【手続補正書】
【提出日】平成21年2月12日(2009.2.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における骨に関連する状態を治療、予防、または改善するための薬剤組成物であって、有効量のＮＥＬＬペプチド、またはＮＥＬＬ  ＲＮＡを含み、前記ＮＥＬＬペプチドが、ＮＥＬＬペプチドの最適な投与量の範囲を実質的に超えない投与量である薬剤組成物。
【請求項２】
哺乳動物における頭蓋縫合にわたる骨過剰増殖の治療、予防または改善のための作用物質を有効量を含む薬剤組成物であって、前記作用物質が、ＮＥＬＬペプチド、ＮＥＬＬペプチドの阻害物質、ＮＥＬＬペプチドの受容体のアンタゴニスト、およびその組合せからなる群から選択される薬剤組成物。
【請求項３】
哺乳動物における軟骨に関連する骨状態を治療または予防するための薬剤組成物であって、軟骨の再生に有効な少なくとも１つの作用物質を有効量含み、前記作用物質が、ＮＥＬＬペプチド、ＮＥＬＬペプチドの阻害物質、ＮＥＬＬペプチドの受容体のアンタゴニスト、ＮＥＬＬペプチドの亢進物質、ＮＥＬＬ  ＲＮＡおよびその組合せからなる群から選択される薬剤組成物。
【請求項４】
前記作用物質が、関節表面再建、顎関節再建、関節炎修復、または椎間円板修復に有効である、請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項５】
骨に関連する状態の治療、予防または改善に有効な量の、ＮＥＬＬペプチドの受容体の調節物質を含む薬剤組成物。
【請求項６】
前記調節物質が、ＮＥＬＬペプチド受容体のアゴニストまたはアンタゴニスト、ＮＥＬＬペプチドを安定化または分解する分子、ＮＥＬＬペプチド受容体を安定化または分解する分子、最初の受容体連結反応後のＮＥＬＬペプチドと受容体との複合体の安定化およびリン酸化に関与する分子、ＮＥＬＬペプチド受容体のアゴニストまたはアンタゴニストのアゴニスト、ＮＥＬＬペプチド受容体のアゴニストまたはアンタゴニストのアンタゴニスト、ならびにその組合せからなる群から選択される、請求項５に記載の薬剤組成物。
【請求項７】
哺乳動物中の骨に関連する状態を治療、予防、または改善するための薬剤組成物であって、有効量のＮＥＬＬペプチドの誘導体を含む薬剤組成物。
【請求項８】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１〜７のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項９】
薬学的に許容される担体が、経口投与、局所投与、ｉｎ  ｓｉｔｕインプラント、静脈内投与、非経口投与、局部投与、動脈内注射、骨折部位への注射、および生体分解性基質での送達からなる群から選択される送達の形態用の担体又は脱無機化骨基質及び／若しくはリン酸カルシウムを含む担体である、請求項８に記載の薬剤組成物。
【請求項１０】
前記ＮＥＬＬペプチドの誘導体が、物理的に修飾されたＮＥＬＬ１ペプチドまたはＮＥＬＬ２ペプチドである、請求項７に記載の薬剤組成物。
【請求項１１】
前記ＮＥＬＬペプチドの誘導体が、化学的に修飾されたＮＥＬＬ１ペプチドまたはＮＥＬＬ２ペプチドである、請求項７に記載の薬剤組成物。
【請求項１２】
前記ＮＥＬＬペプチドの誘導体が、ＰＥＧ化ＮＥＬＬ１ペプチド、ＰＥＧ化ＮＥＬＬ２ペプチド、少なくとも１つの短い炭化水素基を含むＮＥＬＬ１ペプチド、または少なくとも１つの短い炭化水素基を含むＮＥＬＬ２ペプチドから選択される、請求項１１に記載の薬剤組成物。
【請求項１３】
前記化学的に修飾されたＮＥＬＬペプチドが、ＮＥＬＬ１ペプチド模倣物またはＮＥＬＬ２ペプチド模倣物である、請求項１１に記載の薬剤組成物。
【請求項１４】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１０〜１３のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項１５】
第２の作用物質をさらに含み、骨発生、あるいは骨に関連する状態の治療、予防、または改善に有効である、請求項１〜１３のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項１６】
前記第２の作用物質が、ＢＭＰタンパク質、ＴＧＦβタンパク質、ＦＧＦタンパク質、ＩＧＦ（インスリン様成長因子）、ＶＥＧＦ、およびその組合せからなる群から選択される、請求項１５に記載の薬剤組成物。
【請求項１７】
骨状態が、骨折、脊椎固定、長骨骨折、頭蓋顔面骨の治癒または形成、歯科または整形外科インプラントの組み込み、歯科インプラントの組み込み、あるいはその組合せからなる群から選択される、請求項１６に記載の薬剤組成物。
【請求項１８】
製剤上許容される担体をさらに含む、請求項１５に記載の薬剤組成物。
【請求項１９】
経口送達、非経口送達、肺送達および埋め込みからなる群から選択される送達の形態に適した製剤中の、請求項１〜１３のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項２０】
ＮＥＬＬ関連ペプチドの受容体の調節物質を同定する方法であって、
ＮＥＬＬペプチドの受容体分子を試験化合物と接触させるステップと、
前記ＮＥＬＬペプチドを前記受容体分子および前記試験化合物と接触させるステップと、
前記試験化合物がある状態での前記ＮＥＬＬペプチドと前記受容体分子の結合の程度を検出するステップと、
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬペプチドと受容体分子の前記結合の程度を、前記試験化合物がない状態での前記ＮＥＬＬペプチドと前記受容体分子の結合の程度を検出することによって得られる対照の結合の程度と比較するステップと、
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬペプチドと受容体分子の前記結合の程度が、前記対照の結合の程度と異なる場合に、前記試験化合物をＮＥＬＬペプチドの受容体の調節物質に指定するステップと
を含む方法。
【請求項２１】
前記指定するステップが、
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬペプチドと受容体分子の前記結合の程度が、前記対照の結合の程度より低い場合に、前記調節物質をＮＥＬＬペプチドの受容体のアンタゴニストに指定するステップ、または
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬペプチドと受容体分子の前記結合の程度が、前記対照の結合の程度より高い場合に、前記調節物質をＮＥＬＬペプチドの受容体のアゴニストに指定するステップ
をさらに含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＮＥＬＬペプチドを産生する方法であって、宿主細胞中でＮＥＬＬ遺伝子、プロモーター遺伝子及びシグナルペプチドをコードする遺伝子をコードする核酸構築物を発現させるステップを含む方法。
【請求項２３】
前記構築物が、配列番号１〜８１から選択される配列を有する遺伝子を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記プロモーター遺伝子は配列番号８２〜８７から選択され、前記シグナルペプチドは配列番号８８〜９５から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記核酸構築物が、ＮＥＬＬペプチドのゲノムＤＮＡ中の非コード遺伝子をさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＮＥＬＬペプチドがＮＥＬＬ１である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記宿主細胞がチャイニーズハムスター卵巣細胞である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記構築物が、分泌を促進するペプチドを発現する遺伝子をさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
ＮＥＬＬペプチドの発現を誘導する分子を同定する方法であって、
ＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子を試験化合物と接触させるステップと、
前記ＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の発現のレベルを検出するステップと、
ＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルを、前記試験化合物がない状態での前記ＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の発現のレベルと比較するステップと、
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルが、試験化合物がない状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルと異なる場合に、前記試験化合物をＮＥＬＬペプチドの発現の調節物質に指定するステップと
を含む方法。
【請求項３０】
前記指定するステップが、
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルが、試験化合物がない状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルより低い場合に、前記調節物質をＮＥＬＬペプチドの発現の阻害物質に指定するステップ、または
試験化合物がある状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルが、試験化合物がない状態でのＮＥＬＬ１プロモーター遺伝子の前記発現のレベルより高い場合に、前記調節物質をＮＥＬＬペプチドの発現の亢進物質に指定するステップ
をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
有効量のＮＥＬＬペプチド、またはＮＥＬＬ  ＲＮＡを含む足場であって、前記ＮＥＬＬペプチドが、ＮＥＬＬペプチドの最適な投与量の範囲を実質的に超えない投与量である足場。
【請求項３２】
前記ＮＥＬＬペプチドが、ＮＥＬＬ１、ＮＥＬＬ２、ＮＥＬＬ１ペプチドの断片、ＮＥＬＬ２ペプチドの断片、およびその組合せからなる群から選択される、請求項１又は３に記載の薬剤組成物。
【請求項３３】
前記ＮＥＬＬペプチドが、ＮＥＬＬ１、ＮＥＬＬ２、ＮＥＬＬ１ペプチドの断片、ＮＥＬＬ２ペプチドの断片、およびその組合せからなる群から選択される、請求項３１に記載の足場。
【請求項３４】
前記骨に関連する状態が、頭蓋顔面骨発生、非頭蓋顔面骨発生、長骨発生、歯周部の骨発生、膜内骨発生、軟骨内骨発生、軟骨再生、軟骨肥大およびその組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項３５】
前記骨に関連する状態が、頭蓋顔面骨発生、非頭蓋顔面骨発生、長骨発生、歯周部の骨発生、膜内骨発生、軟骨内骨発生、軟骨再生、軟骨肥大およびその組合せからなる群から選択される、請求項３１に記載の足場。
【請求項３６】
前記骨に関連する状態が、骨粗鬆症、微小重力による骨の消失、廃用性萎縮、長期のベッド休養、および骨代謝が二次的作用である複数の症状を伴う疾患からなる群から選択される、請求項１、５又は７のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項３７】
前記骨に関連する状態が、骨粗鬆症、微小重力による骨の消失、廃用性萎縮、長期のベッド休養、および骨代謝が二次的作用である複数の症状を伴う疾患からなる群から選択される、請求項３１に記載の足場。
【請求項３８】
前記複数の症状を伴う疾患により病的石灰化が生じる、請求項３６に記載の薬剤組成物。
【請求項３９】
前記複数の症状を伴う疾患により病的石灰化が生じる、請求項３７に記載の足場。
【請求項４０】
前記複数の症状を伴う疾患が、腎性骨形成異常および／または血管石灰化を引き起こす慢性腎疾患である、請求項３６に記載の薬剤組成物。
【請求項４１】
前記複数の症状を伴う疾患が、腎性骨形成異常および／または血管石灰化を引き起こす慢性腎疾患である、請求項３７に記載の足場。
【請求項４２】
前記骨に関連する状態が、異所性の軟組織石灰化、胆石、腎結石、松果体石灰化、白内障、唾石、心臓弁、または前立腺結石である、請求項３６に記載の薬剤組成物。
【請求項４３】
前記骨に関連する状態が、異所性の軟組織石灰化、胆石、腎結石、松果体石灰化、白内障、唾石、心臓弁、または前立腺結石である、請求項３７に記載の足場。
【請求項４４】
前記ＮＥＬＬ  ＲＮＡが、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、またはその組合せである、請求項１又は３に記載の薬剤組成物。
【請求項４５】
前記ＮＥＬＬ  ＲＮＡが、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、またはその組合せである、請求項３１に記載の足場。
【請求項４６】
化学物質によって、あるいはナノケージまたは生体材料中に前記ＮＥＬＬ  ＲＮＡを組み込むことによってＮＥＬＬ  ＲＮＡを安定化する、請求項１又は３に記載の薬剤組成物。
【請求項４７】
化学物質によって、あるいはナノケージまたは生体材料中に前記ＮＥＬＬ  ＲＮＡを組み込むことによってＮＥＬＬ  ＲＮＡを安定化する、請求項３１に記載の足場。