【手続補正書】
【提出日】平成21年9月24日(2009.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）造影特性を有する造影タンパク質と、
ｂ）少なくとも１つの標的部分
とを含む造影剤であって、前記少なくとも１つの標的部分が、前記造影タンパク質に作動可能に連結しているかまたは取り込まれている、造影剤。
【請求項２】
前記造影タンパク質および前記標的部分が、末端において作動可能に連結している、請求項１に記載の造影剤。
【請求項３】
前記造影タンパク質および前記標的部分が、前記造影タンパク質に作動可能に連結しているかまたは取り込まれている、請求項１に記載の造影剤。
【請求項４】
２つ以上の標的部分が、前記造影タンパク質に作動可能に連結している、請求項１に記載の造影剤。
【請求項５】
前記造影タンパク質が磁気共鳴画像に適している、請求項１に記載の造影剤。
【請求項６】
前記標的部分が、特定の細胞においてエンドサイトーシスを誘導する、請求項１に記載の造影剤。
【請求項７】
前記標的部分および造影配列が、共有結合またはペプチド結合を介して作動可能に連結している、請求項１に記載の造影剤。
【請求項８】
前記造影タンパク質が、常磁性金属イオンをキレート化する、請求項１に記載の造影剤。
【請求項９】
標的ペプチドがガストリン放出ペプチドである、請求項１に記載の造影剤。
【請求項１０】
前記常磁性金属イオンがＧｄ（ＩＩＩ）である、請求項１に記載の造影剤。
【請求項１１】
ｃ）前記少なくとも１つの標的部分の１つと前記造影タンパク質との間のリンカータンパク質
をさらに含む、請求項１に記載の造影剤。
【請求項１２】
ａ）造影タンパク質を選択する工程と、
ｂ）標的タンパク質に結合することが可能な少なくとも１つの標的部分を選択する工程と、
ｃ）前記標的部分および前記造影タンパク質を作動可能に連結させるかまたは取り込ませる工程
とを含む、造影剤を調製するための方法。
【請求項１３】
前記標的部分が、ガストリン放出ペプチド受容体に優先的に結合されるように選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記標的部分が、癌細胞受容体に優先的に結合されるように選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記造影タンパク質が、末端において前記標的部分に作動可能に連結している、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記標的部分が、特定の細胞中への標的エンドサイトーシスを誘導するために選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記造影タンパク質が、常磁性金属イオンをキレート化する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記造影タンパク質が磁気共鳴画像に適している、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
ａ）１つまたはそれ以上の細胞に、標的タンパク質に結合することが可能なタンパク質造影剤を投与する工程と、
ｂ）前記造影剤を前記標的タンパク質に結合させる工程と、
ｃ）前記標的化されたタンパク質の位置において前記１つまたはそれ以上の細胞を撮像する工程
とを含む、１つまたはそれ以上の細胞の磁気共鳴画像を撮像するための方法。
【請求項２０】
動物またはヒト被験体の磁気共鳴画像用のタンパク質造影剤の製造における、造影特性を有する造影タンパク質および少なくとも１つの標的部分の使用であって、前記少なくとも１つの標的部分が前記造影タンパク質に作動可能に連結しているかまたは取り込まれており、前記造影剤が標的タンパク質に結合することができ、かつ撮像される被検体中での標的化されたタンパク質の所在を可能にする、使用。
【請求項２１】
前記１つまたはそれ以上の細胞が、前記標的タンパク質の部位において優先的に撮像される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記１つまたはそれ以上の細胞が、腫瘍位置において撮像される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記１つまたはそれ以上の細胞が、核磁気共鳴によって撮像される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
ａ）足場タンパク質と、
ｂ）少なくとも１つの個別調整された金属イオンキレート部位
とを含む造影剤であって、前記少なくとも１つの金属イオンキレート部位が前記足場タンパク質に取り込まれている、造影剤。
【請求項２５】
前記少なくとも１つの金属イオンキレート部位が前記足場タンパク質に包埋されている、請求項２４に記載の造影剤。
【請求項２６】
前記少なくとも１つの金属イオンキレート部位が実質的に前記足場タンパク質に包埋されている、請求項２４に記載の造影剤。
【請求項２７】
前記金属結合部位が、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩＩ）、Ｍｏ（Ｖ）、およびＶ（ＩＶ）からなる群から選択される常磁性金属イオンに優先的に結合する、請求項２６に記載の造影剤。
【請求項２８】
前記金属結合部位が、ランタノイド系金属からなる群から選択される金属のイオンに優先的に結合する、請求項２４に記載の造影剤。
【請求項２９】
前記足場タンパク質が発色団を有する蛍光タンパク質である、請求項２４に記載の造影剤。
【請求項３０】
細胞、組織、生物体または動物を可視化するための請求項２４に記載の造影剤の製造における、足場タンパク質および個別調整された少なくとも１つの金属イオンキレート部位の使用であって、前記少なくとも１つの金属イオンキレート部位が足場タンパク質に取り込まれている、使用。
【請求項３１】
ａ）足場タンパク質を選択する工程と、
ｂ）少なくとも１つの金属イオンキレート部位を構築する工程と、
ｃ）前記金属イオン結合部位を前記タンパク質に作動可能に包埋する工程
とを含む造影剤を調製するための方法であって、工程（ｃ）が、造影剤特性を前記足場タンパク質に付与する方法。
【請求項３２】
前記足場タンパク質が、
ａ）ｐＨ変性に対する耐性と、
ｂ）タンパク質分解的切断に対する耐性と、
ｃ）変異に対する許容性と、
ｄ）分子サイズ
とに従って選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記足場タンパク質が、前記足場タンパク質に固有の蛍光に基づいて選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記少なくとも１つの金属結合部位が、
ａ）特異性を有する金属イオンに結合する分析物結合ペプチドを同定する工程であって、前記分析物が金属イオンである工程と、
ｂ）前記金属イオン結合ペプチドをコードするアミノ酸配列の少なくとも一部を確かめる工程と、
ｃ）前記分析物結合ペプチドをコードする前記アミノ酸配列を金属結合部位に対して個別調整する工程
とによって構築される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記足場タンパク質が免疫グロブリンタンパク質から選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３６】
前記足場タンパク質が、発色団を有する蛍光タンパク質に由来するタンパク質から選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３７】
ａ）光学特性を有する蛍光タンパク質と、
ｂ）前記蛍光タンパク質に作動可能に取り込まれる少なくとも１つの金属キレート部位
とを含み、前記プローブが撮像用途において造影剤として作用する、多機能性プローブ。
【請求項３８】
前記金属結合部位が、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩＩ）、Ｍｏ（Ｖ）、およびＶ（ＩＶ）からなる群から選択される常磁性金属イオンに優先的に結合する、請求項３７に記載のプローブ。
【請求項３９】
前記金属キレート部位が、ランタノイド系からなる群から選択される金属のイオンに優先的に結合する、請求項３７に記載の造影剤。
【請求項４０】
被験体の増強された画像を作成するための方法であって、
ａ）足場タンパク質に作動可能に包埋された少なくとも１つの金属イオンキレート部位を有する造影剤を投与する工程と、
ｂ）前記被験体の１つもしくはそれ以上の画像を作成する工程
とを含む、方法。