【手続補正書】
【提出日】平成20年11月20日(2008.11.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１：ＶＤＥＡＤ
配列番号２：ＬＤＥＧＤ
配列番号３：ＶＤＥＧＤ
配列番号４：ＶＤＥＳＤ
配列番号５：ＬＤＥＫＤ
配列番号６：ＦＤＥＳＤ
配列番号７：ＬＤＥＡＤ
からなる群において選択されるコア配列を有するペプチド。
【請求項２】
Ｎ末端保護基および／またはＣ末端保護基を有する、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
請求項２に記載のペプチドであって、
Ｎ末端保護基がＭ＝Ａ−（ＣＨ２）ｎ１であり、
式中、
・ｎ１＝０〜２０であり、
・ｎ１＝０である場合にＭはＨであり、
・ＡはＣ１〜Ｃ２０アルキル、１以上の縮合環および／またはヘテロ環であり、
・Ａは、Ｈではない場合、かつ、ｎ１が２より大きい場合に、飽和または不飽和であり、１以上の基、例えば、Ｈ、ＯＨ、ＯＲａ、（ＣＨ２）ｎ１ＯＨ、（ＣＨ２）ｎ１ＯＲａ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲａ、（ＣＨ２）ｎ１ＣＯＯＨ、（ＣＨ２）ｎ１ＣＯＯＲａ、Ｃ１−Ｃ３アルキルまたはシクロアルキル、（ＣＨ２）ｎ１−アルキル、ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ａｒ、（ＣＨ２）ｎ１−Ａｒ、ＣＯ−ＮＨ−Ａｒ、ハロゲン、ＣＦ３、ＳＯ３Ｈ、（ＣＨ２）ｘＰＯ３Ｈ２、Ｂ（ＯＨ）２、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲａによって置換されてもよく、ここで、ｘ＝０、１または２であり、Ｒａは、Ｃ１−Ｃ３アルキルであり、Ａｒは置換アリールまたはヘテロアリール基であってよく、
または、
・Ａは１以上のアミノ酸残基であり、
または、
・Ａは、発色団、蛍光性、発光性、吸収性（ＵＶから近ＩＲまで）の群、放射性同位体、金属性の粒子、例えば、電子顕微鏡法に用いられるもの、比色分析の群、ビオチン／ストレプトアビジン／ニュートラアビジン・ラベリング系、または類似体を示す、ペプチド。
【請求項４】
請求項２または３に記載のペプチドであって、
ペプチドは、Ｃ末端保護基Ｘを有し、Ｘは、Ｈ、またはＯＲｂ、ＮＨＲｂ、ＳＲｂ、ＣＨ２ＯＲｂ、ＣＨ２ＮＨＲｂ、ＣＨ２ＳＲｂ、ＣＨ２ＯＲｂおよびＣＨ２Ｙからなる群から選択されるカルボキシ保護基であり、ここで、Ｒｂ＝アシル、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、置換アリールまたはヘテロアリール（１以上の環およびヘテロ環または非環基と縮合されてもよい）、Ｃ１−Ｃ２０置換または無置換脂肪族、アラルキル炭素環、アルキル炭素環、またはヘテロ環基（場合によっては、１以上の環および／またはヘテロ環または非環式基により縮合される）であり、Ｙは、ハロゲン原子（Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）またはＮＯ２であるか、または、Ｘは、発色団、蛍光性、発光性、吸収性（ＵＶから近ＩＲまで）の群、放射性同位体、金属性の粒子、例えば、電子顕微鏡法に用いられるもの、比色分析の群、ビオチン／ストレプトアビジン／ニュートラアビジン・ラベリング系、または類似体を示す、ペプチド。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１つに記載の少なくとも１種のペプチドまたは阻害剤の治療上の有効量を、製薬上許容される担体と共に含む医薬組成物。
【請求項６】
細胞死を低減させるための、経口、経鼻、局所（皮下、脳室内、化合物または医薬組成物を含浸させられた物質の脳内移植、機械的送達用器具の脳内移植等）、全身（例えば、腹腔内、静脈内）投与用の請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
低酸素虚血Ｈ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）を含む病的状況の治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
脳低酸素虚血（Ｈ−Ｉ）（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）を含む病的状況の治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ニューロン死、特に、全体性または限局性のＨ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）におけるものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ニューロン死、特に、成人、胎児または周産期のＨ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）におけるものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ニューロン死、特に、一過性または永続性のＨ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）におけるものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ニューロン死、特に、再灌流の状況を伴うまたは伴わない、Ｈ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）損傷および卒中様の状況（脳、腎臓、心不全等）の脳損傷におけるものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ニューロン死、成人、胎児または周産期のＨ−Ｉにおける中大脳動脈閉塞症（ＭＣＡＯ）におけるものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ニューロン死、特に、下記病的事象の少なくとも１つが結合した場合のもの：全体性または限局性、一過性または永続性、成人、胎児または周産期の、脳レベルまたは体全体のレベルにおける、再灌流を伴うまたは伴わないＨ−Ｉ（低酸素／低血糖を伴うまたは伴わない虚血）の治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ニューロン死、特に、脳損傷の少なくとも一つの場合のものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ニューロン死、特に、周産期脳損傷の少なくとも１つの場合のものの治療用の請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
請求項５または６に記載の医薬組成物であって、
・慢性変性疾患、例えば、アルツハイマー病、ハンチントン病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄延髄萎縮症、プリオン病、痴呆を含む神経変性疾患の際の細胞死を予防および／または治療する、または、
・てんかんまたはてんかん誘発症を予防および／または治療する、または、
・脊髄損傷の際のアポトーシスを予防および／または治療する、または、外傷性脳損傷の結果として生じるアポトーシスを予防および／または治療する、または、
・神経保護作用を提供する、または、
・脳保護作用を提供する、または、
・自己免疫疾患および移植拒絶反応に伴う、細胞毒性Ｔ細胞およびナチュラル・キラー細胞が介在するアポトーシスを予防および／または治療する、または、
・心不全、心筋症、心臓のウイルス感染または細菌感染、心筋虚血、心筋梗塞および心筋虚血、冠動脈バイパス移植を含む心臓細胞の細胞死を予防する、または、
・ミトコンドリアの薬物毒性、例えば化学療法またはＨＩＶ治療の結果としてのものを予防および／または治療する、または、
・ウイルス感染または細菌感染の際の細胞死を予防する、または、
・炎症または炎症性疾患、炎症性腸疾患、敗血症および敗血症性ショックを予防および／または治療する、または、
・卵胞から卵母細胞への段階、卵母細胞から成熟卵への段階（Nutt et al，２００５；Bergeron et al.,１９９８）および精子の細胞死（例えば、卵巣組織、人工授精卵を凍結・移植する方法）を予防する、または、
・化学療法後の女性および男性の受精能力を保護する、または、
・雌および雄動物の受精能力を保護する、または、
・黄班変性および緑内障を予防および／または治療する、または、急性肝炎、慢性活動性肝炎、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎を予防および／または治療する、または、
・男性型禿頭、放射線、化学療法または環境上のストレスに起因する髪の喪失を予防する、または、
・（高レベルの放射線への露出、熱、火傷、化学薬品、太陽および自己免疫疾患に起因する）皮膚損傷を治療または改善する、または、
・脊髄形成異常症候群における骨髄細胞の細胞死を予防する、または、
・膵臓炎を治療する、または、
・呼吸器系症候群を治療する、または、
・胃腸内側上皮細胞の細胞死を治療および／または予防する、または、
・骨関節炎、変形関節炎、乾癬、糸球体腎炎、アテローム性動脈硬化症、移植片対被移植体の疾患を治療する、または、
・網膜周皮細胞のアポトーシス、網膜ニューロンアポトーシス、緑内障、網膜損傷、虚血の結果として生じる黄斑変性、糖尿病性網膜症または他の外傷を治療する、または、
・アポトーシスの増加と関係する疾病状態を治療する、または、
・植物（例えば、草木、草花、葉状植物（キノコ、海草）等）の細胞死を予防する
ための医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１〜４のいずれか１つに記載のペプチドを用いることを包含するカスパーゼ−２および／または−６活性のインビトロ阻害法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
この系統の化合物も、Ｑｃｏ−ＶＤＶＡＤ−ｃｈｏ（１３）がカスパーゼ−２酵素のより強力性に乏しい阻害剤であるようであることを示す。実際に、上記表１に示されるように、化合物（８）が化合物（１３）によって置き換えられた場合、Ｅ最少の電気的（Ｅクーロン）および疎水性（Ｅファンデルワールス）要素の両方が増加した。下記表２および３は、阻害剤−カスパーゼ−２複合体の安定化についての種々の残基（Ｖ１、Ｄ２、Ｖ３、Ａ４およびＤ５）の寄与および保護基（アセチルおよび２−キノリニルカルボニル）の寄与を示す。これらの結果は、２−キノリニルカルボニル基によるアセチル基の置換（表２）が下記をもたらすことを示す：
・１位のバリン（Ｖ１）とカスパーゼ−２の活性部位との間のより弱い相互作用；
・カルボニル（Ｃ＝Ｏ）保護基と酵素との間のより弱い相互作用；
・立体的に込み合った２−キノリニルカルボニル基による不安定な酵素−阻害剤複合体。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
さらに、それは、ペンタペプチドをベースとするカスパーゼ−２およびカスパーゼ−６の二重阻害剤の最初の記載である。これらの阻害剤は、２種のカスパーゼ、すなわちカスパーゼ−２およびカスパーゼ−６に対して異なる感受性を示す。ＶＤＥＡＤ誘導化合物は、ほぼ同様のレベルでほぼ同様の用量範囲で両方のカスパーゼを阻害することができた（図１３）。対照的に、ＬＤＥＡＤ誘導阻害剤は、カスパーゼ−６に対して活性が低かった用量でカスパーゼ−２を阻害することができた（図１２）。