【手続補正書】
【提出日】平成21年2月18日(2009.2.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
閉じられた端部と開放可能な端部(2、3)とを含む、生物学的試料から腫瘍細胞を分離するための容器(1)であって、下限値1.055 g/cm3から上限値1.070 g/cm3の範囲の固有密度を有するチキソトロープ物質(4)と、場合により、下限値1.055 g/cm3から上限値1.085 g/cm3の範囲の固有密度を有する密度勾配の形態での分離媒質(5)とを含む、前記容器。
【請求項２】
前記腫瘍細胞が播種性腫瘍細胞(9)である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項３】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.057 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項４】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.060 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項５】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の上限値が、1.069 g/cm3である、請求項１記載の容器(1)。
【請求項６】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.065 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項７】
前記の分離媒質(5)の固有密度の下限値が、1.065 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項８】
前記の分離媒質(5)の固有密度の下限値が、1.070 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項９】
前記の分離媒質(5)の固有密度の上限値が、1.080 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項１０】
前記の分離媒質(5)の固有密度の上限値が、1.075 g/cm3である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項１１】
排気可能である、請求項１に記載の容器(1)。
【請求項１２】
遠心分離可能である、請求項１又は１１に記載の容器(1)。
【請求項１３】
少なくとも1種の抗凝血性及び/又は凝集阻害性の物質を含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項１４】
前記チキソトロープ物質(4)が、ケイ酸、ベントナイト、ヘクトライト、カオリン、アルギン酸塩、及び/又はこれらの混合物を含む群の材料から選択される、請求項１〜１３のいずれか１に記載の容器(1)。
【請求項１５】
前記分離媒質(5)が、少なくとも1種のポリマー及び/又は高分子炭水化物、もしくは同じ分離特性を有する媒質から成る水溶液である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項１６】
前記ポリマー及び/又は高分子炭水化物が、ケイ酸塩を基剤とする、請求項１５に記載の容器(1)。
【請求項１７】
前記ポリマー及び/又は高分子炭水化物が、糖類又はジアトリゾエートである、請求項１５に記載の容器(1)。
【請求項１８】
前記糖類又はジアトリゾエートが、Percoll（登録商標）又はFicoll（登録商標）である、請求項１５に記載の容器(1)。
【請求項１９】
前記分離媒質(5)及び/又は前記チキソトロープ物質(4)が、1種又は2種以上の色素を含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２０】
多孔質バリヤ(6)が配置されている、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２１】
前記多孔質バリヤ(6)が、膜、フラップ、フリット、篩、及び/又はフィルタによって形成されている、請求項２０に記載の容器(1)。
【請求項２２】
前記多孔質バリヤ(6)が運動可能である、請求項２０又は２１に記載の容器(1)。
【請求項２３】
前記多孔質バリヤ(6)が、上限値15 mm〜下限値0.1 mmの範囲の厚さを有する、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２４】
前記多孔質バリヤ(6)が、上限値150 μm〜下限値1 μmの範囲の孔サイズを有する、請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２５】
前記多孔質バリヤ(6)が疎水性材料から成り、及び/又は疎水性被覆体を備えている、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２６】
前記多孔質バリヤ(6)がエラストマーによって仕切られている、請求項２０〜２５のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２７】
前記多孔質バリヤ(6)が、収容可能な閉鎖要素を備えている、請求項２０〜２６のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２８】
内側に、前記多孔質バリヤ(6)を終端位置に位置決めする突起が配置されている、請求項２０〜２７のいずれか１項に記載の容器(1)。
【請求項２９】
生物学的試料から腫瘍細胞を分離するための、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の容器(1)の使用。
【請求項３０】
前記腫瘍細胞が播種性腫瘍細胞(9)である、請求項１７に記載の容器(1)の使用。
【請求項３１】
腫瘍細胞の検出方法であって、以下のステップ：
(a) 請求項１〜２８のいずれか１項に記載の容器(1)を用意し；
(b)該容器(1)内に生物学的試料を添加し；
(c)該生物学的試料を少なくとも下側及び上側の区画(7、8)に分割するために該容器(1)を遠心分離し；並びに
(d)該遠心分離後にチキソトロープ物質及び/又は多孔質バリヤ(6)の上方の区画内に位置する、該生物学的試料の腫瘍細胞を用いて分子生物学的診断、免疫学的診断、及び/又は細胞診断を行うこと、
を含む、前記方法。
【請求項３２】
前記生物学的試料として、血液及び骨髄、尿、唾液、リンパ液、浸出液、濾液、髄液、精液、もしくは分散組織、及び/又は天然又は非天然体腔の液体を含む群に由来する体液が使用される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
(1)(i)上皮腫瘍及び(ii)非上皮腫瘍を含む固形腫瘍、並びに(2)血液腫瘍の群に由来する転移性の腫瘍及び/又は新生組織の腫瘍細胞が検出される、請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記生物学的試料が希釈される、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
血液が凝結阻害物質中で採取される、請求項３１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記生物学的試料には、腫瘍細胞における血小板の凝集を回避するための少なくとも1種の凝集阻害物質が添加される、請求項３１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記遠心分離が、下限値500 g〜上限値2500 gの範囲のグラム数で実施される、請求項３１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記生物学的試料が、上限値60分〜下限値5分の時間にわたって遠心分離される、請求項３１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記容器が4℃で冷却され、(i)チキソトロープ物質及び場合によっては(ii)分離媒質の密度は、この温度に合わせて調節されている、請求項３１〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記容器(1)が、遠心分離後、そして、腫瘍細胞で富化された区画の取出し前に冷却される、請求項３１〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記腫瘍細胞が、血漿区画内及び/又は血漿区画の下の区画から得られる、請求項３１〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記播種性腫瘍細胞(9)が、上側の区画(7)から、手動、半自動、及び/又は自動で取出される、請求項３１〜４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
血清学のルーティン・パラメータが、血漿である最も上側の区画から決定される、請求項３１〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
診断のために、免疫細胞化学的着色、PCR(ポリメラーゼ連鎖反応)、RT-PCR(逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応)、細胞培養、FISH(蛍光インサイチュハイブリダイゼーション)、及び/又はFACS(蛍光活性化細胞分別機)を含む群のうちの少なくとも1つの方法が選択される、請求項３１〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
閉じられた端部と開放可能な端部(2、3)とを備えた容器(1)内の、種々異なる固有密度の生物学的試料、及び腫瘍細胞を分離するための少なくとも1種の分離媒質の区画の配置関係であって、初めに、閉じられた端部(2)の領域に、下限値1.060 g/cm3〜上限値1.085 g/cm3の範囲の固有密度を有する密度勾配の形態の分離媒質(5)と、場合により続いて、下限値1.055 g/cm3〜上限値1.070 g/cm3の範囲の固有密度を有するチキソトロープ物質(4)とが提供され、開放可能な端部(3)の領域内に、該生物学的試料の収容のための十分な容積を有する自由空間が配置されており、そして遠心分離後には、(i)該容器(1)の下端部(2)の領域内の赤血球で始まって、(ii)続いて、白血球、リンパ球、単球から成る区画、及び場合により(iii)分離媒質(5)の一部、更に続いて(iv)該チキソトロープ物質(4)、これに続いて(v)希釈分離媒質(5)の区画、続いて(vi)血小板及び腫瘍細胞を有する血漿から成る区画、及び場合により(vii)自由空間が配置されている、前記の配置関係。
【請求項４６】
前記腫瘍細胞が播種性腫瘍細胞(9)である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項４７】
前記の分離媒質(5)の固有密度の下限値が、1.065 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項４８】
前記の分離媒質(5)の固有密度の下限値が、1.070 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項４９】
前記の分離媒質(5)の固有密度の上限値が、1.080 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５０】
前記の分離媒質(5)の固有密度の上限値が、1.075 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５１】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.057 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５２】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.060 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５３】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の上限値が、1.069 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５４】
前記のチキソトロープ物質(4)の固有密度の下限値が、1.065 g/cm3である、請求項４５に記載の配置関係。
【請求項５５】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載の容器(1)を含む、試験キット。
【請求項５６】
場合により濃縮形態の洗浄緩衝剤を有する、少なくとも1つの容器(1)を含む、請求項５５に記載の試験キット。
【請求項５７】
試料用容器を更に含む、請求項５５又は５６に記載の試験キット。