【手続補正書】
【提出日】平成23年8月5日(2011.8.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
基体と、該基体の表面に存在する重合体と、該重合体に結合する第一の標的物質捕捉体とを有し、前記重合体が、下記一般式（１）で示されるカルボキシベタインモノマーの重合体からなり、前記重合体が有するカルボキシル基のうちの一部に、前記第一の標的物質捕捉体が結合しており、前記重合体が有するカルボキシル基のうちの前記第一の標的物質捕捉体が結合していないカルボキシル基の少なくとも一部に一般式（２）に示される化合物が結合していることを特徴とする構造体。
【化１】
2009069141.tif 000001
（式中、Ｒ１は水素原子又はメチル基である。Ｒ２およびＲ３は各々独立にメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基のいずれかから選ばれる基である。Ｘは酸素原子もしくはＮＨである。ａは１以上５以下の整数である。ｂは１以上４以下の整数である。）
【化２】
2009069141.tif 000002
（式中、ｎは１以上４以下の整数であり、且つｎ＋ｂは２以上５以下の整数である。Ｙは、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈのうちのいずれかの基である。また、メチレン基の水素原子は、水酸基、メチル基、ヒドロキシメチル基で置換されていても良い。）
【請求項２】
前記一般式（２）に記載の化合物が、アミノメタンスルホン酸、硫酸モノアミノエチルのいずれかであることを特徴とする請求項１に記載の構造体。
【請求項３】
前記一般式（１）に記載の化合物が、下記一般式（３）に記載の化合物であることを特徴とする請求項１または２に記載の構造体。
【化３】
2009069141.tif 000003
（式中、Ｒ１は水素原子又はメチル基である。Ｒ２およびＲ３は各々独立にメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基のいずれかから選ばれる基である。ａは１以上５以下の整数である。ｂは１以上４以下の整数である。）
【請求項４】
前記一般式（１）に記載の化合物が、下記の化学式（Ａ）に記載の化合物であり、前記一般式（２）に記載の化合物が、アミノメタンスルホン酸、硫酸モノアミノエチルのいずれかであることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の構造体。
【化４】
2009069141.tif 000004
【請求項５】
検出領域を有する基体と、該基体の表面に存在する重合体と、該重合体に結合する第一の標的物質捕捉体とを有し、前記重合体が、下記一般式（１）で示されるカルボキシベタインモノマーの重合体からなり、前記重合体が有するカルボキシル基のうちの一部に、前記第一の標的物質捕捉体が結合しており、前記重合体が有するカルボキシル基のうちの前記第一の標的物質捕捉体が結合していないカルボキシル基の少なくとも一部に一般式（２）に示される化合物が結合していることを特徴とする標的物質検出素子。
【化５】
2009069141.tif 000005
（式中、Ｒ１は水素原子又はメチル基である。Ｒ２およびＲ３は各々独立にメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基のいずれかから選ばれる基である。Ｘは酸素原子もしくはＮＨである。ａは１以上５以下の整数である。ｂは１以上４以下の整数である。）
【化６】
2009069141.tif 000006
（式中、ｎは１以上４以下の整数であり、且つｎ＋ｂは２以上５以下の整数である。Ｙは、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈのうちのいずれかの基である。また、メチレン基の水素原子は、水酸基、メチル基、ヒドロキシメチル基で置換されていても良い。）
【請求項６】
請求項５に記載の標的物質検出素子と、標識物質と第二の標的物質捕捉体とからなる標識材料と、からなることを特徴とする標的物質検出キット。
【請求項７】
前記検出領域が、磁性物質を検出することができる検出領域であり、前記標識物質が磁性物質であることを特徴とする請求項６に記載の標的物質検出キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
（式中、ｎは１以上４以下の整数であり、且つｎ＋ｂは２以上５以下の整数である。Ｙは、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈのうちのいずれかの基である。また、メチレン基の水素原子は、水酸基、メチル基、ヒドロキシメチル基で置換されていても良い。）
前記一般式（２）に記載の化合物が、アミノメタンスルホン酸、硫酸モノアミノエチルのいずれかであることが好ましい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
前記一般式（１）に記載の化合物が、下記の化学式（Ａ）に記載の化合物であり、前記一般式（２）に記載の化合物が、アミノメタンスルホン酸、硫酸モノアミノエチルのいずれかであることが好ましい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
（式中、ｎは１以上４以下の整数であり、且つｎ＋ｂは２以上５以下の整数である。Ｙは、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈのうちのいずれかの基である。また、メチレン基の水素原子は、水酸基、メチル基、ヒドロキシメチル基で置換されていても良い。）
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
なお、一般式（２）で示される化合物４は、言い換えると、以下の一般式（５）〜（９）のいずれかに示される化合物である。これらのうち、一般式（５）、（８）、（９）で示される化合物は参考例である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１００】
（式中、ｎは１以上４以下の整数であり、且つｎ＋ｂは２以上５以下の整数である。Ｙは、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈのうちのいずれかの基である。また、メチレン基の水素原子は、水酸基、メチル基、ヒドロキシメチル基で置換されていても良い。）
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２８】
本ＳＰＲ装置において、タンパク吸着による変化量１ＲＵ＝１ｐｇ／ｍｍ２とすることができるため、この測定結果をＩｇＧの非特異吸着量として図５のように示した。図５の結果から、本発明である化学式３４から化学式３７（ただし、化学式３４、３５は参考例）の非特異吸着防止膜におけるＩｇＧの非特異吸着量は、従来技術である化学式３８の非特異吸着防止膜のそれと比較すると少ないことから、非特異吸着防止能が向上していることが確認された。
なお、以下の方法によって、構造体および磁気バイオセンサを得ることもできる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
実施例２（参考例）
本実施例は、第一の標的物質捕捉体としてＰＳＡ（前立腺特異抗原）を捕捉する一次抗体を含む非特異吸着防止膜が検出領域に形成された磁気バイオセンサと、第二の標的物質捕捉体としてＰＳＡを捕捉する二次抗体を備えたマグネタイトからなる標識材料（磁性標識）を作製し、磁気バイオセンサとしてＰＳＡを検出する例である。尚、磁気バイオセンサの検出方式としては、磁気抵抗効果素子を使用する。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５２】
実施例５（参考例）
実施例２の化学式１２の化合物を化学式１８の化合物に替え、非特異吸着防止膜に含まれる未反応のスクシンイミド基を失活させて、化学式１９に示すような分子内塩構造に変換する。その後、実施例２と同様にＰＳＡの検出を行うと、磁気バイオセンサにおける検出領域の非特異吸着防止膜では、重合体の側鎖の電荷が中性に保持されている。このことから、検体に含まれる夾雑物や標的物質の非特異吸着を防止することができ、標的物質を高感度に検出することができる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５５】
実施例６（参考例）
実施例２の化学式１２の化合物を化学式２０の化合物に替え、非特異吸着防止膜に含まれる未反応のスクシンイミド基を失活させて、化学式２１に示すような分子内塩構造に変換する。その後、実施例２と同様にＰＳＡの検出を行うと、磁気バイオセンサにおける検出領域の非特異吸着防止膜では、重合体の側鎖の電荷が中性に保持されている。このことから、検体に含まれる夾雑物や標的物質の非特異吸着を防止することができ、標的物質を高感度に検出することができる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５８】
実施例７（参考例）
実施例２のカルボキシベタインモノマー（化学式１１）を化学式２２で示されるカルボキシベタインモノマーに替え、更に、化学式１２の化合物を化学式２３の化合物に替え、非特異吸着防止膜に含まれる未反応のスクシンイミド基を失活させて化学式２４に示すような分子内塩構造に変換する。尚、本実施例の重合体の数平均分子量が８９０００で、分子量分布が１．１３であり、重合体のグラフト密度は、０．６８分子／ｎｍ２である。実施例２と同様にＰＳＡの検出を行うと、磁気バイオセンサにおける検出領域の非特異吸着防止膜では、重合体の側鎖の電荷が中性に保持されている。このことから、検体に含まれる夾雑物や標的物質の非特異吸着を防止することができ、標的物質を高感度に検出することができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６８】
実施例１０（参考例）
実施例７の化学式２３の化合物を化学式２９の化合物に替え、非特異吸着防止膜に含まれる未反応のスクシンイミド基を失活させて、化学式３０に示すような分子内塩構造に変換する。その後、実施例７と同様にＰＳＡの検出を行うと、磁気バイオセンサにおける検出領域の非特異吸着防止膜では、重合体の側鎖の電荷が中性に保持されている。このことから、検体に含まれる夾雑物や標的物質の非特異吸着を防止することができ、標的物質を高感度に検出することができる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７１】
実施例１１（参考例）
実施例７の化学式２３の化合物を化学式３１の化合物に替え、非特異吸着防止膜に含まれる未反応のスクシンイミド基を失活させて、化学式３２に示すような分子内塩構造に変換する。その後、実施例７と同様にＰＳＡの検出を行うと、磁気バイオセンサにおける検出領域の非特異吸着防止膜では、重合体の側鎖の電荷が中性に保持されている。このことから、検体に含まれる夾雑物や標的物質の非特異吸着を防止することができ、標的物質を高感度に検出することができる。