【手続補正書】
【提出日】平成23年10月25日(2011.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の配列：
I.  X1-X2-Cys-X3-X4-X5-X6-X7-Cys-X8-X9（配列番号1）、
ここにおいて、
X1はArg、Phe、HisまたはPro；
X2はSer、Gly、LeuまたはHis；
X3はGly、Asn、IleまたはSer；
X4はSer、TrpまたはGly；
X5はTrp、Ile、LeuまたはVal；
X6はPhe、TrpまたはSer；
X7はProまたはPhe；
X8はSer、Leu、ProまたはPhe；および
X9はAla、Phe、LeuまたはHisである；
および、
II.  Phe-Cys-X18-Val-X19-X20-Phe-X21-His-Cys-X22（配列番号3）、
ここにおいて、
X18はHisまたはTrp；
X19はHisまたはPhe；
X20はAla、Asn、HisまたはPro；
X21はAla、Asn、Asp、Gln、His、Leu、SerまたはVal；および
X22はAla、Asp、His、Leu、PheまたはSerである、
からなる群から選択される配列を包含するアミノ酸配列を有する、第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドと結合するポリペプチド。
【請求項２】
以下の配列：
Phe-Gly-Cys-Ser-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Pro-Phe; 
Pro-His-Cys-Asn-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Ser-Leu;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Ile-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-His-Cys-Ile-Gly-Val-Trp-Phe-Cys-Leu-His;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Val-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-His-Pro-Phe-Ala-His-Cys-Leu;
Phe-Cys-His-Val-Phe-His-Phe-Ser-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Asn-Phe-Ser-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Gln-His-Cys-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-His-His-Cys-Phe;
Phe-Cys-His-Val-Phe-Asn-Phe-Val-His-Cys-Ser; および
Phe-Cys-His-Val-Phe-Pro-Phe-Leu-His-Cys-Asp
からなる群から選択されるアミノ酸配列を包含する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
以下の配列：
AEGTGDFHCIGVWFCLHDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFGCSWLFPCPFDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFAFDHCHDPGPEGGGS-NHNH2; 
AEGTGDFCWVFPFQHCADPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFPFHHCFDPGPEGGGS-NHNH2;および
アセチル-AEGTGDRLCSWVSPCSADPEGGGSK
からなる群から選択されるアミノ酸配列を包含する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
100mM NH4OAc、0.8M NaCl、1M ソルビトール、0.02% Tween 80、3mM EDTA、5mM CaCl2、pH6.3を含んでなる溶液中で、ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドと結合し、50%エチレングリコールを含有する溶液中で、上記ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドから解離する能力を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
50%エチレングリコール、20mM His、0.25M NaCl、20mM CaCl2、0.01% Tween 80、pH7を含んでなる溶液と接触させたとき、上記ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドから解離する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドを、それを含有すると予測される溶液中で、検出する方法であって、
(a)上記溶液を、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチドと接触させること、および
(b)結合が、上記ポリペプチドと上記ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドの間に生じたかどうかを判定すること、 
を含んでなる方法。
【請求項７】
ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドを精製する方法であって、
(a)請求項１〜３のいずれか一項に記載の結合分子を固相支持体に固定化すること；
(b)ヒト第VIII因子および／または第VIII因子様ポリペプチドを含有する溶液を上記固相支持体と接触させること；その後、
(c)上記固相支持体から溶液を分離すること
を含んでなる方法。
【請求項８】
上記ポリペプチドが、以下の配列：
Phe-Gly-Cys-Ser-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Pro-Phe; 
Pro-His-Cys-Asn-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Ser-Leu;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Ile-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-His-Cys-Ile-Gly-Val-Trp-Phe-Cys-Leu-His;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Val-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-His-Pro-Phe-Ala-His-Cys-Leu;
Phe-Cys-His-Val-Phe-His-Phe-Ser-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Asn-Phe-Ser-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Gln-His-Cys-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-His-His-Cys-Phe;
Phe-Cys-His-Val-Phe-Asn-Phe-Val-His-Cys-Ser; および
Phe-Cys-His-Val-Phe-Pro-Phe-Leu-His-Cys-Asp
からなる群から選択されるアミノ酸配列を包含するポリペプチドである、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
上記ポリペプチドが、以下の配列：
AEGTGDFHCIGVWFCLHDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFGCSWLFPCPFDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFAFDHCHDPGPEGGGS-NHNH2; 
AEGTGDFCWVFPFQHCADPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFPFHHCFDPGPEGGGS-NHNH2;および
アセチル-AEGTGDRLCSWVSPCSADPEGGGSK
からなる群から選択されるポリペプチドである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
以下の配列：
I.  X1-X2-Cys-X3-X4-X5-X6-X7-Cys-X8-X9（配列番号1）、
ここにおいて、
X1はArg、Phe、HisまたはPro；
X2はSer、Gly、LeuまたはHis；
X3はGly、Asn、IleまたはSer；
X4はSer、TrpまたはGly；
X5はTrp、Ile、LeuまたはVal；
X6はPhe、TrpまたはSer；
X7はProまたはPhe；
X8はSer、Leu、ProまたはPhe；および
X9はAla、Phe、LeuまたはHisである；
および
II.  Phe-Cys-X18-Val-X19-X20-Phe-X21-His-Cys-X22（配列番号3）、
ここにおいて、
X18はHisまたはTrp；
X19はHisまたはPhe；
X20はAla、Asn、HisまたはPro；
X21はAla、Asn、Asp、Gln、His、Leu、SerまたはVal；および
X22はAla、Asp、His、Leu、PheまたはSerである、
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、第VIII因子または第VIII因子様ポリペプチドと結合する能力を有する結合ペプチドをコードする外因性DNAを発現する組換えバクテリオファージ。
【請求項１１】
以下の配列：
Phe-Gly-Cys-Ser-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Pro-Phe; 
Pro-His-Cys-Asn-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Ser-Leu;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Ile-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-His-Cys-Ile-Gly-Val-Trp-Phe-Cys-Leu-His;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Val-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-His-Pro-Phe-Ala-His-Cys-Leu;
Phe-Cys-His-Val-Phe-His-Phe-Ser-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Asn-Phe-Ser-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Gln-His-Cys-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-His-His-Cys-Phe;
Phe-Cys-His-Val-Phe-Asn-Phe-Val-His-Cys-Ser;および
Phe-Cys-His-Val-Phe-Pro-Phe-Leu-His-Cys-Asp;
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する結合ペプチドをコードする外因性DNAを発現し、上記結合ペプチドがバクテリオファージの表面に展示される、請求項１０に記載の組換えバクテリオファージ。
【請求項１２】
試料中の第VIII因子または第VIII因子様ポリペプチドを検出する方法であって、試料を請求項１０または１１に記載のバクテリオファージと接触させ、上記バクテリオファージと第VIII因子または第VIII因子様ポリペプチドの間に結合が生じたかどうかを検出することを含んでなる方法。
【請求項１３】
分離用媒体であって、
(a)多孔性クロマトグラフィーマトリックス材料と、それに固定化された、
(b)以下の配列：
I.  X1-X2-Cys-X3-X4-X5-X6-X7-Cys-X8-X9（配列番号1）、
ここにおいて、
X1はArg、Phe、HisまたはPro；
X2はSer、Gly、LeuまたはHis；
X3はGly、Asn、IleまたはSer；
X4はSer、TrpまたはGly；
X5はTrp、Ile、LeuまたはVal；
X6はPhe、TrpまたはSer；
X7はProまたはPhe；
X8はSer、Leu、ProまたはPhe；および
X9はAla、Phe、LeuまたはHisである；
および
II.  Phe-Cys-X18-Val-X19-X20-Phe-X21-His-Cys-X22（配列番号3）、
ここにおいて、
X18はHisまたはTrp；
X19はHisまたはPhe；
X20はAla、Asn、HisまたはPro；
X21はAla、Asn、Asp、Gln、His、Leu、SerまたはVal；および
X22はAla、Asp、His、Leu、PheまたはSerである、
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、
を含んでなる分離用媒体。
【請求項１４】
上記ポリペプチドが、以下の配列：
Phe-Gly-Cys-Ser-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Pro-Phe; 
Pro-His-Cys-Asn-Trp-Leu-Phe-Pro-Cys-Ser-Leu;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Ile-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-His-Cys-Ile-Gly-Val-Trp-Phe-Cys-Leu-His;
Arg-Leu-Cys-Ser-Trp-Val-Ser-Pro-Cys-Ser-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-His-Pro-Phe-Ala-His-Cys-Leu;
Phe-Cys-His-Val-Phe-His-Phe-Ser-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Ala-Phe-Asp-His-Cys-His;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Asn-Phe-Ser-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Asp;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Asn-His-Cys-Ser;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-Gln-His-Cys-Ala;
Phe-Cys-Trp-Val-Phe-Pro-Phe-His-His-Cys-Phe;
Phe-Cys-His-Val-Phe-Asn-Phe-Val-His-Cys-Ser;および
Phe-Cys-His-Val-Phe-Pro-Phe-Leu-His-Cys-Asp
からなる群から選択される、請求項１３に記載の分離用媒体。
【請求項１５】
分離用媒体であって、
(a)アミン反応性クロマトグラフィーマトリックス材料と、
(b)以下の配列：
AEGTGDFHCIGVWFCLHDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFGCSWLFPCPFDPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFAFDHCHDPGPEGGGS-NHNH2; 
AEGTGDFCWVFPFQHCADPGPEGGGS-NHNH2;
AEGTGDFCWVFPFHHCFDPGPEGGGS-NHNH2;および
アセチル-AEGTGDRLCSWVSPCSADPEGGGSK; 
からなる群から選択されるポリペプチドと、
の反応生成物を含んでなる分離用媒体。
【請求項１６】
上記マトリックス材料が、アルデヒド官能性メタクリレートクロマトグラフィー樹脂である、請求項１５に記載の分離用媒体。
【請求項１７】
上記樹脂がホルミル置換エチレングリコール-メタクリレートコポリマー支持体である、請求項１６に記載の分離用媒体。
【請求項１８】
第VIII因子または第VIII因子様ポリペプチドを、それを含有する溶液から分離する方法であって、
(a)上記溶液を請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の分離用媒体と結合条件下で接触させること、
(b)結合しない物質を除去すること、および
(c)結合した第VIII因子または第VIII因子様ポリペプチドを上記分離用媒体から溶出すること、
を含んでなる方法。
【請求項１９】
前記ポリペプチドがアセチル-AEGTGDRLCSWVSPCSADPEGGGSKである、請求項１５に記載の分離用媒体。
【請求項２０】
前記分離用媒体が項請求項１９に記載の分離用媒体である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記工程(a)が100mM NH4OAc、0.8M NaCl、1M ソルビトール、0.02％ Tween 80、3mM EDTA、5mM CaCl2、pH6.3を含んでなる溶液中で行われる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記溶出が50％のエチレングリコールを含んでなる溶液中で行われる、請求項１８、２０又は２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ポリペプチドが配列アセチル-AEGTGDRLCSWVSPCSADPEGGGSKを含む、請求項9に記載の方法。