【手続補正書】
【提出日】平成21年7月3日(2009.7.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱安定性蛋白質に融合されたヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分を含む単離された抗原であって；
ここで、該ＨＰＶ成分はＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む単離された抗原。
【請求項２】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７よりなる請求項１記載の単離された抗原。
【請求項３】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７よりなる請求項１記載の単離された抗原。
【請求項４】
前記ＨＰＶ成分が配列番号２または配列番号４よりなる請求項１記載の単離された抗原。
【請求項５】
前記熱安定性蛋白質が修飾されたリケナーゼ蛋白質配列を含む請求項１記載の単離された抗原。
【請求項６】
前記リケナーゼについてのコード配列が植物における蛋白質発現について最適化されている請求項５記載の単離された抗原。
【請求項７】
前記リケナーゼ蛋白質配列がリケナーゼのＮ−末端ドメイン、Ｃ−末端ドメインおよび表面ループドメインを含む請求項５記載の単離された抗原。
【請求項８】
前記リケナーゼに融合されたＨＰＶ成分がＮ−末端融合、Ｃ−末端融合、または表面ループ挿入融合蛋白質のいずれか１つである請求項５記載の単離された抗原。
【請求項９】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から独立して選択される少なくとも２つのドメインを含む請求項１記載の単離された抗原。
【請求項１０】
第一のＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７を含み、第二のＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７を含む請求項９記載の単離された抗原。
【請求項１１】
熱安定性蛋白質に融合したヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分を含む抗原、および医薬上許容される担体を含むワクチン組成物であって；
ここで、該ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含み；かつ、該組成物は対象への投与に際して免疫応答を誘導することができるワクチン組成物。
【請求項１２】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７よりなる請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７よりなる請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
前記ＨＰＶ成分が配列番号２または配列番号４よりなる請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
前記熱安定性蛋白質が修飾されたリケナーゼ蛋白質配列を含む請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
前記リケナーゼについてのコード配列が植物における蛋白質発現について最適化されている請求項１５記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
前記リケナーゼ蛋白質配列が、リケナーゼのＮ−末端ドメイン、Ｃ−末端ドメイン、および表面ループドメインを含む請求項１５記載のワクチン組成物。
【請求項１８】
前記リケナーゼに融合したＨＰＶ成分がＮ−末端融合、Ｃ−末端融合、または表面ループ挿入融合蛋白質のいずれか１つである請求項１５記載のワクチン組成物。
【請求項１９】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から独立して選択される少なくとも２つのドメインを含む請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
第一のＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７を含み、第二のＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７を含む請求項１９記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
さらに第二の抗原を含み、ここで、前記組成物は動物への投与に際して免疫応答を誘導することができる請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
前記第二の抗原が熱安定性蛋白質に融合したヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分、および医薬上許容される担体を含み；
ここで、第一の抗原のＨＰＶ成分はＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含み、および第二の抗原のＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される該第一の抗原から区別される少なくとも１つのドメインを含み；かつ
ここで、前記組成物は対象への投与に際して免疫応答を誘導することができる、請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
前記第一の抗原ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含み、および前記第二の抗原のＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７、およびＨＰＶ１８由来のＥ７の断片よりなる群から選択される該第一の抗原とは区別される少なくとも１つのドメインを含む、請求項２２記載のワクチン組成物。
【請求項２４】
前記抗原がトランスジェニック植物、および該抗原を一過的に発現する植物から選択される植物において生産される請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２５】
前記組成物が、植物細胞、植物、種子、果実、またはその抽出物から精製された、部分的に精製された、または精製されていない抗原を含む請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２６】
さらに、ワクチンアジュバントを含む請求項１１記載のワクチン組成物。
【請求項２７】
前記アジュバントがミョウバン、ＭＦ５９、ＭＡＬＰ２、およびサポニンを含む請求項２６記載のワクチン組成物。
【請求項２８】
各々がヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分を含む少なくとも２つの抗原を含むワクチン組成物であって、ここで、該抗原の少なくとも１つは、さらに、熱安定性蛋白質を含み、ここで、該組成物は対象への投与に際して免疫応答を誘導することができるワクチン組成物。
【請求項２９】
少なくとも２つの抗原が、ＨＰＶの成分を含み、その各々が、独立して、ＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６，およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片、およびその組合せよりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含み；かつ、前記組成物は対象への投与に際して免疫応答を誘導することができる請求項２８記載のワクチン組成物。
【請求項３０】
有効量の抗−ＨＰＶワクチン組成物を含む、対象においてヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染に対して保護免疫応答を誘導するための組成物であって、該組成物は、抗原特異的抗体の生産を刺激するのに、または該対象による細胞性免疫応答を刺激するのに十分である量で投与され、それにより、保護免疫応答を誘導することを特徴とし；
ａ．ここに該ワクチン組成物は熱安定性蛋白質に融合したヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分を含む抗原を含み；および
ｂ．ここで、該ＨＰＶ成分はＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む、組成物。
【請求項３１】
経口、鼻腔内、皮下、静脈内、腹腔内、または筋肉内投与されることを特徴とする、請求項３０記載の組成物。
【請求項３２】
植物細胞を前記対象に供することを介して経口投与されることを特徴とする、請求項３０記載の組成物。
【請求項３３】
前記対象がヒトである請求項３０記載の組成物。
【請求項３４】
熱安定性蛋白質に融合されたヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分を含む抗原蛋白質を生産するための方法であって、
ａ．熱安定性蛋白質に融合されたヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の抗原成分をコードする核酸構築体を調製する工程；
ｂ．細胞を工程ａの核酸構築体で形質転換する工程；および
ｃ．該抗原蛋白質の発現に好都合な条件下で該細胞をインキュベートする工程；
ｄ．それにより、該抗原蛋白質を生産する工程；
ことを含み、
ｅ．ここで、該抗原のＨＰＶ成分はＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む、
方法。
【請求項３５】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７よりなる請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７よりなる請求項３４記載の方法。
【請求項３７】
前記ＨＰＶ成分が配列番号１および配列番号３よりなる群から選択されるヌクレオチド配列によってコードされる請求項３４記載の方法。
【請求項３８】
前記ＨＰＶ成分が配列番号２または配列番号４よりなる請求項３４記載の方法。
【請求項３９】
前記熱安定性蛋白質が修飾されたリケナーゼ蛋白質配列を含む請求項３４記載の方法。
【請求項４０】
前記リケナーゼについてのコード配列が植物における蛋白質発現について最適化されている請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記リケナーゼ蛋白質配列がリケナーゼのＮ−末端ドメイン、Ｃ−末端ドメイン、および表面ループドメインを含む請求項３９記載の方法。
【請求項４２】
前記リケナーゼに融合されたＨＰＶ成分がＮ−末端融合、Ｃ−末端融合、または表面ループ挿入融合蛋白質のいずれか１つである請求項３９記載の方法。
【請求項４３】
前記ＨＰＶ成分が、各々が独立して、ＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、ＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片、およびその組合せよりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む少なくとも２つのドメインを含む請求項３４記載の方法。
【請求項４４】
前記抗原蛋白質の発現がウイルスプロモータの制御下にある請求項３４記載の方法。
【請求項４５】
前記核酸構築体が、さらに、ベクター核酸配列を含む請求項３４記載の方法。
【請求項４６】
前記ベクターがバイナリベクターである請求項４５記載の方法。
【請求項４７】
前記核酸構築体が、さらに、ウイルス蛋白質をコードする配列を含む請求項３４記載の方法。
【請求項４８】
前記植物が植物細胞である請求項３４記載の方法。
【請求項４９】
前記植物細胞がアルファルファ、ラディッシュ、カラシ、緑豆、ブロッコリー、オランダガラシ、大豆、小麦、ヒマワリ、キャベツ、クローバー、ペチュニア、トマト、ジャガイモ、ニコチン（ｎｉｃｏｔｉｎｅ）、ほうれん草およびレンズ豆細胞よりなる群から選択される請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
前記抗原蛋白質がクローン根細胞において生産される請求項４８記載の方法。
【請求項５１】
前記抗原蛋白質が発芽種苗において生産される請求項４８記載の方法。
【請求項５２】
さらに、生産される部分的に精製され、または精製された抗原蛋白質を回収する工程を含む、請求項３４記載の方法。
【請求項５３】
熱安定性蛋白質に融合されたヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）の成分をコードする核酸配列を含む単離された核酸構築体であって、ここに；該ＨＰＶの成分はＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片、およびその組合せよりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む、単離された核酸構築体。
【請求項５４】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、あるいはＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、またはＨＰＶ１６由来のＥ６の断片よりなる請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項５５】
前記ＨＰＶ成分がＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ６、あるいはＨＰＶ１８由来のＥ７の断片またはＨＰＶ１８由来のＥ６の断片よりなる請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項５６】
前記ＨＰＶ成分が配列番号２または配列番号４よりなる請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項５７】
前記熱安定性蛋白質が修飾されたリケナーゼ蛋白質配列を含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項５８】
前記リケナーゼについてのコード配列が植物における蛋白質発現について最適化されている請求項５７記載の単離された核酸構築体。
【請求項５９】
前記リケナーゼ蛋白質配列がリケナーゼのＮ−末端ドメイン、Ｃ−末端ドメインおよび表面ループドメインを含む請求項５７記載の単離された核酸構築体。
【請求項６０】
前記リケナーゼに融合されたＨＰＶ成分がＮ−末端融合、Ｃ−末端融合、または表面ループ挿入融合蛋白質のうちのいずれか１つである請求項５７記載の単離された核酸構築体。
【請求項６１】
前記ＨＰＶ成分が、その各々が、独立して、ＨＰＶ１６由来のＥ７、ＨＰＶ１８由来のＥ７、ＨＰＶ１６由来のＥ６、およびＨＰＶ１８由来のＥ６、ＨＰＶ１６由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１８由来のＥ７の断片、ＨＰＶ１６由来のＥ６の断片、およびＨＰＶ１８由来のＥ６の断片およびその組合せよりなる群から選択される少なくとも１つのドメインを含む少なくとも２つを含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６２】
前記ＨＰＶ成分が配列番号１または配列番号３を含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６３】
さらに、ベクター核酸配列を含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６４】
さらに、ウイルスプロモータ核酸配列を含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６５】
前記ベクターがバイナリーベクターである請求項６３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６６】
さらに、ウイルス蛋白質をコードする核酸配列を含む請求項５３記載の単離された核酸構築体。
【請求項６７】
請求項５３記載の核酸構築体を含む細胞。
【請求項６８】
植物細胞である請求項６７記載の細胞。
【請求項６９】
アルファルファ、ラディッシュ、カラシ、緑豆、ブロッコリー、オランダガラシ、大豆、小麦、ヒマワリ、キャベツ、クローバー、ペチュニア、トマト、ジャガイモ、ニコチン、ほうれん草およびレンズ豆細胞よりなる群から選択される請求項６７記載の細胞。
【請求項７０】
前記植物が前記抗原蛋白質を生産することができる請求項５３記載の核酸構築体を含む植物。
【請求項７１】
アルファルファ、ラディッシュ、カラシ、緑豆、ブロッコリー、オランダガラシ、大豆、小麦、ヒマワリ、キャベツ、クローバー、ペチュニア、トマト、ジャガイモ、ニコチン、ほうれん草およびレンズ豆よりなる群から選択される請求項７０記載の植物。
【請求項７２】
アブラナ属、タバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ）属、およびペチュニア属から選択される属のものである請求項７０記載の植物。