【手続補正書】
【提出日】平成21年7月24日(2009.7.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロテアソーム阻害物質を含む、標的抗原に対する免疫応答を刺激するための免疫原性組成物であって、
小胞(bleb)(DRibble)中に標的抗原の不完全なリボソーム産物(defective ribosomal product)(DRiP)を産生するように細胞を刺激するのに十分な条件下で、標的細胞を有効量のプロテアソーム阻害物質と接触させ、かつ
抗原提示細胞(APC)にDRiPを提示させ、それによって、該標的抗原の1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項２】
プロテアソーム阻害物質の有効量が、標的細胞のアポトーシスを実質的に誘導しない量である、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項３】
1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激する免疫賦活薬とさらに併用される、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項４】
免疫賦活薬がアジュバントである、請求項3記載の免疫原性組成物。
【請求項５】
免疫賦活薬が顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)を含む、請求項3記載の免疫原性組成物。
【請求項６】
タンパク質のグリコシル化を減少させる作用物質、オートファジー誘導物質、リソソームを介したタンパク質分解を減少させるのに十分な量のNH4Cl、またはそれらの組合せとさらに併用される、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項７】
細胞が哺乳動物の腫瘍細胞である、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項８】
腫瘍細胞が癌細胞である、請求項7記載の免疫原性組成物。
【請求項９】
腫瘍細胞が良性腫瘍細胞である、請求項7記載の免疫原性組成物。
【請求項１０】
細胞が、病原体、または病原体特異的抗原を発現するベクターに感染した哺乳動物細胞である、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項１１】
プロテアソーム阻害物質が、可逆的なプロテアソーム阻害物質を含む、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項１２】
標的細胞が対象中に存在し、かつ、標的細胞をプロテアソーム阻害物質と接触させるために、対象に該プロテアソーム阻害物質を投与するための、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項１３】
標的細胞が対象中の腫瘍細胞であり、かつ、治療的有効量のリンパ球枯渇(lymphodepletion)剤と併用され、該リンパ球枯渇(lymphodepletion)剤がプロテアソーム阻害物質の投与に先立って、対象に投与される、請求項12記載の免疫原性組成物。
【請求項１４】
標的細胞とプロテアソーム阻害物質との接触が、エクスビボで行われる、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項１５】
治療的有効量の小胞(bleb)中の標的抗原の不完全なリボソーム産物 (DRiP)(DRibbles)を含む、標的抗原に対する免疫応答を刺激するための免疫原性組成物であって、
該DRibbleは、DRibbleを産生するように細胞を刺激するのに十分な条件下で、標的細胞を有効量のプロテアソーム阻害物質と接触させることにより、作製され、かつ、
該DRibbleの対象への投与により、インビボで抗原提示細胞(APC)にDRiPを提示させ、それによって、標的抗原の1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項１６】
プロテアソーム阻害物質と接触させた標的細胞を含む、標的抗原に対する免疫応答を刺激するための免疫原性組成物であって、
該標的細胞は、小胞(bleb)(DRibble)中に標的抗原の不完全なリボソーム産物(defective ribosomal product)(DRiP)を産生するように細胞を刺激するのに十分な条件下で、プロテアソーム阻害物質と接触し、
該標的細胞の対象への投与により、インビボで抗原提示細胞(APC)にDRiPを提示させ、それによって、標的抗原の1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項１７】
標的細胞をプロテアソーム阻害物質とエクスビボで接触させる、請求項16記載の免疫原性組成物。
【請求項１８】
APCが樹状細胞(DC)である、請求項1記載の免疫原性組成物。
【請求項１９】
治療的有効量のDRibbleを負荷されたAPCを含む、対象における腫瘍細胞に対する免疫応答を刺激するための免疫原性組成物であって、
ここで該DRibbleを負荷されたAPCが、以下の段階によって作製され、
(i)DRibbleを産生させ、かつ、オートファジーを誘導するのに十分な条件下で、プロテアソーム阻害物質およびオートファジー誘導因子に、対象中に存在する腫瘍細胞と同じタイプである腫瘍細胞を曝露する段階;
(ii)該DRibbleを単離し、それによって、単離されたDRibbleの集団を作製する段階;
(iii)単離されたDRibbleを、対象由来の末梢血単核細胞(PBMC)から得られる抗原提示細胞(APC)と共に、該APCが1種または複数種のDRiPを提示するのに十分な条件下でインキュベートする段階; および
該免疫原性組成物の対象への投与によって、1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項２０】
腫瘍細胞が対象から得られる、請求項19記載の免疫原性組成物。
【請求項２１】
治療的有効量の単離されたDRibbleを含む、対象における腫瘍細胞に対する免疫応答を刺激するための免疫原性組成物であって、
ここで、該単離されたDRibbleは、DRibbleを産生させるのに十分な条件下で、プロテアソーム阻害物質およびオートファジー誘導因子に対象中に存在する腫瘍細胞と同じタイプである腫瘍細胞を曝露し、該DRibbleを単離することによって、作製され、
該免疫原性組成物の対象への投与によって、1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項２２】
免疫賦活薬とさらに併用される、請求項21記載の免疫原性組成物。
【請求項２３】
治療的有効量のPD-1シグナル伝達阻害物質とさらに併用される、請求項21記載の免疫原性組成物。
【請求項２４】
以下の段階を含む、小胞(DRibble)中の不完全なリボソーム産物(DRiP)を細胞に産生させる方法：
細胞がDRibbleを産生するのに十分な条件下で、該細胞をプロテアソーム阻害物質と接触させ、それによって、該細胞にDRibbleを産生させる段階。
【請求項２５】
細胞によるDRibble産生を増強するのに十分な条件下で、細胞を、グリコシル化を減少させる作用物質、オートファジー誘導物質、リソソームを介したタンパク質分解を減少させるのに十分な量のNH4Cl、またはそれらの組合せと接触させる段階をさらに含む、請求項24記載の方法。
【請求項２６】
細胞によって分泌されたDRibbleを回収する段階をさらに含む、請求項24記載の方法。
【請求項２７】
細胞が、哺乳動物の腫瘍細胞である、請求項24記載の方法。
【請求項２８】
細胞が、病原体に感染した哺乳動物細胞である、請求項24記載の方法。
【請求項２９】
回収する段階が、細胞からDRibbleを分離する段階、およびDRibbleを収集する段階を含む、請求項26記載の方法。
【請求項３０】
DRibbleが少なくとも90％の純度である、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
請求項24記載の方法を用いて産生された、単離されたDRibble。
【請求項３２】
請求項31記載の単離されたDRibbleを含む免疫原性組成物。
【請求項３３】
抗腫瘍化学療法剤、免疫賦活薬、DRibbleを負荷されたAPC、またはそれらの組合せをさらに含む、請求項32記載の免疫原性組成物。
【請求項３４】
ワクチンである、請求項32記載の免疫原性組成物。
【請求項３５】
以下の段階を含む、精製されたDRibble集団を産生する方法：
細胞におけるタンパク質分解を実質的に阻害するのに十分な条件下で、細胞をプロテアソーム阻害物質と接触させる段階;
細胞におけるオートファジーを実質的に増大させるのに十分な条件下で、細胞をオートファジー誘導因子と接触させる段階;
細胞を沈殿させるのに十分であるが、DRibbleを沈殿させない条件下で、細胞を遠心分離する段階;
DRibbleを含む上清を収集する段階;
DRibbleを沈殿させるのに十分な条件下で該上清を遠心分離する段階;および
DRibbleを含む沈殿物を収集し、それによって、精製されたDRibble集団を産生する段階。
【請求項３６】
対象における1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための治療的有効量の請求項32記載の免疫原性組成物であって、
対象への投与によって、対象における1種または複数種のDRiPに対する免疫応答を刺激するための、免疫原性組成物。
【請求項３７】
対象が腫瘍を有し、かつ細胞が腫瘍細胞である、請求項36に記載の免疫原性組成物。
【請求項３８】
免疫原性組成物の投与に先立って、対象に治療的有効量のリンパ球枯渇剤を投与する、請求項37記載の免疫原性組成物。
【請求項３９】
DRibbleが、病原体に感染した細胞から単離される、請求項36記載の免疫原性組成物。
【請求項４０】
対象に、少なくとも180日の期間に渡る、少なくとも3回の免疫原性組成物の投与のための、請求項36記載の免疫原性組成物。
【請求項４１】
DRibbleを産生する腫瘍細胞を含む免疫原性組成物であって、腫瘍細胞が、プロテアソーム機能を阻害するのに十分な量のプロテアソーム阻害物質の存在下、および腫瘍細胞においてオートファジーを誘導するのに十分な量のオートファジー誘導物質の存在下でインキュベートされた、免疫原性組成物。
【請求項４２】
免疫賦活剤をさらに含む、請求項41記載の免疫原性組成物。