(57)【要約】  本発明は、Ｂ型肝炎の予防および治療に用いるための、経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、鼻腔粘膜に投与するための医療用ノズルデバイスと組み合わせた経鼻投与システムに関する。
2019235466.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）の両方またはどちらか一方、および
（ii）噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤
を含む、経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、点鼻用噴霧ノズルを有するシリンジ型噴出器に充填した、Ｂ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項２】
シリンジ型噴出器が、
ノズル噴出孔が形成された先端部を有する中空のノズル本体部と、
ノズル本体部内に配設される中実の充填ロッドと、
充填ロッドとノズル本体部との間に形成され、先端開口部とノズル噴出孔との間で流体連通するノズルチャンバとを備え、
ノズル噴出孔が０．２５ｍｍ〜０．３０ｍｍの径を有することを特徴とする点鼻用噴霧ノズルを備えた、シリンジバレルに流体連通する先端開口部を有する医療用シリンジである、請求項１に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項３】
（ｉ）のＢ型肝炎ワクチンが１種の抗原当り０．０１〜１０ｍｇ／ｍＬである［１］または請求項２に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項４】
組成物中０．１ｗ／ｖ％から１．０ｗ／ｖ％のカルボキシビニルポリマーを含有する、請求項１〜３のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項５】
噴霧性能としての、（１）製剤粒度分布範囲、（２）噴霧密度均一性、および／または（３）噴射角度制御を付加するために、外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤を用いた請求項１〜４のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項６】
ゲル基剤中０．５ｗ／ｖ％から２．０ｗ／ｖ％のカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤を用い、噴霧性能としての、（１）製剤粒度分布範囲、（２）噴霧密度均一性、および／または（３）噴射角度制御を付加するために外部からせん断力を与えて処理し、ゲル基剤を得た後、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）を含むウイルス原液とストレスを与えることなく短時間で均一に混和して得られる、請求項１〜３のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与治療システム。
【請求項７】
カルボキシビニルポリマーを含有する基剤に外部からせん断力を与えて、（１）製剤粒度分布において製剤平均粒子径が３０μｍから８０μｍの範囲、粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に８０％以上であり、（２）噴霧密度が偏りのない均等なフルコーンとなり、（３）噴射角度が３０°から７０°の範囲に制御した噴霧性能を付加されたゲル基剤を用いて製造する請求項１〜６のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項８】
カルボキシビニルポリマーを含有する基剤に外部からせん断力を与えて、（１）製剤粒度分布において製剤平均粒子径が４０μｍから７０μｍの範囲、粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に９０％以上であり、（２）噴霧密度が偏りのない均等なフルコーンとなり、（３）噴射角度が４０°から６０°の範囲に制御した噴霧性能を付加されたゲル基剤を用いて製造する請求項１〜６のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項９】
ノズル噴出孔が実質的に湾曲部を有さないことを特徴とする請求項２〜８のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１０】
ノズル噴出孔が形成された先端部において、製剤の噴出方向における厚みが０．２０ｍｍ〜０．３０ｍｍであることを特徴とする請求項２〜９のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１１】
ノズル本体部の内壁の少なくとも一部が円筒形状に形成され、充填ロッドの外壁の少なくとも一部が周方向に設けられた複数の溝部を含む円筒形状に形成され、
ノズルチャンバは、ノズル本体部の内壁の少なくとも一部と充填ロッドの外壁の少なくとも一部の溝部との間に形成され、
充填ロッドは、ノズル本体部の先端部に対向する渦流形成部を有することを特徴とする請求項２〜１０のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１２】
渦流形成部において、製剤が充填ロッドの溝部から流入する方向が中心軸から位置ずれし、製剤の渦流を形成することを特徴とする請求項１１に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１３】
ノズル本体部の内壁の少なくとも一部が、噴出方向に実質的に垂直な平面における断面が噴出方向に向かって連続的または段階的に小さくなるように形成されたことを特徴とする請求項１１または１２に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１４】
Ｂ型肝炎を予防および／または治療するための、請求項１〜１３のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【請求項１５】
予防および／または治療が必要な患者に、請求項１〜１３のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システムでＢ型肝炎ワクチン組成物を投与することを特徴とする、Ｂ型肝炎の予防および／または治療方法。
【請求項１６】
Ｂ型肝炎の予防および／または治療に用いる、請求項１〜１３のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｂ型肝炎の予防および治療に用いるための、経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、鼻腔粘膜に投与するための医療用ノズルデバイスと組み合わせた経鼻投与システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ型肝炎とは、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）に感染することによって発症する肝炎であり、ＨＢＶは血液や体液を介して感染する。ＨＢＶの肝細胞への持続感染は、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌を引き起こす。【０００３】
Ｂ型慢性肝炎（ＣＨＢ）の治療には現在、第一選択としてインターフェロン製剤（ＩＦＮ）と核酸アナログ製剤（ＮＡ）が主に使用されているが、ＩＦＮは免疫を強めてウイルスの増殖抑制を効果的に持続させる有効例もあるが、一般的にＨＢＶ排除率が低く、またその強い副作用も大きな問題であった。一方、ＮＡは、約９５％の高いＨＢＶ排除率を示すが、治療効果が一時的であり、根治はしないため生涯の服用が必要となり、コンプライアンス、医療経済上の大きな問題が残り、また長期にわたる使用で耐性をもったウイルスの出現の可能性の問題も報告されている。そのため、ＣＨＢに対する新しい治療方法が求められていた。【０００４】
Ｂ型肝炎ワクチンは、日本においては、Ｂ型肝炎ウイルスのＨＢｓ抗原（Ｂ型肝炎表面抗原）を皮下もしくは筋肉内に接種するもののみが認可されており、ＨＢＶキャリアの大幅な減少に一定の成果を上げてきている。一方、ＣＨＢの治療としても、ＨＢＶワクチンによる免疫治療の試行が行われてきたが、十分な治療効果が得られるまでには至っていない。
このような問題点から現在までに多種多様な側面から多くの試みがなされており、新たなＢ型ワクチン接種方法として、経鼻投与型ワクチンが着目されている。しかしながら、現在汎用されている皮下および筋肉内接種ワクチンをそのまま経鼻投与した場合においては、Ｂ型肝炎ウイルスに対する良好な免疫応答を誘導できず、治療効果が十分でないことが実験動物およびヒトで報告されている。【０００５】
そのような中、キューバ生体工学研究所（ＣＩＧＢ）はＨＢｓ抗原とＨＢｃ抗原の２種類の抗原を含む経鼻用治療ワクチンを開発し、バングラデシュにて臨床試験が行われ、ＨｅｂｅｒＮａｓｖａｃ（登録商標、非特許文献１）として商品化に成功している。しかしながら、その投与方法は、経鼻投与だけで免疫応答が不十分なため、皮下投与も併用する２サイクルの接種が必要とされ、経鼻用として完全な粘膜ワクチンとはなっていない。【０００６】
以上のように、皮下や筋肉内等へ接種する従来のＢ型肝炎ワクチンから、次世代Ｂ型肝炎ワクチンとしての経鼻投与型ワクチンの開発と実用化が期待されてはいるが、十分な効果が得られるには至っておらず、実用化に向けては種々課題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＷＯ２０１０／１１４１６９
【特許文献２】ＷＯ２００７／０１２３１９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、投与装置を含めたＢ型肝炎ワクチンの効果的な投与システムを開発することを目的とし、且つその効果がＢ型肝炎の根治を期待できることを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記問題点に鑑み、鋭意検討した結果、噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーからなる経鼻粘膜スプレー投与ゲル基剤をＨＢｓ抗原とＨＢｃ抗原と組合せることにより、アジュバントを特に必要とせず、ヒトに対して免疫誘導能を高められることを見出し、これを最適化された形態の点鼻用噴霧ノズルを有する定量シリンジ型噴出器に組み込んだ投与法を用いた治療システムとすることで、優れたＢ型肝炎ウイルスへの抗体価が得られ、且つ優れたＢ型肝炎の治療効果が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本願発明は、以下に示す通りである。【００１０】
［１］（ｉ）Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）の両方またはどちらか一方、および
（ii）噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤
を含む、経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、点鼻用噴霧ノズルを有するシリンジ型噴出器に充填した、Ｂ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１１】
［２］シリンジ型噴出器が、
ノズル噴出孔が形成された先端部を有する中空のノズル本体部と、
ノズル本体部内に配設される中実の充填ロッドと、
充填ロッドとノズル本体部との間に形成され、先端開口部とノズル噴出孔との間で流体連通するノズルチャンバとを備え、
ノズル噴出孔が０．２５ｍｍ〜０．３０ｍｍの径を有することを特徴とする点鼻用噴霧ノズルを備えた、シリンジバレルに流体連通する先端開口部を有する医療用シリンジである、［１］に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１２】
［３］（ｉ）のＢ型肝炎ワクチンが１種の抗原当り０．０１〜１０ｍｇ／ｍＬである［１］または［２］に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１３】
［４］組成物中０．１ｗ／ｖ％から１．０ｗ／ｖ％のカルボキシビニルポリマーを含有する、［１］〜［３］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１４】
［５］噴霧性能としての、（１）製剤粒度分布範囲、（２）噴霧密度均一性、および／または（３）噴射角度制御を付加するために、外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤を用いた［１］〜［４］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１５】
［６］ゲル基剤中０．５ｗ／ｖ％から２．０ｗ／ｖ％のカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤を用い、噴霧性能としての、（１）製剤粒度分布範囲、（２）噴霧密度均一性、および／または（３）噴射角度制御を付加するために外部からせん断力を与えて処理し、ゲル基剤を得た後、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）を含むウイルス原液とストレスを与えることなく短時間で均一に混和して得られる、［１］〜［３］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与治療システム。【００１６】
［７］カルボキシビニルポリマーを含有する基剤に外部からせん断力を与えて、（１）製剤粒度分布において製剤平均粒子径が３０μｍから８０μｍの範囲、粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に８０％以上であり、（２）噴霧密度が偏りのない均等なフルコーンとなり、（３）噴射角度が３０°から７０°の範囲に制御した噴霧性能を付加されたゲル基剤を用いて製造する［１］〜［６］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１７】
［８］カルボキシビニルポリマーを含有する基剤に外部からせん断力を与えて、（１）製剤粒度分布において製剤平均粒子径が４０μｍから７０μｍの範囲、粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に９０％以上であり、（２）噴霧密度が偏りのない均等なフルコーンとなり、（３）噴射角度が４０°から６０°の範囲に制御した噴霧性能を付加されたゲル基剤を用いて製造する［１］〜［６］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１８】
［９］ノズル噴出孔が実質的に湾曲部を有さないことを特徴とする［２］〜［８］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００１９】
［１０］ノズル噴出孔が形成された先端部において、製剤の噴出方向における厚みが０．２０ｍｍ〜０．３０ｍｍであることを特徴とする［２］〜［９］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００２０】
［１１］ノズル本体部の内壁の少なくとも一部が円筒形状に形成され、充填ロッドの外壁の少なくとも一部が周方向に設けられた複数の溝部を含む円筒形状に形成され、
ノズルチャンバは、ノズル本体部の内壁の少なくとも一部と充填ロッドの外壁の少なくとも一部の溝部との間に形成され、
充填ロッドは、ノズル本体部の先端部に対向する渦流形成部を有することを特徴とする［２］〜［１０］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００２１】
［１２］渦流形成部において、製剤が充填ロッドの溝部から流入する方向が中心軸から位置ずれし、製剤の渦流を形成することを特徴とする［１１］に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００２２】
［１３］ノズル本体部の内壁の少なくとも一部が、噴出方向に実質的に垂直な平面における断面が噴出方向に向かって連続的または段階的に小さくなるように形成されたことを特徴とする［１１］または［１２］に記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００２３】
［１４］Ｂ型肝炎を予防および／または治療するための、［１］〜［１３］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。【００２４】
［１５］予防および／または治療が必要な患者に、［１］〜［１３］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システムでＢ型肝炎ワクチン組成物を投与することを特徴とする、Ｂ型肝炎の予防および／または治療方法。【００２５】
［１６］Ｂ型肝炎の予防および／または治療に用いる、［１］〜［１３］のいずれかに記載のＢ型肝炎ワクチン経鼻投与システム。
【発明の効果】
【００２６】
本発明によると、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）を有効成分とし、アジュバントを特に必要とすることなく、より少ない抗原量で有効な免疫応答を誘導し、かつ、アジュバントを用いる必要がないことから副作用の少ないＢ型肝炎ワクチン経鼻ワクチン組成物を提供することが可能となり、最適化された形態の点鼻用噴霧ノズルを有する定量シリンジ型噴出器を用いた投与方法とすることで、Ｂ型肝炎の治療および予防目的に的確に対処することができる。
本発明の経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物は、噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーからなるゲル基剤を含有するため、鼻腔粘膜に広く長く展着・滞留することにより、より少ない抗原量で有効な免疫応答を誘導可能とする。
経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、最適化された形態の点鼻用噴霧ノズルを有する定量シリンジ型噴出器に充填した本発明のシステムを用いることで、Ｂ型肝炎を予防するだけでなく、治療にもその効果が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の一実施形態に係る点鼻用噴霧ノズルを備えた医療用シリンジ全体の概略的構成を示す部分破断側面図である。
【図２】（ａ）および（ｂ）は、本発明の一実施形態に係る点鼻用噴霧ノズルの概略的構成を示す分解斜視図であって、充填ロッドがノズル本体部に挿入される前後の状態を示すものである。
【図３】（ａ）は、図２（ｂ）に示す点鼻用噴霧ノズルを垂直面で見たときの垂直断面図であり、（ｂ）〜（ｄ）は、図３（ａ）のＢ−Ｂ線、Ｃ−Ｃ線、およびＤ−Ｄ線から見たときの水平断面図である。
【図４】（ａ）および（ｂ）は、ノズル本体部の先端部の拡大断面図であり、（ａ）は湾曲部を設けた先端部を示し、図４（ｂ）は湾曲部を設けない先端部を示す。
【図５】実施例４の製剤を本発明のシリンジ型噴出器に充填し、粒度分布についてレーザー回析式粒度分布測定装置を用いて測定した結果を示す。
【図６】実施例４の製剤を本発明のシリンジ型噴出器に充填し、ハイスピードマイクロスコープを用いてノズル先端からの噴射角度を測定した結果を示す。噴霧された噴射角度は52.27°であった。
【図７】実施例４の製剤を本発明のシリンジ型噴出器に充填し、噴霧パターンテスト紙を用いて確認した結果を示す。フルコーン均質円形であることを確認した。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーからなるゲル基剤とＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）を含有し、アジュバントを特に必要としないことを特徴とする経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、ノズル噴出孔が形成された先端部を有する中空のノズル本体部と、ノズル本体部内に配設される中実の充填ロッドと、充填ロッドとノズル本体部との間に形成され、先端開口部とノズル噴出孔との間で流体連通するノズルチャンバとを備え、ノズル噴出孔が０．２５ｍｍ〜０．３０ｍｍの径を有することを特徴とする点鼻用噴霧ノズルを備えた、シリンジバレルに流体連通する先端開口部を有する医療用シリンジ型の噴出器に充填した、Ｂ型肝炎ワクチン経鼻投与システムを提供する。
なお、本発明において、Ｂ型肝炎ワクチン経鼻投与システムとは、本発明のＢ型肝炎ワクチン組成物を、本発明のシリンジ型噴出器に充填した、ワクチン組成物とその投与器が一体となったものをいう。
【００２９】
本発明で用いる「噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤」とは、例えばＷＯ２００７／１２３１９３に開示されている「皮膚・粘膜付着剤を含有するゲル基剤」を意味し、カルボキシビニルポリマーを含有し、ジェランガムを適宜含有し、外部からせん断力を与えて粘度を調整した基剤である。ＷＯ２００７／１２３１９３に記載されている具体的な外部からのせん断力とは、単なる撹拌や振とうなどでなく、当業者に公知のせん断力を与える装置で行われ、具体的には、高速回転型乳化装置、コロイドミル型乳化装置、高圧乳化装置、ロールミル型乳化装置、超音波式乳化装置および膜式乳化装置を用いることができる。特にホモミキサー型、櫛歯型および断続ジェット流発生型の高速回転型乳化装置が好ましい。かかる基剤は外部からせん断力を与えることで種々粘度に調整でき、噴霧容器などからの噴射角度、噴射密度を目的に適するように管理できることを特徴とする。また、本発明の最適化された形態の点鼻用噴霧ノズルを有する定量シリンジ型噴出器を用いることにより、ＷＯ２００７／１２３１９３で開示されているようなエアレス式噴霧器のようなポンプ式噴霧器と同様の製剤の噴霧適合性（噴霧分散性および製剤粒子径の均一性等）が可能となり、Ｂ型肝炎抗原粒子の鼻腔粘膜での展着性が広範囲に長時間、向上することにより、ワクチンの免疫原性が高められるものである。
【００３０】
本発明のゲル基剤の原料となるカルボキシビニルポリマーは、アクリル酸を主成分として重合して得られる親水性ポリマーであり、水性ゲル剤を調製するために通常用いられる医薬品添加物を限定なく使用することができる。
噴霧性能を付加するために外部からせん断力を与えて処理したカルボキシビニルポリマーを含有するゲル基剤の含量は、カルボキシビニルポリマーの含量に換算して、０．１〜１．０ｗ／ｖ％であり、好ましくは０．３〜０．７ｗ／ｖ％である。
【００３１】
本発明のワクチンは、抗原としてＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）とＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原（ＨＢｃ抗原）を含有することを特徴とする。本発明において用いられるＢ型肝炎ウイルス抗原とは、組換えＤＮＡ技術を応用して、酵母により産生されたＢ型肝炎表面抗原並びにＢ型肝炎ヌクレオキャプシド抗原をいう。
【００３２】
前記Ｂ型肝炎ウイルス抗原は、経鼻粘膜スプレー投与ゲル基剤との混合のために精製または濃縮されたウイルス原液を使用する。本発明のワクチンは、Ｂ型肝炎ウイルス抗原の濃度が１種のワクチン抗原当り０．０１〜１０ｍｇ／ｍＬであることが好ましく、０．０５〜５ｍｇ／ｍＬがより好ましい。
【００３３】
Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ抗原）は、脂質膜上に多くの抗原タンパク質を提示した粒子形（径約５０〜６０ｎｍ）を取っている。提示されている抗原タンパク質は、本来は３つのドメイン（Ｓ、Ｐｒｅ−Ｓ１、Ｐｒｅ−Ｓ２）から構成されるタンパク質で、３つのドメイン全てを保有している抗原はＬ型抗原（ＨＢｓＡｇ Ｌ−ｐｒｏｔｅｉｎ）で、Ｐｒｅ−Ｓ１を欠くものがＭ型抗原、Ｐｒｅ−Ｓ１とＰｒｅ−Ｓ２両者を欠くものが、Ｓ型抗原（ＨＢｓＡｇ Ｓ−ｐｒｏｔｅｉｎ）と区別されている。いずれも遺伝子組換え酵母を用いて、抗原の製造が行われる。
【００３４】
アジュバントとは、免疫応答の強化や抑制等の調節活性を有する物質の総称であり、抗原の免疫原性を高めるためにワクチンに添加される免疫増強剤であり、これまでに多くの物質が検討されている。一方、アジュバントを用いることでワクチンの免疫効果は向上する反面、炎症等の副作用が生じる得る欠点もある。当然、経鼻投与型ワクチンのアジュバントとしても、いくつかの候補が上げられるが、広く安全性が認められているアジュバントがないために、有効性・安全性が確立されているアジュバントを含有する経鼻投与型ワクチンは未だ認可されていない。
【００３５】
本発明者は、前記のように優れた噴霧性能を有する鼻腔粘膜展着率の高い経鼻粘膜スプレー投与ゲル基剤を、前記Ｂ型肝炎子ワクチンに対して用いることにより、皮下投与など他の投与経路による併用を必要とせず、アジュバントを用いることなくより少ない抗原量で有効かつ副作用の少ないワクチンが得られ、粘稠性の高いゲル基剤でも噴霧可能とするデバイスと組み合わせることにより、噴霧された製剤平均粒子径が５０μｍから１２０μｍの範囲（好ましくは、７０μｍから１００μｍの範囲）の適切な範囲、製剤粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に５０％以上（好ましくは、１０μｍから１００μｍの範囲に６０％以上）であり、鼻腔内の必要な部位に投与できるようにデバイスからの噴射角度を３０°から７０°の範囲（好ましくは、４０°から６０°の範囲）にし、噴射密度をフルコーン均等に鼻腔内に噴霧投与を可能にした経鼻粘膜スプレー投与用経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を見出し、その製法並びにそれを用いた予防方法並びに治療方法を発見することにより本発明に至った。
【００３６】
本発明において、噴霧密度に偏りのない均等な噴霧密度を表す「フルコーン」とは、噴霧パターン形状の一つで、均質の円形全域を意味し、反対の用語は周囲のみに局在化したドーナツ型の「ホロコーン」である。
【００３７】
本発明のワクチンは、Ｂ型肝炎ウイルス抗原及び経鼻粘膜スプレー投与ゲル基剤以外に、さらに医薬品として許容されうる担体を含んでいてもよい。前記担体としては、ワクチンおよび鼻腔内投与型製剤の製造に通常用いられる担体を使用することができ、具体的には、食塩水、緩衝化食塩水、デキストロース、水、グリセリン、等張水性緩衝液およびそれらの組合せが挙げられる。また、これに保存剤（例、チメロサール）、等張化剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、安定化剤（例、エデト酸ナトリウム水和物）および不活化剤（例、ホルマリン）等が適宜配合される。
【００３８】
本発明のワクチンは、鼻腔内へ噴霧投与するものである。
本発明のワクチンを用いて、Ｂ型肝炎を予防または治療することができる。
【００３９】
ワクチンの投与方法としては、本発明の最適化された形態の点鼻用噴霧ノズルを片鼻孔または両鼻孔に対して行い、使い捨てデバイスとして用いることができる。
【００４０】
投与量は、対象の年齢、性別、体重等を考慮して決められるが、Ｂ型肝炎ウイルス抗原の濃度が１種のワクチン抗原当り０．０１〜１０ｍｇ／ｍＬであることが好ましく、０．０５〜５ｍｇ／ｍＬがより好ましい。投与される抗原量は１種のワクチン抗原当り０．１〜５ｍｇであることが好ましく、０．５〜２ｍｇがより好ましい。
【００４１】
以下、添付図面を参照して本発明の点鼻用噴霧ノズルを有する定量シリンジ型噴出器に用いられる点鼻用噴霧ノズルの実施形態を説明する。以下の実施形態の説明において、理解を容易にするために方向を表す用語（たとえば「前方」、「後方」、「近位」、および「遠位」など）を適宜用いるが、これらは説明のためのものであって、これらの用語は本発明を限定するものでない。また、各添付図面において、同様の構成部品は同様の参照符号を用いて図示されている。
【００４２】
［医療用シリンジ］
図１は、本発明の一実施形態に係る点鼻用噴霧ノズル１０を備えた医療用シリンジ１全体の概略的構成を示す部分破断側面図である。医療用シリンジ１は、図１に示すように、概略、製剤２を充填可能なシリンジバレル３を有する合成樹脂またはガラスからなるシリンジ本体４と、シリンジ本体４のシリンジバレル３内に挿通されるプランジャロッド５と、プランジャロッド５の遠位端に設けた固定部５ａを介して取り付けられ、シリンジバレル３内に摺動してシリンジバレル３内の製剤をシリンジ本体４の遠位側の先端開口部６から送出するためのピストン７と、シリンジ本体４の近位端の周りに配設された指掛け部８と、医者等の施術者の指から加わった力をプランジャロッド５に伝えるプランジャ操作部９を有する。図１に示す医療用シリンジ１は、ＷＯ２０１３／１４５７８９に記載の定量シリンジ型噴出器と同様のものである。
【００４３】
なお、本発明に係る点鼻用噴霧ノズル１０は、シリンジバレル３内に収容された製剤をプランジャロッド５（およびピストン７）により押出される任意の形態を有する医療用シリンジ１に適用可能であり、本発明に係る特許請求の範囲を限定するものではない。したがって、本願明細書においては、医療用シリンジ（点鼻用定量シリンジ型噴出器）１の詳細な構成に関する説明を省略し、これに用いられる点鼻用噴霧ノズル１０の構成・作用についてより詳細に説明する。なおＷＯ２０１３／１４５７８９は、その記載内容の全体が参考としてここに一体にものとして統合される。
【００４４】
［点鼻用噴霧ノズル］
また医療用シリンジ１は、図１に示すように、シリンジ本体４の先端開口部６に対向して配置される点鼻用噴霧ノズル１０と、その殺菌処理された先端部２２を汚染物質および機械的衝撃から保護するための保護キャップ５０とをさらに有する。図２（ａ）および（ｂ）は、本発明の一実施形態に係る点鼻用噴霧ノズル１０の概略的構成を示す部分破断分解斜視図である。図示のように、点鼻用噴霧ノズル１０は、概略、ノズル噴出孔２１が形成された先端部２２を有する中空のノズル本体部２０と、ノズル本体部２０内に配設される中実の充填ロッド（充填棒）３０とを有する。図２（ａ）および（ｂ）は、充填ロッド３０がノズル本体部２０に配設または挿入される前後の状態を示すものである。ノズル本体部２０の先端部２２は実質的な円形形状を有し、ノズル噴出孔２１は先端部２２の中心に形成されている。
【００４５】
図３（ａ）は、図２（ｂ）に示す点鼻用噴霧ノズル１０を、ノズル噴出孔２１を通る垂直面で見たときの垂直断面図である。図３（ｂ）〜（ｄ）はそれぞれ、図３（ａ）のＢ−Ｂ線、Ｃ−Ｃ線、およびＤ−Ｄ線から見たときの水平断面図である。中空のノズル本体部２０は、その内壁２３が略円筒形状の内部空間２４を形成し、内部空間２４は、図３（ｃ）および図３（ｄ）に示すように、中空のノズル本体部２０のノズル噴出孔２１により近いノズル小径部２５と、シリンジ本体４の先端開口部６が挿入されるノズル大径部２６と、内部空間２４の径がノズル大径部２６からノズル小径部２５に向かって連続的または段階的に小さくなるように形成されたノズル肩部２７とを有する。
【００４６】
一方、ノズル本体部２０に挿入される中実の充填ロッド３０は、その外壁３３がノズル本体部２０の内壁２３（内部空間２４）とほぼ相補的な外形形状を有し、図２（ａ）、図３（ｃ）および（ｄ）に示すように、ロッド大径部３６およびロッド小径部３５の径がロッド大径部３６からロッド小径部３５に向かって連続的または段階的に小さくなるように形成されたロッド肩部３７とを有する。
【００４７】
なお、図３（ａ）に示すように、ノズル本体部２０の内壁２３には突起部２３ａを設け、充填ロッド３０の外壁３３には突起部２３ａを受容する凹部３３ａを設け、充填ロッド３０をノズル本体部２０の内部空間２４に挿入したとき、突起部２３ａと凹部３３ａとが嵌合して、確実に固定できるように構成することが好ましい。
【００４８】
また、図２（ａ）、（ｂ）および図３（ａ）〜（ｄ）から明らかなように、充填ロッド３０は、ロッド小径部３５およびロッド大径部３６において周方向に間隔を設けて配置された複数の溝部３８、３９を有する。また充填ロッド３０は、ノズル肩部２７とロッド肩部３７との間に隙間４０（図３（ａ））が形成されるようにノズル本体部２０に挿入される。したがって、図２（ｂ）のようにアセンブリされた点鼻用噴霧ノズル１０は、溝部３８、３９および隙間４０により流体連通可能なノズルチャンバ４２が形成され、シリンジ本体４の先端開口部６から送出された製剤２を、ノズルチャンバ４２を介して点鼻用噴霧ノズル１０の先端部２２まで案内することができる。
【００４９】
さらに充填ロッド３０は、図３（ｂ）に示すように、点鼻用噴霧ノズル１０の先端部２２に対向する渦流形成部４４を有する。渦流形成部４４は、ロッド小径部３５の各溝部３８から流入した製剤２がノズル本体部２０のノズル噴出孔２１から噴射される前に渦流を形成するように構成されている。具体的には、渦流形成部４４を構成するロッド小径部３５の端部部分がノズル噴出孔２１の垂直中心軸から位置ずれした方向に延びるように形成されている。このように製剤２がノズル噴出孔２１から噴射される前に渦流を形成することにより、製剤の噴射角度を拡大させ、製剤をより均一に噴霧することができる。
【００５０】
なお、図３（ｃ）および図３（ｄ）から明らかなように、ロッド小径部３５の溝部３８をロッド大径部３６の溝部３９より小さく設計して、ノズル噴出孔２１から噴射される前の渦流形成部４４内の製剤の圧力を増大させることが好ましい。またロッド大径部３６およびロッド小径部３５の径がロッド大径部３６からロッド小径部３５に向かって連続的または段階的に小さくなるように設計したことから、患者等の鼻腔内に深く挿入しやすくして、患者等の下鼻甲介付近およびその深部に対する製剤の噴霧を容易にすることができる。すなわちロッド小径部３５の径は、患者等に恐怖感を与えることなく、患者等の鼻孔より十分に小さいものであることが好ましい。
【実施例】
【００５１】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
以下に示す方法にて、スプレー投与用ゲル基剤およびＢ型肝炎ウイルス原液をそれぞれ調製し、両者を以下のように混合して、経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を調製した。【００５２】
〔ゲル基剤の製造〕
スプレー投与用ゲル基剤例１
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【００５３】
スプレー投与用ゲル基剤例２
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【００５４】
〔Ｂ型肝炎ウイルス抗原を含むウイルス原液〕
ウイルス原液例１
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【００５５】
ウイルス原液例２
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【００５６】
〔ゲル基剤とウイルス原液の混合〕
上記のゲル基剤例１とウイルス原液例１を（１：１）の比率で混合撹拌し、均質な経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を得た（実施例１）。同様に上記のゲル基剤例２とウイルス原液例２を（２：８）の比率で混合撹拌し、均質な経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を得た（実施例２）。この混合撹拌はＢ型肝炎ワクチン抗原に熱・圧力等のストレスを与えることなく、緩やかな混合撹拌で短時間に達成できる。得られた経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物の成分分量及び物性値並びに適切なデバイスを用いて噴霧した場合の付加された噴霧性能を示す。【００５７】
実施例１
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【００５８】
実施例２
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【００５９】
よって、外部からせん断力を与えて調製されたゲル基剤を用いて製造された実施例２のＢ型肝炎ワクチン経鼻接種製剤を、ノズル噴出孔が形成された先端部を有する中空のノズル本体部と、ノズル本体部内に配設される中実の充填ロッドと、充填ロッドとノズル本体部との間に形成され、先端開口部とノズル噴出孔との間で流体連通するノズルチャンバとを備え、ノズル噴出孔が０．２５ｍｍ〜０．３０ｍｍの径を有することを特徴とする点鼻用噴霧ノズルを備えた、シリンジバレルに流体連通する先端開口部を有する医療用シリンジに充填して使用した場合、（１）製剤粒度分布において製剤平均粒子径が３０μｍから８０μｍの範囲［５９．７μｍ］、粒度分布が１０μｍから１００μｍの範囲に８０％以上であり［８８．８％］、（２）噴霧密度が偏りのない均等なフルコーンとなり、（３）噴射角度が３０°から７０°の範囲［５５°］に制御されたＢ型肝炎ワクチン経鼻接種システムとなることが確認された。【００６０】
ヒト臨床試験による予防および治療効果
（被験者）
予防効果の検証は、皮下および筋肉内接種ワクチンにて事前に被験者の免疫応答試験を行い、（１）抗体誘導がみられなかったワクチン無反応者、（２）抗体誘導がみられたワクチン反応者、並びに（３）ワクチン未接種者に分類し、対象とした。治療効果の検証は、（４）ＨＢＶ血症があるも肝炎を発症していない無症候性キャリア、（５）ＮＡ治療中のＣＨＢ患者を対象とした。【００６１】
〔予防効果の検証〕
各症例とも実施例２で調製された経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、点鼻用噴霧ノズルを有するシリンジ型噴出器にて、片鼻０．５ｍＬずつ合計１．０ｍＬを経鼻噴霧投与した。（１）ワクチン無反応者、（２）ワクチン反応者、（３）ワクチン未接種者は２週おきに計３回経鼻投与を行った。【００６２】
（皮下および筋肉内接種ワクチン無反応者に対する効果）
皮下および筋肉内接種ワクチンにて免疫応答のなかった１３例のワクチン無反応者に３回のワクチンの経鼻投与を行い、最終投与の１か月後にＨＢｓ抗体価、ＨＢｃ抗体価の測定を行った。１３症例ともＨＢｓ抗体ならびにＨＢｃ抗体が陽転化した（表１）。
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【００６３】
（皮下および筋肉内接種ワクチン反応者に対する効果）
１９例のワクチン反応者に３回のワクチンの経鼻投与を行い、最終投与の１か月後にＨＢｓ抗体価、ＨＢｃ抗体価の測定を行った。１９症例とも、ＨＢｓ抗体が測定限界上限以上となり、ＨＢｃ抗体が陽転化した（表２）。
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【００６４】
（ワクチン未接種者に対する効果）
７例のワクチン未接種者に３回のワクチンの経鼻投与を行い、最終投与の１か月後にＨＢｓ抗体価、ＨＢｃ抗体価の測定を行った。１症例を除いて６症例でＨＢｓ抗体ならびにＨＢｃ抗体が陽転化した（表３）。
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【００６５】
〔治療効果の検証〕
各症例とも実施例２で調製された経鼻粘膜スプレー投与用Ｂ型肝炎ワクチン組成物を、点鼻用噴霧ノズルを有するシリンジ型噴出器にて、片鼻０．５ｍＬずつ合計１．０ｍＬを経鼻噴霧投与した。（４）無症候性キャリア、（５）ＮＡ治療中のＣＨＢ患者は２週おきに計１０回経鼻投与を行った。【００６６】
（無症候性キャリアに対する効果）
４１例の無症候性キャリアに１０回のワクチンの経鼻投与を行った。投与前、最終投与の６か月後のＨＢＶ−ＤＮＡ量、ＨＢｓ抗原量の変化率、ＨＢｓ抗体陽性率を評価した。投与終了６か月後のＨＢＶ−ＤＮＡ量は明確な変化を認めなかったが、ＨＢｓ抗原量は治療前を１００とした場合、７８．６％に低下した。ＨＢｓ抗体は４１例中２０例が陽転したことから、陽転率は４８．８％であった（表４）。
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【００６７】
（ＮＡ治療中のＣＨＢ患者）
２９例のＮＡ治療中のＣＨＢ患者に１０回のワクチンの経鼻投与を行った。最終投与の６か月後のＨＢＶ−ＤＮＡ量、ＨＢｓ抗原量の変化率、ＨＢｓ抗体陽性率を評価した。
ＮＡ治療のため、すべての症例で治療前からＨＢＶ−ＤＮＡは検出感度以下であり、治療６か月後もＨＢＶ−ＤＮＡは検出感度以下が持続していた。ＨＢｓ抗原量は治療前を１００とした場合の７９．３％となり、ＨＢｓ抗体は２９例中１１例が陽転したことから、陽転率は３７．９％であった(表５)。
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【符号の説明】
【００６８】
１…医療用シリンジ、２…製剤、３…シリンジバレル、４…シリンジ本体、５…プランジャロッド、５ａ…固定部、６…先端開口部、７…ピストン、８…指掛け部、９…プランジャ操作部、１０…点鼻用噴霧ノズル、２０…ノズル本体部、２１…ノズル噴出孔、２２…先端部、２３…ノズル本体部の内壁、２３ａ…突起部、２４…内部空間、２５…ノズル小径部、２６…ノズル大径部、２７…ノズル肩部、３０…充填ロッド（充填棒）、３３…充填ロッドの外壁、３３ａ…凹部、３５…ロッド小径部、３６…ロッド大径部、３７…ロッド肩部、３８，３９…溝部、４０…隙間、４２…ノズルチャンバ、４４…渦流形成部、４
６…湾曲部、５０…保護キャップ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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