(57)【要約】  本発明は、（ａ）アマラキ抽出物、（ｂ）ザクロ抽出物、及び、（ｃ）少なくとも１つのカロテノイドから選択される少なくとも２つ、好ましくは全て、の組合せに関する。上記の組合せは抗酸化剤、細胞賦活化剤、及び、皮膚微細表面保護剤として機能する。上記の組合せは、好ましくは、皮膚塗布用の化粧用組成物に配合される。
2012527404.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
から選択される少なくとも２つを含む化粧用組成物。
【請求項２】
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の全てを含む、請求項１記載の化粧用組成物。
【請求項３】
前記アマラキ抽出物が、アマラキの果実の抽出物である、請求項１又は２記載の化粧用組成物。
【請求項４】
前記ザクロ抽出物が、ザクロの果実の抽出物である、請求項１乃至３のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項５】
前記カロテノイドが、天然又は合成由来のカロテノイドから選択される、請求項１乃至４のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項６】
前記カロテノイドが、プロビタミンＡ活性を有するカロテノイド及びプロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドから選択される、請求項１乃至５のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項７】
前記プロビタミンＡ活性を有するカロテノイドが、β−カロテン及びα−カロテンから選択される、請求項６記載の化粧用組成物。
【請求項８】
前記プロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドが、ゼアキサンチン、ルテイン及びリコペンから選択される、請求項６記載の化粧用組成物。
【請求項９】
前記プロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドが、リコペンである、請求項８記載の化粧用組成物。
【請求項１０】
前記アマラキ抽出物（乾燥物）の量が、化粧用組成物の全重量に対して、０．０００１〜５重量％である、請求項１乃至９のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１１】
前記ザクロ抽出物（乾燥物）の量が、化粧用組成物の全重量に対して、０．０００１〜５重量％である、請求項１乃至１０のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１２】
前記カロテノイド（乾燥物）の量が、化粧用組成物の全重量に対して、０．０００１〜５重量％である、請求項１乃至１１のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１３】
皮膚塗布用である、請求項１乃至１２のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１４】
抗老化化粧品用である、請求項１乃至１３のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１５】
抗酸化剤、抗老化剤及び保湿剤からなる群から選択される少なくとも１つを更に含む、請求項１４記載の化粧用組成物。
【請求項１６】
前記抗酸化剤が、アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体、没食子酸、没食子酸誘導体、トコフェロール、フェノール及びポリフェノールからなる群から選択される、請求項１５記載の化粧用組成物。
【請求項１７】
前記抗老化剤が、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、カルボン酸、カルボン酸誘導体、レチノイド、ビタミン及び植物抽出物からなる群から選択される、請求項１５記載の化粧用組成物。
【請求項１８】
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つを含む抗酸化剤。
【請求項１９】
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つを含む細胞賦活化剤。
【請求項２０】
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つを含む皮膚微細表面保護剤。
【請求項２１】
化粧用組成物の製造のための、
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つの組合せの使用。
【請求項２２】
抗酸化剤の製造のための、
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つの組合せの使用。
【請求項２３】
細胞賦活化剤の製造のための、
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つの組合せの使用。
【請求項２４】
皮膚微細表面保護剤の製造のための、
（ａ）アマラキ抽出物
（ｂ）ザクロ抽出物
（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド
の少なくとも２つの組合せの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、３つの有効成分の少なくとも２つ、好ましくは全て、の組合せ、当該組合せを含む化粧用組成物、及び、当該組合せの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
２０代半ばは老化の徴候を感じ始める最初の時期である。老化の徴候の典型的なものは、皮膚、特に顔の細かな皺である。また、多くの女性は皮膚の不均一なきめ及びトーンについても懸念を感じる。
【０００３】
皮膚は、外界と連続的に接触するので、体の他の組織よりも外界からの攻撃に曝されやすい。物理的刺激（紫外線、熱等）及び化学的毒性刺激（大気中の汚染物質、タバコ等）への皮膚の継続的な曝露は酸化ストレスを生じ、細胞の重要な構成器官に損傷を与える。
【０００４】
反応性酸素種（ＲＯＳ）は紫外線による生物的分子の刺激を含む反応により生成する。皮膚への過剰な紫外線の照射は多量の酸化性反応物を生成し、これが皮膚の抗酸化許容量を超えて、細胞内の反応性酸素種を増大させ、多くのＲＯＳ感受性シグナル経路を活性化させる（非特許文献１）。この反応は、繰り返され、且つ、伝播するので、結果的に皮膚組織を損傷しうる。
【０００５】
紫外線への慢性的な曝露は、遺伝子構造、遺伝子活性並びにタンパク質構造及び機能を変化させて、損傷を与える（非特許文献２）。これにより、活性タンパク質の損傷による酵素反応の異常、コラーゲン等の皮膚タンパク質の劣化、ミトコンドリアの変化によるエネルギー生成の不足、及び、細胞膜の崩壊による細胞死を招くと考えられている。
【０００６】
皮膚については、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）中に組織変性が観察され、しなやかさ及び弾力性を失った、臨床的には光老化皮膚と称される状態となる。この皮膚は、きめが粗く深い皺を伴ったざらざらとした皮のような外観であり、表面に不均一なしみが見られる。細胞外マトリックスのタンパク質（コラーゲン、エラスチン、グルコプロテイン等）の合成のバランスの変化、並びに、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）によるこれらの劣化は、光老化皮膚の状態の再現に寄与することが知られている（非特許文献３）。マトリックスメタロプロテアーゼは紫外線又は赤外線照射等の様々な細胞外刺激、成長因子、サイトカイン等によって誘起され、表皮基底膜の劣化及び皺形成に関与しているとされている（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【特許文献１】Sander CS, Chang H, Hamm F, Elsner P, and Thiele JJ, “Role of oxidative stress and the antioxidant network in cutaneous carcinogenesis”, Int. J. Dermatol. 43 (2004) 326-335
【特許文献２】Rittie L and Fisher DJ, “UV-Light-Induced Signal Cascades and Skin Aging”, Aging Research Reviews. 1 (2002) 705-720
【特許文献３】Kossodo S, Wong WR, Simon G, and Kochevar IE, “Effects of UVR and UVR-induced cytokines on production of extracellular matrix proteins and proteases by dermal fibroblasts cultured in collagen gels”, Photochem. Photobiol. 79 (2004) 86-93
【特許文献４】Amano S, Ogura Y, Akutsu N, Matsunaga Y, Kadoya K, Adachi E, and Nishiyama T, “Protective effect of matrix metalloproteinase inhibitors against epidermal basement membrane damage: Skin equivalents partially mimic photoageing process”, Br. J. Dermatol. 153, 37-46
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
酸化ストレスによる上記の変化は光老化の進行、並びに、皮膚表面の細かい線及び皺の顕在化に寄与する。したがって、酸化ストレスに対する保護は明らかに化粧品に有益である。
【０００９】
特に、上記酸化ストレスは、皮膚の微細な表面が粗くなることに関する早すぎる老化の主な原因の１つである。したがって、酸化ストレスに対して保護可能な化粧品は皮膚の微細表面の粗面化に対して有用であり、これにより、皮膚に若々しい外観を与えることができる。
【００１０】
一方、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）は人間にとって基礎的なエネルギーの形態である。この代謝性燃料ともいえる物質は筋肉収縮等の人体の機能の多くに使用されている。ＡＴＰは細胞代謝に不可欠であり、有効に機能するために十分なエネルギーを細胞に与える。ＡＴＰは主にグルコース及び酸素を消費することでミトコンドリアにおいて生産される化学エネルギーを含む分子である。ミトコンドリアはアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）及びリン酸を使用して、グリコリシスから始まる複数のプロセスを経てＡＴＰを生産する。電子伝達系として知られる最終段階は多量のＡＴＰを生成する。この段階ではプロトンがミトコンドリアの内膜空間に集積し、ポテンシャルエネルギーを形成して、ミトコンドリアがＡＴＰを生産する力を生成することができる。
【００１１】
ＡＴＰ生産を促進させるためのミトコンドリアの活性化は細胞の賦活化につながり、細胞エネルギーの上昇は人体の全ての細胞機能、特に皮膚を刺激するので、化粧品に有用である。
【００１２】
本発明の目的は、体、特に皮膚を酸化ストレスから保護し、細胞を賦活化し、皮膚の微細な表面を保護することが可能であり、特に皮膚用の、抗老化化粧品等の化粧品に有用な、新規な抗老化有効成分を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の目的は、特定の有効成分、すなわち、（ａ）アマラキ抽出物、（ｂ）ザクロ抽出物、及び、（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド、の少なくとも２つ、好ましくは３つの組合せによって達成することができる。上記の組合せは、抗酸化剤、細胞賦活化剤及び皮膚微細表面保護剤の有効成分として機能することができる。
【００１４】
前記アマラキ抽出物は、アマラキの果実の抽出物であることが好ましく、前記ザクロ抽出物は、ザクロの果実の抽出物であることが好ましい。
【００１５】
前記カロテノイドは、天然又は合成由来のカロテノイドから選択可能である。更に、前記カロテノイドは、プロビタミンＡ活性を有するカロテノイド及びプロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドから選択可能である前記プロビタミンＡ活性を有するカロテノイドは、β−カロテン及びα−カロテンから選択されることができる。一方、前記プロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドは、ゼアキサンチン、ルテイン及びリコペンから選択されることができる。好ましいプロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドは、リコペンである。
【００１６】
上記の組合せは化粧用組成物に配合可能である。前記アマラキ抽出物（乾燥物）の量、前記ザクロ抽出物（乾燥物）の量、及び、前記カロテノイド（乾燥物）の量は、それぞれ、化粧用組成物の全重量に対して、０．０００１〜５重量％であることができる。
【００１７】
前記化粧用組成物は、好ましくは皮膚塗布用又は皮膚外用であり、また、好ましくは抗老化化粧品用である。
【００１８】
前記化粧用組成物は、抗酸化剤、抗老化剤及び保湿剤からなる群から選択される少なくとも１つを更に含むことができる。前記抗酸化剤は、アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体、没食子酸、没食子酸誘導体、トコフェロール、フェノール及びポリフェノールからなる群から選択されてもよい。前記抗老化剤は、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、カルボン酸、カルボン酸誘導体、レチノイド、ビタミン及び植物抽出物からなる群から選択されてもよい。
【００１９】
本発明の他の側面は、抗酸化剤、細胞賦活化剤、及び、皮膚微細表面保護剤の製造のための、（ａ）アマラキ抽出物、（ｂ）ザクロ抽出物、及び、（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド、の少なくとも２つ、好ましくは３つの組合せの使用である。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】実施例１〜４及び比較例１〜４におけるビチロシンの形成を示すグラフ
【図２】実施例６及び対照のフィブロブラストの写真
【図３】実施例６及び対照のケラチノサイトの写真
【図４】実施例７で処理されたもの及び処理されなかったものの皮膚表面のスコア及び皮膚表面の変化を示すグラフ
【図５】実施例７で処理されたもの及び処理されなかったものの皮膚表面の型を示す写真
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本出願人は、驚くべきことに、（ａ）アマラキ抽出物、（ｂ）ザクロ抽出物、及び、（ｃ）少なくとも１つのカロテノイド、の少なくとも２つ、好ましくは３つの組合せが、強力な、抗酸化剤、細胞賦活化剤及び皮膚微細表面保護剤として機能することを見出した。前記組合せは、新規の抗老化成分として有用であり、化粧用組成物中に好ましく配合される。
【００２２】
（アマラキ抽出物）
アマラキはインド原産であり、トウダイグサ科エンブリカ属に属する。アマラキは、学名をフィランサス  エンブリカ（Phyllanthus emblica）、別名をエンブリカ  オフィシナリス（Emblica officinalis）、英名をエンブリック  ミロバラン（Emblic myrobalan）、インディアン  グースベリー（Indian gooseberry）、そして和名をコミカソウ、ユカン又はアンマロク等と呼ばれている。
【００２３】
本発明で使用されるアマラキ抽出物は、特に限定されるものではないが、好ましくは、アマラキの果実の抽出物であり、アマラキの果実の果肉及び／又は果皮を抽出することができる。アマラキの果実の果肉及び／又は果皮は乾燥していてもよい。抽出を効率良く行うために、アマラキの果実の果肉及び／又は果皮は好ましくは粉砕又は細分化される。
【００２４】
アマラキ抽出物を得る方法は特に限定されず、例えば、様々な溶媒を使用してアマラキの果実を抽出してもよい。抽出は室温で又は高温下で行われてよい。また、溶媒の撹拌を行ってもよい。
【００２５】
抽出に用いる溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール類（エチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）等が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール等の極性溶媒であり、特に好ましくは、水、エタノールである。これらの溶媒は単独で用いてもよく、また２種以上を併用してもよい。
【００２６】
このようにして得られる抽出物は、そのまま用いることができ、また、精製、濃縮、希釈等の処理後に使用することもできる。抽出物の乾燥物も使用可能である。
【００２７】
アマラキ抽出物として、ロナ（Rona）社（米国、ニューヨーク州）より市販されているエンブリカ（Emblica（登録商標））を使用してもよい。
【００２８】
本発明の化粧用組成物では、組成物の全重量を基準にして、アマラキ抽出物（乾燥物）を０．０００１〜５重量％、好ましくは０．００１〜３重量％、より好ましくは０．０１〜２重量％、更により好ましくは０．１〜１重量％使用することができる。
【００２９】
アマラキ抽出物はフリーラジカル（ヒドロキシラジカル及びスーパーオキシドアニオン）捕捉機能を有する。更に、アマラキ抽出物は人体中の酸化の主要な原因の１つである鉄及び銅をキレート化する能力を有する。人体では、紫外線への曝露により、体内のフェリチン等のイオン貯蔵性タンパク質から鉄及び銅イオンの放出が誘起される。これらのイオンは過酸化水素と反応して、非常に活性が高く、皮膚を含めた体組織を損傷するフリーラジカルを生成する。アマラキ抽出物は鉄イオン及び銅イオンをキレート化できるので、抗酸化作用を示す。
【００３０】
アマラキ抽出物の抗酸化作用はザクロ抽出物及び／又はカロテノイドとの組合せによって、相乗的に向上する。
【００３１】
（ザクロ抽出物）
ザクロは、Punica granatumの学名を有する。ザクロはイラン、北インド及びヒマラヤ等の南アジア原産である。
【００３２】
本発明で使用されるザクロ抽出物は、特に限定されるものではないが、好ましくは、ザクロの果実の抽出物であり、ザクロの果実の果肉及び／又は果皮を抽出することができる。ザクロの果実の果肉及び／又は果皮は乾燥していてもよい。抽出を効率良く行うために、ザクロの果実の果肉及び／又は果皮は好ましくは粉砕又は細分化される。
【００３３】
ザクロ抽出物を得る方法は特に限定されず、例えば、様々な溶媒を使用してザクロの果実を抽出してもよい。抽出は室温で又は高温下で行われてよい。また、溶媒の撹拌を行ってもよい。
【００３４】
抽出に用いる溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール類（エチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）等が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール等の極性溶媒であり、特に好ましくは、水、エタノールである。これらの溶媒は単独で用いてもよく、また２種以上を併用してもよい。
【００３５】
このようにして得られる抽出物は、そのまま用いることができ、また、精製、濃縮、希釈等の処理後に使用することもできる。抽出物の乾燥物も使用可能である。
【００３６】
ザクロ抽出物として、アルバン・ミューラー（Alban Muller）社より市販されているアミポリン（Amiporine（登録商標））を使用してもよい。
【００３７】
本発明の化粧用組成物では、組成物の全重量を基準にして、ザクロ抽出物（乾燥物）を０．０００１〜５重量％、好ましくは０．００１〜３重量％、より好ましくは０．０１〜２重量％、更により好ましくは０．１〜１重量％使用することができる。
【００３８】
ザクロ抽出物は、脂質過酸化の低減、及び、フリーラジカル捕捉等の抗酸化性を有する。更に、ザクロ抽出物は、カタラーゼ、ＳＯＤ等の解毒酵素の活性及びグルタチオン濃度を増大させる。ザクロ抽出物の抗酸化作用は当該抽出物中のフラボノイド及びポリフェノールが原因であり得る。更に、ザクロ抽出物はＵＶＡ介在細胞変性及びＵＶＢ介在ケラチノサイト酸化損傷において保護的役割を果たしうる。ザクロ抽出物はＵＶＢによる細胞の生育能力低下、ＵＶＢによる細胞内グルタチオン濃度減少、及び、ＵＶＢによる脂質過酸化増大を阻害することができる。したがって、ザクロ抽出物は紫外線による酸化ストレス、そして、最終的には光老化から、皮膚を保護することができる。
【００３９】
ザクロ抽出物の抗酸化作用はアマラキ抽出物及び／又はカロテノイドとの組合せによって、相乗的に向上する。
【００４０】
また、ザクロ抽出物は、細胞内のミトコンドリアの活性化に基づき、細胞、特にケラチノサイトの賦活化作用を有する。細胞内のミトコンドリアの活性化はミトコンドリア内のＡＴＰ産生を促進する。産生されたＡＴＰは細胞を賦活化する。そして、皮膚細胞が若い細胞のように振る舞うための活力を与えられ、老化の徴候に対抗しうるという点で、細胞賦活化作用は特に皮膚細胞に好ましい。
【００４１】
ザクロ抽出物の細胞賦活化作用はアマラキ抽出物及び／又はカロテノイドとの組合せによって、相乗的に向上する。
【００４２】
健康状態を維持するために、複数種類の細胞からなる臓器である皮膚は、それ自体が良好な状態でなければならない。細胞情報交換を介して、ある皮膚細胞は他の皮膚細胞に何が起こっているのかを認識することができ、環境状態の差異を検出して対応することができる。この情報交換は、制御された応答を生成するチャンネルタンパクを介して隣接する細胞へシグナルを伝達する、又は、皮膚の一体性を維持するために一部の細胞を残りの細胞集団から隔離することに関わっている。
【００４３】
細胞情報交換のための様々なチャンネルタンパクが存在する。これらは細胞膜上に位置しており、細胞間又は細胞内から細胞外環境へ特定の物質を移動させる。
【００４４】
アクアポリン（ＡＱＰ）は細胞膜を介して水を主に輸送するチャンネルを形成するトランス膜タンパクの一群である。これらは、浸透により水を輸送し、濃度勾配により小さな溶解物を受動的に輸送する。この細胞及び細胞外マトリックスの間の水の移動は表皮基底と角質間の短い水の循環を提供し、水量を維持する。
【００４５】
現在のところ、１３のアクアポリンが知られている。既知のアクアポリン中、ＡＱＰ３はヒトのケラチノサイトの細胞膜に豊富に発現している。したがって、ＡＱＰ３を調節することは皮膚の全水分を維持し、皮膚細胞のホメオスタシスを維持する重要な事項となり得ることであり、皮膚の健康状態を維持することができる。
【００４６】
ザクロ抽出物はＡＱＰ３の量を増大することができる。したがって、ザクロ抽出物は皮膚の水和に寄与し、これにより、皮膚は、脱水により生じる細かい線等の老化の徴候に対抗することができる。
【００４７】
（カロテノイド）
カロテノイドという表現は、本発明では、プロビタミンＡ活性を有するカロテノイドとプロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドの両方を意味すると解される。プロビタミンＡ活性を有するカロテノイドの中では、例えば、β−カロテン又はα−カロテンが挙げられる。プロビタミンＡ活性を有しないカロテノイドの中では、例えば、ゼアキサンチン、ルテイン又はリコペンを挙げることができる。
【００４８】
本発明で用いられるカロテノイドは、天然又は合成由来のものとすることができる。天然由来という表現は、天然成分から得られた、純粋な状態又は溶液の状態（溶液中におけるカロテノイドの濃度は任意である）の、カロテノイドを意味すると解される。合成由来という表現は、化学合成により得られた、純粋な状態又は溶液の状態（溶液中におけるカロテノイドの濃度は任意である）の、カロテノイドを意味すると解される。
【００４９】
カロテノイドが天然由来の場合、それは、in vivoで培養された、又はin vitro培養から誘導された全植物（whole plant）由来の植物材料から得られうる。In vivo培養という表現は、通常のタイプのあらゆる培養、すなわち屋外又は温室の土壌中での、或いは土壌を用いない培養、を意味すると理解される。In vitro培養という表現は、人工的に植物又は植物の一部の生成を可能にする、当業者に公知の全ての技術を意味すると解される。In vitroでの植物細胞の成育中の物理化学的条件により付与される選択圧は、in vivoで培養された植物とは異なって、一年を通して利用可能な標準植物材料を得ることを可能にする。
【００５０】
本発明では、好ましくは、in vivo培養から誘導された植物が使用される。
【００５１】
当業者に公知のあらゆる抽出方法が、本発明に用いられるカロテノイドの調製に用いられうる。カロテノイドは、アルコール性、特にエタノール性の、溶液形態とすることができる。カロテノイドは、脂質（油）又は脂質−アルコール溶液形態とすることもできる。
【００５２】
本発明にかかる好ましいカロテノイドは、β−カロテン及びリコペンである。最も好ましくは、リコペンが用いられる。
【００５３】
リコペンは、成熟した果実、特にトマト（Solanum Lycopersicum）に見られる天然顔料である。その構造は、β−カロテンの構造に近い。これは、シス又はトランス形態をとることができる。
【００５４】
トマト抽出物中のリコペンを使用してもよい。例えば、リコレッド（Lycored）社が製造販売している、リコペンに富んだトマト抽出物であるリコマト（Lyc-O-Mato（登録商標））を使用することができる。また、シメックス（Chimex）社によってメキソリル（Mexoryl（登録商標））SAQの名称で市販されている、ポリカプロラクトン重合体でカプセル化されているトマトのリコペンを使用することもできる。
【００５５】
本発明によれば、リコペンの生物利用能を改善することを目的としたリコペンを含有するあらゆる調製物、及び、新規製造方法により得られるリコペンを含有するあらゆる新規原料物質を用いることも可能である。
【００５６】
本発明に用いることができるカロテノイドの量は、当然に、所望の効果に依存し、且つ、大幅に変化させることができる。
【００５７】
本発明の化粧用組成物では、組成物の全重量を基準にして、カロテノイド（純粋物）を０．０００１〜５重量％、好ましくは０．００１〜３重量％、より好ましくは０．０１〜２重量％、更により好ましくは０．１〜１重量％使用することができる。
【００５８】
なお、当業者であれば、溶液の形態のカロテノイド、例えば植物抽出物を用いる場合、最終的な組成物中のカロテノイドの量が、使用することのできる上記の量と一致するように、組成物中に用いる溶液の量を調節することができる。
【００５９】
リコペン等のカロテノイドは、一重項酸素を捕捉する高い能力を備えており、抗酸化性を有する。カロテノイドの抗酸化作用はアマラキ抽出物及び／又はザクロ抽出物との組合せによって、相乗的に向上する。
【００６０】
また、カロテノイドは、細胞内のミトコンドリアの活性化に基づき、細胞、特にケラチノサイトの賦活化作用を有する。細胞内のミトコンドリアの活性化はミトコンドリア内のＡＴＰ産生を促進する。産生されたＡＴＰは細胞を賦活化する。そして、皮膚細胞が若い細胞のように振る舞うための活力を与えられ、老化の徴候に対抗しうるという点で、細胞賦活化作用は特に皮膚細胞に好ましい。
【００６１】
カロテノイドの細胞賦活化作用はアマラキ抽出物及び／又はザクロ抽出物との組合せによって、相乗的に向上する。
【００６２】
ところで、上記のとおり、細胞情報交換のための様々なチャンネルタンパクが存在する。
【００６３】
ギャップ  ジャンクション（Gap Junction）は細胞間に存在するチャンネルであり、Ｋ＋、Ｃａ２＋等のイオン、及び、グルコース等の小代謝物の通過を規制しており、表皮の分化等の皮膚細胞機能全体のホメオスタシスに重要である。
【００６４】
コネキシン（connexin）と称されるタンパク質がギャップ  ジャンクションの最小単位である。ヒトのケラチノサイトのギャップ  ジャンクションは、殆どが、コネキシン４３を含む。したがって、コネキシン４３を調節することは皮膚細胞のホメオスタシスを維持する重要な事項となり得ることであり、皮膚の健康状態を維持することができる。
【００６５】
コネキシン４３は分化中のヒトのケラチノサイトに発現する。通常のヒトのケラチノサイトの培養繁殖中に多量のコネキシン４３が検出される。
【００６６】
リコペンはコネキシン４３遺伝子の発現を増大することができる。したがって、リコペンは重要な保護役割を有し、ギャップ  ジャンクションを介してケラチノサイトの増殖を増大させる役割を有しうる。したがって、リコペン等のカロテノイドは、ケラチノサイトの増殖促進により、皮膚が老化の徴候に対抗することを助ける。
【００６７】
（化粧用組成物）
本発明の化粧用組成物は、抗老化有効成分として、上記の成分（ａ）、成分（ｂ）及び成分（ｃ）の組合せを含む。したがって、本発明の化粧用組成物は抗老化効果を発揮することができる。
【００６８】
本発明の化粧用組成物は、好ましくは、皮膚に対する局所的適用に適している。これは、この種の用途に通常用いられる全てのガレノス形態（galenic form） で、特に、水性又は油性溶液、水中油型又は油中水型又は多重エマルション、シリコーンエマルション、マイクロエマルション又はナノエマルション、水性又は油性ゲル、又は液状、ペースト状又は固形状無水産物の形態で提供することができる。
【００６９】
本発明の化粧用組成物は、様々な程度に流動的であってよく、かつ、白色又は着色した、クリーム、軟膏、乳液、ローション、セラム、ペースト、ムース又はゲルの外観を有することができる。任意に、エアゾール形態で皮膚に適用されてもよい。また、固体形態、例えばスティック形態で提供されてもよい。皮膚のケア製品及び／ 又はメイクアップ製品として用いられてもよい。好ましくは、本発明の化粧用組成物は抗老化化粧品用である。
【００７０】
周知の方法で、本発明の化粧用組成物は、化粧分野で慣例的なアジュバント、例えば親水性又は親油性ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、抗老化剤、溶剤、香料、フィラー、紫外線スクリーニング剤、顔料、消臭剤、着色物質等を含むこともできる。
【００７１】
本発明の化粧用組成物は、上記成分（ａ）、成分（ｂ）及び成分（ｃ）に加えて、好ましくは、抗酸化剤、抗老化剤及び保湿剤からなる群から選択される少なくとも１つを更に含む。
【００７２】
前記抗酸化剤としては、アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体、没食子酸、没食子酸誘導体、トコフェロール、フェノール及びポリフェノール（例えば、カテキン、ルチン、クエルセチン等のフラボノイド）、カルノシン酸、カルノソール、任意に置換された（２，５−ジヒドロキシフェニル）カルボン酸、（２，５−ジヒドロキシフェニル）アルケンカルボン酸、及び、これらの誘導体、塩、エステル及びアミド、カフェー酸及びそのエステル又はアミド、タンニン酸及びそのエステル又はアミド等が挙げられる。
【００７３】
前記抗老化剤としては、α−ヒドロキシ酸（乳酸、グリコール酸、クエン酸等）、β−ヒドロキシ酸（サリチル酸、５−ｎ−オクタノイルサリチル酸等）、カルボン酸（酢酸、パルミチン酸等）、カルボン酸誘導体（レチニルプロピオネート等）、レチノイド（レチノール等）、ビタミン（ビタミンＣ等）、植物抽出物等が挙げられる。
【００７４】
前記保湿剤としては、トレハロース及びその誘導体、ヒアルロン酸及びその誘導体、グリセリン、ペンタンジオール、ピドロ酸ナトリウム、セリン、キシリトール、乳酸ナトリウム、ポリアクリル酸グリセリン、エクトイン及びその誘導体、キトサン、オリゴ及びポリサッカライド、環状炭酸、Ｎ−ラウロイルピロリドンカルボン酸及びＮ−α−ベンゾイル−Ｌ−アルギニン等が挙げられる。
【００７５】
これら種々のアジュバントの量は、当該技術分野で通常用いられる量であり、例えば組成物の全重量の０ ．００１から２０％である。これらのアジュバントは、その性質に依存して、化粧用組成物の脂肪相又は水相に導入することができる。これらのアジュバント及びその濃度は、本発明で使用される植物抽出物又はカロテノイドの有利な特性に不利な影響を与えないようなものとすべきである。
【００７６】
本発明の化粧用組成物がエマルションである場合、脂肪相の比率は、組成物の全重量に対して５から８０重量％ 、好ましくは５から５０重量％の範囲とすることができる。エマルション形態の組成物に用いられる脂肪物質、乳化剤及び補助乳化剤は、化粧料分野で通常用いられるものから選択される。乳化剤及び補助乳化剤は、好ましくは組成物の全重量に対して０．３から３０重量％ 、さらに好ましくは０．５から２０重量％の範囲の比率で組成物中に存在する。
【００７７】
本発明で用いることができる脂肪物質として、油、特に鉱油（流動パラフィン等）、植物由来の油（アボカド油、ダイズ油等）、動物由来の油（ラノリン等）、合成油（ペルヒドロスクアレン等）、シリコーン油（シクロメチコーン等）、及びフッ化油（ペルフルオロポリエーテル等）を用いることができる。また、脂肪物質として、セチルアルコールのような脂肪アルコール、脂肪酸、ロウ及びゴム、そして特にシリコーンゴムを用いることもできる。
【００７８】
本発明で用いることができる乳化剤及び補助乳化剤としては、例えば、脂肪酸とポリエチレングリコールとのエステル、例えばＰＥＧ−１００ステアラート、ＰＥＧ−５０ステアラート及びＰＥＧ−４０ステアラート； 脂肪酸とポリオールとのエステル、例えばグリセリルステアラート、ソルビタントリステアラート、オキシエチレン化ソルビタンステアラート、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）２０又はＴｗｅｅｎ（登録商標）６０の商品名で入手可能なもの；並びに、これらの混合物を挙げることができる。
【００７９】
親水性ゲル化剤としては、特に、カルボキシビニルポリマー（カーボマー）、アクリルコポリマー、例えばアクリラート／アルキルアクリラートコポリマー、ポリアクリルアミド、多糖類、天然ゴム及びクレーを挙げることができ、また、親油性ゲル化剤としては、ベントンのような変性クレー、脂肪酸の金属塩、及び疎水性シリカを挙げることができる。
【００８０】
上記成分（ａ）、成分（ｂ）及び成分（ｃ）の少なくとも２つ、好ましくは全て、の組合せは抗酸化剤、細胞賦活化剤又は皮膚微細表面保護剤として機能するので、本発明の化粧用組成物は、皮膚老化の徴候、特に光老化の徴候の予防及び／又は処置に特に有用である。
【００８１】
また、本発明は、化粧用組成物、特に、皮膚老化の徴候、特に光老化の徴候を予防及び／又は処置するための化粧用組成物の製造のための、上記成分（ａ）、成分（ｂ）及び成分（ｃ）の少なくとも２つ、好ましくは全て、の組合せの使用にも関する。
【００８２】
更に、本発明は、抗酸化剤、細胞賦活化剤又は皮膚微細表面保護剤の製造のための、上記成分（ａ）、成分（ｂ）及び成分（ｃ）の少なくとも２つ、好ましくは全て、の組合せの使用にも関する。
【実施例】
【００８３】
以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、実施例は、本発明を何ら限定するものではない。
【００８４】
１．抗酸化効果
［配合物］
実施例１〜４として、リコペン（Mexoryl（登録商標）SAQ）、アマラキの果実抽出物（Emblica（登録商標））及びザクロの果実抽出物（Amiporine（登録商標））の組合せを含む、アイクリーム、クリーム、エマルジョン及び濃縮液の４つのタイプの配合物が調製された。上記成分の組合せの濃度は、それぞれ、アイクリーム、クリーム及びエマルジョンでは０．１重量％であり、濃縮液では０．５重量％であった。
【００８５】
実施例１〜４に対応する配合物から上記成分を除いたものを比較例１〜４として調製した。
【００８６】
表１〜表４に実施例１〜４及び比較例１〜４の組成を示す。
【００８７】
リコペン：CHIMEX社製Mexoryl（登録商標）SAQ
アマラキ果実抽出物：Rona社製Emblica（登録商標）
ザクロ果実抽出物：Alban Muller社製Amiporine（登録商標）
【００８８】
【表１】
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【００８９】
【表２】
2012527404.tif 000004
【００９０】
【表３】
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【００９１】
【表４】
2012527404.tif 000006
【００９２】
［試験］
実施例１〜４及び比較例１〜４のそれぞれ２ｇを、２００μｇ／ｍｌの濃度でチロシンを含み、また、５０μｇ／ｍｌの濃度でディーゼルガス粒子を含む２０ｍｌのメタノールと混合した。得られた溶液に２０ジュール／ｃｍ２の強度のＵＶＡを照射した。照射後、溶液中で形成されたビチロシンの量を測定し、阻害率を得た。結果を表５に示す。
【００９３】
【表５】
2012527404.tif 000007
【００９４】
上記の結果を図１にも示す。
【００９５】
ビチロシンは、ディーゼルガス粒子の存在下での紫外線照射による酸化によって生成したものである。上記の結果は、リコペン、アマラキ果実抽出物及びザクロ果実抽出物の組合せがチロシンの酸化を有意に阻害したことを示す。したがって、これらの組合せは優れた抗酸化力を有する。
【００９６】
２．細胞賦活化作用
［試験］
通常の細胞培養条件（ＤＭＥＭ、１０％牛胎児血漿、Ｌ−グルタチオン２ｍＭ、ペニシリン５０Ｕ／ｍｌ及びストレプトマイシン５０μｇ／ｍｌ）でフィブロブラストとケラチノサイトを、コロニーを形成するまで培養した。各コロニーにおいて、フィブロブラスト及びケラチノサイトの細胞を
（ａ）１０μｇ／Ｌのアマラキ果実抽出物（比較例５）、
（ｂ）１００μｇ／Ｌのアマラキ果実抽出物（比較例６）、
（ｃ）０．００１％のザクロ果実抽出物（比較例７）、
（ｄ）０．０１％のザクロ果実抽出物（比較例８）、
（ｅ）０．０００１％のリコペン（比較例９）、
（ｆ）０．００１％のリコペン（比較例１０）、
（ｇ）１０μｇ／Ｌのアマラキ果実抽出物、０．００１％のザクロ果実抽出物、及び、０．０００１％のリコペン（実施例５）、又は、
（ｈ）１００μｇ／Ｌのアマラキ果実抽出物、０．０１％のザクロ果実抽出物、及び、０．００１％のリコペン
で２４時間処理した。また、上記で２４時間処理しないものを対照とした。
【００９７】
リコペン：CHIMEX社製Mexoryl（登録商標）SAQ
アマラキ果実抽出物：Rona社製Emblica（登録商標）
ザクロ果実抽出物：Alban Muller社製Amiporine（登録商標）
【００９８】
フィブロブラストとケラチノサイトのミトコンドリアをMitoTracker（登録商標）でラベルし（カラー写真では緑）と共に、膜ポテンシャルをMitoGluor（登録商標）でラベルし（カラー写真では赤）て、当該フィブロブラストと当該ケラチノサイトの写真を撮影した。計算によれば、ミトコンドリアの活性は１０００／赤蛍光に等しいものであった。次に、フィブロブラストとケラチノサイトの写真について目視分析用に二重焼き付けを行い、黄色を付与した。INCell Analyzer（登録商標）1000を使用して色強度が分析され、比較例５〜１０、実施例５及び６、並びに、対照の間で比較された。結果を表６及び７に示す。
【００９９】
【表６】
2012527404.tif 000008
【０１００】
実施例６と対照の写真を図２に示す。
【０１０１】
【表７】
2012527404.tif 000009
【０１０２】
実施例６と対照の写真を図３に示す。
【０１０３】
上記の結果は、フィブロブラスト及びケラチノサイトについて、ミトコンドリア活性の有意な増加（フィブロブラストについては１１％、ケラチノサイトについては２０％）が観察されたことを示す。ミトコンドリアは細胞の「エネルギー工場」であるので、その活性の上昇は細胞内のエネルギーの流れが増大すること示す。
【０１０４】
３．微細表面保護作用
［配合物］
実施例７として、０．５重量％のリコペン、０．５重量％のアマラキの果実抽出物及び０．５重量％のザクロの果実抽出物を含む濃縮液が調製された。濃縮液の組成を表８に示す。
【０１０５】
【表８】
2012527404.tif 000010
【０１０６】
リコペン：CHIMEX社製Mexoryl（登録商標）SAQ
アマラキ果実抽出物：Rona社製Emblica（登録商標）
ザクロ果実抽出物：Alban Muller社製Amiporine（登録商標）
【０１０７】
［試験］
９人の被験者（１８歳から５５歳の白人男女）が選抜され、背中に２つの領域が設定された。次に、合成ポリマーを使用して皮膚の型が採取された。
【０１０８】
初日は、上記の２つの領域の一方に２ｍｇ／ｃｍ２の量で上記濃縮液を塗布した。他方の領域は塗布されなかった。そして、両方の領域にＵＶＡ及びＵＶＢを１．５ＭＥＤ（紅斑形成最小量）で照射した。２日目も、初日と同様の処理が全被験者に実施された。その後、被験者は８日目まで処理を受けることなく放置された。
【０１０９】
皮膚の微細表面の変化を評価するために、皮膚の型を、合成ポリマーを使用して採取した。専門家による目視評価（初期値を７点とする１４点スケール）により、採取した型にスコアを付与し、その後、変動率（％）＝（（スコア−７）／７）＊１００の式により、変動率を計算した。実施例７の濃縮液で処理された領域の変動率と処理されなかった領域の変動率が比較された。結果を表９に示す。
【０１１０】
【表９】
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【０１１１】
上記の結果を図４にも示す。初日（Day 0）前の上記領域の型及び８日目（Day 8）後の上記領域の型を図５に示す。
【０１１２】
２日間の紫外線照射の後、実施例７の濃縮液で処理された領域と何も処理されなかった領域との微細表面は、いずれも、照射前に比べてダメージを受けていた。しかし、実施例７の濃縮液で処理された領域の微細表面は、非処理の場合と比べて、劣化はそれほど進行していなかった。したがって、実施例７の濃縮液は皮膚の微細表面を保護したことが分かる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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