【手続補正書】
【提出日】平成21年7月10日(2009.7.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法であって、
複数の精子細胞を得る工程と、
該複数の精子細胞を選別ストレスにさらす工程と、
所望の特性について該複数の精子細胞を選択する工程と、
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程と、
該第１の維持促進された精子細胞混合物を冷却して、第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物を生成する工程と、
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程と、
該第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を冷凍する工程と、
を含む、方法。
【請求項２】
前記複数の精子細胞を得る工程が複数の哺乳動物精子細胞を得る工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３】
前記複数の哺乳動物精子細胞を得る工程が、ウシの精子細胞、ウマの精子細胞、ブタの精子細胞、ヒツジの精子細胞、シカの精子細胞、イヌの精子細胞、およびイルカ科の精子細胞からなる群から選択される複数の哺乳動物精子細胞を得る工程を含む、請求項２に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４】
所望の特性について前記複数の精子細胞を選択する前記工程が、該複数の精子細胞を選別する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項５】
前記複数の精子細胞を選別する前記工程が、該複数の精子細胞をフローサイトメトリーによって選別する工程を含む、請求項４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項６】
所望の特性について前記複数の精子細胞を選択する前記工程が、該複数の精子細胞を性特性について選択する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項７】
前記複数の精子細胞を性特性について選択する前記工程が、該複数の精子細胞をＸ染色体含有特性およびＹ染色体含有特性からなる群から選択される性特性について選択する工程を含む、請求項６に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項８】
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、動物ベースのタンパク質含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項９】
動物ベースのタンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、リポタンパク質含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項８に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１０】
リポタンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、卵黄含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項９に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１１】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、約５０％未満の卵黄、約４５％未満の卵黄、約４０％未満の卵黄、約３５％未満の卵黄、約３０％未満の卵黄、約２５％未満の卵黄、約２０％未満の卵黄、約１５％未満の卵黄、約１０％未満の卵黄、および約５％未満の卵黄からなる群から選択される卵黄の割合を有する卵黄含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１０に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１２】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、約２０％の卵黄を有する卵黄含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１３】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、卵黄含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて、約０．８％を超える卵黄、約１．６％を超える卵黄、約３．２％を超える卵黄、および約６．４％を超える卵黄からなる群から選択される卵黄の割合を有する第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１２に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１４】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、卵黄含有精子細胞エキステンダーを該複数の選択された精子細胞に加えて、約３．２％の卵黄を有する第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１０に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１５】
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記複数の選択された精子細胞に加えて第１の維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、卵黄ベースのエキステンダー、ミルクベースのエキステンダー、クエン酸エキステンダー、ＴｒｉｓエキステンダーおよびＴＥＳＴエキステンダーからなる群から選択されるタンパク質含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１６】
前記第１の維持促進された精子細胞混合物を冷却して第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物を生成する前記工程が、該第１の維持促進された精子細胞混合物を約１０℃未満、約９℃未満、約８℃未満、約７℃未満、約６℃未満、約５℃未満、約４℃未満、約３℃未満、約２℃未満および約１℃未満からなる群から選択される温度へ冷却する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１７】
前記第１の維持促進された精子細胞混合物を冷却して第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物を生成する前記工程が、該第１の維持促進された精子細胞混合物を約５℃の温度に冷却する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１８】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、グリセロール含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項１９】
グリセロール含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、約３％を超えるグリセロール、約６％を超えるグリセロール、約１２％を超えるグリセロールおよび約２４％を超えるグリセロールからなる群から選択されるグリセロールの割合を有するグリセロール含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１８に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２０】
グリセロール含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、約６％のグリセロールを有するグリセロール含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１８に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２１】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物の量と等しい量を有するタンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２２】
前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物の量と等しい量を有する前記タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを２段階で加える工程をさらに含む、請求項２１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２３】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、滅菌凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２４】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２５】
低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、実質的に液状の凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項２４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２６】
低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、遠心分離に有効な凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項２４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２７】
低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、実質的に均一な密度の凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項２４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２８】
低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、実質的に精子細胞圧縮粒子を含まない凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項２４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項２９】
低密度勾配凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、低粘度凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項２４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３０】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて、約０．４％を超える卵黄、約０．８％を超える卵黄、約１．６％を超える卵黄および約３．２％を超える卵黄からなる群から選択される卵黄の割合を有する第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３１】
タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを前記第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する前記工程が、タンパク質非含有凍結保護物質含有精子細胞エキステンダーを該第１の冷却され維持促進された精子細胞混合物に加えて、約１．６％の卵黄を有する第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を形成する工程を含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３２】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を未浄化状態で維持する工程をさらに含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３３】
前記未浄化の第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物を遠心分離にかける工程をさらに含む、請求項３２に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３４】
前記遠心分離した未浄化の第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の一部をデカントする工程をさらに含む、請求項３３に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３５】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する工程をさらに含む、請求項１に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３６】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、タンパク質含有精子細胞エキステンダーを該第２の維持促進された精子細胞混合物に加える工程を含む、請求項３５に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３７】
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、動物ベースのタンパク質含有精子細胞エキステンダーを該第２の維持促進された精子細胞混合物に加える工程を含む、請求項３６に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３８】
動物ベースのタンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、リポタンパク質含有精子細胞エキステンダーを該第２の維持促進された精子細胞混合物に加える工程を含む、請求項３７に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項３９】
リポタンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、卵黄含有精子細胞エキステンダーを該第２の維持促進された精子細胞混合物に加える工程を含む、請求項３８に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４０】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、約５０％未満の卵黄、約４５％未満の卵黄、約４０％未満の卵黄、約３５％未満の卵黄、約３０％未満の卵黄、約２５％未満の卵黄、約２０％未満の卵黄、約１５％未満の卵黄、約１０％未満の卵黄、および約５％未満の卵黄からなる群から選択される卵黄の割合を有する卵黄含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項３９に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４１】
卵黄含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、約２０％の卵黄を有する卵黄含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項３９に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４２】
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、約３％を超えるグリセロール、約６％を超えるグリセロール、約１２％を超えるグリセロールおよび約２４％を超えるグリセロールからなる群から選択されるグリセロールの割合を有するタンパク質含有精子細胞エキステンダーを加える工程を含む、請求項３６に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４３】
タンパク質含有精子細胞エキステンダーを前記第２の維持促進された精子細胞混合物に加える前記工程が、タンパク質含有精子細胞エキステンダーを、約６％のグリセロールを有する該第２の維持促進された精子細胞混合物に加える工程を含む、請求項３６に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４４】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、該第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を種に適当な冷凍前精子濃度に調節する工程を含む、請求項３５に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４５】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を種に適当な冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、該第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を、ウシの冷凍前精子濃度、ウマの冷凍前精子濃度、ブタの冷凍前精子濃度、ヒツジの冷凍前精子濃度、シカの冷凍前精子濃度、イヌの冷凍前精子濃度およびイルカ科の精子濃度からなる群から選択される冷凍前精子濃度に調節する工程を含む、請求項４４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４６】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を種に適当な冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、該第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を、１ミリリットルにつき約１００，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約５０，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約４０，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約３０，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約２０，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約１５，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約１０，０００，０００未満の数の精子細胞、１ミリリットルにつき約５，０００，０００未満の数の精子細胞および１ミリリットルにつき約２，０００，０００未満の数の精子細胞からなる群から選択される精子濃度に調節する工程を含む、請求項４４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４７】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を種に適当な冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、該第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を１ミリリットルにつき約１０，０００，０００の数の精子細胞に調節する工程を含む、請求項４４に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４８】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約５０％以内、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約２５％以内、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約２０％以内、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約１５％以内、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約１０％以内、一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約５％以内、および一般的な選別精子細胞冷凍方法の冷凍前卵黄含量の約１％以内からなる群から選択される該第２の維持促進された精子細胞混合物の冷凍前卵黄含量を確立する工程を含む、請求項３５に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項４９】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、約５０％未満の卵黄、約４５％未満の卵黄、約４０％未満の卵黄、約３５％未満の卵黄、約３０％未満の卵黄、約２５％未満の卵黄、約２０％未満の卵黄、約１５％未満の卵黄、および約１０％未満の卵黄からなる群から選択される前記第２の維持促進された精子細胞混合物の冷凍前卵黄含量を確立する工程を含む、請求項３５に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。
【請求項５０】
前記第２の冷却され維持促進された精子細胞混合物の精子濃度を冷凍前精子濃度に調節する前記工程が、該第２の維持促進された精子細胞混合物の、約１６．５％の冷凍前卵黄含量を確立する工程を含む、請求項５に記載の選別事象によって損傷した選別精子細胞を冷凍するための方法。