(57)【要約】  本発明は、疼痛特にＰ２Ｘ３受容体サブユニットモジュレーターを使用して治療することが可能な疼痛、特に末梢性疼痛、炎症性疼痛、又は組織損傷性疼痛に関連する疾病状態を治療するうえで重要な役割を果たす新規Ｐ２Ｘ３受容体アンタゴニストに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2012521429.tif 000098
［式中、
Ａはチエノピラゾリル、インダゾリル、インドリル、又はその位置異性体を表し；
Ｂは結合、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ５−１０ヘテロシクリル、又はＣ６−１０アリールを表し；
Ｒ１はＨ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、（ＣＨ２）ｎＣＦ３、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ（Ｒ２）２ＯＨ、−Ｏ−、ＣＮ、（ＣＨ２）ｎＯＲ２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、又はＣ１−６アルコキシを表し；前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル及びアリールはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（ＣＨ２）ｎＣＦ３、又はＣＮの１〜３個の基で場合により置換されており；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表し；
Ｒ３はＣＲ２Ｒ４Ｒ５、（ＣＨＲ２）ｎＣ３−１０シクロアルキル、（ＣＨＲ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨＲ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルを表し、前記シクロアルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
又はＲ２とＲ３はそれらが結合している窒素と一緒になり、１〜３個のＲａの基で場合により置換されたＣ５−１０ヘテロシクリルを形成してもよく；
Ｒ４及びＲ５は独立してＨ、（ＣＨ２）ｎＯＲ２、ＣＨＦ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ２−６アルケニル、ＣＦ３、ＣＦ２、Ｃ（Ｏ）１−２Ｒ２、又はＣ１−６アルキルを表し；前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル及びアリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
Ｒ６は水素、ＯＲ２、（ＣＨ２）ｎＣＦ３、ハロゲン、Ｃ（Ｒ２）２ＯＲ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルを表し、前記アルキル、シクロアルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
ＲａはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、ＯＲ２（ＣＨ２）ｎＣＦ３、−Ｏ−、Ｃ３−６シクロアルキル、ＮＲ２Ｃ（Ｏ）Ｒ２、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２）２、Ｃ（Ｒ２）２ＯＲ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ２、Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２）２、Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ２、Ｃ（Ｏ）Ｃ５−１０ヘテロシクリル、ＮＯ２、ＣＮ、Ｎ（Ｒ２）２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、ＳＯ２Ｒ２、ＯＲ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、又は（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、前記アルキル、ヘテロシクリル及びアリールはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（ＣＨ２）ｎＣＦ３又はＣＮの１〜３個の基で場合により置換されており；及びｎは０〜４を表す］
の化合物又はその薬学的に許容可能な塩及び個々のエナンチオマー及びジアステレオマー。
【請求項２】
Ｂが１〜３個のＲａ基で場合により置換されたＣ６−１０アリールである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｂが１〜３個のＲａ基で場合により置換されたＣ５−１０ヘテロシクリルである請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ａがチエノピラゾリルであり、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３がＡ上の炭素に結合しており、及びＢがフェニル又はピリジルであり、チエノピラゾリル環のピラゾリル部分上の炭素原子に結合している請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ａがインダゾリルであり、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３がＡ上の炭素に結合しており、及びＢがフェニル又はピリジルであり、インダゾリル環のピラゾリル部分上の炭素原子に結合している請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ａがインドリルであり、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３がＡ上の炭素に結合しており、及びＢがフェニル又はピリジルであり、インドリル環のピロリル部分上の炭素原子に結合している請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ａがインドリルであり、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３がＡ上の炭素に結合しており、及びＢがフェニル又はピリジルであり、インドリル環のベンジル部分上の炭素原子に結合している請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｂが結合、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキルから成る群から選択され、前記アルキル、アルケニル及びシクロアルキルが１〜３個のＲａ基で場合により置換されている請求項１記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ６がＣ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎフェニル、チオフェニル、チアゾリル、フラニル、又はピリミジニルを表し、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、Ｒ２は水素であり及びＲ３が（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎインダゾピリジル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、ここでその全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及び、ＲｙがＨ、場合により置換されているＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表している請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
式ＩＩ： 
【化２】
2012521429.tif 000099
［式中、
Ｒ１はＨ、ハロゲン、ＣＦ３又はＣ１−６アルキルであり；ＹはＣＨ又はＮであり；Ｒ２はＨであり；Ｒ６は水素、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールから成る群から選択され、前記アルキル、ヘテロシクリル、アリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨで場合により置換されたＨを表す］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
式ＩＩＩ：
【化３】
2012521429.tif 000100
［式中、
Ｒ２はＨであり；Ｒ６及びＲ６ａは水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルから成る群から選択され、前記アルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＨ、場合により置換されているＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表す］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
式ＩＶ：
【化４】
2012521429.tif 000101
［式中、
Ｒ１はＨ、ハロゲン、ＣＦ３又はＣ１−６アルキルであり；ＹはＣＨ又はＮ、Ｒ２はＨであり；Ｒ６は水素、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールから成る群から選択され、前記アルキル、ヘテロシクリル、アリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＨ、場合により置換されているＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表す］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
式Ｖ：
【化５】
2012521429.tif 000102
［式中、
Ｒ１はＨ、ハロゲン、ＣＦ３、又はＣ１−６アルキルであり；ＹはＣＨ又はＮ、Ｒ２はＨであり；Ｒ６は水素、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールから成る群から選択され、前記アルキル、ヘテロシクリル、アリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＨ、場合により置換されているＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表す］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
式ＶＩ：
【化６】
2012521429.tif 000103
［式中、Ｒ１はＨ、ハロゲン、ＣＦ３、又はＣ１−６アルキルであり；ＹはＣＨ又はＮ、Ｒ２はＨであり；Ｒ６は水素、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールから成る群から選択され、前記アルキル、ヘテロシクリル、アリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＨ、場合により置換されているＣ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表す］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
式ＶＩＩ：
【化７】
2012521429.tif 000104
［式中、Ｒ２はＨであり；Ｒ６及びＲ６ａは水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、から成る群から選択され、前記アルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲｙはＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表し、前記アルキルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されている］
の請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
表１から表６により表される化合物又はその薬学的に許容可能な塩及び個々のエナンチオマー及びジアステレマー。
【請求項１７】
以下の表１、表３：
【表１】
2012521429.tif 000105
2012521429.tif 000106
【表３】
2012521429.tif 000107
2012521429.tif 000108
に表される請求項１６記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩及び個々のエナンチオマー及びジアステレオマー。
【請求項１８】
不活性担体及び有効量の請求項１記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１９】
当該処置を必要とする哺乳動物患者における慢性又は急性疼痛を治療又は予防し、癲癇を治療又は制御し、又は睡眠の質を高めるための方法であって、前記患者に対し治療上有効な量の請求項１に記載の式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む当該方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法であって、オピエートアゴニスト又はアンタゴニスト、カルシウムチャネルアンタゴニスト、５ＨＴ、５ＨＴ１Ａ受容体の完全又は部分アゴニスト又はアンタゴニスト、ナトリウムチャネルアンタゴニスト、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、ＣＯＸ−２選択的阻害剤、ニューロキニン受容体１（ＮＫ１）アンタゴニスト、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、選択的セロトニン再取込み阻害剤（ＳＳＲＩ）及び／又は選択的セロトニン・ノルエピネフリン再取込み阻害剤（ＳＳＮＲＩ）、三環系抗鬱薬、ノルエピネフリンモジュレーター、リチウム、バルプロ酸塩、ノルエピネフリン再取込み阻害剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）、可逆的モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＲＩＭＡ）、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト、非定型抗鬱剤、ベンゾジアゼピン、、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニスト、ニューロンチン（ガバペンチン）及びプレガバリンから成る群から選択される１種以上の治療上活性な化合物を更に含む当該方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、Ｐ２Ｘ３受容体のモジュレーター、例えばアンタゴニストとして作用する化合物、組成物及びそれらの治療的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プリンは、細胞外プリン受容体を介して作用し、種々の生理的及び病理的役割を有すると意味づけられている（Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ  （１９９３）  Ｄｒｕｇ    Ｄｅｖ．  Ｒｅｓ．  ２８：１９５−２０６を参照）。プリン受容体（Ｐ２）は、代謝型ヌクレオチド受容体又は細胞外ヌクレオチドに対するイオンチャネル型受容体のいずれかに類別されている。代謝型ヌクレオチド受容体（通常Ｐ２Ｙ又はＰ２Ｙ（ｎ）と命名されるが、ここで「ｎ」はサブタイプを示す整数の下付き文字である）は、異なる基本的膜貫通シグナル伝達手段に基づくという意味でイオンチャネル型受容体（通常Ｐ２Ｘ又はＰ２Ｘ（ｎ）と命名される）と相違すると考えられ、Ｐ２Ｙ受容体はＧタンパク質共役系を介して作用するが、Ｐ２Ｘ受容体はリガンド開口型イオンチャネルである。
【０００３】
少なくとも７種類のＰ２Ｘ受容体とこれらをコードするｃＤＮＡ配列が今日までに同定されている。Ｐ２Ｘ１  ｃＤＮＡはラット輸精管の平滑筋からクローニングされ（Ｖａｌｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９４）  Ｎａｔｕｒｅ  ３７１：５１６−５１９）、Ｐ２Ｘ２  ｃＤＮＡはＰＣ１２細胞からクローニングされた（Ｂｒａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９４）  Ｎａｔｕｒｅ  ３７１：５１９−５２３）。他の５種類のＰ２Ｘ受容体は、Ｐ２Ｘ１及びＰ２Ｘ２との配列類似性により、ｃＤＮＡライブラリーで確認されている。即ちＰ２Ｘ３は、Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４３２−４３５，Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４２８−４３１で；Ｐ２Ｘ４は、Ｂｕｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  ＥＭＢＯ  Ｊ．１５：５５−６２，Ｓｅｇｕｅｌａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．    １６：４４８−４５５，Ｂｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  ３７５：１２９−１３３，Ｓｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９３：３６８４−３６８８，Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２２０：１９６−２０２で；Ｐ２Ｘ５は、Ｃｏｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １６：２４９５−２５０７，Ｇａｒｃｉａ−Ｇｕｚｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）    ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  ３８８：１２３−１２７で；Ｐ２Ｘ６は、Ｃｏｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６），前掲書，Ｓｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２２３：４５６−４６０で；Ｐ２Ｘ７は、Ｓｕｒｐｒｅｎａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７２：７３５−７３８で確認されている。ラットＰ２Ｘ受容体のアミノ酸配列の比較については、Ｂｕｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）    Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ８：２２２１−２２２８を参照。
【０００４】
プリン受容体、特にＰ２Ｘ受容体はホモマルチメリックカチオン透過性イオンチャネルとして機能し、場合によっては２種類の異なるＰ２Ｘ受容体サブタイプから構成されるヘテロメリックチャネルとして機能することが知られている（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４３２−４３５  （１９９５）；Ｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １８：７１５２−７１５９（１９９８）；Ｔｏｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５４：９８９−９９３  （１９９８）；Ｔｏｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｌ．  ５４：９８９−９９３  （１９９８））。Ｐ２Ｘ２及びＰ２Ｘ３サブユニットは、単独で発現するときには機能的チャネルを形成し、又、同時発現するときには、天然感覚チャネルに認められる電流に類似する性質をもつ機能的ヘテロマルチマーチャネルを形成することもできる。Ｐ２Ｘ２とＰ２Ｘ３の少なくとも１対のＰ２Ｘ受容体サブタイプは、ラット下神経節ニューロンでヘテロメリックチャネルとして機能し、そこで顕著な薬理学的及び電気生理学的性質を示す（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，前掲書（１９９５））。
【０００５】
天然Ｐ２Ｘ受容体は、ＡＴＰによる活性化に基づいて、急速活性型非選択的カチオンチャネルを形成することが知られている。Ｐ２Ｘ受容体により形成されるチャネルは一般に高いＣａ２＋透過率（Ｐ（Ｃａ）／Ｐ（Ｎａ））を有する。個々の受容体に関しては、Ｐ２Ｘ３プリン受容体は小カチオンに選択的に透過性であるリガンド開口型カチオンチャネルである。周知のＰ２Ｘ受容体リガンドには、例えばＡＴＰ、ＵＴＰ、ＵＤＰ等の天然ヌクレオチド、又は例えば２−メチルチオＡＴＰ等の合成ヌクレオチドが含まれる。ＡＴＰは、細胞内エネルギー供与体としての機能に加え現在では中枢及び末梢神経系の両者で重要な神経伝達物質又は補助伝達物質として認められている（Ｒａｌｅｖｉｃ，Ｖ．，ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｒｅｖ．，  ５０：４１３−４９２  （１９９８））。ＡＴＰは刺激に基づいて、神経線維を含む種々の細胞型から放出され、プリン受容体（Ｐ２受容体）を含む特定の膜受容体の活性化により多くの組織に種々の効果を引き起こす（Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ，Ｇ．，  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｒｅｖ．，  ２４：５０９−５８１  （１９７２）；Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ，Ｇ．，  Ｃｅｌｌ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｈｏｒｍｏｎｅｓ：Ａ  Ｍｕｌｔｉｄｉｓｃｉｐｌｉｎａｒｙ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  Ｒ．Ｗ．Ｓｔｒａｕｂ  ａｎｄ  Ｌ．Ｂｏｌｉｄ．編  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ，    １９７８，ｐ．１０７−１１８を参照）。Ｐ２Ｘプリン受容体に関してＡＴＰがＰ２Ｘ３ホモメリック受容体とＰ２Ｘ２／Ｐ２Ｘ３ヘテロメリック受容体を活性化することができ、脊髄後角と感覚神経節からの一次求心性神経で興奮性神経伝達物質として機能することがデータから示唆されている。所定の感覚神経で認められる性質をもつＡＴＰ依存性電流を発生するために、インビトロでは、Ｐ２Ｘ２受容体サブユニットとＰ２Ｘ３受容体サブユニットの同時発現が必要である。Ｌｅｗｉｓ，ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４３２−４３５を参照。
【０００６】
ＡＴＰに加え、ＡＴＰ程ではないがアデノシンも感覚神経終末を刺激することができ、その結果、強い疼痛と感覚神経放電の顕著な増加を生じる。入手可能なデータによると、損傷細胞から放出されたＡＴＰは、感覚神経の侵害受容神経終末で発現するＰ２Ｘ３ホモメリック受容体又はＰ２Ｘ２／Ｐ２Ｘ３ヘテロメリック受容体を活性化することにより疼痛を誘発することができる。これはヒト水疱モデルにおける皮内投与したＡＴＰによる疼痛誘発に関する報告；歯髄での侵害受容神経におけるＰ２Ｘ３含有受容体の同定；及びＰ２Ｘアンタゴニストが動物モデルで鎮痛性であるという報告に一致する。今日までの処、研究データは、脊髄の後根神経節神経終末と脳の神経細胞でＡＴＰ誘導性のＰ２Ｘプリン受容体の活性化により痛覚を生じるメカニズムが、侵害受容シグナル伝達に関与する主要な神経伝達物質であるグルタミン酸の放出の刺激によることを示唆している。
【０００７】
最近では、Ｐ２Ｘ３受容体遺伝子破壊が有害な化学的刺激に対する感受性の減少及び疼痛の軽減という結果を生じることも立証されている。外因性投与したＡＴＰ及びＰ２Ｘ含有受容体アゴニストの侵害受容効果も実験動物で立証されている。Ｂｌａｎｄ−Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １２２：３６６−３７１  （１９９７）；Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｍａｃｏｌ．  １２６：３２６−３３２  （１９９９）を参照。髄腔内（ｉ．ｔ．）投与したＰ２受容体アゴニストの齧歯類における急性及び持続性有害刺激に対する感受性を増加する能力により示される通り、Ｐ２Ｘ活性化と脊髄Ｐ２Ｘ含有受容体の刺激の末梢侵害受容作用も侵害受容に寄与している。Ｄｒｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  ６６６：１８２−１８８  （１９９４）；Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １２７：４４９−４Ｓ６  （１９９９）；Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １２８：１４９７−１５０４  （１９９９）を参照。最近では損傷感覚求心性神経に局在する、Ｐ２受容体媒介性の異所性の神経的興奮性の選択的な増加が、慢性絞扼性神経損傷後のラットで報告されている。Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏ  Ｒｅｐｏｒｔ    １０：２７７９−２７８２  （１９９９）を参照。疼痛伝達におけるこの役割は、ラットＰ２Ｘ３受容体発現が疼痛伝達に関与する感覚神経節の神経細胞のサブセットで主に認められるという知見と一致する。Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４２８−４３０  （１９９５）；Ｖｕｌｃｈａｎｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ３６：１２２９−１２４２  （１９９７）を参照。ＵＳ２００８０００４４４２、ＵＳ２００７００４０９６０９、ＷＯ２００７０４１０８７、ＷＯ２００６１１９５０４、ＷＯ２００１１２６２７、ＷＯ２００７００１９７３、ＵＳＳＮ６１／１３２１７８（代理人整理番号２２４０７）、ＵＳＳＮ６１／００１３７６（代理人整理番号２２４０８）、ＵＳＳＮ６１／１９７８６９（代理人整理番号０００１８）及びＷＯ２００７０１０５５３をも参照。
【０００８】
まとめると、感覚神経におけるＰ２Ｘ３含有受容体（Ｐ２Ｘ３及び／又はＰ２Ｘ２／３）の機能的及び免疫組織化学的局在は、これらのＰ２Ｘ受容体がＡＴＰの侵害受容効果を媒介する上で主要な役割を有すると考えられる。従って、Ｐ２Ｘ３受容体の活性化を遮断又は阻害する化合物は疼痛刺激を遮断するのに役立つ。更に、通常はＰ２Ｘ３受容体及び／又はＰ２Ｘ２／Ｐ２Ｘ３ヘテロメリックチャネルを活性化する化合物（ＡＴＰ等）に対する受容体アンタゴニストは、疼痛伝達を有効に遮断することができる。実際に、例えばＰ２Ｘ３受容体等のＰ２Ｘ受容体のモジュレーターは鎮痛薬として使用することができる。
【０００９】
更に、Ｐ２Ｘ３受容体の活性化を遮断又は阻害する化合物は、泌尿生殖器、胃腸及び呼吸器の疾患、病態及び障害を治療するのにも役立ち、あるいは、ＡＴＰ等の通常はＰ２Ｘ３受容体及び／又はＰ２Ｘ２／Ｐ２Ｘ３ヘテロメリックチャネルを活性化する化合物に対する受容体アンタゴニストは、泌尿生殖器、胃腸及び呼吸器の疾患、病態及び障害を治療するのに役立つ。
【００１０】
Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ  （１９９９）  Ｊ．  Ａｎａｔｏｍｙ  １９４：３３５−３４２；及びＦｅｒｇｕｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９７）  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ５０５：５０３−５１１は齧歯類及びヒト膀胱尿路上皮の求心性神経でＰ２Ｘ受容体サブユニットが確認されたと開示している。これらのデータは、ＡＴＰが膨張の結果として膀胱又は他の中空臓器の上皮／内皮細胞から放出されるらしいということを示唆している。このように放出されたＡＴＰは、例えば尿路上皮基底固有層等の上皮基底層部分に位置する感覚神経細胞に情報を伝達する役割を果たすらしい（Ｎａｍａｓｉｂａｙａｍ，ｅｔ  ａｌ．  （１９９９）  ＢＪＵ  Ｉｎｔｌ．  ８４：８５４−８６０）。Ｐ２Ｘ受容体は感覚神経、交感神経、副交感神経、腸間膜神経及び中枢神経を含むいくつかの神経細胞で研究されている（Ｚｈｏｎｇ，ｅｔ  ａｌ．  （１９９８）  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １２５：７７１−７８１）。これらの研究は、プリン受容体が膀胱からの求心性神経伝達に役割を果たし、Ｐ２Ｘ受容体のモジュレーターが尿失禁等の膀胱障害及び他の泌尿生殖器疾患又は病態の治療に潜在的に有用であることを示唆している。
【００１１】
Ｐ２Ｘ３受容体はヒト結腸で発現することが示されており、正常結腸中よりも炎症結腸中により高レベルで発現する（Ｙ．Ｙｉａｎｇｏｕ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｅｕｒｏｋａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｍｏｔ  （２００１）  １３：３６５−６９）。Ｐ２Ｘ３受容体は、腸管内の膨張又は腔内圧の検出及び反射収縮の開始にも関与すると考えられており（Ｘ．Ｂｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ  （２００３）  ５５１．１：３０９−２２）、これを大腸炎と関連させている（Ｇ．Ｗｙｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  （２００４）  ２８７：Ｇ６４７−５７）。
【００１２】
Ｐ２Ｘ３受容体は、肺神経上皮小体（ＮＥＢ）でも発現することが示されており、肺における疼痛伝達における受容体に関係があるとされている（Ｉｎｇｅ  Ｂｒｏｕｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  （２０００）  ２３：５２０６１）。更に、Ｐ２Ｘ２受容体とＰ２Ｘ３受容体は、肺ＮＥＢにおけるｐＯ２検出に関係があるとされている（Ｗ．Ｒｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  （２００３）  ２３（３６）：１１３１５−２１）。
【００１３】
しかし、Ｐ２受容体アゴニストが酵素分解し易いため、哺乳動物生理における個々のＰ２受容体サブタイプの役割を評価するために、入手可能なプリン受容体リガンドを利用することは困難であった。そのうえ、個々のＰ２Ｘ受容体の役割の研究は、受容体サブタイプに特異的なアゴニスト及びアンタゴニストの欠如により妨げられている。
【００１４】
従って、例えばＰ２Ｘ３等のＰ２Ｘ受容体の制御ができるならば疼痛の治療を必要とする患者で疼痛を最小限にできるので、先端技術は当該受容体を調節又は制御する能力を提供できる方法及び／又は化合物を探求している。更に、研究と治療の両方の目的で、各Ｐ２Ｘ受容体サブタイプの特異的アゴニスト及びアンタゴニスト、特にインビボで有効な薬剤、並びにプリン受容体に特異的なアゴニスト及びアンタゴニスト化合物の同定方法が当分野で必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００８０００４４４２号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００７００４０９６０９号明細書
【特許文献３】国際公開第２００７０４１０８７号
【特許文献４】国際公開第２００６１１９５０４号
【特許文献５】国際公開第２００１１２６２７号
【特許文献６】国際公開第２００７００１９７３号
【特許文献７】米国特許出願６１／１３２１７８
【特許文献８】米国特許出願６１／００１３７６
【特許文献９】米国特許出願６１／１９７８６９
【特許文献１０】国際公開第２００７０１０５５３号
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ（１９９３）ＤｒｕｇＤｅｖ．Ｒｅｓ．２８：１９５−２０６
【非特許文献２】Ｖａｌｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３７１：５１６−５１９
【００１７】
【非特許文献３】Ｂｒａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３７１：５１９−５２３
【非特許文献４】Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４３２−４３５
【非特許文献５】Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：４２８−４３１
【非特許文献６】Ｂｕｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）ＥＭＢＯ  Ｊ．１５：５５−６２
【非特許文献７】Ｓｅｇｕｅｌａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１６：４４８−４５５
【非特許文献８】Ｂｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３７５：１２９−１３３
【非特許文献９】Ｓｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９３：３６８４−３６８８
【非特許文献１０】Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２２０：１９６−２０２）
【非特許文献１１】Ｃｏｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１６：２４９５−２５０７
【非特許文献１２】Ｇａｒｃｉａ−Ｇｕｚｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３８８：１２３−１２７
【非特許文献１３】Ｓｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２２３：４５６−４６０
【非特許文献１４】Ｓｕｒｐｒｅｎａｎｔ  ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７２：７３５−７３８
【非特許文献１５】Ｂｕｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．８：２２２１−２２２８
【非特許文献１６】Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３７７：４３２−４３５（１９９５）
【非特許文献１７】Ｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１８：７１５２−７１５９（１９９８）
【非特許文献１８】Ｔｏｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５４：９８９−９９３（１９９８）
【非特許文献１９】Ｒａｌｅｖｉｃ，Ｖ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．，５０：４１３−４９２（１９９８）
【非特許文献２０】Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ，Ｇ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．，２４：５０９−５８１（１９７２）
【非特許文献２１】Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ，Ｇ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｈｏｒｍｏｎｅｓ：ＡＭｕｌｔｉｄｉｓｃｉｐｌｉｎａｒｙ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｒ．Ｗ．Ｓｔｒａｕｂ  ａｎｄ  Ｌ．Ｂｏｌｉｄ．ＮｅｗＹｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ，１９７８，ｐ．１０７−１１８
【非特許文献２２】Ｂｌａｎｄ−Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２２：３６６−３７１（１９９７）
【非特許文献２３】Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｍａｃｏｌ．１２６：３２６−３３２（１９９９）
【非特許文献２４】Ｄｒｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＢｒａｉｎＲｅｓ．６６６：１８２−１８８（１９９４）
【非特許文献２５】Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２７：４４９−４Ｓ６（１９９９）
【非特許文献２６】Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２８：１４９７−１５０４（１９９９）
【非特許文献２７】Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ１０：２７７９−２７８２（１９９９）
【非特許文献２８】Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３７７：４２８−４３０（１９９５）
【非特許文献２９】Ｖｕｌｃｈａｎｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．３６：１２２９−１２４２（１９９７）
【非特許文献３０】Ｂｕｒｎｓｔｏｃｋ（１９９９）Ｊ．Ａｎａｔｏｍｙ  １９４：３３５−３４２
【非特許文献３１】Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５０５：５０３−５１１
【非特許文献３２】Ｎａｍａｓｉｂａｙａｍ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）ＢＪＵ  Ｉｎｔｌ．８４：８５４−８６０
【非特許文献３３】Ｚｈｏｎｇ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２５：７７１−７８１
【非特許文献３４】Ｙ．Ｙｉａｎｇｏｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｎｅｕｒｏｋａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｍｏｔ（２００１）１３：３６５−６９
【非特許文献３５】Ｘ．Ｂｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ（２００３）５５１．１：３０９−２２
【非特許文献３６】Ｇ．Ｗｙｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ Ｊ．ＰｈｙｓｉｏｌＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ（２００４）２８７：Ｇ６４７−５７
【非特許文献３７】Ｉｎｇｅ  Ｂｒｏｕｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＡｍＪ．Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ（２０００）２３：５２０６１
【非特許文献３８】Ｗ．Ｒｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ（２００３）２３（３６）：１１３１５−２１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
本発明は疼痛、特にＰ２Ｘ３受容体サブユニットモジュレーターを使用して治療することが可能な末梢性疼痛、炎症性疼痛又は組織損傷性疼痛に関連する疾病状態の治療に重要な役割を果たす新規Ｐ２Ｘ３受容体アンタゴニストを提供することにより上記欠陥のいくつかを克服することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明は構造式Ｉ：
【化１】
2012521429.tif 000002
【００２０】
［式中、
Ａはチエノピラゾリル、インダゾリル、インドリル、又はその位置異性体を表し；
Ｂは結合、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ５−１０ヘテロシクリル、又はＣ６−１０アリールを表し；
Ｒ１はＨ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、（ＣＨ２）ｎＣＦ３、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ（Ｒ２）２ＯＨ、−Ｏ−、ＣＮ、（ＣＨ２）ｎＯＲ２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール又はＣ１−６アルコキシを表し；前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル及びアリールはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（ＣＨ２）ｎＣＦ３又はＣＮの１〜３個の基で場合により置換されており；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表し；
Ｒ３は−ＣＲ２Ｒ４Ｒ５、（ＣＨＲ２）ｎＣ３−１０シクロアルキル、（ＣＨＲ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨＲ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルを表し、前記シクロアルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
又はＲ２とＲ３はそれらが結合している窒素と一緒になり、１〜３個のＲａ基で場合により置換されたＣ５−１０ヘテロシクリルを形成してもよく；
Ｒ４及びＲ５は独立してＨ、（ＣＨ２）ｎＯＲ２、ＣＨＦ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ２−６アルケニル、ＣＦ３、ＣＦ２、Ｃ（Ｏ）１−２Ｒ２、又はＣ１−６アルキルを表し；前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル及びアリールは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
Ｒ６は水素、ＯＲ２、（ＣＨ２）ｎＣＦ３、ハロゲン、Ｃ（Ｒ２）２ＯＲ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルを表し、前記アルキル、シクロアルキル、アリール及びヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；
ＲａはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、ＯＲ２（ＣＨ２）ｎＣＦ３、−Ｏ−、Ｃ３−６シクロアルキル、ＮＲ２Ｃ（Ｏ）Ｒ２、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２）２、Ｃ（Ｒ２）２ＯＲ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ２、Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２）２、Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）ＯＲ２，Ｃ（Ｏ）Ｃ５−１０ヘテロシクリル、ＮＯ２、ＣＮ、Ｎ（Ｒ２）２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、ＳＯ２Ｒ２、ＯＲ２、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、又は（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、前記アルキル、ヘテロシクリル及びアリールはＣ１−６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（ＣＨ２）ｎＣＦ３又はＣＮの１〜３個の基で場合により置換されており；及びｎは０〜４を表す。］
の新規Ｐ２Ｘ３型受容体アンタゴニスト又はその薬学的に許容可能な塩と個々のエナンチオマー及びジアステレオマーに関する。
【００２１】
本発明は本明細書に開示する化合物を使用するための組成物及び方法にも関する。本発明のこれら及び他の実施態様は、本明細書の開示に照らして当業者に容易に想到されよう。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明は疼痛及び疼痛に関連する疾病の治療に有用な構造式Ｉの新規Ｐ２Ｘ３型受容体アンタゴニストに関する。
【００２３】
本発明の１実施態様は、Ｂがフェニル、又はナフチル、好ましくはフェニル、から成る群から選択されるＣ６−１０アリールであり、前記フェニル又はナフチルが１〜３個のＲａ基で場合により置換されるときに実現される。、
本発明の１実施態様は、Ｂがピリジル、モルホリニル、ピラジニル、ピペロニル、ピラゾリル、チオフェニル、ピリミジニル、インドリル、又はフラニル、好ましくはピリジル、又はチオフェニル、から成る群から選択されるＣ５−１０ヘテロシクリルであり、その全てが１〜３のＲａ基で場合により置換されているときに実現される。本発明の１下位実施態様は、Ｂが１〜３のＲａ基で場合により置換されたピリジルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。
【００２４】
本発明の他の実施態様は、Ｂが１〜３のＲａ基で場合により置換されたフェニルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。
【００２５】
本発明の他の実施態様は、Ｂが１〜３のＲａ基で場合により置換されたＣ１−６アルキルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。
【００２６】
本発明の他の実施態様は、Ｂが結合であり、全ての他の可変要素が最初に記載した通りであるときに実現される。
【００２７】
本発明の更なる他の実施態様は、Ｂが１〜３のＲａ基で場合により置換されたＣ３−１０シクロアルキルであり、全ての他の可変要素が最初に記載した通りであるときに実現される。
【００２８】
本発明の１実施態様は、Ａがチエノピラゾリルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。本発明の１下位実施態様は、Ａ上の炭素原子に−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３が結合しているときに実現される。本発明の他の下位実施態様は、Ｂがチエノピラゾリル環構造のピラゾリル部分に結合しているときに実現される。
【００２９】
本発明の他の実施態様は、Ａがインダゾリルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。本発明の１下位実施態様は、Ａ上の炭素原子に−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３が結合しているときに実現される。本発明の他の下位実施態様は、Ｂがインダゾリル環構造のピラゾリルを含む部分の炭素原子に結合しているときに実現される。
【００３０】
本発明の他の実施態様は、Ａがインドリルであり、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。本発明の１下位実施態様は、Ａ上の炭素原子に−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３が結合しているときに実現される。本発明の他の下位実施態様は、Ｂがインドリル環構造のベンジル部分の炭素原子に結合しているときに実現される。本発明の更なる他の下位実施態様は、Ｂがインドリル環構造のピロール部分の炭素原子に結合しているときに実現される。
【００３１】
本発明の更なる他の実施態様は、Ｒ６がハロゲン、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルを表し、前記アルキル、ヘテロシクリル及びアリールが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、全ての他の可変要素が上記の通りであるときに実現される。本発明の１下位実施態様は、Ｒ６がＣ１−６アルキル、又は（ＣＨ２）ｎフェニルで場合により置換されているときに実現される。本発明の他の下位実施態様は、Ｒ６がヘテロシクリルである場合、Ｒ６が（ＣＨＲｙ）ｎ  ピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎチオフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミニジル、（ＣＨＲｙ）ｎフラニル、（ＣＨＲｙ）ｎチアジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリルから成る群から選択され、ここでＲｙがＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＨを表し、前記アルキルが１〜３個のＲａ基で場合により置換されているときに実現される。本発明の更なる１下位実施態様は、Ａ上の置換成分であるＲ６が窒素原子に結合しているときに実現される。
【００３２】
本発明の他の実施態様は、Ｒ２が水素であり、Ｒ３が（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎインダゾピリジル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルであり、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、他の全ての可変要素が上記の通りであるときに実現される。本発明の他の下位実施態様は、Ｒ３が（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリルであり、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されているときに実現される。
【００３３】
本発明の他の実施態様は、Ｒ１がＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＮ、又はハロゲン、好ましくはハロゲンがフッ素及び塩素から成る群から選択されるときに実現される。
【００３４】
本発明の他の実施態様は、式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、及びＶＩＩにより実現される；
【化２】
2012521429.tif 000003
【００３５】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒｙ、Ｒ６及びＲ３については上記の通りであり、Ｒ６ａはＲ６、ＹはＣＨ又はＮである］。本発明の１下位実施態様は、ＹがＣＨである場合、式ＩＩ、ＩＶ、Ｖ、及びＶＩの化合物のいずれかにより実現される。本発明の他の下位実施態様は、ＹがＮである場合、式ＩＩ、ＩＶ、Ｖ、及びＶＩの化合物のいずれかにより実現される。本発明の他の下位実施態様は、式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、及びＶＩＩ：
［式中、Ｒ１はＨ、ハロゲン、ＣＮ、又はＣ１−６アルキルであり；Ｒ２はＨであり、Ｒ６及びＲ６ａは水素、Ｃ１−６アルキル、（ＣＨ２）ｎＣ３−１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリルから成る群から独立して選択され、前記アルキル、アリール、ヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３が（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルであり、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されている］
の化合物のいずれかにより実現される。
【００３６】
、（ＣＨ２）ｎＣ３−１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロシクリル、から成る群から独立して選択され、前記アルキル、アリール、ヘテロシクリルは１〜３個のＲａ基で場合により置換されており；及びＲ３は（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎチアゾリル、Ｃ１−６アルキル、及び（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されている］
の化合物のいずれかにより実現される。式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ及びＶＩＩの化合物の更なる下位実施態様は、Ｒ６ａが（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎチオフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎフェニル、（ＣＨＲｙ）ｎＣ３−６シクルアルキル、及びＣ１−６アルキルから成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されており、及びＲ３が（ＣＨＲｙ）ｎピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎオキシドピリジル、（ＣＨＲｙ）ｎピリミジニル、（ＣＨＲｙ）ｎトリアゾリル、（ＣＨＲｙ）ｎピラジニル、（ＣＨＲｙ）ｎピラゾリル、及び（ＣＨＲｙ）ｎオキサジアゾリル、から成る群から選択され、その全てが１〜３個のＲａ基で場合により置換されているときに実現される。
【００３７】
本発明の更なる他の実施態様は、式ＩＩ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００３８】
本発明の他の実施態様は、式ＩＩＩ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００３９】
本発明の他の実施態様は、式ＩＶ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００４０】
本発明の他の実施態様は、式Ｖ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００４１】
本発明の他の実施態様は、式ＶＩ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００４２】
本発明の他の実施態様は、式ＶＩＩ及び他の可変要素が上記の通りである化合物により実現される。
【００４３】
本発明化合物の例は表１−６に示す化合物、又はそれらの薬学的に許容可能な塩及び個々のエナンチオマー及びジアステレオマーである。
【表１】
2012521429.tif 000004
2012521429.tif 000005
2012521429.tif 000006
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【表２】
2012521429.tif 000018
2012521429.tif 000019
【表３】
2012521429.tif 000020
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【表４】
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【表５】
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2012521429.tif 000059
【表６】
2012521429.tif 000060
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任意の可変要素（例えばアリール、複素環、Ｒ１、Ｒ５等）が任意成分中に２回以上出現する場合には、各出現に関するその定義はその他すべての出現から独立している。また、置換基又は可変要素の結合は、このような結合が結果として安定な化合物が得られる場合にのみ許容される。
【００４４】
Ｒａが−Ｏ−であり、それが炭素と結合しているときには、カルボニル基と称し、それが窒素原子（例えばピリジル基上の窒素原子）又は硫黄原子と結合しているときには、夫々Ｎ−オキシド基及びスルホキシド基と称する。
【００４５】
本明細書で使用する場合「アルキル」とは、例えばアルコキシ、アルカノイル、アルケニル、及びアルキニル等の接頭語「アルク（ａｌｋ）」を有する基を包含し、直鎖又は分岐鎖又はその組合せであり得る炭素鎖を意味する。アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル及びヘプチルが含まれる。「アルケニル」とは、２〜１０個の炭素原子及び少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分岐鎖又は環状の炭化水素基を意味する。好ましいアルケニル基には、エテニル、プロペニル、ブテニル及びシクロヘキセニルが含まれる。好ましくは、アルケニルはＣ２−Ｃ６アルケニルである。好ましいアルキニルはＣ２−Ｃ６アルキニルである。「アルケニル」、「アルキニル」及び他の同様の用語には、少なくとも１個の不飽和Ｃ−Ｃ結合を含有する炭素鎖が含まれる。
【００４６】
本明細書で使用する場合「フルオロアルキル」とは、少なくとも１個のフッ素置換基を含有する本明細書に記載するアルキル置換基を意味する。
【００４７】
本発明の化合物には、Ｒ３の定義において開示するようなＮ−オキシドが含まれる。
【００４８】
用語「シクロアルキル」とは、特定の炭素原子数を有する１個の環を含有する飽和炭化水素を意味する。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。
【００４９】
用語「Ｃ１−６」には、６、５、４、３、２又は１個の炭素原子を含有するアルキルが含まれる。
【００５０】
単独又は組合せて本明細書で使用する場合、用語「アルコキシ」には、オキシ連結原子と結合したアルキル基が含まれる。用語「アルコキシ」には、アルキルエーテル基も含まれ、ここで用語「アルキル」は上記に定義した通りであり、「エーテル」とは酸素原子を介して結合した２個のアルキル基を意味する。適切なアルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、メトキシメタン（別称「ジメチルエーテル」）、及びメトキシエタン（別称「エチルメチルエーテル」）が含まれる。
【００５１】
本明細書で使用する場合「アリール」とは、各環が７員までであり、少なくとも１個の環が芳香環である任意の安定な単環式又は二環式炭素環を意味する。このようなアリール成分の例には、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル又はビフェニルが含まれる。
【００５２】
本明細書で使用する場合、複素環、ヘテロシクリル又は複素環式という用語は、飽和又は不飽和であり、炭素原子及びＮ、Ｏ及びＳから成る群から選択される１〜４個のヘテロ原子から構成される安定な５〜７員環の単環式又は安定な８〜１１員環の二環式の複素環を意味し、上記に定義した複素環のいずれかがベンゼン環と縮合した任意の二環基を含む。安定な構造が形成される限り、複素環は任意のヘテロ原子又は炭素原子に結合することができる。用語、複素環又は複素環式にはヘテロアリール部分が含まれる。このような複素環式成分の例には、限定されるものではないが、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニル、及びトリアゾリルが含まれる。
【００５３】
所定実施態様において、複素環基はヘテロアリール基である。本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」とは、５〜１４個、好ましくは５、６、９又は１０個の環原子を有し、環配列中に６、１０又は１４個のπ電子を共有しており、炭素原子に加え、Ｎ、Ｏ及びＳから成る群から選択される１〜約３個のヘテロ原子を有する基を称する。限定されるものではないがヘテロアリール基には、チエニル、ベンゾチエニル、フリル、ベンゾフリル、ジベンゾフリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、インドリル、キノリル、イソキノリル、キノキサリニル、テトラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル及びイソオキサゾリルが含まれる。
【００５４】
所定の他の実施態様において複素環基は、アリール又はヘテロアリール基に縮合している。このような縮合複素環の例には、限定されるものではないが、テトラヒドロキノリニル及びジヒドロベンゾフラニルが含まれる。
【００５５】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」とは、特に指定しない限り、芳香環を含む安定な５〜７員の単環式又は安定な９〜１０員の縮合二環式複素環系を意味し、当該環系のいずれの環もピペリジニルのように飽和、部分飽和、又はピリジニルのように不飽和であってもよく、当該環は炭素原子と、Ｎ、Ｏ及びＳから成る群から選択される１〜４個のヘテロ原子から構成され、ここで窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は任意に四級化されていてもよく、そして上記に定義した複素環のいずれかがベンゼン環と縮合した任意の二環基をも含んでいる。安定な構造が形成される限り、複素環は、任意のヘテロ原子又は炭素原子に結合することができる。限定されるものではないがこのようなヘテロアリール基の例には、ベンズイミダゾール、ベンゾイソチアゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾフラン、ベンゾチアゾール、ベンゾチオフェン、ベンゾトリアゾール、ベンゾオキサゾール、カルボリン、シノリン、フラン、フラザン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリジン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、キナゾリン、キノリン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアジン、トリアゾール及びそのＮ−オキシドが含まれる。
【００５６】
ヘテロシクロアルキルの例には、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニル、イミダゾリニル、ピロリジン−２−オン、ピペリジン−２−オン及びチオモルホリニルが含まれる。
【００５７】
用語「ヘテロ原子」は独立した基準で選択されるＯ、Ｓ又はＮを意味する。
【００５８】
置換されている部分とは、１個以上の水素が独立して他の化学置換基で置換された部分である。非限定的な例として、置換フェニルには、２−フルオロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３−クロロ−４−フルオロ−フェニル、２，４−フルオロ−３−プロピルフェニルが含まれる。別の非限定的例として、置換ｎ−オクチルには、２，４−ジメチル−５−エチルオクチル及び３−シクロペンチルオクチルが含まれる。この定義には、酸素で置換されカルボニル（−ＣＯ−）を形成するメチレン（−ＣＨ２−）も含まれる。
【００５９】
本明細書で用いる場合、特に指定しない限り、ある部分（例えばシクロアルキル、ヒドロカルビル、アリール、アルキル、ヘテロアリール、複素環、尿素等）が「場合により置換されている」と記載する場合には、その基が１〜４個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１又は２個の水素以外の置換基を任意に有することを意味する。限定されるものではないが適切な置換基には、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（例えばオキソで置換された環状−ＣＨ−は−Ｃ（Ｏ）−である）、ニトロ、ハロヒドロカルビル、ヒドロカルビル、アリール、アラルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アシルアミノ、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アミノアルキル、アシル、カルボキシ、ヒドロキシアルキル、アルカンスルホニル、アレンスルホニル、アルカンスルホンアミド、アレンスルホンアミド、アラルキルスルホンアミド、アルキルカルボニル、アシルオキシ、シアノ及びウレイド基が含まれる。（特に指定しない限り）それ自体が更に置換されていない好ましい置換基を以下の通りである：
（ａ）ハロ、シアノ、オキソ、カルボキシ、ホルミル、ニトロ、アミノ、アミジノ、グアニジノ、及び
（ｂ）Ｃ１−Ｃ６アルキル又はアルケニル又はアリールアルキルイミノ、カルバモイル、アジド、カルボキサミド、メルカプト、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルキルアリール、アリールアルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、ＳＯ２ＣＦ３、ＣＦ３、ＳＯ２Ｍｅ、Ｃ１−Ｃ８アルケニル、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ２−Ｃ８アシル、Ｃ２−Ｃ８アシルアミノ、Ｃ１−Ｃ８アルキルチオ、アリールアルキルチオ、アリールチオ、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルフィニル、アリールアルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルホニル、アリールアルキルスルホニル、アリールスルホニル、Ｃ０−Ｃ６Ｎ−アルキルカルバモイル、Ｃ２−Ｃ１５Ｎ，Ｎ−ジアルキルカルバモイル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、アロイル、アリールオキシ、アリールアルキルエーテル、アリール、シクロアルキル若しくは複素環若しくは他のアリール環に縮合したアリール、Ｃ３−Ｃ７複素環、又はシクロアルキル、ヘテロシクリル若しくはアリールに縮合もしくはスピロ縮合したこれらの環のいずれかであり、ここで前記の各々が上記（ａ）に列挙した１個以上の部分で場合により置換されたもの。
【００６０】
「ハロゲン」とはフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００６１】
用語「哺乳動物（ｍａｍｍａｌ）」「哺乳類の（ｍａｍｍａｌｉａｎ）」「哺乳類（ｍａｍｍａｌｓ）」には、ヒト、並びにイヌ、ネコ、ウマ、ブタ及びウシ等の動物が含まれる。
【００６２】
前掲書又は後掲書であるに関わらず、本明細書で引用する全ての特許、特許出願及び刊行物は、その開示内容全体を本明細書に援用され、技術の現状を表すものとみなされる。
【００６３】
本明細書と添付の特許請求の範囲で使用する場合、文脈からそうでないことが明白である場合を除き、単数形の不定冠詞（「ａ」「ａｎ」）と定冠詞（ｔｈｅ）は複数の言及を包含する。従って、例えば「プライマー（ａ  ｐｒｉｍｅｒ）」との言及には、２個以上のこのようなプライマーが含まれ、「アミノ酸（ａｎ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ）」との言及には、２個以上のこのようなアミノ酸が含まれ、その他同様である。
【００６４】
用語「有効量」又は「治療有効量」とは、Ｐ２Ｘ受容体複合体の効力を阻害又は強化するために十分なＰ２Ｘ受容体複合体モジュレーターの濃度を意味する。
【００６５】
「疼痛」とは、分化した神経終末の刺激に起因する多少局在化した不快感、苦痛感又は苦悶感を意味する。疼痛には多くの種類があり、限定されるものではないが、電撃痛、幻肢痛、刺痛、急性疼痛、炎症性疼痛、神経因性疼痛、複合性局所疼痛、神経痛、神経障害、組織傷害性疼痛その他が含まれる（Ｄｏｒｌａｎｄ’ｓ  Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，２８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．）。疼痛治療の目標は、治療被験者により知覚される疼痛の程度又は重篤度を軽減することである。
【００６６】
本明細書に記載する化合物は、１個以上の二重結合を含み、従って他の配座異性体と同様にシス／トランス異性体を生じ得る。特に指定しない限り本発明には、このような可能な全異性体と同様にこのような異性体の混合物が含まれる。
【００６７】
本発明の化合物は、１個以上の不斉中心を含み、従ってラセミ化合物、ラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物及び個々のジアステレオマーとして存在する場合がある。
【００６８】
一般式Ｉの化合物中、原子はその天然の同位体存在度を示してもよいし、又は１個以上の原子が、自然界に優勢に存するのとは異なる原子質量又は質量数を有するが、同一の原子番号を有する特定の同位体で人為的に強化されていてもよい。本発明は、一般式Ｉの化合物の全ての適した同位体変種（ｉｓｏｔｏｐｉｃ  ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ）を含むことを意図している。例えば、水素（Ｈ）の異なる同位体の種類には、プロチウム（１Ｈ）及び重水素（２Ｈ）が含まれる。プロチウムが自然界で優勢に存する水素の同位体である。重水素の強化は、インビボでの半減期延長又は必要用量の軽減等の一定の治療的有利性を与えることが可能であり、又生物学的試料の特性化の標準品として有用な化合物を提供することができる。一般式Ｉの範囲内で同位体的に強化された化合物は、過度の実験をせずに当業者に周知の従来技術により、又は本明細書のスキーム及び実施例に記載したのと類似するプロセスにより、適切な同位体的に強化した試薬及び／又は中間体を使用して調製することができる。
【００６９】
当然理解されることであるが、本明細書で使用する場合、構造式Ｉの化合物との言及は、又薬学的に許容可能な塩を含み、更に遊離化合物の前駆体として使用する場合又は他の合成操作で使用する場合には薬学的に許容できない塩も含むものとする。
【００７０】
本発明の化合物は薬学的に許容可能な塩の形態として投与することができる。用語「薬学的に許容可能な塩」とは、薬学的に許容可能な非毒性の塩基又は酸から調製される塩を意味する。本発明の化合物が酸性である場合には、その対応する塩は、無機塩基と有機塩基を含む薬学的に許容可能な非毒性の塩基から好適に調製することができる。このような無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（二価及び一価）、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（三価及び二価）、カリウム、ナトリウム、亜鉛及びその他が含まれる。薬学的に許容可能な非毒性の有機塩基から誘導される塩には、第１級アミン、第２級アミン、第３級アミンの塩、また同様に環状アミン及び自然界に存するアミン及び合成置換アミンの塩が含まれる。塩を形成することが可能な他の薬学的に許容可能な非毒性の有機塩基には、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン及びトロメタミン等のイオン交換樹脂が含まれる。
【００７１】
本発明の化合物が塩基性である場合には、その対応する塩は、無機酸と有機酸を含む薬学的に許容可能な非毒性の酸から好適に調製することができる。このような酸には、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、樟脳スルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びその他が含まれる。
【００７２】
本発明の医薬組成物は、活性成分としての本発明の化合物（又はその薬学的に許容可能な塩）、薬学的に許容可能なキャリヤー、及び任意に１種以上の他の治療薬又はアジュバントを含有する。このような他の治療薬には、例えばｉ）オピエートアゴニスト又はアンタゴニスト、ｉｉ）カルシウムチャネルアンタゴニスト、ｉｉｉ）５ＨＴ受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、ｉｖ）ナトリウムチャネルアンタゴニスト、ｖ）ＮＭＤＡ受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、ｖｉ）ＣＯＸ−２選択的阻害剤、ｖｉｉ）ＮＫ１アンタゴニスト、ｖｉｉｉ）非ステロイド性抗炎症薬（「ＮＳＡＩＤ」）、ｉｘ）選択的セロトニン再取込み阻害剤（「ＳＳＲＩ」）及び／又は選択的セロトニン・ノルエピネフリン再取込み阻害剤（「ＳＳＮＲＩ」）、ｘ）三環系抗鬱薬、ｘｉ）ノルエピネフリンモジュレーター、ｘｉｉ）リチウム、ｘｉｉｉ）バルプロ酸塩、ｘｉｖ）ニューロンチン（ガバペンチン）、ｘｖ）プレガバリン、並びにｘｖｉ）ナトリウムチャネル遮断薬が含まれる。本発明の組成物には経口、直腸、局所及び非経口（皮下、筋肉内及び静脈内を含む）投与に適した組成物が含まれるが、任意の一定の症例に最適な経路は、個々の宿主、及び活性成分を投与する病態の特質及び重篤度に依存する。医薬組成物は、単位用量形態で好適に提供することができ、薬学分野で周知の方法のいずれかにより調製することができる。
【００７３】
本発明の化合物及び組成物は慢性、内臓、炎症性及び神経因性疼痛症候群の治療に有用である。これらは、外傷性神経損傷、神経圧迫又は神経絞扼、ヘルペス後神経痛、三叉神経痛、小径線維神経障害及び糖尿病性神経障害に起因する疼痛の治療に有用である。本発明の化合物及び組成物は、又慢性腰痛、幻肢痛、慢性骨盤痛、神経腫痛、複合性局所疼痛症候群、慢性関節痛及び関連神経痛、並びに癌、化学療法、ＨＩＶ及びＨＩＶ治療により誘発される神経障害に伴う疼痛の治療にも有用である。本発明の化合物は、又局所麻酔薬としても利用され得る。本発明の化合物は、敏性腸症候群及び関連障害と同様にクローン病の治療にも有用である。
【００７４】
本発明の化合物は、癲癇及び部分性及び全身性強直性発作の治療のための臨床用途を有する。これらは脳卒中又は神経外傷に起因する虚血状態下における神経保護、及び多発性硬化症の治療にとっても有用である。本発明の化合物は頻脈性不整脈の治療に有用である。更に、本発明の化合物は、気分障害（例えば抑鬱又はより具体的には鬱病性障害（例えば突発性又は再発性大鬱病性障害及び気分変調性障害）、又は双極性障害（例えば双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害及び気分循環性障害））；不安障害（例えば広場恐怖を伴うか又は伴わないパニック障害、パニック障害歴を伴わない広場恐怖症、単一恐怖症（例えば特定動物恐怖症）、社会恐怖症、強迫性障害、ストレス障害（外傷後ストレス障害及び急性ストレス障害を含む）、及び全般性不安障害）を含む、神経精神障害の治療にも有用である。従って、本発明の他の側面は、疼痛及び疼痛に関連する他の疾病の治療用医薬の製造における式Ｉの化合物の使用である。
【００７５】
ヒト等の霊長類に加え、他の各種哺乳動物も本発明の方法により治療することができる。例えば、限定されるものではないが、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、モルモット、又は他のウシ科、ヒツジ科、ウマ科、イヌ科、ネコ科、マウス等の齧歯類に属する動物種を含む哺乳動物を治療することができる。しかし、本方法は例えばニワトリ等の鳥類種等の他の種でも実施することができる。
【００７６】
当然なことであるが、鬱病又は不安症の治療のために本発明の化合物は、ノルエピネフリン再取込み阻害剤、選択的セロトニン再取込み阻害剤（ＳＳＲＩ）、モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）、可逆的モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＲＩＭＡ）、セロトニン・ノルアドレナリン再取込み阻害剤（ＳＮＲＩ）、アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト、非定型抗鬱剤、ベンゾジアゼピン、５−ＨＴ１Ａアゴニスト又はアンタゴニスト、特に５−ＨＴ１Ａ部分アゴニスト、ニューロキニン１受容体アンタゴニスト、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニスト、及びその薬学的に許容可能な塩等の他の抗鬱剤又は抗不安剤と併用することができる。
【００７７】
更に、当然なことではあるが、本発明の化合物は、上記病態及び障害を予防するためと同様にカルシウムチャネル活性に関連する他の病態及び障害を予防するために予防的に有効用量レベルで投与することができる。
【００７８】
本発明の化合物を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、液剤又は懸濁液剤を概要約の用途に利用することができる。本発明の目的では、口腔洗浄薬やうがい薬も外用薬の用途の範囲に含まれる。
【００７９】
炎症性及び神経因性疼痛の治療には、体重ｋｇ、１日当たり約０．０１ｍｇ〜約１４０ｍｇ、又は患者一人、１日当たり約０．５ｍｇ〜約７ｇの用量レベルが有用である。例えば、炎症性疼痛は、体重ｋｇ、１日当たり化合物約０．０１ｍｇ〜７５ｍｇ又は患者一人、１日当たり約０．５ｍｇ〜約３．５ｇを投与することにより有効に治療することができる。神経因性疼痛は、体重ｋｇ、１日当たり化合物約０．０１ｍｇ〜１２５ｍｇ、又は患者一人、１日当たり約０．５ｍｇ〜約５．５ｇを投与することにより有効に治療することができる。
【００８０】
単一用量形態を製造するためにキャリヤー材料と配合することができる活性成分の量は、治療する宿主と個々の投与方式により異なる。例えば、ヒト経口投与用製剤は、組成物全体の約５〜約９５％の範囲の適切で好適な量のキャリヤー材料と配合して、活性剤約０．５ｍｇ〜約５ｇを好適に含有することができる。単位用量形態は、一般に活性成分約１ｍｇ〜約１０００ｍｇの間、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ又は１０００ｍｇを含有する。
【００８１】
しかし、当然なことではあるが、任意の個々の患者の特定用量レベルは種々の因子に依存する。患者に関連するこのような因子には、患者の年齢、体重、一般健康状態、性別及び食生活が含まれる。他の因子には、投与時間、投与経路、排泄速度、薬剤併用及び治療する個々の疾患の重篤度が含まれる。
【００８２】
実際には、本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、従来の調剤配合技術により活性成分として調剤キャリヤーと密接な混合製剤として配合することができる。キャリヤーは、例えば経口又は非経口（静脈内を含む）の投与に所望される製剤形態に応じて多様な形態をとることができる。従って、本発明の医薬組成物は、所定量の活性成分を各々含有するカプセル剤、カシェ剤又は錠剤等の経口投与に適した不連続単位として提供することができる。更に、本発明の組成物は、散剤、顆粒剤、液剤、水性液体懸濁液剤、非水性液剤、水中油型エマルション又は油中水型液体エマルションとして提供することができる。上記一般剤形に加え、本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、制御放出手段及び／又は送達装置によっても投与することができる。本発明の組成物はいずれかの薬学方法により調製することができる。一般に、このような方法は、活性成分を１種以上の必須成分を構成するキャリヤーと配合する段階を含む。一般に組成物は、活性成分を液体キャリヤー又は微粉状固体キャリヤー又はその両者と均一かつ緊密に混和することにより調製される。その後、調製物は所望形態に好適に成形され得る。
【００８３】
従って、本発明の医薬組成物は、薬学的に許容可能なキャリヤー、及び化合物又は薬学的に許容可能な塩を含有することができる。本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、１種以上の治療的に活性な化合物と併用して医薬組成物に含めることもできる。
【００８４】
使用することのできる調剤キャリヤーは、例えば固体、液体又は気体である。固体キャリヤーの例には、乳糖、白土、蔗糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム及びステアリン酸が含まれる。液体キャリヤーの例は、液糖、落花生油、オリーブ油及び水である。気体キャリヤーの例には、二酸化炭素と窒素が含まれる。上述したように、経口投与剤形用組成物の調製においては、いずれかの通常の調剤媒体を使用することができる。例えば、懸濁液剤、エリキシル剤及び液剤等の経口液体製剤の場合には、水、グリコール、油類、アルコール、香味剤、防腐剤、着色剤及びその他を含むことができ；また、散剤、カプセル剤及び錠剤等の経口固体製剤の場合には、澱粉、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、及びその他のキャリヤーを含むことができる。投与し易いという理由から錠剤とカプセル剤は、固体調剤キャリヤーを利用する最も有利な経口投与単位形態の代表である。必要に応じて錠剤は、標準的な水性又は非水性の技術によりコーティングしてもよい。上記の一般剤形に加え、制御放出手段及び／又は送達装置も本発明の化合物及び組成物を投与する上で使用することができる。
【００８５】
経口剤形用組成物を調製するには、任意の適切な調剤媒体を使用することができる。例えば、水、グリコール、油類、アルコール、香味剤、防腐剤、着色剤及びその他は、懸濁液剤、エリキシル剤及び液剤等の経口液体製剤を形成するため使用することができ；一方、澱粉、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤等のキャリヤーは、散剤、カプセル剤及び錠剤等の経口固体製剤を形成するために使用することができる。投与し易いという理由から錠剤とカプセル剤は、固体調剤キャリヤーを利用する有利な経口投与単位である。錠剤は、標準的な水性又は非水性技術により任意にコーティングしてもよい。
【００８６】
本発明の組成物を含有する錠剤は、任意に１種以上の補助成分又はアジュバントとともに圧縮又は成形により調製することができる。圧縮錠剤は、活性成分を散剤又は顆粒剤等の自由流動形態で、任意に結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤又は分散剤と混合し、適切な機械で圧縮することにより調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化合物の混合物を適切な機械で成形することにより調製することができる。各錠剤は、活性成分約０．１ｍｇ〜約５００ｍｇを含有すると有利であり、各カシェ剤又は各カプセル剤は、活性成分約０．１ｍｇ〜約５００ｍｇを含有すると有利である。従って、錠剤、カシェ剤又はカプセル剤の１錠が活性成分を０．１ｍｇ、１ｍｇ、５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ又は５００ｍｇを含有し、当該錠剤、カシェ剤又はカプセル剤の１錠又は２錠を１日１回、２回又は３回投与すると好適である。
【００８７】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、活性化合物の水溶液又は水性懸濁液として調製することができる。例えば、ヒドロキシプロピルセルロース等の適切な界面活性剤を含めることができる。分散液剤は、グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びその油中混合物で調製することもできる。更に、微生物の有害な増殖を防ぐために防腐剤を含めることができる。
【００８８】
注射用に適した本発明の医薬組成物には、滅菌水溶液又は分散液が含まれる。更に組成物は、このような滅菌注射溶液又は分散液の即時調製用の滅菌粉末の形態でもよい。いずれの場合も、最終注射剤形態は無菌でなければならず、注射針を通過し易いように有効に流動性でなければならない。医薬組成物は、製造及び保存条件下で安定でなければならず、従って細菌や真菌等の微生物の汚染作用から保護しなければならない。キャリヤーは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール）、植物油及び適切なその混合物を含む溶媒又は分散媒とすることができる。
【００８９】
本発明の医薬組成物は、例えばエアゾール、クリーム、軟膏、ローション及び粉剤等の外用薬用途に適した形態とすることができる。更に、組成物は経皮装置での使用に適した形態とすることができる。これらの製剤は、本発明の代表的化合物又はその薬学的に許容可能な塩を使用して従来の加工法により調製することができる。１例としてクリーム又は軟膏は、親水性材料と水を約５重量％〜約１０重量％の化合物と混合して所望のコンシステンシーを有するクリーム又は軟膏を製造することにより調製される。
【００９０】
本発明の医薬組成物は、キャリヤーが固体である直腸投与に適した形態とすることができ、例えば混合物は単位用量座剤を形成する。適切なキャリヤーには、カカオバター及び当分野で一般に使用されている他の材料が含まれる。座剤は先ず組成物を軟化又は溶融したキャリヤーと混合した後に型で冷却成形することにより好適に形成することができる。
【００９１】
上記キャリヤー成分に加え、上記医薬製剤は、必要に応じて希釈剤、緩衝剤、香味剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、滑沢剤及び防腐剤（酸化防止剤を含む）等の１種以上の他のキャリヤー成分を含んでいてもよい。更に、製剤を所期レシピエントの血液と等張にするために他のアジュバントを含んでいてもよい。本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を含有する組成物は、粉末又は濃縮液形態で調製することもできる。
【００９２】
更に、上述したように本発明の化合物は、１種以上の治療的に活性な化合物と併用することができる。特に、本発明の化合物は、ｉ）オピエートアゴニスト又はアンタゴニスト、ｉｉ）他のカルシウムチャネルアンタゴニスト、ｉｉｉ）５−ＨＴ１Ａアゴニスト又はアンタゴニスト、及び５−ＨＴ１Ａ部分アゴニストを含む５ＨＴ受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、ｉｖ）ナトリウムチャネルアンタゴニスト、ｖ）Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、ｖｉ）ＣＯＸ−２選択的阻害剤、ｖｉｉ）ニューロキニン１受容体（ＮＫ１）アンタゴニスト、ｖｉｉｉ）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ｉｘ）選択的セロトニン再取込み阻害剤（ＳＳＲＩ）及び／又は選択的セロトニン・ノルエピネフリン再取込み阻害剤（ＳＳＮＲＩ）、ｘ）三環系抗鬱薬、ｘｉ）ノルエピネフリンモジュレーター、ｘｉｉ）リチウム、ｘｉｉｉ）バルプロ酸塩、ｘｉｖ）ノルエピネフリン再取込み阻害剤、ｘｖ）モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）、ｘｖｉ）可逆的モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＲＩＭＡ）、ｘｖｉｉ）アルファ−アドレナリン受容体アンタゴニスト、ｘｖｉｉｉ）非定型抗鬱剤、ｘｉｘ）ベンゾジアゼピン、ｘｘ）コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニスト、ｘｘｉ）ニューロンチン（ガバペンチン）、並びにｘｘｉｉ）プレガバリンと有利に併用することができる。
【００９３】
本明細書で使用する略語は以下の意味である（特に指定しない限り、下記しない略語はそれらが通常使用されている通りの意味を有する）：Ａｃ（アセチル）、Ｂｎ（ベンジル）、Ｂｏｃ（第３級ブトキシカルボニル）、Ｂｏｐ試薬（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ＣＡＭＰ（環状アデノシン−３’，５’−一リン酸）、ＤＡＳＴ（（ジエチルアミノ）サルファートリフルオリド）、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン）、ＤＩＢＡＬ（水素化ジイソブチルアルミニウム）、ＤＩＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）、ＤＭＡＰ（４−（ジメチルアミノ）ピリジン）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＤＰＰＦ（１，１’−ビスジフェニルホスフィノフェロセン）、ＥＤＣ（１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）、Ｅｔ３Ｎ（トリエチルアミン）、ＧＳＴ（グルタチオントランスフェラーゼ）、ＨＯＢｔ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）、ＬＡＨ（水素化リチウムアルミニウム）、Ｍｓ（メタンスルホニル；メシル；又はＳＯ２Ｍｅ）、ＭｓＯ（メタンスルホナート又はメシラート）、ＭＣＰＢＡ（メタクロロ過安息香酸）、ＮａＨＭＤＳ（ヘキサメチルジシラザンナトリウム）、ＮＢＳ（Ｎ−ブロモスクシンイミド）、ＮＣＳ（Ｎ−クロロスクシンイミド）、ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）、ＰＤＥ（ホスホジエステラーゼ）、Ｐｈ（フェニル）、ｒ．ｔ．又はＲＴ（室温）、Ｒａｃ（ラセミ）、ＳＡＭ（アミノスルホニル；スルホンアミド又はＳＯ２ＮＨ２）、ＳＰＡ（シンチレーション近接アッセイ）、Ｔｈ（２−又は３−チエニル）、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、Ｔｈｉ（チオフェンジイル）、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）、ＴＭＥＤＡ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン）、ＴＭＳＩ（トリメチルシリルヨージド）、Ｔｒ又はｔｒｉｔｙｌ（Ｎ−トリフェニルメチル）、Ｃ３Ｈ５（アリル）、Ｍｅ（メチル）、Ｅｔ（エチル）、ｎ−Ｐｒ（ノルマルプロピル）、ｉ−Ｐｒ（イソプロピル）、ｎ−Ｂｕ（ノルマルブチル）、ｉ−Ｂｕｔｙｌ（イソブチル）、ｓ−Ｂｕ（第２級ブチル）、ｔ−Ｂｕ（第３級ブチル）、ｃ−Ｐｒ（シクロプロピル）、ｃ−Ｂｕ（シクロブチル）、ｃ−Ｐｅｎ（シクロペンチル）、ｃ−Ｈｅｘ（シクロヘキシル）。
【００９４】
本発明の化合物は実施例に記載する手順に従って調製することができる。以下の実施例は更に本発明の範囲についても記載するが、これに限定されるものではない。
【００９５】
特に指定しない限り、実験手順は以下の条件下で実施した。全操作は室温又は雰囲気温度、即ち１８〜２５℃の範囲の温度で実施した。試薬又は中間体が空気及び水分に感受性の場合には、不活性ガスによる保護を使用した。溶媒の蒸発は、６０℃までの浴温度で減圧下（６００〜４０００パスカル：４．５〜３０ｍｍＨｇ）でロータリーエバポレーターを使用して実施した。反応経過は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）又は高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＨＰＬＣ−ＭＳ）により追跡し、反応時間は単なる例示として示した。全ての最終生成物の構造と純度は、次の技術、即ちＴＬＣ、質量分析法、核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトロメトリー又は微量分析データのうちの少なくとも１種により確認した。記載する場合、収率は例示のために過ぎない。記載する場合、ＮＭＲデータは、示した溶媒を使用して３００ＭＨｚ、４００ＭＨｚ又は５００ＭＨｚで測定し、主要診断プロトンのデルタ（δ）値として、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する１００万分率（ｐｐｍ）で表す。シグナル形状に使用する慣用略語は、ｓ．一重線；ｄ．二重線；ｔ．三重線；ｍ．多重線；ｂｒ．ブロード等である。更に、「Ａｒ」は芳香族シグナルを意味する。化学記号はその通常通りの意味であり、以下の略語を使用する：ｖ（容量）、ｗ（重量）、ｂ．ｐ．（沸点）、ｍ．ｐ．（融点）、Ｌ（リットル）、ｍＬ（ミリリットル）、ｇ（グラム）、ｍｇ（ミリグラム）、ｍｏｌ（モル）、ｍｍｏｌ（ミリモル）、ｅｑ（当量）。
【００９６】
化合物を合成するために本明細書に記載する手順は、官能基を保護する操作段階及び、再結晶、蒸留、カラムクロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、ラジアルクロマトグラフィー及び高圧クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等の精製段階を１以上含むことができる。生成物は、プロトン及び炭素−１３核磁気共鳴法（１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲ）、赤外及び紫外分光法（ＩＲ及びＵＶ）、Ｘ線結晶構造解析、元素分析並びにＨＰＬＣ−質量分析法（ＨＰＬＣ−ＭＳ）等の化学分野で周知の各種技術を使用して特徴づけることができる。官能基保護操作、精製、構造同定方及び定量方法は、化学合成分野の当業者に周知である。
【００９７】
適切な溶媒は、反応成分の１又は全部を少なくとも部分的に溶解し、反応成分とも又は生成物とも不利な相互作用をしない溶媒である。適切な溶媒は、芳香族炭化水素（例えばトルエン、キシレン）、ハロゲン化溶媒（例えば塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、クロロベンゼン）、エーテル（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ジグリム、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アニソール）、ニトリル（例えばアセトニトリル、プロピオニトリル）、ケトン（例えば、２−ブタノン、ジエチルケトン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルケトン）、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、ｔ−ブタノール）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）及び水である。２種以上の溶媒の混合物を使用することもできる。適切な塩基は一般に、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化バリウム及び水酸化カルシウム等のアルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物；例えば、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム及び水素化カルシウム等のアルカリ金属水素化物及びアルカリ土類金属水素化物；例えば、リチウムアミド、ナトリウムアミド及びカリウムアミド等のアルカリ金属アミド；例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム及び炭酸水素セシウム等のアルカリ金属炭酸塩及びアルカリ土類金属炭酸塩；例えば、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド及びマグネシウムエトキシド等のアルカリ金属アルコキシド及びアルカリ土類金属アルコキシド；例えばメチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔ−ブチルリチウム、フェニルリチウム等のアルカリ金属アルキル、アルキルマグネシウムハロゲン化物、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、コリジン、ルチジン及び４−ジメチルアミノピリジン等の有機塩基；並びに例えば、ＤＢＵ及びＤＡＢＣＯ二環式アミンである。
【００９８】
当然なことではあるが、本発明に記載する所望化合物を提供するために、必要に応じて当業者に利用可能な標準的な官能基変換技術を使用して下記実施例に記載する化合物中に存在する官能基を更に操作することができる。
【００９９】
同様に当然なことではあるが、本発明の化合物は１個以上の立体中心を含んでおり、当該化合物は、単一のエナンチオマーもしくはジアステレオマーとして、又は２個以上のエナンチオマーもしくはジアステレオマーを任意の比率で含む混合物として調製されるかもしれない。
【０１００】
当業者に自明の他の変形又は変更も本発明の範囲と教示に含まれる。本発明は下記の特許請求の範囲の記載以外には限定されない。
【実施例】
【０１０１】
本発明の化合物の数種類の調製方法を下記のスキーム及び実施例に例示する。出発材料は当分野で公知の手順又は本明細書に例示する手順に従って作成される。
【０１０２】
反応スキーム
本発明の化合物は、容易に入手可能な出発材料、試薬及び慣用合成手順を使用し、下記のスキーム及び具体的な実施例又はその変法に従って容易に調製することができる。これらの反応では、詳細には記載しないが、当業者にそれ自体公知の変更を利用することも可能である。本発明で請求する化合物の一般的製造手順は、以下のスキームを参照した当業者によって容易に理解し認識しうるであろう。
【０１０３】
１．５型アミン中間体は、スキーム１に示す通り数種類の中間体の１つから調製することができる。この方法はジアステレオ選択的エルマンスルフィンイミン付加化学反応を利用して、１対のジアステレオマースルフィンアミドを生成する。ＨＣｌで脱保護するに先立ってジアステレオマーは、シリカクロマトグラフィーにより分離され１．５が得られる。基質に応じてＲ又はＳエルマン試薬を利用し、明示の好ましい立体配置を有する所期のアルファメチルアミノ化合物が得られるようにする。
【化３】
2012521429.tif 000065
【０１０４】
２．５型の二環チエノピラゾール化合物は、スキーム２に概略した通り調製することができる。３，４，５−トリブロモ−１Ｈ−ピラゾール２．１をアルデヒドに変換し、引き続いてハロゲン化アルキルによりアルキル化し２．２を得る。アルデヒド２．２を閉環し２．３を得る（ＷＯ  ２００６０９２５１０）。ＥＤＣカップリングを伴うエステル加水分解により２．４を得、鈴木カップリングによって２．５型の最終化合物を得る。
【０１０５】
３．５及び３．６型の実施例は、スキーム３に概略した通り調製することができる。３，４，５−トリブロモ−１Ｈ−ピラゾール３．１をアルデヒドに変換し、引き続いてパラメトキシベンジルブロミドによりアルキル化し３．２を得る。アルデヒド３．２を閉環し３．３を得る（ＷＯ  ２００６０９２５１０）。チエノピラゾール３．３を２，４−ジフルオロフェニルボロン酸によりアリール化し３．４を得る。
【化４】
2012521429.tif 000066
【０１０６】
ＴＦＡによりパラメトキシベンジル基を除去し、引き続きエステル加水分解、ＥＤＣカップリング、及びハロゲン化アルキルによるアルキル化又はハロゲン化アリールによるエポキシド又はアリール化によって３．５型の最終化合物及びその位置異性体３．６を得る。いくつかの化合物に関しては、最後の３段階の順序は、最初にアルキル化又はアリール化し、その後にエステル加水分解及びアミドカップリングするように再編成することができる。
【化５】
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【０１０７】
４．４型の実施例はスキーム４に概略した通り調製することができる。インダゾール４．１をＣｕＩ存在下で置換型臭化アリルによりアルキル化し（方法Ａ）又は置換型ヨウ化アルキルによりアルキル化して４．２型の中間体を形成する。鈴木カップリングを伴うＮＢＳを使用した臭素化により４．３を得る。ＥＤＣカップリングを伴うエステル加水分解により４．４型の最終化合物を得る。
【化６】
2012521429.tif 000068
【０１０８】
５．４型の実施例は、スキーム５に概略した通り調製することができる。インダゾール５．１をＢｒ２で臭素化し、引き続き置換型アリール又はヘテロアリール臭化物によりアリール化し５．２型の中間体を得る。アリール又はアルケニルボロン酸エステルによる鈴木カップリングによって５．３型の化合物を得る。Ｒ６ａを更に機能化するための酸化し、引き続きエステル加水分解及びＥＤＣカップリングを実施し５．４型の化合物を得る。下位実施態様型ＶＩＩの化合物を、単に６−（１Ｈ）インダゾールカルボン酸メチルエステルの代わりに５−（１Ｈ）インダゾール炭酸メチルエステルから出発することだけで、これらの方法により類似して調製することができる。
【化７】
2012521429.tif 000069
【０１０９】
６．３型の化合物は、スキーム６に概略した通り調製することができる。臭化物６．１を鈴木カップリングして６．２を得る。ＥＤＣ化プリングを伴うエステル加水分解により６．３型の最終化合物を得る。
【化８】
2012521429.tif 000070
【０１１０】
７．４型の実施例は、スキーム７に概略する通り調製することができる。インドール７．１をＣｕＩ存在下の置換型臭化アリールによりアルキル化して７．２型の中間体を形成する。臭化銅（ＩＩ）を使用する臭素化に引き続く鈴木カップリングにより７．３を得る。ＥＤＣカップリングを伴うエステル加水分解により７．４型の最終化合物を得る。
【化９】
2012521429.tif 000071
【０１１１】
中間体及び実施例：
本発明がより十分に理解できるように以下の実施例を記載する。これらの実施例は例示に過ぎず、本発明を何ら限定するものと解釈すべきではない。
【０１１２】
中間体１
【化１０】
2012521429.tif 000072
【０１１３】
（１Ｓ）−１−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）エタンアミン
ステップＡ：ベンジル［（１Ｓ）−２−アミノ−１−メチル−２−チオキシエチル］カルバミン酸
［（１Ｓ）−２−アミノ−１−メチル−２−オキソエチル］カルバミン酸（１５．０ｇ、６７．５ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（３３７ｍＬ）溶液に２，４−ビス−（４−メトキシフェニル）−１,３−ジチア−２，４−ジホスフェタン−２，４−ジスルフィド（１５．０１ｇ、３７．１ｍｍｏｌ）を添加し、混合液を５５℃に加熱した。１．５時間後、反応液を雰囲気温度に冷却し濃縮した。ジクロロメタンから再結晶して標記の化合物（１３．４ｇ）を得た。ＭＳ  ２３９．１（Ｍ＋１）。
【０１１４】
ステップＢ：［（１Ｓ）−１−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）エチル］カルバミン酸ベンジル
［（１Ｓ）−２−アミノ−１−メチル−２−チオキソエチル］カルバミン酸ベンジル（１３．４ｇ、５６．２ｍｍｏｌ）を含有するエタノール（１．１２５Ｌ）溶液にギ酸ヒドラジド（２０．２６ｇ、３３７ｍｍｏｌ）及び塩化水銀（ＩＩ）
（１９．８５ｇ、７３．１ｍｍｏｌ）を添加した。１時間後、反応液をろ過し濃縮した。炭酸ナトリウム飽和水溶液及び酢酸エチルを添加した。有機層を分離し水層を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機抽出液を併せ、ブラインで洗浄し硫酸マグネシウムで脱水して、ろ過し濃縮した。生じた残渣のエタノール（１．１２５Ｌ）溶液を８０℃に加熱した。１６時間後、反応液を濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ジクロロメタン→１％水酸化アンモニウム含有９０％ジクロロメタン／メタノール）により精製し標記の化合物（８．７ｇ）を得た。ＭＳ  ２４７．１（Ｍ＋１）。
【０１１５】
ステップＣ：（１Ｓ）−１−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）エタンアミン
ベンジル［（１Ｓ）−１−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）エチル］カルバミン酸（８．６ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）を含有するエタノール（１４０ｍＬ）溶液に４Ｍ塩酸の１，４−ジオキサン溶液（４３．７ｍＬ、１７５ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム炭素（１．８５８ｇ、１．７４６ｍｍｏｌ）を添加し、混合液を水素下４７ｐｓｉに加圧した。４時間後、反応液を減圧し、ろ過した。濃縮して、標記化合物を塩酸塩（６．６ｇ）として得た。ＭＳ  １１３．０（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．８２（ｓ，１  Ｈ）；４．６７（ｑ，Ｊ＝６．９  Ｈｚ，１Ｈ）；１．７０（ｄｄ，Ｊ＝６．９，１．０  Ｈｚ，３  Ｈ）。
【０１１６】
中間体２
【化１１】
2012521429.tif 000073
【０１１７】
（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）］エタンアミン
ステップＡ：２−メチル−Ｎ−｛（１Ｅ）−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］メチレン｝−２−プロパンスルフィンアミド
６−（トリフルオロメチル）ニコチンアルデヒド（４５．０ｇ、２５７ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン（６４０ｍＬ）溶液に（Ｓ）−（−）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド（３４．３ｇ、２８３ｍｍｏｌ）及び無水硫酸銅（ＩＩ）（８２ｇ、５１４ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃で撹拌した。４８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却した。反応混合液をセライトでろ過した。フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄し、ろ液を濃縮して標記化合物（７６．８ｇ）を得た。ＭＳ  ２２３．１（Ｍ−ｔｅｒｔ−ブチル＋１）。
【０１１８】
ステップＢ：２−メチル−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝−２−プロパンスルフィンアミド
２−メチル−Ｎ−｛（１Ｅ）−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］メチレン｝−２−プロパンスルフィンアミド（７６．８ｇ、２７６ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン（９２０ｍＬ）溶液にメチルマグネシウムブロミド（３．０Ｍ  ＴＨＦ溶液；１８４ｍＬ、５５２ｍｍｏｌ）を−４５℃で添加した。混合液を−４５℃で４時間撹拌した。反応混合液を−２０℃に加温した。更に、メチルマグネシウムブロミド（３．０Ｍ  ＴＨＦ溶液；２７６ｍＬ、８２８ｍｍｏｌ）を−２０℃で添加した。反応混合液を０℃に加温し、塩化アンモニウム飽和水溶液（３００ｍＬ）で反応を停止した。混合液を雰囲気温度に加温した。有機層を分離し水層をジクロロメタンで抽出した（３回）。有機抽出液を併せ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水しろ過し濃縮した。濃縮液はエチルアルコール（５００ｍＬ）を使用して再結晶した。次に白色の固形物をろ過し減圧下で乾燥した（４１．６ｇ）。ＭＳ  ２９５．０（Ｍ＋１）。
【０１１９】
ステップＣ：（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エタンアミン
２−メチル−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝−２−プロパンスルフィンアミド（４１．６ｇ、１４１ｍｍｏｌ）を含有するメチルアルコール（４７０ｍＬ）溶液に塩化水素（４．０Ｍジオキサン溶液；１０６ｍＬ、４２４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。３０分後、混合液を濃縮し乾固した。残渣はエチルアルコール（１５ｍＬ）及びエーテル（４０ｍＬ）を使用して再結晶した。白色の固形物をろ過し減圧下で乾燥して標記化合物の塩酸塩（２６．３ｇ）を得た。ＭＳ  １９１．２（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤ３  ＯＤ）：δ  ８．８３（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１  Ｈ）；８．１７（ｄ、Ｊ＝８．２  Ｈｚ、１Ｈ）；７．９３（ｄ、Ｊ＝８．２  Ｈｚ  １Ｈ）；４．６９（ｑ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ、１  Ｈ）；１．７０（ｄ、Ｊ＝６．９    Ｈｚ、３Ｈ）。
【０１２０】
中間体３
【化１２】
2012521429.tif 000074
【０１２１】
（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エタンアミン
ステップＡ：｛（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エタンアミン塩酸塩（０．５５４ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（７．０ｍＬ）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．５０６ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．９６９ｍＬ、６．９５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を雰囲気温度で４時間撹拌した。塩化アンモニウム飽和水溶液を添加した。混合液をジクロロメタン（３回）で抽出した。有機抽出液を併せてブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し濃縮して標記化合物（０．６２６ｇ）を得、それをステップＢでそのまま使用した。
【０１２２】
ステップＢ：｛（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
｛（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．６２６ｇ，２．１５７ｍｍｏｌ）を含有するクロロホルム（１０．０ｍＬ）溶液に、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルフェノール（２４ｍｇ，０．１０８ｍｍｏｌ）及び３−クロロ過安息香酸（０．６６５ｇ，２．７０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を５０℃で４８時間撹拌した。反応混合液を雰囲気温度に冷却した。チオ硫酸ナトリウム飽和水溶液及び炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加した。混合液をジクロロメタンで抽出した（３回）。有機抽出液を併せてブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（７５％ヘキサン／酢酸エチル→１００％酢酸エチル）により精製し標記化合物（１４０ｍｇ）を得た。ＭＳ  ３０７．０（Ｍ＋１）。
【０１２３】
ステップＣ：（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エタンアミン塩酸塩
｛（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）−３−ピリジニル］エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４０ｍｇ、０．４５７ｍｍｏｌ）を含有するジオキサン（２ｍＬ）溶液に塩化水素（４．０Ｍジオキサン溶液；０．３４３ｍＬ，１．３７１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を４時間撹拌した。反応混合液を濃縮乾凅し、標記化合物の塩酸塩（１１８ｍｇ）を得た。ＭＳ    ２０７．１（Ｍ＋１）。
【０１２４】
中間体４
【化１３】
2012521429.tif 000075
【０１２５】
（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン
ステップＡ：［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン（２０ｇ、１０６ｍｍｏｌ）、アセトアミドオキシム（１７．３ｇ、２３４ｍｍｏｌ）を含有する１，４−ジオキサン１２０ｍＬとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３０ｍＬからなる溶液にＥＤＣ（４４．８ｇ，２３４ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を６０℃で４時間加熱後、１００℃で１６時間加熱した。雰囲気温度まで冷却後、酢酸エチル３００ｍＬを添加した。混合液を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で洗浄した（２回）。有機抽出液を併せ硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１００％ジクロロメタン→９０％ジクロロメタン／メタノール）により精製し、純粋な［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．０ｇ）を得た。ＭＳ  １７２．１（（Ｍ−ｔ−ブチル＋Ｈ）＋１）。
【０１２６】
ステップＢ：（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン
［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．０ｇ、２６．４ｍｍｏｌ）を含有するジオキサン（４０ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩酸ジオキサン（３０ｍＬ）溶液を添加した。反応混合液を１６時間撹拌した。溶液を濃縮し、減圧乾燥して（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミンの塩酸塩（５．１ｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）：δ    ４．９０−４．８３（ｍ、１  Ｈ）；２．４１（ｓ、３  Ｈ）；１．７２（ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ  １２８．２（Ｍ＋１）。
【０１２７】
中間体５
【化１４】
2012521429.tif 000076
【０１２８】
（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エタンアミン
ステップＡ：５−フルオロピリジン−２−カルボン酸エチル
Ｐａｒｒ社製のスチール製高圧容器中の脱ガスしたエチルアルコール（４００ｍＬ）溶液に、酢酸ナトリウム（４３．３ｇ、５２８ｍｍｏｌ）、２−ブロモ−５−フルオロピリジン（２０ｇ、１１４ｍｍｏｌ）、１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（２．２７ｇ、４．０９ｍｍｏｌ）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（２０４ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）を添加した。容器を窒素下に置きＰａｒｒ栓で密閉した。雰囲気を一酸化炭素ガスで置換し、圧力を３００ｐｓｉに調整した。混合液を９０℃に加熱した。３時間後に、圧力を１００ｐｓｉ未満に低下した。容器を雰囲気温度に冷却し、反応液を一酸化炭素により３００ｐｓｉに再加圧した。容器を９０℃で更に４時間加熱した。容器を雰囲気温度に冷却し残存する一酸化炭素を排気した。混合液を容量の半分まで濃縮した。酢酸エチル（５００ｍＬ）及び水（３００ｍＬ）を添加した。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機抽出液を併せてブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→７０％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記の化合物を得た。ＭＳ  １７０．０（Ｍ＋１）。
【０１２９】
ステップＢ：５−フルオロピリジン−２−カルバルデヒド
５−フルオロピリジン−２−カルボン酸エチル（２５ｇ、１４８ｍｍｏｌ）を含有するテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）溶液に、水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍヘキサン溶液；２９６ｍＬ、２９６ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下して添加した。１時間後、エチルアルコール（１０ｍＬ）で反応を停止した。酒石酸ナトリウムカリウム四水和物飽和水溶液（１．３Ｌ）を添加し、水層を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機抽出液を併せブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水しろ過した。混合溶液（１．４Ｌ）を濃縮せずに次段階に供した。ＭＳ  １２５．９（Ｍ＋１）。
【０１３０】
ステップＣ：Ｎ−［（１Ｅ）−（５−フルオロピリジン−２−イル）メチレン］−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド
５−フルオロピリジン−２−カルバルデヒド（１８．４９ｇ、１４８ｍｍｏｌ）を含有する酢酸エチル（８５０ｍＬ）、ＴＨＦ（２５０ｍＬ）及びヘキサン（３００ｍＬ）からなる溶液に、（Ｒ）−（＋）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド（１９．７１ｇ、１６３ｍｍｏｌ）及び無水硫酸銅（ＩＩ）（５９．０ｇ、３７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を雰囲気温度で撹拌した。１８時間後、混合液をセライトでろ過した。フィルターケーキを酢酸エチルで洗浄し、ろ液を濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ジクロロメタン→９８％ジクロロメタン／メタノール）により精製し標記化合物を得た。
【０１３１】
ステップＤ：Ｎ−［（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エチル］−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド
Ｎ−［（１Ｅ）−（５−フルオロピリジン−２−イル）メチレン］−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５２．１２ｇ、２２８ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（１０００ｍＬ）溶液に、メチルマグネシウムブロミド（３．０Ｍ  テトラヒドロフラン溶液；１９８ｍＬ、５９４ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加した。混合液を雰囲気温度に加温した。３０分後、混合液を−７８℃に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１００ｍＬ）で反応を停止した。混合液を雰囲気温度に加温した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン（３回）で抽出した。有機抽出液を併せ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％酢酸エチル）により精製し標記化合物を得た。ＭＳ  ２４５（Ｍ＋１）。
【０１３２】
ステップＥ：（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エタンアミン
Ｎ−［（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エチル］−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（３４．３ｇ、１４０ｍｍｏｌ）を含有するメチルアルコール（７００ｍＬ）に、塩化水素（４．０Ｍジオキサン溶液；１０５ｍＬ、４２１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。３０分後、混合液を濃縮して乾固した。エチルアルコール（１５ｍＬ）及びエーテル（４０ｍＬ）を使用して残渣を再結晶した。白色の固形物をろ過し、減圧下で乾燥して標記化合物の塩酸塩を得た。ＭＳ  １４１．１（Ｍ＋１）。
【０１３３】
中間体６
【化１５】
2012521429.tif 000077
【０１３４】
（１Ｒ）−１−（５−フルオロ−１−オキシドピリジン−２−イル）エタンアミン
ステップＡ：［（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エタンアミンのスルホン酸塩（７．５ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（９６ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（７．０３ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．１３ｍＬ、２６．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を雰囲気温度に加温した。１６時間後、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン（２回）で抽出した。有機抽出液を併せ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水しろ過した。濃縮して標記化合物（７．７２ｇ）を得た。ＭＳ  ２４１．１（Ｍ＋１）。
【０１３５】
ステップＢ：［（１Ｒ）−１−（５−フルオロ−１−オキシドピリジン−２−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
［（１Ｒ）−１−（５−フルオロピリジン−２−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５．７７ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（９６ｍＬ）溶液に３−クロロ過安息香酸（６．５１ｇ、２６．４ｍｍｏｌ）を添加した。４．５時間後、過剰の３−クロロ過安息香酸（０．５９ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間後、亜硫酸ナトリウム飽和水溶液を添加した。１時間後、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン（２回）で抽出した。有機抽出液を併せ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ジクロロメタン→１％水酸化アンモニウム含有９０％ジクロロメタン／メタノール）により精製し標記化合物（５．４５ｇ）を得た。ＭＳ  ２５７．１（Ｍ＋１）。
【０１３６】
ステップＣ：（１Ｒ）−１−（５−フルオロ−１−オキシドピリジン−２−イル）エタンアミン
［（１Ｒ）−１−（５−フルオロ−１−オキシドピリジン−２−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．４７ｇ、５．７４ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（２８．７ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩酸１，４−ジオキサン溶液（４３．０ｍＬ、１７２ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、濃縮して標記化合物を塩酸塩（１．３９６ｇ）として得た。ＭＳ  １５７．１（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．５５（ｄｄ、Ｊ＝４．３、２．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．７０（ｄｄ、Ｊ＝９．０、６．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．５２（ｄｄｄ、Ｊ＝９．１、７．１、２．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；４．８０（ｑ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、１  Ｈ）；１．７４（ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１３７】
中間体７
【化１６】
2012521429.tif 000078
【０１３８】
（１Ｒ）−１−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）エタンアミン
ステップＡ：［（１Ｒ）−１−シアノエチル］カルバミン酸ベンジル
［（１Ｒ）−２−アミノ−１−メチル−２−オキソエチル］カルバミン酸ベンジル（１０ｇ、４５ｍｍｏｌ）を含有する５０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液に２，４，６−トリクロロ−１，３，５−トリアジン（４．１５ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、水１００ｍＬを添加し、混合液をろ過した。固形物を炭酸水素ナトリウム水溶液１００ｍＬ（２回）で洗浄し、減圧下で乾燥し純粋な［（１Ｒ）−１−シアノエチル］カルバミン酸ベンジル（７．２ｇ）を得た。ＭＳ  ２０５．２（（Ｍ＋１）。
【０１３９】
ステップＢ：［（１Ｒ，２Ｚ）−２−アミノ−２−（ヒドロキシイミノ）−１−メチルエチル］カルバミン酸ベンジル
［（１Ｒ）−１−シアノエチル］カルバミン酸ベンジル（２．５２ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）を含有するエタノール（３０ｍｌ）溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（０．９０ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３．４３ｍｌ、２４．６ｍｍｏｌ）を加え、混合液を７５℃に加熱した。１６時間後、溶液を濃縮し、残渣をジクロロメタン２００ｍＬに溶解した。混合液を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液１００ｍＬ（２回）とブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機抽出層を併せ、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮し［（１Ｒ，２Ｚ）−２−アミノ−２−（ヒドロキシイミノ）−１−メチルエチル］カルバミン酸ベンジル（２．９ｇ）を得た。ＭＳ  ２３８．２（Ｍ＋１）。
【０１４０】
ステップＣ：［（１Ｒ）−１−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）エチル］カルバミン酸ベンジル
［（１Ｒ，２Ｚ）−２−アミノ−２−（ヒドロキシイミノ）−１−メチルエチル］カルバミン酸ベンジル（２．２５ｇ、９．４８ｍｍｏｌ）を含有するジオキサン（８０ｍｌ）溶液に、１−アセチル−１Ｈ−イミダゾール（３．１３ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）を加え、混合液を９０℃に加熱した。１６時間後、溶液を濃縮し、残渣をジクロロメタン２００ｍＬに溶解した。混合液を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液１００ｍＬ（２回）と塩化ナトリウム飽和水溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１００％ジクロロメタン→９５％ジクロロメタン／メタノール）により精製し標記化合物（１．１ｇ）を得た。ＭＳ  ２６２．１（Ｍ＋１）。
【０１４１】
ステップＤ：（１Ｒ）−１−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）エタンアミン
［（１Ｒ）−１−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）エチル］カルバミン酸ベンジル（１．１０ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液に、１Ｍ三塩化ホウ素のジクロロメタン溶液（２１．１ｍＬ、２１．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合液を４時間かけて０℃から２０℃まで加温した。溶液をメタノール５ｍｌによって０℃で反応停止した。雰囲気温度まで加温後、混合液を濃縮し、残渣をジエチルエーテル１００ｍＬ（２回）で洗浄し、（１Ｒ）−１−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）エタンアミンの塩酸塩を固形物（０．８４ｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）：δ  ４．７０−４．６１（ｍ、１  Ｈ）；２．６３（ｓ、３  Ｈ）；１．６７（ｄ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１４２】
中間体８
【化１７】
2012521429.tif 000079
【０１４３】
（１Ｒ）−１−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］エタンアミン
ステップＡ：２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル
４−クロロ−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（３０．２ｇ、１１９．０ｍｍｏｌ）を含有するエタノール（５９４ｍＬ）溶液に、パラジウム（１０％パラジウム炭素、５０％水湿潤；２．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（５０．０ｍＬ、２８６．０ｍｍｏｌ）を窒素下で添加した。混合液を水素下（１気圧）で撹拌した。６時間後、混合液をセライトでろ過した。ろ液を濃縮し酢酸エチルを添加した。混合液を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２回）、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮して標記化合物（２５．６ｇ）を得た。ＭＳ  ２２１．１（Ｍ＋１）。
【０１４４】
ステップＢ：２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルバルデヒド
２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（２５．５ｇ、１１６．０ｍｍｏｌ）を含有するジクロロメタン（５８０ｍＬ）溶液に、水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍ；１３０．０ｍＬ、１３０．０ｍｍｏｌ）を−７８℃で徐々に添加した。混合液を−７８℃で撹拌した。２時間後、塩酸（２．０Ｍ水溶液）を徐々に添加して混合液の反応を停止した。混合液を雰囲気温度に加温した。混合液をジエチルエーテル（３回）で抽出した。有機抽出液を併せ、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮して標記化合物（２８．２ｇ）を得た。
【０１４５】
ステップＣ：２−メチル−Ｎ−｛（１Ｚ）−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］メチレン｝プロパン−２−スルフィンアミド
２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−カルバルデヒド（２７．２ｇ、９９ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン（２５０ｍＬ）溶液に、（Ｒ）−（＋）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド（１３．３ｇ、１０９．０ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（ＩＩ）（３１．５ｇ、１９７ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃に加熱した。１８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し、シリカゲルパッドによりろ過した。フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄し、ろ液を濃縮して標記化合物（２７．３ｇ）を得た。ＭＳ  ２２４［（Ｍ＋１）−５６］。
【０１４６】
ステップＤ：２−メチル−Ｎ−｛｛（１Ｒ）−１−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］エチル｝プロパン−２−スルフィンアミド
２−メチル−Ｎ−｛（１Ｚ）−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］メチレン｝プロパン−２−スルフィンアミド（１４．３ｇ、５１．２ｍｍｏｌ）を含有するトルエン（２６０ｍＬ）溶液に、メチルリチウム（１．６Ｍ；３５．０ｍＬ、５６．０ｍｍｏｌ）を−７０℃で添加した。混合液を−７０℃で１５分間撹拌した。混合液を塩化アンモニウム飽和水溶液で反応停止し、混合液を雰囲気温度に加温した。混合液をジクロロメタン（３回）で抽出した。有機抽出液を併せ、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→３５％ヘキサン／酢酸エチル、次に１００％酢酸エチル→９４％酢酸エチル／メタノール）により精製し標記化合物（７．２３ｇ）を得た。ＭＳ  ２４０［（Ｍ＋１）−５６］。
【０１４７】
ステップＥ：（１Ｒ）−１−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］エタンアミン
２−メチル−Ｎ−｛｛（１Ｒ）−１−［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル］エチル｝プロパン−２−スルフィンアミド（７．２３ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）を含有するメタノール（１００ｍＬ）溶液に、塩酸（４．０Ｍジオキサン溶液；１８．５ｍＬ、７４．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を雰囲気温度で撹拌した。１時間後、混合液を濃縮して標記化合物（４．６ｇ）を得た。
【０１４８】
実施例１．２
【化１８】
2012521429.tif 000080
【０１４９】
１−メチル−３−フェニル−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［６−トリフルオロメチル］ピリジン−３−イル］エチル｝−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
１−メチル−３−フェニル−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸（２５．０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、（１Ｒ）−１−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エタンアミン（２２．１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３２．５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（６．６ｍｇ、４８．０μｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（５４．０μＬ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃で撹拌した。１８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し、水（１００μＬ）及びトリフルオロ酢酸（１００μＬ）を添加した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％トリフルオロ酢酸含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物のトリフルオロ酢酸塩（３８ｍｇ）を得た：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４３１．１１６６。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ９．０７（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．２７  Ｈｚ）、８．８３（１  Ｈ、ｓ）、８．３７（１  Ｈ、ｓ）、８．０９（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．２５  Ｈｚ）、７．９５−７．８９（３  Ｈ、ｍ）、７．５２（２  Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．５７  Ｈｚ）、７．４１（１  Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３７  Ｈｚ）、５．２９−５．２２（１  Ｈ、ｍ）、４．０１（３  Ｈ、ｓ）、１．５８（３  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．０６  Ｈｚ）。
【０１５０】
実施例１．４９
【化１９】
2012521429.tif 000081
【０１５１】
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
ステップＡ：３，５−ジブロモ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド
３，５−ジブロモ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（９８７．９ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．６１３ｇ、１１．６７ｍｍｏｌ）をアルゴン下、２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３９ｍＬ）に溶解した。４−メトキシベンジルブロミド（６１７μｌ、４．２８ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。反応混合液を２時間１０分間撹拌した。反応を中止し、塩化アンモニウム飽和水溶液（３０ｍＬ）で反応停止し、混合液を酢酸エチル（３０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（２０ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜５５％）で溶出して精製した。標記化合物を無色の粘質油として回収した（１．３３４２ｇ、３．５７ｍｍｏｌ、収率９２％）。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３７３．１。
【０１５２】
ステップＢ：３−ブロモ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル
３，５−ジブロモ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１．３３０１ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）、チオグリコール酸エチル（０．４１９ｍｌ、３．７３ｍｍｏｌ）、及び炭酸ナトリウム（０．７６１ｇ、７．１８ｍｍｏｌ）をアルゴン下、密閉厚肉反応容器中２５℃でエタノール（３５ｍｌ）に溶解した。反応混合液を８０℃に加温し４時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（４０ｍｌ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチルで抽出した（３０ｍＬ、３回）。有機相を併せ塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（２０ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、酢酸エチル−ヘキサン（０〜２５％）で溶出してフラッシュクロマグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）により精製した。標記化合物を白色の固形物として回収した（１．２０６３ｇ、３．０５ｍｍｏｌ、収率８６％）。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３９５．２。
【０１５３】
ステップＣ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル
３−ブロモ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（１．１４２２ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、２，４−ジフルオロフェニルボロン酸（１．８６７ｇ、１１．８２ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１．６１４ｇ、１５．２３ｍｍｏｌ）、及び［１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．４２６ｇ、０．５８２ｍｍｏｌ）をアルゴン下、密閉肉厚反応容器中２５℃でジオキサン（１４．４５ｍｌ）に溶解した。反応混合液を８０℃に加熱し２時間撹拌した。炭酸セシウム（１．５２ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を２時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（２０ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（２０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（１５ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜１５％）で溶出して精製した。標記化合物を白色の固形物として回収した（１．０１４７ｇ、２．３６８ｌ、収率８２。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝４２９．３。
【０１５４】
ステップＤ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（１．０１０３ｇ、２．３５８ｍｍｏｌ）を密閉肉厚反応容器中２５℃で１，２−ジクロロエタン（１１．７９ｍｌ）及びトリフルオロ酢酸（１１．７９ｍｌ）の混合液に溶解した。反応混合液を１００℃に加熱し２時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、減圧下で濃縮した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、酢酸エチル−ヘキサン（０〜６０％）で溶出してフラッシュクロマトフラフィ（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）ーにより精製した。標記化合物を白色の固形物として回収した（７１９．０ｍｇ、２．３３２ｍｍｏｌ、率９９％）。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３０９．３。
【０１５５】
ステップＥ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（７１４．９ｍｇ、２．３１９ｍｍｏｌ）を２５℃でテトラヒドロフラン（３５ｍＬ）／メタノール（１２ｍＬ）に溶解した。水酸化ナトリウム（９．２８ｍＬ、９．２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を５０℃に加熱し１８時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、濃塩酸（０．７６７ｍＬ）で反応停止し、減圧下で濃縮した。標記化合物の４食塩相当量含有物を明黄色／白色の固形物（１．１６１３ｇ、２．２５９ｍｏｌ、収率９７％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２８１．２。
【０１５６】
ステップＦ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸（９６４．９ｍｇ、１．８７７ｍｍｏｌ、４食塩相当量含有物）、Ｌ−（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（４６２．３ｍｇ、２．３１１ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（７２５．４ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１２９．６ｍｇ、０．９５２ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（０．８２６ｍＬ、７．５１ｍｍｏｌ）を２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８ｍＬ）に溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し１０分間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１５ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１５ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、酢酸エチル−ヘキサン（０〜１００％）で溶出してフラッシュクロマグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）により精製した。標記化合物を明黄色／白色の固形物として回収した（５５６．０ｍｇ、１．４２８ｍｍｏｌ、収率７６％）。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３９０．２。
【０１５７】
ステップＧ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド（２０３．５ｍｇ、０．５２３ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３３１．５ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．２０ｍｌ）に溶解した。２−ヨードエタノール（６９μＬ、０．８８５ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を５０℃に加熱し４時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、４０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜１００％）で溶出して精製した。標記化合物を明黄色／白色の固形物（１２９．６ｍｇ、０．２９９ｍｍｏｌ、収率５７．２％）として回収した。望ましくない位置異性体、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−２−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−２Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミドを明黄色／白色の固形物（３３．１ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ、収率１４．６１％）として回収した。標記化合物：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４３４．１０９１。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９９−７．８９（ｍ、１  Ｈ）；７．６１（ｄ、Ｊ＝３．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．０１−６．９１（ｍ、２  Ｈ）；６．８０（ｄ、Ｊ＝７．８  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６０−５．５１（ｍ、１  Ｈ）；４．３９−４．３４（ｍ、２  Ｈ）；４．１５（ｄ、Ｊ＝５．４  Ｈｚ、２  Ｈ）；２．９０（ｓ、１  Ｈ）；２．４０（ｓ、３  Ｈ）；１．７０（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。位置異性体：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４３４．１０９５。
【０１５８】
実施例１．８４＆８５
【化２０】
2012521429.tif 000082
【０１５９】
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
ステップＡ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル  
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（２００ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（４４８ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６．５ｍＬ）溶液にトランス−ジメチルオキシラン（１４０ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を１００℃で１８時間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．０５％水酸化アンモニウム含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物（１３４ｍｇ）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３８１．２。
【０１６０】
ステップＢ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（１３４ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ）を含有するメタノール（３．５ｍＬ）溶液に水酸化ナトリウム（１Ｍ、１．０６ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を５０℃で１８時間撹拌した。塩酸（６Ｍ、０．１７６ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を濃縮して標記化合物の３食塩相当量含有物（１８１ｍｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３５３．３。
【０１６１】
ステップＣ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（３−ヒドロキブタン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸の３食塩相当量含有物（１４０ｍｇ、０．２６５ｍｍｏｌ）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン塩酸塩（６３．７ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（３３．７μＬ、０．３０７ｍｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（（１．３ｍＬ）溶液に、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ‘−エチルカルボジイミド塩酸塩（８９ｍｇ、０．４６４ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１８．１ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を５０℃で１時間撹拌した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．０５％水酸化アンモニウム含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物（１０５ｍｇ）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４６２．４。ジアステレオマーをＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤカラム（改質剤ジエチルアミン含有４０％ヘキサン／６０％エタノール、５ｃｍ  ｘ  ５ｃｍ）を使用して分離した。第一溶出ジアステレオマー（３８．１ｍｇ）：１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．３４（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．３７  Ｈｚ）、８．０６（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝３．５５  Ｈｚ）、７．９６（１  Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝８．７４、６．６１  Ｈｚ）、７．４９（１  Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝１１．２６、９．１９、２．６１  Ｈｚ）、７．２４（１Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝８．４７、２．６１  Ｈｚ）、５．３９−５．２８（１  Ｈ、ｍ）、５．１７（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．３０  Ｈｚ）、４．４４−４．３７（１  Ｈ、ｍ）、４．０７−３．９６（１  Ｈ、ｍ）、２．３４（３  Ｈ、ｓ）、１．５７（６  Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．２６、７．０１  Ｈｚ）、１．０１（３  Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．２９  Ｈｚ）。第二溶出ジアステレマー（３８．４ｍｇ）：１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：９．３４（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．３５  Ｈｚ）、８．０７（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝３．５５  Ｈｚ）、７．９６（１  Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝８．７２、６．６４  Ｈｚ）、７．４９（１  Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝１１．２５、９．２１、２．６１  Ｈｚ）、７．２４（１Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝８．５０、２．５７  Ｈｚ）、５．４０−５．２８（１  Ｈ、ｍ）、５．１７（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝４．８７  Ｈｚ）、４．４５−４．３６（１  Ｈ、ｍ）、４．０７−３．９６（１  Ｈ、ｍ）、２．３３（３  Ｈ、ｓ）、１．５８（６  Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．８３、７．０１  Ｈｚ）、１．０１（３  Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．２９  Ｈｚ）。
【０１６２】
実施例１．９８
【化２１】
2012521429.tif 000083
【０１６３】
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
ステップＡ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（８２．０ｍｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）、２−フルオロピラジン（１３４．６ｍｇ、１．３７２ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（２６３．７ｍｇ、０．８０９ｍｍｏｌ）をアルゴン下、２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．６０ｍＬ）に溶解した。反応混合液を８０℃に加熱し２時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（１０ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、４０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜５０％）で溶出して精製した。標記化合物を明黄色／白色の固形物（５５．３ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ、収率５３．８％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３８７．３。
【０１６４】
ステップＢ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸エチル（５４．０ｍｇ、０．１４０ｍｍｏｌ）を２５℃でテトラヒドロフラン（９００μｌ）及びメタノール（６００μｌ）に溶解した。１Ｍ水酸化ナトリウム（５５９μｌ、０．５５９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合液を５０℃に加熱し１２時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、濃塩酸（４６．２μＬ）を添加して反応停止し、減圧下で濃縮した。標記化合物の４食塩相当量含有物（８７．２ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ、収率９９％）を明黄色／白色の固形物として回収した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３５９．２。
【０１６５】
ステップＣ：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボキサミド
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−１−（ピラジン−２−イル）−１Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボン酸（４３．６ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ、４当食塩相当量含有物）、Ｌ−（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（１７．２ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２８．５ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（５．２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（３１μｌ、０．２８２ｍｍｏｌ）を２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７００μｌ）に溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し１０分間撹拌した。反応を中止し、水（約０．２ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約０．２ｍＬ）を添加して反応停止した。反応混合液を、分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．０５％水酸化アンモニウム含有アセトニトリル／水で溶出して直接精製し、標記化合物を白色の固形物（２１．５ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ、収率６６．３％）として得た。ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４６８．１０６３。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ９．４５（ｓ、１  Ｈ）；８．５４−８．４６（ｍ、２  Ｈ）；８．２０−８．１３（ｍ、１  Ｈ）；７．７４（ｄ、Ｊ＝３．９  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．１０−７．０４（ｍ、１  Ｈ）；７．０３−６．９７（ｍ、１  Ｈ）；６．８９（ｄ、Ｊ＝７．８  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６３（ｔ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、１  Ｈ）；２．４４（ｓ、３  Ｈ）；１．７４（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１６６】
実施例３．１
【化２２】
2012521429.tif 000084
【０１６７】
３−（２−クロロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（２．０ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を含有するトルエン（１１．４ｍＬ）溶液に、４−ブロモトルエン（２．３３ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）、リン酸三カリウム（４．８ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）、ヨウ化第一銅（０．１２ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）及びトランス−（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ‘−ビスメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（０．１８ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を密閉容器中１２０℃で撹拌した。１０分後、４−ヨードトルエン（３．０１ｇ）を添加し、混合液を１２０℃で更に２時間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で反応停止した。混合液を酢酸エチルで抽出した（２０ｍＬ、３回）。有機相を併せ塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（１５ｍＬ、１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮して標記化合物（１．７６ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２６７．１。
【０１６８】
ステップＢ：３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（２．７０７５ｇ、１０．１７ｍｍｏｌ）をアルゴン下、２５℃でアセトニトリル（１０２ｍｌ）に溶解した。臭素（１．８８６ｍｌ、３６．６０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を６０時間撹拌した。反応を中止し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（４０ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（３５ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（２５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、酢酸エチル−ヘキサン（０〜５％）で溶出してフラッシュクロマグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、３３０ｇカラム）により精製した。標記化合物（２．８００６ｇ、７．５５ｍｍｏｌ、収率７４．２）を白色の固形物として回収した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３４６．１。
【０１６９】
ステップＣ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（０．３０ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、２−クロロフェニルボロン酸（０．２１ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．８６ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、塩化銅（Ｉ）（９１．６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（５１．６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（９．８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）の混合物にアルゴン下、Ｎ，Ｎ−ジメチルスルホンアミド（４．３ｍＬ）を添加した。混合液を密閉容器中９０℃で３０分間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ）で反応停止した。混合液を酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（１０ｍＬ、１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→９５％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（０．２５ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３７７．２。
【０１７０】
ステップＤ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（０．２５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を含有するメタノール（１．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２．９ｍＬ）からなる溶液に水酸化ナトリウム（１．０Ｍ、３．９８ｍＬ、３．９８ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃に加熱し１．５時間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、ｐＨ＜３となるまで１．０Ｍ塩酸（約４．０ｍＬ）を添加した。混合液を酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（７ｍＬ、１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮して標記化合物（０．２４ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３６３．２。
【０１７１】
ステップＥ：３−（２−クロロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２０．３ｍｇ、５６．０μｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミンの塩酸塩（１４．５ｍｇ、７２．０μｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２３．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（４．１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（２３．０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃に加熱し３０分間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、水（約０．２ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約０．２ｍＬ）を添加して反応停止した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％トリフルオロ酢酸含有５％水／アセトニトリル）にて精製し標記化合物のトリフルオロ酢酸塩（２７．４ｍｇ）を得た：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４７２．１５５１。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２６（ｓ、１  Ｈ）；７．８０（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．６９−７．６２（ｍ、３  Ｈ）；７．６０−７．５５（ｍ、２Ｈ）；７．４６−７．３９（ｍ、２  Ｈ）；７．３６（ｄ、Ｊ＝７．９  Ｈｚ、２  Ｈ）；７．０９（ｄ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６６−５．５９（ｍ、１  Ｈ）；２．４４（ｓ、３  Ｈ）；２．４０（ｓ、３  Ｈ）；１．７２（ｄ、Ｊ＝６．７  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１７２】
実施例３．６
【化２３】
2012521429.tif 000085
【０１７３】
３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１．９２ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（７．１２ｇ、２１．８ｍｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２１．８ｍＬ）溶液をアルゴン下６０℃で１０分間加熱した。２−ヨードプロパン（１．０９ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。混合液を６０℃で１．５時間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３０ｍＬ）で反応停止した。混合液を酢酸エチル（３０ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液で洗浄し（２０ｍＬ、３回）、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→７０％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（１．３３ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２１９．２。
【０１７４】
ステップＢ：３−ブロモ−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１．３ｇ、５．９４ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液にアルゴン下、臭素（０．６０ｍＬ、１１．６４ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．１０ｍＬ）を添加した。混合液を雰囲気温度で１８時間撹拌した。反応を中止し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３０ｍＬ）で反応停止した。混合液を酢酸エチル（３０ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（１５ｍＬ、１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮して標記化合物（１．７４ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２９７．２。
【０１７５】
ステップＣ：３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
３−ブロモ−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（０．３２ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、２−クロロフェニルボロン酸（０．５１ｇ、３．２９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１．１５ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）、塩化銅（Ｉ）（０．１１ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）、１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（６１．１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（１２．６ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）の混合物にアルゴン下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．３ｍＬ）を添加した。混合液を密閉容器中９０℃で１８時間撹拌した。１８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ）で反応停止した。混合液を酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ、４回）、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→８５％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（０．１１ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３２９．２。
【０１７６】
ステップＤ：３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル５７．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を含有するメタノール（１．１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．７ｍＬ）からなる溶液に水酸化ナトリウム（１．０Ｍ、１．１０ｍＬ、１．１０ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃に加熱し１８時間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、ｐＨ＜３となるまで１．０Ｍ塩酸（約１．１ｍＬ）を添加した。混合液を酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（７ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し濃縮して標記の化合物（５５．０ｍｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３１５．０。
【０１７７】
ステップＥ：３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−（２−クロロフェニル）−１−イソプロピル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（１３．３ｍｇ、４２．０μｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミンの塩酸塩（１０．４ｍｇ、６３．０μｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１６．２ｍｇ、８５．０μｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（２．９ｍｇ、２１．０μｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（１８．６μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃に加熱し３０分間撹拌した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％トリフルオロ酢酸含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物のビストリフルオロ酢酸塩（１２ｍｇ）を得た：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４２４．１５３０；１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１２（ｓ、１  Ｈ）；７．７５（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．６３−７．５９（ｍ、１  Ｈ）；７．５７−７．５３（ｍ、１  Ｈ）；７．４９（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．３９（ｄｄ、Ｊ＝５．９、３．５  Ｈｚ、２Ｈ）；６．８４（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６８−５．６１（ｍ、１  Ｈ）；５．０３−４．９５（ｍ、１  Ｈ）；２．４２（ｓ、３  Ｈ）；１．７４（ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、３  Ｈ）；１．６７（ｄ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、６  Ｈ）。
【０１７８】
実施例３．１４２
【化２４】
2012521429.tif 000086
【０１７９】
３−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：３−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
１０〜２０ｍＬ容のマイクロウェーブ用バイアルに収容した、３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１７３．７ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロフェニルボロン酸ピナコールエステル（１８３．４ｍｇ、０．７６４ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（５０５．１ｍｇ、１．５５０ｍｍｏｌ）、塩化銅（Ｉ）（５２．７ｍｇ、０．５３２ｍｍｏｌ）、１，１‘−ビスジフェニルホスフィノフェロセン（２９．３ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）、及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（６．５ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）にアルゴン下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５０ｍＬ）を添加し容器を密閉した。反応混合液を９０℃に加熱し３０分間撹拌した。反応を中止し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１５ｍＬ）で反応停止し、酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、減圧下で濃縮した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、２４ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜１０％）で溶出して精製した。標記化合物を白色の固形物として得た（１０２．１ｍｇ、０．２７０ｍｍｏｌ、収率５３．６％）。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３７９．２。
【０１８０】
ステップＢ：３−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１０１．２ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）をメタノール（１．３０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１．９０ｍＬ）に溶解した。１Ｍ水酸化ナトリウム（１．６０ｍＬ、０．２６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を５０℃に加熱し１．５時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、ｐＨ＜３になるまで１Ｍ塩酸（約１．６０ｍＬ）を添加して反応停止し、溶媒を減圧下で蒸発した。標記化合物を白色の固形物（１９９．５ｍｇ、０．２６５ｍｍｏｌ、収率９９％、６食塩相当量含有物）として回収した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３６５．２。
【０１８１】
ステップＣ： ３−（２，６−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（３０．０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ、６食塩相当量含有物）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（１２．５ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１６．２ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（３．４ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（２０μｌ、０．１８２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５００μｌ）に２５℃で溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し３０分間撹拌した。反応を中止し、水（約０．１ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約０．１ｍＬ）を添加して反応停止した。粗製の反応混合液を分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．１％トリフルオロ酢酸含有のアセトニトリル／水（５〜９５％）で溶出して直接精製し、標記化合物（１６．３ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ、収率５８．２％）を白色の固形物として得た。ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］＝４７４．１７３９。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２９（ｓ、１  Ｈ）；７．７７（ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．６６（ｄ、Ｊ＝８．２  Ｈｚ、２  Ｈ）；７．６１（ｄｄ、Ｊ＝８．５、１．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．４８−７．４０（ｍ、１  Ｈ）；７．３８（ｄ、Ｊ＝８．１  Ｈｚ、２  Ｈ）；７．１０（ｍ、２  Ｈ）；６．７９（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６２（ｍ、１  Ｈ）；２．４６（ｓ、３  Ｈ）；２．４１（ｓ、３  Ｈ）；１．７３（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１８２】
実施例３．２０８
【化２５】
2012521429.tif 000087
【０１８３】
３−（１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１５６．３ｍｇ、０．４２１ｍｍｏｌ）をメタノール（１６００μｌ）及びテトラヒドロフラン（２５００μｌ）に溶解した。１Ｍ水酸化ナトリウム（１６８４μｌ、１．６８４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合液を５０℃に加熱し０．２５時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、ｐＨ＜３となるまで１Ｍ塩酸（約１．７ｍＬ）を添加して反応停止し、溶媒を減圧下で蒸発した。標記化合物（２３６．８ｍｇ、０．３９４ｍｍｏｌ、収率９４％、４食塩相当量含有物）を白色の固形物として得た。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３３１．１。
【０１８４】
ステップＢ：３−ブロモ−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２３３．７ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ、４食塩相当量含有物）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（９４．２ｍｇ、０．４７１ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１５６．１ｍｇ、０．８１４ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（２８．９ｍｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（０．１７１ｍｌ、１．５５４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．８００ｍＬ）に２５℃で溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し１０分間撹拌した。反応を中止し、水（約０．５ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約０．５ｍＬ）を添加して反応停止した。粗製の反応混合液を分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．１％トリフルオロ酢酸含有のアセトニトリル／水で溶出し直接精製した。生成物画分を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（１５ｍＬ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ、２回）、塩化ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発して標記化合物（１５３．９ｍｇ、０．３５０ｍｍｏｌ、収率９０％）を黄褐色の固形物として得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋１］＝４４０．０７３０。
【０１８５】
ステップＣ：Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−３−（プロパ−１−エン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−ブロモ−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド（１５５．２ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ）、２−イソプロペニル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（９９μｌ、０．５２９ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルアミン（９９μｌ、０．７０５ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン−３，３‘，３’‘−トリスルホン酸三ナトリウム塩水和物（２４．３ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（４．２ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１３００μｌ）／水（４００μｌ）に溶解し、密閉容器に収容して１００℃で１．５時間加熱した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、２４ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜６０％）で溶出して精製した。標記化合物を明黄色／白色のの固形物（１０２．８ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ、収率７２．６％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝４０２．３。
【０１８６】
ステップＤ：３−（１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−３−（プロパ−１−エン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド（４０．６ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ）をアセトン（９１９μｌ）／水（９２μｌ）に溶解した。Ｎ−メチルモルホリンオキシド（１５．２ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）を添加した。四酸化オスミウム（２．５％ｎ−ブタノール溶液、３２μｌ、２．５５μｍｏｌ）を添加した。反応混合液を室温で２．５時間撹拌した。反応を中止し、亜硫酸ナトリウム飽和水溶液（５ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。残渣を分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．１％トリフルオロ酢酸含有のアセトニトリル／水で溶出し精製した。生成物画分を酢酸エチル（１５ｍＬ）で希釈し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、溶媒を減圧下で蒸発して標記化合物を白色の固形物（１：１ジアステレオマー混合物）（３２．９ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ、収率７４．７％）として得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋１］＝４３６．２００１。１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１５（ｓ、１    Ｈ）；８．００（ｄｄ、Ｊ＝８．５、４．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．３５−７．４６（ｍ、３  Ｈ）；７．３０（ｄ、Ｊ＝７．９  Ｈｚ、２  Ｈ）；７．１３（ｄ、Ｊ＝８．０  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．５８（ｔ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、１  Ｈ）；４．２２（ｄｄ、Ｊ＝１１．３、３．３  Ｈｚ、１  Ｈ）；３．７８（ｄ、Ｊ＝１１．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；２．４２（ｓ、３  Ｈ）；２．４５−２．２８（ｍ、３  Ｈ）；１．７１−１．６５（ｍ、６  Ｈ）。
【０１８７】
実施例３．２５１
【化２６】
2012521429.tif 000088
【０１８８】
３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：３−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
６−（１Ｈ）−インダゾールカルボン酸メチルエステル（１．５６８８ｇ、８．９０ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（４．３８ｇ、１３．４４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８９ｍｌ）に２５℃で溶解した。臭素（０．５５４ｍｌ、１０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合液を２０分間撹拌した。反応を中止し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３０ｍＬ）及び１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（５０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（５０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。標記化合物を明橙色／白色のの固形物（２．２４１ｍｇ、８．７９ｍｍｏｌ、収率９９％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝２５５．２。
【０１８９】
ステップＢ：３−ブロモ−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
３−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１．８０１ｇ、７．０６ｍｍｏｌ）、３−ブロモチオフェン（２．００ｍＬ、２１．３５ｍｍｏｌ）、トランス−１，２−ビス（メチルアミノ）シクロヘキサン（２３３μＬ、１．４７８ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１４２．８ｍｇ、０．７５０ｍｍｏｌ）、及びリン酸三カリウム（３．１０ｇ、１４．６０ｍｍｏｌ）を密閉容器中でトルエン（３５ｍｌ）に溶解し１２０℃に加熱した。反応液を３時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（２５ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（３０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（２０ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、１２０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜３５％）で溶出して精製した。標記化合物を白色の固形物（１．４１７７ｇ、４．２０ｍｍｏｌ、収率５９．５％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３３７．０。
【０１９０】
ステップＣ：３−（プロパ−１−エン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
３−ブロモ−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１．４１４ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）、２−イソプロペニル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．５８ｍｌ、８．４１ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルアミン（１．１８ｍｌ、８．４０ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン−３，３‘，３’‘−トリスルホン酸三ナトリウム塩水和物（２７５．８ｍｇ、０．４３１ｍｍｏｌ）、及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（４８．３ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）／水（５ｍｌ）に溶解し、密閉容器に収容して１００℃で４時間加熱した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（２０ｍＬ）を添加して反応停止し、混合液を酢酸エチル（２０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、３３０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜１５％）で溶出して精製した。標記化合物を白色の固形物（１．０８４７ｍｇ、３．６４ｍｍｏｌ、収率８７％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝２９９．２。
【０１９１】
ステップＤ：３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル
３−（プロパ−１−エン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（１．０７６３ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）をジメトキシエタン（９０ｍｌ）／ＭｅＯＨ（９０ｍｌ）に２５℃で溶解した。コバルト（ＩＩ）メゾ-テトラフェニルポルフィン（２５．６ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）及びテトラメチルアンモニウムボロヒドリド（１．３１６ｇ、９．０７ｍｍｏｌ）を順次添加した。反応混合液を１．２５時間撹拌した。反応を中止し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１００ｍＬ）を添加し反応停止し、混合液を酢酸エチル（８０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し（８０ｍＬ、１回）、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、３３０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜４５％）で溶出して精製した。標記化合物を橙色の固形物（９１２．２ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ、収率８０％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３１７．１。
【０１９２】
ステップＥ：３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（９０９．８ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１７．２５ｍＬ）及びメタノール（１１．５０ｍＬ）に２５℃で溶解した。１Ｍ水酸化ナトリウム（１１．５０ｍＬ、１１．５０ｍｍｏｌ）を添加し反応混合液を５０℃に加熱した。反応混合液を１５分間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、濃塩酸（０．９５０ｍＬ）を添加して反応停止し、減圧下で濃縮した。標記の化合物を明橙色／白色の固形物（８４．８ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ、収率９３％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３０３．２。
【０１９３】
ステップＦ：３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（４５７．８ｍｇ、１．５１４ｍｍｏｌ）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（３７４．３ｍｇ、１．８７１ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（６００．２ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１０５．３ｍｇ、０．７７４ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（６７０μｌ、６．０９ｍｍｏｌ）を２５℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）に溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し１０分間撹拌した。反応を中止し、水（約１ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約１ｍＬ）を添加して反応停止した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．１％トリフルオロ酢酸含有アセトニトリル／水で溶出して直接精製し、標記の化合物を白色の固形物（５５９．５ｍｇ、１．３６０ｍｍｏｌ、収率９０％）として得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋１］＝４１２．１４５２。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２（ｓ、１  Ｈ）；８．０６（ｄ、Ｊ＝８．５  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．５４（ｄｄ、Ｊ＝８．５、１．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．５２−７．４６（ｍ、２  Ｈ）；６．８９（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．６５−５．５６（ｍ、１  Ｈ）；２．８３（ｓ、１  Ｈ）；２．４０（ｓ、３  Ｈ）；１．８１（ｓ、６  Ｈ）；１．７３（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０１９４】
実施例３．２７２
【化２７】
2012521429.tif 000089
【０１９５】
Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−３−（モルホリン−４−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
ステップＡ：３−（モルホリン−４−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸
３−ブロモ−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸メチル（５０ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）、モルホリン（２５．８μＬ、０．２９７ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジルイデネアセトン）パラジウム（０）（６．８ｍｇ、７．４１μｍｏｌ）、及び２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２‘，４’，６‘−トリイソプロピルビフェニル（１７．７ｍｇ、３７．０μｍｏｌ）を含有するｔｅｒｔ−ブタノール（１．０ｍＬ）溶液にナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５０．０ｍｇ、０．５１９ｍｍｏｌ）を添加した。混合液をマイクロウェーブ用バイアルに密閉し１３０℃で５分間マイクロウェーブ処理した。混合液を雰囲気温度に冷却し、シリンジフィルターを通してろ過した。ろ液を濃縮した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％トリフルオロ酢酸含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物をトリフルオロ酢酸塩（２０ｍｇ）として得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝３３０．２。
【０１９６】
ステップＢ：Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−３−（モルホリン−４−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボキサミド
３−（モルホリン−４−イル）−１−（チオフェン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２０．０ｍｇ、４５．０μｍｏｌ）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン塩酸塩（１８．１ｍｇ、９０μｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（２４．８μＬ、２２６μｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２２６μＬ）溶液にＮ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ‘−エチルカルボジイミド塩酸塩（１５．１ｍｇ、７９．０μｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（３．１ｍｇ、２３μｍｏｌ）を添加した。混合液を５０℃で１時間撹拌した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．０５％水酸化アンモニウム含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物（１９ｍｇ）を得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋１］実測値＝４３９．１５４５。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ９．３７（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．３３  Ｈｚ）；８．２０（１  Ｈ、ｓ）、８．０５（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５７  Ｈｚ）、７．７７−７．７４（２  Ｈ、ｍ）、７．６４（１  Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５６、１．３３  Ｈｚ）、７．５６（１  Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝４．５８、２．１２  Ｈｚ）、５．４３−５．３７（１  Ｈ、ｍ）、３．８３（４  Ｈ、ｔ、Ｊ＝４．３９  Ｈｚ）、３．４３（４  Ｈ、ｔ、Ｊ＝４．３９  Ｈｚ）、２．３３（３  Ｈ、ｓ）、１．６４（３  Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．１５  Ｈｚ）。
【０１９７】
実施例４．１
【化２８】
2012521429.tif 000090
【０１９８】
３−（２−クロロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキサミド
ステップＡ：１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル
５−（１Ｈ）インダゾールカルボン酸メチルエステル（３０２．１ｍｇ、１．７１５ｎｍｏｌ）、４−ヨードトルエン（４５７．２ｍｇ、２．０９７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１７．４ｍｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）、トランス−１，２−ビス（メチルアミノ）シクロヘキサン（２７５μｌ、０．３４８ｍｍｏｌ）、及びリン酸三カリウム（７７１．４ｍｇ、３．６３ｍｍｏｌ）をアルゴン下、トルエン（１７００μｌ）に２５℃で溶解した。反応混合液を１２０℃に加温し１４時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、４０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜６５％）で溶出して精製した。標記の化合物をを明黄色／白色の固形物（３３０．５ｍｇ、１．２４１ｍｍｏｌ、収率７２．４％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝２６７．３。
【０１９９】
ステップＢ：３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル
１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル（３２７．１ｍｇ、１．２２８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１２．３００ｍＬ）に２５℃で溶解した。臭素（１５８μＬ、３．０５７５ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合液を３０分間撹拌した。反応を中止し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２０ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（２０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（２０ｍＬ、１回））で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、４０ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜４５％）で溶出して精製した。標記化合物を明黄色／白色の固形物（４０７．３ｍｇ、１．１８０ｍｍｏｌ、収率９６％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３４６．１。
【０２００】
ステップＣ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル
３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル（１５０．３ｍｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、２−クロロフェニルボロン酸ピナコールエステル（２１０．４ｍｇ、０．８８２ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（５．２ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）、塩化銅（Ｉ）（８８．５ｍｇ、０．８９４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（４３１．８ｍｇ、１．３２５ｍｍｏｌ）、及び１，１‘−ビスジフェニルホスフィノフェロセン（２６．４ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）をアルゴン下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２２００μｌ）に２５℃で溶解した。反応混合液を１００℃に加温し３時間撹拌した。反応を中止し、室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加して反応停止し、酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機相を併せ、塩化アンモニウム飽和水溶液（１０ｍＬ、２回）及び塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、脱水し（硫酸ナトリウム）、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗製生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用し、フラッシュクロマトグラフィー（ＲｅｄｉＳｅｐ  ＳｉＯ２、２４ｇカラム）により酢酸エチル−ヘキサン（０〜３０％）で溶出して精製した。標記化合物を明黄色／白色の固形物（１１７．４ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ、収率７１．６％）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３７７．１。
【０２０１】
ステップＤ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸メチル（１１５．４ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１８３７μｌ）及びメタノール（１２２５μｌ）に２５℃で溶解した。１Ｍ水酸化ナトリウム（１２２５μｌ、１．２２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合液を５０℃で２５分間加熱した。反応を中止し、室温に冷却し、１Ｍ塩酸（１．２２５ｍＬ）を添加して反応停止し、減圧下で濃縮した。標記化合物を白色の固形物（１７１．７８ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ、収率８４％、４食塩相当量含有物）として回収した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＝３６３．２。
【０２０２】
ステップＥ：３−（２−クロロフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（３メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エチル］−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボキサミド
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インダゾール−５−カルボン酸（３０．６ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ、４食塩相当量含有物）、（１Ｒ）−１−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）エタンアミン二塩酸塩（１３．７２ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１７．５２ｍｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（３．１１ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン（２０．１０μｌ、０．１８３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４５７μｌ）に２５℃で溶解した。反応混合液を５０℃に加熱し１０分間撹拌した。反応を中止し、水（約０．２ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（約０．２ｍＬ）を添加して反応停止した。反応混合液を分取ＨＰＬＣ（逆相（Ｃ−１８））により０．１％トリフルオロ酢酸含有アセトニトリル／水で溶出して直接精製し、標記化合物を白色の固形物（１６．２ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ、収率５０．６％）として得た。ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］＝４７２．１５３２。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１７（ｓ、１  Ｈ）；７．８８（ｄｄ、Ｊ＝８．９、１．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．７４（ｄ、Ｊ＝８．９  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．６５−７．６０（ｍ、３  Ｈ）；７．５６−７．５３（ｍ、１  Ｈ）；７．４２−７．３８（ｍ、２  Ｈ）；７．３４（ｄ、Ｊ＝８．１  Ｈｚ、２  Ｈ）；６．７９（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．５８（ｔ、Ｊ＝７．３、１  Ｈ）；２．４２（ｓ、３  Ｈ）；２．３６（ｓ、３  Ｈ）；１．６８（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０２０３】
実施例５．４
【化２９】
2012521429.tif 000091
【０２０４】
４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−[１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル]エチル｝−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド
ステップＡ：４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル
４−ブロモ−１−メチル−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル（０．４５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、ボロン酸４−フルオロフェニル（０．３６ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）、３，３‘，３’‘−ホスフィニジネトリス（ベンゼンスルホン酸）三ナトリウム水和物（８１．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（９．５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）及びジイソプロアミン（０．６０ｍＬ、４．２２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６．３ｍＬ）及び水（２．１ｍＬ）に添加した。混合液を８０℃で１時間加熱した。混合液を雰囲気温度に冷却し、酢酸エチルを添加した。有機層を併せ、水（１０ｍＬ、３回）、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(１００％ヘキサン→５０％ヘキサン／酢酸エチル)により精製し標記化合物(０．４１ｇ)を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２８４．１。
【０２０５】
ステップＢ：４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸
４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル（０．４１ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を含有するメタノール（４．８ｍＬ）溶液に水酸化ナトリウム（１．０Ｍ；４．３６ｍＬ、４，３６ｍｍｏｌ））を添加した。混合液を４５℃で撹拌した。１８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し塩酸（６．０Ｍ；０．７３ｍＬ、４．３６ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を濃縮し乾固して標記化合物のナトリウム塩（０．６１ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２７０．１。
【０２０６】
ステップＣ：４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エチル｝−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド
４−（４−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸のナトリウム塩（２５．０ｍｇ、５６．０μｍｏｌ）、（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エタンアミンの塩酸塩（１６．４ｍｇ、６７．０μｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（３０．９μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５６ｍＬ）溶液に１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１８．９ｍｇ、９８．０μｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（３．８ｍｇ、２８．１μｍｏｌ）を添加した。混合液を雰囲気温度で撹拌した。１８時間後、混合液を濃縮した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％ＮＨ４ＯＨ含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物（２２．１ｍｇ）を得た：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝４５８．１４９１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）：δ  ８．９０（ｄ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、１  Ｈ）；８．５３（ｓ、１  Ｈ）；８．０６（ｓ、１  Ｈ）；７．９４（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．７４（ｄｄ、Ｊ＝８．４、５．５  Ｈｚ、２  Ｈ）；７．６９（ｓ、１  Ｈ）；７．５９（ｄ、Ｊ＝３．１  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．５５（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、１  Ｈ）；７．４０−７．３１（ｍ、２  Ｈ）；６．５６（ｄ、Ｊ＝３．１  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．２７−５．１８（ｍ、１  Ｈ）；３．９０（ｓ、３  Ｈ）；１．５６（ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０２０７】
実施例６．１３
【化３０】
2012521429.tif 000092
【０２０８】
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エチル｝−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド
ステップＡ：１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル
インドール−６−カルボン酸メチル（２．０３ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）、４−ブロモトルエン（３．５６ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）、トランス−（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ‘−ビスメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（０．１８ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（０．１２ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）及びリン酸三カリウム（５．５０ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）の混合物にトルエン（１１．５ｍＬ）を添加した。混合液を密閉容器中１８０℃で１０分間加熱した。混合液を雰囲気温度に冷却し、セライトでろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→７５％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（１．４８ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝２６６．１。
【０２０９】
ステップＢ：１−［３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−イル］エタノン
１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル（２．９ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン（１０５ｍＬ）溶液にアルゴン下、臭化銅（ＩＩ）（４．８９ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）及び水酸化ナトリウム（１．３４ｇ、３３．５ｍｍｏｌ）及びシリカゲル（２．１ｇ）を添加した。混合液を７５℃に加熱した。２時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し、セライトでろ過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→７５％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（３．２８ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３４４．０。
【０２１０】
ステップＣ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル
１−［３−ブロモ−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−イル］エタノン（０．１１ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、２−クロロフェニルボロン酸（７３．９ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．３１ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、塩化銅（Ｉ）（３２．８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、１，１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（１８．６ｍｇ、３４．０μｍｏｌ）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（３．５ｍｇ、１６．０μｍｏｌ）の混合物にアルゴン下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．３ｍＬ）を添加した。混合液を密閉チューブ中９０℃で３０分間撹拌した。混合液を雰囲気温度に冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ、１回）で反応停止した。混合液を酢酸エチル（１５ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％ヘキサン→９５％ヘキサン／酢酸エチル）により精製し標記化合物（０．１１ｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３７６．０。
【０２１１】
ステップＤ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸メチル（０．１１ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を含有するテトラヒドロフラン（２．８ｍＬ）溶液に水酸化ナトリウム（２．０Ｍ；１．４０ｍＬ、２．８０ｍｍｏｌ）を添加した。水（１．５ｍＬ）を添加し、混合液を５０℃で撹拌した。１８時間後、混合液を雰囲気温度に冷却し、１．０Ｍ塩酸をｐＨ＜３となるまで添加した。混合液を酢酸エチル（１０ｍＬ、３回）で抽出した。有機層を併せ、塩化ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し減圧下で濃縮して標記化合物（９８ｍｇ）を得た：ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋１］＝３６２．１。
【０２１２】
ステップＥ：３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−Ｎ−｛（１Ｒ）―１―［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エチル｝−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド
３−（２−クロロフェニル）−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−インドール−６−カルボン酸（９．５ｍｇ、２６．０μｍｏｌ）を含有するＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に（１Ｒ）−１−［１−オキシド−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］エタンアミンの塩酸塩（７．３ｍｇ、３０．０μｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（１２．５ｍｇ、６５．０μｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（２．２ｍｇ、１６．０μｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（１２．０μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を雰囲気温度で３０分間撹拌した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、９５％水／アセトニトリル→０．１％トリフルオロ酢酸含有５％水／アセトニトリル）により精製し標記化合物のビスフルオロ酢酸塩（９．７ｍｇ）を得た：ＨＲＭＳ［Ｍ＋１］実測値＝５５０．１５０５；１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５０（ｓ、１  Ｈ）；８．０８（ｓ、１  Ｈ）；７．６７（ｔ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、３  Ｈ）；７．６１−７．４７（ｍ、４  Ｈ）；７．４４−７．２１（ｍ、６  Ｈ）；６．６６（ｄ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、１  Ｈ）；５．３１−５．２３（ｍ、１  Ｈ）；２．４４（ｓ、３  Ｈ）；１．６４（ｄｄ、Ｊ＝２０．９、７．１  Ｈｚ、３  Ｈ）。
【０２１３】
アッセイ
インビボ内臓痛モデルラット
実験開始時の体重１５０〜１８０ｇ（実験当たりの最大較差＝４０ｇ）のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄ラットを使用する。実験の少なくとも５日前までに動物を実験室に搬送し、その間、実験室の条件に馴化させる。ラットは木材を敷いたマクロロンケージ（４１×２５×１４ｃｍ又は４４×２８×１９ｃｍ）に４、５又は６匹の群で収容し、試験時まで（又は他の指定通りに）飼料と水を自由摂取させる。動物舎を２１±３℃に制御した雰囲気温度と４０〜７０％に維持した相対湿度下、７．００から１９．００の間人工照明下（１２時間）に維持する。臨床徴候及び死亡率に関する情報も実験データと共に記録する。
【０２１４】
一晩絶食後、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄ラットを軽く麻酔（イソフルラン）し、長さ５ｃｍのカニューレを使用して１％酢酸（１．５ｍｌ）を結腸に注入する。７５分間の回復時間後、ラットを再び軽く麻酔し（イソフルラン）、カテーテルに固着した長さ１．５ｃｍのラテックスバルーンを肛門から下行結腸と直腸に挿入する。直後に麻酔を中止する。１５分後に試験物質を経口投与する。投与６０分後にバルーンを水１．２ｍｌで充填し、１０分間、腹部収縮回数を計数する。
【０２１５】
１群当たりラット１０匹を試験する。試験は盲検法で実施する。試験物質を３用量で評価し、ビヒクル群と比較する。ラットを実験終了時に、Ｏ２／ＣＯ２（２０％／８０％）混合物、引き続いてＣＯ２に暴露することによって安楽死させる。データをマン・ホイットニーのＵ検定を使用して処理群をビヒクル対照と比較することにより分析することができる。
【０２１６】
インビボＬ５脊髄神経結紮モデル：  
ａ．手術及び術後ケア  
脊髄神経結紮（ＳＮＬ）処置のために、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ系雄ラット（１００〜２００ｇ；Ｈａｒｌａｎ社製）をイソフルラン（１〜５％；吸入）を使用して麻酔する。無菌法を使用し、ほぼ脊髄神経Ｌ３からＳ２までを背側正中切開する。鋭的及び鈍的剥離操作を併用し、Ｌ６／Ｓ１後部関節間突起を露出する。Ｌ６横突起を露出させて除去し、Ｌ４及びＬ５脊髄神経を椎間孔から出ている部分の末端側に露出する。次に、Ｌ５神経を６−０絹縫合糸で堅く結紮する。筋肉を４−０吸収性縫合糸で閉じ、皮膚を創傷用クリップで閉じる。術後モニターを実施し、動物が最少量の疼痛に曝されるように保証する。動物を２匹ずつ床敷きして収容し、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅスタッフが術後３日間毎日（２回）モニターし、次に研究者が起こり得る苦痛の徴候を毎日モニターする。
【０２１７】
ｂ．行動試験
手術の前に、一連の較正済みｖｏｎ  Ｆｒｅｙフィラメント（０．２５〜１５ｇ）を左後足に押し当て、ディクソン「アップダウン」法（Ｃｈａｐｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈ  ５３：５５，  １９９４）を使用して引っ込め閾値中央値を求めることによって、ラットの手術前の機械的後足引っ込め閾値を試験する。ラットを高所のメッシュ状亜鉛めっき鋼プラットフォーム上の個別のプラスチックチャンバーに収容し６０分間馴化させる。手術前の機械的後足引っ込め閾値を求め、閾値＜１５ｇのラットを試験から除外する。手術前の引っ込め閾値の測定後、ラットを上記ＳＮＬ法にかける。外科処置後２８〜３５日の間に、上記方法を使用してラットの手術後閾値を試験し、後足引っ込め閾値＜４．０ｇを示す動物を異痛症（即ち機械的痛覚過敏）とみなす。ＳＮＬ誘発性機械的痛覚過敏に及ぼす試験化合物の効果は、ビヒクル対照群及び陽性対照プレガバリン（２０ｍｇ／ｋｇ，経口）投与群と共に試験化合物を投与することにより測定する。式：
【数１】
2012521429.tif 000093
を使用して機械的痛覚過敏の回復率％を求めることによりＳＮＬモデルにおける効力を、評価する。
【０２１８】
試験の終わりに、ＣＯ２を使用し全てのラットを安楽死させ、薬剤暴露の生体分析用に血漿と脳組織を採取する。
【０２１９】
インビボ完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）モデル：
Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ系雄ラット（３００〜４００ｇ；Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ社製）の左後足底面にＣＦＡ（２００μｌ，０．５ｍｇ／ｍｌ）の皮内注射をし、引き続いてケージに戻し、柔らかい床敷上で飼育する。ＣＦＡ注射７２時間後、ラットをタオルでくるみ、後足（左又は右）を改良型ランダルセリット式足挟み装置（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ社製，Ｗｏｏｄ  Ｄａｌｅ，ＩＬ）に挿入することにより、ラットのＣＦＡ後機械的後足引っ込め閾値を試験する。レバーに装着したプラスチック棒を後足の背に当て、ラットが声を上げるか又はその後足を棒から引っ込めるまで強めながら後足に力を加える。この時点でラットの後足引っ込め閾値を記録する。機械刺激を各後足に２回加え、左右後足双方のＣＦＡ後機械的後足引っ込め閾値の平均値を求める。ＣＦＡ後引っ込め閾値の測定後、ラットに試験化合物、ビヒクル又は陽性対照ナプロキセン（３０ｍｇ／ｋｇ、経口）を投与し、炎症を起こした（ＣＦＡ）後足の引っ込め閾値に及ぼす化合物の効果を求める。式：
【数２】
2012521429.tif 000094
を使用して機械的痛覚過敏の回復率％を求めることにより、ＣＦＡモデルにおける効力を評価する。
【０２２０】
試験の終わりに、ＣＯ２を使用して全てのラットを安楽死させ、薬剤暴露の生体分析用に血漿と脳組織を採取する。
【０２２１】
健常ラットにおける膀胱内圧測定：
体重２５０〜３５０ｇのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラ雌ラットを温度及び光を制御した室（１２時間明暗サイクル）に収容し、飼料と水を自由摂取させた。動物をウレタン（１．０ｇ／ｋｇ，腹腔内）で麻酔した。必要に応じてウレタンを追加して投与した。下腹部正中切開して膀胱を露出させ、膀胱内圧を記録するために膀胱穹窿部にポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０）を挿入し、０．０５ｍｌ／ｍｉｎの速度で生理的食塩水を膀胱内注入した。膀胱内圧は圧力変換器を使用して測定し、多チャネルデータ収集システム（Ｐｏｗｅｒ  ｌａｂ，ＡＤ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製，Ｂｉｏｐａｃ  ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ  Ｓｐｒｉｎｇｓ，ＣＯ）を使用しサンプリングレート１０Ｈｚでシグナルを記録した。生理的食塩水の膀胱内注入により排尿間隔及び排尿圧の間が安定していることを確認した後、薬剤を静脈内投与した（０．２５ｍｌ／ｋｇ）。Ｃｈａｒｔプログラム（ｖ５．５．４，ＡＤ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）を使用して投与前（基線）と投与後５〜３０分間の排尿から排尿間隔（機能的膀胱容量）及び排尿圧（最大膀胱内圧）を得て、基線に対する比を計算した。
【０２２２】
酢酸誘発性反射亢進モデルラットにおける膀胱内圧測定：
体重２５０〜３５０ｇのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雌ラットを温度及び光を制御した室（１２時間明暗サイクル）に収容し、飼料と水を自由摂取させた。動物をウレタン（１．０ｇ／ｋｇ、腹腔内）で麻酔した。必要に応じてウレタンを追加して投与した。下腹部正中切開して膀胱を露出させ、膀胱内圧を記録するために膀胱穹窿部にポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０）を挿入し、０．０５ｍｌ／ｍｉｎの速度で膀胱内注入した。膀胱内圧は圧力変換器を使用して測定し、多チャネルデータ収集システム（Ｐｏｗｅｒ  ｌａｂ，ＡＤ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製，Ｂｉｏｐａｃ  ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ  Ｓｐｒｉｎｇｓ，ＣＯ）を使用しサンプリングレート１０Ｈｚでシグナルを記録した。生理的食塩水の膀胱内注入により排尿間隔と排尿圧の間が安定していることを確認した後、０．２５％酢酸含有生理的食塩水を同じ注入速度で注入した。３０〜６０分後、注入ポンプを使用し速度１０μｌ／ｍｉｎで薬剤を静脈内に注入した。Ｃｈａｒｔプログラム（ｖ５．５．４，ＡＤ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）を使用して投与前（基線）と薬剤注入後３０〜４５分間の排尿から排尿間隔（機能的膀胱容量）及び排尿圧（最大膀胱内圧）を得て、基線に対する比を計算した。
【０２２３】
ヒトＰ２Ｘ３及びＰ２Ｘ２／３安定細胞株の作製−ヒトＰ２Ｘ３受容体ｃＤＮＡ（受入番号ＮＭ＿００２５５９）を５’ＸｈｏＩ−３’ＨｉｎｄＩＩＩフラグメントとして発現ベクターｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）にサブクローニングした。ヒトＰ２Ｘ２受容体ｃＤＮＡ（受入番号ＮＭ＿１７４８７３）を５’ＥｃｏＲＩ−３’ＮｏｔＩフラグメントとして発現ベクターｐＩＲＥＳｎｅｏ２（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）にサブクローニングした。ヒトＰ２Ｘ３発現構築物を、製造業者の指示に従いＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を使用して、Ｆｌｐ−ｉｎ−２９３細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）にトランスフェクトした。アカゲザルＰ２Ｘ３のｆｌｐ組換えに陽性の細胞をハイグロマイシン１５０μｇ／ｍｌを使用して選択した。安定なヒトＰ２Ｘ３細胞株に、上記のようにＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００を使用してヒトＰ２Ｘ２発現構築物を同時トランスフェクトし、同時トランスフェクトした細胞をハイグロマイシン１００ｍｇ／ｍｌ及び１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を使用して選択した。安定なＰ２Ｘ３細胞株を、１０％ＦＢＳ、ハイグロマイシン１００μｇ／ｍｌ、及びペニシリン１００単位／ｍｌ及びストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌを添加したＤＭＥＭで増殖し、３７℃、湿度９５％で維持した。安定なＰ２Ｘ２／３細胞株を５００μｇ／ｍｌのＧ４１８を添加した以外は上記の通りに増殖した。
【０２２４】
アンタゴニスト親和性を評価するための細胞内カルシウム測定−蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社製）を利用し、カルシウムキレート色素Ｆｌｕｏ−４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を使用して細胞内カルシウムレベルをモニターした。蛍光をモニターするために励起波長及び発光波長は夫々４８８ｎｍ及び５３０ｎｍを使用した。測定開始の約２０時間前に、ヒトＰ２Ｘ３又はヒトＰ２Ｘ２／３を発現する細胞を２０，０００細胞／ウェル（２０μｌ／ウェル）の密度で３８４ウェル黒色プレートに撒いた。測定当日にローディングバッファー（ハンクス平衡塩溶液，２．５ｍＭ  ＣａＣｌ２、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ＢＳＡ０．１％、２．５ｍＭプロベネシド、ＴＲ−４０、Ｆｌｕｏ−４、及びＮａＣｌに代えて１３８ｍＭ  ＮＭＤＧ）２０μｌを加え、暗所下室温で６０分間細胞に色素を負荷させる。アゴニスト添加１０分前、アンタゴニストを容量１０μｌで加え、室温で培養した。この期間に、３秒間隔、次いで１０秒間隔で蛍光データを採取する。アゴニストα，β−ｍｅＡＴＰを６倍濃度で加える（［α，β−ｍｅＡＴＰ］最終＝ＥＣ５０）。アゴニスト添加後、５秒間隔で蛍光を測定し、基線蛍光と比較したピーク相対蛍光単位（ＲＦＵ）の増加に基づいて分析した。式：
【数３】
2012521429.tif 000095
により、ピーク蛍光を使用して、各アンタゴニスト濃度における阻害効果を求めた。
【０２２５】
インビトロ電気生理学的アッセイ−ヒトＰ２Ｘ３受容体を発現する細胞を測定の２０〜３２時間前に６５〜８５％コンフルエントまで増殖した。細胞をトリプシンで解離し、遠心分離し、１×１０６細胞／ｍｌの細胞密度で浴溶液に再懸濁し、ＰａｔｃｈＸｐｒｅｓｓに負荷した。浴溶液は、ｐＨ７．２で、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、４ｍＭ  ＫＣｌ、２ｍＭ  ＣａＣｌ２、１．２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び１１．１ｍＭグルコースを含有した。細胞内液は、１４０ｍＭ  アスパラギン酸Ｋ、２０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ  ＥＧＴＡを含有しｐＨ７．２、又は３０ｍＭ  ＣｓＣｌ、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ  ＥＧＴＡ、１２０ｍＭ  ＣｓＦ、５ｍＭ  ＮａＦ、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含有しＣｓＯＨでｐＨ７．３に調整した。アゴニストストック溶液は、Ｈ２Ｏで調製し使用前に浴溶液で希釈した。全てのアンタゴニストは、ＤＭＳＯの１０ｍＭストック溶液として調製し、使用前に浴溶液で希釈した。全ての実験は、全細胞のパッチクランプ配置下の細胞で室温にて実施した。ＰａｔｃｈＸｐｒｅｓｓ装置では個別の１６細胞までを同時にパッチチクランプすることができた。ＣＴＰ非在下での２分間アンタゴニストインキュベーションを伴うＣＴＰ（１００μＭ；２秒間）を繰返すことによって基線応答を設定した。アンタゴニストプレインキュベーション後に１００μＭ  ＣＴＰ及びアンタゴニストを同時投与し、アンタゴニストの阻害効果を測定した。次に一定濃度範囲のアンタゴニストを使用して同一細胞でこれらの段階を繰返した。いかなる個別の細胞に関しても、最大５種類の濃度のアンタゴニストを試験した。対照Ｐ２Ｘ３電流振幅（ＩＰ２Ｘ３−（対照））は、アンタゴニストインキュベーション前の最後の２回のアゴニスト添加からのピーク電流振幅の平均とした。アンタゴニスト存在下のピークＰ２Ｘ３電流振幅（ＩＰ２Ｘ３−（薬剤））を使用して、式：
【数４】
2012521429.tif 000096
に従い、各アンタゴニスト濃度における阻害効果を計算した。
【０２２６】
少なくとも２個の独立した細胞で各濃度のアンタゴニストを試験した。Ｐ２Ｘ３電流を５０％阻害するために要求される薬剤の濃度（ＩＣ５０）を、各濃度での平均阻害率％データにヒルの式を適合することによって求めた。式：
【数５】
2012521429.tif 000097
Ｐ２Ｘ２／３のインビトロ電気生理学的アッセイ−二のプロトコル変更、即ち、１）アゴニストとして３０μＭ  α，β−ｍｅＡＴＰを使用し；２）電流振幅を２秒間アゴニスト適用の最後に測定した、以外は上記のようにＰ２Ｘ２／３を測定した。
【０２２７】
本明細書に記載するアッセイを使用した結果、本発明の化合物はＰ２Ｘ３受容体に対して活性であることが判明した。式Ｉの化合物は、Ｐ２Ｘ３受容体に対し１００μＭ以下のＩＣ５０活性を有する。式Ｉの化合物の多くは、２００ｎＭ未満のＩＣ５０を有する。例えば、下記化合物は「アンタゴニスト親和性を評価するための細胞内カルシウム測定」においてＩＣ５０＜２５０ｎＭである。特に、例えば、実施例１．１はＩＣ５０＝４６ｎＭ、実施例１．１６はＩＣ５０＝１００ｎＭ、実施例１．３５はＩＣ５０＝３２０ｎＭ、実施例２．１はＩＣ５０＝６３ｎＭ及び実施例２．３はＩＣ５０＝１２０ｎＭである。
【国際調査報告】
2012521429.tif 000109