【手続補正書】
【提出日】平成21年2月2日(2009.2.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象が特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を含んでなるかどうかを評価する方法であって、
（ａ）前記特異抗原に活性化されていないＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞からの、前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の区別を促進するために、前記対象から得たＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を含んでなるリンパ球の試料の少なくとも一部分をインキュベートするステップと、
（ｂ）その後に、特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が前記試料に存在するかどうかを判定するステップと
を含んでなる方法。
【請求項２】
ステップ（ｂ）が、
（ａ）他のＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞に優先して、前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存および／もしくは増殖に有利に働く条件下で、前記試料の少なくとも一部分をインキュベートするステップ、または
（ｂ）前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞に優先して、特異抗原に活性化されていないＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存および／または増殖に有利に働く条件下で、前記試料の少なくとも一部分をインキュベートするステップ
を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記試料の少なくとも一部分が、前記特異抗原、および、活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができる少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートされる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記少なくとも１つのサイトカインが、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記試料の少なくとも一部分が、前記特異抗原の存在下で、かつ、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下でインキュベートされる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
対象が特異抗原に耐性であるか、または耐性になることができるかを判定する方法であって、
（ａ）前記対象から得たＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を含んでなるリンパ球の試料の少なくとも一部分を前記特異抗原と接触させるステップと、
（ｂ）前記リンパ球の試料の少なくとも一部分を、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下、あるいは、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートするステップと、
（ｃ）その後に、前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が前記試料に存在するかを判定するステップと
を含んでなる方法。
【請求項７】
（ｉ）  前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の非増殖または低増殖を検出することによって判定され、または
（ｉｉ）  前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の増殖を検出することによって判定され、または
（ｉｉｉ）  前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在を示す分子を検出することによって判定され、または
（ｉｖ）  前記リンパ球の試料の少なくとも一部分がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋、ＣＤ２５−Ｔ細胞を含んでなり、かつ、前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５−Ｔ細胞の増殖の阻害を検出することによって判定され、または
（ｖ）前記試料がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋、ＣＤ２５−Ｔ細胞を含んでなり、かつ、前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の増殖を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５−Ｔ細胞の増殖を検出することによって判定される、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつ、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下で、かつ、抗−ＩＬ−２および／またはＩＬ−４抗体の存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の非増殖または低増殖を検出することによって判定される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が前記特異抗原と接触され、かつＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下で、さらに抗−ＩＬ−２および／または抗−ＩＬ−４抗体の存在下でインキュベートされ、かつ、前記試料における前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の存在が、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の非増殖または低増殖を検出することによって判定される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記リンパ球の試料の少なくとも一部分がＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインキュベートされ、前記少なくとも１つのサイトカインが、前記リンパ球の試料の少なくとも一部分が外因性起源からインキュベートされる培地に添加される、請求項１から４、６、７、または９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのサイトカインが精製されたタンパク質である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記リンパ球の試料がＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を刺激し、または活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の生存を延長させ、または増殖を支持することができるサイトカインの非存在下でインキュベートされる場合は、前記リンパ球の試料がサイトカインを実質的に含まない培地でインキュベートされる、請求項１、５、７、または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
対象が特異抗原に耐性であるか、または耐性になることができるかを評価する方法であって、前記対象が前記特異抗原に活性化されているＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を含んでなるかどうかを請求項１から５、または７から１２のいずれか一項に記載の方法によって評価するステップを含んでなる方法。
【請求項１４】
特異抗原に活性化されたＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞をインビトロで増殖させる方法であって、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下で前記特異抗原に活性化されたＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を培養するステップを含んでなる方法。
【請求項１５】
前記特異抗原に活性化したＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が、ナイーブＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞をインビトロで前記特異抗原と接触させ、かつ、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を支持することができる１つもしくは複数のサイトカインの存在下でＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を培養することによって、インビトロで前記特異抗原に活性化される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の活性化を支持することができる前記１つもしくは複数のサイトカインが、ＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記特異抗原に活性化したＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞がインビトロで培養する前にインビボで前記特異抗原に活性化される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
ナイーブおよび活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の混合物が、ナイーブおよび活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞をインビトロで前記特異抗原と接触させることによって、かつ、前記ナイーブおよび活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞を、ＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、および／またはＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下で培養することによって、増殖される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記少なくとも１つのサイトカインが、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が培養される培地に外部から添加されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記特異抗原が、自己抗原、同種抗原、異種抗原、アレルゲン、腫瘍抗原および感染症病原体に由来する抗原からなる群から選択される、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞および薬剤として許容される担体を含んでなる、特異抗原に対する耐性を増大させるための組成物であって、前記活性化ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの存在下でインビトロで培養された組成物。
【請求項２２】
対象における特異抗原に対する耐性を削減または除去するために使用される場合の組成物であって、前記組成物がＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γからなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの拮抗薬を含んでなる組成物。
【請求項２３】
ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインを含んでなる、特異抗原に対する耐性を増大させるためのキット。
【請求項２４】
ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γからなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの拮抗薬を含んでなる、特異抗原に対する耐性を減少させるためのキット。
【請求項２５】
それを必要とする対象中の特異抗原に対する耐性を増大させるための薬剤の製造における、請求項１４に記載の方法によってインビトロで増殖させた特異抗原に活性化したＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の使用。
【請求項２６】
特異抗原に活性化した前記ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞が、請求項１５から１９のいずれか一項に記載の方法によってインビトロで増殖される、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
対象における特異抗原に対する耐性を削減するための薬剤の製造における、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３またはＩＦＮ−γの拮抗薬の使用。
【請求項２８】
特異抗原に対する免疫応答に起因する疾患を治療または予防するための薬剤の製造における、請求項１４に記載の方法によってインビトロで増殖させた、前記特異抗原に活性したＣＤ４＋、ＣＤ２５＋Ｔ細胞の使用。
【請求項２９】
対象の治療のために前記対象における耐性を誘発する薬剤の製造における、ＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの使用であって、前記治療が、薬剤の有効量、およびＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの有効量を投与するステップを含んでなる使用。
【請求項３０】
対象の治療のために前記対象における耐性を誘発する薬剤の製造における、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの使用であって、前記治療が、薬剤の有効量、およびＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの有効量を投与するステップを含んでなる使用。
【請求項３１】
特異抗原に対する免疫応答に起因する疾患を治療または予防するための薬剤の製造における、ＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの使用であって、前記治療が、薬剤の有効量、およびＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの有効量を投与するステップを含んでなる使用。
【請求項３２】
特異抗原に対する免疫応答に起因する疾患を治療または予防するための薬剤の製造における、ＩＬ−５、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３およびＩＦＮ−γ、またはその生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される１つもしくは複数のサイトカインの使用であって、前記治療が、薬剤の有効量、およびＩＬ−２、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子、およびＩＬ−４、その生物学的に活性な断片、またはその機能的に同等の分子からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインの有効量を投与するステップを含んでなる使用。