【手続補正書】
【提出日】平成21年3月23日(2009.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一の融合タンパク質を含有してなる修飾されたウイルス様粒子(ＶＬＰ)であって、当該少なくとも一の融合タンパク質が：
(a) 第一ポリペプチド；と
(b) 第二ポリペプチド
とを含有してなり、該第一ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質又はそのムテインであり、該第二ポリペプチドが該第一ポリペプチドのＮ末端又はＣ末端の何れかに融合している、修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２】
前記第二ポリペプチドが少なくとも一の抗原を含有してなる、請求項１に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項３】
前記第一ポリペプチドが１２４−１３８のアミノ酸からなる、請求項１又は２に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項４】
ＡＰ２０５バクテリオファージの前記コートタンパク質又はそのムテインが、
(a) 配列番号１；
(b) 配列番号２；
(c) 配列番号４２；
(d) 配列番号６７；
(e) 配列番号６８；
(f) 配列番号６９；及び
(g) 配列番号１又は６７のムテイン；
からなる群から選択される、請求項１ないし３の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項５】
前記第一ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質であり、該コートタンパク質が配列番号６７である、請求項１ないし４の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項６】
前記第一ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質のムテインであり、該ムテインが配列番号１又は６７に記載のアミノ酸配列を有し、配列番号１又は６７の最大３つのアミノ酸残基が欠失、内部に付加又は置換されている、請求項１ないし３の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項７】
前記第一ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質のムテインであり、該ムテインが配列番号６７に記載のアミノ酸配列を有し、配列番号６７の２つのアミノ酸残基が欠失、内部に付加又は置換されている、請求項１ないし３の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項８】
前記第一ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質のムテインであり、該ムテインが配列番号６７に記載のアミノ酸配列を有し、配列番号６７の３つのアミノ酸残基が欠失、内部に付加又は置換されている、請求項１ないし３の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項９】
前記融合タンパク質がさらにスペーサーを含有し、該スペーサーが前記の第一ポリペプチドと前記の第二ポリペプチドの間に位置する、請求項１ないし８の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１０】
前記スペーサーが最大１５のアミノ酸を有する、請求項９に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１１】
前記の第二ポリペプチドが、
(a) 癌細胞に対する免疫応答を誘発するために適した抗原；
(b) 少なくとも一の病原性微生物に対する免疫応答を誘発するために適した抗原；
(c) 少なくとも一のアレルゲンに対する免疫応答を誘発するために適した抗原；
(d) 少なくとも一の自己抗原に対する免疫応答を誘発するために適した抗原；
(e) 畜産動物又は愛玩動物の免疫応答を誘発するために適した抗原；及び
(f) ポリペプチド毒又はポリペプチドホルモンに対する免疫応答を誘発するために適した抗原
からなる群から選択される少なくとも一の抗原を含有してなる、請求項１ないし１０の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１２】
前記の少なくとも一の抗原が、
(a) ＨＩＶのポリペプチド；
(b) Ｂ型肝炎ウイルスのポリペプチド；
(c) インフルエンザウイルスのポリペプチド；
(d) Ｃ型肝炎ウイルスのポリペプチド；
(e) トキソプラズマのポリペプチド；
(f) マラリヤ原虫のポリペプチド；
(g) 三日熱マラリアのポリペプチド；
(h) 卵形マラリア原虫のポリペプチド；
(i) 四日熱マラリア原虫のポリペプチド；
(j) クラミジアのポリペプチド；
(k) 乳癌細胞のポリペプチド；
(l) 腎臓癌細胞のポリペプチド；
(m) 前立腺癌細胞のポリペプチド；
(n) 皮膚癌細胞のポリペプチド；
(o) 脳癌細胞のポリペプチド；
(p) 白血病細胞のポリペプチド；
(q) 組換え体プロファイリング；
(r) ミツバチの針アレルギーに伴われるポリペプチド；
(s) 木の実アレルギーに伴われるポリペプチド；
(t) 食物アレルギーに伴われるポリペプチド；
(u) 喘息に伴われるポリペプチド；
(v) Ｈｅｒ２；
(w) ＧＤ２；
(x) ＥＧＦ-Ｒ；
(y) ＣＥＡ；
(z) ＣＤ５２；
(aa) ヒトメラノーマｇｐ１００；
(bb) ヒトメラノーマｍｅｌａｎＡ
(cc) チロシナーゼ；
(dd) ＮＡ１７-Ａ  ｎｔ；
(ee) ＭＡＧＥ３；
(ff) Ｐ５３；
(gg) ＣＤ２１；
(hh) ＨＰＶ１６Ｅ７；
(ii) ホスホリパーゼＡ２タンパク質；
(jj) Ｄｅｒ  ｐＩペプチド；
(kk) インフルエンザＭ２タンパク質；
(ll) (a)から(z)及び(aa)から(kk)の前記少なくとも一の抗原の断片；及び、
(mm) (a)から(z)及び(aa)から(kk)の前記少なくとも一の抗原の変異体
からなる群から選択されるものである、請求項２ないし１０の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１３】
前記の少なくとも一の抗原が、インフルエンザＭ２タンパク質の細胞外ドメインを含むか、好ましくはこれからなる、請求項２ないし１０の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１４】
前記のインフルエンザＭ２タンパク質の細胞外ドメインが配列番号４３の配列からなる、請求項１３に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１５】
配列番号４３の最大３つのアミノ酸残基が欠失、内部に付加又は置換されている、請求項１４に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１６】
前記のＭ２タンパク質の細胞外ドメインが、ＡＰ２０５バクテリオファージの前記コートタンパク質又はそのムテインのＮ末端に融合している、請求項１３ないし１５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１７】
前記の少なくとも一の抗原が自己抗原である、請求項２ないし１０の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１８】
前記の自己抗原が、
(a) リンホトキシン(好ましくはリンホトキシンα(ＬＴα)、リンホトキシンβ(ＬＴβ))；
(b) リンホトキシンレセプター；
(c) 核因子ｋＢリガンド(ＲＡＮＫＬ)のレセプター活性化因子；
(d) 血管内皮成長因子(ＶＥＧＦ)；
(e) 血管内皮成長因子レセプター(ＶＥＧＦ-Ｒ)；
(f) インターロイキン-５；
(g) インターロイキン-１７；
(h) インターロイキン-１３；
(i) ＩＬ-２３ｐ１９；
(j) グレリン；
(k) ＣＣＬ２１；
(l) ＣＸＣＬ１２；
(m) ＳＤＦ-１；
(n) Ｍ-ＣＳＦ；
(o) ＭＣＰ-１；
(p) エンドグリン；
(q) ＧｎＲＨ；
(r) ＴＲＨ；
(s) エオタキシン；
(t) ブラジキニン；
(u) ＢＬＣ；
(v) 腫瘍壊死因子α；
(w) アミロイドβペプチド(Ａβ１−４２)；
(x) Ａβ１−６；
(y) アンギオテンシン；
(z) ＣＣＲ５細胞外ドメイン；
(aa) ＣＸＣＲ４細胞外ドメイン；
(bb) ガストリン；
(cc) ＣＥＴＰ；
(dd) Ｃ５ａ；
(ee) ブラジキニン；
(ff) Ｄｅｓ-Ａｒｇブラジキニン
(gg) (a)−(ff)の断片；及び、
(hh) (a)−(ff)の変異体
からなる群から選択されるポリペプチドである、請求項１７に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項１９】
前記の第二ポリペプチドが、
(a) インフルエンザウイルスＭ２ペプチド(配列番号：４３)；
(b) Ｂ型肝炎ウイルスＰｒｅ  Ｓ１ペプチド(配列番号：６２)；
(c) ＨＩＶ Ｎｅｆポリエピトープ(配列番号：２３)；
(d) ＧｎＲＨ(配列番号：２０)；
(e) ガストリンＧ１７(配列番号：４７)；
(f) ネコグレリン(配列番号：５９)；
(g) イヌグレリン(配列番号：５８)；
(h) ＨＩＶ  Ｅｎｖペプチド１(配列番号：９８)；
(i) ＨＩＶ  Ｅｎｖペプチド２(配列番号：９９)；
(j) ＣＣＲ５ ＰＮｔ(配列番号：４５)；及び、
(k) ＣＣＲ５ ＥＣＬ２(配列番号：９１)
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含有してなる、請求項２ないし１０の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２０】
さらに、少なくとも一の免疫賦活性核酸を含有してなり、該免疫賦活性核酸が前記の修飾されたウイルス様粒子内にパッケージ化されている、請求項１ないし１９の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２１】
前記免疫賦活性核酸が非メチル化ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドである、請求項２０に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２２】
前記非メチル化ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドが配列GGGGGGGGGGGACGATCGTCGGGGGGGGGG (配列番号：７１)を含有する、請求項２１に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２３】
前記非メチル化ＣｐＧ含有オリゴヌクレオチドが配列GGGGGGGGGGGACGATCGTCGGGGGGGGGG (配列番号：７１)からなる、請求項２１に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２４】
前記免疫賦活性核酸がＤＮａｓｅ加水分解作用に侵されない、請求項２０ないし２３の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２５】
前記免疫賦活性核酸のヌクレオチド間の結合がホスホジエステル結合である、請求項２０ないし２４の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子。
【請求項２６】
(a) 請求項１ないし２５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子；及び
(b) 薬学的に許容される担体
を含有してなる薬剤組成物。
【請求項２７】
免疫学的に有効な量の請求項１ないし２５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子を含有してなるワクチン組成物。
【請求項２８】
さらに、アジュバントを含有してなる、請求項２７に記載のワクチン組成物。
【請求項２９】
請求項１ないし２５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子、請求項２６に記載の薬剤組成物、請求項２７又は２８に記載のワクチンの、動物又はヒトを免疫化するための医薬の製造のための使用。
【請求項３０】
ポリペプチドを含有してなる融合タンパク質であり、該ポリペプチドがＡＰ２０５バクテリオファージのコートタンパク質又はそのムテインのＮ末端又はＣ末端、又はその両端に融合されており、該ポリペプチドが３−１０のアミノ酸からなり、該融合タンパク質がウイルス様粒子を形成することができる、融合タンパク質。
【請求項３１】
請求項３０の前記融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列。
【請求項３２】
(a) スペーサーをコードするヌクレオチド配列を、第一ポリペプチドをコードする第一ヌクレオチド配列又は第二ポリペプチドをコードする第二ヌクレオチド配列に選択的にインフレームで連結する；
(b) 前記第二ヌクレオチド配列を前記第一ヌクレオチド配列にインフレームで連結した結果、前記の融合タンパク質をコードする第三ヌクレオチド配列を生じる；
(c) 第一ヌクレオチド配列の３'で抑制される停止コドンを選択的に導入する；
(d) 好ましくは結果として生じる発現されたタンパク質が前記の修飾されたウイルス様粒子を形成することができる条件下で、宿主内で該第三ヌクレオチド配列を発現させる；
(e) (d)の工程で得られた該修飾されたウイルス様粒子を精製する、
という工程を含む、請求項１ないし２５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子の産生方法。
【請求項３３】
医薬としての使用のための、請求項１ないし２５の何れか一に記載の修飾されたウイルス様粒子、請求項２６に記載の薬剤組成物、又は請求項２７又は２８に記載のワクチン。