【手続補正書】
【提出日】平成21年9月15日(2009.9.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性因子をカプセル化して、血清で安定なリポソームを形成することが可能な脂質の両親媒性混合物であって、約０．５〜約８の範囲のホスファチジルエタノールアミン対ホスファチジルコリンの比でホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを含んでなり、荷電した両親媒性物質をさらに含んでなり、前記荷電した両親媒性物質が少なくとも１つのｐＨ感受性アニオン性脂質および少なくとも１つのｐＨ感受性カチオン性脂質を含んでなる、混合物。
【請求項２】
前記比が約０．７５〜約５の範囲、好ましくは約１〜約４の範囲にある、請求項１に記載の混合物。
【請求項３】
前記ホスファチジルコリンがＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＳＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＣ、ダイズＰＣまたは卵ＰＣから選択され、そして／あるいは前記ホスファチジルエタノールアミンがＤＯＰＥまたはＤＭＰＥまたはＤＰＰＥから選択される、請求項１または２に記載の混合物。
【請求項４】
前記アニオン性脂質が、ＤＯＧＳｕｃｃ、ＰＯＧＳｕｃｃ、ＤＭＧＳｕｃｃ、ＤＰＧＳｕｃｃおよびＣＨＥＭＳから選択され、そして／あるいは前記カチオン性脂質が、ＭｏＣｈｏｌ、ＨｉｓＣｈｏｌおよびＣＨＩＭから選択される、請求項１に記載の混合物。
【請求項５】
カチオン性およびアニオン性脂質の間の比（電荷比）が４：１〜１：４の範囲にある、請求項１に記載の混合物。
【請求項６】
カチオン性脂質対アニオン性脂質の比が３：１〜２：１の範囲にあり、そして前記混合物が、５〜９５ｍｏｌ％の荷電した脂質ならびに９５〜５ｍｏｌ％のホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを含んでなる、請求項４に記載の混合物。
【請求項７】
カチオン性脂質対アニオン性脂質の比が約１：１であり、そして前記混合物が、５〜７５ｍｏｌ％の荷電した脂質ならびに９５〜２５ｍｏｌ％のホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを含んでなる、請求項４に記載の混合物。
【請求項８】
カチオン性脂質対アニオン性脂質の比が１：３〜１：２の範囲にあり、そして前記混合物が、４０〜７５ｍｏｌ％の荷電した脂質ならびに６０〜２５ｍｏｌ％のホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを含んでなる、請求項４に記載の混合物。
【請求項９】
１：１〜１：４の範囲の比の７０〜２０ｍｏｌ％のＰＯＰＣおよびＤＯＰＥ；ならびに
３０および８０ｍｏｌ％の両性対の荷電した脂質（前記対は、ＭｏＣｈｏｌおよびＣＨＥＭＳ、ＭｏＣｈｏｌおよびＤＭＧＳｕｃｃ、ＭｏＣｈｏｌおよびＤＯＧＳｕｃｃ、ＣＨＩＭおよびＣＨＥＭＳまたはＣＨＩＭおよびＤＭＧＳｕｃｃから選択され、カチオン性対アニオン性脂質の比は３：１〜１：１の範囲にある）、
を含んでなり、好ましくは
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS           6:24:47:23 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS          15:45:20:20 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS          10:30:30:30 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc         6:24:47:23 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc        16:24:30:30 (mol.%)
から選択される処方よりなる、請求項４に記載の混合物。
【請求項１０】
１：１〜１：４の範囲の比の７０〜２０ｍｏｌ％のＰＯＰＣおよびＤＯＰＥ；ならびに
３０および８０ｍｏｌ％のＭｏＣｈｏｌおよびＤＭＧＳｕｃｃまたはＤＯＧＳｕｃｃ（ここで、ＤＭＧＳｕｃｃまたはＤＯＧＳｕｃｃのモル量はＭｏＣｈｏｌのモル量を超える）、を含んでなり、好ましくは、カチオン性対アニオン性脂質の比が１：３〜１：２の範囲にあり、そして前記混合物が、３０〜５０ｍｏｌ％のＰＯＰＣおよびＤＯＰＥならびに７０〜５０ｍｏｌ％の荷電した脂質を含んでなり、より好ましくは、
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc      6:24:23:47 (mol%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc      10:30:20:40 (mol%)
から選択される処方よりなる、請求項４に記載の混合物。
【請求項１１】
好ましくは、前記リポソームが５０〜５００ｎｍの範囲のサイズを有し、好ましくは、前記リポソームが少なくとも１つの活性因子をカプセル化する、請求項４〜９のいずれか一項に記載の脂質の混合物を含む両性リポソーム。
【請求項１２】
前記活性因子が、脊椎動物細胞において１つもしくはそれ以上のＲＮＡに転写されることが可能である核酸を含んでなり、前記ＲＮＡが、ｍＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたはリボザイムであり、前記ｍＲＮＡが１つもしくはそれ以上のタンパク質またはポリペプチドをコードし、好ましくは、前記核酸が環状ＤＮＡプラスミド、線状ＤＮＡ構築物またはｍＲＮＡである、請求項１０に記載の両性リポソーム。
【請求項１３】
前記活性因子がオリゴヌクレオチドであり、好ましくは、前記オリゴヌクレオチドが、デコイオリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、転写に影響を及ぼす因子、スプライシングに影響を及ぼす因子、リボザイム、ＤＮＡザイムまたはアプタマーであり、より好ましくは、前記オリゴヌクレオチドが、それらのホスフェートまたはホスホチオエート型においてＤＮＡ、ＲＮＡ、ロックト核酸（ＬＮＡ）、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、２’Ｏ−メチルＲＮＡ（２’Ｏｍｅ）、２’Ｏ−メトキシエチルＲＮＡ（２’ＭＯＥ）などの修飾ヌクレオシドを含んでなる、請求項１０に記載の両性リポソーム。
【請求項１４】
前記オリゴヌクレオチドが１５〜３０塩基対長のアンチセンスオリゴヌクレオチド、１５〜３０塩基対長のｓｉＲＮＡ、１５〜３０塩基対長のデコイオリゴヌクレオチド、１５〜３０塩基対長の転写に影響を及ぼす因子、２５〜５０塩基対長のＤＮＡザイム、２５〜５０塩基対長のリボザイム、または１５〜６０塩基対長のアプタマーから選択される、請求項１２に記載の両性リポソーム。
【請求項１５】
前記オリゴヌクレオチドが、ＣＤ４０遺伝子、そのセンスもしくはアンチセンス鎖、その任意のエキソンもしくはイントロンまたは非翻訳領域をコードする核酸を標的化するために適合され、それによって、哺乳動物細胞におけるＣＤ４０の発現を調節し、好ましくは、前記オリゴヌクレオチドがＣＤ４０の任意のｍＲＮＡに対して指向され、かかるｍＲＮＡがプレｍＲＮＡおよびそれらのその後の成熟した形態を含み、より好ましくは、前記脂質の混合物が、
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS          6:24:47:23 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS          15:45:20:20 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/CHEMS          10:30:30:30 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc        6:24:47:23 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc        16:24:30:30 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc        6:24:23:47 (mol.%)
POPC/DOPE/MoChol/DMGSucc        10:30:20:40 (mol.%)
から選択される処方よりなる、請求項１２または１３に記載の両性リポソーム。
【請求項１６】
少なくとも８０ｗｔ％の前記オリゴヌクレオチドが前記リポソームの内部に配置される、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の両性リポソーム。
【請求項１７】
前記リポソームがカプセル化されていないオリゴヌクレオチドを含んでなる、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の両性リポソーム。
【請求項１８】
請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の活性因子充填両性リポソームおよびその薬学的に許容可能なビヒクルを含んでなる薬学的組成物。
【請求項１９】
前記活性因子充填両性リポソームに類似の組成およびサイズを有する空のリポソームをさらに含んでなる、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
ヒトまたは非ヒト動物の炎症性、免疫もしくは自己免疫障害の防止あるいは処置のための請求項１４、または請求項１４に従属する場合の請求項１５〜１６のいずれか一項に記載の両性リポソームの使用。
【請求項２１】
移植片拒絶、移植片対宿主病、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、喘息、炎症性腸疾患、乾癬もしくは甲状腺炎の防止または処置のための、全身投与のために処方される請求項１４、または請求項１４に従属する場合の請求項１５〜１６のいずれか一項に記載の両性リポソームの使用であるか、あるいは移植片拒絶、移植片対宿主病、炎症性腸疾患、喘息、クローン病または大腸炎の防止または処置のための防止または処置のための、局所投与のために処方される請求項１４、または請求項１４に従属する場合の請求項１５〜１６のいずれか一項に記載の両性リポソームの使用。