(57)【要約】ＤＮＡメチル基転移酵素ＤＮＭＴを阻害する作用を有する化合物と他の薬剤をがんの予防薬又は治療薬として提供すること。【選択図】なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
他の薬剤と併用される、ＤＮＭＴ阻害剤を含む、医薬組成物。
【請求項２】
ＤＮＭＴ阻害剤と併用される、他の薬剤を含む、医薬組成物。
【請求項３】
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤を含む、医薬組成物。
【請求項４】
ＤＮＭＴ阻害剤が、式（Ｉ）：
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（式中、Ｒ及びＲ’は、それぞれＯＲ３基、水素原子、ハロゲン原子又はアルキル基であり、Ｒ1、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ水素原子又は式（II）：
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（式中、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。）で表される化合物又は其の塩、デシタビン、アザシチジン、ＲＧ１０８、チオグアニン、ゼブラリン、ＳＧＩ−１１０、ＣＣ−４８６、ＳＧＩ−１０２７、ロメグアトリブ又はプロカイナミド塩酸塩である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記Ｒ１が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ２及びＲ又はＲ３が水素原子である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記Ｒ２が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ１及びＲ又はＲ３が水素原子である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記Ｒ１及びＲ２が、それぞれ式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ又はＲ３が水素原子である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２及びＲ３がそれぞれ式（II）で表されるシリル基である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、それぞれ式（II）で表されるシリル基である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、いずれも水素原子である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ８アルキル基又はＣ６〜Ｃ１０アリール基又はＣ７〜Ｃ１４アリールアルキル基である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記Ｃ６〜Ｃ１０アリール基がフェニル基又はナフチル基である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記Ｃ７〜Ｃ１４アリールアルキル基が、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
他の薬剤が、酵素阻害剤である、請求項１〜１３のいずれか1項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
酵素阻害剤が、ヒストンアセチル化酵素阻害剤、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤及びリボヌクレオシド二リン酸レダクターゼ阻害剤からなる群から選択される１種以上である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
酵素阻害剤が、ＤＳ―３２０１ｂ、ＨＢＩ−８０００、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、スラミン（Ｓｕｒａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘからなる群から選択される１種以上である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
薬学上許容される担体を更に含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。 
【請求項１８】
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤が同時に投与される、請求項１、請求項２及び請求項４〜１７のいずれか１項に記載の医薬組成物。 
【請求項１９】
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤が別々に投与される、請求項１、請求項２及び請求項４〜１７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ＤＮＭＴ阻害剤が他の薬剤の投与前に投与される、請求項１、請求項２及び請求項４〜１７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
ＤＮＭＴ阻害剤が他の薬剤の投与後に投与される、請求項１、請求項２及び請求項４〜１７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
がんの予防又は治療のための、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
がんが、白血病である、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
白血病が、ＡＴＬである、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の医薬組成物を含有する、がんの予防薬又は治療薬。
【請求項２６】
がんが、白血病である、請求項２５に記載のがんの予防薬又は治療薬。
【請求項２７】
白血病が、ＡＴＬである、請求項２６〕に記載のがんの予防薬又は治療薬。
【請求項２８】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載されるＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤を含む、がんを予防又は治療するためのキット。
【請求項２９】
哺乳動物に対して、ＤＮＭＴ阻害剤の有効量及び他の薬剤の有効量を投与することを特徴とする、当該哺乳動物におけるがんの予防又は治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がんの予防又は治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液がんは、血液、骨髄、及び／又はリンパ系を攻撃するがんの１種を意味する。この種類のがんには、白血病や多発性骨髄腫が含まれ、これらは全て、新しい、より効果的な治療法を必要とする致命的な疾患となり得る。【０００３】
ＡＴＬ（Adult T-cell Leukemia/Lymphoma：成人T細胞白血病/リンパ腫）とは、1976年に高月ら（非特許文献１〜２）によって発見・命名された疾患であり、腫瘍性ウィルスＨＴＬＶ−１（Human T-cell Leukemia/Lymphotropic Virus type-1）による感染を原因とする白血病もしくは悪性リンパ腫である。ＨＴＬＶ−１の感染者は、日本では南部（特に、九州や沖縄等）に多く、他にはカリブ海沿岸諸国、中央アフリカや南米等に局在化している。
ＨＴＬＶ−１の感染経路としては授乳、性交や輸血等が挙げられ、其のキャリアは全世界で500万〜1000万人（日本では約110万人）いるとされており、日本では男性キャリアのうちの６〜７％、女性の場合は２〜３％が毎年ＡＴＬを発症している。なお、ＨＴＬＶ−１感染からＡＴＬ発症までの期間が非常に長く、結果的に高齢なキャリアにＡＴＬ発症者が多いのが特徴である（非特許文献３）。【０００４】
ＡＴＬの治療はＣＨＯＰ療法（非特許文献４）、modified ＬＳＧ１５療法（非特許文献５）、ＥＰＯＣＨ療法（非特許文献６）やＡＺＴ−ＩＮＦα療法といった化学療法が選択されるが、再発や薬剤耐性化が多く、標準的治療法が未だ確立されていないのが現状である。
最近では、新たなＡＴＬ治療薬としてのケモカイン受容体ＣＣＲ４抗体医薬・モガムリズマブ（Mogamulizumab、製品名：ポテリジオ）（非特許文献７）、抗ウィルス薬・アバカビル（非特許文献８）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害薬・ボリノスタット（Vorinostat、製品名：ゾリンザ）（非特許文献９）やヒストンメチル化酵素ＥＺＨ１／２の二重阻害剤ＤＳ―３２０１ｂの可能性が注目されている。【０００５】
ＤＮＭＴsとは、ＤＮＡメチル基転移酵素群（ＤＮＡ methyltransferases）の略称であり、ＤＮＡ鎖中のアデニン環６位アミノ基のメチル化（Adenine N6-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.72）、シトシン環４位アミノ基のメチル化（Cytosine N4-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.113）又はシトシン環５位へのメチル化（Cytosine C5-specific DNA-methyltransferase: EC 2.1.1.37）を触媒する酵素群である。特に、発現遺伝子のプロモーター領域によく認められるＣｐＧ アイランドと称される配列部分においてシトシン環５位へのメチル化を触媒する酵素群（維持メチル基転移酵素ＤＮＭＴ１やde novo メチル基転移酵素ＤＮＭＴ３ファミリー）は、細胞の正常な発生と分化を調節する際に極めて重要な役割を果たしている（非特許文献１０〜１１）。【０００６】
また、ＤＮＭＴsは、がんの発達においても深く関係している。即ち、全てのＣｐＧの６０〜９０％はシトシン環５位がメチル化されていると考えられているが、異常なレベルのＤＮＡメチル化は遺伝子の発現制御と深く関連しており、プロモーター領域（ＣｐＧアイランド）が高レベルにシトシン環５位メチル化されている遺伝子は、其の転写・発現がサイレンシングしていることが明らかにされている（非特許文献１２〜１４）。【０００７】
一方、細胞には、新しく作られるＤＮＡ鎖においても親鎖と同じ位置のシトシン環５位へメチル基を導入する仕組みが備わっており、この「ＤＮＡメチル化の複製」を可能にしているのもＤＮＭＴsである。それ故、がん化した細胞では、がん抑制遺伝子の多くが転写・発現抑制されてサイレンシング状態になり、増殖しやすい状態になっている。【０００８】
なお、このシトシン環５位のメチル化に関しては、ＤＮＭＴの触媒活性中心にあるシステイン残基のＳＨ基がＤＮＡ配列中のシトシン環６位を攻撃することによりシトシン環５位が活性化され、メチル基供与体Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンからのメチル基転移を促すという反応機構が提案されている。【０００９】
このような背景を持つＤＮＭＴsに対する選択的な酵素阻害剤として、５−アザシチジン（製品名：「ビダーザ(登録商標)」）や其の２’−デオキシ体（デシタビン、製品名：「ダコジェン(登録商標)」）が見いだされ、高リスクな骨髄異形成症候群や急性骨髄白血病の治療薬として臨床使用されている。なお、これらの薬剤はシトシンヌクレオシド類と化学構造（シトシン環５位炭素原子が窒素原子に置換された構造）が酷似しており、核酸生合成ルートを経て、２’−デオキシシチジンの代わりにＤＮＡ中へ入り込むことにより、がん抑制遺伝子プロモーター領域（ＣｐＧアイランド）におけるＤＮＭＴsによるシトシン環５位のメチル化反応を自殺的に阻害し、がん抑制遺伝子の正常な発現を可能にして治療効果を現わすとされている。
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【００１０】
しかしながら、血液がんに対して有効な医薬は未だ見出されていない。【００１１】
上記事情により、臨床の現場では、血液がんを克服する医薬が要望されている。【００１２】
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】インターナショナル  メディシン（International Medicine）,１９９５年，第３４巻，第１０号，ｐ．９４７−９５２．
【非特許文献２】ブラッド（Blood）,２０１７年，第１２９巻，第９号，ｐ．１０７１−１０８１．
【非特許文献３】キャンサー  サイエンス（Cancer Science）,２０１７年，第１０８巻，第９号，ｐ．１７１９−１７２５．
【非特許文献４】インターナショナル  ジャーナル  オブ  ヘマトロジー（International Journal of Hematology）,２０１６年，第１０４巻，第４号，ｐ．４６８−４７５．
【非特許文献５】ロイケミア  リサーチ  アンド  トリートメント（Leukemia Research and Treatment）,２０１２年，論文，登録番号１０１７５４．
【非特許文献６】リンショー  ケツエキ（Rinsho Ketsueki）,１９９８年，第３９巻，第４号，ｐ．２６７−２７２．
【非特許文献７】キャンサー  サイエンス（Cancer Science）,２０１７年，第１０８巻，第１０号，ｐ．２０２２−２０２９．
【非特許文献８】サイエンティフィック  レポーツ（Scientific Reports）,２０１７年，第７巻，第１号，ｐ．１２８４９．
【非特許文献９】インターナショナル  ジャーナル  オブ  モレキュラー  サイエンス（International Journal of Molecular Sciences）,２０１７年，第１８巻，第７号，ｐ．１４１４．
【非特許文献１０】ケミカル  レビューズ（Chemical Reviews），２０１５年，第１１５巻，第６号, ｐ．２２４０−２２５４．
【非特許文献１１】バイオモレキュールス（Biomolecules），２０１７年，第７巻，第１号，ｐ．３．
【非特許文献１２】単行本「エピジェネティックス：ア  レファレンス  マヌアル」（Epigenetics: A Reference Manual），２０１１年，クレイグＪＭ，ワングＮＣ著，カイスターアカデミックプレス．
【非特許文献１３】セル  アンド  バイオサイエンス（Cell & Bioscience），２０１４年，第４巻, ｐ．４６．
【非特許文献１４】モレキュラー  キャンサー（Molecular Cancer）,２０１７年，第１６巻，ｐ．２９．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明の課題は、がん（とりわけ血液がん）の新規予防薬又は治療薬を提供することにある。  
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは、血液がんに対する優れた予防薬又は治療薬を見出すために鋭意研究を重ねた結果、ＤＮＭＴ阻害剤（特に、化合物（Ｉ））と他の薬剤とを組み合わせてなる医薬組成物が、血液がんの予防又は治療のために有用であることを見出した。
本発明は、これらの知見に基づいて完成された。【００１６】
即ち本発明は、以下記載の発明〔１〕〜〔２９〕を提供することにより上記課題を解決したものである。
〔１〕
他の薬剤と併用される、ＤＮＭＴ阻害剤を含む、医薬組成物。
〔２〕
ＤＮＭＴ阻害剤と併用される、他の薬剤を含む、医薬組成物。
〔３〕
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤を含む、医薬組成物。
〔４〕
ＤＮＭＴ阻害剤が、式（Ｉ）：
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（式中、Ｒ及びＲ’は、それぞれＯＲ３基、水素原子、ハロゲン原子又はアルキル基であり、Ｒ1、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ水素原子又は式（II）：
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（式中、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。）で表される化合物又は其の塩、デシタビン、アザシチジン、ＲＧ１０８、チオグアニン、ゼブラリン、ＳＧＩ−１１０、ＣＣ−４８６、ＳＧＩ−１０２７、ロメグアトリブ又はプロカイナミド塩酸塩である、〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔５〕
前記Ｒ１が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ２及びＲ又はＲ３が水素原子である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔６〕
前記Ｒ２が、式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ１及びＲ又はＲ３が水素原子である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔７〕
前記Ｒ１及びＲ２が、それぞれ式（II）で表されるシリル基であり、前記Ｒ又はＲ３が水素原子である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔８〕
前記Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２及びＲ３がそれぞれ式（II）で表されるシリル基である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔９〕
前記Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、それぞれ式（II）で表されるシリル基である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔１０〕
前記Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、いずれも水素原子である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔１１〕
前記Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ８アルキル基又はＣ６〜Ｃ１０アリール基又はＣ７〜Ｃ１４アリールアルキル基である、〔４〕に記載の医薬組成物。
〔１２〕
前記Ｃ６〜Ｃ１０アリール基がフェニル基又はナフチル基である、〔１１〕に記載の医薬組成物。
〔１３〕
前記Ｃ７〜Ｃ１４アリールアルキル基が、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基である、〔１１〕に記載の医薬組成物。
〔１４〕
他の薬剤が、酵素阻害剤である、〔１〕〜〔１３〕のいずれか1項に記載の医薬組成物。
〔１５〕
酵素阻害剤が、ヒストンアセチル化酵素阻害剤、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤及びリボヌクレオシド二リン酸レダクターゼ阻害剤からなる群から選択される１種以上である、〔１４〕に記載の医薬組成物。
〔１６〕
酵素阻害剤が、ＤＳ―３２０１ｂ、ＨＢＩ−８０００、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、スラミン（Ｓｕｒａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘからなる群から選択される１種以上である、〔１４〕に記載の医薬組成物。
〔１７〕
薬学上許容される担体を更に含む、〔１〕〜〔１６〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔１８〕
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤が同時に投与される、〔１〕、〔２〕及び〔４〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。 
〔１９〕 
ＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤が別々に投与される、〔１〕、〔２〕及び〔４〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔２０〕 
ＤＮＭＴ阻害剤が他の薬剤の投与前に投与される、〔１〕、〔２〕及び〔４〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔２１〕 
ＤＮＭＴ阻害剤が他の薬剤の投与後に投与される、〔１〕、〔２〕及び〔４〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔２２〕 
がんの予防又は治療のための、〔１〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の医薬組成物。
〔２３〕 
がんが、白血病である、〔２２〕に記載の医薬組成物。
〔２４〕 
白血病が、ＡＴＬである、〔２３〕に記載の医薬組成物。 
〔２５〕 
〔１〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の医薬組成物を含有する、がんの予防薬又は治療薬。
〔２６〕 
がんが、白血病である、〔２５〕に記載のがんの予防薬又は治療薬。
〔２７〕 
白血病が、ＡＴＬである、〔２６〕に記載のがんの予防薬又は治療薬。
〔２８〕 
〔１〕〜〔２２〕のいずれか１項に記載されるＤＮＭＴ阻害剤及び他の薬剤を含む、がんを予防又は治療するためのキット。
〔２９〕 
哺乳動物に対して、ＤＮＭＴ阻害剤の有効量及び他の薬剤の有効量を投与することを特徴とする、当該哺乳動物におけるがんの予防又は治療方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の医薬組成物は、ＤＮＭＴによって発現が惹起されるＡＴＬのような白血病の予防薬又は治療薬として、有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
特に言及しない限り、本明細書及び特許請求の範囲で用いた用語は以下に述べる意味を有する。
【００１９】
ＤＮＭＴ阻害剤
本発明の「ＤＮＡメチル基転移酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、下記の式（I）：
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（式中、Ｒ及びＲ’は、それぞれＯＲ３基、水素原子、ハロゲン原子又はアルキル基であり、Ｒ1、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ水素原子又は式（II）：
2020090698.tif 000007
（式中、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ置換基を有していてもよいアルキル基又はアリール基又はアリールアルキル基である。）で表されるシリル基である。）で表される化合物又は其の塩、デシタビン、アザチジン、ＲＧ１０８、チオグアニン、ゼブラリン、ＳＧＩ−１１０、ＣＣ−４８６、ＳＧＩ−１０２７、ロメグアトリブ及びプロカイナミド塩酸塩等が挙げられる。式（I）におけるＲ及びＲ’は、好ましくそれぞれＯＲ３基、水素原子又はハロゲン原子である。
【００２０】
式（I）のＲ及びＲ’の好ましい組合せの例示は下記のとおりである。
(i)Rが、ＯＲ３基、水素原子、ハロゲン原子又はアルキル基であり、Ｒ’が、水素原子である。
(ii)Rが、ＯＲ３基又は水素原子であり、Ｒ’が、水素原子である。
(iii)Rが、フッ素原子であり、Ｒ’が、フッ素原子である。
【００２１】
「アルキル基」とは、特に限定しない限り、飽和脂肪族炭化水素基、例えば、炭素数が１〜８個の直鎖又は分岐鎖状又は環状のアルキル基をいい、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基等のＣ１〜Ｃ６アルキル基、ヘプチル基、２−メチルヘキシル基、５−メチルヘキシル基、２，２−ジメチルペンチル基、４，４−ジメチルペンチル基、２−エチルペンチル基、１，１，３−トリメチルブチル基、１，２，２−トリメチルブチル基、１，３，３−トリメチルブチル基、２，２，３−トリメチルブチル基、２，３，３−トリメチルブチル基、１−プロピルブチル基、１，１，２，２−テトラメチルプロピル基、オクチル基、２−メチルヘプチル基、３−メチルヘプチル基、６−メチルヘプチル基、２−エチルヘキシル基、５，５−ジメチルヘキシル基、２，４，４−トリメチルペンチル基、１−エチル−１−メチルペンチル基、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等の基を挙げることができるが、Ｃ１〜Ｃ６アルキルの基が好ましい。Ｃ１〜Ｃ６アルキルの基の好ましい例は、メチル基、エチル基及びプロピル基である。また、環状のアルキル基の好ましい例は、シクロペンチル基及びシクロヘキシル基である。
【００２２】
「アリール」とは、単環式又は二環式芳香族性炭化水素をいい、好ましくは、例えばフェニル基、ナフチル基等のＣ６−１０アリール基であり、もっと好ましくは、フェニル基である。
【００２３】
「アリールアルキル」とは、アリールにより置換されたアルキル基をいう。好ましくは、Ｃ７〜Ｃ１４アリールアルキル基である。Ｃ７〜Ｃ１４アリールアルキル基の例は、ベンジル基、フェネチル基又はナフチルメチル基等を含むが、これらに限定されるものではない。
【００２４】
「置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基又は置換基を有していてもよいアリールアルキル基」は、置換基を有していても、無置換であってもよいことを意味する。置換されている場合、置換基は前記アルキル基、アリール基又はアリールアルキル基の置換可能な位置に１ないし５個、好ましくは１〜３個有していてもよく、置換基数が２個以上の場合は各置換基は同一又は異なっていてもよい。置換基としては、アルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基等が挙げられるが、好ましい置換基の例は、アルキル基又はハロゲンである。
【００２５】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等をいい、好ましい例は、フッ素原子及び塩素原子である。
【００２６】
本発明の式（Ｉ）で表される化合物の塩は、薬理学的に許容される塩であれば如何なる塩であってもよい。其の塩としては、例えば、無機酸塩（例えば、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩等）、有機酸塩（例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、蓚酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等）等の酸付加塩等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２７】
本発明の式（Ｉ）で表される化合物は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても、複数の結晶形の混合物であってもよい。結晶は、自体公知の結晶化法を適用して、結晶化することによって製造することができる。
【００２８】
また、本発明の式（Ｉ）で表される化合物は、溶媒和物（例えば、水和物等）であってもよく、溶媒和物及び無溶媒和物（例えば、非水和物等）のいずれも式（Ｉ）で表される化合物に包含される。
【００２９】
本発明の式（Ｉ）で表される化合物の製造法
本発明に係る５−アザシチジン類糖部シリルエーテル誘導体（式（Ｉ）を参照）は、WO2017/183217で示す方法に準じ、製造することができる。
【００３０】
他の薬剤
本発明の他の薬剤としては、例えば、酵素阻害剤が挙げられ、好ましくは、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、ヒストンアセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤及びリボヌクレオシド二リン酸レダクターゼ阻害剤からなる群から選択される酵素阻害剤の１種以上である。
【００３１】
「ヒストンアセチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、Ｃ６４６、ＭＧ１４９、Ｒｅｍｏｄｅｌｉｎ、及びＡｎａｃａｒｄｉｃ  Ａｃｉｄ等が挙げられる。
【００３２】
「ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ボリノスタット（ＳＡＨＡ、ＭＫ０６８３）、エンチノスタット（ＭＳ−２７５）、パノビノスタット（ＬＢＨ５８９）、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、ＢＧ４５、ＢＲＤ７３９５４、ベリノスタット（ＰＸＤ１０１）、ロミデプシン（ＦＫ２２８、デシペプチド）、４ＳＣ−２０２、ＨＰＯＢ、ＬＭＫ−２３５、ＣＡＹ１０６０３、タスキニモド、ＴＭＰ２６９、Ｎｅｘｔｕｒａｓｔａｔ  Ａ、Ｒｏｃｉｌｉｎｏｓｔａｔ（ＡＣＹ−１２１５）、ＲＧＦＰ９６６、ＲＧ２８３３（ＲＧＦＰ１０９）、Ｓｃｒｉｐｔａｉｄ、ツバスタチンＡ、Ｐｒａｃｉｎｏｓｔａｔ（ＳＢ９３９）、ＣＵＤＣ−１０１、Ｍ３４４、ＰＣＩ−３４０５１、ダシノスタット（ＬＡＱ８２４）、ツバスタチンＡ塩酸塩、アベキシノスタット（ＰＣＩ−２４７８１）、ＣＵＤＣ−９０７、ＡＲ−４２、フェニル酪酸ナトリウム、レスミノスタット、ツバシン、キシノスタット（ＪＮＪ−２６４８１５８５）二塩酸塩、ＭＣ１５６８、Ｇｉｖｉｎｏｓｔａｔ（ＩＴＦ２３５７）、Ｄｒｏｘｉｎｏｓｔａｔ、Ｃｈｉｄａｍｉｄｅ（Ｃ  Ｓ０５５、ＨＢＩ−８０００）、ＣＨＲ−２４８５、ＣＨＲ−３９９６、ＤＡＣ−０６０、ＦＲＭ−０３３４（ＥＶＰ−０３３４）、ＭＧＣＤ−２９０、ＣＸＤ−１０１（ＡＺＤ−９４６８）、ＣＧ２００７４５、アルギニン酪酸塩、スルフォラファン、ＳＨＰ−１４１、ＣＵＤＣ−９０７、ＹＭ７５３（ＯＢＰー８０１）、バルプロ酸ナトリウム、アピシジン及びＣＩ９９４（Ｔａｃｅｄｉｎａｌｉｎｅ）等が挙げられる。
【００３３】
「ヒストンメチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＤＳ−３２０１ｂ、ＥＰＺ−６４３８、ＧＳＫ−１２６、Ｃｈａｅｔｏｃｉｎ、ＢＩＸ０１２９４が挙げられる。
【００３４】
「ヒストン脱メチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＧＳＫ  Ｊ４  ＨＣｌ、ＯＧ−Ｌ００２、ＪＩＢ−０４、ＩＯＸ１、ＳＰ２５０９、ＯＲＹ−１００１（ＲＧ−６０１６）、ＧＳＫ  Ｊ１、ＭＬ３２４、ＧＳＫ−ＬＳＤ１  ２ＨＣｌ等が挙げられる。
【００３５】
「リボヌクレオシド二リン酸レダクターゼ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ゲムシタビン、アラＣ、フルダラビン等が挙げられる。
【００３６】
他の薬剤は、特に好ましくは、ＤＳ−３２０１ｂ、ＨＢＩ−８０００、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、スラミン（Ｓｕｒａｍｉｎ）、ＥＰＺ００５６８７及びＡｄｏｘからなる群から選択される１種以上である。
【００３７】
医薬組成物は、製剤技術分野において慣用の方法、例えば、日本薬局方に記載の方法等により製造することができる。
本発明の上記医薬製剤を経口投与する場合の剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の固形製剤が挙げられる。また、静脈内、皮下、筋肉内等に非経口投与する場合の剤型としては、例えば、注射剤、坐薬、舌下錠等が挙げられる。また、舌下、皮下及び筋肉内等に投与する場合の剤型としては、例えば、舌下錠、マイクロカプセル等の徐放製剤が挙げられる。
【００３８】
医薬的に許容される担体としては、例えば、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、増粘剤；液状製剤における溶剤、分散剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として適宜適量配合される。また必要に応じて、常法に従い防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を用いることもできる。
【００３９】
賦形剤の好適な例としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸等が挙げられる。滑沢剤の好適な例としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。結合剤の好適な例としては、例えば結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられる。増粘剤の好適な例としては、例えば天然ガム類、セルロース誘導体、アクリル酸重合体等が挙げられる。溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油等が挙げられる。分散剤の好適な例としては、例えばツイーン（Ｔｗｅｅｎ）８０、ＨＣＯ  ６０、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。界面活性剤の好適な例としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子等が挙げられる。等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール等が挙げられる。緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等が挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸等が挙げられる。
【００４０】
本発明の医薬組成物はがんの予防又は治療のために用いられる。
がんとしては、頭部及び頸部のがん、乳がん、肺がん、結腸がん、卵巣がん、前立腺がん、膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、多型性神経膠芽腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、炎症性乳がん、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽腫、腎臓がん、肝臓がん、黒色腫、膵臓がん、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺、リンパ芽球Ｔ細胞白血病、ＡＴＬ（Adult T-cell Leukemia/Lymphoma：成人T細胞白血病/リンパ腫）、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ＡＭＬ、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球Ｔ細胞白血病、形質細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫  巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、神経芽細胞腫、膀胱がん、尿路上皮がん、外陰がん、子宮頚がん、子宮体がん、腎がん、中皮腫、食道がん、唾液腺がん、肝細胞がん、胃がん、鼻咽頭がん、頬がん、口腔がん、ＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）、及び精巣がん等が挙げられ、好ましくは、リンパ芽球Ｔ細胞白血病、ＡＴＬ（Adult T-cell Leukemia/Lymphoma：成人T細胞白血病/リンパ腫）、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ＡＭＬ、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球Ｔ細胞白血病、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、巨核芽球性白血病、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病であり、最も好ましくは、ＡＴＬであるが、これらに限定されるものではない。
【００４１】
本発明のＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを組み合わせる場合、ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤の投与時期は限定されず、他の薬剤両者を、投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とは別々に製剤化されていてもよいし、両者が混合された合剤であってもよい。他の薬剤の投与量は、臨床上用いられている投与量に準ずればよく、投与対象、投与ルート、疾患、組み合わせ等により適宜選択することができる。他の薬剤の投与量は、例えば、当該他の薬剤を単剤として使用する時の投与量の３分の1から３倍量とすればよい。
【００４２】
本発明のＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤の投与形態は、特に限定されず、投与時に、ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とが組み合わされていればよい。このような投与形態としては、例えば、（１）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、（４）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例えばＡＴＬの予防又は治療薬→他の薬剤の順序での投与、あるいは逆の順序での投与）等が挙げられる。
【００４３】
本発明のＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを組み合わせることにより、以下のような優れた効果を得ることができる。
（１）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤を単独で投与する場合に比べて、其の投与量を軽減することができる、
（２）患者の症状（軽症、重症等）に応じて、他の薬剤の種類を選択することができる、
（３）ＡＴＬの予防又は治療薬と作用機序が異なる他の薬剤を選択することにより、治療期間を長く設定することができる、
（４）ＡＴＬの予防又は治療薬と作用機序が異なる他の薬剤を選択することにより、治療効果の持続を図ることができる、
（５）ＡＴＬの予防又は治療薬と他の薬剤とを併用することにより、相乗効果が得られる。
【００４４】
本発明のＡＴＬの予防又は治療薬を医薬製剤として患者に投与する場合、ＤＮＭＴ阻害剤(例えば、化合物（Ｉ））を単独で製剤化してもよいし、他の薬剤、薬学的に許容される担体等と混合して製剤化してもよい。医薬製剤中のＤＮＭＴ阻害剤（例えば、化合物（Ｉ））の含有割合は通常０．１〜１００％（ｗ／ｗ）である。また、医薬製剤に、他の薬剤を配合する場合、ＤＮＭＴ阻害剤（例えば、化合物（Ｉ））の含有割合は通常０．１〜９９．９％（ｗ／ｗ）である。
【００４５】
医薬組成物又は剤形内の本発明のＤＮＭＴ阻害剤(例えば、化合物（Ｉ））及び他の薬剤の量は、例えば、約1 mg〜約2,000 mg、約10 mg〜約2,000 mg、約20 mg〜約2,000 mg、約50 mg〜約1,000 mg、約100 mg〜約500 mg、約150 mg〜約500 mg又は約150 mg〜約250 mgの範囲であってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】MT-1におけるＯＲ−２１とＤＳ−３２０１ｂの併用効果を示す図である。
【図２】MT-2におけるＯＲ−２１とＤＳ−３２０１ｂの併用効果を示す図である。
【００４７】
抗ＡＴＬ活性につき、以下に示す。
実施例【００４８】
以下に、実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００４９】
デシタビンとＥＰＺ−６４３８をＡＴＬ細胞株(ＨＴＬＶ−１感染細胞株)に処置した際の細胞増殖抑制効果を評価した。ＡＴＬ細胞株については、ＭＴ−１株, ＭＴ−２株をＪＣＲＢ細胞バンクより購入し使用した。それぞれの細胞を培養液 (10% FBSと1% Penn-Strepを含むRPMI-1640 ) 中で40,000 cells / 1 ml/ well で24 well plate へ播種し、37℃、 5% CO2下で約2時間インキュベートした。ＭＴ−１については、デシタビンの濃度は0.1、0.2、0.5、1 μM となるように、ＥＰＺ−６４３８の濃度は0.5、1、2.5、5 μMとなるように培養液で調整し、24 well plateへ加え、48時間インキュベートした。ＭＴ−２については、デシタビンの濃度は0.05、0.1、0.2、0.5 μM となるように、ＥＰＺ−６４３８の濃度は0.25、0.5、1、2.5 μMとなるように培養液で調整し、24 well plateへ加え、48時間インキュベートした。48時間後に、デシタビン又はＥＰＺ−６４３８を終濃度が同じになるように再添加し、更に48時間（計96時間）インキュベートした後、100 μlの細胞培養液を96 well plate に移し、CCK-8試薬(DOJINDO、CK04)を用いて付属マニュアルに従い反応後、プレートリーダー（Varioskan Flash、サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）で各wellの450 nmと620 nm (Blank)の吸収を測定した。検体無添加 wellの値を100%とした時の各検体処理 wellの値を相対値で表１及び表２に示す。
(表１)
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（表２）
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上記の表１から、デシタビン(DNMT阻害剤)とＥＰＺ−６４３８(ヒストンメチル化酵素阻害剤)の併用処理はＭＴ−１に対して相乗的な細胞増殖抑制効果を誘導することが判明した。
上記の表２から、デシタビンとＥＰＺ−６４３８の併用処理はＭＴ−２に対しても相乗的な細胞増殖抑制効果を誘導することが判明した。
【実施例２】
【００５０】
ＡＴＬ細胞株(ＨＴＬＶ−１ 感染細胞株)であるＭＴ−１株及びＭＴ−２株についてはＪＣＲＢ細胞バンクより購入した。それぞれの細胞を培養液 (10% FBSと1% Penn-Strepを含むRPMI-1640)中で0.5 x 105 cells / 0.9 ml/ well で24 well plate へ播種し、37℃、 5% CO2下で約3時間 インキュベートした。5 μM -1.6 μMとなるように培養液で希釈したＯＲ−２１単剤、ＤＳ−３２０１ｂ単剤、ＯＲ−２１, ＤＳ−３２０１ｂ混合液を100 μlずつ24 well plateへ加え、8日間培養した (化合物終濃度500-16 nM)。この間、2日毎に新鮮な化合物を再添加した。また、培養4日後には細胞培養液を5倍希釈した。抗腫瘍効果については、細胞培養液を100 μlを96 well plateに分取し、CCK-8試薬(DOJINDO、CK04)を用いて付属マニュアルに従い反応後、プレートリーダー（Varioskan Flash、サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）で各wellの450 nmと620 nm (Blank)の吸収を測定した。検体無添加 wellの値を100%とした時の各検体処理 wellの値を相対値で表し、IC50値を算出した。その結果を図１及び２に示す。ＯＲ−２１は、式（I）においてＲ、Ｒ’、 Ｒ２は水素原子であり、Ｒ1は、トリエチルシリル基である化合物であり、ＯＲ−２１の名称は 5'-O-Triethylsilyl-2'-deoxy-5-azacytidine である。
また、形態変化については化合物処理4日後に位相差顕微鏡により観察した。その結果を図２に示す。   図１から、ＯＲ−２１(ＤＮＭＴ阻害剤)とＤＳ−３２０１ｂ(ヒストンメチル化酵素阻害剤)の6日間の併用処理はＭＴ−１の細胞増殖を相乗的に抑制する(IC50; ＯＲ−２１: 58 nM, ＤＳ−３２０１ｂ: > 500 nM, 併用処理: 36 nM)ことが判明した。  図２から、ＯＲ−２１とＤＳ−３２０１ｂの4日間の併用処理はＭＴ−２の細胞増殖を相乗的に抑制する(IC50; ＯＲ−２１: 172 nM, ＤＳ−３２０１ｂ: > 500 nM, 併用処理 118 nM)こと、また細胞がディッシュ底に接着・伸展しており、併用処理により、特徴的に細胞の接着性が亢進することが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００５１】
本発明によれば、ＤＮＭＴ阻害剤を他の薬剤と組み合わせて、がんの予防薬又は治療薬として医療現場に提供することができる。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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