(57)【要約】本発明は、選択されたキナーゼ（Ｐｉｍおよび／またはＣＫ２キナーゼ）を阻害する一般式（Ｉ）の化合物、およびそのような化合物を含有する組成物を提供する。これらの化合物および組成物は、増殖性障害、例えば癌に加え、炎症、疼痛、ならびに特定の感染および免疫障害を含む他のキナーゼ関連状態を治療するのに有用である。2012527479.tif 000102
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容しうるその塩：
2012527479.tif 000100
式中、Ｚ１−Ｚ４を含む二環系は、芳香族であり；
Ｚ１およびＺ２の一方は、Ｃであり、Ｚ１およびＺ２の他方は、Ｎであり；
Ｚ３およびＺ４は、独立して、ＣＲ５またはＮであり；
ここでＲ５は、ＨまたはＲ１であり得；
Ｒ１は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリール、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８であり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈおよび置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキルから選択され；
Ｘは、ＮＲ６、Ｏ、またはＳであり、ここでＲ６は、Ｈであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｙは、ＯまたはＳまたはＮＲ１０であり；
Ｒ１０は、Ｈ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８から選択され、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｗは、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、−ＯＲ７、−ＮＲ７Ｒ８、Ｓ（Ｏ）ｎＲ７、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、またはＣＲ７Ｒ８Ｒ９であり、
ここでｎは、０、１または２であり、
各Ｒ７およびＲ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択され；
ここでＮＲ７Ｒ８中のＲ７およびＲ８はＮと一緒になって、任意に置換されていてもよく、かつ環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、５〜８員環を形成していてもよい。
【請求項２】
Ｚ１がＮであり、Ｚ２がＣである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｚ３がＮである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｚ４がＣＲ５である、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５】
Ｘが、ＮＲ６またはＳである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が、Ｈ、Ｍｅである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３およびＲ４が、両者ともＨである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が、Ｈ、Ｍｅ、ハロ、ＯＭｅ、またはＣＦ３である、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
ＹがＯである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
ＹがＳである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１１】
Ｗが−ＮＨ−Ａであり、式中、Ａは、置換されていてもよいフェニルである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
Ｗが、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１３】
Ｗが、置換されていてもよいフェニルである、請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】
式Ｉａまたは式Ｉｂの化合物であって、
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式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｘ、およびＹは、請求項１で定義された通りであり、
かつＡｒは、置換されていてもよいアリールである、
請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
表１中の化合物から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
薬学的に許容しうる賦形剤と混合された、請求項１〜３または１４のいずれか一項記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１７】
治療における使用のための、請求項１〜３または１４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
血管障害、病原感染、または免疫障害の治療における使用のための、請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
癌を治療するための使用のための、請求項１７記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本願は、２００９年５月２０日出願の米国特許仮出願第６１／１８０，０９０号および２００９年６月１８日出願の米国特許仮出願第６１／２１８，３１８号の優先権の恩典を主張するものである。これらの出願のそれぞれの内容は、参照によってその全体が本明細書に組込まれる。
【０００２】
本発明は、一部として、非限定的に、細胞増殖を阻害すること、および特定のプロテインキナーゼ活性を調節することをはじめとする、特定の生物活性を有する分子に関する。本発明の分子は、カゼインキナーゼ活性（例えば、ＣＫ２活性）および／またはＰｉｍキナーゼ活性（例えば、ＰＩＭ−１活性）を調節することができ、癌および炎症状態に加え、特定の感染障害を治療するのに有用である。本発明は、一部として、そのような化合物を用いる方法、およびこれらの化合物を含有する医薬組成物にも関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
プロテインキナーゼＣＫ２（以前はカゼインキナーゼＩＩと称され、本明細書では「ＣＫ２」と呼ぶ）は、遍在しており、高度に保存されたプロテインセリン／トレオニンキナーゼである。そのホロ酵素は、典型的には、２個の触媒（αおよび／またはα'）サブユニットおよび２個の調節（β）サブユニットからなる四量体複合体で見出される。ＣＫ２は、多数の生理的標的を有し、細胞生存の維持をはじめとする複雑な一連の細胞機能に関与する。正常細胞内のＣＫ２レベルは、厳密に調節されており、長い間、細胞の成長および増殖において役割を担うと考えられてきた。特定の型の癌を治療するのに有用なＣＫ２阻害剤が、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７７４６４（特許文献１）、ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７４８２０（特許文献２）、ＰＣＴ／ＵＳ２００９／３５６０９（特許文献３）に記載されている。
【０００４】
ＣＫ２の出現率および重要性の両方から、それが進化的上、古代の酵素であることが示唆され、ＣＫ２配列の進化分析も同様にそれを示す。非常に多くの生化学過程に重要となった理由、ならびに宿主のＣＫ２が生存および生命周期の生化学システムの不可欠な部分として感染病原（例えば、ウイルス、原虫）に組込まれてきた理由を、その長命性が説明する可能性がある。これらの同じ特徴から、ＣＫ２阻害剤が本明細書で論じられる様々な医療治療に有用であると考えられる理由が、説明される。それは、Ｇｒｕｅｒｒａ  ＆  Ｉｓｓｉｎｇｅｒ，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００８，  １５：１８７０−１８８６（非特許文献１）に要約された通り、多くの生物過程の中枢であるため、本明細書に記載される化合物をはじめとするＣＫ２阻害剤は、様々な疾患及び障害の治療に有用となるはずである。
【０００５】
癌性細胞は、ＣＫ２の上昇を示し、近年の証拠から、ＣＫ２が調節タンパク質のカスパーゼを介した分解を防御することにより、細胞アポトーシスの強力な抑制を発揮することが示唆される。ＣＫ２の抗アポトーシス機能は、形質転換および腫瘍化に関与する能力に寄与する可能性がある。特に、ＣＫ２は、急性および慢性骨髄性白血病、リンパ腫および多発性骨髄腫に関連することが示されている。加えて、ＣＫ２活性上昇が、結腸、直腸および乳房の固体腫瘍、肺および頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）、肺、結腸、直腸、腎臓、乳房、および前立腺の腺癌において観察されている。小分子によるＣＫ２の阻害は、膵臓癌細胞および肝細胞の癌腫細胞（ＨｅｇＧ２、Ｈｅｐ３、ＨｅＬａ癌細胞株）のアポトーシスを誘導することが報告されており、ＣＫ２阻害剤は、ＲＭＳ（横紋筋肉腫）腫瘍を、ＴＲＡＩＬに誘導されるアポトーシスに向けて劇的に感作した。したがってＣＫ２阻害剤は、単独で、またはＴＲＡＩＬもしくはＴＲＩＬ受容体リガンドと併用することで、小児の最も一般的な軟部肉腫であるＲＭＳを治療するのに有用となろう。加えて、ＣＫ２の上昇が、新生物の攻撃性に大きく相関することが見出され、したがって本発明のＣＫ２阻害剤での治療は、良性病巣が悪性病巣へと進行する傾向、または悪性病巣が転移へと進行する傾向を低下させるはずである。
【０００６】
突然変異が構造的変化に関連して調節制御の欠損を引き起こすことの多い他のキナーゼおよびシグナル伝達経路とは異なり、ＣＫ２活性レベルの上昇は、一般に、活性レベルに影響を及ぼす変化よりもむしろ、活性タンパク質の上方調節または過剰発現により引き起こされるようである。活性レベルがｍＲＮＡレベルとうまく相関しないことから、これが凝集による調節を原因としうることを、ＧｕｅｒｒａおよびＩｓｓｉｎｇｅｒは仮定した。ＣＫ２の過剰な活性が、ＳＣＣＨＮ腫瘍および肺腫瘍、乳房腫瘍など多くの癌で示されている。前掲書（Ｉｄ）。
【０００７】
結腸直腸癌腫におけるＣＫ２活性の上昇が、悪性度の上昇に相関することが示された。ＣＫ２の異常な発現および活性が、乳癌細胞におけるＮＦ−κＢの核内レベル上昇を促進することが報告されている。ＣＫ２活性は、ＡＭＬおよびＣＭＬ患者で急性転化時に顕著に上昇し、ＣＫ２阻害剤が、これらの状態に特に効果的となるはずであることを示す。多発性骨髄腫細胞の生存が、ＣＫ２の活性上昇に依存することが示されており、ＣＫ２阻害剤がＭＭ細胞への細胞毒性を示した。同様に、ＣＫ２阻害剤は、マウスｐ１９０リンパ腫細胞の成長を阻害した。それとＢｃｒ／Ａｂｌとの相互作用が、Ｂｃｒ／Ａｂｌ発現細胞の増殖において重要な役割を担うことが報告されており、ＣＫ２阻害剤がＢｃｒ／Ａｂｌ陽性白血病の治療に有用となりうることを示す。ＣＫ２阻害剤が、マウスにおける皮膚乳頭腫、前立腺癌および乳癌異種移植片の進行を阻害すること、ならびに前立腺プロモーターを発現するトランスジェニックマウスの生存を延長することが示されている。前掲書（Ｉｄ）。
【０００８】
様々な非癌疾患過程におけるＣＫ２の役割が、近年になり考察された。Ｇｕｅｒｒａ  ＆  Ｉｓｓｉｎｇｅｒ，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００８，  １５：１８７０−１８８６（非特許文献１）を参照されたい。次々と付け加えられる証拠から、ＣＫ２が、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、および希少の神経変性疾患、例えばグアム−パーキンソン認知症、１８番染色体欠失症候群、進行性核上性麻痺、クッフス病、またはピック病をはじめとする中枢神経系の重病に関与することが示されている。タウタンパク質の選択的なＣＫ２媒介リン酸化が、アルツハイマー病の進行性神経変性に関与しうることが示唆されている。加えて、近年の研究で、ＣＫ２が記憶障害および脳虚血において役割を担い、後者の影響が、明確に、ＰＩ３Ｋ生存経路に対するＣＫ２の調節的影響に介されることが示唆される。
【０００９】
ＣＫ２は、炎症性障害、例えば、急性または慢性炎症痛、糸球体腎炎、そして例えば多発性硬化症（ＭＳ）、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、および若年性関節炎をはじめとする自己免疫疾患の調節に関与することも示されている。それは、セロトニン５−ＨＴ３受容体チャネルの機能を正に調節し、ヘムオキシゲナーゼ−２を活性化し、そして神経細胞の一酸化窒素合成酵素の活性を増強する。選択的ＣＫ２阻害剤は、疼痛検査前に脊髄組織に投与されると、マウスの疼痛反応を強力に低下させることが報告された。それは、ＲＡ患者の滑液の分泌型ＩＩＡホスホリパーゼＡ２をリン酸化し、若年性関節炎患者の滑液に見出される炎症誘発性分子であるＤＥＫ（核内ＤＮＡ結合タンパク質）の分泌を調節する。したがってＣＫ２の阻害は、例えば本明細書に記載されたものなどの炎症病の進行を制御することが期待され、本明細書に開示された阻害剤が、動物モデルにおいて疼痛を効果的に治療することが示されている。
【００１０】
プロテインキナーゼＣＫ２は、血管系の障害、例えば、アテローマ性硬化症、層流性ずり応力、および低酸素などにおいて役割を担うことも示されている。ＣＫ２は、骨格筋および骨組織の障害、例えば、心筋細胞肥大、インスリンシグナル伝達の障害および骨組織石灰化などにおいても役割を担うことが示されている。一つの研究において、ＣＫ２阻害剤は、培養細胞の増殖因子が誘導する血管新生を遅延させるのに効果的であった。さらに、網膜症モデルにおいて、ＣＫ２阻害剤は、オクトレオチド（ソマトスタチン類似体）との併用で、新生血管叢を減少させており、したがって本明細書に記載されたＣＫ２阻害剤は、ソマトスタチン類似体との併用で、網膜症の治療に効果的となろう。
【００１１】
ＣＫ２は、ＧＳＫ、トロポニンおよびミオシン軽鎖をリン酸化することも示され、したがってそれは、骨格筋および骨組織の生理において重要であり、筋組織に影響を及ぼす疾患に関連する。
【００１２】
ＣＫ２が、原虫寄生体、例えば、タイレリア・パルバ（Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ  ｐａｒｖａ）、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）、ドノバンリーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ）、ヘルペトモナス・ムスカルム・ムスカルム（Ｈｅｒｐｅｔｏｍｏｎａｓ  ｍｕｓｃａｒｕｍ  ｍｕｓｃａｒｕｍ）、熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、トリパノソーマ・ブルーセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、トキソプラズマ・ゴンディ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）およびマンソン住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）などの発達および生命周期調節に関与する証拠も示唆された。宿主細胞侵入に不可欠な、原虫寄生体の細胞運動性の調節におけるＣＫ２の役割が、数多くの研究で確認されている。ＣＫ２の活性化、またはＣＫ２の過剰活性が、ドノバンリーシュマニア、ヘルペトモナス・ムスカルム・ムスカルム、熱帯熱マラリア原虫、トリパノソーマ・ブルーセイ、トキソプラズマ・ゴンディおよびマンソン住血吸虫に感染した宿主で起こることが示されている。実際に、ＣＫ２の阻害が、クルーズトリパノソーマ（Ｔ．  ｃｒｕｚｉ）による感染を遮断することが示されている。
【００１３】
ＣＫ２は、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）、ヒト乳頭腫ウイルス、および単純ヘルペスウイルスに加え、他のウイルス型（例えば、ヒトサイトメガロウイルス、Ｃ型およびＢ型肝炎ウイルス、ボルナ病ウイルス、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、および水痘帯状疱疹ウイルス）に関連するウイルスタンパク質と相互作用し、そして／またはそれをリン酸化することも示された。ＣＫ２は、インビトロおよびインビボで、ＨＩＶ−１逆転写酵素およびプロテアーゼをリン酸化および活性化し、ＨＩＶのモデルであるサル／ヒト免疫不全ウイルス（ＳＨＩＶ）の病原性を促進する。したがってＣＫ２阻害剤は、ＨＩＶ感染モデルの病原的影響を低下させることができる。ＣＫ２は、単純ヘルペスウイルスおよび他の数多くのウイルスにおいても数多くのタンパク質をリン酸化し、幾つかの証拠から、ウイルスがＣＫ２を、その不可欠な生命周期タンパク質のためのリン酸化酵素として採用したことが示唆される。したがってＣＫ２の阻害は、生命周期のために宿主のＣＫ２に依存する、感染およびウイルス感染進行を妨害することが期待される。
【００１４】
ＣＫ２は、影響を及ぼす生物過程の多様性が並はずれており、そしてそれは他の面でもほとんどのキナーゼと異なっている。それは構成的に活性があり、ＡＴＰまたはＧＴＰを利用することができ、ほとんどの腫瘍および急激に増殖する組織で上昇している。多くのキナーゼ阻害剤が複数のキナーゼに影響を及ぼし、オフターゲット効果の確率、または各対象間の変動性が高い中、ＣＫ２がほとんどのキナーゼから識別しうる並はずれた構造的特徴も有することも、ＣＫ２阻害剤にＣＫ２への高度の特異性を持たせることを可能にしている。これら全てを理由として、ＣＫ２は、薬物開発での特に興味深い標的となり、本発明は、過剰な、異常な、または望ましくないＣＫ２活性レベルを介した、またはそれを伴う様々な異なる疾患および障害を治療するのに有用となる、効果の高いＣＫ２阻害剤を提供する。
【００１５】
密接に関連するＰＩＭ−１、−２、および−３をはじめとするＰＩＭプロテインキナーゼは、多様な生物過程、例えば、細胞生存、増殖、および分化などに関連づけられている。ＰＩＭ−１は、腫瘍化に高度に関連する多数のシグナル伝達経路に関与する［Ｂａｃｈｍａｎｎ  ＆  Ｍｏｒｏｙ，  Ｉｎｔｅｒｎａｔ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  ３７，  ７２６−７３０  （２００５）（非特許文献２）に考察］。これらの多くは、細胞周期の進行およびアポトーシスに関与する。ＰＭＩ−１が、アポトーシス促進因子ＢＡＤ（アポトーシスイニシエーターの一つであるＢｃｌ２関連死プロモーター）の不活性化を介して抗アポトーシス因子として作用することが示されている。ＢＡＤの不活性化が、Ｂｃｌ−２活性を増強すること、およびそれにより細胞生存を促進することが可能であるため、この発見は、細胞死を防御する際のＰＩＭ−１の直接的な役割を示唆した［Ａｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ５７１，  ４３−４９（２００４）（非特許文献３）］。ＰＩＭ−１は、細胞周期進行の正の調節物質としても認識されている。ＰＩＭ−１は、Ｃｄｃ２５Ａと結合し、それをリン酸化して、そのホスファターゼ活性を上昇させ、そしてＧ１／Ｓ転移を促進する（Ｌｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＢＣ，  ２７８，  ４８００−４８０５  （１９９９）（非特許文献４）に考察）。加えて、ＧＩ／Ｓ進行を阻害するサイクリンキナーゼ阻害剤ｐ２１Ｗａｆが、ＰＩＭ−１により不活性化されることが見出された［Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ．  １５９３，  ４５−５５  （２００２）（非特許文献５）］。その上、ＰＩＭ−１は、リン酸化によりＣ−ＴＡＫ１を不活性化し、Ｃｄｃ２５Ｃを活性化して、Ｇ２／Ｍ転移を加速する［Ｂａｃｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＢＣ，  ２７９，４８３１９−４８（２００４）（非特許文献６）］。
【００１６】
ＰＩＭ−１は、造血器増殖における肝要な関連要素のようである。キナーゼ活性のあるＰＩＭ−１は、ｇｐ１３０を介したＳＴＡＴ３増殖シグナルに必要とされる［Ｈｉｒａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９，  ２５４８−２５５６，  （２０００）（非特許文献７）］。ＰＩＭ−１は、多数の腫瘍および異なる型の腫瘍細胞株において過剰発現または突然変異さえも起こして、ゲノムを不安定にする。Ｆｅｄｏｒｏｖらは、白血病治療のために開発中の第三相化合物、ＬＹ３３３'５３１が、選択的ＰＩＭ−１阻害剤であると結論づけた。Ｏ．  Ｆｅｄｏｒｏｖ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＮＡＳ  １０４（５１），  ２０５２３−２８  （Ｄｅｃ．  ２００７）（非特許文献８）。ＰＩＭ−１が、前立腺がん、口腔癌、およびバーキットリンパ腫をはじめとするヒト腫瘍に関与することを示す証拠が、発表されている（Ｇａｉｄａｎｏ  ＆  Ｄａｌｌａ  Ｆａｖｅｒ，  １９９３）（非特許文献９）。これらの発見は全て、様々な腫瘍および造血器癌をはじめとするヒト癌の開始および進行におけるＰＩＭ−１の重要な役割を指摘しており、したがってＰＩＭ−１活性の小分子阻害剤は、有望な治療戦略となる。
【００１７】
加えて、ＰＩＭ−２およびＰＩＭ−３は、ＰＩＭ−１との重複機能を有し、１を超えるアイソフォームの阻害が、更なる治療利益を提供する可能性がある。しかし、インビボで様々な他のキナーゼの阻害を介した影響を（そのような効果は、副作用または不測の結果を引き起こす場合があるため）ほとんど、または全く有さないことが、ＰＩＭ阻害剤にとって、時には好ましいこととなる。例えば、非特異的キナーゼ阻害剤がもたらしうる影響を論じる、Ｏ．  Ｆｅｄｏｒｏｖ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＮＡＳ  １０４（５１），  ２０５２３−２８  （Ｄｅｃ．  ２００７）（非特許文献８）を参照されたい。したがって、幾つかの実施形態において、本発明は、ＰＩＭ−１、ＰＩＭ−２、およびＰＩＭ−３のうちの少なくとも一種、またはこれらの幾つかの組合せの選択的阻害剤であり、本明細書に更に記載される特定の他のヒトキナーゼに対する活性が実質的に低い化合物を提供するが、式Ｉの化合物は、典型的にはＣＫ２および１種以上のＰｉｍタンパク質に対して活性がある。幾つかの実施形態において、該化合物は、ＰＩＭおよびＣＫ２キナーゼの両方に対して１μｍｏｌ未満のＩＣ５０を示す。
【００１８】
癌におけるＰＩＭ−３の役割の関与は、最初、ＰＩＭ３遺伝子転写がＥＷＳ／ＥＴＳによるＮＩＨ  ３Ｔ３細胞の悪性転移において上方調節されたことを示す、転写プロファイリング実験により示唆された。これらの結果は、ＰＩＭ−３がヒトおよびマウス肝臓細胞および膵臓の癌腫において選択的に発現されるが、正常な肝臓および膵臓組織においては発現されないことを示すに至った。加えて、ＰＩＭ−３  ｍＲＮＡおよびタンパク質は、複数のヒト膵臓および肝臓細胞の癌細胞株において構成的に発現される。
【００１９】
ＰＩＭ−３過剰発現と腫瘍化促進における機能的役割との関連性は、ＰＩＭ−３を過剰発現するヒト膵臓および肝臓細胞の癌細胞株でのＲＮＡｉの研究から得られた。これらの研究において、内在性ＰＩＭ−３タンパク質の除去が、これらの細胞のアポトーシスを促進した。ＰＩＭ−３がアポトーシスを抑制する分子機序は、部分的に、アポトーシス促進タンパク質ＢＡＤのリン酸化の調節を介して実施される。ＢＡＤタンパク質をリン酸化するＰＩＭ−１および２の両者と同様に、ｓｉＲＮＡによるＰＩＭ−３タンパク質のノックダウンにより、Ｓｅｒ１１２でのＢＡＤリン酸化が減少する。したがって、ＰＩＭ−１および２と同様にＰＭＩ−３は、内胚葉から生じる癌、例えば、膵臓および肝臓癌におけるアポトーシスのサプレッサとして作用する。その上、膵臓癌の従来の治療は、臨床転帰が不良であるため、ＰＩＭ−３は、この不治の疾患の有効な制御につながる新規で重要な分子ターゲットになる可能性がある。
【００２０】
２００８年ＡＡＣＲ年次学会（２００８  ＡＡＣＲ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ）で、スーパージェン（ＳｕｐｅｒＧｅｎ）は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）異種移植モデルにおいて腫瘍退縮を起こすリードＰＩＭキナーゼ阻害剤、ＳＧＩ−１７７６を同定したことを公表した（Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ．４９７４（非特許文献１０））。「Ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ＰＩＭ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｉｔｈ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｓｏｌｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ」と題する口演発表で、Ｓｔｅｖｅｎ  Ｗａｒｎｅｒ博士は、小分子ＰＩＭキナーゼ阻害剤の作製を可能とするモデルを構築するために、科学者がどのようにスーパージェンのＣＬＩＭＢ（ＴＭ）テクノロジーを用いたかを詳述した。ＳＧＩ−１７７６は、アポトーシスおよび細胞周期停止を誘導し、それによりインビトロでホスホ−ＢＡＤレベルを低下させて、ｍＴＯＲ阻害を増強する、強力で選択的なＰＩＭキナーゼ阻害剤として同定された。最も注目すべきは、ＳＧＩ−１７７６が、ＭＶ−４−１１（ＡＭＬ）およびＭＯＬＭ−１３（ＡＭＬ）異種移植モデルにおいて大幅な腫瘍退縮を誘導したことである。これは、ＰＩＭキナーゼ阻害剤が、白血病の治療に用いうることを実証している。
【００２１】
Ｆｅｄｏｒｏｖらは、ＰＮＡＳ  ｖｏｌ．  １０４（５１），  ２０５２３−２８（非特許文献８）において、ＰＩＭ−１キナーゼの選択的阻害剤（Ｌｙ５３３３'５３１）が、ＡＭＬ患者の白血病細胞の細胞成長を抑制し、細胞死を誘導することを示した。ＰＩＭ−３は、膵臓癌細胞において発現されることが示されているが、正常な膵臓細胞では発現されないため、それが膵臓癌での良好な標的になるはずであると実証された。Ｌｉ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ６６（１３），  ６７４１−４７  （２００６）（非特許文献１１）。特定の型の癌を治療するのに有用であると説明されているＰＩＭキナーゼ阻害剤が、ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１２８２９（特許文献４）に記載されている。
【００２２】
これらの２種のプロテインキナーゼは、癌および炎症に関連する生化学経路において重要な機能を有し、そして多くの微生物の病原性においても重要であるため、それらの活性の阻害剤は、多くの医療適用を有する。本発明は、ＣＫ２もしくはＰＩＭまたはその両方を阻害する新規な化合物、ならびにこれらの化合物を活用する組成物および使用方法を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２３】
【特許文献１】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７７４６４
【特許文献２】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７４８２０
【特許文献３】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／３５６０９
【特許文献４】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１２８２９
【非特許文献】
【００２４】
【非特許文献１】Ｇｒｕｅｒｒａ  ＆  Ｉｓｓｉｎｇｅｒ，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００８，  １５：１８７０−１８８６
【非特許文献２】Ｂａｃｈｍａｎｎ  ＆  Ｍｏｒｏｙ，  Ｉｎｔｅｒｎａｔ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  ３７，  ７２６−７３０  （２００５）
【非特許文献３】Ａｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ５７１，  ４３−４９（２００４）
【非特許文献４】Ｌｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＢＣ，  ２７８，  ４８００−４８０５  （１９９９）
【非特許文献５】Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ．  １５９３，  ４５−５５  （２００２）
【非特許文献６】Ｂａｃｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＢＣ，  ２７９，４８３１９−４８（２００４）
【非特許文献７】Ｈｉｒａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９，  ２５４８−２５５６，  （２０００）
【非特許文献８】Ｏ．  Ｆｅｄｏｒｏｖ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＮＡＳ  １０４（５１），  ２０５２３−２８  （Ｄｅｃ．  ２００７）
【非特許文献９】Ｇａｉｄａｎｏ  ＆  Ｄａｌｌａ  Ｆａｖｅｒ，  １９９３
【非特許文献１０】２００８  ＡＡＣＲ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，  Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ．４９７４
【非特許文献１１】Ｌｉ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ６６（１３），  ６７４１−４７  （２００６）
【発明の概要】
【００２５】
発明の開示
本発明は、一部として、非限定的に、細胞増殖を阻害すること、血管新生を阻害すること、およびプロテインキナーゼ活性を調節することをはじめとする、特定の生物活性を有する化学的化合物を提供する。これらの分子は、カゼインキナーゼ２（ＣＫ２）活性および／またはＰｉｍキナーゼ活性を調節し、したがって、例えば非限定的に、ＡＴＰからタンパク質またはペプチド基質へのγ−リン酸転移を阻害すること、血管新生を阻害すること、細胞増殖を阻害すること、および細胞のアポトーシスを誘導することをはじめとする生物機能に影響を及ぼす。本発明は、一部として、新規な化学的化合物およびその類似体を製造する方法、ならびにこれらの化合物を使用する方法も提供する。また先に記載された分子を、他の治療薬をはじめとする他の物質と共に含む組成物、およびそのような組成物を使用する方法も提供される。
【００２６】
本発明の化合物は、一般式（Ｉ）を有し：
2012527479.tif 000003
式中、Ｚ１−Ｚ４を含む二環系は、芳香族であり；
Ｚ１およびＺ２の一方は、Ｃであり、Ｚ１およびＺ２の他方は、Ｎであり；
Ｚ３およびＺ４は、独立して、ＣＲ５またはＮであり；
ここでＲ５は、ＨまたはＲ１であり得；
Ｒ１は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリール、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８であり、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈおよび置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキルから選択され；
Ｘは、ＮＲ６、Ｏ、またはＳであり、ここでＲ６は、Ｈであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｙは、ＯまたはＳまたはＮＲ１０であり；
Ｒ１０は、Ｈ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８から選択され、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｗは、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、または−ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ７、Ｓ（Ｏ）ｎＲ７、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、またはＣＲ７Ｒ８Ｒ９であり、
ここでｎは、０、１または２であり、
Ｒ７およびＲ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択され；
ここでＮＲ７Ｒ８中のＲ７およびＲ８はＮと一緒になって、任意に置換されていてもよく、かつ環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、５〜８員環を形成していてもよい。
【００２７】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容しうる塩も包含する。
【００２８】
特定の実施形態において、本発明は、式Ｉａまたは式Ｉｂの化合物、およびこれらの化合物の薬学的に許容しうる塩を提供し：
2012527479.tif 000004
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、ＸおよびＹは、式Ｉに対して定義されたものと同様であり、Ａｒは、置換されていてもよいアリールである。
【００２９】
本発明は、そのような化合物に加え、１種以上の薬学的に許容しうる担体または賦形剤を含有する医薬組成物、ならびに本明細書に更に記載される特定の状態を治療するためにこれらの化合物および組成物を使用する方法も提供する。
【００３０】
同じく本明細書には、本明細書に記載される式Ｉの化合物、ならびに少なくとも１種の薬学的に許容しうる担体もしくは賦形剤、または２種以上の薬学的に許容しうる担体および／もしくは賦形剤を含む医薬組成物が提供される。式Ｉの化合物が、式Ｉａおよび式Ｉｂの化合物を包含しうることを理解されたい。これらの化合物の少なくとも１種を含む医薬組成物を、本明細書に記載されたものなどの治療法に活用することができる。
【００３１】
式Ｉの化合物は、特定のキナーゼタンパク質と結合するが、それが、それらの医薬活性の原理であると考えられる。特定の実施形態において、そのタンパク質は、ＣＫ２タンパク質、例えば、配列番号１、２もしくは３のアミノ酸配列を含むＣＫ２タンパク質など、またはその実質的に同一の変種である。
配列番号１（ＮＰ＿００１８８６；カゼインキナーゼＩＩα１サブユニットアイソフォームａ［ヒト］）
2012527479.tif 000005
配列番号２（ＮＰ＿８０８２２７；カゼインキナーゼＩＩα１サブユニットアイソフォームａ［ヒト］）
2012527479.tif 000006
配列番号３（ＮＰ＿８０８２２８；カゼインキナーゼＩＩα１サブユニットアイソフォームｂ［ヒト］）
2012527479.tif 000007
【００３２】
これらの実質的に同一の変種は、これらの一種と少なくとも９０％の配列相同性を有し、好ましくは少なくとも９０％の配列同一性を有し、そして典型的なアッセイ条件下で、少なくとも５０％の、特異的配列のインビトロキナーゼ活性レベルを有するタンパク質を包含する。
【００３３】
本発明は、インビトロまたはエクスビボのいずれかで、ＣＫ２タンパク質の活性を調節する方法を包含する。適切な方法は、タンパク質を含む系を、そのタンパク質の活性を調節するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物と接触させることを含む。特定の実施形態において、タンパク質の活性が阻害され、時にはタンパク質は、例えば、配列番号１、２もしくは３のアミノ酸配列を含むＣＫ２タンパク質、またはそれの実質的に同一の変種である。特定の実施形態において、ＣＫ２は、細胞内または組織内に存在し、他の実施形態において、それは、無細胞系に存在してもよい。
【００３４】
同じく、タンパク質を含む系を、そのタンパク質の活性を調節するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物と接触させることを含む、Ｐｉｍタンパク質の活性を調節する方法が提供される。特定の実施形態において、その系は、細胞であり、他の実施形態において、その系は、無細胞の系である。特定の実施形態において、Ｐｉｍタンパク質の活性が阻害される。
【００３５】
細胞を、その細胞の増殖を阻害するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物と接触させることを含む、細胞増殖を阻害する方法も提供される。時には細胞は、例えば、癌細胞株（例えば、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肺癌、造血器癌、結腸直腸癌、皮膚癌、卵巣癌の細胞株）などの細胞株である。幾つかの実施形態において、その癌細胞株は、乳癌、前立腺癌または膵臓癌の細胞株である。細胞は、時には組織内に存在し、対象の体内に存在してもよく、時々は腫瘍内に存在し、時には対象の腫瘍内に存在する。特定の実施形態において、その方法は、細胞アポトーシスを誘導することを更に含む。細胞は、時には黄斑変性を有する対象からのものである。
【００３６】
同じく、本明細書に記載された化合物を、それを必要とする対象に、細胞増殖状態を治療するのに効果的な量で投与することを含む、異常な細胞増殖に関係する状態を治療する方法が提供される。特定の実施形態において、その細胞増殖状態は、腫瘍関連の癌である。その癌は、時には乳房、前立腺、膵臓、肺、結腸直腸、皮膚、または卵巣の癌である。幾つかの実施形態において、その細胞増殖状態は、非腫瘍癌、例えば白血病およびリンパ腫をはじめとする造血器癌などである。細胞増殖状態は、幾つかの実施形態において、黄斑変性である。
【００３７】
本発明は、癌または炎症性障害を治療するのに有用な治療薬の治療上効果的な量を、対象に投与すること、ならびにその治療薬の所望の効果を増強するのに効果的な量のＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子を、対象に投与することを含む、そのような治療を必要とする対象における癌または炎症性障害を治療する方法も包含する。特定の実施形態において、ＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子は、式ＩａおよびＩｂの化合物を含む式Ｉの化合物、または薬学的に許容しうるその塩である。特定の実施形態において、ＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子により増強される治療薬の所望の効果は、少なくとも一つの型の細胞におけるアポトーシスの増加である。
【００３８】
幾つかの実施形態において、治療薬、ならびにＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子が、実質的に同時に投与される。治療薬、ならびにＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子は、時には対象により同時に用いられる。治療薬、ならびにＣＫ２および／またはＰｉｍを阻害する分子は、特定の実施形態において、医薬組成物中に混合することができ、他の実施形態において、別個の組成物として投与される。
【００３９】
同じく、本明細書に記載された化合物および単離されたタンパク質を含む、表題の組成物が提供される。そのタンパク質は、時にはＣＫ２タンパク質、例えば、配列番号１、２もしくは３のアミノ酸配列を含むＣＫ２タンパク質など、またはその実質的に同一の変種である。幾つかの実施形態において、そのタンパク質は、Ｐｉｍタンパク質である。特定の組成物は、本明細書に記載された化合物を、細胞と共に含む。その細胞は、癌細胞株などの細胞株であってもよい。後者の実施形態において、癌細胞株は、時には乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肺癌、造血器癌、結腸直腸癌、皮膚癌、卵巣癌の細胞株である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本発明のこれらおよび他の実施形態を、以下の説明に記載する。
【００４１】
本発明を実施する様式
式Ｉの化合物は、非限定的に、細胞増殖を阻害すること、血管新生を減少させること、炎症反応および疼痛を防御または減少させること、ならびに特定の免疫応答を調節することをはじめとする生物活性を発揮する。この式の化合物は、本明細書内のデータに実証される通り、ＣＫ２活性、Ｐｉｍ活性またはその両方を調節することができる。それゆえそのような化合物は、当業者により、多数の適用例に活用することができる。例えば、本明細書に記載された化合物を、例えば、（ｉ）プロテインキナーゼ活性（例えば、ＣＫ２活性）の調節、（ｉｉ）Ｐｉｍ活性（例えば、ＰＩＭ−１活性）の調節、（ｉｉｉ）細胞増殖の調節、（ｉｖ）アポトーシスの調節、および（ｖ）細胞増殖関連障害の治療（例えば、単独投与または別の分子と併用投与）、に用いることができる。
【００４２】
幾つかの例において、本発明の化合物は、キラル中心を１個以上含む。本発明は、単離された立体異性体形態のそれぞれ、およびラセミ混合物をはじめとする、様々な度合いのキラル純度の立体異性体混合物を含む。環ではなく二重結合のＥ異性体およびＺ異性体の両方を含んで形成されうる、様々なジアステレオマーおよび互変異性体も包含する。本発明の化合物は、１つ以上の互変異性体形態で存在してもよく、本明細書には便宜上１種の互変異性体を描写しているが、示された形態の他の互変異性体も包含されることを理解されたい。
【００４３】
単なる実施例として、式Ｉの化合物は、基Ｒ４が結合した、炭素−炭素二重結合を有する。その式を描写することで、それがＥ異性体もしくはＺ異性体、またはその両方を表しうることを示している。他の構造は、特定の異性体を描写するように見える場合もあるが、それは単に簡便さのためであり、本発明を、描写されたオレフィン異性体に限定する意図はない。
【００４４】
本明細書で用いられる用語「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」は、直鎖、分枝鎖および環状の一価ヒドロカルビルラジカル、ならびにこれらの組合せを包含し、それらが非置換である場合には、ＣおよびＨのみを含む。例としては、メチル、エチル、イソブチル、シクロヘキシル、シクロペンチルエチル、２−プロペニル、３−ブチニルなどが挙げられる。そのような基それぞれにおける炭素原子の総数は、時には本明細書に記載された通りであり、例えば、その基が、炭素原子を最大１０個含むことができる場合には、それは、１−１０ＣまたはＣ１−Ｃ１０またはＣ１−１０と表わすことができる。ヘテロ原子（典型的にはＮ、ＯおよびＳ）をヘテロアルキル基内のように炭素原子と置換することができる場合、例えば、基を説明する数は、例えばＣ１−Ｃ６と記載されるが、基内の炭素原子の数と、記載される環または鎖の主鎖の炭素原子の置換として含まれるそのようなヘテロ原子の数との合計を表す。
【００４５】
典型的には、本発明のアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基は、１−１０Ｃ（アルキル）または２−１０Ｃ（アルケニルまたはアルキニル）を含む。好ましくはそれらは、１−８Ｃ（アルキル）または２−８Ｃ（アルケニルまたはアルキニル）を含む。時にはそれらは、１−４Ｃ（アルキル）または２−４Ｃ（アルケニルまたはアルキニル）を含む。単一の基が、多重結合の型を１を超えて、または多重結合を１を超えて含むことができ、そのような基は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む場合には、用語「アルケニル」の定義に含まれ、それらが少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む場合には、用語「アルキニル」に含まれる。
【００４６】
アルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、多くの場合、そのような置換が化学的に意味を成す程度に、置換されていてもよい。典型的な置換基としては、非限定的に、ハロ、＝Ｏ、＝Ｎ−ＣＮ、＝Ｎ−ＯＲ、＝ＮＲ、ＯＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＯ２Ｒ、ＳＯ２ＮＲ２、ＮＲＳＯ２Ｒ、ＮＲＣＯＮＲ２、ＮＲＣＳＮＲ２、ＮＲＣ（＝ＮＲ）ＮＲ２、ＮＲＣＯＯＲ、ＮＲＣＯＲ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲ２、ＯＯＣＲ、ＣＯＲ、およびＮＯ２が挙げられ、ここで各Ｒは、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アシル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアシル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキニル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクリルアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、またはＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールであり、各Ｒは、ハロ、＝Ｏ、＝Ｎ−ＣＮ、＝Ｎ−ＯＲ'、＝ＮＲ'、ＯＲ'、ＮＲ'２、ＳＲ'、ＳＯ２Ｒ'、ＳＯ２ＮＲ'２、ＮＲ'ＳＯ２Ｒ'、ＮＲ'ＣＯＮＲ'２、ＮＲ'ＣＳＮＲ'２、ＮＲ'Ｃ（＝ＮＲ'）ＮＲ'２、ＮＲ'ＣＯＯＲ'、ＮＲ'ＣＯＲ'、ＣＮ、Ｃ≡ＣＲ'、ＣＯＯＲ'、ＣＯＮＲ'２、ＯＯＣＲ'、ＣＯＲ'、およびＮＯ２で置換されていてもよく、ここで各Ｒ'は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アシル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアシル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールである。アルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、Ｃ１−Ｃ８アシル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアシル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、またはＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールにより置換されていてもよく、そのそれぞれは、特定の基に適した置換基により置換されていてもよい。置換基が、同一原子または隣接する原子上に２個のＲまたはＲ'基を含む場合（例えば、−ＮＲ２、または−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｒ）、２個のＲまたはＲ'基は、任意に、それらが結合する置換基の中の原子と一緒になって、５〜８個の環員を有する環を形成していてもよく、それが、ＲまたはＲ'そのものに許容される通り置換されていてもよく、そして環員として更なるヘテロ原子（Ｎ、ＯまたはＳ）を含んでいてもよい。
【００４７】
本明細書で用いられる「置換されていてもよい」は、記載されている特定の基が、非水素置換基を全く有していなくてもよいこと、またはその基が、１個以上の非水素置換基を有していてもよいことを示す。他に明記されていなければ、存在しうるそのような置換基の総数は、記載されている基の非置換形態に存在するＨ原子の数と等しい。任意の置換基が、カルボニル酸素（＝Ｏ）のように二重結合を介して結合している場合、その基は、２つの利用可能な原子価を占めるため、含まれうる置換基の総数は、利用可能な原子価の数に従って減少する。
【００４８】
「アセチレン」置換基は、置換されていてもよい２−１０Ｃアルキニル基であり、式−Ｃ≡Ｃ−Ｒａで示され、ここでＲａは、ＨまたはＣ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキニル、Ｃ１−Ｃ８アシル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアシル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アリールアルキル、またはＣ６−Ｃ１２ヘテロアリールアルキルであり、
各Ｒａ基は、ハロ、＝Ｏ、＝Ｎ−ＣＮ、＝Ｎ−ＯＲ'、＝ＮＲ'、ＯＲ'、ＮＲ'２、ＳＲ'、ＳＯ２Ｒ'、ＳＯ２ＮＲ'２、ＮＲ'ＳＯ２Ｒ'、ＮＲ'ＣＯＮＲ'２、ＮＲ'ＣＳＮＲ'２、ＮＲ'Ｃ（＝ＮＲ'）ＮＲ'２、ＮＲ'ＣＯＯＲ'、ＮＲ'ＣＯＲ'、ＣＮ、ＣＯＯＲ'、ＣＯＮＲ'２、ＯＯＣＲ'、ＣＯＲ'、およびＮＯ２から選択される置換基１個以上で置換されていてもよく、ここで各Ｒ'は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アシル、Ｃ２−Ｃ６ヘテロアシル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アリールアルキル、またはＣ６−Ｃ１２ヘテロアリールアルキルであり、そのそれぞれは、ハロ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アシル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアシル、ヒドロキシ、アミノ、および＝Ｏから選択される基１個以上で置換されていてもよく、ここで２個のＲ'は、結合して、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子最大３個を含んでいてもよい３〜７員環を形成していてもよい。幾つかの実施形態において、−Ｃ≡Ｃ−ＲａのＲａは、ＨまたはＭｅである。
【００４９】
「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルケニル」、および「ヘテロアルキニル」などは、対応するヒドロカルビル（アルキル、アルケニルおよびアルキニル）基と同様に定義されるが、「ヘテロ」の用語は、主鎖残基内にＯ、ＳもしくはＮヘテロ原子、またはその組合せを１〜３個含む基を指し、したがって、対応するアルキル、アルケニル、またはアルキニル基の少なくとも１個の炭素原子は、特定のヘテロ原子１個により置換されて、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、またはヘテロアルキニル基を形成している。アルキル、アルケニルおよびアルキニル基のヘテロ形態に典型的で、かつ好ましい大きさは、一般に、対応するヒドロカルビル基の場合と同様であり、ヘテロ形態に存在しうる置換基は、ヒドロカルビル基に関して先に記載されたものと同様である。オキソ基がニトロまたはスルホニル基内と同様にＮまたはＳ上に存在する場合を除き、化学的安定性の理由から、他に明記されない限り、そのような基が隣接するヘテロ原子を２個を超えて含まないことを理解されたい。
【００５０】
本明細書で用いられる「アルキル」が、シクロアルキルおよびシクロアルキルアルキル基を含む一方、用語「シクロアルキル」は、本明細書では、環炭素原子を介して結合している炭素環非芳香族基を説明するために用いてもよく、「シクロアルキルアルキル」は、アルキルリンカーを介して分子に結合している炭素環非芳香族基を説明するために用いてもよい。同様に、「ヘテロシクリル」は、環員として少なくとも１個のヘテロ原子を含み、ＣまたはＮとなりうる環原子を介して分子に結合する、非芳香族環状基を説明するために用いてもよく、「ヘテロシクリルアルキル」は、リンカーを介して別の分子に結合するような基を説明するために用いてもよい。シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキル基に適した大きさおよび置換基は、アルキル基に関して先に記載されたものと同様である。本明細書で用いられるこれらの用語は、環が芳香族でない限り、二重結合を１または２個含む環も包含する。
【００５１】
本明細書で用いられる「アシル」は、カルボニル炭素原子の利用可能な原子価の位置２個のうちの一方に結合されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアリールアルキルラジカルを含む基を包含し、ヘテロアシルは、カルボニル炭素以外の炭素の少なくとも１個が、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子により置換されている、対応する基を指す。したがってヘテロアシルとしては、例えば、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲおよび−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、ならびに−Ｃ（＝Ｏ)−ヘテロアリールが挙げられる。
【００５２】
アシルおよびヘテロアシル基は、カルボニル炭素原子の空の原子価を介して結合した任意の基または分子に結合している。典型的にはそれらは、ホルミル、アセチル、ピバロイル、およびベンジルをはじめとするＣ１−Ｃ８アシル基、ならびにメトキシアセチル、エトキシアセチル、および４−ピリジノイルをはじめとするＣ２−Ｃ８ヘテロアシル基である。ヒドロカルビル基、アリール基、およびアシルまたはヘテロアシル基を含むような基のヘテロ形態は、アシルまたはヘテロアシル基の対応する成分それぞれに関して一般に適した置換基と同様の、本明細書に記載された置換基で置換されていてもよい。
【００５３】
「芳香族」部分または「アリール」部分は、芳香族性の周知の特徴を有する単環または縮合二環部分を指し、例としては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。同様に「ヘテロ芳香族」および「ヘテロアリール」は、環員としてＯ、ＳおよびＮから選択されるヘテロ原子を１個以上含む、そのような単環または縮合二環系を指す。ヘテロ原子を含むことで、５員環および６員環内の芳香族性が可能になる。典型的なヘテロ芳香族系としては、Ｃ５−Ｃ６芳香族基、例えば、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、チエニル、フラニル、ピロリル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、およびイミダゾリルが挙げられ、縮合された二環部分は、これらの単環基の一つをフェニル環または任意のヘテロ芳香族単環基と縮合することにより形成されて、Ｃ８−Ｃ１０二環基、例えば、インドリル、ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、イソキノリル、キノリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、ピラゾロピリジル、キナゾリニル、キノキサリニル、シンノリニルなどを形成している。環系全体の電子分布に関して芳香族の特徴を有する単環または縮合環二環系は、この定義に含まれる。それは、少なくとも、分子の残り部分に直接結合した環が、芳香族性の特徴を有する二環基も包含する。典型的には、その環系は、環員原子を５〜１２個含む。好ましくは、単環式ヘテロアリールは、環員を５〜６個含み、二環式ヘテロアリールは、環員を８〜１０個含む。
【００５４】
アリールおよびヘテロアリール部分は、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ５−Ｃ１２アリール、Ｃ１−Ｃ８アシル、およびこれらのヘテロ形態をはじめとする様々な置換基で置換されていてもよく、そのそれぞれが、それ自体、更に置換されていてもよく；アリールおよびヘテロアリール部分に対する他の置換基としては、ハロ、ＯＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＯ２Ｒ、ＳＯ２ＮＲ２、ＮＲＳＯ２Ｒ、ＮＲＣＯＮＲ２、ＮＲＣＳＮＲ２、ＮＲＣ（＝ＮＲ）ＮＲ２、ＮＲＣＯＯＲ、ＮＲＣＯＲ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲ２、ＯＯＣＲ、ＣＯＲ、およびＮＯ２が挙げられ、ここで各Ｒは、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロアルキニル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクリルアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アリールアルキル、またはＣ６−Ｃ１２ヘテロアリールアルキルであり、各Ｒは、アルキル基に関して先に記載された通り置換されていてもよい。アリールまたはヘテロアリール基上の置換基は、もちろん、そのような置換基の各型に適する通り、またはその置換基上の各成分に適する通り、本明細書に記載された基で更に置換されていてもよい。したがって、例えばアリールアルキル置換基は、アリール部分が、アリール基にとって典型的となるよう、本明細書に記載された置換基で置換されていてもよく、それは、アルキル部分が、アルキル基にとって典型的となる、または適する通り、本明細書に記載された置換基で更に置換されていてもよい。置換基が、同一原子または隣接する原子上に２個のＲまたはＲ'基を含む場合（例えば、−ＮＲ２または−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）Ｒ）、２個のＲまたはＲ'基は、任意に、結合する置換基内の原子と一緒になって、５〜８個の環員を有する環を形成していてもよく、それがＲまたはＲ'自体に許容される通り置換されていてもよく、そして環員として更なるヘテロ原子（Ｎ、ＯまたはＳ）を含むことができる。
【００５５】
同様に、「アリールアルキル」および「ヘテロアリールアルキル」は、置換または非置換であり、飽和または不飽和の環式または非環式リンカーをはじめとする、アルキレンなどの連結基を介して結合点に結合した芳香族およびヘテロ芳香族環系を指す。典型的にはリンカーは、Ｃ１−Ｃ８アルキルまたはそのヘテロ形態である。これらのリンカーは、カルボニル基を含んでいてもよく、したがってそれらに置換基をアシルまたはヘテロアシル部分として提供させることができる。アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基内のアリールまたはヘテロアリール環は、アリール基に関して先に記載されたものと同様の置換基で置換されていてもよい。好ましくは、アリールアルキル基は、アリール基に関して先に定義された基で置換されていてもよいフェニル環と、非置換であるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル基もしくはヘテロアルキル基１個もしくは２個で置換されたＣ１−Ｃ４アルキレンとを含み、ここでアルキルまたはヘテロアルキル基は、任意に環化して、シクロプロパン、ジオキソラン、またはオキサシクロペンタンなどの環を形成していてもよい。同様に、ヘテロアリールアルキル基は、好ましくは、アリール基に典型的な置換基として先に記載された基で置換されていてもよいＣ５−Ｃ６単環式ヘテロアリール基と、非置換であるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル基もしくはヘテロアルキル基１個もしくは２個で置換されたＣ１−Ｃ４アルキレンとを含むか、あるいは、置換されていてもよいフェニル環またはＣ５−Ｃ６単環ヘテロアリールと、非置換であるか、またはＣ１−Ｃ４アルキルもしくはヘテロアルキル基１個もしくは２個で置換されたＣ１−Ｃ４ヘテロアルキレンとを含み、ここでアルキルまたはヘテロアルキル基は、任意に環化して、シクロプロパン、ジオキソラン、またはオキサシクロペンタンなどの環を形成していてもよい。
【００５６】
アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基が、置換されていてもよい、と記載されている場合、置換基は、基のアルキルまたはヘテロアルキル部分と、アリールまたはヘテロアリール部分のいずれか一方に存在してもよい。アルキルまたはヘテロアルキル部分に存在していてもよい置換基は、一般にアルキル基に関して先に記載されたものと同様であり；アリールまたはヘテロアリール部分に存在していてもよい置換基は、一般にアリール基に関して先に記載されたものと同様である。
【００５７】
本明細書で用いられる「アリールアルキル」基は、それらが非置換であるならばヒドロカルビル基であり、環内およびアルキレンまたは同様のリンカー内の炭素原子の総数が記載される。したがってベンジル基は、Ｃ７−アリールアルキル基であり、フェニルエチルは、Ｃ８−アリールアルキルである。
【００５８】
先に記載された「ヘテロアリールアルキル」は、連結基を介して結合したアリール基を含む部分を指し、アリール部分の少なくとも１個の環原子または連結基内の一原子が、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子である「アリールアルキル」とは異なる。ヘテロアリールアルキル基は、組み合わせた環およびリンカー内の原子の総数に従って本明細書に記載されており、それらとしては、ヘテロアルキルリンカーを介して連結したアリール基；アルキレンなどのヒドロカルビルリンカーを介して連結したヘテロアリール基；およびヘテロアルキルリンカーを介して連結したヘテロアリール基が挙げられる。したがって例えば、Ｃ７−ヘテロアリールアルキルとしては、ピリジルメチル、フェノキシ、およびＮ−ピロリルメトキシが挙げられる。
【００５９】
本明細書で用いられる「アルキレン」は、二価ヒドロカルビル基を指すが、それは二価であるため、他の基２個を同時に連結することができる。典型的にはそれは、−（ＣＨ２）ｎ−（式中、ｎは、１〜８であり、好ましくはｎは、１〜４である）を指すが、明記される場合、アルキレンは、他の基により置換されていてもよく、他の長さものであってもよく、空の原子価が、鎖の反対側の末端に存在する必要はない。したがって−ＣＨ（Ｍｅ）−および−Ｃ（Ｍｅ）２−は、シクロプロパン−１，１−ジイルなどの環状基に可能な通り、アルキレンと呼ぶ場合もある。アルキレン基が置換されている場合、置換基は、本明細書に記載されたアルキル基上に典型的に存在するものを包含する。
【００６０】
一般に、置換基に含まれる任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、もしくはアリール、もしくはアリールアルキル基、またはこれらの基の一種の任意のヘテロ形態は、それ自体が更なる置換基により、任意に置換されていてもよい。これらの置換基の性質は、置換基が他に記載されていなければ、主な置換基そのものに関して列挙されたものと同様である。したがって、例えばＲ７の実施形態がアルキルである場合、Ｒ７が化学的道理に適い、そしてアルキル自体に提供された寸法の限界を逸脱しないならば、このアルキルが、Ｒ７の実施形態に列挙された残りの置換基で任意に置換されていてもよく、例えば、アルキルまたはアルケニルにより置換されたアルキルは、これらの実施形態に関する炭素原子の上限を簡単に超えることになり、包含されない。しかし、アリール、アミノ、アルコキシ、＝Ｏなどにより置換されたアルキルは、本発明の範囲に含まれ、これらの置換基の原子は、記載されているアルキル、アルケニルなどの基を説明するのに用いられた数にカウントされない。置換基の数が明記されていなければ、そのようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、またはアリール基はそれぞれ、利用可能な原子価に従って複数の置換基で置換されていてもよく；具体的には、これらの基のいずれも、例えば、利用可能な原子価のいずれかまたは全ての箇所で、フッ素原子により置換されていてもよい。
【００６１】
本明細書で用いられる「ヘテロ形態」は、設計された炭素環基の少なくとも１個の炭素原子が、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子により置換されている、アルキル、アリール、またはアシルなどの基の誘導体を指す。したがって、アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、およびアリールアルキルのヘテロ形態は、それぞれヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアシル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルである。オキソ基がＮまたはＳに結合して、ニトロまたはスルホニル基を形成している場合を除き、通常はＮ、ＯまたはＳのうちの２種を超える原子が、連続して結合していないことを理解されたい。
【００６２】
本明細書で用いられる「ハロ」としては、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードが挙げられる。フルオロおよびクロロが、多くの場合好ましい。
【００６３】
本明細書で用いられる「アミノ」は、ＮＨ２を指すが、アミノが「置換されている」または「置換されていてもよい」と記載されている場合、その用語は、ＮＲ'Ｒ''を包含し、ここで各Ｒ'およびＲ''は、独立してＨであるか、あるいはアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、もしくはアリールアルキル基、またはこれらの基のうちの一種のヘテロ形態であり、アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、もしくはアリールアルキル基、またはこれらの基のうちの一種のヘテロ形態はそれぞれ、対応する基に適した、本明細書に記載された置換基で置換されていてもよい。その用語は、Ｒ'およびＲ''が一緒に連結して３〜８員環を形成している形態も包含し、飽和、不飽和もしくは芳香族であってもよく、環員としてＮ、ＯおよびＳから独立して選択されるヘテロ原子を１〜３個含み、アルキル基に適する通り、記載された置換基で置換されていてもよい、またはＮＲ'Ｒ''が、芳香族基である場合には、ヘテロアリール基に典型的となるよう、記載された置換基で置換されていてもよい形態も包含する。
【００６４】
本明細書で用いられる用語「炭素環」または「炭素環式」は、環内に炭素原子のみを含む環状化合物を指すが、用語「複素環」または「複素環式」は、ヘテロ原子を含む環を指す。炭素環および複素環構造は、単環系、二環系または多環系を有する化合物を包含する。
【００６５】
本明細書で用いられる用語「ヘテロ原子」は、窒素、酸素または硫黄など、炭素または水素ではない任意の原子を指す。それが鎖または環の主鎖または骨格の一部である場合、ヘテロ原子は、少なくとも二価でなければならず、典型的にはＮ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択される。
【００６６】
複素環化合物の実例としては、非限定的に、テトラヒドロフラン、１，３−ジオキソラン、２，３−ジヒドロフラン、ピラン、テトラヒドロピラン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、１，３−ジヒドロイソベンゾフラン、イソキサゾール、４，５−ジヒドロイソキサゾール、ピペリジン、ピロリジン、ピロリジン−２−オン、ピロール、ピリジン、ピリミジン、オクタヒドロ−ピロロ［３，４ｂ］ピリジン、ピペラジン、ピラジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾール、イミダゾリジン２，４−ジオン、１，３−ジヒドロベンゾイミダゾール−２−オン、インドール、チアゾール、ベンゾチアゾール、チアジアゾール、チオフェン、テトラヒドロチオフェン、１，１−ジオキシド、ジアゼピン、トリアゾール、グアニジン、ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン、２，５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン、２，３，４，４ａ，９，９ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−β−カルボリン、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロピラン、ジオキサン、ラクトン、アジリジン、アゼチジン、ピペリジン、ラクタムが挙げられ、ヘテロアリールを包含してもよい。ヘテロアリールの他の実例としては、非限定的に、フラン、ピロール、ピリジン、ピリミジン、イミダゾール、ベンゾイミダゾールおよびトリアゾールが挙げられる。
【００６７】
本発明は、式Ｉの化合物、およびこれらの化合物の薬学的に許容しうる塩を提供し：
2012527479.tif 000008
式中、Ｚ１−Ｚ４を含む二環系は、芳香族であり；
Ｚ１およびＺ２の一方は、Ｃであり、Ｚ１およびＺ２の他方は、Ｎであり；
Ｚ３およびＺ４は、独立して、ＣＲ５またはＮであり；
ここでＲ５は、ＨまたはＲ１であり得；
Ｒ１は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリール、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８であり、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈおよび置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキルから選択され；
Ｘは、ＮＲ６、Ｏ、またはＳであり、ここでＲ６は、Ｈであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｙは、ＯまたはＳまたはＮＲ１０であり；
Ｒ１０は、Ｈ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８から選択され、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｗは、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、または−ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ７、Ｓ（Ｏ）ｎＲ７、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、またはＣＲ７Ｒ８Ｒ９であり、
ここでｎは、０、１または２であり、
Ｒ７およびＲ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択され；
ここでＮＲ７Ｒ８中のＲ７およびＲ８はＮと一緒になって、任意に置換されていてもよく、かつ環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、５〜８員環を形成していてもよい。
【００６８】
本発明の化合物は、２個以上の窒素原子を含む二環式芳香族複素環系を特徴し、窒素原子１個が示されており、Ｚ１およびＺ２の一方もＮである。該当する特定の実施形態において、Ｚ１は、Ｎであり、Ｚ２は、Ｃであるが；別の実施形態において、Ｚ１は、Ｃであり、Ｚ２は、Ｎである。
【００６９】
任意に、Ｚ３および／またはＺ４は、Ｎであってもよい。特定の実施形態において、それらは、両者ともＣであり；他の実施形態において、Ｚ３は、Ｎであり、Ｚ４は、Ｃであり；他の実施形態において、Ｚ４は、Ｎであり、Ｚ３は、Ｃであり、他の実施形態において、Ｚ３およびＺ４は、両者ともＮである。Ｚ３またはＺ４が、Ｃである場合、それは、ＣＨまたはＣＲ１であってもよく；そのような化合物の好ましい実施形態において、Ｚ３および／またはＺ４は、ＣＨである。
【００７０】
加えて、式Ｉの化合物は、二環基に連結した別の複素環基を含み、その更なる複素環基は、環内のアミド結合に加え、更なるカルボニルまたはチオカルボニル（Ｃ＝ＯまたはＣ＝Ｓ）を含む。更なる複素環基は、二環基の５員環に結合した環外メチレン基（ｓｐ２炭素）を介して二環基に連結する。
【００７１】
この更なる複素環基は、Ｘを含み、それはＮＲ６、ＯまたはＳとなりうる。特定の実施形態において、それは、ＮＲ６であり、Ｒ６は、多くの場合Ｈまたは小さなアルキル基、例えば、Ｍｅである。好ましくは、ＮＲ６は、ＮＨである。他の実施形態において、Ｘは、Ｏである。特定の実施形態において、Ｘは、Ｓである。
【００７２】
この更なる複素環基は、＝Ｙで置換されており；幾つかの実施形態において、Ｙは、Ｏであり、幾つかの実施形態において、Ｙは、Ｓである。他の実施形態において、Ｙは、ＮＲ１０（式中、Ｒ１０は、式Ｉと同義である）であり、幾つかの実施形態において、Ｒ１０は、ＨおよびＣ１−Ｃ４アルキルから選択される。
【００７３】
更なる複素環基は、ＮＲ３も含んでおり、この基内のＲ３は、Ｈまたは小さなアルキル、例えば、Ｍｅであってもよい。幾つかの実施形態において、それは、置換されたアルキル基、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ベンゾイルなどである。好ましくは、Ｒ３は、Ｈである。
【００７４】
２個の複素環基に結合したｓｐ２炭素は、ＣＲ４であって、式中、Ｒ４は、Ｈまたは小さなアルキルであってもよく；好ましい実施形態において、それは、Ｈである。
【００７５】
二環基の５員環は、Ｒ２により置換されている。これは、Ｈ，ハロ、または小さなアルキル、例えば、Ｍｅ、Ｅｔ、ＣＦ３、−ＣＨ２ＯＭｅ、ビニル、またはアセチレンであってもよい。好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈである。
【００７６】
二環基の６員環は、Ｒ１により置換されている。これは、Ｈ、ハロ、または置換されていてもよいアルキル、アリール、アミンもしくはアルコキシ基をはじめとする様々な基であってもよい。幾つかの実施形態において、それは、Ｈ、ハロ、または小さなアルキル、例えば、Ｍｅ、Ｅｔ、ＣＦ３、−ＣＨ２ＯＭｅ、ビニル、またはアセチレンである。多くの実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキルまたはＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいフェニルまたはフェニルメチル、ＣＮ、およびハロから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、ハロ、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、ＣＦ３またはＣＮである。特定の実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｍｅ、ＯＭｅ、およびＣＦ３から選択され、好ましい実施形態において、Ｒ１は、Ｈである。
【００７７】
二環基の６員環は、基Ｗによっても置換されている。これは、所望のプロテインキナーゼ調節活性を保持しながら、様々な異なる特徴を表し得る。特定の実施形態において、Ｗは、多くの場合、フェニル、ピリジル、ピリミジニル、およびピラジニルから選択される、置換されていてもよいアリールまたはヘテロアリール基である。特に、それは、置換されていてもよいフェニル基であってもよい。特別な実施形態において、Ｗは、最大２個の置換基で置換されたフェニルであり；特定の実施形態において、そのフェニル基は、フェニルが二環基に結合している位置に対してオルト位またはメタ位で、Ｈ以外の基、例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｍｅ、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＭｅ、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯＭｅ、の少なくとも１個で置換されている。
【００７８】
Ｗは、芳香族環、好ましくは、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子を最大３個含むフェニル環または５〜６員ヘテロアリール環であってもよく、これらの芳香族環は、任意に置換されていてもよい。Ｗに関する好ましい芳香族環としては、置換されていてもよい、フェニルおよびチオフェニル（チエニル）が挙げられる。Ｗとなりうる置換されたフェニルの特別な実施形態としては、ハロフェニル、例えば、２−フルオロフェニルまたは３−フルオロフェニル、３−カルボキシフェニル、および３−（ＣＯＯＭｅ）−フェニルが挙げられる。適切なチエニル環としては、５−カルボキシチオフェン−２−イルのアミドが挙げられ、ここでアミドは、式ＮＨＲ''で示され、式中、Ｒ''は、Ｈ、または置換されていてもよいＣ１−Ｃ８アルキル基、例えば、エトキシエチルもしくはヒドロキシエチルもしくはヒドロキシプロピル、またはＣ３−Ｃ８シクロアルキルもしくはシクロアルキルアルキル基、例えば、シクロプロピルメチルである。
【００７９】
他の実施形態において、Ｗは、式−ＮＲ７Ｒ８で示される基であってもよく、式中、Ｒ７およびＲ８は、先に記載された通りである。典型的にはＲ７およびＲ８は、両者がともにＨになることはない。これらの実施形態の特定のものにおいて、Ｒ７は、Ｈ、Ｍｅ、またはアシル基、例えば、ホルミル、アセチル、メトキシアセチル、ベンゾイルもしくはトリフルオロアセチルであり；そのようなアシル化化合物は、キナーゼ阻害剤として活性であってもよく、またはそれらは、Ｒ７がＨである化合物のプロドラッグとして作用してもよい。これらの実施形態において、Ｒ８は、置換されていてもよいアルキル基、またはアリールもしくはヘテロアリール基、例えば、フェニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニルなどであってもよく、それは任意に置換されていてもよい。適切な、置換されていてもよいアルキル基としては、Ｃ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチル、エチル、ブチル、プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチル、フルオロエチル、メトキシエチル、イソブチルなどが挙げられる。特定の実施形態において、アリールまたはヘテロアリール基は、少なくとも１個の非Ｈ置換基により置換されている。Ｒ８は、Ｃ１−Ｃ４アルキレン鎖を介してＮＲ７に結合しているようなアリールまたはヘテロアリール基であってもよく、例えばそれは、イミダゾリルメチル、フェニルエチルなどであってもよい。特別な実施形態において、アリールは、フェニルであり、多くの場合、フェニルがＮＲ７Ｒ８のＮに結合している位置に対してメタまたはパラの位置で、少なくとも１個の非Ｈ置換基により置換されている。
【００８０】
このアリールまたはヘテロアリール基上の置換基は、ハロ、Ｃ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシ基、またはアリールもしくはヘテロアリール基、例えばイミダゾール、フェニル、ピリジル、ピラゾリル、チアゾリルなどであってもよく、あるいはそれらは、Ｃ５−Ｃ８複素環基、例えば、モルホリノ、ピペリジン、ピペラジンなどであってもよい。幾つかの実施形態において、Ｒ８により表わされるアリール環（例えば、フェニル）は、式Ｒ'２Ｎ−（ＣＨ２）ｐ−Ｌ−で示される基で置換されており、ここでｐは、０〜３であり、Ｌは、結合、Ｏ、ＳまたはＮＲ''（Ｒ''は、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルである）であり、各Ｒ'は、独立して、Ｈまたは置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルであり、２個のＲ'基は、任意に環化して、環員として更なるヘテロ原子（Ｎ、ＯまたはＳ）を含むことができる環を形成していてもよい。この種類のＲ８の代表的例としては、ジメチルアミノ；４−メチルピペラジニル；４−モルホリニル；４−モルホリノメチル；４−Ｍｅ−ピペラジノエチル；ジメチルアミノメチル；ジエチルアミノメチル；ジメチルアミノエトキシなどが挙げられる。
【００８１】
あるいは、Ｒ８は、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基、例えば、置換されていてもよいベンジル基であってもよい。
【００８２】
あるいは、Ｗは、Ｒ７およびＲ８がＮと一緒になって環を形成しているＮＲ７Ｒ８であってもよく、幾つかの実施形態において、任意に、更なる環員としてＮ、ＯまたはＳを含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環である。実例の環としては、ピペリジン、ピペラジン、ホモピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロリジン、ピロリジノンなどが挙げられる。
【００８３】
式Ｉの化合物において、ＸおよびＹは、それぞれヘテロ原子を表し、それらは、同一であっても、または異なっていてもよい。幾つかの実施形態において、Ｙは、Ｏであり、Ｘは、ＳまたはＮＨまたはＮＭｅまたはＯであり；幾つかの実施形態において、Ｙは、Ｓであり、Ｘは、ＳまたはＮＨまたはＮＭｅまたはＯである。Ｘが、ＮＲ６である場合、Ｒ６は、Ｈ、メチル、エチル、メトキシエチルなどであってもよく；好ましい実施形態において、Ｒ６は、Ｈであるか、またはそれは、Ｍｅである。
【００８４】
本発明の化合物は、以下に明記される特徴、またはこれらの特徴の任意の組合せを含む、式Ｉの化合物を包含する。
【００８５】
式Ｉの化合物の特定の実施形態において、Ｚ１は、Ｎであり、Ｚ２は、Ｃである。
【００８６】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｚ３は、Ｎである。
【００８７】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｚ４は、ＣＲ５である。
【００８８】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｘは、ＮＲ６またはＳである。
【００８９】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｒ２は、ＨまたはＭｅである。
【００９０】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、両者ともＨである。
【００９１】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、ハロ、ＯＭｅ、もしくはＣＦ３、または置換されていてもよいベンジルもしくはフェニル基である。幾つかの実施形態において、それは、Ｈ、Ｍｅ、ハロ、ＯＭｅ、およびＣＦ３から選択され；幾つかの好ましい実施形態において、Ｒ１は、Ｈである。
【００９２】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｙは、Ｏである。
【００９３】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｙは、Ｓである。
【００９４】
先に記載された化合物の特定の実施形態において、Ｗは、−ＮＨ−Ａであり、式中、Ａは、置換されていてもよいフェニルである。先の化合物の別の実施形態において、Ｗは、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである。この型の特別な実施形態において、Ｗは、置換されていてもよいフェニルであってもよい。
【００９５】
一態様において、本発明は、式Ｉａまたは式Ｉｂの化合物を提供し：
2012527479.tif 000009
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、ＸおよびＹは、式Ｉに関して先に定義された通りであり、かつＡｒは、置換されていてもよいアリールである。式Ｉｂの特定の実施形態において、Ａｒは、置換されていてもよいフェニルである。これらの実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、幾つかの例において、ＨおよびＭｅから選択され、好ましくはＲ３およびＲ４は両者とも、Ｈである。これらの実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、ＣＦ３、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、ＯＭｅ、またはハロであってもよく、好ましくはＨ、ＦまたはＣｌである。
【００９６】
本発明の化合物は、以下に明記される特徴、またはこれらの特徴の任意の組合せを含む、式ＩａまたはＩｂの化合物を包含する。
【００９７】
これらの化合物の特定の実施形態において、Ｘは、ＮＲ６またはＳである。
【００９８】
これらの化合物の特定の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、両者ともＨである。
【００９９】
これらの化合物の特定の実施形態において、Ｒ１は、Ｈ、Ｍｅ、ハロ、ＯＭｅ、もしくはＣＦ３、または置換されていてもよいベンジルもしくはフェニル基である。これらの実施形態の幾つかにおいて、Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｍｅ、ＯＭｅ、およびＣＦ３から選択され、好ましい実施形態において、Ｒ１は、Ｈである。
【０１００】
これらの化合物の特定の実施形態において、Ｙは、Ｏである。
【０１０１】
これらの化合物の特定の実施形態において、Ｙは、Ｓである。
【０１０２】
これらの化合物の特定の実施形態において、ＮＲ７Ｒ８は、Ｒ８が置換されていてもよいフェニルである、ＮＨＲ８である。
【０１０３】
式Ｉａにおいて、Ｒ７は、Ｈであってもよく、またはそれは、置換されたＣ１−Ｃ１０アルキルであってもよい。それが、置換されていてもよいアルキルを表す場合、それは多くの場合、ＭｅまたはＣ１−Ｃ６アシル基、例えば、ホルミル、アセチル、もしくはトリフルオロアセチルである。
【０１０４】
式Ｉａにおいて、Ｒ８は、置換されていてもよいアリールまたはヘテロアリールまたはアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｒ８は、置換されていてもよいフェニル、ピリジル、ピリミジニル、またはピラジニル基である。そのような実施形態において、Ｒ８は、Ｈであってもよい。
【０１０５】
式Ｉｂの化合物において、Ａｒは、フェニル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、チエニル（チオフェン環）、フラニル、ピラゾリル、ピロリジニルなどから選択される、置換されていてもよいアリール基であってもよい。Ａｒに関する好ましい芳香族環としては、置換されていてもよいフェニルおよびチオフェニル（チエニル）が挙げられる。Ａｒとなりうる置換されたフェニルの特別な実施形態としては、ハロフェニル、例えば、２−フルオロフェニルまたは３−フルオロフェニル、３−カルボキシフェニル、および３−（ＣＯＯＭｅ）−フェニルが挙げられる。適切なチエニル環としては、５−カルボキシチオフェン−２−イルのアミドが挙げられ、ここでアミドは、式ＮＨＲ''で示され、式中、Ｒ''は、Ｈまたは置換されていてもよいＣ１−Ｃ８アルキル基、例えば、エトキシエチルもしくはヒドロキシエチルもしくはヒドロキシプロピル、またはＣ３−Ｃ８シクロアルキルもしくはシクロアルキルアルキル基、例えば、シクロプロピルメチルである。
【０１０６】
式ＩａおよびＩｂを含む式Ｉの化合物において、置換基Ｒ１は、その置換が二環状核の芳香族性を保持することに矛盾しない、６員環上の任意の利用可能な位置にあってもよい。本明細書に定義される付番の規則を用いた場合、幾つかの実施形態において、Ｒ１は、二環の６位にあり、そして幾つかの実施形態において、それは、二環の７位にある。
【０１０７】
本発明の化合物は、多くの場合、塩として調製することができるように、イオン化可能な基を有する。その化合物を参照する場合に、薬学的に許容しうる塩も用いうることは、当該技術分野で理解されよう。これらの塩は、無機もしくは有機酸を含む酸付加塩であってもよく、または本発明の化合物の酸形態の場合には、その塩は、無機もしくは有機塩基から調製されてもよい。多くの場合、その化合物は、薬学的に許容しうる酸または塩基の付加生成物として調製されて、薬学的に許容しうる塩として調製または使用される。適切な薬学的に許容しうる酸および塩基は、当該技術分野で周知であり、例えば、酸付加塩を形成させる場合には、塩酸、硫酸、臭化水素酸、酢酸、乳酸、クエン酸、または酒石酸、そして塩基性塩を形成させる場合には、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、カフェイン、様々なアミンなどである。適切な塩の調製方法は、当該技術分野で十分に確立されている。幾つかの例において、その化合物は、酸性および塩基性の両方の官能基を含んでいてもよく、その場合それらは、イオン化基を２個有していてもよく、正味電荷を有さなくてもよい。
【０１０８】
別の態様において、本発明は、薬学的に許容しうる賦形剤と混合された、上記の化合物のいずれかを含む医薬組成物を提供する。
【０１０９】
別の態様において、本発明は、上記化合物の効果的量を、癌、血管障害、炎症、または病原感染の治療を必要とする対象に投与することを含む、そのような治療の方法を提供する。
【０１１０】
本発明の化合物は、本明細書に開示された状態、例えば、癌、炎症状態、感染症、疼痛、および免疫障害を治療する医薬剤をはじめとする医薬剤として有用であり、そして医薬剤の製造に有用である。
【０１１１】
本明細書で用いられる用語「治療する」および「治療すること」は、疾患または状態の症候を寛解、軽減、退縮、および除去することを指す。本明細書に記載された候補となる分子または化合物は、配合剤または医薬剤中に治療上効果的な量で存在してもよく、それは、生物学的効果、例えば、特定細胞（例えば、癌細胞）のアポトーシス、特定細胞の増殖抑制を誘導しうる量、または疾患もしくは状態の症候の寛解、軽減、退縮、もしくは除去を誘導しうる量である。その用語は、細胞増殖速度を低下もしくは停止すること（例えば、腫瘍の成長を遅延または停止すること）または増殖する癌細胞の数を低減すること（例えば、腫瘍の一部または全てを除去すること）を指すこともできる。
【０１１２】
これらの用語は、微生物に感染した系（即ち、細胞、組織、または対象）における微生物の力価を低下させること、微生物の増殖速度を低下させること、微生物感染に関連する症候の数もしくは症候の影響を低減すること、そして／または検出可能な量の微生物を系から除去することにも適用可能である。微生物の例としては、非限定的に、ウイルス、細菌および真菌が挙げられる。
【０１１３】
式Ｉの化合物は、ＣＫ２の阻害剤として活性があり、したがって原虫およびウイルスをはじめとする特定の病原による感染を治療するのに有用である。したがって本発明は、神経障害、例えば、統合失調症、妄想症、および免疫無防備状態の患者の脳炎、ならびにシャーガス病を担う寄生性原虫の感染をはじめとする、原虫寄生虫症などの原虫性疾患を治療する方法を提供する。それは、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒトサイトメガロウイルス、Ｃ型およびＢ型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、ボルナ病ウイルス、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、および水痘帯状疱疹ウイルスをはじめとする、様々なウイルス疾患を治療する方法も提供する。これらの障害を治療する方法は、式（Ｉ）の化合物の効果的量を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【０１１４】
本明細書で用いられる用語「アポトーシス」は、内因的な細胞の自己破壊または自殺プログラムを指す。惹起する刺激に応答して、細胞が、細胞収縮、細胞膜の小疱形成ならびにクロマチン凝集および断片化をはじめとする連鎖的イベントを受ける。これらのイベントは、ついには膜結合粒子のクラスター（アポトーシス小体）に細胞が変換され、その後、マクロファージに貪食される。
【０１１５】
本発明は、一部として、本明細書に記載される本発明の範囲内の化合物を少なくとも１種含む医薬組成物、および本明細書に記載された化合物を使用する方法を提供する。
【０１１６】
加えて、本発明は、一部として、ＣＫ２またはＰｉｍタンパク質および本明細書に記載された分子を含む組成物を候補分子と接触させること、ならびにタンパク質と相互作用する本明細書に記載された分子の量を調節するか否かを決定することにより、タンパク質と相互作用する本明細書に記載の分子の量を調節する候補分子を、タンパク質と相互作用する候補分子として特定すること、を含む、ＣＫ２および／またはＰｉｍと相互作用する候補分子を特定する方法を提供する。
【０１１７】
同じく、本明細書により、特定のプロテインキナーゼ活性を調節する方法が提供される。プロテインキナーゼは、ペプチドまたはタンパク質基質中で、アデノシン三リン酸からセリンもしくはトレオニンアミノ酸へ（セリン／トレオニンプロテインキナーゼ）、チロシンアミノ酸へ（チロシンプロテインキナーゼ）、チロシン、セリンもしくはトレオニンへ（二重特異性プロテインキナーゼ）、またはヒスチジンアミノ酸へ（ヒスチジンプロテインキナーゼ）のγ−リン酸の転移を触媒する。したがって本明細書には、プロテインキナーゼの活性を調節（例えば、阻害）するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物に、プロテインキナーゼタンパク質を含む系を接触させることを含む方法が、包含される。幾つかの実施形態において、プロテインキナーゼの活性は、タンパク質の触媒活性である（例えば、アデノシン三リン酸からペプチドまたはタンパク質基質へのγ−リン酸の転移を触媒する）。特定の実施形態において、プロテインキナーゼと相互作用する候補分子を特定する方法が提供され、それらの方法は、プロテインキナーゼおよび本明細書に記載された化合物を、その化合物およびプロテインキナーゼが相互作用する条件下で、候補分子と接触させること、ならびにプロテインキナーゼと相互作用する化合物の量が、候補分子を含まない、化合物とプロテインキナーゼとの対照の相互作用と比較して、調節されるかどうか否かを決定し、それによりプロテインキナーゼと相互作用する化合物の量を、対照の相互作用と比較して調節する候補分子を、プロテインキナーゼと相互作用する候補分子として特定することを含む。そのような実施形態における系は、無細胞系または細胞含有系（例えば、インビトロ）であってもよい。幾つかの実施形態におけるプロテインキナーゼ、化合物または分子は、固相と会合している。特定の実施形態において、化合物とプロテインキナーゼとの相互作用は、検出可能な標識を介して検出され、ここで、幾つかの実施形態において、プロテインキナーゼが検出可能な標識を含み、そして特定の実施形態において、化合物が検出可能な標識を含む。化合物とプロテインキナーゼとの相互作用は、時には、検出可能な標識を用いずに検出される。
【０１１８】
プロテインキナーゼおよび本明細書に記載された化合物を含む表題の組成物も提供される。幾つかの実施形態において、その組成物中のプロテインキナーゼは、セリン−トレオニンプロテインキナーゼである。幾つかの実施形態において、その組成物中のプロテインキナーゼは、ＣＫ２またはＰｉｍサブファミリープロテインキナーゼ（例えば、ＰＩＭ１、ＰＩＭ２、ＰＩＭ３）のサブユニット（例えば、触媒サブユニット、ＳＨ２ドメイン、ＳＨ３ドメイン）であるか、またはそれを含む。特定の実施形態において、その組成物は、無細胞であり、時にはプロテインキナーゼは、組換えタンパク質である。
【０１１９】
プロテインキナーゼは、任意の供給源のもの、例えば、哺乳類、類人猿またはヒトの細胞のものであってもよい。本明細書に開示された化合物により阻害されうる、または潜在的に阻害されうるセリン−トレオニンプロテインキナーゼの例としては、非限定的に、ＣＫ２、ＣＫ２α２、およびＰｉｍサブファミリーキナーゼ（例えば、ＰＩＭ１、ＰＩＭ２、ＰＩＭ３）のヒトバージョンが挙げられる。セリン−トレオニンプロテインキナーゼは、時には、ヒトＣＫ２において列挙されたものに対応する位置で、以下のアミノ酸を１種以上含むサブファミリーのメンバーである：４５位のロイシン、１６３位のメチオニンおよび１７４位のイソロイシン。そのようなプロテインキナーゼの例としては、非限定的に、ＣＫ２、ＳＴＫ１０、ＨＩＰＫ２、ＨＩＰＫ３、ＤＡＰＫ３、ＤＹＫ２およびＰＩＭ−１のヒトバージョンが挙げられる。プロテインキナーゼおよび試薬のヌクレオチドおよびアミノ酸配列は、一般に入手可能である（例えば、Ｗｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ  ＵＲＬｓ  ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｓｉｔｅｓ／ｅｎｔｒｅｚおよびインビトロジェン社（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ．ｃｏｍ））。例えば、様々なヌクレオチド配列が、以下のアクセション番号を用いてアクセス可能である：ＰＩＭ１ではＮＭ＿００２６４８．２およびＮＰ＿００２６３９．１；ＰＩＭ２ではＮＭ＿００６８７５．２およびＮＰ＿００６８６６．２；ＰＩＭ３ではＸＭ＿９３８１７１．２およびＸＰ＿９４３２６４．２。
【０１２０】
本発明は、一部として、異常な細胞増殖に関係する状態を治療する方法も提供する。例えば、本明細書に記載された化合物を、細胞増殖状態を治療するのに効果的な量で、それを必要とする対象に投与することを含む、対象における細胞増殖状態を治療する方法が提供される。対象は、任意に、例えば異種移植腫瘍（例えば、ヒト腫瘍）などの腫瘍を含む、研究動物（例えば、げっ歯類、イヌ、ネコ、サル）であってもよく、またはヒトであってもよい。細胞増殖状態は、時には、非限定的に結腸直腸、乳房、肺、肝臓、膵臓、リンパ節、結腸、前立腺、脳、頭頸部、皮膚、肝臓、腎臓、血液および心臓の癌（例えば、白血病、リンパ腫、癌腫）をはじめとする腫瘍または非腫瘍癌である。
【０１２１】
本発明の化合物および組成物は、単独で使用しても、または本明細書に更に記載される通り、典型的には癌を治療される患者に投与される抗癌剤もしくは他の薬剤、例えば、緩和剤と併用してもよい。
【０１２２】
同じく、炎症または疼痛に関係する状態を治療する方法が提供される。例えば、本明細書に記載された化合物を、疼痛を治療するのに効果的な量で、それを必要とする対象に投与することを含む、対象における疼痛を治療する方法が提供される。本明細書に記載された化合物を、炎症を治療するのに効果的な量で、それを必要とする対象に投与することを含む、対象における炎症を治療する方法も提供される。対象は、例えば、研究動物（例えば、げっ歯類、イヌ、ネコ、サル）であってもよく、またはヒトであってもよい。炎症および疼痛に関連する状態としては、非限定的に、酸逆流、胸やけ、にきび、アレルギーおよびアレルゲン感受性、アルツハイマー病、喘息、アテローム性硬化症、気管支炎、心炎、セリアック病、慢性疼痛、クローン病、硬変、大腸炎、認知症、皮膚炎、糖尿病、ドライアイ、浮腫、気腫、湿疹、線維筋痛症、胃腸炎、歯肉炎、心臓病、肝炎、高血圧、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、関節痛／関節炎／関節リウマチ、メタボリック症候群（シンドロームＸ）、筋炎、腎炎、肥満、骨減少症、糸球体腎炎（ＧＮ）、若年性嚢胞性腎疾患、およびＩ型ネフロン癆（ＮＰＨＰ）、骨粗鬆症、パーキンソン病、グアム−パーキンソン認知症、核上性麻痺、クッフス病、およびピック病、ならびに記憶障害、脳虚血、および統合失調症、歯周病、多発動脈炎、多発性軟骨炎、乾癬、強皮症、副鼻腔炎、シェーグレン症候群、痙攣性結腸、全身性カンジダ症、腱炎、尿路感染、膣炎、炎症性癌（例えば、炎症性乳癌）など挙げられる。
【０１２３】
疼痛または炎症に対する本明細書の化合物の効果を決定およびモニタリングする方法は、公知である。例えば研究動物におけるホルマリン刺激での疼痛行動を、本明細書に記載された化合物の投与後にモニタリングして、疼痛の治療を評価することができる（例えば、Ｌｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｉｎ  １１５（１−２）：  １８２−９０  （２００５））。また、例えば炎症誘発性分子（例えば、ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＭＣＰ−１、ＴＮＦαおよびｉＮＯＳ）の調節を、本明細書に記載された化合物の投与後にモニタリングして、炎症の治療を評価することができる（例えば、Ｐａｒｈａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  Ｄｉｓ．  ２２（６）：  ６０１−９  （２００６））。したがって、本明細書の化合物が炎症または疼痛を低減するか否かを決定する方法も提供され、それらの方法は、疼痛シグナルまたは炎症シグナルの活性を調節（例えば、阻害）するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物に、系を接触させることを含む。
【０１２４】
炎症または疼痛を低減する化合物を特定する方法も提供され、それらの方法は、式Ｉの化合物に系を接触させること；および疼痛シグナルまたは炎症シグナルを検出し、それにより対照分子と比較して疼痛シグナルを調節する化合物が、疼痛の炎症を低減する化合物として特定されることを含む。疼痛シグナルの非限定的例には、ホルマリン刺激での疼痛行動があり、そして炎症シグナルの例としては、非限定的に、炎症誘発性分子のレベルが挙げられる。したがって本発明は、一部として、対照における血管新生を調節する方法、および対象における異常な血管新生に関連する状態を治療する方法に関する。増殖性糖尿病性網膜症。
【０１２５】
ＣＫ２は、アテローム性硬化症の病原において役割を担うことも示されており、層流性ずり応力の流れを保持することにより、アテローム発生を防御することができる。ＣＫ２は、血管分布において役割を担い、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の低酸素誘導性活性化を媒介することが示されている。ＣＫ２は、例えば、心筋細胞肥大、心不全、インスリンシグナル伝達障害およびインスリン抵抗性、低リン酸血症、および骨マトリックス石灰化不全をはじめとする、骨格筋および骨組織に関連する疾患にも関与する。
【０１２６】
したがって一態様において、本発明は、ＣＫ２阻害剤、例えば、本明細書に記載された式Ｉの化合物の効果的量を、これらの状態それぞれの治療を必要とする対象に投与することを含む、そのような治療の方法を提供する。
【０１２７】
本発明は、一部として、対象における免疫応答を調節する方法、および対象における異常な免疫応答に関連する状態を治療する方法にも属する。したがって、本明細書の化合物が免疫応答を調節するか否かを決定する方法が提供され、それらの方法は、免疫応答または免疫応答関連のシグナルを調節（例えば、阻害）するのに効果的な量の本明細書に記載された化合物に、系を接触させることを含む。免疫調節活性と関連するシグナルとしては、例えば、Ｔ細胞増殖の刺激、例えば、インターロイキン、インターフェロン−γ、およびＴＮＦをはじめとするサイトカインの抑制または誘導が挙げられる。免疫調節活性を評価する方法は、当該技術分野で公知である。
【０１２８】
また、本明細書において記載される化合物を、状態を治療するのに効果的な量で、それを必要とする対象に投与することを含む、対象における異常な免疫応答に関連する状態を治療する方法が提供される。異常な免疫応答を特徴とする状態としては、非限定的に、臓器移植片拒絶、喘息、関節リウマチをはじめとする自己免疫障害、多発性硬化症、重症筋無力症、全身性エリテマトーデス、強皮症、多発性筋炎、混合型結合組織疾患（ＭＣＴＤ）、クローン病、および潰瘍性大腸炎が挙げられる。特定の実施形態において、本明細書の化合物を、ｍＴＯＲ経路メンバーまたは関連経路（例えば、ｍＴＯＲ、ＰＩ３キナーゼ、ＡＫＴ）のメンバーの生物活性を調節（例えば、阻害）する分子と共に投与することにより、免疫応答を調節してもよい。特定の実施形態において、ｍＴＯＲ経路メンバーまたは関連経路のメンバーの生物活性を調節する分子は、ラパマイシンである。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物を、ｍＴＯＲ経路メンバーまたは関連経路のメンバーの生物活性を調節する分子、例えばラパマイシンと共に含む組成物が、本明細書において提供される。
【０１２９】
本発明の特定の実施形態において、該化合物は、式Ｉａの化合物であり、特定の実施形態において、それは、式Ｉｂの化合物である。
【０１３０】
配合および投与経路
先に記載された化合物の任意の適切な配合剤を、当該技術分野で公知の方法により投与するために調製することができる。有用な賦形剤または担体の選択は、所望の投与経路および投与される化合物の物理的性質に基づいて、過度の実験法を用いずに実現することができる。
【０１３１】
治療する医師の決定に応じて、非限定的に、経口、非経口、静脈内、筋肉内、経皮、局所および皮下経路をはじめとする任意の適切な投与経路を用いてもよい。治療される対象、投与様式、および所望の治療のタイプ、例えば、防御、予防、治療に応じて、該化合物が、これらのパラメーターと調和する方法で配合される。各投与経路に適した配合剤の調製は、当該技術分野で公知である。そのような配合方法および技術の要約が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、最新版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡに見出される。各物質の配合剤、または２種の物質の組み合わせの配合剤は、多くの場合、希釈剤も含み、そして幾つかの例では、佐剤、緩衝剤、防腐剤などを含む。投与される物質は、リポソーム性組成物中で、またはマイクロエマルジョンとして、投与することもできる。
【０１３２】
注射については、液体溶液もしくは懸濁物として、または注射前の液体中の溶液もしくは懸濁物に適した固体形態として、またはエマルジョンとして、従来の形態で配合剤を調製することができる。適切な賦形剤としては、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロールなどが挙げられる。そのような組成物は、非毒性補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤など、例えば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウラートなどの量を含んでいてもよい。
【０１３３】
薬物のための様々な徐放系も考案されており、それを本発明の化合物に適用することができる。例えば、方法が本明細書に参考として組込まれる、米国特許第５，６２４，６7７号を参照されたい。
【０１３４】
全身投与は、比較的に非侵襲的な方法、例えば、坐剤、経皮パッチ、経粘膜送達および経鼻投与の利用を含んでいてもよい。経口投与も、本発明の化合物に適している。適切な形態としては、当該技術分野で理解される通り、シロップ、カプセル、錠剤が挙げられる。
【０１３５】
動物またはヒト対象への投与では、先に記載された化合物の適切な投与量は、多くの場合、０．０１〜１５ｍｇ／ｋｇであり、時には０．１〜１０ｍｇ／ｋｇである。幾つかの実施形態において、大人の患者への本発明の化合物の適切な投与量は、１〜５００ｍｇ／用量、多くの場合１０〜３００ｍｇであり、その投与量を１日１〜４回投与してもよい。投与量レベルは、その状態の性質、薬効、患者の状態、実施担当者の判断、ならびに投与の頻度および様式に依存するが、そのようなパラメーターの最適化は、当業者の通常レベルの範囲内である。
【０１３６】
併用治療
本発明の化合物は、単独で使用されても、または別の治療薬と併用されてもよい。本発明は、癌、炎症、および免疫障害などの状態の治療を必要とする対象に、前記障害の治療に有用な治療薬の治療上効果的な量を投与すること、ならびに同対象に、本発明の調節剤の治療上効果的な量を投与することによる、そのような状態を治療する方法を提供する。ＣＫ２および／またはＰｉｍ調節剤は、ＣＫ２タンパク質、Ｐｉｍタンパク質、またはその両方の生物活性を阻害または増強する薬剤であり、本明細書の以後は概して「調節剤」と呼ぶ。式Ｉの化合物は、実例の「調節剤」である。治療薬および調節剤を、別個の医薬組成物として、または単一の医薬組成物に混合して、一緒に投与してもよい。治療薬および調節剤を、異なる時間および異なる頻度をはじめとし、別個に投与してもよい。調節剤は、任意の公知経路、例えば、経口、静脈内、筋肉内、鼻内などで投与してもよく、そして治療薬は、任意の従来の経路により投与してもよい。多くの実施形態において、調節剤および治療薬の少なくとも一方、そして任意にその両方を、経口投与してもよい。好ましくは調節剤は阻害剤であり、それは、ＣＫ２およびＰｉｍのいずれか一方、またはそれらの両方を阻害して、本明細書に記載された治療効果を提供してもよい。
【０１３７】
特定の実施形態において、先に記載された「調節剤」は、特定の四重鎖構造を形成しうるＤＮＡの領域に結合することにより作用しうる治療薬と併用してもよい。そのような実施形態において、治療薬は、単独で抗癌活性を有するが、調節剤と併用されると、それらの活性が増強される。この相乗効果により、その治療薬を低投与量で投与しながら、少なくとも一つ所望の効果を同レベルまたはより高レベルで実現することができる。
【０１３８】
調節剤は、別個で、癌を治療する活性を有していてもよい。先に記載された併用治療では、治療薬と併用する際の調節剤の投与量は、多くの場合、調節剤を単独で用いて同じ条件または対象を治療する際に必要となる投与量よりも、２倍〜１０倍低くなる。治療薬と併用される調節剤の適切な量の決定は、当該技術分野で公知の方法により容易に決定される。
【０１３９】
本発明の化合物および組成物は、癌を治療される患者に典型的に投与される抗癌剤または他の薬剤、例えば、緩和剤と併用してもよい。そのような「抗癌剤」としては、例えば、古典的な化学療法薬に加え、分子標的治療薬、生物学的療法薬、および放射線治療薬が挙げられる。
【０１４０】
本発明の化合物および組成物が、抗癌剤〜別の薬剤と併用される場合、本発明は、例えば、刺激的治療、時間差治療、または代替治療を提供する。したがって本発明の化合物を、同じ医薬組成物中で抗癌剤と同時に投与してもよく；本発明の化合物を、別個の医薬組成物中で抗癌剤と同時に投与してもよく；例えば、秒、分、時間、日、または週の時間差で、本発明の化合物を抗癌剤の前に投与しても、または抗癌剤を本発明の化合物の前に投与してもよい。
【０１４１】
時間差治療の例では、本発明の化合物での治療後に、抗癌剤での治療が続いてよく、その逆順での治療を利用してもよく、各成分での治療を１シリーズを超えて利用してもよい。本発明の特定の実施例において、一成分、例えば、本発明の化合物または抗癌剤を、他の成分または誘導体生成物が哺乳類の血流に残留している間に、その哺乳類に投与する。例えば、式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物もしくはその誘導体を、抗癌剤もしくはその誘導体生成物が血流に残留している間に投与してもよく、または抗癌剤を、式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物もしくはその誘導体が血流に残留している間に、投与してもよい。他の実施例において、第一の成分またはその誘導体の全てまたはほとんどが哺乳類の血流から排出された後で、第二の成分を投与する。
【０１４２】
本発明の化合物および抗癌剤は、同一投与形態で投与してもよく、例えば両者を静注溶液として投与してもよく、またはそれらを異なる投与形態で投与してもよく、例えば、一方の化合物を局所投与して、他方を経口投与してもよい。当業者は、薬物および関与する癌の特定の特徴に基づいて、薬剤の組合せが有用となることを識別できよう。
【０１４３】
本発明の化合物との併用で有用となる抗癌剤は、非限定的に、微小管阻害薬、例えば、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイド；白金配位錯体；アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、オキサザホスホリン、アルキルスルホナート、ニトロソ尿素、およびトリアゼン；抗生物質製剤、例えば、アントラサイクリン、アクチノマイシン、およびブレオマイシン；トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば、エピポドフィロトキシン；代謝拮抗薬、例えば、プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物；トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えば、カンプトテシン；ホルモンおよびホルモン類似体；シグナル伝達系阻害剤；非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害剤；免疫療法薬；アポトーシス促進剤、細胞周期シグナル伝達阻害剤；他の薬剤を含む、当業者に公知の分類のいずれかから選択される薬剤を含んでいてもよい。
【０１４４】
微小管阻害薬または有糸分裂阻害剤は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期に腫瘍細胞の微小管に対して典型的に活性を示す、細胞周期特異性薬剤（ｐｈａｓｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ−ａｇｅｎｔｓ）である。微小管阻害薬の例としては、非限定的に、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられる。
【０１４５】
天然の供給源から得られたジテルペノイドは、細胞周期のＧ２／Ｍ期に作用すると考えられる細胞周期特異性抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のｐ−チューブリンサブユニットを、このタンパク質との結合よって安定化すると考えられている。その後このタンパク質の分解が阻害されて、有糸分裂が停止し、続いて細胞死を迎えるようである。
【０１４６】
ジテルペノイドの例としては、非限定的に、タキサン、例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、およびテセタキセルが挙げられる。パクリタキセルは、タイヘイヨウイチイ、タクスス・ブレヴィフォリア（Ｔａｘｕｓ  ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）から単離された天然のジテルペン製品であり、注射液ＴＡＸＯＬ（登録商標）として市販されている。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針状葉から抽出される天然前駆体１０−デアセチルバッカチンＩＩＩを用いて所要量が調製されるパクリタキセルの半合成誘導体である。ドセタキセルは、注射液のＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）として市販されている。
【０１４７】
ビンカアルカロイドは、ツルニチソウ由来の細胞周期特異性抗悪性腫瘍剤である。ビンカアルカロイドは、チューブリンに特異的に結合することにより細胞周期のＭ期（有糸分裂）に作用すると考えられている。その結果、結合したチューブリン分子は、微小管に重合することができない。有糸分裂が中期に停止し、続いて細胞死を迎えると考えられている。ビンカアルカロイドの例としては、非限定的に、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、およびビノレルビンが挙げられる。ビンブラスチン、つまり硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射液のＶＥＬＢＡＮ（登録商標）として市販されている。ビンクリスチン、つまりビンカロイコブラスチン２２−オキソ硫酸塩は、注射液のＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標）として市販されている。ビノレルビンは、酒石酸ビノレルビンの注射液（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））として市販されており、半合成のビンカアルカロイド誘導体である。
【０１４８】
白金配位錯体は、ＤＮＡと相互作用する非細胞周期特異性抗癌剤である。白金配位錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化を受けて、ＤＮＡと鎖内および鎖間架橋を形成して、腫瘍に反発する生物学的影響を引き起こすと考えられている。白金を基にした配位錯体としては、非限定的に、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチン、および（ＳＰ−４−３）−（シス）−アミンジクロロ−［２−メチルピリジン］白金（ＩＩ）が挙げられる。シスプラチン、つまりシスジアンミンジクロロ白金は、注射液のＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）として市販されている。カルボプラチン、つまり白金ジアンミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシラート（２−）−Ｏ，Ｏ'］は、注射液のＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標）として市販されている。
【０１４９】
アルキル化剤は、一般には非細胞周期特異性薬剤であり、典型的には強い求電子剤である。典型的にはアルキル化剤は、ＤＮＡ分子の求核部分、例えば、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、およびイミダゾール基を介して、ＤＮＡにアルキル化することにより、共有結合を形成する。そのようなアルキル化は、核酸の機能を崩壊させて、細胞死をもたらす。アルキル化剤の例としては、非限定的に、アルキルスルホナート、例えば、ブスルファン；エチレンイミンおよびメチルメラミン誘導体、例えば、アルレタミンおよびチオテパ；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、シクロホスファミド、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、メルファラン、およびウラムスチン；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、ロムスチン、およびストレプトゾシン；トリアゼンおよびイミダゾトリアゼン、例えば、ダカルバジン、プロカルバジン、テモゾラミド（ｔｅｍｏｚｏｌａｍｉｄｅ）、およびテモゾロミドが挙げられる。シクロホスファミド、つまり２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン  ２−オキシド一水和物は、注射液または錠剤のＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）として市販されている。メルファラン、つまり４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤のＡＬＫＥＲＡＮ（登録商標）として市販されている。クロラムブシル、つまり４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ＬＥＵＫＥＲＡＮ（登録商標）錠として市販されている。ブスルファン、つまり１，４−ブタンジオールジメタンスルホナートは、ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標）錠として市販されている。カルムスチン、つまり１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素は、シングルバイアルの凍結乾燥物質のＢｉＣＮＵ（登録商標）として市販されている。５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、単一バイアルの物質のＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）として市販されている。
【０１５０】
抗腫瘍性抗生物質は、ＤＮＡに結合または挿入されると考えられる非細胞周期特異性薬剤である。これにより、安定したＤＮＡ錯体または鎖が開裂され、核酸の通常の機能が破壊されて細胞死をもたらす可能性がある。抗腫瘍性抗生物質の例としては、非限定的に、アントラサイクリン、例えば、ダウノルビシン（リポソームダウノルビシンを含む）、ドキソルビシン（リポソームドキソルビシンを含む）、エピルビシン、イダルビシン、およびバルルビシン；ストレプトマイシン関連薬、例えば、ブレオマイシン、アクチノマイシン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ポルフィロマイシン、およびミトキサントロンが挙げられる。アクチノマイシンＤとしても公知のダクチノマイシンは、注射剤の形態で、ＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標）として市販されている。ダウノルビシン、つまり（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２−ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射剤の形態のＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標）として、または注射剤のＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標）として市販されている。ドキソルビシン、つまり（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２−ナフタセンジオン塩酸塩は、注射剤の形態で、ＲＵＢＥＸ（登録商標）またはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ  ＲＤＦ（登録商標）として市販されている。ブレオマイシン、つまりストレプトマイセス・バーチシラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓ）の株から単離された細胞毒性グリコペプチド系抗生物質の混合物は、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標）として市販されている。
【０１５１】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、非限定的に、マンドレーク植物から得られる細胞周期特異性抗悪性腫瘍剤、エピポドフィロトキシンが挙げられる。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡと三重複合体を形成して、ＤＮＡ鎖を切断することにより、細胞周期のＳおよびＧ２期の細胞に影響を及ぼす。鎖切断が重なれば、続いて細胞死を迎える。エピポドフィロトキシンの例としては、非限定的に、エトポシド、テニポシド、およびアムサクリンが挙げられる。エトポシド、つまり４'−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液またはカプセルのＶｅＰＥＳＩＤ（登録商標）として市販されており、ＶＰ−１６として一般に公知である。テニポシド、つまり４'−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液のＶＵＭＯＮ（登録商標）として市販されており、ＶＭ−２６として一般に公知である。
【０１５２】
代謝拮抗性抗悪性腫瘍剤は、ＤＮＡ合成を阻害すること、またはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成を制限することにより、典型的には細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）で作用する細胞周期特異性抗悪性腫瘍剤である。その結果、Ｓ期が進行せず、続いて細胞死を迎える。代謝拮抗剤としては、プリン類似体、例えば、フルダラビン、クラドリビン、クロロデオキシアデノシン、クロファラビン、メルカプトプリン、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、フルダラビンホスファートおよびチオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、フルオロウラシル、ゲムシタビン、カペシタビン、シタラビン、アザシチジン、エダトレキサート、フロクスリジンおよびトロキサシタビン；抗葉酸化合物、例えば、メトトレキサート、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、およびトリメトレキサートが挙げられる。シタラビン、つまり４−アミノ−１−ｐ−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ（登録商標）として市販されており、Ａｒａ−Ｃとして一般に公知である。メルカプトプリン、つまり１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標）として市販されている。チオグアニン、つまり２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、ＴＡＢＬＯＩＤ（登録商標）として市販されている。ゲムシタビン、つまり２'−デオキシ−２'，２'−ジフルオロシチジン一塩酸塩（ｐ−異性体）は、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）として市販されている。
【０１５３】
トポイソメラーゼＩ阻害剤としては、カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体が挙げられる。トポイソメラーゼＩ阻害剤の例としては、非限定的に、カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン、ルビテカン、ベロテカン、および米国特許第６，０６３，９２３号；同第５，３４２，９４７号；同第５，５５９，２３５号；同第５，４９１，２３７号および１９９７年１１月２４日に提出された出願中の米国特許出願第０８／９７７，２１７号に記載された７−（４−メチルピペラジノメチレン）−１０，１１−エチレンジオキシカンプトテシンの様々な光学形態（即ち、（Ｒ）、（Ｓ）または（Ｒ，Ｓ））が挙げられる。イリノテカンＨＣｌ、つまり（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３'，４'，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射液のＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）として市販されている。イリノテカンは、カンプトテシンの誘導体であり、その活性代謝産物８Ｎ−３８と共に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合する。トポテカンＨＣｌ、つまり（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３'，４'，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射液ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）として市販されている。
【０１５４】
ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモンと、癌の成長および／または成長欠損とに関連性がある癌を治療するのに有用な化合物である。癌の治療に有用なホルモンおよびホルモン類似体の例としては、非限定的に、アンドロゲン、例えば、フルオキシメステロンおよびテストラクトン；抗アンドロゲン、例えば、ビカルタミド、シプロテロン、フルタミド、およびニルタミド；アロマターゼ阻害剤、例えば、アミノグルテチミド、アナストロゾール、エキセメスタン、ホルメスタン、ボラゾール、およびレトロゾール；コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾン、プレドニゾンおよびプレドニゾロン；エストロゲン、例えば、ジエチルスチルベストロール；抗エストロゲン、例えば、フルベストラント、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフィン、ドロロキシフェン、およびヨードキシフェン；ならびに選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭＳ）、例えば、米国特許第５，６８１，８３５号、同第５，８７７，２１９号、および同第６，２０７，７１６号に記載されたもの；５α−リダクターゼ、例えば、フィナステリドおよびデュタステリド；黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するゴナドロトピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）およびその類似体、例えば、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば、ブセレリン、ゴセレリン、ロイプロリド、およびトリプトレリン；プロゲスチン、例えば、酢酸メドロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロール；ならびに甲状腺ホルモン、例えば、レボチロキシンおよびリオチロニンが挙げられる。
【０１５５】
シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内変化、例えば、細胞増殖または分化を引き起こす化学的過程を遮断または阻害する阻害剤である。本発明において有用なシグナル伝達阻害剤としては、例えば、受容体型チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断薬、セリン／トレオニンキナーゼ、ホスファチジルイノシトール−３キナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達およびＲａｓオンコジーンの阻害剤が挙げられる。
【０１５６】
幾つかのプロテインチロシンキナーゼは、細胞増殖の調節に関与する様々なタンパク質における特異的チロシル残基のリン酸化を触媒する。そのようなプロテインチロシンキナーゼは、受容体型または非受容体型キナーゼとして大きく分類することができる。受容体型チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、およびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通タンパク質である。受容体型チロシンキナーゼは、細胞増殖の調節に関与しており、時には増殖因子受容体と呼ばれる。
【０１５７】
例えば過剰発現または突然変異による、これらのキナーゼの多くの不適当な活性化または非制御の活性化が、非制御の細胞増殖をもたらすことが示されている。したがって、そのようなキナーゼの異常な活性は、悪性の組織成長に関連づけられている。その結果、そのようなキナーゼの阻害剤が、癌の治療法を提供することができ得る。
【０１５８】
増殖因子受容体としては、例えば、上皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様ドメインおよび上皮成長因子相同ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、およびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、ならびにＲＥＴプロトオンコジーンが挙げられる。
【０１５９】
増殖受容体の幾つかの阻害剤は、開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。増殖因子受容体、および増殖因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Ｋａｔｈ，  Ｊｏｈｎ  Ｃ．，  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）  １０（６）：８０３−８１８；Ｓｈａｗｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ（１９９７），２（２）：５０−６３；およびＬｏｆｔｓ，  Ｆ．  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  "Ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ"，  Ｎｅｗ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，  編者：Ｗｏｒｋｍａｎ，  Ｐａｕｌ  ａｎｄ  Ｋｅｒｒ，  Ｄａｖｉｄ，  ＣＲＣ  ｐｒｅｓｓ  １９９４，  Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。受容体チロシンキナーゼ阻害剤の特別な例としては、非限定的に、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、およびイマチニブが挙げられる。
【０１６０】
増殖因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは、非受容体型チロシンキナーゼと呼ばれる。抗癌剤の標的または潜在的な標的である本発明に有用な非受容体型チロシンキナーゼとしては、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（接着斑キナーゼ）、ブルトン型チロシンキナーゼおよびＢｃｒ−Ａｂｌが挙げられる。そのような非受容体型キナーゼ、および非受容体型チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Ｓｉｎｈ，  Ｓ．  ａｎｄ  Ｃｏｒｅｙ，  Ｓ．Ｊ．，  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ  ＆  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．  （１９９９）８（５）：  ４６５−８０；およびＢｏｌｅｎ，  Ｊ．Ｂ．，  Ｂｒｕｇｇｅ，  Ｊ．Ｓ．，  Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．  （１９９７）  １５：  ３７１−４０４に記載されている。
【０１６１】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断薬は、ＰＩ３−Ｋ  ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰをはじめとする様々な酵素またはアダプタータンパク質におけるＳＨ２またはＳＨ３ドメイン結合を破壊する薬剤である。抗癌剤の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，  Ｔ．Ｅ．，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  （１９９５）  ３４（３）１２５−３２に議論されている。セリン／トレオニンキナーゼの阻害剤としては、Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（ＭＥＫ）、および細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）の遮断薬をはじめとするＭＡＰキナーゼカスケード遮断薬；ならびにＰＫＣ（α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ）、ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ＡＫＴキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦβ受容体キナーゼの遮断薬をはじめとするプロテインキナーゼＣファミリーメンバー遮断薬が挙げられる。そのようなセリン／トレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Ｙａｍａｍｏｔｏ，  Ｔ．，  Ｔａｙａ，  Ｓ．，  Ｋａｉｂｕｃｈｉ，  Ｋ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．  （１９９９）  １２６（５）：７９９−８０３；Ｂｒｏｄｔ，  Ｐ，  Ｓａｍａｎｉ，  Ａ．，  ＆  Ｎａｖａｂ，  Ｒ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  （２０００）  ６０：  １１０１−１１０７；Ｍａｓｓａｇｕｅ，  Ｊ．，  Ｗｅｉｓ−Ｇａｒｃｉａ，  Ｆ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｕｒｖ．  （１９９６）  ２７：４１−６４；Ｐｈｉｌｉｐ，  Ｐ．Ａ，  ａｎｄ  Ｈａｒｒｉｓ，  ＡＬ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔ．  Ｒｅｓ．  （１９９５）７８：  ３−２７；Ｌａｃｋｅｙ，  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  （２０００）  １０（３）：２２３−２２６；米国特許第６，２６８，３９１号；およびＭａｒｔｉｎｅｚ−Ｌａｃａｃｉ，  Ｉ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ  （２０００），  ８８（１），  ４４−５２に記載されている。ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕの遮断薬をはじめとするホスファチジルイノシトール−３キナーゼファミリーメンバーの阻害剤も、本発明において有用となる。そのようなキナーゼは、Ａｂｒａｈａｍ，  ＲＴ．  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  （１９９６）  ８（３）：４１２−８；Ｃａｎｍａｎ，  Ｃ．Ｅ．，  Ｌｉｍ，  Ｄ．Ｓ．  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  （１９９８）  １７（２５）：  ３３０１−８；Ｊａｃｋｓｏｎ，  Ｓ．Ｐ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  （１９９７）  ２９（７）：９３５−８；およびＺｈｏｎｇ，  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （２０００）  ６０（６）：１５４１−５に議論されている。また、ミオイノシトールシグナル伝達阻害剤、例えば、ホスホリパーゼＣ遮断薬およびミオイノシトール類似体が、本発明において有用である。そのようなシグナル阻害剤は、Ｐｏｗｉｓ，  Ｇ．，  ａｎｄ  Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉ  Ａ．，  （１９９４）  Ｎｅｗ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  Ｃａ���ｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，  編者：Ｐａｕｌ  Ｗｏｒｋｍａｎ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｋｅｒｒ，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  １９９４，  Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。
【０１６２】
別のグループのシグナル伝達経路阻害剤は、Ｒａｓオンコジーンの阻害剤である。そのような阻害剤としては、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニル−ゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤に加え、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法が挙げられる。そのような阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断することにより、抗増殖剤として作用することが示された。Ｒａｓオンコジーン阻害は、Ｓｃｈａｒｏｖｓｋｙ，  Ｏ．Ｇ．，  Ｒｏｚａｄｏｓ，  Ｖ．Ｒ．，  Ｇｅｒｖａｓｏｎｉ，  ＳＩ．  Ｍａｔａｒ，  Ｐ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ｓｃｉ．  （２０００）  ７（４）：２９２−８；Ａｓｈｂｙ，  Ｍ．Ｎ．，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｌｉｐｉｄｏｌ．  （１９９８）  ９（２）：９９−１０２；およびＯｌｉｆｆ，  Ａ．，  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ，  （１９９９）  １４２３（３）：Ｃ１９−３０に議論されている。
【０１６３】
上述の通り、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストは、シグナル伝達阻害剤としても作用することができる。このグループのシグナル伝達経路阻害剤は、受容体型チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用を含む。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｃ２２５  ＥＧＦＲ特異性抗体（Ｇｒｅｅｎ，  Ｍ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔ．  Ｒｅｖ．，  （２０００），  ２６（４），  ２６９−２８６参照）；Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Ｓｔｅｒｎ，  ＤＦ，  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （２０００）  ２（３），  １７６−１８３参照）；および２ＣＢ  ＶＥＧＦＲ２特異性抗体（Ｂｒｅｋｋｅｎ，  Ｒ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．  ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （２０００）  ６０（１８）：５１１７−５１２４参照）。
【０１６４】
非受容体型キナーゼ血管新生阻害剤も、本発明における使用を見出すことができる。血管新生関連のＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル伝達阻害剤に関して先に論じられている（受容体は両者とも受容体型チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤が血管新生、主にＶＥＧＦ発現を阻害することが示されているため、血管新生は、ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に概ね関連している。したがって、ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲ阻害剤を血管新生阻害剤と組合わせることが、意味を成す。したがって、非受容体型チロシンキナーゼ阻害剤を、本発明のＥＧＦＲ／ｅｒｂＢ２阻害剤と併用してもよい。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体型チロシンキナーゼ）を認識しないがリガンドには結合する抗ＶＥＧＦ抗体；血管新生を阻害するインテグリン（αｖβ３）の小分子阻害剤；エンドスタチンおよびアンギオスタチン（非ＲＴＫ）も、開示されたｅｒｂファミリー阻害剤との組合せに有用であることを立証することができる（Ｂｒｕｎｓ  ＣＪ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （２０００），  ６０（１１）：  ２９２６−２９３５；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  ＡＢ，  Ｗｉｎｋｌｅｒ  ＭＥ，  ＆  Ｄｅｒｙｎｃｋ  Ｒ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８６）  ２３２（４７５５）：１２５０−５３；Ｙｅｎ  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  （２０００）  １９（３１）：３４６０−９参照）。
【０１６５】
免疫療法のレジメンで用いられる薬剤も、式（Ｉ）の化合物との組合わせに有用となる可能性がある。ｅｒｂＢ２またはＥＧＦＲに対して免疫応答を生じる免疫学的戦略は、数多く存在する。これらの戦略は、一般に腫瘍ワクチン接種の領域である。免疫学的アプローチの有効性が、小分子阻害剤を用いた、ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達経路の複合阻害により、大きく強化される可能性がある。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫／腫瘍ワクチンアプローチの議論が、Ｒｅｉｌｌｙ  ＲＴ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （２０００）  ６０（１３）：  ３５６９−７６；およびＣｈｅｎ  Ｙ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  （１９９８）  ５８（９）：１９６５−７１に見出される。
【０１６６】
アポトーシス促進レジメンで用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）も、本発明の組合せにおいて用いることができる。タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーのメンバーは、アポトーシスを遮断する。それゆえｂｃｌ−２の上方調節は、化学療法抵抗性に関連づけられている。上皮成長因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリーの抗アポトーシスメンバーを刺激することが、試験により示された。それゆえ、腫瘍におけるｂｃｌ−２の発現を下方調節するように設計された戦略で、臨床利益が実証され、それは現在、第ＩＩ相／ＩＩＩ相試験中のもの、即ち、ジェンタ（Ｇｅｎｔａ）のＧ３１３９  ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドである。ｂｃｌ−２へのアンチセンスオリゴヌクレオチド戦略を利用するそのようなアポトーシス促進戦略は、Ｗａｔｅｒｓ  ＪＳ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  （２０００）  １８（９）：  １８１２−２３；およびＫｉｔａｄａ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓ．  Ｄｅｖ．  （１９９４）  ４（２）：  ７１−９に議論されている。
【０１６７】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の制御に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるプロテインキナーゼのファミリー、およびサイクリンと呼ばれるタンパク質のファミリーとそれらとの相互作用が、真核生物細胞周期の進行を制御する。細胞周期の正常な進行には、異なるサイクリン／ＣＤＫ複合体の協調的な活性化および不活性化が必要となる。細胞周期シグナル伝達の複数の阻害剤が、開発中である。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６をはじめとするサイクリン依存性キナーゼならびにそれらの阻害剤の例が、例えば、Ｒｏｓａｎｉａ  ＧＲ  ＆  Ｃｈａｎｇ  Ｙ−Ｔ．，  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔｅｎｔｓ  （２０００）  １０（２）：２１５−３０に記載されている。
【０１６８】
他の分子標的薬としては、免疫抑制マクロライド系抗生物質ラパマイシンなどのＦＫＢＰ結合剤；遺伝子治療薬、アンチセンス療法剤、ならびにレチノイドおよびレキシノイドなどの遺伝子発現調節剤、例えば、アダパレン、ベキサロテン、トランスレチノール酸、９−シスレチノール酸、およびＮ−（４−ヒドロキシフェニル）レチナミド；モノクローナル抗体をはじめとする表現型指向の治療薬（ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｇｅｎｔｓ）、例えば、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、イブリツモマブチウキサタン、リツキシマブ、およびトラスツズマブ：免疫毒素、例えば、ゲムツズマブオゾガマイシン、放射性免疫複合体、例えば、１３１−トシツモマブ；ならびに癌ワクチンが挙げられる。
【０１６９】
種々雑多な薬剤としては、アルトレタミン、三酸化ヒ素、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レバミゾール、マイトタン、オクトレオチド、プロカルバジン、スラミン、タリドミド、光線力学的化合物、例えば、メトキサレンおよびポルフィマーナトリウム、ならびにプロテアソーム阻害剤、例えば、ボルテゾミブが挙げられる。
【０１７０】
生物学的療法剤としては、インターフェロン、例えば、インターフェロン−ｕ２ａおよびインターフェロン−ｕ２ｂ、ならびにインターロイキン、例えば、アルデスロイキン、デニロイキンジフチトックス、およびオプレルベキンが挙げられる。
【０１７１】
癌細胞に対して作用させることを目的としたこれらの抗癌剤に加えて、細胞保護剤、例えば、アミホスチン、デキスラゾンキサン（ｄｅｘｒａｚｏｎｘａｎｅ）、およびメスナ、リン酸塩、例えば、パルミドロネートおよびゾレドロン酸、ならびに刺激因子、例えば、エポエチン、デルベポエチン、フィルグラスチム、ＰＥＧ−フィルグラスチム、およびサルグラモスチムをはじめとする保護剤または補助薬の使用を含む併用治療も、想定される。
【０１７２】
本発明の化合物は、公知の出発原料および方法を用い、以下の反応スキームおよび実施例を参照すれば、製造することができる。本明細書に論じる化合物の特異的位置を指すのに有益となるよう、一貫性のため、以下の付番規則を用いる。
2012527479.tif 000010
【０１７３】
次の合成法を、当業者に二環系の適切な３位基を導入させる以下の実施例の反応と組合わせることにより、特定の７位置換ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン環系を製造することができる。
2012527479.tif 000011
【０１７４】
上記反応は、公知であり（ＷＯ２００５／６３７５５）、例えば、２−フルオロ−３−メトキシフェニルボロン酸および５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １を、炭酸カリウムおよびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を含む１，４−ジオキサン／水混合物に添加して、加熱することにより、実施することができる。化合物２および３は、残渣から単離して、カラムクロマトグラフィーにより分離してもよい。
2012527479.tif 000012
【０１７５】
５−クロロ−７−（２−フルオロ−３−メトキシフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  ２を、炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、化合物４を合成することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物４を提供してもよい。
2012527479.tif 000013
【０１７６】
上記反応は、公知であり（ＷＯ２００５／６３７５５およびＷＯ２００８／１３４０３５）、例えば、３−ブテニルマグネシウムクロリドを、ＴＨＦ／ＮＭＰ中の５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １および鉄（ＩＩＩ）アセチルアセトナートの溶液に添加することにより、実施することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物５および６を提供してもよい。
2012527479.tif 000014
【０１７７】
７−（ブタ−３−エニル）−５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  ５を、炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、化合物７を合成することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物７を提供してもよい。他のアニリンを同様に用いて、フェニル環上での様々な置換様式を提供することができる。
2012527479.tif 000015
【０１７８】
上記反応は、公知であり（ＷＯ２００８／６３６７１）、例えば、ＨＯＡｔおよびＫＣＮを、ＤＭＦ中の５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １の溶液に添加して、加熱することにより、実施することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物８および９を提供してもよい。
2012527479.tif 000016
【０１７９】
５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−カルボニトリル  ８を、炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、化合物１０を合成することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１０を提供してもよい。また、様々なアニリンをこの反応で用いて、フェニル環上での様々な置換様式を変化させることができる。
2012527479.tif 000017
【０１８０】
上記反応は、公知であり（ＷＯ２００８／６３６７１）、例えば、５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を、ＴＨＦ中の（４−フルオロベンジル）亜鉛クロリドの溶液に添加して、加熱することにより、実施することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１１および１２を提供してもよい。
2012527479.tif 000018
【０１８１】
５−クロロ−７−（４−フルオロベンジル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １１を、炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、化合物１３を合成することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１３を提供してもよい。
2012527479.tif 000019
【０１８２】
上記反応は、公知であり（ＵＳ６１９４４１０）、例えば、５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １を、炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、実施することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１４および１５を提供してもよい。
2012527479.tif 000020
【０１８３】
上記反応は、公知であり（ＥＰ１３５４８８４）、例えば、ジエチルマロナートを、ＴＨＦ中の水素化ナトリウムの懸濁物に添加して、５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  １を添加して加熱することにより、実施することができる。残渣をシリカのカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１８および１９を提供してもよい。
2012527479.tif 000021
【０１８４】
ジエチル２−（５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）マロナート  １８を炭酸セシウム、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、（±）−ＢＩＮＡＰおよび３−クロロアニリンを含む１，４−ジオキサン中で加熱することにより、化合物２０を合成することができる。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物２０を提供してもよい。
【０１８５】
最終化合物の一般的調製
前述のスキームから得られた化合物は、本明細書に記載された式Ｉおよび式Ｉａ／Ｉｂの化合物の合成に有用な中間体である。更なる複素環基をそのような化合物に添加する方法は、当該技術分野で公知であり、一般的適用性のある代表的な方法を、本明細書に描写しており、以下の実施例にも例示する。
2012527479.tif 000022
【０１８６】
ビルスマイヤー・ハック反応（Ｖｉｌｓｍｅｉｅｒ−Ｈａａｃｋ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）を用いて、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン  ２１を、ＤＭＦ中のオキシ塩化リンと反応させることにより、構造２２の化合物を調製してもよい。水での後処理後、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、アルデヒド２２を提供してもよい。
2012527479.tif 000023
【０１８７】
得られたアルデヒド（２２）を、塩基、例えばピペリジンを含むエタノール中のヒダントインと反応させて、構造２３で示される所望のピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イルメチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを与えることができる。更に、対応するチアゾリジン−２，４−ジオンおよび化合物２３のロダニン誘導体を、前述の方法を用いて合成することができる。
【０１８８】
以下の実施例は、本明細書を例示しており、それを限定するものではない。質量分析ピークを同定すると、それは、期待された化合物またはそのプロトン化形態に対応する実験値であり、所望の化合物が得られた証拠として提供される。
【実施例】
【０１８９】
実施例１
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000024
ＤＭＦ  １．５ｍｌ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２００ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）に、ＰＯＣｌ３（３５８μＬ、３．９２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、室温で一晩撹拌した。混合物を氷浴で０℃に冷却し、その後、６Ｍ  ＮａＯＨで中和した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  １６５ｍｇを黄色固体として得た（収率７０％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝１８２）
2012527479.tif 000025
【０１９０】
ジオキサン  １．５ｍｌ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１２０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）に、３−クロロアニリン（３５μＬ、３．３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを橙色固体として得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２７３）
2012527479.tif 000026
【０１９１】
ＥｔＯＨ  １ｍｌ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（５４ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（５４μＬ、０．５５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波（２００Ｗ）中、８０℃で６０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３５５）
【０１９２】
実施例２
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000027
ＥｔＯＨ  １ｍｌ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（２２ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）およびピペリジン（５４μＬ、０．１８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波（２００Ｗ）中、８０℃で６０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７２）
【０１９３】
実施例３
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−２−チオキソチアゾリジン−４−オンの合成
2012527479.tif 000028
ＥｔＯＨ  １ｍｌ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）に、ロダニン（２４ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１８μＬ、０．１８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波（２００Ｗ）中、８０℃で１０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−２−チオキソチアゾリジン−４−オンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３８８）
【０１９４】
実施例４
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−１−メチルイミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000029
ＥｔＯＨ  ０．５ｍｌ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（２０ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）に、１−メチルイミダゾリン−２，４−ジオン（８．４ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）およびピペリジン（７．５μＬ、０．０７４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−１−メチルイミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３６９）
【０１９５】
実施例５
メチル３−（３−（（４−オキソ−２−チオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアートの合成
2012527479.tif 000030
ジオキサン／水（２８５０μＬ／１５０μＬ）中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１１５ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）に、３−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸（１７１ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（６２３ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を窒素下で１０分間脱気し、その後、ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ（２３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１０５℃で一晩加熱した。水を添加して、得られた固体をろ過により単離した。その後、固体をジクロロメタンに溶解して水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させてシリカのプラグに通した。得られた溶液を、真空濃縮して、３−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアート  １２５ｍｇを黄色固体として得た（収率７０％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２８２）
2012527479.tif 000031
【０１９６】
ＥｔＯＨ  ０．５ｍｌ中の３−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアート（４０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）に、ロダニン（１９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１４μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、それを三晩行った。形成された固体をろ過により単離し、分取ＴＬＣ（１％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、メチル３−（３−（（４−オキソ−２−チオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアートを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３９７）
【０１９７】
実施例６
メチル３−（３−（（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアートの合成
2012527479.tif 000032
ＥｔＯＨ  ０．５ｍｌ中の３−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアート（２７ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（１１ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）およびピペリジン（９．５μＬ、０．０９６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で一晩撹拌した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、メチル３−（３−（（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアート  ２７ｍｇを橙色固体として得た（収率７４％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３８１）
【０１９８】
実施例７
３−（３−（（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）安息香酸の合成
2012527479.tif 000033
ＥｔＯＨ中のメチル３−（３−（（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）ベンゾアート（２５ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）に、６Ｍ  ＮａＯＨ  １ｍＬを添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧除去した。水を添加して、混合物を１Ｍ  ＨＣｌで中和した。得られた固体をろ過により単離して風乾し、３−（３−（（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）安息香酸を得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３６７）
【０１９９】
実施例８
５−（（５−（３−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000034
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３９ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）に、３−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）アニリン（９０ｍｇ、０．５２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波（２００Ｗ）中、１２０℃で５０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（３−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  ４８ｍｇを得た（収率７０％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３１９）
2012527479.tif 000035
【０２００】
ＥｔＯＨ  ０．５ｍＬ中の５−（３−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（４８ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（１８ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１５μＬ、０．１５１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ過により単離して、ＤＭＦに溶解した。不溶物をろ別し、得られたろ液をＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（３−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４１８）
【０２０１】
実施例９
５−（（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000036
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、３−ｔｅｒｔ−ブチルアニリン（２０６ｍｇ、１．３８１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  ７８ｍｇを得た（収率９６％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２９５）
2012527479.tif 000037
【０２０２】
ＥｔＯＨ中の５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３９ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２８ｍｇ、０．２８０ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１３μＬ、０．１３３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７７）
【０２０３】
実施例１０
５−（（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000038
ＥｔＯＨ中の５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３９ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（１６ｍｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１３μＬ、０．１３３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３９４）
【０２０４】
実施例１１
５−（（５−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000039
ＥｔＯＨ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（３８ｍｇ、０．３８０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５μＬ、０．０２８ｍｍｏｌ）、および酢酸アンモニウム（８８ｍｇ、１．１４３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ過により単離してＨＰＬＣにより精製し、５−（（５−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２４５）
【０２０５】
実施例１２
５−（（５−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000040
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、４−（４−メチルピペラジン−１−イル）アニリン（２６４ｍｇ、１．３８１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して、５−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。残渣を更に精製せずに、次のステップで用いた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３３７）
2012527479.tif 000041
【０２０６】
ＥｔＯＨ中の５−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５６ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（１７ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１７μＬ、０．１６７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。溶媒を減圧除去し、その後、固体をＭｅＯＨに再溶解して、音波処理した。不溶物をろ別し、ろ液をＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４１９）
【０２０７】
実施例１３
５−（（５−（３−（（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000042
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（４０ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）に、３−（（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）アニリン（１１５ｍｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１２０分間加熱した。ＥｔＯＡｃを混合物に添加して、水で洗浄した。その後、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて溶媒を減圧除去し、５−（３−（（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。得られた固体を更に精製せずに、次のステップで用いた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３１９）
2012527479.tif 000043
【０２０８】
ＥｔＯＨ中の５−（３−（（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（７４ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２３ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２３μＬ、０．２３３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で４８時間加熱し、その後、ＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（３−（（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４０１）
【０２０９】
実施例１４
５−（（５−（ピペリジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000044
ＤＭＦ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、３−クロロフェノール（４２ｍｇ、０．３３１ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１９０ｍｇ、１．３８０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で数時間加熱した。水を添加し、形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（３−クロロフェノキシ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  ７０ｍｇを橙色固体として得た（収率９３％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２７４）
2012527479.tif 000045
【０２１０】
ＤＭＦ中の５−（３−クロロフェノキシ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３０ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（１０．９ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２１．８μＬ、０．２１８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。水を添加し、形成された固体をろ過により単離して、５−（（５−（ピペリジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３１３）
【０２１１】
実施例１５
５−（（５−（３−（（ジエチルアミノ）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000046
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、３−（（ジエチルアミノ）メチル）アニリン（１４８ｍｇ、０．８２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１４０分間加熱した。ジクロロメタンを添加して、水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧濃縮した。得られた溶液をＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により調製して、５−（３−（（ジエチルアミノ）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  １０ｍｇを得た（収率１１％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３２４）
2012527479.tif 000047
【０２１２】
ＥｔＯＨ中の５−（３−（（ジエチルアミノ）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（３ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）およびピペリジン（３μＬ、０．０３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。生成物をＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（３−（（ジエチルアミノ）メチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４０６）
【０２１３】
実施例１６
５−（（５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000048
ＮＭＰ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、１−メチルホモピペラジン（１０３μＬ、０．８２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１４０℃で１０分間加熱した。ジクロロメタンおよび水で洗浄して、生成物をジクロロメタンに抽出した。その後、有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧濃縮し、５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２６０）
2012527479.tif 000049
【０２１４】
ＥｔＯＨ中の５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３６ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（１４ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１４μＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱し、ＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３４２）
【０２１５】
実施例１７
５−（（５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000050
ＥｔＯＨ中の５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３６ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（１６ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１４μＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱し、ＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３５９）
【０２１６】
実施例１８
５−（（５−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000051
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（４０ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）に、３−（４−メチルピペラジン−１−イル）アニリン（１２７ｍｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で加熱した。ジクロロメタンおよび水を添加して、生成物をジクロロメタンに抽出した。その後、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧濃縮し、５−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３３７）
【０２１７】
実施例１９
５−（（５−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000052
ＥｔＯＨ中の５−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（７４ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２２ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２２μＬ、０．２２１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。形成された固体をろ去して、ろ液をＨＰＬＣにより調製し、５−（（５−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４１９）
【０２１８】
実施例２０
５−（（５−（３−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000053
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（４０ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）に、３−（２−モルホリノエトキシ）アニリン（１４７ｍｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で加熱した。ジクロロメタンを添加して、水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧濃縮し、５−（３−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。その固体を更に精製せずに、次のステップで用いた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３６８）
2012527479.tif 000054
【０２１９】
ＥｔＯＨ中の５−（３−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（８１ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２７ｍｇ、０．２７０ｍｍｏｌ）およびピペラジン（２２μＬ、０．２２１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で４８時間加熱した。その後、溶液をＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（３−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４５０）
【０２２０】
実施例２１
５−（（５−（３−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000055
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、３−イソプロポキシアニリン（１２５ｍｇ、０．８２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱した。生成された固体をろ過により単離し、その後、分取ＴＬＣ（２％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、５−（３−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２９７）
2012527479.tif 000056
【０２２１】
ＥｔＯＨ中の５−（３−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（８０ｍｇ、０．２７０ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２７ｍｇ、０．２７０ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２７μＬ、０．２７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で数時間加熱した。生成された固体をろ過により単離して、５−（（５−（３−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７９）
【０２２２】
実施例２２
５−（（５−（イソブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000057
アセトニトリル中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（２０ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）に、２−メチルプロパン−１−アミン（２２μＬ、０．２２１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱して、所望の生成物、５−（イソブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを生成した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２１９）
2012527479.tif 000058
【０２２３】
アセトニトリル中の５−（イソブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（２４ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（１１ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１１μＬ、０．１１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃で４８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、形成された固体をろ過により単離して、５−（（５−（イソブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３０１）
【０２２４】
実施例２３
５−（（５−（４−（２−ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000059
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）アニリン（１４９ｍｇ、０．８２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１００分間加熱した。水およびジクロロメタンを添加して、生成物をジクロロメタンに抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧濃縮し、５−（４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４０８）
2012527479.tif 000060
【０２２５】
ＥｔＯＨ中の５−（４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（９０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２８ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２８μＬ、０．２７６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱し、それを３回行った。溶媒を減圧除去して、ＭｅＯＨを添加した。不溶物をろ去し、ろ液をＨＰＬＣにより精製して、５−（（５−（４−（２−ジメチルアミノ）エトキシ）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４０８）
【０２２６】
実施例２４
５−（（５−（イソプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000061
アセトニトリル中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（２０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に、イソプロピルアミン（１９μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。所望の生成物、５−（イソプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドが溶液として形成された。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２０５）
【０２２７】
この溶液に、ヒダントイン（２２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２２μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱し、それを２回行った。溶液を室温まで放冷し、その後、形成された固体をろ過により単離して、５−（（５−（イソプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２８７）
【０２２８】
実施例２５
５−（（５−（２−フルオロエチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000062
ＡＣＮ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（２０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に、２−フルオロエタンアミン塩酸塩（２２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱した。所望の生成物、５−（２−フルオロエチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドが、溶液として形成された。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２０９）
【０２２９】
この溶液に、ヒダントイン（２２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２２μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱し、それを２回行った。溶液を室温まで放冷し、その後、形成された固体をろ過により単離して、５−（（５−（２−フルオロエチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２９１）
【０２３０】
実施例２６
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000063
ＤＭＦ  １．５ｍｌ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（２００ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）に、ＰＯＣｌ３（３５８μＬ、３．９２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌した。混合物を氷浴で０℃に冷却し、その後、６Ｍ  ＮａＯＨで中和した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  １６５ｍｇを黄色固体として与えた（収率７０％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝１８２）
2012527479.tif 000064
【０２３１】
ジオキサン  １．５ｍｌ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１２０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）に、３−クロロアニリン（３５１μＬ、３．３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で１０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを橙色固体として与えた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２７３）
2012527479.tif 000065
【０２３２】
ＥｔＯＨ  １ｍｌ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（５４ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（５４μＬ、０．５５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、８０℃で６０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３５５）
【０２３３】
実施例２７
５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000066
ＥｔＯＨ  １ｍＬ中の５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）に、２，４−チアゾリジンジオン（２２ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１８μＬ、０．１８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、８０℃で２０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（３−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７２）
【０２３４】
実施例２８
５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000067
ＤＭＦ／水（０．０５％）  ４ｍＬ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１５０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）に、２−フルオロフェニルボロン酸（１７４ｍｇ、１．２４５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８１２ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を窒素下で１０分間脱気した。その後、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）２（３０．３ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１００℃で１０分間加熱した。水を添加し、沈殿物をろ過により単離して風乾し、５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２４１）
2012527479.tif 000068
【０２３５】
ＥｔＯＨ  ３ｍＬ中の５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３３ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）に、チアゾリジン−２，４−ジオン（１６ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１４μＬ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。形成された固体をろ過により単離してＥｔＯＨで洗浄し、５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。
【０２３６】
実施例２９
（Ｚ）−５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−２−チオキソチアゾリジン−４−オンの合成
2012527479.tif 000069
チアゾリジン−２，４−ジオンの代わりにロダニンを用い、５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成と同様の手順を用いて、５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）−２−チオキソチアゾリジン−４−オンを調製した。
【０２３７】
実施例３０
（Ｚ）−５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000070
チアゾリジン−２，４−ジオンの代わりにヒダントインを用い、５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成と同様の手順を用いて、５−（（５−（２−フルオロフェニル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを調製した。
【０２３８】
実施例３１
５−（（５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000071
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１２０ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ）に、３−クロロアニリン（４２１ｍｇ、３．３１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２７３）
2012527479.tif 000072
【０２３９】
ＥｔＯＨ中の５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１１７ｍｇ、０．４３０ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（４３ｍｇ、０．４３０ｍｍｏｌ）およびピペリジン（４３μＬ、０．４３０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。溶媒を減圧除去し、残留する固体をＥｔＯＡｃで洗浄して、５−（（５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３５５）
【０２４０】
実施例３２
５−（（５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000073
ＥｔＯＨ中の５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（１１７ｍｇ、０．４３０ｍｍｏｌ）に、チアゾリジン−２，４−ジオン（５０ｍｇ、０．４３０ｍｍｏｌ）およびピペリジン（４３μＬ、０．４３０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で加熱すると、生成物が急速に形成された。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（４−クロロフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）チアゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７２）
【０２４１】
実施例３３
５−（（５−（３−（モルホリノメチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000074
ＤＭＦ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）に、３−（モルホリノメチル）アニリン（２３３ｍｇ、１．２１３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１４０℃で４０分間加熱した。水を添加し、形成された固体をろ過により単離して、５−（３−モルホリノメチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３３８）
2012527479.tif 000075
【０２４２】
ＥｔＯＨ中の５−（３−モルホリノメチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５６ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（１６．６ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）およびピペリジン（１６．８μＬ、０．１６６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ別し、ろ過してＨＰＬＣ、そしてその後ＴＬＣ（１％ＭｅＯＨ／ＤＭＣ）により調製し、５−（（５−（３−（モルホリノメチル）フェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４２０）
【０２４３】
実施例３４
５−（（５−（４−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンの合成
2012527479.tif 000076
ジオキサン中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（３０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）に、４−イソプロポキシアニリン（１２５ｍｇ、０．８２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（４−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒドを得たが、最終ステップで除去される不純物を含んでいた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２９７）
2012527479.tif 000077
【０２４４】
ＥｔＯＨ中の５−（４−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（７０ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）に、ヒダントイン（２３．６ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）およびピペリジン（２３．９μＬ、０．２３６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。形成された固体をろ過により単離して風乾し、５−（（５−（４−イソプロポキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）メチレン）イミダゾリジン−２，４−ジオンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３７９）
【０２４５】
実施例３５
５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３カルバルデヒドの合成
2012527479.tif 000078
ＤＭＦ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５．０ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）に、ＰＯＣｌ３（７．５ｍＬ、８１．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。氷を添加して、ＰＯＣｌ３をクエンチし、その後、混合物を１Ｍ  ＮａＯＨで中和した。得られた黄色沈殿物をろ過して乾燥させ、５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド  ４．８５ｇを黄色固体として得た（収率８２％）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝１８２）
【０２４６】
実施例３６
５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボン酸の合成
2012527479.tif 000079
ＤＭＦ中の５−クロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルバルデヒド（５９０ｍｇ、３．２５ｍｍｏｌ）に、５−カルボキシチオフェン−２−ボロン酸（６７０ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．１３ｍＬ、８．１１ｍｍｏｌ）およびジクロロ−（（ビス−ジフェニルホスフィノ）フェロセニル）パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン添加剤（１２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を窒素下で脱気し、その後、１００℃で２時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、１Ｎ  ＨＣｌで希釈してろ過した。回収された固体を１Ｎ  ＨＣｌで洗浄して、真空乾燥した。所望の生成物、５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボン酸を収率２２％で回収して、更に精製せずに次のステップで用いた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝２７４）
【０２４７】
実施例３７
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000080
反応フラスコで、５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボン酸（４３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、ＨＯＢｔ（２５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２２μＬ、０．１６ｍｍｏｌ）およびシクロプロピルメチルアミン（１１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と共に、ＤＭＦ（１ｍＬ）に添加した。反応混合物を室温で５分間撹拌し、その後、ＥＤＣ（３１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を更に２時間撹拌し、その後、水で希釈してろ過した。回収された固体を別の水、そしてその後エタノールで洗浄した。生成物、Ｎ−（シクロプロピルメチル）−５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミドを、固体として収率１９％で回収した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３２７）
【０２４８】
実施例３８
Ｎ−（２−エトキシエチル）−５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000081
シクロプロピルメチルアミンの代わりに２−エトキシエチルアミンを用い、実施例３７の手順に従って、目的化合物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３４５）
【０２４９】
実施例３９
５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000082
シクロプロピルメチルアミンの代わりに２−ヒドロキシプロピルアミンを用い、実施例３７の手順に従って、目的化合物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝３３１）
【０２５０】
実施例４０
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−５−（３−（（２，５−ジオキソイミダゾリジン−４−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000083
反応フラスコで、Ｎ−（シクロプロピルメチル）−５−（３−ホルミルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミド（１０ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）を、ヒダントイン（３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）およびピペリジン（３μＬ、０．０３ｍｍｏｌ）と共に、エタノール（０．５ｍＬ）に添加した。反応物をマイクロ波中、８０℃で１時間加熱し、その後、室温まで冷却して、水で希釈した。固体をろ過により回収し、水、５０％エタノール／水、そしてその後１００％エタノールで洗浄した。その物質を一晩、真空乾燥した。生成物、Ｎ−（シクロプロピルメチル）−５−（３−（（２，５−ジオキソイミダゾリジン−４−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）チオフェン−２−カルボキサミドを、固体として収率２９％で回収した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４０９）
【０２５１】
実施例４１
５−（３−（（２，５−ジオキソイミダゾリジン−４−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−（２−エトキシエチル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000084
実施例３８で生成されたアルデヒドを用い、実施例４０の手順を利用して、目的化合物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４２７）
【０２５２】
実施例４２
５−（３−（（２，５−ジオキソイミダゾリジン−４−イリデン）メチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−（２−エトキシプロピル）チオフェン−２−カルボキサミドの合成
2012527479.tif 000085
実施例３９で生成されたアルデヒドを用い、実施例４０の手順を利用して、目的化合物を提供した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋１＝４１３）
【０２５３】
生物学的データの試験方法
実施例４３
ＣＫ２アッセイ法
本明細書に記載された化合物の調節活性を、以下の方法による無細胞ＣＫ２アッセイにおいてインビトロで評価した。
【０２５４】
水溶液中の試験化合物を、容量１０μＬで、アッセイ希釈緩衝液（ＡＤＢ；２０ｍＭ  ＭＯＰＳ、ｐＨ７．２、２５ｍＭ  β−グリセロホスファート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  オルトバナジン酸ナトリウム、および１ｍＭ  ジチオトレイトール）１０μＬ、基質ペプチド（ＲＲＲＤＤＤＳＤＤＤ、１ｍＭの濃度でＡＤＢに溶解）１０μＬ、ヒト組換えＣＫ２（ＡＤＢに２５ｎｇ溶解；アップステート（Ｕｐｓｔａｔｅ））１０μＬを含む反応混合物に添加した。ＡＴＰ溶液（９０％  ７５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ＡＤＢに溶解させた７５μｍｏｌ  ＡＴＰ；１０％［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ（原液１ｍＣｉ／１００μｌ；３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ（パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）））１０μＬの添加により反応を開始させ、３０℃で１０分間保持した。反応物を０．７５％リン酸１００μＬでクエンチし、その後、ホスホセルロースフィルタープレート（ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））に移してろ過した。各ウェルを０．７５％リン酸で５回洗浄した後、プレートを５分間真空乾燥して、シンチレーション液１５μＬを各ウェルに添加した後、残留する放射能をワラック（Ｗａｌｌａｃ）ルミネッセンスカウンタを用いて測定した。
【０２５５】
実施例４４
ＰＩＭ−１アッセイ法
以下の手順を用いて、本発明の化合物のＰＩＭ−１キナーゼ活性をアッセイした。
ＰＩＭ−１および他のＰＩＭキナーゼをアッセイする他の方法、ならびに図１内の様々なキナーゼに対する活性をアッセイする方法は、当該技術分野で公知である。
【０２５６】
最終反応容量５０μＬ中で、組換えＰＩＭ−１（１ｎｇ）を１２ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．４ｍＭ  ＥＤＴＡ、１％グリセロール、０．００２％  ブリッジ３５（Ｂｒｉｊ  ３５）、０．０２％  ２−メルカプトエタノール、０．２ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ、１００μＭ  ＫＫＲＮＲＴＬＴＫ、１０ｍＭ  酢酸Ｍｇ、１５μＭ  ＡＴＰ、［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性  約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）、４％ＤＭＳＯ、および必要な濃度の試験阻害化合物と共にインキュベートした。マグネシウムＡＴＰ混合物の添加により、反応を開始させた。２３℃で４０分間インキュベートした後、反応物を０．７５％リン酸１００μｌの添加によりクエンチして、ホスホセルロースフィルタープレートでのろ過により、標識されたペプチドを回収した。プレートを０．０７５％リン酸（１００μｌ／ウェル）で４回洗浄し、その後、シンチレーション液（２０μｌ／ウェル）の添加後に、シンチレーションカウンタによりカウントを測定した。
【０２５７】
実施例４５
ＰＩＭ−２アッセイ法
ＤＭＳＯ（２μｌ）に溶解および希釈された試験化合物を、５×反応緩衝液（４０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、５ｍＭ  ＥＤＴＡ）１０μｌ、ヒト組換えＰＩＭ２溶液（希釈緩衝液（２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０；１ｍＭ  ＥＤＴＡ；５％グリセロール；０．０１％ブリッジ３５；０．１％  ２−メルカプトエタノール；１ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ）に溶解されたＰＩＭ−２  ４ｎｇ）１０μｌおよび水８μｌを含む反応混合物に添加した。ＡＴＰ溶液（４９％（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２；７５μＭ  ＡＴＰ）、１％［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ；原液１ｍＣｉ／１００μｌ；３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ（パーキン・エルマー））１０μｌおよび基質ペプチド溶液（１ｍＭの濃度で水に溶解したＲＳＲＳＳＹＰＡＧＴ）１０μｌの添加により反応を開始させて、反応物を３０℃で１０分間保持した。反応物を０．７５％リン酸１００μｌでクエンチして、ホスホセルロースフィルタープレート（ミリポア、ＭＳＰＨ−Ｎ６Ｂ−５０）に移してろ過した。０．７５％リン酸で４回洗浄した後、シンチレーション液（２０μｌ）を各ウェルに添加して、残留する放射能をワラックルミネッセンスカウンタを用いて測定した。
【０２５８】
実施例４６
細胞増殖調節活性
アラマー・ブルー色素（Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ  ｄｙｅ）（４℃保存、ウェルごとに２０μｌ使用）を用いた代表的な細胞増殖アッセイプロトコルを、以後に記載する。
９６穴プレートの設定および化合物処理
ａ．  細胞を破砕してトリプシン処理する。
ｂ．  血球計算板を用いて細胞を計数する。
ｃ．  培地１００μｌ中に細胞４，０００〜５，０００個／ウェルを入れて、以下のプレート配置に従って９６穴プレートに播種する。ウェルＢ１０〜Ｂ１２には細胞培地のみを添加する。ウェルＢ１〜Ｂ９では、細胞を有し、化合物は添加しない。
2012527479.tif 000086
ｄ．  ２×薬物希釈液１００μlを、上記のプレート配列に示された濃度で各ウェルに添加する。同時に、培地１００μlを対照ウェル（ウェルＢ１０〜Ｂ１２）に添加する。総容量を２００μl／ウェルとする。
ｅ．  加湿インキュベータ中、３７℃、５％ＣＯ２で４日間インキュベートする。
ｆ．  アラマー・ブルー試薬２０μlを各ウェルに添加する。
ｇ．  加湿インキュベータ中、３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートする。
ｈ．  マイクロプレートリーダを用いて、励起波長５４４ｎｍおよび発光波長５９０ｎｍで蛍光を記録する。
【０２５９】
アッセイにおいて、細胞を試験化合物と共に約４日間培養し、その後、色素を細胞に添加して、非還元色素の蛍光を約４時間後に検出する。異なる型の細胞（例えば、ＨＣＴ−１１６ヒト結腸直腸癌腫細胞、ＰＣ−３ヒト前立腺癌細胞、ＭＤＡ−ＭＢ２３１ヒト乳癌細胞、Ｋ−５６２ヒト慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）細胞、ＭｉａＰａｃａヒト膵臓癌腫細胞、ＭＶ−４ヒト急性骨髄性白血病細胞、およびＢｘＰＣ３ヒト膵臓腺癌細胞）を、そのアッセイに用いることができる。
【０２６０】
これらのインビトロおよび細胞アッセイにおける式Ｉの化合物の活性を、表１に要約する。
（表１）式Ｉの化合物の生理活性データ
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【０２６１】
本発明の代表的実施形態は、以下に列挙された実施形態を包含する。
１．  式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容しうるその塩：
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式中、Ｚ１−Ｚ４を含む二環系は、芳香族であり；
Ｚ１およびＺ２の一方は、Ｃであり、Ｚ１およびＺ２の他方は、Ｎであり；
Ｚ３およびＺ４は、独立して、ＣＲ５またはＮであり；
ここでＲ５は、ＨまたはＲ１であり得；
Ｒ１は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリール、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８であり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈおよび置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキルから選択され；
Ｘは、ＮＲ６、Ｏ、またはＳであり、ここでＲ６は、Ｈであるか、またはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、およびＣ２−Ｃ４アルキニルから選択される、置換されていてもよい基であり；
Ｙは、ＯまたはＳまたはＮＲ１０であり；
Ｒ１０は、Ｈ、ＣＮ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルケニル、置換されていてもよいＣ２−Ｃ４アルキニル、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルコキシ、または−ＮＲ７Ｒ８から選択され、ここでＲ７およびＲ８は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択されるか、
またはＲ７およびＲ８は、−ＮＲ７Ｒ８のＮと一緒になって、環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５〜８員環を形成していてもよく；
Ｗは、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、−ＯＲ７、−ＮＲ７Ｒ８、Ｓ（Ｏ）ｎＲ７、置換されていてもよいヘテロシクリル、置換されていてもよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、またはＣＲ７Ｒ８Ｒ９であり、
ここでｎは、０、１または２であり、
各Ｒ７およびＲ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、および置換されていてもよいヘテロアリールアルキルから選択され；
ここでＮＲ７Ｒ８中のＲ７およびＲ８はＮと一緒になって、任意に置換されていてもよく、かつ環員としてＮ、ＯおよびＳから選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよい、５〜８員環を形成していてもよい。
２．  Ｚ１がＮであり、Ｚ２がＣである、実施形態１の化合物。
３．  Ｚ３がＮである、実施形態１または２の化合物。
４．  Ｚ４がＣＲ５である、実施形態１〜３のいずれか一つの化合物。
５．  Ｘが、ＮＲ６またはＳである、実施形態１〜４のいずれか一つの化合物。
６．  Ｒ２が、Ｈ、Ｍｅである、実施形態１または２の化合物。
７．  Ｒ３およびＲ４が、両者ともＨである、実施形態１〜６のいずれか一つの化合物。
８．  Ｒ１が、Ｈ、Ｍｅ、ハロ、ＯＭｅ、またはＣＦ３である、実施形態１〜７のいずれか一つの化合物。
９．  ＹがＯである、実施形態１〜８のいずれか一つの化合物。
１０．  ＹがＳである、実施形態１〜８のいずれか一つの化合物。
１１．  Ｗが−ＮＨ−Ａであり、式中、Ａは、置換されていてもよいフェニルである、実施形態１〜８のいずれか一つの化合物。
１２．  Ｗが、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである、実施形態１〜８のいずれか一つの化合物。
１３．  Ｗが、置換されていてもよいフェニルである、実施形態１２の化合物。
１４．  式Ｉａまたは式Ｉｂの化合物であって、
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式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｘ、およびＹは、請求項１で定義された通りであり、
かつＡｒは、置換されていてもよいアリールである、
実施形態１の化合物。
１５．  表１中の化合物から選択される、実施形態１の化合物。
１６．  薬学的に許容しうる賦形剤と混合された、実施形態１〜１５のいずれか一つの化合物を含む医薬組成物。
１７．  治療における使用のための、実施形態１〜１５のいずれか一つの化合物。
１８．  血管障害、病原感染、または免疫障害の治療における使用のための、実施形態１７の化合物。
１９．  癌を治療するための使用のための、実施形態１７の化合物。
【手続補正書】
【提出日】平成24年2月16日(2012.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2012527479000001.app
【国際調査報告】
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