(57)【要約】本発明は、改善された個別化医療の分野に属する。より正確には、本発明は、前回の5-FUの連続注入中に測定された5-FU血漿濃度と本明細書において記載される決定アルゴリズムとに基づいて、FOLFOXレジメンまたは類似のレジメンによって治療される患者において連続注入によって投与される5-FUの用量を漸進的に最適化するための方法に関する。本発明はまた、各FOLFOXまたは類似の治療サイクルにおいて連続注入で投与された5-FU用量が本発明による決定アルゴリズムを用いて最適化される、癌患者を治療するための方法にも関する。2012503639.tif 000014
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を患っている患者の血液試料から、次回の治療サイクル（n+1）のための5-フルオロウラシル（5-FU）の用量D(n+1)を決定するための方法であって、
・各治療サイクルiが、
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2（±20％）の葉酸またはその塩、
−43〜49時間の連続注入で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含み、かつ
・該血液試料が、前回の治療サイクルnにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも1時間後かつ該灌流の終了前に該患者から採取されており、
・該方法が、
・該血液試料中の5-FU血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する（dose)段階、
・以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて、D(n)に応じてD(n+1)を算出する段階
を含む、方法。
【請求項２】
各サイクルiにおける5-FUの前記連続注入の持続期間が約46時間である、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
各サイクルiにおいてボーラスで投与される5-FUの用量が約400 mg/m2である、請求項1または2に記載の方法。
【請求項４】
各サイクルiにおいて前記患者に投与される葉酸またはその塩の用量が約100 mg/m2である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
各サイクルiにおいて前記患者に投与されるオキサリプラチンの用量が約85、100、または130 mg/m2である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記治療が、各サイクルiにおいて抗癌性モノクローナル抗体の前記患者への投与をさらに含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗癌性モノクローナル抗体が、セツキシマブ、パニツムマブ、またはベバシズマブである、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の終了の15分前〜22時間前に採取されている、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の終了の2〜3時間前に採取されている、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の開始の1時間後〜5時間後の間で採取されている、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
サイクル1において連続注入で投与される5-FUの用量D(1)が、多くても約2500 mg/m2であり、かつ5-FUに対する前記患者の起こりうる感受性の増加に関する治療前診断に基づいて決定されている、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
5-FUに対する前記患者の起こりうる過感受性に関する前記診断が、以下のインビトロ試験のうちの少なくとも2つを組み合わせることによって、該患者の少なくとも1つの生物学的試料から行われる、請求項11に記載の方法：
（a）DPD遺伝子における有意な変異の存在の分析、
（b）ウラシル血漿濃度の測定、および
（c）ジヒドロウラシル血漿濃度／ウラシル血漿濃度の比（UH2/U比）の測定。
【請求項１３】
前記の3つのインビトロ試験が行われ、かつ初回用量D(1)が以下の決定アルゴリズムを用いて決定されている、請求項12に記載の方法：
（a）−DPD遺伝子における有意な変異が検出されておらず、かつウラシル血漿濃度が15μg/L未満である場合に、または
−DPD遺伝子における有意な変異が検出されておらず、かつウラシル血漿濃度が少なくとも15μg/Lであるが、UH2/U比が少なくとも6である場合に、
2500 mg/m2の標準用量D(1)がサイクル1において前記患者に投与され、
（b）他の全ての場合において、
−6≦UH2/U比であれば、D(1)が1750 mg/m2であり、
−3≦UH2/U比＜6であれば、D(1)が1250 mg/m2であり、
−1≦UH2/U比＜3であれば、D(1)が750 mg/m2であり、
−UH2/U比＜1であれば、該患者が5-FUによって治療されないことが好ましい。
【請求項１４】
前記患者が、結腸直腸癌、胃癌、肝管癌、膵臓癌、食道癌、または乳癌を患っている、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、進歩した個別化医療の分野に属する。より正確に言えば、本発明は、前回の5-FUの連続注入中に測定された5-FUの血漿濃度と本明細書において記載される決定アルゴリズムとに基づいて、FOLFOXレジメンまたは類似のレジメンによって治療される患者において連続注入によって投与される5-FUの用量を漸進的に最適化するための方法に関する。本発明はまた、各々のFOLFOXまたは類似の治療サイクルにおいて連続注入で投与される5-FUの用量が本発明による決定アルゴリズムを用いて最適化される、癌患者を治療するための方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ほとんどの薬剤は、有害な効果を有する場合がある。しかしながら、抗癌剤は、より悪い副作用をもたらす薬物の1つである。実際に、抗癌剤は通常、腫瘍細胞に対して何らかの優先性を有する細胞障害性活性剤である。しかし、それらはまた、他の細胞に対しても何らかの毒性を示し、従ってしばしば重篤な有害反応（グレード3〜4の毒性について20〜25％および死亡率0.2％）をもたらす。
【０００３】
このことは、重篤な副作用が患者の生活の質に影響を及ぼすのみならず、毒性によって死に至る可能性があることから、またはより多くは治療の終了もしくは低減に至るのでその有効性が減少する可能性があることからも、重要な問題である。
【０００４】
薬物の同化能および異化能に影響を及ぼす個体間の代謝変動は、毒性リスクに関与する。しかし、抗癌剤の代謝に関する知識および薬理学的技術のいくつかの最近の向上にもかかわらず、治療の個別化はなおも一般的なことではない。
【０００５】
対照的に、用量は通常標準化されている。用量およびプロトコールの標準化はかつて有用であったが、現在では、治療される対象に応じて、治療の有効性および毒性に関してその限界を示している。
【０００６】
しかし、投与される抗癌剤の用量は通常、適切性が実験的根拠または理論的根拠に基づいていない体表面に応じて、ならびにせいぜい全血球計算および腎機能検査などのいくつかの生物学的検査に応じてなおも算出されている。個々の薬物動態特性、代謝特性、遺伝的特性、または後成的特性は考慮されていない。
【０００７】
このように、毒性を低減させかつ治療の有効性を向上させるために、そのような個々の特性が考慮される抗癌性化合物を用いる治療法が必要である。
【０００８】
5-フルオロウラシル（5-FU）は、DNA合成を干渉する物質の治療クラスである、フルオロピリミジンファミリーの優れた抗癌剤である。5-FUは、主要な化学療法剤であり、結腸直腸癌、胃癌、食道癌、ORL癌、および乳癌の治療において、特にアジュバント治療としてまたは転移状況において用いられる。毎年、90,000人より多くの患者が5-FUによって治療される。
【０００９】
しかし、5-FUによって、血性または出血性の可能性がある下痢などの消化管における毒性；重複感染または敗血症を引き起こす可能性がある白血球好中球減少症（leuco-neutropenia）などの造血器合併症（haematopoietic complications）；粘膜炎、手足症候群などの皮膚または粘膜の合併症；トキシダーミア（toxidermia）；心毒性および小脳症候群を含む、重度のグレード3〜4の毒性を20〜25％にもたらす。
【００１０】
そのような副作用は、互いに合併する可能性があり、それによって多臓器（polyvisceral）毒性スキームが起こり、これは患者の5〜8％において非常に早期に起こり、治療した患者の0.8％では死亡さえ引き起こす。これらの副作用はまた、治療中に遅れて出現する場合がある。
【００１１】
5-FUは通常、転移状況において用いられる。加えて、それはまた、アジュバント治療として、すなわち再発が心配される限局性腫瘍について治療される患者の場合において、ますます頻繁に用いられる。重度の毒性の副作用のリスクはそのような状況では考慮されるはずがない。
【００１２】
5-FUの副作用は主に、5-FU代謝の大きい個体間変動によるものである。5-FUの細胞障害性機序は、DNA合成を遮断する活性ヌクレオチドにおけるその変換に基づく。そのような活性ヌクレオチドは、5-FUが同化経路によって代謝される場合に得られる。しかし、5-FUの酵素的活性化（同化経路）と異化経路における5-FUの排出との間には平衡が存在する。異化経路における5-FUの排出の最初の律速酵素は、ジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼ（DPD）である。正常なDPD酵素活性を有する対象において、投与された5-FUの約80％が異化経路におけるDPDによって排出されるが、その細胞障害作用にとって必要である同化経路にとって利用できるのは、投与された5-FUのわずか20％に過ぎないことから、この遍在性酵素は、5-FUの生物学的利用率にとって主要な要因である。
【００１３】
しかし、DPD活性の欠損（完全または部分的）を有する患者では、細胞障害作用にとって必要である同化経路に利用可能な投与された5-FUの百分率が大きく増加して、従って、これらの患者は急性の早期かつ重度の5-FU毒性を発症するリスクが増加している。
【００１４】
他方、DPD活性が増加した患者では、体表面積に基づく標準用量は不十分でありその結果無効である。
【００１５】
DPD活性は大きい個体間変動を示し、測定された活性値は、別個の患者2人の間で6倍の比率で異なる場合がある（Etienne M C, et al: J Clin Oncol 12: 2248-2253, 1994（非特許文献1））。5-FUのクリアランスは対象によって6〜10倍異なることから、この酵素の変動によって、5-FU代謝および血漿中動態（plasmatic kinetics）に大きい変動が起こる（Gamelin E., et al.. J Clin Oncol, 1999, 17, 1105-1110（非特許文献2）; Gamelin E., et al. J. Clin. Oncol, 1998, 16 (4), 1470-1478（非特許文献3））。
【００１６】
この状況は、治療の毒性に関するのみならず、治療の有効性に関しても大きい意味を有する。実際に、薬物動態パラメータが、特に結腸直腸およびORL癌における腫瘍反応に関して、毒性のみならず治療の有効性にも相関することがいくつかの試験から示されている。
【００１７】
加えて、治療が有効でありかつ重度の副作用を引き起こさない5-FUの血漿濃度の範囲はむしろ狭く、そのため有効な5-FU血漿濃度と毒性のある5-FU血漿濃度との間に大きい差はないことが見いだされている。
【００１８】
このように、治療活性を有するために十分でもありかつ重度のグレード3〜4の毒性を防ぐために十分なほど低くもある狭い範囲の5-FU血漿濃度をもたらす、5-FU用量を各患者に投与するために、そのような変動を考慮に入れる治療法が必要である。
【００１９】
DPD活性の変動に加えて、5-FUの代謝はまた、投与された用量に大きく依存し、主として投与期間、すなわち灌流の持続時間に依存する。実際に、DPDは飽和可能であり、そのため患者の血漿中動態は線形ではなく、ボーラス投与から数時間または数日間の連続的灌流に変更すると、クリアランスは10倍になる（Gamelin E., Boisdron-Celle M. Crit Rev Oncol Hematol, 1999, 30, 71-79（非特許文献4））。
【００２０】
このように、5-FUの用量に関して一般的な個別最適化方法を提供することができない。対照的に、小さい変動に対してはある程度許容が適用される場合があるが、各々の5-FU治療プロトコールに関して、5-FU投与の用量および主として5-FU投与の持続に応じて、5-FU用量の特定の個別最適化法を見いださなければならない。
【００２１】
加えて、患者における5-FUの血漿濃度の増加または減少は、患者に投与される5-FUの用量の増加または減少に比例せず、そのため、所定の投与された5-FU用量について得られた、より高いまたはより低い濃度から開始した場合の特定の5-FU血漿濃度に達するために、投与された5-FUの用量をどれほど多く増加または減少させるかを決定することは容易でない。
【００２２】
その上、5-FUは、単剤療法で用いられたある時期があったが、現在では通常、オキサリプラチンまたはイリノテカンなどの他の細胞障害剤と併用して、および任意でセツキシマブ、パニツムマブ、またはベバシズマブなどのモノクローナル抗体を用いる追加の標的療法と併用して投与される。
【００２３】
これらの追加的な剤、および特にオキサリプラチンまたはイリノテカンなどの化学療法剤も同様に、5-FUによって誘導される副作用と類似の副作用を生じる可能性があり、このように腫瘍の治療のみならず毒性の発生においても相乗効果のリスクを生じる。
【００２４】
特に、オキサリプラチンは、5-FUによって誘導される既に従来の毒性である下痢および白血球減少症を著しく誘発する可能性がある（Graham J, Mushin M, Kirkpatrick P. Oxaliplatin. Nat Rev Drug Discov, 2004, 3: 11-12（非特許文献5））。さらに、オキサリプラチンは5-FU代謝を阻害することが示されている（Maindrault-Goebel F, et al. Oncology Multidisciplinary Research Group (GERCOR).Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83（非特許文献6））。
【００２５】
その結果、5-FUと併用して用いられる化学療法剤に応じて、5-FU用量の特定の個別最適化法が見いだされなければならない。そのような方法により、5-FUの血漿濃度の範囲が決定されるべきである。
【００２６】
抗癌プロトコールにおいて患者に投与される5-FUの用量を最適化するためにいくつかの試みがなされている。しかし、先にも言及した通り、特に5-FUの投与様式（および特に連続注入の持続期間）が変更された場合には、または5-FUがオキサリプラチンなどの5-FUの薬物動態に影響を及ぼす可能性がある化学療法剤と併用される場合には、結果を他のプロトコールに置き換えることはできない。
【００２７】
Gamelin et al（Gamelin, E et al. J Clin Oncol. 2008 May 1 ;26(13) :2099-105（非特許文献7））は、8時間連続注入される5-FUと併用した葉酸の毎週の投与に基づく治療において5-FUの用量を調節するための方法を定義した。しかし、現在のプロトコールは一般的に、5-FUを葉酸および別の化学療法剤、一般的にはオキサリプラチンまたはイリノテカンと併用することから、そのようなプロトコールはもはや用いられていない。加えて、現在のプロトコールは、5-FUのかなり長い連続注入を用いる。
【００２８】
Ychou et al（Ychou M, Duffour J, Kramar A, et al. Cancer Chemother Pharmacol, 2003, 52: 282-90（非特許文献8））は、2ヶ月に1回のLV5FU2レジメンに基づく治療において5-FU用量を増加させるための方法を記載している。しかし、現在のプロトコールは一般的に、5-FUを葉酸および別の化学療法剤、一般的にはオキサリプラチンまたはイリノテカンと併用することから、そのようなプロトコールももはや用いられていない。加えて、Ychouらによって記載された方法は、5-FUの用量を増加させることを意図するのみならず、有意な（グレードII〜IV）の毒性が観察されない限り増加が系統的に適用される。このように、この方法は5-FUの用量を増加させ、潜在的に治療の有効性を増加させるが、それは、5-FUの血漿レベルが有効であるが毒性でない狭いウィンドウに留まることによって重度の毒性を防ぐことができない。このように、Ychouらの方法はなおも、最良の治療において許容できない有意なリスクを患者に負わせる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２９】
【非特許文献１】Etienne M C, et al: J Clin Oncol 12: 2248-2253, 1994
【非特許文献２】Gamelin E., et al.. J Clin Oncol, 1999, 17, 1105-1110
【非特許文献３】Gamelin E., et al. J. Clin. Oncol, 1998, 16 (4), 1470-1478
【非特許文献４】Gamelin E., Boisdron-Celle M. Crit Rev Oncol Hematol, 1999, 30, 71-79
【非特許文献５】Graham J, Mushin M, Kirkpatrick P. Oxaliplatin. Nat Rev Drug Discov, 2004, 3: 11-12
【非特許文献６】Maindrault-Goebel F, et al. Oncology Multidisciplinary Research Group (GERCOR).Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83
【非特許文献７】Gamelin, E et al. J Clin Oncol. 2008 May 1 ;26(13) :2099-105
【非特許文献８】Ychou M, Duffour J, Kramar A, et al. Cancer Chemother Pharmacol, 2003, 52: 282-90
【発明の概要】
【００３０】
本出願において、本発明者らは、5-FU灌流の終了前に採取した血液試料から測定された5-FUの血漿濃度と新規の決定アルゴリズムとに基づいて、FOLFOXプロトコール（ボーラスおよび46時間連続注入での5-FU、葉酸、およびオキサリプラチン）によって治療される患者に対して連続注入によって投与される次回の5-FU用量を最適化するための方法を見いだした。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】46時間の連続注入における最適な5-FU用量の分布。最適な用量の各々の範囲に関して、最適な用量を、2500 mg/m2/サイクルの標準用量の百分率として表記し、および用量が最適である患者の数を示す。
【図２】患者119人の3ヶ月時点における治療の有効性。3ヶ月時点において治療に対する完全反応（CR）、治療に対する部分反応（PR）、安定な疾患、または進行性の疾患（PD）を示す、本発明による5-FU調節法を用いて3ヶ月間治療された患者119人の数（灰色の棒グラフ）および百分率（黒色の棒グラフ）を表す。患者の百分率をそのそれぞれの黒色の棒グラフの上に示す。
【図３】患者101人の6ヶ月時点における治療有効性。6ヶ月時点において治療に対する完全反応（CR）、治療に対する部分反応（PR）、安定な疾患、または進行性の疾患（PD）を示す、本発明による5-FU調節法を用いて6ヶ月間治療された患者101人の数（灰色の棒グラフ）および百分率（黒色の棒グラフ）を表す。患者の百分率をそのそれぞれの黒色の棒グラフの上に示す。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
発明の説明
本発明は、このように、癌を患っている患者の血液試料から、次回の治療サイクル（n+1）のための5-フルオロウラシル（5-FU）の用量D(n+1)を決定するための方法であって、
・各治療サイクルiが
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2の葉酸またはその塩
−43〜49時間の連続注入で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含み、かつ
・該血液試料が、前回の治療サイクルnにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも2時間後かつ該灌流の終了前に、該患者から採取されており、
該方法が、
・該血液試料中の5-FUの血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する（dose)段階、
・以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて、D(n)に応じてD(n+1)を算出する段階
を含む方法に関する。
【００３３】
本発明はまた、癌を患っている患者を治療するための方法であって、該方法が、
・各治療サイクルiが、
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2の葉酸またはその塩、
−約46時間の灌流で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含む、連続治療サイクルを該患者に実施する段階、
・各サイクルiにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも3時間後かつ該灌流の終了前に該患者から血液試料を採取し、かつ5-FUの血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する段階を含み、
・治療サイクル1の初回用量D(1)が多くても2500 mg/m2であり、
・各サイクルiにおいて、次回の治療サイクルi+1の次回の用量D(i+1)が、以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて決定される、方法にも関する。
【００３４】
このように、本発明による方法は、FOLFOXレジメンまたは類似のレジメンによって治療される癌患者に関する。
【００３５】
上記の決定アルゴリズムは、FOLFOX 4レジメン、FOLOFOX 6レジメン、またはFOLFOX 7レジメンの後の癌患者について開発および試験されている。
【００３６】
FOLFOX 4（de Gramont A, et al: J Clin Oncol 15: 808-815, 1997; Maindrault-Goebel F, et al. Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（葉酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に85 mg/m2オキサリプラチン。
【００３７】
FOLFOX 6（Tournigand C, et al. J Clin Oncol 2004 Jan 15; 22(7):229-37; Maindrault-Goebel F, et al. Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（葉酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に100 mg/m2オキサリプラチン。
【００３８】
FOLFOX 7（Maindrault-Goebel F, et al. Eur J Cancer. 2001 May;37(8):1000-5）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（葉酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に130 mg/m2オキサリプラチン。
【００３９】
背景のセクションにおいて言及した通り、5-FU用量を最適化するためのアルゴリズムを、特定の治療レジメンから別の全く異なる特異的治療レジメンに移すことはできない。
【００４０】
上記のアルゴリズムは、FOLFOXレジメン（上記を参照されたい）によって治療される癌患者に関して作成されかつ試験されていることから、これらの特定のレジメンおよび類似のレジメンに関して正確である。実際に、5-FUの連続注入の持続期間、葉酸またはオキサリプラチンの存在などのパラメータを有意に変更することはできない。しかし、これらのパラメータの小さい変動は決定アルゴリズムの正確性を損なわない。
【００４１】
このように、FOLFOXレジメンと類似のレジメンは、2つの連続するサイクルが通常約2週間離される反復治療サイクルを含み、各治療サイクルが、
−ボーラスとして投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2の葉酸またはその塩、
−43〜49時間の連続注入によって投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含む、レジメンとして定義されうる（サイクルは通常2週間離される。しかし特定のサイクル後に有意な毒性が観察される場合には、次回のサイクルを約1週間または数週間遅らせてもよく、このように2つのサイクルを約3週間またはそれより長い期間離してもよい）。
【００４２】
各サイクルiは、連続注入で投与される5-FUの用量D(i)以外は、前回のサイクル（i-1）と好ましくは同一であり、該5-FUの用量D(i)は、前回のサイクルの5-FUの連続注入中に採取した患者の血液試料から測定された5-FU血漿濃度と上記の決定アルゴリズムとに基づいて最適化される。
【００４３】
先に言及した通りに、5-FUの連続注入の期間を、FOLFOXプロトコールの46時間と比較して有意に変更しなくてもよい。しかし、5〜10％の変動はアルゴリズムの正確性を損なわず、このように5-FUの連続注入の持続期間は、43〜49時間の間に含まれてもよい。しかし、好ましい態様において、5-FUの連続注入の持続期間は、44〜48時間の間、好ましくは45〜47時間の間に含まれ、および最も好ましくは約46時間である。本発明に従って、期間に適用される場合の「約」という用語は、明記された値の前後半時間の増加または減少を意味すると意図される。
【００４４】
上記の決定アルゴリズムが作成されかつ試験されている特定の治療レジメンは、各サイクルiにおいて400 mg/m2の5-FUボーラスを含む。しかし、治療サイクルにおける葉酸またはオキサリプラチンの存在とは逆に、5-FUボーラスの存在は、決定アルゴリズムの正確性にとって重要なパラメータではない。
【００４５】
実際に、5-FUボーラスは、存在する場合、5-FUの連続注入の開始前に投与される。通常、5-FUボーラスが投与される場合、43〜49時間の5-FU注入は5-FUボーラスの直後である。加えて、5-FUは血液中での半減期が非常に短く、このように5-FUの血漿濃度は5-FUボーラスの終了後に非常に急速に減少し、そのため5-FUボーラスの用量が500 mg/m2を超えないという条件で、5-FUボーラス用量は、連続注入中の5-FUのプラトーに達した血漿濃度に影響を及ぼさず、かつこのように決定アルゴリズムに影響を及ぼさない。しかし、好ましい態様において、各治療サイクルiは、公知のFOLFOXレジメンと同様に、用量約400 mg/m2の5-FUがボーラスで投与されるように行われる。
【００４６】
全ての本発明において、任意の治療剤の用量（5-FU、葉酸、およびオキサリプラチンが含まれる）に適用される場合の「約」という用語は、明記された値の上下10％の増加または減少を意味すると意図される。
【００４７】
先に言及した通り、葉酸は、各治療サイクルiに必ず存在する。葉酸、すなわちN-(5-ホルミル-(6R,S)-5,6,7,8-テトラヒドロプテロイル)-L-グルタミン酸は、化学合成によって得られた場合、その2つの(6R)（この異性体が右旋性であることからD-葉酸とも呼ばれる）および(6S)（この異性体が左旋性であることからL-葉酸とも呼ばれる）ジアステレオマー型の等モル混合物によって形成される。(6,S)異性体のみが産物の周知の薬理学的活性を有するが、他のものはそれを完全に欠如することが知られている。全ての本発明において、葉酸またはその塩は、L-およびD-葉酸のラセミ型混合物として投与されてもよいが、このように葉酸またはその塩の任意の用量は、L-葉酸の用量として表記される。このように、0〜600 mg/m2の葉酸の範囲に言及する場合、用量0〜600 mg/m2のL-葉酸が患者に投与されることを意味する。その結果、L-葉酸およびD-葉酸のラセミ混合物が投与される場合、葉酸の全（L-およびD-葉酸）用量は0〜1200 mg/m2の間に含まれ、L-葉酸の用量は0〜600 mg/m2の間に含まれる。
【００４８】
上記の決定アルゴリズムが作成されかつ試験されている特定の治療レジメンにおいて、葉酸の用量（すなわちL-葉酸の用量）は100 mg/m2である。このように決定アルゴリズムは、0〜600 mg/m2の用量に関して適切でありうる。好ましい態様において、各サイクルiにおいて投与される葉酸の用量は、24〜360 mg/m2の間に含まれ、好ましくは45〜240 mg/m2、より好ましくは56〜180 mg/m2、さらにより好ましくは80〜120 mg/m2の間に含まれる。最も好ましくは、各サイクルiにおいて投与される葉酸の用量は、公知のFOLFOXレジメンと同様に約100 mg/m2である。
【００４９】
先に言及した通り、オキサリプラチンはまた、各治療サイクルiに必ず存在する。上記の決定アルゴリズムは、オキサリプラチンの量が異なる3つの別個のFOLFOXレジメン（FOLFOX4、FOLFOX6、およびFOLFOX7）について作成されかつ試験されていることから、決定アルゴリズムは上記のパラメータによって、および70〜130 mg/m2、好ましくは85〜130 mg/m2の間に含まれる各サイクルで投与されるオキサリプラチンの用量によって、任意の治療レジメンに対して一般化されうる。好ましい態様において、各サイクルiにおいて患者に投与されるオキサリプラチンの用量は、公知のFOLFOX4レジメン、FOLFOX6レジメン、およびFOLFOX7レジメンと同様に、約85、100、または130 mg/m2である。
【００５０】
加えて、本発明による決定アルゴリズムはさらに、EGFR（上皮細胞増殖因子受容体）に対するモノクローナル抗体（セツキシマブまたはパニツムマブ）、またはVEGF（血管内皮増殖因子）に対するモノクローナル抗体（ベバシズマブ）の投与が追加されるFOLFOX4レジメン、FOLFOX6レジメン、またはFOLFOX7レジメンによって治療された患者において、有効性が確認されている。このように、上記の本発明による方法のさらなる態様において、治療はさらに、各サイクルiにおいて抗癌性モノクローナル抗体、好ましくはEGFRまたはVEGFに対するモノクローナル抗体、好ましくはセツキシマブ、パニツムマブ、またはベバシズマブの患者への投与を含む。
【００５１】
本出願において、「D(i)」は常に、43〜49時間の連続注入でサイクルiにおいて患者に投与される5-FUの用量を指す。サイクル（n+1）で投与される次回の用量D(n+1)の決定は、サイクルnで投与される前回の用量D(n)、および前回のサイクルnの5-FUの連続注入中に採取された患者の血液試料から測定された5-FUの血漿濃度（[5-FU]）の値に依存する。代表的であるためには、測定される5-FU血漿濃度は、プラトーに達した5-FUの血漿濃度でなければならない。
【００５２】
5-FUは血液中での半減期が非常に短いので、5-FUの血漿濃度は、5-FUの連続注入の終了後非常に急速に減少する。その結果、代表的であるためには、前回のサイクルnにおいて患者から採取される血液試料は、連続注入の終了前に採取されなければならず、終了後ではない。
【００５３】
加えて、5-FUの血漿レベルは通常、5-FUの連続注入の開始の約1時間後にプラトーに達する。より確実にするために、時に5-FUの連続注入の開始後1時間半待つことによってほとんどの患者が確実にプラトーに達していると考えられる。その結果、血液試料は、連続注入の開始の少なくとも1時間後、好ましくは少なくとも1時間半後、さらにより好ましくは少なくとも2時間後かつ連続注入の終了前に採取されてもよい。
【００５４】
しかし、何人かの患者において、5-FUの血漿濃度のプラトーに達するまでに必要な時間はより長い。このように、好ましい態様において、血液試料は前回のサイクルnにおいて5-FUの連続注入の後半部分で採取される。都合よくは、血液試料はサイクルnにおいて、5-FUの連続注入の終了の15分前〜22時間前、好ましくは30分前〜10時間前、より好ましくは1時間前〜5時間前、および最も好ましくは2〜3時間前で採取されている。
【００５５】
または、一般的に5-FUの連続注入の開始の約1時間後にプラトーに達することから、他の局面に関して、5-FUの連続注入の開始後可能な限り速やかに、すなわち連続注入の開始の少なくとも1時間後、好ましくは少なくとも1時間半後、およびさらにより好ましくは2時間後に可能な限り速やかに、プラトーでの薬物動態分析のために血液試料を採取することが有益である可能性がある。実際に、連続注入は約46時間であり、患者は通常、病院に留まる時間が可能な限り短いことを望む。5-FUの連続注入の設定は病院において当業者によって行われるべきであるが、連続注入の残りの間に患者が帰宅し家にいることができる送達デバイスがある。その場合、これによって、連続注入による次回の5-FU用量の薬物動態分析および算出に必要な血液試料を患者が病院から帰る前に採取する条件で、患者のクオリティオブライフを有意に改善させると考えられる。
【００５６】
5-FUの血漿レベルは通常、5-FUの連続注入の開始の約1時間後にプラトーに達することから、別の好ましい態様において、血液試料は、前回のサイクルnにおいて5-FUの連続注入の開始の少なくとも1時間後であるが連続注入の前半部分において、すなわち5-FUの連続注入の開始の1時間後〜23時間後、好ましくは5-FUの連続注入の開始の1時間半後〜10時間後、好ましくは5-FUの連続注入の開始の1時間半後〜5時間後、好ましくは5-FUの連続注入の開始の1時間半後〜3時間後、または5-FUの連続注入の開始の2時間後〜5時間後、好ましくは2時間後〜4時間後、または5-FUの連続注入の開始の2時間後〜3時間後で採取される。
【００５７】
癌患者のレジメンにおいて、5-FUの初回用量D(1)は、サイクル1において43〜49時間の連続注入で投与されなければならない。この用量は通常、患者が5-FUに対する感受性の増加を示すことを判定されている場合を除き、約2500 mg/m2の標準用量（FOLFOXレジメンにおいて用いられる標準用量）に固定される。
【００５８】
「5-FUに対する感受性の増加」とは、対照対象と比較して、対象における同化経路によって代謝される5-FUの百分率の増加を意味する。「対照対象」において、投与された5-FUの20％のみが同化経路によって代謝されるが、投与された5-FUの80％は異化経路においてDPDによって代謝される。5-FUに対して増加した感受性を有する患者において、同化経路によって代謝される5-FUの百分率は、全DPD欠損または部分的DPD欠損のために増加し、好ましくは投与された5-FUの少なくとも40％、少なくとも60％、少なくとも80％、少なくとも90％、または少なくとも95％が同化経路によって代謝される。
【００５９】
5-FUに対する増加した感受性を有する患者の場合、初回用量D（1）を減少させ、かつ次に決定アルゴリズムを同じように適用する。このようにすれば、高いグレードの毒性のリスクはなく、悪くとも良性のグレードIの毒性のみが得られるはずである。その場合は、決定アルゴリズムを用いて本発明による方法により、最大耐容量に達するよう各サイクルで5-FUの用量D(i)を最適化することができる。
【００６０】
このように、患者は好ましくは、治療の開始前に5-FUの感受性の増加に関する診断に供され、得られた診断に応じて初回用量D(1)が決定される。
【００６１】
本発明による方法の好ましい態様において、サイクル1における連続注入によって投与される5-FUの用量D(1)は、多くても約2500 mg/m2であり、かつ5-FUに対する感受性が増加している可能性がある患者の治療前診断に基づいて決定されている。
【００６２】
EP 1 712 643出願は、対象の5-FUに対する感受性の増加を診断するための方法に関し、その全内容が参照により本明細書に組み入れられる。
【００６３】
簡単に説明すると、5-FUに対する患者の感受性の増加に関する診断は、好ましくは以下のインビトロ試験のうちの少なくとも2つを組み合わせることによって患者の少なくとも1つの生物学的試料から行われる。
（a）DPD遺伝子における有意な変異の存在の分析、
（b）ウラシルの血漿濃度の測定、および
（c）ジヒドロウラシル血漿濃度／ウラシル血漿濃度の比（UH2/U比）の測定。
【００６４】
「生物学的試料」は、血液試料、臓器試料（例として生検）、骨髄試料等が含まれる、患者から採取された任意の試料を意味する。ウラシルおよびジヒドロウラシル血漿濃度を測定するために、生物学的試料は、好ましくは血液または血漿試料である。DPD遺伝子における有意な変異の存在の分析に関して、試料は、血液試料、臓器試料（例として患者から採取された部分転移リンパ節から単離された細胞）が含まれる有核細胞を含む患者からの任意の生物学的試料であってもよい。好ましくは、全ての場合において、該生物学的試料は血液または血漿試料である。
【００６５】
DPD遺伝子における「変異」は、置換（塩基転換のみならず塩基転位）、欠失および挿入が含まれるDPD遺伝子の核酸配列の任意の改変を意味する。
【００６６】
DPD遺伝子における「有意な変異」は、DPD酵素活性の減少を生じる変異として定義される。好ましくは、DPD遺伝子における有意な変異によって、DPD酵素活性の少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、または少なくとも90％のDPD酵素活性の減少が起こる。そのような変異は当業者に公知である。特に、以下の表1のDPD遺伝子における変異は、DPD遺伝子の有意な変異として見なされる。
【００６７】
（表１）DPD遺伝子における公知の有意な変異
2012503639.tif 000003
2012503639.tif 000004
【００６８】
表1において記載されるものなどの有意な変異は、当業者に公知の任意の方法を用いて血液試料から検出されてもよい。例として、ハイブリダイゼーションのプローブおよびアッセイ法、マイクロアッセイ法、またはシークエンシングを用いてもよい。
【００６９】
ウラシルおよびジヒドロウラシルの血漿濃度は、当業者に公知の任意の技術を用いて血液試料または血漿試料から測定されてもよい。特に、これらの濃度は、UV検出を伴うHPLCを用いて、Thermo Electron（Courtaboeuf, France）によって販売されるHypercarb（商標）カラムなどの全多孔性球状炭素粒子からなる静止相を有するHPLCカラムを用いて血液試料または血漿試料から測定されてもよい。
【００７０】
なおより好ましくは、インビトロ試験のうちの少なくとも2つを組み合わせることによって、前記患者の少なくとも1つの生物学的試料から5-FUに対する該患者の増加した感受性に関する診断を含む、本発明による方法において、3つ全てのインビトロ試験が行われ、かつ初回用量D(1)が、以下の決定アルゴリズムを用いて決定されている。
（a）−DPD遺伝子における有意な変異が検出されず、かつウラシル血漿濃度が15μg/L未満である場合に、または
−DPD遺伝子における有意な変異が検出されず、かつウラシル血漿濃度が少なくとも15μg/LであるがUH2/U比が少なくとも6である場合に、
2500 mg/m2の標準用量D(1)がサイクル1において該患者に投与され、
（b）他の全ての場合において、
−6≦UH2/U比であれば、D(1)が1750 mg/m2であり、
−3≦UH2/U比＜6であれば、D(1)が1250 mg/m2であり、
−1≦UH2/U比＜3であれば、D(1)が750 mg/m2であり、
−UH2/U比＜1であれば、該患者が5-FUによって治療されないことが好ましい。
【００７１】
任意の5-FU投与の前に、5-FUに対する増加した感受性を有する患者を検出するためのそのようなプロトコールを用いて、サイクル1において投与される初回5-FU用量D(1)は調節され、かつ重度の毒性は通常観察されない。より正確には、5-FUに対する初期の増加した感受性の検出および用量調節のこのプロトコールを用いると、最初の治療サイクル後に、毒性が通常観察されないか、またはグレード1の毒性のみが観察される。
【００７２】
次回のサイクルにおいて43〜49時間注入で次回の5-FU用量が投与される上記の方法は通常、少なくともグレード2の毒性を観察することなく適用されうる。DPD欠損は5-FUの毒性に関係する真の主要な要因であることから、増加した5-FU感受性の早期検出によりおよび43〜49時間の注入で投与される5-FUの初回サイクルの用量D(1)の調節により、ほぼ全ての症例において少なくともグレード2の毒性の発生を防ぐことができる。このように、本発明による上記の方法は、ほぼ全ての症例においていかなる変更もなく適用されうる。
【００７３】
しかし、非常にまれな症例において、少なくともグレード2の毒性が観察される場合、以下の表2において記載される以下のプロトコールを、観察された毒性のタイプによらず用いてもよい。
【００７４】
（表２）
2012503639.tif 000005
* 5-FU：2用量低減後に血液毒性が再発する場合、5-FUボーラスの投与を中止する。
葉酸：葉酸の用量は通常変更されない。
**：先の治療サイクルにおいて投与された前回の5-FU（mg）用量と比較。
【００７５】
本発明による方法は、FOLFOXレジメンまたは類似のレジメンを用いて治療される可能性がある疾患を患っている患者のために意図される。そのような疾患には、特に結腸直腸癌、胃癌、肝管癌、膵臓癌、食道癌、または乳癌が含まれる。
【実施例】
【００７６】
特許請求される方法が治療の有効性を増加させることができるかおよび治療の毒性を減少させることができるかを判定するために、FOLFOXレジメンによって治療される患者119人を含む試験において該方法を用いた。
【００７７】
患者および方法
患者
試験した患者119人の特徴を以下の表3に記載する。
【００７８】
（表３）
2012503639.tif 000006
【００７９】
実施治療
患者を、一般的な説明において上記の方法に従って、5-FUに対する起こりうる感受性の増加の存在に関して最初に診断した。
【００８０】
次に、5-FU感受性の増加に関する診断に応じて必要であれば46時間の連続注入で投与される初回の5-FUの用量を調節したことを除き、患者を一般的説明において上記の3つのFOLFOX4レジメン、FOLFOX6レジメン、またはFOLFOX7レジメンの1つに従って治療した。
【００８１】
各サイクルにおいて、46時間の連続注入に関する次回の5-FU用量を本発明の方法に従って算出した。
【００８２】
結果
46時間連続注入のための初回5-FU用量
5-FUに対する起こりうる感受性の増加の前もっての検出に基づいて、最初のサイクルの46時間連続注入のための初回5-FU用量を以下のように調節した。
【００８３】
（表４）46時間連続注入のための初回5-FU用量の調節
2012503639.tif 000007
【００８４】
46時間連続注入のための5-FUの最適用量
46時間連続注入のための次回の5-FUの用量を各サイクルで算出することができる本発明による調節法を用いて、各患者の用量を最適な用量に安定化させた。
【００８５】
標準用量2500 mg/m2/サイクルの百分率として表記された得られた最適な用量の範囲を、図1および以下の表5に表す。
【００８６】
（表５）46時間連続注入のための5-FUの最適用量
2012503639.tif 000008
【００８７】
結果は、ほとんどの患者（60.7％）において最適な用量が標準用量（±10％）から変化していることを明らかに示す。より正確には、最適な用量は、
−患者の60.7％において標準用量と比較して、10％より多く減少するか（最適用量＜2250、患者の13.7％）、または10％より多く増加する（最適用量＞2750、患者の47.0％）。加えて、患者の23.1％において、最適用量は、標準用量と比較して20％より多く（最適用量＞3000）増加し、これは患者の有意な比率を表し、
−患者の39.3％のみにおいて標準用量±10％に維持される。
【００８８】
これらの結果は、標準用量の不適切性を強調し、従って本発明による方法の重要性を強調する。
【００８９】
客観的反応
3ヶ月時点および6ヶ月時点における治療有効性を図2および3にそれぞれ示す。
【００９０】
標準的なFOLFOXレジメン（5-FUの用量の調節を伴わない）によって、40〜45％の客観的反応（完全反応（CR）または部分反応（PR））が通常3ヶ月の時点で観察され、本発明による調節法によって治療された患者は、69.7％の有意に増加した客観的反応を有した（図2を参照されたい）。
【００９１】
6ヶ月の時点では、本発明による調節法によって治療された患者の客観的反応はなおも69％であった（図3を参照されたい）。
【００９２】
患者の全生存および無進行生存に関するデータを以下の表6に要約する。
【００９３】
（表６）患者の生存統計データ
2012503639.tif 000009
【００９４】
先に言及した通り、ほとんどの患者において最適な用量を調節しなければならなかった。特に、全ての患者の約4分の1が、3000 mg/m2/サイクルより多い46時間連続注入における5-FUの最適用量を投与された。明らかに、46時間連続注入での5-FUの用量がこれらの患者において増加されていない場合には、該患者は、低すぎる5-FUの最適以下用量を投与され、治療に対して反応しないと考えられる。
【００９５】
このように、得られた結果は、本発明による5-FU調節法が治療の有効性を有意に増加させることを明らかに示している。
【００９６】
毒性
治療の有効性の増加に加えて、本発明による5-FU調節法はまた、治療によって誘導される観察された毒性を有意に減少させた。
【００９７】
3ヶ月時点において、毒性は以下の表7に記載されるとおりであった。
【００９８】
（表７）3ヶ月時点における毒性
2012503639.tif 000010
【００９９】
治療全体を通じて、毒性は以下の表8に記載されるとおりであった。
【０１００】
（表８）治療全体を通じての毒性
2012503639.tif 000011
【０１０１】
このように、5-FUによる毒性は通常、標準的なFOLFOXプロトコールを用いて患者の20〜25％に観察されるが、本発明による5-FU調節法によって治療した患者の7.7％および3.4％のみがそれぞれ、毒性を示した（全てのグレードまたはグレード2および3）。
【０１０２】
結論
上記の結果を考慮すると、このように、本発明による5-FU調節法は、治療の有効性（およびこのように客観的反応の百分率）を増加させることおよび5-FU投与による毒性を減少させる（従って、患者のクオリティオブライフを改善する）ことを同時に行うことによって、患者の治療を有意に改善させることは明らかである。
【０１０３】
参照文献一覧
2012503639.tif 000012
2012503639.tif 000013
【図１】
2012503639.tif 000015
【図２】
2012503639.tif 000016
【図３】
2012503639.tif 000017
【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年9月12日(2011.9.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を患っている患者の血液試料から、次回の治療サイクル（n+1）のための5-フルオロウラシル（5-FU）の用量D(n+1)を決定するための方法であって、
・各治療サイクルiが、
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2（±20％）のフォリン酸またはその塩、
−43〜49時間の連続注入で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含み、かつ
・該血液試料が、前回の治療サイクルnにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも1時間後かつ該灌流の終了前に該患者から採取されており、
・該方法が、
・該血液試料中の5-FU血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する（dose)段階、
・以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて、D(n)に応じてD(n+1)を算出する段階
を含む、方法。
【請求項２】
各サイクルiにおける5-FUの前記連続注入の持続期間が約46時間である、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
各サイクルiにおいてボーラスで投与される5-FUの用量が約400 mg/m2である、請求項1または2に記載の方法。
【請求項４】
各サイクルiにおいて前記患者に投与されるフォリン酸またはその塩の用量が約100 mg/m2である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
各サイクルiにおいて前記患者に投与されるオキサリプラチンの用量が約85、100、または130 mg/m2である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記治療が、各サイクルiにおいて抗癌性モノクローナル抗体の前記患者への投与をさらに含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗癌性モノクローナル抗体が、セツキシマブ、パニツムマブ、またはベバシズマブである、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の終了の15分前〜22時間前に採取されている、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の終了の2〜3時間前に採取されている、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
前記血液試料が、サイクルnにおいて、5-FUの前記連続注入の開始の1時間後〜5時間後の間で採取されている、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
サイクル1において連続注入で投与される5-FUの用量D(1)が、多くても約2500 mg/m2であり、かつ5-FUに対する前記患者の起こりうる感受性の増加に関する治療前診断に基づいて決定されている、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
5-FUに対する前記患者の起こりうる過感受性に関する前記診断が、以下のインビトロ試験のうちの少なくとも2つを組み合わせることによって、該患者の少なくとも1つの生物学的試料から行われる、請求項11に記載の方法：
（a）DPD遺伝子における有意な変異の存在の分析、
（b）ウラシル血漿濃度の測定、および
（c）ジヒドロウラシル血漿濃度／ウラシル血漿濃度の比（UH2/U比）の測定。
【請求項１３】
前記の3つのインビトロ試験が行われ、かつ初回用量D(1)が以下の決定アルゴリズムを用いて決定されている、請求項12に記載の方法：
（a）−DPD遺伝子における有意な変異が検出されておらず、かつウラシル血漿濃度が15μg/L未満である場合に、または
−DPD遺伝子における有意な変異が検出されておらず、かつウラシル血漿濃度が少なくとも15μg/Lであるが、UH2/U比が少なくとも6である場合に、
2500 mg/m2の標準用量D(1)がサイクル1において前記患者に投与され、
（b）他の全ての場合において、
−6≦UH2/U比であれば、D(1)が1750 mg/m2であり、
−3≦UH2/U比＜6であれば、D(1)が1250 mg/m2であり、
−1≦UH2/U比＜3であれば、D(1)が750 mg/m2であり、
−UH2/U比＜1であれば、該患者が5-FUによって治療されないことが好ましい。
【請求項１４】
前記患者が、結腸直腸癌、胃癌、肝管癌、膵臓癌、食道癌、または乳癌を患っている、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
5-FUは通常、転移状況において用いられる。加えて、それはまた、アジュバント治療として、すなわち再発が心配される限局性腫瘍について治療される患者の場合において、ますます頻繁に用いられる。重度の毒性の副作用のリスクをそのような状況では冒すことはできない。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
Gamelin et al（Gamelin, E et al. J Clin Oncol. 2008 May 1 ;26(13) :2099-105（非特許文献7））は、8時間連続注入される5-FUと併用したフォリン酸の毎週の投与に基づく治療において5-FUの用量を調節するための方法を定義した。しかし、現在のプロトコールは一般的に、5-FUをフォリン酸および別の化学療法剤、一般的にはオキサリプラチンまたはイリノテカンと併用することから、そのようなプロトコールはもはや用いられていない。加えて、現在のプロトコールは、5-FUのかなり長い連続注入を用いる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
Ychou et al（Ychou M, Duffour J, Kramar A, et al. Cancer Chemother Pharmacol, 2003, 52: 282-90（非特許文献8））は、2ヶ月に1回のLV5FU2レジメンに基づく治療において5-FU用量を増加させるための方法を記載している。しかし、現在のプロトコールは一般的に、5-FUをフォリン酸および別の化学療法剤、一般的にはオキサリプラチンまたはイリノテカンと併用することから、そのようなプロトコールももはや用いられていない。加えて、Ychouらによって記載された方法は、5-FUの用量を増加させることを意図するのみならず、有意な（グレードII〜IV）の毒性が観察されない限り増加が系統的に適用される。このように、この方法は5-FUの用量を増加させ、潜在的に治療の有効性を増加させるが、それは、5-FUの血漿レベルが有効であるが毒性でない狭いウィンドウに留まることによって重度の毒性を防ぐことができない。このように、Ychouらの方法はなおも、最良の治療において許容できない有意なリスクを患者に負わせる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
本出願において、本発明者らは、5-FU灌流の終了前に採取した血液試料から測定された5-FUの血漿濃度と新規の決定アルゴリズムとに基づいて、FOLFOXプロトコール（ボーラスおよび46時間連続注入での5-FU、フォリン酸、およびオキサリプラチン）によって治療される患者に対して連続注入によって投与される次回の5-FU用量を最適化するための方法を見いだした。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
発明の説明
本発明は、このように、癌を患っている患者の血液試料から、次回の治療サイクル（n+1）のための5-フルオロウラシル（5-FU）の用量D(n+1)を決定するための方法であって、
・各治療サイクルiが
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2のフォリン酸またはその塩
−43〜49時間の連続注入で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含み、かつ
・該血液試料が、前回の治療サイクルnにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも2時間後かつ該灌流の終了前に、該患者から採取されており、
該方法が、
・該血液試料中の5-FUの血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する（dose)段階、
・以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて、D(n)に応じてD(n+1)を算出する段階
を含む方法に関する。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３３】
本発明はまた、癌を患っている患者を治療するための方法であって、該方法が、
・各治療サイクルiが、
−ボーラスで投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2のフォリン酸またはその塩、
−約46時間の灌流で投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含む、連続治療サイクルを該患者に実施する段階、
・各サイクルiにおいて、5-FU灌流の開始の少なくとも3時間後かつ該灌流の終了前に該患者から血液試料を採取し、かつ5-FUの血漿濃度（[5-FU]）をインビトロで投薬する段階を含み、
・治療サイクル1の初回用量D(1)が多くても2500 mg/m2であり、
・各サイクルiにおいて、次回の治療サイクルi+1の次回の用量D(i+1)が、以下の決定スキーム：
−[5-FU]＜100μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.40、
−100≦[5-FU]＜200μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.30、
−200≦[5-FU]＜300μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.20、
−300≦[5-FU]＜400μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.10、
−400≦[5-FU]＜550μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×1.05、
−550≦[5-FU]≦600μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)、
−600＜[5-FU]＜700μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.95、
−700≦[5-FU]＜800μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.90、
−800≦[5-FU]＜900μg/Lであれば、D(n+1)＝D(n)×0.85、
−[5-FU]≧900であれば、D(n+1)＝D(n)×0.80
を用いて決定される、方法にも関する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３５】
上記の決定アルゴリズムは、FOLFOX 4レジメン、FOLOFOX 6レジメン、またはFOLFOX 7レジメンに従う癌患者について開発および試験されている。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
FOLFOX 4（de Gramont A, et al: J Clin Oncol 15: 808-815, 1997; Maindrault-Goebel F, et al. Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（フォリン酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に85 mg/m2オキサリプラチン。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
FOLFOX 6（Tournigand C, et al. J Clin Oncol 2004 Jan 15; 22(7):229-37; Maindrault-Goebel F, et al. Ann Oncol. 2000 Nov;11(11):1477-83）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（フォリン酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に100 mg/m2オキサリプラチン。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３８】
FOLFOX 7（Maindrault-Goebel F, et al. Eur J Cancer. 2001 May;37(8):1000-5）：以下を含む15日ごとのサイクル：
400 mg/m2の5-FUボーラス
＋1日目にエルボリン（フォリン酸カルシウム、100 mg/m2）
＋1日目に開始して2日目に終了する46時間の5-FU（初回用量D(1)＝2500 mg/m2、または患者が5-FUに対して増加した感受性を有する場合には初回用量D(1)は2500 mg/m2未満、以下を参照されたい）
＋1日目に130 mg/m2オキサリプラチン。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
上記のアルゴリズムは、FOLFOXレジメン（上記を参照されたい）によって治療される癌患者に関して作成されかつ試験されていることから、これらの特定のレジメンおよび類似のレジメンに関して正確である。実際に、5-FUの連続注入の持続期間、フォリン酸またはオキサリプラチンの存在などのパラメータを有意に変更することはできない。しかし、これらのパラメータの小さい変動は決定アルゴリズムの正確性を損なわない。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４１】
このように、FOLFOXレジメンと類似のレジメンは、2つの連続するサイクルが通常約2週間離される反復治療サイクルを含み、各治療サイクルが、
−ボーラスとして投与される0〜500 mg/m2の5-フルオロウラシル（5-FU）、
−0〜600 mg/m2のフォリン酸またはその塩、
−43〜49時間の連続注入によって投与される用量D(i)（mg/m2）の5-FU、および
−70〜130 mg/m2のオキサリプラチン
を含む、レジメンとして定義されうる（サイクルは通常2週間離される。しかし特定のサイクル後に有意な毒性が観察される場合には、次回のサイクルを約1週間または数週間遅らせてもよく、このように2つのサイクルを約3週間またはそれより長い期間離してもよい）。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４４】
上記の決定アルゴリズムが作成されかつ試験されている特定の治療レジメンは、各サイクルiにおいて400 mg/m2の5-FUボーラスを含む。しかし、治療サイクルにおけるフォリン酸またはオキサリプラチンの存在とは逆に、5-FUボーラスの存在は、決定アルゴリズムの正確性にとって重要なパラメータではない。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４６】
全ての本発明において、任意の治療剤の用量（5-FU、フォリン酸、およびオキサリプラチンが含まれる）に適用される場合の「約」という用語は、明記された値の上下10％の増加または減少を意味すると意図される。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４７】
先に言及した通り、フォリン酸は、各治療サイクルiに必ず存在する。フォリン酸、すなわちN-(5-ホルミル-(6R,S)-5,6,7,8-テトラヒドロプテロイル)-L-グルタミン酸は、化学合成によって得られた場合、その2つの(6R)（この異性体が右旋性であることからD-フォリン酸とも呼ばれる）および(6S)（この異性体が左旋性であることからL-フォリン酸とも呼ばれる）ジアステレオマー型の等モル混合物によって形成される。(6,S)異性体のみが産物の周知の薬理学的活性を有するが、他のものはそれを完全に欠如することが知られている。全ての本発明において、フォリン酸またはその塩は、L-およびD-フォリン酸のラセミ型混合物として投与されてもよいが、このようにフォリン酸またはその塩の任意の用量は、L-フォリン酸の用量として表記される。このように、0〜600 mg/m2のフォリン酸の範囲に言及する場合、用量0〜600 mg/m2のL-フォリン酸が患者に投与されることを意味する。その結果、L-フォリン酸およびD-フォリン酸のラセミ混合物が投与される場合、フォリン酸の全（L-およびD-フォリン酸）用量は0〜1200 mg/m2の間に含まれ、L-フォリン酸の用量は0〜600 mg/m2の間に含まれる。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
上記の決定アルゴリズムが作成されかつ試験されている特定の治療レジメンにおいて、フォリン酸の用量（すなわちL-フォリン酸の用量）は100 mg/m2である。このように決定アルゴリズムは、0〜600 mg/m2の用量に関して適切でありうる。好ましい態様において、各サイクルiにおいて投与されるフォリン酸の用量は、24〜360 mg/m2の間に含まれ、好ましくは45〜240 mg/m2、より好ましくは56〜180 mg/m2、さらにより好ましくは80〜120 mg/m2の間に含まれる。最も好ましくは、各サイクルiにおいて投与されるフォリン酸の用量は、公知のFOLFOXレジメンと同様に約100 mg/m2である。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７４】
（表２）
2012503639.tif 000018
* 5-FU：2回の用量低減後に血液毒性が再発する場合、5-FUボーラスの投与を中止する。
フォリン酸：フォリン酸の用量は通常変更されない。
**：先の治療サイクルにおいて投与された前回の5-FU（mg）用量と比較。
【国際調査報告】
2012503639.tif 000019
2012503639.tif 000020
2012503639.tif 000021
2012503639.tif 000022