【誤訳訂正書】
【提出日】平成21年10月2日(2009.10.2)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００４】
詳細な説明
略語及び定義
植物性薬品：植物性薬品は、植物から単離された化合物を意味する。植物性抗-菌類化合物は、例えばオシマム・バシリクム（Ocimum basilicum）（バジル）、シンナモマム・アロマチクムvar. カッシア（Cinnamomum aromaticum var. Cassia）（シナモン）、シドルス・リバニ（Cedrus libani）（レバノンシーダー（Cedar of Lebanon））、任意のシドルス（Cedrus）spp.、カメメルム・ノビレ（Chamaemelum nobile）（カミツレ）、シムボポゴン・ナルヅス（Cymbopogon nardus）（シトロネラ）、シジギウム・アエロマチクム（Syzygium aromaticum）（クローブ及びチョウジ油）、クニヌム・シミヌム（Cuminum cyminum）（クミン）、フェニクルム・ヴルガレ（Foeniculum vulgare）（フェンネル）、メラレウカ・アルテルンフォリア（Melaleuca alternfolia）（ティーツリー（Tea Tree））、メンタ x ピペリタ（Mentha x piperita）（ペパーミント）、メンタ・スピカタ（Mentha spicata）（スペアミント）、クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）（ターメリック（Tumeric）、シムボポゴン・シトラテス（Cymbopogon citrates）（レモングラス）、サンタルム・アルブム（Santalum album）（ビャクダン）から単離されるともに、抗-菌類特性を有する植物から単離された他の化合物からも単離することができる。
天然の抗-菌類化合物：天然の抗-菌類化合物（又は天然に存在する抗-菌類化合物）は、植物性供給源（植物性抗-菌類化合物を参照されたい）又は他の天然に存在する供給源（例えば唾液、両生類動物の皮膚、無脊椎動物（例えば線虫））から単離された化合物である。これらの化合物は、動物又は植物によって産生されるタンパク質又は他の生成物でありえる。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１４】
例えば、ミコナゾールは、テルビナフィン及びトルナフテートと異なり、抗細菌活性を有するので、前者を後者のいずれかの薬剤と併用することによって、消毒活性スペクトルが拡大され、皮膚糸状菌、酵母及び細菌までカバーされるであろう。さらにまた、ミコナゾールは制-菌類剤であるので、前記をテルビナフィン又はトルナフテート（我々は前記が菌類胞子の殺活性を有することを示した）のどちらかと併用することによってこの併用の殺滅活性を拡大させるであろう。これらの併用が例として提供され、当業者はこれらの開示から相乗的に作用しえる他の効果的な併用を演繹することができる。
さらにまた、我々は、臭いの原因となる細菌及び蜂巣炎を引き起こす細菌の増殖を制限する組成物を記載する。これらの化合物を処理組成物又は前処理組成物に添加することによって、菌類の汚染を手当てしつつ足の臭い及び蜂巣炎を抑制することを含む有利な相乗効果がもたらされるであろう。好ましい実施態様では、前記組成物は、合成抗-菌類化合物及び天然に存在する抗-菌類化合物の混合物（例えばテルビナフィン若しくはトルナフテート及びレモングラス油、又はテルビナフィン若しくはトルナフテート、レモングラス油）を含む。本発明者らはまた、細菌のみを処理するために、殺菌化合物（天然に存在する化合物（チョウジ油、レモングラス油及びビャクダン油を含むがただしこれらに限定されない））だけを使用することもまた有利であると結論した（例えば基層を殺菌化合物で処理又は前処理する）。殺菌化合物で処理する利点には基層の臭いの減少が含まれるが、ただしこれに限定されない。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
本明細書で提供されるものは、抗細菌、抗-菌類及び殺胞子特性を含む、新規に見出された化合物の特性である。さらにまた新規なものは、一般的な菌類（皮膚糸状菌、酵母など）及び細菌に対する基層の処理及び前処理で予想外の結果を提供する化合物の併用である。本発明者らは、天然に存在する殺-菌類剤を公知の殺-菌類剤と併用することによって予想外に良好な結果がもたらされることを初めて示し、本発明者らはまた天然に存在する殺-菌類化合物の使用は細菌に対するそれらの有用性を拡大することを初めて示した。本発明者らは以下のように結論した：1）精油（特にレモングラス油及びチョウジ油）は天然の生成物として単独で用いて基層に感染する微生物を抑制することができる；及び2）精油を合成抗-菌類化合物と併用することによって、広い活性スペクトルが提供されるであろう。一般的な微生物の処理に加えて、前記を用いて、薬剤耐性微生物（例えばテルビナフィン耐性紅色白癬菌及び多剤耐性カンジダ）を処理するとともに、精油と併用する場合には合成薬剤の濃度を下げて使用することができる。我々の方法は、強力な抗-菌類活性及び抗細菌活性を有する消毒方法及びレジーメンを特定し、さらに基層（すなわち本明細書に記載の全ての基層）（靴を含むが、ただし前記に限定されない）の菌類汚染を予防及び処理する効果的な手段を提供する。
抗-菌類化合物は強力な抗-皮膚糸状菌活性を有することを示したが、本発明者らはまた、バイオアッセイを用いてこれら薬剤の皮膚糸状菌に対する活性を示した。これらの結果は、基層の処理及び前処理は新規で予想を超える結果をもたらし、製造業者及び消費者に、基層（靴を含むが、ただし前記に限定されない）上の細菌、菌類、皮膚糸状菌及び他の望ましくない微生物を抑制する技術及び組成物を提供することができることを示した。
特定の賦形剤（洗剤、油など）の使用もまた本発明で役割を果たし、基層への浸透、浸透速度、被覆の完全性などを高めることができる。これらはまた、抗-菌類化合物及び抗細菌化合物を胞子に浸透させるために用いることができる。賦形剤はまた、胞子の休眠を終了させ、発芽を開始させ、したがって胞子を前記化合物にいっそう感受性にさせるために用いることができる。
前記抗-菌類化合物及び抗細菌化合物を含む組成物はまた、基層への付着を高める化合物を含むことができる。基層への付着を高めることによって、化合物が基層と接触している時間を延長することができる。
本発明の特徴は、以下の実施例（前記は本発明の範囲を限定するものと解してはならない）を参考にさらに理解を進めることができる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２１】
実施例6：in vitro並びに靴及び中敷生検ディスクアッセイを用いる、合成抗-菌類化合物及び靴に感染する微生物に対抗する天然の物質の活性の評価
以下の化合物の靴を消毒する活性を調べた：テルビナフィン、トルナフテート、ミコナゾール、シダー（Cedrus）油、及びティーツリー油、チョウジ油、レモングラス油、ビャクダン油及びスペアミント油。
in vitro感受性検査
最少阻害濃度（MIC）及び最少殺-菌類濃度（MFC）の決定：合成及び天然の生成物の皮膚糸状菌に対する最少阻害濃度を、臨床検査標準協会（Clinical Laboratory Standards Institute（CLSI））（従前は臨床検査標準委員会（National Commitee of Clinical Laboratory Standards, NCCLS））のM38A標準方法（Center for Medical Mycologyで皮膚糸状菌について開発された）の変法（1）を用いて決定したが、一方、これらの物質のカンジダ種に対するMICは、CLSI M27-A2方法論（2）を用いて決定した。細菌に対するMICの決定に用いた方法はCLSI文書M7-A7（3）を骨子とした。
皮膚糸状菌については、テルビナフィン、トルナフテートの段階稀釈を0.004−2μg/mLの範囲で調製し、一方、ミコナゾールについては、濃度は0.015−8μg/mLの範囲とした。最後に精油については、試験した濃度は0.03−16μg/mLの間であった。唯一の例外はティーツリー油であり、この場合、稀釈は0.0078−4μg/mLの範囲で調製した。MICは4日で読み取り、増殖コントロールと比較したとき菌類の増殖を80％阻害する薬剤の最低濃度と定義した（表2）。
カンジダ種に対する薬剤のMICを決定するために、テルビナフィン及びトルナフテートの段階稀釈を0.125−64μg/mLの範囲で、ミコナゾールについては、0.03−16μg/mLの範囲で調製し、さらにティーツリー油は0.125−4μg/mLの範囲を有した。残りの精油は、0.03−16μg/mLの稀釈範囲で調製した。カンジダについては、MICは24時間で読み取り、増殖コントロールと比較したとき菌類の増殖を50％阻害するための最低濃度と定義した（表4）。
細菌種については、抗-菌類物質及び精油の抗-菌類活性及び抗細菌活性の判定に用いた培地は、それぞれRPMI1640（Hardy Diagnostics, Santa Maria, CA）及びMueller-Hinton（Oxoid Ltd., Basingstoke, Hampshire, Emgland）であった。ミコナゾール、テルビナフィン、及びトルナフテートの段階稀釈を、0.125−64μg/mLの範囲で調製し、ティーツリー油の段階稀釈は0.0078−4μg/mLの範囲で調製し、一方、残りの精油については、0.031−16μg/mLの範囲で調製した。MICは16時間で読み取り、増殖コントロールと比較したとき細菌の増殖を80％阻害する薬剤の最低濃度と定義した（表5）。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３１】
結果
足で増殖し、足白癬を引き起こすことが知られている皮膚糸状菌、爪の感染を引き起こすことが知られている酵母、及び足の感染を引き起こすか又は不快な臭いを生じえる細菌に対して有効な全ての精油の抗微生物活性。
C.1.2.皮膚糸状菌に対する活性：
これらの実験で、我々は、皮膚糸状菌、酵母及び細菌に対する精油の活性を評価した。表7は、精油の抗皮膚糸状菌活性の要旨を提示する。表から分かるように、試験した5つの精油が、皮膚糸状菌に対して強力な抗-菌類活性を示し、MICは0.125から0.5μg/mLの範囲であった。
C.1.2酵母に対する活性：
次に、我々は、酵母（C.アルビカンス及びC.パラプシローシス）を抑制するこれらの製油の能力を試験した。表8から分かるように、天然の精油のうち4つ（チョウジ、レモングラス、スペアミント及びティーツリー油）が、これらの臨床的に重要な菌類に対して活性を有し、MICは0.063−0.5μg/mLの範囲であった。ただ1つの例外はビャクダン油であり、4から＞16μg/mLのMICを有した（表3）。これらの結果は、ビャクダン油は調べたカンジダ種及び株に対して抑制活性を示さないことを示唆した。
C.1.3細菌に対する活性：
我々は、次に、（a）臭い発生細菌（ミクロコッカス及びコリネバクテリウム）及び（b）黄色ブドウ球菌（蜂巣炎の主要原因）に対する精油のin vitro活性を試験した。表9で分かるように、クローブの芽油、レモングラス油及びビャクダン油は、調べた臭い産生細菌（MIC=0.25−2μg/mL）に対し活性を有したが、スペアミント及びティーツリー油はin vitro活性を示さなかった（MIC=2−8μg/mL）。さらにまた、チョウジ油、レモングラス油及びビャクダン油は、ブドウ球菌（Staphylococcus）に対していくらかの活性を示した（MIC=0.25−8μg/mL）。さらにまた、レモングラス油は、チョウジ油及びビャクダン油よりも1から2段階稀釈低いMICを有する傾向があり、前者はより活性が高いことを示した。対照的に、スペアミント油及びティーツリー油は、調べた病原性細菌単離株のいずれに対しても顕著な活性は示さなかった（MIC=8−32μg/mL）。これらの実験は、チョウジ油及びレモングラス油は他の精油と比較して最も広い抗微生物活性を有し、天然生成物として靴の処理に使用できる有望な候補物質であることを示した。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
D.1.微生物感染靴に対する抗-菌類剤及び精油の併用活性の評価：
合成抗-菌類剤（例えばテルビナフィン、トルナフテート及びミコナゾール）及び精油（例えばチョウジ油、レモングラス油、ビャクダン油、スペアミント油及びティーツリー油）を併用して用いることについての潜在能力を判定するために、我々は、テルビナフィン、ミコナゾール及びトルナフテートに対し多剤耐性を示す、テルビナフィン耐性毛瘡白癬菌及びC.アルビカンス株（株番号MRL8280）を抑制する精油の能力を評価した。図10に示すように、試験した全てのテルビナフィン耐性毛瘡白癬菌単離株は、天然精油に対して感受性を有し、MICは0.031から25μg/mLの範囲であった。もっとも強力な油はレモングラスであり、これらの白癬菌単離株に対して非常に低いMICを示した。
同様に、前記精油は、多剤耐性C.アルビカンス株の抑制に有効であった。この耐性株の抑制にもっとも有効な精油はレモングラスであった（表11参照）。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３３】
D.結論
これらのデータをもとにして以下のように結論される：1）精油（特にレモングラス油及びチョウジ油）は天然産物として単独で用いて、靴に感染する微生物を抑制することができる。2）精油を合成抗-菌類剤併用することによって、広い活性スペクトルが提供され、テルビナフィン耐性紅色白癬菌及び多剤耐性カンジダが処理されるとともに、精油と併用したときにはより低い濃度の合成薬剤の使用が可能になる。我々の方法によって、強力な抗-菌類活性及び抗細菌活性を有し、靴及び他の基層の菌類汚染を予防及び処理する効果的な手段を提供する消毒“系”が特定された。
テルビナフィン、トルナフテート及び精油は、足に感染して細菌コロニーを生じる微生物に対して強力な抗皮膚糸状菌活性を有することをin vitro感受性アッセイを用いて示したが、我々は、次に、皮膚糸状菌に対するこれらの薬剤の活性を、我々が開発した靴ディスクバイオアッセイ及びSEM技術を用いて調べた。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
我々の発見は以下を示している：
試験した合成薬剤（テルビナフィン、トルナフテート、ミコナゾール）の中で、皮膚糸状菌を抑制するもっとも強い活性を有する薬剤はテルビナフィンであり、トルナフテート及びミコナゾールがこれに続く。
テルビナフィン及びトルナフテートは、靴に存在しえる皮膚糸状菌胞子を殺すことができるが、ミコナゾールは皮膚糸状菌胞子に対して静止的である。
テルビナフィン及びミコナゾールはまた酵母のカンジダ種に対して有効であったが、ただし株依存性及び種依存性態様であった。
ミコナゾールは細菌種に対して活性を示したが、トルナフテートはS.エピデルミディスに対して株依存性抑制を示した。
試験した天然の生成物（ティーツリー油、シダー油、チョウジ油、レモングラス油、ビャクダン油、スペアミント油）の中では。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４１】
3．我々の発見により以下のことが示された：
精油は、靴に感染する皮膚糸状菌、酵母及び細菌を含む広い抗微生物活性を有する。もっとも活性の高い精油はレモングラスであり、チョウジがこれに続く。
精油は、不快な臭いを産生する細菌及び黄色ブドウ球菌（蜂巣炎の主要原因）に対して抑制活性を有する。
天然の精油は、テルビナフィン耐性皮膚糸状菌とともに多剤耐性C.アルビカンスに対して強力なin vitro活性を有する。レモングラスはこれに関してもっとも強力な活性を有する。
バイオアッセイ実験では、テルビナフィン及びトルナフテート前処理は、ビヒクルコントロールと比較して、靴の中敷及び革生検標本上で菌類を抑制することができた。テルビナフィンはもっとも活性の高い前処理薬剤であった。
テルビナフィン後処理は、靴生検ディスク上の既に発生した菌類汚染を処理することができた。トルナフテートは後処理薬剤としての抗-菌類活性を示したが、その活性はテルビナフィンのそれよりも低かった。ティーツリー油は後処理薬剤として有効ではなかった。
合成抗-菌類剤と精油との併用によって、低用量の合成抗-菌類剤を使用して、感染した靴中敷を防止及び処理することができる。
我々のデータは、薬剤の併用が、耐性菌類株の抑制により消毒剤の活性スペクトルを拡張することによって利点を提供する可能性が高いことを示している。
結論すれば、本発明の消毒剤は強力な抗-菌類活性及び抗細菌活性を有し、靴及び他の基層の菌類汚染を防止及び処理する効果的な手段を提供する。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
表7皮膚糸状菌に対する精油の活性
2009512729.tif 000001
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
表8：酵母単離株に対する天然精油の活性
2009512729.tif 000002
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
表9：臭い発生細菌単離株（A）及び病原性細菌単離株(B)に対する天然の油の活性
2009512729.tif 000003
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５１】
表10：テルビナフィン耐性紅色白癬菌に対する天然の油の活性
2009512729.tif 000004
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５２】
表11：C.アルビカンスの多剤耐性株（株8280）に対する精油の活性
2009512729.tif 000005
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第一の抗-菌類化合物及び第二の抗-菌類化合物を含む組成物であって、前記第一の抗-菌類化合物がテルビナフィンまたはミコナゾールであり、前記第二の抗-菌類化合物がレモングラス油、チョウジ油またはバジル油である、前記組成物。
【請求項２】
第一の抗-菌類化合物がテルビナフィンである、請求項1に記載の組成物。
【請求項３】
第二の抗-菌類化合物がレモングラス油またはチョウジ油である、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
さらに第三の抗-菌類化合物を含む、請求項１〜３のいずれか1項記載の組成物。
【請求項５】
第三の抗-菌類化合物がレモングラス油、チョウジ油またはバジル油であり、前記第三の抗-菌類化合物が第二の抗-菌類化合物と異なる、請求項４記載の組成物。
【請求項６】
第一の抗-菌類化合物がテルビナフィンである、請求項４記載の組成物。
【請求項７】
第一の抗-菌類化合物がテルビナフィンであり、第二の抗-菌類化合物がレモングラス油であり、第三の抗-菌類化合物がチョウジ油である、請求項４記載の組成物。
【請求項８】
第二の抗-菌類化合物が0.031〜16μg/mlの濃度である、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
テルビナフィンが0.125〜64μg/mlの濃度である、請求項２記載の組成物。
【請求項１０】
請求項１記載の組成物を基層に適用することを含む、表皮と接触する基層を処理する方法。
【請求項１１】
第一の抗-菌類化合物及び第二の抗-菌類化合物がただ1回適用される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
第一の抗-菌類化合物及び第二の抗-菌類化合物が別個に適用される、請求項1０に記載の方法。
【請求項１３】
請求項1記載の組成物が第三の抗-菌類化合物を含み、前記第三の抗-菌類化合物がレモングラス油、チョウジ油またはバジル油であり、前記第三の抗-菌類化合物が第二の抗-菌類化合物と異なる、請求項１０記載の方法。