【手続補正書】
【提出日】平成22年12月27日(2010.12.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次に示す一般式（１）で示されるフラボノイド、又は生理的に許容されるその塩からなるメラニン産生抑制剤。
【化１】
2009155235.tif 000001
一般式（１）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜８のアルキル基、炭素数１〜８のアルケニル基を表し、且つ、少なくともひとつは酸素原子を含む基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、Ｅ、Ｆは水素原子、水酸基、置換基を有してもよい炭素数１〜４のアルキル基、置換基を有してもよい炭素数６〜１２の芳香族基を表し、該置換基は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基であり、Ｘは下記に示す置換基（１）、（２）または原子無存在を表し、破線の結合はあってもなくてもよいものとする。）
【化２】
2009155235.tif 000002
置換基（１）
（但し、式中Ｒ1、Ｒ2はそれぞれ独立に水素原子又は同一分子内の他の原子と結合している酸素原子を表す。）
【化３】
2009155235.tif 000003
置換基（２）
【請求項２】
次に示す一般式（２）で示されるフラボノイド又は生理的に許容されるその塩からなる、請求項１に記載のメラニン産生抑制剤。
【化４】
2009155235.tif 000004
一般式（２）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｇ、Ｈはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、又は下記置換基（３）に表される炭素数６〜１２の芳香族基を表し、少なくともＧ、Ｈのどちらか一方は芳香族基であるものとする。）
【化５】
2009155235.tif 000005
置換基（３）
（但し、式中Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキ
ルオキシ基、他の同一分子内の原子と結合している酸素原子又は炭素数４〜６のアルケニル基を表す。）
【請求項３】
次に示す一般式（３）で示されるフラバノン誘導体又は生理的に許容されるその塩からなる、請求項１に記載のメラニン産生抑制剤。
【化６】
2009155235.tif 000006
一般式（３）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5は前記と同じ基を表し、式中Ｉは水素原子、水酸基、又は下記置換基（４）に表される炭素数６〜１２の芳香族基であるものとする。破線は一般式（３）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【化７】
2009155235.tif 000007
置換基（４）
（但し、式中R6、R7、R8はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、他の同一分子内の原子と結合している酸素原子又は炭素数４〜６のアルケニル基を表す。）
【請求項４】
次に示す一般式（８）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩からなる、メラニン産生抑制剤。
【化８】
2009155235.tif 000008
一般式（８）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ18、Ｒ19はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基から選ばれる基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、Ｒ20は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【請求項５】
請求項１乃至請求項４のメラニン産生抑制剤を含有することを特徴とする、皮膚外用剤。
【請求項６】
前記化合物がマメ科ハギ属トウクサハギから抽出されたものであることを特徴とする、請求項５に記載の皮膚外用剤。
【請求項７】
前記化合物が外用剤全体に対して０．００００１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする、請求項５又は請求項６に記載の皮膚外用剤。
【請求項８】
化粧料であることを特徴とする、請求項５乃至請求項７のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項９】
医薬部外品であることを特徴とする、請求項５乃至請求項８のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項１０】
美白化粧料であることを特徴とする、請求項５乃至請求項９のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項１１】
メラニン産生抑制効果を有することを特徴とする、請求項５乃至請求項１０のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項１２】
前記化合物を０．００００１〜１０質量％含有するマメ科植物の抽出物であることを特徴とする、請求項５乃至請求項１１のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項１３】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（５）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化９】
2009155235.tif 000009
一般式（５）
（但し、式中J、Kはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜８のアルキル基、炭素数１〜８のアルケニル基を表す。Ｒ12、Ｒ13はそれぞれ独立に水素原子、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基、他の同一分子内原子と結合している酸素分子を表す。破線は一般式（５）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【請求項１４】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（６）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１０】
2009155235.tif 000010
一般式（６）
（但し、式中J、Kは前記と同じ基を表し、Ｌは水素原子、水酸基を表し、Ｒ14、Ｒ15はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。破線は一般式（６）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【請求項１５】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（７）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１１】
2009155235.tif 000011
一般式（７）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ16は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表し、Ｒ17は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭
素数１〜６のアルケニル基を表す。破線は一般式（７）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【請求項１６】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（８）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１２】
2009155235.tif 000012
一般式（８）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ18、Ｒ19はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基から選ばれる基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、Ｒ20は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【請求項１７】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（９）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１３】
2009155235.tif 000013
一般式（９）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20は前記と同じ基を表し、Ｍは水素原子、酸素原子、水酸基を表す。破線はあってもなくてもよい。）
【請求項１８】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（１０）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１４】
2009155235.tif 000014
一般式（１０）
（但し、式中A、B、C、Dは前記と同じ基を表し、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ23はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【請求項１９】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（１１）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１５】
2009155235.tif 000015
一般式（１１）
（但し、式中A、B、C、Dは前記と同じ基を表し、Ｒ24は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基を表す。）
【請求項２０】
前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（１２）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【化１６】
2009155235.tif 000016
一般式（１２）
（但し、式中A、B、C、D、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ23は前記と同じ基を表し、Ｒ25は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜４のヒドロキシアルキル基を表す。）
【請求項２１】
一般式（１）に表される化合物又はその塩を、マメ科ハギ属トウクサハギ地下部から水を含んでもよい有機溶媒により抽出した抽出物として含有することを特徴とする、請求項５乃至請求項１２いずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項２２】
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいアルコール、ハロゲン化炭化水素、ジ（C１からC４）アルキルケトンであることを特徴とする、請求項２１に記載の皮膚外用剤。
【請求項２３】
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいアルコールであることを特徴とする、請求項２１乃至請求項２２いずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項２４】
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいハロゲン化炭化水素であることを特徴とする、請求項２１乃至請求項２２いずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項２５】
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいジ（C１からC４）アルキルケトンを特徴とする、請求項２１乃至請求項２２いずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項２６】
一般式（１）に表される化合物又はその塩を、前記アルコール抽出物の親水性成分の除去物として含有することを特徴とする、請求項２２又は請求項２３に記載の皮膚外用剤。
【請求項２７】
前記抽出物におけるアルコールがメタノールであり、親水性成分の除去が、エーテルと水との液液抽出による水洗であることを特徴とする、請求項２２又は請求項２３に記載の皮膚外用剤。
【請求項２８】
メラニン産生抑制剤としてマメ科植物の極性溶媒による抽出物で前記一般式（１）に表される化合物を０．００００１〜１０質量％含有するものであることを特徴とする、請求項５乃至請求項１１のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項２９】
前記極性溶媒はエタノール、含水エタノール、多価アルコール、含水多価アルコールであることを特徴とする、請求項２８に記載の皮膚外用剤。
【請求項３０】
前記抽出物は、一般式（１）に表される化合物を０．００００１〜１０質量％含有することを特徴とする、請求項２７乃至請求項２９のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【請求項３１】
前記極性溶媒はエタノール、含水エタノール、多価アルコール、含水多価アルコールであることを特徴とする、請求項３０に記載の皮膚外用剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
そこで、このような色素沈着を改善するため、メラニン産生抑制効果をもつ天然物の探索が長年行われ、ジテルペン化合物にメラニン産生抑制効果があることが報告されている（特許文献１〜特許文献３）。また、マメ科ハギ属の抽出物は様々な作用が報告されており、マメ科ハギ属マルバハギにはハギニンＡ、ハギニンＢ、ハギニンＣ、ハギニンＤが含まれ、メラニン産生抑制作用があることが報告されている（特許文献４）。さらに、マメ科ハギ属キハギの植物体からの極性溶媒抽出物のメラニン産生抑制作用が報告されており、その活性化合物としてユークレノンa６が知られている（特許文献５）。しかしながら、マメ科ハギ属トウクサハギの地下部の抽出物にメラニン産生抑制作用があることは知られていないし、その活性成分については全く検討されてこなかった。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
【化１】
2009155235.tif 000017
一般式（１）
（但し、式中A、B、C、Dはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜８のアルキル基、炭素数１〜８のアルケニル基を表し、且つ、少なくともひとつは酸素原子を含む基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、E、Fは水素原子、水酸基、置換基を有してもよい炭素数１〜４のアルキル基、置換基を有してもよい炭素数６〜１２の芳香族基を表し、該置換基は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基であり、Xは下記に示す置換基（１）、（２）または原子無存在を表し、破線の結合はあってもなくてもよいものとする。）
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
【化２】
2009155235.tif 000018
置換基（１）
（但し、式中Ｒ1、Ｒ2はそれぞれ独立に水素原子又は同一分子内の他の原子と結合している酸素原子を表す。）
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
【化５】
2009155235.tif 000019
置換基（３）
（但し、式中Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、他の同一分子内の原子と結合している酸素原子又は炭素数４〜６のアルケニル基を表す。）
（３）次に示す一般式（３）で示されるフラバノン誘導体又は生理的に許容されるその塩からなる、（１）に記載のメラニン産生抑制剤。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
【化６】
2009155235.tif 000020
一般式（３）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5は前記と同じ基を表し、式中Iは水素原子、水酸基、又は下記置換基（４）に表される炭素数６〜１２の芳香族基であるものとする。破線は一般式（３）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
【化７】
2009155235.tif 000021
置換基（４）
（但し、式中Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、他の同一分子内の原子と結合している酸素原子又は炭素数４〜６のアルケニル基を表す。）
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
（４）  次に示す一般式（８）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩からなる、メラニン産生抑制剤。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
【化８】
2009155235.tif 000022
一般式（８）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ18、Ｒ19はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基から選ばれる基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、Ｒ20は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１
〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
（５）（１）乃至（４）のメラニン産生抑制剤を含有することを特徴とする、皮膚外用剤。
（６）前記化合物がマメ科ハギ属トウクサハギから抽出されたものであることを特徴とする、（５）に記載の皮膚外用剤。
（７）前記化合物が外用剤全体に対して０．００００１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする、（５）又は（６）に記載の皮膚外用剤。
（８）化粧料であることを特徴とする、（５）乃至（７）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（９）医薬部外品であることを特徴とする、（５）乃至（８）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（１０）美白化粧料であることを特徴とする、（５）乃至（９）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（１１）メラニン産生抑制効果を有することを特徴とする、（５）乃至（１０）のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
（１２）前記化合物を０．００００１〜１０質量％含有するマメ科植物の抽出物であることを特徴とする、（５）乃至（１１）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（１３）前記一般式（１）に表される化合物において、次に示す一般式（５）で示される化合物又は生理的に許容されるその塩。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
【化９】
2009155235.tif 000023
一般式（５）
（但し、式中Ｊ、Ｋはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜８のアルキル基、炭素数１〜８のアルケニル基を表す。Ｒ12、Ｒ13はそれぞれ独立に水素原子、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基、他の同一分子内原子と結合している酸素分子を表す。破線は一般式（５）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えること
も出来る。）
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
【化１０】
2009155235.tif 000024
一般式（６）
（但し、式中Ｊ、Ｋは前記と同じ基を表し、Ｌは水素原子、水酸基を表し、Ｒ14、Ｒ15はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。破線は一般式（６）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
【化１１】
2009155235.tif 000025
一般式（７）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ16は、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表し、Ｒ17は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。破線は一般式（７）中に表される置換基を有することも出来るし、水素原子に置き換えることも出来る。）
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
【化１２】
2009155235.tif 000026
一般式（８）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ18、Ｒ19はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基から選ばれる基であり、前記置換基のいずれかの原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、Ｒ20は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
【化１３】
2009155235.tif 000027
一般式（９）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20は前記と同じ基を表し、Ｍは水素原子、酸素原子、水酸基を表す。破線はあってもなくてもよい。）
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
【化１４】
2009155235.tif 000028
一般式（１０）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ23はそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルケニル基を表す。）
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
【化１５】
2009155235.tif 000029
一般式（１１）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄは前記と同じ基を表し、Ｒ24は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基を表す。）
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
【化１６】
2009155235.tif 000030
一般式（１２）
（但し、式中Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ23は前記と同じ基を表し、Ｒ25は水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜４のヒドロキシアルキル基を表す。）
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
（２１）
一般式（１）に表される化合物又はその塩を、マメ科ハギ属トウクサハギ地下部から水を含んでもよい有機溶媒により抽出した抽出物として含有することを特徴とする、（５）乃至（１２）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（２２）
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいアルコール、ハロゲン化炭化水素、ジ（C１からC４）アルキルケトンであることを特徴とする、（２１）に記載の皮膚外用剤。
（２３）前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいアルコールであることを特徴とする、（２１）乃至（２２）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（２４）
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいハロゲン化炭化水素であることを特徴とする、（２１）乃至（２２）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（２５）
前記抽出物の抽出に用いる有機溶媒が水を含んでもよいジ（C１からC４）アルキルケトンを特徴とする、（２１）乃至（２２）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（２６）一般式（１）に表される化合物又はその塩を、前記アルコール抽出物の親水性成分の除去物として含有することを特徴とする、（２２）又は（２３）に記載の皮膚外用剤。
（２７）前記抽出物におけるアルコールがメタノールであり、親水性成分の除去が、エーテルと水との液液抽出による水洗であることを特徴とする、（２２）又は（２３）に記載の皮膚外用剤。
（２８）メラニン産生抑制剤としてマメ科植物の極性溶媒による抽出物で前記一般式（１）に表される化合物を０．００００１〜１０質量％含有するものであることを特徴とする、（５）乃至（１１）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（２９）前記極性溶媒はエタノール、含水エタノール、多価アルコール、含水多価アルコールであることを特徴とする、（２８）に記載の皮膚外用剤。
（３０）前記抽出物は、一般式（１）に表される化合物を０．００００１〜１０質量％含有することを特徴とする、（２７）乃至（２９）のいずれかに記載の皮膚外用剤。
（３１）前記極性溶媒はエタノール、含水エタノール、多価アルコール、含水多価アルコ
ールであることを特徴とする、（３０）に記載の皮膚外用剤。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
（新規物質）
lespebuerginA1、lespebuerginA2、lespebuerginA3、lespebuerginA4、
lespebuerginB1、lespebuerginB2、lespebuerginB3、lespebuerginB4、
lespebuerginC1、lespebuerginC2、lespebuerginC3、lespebuerginC4、
lespebuerginC5、lespebuerginC6、lespebuerginC7、lespebuerginD1、
lespebuerginE1、lespebuerginF1、lespebuerginF2、lespebuerginG1、
lespebuerginG2、lespebuerginG3、lespebuerginG4、lespebuerginG5、
lespebuerginG6、lespebuerginG7、lespebuerginG8、lespebuerginG9、
lespebuerginG10、lespebuerginG11、lespebuerginG12、lespebuerginH1、
lespebuerginH2、lespebuerginI1、lespebuerginI2、lespebuerginI3
（既知物質）
coryfolin、6,8-di(γ,γ-dimethylallyl)-4’,7-dihydroxyflavanone、prostratol、
3’,6-di(γ,γ-dimethylallyl)-4’,5,7-trihydroxyflavanone、
3’,6,8-tri(γ,γ-dimethylallyl)-4’,5,7-trihydroxyflavanone、
cajaflavanone、genistein、erythrabyssinII、
erybraedinA、erybraedinB、folitenol
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
（２）トウクサハギ抽出物からの分画操作
前記前処理された抽出物は、常法に従って精製処理される。精製の方法としては、カラムクロマトグラフィー等が好適に例示できる。前記カラムクロマトグラフィーにおける充填剤としては、通常この様な精製で使用されているものであれば特段の限定無く使用でき、例えば、シリカゲル、ＮＨ2修飾シリカゲル、オクタデシル修飾シリカゲル、ＣＮ修飾シリカゲル、「ダイアイオンＨＰ−２０」（三菱化学株式会社製）などの多孔質交換樹脂、ＤＥＡＥ等の修飾セルロースなどが好適に例示でき、シリカゲルが特に安価で好ましい。かかるシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いての精製方法を詳細に述べる。即ち、前記のエーテル抽出物又は酢酸エチル抽出物をアルコールに溶解し、カラムクロマトグラフィー用シリカゲルに吸着させる。該アルコールとしてはメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールが好適に例示できるが、メタノールであることがさらに好ましい。吸着後溶媒であるアルコールは減圧下或いは加熱条件で除去し、シリカゲルを充填したカラムの上部に充填する。該シリカゲルカラムに有機溶媒を加えて化合物を溶出させ、一定量ずつ溶出分画を回収する。該有機溶媒としては、塩化メチル、ジクロロメタン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素とメタノールなどのアルコールの混合溶媒系を用いることが好ましい。該混合溶媒系は、最初にハロゲン化炭化水素のみを移動相として、順次これに少量ずつアルコールを混合してグラジエントをかけて、極性を徐々に挙げて溶出させることが好ましい。前記ハロゲン化炭化水素としては、クロロホルムであることがさらに好ましい。アルコールとしてはメタノールが特に好適に例示できる。斯くして得られた
溶出分画は、薄層クロマトグラフィーにて展開し、同じ展開位置である画分を集めて、溶媒除去し、所望により、これをさらにオクタデシル修飾シリカなどを担体としたHPLCにより単一の化合物を複数得る。斯くして得られる一般式（１）に表される化合物は、前記一般式（２）、一般式（３）、一般式（４）に表される化合物の４種に大別でき、これらの化合物は何れも優れたメラニン産生抑制作用を有する。又、一般式（１）に表される化合物の内、一般式（５）、一般式（６）、一般式（７）、一般式（８）、一般式（９）に表される化合物は文献未記載の新規化合物である。かかる化合物は、そのまま含有させることも出来るが、アルカリとともに塩を形成させ、塩として含有させることも可能である。塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエチルアミン塩やトリエタノールアミン塩等の有機アミン塩、リシン塩やアルギニン塩等の塩基性アミノ酸塩等が好適に例示できる。かかる一般式（１）に表される化合物乃至はその塩は唯一種を含有することも出来るし、二種以上を組み合わせて含有することも出来る。かかる化合物乃至はその塩はメラニン産生抑制剤として、総量で０．００００１〜１０質量％、より好ましくは、０．００００５〜５質量％、更に好ましくは、０．０００１〜２質量％皮膚外用剤に含有される。かかる含有は、単離した一般式（１）に表される化合物を含有させる形態でも良いし、トウクサハギの抽出物、抽出物を前処理したもの、或いは精製分画して一般式（１）に表される化合物の含有量を高めた抽出物加工品の形で含有させることも出来る。この様に一般式（１）に表される化合物の濃度を高めた抽出物の加工物の形で含有することが、皮膚外用剤の処方自由度を損なわず、好ましい。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
本発明の皮膚外用剤においては、かかる成分以外に、通常皮膚外用剤で使用される任意成分を含有することが出来る。この様な任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボカド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類、流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類、オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類、オレイルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール等、イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジエチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類、アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等の前記のシリコーンに分類されないシリコーン油等の油剤類、脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル、ポリオキシエチレンラウリル燐酸ナトリウム等のアニオン界面
活性剤類、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類、イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノラウレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（POEラウリルエーテル、POEオレイルエーテル、ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（POEオクチルフェニルエーテル、ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類、ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、グルコノラクトン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキサンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオール、ポリプロピレングリコール、２−エチル−１，３−ヘキサンジオール等の多価アルコール類、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類、燐酸、クエン酸等のpＨ調整剤、表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、硫酸バリウム等の粉体類、表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類、表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類、レーキ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類、パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外��吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類、エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール類、ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ6塩酸塩、ビタミンＢ6トリパルミテート、ビタミンＢ6ジオクタノエート、ビタミンＢ2又はその誘導体、ビタミンＢ12、ビタミンＢ15又はその誘導体等のビタミンＢ類、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミン類等、ベンジルアルコール、トリアセチン、クロタミトン、炭酸プロレン等炭酸ジエステル、サリチル酸エチレングリコールなどの溶剤などが好ましく例示できる。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
（トウクサハギからの抽出）
マメ科ハギ属トウクサハギの地下部の乾燥品５００ｇに２Ｌのメタノールを加え、2時間還流し、濾過することでメタノール抽出液を得た。残渣について前記の抽出法を繰り返すことで、さらにメタノール抽出液を得て、得られた該抽出液を合一後減圧下濃縮し、メタノールエキスを得た。該メタノールエキスに熱水を５００ｍL加えて懸濁し、エーテルで連続抽出を3時間実施してエーテル分画については減圧下濃縮する。水層は酢酸エチルを加え、3時間連続抽出し減圧下濃縮する。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
（化合物の単離精製）
前記のエキスから化合物を単離精製し、メラニン産生抑制効果試験に供した。単離精製は、前記エーテル分画の濃縮エキスを３０ｍLのメタノールに溶解し、カラムクロマトグラフィー用シリカゲル（PSQ-100B；Fuji Silysia製）３０ｇに加え、エキスをシリカゲルに吸着させ、減圧下でメタノールを留去した。該カラムをカラムクロマトグラフィー用シリカゲル400g、溶出溶媒としてクロロホルムを用いて作成したカラムクロマトグラフィー (9 x 10 cm)に付す。溶出した溶液を順次３００ｍLずつ回収し、これを濃縮後、濃縮エキスを薄層クロマトグラフィーに供して同じ展開位置の画分を回収し１３画分を得た。このうち、さらに単離精製が必要な画分は、高速液体クロマトグラフィーにて逆相系カラム（ＯＤＳカラム）で水−アセトニトリル系の溶媒のグラジエントを用いてＵＶ検出（ＵＶ２８０ｎｍ）により慎重に単離精製を実施した。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
（化合物の構造決定）
各化合物をCDCl3、acetone-d6またはDMSO-d6に溶解し、３５℃で核磁気共鳴分光機（JNMalpha-400 FT-NMR；日本電子社製）により1H及び13Cのスペクトルを測定し、得られたケミカルシフト値、スペクトル形状、結合定数、カップリングの状態から構造を決定した。NMRのケミカルシフトは図に示した炭素位置に従い帰属した。表２から表１７に各化合物のケミカルシフトの帰属を示し、太字で示した化合物番号に括弧で測定に用いた溶媒を記載した。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
＜処方例１＞
【表２１】
2009155235.tif 000031
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
＜処方例２＞
【表２２】
2009155235.tif 000032
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
【化１７】
2009155235.tif 000033
一般式（１）
（但し、式中A、B、C、Dはそれぞれ独立に水素原子、水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基、炭素数１〜８のアルキル基、炭素数１〜８のアルケニル基を表し、且つ、少なくともひとつは酸素原子を含む基であり、前記置換基のいずれか原子は同一分子内の他の原子と結合を形成でき、E、Fは水素原子、水酸基、置換基を有してもよい炭素数１〜４のアルキル基、置換基を有してもよい炭素数６〜１２の芳香族基を表し、該置換基は水酸基、炭素数１〜４のアルキルオキシ基であり、Xは下記に示す置換基（１）、（２）または原子無存在を表し、破線の結合はあってもなくてもよいものとする。）