【手続補正書】
【提出日】平成21年4月24日(2009.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および／または
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の４３．５％未満である
ことを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物。
【請求項２】
ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の４３．５％未満である
ことを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物。
【請求項３】
前記グリセロール骨格のｓｎ−２位にある飽和脂肪酸の少なくとも６０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８５％がパルミチン酸残基であることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項４】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４０％、好ましくは４５〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項５】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４５％、好ましくは５４〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項６】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも３５％、好ましくは４０〜５２％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項７】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも５％、好ましくは７〜１５％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項８】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも９％、好ましくは１０〜２０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項９】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４％、好ましくは５〜１０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１０】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある全脂肪酸部分の０．２〜１５％、好ましくは７〜１４％、より好ましくは１１〜１２．５％がラウリン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１１】
少なくとも２５％または少なくとも３０％の請求項１から請求項９のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物とそれぞれ最大７５％または最大７０％の少なくとも１種の植物油との混合物を含む代用ヒト乳脂組成物であって、前記植物油は任意選択でランダム化されていることを特徴とする組成物。
【請求項１２】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項１１に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１３】
全パルミチン酸残基の３３〜４５％、好ましくは３６〜４３％、より好ましくは４０％が、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合していることを特徴とする請求項１１または請求項１２に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１４】
請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を含む調製粉乳。
【請求項１５】
請求項１４に記載の調製粉乳であって、該調製粉乳は少なくとも１種のタンパク質成分および少なくとも１種の脂肪成分を含み、
前記脂肪成分は請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物であり、
調製粉乳はビタミン、ミネラル、ヌクレオチド、アミノ酸および炭水化物を任意選択でさらに含む
ことを特徴とする調製粉乳。
【請求項１６】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち６０％未満、好ましくは５３％未満の飽和脂肪酸含有量、好ましくはパルミチン酸含有量を有する酵素的にランダム化させた植物由来トリグリセリド混合物と、６０〜８０％のオレイン酸含有量を有する遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を１．５：１〜１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項１７】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記トリグリセリド混合物は、飽和脂肪酸、好ましくはパルミチン酸を全脂肪酸のうち最大８０％、好ましくは６０％未満、より好ましくは４８〜５７％の量で含むことを特徴とする請求項１６または請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記遊離脂肪酸源は、２〜５％のＣ１６：０脂肪酸、６０〜８０％のＣ１８：１脂肪酸および１〜４％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項１６から請求項１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
構造脂質の混合物である好適な脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含む代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、
前記脂肪ベース組成物と混合する前に、前記植物油を酵素的にランダム化することを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項２２】
前記植物油を、前記脂肪ベース組成物と混合する前に、酵素的にランダム化することを特徴とする請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記脂肪ベース組成物を、前記植物油と０．４：１〜４：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の３３％〜４３．５、好ましくは４３％、より好ましくは４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２１または請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記脂肪ベース組成物を、前記植物油と２．３：１〜１：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の３３％〜４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２１または請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％のパルミチン酸含有量を有する酵素的にランダム化させたトリグリセリド混合物と、オレイン酸含有量６０〜８０％および炭素数１２の飽和脂肪酸含有量５〜３０％または炭素数１４以下の飽和脂肪酸含有量１０〜２５％である遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を１：１〜２：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項２６】
前記脂肪ベースが、Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％の量で含み、そのうち３８％を超える量がｓｎ−２位でエステル化されていることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２７】
前記遊離不飽和脂肪酸源は、炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸を、全脂肪酸のうち１０％〜２５％の割合で含むことを特徴とする請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記トリグリセリドは、全脂肪酸のうち少なくとも７５％がパルミチン酸であることを特徴とする請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記遊離脂肪酸源は、５〜２５％のＣ１２：０脂肪酸、０．０５〜２％のＣ１４：０脂肪酸、１〜５％のＣ１６：０脂肪酸、５５〜７５％のＣ１８：１脂肪酸および１〜５％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項２５から請求項２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
ヒト乳脂の組成と実質的に類似した組成を有する脂質組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは５０％以上、より好ましくは７０％以上のパルミチン酸含有量を有する粗トリグリセリド源として作用する酵素的にランダム化させた植物由来トリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満のパルミチン酸を含む遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を５：１〜１：１で反応させるステップ； 
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項３２】
Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜２５％；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜６％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５０％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち５〜３０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０．２〜４％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満の量で含むことを特徴とする脂質組成物。
【請求項３３】
調製粉乳用の代用ヒト乳脂組成物の調製における、請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物の使用。
【請求項３４】
調製粉乳の調製における、請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の脂肪組成物または請求項３１に記載の方法により調製した脂肪組成物の使用。
【請求項３５】
前記脂肪ベースは、Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％含み、このうち３８％を超える量がｓｎ−２位でエステル化されている前記量；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜７％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２５〜６５％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち２〜４０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜８％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち８％未満、好ましくは５％未満の量で含む、構造脂質の混合物であることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項３６】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項２０または請求項２６に記載の方法。
【請求項３７】
前記脂肪ベース組成物と前記油とが好適な比、好ましくは０．１３：１〜４：１の比で混合されることを特徴とする請求項２０、請求項２６〜請求項３１、請求項３５、請求項３６のいずれか１項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
出願人による国際特許出願公開番号ＷＯ２００５／０３６９８７は、ヒト乳脂と高レベルの類似性を有するヒト乳脂代用物の製造に用いることのできる、および／または比較的低い濃度で用いてそのようなヒト乳脂代用物を得ることのできる、脂肪組成物を開示している。この組成物は、パルミチン酸に富んだトリグリセリド源から出発しても得られる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明の発明者らは、上述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００５／０３６９８７において、独自の脂肪組成物を製造することで費用の問題に取り組んでおり、調製粉乳に用いる全脂肪混合物に当該発明の比較的少量の合成脂肪ベース組成物を用いることで、ＨＭＦと高レベルの類似性を有するＨＭＦ代用物を提供している。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
費用の障害を克服する別の方法では、全飽和脂肪酸のうち比較的高い割合がｓｎ−２位に位置するＨＭＦ代用物が提供されている。全飽和脂肪酸のうち４０％を超える（かつ５０％未満である）飽和脂肪酸がｓｎ−２位に位置する脂肪組成物が得られる。このようなＨＭＦ代用物は、欧州特許出願公開第０２０９３２７号または第０４９５４５６号に記載されるように、脂肪ベース組成物を単純で安価な植物油で高度希釈することで得られる。しかしこれらの混合物は、全パルミチン酸に対するｓｎ−２パルミチン酸の比（〜４０から４３％）が、ＨＭＦにおける比（〜７０％）より低い。にもかかわらず臨床研究の結果［Lien 他 Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 1997、167-74］、これらの混合物は、複数の植物油を単に混ぜたものをベースとする調製粉乳と比べて、摂取されるカルシウムおよび脂肪酸の量がより多いことが示されている。ヒト乳脂に非常に近い代用物は、出願人による上述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００５／０３６９８７に記載されている［InFat １、表１］。いずれの場合においても、少なくとも４０％の飽和脂肪酸がｓｎ−２位に位置することを特徴とするこれらのＨＭＦ代用物は、ｓｎ−２パルミチン酸含有量が多くｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比の高い脂肪ベースを、様々な植物トリグリセリドで希釈することで混合物として得られる。この比は通常、４０〜４５％である。これらのＨＭＦ代用物の調製に用いられる脂肪ベースは、オレイン酸に富んだ遊離脂肪酸の混合物を過剰量用いて、パルミチン酸に富んだトリグリセリドをエステル交換することによって生成される。
【特許文献１】欧州特許出願公開第０２０９３２７号
【特許文献２】欧州特許出願公開第０４９５４５６号
【特許文献３】米国特許第５，６５８，７６８号
【特許文献４】国際特許出願公開番号ＷＯ２００５／０３６９８７
【非特許文献１】［Lopez-Lopez A. (2002) European Journal of Clinical Nutrition；56：1242-54、Innis S.M. (1994) Lipids；29：541-5］
【非特許文献２】［Hamosh M. (1990) Nutrition；6：421-8］
【非特許文献３】［Mattson F.H.およびBeck L.H. (1956) J. Biol. Chem.；219：735-740］
【非特許文献４】［Jensen C.他 (1988) Am. J. Clin. Nutr.；43：745-51］
【非特許文献５】［Small D.M. (1991) Annu. Rev. Nutr.；11：413-434］
【非特許文献６】［Lien E.L.他 (1997) J. Ped. Gastr. Nutr.；52(2)：167-174；Carnielli V.P.他 (1995) Am. J. Clin. Nutr.；61：1037-1042；Innis S.M.他 (1993) Am. J. Clin. Nutr.；57：382-390；Filer L.J.他 (1969) J. Nutr.；99：293-8］
【非特許文献７】［Chappel J.E.他 (1986) J. Pediatr.；108：439-447；Hanna F.M.他 (1970) Pediatr.；45：216-224；Tommarelli R.M.他 (1968) J. Nutr.；95：583-90］
【非特許文献８】［Hernell O.他 (1988) Perinatal Nutrition.ニューヨーク州：Academic Press.；259-272；Wang CS.他 (1983) J. Biol. Chem.；258：9197-9202］
【非特許文献９】［Lopez-Lopez A.他 (2001) Early Hum. Dev.；65：S83-S94］
【非特許文献１０】［Innis S.M.他 (1995) J. Nutr.；125：73-81］
【非特許文献１１】［［Ostrom KM.他 (2002) J. Am. Coll. Nutr.；21(6)：564-569］
【非特許文献１２】［Nelson S. E.他 (1998) J. Amer. Coll. Nutr.；17：327-332；Lucas A.他 (1997) Arch. Dis. Child.；77：F178-F187；Carnielli V.P.他 (1996) J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr.23：553-560；Ostrom (2002) 前述文献同箇所；Hanna (1970) 前述文献同箇所］
【非特許文献１３】［Quinlan PT.他 (1995) J. Pediatr. Gastr. and Nutr.；20：81-90］
【非特許文献１４】［Widdowson E.M. (1975) Br. Med. J.；1：633-5；Carlson S.E.他 (1986) Am. J. Clin. Nutr.；44：798-804；Innis S.M.他 (1990) Am. J. Clin. Nutr.；5：994-1000；Koletzko B.他 (1989) Eur. J. Pediatr.；148：669-75］
【非特許文献１５】［Putnam J.C. 他 (1982) Am. J. Clin. Nutr.；36：106-114；Innis S.M.他 (1992) Am. Coll. Nutr.;11:63S-8S；Van Biervliet J.P.他 (1981) Acta. Paediatr. Scand.；70：851-6］
【非特許文献１６】［Lien 他 Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 1997、167-74］
【非特許文献１７】［TantibhedhyangkulおよびHashim (1978) Pediatrics. 61(4)：537-45；FinleyおよびDavidson (1980) Pediatrics. 65(1)：132-8；Lien (1994) J. Pediatr. 125(5)：S62-8；Lien他 (1997) J Pediatr Gastroenterol Nutr. 25(2)：167-74］
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９３】
この方法を用いて、出願人による前述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００５／０３６９８７および欧州特許出願公開第２０９３２７号に記載される生成物（異なる種類の混合物）を得ることができる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０５】
混合油のランダム化は、本発明に記載する脂肪ベース以外の脂肪ベースからなる混合物にも利点がある。欧州特許出願公開第０２０９３２７号または第０４９５４５６号あるいは出願人による上述の国際特許出願公開番ＷＯ２００５／０３６９８７に記載の脂肪ベースを、天然植物油ではなくランダム化植物油と混合してもよい。本発明のこの態様を用いることで、上記した用途と同一のＣ１６パーセント、同一のｓｎ−２パルミチン酸残基対全パルミチン酸残基比を、より少ない量の脂肪ベースで得ることができ、従って混合物の製造費を節約することができる。