【誤訳訂正書】
【提出日】平成21年6月2日(2009.6.2)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
鋳型核酸、またはその一部分を複製するための方法であって、その鋳型核酸の標的部分と相補的な核酸配列を有するプライマーが鋳型核酸とハイブリダイズされ、その後酵素を介して伸長される方法において、
（ａ）第一の温度において、プライマー、鋳型核酸、プライマー伸長を触媒するために有用な酵素、および、前記プライマーに対して化学量論的に過剰量の一本鎖核酸結合タンパク質を含む反応混合液を調製する工程、
（ｂ）前記第一の温度より高い第二の温度において、前記混合液中でハイブリダイゼーション反応を実行してハイブリダイズされた産物を生産する工程であって、前記プライマーは、前記第二の温度において、前記一本鎖核酸結合タンパク質によりハイブリダイゼーション反応に関与することを実質的に阻害されない工程、および
（ｃ）前記第一の温度より高い第三の温度において、プライマー伸長反応を実行して前記ハイブリダイズされた産物から伸長産物を生産する工程、
を含み、前記第一の温度より高い温度において前記一本鎖核酸結合タンパク質が変性した結果として、またはそれと関連して、前記プライマーがハイブリダイゼーションおよび伸長反応の少なくとも一つに関与することを阻害されない方法。
【請求項２】
前記酵素がポリメラーゼであり、前記反応混合液が更に前記第一の温度において二価カチオンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第三の温度において、前記一本鎖核酸結合タンパク質により、前記プライマーがプライマー伸長反応に関与することを阻害されない、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記第一の温度が３７℃あるいはそれ以下であり、前記第二の温度および前記第三の温度がそれぞれ５０℃から約７２℃の範囲にある、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記（ａ）工程と前記（ｂ）工程の間に行われる以下の工程を更に含む、請求項１に記載の方法：
（ａ．１）前記第二の温度および前記第三の温度より高い第四の温度まで、反応混合液を初期加熱して、反応混合液中に存在する二本鎖鋳型核酸を変性させる工程。
【請求項６】
前記（ｃ）工程に続いて実行される以下の工程を更に含む、請求項１に記載の方法：
（ｄ）前記第二の温度および前記第三の温度より高い第四の温度の温度まで、反応混合液を加熱して、前記（ｃ）工程の間に生成した反応液混合液中に存在する二本鎖伸長産物を変性する工程。
【請求項７】
少なくとも一度、前記（ｂ）工程および前記（ｃ）工程を繰り返すことにより、増幅反応を実行して、増幅産物を生成することを含み、前記第一の温度において前記一本鎖核酸結合タンパク質を前記反応混合液に導入した結果として、特異的増幅産物の生成が改善される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記第一の温度が３７℃あるいはそれ以下であり、前記第二の温度および第三の温度がそれぞれ５０℃から約７２℃の範囲であり、前記第四の温度が９０℃あるいはそれ以上である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第二の温度と前記第三の温度が同じである、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記一本鎖核酸結合タンパク質が既知の酵素活性を有しない、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
鋳型核酸、またはその一部分を複製するための方法であって、その鋳型核酸の標的部分と相補的な核酸配列を有するプライマーが鋳型核酸とハイブリダイズされ、その後酵素を介して伸長される方法において、
（ａ）第一の温度において、プライマー、鋳型核酸、プライマー伸長を触媒するために有用な酵素、および、野生型Ｔ７ｇｐ２．５およびその変異体またはそれらの混合物のうちの少なくとも一を含む一本鎖核酸結合タンパク質の有効量を含む反応混合液を準備する工程、
（ｂ）前記第一の温度より高い第二の温度において、前記反応混合液中でハイブリダイゼーション反応を実行してハイブリダイズされた産物を生産する工程、および
（ｃ）前記第一の温度より高い第三の温度において、プライマー伸長反応を実行して前記ハイブリダイズされた産物から伸長産物を生産する工程、
を含み、前記第一の温度において前記反応混合液に前記一本鎖核酸結合タンパク質を導入した結果として、特異的伸長産物の生成が改善される方法。
【請求項１２】
前記一本鎖核酸結合タンパク質がＴ７ｇｐ２．５−Ｆ２３２Ｌを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記一本鎖核酸結合タンパク質がＴ７ｇｐ２．５−Δ２１Ｃを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記一本鎖核酸結合タンパク質が野生型Ｔ７ｇｐ２．５およびＴ７ｇｐ２．５−Δ２６Ｃを含むタンパク質の混合物を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記第一の温度において反応混合液が調製されることに続いて、反応混合液に追加の反応試薬が導入されることを含まない、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも５０％である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも１倍である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記一本鎖核酸結合タンパク質が、バッファー溶液中に該タンパク質を含む組成物から供給され、前記バッファー溶液が、１−１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１−１００ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．００５−２００ｍＭ  ＤＴＴ、１０−８０質量％グリセロール、残部の水を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記反応混合液が、前記第一の温度において、酵素介在性の核酸合成に必要なヌクレオチドを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記反応混合液が、前記第一の温度において、酵素介在性の核酸合成に必要なヌクレオチドを更に含む、請求項４に記載の方法。
【請求項２１】
前記反応混合液が、前記第一の温度において、酵素介在性の核酸合成に必要なヌクレオチドを更に含む、請求項７に記載の方法。
【請求項２２】
前記反応混合液が、前記第一の温度において、酵素介在性の核酸合成に必要なヌクレオチドを更に含む、請求項８に記載の方法。
【請求項２３】
前記反応混合液が、前記第一の温度において、酵素介在性の核酸合成に必要なヌクレオチドを更に含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項２４】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも２倍である、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも３倍である、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも４倍である、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記第一の温度における前記反応混合液が、前記反応混合液中のプライマーに対して化学量論的に過剰量の一本鎖核酸結合タンパク質を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項２８】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも５０％である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも２倍である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも３倍である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記化学量論的な過剰量が少なくとも４倍である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記第一の温度における前記第一の反応混合液に、前記一本鎖核酸結合タンパク質を導入した結果として、特異的伸長産物の生成が改善される、請求項１に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
（発明の要旨）
鋳型核酸の標的部と相補的な核酸配列を有するプライマーが鋳型核酸とハイブリダイズし、酵素により伸長される、鋳型核酸およびその一部分を複製する方法が提供される。その方法は、（ａ）第一の温度で、プライマー、鋳型の核酸、プライマー伸長を触媒するために有効な酵素、および、一本鎖の核酸との結合タンパク質の有効量を含む反応混合液を準備する工程、（ｂ）前記第一の温度より高い第二の温度で、ハイブリダイズされた産物を生産するために、ハイブリダイゼーション反応を実行する工程、および（ｃ）第一の温度より高い第三の温度で、前記ハイブリダイズされた産物から伸長産物を生産するためにプライマー伸長反応を行う工程；を含み、第一の温度における、反応混合液への一本鎖核酸結合タンパク質の導入の結果として、特異的伸長産物の生成が改善される方法である。