(57)【要約】  以下の式2012523416.tif 000063のセロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤、その使用、およびそれを調製するための方法が記載される。
2012523416.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物
【化１】
2012523416.tif 000062
（式中、
Ｒ１は、ｎ−プロピル、イソブチル、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル、および（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−からなる群より選択され、
ｎは、１または２であり、
各Ｒ２は、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、トリフルオロメトキシ、メチルアミノ、シクロプロピルアミノ、およびｔ−ブチルカルボニルアミノからなる群より独立して選択され、但しｎが２の場合、Ｒ２のうちの少なくとも１つは、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、またはエトキシである）
またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１が、ｎ−プロピルまたはイソブチルである請求項１に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ１が、イソブチルである請求項１に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ１が、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項５】
（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジンである請求項１に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項６】
薬学的に受容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む薬学的組成物。
【請求項７】
哺乳動物における慢性疼痛を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の請求項１に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を含む、方法。
【請求項８】
前記哺乳動物がヒトである請求項７に記載の方法。
【請求項９】
治療に使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項１０】
ヒトにおける慢性疼痛の治療に使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項１１】
慢性疼痛の治療のための医薬の製造における、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はセロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
セロトニンおよびノルエピネフリンは、下行疼痛伝達経路における内因性鎮痛機構の調節因子として関与し、セロトニンノルエピネフリン再取り込み阻害剤（ＳＮＲＩ）は、慢性的疼痛状態（例えば、糖尿病性末梢神経障害疼痛および線維筋痛）の治療に有効性を示している（非特許文献１）。
【０００３】
特許文献１は、特定の３−（ピリド−３−イルオキシメチル）−ピペリジン化合物を、疼痛を含む広範囲にわたる障害の治療のためのモノアミン再取り込み阻害剤（セロトニンおよび／またはノルエピネフリン再取り込み阻害剤）として記載している。
【０００４】
特許文献２は、特定の３−ピロリジニル−オキシ−３’−ピリジルエーテル化合物を、疼痛の治療を含む種々の指標のためのニコチン性アセチルコリン受容体リガンドとして記載している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００８／０２３２５８号パンフレット
【特許文献２】米国特許出願公開第２００２０１５１７１２号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｋｒｏｅｎｋｅら，Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｉｎ：ａ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗｓ，Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ３１（２００９）２０６−２１９（２００９年３月３０日にて「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｃｉｅｎｃｅｄｉｒｅｃｔ．ｃｏｍ」よりオンラインでアクセス）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、従来の引用文献と比べてセロトニンおよびノルエピネフリン再取り込みについて高い有効性および高い選択性を有するさらなるＳＮＲＩ化合物を提供する。加えて、特定の本発明の化合物は、従来の引用文献と比べてセロトニン対ノルエピネフリン再取り込み阻害剤活性の改善されたバランスを提供する。すなわち、従来の二重活性化合物は、典型的に、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤活性と比較してより多くのセロトニンを有するが、特定の本発明の特許請求される化合物は、セロトニンおよびノルエピネフリンの両方の再取り込み阻害に対する同様のレベルと非常に近いレベルの二重活性を有する。さらに、本発明の化合物は、一般的に、改善された薬理学的曝露および製剤化の容易さに関して利点がある、低減された酸不安定性を提供する。なおさらには、特定の本発明の化合物は、一般的に、改善された治療的曝露についての利点があり、患者集団内の薬理学的な変動性の減少において有利であり得る、改善された代謝低下プロファイルを提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式（Ｉ）の化合物
【化１】
2012523416.tif 000003
（式中、Ｒ１は、ｎ−プロピル、イソブチル、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル、および（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−からなる群より選択され、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、トリフルオロメトキシ、メチルアミノ、シクロプロピルアミノ、およびｔ−ブチルカルボニルアミノからなる群より独立して選択され、但しｎが２の場合、Ｒ２のうちの少なくとも１つは、フルオロ、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、またはエトキシである）
またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。
【０００９】
さらに、本発明は、薬学的に受容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む薬学的組成物を提供する。さらに、本発明は、式Ｉの化合物の１つ以上の薬学的に受容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、慢性疼痛の治療に適した薬学的組成物を提供する。さらなる実施形態は、糖尿病性末梢神経障害疼痛、線維筋痛、線維筋痛に関連する疼痛、および炎症性疼痛、例えば多発筋痛、関節リウマチ、または変形性関節症のうちいずれか一つの治療に適する薬学的組成物であって、式Ｉの化合物の１つ以上の薬学的に受容可能な賦形剤、担体、または希釈剤と組み合わせて、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、薬学的組成物を提供する。
【００１０】
また、本発明は、哺乳動物おける慢性疼痛を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を含む、方法を提供する。本発明のこの態様の特定の実施形態としては、糖尿病性末梢神経障害疼痛を治療する方法、線維筋痛を治療する方法、線維筋痛に関連する疼痛を治療する方法、および／または炎症性疼痛、例えば多発筋痛、関節リウマチ、もしくは変形性関節症を治療する方法が挙げられ、各方法は、個々に、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を含む。本発明のこの態様の１つの特定の実施形態において、哺乳動物はヒトである。
【００１１】
また、本発明は、治療に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。この態様において、本発明は、哺乳動物、特にヒトにおける慢性疼痛を治療するのに用いられる式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。本発明のこの態様のさらなる実施形態は、慢性疼痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、糖尿病性末梢神経障害疼痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、線維筋痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、線維筋痛に関連する疼痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、炎症性疼痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、多発筋痛の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、関節リウマチの治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、および変形性関節症の治療において使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、のうちいずれか１つを含む。
【００１２】
本発明の別の態様は、慢性疼痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用を提供する。この態様の特定の実施形態としては、糖尿病性末梢神経障害疼痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、線維筋痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、線維筋痛に関連する疼痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、炎症性疼痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、多発筋痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、関節リウマチの治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、および変形性関節症の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の使用、が挙げられる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の化合物は塩基であり、したがって多数の有機酸および無機酸と反応して、薬学的に受容可能な塩を形成する。また、本発明は、式Ｉの化合物の薬学的に受容可能な塩を含む。本願明細書において用いられるように、用語「薬学的に受容可能な塩」は、生体に対して実質的に無毒な式Ｉの化合物の任意の塩を意味する。このような塩は、当業者に知られる「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２−１９（１９７７）」に記載されているものを含む。
【００１４】
持続性の痛みは、体細胞構造または内蔵における慢性的な病的過程によって引き起こされるか、あるいは、末梢神経系もしくは中枢神経系またはその両方の神経系の長期の機能障害および場合によっては永続的な機能障害によって引き起こされる。持続する炎症、組織の損傷、または、神経損傷は、脊髄内の脊髄後角ニューロンの過剰興奮性をもたらし、このプロセスは中枢性感作としても知られる。中枢性感作は、疼痛伝達経路内における、脊髄後角ニューロンの応答変化、受容野の拡大、およびニューロン結合の可塑性により特徴付けられる。これらのプロセスは、上行疼痛伝達経路および脊柱上部内におけるニューロン活性の増加を導き、ならびに／または内因性の脊髄および脊柱の下行疼痛阻害機構の機能障害／脱抑制を導く。
【００１５】
中枢性感作および脱抑制は、自発的な持続性の疼痛の状態が継続する場合があり、また、疼痛性刺激（痛覚過敏）または通常は無痛な機械的疼痛もしくは熱刺激（異痛）の疼痛の経験に対する感受性増加をもたらし得る（Ｃ．Ｊ．Ｗｏｏｌｆ，Ｐａｉｎ：Ｍｏｖｉｎｇ  ｆｒｏｍ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｔｏｗａｒｄ  Ｍｃｈａｎｉｓｍ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１４０，４４１−４５１（２００４））。これらのプロセスは、いくつかの型の持続性の疼痛または慢性疼痛が根底にあると仮定され、これらの疼痛は、神経障害疼痛（糖尿病性神経障害、ＡＩＤＳに関連する感染性神経障害疼痛、非外科的手根管症候群、ヘルペス後神経痛、頸部神経根障害、胸部神経根障害、および腰仙神経根障害、三叉神経痛、複合性局所疼痛症候群ＩおよびＩＩ、化学療法誘導神経障害疼痛、ならびに中枢神経障害疼痛症候群（脊髄損傷、多発性硬化、または、脳卒中関連の疼痛を含む）を含む）、炎症性疼痛（多発筋痛、関節リウマチ、および変形性関節症を含む）、および非神経障害性非炎症性疼痛（慢性疲労症候群、神経根障害を有さない慢性腰痛、線維筋痛、慢性緊張型頭痛、炎症性腸疾患、過敏性大腸症候群、頸部障害、慢性骨盤痛（間質性膀胱炎および顎関節障害（ＴＭＪＤ）を含む）を含む。
【００１６】
内因性疼痛阻害経路におけるセロトニンおよびノルエピネフリンの脱抑制と不均等との相関の認識は、ヒトの慢性疼痛状態の治療におけるセロトニンおよびノルエピネフリンの再取り込み阻害剤の首尾よい評価を導く。したがって、セロトニンおよびノルエピネフリンの両方の再取り込みの二重活性阻害剤である、式Ｉの化合物は、哺乳動物における慢性疼痛（糖尿病性末梢神経障害疼痛および線維筋痛を含む）の治療に有用である。１つの好ましい実施形態において、哺乳動物は、ヒトである。さらに、式Ｉの化合物は、抑鬱障害（大鬱病性障害を含む）、不安障害（全般性不安障害を含む）、および失禁（例えば、衝動型失禁、ストレス型失禁、および混合型失禁）の治療に有用である（Ｏｒｊａｌｅｓら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４６（２５），５５１２−５５３２（２００３）；Ｆｉｓｈら，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１７，２０２２−２０２５（２００７））。
【００１７】
本明細書で用いる略語は以下のように定義される。
「ＨＰＬＣ」は、高圧液体クロマトグラフィーを意味する。
「ＭＳ（ＥＳ＋）」は、エレクトロスプレーイオン化を用いる質量分析を意味する。
「ＭＴＢＥ」は、メチルｔ−ブチルエーテルを意味する。
「ＮＭＲ」は、各磁気共鳴を意味する。
「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味する。
「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを意味する。
「ＭｅＯＨ」は、メタノールを意味する。
「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシドを意味する。
「ＳＣＸカラム」は、強酸性カチオン交換カラムを意味する。
「Ｐｄ（ＯＡｃ）２」は、酢酸パラジウム（ＩＩ）を意味する。
「ＤＭＦ」は、ジメチルホルムアミドを意味する。
「ｎ−ＢｕＬｉ」は、ｎ−ブチルリチウムを意味する。
「ＭｅＯＡｃ」は、酢酸メチルを意味する。
「（Ｓ）−Ｒｕ（ＯＡｃ）２Ｔ−ＢＩＮＡＰ」は、ジアセタト［（Ｓ）−（−）−２，２’−ビス（ジ−ｐ−トリルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル］ルテニウム（ＩＩ）を意味する。
「ＤＭＡ」は、ジメチルアセトアミドを意味する。
「ＸＲＤ」は、Ｘ線回析を意味する。
「ＴＯＣＳＹ」は、全相関分光法を意味する。
「ＳＥＲＴ」は、セロトニン輸送体を意味する。
「ｈＳＥＲＴ」は、ヒトセロトニン輸送体を意味する。
「Ｎｅｔ」は、ノルエピネフリン輸送体を意味する。
「ｈＮｅｔ」、ヒトノルエピネフリン輸送体を意味する。
「ＤＡＴ」は、ドーパミン輸送体を意味する。
「ｈＤＡＴ」は、ヒトドーパミン輸送体を意味する。
「ＨＥＰＥＳ」は、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を意味する。
「ＳＥＭ」は、平均の標準誤差を意味する。
「ＰＣＡ」は、パラ−クロロアンフェタミンを意味する。
「α−ＭＭＴ」は、アルファ−メチル−ｍ−チロシンを意味する。
「ＩＣ５０」は、５０％最大阻害濃度を意味する。
「ＥＤ５０」は、有効量を意味する。
【００１８】
本発明の好ましい化合物は、
（１）Ｒ１は、ｎ−プロピルまたはイソブチル（すなわち、２−メチルプロピル−）であり、
（２）Ｒ１は、イソブチル（すなわち、２−メチルプロピル−）であり、
（３）Ｒ１は、ｎ−プロピルであり、
（４）Ｒ１は、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−であり、
（５）Ｒ１は、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルであり、
（６）Ｒ１は、シクロブチルまたはシクロブチルメチルであり、
（７）各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（８）各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（９）各Ｒ２は、クロロ、メチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１０）各Ｒ２は、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１１）Ｒ１は、イソブチルであり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（１２）Ｒ１は、イソブチルであり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１３）Ｒ１は、イソブチルであり、各Ｒ２は、クロロ、メチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１４）Ｒ１は、イソブチルであり、各Ｒ２は、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１５）Ｒ１は、ｎ−プロピルであり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（１６）Ｒ１は、ｎ−プロピルであり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１７）Ｒ１は、ｎ−プロピルであり、各Ｒ２は、クロロ、メチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１８）Ｒ１は、ｎ−プロピルであり、各Ｒ２は、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（１９）Ｒ１は、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（２０）Ｒ１は、（Ｃ３−Ｃ４）シクロシクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、および、メトキシから独立して選択され、
（２１）Ｒ１は、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−であり、各Ｒ２は、クロロ、メチル、およびメトキシから独立して選択され、
（２２）Ｒ１は、（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキルまたは（Ｃ３−Ｃ４）シクロアルキル−メチル−であり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、メチル、エチル、およびメトキシから独立して選択され、
（２３）Ｒ１は、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（２４）Ｒ１は、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、および、メトキシから独立して選択され、
（２５）Ｒ１は、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、メチル、およびメトキシから独立して選択され、
（２６）Ｒ１は、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、メチル、エチル、および、メトキシから独立して選択され、
（２７）Ｒ１は、シクロブチルまたはシクロブチルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、シクロプロピルメチルオキシ、およびトリフルオロメトキシから独立して選択され、
（２８）Ｒ１は、シクロブチルまたはシクロブチルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、ブロモ、メチル、エチル、および、メトキシから独立して選択され、
（２９）Ｒ１は、シクロブチルまたはシクロブチルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、クロロ、メチル、および、メトキシから独立して選択され、
（３０）Ｒ１は、シクロブチルまたはシクロブチルメチルであり、ｎは、１または２であり、各Ｒ２は、メチル、エチル、および、メトキシから独立して選択され、
（３１）上述の実施形態７から３０のそれぞれについて、さらに好ましい化合物は、ｎが２であり、Ｒ２の置換物が、ピリジル２および６の位置にて置換される、化合物である。
【００１９】
本発明の１つの特に好ましい化合物は、実施例１９、１９Ａおよび１９Ｂに例示されるような、Ｌ−および／またはＤ−酒石酸塩を一例とする、（３Ｓ）−３−（（Ｓ）１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、またはその薬学的に受容可能な塩である。
【００２０】
式Ｉの化合物には２つのキラル中心があり、それぞれ以下のように「＊」で示される。
【化２】
2012523416.tif 000004
【００２１】
したがって、式Ｉの化合物は、種々の立体異性構造（例えば、ラセミ化合物、ならびに、ジアステレオマーおよび光学異性体）で存在し得る。本発明の化合物の活性は、化合物について著しく改善され、ここで、ピロリジン環の３位におけるキラル中心は、式Ｉに要求されるように「Ｓ」絶対配置に存在する。化合物は、「Ｒ」絶対配置、「Ｓ」絶対配置、またはその任意の混合物のうちいずれかに付加された鎖の１’位にて、キラル中心を有し得る。
【化３】
2012523416.tif 000005
【００２２】
一般的に、立体化学的に純粋な化合物は、ラセミ化合物よりも好ましい。一般的に、１つの立体異性体は、他のものより向上した活性を有する。好ましい化合物は、「Ｓ」絶対配置に両方のキラル中心を有するものである。
【化４】
2012523416.tif 000006
【００２３】
式Ｉの化合物の特定の立体異性体および光学異性体は、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら，「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１，ならびにＥ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，（Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  １９９４）、ならびに１９９８年４月２９日に公開された欧州特許出願ＥＰ−Ａ−８３８４４８により開示されるような、周知の技術およびプロセスを用いて当業者によって調製され得る。分離の例としては、再結晶技術またはキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
【００２４】
本発明の化合物は、当該技術分野において周知かつ理解されている方法によって、以下の合成スキームに従って調製され得る。これらのスキームのステップについて適切な反応条件は、当該技術分野において周知であり、溶媒および共試薬の適切な代替物は、当該技術分野の範囲内である。同様に、当業者は、合成中間物が必要または所望される種々の周知技術により単離および／または精製され得ること、ならびに、頻繁に種々の中間物を直接、連続する合成ステップにおいて少しの精製または精製なしで使用できることを理解する。さらに、当業者は、一部の状況において、導入される部分の順序は重要でないことを理解する。本発明の化合物を生成するのに必要なステップの特定の順序は、熟練した化学者に理解されるように、合成される特定の化合物、出発化合物、選択された置換基の相対的なライアビリティに依存することを理解する。置換基Ｒ１および置換基Ｒ２は、特に指定されない限り、前に定義されたとおりであり、全ての試薬は、当該技術分野において周知であり、理解されている。Ｐｇは、窒素保護基であり、当該技術分野において周知なものである（ＷｕｔｓおよびＧｒｅｅｎｅ，Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４ｔｈ  Ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．，（２００７）を参照のこと）。
【００２５】
【化５】
2012523416.tif 000007
【００２６】
出発アルコール（ａ）を、適切な塩基（例えば、水素化ナトリウム）および適切に置換されたフッ化アリールと、適切な溶媒（例えば、ジメチルスルホキシド）中で高温にて反応させて、エーテル（ｂ）を得る。あるいは、アルコール（ａ）を、標準的な光延条件下で適切に置換されたピリジンと反応させて、エーテル（ｂ）を得てもよい。次いで、エーテル（ｂ）を、当業者に周知の条件下で脱保護して、式Ｉの化合物を得る（例えば、上述のＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓを参照のこと）。次いで、得られたアミンを、薬学的に受容可能な酸（例えば、Ｌ−酒石酸、Ｄ−酒石酸、またはＨＣｌ）で、適切な溶媒（例えば、メタノール）中で処理して、式Ｉの化合物の薬学的に受容可能な塩を得る。
【００２７】
必須のアルコール（ａ）を、以下のスキームに記載されるように調製し得る。ここで、Ｒ１、Ｒ２およびＰｇは、前に定義したとおりである。
【００２８】
【化６】
2012523416.tif 000008
【００２９】
Ｎ−保護ピロリジン−３−カルボン酸（ｃ）を、Ｎ，Ｏ−ジメチル−ヒドロキシルアミンと、標準的なアミドカップリング条件下で反応させて、ワインレブアミド（ｄ）を得る。このアミドを、適切な有機金属求核試薬と反応させて、ケトン（ｅ）を得る。ケトン（ｅ）を標準条件下で（例えば、メタノール中で水素化ホウ素ナトリウムと）還元させて、アルコール（ａ）を得る。あるいは、Ｎ−保護２−ピロリジノン（ｆ）を、適切な塩基（例えば、リチウムビス（トリメチルシリル）アミドと適切な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）で処理して、得られたアニオンを、アルデヒドと反応させて、追加の生成物（ｇ）を得てもよい。アミド部分を標準条件下で（例えば、ホウ素−硫化メチルと、テトラヒドロフラン中で高温にて反応させることにより）還元させて、アルコール（ａ）を得る。
【００３０】
６−メトキシ基の６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシピロリジン誘導体への導入を、対応する６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ誘導体の遊離アミンで、標準的求核芳香族置換条件下にてメトキシドによるクロロの求核置換により達成して、スキーム３に示すような所望の化合物を得ることができる。
【００３１】
【化７】
2012523416.tif 000009
【００３２】
以下の調製物および実施例において、記号（Ｓ−ｍｉｘ）は、中間体または式Ｉの化合物を表すものとされ、ここで、ピロリジン環の３位におけるキラル中心は、「Ｓ」絶対配置内にあり、第２のキラル中心（上記において１’で表される）は、「Ｓ」および「Ｒ」の混合物である。記号（Ｓ−１）は、光学異性体の混合物がクロマトグラフィーにより分離される場合、対応する中間体または式Ｉの化合物が、第１の溶出光学異性体であるか、または第１の溶出光学異性体から誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。同様に、記号（Ｓ−２）は、光学異性体の混合物がクロマトグラフィーにより分離される場合、対応する中間体または式Ｉの化合物が、第２の溶出光学異性体であるか、または第２の溶出光学異性体から誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。記号（Ｄ１）は、ジアステレオマーがクロマトグラフィーにより分離される場合、中間体または式Ｉの化合物が、第１の溶出ジアステレオマーであるか、または第１の溶出ジアステレオマーから誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。同様に、記号（Ｄ２）は、ジアステレオマーがクロマトグラフィーにより分離される場合、中間体または式Ｉの化合物が、第２の溶出ジアステレオマーであるか、または第２の溶出ジアステレオマーから誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。記号（Ｄ１−Ｅ１）および記号（Ｄ１−Ｅ２）は、中間体または式Ｉの化合物が、第１の溶出ジアステレオマーの、それぞれ、第１の溶出光学異性体および第２の溶出光学異性体であるか、または第１の溶出光学異性体および第２の溶出光学異性体から誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。同様に、記号（Ｄ２−Ｅ１）および記号（Ｄ２−Ｅ２）は、中間体または式Ｉの化合物が、第２の溶出ジアステレオマーの、それぞれ、第１の溶出光学異性体および第２の溶出光学異性体であるか、または第１の溶出光学異性体および第２の溶出光学異性体から誘導されるかのいずれかであることを表すものとされる。これらの一般的規則の例外は、光延反応がアルコール（ａ）を用いて行われた場合、１’炭素の配置の反転を生じることである。これらの実施例において、出発アルコール（Ｓ−１）の記号は、（Ｓ−２）生成物となり、（Ｄ１）出発アルコールは（Ｄ２）生成物となる。
【００３３】
以下の調製例および実施例は、本発明の化合物の合成に有用な方法を例示している。調製例および実施例に例示された多くの化合物の名称は、ＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ  １０．０で描かれた構造から提供される。
【００３４】
調製例１：（Ｓ）−３−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化８】
2012523416.tif 000010
（Ｓ）−３−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
１，１’−カルボニルジイミダゾール（４１４．３３ｇ，２．５６ｍｏｌ）を少しずつ、ジクロロメタン（５．８１Ｌ）中の（Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピロリジン−３−カルボン酸（５００ｇ，２．３２ｍｏｌ）の攪拌溶液に加え、室温で窒素下で一時間、攪拌する。Ｎ，Ｏ−ジ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２５３．０４ｇ，２．５６ｍｏｌ）を加え、室温で４８時間攪拌する。反応物を１ＮのＨＣｌでクエンチし、酢酸エチル（２×）で抽出する。合わせた有機物を飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮して、５３５ｇ（８９％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２０３（Ｍ−５５）。
【００３５】
グリニャールのワインレブアミドへの添加
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のイソブチルマグネシウムブロミド（テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に２．０Ｍ，６３．４７ｍＬ，１２６．９４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して、窒素下で−７℃に維持されたＴＨＦ（４００ｍＬ）中の（Ｓ）−３−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１．８６ｇ，８４．６２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加える。−５℃で１時間攪拌し、次いでその反応物を室温まで加温し、一晩攪拌し続ける。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチル（２×）で抽出する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーにより残留物を精製し、ヘキサン中の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）（０〜２０％の勾配）で溶出し、２１．６ｇ（９９．６％）の標題の化合物を得る。
【００３６】
調製例２−５の化合物を、調製例１に実質的に記載されるように調製する。
【００３７】
【表１】
2012523416.tif 000011
【００３８】
調製例５：（Ｓ）−３−シクロブチルカルボニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化９】
2012523416.tif 000012
水素化ジイソブチルアルミニウム（トルエン中に１Ｍ，０．７９０ｍＬ，０．７９０ｍｍｏｌ）を、窒素下でＴＨＦ（１ｍＬ）中のマグネシウム（０．９６０ｇ，３９．５ｍｍｏｌ）およびヨウ素（０．１００ｇ，０．３９５ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加える。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のシクロブチルブロミド（８．００ｇ，５９．２ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ滴下して加え、反応物を６０℃で２時間攪拌することにより、全てのマグネシウムを消費する。この混合物を室温まで冷却し、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（Ｓ）−３−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０．２ｇ，３９．５ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ滴下して加える。この反応混合物を室温で２．５時間攪拌する。１Ｍのクエン酸水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（０〜５０％の勾配）で溶出して、標題化合物（５．３０ｇ，５３％）を得る。
【００３９】
調製例６：（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）および異性体２（Ｓ−２）
【化１０】
2012523416.tif 000013
水素化ホウ素ナトリウム（１５．２ｇ，４２３ｍｍｏｌ）を、メタノール（５００ｍＬ）中の（Ｓ）−３−（３−メチルブタノイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１．６ｇ，８４．６ｍｍｏｌ）の溶液に少しずつ加え、室温で一晩攪拌する。さらに当量の水素化ホウ素ナトリウム（３．０４ｇ，８４．６ｍｍｏｌ）を加える。さらに２時間攪拌し、メタノールを半分の体積まで蒸発させ、ブラインを加え、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。ジアステレオ異性体を、０．２％のジエチルメチルアミンを含む１０％のＭｅＯＨ／ＣＯ２で溶出する超臨界流体クロマトグラフィー（ＡＤ−Ｈカラム）により分離し、（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）を第１の溶出異性体（８．２ｇ，３８％）として、および（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体２（Ｓ−２）を第２の溶出異性体（８．９ｇ，４１％）として得る。
【００４０】
調製例７：（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）および異性体２（Ｓ−２）
【化１１】
2012523416.tif 000014
水素化ホウ素ナトリウム（５．１９ｇ，１４５ｍｍｏｌ）を、メタノール（２００ｍＬ）中の（Ｓ）−３−ブタノイル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７．０ｇ，２９．０ｍｍｏｌ）の溶液に少しずつ加え、室温で一晩攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（１．４ｇ，３９ｍｍｏｌ）をさらに加え、室温で一時間攪拌する。メタノールを半分の体積まで蒸発させ、ブラインを加え、酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。ジアステレオ異性体を、ヘキサン中の５％のイソプロピルアミンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより分離し、（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）を第１の溶出異性体（２．６ｇ，３７％）として、および（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体２（Ｓ−２）を第２の溶出異性体（１．８ｇ，２６％）として得る。
【００４１】
調製例８〜９の化合物は、調製例８に実質的に記載されるように調製することができる
【００４２】
【表２】
2012523416.tif 000015
【００４３】
調製例１０：（３Ｓ）−３−（シクロブチル−ヒドロキシ−メチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）
【化１２】
2012523416.tif 000016
水素化ホウ素ナトリウム（１．１９ｇ，３１．４ｍｍｏｌ）を、０℃にて窒素雰囲気下で維持されるＭｅＯＨ（１０５ｍＬ）中の（Ｓ）−３−シクロブタンカルボニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．３０ｇ，２０．９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加える。この混合物を室温まで加温しながら、２時間攪拌する。ＭｅＯＨを濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、有機物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、およびブラインで洗浄する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮し、ジアステレオマーの混合物（Ｓ−ｍｉｘ）として標題化合物（４．４ｇ，８２％）を得る。
【００４４】
調製例１１：（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−ブテニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、（Ｓ−ｍｉｘ）
【化１３】
2012523416.tif 000017
調製例１１の化合物を、（３Ｓ）−３−（ブト−３−エノニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを用いて、調製例１０に実質的に記載されるように調製することができる。
【００４５】
調製例１２：３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ジアステレオマー１（Ｄ１）
【化１４】
2012523416.tif 000018
３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ジアステレオマー１（Ｄ１）およびジアステレオマー２（Ｄ２）
リチウムビス（トリメチルシリル）−アミド（ＴＨＦ中に１．０Ｍ，１４８ｍＬ，１４８ｍｍｏｌ）を、−７８℃にて、ＴＨＦ（４５０ｍＬ）中の２−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２５．０ｇ，１３４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、窒素下で２時間攪拌する。３−メチル−ブチルアルデヒド（１７．５ｍＬ，１６２ｍｍｏｌ）を加え、続いて三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（２０．５ｍＬ，１６２ｍｍｏｌ）を加え、２時間、−７８℃にて攪拌を継続する。この混合物を室温まで加温し、飽和塩化アンモニウム水溶液（２５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出する。合わせた有機物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を２つの等しい部分に分け、各々の部分を、ヘキサン中の０〜４０％のＥｔＯＡｃで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ジアステレオマー１（１２．５ｇ，３４％）（Ｄ１）を第１の溶出異性体、ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２１６．０（Ｍ−５６）として、および３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ジアステレオマー２（３．８７ｇ，１１％）（Ｄ２）を第２の溶出異性体、ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２１６．０（Ｍ−５６）として得る。
【００４６】
アミド還元
ホウ素−硫化メチル錯体（ＴＨＦ中に２．０Ｍ，６８．８ｍＬ，１３８ｍｍｏｌ）を、窒素下に維持されたＴＨＦ（２２０ｍＬ）中の３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ１）（１２．５ｇ，４５．９ｍｍｏｌ）の溶液にゆっくりと加える。この混合物を２時間、還流まで加熱して、飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）でクエンチする。酢酸エチル（２×）で抽出する。合わせた有機物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）、５％のクエン酸（１００ｍＬ）、およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄する。乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。ヘキサン中の０〜４０％のＥｔＯＡｃで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによりその残留物を精製し、１０．７ｇ（９１％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２０２．０（Ｍ−５６）。
【００４７】
調製例１３：（３Ｓ）−３−（２−シクロプロピル−１−ヒドロキシエチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）
【化１５】
2012523416.tif 000019
酢酸パラジウム（ＩＩ）（５０．０ｍｇ；０．２２ｍｍｏｌ）を、０℃にて窒素下で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−ヒドロキシブト−３−エニル）ピロリジン−１−カルボン酸塩（Ｓ−ｍｉｘ）（３．０ｇ，１２．４３ｍｍｏｌ）および新たに調製したジアゾメタン（５０ｍＬ，ジエチルエーテル中に約２３．８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加える（注意：激しいガスが発生）。１０分間、０℃で攪拌する。室温まで加温し、水に注ぎ、酢酸エチル（３×）で抽出する。合わせた有機物を水およびブラインで洗浄する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮する。その残留物を、ヘキサン中の０〜１００％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、２．９ｇ（９１％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２００．０（Ｍ−５５）。
【００４８】
調製例１４：３−（２−シクロブチル−１−ヒドロキシエチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル
【化１６】
2012523416.tif 000020
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（ジエトキシホスホリル）アセチル）ピロリジン−１−カルボン酸塩
ブチルリチウム（９８．０ｍＬ，１５７ｍｍｏｌ）を、−７８℃にて窒素下で、１５分にわたって、ＴＨＦ（１９４ｍＬ）中のジエチルメチルホスホン酸塩（２３．６ｇ，１５５ｍｍｏｌ）の溶液に、滴下して加える。ＴＨＦ中の（Ｓ）−３−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（５．０ｇ，１９．４ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で約３．５時間、攪拌する。水に注ぎ、酢酸エチル（３×）で抽出する。合わせた有機物を水およびブラインで洗浄する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮する。その残留物を、クロロホルム中の０〜５０％のアセトンで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにかけ、続いてジクロロメタン中の０〜３０％のアセトンで溶出する、別のシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、３．１５ｇ（４７％）の所望の化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２９４．０（Ｍ−５５）。
【００４９】
３−（２−シクロブチリデンアセチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル
シクロブタノン（０．７３８ｍＬ；９．８９ｍｍｏｌ）を、５℃にて窒素下に維持されたエタノール（４５ｍＬ）中の３−（２−（ジエトキシホスホリル）−アセチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（３．１４ｇ，８．９９ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（６５６ｍｇ，１１．７ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加える。室温まで加温し、３時間攪拌する。減圧下で濃縮し、その残留物を、ヘキサン中の２０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにかけ、０．８５ｇ（３６％）の所望の粗化合物を得て、これをさらに精製せずに、次の工程に使用する。
【００５０】
３−（２−シクロブチルアセチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル
パラジウム炭素（５０ｍｇ，触媒）を、酢酸エチル（２５ｍＬ）中の３−（２−シクロブチリデン−アセチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（８５０ｍｇ，３．２０ｍｍｏｌ）に加え、室温にて窒素下で攪拌する。水素ガスのバルーンを挿入し、一晩攪拌する。セライトで反応物を濾過し、酢酸エチルでリンスし、乾燥するまで濃縮し、３９１ｍｇ（４６％）の所望の化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２１２．０（Ｍ−５５）。
【００５１】
還元
水素化ホウ素ナトリウム（７１．９ｍｇ，１．９０ｍｍｏｌ）を、０℃にて、メタノール（７．３１ｍＬ）中の３−（２−シクロブチルアセチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（３９１ｍｇ，１．４６ｍｍｏｌ）に少しずつ加える。室温で一晩攪拌する。減圧下で濃縮し、水で希釈し、酢酸エチル（３×）で抽出する。合わせた有機物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、およびブラインで洗浄する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮して、０．３９ｇ（９７％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２１４．０（Ｍ−５５）。
【００５２】
調製例１５：（３Ｓ）−３−［２−シクロプロピル−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）および異性体２（Ｓ−２）
【化１７】
2012523416.tif 000021
水素化ナトリウム（６０％，９４．０ｍｇ，２．３５ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下に維持された（３Ｓ）−３−（２−シクロプロピル−１−ヒドロキシ−エチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）（３１．５ｇ，１２３．３６ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（１１．８ｍＬ）の混合物に、室温にてゆっくりと加える。１０分間攪拌し、次いで２−クロロ−５−フルオロピコリン（３５９ｍｇ，２．４７ｍｍｏｌ）を加える。６０℃まで加熱し、一晩攪拌する。その混合物を冷却し、水に注ぎ、酢酸エチル（３×）で抽出する。合わせた有機物を洗浄し、水およびブラインで抽出する。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮する。粗残留物を、ヘキサン中の２０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、（３Ｓ）−３−［２−シクロプロピル−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｓ−１）（９９ｍｇ，２２％）を第１の溶出異性体として、および（３Ｓ）−３−［２−シクロプロピル−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体２（Ｓ−２）（８０ｍｇ，１８％）を第２の溶出異性体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３２５．０（Ｍ−５５）。
【００５３】
調製例１６〜２３の化合物は、調製例１５に実質的に記載されるように調製することができる。
【００５４】
【表３−１】
2012523416.tif 000022
【表３−２】
2012523416.tif 000023
【００５５】
調製例２４：３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１（Ｄ２Ｅ１）および異性体２（Ｄ２Ｅ２）
【化１８】
2012523416.tif 000024
【００５６】
光延反応
室温にて１０分間、トルエン（１０ｍＬ）中の３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ１）（６００ｍｇ，２．３３ｍｍｏｌ）および２−クロロ−５−ヒドロキシ−ピリジン（０．４５１ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）の溶液を窒素で泡立てる。トリ−ｎ−ブチルホスフィン（０．８７２ｍＬ，３．５０ｍｍｏｌ）を加え、その後、アゾジカルボン酸ジピペリジド（０．８８２ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を７０℃まで加熱し、一晩攪拌する。さらなる３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ１）（６００ｍｇ，２．３３ｍｍｏｌ）、トリ−ｎ−ブチルホスフィン（０．８７２ｍＬ，３．５０ｍｍｏｌ）およびアゾジカルボン酸ジピペリジド（０．８８２ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）を加える。７０℃で３時間、攪拌を継続する。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に注ぐ。酢酸エチル（２×）で抽出し、有機抽出物を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。粗残留物を、ヘキサン中の０〜２０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、１８０ｍｇの３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ２）をキラル分離のために得る。
【００５７】
キラルクロマトグラフ分離
０．２％のジエチルメチルアミンを含む１２％のイソプロピルアミン／ＣＯ２で溶出する、ＯＤ−Ｈカラム上で、超臨界流体クロマトグラフィーを用いて、３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ２）の異性体の混合物を分離して、３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ２Ｅ１）を第１の溶出異性体（８０．６ｍｇ，９．４％）として、および３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｄ２Ｅ２）を第２の溶出異性体（８１．２ｍｇ，９．４％）として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３９１［Ｍ＋１］。
【００５８】
調製例２５〜２８の化合物は、調製例２４に実質的に記載されるように調製できる。
【００５９】
【表４】
2012523416.tif 000025
【００６０】
調製例２９：（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）
【化１９】
2012523416.tif 000026
水素化ナトリウム（６０％，１２１．２ｍｇ，３．０３ｍｍｏｌ）、（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（０．６５ｇ，２．５３ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（１０．０ｍＬ）を混合する。窒素雰囲気下で室温にて１時間、混合物を攪拌する。２−クロロ−５−フルオロピコリン（２．２１ｇ，１５．２ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を７０℃で一晩攪拌する。混合物を室温まで冷却し、ブラインで反応物をクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮する。粗残留物を、ヘキサン中の０〜２０％の酢酸エチル、続いてヘキサン中の２０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、０．５８ｇ（６０％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝４２５．０（Ｍ＋２３）。
【００６１】
調製例３０：６−メトキシ−２−メチル−ピリジン−３−オール
【化２０】
2012523416.tif 000027
過酸化水素（７．６９ｍＬ，８９．８ｍｍｏｌ）を、室温にて窒素下で維持されたジクロロメタン（１００ｍＬ）中の２−メトキシ−６−メチル−５−ピリジルボロン酸（５．０ｇ，３０ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加える。一晩、周囲温度にて攪拌し、水を加え、ジクロロメタンでその混合物を抽出する。有機相を合わせ、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮して、２．６ｇ（６２％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝１４０［Ｍ＋１］。
【実施例】
【００６２】
実施例１：（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−１）
【化２１】
2012523416.tif 000028
【００６３】
脱保護
トリフルオロ酢酸（１．５１ｇ，１．０ｍＬ，１３．２ｍｍｏｌ）を、メトキシベンゼン（１．０ｍＬ）およびジクロロメタン（２．０ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−１）（９９．０ｍｇ，０．２６０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。室温にて窒素下で、一時間攪拌する。その混合物を、予め詰めたＳＣＸカラムに直接負荷し、ＣＨ２Ｃｌ２、続いてＣＨ３ＯＨでリンスする。メタノール中の２ＭのＮＨ３で溶出し、減圧下で濃縮して、５８ｍｇ（７９％）の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン（Ｓ−１）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８１．２［Ｍ＋１］。
【００６４】
塩の形成
Ｌ−酒石酸（３１．０ｍｇ，０．２０７ｍｍｏｌ）を、メタノール（２ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン（Ｓ−１）（５８．０ｍｇ，０．２０７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を、室温にて一時間窒素下で攪拌する。濃縮し、真空オーブンで乾燥させて、８９．０ｍｇ（９９％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８１．０［Ｍ＋１］。
【００６５】
実施例２〜８の化合物は、実施例１に実質的に記載されるように調製できる。
【００６６】
【表５−１】
2012523416.tif 000029
【表５−２】
2012523416.tif 000030
【００６７】
実施例９：（３Ｓ）−３−（３−メチル−１−（２−メチル−６−メチルアミノ−３−ピリジルオキシ）ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２２】
2012523416.tif 000031
Ｐｄ−触媒化カップリング反応
５ｍＬのマイクロ波用の容器に、１０ｍｇ／ｍＬのトルエン中のＰｄ（ＯＡｃ）２（２．９３ｍｇ，０．０１３ｍｍｏｌ）の溶液の０．２９４ｍＬを入れる。窒素雰囲気下で、１０ｍｇ／ｍＬのトルエン中の、Ｄｅｇｕｓｓａから得たｃａｔａＣＸｉｕｍ＠ＰｔＢ［（Ｎ−フェニル−２−（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）ピロール］（７．５０ｍｇ，０．０２６ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３０．２ｍｇ，０．３１４ｍｍｏｌ）の溶液の０．７５６ｍＬを加える。１０ｍｇ／ｍＬのトルエン中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（０．１００ｇ，０．２６１ｍｍｏｌ）およびメチルアミン（０．３９２ｍＬ，０．７８５ｍｍｏｌ）の溶液の１ｍＬを加える。その反応混合物を、１５０℃にて１．５時間加熱する。Ｓｉ−ＳＨ樹脂を加え、２時間、攪拌して、Ｐｄを除去する。粗混合物を予め詰めたＳＣＸ−カラムに注ぎ、メタノールで洗浄し、生成物を、メタノール中の２ＭのＮＨ３で遊離させ、濃縮する。粗生成物をさらに精製せずに次の工程に使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３７８［Ｍ＋１］。
【００６８】
脱保護
（３Ｓ）−３−［１−（２−メチル−６−メチルアミノ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）およびＨＣｌ水溶液（４Ｍ，０．２６１ｍＬ，１．０４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて一時間攪拌する。完全に変換した後、混合物を濃縮し、ジクロロメタンに溶解し、混合物を予め詰めたＳＣＸカラムに負荷する。ジクロロメタン、続いてメタノールで洗浄する。生成物をメタノール中の２ＭのＮＨ３で遊離させ、減圧下で濃縮する。逆相クロマトグラフィー（水中の０．０１Ｍのギ酸アンモニウム中の１７〜４３％勾配のアセトニトリル、８５ｍＬ／分、８分間、Ｃ１８  ＯＤＢ  ＸＢｒｉｄｇｅカラム、３０×７５ｍｍ、５μｍ）により粗残留物を精製して、９ｍｇ（１２％）の（３Ｓ）−３−［１−（２−メチル−６−メチルアミノ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン（Ｓ−２）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７８［Ｍ＋１］。
【００６９】
精製した物質をアセトニトリル／メタノール（５：１）の混合物に溶解することによって、Ｌ−酒石酸塩を調製する。Ｌ−酒石酸（１．０５当量）の１Ｎ水溶液を加える。混合物を凍結乾燥して、標題化合物を固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７８［Ｍ＋１］。
【００７０】
実施例１０：（３Ｓ）−３−［１−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２３】
2012523416.tif 000032
標題化合物は、実施例９に実質的に記載されるように調製できる。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３０４［Ｍ＋１］。
【００７１】
実施例１１：（３Ｓ）−３−（１−（６−エトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２４】
2012523416.tif 000033
Ｐｄ−触媒化カップリング反応
５ｍＬのマイクロ波用の容器に、（Ｓ）−（−）−２，２’−ビス（ジ−ｐ−トリルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（１５．１ｍｇ，０．０２２２ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１０．２ｍｇ，０．０１１１ｍｍｏｌ）およびトルエン（２ｍＬ）を入れる。トルエン（１ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（８５．０ｍｇ，０．２２２ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その後、ナトリウムエトキシド（０．２１６ｍｇ，０．６６６ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物をマイクロ波条件下にて、１４０℃で３０分間、照射する。Ｓｉ−ＳＨ樹脂を加え、２時間攪拌し、Ｐｄを取り除く。粗混合物をＳＣＸ−カラムに注ぎ、メタノールで洗浄し、生成物をメタノール中の２ＭのＮＨ３で遊離させ、濃縮する。粗生成物を、さらに精製せずに、次の工程に使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３９３［Ｍ＋１］。
【００７２】
脱保護
（３Ｓ）−３−［１−（６−エトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）およびＨＣｌ水溶液（ジオキサン中に４Ｎ、０．２６１ｍＬ，１．０４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて一時間攪拌する。完全に変換した後、混合物を濃縮し、残留物をクロロメタンに溶解し、予め詰めたＳＣＸカラムに負荷する。ジクロロメタン、続いてメタノールでカラムを洗浄する。生成物をメタノール中の２ＭのＮＨ３で遊離させ、減圧下で濃縮する。粗残留物を、逆相クロマトグラフィー（水中の０．０１Ｍのギ酸アンモニウム中の３４〜６０％勾配のアセトニトリル、８５ｍＬ／分、８分間、Ｃ１８  ＯＤＢ  ＸＢｒｉｄｇｅカラム、３０×７５ｍｍ、５μｍ）により精製して、１３．４ｍｇ（２１％）の（３Ｓ）−３−［１−（６−エトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン（Ｓ−２）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２９３［Ｍ＋１］。
【００７３】
精製した物質をアセトニトリル／メタノール（５：１）の混合物に溶解することによって、Ｌ−酒石酸塩を調製する。Ｌ−酒石酸（１．０５当量）の１Ｎ水溶液を加える。混合物を凍結乾燥させて、標題化合物を固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２９３［Ｍ＋１］。
【００７４】
実施例１２：（３Ｓ）−３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２５】
2012523416.tif 000034
（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（０．４００ｇ，１．６４ｍｍｏｌ）および水素化ナトリウム（６０％，１３２ｍｇ，３．２９ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に加える。混合物を窒素雰囲気下に維持し、１５分間攪拌する。６−クロロ−３−フルオロピコリン（１．４４ｇ，９．８６ｍｍｏｌ）を加える。混合物を７０℃まで加熱し、１時間攪拌する。反応混合物をブラインに注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出する。抽出物を合わせ、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮する。粗残留物を、さらに精製せず、次の反応に使用する。
【００７５】
脱保護およびＬ−酒石酸塩の形成を実質的に実施例１のように実施して、標題化合物（３８４ｍｇ，５６％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２６８［Ｍ＋１］。
【００７６】
実施例１３〜１６の化合物は、実施例１２に実質的に記載されるように調製できる。
【００７７】
【表６】
2012523416.tif 000035
【００７８】
実施例１７：（３Ｓ）−３−（１−（６−ブロモ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２６】
2012523416.tif 000036
反応容器に、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（１００ｍｇ，０．３８９ｍｍｏｌ）の溶液を入れる。３−フルオロ−６−ブロモ−３−ピリジン（９０ｍｇ，０．０５１ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６（１０．３ｍｇ，０．０３９ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６８．２ｍｇ，０．６９９ｍｍｏｌ）を加える。ＬＣ／ＭＳが、所望の生成物への変換を示すまで、反応物を８０℃で数時間加熱する。溶媒を蒸発させて、残留物をさらに精製せずに次の反応に使用する。
【００７９】
脱保護および塩の形成を、実施例１１のように実質的に実施して、標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３１４［Ｍ＋１］。
【００８０】
実施例１８：（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２７】
2012523416.tif 000037
標題化合物は、実施例１７に実質的に記載されるように調製できる。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２６９［Ｍ＋１］。
【００８１】
実施例１９：（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化２８】
2012523416.tif 000038
室温で１０分間、トルエン（１０ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−１）（０．５ｇ，１．９４ｍｍｏｌ）および６−メトキシ−２−メチル−ピリジン−３−オール（０．４１ｇ，２．９１ｍｍｏｌ）の溶液を窒素でパージする。トリ−ｎ−ブチルホスフィン（０．７３ｍＬ，２．９１ｍｍｏｌ）を加え、その後、アゾジカルボン酸ジピペリジド（０．５９ｍｇ，２．９１ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を７０℃まで加熱し、一晩攪拌する。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）に注ぐ。酢酸エチル（２×）で抽出し、有機抽出物を合わせて、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。粗残留物を、ヘキサン中の０〜２０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、（３Ｓ）−３−［１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−２）（１０１ｍｇ，１３％）を得る。脱保護およびＬ−酒石酸塩の形成を、実施例１のように実質的に実施して、標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７９［Ｍ＋１］。
【００８２】
実施例１９Ａ：（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、（Ｓ−２）。代替的合成
【化２９】
2012523416.tif 000039
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−２−オン：
磁気攪拌棒、サーマルカップル、添加漏斗、およびＮ２注入口が備わった５Ｌの三つ口丸底フラスコに、ジイソプロピルアミン（１７６ｍＬ，１２６５ｍｍｏｌ）および２−メチルテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）を入れる。この溶液を攪拌しながら約−１０℃（塩／氷槽）まで冷却し、温度を０℃かまたは０℃以下に維持しながら、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中に２．５Ｍ，５０４ｍＬ，１２５９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加える。添加漏斗を２−メチルテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）でリンスする。約−５℃にて約１５分間、溶液を攪拌する。２−Ｍｅ−ＴＨＦ（５００ｍＬ）中のＮ−ベンジル−２−ピロリジノン（１００．８ｇ，５７５．２ｍｍｏｌ）、イソ吉草酸エチル（９０ｇ，６９０ｍｍｏｌ）の溶液を、温度を５℃かまたは５℃以下に維持する速度で、滴下して加え、黄色のスラリーを得る。反応混合物を−５℃にて約１時間攪拌し、ヘプタン（１Ｌ）を滴下して加え、さらに−５℃にて１時間攪拌する。固体を中サイズのフリット漏斗を通す濾過により収集し、２−メチルテトラヒドロフラン／ヘプタン（２５０ｍＬ）の１：１の溶液、続いてヘプタン（２５０ｍＬ）で洗浄し、固体が粉末状になるまで空気乾燥させる。黄色の固体を、磁気攪拌棒が備わった５Ｌの三つ口丸底フラスコに入れ、ＭＴＢＥ（１Ｌ）および１０％クエン酸（１Ｌ）を加える。混合物を、室温にて約１時間攪拌し、均質な混合物を得る。層を分離し、有機層をＨ２Ｏ（２×５００ｍＬ）、続いてブライン（５００ｍＬ）で洗浄する。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗中間物（１２８ｇ）を橙色の油状物として得る。クーゲルロール蒸留により、粗物質から主な不純物を取り除き、所望の中間生成物を濃い橙色の油状物（１１７．４ｇ，４５２．７ｍｍｏｌ，７８．７％収率）として得る。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３８−７．１６（ｍ，５Ｈ），４．５５−４．３５（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８６，９．３７Ｈｚ），３．３８−３．１４（ｍ，２Ｈ），２．９２−２．８（ｍ，１Ｈ），２．６４−２．４２（ｍ，２Ｈ），２．２８−２．１１（ｍ，１Ｈ），２．０８−１．９３（ｍ，１Ｈ），０．９６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０３Ｈｚ）０．９３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０４Ｈｚ）。ＧＣ／ＭＳ＝２６０（Ｍ＋１）。
【００８３】
（Ｒ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）ピロリジン−２−オン：
４００ｍＬのステンレス鋼のオートクレーブ器に、ＩＰＡ（２５０ｍＬ）中の（Ｓ）−１−ベンジル−３−（３−メチルブタノイル）ピロリジン−２−オン（２０ｇ，７７．１２ｍｍｏｌ）の溶液、続いて３５％のＨＣｌ（基質に対して６％，４．６３ｍｍｏｌ，Ｍ＝３６．４ｇ／ｍｏｌ，ｄ＝１．１８ｇ／ｍＬ，０．４０８ｍＬ）を入れる。Ｎ２ガス（５×〜５０ＰＳＩ）でパージする。器を通気させて、（Ｓ）−Ｒｕ（ＯＡｃ）２Ｔ−ＢＩＮＡＰ（２５０ｍｇ，０．２７８４ｍｍｏｌ）を迅速に加え、この間にＮ２のストリームが反応混合物の上を流れる。オートクレーブをすぐに密封し、Ｎ２ガス（５×〜５０ＰＳＩ）でパージする。Ｈ２ガス（５×６０ＰＳＩ）で器をパージし、次いでＨ２ガス（６０ＰＳＩ）を器に充填する。反応混合物を６５℃にて一晩（約１６〜１８時間）攪拌する。器の圧力はこの時間の間に約７０ＰＳＩまで上昇し、器を必要に応じてＨ２ガスで最充填し、反応の過程にわたって６０ＰＳＩの一定の圧力に維持されない。室温まで冷却し、減圧下で濃縮して、粗（Ｒ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）ピロリジン−２−オンを、暗褐色の油状物として得て、それをさらに精製せずに次の工程に用いる（２１．６ｇ，８２．６ｍｍｏｌ，約９５〜９７％ｅｅ，１００％より多い収率）。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３８−７．１８（ｍ，５Ｈ），４．４８（ｓ，２Ｈ），４．３４−４．２２（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．１４（ｍ，２Ｈ），２．６３（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９３，９．３７Ｈｚ），２．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８６Ｈｚ），２．１２−１．７０（ｍ，３Ｈ），１．５４−１．３８（ｍ，１Ｈ），１．２４−１．１０（ｍ，１Ｈ），０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝３．５１Ｈｚ），０．９３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２．９３Ｈｚ）。ＧＣ／ＭＳ＝２６２（Ｍ＋１）。
【００８４】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン：
磁気攪拌棒、サーマルカップル、添加漏斗、およびＮ２注入口が備わった１Ｌの三つ口丸底フラスコに、粗（Ｒ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）ピロリジン−２−オン（３８．２６ｍｍｏｌ，推定上）およびトルエン（１００ｍＬ）を入れる。わずかに不均一の攪拌溶液を０℃（塩／氷槽）まで冷却し、温度を５℃かまたは５℃以下に維持しながら、Ｖｉｔｒｉｄｅ（商標）（Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ）（トルエン中に６５ｗｔ％，２４ｍＬ，８６．０８５ｍｍｏｌ）およびトルエン（７０ｍＬ）の溶液を滴下して加える。トルエン（１０〜２０ｍＬ）で添加漏斗をリンスする。室温で一晩（約１６時間）攪拌する。反応混合物を０ｏＣ（塩／氷槽）まで冷却し、飽和ロッシェル塩溶液（２００ｍＬ）、続いてＭＴＢＥ（２００ｍＬ）でクエンチする。混合物を攪拌しながら室温まで加温し、次いで１時間、この温度にて攪拌する。有機層および水層を分離し、有機層をＨ２Ｏ（２×２００ｍＬ）、次いでブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、濃縮して、所望の中間体を茶色の油状物として得る（９．６１ｇ，３８．８５ｍｍｏｌ，１００％より多い収率）。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３６−７．１８（ｍ，５Ｈ），３．８２−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．５８（ｄｄ，２Ｈ，７．６１，２０．５１Ｈｚ），２．８７（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．１０，８．７９Ｈｚ），２．７９−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．４８−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．２６−２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９８−１．６４（ｍ，３Ｈ），１．４６−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１４−０．９８（ｍ，１Ｈ），０．９２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．１８Ｈｚ），０．８９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ＝２４８．１（Ｍ＋１）。
【００８５】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジンの分離／精製：
磁気攪拌棒およびＮ２注入口が備わった５００ｍＬの丸底フラスコに、粗（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン（９．６１ｇ，３８．２６ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＡｃ（９６ｍＬ）を入れる。ジベンゾイル−（Ｌ）−酒石酸（１３．７１ｇ，３８．２６ｍｍｏｌ）を攪拌しながら一部ずつ加え、反応混合物が濁るまで（約５分）、室温にてその混合物を攪拌する。予熱された油槽において、５０℃で一晩攪拌しながら（約１６時間）加熱する。反応混合物を室温まで冷却し、固体を、中サイズのフリット漏斗を通す濾過により分離する。固体を酢酸メチル（５×２０ｍＬ）で洗浄し、空気乾燥させて、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン塩を白色の固体として得る（１５．１ｇ，２４．９３ｍｍｏｌ，３ステップにわたって６５．２％の収率，８１．４％の異性体回収率、推定８０％ｅｅ）。ＬＣ／ＭＳ＝２４８．１（Ｍ＋１）。
【００８６】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン塩の脱塩：
磁気攪拌棒が備わった５００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン塩（１３．７１ｇ，２２．６３６ｍｍｏｌ）およびＭＴＢＥ（１４０ｍＬ）を入れる。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１４０ｍＬ）を加え、室温で一晩、不均一な混合物を攪拌する。濁った溶液をＥｔＯＡｃ（１４０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）、続いてＨ２Ｏ（約１００ｍＬ）で希釈し、透明な混合物を得る。層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で有機層を乾燥させる。濾過し、濃縮して、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジンを、黄褐色の油状物として得て、それをさらに精製せずに次の工程に用いる（５．３７ｇ，２１．７０７ｍｍｏｌ，９５．９％回収）。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３６−７．１８（ｍ，５Ｈ），３．８２−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．５８（ｄｄ，２Ｈ，７．６１，２０．５１Ｈｚ），２．８７（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．１０，８．７９Ｈｚ），２．７９−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．４８−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．２６−２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９８−１．６４（ｍ，３Ｈ），１．４６−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１４−０．９８（ｍ，１Ｈ），０．９２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．１８Ｈｚ），０．８９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ＝２４８．１（Ｍ＋１）。
【００８７】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン：
クライゼンアダプター、サーマルカップル、およびＮ２注入口が備わった２００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−ピロリジン（５．６９ｇ，２３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（５８ｍＬ）を入れる。ＮａＨ（１．２９ｇ，３２．２ｍｍｏｌ）を攪拌しながら一部ずつ加え、室温にて１時間攪拌する。６−クロロ−３−フルオロ−２−メチルピリジン（３．５２ｇ，２４．１５ｍｍｏｌｅｓ）を攪拌しながら一部ずつ加え、次いで２４時間室温にて攪拌する。反応混合物をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）でクエンチし、ＭＴＢＥ（１２０ｍＬ）で抽出する。有機層をＨ２Ｏ（２×６０ｍＬ）、続いてブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、濃縮し、次いでシリカ（２２５ｇ，トルエンで湿潤）に負荷し、以下：ヘキサン（２×５００ｍＬ）、１５％のＭＴＢＥ／ヘキサン（１６×５００ｍＬ）、５０％のＭＴＢＥ／ヘキサン（８×５００ｍＬ）で溶出することによって、（トルエン中の）粗物質を精製する。
【００８８】
適切な画分を濃縮して、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジンを、淡黄色の油状物として得る（５．７７ｇ，１５．４７ｍｍｏｌ，６７％収率、純度＞９８％）。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３８−７．２０（ｍ，５Ｈ），７．０６（ｓ，２Ｈ），４．３２−４．２０（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．４８（ｍ，２Ｈ）２．７８−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．６４−２．３０（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．２８−２．２０（ｍ，１Ｈ），２．０５−１．８５（ｍ，１Ｈ），１．８２−１．５２（ｍ，４Ｈ），１．４８−１．３４（ｍ，１Ｈ），０．９２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４５Ｈｚ），０．８８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４５Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ＝３７３．２（Ｍ），３７５．３（Ｍ＋２）。
【００８９】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン：
磁気攪拌棒およびＮ２注入口が備わった２００ｍＬのＲＢフラスコに、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン（５．４６ｇ，１４．６５ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３０ｍＬ）を入れる。カリウムメトキシド（４．１１ｇ，５８．６１ｍｍｏｌ）を攪拌しながら一部ずつ加える。反応混合物を油槽において、１００℃にて１時間攪拌する。Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ）およびＭＴＢＥ（６０ｍＬ）で希釈する。層を分離し、有機層をＨ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、続いてブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。（トルエン中の）粗物質を濾過し、濃縮する。シリカ（２２５ｇ，トルエンで湿潤）に負荷し、以下：ヘキサン（２×５００ｍＬ）、５０％のＭＴＢＥ／ヘキサン（６×５００ｍＬ）で溶出する。適切な画分を濃縮して、（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン（４．３２ｇ，１１．７２ｍｍｏｌ，８０％収率）を、黄色／橙色の油状物として得る。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３４−７．２（ｍ，５Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），６．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７９），４．１７−４．０７（ｍ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．６８−３．５０（ｍ，２Ｈ），２．７８−２．６７（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．４８（ｍ，１Ｈ），２．４８−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．３３−２．２４（ｍ，１Ｈ），２．００−１．５０（ｍ，５Ｈ），１．４４−１．３０（ｍ，１Ｈ），０．８８５（ａｔ，６Ｈ，Ｊａ＝７．０３Ｈｚ，Ｊｂ＝６．４４Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ＝３６９．３（Ｍ＋１）。
【００９０】
（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン：
４００ｍＬのステンレス鋼のオートクレーブに、エタノール（８２ｍＬ）中の２０重量％のＰｄ／Ｃ（１０％，湿潤，８２０ｍｇ）、続いて（Ｓ）−１−ベンジル−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジン（４．１ｇ，１１．１２６ｍｍｏｌ）の溶液を入れる。Ｈ２ガス（３×５０ＰＳＩ）でパージし、次いでその器にＨ２ガス（５０ＰＳＩ）を充填する。反応混合物を６０ｏＣ１まで加熱し、６０℃にて２４時間攪拌する。その器の圧力を約５５ＰＳＩまで、６０℃にて上昇させ、その器を必要に応じてＨ２ガスで再充填する。反応混合物を室温まで冷却させ、中サイズのフリット漏斗を通して濾過し、セライト（エタノールで湿潤）を入れ、エタノール（約８０ｍＬ）で洗浄する。減圧下で濃縮して、（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチルブチル）−ピロリジンを、淡黄色の油状物として得る（３．０２ｇ，１０．８４８ｍｍｏｌ，９７．５％収率）。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），６．５０（ｄ，１Ｈ，８．７９Ｈｚ），４．２（ａｑ，１Ｈ，Ｊａ＝７．０３Ｈｚ，Ｊｂ＝５．２７Ｈｚ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．０８−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．９４−２．８２（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．５０−２．２６（ｍ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），１．９４−１．７８（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．５２（ｍ，３Ｈ），１．４４−１．３０（ｍ，１Ｈ），０．８９８（ａｔ，６Ｈ，Ｊａ＝６．４５Ｈｚ，Ｊｂ＝７．０３Ｈｚ）。ＬＣ／ＭＳ＝２７９．３（Ｍ＋１）。
【００９１】
実施例１９Ｂ：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン、Ｄ−酒石酸塩
【化３０】
2012523416.tif 000040
（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジン（３５３ｍｇ）を、１０００ｒｐｍで攪拌しながら６０℃にてＴＨＦ（１ｍＬ）に溶解する。わずかに濁った黄色の溶液が生じる。Ｄ−酒石酸溶液（８０℃にて３ｍＬのＴＨＦに溶解した２１８ｇ）を、ゆっくりとその溶液に加える。０．４５μｍのＰＴＦＥシリンジフィルタを通して溶液を濾過し、アセトニトリル（４ｍＬ）を加える。蓋のないフード内で蒸発させる。約２０分後、大量の灰色がかった固体が沈殿する。溶液を真空濾過し、固体を６０℃の真空オーブン中で１時間乾燥させて、粉末状の灰色がかった固体を得る。
【００９２】
Ｘ線粉末回折
結晶質のＸＲＤパターンを、ＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）を備えた、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ  Ｘ線粉末回折計ならびに５０ｋＶおよび４０ｍＡで作動する、Ｖａｎｔｅｃ検出器で得る。サンプルを、２θにおいて０．０２°のステップサイズおよび９．０秒／ステップの走査速度を用いて、かつ、１ｍｍの発散スリットおよび受光スリットならびに０．１ｍｍの検出器スリットを用いて、２θにおいて４から４０°の間で走査する。乾燥粉末を、凹型のトップローディングサンプルホルダーに詰め、平滑面を、スライドガラスを用いて得る。結晶形回折パターンを、室温および相対湿度で収集する。バックグラウンドをピーク検出前に除去する。任意の所与の結晶形に関して、回折ピークの相対強度が、結晶形態および晶癖などの要因に由来する好ましい配向に起因して変化し得ることは、結晶学の分野において周知である。好ましい配向の影響が存在する場合、ピーク強度は変化するが、多形体の特性ピーク位置は変化しない。例えば、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ＃２３，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ＃１８，１８４３〜１８４４ページ，１９９５年を参照のこと。さらに、任意の所与の結晶形に関して、角ピーク位置はわずかに変化し得ることもまた、結晶学の分野において周知である。例えば、ピーク位置は、サンプルが分析される温度または湿度、サンプル変位、あるいは内部標準の存在または非存在の変化に起因してシフトし得る。この場合、２θにおいて±０．１のピーク位置変動性は、示した結晶形の絶対的な識別を妨げずに、これらの可能性のある変化を考慮に入れる。結晶形の確認は、（°２θの単位において）特徴的なピーク、典型的に、より突出したピークの任意の特有の組み合わせに基づいてなされてもよい。従って、（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジンのｄ−酒石酸塩の好ましいサンプルが、０．１度の回折角の許容範囲で、以下の表１に記載する回折ピーク（２θ値）を有する場合、ならびに特に、９．２６、１６．１２、および１６．５９からなる群より選択される１つ以上のピークと組み合わせて４．６３におけるピークを有する場合、ＣｕＫα放射線を用いてＸＲＤパターンによって特徴付けられる。
【００９３】
表１：（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−３−メチル−ブチル）−ピロリジンのｄ−酒石酸塩のＸ線粉末回折ピーク
【表７】
2012523416.tif 000041
【００９４】
実施例２０〜３２の化合物は、実施例１９に実質的に記載されるように調製できる。
【００９５】
【表８−１】
2012523416.tif 000042
【表８−２】
2012523416.tif 000043
【００９６】
実施例３３：３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｄ１Ｅ２）
【化３１】
2012523416.tif 000044
脱塩
３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｄ１）（８０．０ｍｇ，０．１８０ｍｍｏｌ）をＳＣＸカラムに注ぎ、ジクロロメタン、メタノール中の５０％ジクロロメタンおよびメタノールでリンスする。メタノール中の２ＭのＮＨ３で化合物を溶出し、濃縮して、３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン（５０ｍｇ）を得る。
【００９７】
キラルクロマトグラフ分離
アミン（５０ｍｇ）を、２５％メタノール／０．２％イソプロピルアミン／ＣＯ２で溶出する超臨界流体キラルクロマトグラフィー（Ｃｈｉｒａｃｅｌ  ＯＤ−Ｈ）にかけ、３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン（Ｄ１Ｅ１）（２１ｍｇ，４０％，＞９９％ｅｅ）および３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン（Ｄ１Ｅ２）（２０ｍｇ，３８％，＞９９ｅｅ）を得る。
【００９８】
３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロブチル−エチル）−ピロリジン（Ｄ１Ｅ２）のＬ−酒石酸塩の形成を、実質的に実施例１のように実施して、標題化合物を得る。Ｍｓ（ｍ／ｚ）＝２９５．２（Ｍ＋１）。
【００９９】
実施例３４：（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−２）
【化３２】
2012523416.tif 000045
脱塩
（３Ｓ）−３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジン（Ｓ−２）（１．００ｇ，２．３９ｍｍｏｌ）のＬ−酒石酸塩をメタノールに溶解し、その溶液をＳＣＸカラムに注ぐ。カラムをメタノールでリンスし、次いでメタノール中の２ＭのＮＨ３で遊離アミンを溶出する。溶媒を蒸発させ、真空下でアミンを乾燥させ、０．６５ｇ（９９％）の（３Ｓ）−３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジン（Ｓ−２）を得て、それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
【０１００】
塩化物をメトキシに置換する
（３Ｓ）−３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジン（Ｓ−２）（０．６５ｇ，２．４４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（９．７５ｍＬ）、メタノール（０．４９３ｍＬ，１２．１８ｍｍｏｌ）、および水素化ナトリウム（０．３９０ｇ，９．７５ｍｍｏｌ）を反応バイアルに加える。バイアルから気体を抜き、窒素でパージする。混合物を１００℃で一晩加熱する。反応混合物をＳＣＸカラムに注ぎ、メタノールでリンスする。ＳＣＸカラムをシリカゲルカラムの上部に取り付け、クロロホルム中の５〜３０％のＮＨ３ＯＨ／エタノール（１：９）で溶出して、０．４２０ｇ（６５％）の（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジンを得る。
【０１０１】
（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−ブチル）−ピロリジン（Ｓ−２）のＬ−酒石酸塩の形成を、実質的に実施例１のように実施して、標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２６５［Ｍ＋１］。
【０１０２】
実施例３５：（３Ｓ）−３−［１−シクロブチル−１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−メチル］−ピロリジン（Ｓ−１）、Ｌ−酒石酸塩
【化３３】
2012523416.tif 000046
実質的に実施例３４に記載されるように、標題化合物は、（３Ｓ）−３−［１−シクロブチル−１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−メチル］−ピロリジン（Ｓ−１）、Ｌ−酒石酸塩から調製できる。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７７［Ｍ＋１］。
【０１０３】
実施例３６：（３Ｓ）−３−［１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−１）
【化３４】
2012523416.tif 000047
脱保護
（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−１）（０．５０ｇ，１．３１ｍｍｏｌ）、メトキシベンゼン（６．６ｍＬ）およびジクロロメタン（６．６ｍＬ）を反応バイアル中で混合する。バイアルから気体を抜き、窒素でパージする。トリフルオロ酢酸（１．５１ｇ，１．０ｍＬ，１３．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間攪拌する。予め詰められたＳＣＸカラムに直接混合物を負荷し、ＣＨ２Ｃｌ２、続いてＣＨ３ＯＨでリンスする。メタノール中の２ＭのＮＨ３で溶出し、減圧下で濃縮して、０．３５３ｇ（９６％）の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン（Ｓ−１）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８１．２［Ｍ＋１］。
【０１０４】
塩化物をメトキシに置換する
（３Ｓ）−３−（１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−シクロプロピル−エチル）−ピロリジン（Ｓ−１）（０．３５ｇ，１．２５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（４．９９ｍＬ）、メタノール（０．４０４ｍＬ，９．９７ｍｍｏｌ）、および水素化ナトリウム（０．３４９ｇ，８．７３ｍｍｏｌ）を反応バイアルに加える。バイアルから気体を抜き、窒素でパージする。混合物を１１０℃で４時間加熱する。反応物をｐＨ７のバッファーに溶解し、５ＮのＨＣｌで中和する。ＳＣＸカラムに混合物を注ぎ、メタノールでリンスする。シリカゲルカラムの上部にＳＣＸカラムを取り付け、クロロホルム中の５〜３５％のＮＨ４ＯＨ／エタノール（１：９）で溶出して、０．２０９ｇ（６１％）の（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル）−ピロリジン（Ｓ−１）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７７［Ｍ＋１］。
【０１０５】
（３Ｓ）−３−（１−（６−メトキシ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−シクロプロピル−エチル）−ピロリジン（Ｓ−１）のＬ−酒石酸塩の形成を、実質的に実施例１のように実施して、標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２７７［Ｍ＋１］。
【０１０６】
実施例３７：（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−１）
【化３５】
2012523416.tif 000048
【０１０７】
ワインレブアミドの調製
【化３６】
2012523416.tif 000049
ＴＨＦ（２４０ｍＬ）中の（Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピロリジン−３−カルボン酸（４０ｇ，１８６ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＨＦ（１６０ｍＬ）中の１，１’−カルボニルジイミダゾール（３１．４ｇ，１９０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に滴下して加え、窒素下で２．５時間室温にて攪拌する。Ｎ，Ｏ−ジ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１８．８ｇ，１９０ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌する。反応物を水でクエンチする。相を分離し、ｔ−ブチルメチルエーテル（２×）で水相を抽出する。有機物を合わせ、１０％のＨ３ＰＯ４水溶液、２０％のＫＨＣＯ３水溶液、水およびブラインで洗浄する。濃縮して、３７．１ｇ（７７％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２０３．１［Ｍ−５５］。
【０１０８】
グリニャールのワインレブアミドへの添加およびケトンのアルコールへの還元
【化３７】
2012523416.tif 000050
アリルマグネシウムブロミド（ＴＨＦ中に２．０Ｍ，１００．３ｍＬ，２００．５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃で窒素下に維持されたＴＨＦ（２９６ｍＬ）中の（Ｓ）−３−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３７．０ｇ，１４３．２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にゆっくりと滴下して加える。反応物を室温まで加温し、４８時間攪拌し続ける。混合物を、水（７４ｍＬ）中の水素化ホウ素ナトリウム（５．４２ｇ，１４３ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムブロミド（０．７４ｇ，２．３９ｍｍｏｌ）の冷溶液（０〜５℃）に加え、１時間攪拌する。相を分離し、ｔ−ブチルメチルエーテル（２×）で水相を抽出する。有機層を合わせ、水およびブラインで洗浄する。濃縮して、ｔ−ブチルメチルエーテル／ヘキサン（３／７〜７／３）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗残留物を精製して、（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブト−３−エニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）（２９ｇ，８５％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝１８６．１［Ｍ−５５］。
【０１０９】
（３Ｓ）−３−（２−シクロプロピル−１−ヒドロキシエチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）
【化３８】
2012523416.tif 000051
酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．３１ｇ，０．２９８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（４３．２ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−（１−ヒドロキシ−ブト−３−エニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）（１４．４ｇ，５９．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加える。−３０〜−４０℃にて窒素下で、ジアゾメタン（１００ｍＬ，ジエチルエーテル中に約５０ｍｍｏｌ）の新しく調製した溶液をゆっくりと加える（注意：激しいＮ２ガスが発生）。溶媒を蒸発させ、粗生成物をジクロロメタン（４３．２ｍＬ）に溶解する。酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．３１ｇ，０．２９８ｍｍｏｌ）、続いてジアゾメタン（１００ｍＬ，ジエチルエーテル中に約５０ｍｍｏｌ）の新しく調製した溶液を、−３０〜−４０℃にて窒素下で維持した混合物に加える（注意：激しいＮ２ガスが発生）。溶媒を蒸発させ、粗生成物をジクロロメタン（４３．２ｍＬ）に溶解する。酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．３１ｇ，０．２９８ｍｍｏｌ）、続いてジアゾメタン（５０ｍＬ，ジエチルエーテル中に約２５ｍｍｏｌ）の新しく調製した溶液を、−３０〜−４０℃にて窒素下で維持した混合物に加える（注意：激しいＮ２ガスが発生）。溶媒を蒸発させ、ヘキサン（１４０ｍＬ）を粗残留物に加え、懸濁液を室温で一晩攪拌する。懸濁液をセライト（登録商標）のパッドで濾過し、濃縮して、定量的収率で（３Ｓ）−３−（２−シクロプロピル−１−ヒドロキシエチル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２００．１［Ｍ−５５］。
【０１１０】
（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−１）および（Ｓ−２）
【化３９】
2012523416.tif 000052
室温で窒素雰囲気下に維持した、（３Ｓ）−３−（２−シクロプロピル−１−ヒドロキシ−エチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−ｍｉｘ）（１９．８ｇ，７７．５ｍｍｏｌ）、６−クロロ−３フルオロ−２−メチル−ピリジン（１６．９ｇ，１１６．３ｍｍｏｌ）およびジメチルアセトアミド（５９．４ｍＬ）の混合物に、水素化ナトリウム（６０％，６．２０ｇ，１５５．１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加える。４０℃に加熱して、３．５時間攪拌する。混合物を冷却し、メタノールを加える。混合物を、１０％のＨ３ＰＯ４水溶液（１００ｍＬ）およびｔ−ブチルメチルエーテル（１００ｍＬ）に注ぐ。相を分離し、ｔ−ブチルメチルエーテル（２×）で水相を抽出する。有機相を合わせ、水およびブラインで洗浄する。溶媒を蒸発させて、粗残留物を得る。ｔ−ブチルメチルエーテル／ヘキサン（２：８〜４：６）で溶出するシリカゲルで粗残留物をクロマトグラフして、粗残留物を得て、それを別のバッチ（２ｇのアルコールに基づいた）からの粗残留物と混合した。ジアステレオマーの混合物を、ヘキサン中の２５％のｔ−ブチルメチルエーテルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより分離して、第１の溶出異性体として（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１、（Ｓ−１）（１５．０ｇ，５１％）、ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３２５．０（Ｍ−５５）、および第２の溶出異性体として（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体２、（Ｓ−２）（１２．０ｍｇ，４１％）、ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３２５．０（Ｍ−５５）を得る。
【０１１１】
（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン、（Ｓ−１）
【化４０】
2012523416.tif 000053
ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中に４Ｍ、５２．７ｍＬ，６２７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（４０．２ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ−１）（１３．４ｇ，３５．２ｍｍｏｌ）の溶液に加える。室温で１時間、窒素下で攪拌する。溶媒を蒸発させ、残留物を、ｔ−ブチルメチルエーテル（４０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）の混合物に溶解する。相を分離し、ｔ−ブチルメチルエーテル（２×）で水相を洗浄する。１０％のＫ２ＣＯ３水溶液の添加によって水相のｐＨを９に調整し、ｔ−ブチルメチルエーテル（３×）で抽出する。合わせた有機相を水およびブラインで洗浄する。揮発性物質を蒸発させて、（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン（Ｓ−１）（９．６ｇ，９７％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８１．２［Ｍ＋１］。
【０１１２】
（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン、Ｌ−酒石酸塩（Ｓ−１）
【化４１】
2012523416.tif 000054
Ｌ−酒石酸（５．１ｇ，３３．９ｍｍｏｌ）を、メタノール（４８．５ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［１−（６−クロロ−２−メチル−３−ピリジルオキシ）−２−シクロプロピル−エチル］−ピロリジン（Ｓ−１）（９．７ｇ，３４．５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。窒素下で１５分間、室温にて混合物を攪拌する。揮発性物質を蒸発させ、残留物を水（１００ｍＬ）に溶解し、ｔ−ブチルメチルエーテル（２×）で抽出する。２５℃に浴槽を維持しながら、水相を５０ｍＬの最終体積までロータリーエバポレーターで濃縮する。残留物を凍結乾燥して、１４．０ｇ、（９５％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８１．０［Ｍ＋１］。
【０１１３】
３（Ｓ）−（１’−ヒドロキシ−３’−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル異性体１および２の絶対配置の割当
図１に示すように、３（Ｓ）−（１’−ヒドロキシ−３’−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルにおいて、炭素５および７（Ｃ５およびＣ７）に相当する２つの立体炭素が存在する。
【化４２】
2012523416.tif 000055
Ｃ７の配置は、開始（Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ピロリジン−３−カルボン酸から既知であるため、相対配置の決定により、Ｃ５における絶対配置の割当が導かれる。屈曲性分子の相対配置は、プロトン−炭素結合が、Ｍａｔｓｕｍｏｒｉら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６４，８６６（１９９９）によって記載されている、Ｊに基づく配置法により考慮される場合、達成され得る。このアプローチは、特定のＣ−Ｃ結合にわたるＨ−ＨおよびＨ−Ｃ結合の測定、ならびにＫａｒｐｌｕｓ−Ａｌｔｏｎａ相関関係によるそれらの二面角への変換に関する。Ｈ−Ｃ結合はまた、Ｋａｒｐｌｕｓ相関関係に従い、１〜３Ｈｚの範囲の小さい値はゴーシュ配向の指標であり、６〜８Ｈｚの範囲の大きい値はアンチ配座を示す。
【０１１４】
関連Ｈ５−Ｃ１１プロトン−炭素結合定数は、Ｐ．Ｖｉｄａｌら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，７２，３１６６−３１７０（２００７）によって記載されている、サテライト選択的１Ｄ−ＴＯＣＳＹ実験を用いて測定する。選択的パルスのオフセットをＨ１１の低周波数１３Ｃサテライトに設定する１Ｄ−ＴＯＣＳＹ実験を得る。得られたスペクトルを、主要な１２ＣアイソトポマーのＨ１１シグナルが励起される従来の１Ｄ−ＴＯＣＳＹ実験と比較するか、または１Ｈスペクトルと比較する。Ｃ１１とＨ５との間の３つの結合、Ｈ、Ｃ結合を、１Ｈスペクトルにおけるその位置に対するサテライト選択的ＴＯＣＳＹスペクトルにおいて送信したＨ５シグナルの置換から測定する。結合定数は置換の２倍である。Ｃ８とＨ５との間の結合定数は、重複するシグナルに起因して測定しない。Ｃ７−Ｃ５結合にわたるプロトン−プロトンおよびプロトン−炭素結合定数を、実質的に調製例４に記載されるように調製した３（Ｓ）−（１−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、異性体１および異性体２の各々について測定し、それらの値は以下の表にある。
【０１１５】
【表９】
2012523416.tif 000056
【０１１６】
異性体２における小さなＨ５−Ｃ１１結合定数は、Ｈ５およびＣ１１が、３（Ｓ）−１’（Ｓ）異性体と一致する、両方の集中する配座異性体において互いにゴーシュであることを示す。
【０１１７】
インビトロでの輸送体親和性アッセイ
ヒトセロトニン輸送体（ＳＥＲＴ）、ノルエピネフリン輸送体（ＮＥＴ）、またはドーパミン輸送体（ＤＡＴ）を、ｐｃＤＮＡ３ベクター中でクローニングし、ＨＥＫ２９３細胞中で安定にトランスフェクトする。膜ストックを標準的なプロトコルに従って調製し、Ｋｄ値を、膜の各バッチについて飽和結合または同種競合結合法を用いて算出する（ＢｙｌｕｎｄおよびＴｏｅｗｓ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓ．（Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌｄ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ９），２６５，４２１−４２９（１９９３）。全ての結合アッセイを、濾過放射性リガンド結合アッセイをシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）フォーマットに変換することによって開発された方法を用いて９６ウェルプレートで実施する（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒら，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９０，２１−４９（２００２））。手短に述べると、３Ｈ−シタロプラムの存在下で５０ｍＭのＴｒｉｓ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、および５ｍＭのＫＣｌ（ｐＨ７．４）を含有するアッセイバッファー中に１０μｇ／ウェルの濃度でＳＥＲＴ膜を使用する。フルオキセチン（１００μＭ）を非特異的結合を決定するために使用し、ベンラファクシンを陽性コントロールとして使用する。５０ｍＭのＴｒｉｓ、３００ｍＭのＮａＣｌ、および５ｍＭのＫＣｌ（ｐＨ７．４）を含有するアッセイバッファー中に８μｇ／ウェルの濃度でＮＥＴ膜を使用する。３Ｈ−ニソキセチンをトレーサーとして使用し、１００μＭのデシプラミンは非特異的結合の尺度として役立ち、ニソキセチンは陽性コントロールとして使用する。ＤＡＴ結合アッセイに関して、アッセイバッファーはＳＥＲＴに関するものと同じであり、膜は２０μｇ／ウェルで使用し、１００μＭのノミフェンシンを非特異的結合を決定するために使用し、３Ｈ−ＷＩＮ３５４２８（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）は放射性トレーサーとして役立ち、ノミフェンシンは陽性コントロールとして使用する。全ての場合において、０．５ｍｇ／ウェルのコムギ胚芽凝集素シンチレーション近接アッセイビーズ（ＷＧＡ−ＳＰＡ，ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、膜を捕捉するために使用し、プレートを室温で３時間インキュベートする。放射線を測定し、Ｋｉ値を、４パラメーターロジスティック曲線フィッティングプログラム（ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ  ｖ５．３．１．２２）を用いて算出する。
【０１１８】
例示的な化合物を実質的に上記のように試験し、ｈＳＥＲＴおよびｈＮＥＴ受容体に対して高い親和性を有することが見出されるが、インビトロにおいてｈＤＡＴ受容体に対して非常に低い親和性を有することが見出される。ＳＥＲＴおよびＮＥＴに対するＫｉは、それぞれ、２０．１ｎＭおよび２３．４ｎＭ未満であることが見出され、一方、ＤＡＴに対するＫｉは２５５ｎＭより大きいことが見出される。実施例１９の化合物を上記のように実質的に試験し、以下の表に示す親和性を有することが見出される。
【０１１９】
【表１０】
2012523416.tif 000057
【０１２０】
インビトロでの阻害活性アッセイ：
ヒトセロトニン（ＳＥＲＴ）またはノルエピネフリン（ＮＥＴ）輸送体をｐｃＤＮＡ３ベクター中でクローニングし、ＨＥＫ２９３細胞中に安定にトランスフェクトする。両方のアッセイを、Ｅｓｈｌｅｍａｎら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｔｌ  Ｔｈｅｒ．，２８９，８７７−８８５（１９９９））およびＷａｌｌら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４７，５４４−５５０（１９９５）によって記載される方法から改変する。細胞を、ポリ−Ｄ−リジンでコーティングされたフラスコまたは９６ウェルプレートで、５％のウシ胎仔血清、２５０μｇ／ｍＬのジェネテシン、および２０ｍＭのＨｅｐｅｓを含有するＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２  ３：１（１部のＮｕｔｒｉｅｎｔ  Ｍｉｘ  Ｆ−１２倍地中の３部のダルベッコ改変イーグル培地）中で増殖させる。細胞を、ウェルごとに４０，０００個の細胞で２００μＬの培地に播種し、アッセイの前に３７℃で１８〜２４時間インキュベートする。アッセイ取り込みバッファーは、１．２６％の重炭酸ナトリウム、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ならびに各々１００μＭのパーギリンおよびアスコルビン酸を補足したＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ重炭酸塩ストックからなる。化合物またはインダトラリン（陽性コントロールとして）で３０分、プレインキュベートした後、３Ｈ−セロトニンまたは３Ｈ−ノルエピネフリンを１分５０秒間添加する。次いで、３Ｈ−基質を除去し、細胞を、マルチメク（ｍｕｌｔｉｍｅｋ）を用いて１００μＬの冷取り込みバッファーで４回洗浄する。Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（１％）を加えて細胞を溶解させ、混合後、全ての内容物を白底プレートに移す。Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ（商標）４０を各ウェルに加え、放射線をウェルごとに１分間定量する。結果を、４パラメーターロジスティック曲線フィッティングプログラム（ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ  ｖ５．３．１．２２）を用いてＩＣ５０値として分析する。
【０１２１】
例示した化合物を実質的に上記のように試験し、セロトニンおよびノルエピネフリン再取り込みの阻害剤であり、それぞれ、２２７ｎＭおよび４４．６ｎ未満のＳＥＲＴおよびＮＥＴのＩＣ５０を有することが見出される。実施例１９の化合物を上記のように実質的に試験し、インビトロにおけるセロトニンおよびノルエピネフリン再取り込みの阻害剤であり、以下の表に示すようなＩＣ５０を有することが見出される。
【０１２２】
【表１１】
2012523416.tif 000058
【０１２３】
インビボでの輸送体占有率アッセイ：
３つの群において、２４０〜２８０ｇｍの体重の雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットをセロトニン輸送体占有率を決定するために使用する。各実験を開始する前に動物を１２時間絶食させる。ビヒクルまたは０．１０、０．３３、１．００、３．３３もしくは１０．００ｍｇ／ｋｇ用量の、０．１、０．３３、１、３．３３もしくは１０％のＣＡＰＴＩＳＯＬ（商標）（ＣＡＰＴＩＳＯＬ（商標）（％）の濃度＝試験化合物の用量（ｍｇ／ｋｇ））を含有する２５ｍＭのリン酸バッファー（ｐＨ＝３．０）中の４％グルコース中の試験化合物を動物に経口投与する。２時間後、生理食塩水中のＮ，Ｎ−ジメチル−２−（２−アミノ−４−シアノフェニルチオ）−ベンジルアミン（１０μｇ／ｋｇ）を、側部尾静脈において、動物に静脈内投与する。さらに４０分後、ラットを頸椎脱臼により屠殺し、前頭葉の一部を除去し、ドライアイス上に置く。３匹のラットのさらなるコントロール群に、１２ｍｇ／ｋｇにてマレイン酸パロキセチン、続いて１時間後、Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（２−アミノ−４−シアノフェニルチオ）−ベンジルアミン（１０μｇ／ｋｇ）をｉ．ｖ．投与する。
【０１２４】
組織を解凍させ、次いで０．１％のギ酸を含有する４容量（ｗ／ｖ）のアセトニトリルを加える。サンプルを、超音波ディスメンブレータ（ｄｉｓｍｅｍｂｒａｔｏｒ）プローブを用いて均質にし、１４，０００×ｇにて１６分間、遠心分離する。１容量の上清を、オートサンプラバイアル中の３容量の水に加え、ボルテックスする。分離を、Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ１８  ＨＰＬＣカラムおよび２０％〜９０％のアセトニトリル／水（各々０．１％のギ酸を含む）の移動相勾配を用いて達成する。全ＨＰＬＣランタイムは３．５分であり、さらに２．０分の再平衡時間を有する。ＭＲＭモードで動作するＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）を検出のために使用する。モニターされたイオン遷移は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（２−アミノ−４−シアノフェニルチオ）−ベンジルアミンについて２８４．１／２３９．１ｍ／ｚである。
【０１２５】
ビヒクルで前処置した動物の皮質におけるＮ，Ｎ−ジメチル−２−（２−アミノ−４−シアノフェニルチオ）−ベンジルアミド（トレーサー）のレベルは、非特異的および特異的結合の合計を表し、０％の値の占有率（トレーサーに利用可能な全ての受容体）と指定する。マレイン酸パロキセチンの非常に高濃度の静脈内投与で前処置した動物（陽性コントロール群）におけるトレーサーの低いレベルは、非特異的結合を表し、１００％の値の占有率（トレーサーに利用可能でない受容体）と指定する。試験化合物の経口投与後の皮質におけるトレーサーのレベルを、セロトニン輸送体占有率を決定するために、それらの２つの極値の間で線形的に補間する。データを、Ｐｒｉｓｍバージョン３．０（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて算出した平均±ＳＥＭ（ｎ＝３／群）として表す。ＥＤ８０値を、非線形回帰を用いてデータをＳ字形曲線にフィッティングすることによって得る。
【０１２６】
実施例１９の化合物を実質的に上記のように試験し、投与から１時間後の以下の用量反応データに基づいて、７．１ｍｇ／ｋｇの絶対ＥＤ８０を有することを見出したので、インビボにおけるセロトニン受容体の占有率が確認される。
【０１２７】
【表１２】
2012523416.tif 000059
【０１２８】
アルファＭＭＴ：モノアミン枯渇阻害アッセイ：
神経伝達物質輸送体阻害剤は、枯渇剤が輸送体を介してニューロン内への能動的取り込みを必要とする場合、脳内モノアミンの枯渇を阻害できる。ＤＬ−パラ−クロロアンフェタミン（ＰＣＡ）は、神経細胞輸送体を介してセロトニン性神経細胞内に輸送され、ラット脳内セロトニン（５−ＨＴ）濃度の長期間の枯渇を生じる。アルファ−メチル−ｍ−チロシン（α−ＭＭＴ）は、インビボにおいてメタラミノールにβ水酸化され、ラット脳においてＮＥレベルの低下を生じる、神経細胞輸送体を介してノルエピネフリン（ＮＥ）神経細胞に能動的に輸送されるノルアドレナリン枯渇剤である。ＰＣＡによるラット脳５−ＨＴレベルおよびα−ＭＭＴによるラット皮質ＮＥ濃度の枯渇は、５−ＨＴおよびＮＥ再取り込み阻害活性を有する薬剤により遮断される。本発明の化合物は、以下の方法を用いて、給餌したラットおよび絶食したラットのインビボにおいて、ＰＣＡによるラット脳５−ＨＴ濃度の枯渇およびａ−ＭＭＴによるラット皮質ＮＥ濃度の枯渇を防ぐ、それらの活性について評価することができる。
【０１２９】
１６０〜１８０ｇの体重の雄のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットを、一晩絶食させるか、または自由に餌を与えた。１０ｍｇ／ｋｇのＰＣＡ塩酸塩（ｉｐ）または６．２５ｍｇ／ｋｇのα−ＭＭＴ（ｓｃ）の投与の２時間前に、動物にビヒクル（滅菌Ｈ２Ｏ）または試験化合物を強制投与する。全ての化合物は１ｍＬ／ｋｇで投与する。動物を、ＰＣＡまたはα−ＭＭＴ投与から２時間後に屠殺する。組織を解剖し、ドライアイス上で凍結させ、分析前に−７０°で保存する。ＰＣＡを投与した動物について、全脳内セロトニン（５−ＨＴ）濃度を、ＦｕｌｌｅｒおよびＰｅｒｒｙ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２４８，５０−５６（１９８９）に記載されるように電気化学的検出を用いて高圧液体クロマトグラフィーを用いて測定する。α−ＭＭＴを投与した動物について、皮質ノルエピネフリン濃度を、Ｂｙｍａｓｔｅｒら，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（５），６９９−７１１（２００２）に記載されるようにアルミナ吸収後にＨＰＬＣ−ＥＣによって測定する。データを、ピーク高さおよびサンプル濃度を算出するＥＺＣｈｒｏｍ（商標）クロマトグラフィーデータシステム（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｒａｍｏｎ，ＣＡ）を用いて収集する。Ｔｕｋｅｙ’ｓ  Ｈｏｎｅｓｔｌｙ  Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ事後検定に従う、分散の分析により、処置群の間で有意差（Ｐ≦０．０５）が確認される。ＰＣＡ−またはα−ＭＭＴにより誘導されたモノアミンの枯渇を５０％拮抗した用量（ＥＤ５０）を、最適フィット線形回帰分析を用いて算出する。
【０１３０】
実施例１９の化合物を上記のように実質的に試験し、以下の用量反応に基づいて９．５ｍｇ／ｋｇのＥＤ８０で、ラット皮質においてα−ＭＭＴにより誘導されたノルエピネフリンの枯渇を拮抗することが見出されるので、ノルエピネフリン輸送体機能を阻害することにおいてインビボでの有効性が確認される。
【０１３１】
【表１３】
2012523416.tif 000060
【０１３２】
手動のホルマリン試験
手動のホルマリン試験を、特注のＰｌｅｘｉｇｌａｓボックス、約２５ｃｍ×２５ｃｍ×２０ｃｍのサイズで実施する。ケージの後方に置いたミラーにより、ホルマリン注射した足の観察を妨げられずにできる。ラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（ＣＲＬ）Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ））を、実験の少なくとも３０分前に、小部屋に個々に入れる。全ての試験を０８：００から１４：００の間に実施し、試験室の温度を２１〜２３℃に維持する。末梢に投与する試験化合物を、ホルマリンチャレンジの前に種々の時間で投与する。ホルマリン（５０μＬの生理食塩水中の５％溶液）を、２７ゲージ針を用いて右後足の背外側面に皮下注射する。観察をホルマリン注射の直後に開始する。ホルマリンにより誘導された疼痛を、５分間隔でリッキング（足をなめる（ｌｉｃｋｉｎｇ））する事象が継続する各々の秒数を記録することによって定量する。疼痛のスコアをホルマリン注射後、５０分間測定する。疼痛行動の２段階が、以前に記載される（Ｗｈｅｅｌｅｒ−Ａｃｅｔｏ，Ｈ．，Ｐｏｒｒｅｃａ，Ｆ．およびＣｏｅａｎ，Ａ．，Ｔｈｅ  ｒａｔ  ｐａｗ  ｆｏｒｍａｌｉｎ  ｔｅｓｔ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｎｏｘｉｏｕｓ  ａｇｅｎｔｓ，Ｐａｉｎ  ４０（１９９０）２２９−２３８）ように観察される。初期段階は、ホルマリン注射直後に開始し、約５分継続し、続いて、後期段階は、１０〜１５分の間に開始し、典型的には、ホルマリン注射後約２５〜３５分に最大反応が観察される。５０分後、観察が終わり、動物をＣＯ２で屠殺する。
【０１３３】
ホルマリン試験について報告されている異なるスコア付けパラメータのうち、注射した足のリッキング、およびビッティング（かみつき（ｂｉｔｉｎｇ））に費やした全時間を最も関連があるとみなす（Ａｂｂｏｔｔら，Ｔｈｅ  ｆｏｒｍａｌｉｎ  ｔｅｓｔ：ｓｃｏｒｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｉｒｓｔ  ａｎｄ  ｓｅｃｏｎｄ  ｐｈａｓｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐａｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  ｒａｔｓ，Ｐａｉｎ  ６０（１９９５）９１−１０２；Ｃｏｄｅｒｒｅら，Ｔｈｅ  ｆｏｒｍａｌｉｎ  ｔｅｓｔ：ａ  ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｗｅｉｇｈｔｅｄ−ｓｃｏｒｅｓ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ｐａｉｎ  ｒａｔｉｎｇ，Ｐａｉｎ  ５４（１９９３）４３−５０）。初期スコアは、０〜５分の時間のリッキングに費やした時間（秒）の合計である。後期スコアは、観察時間の１６分から４０分のリッキングに費やした全秒数を加算することによって得られる。データは、平均の標準誤差（±ＳＥＭ）を用いて平均として示す。データは、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）および両側比較のためのダネット「ｔ」検定により分析された適切な対比により評価する。Ｐ値が０．０５未満である場合、差異は有意とみなす（Ａｂｂｏｔｔ，前出；Ｃｏｄｅｒｒｅ，前出；およびＷｈｅｅｌｅｒ−Ａｃｅｔｏ，前出）。
【０１３４】
実施例１９の化合物を実質的に上記のように試験し、以下の用量反応から導いて１３．４ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０で疼痛行動が有意に減少することが見出される。
【０１３５】
【表１４】
2012523416.tif 000061
【０１３６】
いかなる製剤も用いずに本発明の方法に利用される化合物を直接投与することも可能であるが、その化合物は、通常、式Ｉの少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に受容可能な塩、活性成分および少なくとも１つの薬学的に受容可能な担体、希釈剤および／または賦形剤を含む、薬学的組成物の形態で投与される。これらの組成物は、経口、鼻腔内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、および肺を含む、種々の経路によって投与され得る。このような薬学的組成物およびそれらを調製するためのプロセスは、当該技術分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｅｄ．，第２１版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｃｏ．，２００５）を参照のこと。
【０１３７】
組成物は、好ましくは、単位剤形で製剤化され、各々の用量は、約０．１〜約５００ｍｇ、より通常、約１．０〜約２００ｍｇ、例えば約１から２０ｍｇの間の活性成分を含有する。用語「単位剤形」とは、ヒト被験体および他の哺乳動物のための単一の用量として適切な物理的に別個の単位を指し、各々の単位は、少なくとも１つの適切な薬学的に受容可能な担体、希釈剤および／または賦形剤と関連して、所望の治療効果を生じるように算出された所定の量の活性物質を含有する。
【０１３８】
式Ｉの化合物は、一般に、広範囲の用量にわたって有効である。例えば、通常、１日当たりの用量は、体重の約０．００１〜約３０ｍｇ／ｋｇ、より通常、約０．０１〜３．０ｍｇ／ｋｇ、および例えば０．０１から０．３ｍｇ／ｋｇなどの範囲内である。一部の例において、前述の範囲の下限値以下の用量レベルが十分以上であってもよく、一方、他の場合において、さらに多い用量が、いかなる有害な副作用も引き起こさずに利用されてもよい。従って、上記の用量範囲は本発明の範囲を限定するものと決して意図されるべきではない。投与される実際の化合物の量は、治療される状態、選択される投与経路、投与される実際の化合物（複数も含む）、個々の患者の年齢、体重、および反応、ならびに患者の症状の重症度を含む、関連する状況を考慮して医師により決定されることは理解されるだろう。
【国際調査報告】
2012523416.tif 000064
2012523416.tif 000065
2012523416.tif 000066