan, H. and Lengauer, C., (2004)Cell Cycle 3, 693-694)、そしてその基質認識ドメイン中の第三のＷＤ４０反復における重要なアルギニン残基を変異させ、それによりその基質と結合する能力が妨害される(Orlicky, S., Tang, X., Willems, A., Tyers, M. and Sicheri, F., (2003)Cell 112, 243-256.;Rajagopalan, H., Jallepalli, P.V., Rago, C., Velculescu, V.E., Kinzler, K.W., Vogelstein, B. and Lengauer, C., (2004)Nature 428, 77-81.)。