【手続補正書】
【提出日】平成21年6月23日(2009.6.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５６】
任意の段階ａ３）ｉｉ）におけるＳｉ−Ｃｌ末端結合を有する誘導体を生成するために使用される、段階ａ２）のＨＳｉ（Ｒ１）３−ｍＣｌｍ反応剤の部分Ｒ１及びＨＳｉ（Ｒ２）３−ｎＣｌｎ反応剤の部分Ｒ２の両方、並びに段階ａ４）の任意の繰り返しのＨＳｉ（Ｒｉ）３−ｚＣｌｚ反応剤の連続したＲｉ部分は互いに全く同じであり、メチル部分に対応する、請求項５２から５５までのいずれか一項に記載のカルボシランデンドリマーの調製方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項６２】
Ｓｉ−Ｃｌ末端結合を有する最終カルボシランデンドリマー骨格が、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン（ＣＨ２ＯＨ−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２）、２−［２−（ジメチルアミノエチル）メチル］アミノエタノール（ＣＨ２ＯＨ−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２）又は３，５−ビス（ジメチルアミノエトキシ）ベンジルアルコール（ＣＨ２ＯＨ−（Ｃ６Ｈ３）−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）２）２）から選択されるアルコール−アミンを用いて段階ｂ１）において処理される、請求項６１に記載のカルボシランデンドリマーの調製方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
本発明の他の実施形態において、第１級、第２級又は第３級アミノ基を含み、１つの末端に炭素−炭素二重結合を有し、Ｓｉ−Ｈ結合を有するカルボシランデンドリマーと反応させられる化合物は、１つの末端にアルケニル部分（ＣＨ２＝ＣＨ−（ＣＨ２）ｅ−（ここで「ｅ」は、この場合も先と同様に０と２の間で変化する）及びもう１つの別の末端にアミノ基（第１級、第２級又は第３級）を含む化合物であり、この化合物はアルケニル部分ＣＨ２＝ＣＨ−（ＣＨ２）ｅ−とアミノ基の間に−Ｒａ−部分をさらに含む。その好ましい実施形態において、使用される化合物は、４−アリル−２−メトキシ−１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエトキシ）ベンゼン、（ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＨ２）Ｃ６Ｈ３（ＯＭｅ）｛Ｏ（ＣＨ２）２ＮＭｅ２｝である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
２．Ｓｉ−Ｈ末端結合のヒドロシル化経路
Ｓｉ−Ｈ端末結合を含むカルボシランデンドリマーをＫａｒｓｔｅｄｔ触媒［２８］の存在下でアリルアミン（ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＨ２−ＮＨ２）で処理すると、実用的な収率で、末端アミノ基１Ｇ−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］４（１３）、２Ｇ−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］８（１４）、３Ｇ−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］１６（１５）を有するカルボシランデンドリマーの形成をもたらす。これらが生成される反応は、スキーム５：
【化１８】
2009502765.tif 000001
に示される。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３９】
これらの試験を行うために選択したデンドリマーは、以下の通りである。
デンドリマー：
【化５１】
2009502765.tif 000002
【化５２】
2009502765.tif 000003
【化５３】
2009502765.tif 000004
【化５４】
2009502765.tif 000005
Ｇ４：（第４世代ＰＡＭＡＭデンドリマー；Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＣＯ．、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ）
１４０末端アミノ基
分子量＝１４，２１５
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８８】
（実施例３６）大きいサイズのＤＮＡと複合体を形成する能力
使用するプラスミド、Ｎｆ−ｋａｐｐａＢ−ｌｕｃと複合体を形成することができるＣＢＳ  ＩＭ８を有するプラスミドを用いて予備的試験を実施した。前の実験と同様の形態において、電気泳動に先立ってウェルにおいて５０００ｂｐまで測定するラダー型マーカーを置き、異なる試料を用いて電気泳動を実施した。試料は以下であった：
レーン１：１μｌ  ｐ＋０．５８μｌ  ＩＭ８（＋／−）＝２／１＋２８μｌ  ＲＰＭＩ
レーン２：１μｌ  ｐ＋１．７４μｌ  ＩＭ８（＋／−）＝６／１＋２８μｌ  ＲＰＭＩ
レーン３：１μｌ  ｐ＋２．９μｌ  ＩＭ８（＋／−）＝１０／１＋２７μｌ  ＲＰＭＩ
レーン４：１μｌ  ｐ＋２９μｌ  ＩＭ８（＋／−）＝１００／１＋０μｌ  ＲＰＭＩ
レーン５：１μｌ  ｐ（０．４３μｇｐ）
レーン６：２μｌ  ｐ
ここで、ｐ＝プラスミド。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２００】
目視観察結果から、リンパ球に対する毒性の最も少ないデンドリマーは、ＣＢＳ  ＮＮ及びＰｈｅであり、２つの試験ＰＡＭＡＭデンドリマーはより毒性であったことが集約される。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０４】
（実施例３９）赤血球についての試験
血球凝集の有無を検出する目視検査及び分光測光法によるヘモグロビン放出（溶血性試験）の定量化を実施した。結果がリンパ球に対してより毒性であったので、前の実施例３８のデンドリマーからＣｌＮＨ４を除外した。結果をＰＡＭＡＭ型第４世代デンドリマーについて生成されたものと比較した。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３０】
部分ＡはＣＢＳデンドリマーで処理されたＰＢＭＣ型細胞集団を示し、部分ＢはＰＡＭＡＭ型デンドリマーで処理された集団を示す。暗い細胞の影は、アポトーシス−壊死細胞に対応する。生細胞は、灰色で表す。細胞型の各１つに対応する数値割合（％）を得て、表７に示す値を生じた。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３５５】
図３４ａ及び図３４ｂは、Ｕ８７−ＭＧ細胞系に関して得られた結果を示す。グラフは、デンドリマー（対照）を有しないオリゴヌクレオチド、又は各グラフに示す−電荷／＋電荷比：１：１、１：２、１：４及び１：８をもたらす比におけるデンドリマーの１つと抗ｒｅｖオリゴヌクレオチドとで形成された複合体と一緒にインキュベートした細胞に関して得られた結果に対応する。図３４ａは、ＮＮデンドリマーを用いて行った試験に対応し、一方、図３４ｂは、ＮＮ１６デンドリマーを用いて行った試験に対応する。双方の場合において、グラフから、より多量のデンドリマーと形成された複合体と一緒のＵ８７−ＭＧ細胞のインキュベーションは、トランスフェクションの増加をもたらし、オリゴヌクレオチドと一緒のみの細胞（対照）のインキュベーションの場合に得られた１９％から、−電荷／＋電荷比１：８を有するＮＮ１６デンドリマーと形成したデンドリプレックスと一緒にインキュベートした場合９５％、及び−電荷／＋電荷比１：８をまた有するＮＮ１６デンドリマーと形成したデンドリプレックスと一緒にインキュベートした場合９７．８％に移行したことを観察することができる。したがって、この結果は、オリゴヌクレオチドに関してデンドリマーの増加が、トランスフェクトされた細胞の割合（％）の増加をもたらすことを示し、−電荷／＋電荷比が１：８の場合に最大のトランスフェクション点に達することになった。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３５９】
【図１ａ】非四級化アミン部分を有する本発明のいくつかのカルボシランデンドリマーの構造であって、実施例７、１１、２及び５において合成された構造を示す図である。
【図１ｂ】非四級化アミン部分を有する本発明のいくつかのカルボシランデンドリマーの構造であって、実施例１３及び１４において合成された構造を示す図である。
【図２ａ】四級化アミン部分を有する本発明のいくつかのカルボシランデンドリマーの構造であって、実施例２２、２６、１９及び２７において合成された構造を示す図である。
【図２ｂ】四級化アミン部分を有する本発明のいくつかのカルボシランデンドリマーの構造であって、実施例２８及び２９において合成された構造を示す図である。
【図３】ＯＤＮとＩＭ８デンドリマー（ゲルａではＧＦ）及び（ゲルｂでは異なるＯＤＮ）、ＣｌＮＨ４（ゲルｃ）、ＮＮ及びＰｈｅ（ゲルｄ）並びにＩＭ１６（ゲルｅ、ＩＭ８試料も含む）との間の複合体形成の電気泳動ゲルを示す図である。
【図４】異なるｐＨ値における、ＯＤＮとデンドリマーＰｈｅ、ＣｌＨＮ４（ゲルＡ）、ＮＮ（ゲルＢ）並びにＩＭ８及びＩＭ１６（ゲルＣ）と間で形成された複合体の電気泳動ゲルを示す図である。
【図５】０、６又は２４時間水溶液中に残存する本発明のデンドリマー複合体及びＯＤＮ  ＰＰＴの進展を示す図である。
【図６】アルブミン及びＳＤＳの存在下で、デンドリマー複合体及びＯＤＮ  ＴＡＲからなる試料の電気泳動ゲルを示す図である。左部分は、パラゴンブルー（Ｐａｒａｇｏｎ  Ｂｌｕｅ）を用いたタンパク質の染色であり、右部分は臭化エチジウムを用いたＤＮＡ試料の染色の写真である。
【図７】４０分、４時間及び１７時間、完全培地の存在下でインキュベートされた、本発明のデンドリマー及びＯＤＮからなる試料の進展を示す図である。
【図８】ヒト血清の存在下で、デンドリマー及びＯＤＮの試料の電気泳動ゲルを示す図である。左部分は、ＤＮＡ試料の紫外線光を用いて作製された写真を示し、右部分はパラゴンブルーを用いたゲルのタンパク質の染色を示す。
【図９ａ】０時間、４時間及び２４時間後の、デンドリマー及びＯＤＮの混合物に対応する電気泳動ゲルの臭化エチジウムを用いた染色を示す図である。
【図９ｂ】臭化エチジウムを用いた染色が図９ａに示される、４時間に対応するゲルのタンパク質染色を示す図である。
【図１０】プラスミドＮｆ−ｋａｐｐａＢ−ｌｕｃとＩＭ８デンドリマーとの複合体の試料の電気泳動ゲルを示す図である。
【図１１】ＲＮＡｉと本発明のデンドリマー（ＩＭ８）との複合体形成の試験の電気泳動ゲルを示す図である。
【図１２】細胞をデンドリマーＩＭ８、ＩＭ１６、ＣｌＮＨ４、ＮＮ、Ｐｈｅ及びＳＦとインキューベーション後、濃度１、５、１０、２０及び１００μＭに対するミトコンドリア活性の結果に関するグラフを示す図であり、前の番号付与において占める位置に配置された各濃度に対する対応する棒を有する。
【図１３】濃度１、５、１０及び２０μＭで、赤血球をデンドリマーＩＭ８、ＩＭ１６、ＮＮ、Ｐｈｅ及びＳと一緒にインキュベーション後のヘモグロビン放出の結果に関するグラフを示す図である。各棒は、前回の番号付けに対応する順に置かれたデンドリマーに対応し、棒の各群は、昇り順に並べられた濃度に対応する。
【図１４】本発明の異なるデンドリプレックス及びデンドリマーと一緒にインキュベートされ、トリパンブルー（Ｔｒｙｐａｎ  Ｂｌｕｅ）で染色された細胞の死亡率の割合に関するグラフを示す図である。
【図１５】細胞の割合を、アポトーシス−壊死細胞と生細胞とに対応する大きさ及び複雑度に関して比較するフローサイトメトリー試験の結果を示す図である。Ｘ軸は大きさを、Ｙ軸は複雑度を示し、暗細胞の暗い影はアポトーシス−壊死細胞に対応する。Ａ部分はＣＢＳデンドリマーで処理されたＰＢＭＣ細胞、及びＢ部分はＰＡＭＡＭタイプデンドリマーで処理されたＰＢＭＣ細胞に対応する。
【図１６】ＣＭＳデンドリマー（Ａ）又はＰＡＭＡＭタイプデンドリマー（Ｂ）で処理されたＰＢＭＣ細胞において、フローサイトメトリー試験後に生じた生細胞及びアポトーシス細胞の割合の表示を示す図である。
【図１７】１：対照、２：ＯＤＮ＋ＩＭ８、３：ＯＤＮ＋ＩＭ１６、４：ＯＤＮ＋ＳＦ、５：ＯＤＮ、６：ＩＭ８、７：ＩＭ１６、８：ＳＦと一緒にインキュベートされた細胞についてＤＡＰＩ生細胞染料を用いた染色を示す図である。
【図１８】ＩＭ８−ＯＤＮと一緒の細胞のインキュベーション７２時間後、０、３０、６０、９０、１２０及び１５０秒後に撮られた写真を示す図である。
【図１９】ＰＨＡ及び対照（Ｃ）とともに、異なるＣＢＳデンドリマーを用いて細胞を刺激するリンパ球増殖試験のシンチレーション計数器に生じた結果に関するグラフを示す図である。
【図２０】ＰＢＭＣがＡ：１時間、Ｂ：３時間、Ｃ：２４時間後に一緒にトランスフェクトされたＯＤＮの細胞局在を示す図である。
【図２１Ａ】ＯＤＮを用いてトランスフェクトされた細胞に存在する蛍光分析を示す図であり、上部グラフは青色蛍光、真中は緑色及び下部は赤色に対応する、ＸＹにおける平均切断を示す線にわたって各点で生じた蛍光値を縦座標に示す。
【図２１Ｂ】ＯＤＮを用いてトランスフェクトされた細胞に存在する蛍光分析を示す図であり、青色蛍光（上部グラフ）及び緑色蛍光（下部グラフ）が分析される核の周辺を目的領域（ＲＯＩ）とした蛍光の同様の分析を示す図である。
【図２２】ＰＰＴ又は本発明のデンドリプレックスを用いたトランスフェクション後に生じた蛍光パターンを示す図であり、１：対照；２：ＰＰＴ；３：ＰＰＴ＋ＩＭ８；４：ＰＰＴ＋ＮＮ；５：ＰＰＴ＋Ｐｈｅ；６：ＰＰＴ＋ＩＭ１６である。
【図２３】ＣｌＮＨ４及びＰＰＴデンドリプレックスを用いたトランスフェクション後に生じた蛍光パターンを示す図である。
【図２４】ＰＰＴ＋ＮＮで処理された細胞のＸＹの中央平面における蛍光のヒストグラムを示す図であり、上部のグラフは平面にわたって見られる緑色蛍光の強度を縦軸で示し、真中のグラフは赤色蛍光に対応する類似分析、及び下部のグラフは青色蛍光に対応する類似分析を示す。
【図２５】感染前後のＮＮデンドリマーの異なる濃度を有する細胞数によってＨＩＶのＤＮＡ複写数を計算して生じたグラフィックを示す図である。
【図２６ａ】レーン上に示されるＮＮデンドリマーのミクロモル濃度（μＭ）をアクリルアミド／ビスアクリルアミドの電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２６ｂ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＮＮデンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／８（「１」と印したレーン）、１／４（「２」と印したレーン）、１／２（「３」と印したレーン）又は１／１（「４」と印したレーン）のメトトレキサートと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２６ｃ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＮＮデンドリマーの試料又は異なるヘパリン単位：１０Ｕ（「１」と印したレーン）、１Ｕ（「２」と印したレーン）、０．５Ｕ（「３」と印したレーン）又は０．１Ｕ（「４」と印したレーン）と一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２６ｄ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＮＮデンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／３（「１」と印したレーン）、１／１．５（「２」と印したレーン）、４／１（「３」と印したレーン）又は１０／１（「４」と印したレーン）のインシュリンと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２７ａ】レーン上に示されるＮＮ１６デンドリマーのミクロモル濃度（μＭ）をアクリルアミド／ビスアクリルアミドゲルの電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２７ｂ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＮＮ１６デンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／１６（「１」と印したレーン）、１／８（「２」と印したレーン）、１／４（「３」と印したレーン）又は１／２（「４」と印したレーン）のメトトレキサートと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２７ｃ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＮＮ１６デンドリマーの試料又は異なるヘパリン単位：１０Ｕ（「１」と印したレーン）、１Ｕ（「２」と印したレーン）、０．５Ｕ（「３」と印したレーン）又は０．１Ｕ（「４」と印したレーン）と一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２７ｄ】非薬剤（対照）一緒にインキュベートされたＮＮ１６デンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／３（「１」と印したレーン）、１／１．５（「２」と印したレーン）、４／１（「３」と印したレーン）又は１０／１（「４」と印したレーン）のインシュリンと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２８ａ】レーン上に示されるＩＭ１６デンドリマーのミクロモル濃度（μＭ）をアクリルアミド／ビスアクリルアミドゲルの電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２８ｂ】非薬剤（対照）一緒にインキュベートされたＩＭ１６デンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／１６（「１」と印したレーン）、１／８（「２」と印したレーン）、１／４（「３」と印したレーン）又は１／２（「４」と印したレーン）のメトトレキサートと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２８ｃ】非薬剤（対照）と一緒にインキュベートされたＩＭ１６デンドリマーの試料又は異なるヘパリン単位：１０Ｕ（「１」と印したレーン）、１Ｕ（「２」と印したレーン）、０．５Ｕ（「３」と印したレーン）又は０．１Ｕ（「４」と印したレーン）と一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２８ｄ】非薬剤（対照）一緒にインキュベートされたＩＭ１６デンドリマーの試料又はデンドリマー／薬剤分子の比が１／３（「１」と印したレーン）、１／１．５（「２」と印したレーン）、４／１（「３」と印したレーン）又は１０／１（「４」と印したレーン）のインシュリンと一緒にインキュベートした該デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。
【図２９】非薬剤（「Ｄ」と印したレーン）と一緒にインキュベートした又はｐＨがレーン上に示された数値を取ったインシュリン（「Ｃ」と印したレーン）と一緒にインキュベートしたＩＭ１６デンドリマーの試料を電気泳動した後生じるバンドのパターンを示す図である。図の右側及び左側に現れる２つの写真の各々は、同じ電気泳動条件において生じる、異なるゲルに対応する。
【図３０】示された濃度で、各棒下に示された化合物と一緒にＵ８７−ＭＧ細胞（「Ａ」と印した上のグラフ）又はＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞（「Ｂ」と印した下のグラフ）をインキュベートした後生じる対照（「Ｃ−」）について言う増殖因子の値を縦軸に示す棒グラフ示す図である。Ｃ−：負の制御、さらなる化合物を有さない培養地でインキュベートされたのみの試料に対応する。
【図３１】示された濃度及び容量で、２４時間（「Ａ」と印した上のグラフ）、３日間（「Ｂ」と印した真中のグラフ）又は７日間（「Ｃ」と印した下のグラフ）、棒下に示される化合物と一緒にインキュベートしたＵ８７−ＭＧ細胞中でＭＴＴと一緒に試験を行った後生じる対照（「Ｃ−」）の生存可能因子に関する割合として計算される、生存可能因子の値を縦軸に示す棒グラフを示す図である。Ｄｅｘｔｒ：Ｄｅｘｔｒａｎ；Ｓｐｆｅｃｔ：Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ。
【図３２】示された濃度及び容量で、棒下に示される化合物と一緒に２４時間インキュベートされたＵ８７−ＭＧ細胞培養液上清においてラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の定量後生じる対照（「Ｃ−」）の細胞毒性因子に関する割合として表される、細胞毒性因子の値を縦軸に示す棒グラフを示す図である。Ｄｅｘｔｒ：Ｄｅｘｔｒａｎ；Ｓｐｆｅｃｔ：Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ。ＤＭＥＭ：細胞を有しない培養地に対応する値。
【図３３】ＭＴＴ（「Ａ」と印した上のグラフ）を用いた試験を実施後生ずる結果に対応する対照（「Ｃ」）に関する割合、又は示される濃度及び容量において、棒下に示される化合物と一緒に２４時間インキュベートしたＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞における培養液上清中のラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）（「Ｂ」と印した下のグラフ）の定量の値を縦軸に示す棒グラフを示す図である。Ｄｅｘｔｒ：Ｄｅｘｔｒａｎ；Ｓｐｆｅｃｔ：Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ。ＤＭＥＭ：細胞を有しない培養地に対応する値。
【図３４ａ】デンドリマー（「Ｃｔｒｌ」と印したグラフ、対照）不在下で、フルオレセイン（オリゴ−ＦＩＴＣ）で標識された抗ｒｅｖオリゴヌクレオチドと一緒に、又は各グラフに示される−電荷／＋電荷比：１：１、１：２、１：４及び１：８をもたらす比率におけるオリゴヌクレオチドとＮＮデンドリマーとの間に形成される複合体と一緒にインキュベートしたＵ８７−ＭＧ細胞を分析後フローサイトメトリーにおいて生じるグラフを示す図である。
【図３４ｂ】デンドリマー（「Ｃｔｒｌ」と印したグラフ、対照）不在下で、フルオレセイン（オリゴ−ＦＩＴＣ）で標識された抗ｒｅｖオリゴヌクレオチドと一緒に、又は各グラフに示される−電荷／＋電荷比：１：１、１：２、１：４及び１：８をもたらす比率におけるオリゴヌクレオチドとＮＮ１６デンドリマーとの間に形成される複合体と一緒にインキュベートしたＵ８７−ＭＧ細胞を分析後フローサイトメトリーにおいて生じるグラフを示す図である。
【図３５】デンドリマー（「Ｃｔｒｌ」と印したグラフ、対照）不在下で、フルオレセイン（オリゴ−ＦＩＴＣ）で標識された抗ｒｅｖオリゴヌクレオチドと一緒に、又は各グラフに示される−電荷／＋電荷比：１：１、１：２、１：４及び１：８をもたらす比率におけるオリゴヌクレオチドとＮＮ１６デンドリマーとの間に形成される複合体と一緒にインキュベートしたＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞を分析後フローサイトメトリーにおいて生じるグラフを示す図である。