【手続補正書】
【提出日】平成21年10月26日(2009.10.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスを生成する方法であって、
ａ）単離した組織試料を提供するステップと；
ｂ）該組織試料から損傷のない細胞を除去して無細胞画分を得るステップと；
ｃ）１日以上の第１の期間、該無細胞画分をインキュベーションチャンバー中で撹乱せずにインキュベートするステップと；
ｄ）ステップｂ）の前および／または後に処理媒体を加えるステップと；
ｅ）該無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスを単離するステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記単離した組織試料が、筋肉組織、結合組織、上皮組織、神経組織、血液、基本組織、表皮組織、維管束組織およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組織試料が血液を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ステップｂ）の前および／または後に前記組織試料を懸濁、可溶化および／またはホモゲナイズして、溶液または懸濁液を得るステップをさらに含む、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記試料が、
ａ）血液画分；
ｂ）バフィーコート層を含む血液画分；
ｃ）バフィーコート／血小板／血漿層を含む血液画分；
ｄ）抗凝血薬を含む血液試料または血液画分；および
ｅ）１種以上の血餅を含む血液試料または血液画分
からなる群より選択される、請求項１から４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記損傷のない細胞を除去するステップが、凍結、ろ過および／または遠心分離により行われる、請求項１から５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記除去するステップが、前記組織試料をサイズ選択フィルターに通すことを含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記サイズ選択フィルターが約５μＭより大きい粒子、約１．２μＭより大きい粒子、および／または約０．８μＭより大きい粒子を排除する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第１の期間が、
ａ）少なくとも３日間；
ｂ）少なくとも５日間；
ｃ）少なくとも７日間；および
ｄ）少なくとも１２日間
から選択される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記インキュベートするステップが、前記無細胞試料を低酸素環境でインキュベートすることを含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
１種以上の治療用作用物質を提供するステップをさらに含み、該１種以上の治療用作用物質は、タンパク質、ペプチド、薬物、サイトカイン、細胞外マトリックス分子、増殖因子、およびそれらの組合せからなる群から選択される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスを、それが生成された後または生成される間に、細胞と共に播種するまたは混合するステップをさらに含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
ａ）タンパク質、脂質、炭水化物および塩の不均等な混合物；
ｂ）約１００ｎｍ〜４μｍの直径を有する球状構造の凝集体；および
ｃ）少なくとも１％のタンパク質含有量を有するタンパク質性の芯
を含む、組織試料由来の単離した無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスであって；
該無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスは、該組織試料中に最初に存在したときと比較して実質的な代謝活性を欠く
組織再生マトリックス。
【請求項１４】
前記単離した組織試料は、筋肉組織、結合組織、上皮組織、神経組織、血液、基本組織、表皮組織、維管束組織およびそれらの組合せからなる群より選択される、請求項１３に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項１５】
前記組織試料が血液を含む、請求項１３または１４に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項１６】
前記マトリックスに散在した繊維を含み、該繊維に球状構造が付着される、請求項１３、１４または１５に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項１７】
自己集合性である、請求項１３から１６のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項１８】
トランスフェリン、血清アルブミン、血清アルブミン前駆体、補体成分３、Ａ〜Ｄ鎖ヘモグロビン、ＩｇＭ、ＩｇＧ１、メダラシン阻害剤２、炭酸脱水酵素、ＣＡ１タンパク質、およびそれらの組合せからなる群から選択された１種以上のタンパク質をさらに含む、請求項１３から１７のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項１９】
前記球体がＣＤ５６抗体によって認識される、請求項１３〜１８のいずれかに記載の単離した無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２０】
細胞の成長、組織の成長、遺伝子の上方制御、細胞の阻害、細胞の増殖、細胞の分化、細胞の脱分化、細胞の分化形質転換、神経突起の伸長、１種以上の自然な創傷治癒過程またはこれらの組合せを促進し、導き、および／または支持することができる、請求項１３から１９のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２１】
１種以上の治療用作用物質をさらに含む、請求項１３から２０のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２２】
前記１種以上の治療用作用物質は、タンパク質、ペプチド、薬物、サイトカイン、細胞外マトリックス分子、増殖因子、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項２１に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２３】
前記１種以上の治療用作用物質が、前記無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス内に不均等に分布するか、または該無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス内に均等に分布する、請求項２１または２２に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２４】
前記１種以上の治療用作用物質の１つ以上の有利な効果を保護および／または増強する、請求項１３から２３のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２５】
前記無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスが生成された後または生成される間に、該マトリックスに播種または混合された細胞をさらに含む、請求項１３から２４のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２６】
前記細胞が、幹細胞、前駆細胞、体細胞、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項２５に記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２７】
固体もしくは半固体形態、または三次元マトリックスの形態、または懸濁液の形態である、請求項１３から２６のいずれかに記載の無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２８】
組織の損傷、欠損または変性部位における、または該部位への、幹細胞、前駆細胞、体細胞またはそれらの組合せの増殖、増員、分化および／または脱分化を刺激するための医薬の製造における使用のための、請求項１３から２７のいずれかに記載の、または請求項１から１２のいずれかに記載の方法によって生成された無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項２９】
損傷または変性した中枢神経系組織の部位またはその付近において、神経栄養性の活性を刺激するための、請求項１３から２７のいずれかに記載の、または請求項１から１２のいずれかに記載の方法によって生成された無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスであって、該神経栄養性の活性は、ＦＧＦ−９、Ｎｅｔｒｉｎ−１、ＮＴ−３、ＮＣＡＭ−１、ＧＡＰ−４３およびニューレグリンからなる群より選択される少なくとも1種の神経栄養性遺伝子の発現の増加によって特徴付けられる、無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックス。
【請求項３０】
創傷治癒および／または組織再生を促進し、導き、および／または支持するための、組織損傷、欠損または変性の部位における、または該部位への、幹細胞、前駆細胞、体細胞またはそれらの組合せの増殖、増員、分化および／または脱分化を刺激するための、ならびに／あるいは損傷または変性した中枢神経系組織の部位またはその付近において神経栄養性の活性を刺激するための薬学的組成物であって、請求項１３から２７のいずれかに記載の、または請求項１から１２のいずれかに記載の方法によって生成された無細胞、生体吸収性の組織再生マトリックスを含む、薬学的組成物。