【手続補正書】
【提出日】平成20年10月6日(2008.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
成熟樹状細胞(DC)を調製する方法であって、
(a)単離した未成熟樹状細胞(iDC)を、TNF-αRアゴニストの存在下で、インターフェロンγ受容体(IFN-γR)アゴニストを含んでなる第一のシグナルによりシグナル化して、CD83+成熟樹状細胞を産生し、
(b)前記CD83+成熟樹状細胞を、有効量のCD40アゴニストを含んでなる第二の一過性シグナルによりシグナル化して、CD83+CCR7+成熟樹状細胞を産生させること
を含んでなる方法。
【請求項２】
前記iDCまたは前記シグナル化DCを、PGE2と接触させることをさらに含んでなる、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記工程(a)および(b)が、前記細胞と、GM-CSFと、IL-4またはIL-13の少なくとも一方とを接触させることをさらに含んでなる、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
前記CD40アゴニストがCD40に対するアゴニスト性抗体である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記CD40アゴニストがCD40Lポリペプチドである、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記CD40Lポリペプチドが、下記からなる群から選択される、請求項5に記載の方法：
a)  配列番号:2を含んでなるポリペプチド、
b)  配列番号:2のアミノ酸残基47 - 261を含んでなるポリペプチド、
c)  配列番号:2のアミノ酸残基51 - 261を含んでなるポリペプチド、
d)  配列番号:2のアミノ酸残基120 - 261を含んでなるポリペプチド、
e)  配列番号:2のアミノ酸残基113 - 261を含んでなるポリペプチド、
f)  配列番号:2のアミノ酸残基112 - 261を含んでなるポリペプチド、
g)  配列番号:10を含んでなるポリペプチド、
h)  配列番号:2のアミノ酸残基35 - 261を含んでなるポリペプチド、
i)  配列番号:2のアミノ酸残基34 - 225を含んでなるポリペプチド、
j)  配列番号:2のアミノ酸残基113 - 225を含んでなるポリペプチド、
k)  配列番号:2のアミノ酸残基120 - 225を含んでなるポリペプチド、および
1)  (a) - (k)のいずれかのポリペプチドの断片であって、CD40に結合している前記断片。
【請求項７】
前記CD40Lポリペプチドが、下記からなる群から選択されるポリペプチドに対して少なくとも77%配列同一性を有するポリペプチドである、請求項5に記載の方法：
a)  配列番号:2を含んでなるポリペプチド、
b)  配列番号:2のアミノ酸残基47 - 261を含んでなるポリペプチド、
c)  配列番号:2のアミノ酸残基51 - 261を含んでなるポリペプチド、
d)  配列番号:2のアミノ酸残基120 - 261を含んでなるポリペプチド、
e)  配列番号:2のアミノ酸残基113 - 261を含んでなるポリペプチド、
f)  配列番号:2のアミノ酸残基112 - 261を含んでなるポリペプチド、
g)  配列番号:10を含んでなるポリペプチド、
h)  配列番号:2のアミノ酸残基35 - 261を含んでなるポリペプチド、
i)  配列番号:2のアミノ酸残基34 - 225を含んでなるポリペプチド、
j)  配列番号:2のアミノ酸残基113 - 225を含んでなるポリペプチド、
k)  配列番号:2のアミノ酸残基120 - 225を含んでなるポリペプチド、および
1)  (a) - (k)のいずれかのポリペプチドの断片であって、CD40に結合している前記断片。
【請求項８】
IFN-γRアゴニストをコードするmRNAの翻訳時に前記第一のシグナルを生じる、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記iDCとIFN-γRアゴニストとの接触時に前記第一のシグナルを生じる、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
CD40アゴニストをコードするmRNAの翻訳時に前記第二のシグナルを生じる、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記樹状細胞を前記mRNAでトランスフェクトする、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
前記細胞を、エレクトロポレーションを用いてトランスフェクトする、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
前記mRNAが、CD40Lポリペプチドをコードし、かつ下記からなる群から選択されるポリヌクレオチドを含んでなる、請求項10に記載の方法：
a)  配列番号:1のポリヌクレオチド、
b)  配列番号:1のヌクレオチド40 - 822を含んでなるポリヌクレオチド、
c)  配列番号:1のヌクレオチド178 - 822を含んでなるポリヌクレオチド、
d)  配列番号:1のヌクレオチド190 - 822を含んでなるポリヌクレオチド、
e)  配列番号:1のヌクレオチド397 - 822を含んでなるポリヌクレオチド、
f)  配列番号:1のヌクレオチド376 - 822を含んでなるポリヌクレオチド、
g)  配列番号:9のポリヌクレオチド、
h)  配列番号:13のポリヌクレオチド、
i)  (a) - (h)の任意のポリヌクレオチドと少なくとも80%の配列同一性を有するポリヌクレオチド、
j)  ストリンジェント条件下で(a) - (h)の任意のポリヌクレオチドにハイブリダイゼーションするポリヌクレオチド、および
k)  さらに配列番号:14、15、16、17、または18の核酸からなる群から選択される3'未翻訳配列、および/または配列番号:19、20、21、22、または23の核酸からなる群から選択される5'未翻訳配列を含んでなる(a) - (j)のポリヌクレオチド。
【請求項１４】
CCR7+成熟DCが106個のDC当たり0 - 500pgのIL-10を分泌する、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
CCR7+成熟DCがIL-12p70タンパク質を分泌する、請求項1〜14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
未成熟樹状細胞がCD34+造血幹細胞または前駆細胞から調製される、請求項1〜15のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
未成熟樹状細胞が末梢血単核球(PBMC)から調製される、請求項1〜15のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
未成熟樹状細胞がIL-4および/または IL-13の存在下にて前記PBMCをGM-CSFと接触させることによって調製される、請求項17に記載の方法。
【請求項１９】
前記IFN-γRアゴニストがIFN-γまたはその生物活性断片である、請求項1〜18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記IFN-γが配列番号:6の配列を有する、請求項19に記載の方法。
【請求項２１】
前記IFN-γRアゴニストが配列番号:6と少なくとも80%の配列同一性を有するポリペプチドを含んでなる、請求項1〜18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
さらに前記iDC、シグナル化DC、またはCCR7+成熟DCに一以上の抗原または一以上の抗原をコードする(複数の)ポリヌクレオチドを導入して、抗原を負荷したCCR7+成熟DCを産生させることを含んでなる、請求項1〜21のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
抗原が病原体、病原体溶解物、病原体抽出物、病原体ポリペプチド、癌細胞、癌細胞溶解物、癌細胞抽出物、癌細胞特異的ポリペプチドからなる群から選択される、請求項22に記載の方法。
【請求項２４】
(複数の)抗原をコードする(複数の)ポリヌクレオチドを前記iDC、シグナル化DC、またはCCR7+成熟DCに導入する、請求項22に記載の方法。
【請求項２５】
前記ポリヌクレオチドをエレクトロポレーションによって導入する、請求項24に記載の方法。
【請求項２６】
前記ポリヌクレオチドがmRNAである、請求項24に記載の方法。
【請求項２７】
mRNAをコードする抗原を、CD40アゴニストをコードするmRNAと共に導入する、請求項26に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗原またはポリヌクレオチドを前記第一のシグナルの前に導入する、請求項22に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗原またはポリヌクレオチドを前記第一のシグナルの後であって、かつ前記第二のシグナルの前に輸送する、請求項22に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗原またはポリヌクレオチドを前記第二のシグナル後に輸送する、請求項22に記載の方法。
【請求項３１】
前記抗原またはポリヌクレオチドを前記第二のシグナルと実質的に同時に輸送する、請求項22に記載の方法。
【請求項３２】
対象者に免疫応答を生じさせる医薬組成物であって、前記対象者に請求項22に記載の方法によって産生した抗原負荷CCR7+成熟DCの有効量で投与されることを含んでなる、医薬組成物。
【請求項３３】
前記DCが対象者と同種である、請求項32に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記DCが対象者にとって自己由来である、請求項32に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
免疫エフェクター細胞を刺激する方法であって、請求項22に記載の方法によって産生した抗原負荷CCR7+成熟DCの存在下にて前記細胞を培養して、刺激された免疫エフェクター細胞を産生することを含んでなる、方法。
【請求項３６】
対象者の免疫を高める医薬組成物であって、前記対象者に請求項35に記載の方法によって産生した刺激された免疫エフェクター細胞の有効量で投与されることを含んでなる、医薬組成物。
【請求項３７】
さらに前記未成熟樹状細胞、前記シグナル化樹状細胞、または前記CCR7+樹状細胞をNKT細胞リガンドと接触させることを含んでなる、請求項1〜31または35のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記NKT細胞リガンドが、α-ガラクトシルセラミド、α-グルコシルセラミド、α-6-デオキシガラクトシルセラミド、α-6-デオキシガラクトシルセラミド、β-6-デオキシガラクトフラノシルセラミド、β-6-デオキシガラクトフラノシルセラミド、β-アラビノシルセラミド、α-C-ガラクトシルセラミド、およびα-S-ガラクトシルセラミドからなる群から選択される化合物である、請求項37に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物が(2S,3S,4R)-1-O-(α-Dガラクトピラノシル)-2-(N-ヘキサコサノイルアミノ)-1,3,4-オクタデカントリオール(KRN7000)である、請求項38に記載の方法。
【請求項４０】
前記CCR7+樹状細胞を前記化合物と接触させる、請求項37に記載の方法。
【請求項４１】
前記未成熟DCを前記化合物と接触させる、請求項37に記載の方法。
【請求項４２】
前記シグナル化DCを前記化合物と接触させる、請求項37に記載の方法。
【請求項４３】
CD83+CCR7-成熟樹状細胞。
【請求項４４】
請求項1〜31、35、または37〜42のいずれか一項に記載の方法によって調製される、CCR7+成熟DC。