【手続補正書】
【提出日】平成21年10月29日(2009.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号５）を含んでなるタンパク質と、
ｂ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号６）又は成熟Ｍｅｔ−Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号２６）を含んでなるタンパク質と、
ｃ）Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１７）を含んでなるタンパク質と、
ｄ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１８）を含んでなるタンパク質と、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質をコード化する核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズし得る核酸分子によりコード化されるタンパク質であって、前記核酸分子がＣＸＣケモカインに結合するタンパク質をコード化する、タンパク質と、
ｆ）アミノ酸配列がａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質と少なくとも約７０％同一であり、且つＣＸＣケモカインに結合するタンパク質と、
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、又はｆ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメントがＣＸＣケモカインに結合する、タンパク質と、
ｈ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、又はｆ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメント又はタンパク質が免疫調節活性を有する、タンパク質と
からなる群より選択されるポリペプチド。
【請求項２】
ａ）Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号５）を有するタンパク質と、
ｂ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号６）又は成熟Ｍｅｔ−Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号２６）を有するタンパク質と、
ｃ）Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１７）を有するタンパク質と、
ｄ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１８）を有するタンパク質と、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメントがＣＸＣケモカインに結合する、タンパク質と、
ｆ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメントが免疫調節活性を有する、タンパク質と
からなる群より選択される、請求項１記載のポリペプチド。
【請求項３】
請求項１記載のタンパク質の活性突然変異体であって、その突然変異体において１又は複数個のアミノ酸残基が付加、欠失、又は置換されており、且つその突然変異体がＣＸＣケモカインに結合する、活性突然変異体。
【請求項４】
前記突然変異体が、
ａ）配列番号５によるＥｖａｓｉｎ−３の残基４８、５２、５９、６３、６５、７６番に相当する位置にシステイン残基と、
配列番号５によるＥｖａｓｉｎ−３のアスパラギン５１及び８２番に一致する位置にグリコシル化部位と
を含有することを特徴とする、請求項３に記載のタンパク質の活性突然変異体。
【請求項５】
哺乳動物に投与された場合、前記アミノ酸の付加物、欠失物、又は置換物が前記ポリペプチドの免疫原性を低下させる、請求項３又は請求項４に記載のタンパク質の活性突然変異体。
【請求項６】
膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリン定常部、多量体化ドメイン、ヘテロ二量体タンパク質ホルモン、シグナルペプチド、搬出シグナル、及びタグ配列の中から選択される１又は複数個のアミノ酸配列と作動式に連結した、請求項１から５の何れか一項に記載のタンパク質を含んでなる融合タンパク質。
【請求項７】
前記ポリペプチドが翻訳後に修飾されることを特徴とする、請求項１から６の何れか一項に記載のタンパク質。
【請求項８】
前記タンパク質がグリコシル化されることを特徴とする、請求項７記載のタンパク質。
【請求項９】
前記タンパク質が、活性フラクション、前駆体、塩、誘導体、抱合体、複合体の形態であるか、又はＰＥＧ化されることを特徴とする、請求項１から８の何れか一項に記載のタンパク質。
【請求項１０】
請求項１から８の何れか一項に記載のポリペプチドをコード化する核酸分子。
【請求項１１】
ａ）Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号５）を含んでなるタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｂ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号６）又は成熟Ｍｅｔ−Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号２６）を含んでなるタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｃ）Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１７）を含んでなるタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｄ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１８）を含んでなるタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｅ）ストリンジェントな条件下でａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）の核酸分子とハイブリダイズする能力があり、且つＣＸＣケモカインに結合するタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｆ）アミノ酸配列がａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質と少なくとも約７０％同一であり、且つＣＸＣケモカインに結合するタンパク質をコード化する核酸分子と、
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、又はｆ）の核酸分子によってコード化されるタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質をコード化する核酸分子であって、そのフラグメントがＣＸＣケモカインに結合する、核酸分子と、
ｈ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、ｆ）、又はｇ）の核酸分子の縮退変種と
からなる群より選択される、請求項１０記載の核酸分子。
【請求項１２】
前記核酸分子が、
ａ）Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号５）を有するタンパク質と、
ｂ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号６）又は成熟Ｍｅｔ−Ｅｖａｓｉｎ−３のアミノ酸配列（配列番号２６）を有するタンパク質と、
ｃ）Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１７）を有するタンパク質と、
ｄ）成熟Ｅｖａｓｉｎ−３−ＨＩＳのアミノ酸配列（配列番号１８）を有するタンパク質と、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメントがＣＸＣケモカインに結合する、タンパク質と、
ｆ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質のフラグメントを含んでなるタンパク質であって、そのフラグメントが免疫調節活性を有する、タンパク質と、
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、又はｄ）のタンパク質の活性突然変異体であって、その突然変異体において１又は複数個のアミノ酸残基が付加、欠失、又は置換されており、且つその突然変異体がＣＸＣケモカインに結合する、活性突然変異体と、
ｈ）膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリン定常部、多量体化ドメイン、ヘテロ二量体タンパク質ホルモン、シグナルペプチド、搬出シグナル、及びタグ配列の中から選択される１又は複数個のアミノ酸配列と作動式に連結した、ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、ｆ）、又はｇ）のタンパク質を含んでなる融合タンパク質と
からなる群より選択されるタンパク質をコード化する、請求項１１記載の核酸分子。
【請求項１３】
前記ＣＸＣケモカインがＣＸＣＬ８／ＩＬ−８であることを特徴とする、請求項１０から１２の何れか一項に記載の核酸分子。
【請求項１４】
前記分子がＤＮＡ分子、特にｃＤＮＡ分子である、請求項１０から１３の何れか一項に記載の核酸分子。
【請求項１５】
前記分子が、配列番号３又は１５のＤＮＡ配列を含んでなるか、或いは配列番号３又は１５のＤＮＡ配列である、請求項１０記載の核酸分子。
【請求項１６】
前記分子が、配列番号４又は２５のＤＮＡ配列を含んでなるか、或いは配列番号４又は２５のＤＮＡ配列である、請求項１０記載の核酸分子。
【請求項１７】
長さが少なくとも約２０ヌクレオチドのオリゴヌクレオチド、長さが少なくとも約３０ヌクレオチドのオリゴヌクレオチド、及び長さが少なくとも約５０ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドからなる群より選択される、請求項１１又は請求項１２に記載の核酸のフラグメントを含んでなるオリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１０から１６の何れか一項に記載の核酸分子を含んでなる、クローニング又は発現ベクター。
【請求項１９】
前記核酸分子と作動式に結合するプロモーター、特に組織特異的、構成的、又は誘導性プロモーターを更に含んでなる、請求項１８記載の発現ベクター。
【請求項２０】
請求項１８又は請求項１９に記載の発現ベクターにより形質転換された、又は前記発現ベクターをトランスフェクトされた宿主細胞。
【請求項２１】
請求項１から８の何れか一項に記載のタンパク質を産生するように遺伝子改変された細胞。
【請求項２２】
発現を可能にする又は促進させる条件下で請求項２０又は請求項２１に記載の宿主細胞を培養することを含んでなる、ポリペプチドを調製するための方法。