【手続補正書】
【提出日】平成21年2月26日(2009.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目的とするタンパク質、融合パートナー、およびそれらの間に置かれたペプチドリンカーを含むキメラタンパク質であって、該目的のタンパク質が該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、該融合パートナーが該ペプチドリンカーのＣ末端に結合されるか、または該目的とするタンパク質が該ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、該融合パートナーが該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、該ペプチドリンカーは、配列：
Ｘ１−Ｘ２−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５
からなり、
Ｘ１が互いに同一または異なった２個〜１０個のアミノ酸残基であり；
Ｘ２が疎水性アミノ酸残基であり；
Ｘ３がアルギニンまたはリジンであり；
Ｘ４がアラニンまたはグリシンであり；そして、
Ｘ５が非酸性アミノ酸である；
キメラタンパク質。
【請求項２】
Ｘ１が４個〜１０個のアミノ酸残基である、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項３】
Ｘ１がプロリンおよびアルギニンを含む、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項４】
Ｘ２が、グリシン、アラニン、プロリン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンからなる群から選択される、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項５】
Ｘ２がグリシンである、請求項４記載のキメラタンパク質。
【請求項６】
Ｘ５が、セリン、アラニン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リジン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンからなる群から選択される、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項７】
Ｘ５がセリンである、請求項６記載のキメラタンパク質。
【請求項８】
前記ペプチドリンカーが、配列Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（配列番号：７）からなる、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項９】
前記ペプチドリンカーが、配列Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（配列番号：８）からなる、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項１０】
親和性ペプチドが、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、ヘキサヒスチジン、Ｔ７ペプチド、ユビキチン、Ｆｌａｇペプチド、ｃ−ｍｙｃペプチド、ポリアルギニン、ポリシステイン、ポリフェニルアラニン、ＢＴａｇ、ガラクトース結合ドメイン、セルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）、チオレドキシン、ブドウ球菌プロテインＡ、連鎖球菌プロテインＧ、カルモジュリン、β−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、Ｓ−ペプチド、ストレプトアビジン、Ｈｉｓ−タグ、およびＳｔｒｅｐ−タグからなる群から選択される、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項１１】
前記親和性ペプチドが、ＧＳＴ、ＭＢＰおよびＨｉｓ−タグからなる群から選択される、請求項１０に記載のキメラタンパク質。
【請求項１２】
前記親和性ペプチドがＧＳＴである、請求項１１に記載のキメラタンパク質。
【請求項１３】
前記目的とするタンパク質が、インターロイキン（ＩＬ）−１１、チモシンβ４、チモシンα１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、プロテアーゼ活性化型受容体１（ＰＡＲ１）、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＲＡＮＴＥＳ、ストロマ細胞由来因子−１α、単球走化性タンパク質、幹細胞因子、ＦＬＴ−３Ｌ、副甲状腺ホルモン、トロンボポエチン、上皮細胞増殖因子、塩基性線維芽細胞増殖因子、インスリン様増殖因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、マクロファージコロニー刺激因子、血小板由来増殖因子、形質転換増殖因子（ＴＧＦ）−β１、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−α、インターフェロン（ＩＦＮ）−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、肝細胞増殖因子、血管内皮増殖因子、および免疫グロブリン重鎖からなる群から選択される、請求項１記載のキメラタンパク質。
【請求項１４】
前記目的とするタンパク質が、ヒトＩＬ１１、チモシンβ４、ＩＬ−６、およびＰＡＲ４からなる群から選択される、請求項１３記載のキメラタンパク質。
【請求項１５】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＣ末端に結合される、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項１６】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＮ末端に結合される、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項１７】
目的とするタンパク質、融合パートナー、およびそれらの間に置かれたペプチドリンカーを含むキメラタンパク質であって、該目的とするタンパク質が、該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、該融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＣ末端に結合されるか、または該目的とするタンパク質が、該ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、該融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、
該ペプチドリンカーが、配列：
Ｘ１−Ｘ２−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５
からなり、ここで、
Ｘ１が互いに同一または異なった２個〜１０個のアミノ酸残基であり；
Ｘ２が疎水性アミノ酸残基であり；
Ｘ３がアルギニンまたはリジンであり；
Ｘ４がアラニンまたはグリシンであり；および、
Ｘ５が非酸性アミノ酸であり；
該目的とするタンパク質が、インターロイキン（ＩＬ）−１１、チモシンβ４、チモシンα１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、プロテアーゼ活性化型受容体１（ＰＡＲ１）、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＲＡＮＴＥＳ、ストロマ細胞由来因子−１α、単球走化性タンパク質、幹細胞因子、ＦＬＴ−３Ｌ、副甲状腺ホルモン、トロンボポエチン、上皮細胞増殖因子、塩基性線維芽細胞増殖因子、インスリン様増殖因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、マクロファージコロニー刺激因子、血小板由来増殖因子、形質転換増殖因子（ＴＧＦ）−β１、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−α、インターフェロン（ＩＦＮ）−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、肝細胞増殖因子、血管内皮増殖因子、および免疫グロブリン重鎖からなる群から選択される、キメラタンパク質。
【請求項１８】
前記目的とするタンパク質が、ヒトＩＬ１１、チモシンβ４、ＩＬ−６、およびＰＡＲ４からなる群から選択される、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項１９】
前記目的とするタンパク質がヒトＩＬ１１である、請求項１８記載のキメラタンパク質。
【請求項２０】
前記目的とするタンパク質がチモシンβ４である、請求項１８記載のキメラタンパク質。
【請求項２１】
前記目的とするタンパク質がＩＬ−６である、請求項１８記載のキメラタンパク質。
【請求項２２】
前記目的とするタンパク質がＰＡＲ４である、請求項１８記載のキメラタンパク質。
【請求項２３】
前記融合パートナーが親和性ペプチドである、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項２４】
前記親和性ペプチドが、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、ヘキサヒスチジン、Ｔ７ペプチド、ユビキチン、Ｆｌａｇペプチド、ｃ−ｍｙｃペプチド、ポリアルギニン、ポリシステイン、ポリフェニルアラニン、ＢＴａｇ、ガラクトース結合ドメイン、セルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）、チオレドキシン、ブドウ球菌プロテインＡ、連鎖球菌プロテインＧ、カルモジュリン、β−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、Ｓ−ペプチド、ストレプトアビジン、Ｈｉｓ−タグ、およびＳｔｒｅｐ−タグからなる群から選択される、請求項２３記載のキメラタンパク質。
【請求項２５】
前記親和性ペプチドが、ＧＳＴ、ＭＢＰおよびＨｉｓ−タグからなる群から選択される、請求項２４に記載のキメラタンパク質。
【請求項２６】
前記親和性ペプチドがＧＳＴである、請求項２５記載のキメラタンパク質。
【請求項２７】
Ｘ１は４個〜１０個のアミノ酸残基である、請求項１７に記載のキメラタンパク質。
【請求項２８】
Ｘ１がプロリンおよびアルギニンを含む、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項２９】
Ｘ２が、グリシン、アラニン、プロリン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンからなる群から選択される、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項３０】
Ｘ２がグリシンである、請求項２９記載のキメラタンパク質。
【請求項３１】
Ｘ５が、セリン、アラニン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リジン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンからなる群から選択される、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項３２】
Ｘ５がセリンである、請求項３１記載のキメラタンパク質。
【請求項３３】
前記ペプチドリンカーが、配列Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（配列番号：７）からなる、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項３４】
前記ペプチドリンカーが、配列Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（配列番号：８）からなる、請求項１７記載のキメラタンパク質。
【請求項３５】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＣ末端に結合される、請求項１７に記載のキメラタンパク質。
【請求項３６】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＮ末端に結合される、請求項１７に記載のキメラタンパク質。
【請求項３７】
目的とするタンパク質、融合パートナー、およびそれらの間に置かれたペプチドリンカーを含むキメラタンパク質であって、該目的のタンパク質が該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、該融合パートナーが該ペプチドリンカーのＣ末端に結合されるか、または該目的とするタンパク質が該ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、該融合パートナーが該ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、該ペプチドリンカーは、配列Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（配列番号：８）からなる、キメラタンパク質。
【請求項３８】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＮ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＣ末端に結合される、請求項３７に記載のキメラタンパク質。
【請求項３９】
前記目的とするタンパク質が、前記ペプチドリンカーのＣ末端に結合され、前記融合パートナーが、該ペプチドリンカーのＮ末端に結合される、請求項３７に記載のキメラタンパク質。
【請求項４０】
前記融合パートナーが、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、ヘキサヒスチジン、Ｔ７ペプチド、ユビキチン、Ｆｌａｇペプチド、ｃ−ｍｙｃペプチド、ポリアルギニン、ポリシステイン、ポリフェニルアラニン、ＢＴａｇ、ガラクトース結合ドメイン、セルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）、チオレドキシン、ブドウ球菌プロテインＡ、連鎖球菌プロテインＧ、カルモジュリン、β−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、Ｓ−ペプチド、ストレプトアビジン、Ｈｉｓ−タグ、およびＳｔｒｅｐ−タグからなる群から選択される親和性ペプチドである、請求項３７記載のキメラタンパク質。
【請求項４１】
前記親和性ペプチドが、ＧＳＴ、ＭＢＰおよびＨｉｓ−タグからなる群から選択される、請求項４０に記載のキメラタンパク質。
【請求項４２】
前記親和性ペプチドがＧＳＴである、請求項４１記載のキメラタンパク質。
【請求項４３】
前記目的とするタンパク質が、ヒトＩＬ１１、チモシンβ４、ＩＬ−６、およびＰＡＲ４からなる群から選択される、請求項３７記載のキメラタンパク質。