【手続補正書】
【提出日】平成21年3月10日(2009.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
前駆細胞から分化した内皮細胞群を得；
心臓弁形を有するマトリックスに、細胞がマトリックスに付着して内皮細胞層を形成するように内皮細胞を播種し；
前駆細胞から分化した平滑筋細胞群を得；
平滑筋細胞が内皮細胞層に連結する平滑筋細胞層を形成するように、平滑筋細胞を内皮細胞層上に沈着させ；
播種されたマトリックスを、予備調整する小室中の取付け要素に取り付け、ここで取付け要素は、流体流系に流動的につながれたチャンネルを有し；そして
生物学的流体が播種されたマトリックスを通って移動する流系で播種されたマトリックスを予備調整し、ここで生物学的流体の流速および脈拍数は、予備調整された心臓弁が引き起こすように制御される、
ことを含んでなる予備調整された心臓弁の製造法。
【請求項２】
生体適合性マトリックスが脱細胞化マトリックス、エレクトロスピンされたマトリックスおよび合成ポリマーマトリックスからなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
予備調整する小室が心臓弁リーフレットを取り付けるために適する寸法を有する容器である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
マトリックスを予備調整する工程が、生物学的流体を、閉鎖された一方向の流体流系に取り付けられたマトリックスの内側表面を通して運ぶことを含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項５】
マトリックスを予備調整する工程が、生物学的流体を、取り付けられたマトリックスの内側表面を通して連続流として運ぶことを含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項６】
連続流が約１ダイン／ｃｍ２〜約３０ダイン／ｃｍ２の範囲の壁体剪断応力を誘導するように経時的に増やされる流速を有する請求項５に記載の方法。
【請求項７】
マトリックスを予備調整する工程が、生物学的流体を、取り付けられたマトリックスの内側表面を通してパルス流として運ぶことを含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項８】
パルス流が、約１０ダイン／ｃｍ２〜約４５ダイン／ｃｍ２の範囲の壁体剪断応力を誘導するように経時的に増やされる脈拍数を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
パルス流が、約６０〜約２００ｍＨｇの範囲の壁体圧分布を誘導するように経時的に増やされる脈拍数を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
生物学的流体が、播種された管状マトリックスを通ってポンプにより運ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
生物学的流体が、血液と等価な組成および粘度を有する請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
生物学的流体が、培養基、バッファー媒質および生理学的媒質からなる群から選択される請求項１に記載方法。
【請求項１３】
管状マトリックスの外側表面が生理学的流体に暴露されるように、ある容量の生物学的流体を予備調整する小室にさらに加えることを含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
マトリックスが、少なくとも１つの天然成分および少なくとも１つの合成ポリマー成分およびナノ粒子に結合した治療薬を含んでなるエレクトロスピンされたマトリックスである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
天然成分がコラーゲンであり、そして合成ポリマー成分がポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
さらにエラスチンを含んでなる請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
治療薬がヘパリンであり、そしてナノ粒子が量子ドットである請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
ヘパリンおよび量子ドットがポリマーにカプセル化されている請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ナノ粒子からのヘパリンの放出が、約７００ｎｍ〜約１０００ｎｍの範囲の波長の放射の適用により制御される請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
加熱がポリマーの超構造を改変するように、ナノ粒子を加熱することによりナノ粒子からヘパリンが局所的に放出される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
エレクトロスピンされたマトリックスがさらに画像強化剤を含んでなる請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
画像強化剤がガドリニウムである請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
内皮細胞がヒトの伏在静脈から単離される請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
内皮細胞が末梢血または骨髄から単離された前駆細胞から誘導される請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前駆細胞から分化した内皮細胞群を播種した心臓弁形を有する生体適合性マトリックス、ここで内皮細胞がマトリックスに付着して内皮細胞層を形成し；
内皮細胞層上に播種した前駆細胞から分化した平滑筋細胞群、ここで平滑筋細胞は内皮細胞層に付着する平滑筋細胞層を形成し；そして
ここで播種された細胞は、心臓を通る正常な血流と等価の流速および脈拍数で播種されたマトリックスを通って通過する生物学的流体に播種された細胞を暴露する予備調整する小室中で予備調整されている、
を含んでなる予備調整された組織を工作した心臓弁。
【請求項２６】
生体適合性マトリックスが脱細胞化マトリックス、エレクトロスピンされたマトリックスおよび合成ポリマーマトリックスからなる群から選択される請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
生体適合性マトリックスが脱細胞化心臓弁である請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも１つの天然成分、および少なくとも１つの合成ポリマー成分を含んでなるエレクトロスピンされたマトリックスであって、マトリックスが細胞の付着および生理学的条件に耐える十分な機械的強度を可能にするために、相互連結している繊維および孔の三次元超構造を有する上記マトリックス。
【請求項２９】
少なくとも１つの天然成分が、コラーゲンおよびエラスチンからなる群から選択される請求項２８に記載のマトリックス。
【請求項３０】
少なくとも１つの合成ポリマーが、ポリ（乳酸）ポリマー、ポリ（グリコール酸）ポリマー、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリ（ウレタン）、ポリ（シロキサン）もしくはシリコン、ポリ（エチレン）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（２−ヒドルキシエチルメタクリレート）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（酢酸ビニル）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレン−コ−酢酸ビニル）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（メタクリル酸）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ナイロン、ポリアミド、ポリ無水物、ポリ（エチレン−コ−ビニルアルコール）（ＥＶＯＨ）、ポリカプロラクトン、ポリ（酢酸ビニル）、ポリビニルヒドロキシド、ポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）およびポリオルトエステルからなる群、あるいはこの群の少なくとも２つの員から形成されるポリオルトエステルまたはコ−ポリマーから選択される、請求項２８に記載のマトリックス。
【請求項３１】
約１５％〜７５％の範囲の量のコラーゲンＩ、約１％〜３０％の範囲の量のエラスチンおよび約１０％〜７０％の範囲の量のポリ（ラクチド−コ−グリコライリド）を含んでなるエレクトロスピンされたマトリックスであって、マトリックスが細胞の付着を可能にするための相互連結された繊維および孔の三次元超構造を有する上記マトリックス。
【請求項３２】
エレクトロスピンされたマトリックスの調製法であって：
少なくとも１つの天然成分および少なくとも１つの合成ポリマー成分を含んでなる溶液を荷電し；そして
荷電した溶液の電場の下での移動が荷電した溶液の蒸発、および接地した標的上へのマトリックス繊維の生成を生じるように、電場の下で接地した標的上に荷電した溶液を放出する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項３３】
細胞の付着を可能とするための相互連結された繊維および孔の三次元超構造を有し、そして画像強化剤をさらに含んでなるマトリックス。
【請求項３４】
画像強化剤がガドリニウム、セリウム、サマリウム、テルビウム、エルビウム、スカンジウム、バリウム、ビスマス、セリウム、ジスプロシウム、ユーロピウム、ハフニウム、インジウム、ランタン、ネオジウム、ニオブ、プラセオジミウム、ストロンチウム、タンタル、イッテルビウム、ジルコニオムからなる群から選択される請求項３３に記載のマトリックス。
【請求項３５】
マトリックスがコラーゲンＩ、コラーゲンＩＩ、コラーゲンＩＩＩ、コラーゲンＩＶ、コラーゲンＶ、コラーゲンＶＩ、コラーゲンＶＩＩ、コラーゲンＶＩＩＩ、コラーゲンＩＸおよびコラーゲンＸからなる群から選択されるコラーゲンをさらに含んでなる、請求項３３に記載のマトリックス。
【請求項３６】
人工組織構造物の改造をモニタリングする方法であって：
細胞が播種され、そしてさらに画像強化剤を含んでなる、相互連結された繊維および孔の三次元超構造を有するマトリックスを準備し；
画像強化剤を含むマトリックスを標的部位に移植し；そして
移植時に画像強化剤から生じるシグナルを検出し、そして移植後に画像強化剤から生じるシグナルを検出し、ここでシグナルの変化が人工組織構造物の改造をモニタリングを可能にする、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項３７】
細胞の付着を可能にするために、相互連結された繊維および孔の三次元超構造を有し、そしてさらにマトリックス中に包含されたナノ粒子を含んでなる、エレクトロスピンされたマトリックス。
【請求項３８】
ナノ粒子がＣｄＳｅ、ＣｄＳ、ＣｄＴｅ、ＺｎＳ、ＺｎＳｅ、ＺｎＴｅ、ＧａＮ、ＧａＰ、ＧａＡｓ、ＧａＳｂ、ＩｎＰ、ＩｎＡｓ、ＩｎＳｂ、ＡｌＳ、ＡｌＡｓ、ＡｌＳｂ、ＰｂＳ、ＰｂＳｅ、Ｇｅ、Ｓｉおよびその組み合わせからなる群から選択される物質から作られた量子ドットをさらに含んでなる、請求項３７に記載のマトリックス。
【請求項３９】
ナノ粒子が治療薬と結合されている請求項３７に記載のマトリックス。
【請求項４０】
治療薬が、ヘパリン、トランスフォーミング増殖因子−アルファ（ＴＧＦ−α）、トランスフォーミング増殖因子−ベータ（ＴＧＦ−β）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、神経増殖因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子、軟骨由来因子、骨成長因子（ＢＧＦ）、塩基性繊維芽細胞増殖因子、インスリン−様増殖因子（ＩＧＦ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、肝細胞増殖因子、グリア神経栄養成長因子（ＧＤＮＦ）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、角質細胞増殖因子（ＫＧＦ）および骨格成長因子からなる群から選択される、請求項３９に記載のマトリックス。
【請求項４１】
標的部位への治療薬の放出を制御する方法であって：
細胞の付着を可能にするために、相互連結された繊維および孔の三次元超構造を有し、そしてさらにマトリックスの中または上に包含されたナノ粒子を含んでなるマトリックスを準備し、ここでナノ粒子は治療薬に結合されており；
マトリックスを標的部位に送達し；そして
治療薬を標的部位に放出し、これにより治療薬の制御された放出を提供する、
ことを含んでなる上記方法。