【手続補正書】
【提出日】平成21年9月1日(2009.9.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非動物由来のプロテインＡの精製方法であって、
（ａ）ベジタリアンアミノ酸またはペプチドを含有する培地中で黄色ブドウ球菌の分泌型系統を発酵させることにより産生された非動物由来プロテインＡ溶液を提供すること、ここで、当該培地は、動物の生成物を含まないものである；
（ｂ）濾過したプロテインＡ溶液を第１カラムに負荷すること；
（ｃ）バッファー−塩混合物でカラムを洗浄し、カラムから望まれない色および混入しているタンパク質を洗い流すこと；
（ｄ）プロテインＡを第１カラムから溶出し、プロテインＡ溶液貯留物を産生すること；
（ｅ）プロテインＡ溶液貯留物のｐＨおよび伝導率を調節すること；
（ｆ）プロテインＡ溶液貯留物からのプロテインＡを第２カラムに負荷すること；
（ｇ）バッファー−塩混合物で第２カラムを洗浄し、カラムから望まれない色および混入しているタンパク質を洗い流すこと；および、
（ｈ）プロテインＡを第２カラムから溶出し、精製プロテインＡ溶液を産生すること；
を含み、
ここで、第１カラムは、（１）陰イオン交換カラム、ＨＩＣカラムおよびセラミックのヒドロキシアパタイトカラムからなる群、または、（２）陽イオン交換カラムから選択され；そして、第１カラムが、陰イオン交換カラム、ＨＩＣカラムおよびセラミックのヒドロキシアパタイトカラムからなる群から選択されるカラムである場合、第２カラムは陽イオン交換カラムであり、第１カラムが陽イオン交換カラムである場合、第２カラムは、陰イオン交換カラム、ＨＩＣカラムおよびセラミックのヒドロキシアパタイトカラムからなる群から選択されるカラムである、方法。
【請求項２】
第１カラムが、陰イオン交換カラム、ＨＩＣカラムおよびセラミックのヒドロキシアパタイトカラムからなる群から選択され；そして、第２カラムが陽イオン交換カラムである、請求項１に記載の非動物由来プロテインＡの精製方法。
【請求項３】
付加的段階：
（ｉ）集めるのに適する分画を選択するために、第１カラムおよび第２カラムからの精製プロテインＡの各分画の、２７５ｎｍおよび３４０ｎｍの吸光度を監視し、Ａ２７５／Ａ３４０比を得ること、
を含む、請求項１に記載の精製方法。
【請求項４】
第１カラムが陰イオン交換カラムである、請求項２に記載の精製方法。
【請求項５】
第１カラムがＨＩＣカラムである、請求項２に記載の精製方法。
【請求項６】
第１カラムがセラミックのヒドロキシアパタイトカラムである、請求項２に記載の精製方法。
【請求項７】
さらなる段階：
（ｋ）精製プロテインＡ溶液を、乾燥生成物に乾燥させること、
を含む、請求項１に記載の精製方法。
【請求項８】
乾燥が凍結乾燥により起こる、請求項７に記載の精製方法。
【請求項９】
プロテインＡ溶液を第１カラムに負荷する前に、細菌細胞、粒子および低分子量分子（＜１０,０００ダルトン）を除去するために該プロテインＡ溶液を濾過するさらなる段階を含む、請求項１に記載の精製方法。
【請求項１０】
第１カラムが陽イオン交換カラムであり、第２カラムが、陰イオン交換カラム、ＨＩＣカラムおよびセラミックのヒドロキシアパタイトカラムからなる群から選択されるカラムである、請求項１に記載の非動物由来プロテインＡの精製方法。
【請求項１１】
付加的段階：
（ｉ）集めるのに適する分画を選択するために、第１および第２カラムからの精製プロテインＡの各分画の、２７５ｎｍおよび３４０ｎｍの吸光度を監視し、Ａ２７５／Ａ３４０比を得ること、
を含む、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１２】
第２カラムが陰イオン交換カラムである、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１３】
第２カラムがＨＩＣカラムである、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１４】
第２カラムがセラミックのヒドロキシアパタイトカラムである、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１５】
さらなる段階：
（ｊ）精製プロテインＡ溶液を、乾燥生成物に乾燥させること、
を含む、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１６】
乾燥が凍結乾燥により起こる、請求項１５に記載の精製方法。
【請求項１７】
プロテインＡ溶液を陽イオン交換カラムに負荷する前に、細菌細胞、粒子および低分子量分子（＜１０,０００ダルトン）を除去するために該プロテインＡ溶液を濾過するさらなる段階を含む、請求項１０に記載の精製方法。
【請求項１８】
ベジタリアンプロテインＡ−クロマトグラフィー樹脂を形成させるための、請求項１の方法により産生され、クロマトグラフィー樹脂に固定された、精製ベジタリアンプロテインＡ。
【請求項１９】
クロマトグラフィー樹脂が合成ポリマーまたは無定形物質である、請求項１８に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２０】
クロマトグラフィー樹脂が、ポリメタクリレートまたはポリガラクトースからなる群から選択される合成ポリマーである、請求項１９に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２１】
クロマトグラフィー樹脂が、シリカまたは珪藻土からなる群から選択される無定形物質である、請求項１９に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２２】
ベジタリアンプロテインＡのカルボキシルまたはアミノ基を、クロマトグラフィー樹脂の化学的官能基と反応させることにより産生される、請求項１８に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２３】
プロテインＡ−クロマトグラフィー樹脂を形成させるための、請求項２の方法により産生され、クロマトグラフィー樹脂に固定された、精製ベジタリアンプロテインＡ。
【請求項２４】
クロマトグラフィー樹脂が合成ポリマーまたは無定形物質である、請求項２３に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２５】
クロマトグラフィー樹脂が、ポリメタクリレートまたはポリガラクトースからなる群から選択される合成ポリマーである、請求項２４に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２６】
クロマトグラフィー樹脂が、シリカまたは珪藻土からなる群から選択される無定形物質である、請求項２４に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２７】
ベジタリアンプロテインＡのカルボキシルまたはアミノ基を、クロマトグラフィー樹脂の化学的官能基と反応させることにより産生される、請求項２３に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項２８】
抗体または抗体断片を請求項２３のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィーカラムと接触させることを含む、クロマトグラフィー樹脂への抗体または抗体断片の結合方法。
【請求項２９】
抗体または抗体断片を請求項２５のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィーカラムと接触させることを含む、クロマトグラフィー樹脂への抗体または抗体断片の結合方法。
【請求項３０】
プロテインＡ−クロマトグラフィー樹脂を形成させるために、請求項１０の方法により産生され、クロマトグラフィー樹脂に固定された、精製ベジタリアンプロテインＡ。
【請求項３１】
クロマトグラフィー樹脂が合成ポリマーまたは無定形物質である、請求項３０に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項３２】
クロマトグラフィー樹脂が、ポリメタクリレートまたはポリガラクトースからなる群から選択される合成ポリマーである、請求項３１に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項３３】
クロマトグラフィー樹脂が、シリカまたは珪藻土からなる群から選択される無定形物質である、請求項３１に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項３４】
ベジタリアンプロテインＡのカルボキシルまたはアミノ基を、クロマトグラフィー樹脂の化学的官能基と反応させることにより産生される、請求項３０に記載のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂。
【請求項３５】
抗体または抗体断片を請求項１８のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィー樹脂と接触させることを含む、クロマトグラフィー樹脂への抗体または抗体断片の結合方法。
【請求項３６】
請求項３５の方法によりベジタリアンプロテインＡに結合した、抗体または抗体断片。
【請求項３７】
抗体または抗体断片を請求項２３のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィーカラムと接触させることを含む、クロマトグラフィー樹脂への抗体または抗体断片の結合方法。
【請求項３８】
請求項３７の方法によりベジタリアンプロテインＡに結合した、抗体または抗体断片。
【請求項３９】
抗体または抗体断片を請求項３０のベジタリアンプロテインＡクロマトグラフィーカラムに接触させることを含む、クロマトグラフィー樹脂への抗体または抗体断片の結合方法。
【請求項４０】
請求項３９の方法によりベジタリアンプロテインＡに結合した、抗体または抗体断片。