【手続補正書】
【提出日】平成21年1月27日(2009.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物のエピトープを特異的に結合する単離された抗体。
【請求項２】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体が、ヒト化抗体もしくはキメラ抗体、またはこれらの断片である、請求項１に記載の抗体。
【請求項５】
配列番号４または配列番号６の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドに結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項６】
配列番号４または配列番号６の配列を有するポリペプチドに結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項７】
癌細胞の増殖を対照と比較して少なくとも３０％抑制する、請求項１に記載の抗体。
【請求項８】
癌細胞の成長を対照と比較して少なくとも３０％抑制する、請求項１に記載の抗体。
【請求項９】
β−カテニンシグナル伝達およびＷｎｔシグナル伝達を対照と比較して少なくとも３０％抑制する、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０】
前記抗体がＡＤＣＣ活性を示す、請求項１に記載の抗体。
【請求項１１】
前記抗体が、強化されたＡＤＣＣ活性を示すように改変される、請求項１に記載の抗体。
【請求項１２】
前記抗体が標識される、請求項１に記載の抗体。
【請求項１３】
前記標識が酵素、放射性同位体、またはフルオロフォアである、請求項１に記載の抗体。
【請求項１４】
前記抗体が、細胞傷害性または治療用薬剤に結合体化される、請求項１に記載の抗体。
【請求項１５】
前記抗体が、少なくとも１×１０８Ｋａの親和性でＤＫＫＬ−１スプライス産物に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項１６】
請求項１に記載の抗体を生成する単離細胞。
【請求項１７】
請求項１に記載の抗体を生成するハイブリドーマ。
【請求項１８】
請求項１に記載の抗体を生成する非ヒト遺伝子組換え動物。
【請求項１９】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子、および
１つまたは複数の薬学的に許容可能な担体
を含む組成物であって、
該ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子は、
配列番号３または配列番号５の単離二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）；
配列番号３または配列番号５の配列の少なくとも１０個の連続するヌクレオチドを含む単離オリゴヌクレオチド；または
ＤＫＫＬ−１スプライス産物のエピトープを特異的に結合する抗体である
組成物。
【請求項２０】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記抗体が、検出可能な標識をさらに含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物が、配列番号４または配列番号６の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド配列を有する、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２４】
ＤＫＫＬ−１イソ型２が配列番号４のポリペプチド配列を有する、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２５】
ＤＫＫＬ−１イソ型３が、配列番号６のポリペプチド配列を有する、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２６】
癌または癌症状を治療する必要がある患者の癌または癌症状を治療するための組成物であって、
請求項１９のＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子
を含む組成物。
【請求項２７】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、ＤＫＫＬ−１を発現する癌細胞の成長を、細胞の成長を測定するインビトロアッセイで少なくとも３０％抑制する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、ＤＫＫＬ−１を発現する癌細胞の増殖を、細胞の増殖を測定するインビトロアッセイで少なくとも３０％抑制する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３０】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、１つまたは複数のβ−カテニンシグナル伝達およびＷｎｔシグナル伝達を、対照と比較して少なくとも３０％抑制する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、ＤＫＫＬ−１スプライス産物の発現を、対照と比較して少なくとも３０％抑制する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３２】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、配列番号１３、１４および１５から成る群から選択された配列を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３３】
前記オリゴヌクレオチドが、アンチセンスまたはＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、配列番号３もしくはその相補体の配列、または配列番号５もしくはその相補体にハイブリダイズ可能な配列を含む二本鎖ＲＮＡである、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３５】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子がモノクローナル抗体である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３６】
前記癌が卵巣癌、肺癌、肝臓癌、子宮頸癌、結腸癌、乳癌、またはリンパ腫である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３７】
前記肺癌が中皮腫または非小細胞肺癌である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記乳癌が、導管腺癌、小葉腺癌、および転移性腺癌から成る群から選択される、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３９】
従来の癌治療物質と組み合わせて使用されることを特徴とする、請求項２６に記載の組成物。
【請求項４０】
化学療法、放射線療法、または外科手術のうちの１つまたは複数による前記患者の治療と組み合わせて使用されることを特徴とする、請求項２６に記載の組成物。
【請求項４１】
患者におけるＤＫＫＬ−１スプライス産物に関連する生物活性を改変するための組成物であって、
請求項１９に記載のＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子
を含む組成物。
【請求項４２】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物が、ＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４３】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が、ＤＫＫＬ−１イソ型２またはイソ型３に選択的に結合するモノクローナル抗体である、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
前記患者が、卵巣癌、肺癌、肝臓癌、子宮頸癌、結腸癌、乳癌、またはリンパ腫の１つまたは複数を有するか、またはそれらに罹りやすいことを特徴とする、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４５】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子が抗体であり、かつ該ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子がインビボ治療抗体遺伝子導入を介して前記被験体に投与されることを特徴とする、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４６】
癌患者を治療するための請求項１９に記載の組成物であって、
患者サンプルにおけるＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現の有無が検出され、該サンプル中におけるＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現の存在は、ＤＫＫＬ−１療法の候補である患者を示し、
該患者がＤＫＫＬ−１療法の候補者である場合、治療上効果的な量の該組成物が該患者に投与されることを特徴とする、
組成物。
【請求項４７】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現が、ＤＫＫＬ−１スプライス産物のＲＮＡを測定することによって検出されることを特徴とする、請求項４６に記載の組成物。
【請求項４８】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現が、ＤＫＫＬ−１スプライス産物を測定することによって検出されることを特徴とする、請求項４６に記載の組成物。
【請求項４９】
従来の癌治療用物質と組み合わせて使用されることを特徴とする、請求項４６に記載の組成物。
【請求項５０】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物が、ＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項４６に記載の組成物。
【請求項５１】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物を発現する細胞の集団内の癌細胞表現型を抑制する方法であって、
該癌細胞表現型を抑制する上で効果的な量の請求項１９に記載のＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子を該集団に投与するステップ
を含む方法。
【請求項５２】
前記癌細胞表現型が細胞の増殖、癌細胞の成長、癌細胞の移動、癌細胞の転移、腫瘍原性、および癌細胞の生存である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記癌細胞が、卵巣癌、肺癌、肝臓癌、子宮頸癌、結腸癌、乳癌、またはリンパ腫から成る群から選択される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
サンプル中でＤＫＫＬ−１スプライス産物を発現する１つまたは複数の癌細胞を検出する方法であって、
該サンプルを、画像化剤に結合された請求項１９のＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子を含む組成物と接触させるステップと、
該サンプル中の該画像化剤の局在を検出するステップと
を含む方法。
【請求項５５】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子がモノクローナル抗体である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記画像化剤が、１８Ｆ、４３Ｋ、５２Ｆｅ、５７Ｃｏ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、７７Ｂｒ、８７ＭＳｒ、８６Ｙ、９０Ｙ、９９ＭＴｃ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２７Ｃｓ、１２９Ｃｓ、１３１Ｉ、１３２Ｉ、１９７Ｈｇ、２０３Ｐｂ、または２０６Ｂｉである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
癌インヒビターを特定する方法であって、該癌は、対照と比較したＤＫＫＬ−１スプライス産物の過剰発現により特徴付けられ、該方法は、
ＤＫＫＬ−１スプライス産物を発現する細胞を候補化合物に接触させるステップと、
ＤＫＫＬ−１スプライス産物の下流マーカーが抑制されているか否かを決定するステップであって、下流マーカーの抑制が癌インヒビターを示すステップと
を含む方法。
【請求項５８】
前記下流マーカーがＷｎｔまたはβ−カテニンである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子をスクリーニングする方法であって、
ＤＫＫＬ−１スプライス産物を発現する細胞をテスト化合物と接触させるステップと、
Ｗｎｔ経路の構成要素の活性を測定するステップであって、ここで、該Ｗｎｔ経路の構成要素の活性が、対照と比較して調節される場合、該テスト化合物がＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子である、ステップと
を含む方法。
【請求項６０】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子に対する患者の感受性を決定する方法であって、
該患者の癌サンプルにおけるＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現の証拠を検出するステップ
を含み、ＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現の証拠が、該ＤＫＫＬ−１スプライス産物調節因子に対する該患者の感受性を示す、
方法。
【請求項６１】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物の差次的発現の証拠が、前記患者の癌サンプル中におけるＤＫＫＬ−１スプライス産物の上方制御である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】
ＤＫＫＬ−１スプライス産物を含むサンプルからＤＫＫＬ−１スプライス産物を精製する方法であって、
ａ）固体支持体に結合する請求項１に記載の抗体を含む親和性マトリックスを提供するステップと、
ｂ）該サンプルを該親和性マトリックスと接触させて、親和性マトリックス−ＤＫＫＬ−１スプライス産物複合体を形成するステップと、
ｃ）該親和性マトリックス−ＤＫＫＬ−１スプライス産物複合体を該サンプルの残りから分離するステップと、
ｄ）該ＤＫＫＬ−１スプライス産物を該親和性マトリックスから解放するステップと
を含む方法。
【請求項６４】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
細胞毒性または診断用薬を、ＤＫＫＬ−１スプライス産物を発現する１つまたは複数の細胞に送達する方法であって、該方法は、
請求項１に記載の抗体またはその断片に結合体化する該細胞毒性または診断用薬を提供するステップと、
該細胞を該抗体−薬剤または断片−薬剤の結合体に曝露するステップと
を含む方法。
【請求項６６】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記細胞毒性薬が化学療法薬である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
癌患者の予後を決定するのを支援するための方法であって、
該患者のサンプル中の野生型ＤＫＫＬ−１発現産物とＤＫＫＬ−１スプライス産物発現産物の比率を決定するステップであって、該野生型ＤＫＫＬ−１発現産物とＤＫＫＬ−１スプライス産物発現産物の比率が、該癌患者の予後を決定するために使用される、ステップ
を含む方法。
【請求項６９】
前記野生型ＤＫＫＬ−１が、配列番号１の配列を有する核酸によってコードされる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記野生型ＤＫＫＬ−１が配列番号２の配列を有する、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記ＤＫＫＬ−１スプライス産物がＤＫＫＬ−１イソ型２またはＤＫＫＬ−１イソ型３である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７２】
野生型ＤＫＫＬ−１の発現産物：ＤＫＫＬ−１スプライス産物の発現産物の比率が少なくとも２：１であることが、予後が良好な患者を示す、請求項６８に記載の方法。