(57)【要約】  本明細書には、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの方法および組成物、並びに哺乳動物におけるＰＩ−３キナーゼ活性を阻害する際のそれらの使用および患者における線維化症状の処置が記載される。【選択図】  図３Ａ
2012523429.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする個体にＰＩ−３キナーゼインヒビターを投与する工程を含む、軽度又は中程度又は重度の肺線維症を処置する方法。
【請求項２】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、ＰＩ−３キナーゼアルファ、ＰＩ−３キナーゼベータ、ＰＩ−３キナーゼデルタ若しくはＰＩ−３キナーゼガンマ、またはそれらの組み合わせを選択的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、ＰＩ−３キナーゼアルファ若しくはＰＩ−３キナーゼベータ、またはそれらの組み合わせを選択的に阻害することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、ＰＩ−３キナーゼの可逆的阻害剤であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、ＰＩ−３キナーゼの不可逆阻害剤であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記肺線維症が、特発性肺線維症であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記肺線維症が、石綿肺、嚢胞性線維症、感染、環境アレルゲンへの接触、肺移植、自己免疫性疾患に関係しているか、または前記肺線維症が、薬剤性の肺線維症であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、肺線維症の進行を低減、または逆戻り、または減少させることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、進行性の体重喪失を防ぐことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、肺力学におけるＴＧＦアルファに依存する変化の進行を減少させることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが、肺線維症の確立を防ぐことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが経口投与されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターが吸入可能な製剤として投与されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
治療上有効な量のウォルトマンニンまたはウォルトマンニンアナログを、それを必要とする個体に投与する工程を含む、線維化症状を伴うまたは線維化症状を有している疑いのあると診断された個体における線維化症状を処置する方法。
【請求項１５】
前記ウォルトマンニンアナログが、以下の式：
【化１】
2012523429.tif 000011
式中、
−−−は、任意の結合であり；
ｎは１−６であり；
Ｙはヘテロ原子であり；
Ｒ１及びＲ２は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択され、又はＲ１及びＲ２は、それらが付いている原子と共にヘテロシクロアルキル基を形成し；
Ｒ３は、存在しないか、Ｈ、又はＣ１−Ｃ６の置換又は非置換のアルキルであり；
Ｒ４は、（Ｃ＝Ｏ）Ｒ５、（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ５、（Ｓ＝Ｏ）Ｒ５、（ＳＯ２）Ｒ５、（ＰＯ３）Ｒ５、（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ５Ｒ６であり；
Ｒ５は、置換又は非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり；及び
Ｒ６は、置換又は非置換のＣ１−Ｃ６アルキルである、
の化合物であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
式ＩＡまたは式ＩＢの前記化合物が、以下：
【化２】
2012523429.tif 000012
式中、Ｙはヘテロ原子であり、並びにＲ１及びＲ２は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択される、
から選択されることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
Ｙが窒素および硫黄から選択されるヘテロ原子であることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記Ｒ１およびＲ２が不飽和のアルキルであることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記ウォルトマンニンアナログがＰＩ−３キナーゼインヒビターであることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターがＰＸ−８６６であることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＰＩ−３キナーゼインヒビターがＰＸ−８６７であることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記線維化症状が、軽度、中程度、又は重度の、肺線維症、嚢胞性線維症、眼線維症、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、骨線維症、線維化性結腸疾患、後腹膜線維症、間質性肺炎、肺内の進行性塊状線維症、ケロイド、強皮症、瘢痕肥大、腎臓線維症、腸線維症、肝臓線維症、線維化性の胆汁うっ滞性肝炎、腎原性全身性線維症、臓器移植に関係する線維症、結合線維組織増殖症候群、又はアナフィラキシーショック線維症であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
前記線維化症状が、軽度、中程度、又は重度の特発性肺線維症であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
前記線維化症状が、石綿肺、嚢胞性線維症、感染、環境アレルゲンへの接触、自己免疫性疾患に関連した肺線維症、又は薬剤性の肺線維症であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項２５】
前記線維化症状が、臓器移植に関連することを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００９年４月９日に出願の米国仮特許出願第６１／１６７，９０５号及び２００９年８月２１日に出願の米国仮特許出願第６１／２３５，７４０号の利益を主張するものであり、これら全ては、全体において引用することにより本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
組織修復過程の間の過剰な結合組織の沈着は線維症を引き起こす。幾つかの例において、異常な及び／又は過剰な線維結合組織が、例えば、傷害、疾患又は感染のために失われた組織の上に広がる又はその組織に取って代わるとき、線維症は発症する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本明細書には、ウォルトマンニン又はウォルトマンニンアナログをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、結合線維組織増殖症候群を処置する方法が提供される。本明細書にはまた、ＰＩ−３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）インヒビターをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、肺線維症を処置する方法が記載される。本明細書にはさらに、ウォルトマンニン又はウォルトマンニンアナログをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、肺線維症を処置する方法が記載される。幾つかの例において、線維症は、器官における異常な線維結合組織の進行に関係する。幾つかの例において、線維症は、影響を受けた器官において瘢痕化を引き起こし、それにより、深部器官で機能的及び／又は構造的な構成（ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ）を妨害する。幾つかの例において、線維症は、臓器移植及び／又は臓器同種移植片の手術後に、器官において生じる。幾つかの例において、ＰＩ−３キナーゼの活性は、本明細書に記載されるように、結合線維組織増殖症候群の発症及び／又は進行に関係する。
【０００４】
従って、本明細書には、ＰＩ−３キナーゼの活性を低減又は部分的に低減する方法が記載され、それによって、線維症を逆戻りさせる（ｒｅｖｅｒｓｉｎｇ）又は線維症の進行を遅らせる又は（例えば、臓器移植後の）線維症の確立（ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ）を予防する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるウォルトマンニンアナログは、ＰＩ−３キナーゼインヒビターである。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、可逆的なＰＩ−３キナーゼインヒビターである。他の実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、不可逆的なＰＩ−３キナーゼインヒビターである。
【０００５】
本明細書には、幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、軽度又は中程度又は重度の肺線維症を処置する方法が提供される。
【０００６】
幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、ＰＩ−３キナーゼアルファ、ＰＩ−３キナーゼベータ、ＰＩ−３キナーゼデルタ又はＰＩ−３キナーゼガンマ、又はそれらの組み合わせを選択的に阻害する。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、ＰＩ−３キナーゼアルファ又はＰＩ−３キナーゼベータ又はそれらの組み合わせを選択的に阻害する。
【０００７】
幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、ＰＩ−３キナーゼの可逆的インヒビターである。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、ＰＩ−３キナーゼの不可逆的インヒビターである。
【０００８】
幾つかの実施形態において、肺線維症は特発性肺線維症である。幾つかの実施形態において、肺線維症は、石綿症、嚢胞性線維症、感染症（例えば、肺炎）、環境アレルゲン（例えば、炭塵、石綿、たばこの煙、ディーゼル排気、オゾン、産業排気からの微粒子）への接触、肺移植、自己免疫性疾患（例えば、強皮症）に関係する、又は肺線維症は、薬物誘発性の肺線維症である。
【０００９】
上述される方法の幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの投与は、肺線維症の進行を低減又は逆戻り又は減少させる。上述される方法の幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの投与は、進行性の体重損失を防ぐ。上述される方法の幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの投与は、肺力学におけるＴＧＦ−アルファ−依存の変化の進行を遅らせる。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの投与は、肺線維症の確立を防ぐ。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、予防的に（例えば、肺移植前に）投与される。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターは、治療上（例えば、軽度の又は中程度又は重度の肺線維症の発症後に）投与される。
【００１０】
方法の幾つかの実施形態において、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターは、経口投与される。方法の幾つかの実施形態において、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターは、吸入可能な製剤として投与される。
【００１１】
本明細書にはまた、治療上有効な量のウォルトマンニンアナログをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、結合線維組織増殖症候群を患っていると診断された又はその疑いのある個体における、結合線維組織増殖症候群を処置する方法が提供される。
【００１２】
幾つかの実施形態において、ウォルトマンニンアナログは以下の式の化合物である：
【００１３】
【化１】
2012523429.tif 000003
【００１４】
式中、
−−−は任意の結合であり；
nは１−６であり；
Yはヘテロ原子であり；
R1及びR2は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択される、又はR1及びR2は、それらに付いている原子と共にヘテロシクロアルキル基を形成し；
R3は、存在しないか、H、又はC1−C6の置換又は非置換のアルキルであり；
R4は、（C＝O）R5、（C＝O）OR5、（S＝O）R5、（SO2）R5、（PO3）R5、（C＝O）NR5R6であり；
R5は、置換又は非置換のC1−C6アルキルであり；及び
R6は、置換又は非置換のC1−C6アルキルである。
【００１５】
幾つかの実施形態において、式ＩＡ又は式ＩＢの化合物は、以下から選択される：
【００１６】
【化２】
2012523429.tif 000004
【００１７】
式中、Yはヘテロ原子であり、R1及びR2は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択される。
【００１８】
幾つかの実施形態において、Yは、窒素及び硫黄から選択されるヘテロ原子である。幾つかの実施形態において、R1及びR2は、不飽和のアルキルである。幾つかの実施形態において、ウォルトマンニンアナログは、ＰＩ−３キナーゼインヒビターである。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターはＰＸ−８６６である。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビターはＰＸ−８６７である。
【００１９】
幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群は、軽度、中程度、又は重度の肺線維症、嚢胞性線維症、眼線維症（例えば、緑内障ろ過手術後の瘢痕化）、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、骨線維症、線維化性結腸疾患、後腹膜線維症、間質性肺炎、肺内の進行性塊状線維症、ケロイド、強皮症、肥大性瘢痕、腎臓線維症、腸線維症、肝臓線維症、線維化性の胆汁うっ滞性肝炎、腎原性全身性線維症、臓器移植に関係する線維症、結合線維組織増殖症候群、又はアナフィラキシーショックの線維症である。
【００２０】
幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群は、軽度、中程度、又は重度の特発性肺線維症である。幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群は、石綿症、嚢胞性線維症、感染、環境アレルゲンへの接触、肺移植、自己免疫性疾患に関係する肺線維症である、又は結合線維組織増殖症候群は、薬物誘発性の肺線維症である。幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群は、臓器移植と関係する。
【００２１】
本明細書に記載される方法、化合物、及び組成物の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明白となる。しかしながら、詳細な説明と具体的な実施例は、具体的な実施形態を示しているが、例示目的としてのみ与えられることを理解されたい。本明細書に言及される全ての引用は、特許、特許出願、及び公報を含み、言及される目的のための引用により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
本発明の新しい特徴は、添付の特許請求の範囲内に特に明記される。本発明の特徴及び利点のより良い理解は、本発明の原理が利用される、実例となる実施形態を明記する以下の詳細な説明、及び以下の添付図面への言及によって得られる：
【００２３】
【図１Ａ】図１Ａは、本開示に従った典型的なウォルトマンニンアナログ及び代謝物質の構造式を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本開示に従った典型的なウォルトマンニンアナログ及び代謝物質の構造式を示す。
【図２Ａ】図２は、ＰＸ−８６６が、ＴＧＦα誘発性のＡｋｔのリン酸化（Ｐ−Ａｋｔ）を阻害することを示す。ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスにおける、Ｐ−Ａｋｔレベルのウエスタンブロット解析は、Ｄｏｘ処置された単一の導入遺伝子（ＣＣＳＰ／−）のコントロールと比較して、Ｄｏｘ誘発性のＴＧＦα発現の１日後に５倍を超えて増加した。ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスのＰＸ−８６６での前処置は、代表的なイムノブロッティング（Ａ）及びデンシトメトリー解析（Ｂ）によって実証されるように、増加したＡｋｔのリン酸化を妨げた。値は、各群において、平均±ＳＥ、n＝６である。ＣＣＳＰ／−コントロール及びＰＸ−８６６−処置マウスと比較して、＊Ｐ＜０．０５である。
【図２Ｂ】図２は、ＰＸ−８６６が、ＴＧＦα誘発性のＡｋｔのリン酸化（Ｐ−Ａｋｔ）を阻害することを示す。ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスにおける、Ｐ−Ａｋｔレベルのウエスタンブロット解析は、Ｄｏｘ処置された単一の導入遺伝子（ＣＣＳＰ／−）のコントロールと比較して、Ｄｏｘ誘発性のＴＧＦα発現の１日後に５倍を超えて増加した。ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスのＰＸ−８６６での前処置は、代表的なイムノブロッティング（Ａ）及びデンシトメトリー解析（Ｂ）によって実証されるように、増加したＡｋｔのリン酸化を妨げた。値は、各群において、平均±ＳＥ、n＝６である。ＣＣＳＰ／−コントロール及びＰＸ−８６６−処置マウスと比較して、＊Ｐ＜０．０５である。
【図３Ａ】図３Ａは、ＰＸ−８６６が、肺線維症の確立を防ぐことを示す。４週間のＤｏｘに続いて、コントロールの及びＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスからの肺の切片を、トリクロムで染色した（Ａ）。ＴＧＦα誘発の開始にＰＸ−８６６を投与された、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスは、ビヒクル処置のＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、線維症の著しい減衰を示した。顕微鏡写真は２匹の別々の動物からのものであり、各群における５〜７匹のマウスからの肺を表している。顕微鏡写真は全て、同じ倍率で撮られ、目盛は２００μｍである。肺のコラーゲン含有量は、方法（Methods）に記載されるように、トランスジェニックマウスの肺から測定された。ＴＧＦα誘発の時に毎日投与されたＰＸ−８６６は、肺コラーゲンの増加を防いだ（Ｂ）。値は、平均±ＳＥである。ＣＣＳＰ／−コントロール及びＰＸ−８６６−処置マウスと比較して、＊ｐ＜０．０５である。ビヒクルで処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、＋ｐ＜０．０５である。
【図３Ｂ】図３Ａは、ＰＸ−８６６が、肺線維症の確立を防ぐことを示す。４週間のＤｏｘに続いて、コントロールの及びＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスからの肺の切片を、トリクロムで染色した（Ａ）。ＴＧＦα誘発の開始にＰＸ−８６６を投与された、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスは、ビヒクル処置のＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、線維症の著しい減衰を示した。顕微鏡写真は２匹の別々の動物からのものであり、各群における５〜７匹のマウスからの肺を表している。顕微鏡写真は全て、同じ倍率で撮られ、目盛は２００μｍである。肺のコラーゲン含有量は、方法（Methods）に記載されるように、トランスジェニックマウスの肺から測定された。ＴＧＦα誘発の時に毎日投与されたＰＸ−８６６は、肺コラーゲンの増加を防いだ（Ｂ）。値は、平均±ＳＥである。ＣＣＳＰ／−コントロール及びＰＸ−８６６−処置マウスと比較して、＊ｐ＜０．０５である。ビヒクルで処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、＋ｐ＜０．０５である。
【図４】図４は、ＰＸ−８６６が、肺機能におけるＴＧＦα依存の変化を防ぐことを示す。肺力学は、方法に記載されるように測定された。ＰＸ−８６６は、ＴＧＦα誘発の時に毎日投与され、４週間のＤｏｘを受けている、ビヒクル処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較して、気道抵抗、気道及び組織のエラスタンスの増加、及びコンプライアンスの減少を防いだ。ＣＣＳＰ／−コントロール及びＰＸ−８６６−処置マウスと比較して、＊ｐ＜０．０５である。データは、各群において６〜１０匹のマウスから導き出された。
【図５】図５は、ＰＸ−８６６が、進行性の体重損失を防ぐことを示す。確立された線維症において、ＰＩ３Ｋの阻害の有効性を評価するために、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスは、４週間のＤｏｘの後にＰＸ−８６６で処置され、更に４週間Ｄｏｘを与え続ける（ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ｏｎ Ｄｏｘ）。治療プロトコルは、パネルにおいて概略的に表わされる（Ａ）。コントロールには、ビヒクルで処置され、更に４週間Ｄｏｘを与え続ける、ＣＣＳＰ／−及びＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスが含まれた。マウスについては、処置中に毎週体重を量った。８週間のＴＧＦαのＤｏｘ誘発性の発現は、ビヒクル処置マウスにおける進行性の体重損失を引き起こし（赤のライン）、一方で、ＴＧＦα誘発の４週間後にＰＸ−８６６で処置されたマウスは、体重に変化はなかった（緑のライン）が、重さはＣＣＳＰ／−コントロール（青のライン）、及び４週間のＤｏｘを受け、その後、Ｄｏｘを取り除かれ（Ｔａｋｅｎ ｏｆｆ Ｄｏｘ）、４週間のビヒクルで処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスの下のままであった（金のライン）（Ｂ）。ＣＣＳＰ／−コントロールマウス、及びＤｏｘを与え続けた及び取り除いた（ｏｎ ａｎｄ ｏｆｆ Ｄｏｘ）ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＊ｐ＜０．０５であり；ＰＸ−８６６−処置のＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＃ｐ＜０．０５である。データは１群当たり１０匹のマウスから導き出された。
【図６Ａ】図６は、ＰＸ−８６６が、肺線維症の進行を低下させることを示す。ＴＧＦα誘発の開始の４週間後にＰＸ−８６６を投与されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウス、及びＤｏｘを取り除かれたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスの両方は、ビヒクル処置のＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、線維症の減衰を示した（図６Ａ）。顕微鏡写真は、外膜領域（上部）及び肺胞領域（底部）を有する胸膜面に焦点を合わせた２匹の別々の動物からのものである。顕微鏡写真は全て、同じ倍率で撮られ、各群における６匹のマウスからの肺を表している。ＰＸ−８６６−処置マウスにおける肺コラーゲンは、４週間後にＤｏｘを取り除かれたマウスと比較して、変化はなかった（図６Ｂ）が、ＣＣＳＰ／−コントロールマウスと比較すると高いままであった。＊ｐ＜０．０５、ＣＣＳＰ／−コントロールマウス、及びＤｏｘを与え続けた及び取り除いたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＊ｐ＜０．０５であり；ビヒクル処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＃ｐ＜０．０５である。データは、１群当たり１０匹のマウスから導き出された。
【図６Ｂ】図６は、ＰＸ−８６６が、肺線維症の進行を低下させることを示す。ＴＧＦα誘発の開始の４週間後にＰＸ−８６６を投与されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウス、及びＤｏｘを取り除かれたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスの両方は、ビヒクル処置のＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、線維症の減衰を示した（図６Ａ）。顕微鏡写真は、外膜領域（上部）及び肺胞領域（底部）を有する胸膜面に焦点を合わせた２匹の別々の動物からのものである。顕微鏡写真は全て、同じ倍率で撮られ、各群における６匹のマウスからの肺を表している。ＰＸ−８６６−処置マウスにおける肺コラーゲンは、４週間後にＤｏｘを取り除かれたマウスと比較して、変化はなかった（図６Ｂ）が、ＣＣＳＰ／−コントロールマウスと比較すると高いままであった。＊ｐ＜０．０５、ＣＣＳＰ／−コントロールマウス、及びＤｏｘを与え続けた及び取り除いたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＊ｐ＜０．０５であり；ビヒクル処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較すると、＃ｐ＜０．０５である。データは、１群当たり１０匹のマウスから導き出された。
【図７】図７は、ＰＸ−８６６が、肺力学においてＴＧＦα依存の変化の進行を遅らせることを示す。Ｄｏｘでの処置の４週間後にＰＸ−８６６を投与された、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスは、８週間のＤｏｘを受けている、ビヒクル処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較して、気道抵抗、及び気道及び組織のエラスタンスの増加を減少させ、コンプライアンスの減少を抑えることを示した。ＰＸ−８６６マウスにおける肺力学は、コントロールの及び４週間ＤｏｘのないＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、著しく変更された。ＣＣＳＰ／−コントロールマウス、及びＤｏｘを与え続けた及び取り除いたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較して、＊ｐ＜０．０５であり；ＰＸ−８６６−処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαトランスジェニックマウスと比較して、＃ｐ＜０．０５である。データは、１群当たり１０匹のマウスから導き出された。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本明細書には、ＰＩ−３キナーゼインヒビターを含む、化合物、医薬組成物及び薬剤（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物）、及びＰＩ−３キナーゼ活性に関係する疾患又は疾病を処置又は予防するための化合物などを使用する方法が記載される。本明細書にはまた、幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼ活性を阻害又は部分的に阻害する化合物（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物）、及びＰＩ−３キナーゼ活性に関係する結合線維組織増殖症候群の症状を逆戻りさせる又は緩和するための化合物及び組成物などを使用する方法が記載される。本明細書にはまた、ウォルトマンニンアナログ、及び結合線維組織増殖症候群の処置のためのウォルトマンニンアナログを含む、医薬組成物及び薬剤が提供される。
【００２５】
幾つかの例において、線維症は、フィブロネクチンを発現する筋線維芽細胞及び／又は線維芽細胞の増殖に関係する。幾つかの例において、影響を受けた器官におけるフィブロネクチンを発現する筋線維芽細胞及び／又は線維芽細胞の生存は、線維症の進行の決定因子である。幾つかの例において、フィブロネクチン媒介の付着は、ＰＩ−３キナーゼのシグナル伝達経路を活性化し、線維症の発症及び／又は進行の一因である。幾つかの例において、器官構造における変更されたフィブロネクチンの発現及び／又は分解は、線維症の病理学的兆候に関係する。
【００２６】
幾つかの例において、ゲフィチニブ又はエルロチニブなどのＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビターで処置される肺癌の患者は、薬物誘発性の間質性肺疾患を発症する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、間質性肺疾患などの薬物誘発性の結合線維組織増殖症候群を発症する患者の処置（例えば、線維症の低減又は逆戻り）を可能にする。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される処置の方法は、現在の処置の方法（例えば、免疫抑制剤、ＥＦＧＲチロシンキナーゼインヒビターでの処置）では効果のない結合線維組織増殖症候群の処置を可能にする。
【００２７】
ＰＩ−３キナーゼは、ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の３位の水酸基をリン酸化することが可能な、関係する酵素のファミリーである。それらは、細胞成長、増殖、分化、運動性、生存及び細胞内移動を含む、細胞機能の種々のリストに関連付けられる。これらの機能の多くは、プロテインキナーゼＢ（Ａｋｔ）を活性化するためのＰＩ−３キナーゼの能力に関連する。ＰＩ−３キナーゼのｐ１１０δアイソフォームの遺伝子の及び薬理学的な不活性化は、この酵素がＴ細胞、Ｂ細胞、肥満細胞及び好中球の機能にとって重要であることを明らかにした。幾つかの例において、ＰＩ−３キナーゼは、炎症反応の開始及び／又は維持を含む免疫系の反応において役割を果たす。幾つかの例において、ＰＩ−３キナーゼのシグナル伝達経路の阻害は細胞外マトリックスの沈着を阻害し、線維形成促進（profibrogenic）の因子の発現を減らす。線維形成促進の因子は、限定されないが、結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、トランスフォーミング成長因子アルファ（ＴＧＦ−α）、トランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）などを含む。
【００２８】
幾つかの例において、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔは、ＥＧＦＲ誘発性の腫瘍形成過程を媒介する、主要な下流シグナル伝達経路であり、ＴＧＦα誘発性の線維症の症状（例えば、肺線維症）を媒介する。幾つかの例において、活発な線維形成の間の肝細胞におけるＰＩ−３キナーゼのシグナル伝達の阻害は、細胞外マトリックスの沈着を阻害し、線維形成促進の因子の発現を減らすため、肝線維症の進行を逆戻り又は低減させる。Ｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００９，５０，１５１２−２３を参照。幾つかの例において、α８β１は、線維症及び臓器傷害の他のモデルにおいて筋線維芽細胞上でアップレギュレートされる。幾つかの例において、α８β１を発現する筋線維芽細胞の生存は、ＰＩ−３キナーゼによって媒介される。幾つかの例において、ＰＩ−３キナーゼの阻害は、臓器傷害に関係する持続性の線維症を低減又は逆戻りさせる。Ｆａｒｉａｓ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３２９，２００５，Ｐａｇｅｓ ３０５−３１１を参照。
【００２９】
従って、（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物の投与を介した）ＰＩ−３キナーゼ活性の阻害は、それを必要とする個体において線維症の進行を逆戻りさせる、低減させる、又は遅らせる。加えて、（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物及び／又はウォルトマンニンアナログの投与を介した）ＰＩ−３キナーゼ阻害は、線維症が宣告され、進行した後、確立された線維症を緩和及び／又は処置する。幾つかの実施形態において、（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物及び／又はウォルトマンニンアナログの投与を介した）ＰＩ−３キナーゼ活性の阻害は、結合線維組織増殖症候群にかかりやすい個体（例えば嚢胞性線維症の家族歴を有する個体）において線維症の発症を遅らせる。幾つかの実施形態において、（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物及び／又はウォルトマンニンアナログの投与を介した）ＰＩ−３キナーゼ活性の阻害は、（例えば、臓器移植後の）線維症の発病を減少させる又は予防する。
【００３０】
従って、本明細書には、それを必要とする個体においてＰＩ−３キナーゼの活性を低減又は部分的に低減する方法が記載され、それによって、線維症を逆戻りさせる、又は線維症の進行を遅らせる。幾つかの実施形態において、方法は、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ、ＩＩＢ又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物及び／又はウォルトマンニンアナログ）を、それを必要とする個体に投与する工程を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、可逆的なＰＩ−３キナーゼインヒビターである。他の実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、不可逆的なＰＩ−３キナーゼインヒビターである。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターは、ＰＩ−３キナーゼデルタ又はＰＩ−３キナーゼガンマへの阻害活性と比較して、より効力のあるＰＩ−３キナーゼアルファ又はＰＩ−３キナーゼベータのインヒビターである。
【００３１】
特定の定義
本明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈がはっきりと特に指示していない限り、複数の指示対象を含むことも留意されたい。従って、例えば、「細胞」への言及は、当業者に周知の１以上の細胞及びその同等物などへの言及である。他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての専門及び科学用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるこれらのものと類似又は同等の任意の方法及び物質は、本明細書に記載される実施形態の実施又は試験において使用され得るが、特定の好ましい方法、装置、及び物質がこれより記載される。
【００３２】
本明細書で使用されるように、用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、使用されている数の数値の±１０％を意味する。それ故、約５０％は、４５％〜５５％の範囲内を意味する。「随意の（Ｏｐｔｉｏｎａｌ）」又は「随意に（Ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」は、続いて記載される構造、事象又は状況が生じないかもしれないこと、及びその記載が、事象が生じる及び生じない例を含むことを意味すると受け取られ得る。
【００３３】
治療薬と共に使用されるときの「投与すること」は、直接、標的組織の中又は上に投与するように、治療薬を全身に又は局所に投与すること、又は治療薬が標的である組織に確実に効果を与えるように患者に治療薬を投与することを意味する。従って、本明細書に使用されるように、用語「投与すること（Ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」は、ウォルトマンニンアナログ又はその代謝物質と共に使用されるとき、限定されないが、ウォルトマンニンアナログ又はその代謝物質を標的組織の中又は上に提供すること；例えば、治療薬が標的組織又は細胞に行き渡るような静脈注射によって、ウォルトマンニンアナログ又はその代謝物質を、患者の全身に提供することを含む。組成物を「投与すること」は、注入、局所投与、及び経口投与で、又は他の方法単独で又は他の周知の手法と組み合わせて達成され得る。
【００３４】
本明細書で使用されるように，用語「治療薬（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）」は、患者の望まれない疾病又は疾患を処置、除去、緩和、予防又は改善するために利用される薬剤を意味する。幾つかの実施形態において、治療薬は、本明細書に記載される線維症の症状の処置及び／又は緩和、又は症状の逆戻りに向けられる。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される治療薬は、肺線維症の処置及び／又は肺線維症の症状の緩和又は逆戻りに向けられる。
【００３５】
用語「動物（ａｎｉｍａｌ）」は本明細書に使用されるように、限定されないが、ヒト、及び野生動物、家畜などのヒト以外の脊椎動物を含む。用語「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」及び「被験体（ｓｕｂｊｅｃｔ）」及び「個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）」は、置換え可能で、本開示の化合物で処置され得る任意の生存生物を意味すると受け取られ得る。そのため、用語「患者」および「被験体」は、限定されないが、任意のヒト以外の哺乳動物、任意の霊長類又はヒトを含む。
【００３６】
用語「阻害すること（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」は、症状の発症を防ぐ、症状を緩和する、又は疾患、疾病又は障害を除去するための、本開示の化合物の投与を含む。
【００３７】
「薬学的に許容可能な」により、担体、希釈剤、又は賦形剤は、製剤の他の成分と適合性がなければならず、そのレシピエントに有害であってはならないことが意味される。
【００３８】
用語「医薬組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」は、少なくとも１つの活性成分を含む組成物を意味するものとし、それによって、組成物は、哺乳動物（例えば、限定されないが、ヒト）において、特定の、効果的な結果のための検査に適用可能である。当業者は、活性成分が技術者のニーズに基づく所望の効果的な結果を有しているかどうかを決定するのに適切な技術を理解及び認識するであろう。
【００３９】
本明細書に使用されるような「治療上有効な量」、又は「有効な量」は、研究者、獣医、医師又は他の臨床医によって求められている組織、器官系、動物、個体又はヒトにおける生物学的反応又は薬への反応を引き出す活性化合物又は医薬品の量を指し、１以上の以下のことを含む：（１）疾患を予防すること；例えば、疾患、疾病又は障害にかかりやすいが、疾患の病状又は総体症状をまだ経験又は示していない個体において、疾患、疾病又は障害を予防すること、（２）疾患を阻害すること；例えば、疾患、疾病又は障害の病状又は総体症状を経験している又は示している個体において、疾患、疾病又は障害を阻害すること（即ち、病状又は総体症状の更なる進行を抑えること）、及び（３）疾患を緩和すること；例えば、疾患、疾病又は障害の病状又は総体症状を経験している又は示している個体において、疾患、疾病又は障害を緩和すること（即ち、病状又は総体症状を逆戻りさせること）。そのため、本開示の組成物の「治療上有効な量」又は「有効な量」の限定しない例は、細胞の活性化、移動、又は増殖を阻害する、又は癌を効果的に処置する又は癌の症状を緩和するために使用され得る。
【００４０】
用語「線維症（ｆｉｂｒｏｓｉｓ）」、「結合線維組織増殖症候群（ｆｉｂｒｏｓｉｎｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）」、又は「線維症の症状（ｆｉｂｒｏｔｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）」は、置換え可能に使用される。本明細書に使用されるように、用語「線維症」又は「結合線維組織増殖症候群」又は「線維症の症状」は、急性又は慢性の炎症及び／又は傷害に引き続き起こり、炎症又は傷害の部位での細胞及び／又はコラーゲンの異常蓄積に関係し、限定されないが、心臓、腎臓、関節、肺、又は皮膚などの個体の器官又は組織の線維症を含む症状を指す。用語「線維症」または「結合線維組織増殖症候群」又は「線維症の症状」は、肺線維症、特発性肺線維症、特発性間質性肺炎を含む間質性肺疾患、眼線維症（例えば、加齢黄斑変性症に関係する瘢痕化、又は緑内障ろ過手術後の瘢痕化）、嚢胞性線維症、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、骨線維症、線維化性結腸疾患、後腹膜線維症、間質性肺炎、肺における進行性塊状線維症（石炭労働者じん肺症の合併症）、ケロイド、強皮症、肥大性瘢痕、腎臓線維症（例えば、尿細管間質性線維症）、（例えば、クローン病、炎症性大腸疾患に関係する）腸線維症、肝臓線維症、線維化性の胆汁うっ滞性肝炎、腎原性全身性線維症、結合線維組織増殖症候群、アナフィラキシーショックの線維症などを含む。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の線維症又は結合線維組織増殖症候群は、原因が不明である（特発性）。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の線維症又は結合線組織増殖症候群は、嚢胞性線維症に関係する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の結合線維組織増殖症候群は、自己免疫性疾患、炎症、癌などに関係する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の結合線維組織増殖症候群は、感染症（例えば、肺炎、結核、鳥インフルエンザなど）に関係する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の線維症又は結合線維組織増殖症候群は、臓器移植（例えば、肺移植、肝移植、腎移植）に関係する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の線維症又は結合線維組織増殖症候群は、限定されないが、石綿、炭塵、たばこの煙、ディーゼル排気、オゾン、大気微粒子などを含む、アレルゲン及び／又は環境汚染物質への接触に関係する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される任意の線維症又は結合線維組織増殖症候群は薬物誘発性の線維症である。
【００４１】
本発明の方法は、内科治療及び／又は予防的治療の両方を適切なものとして含む。治療上の及び／又は予防的な効果を得るために投与される化合物の特定の投与量は、例えば、投与される化合物、投与経路、及び処置されている疾病を含む事例を取り巻く、特定の状況によって、もちろん、決定されるであろう。化合物は、広い投与量範囲にわたって有効であり、例えば、１日当たりの投与量は、通常、０．００１から１００ｍｇ／ｋｇまでの範囲内、より一般的には、０．０１から１ｍｇ／ｋｇまでの範囲内にある。しかしながら、投与される有効な量が、処置される疾病、投与される化合物の選択、及び投与の選択される経路を含む、関連する状況に照らして、医師によって決定されることが理解されるであろう。本明細書に記載される化合物の治療上有効な量は、典型的に、生理学的に容認可能な賦形剤の組成物において投与されるとき、組織において有効な全身濃度又は局所濃度を達成するのに十分であるような量である。
【００４２】
本明細書に使用されるような用語「処置（ｔｒｅａｔ）」、「処置される（ｔｒｅａｔｅｄ）」、又は「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、治療処置及び予防的な対策又は予防策の両方を指し、その目的は、望まれない生理学的な疾病、傷害又は疾患を予防する又は遅らせる（減少させる）、又は有益な又は所望の臨床結果を得ることである。本明細書に記載される目的のために、有益な又は所望の臨床結果は、限定されないが、症状の軽減；疾病、傷害又は疾患の範囲の減少；疾病、傷害又は疾患の状態の安定化（即ち、悪化させない）；疾病、傷害又は疾患の発症の遅延又は進行の停滞；疾病、傷害又は疾患の緩和；及び検知可能又は検知不可能であろうと、疾病、傷害又は疾患の（部分的又は全体的な）緩解、又は向上又は改善を含む。処置は、過剰レベルの副作用のない、臨床的に有意な反応を引き出すことを含む。処置はまた、処置を受けない場合に予想される生存と比較して、生存を延長することを含む。
【００４３】
用語、「ウォルトマンニンアナログ（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ ａｎａｌｏｇ）」又は「ウォルトマンニンのアナログ（ａｎａｌｏｇ ｏｆ ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ）」は、ウォルトマンニンにおいて、１以上の原子、官能基、又は下部構造が異なる原子、官能基、又は下部構造に置き換えられた一方で、ウォルトマンニンの機能活性を保持又は改善する、及び／又はＰＫ特性を改善する、及び／又はウォルトマンニンの毒性を低減する、任意の化合物を指す。
【００４４】
「アルキル」基は、脂肪族炭化水素基を指す。「アルキル」基は、置換及び非置換のアルキル基を含む。アルキル基への言及は、「飽和のアルキル」及び／又は「不飽和のアルキル」を含む。アルキル基は、飽和又は不飽和であろうと、分枝の基、直鎖の基、又は環式の基を含む。ほんの一例として、アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソ−ペンチル、ネオ−ペンチル、及びヘキシルを含む。幾つかの実施形態において、アルキル基は、決して限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、ペンチル、ヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。「低級アルキル」は、C1−C6アルキルである。「ヘテロアルキル」基は、アルキル基の炭素の任意の１つを、（例えば、CH2基をNH基又はO基に）付けた適切な数の水素原子を有するヘテロ原子と置換する。
【００４５】
用語「シクロアルキル（ｃｙｃｌｏａｌｋｙｌ）」又は「環式のアルキル（ｃｙｃｌｉｃ ａｌｋｙｌ）」は、単環式又は多環式の非芳香族のラジカルを指し、環を形成する各々の原子（即ち骨格原子）は、炭素原子である。「シクロアルキル」基は、置換及び非置換のシクロアルキル基を含む。様々な実施形態において、シクロアルキルは、飽和、又は部分的に不飽和である。幾つかの実施形態において、シクロアルキルは、芳香環と融合する。幾つかの実施形態において、シクロアルキルは、ヘテロアリール環と融合する。シクロアルキル基は、３乃至１０の環原子を有する基を含む。シクロアルキル基の用例は、限定されないが、以下の部分などを含む：
【００４６】
【化３】
2012523429.tif 000005
【００４７】
単環式のシクロアルキルは、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルを含む。二環式のシクロアルキルは、限定されないが、テトラヒドロナフチル、インダニル、テトラヒドロペンタレンなどを含む。多環式のシクロアルキルは、アダマンタン、ノルボルナンなどを含む。用語、シクロアルキルは、「不飽和の非芳香性のカルボサイクリル」又は「非芳香性の不飽和のカルボサイクリル」を含み、両方とも、本明細書に定義されるように、非芳香性のカルボサイクリルを指し、少なくとも１つの炭素炭素二重結合又は１つの炭素炭素三重結合を含む。
【００４８】
「ヘテロアリサイクリック」基又は「ヘテロシクロ」基又は「ヘテロシクロアルキル」基は、シクロアルキル基を指し、少なくとも１つの骨格環原子は、窒素、酸素及び硫黄から選択されるヘテロ原子である。「ヘテロシクロアルキル」基は、置換及び非置換のヘテロシクロアルキル基を含む。様々な実施形態において、ラジカルは、アリール又はヘテロアリールと融合する。非芳香族ヘテロ環としても言及される、ヘテロシクロ基の用例は以下のものなどを含む：
【００４９】
【化４】
2012523429.tif 000006
【００５０】
用語「ヘテロアリサイクリック」はまた、炭水化物の環状体を全て含み、炭水化物は、限定されないが、単糖類、二糖類、及びオリゴ糖類を含む。
【００５１】
ウォルトマンニンアナログ
ウォルトマンニンは、菌類ペニシリウムのウォルトマンニンの培養液から分離された天然の化合物である。ウォルトマンニンは、キナーゼ上の特定のリジン、パイ（ｐｉ）１０ａ アイソフォームの触媒部位のＡＴＰ結合ポケットのLys802又はパイ１０５アイソフォームのLys883との共有結合相互作用を介して、ＰＩ−３−キナーゼを不可逆的に阻害する。ｐ１１０α、ｐ１１０β、ｐ１１０δ、及びｐ１１０γなどのＰＩ−３キナーゼのほとんどのアイソフォームは、例えば、ウォルトマンニンによって等しく阻害される。しかしながら、ウォルトマンニンは肝臓及び血液の毒性を示し、生物学的に不安定な分子である。中性ｐＨで、３７℃又は０°Ｃのいずれかで水溶液として保存されたサンプルは、フラン環の加水分解の開放によって分解されやすい。フラン環の親電子性は、ウォルトマンニンの阻害活性の中心であることが示されてきた。ＰＩ−３−キナーゼの不可逆阻害は、ウォルトマンニンの位置Ｃ（２０）でのフラン環上のキナーゼの活発なリジンのアタック（ａｔｔａｃｋ）に続くエナミンの形成によって生じる。従って、ウォルトマンニンの分解は、ＰＩ−３キナーゼ上のその阻害活性を妨げる。
【００５２】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるウォルトマンニンのアナログ及び代謝物質は、改善された生物学的安定性及び低減された全身毒性を示す。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるウォルトマンニンのアナログ及び代謝物質は、ＰＩ−３キナーゼインヒビターである。従って、本明細書に記載されるウォルトマンニンアナログの方法及び組成物は、例えば、肺線維症を含む線維症の症状を処置する、改善された方法を可能にする。
【００５３】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される処置の方法に適しているウォルトマンニンアナログは、以下の式ＩＡ又はＩＢの化合物を含む：
【００５４】
【化５】
2012523429.tif 000007
【００５５】
式中、
−−−は任意の結合であり；
nは１−６であり；
Yはヘテロ原子であり；
R1及びR2は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択される、又はR1及びR2は、それらに付いている原子と共にヘテロシクロアルキル基を形成し；
R3は、存在しないか、H、又はC1−C6の置換又は非置換のアルキルであり；
R4は、（C＝O）R5、（C＝O）OR5、（S＝O）R5、（SO2）R5、（PO3）R5、（C＝O）NR5R6であり；
R5は、置換又は非置換のC1−C6アルキルであり；及び
R6は、置換又は非置換のC1−C6アルキルである。
【００５６】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される処置の方法に適しているウォルトマンニンアナログは、以下の式の化合物を含む：
【００５７】
【化６】
2012523429.tif 000008
【００５８】
式中、Yはヘテロ原子であり、R1及びR2は、不飽和のアルキル、非直鎖のアルキル、環式のアルキル、及び置換のアルキルから独立して選択される。
【００５９】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される結合線維組織増殖症候群の処置に適しているウォルトマンニンアナログは、限定されないが、ＰＸ−８６６、ＰＸ−８６７、ＰＸ−８６８、ＰＸ−８７０、ＰＸ−８７１、ＰＸ−８８０、ＰＸ−８８１、ＰＸ−８８２、ＰＸ−８８９、ＰＸ−８９０、ＤＪＭ２−１７０、ＤＪＭ２−１７１、ＤＪＭ２−１７７、ＤＪＭ２−１８１及びそれらの組み合わせから選択された、化合物及び／又はその代謝物質を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される線維性障害の処置に適しているウォルトマンニンアナログは、英国公報第２３０２０２１号に記載される化合物を含み、その化合物は、引用によって本明細書に組み込まれる。
【００６０】
図１は、結合線維組織増殖症候群の処置に有用な、典型的なウォルトマンニンアナログ及びその代謝物質の式を示す。
【００６１】
ＰＩ−３キナーゼインヒビター
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）の処置に適しているＰＩ−３キナーゼインヒビターは、限定されないが、ウォルトマンニンアナログ、ウォルトマンニン代謝物質、ＮＶＰ−ＢＥＺ２３５、ＰＩ−１３０、ＬＹ２９４００２及びオールトランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）を含む。
【００６２】
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される結合線維組織増殖症候群の処置に適しているＰＩ−３キナーゼインヒビターは、本明細書に記載のような式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ及びＩＩＢの化合物を含む。
【００６３】
幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）の処置に適しているＰＩ−３キナーゼインヒビターは、限定されないが、米国特許出願公開第２００５／００３２７２７号、２００７／０２０３０９８号、２００７／０２５９８７６号、２００８／０１８８４２３号、２００９／００４２７７３号、２００７／００２１４４７号、２００８／００３９４５９号、２００８／０３００２３９号、２００９／００１８１３１号、２００９／００２３７４２号、２００９／００２９９９８号、２００９／００４８２５２号、２００９／０１７０８４８号、２００９／０２１５８１８号、２００９／０３０６０７４号、２００９／００４８２５２号、２００８／０３００２３９号、２００９／００１８１３１号、２００９／００２３７４２号、２００９／００４８２５２号、２００９／０１７０８４８号、２００９／０２１５８１８号、２００９／０３０６０７４号に記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビターを含み、それらに記載されるＰＩ−３キナーゼインヒビター化合物は、引用によって本明細書に組み込まれる。
【００６４】
結合線維組織増殖症候群及び処置の方法
肺線維症
本明細書には、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターをそれを必要とする個体に投与する工程を含む、間質性肺疾患を処置する方法が提供される。幾つかの実施形態において、間質性肺疾患は、肺線維症である。幾つかの実施形態において、間質性肺疾患は、特発性肺線維症である。
【００６５】
肺線維症は、多くの小児及び成人の肺疾患における罹患率及び死亡率の一因である。肺線維症を引き起こす臨床疾患は、不均一であり、線維症は、急性呼吸窮迫症候群におけるような急性肺傷害に続き、嚢胞性線維症（ＣＦ）におけるような慢性炎症性疾患から発症する可能性がある、又は特発性肺線維症（ＩＰＦ）におけるように、原因不明に発症する可能性がある。肺線維症の病理的特徴は、基礎疾患プロセスによって変わり得るが、多くの共通する特徴が存在し、それは間充織細胞の増殖、細胞外マトリックスの拡張及び肺実質のリモデリングを含む。本明細書で使用されるように、肺線維症は、特発性肺線維症、びまん性間質性肺線維症、間質性肺臓炎、肺における進行性塊状線維症（石炭労働者じん肺症の合併症）などを含む。また、本明細書に記載される実施形態の範囲内で検討されるのは、嚢胞性線維症などの基礎疾患、又は強皮症などの自己免疫性疾患から生じる肺線維症である。本明細書で使用されるように、肺線維症は、限定されないが、石綿（即ち、石綿肺に関連する肺線維症）、炭塵、たばこの煙、ディーゼル排気、オゾンなどの大気汚染物質、産業排気からの微粒子などを含む、環境アレルゲン又は汚染物質への接触から生じる肺線維症を含む。本明細書で使用されるように、肺線維症は、肺炎などの感染又は任意の他の感染に関係する肺線維症を含む。肺線維症はまた、薬物誘発性の肺線維症（例えば、ブレオマイシンなどの薬物の投与から副作用として生じる線維症）を含む。
【００６６】
従って、本明細書で提供される方法及び組成物は、本明細書に記載される任意の間質性肺障害及び／又は肺性の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。幾つかの実施形態において、間質性肺疾患及び／又は肺性の結合線維組織増殖症候群は、肺における筋線維芽細胞の増殖に関係する。幾つかの実施形態において、それを必要とする個体への１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される式ＩＡ、ＩＡＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）の投与は、肺における筋線維芽細胞の増殖を阻害、又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意の間質性肺疾患及び／又は肺性の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００６７】
ＥＧＦＲ（ＨＥＲ１）は、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３及びＨＥＲ４も含む受容体チロシンキナーゼのタンパク質ファミリーに属する。６つのＥＧＦＲリガンド（ＴＧＦα、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、アンフィレグリン、ベータセルリン及びヘレグリン）は、肺に又は肺細胞内に局在している。活性化リガンドによって、ＥＧＦＲファミリーメンバーは、異なる生物学的能力で様々なホモダイマー又はヘテロダイマーを形成する。ＥＧＦＲの活性化は、種々の細胞機能を制御し、それらの多くは、細胞成長、増殖、分化、移動、アポトーシスからの保護及び形質転換を含む線維形成に関係する。肺上皮においてＴＧＦαを特異的に発現する、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）制御可能なトランスジェニックマウスは、炎症とは無関係である、進行性及び広範囲な、脈管外膜の線維症、気管支周囲の線維症、間質性及び胸膜線維症を示す。これらのマウスの肺におけるＴＧＦαの発現後に観察される遺伝子発現特性は、ヒトにおける肺性の線維症の疾患において見受けられる特性に類似している。
【００６８】
幾つかの例において、ＥＧＦＲ活性の下流のシグナル伝達経路は、ＴＧＦα誘発性の肺線維症を媒介する。細胞外ドメインへのリガンドの結合の後に、受容体のホモダイマー及びヘテロダイマーが形成され、細胞質ドメインにおいて特異残基上の内因性のチロシンキナーゼ活性による、自己リン酸化又はリン酸基転移につながる。リン酸化チロシン残基は、ＲＡＳ／ＲＡＦ／キナーマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）カスケード、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路、ホスホリパーゼＣγ経路及びホスファチジルイノシトール３’−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢ）シグナル伝達経路を含む、多数の下流のエフェクター経路を活性化するシグナル伝達分子のためのドッキング部位になる。ＰＩ３Ｋは、受容体チロシンキナーゼ、Gタンパク質共役受容体又はサイトカイン受容体の活性化に反応して、ホスファチジルイノシトール（３，４，５）−三リン酸塩（ＰＩＰ３）を形成するための、ホスファチジルイノシトール（４，５）−重リン酸塩（ＰＩＰ２）のリン酸化を触媒するシグナル伝達酵素である。ＰＩＰ３は、次々にＡｋｔを活性化し、成長、増殖、移動、生存及びコラーゲン遺伝子の発現を含む線維成長に関係する多くの細胞プロセスに関係している。腫瘍抑制因子ホスファターゼ及びテンシンホモログ（ＰＴＥＮ）は、ＰＩＰ３をＰＩＰ２に脱リン酸化するＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路のマイナス成長調節物質（ｎｅｇａｔｉｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ）である。ＰＴＥＮの薬理学的インヒビターで処置された、ＰＴＥＮハプロ不全のマウス及び野生型マウスの両方は、肺線維症の病因における対立しないＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ活性のためのインビボの役割を支持する、ブレオマイシン誘発性の肺傷害に続く、増大したコラーゲン沈着及び筋線維芽細胞の分化を示す。
【００６９】
幾つかの実施形態において、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターのそれを必要とする個体への投与は、肺細胞においてＥＧＦＲの活性を減少又は抑制する。幾つかの実施形態において、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターのそれを必要とする個体への投与は、ＴＧＦ−αのＥＧＦＲへの結合を減少又は妨害し、それによって、ＰＩ−３キナーゼの下流の活性を阻害又は部分的に阻害する。
【００７０】
ＰＢＫ−ＡｋｔがＥＧＦＲ誘発性の腫瘍形成過程を媒介する主要な下流のシグナル伝達経路であるため、ＰＢＫ−ＡｋｔはＴＧＦα誘発性の肺線維症を媒介し得る。ＰＸ−８６６は、抗腫瘍物質として現在、高度な前臨床開発中であるＰＩ３Ｋの新しいインヒビターである。制御可能なトランスジェニックマウスにおいてＴＧＦα誘発の時にＰＸ−８６６を投与することによる、肺線維症の開始および伝播におけるＰＢＫの役割は、図２乃至７及び実施例１乃至２において本明細書に記載される。
【００７１】
幾つかの例において、ＰＩ３Ｋ以外の追加の下流のシグナル伝達経路は、活性化されたままであり、肺線維症の維持への一因であり続ける。ＥＧＦＲなどのチロシンキナーゼ受容体は、細胞の成長及び増殖を制御するＰＩ３Ｋ及び他の経路を活性化する。幾つかの実施形態において、肺線維症の維持における追加のシグナル伝達経路の活性の、標的とされた治療介入は、肺線維症の併用療法を可能にする。
【００７２】
実施例１乃至２及び図２乃至７は、ＰＩ３ＫインヒビターＰＸ−８６６での処置が、トランスジェニックマウスにおいてＥＧＦＲ媒介の肺線維症及び関係する肺力学の変化を妨げることを示す。増加したＥＧＦＲリガンド及びＥＧＦＲの活性化は、線維性肺疾患を患う患者の幾つかの研究において確認されてきた。増加したＴＧＦαは、ＩＰＦを患った患者の肺洗浄液において検知され、免疫組織化学は、ＴＧＦα及びＥＧＦＲの増加をタイプＩＩの上皮細胞、線維芽細胞及びＩＰＦサンプルの脈管内皮に限局した。増加したＥＧＦＲ及びＥＧＦＲリガンドもまた、嚢胞性線維症、気管支肺異形成及び喘息を患う患者の再構築された組織において確認された。幾つかの例において、ＥＧＦＲ標的の治療は、肺線維症のブレオマイシン、ナフタリン、石綿肺及びオバルブミンのモデルを含む、多くの動物モデルにおいて線維症を阻止する。従って、本明細書に記載される実施形態の範囲内で検討もされるのは、肺線維症の処置のためのＥＧＦＲ標的の治療薬及びＰＩ−３キナーゼモジュレーターを投与する工程を含む、併用療法である。
【００７３】
幾つかの例において、ＥＧＦＲシグナル伝達は間質性肺疾患を媒介し、急性肺傷害の間にサーファクタントタンパク質の発現を維持する。特定の場合において、ＥＧＦＲの阻害は、サーファクタントタンパク質の発現を減少させることにより肺傷害を悪化させる。同時に、これらの発見は、肺のリモデリングに特有である経路を定義するという目標を持って線維症を媒介する、ＥＧＦＲの下流のシグナル伝達経路の更なる分析を支持する。本開示は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔが、肺線維症を媒介するＥＧＦＲ活性の下流の主要なエフェクター経路であることを示す。
【００７４】
ＰＩ３Ｋ経路は、肺線維症の媒介に関係する。ヒト及びマウスの線維芽細胞の両方における研究は、ＰＩ３Ｋ活性が、増加した増殖、コラーゲン合成及び筋線維芽細胞の分化と共に減少したアポトーシスにつながることを示す。ＩＰＦを患う患者から分離された線維芽細胞は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔの異常活性化に関係する減少したＰＴＥＮ発現及び活性、及び増加した増殖を示す。制御可能なＴＧＦβ１トランスジェニックモデルにおける肺線維症は、マウスがＡｋｔインヒビターで処置されたとき、著しく減衰した。
【００７５】
ＴＧＦαトランスジェニックモデルにおける線維症は、ＴＧＦα活性と無関係に発症し、これは、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路が、多数の線維症促進の刺激が間葉の増殖及びマトリックスの沈着の細胞反応を引き出すために集中する、潜在的な合流点を表わし得ることを示唆する。血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）ファミリーは、肺線維症の炎症性のモデルにおいて関係する別の線維症促進のサイトカインファミリーである。ＰＤＧＦは、ＥＧＦＲのように、受容体チロシンキナーゼである２つの受容体を介して作用する。ＥＧＦＲ及びＴＧＦβ１のように、ＰＤＧＦ受容体はＰＩ３Ｋを活性化する。集合的に、これらのデータは、ＰＩ３Ｋを、多数の線維形成のサイトカインが集中する共通経路として更に支持する。
【００７６】
上皮細胞及び間充織細胞の両方は、ＴＧＦαに反応して増殖するが、両方の細胞タイプにおけるＰＩ３Ｋ活性が、線維症につながるかどうかは不明瞭である。Ｐｔｅｎ遺伝子が肺上皮から暫定的に消失されたトランスジェニックマウスは、気管支内腔及び細気管支腔へ突き出た線維血管性コアを伴う、乳頭が並んだ（ｌｉｎｉｎｇ ｐａｐｉｌｌａｅ）富細胞性の上皮細胞によって特徴付けられた際立った上皮過形成に関係する、増加した上皮のＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ活性を示した。しかしながら、ＴＧＦαマウスと異なり、過形成は進行性ではなく、実質線維化は発症せず、これが、線維芽細胞のＰＩ３Ｋ活性がＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ媒介の線維症の媒介において重要であることを示唆した。
【００７７】
最近のデータは、ヒトの線維性肺疾患におけるＰＩ３Ｋ−Ａｋｔの活性を支持する。ＩＰＦ患者からの肺生検の免疫組織学的分析は、線維芽細胞の病巣における増加したリン酸化のＡｋｔを示す。ヒトの線維症の疾患における異常なＰＩ３Ｋシグナル伝達の証拠と結び付けられた、ＴＧＦα及びＴＧＦβトランスジェニックモデルにおけるＰＩ３Ｋ阻害は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路を薬理学的に標的とすることを支持する。
【００７８】
幾つかの実施形態において、本明細書には、被験体に治療上有効な量のウォルトマンニンアナログ又はウォルトマンニン代謝物質を投与する工程を含む、被験体の肺線維症を処置する方法が提供される。
【００７９】
幾つかの実施形態において、本明細書には、肺線維症の治療のための、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）を使用するための方法が提供され、ここでの肺線維症は、軽度又は中程度である。幾つかの実施形態において、本明細書には、肺線維症の治療のためのＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）を使用するための方法が提供され、ここでの肺線維症は、宣告され進行しているものである。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）は、肺線維症の進行を減少させる。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）は、肺力学においてＴＧＦ−α依存の変化の進行を遅らせる。幾つかの実施形態において、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）は、進行性の体重損失を防ぐ。
【００８０】
幾つかの実施形態において、本明細書には、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物の代謝物質を投与する工程を含む、肺線維症を処置する方法が提供される。一例として、特定の代謝物質が図１に示される。そのような実施形態の幾つかにおいて、そのような代謝物質は、ウォルトマンニンのインヒビターの活性に類似した又はそれより良いＰＩ−３キナーゼに対する阻害活性を示す。
【００８１】
眼線維症
本明細書には、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼのインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）をそれを必要とする個体に投与する工程を含む、眼線維症（眼の任意の領域における線維症及び／又は瘢痕化）の処置の方法が提供される。幾つかの例において、眼の恒常性が、例えば、感染又は炎症又は代謝性疾患によって妨害されるとき、線維症はグリア細胞及び／又は線維芽細胞によって媒介される。幾つかの例において、角膜の線維症（例えば、ヘルペス性角膜炎）は、感染（例えばウイルス感染）の後に生じる。幾つかの例において、糖尿病に関係する網膜の低酸素症は、線維症及びそれに続く牽引性網膜剥離（進行性の糖尿病性網膜症の合併症）につながる。幾つかの例において、新生血管の加齢黄斑変性（ＡＲＭＤ）に関係する網膜下の大量出血は、網膜下の線維症を引き起こす。幾つかの例において、線維芽細胞及び線維芽細胞様細胞（例えば、眼内のグリア細胞）の増殖は、細胞外マトリックスの変異につながり、それが瘢痕形成及び／又は視力喪失につながる。幾つかの例において、結膜の退化は、結果的に角膜表面での線維症につながる。幾つかの例において、眼線維症は、角膜移植の後に生じる。幾つかの例において、未熟児網膜症（ＲＯＰ）は、未熟児の眼内の線維症に関係する。幾つかの例において、瘢痕化は、緑内障ろ過手術の後に生じる。
【００８２】
幾つかの例において、眼線維症は、血管新生促進のＶＥＧＦ及び線維症促進のＣＴＧＦのレベル間のバランスの変化の結果である。幾つかの実施形態において、１以上のＰＩ−３キナーゼインヒビターのそれを必要とする個体への投与は、ＣＴＧＦを阻害又は部分的に阻害する。幾つかの実施形態において、ＣＴＧＦの阻害又は部分的な阻害は、眼線維症の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。従って、本明細書で提供される方法及び組成物は、本明細書に記載される任意の眼の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００８３】
幾つかの実施形態において、眼の結合線維組織増殖症候群は、線維芽細胞又は線維芽細胞様細胞の増殖に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、線維芽細胞の増殖を阻害又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意の眼の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、緑内障ろ過手術後の瘢痕化の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、ＡＲＭＤに関係する網膜内の瘢痕化の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００８４】
胃腸管における結合線維組織増殖症候群
本明細書には、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼのインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）をそれを必要とする個体に投与する工程を含む、胃腸（ＧＩ）管における結合線維組織増殖症候群の処置の方法が提供される。ＧＩ管における結合線維組織増殖症候群は、限定されないが、線維化性結腸疾患、（例えば、クローン病、炎症性大腸疾患に関係する）腸線維症、肝臓線維症、線維化性の胆汁うっ滞性肝炎などを含む。そのような実施形態の幾つかにおいて、ＧＩ管の結合線維組織増殖症候群は嚢胞性線維症（例えば、線維化性結腸疾患）に関係する。幾つかの例において、活性化された線維芽細胞は、肝臓線維症の間の線維性の細胞外マトリックスの蓄積の一因である。
【００８５】
幾つかの実施形態において、ＧＩ管の結合線維組織増殖症候群は、線維芽細胞の増殖に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、線維芽細胞の増殖を阻害又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意のＧＩ管の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００８６】
腎臓系における結合線維組織増殖症候群
本明細書には、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼのインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）をそれを必要とする個体に投与する工程を含む、腎臓係における結合線維組織増殖症候群の処置の方法が提供される。腎臓係における結合線維組織増殖症候群は、限定されないが、慢性腎疾患、後腹膜線維症、糖尿病腎症、慢性の糸球体硬化症、尿細管間質性線維症などを含む。
【００８７】
幾つかの実施形態において、腎臓の結合線維組織増殖症候群は、線維芽細胞の増殖及び／又は活性化に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、線維芽細胞の増殖を阻害又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意の腎臓の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００８８】
皮膚の結合線維組織増殖症候群
本明細書には、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼのインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）をそれを必要とする個体に投与する工程を含む、皮膚の結合線維組織増殖症候群の処置の方法が提供される。皮膚の結合線維組織増殖症候群は、限定されないが、ケロイド、強皮症、肥大性瘢痕、腎原性全身性線維症などを含む。幾つかの例において、ケロイドは、皮膚傷害の治癒の後に発症する緻密線維組織の異常増殖の結果である。幾つかの例において、肥大性瘢痕は、熱傷害及び／又は深い真皮を含む他の傷害の後に見られる。腎原性全身性線維症（ＮＳＦ）は、皮膚において顕著な及び目に見える影響を有する全身性障害である。幾つかの例において、ＮＳＦと診断された患者は、軽度に隆起したプラーク、丘疹又は集密的な丘疹；及び／又は増加した数の線維芽細胞を示す生検、真皮において見られる正常なパターンのコラーゲン線維束の変化、及び増加したムチンの皮膚沈着を伴う、広範囲の硬化した皮膚を生じる。
【００８９】
幾つかの実施形態において、皮膚の結合線維組織増殖症候群は、任意の皮層における線維芽細胞の増殖及び／又は活性化に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、線維芽細胞の増殖を阻害又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意の皮膚の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００９０】
臓器移植に関係する結合線維組織増殖症候群
幾つかの実施形態において、結合線維組織増殖症候群は、移植肝（例えば、線維化性の胆汁うっ滞性肝炎、肝臓線維症、腎線維症など）などの（同種移植片及び／又は異種移植片を含む）臓器移植に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）のそれを必要とする個体への投与は、移植臓器又はその近くにおける線維症の発生を減少させる又は妨げる。
【００９１】
他の結合線維組織増殖症候群
本明細書には、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼのインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物）をそれを必要とする個体に投与する工程を含む、特定の他の結合線維組織増殖症候群の処置の方法が提供される。そのような結合線維組織増殖症候群は、限定されないが、嚢胞性線維症、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、骨線維症、結合線維組織増殖症候群、アナフィラキシーショックの線維症などを含む。
【００９２】
実施例３乃至１２は、上述される特定の結合線維組織増殖症候群の処置のための特定のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）の使用を記載する。
【００９３】
幾つかの実施形態において、上述される任意の結合線維組織増殖症候群は、線維芽細胞の増殖及び／又は活性化に関係する。幾つかの実施形態において、１以上のウォルトマンニンアナログ及び／又はＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）のそれを必要とする個体への投与は、線維芽細胞の増殖を阻害又は部分的に阻害し、それによって、本明細書に記載される任意の結合線維組織増殖症候群の進行及び／又は発症を減らし、逆戻りさせ、又は遅らせる。
【００９４】
１つの実施形態において、本明細書には、以下の構造を有する治療上有効な量のＰＸ−８６６を被験体に投与する工程を含む、被験体において上述される任意の結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）を処置する方法が提供される：
【００９５】
【化７】
2012523429.tif 000009
【００９６】
１つの実施形態において、本明細書には、以下の構造を有する治療上有効な量のＰＸ−８６７を被験体に投与する工程を含む、被験体において上述される任意の結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）を処置する方法が提供される：
【００９７】
【化８】
2012523429.tif 000010
【００９８】
特定の更なる実施形態は、限定されないが、ＰＸ−８６８、ＰＸ−８７０、ＰＸ−８７１、ＰＸ−８８０、ＰＸ−８８１、ＰＸ−８８２、ＰＸ−８８９、ＰＸ−８９０、ＤＪＭ２−１７０、ＤＪＭ２−１７１、ＤＪＭ２−１７７、ＤＪＭ２−１８１及びそれらの組み合わせから選択される、治療上有効な量のウォルトマンニンアナログ及び代謝物質を、それを必要とする個体に投与する工程を含む、結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）を処置する方法を提供する。
【００９９】
併用療法
幾つかの実施形態において、本明細書には、結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）を処置するための第２の治療薬と組み合わせた、ＰＩ−３キナーゼインヒビター（例えば、本明細書に記載される式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター）を使用するための方法が提供される。
【０１００】
幾つかの実施形態において、本明細書には、結合線維組織増殖症候群（例えば、肺線維症）を処置するための第２の治療薬と組み合わせた、ウォルトマンニンアナログ又は代謝物質を使用するための方法が提供される。
【０１０１】
第２の治療薬の例は、限定されないが、例えば、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾン、デキサメタゾン、トリアムシノロン又は任意の他のコルチコステロイド）、ガンマインターフェロン、血清アミロイドＰ、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ペニシラミン、シクロスポリンなどの免疫抑制剤を含む。他の第２の治療薬は、コルヒチン、ミコフェノール酸モフェチル、ピルフェニドンなどを含む。幾つかの実施形態において、第２の治療薬は、タンパク質の治療薬（例えば、抗体）である。
【０１０２】
ラパマイシンの哺乳類標的（ｍＴＯＲ）は、高度に保存された細胞内のセリン／トレオニンキナーゼ及びＰＩ３Ｋ経路における主要な下流の構成成分である。ケラチン研究は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路が、肺内でのＥＧＦＲ活性によって誘発された線維化反応を媒介することを示す。従って、幾つかの実施形態において、本明細書に記載される線維症の処置の方法は、本明細書に記載される確立された肺線維症及び／又は他の線維症の症状の予防、進行の遅延、逆戻り及び／又は部分的な逆戻りのためにＰＩ−３キナーゼインヒビターと組み合わせた、小分子のＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビター（例えばゲフィチニブ、エルロチニブなど）を投与する工程を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に記載される線維症の処置の方法は、本明細書に記載される確立された肺線維症及び／又は他の線維症の症状の予防、進行の遅延、逆戻り及び／又は部分的な逆戻りのために、限定されないが、ラパマイシン、テムシロリムス、デフォロリムス、エベロリムス、ＢＥＺ２３５などを含む、小分子のｍＴｏｒインヒビターを投与する工程を含む。
【０１０３】
医薬組成物／製剤
幾つかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は、医薬組成物に製剤される。具体的な実施形態において、医薬組成物は、活性化合物を薬学的に使用可能な調剤に処理することを促進する賦形剤及び助剤を含む、１以上の生理学的に許容可能な担体を用いて、従来の方法で製剤される。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。任意の薬学的に許容可能な技術、担体、及び賦形剤は、本明細書に記載される医薬組成物を製剤するのに適したものとして使用される：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ Ｅｄ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）；Ｈｏｏｖｅｒ，Ｊｏｈｎ Ｅ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １９７５；Ｌｉｂｅｒｍａｎ，Ｈ．Ａ．ａｎｄ Ｌａｃｈｍａｎ，Ｌ．，Ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｃｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８０；及び、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓｅｖｅｎｔｈ Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ１９９９）。
【０１０４】
本明細書には、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログ、及び薬学的に許容可能な希釈剤、賦形剤、又は担体を含む医薬組成物が提供される。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、併用療法におけるように、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログが、他の活性成分と混合される医薬組成物として投与される。本明細書に包含されるのは、下記の併用療法の節及び本開示の至る所に記述される活性分子の全ての組み合わせである。具体的な実施形態において、医薬組成物は、１以上の式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物を含む。
【０１０５】
医薬組成物は、本明細書で使用されるように、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログと、担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、及び／又は賦形剤などの他の化学成分との混合物を指す。特定の実施形態において、医薬組成物は、有機体への化合物の投与を促進する。幾つかの実施形態において、本明細書に提供される処置又は使用の方法を実行することで、治療上有効な量の式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ又はＩＩＢの化合物、又は本明細書に記載される任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログが、処置される疾患又は疾病を有する哺乳動物に医薬組成物として投与される。特定の実施形態において、哺乳動物は、ヒトである。特定の実施形態において、治療上有効な量は、被験体の疾患の重症度、年齢及び相対的な健康状態、使用される化合物の効力及び他の要因によって変化する。本明細書に記載される化合物は、単独で、又は混合物の成分としての１以上の治療薬と組み合わせて使用される。
【０１０６】
そのような組成物において、薬理学的に活性な化合物は、「活性成分」として知られている。組成物を作る際に、活性成分は、通常、担体と混合される、又は担体によって薄められる、又はカプセル、サシェ（ｓａｃｈｅｔ）、紙又は他の容器の形態であり得る担体内に封入されるであろう。担体が希釈剤として機能するとき、それは、ビヒクル、活性成分の媒体の賦形剤として働く、固形、半固形、又は液状の物質であり得る。従って、組成物は、タブレット、丸剤、散剤、トローチ、サシェ、カシェ剤、エリキシル剤、乳剤、エマルション、シロップ、懸濁剤、軟及び硬ゼラチンカプセル、無菌注射剤、及び無菌包装された散剤の形態であることが可能である。
【０１０７】
適切な担体、賦形剤及び希釈剤の幾つかの例は、ラクトース、デキストロース、蔗糖、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウムアルギン酸塩、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、トラガカント、ゼラチン、シロップ、メチルセルロース、メチル−及びプロピルヒドロキシベンゾアート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、水、及び鉱油を含む。組成物は、平滑剤、湿潤剤、乳化及び懸濁化剤、保存剤、甘味剤又は香味剤を更に含むことができる。組成物は、当業者に周知の手順を使用することによって、患者への投与の後の活性成分の即時、持続、遅延の放出を提供するように製剤され得る。
【０１０８】
投与の適切な経路は、限定されないが、経口投与、静脈内投与、直腸投与、エアロゾール投与、非経口投与、経眼投与、経肺投与、経粘膜投与、経皮投与、膣内投与、経耳投与、経鼻投与、及び局所投与を含む。加えて、ほんの一例ではあるが、非経口送達は、くも膜下注射、直接的な脳室内注射、腹腔内注射、リンパ内注射、及び鼻腔内注射だけでなく、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、髄内注射も含む。
【０１０９】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、しばしばデポ製剤又は持続放出性製剤として、例えば、器官への直接的な化合物の注射を介して、全身的な様式よりもむしろ局所的な様式で投与される。
【０１１０】
線維症（例えば、肺線維症）の処置のための活性化合物の阻害量の局所送達は、線維症の部位又はその近くに化合物を投与する様々な技術により得る。局所送達の技術の例は、限定されないが、利用可能な技術の例示となるように意図される。例は、局所送達のカテーテル、部位特異的な担体、移植、直接注射、又は直接適用を含む。カテーテルによる局所送達は、線維症の部位への直接的な治療薬の投与を可能にする。
【０１１１】
移植による局所送達とは、線維症の臓器（例えば、肺）への治療薬を含むマトリックスの外科的な配置を指す。移植されたマトリックスは、拡散、化学反応、又は溶媒の活性化体によって治療薬を放出する。
【０１１２】
別の実施例は、ポリマーの腔内シーリングによる治療薬の送達である。この技術は、内腔の内面にポリマーインプラントを適用するためにカテーテルを使用する。生分解性のポリマーインプラントに組み込まれた治療薬は、それにより、手術部位に放出される。それは、ＰＣＴ ＷＯ ９０／０１９６９（Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ，Ａｕｇ．２３，１９８９）に記載される。
【０１１３】
インプラントによる局所送達のさらなる例は、部位への小胞または粒子状物質の直接注入による。これらの粒子状物質は、タンパク質、脂質、炭水化物または合成高分子など物質からできているかもしれない。これらの粒子状物質は、コーティングとして微小粒子の全体にわたって、または微小粒子一面に取り込まれた治療薬を有する。粒子状物質を取り込む送達システムは、Ｌａｎｇｅ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３ （１９９０）ａｎｄ  Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｐｐ．Ｐｏｌｙ．Ｓｃｉ．,２６：８０９（１９８１）に記載されている。
【０１１４】
部位特異的担体による局所送達は、薬物を標的線維症の臓器（例えば、肺）に向ける担体に治療薬を付着させることを記載する。この送達技術の例は、タンパク質リガンドまたはモノクローナル抗体など担体の使用を含む。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、長期間作用型製剤は、移植（例えば皮下、又は筋肉内に）又は筋肉内注射により投与される。更に、他の実施形態において、薬物は標的とする薬物送達システムにおいて、例えば、臓器特異的抗体（ｏｒｇａｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）に覆われたリポソームにおいて送達される。このような実施形態において、リポソームは臓器に対し標的とされ、臓器により選択的に取り込まれる。また他の実施形態において、本明細書に記載の化合物は、急速放出製剤の形態、拡張放出製剤の形態、または中間的放出製剤の形態で提供される。また他の実施形態において、本明細書に記載の化合物は局所的に投与される。
【０１１６】
１つの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの１つ以上の化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログが、水溶液中で製剤される。特定の実施形態において、その水溶液は、ほんの一例であるが、ハンクス溶液、リンガー溶液または生理的食塩水の緩衝液のような生理的に適合する緩衝液から選択される。他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの１つ以上の化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログが、経粘膜投与のために製剤される。特定の実施形態において、粘膜用製剤は、浸透すべきバリアにとって適切である浸透剤を含む。本明細書に記載の化合物が、他の非経口投与のために処方されるさらに他の実施形態において、適切な処方は、水溶性または非水溶性の溶液を含む。特定の実施形態において、そのような溶液は、生理学的に適合する緩衝液および／または賦形剤を含む。
【０１１７】
別の実施形態において、本明細書に記載の化合物は、経口投与のために製剤される。式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡ若しくはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む本明細書に記載されている化合物は、活性化合物を、例えば薬学的に許容可能な担体または賦形剤と組み合わせることにより製剤される。様々な実施形態において、本明細書に記載の化合物は、ほんの一例であるが、錠剤、粉剤、丸薬、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、エリキシル剤、スラリー剤、懸濁剤などを含む、経口の投与形態で製剤される。
【０１１８】
経口投与については、化合物は、担体および賦形剤と混合されたり、タブレットにかたどられたり、ゼラチンカプセルに封入されたりし得る。
【０１１９】
特定の実施形態において、経口使用の医薬調製物は、一もしくはそれより多い固体の賦形剤を、本明細書に記載されている一もしくはそれより多い化合物と混合することによって得られ、必要に応じて、錠剤または糖衣錠コア（ｄｒａｇｅｅ  ｃｏｒｅｓ）を得るために、得られた混合物を任意に粉砕し、適切な助剤を添加した後に顆粒の混合物を処理することで得られる。適切な賦形剤は、特に、ラクトース、ショ糖、マンニトールまたはソルビトールを含む糖などのフィラー；例えば、トウモロコシデンプン、小麦でん粉、米でん粉、じゃが芋でん粉、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースなどのセルロース調製物：またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰまたはポビドン）あるいはリン酸カルシウムなどの他のもの、である。具体的な実施形態において、崩壊剤が任意に加えられる。崩壊剤は、ほんの一例ではあるが、架橋クロスカルメロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩を含む。
【０１２０】
１つの実施形態において、糖衣錠コアや錠剤などの剤形は、一もしくはそれより多い適切なコーティングを提供する。具体的な実施形態において、濃縮糖液は、剤形をコーティングするために使用される。糖液は、ほんの一例ではあるが、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適切な有機溶媒、または混合溶媒などのさらなる成分を任意に含む。染料および／または色素はまた、同定目的のためコーティングへ任意に加えられる。更に、染料および／または色素は、活性な化合物の投与量の異なる組み合わせを特徴づけるため任意に利用される。
【０１２１】
特定の実施形態において、本明細書に記載されている少なくとも一つの治療上有効な量の化合物は、他の経口剤形態で製剤される。経口剤形態は、ゼラチン製の柔らかい密封されたカプセル剤のみでなく、ゼラチン製の押し出しカプセル剤、およびグリセロールやソルビトールなどの可塑剤を含む。具体的な実施態様において、押し出しカプセル剤は、一もしくはそれより多いフィラーと混合された活性成分を含む。フィラーは、ほんの一例ではあるが、ラクトース、でん粉などの結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、および任意に安定剤を含む。他の実施形態において、軟カプセル剤は適切な液体中で溶解または懸濁された一もしくはそれより多い活性な化合物を含む。適切な液体は、ほんの一例ではあるが、一もしくはそれより多い脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコールを含む。更に、安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ）が任意に加えられる。
【０１２２】
他の実施形態において、本明細書に記載されている治療上有効な量の少なくとも一つの化合物は、口腔投与または舌下投与のために製剤される。口腔投与または舌下投与に適した製剤は、ほんの一例ではあるが、錠剤、ロゼンジ剤、またはゲル剤を含む。
【０１２３】
更に他の実施態様において、本明細書に記載されている化合物は、ボーラス注入または持続注入に適した製剤を含む、非経口注入のために処方される。式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、代替的に、１０％の水性のグルコース溶液、等張の食塩水、滅菌水などのような液体に溶かされ、静注で、または注入によって投与され得る。
【０１２４】
具体的な実施形態において、注入用製剤は、単位剤形で（例えばアンプルで）、または複数回用量容器で提供される。保存剤が、注入製剤へ任意に加えられる。更なる他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、油性ビヒクルまたは水性ビヒクル中の、無菌の懸濁剤、溶剤、またはエマルションとして、非経口注入に適した形態で製剤される。非経口注入製剤は、懸濁剤、安定剤、および／または分散剤などの処方剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）を任意に含む。具体的な実施形態において、非経口投与のための医薬製剤は、水溶性形態の活性な化合物の水溶液を含む。更なる実施形態において、活性な化合物の懸濁剤は、適切な油性注入懸濁剤として調製される。本明細書に記載されている医薬組成物で使用される適切な親油性溶媒またはビヒクルは、ほんの一例ではあるが、ごま油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。特定の具体的な実施形態において、水性注入懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランのような懸濁剤の粘度を増加させる物質を含む。懸濁剤は、高濃縮溶液の調製を可能にするため、化合物の溶解度を増加させる適切な安定剤または薬剤を任意に含む。代替的に、他の実施形態において、活性成分は、使用前に適切なビヒクル、例えば発熱物質を含まない滅菌水と共に構成するための粉末形態である。
【０１２５】
１つの態様において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、本明細書に記載されているような、または当該技術分野で既知の非経口注射のための溶液として調製され、自動注入器により投与される。米国特許第４，０３１，８９３号、 第５，３５８，４８９号；第５，５４０，６６４号；第５，６６５，０７１号、第５，６９５，４７２号およびＷＯ／２００５／０８７２９７（その各々はそのような開示のために参照によって本明細書に組み込まれる）に開示されたもののような自動注入器が知られている。一般に、自動注入器はすべて、注入されるための式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む多くの溶液を含む。一般に、自動注入器は溶液の保持のためリザーバを含み、それは、薬物を送達するための注射針と同様、自動的に注射針を配置し、患者に注射針を挿入し、そして患者に薬物を送達するためのメカニズムとも流体で連絡している。典型的な注射器は、溶液の１ｍＬにつき、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログのおよそ０．５ｍｇから１０ｍｇの濃度で、溶液の約０．３ｍＬを与える。各注射器は、化合物の１回用量のみ送達することができる。
【０１２６】
さらに他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、局所的に投与される。本明細書に記載されている化合物は、溶液、懸濁剤、ローション剤、ゲル剤、ペースト剤、薬用スティック、バーム、クリーム、または軟膏のような様々な局所投与が可能な組成物へと製剤される。そのような医薬組成物は、可溶化剤、安定剤、等張増強剤、緩衝剤、および保存剤を任意に含む。
【０１２７】
さらに他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、経皮投与のために製剤される。具体的な実施形態において、経皮製剤は、経皮送達装置および経皮送達パッチを利用し、そして、ポリマーまたは粘着剤で溶解および／または分散した親油性エマルションまたは緩衝水溶液になることが可能である。様々な実施形態において、このようなパッチは、治療剤の連続送達、パルス送達、またはオンデマンド送達用に構築される。さらなる実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの経皮的な送達は、イオン導入パッチなどによって達成される。特定の実施形態において、経皮パッチは、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの制御された送達を提供する。具体的な実施形態において、吸収速度は、律速膜（ｒａｔｅ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）を使用することで、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルの中に補足することで低減される。代替的な実施形態において、吸収促進剤は吸収性を高めるために使用される。吸収促進剤または担体は、皮膚を介する通過を補助する、薬学的に許容可能な吸収性溶媒を含む。例えば、１つの実施形態において、経皮装置は、支持部材、任意に担体と共に、化合物を含むリザーバ、任意に、制御された所定の速度で長時間にわたって宿主の皮膚に化合物を送達するための律速用バリア、および皮膚に装置を固定する手段を含む包帯の形態である。
【０１２８】
本明細書に記載の経皮製剤は当該技術分野で記載された様々な装置を用いて投与される。例えば、そのような装置は、限定されないが、米国特許第３，５９８，１２２号、第３，５９８，１２３号、第３，７１０，７９５号、第３，７３１，６８３号、米国特許第３，７４２，９５１号、第３，８１４，０９７号、第３，９２１，６３６号、第３，９７２，９９５号、第３，９９３，０７２号、第３，９９３，０７３号、第３，９９６，９３４号、第４，０３１，８９４号、第４，０６０，０８４号、第４，０６９，３０７号、第４，０７７，４０７号、第４，２０１，２１１号、第４，２３０，１０５号、第４，２９２，２９９号、第４，２９２，３０３号、第５，３３６，１６８号、第５，６６５，３７８号、第５，８３７，２８０号、第５，８６９，０９０号、第６，９２３，９８３号、第６，９２９，８０１号、及び第６，９４６，１４４号を含む。
【０１２９】
本明細書に記載の経皮剤形は、当該技術分野では通常である、特定の薬学的に許容可能な賦形剤を組み込むことがある。１つの実施形態において、本明細書に記載されている経皮的な製剤は少なくとも３つのコンポーネント：（１）式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの製剤；（２）浸透促進剤；および（３）水性アジュバント、を含む。加えて、経皮製剤は、これらに限定されないが、例えば、ゲル化剤、クリーム、及び軟膏基剤などの付加的な化合物をさらに含み得る。幾つかの実施形態において、経皮製剤は、吸収を促進し、皮膚から取り除かれることを防ぐために、裏地、又は不織布裏地さらに含む。他の実施形態において、本明細書に記載の経皮製剤は肌への拡散を促進するために飽和状態又は過飽和状態を維持する。
【０１３０】
他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、吸入による投与のために製剤される。吸入投与に適した様々な形態は、エアロゾル、ミスト、または粉末を含むが、これら限定されない。式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢまたは本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの医薬組成物は、適切な推進剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切なガス）を使用して、加圧包装またはネブライザーからエアロゾルスプレー形態で都合よく送達される。具体的な実施形態において、加圧されたエアロゾルの用量単位は、計量された量を送達するために、バルブを提供することによって決定される。特定の実施形態において、吸入器または注入器で使用するための、ほんの一例ではあるが、ゼラチンなどから成るカプセル剤および薬包は、化合物と、ラクトースまたはでん粉などの適切な粉末基剤の粉末混合を含んで製剤される。
【０１３１】
経鼻投与の剤形は従来技術で周知であり、例えば、米国特許第４，４７６，１１６号、第５，１１６，８１７号、第６，３９１，４５２号に記載され、その各々は参照によって特に組み込まれる。式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む剤形は、これらの技術及び当該技術分野で周知の他の技術に従って調製されるが、このような剤形は、ベンジルアルコール又は他の好適な保存料、フルオロカーボン、及び／又は従来技術で公知の可溶化剤又は分散剤を用いて生理食塩水中の溶液として調製される。例えば、Ａｎｓｅｌ，Ｈ．Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  Ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄ．（１９９５）を参照されたい。好ましくは、これらの組成物及び剤形を、適切で毒性のない、薬学的に許容可能な成分を用いて調製される。これらの成分は、REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 21st edition, 2005（当該分野における標準的なリファレンスである）などのソースにおいて見出される。適切な担体の選択は、所望の鼻腔剤形（例えば、溶液、分散液、軟骨剤、又はゲル剤）の正確な性質に大きく依存している。鼻腔剤形は、一般的に、活性成分に加えて、大量の水を含有する。ｐＨ調節剤、乳化剤、又は分散剤、保存料、界面活性剤、ゲル化剤、又は緩衝剤、及び他の安定剤及び可溶化剤などの少量の他の成分も同様に存在することもある。好ましくは、鼻腔剤形は、鼻からの分泌物と等張であるべきである。
【０１３２】
吸入による投与に関して、本明細書に記載の化合物は、エアロゾル、噴霧、又は粉末としての形態で有り得る。本明細書に記載の医薬組成物は、好適な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、又は他の好適な気体）を用いて、加圧包装又は噴霧器から送り出されるエアロゾルの噴霧という形状で効果的に送達される。加圧型エアロゾルの場合、用量単位は計測された量を送達するためのバルブを提供することによって決定されてもよい。インヘラー又は吸入器を用いるための、ほんの一例ではあるが、ゼラチンのカプセル剤及び薬包は、本明細書に記載の化合物と、ラクトース又はスターチのような粉末基材の粉末混合を含んで製剤され得る。
【０１３３】
更なる他の実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、ポリビニルピロリドン、ＰＥＧなどの合成ポリマーだけでなく、ココアバターまたは他のグリセリドなどの従来の坐薬用基剤を含む、浣腸剤、直腸用ゲル剤、直腸用気泡剤、直腸用エアロゾル、坐薬、ゼリー状坐薬、または保持用浣腸剤などの直腸用組成物に製剤される。組成物の坐薬形態において、これらに限定されないが、例えば脂肪酸グリセリドの混合物などの低融点ワックスは、任意にココアバターと組み合わされて最初に溶解する。
【０１３４】
特定の実施形態において、医薬組成物は、賦形剤および補助剤を含む一もしくはそれより多い生理的に許容可能な担体を用いる任意の従来の様式で製剤され、これらの賦形剤および補助剤は、薬学的に使用できる調製物へと活性化合物を処理するのを容易にする。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。薬学的に許容可能なあらゆる技術、担体、および賦形剤は、適切に、当技術分野で理解されているように任意に使用される。式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む医薬組成物は、従来の様式、ほんの一例として、従来の混合、溶解、造粒、ドラジェー製法、微粒子化、乳化、カプセル化、封入、又は圧縮プロセスなどの手段によって、製造可能である。
【０１３５】
医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤、および、有効成分として少なくとも１つの式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む。活性成分は、遊離酸形態もしくは遊離塩基形態、または薬学的に許容可能な塩の形態である。更に、本明細書に記載されている方法および医薬組成物は、同じタイプの活性を備えるこれら化合物の活性代謝物質だけでなく、Ｎ−酸化物、結晶型（多形体としても知られている）の使用を含む。本明細書に記載されている化合物の全ての互変異性体は、本明細書提示の化合物の範囲内に含まれる。更に、本明細書に記載されている化合物は、水やエタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒を有する溶媒和形態のみでなく、非溶媒和形態も含む。本明細書に提示の化合物の溶媒和形態は、また、本明細書で開示されるとみなされる。更に、医薬組成物は、保存剤、安定剤、湿潤剤、もしくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調整する塩、緩衝剤、および／または他の治療上有効な物質などの、他の医薬品または治療剤、担体、アジュバントを任意に含む。
【０１３６】
本明細書に記載されている化合物を含む組成物の調製方法は、固体、半固体、または液体を形成するために、化合物を一もしくはそれより多い不活性な薬学的に許容可能な賦形剤または担体と共に処方する工程を含む。固形組成物は、粉剤、錠剤、分散性顆粒、カプセル剤、カシェ剤、および坐薬を含むが、これらに限定されない。液体組成物は、本明細書に開示される、化合物を溶解した溶液、化合物を含むエマルション、または化合物を含むリポソーム、ミセル、またはナノ粒子を含む溶液を含む。半固形組成物は、ゲル剤、懸濁剤、およびクリームを含むが、これらに限定されない。本明細書に記載されている医薬組成物の形態は、液体溶液または懸濁液、使用前に液体に溶解もしくは懸濁することに適した固形形態、またはエマルションを含む。これらの組成物はまた、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤などの微量の非毒性補助物質を任意に含む。
【０１３７】
幾つかの実施形態において、少なくとも１つの式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物又は本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログを含む医薬組成物は、薬物が溶液中、懸濁液中、またはその両方に存在する液体の形態を実例としてとる。一般的に組成物が溶液または懸濁液として投与されると、薬剤の第一の部分は溶液中に存在し、薬剤の第二の部分は液体マトリックス中の懸濁液中に粒子形態で存在する。いくつかの実施形態において、液体組成物はゲル製剤を含む。他の実施形態において、液体組成物は水性である。
【０１３８】
特定の実施形態において、医薬品の水溶性懸濁液は、懸濁剤として一もしくはそれより多いポリマーを含む。ポリマーは、セルロースポリマー、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの水溶性ポリマー、および架橋カルボキシル含有ポリマーなどの非水溶性ポリマーを含む。本明細書に記載されている特定の医薬組成物は、例えばカルボキシメチルセルロース、カルボマー（アクリル酸ポリマー）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリアクリルアミド、ポリカルボフィル、アクリル酸／アクリル酸ブチルコポリマー、アルギン酸ナトリウム、およびデキストランから選択される粘膜付着性ポリマーを含む。
【０１３９】
医薬組成物はまた、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの溶解性を助けるために可溶化剤を任意に含む。「可溶化剤」という用語は、一般的に、薬剤のミセル溶液または真性溶液をもたらす薬剤を含む。特定の許容可能な非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０は可溶化剤として役立ち、眼科用として許容可能なグリコール、ポリグリコール、例えばポリエチレングリコール４００、およびグリコールエーテルも役立ち得る。
【０１４０】
更に、医薬組成物は、１つ以上のｐＨ調整剤または酢酸、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸および塩酸のような酸；水酸化ナトリウム、リン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウムおよびトリスヒドロキシメチルアミノメタンのような塩基；およびシトラート／デキストロース、重炭酸ナトリウムおよび塩化アンモニウムのような緩衝液を含む緩衝剤を随意に含む。このような酸、塩基、および緩衝液は、組成物のｐＨを許容可能な範囲で維持するのに必要とされる量で含まれる。
【０１４１】
更に、医薬組成物は、組成物の重量モル浸透圧濃度を許容可能な範囲にするために必要な量で一もしくはそれより多い塩を任意に含む。このような塩は、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、またはアンモニウムカチオン及び塩化物アニオン、クエン酸アニオン、アスコルビン酸アニオン、ホウ酸アニオン、リン酸アニオン、重炭酸アニオン、硫酸アニオン、チオ硫酸アニオン又は亜硫酸水素アニオンを有するものを含み、適切な塩は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、チオ硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム及び硫酸アンモニウムを含む。
【０１４２】
他の医薬組成物は、微生物の活性を抑制する一もしくはそれより多い保存剤を任意に含む。
適切な保存剤は、メルフェン（merfen）とチオマーサルなど水銀を含有している物質；安定した二酸化塩素；塩化ベンザルコニウム、セチルトリメチルアンモニウム臭化物及びセチルピリジニウム塩化物等の四級アンモニウム化合物を含む。更なる他の医薬組成物は、物理的安定性を増幅するため、または他の目的のために、一もしくはそれより多い界面活性剤を含む。適切な界面活性剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリド及び例えばポリオキシエチレン（６０）水素化ヒマシ油等の植物油、及び、例えば、オクトキシノール１０、オクトキシノール４０等のポリオキシエチレンアルキルエーテルとアルキルフェニルエーテルを含む。
【０１４３】
更なる他の医薬組成物は、必要な化学安定性を増幅させる一もしくはそれより多い抗酸化剤を含み得る。適切な抗酸化剤は、ほんの一例ではあるが、アスコルビン酸および二亜硫酸ナトリウムを含む。
【０１４４】
特定の実施形態において、医薬品の水性懸濁液組成物は、単回用量用の再密閉できない容器に包装される。あるいは、複数回用量用の再密閉できる容器が使用され、この場合は、組成物中に保存剤を含むことが一般的である。
【０１４５】
代替の実施形態において、疎水性医薬化合物用の他の送達システムが利用される。リポソームおよびエマルションは、本明細書での送達用ビヒクルまたは担体の例である。特定の実施形態において、Ｎ−メチルピロリドンなどの有機溶媒も利用される。更なる実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、治療薬剤を含む固形疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放システムを用いて送達される。様々な徐放物質が本明細書で役立つ。いくつかの実施形態において、徐放カプセル剤は、数時間から２４時間までの間、化合物を放出する。治療試薬の化学的性質と生物学的安定性に依存して、タンパク質安定化のための追加方策が利用され得る。
【０１４６】
特定の実施形態において、本明細書に記載されている製剤は、一もしくはそれより多い抗酸化剤、金属キレート剤、チオール含有化合物、および／または他の一般的な安定剤を含む。これら安定剤の例としては、限定されるものではないが、（ａ）約０．５％〜約２％ｗ／ｖのグリセロール、（ｂ）約０．１％〜約１％ｗ／ｖのメチオニン、（ｃ）約０．１％〜約２％ｗ／ｖのモノチオグリセロール、（ｄ）約１ｍＭ〜約１０ｍＭのＥＤＴＡ、（ｅ）約０．０１％〜約２％ｗ／ｖのアスコルビン酸、（ｆ）０．００３％〜約０．０２％ｗ／ｖのポリソルベート８０、（ｇ）０．００１％〜約０．０５％ｗ／ｖのポリソルベート２０、（ｈ）アルギニン、（ｉ）ヘパリン、（ｊ）硫酸デキストラン、（ｋ）シクロデキストリン、（ｌ）ペントサンポリサルフェートおよび他のヘパリノイド、（ｍ）マグネシウムと亜鉛などの２価カチオン；又は（ｎ）それらの組み合わせが挙げられる。
【０１４７】
投与方法および処置レジメン
１つの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、線維症の症状の処置のための薬物の製剤に使用される。加えて、そのような処置を必要とする被験体における本明細書に記載されているあらゆる疾患や疾病を処置するための方法は、先述の被験体に治療上有効な量の、少なくとも一つの式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログ、またはその薬学的に許容可能な塩、薬学的に活性な代謝物質、薬学的に許容可能なプロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な溶媒和物を含む、医薬組成物の投与を含む。
【０１４８】
特定の実施形態において、本明細書に記載されている化合物を含む組成物は、予防的および／または治療的処置のために投与される。特定の治療上の適用では、組成物は、既に疾患や疾病で苦しむ患者に、その疾患または疾病の症状を治し、または少なくとも部分的に阻止するのに十分な量で投与される。このような使用に有効な量は、疾患または疾病の重症度および経過、以前の治療、患者の健康状態、体重、および薬物への反応性、ならびに処置を行う医師の判断に左右される。治療上有効な量は、投与量増加臨床試験などを含むが、これらに限定されない方法により任意に定められる。
【０１４９】
予防上の適用において、本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、特定の疾患、障害、又は疾病の影響を受け易く、またはその危険に曝されている患者に投与される。このような量は、「予防に有効な量または用量」と定義される。このような使用において、正確な量は、患者の健康状態、体重などにも左右される。患者に使用されると、この使用に有効な量は、疾患、障害、または疾病の重症度および経過、以前の治療、患者の健康状態および薬物への反応性、ならびに処置を行う医師の判断に左右される。
【０１５０】
患者の疾病が改善されない特定の実施形態において、患者の疾患または疾病の症状を改善、あるいは、そうでなければ、制御または制限するために、医師の裁量により化合物の投与は、慢性的に、つまり、患者の生存時間全体を含む長時間の間投与される。
【０１５１】
患者の疾状が改善される特定の実施形態において、投与される薬の投与量は、一時的に減少するか、一定時間の間一時的に停止させられることもある（即ち、「休薬期間」）。具体的な実施形態において、休薬期間の長さは、２日から１年までの間であり、ほんの一例ではあるが、２日、３日、４日、５日、６日、７日、１０日、１２日、１５日、２０日、２８日、３５日、５０日、７０日、１００日、１２０日、１５０日、１８０日、２００日、２５０日、２８０日、３００日、３２０日、３５０日、および３６５日を含む。休薬期間中の投与量の減少は、１０％から１００％の間であり、ほんの一例ではあるが、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％である。
【０１５２】
一旦患者の状態の改善が生じると、必要ならば維持量が投与される。続いて、具体的な実施形態において、投与量もしくは投与頻度、またはその両方が、その症状の機能として、改善された疾患、障害、または疾病が持続する量まで減らされる。しかし、特定の実施形態において、任意の症状の再発により、患者は断続的な処置を長期的に必要とする。
【０１５３】
このような量に相当する所与の薬剤の量は、特定の化合物、処置を必要とする被験体または宿主の疾患状態およびその重症度、アイデンティティ（例えば体重、性別）などの要因次第で変わるが、それにもかかわらず、例えば投与される特定の薬剤、投与経路、処置される疾病、および処置される被験体または宿主を含む症例を取り巻く特定の環境に応じて定めることができる。しかし一般的に、成人の処置に利用される投与量は、典型的に１日当たり０．０２〜５０００ｍｇ、好ましくは１日当たり１〜１５００ｍｇの範囲内にある。１つの実施形態において、所望の投与量は単回投与で、または同時に（もしくは短時間で）投与されるか、または適切な間隔、例えば一日に２回、３回、４回、またはそれ以上の下位投与量として投与される分割用量で、都合よく提供される。
【０１５４】
幾つかの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、慢性的に投与される。幾つかの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、断続的に投与される（例えば、化合物が投与されないか、低減された量で投与される期間を含む休薬期間）。幾つかの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、（ａ）式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの毎日の投与を含む、第１の期間；その後に続く（ｂ）投与される、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログの毎日の量の用量減少を含む第２の期間、を含むサイクルで投与される。幾つかの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログは、第２の期間に投与されない。幾つかの実施形態において、投与量のみでなく第１と第２の期間の持続期間は、本明細書に記載されているか、当該技術分野で既知の方法を使用して決定される。いくつかの場合において、休薬期間または用量減少期間は、活性剤の薬力学的特性に依存して適切である。
【０１５５】
特定の実施形態において、本明細書に記載されている医薬組成物は、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形である。単位剤形において、製剤は、一以上の化合物の適量を含有する単位用量に分割される。具体的な実施形態において、単位用量は、製剤の分離量を含有するパッケージ形態である。制限のない例は、包装された錠剤やカプセル剤、およびバイアルまたはアンプルの中にある粉剤である。水性懸濁組成物は、単回用量用の再密閉できない容器の中に任意に包装される。代わりに、複数回用量用の再密閉できる容器は、組成物内に保存剤を含むのが一般的な場合に使用される。ほんの一例ではあるが、いくつかの実施形態において、非経口注入用の製剤は、単位剤形か、または、添加保存剤を備えた複数回用量容器に入れて提供され、この単位剤形は、アンプルを含むが、これに限定されない。
【０１５６】
１つの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログに適切な毎日の量は、体重当たり約０．００１から約１００ｍｇ／ｋｇまである。１つの実施形態において、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物または本明細書に記載されている任意の他のＰＩ−３キナーゼインヒビター及び／又はウォルトマンニンアナログに適切な毎日の量は、体重当たり約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇまである。いくつかの実施形態において、限定されないがヒトを含む大型哺乳動物における一日当たりの指示用量は、約０．５ｍｇから約１０００ｍｇまでの範囲であり、限定されないが１日最大４回までの分割用量で適宜投与される。１つの実施形態において、一日当たりの用量は、拡張放出形態で投与される。特定の実施形態において、経口投与に適切な単位剤形は約１〜５００ｍｇの活性成分を含む。他の実施形態において、剤形における活性の１日の用量または量は、本明細書が示す範囲よりも低くまたは高く、個々の処置レジメンに関する多くの変数に基づく。様々な実施形態において、一日における単位ごとの投与量は、使用される化合物の活性、処置される疾患または疾病、投与の形態、個々の被験体の必要条件、処置される疾患または疾病の重症度、および医師の判断などを含むが、これらに限定されない多くの変数に依存して変更される。
【０１５７】
このような処置レジメンの毒性および治療効果は、ＬＤ５０（個体群の５０％致死量）およびＥＤ５０（個体群の５０％における治療上有効な用量）の決定などを含むが、これらに限定されない細胞培養物または実験動物における標準の薬学的手順により定められる。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指数であり、ＬＤ５０とＥＤ５０との間の比率として表わされる。特定の実施形態において、細胞培養アッセイと動物実験から得たデータは、ヒトを含む哺乳動物に使用する治療上有効な１日の用量範囲および／または治療上有効な単位投与量での処方の際に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物の１日の投与量は、最小限の毒性を持つＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内にある。特定の実施形態において、１日の投与量および／または単回投与量は、利用される剤形および使用される投与経路次第で、この範囲内で変動する。
【０１５８】
使用される方法と材料を示す本発明と実施形態は、以下の制限しない実施例への言及によってさらに理解されるだろう。
【実施例】
【０１５９】
＜実施例１＞
トランスジェニックマウスおよびＰＸ−８６６の投与：
２．３ｋｂのラット・クラーラ細胞分泌タンパク質（ＣＣＳＰ）（別名、ｓｅｃｒｅｔｏｇｌｏｂｉｎ、ｆａｍｉｌｙ１Ａ、ｍｅｍｂｅｒ１（Ｓｃｇｂｌａｌ）遺伝子プロモーター）の制御の下で逆テトラサイクリン反応性トランス活性化因子（reverse tetracycline-responsive transactivator）（ｒｔＴＡ）を発現するＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ活性化体マウスを、最小ＣＭＶプロモーターを加えたテトラサイクリンオペロンの７つのコピーの制御の下でのヒトＴＧＦα（（ＴｅｔＯ）７−ｃｍｖ  ＴＧＦα）  ｃＤＮＡを含んでいる条件付きドキシサイクリン（Ｄｏｘ）調節トランスジェニックマウス（conditional doxycycline (Dox) regulated transgenic mice containing the human TGFα cDNA under the control of seven copies of the tetracycline operon ((TetO)7-cmv TGFα) plus a minimal CMV promoter）と交配させた。シングルトランスジェニック（ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ＋／−）マウスとバイトランスジェニックＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ＋／−／（ＴｅｔＯ）７−ｃｍｖ  ＴＧＦα＋／−マウスを、同腹仔内でホモ接合ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ＋／＋マウスをヘミ接合（ＴｅｔＯ）？−ｃｍｖ  ＴＧＦα＋／−マウスに交配させることによって、作製した。全てのマウスは、ＦＶＢ／ＮＪ近交系に由来する。マウスを、ウイルスフリーの容器内で養った。動物プロトコルはすべて、シンシナティチルドレンズ・ホスピタル研究財団（the Cincinnati Children's Hospital Research Foundation）の動物実験委員会（Institutional Animal Use and Care Committe）によって検討され承認された。ＴＧＦα発現を誘発するために、Ｄｏｘ（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ.Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を、０．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度で飲料水、および食物（６２．５ｍｇ／ｋｇ）に入れて投与した。水は、１週に３回交換した。当該技術分野で公知のように、マウスの遺伝子型を同定した（genotyped）。
【０１６０】
ＰＩ３ＫインヒビターＰＸ−８６６（ＰｒｏＩＸ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｔｕｃｓｏｎ、Ａｒｉｚｏｎａ）を、５％のＥｔＯＨ中へ懸濁し、５ｍｇ／ｍｌの保存溶液を作った。投与の３時間前に、食物と水をケージから取り除いた。その後、マウスに麻酔（Ｉｓｏｆｌｕｒａｎｅ；Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｓ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）をかけ、無菌のビヒクルまたは薬物（３ｍｇ／ｋｇ）を、２０ゲージの給餌カテーテル（Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ、Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ、ＭＡ）を使用して胃管栄養によって投与した。マウスを、一日おきに４週までの間、ビヒクルまたはＰＸ−８６６で処置した。マウスを、Ｄｏｘ、ビヒクルまたはＰＸ−８６６処置の１日後または４週後に、ペントバルビタールナトリウム（６５ｍｇ／ｍｌ）安楽死用溶液（Ｆｏｒｔ  Ｄｏｄｇｅ  Ａｎｉｍａｌ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｆｏｒｔ  Ｄｏｄｇｅ、ＩＡ）で死なせた。
【０１６１】
ウェスタンブロット：
ウエスタンブロット解析を、以前記載したように肺ホモジェネート上で行った。ブロットをｔｏｔａｌ  ａｎｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  Ａｋｔに対する抗体（Ｓｅｒ  ４７３およびＴｈｒ  ３０８、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）と共に培養し、Ｐｈｏｓｐｈｏｒｌｍａｇｅｒ  ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｍａｇｅｑｕａｎｔ  ５．２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）の上で容量積分関数（volume Integration function）を使用して定量した。
【０１６２】
肺組織学、免疫染色、および総肺コラーゲン：
肺を以前記載したように膨張固定した（inflation fixed）。切片（５ｗｍ）を、以前記載したように、三重染色のため、ｐｏｌｙｓｉｎｅスライドに載せた。総肺コラーゲンを、以前記載したように、合計の可溶性コラーゲンを定量することによって測定した（Ｓｉｒｃｏｌ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ａｓｓａｙ、Ｂｉｏｃｏｌｏｒ、Ｉｒｅｌａｎｄ）。
【０１６３】
肺力学：
肺力学を、マウスに関してコンピューター化Ｆｌｅｘｉ  Ｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ（ＳＣＩＲＥＱ、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、Ｃａｎａｄａ）で評価した。マウスに、ケタミンとキシラジンで麻酔をかけ、気管切開術を行い、その後、４５０呼吸／分の速度およびＳＣＩＲＥＱシステム（これによって、動肺コンプライアンス解析ができる）によってコンピューター化された２ｃｍ  Ｈ２Ｏの陽性呼気終圧（ＰＥＥＰ）で、８ｍｌ／ｋｇの換気量で換気した。換気モードを、強制振動シグナル（forced oscillatory signal）（０．５−１９．６Ｈｚ）に変更し、呼吸インピーダンスを測定した。組織エラスタンスを、各インピーダンス周波数範囲にモデルを適合させることにより、２ｃｍ  Ｈ２ＯのＰＥＥＰでマウスに対して得た。このシステムにより、較正手順によって、装置と気管内チューブのインピーダンスを除外した。
【０１６４】
ＰＸ−８６６はＡｋｔのＴＧＦαに誘発されるリン酸化を阻害する：
ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスを、ＴＧＦαの発現を誘発するために、１日のＤｏｘで処理した。ウエスタンブロット解析によって測定されるように、Ｓｅｒ  
４７３に対するリン酸化Ａｋｔ（Ｐ−Ａｋｔ）レベルは、Ｄｏｘ処理コントロールマウスと比較して、５倍以上に増加した。Ｔｈｒ  ３０８に対するＰ−Ａｋｔは、続くＴＧＦα発現を変化させなかった（データは示さず）。ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスにおけるＰＸ−８６６処置は、Ｐ−ＡｋｔにおけるＴＧＦα−誘発の増加を阻害した（図２Ａおよび２Ｂ）。
【０１６５】
統計：
マウス群（ＣＣＳＰ／−ビヒクル、ＣＣＳＰ／ＴＧＦαビヒクル、ＣＣＳＰ／ＴＧＦα  ＰＸ−８６６）に対して、誤差（means）（＋／−  ＳＥＭ）を計算し各変数に対してプロットした。式量濃度のために、プロットおよびシャピロ−ウィルク検定を使用して、データを評価した。式量濃度推定が得られなかった場合、グループ間の差異に関して試験するために、対数変換した値を、一元配置分散分析において使用した。対数変換が式量濃度を改善しなかった場合、ノンパラメトリックの一元配置分散分析を使用した。シミュレーションに基づく、ステップダウンの多重比較補正をすべての対の比較（pair-wise comparison）に使用した。ノンパラメトリックの一元配置分散分析に対しては、ボンフェローニ−ホルム多重比較補正を使用した。
【０１６６】
４つの異なる群のマウスの重量を、基線で測定し、次の８週の間、週一回、等しく間隔を置いたインターバルで測定した。Ｇｒｏｕｐ＊Ｔｉｍｅの誤差における差異を計算するために、繰り返された測定の解析を、要素としてＧｒｏｕｐ＊Ｔｉｍｅと基線を用いて行った。別々のＴｏｅｐｌｉｚ分散／共分散構造（separate Toepliz variance/covariance structure）が各グループに使用された。（プライオリに）選択されたＧｒｏｕｐ＊Ｔｉｍｅの誤差の差異を計算し、多重比較に対してシミュレーションベースの補正を使用して試験した。
【０１６７】
＜実施例２＞
ＰＸ−８６６はＴＧＦα−誘発肺線維症を阻害する：
ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスを、ＴＧＦα発現を誘発するためにＤｏｘで処理し、同時に、４週間、ＰＸ−８６６（一日おきに４ｍｇ／ｋｇ）またはビヒクルのいずれかで処置した。ＴＧＦαの誘発は、広範囲な胸膜、血管周囲および気管支周囲の線維形成を引き起こした（図３Ａ）。総肺コラーゲンレベルは、Ｄｏｘ処理コントロールマウスと比較して、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスにおいて２倍を超えた。ＰＸ−８６６処置マウスは、Ｄｏｘ処理コントロールマウスと比較して、組織学および総肺コラーゲンによって評価されるように、肺線維形成に何の違いも示さなかった（図３Ａおよび３Ｂ）。Ｄｏｘ処理コントロールマウスと比較して、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスにおいて、肺コンプライアンスは３０％以上減少し、気道抵抗、エラスタンスおよび組織エラスタンスは、２倍を超えて増加した。ＰＸ−８６６で処置されたマウスは、Ｄｏｘ処理コントロールマウスと比較して、肺力学に何の違いも示さなかった（図４）。
【０１６８】
ＰＸ−８６６は、確立しているＴＧＦα誘発肺線維症の進行を防ぐ。
ＰＸ−８６６が確立している線維症の進行に影響を及ぼしているか否かを測定ために、Ｄｏｘ処理の後４週間、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスに、ＰＸ−８６６を投与し、さらに４週の間、Ｄｏｘを与え続けた（remain on Dox）（合計８週）。コントロールは、ビヒクルで処置され、さらに４週の間、Ｄｏｘを与え続けたＣＣＳＰ／−およびＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスを含んだ。第３組のコントロールは、４週間のＤｏｘを受け、その後Ｄｏｘを取り除き、そしてビヒクルで４週間処置したＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスを含んだ（図５Ａ）。マウスにおける線維形成を逆戻りさせることに関するＰＸ−８６６の有効性を比較するために、ＥＧＦＲ活性化が失われる場合、マウスに対する継続的なＥＧＦＲ活性化と共に、オン・オフＤｏｘ群を加えた。ビヒクルで処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスの体重は、Ｄｏｘの８週間後に、基線から２６％を超えて減少した（図５Ｂ）。５週の初めに投与したＰＸ−８６６は、ビヒクルに処置されたＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、さらなる体重減少を防いだが、体重は、ＣＣＳＰ／−コントロールマウスまたはオフＤｏｘのＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスより少ないままであった。８週間Ｄｏｘおよびビヒクルにより処置したＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスは、線維症が間質へ進行し肺胞の構造を目立たなくし、顕著な胸膜肥厚を示した（図６Ａ）。さらに、大小の血管および気道において、血管周囲および気管支周囲の線維形成が進行した。ＰＸ−８６６処置ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスは、ビヒクル処置マウスと比較して、低減した血管周囲および気管支周囲の線維形成のみでなく低減した胸膜線維症も示した。オフＤｏｘのＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスも、ほとんど線維形成が小さな気道および血管で見られない、同様の低減された胸膜および外膜の線維症を示した。総肺コラーゲンレベルは、Ｄｏｘの８週後に、Ｄｏｘ処理ＣＣＳＰ／−コントロールマウスと比較して、ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスにおいて４倍高かった（図６Ｂ）。ＰＸ−８６６処置ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスとオフＤｏｘのマウスの両方は、ビヒクル処置マウスと比較して、低減した肺コラーゲンレベルを示したが、レベルは、ＣＣＳＰ／−コントロールマウスと比較して、顕著に上昇したままであった。ＰＸ−８６６処置ＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスの肺力学は、ビヒクル処置マウスと比較して、顕著に改善されたが、また、コントロールおよび４週間オフＤｏｘのＣＣＳＰ−ｒｔＴＡ／ｏｔｅｔ−ＴＧＦαマウスと比較して、顕著に変化したままであった（図７）。
【０１６９】
肺線維症の個体の臨床治療をよりよく反映するために、ＰＩ３Ｋシグナル伝達の役割を、確立されたＴＧＦα誘発線維症の維持に対して測定した。Ｄｏｘ中へＰＸ−８６６で４週間処置したマウス（mice treated with PX-966 4 weeks into Dox）は、ビヒクル処置されたマウスと比較して、体重の標準化、肺組織学上の低減された線維症および改善された肺力学を示した。しかしながら、ＣＣＳＰ／−コントロールマウスと比較して、体重、肺組織学およびコラーゲンならびに肺力学はすべて変化したままであり、これは、線維症表現型の不完全な逆戻りを示す。線維症のプロセスは処置から４週間で完全に解かれるとは予想されないので、マウスにおいてＤｏｘを取り除くことによってＴＧＦα過剰発現が消失したエンドポイントを比較した。線維症のエンドポイントは、ＰＸ−８６６とオフＤｏｘの群の間で類似するならば、ＰＩ３Ｋ阻害は肺線維症を逆戻りさせるのに有効だろう。現在の研究は、ＰＸ−８６６マウスは、オフＤｏｘのマウスと比較して、総肺コラーゲンおよび組織学によって測定された同程度の線維症を示し、一方、ＰＸ−８６６−処置マウスにおいて、体重および肺力学を含む線維症の生理学測定は変化したままであった。線維症を逆戻りさせる際のＰＩ３Ｋの抑制をさらに評価するために、ＰＸ−８６６処置マウスを、４週間のみＤｏｘを与えたマウス（mice after only 4 weeks of Dox）と比較した。４週のＤｏｘ群における線維症のエンドポイント（図３および４）は、マウスが処置を始める場合、肺線維症の新しい出発点を表わす。ＰＩ３Ｋの阻害が線維症を逆戻りさせるならば、線維症エンドポイントは、４週のＤｏｘマウスと比較して改善することが予期される。ＰＸ−８６６処置マウスは、４週のＤｏｘマウスと比較して、肺組織学およびコラーゲンで測定された同程度の線維症を示し、一方、肺力学は、ＰＸ−８６６処置マウスにおいて顕著に変化したままであった。まとめると、逆戻り研究は、ＰＩ３Ｋの阻害は、線維症が確立した後、肺線維症進行を妨げるが、生理学的変質を減少させることを示す。ＰＸ−８６６−処置マウス中の毎週の体重の値は、処置の最後の２週間の間上昇する傾向があり、これは、ＰＸ−８６６処置マウスにおける線維症の遅延性の回復および分解（resolution）を示唆する。
【０１７０】
＜実施例３＞
ブレオマイシンはマウス肺線維症モデルを誘発した：
薬物誘発肺線維症のマウスモデルを本研究の中で使用する。Ｗａｌｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．  ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ, ｐｏｓｔｅｄ ｏｎｌｉｎｅ  Ｍａｒｃｈ  ２００８からのプロトコルを適用する。ブレオマイシンを、肺に直接的にか、または全身的にかのいずれかで送達し、マウスにおいて肺線維症のモデルを作製する。ＰＸ−８６６またはＰＸ−８６７を含む製剤を、治療的にまたは予防的に投与する。Ｓｉｒｃｏｌ  Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ａｓｓａｙ（Ｂｉｏｃｏｌｏｒ，Ｌｔｄ．；Ａｃｃｕｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手可能）を使用して、肺コラーゲン含有量を測定する。肺におけるコラーゲン含有量の減少は、このモデルにおける治療効果を示す。
【０１７１】
＜実施例４＞
腸線維症に関する動物モデル
Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２００３、１２５、１７５０−６１に記載されている慢性の腸線維症ネズミモデルを、本研究の中で使用する。慢性炎症を、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）の毎週の注射によって確立する。線維症は、典型的にはＴＮＢＳ注射剤の停止の後２−４週の間続く。ＰＸ−８６６を含む製剤を、治療的または予防的に投与する。
【０１７２】
結腸の線維症を組織学によって測定する。合計のコラーゲンレベルを、Ｋｉｖｉｒｉｋｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，（Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、１９６７、１９：２４９−５５）によって記載されたようにヒドロキシプロリンの定量化によって試験する。コントロールおよびＴＮＢＳで処置した結腸間充織細胞を、形態学と表現型によって特徴付ける。形質転換増殖因子ベータ−１（ＴＧＦ−β−１）の結腸での発現を、半定量的なポリメラーゼ連鎖反応によって測定する。コラーゲンレベルとＴＧＦ−β−１の発現の減少は、このモデルにおける腸の線維症への治療効果を示す。
【０１７３】
＜実施例５＞
ウサギの創傷治癒および過形成性瘢痕モデル
麻酔の後に、耳の創傷を１０匹のヤングアダルトのメスのニュージーランドウサギに作る（各耳の上に４つの創傷、１匹の動物当たり合計８つの創傷）。創傷を、７ｍｍの生検パンチを使用して作成し、その創傷は、軟骨を露出するように作られる。解剖顕微鏡を使用して、各傷の表皮、真皮および軟骨膜の完全除去を確実にする。過形成性瘢痕モデルとして、増加した創傷を結果として生じるのは、軟骨膜の層の除去および続いてのその欠陥の表皮再形成における遅延である。各創傷は独立して直り、別々のサンプルと考えられる。
【０１７４】
創傷治癒の初期相および後期相を研究するために、２つの処置群を調べる。早期処置群（ｎ＝１５ウサギ、１２０の創傷）を、負傷の後０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日および７日に、局所製剤の重量で０．０５―１．５％として製剤された試験化合物（溶液、クリーム、軟膏またはゲル）、または局所ビヒクル製剤を使用するプラセボのいずれかで処置し、負傷後２８日目に採取する。後期の処置群（ｎ＝１５ウサギ、１２０の創傷）を、負傷の後７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日および１４日に、局所製剤の重量で０．０５―１．５％として製剤された試験化合物（溶液、クリーム、軟膏またはゲル）、または局所ビヒクル製剤を使用するプラセボのいずれかで処置し、負傷後２８日目に採取する。各群中の創傷の半分を活性な化合物で処置し、半分をプラセボで処置する。各創傷を滅菌包帯（Ｔｅｇａｄｅｒｍ；３Ｍ）で覆い、各処置の後および肉眼的検査（gross examination）において創傷が再度上皮で覆われたように見えるまで必要とされる時、包帯を毎日替える。感染、乾燥またはネクローシスの証拠があるとき、創傷は解析から除外される。
【０１７５】
各研究の終わりに、創傷を、周囲の傷ついていない組織の５ｍｍのマージンと共に採取する。瘢痕を二分し、各創傷の半分は、４％の中性緩衝ホルムアルデヒドで固定し、脱水し、パラフィンに埋め込み、４μｍの断片にカットし、Ｍａｓｓｏｎ’s ｔｒｉｃｈｒｏｍｅまたはｓｉｒｒｕｓ ｒｅｄで染色する。各創傷の他方の半分を、液体窒素で急速冷凍し、ＲＮＡ抽出のために保存する。
【０１７６】
組織学解析
【０１７７】
光学顕微鏡を使用して、各組織断片を調べ、創傷治癒の程度および瘢痕肥大を、盲検で、等級をつけられたレンズレクチルで測定する。創傷治癒パラメーター：適切な測定は、肉芽組織内殖の用量および高さ、創傷の上皮化並びに創傷閉鎖である。各パラメーターを２度評価し、結果を平均する。
【０１７８】
瘢痕肥大パラメーター：
瘢痕の増大インデックスを、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．，２００５、２０１、ｐ３９１−３９７）によって記載されるように測定する。値を、盲検で２度測定し、結果を平均する。
【０１７９】
＜実施例６＞
腎臓線維症の動物モデル
マウスを全身麻酔によって鎮静させ、切開を背中の右側に作る。右の近位の尿管を晒し、二重結紮する。偽手術されたマウスは尿管を晒すが、結紮しない。その後、間質の再造形を調べる。間質の腎臓線維症は、典型的には手術の約１５日後に確立される。マウスのふさがれた腎臓は、線維芽細胞の増殖および炎症性の単核細胞の流入を伴う拡大した尿細管によって線維症の変更を示し、一方、偽手術されたマウスにおいて、正常な構造が保たれた。
【０１８０】
式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物の経口製剤は、治療的または予防的に投与される。組織形態計測的なコンパートメントを、フルカラーの３ＣＣＤカメラおよびＺｅｉｓｓ−ＫｏｎｔｒｏｎからのＫＳ−４００画像分析ソフトウェアを装備したＺｅｉｓｓ顕微鏡を使用して記録する。組織も、平滑筋アルファアクチンの間質の発現に関して観察される。間質のコラーゲンの蓄積を、免疫ペルオキシダーゼ、およびＳｅｒｉｕｓ  ｒｅｄ染色によって測定する。線維症の逆戻りまたは低減は、ＰＸ−８６６の経口量の治療上の有効性を示す。
【０１８１】
＜実施例７＞
緑内障ろ過手術後の瘢痕化のための動物モデル
すべての実験は、雌のチンチラ雑種ウサギ（ＣｈＢＢ：ＣＨ）、３〜６月齢、および１．５〜２．５ｋｇの重量で行う。動物を実験前に１週間馴化（acclimatized）させる。
【０１８２】
手術は、ケタミンおよびキシラジンの筋肉注射による全身麻酔並びにオキシブプロカイン点眼での局所麻酔のもと右眼において行う。Ｇｒｉｓａｎｔｉ ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Viｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ, ２００５；４６：１９１−１９６に記載されているように、周辺虹彩切除術を行う。手術の後の３日連続して、各動物に、ＰＸ−８６６またはＰＸ−８６７を含む点滴剤を１日１回投与する。
【０１８３】
処置された眼の一般的な外観を評価し、局所毒性および眼不耐性を評価し、および眼内圧を測定するために、臨床検査を行う。線維症の組織の堆積に起因する結膜の透明性の喪失および肥厚化を、臨床的に試験し、創傷治癒を測定する。瘢痕化の抑制が半透明の結膜を維持すると予期される。
【０１８４】
すべてのウサギを、術後１４日目に死なせ、処置した眼を組織学検査のために摘出する。標本の組織学的解析は、虹彩切除術の場所によって示されるような強膜切開部位の中心で行う。
【０１８５】
全面的な痕跡を与えるために組織をヘマトキシリンおよびエオジンで染色し、コラーゲンの細胞間マトリックス（ＥＣＭ）堆積を測定するためにマソンの技術で染色する。ＥＣＭ堆積の減少は治療効果を示す。
【０１８６】
＜実施例８＞
医薬組成物
【０１８７】
実施例８ａ：非経口組成物
【０１８８】
注射による投与に適切な非経口医薬組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物の水溶性の塩１００ｍｇを滅菌水中に溶解させ、その後、０．９％の滅菌食塩水１０ｍＬと混合する。混合物を、注射による投与に適した投与量単位の形態に組み込む。
【０１８９】
実施例８ｂ：経口組成物
【０１９０】
経口送達用の医薬組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物１００ｍｇをスターチ７５０ｍｇと混合する。混合物を、経口投与に適する、例えば硬ゼラチンカプセルのような経口投与量単位に組み込む。
【０１９１】
実施例８ｃ：舌下（硬ロゼンジ）組成物
【０１９２】
硬ロゼンジなどの、口腔送達用の医薬組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物１００ｍｇを、１．６ｍＬのライト・コーンシロップ、２．４ｍＬの蒸留水、及び、０．４２ｍＬのミント抽出物と混ざった、４２０ｍｇの粉末状砂糖と混合する。混合物を軽く混ぜ、型に流し込むことで、口腔投与に適したドロップ剤を形成する。
【０１９３】
実施例８ｄ：吸入用組成物
【０１９４】
吸入送達用の医薬組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物２０ｍｇを、５０ｍｇの無水クエン酸、及び、１００ｍＬの０．９％塩化ナトリウム溶液と混合する。混合物を吸入投与に好適な吸入送達用ユニット（例えば、噴霧器）に取り込む。
【０１９５】
実施例８ｅ：直腸ゲル組成物
【０１９６】
直腸送達用の医薬組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物１００ｍｇを、２．５ｇのメチルセルロース（１５００ｍＰａ）、１００ｍｇのメチルパラペン（ｍｅｔｈｙｌｐａｒａｐｅｎ）、５ｇのグリセリン及び１００ｍＬの精製水と混合する。その後、結果として生じたゲル混合物を、直腸投与に適切な直腸送達用ユニット（例えば、注射器）に取り込む。
【０１９７】
実施例８ｆ：局所ゲル組成物
【０１９８】
医薬的局所ゲル組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物１００ｍｇを、１．７５ｇのヒドロキシプロピルセルロース、１０ｍＬのプロピレングリコール、１０ｍＬのミリスチン酸イソプロピル、及び、１００ｍＬの精製アルコールＵＳＰと混合する。その後、結果として生じたゲル混合物を、局所投与に適切な容器（チューブなど）に取り込む。
【０１９９】
実施例８ｇ：点眼溶液組成物
【０２００】
医薬的点眼溶液組成物を調製するために、本明細書に記載の化合物１００ｍｇを、１００ｍＬの精製水中で０．９ｇのＮａＣｌと混合し、０．２ミクロンのフィルタを用いてろ過する。その後、結果として生じた等張液を、点眼投与に適切な点眼用の送達ユニット（点眼薬容器等）に取り込む。
【０２０１】
＜実施例９＞
摘出されたケロイドの再発の処置および予防に対するＰＩ−３キナーゼインヒビター化合物の影響を評価する臨床試験。術後７日に始める処置
耳垂上のケロイド瘢痕の切除に続いて局所的に投与された化合物の安全性および有効性を評価するための試験研究における、２重盲検の、無作為化した、プラセボ対照。各患者は、両側性のケロイド瘢痕切除を受け、患者がそれぞれ自分自身のコントロールとして働くように、片方の耳垂を化合物で処置し、一方、もう片方の耳垂をプラセボで処置する。
【０２０２】
１８〜６５歳の１０〜１２の被験体が、研究に参加する。全ての被験体は、切開後、その結果が各耳垂上の単一の傷の長さ２ｃｍもあるように、外科的切除に適している両側性のケロイド瘢痕を有しているべきである。創傷は、耳垂の皮膚、脂肪および線維組織に制限される。
【０２０３】
被験体は、研究前に１２週以内に、照射、冷凍外科、コルチコステロイドまたは他の薬物によるケロイド処置を経験していてはならない。被験体は、出血性疾患の病歴を有さず、進行中の乾癬若しくは湿疹、又は悪性皮膚腫瘍を経験していてはならず、またそれらを有していてはならない。子を妊娠している可能性のある女性の被験体は文書による陰性尿妊娠テストを受けるべきであり、研究期間の間、避妊の医学的に証明された形態を実行しなくてはならない。書面のインフォームドコンセントを、各被験体から得る。
【０２０４】
外科ケロイド切除および処置プロトコル
【０２０５】
１０〜１２の患者が、両側性のケロイド切除を受ける。各患者は、創傷を閉じた（wound closure）７日後に、各直線センチメートルの片方の耳垂創縁に(to each linear centimeter of one ear lobe wound margin）、臨床的に許容可能で安全な局所用の製剤（溶液、クリーム、軟膏またはゲル）中０．０５から１．５％の間の適切な濃度に処方されたＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物の経皮投与を受け、その後、４週間の間、２４時間ごとに繰り返して受ける。もう片方の耳垂は、創傷を閉じた後すぐに、各直線センチメートルの片方の耳垂創縁に投与されるプレセボ（処置群において使用されるのと同一であるが、活性な医薬成分を欠いている、臨床的に許容可能で安全な局所用の製剤）で局所的に処置され、その後、４週間の間、２４時間ごとに繰り返して処置される。主要な評価は、視覚的なアナログスケールを用いた、手術後４週から６月の時間にわたるレイパネル（lay panel）による写真の評価に基づく。
【０２０６】
主要な評価項目は、５２週の時間枠の間、ケロイド指標で試験化合物について予備的な安全性の実績を獲得することである。副次的評価項目は、（ｉ）ケロイド再発（時間枠５２週間）および（ｉｉ）医師のグローバル評価と被験体の評価（時間枠５２週間）である。
【０２０７】
＜実施例１０＞
肺線維症の処置に対するＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物の影響を評価する第Ｉ相試験
この研究は、以前の処置に失敗したことのある特発性肺線維症の患者について、ＰＩ−３キナーゼインヒビターの投与の安全性を評価する。
【０２０８】
研究タイプ：介入
【０２０９】
研究設計：処置、無作為化されていない、非盲検の、管理されない、単一グループの割付、安全性／有効性の研究
【０２１０】
各患者に、式ＩＡ、ＩＢ、ＩＩＡまたはＩＩＢの化合物の１日２回の用量（a twice daily dose）を投与する。
【０２１１】
適格性：３５歳〜８０歳；研究に資格を有する両方の性；健康なボランティア：受け入れず（Not accepted）。
【０２１２】
包含基準：特発性肺線維症の診断；下記の少なくとも１つによって定義された、６か月の処置（アザチオプリンまたはシクロホスファミドとの／なしでの、ステロイド）にもかかわらず疾患が進行していること：増加した症状：少なくとも１０％の呼気肺活量の減少、少なくとも２０％の一酸化炭素に対する拡散能力の低下、ＣＸＲまたは高分解能ＣＴ走査における増加した浸潤、スクリーニング前少なくとも３０日間は、＜１５ｍｇのプレドニゾンを取ること。
【０２１３】
除外基準：かなりの環境曝露、コラーゲン道管病の診断、活性感染の証拠、臨床的に顕著な心臓病、心筋梗塞、６か月内の大動脈冠動脈バイパス術または血管形成術、不安定狭心症、６か月以内の入院が必要とされるうっ血性心不全、制御されていない不整脈、不十分にしか制御されていないあるいは重篤な糖尿病、妊娠または授乳中、別の実験プロトコルへの現在の登録。
【０２１４】
生理学基準：ＦＥＶ１／ＦＶＣ＜０．６０
【０２１５】
研究所基準：総ビリルビン＞１．５×正常の上限、ＡＳＴまたはＡＬＴ＞３×正常の上限、アルカリフォスファターゼ＞３×正常の上限、白血球数＜２，５００／ｍｍ３、ヘマトクリット＜３０％、血小板＜１００，０００／ｍｍ３、プロトロンビン時間ＩＮＲ＞１．５。
【０２１６】
この研究に対する主要なエンドポイントは、安全性である。
【０２１７】
副次的なエンドポイント：肺機能、運動能力および生活の質の変化。
【０２１８】
＜実施例１１＞
肝臓線維症の処置に対するＰＩ−３キナーゼインヒビターの化合物の影響を評価する臨床試験
本研究の目的は、肝臓線維症の発生率が、Ｃ型肝炎肝硬変のための肝移植の後の患者で低減されるか否かにある。本研究は、感染が戻っても線維症の発生率が低減されるか遅れるかどうかも評価する。
【０２１９】
研究タイプ：介入
【０２２０】
研究設計：Ｃ型肝炎肝硬変のための移植１２か月後に肝臓線維症の進行を比較する、無作為化された、非盲検の研究。各患者に、ＰＸ−８６６またはＰＸ−８６７の１日３回の用量（a thrice daily dose）を投与する。
【０２２１】
適格性：１８歳〜７５歳；両方の性。
【０２２２】
包含基準：移植の理由はＣ型肝炎肝硬変による末期の肝臓病である；生体ドナーから第１の肝移植を受けた患者；ＨＣＶ＋、ＨＩＶ＋またはＨＢＶ＋ドナーからの肝臓のレシピエント；予め決められたサイズを超える肝臓癌のために移植された者；少なくとも６か月の間禁欲的でなかった、共存するアルコール性疾患を患う患者。
【０２２３】
主要な評価項目：線維症の割合（ステージ２またはその上［Ｉｓｈａｋ−Ｋｎｏｄｅｌｌ  ＦＳ＞２］）
【０２２４】
副次的評価項目：死または移植片機能喪失の結合したエンドポイントまたはＦＳ＞２の割合；平均線維症スコア、少なくとも１つのステージの線維症の増加がある患者のパーセンテージ；線維化胆汁うっ滞性肝炎の発生率。
【０２２５】
＜実施例１２＞
腎臓線維症の治療に対するＰＩ−３キナーゼインヒビター化合物の影響を評価する臨床試験
ＰＸ−８６６で処置した腎臓同種移植レシピエントにおける、６か月でのプロトコル生検における、間質性線維症および動脈硬化症の発生および程度、並びに糸球体の容量を測定すること。
【０２２６】
研究タイプ：介入
【０２２７】
研究設計：無作為化された、非盲検の、並行割付（parallel assignment）、アクティブコントロール（active control）。各患者は、ＰＸ−８６６またはＰＸ−８６７の１日３回の用量（a thirice daily dose）を投与される。
【０２２８】
適格性：年齢＞１８歳。
【０２２９】
包含基準：生体ドナーからの腎臓同種移植のために、少なくとも１つのＨＬＡのミスマッチが必要である；書面のインフォームド・コンセント（地方条例により遵守する）。
【０２３０】
除外基準：拒絶反応のため移植の失敗の病歴を有する、２回目または３回目の腎臓同種移植のレシピエント；ハプロタイプ同一の生体ドナーまたは心臓の鼓動がないドナーからの腎臓同種移植のレシピエント。
【０２３１】
主要な評価項目：本研究の主要なエンドポイントは、６か月でのプロトコル生検の皮質の断片的な間質性線維症の容量である。
【０２３２】
副次的評価項目：１年での患者の生存および移植片の生存；６か月および１２か月での
血清中クレアチニンおよび推定されたクレアチニン・クリアランス；６か月でのプロトコル生検における脈管内膜のエリアおよび動脈壁の厚さおよび糸球体の容量；最初の年の間の急性拒絶エピソードの発生；処置不成功の発生。
【０２３３】
本発明は参照と共にその特定の好ましい実施形態のために相当詳細に記載されたが、他のバージョンが可能である。それ故、添付の請求項の精神および範囲は、本明細書に含まれる記載および好ましいバージョンに限定的であるべきでない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【国際調査報告】
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