(57)【要約】炎症を処置するためのアポゴシポールおよびその誘導体を使用する方法が開示される。また、構造Ａを有する化合物の群が記載され、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物が提供される：ここで、各Ｒは、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、またはＨＮＳＯ２Ｘであり、ここで、Ｘは、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環である。化合物Ａの群は、癌などの様々な疾患または障害のために使用され得る。【選択図】  図１Ａ
2012524101.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造Ａを有する化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物であって：
【化１】
2012524101.tif 000041
式中、
各Ｒは、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、またはＮＨＳＯ２Ｘであり；
Ｘは、ヒドロキシル、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環であることを特徴とする化合物。
【請求項２】
各Ｒは、独立して、ＮＨ（ＣＯ）Ｘであり；およびＸは、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、置換された（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール、または置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリールであり、ここで、各置換基は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、フェニルまたはフェノキシであることを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
各Ｒは、独立して、
【化２】
2012524101.tif 000042
であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
各Ｒは、独立して、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ６Ｈ５であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘは、アルキルアリールであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘは、ベンジルであることを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
化合物は：
【化３】
2012524101.tif 000043
であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
化合物は、化合物Ｉ〜ＸＸＩＩ：
【化４】
2012524101.tif 000044
【化５】
2012524101.tif 000045
【化６】
2012524101.tif 000046
【化７】
2012524101.tif 000047
【化８】
2012524101.tif 000048
【化９】
2012524101.tif 000049
【化１０】
2012524101.tif 000050
【化１１】
2012524101.tif 000051
【化１２】
2012524101.tif 000052
であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
化合物は、化合物Ｉ：
【化１３】
2012524101.tif 000053
であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
化合物は、化合物ＸＸＩ：
【化１４】
2012524101.tif 000054
であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項１２】
化合物は、化合物ＸＸＩＩ：
【化１５】
2012524101.tif 000055
であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項１３】
疾患または障害を処置するための方法であって、治療上有効な量の請求項１に記載の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法であって、それによって、疾患または障害を処置することを特徴とする方法。
【請求項１４】
前記疾患または障害は、癌であることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
処置は、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質の活性の阻害を含むことを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
化合物を抗癌剤と組み合わせて投与する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体の癌および自己免疫性疾患を処置する方法であって、該方法は、治療上有効な量の請求項１に記載の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１９】
被験体が化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定する工程、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較する工程をさらに含む、請求項１８に記載の方法であって、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示すことを特徴とする方法。
【請求項２０】
測定は、被験体からのサンプルに基づいてなされることを特徴とする、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
被験体が、請求項１に記載の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定する方法であって、該方法は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較する工程を含み、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示すことを特徴とする方法。
【請求項２２】
測定は、被験体からのサンプルに基づいてなされることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記サンプルは、体液または腫瘍サンプルであることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
ＢＣＬ−２ファミリーポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−Ｗ、ＭＣＬ−１、およびＢＣＬ−Ａ１から選択されることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法であって、該方法は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の請求項１に記載の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２６】
前記細胞は、癌細胞であることを特徴とする、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞は、免疫系の細胞であることを特徴とする、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
被験体において、請求項１に記載の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの有効性を測定する方法であって、該方法は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前およびその間に、被験体の細胞において、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較する工程を含み、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の減少したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、またはその溶媒和物を利用する治療の有効性を示すことを特徴とする方法。
【請求項３０】
前記被験体は、癌を有することを特徴とする、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記被験体は、自己免疫性疾患を有することを特徴とする、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
被験体の炎症を処置する方法であって、該方法は、薬学的に有効な量の構造Ｂ：
【化１６】
2012524101.tif 000056
を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、処置を必要とする被験体に投与し、それによって、炎症を低減する工程を含み、
式中、各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素、ヒドロキシル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルハロ、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、またはハロであり；Ｒ７は、独立して、水素、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、−（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、および−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、およびＮＨＳＯ２Ｘであり、ここで、Ｘは、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環であることを特徴とする方法。
【請求項３４】
化合物は、アポゴシポールであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
化合物は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
各Ｒ７は、独立して、水素、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはシクロヘキシルであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
各Ｒ１０は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
各Ｒ６、Ｒ８、およびＲ９は、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３であり、各Ｒ７は、イソ−プロピルであり；および各Ｒ１０は、−ＣＨ３であることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４０】
化合物は、アポゴシポールのプロドラッグであることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４１】
化合物は、化合物ＸＸＩ：
【化１７】
2012524101.tif 000057
であることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４２】
化合物は、化合物ＸＸＩＩ：
【化１８】
2012524101.tif 000058
であることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４３】
被験体は、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質ジストロフィー、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である疾病を患うことを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４４】
前記ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏）であることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４５】
選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
【請求項４６】
被験体における炎症を処置する方法であって、該方法は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体である抗炎症剤を、そのような処置を必要とする被験体に投与する工程を含み、それによって、炎症を処置することを特徴とする方法。
【請求項４７】
選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
化合物は、アポゴシポールであることを特徴とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
化合物は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールであることを特徴とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項５０】
アポゴシポールの誘導体は、構造Ｂ：
【化１９】
2012524101.tif 000059
を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物であり、
式中、各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素、ヒドロキシル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルハロ、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、またはハロであり、および各Ｒ７は、独立して、水素、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、−（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、および−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、またはＮＨＳＯ２Ｘであり、ここで、Ｘは、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環であることを特徴とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項５１】
各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒであることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
各Ｒ７は、独立して、水素、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはシクロヘキシルであることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
各Ｒ６、Ｒ８およびＲ９は、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３であり、各Ｒ７は、イソ−プロピルであり；および各Ｒ１０は、−ＣＨ３であることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５４】
前記アポゴシポールの誘導体は、化合物ＸＸＩ：
【化２０】
2012524101.tif 000060
であることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５５】
前記アポゴシポールの誘導体は、化合物ＸＸＩＩ：
【化２１】
2012524101.tif 000061
であることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５６】
前記誘導体プルプロガリン誘導体は、５Ｄｌ、１１６３、または１１４２であることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５７】
前記炎症は、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質ジストロフィー、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である疾病に関係する炎症であることを特徴とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項５８】
前記ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏）であることを特徴とする、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
疾患または障害を処置するための方法であって、該方法は、治療上有効な量の本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含み、それによって、疾患又は障害を処置することを特徴とする方法。
【請求項６０】
前記疾患または障害は、癌であることを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
処置は、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質の活性の阻害を含むことを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
化合物を抗癌剤と組み合わせて投与する工程を含むことを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６４】
少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体において癌または自己免疫性疾患を処置する方法であって、該方法は、治療上有効な量の本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項６５】
被験体が、化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定する工程、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較する工程をさらに含む、請求項６４に記載の方法であって、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示すことを特徴とする方法。
【請求項６６】
測定は、被験体からのサンプルに基づいてなされることを特徴とする、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
被験体が本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定する方法であって、該方法は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、コントロールサンプルと比較する工程を含み、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示すことを特徴とする方法。
【請求項６８】
測定は、被験体からのサンプルに基づいてなされることを特徴とする、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記サンプルは、体液または腫瘍サンプルであることを特徴とする、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
ＢＣＬ−２ファミリーポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−Ｗ、ＭＣＬ−１、およびＢＣＬ−Ａ１から選択されることを特徴とする、請求項６７に記載の方法。
【請求項７１】
コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法であって、該方法は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の請求項１に記載の化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項７２】
前記細胞は、癌細胞であることを特徴とする、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記細胞は、免疫系の細胞であることを特徴とする、請求項７１に記載の方法。
【請求項７５】
被験体において、本明細書に記載されるような化合物または立体異性体、それらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物の投与を含む、治療レジメンの有効性を測定する方法であって、該方法は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前およびその間に、被験体の細胞において、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較する工程を含み、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の減少したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の有効性を示すことを特徴とする方法。
【請求項７６】
前記被験体は、癌を有することを特徴とする、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫であることを特徴とする、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記被験体は、自己免疫性疾患を有することを特徴とする、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
前記被験体は、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質ジストロフィー、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である疾病を患うことを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項８０】
前記ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏）であることを特徴とする、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項７８に記載の方法。
【請求項８２】
被験体において炎症を処置する方法であって、該方法は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体または立体異性体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体である抗炎症剤を、そのような処置を必要とする被験体に投与する工程を含み、それによって、炎症を処置することを特徴とする方法。
【請求項８３】
選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
化合物は、アポゴシポールの立体異性体であることを特徴とする、請求項８２に記載の方法。
【請求項８５】
本明細書に記載されるようなアポゴシポールの立体異性体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、様々な障害、疾患および病状を処置するための、より具体的には、癌、自己免疫性疾患、および／または炎症を処置するための、アポゴシポールおよびその誘導体などのナフタレンから生じる化合物の種類に一般的に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞のアポトーシスカスケードは、細胞死につながると知られている。ＢＣＬ−２ファミリータンパク質などの抗アポトーシスのタンパク質が、細胞によって過剰産生されるとき、制御できない細胞成長が続いて起こり得て、潜在的に、様々な重い疾患、障害および病状、特に癌につながる可能性がある。プログラム細胞死（アポトーシス）は、正常組織の恒常性の維持において重要な役割を果たしており、細胞産生および細胞喪失の適切なバランスを確かなものとする。プログラム細胞死の調節の異常は、腫瘍形成を促進し、化学療法抵抗性の大きな一因となる。Ｂｃｌ−２（Ｂ細胞リンパ腫／白血病−２）ファミリータンパク質は、アポトーシスの中心的調節因子である。ヒトにおいて、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ＸＬ、Ｍｃｌ−１、Ｂｆｌ−１、Ｂｃｌ−ＷおよびＢｃｌ−Ｂを含む、Ｂｃｌ−２ファミリーの６の抗アポトーシスメンバーが、これまでに確認され、特徴づけられている。抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質の過剰発現が、多くのヒトの癌および白血病において生じており、それ故、これらのタンパク質は、新しい抗癌剤の開発のための非常に魅力的な標的である。Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質のメンバーはまた、Ｂａｋ、Ｂａｘ、Ｂａｄ、ＢｉｍおよびＢｉｄなどのアポトーシス促進性の作動因子を含む。抗アポトーシスおよびアポトーシス促進性のＢｃｌ−２ファミリータンパク質は、二量体となり、互いの機能を無効にする。構造研究は、アポトーシス促進性のファミリーメンバーのＢＨ３二量体ドメインを結合する、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質の表面上の疎水性の間隙を明らかにした。したがって、アポトーシス促進性のタンパク質のＢＨ３ドメインを模倣する分子は、アポトーシスを誘発し、および／または癌細胞死を阻害する抗アポトーシスのＢｃｌ−２タンパク質の能力を抑制する。
【０００３】
アポトーシスは、進行の間の不要な細胞の生理学的な除去のための、組織の恒常性において、および宿主防御機構において役割を果たす。タンパク質のＢＣＬ−２ファミリーは、アポトーシスの調節に関係すると考えられる。具体的には、ＢＣＬ−２遺伝子ファミリーのメンバーは、プログラム細胞死を阻害する（例えば、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、ｃｅｄ−９）、または細胞死を促進する（例えば、Ｂａｘ、Ｂａｋ、ＢＣＬ−Ｘｓ）ために作用し得る。ＢＣＬ−ＸＬなどの、このファミリーの生存促進性のメンバーは、アポトーシス促進性の相当物のＢＨ３ドメインの結合を可能にすると考えられる疎水性の溝を、表面上に含む。この結合は、アポトーシスの調節において役割を果たすと考えられ、実際に、生存促進性のタンパク質および抗生存タンパク質は、二量体化を介して互いの機能を逆転し得る。
【０００４】
それ故、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質などの、抗アポトーシスのタンパク質を阻害する必要性が存在する。様々な潜在的なＢＣＬ−２アンタゴニストは、以前に確認されている。しかしながら、これらの化合物はどれも、ＢＣＬ−２ファミリーにおける６つの以下のタンパク質：ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−Ｗ、ＢＣＬ−Ｂ、ＢＦＬ−１およびＭＣＬ−１のタンパク質のすべてを阻害しない。例えば、以前に確認された合成のＢＣＬ−２アンタゴニストはどれも、タンパク質ＢＦＬ−１の阻害に有効ではなかった。それ故、そのようなアンタゴニストの有効性は、望まれるほど高くない。加えて、既存のアンタゴニストは、機能不全または安全性の問題などの、他の欠点を有することを特徴とする。
【０００５】
プログラム細胞死の調節の異常は、腫瘍形成を促進し、化学療法抵抗性の一因にもなり得る。抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリータンパク質の過剰発現が、多くのヒトの癌および白血病において生じており、それ故、これらのタンパク質は、新しい抗癌剤の開発のための標的として使用される。構造研究は、アポトーシス促進性のファミリーメンバーのＢＨ３二量体ドメインを結合する、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質の表面上の疎水性の間隙を明らかにした。したがって、アポトーシス促進性のタンパク質のＢＨ３ドメインを模倣する分子は、アポトーシスを誘発し、および／または癌細胞死を阻害する抗アポトーシスのＢｃｌ−２タンパク質の能力を抑制する。
【０００６】
図１Ａに示された天然物ゴシポールが、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬおよびＭＣＬ−１のインヒビターであり、ＢＨ３の模倣物として機能することは以前に示されている。（−）ゴシポールは、現在臨床試験されており、進行悪性腫瘍患者において単剤の抗腫瘍活性を示している。ゴシポールが、２つの反応性アルデヒド基が原因である可能性が高い毒性問題があると考え、我々は、アポゴシポール、すなわち、これらのアルデヒドを欠くが、インビトロにおいて抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリータンパク質に対する活性を保持し、以前にも細胞内評価された化合物を調製した。最近、ゴシポールおよびアポゴシポールのマウスにおける有効性と毒性が比較された。症状発現前のインビボのデータは、アポゴシポールが、ゴシポールと比較して、よりよい有効性および低減された毒性を有する上、より遅いクリアランスに起因する、ゴシポールと比較した、時間にわたる優れた血中濃度を含む、よりよい単一用量の薬物動態学的特性を有することを示している。これらの観察は、アポゴシポールが、癌治療のための有望な主要の化合物であることを示す。
【０００７】
ＢＣＬ−２ファミリーメンバーもまた、炎症性障害に関係すると考えられる。例えば、ＢＣＬ−２ファミリーメンバーが、好中球のアポトーシスおよび炎症性の蓄積において役割を果たすことが示されている。いくつかの炎症性疾患において、好中球のアポトーシスの遅延は、アポトーシス促進性のＢＣＬ−２ファミリーメンバーＢＡＸの低下したレベルに関係する。急性喘息の小児から分離された好酸球が、抗アポトーシスのタンパク質ＢＣＬ−２の増加した発現を有し、呼気流量と逆相関していたことも示されている。ＢＣＬ−２ファミリータンパク質はまた、クローン病に関係する。クローン病患者からの基底膜から分離されたＴ細胞において、ＢＡＸ発現は減じられ、ＢＣＬ−ＸＬ発現は増加される。これは、炎症細胞の生存が、生存促進性のおよび抗アポトーシスのシグナル伝達機構によって、炎症性疾患の病因に関係することを示す。ループスは、複合の全身性自己免疫性疾患であり、高レベルの抗ＤＮＡおよび抗糸球体の自己抗体、活性化したＢおよびＴ細胞、および糸球体腎炎によって特徴付けられる。ループス感受性のマウスからの好中球は、アポトーシスの低下した割合を示す。減少したアポトーシスは、ループス感受性のマウスにおける好中球のより大きな蓄積の一因となる、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の変更された発現に関係する。いくつかの異なるループス株を使用するシグナル伝達の研究は、多数のシグナル伝達経路が、ＢＣＬ−２およびＢＣＬ−ＸＬの活性化を含めて、疾患が進行するとともに、リンパ球および非リンパ球においてアップレギュレートされることを示す。これらの抗アポトーシスの分子が、自己反応性のＢおよびＴ細胞を含む、すべての細胞の寿命を延ばすことが知られている。
【０００８】
既存のＢＣＬ−２インヒビターのこれらの欠点および欠乏を考慮すると、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質などの抗アポトーシスのタンパク質の新しいアンタゴニストが望まれる。そのような新しいアンタゴニストが、既存の化合物より安全および有効であることが望ましい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本開示は、タンパク質のＢＣＬ−２ファミリーを含む、抗アポトーシスのタンパク質の新しいアンタゴニストを提供することにより、これらのニーズに対応する。したがって、１つの実施形態において、本開示は、構造Ａを有する化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を提供する：
【００１０】
【化１】
2012524101.tif 000003
【００１１】
式中、Ｒは、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、およびＨＮＳＯ２Ｘであり、式中、Ｘは、ヒドロキシル、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環である。
【００１２】
別の実施形態によると、本開示は、構造Ａを有する化合物、式（Ｉ）を有する特定の化合物の種である化合物を提供する：
【００１３】
【化２】
2012524101.tif 000004
【００１４】
別の実施形態によると、本開示は、種Ｉを含む、構造Ａを有する治療上有効な量の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することにより、癌または自己免疫性疾患を処置するための方法を提供する。
【００１５】
本開示はまた、炎症を処置するための方法を提供する。特に、本開示は、炎症の処置のためのアポゴシポールの使用に関連する。従って、炎症を処置するための方法は開示される。方法は、炎症を低減するのに有効な量における化合物を哺乳動物に投与する工程を含み、該化合物は、構造Ｂを有する：
【００１６】
【化３】
2012524101.tif 000005
【００１７】
式中、各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素、ヒドロキシル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルハロ、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびハロ、および各Ｒ７は、水素、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、−（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、および−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、およびＮＨＳＯ２Ｘであり、式中、Ｘは、ヒドロキシル、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物である。幾つかの実施形態において、炎症を処置するために使用される化合物は、アポゴシポール、例えば、（＋）アポゴシポールを実質に含まない（−）アポゴシポールである。
【００１８】
また、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン（theaflavanin）、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、プルプロガリンの誘導体、およびそれらの混合物から選択される抗炎症剤を、被験体に投与することにより、被験体における炎症を処置する方法が開示される。
【００１９】
加えて、本開示は、炎症が開示される炎症性疾患を患う哺乳動物において、アポトーシスを誘発する、カスパーゼ活性を調節する、または細胞死を誘発するための方法を提供する。方法は、アポトーシスを誘発する、カスパーゼ活性を調節する、または標的細胞の細胞死を誘発する（induce cell death the target cells）のに有効な量で化合物と哺乳動物を接触させる工程を含み、使用される化合物は、本明細書に記載されるような構造Ｂを有している。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１Ａ】図１Ａは、ゴシポールおよびアポゴシポールの構造を示す（Ａ）。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本開示の化合物の構造を示す（Ｂ）。
【図１Ｃ】図１Ｃは、分子ドッキングの研究を示す（Ｃ）。
【図１Ｄ】図１Ｄは、分子ドッキングの研究を示す（Ｄ）。
【図２Ａ】図２Ａは、ＮＭＲ結合の研究を示す（Ａ）。
【図２Ｂ】図２Ｂは、本開示のいくつかの化合物の活性の阻害を示す（Ｂ）。
【図３】図３は、ＢＣＬ−２マウス脾臓の縮小への本開示の化合物の有効性を示す。
【図４】図４は、ＢＣＬ−ＸＬを使用した本開示の化合物のＦＰ競合的結合曲線を示す。
【図５Ａ】図５Ａは、ゴシポール対アポゴシポールの毒性の特性を表す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ゴシポール対アポゴシポールの毒性の特性を表す。
【図６Ａ】図６Ａは、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの血液学的特性を表す。
【図６Ｂ】図６Ｂは、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの血液学的特性を表す。
【図６Ｃ】図６Ｃは、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの血液学的特性を表す。
【図７】図７は、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの相対的な（reative）血液化学的特性を表す。
【図８】図８は、アポゴシポールとゴシポールによる、ＤＯＨＨ２、ＲＳ１１８４６および３８０を含む、ＮＨＬ Ｂ細胞株のアポトーシス誘発の比較を表す。
【図９】図９は、トランスジェニックマウスからの培養されたマウスのＢ細胞に対する、ゴシポールおよびアポゴシポールの活性の比較：ＢＣＬ−２対ＢＣＬ−２／ＴＲＡＦ２ＤＮを表す。
【図１０】図１０は、培養されたＣＬＬ Ｂ細胞のアポトーシスのアポゴシポールおよびゴシポール誘発の比較を表す。
【図１１Ａ】図１１Ａは、ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスにおけるアポゴシポール活性を表す。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスにおけるアポゴシポール活性を表す。
【図１２】図１２は、本開示のいくつかの化合物を合成するために使用され得る、一般的な合成スキームを示す。
【図１３Ａ】図１３Ａは、ゴシポール（１）、アポゴシポール（２）およびＢＩ７９Ｄ１０（３）の構造を示す。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の構造を示す。
【図１３Ｃ】図１３Ｃは、分子ドッキングの研究を示し、Ｂｃｌ−２（ＰＤＢ ＩＤ：１ＹＳＷ）への化合物２（アポゴシポール）のドッキングした構造の立体図を示す。
【図１３Ｄ】図１３Ｄは、分子ドッキングの研究を示し、Ｂｃｌ−２（ＰＤＢ ＩＤ：１ＹＳＷ）への化合物８ｒのドッキングした構造の立体図を示す。
【図１４Ａ】図１４Ａは、ＮＭＲ結合の研究を示し、Ｂｃｌ−ＸＬ（２５μＭ、黒）、および化合物８ｍの存在下のＢｃｌ−ＸＬ（２００μＭ、灰色）、化合物８ｑの存在下のＢｃｌ−ＸＬ（２００μＭ、青）、および化合物８ｒの存在下のＢｃｌ−ＸＬ（２００μＭ、赤）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの脂肪族の領域を示す。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、  Ｂｃｌ−２を使用する、８ｍ（黒の（solid）四角形）、８ｑ（黒の三角形）、８ｒ（黒の逆三角形）および２（アポゴシポール）（黒色の点）の蛍光偏光法ベースの競合的結合曲線を示す。
【図１４Ｃ】図１４Ｃは、Ｈ４６０ヒト肺の細胞株における、化合物８ｍ（赤の四角形）、８ｑ（緑の三角形）、８ｒ（青のダイヤモンド）、８ｐ（暗色の三角形）および２（アポゴシポール）（暗色の点）による細胞成長の阻害を示す。細胞は、３日間処置され、細胞の生存率は、ＡＴＰ−ＬＩＴＥアッセイを使用して評価された。
【図１４Ｄ】図１４Ｄは、野生型（ＭＥＦ／ＷＴ；青の縦棒）またはｂａｘ−／−ｂａｋ−／―のダブルノックアウト（赤の縦棒）の遺伝子型を有するマウスの胚線維芽細胞が、１０μＭの様々な５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体で処置され、アポトーシスが、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣアッセイにより監視された結果を示す。
【図１５Ａ】図１５Ａは、粉末形態において室温で残されたときのアポゴシポール誘導体の化学的安定性を示す：８ｍ（赤の点）、８ｐ（緑の四角形）、８ｑ（紫の点）、８ｒ（青の三角形）、８ｋ（ピンクの点）、１２ｅ（暗色の点）、２（アスコルビン酸を有するアポゴシポール、暗色の四角形）および２（アポゴシポール、暗色の三角形）。化学的安定性は、室温で６０日間空気中で評価された。安定性は、ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳの組み合わせを使用して監視された。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、０．０７２ｍｍｏｌ／ｋｇの単一の腹腔内注射の投与量における、Ｂｃｌ−２マウス脾臓の縮小への５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の影響を示す。すべての縮小データは、マウス脾臓サイズの最大限の減少のパーセンテージである。
【図１５Ｃ】図１５Ｃは、様々な量の化合物８ｒの単一の腹腔内注射によって誘発されたマウスにおける％体重喪失を示す。
【図１５Ｄ】図１５Ｄは、単一の腹腔内注射での６匹のＢｃｌ−２マウス処置の脾臓重量の減少への、４２ｍｇ／ｋｇ（０．０６ｍｍｏｌ／ｋｇ）での化合物８ｒの影響を示す。データは、±Ｓ．Ｅ．（ｎ＝６）．Ｐ＜０．０００１として示される。
【図１６】図１６は、本開示の化合物のいくつかを合成するために使用され得る、合成スキームを示す。
【図１７】図１７は、本開示の化合物のいくつかを合成するために使用され得る、一般的な合成スキームを示す。
【図１８】図１８は、本開示の化合物のいくつかを合成するために使用され得る、一般的な合成スキームを示す。
【図１９】図１９は、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のＩＴＣ研究を示す。
【図２０Ａ】図２０Ａは、化合物８ｒが、ＦＩＴＣ−Ｂｉｍ ＢＨ３ペプチドに対するＢｃｌ−２ファミリータンパク質の結合と競合することを示す。
【図２０Ｂ】図２０Ｂは、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウムのアッセイを使用した、ＢＰ３に対するＡＢＴ−７３７の細胞毒性のアッセイを示す。
【図２１Ａ】図２１Ａは、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウムのアッセイを使用した、ＢＰ３細胞に対する５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の細胞毒性のアッセイを示す。
【図２１Ｂ】図２１Ｂは、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウムのアッセイを使用した、ＲＳ１１８４６癌細胞株に対する５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の細胞毒性のアッセイを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
特に定義のない限り、本開示に関して使用される、学術用語および専門用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものとする。さらに、特に文脈に必要とされない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。一般的に、本明細書に記載される、細胞および組織培養、分子生物学、およびタンパク質およびオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの化学およびハイブリダイゼーションに関係して利用される命名法、およびそれらの技術は、当該技術分野に周知で、一般に使用されるものである。標準的な技術は、組換ＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、および組織の培養及び形質転換（例えば、電気穿孔、リポフェクション）に使用される。酵素反応および精製法は、製造者の仕様書に従って、または当該技術分野において通常達成可能なように、又は本明細書に記載されるように実行される。本明細書に記載される、分析化学、有機合成化学、および医薬品化学及び薬化学に関係して利用される命名法、およびそれらの実験法及び技術は、当該技術分野に周知で、一般に使用されるものである。標準的な技術は、化学合成、化学分析、薬剤、製剤、および送達、および患者の処置に使用される。
【００２２】
以下の用語、定義および略語がさらに適用される：
【００２３】
用語「患者」は、本開示の方法によって処置される有機体を指す。そのような有機体は、限定されないが、ヒトおよび他の哺乳動物を含む。本開示の文脈において、用語「被験体」は、本明細書に記載される処置（例えば、本開示の化合物、および随意に１以上の追加の治療薬の投与）を受けるまたは受けた個体を一般に指す。
【００２４】
用語「タンパク質のＢＣＬ−２ファミリー」は、現在、少なくとも以下の６つのタンパク質を含む、タンパク質のファミリーを指す：ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−Ｗ、ＢＣＬ−Ｂ、ＢＦＬ−１、およびＭＣＬ−１。
【００２５】
置換基が、それらの従来の化学式、左から右に書かれる、によって明記される場合、それらは、構造を右から左に書くことによって生じる、化学的に同一の置換基を等しく包含する。例えば、−−ＣＨ２Ｏ−−は−−ＯＣＨ２−に等しい。
【００２６】
単独でのまたは別の置換基の一部としての用語「アルキル」は、特に指定のない限り、直鎖（例えば非分枝鎖）または分枝鎖、または環式炭化水素ラジカル、またはそれらの組み合わせを意味し、完全飽和、一不飽和または多価不飽和であり得る、およびジラジカルおよび多価ラジカルを含むことができ、指定される炭素原子数を有する（すなわちＣ１−Ｃ１０は１〜１０の炭素を意味する）。飽和の炭化水素ラジカルの例は、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、シクロヘキシル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチルなどの基、例えばｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどのホモログおよび異性体を含む。不飽和のアルキル基は、１以上の二重結合または三重結合を有する基である。不飽和のアルキル基の例は、限定されないが、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−および３−プロピニル、３−ブチニル、およびより高度なホモログおよび異性体を含む。炭化水素基に限定されるアルキル基は、「ホモアルキル」と称される。
【００２７】
基、置換基のために本明細書に記載された特定の値、および範囲は、実例目的であり；それらは、基および置換基のための定義された範囲内における、他の定義された値または他の値を除外しない。例えば、「アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、３−ペンチル、またはヘキシルであり得；シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルであり得；「−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（アルコキシ）」は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ペントキシ、３−ペントキシ、またはヘキシルオキシであり得る。
【００２８】
単独でのまたは別の置換基の一部としての用語「アルキレン」は、限定されないが、−−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−−、−−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−−、−−ＣＨ２Ｃ．ｉｄｅｎｔ．ＣＣＨ２−−、−−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ２−−によって示されるような、アルキルから生じる二価のラジカルを意味する。典型的には、アルキル（またはアルキレン）基は、１〜２４の炭素原子を有し、１０または１０以下の炭素原子を有するそれらの基を含む。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、短鎖のアルキルまたはアルキレン基であり、一般に８または８以下の炭素原子を有する。
【００２９】
用語「アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル」などは、直線および分枝の基両方を表すが；「プロピル」などの個々の基への言及は、直鎖基、具体的に引用されている「イソプロピル」などの分枝鎖異性体を包含する。
【００３０】
単独でのまたは別の用語（手段）と組み合わせた、用語「ヘテロアルキル」は、特に明言のない限り、安定した直鎖または分枝鎖、または環式炭化水素ラジカル、またはそれらの組み合わせを意味し、少なくとも１の炭素原子およびＯ、Ｎ、Ｐ、ＳｉおよびＳから成る群から選択される、少なくとも１のヘテロ原子から成っており、ここで、窒素、リン、および硫黄原子は、随意に酸化され、窒素ヘテロ原子は随意に四級化され得る。ヘテロ原子、Ｏ、Ｎ、Ｐ、およびＳｉおよびＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部の位置、またはアルキル基が分子の残部に付けられる位置に置かれ得る。例は、限定されないが、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−Ｏ−−ＣＨ３、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−ＮＨ−−ＣＨ３、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−Ｎ（ＣＨ３）−−ＣＨ３、−−ＣＨ２−−Ｓ−−ＣＨ２−−ＣＨ３、−−ＣＨ２−−ＣＨ２、−−Ｓ（Ｏ）−−ＣＨ３、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−Ｓ（Ｏ）２−−ＣＨ３、−−ＣＨ＝ＣＨ−−Ｏ−−ＣＨ３、−−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−−ＣＨ２−−ＣＨ＝Ｎ−−ＯＣＨ３、−−ＣＨ＝ＣＨ−−Ｎ（ＣＨ３）−−ＣＨ３、Ｏ−−ＣＨ３、−−Ｏ−−ＣＨ２−−ＣＨ３、および−−ＣＮを含む。２つまでのまたは３つまでのヘテロ原子は、例えば、−−ＣＨ２−−ＮＨ−−ＯＣＨ３および−−ＣＨ２−−Ｏ−−Ｓｉ（ＣＨ３）３のように連続的であり得る。同様に、単独でのまたは別の置換基の一部としての、用語「ヘテロアルキレン」は、限定されないが、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−Ｓ−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−および−−ＣＨ２−−Ｓ−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−ＮＨ−−ＣＨ２によって示されるような、ヘテロアルキルから生じる二価のラジカルを意味する。ヘテロアルキレン基に関して、ヘテロ原子はまた、いずれかのまたは両方の鎖末端（例えば、アルキレンオキソ、アルキレンジオキソ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）を占有することができる。またさらに、アルキレンおよびヘテロアルキレンに関して、結合基の式が書かれる方向によって意味される結合基の配向はない。例えば、式−−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’−−は、−−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’−−および−−Ｒ’ＯＣ（Ｏ）−−の両方を意味する（res）。上述されるように、本明細書に使用されるようなヘテロアルキル基は、−−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、−−ＮＲ’Ｒ’、−−ＯＲ’、−−ＳＲ’、および／または−−ＳＯ２Ｒ’のようなヘテロ原子を介した分子の残部に付けられるそれらの基を含む。−−ＮＲ’Ｒ’’などの特定のヘテロアルキル基の記述の後に、「ヘテロアルキル」が記述される場合、用語、ヘテロアルキルおよび−−ＮＲ’Ｒ’’は、重複していない、または互いに排他的ではない。むしろ、特定のヘテロアルキル基は、明瞭さを加えるために記述される。したがって、用語「ヘテロアルキル」は、−−ＮＲ’Ｒ’’などの、排他的な特定のヘテロアルキル基のように、本明細書において解釈されるべきでない。
【００３１】
単独でのまたは他の用語と組み合わせた、用語「シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」は、特に明言のない限り、それぞれ、「アルキル」および「ヘテロアルキル」の環式のバージョンを意味する。さらに、ヘテロシクロアルキルに関して、ヘテロ原子は、ヘテロ環が分子の残部に付けられる位置を占有することができる。シクロアルキルの例は、限定されないが、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチルなどを含む。ヘテロシクロアルキルの例は、限定されないが、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルフォリニル、３−モルフォリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどを含む。用語「シクロアルキレン」および「ヘテロシクロアルキレン」は、それぞれ、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルの二価の誘導体を指す。
【００３２】
より具体的には、用語「アルキル」は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチルなどの１〜６の炭素原子の分枝または非分枝の飽和炭化水素基を指す。本明細書におけるアルキル基は、例えば、メチル、エチルなどの、１〜６の炭素原子を含む。本明細書に使用されるように、用語「アルキル」はまた、用語「シクロアルキル」を含み、３、５または６の炭素原子を含む、３〜８の環式アルキル基を指す。本明細書に使用されるような用語「シクロアルキレン」は、二価の環式アルキレン基、典型的には、３、５、６または８員環を指す。
【００３３】
本明細書に使用されるような用語「アルコキシ」は、単一の、末端のエーテル連鎖を介して結合された、アルキル基を指し、すなわち、「アルコキシル」基は、Ｒが本明細書に定義されるようにアルキルである、−ＯＲとして定義され得る。「低級アルコキシ」基は、１〜６の炭素原子を含むアルコキシ基を指す。
【００３４】
用語「アリール」は、特に明言のない限り、一緒に融合される、または共有結合で結合される単環または多環（１〜３の環）であり得る、多不飽和、芳香族、炭化水素の置換基を意味する。用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される、（多環の場合において、各、別々の環内に）１〜４のヘテロ原子を含むアリール基（または環）を指し、ここでの窒素および硫黄原子は随意に酸化され、窒素原子は随意に四級化される。ヘテロアリール基は、炭素またはヘテロ原子を介して分子の残部に付けられ得る。アリールおよびヘテロアリール基の限定されない例は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソキサゾリル、４−イソキサゾリル、５−イソキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンジミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリル、および６−キノリルを含む。上記のアリールおよびヘテロアリールの環構造の各々の置換基は、下記に記載される許容可能な置換基の群から選択される。用語「アリーレン」および「ヘテロアリーレン」は、それぞれ、アリールおよびヘテロアリールの二価のラジカルを指す。
【００３５】
簡潔に言うと、他の用語（例えば、アリールオキソ、アリールチオキソ、アリールアルキル）と組み合わせて使用されるときの用語「アリール」は、上に定義されるようなアリールおよびヘテロアリール環の両方を含む。したがって、用語「アリールアルキル」は、アリール基がアルキル基（例えば、ベンジル、フェンエチル、ピリジルメチルなど）に付けられる、それらのラジカルを含むように意図され、アルキル基は、炭素原子（例えば、メチレン基）が、例えば、酸素原子（例えば、フェノキシメチル、２−ピリジルオキシメチル、３−（１−ナフチルオキシ）プロピルなど）に置換された、それらのアルキル基を含む。しかしながら、用語「ハロアリール」は、本明細書に使用されるように、１以上のハロゲンで置換されたアリールを覆うように意図される。
【００３６】
本明細書に使用されるような用語「アリール」は、芳香族の炭素環、典型的には、６または１０員環を指し、ここでの少なくとも１の環は芳香族である。例えば、「アリール」は、少なくとも１の環が芳香族である約９〜１０の原子を有する、フェニル基またはオルト位で結合した二環式の炭素基を表す。
【００３７】
「ヘテロアリール」は、炭素および各々が独立した非過酸化酸素、硫黄、およびＮ（Ｘ）であり得る１〜４のヘテロ原子から成る、５または６の原子を含む単環式の芳香環の環炭素を介して付けられた基を包含し、ここでのＸは、存在しないまたはＨ、Ｏ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルである。「ヘテロアリール」はまた、特にベンズ−誘導体から生じる、またはプロピレン、トリメチレン、テトラメチレンのｄｉ基（digroup）をそれに融合させることによって生じる、約８〜１０個の環原子のオルト位で結合した二環式のヘテロ環の基を包含する。
【００３８】
ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、またはヘテロアリールが、員の特定の員（例えば「３〜７の員」）を含む場合、用語「員」は、炭素またはヘテロ原子を指す。
【００３９】
単独でのまたは別の置換基の一部としての用語「ハロ」または「ハロゲン」は、特に明言のない限り、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。加えて、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキルおよびポリハロアルキルを含むように意図される。例えば、用語「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」は、限定されないが、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどを含むように意図される。用語「ハロ」はまた、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを指す。
【００４０】
本明細書で使用される場合、用語「オキソ」は、炭素原子に二重結合している酸素を意味する。
【００４１】
上記の用語（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」と同様、それらの二価のラジカル誘導体も）の各々は、示されたラジカルの置換および非置換の両方の形態を含むことを意味する。各タイプのラジカルに対する置換基は以下に提供される。
【００４２】
アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルの一価および二価の誘導体ラジカル（アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル（heteroalkenyl）、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニルおよびヘテロシクロアルケニルとしばしば呼ばれている基を含む）に対する置換基は、限定されないが、以下から選択された様々な基の１つ以上であり得る：ゼロから（２ｍ’＋１）までの範囲の数の、−−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−−ＯＲ’、−−ＮＲ’Ｒ’’、−−ＳＲ’、−ハロゲン、−−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−−ＣＯ２Ｒ’、−−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−−ＮＲ’−−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’−−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−−ＮＲ−−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−−ＣＮおよび−−ＮＯ２、ここで、ｍ’は、そのようなラジカル中の炭素原子数の合計である。Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’は、各々独立して、水素、置換又は非置換のヘテロアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール（例えば１−３のハロゲンにより置換されたアリール）、置換又は非置換のアルキル、アルコキシルまたはチオアルコキシルの基、またはアリールアルキルの基を指す。本開示の化合物が１以上のＲ基を含んでいる場合、例えば、各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’の基が、これらの基の１以上が選択される場合そうであるように、Ｒ基の各々は独立して選択される。Ｒ’およびＲ’’’が同じ窒素原子に付いている場合、それらはその窒素原子と結合し、４−、５−、６−または７員環を形成する。例えば、−−ＮＲ’Ｒ’’は、制限されないが、１−ピロリジニルおよび４−モルフォリニルを含むことを意味する。置換基についての上記の議論から、当業者は、用語「アルキル」は、ハロアルキル（例えば、−−ＣＦ３および−−ＣＨ２ＣＦ３）およびアシル（例えば、−−Ｃ（Ｏ）ＣＨ−−、−−Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、−−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３、など）のような水素の基以外の基に結合した炭素原子を含む基を含むことを意味するということを理解するだろう。
【００４３】
上記のアルキルラジカルに対して記載された置換基と同様に、アリールとヘテロアリールの基（同様に、それらの二価の誘導体も）に対する典型的な置換基は、変更され、例えば以下から選択される：芳香族環系上でゼロから開いた原子価の総数までの範囲の数の、ハロゲン、−−ＯＲ’、−−ＮＲ’Ｒ’’、−−ＳＲ’、−ハロゲン、−−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−−ＣＯ２Ｒ’、−−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−−ＮＲ’−−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−−ＮＲ−−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、−−ＮＲ−−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−−ＣＮおよび−−ＮＯ２、−−Ｒ’、−−Ｎ３、−−ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキソ、およびフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル；およびここで、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’は、水素、置換又は非置換のアルキル、置換又は非置換のヘテロアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール、置換又は非置換のヘテロアリールから独立して選択される。本開示の化合物が１以上のR’基を含む場合、例えば、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’の基が、これらの基の１以上が選択される場合そうであるように、Ｒ基の各々は独立して選択される。
【００４４】
アリールまたはヘテロアリールの環の隣接した原子上の置換基の２つは、随意に式−Ｔ−−Ｃ（Ｏ）−−（ＣＲＲ’）ｑ−−Ｕ−−の環を形成し、ここで、ＴとＵは、独立して、−−ＮＲ−−、−−Ｏ−−、−−ＣＲＲ’−−または単結合であり、および、ｑは０〜３の整数である。代替的に、アリールまたはヘテロアリールの環の隣接した原子上の置換基の２つは、式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−−Ｂ−−の置換基で随意に置換されてもよく、ここで、ＡとＢは、独立して、−−ＣＲＲ’−−、−−Ｏ−−、−−ＮＲ−−、−−Ｓ−−、−−Ｓ（Ｏ）−−、−−Ｓ（Ｏ）２−−、−−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’又は単結合であり、およびｒは１〜４の整数である。そのように形成された新しい環の単結合の１つは、随意に二重結合と置換されてもよい。代替的に、アリールまたはヘテロアリールの環の隣接した原子上の置換基の２つは、随意に式−−（ＣＲＲ’）５−−Ｘ’−−（Ｃ’’Ｒ’’’）ｄ−−の置換基で置換されてもよく、ここで、ｓおよびｄは、独立して、０〜３の整数であり、およびＸ’は、−−Ｏ−−、−−ＮＲ’−−、−−Ｓ−−、−−Ｓ（Ｏ）−−、−−Ｓ（Ｏ）２−−、または−−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−−である。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’、およびＲ’’’は、独立して、水素、置換又は非置換のアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール、置換又は非置換のヘテロアリールから選択される。
【００４５】
本明細書で使用される場合、用語「ヘテロ原子」または「ヘテロ原子環」は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）およびシリコン（Ｓｉ）を含むことを意味する。
【００４６】
本明細書で使用される場合、用語「アミノアルキル」は、アルキレンリンカ−に共有結合で結合されたアミノ基を指す。アミノ基は、−−ＮＲ’Ｒ’’であり、ここで、Ｒ’およびＲ’’は、典型的には、水素、置換又は非置換のアルキル、置換又は非置換のヘテロアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール、置換又は非置換のヘテロアリールから選択される。
【００４７】
本明細書で使用される場合、用語「置換基」は、以下の部分から選択される基を意味する：
（Ａ）−−ＯＨ、−−ＮＨ２、−−ＳＨ、−−ＣＮ、−−ＣＦ３、−−ＮＯ２、オキソ、ハロゲン、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、および［００４０］（Ｂ）アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリール、これらは、以下から選択される少なくとも１つの置換基により置換される：［００４１］（ｉ）オキソ、−−ＯＨ、−−ＮＨ２、−−ＳＨ、−−ＣＮ、−−ＣＦ３、−−ＮＯ２、ハロゲン、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、および［００４２］（ｉｉ）アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリール、これらは、以下から選択される少なくとも１つの置換基により置換される：（ａ）オキソ、−−ＯＨ、−−ＮＨ２、−−ＳＨ、−−ＣＮ、−−ＣＦ３、−−ＮＯ２、ハロゲン、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、および［００４４］（ｂ）アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール、これらは、以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換される：オキソ、−−ＯＨ、−−ＮＨ２、−−ＳＨ−−ＣＮ、−−ＣＦ３、−−ＮＯ２、ハロゲン、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、また非置換のヘテロアリール。 
【００４８】
本明細書で使用される場合、「サイズの限定された置換基（size-limited substituentまたはsize-limited substituent group）」は、「置換基」に対して上記の全ての置換基から選択される基を意味し、ここで、置換又は非置換のアルキルの各々は、置換又は非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルであり、置換又は非置換のヘテロアルキルの各々は、置換又は非置換の２〜２０員のヘテロアルキルであり、置換又は非置換のシクロアルキルの各々は、置換又は非置換のＣ４−Ｃ８シクロアルキルであり、および置換又は非置換のヘテロシクロアルキルの各々は、置換又は非置換の４〜８員のヘテロシクロアルキルである。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「低級の置換基（lower substituentまたはlower substituent group）」は、「置換基」に対して上記の全ての置換基から選択される基を意味し、ここで、置換又は非置換のアルキルの各々は、置換又は非置換のＣ１−Ｃ８アルキルであり、置換又は非置換のヘテロアルキルの各々は、置換又は非置換の２〜８員のヘテロアルキルであり、置換又は非置換のシクロアルキルの各々は、置換又は非置換のＣ５−Ｃ７シクロアルキルであり、および置換又は非置換のヘテロシクロアルキルの各々は、置換又は非置換の５〜７員のヘテロシクロアルキルである。
【００５０】
本開示の化合物は塩として存在してもよい。本開示はそのような塩を含む。適用可能な塩形態の例は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩（例えば、（＋）−酒石酸塩、（−）−酒石酸塩、またはラセミ混合物を含むそれらの混合物）、コハク酸塩、安息香酸塩およびグルタミン酸などのアミノ酸との塩を含む。これらの塩は、当業者に公知の方法によって準備され得る。ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、若しくはマグネシウムの塩のような塩基付加塩（base addition salt）、または類似の塩も含まれる。本開示の化合物が比較的基礎的な機能性を含んでいるとき、酸付加塩（acid addition salt）は、そのまま（neat）か、または適切な不活性な溶媒中かのいずれかで、そのような化合物の中性の形態を、十分な量の所望の酸と接触することにより得ることができる。許容可能な酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素（monohydrogencarbonic）、リン酸、リン酸一水素（monohydrogenphosphoric）、リン酸二水素（dihydrogenphosphoric）、硫酸、硫酸一水素（monohydrogensulfuric）、ヨー化水素酸、または亜リン酸などの無機酸から誘導されたものと同様に、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コルク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トイルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの有機酸から誘導されたものを含む。アルギネート（arginate）などのようなアミノ酸の塩、およびグルクロンまたはガラクツロン酸（galactunoric acid）などのような有機酸の塩も含む。本開示の特定の具体的な化合物は、化合物が塩基付加塩か酸付加塩のいずれかに変換されることができる、塩基と酸の両方の機能性を含む。
【００５１】
化合物の中性の形態は、塩を塩基または酸と接触させ、従来の方法で親化合物を分離することにより再生成される。化合物の親形態は、極性溶媒中の溶解度など特定の物性において様々な塩形態によって異なる。
【００５２】
本開示の特定の化合物は、水和された形態を含む、溶媒和された形態のみでなく、溶媒和されていない形態でも存在し得る。一般に、溶媒和形態は、非溶媒和形態と等しく、本開示の範囲内に包含される。本開示の特定の化合物は、多結晶または非晶形で存在してもよい。一般に、物理的形態はすべて本開示によって熟考された用途には等価で、本開示の範囲内であることが意図される。
【００５３】
本開示の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学式またはキラル中心）または二重結合；鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオ異性体、互変異性体、幾何異性体、アミノ酸に対する、絶対的な立体化学の観点からの（Ｒ）−若しくは（Ｓ）−として、または、（Ｄ）−若しくは（Ｌ）−として定義され得る立体異性的な形態を有し、および個々の異性体は本開示の範囲内に包含される。本開示の化合物は、当該技術分野で合成及び／又は分離するには不安定すぎると知られているものは含まない。その本開示は、ラセミ体、および光学上純粋な形態の化合物を包含することを意図する。光学的に活性な（旋光性の）（Ｒ）−および（Ｓ）−、または（Ｄ）−および（Ｌ）−異性体はキラルのシントンまたはキラルの試薬を使用して準備されるか、または従来の技術を使用して分離され得る。本明細書に記載されている化合物がオレフィン結合または幾何学的非対称性の他の中心を含んでいる場合、およびもし他の方法で指定されないならば、化合物がＥおよびＺ幾何異性体の両方を含むことが意図される。
【００５４】
本明細書で使用される場合、用語「互変異性体」は、平衡に存在し、およびある異性体の形態から別の形態に容易に変換される２以上の構造異性体のうちの１つを指す。
【００５５】
本開示の特定の化合物が互変異性型で存在し得ることが当業者にとって明らかであり、化合物のこのような互変異性型は全て、本開示の範囲内である。
【００５６】
他に述べられないならば、本明細書に示される構造は、構造の立体化学の形態をすべて；すなわち、各不斉中心に対するＲとＳの配置、を含むことも意図される。従って、化合物の鏡像異性およびジアステレオ異性の混合物のみでなく、単一の立体化学の異性体も本開示の範囲内である。
【００５７】
他に述べられないならば、本明細書に示される構造は、１以上の同位体的に増やした原子（isotopically enriched atoms）の存在において異なる化合物も含むことを意図される。例えば、ジューテリウム若しくはトリチウムによる水素の置換、または、１３Ｃ−若しくは１４Ｃ−を増やした炭素原子による炭素の置換を除く構造を有する化合物は本開示の範囲内である。
【００５８】
本開示の化合物はまた、そのような化合物を構成する原子の１以上に不自然な割合の原子の同位元素を含んでいるかもしれない。例えば、化合物は、放射性同位体、例えばトリチウム（３Ｈ）、ヨウ素１２５（１２５Ｉ）または炭素１４（１４Ｃ）により放射識別され得る。本開示の化合物の同位元素の変更はすべて、放射性でも放射性でなくても、本開示の範囲内に包含される。
【００５９】
用語「薬学的に許容可能な塩」は、本明細書に記載の化合物で見出される特定の置換部分に依存して、比較的無毒な酸または塩基により調製される活性化合物の塩を含むことが意図される。本開示の化合物が相対的に酸性の機能性を含んでいる場合、塩基付加塩は、そのまま（neat）か、または適切な不活性な溶媒中かのいずれかで、そのような化合物の中性の形態を、十分な量の所望の塩基と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容可能な塩基付加塩の例としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、若しくはマグネシウムの塩、または類似の塩が挙げられる。本開示の化合物が相対的に塩基性の機能性を含んでいる場合、酸付加塩は、そのまま（neat）か、または適切な不活性な溶媒中かのいずれかで、そのような化合物の中性の形態を、十分な量の所望の酸と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容可能な酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素（monohydrogencarbonic）、リン酸、リン酸一水素（monohydrogenphosphoric）、リン酸二水素（dihydrogenphosphoric）、硫酸、硫酸一水素（monohydrogensulfuric）、ヨー化水素酸、または亜リン酸などの無機酸から誘導されたものと同様に、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コルク酸、スベリック酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トイルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの比較的無毒な有機酸から誘導された塩も含む。また、アルギネート（arginate）などのようなアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸（galactunoric acid）などのような有機酸の塩も含む（”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１−１９を参照）。本開示の特定の化合物は、化合物が塩基付加塩または酸付加塩のいずれかに変換されることを可能にする、塩基性と酸性の両方の機能性を含む。
【００６０】
塩形態に加えて、本開示はプロドラッグ形態である化合物を提供する。本明細書に記載されている化合物のプロドラッグは、本開示の化合物を提供するために生理学的条件の下で化学変化を容易に受ける化合物である。さらに、プロドラッグは、エキソビボ環境において化学的方法または生化学的方法によって本開示の化合物に変換することができる。例えば、適切な酵素または化学試薬を有する経皮パッチリザーバに配される時、プロドラッグはゆっくり本開示の化合物に変換することができる。
【００６１】
本明細書の置換基の基に使用される場合、用語「１つの（”ａ”、”ａｎ”、または”ａ（ｎ）”」は、少なくとも１つを意味する。例えば、化合物が、「１つの」アルキルまたはアリールで置換される場合、化合物は、少なくとも１つのアルキル及び／又は少なくとも１つのアリールにより随意に置換される。さらに、部分がＲ置換基により置換される場合、その基は、「Ｒで置換された」として言及されてもよい。部分がＲで置換される場合、その部分は、少なくとも１つのＲ置換基により置換され、Ｒ置換基はそれぞれ随意に異なる。
【００６２】
本開示の化合物の記載は、当業者に公知の化学結合の法則によって限定される。従って、基が多くの置換基の１以上によって置換されてもよい場合、そのような置換は化学結合の法則に従うように、および、本質的に不安定でない、及び／又は、水性、中性、またいくつかの既知の生理学的条件下において不安定だろうとして当業者に知られている化合物を提供するように選択される。例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、当業者に既知の化学結合の法則に従って環ヘテロ原子によって分子の残部に付けられ、それによって、本質的に不安定な化合物を回避する。
【００６３】
特定の疾患に関する用語「処置する」または「処置」は、その疾患の予防を含む。
【００６４】
用語「プロドラッグ（“prodrug”または“pro-drug”）」は、インビボで親薬物へと変換される薬剤を表す。プロドラッグは、幾つかの状況では、親薬物よりも投与しやすいという理由から、しばしば役に立つことがある。例えば、プロドラッグは、経口投与により生物利用が可能となることがある一方で、親薬物はそうならない。プロドラッグは、親薬物を超えて医薬組成物中の溶解度を改善してもよいし、または増加した旨味を示したり、または調製し易いことがある。
【００６５】
本明細書で使用される場合、用語「アポゴシポール」は、制限されないが、Ｌ−アポゴシポール、Ｄ−アポゴシポール、ラセミ体のアポゴシポール、Ｓ−アポゴシポール、Ｒ−アポゴシポール、（−）アポゴシポールおよび（＋）アポゴシポールを含み、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールを含む、幅広い用語である。
【００６６】
本開示の全体にわたって、特定の化合物が名前、例えばアポゴシポール、によって言及される場合、本開示の範囲は、言及された化合物の薬学的に許容可能な塩、エステル、アミド、代謝物またはプロドラッグを包含することが理解される。
【００６７】
キラル中心を有する本開示の化合物は、光学的に活性な（旋光性の）、およびラセミ体の形態で存在および分離され得ることが当業者によって認識される。いくつかの化合物は多型性を示してもよい。本開示は、本開示の化合物の、任意のラセミ体、旋光性、多形性、若しくは立体異性の形態、またはそれらの混合物（これらは、本明細書に記載されている有用な特性を有する）を包含することが理解されるべきである。また、言及された化合物がキラル中心を含むとき、本開示の範囲はまた、各鏡像異性体を個々に含む、実質的に他方の鏡像異性体を含まない、組成物のみでなく、２つの鏡像異性体のラセミ体混合物も含む組成物を含む。従って、例えば、本明細書では、Ｒ鏡像異性体を実質的に含まないＳ鏡像異性体を含む組成物、またはＳ鏡像異性体を実質的に含まないＲ鏡像異性体を含む組成物が熟慮される。
【００６８】
「実質に含まない」は、組成物が、より少ない鏡像異性体を１０％未満、または８％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満含むことが意図される。言及された化合物が１を超えるキラル中心を含むならば、本開示の範囲は、様々なジアステレオ異性体の混合物を含む化合物と同様、他方のジアステレオ異性体を実質的に含まない個々のジアステレオ異性体を含む組成物も含む。従って、例えば、市販のアポゴシポールは２つの別個の鏡像異性体を含むラセミ体混合物である。本開示の全体にわたる「アポゴシポール」の言及は、アポゴシポールのラセミ体混合物を含む組成物、（−）鏡像異性体を実質的に含まない（＋）鏡像異性体を含む組成物、および（＋）鏡像異性体を実質的に含まない（−）鏡像異性体を含む組成物を含む。
【００６９】
例えば、再結晶技術によるラセミ体の形態の分解によって、光学的に活性な開始物質からの合成によって、キラル合成によって、またはキラル固定相を使用するクロマトグラフィー分離によって）光学的に活性な形態を準備する方法、および本明細書に記載の標準試験を使用して、若しくは当該技術分野で周知の他の類似の試験を使用して、抗癌活性を測定する方法が当該技術分野で周知である。
【００７０】
用語「医薬組成物」は、化合物と、賦形剤または担体など他の化学成分との混合物を指す。医薬組成物は生物体への化合物投与を促進する。化合物を投与する複数の技術が、当該技術分野に存在し、それは、経口投与、注射、エアロゾル投与、非経口投与、注入経眼投与を含むが、これらに限定されない。医薬組成物はまた、化合物を、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などの無機酸または有機酸と反応させることにより得ることができる。
【００７１】
用語「薬学的に許容可能な塩」は、投与される生物体に対して著しい刺激を起こさず、化合物の生物活性および特性を抑止しない化合物の製剤を指す。薬学的な塩は、本開示の化合物と、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などの無機酸とを反応させることにより得られる。薬学的な塩はまた、本開示の化合物と、アンモニウム塩などの塩、ナトリウム塩又はカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩またはマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミンなどの有機塩基の塩、及びアルギニン、リジンなどのアミノ酸とのそれらの塩などを形成する塩基とを反応させることにより得られる。
【００７２】
本明細書で使用される場合、「炎症」は、物理的な傷害、感染または局所的な免疫反応によって開始される、流体、血漿および白血球の局所的な蓄積に対する一般的な用語である。炎症の様々な形態が異なる疾患に関係している。「炎症に関連する」疾患は、例えば、狼瘡、乾癬、関節リウマチおよび炎症性腸疾患を含む。他の炎症に関連する疾患は本明細書において論じられる。
【００７３】
本明細書で使用される場合、用語「抗炎症剤」は、炎症の処置において使用される任意の抗炎症の化合物を指す。
【００７４】
本明細書で使用される場合、用語「処置」は、疾患の予防、改善または治療のための本開示の化合物の治療上の投与に関係する。
【００７５】
本明細書で使用される場合、用語「医薬品または薬物」は、患者に適切に投与された時、所望の治療効果を誘発することができる化学化合物または組成物を指す。
【００７６】
本明細書で使用される場合、用語「実質純粋な」は、対象の種が優勢な種である（すなわち、モルベースで、それは、組成物中の他の個々の種より豊富である）ことを意味し、および実質的に純化された一部分が、対象の種がすべての高分子の種の少なくとも約５０％（モルベースで）を含む組成物である。一般に、実質的に純粋な組成物は、組成物中のすべての高分子の種の約８０％を超えて、例えば、約８５％、９０％、９５％、および９９％を超えて、含まれる。対象の種はまた、本質的な均質（混入物質種は従来の検出方法によって組成物中に検知することができない）にまで精製されてもよく、そこでは組成物は、基本的に単一の種から成る。
【００７７】
１つの態様において、本開示は、構造Ａ：
【００７８】
【化４】
2012524101.tif 000006
【００７９】
を有する化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を提供し、ここで、Ｒはそれぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸまたはＮＨＳＯ２Ｘであり；およびＸは、ヒドロキシル、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環である。
【００８０】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、各Ｒは、独立してＮＨ（ＣＯ）Ｘであり；Ｘは、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、あるいは置換されたヘテロ環である、を提供する。
【００８１】
別の態様において、本開示は構造Ａを有する化合物、ここで、Ｘは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、置換された（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリールまたは置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリールであり、ここで、各置換基は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、フェニル、あるいはフェノキシである、を提供する。
【００８２】
別の態様において、本開示は構造Ａを有する化合物、ここで、Ｒは、独立して、
【００８３】
【化５】
2012524101.tif 000007
【００８４】
である、を提供する。
【００８５】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、Ｒはそれぞれ独立してＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ６Ｈ５である、を提供する。
【００８６】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、Ｘはアルキルアリールである、を提供する。
【００８７】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、Ｘはベンジルである、を提供する。
【００８８】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、化合物は：
【００８９】
【化６】
2012524101.tif 000008
【００９０】
である、を提供する。
【００９１】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物、ここで、化合物は化合物Ｉ−ＸＸＩＩ：
【００９２】
【化７】
2012524101.tif 000009
【００９３】
【化８】
2012524101.tif 000010
【００９４】
【化９】
2012524101.tif 000011
【００９５】
【化１０】
2012524101.tif 000012
【００９６】
【化１１】
2012524101.tif 000013
【００９７】
【化１２】
2012524101.tif 000014
【００９８】
【化１３】
2012524101.tif 000015
【００９９】
【化１４】
2012524101.tif 000016
【０１００】
【化１５】
2012524101.tif 000017
【０１０１】
である。
【０１０２】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物を提供し、ここで、化合物は化合物Ｉである：
【０１０３】
【化１６】
2012524101.tif 000018
【０１０４】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物を提供し、ここで、化合物は化合物ＸＸＩである。
【０１０５】
【化１７】
2012524101.tif 000019
【０１０６】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する化合物を提供し、ここで、化合物は化合物ＸＸＩＩである。
【０１０７】
【化１８】
2012524101.tif 000020
【０１０８】
別の態様において、本開示は、疾患または障害を処置するための方法を提供し、治療上有効な量の構造Ａを有する化合物、またはそれらの組み合わせ、又は薬学的に許容可能なそれらの塩、または水化物、Ｎ−オキシド若しくは溶媒和物化合物を、それらを必要とする被験者に投与し、それによって、疾患または障害を処置する。
【０１０９】
別の態様において、本開示は、治療上有効な量の構造Ａを有する化合物を、それらを必要とする被験者に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、その疾患又は障害は癌である。
【０１１０】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する治療上有効な量の化合物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、ここで、疾患または障害は癌であり、ここで、癌は肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１１１】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する治療上有効な量の化合物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、ここで、処置は、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質の活性の阻害を含む。
【０１１２】
別の態様において、本開示は、構造Ａを有する治療上有効な量の化合物を、それを必要とする被験体に投与すること、構造Ａを有する化合物を抗癌剤と組み合わせて投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供する。
【０１１３】
別の態様において、本開示は、治療上有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与することによって、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有している被験体の癌および自己免疫性疾患を処置するための方法を提供する。
【０１１４】
別の態様において、本開示は、治療上有効な量の構造Ａを有する化合物を、被験体に投与することによって、また、被験体が、化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定し、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体において癌および自己免疫性疾患を処置するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示す。
【０１１５】
別の態様において、本開示は、被験体が、化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定し、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、治療上有効な量の構造Ａを有する化合物を被験体に投与する工程を含む、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体において癌および自己免疫性疾患を処置するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示し、ここで、測定は、被験体からのサンプルに基づいて行われている。
【０１１６】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、被験体が、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示す。
【０１１７】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、被験体が、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示し、ここで、測定は、被験体からのサンプルに基づいて行われている。
【０１１８】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、被験体が、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示し、ここで、サンプルは、体液または腫瘍サンプルである。
【０１１９】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、被験体が、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルとは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシドまたは溶媒和物を利用する治療への被験体の反応のレベルを示し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリーポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−Ｗ、ＭＣＬ−１、およびＢＣＬ−Ａ１から選択される。
【０１２０】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法を提供する。
【０１２１】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法を提供し、ここで、細胞は癌細胞である。
【０１２２】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法を提供し、ここで、細胞は癌細胞であり、ここで、癌は、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１２３】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発する方法を提供し、ここで、細胞は、免疫系の細胞である。
【０１２４】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物の化合物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示す。
【０１２５】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物の化合物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は癌を有する。
【０１２６】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物の化合物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は癌を有し、ここで、癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１２７】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物の化合物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は自己免疫性疾患を有する。
【０１２８】
別の態様において、本開示は、構造Ｂ：
【０１２９】
【化１９】
2012524101.tif 000021
【０１３０】
を有する薬学的に有効な量の化合物を、それを必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供する。
式中、各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、水素、ヒドロキシル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルハロ、−ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、またはハロであり；各Ｒ７は、独立して、水素、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、−（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、および−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（Ｃ６−Ｃ１０）アリール、Ｃ（Ｏ）Ｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＸ、ＮＨ（ＣＯ）Ｘ、ＳＯ２ＮＨＸ、およびＮＨＳＯ２Ｘであり、ここで、Ｘは、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、置換されたアルキルアリール、ヘテロ環、または置換されたヘテロ環、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物であり、それらによって、炎症を低減する。
【０１３１】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、化合物はアポゴシポールである。
【０１３２】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、化合物はアポゴシポールであり、ここで、化合物は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールである。
【０１３３】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒである。
【０１３４】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、各Ｒ７は、独立して、水素、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはシクロヘキシルである。
【０１３５】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、各Ｒ１０は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒである。
【０１３６】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、各Ｒ６、Ｒ８、およびＲ９は、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３であり、各Ｒ７は、イソ−プロピルであり；および各Ｒ１０は、−ＣＨ３である。
【０１３７】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、化合物は、アポゴシポールのプロドラッグである。
【０１３８】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、化合物は、化合物ＸＸＩである：
【０１３９】
【化２０】
2012524101.tif 000022
【０１４０】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、化合物は、化合物ＸＸＩＩである：
【０１４１】
【化２１】
2012524101.tif 000023
【０１４２】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、被験体とは疾病を患い、ここで、疾病とは、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である。
【０１４３】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏症）である。
【０１４４】
別の態様において、本開示は、薬学的に有効な量の構造Ｂを有する化合物を、処置を必要とする被験体に投与すること、および選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与することによって、被験体の炎症を処置するための方法を提供する。
【０１４５】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体であり、それらによって炎症を処置する。
【０１４６】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与すること、および選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体であり、それらによって炎症を処置する。
【０１４７】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、アポゴシポールである。
【０１４８】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールである。
【０１４９】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、アポゴシポールの誘導体であり、ここで、アポゴシポールの誘導体は、構造Ｂを有する化合物であり、ここで、誘導体、プルプロガリン誘導体は、５Ｄｌ、１１６３、または１１４２である。
【０１５０】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体であり、それらによって炎症を処置し、ここで、炎症は疾病に関係し、ここで、疾病とは、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、 自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である。
【０１５１】
別の態様において、本開示は、抗炎症剤を処置を必要とする被験体に投与することによって、そのような処置を必要とする被験体の炎症を処置するための方法を提供し、ここで、抗炎症剤は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体であり、それらによって炎症を処置し、ここで、炎症は疾病に関係し、ここで、疾病とは、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、 自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍であり、ここで、ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏症）である。
【０１５２】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置する。
【０１５３】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置し、ここで、疾患または障害は、癌である。
【０１５４】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置し、ここで、疾患または障害は、癌であり、ここで、癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１５５】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置し、ここで、処置は、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質の活性の阻害を含む。
【０１５６】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与すること、抗癌剤と組み合わせた化合物を投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置する。
【０１５７】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与することによって、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体における癌または自己免疫性疾患を処置するための方法を提供する。
【０１５８】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与すること、被験体が化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定すること、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体における癌または自己免疫性疾患を処置するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示す。
【０１５９】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を被験体に投与すること、被験体が化合物を利用する治療に反応するかどうかを測定すること、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、正常なコントロールサンプルと比較することによって、少なくとも１つの高められたＢＣＬ−２ファミリータンパク質の発現レベルを有する被験体における癌または自己免疫性疾患を処置するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示し、ここで、測定は、被験体からのサンプルに基づいて行われる。
【０１６０】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、コントロールサンプルと比較することによって、被験体が本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、その薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示す。
【０１６１】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、コントロールサンプルと比較することによって、被験体が本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、その薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示し、ここで、測定は、被験体からのサンプルに基づいて行われる。
【０１６２】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、コントロールサンプルと比較することによって、被験体が本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、その薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示し、ここで、サンプルは、体液または腫瘍サンプルである。
【０１６３】
別の態様において、本開示は、被験体における少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを測定し、コントロールサンプルと比較することによって、被験体が本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療に反応するかどうかを測定するための方法を提供し、ここで、高められたレベルは、化合物、その薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療への被験体の反応を示し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリーポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−Ｗ、ＭＣＬ−１およびＢＣＬ−Ａ１から選択される。
【０１６４】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発するための方法を提供する。
【０１６５】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発するための方法を提供し、ここで、細胞は癌細胞である。
【０１６６】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発するための方法を提供し、ここで、細胞は癌細胞であり、ここで、癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１６７】
別の態様において、本開示は、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを低下させ、細胞におけるアポトーシスを誘発するために、有効な量の構造Ａを有する化合物、またはその組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を細胞に投与することによって、コントロール細胞におけるレベルよりも高い、少なくとも１つのＢＣＬ−２ファミリータンパク質メンバーのレベルを有する細胞においてアポトーシスを誘発するための方法を提供し、ここで、細胞は、免疫系の細胞である。
【０１６８】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示す。
【０１６９】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は癌を有する。
【０１７０】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は癌を有し、ここで、癌は、肺癌、乳癌、前立腺癌、またはリンパ腫である。
【０１７１】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較することによって、被験体において、本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体は自己免疫性疾患を有する。
【０１７２】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置し、ここで、被験体とは疾病を患い、ここで、疾病とは、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、 自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍である。
【０１７３】
別の態様において、本開示は、本明細書に記載されるような治療上有効な量の化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与することによって、疾患または障害を処置するための方法を提供し、それによって、疾患又は障害を処置し、ここで、被験体とは疾病を患い、ここで、疾病とは、紅斑性狼瘡、乾癬、乾癬性関節炎、狼瘡性腎炎、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、ＩＴＰ、ＴＴＰ、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、 自己免疫溶血性貧血、インスリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、リウマチ熱、骨関節炎、痛風性関節炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎、喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍であり、ここで、ミトコンドリアミオパシーは、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、または複合系統病（Ｂ１２欠乏症）である。
【０１７４】
別の態様において、本開示は、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物での処置の前、および間に、被験体の細胞内のＢＣＬ−２ファミリータンパク質のレベルを比較すること、および選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与することによって、被験体において、本明細書に記載されるような化合物またはその立体異性体、またはそれらの組み合わせ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を投与する工程を含む、治療レジメンの効果を測定するための方法を提供し、ここで、ＢＣＬ−２ファミリータンパク質の低減したレベルは、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、Ｎ−オキシド、または溶媒和物を利用する治療の効果を示し、ここで、被験体とは自己免疫性疾患を有する。
【０１７５】
別の態様において、本開示は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体または立体異性体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体である抗炎症剤を、そのような処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体における炎症を処置するための方法を提供し、それによって、炎症を処置する。
【０１７６】
別の態様において、本開示は、ゴシポール、アポゴシポール、Ｌ−アポゴシポール、アポゴシポールの誘導体または立体異性体、テアフラビン、テアフラビン−３’−没食子酸、テアフラバニン、（−）ガロカテキン−３−没食子酸（ＧＣＧ）、（−）エピガロカテキン−３−没食子酸（ＥＧＣＧ）、（−）カテキン−３−没食子酸（ＣＧ）、（−）エピカテキン−３−没食子酸（ＥＣＧ）、またはプルプロガリンの誘導体である抗炎症剤を、そのような処置を必要とする被験体に投与すること、および選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）を投与することによって、被験体における炎症を処置するための方法を提供し、それによって、炎症を処置する。
【０１７７】
別の態様において、本開示は、アポゴシポールの立体異性体である抗炎症剤を、そのような処置を必要とする被験体に投与することによって、被験体における炎症を処置するための方法を提供する。
【０１７８】
本明細書に述べられるように、炎症性障害は、アポトーシス調節因子の活性を伴い得る。したがって、ＢＣＬ−２タンパク質などのアポトーシス調節因子の活性を調節する化合物を同定することが望まれる。そのような化合物は、本明細書に記載される。幾つかの実施形態において、これらの化合物の結合は、抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリーメンバーの、アポトーシス促進性のＢＣＬ−２ファミリーメンバーとの相互作用を防ぎ、それによって、抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリーメンバーの生物学的活性を低減する。その結果、化合物は、抗アポトーシスのＢＣＬ−２タンパク質活性を伴う炎症性障害を処置するまたは防ぐために使用され得る。様々な実施形態において、対象である化合物は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールを含むアポゴシポールだけでなく、アポゴシポールの様々な誘導体および本明細書に記載される他の関連する化合物も含む。そのような化合物は、炎症、例えば、紅斑性狼瘡に関係する疾病の進行への高い罹病性を有する患者に投与されることが可能であり、患者がそのような疾病を進行させる確率を下げる。
【０１７９】
本明細書に示されるように、アポゴシポールは、ゴシポールより効果的であり、より毒性が少ない。ゴシポールにおけるアルデヒドは、化合物を反応的にし、その結果、効果的に活性薬物の利用可能な濃度を減少させ、毒性を引き起こす。アポゴシポール、問題のアルデヒドのないゴシポールアナログは、抗アポトーシスのＢＣＬ−２−ファミリータンパク質に対する十分な活性を保持する。本出願の実施例の部分により詳細に記載される、毎日の用量試験は、マウスが、ゴシポールよりも約２〜４倍のアポゴシポールの用量に耐性があることを示す。さらに、試験は、アポゴシポールが毒性学と有効性に関して、親化合物のゴシポールより優れていることを示す。
【０１８０】
本明細書に示される一般的な構造Ｂにおいて、使用され得る、いくつかの特定のＲ６、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０の基は、独立して、水素、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒを含む。使用され得る、いくつかの特定のＲ７の基は、独立して、水素、−Ｃ２Ｈ５；−ｉ‐Ｐｒ、ｎ‐Ｐｒ、ｎ‐Ｂｕ、ｔ‐Ｂｕ、ｉ‐Ｂｕ、ｓ‐Ｂｕ、またはシクロヘキシルを含む。
【０１８１】
幾つかの実施形態において、本明細書に示される一般的な構造Ｂの化合物は、アポゴシポールである。癌を処置するためのアポゴシポールの使用は、２００５年６月２５日に出願の、ＰＣＴ公報番号ＷＯ ２００５／００９４３４に記載され、全体の引用により、本明細書に組み込まれる。
【０１８２】
本明細書に示される、一般的な構造Ｂを記載する本開示の１つの特定の化合物は、酢酸塩部分（−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３）としての各Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９を有し、−ｉ‐ＰｒとしてのＲ７を有し、および−ＣＨ３としてのＲ１０を有する（アポゴシポール ヘキサ酢酸塩）。この化合物はまた、アポゴシポールの経口投与のためのプロドラッグとして使用され得る。別の実施形態において、本開示の化合物は、式Ｂの化合物を含み、そこで、Ｒ６の基の１つは水素以外の基である。１つの実施形態において、化合物は、（−）アポゴシポールであり得る。他の実施形態において、化合物は、（−）アポゴシポール、（＋）アポゴシポール、ラセミアポゴシポール、Ｓ−アポゴシポール、Ｒ−アポゴシポール、またはそれらの混合物であり得る。別の実施形態において、化合物は、実質的に純粋な（−）アポゴシポールである。幾つかの実施形態において、（−）アポゴシポールは、組成物中のすべての高分子種の少なくとも８０％であり、例えば、約８５％、９０％、９５％、および９９％を超えている。例えば、（−）アポゴシポールは、基本的に均質に精製されることがあり、そこで、組成物は、基本的に（−）アポゴシポール単独から成る。様々な実施形態において、化合物は、（＋）アポゴシポールを実質的に含まない（−）アポゴシポールである。幾つかの実施形態において、本明細書に示される一般的な構造Ｂの化合物は、本明細書に示される化合物ＸＸＩまたはＸＸＩＩである。
【０１８３】
１つの実施形態において、本明細書に示される、一般的な構造Ｂの化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約５０％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約５０％またはそれ以下を含む。特定の実施形態において、化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約６０％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約４０％またはそれ以下を含む。幾つかの実施形態において、化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約７０％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約３０％またはそれ以下を含む。幾つかの実施形態において、化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約８０％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約２０％またはそれ以下を含む。幾つかの実施形態において、化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約９０％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約１０％またはそれ以下を含む。幾つかの実施形態において、化合物は、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約９５％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約５％またはそれ以下を含む。幾つかの実施形態において、アポゴシポールは、アポゴシポールの（−）鏡像異性体の重量約９９％またはそれ以上、およびアポゴシポールの（＋）鏡像異性体の重量約１％またはそれ以下を含む。
【０１８４】
天然物ゴシポール（１）は、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ＸＬおよびＭｃｌ−１の強力なインヒビターであり、ＢＨ３の模倣物として機能する。（−）ゴシポールは、現在、第二相臨床試験（ in phase clinical II trail）中であり、進行悪性腫瘍患者における単剤の抗腫瘍活性を示している。ゴシポールが、２つの反応性アルデヒド基が原因である可能性が高い毒性問題があると考え、我々は、アポゴシポール（２）、すなわち、これらのアルデヒドを欠くが、インビトロでおよび細胞において抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対する活性を保持する化合物を調製した。最近、我々はまた、ゴシポールおよびアポゴシポールのマウスにおける有効性および毒性を比較した。我々の症状発現前のインビボのデータは、アポゴシポールが、ゴシポールと比較して、優れた有効性および著しく低減された毒性を有することを示す。我々はまた、マウスにおけるアポゴシポールの単一用量の薬物動態学的特性を評価した。アポゴシポールは、より遅いクリアランスに起因する、ゴシポールと比較した、時間にわたる優れた血中濃度を示した。これらの観察は、アポゴシポールが、癌治療のための有望な主要の化合物であることを示す。最近、我々は、アポゴシポールのアトロフ異性体の分離および特性を報告した。これらの試験は、ラセミアポゴシポールが、その個々の異性体と同様に効果的であることを明らかにした。我々はさらに、５，５’のケトン置換されたアポゴシポール誘導体の合成および評価を行い、最良の化合物３（ＢＩ７９Ｄ１０）は、アポゴシポールと比較して、改善されたインビトロおよびインビボの有効性を示したことを報告した。しかしながら、化合物３が、トランスジェニックマウスの試験の過程において、軽度のＧＩ毒性を示した一方で、アポゴシポールは、毒性の兆候を示さず、これは、化合物３における比較的活発なケトン基が原因である可能性が高い。代わりに、我々は、現在、５，５’の位置で、反応的なケトン基をより新薬の開発につながるようなアミドおよびアルキル基で置換する、新しい５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の活性を調製および評価することを重視している。
【０１８５】
アポゴシポールは、ゴシポールと比較して、改善されたインビボの有効性および低減された毒性を有する、Ｂｃｌ−ＸＬおよびＢｃｌ−２の有望なインヒビターである。Ｂｃｌ−２におけるＢＨ３結合の溝へのアポゴシポールの分子ドッキングの研究は、アポゴシポールが、１および１’の水酸基を介して、Ｂｃｌ−２において、残基Ａｒｇ１４３およびＴｙｒ１０５と共にそれぞれ２つの水素結合を形成することを示唆する。アポゴシポールはまた、右側のナフタレン環上の６’の水酸基を介して、Ｂｃｌ−２において、Ｔｒｐ１４１およびＴｙｒ１９９と共に水素結合を形成する。左側のナフタレン環上のイソプロピル基を、Ｂｃｌ−２において第１の疎水性ポケット（Ｐ１）に挿入する一方、右側のナフタレン環上のイソプロピル基を、疎水性ポケット（Ｐ２）へ挿入する。予測された結合モデルの解析は、アポゴシポールの全面的なコア構造が、Ｂｃｌ−２のＢＨ３結合の溝にかなりよく適合する一方で、２つのイソプロピル基は、疎水性ポケットＰ１およびＰ２を明らかに十分には占有しないことを示す。それ故、イソプロピル基を適切な置換基で置換する、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のライブラリーは、Ｂｃｌ−２上の疎水性ポケットをより有効に占有することができる新しい分子を引き出す目的で作られた。
【０１８６】
合成経路は、５，５’の位置で様々なアミド基を組み入れるために開発された。化合物１（ゴシポール）は、９０℃でＮａＯＨ溶液によって処置され、化合物２（アポゴシポール）を提供し、炭酸カリウムの存在下で硫酸ジメチルによって容易にメチル化され、化合物４を与えた。室温でのジクロロメチルメチルエーテルの後の化合物４のＴｉＣｌ４との反応は、イソプロピル基の喪失および同時のビスホルミル化を引き起こし、アルデヒド化合物５を与えた。化合物５のアルデヒド基は、次亜塩素酸ナトリウムとの軽度の酸化によって、カルボン酸６に転換された。その後、カルボン酸６は、室温で、１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）の存在下において様々な市販の利用可能なアミンと結合され、化合物７を与えた。３臭化ホウ素を使用した化合物７のその後の脱メチル化は、化合物８を与えた。５，５’のアルキル置換されたアポゴシポール誘導体の合成は、図１２および１６〜１８に概説された。化合物５は、異なるグリニャールまたはリチウム試薬で処置され、第二アルコール９を与え、酸化され、ピリジニウム塩化クロムによってフェノン１０を与えた。３臭化ホウ素を使用したその後の脱メチル化の後、トリエチルシランはフェノン１０をアルキル化合物１１に還元し、化合物１２を与えた。５，５’の位置で水素原子またはカルボン酸を有する、化合物１３および１４は、５，５’の位置での置換が、生物学的活性を高めるのに重要であるかどうかを調査するために合成化される。化合物１３は、イソプロピル基を喪失するために、化合物４を濃硫酸で処置することによって合成された。結果として生じる産物および化合物６は、その後、３臭化ホウ素で個々に処置され、化合物１３および１４をそれぞれ与えた。
【０１８７】
合成された５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体は、Ｂｃｌ−ＸＬに対する一次元の１Ｈ核磁気共鳴法（１Ｄ−１Ｈ ＮＭＲ）の結合アッセイによって最初に検査された。１Ｄ−１Ｈ ＮＭＲの結合アッセイにおける活性化合物は、その後、選択され、等温滴定熱量測定アッセイ（ＩＴＣ）、細胞の生存率アッセイおよび競合的な蛍光偏光法アッセイ（ＦＰＡ）で評価された。化合物（８ｒ、８ｑ、８ｍ）の基は、これらのアッセイにおいてＢｃｌ−ＸＬに対する高い結合親和性を示した。最も強力な化合物８ｒは、Ｂｃｌ−ＸＬの一次元の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおいて活性部位のメチル基（−０．３８〜０．４２ｐｐｍの間の範囲）の著しい化学シフト変化を誘発しており、また、ＦＰ置換のアッセイにおいて０．７６μＭのＩＣ５０値も有しており、アポゴシポールより５倍有効である。ＮＭＲ結合のデータおよびＦＰアッセイの結果を確認するために、我々はさらに、ＩＴＣアッセイを使用して、Ｂｃｌ−ＸＬに対する化合物８ｒの結合親和性を評価した。ＮＭＲ結合およびＦＰＡデータに一致して、化合物８ｒは、０．１１μＭのＫｄ値を有するＢｃｌ−ＸＬへの強力な結合親和性を示し、同じアッセイにおいてアポゴシポール（Ｋｄ＝１．７μＭ）より１５倍強力である。ＮＭＲ結合、ＦＰＡ、およびＩＴＣデータと一致して、化合物８ｒは、ＰＣ３ＭＬ細胞における細胞成長を阻害する際の強固な有効性を示し、ＰＣ３ＭＬ細胞は、高レベルのＢｃｌ−ＸＬを発現する。８ｒのＥＣ５０値は１．７μＭであり、故に、アポゴシポールより６倍強力である（ＥＣ５０＝１０．４μＭ）。化合物（８ｊ〜８ｓ）は、２．８μＭの平均のＩＣ５０値を有するこれらのアッセイにおいて、Ｂｃｌ−ＸＬに対する８ｒと同様の結合親和性を示した。
【０１８８】
Ｂｃｌ−２およびＭｃｌ−１は、細胞アポトーシスにおいて重大な役割を果たしており、Ｂｆｌ−１は、最近Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質中の大きなＢ細胞リンパ腫において重要な抗アポトーシス因子であると示唆されている。それ故、我々はさらに、ＦＰアッセイを使用して、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１に対する、選択されたＢｃｌ−ＸＬ活性の５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の結合特性および特異性を評価した。化合物８ｒは、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１に対する強固な結合親和性を示した。それは、０．３２、０．２８および０．７３μＭのＩＣ５０値で、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１をそれぞれ阻害し、同じＦＰアッセイにおいてアポゴシポールより約１０倍以上強力である。化合物８ｒは、Ｈ４６０、Ｈ１２９９およびＢＰ３細胞株に対してさらに評価され、それらは高レベルのＢｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１をそれぞれ発現する。ＦＰＡデータと一致して、化合物８ｒは、０．３３μＭおよび０．６６μＭのＩＣ５０値でＨ４６０およびＢＰ３細胞の細胞成長を阻害する際のかなりの有効性をそれぞれ示し、アポゴシポールより約７〜１０倍以上強力である。化合物８ｒの分子ドッキングの研究は、５，５’の位置での２−フェニルプロピル基が、Ｂｃｌ−２において疎水性ポケット（Ｐ１およびＰ２）に深く挿入され、それ故、アポゴシポールのイソプロピル基と比較して、より有効にこれらの範囲を占有したことを示した。加えて、右側のナフタレン環上のカルボニル基はまた、残基Ｔｙｒ１９９で更なる水素結合を形成した。しかしながら、化合物８ｒは、アポゴシポールと比較して、Ｈ１２９９細胞株における同様の細胞活性を示したが、それはおそらく、異なる細胞株が、化合物８ｒに対して異なる感受性を有するからである。１２ｅ、８ｎ、８ｐ、８ｑ、８ｋのような、他の５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体はまた、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１に対して強固な全活性の（ｐａｎ−ａｃｔｉｖｅ）阻害特性を示した。最も有力な化合物８ｑは、ＦＰアッセイにおいて、０．６７、０．５９および１．３μＭのＩＣ５０値で、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１にそれぞれ結合した。ＦＰＡに一致して、それは、０．４０、０．３６および０．２０μＭのＩＣ５０値での、Ｈ４６０、Ｈ１２９９およびＢＰ３細胞株に対するそれぞれの強力な細胞阻害活性を示す。
【０１８９】
合成された５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の構造活性相関（ＳＡＲ）の解析は、５，５’の位置での置換が、Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質へのより強固な結合親和性を達成させるために重要であることを明らかにした。従って、５，５’の位置上の水素原子またはカルボン酸基を有する化合物１３および１４は、すべてのアッセイにおいて弱い阻害を示したか、または阻害を示さなかった。５，５’のアミド置換されたアポゴシポール誘導体のＳＡＲの解析はさらに、より長く柔軟な疎水基が、小さく、短く、固い疎水基よりも、よい有効性を見せることを示す。より長いメチルシクロヘキシル基（８ｍ）による、小さなメチルシクロプロパン（８ｌ）または短いシクロペンチル（８ｂ）基の置換は、著しく細胞阻害の能力を増加させた。また、５，５’の位置でフェネチル基を有する化合物（８ｎ〜８ｓ）は、０．６４μＭおよび２．６μＭの平均のＥＣ５０値でのＨ４６０およびＰＣ３ＭＬの細胞株における強力な細胞活性をそれぞれ示した一方で、フェニル基を有する化合物（８ａ〜８ｅ）は、８．６μＭおよび１１．３μＭの平均のＥＣ５０値での弱い細胞活性をそれぞれ示した。我々のモデリング予測に基づいて、これはおそらく、より長く、柔軟な基が、Ｐ１およびＰ２ポケットにより深く挿入され得るからである。我々はまた、５，５’のアルキル置換されたアポゴシポール誘導体のＳＡＲを調査した。一般に、より長い疎水基はまた、改善された能力を示す。イソブチルおよびイソペンチル基を有する化合物１２ａおよび１２ｂは、イソプロピル基を有するアポゴシポールと比較して、改善された活性を示した。また、フェネチル基を有する化合物１２ｅは、ベンジル基を有する化合物１２ｄより活性である。
【０１９０】
Ｈ４６０細胞株は、いくつかの基によって研究されている。全（ｐａｎ）−Ｂｃｌ−２ファミリーインヒビター、ＧＸ１５−０７０は、３．８５μＭのＩＣ５０値でＨ４６０細胞株において試験された。ＢＰ３は、Ｂｆｌ−１を過剰発現する、ヒトのびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の細胞株である。Ｂｆｌ−１、Ｂｃｌ−ＸＬおよびＭｃｌ−１のｍＲＮＡの比率は、約１０：３：１である。我々は、ＢＰ３細胞が、以下の表１に示されるように、ウエスタンブロット解析によって、高レベルのＢｆｌ−１およびＭｃｌ−１を過剰発現したと断定した。
【０１９１】
【表１】
2012524101.tif 000024
【０１９２】
強力なＢｃｌ−ＸＬおよびＢｃｌ−２アンタゴニストＡＢＴ−７３７は、ＡＢＴ７３７がＭｃｌ−１およびＢｆｌ−１に対して有効ではないため、ＢＰ３細胞株に対する細胞活性を示さなかった。
【０１９３】
故に、次に我々は、高レベルのＢｃｌ−２およびＢｃｌ−ＸＬを発現する、ヒトのリンパ腫ＲＳ１１８４６細胞株のアポトーシスを誘発するために、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の能力を評価した。これらのアッセイに関して、我々はフローサイトメトリー解析に続いて、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）二重染色法を使用した。ほとんどの合成されたアポゴシポール誘導体は、用量依存性の方法で、ＲＳ１１８４６細胞株のアポトーシスを有効に誘発した。特に、化合物８ｑ、８ｒおよび８ｎは、３．０から５．８μＭまでの範囲のＥＣ５０を用いると有効であり、ヒトの癌ＰＣ３ＭＬおよびＨ４６０細胞株における以前の結果と一致している。また、陰性対照の化合物１３および１４は、ＲＳ１１８４６細胞株の弱いアポトーシスを誘発した、またはアポトーシスを誘発しなかった。
【０１９４】
我々はまた、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体が、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質が細胞保護的な表現型を欠く、Ｂａｘ／Ｂａｋのダブルノックアウト（ＤＫＯ）マウスの胚線維芽細胞（ＭＥＦ）に対して、細胞毒性があるかどうかを調査した。いくつかの強力な全（ｐａｎ）−活性のＢｃｌ−２化合物（８ｍ、８ｑ、８ｒ、８ｋ、８ｐ、１２ｅ）は、ＦＩＴＣ−Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩアッセイを使用して、１０μＭでそれらの２０〜３５％を死滅させることによって、Ｂａｘ／Ｂａｋのダブルノックアウトマウスの胚線維芽細胞（ＭＥＦ／ＤＫＯ）において、わずかに細胞毒性を示し、これは、これらの化合物がいくつかのオフターゲット効果を示したことを意味している。しかしながら、これらの化合物は、１０μＭでＭＥＦおよびＭＥＦ／ＤＫＯ細胞においてよく似た細胞毒性を示したゴシポールよりも低減されたオフターゲット効果を示した。それに比べて、アポゴシポールはオフターゲット効果を低減させたが、５，５’のアミド置換されたアポゴシポール誘導体と比較して、ＭＥＦ細胞のアポトーシスを誘発するための能力がより弱いことを示した。
【０１９５】
アポゴシポールは、キノンに酸化し得るナフタレン環上の６つの水酸基を有するポリフェノール骨格である。我々はアポゴシポールをアスコルビン酸と共結晶化することにより、以前にアポゴシポールを安定化させた。アポゴシポールはまた、ナフタレン環上のカルボニル基などの電子求引性基の導入により安定化されることができ、それは、これらがナフタレン環上の電子密度を減少させ、続いて、酸化速度および他の副反応を遅らせるからである。固体化合物（８ｍ、８ｑ、８ｒ、８ｋ、８ｐ、１２ｅ）の化学的安定性は、室温で評価された。化合物の安定性は、ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳの組み合わせを使用して監視された。全体として、５，５’のアミド置換されたアポゴシポール誘導体は、アポゴシポールと比較して、優れた化学的安定性を示す。特に、８ｒと８ｑが、室温で６０日後、１０％分解された一方で、アポゴシポールは、アスコルビン酸が欠如している同じ条件下で、ほぼ８０％分解される。５，５’の位置でフェネチル基を有する化合物１２ｅはまた、電子求引性基の欠如のため、アミド化合物ほど安定していない。
【０１９６】
５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の薬理学的特性を試験するために、我々は、それらのインビトロの血漿の安定性、ミクロソームの安定性、および細胞膜の透過性を測定した。これらの研究から、我々は、合成された化合物がアポゴシポールよりも優れた血漿およびミクロソームの安定性を示すという結論を下すことができた。化合物８ｒおよび８ｍが、ラットの血漿における１時間のインキュベーションの後に、それぞれ、４％および１１％分解した一方で、アポゴシポールは、同じ条件下で４７％分解した。加えて、化合物８ｒおよび８ｍが、ラットのミクロソームの調製における１時間のインキュベーションの後に、それぞれ、２４％および１０％分解した一方で、アポゴシポールは、同じ条件下で３６％分解した。化合物８ｒおよび８ｍはまた、アポゴシポールと比較して、同様のまたは改善された細胞膜の透過性を示した。
【０１９７】
故に、１Ｄ １Ｈ−ＮＭＲ結合アッセイ、ＦＰアッセイ、ＩＴＣアッセイ、細胞毒性アッセイおよび予備のインビトロのＡＤＭＥデータの組み合わせを使用して、８ｒおよび８ｑなどの化合物は、Ｂ６Ｂｃｌ−２のトランスジェニックマウスを使用した更なるインビボの研究のために選択された。Ｂ６Ｂｃｌ−２トランスジェニックマウスのＢ細胞は、ヒトＢｃｌ−２を過剰発現し、マウスの脾臓において蓄積する。脾臓重量が、同年齢および同性別であるＢｃｌ−２−トランスジェニックマウスにおいて極めて一致し、変異性が、コントロールＢ６Ｂｃｌ２マウス中で±２％内にあったことを我々が断定したために、脾臓重量は、インビボの活性を評価するためのエンドポイントとして使用される。我々は、最初に、７２μｍｏｌ／ｋｇの単一の腹腔内（ｉｐ）注射を受けた単一のＢｃｌ−２トランスジェニックマウスにおいて、アポゴシポールおよびゴシポールと並べて、８ｒおよび８ｑなどの化合物のインビボの活性を検査した。すべてのインビトロのデータと一致して、試験された５，５’のアミド置換されたアポゴシポール誘導体は、アポゴシポールおよびゴシポールと比較して、優れたインビボの活性を示した。特に、化合物（８ｒ、８ｋおよび８ｐ）は、４０％を上回る脾臓重量の減少を誘発した。最大の脾臓縮小が、この実験モデルにおいて５０％しかないため、これらの化合物が、最大に近い（８５〜９５％）生物学的活性を誘発した一方で、アポゴシポールおよびゴシポールは、同じ用量で脾臓重量において最大の減少の４０％を誘発した。また、陰性対照の化合物１３は、予想通り、トランスジェニックマウスモデルにおいて活性を示さなかった。全体的に試験された５，５’のアルキル置換されたアポゴシポール誘導体（１２ｃおよび１２ｅ）は、５，５’のアミド置換されたアポゴシポール誘導体と比較して、より低いインビボの活性を示した。しかしながら、５，５’のアルキル置換されたアポゴシポールは、７２μｍｏｌ／ｋｇおよび１２０μｍｏｌ／ｋｇでも著しい毒性の徴候を示さない一方で、５，５’のアミド置換されたアポゴシポールは、以下の表２に示されるように、７２μｍｏｌ／ｋｇで毒性徴候を示す。
【０１９８】
【表２】
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【０１９９】
化合物８ｒで処置されたマウスは、７２μｍｏｌ／ｋｇ（５０ｍｇ／ｋｇ）でＧＩ毒性のより明らかな兆候を有していた。化合物８ｒの毒性および有効性のバランスを保つために、我々は次に、５匹のマウスの群を使用して、８ｒの最大耐用量（ＭＴＤ）を調査した。マウスは、１００、７５、５０、２５および１２．５ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）の単一用量で処置され、１４日間観察され、罹患率（体重喪失）および死亡率をモニターした。マウスはすべて、１４日後に生きており、最大の体重喪失は、５日目に観察され、１４日後に、８０〜１００％回復した。２５および１２．５ｍｇ／ｋｇ投与されたマウスが、体重喪失を示さなかった一方で、５０ｍｇ／ｋｇ投与されたマウスは、約１３％の体重喪失を示した。それ故、化合物８ｒのＭＴＤは、約２５ｍｇから５０ｍｇ／ｋｇの間である可能性が高い。我々は次に、４２ｍｇ／ｋｇ（６０μｍｏｌ／ｋｇ）の用量に各６匹のマウスの群において、化合物８ｒのインビボの活性および毒性を評価した。単一のマウスの実験と一致して、これらのマウスの化合物８ｒでの処置は、６匹のマウスの対照群と比較して、脾臓重量（Ｐ＜０．０００１）の著しい（〜７０％）減少という結果になった。マウスはすべて、処置に良好な耐性を示し、ＧＩ毒性の軽度の兆候が観察された。マウスの平均の体重喪失は、８ｒでのこの研究の間で、７．８％であった。
【０２００】
要約すれば、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のライブラリーは、様々なインビトロおよびインビボのアッセイにおいて合成化され、評価された。最も強力な化合物、８ｒは、７６０ｎＭ、３２０ｎＭ、２８０ｎＭおよび７３０ｎＭのＩＣ５０値で、Ｂｃｌ−ＸＬ、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１にそれぞれ結合することが判明した。化合物はまた、ＰＣ３ＭＬ、Ｈ４６０、Ｈ１２９９およびＢＰ３の癌細胞株の細胞培養における成長を強力に阻害し、ナノモル範囲に対するマイクロモル以下の範囲におけるＥＣ５０値で、Ｂｃｌ−ＸＬ、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１をそれぞれ発現する。化合物８ｒが、用量依存性の方法で、ＲＳ１１８４６のヒトのリンパ腫細胞株のアポトーシスを有効に誘発し、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質が細胞保護的な表現型を欠く、Ｂａｘ／Ｂａｋのダブルノックアウトマウスの胚線維芽細胞に対して、細胞毒性をほとんど示しておらず、化合物８ｒが、オフターゲット効果をほとんど有さないことを意味している。最後に、化合物８ｒは、Ｂｃｌ−２がＢ細胞において過剰発現する、Ｂｃｌ−２トランスジェニックマウスにおけるアポゴシポールと比較して、有益な化学的安定性、インビトロのＡＤＭＥ特性および優れたインビボの有効性を示した。腫瘍形成、化学療法抵抗性における抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質の重大な役割、および抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対する８ｒの強力な阻害活性を考えれば、化合物８ｒは、新しいアポトーシスに基づいた癌治療の開発のための生存可能な薬物候補であることを意味する。
【０２０１】
【化２２】
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【０２０２】
【表３−１】
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【０２０３】
【表３−２】
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【０２０４】
【表４】
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【０２０５】
【表５】
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【０２０６】
【表６】
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【０２０７】
本明細書に開示される化合物の抗アポトーシスの、ＢＣＬ−２タンパク質への結合は、アポトーシスを誘発し、それによって、炎症および／または炎症性障害を処置する。
幾つかの実施形態において、本明細書に開示される化合物は、例えば、ＢＣＬ−２またはＢＣＬ−ＸＬなどの抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリータンパク質に結合し得る。
この結合は、抗アポトーシスのＢＣＬ−２ファミリーメンバーの、アポトーシス促進性のＢＣＬ−２ファミリーメンバーへの結合を阻害し得る。様々な実施形態において、本明細書に開示される化合物の結合は、抗アポトーシスのＢＣＬ−２タンパク質とアポトーシス促進性のＢＣＬ−２ファミリーメンバーのＢＨ３ドメインの間の複合体の形成を減少させ得る。
【０２０８】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）結合アッセイおよび計算的なドッキングの研究の組み合わせによって誘導され、一連の５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体は、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質の強力な全（ｐａｎ）−活性インヒビターとして合成された。最も強力な化合物、８ｒは、０．７６μＭ、０．３２μＭ、０．２８μＭおよび０．７３μＭのＩＣ５０値で、Ｂｃｌ−ＸＬ、Ｂｃｌ−２、Ｍｃｌ−１およびＢｆｌ−１へのＢＨ３ペプチドの結合をそれぞれ阻害する。この化合物はまた、０．３３μＭおよび０．６６μＭのＥＣ５０値で、Ｈ４６０のヒトの肺癌およびＢＰ３のヒトのＢ細胞リンパ腫細胞株における細胞成長をそれぞれ、強力に阻害する。化合物８ｒは、用量依存性の方法で、ＲＳ１１８４６のヒトのリンパ腫細胞株のアポトーシスを有効に誘発し、抗アポトーシスのＢｃｌ−２ファミリータンパク質が細胞保護的な表現型を欠くｂａｘ−／−Ｂａｋ−／−細胞に対して、細胞毒性をほとんど示さず、これは、化合物８ｒがオフターゲット効果をほとんど有さないことを意味している。化合物８ｒはまた、Ｂｃｌ−２が脾臓のＢ細胞において過剰発現されるトランスジェニックマウスにおいて、インビボの有効性を示す。アポゴシポールに関する、その改善された化学的な、血漿およびミクロソームの安定性と共に、化合物８ｒは、癌に対する新しいアポトーシスに基づいた治療を意味する。
【０２０９】
他の実施形態によると、本開示は、疾患または障害を処置するための方法を提供する。方法は、そのような処置、有効な量の任意の本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、または溶媒和物を、そのような処置を必要とする被験体に投与する工程を含むことができる。処置され得る疾患または障害の限定しない例は、癌および自己免疫性疾患である。
【０２１０】
別の実施形態によると、本開示は、癌を処置するための方法を提供する。方法は、治療上有効な量の任意の本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水化物、または溶媒和物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む。任意の本明細書に記載される化合物は、あらゆるタイプの癌を処置するために使用され得る。幾つかの態様において、治療され得る癌の種類は、肺癌、乳癌、前立腺癌だけでなく、様々なリンパ腫も含む。
【０２１１】
別の実施形態によると、あらゆる開示された化合物は、ヒトなどの哺乳動物における病理学的な疾病または症状の処置のための薬剤の製造に使用され得る。薬剤は、本明細書に記載される制限の範囲内で、癌の処置に向けられ得る。
【０２１２】
別の実施形態によると、本開示は、医薬組成物を提供する。医薬組成物は、開示されるあらゆる化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、水化物、または溶媒和物、および薬学的に許容可能な希釈剤または担体を含み得る。医薬組成物は、癌を治療するために使用され得る。医薬組成物は、１以上の追加の治療上の抗癌剤をさらに随意に含み、それは、限定されないが、（１）微小管インヒビター（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、およびビンデシンなど）、微小管安定剤（例えば、パクリタキセル［タキソール］、およびドセタキセル、タキソテールなど）、およびクロマチン機能のインヒビターを含み、エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシド［ＶＰ−１６］、およびテニポシド［ＶＭ−２６］など）などのトポイソメラーゼインヒビター、 およびトポイソメラーゼＩ（例えば、カンプトテシンおよびイシリノテカン（Isirinotecan）［ＣＰＴ−１１］など）を標的とする薬剤を含む、アルカロイド；（２）ナイトロジェンマスタード（例えば、メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、およびブスルファン［ミレラン］など）、ニトロソウレア（例えば、カルマスティン、ロムスチン、およびセムスチンなど）、および他のアルキル化剤（例えば、ダカルバジン、ヒドロキシメチルメラミン、チオテパ、およびマイトマイシンなど）を含む、共有結合のＤＮＡ結合剤［アルキル化剤］；（３）ヌクレイン酸インヒビター（例えば、ダクチノマイシン［アクチノマイシンＤ］など）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン［ダウノマイシン、およびセルビジン］、ドキソルビシン［アドリアマイシン］、およびイダルビシン［イダマイシン］など）、アントラセンディオン（例えば、［ミトキサントロン］などのアントラサイクリンアナログなど）、ブレオマイシン（ブレノキサン）など、およびプリカマイシン（ミトラマイシン）などを含む、非共有結合のＤＮＡ結合剤［抗腫瘍抗生物質］；（４）葉酸代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、ホレックス（Folex）、およびメキサートなど）、プリン代謝拮抗薬（例えば、６−メルカプトプリン［６−ＭＰ、プリネトール］、６−チオグアニン［６−ＴＧ］、アザチオプリン、アシクロビル、ガンシクロビル、クロロデオキシアデノシン、２−クロロデオキシアデノシン［ＣｄＡ］、および２’−デオキシコホルマイシン［ペントスタチン］など）、ピリミジンアンタゴニスト（例えば、フルオロピリミジン［例えば、５−フルオロウラシル（アドルシル）、５−フルオロデオキシウリジン（ＦｄＵｒｄ）（フロクスウリジン）］など）、および、サイトシンアラビノサイド（例えば、サイトサール［ａｒａ−Ｃ］およびフルダラビンなど）を含む、代謝拮抗薬；（５）Ｌ−アスパラギナーゼ、およびヒドロキシ尿素などを含む、酵素；（６）抗エストロゲン（例えば、タモキシフェンなど）、非ステロイド性の抗アンドロゲン（例えば、フルタミドなど）およびアロマターゼインヒビター（例えば、アナストロゾール［アリミデックス］など）などのグルココルチコイドを含む、ホルモン；（７）白金化合物（例えば、シスプラチンおよびカルボプラチンなど）；（８）抗癌薬、毒素、および／または放射性核種などと結合した、モノクロナル抗体；（９）生物学的応答修飾物質（例えば、インターフェロン［例えば、ＩＦＮ−．ａｌｐｈａ．など］およびインターロイキン［例えば、ＩＬ−２など］など）；（１０）養子免疫療法；（１１）造血成長因子；（１２）腫瘍細胞の分化を誘発する薬剤（例えば、オールトランス型レチノイン酸など）；（１３）遺伝子療法薬剤；（１４）アンチセンス療法薬剤；（１５）腫瘍ワクチン；（１６）腫瘍転移に対して向けられる薬剤（例えば、バチマスタットなど）；（１７）血管新生のインヒビター、および（１８）選択的セロトニン再取り込みインヒビター（ＳＳＲＩ）、のような薬剤などを含む。
【０２１３】
使用され得る適切なＳＳＲＩの、反応性があるが、限定しない例は、セルトラリン（例えば、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．による商標「Ｚｏｌｏｆｔ（登録商標）」のもと市場に出された、セルトラリン塩酸塩）またはセルトラリン代謝物質、フルボキサミン（例えば、Ｓｏｌｖａｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．による商標「Ｌｕｖｏｘ（登録商標）」のもと市場に出された、フルボキサミン・メレート）、パロキセチン（例えば、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．による商標「Ｐａｘｉｌ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸パロキセチン）、フルオキセチン（例えば、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙによる商標「Ｐｒｏｚａｃ（登録商標）」または「Ｓａｒａｆｅｍ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸フルオキセチン）およびシタロプラム（例えばＦｏｒｅｓｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ，Ｉｎｃ．による商標「Ｃｅｌｅｘａ（登録商標）」のもと市場に出された、シタロプラム臭化水素酸塩）、およびそれらの代謝物質を含む。さらなる実施例は、ベンラファキシン（例えば、Ｗｙｅｔｈ−Ａｙｅｒｓｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによる商標「Ｅｆｆｅｘｏｒ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸ベンラファキシン）、（例えば、Ｏｒｇａｎｏｎ，Ｉｎｃ．による商標「Ｒｅｍｅｒｏｎ（登録商標）」のもと市場に出された）ミルタザピン、ブスピロン（例えば、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂによる商標「Ｂｕｓｐａｒ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸ブスピロン）、トラゾドン（例えば、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ ａｎｄ Ａｐｏｔｈｅｃｏｎによる商標「Ｄｅｓｙｒｅｌ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸トラゾドン）、ネファゾドン（例えば、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂによる商標「Ｓｅｒｚｏｎ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸ネファゾドン）、クロミプラミン（例えば、Ｎｏｖｏｐｈａｒｍ，ＬＴＤ，Ｃｉｂａ，ａｎｄ Ｔａｒｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによる商標「Ａｎａｆｒａｎｉｌ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸クロミプラミン）、イミプラミン（例えば、Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｃｏｍｅ．Ｉｎｃ．による商標「Ｔｏｆｒａｎｉｌ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸イミプラミン）、ノルトリプチリン（例えば、Ｌｕｎｄｂｅｃｋによる商標「Ｎｏｒｔｒｉｎｅｌ（登録商標）」のもと市場に出された、塩酸ノルトリプチリン）、（例えば、Ｏｒｇａｎｏｎ，Ｉｎｃ．による商標「Ｔｏｌｖｏｎ（登録商標）」のもと市場に出された）ミアンセリン、デュロキセチン（例えば、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙによって市場に出された、塩酸デュロキセチン）、ダポキセチン（例えば、ＡＬＺＡ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって市場に出された、塩酸ダポキセチン）、リトキセチン（例えば、Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ Ｒｅｃｈｅｒｃｈｅ（Ｌ．Ｅ．Ｒ．Ｓ．），Ｂａｇｎｅｕｘ，Ｆｒａｎｃｅ．によって市場に出された、塩酸リトキセチン）、フェモキセチン、（例えば、ＭＥＲＣＫ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．による商標「Ｇａｍｏｎｉｌ（登録商標）」のもと市場に出された��ロフェプラミン、（例えば、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙによって市場に出された）トモキセチンを含む。本開示は、現在使用されるＳＳＲＩ、またはその後発見されたまたは製剤されたＳＳＲＩを包含する。本明細書にリストされるものを含むＳＳＲＩは、約２ｍｇから約２，５００ｍｇの間の量で毎日、経口投与され得る。
【０２１４】
広い意味で、任意の癌または腫瘍（例えば血液および固形腫瘍）は、本開示の実施形態に従って処置され得る。本開示の実施形態に従って処置され得る典型的な癌は、限定されないが、頭頸部癌、脳癌（例えば多形グリア芽細胞腫）、乳癌、結腸直腸癌、食道癌、胃癌、肝癌、膀胱癌、子宮頚部癌、子宮内膜癌、肺癌（非小細胞）、卵巣癌および他の婦人科癌（例えば子宮と頚部の腫瘍）、膵癌、前立腺癌、腎癌、絨毛癌（肺癌）、皮膚癌（例えば黒色腫、基底細胞癌）、ヘアリーセル白血病、慢性リンパ性白血病、急性リンパ性白血病（胸および膀胱）、急性骨髄白血病、髄膜白血病、慢性骨髄白血病、および赤白血病を含む。より一般に、処置される癌は、白血病およびＢ細胞癌（例えばリンパ腫、多発性骨髄腫、およびＭＤＳ）を含む。
【０２１５】
任意の本明細書に記載される化合物および本開示の方法を使用した、処置され得る自己免疫性疾患の制限しない例は、関節リウマチ、乾癬性関節炎、若年性特発性関節炎、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、重症筋無力症、若年性糖尿病、糸球体腎炎、自己免疫性甲状腺炎、ベーチェット病、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性類天疱瘡、サルコイドーシス、乾癬、魚鱗癬、グレーブス眼症、乾癬、乾癬炎症性腸疾患、および喘息を含む。
【０２１６】
より詳細に本明細書に議論されるように、幾つかの実施形態はまた、様々な炎症性障害、疾患および疾病の処置および／または予防のための方法を提供する。そのような炎症性障害、疾患および疾病は、限定されないが、例えば、紅斑性狼瘡、関節リウマチ、多発性硬化症、および乾癬などの全身性自己免疫性疾患；および、例えば、潰瘍性大腸炎、重症筋無力症、グレーブス病、橋本甲状腺炎、クローン病、狼瘡性腎炎、自己免疫溶血性貧血、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、インシュリン依存型糖尿病、糸球体腎炎、およびリウマチ熱などの臓器特異的自己免疫性疾患を含む。本開示に従って処置され得る、他の炎症性疾患は、限定されないが、乾癬性関節炎、骨関節炎および痛風性関節炎などの他の炎症性関節炎の疾病だけでなく、損傷、アレルギー、感染、微生物、外傷、または物理的または化学的因子によって引き起こされる、結膜炎、皮膚炎、気管支炎、鼻炎などの他の炎症性の疾病も含む。喘息、シェーグレン症候群、髄膜炎、副腎白質萎縮症、ＣＮＳ血管炎、ミトコンドリアミオパシー、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、または腫瘍の炎症性の態様の処置はまた、本開示の一部として熟考される。ミトコンドリアミオパシーの例は、ＭＥＬＡＳ症候群、ＭＥＲＦ症候群、レーバー病、ウェルニッケ脳症、レット症候群、ホモシスチン尿症、高プロリン血症、非ケトーシス型高グリシン血症、ヒドロキシ酪酸性アミノ酸尿症、亜硫酸酸化酵素欠乏症、および複合系統病（Ｂ１２欠乏）を含む。そのような予防および／または処置と関連して、本明細書に記載される化合物による、製品、組成物、使用の方法、および医療処置もまた提供される。
【０２１７】
幾つかの場合において、塩として任意の本明細書に記載される化合物を投与することが適切であり得る。薬学的に許容可能な塩の例は、生理学的に許容可能な陰イオン、例えば、トシラート、メタンスルホン酸、酢酸塩、シトラート、マロネート、酒石酸塩、琥珀酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、ケトグルタル酸塩、およびグリセロリン酸塩を形成する酸で形成された有機酸付加塩を含む。塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩、および炭酸塩を含む、適切な無機塩がまた形成され得る。薬学的に許容可能な塩はまた、当該技術分野に周知の標準的な手順を使用して、例えば、任意の本明細書に記載される化合物を、生理学的に許容可能な陰イオンを与える適切な塩基と反応させることにより得られ得る。カルボン酸のアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウムまたはリチウム）またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）の塩もまた作られ得る。
【０２１８】
任意の本明細書に記載される化合物を組み込む、任意の錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤などはまた、トラガカントゴム、アラビアゴム、トウモロコシ澱粉またはゼラチンなどの結合剤；リン酸カルシウムなどの賦形剤；トウモロコシ澱粉、じゃが芋澱粉、アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；および蔗糖、果糖、ラクトースまたはアスパルテームなどの甘味剤を含み得、またはペパーミント、ウィンターグリーン油またはサクランボ香料などの香料が加えられ得る。任意の本明細書に記載される化合物のユニット剤形があるとき、それは、本明細書のタイプの物質に加えて、植物油またはポリエチレングリコールなどの液体担体を含み得る。様々な他の物質は、コーティング材として、またはそうでなければ固体のユニット剤形の物理的形態を修正するために含まれ得る。例えば、錠剤、丸剤、またはカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、シェラックまたは砂糖などでコーティングされ得る。シロップまたはエリキシルは、活性化合物、甘味剤としての蔗糖または果糖、防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、サクランボまたはオレンジ香料としての色素および香料を含み得る。任意のユニット剤形を調製するのに使用される任意の物質は、用いられる量において薬学的に許容可能で、実質無毒であるべきである。さらに、任意の本明細書に記載される化合物は、持続性放出製剤および装置に組み込まれ得る。
【０２１９】
任意の本明細書に記載される化合物はまた、注入または注射によって静脈内または腹腔内に投与され得る。任意の本明細書に記載の化合物の溶液は、水中で調製され、無毒な界面活性剤と随意に混合され得る。分散液はまた、グリセロール、液体のポリエチレングリコール、トリアセチン、およびそれらの混合物中および油中に調製され得る。通常の貯蔵および使用条件の下では、これらの製剤は、微生物の成長を防ぐための防腐剤を含み得る。
【０２２０】
無菌注射剤溶液は、濾過滅菌の後に必要とされるような、適切な溶剤中に治療上十分な量で含まれる任意の本明細書に記載の化合物を、本明細書に列挙した様々な他の成分と組み合わせることにより調剤され得る。無菌注射剤溶液の調製のための無菌の粉末剤の場合において、調製の方法は、真空乾燥および凍結乾燥の技術であり、それは、以前に無菌濾過された溶液中に有効成分および任意の更なる所望の成分の粉末剤をもたらす。
【０２２１】
局所投与のために、任意の本明細書に記載の化合物は、純粋な形態で、すなわち液体であるとき、適用され得る。しかしながら、固体または液体であり得る、皮膚科学的に許容可能な担体と組み合わせた、組成物または製剤として皮膚にそれを投与することが一般に望ましい。有用な固体担体は、タルク、粘土、微結晶性セルロース、シリカ、アルミナなどの微粉固体を含む。有用な液体担体は、水、アルコールまたはグリコールまたは水−アルコール／グリコールのブレンドを含み、その中で化合物は、随意に、無毒な界面活性剤を用いて、有効なレベルで溶かされ得るまたは分散され得る。補助薬および更なる抗菌剤は、所与の使用の特性を最適化するために加えられ得る。
【０２２２】
結果として生じた液状組成物は、吸収性パッドから適用されるか、絆創膏および他の包帯を含浸させるために使用されるか、または、ポンプタイプまたはエアゾール噴霧器を使用して、患部にスプレーされ得る。当業者に周知のように、合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪族アルコール、変性セルロースまたは変性無機物質のような増粘剤はまた、使用者の皮膚に直接適用するために、塗布可能なパスタ剤、ゲル剤、軟膏剤、石鹸などを形成する液体担体と共に用いられ得る。
【０２２３】
本開示はまた、薬学的に許容可能な希釈剤または担体と組み合わせた、本明細書に記載される化合物の医薬組成物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。さらに、本開示は、他の既知の抗炎症性化合物と組み合わせた、本明細書に開示される化合物の使用を提供する。
【０２２４】
様々な実施形態において、本開示は、有効な量の本明細書に記載される化合物、更なる抗炎症性化合物と組み合わせた本明細書に記載される化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩を、そのような治療を必要とする哺乳動物に投与することによって、炎症に関係する炎症性の疾患および／または疾病を処置するための方法を提供する。他の実施形態において、炎症に関係する炎症性の疾患および／または疾病を防ぐための方法、または患者がそのような炎症を発病させる可能性を減少させる方法が提供される。方法は、本明細書に記載される有効な量の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を、そのような治療を必要とする哺乳動物に投与する工程を含み得る。
【０２２５】
炎症の処置または予防に影響を与えるために、本明細書に示される一般構造Ｂの化合物の少なくとも１つによる治療上有効な量の化合物、一般構造Ｂの化合物の単一の鏡像異性体、（＋）鏡像異性体および（−）鏡像異性体の混合物、約９０％またはそれ以上の重量の（−）鏡像異性体、および約１０％またはそれ以下の重量の（＋）鏡像異性体の混合物、一般構造Ｂの化合物の個々のジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体の混合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、またはプロドラッグを、それを必要とする哺乳動物の被験体に投与することによって、哺乳動物の被験体、特に、炎症に関する疾患または疾病を有すると疑われる、またはその傾向のあるヒトを処置するための方法も提供される。幾つかの実施形態において、化合物は、アポゴシポールである。
【０２２６】
幾つかの実施形態において、炎症を処置するまたは炎症を予防するための方法は、本明細書に開示される疾患または障害を処置または予防するのに有用な、有効な量の別の治療薬の投与を含む。幾つかの実施形態において、他の治療薬の治療的効果が発揮される時間は、アポゴシポールまたは誘導体の治療的効果が発揮される時間と重なる。
【０２２７】
幾つかの実施形態において、他の治療薬は抗炎症剤である。本明細書に開示される幾つかの実施形態による、使用に適している抗炎症剤の例は、限定されないが、ステロイド（例えば、コルチゾール、コルチゾン、フルドロコルチゾン、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、６−メチルプレドニゾン、トリアムシノロン、ベータメタゾンまたはデキサメタゾン）、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ（例えば、アスピリン、アセトアミノフェン、トルメチン、サリチル酸塩、イブプロフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、ナブメトン、ロフェコキシブ、セレコキシブ、エトドラクまたはニメスリド）を含む。紅斑性狼瘡の処置に関して、例えば、本明細書に開示される化合物はまた、例えば、ヒドロキシクロロキノンを含む抗マラリア薬と併用して、または、例えば、アザチオプリンおよびシクロホスファミドを含む細胞傷害性化学療法と併用して投与され得る。
【０２２８】
幾つかの実施形態において、別の治療薬は、抗生物質（例えば、バンコマイシン、ペニシリン、アモキシシリン、アンピシリン、セフォタキシム、セフトリアキソン、セフィキシム、リファンピンメトロニダゾール、ドキシサイクリンまたはストレプトマイシン）である。別の実施形態において、他の治療薬は、ＰＤＥ４インヒビター（例えば、ロフルミラストまたはロリプラム）である。別の実施形態において、他の治療薬は、抗ヒスタミン剤（例えば、シクリジン、ヒドロキシジン、プロメタジンまたはジフェンヒドラミン）である。別の実施形態において、他の治療薬は、抗マラリア薬（例えば、アルテミシニン、アルテムエーテル、アルテスナート、リン酸クロロキン、塩酸メフロキン、ドキシサイクリン塩酸塩、塩酸プログアニル、アトバクオンまたはハロファントリン）である。
【０２２９】
本開示の併用療法に有用な別のタイプの治療薬は、ヒト化モノクロナル抗体などの抗体である。制限しない例は、抗ＣＤ９９抗体を含む。例えば、米国特許第７，２２３，３９５号；Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．，５２：１２５（２００１）を参照。リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）は、関節リウマチを処置するための本開示と組み合わせて有用である別の治療薬である。本開示に有用な別の治療薬はまた、本明細書に使用されるように、直接または間接的に細胞死を促進する任意の分子である、細胞毒性薬剤になり得る。特定の抗癌剤は、フラボピリドール、アドリアマイシン（ドキソルビシン）、ＶＰ１６（エトポシド）、タキソール（パクリタキセル）、シスプラチンなどを含む。
【０２３０】
化合物が、安定した無毒な酸または塩基を形成するのに十分塩基性であるかまた酸性である場合に、塩としての化合物の投与は、適切であり得る。薬学的に許容可能な塩の例は、生理学的に許容可能な陰イオン、例えば、トシラート、メタンスルホン酸、酢酸塩、シトラート、マロネート、酒石酸塩 、琥珀酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、ａ−ケトグルタル酸塩、およびａ．−グリセロリン酸塩を形成する酸で形成された有機酸付加塩である。塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩、および炭酸塩を含む、適切な無機塩も形成され得る。
【０２３１】
薬学的に許容可能な塩はまた、当該技術分野に周知の標準的な手順を使用して、例えば、アミンなどの十分な塩基性化合物を、生理学的に許容可能な陰イオンを与える適切な酸と反応させることにより得られ得る。カルボン酸のアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウムまたはリチウム）またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）の塩も作られ得る。
【０２３２】
本開示を実行するのに有用な化合物は、医薬組成物として製剤され、選択された投与の経路、すなわち、経口または非経口、静脈内、筋肉内、局所または皮下の経路による、経路に適した様々な形態で、ヒトの患者などの哺乳動物の宿主に投与され得る。
【０２３３】
化合物は、全身的に投与され得、例えば、不活性の希釈剤または同化可能な食用の担体などの薬学的に許容可能なビヒクルと組み合わせて、経口で投与され得る。投与の経路は、経口または静脈内の経路である。他の投与の経路は、例えば、非経口の（ｐａｒｅｎｔａｌ）、筋肉内の、局所のおよび皮下の経路を含む。化合物は、硬性または軟性のシェルゼラチンカプセル内に封入され得るか、錠剤に圧縮され得るか、または患者が食べる食品に直接組み込まれ得る。経口の治療的投与のために、活性化合物は、１以上の賦形剤と組み合わされ、摂取可能な錠剤、バッカル錠剤、トローチ、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップ剤、ウエハーなどの形態で使用され得る。そのような組成物および調剤は、活性化合物の少なくとも０．１％を含むべきである。組成物および調剤のパーセンテージは、もちろん、変化し得、与えられたユニット剤形の重量の約２〜約６０％までの間が好都合であり得る。そのような治療上有用な組成物における活性化合物の量は、有効量レベルが得られるような量である。
【０２３４】
まさに一般構造Ａの化合物の場合でのように、一般構造Ｂの化合物は、様々な方法で投与され得る。例えば、錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤などはまた、以下の：トラガカントゴム、アラビアゴム、トウモロコシ澱粉またはゼラチンなどの結合剤；リン酸カルシウムなどの賦形剤；トウモロコシ澱粉、じゃが芋澱粉、アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；および蔗糖、果糖、ラクトーゼまたはアスパルテームなどの甘味剤を含み得、またはペパーミント、ウィンターグリーン油またはサクランボ香料などの香料が加えられ得る。ユニット剤形がカプセル剤であるとき、それは、本明細書のタイプの物質に加えて、植物油またはポリエチレングリコールなどの液体担体を含み得る。様々な他の物質は、コーティング材として、またはそうでなければ固体のユニット剤形の物理的形態を修正するために含まれ得る。例えば、錠剤、丸剤またはカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、セラックまたは砂糖などでコーティングされ得る。シロップまたはエリキシルは、活性化合物、甘味剤としての蔗糖または果糖、防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、サクランボまたはオレンジ香料としての色素および香料を含み得る。任意のユニット剤形を調製するのに使用される任意の物質は、用いられる量において薬学的に許容可能で、実質無毒であるべきである。さらに、活性化合物は、持続性放出製剤および装置に組み込まれ得る。
【０２３５】
化合物はまた、注入または注射によって静脈内にまたは腹腔内に投与され得る。活性化合物またはその塩の溶液は、水中で調製され、無毒な界面活性剤と随意に混合され得る。分散液はまた、グリセロール、液体のポリエチレングリコール、トリアセチン、およびそれらの混合物中および油中に調製され得る。通常の貯蔵および使用条件の下では、これらの製剤は、微生物の成長を防ぐための防腐剤を含む。
【０２３６】
注射または注入に適している製薬の剤形は、無菌注射可能または注入可能な溶液、または分散液の即時調製に適した有効成分による無菌溶液注射剤または分散液または無菌粉末剤を含むことができ、随意にリポソームに入れられる。あらゆる場合において、最終の剤形は、製造および貯蔵の条件の下では、無菌、液性、および安定的であるべきである。液体担体またはビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、無毒なグリセリルエステル、およびそれらの適切な混合物を含む、溶剤または液体の分散媒になり得る。適切な流動性は、例えば、リポソームの形成、分散液の場合における必要な粒径の維持、または界面活性剤の使用によって、維持可能である。微生物の活動の予防は、様々な抗菌剤および抗真菌薬、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノル、ソルビン酸、チメロサールなどによってもたらされ得る。多くの場合において、等張剤、例えば、砂糖、緩衝液、塩化ナトリウムを含むことが望ましい。注射可能な組成物の持続的吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの、組成物における使用によってもたらされ得る。
【０２３７】
無菌注射剤溶液は、濾過滅菌の後に必要とされるように、適切な溶剤で必要な量における活性化合物を、本明細書に列挙した様々な他の成分と組み合わせることにより調製される。無菌注射剤溶液の調製のための無菌の粉末剤の場合において、調製の方法は、真空乾燥および凍結乾燥の技術であり、それは、以前に無菌濾過された溶液中に有効成分および任意の更なる所望の成分の粉末剤をもたらす。
【０２３８】
局所投与のために、化合物は、純粋な形態で、すなわち液体であるときに、適用され得る。しかしながら、固体または液体であり得る、皮膚科学的に許容可能な担体と組み合わせた、組成物または製剤として皮膚にそれらを投与することが一般に望ましい。
【０２３９】
有用な固体担体は、タルク、粘土、微結晶性セルロース、シリカ、アルミナなどの微粉固体を含む。有用な液体担体は、水、アルコールまたはグリコールまたは水−アルコール／グリコールのブレンドを含み、その中で化合物は、随意に、無毒な界面活性剤を用いて、有効なレベルで溶かされ得るまたは分散され得る。香料などの補助薬および更なる抗菌剤は、所与の使用の特性を最適化するために加えられ得る。結果として生じた液状組成物は、吸収性パッドから適用されるか、絆創膏および他の包帯を含浸させるために使用されるか、または、ポンプタイプまたはエアゾール噴霧器を使用して、患部にスプレーされ得る。
【０２４０】
合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪族アルコール、変性セルロースまたは変性無機物質のような増粘剤はまた、使用者の皮膚に直接適用するために、塗布可能なパスタ剤、ゲル剤、軟膏剤、石鹸などを形成する液体担体と共に用いられ得る。
【０２４１】
皮膚に構造ＡまたはＢの化合物を送達するために使用され得る有用な皮膚科学的な組成物の例は、当該技術分野に公知である；例えば、米国特許第４，６０８，３９２号、第４，９９２，４７８号、第４，５５９，１５７号、および第４，８２０，５０８号を参照。
【０２４２】
化合物の有用な用量は、動物モデルにおけるそれらのインビトロの活性、およびインビボの活性を比較することにより決定され得る。マウス、および他の動物における有効量の、ヒトへの推定のための方法は、当該技術分野に公知である；例えば、米国特許第４，９３８，９４９号を参照。
【０２４３】
一般に、ローション剤などの液状組成物における一般構造Ｂの化合物の濃度は、約０．５質量％から１０．０質量％の間などのように、約０．１質量％から約２５．０質量％の間であり得る。ゲルまたは粉末剤などの半固形または固形の組成物における濃度は、約０．５質量％〜２．５質量％の間などのように、約０．１質量％から約５．０質量％の間であり得る。
【０２４４】
処置における使用に必要とされる、化合物、またはその活性塩または誘導体の量は、選択される特定の塩によって変化するが、投与の経路、処置されている疾病の性質、および患者の年齢および状態によっても変化し、最終的に、係る医師または臨床医の判断に委ねられる。しかしながら、一般に、適切な用量は、１日当たり約０．２から約１００．０μｍｏｌ／ｋｇの間の範囲内であり得る。１つの実施形態において、用量は、例えば、１日当たり約０．２から約１．０μｍｏｌ／ｋｇの間であり得る。幾つかの実施形態において、適切な用量は、約０．５から約１００ｍｇ／ｋｇの間の範囲、例えば、１日当たり、レシピエントのキログラム体重当たり約３から約５０ｍｇの間などのように、１日当たり体重の約１０から約７５ｍｇ／ｋｇの間、例えば、約１５から約６０ｍｇ／ｋｇ／日の間などのように、約６から約９０ｍｇ／ｋｇ／日の間の範囲であり得る。
【０２４５】
本明細書に開示される方法における使用に適している医薬組成物は、有効成分が、その意図した目的を達成するのに有効な量において含まれている場合の組成物を含む。より具体的には、治療上有効な量は、疾患の症状を防ぐ、緩和する、または改善する、または処置されている被験体の生存を延長するのに有効な化合物の量を意味する。治療上有効な量の測定は、特に本明細書に提供される詳細な開示の観点から、十分、当業者の能力内である。
【０２４６】
本明細書に開示される医薬組成物のための正確な製剤、投与の経路および用量は、患者の疾病を考慮して、個々の医師によって選択され得る。典型的に、患者に投与される組成物の用量の範囲は、患者の体重の約０．５から約１０００ｍｇ／ｋｇの間、または約１から約５００ｍｇ／ｋｇの間、または約１０から約５００ｍｇ／ｋｇの間、または患者の体重の約５０から約１００ｍｇ／ｋｇの間であり得る。用量は、患者に必要とされるように、１日以上の間に与えられた単一のまたは一連の２以上の量であり得る。ヒトの用量が確立されない場合、適切なヒトの用量は、動物における毒性試験および有効性研究によって認められるように、ＥＤ５０またはＩＤ５０の値、またはインビトロまたはインビボの研究から導き出された他の適切な値から推測され得る。
【０２４７】
ほとんどの場合、正確な用量は、薬物ごとをベースにして測定されるが、用量に関して、いくつかの一般化が作られ得る。成人のヒトの患者に対する毎日の用量の計画は、例えば、約１ｍｇから約２５０ｍｇの間、例えば、約５と約２００ｍｇの間などのような、各成分の約０．１ｍｇから約５００ｍｇの間の経口の用量、または約０．１ｍｇから約６０ｍｇの間、例えば、本明細書に開示される医薬組成物、または遊離塩基として計算されたそれらの薬学的に許容可能な塩の各成分の約１から約４０ｍｇの間などのような、約０．０１ｍｇから約１００ｍｇの間の各成分の静脈内、皮下、または筋肉内の用量であり得、組成物は、１日当たり１〜４回投与され得る。あるいは、本明細書に開示される組成物は、１日当たり４００ｍｇまでの各成分の用量で、持続点滴静注によって投与され得る。したがって、各成分の経口投与による毎日の用量の合計は、典型的に、約１から約２０００ｍｇの間の範囲内になり、非経口投与による毎日の用量の合計は、典型的に、約０．１から約４００ｍｇの間の範囲内になる。幾つかの実施形態において、化合物は、継続的な治療の期間、例えば１週間以上、または数ヶ月または数年間、投与される。
【０２４８】
用量および間隔は、調節する効果、または最小有効濃度（ＭＥＣ）を維持するのに十分な、活性部分の血漿レベルを提供するために個々に調節され得る。ＭＥＣは、各化合物に関して変化するが、インビトロのデータから評価され得る。ＭＥＣを達成するのに必要な用量は、個々の特性および投与の経路に依存する。しかしながら、ＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイは、血漿濃度を測定するために使用され得る。
【０２４９】
投与の間隔はまた、ＭＥＣ値を使用して決定され得る。組成物は、ＭＥＣの上の血漿レベルを、３０〜９０％の間、例えば、５０〜９０％の間などのように、１０〜９０％の時間の間、維持するレジメンを使用して、投与されるべきである。局所投与または選択的取り込みの場合において、薬物の有効な局所濃度は、血漿濃度と関連がなくてもよい。
【０２５０】
投与される組成物の量は、もちろん、処置される被験体、被験体の体重、病気の重症度、投与の方法および処方医師の判断に依存する。
【０２５１】
様々な実施形態において、組成物は、必要に応じて、有効成分を含んでいる１以上のユニット剤形を含み得る、パックまたはディスペンサー装置において投与され（ｅｄ）得る。パックは、例えば、ブリスターパックなどの金属又はプラスチックホイルを含み得る。パックまたはディスペンサー装置は、投与に関する説明を伴い得る。パックまたはディスペンサー装置はまた、医薬品の製造、使用、又は販売を規定する政府機関により指示された形状の容器に関連する通知書が添えられてもよく、この通知書は、ヒトまたは動物の投与のための薬物の形状について、政府機関の承認を反映したものである。このような通知書は、例えば、処方薬に関して米国食品医薬品局によって承認されたラベル、又は承認された製品挿入物であり得る。適合可能な薬学的な担体において処方された、本明細書に開示される化合物を含む組成物はまた、調製され、適切な容器に入れられ、示された疾病の処置のために標識化され得る。
【０２５２】
様々な実施形態において、開示の化合物は、当該技術分野に公知の方法を使用して、標識化され得る。１つの検知可能な基は、蛍光基である。蛍光基は典型的に、高い信号対雑音比をもたらし、それによって、検知手順において増加した分解および感受性を提供する。例えば、蛍光基は、約３５０ｎｍ以上、例えば、約４００ｎｍ以上などのように、約３００ｎｍ以上の波長で光を吸収する。蛍光基によって放射された光の波長は、約３６０ｎｍ以上、例えば、約４１０ｎｍ以上などのように、約３１０ｎｍ以上である。
【０２５３】
蛍光の検知可能な部分は、以下の制限しない例を含む、様々な構造的分類から選択され得る：１−および２−アミノ−ナフタレン、ｐ，ｐ’ジアミノスチルベン、ピレン、４級フェナントリジン塩、９−アミノアクリジン、ｐ，ｐ’−ジアミノベンゾフェノンイミン、アントラセン、オキサカルボシアニン、メロシアニン、３−アミノエキレニン、ペリレン、ビスベンゾオキサゾール、ビス−ｐ−オキサゾリルベンゼン、１，２−ベンゾフェナジン、レチノール、ビス−３−アミノプリジニウム塩、ヘレブリゲニン、テトラサイクリン、ステロフェノール、ベンジミダゾリル  フェニルアミン、２−オキソ−３−クロメン、インドール、キサンテン、７−ヒドロキシクマリン、フェノキサジン、サリチル酸塩、ストロファンチジン、ポルフィリン、トリアリールメタン、フラビン、キサンテン色素（例えば、フルオレセインおよびローダミン色素）；シアニン色素；４，４−ジフルオロ−４−ボラ−３ａ、４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン色素および蛍光タンパク質（例えば、緑色蛍光タンパク質、フィコビリンタンパク質）。
【０２５４】
様々な実施形態において、化合物は標識化されることができ、ここで、標識化する基は、自然に信号を発する、または適切な刺激の導入時に信号を発生させる。標識は、例えば、ｌ３Ｃ、１５Ｎ、１９Ｆ、１Ｈなどの原子を含む。様々な実施形態において、化合物は、ユニット剤形で都合よく投与され得る；例えば、約１０から約７５０ｍｇの間、例えば、ユニット剤形につき約５０から約５００ｍｇの間などのように、約５から約１，０００ｍｇの間の有効成分を含んでいる。
【０２５５】
幾つかの実施形態において、有効成分は、約１から約５０μＭの間、例えば、約２から約３０μＭの間などのように、約０．５から約７５μＭの間の活性化合物の最大血漿濃度を達成するために投与され得る。これは、例えば、随意に食塩水において、有効成分の０．０５〜５％の溶液の静脈注射によって達成され得るか、または、約１〜１００ｍｇの有効成分を含むボーラスとして経口投与され得る。望ましい血中濃度は、例えば、約０．０１〜５．０ｍｇ／ｋｇ／時間を提供する持続注入、または約０．４〜１５ｍｇ／ｋｇの有効成分を含む間欠注入によって維持され得る。
【０２５６】
所望の用量は、単一用量で、または適切な間隔で投与される分割量として、例えば、１日につき２、３、４回、またはそれ以上の半用量として、都合良く投与され得る。半用量自体は、例えば、注入器からの多数の吸入などのような、多くの別々の大まかに間隔を置かれた投与へと、更に分割され得る。
【０２５７】
（実施例）
本開示のいくつかの態様は、以下の制限しない実施例によって更に例証され得る。
【０２５８】
＜実施例１＞
＜分子モデリング＞
分子モデリング研究を、Ｌｉｎｕｘワークステーションおよび６４ ３．２ＧＨｚのＣＰＵｓ Ｌｉｎｕｘクラスタにて行った。ドッキング研究を、Ｂａｋ由来のペプチド（タンパク質構造データバンクコード１ＢＸＬ）との複合体における、ＢＣＬ−ＸＬの結晶構造を使用して行なった。ペプチド結合ポケットにおける５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のドッキングされた構造を、ＧＯＬＤドッキングプログラムにおけるスコアリング機能として、ＣｈｅｍＳｃｏｒｅによって得た。タンパク質表面を、Ｓｙｂｙｌ（Ｔｒｉｐｏｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）において実行されるような、プログラムＭＯＬＣＡＤで調製した。ドッキング研究をまた、ベンゾチアゾールＢＨ３模倣リガンド（タンパク質構造データバンクコード１ＹＳＷ）との複合体における、ＢＣＬ−２の結晶構造を使用して行った。リガンドをタンパク質構造から抽出し、小分子に関する結合部位を決定するために使用した。アポゴシポールとその誘導体を、スコアリング機能としてＣｈｅｍＳｃｏｒｅを使用するＧＯＬＤドッキングプログラムによって、ＢＣＬ−２タンパク質へとドッキングさせた。活性部位半径を１０Åに設定し、１０ＧＡの溶液を各々の分子のために生成した。ＧＯＬＤにおけるＧＡドッキング手順は、小分子が最良の結合立体配座を柔軟に探索することを可能にした一方で、タンパク質構造は不変であった。タンパク質表面を、Ｓｙｂｙｌ（Ｔｒｉｐｏｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）において実行されるような、プログラムＭＯＬＣＡＤ５で調製し、研究された小分子に関する結合ポーズ（binding poses）を分析するために使用した。
【０２５９】
＜実施例２＞
＜一般的な化学的手順＞
特に断りのない限り、全ての試薬および無水の溶媒（ＣＨ２Ｃｌ２、ＴＨＦ、ジエチルエーテルなど）を商業的供給源から得て、精製することなく使用した。全ての反応を、炉乾燥したガラス器（oven-dried glassware）で行った。空気または湿気に敏感な試薬に関する全ての反応を、窒素雰囲気下にて行なった。シリカゲルまたは逆相クロマトグラフィーを、各々、予め包装されたシリカゲルまたはＣ−１８カートリッジ（ＲｅｄｉＳｅｐ）を使用して行った。全ての最終化合物を、アトランティスＴ３ ３μＭ ４．６ｍｍ×１５０ｍｍの逆相カラムを使用する、Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏ.からのＨＰＬＣ Ｂｒｅｅｚｅによって決定されるように、＞９５％の純度に精製した。インビボの研究のための化合物を再び、予備のＨＰＬＣを使用して、＞９９％の純度にまで再び精製した。溶離剤は、１５分の間、５０％のＡおよび５０％のＢから５％のＡおよび９５％のＢまで、１ｍｌ／分の流量で直線勾配であり、その後、１００％のＢで５分間であった（溶媒Ａ：０．１％のＴＦＡを有するＨ２Ｏ；溶媒Ｂ：０．１％のＴＦＡを有するＡＣＮ）。化合物を、λ＝２５４ｎｍにて検知した。ＮＭＲスペクトルを、Ｖａｒｉａｎ３００またはＢｒｕｋｅｒ６００ＭＨｚの器具にて記録した。化学シフトを、１Ｈ（０．００ｐｐｍでのＭｅ４Ｓｉ）に関して、ｐｐｍ（δ）で報告する。結合定数（Ｊ）を、その間中Ｈｚで報告する。多量のスペクトルデータを、低分解能用のＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ−２０１０ＥＶ、および高分解能または低分解能用のＡｇｉｌｅｎｔ ＥＳＩ−ＴＯＦにて得た。
【０２６０】
＜実施例３＞
＜本開示の化合物の合成＞
５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体を以下のように概説する：
【０２６１】
【化２３】
2012524101.tif 000032
【０２６２】
簡潔に及び全般的に言うと、ゴシポール１を、硫酸ジメチルの後にＮａＯＨ溶液で処理し、メチルアポゴシポールを得た。メチルアポゴシポールのＴｉＣｌ４及びジクロロメチルメチルエーテルとの反応は、イソプロピル基の損失および同時のビスホルミル化をもたらし、アルデヒド２を得た。化合物２を、異なるＧｒｉｇｎａｒｄまたはリチウム試薬で処置し、第二アルコールを得て、それを、クロロクロム酸ピリジニウムを使用して酸化してフェノンにした。フェノンのその後の脱メチル化によって、化合物３を得た。
【０２６３】
より具体的には、５０ｍｌの４０％のＮａＯＨ中のゴシポール酢酸１（５ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）を、暗所で３．５時間、９０℃で窒素下にて加熱した。反応混合物を冷やし、氷（３００ｍｌ）と濃縮したＨ２ＳＯ４（３５ｍｌ）混合物の上にゆっくりと注ぎ、白色の沈殿物を形成した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、白色固体としてアポゴシポール（３．８ｇ、９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ δ ７．６１（ｓ、２Ｈ）、７．５０（ｓ、２Ｈ）、５．９３（ｓ、２Ｈ）、５．２７（ｓ、２Ｈ）、５．１３（ｓ、２Ｈ）、３．８８（ｍ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、６Ｈ）、１．５５（ｄ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０２６４】
アポゴシポール（３．８ｇ、８．２１ｍｍｏｌ）をその後、２００ｍｌのアセトンに溶かした。Ｋ２ＣＯ３（２３．９ｇ、２０６．７ｍｍｏｌ）および硫酸ジメチル（１６．３ｍｌ、２０６．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間、窒素下にて還流した。溶液から分離した固体を濾過によって集めた。固体を（アセトンと水で）洗浄し、乾燥し、４．２ｇのメチル化されたアポゴシポール（９３％）を得た。０℃での乾燥した塩化メチル（４０ｍｌ）中の、メチル化されたアポゴシポールの溶液（１．６ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）に、四塩化チタン（１４．３ｇ、７５．５ｍｍｏｌ）を加えた。添加が完了した後、暗赤色の溶液を０℃で更に１５分撹拌した。ジクロロメチルメチルエーテル（２．９３ｇ、２５．５ｍｍｏｌ）を１５分以上滴下で（dropwise）加え、反応混合物を１４時間窒素下で、外気温度で撹拌した。
【０２６５】
反応混合物を氷の上に注ぎ、結果として生じる水層を、塩化メチルで２度抽出した。結合した有機画分を、水とブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥し、濃縮し、暗赤色のオイルを得た。オイルを、ジエチルエーテルで粗製生成物を倍散した後、クロマトグラフィーで分離して（アセトニトリル／メチル塩化物）、黄色の固体として中間物２（０．６０ｇ、４０％）を得た。
【０２６６】
中間物２に関して： １Ｈ ＮＭＲ：８．４７（ｓ、１Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、７．０５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、２．７９（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）、２．４４（ｓ、３Ｈ）、１．７０（ｍ、２Ｈ）、１．０３（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２６７】
＜実施例４＞
＜本開示の化合物Ｉの合成＞
【０２６８】
【化２４】
2012524101.tif 000033
【０２６９】
本明細書に示される式を有し、また1,1’-（1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル）ビス（2-フェニルエタノン）として知られている本開示の化合物Ｉを、以下のように合成した。室温で、新たな塩化ベンジルマグネシウム（５．４ｍｍｏｌ）溶液に、無水のテトラヒドロフラン（１５ｍｌ）中のアルデヒド２の溶液（１．０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１２時間この温度で撹拌した。反応混合物を、飽和した塩化アンモニウム溶液上に注ぎ、水層をジエチルエーテルにより２度抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥した。エーテルの蒸発の後の濾過によって、黄色のオイルを得た。乾燥した塩化メチル（１０ｍｌ）中の黄色のオイルの溶液を、乾燥した塩化メチル（１２ｍｌ）中のクロロクロム酸ピリジニウム（２．６ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物を４時間、外気温度にて撹拌し、セライトを通して濾過した。
【０２７０】
濾液をクロマトグラフィーで分離し、０．３ｇのメチル化された化合物Ｉ（２２％）を得た。０．２７ｍＬのＢＢｒ３溶液（０．７２ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を、−７８℃で８ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中のメチル化された化合物Ｉの溶液（１２０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）へ滴下で加えた。撹拌を、１時間−７８℃で、１時間０℃で、１時間外気温度で続けた。１０ｍＬの６Ｍの塩酸を含む５０グラムの氷を混合物に加え、室温で１時間撹拌した。水層をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機質層を、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥した。溶剤を真空内で濃縮し、残留物をＣ−１８カラムクロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／アセトニトリル）で精製し、オレンジ色の固体として８０ｍｇの化合物ｃＩ（７７％）を得た。
【０２７１】
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６１（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｍ、８Ｈ）、７．２２（ｍ、２Ｈ）、６．９７（ｓ、２Ｈ）、４．４０（ｄｄ、Ｊ１＝１５．６Ｈｚ、Ｊ２＝２２．８Ｈｚ、４Ｈ）、１．８７（ｓ、６Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ３）２ＳＯ）δ２０４．６、１４９．４、１４４．８、１４４．５、１３５．４、１３４．２、１３０．５、１２８．６、１２６．９、１２６．３、１２２．６、１１９．４、１１６．８、１１５．０、１０７．１、５１．０、２１．１；ＨＲＭＳ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ ［Ｃ３８Ｈ３０Ｏ８＋Ｈ］６１５．２０１９；ｆｏｕｎｄ ６１５．２０１３。ＨＰＬＣは９９％純度である。
【０２７２】
一般的な構造Ａによって包含された他の誘導体を合成し、特徴づけた。合成は、アルデヒド中間体化合物２を扱う際に異なるＧｒｉｇｎａｒｄまたはリチウム試薬を使用するように、必要な調整を伴って、実施例３および４に記載のパターンに従った。化合物のスペクトル特性は、以下のとおりであった（ローマ数字は、本開示の本明細書に記載された化合物に対応する）。
【０２７３】
化合物ＩＩＩ。（1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-メチルプロパン-1-オン)）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １２．３８（ｓ、２Ｈ）、７．９９（ｓ、２Ｈ）、７．８２（ｓ、２Ｈ）、７．４４（ｓ、２Ｈ）、６．１８（ｓ、２Ｈ）、５．４１（ｓ、２Ｈ）、３．８６（ｍ、２Ｈ）、２．１３（ｓ、６Ｈ）、１．３３（ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０２７４】
化合物ＸＶＩＩＩ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2,2-ジメチルプロパン-1-オン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５６（ｓ、２Ｈ）、６．７８（ｓ、２Ｈ）、１．９５（ｓ、６Ｈ）、１．３４（ｍ、１８Ｈ）。
【０２７５】
化合物ＩＶ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(3-メチルブタン-1-オン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．１２（ｓ、２Ｈ）、２．９７（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、１．９６（ｓ、６Ｈ）、１．０３（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０２７６】
化合物ＸＸ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ジペンタン-1-オン。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．０７（ｓ、２Ｈ）、３．０７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、１．９７（ｓ、６Ｈ）、１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．４５（ｍ、４Ｈ）、０．９７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【０２７７】
化合物ＸＩＸ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-メチルブタン-1-オン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ  ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．０５（ｓ、２Ｈ）、３．４３（ｍ、２Ｈ）、１．９６（ｓ、６Ｈ）、１．５０（ｍ、４Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）、０．９９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、６Ｈ）。
【０２７８】
化合物ＶＩＩ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(フェニルメタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．８９（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、７．６７（ｓ、２Ｈ）、７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．４９（ｓ、４Ｈ）、６．８２（ｓ、２Ｈ）、１．９３（ｓ、６Ｈ）。
【０２７９】
化合物ＸＶＩＩ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(ベンゾ[d]チアゾール-2-イルメタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ８．１４（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２Ｈ）、８．０７（ｓ、２Ｈ）、７．７５（ｓ、２Ｈ）、７．５９（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝２．４Ｈｚ、４Ｈ）、７．０３（ｓ、２Ｈ）、１．９３（ｓ、６Ｈ）。
【０２８０】
化合物ＶＩ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(シクロペンチルメタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．０５（ｓ、２Ｈ）、３．８４（ｍ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．０３（ｍ、４Ｈ）、１．９９（ｓ、６Ｈ）、１．９３（ｍ、４Ｈ）、１．７７（ｍ、４Ｈ）、１．６７（ｍ、４Ｈ）。
【０２８１】
化合物ＶＩＩＩ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(ナフタレン-1-イルメタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ  ８．９７（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、８．０７（ｍ、２Ｈ）、７．９８（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．６８（ｍ、８Ｈ）、７．４３（ｍ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）、１．７９（ｓ、６Ｈ）。
【０２８２】
化合物Ｖ。1,1’-（1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル）ビス（3-メチルヘプタン-1-オン）。１Ｈ ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＳＯ）δ １０．０８（ｓ、２Ｈ）、９．２６（ｓ、２Ｈ）、８．０８（ｓ、２Ｈ）、７．５３（ｓ、２Ｈ）、６．９１（ｓ、２Ｈ）、２．８７（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、４Ｈ）、１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．８５（ｓ、６Ｈ）、１．３０（ｍ、１６Ｈ）、０．８７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．５Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０２８３】
化合物ＩＸ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(ビフェニル-4-イルメタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．９７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、４Ｈ）、７．７０（ｍ、１０Ｈ）、７．４６（ｍ、６Ｈ）、６．８６（ｓ、２Ｈ）、１．８８（ｓ、６Ｈ）。
【０２８４】
化合物Ｘ。（1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル）ビス(（４-tert-ブチルフェニル）メタノン）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．８２（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、７．６５（ｓ、２Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、６．８０（ｓ、２Ｈ）、１．８６（ｓ、６Ｈ）、１．３４（ｓ、１８Ｈ）。
【０２８５】
化合物ＸＩ。(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス((4-(トリフルオロメチル)フェニル)メタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ８．０４（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．６９（ｓ、２Ｈ）、６．８７（ｓ、２Ｈ）、１．８８（ｓ、６Ｈ）。
【０２８６】
化合物ＩＩ。(3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４６（ｓ、２Ｈ）、７．１１（ｓ、２Ｈ）、７．０３（ｓ、２Ｈ）、１．９７（ｓ、６Ｈ）。
【０２８７】
化合物ＸＶＩ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(3-(4-フルオロフェニル)プロパン-1-オン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、６．９７（ｍ、４Ｈ）、６．８８（ｓ、２Ｈ）、３．４０（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．１０（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、１．９０（ｓ、６Ｈ）。
【０２８８】
化合物ＸＩＩ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-p-トリルエタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５９（ｓ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、４Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、４Ｈ）、６．９３（ｓ、２Ｈ）、４．３０（ｄｄ、Ｊ１＝１５．６Ｈｚ、Ｊ２＝９．９Ｈｚ、４Ｈ）、２．２７（ｓ、６Ｈ）、１．８５（ｓ、６Ｈ）。
【０２８９】
化合物ＸＶ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-シクロヘキシルエタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６１（ｓ、２Ｈ）、７．１０（ｓ、２Ｈ）、２．９５（ｄｄ、Ｊ１＝３．３Ｈｚ、Ｊ２＝３．０Ｈｚ、４Ｈ）、２．０２（ｍ、２Ｈ）、１．９５（ｓ、６Ｈ）、１．７６（ｍ、１０Ｈ）、１．１１（ｍ、１０Ｈ）。
【０２９０】
化合物ＸＩＩＩ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-(3-ブロモフェニル) エタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６３（ｓ、２Ｈ）、７．５１（ｓ、２Ｈ）、７．２９（ｍ、６Ｈ）、７．００（ｓ、２Ｈ）、４．３６（ｄｄ、Ｊ１＝８．１Ｈｚ、Ｊ２＝９．０Ｈｚ、４Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）。
【０２９１】
化合物ＸＩＶ。1,1’-(1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジイル)ビス(2-(4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)エタノン)。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６３（ｓ、２Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、４Ｈ）、６．９９（ｓ、２Ｈ）、４．４０（ｄｄ、Ｊ１＝８．１Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、１．８８（ｓ、６Ｈ）。
【０２９２】
本開示のいくつかの化合物は、図１２に示されるように合成される（ＲはＣＯＮＸまたはＣＯＮＲ１Ｘである場合、ＲまたはＲ１はアルキル、芳香族基、又は複素環基であり、Ｘはアルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アルキルアリール、および複素環である）。
【０２９３】
更なるスペクトルのデータおよび本開示の化合物に関する純度のデータを、表７にまとめる。
【０２９４】
【表７】
2012524101.tif 000034
【０２９５】
＜実施例５＞
＜5,5’-ジイソプロピル-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサノール（２）の合成＞
５０ｍｌの４０％のＮａＯＨの中のゴシポール酢酸（１）（５ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）を、暗所で３．５時間、９０℃で窒素下にて加熱した。反応混合物を冷却し、氷（３００ｍｌ）と濃縮したＨ２ＳＯ４（３５ｍｌ）の混合物の上にゆっくり注ぎ、白色の沈殿物を形成した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、白色固体として化合物２（アポゴシポール）を得た（３．８ｇ、９５％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．６１（ｓ、２Ｈ）、７．５０（ｓ、２Ｈ）、５．９３（ｓ、２Ｈ）、５．２７（ｓ、２Ｈ）、５．１３（ｓ、２Ｈ）、３．８８（ｍ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、６Ｈ）、１．５５（ｄ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０２９６】
＜実施例６＞
＜5,5’-ジイソプロピル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル（４）の合成＞
化合物２（アポゴシポール）（３．８ｇ、８．２１ｍｍｏｌ）を、２００ｍｌのアセトンに溶かした。Ｋ２ＣＯ３（２３．９ｇ、２０６．７ｍｍｏｌ）および硫酸ジメチル（１６．３ｍｌ、２０６．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間、窒素下にて還流した。固体を濾過によって集め、アセトンおよび水を使用して洗浄し、乾燥し、白色固体として４．２ｇの化合物４を得た（９３％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）７．８３（ｓ、２Ｈ）、７．４３（ｓ、２Ｈ）、３．９８（ｍ、８Ｈ）、３．９４（ｓ、６Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、２．２０（ｓ、６Ｈ）、１．５６（ｓ、１２Ｈ）。
【０２９７】
＜実施例７＞
＜1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボアルデヒド（５）の合成＞
０℃で、乾燥した塩化メチレン（４０ｍｌ）中の化合物４の溶液（１．６ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）に、四塩化チタン（１４．３ｇ、７５．５ｍｍｏｌ）を加えた。添加が完了した後、暗赤色の溶液を０℃で更に１５分撹拌した。ジクロロメチルメチルエーテル（２．９３ｇ、２５．５ｍｍｏｌ）を１５分にわたって滴下で加え、反応混合物を１２時間、窒素下にて、外気温度で撹拌した。反応混合物を氷の上に注ぎ、結果として生じる水層を、塩化メチレンで２度抽出した。組み合わせた有機画分を、水とブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥し、濃縮し、暗赤色のオイルを得た。オイルを、ジエチルエーテルによる粗製生成物の倍散の後、クロマトグラフィーで分離して（アセトニトリル／塩化メチレン）、黄色の固体として化合物５を得た（０．６０ｇ、４０％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１０．８４（ｓ、２Ｈ）、８．９３（ｓ、２Ｈ）、７．８２（ｓ、２Ｈ）、４．１０（ｓ、６Ｈ）、４．０３（ｓ、６Ｈ）、３．４８（ｓ、６Ｈ）、２．２２（ｓ、６Ｈ）。
【０２９８】
＜実施例８＞
＜1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボン酸（６）の合成＞
化合物５（６．６g、１２．７ｍｍｏｌ）を、氷槽中で４０ｍｌのアセトニトリルと４０ｍｌのＴＨＦに溶かした。リン酸二水素ナトリウム（８７６ｍｇ、６．３５ｍｍｏｌ）、３０％の過酸化水素（２．６ｍＬ、２５．４ｍｍｏｌ）を加えた。２０ｍｌの水に溶かされた亜塩素酸ナトリウム（４．１４ｇ、４５．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、その後、３０ｍｌの６ＭのＨＣｌと共に１００ｇの氷の上に注いだ。溶液をエーテルで抽出した（３×１００ｍＬ）。エーテル抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムを介して乾燥し、濾過した。真空内で溶剤を蒸発させ、その残留物を、Ｃ−１８カラムクロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／アセトニトリル）によって精製し、赤色固体として５．９ｇの化合物６を得た（８５％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ８．０（ｓ、２Ｈ）、７．６８（ｓ、２Ｈ）、４．１（ｓ、６Ｈ）、４．０６（ｓ、６Ｈ）、３．５４（ｓ、６Ｈ）、２．２１（ｓ、６Ｈ）。
【０２９９】
＜実施例９＞
＜1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-N５, N５’-ビス（２−フェニルプロピル）−２，２’−ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｒ）の合成＞
化合物６（５００ｍｇ、０．９０７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（５２２ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（２４４ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を、１５ｍｌの乾燥したＣＨ２Ｃｌ２に溶かし、窒素雰囲気下で１０分間、室温で撹拌した。２−フェニル−１−プロパンアミン（０．３０ｍｌ、２．０９ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（０．５１ｍｌ、３．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間、室温で撹拌した。混合物をその後５０ｍｌの水の上に注ぎ、溶液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（３×１００ｍＬ）。エーテル抽出物を水とブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムを介して乾燥し、濾過した。真空内で溶剤を蒸発して、その残留物を、シリカクロマトグラフィーによって精製し、黄色固体として３２０ｍｇの化合物７ｒを得た（４５％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５６（ｓ、２Ｈ）、７．３７（ｍ、８Ｈ）、７．２２（ｍ、４Ｈ）、３．９８（ｓ、６Ｈ）、３．８５（ｓ、６Ｈ）、３．７７（ｍ、２Ｈ）、３．６２（ｍ、２Ｈ）、３．５５（ｓ、３Ｈ）、３．５３（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．０１（ｓ、３Ｈ）、２．００（ｓ、３Ｈ）、１．３８（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｓ、３Ｈ）。
【０３００】
＜実施例１０＞
＜1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（2-フェニルプロピル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（8r）の合成＞
０．４５ｍＬのＢＢｒ３溶液（１．１８ｇ、４．７３ｍｍｏｌ）を−７８℃で、２０ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中の化合物７の溶液（３１０ｍｇ、 ０．４０ｍｍｏｌ）へ滴下で加えた。撹拌を、１時間−７８℃で、２時間０℃で、１０時間外気温度で続けた。１０ｍＬの６ＭのＨＣｌを含む５０グラムの氷を混合物に加え、室温で１時間撹拌した。水層をジクロロメタンで抽出した（３×５０ｍｌ）。組み合わせた有機質層を、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥した。溶剤を真空で濃縮し、残留物をＣ-１８カラムクロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／アセトニトリル）を使用して精製し、白黄色の固体として２００ｍｇの化合物８ｒを得た（７２％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５６（ｓ、２Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、４Ｈ）、７．３２（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２０（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、６．９８（ｓ、１Ｈ）、３．７５−３．５９（ｍ、４Ｈ）、３．１９（ｍ、２Ｈ）、１．８８（ｄ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、３Ｈ）、１．８８（ｄ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、３Ｈ）、１．４１（ｍ、６Ｈ）。
【０３０１】
本明細書にて言及された手順および使用される適切な出発物質および試薬に伴い；化合物（７ａ−７ｔ、８ａ−８ｔおよび１４）を合成した。
【０３０２】
＜実施例１１＞
＜1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-5,5’-ジフェネチル-2,2’-ビナフチル（１１ｅ）の合成＞
室温で、新たな塩化ベンジルマグネシウム（５．４ｍｍｏｌ）溶液に、無水のテトラヒドロフラン（１５ｍｌ）中の５の溶液（１．０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１２時間この温度で撹拌した。反応混合物を、飽和した塩化アンモニウム溶液上に注ぎ、水層をジエチルエーテルにより２度抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥した。エーテルの蒸発の後の濾過により、黄色のオイルを得た。乾燥した塩化メチレン（１０ｍｌ）中の黄色のオイルの溶液を、乾燥した塩化メチレン（１２ｍｌ）中のクロロクロム酸ピリジニウム（２．６ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物を４時間、外気温度にて撹拌し、セライトを通して濾過した。濾液をクロマトグラフィーで分離し、０．３ｇの１０ｅを得た（２２％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５４（ｓ、２Ｈ）、７．３２（ｍ、１０Ｈ）、７．１４（ｓ、２Ｈ）、４．２９（ｓ、４Ｈ）、４．０２（ｓ、６Ｈ）、３．９６（ｓ、６Ｈ）、３．４９（ｓ、６Ｈ）、２．０２（ｓ、６Ｈ）。１０ｍｌのＴＦＡ中の化合物１０ｅの溶液（１７０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）に、０．６ｍｌのトリエチルシランを滴下で加えた。溶液を室温で一晩撹拌し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後に真空下で濃縮し、無色のオイルとして化合物１１ｅを得た（１４０ｍｇ、９０％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．６７（ｓ、２Ｈ）、７．４４（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｓ、８Ｈ）、７．２５（ｓ、２Ｈ）、４．０４（ｓ、６Ｈ）、３．９５（ｓ、６Ｈ）、３．６０（ｓ、６Ｈ）、３．４１（ｍ、４Ｈ）、３．０２（ｍ、４Ｈ）、２．１８（ｓ、６Ｈ）。
【０３０３】
＜実施例１２＞
＜3,3’−ジメチル−5,5’-ジフェネチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサノール（１２ｅ）の合成＞
０．２７ｍＬのＢＢｒ３溶液（０．７２ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を−７８℃で、８ｍＬの無水ＣＨＣｌ２中の１１ｅの溶液（２００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）へ滴下で加えた。撹拌を、１時間−７８℃で、１時間０℃で、１時間外気温度で各々続けた。１０ｍＬの６ＭのＨＣｌを含む１００グラムの氷を混合物に加え、室温で１時間撹拌した。水層をジクロロメタンで抽出した（３×５０ｍｌ）。組み合わせた有機質層を、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４を介して乾燥した。溶剤を真空下で濃縮し、残留物をＣ-１８カラムクロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ／アセトニトリル）で精製し、オレンジ色の固体として１２８ｍｇの化合物１２ｅ（７５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４４（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｍ、１０Ｈ）、５．３５（ｓ、ＯＨ、４Ｈ）、５．１７（ｓ、ＯＨ、２Ｈ）、３．３７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．０３（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）および２．１３（ｓ、６Ｈ）。
【０３０４】
＜実施例１３＞
＜化合物１１ａ−１１ｅおよび１２ａ−１２ｅの合成＞
本明細書に言及された手順および使用された適切な出発物質および試薬に伴い;化合物（１１ａ−１１ｅおよび１２ａ−１２ｅ）を合成した。
【０３０５】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ジフェニル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ａ）。収量（Yield）：４５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．５９（ｓ、２Ｈ）、７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４０（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．１８（ｓ、２Ｈ）、４．０４（ｓ、６Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．６３（ｓ、６Ｈ）、２．１１（ｓ、６Ｈ）。
【０３０６】
N５, N５’-ジシクロペンチル−1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｂ）。収量：４０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｓ、２Ｈ）、４．４７（ｍ、２Ｈ）、３．９８（ｓ、６Ｈ）、３．９６（ｓ、６Ｈ）、３．６０（ｓ、６Ｈ）、２．１１（ｍ、１０Ｈ）、１．７９（ｓ、４Ｈ）、１．６８（ｓ、８Ｈ）。
【０３０７】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（４−フェノキシフェニル）−2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｃ）。収量：４６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７６（ｍ、６Ｈ）、７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．５３（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．１１（ｍ、２Ｈ）、７．０３（ｍ、８Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．６３（ｓ、６Ｈ）、２．１２（ｓ、６Ｈ）。
【０３０８】
N５, N５’-ビス（３−エチルフェニル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｄ）。収量：４７％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６２（ｓ、２Ｈ）、７．５８（ｍ、４Ｈ）、７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｍ、２Ｈ）、７．０５（ｍ、２Ｈ）、４．０４（ｓ、６Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．６３（ｓ、６Ｈ）、２．５４（ｑ、Ｊ１＝Ｊ２＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、２．１１（ｓ、６Ｈ）および１．２８（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝８．４Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３０９】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-（トリフルオロメチル）フェニル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｅ）。収量：５０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．８８（ｓ、２Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．６０（ｍ、４Ｈ）、７．５４（ｓ、２Ｈ）、７．３６（ｓ、２Ｈ）、４．７７（ｓ、４Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．９４（ｓ、６Ｈ）、３．５８（ｓ、６Ｈ）、２．０５（ｓ、６Ｈ）。
【０３１０】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（1-フェニルプロピル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｆ）。収量：４６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５０（ｍ、６Ｈ）、７．３８（ｍ、４Ｈ）、７．２６（ｍ、４Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、４．０１（ｓ、６Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．８９（ｓ、６Ｈ）、３．５８（ｓ、３Ｈ）、３．５５（ｓ、３Ｈ）、１．９５（ｍ、１０Ｈ）、１．１０（ｓ、６Ｈ）。
【０３１１】
N５, N５’-ジベンジル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｇ）。収量：４６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ  ７．５３（ｍ、６Ｈ）、７．３８（ｍ、６Ｈ）、７．３０（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｓ、４Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．９１（ｓ、６Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、２．０２（ｓ、６Ｈ）。
【０３１２】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-メチルベンジル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｈ）。収量：４３％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２６（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．６４（ｓ、４Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．９２（ｓ、６Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、２．３７（ｓ、６Ｈ）、２．０２（ｓ、６Ｈ）。
【０３１３】
N５, N５’-ビス（3-クロロベンジル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｉ）。収量：４６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．６１（ｓ、２Ｈ）、７．５３（ｓ、２Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．３６（ｍ、４Ｈ）、７．３１（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．６８（ｓ、４Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．９８（ｓ、６Ｈ）、３．５８（ｓ、６Ｈ）、２．０７（ｓ、６Ｈ）。
【０３１４】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（２，４，６-トリメチルベンジル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｊ）。収量：４０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４８（ｓ、２Ｈ）、７．４１（ｓ、２Ｈ）、６．９６（ｓ、２Ｈ）、６．８８（ｓ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、６Ｈ）、３．８７（ｓ、６Ｈ）、３．５５（ｓ、６Ｈ）、３．３９（ｓ、６Ｈ）、２．４６（ｓ、６Ｈ）、２．２７（ｓ、６Ｈ）、２．０５（ｓ、６Ｈ）。
【０３１５】
N５, N５’-ビス（1-（４-クロロフェニル）エチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｋ）。収量：４９％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５２（ｍ、６Ｈ）、７．３９（ｍ、４Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、７．２５（ｓ、１Ｈ）、５．３６（ｍ、２Ｈ）、４．０１（ｓ、３Ｈ）、４．００（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、３．５７（ｓ、３Ｈ）、３．５６（ｓ、３Ｈ）、２．０１（ｓ、３Ｈ）、２．００（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）、１．５７（ｓ、３Ｈ）。
【０３１６】
N５, N５’-ビス（シクロプロピルメチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｌ）。収量：４６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４９（ｓ、２Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．９６（ｓ、６Ｈ）、３．５９（ｓ、６Ｈ）、３．３７（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、４Ｈ）、２．１０（ｓ、６Ｈ）、１．２（ｍ、２Ｈ）、０．５９（ｍ、４Ｈ）、０．３７（ｍ、４Ｈ）。
【０３１７】
N５, N５’-ビス（シクロヘキシルメチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｍ）。収量：５０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｓ、２Ｈ）、４．０２（ｓ、６Ｈ）、３．９４（ｓ、６Ｈ）、３．５９（ｓ、６Ｈ）、３．３３（ｄ、Ｊ＝１７．４Ｈｚ、４Ｈ）、２．０９（ｓ、６Ｈ）、１．９４（ｄ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ、４Ｈ）、１．８０（ｄ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ、４Ｈ）、１．７２（ｄ、Ｊ＝１０．６Ｈｚ、４Ｈ）、１．３９−１．０７（ｍ、１０Ｈ）。
【０３１８】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’−ジフェネチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｎ）。収量：５１％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５１（ｓ、２Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．３０（ｍ、６Ｈ）、７．２２（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．００（ｓ、６Ｈ）、３．８９（ｓ、６Ｈ）、３．７８（ｔ、Ｊ１＝７．２Ｈｚ、Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、３．０２（ｔ、Ｊ１＝６．６Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．０４（ｓ、６Ｈ）。
【０３１９】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-メチルフェネチル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｏ）。収量：５０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５１（ｓ、２Ｈ）、７．２８（ｓ、２Ｈ）、７．２３（ｍ、４Ｈ）、７．１２（ｍ、４Ｈ）、３．９７（ｓ、６Ｈ）、３．８９（ｓ、６Ｈ）、３．７５（ｓ、６Ｈ）、３．５８（ｍ、４Ｈ）、２．９７（ｍ、４Ｈ）、２．２９（ｓ、６Ｈ）、２．０２（ｓ、６Ｈ）。
【０３２０】
N５, N５’-ビス（3-クロロフェネチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｐ）。収量：４５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５１（ｓ、２Ｈ）、７．３９（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２５（ｍ、４Ｈ）、４．０３（ｓ、６Ｈ）、３．９５（ｓ、６Ｈ）、３．７８（ｍ、４Ｈ）、３．５５（ｓ、６Ｈ）、３．０２（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、２．０４（ｓ、６Ｈ）。
【０３２１】
N５, N５’-ビス（4-エチルフェネチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｑ）。収量：４７％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．２７（ｓ、２Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．１５（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、４．０２（ｓ、６Ｈ）、３．９２（ｓ、６Ｈ）、３．９１（ｍ、４Ｈ）、３．４９（ｓ、６Ｈ）、３．０１（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、２．６１（ｑ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．８Ｈｚ、６Ｈ）、２．１１（ｓ、６Ｈ）、１．２１（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３２２】
N５, N５’-ビス（2，３-ジヒドロ−１Ｈ−インデン−2-イル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（７ｓ）。収量：４７％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５０（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｓ、２Ｈ）、７．２６（ｍ、４Ｈ）、７．１５（ｍ、４Ｈ）、４．９４（ｍ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．９０（ｓ、６Ｈ）、３．５６（ｓ、６Ｈ）、３．４３（ｍ、４Ｈ）、３．０７（ｍ、４Ｈ）、２．０８（ｓ、６Ｈ）。
【０３２３】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ジフェニル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ａ）。収量：７５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７７（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．６３（ｓ、２Ｈ）、７．３８（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２８（ｓ、２Ｈ）、７．１６（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．０１（ｓ、６Ｈ）。
【０３２４】
N５, N５’-ジシクロペンチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｂ）。収量：７６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｓ、２Ｈ）、７．１９（ｓ、２Ｈ）、４．４６（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｍ、４Ｈ）、１．９７（ｓ、６Ｈ）、１．８０（ｍ、４Ｈ）、１．６９（ｍ、８Ｈ）。
【０３２５】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（4-フェノキシフェニル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｃ）。収量：６５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．７８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、７．６４（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．２８（ｓ、２Ｈ）、７．０８（ｍ、２Ｈ）、７．０２（ｍ、８Ｈ）、２．０１（ｓ、６Ｈ）。
【０３２６】
N５, N５’-ビス（3-エチルフェニル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｄ）。収量：６９％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６３（ｓ、４Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２８（ｍ、４Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．６８（ｑ、Ｊ１＝Ｊ２＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、２．０１（ｓ、６Ｈ）、１．２８（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝８．４Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３２７】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-（トリフルオロメチル）フェニル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｅ）。収量：６９％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ８．２６（ｓ、２Ｈ）、７．９６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．６５（ｓ、２Ｈ）、７．５７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．２７（ｓ、２Ｈ）、２．０１（ｓ、６Ｈ）。
【０３２８】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（1-フェニルプロピル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｆ）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５０（ｍ、４Ｈ）、７．３１（ｍ、６Ｈ）、７．０９（ｓ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）、５．０９（ｍ、２Ｈ）、１．８８（ｍ、６Ｈ）、１．０９（ｍ、６Ｈ）。
【０３２９】
N５, N５’-ジベンジル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｇ）。収量：７８％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．３６（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．１６（ｓ、２Ｈ）、４．７０（ｓ、４Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）。
【０３３０】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-メチルベンジル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｈ）。収量：７５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、１Ｈ）、７．３６（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．１６（ｓ、２Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．６５（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝１５．０Ｈｚ、４Ｈ）２．３６（ｓ、６Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）。
【０３３１】
N５, N５’-ビス（3-クロロベンジル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｉ）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５９（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．４６（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．３５（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．１５（ｓ、２Ｈ）、４．６８（ｓ、４Ｈ）、１．９３（ｓ、６Ｈ）。
【０３３２】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（2,4,6-トリメチルベンジル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｊ）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５４（ｓ、２Ｈ）、７．１８（ｓ、２Ｈ）、６．８７（ｓ、４Ｈ）、４．７０（ｓ、４Ｈ）、２．４６（ｓ、１２Ｈ）、２．２２（ｓ、６Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）。
【０３３３】
N５, N５’-ビス（1-（4-クロロフェニル）エチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｋ）。収量：７３％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５３（ｍ、６Ｈ）、７．３５（ｍ、４Ｈ）、７．０９（ｓ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）、５．３３（ｍ、２Ｈ）、１．９１（ｓ、３Ｈ）、１．８６（ｓ、３Ｈ）、１．５６（ｍ、３Ｈ）、１．５４（ｍ、３Ｈ）。
【０３３４】
N５, N５’-ビス（シクロプロピルメチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｌ）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．２６（ｓ、２Ｈ）、３．３６（ｍ、４Ｈ）、１．９７（ｓ、６Ｈ）、１．１８（ｍ、２Ｈ）、０．５７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、４Ｈ）、０．３７（ｍ、４Ｈ）。
【０３３５】
N５, N５’-ビス（シクロヘキシルメチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｍ）。収量：８０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．２２（ｓ、２Ｈ）、３．３２（ｍ、４Ｈ）、１．９６（ｓ、６Ｈ）、１．７９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、１．７１（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、４Ｈ）、１．３９−１．０８（ｍ、１４Ｈ）。
【０３３６】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ジフェネチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｎ）。収量：８０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．３１（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．２１（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．０９（ｓ、２Ｈ）、３．７４（ｍ、４Ｈ）、３．０１（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、１．９２（ｓ、６Ｈ）。
【０３３７】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル- N５, N５’-ビス（3-メチルフェネチル）-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｏ）。収量：７６％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｓ、２Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．０６（ｓ、２Ｈ）、３．８０（ｍ、４Ｈ）、２．９６（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．２９（ｓ、６Ｈ）、１．９０（ｓ、６Ｈ）、１．４０（ｓ、４Ｈ）。
【０３３８】
N５, N５’-ビス（3-クロロフェネチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｐ）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｓ、２Ｈ）、７．３９（ｓ、２Ｈ）、７．３０（ｔ、Ｊ１＝７．２Ｈｚ、Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、７．２１（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．０３（ｓ、２Ｈ）、３．７９（ｍ、２Ｈ）、３．７０（ｍ、２Ｈ）、３．００（ｍ、４Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）。
【０３３９】
N５, N５’-ビス（4-エチルフェネチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｑ）。収量：７５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．２６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．１５（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．１０（ｓ、２Ｈ）、３．７５（ｍ、２Ｈ）、３．７０（ｍ、２Ｈ）、２．９８（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．６０（ｑ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、１．９１（ｓ、６Ｈ）および１．２０（ｔ、Ｊ１＝７．８Ｈｚ、Ｊ２＝７．２Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３４０】
N５, N５’-ビス（2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｓ）。収量：７２％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｓ、２Ｈ）、７．２４（ｓ、４Ｈ）、７．１９（ｓ、２Ｈ）、７．１４（ｓ、４Ｈ）、４．９４（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｍ、４Ｈ）、３．０７（ｍ、４Ｈ）、１．９４（ｓ、６Ｈ）。
【０３４１】
N５, N５’-ビス（4-クロロフェネチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボキサミド（８ｔ）。収量：７５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．５７（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．０２（ｓ、２Ｈ）、３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．７１（ｍ、２Ｈ）、２．９９（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、１．９３（ｓ、６Ｈ）。
【０３４２】
5，5’-ジイソブチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル（１１ａ）。収量：８５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．６０（ｓ、２Ｈ）、７．４１（ｓ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．９０（ｓ、６Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、２．９７（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．１９（ｓ、６Ｈ）、２．１２（ｍ、２Ｈ）、１．０３（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．０Ｈｚ、１２Ｈ）。
【０３４３】
5，5’-ジイソペンチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル（１１ｂ）。収量：８１％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．６３（ｓ、２Ｈ）、７．３８（ｓ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．９６（ｓ、６Ｈ）、３．５９（ｓ、６Ｈ）、３．０８（ｍ、４Ｈ）、２．２（ｓ、６Ｈ）、１．８０（ｍ、２Ｈ）、１．２９（ｍ、４Ｈ）、１．０６（ｍ、１２Ｈ）。
【０３４４】
5,5’-ビス（シクロペンチルメチル）-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル（１１ｃ）。収量：８０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．６５（ｓ、２Ｈ）、７．４０（ｓ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、３．９０（ｓ、６Ｈ）、３．５８（ｓ、６Ｈ）、３．０９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．３８（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｓ、６Ｈ）、１．７３（ｍ、８Ｈ）、１．５４（ｍ、８Ｈ）。
【０３４５】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサメトキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル（１１ｅ）。収量：９０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．４６（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｓ、２Ｈ）、７．１４（ｓ、２Ｈ）、４．０４（ｓ、６Ｈ）、４．０２（ｓ、６Ｈ）、３．５７（ｓ、６Ｈ）、２．１８（ｓ、６Ｈ）。
【０３４６】
5,5’-ジイソブチル-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール(hexaol)（１２ａ）。収量：８０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４４（ｓ、２Ｈ）、７．３４（ｓ、２Ｈ）、２．９５（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．１４（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｓ、６Ｈ）、１．０２（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、６Ｈ）、１．００（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３４７】
5,5’-ジイソペンチル-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール（１２ｂ）。収量：７９％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４２（ｓ、２Ｈ）、７．３４（ｓ、２Ｈ）、３．０４（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝５．４Ｈｚ、４Ｈ）、２．０５（ｓ、６Ｈ）、１．７４（ｍ、２Ｈ）、１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．０５（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、６Ｈ）、１．０４（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３４８】
5,5’-ビス（シクロペンチルメチル）-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール（１２ｃ）。収量：７８％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４１（ｓ、２Ｈ）、７．３７（ｓ、２Ｈ）、３．０６（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．０３（ｓ、６Ｈ）、１．７２（ｍ、８Ｈ）、１．５０（ｍ、８Ｈ）。
【０３４９】
5,5’-ジベンジル-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール（１２ｄ）。収量：７２％。１Ｈ ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＳＯ）δ ９．８１（ｓ、２Ｈ）、８．６４（ｓ、２Ｈ）、７．７６（ｓ、２Ｈ）、７．３９（ｓ、２Ｈ）、７．２４（ｍ、１０Ｈ）、７．１０（ｍ、２Ｈ）、４．２８（ｄｄ、Ｊ１＝１５．０Ｈｚ、Ｊ２＝１９．８Ｈｚ、４Ｈ）、１．９４（ｓ、６Ｈ）。Ｅ１ １３ＣＮＭＲ（）δ１５０．６９、１４５．８６、１４５．６６、１４３．２０、１３４．０４、１２６．９７、１２０．４６、１１９．８５、１１７．３８、１１６．１３、１０５．１０、１０１．０９、３２．０、２２．５。
【０３５０】
3,3’-ジメチル-5,5’-ジフェネチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール（１２ｅ）。収量：７３％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．５２（ｓ、２Ｈ）、７．４４（ｓ、２Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、４Ｈ）、７．１８（ｔ、Ｊ１＝７．２Ｈｚ、Ｊ２＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、５．３５（ｓ、４Ｈ）、５．１７（ｓ、２Ｈ）、３．３７（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．０３（ｔ、Ｊ１＝Ｊ２＝６．６Ｈｚ、４Ｈ）、２．１３（ｓ、６Ｈ）。
【０３５１】
3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサオール（１３）。収量：７５％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ７．４６（ｓ、２Ｈ）、７．１１（ｓ、２Ｈ）、７．０２（ｓ、２Ｈ）、１．９７（ｓ、６Ｈ）。
【０３５２】
1,1’,6,6’,7,7’-ヘキサヒドロキシ-3,3’-ジメチル-2,2’-ビナフチル-5,5’-ジカルボン酸（１４）。収量：７０％。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ ８．２９（ｓ、２Ｈ）、７．８３（ｓ、２Ｈ）、２．０４（ｓ、６Ｈ）。
【０３５３】
【表８】
2012524101.tif 000035
【０３５４】
＜実施例６＞
＜ＮＭＲ実験＞
ＮＭＲに基づく結合アッセイを、追加された化合物が存在しない及び存在する状態で、各々２００μＭの濃度にて、２５μＭの濃度で５００μＬのＢＣＬ-ＸＬの溶液を用いた一次元の１Ｈ実験を得ることにより、行った。スペクトルの脂肪性の領域を観察することによって、結合を、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ、ＶａｌまたはＡｌａの活性部位のメチル基における、化学シフト変化により容易に検出することができた（−０．８と０．３ｐｐｍの間の範囲）。全ての実験を、４つのｒｆチャンネルおよびＺ軸パルス磁場勾配（z-axis pulse-field gradients）が備わった、６００ＭＨｚの分光計Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ６００（spectrometer Bruker Avance 600）を用いて行った。
【０３５５】
＜実施例７＞
＜蛍光分極法アッセイ（ＦＰＡ）＞
Ｂａｋ ＢＨ３ペプチド（Ｆ−ＢａｋＢＨ３）（ＧＱＶＧＲＱＬＡＩＩＧＤＤＩＮＲ）を、イソチオシアン酸フルオレセイン（ＦＩＴＣ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）でＮ末端にて標識化し、ＨＰＬＣによって精製した。競合結合アッセイについては、１００ｎＭのＧＳＴ−ＢＣＬ−ＸＬΔＴＭタンパク質を、室温で１０分間、９６−ウェルブラックプレートにおいて、４７．５μＬのＰＢＳ（ｐＨ＝７．４）中で様々な濃度で試験された化合物と共に前培養し、その後１００ｎＭのＦＩＴＣ−標識化されたＢａｋ ＢＨ３ペプチド２．５μＬを加え、５０μＬの最終容量を生成した。野生型及び変異型Ｂａｋ ＢＨ３ペプチドを、陽性および陰性のコントロールとして、各々のアッセイプレートにそれぞれ含めた。室温で３０分培養した後、ミリ分極単位（millipolarization units）における分極値を、マルチラベルプレートリーダ（multilabel plate reader）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて、４８０／５３５ｎｍの励起／発光波長にて測定した。ＩＣ５０を、Ｓ字結腸の用量応答の非線形の回帰モデル（ＳｉｇｍａＰｌｏｔ １０．０．１、Ｓｙｓｔａｔ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ，ＵＳＡ）に実験データを適合させることにより測定した。報告されたデータは、３つの独立した実験±標準誤差（ＳＥ）の平均値である。ＢＣＬ−２とＭｃｌ−１ ＦＰＡの能力は類似している。簡潔に言うと、５０ｎＭのＧＳＴ−ＢＣＬ−２または−Ｍｃｌ−１を２分間、アポゴシポール又はその５，５’の置換された誘導体の様々な濃度にて培養し、次に１５ｎＭのＦＩＴＣ抱合型−Ｂｉｍ ＢＨ３ペプチド（FITC-conjugated-Bim BH3 peptide）をＰＢＳ緩衝液に加えた。蛍光分極を１０分後に測定した。
【０３５６】
＜実施例８＞
＜等温滴定熱量計アッセイ（ＩＴＣ）＞
滴定を、Ｍｉｃｒｏｃａｌ（Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ, ＭＡ）からのＶＰ−ＩＴＣまたはＩＴＣ２００熱量計を使用して行った。ＢＣＬ−ＸＬを、２０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）および５−１０％のＤＭＳＯの中で２５〜１００μＭの間の濃度にて使用した。滴定液を、同じ緩衝液中のタンパク質の濃度の、１０−１５倍の濃度で使用した。滴定を２５℃で実行した。データを、ＩＴＣ製造業者（Ｍｉｃｒｏｃａｌ，Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ，ＭＡ）によって提供されるＭｉｃｒｏｃａｌ Ｏｒｉｇｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅを使用して分析した。
【０３５７】
＜実施例９＞
＜細胞の生存率およびアポトーシスアッセイ＞
ヒト癌細胞株（ＰＣ３ＭＬ、Ｈ４６０、Ｈ１２９９、ＲＳ１１８４６）に対する化合物の活性を、ＡＴＰ−ＬＩＴＥアッセイ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して評価した。全ての細胞を、５％のウシ胎児血清（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．）、ペニシリンおよびストレプトマイシン（Ｏｍｅｇａ）で補われた５ｍＭのＬ−グルタミンの入った、Ｆ１２またはＲＰＭＩ１６４０培地のいずれかの中に播種した。継代に関しては、細胞を５％のＦＢＳの中で培養した。細胞を、倍増時間に依存する様々な初期の密度にて、９６ウェルプレートへと平板培養した。Ｈ４６０とＨ１２９９を２０００の細胞／ウェルにて、Ａ５４９とＰＣ３を３０００の細胞／ウェルにて、及びＲＳ１１８４５６Ｓを１００００の細胞／ウェルにて平板培養した。化合物を０．１％のＤＭＳＯを伴う最終濃度に希釈した。細胞上に化合物を分配する前に、新規の５％の培地を容器に入れた。化合物の投与は、新規の培地へ播種してから２４時間後に行った。細胞の生存率を、処置の７２時間後にＡＴＰ−ＬＩＴＥ試薬（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して評価した。データを、プリズム版５．０１（Ｇｒａｐｈａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、ＤＭＳＯコントロールで処置された細胞（DMSO control-treated cells）に標準化した。
【０３５８】
ＲＳ１１８４６細胞に対する化合物のアポトーシスの活性を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−及びヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色することにより評価した。リンパ腫細胞株、ＲＳ１１８４６を、１０％のウシ胎児血清（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）およびペニシリン／ストレプトマイシン（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）を含む、ＲＰＭＩ １６４０培地（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）の中で培養した。細胞を、１〜２日間、５，５’の置換されたアポゴシポールの様々な濃度で培養した。生存可能な細胞のパーセンテージを、アポトーシス検出キット（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ Ｉｎｃ．）を使用し、ＦＩＴＣ−Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−およびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）−標識化して、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳｏｒｔ；Ｂｅｃｔｉｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｉｎｃ．；Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）によって染色された細胞を分析することにより測定した。ａｎｎｅｘｉｎ−Ｖ−陰性およびＰＩ−陰性であった細胞を、生存可能であると考えた。
【０３５９】
マウスの胚性繊維芽細胞野生型細胞（ＭＥＦ／ＷＴ）及びマウスの胚性繊維芽細胞ＢＡＸ／Ｂａｋ二重ノックアウト細胞（ＭＥＦ／ＤＫＯ）に対する、８ｒ、８ｑのような化合物のアポトーシスの活性を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−およびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）での染色により測定した。ＭＥＦ／ＷＴおよびＭＥＦ／ＤＫＯ細胞を、（１０％のＦＣＳによって補われたＤＭＥＭ培地中１ｍｌにおいて）プレートにつき５０万の播種密度にて、２４−ウェルプレートの中に播種した。翌日、化合物を、０、２．５、５．０、７．５および１０μＭの最終濃度にて、野生型およびＤＫＯ細胞に加えた。翌日に、浮遊細胞を、０．２５％のトリプシン／ＥＤＴＡ溶液（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎ−Ｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｉｎｃ．）を用いた簡単な培養の後に採取された付着細胞と共に貯蔵した。細胞を遠心分離機にかけ、上澄み液を捨て、細胞ペレットを、１μＬのＡｎｎｅｘｉｎ−ＦＩＴＣおよび１μＬのＰＩ（ヨウ化プロピジウム）の追加の後に、０．２ｍｌのＡｎｎｅｘｉｎ−Ｖ結合緩衝液で再懸濁した。生存可能な細胞のパーセンテージを、３色のＦＡＣＳｏｒｔ器具によって測定し、およびデータを、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−陰性、生存可能な細胞としてのＰＩ−陰性を採点するフロージョープログラム（Flow-Jo program）によって分析した。
【０３６０】
＜実施例１０＞
＜インビトロでのＡＤＭＥＴ研究＞
肝ミクロソームの安定。貯蔵されたラット肝ミクロソーム（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，＃ ４５２７０１）を、ＮＡＤＰＨが存在しない状態で、５分間３７．５℃で試験化合物を用いて前培養した。反応を、ＮＡＤＰＨの追加によって始め、その後、同じ条件の下で培養した。最終培養濃度は、ｐＨ７．４でのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、４μＭの試験化合物、２ｍＭのＮＡＤＰＨ、および１ｍｇ／ｍＬ（総タンパク）の肝ミクロソームであった。培養混合物の１つのアリコート（１００μＬ）を、０、１５、３０および６０分で取り除き、内部標準を含む２００μＬのＡＣＮ／ＭｅＯＨとすぐに組み合わせた。混合の後、サンプルを１２分間およそ１３０００ｒｐｍで遠心分離機にかけた。上澄み液をオートサンプラーバイアルへ移し、試験化合物の量をＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ ２０１０ＥＶ質量分析計を使用して定量化した。時間の関数としての親化合物のＡＵＣ（曲線下面積）の変化を、ミクロソームの安定性の基準として使用した。
【０３６１】
血漿の安定性。試験化合物のＤＭＳＯ中の１０ｍＭの溶液の２０μＬのアリコートを、２．０ｍＬのヘパリン処置されたラットの血漿（Ｌａｍｐｉｒｅ，Ｐ１−１５０Ｎ）に加え、１００μＭの最終溶液を得た。混合物を、３７．５℃で１時間培養した。１００μＬのアリコートを得て（０、３０分、１時間）、内部標準を含む２００μＬのＭｅＯＨで希釈した。混合の後、サンプルを１２分間およそ１３０００ｒｐｍで遠心分離機にかけた。上澄み液をオートサンプラーバイアルへ移し、試験化合物の量をＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ ２０１０ＥＶシステムを使用して定量化した。時間の関数としての親化合物のＡＵＣ（曲線下面積）の変化を、ミクロソームの安定性の基準として使用した。
【０３６２】
＜実施例１１＞
＜ＰＡＭＰＡアッセイ＞
ＰＡＭＰＡは、並列人工膜浸透アッセイ（parallel artificial membrane permeation assay）である。９６−ウェル微小滴定プレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，＃ ＭＳＳＡＣＣＥＰＴＯＲ）を、水性の緩衝溶液（ｐＨ７．２）で完全に満たし、微小滴定フィルタプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，＃ ＭＡＰＢＭＮ３１０）で覆った。疎水性のフィルタ材料を、ヘキサン中の１０％のヘキサデカンの溶液に浸透し、有機溶剤を完全に蒸発させた。浸透研究を、フィルタプレートの上へ、１００μＭの試験化合物溶液の内２００μＬを移すことによって始めた。一般的なリン酸緩衝液では、ｐＨ７．２の緩衝液を使用した。貯蔵溶液の最大のＤＭＳＯ含有率は＜５％だった。平行して、細胞膜を欠く平衡溶液を、正確な濃度および規格を使用したが細胞膜を欠いて調製した。アクセプターおよび平衡溶液の濃度を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ ２０１０ＥＶおよびＡＵＣ法を使用して測定した。細胞膜層を通した化合物の浸透を、パーセンテージ浸透（％流量）によって記載する。流量値を、８時間後のアクセプター区画の濃度及び細胞膜障壁を含んでいない同じ濃度で参照のウェル（reference well）の濃度を考慮して、計算した。
【０３６３】
＜実施例１２＞
＜トランスジェニックマウスの研究＞
ＢＣＬ−２を発現するトランスジェニックマウスを、Ｂ６株として記載した。ＢＣＬ−２導入遺伝子は、t（１４；１８）転座の小型遺伝子版であり、その中でヒトＢＣＬ−２遺伝子が免疫グロブリン重鎖（ＩｇＨ）座および関連するＩＧＨエンハンサーに融合される。導入遺伝子を、Ｂａｌｂ／ｃバックグラウンドに増やした。これらのマウスは、１２〜２４月齢まで変形を受けるマウスのおよそ９０％が、およそ６月齢に始まるモノクローナルの侵攻性リンパ腫に対する非同期性の形質転換と共に多クローンのＢ細胞増殖を進行し、ここで使用されるすべての動物は、まだ侵攻性リンパ腫を進行していなかった。
【０３６４】
＜実施例１３＞
＜さらなるマウスの実験＞
５００μＬの溶液（エタノール：クレモフォールＥＬ：生理食塩水＝１０：１０：８０）中に溶けた化合物を、年齢および性別が同じＢ６ＢＣＬ２マウスに腹腔内に注入し、一方でコントロールマウスに、化合物を含まない５００μＬの同じ製剤を腹腔内に注入した。２４時間後、Ｂ６ＢＣＬ２マウスを致死量のアベルチンの腹腔内投与によって犠牲にした。脾臓を除去し、重さを量った。マウスの脾臓の重さを、予備研究で脾臓の重さが年齢および性別が同じＢＣＬ−２−トランスジェニックマウスにおいて高く一貫していることを我々が測定したように、活性を評価するためのエンドポイントとして使用する。脾臓の重さの変動性は、コントロール処置され、年齢が同じ、性別が同じＢ６ＢＣＬ２マウス中の±２％の範囲にあった。脾臓の組織を３日間、ｚ−ＦＩＸにおいて固着し、ＰＢＳの中で洗い流し、脾臓の組織学の分析（Ｈ＆Ｅ染色およびＴＵＮＥＬアッセイ）のために保存した。
【０３６５】
＜実施例１４＞
＜アポゴシポールとの比較＞
ＢＣＬ−ＸＬにおけるＢＨ３結合溝の中へのアポゴシポールの分子ドッキングの研究は、アポゴシポールが、正確なナフタレン環の上の隣接する第６および第７ヒドロキシル基を介して、ＢＣＬ−ＸＬにおける残基Ａｒｇ １３９およびＴｙｒ１９５との２つの水素結合を形成することを示す。左のナフタレン環の上のイソプロピル基は、ＢＣＬ−ＸＬにおける第１疎水性ポケット（Ｐ１）に挿入し、その一方で右のナフタレン環の上のメチル基およびイソプロピル基は、隣接した２つの疎水性ポケット、それぞれＰ２およびＰ３へ挿入する。予測された結合モデルの分析は、アポゴシポールの全体的なコア構造がＢＣＬ−ＸＬのＢＨ３結合溝に相当よく適合する一方で、２つのイソプロピル基は疎水性ポケットＰ１およびＰ３を一見したところ完全には占領しないことを示す。
【０３６６】
それ故、イソプロピル基をより大きな疎水性置換基に取り替える、５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のライブラリを、ＢＣＬ−ＸＬの上の疎水性ポケットをより有効に占領することができる新しい分子を得る目的で設計した。
【０３６７】
設計された５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体を本明細書記載の通りに合成し、表９に示されるような核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）結合アッセイ、競合的な蛍光偏光法アッセイ（ＦＰＡ）、及び細胞生存率アッセイにより評価した。
【０３６８】
【表９−１】
2012524101.tif 000036
【０３６９】
【表９−２】
2012524101.tif 000037
【０３７０】
化合物Ｉは、これらのアッセイにおけるＢＣＬ−ＸＬのための高親和性を示した。それは、ＢＣＬ−ＸＬの一次元の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおける活性部位メチル基（−０．３〜０．８ｐｐｍの間の領域）において著しい化学シフト変化を誘発し、ＦＰ置換（displacement）アッセイにおいて、０．１９μＭのＩＣ５０値を有し、それはアポゴシポールよりほぼ２０倍強力である。
【０３７１】
化合物ＸＶＩＩ、ＶＩ、ＶＩＩＩ、ＸＩ、ＸＶＩおよびＸＩＩのような化合物のグループはまた、０．１４から０．４５μＭにまで及ぶＩＣ５０値を伴うＦＰアッセイにおいてＢＣＬ−ＸＬに対する高い結合親和性を示し、ＢＣＬ−ＸＬの一次元の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおいて化学シフト変化を誘発する。ＮＭＲ結合データおよびＦＰアッセイの結果を確認するため、化合物Ｉおよび他の化合物の結合親和性を、ＩＴＣ（等温滴定熱量測定）を使用してＢＣＬ−ＸＬのためさらに評価した。
【０３７２】
【表１０】
2012524101.tif 000038
【０３７３】
以上のように、ＮＭＲ結合およびＦＰＡのデータに一致して、化合物Ｉおよびそのｐ−メチル置換誘導体化合物ＸＩＩは、０．１７および０．０４μＭのＫｄ値のＢＣＬ−ＸＬに対する強力な結合親和性をそれぞれ示し、それは同じアッセイにおけるアポゴシポール（Ｋｄ＝１．７μＭ）より１０および４０倍強力である。ＢＣＬ−ＸＬのＢＨ３結合溝における化合物Ｉの分子ドッキングの研究は、５，５’のベンジル基が疎水性ポケット（Ｐ１およびＰ３）により深く挿入し、故にアポゴシポールのイソプロピル基と比較して、より有効にこれらの領域を占領することを実証した。
【０３７４】
ＮＭＲ結合、ＦＰＡおよびＩＴＣデータと一致して、化合物ＩおよびＸＩＩのような化合物は、高レベルのＢＣＬ−ＸＬを発現する、ＰＣ３ＭＬ細胞における細胞増殖を阻害する際に顕著な効果を示す。それらのＥＣ５０値は、１．９から４．６μＭにまで及び、故にアポゴシポール（ＥＣ５０＝１０．３μＭ）より２〜５倍強力である。
【０３７５】
５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の、他の抗アポトーシス性のＢＣＬ−２ファミリータンパク質に対する結合性および特異性を評価するために、選択されたＢＣＬ−ＸＬ活性化合物を、ＦＰアッセイを使用してＢＣＬ−２およびＭｃｌ−１に対して評価した。これらＢＣＬ−ＸＬ阻害剤はまた、ＢＣＬ−２およびＭｃｌ−１に対する強い結合親和性を示した。化合物Ｉは、それぞれ０．３６および０．５２μＭのＥＣ５０値を有するＢＣＬ−２およびＭｃｌ−１に結合し、それはアポゴシポール（ＥＣ５０＝２．８μＭ）よりおよそ８及び５倍強力である。化合物ＸＩＩは化合物Ｉよりもわずかに活動的ではなく、一方で化合物ＶＩＩＩはアポゴシポールの活性に類似する活性を有する。
【０３７６】
化合物ＩおよびＸＩＩが、ＦＰアッセイにおいてＢＣＬ−２およびＭｃｌ−１に対する強い結合親和性を示したので、全ての５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体を、高レベルのＢＣＬ−２およびＭｃｌ−１をそれぞれ発現する、Ｈ４６０およびＨ１２９９の細胞株に対して更に評価した。ＦＰＡのデータに一致して、化合物ＩおよびＸＩＩは、それぞれ０．６８および０．８２μＭのＥＣ５０値を有するＨ４６０細胞株の増加を阻害し、それはアポゴシポール（ＥＣ５０＝３．４μＭ）よりおよそ４〜５倍強力である。化合物Ｉの構造に類似する構造を有する化合物ＶＩＩおよびＶＩＩＩはまた、それぞれ０．３０および０．５９μＭのＥＣ５０値を有するＨ４６０細胞株における細胞増殖を阻害した。試験された５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体のほとんどはまた、１から４μＭにまで及ぶＥＣ５０値を有するＨ４６０およびＨ１２９９の細胞株において、強力な細胞活性を示した。
【０３７７】
対照的に、化合物ＩＩ、５，５’の位置の上にある水素原子を有する陰性のコントロール化合物は、Ｈ４６０（ＥＣ５０＝１０．１μＭ）およびＨ１２９９（ＥＣ５０＝１３．４μＭ）の細胞株の両方において、弱い細胞成長阻害活性を示し、それは５，５’の置換基が強い阻害に必要であることを示す。この観察は、強力なＢＣＬ−ＸＬアンタゴニストＡＢＴ−７３７に関する報告に一致しており、これは、Ｍｃｌ−１に対して有効でなく、Ｈ１２９９のようなＭｃｌ−１過剰発現細胞株を死滅させるのに結果として有効ではない。
【０３７８】
５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体を、高レベルのＢＣＬ−２およびＢＣＬ−ＸＬを発現する、ヒトリンパ腫ＲＳ１１８４６細胞株のアポトーシスを誘発するそれらの能力に関して、更に試験した。これらのアッセイに関して、我々はフローサイトメトリー解析に続いて、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）二重染色法を使用した。合成されたアポゴシポール誘導体のほとんどは、用量依存性の方法でＲＳ１１８４６細胞株のアポトーシスを効果的に誘発した。特に、化合物Ｉ、ＶＩＩＩ、ＸＩおよびＸＩＩは、３．０から５．５μＭまでの範囲のＥＣ５０を有し、それはヒトの癌ＰＣ３ＭＬおよびＨ４６０細胞株における以前の結果と一致する。再び、陰性のコントロール化合物ＩＩは、ＲＳ１１８４６細胞株の弱いアポトーシス（ＥＣ５０＝２４．７）を誘発し、それはその貧弱な抗−ＢＣＬ−２活性と一致する。
【０３７９】
５，５’の置換されたアポゴシポール誘導体の薬理学的特性を試験するために、それらのインビトロでの血漿安定性、ミクロソームの安定性および細胞膜の透過性を測定した。
結果を表１１に示す。
【０３８０】
【表１１】
2012524101.tif 000039
【０３８１】
表４において提供されるデータを見て分かるように、本開示の合成された化合物は、優れた血漿安定性を示し、アポゴシポールより全体的に安定している。化合物Ｉは、ラットの血漿における培養の１時間後に１５％分解した。加えて、化合物ＩおよびＸＩＩは、アポゴシポールと比較して、類似又は改善したミクロソームの安定性を示し、一方で化合物ＶＩおよびＸＶＩＩＩは、ラット肝細胞のミクロソームの製剤におけるアポゴシポールより速く分解した。化合物ＩおよびＸＩＩはまた、アポゴシポールと比較して、改善された細胞膜の透過性を示した。
【０３８２】
従って、１Ｄ １Ｈ−ＮＭＲ結合アッセイ、ＦＰアッセイ、ＩＴＣアッセイ、細胞毒性アッセイ及び予備のインビトロのＡＤＭＥデータの組み合わせを使用して、化合物ＩおよびＸＩＩのような化合物を、Ｂ６ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスを使用する、更なるインビボの研究のため選択した。Ｂ６ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスのＢ細胞は、ＢＣＬ−２を過剰発現し、マウスの脾臓中に蓄積する。脾臓の重さが、年齢および性別が同じＢＣＬ−２−トランスジェニックマウスにおいて高度に一貫していて、変動性が、コントロール処置された年齢が同じ、性別が同じＢ６ＢＣＬ２マウス間で±２％の内にあったことを我々が測定したように、脾臓の重さをインビボの活性を評価するためにエンドポイントとして使用する。化合物ＩおよびＸＩＩのような化合物のインビボの活性を、６０μｍｏｌ／ｋｇでの単一のＢＣＬ−２トランスジェニックマウスにおいて、アポゴシポールおよびゴシポールと隣りあわせで最初にスクリーンした。
【０３８３】
全ての試験された化合物は、マウスの顕著な脾臓の重さの減少を誘発し、化合物Ｉは、脾臓の重さにおいて４０％の減少を引き起こす最良の効果を示した。最大の脾臓収縮がこの実験モデルにおいてわずか５０％であるので、化合物Ｉのインビボの効果は、６０μｍｏｌ／ｋｇでほぼ最大の生物活性を誘発した。単一のマウス実験からの結果を確認するために、化合物Ｉのインビボの活性を、６匹のマウス各々のグループにおいて次に評価した。単一のマウス実験に一致して、これらのマウスの化合物Ｉの処置は、６匹のマウスのコントロール群と比較して、脾臓の重さの顕著な（〜４０％）減少をもたらした（Ｐ＜０．０００１）。全てのマウスは、肉眼的な毒性なしで処置に十分耐容性があった；最大の損失重量は、化合物Ｉの研究の最中４％だった。
【０３８４】
＜実施例１５＞
＜全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の予防および処置のためのマウスモデル＞
この実施例は、ニュージーランドブラック×ニュージーランドホワイトＦ１（ＮＺＢＷ）およびＭＲＬ／ｌｐｒマウスモデルにおけるＳＬＥの進行に対するアポゴシポールの処置の効果を検査するための、提案された研究を説明する。
【０３８５】
＜予防研究＞
２つの遺伝学的に多様な株、ＮＺＢ／ＮＺＷ Ｆ１（これは、Ｂ６．Ｓｌｅ１．Ｓｌｅ３コンジェニックに遺伝学的に類似する）およびＭＲＬ／ｌｐｒに、３月齢から５月齢まで、すなわち２か月間、予防研究を受けさせる。マウスを、それらが研究の初めに抗核自己抗体に対して陰性であることを保証するために点検する。１つの実施例において、各々の株の１０匹のマウスがアポゴシポールを受ける一方で、別の１０匹の年齢／性別が同じメスはビヒクルを受ける（「プラセボ群」）。１０匹のマウスは最初に試験されるが、これらの数は、最初のセットの得られたデータを使用して行なわれた検出力分析に従って容易に増やすことができる。マウスに、１日につき約０．２μｍｏｌ／ｋｇから約１．０μｍｏｌ／ｋｇまで与える。投与経路は経口になる。しかしながら、静脈内投与も使用することができる。
【０３８６】
マウスを、血清自己抗体レベルおよび２４時間の尿タンパクレベルに関して２週間の間隔で監視し、および（フローサイトメトリーを使用して）全血球数、血液白血球の数および活性化状態に関して月１回の間隔で監視する。研究の終わりに、全てのマウスをまた、クレアチニン／ＢＵＮレベル、脾臓の白血球数および活性化状態、同様に腎臓における糸球体及び間質の病変の組織学の重症度に関して試験する。統計解析を、アポゴシポールで処置されたマウスが自己抗体および白血球の数／活性化（主要な評価項目）、または腎臓病（副次的評価項目）を著しく減らしているかどうか測定するために行なう。最終的に、両方の研究群からのフローソート（flow-sorted）白血球占有数を、ＢＣＬ−２の妨害（blockade）がまた、狼瘡における他の活性化過剰のシグナル経路を弱めるか否か確認するために、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ-ｘＬ、ＡＫＴ、ｍＴＯＲ、Ｅｒｋ１、２、ｐ３８、ＣＤＫ１／２およびＮＦｋＢのリン酸化状態に関して試験する。
【０３８７】
＜処置研究＞
同じ２つの遺伝的に多様な株、ＮＺＢ／ＮＺＷ Ｆ１およびＭＲＬ／ｌｐｒに、５月齢（１度、それらは抗核自己抗体には陽性で、タンパク尿になる）から７月齢まで、すなわち２ヶ月の間、処置研究を受けさせる。各々の株の２０匹のマウスはアポゴシポールを受ける一方で、別の２０匹の年齢／性別が同じメスはビヒクルを受ける（「プラセボ群」）。マウスに、１日につき約０．２μｍｏｌ／ｋｇから約１．０μｍｏｌ／ｋｇまで与える。投与経路は経口である。しかしながら、静脈内投与も使用することができる。全てのマウスを、それらが研究の初めに抗核自己抗体に対して陽性であることを保証するために試験する。１つの実施例において、１０匹のマウスを脾臓の白血球数／活性化に関して検査するため、処置期間後すぐに犠牲にし、一方で各々のグループにおける残りの１０匹のマウスを、（死亡率へのアポゴシポールの影響を確認するため）死ぬまで追跡調査する。
【０３８８】
マウスを、血清自己抗体レベルおよび２４時間の尿タンパクレベルに関して２週間の間隔で監視し、および（フローサイトメトリーを使用して）全血球数、血液白血球の数および活性化状態に関して月１回の間隔で監視する。研究の終わりに、全てのマウスをまた、クレアチニン／ＢＵＮレベル、脾臓の白血球数および活性化状態、同様に腎臓における糸球体及び間質の病変の組織学の重症度に関して試験する。統計解析を、アポゴシポールで処置されたマウスが自己抗体、死亡率および白血球の数／活性化（主要な評価項目）、または腎臓病（副次的評価項目）を著しく減らしているかどうか測定するために行なう。最終的に、両方の研究群からフローソート白血球占有数を、ＢＣＬ−２の妨害がまた、狼瘡における他の活性化過剰のシグナル経路を弱めるか否か確認するため、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ-ｘＬ、ＡＫＴ、ｍＴＯＲ、Ｅｒｋ１、２、ｐ３８、ＣＤＫ１／２およびＮＦｋＢのリン酸化状態に関して試験する。
【０３８９】
追跡して行う研究は、選択された狼瘡チェックポイントへのＢＣＬ−２の妨害の影響力の評価、アポゴシポールおよび他の従来の薬物の組み合わせの使用が、低減した副作用と共により良い治療上の効果を与えるか否かの評価、アポゴシポールによる全身の免疫抑制のレベルの評価、およびヒト狼瘡におけるＢＣＬ−２ファミリーメンバー活性化のレベルの評価を含む。
【０３９０】
＜実施例１６＞
＜多発性硬化症のネズミのモデルにおける、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の予防＞
この実施例は、多発性硬化症のネズミのモデルにおける、活性のＥＡＥおよび受動的なＥＡＥの両方の進行に対するアポゴシポール処置の効果を検査するための、提案された研究を説明する。
【０３９１】
実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）は、中枢神経系（ＣＮＳ）のＴ細胞を媒介とした自己免疫疾患である。疾患を、ＣＮＳミエリン抗原での免疫処置によってマウスの感受性系統において誘発させ、または代わりに、疾患を、抗原により刺激されたＣＤ４＋Ｔ細胞を使用してＳＪＬ／Ｊマウスのような敏感なマウスに受動的に移す（Pettinelli, J. Immunol. 127, 1981, p. 1420）。ＥＡＥは、霊長類における多発性硬化症のために許容可能な動物モデルとして広く認識される（Alvord et al. （eds.） 1984. Experimental allergic encephalomyelitis--A useful model for multiple sclerosis. Alan R. Liss, New York）。
【０３９２】
＜予防研究＞
メスのＳＪＬ／Ｊマウスに、７週齢から１０週齢まで、すなわち２か月の間、予防研究を受けさせる。１つの実施例において、１０匹のマウスがアポゴシポールを受ける一方で、別の１０匹の年齢／性別が同じメスはビヒクルを受ける（「プラセボ群」）。１０匹のマウスは最初に試験されるが、これらの数を、最初のセットの得られたデータを使用して行なわれた検出力分析に従って容易に増やすことができる。マウスに、１日につき約０．２μｍｏｌ／ｋｇから約１．０μｍｏｌ／ｋｇまで与える。投与経路は経口である。しかしながら、静脈内投与も使用することができる。
【０３９３】
ａ）活性ＥＡＥ。活性ＥＡＥを、０日目および７日目に完全フロイントアジュバント（「ＣＦＡ」）中で、例えば約８００μｇのマウス脊髄ホモジェネート（「ＭＳＣＨ」）を有するメスのＳＪＬ／Ｊマウスの免疫処置によって誘発する；Racke et al., J. Neuroimmunol., Vol 46:175-184,（1993）に記載の手順に従う。
【０３９４】
ｂ）受動ＥＡＥ。受動ＥＡＥを、以下の通りミエリン塩基性タンパク質（「ＭＢＰ」）に感受性を持つＴリンパ球の養子免疫伝達によって誘発する：メスのＳＪＬ／Ｊマウス（４〜６週齢）に、ＣＦＡ中４００μｇのＭＢＰで０日目および７日目に免疫を与える。１４日目に、局所的な流出するリンパ節細胞および脾臓を集めて培養する。細胞を、例えば、１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ Ｌａｂｓ，Ｌｏｇａｎ，Ｕｔａｈ）、２ｍＭのＬ−グルタミン（Ｇｉｂｃｏ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）、５×１０−５Ｍの２−メルカプトエタノール（Ｇｉｂｃｏ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）、１％のペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）、および１００μｇ／ｍｌのＭＢＰを含むＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）中で、約４×１０６の細胞／ウェルにて培養する。４日後に、生存可能なＴ細胞ブラストを集め、洗浄し、レシピエントマウスへ腹腔内注入する（５００μＬのＰＢＳ中、細胞に対して１×１０７〜１．５×１０７）。
【０３９５】
マウスを、ＥＡＥの臨床徴候のため毎日の間隔で監視し、０〜３のスケールで以下のように採点する：０．５−−末梢の引きずる尾；１．０−−完全な引きずる尾；１．５−−引きずる尾および後肢の麻痺（不安定な足取り）；２．０−−部分的な後肢の麻痺；３．０−−完全な両側の後肢の麻痺。研究の終わりに、全てのマウスをまた、脊髄のリンパ球浸潤および脱髄のために試験する。統計解析を、アポゴシポールで処置されたマウスが疾患の重症度、炎症及び／又は脱髄を著しく少なくしているか否か測定するために行う。
【０３９６】
＜実施例１７＞
＜ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスモデルにおける糖尿病の予防および処置＞
この実施例は、糖尿病を防ぐ又は処置するためのアポゴシポールの能力を試験するためにＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスモデルの提案された使用を全般的に説明する。
【０３９７】
非肥満糖尿病（ＮＯＤ）のマウスは、主な臨床的な特徴が高い血糖レベル（高血糖症）である自己免疫疾患、この場合はインスリン依存型糖尿病（ＩＤＤＭ）のためのモデルである。高い血糖レベルは、膵臓のランゲルハンス島における、インスリン産生β細胞の免疫により媒介された破壊によって引き起こされる。この破壊は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、マクロファージおよび樹状細胞からなる不均質混合物によって、大規模な細胞浸潤環境及び島（膵島炎）への浸透に付随する。
【０３９８】
炎症のためのＮＯＤマウスモデルについては全般的に前述した。メスのＮＯＤマウスは、膵臓におけるβ細胞の破壊およびおよそ１２〜１４週齢の頃に始まる尿へデキストロースを漏らすことを伴う、ＩＤＤＭのような疾患を自然に進行する。ＮＯＤ膵臓の通常の長期的な組織学的検査は、３〜４週齢に血管を囲む浸潤細胞を実証するが、島は６〜７週に、通常はまだ明確である。浸潤細胞は、その後島に到着し、それらを囲むまたは１つの極に蓄積する。１０〜１２週目に、浸潤細胞は島に浸潤し、島はリンパ球と共に膨張する。これらのマウスにおける糖尿病の発症を発見する、最も容易で最も信頼できる方法は、血液におけるグルコースレベルについて試験することである。
【０３９９】
糖尿病を、例えば、Ａｂｂｏｔｔ Ｍｅｄｉｓｅｎｓｅ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｑ．Ｉ．Ｄ． ｇｌｕｃｏｍｅｔｅｒを使用する静脈血の測定によって評価することができ、また糖尿のために監視することができる（Ｇｌｕｋｅｔｕｒ Ｔｅｓｔ；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。動物を、約１３．７５ｍｍｏｌ／l（２５０ｍｇ／ｄｌ）より高い２つの連続したグルコース測定の後に糖尿病であると考える。糖尿病の発症は、最初の連続した測定値から日付をつける。＞３３ｍｍｏｌ／lの持続した高血糖症の場合において、動物を延長された苦痛を避けるために犠牲にする。
【０４００】
＜予防研究＞
ＮＯＤ／ＬｔＪマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）に、約８〜１０週齢の間、即ち２か月の間、予防研究を受けさせる。マウスを、それらが研究の初めにＩＤＤＭのような病徴に対して陰性であることを保証するために点検する。１つの実施例において、１０匹がアポゴシポールを受ける一方で、別の１０匹の年齢／性別が同じメスはビヒクルを受ける（「プラセボ群」）。１０匹のマウスは最初に試験されるが、これらの数を、最初のセットの得られたデータを使用して行なわれた検出力分析に従って容易に増やすことができる。マウスに、１日につき約０．２μｍｏｌ／ｋｇから約１．０μｍｏｌ／ｋｇまで与える。投与経路は経口である。静脈内投与も使用することができる。
【０４０１】
マウスを、血液グルコースレベルおよび２４時間の尿タンパクおよびグルコースレベルに関して毎日の間隔で監視し、および（フローサイトメトリーを使用して）全血球数、血液白血球の数および活性化状態のため月１回の間隔で監視する。研究の終わりに、全てのマウスをまた、膵臓におけるインスリンレベル、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、マクロファージおよび樹状細胞の存在、同様に膵臓の一般的な形態学に関して試験する。統計解析を、アポゴシポールで処置されたマウスが糖尿病の発症を著しく遅くしているか否か測定するために行う。
【０４０２】
＜処置研究＞
ＮＯＤ／ＬｔＪマウスに約１０〜１２週齢に始まる処置研究を受けさせる。２０匹のマウスはアポゴシポールを受ける一方で、別の２０匹の年齢／性別が同じメスはビヒクルを受ける（「プラセボ群」）。マウスに、１日につき約０．２μｍｏｌ／ｋｇから約１．０μｍｏｌ／ｋｇまで与える。投与経路は経口である。静脈内投与も使用することができる。全てのマウスを、それらが研究の初めにＩＤＤＭのような疾患に対して陽性であることを保証するために試験する（すなわち、約１３．７５ｍｍｏｌ／l（２５０ｍｇ／ｄｌ）より高い２つの連続したグルコースの測定）。１つの実施例において、１０匹のマウスを膵臓の形態学及び膵臓のリンパ球の存在に関して検査するため、処置期間の直後に犠牲にし、一方で各々のグループにおける残りの１０匹のマウスを、（死亡率に対するアポゴシポールの影響を確認するため）死ぬまで追跡調査する。
【０４０３】
マウスを、血液グルコースレベルおよび２４時間の尿タンパクおよびグルコースレベルに関して毎日の間隔で監視し、および（フローサイトメトリーを使用して）全血球数、血液白血球の数および活性化状態に関して月１回の間隔で監視する。研究の終わりに、全てのマウスをまた、膵臓におけるインスリンレベル、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、マクロファージおよび樹状細胞の存在、同様に膵臓の一般的な形態学に関して試験する。統計解析を、アポゴシポールで処置されたマウスが血糖レベル、尿グルコースレベル、および死亡率および白血球の数／活性化を著しく低下させているか否か測定するために行なう。
【０４０４】
追跡して行う研究は、選択されたＩＤＤＭ−のような疾患チェックポイントに対するＢＣＬ２の妨害の影響力の評価、アポゴシポールおよび他の従来の薬物の組み合わせた使用が、低減した副作用と共に、よりよい治療上の効果を与えるか否かの評価、アポゴシポールによる全身の免疫抑制のレベルの評価、およびヒト糖尿病におけるＢＣＬ２ファミリーメンバー活性化のレベルの評価を含む。
【０４０５】
＜実施例１８＞
＜ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスにおけるアポゴシポール活性および毒性の研究＞
毒性および効果の研究を、ゴシポールとアポゴシポールを比較するためにマウスにおいて行った。０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇ ｐ．ｏ．の１日量にて、ゴシポールで処置されたＢｌｂ／ｃマウスにおける％死亡率は、３週目の終わりまでに１００％であった。ゴシポールで処置されたマウスは、以下の毒性：ＧＩ毒性（部分的な麻痺性イレウス）、血液学の毒性（リンパ球減少症）、肝毒（ＡＬＴとＡＳＴの血中濃度の上昇）、体重損失および心毒性（cardic toxicity）を進行し、および死因は、ゴシポールで処置されたマウスの心不全であった。
【０４０６】
図５Ａおよび５Ｂは、ゴシポール対アポゴシポールの毒性の特性を更に図示する。図５Ａは、若く健康なＢａｌｂ／ｃマウス（７週齢のメス、１つのグループにつき６匹のマウス）における％生存を示す。マウスに３週間、０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇ、ＱＤ×５の１日量でアポゴシポール、ゴシポールまたはビヒクルコントロール（vehicle-control）を経口投与した。％生存は、ゴシポールでの処置の３週目の終わりに０まで落ち、一方で％生存はアポゴシポールまたはビヒクルコントロールで処置された群においては高いままであった。
【０４０７】
図５Ｂは、３週間、０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇ、ＱＤ×５の１日量でアポゴシポール、ゴシポールまたはビヒクルコントロールでの処置の全期間中に監視された、体重における変化を図示する。データは、グラム（平均±標準偏差）で表した。
【０４０８】
図５Ａおよび５Ｂによって提供されるデータから見てわかるように、アポゴシポールは、これらのすべてのカテゴリーにおけるゴシポールほど有毒ではなく、アポゴシポールは処置の全期間中、Ｅ．Ｃ．Ｇ配列における任意の異常な変化を誘発しなかった。ゴシポールで処置されたマウスは、薄汚れた体毛と共に不活発（lethagic）になり、一方でアポゴシポールまたはビヒクル対照で処置されたマウスは処置期間中、体重の損失が無く活動的で、一見したところでは、健康なままだった。ビヒクルコントロールマウスと同様にアポゴシポールで処置されたマウス（ゴマ油中０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇのアスコルビン酸）も、ＭＰ１５０ Ｂｉｏｐａｃシステム（第３の電極＝接地）の使用によって、２つの電極を用いて正常なＥ．Ｃ．Ｇ．パターンを明らかにした。加えて、ビヒクル対照マウスと同様にアポゴシポールで処置されたマウスも、超音波診断シネマ（３００のフレーム）で正常な排便を示し、一方、体重の損失は処置の全経過中に示されなかった。６匹のアポゴシポールで処置されたマウスのうちの１匹を、処置の１８日目に死亡した状態で発見した。このマウスは、死ぬ前日までは見たところ健康であり、死因はこの瞬間では不明である。
【０４０９】
アポゴシポールは、０．２４ｍｍｏｌ／ｋｇ，ｐ．ｏ．の１日量でＳＣＬＣ Ｈ１４６細胞株を移植されたヌードマウスにおいて耐容性が良好であり（致死および体重の損失はない）、アポゴシポールの抗腫瘍効果を立証した。アスコルビン酸安定化アポゴシポールは、光がある、または光のない窒素ガスまたは空気下で、４℃または室温で貯蔵された場合、２．５週間安定していた。
【０４１０】
＜毒性＞
アポゴシポールは、ゴシポールほど有毒ではないことが測定された。ゴシポールおよびアポゴシポールの毒性を、正常なメスのＢａｌｂ／ｃマウスにおいて比較した。予備最大耐用量（ＭＴＤ）の研究は、経口または腹腔内投与によって送達されたとしても、アポゴシポールがゴシポールほど有毒ではなかったことを示唆した。以前のＮＣＩが後援した研究は、ラセミ体ゴシポールおよび（−）ゴシポールが致命的でなく、２１日までの間毎日０．０６ｍｍｏｌ／ｋｇで経口的に投薬された場合、抗腫瘍活性を示すことを測定した。したがって、経口投与されたゴシポールおよびアポゴシポールを、この用量の２倍で比較した；動物に０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇを投薬した。アポゴシポールがこの弱い酸（これは、貯蔵上の合成の安定を与える）と共に１：１のモル比で処方されるので、アスコルビンをコントロールとして利用した。化合物またはビヒクルコントロールを、３週間以上１５回投薬し、５日連続（月曜〜金曜）で化合物を与え、週末に休止する。
【０４１１】
＜ＢＣＬ−２トランスジェニックマウス＞
ＢＣＬ−２を発現するトランスジェニックマウスを、Ｂ６株のように記載した。ＢＣＬ−２導入遺伝子は、t（１４；１８）転座の小型遺伝子版であり、その中でヒトＢＣＬ−２遺伝子が免疫グロブリン重鎖（ＩｇＨ）座および関連するＩＧＨエンハンサーに融合される。導入遺伝子を、Ｂａｌｂ／ｃバックグラウンドに増やした。
【０４１２】
＜患者の試験体＞
ＣＬＬを患う患者からの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、ＣＬＬ研究グループ（CLL Research Consortium）（ＣＲＣ）組織バンク（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から得た。血液サンプルを、インフォームドコンセントを得た後に集めた。ＰＢＭＣを、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ １０７７（Ｓｉｇｍｅ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ ６３１７８）を使用する密度勾配遠心分離によって分離した。全ての患者は、ＣＬＬの診断のためのＮＣＩ ＩＷＣＬＬ基準を満たした。フローサイトメトリーによって評価されるように、使用したサンプルは≧９５％のＣＤ１９およびＣＤ５陽性細胞を含んだ。ＣＬＬサンプルを、５％のＣＯ２：９５％の空気において、３７℃で１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）（ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｌｏｇａｎ，Ｕｔａｈ ８４３２１ ｏｒ Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）を含むＲＰＭＩ培地において培養した。
【０４１３】
＜ゴシポールおよびアポゴシポールの製剤および処方＞
アポゴシポール（ＮＳＣ７３６６３０）を、１：１のモル比でアスコルビン酸と共に結晶化した。ゴシポール（ＮＳＣ１９０４８）を酢酸の形態で凍結乾燥した。両方の化合物をＮＣＩ−ＤＴＰ（ＲＡＩＤプログラム）によって提供した。化合物を経口投与の直前に１００％のゴマ油中に溶かした。ビヒクルコントロールは、１００％のゴマ油中で対応する濃度の懸濁されたアスコルビン酸から成った。
【０４１４】
＜マウスの実験＞
ゴシポールおよびアポゴシポールを、ストレート形の経口の胃管栄養注射針（１８Ｇ−３′′Ｓｔｒａｉｇｈｔ ２．２５ｍｍ ｂａｌｌ，Ｂｒａｉｎｔｒｅｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．）を使用して、０．０６ｍｍｏｌ／ｋｇまたは０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇの用量で、毎日マウスに経口投与した。投与の量は１０ｍｌ／ｋｇ、すなわち、典型的には２０ｇｍのマウスにつき０．２ｍＬであった。研究の開始時に７〜８週齢の正常なＢａｌｂ／ｃマウスを毒性試験のために利用し、一方で＞６月齢のＢａｌｂ／ｃバックグラウンド上のトランスジェニックマウスを効果研究のために利用した。年齢が同じ、性別が同じマウスに、投薬を再開する前に、２日間休止した後、５日連続（月曜日〜金曜日）に多くの毎日の投薬を使用して、通常毎週５回投薬した。ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスに関しては、脾臓のサイズを毎週、超音波診断（Ｖｉｓｕａｌｓｏｎｉｃｓ）によって、及びデジタルキャリパーを使用する理学的検査によって長期的に監視した。処置の終わりでは、マウスを０．７ｍｌのアベルチンの腹腔内（ｉ．ｐ．）注射によって犠牲にし、全血を、イエロートップ血清セパレーターチューブ（Yellow-Top Serum Separator tube）（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｆｌａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ ０７４１７−１８８５）へと集めた。脾臓を取り除き、重さを量った。
【０４１５】
＜血液学研究＞
全血（２５０μＬ）を、麻酔をかけられたマウスの心臓穿刺を介してまたは上腕動脈の切断を介して、ＥＤＴＡをコーティングしたガラス管（ｐｕｒｐｌｅ ｔｏｐ；ＭＩＣＲＯＴＡＩＮＥＲ Ｂｒａｎｄ Ｔｕｂｅ ｗｉｔｈ ＥＤＴＡ，Ｃａｔａｌｏｇｕｅ ＃３６５９７３，Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ ０７４１７−１８８５）の中に集めた。徹底した混合の後、試験体をＶｅｔＳｃａｎ ＨＭ２（Ａｂａｘｉｓ Ｉｎｃ．， Ｕｎｉｏｎ Ｃｉｔｙ，ＣＡ ９４５８７）血液学解析器を使用して分析し、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血小板（ＰＬＴ）数、白血球の差異（％リンパ球、％単球および％顆粒球を含む）、ヘマトクリット（Ｈｔ）、およびヘモグロビン（Ｈｂ）を測定した。
【０４１６】
図６Ａ−６Ｃは、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの血液学の特性を図示する。マウスに３週間、０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇ、ＱＤ×５の１日量でアポゴシポール、ゴシポールまたはビヒクルコントロールを経口投与した（１グループにつき６匹のマウス）。血液学の特性を、ビヒクルコントロールまたはアポゴシポールでの処置の終わり、またはゴシポールで処置されたマウスの死亡時刻にて、自動化されたＨＭ２血液学解析器（Ａｂａｘｉｓ Ｉｎｃ．， Ｕｎｉｏｎ Ｃｉｔｙ，ＣＡ ９４５８７）の使用によって分析した。
【０４１７】
図６ＡはＷＢＣ（左のパネル）およびＲＢＣ（右のパネル）を示す。図に示すように、ＷＢＣとＲＢＣの両方は、ゴシポールとアポゴシポールでの処置に影響されなかった。図６Ｂは、ヘモグロビン（Ｈｂ）（左のパネル）、およびヘマトクリット（Ｈｔ）（右のパネル）に関するデータを示す。図に示すように、ＨｂとＨｔの両方は、ゴシポールとアポゴシポールでの処置に影響されなかった。最終的に、図２Ｃはリンパ球数（左のパネル）および血小板数：（右のパネル）に関するデータを提供する。図に示すように、ゴシポールはリンパ球減少症を誘発し、一方でアポゴシポールは、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおいてリンパ球減少症を誘発しなかった。
【０４１８】
＜血液生化学検査＞
全血のおよそ５００μＬを、ガラス管（ｙｅｌｌｏｗ−ｔｏｐ；ＭＩＣＲＯＴＡＩＮＥＲ Ｂｒａｎｄ，Ｓｅｒｕｍ Ｓｅｐａｒａｔｏｒ Ｔｕｂｅ，Ｃａｔａｌｏｇｕｅ ＃３６５９５６，Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｆｌａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ ０７４１７−１８８５）の中に集め、３０分間冷凍し、その後２分間１２０００ｒ．ｐ．ｍ．（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ ５４１５Ｃ）で遠心分離機にかけ、細胞およびフィブリン塊から血清を分離した。結果として生じる血清標本を、自動化血液化学解析器（"ＣＯＢＡＳ ＭＩＲＡ Ｃｌａｓｓｉｃ"；Ｒｏｃｈｅ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ ４６２５０−０４１４）を使用して分析し、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、血中尿素窒素（ＢＵＮ）、およびクレアチンを測定した。
【０４１９】
図７は、アポゴシポールまたはゴシポールで処置されたマウスの相対的な血液化学特性を図示する実験データを提供する。マウスに３週間、０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇ、ＱＤ×５の１日用量でアポゴシポール、ゴシポールまたはビヒクルコントロールを経口投与した（１つのグループ当たり６匹のマウス）。図に示すように、ゴシポールはＡＬＴの血中濃度の上昇を誘発し、アポゴシポールはゴシポールほど肝臓に有毒ではなかった。
【０４２０】
＜超音波画像診断＞
胃および腸を試験し、また膨張の証拠、ＧＩ毒性の指標のための超音波によって撮像する。簡潔に言うと、マウスにイソフルオラン（５％）および酸素ガス（９５％）の混合物を使用して麻酔をかけ、アクアゲル潤滑ゲル（Ｐａｒｋｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ ０７００４）を使用して熱したテーブル上で拘束し、腹部の毛を、化学的脱毛薬剤（Ｎａｉｒ（商標） Ｈａｉｒ Ｒｅｍｏｖａｌ，Ｃｈｕｒｃｈ ＆ Ｄｗｉｇｈｔ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．０８５４３）で取り除いた。Ａｑｕａｓｏｎｉｃ１００超音波伝送ゲル（Ｐａｒｋｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ ０７００４）を、高周波プローブを使用して画像化する前に腹に塗り、ガスおよび腸の膨張を評価した。
【０４２１】
＜心臓毒性＞
超音波診断の直後に、麻酔をかけられたマウスの心電図（ＥＣＧ）分析を、ＭＰ１５０バイオパックシステムを使用して行なった。
【０４２２】
＜組織学＞
肝臓、腎臓、脾臓、心臓、胃、小腸、大腸および肺を含む重要臓器を、３日間ｚ−ＦＩＸ溶液（ＣＯＭＰＡＮＹ？）の中に固定し、リン酸緩衝生理食ブライン（ＰＢＳ）[ｐＨ７．４]で３回洗い流し、その後、パラフィンブロックの中に埋め込んだ。薄片を切断し（０．５ｕｍ）、ヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色し、組織学の異常のため光学顕微鏡観察法によって評価した。加えて、染色されてない切片を、末端デオキシヌクレオチド転移酵素の末端標識（ＴＵＮＥＬ）方法によって分析し、アポトーシスを示すＤＮＡフラグメンテーションで細胞を染色した。
【０４２３】
＜脾臓細胞の隔離＞
脾臓を犠牲になったマウスから切除し、細胞浮遊をマウスの赤血球を溶血するキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）で処理した。総脾臓細胞数を、血球計数器を使用するトリパンブルー色素排除法によって測定した。Ｂリンパ球のパーセンテージを、蛍光活性化細胞選別装置（ＦＡＣＳ）分析（ＦＡＣＳ−ＣＡＮＴＯ，Ｂｅｃｔｉｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＩｎｃ．，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）によって測定し、続いてＰｈｙｃｏ−エリスリン（ＰＥ）と結合した抗ＣＤ１９または抗Ｂ２２０抗体（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ．９５１３１）で細胞を染色した。
【０４２４】
＜細胞培養と細胞毒性の研究＞
脾臓細胞を、１０％のウシ胎児血清（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）およびペニシリン／ストレプトマイシン（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）を含む、ＲＰＭＩ １６４０培地（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）において、１×１０６細胞／ｍＬにて懸濁した。ＲＳ１１８４６、ＤＯＨＨ２および３８０の細胞を含む、ヒトＢ−ＣＬＬ細胞および３Ｂ−ＮＨＬ細胞株を、１０％のウシ胎児血清（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）およびペニシリン／ストレプトマイシン（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）を含む、ＲＰＭＩ １６４０培地（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ ２０１７１）中で培養した。細胞を、１〜２日間、ゴシポール、アポゴシポール、またはアスコルビン酸の様々な濃度で培養した。生存細胞のパーセンテージを、アポトーシス検出キット（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ Ｉｎｃ．）を使用して、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−およびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）標識化、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳｏｒｔ；Ｂｅｃｔｉｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｉｎｃ．；Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）によって染色された細胞を分析することによって測定した。ａｎｎｅｘｉｎ−Ｖ陰性およびＰＩ陰性であった細胞を、生存可能であると考えた。
【０４２５】
図８は、アポゴシポールとゴシポールによる、ＤＯＨＨ２、ＲＳ１１８４６および３８０を含む、ＮＨＬ Ｂ細胞株のアポトーシス誘発の比較を図示する実験データを提供する。ＤＯＨＨ２、ＲＳ１１８４６および３８０を含むＮＨＬ Ｂ細胞株を、図で示されるようなゴシポールおよびアポゴシポールが存在しないおよびゴシポールおよびアポゴシポールの様々な濃度が存在する状態で、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ培地において４８時間培養した。
【０４２６】
４８時間培養した後、％生存率を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣ／ＰＩアポトーシス検出キット（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ Ｉｎｃ．）の使用によって細胞を染色した後、ＦＡＣＳｏｒｔによって測定した。生存細胞を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ陰性、ＰＩ陰性細胞によって決定した。ＤＯＨＨ２とＲＳ１１８４６の細胞株は、およそ３μＭのＩＣ５０を有するインビトロのゴシポールおよびアポゴシポールに対してわずかにより敏感であり、一方で３８０の細胞株は、ゴシポールとアポゴシポールに対してわずかにより耐性があった。全ての３つのＮＨＬ Ｂリンパ腫細胞株において、アポゴシポールはゴシポールよりわずかに強力であったが、それらの性能はほぼ匹敵した。
【０４２７】
図９は、トランスジェニックマウスから培養されたマウスＢ細胞に対する、ゴシポールおよびアポゴシポールの活性の比較：ＢＣＬ−２対ＢＣＬ−２／ＴＲＡＦ２ＤＮを図示する実験データを提供する。脾臓組織を、ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスおよびＢＣＬ−２／ＴＲＡＦ２ＤＮマウスから取り除き、脾臓細胞を、製造業者のマニュアルに従ってマウス赤血球を溶解するキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）の使用によって分離した。
【０４２８】
脾臓細胞を、図で示されるようなゴシポールおよびアポゴシポールが存在しないおよびゴシポールおよびアポゴシポールの様々な濃度が存在する状態で、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ培地において１８時間培養した。１８時間の培養の後、脾臓細胞の％生存率を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣ／ＰＩアポトーシス検出キット（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ Ｉｎｃ．）の使用によって細胞を染色した後、ＦＡＣＳｏｒｔによって測定した。生存細胞を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ陰性、ＰＩ陰性細胞によって決定した。ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスにおいて、アポゴシポールは、アポゴシポールに関するおよそ１−２μＭのＩＣ５０対ゴシポールに関する１０μＭのＩＣ５０を有する、培養されたＢ細胞に対するアポトーシスの誘発において、ゴシポールより数倍強力であった。対照的に、ＢＣＬ−２／ＴＲＡＦ２ＤＮマウスからのマウスＢ細胞は、ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスより、アポゴシポールおよびゴシポールの両方に対しておよそ１０倍耐性があった。
【０４２９】
図１０は、培養されたＣＬＬ Ｂ細胞のアポトーシスのアポゴシポールおよびゴシポール誘発の比較を図示する実験データを提供する。ＣＬＬサンプルを、図で示されるようなゴシポールおよびアポゴシポールが存在しないおよびゴシポールおよびアポゴシポールの様々な濃度が存在する状態において、５％のＣＯ２で、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ培地中で、４８時間３７℃で培養した。
【０４３０】
４８時間培養した後、％生存率を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＦＩＴＣ／ＰＩアポトーシス検出キット（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ Ｉｎｃ．）の使用によって細胞を染色した後、ＦＡＣＳｏｒｔによって測定した。生存細胞を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ陰性、ＰＩ陰性細胞によって決定した。アポゴシポールは、インビトロで、培養されたＣＬＬ Ｂ細胞に対するゴシポールよりおよそ３倍強力であった。二元配置のＡＮＯＶＡ分析による、アポゴシポールグループとゴシポールグループの間のアポトーシス誘発において、有意な差異があった（ｐ＜０．０２５）。
【０４３１】
図１１Ａ及び１１Ｂは、ＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスにおけるアポゴシポール活性を図示する実験データを提供する。図１１Ａは、（０．０６ｍｍｏｌ／ｋｇでの）低用量研究の結果を示し、および図１１Ｂは−−高用量研究（０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇでの）の結果を示す。年齢が同じ、性別が同じＢＣＬ−２トランスジェニックマウスを、有効性研究のために使用した。ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスは、時間の関数として、脾腫により特徴付けられるような劣等種のＢ細胞リンパ腫を自然に進行した。ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスにおいて、疾患の進行を２つの段階に分ける；最初の段階において、疾患をＢ６マウス中の過剰発現されたＢＣＬ−２により脾臓におけるＢ細胞の拡張の結果としての脾腫により特徴付け、第二段階において、別の遺伝的打撃（複数）（genetic hit）が起こり、脾腫と同様、かさ高いリンパ節症により特徴付けられるような、播種性リンパ腫を結果として生じ得る。
【０４３２】
この研究において、初期段階におけるＢＣＬ−２トランスジェニックマウスを、この有効性研究に使用した。未処置のＢＣＬ−２トランスジェニックマウスを用いた個別研究において、脾臓の湿重量は１９５ｍｇから３３５ｍｇまでの範囲に及び、脾臓の湿重量は、年齢が同じ性別が同じＢＣＬ−２トランスジェニックマウスにおいてほぼ比較可能であることが分かった。１：１のモル比でのアスコルビン酸により安定したアポゴシポール、１：１のモル比での酢酸により安定したゴシポール、およびビヒクルコントロール（１００％のゴマ油中のアスコルビン酸）を、ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスに、継続して３週間１日１回（ＱＤＸ５）、経口投与した。処置の終わりでは、ＢＣＬ−２トランスジェニックマウスを、０．７ｍｌのアベルチン（麻酔の溶液）の腹膜腔内注射によって犠牲にして、脾臓を取り除き、重さを量った。脾臓細胞を、マウス赤血球を溶解するキット（ＲＤ Ｓｙｓｔｅｍｓ）の使用によって分離した。総脾臓細胞数を、トリパンブルー排除アッセイによって測定した。％Ｂ細胞数を、ＣＤ−５、Ｂ細胞マーカーで細胞を染色した後、ＦＡＣＳ分析によって測定した。相関的なデータを、図１１Ａおよび１１Ｂによって示す。
【０４３３】
図１１Ａからわかるように、０．０６ｍｍｏｌ／ｋｇの低用量では、脾臓におけるＢ細胞数と同様に脾臓の湿重量の減少によっても証明されるように、ゴシポールとアポゴシポールの両方は耐容性が良く、脾腫の退縮を誘発した。アポゴシポールは、優位な程度（脾臓の湿重量に関してはｐ＜０．０３、脾臓のＢ細胞数に関してはＰ＜０．０５）にまで脾臓の退収を誘発し、一方でゴシポールは、相当な程度ではあるが優位ではない脾臓の退収を誘発した。
【０４３４】
図１１Ｂからわかるように、０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇの高用量では、ゴシポールはＢＣＬ−２トランスジェニックマウスに耐容性がなく、一方でアポゴシポールは０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇの高線量でのＢＣＬ−２のトランスジェニックマウスに耐容性が良かった。アポゴシポールは、優位な程度（脾臓の湿重量に関してはｐ＜０．００１、脾臓のＢ細胞数に関してはＰ＜０．０００１）にまで脾腫の退収を誘発した。年齢が同じ、性別が同じＢＣＬ−２トランスジェニックマウスを、アポゴシポール治療の終了後に脾臓の退収のために評価し、脾臓の大きさを０．１２ｍｍｏｌ／ｋｇの１日用量の半分によってほぼ低減した。
【０４３５】
＜実施例１９＞
＜ヒト癌細胞に対する化合物の細胞毒性活性の評価＞
本実施例は、ヒト癌細胞に対するゴシポールの効果を示す。ヒト癌細胞に対する化合物の細胞毒性活性を評価するために、それらの生物活性を、２つの乳癌細胞株：ＭＣＦ７（ＢＣＬ−２／ＢＣＬ−ＸＬの高発現体（high expressor））およびＺＲ７５−ｌ（ＢＣＬ−２／ＢＣＬ−ｘＬの低発現体（low expressor））を使用するＸＴＴ色素減少アッセイを使用して試験した。ゴシポールはそれぞれ、ＭＣＦ７およびＺＲ７５−ｌ細胞にとって細胞毒性薬剤であり、１３．２μＭおよび８．４μＭのＩＣ５０値で、用量依存性の方法において細胞の生存率を低減する。しかしながら、プルプロガリンは、その親水性の形質（ＣｌｏｇＰ−０．７）により潜在的に、これらのアッセイにおいて明らかな活性を示さなかった。
【０４３６】
この観察と一致して、（〜２．５のそのＣｌｏｇＰに基づいて）よりよい細胞膜の透過性特性を有すると予測される、プルプロガリン派生物５Ｄｌは、〜５０μＭのＺＲ７５−ｌ細胞株のＩＣ５０値で、用量依存性の方法において細胞の生存率を低減した（図示せず）。それ故、化合物の細胞活性をＨｅＬａ細胞で評価し、ＨｅＬａ細胞は化合物の取り込みに関してそれほど選択的でないと知られている。ＨｅＬａ細胞生存率アッセイにより得られた阻害データは、ｒ＝０．９の相関係数で、ＢＣＬ−ＸＬを有するインビトロの結合データに類似する（ｐ＝０．００１）。
【０４３７】
Ｂａｋペプチドを有する複合体において見出されたＢＣＬ−ＸＬ形態を使用する、Ｓｙｂｙｌ（ＴＲＩＰＯＳ）で実施されたＦｌｅｘＸソフトウェア（Kramer et al., Proteins, 37:228 （1999））を用いたドッキング研究は、複合体におけるＢａｋの螺旋状のＢＨ３ペプチドによって通常占められる深い疎水性の間隙において、ゴシポールのための最適な場所を示した。ゴシポールの（＋）および（−）立体異性体の両方をドッキングしたが、これらは、（−）ゴシポールが細胞毒性薬剤としての（＋）ゴシポールより１０倍強力であることを示した以前の細胞ベースのアッセイとは、異なる活性を示す。スコアリング関数によって測定されたような適合の良さ、およびＳｙｂｙｌのＤＯＣＫルーチンでの最小化の後の分子間エネルギーは、（−）ゴシポール（−３２．７ｋｃａｌ／ｍｏｌ）対（＋）ゴシポール（−２５Ｋｃａ１／ｍｏｌ）に対して、これらの観察に一致して、相当より良いものであった。ゴシポールの両方の立体異性体の全体的なポジショニングは非常に類似している。
【０４３８】
＜蛍光偏光法アッセイ（ＦＰ Ａ）＞
ＦＰ Ａアッセイを、ＬＪＬ Ａｎａｌｙｓｔ ＨＴ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏ．，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）を使用して、フルオレセイン標識Ｂａｄペプチド（ＮＬ Ｗ ＡＡＱＲＹＧＲＥＬＲＲＭＳＤ−Ｋ（ＦＩＴＣ）−ＦＶＤ）（Ｓｙｎｐｅｐ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｄｕｂｌｉｎ，ＣＡ）で実行した。すべてのストックおよびサンプルのための稀釈緩衝液は、５０μＭのＴｒｉｓ−ＢｉｓのｐＨ７．４、０．０１％のウシのγグロブリンであった。ゴシポールの一連の２倍の希釈液を調製し、すなわち稀釈緩衝液中で１００μＭ、５０のμＭ、０．１μＭまで下げて調製した。各々の管に、３０ｎＭのＢＣＬ−ＸＬおよび４ｎＭの蛍光標識されたペプチドを含む溶液を加えた。管を室温で５分間インキュベートし、２０μＬの各々の反応混合物を、９６−ウェルブラックＰＳ、ＨＥマイクロプレート（ＬＪＬ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ｃｏ）に移した。全てのアッセイを、ゴシポールを入れない空のウェルと共に、４つ組で行った。その後、プレートを総強度のために読み取り、極性形成（ｍＰユニットにおける）を測定した。化合物とＦＩＴＣ−ＢＨ３ペプチドの間の任意の相互作用を評価するために、コントロールはタンパク質の欠如下で用量反応測定を含んだ。最終的な効果を減算によって考慮に入れた。
【０４３９】
＜ＮＭＲ分光学＞
ＢＣＬ−ＸＬに関する２Ｄ［１５Ｎ，１Ｈ］−ＴＲＯＳＹスペクトルを、１５Ｎ−標識ＢＣＬ−ＸＬの０．５ｍＭのサンプルで測定した。１５Ｎ−標識化および標識化されていないＢＣＬ−ＸＬを、既知の方法に従って調合して精製した。化学シフトマッピング及びドッキング研究については、Ｂａｋペプチド（ＰＤＢコード１ＢＸＬ）を有する複合体中のＢＣＬ−ＸＬの三次元構造を使用した。標識化タンパク質での化学シフトマッピングに加えて、ＷａｔｅｒＬＯＧＳＹ実験のようなＴ１ｐ測定および飽和移動実験も、研究された化合物のＢＣＬ−ＸＬへの結合をさらに確認するために行った。
【０４４０】
全ての実験を、４つのｒｆチャンネルおよびＺ軸パルス磁場勾配の両方を備えた、５００ＭＨｚ Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ＋分光計または６００ＭＨｚ Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ６００分光計により行った。選択的な水飽和を、１０ｍｓの遅延によって間隔を置かれた７ｍｓの持続時間の選択的な連続のＩＢＵＲＰ２パルスにより行った。使用された合計の飽和時間は２．５ｓであり、Ｔ１ｐシリーズを、可変長のスピンロックパルスで測定した。その後、測定を、１０μＭのタンパク質が存在しないおよび存在する状態において１００μＭの化合物で、１ｍｓ、１０ｍｓ、５０ｍｓ、１５０ｍｓ、２００ｍｓ、２５０ｍｓおよび３００ｍｓのスピンロック時間で行った。すべての実験において、残留水分シグナルの脱位相をＷＡＴＥＲＧＡＴＥ配列により得た。
【０４４１】
＜分子モデリング＞
分子モデリング研究を、ソフトウェアパッケージＳｙｂｙｌバージョン６．９（ＴＲＩＰＯＳ）を備えた様々なＲ１２０００ ＳＧＩオクタンワークステーション上で行った。ゴシポールのドッキングされた構造を、Ｓｙｂｙｌで実施されるように、ＦｌｅｘＸによって最初に得た。２つの計算を行った。最初に、全ての結合部位の捻れ角度を固定し続け、一方、第２の側鎖において、捻れ角度を自由に変化させた。側鎖が自由に回転することができた時、３０の最良の溶液のための平均スコアリング機能は、わずかにより低かった。モデルにおける側鎖の位置は、初期値から実質的に変わらなかった。（＋）ゴシポールに関するスコアリング機能は、（−）ゴシポールより劣っていたが、両方の立体異性体の全体的なポジショニングは非常に類似していた。
【０４４２】
結果得られた最良のスコアリング構造は、その後、その位置を固定し続けるＳＹＢＹＬのルーチンＤＯＣＫの使用によりエネルギー最小化された（energy minimized）。ＤＯＣＫ最小化の後のリガンドのエネルギーは、エネルギーのそれらの大域的最小点から５ｋｃａｌ／ｍｏｌ以内にあった。化合物の重ね合わせを、ＳＹＢＹＬのルーチンＭＵＬＴＩＦＩＴによって得た。三次元構造を示す色つきの図を、プログラムＳＹＢＹＬおよびＭＯＬＭＯＬにより準備した。
【０４４３】
＜癌細胞生存に対する化合物の阻害作用＞
培養中の癌細胞の生存率に対する化合物の影響を、ＭＣＦ７およびＺＲ７５−１細胞株を用いて、ＸＴＴアッセイの使用により監視した。ＭＣＦ７細胞を、ｌ０−１０Ｍのインスリン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムおよびグルタミンで補われた、１０％のウシ胎児血清、ペニシリン／ストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ中で成長させた。ＺＲ７５−１細胞を、ＨＥＰＥＳ緩衝液、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムおよびグルタミンで補われた、１０％のウシ胎児血清、ペニシリン／ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ中で成長させた。細胞を、マイコプラズマ汚染について規則的に試験した。細胞を、１つのウェル当たり１０００個の細胞の始原細胞密度にて３つ組で播種した。空のウェルには細胞を入れなかった。
【０４４４】
ゴシポール、プルプロガリンおよび５Ｄ１を、０、１、１０および１００μＭの終末濃度で加え、３日間培養した。生存細胞の相対数をＸＴＴアッセイによって測定した。簡潔に言うと、９６−ウェルプレートにおいて我々は、各々のウェルに、０．０２５ｍＭのＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）を含む、１ｍｇ／ｍｌのＸＴＴ（2,3-ビス （2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルホフェニル）-5-[（フェニルアミノ）カルボニル]-2H-水酸化テトラゾリウム）（Polysciences, Washington, PA）の、５０μＬの混合物を加えた。９６−ウェルプレートを、ＸＴＴホルマザン産生を可能にするため、さらに４時間再度培養した。その後、各々のプレートの中身を混合し、光学密度を４５０ｎｍ（ＯＤ４５０）の波長で測定した。総ＯＤ４５０を、空のウェルのＯＤ４５０を減算した後に測定した。低い継代のＨｅＬａ細胞（継代数１０と２０の間）を、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ｐｌｕｓ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ｐｃＤＮＡ３−ＢＣＬ−ＸＬまたはコントロールｐｃＤＮＡ３プラスミドでトランスフェクトし、８００μｇ／ｍｌのＧ４１８を含む培地において選択した。ＢＣＬ−ＸＬの免疫ブロット法分析を前述の通り行った。Ｈｅｌａ−トランスフェクタントを、ゴシポール、プルプロガリンおよびその誘導体の様々な投与量（０、１、３、１０および１００μＭ）で処置した。
【０４４５】
＜化学薬品＞
純粋なポリフェノールを、ＳＩＧＭＡ（ゴシポールとプルプロガリン）及び／又はミクロスコアディスカバリーシステム（プルプロガリン誘導体）から得た。参照化合物をChembridge Corp. （San Diego）から得た。ゴシポールを（＋）および（−）異性体のラセミ体混合物として試験した。化合物を１００ｍＭの濃度でＤＭＳＯの中に溶かし、−２０のＤＣで貯蔵した。ＮＭＲ分析を、結合および置換アッセイのためのさらなる稀釈の前に、品質管理として化合物に関して周期的に行なった。ゴシポールの反応度を、１５Ｎ−標識化された試験タンパク質（ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメイン）により試験した。１ｍＭのゴシポールおよび２００μＭのＮ−標識化ＢＩＲ３を含む溶液を２時間培養し、［１５Ｎ，１Ｈ］−相関スペクトルを記録し、ａｐｏ−Ｂｉｒ３のスペクトルと比較した。明らかな差は、スペクトルにおいて観察されなかった。結果を、表１２に示す。
【０４４６】
【表１２】
2012524101.tif 000040
【０４４７】
＜実施例２０＞
＜最大耐容用量（ＭＴＤ）＞
若い雌のＢａｌｂ／ｃマウス（７週齢）に、１００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇおよび６．２５ｍｇ／ｋｇの化合物８ｒを腹腔内に注入し（１つの投与量当たり１匹のマウス）、ＮＣＩでのＤＴＰ（発展的な治療学プログラム）によって提案されたＭＴＤの一般的なプロトコルに従って１４日間、生存、生命徴候、体重減少などについて観察した。化合物８ｒを、エタノール：クロモフォアＥＬ（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒｅ ＥＬ）：食塩水＝１０：１０：８０の比率で、注入の直前に、クロモフォアＥＬおよび食塩水で補われた１００％のエタノールの中に最初に溶かした。研究の終わりに際して、さらなる組織学の評価のため、マウスをＣＯ２によって安楽死させ、重要臓器を集め、室温で３日間ｚ−ＦＩＸ溶液で固定し、ＰＢＳの中で３回すすいだ。
【０４４８】
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Bruncko, M.; Oost, T. K.; Belli, B. A.; Ding, H.; Joseph, M. K.; Kunzer, A.; Martineau, D.; McClellan, W. J.; Mitten, M.; Ng, S. C.; Nimmer, P. M.; Oltersdorf, T.; Park, C. M.; Petros, A. M.; Shoemaker, A. R.; Song, X.; Wang, X.; Wendt, M. D.; Zhang, H.; Fesik, S. W.; Rosenberg, S. H.; Elmore, S. W. Studies leading to potent, dual inhibitors of ＢＣＬ−２ and Bcl-xL. J Med Chem 2007, 50, 641-62.
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Kitada, S.; Kress, C. L.; Krajewska, M.; Jia, L.; Pellecchia, M.; Reed, J. C. ＢＣＬ−２ antagonist apogossypol (NSC736630) displays single-agent activity in ＢＣＬ−２-transgenic mice and has superior efficacy with less toxicity compared with gossypol (NSC19048). Blood 2008, 111, 3211-9.
【０４９６】
本開示は上記の実施例に関して記載されてきたが、修飾と変更が本開示の精神および範囲内に含まれることは理解される。従って、本開示は以下の請求項によってのみ限定される。
【図１Ｂ】
2012524101.tif 000062
【図１Ｄ】
2012524101.tif 000063
【図３Ａ】
2012524101.tif 000064
【図５Ａ】
2012524101.tif 000065
【図６Ｃ】
2012524101.tif 000066
【図１０】
2012524101.tif 000067
【図１１Ｂ】
2012524101.tif 000068
【図１３Ａ】
2012524101.tif 000069
【図１３Ｂ】
2012524101.tif 000070
【図１４Ａ】
2012524101.tif 000071
【図１５Ｂ】
2012524101.tif 000072
【図１８】
2012524101.tif 000073
【図２０Ａ】
2012524101.tif 000074
【図２０Ｂ】
2012524101.tif 000075
【図１Ａ】
2012524101.tif 000076
【図１Ｃ】
2012524101.tif 000077
【図２Ａ】
2012524101.tif 000078
【図２Ｂ】
2012524101.tif 000079
【図３Ｂ】
2012524101.tif 000080
【図４】
2012524101.tif 000081
【図５Ｂ】
2012524101.tif 000082
【図６Ａ】
2012524101.tif 000083
【図６Ｂ】
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【図７】
2012524101.tif 000085
【図８】
2012524101.tif 000086
【図９】
2012524101.tif 000087
【図１１Ａ】
2012524101.tif 000088
【図１２】
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【図１３Ｃ】
2012524101.tif 000090
【図１３Ｄ】
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【図１４Ｂ】
2012524101.tif 000092
【図１４Ｃ】
2012524101.tif 000093
【図１４Ｄ】
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【図１５Ａ】
2012524101.tif 000095
【図１５Ｃ】
2012524101.tif 000096
【図１５Ｄ】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１９】
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【図２１Ａ】
2012524101.tif 000101
【図２１Ｂ】
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【国際調査報告】
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2012524101.tif 000104
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