【手続補正書】
【提出日】平成21年6月29日(2009.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式Ｗ−Ａ−Ｘ−Ｂ−Ｙで示されるようなアミノ酸配列を含み、
Ａが、配列番号１の領域２の配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列から本質的に構成され；
Ｂが、配列番号１の領域４の配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列から本質的に構成され；
Ｘが、０個、１個又は複数個のアミノ酸から構成され；
Ｗが、０個、１個又は複数個のアミノ酸から構成され；
Ｙが、０個、１個又は複数個のアミノ酸から構成され；
Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及びＧＤＦ−１１の１つ以上に結合し、かつ
野生型Ｌｅｆｔｙポリペプチドではない、組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２】
ヒトＬｅｆｔｙポリペプチドのシステインノット部分と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項３】
配列番号１のアミノ酸２２〜３５３、及び配列番号２のアミノ酸２２〜３５３からなる群から選択されるヒトＬｅｆｔｙポリペプチド配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含み、
ＲＸＸＲ開裂配列の１つ又は両方が、改変された配列における開裂を防止するように改変される、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項４】
Ａが、配列番号１の領域２の配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列から構成され、Ｂが、配列番号１の領域４の配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列から構成される、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項５】
Ａが、ＣＲＱＥＭＹＩＤＬＱＧＭＫＷＡＫＮＷＶＬＥＰＰＧ  ＦＬＡＹＥＣＶＧＴ（配列番号５）、及びＣＲＱＥＭＹＩＤＬＱＧＭＫＷＡＥＮＷＶＬＥＰＰＧＦＬＡＹＥＣＶＧＴ（配列番号７）からなる群から選択され、Ｂが、ＣＩＡＳＥＴＡＳＬＰＭＩＶＳＩＫＥＧＧＲＴＲＰＱＶＶＳＬＰＮＭＲＶＱＫＣ（配列番号６）、及びＣＩＡＳＥＴＤＳＬＰＭＩＶＳＩＫＥＧＧＲＴＲＰＱＶＶＳＬＰＮＭＲＶＱＫＣ（配列番号８）からなる群から選択される、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項６】
Ｘが免疫原性の低いアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項７】
Ｘがグリコシル化部位を含む、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項８】
Ｘの長さが０〜５０アミノ酸である、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項９】
Ｘが二量体化ドメインを含む、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１０】
前記ポリペプチドが更なるドメインに融合している、請求項１〜８の何れか１項に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１１】
前記更なるドメインが二量体化ドメインである、請求項１０に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１２】
前記更なるドメインが、前記Ｌｅｆｔｙポリペプチドのカルボキシル又はアミノ末端に融合している、請求項１０に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１３】
前記二量体化ドメインがＬｅｆｔｙプロペプチド配列を含む、請求項９又は１１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１４】
前記二量体化ドメインが免疫グロブリンＦａｂ定常ドメインを含む、請求項９又は１１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１５】
前記免疫グロブリンＦａｂ定常ドメインが、免疫グロブリン重鎖定常領域、及び免疫グロブリン軽鎖定常領域から選択される、請求項１４に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１６】
前記二量体化ドメインがロイシンジッパードメインである、請求項９又は１１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１７】
前記ロイシンジッパードメインが、少なくとも４つのロイシンヘプタドを含む、請求項１６に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１８】
前記ロイシンジッパードメインが、Ｆｏｓ及びＪｕｎロイシンジッパードメインからなる群から選択される、請求項１７に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項１９】
前記Ｌｅｆｔｙポリペプチドと前記二量体化ドメインの間に介在し、且つ該Ｌｅｆｔｙポリペプチドと二量体化ドメインを共有結合させるリンカー配列を更に含む、請求項１１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２０】
Ｘが、Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合するドメインを含む、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２１】
前記更なるドメインが、Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合するドメインである、請求項１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２２】
Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合する前記ドメインが、Ｉ型受容体へのＮｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１の結合を阻害する、請求項２０又は２１に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２３】
Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合する前記ドメインが、ＡＬＫ４及びＡＬＫ７からなる群から選択されるＩ型受容体へのＮｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１の結合を競合的に阻害する、請求項２２に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２４】
Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合する前記ドメインが、
（ａ）ＡＬＫ４の細胞外部分；
（ｂ）ＡＬＫ７の細胞外部分；
（ｃ）Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１を結合する抗体の抗原結合部分；並びに
（ｄ）Ｎｏｄａｌ、ミオスタチン及び／又はＧＤＦ−１１に結合するように選択されたランダム化ポリペプチド
からなる群から選択される、請求項２２に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２５】
前記修飾されたＬｅｆｔｙポリペプチドが、細胞内で、ＡｃｔＲＩＩ受容体、ミオスタチン、Ｎｏｄａｌ、及びＧＤＦ−１１から選択されるタンパク質により媒介されるシグナル伝達を阻害する、請求項１〜２４の何れか１項に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２６】
前記修飾されたＬｅｆｔｙポリペプチドが、前記組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドの分泌を媒介する異種配列を含む、請求項１〜２５の何れか１項に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２７】
前記組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドの分泌を媒介する前記異種配列が、蜜蜂メラチンリーダー配列である、請求項２６に記載の組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド。
【請求項２８】
請求項１〜２７の何れか１項に記載のＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、組換えポリヌクレオチド。
【請求項２９】
前記Ｌｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列に操作可能に結合したプロモーター配列を更に含む、請求項２８に記載の組換えポリヌクレオチド。
【請求項３０】
請求項２９に記載の組換えポリヌクレオチドで形質転換された細胞。
【請求項３１】
哺乳動物細胞である、請求項３０に記載の細胞。
【請求項３２】
ヒト細胞である、請求項３１に記載の細胞。
【請求項３３】
組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドを製造する方法であって、
ａ）請求項３０に記載の細胞を、該組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドの発現に好適な条件下で培養する工程；
ｂ）このようにして発現された該組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチドを回収する工程を包含する、方法。
【請求項３４】
ａ）第１のＬｅｆｔｙポリペプチド；及び
ｂ）第２のＬｅｆｔｙポリペプチド
を含み、
該第１及び第２のＬｅｆｔｙポリペプチドが複合体を形成するように会合し、該複合体が、ミオスタチン、Ｎｏｄａｌ及びＧＤＦ−１１からなる群から選択されるＴＧＦ−βファミリーメンバーに結合する、単離されたＬｅｆｔｙポリペプチド複合体。
【請求項３５】
前記ポリペプチド複合体がホモ二量体である、請求項３４に記載のＬｅｆｔｙポリペプチド複合体。
【請求項３６】
請求項１〜２６又は請求項３４〜３５の何れか１項に記載の修飾されたＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、薬学的製剤。
【請求項３７】
ｉｎ  ｖｉｖｏでＧＤＦ−１１及び／又はミオスタチンの活性を阻害するための組成物であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、組成物。
【請求項３８】
筋肉損失又は筋肉増殖不全に関連した障害を有する被験体を処置するための組成物であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、組成物。
【請求項３９】
前記被験体が、筋萎縮、ＡＬＳ、及び筋肉消耗疾患から選択される状態を有する、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記筋肉消耗疾患が、悪液質、食欲不振、ＤＭＤ症候群、ＢＭＤ症候群、ＡＩＤＳ消耗症候群、筋ジストロフィー、神経筋疾患、運動ニューロン疾患、神経筋接合部の疾患、及び炎症性筋障害からなる群から選択される、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
神経変性に関連した障害を有する被験体を処置するための組成物であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、組成物。
【請求項４２】
前記障害が、アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病（ＨＤ）からなる群から選択される、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＧＤＦ−１１及び／又はミオスタチンの活性を阻害するための方法であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを該細胞に投与する工程を包含する、方法。
【請求項４４】
被験体の体脂肪量を減少させる、又は体脂肪量の増加速度を低下させるための組成物であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、組成物。
【請求項４５】
被験体の望ましくない体重増加に関連した障害を処置するための組成物であって、有効量のＬｅｆｔｙポリペプチドを含む、組成物。
【請求項４６】
前記障害が、肥満症、インスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、心血管系疾患、癌、高血圧、変形性関節症、卒中、呼吸障害、及び胆嚢疾患からなる群から選択される、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
前記Ｌｅｆｔｙポリペプチドが、野生型Ｌｅｆｔｙポリペプチド又はその断片、組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド、及び二量体化Ｌｅｆｔｙポリペプチドから選択される、請求項３７〜４２、４４〜４６の何れか１項に記載の組成物。
【請求項４８】
筋肉組織の異常な量、発達又は代謝活性に関連した障害を処置する医薬品の製造のためのＬｅｆｔｙポリペプチドの使用。
【請求項４９】
神経変性に関連した障害を処置する医薬品の製造のためのＬｅｆｔｙポリペプチドの使用。
【請求項５０】
望ましくない体脂肪量に関連した障害を処置する医薬品の製造のためのＬｅｆｔｙポリペプチドの使用。
【請求項５１】
前記障害が、肥満症及びインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）からなる群から選択される、請求項５０に記載の使用。
【請求項５２】
前記Ｌｅｆｔｙポリペプチドが、野生型Ｌｅｆｔｙポリペプチド又はその断片、組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド、及び二量体化Ｌｅｆｔｙポリペプチドから選択される、請求項４８〜５１の何れか１項に記載の使用。
【請求項５３】
前記Ｌｅｆｔｙポリペプチドが、野生型Ｌｅｆｔｙポリペプチド又はその断片、組換えＬｅｆｔｙ誘導体ポリペプチド、及び二量体化Ｌｅｆｔｙポリペプチドから選択される、請求項４３に記載の方法。