【手続補正書】
【提出日】平成21年3月19日(2009.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
C-x(3)-C-x(7,9)-C-C及びC-C-x(8)-C-x-C；又は
C-C-x(8)-C-x-C及びC-x-C-x(8,11)-C；又は
C-x(3)-C-x(7,9)-C-C及びC-x-C-x(8,11)-C；
により表されるアミノ酸配列を含んで成る、抗菌活性を有するポリペプチド。
【請求項２】
C-x(3)-C-x(7,9)-C-C及びC-C-x(8)-C-x-C及び C-x-C-x(8,11)-Cにより表されるアミノ酸配列を含んで成る、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
デフェンシンである請求項１又は２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
５，６，７，８，９又は10個のシステイン残基を含んで成る請求項１〜３のいずれか1項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
（ａ）配列番号2のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号4のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号6のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号8のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 10のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 12のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 14のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 16のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号18のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号20のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号22のアミノ酸 1 − 45, 
配列番号24のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号26のアミノ酸 1 − 44,又は
配列番号28のアミノ酸 1 − 59と少なくとも60％の同一性を有するアミノ酸配列を含んで成るポリペプチド；或いは
（ｂ）（i）配列番号1のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号3のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号5のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号7のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号9のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号11のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号 13のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号15のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号17のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号 19のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号21のヌクレオチド 118 − 252, 
配列番号23のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号25のヌクレオチド 121 − 252, 又は
配列番号27のヌクレオチド 145 − 321；又は
（ii）（i）の相補的鎖と、
少なくとも中位の緊縮条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされる、請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
配列番号2のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号4のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号6のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号8のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 10のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 12のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 14のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 16のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号18のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号20のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号22のアミノ酸 1 − 45, 
配列番号24のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号26のアミノ酸 1 − 44,又は
配列番号28のアミノ酸 1 − 59と、
少なくとも65％の同一性、好ましくは少なくとも70％の同一性、少なくとも80％の同一性、少なくとも85％の同一性、少なくとも90％の同一性、少なくとも95％の同一性又は少なくとも99％の同一性を有するアミノ酸配列を含んで成る請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
（i）配列番号1のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号3のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号5のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号7のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号9のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号11のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号 13のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号15のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号17のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号 19のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号21のヌクレオチド 118 − 252, 
配列番号23のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号25のヌクレオチド 121 − 252, 又は
配列番号27のヌクレオチド 145 − 321；又は（ii）（i）の相補的鎖と、
中位の緊縮条件、好ましくは中位の高い又は高い緊縮条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされる請求項５記載のポリペプチド。
【請求項８】
配列番号2, 配列番号4, 配列番号6, 配列番号8, 配列番号10, 配列番号12, 配列番号14, 配列番号16, 配列番号18, 配列番号20, 配列番号22, 配列番号24, 配列番号26,又は 配列番号28、から成る請求項１〜７のいずれか１項記載のポリペプチド。
【請求項９】
配列番号2のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号4のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号6のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号8のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 10のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 12のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 14のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 16のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号18のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号20のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号22のアミノ酸 1 − 45, 
配列番号24のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号26のアミノ酸 1 − 44,又は
配列番号28のアミノ酸 1 − 59から成る請求項８記載のポリペプチド。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項記載のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含んで成るポリヌクレオチド。
【請求項１１】
配列番号1 , 配列番号3, 配列番号5, 配列番号7, 配列番号9, 配列番号11 , 配列番号13, 配列番号15, 配列番号17, 配列番号19, 配列番号21 , 配列番号23, 配列番号25, 又は配列番号27の成熟ポリペプチドコード配列に少なくとも１つの突然変異を有し、ここで前記変異体ヌクレオチド配列が、
配列番号2のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号4のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号6のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号8のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 10のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号 12のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 14のアミノ酸 1 − 46, 
配列番号 16のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号18のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号20のアミノ酸 1 − 48, 
配列番号22のアミノ酸 1 − 45, 
配列番号24のアミノ酸 1 − 49, 
配列番号26のアミノ酸 1 − 44,又は
配列番号28のアミノ酸 1 − 59から成るポリペプチドをコードする請求項10記載のポリヌクレオチド。
【請求項１２】
発現宿主においてポリペプチドの生成を指図する１又は複数の制御配列に操作可能的に連結される請求項10記載のポリヌクレオチドを含んで成る核酸構造体。
【請求項１３】
請求項12記載の核酸構造体を含んで成る組換え発現ベクター。
【請求項１４】
請求項12記載の核酸構造体を含んで成る組換え宿主細胞。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項記載のポリペプチドの生成方法であって、（ａ）その野生型において、前記ポリペプチドの生成の助けと成る条件下でポリペプチドを生成することができる細胞を培養し；そして（ｂ）前記ポリペプチドを回収することを含んで成る方法。
【請求項１６】
請求項１〜９のいずれか１項記載のポリペプチドの生成方法であって、（ａ）前記ポリペプチドの生成の助けと成る条件下で、前記ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含んで成る核酸構造体を含んで成る宿主細胞を培養し；そして（ｂ）前記ポリペプチドを回収することを含んで成る方法。
【請求項１７】
（ａ）（i）配列番号1のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号3のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号5のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号7のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号9のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号11のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号 13のヌクレオチド 118 − 255, 
配列番号15のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号17のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号 19のヌクレオチド 112 − 255, 
配列番号21のヌクレオチド 118 − 252, 
配列番号23のヌクレオチド 151 − 297, 
配列番号25のヌクレオチド 121 − 252, 又は
配列番号27のヌクレオチド 145 − 321；又は（ii）(i)の相補的鎖と、
中位の緊縮条件、好ましくは中位の高い又は高い緊縮条件下でDNA集団とをハイブリダイズし；そして（ｂ）抗菌活性を有するポリペプチドをコードする、ハイブリダイズするポリヌクレオチドを単離することにより得られる、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１８】
（ａ）本発明の抗菌活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含んで成るトランスジェニック直物又は植物細胞を、前記ポリペプチドの生成の助けとなる条件下で培養し；そして（ｂ）前記ポリペプチドを回収することを含んで成る、請求項１〜９のいずれか１項記載のポリペプチドの生成方法。
【請求項１９】
請求項１〜９のいずれか１項記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにより形質転換されている、トランスジェニック植物、植物部分又は植物細胞。
【請求項２０】
請求項１〜９のいずれか１項記載の抗菌ポリペプチドと微生物細胞とを接触することを含んで成る、微生物細胞を殺害するか又はその細胞の増殖を阻害するための方法。
【請求項２１】
医薬、又は獣医又はヒト抗菌治療又は予防剤として使用するための請求項１〜９のいずれか１項記載の抗菌ポリペプチド。
【請求項２２】
微生物感染の処理又は予防使用のための獣医又はヒト治療剤の調製への請求項１〜９のいずれか１項記載の抗菌ポリペプチドの使用。
【請求項２３】
動物飼料への少なくとも１つの請求項１〜９のいずれか１項記載の抗菌ポリペプチドの使用。