(57)【要約】本発明は、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによって、処置を必要とする哺乳類においてエストロゲン欠乏症を処置する方法を提供する。本発明の方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによって、エストロゲン欠乏哺乳類における血糖管理を改善することをさらに含み得る。血糖管理の改善には、血糖値の低下、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値の低減などが含まれる。一実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は２型糖尿病などの糖尿病を有し、かつ、過体重または肥満である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
処置を必要とする哺乳類においてエストロゲン欠乏症を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２】
エストロゲン欠乏哺乳類において肥満を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項３】
エストロゲン欠乏哺乳類において過体重を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項４】
エストロゲン欠乏哺乳類において体重を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項５】
エストロゲン欠乏哺乳類において体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項６】
エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項７】
エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体重および／または体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項８】
エストロゲン欠乏哺乳類において体重を維持する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項９】
エストロゲン欠乏哺乳類において胃内容排出を遅延させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
エストロゲン欠乏哺乳類において胃運動を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１１】
エストロゲン欠乏哺乳類において食欲を減退させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１２】
エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を増大させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１３】
雌哺乳類において卵巣摘出後の体重増加を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１４】
雌哺乳類において卵巣摘出後の肥満および／または過体重を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
雌哺乳類において閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１６】
雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１７】
雌哺乳類において閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１８】
雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
雌哺乳類において閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２０】
雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２１】
雌哺乳類において閉経期の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２２】
雌哺乳類において閉経後の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２３】
雌哺乳類において閉経期前後の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２４】
Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類においてＢｄｎｆレベルを増大させる方法であって、Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２５】
Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とする哺乳類においてＢｄｎｆレベルを増大させる方法であって、Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とする哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２６】
有効量のレプチンまたはレプチン類似体を投与することをさらに含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
有効量のメトレレプチンを投与することをさらに含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
有効量のＧＬＰ−１受容体アゴニストもしくはその類似体；ＰＹＹもしくはその類似体；ＧＩＰもしくはその類似体；またはＣＣＫもしくはその類似体を投与することをさらに含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
ＧＬＰ−１受容体アゴニストがＧＬＰ−１（７−３７）またはエキセンディン４である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
哺乳類がヒト女性である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
アミリンアゴニスト化合物が式（Ｉ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＩ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＩＩ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＶ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
アミリンアゴニスト化合物が式（Ｖ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１３９のいずれか１つのアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１３９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１１、２０〜３９、１３８および１３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１１、２０〜３９、１３８および１３９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号２０のアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号４０〜１３７のいずれか１つのアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号４０〜１３７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１３７のアミノ酸配列を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に末梢投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に非経口投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に皮下投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に静脈内投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に筋肉内投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に動脈内投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に鼻腔投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約２００またはそれ未満のＩＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約１００またはそれ未満のＩＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約５０またはそれ未満のＩＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約２０またはそれ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約１５またはそれ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約５またはそれ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
アミリンアゴニスト化合物がペプチド、炭水化物、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸、ポリアミノ酸、デキストラン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリルアミド、またはその２つ以上の組合せと結合されている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
アミリンアゴニスト化合物がペプチド、炭水化物、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸またはポリアミノ酸と結合されている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
ペプチドがエキセンディン、エキセンディン類似体、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１類似体、ＣＣＫ、ＣＣＫ類似体、ＰＹＹ、ＰＹＹ類似体、ＧＩＰまたはＧＩＰ類似体である、請求項５８または５９に記載の方法。
【請求項６１】
アミリンアゴニスト化合物が１つ、２つ、３つまたは４つのアミノ酸残基でグリコシル化されている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
哺乳類にホルモン補充療法が施されない、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
哺乳類が閉経期前後である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
哺乳類が閉経期である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
哺乳類が閉経後である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
哺乳類が卵巣機能不全であるか、または卵巣摘出(overectomy)もしくは子宮摘出を受けている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
ヒト女性が約３０またはそれ未満のエストラジオールレベルおよび約３０またはそれを超える卵胞刺激ホルモンレベルを有する、請求項３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ〜５ｍｇである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μ／日〜５ｍｇ／日である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ／週〜５ｍｇ／週である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ／月〜５ｍｇ／月である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１０μｇ〜３ｍｇである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１０μｇ／日〜３ｍｇ／日である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７４】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１０μｇ／週〜３ｍｇ／週である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１０μｇ／月〜３ｍｇ／月である、請求項２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７６】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ〜２ｍｇである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／日〜２ｍｇ／日である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７８】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／週〜２ｍｇ／週である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／月〜２ｍｇ／月である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１００μｇ〜１ｍｇである、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１００μｇ／日〜１ｍｇ／日である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が毎日一用量または分割用量で投与される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１００μｇ／週〜１ｍｇ／週である、請求項１〜６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１００μｇ／月〜１ｍｇ／月である、請求項１〜６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が少なくともアミリンアゴニスト化合物の治療上有効な最小血漿レベルをもたらす、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩＩ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８７】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩＩＩ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＸ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
アミリンアゴニスト化合物が式（Ｘ）の化合物である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
アミリンアゴニスト化合物がヒト・アミリンアミノ酸配列の断片、ラットアミノ酸配列の断片、サケ・カルシトニンアミノ酸配列の断片、ヒト・カルシトニン配列の断片またはその２つ以上の組合せを含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
アミリンアゴニスト化合物が（ａ）ループ領域；（ｂ）αらせんループＩ型；および（ｃ）Ｃ末端テールを含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
アミリンアゴニスト化合物が（ｉ）アミリンペプチド断片および（ｉｉ）カルシトニンペプチド断片を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
アミリンがヒト・アミリンまたはラット・アミリンであり、カルシトニンがヒト・カルシトニンまたはサケ・カルシトニンである、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
哺乳類が糖尿病を有している、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
血糖管理の改善を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類において血糖管理を改善することをさらに含む、請求項１〜１４および９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
血糖管理を改善する方法が血糖値を低下させるまたはヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値を低減する方法である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
血糖管理の改善を必要とする閉経期、閉経後または閉経期前後の雌哺乳類において血糖管理を改善することをさらに含む、請求項１５〜２４および９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
血糖管理を改善する方法が血糖値を低下させるまたはヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値を低減する方法である、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
アミリンアゴニスト化合物が配列番号１４２のアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、請求項１〜９８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は２００９年４月１０日に出願された米国仮特許出願番号６１／１６８，３１７の利益を主張するものであり、その全開示内容は目的によらず、引用することにより本明細書の一部とされる。
【０００２】
技術分野
本開示は、エストロゲン欠乏哺乳類を処置するためのアミリンアゴニスト化合物の使用を含む医学分野にある。
【背景技術】
【０００３】
閉経は女性が排卵を止め、月経が停止した際に起こる。エストロゲンは排卵を担う女性の性ホルモンである。エストロゲンは体脂肪分布に影響を及ぼすことが分かっている。多くの医学研究の結果が、閉経が体重の漸増および体脂肪の腹部領域への再分布に関連することを示している。動物試験では、エストロゲンの欠如が過剰な体重増加をもたらすことが示されている。
【０００４】
妊娠可能年齢の女性は下半身に脂肪を蓄える傾向にあるが、男性および閉経後の女性は腹部の周りに蓄える。ヒトの過体重はそれだけでリスク因子であるが、脂肪組織の再分布は心血管疾患および糖尿病のリスクをさらに高める。閉経後の女性は、１つには、エストロゲン生産の低下、それと同時に総リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロールレベルおよび低密度リポタンク質コレステロールレベルの上昇のために冠動脈心疾患のリスクが高い。肥満、体重増加、ならびに体脂肪分布および組成の有害な変化はこの現象の一部である。さらに、ＬＤＬコレステロールレベルの上昇および他の冠動脈心疾患リスク因子（例えば、高血圧、高総コレステロールおよびトリグリセリドレベル、インスリン抵抗性）の発症も体重増加によって直接的な影響を受ける。最大のエストロゲン欠乏は卵巣が除去された際または手術もしくは疾患によって傷つけられた際に起こる。よって、これらの女性の多くは重大な体重の問題を抱える。これは被っているテストステロンおよびエストロゲン双方の欠乏に関連していると思われる。
【０００５】
閉経後の女性の生活の質を改善するため、エストロゲン欠乏に関連する症状を緩和するため、およびエストロゲン欠乏に関連する疾患の進行を遅くするためにホルモン補充療法が用いられてきた。閉経に関連する有害な身体的および生理的変化を緩和する助けとするために様々なホルモン補充療法が利用できる。このような治療計画には、エストロゲンなどの単剤療法、およびエストラジオールとプロゲステロン／プロゲスチンなどの併用療法が含まれる。
【０００６】
何十年という間、閉経期および閉経後の女性は一般にホルモン補充療法で処置されていた。しかしながら、女性の健康イニシアチブ(Women's Health Initiative)（ＷＨＩ）と呼ばれる大規模臨床試験により、ホルモン補充療法は女性の乳癌および心疾患リスクを高め得ることが報告された。Writing Group for the Women's Health Initiative Investigators, JAMA, 288(3):321-333 (2002)。ＷＨＩの終了３年後、臨床試験中にホルモン補充療法を受けた女性は、なお浸潤性乳癌の高いリスクを示した。Heiss et al, JAMA, 299(9):1036-1045 (2008)。これらの報告に述べられたリスクを考慮して、多くの医師が自分達の女性患者にホルモン補充療法を指示するのを止め、多くの女性がホルモン補充療法を見合わせることを選択した。
【０００７】
エストロゲンは、摂食行動および代謝に対する影響を通じてエネルギーバランスおよび体重の恒常性に影響を及ぼすことが広く知られている（１、２）。例えば卵巣の実験的除去（ＯＶＸ）によりエストロゲンが存在しないと、カロリー消費が増し、次いで、体重および脂肪量の増加が加速される（３、４）。齧歯類では、ＯＶＸ後の過食および急速な体重増加の誘導はエストロゲン補充によって逆転させることができる（３、４）。脂肪組織の分布および代謝に対するエストロゲンのよく確立された効果の他、無傷な齧歯類とＯＶＸ齧歯類の、神経ホルモンシグナルに対する反応性を比較する薬理学的および神経生物学的研究は、エストロゲンがエネルギーバランスの中枢的制御を調節する機構を解明した。急性試験は、エストロゲンの存在が満腹感の短期シグナル（例えば、ＣＣＫ（５、６））、脂肪蓄積の長期シグナル（例えば、レプチン、インスリン（４、７））の食欲不振特性を増強する一方で食欲促進シグナル（例えば、メラニン凝集モルモン、ニューロペプチドＹ、グレリン（８〜１１））の効力を低下させることを暗示する。上述の神経ホルモンシグナルの多くは、可能性のある抗肥満標的として追跡されてきた、または現在追跡されており、閉経後の女性はこれらの薬剤が最終的に処方される肥満集団の高いパーセンテージを占めることから、これらの前臨床的所見は潜在的に臨床的重要性を持つ（１２）。
【０００８】
この点で十分に探求されて来なかった１つの神経ホルモンシグナルが、強力な満腹シグナルとして売り込まれてきた膵臓ホルモンのアミリンである（１３）。栄養摂取に応答してインスリンとともに分泌されると、アミリンは脳幹の最後野（ＡＰ）で、その受容体を介して胃内容排出および食物摂取を阻害する働きをする（１４）。しかしながら、ＣＣＫとは異なり、食事性肥満（ＤＩＤ）ラットにアミリンの持続的末梢注入を行うと、脂肪特異的様式で食物摂取および体重が低下する（１５）。合成アミリン類似体であるプラムリンチドのヒト被験体への投与も同様に食物摂取および体重を低下させた（１６、１７）。これらのデータを考え合わせると、アミリンはエネルギーバランスに対する短期効果と長期効果の双方を発揮し得ることを示す。見た限りでは、エストロゲンは、体重調節に中心的結果を持つ多くの神経ホルモンシグナルの有効性／効力に影響を及ぼし得る。
【０００９】
よって、当技術分野ではとりわけ、閉経およびエストロゲン欠乏症の他の原因に関連する体重増加、過体重および肥満を処置するために、エストロゲンなどのホルモンを用いることなく使用できる新規化合物および組成物の必要がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本明細書では、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによって、処置を必要とする哺乳類においてエストロゲン欠乏症を処置する方法が提供される。本明細書に記載される例示的方法は、（ｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において肥満を処置すること；（ｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において過体重を処置すること；（ｉｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において体重を低減すること；（ｉｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において体脂肪を低減すること；（ｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体脂肪を低減すること；（ｖｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を増大させること；（ｖｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において食欲を減退させること；（ｖｉｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において胃内容排出を遅延させること；（ｉｘ）エストロゲン欠乏哺乳類において胃運動を低減すること；（ｘ）雌哺乳類において卵巣摘出後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉ）雌哺乳類において卵巣摘出後の肥満または過体重を処置すること；（ｘｉｉ）ヒト女性において閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉｉｉ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉｖ）ヒト女性において閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉ）ヒト女性において閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉｉ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉｉｉ）ヒト女性において閉経期の肥満を処置すること；（ｘｉｘ）ヒト女性において閉経期前後の肥満を処置すること；（ｘｘ）ヒト女性において閉経後の肥満を処置すること；（ｘｘｉ）ヒト女性において閉経期の体重増加を処置すること；（ｘｘｉｉ）ヒト女性において閉経期前後の体重増加を処置すること；（ｘｘｉｉｉ）ヒト女性において閉経後の体重増加を処置すること；および（ｘｘｉｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において脳由来神経栄養因子（Ｂｄｎｆ）のレベルを増大させることを含む。治療上有効な量は好ましくは、哺乳類において少なくともアミリンアゴニスト化合物の最小の治療上有効な血漿レベルをもたらす。
【００１１】
本明細書に記載されている方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによって、エストロゲン欠乏哺乳類における血糖管理を改善することをさらに含み得る。血糖管理の改善には、血糖値の低下、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値の低減などが含まれる。一実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は２型糖尿病などの糖尿病を有し、かつ、過体重または肥満である。
【００１２】
本明細書に記載されている方法の他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は、有効量のレプチンまたはレプチン類似体をさらに投与してもよい。レプチンまたはレプチン類似体（メトレレプチンなど）はアミリンアゴニスト化合物と同じ医薬組成物で投与することもできるし、あるいは別の医薬組成物で投与することもできる。
【００１３】
本明細書に記載されている方法の他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は、有効量のＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはその類似体（例えば、ＧＬＰ−１（７−３７）またはその類似体；エキセンディン−４またはその類似体）；ＰＹＹまたはその類似体；ＧＩＰまたはその類似体をさらに投与してもよい。これらの化合物はアミリンアゴニスト化合物と同じ医薬組成物で投与することもできるし、あるいは別の医薬組成物で投与することもできる。
【００１４】
本明細書に記載されている他の方法としては、アミリンアゴニスト化合物を投与することによって、脳由来神経栄養因子（Ｂｄｎｆ）のレベルの増大を必要とする患者において脳由来神経栄養因子（Ｂｄｎｆ）のレベルを増大させることを含む。患者はヒトなどの哺乳類であり得る。ヒトは男性または女性であり得る。この方法に関して、患者はエストロゲン欠乏症を有する必要はない。脳由来神経栄養因子のレベルの増大を必要とする患者はＷＡＧＲ症候群を持ち得る。
【００１５】
本明細書に記載されている方法では、アミリンアゴニスト化合物は当技術分野で公知であるか、または２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ヒト＿アミリン（配列番号２０）もしくはその薬学上許容される塩、ＫＣＮＴＡＴＣＶＬＧＲＬＳＱＥＬＨＲＬＱＴＹＰＲＴＮＴＧＳＮＴＹ（配列番号１３７）もしくはその薬学上許容される塩など、本明細書に記載されている。アミリンアゴニスト化合物は薬学上許容される塩の形態であってよく、かつ／またはアミド化されていてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１Ａ−１Ｃ】ラット・アミリン（配列番号１５）で処置した３群の食事性肥満（ＤＩＯ）雌ラットに対する効果を示す。アミリンで処置した卵巣摘出（ＯＶＸ）雌ラット（図１Ｂ）は、アミリンで処置した無傷な雌ラット（図１Ａ）ならびにアミリンおよびエストロゲンで処置したＯＶＸ雌ラット（図１Ｃ）よりも約２倍大きい持続的体重減少を示した。ビヒクル対照に対して＊ｐ＜０．０５。
【図２Ａ−２Ｃ】ラット・アミリン（配列番号１５）で処置した３群のＤＩＯ雌ラットの食物摂取に対する効果を示す。アミリンで処置したＯＶＸ雌ラット（図２Ｂ）は、アミリンで処置した無傷な雌ラット（図２Ａ）ならびにアミリンおよび１７−βエストラジオールで処置したＯＶＸ雌ラット（図２Ｃ）よりも約２倍大きい食物摂取の持続的低減を示した。ビヒクル対照に対して＊ｐ＜０．０５。
【図３Ａ−３Ｃ】脂肪蓄積変化（図３Ａおよび３Ｂ）ならびにビヒクルまたはラット・アミリン（配列番号１５）で処置したＤＩＯ雌ラットの除脂肪率％変化（図３Ｃ）を示す。図３Ａは、ビヒクル補正後の脂肪蓄積変化を示す。アミリンで処置したＯＶＸ雌ラットは、アミリンで処置した無傷な雌ラット（Ｓｈａｍ）ならびにアミリンおよびエストロゲンで処置したＯＶＸ雌ラット（ＯＶＸ＋Ｅ）よりも約４０％大きい、ビヒクル補正後の脂肪蓄積変化を示した。図３Ｂは、図３Ａに示される脂肪蓄積データセットの変化のビヒクル補正前を示す。黒い棒＝アミリン；白い棒＝ビヒクル。ビヒクル対照に対して＊ｐ＜０．０５。
【図４Ａ−４Ｃ】偽手術ラットおよびＯＶＸ雌ラットの体重に対する、さらに３つの例示的アミリンアゴニストの効果を示す。図４Ａは、示された動物が配列番号２０の５０μｇ／ｋｇ／日注入で処置される場合の効果を示す。図４Ｂは、示された動物が配列番号１３７の２μｇ／ｋｇ／日注入で処置される場合の効果を示す。図４Ｃは、示された動物が配列番号１４２の５μｇ／ｋｇ／日注入で処置される場合の効果を示す。ビヒクル対照に対して＊ｐ＜０．０５。
【図５Ａ−５Ｆ】エストロゲン欠乏ＤＩＯラットにおけるアミリンにより誘導される代謝変化を強調して示す。ビヒクルまたはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを連続注入したＤＩＯ偽手術（ＳＨＡＭ）対照または卵巣摘出（ＯＶＸ）ラットに関して、酸素消費率（図５Ａおよび５Ｂ）、基質利用（図５Ｃおよび５Ｄ）およびＸ軸における運動活性（図５Ｅおよび５Ｆ）を〜４８時間にわたって縦型で示す（図５Ａ、５Ｃおよび５Ｅ）か、または明期および暗期の平均値として示す（図５Ｂ、５Ｄおよび５Ｆ）。代謝率のマーカーである酸素消費率ＶＯ２、呼吸商ＲＱ。影を付けたグレーの領域は暗期を示す。グラフを見やすくするために、縦型で示されるデータからエラーバーを除いた。ＳＨＡＭ−ビヒクルに対して＊ｐ＜０．０５、ＳＨＡＭ−アミリンに対して＃ｐ＜０．０５、ＯＶＸ−ビヒクルに対して＾ｐ＜０．０５。
【図６Ａ−６Ｆ】食物摂取の低下でＯＶＸラットの体重に対するアミリンの効果の全てを説明することはできないことを示す。ビヒクルもしくはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを連続注入した、またはアミリン処置動物の平均食物摂取に制限して（ヨークフィード(yoked-fed)）ビヒクルを連続注入したＤＩＯ  ＯＶＸラットに関して、酸素消費率（図６Ａおよび６Ｂ）、基質利用（図６Ｃおよび６Ｄ）およびＸ軸における運動活性（図６Ｅおよび６Ｆ）を〜１２０時間にわたって縦型で示す（図６Ａ、６Ｃおよび６Ｅ）か、または全体の平均値として示す（図６Ｂ、６Ｄおよび６Ｆ）。代謝率のマーカーである酸素消費率ＶＯ２２、呼吸商ＲＥＲ。影を付けたグレーの領域は暗期を示す。グラフを見やすくするために、示されるデータからエラーバーを除いた。ＯＶＸ−ビヒクルに対して＊ｐ＜０．０５、０５ＯＶＸ−アミリンに対して＾ｐ＜０。
【図７Ａ−７Ｊ】ビヒクルまたはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを連続注入したＯＶＸ動物（図７Ａ、７Ｃ、７Ｂおよび７Ｄ）およびＳＨＡＭ（図７Ｅ、７Ｇ、７Ｆおよび７Ｈ）動物の最後野（図７Ａ、７Ｃ、７Ｅおよび７Ｇ；倍率１０倍）または孤束核（図７Ｂ、７Ｄ、７Ｆおよび７Ｈ；倍率２０倍）におけるＢｒｄＵ染色。ＡＰ（図７１）またはＮＴＳ（図７１）における平均細胞総数。ＳＨＡＭビヒクルに対して＊ｐ＜０．０５、ＳＨＡＭアミリン、ＳＨＡＭビヒクルおよびＯＶＸビヒクルに対して＾ｐ＜０．０５。ＮＴＳの数は片側のみ。
【図８Ａ−８Ｃ】海馬におけるＢｒｄＵ染色結果を示す。図８Ａは、ＯＶＸ／アミリン処置動物の海馬におけるＤＡＢによるＢｒｄＵ染色を示す（倍率１０倍）。図８Ｂは、ビヒクルまたはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを連続注入したＯＶＸ動物およびＳＨＡＭ動物のＤＡＢ染色による海馬の平均細胞総数を示す；ＯＶＸビヒクルに対して＊ｐ＜０．０５。海馬の細胞総数は全て片側だけである。図８Ｃは、ＯＶＸ／アミリン処置動物の海馬におけるＢｒｄＵ／ＮｅｕＮ染色（倍率２０倍）を示し、ＢｒｄＵ標識は緑であり、ＮｅｕＮ標識は赤であり、同時局在細胞は黄色に見える。
【図９Ａ−９Ｈ】エストロゲン欠乏ＺＤＦラットにおけるアミリンにより媒介される体重減少の増進を示す。ビヒクルまたはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを４週間連続注入した肥満で糖尿病の偽手術（ＳＨＡＭ）もしくは卵巣摘出（ＯＶＸ）ＺＤＦラット（図９Ａ、９Ｃ、９Ｅおよび９Ｇ）、または無傷な痩せ型ＺＤＦ対照（図９Ｂ、９Ｄ、９Ｆおよび９Ｈの、ビヒクル補正後のパーセント（図９Ａおよび９Ｂ）、または全体的な体重変化（図９Ｃおよび９Ｄ）、累積食物摂取（図９Ｅおよび９Ｆ）および体成分パラメーターの変化（図９Ｇおよび９Ｈ）。ＳＨＡＭ−ビヒクルに対して（または痩せ型ラットではビヒクル対照に対して）＊ｐ＜０．０５、ＳＨＡＭ−アミリンに対して＃ｐ＜０．０５、ＯＶＸ−ビヒクルに対して＾ｐ＜０．０５。
【００１７】
詳細な説明
「エストロゲン欠乏症」とは、生殖齢にある同種の典型的な健常雌よりも血中に循環しているエストロゲンが少ない哺乳類を表す。エストロゲン欠乏症は閉経、閉経前後、閉経後、卵巣機能不全、卵巣摘出、子宮摘出などによって起こり得る。エストロゲン欠乏症は一般に、ヒト女性では、エストラジオールレベルが約３０またはそれ未満であり、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）レベルが約３０またはそれを超える場合に診断が下される。閉経後の雌哺乳類は全てエストロゲン欠乏症を持つと考えられる。閉経期前後の雌哺乳類も、エストロゲンレベルの変動および卵巣機能の停止によって引き起こされるエストロゲン欠乏症を持ち得る。
【００１８】
「エストロゲン」とは、例えば、エストラジオール、エストロン、エストリオールおよびその２以上の組合せを含む。
【００１９】
「ホルモン補充療法」とは、閉経期または閉経後の雌などのエストロゲン欠乏哺乳類に対するホルモンの投与を表す。これらのホルモンは、エストロゲン（その類似体および誘導体を含む）、プロゲステロン（その類似体および誘導体を含む）、テストステロン（その類似体および誘導体を含む）およびその２以上の組合せを含み得る。ホルモン補充療法は、単剤療法および併用療法を含む。治療上有効な量のホルモン補充療法を投与された哺乳類はエストロゲン欠乏ではなくなく。
【００２０】
「肥満」および「過体重」とは、あるべき体重より重い体重を持つ哺乳類を表し、例えば、身体的外観、体格指数（ＢＭＩ）、腹囲／臀囲比、皮下脂肪厚および腹囲によって判定することができる。米国疾病管理予防センターは、過体重をＢＭＩが２５〜２９．９の成人と定義し、肥満をＢＭＩが３０以上の成人と定義している。ＢＭＩは、その人の性別、体重および身長に基づいて計算される。米国疾病管理予防センターは、ウエスト／ヒップ比が１．０より大きい人が過体重であるとしている。
【００２１】
「除脂肪体重」または「除脂肪量」とは脂肪を除いた体重を表し、すなわち、全体重−（マイナス）体脂肪重が除脂肪体重である。除脂肪体重は水中体重測定法、コンピューターチャンバー、二重Ｘ線吸収骨塩定量、皮膚キャリパー、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）および生体電気インピーダンス法（ＢＩＡ）などの方法によって測定することができる。
【００２２】
「体脂肪」または「全体脂肪」とは、体の至る所に現れ、または見出される際の、沈着した脂質を意味する。
【００２３】
「脂肪分布」、「体脂肪分布」または「全体脂肪分布」とは、体に沈着した脂肪の場所を意味する。このような脂肪沈着の場所としては、例えば、皮下、内臓および異所性の脂肪貯蔵所が含まれる。
【００２４】
「皮下脂肪」とは、皮膚表面の直下の脂質沈着を意味する。エストロゲン欠乏哺乳類における皮下脂肪の量は、皮下脂肪の測定に利用できるいずれの方法によっても測定可能である。皮下脂肪の測定方法は、例えば、全開示内容が引用することにより本明細書の一部とされる米国特許第６，５３０，８８６号に記載されているものなど、当技術分野で公知である。
【００２５】
「内臓脂肪」とは、腹腔内脂肪組織としての脂肪の貯蔵所を意味する。内臓脂肪は生命維持に必要な臓器を取り囲み、肝臓によって代謝されて血中コレステロールを生成することができる。
【００２６】
内臓脂肪は多嚢胞性卵巣症候群、代謝症候群および心血管疾患などの症状のリスクの増大との関連が見出されている。
【００２７】
「異所性脂肪貯蔵」とは、除脂肪体重を構成する組織および臓器（例えば、骨格筋、心臓、肝臓、膵臓、腎臓、血管）内およびその周囲の脂肪沈着を意味する。一般に、異所性脂肪貯蔵は、体内の従来の脂肪組織貯蔵所の外側での脂質の蓄積である。
【００２８】
「哺乳類」とは、一般に毛皮または毛髪を有し、後代を出生させ、後代を乳で育てる温血動物を表す。哺乳類にはヒト女性；伴侶動物（例えば、イヌ、ネコ）；農用動物（例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ）；野生動物などが含まれる。一実施形態では、該哺乳類は雌である。一実施形態では、該哺乳類はヒト女性である。一実施形態では、該哺乳類はネコまたはイヌである。一実施形態では、該哺乳類は糖尿病哺乳類、例えば、２型糖尿病を有するヒト女性である。一実施形態では、該哺乳類は肥満で糖尿病の哺乳類、例えば、２型糖尿病を有する肥満のヒト女性である。
【００２９】
「栄養素利用度の低下」とは、体が脂肪として貯蔵するために体が利用可能な栄養素を減らすいずれの手段も含むものとする。言い換えれば、養素利用度の低下は、限定されるものではないが、食欲の減退、満腹感の増大、食物選択／食味忌避への働きかけ、代謝の増大および／または食物吸収の低減もしくは抑制を含む手段によるものであり得る。働きかけを受け得る例示的機構としては、胃内容排出の遅延または腸における食物吸収の低減が含まれる。
【００３０】
「栄養素利用度の増大」とは、体が脂肪として貯蔵するために体が利用可能な栄養素を増やすいずれの手段も含むものとする。言い換えれば、栄養素利用度の増大は、限定されるものではないが、食欲の増進、満腹感の減退、食物選択への作用、食味忌避の軽減、代謝の低減および／または食物吸収の増大を含む手段によるものであり得る。働きかけを受け得る例示的機構としては、胃運動低下の軽減または腸における食物吸収の増大が含まれる。
【００３１】
「アミリンアゴニスト化合物」とは、天然アミリンペプチド、アミリン類似体ペプチドおよびアミリンアゴニスト活性を有するその他の化合物（例えば、小分子）を含む。「アミリンアゴニスト化合物」は、天然源に由来してもよいし、合成することもでき、または組換えＤＮＡ技術から得ることもできる。アミリンアゴニスト化合物はアミリンアゴニスト受容体結合活性を有し、アミノ酸（例えば、天然、非天然またはそれらの組合せ）、ペプチドミメティクス、化学部分などを含み得る。当業者は、アミリン受容体結合アッセイを用いて、またはヒラメ筋検査においてアミリンアゴニスト活性を測定することによってアミリンアゴニスト化合物を認識するであろう。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物は、本明細書、米国特許第５，６８６，４１１号および米国特許公開第２００８／０１７６８０４号（これらの開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）に記載されているものなどのアミリン受容体結合アッセイにおいて、約２００またはそれ未満、約１００またはそれ未満または約５０またはそれ未満のＩＣ５０を有する。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物は、本明細書および米国特許第５，６８６，４１１号に記載されているものなどのヒラメ筋検査において約２０またはそれ未満、約１５またはそれ未満、約１０またはそれ未満または約５またはそれ未満のＥＣ５０を有する（その開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物は、２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ヒト＿アミリン（配列番号２０）と少なくとも９０％または１００％の配列同一性を有する。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物は、アミリン（例えば、ヒト・アミリン（配列番号１）、ラット・アミリン（配列番号１５）など）およびカルシトニン（例えば、ヒト・カルシトニン（配列番号１４０）、サケ・カルシトニン（配列番号１４１）などのペプチドキメラである。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物は、配列番号１３７と少なくとも９０％または１００％の配列同一性を有する。好適な例示的アミリンアゴニスト化合物はまた、米国特許公開第２００８／０２７４９５２（その開示内容は引用することによりそのまま本明細書の一部とされる）に記載される。
【００３２】
本明細書において「類似体」とは、親化合物と同等またはそれより良好な特性を有する化合物を意味する。該類似体は優れた安定性、溶解度、有効性、半減期などを持ち得る。一実施形態では、類似体は、親化合物と少なくとも７５％の配列同一性、親化合物と少なくとも８０％の配列同一性、少なくとも８５％の配列同一性、少なくとも９０％の配列同一性または少なくとも９５％の配列同一性を有する化合物である。例えば、レプチン類似体はヒト・レプチンと少なくとも７５％の配列同一性を持ち、エキセンディン類似体はエキセンディン−４と少なくとも７５％の配列同一性を持ち、ＧＬＰ−１（７−３７）類似体はＧＬＰ−１（７−３７）と少なくとも７５％の配列同一性を持ち得るなどである。
【００３３】
本明細書に記載される化合物の命名法は、（１）そのアミノ酸配列が基にしているペプチド、および（２）そのアミノ酸配列に対して行われた改変を示すために用いられている。上付き数字が前に付いたアミノ酸は、その名称のアミノ酸が、そのアミノ酸配列の特定のアミノ酸位置に本来存在するアミノ酸に取って代わっていることを示す。例えば、１８Ａｒｇ２５，２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２５）は、ヒト・アミリン（すなわち、ｈ−アミリン）のアミノ酸配列に基づき、かつ、下記の置換を有する、すなわち、Ａｒｇがｈ−アミリンの１８番においてＨｉｓに取って代わり、Ｐｒｏがｈアミリンの２５番においてＡｌａに取って代わり、Ｐｒｏがｈ−アミリンの２８番においてＳｅｒに取って代わっているペプチドを表す。ｄｅｓ−１Ｌｙｓ−ｈ−アミリン（配列番号２）とは、ｈ−アミリンの１番のＬｙｓ（すなわち、１Ｌｙｓ）がアミノ酸配列から欠失されている（すなわち、ｄｅｓ−）こと以外はヒト・アミリン（すなわち、ｈ−アミリン）のアミノ酸配列に基づくペプチドを表す。
【００３４】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（Ｉ）：
【００３５】
【化１】
2012523434.tif 000002
［式中、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合を形成し；Ｘａａ１はＬｙｓまたは水素であり；Ｘａａ１３はＡｌａまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１７はＩｌｅまたはＶａｌであり；Ｘａａ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり；Ｘａａ１９はＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ２１はＨｉｓまたはＡｓｎであり；Ｘａａ２０はＡｓｎまたはＳｅｒであり；Ｘａａ２３はＬｅｕまたはＰｈｅであり；Ｘａａ２５はＰｒｏ、ＡｌａまたはＴｈｒであり；Ｘａａ２６はＩｌｅ、ＶａｌまたはＡｌａであり；Ｘａａ２８はＰｒｏ、ＳｅｒまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２９はＰｒｏまたはＳｅｒであり；Ｘａａ３１はＡｓｐまたはＡｓｎであり；Ｘａａ３５はＡｓｎまたはＡｓｐであり；かつＺはＯＨまたはＮＨ２である］
の化合物またはその薬学上許容される塩
【００３６】
式（Ｉ）の化合物の一実施形態では、Ｘａａ２５、Ｘａａ２８およびＸａａ２９の少なくとも１つはプロリンである。式（Ｉ）の化合物の一実施形態では、Ｘａａ２５、Ｘａａ２８およびＸａａ２９の少なくとも２つはプロリンである。
【００３７】
式（Ｉ）の例示的化合物としては、ヒト・アミリン（配列番号１）；ｄｅｓ−１Ｌｙｓ−ｈ−アミリン（配列番号２）；１７Ｉｌｅ１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ−ｈ−アミリン（配列番号３）；１７Ｉｌｅ１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ２６Ｖａｌ２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号４）；２５Ｐｒｏ−ｈ−アミリン（配列番号５）；２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号６）；２９Ｐｒｏ−ｈ−アミリン（配列番号７）；１３Ｔｈｒ１８Ａｒｇ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２６Ａｌａ２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ＿ｈ−アミリン（配列番号８）；１３Ｔｈｒ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２６Ａｌａ２８Ｌｅｕ２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ＿ｈ＿アミリン（配列番号９）；１３Ｔｈｒ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２６Ａｌａ２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ＿ｈ＿アミリン（配列番号１０）；ｄｅｓ−１Ｌｙｓ−１３Ｔｈｒ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２６Ａｌａ２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ＿ｈ＿アミリン（配列番号１１）；およびこれらのペプチドのいずれかの薬学上許容される塩が含まれる。
【００３８】
式（Ｉ）の他の例示的化合物としては、サル・アミリン（配列番号１２）；ネコ・アミリン（配列番号１３）；イヌ・アミリン（配列番号１４）；ラット・アミリン（配列番号１５）；マウス・アミリン（配列番号１６）；ハムスター・アミリン（配列番号１７）；モルモット・アミリン（配列番号１８）；デグー・アミリン（配列番号１９）；およびこれらの化合物のいずれかの薬学上許容される塩が含まれる。
【００３９】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（ＩＩ）：
【００４０】
【化２】
2012523434.tif 000003
［式中、Ｘａａ１はＬｙｓ、Ａｌａ、Ｓｅｒまたは水素（好ましくは、Ｌｙｓまたは水素）であり；Ｘａａ２はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、オルニチン（Ｏｒｎ）またはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ７のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ７のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ７のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ７のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ７はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ２のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ２のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ２のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ２のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ１３はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、ＡｌａまたはＴｈｒ）であり；Ｘａａ１７はＶａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅ（好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ１８はＨｉｓまたはＡｒｇであり；Ｘａａ１９はＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２０はＳｅｒ、Ｔｈｒ、ＧｌｎまたはＡｓｎ（好ましくは、ＳｅｒまたはＡｓｎ）であり；Ｘａａ２１はＡｓｎ、ＧｌｎまたはＨｉｓ（好ましくは、ＡｓｎまたはＨｉｓ）であり；Ｘａａ２３はＰｈｅ、ＬｅｕまたはＴｙｒ（好ましくは、ＰｈｅまたはＬｅｕ）であり；Ｘａａ２６はＩｌｅ、Ｖａｌ、ＡｌａまたはＬｅｕ（好ましくは、Ｉｌｅ、ＶａｌまたはＡｌａ、より好ましくは、ＩｌｅまたはＶａｌであり）；Ｘａａ３１はＡｓｎ、ＡｓｐまたはＧｌｎ（好ましくは、ＡｓｎまたはＡｓｐ）であり；かつ、ＺはＯＨまたはＮＨ２（好ましくは、ＮＨ２）である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である。
【００４１】
一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキル架橋アミンもしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミン；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖などの分子内結合を形成し得る。アルキル鎖は、約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７のアミノ酸残基は分子内結合を形成しない。
【００４２】
一実施形態では、式（ＩＩ）のアミリンアゴニスト化合物は、式：ＫＣＮＴＡＴＣＡＴＱＲＬＡＮＦＬＶＨＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＮＶＧＳＮＴＹ−ＮＨ２（配列番号２０）（式中、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合を形成する）を有する２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン、またはその薬学上許容される塩である。一実施形態では、該化合物は２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリンの酢酸塩である。
【００４３】
式（ＩＩ）の他の例示的化合物としては、ｄｅｓ＿１Ｌｙｓ＿２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２１）；１８Ａｒｇ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２２）；ｄｅｓ＿１Ｌｙｓ＿１８Ａｒｇ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２３）；２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２４）；１７Ｉｌｅ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２５）；２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２６）；１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２７）；１７Ｉｌｅ２３Ｌｅｕ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号２８）；ｄｅｓ＿１Ｌｙｓ＿１７Ｉｌｅ２３Ｌｅｕ２５，２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ−アミリン（配列番号２９）；１７Ｉｌｅ１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３０）；１３Ｔｈｒ１８Ａｒｇ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ａｌａ２８，２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ−ｈ−アミリン（配列番号３１）；およびこれらのペプチドの薬学上許容される塩が含まれる。当業者は、これらの例示的化合物は場合により２番と７番のＣｙｓアミノ酸残基間に分子内ジスルフィド結合を有していてもよいことを認識するであろう。
【００４４】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（ＩＩＩ）：
【００４５】
【化３】
2012523434.tif 000004
［式中、Ｘａａ１はＬｙｓ、Ａｌａ、Ｓｅｒまたは水素（好ましくは、Ｌｙｓまたは水素）であり；Ｘａａ２はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ７のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ７のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ７のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ７のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ７はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ２のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ２のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ２のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ２のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ１３はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、ＴｈｒまたはＡｌａ、より好ましくは、Ａｌａ）であり；Ｘａａ１７はＶａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅ（好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ１８はＨｉｓまたはＡｒｇであり；Ｘａａ１９はＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２０はＳｅｒ、Ｔｈｒ、ＧｌｎまたはＡｓｎ（好ましくは、ＳｅｒまたはＡｓｎ、より好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２１はＡｓｎ、ＧｌｎまたはＨｉｓ（好ましくは、ＡｓｎまたはＨｉｓ、より好ましくは、Ａｓｎ）であり；Ｘａａ２３はＰｈｅ、ＬｅｕまたはＴｙｒ（好ましくは、ＰｈｅまたはＬｅｕ）であり；Ｘａａ２６はＩｌｅ、Ｖａｌ、ＡｌａまたはＬｅｕ（好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ２９はＳｅｒまたはＴｈｒであり；Ｘａａ３１はＡｓｎ、ＡｓｐまたはＧｌｎ（好ましくは、ＡｓｎまたはＡｓｐ）であり；かつ、ＺはＯＨまたはＮＨ２（好ましくは、ＮＨ２）である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である。
【００４６】
一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミン；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖などの分子内結合を形成し得る。アルキル鎖は、約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、オルニチンまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７のアミノ酸残基は分子内結合を形成しない。
【００４７】
式（ＩＩＩ）の例示的化合物としては、１８Ａｒｇ２５，２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３２）；ｄｅｓ＿１Ｌｙｓ＿１８Ａｒｇ２５，２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３３）；１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ２５，２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３４）；２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３５）；ｄｅｓ＿１Ｌｙｓ＿２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３６）；１８Ａｒｇ２３Ｌｅｕ２５Ｐｒｏ２６Ｖａｌ２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３７）；２５，２８Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号３８）；およびこれらのペプチドの薬学上許容される塩が含まれる。
【００４８】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（ＩＶ）：
【００４９】
【化４】
2012523434.tif 000005
［式中、Ｘａａ１はＬｙｓ、Ａｌａ、Ｓｅｒまたは水素（好ましくは、Ｌｙｓまたは水素）であり；Ｘａａ２はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ７のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ７のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ７のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ７のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ７はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ２のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ２のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ２のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ２のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ１３はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、ＴｈｒまたはＡｌａ、より好ましくは、Ａｌａ）であり；Ｘａａ１７はＶａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅ（好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ１８はＨｉｓまたはＡｒｇであり；Ｘａａ１９はＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２０はＳｅｒ、Ｔｈｒ、ＧｌｎまたはＡｓｎ（好ましくは、ＳｅｒまたはＡｓｎ、より好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２１はＡｓｎ、ＧｌｎまたはＨｉｓ（好ましくは、ＡｓｎまたはＨｉｓ、より好ましくは、Ａｓｎ）であり；Ｘａａ２３はＰｈｅ、ＬｅｕまたはＴｙｒ（好ましくは、ＰｈｅまたはＬｅｕ）であり、Ｘａａ２６はＩｌｅ、Ｖａｌ、ＡｌａまたはＬｅｕ（好ましくは、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＡｌａ、より好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ３１はＡｓｎ、ＡｓｐまたはＧｌｎ（好ましくは、ＡｓｎまたはＡｓｐ、より好ましくは、Ａｓｎ）であり；かつ、ＺはＯＨまたはＮＨ２（好ましくは、ＮＨ２）である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である。
【００５０】
一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミン；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖などの分子内結合を形成し得る。アルキル鎖は、約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７のアミノ酸残基は分子内結合を形成しない。
【００５１】
式（ＩＶ）の例示的化合物としては、１３Ｔｈｒ１８Ａｒｇ２１Ｈｉｓ２３Ｌｅｕ２８，２９Ｐｒｏ３１Ａｓｐ＿ｈ＿アミリン（配列番号３９）、２８，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号１３８）およびその薬学上許容される塩が含まれる。当業者は、これらの例示的化合物は２番と７番のＣｙｓアミノ酸残基間に分子内ジスルフィド結合を有することを認識するであろう。
【００５２】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（Ｖ）：
【００５３】
【化５】
2012523434.tif 000006
［式中、Ｘａａ１はＬｙｓ、Ａｌａ、Ｓｅｒまたは水素（好ましくは、Ｌｙｓまたは水素）であり；Ｘａａ２はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ７のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ７のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ７のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ７のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ７はＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓであり、ここで、このアミノ酸は場合によりＸａａ２のアミノ酸と連結して分子内結合を形成してもよく（例えば、ＣｙｓはＸａａ２のＣｙｓとジスルフィド結合を形成し；ＳｅｒはＸａａ２のＳｅｒと結合を形成し；ＡｓｐまたはＬｙｓはＸａａ２のそれぞれＬｙｓまたはＡｓｐと結合を形成する）；Ｘａａ１３はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、ＴｈｒまたはＡｌａ、より好ましくは、Ａｌａ）であり；Ｘａａ１７はＶａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅ（好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ１８はＨｉｓまたはＡｒｇであり；Ｘａａ１９はＳｅｒまたはＴｈｒ（好ましくは、Ｓｅｒ）であり；Ｘａａ２０はＳｅｒ、Ｔｈｒ、ＧｌｎまたはＡｓｎ（好ましくは、ＳｅｒまたはＡｓｎ）であり；Ｘａａ２１はＡｓｎ、ＧｌｎまたはＨｉｓ（好ましくは、ＡｓｎまたはＨｉｓ、より好ましくは、Ａｓｎ）であり；Ｘａａ２３はＰｈｅ、ＬｅｕまたはＴｙｒ（好ましくは、ＰｈｅまたはＬｅｕ）であり；Ｘａａ２６はＩｌｅ、Ｖａｌ、ＡｌａまたはＬｅｕ（好ましくは、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＡｌａ、より好ましくは、ＶａｌまたはＩｌｅ）であり；Ｘａａ２８はＳｅｒまたはＴｈｒであり；Ｘａａ３１はＡｓｎ、ＡｓｐまたはＧｌｎ（好ましくは、ＡｓｎまたはＡｓｐ、より好ましくは、Ａｓｎ）であり；かつ、ＺはＯＨまたはＮＨ２（好ましくは、ＮＨ２）である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である。
【００５４】
一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミン；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖などの分子内結合を形成し得る。アルキル鎖は、約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７は独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７はＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。一実施形態では、Ｘａａ２およびＸａａ７のアミノ酸残基は分子内結合を形成しない。
【００５５】
一実施形態では、式（Ｖ）のアミリンアゴニスト化合物は、２５，２９Ｐｒｏ＿ｈ＿アミリン（配列番号１３９）またはその薬学上許容される塩である。
【００５６】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは式（ＶＩ）：
【００５７】
【化６】
2012523434.tif 000007
［式中、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合を形成し；Ｘａａ１はＬｙｓ、Ｓｅｒまたは不在であり；Ｘａａ８はＡｌａまたはＶａｌであり；Ｘａａ９はＬｅｕまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１０はＧｌｎまたはＧｌｙであり；Ｘａａ１３はＡｌａ、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ１４はＡｓｎまたはＧｌｎであり；Ｘａａ１５はＰｈｅまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１７はＩｌｅ、ＶａｌまたはＨｉｓであり；Ｘａａ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり；Ｘａａ２６はＡｓｐ、ＡｓｎまたはＴｈｒであり；Ｘａａ３０はＡｓｎまたはＡｓｐであり；かつ、ＺはＯＨまたはＮＨ２である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である。
【００５８】
式（ＶＩ）の例示的化合物は配列番号４０〜１３７である。一実施形態では、式（ＶＩＩ）の化合物はＫＣＮＴＡＴＣＶＬＧＲＬＳＱＥＬＨＲＬＱＴＹＰＡＴＮＴＧＳＮＴＹ（配列番号１３７）（場合によりアミド化されていてもよい）またはその薬学上許容される塩である。
【００５９】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは、配列番号１３７のアミノ酸配列と少なくとも８７％の配列同一性を有する。このようなアミリンアゴニストペプチドには、配列番号５１、５２、７６、８８および１１７が含まれる。一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは、配列番号１３７のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する。このようなアミリンアゴニストペプチドとしては、配列番号４４、４５、４９、５８、６６、７１、７５、８６、１０８、１１０、１１３、１１５、１１６、１２０、１２２、１２３、１２４、１３１または１３２が含まれる。一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは、配列番号１３７のアミノ酸配列と少なくとも９３％の配列同一性を有する。このようなアミリンアゴニストペプチドとしては、配列番号５５、６７、７０、７３、８２、８３、８４、８９、９４、１００、１０３、１０６、１０７、１１１、１１２、１２５および１３３が含まれる。一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは、配列番号１３７のアミノ酸配列と少なくとも９６％の配列同一性を有する。このようなアミリンアゴニストペプチドとしては、配列番号４０、４２、４３、４６、４７、４８、５４、６４、６５、６８、６９、７４、７８、７９、８０、８１、８５、９０、９１、９２、９３、９５、９６、９７、９８、９９、１０１、１０２、１０９、１１８、１１９、１２１、１３０および１３７が含まれる。
【００６０】
一実施形態では、アミリンアゴニストペプチドは配列番号４０〜１３７もしくはその薬学上許容される塩、または配列番号４０〜１３７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも８７％、９０％、９３％または９６％の配列同一性を有するアミリンアゴニストペプチドもしくはその薬学上許容される塩であり得る。アミリンアゴニストペプチドは場合によりアミド化されていてもよい。
【００６１】
配列番号４０〜１３７のアミリンアゴニストペプチドは、
配列番号４０  KCNTATCVLGKLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号４１  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPRTNTGSNTY
配列番号４２  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPPTNTGSNTY
配列番号４３  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY
配列番号４４  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPPTNVGSNTY
配列番号４５  KCNTATCVLGRLANFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号４６  ACNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号４７  KCNAATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号４８  KCNTAACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号４９  CANLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５０  イソカプロイル-STAVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５１  CSNASTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５２  CSNLATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５３  CSNLSACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５４  KCNTATCVLGRLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５５  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSGTP
配列番号５６  CSALSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５７  Ac-(Agy)SNLST(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５８  Ac-K(Agy)NTAT(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号５９  イソカプロイル-STAVL(Aib)RLSQELRLQTYPRTNTGSGTP
配列番号６０  イソカプロイル-STAVLG[K(For)]LSQELH[K(For)]LQTYPRTNTGSGTP
配列番号６１  イソカプロイル-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNTGSNTY
配列番号６２  イソカプロイル-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNVGSNTY
配列番号６３  KCNTATCLLQQLQKLLQKLKQYPRTNTGSNTY
配列番号６４  KCNTASCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号６５  KCNTAVCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号６６  KCNTATCVLGRLSQELHRYPRTNTGSNTY
配列番号６７  KCNTATCVLGK(For)LSQELHK(For)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号６８  KCNTA(d-Thr)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号６９  KCNTA(dAh)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７０  Ac-ACNTATCVLGRLSQELHK(PEG5000)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号７１  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７２  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７３  KCNTATCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７４  KCNTSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７５  KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７６  KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY
配列番号７７  KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
配列番号７８  KCNTA(Hse)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号７９  KCNTA(Ahb)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８０  KCNTA(Ahp)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８１  KCNTAT(OPO3H2)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８２  KCNTATCVLG(Orn)LSQELH(Orn)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号８３  KCNTATCVLG(Cit)LSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号８４  KCNTATCVLG(homoK)LSQELH(homoK)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号８５  L-オクチルグリシンKCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８６  N-3,6-ジオキサオクタノイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY
配列番号８７  KCNTATCMLGRYTQDFHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８８  DSNLSTKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号８９  KDNTATKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号９０  CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号９１  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(9Anc)
配列番号９２  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(L-オクチルグリシン)
配列番号９３  N-イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号９４  KCNTATCVLG(homoR)LSQELH(homoR)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号９５  FCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号９６  KCNTATCVLGRLSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号９７  KCNTATCVLGRLSQELH(Orn)LQTYPRTNTGSNTY
配列番号９８  ICNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号９９  1-オクチルグリシン-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１００  イソカプロイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１０１  KCNTATCVLG(Cit)LSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１０２  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)
配列番号１０３  イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)
配列番号１０４  KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSEAF
配列番号１０５  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPTNVGSEAF
配列番号１０６  KCNTATCVLGRLSRSLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１０７  KCNTATCVTHRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１０８  KCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１０９  CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNT
配列番号ｌｌ０  KCNTATCVLGRLSQELHRLQNFVPRTNTGSNTY
配列番号１１１  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSETF
配列番号１１２  ACDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号ｌ１３  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSKAF
配列番号１１４  KCDTATCVTHRLAGLLSRSQTYPRTNTGSNTY
配列番号１１５  KCNTATCVLGRLADALHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１１６  KCNTATCVLGRLAAFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１１７  SCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１１８  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTMPRTNTGSNTY
配列番号１１９  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY
配列番号１２０  KCNTATCVLGRLNEYLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２１  SCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２２  KCNTATCVLGRLTEFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２３  KCNTATCVLGRLAEFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２４  KCNTATCVLGRLTDYLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２５  KCNTATCVLGRLAQFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１２６  KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSNTY
配列番号１２７  KCNTATCVLGRLADFLHRFHTFPRTNTGSNTY
配列番号１２８  KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSGTP
配列番号１２９  CNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３０  KCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３１  KCNTATCVLGRLFDFLHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３２  KCNTATCVLGRLAAALHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３３  TCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３４  CSNLSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
配列番号１３５  KCNTATCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
配列番号１３６  CSNLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
配列番号１３７  KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
である。
【００６２】
本明細書に記載されているアミノ酸配列に関して、Ａｃはアセチルであり；Ａｇｙは（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−ペント−４−エン酸であり；Ａｉｂはα−メチルアラニンであり；４Ａｂｕは４−アミノ酪酸であり；ｄＡｈは（Ｒ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−メチル−酪酸であり；Ａｈｐは（Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタン酸であり；Ａｈｂは（Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−メチル−酪酸であり；Ｈｓｅはホモセリンであり；Ｃｉｔはシトルリンであり；Ｏｒｎはオルニチンであり；９ＡｎｃはＨ２Ｎ（ＣＨ２）８ＣＯＮＨ２であり；ＰＥＧ５０００は約５，０００の分子量を有するポリエチレングリコールである。
【００６３】
他の実施形態では、本明細書に記載されている方法において有用なアミリンアゴニスト化合物は、少なくともループ領域、らせん領域およびＣ末端テールを含む。ループ領域は、式Ｘ−（Ｘａａ１配列）−Ｙ｛式中、ＸおよびＹは結合を形成することができ、かつ、互いに化学的に結合して、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミンなどの分子内結合を形成する側鎖；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖を有する、独立に選択される残基である｝を含むアミノ配列を含む。アルキル鎖は約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、ＸおよびＹは独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、ＸおよびＹはＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、ＸおよびＹはＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、ＸおよびＹはＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。
【００６４】
Ｘａａ１配列は、ＸとＹの間に３、４、５または６アミノ酸のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、Ｘａａ１配列は、Ｙに隣接して１以上の置換または非置換ヒドロキシル含有残基を有する領域を有するアミノ酸配列を含む。例えば、ヒドロキシル含有残基領域は、ＳｅｒまたはＴｈｒのいずれかであるＹに隣接する３個のアミノ酸のうち少なくとも２個を持ち得る。Ｘａａ１配列中の他のアミノ酸はいずれのアミノ酸であってもよい。特定の実施形態では、Ｘａａ１配列は３アミノ酸である。他の実施形態では、Ｘａａ１配列は４アミノ酸である。さらに他の実施形態では、Ｘａａ１配列は５アミノ酸である。さらに他の実施形態では、Ｘａａ１配列は６アミノ酸である。よって、Ｘａａ１は、Ｘａａ２Ｘａａ３Ｘａａ４Ｘａａ５Ｘａａ６Ｘａａ７により表すことができる。特定の実施形態では、Ｘａａ２、Ｘａａ３および／またはＸａａ４は不在であってもよい。特定の実施形態では、Ｘａａ５、Ｘａａ６およびＸａａ７はヒドロキシ含有残基領域を含む。従って、３個のアミノ酸のうち少なくとも２個はＳｅｒ、ｈＳｅｒ、Ｔｈｒ、ａｌｌｏＴｈｒ、ｄ−Ｔｈｒまたは他の、その非天然類似体であり得る。Ｘａａ２は任意のアミノ酸であるか、または不在であってもよく、Ｘａａ３は任意のアミノ酸であるか、または不在であってもよく、Ｘａａ４は任意のアミノ酸であるか、または不在であってもよく、Ｘａａ５は、Ｘａａ６がＳｅｒまたはＴｈｒであり、かつ、Ｘａａ７がＳｅｒまたはＴｈｒである場合にはいずれのアミノ酸であってもよく、Ｘａａ６は、Ｘａａ５がＳｅｒまたはＴｈｒであり、かつ、Ｘａａ７がＳｅｒまたはＴｈｒである場合にはいずれのアミノ酸であってもよく、Ｘａａ７は、Ｘａａ５がＳｅｒまたはＴｈｒであり、かつ、Ｘａａ６がＳｅｒまたはＴｈｒである場合にはいずれのアミノ酸であってもよい。よって、ある特定の実施形態では、Ｘａａ１は、Ｘａａ２は不在；Ｘａａ３はＡｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｓｐまたは不在；Ｘａａ４はＡｓｎ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｙまたは不在；Ｘａａ５はＡｌａ、Ｌｅｕ、ＴｈｒまたはＳｅｒ；Ｘａａ６はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒ；かつ、Ｘａａ７はＡｌａ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｈｓｅ、（Ｓ）−２−アミオ(amio）−３−ヒドロキシメチルブタン酸（Ａｈｂ）、（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３ヒドロキシ−メチルペンタン酸（Ａｈｐ）、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｔｈｒまたはその誘導体として表すことができる。他の実施形態では、Ｘａａ１は、Ｘａａ２は不在、Ｘａａ３はＳｅｒ、Ｇｌｙまたは不在；Ｘａａ４はＡｓｎまたはＡｓｐ；Ｘａａ５はＡｌａ、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＬｅｕ；Ｘａａ６はＡｌａ、ＴｈｒまたはＳｅｒ；かつ、Ｘａａ７はＳｅｒ、Ｄ−Ｔｈｒ、ａｌｌｏＴｈｒまたはＴｈｒとして表すことができる。特定の実施形態では、ループ領域は、Ｘａａ３がＡｌａであるか、Ｘａａ３がＳｅｒであるか、またはＸａａ３がＧｌｙである場合の上記のＸａａ１表現を含む。その代わりにまたはその上に、ループ領域は、Ｘａａ４がＡｌａであるか、Ｘａａ４がＡｓｎであるか、Ｘａａ４がＡｓｐであるか、またはＸａａ４がＧｌｙである場合の上記のＸａａ１表現を含む。その代わりにまたはその上に、ループ領域は、Ｘａａ５がＡｌａであ���か、Ｘａａ５がＴｈｒであるか、またはＸａａ５がＬｅｕである場合の上記のＸａａ１表現を含む。その代わりにまたはその上に、ループ領域は、Ｘａａ６がＳｅｒであるか、またはＸａａ６がＡｌａである場合の上記のＸａａ１表現を含む。その代わりにまたはその上に、ループ領域は、Ｘａａ７がＴｈｒであるか、またはＸａａ７がＤ−Ｔｈｒである場合の上記のＸａａ１表現を含む。さらに、このループ領域には置換、挿入、欠失および／または誘導体化などの１以下、２以下または３以下の修飾が行えると考えられる。
【００６５】
ループ領域の例としては、限定されるものではないが、Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ａ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｄ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｇ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ａ−Ａ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−ｄＴｈｒ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｔ（ＯＰＯ３Ｈ２）−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｓ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ａ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｖ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｈｓｅ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ａｈｂ−Ｃ；Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ａｈｐ−Ｃ；Ｃ−Ｓ−Ｎ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｇ−Ｎ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｓ−Ａ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｓ−Ｎ−Ａ−Ｓ−Ｔ−Ｃ；Ｃ−Ｓ−Ｎ−Ｌ−Ａ−Ｔ−Ｃ；およびＣ−Ｓ−Ｎ−Ｌ−Ｓ−Ａ−Ｃが挙げられる。従前に示したように、さらに、このループ領域には置換、挿入、欠失および／または誘導体化などの１以下、２以下または３以下の修飾が行えると考えられる。
【００６６】
ループ領域はさらに、Ｎ末端に修飾または付加的アミノ酸をさらに含んでもよい。このような修飾としては、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、オクチルグリシン、Ｉｓｏｃａｐ、Ｆｍｏｃ−３，６−ジオキシオクタン酸、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンスクシニミック酸(tridecanamine succinimic acid)、アセチルなどの化合物および／または溶解度、送達、シグナル伝達に関わる基の付加が含まれる。例示的修飾ループとしては、Ｘａａ１の配列へのＬｙｓの付加またはＸａａ１の配列へのＩｌｅの付加が含まれる。例えば、修飾ループ領域はＫ−Ｃ−Ｎ−Ｔ−Ａ−Ｔ−Ｃであり得る。特定の実施形態では、ループ領域のＮ末端における付加および／または修飾はループ領域を変化させ得る。例えば、ループ領域は次のように修飾することができる：シクロ（２，７）１−７ｈアミリン、シクロ（Ａｓｐ２Ｌｙｓ７）１−７ｈアミリン、Ｎ−イソカプロイル１−７ｈアミリン、Ｎ−３，６ジオキサオクタノイル１−７ｈアミリン、Ｌ−オクチルグリシン１−７ｈアミリン、アセチル（Ａｇｙ２，Ａｇｙ７）１−７ｈアミリン（ここで、Ａｇｙはアリルグリシンである）、アセチル（Ａｌａ１）１−７ｈアミリン、（Ｔｈｒ１，Ａｓｐ３）１−７ｈアミリン、Ｉｓｏｃａｐ（Ａｌａ７）５−７ｓＣＴ、アセチル（Ａｇｙ２，Ａｇｙ７）１−７ｓＣＴおよびシクロ（１，７）（Ａｓｐ１，Ｌｙｓ７）１−７ｓＣＴ。従って、Ｉｓｏｃａｐ（７Ａｌａ）５−７ｓＣＴの例を考慮すれば、特定の実施形態は、アミノ酸Ｘａａ２〜Ｘａａ５が不在であるようなループ領域のＮ末端における修飾を含む。
【００６７】
本願を通して、アミノ酸配列は、参照ペプチドの隣に位置ａ−ｂのアミノ酸として表すことができる。本願では、参照ペプチドはヒト・アミリン（ｈアミリン）（配列番号１）；ラット・アミリン（ｒアミリン）（配列番号１５）；サケ・カルシトニン（ｓＣＴ）ＣＳＮＬＳＴＣＶＬＧＫＬＳＱＥＬＨＫＬＱＴＹＰＲＴＮＴＧＳＧＴＰ（配列番号１４１）；およびヒト・カルシトニン（ｈＣＴ）ＣＧＮＬＳＴＣＭＬＧＴＹＴＱＤＦＮＫＦＨＴＦＰＱＴＡＩＧＶＧＡＰ（配列番号１４０）である。例えば前段で、１−７ｈアミリンは、ヒト・アミリン（配列番号１）の１番〜７番（含む）のアミノ酸配列を表す。参照ペプチドに対する修飾は、修飾の次に修飾の位置として示すことができる。例えば、（Ａｓｐ２，Ｌｙｓ７）１−７ｈアミリンは、２番にＣｙｓからＡｓｐへの修飾、そして７番にＣｙｓからＬｙｓへの修飾を有するヒト・アミリンの１〜７番のアミノ酸配列を表す。
【００６８】
化合物のαらせん領域は約８〜２３アミノ酸長であり得る。特定の実施形態では、αらせん領域は両親媒性(amphiphatic)である。特定の実施形態では、αらせん領域は約３〜６回のらせんターンを含む。特定の実施形態では、αらせん領域は、３、４、５または６回のらせんターンを含む。他の実施形態では、αらせん領域は、約３、４、５または６回のらせんターンに相当する強固な構造である。理想的ならせんの例はＬＬＱＱＬＱＫＬＬＱＫＬＫＱＹである。特定の実施形態では、αらせんは両親媒性(ampliphatic)構造である。よって、この種の構造を提供する望ましいアミノ酸の特性を選択すればよい。
【００６９】
カルシトニンαらせん領域、アミリンとカルシトニンαらせん領域の組合せ、もしくはその一部、および／またはいくつかのＣＧＲＰエレメントが本ペプチドのαらせん領域に望ましいことが判明している。ループ領域の場合と同様に、αらせん領域は任意のアミリンまたはカルシトニンおよびそれらの類似体に由来し得ると考えられる。よって、特定の実施形態では、αらせん領域は、カルシトニンまたはカルシトニン類似体のαらせん領域の少なくとも一部である。他の実施形態では、αらせん領域は、カルシトニンまたはカルシトニン類似体のαらせん領域の少なくとも一部、およびアミリンまたはアミリン類似体のαらせん少なくとも一部である。さらに他の実施形態では、新規化合物のαらせん領域はＣＧＲＰエレメントを含む。さらに、置換、挿入、欠失および／または誘導体化などの１以下、２以下、３以下、４以下または５以下のさらなる修飾を含み得ると考えられる。
【００７０】
特定の実施形態では、αらせん領域は、ｓＣＴの８番〜ｓＣＴの１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６または２７番のアミノ酸を含み得る。さらに、αらせん領域は、同種または異種のカルシトニンまたはカルシトニン類似体αらせん領域の２以上の位置、例えば、８−２１ｓＣＴ  １９−２７ｓＣＴ；８−２１ｓＣＴ  １８−２７ｓＣＴ；または８−１６ｈＣＴ  １７−２７ｓＣＴ；または（Ａｒｇ１１）８−１６ｈＣＴ（Ａｒｇ１８）１７−２７ｓＣＴを含み得る。その代わりにまたはその上に、上記８−１８ｓＣＴ  ８−２７ｓＣＴのαらせんは、（Ａｉｂ１０）、（Ａｒｇ１１）、（Ｏｒｎ１１）、（ｈＡｒｇ１１）、（Ｃｉｔ１１）、（ｈＬｙｓ１１）、（Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１１）、（Ａｉｂ１７）、（Ａｒｇ１８）、（Ｏｒｎ１８）、（ｈＡｒｇ１８）、（Ｃｉｔ１８）、（ｈＬｙｓ１８）、（Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１８）、（Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００）１８）、（Ｌｅｕ２２）、（Ｐｒｏ２４）またはその任意の組合せのうち１以上の置換をさらに含み得る。
【００７１】
一実施形態では、αらせん領域は、（αらせん領域Ｉ型）Ｒ１−Ｖａｌ  Ｌｅｕ  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｇｌｎ  Ｘａａ１５  Ｌｅｕ  Ｘａａ１  Ｘａａ１８  Ｌｅｕ  Ｇｌｎ  Ｔｈｒ  Ｘａａ２２  Ｐｒｏ  Ｘａａ２４  Ｔｈｒ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ−Ｒ１（ここで、Ｘａａ１０はＧｌｙまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１１はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓまたはＬｙｓ（ｆｏｒ）であり；Ｘａａ１５はＧｌｕまたはＰｈｅであり；Ｘａａ１７はＨｉｓまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１８はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓ、Ｌｙｓ（ｆｏｒ）、Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００）であり；Ｘａａ２２はＴｒｙまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２４はＡｒｇまたはＰｒｏであり；あるいはＲ１は不在であるか、または１〜４個の付加的アミノ酸を含む）により表すことができる。
【００７２】
αらせん領域Ｉ型の例としては、８−１８ｓＣＴ、８−２１ｓＣＴ、８−２４ｓＣＴ、８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１）８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１８）８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８）８−１８ｓＣＴ、（１１Ｏｒｎ  １８Ｏｒｎ）８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｃｉｔ）８−１８ｓＣＴ、（１１ｈＡｒｇ  １８ｈＡｒｇ）８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ｏｒｎ１８）８−１８  ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  Ａｒｇ１８）８−１８ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  １８Ｃｉｔ）８−１８ｓＣＴ、（１１ｈＬｙｓ  １８ｈＬｙｓ）８−１８ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ａｒｇ  １７Ａｉｂ  Ａｒｇ１８）８−１８ｓＣＴ、（１１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−１８ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）  １７Ａｉｂ  １８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００））８−１８ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１）８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１８）８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ａｒｇ）８−２１ｓＣＴ、（１１Ｏｒｎ  １８Ｏｒｎ）８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｃｉｔ）８−２１ｓＣＴ、（１１ｈＡｒｇ  １８ｈＡｒｇ）８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｏｒｎ）８２１ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  Ａｒｇ１８）８−２１ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  １８Ｃｉｔ）８−２１ｓＣＴ、（１１ｈＬｙｓ  １８ｈＬｙｓ）８−２１ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  Ａｒｇ１１  １７Ａｉｂ  Ａｒｇ１８）８−２１ｓＣＴ、（１１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２１ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１７Ａｉｂ  １８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００））８−２１ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１８）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８  ２２Ｌｅｕ）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８  ２４Ｐｒｏ）８−２４ｓＣＴ、（１１Ｏｒｎ  １８Ｏｒｎ）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｃｉｔ）８−２４ｓＣＴ、（１１ｈＡｒｇ  １８ｈＡｒｇ）８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｏｒｎ）８−２４ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  Ａｒｇ１８）８−２４ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  １８Ｃｉｔ）８−２４ｓＣＴ、（１１ｈＬｙｓ  １８ｈＬｙｓ）８−２４ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ａｒｇ  １７Ａｉｂ  Ａｒｇ１８）８−２４ｓＣＴ、（１１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２４ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）１７Ａｉｂ  １８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００））８−２４ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１８）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８  ２２Ｌｅｕ）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８  ２４Ｐｒｏ）８−２７ｓＣＴ、（１１Ｏｒｎ  １８Ｏｒｎ）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｃｉｔ）８−２７ｓＣＴ、（１１ｈＡｒｇ  １８ｈＡｒｇ）８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｏｒｎ）８−２７ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  Ａｒｇ１８）８−２７ｓＣＴ、（１１Ｃｉｔ  １８Ｃｉｔ）８−２７ｓＣＴ、（１１ｈＬｙｓ  １８ｈＬｙｓ）８−２７ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  Ａｒｇ１１  １７Ａｉｂ  Ａｒｇ１８）８−２７ｓＣＴ、（１１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）  １８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２７ｓＣＴ、（１０Ａｉｂ  １１Ｌｙｓ（ｆｏｒ）  １７Ａｉｂ  １８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  １８Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００））８−２７ｓＣＴ、（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８）８−２１ｓＣＴ−１９−２７ｓＣＴおよび（Ａｒｇ１１  Ａｒｇ１８）８−２１ｓＣＴ−（１８Ｌｅｕ）１８−２７ｓＣＴが挙げられる。
【００７３】
特定の実施形態では、αらせん領域は、アミリンまたはアミリン類似体のαらせん領域の一部とカルシトニンまたはカルシトニン類似体のαらせん領域の一部を含み得る。αらせん領域は、ｈアミリンの８番〜ｈアミリンの１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９番のアミノ酸と、ｓＣＴの１３、１４、１５、１６、１７、１８および１９番〜ｓＣＴの１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６または２７番のアミノ酸を含み得る。その代わりにまたはその上に、上記のアミリンおよびカルシトニンのαらせん領域は、（８Ｖａｌ）、（９Ｌｅｕ）、（９Ｍｅｔ）、（１０Ｇｌｙ）、（１０Ｈｉｓ）、（１２Ｔｈｒ）、（１３Ｔｈｒ）、（１３Ａｓｎ）、（１３Ｐｈｅ）、（１３Ｔｙｒ）、（１４Ａｒｇ）、（１４Ａｌａ）、（１４Ａｓｐ）、（１４Ｇｌｕ）、（１４Ｇｌｎ）、（１４Ｔｈｒ）、（１４Ｇｌｙ）、（１５Ｌｅｕ）、（１５Ｓｅｒ）、（１５Ｇｌｕ）、（１５Ａｌａ）、（１５Ｔｙｒ）、（１６Ａｓｐ）、（１７Ｓｅｒ）、（１７Ｐｈｅ）、（１７Ａｒｇ）、（１７Ａｉｂ）、（Ａｒｇ１８）、（１８Ｏｒｎ）、（１８ｈＡｒｇ）、（１８Ｃｉｔ）、（１８ｈＬｙｓ）、（１８Ｌｙｓ（ｆｏｒ））、（１８Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００））、（１９Ｐｈｅ）、（２０Ｈｉｓ）、（２１Ａｓｎ）、（２２Ｍｅｔ）、（２２Ｖａｌ）、（２２Ｐｈｅ）、（２２Ｌｅｕ）、（２４Ｐｒｏ）またはその任意の組合せの１以上の置換をさらに含み得る。特定の実施形態では、αらせん領域のアミノ酸数は少なくとも１０である。他の実施形態では、αらせん領域のアミノ酸数は１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３である。他の実施形態では、αらせん領域のアミノ酸数は２４以上である。
【００７４】
一実施形態では、αらせん領域は、（αらせん領域ＩＩ型）Ｒ１−Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１0  Ｒ  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｐ  Ｘａａ２４  ＴＮＴ−Ｒ１（ここで、Ｘａａ８はＡｌａまたはＶａｌであり；Ｘａａ９はＴｈｒ、ＭｅｔまたはＬｅｕであり；Ｘａａ１０はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓであり；Ｘａａ１２はＬｅｕまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１３はＡｌａ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、ＳｅｒまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１４はＡｓｎ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；Ｘａａ１５はＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、ＡｓｐまたはＴｙｒであり；Ｘａａ１６はＬｅｕまたはＡｓｐであり；Ｘａａ１７はＶａｌ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、ＰｈｅまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１８はＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓ、Ｌｙｓ（ｆｏｒ）またはＬｙｓ（ＰＥＧ５０００）であり；Ｘａａ１９はＬｅｕ、ＳｅｒまたはＰｈｅであり；Ｘａａ２０はＧｌｎまたはＨｉｓであり；Ｘａａ２１はＴｈｒまたはＡｓｎであり；Ｘａａ２２はＴｙｒ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、ＬｅｕまたはＭｅｔであり；Ｘａａ２４はＡｒｇまたはＰｒｏであり；かつ、Ｒ１は不在であるか、または１〜４個の付加的アミノ酸を含む）により表すことができる。
【００７５】
ＩＩ型αらせん領域の例としては、限定されるものではないが、（８Ｖａｌ  ９Ｌｅｕ  １０Ｇｌｙ）１１−１５ｈアミリン１６−２７ｓＣＴ、（８Ｖａｌ  ９Ｌｅｕ  １０Ｇｌｙ）１１−１５ｈアミリン（１８Ａｒｇ）１６−２７ｓＣＴ、８−１２ｈアミリン（１８Ａｒｇ）１３−２７ｓＣＴ、８−１８ｈアミリン１９−２３ｓＣＴ、８−１８Ｈアミリン１９−２７ｓＣＴ、（１５Ｇｌｕ  １８Ａｒｇ）８−１８ｈアミリン１９−２４ｓＣＴ、（１４Ａｒｇ  １５Ｓｅｒ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｌａ  １５Ａｌａ）８−１８ｈアミリン１９−２７ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ  １５Ａｌａ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン１９−２３ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン１９−２７ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｌａ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ｇｌｕ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ｔｈｒ  １４Ａｓｐ  １５Ｔｙｒ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ｇｌｎ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（１３Ａｓｎ  １４Ｇｌｕ  １５Ｔｙｒ）８−１８ｈアミリン１９−２７ｓＣＴ、（１３Ｐｈｅ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン１９−２７ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン（１５Ｇｌｕ  １８Ａｒｇ）８−１８ｈアミリン１９−２４ｓＣＴ、（１９Ｐｈｅ  ２２Ｐｈｅ）１９−２７ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン（１９Ｐｈｅ  ２０Ｈｉｓ  ２２Ｐｈｅ）１９−２７ｓＣＴ、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ）８−１８ｈアミリン（１９Ｐｈｅ  ２２Ｐｈｅ）１９−２７ｓＣＴ、（９Ｔｈｒ  １０Ｈｉｓ）８−１８ｈアミリン１９−２２ｓＣＴ、（９Ｔｈｒ  １０Ｈｉｓ  １４Ｇｌｙ  １５Ｌｅｕ  １７Ｓｅｒ  １８Ａｒｇ）８−１９ｈアミリン２０−２３ｓＣＴ、８−１８ｈアミリン（２１Ａｓｎ  ２２Ｐｈｅ  ２３Ｖａｌ）１９−２３ｓＣＴ、８−１８ｈアミリン（２２Ｍｅｔ）１９−２７ｓＣＴ、８−１８ｈアミリン（２２Ｖａｌ）１９−２７ｓＣＴ、（９Ｍｅｔ  １２Ｔｈｒ  １３Ｔｙｒ  １４Ｔｈｒ  １５Ｇｌｕ  １６Ａｓｐ  １７Ｐｈｅ）８−１７ｈアミリン（１８Ａｒｇ）１８−２０ｓＣＴ）が挙げられる。他の実施形態では、新規化合物は、ｓＣＴの２２、２３、２４、２５、２６または２７番に相当する位置で終わるαらせんを有する上記例示的化合物の変種を含む。言い換えれば、化合物８−１８ｈアミリン１９−２４ｓＣＴは、特に、この化合物が単に２４番の位置までに末端切断された上記の８−１８ｈアミリン１９−２７ｓＣＴであるとも言える。別の例として、化合物（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ  １５Ａｌａ）８−１８ｈアミリン１９−２３は、特に、（１３Ａｌａ  １４Ａｓｐ  １５Ａｌａ）８−１８ｈアミリン１９−２２に上記の言葉を当てはめて記載される。
【００７６】
特定の実施形態では、Ｃ末端テールは、ｈアミリンの２７、２８、２９、３０、３１、３２または３３番〜３６または３７番のアミノ酸を含む。他の実施形態では、Ｃ末端テールは、ｓＣＴの２７または２８番〜３２番のアミノ酸を含むが、ループ領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来し、かつ、αらせん領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来する場合には、Ｃ末端テールの最後の位置はＰｒｏ、Ｈｙｐ、ホモセリン（Ｈｓｅ）またはＨｓｅの誘導体ではない。その代わりにまたはその上に、上記のアミリンおよびカルシトニンのαらせんは、（２７Ｔｙｒ）ｈアミリン、（２９Ａｒｇ）ｈアミリン、（３２Ｖａｌ）ｈアミリン、（３２Ｔｈｒ）ｈアミリン、（３４Ｇｌｕ）ｈアミリン、（３５Ｌｙｓ）ｈアミリン、（３６Ｐｈｅ）ｈアミリン、（３６Ａｌａ）ｈアミリン、（３７Ｐｈｅ）ｈアミリン、（３０Ａｓｎ）ｓＣＴ、（３２Ｔｙｒ）ｓＣＴまたはその任意の組合せの１以上の置換をさらに含み得る。
【００７７】
一実施形態では、Ｃ末端テールは、Ｘａａ２８  Ｘａａ２９  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２  Ｘａａ３３  Ｇ  Ｘａａ３５  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８により表すことができ、ここで、Ｘａａ２８はＬｙｓ、Ｔｙｒまたは不在であり；Ｘａａ２９はＳｅｒ、Ｐｒｏまたは不在であり；Ｘａａ３０はＳｅｒ、Ｐｒｏ、Ａｒｇまたは不在であり；Ｘａａ３１はＴｈｒまたは不在であり；Ｘａａ３２はＡｓｎまたは不在であり；Ｘａａ３３はＶａｌ、Ｔｈｒまたは不在であり；  Ｘａａ３５はＳｅｒ、Ｇｌｕであり；Ｘａａ３６はＡｓｎ、ＬｙｓまたはＧｌｙであり；Ｘａａ３７はＴｈｒ、ＰｈｅまたはＡｌａであり；Ｘａａ３８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏまたは不在であり；ただし、ループ領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来し、かつ、αらせん領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来する場合には、Ｃ末端テールの最後の位置はＰｒｏ、Ｈｙｐ、ホモセリン（Ｈｓｅ）またはＨｓｅの誘導体ではない。
【００７８】
Ｃ末端テールの例としては、限定されるものではないが、２７−３７ｒアミリン、（２７Ｔｙｒ  ２９Ａｒｇ  ３２Ｔｈｒ）２７−３７ｒアミリン、（２９Ａｒｇ  ３２Ｔｈｒ）２８−３７ｒアミリン、３０−３７ｈアミリン、（３２Ｔｈｒ）３０−３７ｈアミリン、（３５Ｌｙｓ  ３６Ａｌａ  ３７Ｐｈｅ）３０−３７ｈアミリン、３０−３６ｈアミリン、（３２Ｖａｌ）  ３０−３６ｈアミリン、（３４Ｇｌｕ  ３６Ｐｈｅ）３０−３６ｈアミリン、３１−３７ｈＡｍｙｉｎ、３１−３６ｈアミリン、３３−３６ｈアミリン、３３−７ｈアミリン、２８−３２ｓＣＴ、（３０Ａｓｎ  ３２Ｔｙｒ）２８−３２  ｓＣＴおよび２７−３２  ｓＣＴが挙げられる。他の実施形態では、Ｃ末端テールはアミノ酸配列ＫＳＮＦＶＰＴＮまたはＳＮＦＶＰＴＮＶを含む。
【００７９】
さらに、前段に記載されているようにＣ末端テールには置換、挿入、欠失および／または誘導体化などの１以下、２以下または３以下の修飾を行えると考えられる。新規化合物のＣ末端テールは、Ｃ末端に修飾または付加的アミノ酸をさらに含んでもよい。このような修飾としては、Ｌｙｓ、４個までのＬｙｓ、Ｌ−オクチルグリシン、４ＡＢＵ（４アミノ酪酸）、９Ａｎｃ（９−アミオノナン酸(9-amiononanoic acid)）などの化合物および／または溶解度、安定性または送達に関わる基の付加が含まれる。例としては、３３−３７ｈアミリンＬ−オクチルグリシン、３３−３７ｈアミリン４ＡＢＵおよび３３−３７ｈアミリン９Ａｎｃが挙げられる。
【００８０】
さらに別の態様では式（ＶＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘ  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｙ  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  Ｘａａ２９  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２［式中、Ｘａａ１はＡ、Ｃ、ｈＣ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、ｈＫ、Ｒ、ｈＲ、Ｓ、Ｈｓｅ（ホモＳＥＲ）、Ｔ、Ｇ、Ｑ、Ｎ、Ｍ、Ｙ、Ｗ、Ｐ、Ｈｙｐ（ヒドロキシプロリン）、Ｈ、Ｖまたは不在であり；Ｘａａ３はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、Ｇ、Ｖ、Ｒ、Ｋ、ｈＫ、ｈＲ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍまたは不在であり；Ｘａａ４はＡ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｔ、Ｖ、Ｍまたは不在であり；Ｘａａ５はＡ、Ｓ、Ｔ、Ｈｓｅ、Ｙ、Ｖ、Ｉ、ＬまたはＭであり；Ｘａａ６はＴ、Ａ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｙ、Ｖ、Ｉ、ＬまたはＭであり；Ｘａａ８はＡ、Ｖ、Ｉ、Ｌ、ＦまたはＭであり；Ｘａａ９はＬ、Ｔ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｖ、ＩまたはＭであり；Ｘａａ１０はＧ、Ｈ、Ｑ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、ｈＫまたはｈＲであり；Ｘａａ１１はＫ、Ｒ、Ｑ、Ｎ、ｈＫ、ｈＲまたはＨであり；Ｘａａ１２はＬ、Ｉ、Ｖ、Ｆ、Ｍ、ＷまたはＹであり；Ｘａａ１３はＡ、Ｆ、Ｙ、Ｎ、Ｑ、Ｓ、ＨｓｅまたはＴであり；Ｘａａ１４はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、Ｈ、ｈＲまたはｈＫであり；Ｘａａ１５はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｌ、Ｓ、Ｙ、Ｉ、ＶまたはＭであり；Ｘａａ１６はＬ、Ｆ、Ｍ、Ｖ、ＹまたはＩであり；Ｘａａ１７はＨ、Ｑ、Ｎ、Ｓ、Ｈｓｅ、ＴまたはＶであり；Ｘａａ１８はＫ、ｈＫ、Ｒ、ｈＲ、Ｈ、ｕ（Ｃｉｔ）またはｎ（Ｏｒｎ）であり；Ｘａａ１９はＦ、Ｌ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｖ、Ｉ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ２０はＨ、Ｒ、Ｋ、ｈＲ、ｈＫ、Ｎ、Ｑまたは不在であり；Ｘａａ２１はＴ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｖ、Ｉ、Ｌ、Ｑ、Ｎまたは不在であり；Ｘａａ２２はＦ、Ｌ、Ｍ、Ｖ、ＹまたはＩであり；Ｘａａ２３はＰまたはＨｙｐであり；Ｘａａ２４はＰ、Ｈｙｐ、Ｒ、Ｋ、ｈＲ、ｈＫまたはＨであり；Ｘａａ２５はＴ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｖ、Ｉ、Ｌ、ＦまたはＹであり；Ｘａａ２６はＮ、Ｑ、ＤまたはＥであり；Ｘａａ２７はＴ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、ＩまたはＬであり；Ｘａａ２８はＧまたはＡであり；Ｘａａ２９はＳ、Ｈｓｅ、Ｔ、Ｖ、Ｉ、ＬまたはＹであり；Ｘａａ３０はＥ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、Ｄ、Ｒ、ｈＲ、ｈＫ、ＨまたはＱであり；Ｘａａ３１はＡ、Ｔ、Ｓ、Ｈｓｅ、Ｖ、Ｉ、Ｌ、ＦまたはＹであり；かつ、Ｘａａ３２はＦ、Ｐ、Ｙ、Ｈｓｅ、Ｓ、ＴまたはＨｙｐであり；ＸとＹは結合を生じることができ、互いに化学的に結合して、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミンなどの分子内結合を形成する側鎖；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖を有する、独立に選択される残基である］のアミノ酸配列を含むペプチドを含む以下のペプチドが本明細書に記載されている方法において使用可能である���アルキル鎖は約１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。特定の実施形態では、分子内結合はジスルフィド結合、アミド結合、イミン結合、アミン結合、アルキル結合およびアルケン結合であり得る。特定の実施形態では、ＸおよびＹは独立にＳｅｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ＯｒｎまたはＣｙｓから選択される。特定の実施形態では、ＸおよびＹはＣｙｓおよびＣｙｓである。他の実施形態では、ＸおよびＹはＳｅｒおよびＳｅｒである。さらに他の実施形態では、ＸおよびＹはＡｓｐおよびＬｙｓまたはＬｙｓおよびＡｓｐである。
【００８１】
さらに別の態様では、該ペプチドは、式（ＶＩＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  Ｓｅｒ  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２［式中、Ｘａａ１はＡ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｉ、Ｋ、Ｓ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ２はＣ、Ｄ、Ｓまたは不在であり；Ｘａａ３はＡ、Ｄ、Ｎまたは不在であり；Ｘａａ４はＡ、Ｌ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ５はＡまたはＳであり；Ｘａａ６はＴ、Ａ、ＳまたはＶであり；Ｘａａ７はＣ、ＫまたはＡであり；Ｘａａ８はＡ、Ｖ、ＬまたはＭであり；Ｘａａ９はＬまたはＴであり；Ｘａａ１０はＧ、ＨまたはＱであり；Ｘａａ１１はＫ、Ｒ、ＱまたはｈＡｒｇであり；Ｘａａ１２はＬ、ＷまたはＹであり；Ｘａａ１３はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、ＳまたはＴであり；Ｘａａ１４はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｎ、Ｋ、ＱまたはＲであり；Ｘａａ１５はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｌ、ＳまたはＹであり；Ｘａａ１６はＬまたはＦであり；Ｘａａ１７はＨ、Ｑ、ＳまたはＶであり；Ｘａａ１８はＫ、Ｒ、ｈＡｒｇ、ｕ（Ｃｉｔ）またはｎ（Ｏｒｎ）であり；Ｘａａ１９はＦ、Ｌ、Ｓまたは不在であり；Ｘａａ２０はＨ、Ｑまたは不在であり；Ｘａａ２１はＴ、Ｎまたは不在であり；Ｘａａ２２はＦ、Ｌ、Ｍ、ＶまたはＹであり；Ｘａａ２３はＰであり；Ｘａａ２４はＰまたはＲであり；Ｘａａ２５はＴであり；Ｘａａ２６はＮであり；Ｘａａ２７はＴまたはＶであり；Ｘａａ２８はＧであり；Ｘａａ３０はＥ、Ｇ、ＫまたはＮであり；Ｘａａ３１はＡまたはＴであり；かつ、Ｘａａ３２はＦ、ＰまたはＹである］のアミノ酸配列を含み得る。
【００８２】
さらに別の態様では、化合物は、式（ＩＸ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｌｅｕ  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｌｅｕ  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｐｒｏ  Ｘａａ２４  Ｔｈｒ  Ａｓｎ  Ｘａａ２７  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２［式中、Ｘａａ１はＡ、Ｃ、Ｆ、Ｉ、Ｋ、Ｓまたは不在であり；Ｘａａ２はＣ、ＤまたはＳであり；Ｘａａ３はＡ、ＤまたはＮであり；Ｘａａ４はＡ、ＬまたはＴであり；Ｘａａ５はＡまたはＳであり；Ｘａａ６はＴであり；Ｘａａ７はＣまたはＫであり；Ｘａａ８はＡまたはＶであり；Ｘａａ９はＬまたはＴであり；Ｘａａ１０はＧ、ＨまたはＱであり；Ｘａａ１１はＫ、ＲまたはｈＡｒｇであり；Ｘａａ１３Ａ、Ｆ、Ｎ、ＳまたはＴであり；Ｘａａ１４はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｎ、ＱまたはＲであり；Ｘａａ１５はＡ、Ｅ、Ｆ、Ｌ、ＳまたはＹであり；Ｘａａ１７はＨ、ＳまたはＶであり；Ｘａａ１８はＫ、Ｒ、ｈＡｒｇ、ｕ（Ｃｉｔ）またはｎ（Ｏｒｎ）であり；Ｘａａ１９はＦ、ＬまたはＳであり；Ｘａａ２０はＨまたはＱであり；Ｘａａ２１はＴまたはＮであり；Ｘａａ２２はＦ、Ｌ、Ｍ、ＶまたはＹであり；Ｘａａ２４はＰまたはＲであり；Ｘａａ２７はＴまたはＶ；Ｘａａ３０はＥ、Ｇ、ＫまたはＮであり；Ｘａａ３１はＡまたはＴであり；かつ、Ｘａａ３２はＦ、ＰまたはＹである］のアミノ酸配列を含む。
【００８３】
一般的態様において、式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）の配列は、置換、挿入、欠失、延長および／または誘導体化の１、２、３、４、５またはそれを超える修飾をさらに含む。特定の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの配列は、２２番と２３番のアミノ酸間に挿入されたＶａｌを含む。他の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩの配列は、２２番と２３番のアミノ酸間に挿入されたＧｌｎを含む。さらに他の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの配列は、２２番と２３番のアミノ酸間に配列ＧｌｎＴｈｒＴｙｒを含む。さらに他の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの配列は、２２番と２３番のアミノ酸間に配列Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒを含む。別の一般的態様では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの修飾はＮ末端におけるものであり得る。特定の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩのＮ末端部分はオクチルグリシンの付加を有する。他の実施形態では、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩのＮ末端部分はｉｓｏｃａｐの付加を有する。
【００８４】
さらに別の態様では、好適なペプチドは、式（Ｘ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｐｒｏ  Ｘａａ２４  Ｔｈｒ  Ａｓｎ  Ｘａａ２７  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２［式中、Ｘａａ１はＡ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｋ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ２はＡ、Ｃ、Ｄ、Ｓまたは不在であり；Ｘａａ３はＡ、Ｄ、Ｎまたは不在であり；Ｘａａ４はＡ、Ｌ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ５はＡまたはＳであり；Ｘａａ６はＡ、Ｓ、ＴまたはＶであり；Ｘａａ７はＡ、ＣまたはＫであり；Ｘａａ８はＡ、Ｌ、ＭまたはＶであり；Ｘａａ９はＬまたはＴであり；Ｘａａ１０はＧ、ＨまたはＱであり；Ｘａａ１１はＫ、ＱまたはＲであり；Ｘａａ１２はＬ、ＷまたはＹであり；Ｘａａ１３はＡ、Ｎ、Ｑ、ＳまたはＴであり；Ｘａａ１４はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、ＱまたはＲであり；Ｘａａ１５はＡ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｌ、ＳまたはＹであり；Ｘａａ１６はＦまたはＬであり；Ｘａａ１７はＨ、Ｑ、ＳまたはＶであり；Ｘａａ１８はＫまたはＲであり；Ｘａａ１９はＦ、Ｌ、Ｓまたは不在であり；Ｘａａ２０はＨ、Ｋ、Ｑまたは不在であり；Ｘａａ２１はＱ、Ｔまたは不在であり；Ｘａａ２２はＦ、ＬまたはＹであり；Ｘａａ２４はＰまたはＲであり；Ｘａａ２７はＴまたはＶであり；Ｘａａ３０はＥ、ＫまたはＮであり；Ｘａａ３１はＡまたはＴであり；Ｘａａ３２はＦ、Ｙまたは不在である］のアミノ酸配列を含む。
【００８５】
さらに別の態様では、好適なペプチドは、（ａ）Ｘａａ１を含むループ領域；（ｂ）αらせんループＩ型；および（ｃ）Ｃ末端テールを含むアミノ酸配列を含み、
ここで、Ｘ１は、Ｘ  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｙのアミノ配列を含み、Ｘａａ２は任意のアミノ酸または不在であり；Ｘａａ３はＡｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｓｐまたは不在であり；Ｘａａ４はＡｓｎ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｙまたは不在であり；Ｘａａ５はＡｌａ、Ｌｅｕ、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ６はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒであり；かつ、Ｘａａ７はＡｌａ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｈｓｅ、（Ｓ）−２−アミ０(amio)−３−ヒドロキシ−メチルブタン酸（Ａｈｂ）、（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３ヒドロキシメチルペンタン酸（Ａｈｐ）、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｔｈｒまたはその誘導体であり；ＸとＹは結合を生じることができ、互いに化学的に結合して、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミンなどの分子内結合を形成する側鎖；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖を有する、独立に選択される残基であり；
αらせん領域Ｉ型は、配列Ｒ１−Ｖａｌ  Ｌｅｕ  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｇｌｎ  Ｘａａ１５  Ｌｅｕ  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｌｅｕ  Ｇｌｎ  Ｔｈｒ  Ｘａａ２２  Ｐｒｏ  Ｘａａ２４  Ｔｈｒ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ−Ｒ１を含み、ここで、Ｘａａ１０はＧｌｙまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１１はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓまたはＬｙｓ（ｆｏｒ）であり；Ｘａａ１５はＧｌｕまたはＰｈｅであり；Ｘａａ１７はＨｉｓまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１８はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓ、Ｌｙｓ（ｆｏｒ）、Ｌｙｓ（ＰＥＧ５０００）であり；Ｘａａ２２はＴｒｙまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２４はＡｒｇまたはＰｒｏであり；またはＲ１は不在であるか、もしくは１〜４個の付加的アミノ酸を含み；かつ、
Ｃ末端テールは、配列Ｘａａ２８Ｘａａ２９Ｘａａ３０Ｘａａ３１Ｘａａ３２Ｘａａ３３ＧｌｙＸａａ３５Ｘａａ３６Ｘａａ３７Ｘａａ３８を含み、ここで、Ｘａａ２８はＬｙｓ、Ｔｙｒまたは不在であり；Ｘａａ２９はＳｅｒ、Ｐｒｏまたは不在であり；Ｘａａ３０はＳｅｒ、Ｐｒｏ、Ａｒｇまたは不在であり；Ｘａａ３１はＴｈｒまたは不在であり；Ｘａａ３２はＡｓｎまたは不在であり；Ｘａａ３３はＶａｌ、Ｔｈｒまたは不在であり；Ｘａａ３５はＳｅｒまたはＧｌｕであり；Ｘａａ３６はＡｓｎ、ＬｙｓまたはＧｌｙであり；Ｘａａ３７はＴｈｒ、ＰｈｅまたはＡｌａであり；Ｘａａ３８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏまたは不在であり；ただし、ループ領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来し、かつ、αらせん領域がカルシトニンまたはカルシトニン類似体に由来する場合には、Ｃ末端テールの最後の位置はＰｒｏ、Ｈｙｐ、ホモセリン（Ｈｓｅ）またはＨｓｅの誘導体ではない。
【００８６】
さらに別の態様では、好適なペプチドは、（ａ）Ｘａａ１を含むループ領域；（ｂ）αらせんループＩＩ型；および（ｃ）Ｃ末端テールを含むアミノ酸配列を含み、
ここで、ループ領域Ｘａａ１は、Ｘ  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｙのアミノ酸配列を含み、Ｘａａ２は任意のアミノ酸または不在であり；Ｘａａ３はＡｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｓｐまたは不在であり；Ｘａａ４はＡｓｎ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｙまたは不在であり；Ｘａａ５はＡｌａ、Ｌｅｕ、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ６はＡｌａ、ＳｅｒまたはＴｈｒであり；かつ、Ｘａａ７はＡｌａ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｈｓｅ、（Ｓ）−２−アミオ(amio)−３−ヒドロキシ−メチルブタン酸（Ａｈｂ）、（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３ヒドロキシ−メチルペンタン酸（Ａｈｐ）、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｔｈｒまたはその誘導体であり；ＸとＹは結合を生じることができ、互いに化学的に結合して、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；アルキルアルデヒドまたはアルキルハリドおよび縮合され還元されてアルキルアミン架橋もしくはイミン架橋を形成し得るアルキルアミンなどの分子内結合を形成する側鎖；または連結してアルキル結合、アルケニル結合、アルキニル結合、エーテル結合もしくはチオエーテル結合を形成し得る側鎖を有する、独立に選択される残基であり；
αらせん領域ＩＩ型は、配列Ｒ１−Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｒ  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｘａａ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｐ  Ｘａａ２４  ＴＮＴ−Ｒ１を含み、ここで、Ｘａａ８はＡｌａまたはＶａｌであり；Ｘａａ９はＴｈｒ、ＭｅｔまたはＬｅｕであり；Ｘａａ１０はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓであり；Ｘａａ１２はＬｅｕまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１３はＡｌａ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、ＳｅｒまたはＴｈｒであり；Ｘａａ１４はＡｓｎ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；Ｘａａ１５はＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、ＡｓｐまたはＴｙｒであり；Ｘａａ１６はＬｅｕまたはＡｓｐでありＸａａ１７はＶａｌ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、ＰｈｅまたはＡｉｂであり；Ｘａａ１８はＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈＡｒｇ、Ｃｉｔ、ｈＬｙｓ、Ｌｙｓ（ｆｏｒ）またはＬｙｓ（ＰＥＧ５０００）であり；Ｘａａ１９はＬｅｕ、ＳｅｒまたはＰｈｅであり；Ｘａａ２０はＧｌｎまたはＨｉｓであり；Ｘａａ２１はＴｈｒまたはＡｓｎであり；Ｘａａ２２はＴｙｒ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、ＬｅｕまたはＭｅｔであり；Ｘａａ２４はＡｒｇまたはＰｒｏであり；かつ、Ｒ１は不在であるか、または１〜４個の付加的アミノ酸を含み；かつ、
Ｃ末端テールは、配列Ｘａａ２８  Ｘａａ２９  Ｘａａ３０  Ｘａａ３１  Ｘａａ３２  Ｘａａ３３  Ｇ  Ｘａａ３５  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８を含み、ここで、Ｘａａ２８はＬｙｓ、Ｔｙｒまたは不在であり；Ｘａａ２９はＳｅｒ、Ｐｒｏまたは不在であり；Ｘａａ３０はＳｅｒ、Ｐｒｏ、Ａｒｇまたは不在であり；Ｘａａ３１はＴｈｒまたは不在であり；Ｘａａ３２はＡｓｎまたは不在であり；Ｘａａ３３はＶａｌ、Ｔｈｒまたは不在であり；Ｘａａ３５はＳｅｒまたはＧｌｕであり；Ｘａａ３６はＡｓｎ、ＬｙｓまたはＧｌｙであり；Ｘａａ３７はＴｈｒ、ＰｈｅまたはＡｌａであり；かつ、Ｘａａ３８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏまたは不在である。
【００８７】
本明細書に記載されている化合物は、種々の無機酸、有機酸および塩基を伴って薬学上許容される塩を形成することができる。有機酸および無機酸で作製される例示的塩としては、ＨＣｌ、ＨＢｒ、Ｈ２ＳＯ４、Ｈ３ＰＯ４、トリフルオロ酢酸、酢酸、ギ酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、マレイン酸、フマル酸、カンファースルホン酸などが挙げられる。塩基で作製される例示的塩としては、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（ナトリウム塩およびカリウム塩など）およびアルカリ土類金属塩（カルシウム塩およびマグネシウム塩）が挙げられる。一実施形態では、薬学上許容される塩は酢酸塩、塩酸塩またはトリフルオロ酢酸塩である。薬学上許容される塩は、遊離の酸または塩基の形態の化合物を１当量以上の適当な塩基または酸と、その塩が可溶な溶媒もしくは媒体中、後に真空でもしくは凍結乾燥によって除去される水などの溶媒中で反応させることによる、あるいは既存の塩のイオンを好適なイオン交換樹脂上の別のイオンと交換することによる常法によって形成することができる。
【００８８】
本明細書に記載されているペプチドは、当技術分野で公知の慣例のカップリング反応を用いて作製することができる。例えば、該ペプチドは成長中のペプチド鎖に所望のアミノ酸を連続的に付加することによって作製することができる。一般に、α−Ｎ−カルバモイルで保護されたアミノ酸および樹脂支持体上の成長中のペプチド鎖と結合しているアミノ酸を、室温にて、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルホルムアミドまたは塩化メチレンなどの不活性溶媒中、ジシクロヘキシルカルボジイミド１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなどのカップリング剤の存在下、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下で反応させる。得られたペプチドから、トリフルオロ酢酸またはピペリジンなどの試薬を用いてα−Ｎ−カルバモイル保護基を除去し、次の所望のＮ保護アミノ酸を用いてカップリング反応を繰り返す。好適なＮ保護基は当技術分野で公知であり、ここではｔ−ブチルオキシカルボニルが好ましい。
【００８９】
好適なカップリング条件としては、固相支持体の膨潤を最大にし、合成サイル中のペプチド鎖の二次構造要素を最小にし、かつ、ペプチド間およびペプチド内水素結合を最小にする溶媒系の使用が含まれる。好ましくは、合成サイクルには、カップリング工程後に、ペプチド鎖の未反応のα−アミノ基が非反応性とするキャッピング工程が含まれる。この合成サイクルを、適当な保護α−アミノ酸を用いて連続的に繰り返し、特定の配列のアミリンまたはアミリン類似体を得る。この連続的合成サイクルが完了した後に、これらのペプチドは固相支持体から切断される。ペプチド鎖のシステイン残基が選択的に脱保護され、ペプチド結合を固相支持体から切断する前に分子内ジスルフィド結合が形成されることが好ましい。
【００９０】
ペプチドは、Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａ  Ｐｒｅｐ  ３０００システムを用いたＲＰ−ＨＰＬＣ（分取および分析）により精製することができる。Ｃ４、Ｃ８またはＣ１８分取カラム（１０μ、２．２×２５ｃｍ；Vydac, Hesperia, Calif.）を用いてペプチドを単離することができ、純度はＣ４、Ｃ８またはＣ１８分析カラム（５μ、０．４６×２５ｃｍ；Vydac）を用いて測定することができる。溶媒（Ａ＝０．１％ＴＦＡ／水およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ）を、分析カラムには流速１．０ｍｌ／分で、分取カラムには１５ｍｌ／分で送り込んだ。アミノ酸分析はＷａｔｅｒｓ  Ｐｉｃｏ  Ｔａｇシステムで行い、Ｍａｘｉｍａプログラムを用いて処理することができる。ペプチドは蒸気相酸加水分解（１１５℃、２０〜２４時間）によって加水分解することができる。加水分解物は標準的な方法(Cohen, et al., The Pico Tag Method: A Manual of Advanced Techniques for Amino Acid Analysis, pp. 11-52, Millipore Corporation, Milford, Mass. (1989))によって誘導体化し、分析することができる。高速原子衝突分析はM-Scan, Incorporated (West Chester, Pa.)によって行うことができる。質量較正はヨウ化セシウムまたはヨウ化セシウム／グリセロールを用いて行うことができる。飛行時間検出を用いるプラズマ脱離イオン化分析はＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｂｉｏ−Ｉｏｎ  ２０質量分析計で行うことができる。
【００９１】
本明細書に記載されている化合物は、米国特許第５，６８６，４１１号、同第５，４２４，３９４号および米国特許公開第２００８／０２７４９５２号（これらの開示内容は引用することによりそのまま本明細書の一部とされる）に従って作製することができる。これらの方法は、各合成サイクルにおいて示されたアミノ酸が不溶性の樹脂支持体に結合された成長中のペプチド鎖が、その成長中のペプチド鎖のα−アミノ基と示されたアミノ酸のα−カルボキシルの間でペプチド結合を形成することによって付加される連続合成サイクルを用いたアミリンアゴニストペプチドの固相合成を提供し、ここで、各合成サイクルは、（ｉ）成長中のペプチド鎖をα−アミノ脱保護条件下で処理してα−アミノ基を除去すること；（ｉｉ）α−アミノで保護された、示されたアミノ酸のα−カルボキシル基を活性化すること；（ｉｉｉ）成長中のペプチド鎖と示されたアミノ酸をカップリング条件下で接触させて、ペプチド鎖の遊離のα−アミノと示されたアミノ酸の活性化されたα−カルボキシルの間にペプチド結合を形成させること；および（ｉｖ）必要に応じて工程（ｉｉ）および（ｉｉｉ）を繰り返すことを含む。
【００９２】
本明細書に記載されているペプチドはまた、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d Ed., Cold Spring Harbor (1989)に記載されているものなど、今般当技術分野で公知の方法を用いた組換えＤＮＡ技術を用いて作製することもできる。
【００９３】
本明細書の記載の化合物は、さらなる有益な生物学的特性を与えるために１以上のポリマーと結合させることもできる。このようなさらなる有益な生物学的特性としては、例えば、化合物に付加的治療活性を与えること；化合物のin vivo半減期を延長すること；腎臓による化合物の排泄率を低減すること；化合物の免疫原性を低減すること；化合物のタンパク質分解率を低減すること；または化合物の安定性を高めることが含まれる。アミリンアゴニスト化合物と結合させることができる例示的ポリマーとしては、ペプチド、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸、ポリアミノ酸、デキストラン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリルアミドなどが含まれる。一実施形態では、アミリンアゴニスト化合物はペプチド、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸およびポリアミノ酸と結合される。
【００９４】
一実施形態では、本明細書に記載されているアミリンアゴニスト化合物は、アミリンアゴニスト化合物とは異なる治療活性を有し、かつ／またはアミリンアゴニスト化合物とは異なる受容体を標的とするペプチドに結合される。例示的ペプチドとしては、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、エキセンディン、エキセンディン類似体、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３７）類似体）；ＰＹＹ；ＰＹＹ類似体；レプチン；レプチン類似体；ＧＩＰ；ＧＩＰ類似体などが含まれる。別のペプチドに（例えば、直接またはアミノ酸および／または化学部分リンカーを介して）結合されたアミリンアゴニスト化合物はハイブリッドペプチドと呼ぶことができる。他の治療用ペプチドに結合されたアミリンアゴニストペプチドを含むハイブリッドペプチドの例は、例えば、ＷＯ２００５／０７７０７２およびＷＯ２００７／０２２１２３（これらの開示内容は引用することによりそのまま本明細書の一部とされる）に記載されている。
【００９５】
一実施形態では、本明細書に記載されている化合物は、糖（例えば、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、ガラクトース、シアル酸、グルコース、フコース、マンノースなど）に結合されてグリカンを形成している。このような化合物はグリコシル化ペプチドと呼ぶことができる。アミリンアゴニストペプチドは、例えば、Ａｓｎアミノ酸残基、Ｓｅｒアミノ酸残基、Ｔｈｒアミノ酸残基またはその２つ以上の組合せにおいてグリコシル化（例えば、Ｎ結合グリコシル化、Ｏ結合グリコシル化）することができる。アミノ酸のグリコシル化法は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第５，８５４，３９１号（その開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）に記載されている。
【００９６】
一実施形態では、本明細書に記載されている化合物は、１または２つのポリエチレングリコール、好ましくは、１つのポリエチレングリコールに結合される。ポリエチレングリコールの分子量は約５，０００ダルトン〜約４０，０００ダルトンであり得る。一実施形態では、本明細書に記載されている化合物はポリアミノ酸と結合される。例示的ポリアミノ酸としては、ポリリシン（例えば、ポリ−Ｄ−リシンおよび／またはポリ−Ｌ−リシン）、ポリアスパラギン酸、ポリセリン、ポリグルタミン酸などが含まれる。一実施形態では、本明細書に記載されている化合物は脂肪酸と結合される。脂肪酸は、飽和または不飽和および分枝型または直鎖型のＣ４−Ｃ２８脂肪酸鎖であり得る。
【００９７】
本明細書に記載されている化合物を１以上のポリマーと結合させる場合には、当技術分野で公知のいずれの架橋基を用いてもよい。架橋基はその化合物とポリマーを架橋するのに好適ないずれの化学基を含んでもよい。例示的架橋基としては、アミノ酸、マレイミド基、ジカルボン酸基、スクシンイミド基またはその２つ以上の組合せが含まれる。あるいは、化合物は架橋基を用いずに直接ポリマーに結合させることもできる。化合物と１以上のポリマーを架橋する方法は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第６，３２９，３３６号；同第６，４２３，６８５号；同第６，９２４，２６４号；ＷＯ２００７／０２２１２３；ＷＯ２００７／０５３９４６；ＷＯ２００８／０５８４６１；およびＷＯ２００８／０８２２７４（これらの開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）に記載されている。
【００９８】
他の実施形態では、該化合物は、化学部分の付加、新たな結合の生成および化学部分の除去に関わり得る他の化学修飾を有してもよい。アミノ酸側基における例示的修飾としては、リシンε−アミノ基のアシル化；アルギニン、ヒスチジンまたはリシンのＮ−アルキル化；グルタミン酸またはアスパラギン酸カルボン酸基のアルキル化；およびグルタミンまたはアスパラギンの脱アミド化が含まれる。末端アミノ基の例示的修飾としては、デスアミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキルおよびＮ−アシル修飾、例えば、アルキルアシル、分枝アルキルアシル、アルキルアリール−アシルが含まれる。末端カルボキシ基の例示的修飾としては、アミド、低級アルキルアミド、ジアルキルアミド、アリールアミド、アルキルアリールアミドおよび低級アルキルエステル修飾が含まれる。低級アルキルはＣ１−４アルキルである。さらに、１以上の側基または末端基は当業者に既知の保護基によって保護され得る。アミノ酸のα−炭素はモノメチル化またはジメチル化されてもよい。
【００９９】
本明細書に記載されているアミリンアゴニスト化合物を含有する医薬組成物は、非経口投与（静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与を含む）、鼻腔投与または経口投与を含む末梢投与に好適な溶液の形態で提供することができる。本明細書に記載されているアミリンアゴニスト化合物を含有する医薬組成物は、例えば、米国特許第５，９９８，３６７号および同第６，４１０，５１１号（これらの開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）の教示に従って製造することができる。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences by MartinおよびWang et al, Journal of Parenteral Science and Technology, Technical Report No. 10, Supp. 42:2S (1988)（これらの開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる）をはじめ、化合物を含有する医薬組成物の製造に関する他の参照文献も考えられる。
【０１００】
これらの医薬製剤は中性ｐＨで安定化され得る。アミリンアゴニスト化合物は両性であるので、遊離塩基、酸付加塩または金属塩として利用可能である。上記のように広範な薬学上許容される酸付加塩が利用可能である。これらには、有機酸および無機酸の双方から、好ましくは、無機酸から製造されるものが含まれる。例として記載することができる典型的な酸としては、酢酸、クエン酸、コハク酸、乳酸、塩酸および臭化水素酸が挙げられる。これらの生成物は当技術分野で周知の手順によって容易に製造される。
【０１０１】
アミリンアゴニスト化合物は通常、注射または注入用の非経口組成物として提供される。それらは例えば、不活性油、好適にはゴマ油、落花生油またはオリーブ油などの植物油に懸濁させることができる。あるいは、それらはｐＨ約５．６〜７．４の等張バッファー水溶液に懸濁させることができる。有用なバッファーとしては、クエン酸ナトリウム−クエン酸およびリン酸ナトリウム−リン酸が含まれる。持続性または「デポー」徐放性製剤の形態を用いて、非経口注射後何時間もまたは何日も血流中に治療上有効な量の製剤を送達してもよい。
【０１０２】
これらの製剤の所望の等張性は、塩化ナトリウム、またはデキストロース、ホウ酸、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコール、ポリオール（マンニトールおよびソルビトールなど）または他の無機もしくは有機溶質などの他の薬学上許容される薬剤を用いて達成することができる。塩化ナトリウムはナトリウムイオンを含むバッファーに好ましい。
【０１０３】
所望により、上記組成物の溶液をメチルセルロースなどの増粘剤で増粘してもよい。それらは油中水または水中油いずれかの乳化形態で作製してもよい。例えば、アラビアガム粉末、非イオン界面活性剤またはイオン界面活性剤、例えば、アルカリポリエーテルアルコールスルフェートまたはスルホネートを含む広範な薬学上許容される乳化剤が使用可能である。
【０１０４】
医薬組成物は一般に認知されている手順に従って成分を混合することにより製造することができる。例えば、選択された成分を単にブレンダーまたはその他の標準的な装置で混合して濃縮混合物を作製し、次にそれを、水または増粘剤およびおそらくはｐＨを制御するためのバッファーまたは張度を制御するための付加的溶質を添加することにより最終の濃度および粘度に調節することができる。
【０１０５】
非経口製剤に用いるためのアミリンアゴニスト化合物の典型的な治療上有効な量は、約１μｇ〜約５ｍｇ；約１０μｇ〜約３ｍｇ；約５０μｇ〜約２ｍｇ；または約１００μｇ〜約１ｍｇである。これらの用量を毎日（例えば、ＢＩＤまたはＴＩＤ）、毎週または毎月投与すればよい。アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量は製剤および投与頻度（例えば、即放、徐放）によって異なる。鼻腔または経口製剤で用いるためのアミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量は、非経口製剤で用いる量よりも約５倍〜１５倍高い。
【０１０６】
治療方法および使用
一般的態様では、処置を必要とする哺乳類において、そのエストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによってエストロゲン欠乏症を処置する方法が提供される。本明細書に記載されている例示的方法は、（ｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において肥満を処置すること；（ｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において過体重を処置すること；（ｉｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において体重を低減すること；（ｉｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において体脂肪を低減すること；（ｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体脂肪を低減すること；（ｖｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を増大させること；（ｖｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において食欲を減退させること；（ｖｉｉｉ）エストロゲン欠乏哺乳類において胃内容排出を遅延させること；（ｉｘ）エストロゲン欠乏哺乳類において胃運動を低減すること；（ｘ）雌哺乳類において卵巣摘出後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉ）雌哺乳類において卵巣摘出後の肥満または過体重を処置すること；（ｘｉｉ）ヒト女性において閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉｉｉ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｉｖ）ヒト女性において閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉ）ヒト女性において閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉｉ）ヒト女性において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減すること；（ｘｖｉｉｉ）ヒト女性において閉経期の肥満を処置すること；（ｘｉｘ）ヒト女性において閉経期前後の肥満を処置すること；（ｘｘ）ヒト女性において閉経後の肥満を処置すること；（ｘｘｉ）ヒト女性において閉経期の体重増加を処置すること；（ｘｘｉｉ）ヒト女性において閉経期前後の体重増加を処置すること；（ｘｘｉｉｉ）ヒト女性において閉経後の体重増加を処置すること；および（ｘｘｉｖ）エストロゲン欠乏哺乳類において脳由来神経栄養因子（Ｂｄｎｆ）のレベルを増大させることを含む。治療上有効な量は好ましくは、哺乳類において少なくともアミリンアゴニスト化合物の最小の治療上有効な血漿レベルをもたらす。
【０１０７】
本明細書に記載されている方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物またはアミリンアゴニスト化合物を含む医薬組成物を投与することによって、エストロゲン欠乏哺乳類における血糖管理を改善することをさらに含み得る。血糖管理の改善には、血糖値の低下、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値の低減などが含まれる。一実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は２型糖尿病などの糖尿病を有し、かつ、過体重または肥満である。
【０１０８】
上述のエストロゲン欠乏症およびエストロゲン欠乏哺乳類を処置する方法に関して、本明細書に開示される方法は、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率を高めるため、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率の低下を軽減するため、またはエストロゲン欠乏哺乳類において代謝率を保持するために用いられる。特定の実施形態では、代謝率は、エネルギー源としての、除脂肪体組織よりも体脂肪の優先的使用に関わる。一態様において、除脂肪体重は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与後に低減されない。別の態様において、除脂肪体重の低減は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与後に弱まるか、または抑制される。さらに別の態様において、除脂肪体重は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与後に増大される。このようなエネルギー源としての脂肪の優先度は、処置期間の始めと終わりに全体重と脂肪含量を測定することにより確認される脂肪組織と除脂肪体組織の量を比較することによって決定することができる。代謝率の増大は、ある期間のエストロゲン欠乏哺乳類によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用レベルが、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下での別の期間のそのエストロゲン欠乏哺乳類によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用レベルに比べて高いことである。特定の実施形態では、代謝率はエストロゲン欠乏哺乳類において少なくとも約５％増大され、他の実施形態では、代謝率はエストロゲン欠乏哺乳類において、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下での別の期間のそのエストロゲン欠乏哺乳類によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用レベルに比べて少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％または３５％増大される。この代謝率の増大は例えば呼吸熱量計を用いて測定することができる。
【０１０９】
別の実施形態では、提供される方法は、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率の低下の軽減を惹起するのに有効である。このような代謝率の低下はエストロゲン欠乏哺乳類が受けているエストロゲン欠乏症の一次的結果であってもよく、あるいはまたこのようなエストロゲン欠乏哺乳類が携わっている、例えば、低カロリー食、制限食または減量により代謝率の低下をもたらす栄養的または運動的治療計画からの二次的な結果であってもよい。制限食は、必ずしもカロリーに基づくものではないが、食事に許容される食物の種類または食物の量またはその双方に対する許可または禁止またはその双方を含む。例えば、個々の食事と同様に、体は低いカロリー摂取に基づき低い代謝率で補う。本質において、体は食物要求を下方調節し、それにより少ない食物で生き延びる。ダイエットが続くと、カロリー摂取の閾値が低くなる。ダイエットが終わって通常食を食べると、カロリー摂取閾値の低下および基礎代謝率の低下のためにその個体は一般に体重が戻る(NIH Technology Assessment Conference Panel (1992) Ann. Intern. Med. 116:942-949; Wadden (1993) Ann. Intern. Med. 119:688-693)。一態様において、代謝率の低下が低カロリー食または減量の結果である場合に、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率の低下を軽減する方法が提供される。このような方法を用いることで、エストロゲン欠乏哺乳類の代謝率の低下は、少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９５％軽減される。このような方法では、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを、代謝率の低下または低減をもたらす条件的または栄養的または運動的治療計画を開始する時点で投与するのが望ましいと思われる。しかしながら、また、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与を、条件的または栄養的または運動的治療計画を開始する前に開始することも考えられる。一例において、代謝率は呼吸熱量計を用いて測定される。
【０１１０】
別の態様において、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝プラトーを低減する方法が提供され、ここで、方法は、有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストをこのようなエストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は、例えば低カロリー食、運動の増加またはその組合せのために体重が減少中であるかまたは体重が減少したものである。「代謝プラトー」とは、カロリーまたはエネルギーの取り込みの変化に合わせて体が調節している安定な代謝率の期間を意味する。カロリーの取り込みまたは消費変化は、例えば、低カロリー食または身体活動の増加の結果であり得る。このようなプラトーは、減量計画中に例えば、体重減少が減速または停止した際に見られる。特定の実施形態では、本発明の方法は、エストロゲン欠乏哺乳類における代謝プラトーの持続期間を、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下で同じ期間において、それ以外の点では同一の被験体における代謝プラトーの持続期間に比べて短縮する。他の実施形態では、本発明の方法は、代謝プラトーの頻度を、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下で同じ期間において、それ以外の点では同一のエストロゲン欠乏哺乳類における代謝プラトーの頻度に比べて少なくする。さらに他の実施形態では、本発明の方法は、代謝プラトーの開始を、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下で同じ期間において、それ以外の点では同一のエストロゲン欠乏哺乳類における代謝プラトーの開始に比べて遅延させる。特定の実施形態では、代謝プラトーは体重減少の少ないまたは全くない期間を図示することによって特定される。特定の実施形態では、少なくとも１つの代謝プラトーが低減される。他の実施形態では、少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つまたは１０の代謝プラトーが低減される。別の態様において、代謝プラトーが、同一または同等の条件下で、本明細書で提供されるアミリンアゴニストが投与されないエストロゲン欠乏哺乳類に比べて１日遅延される。他の態様において、代謝プラトーが、エストロゲン欠乏哺乳類において２日、３日、４日、５日、６日、１週間、１０日、２週間または３週間遅延される。
【０１１１】
さらに他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率を保持する方法が提供される。特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類は、例えば低カロリー食、制限食の開始または予想される体重減少によって代謝率を失うリスクがあり得る。代謝率の保存は、ある期間のエストロゲン欠乏哺乳類によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用レベルが、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与しない実質的に同等または同一の条件下で同じ期間において、それ以外の点では同一のエストロゲン欠乏哺乳類によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用レベルに比べて維持されることである。一態様において、代謝率は、代謝率に低下をもたらす事象の開始前のエストロゲン欠乏哺乳類の代謝率の１５％以内に維持される。他の態様において、代謝率は、エストロゲン欠乏哺乳類の代謝率の１０％以内、７％以内、５％以内、３％以内またはそれ未満に維持される。一態様において、本明細書で提供されるアミリンアゴニストは、低カロリー食、制限食または運動計画の開始時に投与される。
【０１１２】
代謝率はこのような代謝率を決定するために利用可能ないずれかの方法を用いて、例えば呼吸熱量計を用いることによって評価することができる。代謝率をアッセイするためのこのような方法および装置は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第４，５７２，２０８号、同第４，８５６，５３１号、同第６，４６８，２２２号、同第６，６１６，６１５号、同第６，０１３，００９号および同第６，４７５，１５８号に記載されている。あるいは、動物の代謝率は、食餌時間後に動物が異化した脂肪組織に対する除脂肪組織の量を測定することによって評価することができる。よって、全体重および脂肪含量を食餌時間の終了時に測定することができる。ラットでは、総体脂肪を測定するのによく用いられる方法は、後腹壁と後壁側腹膜の間の領域である腹膜後方に位置する脂肪体である腹膜後脂肪体を外科術で摘出して秤量することである。この脂肪体の重量はその動物の体脂肪率％と直接相関していると考えられる。ラットにおける体重と体脂肪の間の関係は直線的であるので、肥満動物は相応して高い体脂肪率％および腹膜後脂肪体重量を有する。
【０１１３】
本発明の別の態様において、エストロゲン欠乏哺乳類において代謝率を高めることによって脂肪量を低減する方法が提供され、該方法は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを、エストロゲン欠乏哺乳類の代謝率を高めることによって脂肪量を低減するのに有効な量で投与することを含む。脂肪量は、全体重のパーセンテージとして表すことができる。いくつかの態様において、脂肪量は処置の過程で少なくとも１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％または少なくとも２５％低減される。一態様において、エストロゲン欠乏哺乳類の除脂肪量は処置の過程で低減されない。別の態様において、エストロゲン欠乏哺乳類の除脂肪量は、処置の過程で維持または増大される。別の態様において、エストロゲン欠乏哺乳類は低カロリー食または制限食中である。「低カロリー食」とは、エストロゲン欠乏哺乳類が、同じエストロゲン欠乏哺乳類の普通食に比べて少ない１日当たりのカロリーを摂取していることを意味する。一例では、エストロゲン欠乏哺乳類は１日当たり少なくとも５０少ないカロリーを消費している。他の例では、エストロゲン欠乏哺乳類は１日当たり少なくとも１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００または１０００少ないカロリーを消費している。
【０１１４】
本発明の特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において脂肪分布を変化させる方法が提供され、該方法は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを、エストロゲン欠乏哺乳類において脂肪分布を変化させるのに有効な量で投与することを含む。一態様において、その変化は、エストロゲン欠乏哺乳類における内臓脂肪または異所性脂肪またはその双方の代謝の増大から生じる。いくつかの実施形態では、該方法は、皮下脂肪よりも少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％または５０％高い内臓脂肪または異所性脂肪またはその双方の代謝に関わる。一態様において、該方法は好都合な脂肪分布をもたらす。特定の実施形態では、好都合な脂肪分布は内臓脂肪、異所性脂肪またはその双方に対する皮下脂肪の比率が高いものである。一態様において、該方法は、例えば筋肉細胞量の増加の結果としての除脂肪体重の増加に関わる。
【０１１５】
他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において皮下脂肪の量を低減する方法が提供され、該方法は、投与を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類に本明細書で提供されるアミリンアゴニストを、そのエストロゲン欠乏哺乳類の皮下脂肪の量を低減するのに有効な量で投与することを含む。一例では、皮下脂肪の量はエストロゲン欠乏哺乳類において少なくとも約５％低減される。他の例では、皮下脂肪の量は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与前のエストロゲン欠乏哺乳類に比べて少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％または５０％低減される。
【０１１６】
本明細書に記載されている方法は、エストロゲン欠乏哺乳類において内臓脂肪の量を低減するために使用可能である。一例では、内臓脂肪は、エストロゲン欠乏哺乳類において少なくとも約５％低減される。他の例では、エストロゲン欠乏哺乳類における内臓脂肪は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与前のエストロゲン欠乏哺乳類に比べて少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％または５０％低減される。内臓脂肪は、エストロゲン欠乏哺乳類において内臓脂肪の量を決定するのに利用可能ないずれの手段によって測定することもできる。このような方法としては、例えば、ＣＴスキャンおよびＭＲＩの手段による腹部断層撮影法が含まれる。内臓脂肪を決定する他の方法は、例えば、米国特許第６，８６４，４１５号、同第６，８５０，７９７号および同第６，４８７，４４５号に記載されている。
【０１１７】
特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において異所性脂肪の蓄積を予防する、または異所性脂肪の量を低減する方法が提供され、該方法は、投与を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類に本明細書で提供されるアミリンアゴニストを、エストロゲン欠乏哺乳類において異所性脂肪の蓄積を予防するまたは異所性脂肪の量を低減するのに有効な量で投与することを含む。一例では、エストロゲン欠乏哺乳類における異所性脂肪の量は、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与前のエストロゲン欠乏哺乳類に比べて少なくとも約５％低減される。他の例では、エストロゲン欠乏哺乳類における異所性脂肪の量は、少なくとも約１０％、または少なくとも約１５％、２０％、２５％、３０％、４０％または５０％低減される。あるいは、異所性脂肪の量は、エストロゲン欠乏哺乳類の皮下脂肪に比べて、比例して５％、１０％、１５％、０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％低減される。異所性脂肪はエストロゲン欠乏哺乳類において、異所性脂肪を測定するのに利用可能ないずれの方法を用いて測定してもよい。
【０１１８】
他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類においてより好都合な脂肪分布を作り出す方法が提供され、該方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に本明細書で提供されるアミリンアゴニストを好都合な脂肪分布を作り出すのに有効な量で投与することを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供されるアミリンアゴニストの投与は、エストロゲン欠乏哺乳類において内臓脂肪または異所性脂肪またはその双方の量を低減する。このような方法は内臓脂肪または異所性脂肪に対する皮下脂肪の比率を高くする。このような比率の改善は、心血管疾患、多嚢胞性卵巣症候群、代謝症候群またはその任意の組合せの発生リスクの軽減をもたらし得る。特定の実施形態では、異所性または内臓脂肪は、皮下脂肪よりも５％高い比率で代謝される。他の実施形態では、異所性または内臓脂肪は、皮下脂肪よりも少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％高い比率で代謝される。
【０１１９】
また、まず、エストロゲン欠乏哺乳類の体重を病的肥満に至らないレベルまで低減し、次いで、そのエストロゲン欠乏哺乳類本明細書で提供されるアミリンアゴニストをそのエストロゲン欠乏哺乳類の体重をさらに低減するのに有効な量で投与することによる、病的肥満対象において体重を低減する方法が提供される。エストロゲン欠乏哺乳類の体重を病的肥満には至らない体重まで低減する方法には、カロリー摂取の低減、身体活動の増加、薬物療法、胃バイパス手術などの肥満手術、または先に述べた方法の任意の組合せが含まれる。一態様において、本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与すると、エストロゲン欠乏哺乳類の体重がさらに低減される。他の実施形態では、体格指数が４０以下のエストロゲン欠乏哺乳類において体格指数を低減する方法であって、本明細書で提供されるアミリンアゴニストをエストロゲン欠乏哺乳類の体重をさらに低減するのに有効な量で投与することによる方法が提供される。
【０１２０】
体重を低減するとは、処置の過程が数日であれ数週間であれ数ヶ月であれまたは数年であれ、エストロゲン欠乏哺乳類が処置の過程でその哺乳類の全体重の一部が失うことを意味する。あるいは、体重の低減は、除脂肪量に対する脂肪量の割合の低下と定義することができる（言い換えれば、そのエストロゲン欠乏哺乳類は、相当する全体重の低下を必要とせず、脂肪量を低減するが、除脂肪量を維持するかまたは増す。これらの実施形態において、有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストは処置の過程でエストロゲン欠乏哺乳類の体重を低減するのに有効な量であるか、あるいはまた、処置の過程でエストロゲン欠乏哺乳類の脂肪量のパーセンテージを低下させるのに有効な量である。特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類の体重は処置の過程で少なくとも約１％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％または少なくとも約２０％低減される。あるいは、エストロゲン欠乏哺乳類の脂肪量のパーセンテージは処置の過程で、少なくとも１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％または少なくとも２５％低減される。
【０１２１】
特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において栄養素利用度を低減する、例えば、体重を低減する方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを１日１回以上のボーラス用量で投与することを含む。ボーラス用量は、薬剤の間欠的投与である（連続注入とは対照的）。エストロゲン欠乏哺乳類は、１日に１以上のボーラス用量で投与することができる。ボーラス用量は、エストロゲン欠乏哺乳類に投与される場合はいつも同じであってよく、あるいはエストロゲン欠乏哺乳類に、１日の特定の時点に他の時点に比べて高いボーラス用量が投与されるように調節することもできる。例えば徐放性製剤などの特定の製剤の投与であるボーラス用量は、例えば、３日おきに１回、１週間に１回、１か月に２回、毎月１回などの低頻度で投与することができる。さらに、ボーラス用間の時間は好ましくは、前のボーラス用量で投与された薬剤をエストロゲン欠乏哺乳類の血流から排除させるに十分な長さであることが好ましい。
【０１２２】
他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において栄養素利用度を低減する、例えば、体重を低減する方法は、エストロゲン欠乏哺乳類に有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを連続用量で投与することを含む。連続用量とは、例えば静注または経皮パッチによる薬剤の連続注入を意味するものとする。あるいは、連続用量は、一定時間にわたってエストロゲン欠乏哺乳類の全身へ薬剤を放出する制御放出カプセルまたは錠剤の形態で経口投与することもできる。連続用量によって投与される場合、薬剤は約１時間の間放出され、場合によっては、薬剤は約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８または２４時間の間放出される。
【０１２３】
本発明はさらにまた、エストロゲン欠乏哺乳類において酸化的代謝を増大させる方法も対象とし、該方法は投与を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類に有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを投与することを含む。酸化的代謝は、炭水化物（糖）からエネルギーを作り出すために酵素が用いられるプロセスである。
【０１２４】
別の態様では、エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を誘導する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１２５】
さらに別の態様では、エストロゲン欠乏哺乳類において空腹を制御する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１２６】
なおさらなる態様では、エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を延長する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１２７】
なおさらなる態様では、食餌の大きさを減じることによってエストロゲン欠乏哺乳類のカロリー摂取を低減する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１２８】
別の態様において、エストロゲン欠乏哺乳類の食物摂取を制御する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１２９】
さらに別の態様では、エストロゲン欠乏哺乳の低カロリー食または制限食へのコンプライアンスを確保するまたは補助する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１３０】
さらなる態様において、恒常性に対する身体の傾向をより健康な設定値に調節するようにエストロゲン欠乏哺乳類の設定値を調節する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。
【０１３１】
なおさらなる態様では、減量療法または減量計画を受けたことがあるまたは受けたまたは受けているエストロゲン欠乏哺乳類において体重減少を維持する、または減少した体重を維持する方法が提供され、該方法は有効量の本明細書で提供されるアミリンアゴニストを該エストロゲン欠乏哺乳類に投与することを含む。本発明のこの態様の他の実施形態では、体重減少エストロゲン欠乏哺乳類の設定値を再設定することにより維持される。
【０１３２】
特定の実施形態では、本発明の方法は、治療または予防を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類において栄養素利用度の低減から利益を受ける代謝症状または障害を治療および／または予防するのに用いられる。よって、これらの方法は肥満、糖尿病（例えば、２型または非インスリン依存性糖尿病、１型糖尿病および妊娠性糖尿病）、摂食障害、インスリン抵抗性症候群および心血管疾患を治療および／または予防するのに有用であり得る。
【０１３３】
特定の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類において脂肪分布の変更、脂肪量の低減またはその双方に用いられる方法が提供される。よって、体成分の変更が有益である対象もまた本方法から利益を受け得る。本明細書で意図される体成分の変更には、除脂肪体重の最小限の減少、維持または増加を伴う体脂肪の減少または維持が含まれる。このような状況においては、減少するばかりでなく増加することもある。よって、対象は痩せるか、過体重または肥満となり得る（当技術分野ではこれらの用語が一般に用いられる）。本発明の方法はまた、除脂肪量を残しつつ、非脂肪組織の脂肪を低減することを含み得る。この方法の使用には、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）または脂肪異栄養症などの疾患を処置することが含まれる。
【０１３４】
本明細書に記載されている方法の他の実施形態では、エストロゲン欠乏哺乳類（例えば、ヒト女性）には有効量のレプチンまたはレプチン類似体をさらに投与してもよい。レプチンまたはレプチン類似体は、アミリンアゴニスト化合物と同じ医薬組成物で投与してもよいし、あるいは別の医薬組成物で投与してもよい。一実施形態では、レプチンまたはレプチン類似体はメトレレプチンである。本明細書で開示されている方法で使用可能なレプチンおよびレプチン類似体は、例えば、米国特許第５，５９４，１０１号、同第５，８５１，９９５号、同第５，６９１，３０９号、同第５，５８０，９５４号、同第５，５５４，７２７号、同第５，５５２，５２３号、同第５，５５９，２０８号、同第５，７５６，４６１号、同第６，３０９，８５３号およびＰＣＴ公開出願番号ＷＯ９６／２３５１７号、ＷＯ９６／００５３０９、ＷＯ２００４／０３９８３２、ＷＯ９８／５５１３９、ＷＯ９８／１２２２４およびＷＯ９７／０２００４に記載されており、これらはそれぞれ、目的によらず引用することによりそのまま本明細書の一部とされる。当技術分野で公知のいずれのレプチンまたはレプチン類似体も、開示されている方法に従って使用可能である。ポリペプチドコンジュゲートおよび本明細書に記載されている方法での使用が意図される代表的レプチンとしては、下記のレプチンが含まれる。
【０１３５】
マウス・レプチン：
VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPQASGLETLESLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLQQLDLSPGC
（ここで、２８番のＸａａはＱまたは不在である）（配列番号３）
【０１３６】
ブタ・レプチン：
VPIWRVQDDTKTLIKTIVTRISDISHMQSVSSKQRVTGLDFIPGLHPVLSLSKMDQTLAIYQQILTSLPSRNVIQISNDLENLRDLLHLLASSKSCPLPQARALETLESLGGVLEASLYSTEVVALSRLQGALQDMLRQLDLSPGC（配列番号１５）
【０１３７】
ウシ・レプチン：
VPICKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQRVTGLDFIPGLHPLLSLSKMDQTLAIYQQILTSLPSRNVVQISNDLENLRDLLHLLAASKSCPLPQVRALESLESLGVVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDMLRQLDLSPGC
（ここで、２８番のＸａａはＱまたは不在である）（配列番号１６）
【０１３８】
ヒト・レプチン：
VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISH-Xaa-XaaSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC
（ここで、２７番のＸａａはＴまたはＡであり；２８番のＸａａはＱまたは不在である）（配列番号２）
【０１３９】
アカゲザル・レプチン：
VPIQKVQSDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQRVTGLDFIPGLHPVLTLSQMDQTLAIYQQILINLPSRNVIQISNDLENLRDLLHLLAFSKSCHLPLASGLETLESLGDVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC（配列番号１７）
【０１４０】
ラット・レプチン：
VPIHKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSARQRVTGLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQILTSLPSQNVLQIAHDLENLRDLLHLLAFSKSCSLPQTRGLQKPESLDGVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDILQQLDLSPEC（配列番号４）
【０１４１】
カモノハシ・レプチン：成熟カモノハシ・レプチン配列は次の通り：
ISIEKIQADTKTLTKTIITRIIQLSTQNGVSTDQRVSGLDFIPGNQQFQNLADMDQTLAVYQQILSSLPMPDRTQISNDLENLRSLFALLATLKNCPFTRSDGLDTMEIWGGIVEESLYSTEVVTLDRLRKSLKNIEKQLDHIQG（配列番号１８）
２１残基Ｎ末端シグナル配列を含むカモノハシ・レプチンの全長配列は次の通り：
MRCILLYGFLCVWQHLYYSHPISIEKIQADTKTLTKTIITRIIQLSTQNGVSTDQRVSGLDFIPGNQQFQNLADMDQTLAVYQQILSSLPMPDRISNDLENLRSLFALLATLKNCPFTRSDGLDTMEIWGGIVEESLYSTEVVTLDRLRKSLKNIEKQLDHIQG（配列番号１９）
【０１４２】
メトレレプチン（ｒｍｅｔ−Ｈｕ−レプチン；Ａ１００）：
MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC（配列番号１）
【０１４３】
レプチンＡ２００：レプチンＡ２００は、当技術分野で知られているように、Ｆｃ抗体フラグメントとレプチンとの融合産物である。例えば、Lo et al., 2005, Protein Eng. Design & Selection, 18:1-10参照。（配列番号７）
【０１４４】
レプチンＡ３００：レプチンＡ３００は、置換Ｗ１０１ＱおよびＷ１３９Ｑを有するメトレレプチンである（Ｎ末端の＊Ｍｅｔを残基１として数える）：
MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPQASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLQQLDLSPGC（配列番号６）
【０１４５】
レプチンＡ５００：本発明者らを含む多数の発明者による研究が、レプチンにおける残基置換の、凝集に対する影響に焦点を当ててきた。例えば、目的によらず、引用することにより本明細書の一部とされるRicci et al., 2006. "Mutational approach to improve physical stability of protein therapeutics susceptible to aggregation: Role of altered conformation in irreversible precipitation," Book Chapter. In: Misbehaving Proteins: Protein (Mis)Folding, Aggregation, and Stability. Murphy RM, Tsai AM, Eds. New York. Springer, pp. 331-350を参照。よって、下記の配列を有するレプチンＡ５００を本明細書に記載の化合物および方法で用いた。
VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLEFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPQASGLETLESLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLQQLDLSPGC（配列番号５）
【０１４６】
他の例示的レプチンおよびレプチン類似体および関連分子が下記の公報に報告されているが、報告されているいずれの化合物も、その活性に関しては示されていない：米国特許第５，５２１，２８３号；同第５，５２５，７０５号；同第５，５３２，３３６号；同第５，５５２，５２２号；同第５，５５２，５２３号；同第５，５５２，５２４号；同第５，５５４，７２７号；同第５，５５９，２０８号；同第５，５６３，２４３号；同第５，５６３，２４４号；同第５，５６３，２４５号；同第５，５６７，６７８号；同第５，５６７，８０３号；同第５，５６９，７４３号；同第５，５６９，７４４号；同第５，５７４，１３３号；同第５，５８０，９５４号；同第５，５９４，１０１号；同第５，５９４，１０４号；同第５，６０５，８８６号；同第５，６１４，３７９号；同第５，６９１，３０９号；同第５，７１９，２６６号；ＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／２３５１３；ＷＯ９６／２３５１４；ＷＯ９６／２３５１５；ＷＯ９６／２３５１６；ＷＯ９６／２３５１７；ＷＯ９６／２３５１８；ＷＯ９６／２３５１９；ＷＯ９６／３４１１１；ＷＯ９６／３７５１７；ＷＯ９６／２７３８５；ＷＯ９７／００８８６；ＷＯ９７／２０９３３；ＷＯ９７／１６５５０；ＷＯ９６／３５７８７；ＷＯ９６／３４８８５；ＷＯ９７／４６５８５；ＷＯ９６／２２３０８；欧州特許公開番号ＥＰ７２５０７８；ＥＰ７２５０７９；ＥＰ７４４４０８；ＥＰ７４５６１０；ＥＰ８３５８７９；ＥＰ７３６５９９；ＥＰ７４１１８７。
【０１４７】
さらなる実施形態：
実施形態１  処置を必要とする哺乳類においてエストロゲン欠乏症を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１４８】
実施形態２  エストロゲン欠乏哺乳類において肥満を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１４９】
実施形態３  エストロゲン欠乏哺乳類において過体重を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５０】
実施形態４  エストロゲン欠乏哺乳類において体重を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５１】
実施形態５  エストロゲン欠乏哺乳類において体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５２】
実施形態６  エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５３】
実施形態７  エストロゲン欠乏哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら体重および／または体脂肪を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５４】
実施形態８  エストロゲン欠乏哺乳類において体重を維持する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５５】
実施形態９  エストロゲン欠乏哺乳類において胃内容排出を遅延させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５６】
実施形態１０  エストロゲン欠乏哺乳類において胃運動を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５７】
実施形態１１  エストロゲン欠乏哺乳類において食欲を減退させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５８】
実施形態１２  エストロゲン欠乏哺乳類において満腹感を増大させる方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１５９】
実施形態１３  雌哺乳類において卵巣摘出後の体重増加を低減する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６０】
実施形態１４  雌哺乳類において卵巣摘出後の肥満および／または過体重を処置する方法であって、エストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６１】
実施形態１５  雌哺乳類において閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６２】
実施形態１６  雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６３】
実施形態１７  雌哺乳類において閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６４】
実施形態１８  雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６５】
実施形態１９  雌哺乳類において閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６６】
実施形態２０  雌哺乳類において除脂肪筋肉量を維持しながら閉経期前後の体重増加および／または体脂肪を低減する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６７】
実施形態２１  雌哺乳類において閉経期の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経期の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６８】
実施形態２２  雌哺乳類において閉経後の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１６９】
実施形態２３  雌哺乳類において閉経期前後の肥満または過体重を処置する方法であって、閉経期前後の雌哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１７０】
実施形態２４  Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類においてＢｄｎｆレベルを増大させる方法であって、Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１７１】
実施形態２５  Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とする哺乳類においてＢｄｎｆレベルを増大させる方法であって、Ｂｄｎｆレベルの増大を必要とする哺乳類に治療上有効な量のアミリンアゴニスト化合物を投与することを含む、方法。
【０１７２】
実施形態２６  有効量のレプチンまたはレプチン類似体を投与することをさらに含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７３】
実施形態２７  有効量のメトレレプチンを投与することをさらに含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７４】
実施形態２８  有効量のＧＬＰ−１受容体アゴニストもしくはその類似体；ＰＹＹもしくはその類似体；ＧＩＰもしくはその類似体；またはＣＣＫもしくはその類似体を投与することをさらに含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７５】
実施形態２９  ＧＬＰ−１受容体アゴニストがＧＬＰ−１（７−３７）またはエキセンディン４である、実施形態２８に記載の方法。
【０１７６】
実施形態３０  哺乳類がヒト女性である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７７】
実施形態３１  アミリンアゴニスト化合物が式（Ｉ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７８】
実施形態３２  アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＩ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１７９】
実施形態３３  アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＩＩ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８０】
実施形態３４  アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＶ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８１】
実施形態３５  アミリンアゴニスト化合物が式（Ｖ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８２】
実施形態３６  アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８３】
実施形態３７  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１３９のいずれか１つのアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８４】
実施形態３８  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１３９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８５】
実施形態３９  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１１、２０〜３９、１３８および１３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８６】
実施形態４０  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１〜１１、２０〜３９、１３８および１３９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８７】
実施形態４１  アミリンアゴニスト化合物が配列番号２０のアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８８】
実施形態４２  アミリンアゴニスト化合物が配列番号４０〜１３７のいずれか１つのアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１８９】
実施形態４３  アミリンアゴニスト化合物が配列番号４０〜１３７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９０】
実施形態４４  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１３７のアミノ酸配列を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９１】
実施形態４５  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に末梢投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９２】
実施形態４６  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に非経口投与される、実施形態１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【０１９３】
実施形態４７  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に皮下投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９４】
実施形態４８  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に静脈内投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９５】
実施形態４９  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に筋肉内投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９６】
実施形態５０  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に動脈内投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９７】
実施形態５１  アミリンアゴニスト化合物が哺乳類に鼻腔投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９８】
実施形態５２  アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約２００またはそれ未満のＩＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０１９９】
実施形態５３  アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約１００またはそれ未満のＩＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２００】
実施形態５４  アミリンアゴニスト化合物がアミリン受容体結合アッセイにおいて約５０またはそれ未満のＩＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０１】
実施形態５５  アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約２０またはそれ未満のＥＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０２】
実施形態５６  アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約１５またはそれ未満のＥＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０３】
実施形態５７  アミリンアゴニスト化合物がヒラメ筋検査において約５またはそれ未満のＥＣ５０を有する、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０４】
実施形態５８  アミリンアゴニスト化合物がペプチド、炭水化物、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸、ポリアミノ酸、デキストラン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリルアミド、またはその２つ以上の組合せと結合されている、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０５】
実施形態５９  アミリンアゴニスト化合物がペプチド、炭水化物、糖、ポリエチレングリコール、アルブミン、脂肪酸またはポリアミノ酸と結合されている、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０６】
実施形態６０  ペプチドがエキセンディン、エキセンディン類似体、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１類似体、ＣＣＫ、ＣＣＫ類似体、ＰＹＹ、ＰＹＹ類似体、ＧＩＰまたはＧＩＰ類似体である、実施形態５８または５９に記載の方法。
【０２０７】
実施形態６１  アミリンアゴニスト化合物が１つ、２つ、３つまたは４つのアミノ酸残基でグリコシル化されている、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０８】
実施形態６２  哺乳類にホルモン補充療法が施されない、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２０９】
実施形態６３  哺乳類が閉経期前後である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１０】
実施形態６４  哺乳類が閉経期である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１１】
実施形態６５  哺乳類が閉経後である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１２】
実施形態６６  哺乳類が卵巣機能不全であるか、または卵巣摘出(overectomy)もしくは子宮摘出を受けている、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１３】
実施形態６７  ヒト女性が約３０またはそれ未満のエストラジオールレベルおよび約３０またはそれを超える卵胞刺激ホルモンレベルを有する、実施形態３０のいずれか一つに記載の方法。
【０２１４】
実施形態６８  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ〜５ｍｇである、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１５】
実施形態６９  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μ／日〜５ｍｇ／日である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１６】
実施形態７０  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ／週〜５ｍｇ／週である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１７】
実施形態７１  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１μｇ／月〜５ｍｇ／月である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１８】
実施形態７２  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１０μｇ〜３ｍｇである、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２１９】
実施形態７３  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１０μｇ／日〜３ｍｇ／日である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２０】
実施形態７４  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１０μｇ／週〜３ｍｇ／週である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２１】
実施形態７５  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１０μｇ／月〜３ｍｇ／月である、請求項２５のいずれか一項に記載の方法。
【０２２２】
実施形態７６  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ〜２ｍｇである、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２３】
実施形態７７  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／日〜２ｍｇ／日である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２４】
実施形態７８  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／週〜２ｍｇ／週である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２５】
実施形態７９  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が５０μｇ／月〜２ｍｇ／月である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２６】
実施形態８０  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１００μｇ〜１ｍｇである、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２７】
実施形態８１  アミリンアゴニスト化合物の治療上有効な量が１００μｇ／日〜１ｍｇ／日である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２８】
実施形態８２  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が毎日一用量または分割用量で投与される、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２２９】
実施形態８３  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１００μｇ／週〜１ｍｇ／週である、実施形態１〜６０のいずれか一つに記載の方法。
【０２３０】
実施形態８４  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が１００μｇ／月〜１ｍｇ／月である、実施形態１〜６０のいずれか一つに記載の方法。
【０２３１】
実施形態８５  アミリンアゴニスト類似体の治療上有効な量が少なくともアミリンアゴニスト化合物の治療上有効な最小血漿レベルをもたらす、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３２】
実施形態８６  アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩＩ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３３】
実施形態８７  アミリンアゴニスト化合物が式（ＶＩＩＩ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３４】
実施形態８８  アミリンアゴニスト化合物が式（ＩＸ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３５】
実施形態８９  アミリンアゴニスト化合物が式（Ｘ）の化合物である、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３６】
実施形態９０  アミリンアゴニスト化合物がヒト・アミリンアミノ酸配列の断片、ラットアミノ酸配列の断片、サケ・カルシトニンアミノ酸配列の断片、ヒト・カルシトニン配列の断片またはその２つ以上の組合せを含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３７】
実施形態９１  アミリンアゴニスト化合物が（ａ）ループ領域；（ｂ）αらせんループＩ型；および（ｃ）Ｃ末端テールを含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３８】
実施形態９２  アミリンアゴニスト化合物が（ｉ）アミリンペプチド断片および（ｉｉ）カルシトニンペプチド断片を含む、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２３９】
実施形態９３  アミリンがヒト・アミリンまたはラット・アミリンであり、カルシトニンがヒト・カルシトニンまたはサケ・カルシトニンである、実施形態９２に記載の方法。
【０２４０】
実施形態９４  哺乳類が糖尿病を有している、実施形態１〜２５のいずれか一つに記載の方法。
【０２４１】
実施形態９５  血糖管理の改善を必要とするエストロゲン欠乏哺乳類において血糖管理を改善することをさらに含む、実施形態１〜１４および９４のいずれか一つに記載の方法。
【０２４２】
実施形態９６  血糖管理を改善する方法が血糖値を低下させるまたはヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値を低減する方法である、実施形態９５に記載の方法。
【０２４３】
実施形態９７  血糖管理の改善を必要とする閉経期、閉経後または閉経期前後の雌哺乳類において血糖管理を改善することをさらに含む、実施形態１５〜２４および９４のいずれか一つに記載の方法。
【０２４４】
実施形態９８  血糖管理を改善する方法が血糖値を低下させるまたはヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値を低減する方法である、実施形態９７に記載の方法。
【０２４５】
実施形態９９  アミリンアゴニスト化合物が配列番号１４２のアミノ酸配列またはその薬学上許容される塩を含む、実施形態１〜９８のいずれか一つに記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【０２４６】
実施例
下記の実施例は単に例示を目的とし、本開示または特許請求の範囲を限定するものではない。
【０２４７】
実施例１
アミリン受容体結合アッセイ、すなわち、膜に結合されたアミリン受容体と特異的に結合する化合物の能力を測定する競合アッセイは、米国特許第５，６８６，４１１号（例えば、実施例１８）に記載されており、その開示内容は引用することにより本明細書の一部とされる。このアッセイに用いられる膜調製物の好ましい供給源は、側座核および周囲領域に由来する膜を含む前脳基底部である。アッセイされる化合物は、これらの受容体調製物との結合をめぐって１２５１  Ｂｏｌｔｏｎ  Ｈｕｎｔｅｒラット・アミリンと競合する。結合量（Ｂ）をリガンド濃度の対数の関数としてプロットした競合曲線を、４パラメーターロジスティック方程式に対する非線形回帰(Inplot program; GraphPAD Software, San Diego, Calif.)またはＤｅＬｅａｎらのＡＬＬＦＩＴプログラム(ALLFIT, Version 2.7 (NIH, Bethesda, Md. 20892))による分析を用い、コンピューターによって分析する。Munson and Rodbard, Anal. Biochem. 107:220-239 (1980)。
【０２４８】
実施例２
ヒラメ筋におけるアミリンアゴニスト化合物の生物活性のアッセイは、その開示内容が引用することにより本明細書の一部とされる米国特許第５，６８６，４１１号（例えば、実施例１９）に記載されている方法を用いて行うことができ、そこでは、アミリンアゴニスト活性をインスリンにより刺激されるグリコーゲン合成の阻害を測定することによって評価することができる。要するに、例示的方法は、１２時間絶食させた雄ウィスターラットから調製したヒラメ筋帯を含む。これらの筋肉の腱を連結した後、ステンレス製のクリップにつなぐ。筋肉帯を、３．５ｍｌ  Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ重炭酸バッファー、７ｍＭ  Ｎ−２−ヒドロキシエチル−ペペラジン−Ｎ’−２−エタン−硫酸、ｐＨ７．４および５．５ｍＭピルビン酸塩の入ったエルレンマイヤーフラスコ中でプレインキュベートする。フラスコを密封し、１９：１（ｖ／ｖ）比のＯ２およびＣＯ２ガスを絶えず送る。振動水浴内で、この媒体中、３７℃で３０分間、筋肉のプレインキュベーションを行った後、筋肉帯を、［Ｕ−１４Ｃ］グルコース（０．５μＣｉ／ｍｌ）およびインスリン（１００μＵ／ｍｌ）を加えた同一の媒体（ピルビン酸塩は除く）の入った同様のバイアルに移す。これらのフラスコを密封し、１時間のインキュベーションのうち最初の１５分間に再びガスを送り込む。インキュベーション期間の終了時に、筋肉をブロットし、液体窒素中で急速冷凍する。インキュベーション媒体中の乳酸塩濃度は分光光度の測定により決定することができ、グリコーゲンにおける［Ｕ−１４Ｃ］グルコースの組み込みを測定することができる。
【０２４９】
以下の実施例に記載されている研究は全て、動物福祉法のガイドラインに従って、Amylin Pharmaceuticals, Inc.の所内動物実験委員会(Institutional Animal Care and Use Committee)により認可されたものである。動物は標準的なケージにて２２℃、１２時間明期、１２時間暗期の周期で飼育した。さらに、データは全て、それぞれＮｅｕｍａｎ−ＫｅｕｌｓまたはＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ分析による一元配置または二元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を用いて分析した。統計的有意性はｐ＜０．０５で仮定した。グラフはウィンドウズ用Ｐｒｉｓｍ  ４(Graphpad Software, San Diego, CA)を用いて作成した。データは全て平均値±ＳＥＭで表す。
【０２５０】
実施例３
材料および方法
雌肥満傾向ラット（ｎ＝３６；ＣＲＬＣＤ−ＯＰ、Charles River, Wilmington, MA)をおよそ４か月間、３２％ｋｃａｌ/脂肪精製高脂肪食（Ｄ１２３６６Ｂ、Research Diets, New Brunswick, NJ)で予め太らせ、このモデルにおいて肥満を誘導した。次に、ラットの体重を合わせ（平均体重３１１±４ｇ）、両側卵巣摘出手術（ＯＶＸ；ｎ＝２４）または偽手術（ＳＨＡＭ；ｎ＝１２）のいずれかを施した。ラットをおよそ３週間放置して手術から回復させ、回復１週間後にＯＶＸ群のコホート（ｎ＝１２）にエストロゲン補充を開始した（ＯＶＸ＋Ｅ；４日おきに落花生油中２μｇβ−エストラジオール(Sigma-Aldrich, St Louis, MO)を皮下に）。手術後およそ３週間目に、各群の半数に、ビヒクル（無菌水中５０％ジメチルスルホキシド）またはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ、Amylin Pharmaceuticals, Inc., San Diego, CA）のいずれかを２８日間送り出す単一の浸透圧ミニポンプ(Ａｌｚｅｔモデル２ＭＬ４; Durect Corporation, Cupertino, CA)を移植した。食物摂取および体を毎週測定した。体成分を−１日目および最終日にＮＭＲ(Echo Medical Systems, Houston, TX)により測定した。２８日目に過剰用量のイソフルランによって動物を安楽死させ、心血液を採集した。
【０２５１】
結果
偽処置雌ラット（ＳＨＡＭ）では、ラット・アミリン（配列番号１５）の持続的注入（５０μｇ／ｋｇ／日、４週間間）は、５．１±１．１％の持続的なビヒクル補正体重減少を誘導し（図１Ａ）、この用量および時点での雄ＤＩＯラットにおけるこれまでの研究と一致していた。１２匹の両側卵巣摘出（ＯＶＸ）雌ラットの群では、ラット・アミリン（配列番号１５）の持続的注入（５０μｇ／ｋｇ／日、４週間）は１１．２±１．１％の持続的体重減少を誘導したが、ＯＶＸラットにおける同用量のアミリンの体重減少の誘導は−１１．２±１．１％であった（２〜４週間目でＳＨＡＭに対してｐ＜０．００１；図１Ｂ）。４週間ラット・アミリン（配列番号１５）（５０μｇ／ｋｇ／日）の持続的注入投与に加えて、４日おきに２μｇ（ＳＣ）の用量での１７−βエストラジオールの持続的注入で処置した１２匹のＯＶＸラットの第２群（ＯＶＸ−Ｅ）は、６．３±１．６％の持続的体重減少を誘導し（３〜４週目でＯＶＸ群に対してｐ＜０．０１；いずれの時点でもＳＨＡＭに対してｎｓ；図１Ｃ）；従って、ＯＶＸラットにおけるエストロゲンの補充（ＯＶＸ＋Ｅ）は、エストロゲンを投与しなかったＯＶＸラットにおいて見られたアミリン注入による効果を排除した。
【０２５２】
上記のエストロゲン欠乏状態において見られた体重に対するアミリンの効果は、肥満の増長に対するＯＶＸ手術自体の影響を考慮することによってより良く理解される。２８日の処理期間にわたる体重増加（ｇ）は、ＳＨＡＭ−ビヒクルで１８．５±２．３ｇ；ＯＶＸ−ビヒクルで３０．２±３．３ｇ；そしてＯＶＸ＋Ｅ−ビヒクルで２２．２±４．２ｇであった（４週目においてＳＨＡＭに対するＯＶＸではｐ＜０．０５であるが、ＯＶＸ＋Ｅはそうではない；示されていない）。アミリン処置群では、体重変化（ｇ）は、ＳＨＡＭ−アミリンで２．４±２．１ｇ；ＯＶＸ−アミリンで−７．７±３．６ｇ；そしてＯＶＸ＋Ｅで３．６±４．４ｇであった（４週目においてＯＶＸ＋Ｅに対するＯＶＸではｐ＜０．０５であるが、ＳＨＡＭはそうではない；示されていない）。これらのデータは、肥満ＯＶＸラットは処置期間の間、体重増加に感受性を示すが、アミリン注入はこの傾向を打ち消すだけでなく、基準レベルを下回る体重減少を能動的に誘導したことを示唆する。
【０２５３】
これらのラットにおけるアミリン注入は、全ての手術群で、ビヒクル対照よりも累積食物摂取が少ないことと関連していた。具体的には、アミリン注入を施したＳＨＡＭラットは、累積食物摂取において、ビヒクルのみを施したＳＨＡＭラットに比べて１０．９±３．４％の低下を受け（図２Ａ）、アミリン注入を施したＯＶＸラットは、累積食物摂取において、ビヒクルのみを施したＯＶＸラットに比べて２３．０±２．０％の低下を受け（図２Ｂ）、そして、アミリン注入を施したＯＶＸ＋Ｅラットは、累積食物摂取において、ビヒクルのみを施したＯＶＸ＋Ｅラットに比べておよそ１５％の低下を受けた（図２Ｃ）。アミリンにより誘導される累積食物摂取の低下は、ＯＶＸ群では、ＳＨＡＭ群またはＯＶＸ＋Ｅ群のいずれに比べても増強されていなかった。さらに、ＯＶＸビヒクル処置動物は４週目ＳＨＡＭビヒクル処置動物およびＯＶＸ＋Ｅビヒクル処置動物の双方よりも多くの食物を消費したが（ＳＨＡＭビヒクル処置動物では３２９±７ｇ；ＯＶＸビヒクル処置動物では３５４±１１ｇ；ＯＶＸ＋Ｅビヒクル処置動物では３２６±７ｇ；４週目においてＳＨＡＭおよびＯＶＸ＋Ｅ群に対するＯＶＸでｐ＜０．０５）；アミリン処置群間では累積食物摂取に差はなかった。
【０２５４】
アミリン処置はまた、図３Ａ（ビヒクル補正後）および３Ｂ（ビヒクル補正前）に示されるように、脂肪蓄積（脂肪量％）における有意な低下と関連していた。ＯＶＸ雌ラットでは、アミリン注入は脂肪蓄積においてビヒクルに比べて約７．５±０．６％の低下を誘導した。ＯＶＸ＋Ｅ雌ラットでは、アミリン注入は、脂肪蓄積においてビヒクルに比べて約４．７％の低下を誘導した。データをビヒクルに関して補正せずに見た場合（図３Ｂ）、図３Ｂの場合のようにデータセットの非ビヒクル補正値で表されるように、ＯＶＸ−ビヒクル対照に増加傾向（図３Ｂの黒いバー参照）があるにもかかわらず、手術の影響、または薬剤と手術の間の相互作用の影響、または脂肪蓄積の変化の影響は無いと思われる（図３Ｂの白い棒を比較）。また、除脂肪率％の変化に対しても薬剤または手術の影響は無かった（図３Ｃ）。
【０２５５】
このように、以下の表１で一部をまとめたように、４週間のアミリン処置の後に見られた結果は、ＯＶＸ雌ラットは、偽処置雌ラット（ＳＨＡＭ）およびエストロゲンを投与したＯＶＸ雌ラット（ＯＶＸ＋Ｅ）と比較した場合、優れた体重減少、優れた食物摂取の低下および優れた脂肪蓄積の低下を受けたことを示した。ＯＶＸ雌ラットの体重減少、累積食物摂取の低下および脂肪蓄積の低下の誘導におけるアミリンの有効性における、およそ２倍と見られる増加は、１７−βエストラジオールを投与したＯＶＸ雌ラットでは、ＳＨＡＭラットで見られるものと同等のレベルにまで戻った。
【０２５６】
【表１】
2012523434.tif 000008
（全群に対してｐ＜０．０５）
【０２５７】
脂肪蓄積の低下は、全てのアミリン処置群においてレプチンレベルの有意な低下と関連していた。アミリンはまた、全ての群でインスリンを減少させる傾向があり、ＳＨＡＭではグルコースを減少させたが、ＯＶＸまたはＯＶＸ＋Ｅラットでは減少させなかった。食欲促進ホルモングレリンのレベルは２８日目においてアミリン処置のよる変化は無かった。
【０２５８】
外因性アミリンがＳＨＡＭまたはＯＶＸ＋Ｅ動物に比べてＯＶＸ状態において体重減少の増進を惹起した中枢機構を探求するために、内側基底視床下部の遺伝子発現を調べた。視床下部腹内側部で発現の高い食欲促進ニューロペプチドとして働き得る重要な神経向性因子である脳由来神経栄養因子（Ｂｄｎｆ）ｍＲＮＡのレベルは、アミリン処置ＯＶＸラットではＳＨＡＭまたはＯＶＸ＋Ｅ動物に比べて高かった（１．７倍）。重要なニューロペプチドであるプロオピオメラノコルチン（Ｐｏｍｃ）、ニューロペプチドＹ（Ｎｐｙ）もしくは痛風関連ペプチド（Ａｇｒｐ）の発現、またはエストロゲン受容体−α（ＥＲα）の発現に差は見られなかった。これらのデータは、Ｂｄｎｆ機能が関わり得る機構であるアミリンシグナル伝達の調節におけるエストロゲンの役割を暗示する。
【０２５９】
実施例４
ＳＨＡＭ、ＯＶＸおよびＯＶＸ＋Ｅラットのセットをもう１つ作出するために、雌肥満傾向ラットを実施例３で上記したように処置した。各群のラットにビヒクルか、または下記のアミリンアゴニスト：５０μｇ／ｋｇ／日の配列番号２０、２μｇ／ｋｇ／日の配列番号１３７、もしくは５μｇ／ｋｇ／日の配列番号１４２のうち１つのいずれかを投与した。図４Ａ、４Ｂおよび４Ｃに示される結果は、これらの各供試アミリンアゴニストはＯＶＸラットに投与した場合、ＳＨＡＭラットに投与した場合に見られる体重減少に比べて、高いか同等の体重減少を示す（データ点の標準偏差を考慮）。従って、実施例３に記載されている所見と一致して、これらの例示的アミリンアゴニストは少なくともエストロゲン欠乏症に関連する典型的な体重増加を弱め、さらには、エストロゲン欠乏症の状態において、正常なエストロゲンレベルを持つＳＨＡＭ対照(SHAM contrils)に比べて高い体重減少さえ惹起することができる。
【０２６０】
実施例５
アミリン注入によって誘導された高い体重減少はＯＶＸラットにおける代謝の改善と関連している
材料および方法
ＯＶＸ状態においてアミリンにより媒介される体重減少に対する感受性の明確な増強をさらに特徴付けるために、処置期間１〜４日の間にビヒクルまたはアミリンで処置したＳＨＡＭまたはＯＶＸラットの代謝をモニタリングした。
【０２６１】
実施例３および４に記載されているものと同様の実験計画に従った。雌ＣＲＬ：ＣＤ−ＯＰラット（ｎ＝２４）をおよそ４ヶ月間予め太らせ（平均体重２９５±３ｇ）、その後、ＳＨＡＭ手術（ｎ＝１２）またはＯＶＸ手術（ｎ＝１２）のいずれかを施した。術後およそ３週間で、ラットに、ビヒクル（ｎ＝６／手術群）またはアミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ；ｎ＝６／手術群）のいずれかを送り出す単一の浸透圧ミニポンプ（Ａｌｚｅｔモデル２ＭＬ２、Durect Corporation）を移植した。動物はポンプ移植術の前日に３時間代謝ケージに馴化させ、ポンプ移植術後の午前中に同じチャンバーへ戻した。ラットをこれらの代謝チャンバーで２晩飼育し、高速Ｏｘｙｍａｘ間接熱量測定システム(Columbus Instruments, Columbus, OH)を用いて、代謝率の代用としての酸素消費率（ＶＯ２）と二酸化炭素の生産（ＶＣＯ２）を測定した。代謝率は動物の最初の体重に対してノーマライズした。呼吸商（ＲＱ）はＶＣＯ２／ＶＯ２として算出した。また、試験中、Ｘ軸における全身体活動（レーザー光のとぎれ）を測定した。自動給餌システム装置により、食物摂取の正確な連続的モニタリングを可能とした。２晩の後、ラットをホームケージに戻し、神経発生の評価に用いた（下記）。
【０２６２】
ヨークフィード対照群に比べた場合の、ＯＶＸラットへのアミリン注入の、エネルギー代謝に対する効果も評価した。この研究では、雌ＣＲＬ：ＣＤ−ＯＰラット（ｎ＝２４）をおよそ４ヶ月間予め太らせ（平均体重３４８±４ｇ）、その後、ＯＶＸ手術を施した。術後およそ２週間で、ラットに、ビヒクル（ｎ＝１６）またはアミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ；ｎ＝８）のいずれかを送り出す単一の浸透圧ミニポンプ（Ａｌｚｅｔモデル２ＭＬ２、Durect Corporation）を移植した。動物はポンプ移植の前日に３時間代謝ケージに馴化させ、ポンプ移植術後の午前中に同じチャンバーへ戻した。ラットこれらの代謝チャンバーで５晩飼育し、高速Ｏｘｙｍａｘ間接熱量測定システム(Columbus Instruments)を用いて、ＶＯ２とＶＣＯ２を測定し、最初の体重に対してノーマライズした。また、Ｘ軸における全身体活動（レーザー光のとぎれ）を測定した。自動給餌システムにより食物量をビヒクル群の半分になるように制限して、３０分おきにアミリン処置動物が消費する食物の平均量をそれらが消費するようにした。従って、実際、この対照群は、与えられた後すぐに動物が１日の食物分配を消費する従来のペアフィード(pair-fed)よりもむしろ、試験（アミリン処置）群とほぼ同時に同量の食物を消費することから、真に食物が対応した群、またはヨークフィード群である。
【０２６３】
結果
代謝チャンバー内での期間中、各群の体重変換は、ＳＨＡＭ−ビヒクルで９．８±４．７ｇ；ＳＨＡＭ−アミリンで５．４±３．０ｇ；ＯＶＸ−ビヒクルで９．２±５．４ｇ；ＯＶＸ−アミリンで６．４±１．４ｇであった（群間で有意さは無かった）。これらの初期の時点では、体重はベースラインから有意にかけ離れてはいなかった。本発明者らは、本試験期間、代謝率（ＶＯ２として）、基質利用（ＲＱとして）およびＸ軸における身体活動（光線のとぎれとして）を連続的にモニタリングすることができる。代謝率は、ＳＨＡＭ処置ＤＩＯ雌ラットにおいては、アミリン投与によって変化せず、雄ＤＩＯラットの代謝におけるアミリンの効果（１５）と一致していた。しかしながら、ＯＶＸ手術は、明期および暗期の双方でＶＯ２を有意に低下させた（図５Ａおよび５Ｂ）。ＯＶＸ−ビヒクル対照は、ＳＨＡＭ−ビヒクル群およびＳＨＡＭ−アミリン群の双方に比べて低いＶＯ２を示した。ＯＶＸ雌に対するアミリンの投与は、ＳＨＡＭ群に比べ、ＶＯ２を有意に増加させたが、代謝率は低いままであった（図５Ｂ）。ＲＱ値はＳＨＡＭ動物でアミリンの投与によって有意に引き下げられ（図５Ｃおよび５Ｄ）、脂肪利用の優先性を示唆する。ＯＶＸ手術は、両ＳＨＡＭ群よりもＲＱに増加をもたらしたが、アミリン処置はまたこのＯＶＸ状態においてＲＱを引き下げ、明期では、ＲＱはＳＨＡＭ−アミリン群のＲＱをさらに超えて引き下げた（図５Ｄ）。明期では、群間で身体活動に差は無かったが、活性が総じて著しく高かった暗期では、ＳＨＡＭ状態およびＯＶＸ状態の双方でアミリン処置が高い活性と関連していた（図５Ｅおよび５Ｆ）。これらのことを考え合わせると、ＯＶＸはＳＨＡＭ対照と比較した場合に代謝率の低下および脂肪利用の優先性の低下に関連しており、ＯＶＸ雌へのアミリン投与は、代謝率および脂肪酸化、ならびに身体活動の増加を含む、このモデルにおいて見られる、総じて高い体重減少の一因であると思われる代謝促進結果を示した。
【０２６４】
次に、処理期間１〜６日の、ビヒクル対照ならびにヨークフィード対照（ＯＶＸ−ＹＦ）に比べた場合の、ＯＶＸ雌ＤＩＯラットへのアミリン投与の代謝結果を調べた。代謝チャンバー内での期間中、食物摂取はＯＶＸ−アミリン（５０．１±６．７ｇ）およびＯＶＸ−ＹＦ群（４３．４±０．９ｇ；双方ともＯＶＸビヒクル対照８２．０±３．９ｇに対してｐ＜０．０５）の間で一致しており、体重はアミリン処置およびヨークフィーディングによって低減された：ＯＶＸ−ビヒクルで２５．０±２．４ｇ；ＯＶＸ−アミリンで４．５±６．６ｇ；ＯＶＸ−ＹＦで−３．２±２．３ｇ（ビヒクルに対するアミリンおよびＹＦ群でｐ＜０．０５）。これまでの試験と同様に、アミリン投与にはＶＯ２レベルに対する有意な効果は無かったが、ＯＶＸ−ＹＦラットは、ＯＶＸ−ビヒクル群およびＯＶＸ−アミリン群に比べて低いＶＯ２を示した（図６Ａおよび６Ｂ）。ここでもＲＱの著しい低下はアミリン処置ラットおよびＹＦラットの双方で明らかであり、これはＯＶＸ−アミリンよりも有意に低いが大きくはなかった（図６Ｃおよび６Ｄ）。全身体活動レベルはアミリン処置によってビヒクル対照に比べて高まり、ＯＶＸ−ＹＦラットもまた同等の高い活性を示した（図３Ｅおよび３Ｆ）。
【０２６５】
実施例６
エストロゲン欠乏肥満ラットにおけるアミリンにより媒介される過大な体重減少の基礎にある中枢機構
材料および方法
急性アミリン投与後のＤＩＯエストロゲン欠乏ラットにおけるニューロン活性化の評価
２０匹の雌ラットに、上記の実施例に記載されているようにＯＶＸまたは偽手術のいずれかを施した。２週間回復させた後、明期に入って２時間目の最初に、動物にアミリン（１０μｇ／ｋｇ  ＩＰ；Peptisyntha, Torrance, CA；ＯＶＸもＳＨＡＭもｎ＝５）または生理食塩水（ＯＶＸもＳＨＡＭもｎ＝５）を注射した。２時間後、ラットに全身麻酔をかけ、生理食塩水、次いで冷４％ＰＦＡを潅流させた。組織を一晩、後固定し、３０％スクロース中で２４時間、凍結保護を行った。脳をドライアイス上で凍結させ、凍結ミクロトームにて、５系列の３０μｍ厚切片を取る切片化まで−８０℃で保存した。
【０２６６】
浮遊切片に対して免疫組織化学的方法を行った。ｃ−Ｆｏｓについては１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）でブロッキングを行った。ＦｏｓＢ、Ｆｒａ−１およびＦｒａ−２と交差反応しないヒトｃ−Ｆｏｓタンパク質のアミノ酸２１０〜３３５に対するウサギポリクローナル抗体(Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA)を１：４，０００希釈で用いた。切片を４℃で一晩インキュベートした。翌日、組織を暗所で２時間、ＰＢＳ／Ｔｒｉｔｏｎ中、ヤギ抗ウサギＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ  ４８８二次抗体（１：２５０、Molecular Probes, Eugene, OR）とともにインキュベートした。ＰＢＳで洗浄した後、組織をすぐにスライドにのせ、Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ  Ｐｒｏｌｏｎｇ  Ｇｏｌｄ退色防止剤(Molecular Probes, Eugene, OR)を用いてカバーガラスをかけ、−２０℃で保存した。Ｌｅｉｃａ  ＬＳＭ  ７１０共焦顕微鏡およびＺｅｎ  ２００８ソフトウエアを用い、蛍光画像を取り込んだ。各領域における陽性細胞の分析は盲検研究者により行い、ｃ−Ｆｏｓ陽性核の計数を手作業で行った。結果は動物当たり３切片についての平均細胞数で表す。
【０２６７】
ＤＩＯエストロゲン欠乏ラットにおける神経発生の評価
代謝分析後、ＳＨＡＭ−ビヒクル、ＳＨＡＭ−アミリン、ＯＶＸ−ビヒクルおよびＯＶＸアミリンラット（各群ｎ＝６）、をホームケージに戻し、ポンプ移植後５〜１２日目に、１日２回、１２時間空けてブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ；７５ｍｇ／ｋｇ）のｉ．ｐ．注射を行った。１４日目に動物にイソフルランで全身麻酔をかけ、生理食塩水、次いで冷４パラホルムアルデヒドを潅流させた。脳を一晩、後固定し、３０％スクロース中で２４時間、凍結保護を行った後、ドライアイス上で凍結させ、切片化まで−８０℃で保存した。凍結ミクロトームにて、５系列の３０ミクロン厚切片を取った。
【０２６８】
染色は浮遊切片に対して行った。ＰＢＳで洗浄した後、切片を６５℃で２時間、５０％ホルムアミド中でインキュベートした。３７℃、３０分間、２Ｎ  ＨＣｌでＤＮＡを変性させた後、この酸を０．１Ｍホウ酸バッファーで中和した。ＰＢＳで洗浄した後、組織をＰＢＳ／Ｔｒｉｔｏｎ／ＢＳＡでブロッキングし、次いで、４℃で一晩、ラットモノクローナ抗ＢｒｄＵ（１：１００、Accurate Chemical）とともにインキュベートした。翌日、組織を暗所で２時間、ＰＢＳ／Ｔｒｉｔｏｎ中、ヤギ抗ラットＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ  ４８８二次抗体（１：２５０、Molecular Probes, Eugene, OR）とともにインキュベートした。ＰＢＳで洗浄した後、組織をすぐにスライドにのせ、Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ  Ｐｒｏｌｏｎｇ  Ｇｏｌｄ退色防止剤(Molecular Probes, Eugene, OR)を用いてカバーガラスをかけ、−２０℃で保存した。上記のように蛍光画像を取り込んだ。
【０２６９】
次に、これらのラットからの組織を、細胞のタイプが正確に決定できるように、成熟ニューロンのマーカーであるＮｅｕＮとともにＢｒｄＵに対して二重標識した。プロトコールは、切片をまたマウスモノクローナル一次抗ＮｅｕＮ（１：１００、Chemicon International）、次いでヤギ抗マウスＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ  ５９４二次抗体（１：２５０、Molecular Probes）とともにインキュベートすること以外は、上記と同じであった。
【０２７０】
結果
まず、ＳＨＡＭラットに対するＯＶＸラットの脳幹のｃ−Ｆｏｓを調べた。ＡＰにおいてはアミリン処置群間（ＯＶＸ＝９０±４細胞、ＳＨＡＭ＝７１±５細胞）またはビヒクル処置群間（ＯＶＸ＝３±１細胞、ＳＨＡＭ＝２±１細胞）に、ＮＴＳにおいてはアミリン処置群間（ＯＶＸ＝３０±１細胞、ＳＨＡＭ＝３４±２細胞）またはビヒクル処置群間（ＯＶＸ＝４±１細胞、ＳＨＡＭ＝１±０細胞）に有意差は無かった。従って、ＳＨＡＭラットに対するＯＶＸの、アミリン後に見られる体重減少および食物摂取の差はアミリンシグナル伝達の短期の増大とは相関せず、むしろ、経時的に進展する長期機構によって媒介される。
【０２７１】
卵巣摘出は海馬における神経発生を低下させることが知られており、この欠陥はエストロゲン補充で矯正することができる（１８）。アミリン、エストロゲンおよび神経発生の間の潜在的関係を探求するために、ＢｒｄＵ−免疫反応性を、自発的神経発生を示すことが知られている（１９、２０）特異的な脳領域としての最後野（ＡＰ）、孤束核（ＮＴＳ）および海馬内で測定した。陽性対照領域であると考えられる海馬では、予期されたように、ＯＶＸ処置は神経発生をベースラインより下に引き下げ、アミリンの持続的注入はそれを回復させることができた（ｐ＜０．０５）（図８Ｂのグラフで定量的に示す；ＯＶＸ／アミリン処置動物の海馬(hippocampous)におけるＤＡＢによるＢｒｄＵ染色を図８Ａに示し、別のＯＶＸ／アミリン処置動物の海馬におけるＢｒｄＵ／ｎｅｕＮ染色を図８Ｃに示す）。
【０２７２】
ＡＰでは、ＳＨＡＭ対照に比べ、ＯＶＸはこの場合にもビヒクル処置動物の神経発生を有意に低下させ（ｐ＜０．０１）、ＯＶＸ動物においてアミリン処置はこの効果を逆転させることができ、さらには、ベースラインレベルを超えて、神経発生を高めることができた（ｐ＜０．００１）（図７Jのグラフで定量的に示す；例えば、図７Ａ、７Ｃ、７Eおよび７Ｇ参照）。さらに、ＢｒｄＵ＋ニューロン特異的マーカーＮｅｕＮに対する二重標識は、ＡＰにおいては、ＢｒｄＵ陽性細胞のおよそ６０％がＮｅｕＮに関しても陽性であり、従って、成熟ニューロンであった（示されていない）が、海馬においては、ＢｒｄＵ陽性ニューロンの３８％がＮｅｕＮに関して陽性であったことを示した（図８Ａ〜８Ｃ）。
【０２７３】
ＮＴＳでは、アミリンは、ＯＶＸ−ビヒクル群および両ＳＨＡＭ群よりもＢｒｄＵ陽性細胞の数を有意に増した（ｐ＜０．０５）（図７Ｉのグラフで定量的に示す；例えば、図７Ｂ、７Ｄ、７Ｆおよび７Ｈ参照）。
【０２７４】
ＮＴＳにおいて群間に他の有意な差は無く、ＢｒｄＵ染色は脳の他の領域には存在しなかった。
【０２７５】
実施例７
エストロゲン欠乏ラットにおけるアミリンの改善された有効性のメディエーターとしてのレプチン感受性のアミリン依存的増大に関する役割の検討
材料および方法
痩せ型または肥満型の糖尿病ＺＤＦラットへのアミリン注入
肥満型糖尿病雌ＺＤＦラット(Charles River Laboratories)を３２％ｋｃａｌ／脂肪精製食でおよそ６週間維持し、１０週齢時に２つの体重対応群へ選別した。１つの群に両側卵巣摘出（ｎ＝１２）または偽手術（ｎ＝１２）を施した。術後２週間目に、各手術群の半数に、ビヒクルまたはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ）のいずれかを２８日間送り出す単一の浸透圧ミニポンプ(Ａｌｚｅｔモデル２ＭＬ４; Durect Corporation)を移植した。痩せ型（平均体重２２６±３ｇ）ＺＤＦ対照(Charles River)は標準的な実験用齧歯類飼料（ＬＭ−４８５、５％ｋｃａｌ／脂肪；Harlan Teklad）で維持し、体重対応群に選別し、ビヒクル（ｎ＝９）またはラット・アミリン（５０μｇ／ｋｇ／ｄ；ｎ＝９）のいずれかを２８日間送り出す単一の浸透圧ミニポンプ(Ａｌｚｅｔモデル２ＭＬ４; Durect Corporation)を移植した。両研究とも、食物摂取および体重を毎週モニタリングし、ベースライン時と終了時に、ＮＭＲ(Echo Medical Systems）を用いて体成分を評価した。２８日後、ラットを過剰用量のイソフルランで安楽死させ、心血液を採集した。
【０２７６】
血漿代謝産物分析
末端血漿インスリン(Crystal Chem Inc., Downer's Grove, IL)およびレプチン、総アディポネクチンおよび総グレリン(Millipore, Billerica, MD)レベルは、市販のＥＬＩＳＡを用いて測定した。血漿グルコース、トリグリセリドおよび総コレステロールレベルは、オリンパス・バイオアナライザー(Olympus America Diagnostics, Center Valley, PA)を用いて測定した。血漿アミリンレベルは、内部ＩＥＭＡを用いて測定した。
【０２７７】
結果
ＯＶＸ状態は、体重ならびに体脂肪量および対応する血漿レプチンレベルを著しく増大させることが知られている。ＯＶＸラットにおける過大な体重減少が少なくとも一部には、ＯＶＸ術後の末梢レプチンレベルの上昇に感受性のあるアミリンによるものであるかどうか調べるため、肥満かつ非機能的レプチン受容体による糖尿病であるＺＤＦラットへのアミリン注入の効果を調べた。ＳＨＡＭ  ＺＤＦラットへの持続的アミリン注入は、２８日間、体重を有意に減少させなかった（図９Ａ）。同用量でのＯＶＸＺＤＦラットへのアミリン注入は、他の全ての群に比べて体重を有意に減少させた（図９Ａ）。しかしながら、体重生値の変化を分析したところ、これらの差はＯＶＸ術後のＺＤＦラットの著しい体重増加によるとことが大きいことが明らかになった。従って、アミリン薬理学は実際の体重減少をそれほど誘導せず、むしろ、ＯＶＸ  ＺＤＦラットの体重増加を有意に弱めるものであった（図９Ｃ）。体重増加傾向はアミリンで処置されたＯＶＸ  ＺＤＦラットでさえ明白であり、それらは４週間後にＳＨＡＭ−ビヒクル対照に比べて有意に大きな体重増加を示した（図９Ｃ）。体重の変化は食物摂取の抑制と関連があった（図９Ｅ）。アミリンはＳＨＡＭ  ＺＤＦラットの体重を減少させずに、４週間後の食物摂取をビヒクル対照に比べて抑制したが、ＯＶＸ  ＺＤＦ−ビヒクルラットは１〜４週に他の全てのラットよりも多い食物を消費した（図９Ｅ）。ＺＤＦ  ＯＶＸラットはまた、有意に高い脂肪量を示し、これはアミリン投与により弱められ、除脂肪量の減少と一致していた（図９Ｇ）。
【０２７８】
ＳＨＡＭ  ＺＤＦラットへのアミリン注入は、ＤＩＯラットに比べて体重の減少に効果的でないと思われるので、系統特異的な効果を除外するために、ＺＤＦラットと同じバックグラウンド系統にある痩せ型ラットへのアミリン投与の影響を調べた。痩せ型対照においては、ＤＩＯラットの場合と同様に、アミリン注入は体重を有意に減少させ、真の体重減少として反映され（図９Ｂおよび９Ｄ）、食物摂取を抑制し（図９Ｆ）、特に脂肪量を減少させた（図９Ｈ）。
【０２７９】
血漿アミリンレベルを分析したところ、ＺＤＦラットの高アミリン血症がこのモデルにおけるアミリンの低い有効性によるものであり得ることが明らかになった。全てのアミリン処置ラットが同等のアミリン循環レベルを有していたが（表３）、ＺＤＦラットは、外科手術の状態に関係なく、痩せ型対照に比べて有意に高いアミリンレベルを示した（表２）。従って、アミリンの薬理レベルは痩せ型ラットより〜５０倍高いが、ＺＤＦラットでは、血漿アミリンは〜１２倍の増加に過ぎないことが明らかであった。ＺＤＦかつ痩せ型のラットでは、血漿グルコースレベルに対する手術または薬理学の効果は無く、インスリンはＺＤＦ  ＯＶＸかつ痩せ型の対照ラットにおいてアミリン処置により有意に減少した（表３）。ＯＶＸラットの血漿トリグリセリドはＳＨＡＭ  ＺＤＦ対照に比べて減少し、アミリン注入が血漿トリグリセリドを減少させた痩せ型動物とは異なり、アミリンの効果は無かった（表３）。総コレステロールレベルはＳＨＡＭ  ＺＤＦラットでは低下したが、総じてＯＶＸによって増大し、痩せ型動物では変化が無かった（表３）。
【０２８０】
【表２】
2012523434.tif 000009
＊外科手術群内でビヒクル対照に対してｐ＜０．０５；ａ薬剤処置内でＳＨＡＭに対してｐ＞０．０５；ｂ処置内でＯＶＸに対してｐ＜０．０５
【０２８１】
【表３】
2012523434.tif 000010
＊外科手術群または痩せ型群内でビヒクル対照に対してｐ＜０．０５；ａＳＨＡＭ−ビヒクルに対してｐ＞０．０５；ｂＳＨＡＭ−アミリンに対してｐ＜０．０５；ｃＯＶＸ−ビヒクルに対してｐ＞０．０５
【０２８２】
実施例３〜７の考察
摂食行動および全体的なエネルギーの恒常性に対するエストロゲンシグナル伝達の影響は長年広く知られていた（１、２）。食物摂取を弱め、体重を減少させるというエストロゲン自体の特異な作用に加え、実験的に誘導されたエストロゲン欠乏症は過食および有意な体重増加をもたらす（１、３、２１）。ＯＶＸにより媒介される肥満は脂肪組織、特に内臓脂肪の著しい増加と関連し（４）、エストロゲンが局部的脂肪沈着に影響を及ぼし得ると提案されている（２２）。エストロゲンまたはエストロゲンの不在がこのように明白なエネルギーバランスへの効果を媒介する機構が多くの研究の主題となっている。包括的な体重制御がシグナル伝達経路の複数の収束、推定されるエネルギー貯蔵の短期および長期シグナルの組み込みによって調節される（２３）という認識の高まりは、エストロゲンシグナル伝達がその効果を媒介するために１以上のレベルでこれらの系とオーバーラップしている可能性があることを暗示する。エストロゲンの状態がＮＰＹ（１０、１１）、レプチン（４、７）およびＣＣＫ（５、６）などのエネルギーバランスの重要なレギュレーターに対する感受性を変化させるという所見は、この仮説を追認する。満腹感シグナルとしての膵臓ペプチドアミリンの役割を裏付ける証拠が蓄積され続けているが（１３、１５）、アミリンにより媒介される食物摂取および体重調節に対するエストロゲンの影響はまだ探求されていない。
【０２８３】
アミリンにより誘導される体重減少がエストロゲンシグナル伝達とは独立に起こったならば、本発明者らは、体重減少はＳＨＡＭまたはＯＶＸラット間でほぼ等しいと予測したであろう。しかしながら、本発明者らは、ＯＶＸラットにおいて同用量のアミリンにより媒介される体重減少はＳＨＡＭ動物のおよそ２倍大きいことを見出した。ＯＶＸラットへのエストロゲン補充は明らかにアミリンの体重減少能を弱め、実際にアミリン応答を正常化した。ＯＶＸ手術はそれ自体、有意な体重（ＳＨＡＭ対照よりも〜４０％大きい）および脂肪量の増加を誘導したが、アミリン処置ＯＶＸラットは、処置期間中、負の体重変化を伴った「真の」体重減少を示した。この点で、アミリンシグナル伝達に対するＯＶＸの影響は、ＯＶＸ動物においては効力の低下を、そしてエストロゲン投与後は効力の増強を示すＣＣＫなどの他のサティオゲニックニューロペプチド(satiogenic neuropeptides)の場合とは反対であると思われる（５、６、２４）。このユニークな減少を説明できる、あり得る機構を探求するため、本発明者らは、１）ＳＨＡＭおよびＯＶＸＤＩＯラットにおけるアミリン投与の末梢代謝結果；２）アミリン依存的レプチン作用の増強の寄与；および３）エストロゲン欠乏症に対する中心的応答のアミリン調節、具体的には、後脳神経発生に対するＯＶＸおよびその後のアミリン注入の影響、の３つの主要領域に焦点を当てた。
【０２８４】
本発明者らのグループおよび他のグループからのこれまでの報告によれば、アミリンの潜在能力は食欲不振による体重減少にもかかわらずエネルギー消費／代謝率を維持する（１５、２５）。従って、本発明者らは、ＯＶＸ  ＤＩＯラットにおいてアミリンにより媒介される体重減少の増進の代謝成分を、間接熱量測定を用いて特徴付けた。この分析により、ＯＶＸ動物におけるアミリンに対する有意に高い代謝促進機能が明らかになった。ＳＨＡＭ対照に比べ、ＯＶＸラットは低い代謝率および高いＲＱを示すが、これは代謝効率またはより多くのカロリーを保存および貯蔵する能力が高いことを示唆する。これは、およそ３週間後、自由に食餌を摂らせたＯＶＸラットのエネルギー消費がＳＨＡＭ対照に比べて低い傾向にあり、また、どの時点でもＲＱに差が無いことだけを報告したこれまでの研究（２６）とは対照的である。これらの差は、本発明者らが肥満ラットにおいてＯＶＸの結果を調べたのに対し、Chen & Heimanは正常体重の動物において２４時間の周期的熱量測定だけを検討した（２６）という事実によって説明することができる。エストロゲン欠乏症の代謝結果は、ＯＶＸにより誘導される正のエネルギーバランスがＳＨＡＭに比べて影響が大きいと思われる場合の肥満の状態は、全ての動物が体重を増やす傾向がより高いと思われる痩せ型の動物の場合よりも顕著であり得る。実際、最近の研究では、痩せ型の動物は、術後最初の３週間において、肥満型ラットよりも高いＯＶＸ後食物効率（食物摂取に対する体重）を示すが、これは有意に高い体重増加率を表すのではなかった（２７）。さらに、ＯＶＸは、一般的な代謝マーカーである脱共役タンパク質−１  ｍＲＮＡの、褐色脂肪組織での発現の低さに関連が見られているが、これは代謝率がＯＶＸにより抑制されていたことを示唆する（２８）。ＯＶＸラットにおける代謝および脂肪利用の低下は、このモデルにおける総じて高い体重および脂肪組織の増加に有意に寄与し得る。ＤＩＯ雄ラットでこれまでに報告されたように（１５）、ＳＨＡＭラットに対するアミリンの促進作用は代謝率を維持したが引き上げることはなく、ＲＱを引き下げた。また、暗期には、Ｘ軸身体活動の有意な増加も見られた。しかしながら、ＯＶＸラットでは、アミリンは代謝率を有意に引き上げたが完全に正常化することはなく、また、ＲＱを引き下げ、暗期の運動活性を増した。これらを考え合わせると、ＯＶＸラットへのアミリン注入により誘導された体重減少の増進は有意な代謝促進効果と関連していることが明らかである。食物摂取が対応する対照ＯＶＸ動物とアミリン処置ＯＶＸラットを比較したところ、体重減少がこれらの利益の全てではないにしてもいくつかを説明できることが明らかになった。ヨークフィードＯＶＸラットは等しく低いＲＱを示したが、カロリー制限に対する正常な生理学的応答である代謝率の低下を示した。従って、アミリンにより誘導される体重減少は、このモデルにおける基質利用上の利益を説明することができるものの、アミリン促進作用の明確な代謝寄与を説明することはできない。
【０２８５】
エストロゲンシグナル伝達とレプチン生理学の間には強い関連がある（２９）。ＯＶＸのより誘導される体重増加は、おそらくは増加した脂肪量による循環レプチンの増加と関連があり、ある程度の中枢レプチン抵抗性を誘導すると提案されてきたが（１０）、いくつかの報告では、レプチンはＯＶＸに誘導される体重および脂肪の増加を防ぐ／弱めることができることが示唆されている（２６、３０）。最近になって、アミリンはレプチンと相乗作用して、ＤＩＯラットの体重を著しく減少させることが示された。有効用量のアミリンと組み合わせても体重減少に有効でないレプチンの用量（〜５％体重減少）が、ＤＩＯラットでは〜１５％の体重減少をもたらす（３１、３２）。相乗的体重減少は脂肪特異的であり、これまでのレプチン抵抗性モデルにおけるレプチン感受性の再捕捉、すなわち、ペアフィード対照に比べて高い代謝率、高い脂肪利用および高い脂肪減少を反映する（３２）。本発明者らは、アミリンが、非機能的なレプチン受容体のために肥満症候群を示すＳＨＡＭまたはＯＶＸ  ＺＤＦラットにアミリンを注入することによって内因性レプチンに対する感受性を高めることにより、ＯＶＸラットにおいてより高い程度で体重を減少させたという可能性を探求した。本発明者らは、このモデルではレプチンの全面的なシグナル伝達能が破壊されるので、体重減少効果は、間接的レプチン成分を除き、単にアミリン促進作用によるものであろうという仮説を立てた。本発明者らは、ＺＤＦラットにおいて、ＤＩＯ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットと同様に、アミリン注入は体重減少におよそ２倍の効力があった。このモデルでは、「真の」体重減少は見られず、むしろ、アミリンはＯＶＸに関連した著しい体重増加を防いだ。興味深いことに、ＳＨＡＭ  ＺＤＦラットへのアミリン注入もまた、おそらくはＺＤＦ動物の先天的な高アミリン血症のために、同じバックグラウンド系統の痩せ型動物に比べて効果は低かった。総じて、一貫して見られたレプチンシグナル伝達を欠いたＯＶＸ動物での体重減少に対するアミリンの有効性の増大は、これがレプチン経路の動員によるものではなかったことを暗示する。
【０２８６】
エストロゲン欠乏状態における高いアミリンにより媒介される体重減少の末梢結果の他、本発明者らは、これらの効果が媒介され得るいくつかの中枢機構を探求した。海馬における成体での神経発生は、学習および記憶（３３）、ストレスの調節（３４）および数種の抗鬱薬のプラスの効果（３５）重要である可能性があると考えられている。ＯＶＸはストレス（３４）、グルココルチコイドなどのストレスホルモン（３６）、加齢（３７）および睡眠不足（３６）を伴って神経発生を低下させることが分かっているいくつかの実験的操作の１つである。エストロゲン補充はＯＶＸ動物におけるこの低下を逆転させることができる（１８、３８）。しかしながら、これまでに発表されている報告は海馬内での観察に限られており、他の脳領域での神経発生に対するエストロゲンの影響は報告されていない。最近の研究では、ＡＰおよび孤束核（ＮＴＳ）を含むいくつかの後脳領域に、海馬で見られるものと同様の自発的神経発生が存在すること見出された（２０）。本発明者らは、ＯＶＸがまた後脳の自発的神経発生も弱めるかどうか、そしてアミリンがこの効果を逆転させるかどうかを決定したいと考えた。本発明者らは、ＯＶＸがＡＰ／ＮＴＳならびに海馬における神経発生を減少させること、そしてアミリンがこの欠乏を正すことができたことを見出した。さらに、ＯＶＸラットにおいて、アミリンはビヒクルおよびアミリン処置の双方の後にＳＨＡＭ動物で見られたレベルを超えて神経発生を増大させると思われた。従って、アミリン処置後のＡＰにおける新たなニューロンの多大な増加はＯＶＸ動物においてアミリンにより媒介される著しい体重減少をもたらす可能性があるが、この仮説はまだ試験されていない。ＯＶＸラットとＳＨＡＭラットの間で急性のアミリンにより誘導されるｃ−Ｆｏｓレベルには差がないという所見は、ＡＰにおけるアミリンの異なる効果が時間的または薬理学的に独立であり得ることを示唆する。長期のアミリン処置後にＡＰにおける新たなニューロンがアミリン応答性であるかどうか、またはＯＶＸ動物においてアミリン処置後に見られる高い体重減少を、神経発生が生じないようにされる場合には弱めることができるかどうかを決定することは重要であろう。さらに、ＡＰならびに他の後脳領域においてエストロゲン受容体とアミリン応答性ニューロンの同時局在パターンを調べることにより確認することができるものなどの、アミリンシグナル伝達とエストロゲンシグナル伝達の間のより直接的な結合はまだ決定されていない。ＡＰにおけるアミリンにより誘導されるｃ−Ｆｏｓとエストロゲン受容体との同時局在、ならびにアミリンアンタゴニストがエストロゲンにより誘導される食物摂取の低下を阻害するかどうかの検討は、このような直接的関連が存在するかどうかを確認する助けとなるであろう。
【０２８７】
運動は海馬の神経発生を増大させることが示されており（３７）、一方、ＯＶＸは自発的運動の減少との関連が見出されている（３９）。また、カロリー制限も海馬において神経発生を増大させる（４０）。カロリー制限と運動が後脳の神経発生を増大させ得る程度はまだ探求されておらず、その上、直接的なアミリンシグナル伝達よりもむしろ、後脳の神経発生の促進に対する体重減少自体の役割は、これらの研究から詳細に示すことができない。ＤＩＯラットは、痩せ型ラットに比べて、述べられている脳領域の全てで有意に低い神経発生レベルを示す（本発明者らの未発表の所見）。また、後脳の神経発生におけるアミリンまたは体重減少により媒介される変化が同様に、前提となるその動物の体重の状態によって影響を受けるかどうかもまだ明らかでない。全体的に見て、肥満に関連するエストロゲン欠乏症の状態における、アミリンにより媒介される高い体重減少に関する高い後脳ニューロン成長生理学的結果はまだ完全に特徴付けられていない。
【０２８８】
本開示を詳細に示したが、当業者ならば、その主旨および範囲から逸脱することなく、変更および改変を行えることが分かるであろう。
【０２８９】
配列表
配列番号１
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２
CNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３
KCNTATCATQRLANFLIRSSNNLGAILSSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４
KCNTATCATQRLANFLIRSSNNLGAVLSPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILSSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILPSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８
KCNTATCATQRLTNFLVRSSHNLGAALSPTDVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９
KCNTATCATQRLTNFLVHSSHNLGAALLPTDVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０
KCNTATCATQRLTNFLVHSSHNLGAALSPTDVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１
CNTATCATQRLTNFLVHSSHNLGAALSPTDVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Arg His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Thr Ile Leu Ser Ser Thr Asn Val Gly Ser Asp Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Ile Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Ala Ile Leu Ser Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１４
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Val Arg Thr Ser Asn Asn Leu Gly Ala Ile Leu Ser Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１５
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Val Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Pro Val Leu Pro Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１６
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Val Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Pro Val Leu Pro Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１７
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Val Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Pro Val Leu Ser Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１８
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Thr Asn Phe Leu Val Arg Ser Ser His Asn Leu Gly Ala Ala Leu Leu Pro Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１９
Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Thr Asn Phe Leu Val Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Ala Ala Leu Leu Pro Thr Lys Val Gly Ser Asn Thr Tyr
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓはジスルフィド結合によって連結され；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２０
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２１
CNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２２
KCNTATCATQRLANFLVRSSNNFGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２３
CNTATCATQRLANFLVRSSNNFGPVLPPTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２４
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２５
KCNTATCATQRLANFLIHSSNNFGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２６
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNLGPVLPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２７
KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２８
KCNTATCATQRLANFLIHSSNNLGPILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号２９
CNTATCATQRLANFLIHSSNNLGPILPPTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３０
KCNTATCATQRLANFLIRSSNNRGPVLPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３１
KCNTATCATQRLTNFLVRSSHNLGPALPPTDVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３２
KCNTATCATQRLANFLVRSSNNFGPILPSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３３
CNTATCATQRLANFLVRSSNNFGPILPSTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３４
KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPILPSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３５
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNLGPVLPSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３６
CNTATCATQRLANFLVHSSNNLGPVLPSTNVGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３７
ＫＣＮＴＡＴＣＡＴＱＲＬＡＮＦＬＶＲＳＳＮＮＬＧＰＶＬＰＳＴＮＶＧＳＮＴＹ
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３８
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPSTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号３９
KCNTATCATQRLTNFLVRSSHNLGAILPPTDVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４０
KCNTATCVLGKLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４１
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４２
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPPTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４３
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４４
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４５
ＫＣＮＴＡＴＣＶＬＧＲＬＡＮＦＬＨＲＬＱＴＹＰＲＴＮＴＧＳＮＴＹ
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４６
ACNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４７
KCNAATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４８
KCNTAACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号４９
CANLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５０
イソカプロイル-STAVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５１
CSNASTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５２
CSNLATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５３
CSNLSACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５４
KCNTATCVLGRLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５５
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSGTP
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５６
CSALSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５７
Ac-(Agy)SNLST(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、Ｃ末端Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５８
Ac-K(Agy)NTAT(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、Ｃ末端Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号５９
イソカプロイル-STAVL(Aib)RLSQELRLQTYPRTNTGSGTP
ここで、Ｃ末端Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６０
イソカプロイル-STAVLG[K(For)]LSQELH[K(For)]LQTYPRTNTGSGTP
ここで、Ｃ末端Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６１
イソカプロイル-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNTGSNTY
ここで、Ｃ末端Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６２
イソカプロイル-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNVGSNTY
ここで、Ｃ末端Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６３
KCNTATCLLQQLQKLLQKLKQYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６４
KCNTASCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６５
KCNTAVCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６６
KCNTATCVLGRLSQELHRYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、２９Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６７
KCNTATCVLGK(For)LSQELHK(For)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、Ｃ末端Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６８
KCNTA(d-Thr)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号６９
KCNTA(dAh)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７０
Ac-ACNTATCVLGRLSQELHK(PEG5000)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７１
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３５Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７２
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３５Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７３
KCNTATCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７４
KCNTSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７５
KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７６
KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７７
KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７８
KCNTA(Hse)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号７９
KCNTA(Ahb)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８０
KCNTA(Ahp)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８１
KCNTAT(OP03H2)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８２
ＫＣＮＴＡＴＣＶＬＧ（Ｏｒｎ）ＬＳＱＥＬＨ（Ｏｒｎ）ＬＱＴＹＰＲＴＮＴＧＳＮＴＹ
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８３
KCNTATCVLG(Cit)LSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８４
KCNTATCVLG(homoK)LSQELH(homoK)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８５
L-オクチルグリシンKCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８６
N-3,6-ジオキサオクタノイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８７        
KCNTATCMLGRYTQDFHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８８
DSNLSTKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号８９
KDNTATKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９０
CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３１Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９１
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(9Anc)
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９２
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(L-オクチルグリシン)
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９３
N-イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９４
KCNTATCVLG(homoR)LSQELH(homoR)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９５
FCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９６
KCNTATCVLGRLSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９７
KCNTATCVLGRLSQELH(Orn)LQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９８
ICNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号９９
1-オクチルグリシン-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１００
イソカプロイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０１
KCNTATCVLG(Cit)LSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０２
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０３
イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０４
KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSEAF
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｈｅは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０５
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPTNVGSEAF
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｈｅは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０６
KCNTATCVLGRLSRSLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０７
KCNTATCVTHRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０８
KCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１０９
CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNT
ここで、１Ｃｙｓおよび６Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３０Ｔｈｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号ｌｌ０
KCNTATCVLGRLSQELHRLQNFVPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１１
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSETF
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｈｅは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１２
ACDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１３
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSKAF
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｈｅは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１４
KCDTATCVTHRLAGLLSRSQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１５
KCNTATCVLGRLADALHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１６
KCNTATCVLGRLAAFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１７
SCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１８
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTMPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１１９
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２０
KCNTATCVLGRLNEYLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２１
SCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２２
KCNTATCVLGRLTEFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２３
KCNTATCVLGRLAEFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２４
KCNTATCVLGRLTDYLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２５
KCNTATCVLGRLAQFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２６
KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２７
KCNTATCVLGRLADFLHRFHTFPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２８
KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSGTP
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｈｅは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１２９
CNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３０
KCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３１
KCNTATCVLGRLFDFLHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３２
KCNTATCVLGRLAAALHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３３
TCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３４
CSNLSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３５
KCNTATCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３６
CSNLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３７
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３８
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILPPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１３９
KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILSPTNVGSNTY
ここで、２Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３７Ｔｙｒは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１４０
CGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAP
ここで、１Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１４１
CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSGTP
ここで、１Ｃｙｓおよび７Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
配列番号１４２
HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSGGGKCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY
ここで、４４Ｃｙｓおよび４９Ｃｙｓは場合によりジスルフィド結合によって連結されていてもよく；かつ、３２Ｐｒｏは場合によりアミド化されていてもよい。
【図１Ａ】
2012523434.tif 000011
【図１Ｂ】
2012523434.tif 000012
【図１Ｃ】
2012523434.tif 000013
【図２Ａ】
2012523434.tif 000014
【図２Ｂ】
2012523434.tif 000015
【図２Ｃ】
2012523434.tif 000016
【図３Ａ】
2012523434.tif 000017
【図３Ｂ】
2012523434.tif 000018
【図３Ｃ】
2012523434.tif 000019
【図４Ａ】
2012523434.tif 000020
【図４Ｂ】
2012523434.tif 000021
【図４Ｃ】
2012523434.tif 000022
【図５Ａ】
2012523434.tif 000023
【図５Ｂ】
2012523434.tif 000024
【図５Ｃ】
2012523434.tif 000025
【図５Ｄ】
2012523434.tif 000026
【図５Ｅ】
2012523434.tif 000027
【図５Ｆ】
2012523434.tif 000028
【図６Ａ】
2012523434.tif 000029
【図６Ｂ】
2012523434.tif 000030
【図６Ｃ】
2012523434.tif 000031
【図６Ｄ】
2012523434.tif 000032
【図６Ｅ】
2012523434.tif 000033
【図６Ｆ】
2012523434.tif 000034
【図７Ａ】
2012523434.tif 000035
【図７Ｂ】
2012523434.tif 000036
【図７Ｃ】
2012523434.tif 000037
【図７Ｄ】
2012523434.tif 000038
【図７Ｅ】
2012523434.tif 000039
【図７Ｆ】
2012523434.tif 000040
【図７Ｇ】
2012523434.tif 000041
【図７Ｈ】
2012523434.tif 000042
【図７Ｉ】
2012523434.tif 000043
【図７Ｊ】
2012523434.tif 000044
【図８Ａ】
2012523434.tif 000045
【図８Ｂ】
2012523434.tif 000046
【図８Ｃ】
2012523434.tif 000047
【図９Ａ】
2012523434.tif 000048
【図９Ｂ】
2012523434.tif 000049
【図９Ｃ】
2012523434.tif 000050
【図９Ｄ】
2012523434.tif 000051
【図９Ｅ】
2012523434.tif 000052
【図９Ｆ】
2012523434.tif 000053
【図９Ｇ】
2012523434.tif 000054
【図９Ｈ】
2012523434.tif 000055
【配列表】
2012523434000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成23年11月30日(2011.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2012523434000001.app
【国際調査報告】
2012523434.tif 000066
2012523434.tif 000067
2012523434.tif 000068
2012523434.tif 000069