(57)【要約】  式（Ｉ）（式中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２、Ａ、Ｐｏｌｙは、明細書にて定義されるとおりである）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩である、第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１１２】
2020067507.tif 000124
［式（Ｉ）中、Ｄは第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの、第１級又は第２級アミノ基が有する水素原子を除いた残基を表し；Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり；Ａは置換又は無置換の２価の炭化水素基であって−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＮＨ−と結合する両端以外に１以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、当該ヘテロ原子はそれぞれ独立して−Ｏ−、置換基を有していてもよい-−ＮＨ−及び−Ｓ−からなる群より選択され；Ｒ１、Ｒ２及びＡのうち任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき；Ｐｏｌｙは酸性多糖残基を表し、Ｐｏｌｙに隣接する−Ｃ（＝Ｏ）−は前記酸性多糖のカルボキシ基に由来する］。
【請求項２】
前記式（Ｉ）が下記式（ＩＩ）で示される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１１３】
2020067507.tif 000125
［式（ＩＩ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＰｏｌｙは請求項１に定義されるとおりであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき、ｌ及びｎはそれぞれ独立して０、１又は２であり、ｍは０又は１である］。
【請求項３】
式（Ｉ）又は式（ＩＩ）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換の炭素数１〜６の直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状アルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換若しくは無置換の炭素数６〜１４の単環式若しくは多環式芳香族基、又は環構成原子として窒素原子、酸素原子若しくは硫黄原子を少なくとも１つ含む置換若しくは無置換の３〜８員環の複素環基であることを特徴とする、請求項１又は請求項２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
式（Ｉ）又は式（ＩＩ）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で表される基におけるアルキルの置換基、シクロアルキル基の置換基、アルケニル基の置換基、シクロアルケニルル基の置換基、アルキニル基の置換基、芳香族基の置換基及び複素環基の置換基が、水酸基、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、ハロゲン原子、芳香族基、複素環基、アルコキシ基、グアニジノ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アシル基、置換スルホニル基、ヘテロシクリルオキシ基、ヘテロシクリルチオ基、アミド基、ウレイド基、カルボキシ基、カルバモイル基、オキソ基、チオキソ基、スルファモイル基、スルホ基、シアノ基、ニトロ基、アシルオキシ基、アジド基、スルホンアミド基、メルカプト基、アルコキシカルボニルアミノ基、アミノカルボニルオキシ基、置換スルフィニル基、スルファミド基、アミノスルホニルオキシ基、アルコキシスルホニルアミノ基、置換スルホニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルオキシ基、アルコキシスルホニル基、Ｒｘ（Ｒｙ）Ｎ基及びＲｘ（Ｒｙ）（Ｒｚ）Ｎ＋基から選ばれる基であり、Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚはそれぞれ独立して水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族炭化水素基又は複素環基からなる群から選択され、このとき、Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚのうち２つ以上が一体となって飽和又は不飽和の複素環を形成してもよい、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
式（Ｉ）又は（ＩＩ）中、Ｐｏｌｙがグリコサミノグリカン残基である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
式（Ｉ）又は（ＩＩ）中、Ｐｏｌｙがコンドロイチン、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸残基である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
下記式（ＸＸ）で示される請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１１４】
2020067507.tif 000126
［式（ＸＸ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＡは請求項１に定義したとおりであり、
【化１１５】
2020067507.tif 000127
で示される部分は、酸性多糖のカルボキシ基に由来する基及びカルボキシ基を除いたポリマーを表し；ｑは前記ポリマーに縮合させた化合物の数を表し；ｒはカルボキシ基の置換数を表す。］。
【請求項８】
前記式（ＸＸ）で示される化合物が下記式（ＸＸＸ）で示される化合物である、請求項７に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩：
【化１１６】
2020067507.tif 000128
［式（ＸＸＸ）中、Ｄ、Ｒ１及びＲ２は請求項１に定義されるとおりであり、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は請求項２に定義されるとおりであり、ｑ及びｒは請求項７に記載されるとおりであり、
【化１１７】
2020067507.tif 000129
で示される部分は、カルボキシ基に由来する基及びカルボキシ基を除いたポリマーを表す。］。
【請求項９】
下記式（ＩＩＩ）で示される化合物と下記式（ＩＶ）で示される酸性多糖とを縮合する工程を含む、下記式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の製造方法：
【化１１８】
2020067507.tif 000130
［式（Ｉ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）におけるＤ、Ａ、Ｒ１、Ｒ２及びＰｏｌｙは、請求項１に定義されるとおりであり、また式（ＩＩＩ）で示される化合物は無機酸又は有機酸との塩を形成していてもよい。］。
【請求項１０】
第１級又は第２級アミン化合物と、酸性多糖とを下記式（Ｖ）で示されるリンカーを介して結合させる工程を含む、コンジュゲートの製造方法：
【化１１９】
2020067507.tif 000131
（ここで、上記の（Ｖ）におけるＲ１、Ｒ２及びＡは、請求項１に定義されるとおりであり、記号†は、第１級又は第２級アミン化合物のアミノ基の窒素原子との結合点を表し、記号‡は、酸性多糖のカルボキシ基に由来するカルボニル炭素との結合点を意味する。）。
【請求項１１】
前記リンカーが、下記式（ＶＩ）で表される、請求項１０に記載のコンジュゲートの製造方法：
【化１２０】
2020067507.tif 000132
（ここで、上記の（ＶＩ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｌ、ｍ及びｎは請求項２に定義されるとおりであり、記号†及び‡は請求項９に定義されるとおりである。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートとその製造方法に関するものである。詳しくは、本発明は放出速度制御可能なアミノアシルオキシメチル基をリンカーとした第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートとその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
薬物とポリマーとのコンジュゲートはプロドラッグ又はドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）の領域で広く検討されており、放出制御、吸収改善、生体内安定化又は目的組織へのターゲッティング等の機能を持たせるうえで重要な手段の一つになっている。
例えば、水溶性非ポリペプチドオリゴマーとカルシミメティクスとのコンジュゲートが米国特許公開第２０１２／２３８６２１号に報告されている。また、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）とゴシポールとのコンジュゲートが特許第５６９０９４４号公報に報告されている。コンジュゲートに使用されるポリマーとして食物繊維の一つであるアルギン酸も検討されており、アルギン酸と各種薬物とのコンジュゲートが特開平８−２４３２５号公報に報告されている。また、コンジュゲートに使用されるポリマーとしてグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）も広く検討されており、ヒアルロン酸又はコンドロイチン硫酸とペプチドとのコンジュゲートが米国特許第５９５５５７８号明細書に報告されている。さらに、ヘパリンと各種薬物とのコンジュゲートが国際公開第９３／１８７９３号に報告されている。また、コンジュゲートに使用されるポリマーとしてヒアルロン酸についても検討されており、ヒアルロン酸とタキサンとのコンジュゲートが国際公開第２００５／０８５２９４号、ヒアルロン酸とセリンプロテアーゼインヒビターなどのタンパク質とのコンジュゲートも特表２００６−５０４７４７号公報に報告されている。【０００３】
また、ＧＡＧと第１級アミン薬物とを還元的アミノ化により結合する方法が、特表２０００−５０１０８２号公報に、モノマー構造中にカルボキシ基を有する多糖類である酸性多糖と第１級又は第２級アミン薬物とのアミド結合を形成する方法が特開平８−２４３２５号公報にそれぞれ報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許公開第２０１２／２３８６２１号
【特許文献２】特許第５６９０９４４号公報
【特許文献３】特開平８−２４３２５号公報
【特許文献４】米国特許第５９５５５７８号明細書
【特許文献５】国際公開第９３／１８７９３号
【特許文献６】国際公開第２００５／０８５２９４号
【特許文献７】特表２００６−５０４７４７号公報
【特許文献８】特表２０００−５０１０８２号公報
【特許文献９】国際公開第２０１２／０８８５２２号
【特許文献１０】特表２００３−５１１４２３号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】J. Control. Rel. 第８８巻、第３５頁−４２頁、２００３年
【非特許文献２】Expert Opin. Drug Deliv. 第９巻、第１３１９頁−１３２３頁、２０１２年
【非特許文献３】Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products、２０１４年
【非特許文献４】EMA/CHMP/SWP/647258/2012
【非特許文献５】講演2 「食物アレルギーを引き起こす意外なアレルゲン」第32回日本臨床皮膚科医会総会・臨床学術大会、２０１６年
【非特許文献６】J. Med. Chem. 第３９巻、第４２４頁−４３１頁、１９９６年
【非特許文献７】Anesthesia & Analgesia、第１０５巻、第７２４頁−７２８頁、２００７年
【非特許文献８】Int. J. Nanomed. 第７巻、第２９５７頁−２９６６頁、２０１２年
【発明の概要】
【０００６】
上述のとおり、薬物−ポリマーコンジュゲートは、種々検討されている。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は汎用的に用いられている水溶性ポリマーの一つであり、直鎖分子の末端に官能基を導入したＰＥＧと薬物とのコンジュゲートが国際公開第２０１２／０８８５２２号及び米国特許公開第２０１２／２３８６２１号に報告されている。また、ポリアミノ酸の一つであるポリ−γ−グルタミン酸（ＰＧＡ）を使用したコンジュゲートが特表２００３−５１１４２３号公報に報告されている。
これらコンジュゲート化のポリマーとしてＰＥＧやＰＧＡを用いた場合には薬物動態面或いは安全性面での懸念が報告されており、例えばJ. Control. Rel. 第８８巻、第３５頁−４２頁、２００３年及びExpert Opin. Drug Deliv. 第９巻、第１３１９頁−１３２３頁、２０１２年ではＰＥＧ製剤の投与により抗ＰＥＧ抗体が生成し、２回目以降の投与時のクリアランスが早くなるＡｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｌｅａｒａｎｃｅ現象（ＡＢＣ現象）が報告されている。また、アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）では、ＰＥＧ化タンパク製剤の臨床試験において、抗タンパク薬物抗体の測定に加えて、抗ＰＥＧ抗体の測定実施が推奨されている（Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products、２０１４年）。さらに、４０kDa以上のＰＥＧ化製剤の反復投与によるマクロファージや上衣細胞の空胞化が観察されている（EMA/CHMP/SWP/647258/2012）。納豆アレルギーの抗原物質でもあるＰＧＡに関しても、遅発性のアナフィラキシーショックを来すケースが報告されている(講演２「食物アレルギーを引き起こす意外なアレルゲン」、第32回日本臨床皮膚科医会総会・臨床学術大会、２０１６年)。
医薬品としてのコンジュゲートを考えた場合、安全性以外にも薬効発現、溶解性、徐放性能等も考慮する必要性がある。プロドラッグが薬物を遊離させるメカニズムとして、一般に加水分解が利用される。分子内にカルボキシ基又は水酸基を有する薬物の場合には酸性多糖とリンカーを介してエステル結合の形成が可能で、このエステル結合の加水分解による薬物遊離が可能である。一方、第１級又は第２級アミン薬物の場合、コンジュゲートにおいて形成される還元的アミノ化による結合又はアミド結合は加水分解を受けづらいため、十分な薬物遊離能を有していないことが予想される。分子内にカルボキシ基又は水酸基を持たない第１級又は第２級アミン薬物に関しては、従来の方法ではポリマーとリンカーを介してエステル結合を形成することができないため、プロドラッグの基本メカニズムである加水分解を利用した薬物放出制御が達成された酸性多糖コンジュゲートは存在していない。
コンジュゲート化は薬物の有する官能基に従って反応が選択されるため、従来の方法で徐放性を有する第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖とのコンジュゲートを得ることはできず、新規な方法の構築が望まれている。
【０００７】
また、コンジュゲートにおけるポリマー分子量はそのＤＤＳ製剤としての性能に深く関係しており、コンジュゲートの組織又は血中における滞留性や消化管からの吸収率は、ポリマー分子量の大きさに依存して向上することが報告されている（J. Med. Chem. 第３９巻、第４２４頁−４３１頁、１９９６年；Anesthesia & Analgesia、第１０５巻、第７２４頁−７２８頁、２００７年；Int. J. Nanomed. 第７巻、第２９５７頁−２９６６頁、２０１２年）。しかしながら、一般的にポリマーの高分子量化はポリマー自体の水溶性を低下させてしまい、結果として高分子量のポリマーを用いたコンジュゲートも水溶性が低下してしまう。このように、組織又は血中における滞留性向上を目的にした担体の高分子量化は単純ではなく、分子量と水溶性とのバランスを図ることが必要となる。ＰＥＧのような薬物と結合する反応点の少ないポリマーを用いる場合、必然的にポリマー１分子に対しての薬物導入量は低くなり、高分子量体を用いた場合は溶解性の問題から薬液中の薬物量の著しい低下を招き、薬効発現に必要な薬物濃度に達しない可能性がある。さらにはＰＥＧでは、上述したように４０kDa以上の分子量にて毒性の懸念が増すため、ポリマーの高分子量化には不利な担体と言える。
【０００８】
本発明は、第１級又は第２級アミン化合物を有し、高い薬物濃度、滞留性、溶解性を兼ね備えた、新規なコンジュゲートの提供とその製造方法を提供することを目的とする。本発明は特に、第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートの提供とその製造方法を提供することを目的とする。
【０００９】
本発明者らは、第１級又は第２級アミン薬物に対して達成されていなかったこれらコンジュゲートの課題に対して鋭意検討した結果、放出速度制御可能なアミノアシルオキシメチル基をリンカーとした第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートを見出し、本発明を完成するに至ったものである。本発明は、第１級又は第２級アミン化合物と酸性多糖との新規なコンジュゲートとその製造方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例２２、２３、２９、３１についての、ｐＨ７．０の緩衝液中における、時間と薬物の遊離率の関係を示すグラフである。
【図２】実施例３４、６３、６９についての、ｐＨ７．０の緩衝液中における、時間と薬物の遊離率の関係から示すグラフである。
【図３】実施例８０についての、ｐＨ７．０の緩衝液中における、時間と薬物の遊離率の関係を示すグラフである。
【図４】実施例３６、３８、４１、４７についての、ｐＨ７．０の緩衝液中における、時間と薬物の遊離率の関係を示すグラフである。
【図５】実施例８６、８８、８９についての、ｐＨ７．０の緩衝液中における、時間と薬物の遊離率の関係を示すグラフである。
【図６】実施例８１及び参考例１についての、０．２２μｍフィルターの濾過性を、薬物濃度と溶液通過率の関係から示すグラフである。
【図７】実施例８２及び参考例１についての、０．２２μｍフィルターの濾過性を、薬物濃度と溶液通過率の関係から示すグラフである。
【図８】実施例８４、８５及び参考例２についての、０．２２μｍフィルターの濾過性を、薬物濃度と溶液通過率の関係から示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の一側面にかかるコンジュゲートは、以下の一般式（Ｉ）で示される構造を有する化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【化１】
2020067507.tif 000002
式（Ｉ）中、Ｄは第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの、第１級又は第２級アミノ基が有する水素原子を除いた残基を表し；Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり；Ａは置換又は無置換の２価の炭化水素基であって−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＮＨ−と結合する両端以外に１以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、当該ヘテロ原子はそれぞれ独立して−Ｏ−、置換基を有していてもよい−ＮＨ−及び−Ｓ−からなる群から選択され；Ｒ１、Ｒ２及びＡのうち任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき；Ｐｏｌｙは酸性多糖残基を表し、Ｐｏｌｙに隣接する−Ｃ（＝Ｏ）−は前記酸性多糖のカルボキシ基に由来する。
Ｐｏｌｙ−ＣＯで表される、酸性多糖Ｐｏｌｙ−ＣＯ２Ｈの、アミン体との縮合に利用されているカルボキシ基のＯＨ部分を除いた構造と、Ｄで表される、それ自体又はその薬学的に許容される塩が第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの、第１級又は第２級アミノ基が有する水素原子を除いた構造とが、Ａを含むリンカーを介して結合されることにより、コンジュゲートを形成する。コンジュゲートは好ましくは、第１級又は第２級アミノ基を含有する薬物とのコンジュゲートである。以下、Ｄに関する記載においては、第１級又は第２級アミン又はそれらの薬学的に許容される塩であるものをまとめて「第１級又は第２級アミン化合物」として説明することがある。
前述のように、コンジュゲートの部分構造であるポリマーの高分子化はＤＤＳ製剤の機能を考える上で重要な因子となるが、ＰＥＧは構造上の問題や毒性の懸念から高分子化には不利な担体である。一方、酸性多糖をコンジュゲートの担体として用いた場合、後述の試験結果で示すようにポリマーを高分子量化しても尚、高い薬物担持量を確保し、かつ毒性の懸念も少ない医薬組成物を調製することが可能である。
本発明で見出した構造を有するリンカーは、新規な第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートを製造可能とするものであり、そのコンジュゲートは酸性多糖を担体として用いたことにより、従来技術と比較して安全性、ポリマー分子量、薬物担持量等の点で実用性の高い医薬組成物の提供が可能となる。この発明による医療等への貢献度は多大なものである。
【００１２】
コンジュゲートは、酸性多糖残基のカルボキシ基がアミド結合を形成することでリンカー中の炭化水素鎖（上記式（Ｉ）においてＡで表される２価の炭化水素基）と結合する。
Ａで表される２価の炭化水素基は、炭素数１以上の炭素鎖であればよく、分岐構造、環状構造をとっていてもよい。２価の炭化水素基Ａが分岐構造を有する場合、上記一般式（Ｉ）においてＡが結合するカルボニル基及びＮＨ基を最小の原子数で連結する分子鎖の少なくとも１点に、水素原子以外の原子が結合するような構造をとることができる。そのような分岐構造の例としては、２−メチル−１，３−プロピレニル、１−フェニル−１，３−プロピレニルのような構造が挙げられる。２価の炭化水素基Ａの一部が環状構造をとる場合、当該環は同じ原子であってもよい環の任意の２点でＡの残りの部分と結合することができる。そのような環状構造の例としては、１，２−フェニレン、１，４−シクロヘキシレン、１，１−シクロプロペニレンなどが挙げられる。さらに、他の部分構造、特に前記式（Ｉ）において−Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）−で表される構造と一体となって環を形成することもできる。また、２価の炭化水素基Ａは、任意の位置に置換基を有していてもよく、置換基の例としては、前述のＲ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の基として例示されているものを挙げることができる。Ａは、好ましくは下記一般式（ＩＩ）が有するような、−Ｃ（Ｒ３）（Ｒ４）−（ＣＨ２）ｌ−（Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６））ｍ−（ＣＨ２）ｎ−で表される２価の炭化水素基である（ここで、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｌ、ｍ及びｎは、先に定義したとおりである）。設計、原料入手の容易さから、Ａは炭素数１〜１０の直鎖又は分岐状アルキレン基であることが好ましく、Ａは炭素数１〜６であることがさらに好ましい。
前記式（Ｉ）で示されるコンジュゲートは、下記式（ＩＩ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩であることが好ましい。
【化２】
2020067507.tif 000003
式（ＩＩ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＰｏｌｙは先に定義されるとおりであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき、ｌ及びｎはそれぞれ独立して０、１又は２であり、ｍは０又は１である。
【００１３】
前記式（Ｉ）において−、Ａは、エステル結合を介してＣ（Ｒ１）（Ｒ２）−で表されるて、置換又は無置換のメチレン基と結合している。一方、第１級又は第２級アミン化合物はウレタン結合を介して当該メチレン基に結合している。したがって、エステル結合の酸素原子−メチレン基の炭素原子−ウレタン結合の酸素原子−ウレタン結合の炭素原子−第１級又は第２級アミン化合物ＤＨに由来する窒素原子、の順で結合を形成する。メチレン基は無置換でも、置換されていてもよく、置換されている場合、２つの置換基が一緒になって環を形成していてもよく、前記２価の炭化水素基Ａの一部（即ち一般式（ＩＩ）においてはＲ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６）の少なくとも１点と結合して環を形成していてもよい。当該環は、縮合環、スピロ環であってもよい。第１級又は第２級アミン化合物ＤＨは、リンカーを介して、ウレタンとしてコンジュゲートの構造中に存在する。
【００１４】
コンジュゲートの末端にある、第１級又は第２級アミン化合物ＤＨを含むウレタン構造Ｄ−ＣＯＯは、これに結合するオキシメチレン基の存在により速やかに分解し、第１級又は第２級アミン化合物ＤＨを遊離することができる。この機構を前記式（Ｉ）で示される化合物を用いて説明すると、以下のとおりである。前記式（Ｉ）で示される第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートは、水の存在下ではエステル結合部分の加水分解が進行し、式（ＶＩＩ）で示されるヒドロキシメチル体と式（ＶＩＩＩ）で示されるカルボン酸体とに分解される。更に式（ＶＩＩ）で示されるヒドロキシメチル体は、ウレタン構造を有することから構造的に不安定であるため、速やかに式（ＩＸ）で示される第１級又は第２級アミン化合物ＤＨと式（Ｘ）で示される二酸化炭素、及び式（ＸＩ）で示されるアルデヒド体（又はケトン体）とに分解される。ここで生成した第１級又は第２級アミン化合物の持つ機能が発揮されるものである。故に、前記式（Ｉ）で示される第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートは、エステル結合部分の加水分解速度を制御することにより、第１級又は第２級アミン化合物の放出を制御し、その第１級又は第２級アミン化合物の持つ機能の持続力を制御することが可能である。
【化３】
2020067507.tif 000004
【００１５】
本発明における第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートの一つの態様は、前記式（Ｉ）又は（ＩＩ）で示される化合物であり、（Ｉ）又は（ＩＩ）で示される化合物製造の重要中間体であるアミン体は、以下の式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示される化合物である。
【化４】
2020067507.tif 000005
【化５】
2020067507.tif 000006
式中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａ、ｌ、ｍ及びｎは、先に定義したとおりである。上記式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示される化合物は、更に無機酸又は有機酸との塩を形成してもよい。
【００１６】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＸＩＩ）において置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で示される基が包含するアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族基及び複素環基としては、具体的には以下の基が挙げられる。
【００１７】
アルキル基としては、直鎖状又は分岐状のアルキル基のいずれでもよい。また、アルキル基の炭素数は好ましくは１、２、３、４、５又は６であり、例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、２−プロピル、ｎ−ブチル基、１−メチルプロピル基、１，１−ジメチルエチル基、２−メチルプロピル基、ｎ−ペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、３−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、１，１−ジメチルプロピル基、１，２−ジメチルプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１，１，２−トリメチルプロピル基、１−エチル−１−メチルプロピル基、１−エチル−２−メチルプロピル基等を挙げることができる。
【００１８】
シクロアルキル基は、結合点の炭素原子が環を構成する原子として含まれるものであればいずれでもよく、シクロアルカン、シクロアルケン、芳香族環又は複素環と縮合したもの、又はスピロ環を形成してもよい。また、シクロアルキル基の炭素数は、好ましくは３、４、５、６、７又は８である。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基を挙げることができる。
【００１９】
アルケニル基としては、直鎖状又は分岐状のアルケニル基のいずれでもよい。また、アルケニル基の炭素数は、好ましくは２、３、４、５又は６である。アルケニル基の例としては、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−メチルビニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、１−エチルビニル基、１−メチル−１−プロペニル基、１−メチル−２−プロペニル基、２−メチル−１−プロペニル基、２−メチル−２−プロペニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１−プロピルビニル基、１−メチル−１−ブテニル基、１−メチル−２−ブテニル基、１−メチル−３−ブテニル基、２−メチル−１−ブテニル基、２−メチル−２−ブテニル基、２−メチル−３−ブテニル基、３−メチル−１−ブテニル基、３−メチル−２−ブテニル基、３−メチル−３−ブテニル基、１−エチル−１−プロペニル基、１−エチル−２―プロペニル基、１−（２−メチルエチル）ビニル基、１，２−ジメチル−１−プロペニル基、１，２−ジメチル−２−プロペニル基、１，１−ジメチル−２−プロペニル基、１−ヘキセニル基、２−ヘキセニル基、３−ヘキセニル基、４−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、１−ブチルビニル基、１−メチル−１−ペンテニル基、１−メチル−２−ペンテニル基、１−メチル−３−ペンテニル基、１−メチル−４−ペンテニル基、２−メチル−１−ペンテニル基、２−メチル−２−ペンテニル基、２−メチル−３−ペンテニル基、２−メチル−４−ペンテニル基、３−メチル−１−ペンテニル基、３−メチル−２−ペンテニル基、３−メチル−３−ペンテニル基、３−メチル−４−ペンテニル基、４−メチル−１−ペンテニル基、４−メチル−２−ペンテニル基、４−メチル−３−ペンテニル基、４−メチル−４−ペンテニル基、１−プロピル−１−プロペニル基、１−プロピル−２−プロペニル基、１−エチル−１−ブテニル基、１−エチル−２−ブテニル基、１−エチル−３−ブテニル基、２−エチルー１−ブテニル基、２−エチル−２−ブテニル基、２−エチル−３−ブテニル基、１−（２−メチルプロピル）ビニル基、１，２−ジメチル−１−ブテニル基、１，２−ジメチル−２−ブテニル基、１，２−ジメチル−３−ブテニル基、１−（３−メチルプロピル）ビニル基、１，３−ジメチル−１−ブテニル基、１，３−ジメチル−２−ブテニル基、１，３−ジメチル−３−ブテニル基、２，３−ジメチル−１−ブテニル基、２，３−ジメチル−２−ブテニル基、２，３−ジメチル−３−ブテニル基、３，３−ジメチル−１−ブテニル基、２，２−ジメチル−３−ブテニル基、１，１−ジメチル−２−ブテニル基、１，１―ジメチル−３−ブテニル基、１，１，２−トリメチル−２−プロペニル基、１−エチル−１−メチル−２−プロペニル基、１−エチル−２−メチル−１−プロペニル基、１−エチル−２−メチル−２−プロペニル基、１−（１−メチルエチル）−１−プロペニル基、１−（１−メチルエチル）−２−プロペニル基等を挙げることができる。
【００２０】
シクロアルケニル基は、結合点の炭素原子及びＣ＝Ｃ二重結合が環を構成する原子として含まれるものであればいずれでもよく、シクロアルカン、シクロアルケン、芳香族環又は複素環と縮合したもの、若しくはスピロ環を形成してもよい。また、シクロアルケニル基の炭素数は好ましくは３、４、５、６、７又は８である。シクロアルケニル基の例としては、１−シクロプロペン−１−イル基、２−シクロプロペン−１−イル基、１−シクロブテン−１−イル基、２−シクロブテン−１−イル基、１−シクロペンテン−１−イル基、２−シクロペンテン−１−イル基、３−シクロペンテン−１−イル基、１−シクロヘキセン−１−イル基、２−シクロヘキセン−１−イル基、３−シクロヘキセン−１−イル基、１−シクロヘプテン−１−イル基、２−シクロヘプテン−１−イル基、３−シクロヘプテン−１−イル基、４−シクロヘプテン−１−イル基、１−シクロオクテン−１−イル基、２−シクロオクテン−１−イル基、３−シクロオクテン−１−イル基、４−シクロオクテン−１−イル基、１，３−シクロペンタジエン−１−イル基、２，４−シクロペンタジエン−１−イル基、１，３−シクロヘキサジエン−１−イル基、１，４−シクロヘキサジエン−１−イル基、１，５−シクロヘキサジエン−１−イル基、２，４−シクロヘキサジエン−１−イル基、２，５−シクロヘキサジエン−１−イル基、１，３−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，４−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，５−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，６−シクロヘプタジエン−１−イル基、２，４−シクロヘプタジエン−１−イル基、２，５−シクロヘプタジエン−１−イル基、２，６−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，４−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，５−シクロヘプタジエン−１−イル基、３，５−シクロヘプタジエン−１−イル基、１，３−シクロオクタジエン−１−イル基、１，４−シクロオクタジエン−１−イル基、１，５−シクロオクタジエン−１−イル基、１，６−シクロオクタジエン−１−イル基、１，７−シクロオクタジエン−１−イル基、２，４−シクロオクタジエン−１−イル基、２，５−シクロオクタジエン−１−イル基、２，６−シクロオクタジエン−１−イル基、２，７−シクロオクタジエン−１−イル基、３，５−シクロオクタジエン−１−イル基、３，６−シクロオクタジエン−１−イル基、１，３，５−シクロヘプタトリエン−１−イル基、１，３，６−シクロヘプタトリエン−１−イル基、１，４，６−シクロヘプタトリエン−１−イル基、２，４，６−シクロヘプタトリエン−１−イル基、１，３，５−シクロオクタトリエン−１−イル基、１，３，６−シクロオクタトリエン−１−イル基、１，３，７−シクロオクタトリエン−１−イル基、１，４，６−シクロオクタトリエン−１−イル基、１，４，７−シクロオクタトリエン−１−イル基、１，５，７−シクロオクタトリエン−１−イル基、２，４，６−シクロオクタトリエン−１−イル基、２，４，７−シクロオクタトリエン−１−イル基、シクロオクタテトラエン−１−イル基等を挙げることができる。
【００２１】
アルキニル基としては、直鎖状、分岐鎖状又は環状のいずれでもよい。また、アルキニル基の炭素数は、好ましくは２、３、４、５又は６である。アルキニル基の例としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、１−メチル−２−プロピニル基、１−ペンチニル基、２−ペンチニル基、３−ペンチニル基、４−ペンチニル基、１−メチル−２−ブチニル基、１−メチル−３−ブチニル基、２−メチル−３−ブチニル基、３−メチル−１−ブチニル基、１−エチル−２−プロピニル基、１，１−ジメチル−２−プロピニル基、１−ヘキシニル基、２−ヘキシニル基、３−ヘキシニル基、４−ヘキシニル基、１−メチル−２−ペンチニル基、１−メチル−３−ペンチニル基、１−メチル−４−ペンチニル基、２−メチル−３−ペンチニル基、２−メチル−４−ペンチニル基、３−メチル−１−ペンチニル基、３−メチル−４−ペンチニル基、４−メチル−１−ペンチニル基、４−メチル−２−ペンチニル基、１−ブチル−２−プロピニル基、１−エチル−２−ブチニル基、１−エチル−３−ブチニル基、２−エチル−３−ブチニル基、１，１−ジメチル−２−ブチニル基、１，１−ジメチル−３−ブチニル基、１，２−ジメチル−３−ブチニル基、２，２−ジメチル−３−ブチニル基、３，３−ジメチル−１−ブチニル基、１−エチル−１−メチル−２−プロピニル基、１−（２−メチルエチル）−２−プロピニル基、２−シクロヘキシン−１−イル基、３−シクロヘキシン−１−イル基等を挙げることができる。
【００２２】
芳香族基としては、単環式でも多環式でもよく、シクロアルカン、シクロアルケン、芳香族環又は複素環と縮合してもよい。また、芳香族基の炭素数は、好ましくは６、７、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４である。芳香族基の例としては、フェニル基、ナフチル基、アントラセニル基等を挙げることができる。
【００２３】
複素環基としては、環構成原子として窒素原子、酸素原子又は硫黄原子等の複素原子を少なくとも１以上含み、これらはシクロアルカン、シクロアルケン、芳香族環又は複素環と縮合しても、スピロ環を形成してもよい。また、複素環の環の大きさは、好ましくは３、４、５、６、７又は８員環である。複素環の例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ジアゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジノ基、ホモピペリジノ基、ピラゾリジニル基、イミダゾリジニル基、トリアゾリジニル基、テトラゾリジニル基、オキサゾリジニル基、イソオキサゾリジニル基、チアゾリジニル基、イソチアゾリジニル基、オキサジアゾリジニル基、チアジアゾリジニル基、ピペラジニル基、ホモピペラジニル基、トリアゼパニル基、モルホリノ基、チオモルホリノ基、キヌクリジニル基、トロパニル基、ピロリニル基、ピラゾリニル基、イミダゾリニル基、オキサゾリニル基、チアゾリニル基、イソオキサゾリニル基、イソチアゾリニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、ジヒドロオキサゾリル基、テトラヒドロオキサゾリル基、イソオキサゾリル基、ジヒドロイソオキサゾリル基、テトラヒドロイソオキサゾリル基、チアゾリル基、ジヒドロチアゾリル基、テトラヒドロチアゾリル基、イソチアゾリル基、ジヒドロイソチアゾリル基、テトラヒドロイソチアゾリル基、トリアゾリニル基、トリアゾリル基、オキソジアゾリル基、ジヒドロオキソジアゾリル基、テトラヒドロオキソジアゾリル基、チアジアゾリル基、ジヒドロチアジアゾリル基、テトラヒドロチアジアゾリル基、テトラゾリニル基、テトラゾリル基、フラザニル基、ジヒドロフラザニル基、テトラヒドロフラザニル基、ピペリデイニル基、トリアジナニル基、ピリジル基、ジヒドロピリジル基、テトラヒドロピリジル基、ピラジニル基、ジヒドロピラジニル基、テトラヒドロピラジニル基、ピリミジニル基、ジヒドロピリミジニル基、テトラヒドロピリミジニル基、パーヒドロピリミジニル基、ピリダジニル基、ジヒドロピリダジニル基、テトラヒドロピリダジニル基、パーヒドロピリダジニル基、トリアジニル基、ジヒドロトリアジニル基、テトラヒドロトリアジニル基、オキサジニル基、ジヒドロオキサジニル基、テトラヒドロオキサジニル基、オキサジアジニル基、ジヒドロオキサジアジニル基、テトラヒドロオキサジアジニル基、チアジニル基、ジヒドロチアジニル基、テトラヒドロチアジニル基、チアジアジニル基、ジヒドロチアジアジニル基、テトラヒドロチアジアジニル基、アゼピニル基、ジヒドロアゼピニル基、テトラヒドロアゼピニル基、パーヒドロアゼピニル基、ジアゼピニル基、ジヒドロジアゼピニル基、テトラヒドロジアゼピニル基、パーヒドロジアゼピニル基、オキサゼピニル基、ジヒドロオキサゼピニル基、テトラヒドロオキサゼピニル基、パーヒドロオキサゼピニル基、オキサジアゼピニル基、ジヒドロオキサジアゼピニル基、テトラヒドロオキサジアゼピニル基、パーヒドロオキサジアゼピニル基、チアゼピニル基、ジヒドロチアゼピニル基、テトラヒドロチアゼピニル基、パーヒドロチアゼピニル基、チアジアゼピニル基、ジヒドロチアジアゼピニル基、テトラヒドロチアジアゼピニル基、パーヒドロチアジアゼピニル基、トリアゼピニル基、ジヒドロトリアゼピニル基、テトラヒドロトリアゼピニル基、パーヒドロトリアゼピニル基、アゾシニル基、ジヒドロアゾシニル基、テトラヒドロアゾシニル基、オキソヒドロアゾシニル基、パーヒドロアゾシニル基、モルファニル基、ベンザゾシニル基、アゼピンドリル基、インドリニル基、インドレニニル基、イソインドリニル基、イソインドレニニル基、インドリル基、パーヒドロインドリル基、イソインドリル基、パーヒドロイソインドリル基、インドリジニル基、インドリジジニル基、イミダゾピリジノ基、インダゾリル基、ジヒドロインダゾリル基、パーヒドロインダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、ジヒドロベンゾイミダゾリル基、パーヒドロベンゾイミダゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ジヒドロベンゾオキサゾリル基、パーヒドロベンゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ジヒドロベンゾチアゾリル基、パーヒドロベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ベンゾチアジアゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、プリニル基、キノリル基、ジヒドロキノリル基、テトラヒドロキノリル基、パーヒドロキノリル基、キノリジニル基、ジヒドロキノリジニル基、テトラヒドロキノリジニル基、イソキノリニル基、ジヒドロイソキノリニル基、テトラヒドロイソキノリニル基、パーヒドロイソキノリニル基、シンノリニル基、ジヒドロシンノリニル基、テトラヒドロシンノリニル基、パーヒドロシンノリニル基、キナゾリニル基、ジヒドロキナゾリニル基、テトラヒドロキナゾリニル基、パーヒドロキナゾリニル基、フタラジニル基、ジヒドロフタラジニル基、テトラヒドロフタラジニル基、パーヒドロフタラジニル基、キノキサリニル基、ジヒドロキノキサリニル基、テトラヒドロキノキサリニル基、パーヒドロキノキサリニル基、ナフチリジニル基、ジヒドロナフチリジニル基、テトラヒドロナフチリジニル基、パーヒドロナフチリジニル基、プテリジニル基、キノリリジニル基、ジヒドロベンゾオキサジニル基、ジヒドロベンゾチアジニル基、ベンゾアゼピニル基、ジヒドロベンゾアゼピニル基、テトラヒドロベンゾアゼピニル基、ベンゾジアゼピニル基、ジヒドロベンゾジアゼピニル基、テトラヒドロベンゾジアゼピニル基、ベンゾオキサゼピニル基、ジヒドロベンゾオキサゼピニル基、テトラヒドロベンゾオキサゼピニル基、ベンゾチアゼピニル基、ジヒドロベンゾチアゼピニル基、テトラヒドロベンゾチアゼピニル基、ベンゾオキサジアゼピニル基、ベンゾチアゼアゼピニル基、ベンザゼピニル基、ピリドアゼピニル基、カルバゾリル基、ジヒドロカルバゾリル基、テトラヒドロカルバゾリル基、パーヒドロカルバゾリル基、β−カルボリニル基、ジヒドロβ−カルボリニル基、テトラヒドロβ−カルボリニル基、パーヒドロβ−カルボリニル基、アクリジニル基、ジヒドロアクリジニル基、テトラヒドロアクリジンニル基、パーヒドロアクリジニル基、フェナジニル基、ジヒドロフェナジニル基、テトラヒドロフェナジニル基、パーヒドロフェナジニル基、フェノチアジニル基、ジヒドロヒドロフェノチアジニル基、テトラヒドロフェノチアジニル基、パーヒドロフェノチアジニル基、フェノキサジニル基、ジヒドロフェノキサジニル基、テトラヒドロフ���ノキサジニル基、パーヒドロフェノキサジニル基、フェナルサジニル基、フェナントリジニル基、ジヒドロフェナントリジニル基、テトラヒドロフェナントリジニル基、パーヒドロフェナントリジニル基、フェナントロリニル基、ジヒドロフェナントロリニル基、テトラヒドロフェナントロリニル基、パーヒドロフェナントロリニル基、ペリミジニル基、ジヒドロペリミジニル基、テトラヒドロペリミジニル基、パーヒドロペリミジニル基、プテリニル基、ピロリリジニル基、モルフィナニル基、ハスバナニル基、フリル基、ジヒドロフリル基、テトラヒドロフリル基、ピラニル基、ジヒドロピラニル基、テトラヒドロピラニル基、オキセピニル基、ジヒドロオキセピニル基、テトラヒドロオキセピニル基、パーヒドロオキセピニル基、チエニル基、ジヒドロチエニル基、テトラヒドロチエニル基、チオピラニル基、ジヒドロチオピラニル基、テトラヒドロチオピラニル基、チエピニル基、ジヒドロチエピニル基、テトラヒドロチエピニル基、パーヒドロチエピニル基、ベンゾフリル基、ジヒドロベンゾフリル基、テトラヒドロベンゾフリル基、パーヒドロベンゾフリル基、イソベンゾフリル基、ジヒドロイソベンゾフリル基、テトラヒドロイソベンゾフリル基、パーヒドロイソベンゾフリル基、ベンゾチエニル基、ジヒドロベンゾチエニル基、テトラヒドロベンゾチエニル基、パーヒドロベンゾチエニル基、イソベンゾチエニル基、ジヒドロイソベンゾチエニル基、テトラヒドロイソベンゾチエニル基、パーヒドロイソベンゾチエニル基、ベンゾピラニル基、ジヒドロベンゾピラニル基、パーヒドロベンゾピラニル基、ベンゾチオピラニル基、ジヒドロベンゾチオピラニル基、パーヒドロベンゾチオピラニル基、ベンゾオキセピニル基、ジヒドロベンゾオキセピニル基、テトラヒドロベンゾオキセピニル基、パーヒドロベンゾオキセピニル基、ベンゾチエピニル基、ジヒドロベンゾチエピニル基、テトラヒドロベンゾチエピニル基、パーヒドロベンゾチエピニル基、ベンゾフリル基、ジヒドロジベンゾフリル基、テトラヒドロジベンゾフリル基、パーヒドロジベンゾフリル基、キサンテニル基、ジヒドロキサンテニル基、テトラヒドロキサンテニル基、パーヒドロキサンテニル基、ベンゾチエニル基、ジヒドロジベンゾチエニル基、テトラヒドロジベンゾチエニル基、パーヒドロジベンゾチエニル基、チオキサンテニル基、ジヒドロチオキサンテニル基、テトラヒドロチオキサンテニル基、パーヒドロチオキサンテニル基、フェノキサチイニル基、ジヒドロフェノキサチイニル基、テトラヒドロフェノキサチイニル基、パーヒドロフェノキサチイニル基、ジベンゾジオキシニル基、ジヒドロジベンゾジオキシニル基、テトラヒドロジベンゾジオキシニル基、パーヒドロジベンゾジオキシニル基、チアンスレニル基、ジヒドロチアンスレニル基、テトラヒドロチアンスレニル基、パーヒドロチアンスレニル基、オキシラニル基、オキセタニル基、チイラニル基、チエタニル基、オキサチイニル基、ジヒドロオキサチイニル基、テトラヒドロオキサチイニル基、ベンゾオキサチイニル基、ジヒドロベンゾオキサチイニル基、テトラヒドロベンゾオキサチイニル基、パーヒドロベンゾオキサチイニル基、ベンゾジオキセパニル基、ジオキ���ラニル基、ジオキサニル基、ジチオラニル基、ジチアニル基、ジオキソインダニル基、ベンゾジオキサニル基、クロマニル基、ベンゾジチオラニル基、ベンゾジチアニル基等を挙げることができ、不飽和複素環基の場合は少なくとも一部が水素化された複素環基も含む。
【００２４】
また、置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ任意の２つ又は３つの置換基が一体となって環を形成してもよい。その環としては、例えばシクロプロパン、シクロプロペン、シクロブタン、シクロブテン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロペンタジエン、シクロヘキサン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン、シクロヘプタン、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロヘプタトリエン、シクロオクタン、シクロオクテン、シクロオクタジエン、シクロオクタトリエン、アジリジン、アゼチジン、ジアゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ホモピペリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、オキサゾジアゾリジン、チアジアゾリジン、ピペラジン、ホモピペラジン。トリアゼパン、モルホリン、チオモルホリン、キヌクリジン、トロパン、ピロリン、ピラゾリン、イミダゾリン、オキサゾリン、チアゾリン、イソオキサゾリン、イソチアゾリン、ジヒドロオキサゾール、テトラヒドロオキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、テトラヒドロイソオキサゾール、ジヒドロチアゾール、テトラヒドロチアゾール、ジヒドロイソチアゾール、テトラヒドロイソチアゾール、トリアゾリン、ジヒドロオキサジアゾール、テトラヒドロオキサジアゾール、ジヒドロチアジアゾール、テトラヒドロチアジアゾール、ジヒドロフラザン、テトラヒドロフラザン、ピペリデイン、トリアジナン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、パーヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、パーヒドロピリダジン、オキサジン、ジヒドロオキサジン、テトラヒドロオキサジン、オキサジアジン、ジヒドロオキサジアジン、テトラヒドロオキサジアジン、チアジン、ジヒドロチアジン、テトラヒドロチアジン、チアジアジン、ジヒドロチアジアジン、テトラヒドロチアジアジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、パーヒドロアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、パーヒドロジアゼピン、オキサゼピン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサゼピン、オキサジアゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、チアゼピン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、パーヒドロチアゼピン、チアジアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、トリアゼピン、ジヒドロトリアゼピン、テトラヒドロトリアゼピン、パーヒドロトリアゼピン、アゾシン、ジヒドロアゾシン、テトラヒドロアゾシン、オキソヒドロアゾシン、パーヒドロアゾシン、モルファン、アゼピンドール、インドリン、インドレニン、イソインドリン、イソインドレニン、パーヒドロインドール、パーヒドロイソインドール、パーヒドロイソインドール、インドリジジン、ジヒドロインダゾール、パーヒドロインダゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、パーヒドロキノリン、キノリジン、ジヒドロキノリジン、テトラヒドロキノリジン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、パーヒドロイソキノリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、パーヒドロシンノリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、パーヒドロキナゾリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、パーヒドロフタラジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、パーヒドロキノキサリン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、パーヒドロナフチリジン、キノリリジン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ジヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロベンゾアゼピン、パーヒドロベンゾアゼピン、ジヒドロベンゾジアゼピン、テトラヒドロベンゾジアゼピン、パーヒドロベンゾジアゼピン、ジヒドロベンゾオキサゼピン、テトラヒドロベンゾオキサゼピン、パーヒドロベンゾオキサゼピン、ジヒドロベンゾチアゼピン、テトラヒドロベンゾチアゼピン、パーヒドロベンゾチアゼピン、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、パーヒドロカルバゾール、ジヒドロβ−カルボリン、テトラヒドロβ−カルボリン、パーヒドロβ−カルボリン、ジヒドロアクリジン、テトラヒドロアクリジン、パーヒドロアクリジン、ジヒドロフェナジン、テトラヒドロフェナジン、パーヒドロフェナジン、ジヒドロヒドロフェノチアジン、テトラヒドロフェノチアジン、パーヒドロフェノチアジン、ジヒドロフェノキサジン、テトラヒドロフェノキサジン、パーヒドロフェノキサジン、ジヒドロフェナントリジン、テトラヒドロフェナントリジン、パーヒドロフェナントリジン、ジヒドロフェナントロリン、テトラヒドロフェナントロリン、パーヒドロフェナントロリン、ジヒドロペリミジン、テトラヒドロペリミジン、パーヒドロペリミジン、ピロリリジン、モルフィナン、ハスバナン、ジヒドロフラン、テトラヒドロフラン、ピラン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、ジヒドロオキセピン、テトラヒドロオキセピン、パーヒドロオキセピン、ジヒドロチオフェン、テトラヒドロチオフェン、チオピラン、ジヒドロチオピラン、テトラヒドロチオピラン、ジヒドロチエピン、テトラヒドロチエピン、パーヒドロチエピン、ジヒドロベンゾフラン、テトラヒドロベンゾフラン、パーヒドロベンゾフラン、ジヒドロイソベンゾフラン、テトラヒドロイソベンゾフラン、パーヒドロイソベンゾフラン、ジヒドロベンゾチオフェン、テトラヒドロベンゾチオフェン、パーヒドロベンゾチオフェン、ジヒドロイソベンゾチオフェン、テトラヒドロベンゾチオフェン、パーヒドロベンゾチオフェン、ベンゾピラン、ジヒドロベンゾピラン、パーヒドロベンゾピラン、ベンゾチオピラン、ジヒドロベンゾチオピラン、パーヒドロベンゾチオピラン、ジヒドロベンゾオキセピン、テトラヒドロベンゾオキセピン、パーヒドロベンゾオキセピン、ジヒドロベンゾチエピン、テトラヒドロベンゾチエピン、パーヒドロベンゾチエピン、ジヒドロジベンゾフラン、テトラヒドロジベンゾフラン、パーヒドロジベンゾフラン、キサンテン、ジヒドロキサンテン、テトラヒドロキサンテン、パーヒドロキサンテン、ジヒドロジベンゾチオフェン、テトラヒドロジベンゾチオフェン、パーヒドロジベンゾチオフェン、チオキサンテン、ジヒドロチオキサンテン、テトラヒドロチオキサンテン、パーヒドロチオキサンテン、ジヒドロフェノキサチイン、テトラヒドロフェノキサチイン、パーヒドロフェノキサチイン、ジヒドロジベンゾジオキシン、テトラヒドロジベンゾジオキシン、パーヒドロジベンゾジオキシン、ジヒドロチアンスレン、テトラヒドロチアンスレン、パーヒドロチアンスレン、オキシラン、オキセタン、チイラン、チエタン、ジヒドロオキサチイン、テトラヒドロオキサチイン、ジヒドロベンゾオキサチイン、テトラヒドロベンゾオキサチイン、パーヒドロベンゾオキサチイン、ベンゾジオキセパン、ジオキソラン、ジオキサン、ジチオラン、ジチアン、ジオキソインダン、ベンゾジオキサン、クロマン、ベンゾジチオラン、ベンゾジチアン、ノルボルナン、１−アザノルボルナン、２−アザノルボルナン、７−アザノルボルナン、ノルボルネン、１−アザノルボルネン、２−アザノルボルネン、７−アザノルボルネン、ノルボルナジエン、ビシクロ［２，２，２］オクタン、１−アザビシクロ［２，２，２］オクタン、２−アザビシクロ［２，２，２］オクタン、ノルピナン、ノルピネン、ノルカナン、ノルカネン等を挙げることができ、不飽和環の場合は少なくとも一部が水素化された環も含む。また、環を形成する場合はＲ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の任意の２置換基又は３置換基で環を形成することが好ましい。
【００２５】
また、上記アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族基、及び複素環基が有し得る置換基は、水酸基、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、ハロゲン原子、芳香族基、複素環基、アルコキシ基、グアニジノ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アシル基、置換スルホニル基、ヘテロシクリルオキシ基、ヘテロシクリルチオ基、アミド基、ウレイド基、カルボキシ基、カルバモイル基、オキソ基、チオキソ基、スルファモイル基、スルホ基、シアノ基、ニトロ基、アシルオキシ基、アジド基、スルホンアミド基、メルカプト基、アルコキシカルボニルアミノ基、アミノカルボニルオキシ基、置換スルフィニル基、スルファミド基、アミノスルホニルオキシ基、アルコキシスルホニルアミノ基、置換スルホニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルオキシ基、アルコキシスルホニル基、Ｒｘ（Ｒｙ）Ｎ基及びＲｘ（Ｒｙ）（Ｒｚ）Ｎ＋基（Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚはそれぞれ独立して水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族炭化水素基又は複素環基を表す。また、Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚのうちの２つ以上が一体となって飽和又は不飽和の複素環を形成してもよく、その環は脂肪族環或いは複素環とで縮合環或いはスピロ環を形成することもでき、芳香族環とは縮合環を形成することもできる）から選ばれる基が挙げられる。
【００２６】
なお、ここに挙げた水素原子である場合を除くＲｘ、Ｒｙ、Ｒｚ及び置換基としてのアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族基、複素環基は、前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で示される基と同類の基を含む。また、置換基としてのアルコキシ基、アルキルチオ基のアルキル基は前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６におけるアルキル基の定義と同義であり、アリールオキシ基、アリールチオ基のアリール基は前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６における芳香族基の定義と同義である。
【００２７】
また、置換基としてのグアニジノ基、アシル基、置換スルホニル基、ヘテロシクリルオキシ基、ヘテロシクリルチオ基、カルバモイル基、ウレイド基、アミド基、スルファモイル基、アシルオキシ基、スルホンアミド基、アルコキシカルボニルアミノ基、アミノカルボニルオキシ基、置換スルフィニル基、スルファミド基、アミノスルホニルオキシ基、アルコキシスルホニルアミノ基、置換スルホニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルオキシ基、アルコキシスルホニル基の例示を以下に示す。
【化６】
2020067507.tif 000007
【００２８】
上記例示基中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１７、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２６、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５及びＲ３６、Ｒ３８及びＲ３９は、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基、又は置換若しくは無置換の複素環基を表す。Ｒ２５、Ｒ２７、Ｒ３７、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基、又は置換若しくは無置換の複素環基を表す。Ｒ１３及びＲ１４は、置換又は無置換の複素環基を表す。また、これら置換アルキル基、置換シクロアルキル基、置換アルケニル基、置換シクロアルケニル基、置換アルキニル基、置換芳香族基、置換複素環基の置換基としては、前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６におけるこれらの基の置換基と同様のものが挙げられる。
【００２９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で示される基は、それぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換の炭素数１〜６の直鎖状若しくは分岐鎖状のアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状アルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換若しくは無置換の炭素数６〜１４の単環式若しくは多環式芳香族基、又は環構成原子として窒素原子、酸素原子若しくは硫黄原子を少なくとも１つ含む置換若しくは無置換の３〜８員環の複素環基であることが好ましい。その中でも、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で示される基は、各々独立して、水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基であるか、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうち２つが連結して炭素数３〜８のシクロアルキル基を形成するものであることが、原料の入手容易性の面から好ましい。特に、Ｒ１及びＲ２は、共に水素原子であるか、又は一方がメチル基であることが好ましい。
【００３０】
式（Ｉ）又は（ＩＩ）で示される第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲート、及び式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示される重要中間体であるアミン体において、Ｄは第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの、第１級又は第２級アミノ基が有する水素原子を除いた残基を表した構造であり、ＤＨは具体的には下記式（ＸＩＩＩ）で示される化合物である。
【化７】
2020067507.tif 000008
Ｒ４３及びＲ４４はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基、Ｒ４５Ｏ−基、Ｒ４６Ｓ−基又はＲ４７（Ｒ４８）Ｎ−基（ここで、Ｒ４５、Ｒ４６、Ｒ４７及びＲ４８は、それぞれ独立して、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換、無置換の複素環基、若しくはＲｘ（Ｒｙ）Ｎ基である）である。ここで、Ｒ４３及びＲ４４が同時に水素原子になることはない。また、Ｒ４３及びＲ４４は２つが単結合又は二重結合を形成して飽和又は不飽和の複素環を形成してもよく、その環は脂肪族環又は複素環とで縮合環又はスピロ環を形成することもでき、芳香族環とは縮合環を形成することもできる。ここでのアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族基又は複素環基は、前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６での定義と同義である。また、ここでのＲｘ及びＲｙは前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の置換基であるＲｘ（Ｒｙ）Ｎ基におけるＲｘ及びＲｙの定義と同義である。
【００３１】
Ｒ４３及びＲ４４が結合して作られる飽和又は不飽和の複素環としては、例えばアジリジン、アゼチジン、ジアゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ホモピペリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、テトラゾリジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、オキサジアゾリジン、チアジアゾリジン、ピペラジン、ホモピペラジン、トリアゼパン、モルホリン、チオモルホリン、ピロリン、ピラゾリン、イミダゾリン、トリアゾリン、テトラゾリン、ジヒドロフラザン、テトラヒドロフラザン、ピペリデイン、トリアジナン、ジヒドロピリジン、ジヒドロピラジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、パーヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、パーヒドロピリダジン、ジヒドロトリアジン、テトラヒドロトリアジン、テトラヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジアジン、テトラヒドロオキサジアジン、テトラヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、テトラヒドロチアジアジン、アゼピン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、ジアゼピン、ジヒドロジアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、パーヒドロジアゼピン、オキサゼピン、ジヒドロオキサゼピン、テトラヒドロオキサゼピン、パーヒドロオキサゼピン、オキサジアゼピン、ジヒドロオキサジアゼピン、テトラヒドロオキサジアゼピン、パーヒドロオキサジアゼピン、チアゼピン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、パーヒドロチアゼピン、チアジアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、トリアゼピン、ジヒドロトリアゼピン、テトラヒドロトリアゼピン、パーヒドロトリアゼピン、ジヒドロアゾシン、テトラヒドロアゾシン、オキソヒドロアゾシン、パーヒドロアゾシン、モルファン、アゼピンドール、インドリン、イソインドリン、ジヒドロインダゾール、パーヒドロインダゾール、ジヒドロベンゾイミダゾール、パーヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾオキサゾール、パーヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、パーヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、パーヒドロキノリン、ジヒドロイソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、パーヒドロイソキノリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、パーヒドロシンノリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、パーヒドロキナゾリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、パーヒドロフタラジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、パーヒドロキノキサリン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、パーヒドロナフチリジン、ベンゾアゼピン、ジヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロベンゾアゼピン、ベンゾジアゼピン、ジヒドロベンゾジアゼピン、テトラヒドロベンゾジアゼピン、ジヒドロベンゾオキサゼピン、テトラヒドロベンゾオキサゼピン、ジヒドロベンゾチアゼピン、テトラヒドロベンゾチアゼピン、ベンザゼピン、カルバゾール、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、パーヒドロカルバゾール、β―カルボリン、ジヒドロβ―カルボリン、テトラヒドロβ―カルボリン、パーヒドロβ―カルボリン、ジヒドロアクリジン、ジヒドロフェナジン、フェノチアジン、フェノキサジン、フェナルサジン、ジヒドロフェナントリジン、ジヒドロペリミジン、プテリン、モルフィナン、ハスバナン等を挙げることができ、不飽和複素環の場合は少なくとも一部が水素化された複素環も含むものである。また、これらの構造が２つ以上、直接又はアルキレン基を介して結合した構造も採用することもでき、該複素環基は、前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で示される複素環基と同じ定義であり、置換基を有することができる。
【００３２】
上記アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族基、複素環基、Ｒ４５Ｏ−基、Ｒ４６Ｓ−基又はＲ４７（Ｒ４８）Ｎ−基並びにＲ４３、及びＲ４４が結合して形成した飽和又は不飽和の複素環が有し得る置換基は、前記Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６におけるこれらの基の置換基と同様のものが挙げられる。
【００３３】
また、Ｄは第１級又は第２級アミン化合物ＤＨ中のリンカーとの結合に用いられる窒素原子に結合している水素原子を除いた残基を表した構造である。第１級又は第２級アミン化合物ＤＨは生物活性を有する化合物であることが好ましい。生物活性を有する化合物として、例えば、医薬品、医薬部外品、医療機器、体外診断用医薬品、再生医療等製品、動物用医薬品、農薬、サプリメント等の有効成分を挙げることができる。遊離した第１級又は第２級アミン化合物ＤＨが生物活性を有し、かつ該化合物の第１級又は第２級アミノ基によってウレタン結合を形成しうるものであれば、化合物の構造に制限はなく、化合物として利用可能な公知の化合物を用いることができる。
【００３４】
式（ＩＩＩ）又は（ＸＩ）で示されるアミン体は無機酸、有機酸と塩を形成してもよい。無機酸としては塩酸、硫酸、硝酸等が、有機酸としてはトリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸及びトリフルオロメタンスルホン酸等が挙げられる。無機酸又は有機酸との塩は、好ましくは、式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体の分子末端に存在するアミノ基と、無機酸又は有機酸とで塩を形成している。
【００３５】
酸性多糖に由来する構造を与えるポリマーは、モノマー単位に少なくとも１つのカルボキシ基を有しており、式（ＩＶ）で表すことができる。
Ｐｏｌｙ−ＣＯ２Ｈ      （ＩＶ）
以下、Ｐｏｌｙの部分を「酸性多糖残基」ということがある。酸性多糖は１分子中に複数のカルボキシ基を有し、本発明のコンジュゲートにおいては式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体が複数縮合されていてもよい。
【００３６】
例えば、本発明の一態様として、コンジュゲートは以下の式（ＸＸ）で表すこともでき、これは式（Ｉ）で示される化合物と等価である。
【化８】
2020067507.tif 000009
（式中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＡは、先に定義したとおりであり、
【化９】
2020067507.tif 000010
で示される部分は、酸性多糖のカルボキシ基に由来する基（−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（−Ｒ１）（−Ｒ２）ＯＣ（＝Ｏ）Ｄで表される基）及びカルボキシ基を除いたポリマー（ポリマー鎖）を表し、ｑはポリマーに縮合させた化合物（式（ＩＩＩ）で示されるアミン体）の数（すなわち、カルボキシ基に由来する基の数）を表し、ｒはカルボキシ基の数を表す）
なお、上記式（ＸＸ）は、酸性多糖中に、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（−Ｒ１）（−Ｒ２）ＯＣ（＝Ｏ）Ｄで示される基、及び−ＣＯＯＨで表される基がそれぞれｑ個及びｒ個連続してブロック状に配列されていることのみを意味しているわけではない。−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（−Ｒ１）（−Ｒ２）Ｏ（＝Ｏ）Ｄで示される基、及び−ＣＯＯＨで示される基は、ポリマー鎖中に、ランダムに配列されていても、ブロック状又は交互に規則的に配列されていてもよいことを理解すべきである。
【００３７】
また、本発明の別の一態様として、コンジュゲートは以下の式（ＸＸＸ）で表すこともでき、これは式（ＩＩ）で示される化合物と等価である。
【化１０】
2020067507.tif 000011
（式（ＸＸＸ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｒ及びＰは先に定義したとおりであり、ｑは、ポリマーに縮合させた化合物（式（ＸＩＩ）で示されるアミン体）の数を表す。）
【００３８】
ｑ及びｒの値は、酸性多糖に縮合させる化合物（式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体）の割合に応じて決定される。酸性多糖１分子鎖にどの程度、前記式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体を縮合させるかは、ＤＨで示される構造、酸性多糖の種類などに応じて、適宜変更、調整することができる。ＤＨで示される構造を有する化合物がどの程度導入されているかは、本明細書においては、「導入率」として示すことができる。導入率は、１Ｈ ＮＭＲによる積分比の計算、分光法による濃度の算出などの方法によって求めることができる。分光法として、例えば、紫外可視吸収分光法が挙げられる。本明細書においては、モル比の計算による導入率（モル％）、濃度計算による導入率（wt％）などをまとめて単に「導入率」ということができ、ｑ／（ｑ＋ｒ）×１００ で表される。モル比の計算（１Ｈ ＮＭＲによる積分比の計算）に基づく導入率は、特に限定されないが、１〜８０モル％の範囲が例示できる。ここで、ｑ及びｒは、上記の導入率の範囲となるような値であることが好ましい。本発明のコンジュゲートを水溶液とした場合に、高い薬物濃度（第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの濃度）で濾過性を有するという観点から、導入率は２〜７０％が好ましく、５〜６０％がより好ましく、１０〜５０％がさらに好ましい。
酸性多糖において式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体と縮合せずに残った酸性多糖のカルボキシ基は遊離のカルボキシ基として存在していてもよく、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の金属、又はトリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン等の有機塩基との塩を形成していてもよく、又はテトラブチルアンモニウムヒドロキシドを用いて塩を形成していてもよい。
本発明のコンジュゲートは、水溶液としたときに高い濾過性を有することが好ましい。具体的には、水溶液中の第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの濃度が０．５（w/w）％であるとき、フィルター濾過率が５０重量％以上のものが好ましく、８０重量％以上のものがより好ましく、９０重量％以上のものが特に好ましい。
このフィルター濾過率（重量％）は、後述の実施例の方法で測定でき、具体的には、孔径０．２２μｍのポリフッ化ビニリデン（PVDF）膜の遠心式フィルターユニットに、７０〜９０ｍｇの本発明のコンジュゲートの水溶液を入れ、２５℃、１２０００Ｇで９０分間遠心した後、フィルター通過液を秤量し、フィルターユニットに入れた水溶液に対するフィルター通過液の重量比から算出できる。
【００３９】
酸性多糖としては、例えば、アルギン酸、ヒアルロン酸、ヘパリン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ）、ケラタン硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ペクチン（ホモガラクツロナン及びラムガラクツロナン）、キサンタンガム、キシラン及びサクラン等の天然にも存在する多糖類、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルキチン、カルボキシメチルキトサン、カルボキシメチルデキストラン、カルボキシメチルアミロース、サクシニルキトサンが挙げられる。グリコサミノグリカンとして、例えば、ヒアルロン酸、ヘパリン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ）、ケラタン硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸が挙げられる。
これら酸性多糖は各種方法によって、あらかじめ架橋又は化学修飾されていてもよく、第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートとした後に、更に架橋又は化学修飾される場合もある。また、これら酸性多糖は薬学的に許容される塩、例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の金属、又はトリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン等の有機塩基との塩を形成していてもよく、又はテトラブチルアンモニウムヒドロキシドを用いて塩を形成していてもよい。
酸性多糖の分子量は、一般に扱われている製品が有する分子量であれば特に制限なく採用することができるが、コンジュゲートの用途、コンジュゲートに求められる性質に応じて、適宜調整することもできる。好ましい分子量の例としては、１０kDa以上が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００４０】
Ｐｏｌｙとは、式（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）で示されるアミン体との縮合に利用される、カルボキシ基部分を除いた前記式（ＩＶ）で示される酸性多糖の部分構造を意味するものである。Ｐｏｌｙとしては、酸性多糖残基、グリコサミノグリカン残基、コンドロイチン残基、コンドロイチン硫酸残基及びヒアルロン酸残基を好ましい態様として例示することができる。これらはそれぞれ、化合物（ＩＩＩ）又は（ＸＩＩ）と縮合したカルボキシ基を除いた酸性多糖、グリコサミノグリカン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸の部分構造を意味するものである。
【００４１】
酸性多糖をコンジュゲートの担体として用いた場合、後述の試験結果で示すようにポリマーを高分子量化しても尚、高い薬物濃度の医薬組成物が調製可能である。例えば、本発明のコンジュゲートを水溶液とした場合、水溶液中の第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの濃度が、０．３〜３０ (w/w) ％であることが好ましく、０．５〜２０ (w/w)％であることがより好ましい。
このように本発明である、新規な第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートは、他のポリマーよりも高い安全性が期待できるものであり、且つポリマー分子量に大きな影響を受けずに薬効発現に必要な量の薬物導入を可能とする優れたコンジュゲートである。
【００４２】
式（Ｉ）で示される第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートの製造例を以下に示す。
【化１１】
2020067507.tif 000012
（式中、Ｒａはベンジル基又はｔ−ブチル基を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｄ、Ａ及びＰｏｌｙは、先に定義したとおりである。）
【００４３】
第１工程
本工程は前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸と前記式（ＸＶ）で示されるヨードメチルカーボネート体を反応させ、前記式（ＸＶＩ）で示されるp-ニトロフェニルエステル体を製造する工程である。本工程は前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸のカルボン酸と金属酸化物或いは塩基を反応させ、カルボン酸塩とした後、前記式（ＸＶ）で示されるヨードメチルカーボネート体と反応させて実施することができ、又は、塩基存在下、前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸と前記式（ＸＶＩ）で示されるヨードメチルカーボネート体とを反応させて実施することができる。
【００４４】
塩を形成するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えばメタノール、エタノール、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶剤媒を用いることができる。金属酸化物としては、例えば酸化銀（Ｉ）、酸化水銀（ＩＩ）を用いることができ、また塩基としては炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム等を用いることができる。反応温度としては、通常−３０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは−１５℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００４５】
エステル化を実施するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えばジメチルホルムアミド、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶剤媒を用いることができる。共存させる塩基としては、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミノピリジン、ジアザビシクロウンデセン、１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン、金属ビス(トリメチルシリル)アミド、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることができる。反応温度としては、通常−３０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは０℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００４６】
第２工程
本工程は前記式（ＩＸ）で示される第１級又は第２級アミン化合物と前記式（ＸＶＩ）で示されるp-ニトロフェニルエステル体とを反応させて前記式（ＸＶＩＩ）で示されるエステル体を製造する工程である。本工程は、例えば前記式（ＩＸ）で示される第１級又は第２級アミン化合物が有機酸又は無機酸との塩を形成している場合は、必要に応じて塩基を添加することも可能である。本工程を実施するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えば塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶剤媒を用いることができ、必要に応じて水を添加して二相系あるいは混合溶媒とすることもできる。また塩基としては、例えばピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミノピリジン、ジアザビシクロウンデセン、1,8-ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン、金属ビス(トリメチルシリル)アミド、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることができる。反応温度としては、通常−７８℃〜２００℃の範囲で、好ましくは−２０℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００４７】
第３工程
本工程は前記式（ＩＸ）で示される第１級又は第２級アミン化合物から前記式（ＸＩＸ）で示されるクロロアルキルエステル体を製造する工程である。本工程は塩基存在下、前記式（ＩＸ）で示される第１級又は第２級アミン化合物に前記式（ＸＶＩＩＩ）で示されるクロロギ酸クロロアルキルを反応させて実施することができる。
【００４８】
本工程を実施するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えば塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶媒を用いることができ、必要に応じて水を添加して二相系あるいは混合溶媒とすることもできる。また塩基としては、例えば炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミノピリジン、ジアザビシクロウンデセン、１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン、金属ビス(トリメチルシリル)アミド、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることができる。反応温度としては、通常−７８℃〜２００℃の範囲で、好ましくは−２０℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００４９】
第４工程
本工程は前記式（ＸＩＸ）で示されるクロロアルキルエステル体と前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸とを反応させて前記式（ＸＶＩＩ）で示されるエステル体を製造する工程である。本工程は前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸のカルボン酸と塩基を反応させ、カルボン酸塩とした後、前記式（ＸＩＸ）で示されるクロロアルキルエステル体と反応させて実施することができ、又は、塩基存在下、前記式（ＸＩＶ）で示される保護アミノ酸と前記式（ＸＩＸ）で示されるクロロアルキルエステル体と反応させて実施することができる。
【００５０】
塩を形成するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えばメタノール、エタノール、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶媒を用いることができる。また塩基としては、例えば炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム等を用いることができる。反応温度としては、通常−３０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは−１５℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００５１】
エステル化を実施するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えばジメチルホルムアミド、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエン、キシレン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジメトキシエタン等の有機溶媒を用いることができる。共存させる塩基としては、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミノピリジン、ジアザビシクロウンデセン、１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン、金属ビス(トリメチルシリル)アミド、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることができる。反応温度としては、通常−３０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは０℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００５２】
第５工程
本工程は前記式（ＸＶＩＩ）で示されるエステル体を脱保護して前記式（ＩＩＩ）で示されるアミン体を製造する工程である。
本工程でＲａがベンジル基の場合、接触水素添加により脱保護して前記式（ＩＩＩ）で示されるアミン体を製造することができる。用いる金属触媒としては、例えば酸化白金やプラチナカーボン等の白金触媒、パラジウムカーボン、パラジウムブラック又は酸化パラジウム等のパラジウム触媒、ラネーニッケル等のニッケル触媒を用いることができる。本工程を実施するにあたっては、溶媒中で行うことが好ましく、例えばメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ジオキサン、水等を用いることができる。反応温度としては、通常−５０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは１０℃〜１００℃の範囲内で進行させることができる。
【００５３】
本工程でＲａがｔ−ブチル基の場合、酸を用いて脱保護して前記式（ＩＩＩ）で示されるアミン体を製造することができる。酸としては、例えば塩化水素、塩酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等を用いることができる。本工程で得られる前記式（ＩＩＩ）で示されるアミン体はこれらの酸との塩を形成して製造されるものである。本工程は無溶媒又は溶媒中で反応を進行させることができ、溶媒としては例えば、酢酸エチル、ジオキサン、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、ジエチルエーテル、水等を用いることができる。反応温度としては、通常−５０℃〜２００℃の範囲で、好ましくは０℃〜８０℃の範囲内で進行させることができる。
【００５４】
第６工程
本工程は前記式（III）で示されるアミン体と前記式（ＩＶ）で示される酸性多糖とを縮合して前記式（Ｉ）で示される第１級又は第２級アミン化合物−酸性多糖コンジュゲートを製造する工程である。本工程で用いられる前記式（ＩＶ）で示されるカルボキシ基を有するポリマーは、あらかじめ金属や有機塩基との塩を形成しているものを用いてもよい。縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ又はＷＳＣ）、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（ＤＭＴ−ＭＭ）、フルオロ−テトラメチルホルムアミジウムヘキサフルオロフォスフェート（ＴＦＦＨ）、フルオロ−ビス（テトラメチレン）ホルムアミジウム）ヘキサフルオロフォスフェート（ＢＴＦＦＨ）等を用いることができる。また、酸性多糖のカルボキシ基がＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル又はｐ−ニトロフェニルエステル等の活性エステルに誘導体化された場合、縮合剤の添加は必要なく、式（ＩＩＩ）で示されるアミン体との混合のみ、又は必要に応じて塩基を添加することで縮合することも可能である。
【００５５】
本工程は溶媒中で行うことが好ましく、例えば塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトン、ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジメトキシエタン、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、エチレンクリコール等の有機溶媒又は水を用いることができる。また、これら有機溶媒と水との任意の割合での混合溶媒を使用することもできる。
【００５６】
本発明は、以下の各項で特定される発明に関する。
１．  式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１２】
2020067507.tif 000013
［式（Ｉ）中、Ｄは第１級又は第２級アミン化合物ＤＨの、第１級又は第２級アミノ基が有する水素原子を除いた残基を表し；Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり；Ａは置換又は無置換の２価の炭化水素基であって−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＮＨ−と結合する両端以外に１以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、当該ヘテロ原子はそれぞれ独立して−Ｏ−、置換基を有していてもよい−ＮＨ−及び−Ｓ−からなる群より選択され；Ｒ１、Ｒ２及びＡのうち任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき；Ｐｏｌｙは酸性多糖残基を表し、Ｐｏｌｙに隣接する−Ｃ（＝Ｏ）−は前記酸性多糖のカルボキシ基に由来する］。
２．前記式（Ｉ）が下記式（ＩＩ）で示される、前記１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１３】
2020067507.tif 000014
［式中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＰｏｌｙは前記１に定義されるとおりであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換のアルキル基、置換若しくは無置換のシクロアルキル基、置換若しくは無置換のアルケニル基、置換若しくは無置換のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換のアルキニル基、置換若しくは無置換の芳香族基又は置換若しくは無置換の複素環基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ任意の２つ又は３つの基が一体となって環を形成することもでき、ｌ及びｎはそれぞれ独立して０、１又は２であり、ｍは０又は１である］。
３．式（Ｉ）又は式（ＩＩ）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素原子、置換若しくは無置換の炭素数１〜６の直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルキル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状アルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数３〜８のシクロアルケニル基、置換若しくは無置換の炭素数２〜６の直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換若しくは無置換の炭素数６〜１４の単環式若しくは多環式芳香族基、又は環構成原子として窒素原子、酸素原子若しくは硫黄原子を少なくとも１つ含む置換若しくは無置換の３〜８員環の複素環基であることを特徴とする、前記１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
４．式（Ｉ）又は式（ＩＩ）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６で表される基におけるアルキルの置換基、シクロアルキル基の置換基、アルケニル基の置換基、シクロアルケニルル基の置換基、アルキニル基の置換基、芳香族基の置換基及び複素環基の置換基が、水酸基、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、ハロゲン原子、芳香族基、複素環基、アルコキシ基、グアニジノ基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アシル基、置換スルホニル基、ヘテロシクリルオキシ基、ヘテロシクリルチオ基、アミド基、ウレイド基、カルボキシ基、カルバモイル基、オキソ基、チオキソ基、スルファモイル基、スルホ基、シアノ基、ニトロ基、アシルオキシ基、アジド基、スルホンアミド基、メルカプト基、アルコキシカルボニルアミノ基、アミノカルボニルオキシ基、置換スルフィニル基、スルファミド基、アミノスルホニルオキシ基、アルコキシスルホニルアミノ基、置換スルホニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルオキシ基、アルコキシスルホニル基、Ｒｘ（Ｒｙ）Ｎ基及びＲｘ（Ｒｙ）（Ｒｚ）Ｎ＋基（ここで、Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚはそれぞれ独立して水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基、芳香族炭化水素基又は複素環基を表す。また、Ｒｘ、Ｒｙ及びＲｚが結合して飽和若しくは不飽和の複素環を形成してもよく、その環は脂肪族環又は複素環とで縮合環或いはスピロ環を形成することもでき、芳香族環とは縮合環を形成することもできる）から選ばれる基であることを特徴とする、前記１〜３のいずれか１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
５．式（Ｉ）又は（ＩＩ）中、Ｐｏｌｙがグリコサミノグリカン残基である、前記１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
６．式（Ｉ）又は（ＩＩ）中、Ｐｏｌｙがコンドロイチン、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸残基である、前記１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
７．下記式（ＸＸ）で示される前記１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１４】
2020067507.tif 000015
［式（ＸＸ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２及びＡは、前記１に定義したとおりであり、
【化１５】
2020067507.tif 000016
で示される部分は、酸性多糖のカルボキシ基に由来する基及びカルボキシ基を除いたポリマーを表し；ｑは前記ポリマーに縮合させた化合物の数を表し；ｒはカルボキシ基の数を表す。］。
８．前記式（ＸＸ）で示される化合物が下記式（ＸＸＸ）で示される化合物である、前記７に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩；
【化１６】
2020067507.tif 000017
［式（ＸＸＸ）中、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２は前記１に定義されるとおりであり、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は前記２に定義されるとおりであり、ｑ及びｒは前記７に記載されるとおりであり、  
【化１７】
2020067507.tif 000018
で示される部分は、カルボキシ基に由来する基及びカルボキシ基を除いたポリマーを表す。］。
９．下記式（ＩＩＩ）で示される化合物と下記式（ＩＶ）で示される酸性多糖とを縮合する工程を含む、下記式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の製造方法。
【化１８】
2020067507.tif 000019
［式（Ｉ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）におけるＤ、Ａ、Ｒ１、Ｒ２及びＰｏｌｙは、前記１に定義されるとおりであり、また（ＩＩＩ）で示される化合物は無機酸又は有機酸との塩を形成していてもよい。）
１０．第１級又は第２級アミン化合物と、酸性多糖とを下記式（Ｖ）で示されるリンカーを介して結合される工程を含む、コンジュゲートの製造方法。
【化１９】
2020067507.tif 000020
（ここで、上記の（Ｖ）におけるＲ１、Ｒ２及びＡは、前記１に定義されるとおりであり、記号†は、第１級又は第２級アミン化合物のアミノ基の窒素原子との結合点を表し、記号‡は、酸性多糖に由来するカルボニル炭素との結合点を意味する。）
１１．前記リンカーが下記式（ＶＩ）で表される、前記１０に記載のコンジュゲートの製造方法。
【化２０】
2020067507.tif 000021
（ここで、上記（ＶＩ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｌ、ｍ及びｎは前記２に定義されるとおりであり、記号†及び‡は前記８に定義されるとおりである。）
【実施例】
【００５７】
以下に、参考例、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれら具体例に限定されるものではない。【００５８】
参考例１
２−［［３−［［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ］−２−オキソエチル−メトキシポリエチレングリコール（２０,０００）  コンジュゲート
【化２１】
2020067507.tif 000022
メトキシポリエチレングリコール（２０,０００）酢酸  N−ヒドロキシスクシンイミド  エステル551 mg(0.03 mmol)及びトリエチルアミン28 mg(0.28 mmol)をアセトニトリル1.5 mLに溶解した。ここへＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩100 mg(0.3 mmol)のアセトニトリル／ジオキサン(1/1)混合溶液を加え、室温にて一晩攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残渣にアセトニトリル2 mLを加えて溶解した。溶液を攪拌しながら白濁するまでイソプロピルアルコールをゆっくりと滴下した。懸濁液をイソプロピルアルコール25 mLに撹拌しながら滴下し、析出した沈殿をろ取した。フィルター上の沈殿物をイソプロピルアルコールで２回、ジエチルエーテルで１回洗浄した。室温下、真空ポンプで一晩乾燥して標記化合物507.2 mgを得た。1H-NMRの積分値より、エチレフリンの導入率は68.6％であった。【００５９】
実施例１
炭酸  クロロメチル  ４−ニトロフェニル  エステル
【化２２】
2020067507.tif 000023
氷冷下、p-ニトロフェノール5.6 g(40.3 mmol)及びピリジン3.2 g(40.3 mmol)の酢酸エチル溶液にクロロギ酸クロロメチル5.7 g(44.3 mmol)の酢酸エチル溶液を加え、同温度で30分、室温で2時間撹拌した。反応液に水を加えて撹拌後、有機層を分取した。有機層を10％硫酸水素カリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下に溶媒を留去して標記化合物8.6 g(83％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 5.85(2H, s), 7.43(2H, d, J=9Hz), 8.31(2H, d, J=9Hz)【００６０】
実施例２
炭酸  ヨードメチル  ４−ニトロフェニル  エステル
【化２３】
2020067507.tif 000024
ヨウ化ナトリウム11.07 g(73.9 mmol)、炭酸  クロロメチル  ４−ニトロフェニル  エステル8.55 g(36.9 mmol)のアセトン懸濁液を40℃で一晩撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、ジエチルエーテルを加えて撹拌した。不溶物を濾過して除き、有機層を水、10％チオ硫酸ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去して標記化合物8.78 g(74％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 6.07(2H, s), 7.42(2H, d, J=9Hz), 8.30(2H, d, J=9Hz)【００６１】
実施例３
炭酸  １−クロロエチル  ４−ニトロフェニル  エステル
【化２４】
2020067507.tif 000025
氷冷下、p-ニトロフェノール5.6 g(40.3 mmol)及びピリジン3.2 g(40.3 mmol)の酢酸エチル溶液にクロロギ酸1-クロロエチル6.3 g(44.3 mmol)の酢酸エチル溶液を加え、同温度で30分、室温で2時間撹拌した。反応液に水を加えて撹拌後、有機層を分取した。有機層を10％チオ硫酸ナトリウム水溶液、1 M水酸化ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去して標記化合物7.5 g(76％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.93(3H, d, J=6Hz), 6.51(1H, q, J=6Hz), 7.43(2H, d, J=9Hz), 8.30(2H, d, J=9Hz)【００６２】
実施例４
炭酸  １−ヨードエチル  ４−ニトロフェニル  エステル
【化２５】
2020067507.tif 000026
ヨウ化ナトリウム6.10 g(40.7 mmol)、炭酸  １−クロロエチル  ４−ニトロフェニル  エステル5.00 g(20.4 mmol)のアセトン懸濁液を40℃で一晩撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、ジエチルエーテルを加えて、有機層を水、10％チオ硫酸ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜40％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製し、標記化合物と出発物質、炭酸  １−クロロエチル  ４−ニトロフェニル  エステルとの混合物(mol比 2:3)3.00 g(21％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 2.33(3H, d, J=6Hz), 6.84(1H, q, J=6Hz), 7.43(2H, d, J=9Hz), 8.30(2H, d, J=9Hz)【００６３】
実施例５
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン  ［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］メチル  エステル
【化２６】
2020067507.tif 000027
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン4.73 g(25.0 mmol)のアセトニトリル60 mL溶液に酸化銀（Ｉ）3.48 g(15.0 mmol)を加えた。アルゴン気流下、混合液に水30 mLを加え、70℃で1時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、ろ液を減圧下にて濃縮した。残留物を真空ポンプにて一晩乾燥し、Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン銀塩7.77 gを得た。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン銀塩2.96 g(10.0 mmol)の乾燥トルエン懸濁液に炭酸  ヨードメチル  ４−ニトロフェニル  エステル1.62 g(5.0 mmol)の乾燥トルエン溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に酢酸エチルを加えて不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜40％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物276 mg(14％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.44(9 H, s), 2.66(2 H, t, J=6 Hz), 3.39-3.50(2 H, m), 4.96(1 H, br s), 5.90(2 H, s), 7.42 (2 H, d, J=9 Hz), 8.30(2 H, d, J=9 Hz)【００６４】
実施例６
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン  １−［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］エチル  エステル
【化２７】
2020067507.tif 000028
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン4.73 g(25.0 mmol)のアセトニトリル60 mL溶液に酸化銀（Ｉ）3.48 g(15.0 mmol)を加えた。アルゴン気流下、混合液に水30 mLを加え、70℃で1時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、ろ液を減圧下にて濃縮した。残留物を真空ポンプにて一晩乾燥し、Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン銀塩7.77 gを得た。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン銀塩2.52 g(8.5 mmol)の乾燥トルエン懸濁液に炭酸  １−ヨードエチル  ４−ニトロフェニル  エステルと炭酸  １−クロロエチル  ４−ニトロフェニル  エステルの混合物(mol比 2:3)1.50 g(2.1 mmol)の乾燥トルエン溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に酢酸エチルを加えて不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜40％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物116 mg(14％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.43(9 H, s), 1.63(3 H, d, J=5 Hz), 2.61(2 H, t, J=6 Hz), 3.36-3.48(2 H, m), 4.95(1 H, br s), 6.86(1 H, q, J=5 Hz), 7.41(2 H, d, J=9 Hz), 8.29(2 H, d, J=9 Hz)【００６５】
実施例７
N−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル
【化２８】
2020067507.tif 000029
エチレフリン塩酸塩1000 mg(4.6 mmol)及び炭酸水素ナトリウム1158 mg(13.8 mmol)の酢酸エチル-水(5 mL:2.5 mL)混合溶液に、氷冷下クロロギ酸クロロメチル652 mg(5.1 mmol)の酢酸エチル溶液を滴下し、室温で3時間30分攪拌した。水層を除去し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(12％〜100％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物575 mg(2.1 mmol)(46％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.05-1.16(3H, m), 3.20-3.33(2H, m), 3.35-3.56(2H, m), 4.85-4.99(1H, m), 5.06-5.14(1H, m), 5.75-5.87(2H, m), 6.74-6.81(1H, m), 6.82-6.98(2H, m), 7.22(1H, br t, J=8 Hz)【００６６】
実施例８
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  ［３−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル
【化２９】
2020067507.tif 000030
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン4730 mg(25.0 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム4073 mg(12.5 mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニンセシウム塩から674 mg(2.1 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル575 mg(2.1 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を水で洗浄した後、再度水層をジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を合わせ飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(33％〜60％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物640 mg(1.5 mmol)(71％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.02(2H, br t, J=7 Hz), 1.12(1H, br t, J=7 Hz), 1.44(9H, br s), 2.61(2H, t, J=7Hz), 3.05-3.26(1H, m), 3.27-3.47(4H, m), 3.52(1H, br s), 4.74-4.84(1/2H, m), 4.92-4.98(1/2H, m), 5.02(1H, br s), 5.72-5.85(2H, m),  6.73-6.82(1H, m), 6.83-6.94(2H, m), 7.21(1H, br t, J=8 Hz)【００６７】
実施例９
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩
【化３０】
2020067507.tif 000031
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  ［３−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル640 mg (1.5 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液3 mLを加えて4時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取し、エタノールに溶解した。減圧下、溶媒を留去して標記化合物507 mg(1.4 mmol)(93％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.97-1.05(3H, m), 2.73-2.80(2H, m), 3.04(2H, t, J=7 Hz), 3.13-3.31(4H, m), 4.57-4.70(1H, m), 5.39-5.46(1H, m), 5.68(1H, s), 5.74(1H, s), 6.62-6.70 (1H, m), 6.70-6.80(2H, m), 7.12(1H, t, J=8 Hz), 8.00 (3 H, br s), 9.35 (1 H, s) 【００６８】
実施例１０
［３−［［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化３１】
2020067507.tif 000032
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.4 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩42 mg(0.1 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)54 mg(0.1 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 4 mL）。反応液を90％エタノール8mLに撹拌しながら滴下し、混合液にエタノール12 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物211 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのエチレフリンの導入率は22％であった。【００６９】
実施例１１
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−クロロ−２−メチルプロピル  エステル
【化３２】
2020067507.tif 000033
エチレフリン塩酸塩1000 mg(4.6 mmol)及び炭酸水素ナトリウム1158 mg(13.8 mmol)の酢酸エチル-水(5 mL:10 mL)混合溶液に、氷冷下クロロギ酸１−クロロ−２−メチルプロピル943 mg(5.5 mmol)の酢酸エチル溶液を滴下し、室温で一晩攪拌した。氷冷下、再度クロロギ酸１−クロロ−２−メチルプロピル351 mg(2.1 mmol)の酢酸エチル溶液を滴下し、室温で一晩攪拌した。水層を除去し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(1％〜12％メタノール／クロロホルム)にて精製し、真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物409 mg(1.3 mmol)(28％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.01-1.17 (9 H, m), 2.08-2.27(1H, m), 3.12-3.57(4H, m), 4.85-5.00 (1H, m), 6.33-6.44(1H, m), 6.72-6.83(1H, m), 6.84-6.96(2H, m), 7.22(1 H, br t, J=8 Hz)【００７０】
実施例１２
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］−２−メチルプロピル  エステル
【化３３】
2020067507.tif 000034
３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸509 mg(2.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム408 mg(1.3 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸セシウム塩から416 mg(1.3 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−クロロ−２−メチルプロピル  エステル409 mg(1.3 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−クロロ−２−メチルプロピル  エステル160 mg(0.5 mmol)をさらに加え、三晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜40％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製し、真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物109 mg(0.23 mmol)(18％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.92-1.13(9H, m), 1.16(3H, t, J=7 Hz), 1.42(9H, br s), 1.88-2.13(2H, m), 2.72(1H, br s), 2.87-3.48(5H, m), 3.48-3.64(1H, m), 4.75-4.97(1H, m), 5.05-5.25(1H, m), 6.52-6.65(1H, m), 6.72-7.02(3H, m), 7.12-7.23(1H, m)【００７１】
実施例１３
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−（３−アミノ−２−メチル−１−オキソプロポキシ）−２−メチルプロピル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化３４】
2020067507.tif 000035
Ｎ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］−２−メチルプロピル  エステル47 mg (0.1 mmol)の塩化メチレン溶液にトリフルオロ酢酸0.2 mLをゆっくりと加えて2時間30分静置した。減圧下溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物25 mg (50％)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.91-1.06(9H, m), 1.11-1.19(3H, m), 1.97-2.08(1H, m), 2.76-2.83(1H, m), 2.83-2.92(1H, m), 3.01-3.30(5H, m), 4.57-4.67(1H, m), 5.33-5.48(1H, m), 6.45(1/5H, d, J=4 Hz), 6.48 (4/5 H, d, J=4 Hz), 6.61-6.85(3H, m), 7.02-7.18(1H, m), 7.79(3H, br s), 9.22-9.39(1H, m)【００７２】
実施例１４
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  クロロメチル  エステル
【化３５】
2020067507.tif 000036
トロキシピド1500 mg(5.1 mmol)及びトリエチルアミン619 mg(6.1 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下クロロギ酸クロロメチル789 mg(6.1 mmol)の塩化メチレン溶液を加え、室温にて一晩攪拌した。反応液を減圧下に濃縮後、酢酸エチルを加えて水、10％硫酸水素カリウム水溶液及び飽和食塩水にて洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(25％ 酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物1824 mg(4.7 mmol)(92％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.55-1.84(3H, m), 1.85-2.10(1H, m), 3.29-3.79(4H, m), 3.88(3H, s), 3.91(6H, s), 4.10-4.29(1H, m), 5.61-5.75(1H, m), 5.81-6.11(3/2H, m), 6.39(1/2H, br s), 6.89-7.06(2H, m)【００７３】
実施例１５
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−クロロエチル  エステル
【化３６】
2020067507.tif 000037
トロキシピド1500 mg(5.1 mmol)及びトリエチルアミン619 mg(6.1 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下クロロギ酸１−クロロエチル874 mg(6.1 mmol)の塩化メチレン溶液を加え、室温にて一晩攪拌した。反応液を減圧下に濃縮後、酢酸エチルを加えて水、10％硫酸水素カリウム水溶液及び飽和食塩水にて洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(1％〜10％ メタノール／クロロホルム)にて精製して標記化合物1146 mg(2.9 mmol)(56％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.64-2.13(7H, m), 3.14-3.31(1H, m), 3.36-3.66(2H, m), 3.81-3.97(10H, m), 4.10-4.30(1H, m), 5.88-6.14(1/2H, m), 6.46-6.71(3/2H, m), 6.90-7.10(2H, m)【００７４】
実施例１６
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル
【化３７】
2020067507.tif 000038
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン4730 mg(25.0 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム4073 mg(12.5 mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニンセシウム塩から643 mg(2.0 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへ３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  クロロメチル  エステル775 mg(2.0 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を水で洗浄した後、再度水層をジエチルエーテルにて逆抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(33％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物763 mg(1.4 mmol)(71％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.42(9H, s), 1.56-1.84(2H, m), 1.86-2.10(2H, m), 2.54(2H, br s), 3.15-3.45(4H, m), 3.55-3.79(2H, m), 3.88-3.93(9H, m), 4.05-4.27(1H, m), 4.93(1/2H, br s), 5.10(1/2H, br s), 5.69-6.00(5/2H, m), 6.37(1/2H, br s), 6.90-7.05(2H, m)【００７５】
実施例１７
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］アセチル］オキシ］メチル  エステル
【化３８】
2020067507.tif 000039
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−グリシン2190 mg(12.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム2037 mg(6.3 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−グリシンセシウム塩から159 mg(0.5 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへ３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  クロロメチル  エステル200 mg(0.5 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜80％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物113 mg(0.2 mmol)(40％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.43(9H, s), 1.56-1.84(2H, m), 1.86-2.09(2H, m), 3.14-3.43(2H, m), 3.52-3.80(2H, m), 3.84-3.97(11H, m), 4.04-4.27(1H, m), 4.88-5.15(1H, m), 5.70-6.01(5/2H, m), 6.37(1/2 H, br s), 6.90-7.06(2H, m)【００７６】
実施例１８
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］エチル  エステル
【化３９】
2020067507.tif 000040
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン4730 mg(25.0 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム4073 mg(12.5 mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニンセシウム塩から481 mg(1.5 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへ３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−クロロエチル  エステル600 mg(1.5 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(30％〜80％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物231 mg(0.4 mmol)(28％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.37-1.46(9H, m), 1.51(3H, d, J=5 Hz), 1.57-2.13(4H, m), 2.28-2.62(2H, m), 3.06-3.83(6H, m), 3.87-3.93(9H, m), 4.16(1H, br s), 4.87-5.20(1H, m), 6.10(1/2H, br s), 6.44(1/2H, br s), 6.79(1H, br s), 7.01(2H, s)【００７７】
実施例１９
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］アセチル］オキシ］エチル  エステル
【化４０】
2020067507.tif 000041
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−グリシン2190 mg(12.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム2037 mg(6.3 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−グリシンセシウム塩から238 mg(0.8 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへ３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−クロロエチル  エステル300 mg(0.8 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去して標記化合物213 mg(0.4 mmol)(51％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.43(9H, br s), 1.52(3H, d, J=5 Hz), 1.57-2.08(4 H, m), 3.26-3.73(4H, m), 3.75-3.99(11H, m), 4.09-4.21(1H, m), 4.80-5.02(1H, m), 6.06(1/2H, br s), 6.35 (1/2H, br s), 6.79-6.90(1H, m), 7.00(2H, s)【００７８】
実施例２０
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル  塩酸塩
【化４１】
2020067507.tif 000042
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［［［３−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル763 mg (1.4 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液2 mLを加えて3時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物703 mg(定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.39-1.53(1H, m), 1.54-1.67(1H, m), 1.73-1.85(1H, m), 1.89-1.99(1H, m), 2.75(2H, br t, J=7 Hz), 2.79-2.93(2H, m), 3.04(2H, t, J=7 Hz), 3.71(3H, s), 3.77-3.94(8H, m), 3.96-4.12(1H, m), 5.74(2H, s), 7.18(2H, s), 7.88(3H, br s), 8.30(1H, br s)【００７９】
実施例２１
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（２−アミノアセチル）オキシ］メチル  エステル  塩酸塩
【化４２】
2020067507.tif 000043
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］アセチル］オキシ］メチル  エステル113 mg (0.2 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液0.75 mLを加えて3時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物88 mg (91％)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.40-1.53(1H, m), 1.54-1.66(1H, m), 1.74-1.85(1H, m), 1.90-1.98(1H, m), 2.71-2.94(2H, m), 3.71(3H, s), 3.79-3.95(10H, m), 3.97-4.12(1H, m), 5.83(2H, br s), 7.18(2H, s), 8.11(3H, br s), 8.25-8.36(1H, m)【００８０】
実施例２２
［３−［［(トロキシピド−カルボニル)オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化４３】
2020067507.tif 000044
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩37 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)36 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 4 mL)。反応液を90％エタノール8 mLに撹拌しながら滴下し、混合液にエタノール12 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物205 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は19％であった。【００８１】
実施例２３
［２−［［(トロキシピド−カルボニル)オキシ］メトキシ］−２−オキソエチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化４４】
2020067507.tif 000045
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（２−アミノアセチル）オキシ］メチル  エステル  塩酸塩36 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)36 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 4 mL)。反応液を90％エタノール8 mLに撹拌しながら滴下し、混合液にエタノール12 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物211 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は27％であった。【００８２】
実施例２４
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  クロロメチル  エステル
【化４５】
2020067507.tif 000046
メトキシフェナミン1500 mg(7.0 mmol)及びピリジン1210 mg(15.3 mmol)の酢酸エチル溶液に、氷冷下クロロギ酸クロロメチル986 mg(7.7 mmol)の酢酸エチル溶液を加え、室温にて3時間攪拌した。反応液を減圧下に濃縮後、酢酸エチルを加えて10％硫酸水素カリウム水溶液及び飽和食塩水にて洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(30％〜80％ 酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物654 mg(2.4 mmol)(35％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.17(3H, d, J=7 Hz), 2.73-2.86(5H, m), 3.83(3H, s), 4.40-4.51(1/2H, m), 4.51-4.60(1/2H, m), 5.53-5.66(1H, m), 5.66-5.74(1H, m), 6.80-6.90(2H, m), 7.02-7.12(1H, m), 7.15-7.21(1H, m)【００８３】
実施例２５
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−クロロエチル  エステル
【化４６】
2020067507.tif 000047
メトキシフェナミン1500 mg(7.0 mmol)及びピリジン1210 mg(15.3 mmol)の酢酸エチル溶液に、氷冷下クロロギ酸１−クロロエチル1094 mg(7.7 mmol)の酢酸エチル溶液を加え、室温にて3時間攪拌した。反応液を減圧下に濃縮後、酢酸エチルを加えて10％硫酸水素カリウム水溶液及び飽和食塩水にて洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(30％〜80％ 酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物1215 mg(4.3 mmol)(61％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.13-1.22(3H, m), 1.52-1.57(1H, m), 1.73-1.79(2H, m), 2.70-2.86(5H, m), 3.79-3.87(3H, m), 4.42-4.51(1/2H, m), 4.51-4.59(1/2H, m), 6.37(1/3H, q, J=6 Hz), 6.47-6.57(2/3H, m), 6.80-6.88(2H, m), 7.00-7.13(1H, m), 7.14-7.22(1H, m)【００８４】
実施例２６
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  ［５−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソペントキシ］メチル  エステル
【化４７】
2020067507.tif 000048
５−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ペンタン酸2716.0 mg(12.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム2036.5 mg(6.3 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた５−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ペンタン酸セシウム塩から841 mg(2.4 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  クロロメチル  エステル654 mg(2.4 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を水で洗浄した後、再度水層をジエチルエーテルにて逆抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物1002 mg(2.2 mmol)(92％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.15(3H, d, J=7 Hz), 1.42-1.46(9H, m), 1.46-1.56(2H, m), 1.57-1.68(2H, m), 2.29-2.38(2H, m), 2.71-2.83(5H, m), 3.05-3.15(2H, m), 3.83(3H, s), 4.41-4.51(1/2H, m), 4.51-4.64(3/2H, m), 5.50-5.63(1H, m), 5.66-5.75(1H, m), 6.80-6.87(2H, m), 7.00-7.12(1H, m), 7.14-7.21(1H, m)【００８５】
実施例２７
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［４−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］エチル  エステル
【化４８】
2020067507.tif 000049
４−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ブタン酸2540 mg(12.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム2037 mg(6.3 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた４−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ブタン酸セシウム塩から352 mg(1.1 mmol)採取し、Ｎ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−クロロエチル  エステル300 mg(1.1 mmol)のＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を水で洗浄した後、再度水層をジエチルエーテルにて逆抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(13％〜80％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製し、真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物282 mg(0.6 mmol)(59％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.10-1.24(4H, m), 1.37-1.49(11H, m), 1.72-1.83(2H, m), 2.23-2.38(2H, m), 2.71-2.81(5H, m), 3.08-3.19(2H, m), 3.82(2H, s), 3.84(1H, s), 4.39-4.58(1H, m), 4.69(1H, br s), 6.56(1/3H, q, J=5 Hz), 6.69-6.76(2/3H, m), 6.81-6.88(2H, m), 7.00-7.13(1H, m), 7.18(1H, td, J=8, 2 Hz)【００８６】
実施例２８
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  （５−アミノ−１−オキソペントキシ）メチル  エステル  塩酸塩
【化４９】
2020067507.tif 000050
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  ［５−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソペントキシ］メチル  エステル270 mg (0.6 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液1.5 mLを加えて3時間静置した。減圧下、溶媒を留去して標記化合物233 mg (定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.05-1.14(3H, m), 1.48-1.63(4H, m), 2.24-2.41(2H, m), 2.64-2.74(5H, m), 2.74-2.83(2H, m), 3.76-3.81(3H, m), 4.32-4.45(1H, m), 5.39-5.53(1H, m), 5.56-5.62(1H, m), 6.80-6.86(1H, m), 6.90-6.96(1H, m), 7.02-7.09(1H, m), 7.18(1H, td, J=8, 2 Hz), 7.84(3H, br s)【００８７】
実施例２９
［５−［［(メトキシフェナミン−カルボニル)オキシ］メトキシ］−５−オキソペンチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化５０】
2020067507.tif 000051
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液にＮ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  （５−アミノ−１−オキソペントキシ）メチル  エステル  塩酸塩30 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)36 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 4 mL)。反応液を90％エタノール8 mLに撹拌しながら滴下し、混合液にエタノール12 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物170 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメトキシフェナミンの導入率は8％であった。【００８８】
実施例３０
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−（４−アミノ−１−オキソブトキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化５１】
2020067507.tif 000052
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［４−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］エチル  エステル282 mg (0.6 mmol)の塩化メチレン溶液にトリフルオロ酢酸0.5 mLをゆっくりと加えて2時間静置した。減圧下、溶媒を留去して標記化合物331 mg (定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.04-1.15(4H, m), 1.31(1H, d, J=5 Hz), 1.38(1H, d, J=5 Hz), 1.71-1.79(2H, m), 2.27-2.46(2H, m), 2.64-2.73(5H, m), 2.75-2.85(2H, m), 3.75-3.82(3H, m), 4.32-4.42(1H, m), 6.37(1/3H, q, J=5 Hz), 6.51-6.64(2/3H, m), 6.82-6.87(1H, m), 6.91-6.98(1H, m), 7.00-7.11(1H, m), 7.14-7.21(1H, m), 7.70(3H, br s)【００８９】
実施例３１
［４−［１−［(メトキシフェナミン−カルボニル)オキシ］エトキシ］−４−オキソブチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化５２】
2020067507.tif 000053
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液にＮ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−N−メチルカルバミン酸  １−（４−アミノ−１−オキソブトキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩41 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド（ＤＭＴ−ＭＭ）36 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加えた後、反応液を90％エタノール12 mLに撹拌しながら滴下し、混合液にエタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物200 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメトキシフェナミンの導入率は5％であった。【００９０】
参考例２
２−［［３−オキソ−３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］プロピル］アミノ］−２−オキソエチル−メトキシポリエチレングリール（２０,０００）  コンジュゲート
【化５３】
2020067507.tif 000054
メトキシポリエチレングリール（２０,０００）酢酸  N−ヒドロキシスクシンイミド  エステル294 mg(0.02 mmol)およびトリエチルアミン15 mg(0.15 mmol)のアセトニトリル溶液に、３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩35 mg(0.07 mmol)のアセトニトリル／ジオキサン(1/1)混合溶液を加え、室温にて一晩攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残渣にアセトニトリル1 mLを加えて溶解した。溶液を攪拌しながら白濁するまでイソプロピルアルコールをゆっくりと滴下した。懸濁液をイソプロピルアルコール12 mLに撹拌しながら滴下し、析出した沈殿をろ取した。フィルター上の沈殿物をイソプロピルアルコールで２回、ジエチルエーテルで１回洗浄した。室温下、真空ポンプで一晩乾燥して標記化合物285 mgを得た。1H-NMRの積分値より、トロキシピドの導入率は49.4％であった。【００９１】
実施例３２
６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸  銀塩
【化５４】
2020067507.tif 000055
６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸2.32 g(10.0 mmol)のアセトニトリル20 mL溶液に酸化銀（Ｉ）1.39 g(6.0 mmol)を加えた。アルゴン気流下、混合液に水10 mLを加え、70℃で1時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、ろ液を減圧下にて濃縮した。残留物を真空ポンプにて一晩乾燥し、標記化合物2.73 g(8.1 mmol)(81%)を得た。【００９２】
実施例３３
６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸  １−［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］エチル  エステル
【化５５】
2020067507.tif 000056
ヨウ化ナトリウム7.12 g(47.5 mmol)、炭酸  １−クロロエチル  ４−ニトロフェニル  エステル 2.33 g(9.49 mmol)のアセトン懸濁液を40℃で一晩撹拌した。反応液を濾過後、ろ液を減圧下に濃縮し、トルエンを加えて再び濾過した。ろ液を濃縮後、６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸  銀塩2.73 g(8.1 mmol)の乾燥トルエン懸濁液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に酢酸エチルを加えて不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(5％〜30％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物700 mg(1.6 mmol)(17%)を得た。
1H NMR (CDCl3, δ): 1.31 - 1.41 (2 H, m), 1.44 (9 H, s), 1.46 - 1.53 (2 H, m), 1.61 (3 H, d, J=5 Hz), 1.67 (2 H, quin, J=8 Hz), 2.38 (2 H, t, J=8 Hz), 3.05 - 3.17 (2 H, m), 4.51 (1 H, br s), 6.84 (1 H, q, J=5 Hz), 7.41 (2 H, d, J=10 Hz), 8.29 (2 H, d, J=9 Hz)【００９３】
実施例３４
［３−［１−［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］−２−メチルプロポキシ］−３−オキソ−２−メチルプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化５６】
2020067507.tif 000057
コンドロイチン硫酸ナトリウム100 mg(0.2 mmol)を水2 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール2 mLを滴下した。混合液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  １−（３−アミノ−２−メチル−１−オキソプロポキシ）−２−メチルプロピル  エステル  トリフルオロ酢酸塩19 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)18 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液50 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 2 mL）。反応液を90％エタノール10 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール15 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物89 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのエチレフリンの導入率は17％であった。【００９４】
実施例３５
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化５７】
2020067507.tif 000058
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］エチル  エステル74 mg (0.1 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.1 mLをゆっくりと加えて、室温で8時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物58 mg (79％)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.36 - 1.52 (4 H, m), 1.54 - 1.68 (1 H, m), 1.73 - 1.85 (1 H, m), 1.88 - 1.99 (1 H, m), 2.62 - 2.96 (4 H, m), 2.96 - 3.27 (2 H, m), 3.72 (3 H, s), 3.76 - 3.94 (8 H, m), 3.99 - 4.07 (1 H, m), 6.66 - 6.76 (1 H, m), 7.16 (2 H, s), 7.73 (3 H, br s), 8.12 (1 H, br d, J=7 Hz)【００９５】
実施例３６
［３−オキソ−３−［１−［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］エトキシ］プロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化５８】
2020067507.tif 000059
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩34 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物171 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は14％であった。【００９６】
実施例３７
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［（２−アミノアセチル）オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化５９】
2020067507.tif 000060
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］アセチル］オキシ］エチル  エステル106 mg (0.2 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.15 mLをゆっくりと加えて、室温で5時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物100 mg (90％)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.39 - 1.54 (4 H, m), 1.55 - 1.67 (1 H, m), 1.73 - 1.83 (1 H, m), 1.86 - 2.04 (1 H, m), 2.72 - 2.99 (2 H, m), 3.72 (3 H, s), 3.76 - 3.97 (10 H, m), 4.00 - 4.10 (1 H, m), 6.73 - 6.85 (1 H, m), 7.16 (2 H, s), 8.05 - 8.33 (4 H, m)【００９７】
実施例３８
［２−［１−［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］エトキシ］−２−オキソエチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化６０】
2020067507.tif 000061
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［（２−アミノアセチル）オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩33 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物157 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は18％であった。【００９８】
実施例３９
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］エチル  エステル
【化６１】
2020067507.tif 000062
２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸91mg(0.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム79 mg(0.2 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸  セシウム塩をＮ，  Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ここへ３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−クロロエチル  エステル150 mg(0.4 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて３回抽出した。得られた有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物143 mg(0.3 mmol)(68％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.33 - 1.54 (18 H, m), 1.56 - 2.12 (4 H, m), 2.96 - 3.71 (3 H, m), 3.78 - 4.07 (10 H, m), 4.09 - 4.34 (1 H, m), 4.74 - 4.96 (1 H, m), 6.76 (1H, q, J=5 Hz), 7.02 (2 H, s)【００９９】
実施例４０
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−（２−アミノ−２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化６２】
2020067507.tif 000063
３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］エチル  エステル143 mg (0.3 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.19 mLをゆっくりと加えて、室温で4時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物145 mg (定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.32 - 1.65 (11 H, m), 1.71 - 1.86 (1 H, m), 1.87 - 1.99 (1 H, m), 2.67 - 3.03 (2 H, m), 3.70 (3 H, s), 3.75 - 3.94 (8 H, m), 3.96 - 4.10 (1 H, m), 6.67 - 6.81 (1 H, m), 7.15 (2 H, s), 8.12 - 8.32 (1 H, m), 8.46 (3 H, br s)【０１００】
実施例４１
［１，１−ジメチル−２−オキソ−２−［１−［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］エトキシ］エチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化６３】
2020067507.tif 000064
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  １−（２−アミノ−２−メチル−１−オキソプロポキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩34 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 2 mL）。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物233 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は2％であった。【０１０１】
実施例４２
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［［１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロペンチル］カルボニル］オキシ］エチル  エステル
【化６４】
2020067507.tif 000065
１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロペンタンカルボン酸 325 mg(1.4 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム254 mg(0.8 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロペンタンカルボン酸  セシウム塩から278 mg(0.8 mmol)採取し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−クロロエチル  エステル200 mg(0.7 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物259 mg(0.5 mmol)(77％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.09 - 1.20 (3 H, m), 1.23 (1 H, d, J=5 Hz), 1.37 - 1.50 (11 H, m), 1.66 - 1.79 (4 H, m), 1.80 - 2.06 (2 H, m), 2.10 - 2.21 (1 H, m), 2.22 - 2.34 (1 H, m), 2.67 - 2.83 (5 H, m), 3.79 - 3.89 (3 H, m), 4.37 - 4.46 (1/3 H, m), 4.47 - 4.59 (2/3 H, m), 4.86 (1 H, br s), 6.59 (1/3 H, q, J=5 Hz), 6.69 - 6.80 (2/3 H, m), 6.80 - 6.91 (2 H, m), 7.01 - 7.12 (1 H, m), 7.18 (1 H, td, J=8, 2 Hz)【０１０２】
実施例４３
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［（１−アミノシクロペンチル）カルボニル］オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化６５】
2020067507.tif 000066
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［［１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロペンチル］カルボニル］オキシ］エチル  エステル259 mg (0.5 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.41 mLをゆっくりと加えて、室温で6時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にヘキサンを加え攪拌した。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物226 mgを得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.06 - 1.16 (3 H, m), 1.22 (1 H, d, J=5 Hz), 1.37 - 1.49 (2 H, m), 1.57 - 1.95 (6 H, m), 1.99 - 2.21 (2 H, m), 2.65 - 2.76 (5 H, m), 3.71 - 3.85 (3 H, m), 4.31 - 4.49 (1 H, m), 6.41 (1/3 H, q, J=5 Hz), 6.57 - 6.69 (2/3 H, m), 6.79 - 6.88 (1 H, m), 6.91 - 6.97 (1 H, m), 6.99 - 7.12 (1 H, m), 7.13 - 7.32 (1 H, m), 8.45 (3 H, br s)【０１０３】
実施例４４
［１−［［１−［（メトキシフェナミン−カルボニル）オキシ］エトキシ］カルボニル］シクロペンチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化６６】
2020067507.tif 000067
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［（１−アミノシクロペンチル）カルボニル］オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩29 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 2 mL）。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物221 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメトキシフェナミンの導入率は1％であった。【０１０４】
実施例４５
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［［１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロプロピル］カルボニル］オキシ］エチル  エステル
【化６７】
2020067507.tif 000068
１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロプロパンカルボン酸 350 mg(1.7 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム312 mg(1.0 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロプロパンカルボン酸  セシウム塩から257 mg(0.8 mmol)採取し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−クロロエチル  エステル200 mg(0.7 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物148 mg(0.3 mmol)(47％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.07 - 1.23 (6 H, m), 1.35 - 1.54 (13 H, m), 2.67 - 2.85 (5 H, m), 3.80 - 3.85 (3 H, m), 4.34 - 4.47 (1/2 H, m), 4.49 - 4.60 (1/2 H, m), 5.08 (1 H, br s), 6.53 - 6.61 (1/3 H, m), 6.65 - 6.78 (2/3 H, m), 6.80 - 6.92 (2 H, m), 6.99 - 7.14 (1 H, m), 7.14 - 7.23 (1 H, m)【０１０５】
実施例４６
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［（１−アミノシクロプロピル）カルボニル］オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化６８】
2020067507.tif 000069
Ｎ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［［１−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］シクロプロピル］カルボニル］オキシ］エチル  エステル148 mg (0.3 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.25 mLをゆっくりと加えて、室温で6時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にヘキサンを加え攪拌した。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物144 mgを得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.06 - 1.19 (4 H, m), 1.22 - 1.49 (6 H, m), 2.65 - 2.75 (5 H, m), 3.75 - 3.82 (3 H, m), 4.31 - 4.48 (1 H, m), 6.39 (1/3 H, q, J=5 Hz), 6.52 - 6.60 (2/3 H, m), 6.81 - 6.88 (1 H, m), 6.90 - 6.98 (1 H, m), 7.00 - 7.10 (1 H, m), 7.14 - 7.32 (1 H, m), 8.68 (3 H, br s)【０１０６】
実施例４７
［１−［［１−［（メトキシフェナミン−カルボニル）オキシ］エトキシ］カルボニル］シクロプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化６９】
2020067507.tif 000070
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−［２−（２−メトキシフェニル）−１−メチルエチル］−Ｎ−メチルカルバミン酸  １−［［（１−アミノシクロプロピル）カルボニル］オキシ］エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物145 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメトキシフェナミンの導入率は10％であった。【０１０７】
実施例４８
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル
【化７０】
2020067507.tif 000071
Ｎ−メチル−４−（トリフルオロメチル）アニリン613 mg(3.5 mmol)及びピリジン305 mg(3.9 mmol)のジエチルエーテル溶液に氷冷下クロロギ酸クロロメチル496 mg(3.9 mmol)のジエチルエーテル溶液を加え、室温にて１時間攪拌した。反応液を濾過し、減圧下溶媒を留去して、標記化合物926 mg(3.5 mmol)(定量的)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 3.38 (3 H, s), 5.78 (2 H, s), 7.39 (2 H, br d, J=8 Hz), 7.64 (2 H, d, J=9 Hz)【０１０８】
実施例４９
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］メチル  エステル
【化７１】
2020067507.tif 000072
３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］酪酸509 mg(2.5 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム408 mg(1.3 mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られた３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］酪酸  セシウム塩から275 mg(0.8 mmol)採取し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル200 mg(0.8 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物275 mg(0.6 mmol)(84％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.21 (3 H, d, J=7 Hz), 1.43 (9 H, s), 2.48 - 2.66 (2 H, m), 3.36 (3 H, s), 3.96 - 4.16 (1 H, m), 4.82 (1 H, br s), 5.79 (2 H, s), 7.32 - 7.47 (2 H, m), 7.62 (2 H, d, J=9 Hz)【０１０９】
実施例５０
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソブトキシ）メチル  エステル  塩酸塩
【化７２】
2020067507.tif 000073
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］メチル  エステル275 mg (0.6 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液1.6 mLを加えて3時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物253 mg (定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.22 (3 H, d, J=7 Hz), 2.67 (1 H, dd, J=17, 8 Hz), 2.81 (1 H, dd, J=17, 6 Hz), 3.30 (3 H, s), 3.47 - 3.56 (1 H, m), 5.71 - 5.77 (2 H, m), 7.57 (2 H, d, J=8 Hz), 7.76 (2 H, d, J=8 Hz), 8.02 (3 H, br s)【０１１０】
実施例５１
［１−メチル−３−［［［［メチル［４−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］カルボニル］オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化７３】
2020067507.tif 000074
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソブトキシ）メチル  エステル  塩酸塩22 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物153 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのＮ−メチル−４−（トリフルオロメチル）アニリンの導入率は10％であった。【０１１１】
実施例５２
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル
【化７４】
2020067507.tif 000075
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−アラニン78 mg(0.4 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム73 mg(0.2 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−アラニン  セシウム塩をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル100 mg(0.4 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物150 mg(0.4 mmol)(定量的)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.40 (3 H, d, J=7 Hz), 1.44 (9 H, s), 3.36 (3 H, s), 4.27 - 4.41 (1 H, m), 4.97 (1 H, br s), 5.76 - 5.89 (2 H, m), 7.32 - 7.47 (2 H, m), 7.62 (2 H, d, J=8 Hz)【０１１２】
実施例５３
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル  塩酸塩
【化７５】
2020067507.tif 000076
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル147 mg (0.3 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液1.5 mLを加えて8時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物96 mg (0.3 mmol)(79%)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.41 (3 H, d, J=7 Hz), 3.31 (3 H, s), 4.18 (1 H, q, J=7 Hz), 5.77 - 5.88 (2 H, m), 7.58 (2 H, d, J=8 Hz), 7.77 (2 H, d, J=8 Hz), 8.43 (3 H, br s)【０１１３】
実施例５４
［（１Ｓ）−１−メチル−２−［［［［メチル［４−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］カルボニル］オキシ］メトキシ］−２−オキソエチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化７６】
2020067507.tif 000077
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル  塩酸塩21 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物148 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのＮ−メチル−４−（トリフルオロメチル）アニリンの導入率は15％であった。【０１１４】
実施例５５
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル
【化７７】
2020067507.tif 000078
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−バリン89 mg(0.4 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム73 mg(0.2 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−バリン  セシウム塩をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル100 mg(0.4 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物130 mg(0.3 mmol)(78％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.86 (3 H, d, J=7 Hz), 0.95 (3 H, d, J=7 Hz), 1.44 (9 H, s), 2.07 - 2.22 (1 H, m), 3.35 (3 H, s), 4.26 (1 H, br dd, J=8, 4 Hz), 4.96 (1 H, br d, J=8 Hz), 5.70 - 5.94 (2 H, m), 7.32 - 7.42 (2 H, m), 7.62 (2 H, d, J=9 Hz)【０１１５】
実施例５６
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル  塩酸塩
【化７８】
2020067507.tif 000079
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル126 mg (0.3 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液2 mLを加えて5時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物103 mg (0.3 mmol)(定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.92 (3 H, d, J=7 Hz), 0.96 (3 H, d, J=7 Hz), 2.11 - 2.23 (1 H, m), 3.30 (3 H, s), 4.02 (1 H, br d, J=4 Hz), 5.74 - 5.95 (2 H, m), 7.56 (2 H, d, J=9 Hz), 7.77 (2 H, d, J=9 Hz), 8.44 (3 H, br s)【０１１６】
実施例５７
［（１Ｓ）−２−メチル―１−［［［［［メチル［４−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］カルボニル］オキシ］メトキシ］カルボニル］プロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化７９】
2020067507.tif 000080
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル  塩酸塩23 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 2 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物147 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのＮ−メチル−４−トリフルオロメチルアニリンの導入率は16％であった。【０１１７】
実施例５８
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−３，３−ジメチル−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］メチル エステル
【化８０】
2020067507.tif 000081
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン95 mg(0.4 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム73 mg(0.2 mmol)を加えて室温で10分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン  セシウム塩をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル100 mg(0.4 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物100 mg(0.2 mmol)(58％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.95 (9 H, s), 1.43 (9 H, s), 3.35 (3 H, s), 4.01 - 4.23 (1 H, m), 5.05 (1 H, br d, J=8 Hz), 5.72 - 5.92 (2 H, m), 7.36 (2 H, br d, J=8 Hz), 7.61 (2 H, d, J=8 Hz)【０１１８】
実施例５９
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジメチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル  塩酸塩
【化８１】
2020067507.tif 000082
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−３，３−ジメチル−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソブトキシ］メチル エステル94 mg (0.2 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液1.5 mLを加えて5時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物77 mg (0.2 mmol)(定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.97 (9 H, s), 3.30 (3 H, s), 3.82 (1 H, s), 5.70 - 5.97 (2 H, m), 7.56 (2 H, d, J=9 Hz), 7.76 (2 H, d, J=9 Hz), 7.90 - 8.43 (3 H, br s)【０１１９】
実施例６０
［（１Ｓ）−２，２−ジメチル−１−［［［［［メチル［４−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］カルボニル］オキシ］メトキシ］カルボニル］プロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化８２】
2020067507.tif 000083
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.30 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液にＮ−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバミン酸  ［（２Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジメチル−１−オキソブトキシ］メチル エステル  塩酸塩24 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 3 mL)。反応液をエタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回、更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物151 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのＮ−メチル−４−（トリフルオロメチル）アニリンの導入率は20％であった。【０１２０】
実施例６１
［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）−１−メチルエチル］カルバミン酸  １−［６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソヘキシロキシ］エチル  エステル
【化８３】
2020067507.tif 000084
メキシレチン塩酸塩59 mg(0.27 mmol)及びジイソプロピルエチルアミン71 mg(0.55 mmol)の塩化メチレン溶液に６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸  １−［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］エチル  エステル121 mg(0.27 mmol)の塩化メチレン溶液を加えて室温で一晩攪拌した。減圧下溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(10％〜35％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物56 mg(0.12 mmol)(44%)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.30 - 1.38 (2 H, m), 1.39 - 1.51 (17 H, m), 1.59 - 1.71 (2 H, m), 2.26 (6 H, s), 2.27 - 2.41 (2 H, m), 3.10 (2 H, br s), 3.67 - 3.75 (1H, m), 3.75 - 3.87 (1 H, m), 4.06 (1 H, br s), 4.56 (1 H, br s), 5.18 (1 H, br s), 6.81 - 6.88 (1 H, m), 6.90 - 6.95 (1 H, m), 6.98 - 7.02 (2 H, m)【０１２１】
実施例６２
［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）−１−メチルエチル］カルバミン酸  １−（６−アミノ−１−オキソヘキシロキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化８４】
2020067507.tif 000085
［［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）］−１−メチルエチル］カルバミン酸  １−［６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソヘキシロキシ］エチル  エステル56 mg (0.12 mmol)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.1 mLをゆっくりと加えて、室温で6時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物37 mgを得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.18 - 1.24 (3 H, m), 1.25 - 1.36 (2 H, m), 1.40 (3 H, t, J=5.7 Hz), 1.45 - 1.58 (4 H, m), 2.20 (6 H, s), 2.23 - 2.34 (2 H, m), 2.70 - 2.81 (2H, m), 3.61 - 3.66 (2 H, m), 3.80 - 3.91 (1 H, m), 6.67 - 6.73 (1 H, m), 6.90 (1 H, t, J=8 Hz), 7.00 (2 H, d, J=8 Hz), 7.51 - 7.73 (4 H, m)【０１２２】
実施例６３
［６−［１−［（メキシレチン−カルボニル）オキシ］エトキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化８５】
2020067507.tif 000086
コンドロイチン硫酸ナトリウム100 mg(0.2 mmol)を水2 mLに溶解し、撹拌しながらジオキサン2 mLを滴下した。混合液に［［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）］−１−メチルエチル］カルバミン酸  １−（６−アミノ−１−オキソヘキシロキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩19 mg(0.04 mmol)の50％ジオキサン水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)18 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液50 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 2 mL）。反応液を90％エタノール10 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール15 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物104 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメキシレチンの導入率は14％であった。【０１２３】
実施例６４
［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）−１−メチルエチル］カルバミン酸  ［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル
【化８６】
2020067507.tif 000087
メキシレチン塩酸塩98 mg(0.45 mmol)及びジイソプロピルエチルアミン117 mg(0.91 mmol)の塩化メチレン溶液にＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−β−アラニン  ［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］メチル  エステル175 mg(0.45 mmol)の塩化メチレン溶液を加えて室温で一晩攪拌した。減圧下溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(10％〜50％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製した。得られた粗精製物を再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー(10％酢酸エチル／トルエン)にて精製し、標記化合物149 mg(0.35 mmol)(78%)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.39 - 1.47 (12 H, m), 2.25 (6 H, s), 2.59 (2 H, t, J=6 Hz), 3.34 - 3.47 (2 H, m), 3.73 (1 H, dd, J=9, 4 Hz), 3.80 (1 H, dd, J=9, 4 Hz), 4.02 - 4.18 (1 H, m), 5.01 (1 H, br s), 5.26 (1 H, br d, J=8 Hz), 5.77 (2 H, s), 6.90 - 6.95 (1 H, m), 7.00 (2 H, d, J=8 Hz)【０１２４】
実施例６５
［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）−１−メチルエチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩
【化８７】
2020067507.tif 000088
［［２−（２，６−ジメチルフェノキシ）］−１−メチルエチル］カルバミン酸  ［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル149 mg (0.35 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液4 mLを加えて6時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残留物にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物112 mg(0.31 mmol)(89%)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.23 (3 H, d, J=7 Hz), 2.20 (6 H, s), 2.74 (2 H, t, J=7 Hz), 3.02 (2 H, t, J=7 Hz), 3.64 (2 H, d, J=6 Hz), 3.84 - 3.95 (1 H, m), 5.69 (2 H, s), 6.87 - 6.94 (1 H, m), 7.01 (2 H, d, J=7 Hz), 7.72 (1 H, d, J=8 Hz), 8.00 (3 H, br s)【０１２５】
実施例６６
［３−［［（メキシレチン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化８８】
2020067507.tif 000089
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.4 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液に［［１−メチル−２−（２，６−ジメチルフェノキシ）］エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩28 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)22 mg(0.05 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 3 mL）。反応液を90％エタノール11 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール15 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物207 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのメキシレチンの導入率は11％であった。【０１２６】
実施例６７
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソヘキシロキシ］エチル  エステル
【化８９】
2020067507.tif 000090
フルボキサミンマレイン酸塩200 mg(0.46 mmol)及びジイソプロピルエチルアミン89 mg(0.69 mmol)の塩化メチレン溶液に６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ヘキサン酸  １−［［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ］エチル  エステル101 mg(0.23 mmol)の塩化メチレン溶液を加えて室温で一晩攪拌した。減圧下溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(10％〜50％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物134 mg(0.19 mmol, 純度90 mol%)(84%)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.21-1.41 (2H, m), 1.41 - 1.50 (14 H, m), 1.58 - 1.69 (6 H, m), 2.25 - 2.35 (2 H, m), 2.79 (2 H, t, J=7 Hz), 3.02 - 3.17 (2 H, m), 3.32 (3 H, s), 3.35 - 3.44 (2 H, m), 3.47 - 3.66 (2 H, m), 4.27 (2 H, t, J=5 Hz), 4.58 (1 H, br s), 5.37 (1 H, br s), 6.83 (1 H, q, J=5 Hz), 7.62 (2 H, d, J=8 Hz), 7.74 (2 H, d, J=8 Hz)【０１２７】
実施例６８
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−（６−アミノ−１−オキソヘキシロキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化９０】
2020067507.tif 000091
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［６−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソヘキシロキシ］エチル  エステル133 mg (0.19 mmol, 純度90 mol%)の塩化メチレン溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.15 mLをゆっくりと加えて、室温で5時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、トルエンに溶解し、ヘキサンを加えて沈殿を析出させた。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物123 mg(定量的)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 1.22 - 1.35 (2 H, m), 1.37 (3 H, d, J=5 Hz), 1.43 - 1.55 (8 H, m), 2.27 (2 H, t, J=7 Hz), 2.71 - 2.81 (4 H, m), 3.19 (3 H, s), 3.23 - 3.41 (4 H, m), 4.15 (2 H, t, J=6 Hz), 6.67 (1 H, q, J=5 Hz), 7.54 (1 H, t, J=6 Hz), 7.61 (3 H, br s), 7.77 (2 H, d, J=8 Hz), 7.86 (2 H, d, J=8 Hz)【０１２８】
実施例６９
［６−［１−［（フルボキサミン−カルボニル）オキシ］エトキシ］−６−オキソヘキシル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化９１】
2020067507.tif 000092
コンドロイチン硫酸ナトリウム100 mg(0.2 mmol)を水2 mLに溶解し、撹拌しながらジオキサン2 mLを滴下した。混合液に［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−（６−アミノ−１−オキソヘキシロキシ）エチル  エステル  トリフルオロ酢酸塩25 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)18 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液50 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 2 mL）。反応液を90％エタノール10 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール15 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物103 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのフルボキサミンの導入率は11％であった。【０１２９】
実施例７０
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−クロロ−２−メチルプロピル  エステル
【化９２】
2020067507.tif 000093
フルボキサミンマレイン酸塩300 mg(0.69 mmol)及びジイソプロピルエチルアミン223 mg(1.73 mmol)の塩化メチレン溶液に氷冷下クロロギ酸１−クロロ−２−メチルプロピル189 mg(1.11 mmol)の塩化メチレン溶液を加え、室温にて４時間攪拌した。反応液を濃縮後、酢酸エチルに溶解し、10%硫酸水素カリウム水溶液、飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去して、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（10% 酢酸エチル／ヘキサン）にて精製した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥して、標記化合物140 mg(0.31 mmol)(45%)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 1.04 (3 H, d, J=6 Hz), 1.05 (3 H, d, J=6 Hz), 1.60 - 1.66 (4 H, m), 2.09 - 2.20 (1 H, m), 2.79 (2 H, t, J=8 Hz), 3.33 (3 H, s), 3.40 (2 H, t, J=6 Hz), 3.58 (2 H, dd, J=10, 5 Hz), 4.26 - 4.33 (2 H, m), 5.53 (1 H, br s), 6.34 (1 H, d, J=4 Hz), 7.62 (2 H, d, J=8 Hz), 7.74 (2 H, d, J=8 Hz)【０１３０】
実施例７１
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソ−２−フェニルエトキシ］−２−メチルプロピル  エステル
【化９３】
2020067507.tif 000094
Ｎ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−２−フェニルグリシン502 mg(2.0 mmol)のメタノール溶液に炭酸セシウム358 mg(1.1 mmol)を加えて室温で30分間攪拌した。混合懸濁液を減圧下、溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥した。得られたＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−２−フェニルグリシン  セシウム塩から366 mg(0.95 mmol)採取し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−クロロ−２−メチルプロピル  エステル140 mg(0.31 mmol)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液を加え一晩攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルにて抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（20% 酢酸エチル／ヘキサン）にて精製した。減圧下溶媒を留去し、真空ポンプを用いて一晩乾燥し、標記化合物71 mg(0.11 mmol)(34％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.63 - 0.75 (3 H, m), 0.94 (3 H, d, J=7 Hz), 1.22 - 1.49 (9 H, m), 1.56 - 1.68 (4 H, m), 1.78 - 1.90 (1/2 H, m), 1.95 - 2.10 (1/2 H, m), 2.71 - 2.86 (2 H, m), 3.26 (1 H, s), 3.32 (2 H, s), 3.35 - 3.45 (3 H, m), 3.48 - 3.64 (1 H, m), 4.07 - 4.23 (1 H, m), 4.29 (1 H, t, J=5 Hz), 5.17 - 5.25 (1/2 H, m), 5.28 - 5.36 (1 H, m), 5.36 - 5.45 (1/2H, m), 5.47 - 5.59 (1/2 H, m), 5.67 - 5.77 (1/2 H, m), 6.58 - 6.69 (1 H, m), 7.28 - 7.39 (5 H, m), 7.59 - 7.63 (2 H, m), 7.69 - 7.77 (2 H, m)【０１３１】
実施例７２
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソ−２−フェニルエトキシ］−２−メチルプロピル  エステル  トリフルオロ酢酸塩
【化９４】
2020067507.tif 000095
［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソ−２−フェニルエトキシ］−２−メチルプロピル  エステル69 mg (0.10 mmol)の塩化メチレン1 mL溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸0.25 mLをゆっくりと加えて、室温で3時間攪拌した。減圧下溶媒を留去した後、残留物にヘキサンとジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。上清をデカンテーションして真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物64 mg(0.09 mmol)(95%)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.57 (3/2 H, d, J=7 Hz), 0.59 (3/2 H, d, J=7 Hz), 0.86 - 0.92 (3 H, m), 1.41 - 1.54 (4 H, m), 1.71 - 1.80 (1/2 H, m), 1.90 - 1.98 (1/2 H, m), 2.71 - 2.82 (2 H, m), 3.18 (3 H, s), 3.23 - 3.32 (4 H, m), 3.37 - 3.45 (1 H, m), 3.98 - 4.12 (1 H, m), 4.12 - 4.22 (1 H, m), 5.35 - 5.42 (1 H, m), 6.57 (1/2 H, d, J=5 Hz), 6.59 (1/2 H, d, J=5 Hz), 7.39 - 7.54 (5 H, m), 7.77 (2 H, dd, J=9, 2 Hz), 7.86 (2 H, d, J=9 Hz), 8.78 - 8.99 (3 H, m)【０１３２】
実施例７３
［［２−［１−［（フルボキサミン−カルボニル）オキシ］−２−メチルプロポキシ］−２−オキソ−１−フェニル］エチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化９５】
2020067507.tif 000096
コンドロイチン硫酸ナトリウム200 mg(0.4 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液に［２−［［（Ｅ）−［５−メトキシ−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ペンチリデン］アミノ］オキシ］エチル］カルバミン酸  １−［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソ−２−フェニルエトキシ］−２−メチルプロピル  エステル  トリフルオロ酢酸塩53 mg(0.08 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)22 mg(0.05 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 4 mL）。反応液を90％エタノール12 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール15 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物226 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのフルボキサミンの導入率は11％であった。【０１３３】
実施例７４
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル
【化９６】
2020067507.tif 000097
ＤＬ−アミノグルテチミド2000 mg(8.6 mmol) 及び炭酸水素ナトリウム2170 mg(25.8 mmol)のジエチルエーテル-水(3 mL:3 mL)混合溶液に氷冷下クロロギ酸クロロメチル1221 mg(9.47 mmol)のジエチルエーテル溶液を加え、室温にて３０分攪拌した。水層を除去し、酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去して真空ポンプで一晩乾燥し、標記化合物2514 mg(7.7 mmol)(90％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.87 (3 H, t, J=7 Hz), 1.91 (1 H, dq, J=14, 7 Hz), 2.04 (1 H, dq, J=14, 7 Hz), 2.22 (1 H, td, J=14, 5 Hz), 2.32 - 2.46 (2 H, m), 2.56 - 2.64 (1 H, m), 5.83 (2 H, s), 6.87 (1 H, br s), 7.25 (2 H, d, J=9 Hz), 7.43 (2 H, br d, J=8 Hz), 7.91 (1 H, s)【０１３４】
実施例７５
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ヨードメチル  エステル
【化９７】
2020067507.tif 000098
ヨウ化ナトリウム296 mg(2.0 mmol)及び［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  クロロメチル  エステル475 mg(1.5 mmol)のアセトン懸濁液を40℃で一晩撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、ジエチルエーテルを加えて撹拌した。不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去して標記化合物615 mg(定量的)を得た。得られた化合物は精製せずにそのまま次の工程に使用した。【０１３５】
実施例７６
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル
【化９８】
2020067507.tif 000099
２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸610 mg(3.0 mmol)のアセトニトリル10 mL溶液に酸化銀（Ｉ）383 mg(1.7 mmol)を加えた。アルゴン気流下、混合液に水5 mLを加え、70℃で2時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、ろ液を減圧下にて濃縮した。残留物を真空ポンプにて一晩乾燥し、２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸  銀塩932 mgを得た。得られた２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチルプロパン酸  銀塩223 mg(0.72 mmol)の乾燥トルエン懸濁液に［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ヨードメチル  エステル298 mg(0.72 mmol)の乾燥トルエン溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に酢酸エチルを加えて不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(15％〜80％酢酸エチル／ヘキサン)にて精製して標記化合物91 mg(0.18 mmol)(26％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.86 (3 H, t, J=8 Hz), 1.37 (9 H, s), 1.46 (3 H, s), 1.50 (3 H, s), 1.90 (1 H, dq, J=15, 7 Hz), 1.97 - 2.07 (1 H, m), 2.17 - 2.26 (1 H, m), 2.32 - 2.45 (2 H, m), 2.55 - 2.64 (1 H, m), 4.91 (1 H, br s), 5.86 (2 H, s), 6.91 (1 H, br s), 7.22 (2 H, d, J=8 Hz), 7.40 (2 H, br d, J=8 Hz), 7.79 (1 H, s)【０１３６】
実施例７７
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  （２−アミノ−２−メチル−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩
【化９９】
2020067507.tif 000100
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２−メチル−１−オキソプロポキシ］メチル  エステル90 mg (0.18 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液1.5 mLを加えて10時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物64 mg (0.15 mmol)(83%)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.75 (3 H, t, J=7 Hz), 1.45 (3 H, s), 1.49 (3 H, s), 1.73 - 1.91 (2 H, m), 2.06 - 2.20 (2 H, m), 2.27 - 2.38 (1 H, m), 2.41 - 2.48 (1 H, m), 5.88 (2 H, s), 7.24 (2 H, d, J=8 Hz), 7.47 (2 H, br d, J=8 Hz), 8.73 (3 H, br s), 10.15 (1 H, br s), 10.82 (1 H, s)【０１３７】
実施例７８
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−［［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］メチル］−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル  エステル
【化１００】
2020067507.tif 000101
２−［［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］メチル］−３−メチルブタン酸1874 mg(8.1 mmol)のアセトニトリル20 mL溶液に酸化銀（Ｉ）1127 mg(4.9 mmol)を加えた。アルゴン気流下、混合液に水10 mLを加え、70℃で1時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、ろ液を減圧下にて濃縮した。残留物を真空ポンプにて乾燥し、２−［［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］メチル］−３−メチルブタン酸  銀塩1875 mgを得た。得られた２−［［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］メチル］−３−メチルブタン酸  銀塩360 mg(1.1 mmol)の乾燥トルエン懸濁液に［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ヨードメチル  エステル296 mg(0.71 mmol)の乾燥トルエン溶液を加え、室温にて5時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加えて不溶物を濾過して除き、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(15％〜80％酢酸エチル／トルエン)にて精製して標記化合物48 mg(0.09 mmol)(13％)を得た。
1H-NMR (CDCl3, δ): 0.87 (3 H, t, J=7 Hz), 0.93 - 1.04 (6 H, m), 1.35 - 1.46 (9 H, m), 1.90 (1 H, dq, J=14, 7 Hz), 1.95 - 2.08 (2 H, m), 2.17 - 2.27 (1 H, m), 2.32 - 2.45 (2 H, m), 2.47 - 2.54 (1 H, m), 2.56 - 2.66 (1 H, m), 3.19 - 3.32 (1 H, m), 3.40 - 3.54 (1 H, m), 4.84 (1 H, br s), 5.80 - 5.89 (2 H, m), 6.91 (1 H, br s), 7.24 (2 H, d, J=9 Hz), 7.36 - 7.46 (2 H, m), 7.81 (1 H, s)【０１３８】
実施例７９
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−（アミノメチル）−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル  エステル  塩酸塩
【化１０１】
2020067507.tif 000102
［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−［［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］メチル］−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル  エステル48 mg (0.09 mmol)の酢酸エチル溶液に4N塩酸/ジオキサン溶液0.6 mLを加えて10時間静置した。減圧下、溶媒を留去した後、残渣にジイソプロピルエーテルを加え攪拌した。析出した結晶をろ取して標記化合物34 mg (0.08 mmol)(83%)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6, δ): 0.75 (3 H, t, J=7 Hz), 0.85 - 0.96 (6 H, m), 1.71 - 1.91 (2 H, m), 1.93 - 2.05 (1 H, m), 2.08 - 2.18 (2 H, m), 2.28 - 2.39 (1 H, m), 2.40 - 2.48 (1 H, m), 2.61 - 2.70 (1 H, m), 2.91 - 2.99 (1 H, m), 3.01 - 3.14 (1 H, m), 5.75 (1 H, d, J=6 Hz), 5.86 (1 H, d, J=6 Hz), 7.23 (2 H, d, J=9 Hz), 7.46 (2 H, br d, J=8 Hz), 7.99 (3 H, br s), 10.08 (1 H, br s), 10.82 (1 H, s)【０１３９】
実施例８０
［２−［［［（アミノグルテチミド−カルボニル）オキシ］メトキシ］カルボニル］−３−メチルブチル］アミノ−コンドロイチン硫酸  コンジュゲート
【化１０２】
2020067507.tif 000103
コンドロイチン硫酸ナトリウム150 mg(0.3 mmol)を水3 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール3 mLを滴下した。混合液に［４−（３−エチル−２，６−ジオキソ−３−ピペリジニル）フェニル］カルバミン酸  ［２−（アミノメチル）−３−メチル−１−オキソブトキシ］メチル  エステル  塩酸塩27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)27 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100 μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 1 mL）。反応液を90％エタノール9 mLに撹拌しながら滴下し、静置した。上清をデカンテーション後、90%エタノール10 mLを加えて撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物151 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのアミノグルテチミドの導入率は15％であった。【０１４０】
実施例８１
［３−［［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸（２０，０００）  コンジュゲート
【化１０３】
2020067507.tif 000104
コンドロイチン硫酸ナトリウム（２０，０００）200 mg(0.4 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩71 mg(0.2 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)90 mg(0.2 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液100μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 5 mL）。反応液を90%エタノール8 mLに撹拌しながら滴下した。上清をデカンテーションし、沈殿物を50%エタノール水溶液16 mLに溶解した。エタノール50 mLを攪拌しながら加えたのち、上清をデカンテーションした。90%エタノール10 mLを加え遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物233 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのエチレフリンの導入率は37.4％であった。【０１４１】
実施例８２
［３−［［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸（４０，０００）  コンジュゲート
【化１０４】
2020067507.tif 000105
コンドロイチン硫酸ナトリウム（４０，０００）200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩72 mg(0.20 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)91 mg(0.20 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液333μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 3 mL）。反応液をエタノール13 mLに撹拌しながら滴下した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて1回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物239 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのエチレフリンの導入率は34.7％であった。【０１４２】
実施例８３
［３−［［（エチレフリン−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−ヒアルロン酸（６５０，０００）  コンジュゲート
【化１０５】
2020067507.tif 000106
1%ヒアルロン酸ナトリウム（６５０，０００）水溶液10 g(0.25 mmol)に撹拌しながらエタノール10 mLを滴下した。混合液にＮ−エチル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチル］カルバミン酸  （３−アミノ−１−オキソプロポキシ）メチル  エステル  塩酸塩18 mg(0.05 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)11 mg(0.02 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に塩化ナトリウム500 mgを加え溶解し、そこへエタノール30 mLを滴下して沈殿を形成した。上清をデカンテーションしてからエタノール10 mLを加え攪拌した。再度上清をデカンテーションしてから、遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物83 mgを得た。1H-NMRの積分値より、ヒアルロン酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのエチレフリンの導入率は9.1％であった。【０１４３】
実施例８４
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸（２０，０００）  コンジュゲート
【化１０６】
2020067507.tif 000107
コンドロイチン硫酸ナトリウム（２０，０００）250 mg(0.49 mmol)を水5 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール5 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩116 mg(0.24 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)113 mg(0.24 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液417μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した(およそ 4 mL)。反応液をエタノール15 mLに撹拌しながら滴下して撹拌した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて1回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物321 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は35.7％であった。【０１４４】
実施例８５
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−コンドロイチン硫酸（４０，０００）  コンジュゲート
【化１０７】
2020067507.tif 000108
コンドロイチン硫酸ナトリウム（４０，０００）200 mg(0.39 mmol)を水4 mLに溶解し、撹拌しながらエタノール4 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩94 mg(0.20 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)91 mg(0.20 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20％塩化ナトリウム水溶液333μLを加え、更に反応液が白濁する直前までエタノールを滴下した（およそ 3 mL）。反応液をエタノール13 mLに撹拌しながら滴下した。遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて1回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合物240 mgを得た。1H-NMRの積分値より、コンドロイチン硫酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は39.6％であった。【０１４５】
実施例８６
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−ヒアルロン酸（７０，０００）  コンジュゲート
【化１０８】
2020067507.tif 000109
1%ヒアルロン酸ナトリウム（７０，０００）水溶液15 g(0.37 mmol)に撹拌しながらエタノール15 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩53 mg(0.11 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)25 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に塩化ナトリウム750 mgを加え溶解し、そこへエタノール45 mLを滴下して沈殿を形成した。上清をデカンテーションしてからエタノール15 mLを加え攪拌した。再度上清をデカンテーションしてから、遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合158 mgを得た。1H-NMRの積分値より、ヒアルロン酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は12.8％であった。【０１４６】
実施例８７
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−ヒアルロン酸（１００，０００）  コンジュゲート
【化１０９】
2020067507.tif 000110
1%ヒアルロン酸ナトリウム（１００，０００）水溶液15 g(0.37 mmol)に撹拌しながらエタノール15 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩53 mg(0.11 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)25 mg(0.06 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に塩化ナトリウム750 mgを加え溶解し、そこへエタノール45 mLを滴下して沈殿を形成した。上清をデカンテーションしてからエタノール15 mLを加え攪拌した。再度上清をデカンテーションしてから、遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合139 mgを得た。1H-NMRの積分値より、ヒアルロン酸の全二糖単位（グルクロン酸）あたりのトロキシピドの導入率は13.5％であった。【０１４７】
実施例８８
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−カルボキシメチルセルロース  コンジュゲート
【化１１０】
2020067507.tif 000111
1%カルボキシメチルセルロース水溶液20 g(0.88 mmol)に撹拌しながらエタノール20 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩21 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)25 mg(0.04 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20%塩化ナトリウム水溶液2 mLを加え溶解し、そこへエタノール60 mLを滴下して沈殿を形成した。上清をデカンテーションしてから90%エタノール30 mLを加え攪拌した。再度上清をデカンテーションしてから、遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％エタノールで2回、エタノールで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合201 mgを得た。分光光度計の測定結果(255 nm)より、トロキシピドの導入率は2％であった。【０１４８】
実施例８９
［３−［［（トロキシピド−カルボニル）オキシ］メトキシ］−３−オキソプロピル］アミノ−アルギン酸  コンジュゲート
【化１１１】
2020067507.tif 000112
1%アルギン酸ナトリウム水溶液20 g(1.01 mmol)に撹拌しながらエタノール20 mLを滴下した。混合液に３−［（３，４，５−トリメトキシベンゾイル）アミノ］−１−ピペリジンカルボン酸  ［（３−アミノ−１−オキソプロポキシ）］メチル  エステル 塩酸塩24 mg(0.05 mmol)の50％エタノール水溶液、次いで速やかに４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム クロリド(DMT-MM)23 mg(0.05 mmol)の50％エタノール水溶液を加え、室温にて一晩撹拌した。反応液に20%塩化ナトリウム水溶液3 mLを加え溶解し、そこへアセトン400 mLを滴下して沈殿を形成した。上清をデカンテーションしてから90%アセトン100 mLを加え攪拌した。再度上清をデカンテーションしてから、遠心分離機を用いて沈殿を分取し、90％アセトンで2回、アセトンで2回更にジエチルエーテルにて2回洗浄した。得られた沈殿を真空ポンプにて一晩乾燥して標記化合183 mgを得た。分光光度計の測定結果(255 nm)より、トロキシピドの導入率は2％であった。【０１４９】
試験例１  薬物−ポリマーコンジュゲートの薬物遊離試験
［操作］
リン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ７．０に、表１に示される各評価ポリマーコンジュゲートを１．５mg/mLの濃度で溶解し分注した。溶解直後を初期状態（保存０日）として、アセトニトリル／生理食塩水溶液（１：１）で０．５mg/mLに希釈した後、溶液中に存在する薬物−ポリマーコンジュゲートと遊離薬物をＳＥＣ−ＨＰＬＣにて分析した。他の分注液を溶解直後から３６℃の保存条件に付し、各時間経過後、同様に分析した。こうして得られた各時点での遊離薬物と薬物−ポリマーコンジュゲートのピーク面積比から、薬物遊離率（％）を算出した。時間と薬物遊離率（Drug Release）との関係は図１、図２、図３、図４及び図５に示すとおりである。
ＨＰＬＣ条件は以下のとおりである。
カラム：ＴＳＧｇｅｌ  α-３０００（７．８mm×３００mm）
流速：０．５mL/min
温度：３５℃
移動相：アセトニトリル／生理食塩水＝１／２
薬物遊離率＝遊離薬物ピーク面積／（遊離薬物ピーク面積＋コンジュゲートピーク面積）×１００【０１５０】
［結果］
図１、図２、図３、図４及び図５が示すように、本発明の化合物である新規な第１級アミン化合物又は第２級アミン化合物と酸性多糖ポリマーコンジュゲートは、何れも時間依存的に薬物遊離量が増加している結果が得られており、生物活性を有する第１級アミン化合物又は第２級アミン化合物の構造によらず徐放性を持たせることが可能である。
図１、図２、図３、図４及び図５が示すように、生物活性を有する第１級アミン化合物又は第２級アミン化合物の遊離速度をリンカーの構造によって非常に細かく且つ幅広く調節することが可能である。【０１５１】
【表１】
2020067507.tif 000113
【０１５２】
【表２】
2020067507.tif 000114
【０１５３】
【表３】
2020067507.tif 000115
【０１５４】
【表４】
2020067507.tif 000116
【０１５５】
【表５】
2020067507.tif 000117
【０１５６】
試験例２  薬物−ポリマーコンジュゲートの濾過性比較試験
［操作］
エッペンチューブに表６、表８、及び表１０に示される各コンドロイチン硫酸（CS）−コンジュゲート及びポリエチレングリコール（PEG）−コンジュゲートを秤量し、それぞれの検体が表７、表９及び表１１に示されるコンジュゲート濃度となるように蒸留水を加えた。ボルテックスミキサーで３０秒攪拌後、２０００Gで６０秒遠心した。これを２回繰り返した後、室温下で１時間静置した。再度ボルテックスミキサーで３０秒攪拌後、２０００Gで６０秒遠心して溶解液を調製した。
孔径０．２２μｍ、ポリフッ化ビニリデン（PVDF）膜の遠心式フィルターユニットに溶解した各種検体を約７０〜９０ ｍｇ秤量し、２５℃、１２０００Gで９０分間遠心した。フィルター通過液を秤量し、フィルター通過率（重量％）を算出した。
各検体の導入率から算出した溶液中の薬物濃度とフィルター通過率の関係は図６、図７及び図８に示すとおりである。【０１５７】
［結果］
濾過性のある溶液ではフィルター濾過による除塵、除菌、滅菌などが可能になる。特に濾過滅菌に使用される孔径０．２２μｍフィルターの濾過性は、点眼剤や注射剤などの溶液製剤を製造する上で重要なパラメータの一つである。
図６、図７及び図８が示すように、本発明の化合物である第１級アミン又は第２級アミン化合物の酸性多糖コンジュゲートはPEGコンジュゲートよりも高い薬物濃度で０．２２μｍフィルター濾過可能な溶液の調製が可能である。また、酸性多糖コンジュゲートはポリマー分子量を高分子化した場合でも、PEGコンジュゲートよりも高い薬物濃度で濾過性を有する溶液を調製可能であり、高分子量かつ高薬物濃度の溶液製剤を提供することができる。【０１５８】
【表６】
2020067507.tif 000118
【０１５９】
【表７】
2020067507.tif 000119
【０１６０】
【表８】
2020067507.tif 000120
【０１６１】
【表９】
2020067507.tif 000121
【０１６２】
【表１０】
2020067507.tif 000122
【０１６３】
【表１１】
2020067507.tif 000123
【図１】
2020067507.tif 000133
【図２】
2020067507.tif 000134
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2020067507.tif 000139
【図８】
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【国際調査報告】
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