【手続補正書】
【提出日】平成21年2月19日(2009.2.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
2008520965.tif 000001
（式中、
−Ａユニットは、サッカライド特性（ｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｎａｔｕｒｅ）のプローブ分子を表し；
−Ｘユニットは、２つの末端を含む炭素又はヘテロ炭素鎖で構成されるスペーサーアーム（２つの末端のうち、一方は前記スペーサーアームＸとＡを共有結合し、もう一方の末端は前記スペーサーアームＸとＢを共有結合し、前記鎖は少なくとも１つの、２つの末端の間に位置するエチレン性不飽和を含んでおり、前記鎖はいくつかのアセチレン性不飽和を含み得ないと理解される）を表し；
−Ｂは、シラン化基（ｓｉｌａｎｉｚｅｄ  ｇｒｏｕｐ）である）
に対応することを特徴とする、糖末端官能基を含むシラン化剤。
【請求項２】
サッカライド特性のプローブ分子が、１８０から１００００ｇ／ｍｏｌの間の分子量を示すことを特徴とする、請求項１に記載のシラン化剤。
【請求項３】
サッカライド特性のプローブ分子が、単糖、オリゴ糖、多糖、複合糖質、糖タンパク質、糖脂質、及び糖リポタンパク質から選択されることを特徴とする、請求項１又は２に記載のシラン化剤。
【請求項４】
単糖が、グルコサミン、アジドグルコサミン、Ｄ−リボース、Ｄ−キシロース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マンノース、２−デオキシリボース、Ｌ−フコース、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、Ｎ−アセチルノイラミン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｌ−イズロン酸、Ｄ−ソルビトール及びＤ−マンニトールから選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項５】
オリゴ糖が、スクロース、ラクトース、ヘパラン硫酸のフラグメント、ヘパリン、コンドロイチン又はデルマタン硫酸のサッカライドフラグメント、及びルイス抗原から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項６】
ポリ−オリゴ糖が、ヘパラン硫酸、ヘパリン又はコンドロイチンのサッカライド画分及びデルマタン硫酸から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項７】
複合糖質が、ヘパラン硫酸、ヘパリン、コンドロイチン及びデルマタン硫酸から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項８】
糖タンパク質が、免疫グロブリンＧ及びヒアルロン酸から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項９】
糖脂質が、ガラクトシルセラミド、ガングリオシド及びセレブロシドから選択されることを特徴とする、請求項３に記載のシラン化剤。
【請求項１０】
プローブ分子のサッカライドエンティティの、１又はそれ以上のヒドロキシル及び／又はアミン官能基が、アセチル、ベンジル及びアリール、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、トリクロロアセトアミデート、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル及びフルオレニルメトキシカルボニル基から選択される１又はそれ以上の保護基により保護されていることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１１】
プローブ分子のサッカライドエンティティの、１又はそれ以上のヒドロキシル及び／又はアミン官能基が、ベンジル、アセテート、ベンジリデン、イソプロピリデン及びフタルイミド基から選択される１又はそれ以上の疎水性基により置換されていることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１２】
スペーサーアームＸを構成している鎖の各末端を介してユニットＡとＢに結合される共有結合が、最初スペーサーアームＸの前駆体が保有する化学官能基と、一方ではプローブ分子Ａにより、他方ではシラン化基Ｂにより保有される相補的な化学官能基との間での反応の結果生じることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１３】
前記共有結合が、ヒドロキシル基と、ハロゲン原子並びにホスファイト、トリクロロアセトアミデート、チオアルキル、ホスフェート、ペンテニル、スルホキシド及びキサンテート基から選択される基との間での反応の結果生じることを特徴とする、請求項１２に記載のシラン化剤。
【請求項１４】
スペーサーアームＸが、直鎖又は分枝を有するＣ２−Ｃ４０アルキル又はＣ６−Ｃ４０アリール鎖を表し、前記鎖が少なくとも１つのエチレン性不飽和を含み、必要に応じて酸素、窒素、硫黄及びケイ素から選択される１もしくはそれ以上のヘテロ原子、及び／又は、アミド、オキシム及び第三級アミン官能基より選択される１もしくはそれ以上の官能基によって割り込まれ得、及び／又は、必要に応じて、直鎖又は分枝を有するＣ２−Ｃ２０アルキルもしくはＣ６−Ｃ２０アリール鎖から選択される１又はそれ以上の置換基によって置換され、前記鎖が必要に応じてまた、酸素、窒素、硫黄及びケイ素から選択される１もしくはそれ以上のヘテロ原子によって割り込まれ得ることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１５】
シラン化基Ｂが、−Ｓｉ（Ｒ１）３、−ＳｉＲ１（Ｒ２）２及び−ＳｉＲ１Ｒ２Ｒ３基（ここでＲ１、Ｒ２及びＲ３基は、互いに独立して、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４のアルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４のアルキル基、アミノ基又はエステル官能基を表す）より選択されることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１６】
シラン化基が、トリメトキシシリル、トリエトキシシリル、トリメチルシリル及びトリエチルシリル基より選択されることを特徴とする、請求項１５に記載のシラン化剤。
【請求項１７】
式（Ｉ）：
（式中、
−Ａは単糖、オリゴ糖及び多糖より選択され、
−Ｘは少なくとも１つのエチレン性不飽和を含む２から４０の炭素原子を有する炭素鎖を表し、前記鎖は直鎖又は分枝鎖で、必要に応じて１もしくはそれ以上の環、及び／又は、１もしくはそれ以上の官能基（例えばアミド、オキシム及び第三級アミン官能基）により割り込まれ；
−Ｂはトリメトキシシリル又はトリエトキシシリル基を表す。）
の化合物から選択されることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１８】
下記式（Ｉ−１）及び（Ｉ−２）：
【化２】
2008520965.tif 000002
（式中、Ａｃはアセチル基を表す）
の化合物から選択されることを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載のシラン化剤。
【請求項１９】
固体支持体の官能化のための、請求項１から１８のいずれか１項で定義された式（Ｉ）の少なくとも１つのシラン化剤の、使用。
【請求項２０】
グライコチップ（ｇｌｙｃｏｃｈｉｐ）の製造のための、請求項１から１８のいずれか１項で定義された式（Ｉ）の少なくとも１つのシラン化剤の、使用。
【請求項２１】
有機溶媒中の請求項１から１８のいずれか１項で定義された式（Ｉ）の少なくとも１つのシラン化剤の溶液により、少なくとも１つの固体支持体の表面をシラン化する、少なくとも１つの工程を含むことを特徴とする、サッカライド特性のプローブ分子により官能化された固体支持体の調製のための方法。
【請求項２２】
請求項１から１８のいずれか１項で定義された式（Ｉ）の１又はそれ以上のシラン化剤によって官能化された、少なくとも１つの表面を含むことを特徴とする、固体支持体。
【請求項２３】
スクリーニングにより、有益なタンパク質を認識するオリゴ糖配列、又は有益な糖を認識するリガンドを同定するための、請求項２２で定義した固体支持体の使用。
【請求項２４】
請求項２２で定義した固体支持体が、１もしくはそれ以上の潜在的なオリゴ糖分子又は各々１もしくはそれ以上の潜在的なタンパク質リガンドを含む溶液と接触させる工程を、少なくとも１つ含むことを特徴とする、糖分子又は各々のタンパク質リガンドをスクリーニングするための方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
プローブ分子のサッカライドエンティティ（ｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｅｎｔｉｔｉｅｓ）の１又はそれ以上のヒドロキシル及び／又はアミン官能基は、１又はそれ以上の保護基により保護され得る。これらの保護基は当業者によく知られ、また、十分にＴ． Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，による著書“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，  １９９１．に記載されている。
本発明の有利な形態によれば、これらの保護基は以下の基より選択される：アセチル；ベンジル；アリール、より詳細には１から４０の炭素原子を有するアルキル鎖から選択されたＲ基により置換されたアリール基；２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、トリクロロアセトアミデート（ｔｒｉｃｈｌｏｒｏａｃｅｔａｍｉｄａｔｅ：ＴＣＡ）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）及びフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
【化４】
2008520965.tif 000003
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
【化７】
2008520965.tif 000004
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
収率６０％で式（Ｉ−１）の化合物の無色の液体を結果として得るために、この工程の間、２．８４μｌ（４．５  ｘ  １０−４ ｍｏｌ）のＫａｒｓｔｅｄｔ触媒存在下で３時間、およそ５０℃の温度で、上記の前の反応で得られた１００ｍｇ（２．２６  ｘ  １０−４ｍｏｌ，  １当量）の化合物（６）を７１μｌ（３．６２  ｘ  １０−４ ｍｏｌ，  １．６当量）のトリエトキシシランと反応させる。
実施例２：式（Ｉ）のシラン化剤で官能化された固体支持体の調製
この実施例では、ＳｉＯ２で作られた平坦な基体を使用した。
１）基体の再水和（Ｂｒｏｗｎ再水和）
ＳｉＯ２基体を、２時間周囲温度にて、５ｇのＮａＯＨを含む脱イオン水（１５ｍｌ）と無水エタノール（２０ｍｌ）との混合物に浸した。