(57)【要約】  本発明は、食物アレルゲンではないアレルゲンまたは喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とするヒトＴｒ１細胞を含む組成物、および食物アレルギー性症状以外のアレルギー性または喘息性症状を治療するためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
食物アレルゲンではない、アレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む医薬。
【請求項２】
１種または複数の薬学的に許容される担体と組み合わせた、食物アレルゲンではない、アレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む薬剤組成物。
【請求項３】
前記ヒトＴｒ１細胞集団がヒトＴｒ１クローン集団である、請求項１または２のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項４】
アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンが、食物アレルゲンではない、吸入性アレルゲン、摂取性アレルゲンおよび接触性アレルゲンを含む群から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項５】
アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンが、チリダニ、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される、請求項４に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項６】
アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンが、花粉、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される、請求項４に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項７】
アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンが、イヌ、ネコ、齧歯類、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される、請求項４に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項８】
食物アレルギー性症状以外の、アレルギー性または喘息性症状を治療するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項９】
前記アレルギー性または喘息性症状が、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎、湿疹およびアナフィラキシーを含む群において選択される、請求項８に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項１０】
本発明の有効量の医薬または薬剤組成物の対象への投与を、アレルギー性または喘息性症状を治療するために使用される１種または複数の治療剤と組み合わせる、請求項８から９のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項１１】
喘息にかかりやすい対象を治療するための、請求項８から１０のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項１２】
Ｔｒ１細胞が、それらが投与されることになっている対象の自己由来である、請求項８から１１のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項１３】
１０４ｋｇから１０９／ｋｇのＴｒ１細胞がそれを必要とする対象に投与される、請求項８から１２のいずれか一項に記載の医薬または薬剤組成物。
【請求項１４】
それを必要とする対象の食物アレルギー性の症状以外のアレルギー性または喘息性症状を治療する方法であって、
−前記対象の血液試料から取得される、食物アレルゲンではない、アレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とするＴｒ１細胞を取得するステップと、
−アレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とする前記Ｔｒ１細胞をクローニングするステップと、
−先のステップで取得したＴｒ１クローンをさらに拡大するステップと、
―そうして取得したＴｒ１クローンを前記対象に、好ましくは静脈内経路により注入するステップと、を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はアレルギーおよび喘息の治療の分野に関する。本発明は、詳細には、アレルギー性または喘息性症状に関係する抗原を対象とするヒトＴｒ１細胞を含む医薬を使用して、アレルギー性または喘息性症状を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
喘息を包含するアレルギー性疾患は、無害の抗原に対する異常な免疫応答から生じる慢性炎症性障害として定義される。したがって、アレルギー性疾患の発生率の上昇が急速で、地理的に局所的であるという性質は、環境および生活様式の最近の変化に対応して影響を受けていることを示す。環境および生活様式の役割に基づく一仮説によると、重要な免疫学的調節制御の不適切または不完全な発症は環境微生物への不適切な曝露に起因している。
【０００３】
アレルギーおよびアトピーの個体は、チリダニおよび花粉などのありふれた無害の環境アレルゲンからの特異的な比較的高いレベルの血中ＩｇＥを有する。アレルギーの感作に続くアレルゲンへの曝露は、肥満細胞および好塩基球の表面に結合されたアレルゲンに特異的なＩｇＥの架橋、これらの細胞の顆粒消失および、喘鳴および結膜炎を包含する初期または急性アレルギー反応に関連した症候をもたらすヒスタミンおよび他の媒体の放出をもたらす。アレルギーの患者のアレルゲンに特異的なＩｇＥ応答の上記選択的な増強のメカニズムに関して、Ｔｈ２細胞は主要な役割を果たす。例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−９およびＩＬ−１３などのＴｈ２由来サイトカインのレベルは、アレルギーの患者において、より高いことが示されている。
【０００４】
アレルギーおよび喘息に対する現在の治療は、主として抗ヒスタミン剤、グルココルチコイド、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、エピネフリン（アドレナリン）、テオフィリン、クロモリンナトリウムまたはβ２作動薬の使用に基づく。モンテルカスト（シングレア）またはザフィルルカスト（アコレート）などの抗ロイコトリエンは、アレルギー性疾患の治療に対してＦＤＡ承認されている。抗コリン作動薬、うっ血除去薬、肥満細胞安定化薬および好酸球走化性を害すると考えられる他の化合物もまた、一般に使用される。これらの薬物は、アレルギーの症候を緩和するのに役立ち、急性アナフィラキシーの回復において必須であるが、アレルギー性疾患の長期の治療においては役割をあまり果たさない。さらに、上記薬物はいくらかの副作用を有することがある。患者の約３分の１は、最終的にこれらの薬物で最適な疾患制御を達成しない。
【０００５】
アレルギー性症状を治療するための別の療法は、感作するアレルゲンの繰り返し投与（皮下注射ＳＣＩＴまたは舌下適応ＳＬＩＴに施すことによる）を含むアレルゲンに特異的な免疫療法（ＳＩＴ）である。しかしながら、この療法は、患者にとって必ずしも安全だとは限らない。副作用およびアナフィラキシーの少数の症例が特に重症の喘息患者において観察されているからである。
【０００６】
したがって、アレルギー性および喘息性症状の治療に対して特異的および永続的な効果を有する新規の戦略が必要とされる。
【０００７】
本発明において、本発明者らは、特異的なアレルゲンに関係する抗原を対象とするＴｒ１細胞の使用に基づいたアレルギーまたは喘息の特異的療法を提供することを目標とする。Ｍｅｉｌｅｒらは、自然にハチに刺されてハチ毒の高い供与量にさらされる養蜂家をモデルに使用し、健常の個体のアレルゲンに対するＴ細胞寛容のメカニズムを分析している。著者らは、ハチ毒に被曝すると、アレルゲンに特異的なＴ細胞の、Ｔｈ１およびＴｈ２細胞からＩＬ−１０分泌Ｔｒ１細胞への即時の切り替えが数日内に起こることを説明している。著者らは、ＨＲ２（ヒスタミン受容体２）がアレルゲンに対する末梢性寛容に関与する必須の受容体を代表し、かつ、ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１はまたこの寛容メカニズムに役割を果たすことを見出した。著者らは、養蜂家が極めて高い特異的ＩｇＧ４を示すことを観察し、それが重症アナフィラキシーの予防の１つの理由であり得ると示唆した。
【０００８】
Ｈａｕｂｅｎらは、気道炎症のネズミモデルで観察した結果に基づいて、Ｔｒ１細胞がＴｈ２介在病状を抑制することができることを明らかにしている。これらのネズミモデルに関する試験は、ＯＶＡのＴｒ１細胞特異性が、気道炎症を誘発するＯＶＡにさらされたマウス中でＩＬ−１０を分泌することによって気道炎症を防御することができることを示した。上記実験は、Ｔｒ１細胞分化およびＩＬ−１０分泌を誘発するアレルゲン特異的療法（ＳＩＴ）への関心を確実にした。
【０００９】
したがって、Ｔｒ１細胞療法についてのこれらの情報に基づき、本発明者らは、アレルギー性の症状を治療するために、新規の療法を提供することを目標とする。これは患者に投与されるＴｒ１細胞の療法であり、上記Ｔｒ１細胞はアレルゲンに関係する抗原に対して特異的である。この細胞療法は、アレルゲンに関係する抗原が患者有機体中に存在する場合にのみ誘発されるという利点を有し、したがって、患者の全体免疫系を活性化する、アレルゲンに関係する抗原の患者への投与を必要としない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の一目的は、アレルギー性または喘息性症状に関係する、アレルゲン食品ではないアレルゲンを対象とする、少なくとも１つのヒトＴｒ１細胞集団を含む組成物である。
【００１１】
一実施形態によると、前記ヒトＴｒ１細胞集団はヒトＴｒ１クローン集団である。
【００１２】
別の実施形態によると、アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンは、食物アレルゲンではない吸入性アレルゲン、摂取性アレルゲンおよび接触性アレルゲンを含む群から選択される。
【００１３】
別の実施形態によると、アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンは、チリダニ、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される。
【００１４】
別の実施形態によると、アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンは、花粉、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される。
【００１５】
別の実施形態によると、アレルギー性または喘息性症状に関係する前記アレルゲンは、イヌ、ネコ、齧歯類、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択される。
【００１６】
本発明の別の目的は、アレルギー性または、喘息性症状に関係する、食品アレルゲンではないアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む医薬または薬剤組成物である。
【００１７】
一実施形態によれば、前記ヒトＴｒ１細胞集団はヒトＴｒ１クローン集団である。
【００１８】
別の実施形態によれば、前記ヒトＴｒ１細胞集団は、吸入性アレルゲン、摂取性アレルゲンおよび接触性アレルゲンを含む群から選択される、アレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする。
【００１９】
別の実施形態によれば、前記ヒトＴｒ１細胞集団は、チリダニ、花粉、イヌ、ネコ、齧歯類、これらの断片、変異体および混合物からのアレルゲンの群において選択されるアレルゲンを対象とする。
【００２０】
別の実施形態によれば、前記医薬または薬剤組成物は、食物アレルギー症状以外のアレルギー性または喘息性症状の治療を目的とする。
【００２１】
一実施形態によれば、前記アレルギー性または喘息性症状は、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎、湿疹およびアナフィラキシーである。
【００２２】
別の実施形態によれば、アレルギー性または喘息性症状を治療するために使用される１種または複数の治療剤と組み合わせて、前記医薬または薬剤組成物は、その有効量が、対象に投与される。
【００２３】
別の実施形態によれば、前記医薬または薬剤組成物は、喘息にかかりやすい対象の治療を目的とする。
【００２４】
本発明の別の目的は、それを必要とする対象の食物アレルギー性の症状以外のアレルギー性または喘息性症状を治療する方法であって、
−前記対象の血液試料から取得される、食物アレルゲンではない、アレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とするＴｒ１細胞を取得するステップ、
−アレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とする前記Ｔｒ１細胞をクローニングするステップ、
−先のステップで取得したＴｒ１クローンをさらに拡大するステップ、
―そうして取得したＴｒ１クローンを前記対象に、好ましくは静脈内注射により注入するステップを含む方法である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
定義
本明細書で使用される「Ｔｒ１細胞」という用語は、静止状態でＣＤ４＋ＣＤ２５−ＦｏｘＰ３−の表現型を有し、活性化されると高レベルのＩＬ−１０および有意なレベルのＴＧＦ−βを分泌できる細胞を指す。Ｔｒ１細胞は、独特のサイトカインプロファイルにより一部特徴付けられ、これらは、高レベルのＩＬ−１０、有意なレベルのＴＧＦ−β、および中間レベルのＩＦＮ−γを産生するが、ＩＬ−４またはＩＬ−２は、ほとんどまたは全く産生しない。サイトカイン産生は、典型的には、抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８抗体またはインターロイキン２、ＰＭＡ＋イオノマイシンなどのＴリンパ球のポリクローナル活性化因子を用いて活性化した後の細胞の培養物において評価される。代替として、サイトカイン産生は、抗原提示細胞により提示される特異的Ｔ細胞抗原を用いて活性化した後の細胞の培養物において評価される。高レベルのＩＬ−１０とは、少なくとも約５００ｐｇ／ｍｌ、典型的には約１０００、２０００、４０００、６０００、８０００、１００００、１２０００、１４０００、１６０００、１８０００、または２００００ｐｇ／ｍｌ以上の量に相当する。有意なレベルのＴＧＦ−βとは、少なくとも約１００ｐｇ／ｍｌ、典型的には約２００、３００、４００、６００、８００、または１０００ｐｇ／ｍｌ以上の量に相当する。中間レベルのＩＦＮ−γとは、０ｐｇ／ｍｌないし少なくとも４００ｐｇ／ｍｌの間、典型的には約６００、８００、１０００、１２００、１４００、１６００、１８００、または２０００ｐｇ／ｍｌ以上の量を含む濃度に相当する。ＩＬ−４またはＩＬ−２が、ほとんどまたは全くないとは、約５００ｐｇ／ｍｌ未満、好ましくは約２５０、１００、７５、または５０ｐｇ／ｍｌ以下の量に相当する。
【００２６】
本明細書で使用される「抗原」という用語は、本発明の細胞が対象とするタンパク質、またはペプチドを指す。一実施形態では、「抗原」という用語は、目的の抗原と配列相同性、もしくは目的の抗原と構造的相同性、またはこれらの組合せを共有する、合成由来の分子または天然由来の分子を指し得る。一実施形態では、抗原はミメトープであってもよい。抗原の「断片」とは、より短いペプチドのような、抗原の任意のサブセットを指す。抗原の「変異体」とは、抗原全体またはその断片のどちらかに実質的に類似する分子を指す。変異体の抗原は、当分野で周知の方法を使用して、変異体のペプチドを直接化学合成することにより、都合よく調製することができる。
【００２７】
本明細書で使用される「対象」という用語は、ヒトを指す。
【００２８】
本明細書で使用される「有効量」という用語は、有益な、または所望の臨床結果（例えば、臨床症状の改善）を生じさせるに十分な量を指す。
【００２９】
本明細書で使用される「クローン」または「クローン集団」という用語は、特有の分化細胞に由来する分化細胞の集団を指す。
【００３０】
本明細書で使用される「治療」または「治療する」という用語は、通常、治療される個体の自然経過を変えようとする臨床的介入を指し、臨床病理の過程中に行うことができる。望ましい効果とは、症候を軽減し、いかなる直接的または間接的な疾患の病理学的事象も抑制、減少または阻害し、疾患進行率を低下させ、疾患の状態を改善もしくは緩和させ、寛解もしくは改善された予後を生じさせることを含むが、これらに限定されるものではない。本発明の文脈において、望ましい効果とは、アレルギーまたは喘息の臨床症候における何らかの改善を指し、また、患者の健康における何らかの改善をいう。
【００３１】
本明細書で使用される「アレルギー」という用語は、それらの症候が花粉症、鼻閉、そう痒および鼻汁を含む、アナフィラキシー、湿疹、鼻炎、結膜炎などの何らかのアレルギー性の症状を指す。
【００３２】
本明細書で使用される「喘息」という用語は、気道が時々収縮し、炎症を起こし、かつ、過剰量の粘液で覆われる呼吸器を含む慢性病を指す。この気道狭窄は喘鳴音、息切れ、胸部絞扼感および咳嗽などの症候の原因となる。
【００３３】
皮膚検査および血液検査などのアレルギーまたは喘息を評価するための様々な方法が知られている。  
【００３４】
例えば、アレルゲンに特異的なＩｇＥ抗体の存在の評価について、アレルギー皮膚試験は、血液アレルギーテストより敏感で特異的であり使用がより簡単であり、それほど高価ではないので、好ましい。皮膚検査もまた、患者の皮膚にされた一連のごく小さい穿刺またはプリックによる「穿刺検査」および「プリック検査」として知られている。少量の疑わしいアレルゲンおよび／またはそれらの抽出物（花粉、草、ダニタンパク質、ピーナッツ抽出物など）が、ペンまたは色素（それ自体がアレルギー応答の原因とならないように、インク／色素は注意深く選択されるべきである）を用いて印付けされる皮膚の部位に導入される。小さいプラスチックまたは金属用具が皮膚を刺すかまたは小穴を空けるために使用される。時には、アレルゲンは、針および注射器を用いて、患者の皮膚に「皮内に」注入される。検査の一般的な領域は前腕内側および背中を包含する。患者が物質に対してアレルギー性ならば、目に見える炎症反応が３０分以内に通常生じる。この応答は、皮膚の軽微な発赤から、より敏感な患者においてはみみずばれ（ｆｕｌｌ−ｂｌｏｗｎ  ｈｉｖｅ）（「膨疹・潮紅」と呼ばれる）の範囲である。皮膚プリックテストの結果の解釈は、重症度の尺度についてアレルギー専門医によって通常行われ、＋／−は境界線の反応を意味し、かつ、４＋は大きい反応である。
【００３５】
特異的な物質に対するアレルギーの検出のための、様々な血液アレルギー検査法が利用可能である。この種の検査は「全ＩｇＥレベル」を測定し患者血清中に含まれるＩｇＥを評価する。これは、放射測定および比色定量免疫測定法の使用によって求めることができる。放射測定アッセイは、血中のＩｇＥ抗体のレベルを定量するために放射性同位元素で標識したＩｇＥ結合（抗ＩｇＥ）抗体を使用する放射性アレルゲン吸着試験（ＲＡＳＴ）法を包含する。他のより新規の方法は、放射性同位元素の位置で比色定量または蛍光測定技術を使用する。一部の「スクリーニング」試験法は、疑わしいアレルギー感作を有する患者の「イエス」または「ノー」という答えを与える、定性試験結果を提供するように意図される。
【００３６】
低い全ＩｇＥレベルでは、普通に吸入されるアレルゲンに対する感作を除外するのには十分ではない。ＲＯＣ曲線などの統計的手法、予測値計算および尤度比は、様々な試験法の互いとの関係を吟味するために使用されてきた。これらの方法のよると、高い全ＩｇＥレベルの患者が、アレルギー性感作の高い確率を有することを示したが、しかし、注意深く選択されたアレルゲンに特異的なアレルギーテストを備えたさらなる調査が、しばしば是認される。
【００３７】
これらの方法はすべて、アレルギー性症状または喘息症状の原因である少なくとも１種のアレルゲンの決定を可能にする。
【００３８】
本発明は、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団の使用に基づいた、食物アレルギー性の症状以外の、少なくとも１種の特異的なアレルギー性または喘息性症状を治療する方法を提供することを目標とする。この方法では、アレルギー性の症状に関係するアレルゲンを対象に投与する必要はない。
【００３９】
本発明は、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とするヒトＴｒ１細胞を含む組成物の対象に対する投与を含む、それを必要とする対象の、食物アレルギー性の症状以外の、少なくとも１種の特異的なアレルギー性または喘息性症状を治療する方法に関する。
【００４０】
本発明によれば、「ヒトＴｒ１細胞集団」とは、本明細書の定義において先に記載したＴｒ１細胞に相当し、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞もしくはＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞（天然または従来のＴｒｅｇ）、ＴＧＦ−β分泌Ｔｈ３細胞、または制御性ＮＫＴ細胞を含まない。
【００４１】
本発明によれば、「食物アレルギー性の症状以外の特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲン」とは、吸入性アレルゲン、食物アレルゲンを除いた摂取性アレルゲンおよび接触性アレルゲンの群において選択される。
【００４２】
吸入性アレルゲンの例を以下を挙げるがこれらに限定されない：
−コナダニ亜目：アカルス・シロＡｃａｒｕｓ  ｓｉｒｏ（貯蔵庫ダニ、Ａｃａ  ｓ  １３）、ブロミア・トロピカリスＢｌｏｍｉａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ（ダニ、Ｂｌｏ  ｔ）、デルマトパゴイデス・ファリナエＤｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ  ｆａｒｉｎａｅ（アメリカチリダニ、Ｄｅｒ  ｆ）、デルマトパゴイデス・ミクロケラスＤｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ  ｍｉｃｒｏｃｅｒａｓ（チリダニ、Ｄｅｒ  ｍ）デルマトパゴイデス・プテロニシナスＤｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ  ｐｔｅｒｏｎｙｓｓｉｎｕｓ（ヨーロッパチリダニ、Ｄｅｒ  ｐ）、エウログリュプス・マュネイＥｕｒｏｇｌｙｐｈｕｓ  ｍａｙｎｅｉ（チリダニ、Ｅｕｒ  ｍ）、グリュキュパグス・デメスティクスＧｌｙｃｙｐｈａｇｕｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ（貯蔵庫ダニ、Ｇｌｙ  ｄ  ２）、レピドグリュプス・デストルクトルＬｅｐｉｄｏｇｌｙｐｈｕｓ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒ（貯蔵庫ダニ、Ｌｅｐ  ｄ）、チュロパグス・プトレスケンティアエＴｙｒｏｐｈａｇｕｓ  ｐｕｔｒｅｓｃｅｎｔｉａｅ（貯蔵庫ダニ、Ｔｙｒ  ｐ）；
−ゴキブリ目：ブラテッラ・ゲルマニカＢｌａｔｔｅｌｌａ  ｇｅｒｍａｎｉｃａ（チャバネゴキブリ、Ｂｌａ  ｇ）、ペリプラネタ・アメリカナＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ（ワモンゴキブリ、Ｐｅｒ  ａ）
−鞘翅類：ハルモニア・アクシュリディスＨａｒｍｏｎｉａ  ａｘｙｒｉｄｉｓ（ナミテンントウ、Ｈａｒ  ａ）、
−双翅目：アエデス・アエギュプティＡｅｄｅｓ  ａｅｇｙｐｔｉ（ネッタイシマカ、Ａｅｄ  ａ）、キロノムス・キイエンシスＣｈｉｒｏｎｏｍｕｓ  ｋｉｉｅｎｓｉｓ（ユスリカ、Ｃｈｉ  ｋ）、キロノムス・トゥンミ・トゥンミＣｈｉｒｏｎｏｍｕｓ  ｔｈｕｍｍｉ  ｔｈｕｍｍｉ（ユスリカ、Ｃｈｉ  ｔ）、フォルキポミュイア・タイワナＦｏｒｃｉｐｏｍｙｉａ  ｔａｉｗａｎａ（ヌカカ、Ｆｏｒ  ｔ）、グロッシナ・モルシタンスＧｌｏｓｓｉｎａ  ｍｏｒｓｉｔａｎｓ（サバンナツェツェバエ，  Ｇｌｏ  ｍ）、
−半翅目：トリアトマ・プロトラクタＴｒｉａｔｏｍａ  ｐｒｏｔｒａｃｔａ（カリホルニアサシカメ、Ｔｒｉａ  ｐ）、
−膜翅類：アピス・ケラナＡｐｉｓ  ｃｅｒａｎａ（トウヨウミツバチ、Ａｐｉ  ｃ）、アピス・ドルサタＡｐｉｓ  ｄｏｒｓａｔａ（オオミツバチ、Ａｐｉ  ｄ）、アピス・メッリフェラＡｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ（ミツバチ、Ａｐｉ  ｍ）、ボンブス・ペンシュルワニクスＢｏｍｂｕｓ  ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉｃｕｓ（マルハナバチ、Ｂｏｍ  ｐ）、ボンブス・テッレストリスＢｏｍｂｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ（セイヨウオオマルハナバチ、Ｂｏｍ  ｔ）、ドリコウェスプラ・アレナリアＤｏｌｉｃｈｏｖｅｓｐｕｌａ  ａｒｅｎａｒｉａ（スズメバチ、Ｄｏｌ  ａ）、ドリコウェスプラ・マクラタＤｏｌｉｃｈｏｖｅｓｐｕｌａ  ｍａｃｕｌａｔａ（ハクメンスズメバチ、Ｄｏｌ  ｍ）、ミルメキア・ピロスラＭｙｒｍｅｃｉａ  ｐｉｌｏｓｕｌａ（オーストラリアジャンパーアリ、Ｍｙｒ  ｐ）、ポリステス・アンニュラリスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ａｎｎｕｌａｒｉｓ（キバチ，Ｐｏｌ  ａ）、ポリステス・ドミヌルスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ｄｏｍｉｎｕｌｕｓ（チチュウカイアシナガバチ、Ｐｏｌ  ｄ）、ポリステス・エクスクラマンスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ｅｘｃｌａｍａｎｓ（キバチ、Ｐｏｌ  ｅ）、ポリステス・フスカトゥスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ｆｕｓｃａｔｕｓ（キバチ、Ｐｏｌ  ｆ）、ポリステス・ガッリクスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ｇａｌｌｉｃｕｓ（キバチ、Ｐｏｌ  ｇ）、ポリステス・メトリクスＰｏｌｉｓｔｅｓ  ｍｅｔｒｉｃｕｓ（キバチ、Ｐｏｌ  ｍ）、ポリュビア・パウリスタＰｏｌｙｂｉａ  ｐａｕｌｉｓｔａ（キバチ、Ｐｏｌ  ｐ）、ポリュビア・スクテッラリスＰｏｌｙｂｉａ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｓ（キバチ、Ｐｏｌ  ｓ）、ソレノプシス・ゲミナタＳｏｌｅｎｏｐｓｉｓ  ｇｅｍｉｎａｔａ（ネッタイヒアリ、Ｓｏｌ  ｇ）、ソレノプシス・インウィクタＳｏｌｅｎｏｐｓｉｓ  ｉｎｖｉｃｔａ（アカトフシアリ、Ｓｏｌ  ｉ）、ソレノプシス・リクテリＳｏｌｅｎｏｐｓｉｓ  ｒｉｃｈｔｅｒｉ（クロフシアリ、Ｓｏｌ  ｒ）、ソレノプシス・サエウィッシマＳｏｌｅｎｏｐｓｉｓ  ｓａｅｖｉｓｓｉｍａ（ブラジルヒアリ、Ｓｏｌ  ｓ）、ウェスパ・クラブロＶｅｓｐａ  ｃｒａｂｒｏ（モンスズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｃ）、ウェスパ・マンダリニアＶｅｓｐａ  ｍａｎｄａｒｉｎｉａ（オオスズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｍ）、ウェスプラ・フラウォピロサＶｅｓｐｕｌａ  ｆｌａｖｏｐｉｌｏｓａ（スズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｆ）、ウェスプラ・ゲルマニカＶｅｓｐｕｌａ  ｇｅｒｍａｎｉｃａ（スズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｇ）、ウェスプラ・マクリフロンスＶｅｓｐｕｌａ  ｍａｃｕｌｉｆｒｏｎｓ（スズメバチ、ｖｅｓ  ｍ）、ウェスプラ・ペンシュルワニカＶｅｓｐｕｌａ  ｐｅｎｓｙｌｖａｎｉｃａ（スズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｐ）、ウェスプラ・スクアモサＶｅｓｐｕｌａ  ｓｑｕａｍｏｓａ（スズメバチ、Ｖｅｓｐ  ｓ）、ウェスプラ・ウィドゥアＶｅｓｐｕｌａ  ｖｉｄｕａ（キバチ、Ｖｅｓ  ｖｉ）、ウェスプラ・ウルガリスＶｅｓｐｕｌａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ（スズメバチ、Ｖｅｓ  ｖ）、
−マダニ類：アルガス・レフレクスＡｒｇａｓ  ｒｅｆｌｅｘｕｓ（ハトマダニ、Ａｒｇ  ｒ）、
−鱗翅類：ボンビュクス・モリＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉ（カイコガ、Ｂｏｍｂ  ｍ）、プロディア・インテルプンクテッラＰｌｏｄｉａ  ｉｎｔｅｒｐｕｎｃｔｅｌｌａ（ノシメマダラメイガＰｌｏ  ｉ）、タウメトポエア・ピテュオカンパＴｈａｕｍｅｔｏｐｏｅａ  ｐｉｔｙｏｃａｍｐａ（マツギョウレツガＰｉｎｅ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｏｎａｒｙ  ｍｏｔｈ（Ｔｈａ  ｐ）、
−シミ目：レピスマ・サッカリナＬｅｐｉｓｍａ  ｓａｃｃｈａｒｉｎａ（シミ、Ｌｅｐ  ｓ）、
−ノミ目：クテノケパリデス・フェリス・フェリスＣｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ  ｆｅｌｉｓ  ｆｅｌｉｓ（ネコノミ、Ｃｔｅ  ｆ）
−食肉目：カニス・ファミリアリス（イヌ、Ｃａｎ  ｆ））フェリス・デメスティクスＦｅｌｉｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ（ネコ、Ｆｅｌ  ｄ）、
−ウサギ目：オリュクトラグス・クニクルスＯｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ  ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ（ウサギ、Ｏｒｙ  ｃ）、
−奇蹄類：エクウス・カバッルスＥｑｕｕｓ  ｃａｂａｌｌｕｓ（家畜馬、Ｅｑｕ  ｃ）、
−カレイ目：レピドルホンブス・ウイッフィアゴニスＬｅｐｉｄｏｒｈｏｍｂｕｓ  ｗｈｉｆｆｉａｇｏｎｉｓ（ヒラメ、カレイ、イシガレイ、Ｌｅｐ  ｗ）、
−齧歯目：カウィア・ポルケッルスＣａｖｉａ  ｐｏｒｃｅｌｌｕｓ（モルモット、Ｃａｖ  ｐ）、
ムス・ムスクルスＭｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス、Ｍｕｓ  ｍ）、ラットス・ノルウェギウスＲａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇｉｕｓ（ラット、Ｒａｔ  ｎ）、
−球果植物目：カマエキュパリス・オブトゥサＣｈａｍａｅｃｙｐａｒｉｓ  ｏｂｔｕｓａ（ヒノキ、Ｃｈａ  ｏ）、クプレッサス・アリゾニカＣｕｐｒｅｓｓｕｓ  ａｒｉｚｏｎｉｃａ（イトヒバ、Ｃｕｐ  ａ）、クリュプトメリア・ヤポニカＣｒｙｐｔｏｍｅｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ（スギ、Ｃｒｙ  ｊ）、クプレッサス・セムペルウィレンスＣｕｐｒｅｓｓｕｓ  ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ（イトスギ、Ｃｕｐ  ｓ）、ユニペルス・アシェイＪｕｎｉｐｅｒｕｓ  ａｓｈｅｉ（マウンテンシダー、Ｊｕｎ  ａ）、ユニペルス・オクシュケドルスＪｕｎｉｐｅｒｕｓ  ｏｘｙｃｅｄｒｕｓ（ケードネズ、Ｊｕｎ  ｏ）、ユニペルス・サビノイデスＪｕｎｉｐｅｒｕｓ  ｓａｂｉｎｏｉｄｅｓ（マウンテンシダー、Ｊｕｎ  ｓ）、ユニペルス・ウィルギニアナＪｕｎｉｐｅｒｕｓ  ｖｉｒｇｉｎｉａｎａ（エンピツビャクシン、Ｊｕｎ  ｖ）、
−リンドウ目：カタラントゥス・ロセウスＣａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ  ｒｏｓｅｕｓ（ニチニチソウ、Ｃａｔ  ｒ）、
−イネ目：アントクサ・オドラトゥムＡｎｔｈｏｘａｎｔｈｕｍ  ｏｄｏｒａｔｕｍ（ハルガヤ、Ａｎｔ  ｏ  １）、キュノドン・ダクチテュロンＣｙｎｏｄｏｎ  ｄａｃｔｙｌｏｎ（バミューダグラス、Ｃｙｎ  ｄ  １、Ｃｙｎ  ｄ  ７、Ｃｙｎ  ｄ  １２、Ｃｙｎ  ｄ  １５、Ｃｙｎ  ｄ  ２２ｗ、Ｃｙｎ  ｄ  ２３、Ｃｙｎ  ｄ  ２４）、ダクテュリス・グロメラタＤａｃｔｙｌｉｓ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ（オーチャードグラス、Ｄａｅ  ｇ  １、Ｄａｅ  ｇ  ２、Ｄａｅ  ｇ  ３、Ｄａｅ  ｇ  ４、Ｄａｅ  ｇ  ５）、フェストゥカ・プラテンシスＦｅｓｔｕｃａ  ｐｒａｔｅｎｓｉｓ（ヒロハノウシノケグサ（Ｆｅｓ  ｐ  ４）、ホルクス・ラナトゥスＨｏｌｃｕｓ  ｌａｎａｔｕｓ（ベルベットグラス、Ｈｏｌ  ｌ  １、Ｈｏｌ  ｌ  ５）、ホルデウム・ブルガレＨｏｒｄｅｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ（オオムギ、Ｈｏｒ  ｖ  １、Ｈｏｒ  ｖ  ５、Ｈｏｒ  ｖ  １２、Ｈｏｒ  ｖ  １５、Ｈｏｒ  ｖ  １６、Ｈｏｒ  ｖ  １７、Ｈｏｒ  ｖ  ２１）、ロリウム・ペレンネＬｏｌｉｕｍ  ｐｅｒｅｎｎｅ（ライグラス、Ｌｏｌ  ｐ  １、Ｌｏｌ  ｐ  ２、Ｌｏｌ  ｐ  ３、Ｌｏｌ    ｐ  ４、Ｌｏｌ  ｐ  ５、Ｌｏｌ  ｐ  １１）、オリュザ・サティウァＯｒｙｚａ  ｓａｔｉｖａ（イネ、Ｏｒｙ  ｓ  １、Ｏｒｙ  ｓ  １２）、パスパルム・ノタルムＰａｓｐａｌｕｍ  ｎｏｔａｒｕｍ（バヒアグラス、Ｐａｓ  ｎ  １）、パラリス・アウワティカＰｈａｌａｒｉｓ  ａｑｕａｔｉｃａ（カナリアクサヨシ、Ｐｈａ  ａ  １、Ｐｈａ  ａ  ５）、プレウム・プラテンセＰｈｌｅｕｍ  ｐｒａｔｅｎｓｅ（チモシー、Ｐｈｌ  ｐ  １、Ｐｈｌ  ｐ  ２、Ｐｈｌ  ｐ  ４、Ｐｈｌ  ｐ  ５、Ｐｈｌ  ｐ  ６、Ｐｈｌ  ｐ  ７、Ｐｈｌ  ｐ  １１、Ｐｈｌ  ｐ  １２、Ｐｈｌ  ｐ  １３）、ポア・プラテンシスＰｏａ  ｐｒａｔｅｎｓｉｓ（ケンタッキーブルーグラス、Ｐｏａ  ｐ  １、Ｐｏａ  ｐ  ５）、セカレ・ケレアレＳｅｃａｌｅ  ｃｅｒｅａｌｅ（ライ麦、Ｓｅｃ  ｃ  １、Ｓｅｃ  ｃ  ２０）、ソルガム・ハレペンセＳｏｒｇｈｕｍ  ｈａｌｅｐｅｎｓｅ（セイバンモロコシ、Ｓｏｒ  ｈ  １）、トリティクム・アエスティウムＴｒｉｔｉｃｕｍ  ａｅｓｔｉｖｕｍ（小麦、Ｔｒｉ  ａ  １２、Ｔｎ  ａ  １４、Ｔｒｉ  ａ  １８５、Ｔｎ  ａ  １９、Ｔｒｉ  ａ  ２５、Ｔｒｉ  ａ  ２６、Ｔｒｉ  ａ  ２７、Ｔｒｉ  ａ  ２８、Ｔｎ  ａ  ２９、Ｔｒｉ  ａ  ３０）、ゼア・マュスＺｅａ  ｍａｙｓ（トウモロコシ、Ｚｅａ  ｍ  １、Ｚｅａ  ｍ  １２、Ｚｅａ  ｍ  １４、Ｚｅａ  ｍ  ２５）、
−ブナ目：アルヌス・グルティノサＡｌｎｕｓ  ｇｌｕｔｉｎｏｓａ（ハンノキ、Ａｌｎ  ｇ  １、Ａｌｎ  ｇ  ４）、ベトゥラ・ウェッルコサＢｅｔｕｌａ  ｖｅｒｒｕｃｏｓａ（カバ、Ｂｅｔ  ｖ  １、Ｂｅｔ  ｖ  ２、Ｂｅｔ  ｖ  ３、Ｂｅｔ  ｖ  ４、Ｂｅｔ  ｖ  ５、Ｂｅｔ  ｖ  ６、Ｂｅｔ  ｖ  ７）、カルピヌス・ベトゥルスＣａｒｐｉｎｕｓ  ｂｅｔｕｌｕｓ（クマシデ、Ｃａｒ  ｂ  １）、
−シソ目：フラクシヌス・エクセルシオルＦｒａｘｉｎｕｓ  ｅｘｃｅｌｓｉｏｒ（タモ、Ｆｒａ  ｅ  １）、
リグストルム・ウルガレＬｉｇｕｓｔｒｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ（イボタノキ、Ｌｉｇ  ｖ）、シュリンガ・ウルガリスＳｙｒｉｎｇａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ（ライラック、Ｓｙｒ  ｖ）、
−キントラノオ目：ヘウェア・ブラシリエンシスＨｅｖｅａ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ（パラゴムノキ（ラテックス）、Ｈｅｖ  ｂ  １、Ｈｅｖ  ｂ  ２、Ｈｅｖ  ｂ  ３、Ｈｅｖ  ｂ  ４、Ｈｅｖ  ｂ  ５、Ｈｅｖ  ｂ  ６、Ｈｅｖ  ｂ  ７、Ｈｅｖ  ｂ  ８、Ｈｅｖ  ｂ  ９、Ｈｅｖ  ｂ  １０、Ｈｅｖ  ｂ  １１、Ｈｅｖ  ｂ  １２、Ｈｅｖ  ｂ  １３）
−ヤマモガシ目：プラタヌス・アケリフォリアＰｌａｔａｎｕｓ  ａｃｅｒｉｆｏｌｉａ  （カエデバスズカケノキ、Ｐｌａ  ａ  １，  Ｐｌａ  ａ  ２，  Ｐｌａ  ａ  ３）、プラタヌス・オリエンタリスＰｌａｔａｎｕｓ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ（スズカケノキ、Ｐｌａ  ｏｒ  １、ｐｌａ  ｏｒ  ２、Ｐｌａ  ｏｒ  ３）
−これらの断片または変異体。
【００４３】
食物アレルゲンを除く摂取性アレルゲンの例は、以下の子嚢菌類：
−クロイボタケ目：アルテルナリア・アルテルナタＡｌｔｅｒｎａｒｉａ  ａｌｔｅｒｎａｔａ（アルタナリア真菌、Ａｌｔ  ａ）、クラドスポリウム・クラドスポリオイデスＣｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ（Ｃｌａ  ｃ）、クラドスポリウム・ヘルバルムＣｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｈｅｒｂａｒｕｍ（Ｃｌａ  ｈ）、クルウラリア・ルナタＣｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｌｕｎａｔａ（Ｃｕｒ  １）、
−ユーロチウム目：アスペルギッルス・フラウスＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ（Ａｓｐ  ｆｌ）、
アスペルギッルス・フミガトゥスＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ（Ａｓｐ  ｆ）、アスペルギッルス・ニゲルＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ（Ａｓｐ  ｎ）、アスペルギッルス・オリュザエＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ（Ａｓｐ  ｏ）、ペニシッリウム・ブレウィコンパクトゥムＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｂｒｅｖｉｃｏｍｐａｃｔｕｍ（Ｐｅｎ  ｂ）、ペニシッリウム・クリュソゲヌムＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ（Ｐｅｎ  ｃｈ）、ペニシッリウム・キトリヌムＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ（Ｐｅｎ  ｃ）、ペニシッリウム・オクサリクムＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｏｘａｌｉｃｕｍ（Ｐｅｎ  ｏ）、
−肉座菌目：フサリウム・クルモルムＦｕｓａｒｉｕｍ  ｃｕｌｍｏｒｕｍ（Ｆｕｓ  ｃ）、
−ホネタケ目：トリコピュトン・ルブルムＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｒｕｂｒｕｍ（Ｔｒｉ  ｒ）、トリコピュトン・トンスランスＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｔｏｎｓｕｒａｎｓ  （Ｔｒｉ  ｔ）、
−酵母菌目：カンディダ・アルビカンスＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ（酵母、Ｃａｎｄ  ａ）、カンディダ・ボイディニイＣａｎｄｉｄａ  ｂｏｉｄｉｎｉｉ（酵母、Ｃａｎｄ  ｂ）、
−ツベルクラリア目：エピコックム・プルプラセンスＥｐｉｃｏｃｃｕｍ  ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ（Ｅｐｉ  ｐ）、
および担子菌類：
−帽菌類：コプリヌス・コマタスＣｏｐｒｉｎｕｓ  ｃｏｍａｔｕｓ（ササクレヒトヨダケ、Ｃｏｐ  ｃ）、シロシペ・クベンシスＰｓｉｌｏｃｙｂｅ  ｃｕｂｅｎｓｉｓ（マジックマッシュルーム、Ｐｓｉ  ｃ）、
−サビキン綱：ロードトルラ・ムキラギノサＲｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ  ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ（酵母、Ｒｈｏ  ｍ）、
−クロボキン綱：マラッセジア・フルフルＭａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ（癜風感染剤、Ｍａｌａ  ｆ）、
マラッセジア・シュンポディアリスＭａｌａｓｓｅｚｉａ  ｓｙｍｐｏｄｉａｌｉｓ（Ｍａｌａ  ｓ）、
および抗生物質（ペニシリン、セファロスポリン、アミノシド、キノロン、マクロライド、テトラサイクリン、スルファミドなど）、薬物（アセチルサリチル酸、ワクチン剤、モルヒネおよび誘導体など）、ビタミンＫ１などのビタミン類、
−これらの断片または変異体
からのアレルゲンを包含するが、これらに限定されない。
【００４４】
当業者は引用した各アレルゲンに対応する配列を知ることができる。例えば、上記配列または登録番号はウェブサイトｗｗｗ．ａｌｌｅｒｇｅｎ．ｏｒｇに見出すことができる。
【００４５】
接触性アレルゲンの例は、重金属（ニッケル、クロム、金など）、ラテックス、ハロセン、ヒドララジンなどのハプテンを包含するが、これらに限定されない。後者化合物は、非タンパク質系構造にもかかわらず、蛋白質構造の直接の集積によって自己タンパク質を修飾することができ、アレルギー応答の免疫原性および誘発を引き起こす。本文脈においては、Ｔｒ１調節性リンパ球は、アレルギー応答誘発の原因となる修飾自己タンパク質を特異的に認識するために産生させることができる。
【００４６】
本明細書において使用される場合、「食物アレルギー性症状以外の上記特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲン」という用語は、ミルク、卵、ピーナッツ、木本性ナッツ（クルミ、カシューなど）、魚類、甲殻類、大豆、小麦およびニンジン、りんご、西洋ナシ、アボカド、アプリコット、桃からのアレルゲンなどの食物アレルゲンを除外する。
【００４７】
好ましい実施形態において、上記ヒトＴｒ１細胞は花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）に由来するアレルゲンを対象とする。
【００４８】
理論に束縛されることは欲しないが、本出願人は、食物アレルギー性の症状以外の特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする注入されたＴｒ１細胞集団が、対象中に存在する抗原によってインビボで活性化され、次いで、上記アレルギー性または喘息性症状を制御できることを仮定している。
【００４９】
本発明の一実施形態において、ヒトＴｒ１細胞は、
ａ）対象から始原細胞集団を単離するステップ、
ｂ）ＩＬ−１０の存在下で上記始原細胞集団を培養することにより、樹状細胞の集団を取得するステップ
ｃ）食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンの存在下で上記対象から単離されたＣＤ４＋Ｔリンパ球集団にステップｂ）の細胞を接触させ、上記抗原を対象とするＣＤ４＋Ｔ細胞をＴｒ１細胞集団中へ分化させるステップ、および
ｄ）ステップｃ）からＴｒ１細胞集団を回収するステップ
により取得することができる。
【００５０】
ステップｂ）において、ＩＬ−１０は培地中に５０から２５０Ｕ／ｍｌ、好ましくは１００Ｕ／ｍｌ存在する。Ｔｒ１細胞を取得する上記方法は、ＷａｋｋａｃｈらのＩｍｍｕｎｉｔｙ  ２００３  Ｍａｙ；１８（５）：６０５−１７に記載されている。
【００５１】
上記方法は、ステップｂ）のＤＣの代わりにデキサメタゾン、およびビタミンＤ３または免疫寛容原性（ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｓｅｄ）もしくは未成熟のＤＣを用いて実施することもできる。
【００５２】
本発明の別の実施形態において、ヒトＴｒ１細胞は、
ａ）食物のアレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする、対象から単離されたＣＤ４＋Ｔ細胞集団を、適切な量のＩＦＮ−αを含む培地中で培養するステップ、および
ｂ）上記Ｔｒ１細胞集団を回復させるステップ
により取得することができる。
【００５３】
ＩＦＮ−αは、好ましくは、培地中に５ｎｇ／ｍｌで存在する。ステップａ）において、培地は、適切な量のＩＬ−１０、好ましくは１００Ｕ／ｍｌをさらに含み得る。
【００５４】
ステップｂ）において、Ｔｒ１細胞集団を、好ましくは培地中で５ｎｇ／ｍｌであるＩＬ−１５を含む培地中で培養して増殖させる。Ｔｒ１細胞を取得する上記方法は、特許ＵＳ６７４６６７０中に記載されている。
【００５５】
本発明のさらに別の実施形態において、ヒトＴｒ１細胞は、
ａ）人工抗原提示細胞によって提示された、食物のアレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンの存在下でＣＤ４＋Ｔ細胞集団をインビトロで活性化させるステップ、および
ｂ）少なくとも１０％のＴｒ１細胞を含む活性化されたＣＤ４＋Ｔ細胞を回復させるステップ
により取得することができる。
【００５６】
好ましくは、人工抗原提示細胞は、ＨＬＡＩＩ系分子およびヒトＬＦＡ−３分子を発現し、副刺激分子Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ４０、ＣＤ２３およびＩＣＡＭ−１を発現しない。
【００５７】
Ｔｒ１細胞を取得する上記プロセスは、特許出願ＷＯ０２／０９２７９３に記載されている。
【００５８】
本発明のさらに別の実施形態においてヒトＴｒ１細胞は、
ａ）食物のアレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンおよび適切な量のＩＬ−１０の存在下でＣＤ４＋Ｔ細胞集団をインビトロで活性化させるステップ、および
ｂ）Ｔｒ１細胞集団を回復させるステップ
により取得することができる。
【００５９】
好ましくは、ＩＬ−１０は１００Ｕ／ｍｌで培地中に存在する。上記方法はＧｒｏｕｘらのＮａｔｕｒｅ  １９９７，３８９（６６５２）：７３７−４２に記載されている。
【００６０】
本発明のさらに別の実施形態において、ヒトＴｒ１細胞は、
ａ）白血球集団または末梢血単核球（ＰＢＭＣ）集団を、食物のアレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンで刺激するステップ、
ｂ）刺激を受けた集団から、抗原特異的Ｔｒ１細胞集団を回復させるステップ、および
ｃ）上記抗原特異的Ｔｒ１細胞集団を場合によって拡大させるステップ
により取得することができる。
【００６１】
白血球は、いくつかの種類の細胞を包含し、これらの細胞は、その重要性、その分布、その数、その寿命およびその可能性により、特徴付けられる。これらの種類は、多核白血球または顆粒白血球であり、その中には好酸球性、好中球性、および好塩基球性の白血球、ならびに単核細胞または末梢血単核球（ＰＢＭＣ）が見られ、これは巨大な白血球であり、かつ、免疫システム（リンパ球および単球）の主要な細胞型にある。白血球またはＰＢＭＣは、当分野で公知の、任意の方法により末梢血液から分離することができる。有利には、ＰＢＭＣの分離には、遠心分離、好ましくは密度勾配遠心分離、好ましくは非連続的な密度勾配遠心分離を使用することができる。代替手段は特異的モノクローナル抗体の使用である。特定の実施形態において、ＰＢＭＣは典型的には、標準的な手順を使用して、フィコール・ハイパックの手段により全血産物から単離される。別の実施形態では、ＰＢＭＣは、白血球除去の手段により回収される。
【００６２】
上記方法は特許出願ＷＯ２００７／０１０４０６に記載されている。
【００６３】
さらに別の実施形態において、ヒトＴｒ１細胞は、
ａ）食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンの存在下で、白血球集団または末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）集団を、間葉系幹細胞を用いて培養するステップ、
ｂ）Ｔｒ１細胞集団を回復させるステップ
により取得することができる。
【００６４】
上記方法はまた、ＰＢＭＣまたは白血球の代わりに、ナイーブＴ細胞またはメモリーＴ細胞を用いて実行することもできる。
【００６５】
そうして取得したＴｒ１細胞集団は、インターロイキン−２およびインターロイキン−４などのサイトカインの存在下で、培養によりさらに拡大し得る。代替として、インターロイキン−１５およびインターロイキン−１３もまた、Ｔｒ１細胞の拡大培養に使用することができよう。
【００６６】
先に記載した方法では、ヒトＴｒ１細胞は、国際公開第２００５／０００３４４号に記載される同定方法により特徴付けることができる。Ｔｒ１細胞の上記同定方法は、ＣＤ４分子、ならびにＣＤ１８および／またはＣＤ１１ａ、およびＣＤ４９ｂを含む群の分子をコードする遺伝子の発現産物の同時存在性を検出することに基づく。Ｔｒ１細胞は、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、または上記マーカーを対象とする抗体を用いた免疫親和性の方法により、同定および／または精製できる。
【００６７】
Ｔｒ１細胞は、フローサイトメトリーまたは磁気ビーズを使用して、ポジティブ選択またはネガティブ選択により濃縮することができる。そのような方法はまた、国際公開第２００５／０００３４４号に記載されている。
【００６８】
本発明の別の実施形態では、食物アレルギー性症状以外の特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とするＴｒ１細胞は、国際公開第２００６／１０８８８２号に記載されている、インビトロでの方法により拡大され得る。上記方法は、
ａ）３５℃より下の温度Ｔ１、培地Ｍｆにおいて、昆虫フィーダー細胞などのフィーダー細胞を培養するステップであって、上記温度Ｔ１によりフィーダー細胞の増殖が可能となり、上記フィーダー細胞が次の細胞表面タンパク質：
―ＣＤ３／ＴＣＲ複合体、
―ＣＤ２８タンパク質、
―ＩＬ−２受容体、
―ＣＤ２タンパク質、
―ＩＬ−４受容体
と相互作用する因子を発現するステップ、
ｂ）ステップａ）で取得した、その培地Ｍｆから除去した、またはその培地Ｍｆ以外のフィーダー細胞を、培地Ｍｐに含まれるＴｒ１細胞集団と接触させるステップであって、上記培地Ｍｐが、Ｔｒ１細胞集団、フィーダー細胞、および培地Ｍｐを含む混合物を取得するために、ステップａ）で記載した因子を最初から含んでいない上記ステップ、
ｃ）ステップｂ）で取得した混合物を、少なくとも３５℃の温度Ｔ２で培養するステップであって、Ｔｒ１細胞集団が増殖し、かつフィーダー細胞が増殖しないように上記温度を選択する上記ステップ、
ｄ）そのように拡大したＴｒ１細胞集団を回復させるステップ
を含む。
【００６９】
上に言及した細胞表面タンパク質と相互作用する因子の例は、
―ＣＤ３重鎖の抗ＣＤ３細胞質内ドメインが膜貫通ドメインと置換された、修飾された抗ＣＤ３抗体、
―ＣＤ８０またはＣＤ８６タンパク質、
―フィーダー細胞から分泌されたＩＬ−２、
―ＣＤ５８タンパク質、
―ＩＬ−４およびＩＬ−１３を含む群から選択されるインターロイキン
を含む。
【００７０】
本発明の好ましい実施形態において、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする上記Ｔｒ１細胞は、Ｔ細胞をクローニングするための従来の方法を使用してクローニングすることができる。
【００７１】
本発明の好ましい実施形態において、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１つのヒトＴｒ１細胞集団、または食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とするヒトＴｒ１細胞の少なくとも１つのクローンを含む組成物は、保存のために凍結することができる。
【００７２】
本発明の好ましい実施形態において、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する上記アレルゲンは、花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）、これらの断片または変異体に由来するアレルゲンを含む群から選択される。
【００７３】
好ましくは、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する上記アレルゲンは、花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、これらの断片または変異体に由来するアレルゲンの群から選択される。
【００７４】
好ましくは、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する上記アレルゲンは、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、これらの断片または変異体に由来するアレルゲンの群から選択される。
【００７５】
好ましくは、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する上記アレルゲンは、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）、これらの断片または変異体に由来するアレルゲンの群から選択される。
【００７６】
食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンの「変異体」という用語は、天然抗原とほとんど同一の抗原でありかつ同一の生物活性を共有する抗原である。天然抗原とその変異体との間のごくわずかな違いは、例えばアミノ酸置換、欠失、および／または付加にあり得る。このような変異体は、例えばアミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基と置換された保存アミノ酸置換を含み得る。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーが当分野において規定されており、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、電荷を持たない極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を挙げることができる。
【００７７】
本発明の別の目的は、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む医薬を提供することである。
【００７８】
本発明はまた、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含み、１種または複数の薬学的に許容される担体と組み合わせた薬剤組成物を提供することを意図している。
【００７９】
好ましい実施形態によれば、上記ヒトＴｒ１細胞集団はヒトＴｒ１クローン集団である。
【００８０】
好ましい実施形態によれば、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする上記アレルゲンは、花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）、これらの断片、変異体および混合物に由来するアレルゲンの群において選択される。
【００８１】
より好ましい実施形態によれば、本発明の医薬または薬剤組成物は、花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）、これらの断片、変異体および混合物に由来するアレルゲンの群において選択される、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする、少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団またはクローンを含む。
【００８２】
本明細書において有用な薬学的に許容される担体は従来のものである。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  第１６版、Ｏｓｏｌ、Ａ．編（１９８０）は、本発明の組成物の薬学的送達に適切な組成物および製剤を記載している。一般的に、担体の特質は、用いられる投与方法によって決まる。例えば、非経口的な製剤は、ビヒクルとして、水、生理食塩水、平衡塩類溶液、水溶性ブドウ糖、ゴマ油、グリセリン、エタノール、これらの組合せなどの、薬学的および生理学的に許容される液体を含む注射液を通常は含む。担体および組成物は無菌化することができ、製剤は投与方法に適合する。生物学的に中性の担体に加え、投与される薬剤組成物は、湿潤剤または乳化剤、保存剤、およびｐＨ緩衝剤など、例えば酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラウラートのような無毒性の補助物質を少量包含することができる。組成物は溶液、懸濁液および乳剤にできる。
【００８３】
本発明は、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む、上記アレルギー性または喘息性症状を治療するための薬剤組成物または医薬に関する。
【００８４】
本発明は、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む、上記アレルギー性または喘息性症状の治療に使用するための薬剤組成物または医薬に関する。
【００８５】
本発明は、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする少なくとも１種のヒトＴｒ１細胞集団を含む、上記アレルギー性または喘息性症状を治療するための医薬または薬剤組成物を調製するための組成物の使用に関する。
【００８６】
上記アレルギー性または喘息性症状は、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎、湿疹およびアナフィラキシーを包含するがこれらに限定されない。
【００８７】
好ましい実施形態によれば、上記ヒトＴｒ１細胞集団はヒトＴｒ１クローン集団である。
【００８８】
好ましい実施形態によれば、上記１種のヒトＴｒ１細胞集団またはクローンは、花粉（Ｃｕｐ、Ｊｕｎ）、チリダニ（Ｄｅｒ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、Ｌｅｐ）、イヌ、ネコおよび齧歯類（Ｃａｎ、Ｆｅｌ、Ｍｕｓ、Ｒａｔ）、これらの断片、変異体および混合物に由来するアレルゲンの群において選択される、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする。
【００８９】
一実施形態において、本発明は、喘息を治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９０】
一実施形態において、本発明は、湿疹を治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９１】
一実施形態において、本発明は、アナフィラキシーを治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９２】
別の実施形態において、本発明は、アトピー性皮膚炎を治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９３】
別の実施形態において、本発明は、アレルギー性鼻炎を治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９４】
別の実施形態において、本発明は、結膜炎を治療するための医薬または薬剤組成物の調製のための、上に記載した組成物の使用に関する。
【００９５】
本発明の別の実施形態において、アレルギー性または喘息性症状を治療する方法は、生命に危険のあるアナフィラキシー反応および死亡の可能性をもたらす恐れのある重いアレルギー性の症状を有する対象に投与することである。
【００９６】
本発明の目的はまた、上に記載した有効量の医薬または上に記載した薬剤組成物を対象に投与することを含む、それを必要とする対象における、食物アレルギー性症状以外の、アレルギー性または喘息性症状を治療する方法である。
【００９７】
食物アレルギー性症状以外の、上記アレルギー性または喘息性症状は、好ましくは、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、結膜炎、湿疹およびアナフィラキシーの群において選択される。
【００９８】
組成物は、非経口投与薬、筋肉内、静脈内、腹腔内、注射、鼻腔内吸入、肺吸入、皮内、鞘内用に製剤化することができる。好ましくは、本発明の医薬または薬剤組成物は、好ましくは鼻腔内吸入、肺吸入、腹腔内もしくは静脈注射によって、または患者のリンパ節への直接注射によって投与されてもよい。
【００９９】
食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係するアレルゲンを対象とする、アレルギー性または喘息性症状の治療に有効なＴｒ１細胞の量は、炎症の性質に依存し、標準的臨床手法によって求めることができる。配合物において使用される正確な用量はまた、投与経路および疾患または障害の重篤度に依存し、医師の判断および各個体の状況によって決定されるべきである。有効量はインビトロまたは動物モデルの試験システムに由来する用量応答曲線から外挿で求めることができる。
【０１００】
本発明の一実施形態において、１０４／ｋｇから１０９／ｋｇの細胞が対象に投与される。好ましくは、１０６／ｋｇから１０８／ｋｇの細胞、より好ましくは約１０８／ｋｇの細胞が、対象に投与される。
【０１０１】
本発明の一実施形態において、対象の臨床状態の低下によって再発が起こった時点で、対象は上記医薬が投与される。
【０１０２】
本発明の一実施形態において、対象には、本発明の医薬または薬剤組成物が１回投与される。
【０１０３】
本発明の第２の実施形態において、対象には、本発明の医薬または薬剤組成物が月に１回投与される。
【０１０４】
本発明の第３の実施形態において、対象には、本発明の医薬または薬剤組成物が四半期に１回投与される。
【０１０５】
本発明の第４の実施形態において、対象には、本発明の医薬または薬剤組成物が１年に１回から２回投与される。
【０１０６】
本発明の別の実施形態において、その必要がある対象に投与される医薬または薬剤組成物は、上記対象の細胞が自己由来であるヒトＴｒ１細胞を含む。
【０１０７】
これは、Ｔｒ１細胞が由来する対象にそれが投与されるか、またはＴｒ１細胞の産生のために使用する前駆体がＴｒ１細胞を投与する対象に由来することを意味する。
【０１０８】
本発明はまた、それを必要とする対象のアレルギー性または喘息性症状を治療する方法に関し、上記プロセスは：
―上記対象の血液試料を採取するステップ、
−食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とするＴｒ１細胞を取得するステップ、
−食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とする上記Ｔｒ１細胞をクローニングするステップ、
−先のステップで取得したＴｒ１クローンをさらに拡大するステップ、
―そうして取得したＴｒ１クローンを上記対象に、好ましくは静脈内経路により注入するステップ
を含む。
【０１０９】
好ましくは、食物アレルギー性症状以外の、特異的なアレルギー性または喘息性症状に関係する選択されたアレルゲンを対象とするＴｒ１クローンのクローニングおよび拡大は、以下の方法：
ａ）３５℃より下の温度Ｔ１、培地Ｍｆで、昆虫フィーダー細胞などのフィーダー細胞を培養するステップであって、上記温度Ｔ１によりフィーダー細胞の増殖が可能となり、上記フィーダー細胞が次の細胞表面タンパク質：
―ＣＤ３／ＴＣＲ複合体、
―ＣＤ２８タンパク質、
―ＩＬ−２受容体、
―ＣＤ２タンパク質、
―ＩＬ−４受容体
と相互作用する因子を発現するステップ、
ｂ）ステップａ）で取得した、その培地Ｍｆから除去した、またはその培地Ｍｆ以外のフィーダー細胞を、培地Ｍｐに含まれるＴｒ１細胞集団と接触させるステップであって、上記培地Ｍｐが、Ｔｒ１細胞集団、フィーダー細胞、および培地Ｍｐを含む混合物を取得するために、ステップａ）で記載した因子を最初から包含していない上記ステップ、
ｃ）ステップｂ）で取得した混合物を、少なくとも３５℃である温度Ｔ２で培養するステップであって、Ｔｒ１細胞集団が増殖し、かつフィーダー細胞が増殖しないように上記温度を選択する上記ステップ、
ｄ）そのように拡大されたＴｒ１細胞集団を回復させるステップ
を用いて実行される。
【０１１０】
上述の細胞表面タンパク質と相互作用する因子の例は、
―ＣＤ３重鎖の抗ＣＤ３細胞質内ドメインが膜貫通ドメインと置換された、修飾された抗ＣＤ３抗体、
−ＣＤ８０またはＣＤ８６タンパク質、
−フィーダー細胞から分泌されたＩＬ−２、
−ＣＤ５８タンパク質、
−ＩＬ−４およびＩＬ−１３を含む群から選択されるインターロイキン
を包含する。
【０１１１】
本発明の別の実施形態において、それを必要とする対象の食物アレルギー性症状以外の、アレルギー性または喘息性症状を治療する方法は、アレルギー性または喘息性症状を治療するために使用される１種または複数の治療剤と組み合わせた、有効量の本発明の医薬または薬剤組成物の上記対象への投与を含む。
【０１１２】
本発明は、本発明の有効量の医薬または薬剤組成物の上記対象への投与を、アレルギー性または喘息性症状を治療するために使用される１種または複数の治療剤と組み合わせた、本発明の薬剤組成物または医薬の使用に関する。
【０１１３】
アレルギー性または喘息性症状を治療するために使用される治療剤の例は、抗ヒスタミン剤およびグルココルチコイド（シクレソニド、ベクロメタゾン、ブデソニド、フルニソリド、フルチカゾン、モメタゾンおよびトリアムシノロンなど）、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、エピネフリン（アドレナリン）、テオフィリン、クロモリンナトリウム、β２作動薬、抗ロイコトリエン（モンテルカスト、ザフィルルカスト、プランルカストおよびジロイトンなど）、抗コリン作動薬／抗ムスカリン（イプラトロピウム、オキシトロピウムおよびチオトロピウムなど）、うっ血除去薬、肥満細胞安定化薬（クロモグリク酸塩（クロモリン）およびネドクロミルなど）、メチルキサンチン（テオフィリンおよびアミノフィリンなど）、好酸球走化性を減じると考えられる化合物、およびＩｇＥ遮断薬（オマリズマブなど）である。
【０１１４】
本発明の別の実施形態において、それを必要とする対象の、食物アレルギー性症状以外の、アレルギー性または喘息性症状を治療する方法は、アレルゲン特異的免疫療法（ＳＩＴ）と組み合わせた、本発明の有効量の医薬または薬剤組成物の上記対象に対する投与を含む。
【０１１５】
本発明は、本発明の有効量の医薬または薬剤組成物の上記対象に対する投与が、アレルゲン特異的免疫療法（ＳＩＴ）との組合せである、本発明の薬剤組成物または医薬の使用に関する。
【０１１６】
別の実施形態において、本発明はまた、本発明の医薬または薬剤組成物が、喘息にかかりやすいそれを必要とする対象に投与されることとする、食物アレルギー性症状以外の、アレルギー性または喘息性症状の治療の方法に関する。
【０１１７】
喘息は環境および遺伝因子の複雑な相互関係によって引き起こされる。これらの因子はまた、人の喘息がどの程度重いか、またそれらが投薬にどの程度よく応答するか、影響を及ぼす場合がある。他の複合疾患と同様に、多くの環境および遺伝因子が喘息の原因として示唆されてきた。少なくとも１つの遺伝的関連解析において、１００を超える遺伝子が喘息に関係している。２００５年末までには、２５の遺伝子が６つ以上の別々の集団で喘息と関係していた。これらの遺伝子の多くは免疫系または炎症の調節と関係がある。研究によるとまた、特異的な環境曝露と組み合わせた場合、いくつかの遺伝変異体のみが喘息の原因となり得、かつ、それ以外には喘息の危険因子にはなり得ないことを示唆する。喘息に関係する遺伝子のいくつかは次のとおりである：ＧＳＴＭ１、ＩＬ１０、ＣＴＬＡ−４、ＳＰＩＮＫ５、ＬＴＣ４Ｓ、ＬＴＡＧ、ＲＰＡ、ＮＯＤ１、ＣＣ１６、ＧＳＴＰ１、ＳＴＡＴ６、ＮＯＳ１、ＣＣＬ５、ＴＢＸ、Ａ２Ｒ、ＴＧＦＢ１、ＩＬ４、ＩＬ１３、ＣＤ１４、ＡＤＲＢ２（β−２アドレナリン受容体）、ＨＬＡ−ＤＲＢ１、ＨＬＡ−ＤＱＢ１、ＴＮＦ、ＦＣＥＲ１Ｂ、ＩＬ４Ｒ、ＡＤＡＭ３３。
【０１１８】
本発明は、上記対象が、抗ヒスタミン剤、グルココルチコイド、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、エピネフリン（アドレナリン）、テオフィリン、クロモリンナトリウム、β２作動薬、抗ロイコトリエン、抗コリン作動薬／抗ムスカリン、うっ血除去薬、肥満細胞安定化薬、メチルキサンチンの群中の１種または複数の治療剤に適切に応答しないかまたは適切に応答しない可能性がある、本発明の薬学的組成物または薬剤の使用に関する。「不適切な応答」および「適切に応答しない」または「適切に応答しない可能性がある」とは、実際のまたは推定される対象からの応答を指し、その対象に関する限り、治療が有効ではないか、毒性があるかもしくは症状を悪化させるかまたはそのような可能性があることを示している。
【図面の簡単な説明】
【０１１９】
【図１】Ｄｅｒｐ−１アレルゲンを用いた特異的活性化後のＴｒ１クローンのＩＬ−１０産生を示す図である。図１は、特異的アレルゲンＤｅｒｐ−１の存在下におけるＴ細胞クローンによるＩＬ−１０産生の特異的増加を描写する。照射した自己由来の抗原提示細胞の存在下においてＤｅｒｐ−１アレルゲンを含む場合と含まない場合にクローンを活性化させた。４８時間後、ＥＬＩＳＡによってＩＬ−１０産生を測定した。
【図２】抗Ｄｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１クローンのサイトカイン分泌プロファイルを示す図である。抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８のモノクローナル抗体で活性化させた細胞の４８時間後の上清中の、Ｄｅｒｐ−１アレルゲン特異的Ｔｒ１細胞クローンのＩＬ−１０、ＩＬ−４、およびＩＦＮγの分泌を測定した。
【図３】抗Ｄｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１クローンのインビトロでの抑制活性を示す図である。自己由来のＣＤ４＋Ｔリンパ球を用いる共培養試験でＤｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１クローンの抑制活性を評価した。細胞集団を、抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体を使用して、３日間共培養した。次いで、自己由来のＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞増殖を、Ｔｒ１細胞がない状態または段階的な量が存在する状態で評価した。結果は、ＣＤ４＋Ｔリンパ球へのＴｒ１細胞の添加がＴ細胞の増殖を強く阻害することを示す。
【図４】抗Ｄｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１クローン培養上清の抑制活性を示す図である。抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体を使用して、３日間、ＣＤ４＋Ｔリンパ球を培養した。次いで、ＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞増殖をＴｒ１細胞培養液上清の存在下で評価した。結果は、ＣＤ４＋Ｔリンパ球へのＴｒ１細胞培養液上清の添加がＴ細胞の増殖を強く阻害することを示す。
【図５】抗Ｄｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１クローン培養液上清の抑制活性が、モノクローナル抗体抗−ＩＬ−１０および抗ＴＧＦ−βによって阻害されることを示す図である。
【０１２０】
（実施例）
以下の説明では、詳細なプロトコルが与えられていない全ての実験は、標準的なプロトコルに従って行っている。
【０１２１】
以下の実施例は本発明の好ましい実施形態を実証するために挙げられている。当業者には、本発明者により見出された手法を示す以下の実施例で開示される手法が、本発明の実施において十分に機能し、したがってその実施のための好ましい様式を構築していると考え得ることが理解されるべきである。しかし、本開示を踏まえると、当業者は、開示される特定の実施形態において多くの変更をなすことができ、また、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく同様の結果または類似の結果をさらに得ることができることを理解すべきである。
【０１２２】
（実験手順）
Ｔｒ１細胞の単離
健常患者から血液試料を採取し、密度勾配遠心分離法を用いて白血球を分離した。次いで、この抗原を対象とするＴｒ１細胞の特異的増殖を誘発するために、Ｄｅｒｐ−１アレルゲン（配列番号：１）の存在下で細胞を培養した。培養の１３日後、限界希釈法により細胞集団をクローニングした。次いで、Ｄｅｒｐ−１アレルゲンに対するそれらの特異性、および特徴的なＴｒ１サイトカイン産生プロファイルについてクローンを評価した。
【０１２３】
サイトカイン分析
抗原特異性の判定のため、抗原提示細胞（４．１０５）の存在下、および特異的抗原（Ｄｅｒｐ−１アレルゲン）の存在下または非存在下で刺激した、Ｔｒ１細胞クローンの４８時間後の上清についてサンドイッチＥＬＩＳＡを行った。サイトカイン産生プロファイルの決定のため、抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体でＤｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１細胞クローンを刺激し、４８時間後に上清を収穫した。ＥＬＩＳＡは、抗ＩＬ−４（１１Ｂ１１）、抗ＩＬ−１０（２Ａ５）、抗ＩＦＮγ（ＸＧＭ１．２）、ビオチン抗ＩＬ−４（２４Ｇ２）、抗ＩＬ−１０（ＳＸＣ１）、抗ＩＦＮγ（Ｒ４−６Ａ２）（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ  Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して行った。
【０１２４】
抑制検討
共培養の抑制検討のために、段階的な量のＤｅｒｐ−１アレルゲン特異的Ｔｒ１クローンを自己由来のＣＤ４＋Ｔリンパ球とともに共培養した。抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体被覆したビーズを用いて共培養物を刺激した。３日後、Ｒｏｃｈｅ（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）のＷＳＴ−１増殖キットを使用して全細胞増殖を評価した。自己由来のＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖の抑制もまた、抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体被覆したビーズを用いて４８時間の間、活性化させたＴｒ１細胞の希釈上清を使用して評価した。抗ＩＬ−１０および抗ＴＧＦｂｅｔａモノクローナル抗体は、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓから購入し、１０μｇ／ｍｌで使用した。
【０１２５】
結果
図１は、抗原の存在下または非存在下での、Ｄｅｒｐ−１アレルゲンに特異的な２つの別々のＴｒ１細胞集団のＩＬ−１０産生を示す。結果は、Ｄｅｒｐ−１アレルゲンの刺激がＩＬ−１０の産生の増加を誘発することを示す。これらの結果は、Ｄｅｒｐ−１アレルゲンに対する細胞集団の特異性を実証する。
【０１２６】
Ｄｅｒｐ−１アレルゲンに特異的なこれらのＴｒ１細胞集団のサイトカイン分泌プロファイルをさらに判定するため、抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体の存在下で細胞を刺激した。ＩＬ−４、ＩＬ−１０およびＩＦＮγの産生を測定するため、４８時間後の上清についてＥＬＩＳＡを行った。図２は、後者のＤｅｒｐ−１アレルゲン特異的集団について観測されたサイトカイン分泌プロファイルが、Ｔｒ１サイトカイン分泌プロファイル、すなわちＩＬ−１０の高い産生、ＩＦＮγの低い産生、およびＩＬ−４の無産生と一致することを示す。
【０１２７】
次いで、これらのＤｅｒｐ−１アレルゲンＴｒ１集団の抑制活性を評価した。抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８モノクローナル抗体の存在下で、自己由来のＣＤ４＋Ｔ細胞とともにＴｒ１細胞を共培養した。３日間の刺激の後、細胞増殖を測定した。図３は、２つのＴｒ１集団の結果を示し、これらの細胞の抑制活性を裏付ける。
【０１２８】
これらの抗Ｄｅｒｐ−１  Ｔｒ１クローンの抑制活性もまた、図４に示す培養液上清（ｓｕｐ）に見出された。
図５は、この抑制活性がＩＬ−１０およびＴＧＦ−βの分泌によって媒介されることを示す。
【０１２９】
これらの試験は、アレルギー性または喘息性症状に関連する、Ｄｅｒ  ｐ  １などのアレルゲンに対して特異的なヒトＴｒ１細胞が健常対象から単離してクローニングすることができ、かつ、これらのＴｒ１細胞はインビトロで機能することを示した。
【０１３０】
マウスの自然の自発的なアレルギー性または喘息性症状に対して利用可能なインビボモデルは、現時点でない。唯一の既存のモデルは、好ましくは鼻腔内または気管内の経路によってマウスに対する実験的アレルゲンの投与中に存在する人工モデルであり、腹腔内投与によって実験的アレルゲンに対する免疫の最初の誘発の数日後に気道炎症を誘発する。
【０１３１】
アレルギー性または喘息性症状に関連する、アレルゲンに対して特異的なこれらのヒトＴｒ１細胞がインビボで機能することを立証するためには、これらを、上記アレルゲンに関係するアレルギー性または喘息性症状を示す対象に注入することが必要である。
【０１３２】
食物抗原を対象とするＴｒ１細胞が、クローン病を患う患者を治療することが上記患者に注入した場合にできたので、本発明者らは、これらのＴｒ１細胞がインビボで機能するという証拠を提供する。
【０１３３】
実際に、これらの患者がその生活の質および安寧の劣化をもたらす消化管の持続的炎症を有していることを意味する、少なくとも６か月の間の２２０を上回るクローン病活性度指数（ＣＤＡＩ）の病歴を有する４人の患者に、食物抗原に対して特異的なＴｒ１細胞を注入した。Ｔｒ１細胞注入の５週間後に、ＣＤＡＩの減少、ＩＢＤＱ（炎症性大腸疾患質問表）によって測定された生活の質の改善および血液Ｃ反応性蛋白質、全身系の炎症性マーカーの減少によって、寛解導入が観察された。
【表１】
2012518627.tif 000002
【０１３４】
重症のクローン病を見せる４人の患者を、食物抗原に特異的なＴｒ１細胞を用いて治療した。
その疾患の重症度を評価するクローン病活性度指数（ＣＤＡＩ）、および炎症のレベルを評価する血液Ｃ反応性蛋白質（ＣＲＰ）の濃度を、治療前後に評価した。この表は、４人の患者すべてが、ＣＤＡＩおよび血液ＣＲＰレベルを低下させることによる細胞療法治療に応答したことを示す。
【０１３５】
これらのデータは、抗原に特異的なＴｒ１細胞が、対象に注入した場合、上記抗原に関係する症状について上記対象を治療するためにインビボで機能することができることを示す。
【図１】
2012518627.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2012518627.tif 000007
【配列表】
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【国際調査報告】
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