【手続補正書】
【提出日】平成20年11月25日(2008.11.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＤＰＰ−ＩＶ阻害活性を有するタンパク質の加水分解物であって、少なくとも１個のプロリン残基を含む２〜８個のアミノ酸からなる長さを有するペプチド中に濃縮されている、上記加水分解物。
【請求項２】
前記タンパク質の加水分解物が、乳タンパク質の加水分解物である、請求項１に記載のタンパク質の加水分解物。
【請求項３】
前記タンパク質の加水分解物が、カゼインの加水分解物である、請求項２に記載のタンパク質の加水分解物。
【請求項４】
３〜７個のアミノ酸からなる長さを有するペプチドを、２０重量％から８０重量％の間で含有する、請求項１から３までのいずれか一項に記載のタンパク質の加水分解物。
【請求項５】
前記ペプチドが、ＬＰＬ（配列番号２）、ＩＰＩ（配列番号１）、ＰＦＰ（配列番号３９）、ＬＰＬＰ（配列番号４０）、ＨＰＩＫ（配列番号４１）、ＬＰＶＰ（配列番号４２）、ＭＰＬＷ（配列番号１６）、ＧＰＦＰ（配列番号４３）、ＰＬＬＱ（配列番号４４）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＡＰＦＰＥ（配列番号４６）、ＬＰＱＹＬ（配列番号４７）、ＬＰＶＰＱ（配列番号４８）、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＡＰＦＰＥＶＦ（配列番号５０）、ＧＰＦＰＩＩＶ（配列番号３２）、ＥＭＰＦＰＫ（配列番号５１）、ＰＱＳＶＬＳ（配列番号５２）、ＹＶＰＥＰＦ（配列番号５３）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、及びＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）から選択される、請求項１から４までのいずれか一項に記載のタンパク質の加水分解物。
【請求項６】
前記ペプチドが、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、ＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＬＰＬ（配列番号２）及びＩＰＩ（配列番号１）から選択される、請求項５に記載のタンパク質の加水分解物。
【請求項７】
タンパク質の加水分解物から誘導できる単離ペプチドであって、ＤＰＰ−ＩＶ阻害活性を有し、且つＬＰＬ（配列番号２）、ＩＰＩ（配列番号１）、ＰＦＰ（配列番号３９）、ＬＰＬＰ（配列番号４０）、ＨＰＩＫ（配列番号４１）、ＬＰＶＰ（配列番号４２）、ＭＰＬＷ（配列番号１６）、ＧＰＦＰ（配列番号４３）、ＰＬＬＱ（配列番号４４）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＡＰＦＰＥ（配列番号４６）、ＬＰＱＹＬ（配列番号４７）、ＬＰＶＰＱ（配列番号４８）、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＡＰＦＰＥＶＦ（配列番号５０）、ＧＰＦＰＩＩＶ（配列番号３２）、ＥＭＰＦＰＫ（配列番号５１）、ＰＱＳＶＬＳ（配列番号５２）、ＹＶＰＥＰＦ（配列番号５３）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、ＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、ＬＦ（配列番号５７）、ＬＬ（配列番号５８）、ＩＩ（配列番号５９）、ＬＣ（配列番号６０）及びＶＴＫＣＣＴＥ（配列番号５６）、又はそれらの２種以上の混合物から選択される、上記ペプチド。
【請求項８】
前記ペプチドが、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、ＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＬＰＬ（配列番号２）及びＩＰＩ（配列番号１）から選択される、請求項７に記載の単離ペプチド又は混合物。
【請求項９】
請求項１から６までのいずれか一項に記載のタンパク質の加水分解物、又は請求項７若しくは８に記載の単離ペプチド若しくは混合物を含む、ＤＰＰ−ＩＶが仲介する状態の予防及び／又は治療のための、医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【請求項１０】
前記ＤＰＰ−ＩＶが仲介する状態が、肥満、２型糖尿病及び免疫学的障害からなる群から選択される、請求項９に記載の医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【請求項１１】
肥満の予防及び／又は治療のための、請求項９又は１０に記載の医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【請求項１２】
２型糖尿病の予防及び／又は治療のための、請求項９又は１０に記載の医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【請求項１３】
免疫学的障害の予防及び／又は治療のための、請求項９又は１０に記載の医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【請求項１４】
関節リウマチ、多発性硬化症及びグレーブス病からなる群から選択される自己免疫疾患の予防及び／又は治療のための、請求項１３に記載の医薬品、栄養補助食品、飲料又は食品。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
好ましいペプチドは、トリペプチド配列、ＺＰＸ又はＸＰＺの１個を含有する。ただし、Ｚは、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）又はフェニルアラニン（Ｆ）であり、Ｘは、Ｚ、又はグルタミン（Ｑ）、アラニン（Ａ）、ヒスチジン（Ｈ）、グリシン（Ｇ）、メチオニン（Ｍ）若しくはチロシン（Ｙ）である。それらの例として、ＩＰＩ（配列番号１）、ＬＰＬ（配列番号２）、ＶＰＦ（配列番号３）、ＦＰＩ（配列番号４）、ＬＰＡ（配列番号５）、ＩＰＹ（配列番号６）、ＬＰＱ（配列番号７）、ＨＰＩ（配列番号８）、ＧＰＦ（配列番号９）、ＭＰＬ（配列番号１０）等があげられる。これらのトリペプチド配列は、３〜８個のアミノ酸からなるペプチドの一部であることができ、その他のアミノ酸は、好ましくは、コムギ、ダイズ及び乳のタンパク質等の自然のタンパク質に存在するようなアミノ酸である。乳タンパク質に由来するペプチドの例を以下に示す。
【化１】
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ただし、好ましいペプチドは、少なくとも下線を施したトリペプチド配列を有し、且つ０から４又は５個までの周囲のアミノ酸をさらに有し、より好ましくは、プロリン残基（Ｐ）が、Ｎ末端から第２番目の残基であるぺプチドである。これらのペプチドを、そのまま、又はいずれかの混合物、特に、加水分解物の一部として使用することができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
より好ましい実施形態では、本発明による、タンパク質の加水分解物中に濃縮されているペプチドは、ＬＰＬ（配列番号２）、ＩＰＩ（配列番号１）、ＰＦＰ（配列番号３９）、ＬＰＬＰ（配列番号４０）、ＨＰＩＫ（配列番号４１）、ＬＰＶＰ（配列番号４２）、ＭＰＬＷ（配列番号１６）、ＧＰＦＰ（配列番号４３）、ＰＬＬＱ（配列番号４４）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＡＰＦＰＥ（配列番号４６）、ＬＰＱＹＬ（配列番号４７）、ＬＰＶＰＱ（配列番号４８）、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＡＰＦＰＥＶＦ（配列番号５０）、ＧＰＦＰＩＩＶ（配列番号３２）、ＥＭＰＦＰＫ（配列番号５１）、ＰＱＳＶＬＳ（配列番号５２）、ＹＶＰＥＰＦ（配列番号５３）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、及びＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、並びに１個又は２個のプロリン残基を含む、少なくとも３個のアミノ酸を有する、これらのペプチドに由来する切断されたペプチドから選択される。オンラインＬＣ−ＢＣＤ−ＭＳによって、これらの特定のペプチドが、ＤＰＰ−ＩＶの強力な阻害剤であり、したがって、肥満、２型糖尿病及び免疫学的障害等のＤＰＰ−ＩＶが仲介する状態の予防及び／又は治療に、好都合に利用できることが見出された。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明による、タンパク質の加水分解物中に濃縮されているペプチドは、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、ＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＬＰＬ（配列番号２）及びＩＰＩ（配列番号１）からなる群から選択されるのが最も好ましい。これらのペプチドは、最も強力なＤＰＰ−ＩＶ阻害剤として同定された。したがって、これらのペプチドは、特に興味深い。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
別の態様では、本発明は、タンパク質の加水分解物に由来する単離ペプチドに関するものであり、当該のペプチドは、ＤＰＰ−ＩＶ阻害活性を有し、且つ少なくとも１個のプロリン残基を含む２〜８個のアミノ酸からなる長さを有し、当該のペプチドは、ＬＰＬ（配列番号２）、ＩＰＩ（配列番号１）、ＰＦＰ（配列番号３９）、ＬＰＬＰ（配列番号４０）、ＨＰＩＫ（配列番号４１）、ＬＰＶＰ（配列番号４２）、ＭＰＬＷ（配列番号１６）、ＧＰＦＰ（配列番号４３）、ＰＬＬＱ（配列番号４４）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＡＰＦＰＥ（配列番号４６）、ＬＰＱＹＬ（配列番号４７）、ＬＰＶＰＱ（配列番号４８）、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＡＰＦＰＥＶＦ（配列番号５０）、ＧＰＦＰＩＩＶ（配列番号３２）、ＥＭＰＦＰＫ（配列番号５１）、ＰＱＳＶＬＳ（配列番号５２）、ＹＶＰＥＰＦ（配列番号５３）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、及びＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）からなる群、又はそれらの２種以上の混合物から選択される。特に、これらのペプチドは、非常に強力なＤＰＰ−ＩＶ阻害性の化合物であることが見出された（例えば、実施例１を参照）。さらに、別のペプチド、すなわち、ＬＦ（配列番号５７）、ＬＬ（配列番号５８）、ＩＩ（配列番号５９）、ＬＣ（配列番号６０）及びＶＴＫＣＣＴＥ（配列番号５６）も、ＤＰＰ−ＩＶ阻害性の化合物であることが見出されたことに留意されたい。ＤＰＰ−ＩＶ阻害アッセイを、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施した。それに従って、ＤＰＰ−ＩＶ阻害活性を有するものとしている。しかし、中等度のＤＰＰ−ＩＶ阻害活性しか示さない化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、相当に向上した効果を示すことがあるという事実が、当業者には知られている。ペプチドは、上記で議論したように、３〜７個のアミノ酸からなる長さを有するのが好ましい。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
好ましい実施形態では、上記で議論した同一の理由から、本発明による単離ペプチドは、ＶＰＹＰＱ（配列番号４９）、ＶＰＬＧＴＱ（配列番号５４）、ＬＰＶＰＱＫ（配列番号５５）、ＫＶＬＰ（配列番号４５）、ＬＰＬ（配列番号２）及びＩＰＩ（配列番号１）からなる群から選択され、又は本発明による混合物は、当該の群の２種以上から選択される。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
【表２】
2008525430.tif 000002