【手続補正書】
【提出日】平成23年8月30日(2011.8.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）細胞培養液上清と免疫アジュバントとを含むこと、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成されること
を特徴とするワクチン組成物。
【請求項２】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：Ｈ７であること
を特徴とする請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項３】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：ＮＭであること
を特徴とする請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項４】
ＥｓｐＡ、ＥｓｐＢ、ＥｓｐＤ、Ｔｉｒ及びインチミンからなる群から選択される１以上の組換え又は精製ＥＨＥＣ抗原を更に含むこと
を特徴とする請求項１〜３の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項５】
前記組成物は、組換えIII型抗原が補充されていないこと
を特徴とする請求項１〜３の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項６】
前記最小培地は、０．１％のカザミノ酸、０．４％のグルコース、８ｍＭのＭｇＳＯ４、及び４４ｍＭのＮａＨＣＯ３が補充されていること
を特徴とする請求項１〜５の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項７】
前記III型抗原は、前記細胞培養液上清の全タンパク質の１０％〜５０％を含むこと
を特徴とする請求項１〜６の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項８】
前記III型抗原ＥｓｐＡ＋Ｔｉｒは、前記細胞培養液上清の全タンパク質の少なくとも２０％を含むこと
を特徴とする請求項７に記載のワクチン組成物。
【請求項９】
前記ＥＨＥＣは、２〜１０％のＣＯ２の存在下３７℃の温度で培養されること
を特徴とする請求項１〜８の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１０】
前記ＥＨＥＣは、６００ｎｍで０．７〜０．８の吸光度（ＯＤ）で培養されること
を特徴とする請求項１〜９の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
前記細胞培養液上清は、濃縮されること
を特徴とする請求項１〜１０の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１２】
前記細胞培養液上清は、単離されること
を特徴とする請求項１〜１１の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
前記細胞培養液上清は、１又は２以上のＥＨＥＣ血清型から取得されること
を特徴とする請求項１〜１２の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
前記１又は２以上のＥＨＥＣ血清型は、Ｏ１５７、Ｏ１５８、Ｏ５、Ｏ８、Ｏ１８、Ｏ２６、Ｏ４５、Ｏ４８、Ｏ５２、Ｏ５５、Ｏ７５、Ｏ７６、Ｏ７８、Ｏ８４、Ｏ９１、Ｏ１０３、Ｏ１０４、Ｏ１１１、Ｏ１１３、Ｏ１１４、Ｏ１１６、Ｏ１１８、Ｏ１１９、Ｏ１２１、Ｏ１２５、Ｏ２８、Ｏ１４５、Ｏ１４６、Ｏ１６３、及びＯ１６５からなる群から選択されること
を特徴とする請求項１３に記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
前記免疫アジュバントは、２０％（ｖ/ｖ）〜４０％（ｖ/ｖ）の濃度でワクチン組成物中に含まれること
を特徴とする請求項１〜１４の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
前記免疫アジュバントは、３０％（ｖ/ｖ）の濃度でワクチン組成物中に含まれること
を特徴とする請求項１５に記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
前記免疫アジュバントは、乳化剤、ムラミルジペプチド、水溶性アジュバント、キトサンをベースとするアジュバント、サポニン、オイル、リポ多糖、細菌細胞壁抽出物、細菌ＤＮＡ、細菌複合体、合成オリゴヌクレオチド、及び脂肪族窒素性塩基からなる群より選択される少なくとも１つを含むこと
を特徴とする請求項１〜１６の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項１８】
前記オイルは、単一の油及び油混合物からなる群より選択されること
を特徴とする請求項１７に記載のワクチン組成物。
【請求項１９】
前記乳化剤は、天然乳化剤、合成乳化剤、陰イオン性乳化剤、陽イオン性乳化剤、及び非イオン性乳化剤からなる群より選択され；前記水溶性アジュバントは、水酸化アルミニウムを含み；前記細菌細胞壁抽出物は、抗酸菌細胞壁抽出物を含み；前記細菌ＤＮＡは、抗酸菌ＤＮＡを含み；前記細菌複合体は、抗酸菌細胞壁複合体を含み；又は前記脂肪族窒素性塩基は、アミン、４級アンモニウム化合物、グアニジン、ベンザミジン及びチオウレアからなる群より選択され、若しくはN,N-dioctadecyl-N,N-bis(2-hydroxyethyl)propanediamineを含むこと
を特徴とする請求項１７に記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
前記天然乳化剤は、アカシア、ゼラチン、レシチン及びコレステロールからなる群より選択され；前記陰イオン性乳化剤は、ラウリン酸のカリウム塩、オレイン酸のカリウム塩、ラウリン酸のナトリウム塩、オレイン酸のナトリウム塩、ラウリン酸のアンモニウム塩、オレイン酸のアンモニウム塩、脂肪酸のカルシウム塩、脂肪酸のマグネシウム塩、脂肪酸のアルミニウム塩、金属セッケン及び有機スルホン酸塩からなる群より選択され；前記陽イオン性乳化剤は、セチルトリメチルアンモニウムブロマイドを含み；又は前記非イオン性乳化剤は、グリセロールエステル、ポリオキシエチレングリコールエステル、ポリオキシエチレングリコールエーテル及びソルビタン・脂肪酸エステルからなる群より選択され；前記オイルは、ミネラルオイル、植物油、及び動物油からなる群より選択され；前記植物油は、カノーラ油、扁桃油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油、ピーナツ油、ベニバナ油、ゴマ油、及び大豆油からなる群より選択され；前記動物油は、タラの肝油、オヒョウ油、ニシン油、オレンジラフィー油及びサメの肝油からなる群より選択されること
を特徴とする請求項１９に記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
前記有機スルホン酸塩は、ラウリル硫酸ナトリウムを含み；前記グリセロールエステルは、グリセリル・モノステアリン酸を含み；前記ソルビタン・脂肪酸エステルは、ソルビタン・モノパルミチン酸及びそれらのポリオキシエチレン誘導体からなる群より選択されること
を特徴とする請求項２０に記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
前記ポリオキシエチレン誘導体は、ポリオキシエチレンソルビタン・モノパルミチン酸を含むこと
を特徴とする請求項２１に記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
前記免疫アジュバントは、ジメチルジオクタデシルアンモニウム・ブロマイドを含むこと
を特徴とする請求項１〜１６の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項２４】
前記免疫アジュバントは、ミネラルオイルを更に含むこと
を特徴とする請求項１８に記載のワクチン組成物。
【請求項２５】
前記免疫アジュバントは、ＶＳＡ３を含むこと
を特徴とする請求項２４に記載のワクチン組成物。
【請求項２６】
前記免疫アジュバントは、水中油型エマルジョン、又は非水中油型エマルジョンから構成されること
を特徴とする請求項１〜１６の何れか１項に記載のワクチン組成物。
【請求項２７】
前記非水中油型エマルジョンは、油エマルジョン、油中水型エマルジョン及び水中油中水型エマルジョンからなる群より選択されること
を特徴とする請求項２６に記載のワクチン組成物。
【請求項２８】
分泌性ＥＨＥＣ抗原に対する哺乳動物の免疫反応を惹起する医薬の製造における、腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）細胞培養液上清を含む組成物の使用であって、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成される、
使用。
【請求項２９】
哺乳動物における腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）の定着の低減のための医薬の製造における、腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）細胞培養液上清を含む組成物の使用であって、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成される、
使用。
【請求項３０】
哺乳動物から排泄される腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）を低減するための医薬の製造における、腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）細胞培養液上清を含む組成物の使用であって、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成される、
使用。
【請求項３１】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：Ｈ７であること
を特徴とする請求項２８〜３０の何れか１項に記載の使用。
【請求項３２】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：ＮＭであること
を特徴とする請求項２８〜３０の何れか１項に記載の使用。
【請求項３３】
前記組成物は、ＥｓｐＡ、ＥｓｐＢ、ＥｓｐＤ、Ｔｉｒ及びインチミンからなる群から選択される１又は２以上の組換え又は精製ＥＨＥＣ抗原を更に含むこと
を特徴とする請求項２８〜３２の何れか１項に記載の使用。
【請求項３４】
前記組成物は、組換えIII型抗原が補充されていないこと
を特徴とする請求項２８〜３３の何れか１項に記載の使用。
【請求項３５】
前記最小培地は、０．１％のカザミノ酸、０．４％のグルコース、８ｍＭのＭｇＳＯ４、及び４４ｍＭのＮａＨＣＯ３が補充されていること
を特徴とする請求項２８〜３４の何れか１項に記載の使用。
【請求項３６】
前記III型抗原は、前記細胞培養液上清の全タンパク質の１０％〜５０％を含むこと
を特徴とする請求項２８〜３５の何れか１項に記載の使用。
【請求項３７】
前記III型抗原ＥｓｐＡ＋Ｔｉｒは、前記細胞培養液上清の全タンパク質の少なくとも２０％を含むこと
を特徴とする請求項３６に記載の使用。
【請求項３８】
前記ＥＨＥＣは、２〜１０％のＣＯ２の存在下３７℃の温度で培養されること
を特徴とする請求項２８〜３７の何れか１項に記載の使用。
【請求項３９】
前記ＥＨＥＣは、６００ｎｍで０．７〜０．８の吸光度（ＯＤ）で培養されること
を特徴とする請求項２８〜３８の何れか１項に記載の使用。
【請求項４０】
前記細胞培養液上清は、濃縮されること
を特徴とする請求項２８〜３９の何れか１項に記載の使用。
【請求項４１】
前記細胞培養液上清は、単離されること
を特徴とする請求項２８〜４０の何れか１項に記載の使用。
【請求項４２】
前記細胞培養液上清は、１又は２以上のＥＨＥＣ血清型から取得されること
を特徴とする請求項２８〜４１の何れか１項に記載の使用。
【請求項４３】
前記１又は２以上のＥＨＥＣ血清型は、Ｏ１５７、Ｏ１５８、Ｏ５、Ｏ８、Ｏ１８、Ｏ２６、Ｏ４５、Ｏ４８、Ｏ５２、Ｏ５５、Ｏ７５、Ｏ７６、Ｏ７８、Ｏ８４、Ｏ９１、Ｏ１０３、Ｏ１０４、Ｏ１１１、Ｏ１１３、Ｏ１１４、Ｏ１１６、Ｏ１１８、Ｏ１１９、Ｏ１２１、Ｏ１２５、Ｏ２８、Ｏ１４５、Ｏ１４６、Ｏ１６３、及びＯ１６５からなる群から選択されること
を特徴とする請求項４２に記載の使用。
【請求項４４】
前記組成物は、更に、免疫アジュバントを含むこと
を特徴とする請求項２８〜４３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４５】
前記免疫アジュバントは、２０％（ｖ/ｖ）〜４０％（ｖ/ｖ）の濃度で前記組成物中に含まれること
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
前記免疫アジュバントは、３０％（ｖ/ｖ）の濃度でワクチン組成物中に含まれること
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項４７】
前記免疫アジュバントは、乳化剤、ムラミルジペプチド、水溶性アジュバント、キトサンをベースとするアジュバント、サポニン、オイル、リポ多糖、細菌細胞壁抽出物、細菌ＤＮＡ、細菌複合体、合成オリゴヌクレオチド、及び脂肪族窒素性塩基からなる群より選択される少なくとも１つを含むこと
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項４８】
前記オイルは、単一の油及び油混合物からなる群より選択されること
を特徴とする請求項４７に記載の使用。
【請求項４９】
前記乳化剤は、天然乳化剤、合成乳化剤、陰イオン性乳化剤、陽イオン性乳化剤、及び非イオン性乳化剤からなる群より選択され；前記水溶性アジュバントは、水酸化アルミニウムを含み；前記オイルは、ミネラルオイル、植物油、及び動物油からなる群より選択され；前記細菌細胞壁抽出物は、抗酸菌細胞壁抽出物を含み；前記細菌ＤＮＡは、抗酸菌ＤＮＡを含み；前記細菌複合体は、抗酸菌細胞壁複合体を含み；前記脂肪族窒素性塩基は、アミン、４級アンモニウム化合物、グアニジン、ベンザミジン及びチオウレアからなる群より選択されるか、又はN,N-dioctadecyl-N,N-bis(2-hydroxyethyl)propanediamineを含むこと
を特徴とする請求項４７に記載の使用。
【請求項５０】
前記天然乳化剤は、アカシア、ゼラチン、レシチン及びコレステロールからなる群より選択され；前記陰イオン性乳化剤は、ラウリン酸のカリウム塩、オレイン酸のカリウム塩、ラウリン酸のナトリウム塩、オレイン酸のナトリウム塩、ラウリン酸のアンモニウム塩、オレイン酸のアンモニウム塩、脂肪酸のカルシウム塩、脂肪酸のマグネシウム塩、脂肪酸のアルミニウム塩、金属セッケン及び有機スルホン酸塩からなる群より選択され；前記陽イオン性乳化剤は、セチルトリメチルアンモニウムブロマイドを含み；又は前記非イオン性乳化剤は、グリセロールエステル、ポリオキシエチレングリコールエステル、ポリオキシエチレングリコールエーテル及びソルビタン・脂肪酸エステルからなる群より選択され；前記植物油は、カノーラ油、扁桃油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油、ピーナツ油、ベニバナ油、ゴマ油、及び大豆油からなる群より選択され；前記動物油は、タラの肝油、オヒョウ油、ニシン油、オレンジラフィー油及びサメの肝油からなる群より選択されること
を特徴とする請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
前記有機スルホン酸塩は、ラウリル硫酸ナトリウムを含み；前記グリセロールエステルは、グリセリル・モノステアリン酸を含み；前記ソルビタン・脂肪酸エステルは、ソルビタン・モノパルミチン酸及びそれらのポリオキシエチレン誘導体からなる群より選択されること
を特徴とする請求項４９に記載の使用。
【請求項５２】
前記ポリオキシエチレン誘導体は、ポリオキシエチレンソルビタン・モノパルミチン酸を含むこと
を特徴とする請求項５１に記載の使用。
【請求項５３】
前記免疫アジュバントは、ジメチルジオクタデシルアンモニウム・ブロマイドを含むこと
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項５４】
前記免疫アジュバントは、ミネラルオイルを更に含むこと
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項５５】
前記免疫アジュバントは、ＶＳＡ３を含むこと
を特徴とする請求項５４に記載の使用。
【請求項５６】
前記免疫アジュバントは、水中油型エマルジョン、又は非水中油型エマルジョンから構成されること
を特徴とする請求項４４に記載の使用。
【請求項５７】
前記非水中油型エマルジョンは、油エマルジョン、油中水型エマルジョン及び水中油中水型エマルジョンからなる群より選択されること
を特徴とする請求項５６に記載の使用。
【請求項５８】
前記哺乳動物は、非ヒト哺乳動物であること
を特徴とする請求項２８〜５７の何れか１項に記載の使用。
【請求項５９】
前記非ヒト哺乳動物は、反芻動物であること
を特徴とする請求項５８に記載の使用。
【請求項６０】
前記反芻動物は、ウシ（bovine subject）であること
を特徴とする請求項５８に記載の使用。
【請求項６１】
前記反芻動物は、羊（ovine subject）であること
を特徴とする請求項５８に記載の使用。
【請求項６２】
分泌性腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）抗原に対する非ヒト哺乳動物の免疫反応を惹起する方法であって、該方法は、ＥＨＥＣ細胞培養液上清を含む組成物の治療有効量を該非ヒト哺乳動物へ投与する工程を含むこと、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成されること
を特徴とする方法。
【請求項６３】
非ヒト哺乳動物における分泌性腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）の定着（住みつき）を低減する方法であって、該方法は、ＥＨＥＣ細胞培養液上清を含む組成物の治療有効量を該非ヒト哺乳動物へ投与する工程を含むこと、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成されること
を特徴とする方法。
【請求項６４】
非ヒト哺乳動物からの分泌性腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）の排泄（shedding）を低減する方法であって、該方法は、ＥＨＥＣ細胞培養液上清を含む組成物の治療有効量を該非ヒト哺乳動物へ投与する工程を含むこと、
前記ＥＨＥＣ細胞培養液上清は、２０〜１００ｍＭのＮａＨＣＯ３、５〜１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１〜１．５％のグルコース、及び０．０５〜０．５％のカザミノ酸が補充された最小培地を含む細胞培養培地においてＥＨＥＣを培養する工程を含むプロセスによって生成されること
を特徴とする方法。
【請求項６５】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：Ｈ７であること
を特徴とする請求項６２〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６６】
前記ＥＨＥＣは、ＥＨＥＣ Ｏ１５７：ＮＭであること
を特徴とする請求項６２〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６７】
前記組成物は、ＥｓｐＡ、ＥｓｐＢ、ＥｓｐＤ、Ｔｉｒ及びインチミンからなる群から選択される１又は２以上の組換え又は精製ＥＨＥＣ抗原を更に含むこと
を特徴とする請求項６２〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６８】
前記組成物は、組換えIII型抗原が補充されていないこと
を特徴とする請求項６２〜６６の何れか１項に記載の方法。
【請求項６９】
前記最小培地は、０．１％のカザミノ酸、０．４％のグルコース、８ｍＭのＭｇＳＯ４、及び４４ｍＭのＮａＨＣＯ３が補充されていること
を特徴とする請求項６２〜６８の何れか１項に記載の方法。
【請求項７０】
前記III型抗原は、前記細胞培養液上清の全タンパク質の１０％〜５０％を含むこと
を特徴とする請求項６２〜６９の何れか１項に記載の方法。
【請求項７１】
前記III型抗原ＥｓｐＡ＋Ｔｉｒは、前記細胞培養液上清の全タンパク質の少なくとも２０％を含むこと
を特徴とする請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記ＥＨＥＣは、２〜１０％のＣＯ２の存在下３７℃の温度で培養されること
を特徴とする請求項６２〜７１の何れか１項に記載の方法。
【請求項７３】
前記ＥＨＥＣは、６００ｎｍで０．７〜０．８の吸光度（ＯＤ）で培養されること
を特徴とする請求項６２〜７２の何れか１項に記載の方法。
【請求項７４】
前記細胞培養液上清は、濃縮されること
を特徴とする請求項６２〜７３の何れか１項に記載の方法。
【請求項７５】
前記細胞培養液上清は、単離されること
を特徴とする請求項６２〜７４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７６】
前記細胞培養液上清は、１又は２以上のＥＨＥＣ血清型から取得されること
を特徴とする請求項６２〜７５の何れか１項に記載の方法。
【請求項７７】
前記１又は２以上のＥＨＥＣ血清型は、Ｏ１５７、Ｏ１５８、Ｏ５、Ｏ８、Ｏ１８、Ｏ２６、Ｏ４５、Ｏ４８、Ｏ５２、Ｏ５５、Ｏ７５、Ｏ７６、Ｏ７８、Ｏ８４、Ｏ９１、Ｏ１０３、Ｏ１０４、Ｏ１１１、Ｏ１１３、Ｏ１１４、Ｏ１１６、Ｏ１１８、Ｏ１１９、Ｏ１２１、Ｏ１２５、Ｏ２８、Ｏ１４５、Ｏ１４６、Ｏ１６３、及びＯ１６５からなる群から選択されること
を特徴とする請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記組成物は、更に、免疫アジュバントを含むこと
を特徴とする請求項６２〜７７の何れか１項に記載の方法。
【請求項７９】
前記免疫アジュバントは、２０％（ｖ/ｖ）〜４０％（ｖ/ｖ）の濃度で前記組成物中に含まれること
を特徴とする請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記免疫アジュバントは、３０％（ｖ/ｖ）の濃度でワクチン組成物中に含まれること
を特徴とする請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記免疫アジュバントは、乳化剤、ムラミルジペプチド、水溶性アジュバント、キトサンをベースとするアジュバント、サポニン、オイル、リポ多糖、細菌細胞壁抽出物、細菌ＤＮＡ、細菌複合体、合成オリゴヌクレオチド、及び脂肪族窒素性塩基からなる群より選択される少なくとも１つを含むこと
を特徴とする請求項７８に記載の方法。
【請求項８２】
前記オイルは、単一の油及び油混合物からなる群より選択されること
を特徴とする請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記乳化剤は、天然乳化剤、合成乳化剤、陰イオン性乳化剤、陽イオン性乳化剤、及び非イオン性乳化剤からなる群より選択され；前記水溶性アジュバントは、水酸化アルミニウムを含み；前記オイルは、ミネラルオイル、植物油、及び動物油からなる群より選択され；前記細菌細胞壁抽出物は、抗酸菌細胞壁抽出物を含み；前記細菌ＤＮＡは、抗酸菌ＤＮＡを含み；前記細菌複合体は、抗酸菌細胞壁複合体を含み；前記脂肪族窒素性塩基は、アミン、４級アンモニウム化合物、グアニジン、ベンザミジン及びチオウレアからなる群より選択されるか、又はN,N-dioctadecyl-N,N-bis(2-hydroxyethyl)propanediamineを含むこと
を特徴とする請求項８１に記載の方法。
【請求項８４】
前記天然乳化剤は、アカシア、ゼラチン、レシチン及びコレステロールからなる群より選択され；前記陰イオン性乳化剤は、ラウリン酸のカリウム塩、オレイン酸のカリウム塩、ラウリン酸のナトリウム塩、オレイン酸のナトリウム塩、ラウリン酸のアンモニウム塩、オレイン酸のアンモニウム塩、脂肪酸のカルシウム塩、脂肪酸のマグネシウム塩、脂肪酸のアルミニウム塩、金属セッケン及び有機スルホン酸塩からなる群より選択され；前記陽イオン性乳化剤は、セチルトリメチルアンモニウムブロマイドを含み；前記非イオン性乳化剤は、グリセロールエステル、ポリオキシエチレングリコールエステル、ポリオキシエチレングリコールエーテル及びソルビタン・脂肪酸エステルからなる群より選択され；前記植物油は、カノーラ油、扁桃油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油、ピーナツ油、ベニバナ油、ゴマ油、及び大豆油からなる群より選択され；前記動物油は、タラの肝油、オヒョウ油、ニシン油、オレンジラフィー油及びサメの肝油からなる群より選択されること
を特徴とする請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記有機スルホン酸塩は、ラウリル硫酸ナトリウムを含み；前記グリセロールエステルは、グリセリル・モノステアリン酸を含み；前記ソルビタン・脂肪酸エステルは、ソルビタン・モノパルミチン酸及びそれらのポリオキシエチレン誘導体からなる群より選択されること
を特徴とする請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記ポリオキシエチレン誘導体は、ポリオキシエチレンソルビタン・モノパルミチン酸を含むこと
を特徴とする請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記免疫アジュバントは、ジメチルジオクタデシルアンモニウム・ブロマイドを含むこと
を特徴とする請求項７８に記載の方法。
【請求項８８】
前記免疫アジュバントは、ミネラルオイルを更に含むこと
を特徴とする請求項７８に記載の方法。
【請求項８９】
前記免疫アジュバントは、ＶＳＡ３を含むこと
を特徴とする請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記免疫アジュバントは、水中油型エマルジョン、又は非水中油型エマルジョンから構成されること
を特徴とする請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記非水中油型エマルジョンは、油エマルジョン、油中水型エマルジョン及び水中油中水型エマルジョンからなる群より選択されること
を特徴とする請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
前記非ヒト哺乳動物は、反芻動物であること
を特徴とする請求項６２〜９１の何れか１項に記載の方法。
【請求項９３】
前記反芻動物は、ウシ（bovine subject）であること
を特徴とする請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記反芻動物は、羊（ovine subject）であること
を特徴とする請求項９２に記載の方法。