(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）：2019221114.tif 000051［式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、本願明細書に記載の定義と同義である］で示される化合物またはその塩を含む、皮膚疾患の治療に有用な組成物（特に、皮膚組織修復剤）を提供する。
2019221114.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2019221114.tif 000033
［式中、Ｘは、ＮＨ、Ｎ＋＝ＣＨ−Ｒ１またはＮ＋＝ＣＨ−Ｃ＝Ｒ１’であり；
Ｒ１は、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ２−６アルケニル、ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン−置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）であり、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化２】
2019221114.tif 000034
を形成してもよく；
Ｒ１’は、
【化３】
2019221114.tif 000035
（式中、Ｒ１’ａは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたは
【化４】
2019221114.tif 000036
（式中、Ｒ３ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；および
Ｒ４は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである］
で示される化合物またはその塩を含む、皮膚組織修復剤。
【請求項２】
式（Ｉ）が、式（Ｉａ）：
【化５】
2019221114.tif 000037
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、請求項１と同義である］
である、請求項１記載の皮膚組織修復剤。
【請求項３】
Ｒ１が、
（１）Ｃ２−６アルケニル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（２）ＣＯＯＨ、
（３）Ｃ３−６シクロアルキル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルおよびＣ２−６アルケニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（４）−Ｃ２−１０アルケニレン−Ｃ３−６シクロアルキル（該Ｃ２−１０アルケニレンおよびＣ３−６シクロアルキルは、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、または
（５）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり、ここで、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化６】
2019221114.tif 000038
を形成してもよい、請求項１または２記載の皮膚組織修復剤。
【請求項４】
Ｒ１が、ＣＯＯＨ、１−ペンテン、
【化７】
2019221114.tif 000039
または−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２ＯＨであり、および
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の皮膚組織修復剤。
【請求項５】
式（Ｉ）が、式（Ｉｂ）：
【化８】
2019221114.tif 000040
［式中、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、請求項１と同義である］
である、請求項１記載の皮膚組織修復剤。
【請求項６】
Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである、請求項５記載の皮膚組織修復剤。
【請求項７】
式（Ｉｂ）が、
【化９】
2019221114.tif 000041
である、請求項５または６記載の皮膚組織修復剤。
【請求項８】
式（Ｉ）：
【化１０】
2019221114.tif 000042
［式中、Ｘは、ＮＨ、Ｎ＋＝ＣＨ−Ｒ１またはＮ＋＝ＣＨ−Ｃ＝Ｒ１’であり；
Ｒ１は、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ２−６アルケニル、ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン−置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）であり、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化１１】
2019221114.tif 000043
を形成してもよく；
Ｒ１’は、
【化１２】
2019221114.tif 000044
（式中、Ｒ１’ａは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたは
【化１３】
2019221114.tif 000045
（式中、Ｒ３ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；および
Ｒ４は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである］
で示される化合物またはその塩を含む、皮膚疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項９】
式（Ｉ）が、式（Ｉａ）：
【化１４】
2019221114.tif 000046
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、請求項８と同義である］
である、請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
Ｒ１が、
（１）Ｃ２−６アルケニル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（２）ＣＯＯＨ、
（３）Ｃ３−６シクロアルキル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルおよびＣ２−６アルケニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（４）−Ｃ２−１０アルケニレン−Ｃ３−６シクロアルキル（該Ｃ２−１０アルケニレンおよびＣ３−６シクロアルキルは、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、または
（５）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり、ここで、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化１５】
2019221114.tif 000047
を形成してもよい、請求項８または９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
Ｒ１が、ＣＯＯＨ、１−ペンテン、
【化１６】
2019221114.tif 000048
または−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２ＯＨであり、および
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素である、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
式（Ｉ）が、式（Ｉｂ）：
【化１７】
2019221114.tif 000049
［式中、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、請求項８と同義である］
である、請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１３】
Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである、請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
式（Ｉｂ）が、
【化１８】
2019221114.tif 000050
である、請求項１２または１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
皮膚疾患が、炎症性皮膚疾患または乾燥性皮膚疾患である、請求項８〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
炎症性皮膚疾患が、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬または尋常性ざ瘡である、請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項１７】
乾燥性皮膚疾患が、乾皮症または進行性指掌角皮症である、請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の皮膚組織修復剤を含む、化粧料。
【請求項１９】
赤ビート抽出物を含む、皮膚組織修復剤。
【請求項２０】
赤ビート抽出物を含む、皮膚疾患を治療するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベタニンまたはその類似化合物を含む皮膚組織修復剤に関する。より詳細には、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を含む、皮膚組織修復剤、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を含む、皮膚疾患を治療するための医薬組成物および該皮膚組織修復剤を含む化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、表皮、真皮および皮下組織の３層構造をとっている。表皮は、基底層、有棘層、顆粒層および角層の４層で構成され、角質細胞がレンガ状に積み重なっている角層において、体内の水分が体外に放出されるのを防ぎ、そして、体外からの刺激を防御している。また、皮膚組織は、皮膚バリアのみならず免疫細胞を多数有しているため、皮膚バリアおよび免疫を担う細胞が外来異物の侵入を抑制および防御している。これらの防御システムが異常を来すと、体外からの異物の侵入等の刺激によって炎症や肌の乾燥が起こり、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患を発症する。【０００３】
皮膚疾患の一種であるアトピー性皮膚炎は、湿疹、かゆみ、乾燥によるひび割れなどの様々な症状が現れる。そのような皮膚疾患の治療には、第一選択薬としてステロイド薬を使用し、それで治癒しない場合に漢方薬の処方など、個別に治療法を探索するのが一般的である。ステロイド薬が効かなければ十分な治療効果を得ることは難しく、多くの患者は、ハンドクリームや絆創膏で患部を保護するなどの対処療法で対処するのみで、また、ステロイド薬を使用できない患者も存在することから、ステロイド治療に代わる新たな治療法の確立が求められている。【０００４】
ベタニン色素を大量に含む赤ビートは食用であり、その抽出物は天然の赤色着色料としても広く知られており、また抗酸化作用、肝機能強化、脂肪燃焼といった機能を有することも知られている。しかしながら、酸化しやすく、またイミン結合部位が解離し易い水溶性天然色素であるベタニンのみを精製することは非常に困難であることもあって、ベタニン自身の作用についてはほとんど研究が行われておらず（例えば、特許文献１）、アイスクリーム、粉末飲料など、多量の安定剤（デキストランなど）との混合物でも使用に差し支えのない食品添加用赤色着色料としての用途以外、他の使用例については特に報告がない（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２００４−０１８８２８号公報
【特許文献２】特開２００２−５１７２６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ベタニンまたはその類似化合物を含む、皮膚疾患の治療に有用な組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、赤ビートから水溶性赤色色素ベタニンを精製する際に、偶然にもベタニン色素がひどく荒れた手の患部に沈着し、数日後にはベタニン色素が沈着した患部が劇的に治癒することを見出した。そこで、日常的に皮膚疾患を患う被験者の手荒れによる湿疹および指関節のひび割れ部位に精製ベタニン色素水溶液を染み込ませ、ベタニン色素の効果を検討した結果、ベタニン色素は石けん水等で洗ってもすぐに落ちずに、ベタニン色素で着色した炎症皮膚が古い角質とともに剥落して、湿疹およびひび割れが治癒することを見出し、本発明を完成するに至った。【０００８】
すなわち、本発明は、以下の態様を提供するものである。
［１］  式（Ｉ）：
【化１】
2019221114.tif 000003
［式中、Ｘは、ＮＨ、Ｎ＋＝ＣＨ−Ｒ１またはＮ＋＝ＣＨ−Ｃ＝Ｒ１’であり；
Ｒ１は、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ２−６アルケニル、ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン−置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）であり、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化２】
2019221114.tif 000004
を形成してもよく；
Ｒ１’は、
【化３】
2019221114.tif 000005
（式中、Ｒ１’ａは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたは
【化４】
2019221114.tif 000006
（式中、Ｒ３ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；および
Ｒ４は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである］
で示される化合物またはその塩を含む、皮膚組織修復剤。
［２］  式（Ｉ）が、式（Ｉａ）：
【化５】
2019221114.tif 000007
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、［１］と同義である］
である、［１］に記載の皮膚組織修復剤。
［３］  Ｒ１が、
（１）Ｃ２−６アルケニル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（２）ＣＯＯＨ、
（３）Ｃ３−６シクロアルキル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルおよびＣ２−６アルケニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（４）−Ｃ２−１０アルケニレン−Ｃ３−６シクロアルキル（該Ｃ２−１０アルケニレンおよびＣ３−６シクロアルキルは、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、または
（５）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり、ここで、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化６】
2019221114.tif 000008
を形成してもよい、［１］または［２］に記載の皮膚組織修復剤。
［４］  Ｒ１が、ＣＯＯＨ、１−ペンテン、
【化７】
2019221114.tif 000009
または−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２ＯＨであり、および
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素である、［１］〜［３］のいずれかに記載の皮膚組織修復剤。
［５］  式（Ｉ）が、式（Ｉｂ）：
【化８】
2019221114.tif 000010
［式中、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、［１］と同義である］
である、［１］に記載の皮膚組織修復剤。
［６］  Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである、［５］に記載の皮膚組織修復剤。
［７］  式（Ｉｂ）が、
【化９】
2019221114.tif 000011
である、［５］または［６］に記載の皮膚組織修復剤。
［８］  式（Ｉ）：
【化１０】
2019221114.tif 000012
［式中、Ｘは、ＮＨ、Ｎ＋＝ＣＨ−Ｒ１またはＮ＋＝ＣＨ−Ｃ＝Ｒ１’であり；
Ｒ１は、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ２−６アルケニル、ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン−置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）であり、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化１１】
2019221114.tif 000013
を形成してもよく；
Ｒ１’は、
【化１２】
2019221114.tif 000014
（式中、Ｒ１’ａは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたは
【化１３】
2019221114.tif 000015
（式中、Ｒ３ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；および
Ｒ４は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである］
で示される化合物またはその塩を含む、皮膚疾患を治療するための医薬組成物。
［９］  式（Ｉ）が、式（Ｉａ）：
【化１４】
2019221114.tif 000016
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、［８］と同義である］
である、［８］に記載の医薬組成物。
［１０］  Ｒ１が、
（１）Ｃ２−６アルケニル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（２）ＣＯＯＨ、
（３）Ｃ３−６シクロアルキル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルおよびＣ２−５アルケニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（４）−Ｃ２−１０アルケニレン−Ｃ３−６シクロアルキル（該Ｃ２−１０アルケニレンおよびＣ３−６シクロアルキルは、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、または
（５）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり、ここで、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化１５】
2019221114.tif 000017
を形成してもよい、［８］または［９］に記載の医薬組成物。
［１１］  Ｒ１が、ＣＯＯＨ、１−ペンテン、
【化１６】
2019221114.tif 000018
または−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２ＯＨであり、および
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素である、［８］〜［１０］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１２］  式（Ｉ）が、式（Ｉｂ）：
【化１７】
2019221114.tif 000019
［式中、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、［８］と同義である］
である、［８］に記載の医薬組成物。
［１３］  Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである、［１２］に記載の医薬組成物。
［１４］  式（Ｉｂ）が、
【化１８】
2019221114.tif 000020
である、［１２］または［１３］に記載の医薬組成物。
［１５］  皮膚疾患が、炎症性皮膚疾患または乾燥性皮膚疾患である、［８］〜［１４］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１６］  炎症性皮膚疾患が、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬または尋常性ざ瘡である、［１５］に記載の医薬組成物。
［１７］  乾燥性皮膚疾患が、乾皮症または進行性指掌角皮症である、［１５］に記載の医薬組成物。
［１８］  ［１］〜［７］のいずれかに記載の皮膚組織修復剤を含む、化粧料。
［１９］  治療を必要とする患者に、治療上の有効量の［１］〜［７］のいずれかに記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を投与することを特徴とする、皮膚疾患の治療方法。
［２０］  皮膚疾患を治療するための医薬の製造における、［１］〜［７］のいずれかに記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩の使用。
［２１］  皮膚疾患の治療に使用する、［１］〜［７］のいずれかに記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩。
［２２］  治療を必要とする患者の皮膚組織に、［１］〜［７］のいずれかに記載の皮膚組織修復剤を投与することを特徴とする、皮膚組織を修復する方法。
［２３］  治療を必要とする患者の皮膚組織に、［１］〜［７］のいずれかに記載の皮膚組織修復剤を投与することを特徴とする、皮膚組織再生能を増強する方法。
［２４］  治療を必要とする患者の皮膚組織に、［１］〜［７］のいずれかに記載の皮膚組織修復剤を投与することを特徴とする、皮膚細胞の増殖を促進する方法。
［２５］  治療を必要とする患者に、［１８］に記載の化粧料を直接塗布することを特徴とする、肌質を改善する方法。
［２６］  赤ビート抽出物を含む、皮膚組織修復剤。
［２７］  赤ビート抽出物を含む、皮膚疾患を治療するための医薬組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の皮膚組織修復剤、医薬組成物および化粧料に使用される式（Ｉ）で示される化合物またはその塩は、患部の皮膚組織を修復または再生することによって、ステロイド薬でも治癒しなかった慢性的な皮膚疾患、例えばアトピー性皮膚炎またはその症状に対して優れた治療効果を発揮することが期待できる。また、本発明の化粧料は、ベタニンが皮膚疾患の患者に現れる乾燥肌、肌荒れなどの症状が改善されることから、肌質を改善する効果を発揮することも期待できる。
さらに、高純度ベタニンは食品由来の天然色素であることから、肌や創傷部位に直接塗布してもアレルゲンにならず、安全に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ベタニン塗布直後と塗布後１日目、２日目、３日目、４日目および１０日目の患部の状態を撮影した写真を示す。また、７０％エタノールを噴射した際の患部の痛みの評価を示す。
【図２】左足踵へのベタニン塗布２週間後の両足の踵の状態を撮影した写真を示す。
【図３】両足踵へのベタニン塗布後の両足の踵の状態を撮影した写真を示す。（Ａ）は右足踵へのベタニン塗布直後、（Ｂ）は塗布後１日目、（Ｃ）は塗布後１１日目、および（Ｄ）は塗布後１４日目の両足の踵の状態を撮影した写真を示す。
【図４】右手小指の付け根のひび割れへのベタニン塗布後１０日目および３週間後の患部の状態を撮影した写真を示す。
【図５】左足親指の鶏眼へのベタニン塗布直後と１週間後の両足の親指の状態を撮影した写真を示す。
【図６】ベタニンを塗布した手のひらと石けんまたは市販の薬用練り歯磨きの泡で洗浄した手のひらを撮影した写真を示す。
【図７】ベタニン投与後０日目、１日目および２日目の無傷ヒト表皮モデルの顕微鏡写真を示す。ベタニンを投与することにより、投与後１日目に基底細胞の遊走性メラノサイト化が始まり、２日目には樹状突起を持ったメラノサイトへの再分化が認められる。
【図８】０．４ｍＭおよび４ｍＭのベタニン投与後９日目の機械的有傷開口部近傍の表皮モデル切片垂直断面の顕微鏡写真を示す。上図は、４ｍＭベタニンを投与した表皮モデルであり、メラノサイト化（黒矢印）後に，基底細胞に再分化した細胞列が認められる。下図は、０．４ｍＭベタニンを投与した表皮モデルである。
【図９】４ｍＭのベタニン投与後１日目、２日目および３日目の創傷部位および対照（水）投与後１日目、４日目および７日目の創傷部位の電子顕微鏡像を示す(n=2)。右下の線（−）は、その長さが３００μｍであることを表す。上図は、４ｍＭのベタニン投与の創傷部位の修復経過であり、下図は、対照投与の創傷部位の修復経過である。
【図１０】０．４ｍＭおよび４ｍＭのシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド投与後０日目、３日目、５日目および６日目の創傷部位の電子顕微鏡像を示す(n=2)。上図は、０．４ｍＭのシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド投与の創傷部位の修復経過であり、下図は、４ｍＭのシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド投与の創傷部位の修復経過である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下に、本発明について詳細に説明する。
【００１２】
本発明において、「ベタニン」とは、下記の構造を有し、水溶性赤色色素であって、赤ビートの主色素成分である。「赤ビート」とは、ヒユ科フダンソウ属ビートの中で赤ビートあるいはテーブルビートと呼ばれる品種群を意味する。赤ビートとしては、限定されるものではないが、Ｍｏｎｅｔａ、Ｃｒｏｓｂｙ’ｓ Ｅｇｙｐｔｉａｎ、Ｃｙｌｉｎｄｒａ、Ｐａｂｌｏ Ｆ１、Ｃａｒｄｅａｌ、Ｃｈｉｏｇｇｉａ、Ｍｏｕｌｉｎ Ｒｏｕｇｅ、Ｄｅｔｒｏｉｔ２、Ｄｅｔｒｏｉｔ ｄａｒｋｒｅｄ、Ｂｏｌｔａｒｄｙなどの品種を使用することができる。本発明においては、ベタニン含有量が高く，夾雑物を余り含まないＣｙｌｉｎｄｒａまたはＤｅｔｒｏｉｔ ｄａｒｋｒｅｄを使用することが好ましい。
【化１９】
2019221114.tif 000021
【００１３】
本発明において、ベタニンの純度は、９０％以上であり、好ましくは９５％以上であり、より好ましくは９８％以上である。
【００１４】
本発明において、「ベタニンまたはその類似化合物」とは、式（Ｉ）：
【化２０】
2019221114.tif 000022
［式中、Ｘは、ＮＨ、Ｎ＋＝ＣＨ−Ｒ１またはＮ＋＝ＣＨ−Ｃ＝Ｒ１’であり；
Ｒ１は、水素、置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ２−６アルケニル、ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−置換されていてもよいＣ１−６アルキル、置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン−置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）であり、Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化２１】
2019221114.tif 000023
を形成してもよく；
Ｒ１’は、
【化２２】
2019221114.tif 000024
（式中、Ｒ１’ａは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたは
【化２３】
2019221114.tif 000025
（式中、Ｒ３ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
であり；および
Ｒ４は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである］
で示される化合物またはその塩を意味する。
【００１５】
式（Ｉ）は、好ましくは、式（Ｉａ）：
【化２４】
2019221114.tif 000026
または式（Ｉｂ）：
【化２５】
2019221114.tif 000027
である。
【００１６】
Ｒ１として好ましくは、
（１）Ｃ２−６アルケニル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（２）ＣＯＯＨ、
（３）Ｃ３−６シクロアルキル（該基は、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルおよびＣ２−６アルケニルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、
（４）−Ｃ２−１０アルケニレン−Ｃ３−６シクロアルキル（該Ｃ２−１０アルケニレンおよびＣ３−６シクロアルキルは、置換可能な位置で、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群から選択される１つまたは同一もしくは異なる２つ以上の基で置換されていてもよい）、または
（５）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａ（ここで、Ｒ１ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルである）
である。Ｒ１が−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ（ＯＲ１ａ）−ＣＨ２ＯＲ１ａである場合、Ｒ１が結合する炭素原子と一緒になって、
【化２６】
2019221114.tif 000028
を形成することができる。Ｒ１としてより好ましくは、ＣＯＯＨ、１−ペンテン、
【化２７】
2019221114.tif 000029
または−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２ＯＨである。
【００１７】
Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４として好ましくは、水素、Ｃ１−６アルキルまたはＣ１−６ハロアルキルであり、より好ましくは、水素である。
【００１８】
本発明において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
【００１９】
本発明において、「Ｃ１−６アルキル」とは、炭素数１〜６個を有する直鎖状もしくは分枝状の飽和炭化水素基を意味する。好ましくは、「Ｃ１−４アルキル」である。「Ｃ１−６アルキル」の具体例としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルなどが挙げられる。
【００２０】
本発明において、「Ｃ１−６ハロアルキル」とは、１個以上の水素原子がハロゲン原子によって置き換えられている、上記に定義のＣ１−６アルキルを意味する。置き換えられている水素原子の数は、１個から、最大で親アルキル基に他に存在しうる水素原子の総数の範囲まで及びうる。ハロゲン原子を複数有する場合は、同一または異なるハロゲン原子で置換されていてもよい。「Ｃ１−６ハロアルキル」の例として、限定されるものではないが、クロロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルなどが挙げられる。
【００２１】
本発明において、「Ｃ２−６アルケニル」とは、１〜３個の炭素−炭素二重結合を含有する、炭素数２〜６個を有する直鎖状もしくは分枝状の不飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ２−６アルケニル」の例として、限定されるものではないが、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ヘプタジエニルなどが挙げられる。
【００２２】
本発明において、「Ｃ２−１０アルケニレン」とは、１〜５個の炭素−炭素結合を含有する、炭素数２〜６個の直鎖状もしくは分枝状の二価の不飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ２−１０アルケニレン」の例として、限定されるものではないが、プロペニレン、ブテニレン、ペンテニレン、ヘキセニレン、ブタジニレン、ヘキサトリエニレン、ノナテトラエニレン、デカペンタエニレンなどが挙げられる。
【００２３】
本発明において、「Ｃ３−６シクロアルキル」とは、３員〜６員の単環式もしくは多環式環状の飽和または部分不飽和の炭化水素基を意味する。好ましくは、「Ｃ５−６シクロアルキル」であり、より好ましくはシクロヘキセニルである。「Ｃ３−６シクロアルキル」の具体例としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル等が挙げられる。
【００２４】
本発明において、「置換されていてもよいＣ１−６アルキル」、「置換されていてもよいＣ２−６アルケニル」、「置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル」、「置換されていてもよいＣ２−１０アルケニレン」における置換基としては、例えば、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ２−６アルケニルなどが挙げられ、好ましくはＣ１−６アルキルおよびＣ２−６アルケニルであり、より好ましくはメチルおよびプロペニルである。
【００２５】
ベタニンは、例えば赤ビート根を０．３％クエン酸溶液で抽出処理し、これに７０％飽和硫酸アンモニウム溶液を加え、遠心分離あるいは濾別して除タンパク処理を行い、清澄な上清（色素前処理液）を得、さらにこの色素前処理液（好ましくは、ｐＨ４．５〜５．０）を、逆相シリカゲルＯＤＳカラムあるいはセパビーズを用いて色素を担体に吸着させ、そのカラム中の色素吸着担体をクエン酸等の酸性水溶液もしくは１％エタノール含有酸性水溶液で吸引洗浄し、残存する硫酸アンモニウムや糖類を除去後、この担体をクエン酸酸性水溶液に終濃度２０％もしくは４０％（ｖ／ｖ）のエタノールを加えて溶出・減圧濃縮し、クエン酸と色素の共沈殿物を得るか，あるいは新規には濃縮物を９５％エタノールに再懸濁し、超音波で良く分散させたのち、濾過もしくは９５％エタノールでの洗浄を数回繰り返した沈澱物を遠心分離により回収、減圧乾燥し、乾燥微粉末として得ることができる。ベタニンの類似化合物は、精製したベタニンから公知の方法にて製造することができる。また、ベタニン調製には、市販の比較的純度の高いベタニン溶液を用いてもよい。
【００２６】
式（Ｉ）で表される化合物は、塩形態であってもよく、医薬として許容される塩であれば特に限定されない。塩としては、例えば、アルカリ金属（例えば、カリウム、ナトリウム、リチウムなど）の塩、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、マグネシウムなど）の塩、アンモニウム塩（例えば、テトラメチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩など）、有機アミン（例えば、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなど）の塩などが挙げられる。
【００２７】
式（Ｉ）で表される化合物は、光学活性体および立体異性体などの異性体として存在する場合もあり得る。従って、式（Ｉ）で表される化合物は、ラセミ体、光学活性体、立体異性体およびその混合物や単離されたものも包含する。
【００２８】
本発明において、ベタニンまたはその類似化合物の純度は、質量分析（MALDI-TOF-MSとESI-MS）、1H-NMR、およびUVスペクトラムで検定しているが、特にこれらの方法に限定されない。さらに、ベタニンはβ−グルコシダーゼ処理によって遊離したグルコースの定量によってその完全分解物の９８〜９９．５％が回収できていること、さらには火炎焼却によって灰化しても無機塩が残存しないことからも、精製粉末ベタニンが高純度精製物であることを確認している。
【００２９】
本発明において、「赤ビート抽出物」とは、赤ビート根を原料として、通常用いられる抽出方法で抽出して得られる低分子の物質である。かかる抽出方法は、例えば水や含水エタノールで、酸性物質やアルカリ性物質を適宜添加して、適宜加熱して赤ビート根を処理して、抽出液を濃縮する方法が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００３０】
本発明において、「皮膚疾患」とは、炎症性皮膚疾患または乾燥性皮膚疾患およびそれらの症状を意味する。炎症性皮膚疾患としては、例えば、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、乾癬、尋常性ざ瘡などが挙げられ、また、乾燥性皮膚疾患としては、例えば、乾皮症、進行性指掌角皮症などが挙げられる。本発明における皮膚疾患としては、アトピー性皮膚炎が好ましい。
皮膚疾患の症状としては、例えば、乾燥肌、肌荒れ、ひび割れ、鶏眼、湿疹、かぶれ、さらには炎症性皮膚疾患により生じた治癒痕の色素沈着、いわゆるささくれやアカギレと呼ばれる手荒れ，または代謝阻害剤服用時の副作用として指関節のヒビなどが挙げられる。
【００３１】
本発明において、「皮膚組織修復剤」とは、異常や欠損の生じた皮膚組織（患部）の修復（治癒）とともに当該患部およびその周辺の皮膚組織の状態をより健全なものに改善し得る機能を備えた薬剤を意味する。また、皮膚組織の破壊の抑制、皮膚組織の再生能の増強、そして、皮膚細胞の増殖の促進によって、治療効果を発揮する薬剤も含まれる。
【００３２】
本発明において、「治療」とは、哺乳動物、特にヒトにおける皮膚疾患、特に皮膚の創傷部位の治癒および改善を意味する。また、疾患およびその症状の緩和、軽減および進行の抑制なども含まれる。
【００３３】
本発明において、「患者」とは、ヒトおよびその他の動物、例えば、イヌ、ネコ、ウマなどを意味する。患者は、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。
【００３４】
本発明において、「治療上の有効量」とは、未治療対象と比べて、疾患およびその症状の治療効果をもたらす量、または疾患およびその症状の進行の遅延をもたらす量などを意味する。また、「治療上の有効量」は、皮膚組織の修復（再生）を促進するのに有効な量も含まれる。その量は、化合物の種類、疾患およびその重篤度、ならびに治療されるべき哺乳動物の年齢、体重などに依存して変化する。
【００３５】
本発明の皮膚組織修復剤、医薬組成物および化粧料は、式（Ｉ）で示される化合物またはその塩による皮膚疾患に対する効果を妨げない範囲であれば、他の医薬活性成分、例えばステロイド薬、抗アレルギー薬、免疫抑制薬、抗炎症薬などの薬剤を組み合わせてもよい。他の医薬活性成分は、皮膚組織修復剤、医薬組成物または化粧料の総重量に対して、例えば、０．０１〜１０重量％の量で配合してもよい。また、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３６】
本発明の皮膚組織修復剤および医薬組成物は、経口または非経口（例えば、局所）投与形態で投与することができ、皮膚の局所表面に有効成分を直接投与できる形態で投与することが好ましい。その剤形は、医薬品として使用可能なものであれば特に制限されるものではなく、その例として、注射剤、軟膏剤（例えば、油脂性軟膏剤、水溶性軟膏剤）、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤、パップ剤、テープ剤、スプレーなどが挙げられる。葆本発明の剤形は、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤またはローション剤が好ましい。これらは公知の方法によって製造することができる。
【００３７】
本発明の化粧料は、化粧品として使用可能な形態であれば特に制限されるものではなく、その例として、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、乳液などが挙げられる。本発明の化粧料は、例えば、化粧水；メイクアップベースローション、メイクアップベースクリーム、液状もしくはクリーム状または軟膏型のファンデーションなどの美白用メイクアップ化粧料；日焼け止めローション、日焼け止めクリームなどの日焼け止め化粧料；ハンドクリーム；レッグクリーム；およびボディローションとして使用することができる。
【００３８】
本発明の皮膚組織修復剤、医薬組成物および化粧料は、通常医薬および化粧料に用いられる添加剤、例えば、基剤、吸収促進剤、保湿剤、増粘剤、乳化剤、抗酸化剤、安定化剤、殺菌剤、防腐剤などを自体公知の方法により適宜配合してもよい。
【００３９】
基剤の例として、白色ワセリン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、流動パラフィン、スクワレン、中鎖脂肪酸トリグリセリドなどが挙げられる。
【００４０】
吸収促進剤の例として、尿素、セバシン酸ジエチル、イソプロピルアルコール、ｌ−メントール、サリチル酸、中鎖脂肪酸エステルなどが挙げられる。
【００４１】
保湿剤の例として、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、１，３−ブタンジオール、ヒアルロン酸ナトリウムなどの多価アルコール類が挙げられる。
【００４２】
増粘剤の例として、アラビアガム、グアーガム、カラギーナン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどが挙げられる。
【００４３】
乳化剤の例として、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウムなどが挙げられる。
【００４４】
抗酸化剤の例として、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）などが挙げられる。
【００４５】
安定化剤の例として、ポリソルベート、ポリエチレングリコール、軽質無水ケイ酸などが挙げられる。
【００４６】
防腐剤の例として、パラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、ソルビン酸、フェノールなどが挙げられる。
【００４７】
本発明の医薬組成物、皮膚組織修復剤および化粧料中に有効成分として含まれる式（Ｉ）で示される化合物またはその塩は、皮膚疾患を治療するための効果をもたらす濃度であればよい。式（Ｉ）で示される化合物またはその塩の濃度は、限定されるものではないが、０．１〜１００ｍＭであり、好ましくは０．２〜５０ｍＭ、より好ましくは０．３〜２０ｍＭ、さらにより好ましくは０．４〜１５ｍＭである。その一日投与量は、化合物の種類、投与方法、患者の症状・年齢などの様々な要因により異なるが、通常、成人（体重６０ｋｇ）において０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは０．５ｍｇ〜５０ｍｇ、より好ましくは１ｍｇ〜１０ｍｇの範囲内の量であればよい。その量を１日１回患部へ直接塗布すればよく、隔日に１回であってもよい。
【実施例】
【００４８】
以下に、実施例および試験例を示すが、これらは本発明をより良く理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。【００４９】
実施例１：ベタニン水溶液の調製
赤ビート塊根（品種：Ｃｙｌｉｎｄｒａ）根部を水洗し、等量の０．３％クエン酸溶液（ｗ／ｖ）中で破砕し，色素粗抽出液を得た。該色素粗抽出液に、７０％飽和になるよう硫酸アンモニウムを加え、遠心分離（５０００ｘｇ、５分、４℃）して除タンパク処理を行い、清澄な上清（色素前処理液）を得た。次いで、該色素前処理液をセパビーズ７０ＳＰあるいは逆相シリカゲルＯＤＳカラムに吸引通液し（ＳＶ２×２４時間、４℃）、色素成分を逆相系樹脂に吸着させた。この色素成分を吸着させた逆相シリカゲルを０．３％クエン酸水溶液さらには１％エタノール含有０．３％クエン酸水溶液で十分に洗浄後（ＳＶ２×２４時間、４℃）、０．３％クエン酸酸性水溶液に１０〜２０％エタノールまたは４０％発酵エタノールを加えて溶出・濃縮し、濃縮物をそのまま９５％エタノールに懸濁物として分散させるか，あるいは４℃保存で生じたクエン酸との黒色共沈殿物を９５％エタノールで洗浄して、ベタニンを不溶物として得た。得られたベタニンを、濃度が１０ｍＭ〜１５ｍＭになるように滅菌水に溶解して、ベタニン水溶液を調製した。以下の試験例１〜試験例３に用いた。【００５０】
実施例２：ベタニンの純度測定
グルコースＣＩＩ−テストワコーを用いて、実施例１で得られたベタニンの純度を測定した。200.0 mg(0.363 mmol)のベタニン粉末（遊離グルコースの理論値：65.39 mg）を用いて測定したところ、64.18 mg (98.1%:505 nm)および65.09 mg(99.5%:320 nm)のグルコース量が得られ、９８〜９９．５％のグルコース遊離が確認できた。すなわち、ベタニンの純度が９８〜９９．５％であることが示された。
本試験では、質量分析（MALDI-TOF-MSおよびESI-MS）によりベタニンの分子量を、そして、1H-NMR測定により、不純物がないことを確認した。【００５１】
試験例１：ベタニンの皮膚組織修復効果の評価（１）
以下のように、アトピー性皮膚炎を患う被験者の患部に実施例１のベタニン水溶液を塗布し、その皮膚組織修復効果を評価した。
［被験者］
２３歳、男性。幼少期よりアトピー性皮膚炎を発症しており、手の乾燥、ひび割れおよび炎症が見られた。普段はステロイド薬と保湿剤を併用しており、ひび割れはステロイド薬を使用しなければ治癒しないレベルであった。
［方法］
右手中指にアトピー性皮膚炎に起因するひび割れが生じており、そのひび割れ部位に実施例１のベタニン水溶液を１日１回１〜２滴、４日間直接塗布した。塗布の１分後に患部を水洗し、７０％エタノールを患部に噴射して、エタノールに対する患部の痛みおよび患部の状態を観察した。ベタニン塗布開始の５日目以降はベタニン水溶液を塗布せずに、７０％エタノールを患部に噴射してその痛みを観察した。ベタニン塗布期間中はステロイド薬を使用しなかった。
［結果］
７０％エタノールに対する患部の痛みについて、「激痛」を（＋＋）、「多少痛いが、大きく軽減した」を（＋）、「痛みが気にならない」を（±）、そして、「痛みなし／完治」を（−）として評価した。その評価結果を表１に示す。
【表１】
2019221114.tif 000030
【００５２】
また、ベタニン塗布直後と塗布後１日目、２日目、３日目、４日目および１０日目の患部の状態を撮影した写真を図１に示す。４日目で完全に傷口がふさがっており、１０日目にはひび割れが完全に治癒した。【００５３】
試験例２：ベタニン皮膚組織修復効果の評価（２）
以下のように、乾燥性皮膚疾患を患う被験者の患部に実施例１のベタニン水溶液を塗布し、その皮膚組織修復効果を評価した。
［被験者］
５５歳、女性。手および踵にひび割れが見られた。また、足の親指にはヒールダコも見られた。踵は普段、入浴時の研磨と入浴後の尿素配合クリームで処置し、手はステロイド薬で処置していたが、ひび割れは治癒しないレベルであった。
［方法］
踵のひび割れについて、左右塗り分け法によってベタニンの効果を確認した。左足踵のひび割れ部位に実施例１のベタニン水溶液を１日１回１〜２滴、直接塗布し、右足踵のひび割れは処置せずに、１４日間両足の踵の状態を比較した。その後、左足踵へのベタニン水溶液塗布後１４日目から、右足踵のひび割れ部位にも実施例１のベタニン水溶液を１日１回１〜２滴、１４日間直接塗布し、その状態を観察した。ベタニン塗布期間は、両足とも入浴時の研磨を行わず、また、入浴後の尿素配合クリームで踵を処置しなかった。
さらに、右手小指の付け根のひび割れ部位に実施例１のベタニン水溶液を１日１回１〜２滴、７日間塗布し、塗布から３週間その状態を観察した。また、左足親指の鶏眼のみに実施例１のベタニン水溶液を１日１回１〜２滴、７日間塗布し、左右塗り分け法によりベタニンの効果を評価した。
［結果］
左足踵へのベタニン塗布２週間後の両足の踵の状態を撮影した写真を図２に示す。ベタニンの効果を確認するために、両足の踵の足蹠紋数をカウントした。その結果を表２に示す。
【表２】
2019221114.tif 000031
【００５４】
右足踵へのベタニン塗布直後（Ａ）、塗布後１日目（Ｂ）、塗布後１１日目（Ｃ）および塗布後１４日目（Ｄ）の両足の踵の状態を撮影した写真を図３に示す。踵の状態を確認するために、図３（Ａ）の円内の縦のひび割れの数をカウントし、さらに、右踵へのベタニン塗布後１日目の、両足の横と斜め方向のひび割れの数をカウントした。そのカウントしたひび割れ数を表３に示す。
【表３】
2019221114.tif 000032
【００５５】
被験者は、ベタニン水溶液の塗布により、左踵の皮膚が１週間で柔らかくなったことを実感した。また、右踵の皮膚は塗布後３日目から柔らかくなったことを実感し、１０日目頃から角質が落ち、見た目も改善し、１４日目には足蹠紋数が復活し、ひび割れの数が大幅に減少して、その症状は改善された。【００５６】
右手小指の付け根のひび割れへのベタニン塗布後１０日目および３週間後の患部の状態を撮影した写真を図４に示す。被験者は、塗布後４日目以降から痛みが気にならなくなったが、周辺が腫れて硬くなった（右図）。その後、しこり状の腫れが引き始め、３週間で完全に治癒した。【００５７】
左足親指の鶏眼へのベタニン塗布直後と１週間後の両足の親指の状態を撮影した写真を図５に示す。被験者は、塗布後４日目から左足親指の皮膚が柔らかくなったことを実感し、１週間後その症状は改善された。【００５８】
試験例３：ベタニンの皮膚組織修復効果の評価（３）
以下のように、指関節にひどい被験者の患部に実施例１のベタニン水溶液を塗布し、その皮膚組織修復効果を評価した。また、石けんおよび薬用練り歯磨きのベタニン色素の洗浄効果を確認した。
［被験者］
５５歳、男性。指関節部分にひどいひび割れが見られた。
［方法］
右手にベタニンを塗布した。その後、手のひらを石けんのみで洗浄し、ひび割れが生じている指部分を市販の薬用練り歯磨きの泡のみで洗浄し、ベタニン色素の沈着除去効果を確認した。
［結果］
ベタニンを塗布した手のひらと石けんまたは市販の薬用練り歯磨きの泡で洗浄した手のひらを撮影した写真を図６に示す。【００５９】
石けんのみで洗浄した部分はベタニンが残留しているが、薬用練り歯磨きの泡で洗浄した部分はひどいひび割れ部分のみにベタニンが残留し、それ以外の箇所は色素沈着が除去された。すなわち、ベタニンは、傷口に塗布すると皮膚が再生するまで色素としてその部位にとどまることが示された。その結果、ベタニンは、炎症部位の癒傷効果を効率的にもたらし、皮膚再生にはベタニン塗布が有効であることが示された。また、色を落としたい場合は、市販の練り歯磨きの泡で簡単に色素を除去できることが示された。【００６０】
試験例４：無傷ヒト表皮モデルにおける高純度ベタニン投与による効果
ヒト表皮モデル作製キット・ラボサイト エピキット（株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング（J-TEC））を購入し、ヒト表皮モデルを作製した。その作製したヒト表皮モデルに４ｍＭの実施例１のベタニン溶液を投与し、高純度ベタニン投与による効果を確認した。
［結果］
ベタニン投与後０日目、１日目および２日目の無傷ヒト表皮モデルの顕微鏡写真を図７に示す。ベタニン投与後１日目に基底細胞の遊走性メラノサイト化が始まり、投与後２日目には樹状突起を持ったメラノサイトへの再分化が認められた。【００６１】
試験例５：傷害ヒト表皮モデルにおけるベタニンの皮膚組織修復効果の評価
作製したヒト表皮モデルを使用して、ベタニンの皮膚組織修復効果を検討した。具体的には、作製した表皮モデルにカッターで傷口を作り、その創傷部位に直接、０．４ｍＭまたは４ｍＭの実施例１のベタニン水溶液をマイクロピペットで２０μｌ滴下して、１４日間培養して、ベタニンの皮膚修復効果を評価した。対照として水を使用した。
［結果］
０．４ｍＭおよび４ｍＭのベタニン投与後９日目の機械的有傷開口部近傍の表皮モデル切片垂直断面の顕微鏡写真を図８に示す。また、４ｍＭのベタニン投与後１日目、２日目および３日目の創傷部位(n=2)および対照（水）投与後１日目、４日目および７日目の創傷部位(n=2)の電子顕微鏡像を図９に示す。【００６２】
４ｍＭのベタニン投与では、顕著なメラノサイト化と樹状突起の発達が認められた。また、ベタニンを投与した場合、創傷部位に樹状突起に起因する繊維状メラノサイトが広がり、２日目には創傷部位が治癒した。対照では７日経過しても創傷部位がほとんど治癒しなかった。
本結果より、ベタニンは、優れた皮膚組織修復効果をもたらすことが示された。また、その皮膚組織修復効果は、ベタニンの濃度を４ｍＭ程度まで高めることにより増強されることが示唆された。【００６３】
試験例６：傷害ヒト表皮モデルにおけるシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド(cycloDOPA 5-O-Glc)の皮膚組織修復効果の評価
作製したヒト表皮モデルを使用して、シクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド(cycloDOPA 5-O-Glc)の皮膚組織修復効果を検討した。具体的には、作製した表皮モデルにカッターで傷口を作り、その創傷部位に直接、０．４ｍＭまたは４ｍＭのシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドをマイクロピペットで２０μｌ滴下して、１４日間培養して、シクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドの皮膚修復効果を評価した。なお、本試験で使用されるシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドは、常法により調製した。
［結果］
０．４ｍＭおよび４ｍＭのシクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシド投与後０日目、３日目、５日目および６日目の創傷部位(n=2)の電子顕微鏡像を図１０に示す。【００６４】
シクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドを投与した場合でも、創傷部位が治癒することが示された。すなわち、シクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドもまた、ベタニン同様に、優れた皮膚組織修復効果を有することが示された。
シクロドーパ  ５−Ｏ−βグルコシドは、０．４ｍＭ程度の低濃度で、より優れた皮膚組織修復効果をもたらすことが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を含有する医薬組成物および皮膚組織修復剤は、特に難治性といわれるアトピー性皮膚塩の治療に極めて効果的であり、そして、ベタニンが食品由来の天然色素であることから、ステロイド薬で効果が得られなかった患者や副作用からステロイド薬を使用できなかった患者に使用することができる。したがって、本発明により、新たな皮膚疾患の治療剤の提供が期待できる。
また、皮膚表面のキメが細かく整い、肌触りが柔らかくなることは、肌の乾燥、そして、皮膚のバリア機能の低下を防ぐことから、肌質を改善するスキンケア化粧料として提供することも期待できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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