【誤訳訂正書】
【提出日】平成21年1月20日(2009.1.20)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  １７位のシステイン残基のアラニン残基への置換、６３位のグルタミン残基のアルギニン残基への置換、および、カルボキシル末端１５アミノ酸残基の欠失を有する、改変されたヒト毛様体神経栄養因子。
【請求項２】  請求項１に記載の改変されたヒト毛様体神経栄養因子をコードする、単離された核酸分子。
【請求項３】  発現制御配列に作動可能に連結された、請求項２に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項４】  請求項３に記載の組換えＤＮＡ分子で形質転換された、宿主細胞。
【請求項５】  改変された毛様体神経栄養因子分子を産生するための方法であって、以下：（ａ）請求項３に記載のＤＮＡ分子を含む組換え宿主細胞を増殖させる工程であって、その結果、該ＤＮＡ分子が該宿主細胞により発現されて、該改変された毛様体神経栄養因子分子を産生する、工程、および（ｂ）該発現され、改変された毛様体神経栄養因子分子を単離する工程、を含む、方法。
【請求項６】  前記宿主細胞が真核生物細胞である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  前記宿主細胞が原核生物細胞である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】  前記真核生物細胞が細菌細胞である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】  前記細菌細胞がＥ．ｃｏｌｉである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】  ポリエチレングリコールでＰＥＧ化されている、請求項１に記載の改変されたヒト毛様体神経栄養因子。
【請求項１１】  １７位のシステイン残基のアラニン残基への置換、６３位のグルタミン残基のアルギニン残基への置換、および、カルボキシル末端１３アミノ酸残基の欠失を有し、ポリエチレングリコールでＰＥＧ化されている、改変されたヒト毛様体神経栄養因子。
【請求項１２】  ２０ｋＤのＰＥＧでモノＰＥＧ化されている、請求項１０または１１に記載の改変されたヒト毛様体神経栄養因子。
【請求項１３】  請求項１、１０、１１または１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子、およびキャリアを含む、組成物。
【請求項１４】  神経系の疾患または障害の処置において使用するための組成物であって、該組成物は、請求項１、１０、１１もしくは１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子または請求項１３に記載の組成物を含む、組成物。
【請求項１５】  前記疾患または障害が変性疾患である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】  前記疾患または障害が脊髄、運動ニューロン、コリン作用性ニューロンまたは海馬の細胞に関する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】  請求項１４に記載の組成物であって、ここで前記神経系の疾患または障害が外傷、手術、梗塞形成、感染、悪性疾患および毒性因子への曝露から選択される事象により生じる神経系に対する損傷を含む、組成物。
【請求項１８】  前記疾患または障害が筋萎縮症を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】  線条体ニューロンを変性から保護するために使用するための組成物であって、該組成物は、請求項１、１０、１１もしくは１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子または請求項１３に記載の組成物を含む、組成物。
【請求項２０】  中枢神経系への直接投与によりハンティングトン病の処置において使用するための組成物であって、該組成物は、請求項１、１０、１１もしくは１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子または請求項１３に記載の組成物を含む、組成物。
【請求項２１】  哺乳動物において体重の減少の誘導に使用するための組成物であって、該組成物は、請求項１、１０、１１もしくは１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子または請求項１３に記載の組成物を含む、組成物。
【請求項２２】  前記哺乳動物がヒトである、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】  前記組成物が、病的な肥満または遺伝的に決定された起源の肥満の処置に使用される、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】  ヒトにおける妊娠発症糖尿病または成人発症糖尿病の発生の予防または処置に使用するための組成物であって、該組成物は、請求項１、１０、１１もしくは１２に記載の改変された毛様体神経栄養因子分子または請求項１３に記載の組成物を含む、組成物。
【請求項２５】  投与が、静脈内、皮下、筋肉内、クモ膜下腔、脳室内および実質内から選択される送達経路を介するか、または前記改変された毛様体神経栄養因子を放出する細胞の移植を介する、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２４】
好ましい実施態様において、ヒトＣＮＴＦにおける６３位のアミノ酸グルタミンを、アルギニン（６３Ｑ→Ｒと称する）または生物学的活性が改良された改変ＣＮＴＦ分子を生じる別のアミノ酸に置換する。さらなる実施態様において、ｒＨＣＮＴＦ改変体は、６３Ｑ→Ｒ変異と３つの他の新規の特徴を組み合わせる：
１）最後の１３個のアミノ酸残基の欠失（ΔＣ１３と称する）。これは、ｒＨＣＮＴＦの可溶性の上昇をその活性を損なうことなく与える；
２）１７位の独特なシステイン残基の置換。これは、生理的緩衝液中で、生理的ｐＨおよび温度条件下で、その活性に影響することなくｒＨＣＮＴＦの安定化をもたらす；または
３）アミノ酸残基６４Ｗの置換。これは、ｒＨＣＮＴＦのインビトロでの生物学的活性を変化させ、そしてそのインビボでの治療指数に７倍の改良をもたらす。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５３】
ｒＨＣＮＴＦおよびｒＨＣＮＴＦ，ΔＣ１３の熱不安定性が、分子間ジスルフィド結合形成によって開始され、そしてタンパク質濃度および温度に強く依存した凝集の結果であることが決定された。ヒトＣＮＴＦの１７位の単一のシステイン残基をアラニン残基で置換することによって、はるかにより大きな安定性を示し、かつＰＢＳ中３７℃で少なくとも７日間インキュベートした後にそれらの生物学的活性を維持するタンパク質が得られた。この特性は、ｒＨＣＮＴＦ，６３ＱＲ改変体において維持され、この改変体は、６３位のグルタミン残基のアルギニンにへの置換に起因してより高い効力を有する。特定の例において、ｒＨＣＮＴＦ，１７ＣＡ，６３ＱＲ，ΔＣ１３（ＲＧ２９７とも呼ばれる）は、６３ＱＲ置換によって、ｒＨＣＮＴＦよりも、より高い生物学的効力を示し、ΔＣ１３欠失のためにより高い可溶性を示し、そして１７ＣＡ置換のためにより高い安定性を示す。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１１】
３７℃でのｒＨＣＮＴＦの不安定性が、分子間ジスルフィド結合の形成により引き起こされる凝集によリ生じるという可能性をさらに試験するために、１７位の唯一のシステイン残基を、確立された遺伝子操作方法論を使用して、アラニンに置換した。このプロセスによって生成された、２つのｒＨＣＮＴＦ改変体、ｒＨＣＮＴＦ，１７ＣＡ，ΔＣ１３およびｒＨＣＮＴＦ，１７ＣＡ，６３ＱＲ，ΔＣ１３を、非還元的な１５％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる同じ分析に供した。図５は、３７℃で１４日間のインキュベーション後でさえ、両方のタンパク質が、明らかな二量体化または凝集体形成を伴なわず、可溶性のままであったことを示す。ペレット中に見出された少ない割合のタンパク質（それはほとんど、上清の除去後の遠心管に残存している少量の可溶性タンパク質を示した）においてでさえ、二量体化がほとんど明らかにならなかった。これらの結果は、ｒＨＣＮＴＦの不安定性が、分子間ジスルフィド結合の形成によって引き起こされる凝集によって生じるという結論を確証し、そして他のｒＨＣＮＴＦ改変体（例えば、ＲＧ２９７）における遊離の−ＳＨ官能基の除去がまた、より高い安定性を生じることを実証した。