(57)【要約】  【解決手段】  認知機能低下、及び、特に、アルツハイマー疾患の治療のための中枢神経系薬剤候補である化合物が提供される。本発明の化合物または薬学的に許容可能な塩によって、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を治療、阻害、及び／または軽減するための方法も提供される。また、本発明の化合物／組成物を調製するための方法も提供される。  【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式Ｉの化合物
【化１９】
2012523418.tif 000022
またはそれらの薬学的に許容可能な塩であって、
Ｒ１は（Ａ１）及び（Ａ２）から選択されるものであり、
【化２０】
2012523418.tif 000023
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、ＮＲｃＲｄ、ＮＲｃＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＮＲｃＣ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲｃＳ（Ｏ）２Ｒｂ、ＮＲｃＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄ、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、及びＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄから選択されるものであり、
Ｒ７はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ８はＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ９はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１０はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１及びＳ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１から選択されるものであり、
それぞれＲａは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルから選択されるものであり、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルのそれぞれは、ＯＨ、ＣＮ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換されるものであり、
それぞれＲｂは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択されるものであり、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換されるものであり、
Ｒｃ及びＲｄは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換されるものであり、
または、Ｒｃ及びＲｄは、それらが結合するＮ原子と共に、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換された４員環、５員環、６員環、または７員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、
それぞれＲａ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルのそれぞれは、ＯＨ、ＣＮ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
それぞれＲｂ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
Ｒｃ１及びＲｄ２は、Ｈ、Ｃ１−10アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
または、Ｒｃ１及びＲｄ１は、それらが結合するＮ原子と共に、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換された４員環、５員環、６員環、または７員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、及び、
ｍは０、１または２であり、
ただし、
（ａ）Ｒ１が（Ａ１）の部分であるとき、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の２つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ１−６ハロアルコキシから独立に選択され、及び、
（ｂ）Ｒ１が（Ａ１）の部分であるとき、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、Ｈ以外である、
化学式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
請求項１の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６ハロアルコキシから選択されるものである。
【請求項３】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択されるものである。
【請求項４】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つはＯＨであり、及び、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、またはＣ１−６ハロアルコキシである。
【請求項５】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つはＯＨであり、及び、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、Ｃ１−３アルコキシまたはＣ１−３ハロアルコキシである。
【請求項６】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つはＯＨであり、及び、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、メトキシまたはトリハロメトキシである。
【請求項７】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つはＯＨであり、及び、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、メトキシである。
【請求項８】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ４はＯＨであり、及び、
Ｒ５はメトキシである。
【請求項９】
請求項１または２の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、
Ｒ４はＯＨであり、及び、
Ｒ５はメトキシであり、及び、
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ６はそれぞれＨである。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ７はＨまたはＣ１−６アルキルである。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ７はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【請求項１２】
請求項１〜９のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ７はＣ１−３アルキルである。
【請求項１３】
請求項１〜９のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ７はＨである。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ８はＣ１−６アルキルである。
【請求項１５】
請求項１〜１３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ８はＣ１−３アルキルである。
【請求項１６】
請求項１〜１３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ８はメチルである。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ９はＨまたはＣ１−６アルキルである。
【請求項１８】
請求項１〜１６のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ９はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【請求項１９】
請求項１〜１６のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ９はＨである。
【請求項２０】
請求項１〜１６のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ９はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１０はＨまたはＣ１−６アルキルである。
【請求項２２】
請求項１〜２０のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１０はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【請求項２３】
請求項１〜２０のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１０はＨである。
【請求項２４】
請求項２３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１１はＨまたはＣ１−６アルキルである。
【請求項２５】
請求項１〜２３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１１はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【請求項２６】
請求項１〜２３のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１１はＨである。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、Ｈ以外である。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６はそれぞれ独立にＨ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択されるものである。
【請求項２９】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６はそれぞれ独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択されるものである。
【請求項３０】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つはハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択されるものである。
【請求項３１】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ、Ｃ１−６ハロアルキルから選択されるものである。
【請求項３２】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１４はハロである。
【請求項３３】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１４はＣ１−６ハロアルキルである。
【請求項３４】
請求項１〜２７のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロである。
【請求項３５】
請求項１〜３４のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物は化学式ＩＩの化合物である。
【化２１】
2012523418.tif 000024
【請求項３６】
請求項３５の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物は化学式ＩＩａの化合物である。
【化２２】
2012523418.tif 000025
【請求項３７】
請求項３５の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物は化学式ＩＩｂの化合物である。
【化２３】
2012523418.tif 000026
【請求項３８】
請求項１〜３４のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物は化学式ＩＩＩの化合物である。
【化２４】
2012523418.tif 000027
【請求項３９】
請求項３８の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、ｍは１である。
【請求項４０】
請求項３８の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、ｍは０である。
【請求項４１】
４−（３−（４−クロロベンジルアミノ）ブチル）−２−メトキシフェノールまたは（トリフルオロメチル）ベンジルアミノ）ブチル）−２−メトキシフェノールである化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項４２】
請求項４１の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩は、８０重量％、９０重量％、９５重量％または９９重量％よりも高い純度を有するものである。
【請求項４３】
請求項１〜４２のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に許容可能な担体からなる医薬組成物。
【請求項４４】
化学式ＩＩａの化合物からなる組成物、
【化２５】
2012523418.tif 000028
またはそれらの薬学的に許容可能な塩を調製するための方法であって、
（ａ）化学式ＩＩａの化合物を生成するために、反応性アミノ化条件下で、化学式ＸＩのアミンとショウガ油を反応させる工程、及び、
【化２６】
2012523418.tif 000029
（ｂ）化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩を有する組成物を分離する工程であって、前記組成物は化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の少なくとも８０重量％、８５重量％、９０重量％または９５重量％を有するものであり、
Ｒ１０はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、またはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１、及び、Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１から選択されるものであり、
それぞれＲａ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルのそれぞれは、ＯＨ、ＣＮ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換され、
それぞれＲｂ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換されるものであり、
Ｒｃ１及びＲｄ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換されるものであり、
または、Ｒｃ１及びＲｄ１は、それらが結合するＮ原子と共に、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換された４員環、５員環、６員環、または７員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、及び、
ｍは０、１または２であり、
ただし、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つはＨ以外である、方法。
【請求項４５】
（ａ）粗生成物を製造するために、反応性アミノ化条件下で４−クロロベンジルアミンとショウガ油を反応させる工程であって、前記ショウガ油と前記４−クロロベンジルアミンの割合が、重量で約３：１である、前記反応させる工程と、
（ｂ）化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の少なくとも８０重量％、８５重量％、９０重量％または９５重量％を有する組成物を分離させる工程と、
を有する方法によって形成される化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩であって、
前記化合物の［Ｍ＋Ｈ＋］の質量分析スペクトルは約３２０．２である、
化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項４６】
請求項４５の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）スペクトルは以下のピーク、７．３０〜７．２４（ｍ）、６．８１（ｄ）、６．６６〜６．６２（ｍ）、４．２５（ｂｒ  ｓ）、３．８２（ｓ）、３．８２（ｄ）、３．７２（ｄ）、２．７３（ｍ）、２．６６〜２．５１（ｍ）、１．８６〜１．７８（ｍ）、１．７２〜１．６３（ｍ）、１．６２〜１．５１（ｍ）及び１．１７（ｄ）である。
【請求項４７】
請求項４６の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）スペクトルは以下の化学シフト、１４６．６、１４３．８、１３３．９、１３２．８、１２９．９、１２９．７、１２８．６、１２０．８、１１４．５、１１０．９、５５．８、５１．９、５０．２、３８．５、３１．９、３１．６、２９．７、２６．９、２２．６及び１９．９から選択された少なくとも１６ピークからなるものである。
【請求項４８】
請求項４５の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）スペクトルは以下のピーク、７．１０〜７．３０（ｍ、４Ｈ）、６．６３（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、６．５８（ｍ、１Ｈ）、６．４８（ｍ、１Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｍ、１Ｈ）、３．５８（ｍ、１Ｈ）、２．５７（ｍ、１Ｈ）、２．５０（ｍ、１Ｈ）、２．３５（ｍ、１Ｈ）、１．７３（ｍ、１Ｈ）、１．４９（ｍ、１Ｈ）、及び１．０４（ｄ、３Ｈ）である。
【請求項４９】
請求項４８の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）スペクトルは以下のピーク、１４７．５、１４５．３、１３７．２、１３３．３、１３２．６、１２９．９、１２８．１、１２０．４、１１４．７、１１１．６、５４．９、５１．３、４９．２、３７．７、３１．５及び１８．０である。
【請求項５０】
（ａ）粗生成物を製造するために、反応性アミノ化条件下で４−トリフルオロメチルベンジルアミンとショウガ油を反応させる工程であって、前記ショウガ油と前記４−トリフルオロメチルベンジルアミンの割合が、重量で約３：１である、前記反応させる工程と、
（ｂ）化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の少なくとも８０重量％、８５重量％、９０重量％または９５重量％を有する組成物を分離させる工程と、
を有する方法によって形成される化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩であって、
前記化合物の［Ｍ＋Ｈ＋］の質量分析スペクトルは約３５３である、
化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項５１】
請求項５０の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）スペクトルは以下のピーク、７．５７（ｄ、２Ｈ）、７．４３（ｄ、２Ｈ）、６．８２（ｄ、１Ｈ）、６．６５（ｍ、２Ｈ）、５．１６〜４．４２（ｂｒ  ｓ、２Ｈ）、３．９０（ｄ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｄ、１Ｈ）、２．７６〜２．７０（ｍ、１Ｈ）、２．６７〜２．５５（ｍ、２Ｈ）、１．８４〜１．７７（ｍ、１Ｈ）、１．６９〜１．６３（ｍ、１Ｈ）、及び、１．１７（ｄ、３Ｈ）である。
【請求項５２】
請求項５１の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩において、前記化合物の１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）スペクトルは以下の化学シフト１４６．７、１４４．６、１４３．９、１３４．０、１２９．１、１２８．４、１２７．５、１２５．４、１２５．３、１２３．２、１２０．８、１１４．６、１１１．０、５５．７、５２．１、５０．６、３８．８、３２．０、２０．１から選択された少なくとも１７ピークからなるものである。
【請求項５３】
患者において認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法であって、前記患者に、請求項１〜４２のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩を投与する工程を有するものである、方法。
【請求項５４】
請求項５３の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、記憶喪失、混乱、判断力欠乏、人格変化、見当識障害、言語機能の喪失からなる群から選択される認知機能低下の症状の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【請求項５５】
請求項５３の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療及び／または軽減する方法は、
（ｉ）長期間の増強の回復、及び／または、
（ｉｉ）神経変性を阻害、治療及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｉｉｉ）一般的なアミロイドシスを阻害、治療及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｉｖ）アミロイド生成、アミロイド組み立て、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｖ）神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたは１つ以上の活性／効果の阻害、治療及び／または軽減する工程、
の１つまたはそれ以上を有するものである。
【請求項５６】
請求項５３の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、アミロイド生成、アミロイド組み立て、神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたはそれ以上の効果、アミロイド凝集、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【請求項５７】
請求項５３の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたはそれ以上の活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド結合、及びアミロイド堆積を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【請求項５８】
請求項４５〜５２のいずれか１つの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩を患者に投与する工程を有する、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法。
【請求項５９】
請求項５８の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、記憶喪失、混乱、判断力欠乏、人格変化、見当識障害、言語機能の喪失からなる群から選択される認知機能低下の症状の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【請求項６０】
請求項５８の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、
（ｉ）長期間の増強の回復、及び／または、
（ｉｉ）神経変性を阻害、治療及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｉｉｉ）一般的なアミロイドシスを阻害、治療、及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｉｖ）アミロイド生成、アミロイド組み立て、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程、及び／または、
（ｖ）神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたはそれ以上の活性／効果を阻害、治療、及び／または軽減する工程、
の１つまたはそれ以上を有するものである。
【請求項６１】
請求項５８の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、アミロイド生成、アミロイド組み立て、神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたはそれ以上の活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【請求項６２】
請求項５８の方法において、前記認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法は、神経細胞でのＡベータオリゴマーの１つまたはそれ以上の活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、及び／または軽減する工程を有するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、２００９年４月９日出願の米国仮出願番号６１／１６７，９８４、２０１０年２月２６日出願の米国仮出願番号６１／３０８，６６７、及び、２０１０年３月１日出願の米国仮出願番号６１／３０９，０９１に対して優先権の利益を主張するものであり、それぞれは完全に本明細書に参照により組み込まれる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００２】
本発明は、特に、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、
【化１】
2012523418.tif 000002
【０００３】
【化２】
2012523418.tif 000003
【０００４】
または薬学的に許容可能な塩を提供するものであり、そこにおいて、組成の部材は以下に提供される。
【０００５】
本発明はさらに、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体からなる医薬組成物を提供する。
【０００６】
本発明はさらに、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩によって、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減する方法を提供する。
【０００７】
本発明はさらに、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩によって、認知機能低下を阻害、治療、及び／または軽減する方法を提供する。
【０００８】
本発明はさらに、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩によって、アミロイド生成、アミロイドの組み立て、アミロイド凝集（神経細胞のような脳内の細胞に）、ニューロンでのＡベータオリゴマーの活性／効果、及び、アミロイド堆積（例えば神経細胞のような脳内の細胞において）の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減する方法を提供する。
【０００９】
本発明はさらに、治療において使用するための、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１０】
本発明はさらに、治療において使用するための薬剤を製造／調製するため、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００１１】
いくつかの実施形態において、認知機能低下の阻害、治療、または軽減のために有用な化合物の調製のための方法が提供されている。「化学的条件付け」と呼ばれる方法において、本発明の特定の化合物は、ショウガのような薬用植物においてみられるような天然型化合物から由来するものである。本明細書において記載される化学的条件付けの工程は、多種多様な生物学的抽出物に適用することができ、及び、潜在的新薬剤候補をスクリーニングするための合成配列をつくるために使用されることがある。
【００１２】
さらに、一般的に、化学的条件付け工程によって由来する化合物は、化学的安定であり、及び構造的に多様であり、及び、薬学的活性のための薬剤スクリーニングにおいて使用するための良好な候補である。いくつかの実施形態において、ショウガ油由来の化合物が提供される。本発明のいくつかの実施形態によると、本明細書に記載された化学的的条件付けの工程によって、ショウガ油由来の化合物が提供される。他の実施形態において、本発明は、ショウガ油由来の化学的化合物の配列を調製するための方法を提供する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）へのアミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）の結合を阻害、治療、または軽減し（特に阻害する）、及び、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の阻害、治療、及び軽減のために有用である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、アミロイド凝集、アミロイド結合、及び、アミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減する。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、アミロイド凝集を阻害、治療、または軽減する。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、アミロイド結合を阻害、治療、または軽減する。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、アミロイド堆積を阻害、治療、または軽減する。いくつかの実施形態においては、本発明の化合物は、ニューロンでのＡベータオリゴマーの活性／効果を阻害、治療、または軽減する。いくつかの実施形態において、この化合物は、ベータ−セクレターゼ分析において活性を示し、及び、認知機能低下及びアルツハイマー疾患の阻害、治療、軽減において潜在的に有用である。いくつかの実施形態において、ショウガ油の派生物は、精製された、及び分離された形態（例えば、８０重量％、８５重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％、または９９重量％を超える純度によって）での化合物である。本明細書に記載された化合物及び方法は、記憶喪失、混乱、判断力欠乏、人格変化、見当識障害、言語機能の喪失のような認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の１つまたはそれ以上の症状を治療するのに使用されることがある。さらに、本明細書に記載された化合物及び方法は、長期間の増強を回復することにより、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療、及び／または軽減することにおいて、及び／または、神経変性及び一般的なアミロイドシスの１つまたはその両方を阻害、治療、または軽減することにおいて、さらに具体的には、アミロイド生成、アミロイド組み立て、アミロイド結合、及びアミロイド堆積を阻害、治療または軽減することにおいて、有用であることがある。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、アミロイド前駆体タンパク質の処理物の存在、及び、非存在におけるＭＴＴ分析の結果を示したものである。
【図２】図２は、実施例２の化合物による膜輸送効果で媒介されるアミロイド前駆体タンパク質の処理物の阻害を示す。
【図３】図３は、実施例２の化合物が、アミロイド先駆体タンパク質の処理物の記憶喪失効果を阻害することを示す。
【図４】図４は、実施例２の化合物が、ＡＤ患者から分離されたＡベータ組み立ての膜輸送効果を阻害することを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
記憶喪失、混乱、判断力欠乏、人格変化、見当識障害、言語機能の喪失のような認知機能低下は、年をとるにつれて、多くの人において、様々な程度で発生する。認知機能低下の最も一般的で、重症、及び不可逆的な形態は、アルツハイマー疾患である、現在において、それは常に致命的である。
【００１６】
認知機能低下及びアルツハイマーの症状は、アミロイド斑及び神経原線維濃縮体の形成から生じると考えられ、脳内のニューロン（神経細胞）の低下及び続いて起こる症状の発現に関与すると考えられる。アミロイドは体が通常生成するタンパク質フラグメントにおいて一般的な用語である。ベータ−アミロイドは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれるほかのタンパク質から切断されるタンパク質のフラグメントである。健康な脳において、ベータ−アミロイドタンパク質フラグメントは、壊され、除去される。アルツハイマー疾患及び認知機能低下の他の形態を有する個体において、このフラグメントは、硬く、不溶性の斑を形成して蓄積する。神経原線維濃縮体は脳細胞の内側でみられる不溶性のねじれた線維である。神経原線維濃縮体に含まれるタンパク質、つまり、タウタンパク質は、微小管を形成し、神経細胞の一部から他に、栄養分及び他の重要な物質を輸送するのを助ける。アルツハイマー疾患において、タウタンパク質は異常であり、及び、微小管構造は崩壊する。
【００１７】
ベータ−セクレターゼは、ベータ−アミロイドの生成の原因となる脳内の酵素であり、アルツハイマー疾患の脳において斑及び濃縮体を形成する原因となる病原性物質である。ベータ−アミロイド及びそのオリゴマー（ベータ−アミロイドオリゴマーまたはＡベータオリゴマー）は、アルツハイマー疾患の脳においての初期の認知機能低下の原因となると信じられている。ベータ−セクレターゼの阻害は、脳におけるベータ−アミロイド負担を少なくし、それによって、認知機能低下を遅らせ、アミロイドオリゴマーの形成、斑及び濃縮体の形成を遮断し、神経変性を止め、及び、軽度認知障害及びアルツハイマー疾患のような認識障害のより重症な形態を潜在的に治療することが期待される。
【００１８】
ジンゲロールは、ショウガ、ショウガ（学名）から分離される一連の天然小分子であり、例えば、［６］−ジンゲロール、［８］−ジンゲロールのように、そのアルキル鎖によって分類される。ジンゲロールは、化学的及び生物学的条件の下で比較的不安定で、不活性物質を形成することは公知である。例えば、ジンゲロールのベータ−ヒドロキシカルボニル昨日は、不活性生成物を形成するために酸化または脱水に弱く、及び、ジンゲロールは、特に酸性条件下で急速な脱水の傾向があり、そうすると、準物質さえ長期間での貯蔵は困難である。従って、医薬作用のためのジンゲロールの単純な経口投薬は、胃及び上部腸管の酸性環境下のために不可能である。さらに、化学的及び生物学的不安定性は、静注投与において深刻な問題となりうる。したがって、認知機能低下の阻害剤、及び、特に、アミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）生成、アミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）凝集、及び／またはアミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）堆積（つまり斑形成）の阻害、神経変性の阻害、及び／または長期間の増強の回復、及び／またはニューロンでのＡベータオリゴマーの活性／効果の阻害などの方法による認知機能低下及びアルツハイマー疾患の治療に有用な化合物を発見することに対して強い必要性がある。化学的及び生物学的安定性のある、認知機能低下の阻害剤も必要とされている。
【００１９】
植物は、認知機能低下及びアルツハイマー疾患における薬剤発見において潜在的に有益な資源として、比較的わずかに関心をもたれた。関心のある医薬の化合物の不自然な派生物を生成するための植物性抽出物の使用は、一般的ではない。したがって、植物性抽出物及び他の生物学的資源から関心のある医薬の化合物を生成する方法も必要とされている。特に、認知機能低下及びアルツハイマー疾患の治療及び軽減に有用な植物性抽出物から由来する化合物を生成、及び、同定する必要もある。
【００２０】
本明細書に記載される化合物、組成物、及び方法は、これらの必要及び他の端の方向を目指す。
【００２１】
本発明の実施形態は、特に、化学式Ｉの化合物、
【００２２】
【化３】
2012523418.tif 000004
【００２３】
またはそれらの薬学的に許容可能な塩であって、
Ｒ１は（Ａ１）及び（Ａ２）から選択され、
【００２４】
【化４】
2012523418.tif 000005
【００２５】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、ＮＲｃＲｄ、ＮＲｃＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＮＲｃＣ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲｃＳ（Ｏ）２Ｒｂ、ＮＲｃＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄ、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ及びＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄから選択されるものであり、
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ８は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｃ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ１、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｒｄ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｃ（Ｏ）ＯＲａ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１、ＮＲｃ１Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１、Ｓ（Ｏ）Ｒｂ１、Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ１、及びＳ（Ｏ）２ＮＲｃ１Ｒｄ１、
それぞれＲａは独立に、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルは、ＯＨ、ＣＮ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換され、
それぞれＲｂは独立に、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換され、
Ｒｃ及びＲｄは独立に、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４または５つの置換基によって選択的に置換され、
またはＲｃ及びＲｄは、それらが結合するＮ原子と共に、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換された４員環、５員環、６員環、または７員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、
それぞれＲａ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルのそれぞれは、ＯＨ、ＣＮ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
それぞれＲｂ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
Ｒｃ１及びＲｄ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから独立に選択され、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキルアルキルのそれぞれは、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換され、
または、Ｒｃ１及びＲｄ１は、それらが結合するＮ原子と共に、ＯＨ、アミノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルから独立に選択された１、２、３、４、または５つの置換基によって選択的に置換された４員環、５員環、６員環、または７員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、及び、
ｍは０、１または２である。
【００２６】
実施形態によっては、Ｒ１が（Ａ１）の部分であるとき、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうち２つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ１−６ハロアルコキシから独立に選択される。
【００２７】
実施形態によっては、Ｒ１が（Ａ１）の部分であるとき、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、Ｈ以外である。
【００２８】
実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６のうち２つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ１−６ハロアルコキシから独立に選択される。さらに実施形態によっては、残りのＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ、Ｈである。
【００２９】
実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、Ｈ。ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００３０】
実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨであり、及び、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシまたはＣ１−６ハロアルコキシである。さらに実施形態によっては、残りのＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ、Ｈである。
【００３１】
実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨであり、及び、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、Ｃ１−３アルコキシまたはＣ１−３ハロアルコキシである（さらに実施形態によっては、残りのＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ、Ｈである）。さらに実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨであり、及び、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、メトキシまたはトリハロメトキシである（さらに実施形態によっては、残りのＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれＨである）。さらに実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、ＯＨであり、及び、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の１つは、メトキシである（さらに実施形態によっては、残りのＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ、Ｈである）。
【００３２】
実施形態によっては、Ｒ４は、ＯＨであり、Ｒ５はメトキシである。さらに実施形態によっては、Ｒ４は、ＯＨであり、Ｒ５はメトキシであり、及び、Ｒ２、Ｒ３及びＲ６はそれぞれＨである。
【００３３】
実施形態によっては、Ｒ７はＨまたはＣ１−６アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ７はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【００３４】
実施形態によっては、Ｒ７はＣ１−３アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ７はメチルまたはエチルである。さらに実施形態によっては、Ｒ７はメチルである。
【００３５】
実施形態によっては、Ｒ７はＨである。
【００３６】
実施形態によっては、Ｒ８はＣ１−６アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ８はＣ１−３アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ８はメチルである。
【００３７】
実施形態によっては、Ｒ９はＨまたはＣ１−６アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ９はＨまたはＣ１−３アルキルである。
【００３８】
実施形態によっては、Ｒ９はＨである。
【００３９】
実施形態によっては、Ｒ９はＣ１−３アルキルである。
【００４０】
実施形態によっては、Ｒ１０はＨまたはＣ１−６アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１０はＨまたはＣ１−３アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１０はＨである。他の実施形態においては、Ｒ１０はＣ１−３アルキルである。
【００４１】
実施形態によっては、Ｒ１１はＨまたはＣ１−６アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１１はＨまたはＣ１−３アルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１１はＨである。他の実施形態においては、Ｒ１１はＣ１−３アルキルである。
【００４２】
実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、Ｈ以外である。
【００４３】
実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ，ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立して選択される。
【００４４】
実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれ、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立して選択される。
【００４５】
実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択される。
【００４６】
実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、及び、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。さらに実施形態によっては、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。
【００４７】
実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。
【００４８】
実施形態によっては、Ｒ１４はハロである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１４はＦ
である。
【００４９】
実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−３ハロアルキルである。さらなる実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態において、Ｒ１４はＣＦ３である。
【００５０】
実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらなる実施形態において、Ｒ１５はハロまたはＣ１ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。
【００５１】
実施形態によっては、Ｒ１５はハロである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１５はＦ
である。
【００５２】
実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−６ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−３ハロアルキルである。さらなる実施形態においては、Ｒ１５はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１５はＣＦ３である。
【００５３】
実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１−３ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、及びＲ１６はＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【００５４】
実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロである。
【００５５】
実施形態によっては、化学式Ｉの化合物は、化学式ＩＩの化合物である。
【００５６】
【化５】
2012523418.tif 000006
【００５７】
実施形態によっては、化学式ＩＩの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩は化学式ＩＩａまたはＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩である。
【００５８】
【化６】
2012523418.tif 000007
【００５９】
実施形態によっては、化学式ＩＩの化合物は、化学式ＩＩａの化合物である。さらに実施形態によっては、Ｒ１０及びＲ１１は、Ｈ及びＣ１−３アルキルからそれぞれ独立に選択される。さらに他の実施形態においては、Ｒ１０及びＲ１１は、Ｈ及びメチルからそれぞれ独立に選択される。更なる実施形態においては、Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれＨである。
【００６０】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１０及びＲ１１の１つは、Ｈ及びＣ１−３アルキルから選択され、もう一方はＨである。さらに実施形態によっては、Ｒ１０及びＲ１１はＣ１−３アルキルである。さらに他の実施形態においては、Ｒ１０及びＲ１１の１つはメチルである。
【００６１】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１０及びＲ１１の両方は、Ｃ１−３アルキルから選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１０及びＲ１１はメチルである。
【００６２】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００６３】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００６４】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル及びＣ３−７シクロアルキルからそれぞれ独立に選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれ、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−６アルキル、及びＣ１−６ハロアルキルからそれぞれ独立に選択される。さらに他の実施形態においては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、及びＣ１−６ハロアルキルからそれぞれ独立に選択される。
【００６５】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、及び、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれＨである。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の１つまたは２つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、及び、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれＨである。さらに他の実施形態において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、及び、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、それぞれＨである。
【００６６】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択される。
【００６７】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択される。
【００６８】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−３ハロアルキルから選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１ハロアルキルから選択される。
【００６９】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１４はハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【００７０】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６はＨである）。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１４はＦである。
【００７１】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６はＨである）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−３ハロアルキルである。さらに他の実施形態において、Ｒ１４はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１４はＣＦ３である。
【００７２】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−６ハロアルキルであり、及び、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、及びＲ１６のそれぞれはＨである。
【００７３】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６はＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６はＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１５はハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【００７４】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はハロである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１５はＦである。
【００７５】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−６ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−３ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態では、Ｒ１５はＣＦ３である。
【００７６】
化学式ＩＩａの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３及びＲ１６はＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はハロまたはＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロである。
【００７７】
実施形態によっては、化学式ＩＩの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩は、化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩である。
【００７８】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＮＨ（Ｃ３−７シクロアルキル）、Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、ＳＨ、Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００７９】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００８０】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル及びＣ３−７シクロアルキルからそれぞれ独立に選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−６アルキル及びＣ１−６ハロアルキルからそれぞれ独立に選択される。さらに他の実施形態において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−６アルキル及びＣ１−６ハロアルキルからそれぞれ独立に選択される。
【００８１】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の１つまたは２つは、及び、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。さらに他の実施形態において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択され、残りのＲ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。
【００８２】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−４アルキル）、及びＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）から選択される。
【００８３】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−６ハロアルキルから選択される。
【００８４】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１−３ハロアルキルから選択される。さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、ハロ及びＣ１ハロアルキルから選択される。
【００８５】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである。さらに他の実施形態においては、Ｒ１４はハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【００８６】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１４はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１４はＦである。
【００８７】
化学式ＩＩｂの化合物の実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１−３ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１４はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態によっては、Ｒ１４はＣＦ３である。
【００８８】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４はハロまたはＣ１−６ハロアルキルであり、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５及びＲ１６のそれぞれはＨである。
【００８９】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−６ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１６のそれぞれはＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１−３ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【００９０】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はハロである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌまたはＦである。実施形態によっては、Ｒ１５はＣｌである。実施形態によっては、Ｒ１５はＦである。
【００９１】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−６ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１−３ハロアルキルである。さらに実施形態によっては、Ｒ１５はＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態において、Ｒ１５はＣＦ３である。
【００９２】
化学式ＩＩｂの化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１−３ハロアルキルである（さらに実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３及びＲ１６はＨである。）。さらに実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１ハロアルキルである。さらに他の実施形態において、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロである。
【００９３】
実施形態によっては、化学式Ｉの化合物は、化学式ＩＩＩ の化合物である。
【００９４】
【化７】
2012523418.tif 000008
【００９５】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、ｍは１である。
【００９６】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、ｍは０である。
【００９７】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の少なくとも１つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ１−６ハロアルコキシから選択される。
【００９８】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の少なくとも２つは、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ１−６ハロアルコキシから独立に選択される。
【００９９】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６の少なくとも１つは、Ｈ以外である。
【０１００】
化学式ＩＩＩの化合物または薬学的に許容可能な塩の実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１−３ハロアルキルである。実施形態によっては、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立にハロまたはＣ１ハロアルキルである。
【０１０１】
本明細書の様々な箇所で、本発明の化合物の置換基が基または範囲において記載されている。本発明の実施形態は、基及び範囲のような部材のそれぞれ及び各個別のサブコンビネーションを含むことが特に意図される。例えば、用語「Ｃ１−６アルキル」は、メチル（Ｃ１アルキル）、エチル（Ｃ２アルキル）、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、及びＣ６アルキルを開示することを特に意図したものである。
【０１０２】
変数が複数回現れる本発明の化合物において、各変数は、変数を定義するマーカッシュ群から選択される別の部分となる。例えば、構造が、同じ化合物上に同時に存在する２つのＲ基を有すると記載される箇所において、この２つのＲ基は、Ｒのために定義されたマーカッシュ群から選択される他の部分を表すことができる。
【０１０３】
本発明の特定の特徴は、別々の実施形態の文脈において明確に記載され、単一実施形態の組み合わせにおいて提供されることもある。反対に、本発明の様々な特徴は、単一実施形態の文脈において簡潔に記載され、別々に、または任意の適当なサブコンビネーションにおいて提供されることもある。
【０１０４】
ｎが概して整数である、用語「ｎ員環」は、環を形成する原子の数がｎである部分の環を形成する原子の数を記載するものである。例えば、ピリジンは６員ヘテロアリール環の実施例であり、チオフェンは５員環ヘテロアリール基の実施例である。
【０１０５】
本明細書で使用されているように、用語「アルキル」は、直鎖または分枝の飽和炭化水素基を意味するものである。アルキル基の実施例は、非限定ではあるが、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ−プロピル及びイソプロピル）、ブチル（例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル）、ペンチル（例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル）なども含む。アルキル基は、１から約２０、２から約２０、１から約１０、１から約８、１から約６、１から約４、または１から約３の炭素原子を含むことがある。用語「アルキレン」は、二価アルキル連結基を意味するものである。アルキレンの実施例は、メチレン（ＣＨ２）である。
【０１０６】
本明細書で使用されているように、「アルケニル」は１つまたはそれ以上の二重炭素結合を有するアルキル基を意味する。アルケニル基の実施例は、非限定ではあるが、エテニル、プロペニル、シクロヘキセニルなどを含む。用語「アルケニルエニル」は二価連結アルケニル基を意味するものである。
【０１０７】
本明細書で使用されているように、「アルキニル」は１つまたはそれ以上の三重炭素結合を有するアルキル基を意味する。アルキニル基の実施例は、非限定ではあるが、エチニル、プロピニル、などを含む。用語「アルキニルエニル」は、二価連結アルキニル基を意味するものである。
【０１０８】
本明細書で使用されているように「ハロアルキル」は、１つまたはそれ以上のハロゲン置換基を有するアルキル基を意味するものである。ハロアルキル基の実施例は、非限定ではあるが、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、ＣＨＦ２、ＣＣｌ３、ＣＨＣｌ２、Ｃ２Ｃｌ５、ＣＨ２ＣＦ３などを含む。
【０１０９】
本明細書で使用されているように、「アリール」は、単環式または多環式（例えば、２、３または４縮合環を有する）芳香族炭化水素、例えば、フェニル、ナフチル、アントラニル、フェナントレニル、インダニル、インデニルなどを意味するものである。実施形態によっては、アリール基は、６から約２０の炭素原子を有する。実施形態によっては、アリール基は、６から約１０の炭素原子を有する。
【０１１０】
本明細書で使用されているように、「シクロアルキル」は、環化されたアルキル、アルケニル及び最大で２０の環形性炭素原子を含むアルキニル基を含む非芳香族環状炭化水素を意味する。シクロアルキル基は、スピロ環系と同様に、単−または複素（例えば、２、３または４縮合環を有する）環系を含むことができる。シクロアルキル基は、３から約１５、３から約１０、３から約８、３から約６、４から約６、３から約５または５から約６の環形成炭素原子を含むことがある。シクロアルキル基の環形成炭素原子は、選択的にオキソまたはスルフィドによって置換されることがある。シクロアルキル基の実施例は、非限定ではあるが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプタトリエニル、ノルボニル、ノルピニル、ノルカルニル、アダマンチルなどを含む。シクロアルキル環に縮合された（つまりシクロアルキル環と共通の結合を有する）１つまたはそれ以上の芳香環、例えば、ペンタン、ペンテン、ヘキサンなどのベンゾまたはチエニル誘導体（例えば、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル、または１Ｈ−インデン−２（３Ｈ）−１−１−イル）を有する部分も、シクロアルキルの定義において含まれる。好適には、「シクロアルキル」は最大で２０の環形成炭素原子を含む環化されたアルキル基を意味する。シクロアルキルの実施例は、好適には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチルなどを含む。
【０１１１】
本明細書で使用されるように、「ヘテロアリール」基は、最大で２０の環形成炭素原子を有し、硫黄、酸素、または窒素のような少なくとも１つのヘテロ原子環部材（環形成原子）を有する芳香族複素環を意味するものである。実施形態によっては、ヘテロアリール基は、硫黄、酸素、及び窒素からそれぞれ独立に選択される少なくとも１つまたはそれ以上のヘテロ原子環形成原子を有する。ヘテロアリール基は単環または多環（例えば、２、３または４縮合環を有する）系を含む。ヘテロアリール基の実施例は、非限定的に、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノイル、イソキノイル、チエニル、イミダゾリル、チアゾニル、インドリル、ピリル、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンズチアゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾチエニル、プリニル、カルバゾリル、ベンズイミダゾリル、インドリニルなどを含む。実施形態によっては、ヘテロアリール基は、１から約２０の炭素原子を有し、さらに実施形態によっては、１から約５、１から約４、１から約３、１から約２の炭素原子を環形成原子として有する。実施形態によっては、ヘテロアリール基は、３から約１４、３から約７、または５から６環形成原子を含む。実施形態によっては、ヘテロアリール基は、１から約４、１から約３、または１から約２のヘテロ原子を含む。
【０１１２】
本明細書で使用されるように、「ヘテロシクロアルキル」は、１つまたはそれ以上の環形成炭素原子がＯ、ＮまたはＳ原子によって置換された、環化されたアルキル、アルケニル及びアルキニル基を含む最大で２０の環形成原子を有する非芳香族複素環を意味する。ヘテロシクロアルキル基は、単環または多環（例えば縮合系及びスピロ系の両方）であることがある。「ヘテロシクロアルキル」基の実施例は、モルフォリノ、チオモルフォリノ、ピペラジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、２，３−ジヒドロベンゾフリル、１，３−ベンゾジオキソール、ベンゾ−１，４−ジオキサン、ピペリジニル、ピロリジニル、イソキサゾリジニル、イソチアゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イミダゾリジニル、ピロリジン−２−１−３−イルなどを含む。ヘテロシクロアルキル基の環形成炭素原子及びヘテロ原子は、オキソまたはスルフィドによって選択的に置換されることがある。例えば、環形成Ｓ原子は、１または２のオキソによって置換されることがある（つまり、ＳＯまたはＳ（Ｏ）２を形成する）。他の実施例において、環形成Ｃ原子は、オキソによって置換されることがある（つまりカルボニルを形成する）。非芳香族複素環に縮合される（つまり共通の結合を有する）１つまたはそれ以上の芳香族環、例えば、インドレン、イソインドレン、イソインドリン−１−１−３−イル、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−５−イル、５，６−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−７（４Ｈ）−１−５−イル、及び、３，４−ジヒドロイソキノリン−１（２Ｈ）−１−３イル基のような複素環のピリジニル、チオフェニル、フタリミジル、ナフタリミジル、及びベンゾ誘導体を有する部分は、ヘテロシクロアルキルの定義において含まれる。環形成炭素原子及びヘテロアルキル基のヘテロ原子はオキソまたはスルフィドによって選択的に置換されることがある。実施形態によっては、ヘテロシクロアルキル基は１から約２０の炭素原子を有し、及び、さらに実施形態によっては約３から約２０の炭素原子を有する。実施形態によっては、ヘテロシクロアルキル基は、３から約１４、３から約７、または５から６の環形成原子を含む。実施形態によっては、ヘテロシクロアルキル基は、１から約４、１から約３、または１から２のヘテロ原子を有する。実施形態によっては、ヘテロシクロアルキル基は０から３の二重結合を含む。実施形態によっては、ヘテロシクロアルキル基は０から２の三重結合を含む。
【０１１３】
本明細書で使用されるように、「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素及び要素を含む。
【０１１４】
本明細書で使用されるように、「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の実施例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（つまりｎ−プロポキシ及びイソプロポキシ）、ｔ−ブトキシなどを含む。
【０１１５】
本明細書で使用されるように、「ハロアルコキシ」は、−Ｏ−ハロアルキル基を意味する。ハロアルコキシ基の実施例はＯＣＦ３である。「トリハロメトキシ」は３つのハロゲン置換基を有するメトキシ基を意味する。トリアハロメトキシ基の実施例は、非限定的ではあるが、ＯＣＦ３、−ＯＣＣｌＦ２、−ＯＣＣｌ３などを含む。
【０１１６】
本明細書で使用されるように、「アリールアルキル」はアリールによって置換されたＣ１−６アルキルを意味し、及び、「シクロアルキルアルキル」はシクロアルキルによって置換されたＣ１−６アルキルを意味する。
【０１１７】
本明細書で使用されるように、「ヘテロアリールアルキル」はヘテロアリール基によって置換されたＣ１−６アルキル基を意味し、及び「ヘテロシクロアルキルアルキル」はヘテロシクロアルキル基によって置換されたＣ１−６アルキルを意味する。
【０１１８】
本明細書で使用されるように、「アミノ」はＮＨ２である。
【０１１９】
本明細書で使用されるように、「アルキルアミノ」はアルキル基によって置換されたアミノ基を意味する。
【０１２０】
本明細書で使用されるように、「ジアルキルアミノ」は２つのアルキル基によって置換されたアミノ基を意味する。
【０１２１】
本明細書で使用されるＣ（Ｏ）はＣ（＝Ｏ）を意味する。
【０１２２】
本明細書で使用されるＣ（Ｓ）はＣ（＝Ｓ）を意味する。
【０１２３】
本明細書で使用されるＳ（Ｏ）はＳ（＝Ｏ）を意味する。
【０１２４】
本明細書で使用されるＳ（Ｏ）２は、Ｓ（＝Ｏ）２を意味する。
【０１２５】
本明細書で使用される、「選択的に置換された」は置換が任意であり、及び、従って、非置換型及び置換型原子及び部分の両方を含む。「置換された」原子または部分は、指定された原子または部分の通常の原子価が上回らない場合に、指定された原子または部分において任意の水素が、示された置換基から選択されたものと置換され、置換が安定な合成物を結果として生じることを示す。例えば、メチル基（つまりＣＨ３）が選択的に置換されると、炭素原子上の３つの水素原子が置換基によって置換されることがある。
【０１２６】
本明細書で使用されているように、数値と関連する「約」は、数値が近似、または小さな変動は、開示された実施形態の実行に著しい影響を及ぼさないことを意味する。数値限定が用いられる場合において、文脈によって特に明記されない限り、「約」は数値が±１０％変化することがあり、及び、それは、開示された実施形態の範囲内のままである。
【０１２７】
本明細書の実施形態に記載された化合物は、非対称であることがある（例えば、１つまたそれ以上の立体中心を有する）。エナンチオマー及びジアステレオマーのような全ての立体異性体は、特に明記されない限り、意図されたものである。非対称に置換された炭素原子を含む本発明の化合物は、光学活性またはラセミ体で分離されることがある。ラセミ混合物の分割または立体選択的合成のような、光学活性開始剤から光学活性体を調製する方法は当業者において知られている。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何学異性体は、本明細書に記載された化合物において存在することがあり、及び、全ての安定な異性体は、本発明において予期される。本発明の化合物のシス及びトランス幾何学異性体は、異性体の混合物として、または分離された異性体として、記載され、及び、分離されることがある。立体異性または幾何学異性ができる化合物が、特異的Ｒ／Ｓまたはシス／トランス構成を参照することなくその構造または名前において示されている場合、全てのこの種の異性体が考慮されるように意図されている。
【０１２８】
化合物のラセミ混合物の分割は、当業者に知られた任意の多くの方法によって行うことができる。実施例の方法は、光学活性、塩形成有機酸であるキラル分割を用いる分別再結晶を含む。分別再結晶法において適当な分割剤は、例えば、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、またはβ−カンフルスルホン酸のような様々な光学活性カンフルスルホン酸のＤ及びＬ型のような光学活性酸である。分別再結晶法において適当な他の分割剤は、α−メチルベンジルアミン（例えばＳ及びＲ型、またはジアステレオマー純型）、２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミン、１，２−ジアミノシクロヘキサンなどの立体異性純型を含む。
【０１２９】
ラセミ混合物の分割は、光学活性分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン）を詰められたカラムでの溶出によっても行われることがある。適当な溶出溶媒組成物は、当業者によって測定されることができる。
【０１３０】
本発明の実施形態の化合物は、互変異性体も含む。互変異性体は、プロトンの付随する移動と共に、隣接する二重結合と単結合を交換することから生じる。互変異性体は、同じ実験式及び総電荷を有する異性体プロトン化状態であるプロトン互変異性体を含む。プロトン互変異性体の実施例は、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、アミド−イミド酸対、エナミン−イミン対、及び、１Ｈ−及び３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−及び２Ｈ−イソインドール、及び１Ｈ−及び２Ｈ−ピラゾールのように、プロトンが複素環系の２つまたはそれ以上の位置を占めている場合の環状型を含む。互変異性体は、平衡である、または、適切な置換によって１つの形に立体配置的に固定されることがある。
【０１３１】
本発明の実施形態の化合物は、無水和物及び非溶媒和物と同様に、水和物及び溶媒和物を含む。
【０１３２】
本明細書で使用されるように、用語「化合物」は全ての立体異性体、幾何学異性体、互変異性体及び示された構造の同位体を含むことを意味する。
【０１３３】
全ての化合物及びそれらの薬学的に許容可能な塩は、水及び溶媒（例えば水和物及び溶媒和物）のように他の物質と共に調製されるまたは現れるか、分離されることもある。
【０１３４】
本発明の実施形態の化合物は、中間体または最終化合物で生じる原子の全ての同位体も含むことがある。同位体は、同じ原子番号であるが、異なる質量数を有するそれらの原子を含む。例えば、水素の同位体はトリチウム及びジュウテリウムを含む。
【０１３５】
実施形態によっては、本発明の化合物またはそれらの塩は、実質的に分離されている。「実質的に分離されている」とは、その化合物が形成される、または検出される環境から少なくとも部分的にまたは実質的に分離されていることを意味する。部分的な分離は、例えば、本発明の化合物において濃縮された組成物を含むことがある。実質的な分離は、本発明の化合物またはそれらの塩の少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％、または少なくとも約９９重量％を含む組成物を含むことがある。化合物を及びそれらの塩を分離するための方法は、当業者においてありふれている。
【０１３６】
本発明の実施形態の化合物は、安定な構造の化合物を含むよう意図されたものである。本明細書で使用されているように、「安定な化合物」及び「安定な構造」は、反応混合物からの有用な純度への分離、及び有効な治療薬への製剤を存続するために十分に強い化合物を意味する。
【０１３７】
用語「薬学的に許容可能な」は、堅実な医学判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または合理的な利点／危険率と相応な他の問題または複雑さのない、ヒトまたは動物の組織への接触においての使用に適切なこれらの化合物、材料、組成物及び／または剤形に関連して用いられる。
【０１３８】
本明細書で使用されるように、表現「外気温」及び「室温」は当業者において理解されており、一般に温度、例えば、反応温度に関連するものである。例えば反応温度は、大体反応が行われる部屋の温度であり、例えば約２０℃から約３０℃である。
【０１３９】
本発明の実施形態は、本明細書に記載された化合物の薬学的に許容可能な塩を含む。本明細書で使用されるように、「薬学的に許容可能な塩」は、開示された化合物の誘導体を意味し、そこにおいて、親化合物は、塩にするために、酸または塩基部分の交換によって修飾される。薬学的に許容可能な塩の実施例は、非限定的ではあるが、アミン、アルカリのような塩基性残基の鉱物または有機酸塩、またはカルボキシル酸などのような酸性残基の有機塩が含まれる。本発明の薬学的に許容可能な塩は、例えば非中毒性の無機または有機酸から形成される親化合物の従来の非中毒性塩を含む。本発明の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法によって塩基性または酸性部分を含む親化合物から合成されることがある。通常、このような塩は、水中または有機溶媒中または２つの混合溶液中において適切な塩基または酸の化学量論的な量で、これらの化合物の遊離酸または遊離塩基を反応させることで調製されることがある。一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリル（ＡＣＮ）のような非水系媒体が好適である。適当な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１７ｔｈ  ｅｄ．、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、１９８５、ｐ．  １４１８及びＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、６６、２  （１９７７）にあり、それぞれその全体は参照によって本明細書に組み込まれる。
【０１４０】
合成
本発明の実施形態の化合物及びそれらの塩は、既知の有機合成技術を用いて調製されることがあり、及び、任意の多くの可能な合成ルートに従って合成されることがある。
【０１４１】
本発明の化合物を調製するための反応は、有機合成の当業者によって直ちに選択されることができる適当な溶媒において実施されることができる。適当な溶媒は、反応が行われる温度、例えば、溶媒の凝固点から沸点の範囲であることがある温度において、開始材料（反応体）、中間体、または生成物と実質的に反応しない。所与の反応は、１つの溶媒または複数の溶媒の混合において行われることがある。特定の反応工程によっては、特定の反応工程に適当な溶媒が、当業者によって選択されることがある。
【０１４２】
本発明の化合物の調製は、様々な化学群の保護または脱保護を含むことがある。保護及び脱保護における必要、及び、適当な保護基の選択は、当業者によって直ちに決定することができる。保護基の化学作用は、例えば、Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３ｒｄ  Ｅｄ．、Ｗｉｌｅｙ  &  Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  （１９９９）に記載され、その全体は参照により本明細書に組み込まれている。
【０１４３】
反応は、当業者において既知の任意の適当な方法によって監視されることができる。例えば、製品製造は、核磁気共鳴分光法（例えば１Ｈまたは１３Ｃ）、赤外線分光法、分光光度法（例えば紫外−可視）、質量分析、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）または薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）のようなクロマトグラフィー法によって監視されることがある。
【０１４４】
本発明の実施形態の化合物は、例えば、後述する反応経路、合成手順及び技術によって調製されることがある。
【０１４５】
模式図１に示すように、ベンズアルデヒド誘導体１−１は、ケイ皮アルデヒド１−２を提供するための酸または塩基の触媒がある場合には、アセトアルデヒドと反応することができる。グリニャール試薬Ｒ８ＭｇＸ１（そこにおいてＸ１は、例えばＣｌまたはＢｒである）のような有機金属化合物とケイ皮アルデヒド１−２の反応、続いて、ケトンへの中間アルコールの酸化、及び水素付加条件下（例えば、Ｐｄ／Ｃ触媒の存在下）でのＣ＝Ｃ結合のＣ−Ｃ単結合への還元はケトン１−３を提供する。還元的アミノ化条件下（例えば、ホウ化水素還元剤の存在下）でアミン１−４とケトン１−３の反応は、化合物１−５を提供する。
【０１４６】
【化８】
2012523418.tif 000009
【０１４７】
模式図２に示すように、ケトン２−１は、アルコール２−２ａを提供するために、グリニャール試薬Ｒ７ＭｇＸ２（そこにおいてＲ７はＣ１−６アルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであることがあり、及びＸ２はＣｌまたはＢｒのようなハロであることがある）のような有機金属化合物と反応させることができる。ホウ化水素還元剤の存在下のようなケトン２−１の還元は、アルコール２−２ｂを提供する。アルコール２−２（そこにおいて、Ｒ７はＨ、Ｃ１−６アルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであることがある）のＯＨ基はＯＭｓ（メシレートまたはＣＨ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−）またはＯＴｆ（トリフラートまたはＣＦ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−）のような良好な脱離基Ｌｇ１に変換されることがあり、続いて、ＮＨ３との反応によってアミン２−４を提供する。ケトン２−１はまた、アミン２−５を提供するためにＮＨ３と還元的アミノ化を経ることもある。
【０１４８】
【化９】
2012523418.tif 000010
【０１４９】
模式図３に示すように、アミン３−１（そこにおいて、Ｒ７は例えばＨ、Ｃ１−６アルキルまたはＣ３−７シクロアルキルであることがある）は、化合物３−３を提供するために化合物３−２（Ｌｇ２はトリフラート基（−ＯＴｆ）またはハロ（例えばＣｌまたはＢｒ）のような脱離基であることがある）と反応されることがある。
【０１５０】
【化１０】
2012523418.tif 000011
【０１５１】
模式図４に示すように、ベンズアルデヒド誘導体４−１は、グリニャール試薬ＭｅＭｇＸ１（そこにおいてＸ１はＣｌまたはＢｒのようなハロである）のようなメチル金属化合物と反応させ、ケトン４−２を提供するためにケトンへの中間アルコールの酸化が続く。エステル化合物４−３（そこにおいて、Ｒ１はアルキル（例えばメチルまたはエチル）またはアリールアルキルであることがあり、及び、Ｐｇ１はアミン保護基（例えば第３級ブチルオキシカルボニルまたはＢｏｃ、ベンジルオキシカルボニルまたはＣｂｚ、またはベンジル）であることがある）は、アルコールへ還元されることがあり（水素化アルニウムリチウムまたはＬＡＨなどの還元剤の存在下）、化合物４−４を提供するために、ＯＭｓ（メシレートまたはＣＨ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−）またはＯＴｆ（トリフラートまたはＣＦ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−）のような良好な脱離基Ｌｇ３へのＯＨ基の変換が続く。
【０１５２】
強塩基（例えばリチウムジイソプロピルアミドまたはＬＤＡ）の存在下で化合物４−４と化合物４−２の反応、続いて、Ｃ（Ｏ）をＣＨ２に還元するための水素付加（例えばＰｄ／Ｃ触媒の存在下）及び、適当な条件下での保護基Ｐｇ１の削除（例えば、ベンジル基は、Ｐｄ／Ｃの存在のもとに、水素付加条件下で削除され、Ｂｏｃ基は酸性条件下で削除される）は、アミン４−５を提供する。化合物４−７を提供するために、アミン４−５は化合物４−６（そこにおいて、Ｌｇ２はトリフラート基（−ＯＴｆ）またはハロ（例えばＣｌまたはＢｒ）のような脱離基）と反応させることができる。
【０１５３】
【化１１】
2012523418.tif 000012
【０１５４】
本明細書に記載された全ての模式図において、（反応性）官能基がＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６などのような置換基に存在する場合、適当な場合に更なる修飾がなされる、及び／または望まれることを当業者は認識することができる。例えば、ＣＮ基は、アミノ基を提供するために加水分解されることがあり、カルボン酸はアミドに転換されることがあり、カルボン酸はエステルに転換されることがあり、そして、それは順にアルコールに還元され、さらに順に修飾されることもある。他の実施例において、ＯＨ基はメシレートのような良好な脱離基に転換されることがあり、ＣＮによってのように、順に求核置換に適するようになる。他の実施例において、−Ｓ−は、−Ｓ（Ｏ）−及び／または−Ｓ（Ｏ）２−に酸化されることがある。さらにもう１つの実施例において、Ｃ＝ＣまたはＣ≡Ｃのような不飽和結合は、水素付加によって飽和結合に還元されることがある。実施形態によっては、第一アミンまたは第二アミン部分（Ｒ１−Ｒ１６などのような置換基上に存在する）は、酸塩化物、塩化スルホニル、イソシアン酸塩またはチオイソシアン酸化合物などのような適切な試薬と反応させることで、アミド、スルホンアミド、尿素またはチオ尿素部分に変換されることがある。従って、官能基を含む置換基を有する化学式Ｉの化合物（例えば模式図３の化合物３−３）は、他の置換基を有する化学式Ｉの他の化合物に変換されることがある。
【０１５５】
本明細書で使用されるように、用語「反応」は、指定された化学反応体を、化学変化が系における任意の初期の導入と異なる化合物を生成するようにすることに関連する。反応は溶媒の有無によって起こることがある。
【０１５６】
化学的条件づけ
実施形態によっては、ショウガ油のような生物学的抽出物から化学的化合物の配列を調製する方法が提供されている。
【０１５７】
本発明の方法、用語「化学的条件付け」は、全ての生物学的抽出物、特に、一般的または医薬的天然植物抽出物に一般的に適用可能である。例えば、ＵＳ２００８０１９３５７４及びＷＯ２００８０４２７５５を参照、これらはそれぞれ、その全体は参照によって本明細書に組み込まれる。化学的条件付けは、直ちに利用可能な天然の材料から新規で人為的なドラッグライク化合物を製造する方法である。一般的に、化学的に条件付けされた抽出物のプレ分画と結合した天然抽出物の「化学的条件付け」は、生化学分析における偽陽性結果を生成する反応性天然化合物を破壊することによって、抽出物の生化学スクリーニングの成功を容易にする。化学的条件付けは、新規なリードライク及びドラッグライク化合物を製造し、及び、本明細書に記載された還元的アミノ化プロトコルは、特にリードライク及びドラッグライクである、構造的に多用な窒素含有生成物を製造することができる。
【０１５８】
本発明の特定の実施形態において、生物学的抽出物から化学的化合物を調製するための方法は、以下の模式図５ａにおいて説明される。この方法によると、第一に、生物学的抽出物、例えば、植物性抽出物が提供されると、生物学的抽出物は、１またはそれ以上の生物学的化合物を有し、各生物学的化合物は１つまたはそれ以上の求電子基を有する。次に、生物学的抽出物における生物学的化合物は、アミンを生物学化合物に結合するために、アミンと反応させられる。次に、結合されたアミンを有する生物学的化合物は、中間体イミン及びエナミン化合物を還元するため、及び１つまたはそれ以上の窒素含有化合物を形成するために、還元剤と反応させられる。従って、結果として生じる窒素含有化合物は、生物学的抽出物の生物学的化合物の誘導体である。実施形態によっては、生物学的抽出物における生物学的化合物は、様々なアミンと反応されるケトン及びアルデヒドを有する化合物である。この反応の後に、第二級及び第三級アミンを提供するために中間体イミン及びエナミンのヒドリド還元が続く。ケトン及びアルデヒドのアミンとの反応に続くイミン及びエナミンの還元は当業者において知られている。
【０１５９】
【化１２】
2012523418.tif 000013
Ｒ’及びＲ’’は、生物学的化合物を形成する多様な置換基を表し、且つ、
Ｒ※は、窒素と共に、アミン化合物を形成する多様な置換基を表す。
【０１６０】
本明細書に記載された化学的条件付けの方法は、生物学的抽出物を使用し、窒素含有化学的化合物の配列を効果的に製造するために多くの異なる試薬を使用する。還元的アミノ化配列の投与としての使用のための多くの低分子量アミンの手早い商業的な入手可能性は、同じ天然抽出物から多くの異なった、及び、様々な構造の中枢神経系ドラッグライク混合物の発展を可能にする。本発明の方法において使用するために適当なアミンは、第一級アミン、第二級アミン、環状アミン、ピロリジン、及びアミノ酸からなる群から選択される。本発明の方法において使用するために適当な還元剤は、非限定的ではあるが、水素化ホウ素ナトリウム、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム及び水素化アルミニウムリチウムを含むヒドリド還元剤の群から選択される。
【０１６１】
この方法は、さらに、クエンチング剤で反応をクエンチングすることからなることがあり、そこにおいて、クエンチング剤は、非限定的ではあるが、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸ナトリウム十水和物からなる群から選択される。この方法はさらに、窒素含有化学化合物の１つまたはそれ以上を純型または不純型で分離することからなることもある。結果として生じる窒素含有化学化合物は、生物学的活性においてスクリーニングされ、テストされることがある。
【０１６２】
本明細書に記載された還元的アミノ化により化学的条件付けの処理は、ジンゲロールのようなケトンを含む天然抽出物において反応性求電子試薬を破壊し、アミンのような化学的安定化合物にそれらを転換する。結果として生じる条件づけされた抽出物は、天然化合物と潜在的薬剤候補である新規で人為的な窒素含有アミン生成物の両方を含む。ジンゲロールの抽出物の場合、窒素含有アミン生成物は、潜在的中枢神経系薬である。
【０１６３】
本開示の目的のため、以下の用語は以下の意味をもつ。
【０１６４】
用語「生物学的化合物」は本明細書において使用されるように、自然において発生する化学的化合物を意味する。
【０１６５】
用語「生物学的抽出物」は本明細書において使用されるように、自然で発生する化学的化合物を含む植物性抽出物または他の有機物質からの抽出物のような生物学的試料からの抽出物を意味する。
【０１６６】
用語「反応性求電子基」は本明細書において使用されるように、求核試薬と反応することのできる原子または原子の群のことを意味する。
【０１６７】
用語「窒素含有誘導体」は、本明細書において使用されるように、窒素原子が、例えば親化合物の酸素のような他の原子の置換である場合、窒素原子を含むそれらの誘導体のことを示す。
【０１６８】
一実施形態において、化学的条件付け処理の特異的な実施例を以下の模式図５に示す。模式図５は、この方法の一実施形態に従って、ショウガ油またはショウキョウ樹脂油において行われる還元的アミノ化条件付けプロトコルの２つの工程を示し、ここにおいて、ケトン５−１からなるショウガ油またはジンゲロールはアミン５−４に転換される。模式図５において示される方法に従うと、ショウガ油（ケトン５−１及び天然のショウガにおいて生じる他の分子を含むショウガの抽出物）は化合物５−３を形成するためにアミン５−２と反応する。それから、結果として生じた化合物５−３は、ホウ化水素のような還元試薬で還元され、窒素含有化合物５−４を形成する（反応粗生成物は他の化学的化合物も含む）。
【０１６９】
【化１３】
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【０１７０】
この方法の次の工程において、アミン５−４は抽出物（還元的アミノ化の２つの工程の反応粗生成物）から分離／精製される。条件付けされた抽出物は、フラッシュクロマトグラフィーによって分画されることができる。アミン５−４を含むこの分画は、当業者において既知である方法に従ってさらに精製／分離されることができる。アミン５−４を含む分画のさらなる分離及び特徴付けは、以下のようになることがある。分離された５−４は、例えば本明細書に記載された方法によって生物学的活性をテストされる。
【０１７１】
模式図５に示された、本発明の化学的条件付け処理において使用されたベンジルアミン５−２のいくつかの実施例は以下のものを含む。
【０１７２】
【化１４】
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【０１７３】
この化学的条件付けの方法によって生成された新規なリード化合物は、本明細書に記載された合成方法に調製されることがある。
【０１７４】
実施形態によっては、アミン５−４のようなショウガ油の誘導体は、ベータ−セクレターゼ阻害活性を有し、及び／またはアミロイド生成、アミロイド組み立て、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマー、アミロイド凝集、アミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）結合またはアミロイド堆積を阻害する。これらの化合物は、認知機能の低下、アミロイド生成、神経変性及びアルツハイマー疾患の治療及び予防に役立つ治療的薬剤である。
【０１７５】
方法
実施形態によっては、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）へのアミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）の結合を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）し、及び、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の阻害、治療、及び軽減に有用である。実施形態によっては、本発明の化合物は、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減（部分的に阻害）する。実施形態によっては、本発明の化合物は、アミロイド堆積を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）する。実施形態によっては、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）し、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の阻害、治療、及び軽減において有用である。実施形態によっては、本発明の化合物は、Ａベータオリゴマーの破壊、Ａベータオリゴマーのニューロンへの結合の阻害及び／またはＡベータオリゴマー結合によって阻害される作用のシグナル伝達メカニズムの反作用を介して、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）する。
【０１７６】
実施形態によっては、この化合物は、ベータ−セクレターゼ分析において活性を示し、及び、認知機能低下及びアルツハイマー疾患の阻害、治療、及び軽減において有用である。実施形態によっては、ショウガ油の誘導体は、精製され、及び分離された化合物である（例えば、８０重量％、８５重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％または９９重量％以上の純度）。本明細書に記載された化合物及び方法は、記憶喪失、混乱、判断力欠乏、人格変化、見当識障害、言語機能の喪失のような、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の１つまたはそれ以上の症状を治療するのに用いられる。さらに、本明細書に記載された化合物及び方法は、長期間の増強の回復、及び／または神経変性及び一般的なアミロイドシスの１つまたは両方を阻害、治療、または軽減することにより、より具体的には、アミロイド生成、アミロイド組み立て、アミロイド凝集、アミロイド（アミロイドオリゴマー）結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減することにより、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を阻害、治療及び／または軽減するのに有用であることがある。
【０１７７】
実施形態によっては、本発明の化合物は、アミロイド生成、アミロイド組み立て、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療または軽減することができる。実施形態によっては、本発明の化合物は、長期間の増強を回復し、神経変性及び一般的なアミロイドシスの１つまたは両方を阻害、治療、または軽減することができる。
【０１７８】
実施形態によっては、本発明の化合物は、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）する。実施形態によっては、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）へのアミロイド（Ａベータオリゴマーを含む）の結合を阻害、治療または軽減（部分的に阻害）する。実施形態によっては、本発明の化合物は、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の阻害、治療及び軽減において有用である。
【０１７９】
実施形態によっては、本発明の化合物は、ベータ−セクレターゼの活性を阻害することがある。実施形態によっては、本発明の化合物は、本明細書に記載された任意の化合物または組成物の１つまたはそれ以上とベータ−セクレターゼを接触させることによってベータ−セクレターゼを阻害する方法において使用されることがある。
【０１８０】
本発明の他の態様は、本発明の化合物またはそれらの医薬組成物の治療的有効量または投与量を個体に投与することにより、個体（例えば患者）の認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患を治療する方法に関する。
【０１８１】
本明細書の疾患／障害の治療は、疾患／障害に関連した１つまたはそれ以上の症状、例えば、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の症状を治療することを含む。
【０１８２】
本明細書で使用されるように、用語「接触させる」は、生体外系または生体内系に示された部分をもたらすことを意味する。例えば、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞（またはベータ−アミロイドオリゴマーの１つまたはそれ以上の存在下での神経細胞）と本発明の化合物を「接触させること」は、ベータセクレターゼまたは神経細胞を有するヒトのような個体または患者に、本発明の化合物を投与すること、同様に、例えば、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞（またはベータ−アミロイドオリゴマーの１つまたはそれ以上の存在下での神経細胞）を含む細胞質のまたは精製された調製を含む試料内に本発明の化合物を導入することを含む。
【０１８３】
本明細書で使用されるように、交互に用いられている用語「個体」または「患者」は、哺乳類、好適には、ネズミ、ラット、他の齧歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマまたは霊長類、及び最も好適にはヒトを含む任意の動物を意味するものである。
【０１８４】
本明細書で使用されているように、用語「治療的有効量」は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって、組織、系、動物、個体またはヒトにおいて求められる生物学的または医薬的応答を誘発する活性化合物または薬剤の量を意味する。
【０１８５】
本明細書で使用されているように、用語「治療する」または「治療」は、（１）疾患を予防すること、例えば、疾患、状態または障害にかかりやすいが、疾患の病態または総体症状をまだ経験または示していない個体における疾患、状態または障害を予防すること、（２）疾患を阻害／遅らせること、疾患、状態、または障害の病態または総体症状を経験または示している個体における疾患、状態または障害を阻害／遅らせること、及び、（３）疾患を改善すること、例えば、疾患。状態または障害の病態または総体症状を経験または示している個体において、疾患、状態または障害を改善すること（つまり、病態及び／または総体症状を逆行させること）、例えば、疾患の重症度を減少させること、または疾患を完全に除去／治癒すること、の１つまたはそれ以上を意味する。本明細書で使用されているように、疾患を治療することはさらに、疾患に関連する１つまたはそれ以上の症状を治療することを含む。
【０１８６】
併用療法
特定の実施形態において、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の治療のための１つまたはそれ以上の付加的な医薬品は、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の治療のために本発明の化合物と組み合わせて用いられることがある。付加的医薬品の１つまたはそれ以上は患者に同時にまたは順次に投与されることがある。
【０１８７】
製剤処方及び剤形
特定の実施形態において、本発明の化合物は、医薬組成物の形で投与される。これらの組成物は、製薬技術においてよく知られている方法で調製されることができ、及び、局所治療であるか、全身治療であるかによって、及び、治療される領域によって、様々な経路で投与されることができる。投与は、局所（経皮、表皮、眼及び鼻腔内、膣、直腸を含む
粘液を分泌する膜を含む）、肺（例えば、気管内または鼻腔内の噴霧器によるものを含む、粉末またはエアロゾルの吸入または吹送による）、経口または非経口であることがある。非経口投与は、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内注射または点滴または、例えばくも膜下腔内などの頭蓋内または心室内投与を含む。非経口投与は、単一ボーラス投与の形であるか、例えば、連続灌流ポンプであることがある。局所投与のための医薬組成物及び製剤は、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐剤、スプレー、液剤及び粉末が含まれることがある。従来の医薬担体、水性、粉末または油性基剤、増粘剤などが必要または望ましいこともある。被覆サック、グローブなどもまた有用であることがある。
【０１８８】
この発明の実施形態は、活性成分として、薬学的に許容可能な担体（賦形剤）の１つまたはそれ以上との組み合わせにおいて前記の発明の化合物の１つまたはそれ以上を含む医薬組成物を含むこともある。本発明の組成物の製造において、活性成分は、典型的には賦形剤と混合され、賦形剤によって希釈され、または、例えば、カプセル、小袋、紙または他の容器の形で担体内に封入される。賦形剤が希釈剤として役立つとき、それは、固体、半固体、または液剤であることがあり、活性成分のための媒介物、担体または媒体として作用する。従って、組成物は、錠剤、丸薬、粉剤、トローチ剤、小袋剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中）、例えば、１０重量％までの活性化合物を含む軟膏、ソフト及びハードゼラチンカプセル、坐剤、殺菌し注射可能な溶液、及び、殺菌包装した粉末の形態でありうる。
【０１８９】
製剤の調製において、活性化合物は、他の成分と結合する前に適当な粒径を提供するために製粉されることがある。活性化合物が実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒径に製粉されることができる。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径は、製剤において実質的に同一な分布を提供するために例えば約４０メッシュ製粉によって調整されることができる。
【０１９０】
本発明の化合物は、錠剤及び他の製剤型に適合する粒径を得るために、湿式製粉のような既知の製粉処理を用いて製粉されることがある。本発明の化合物の微細に分かれた（ナノ微粒子）調製は、例えば、国際特許出願番号ＷＯ２００２／０００１９６において参照されるように、当業者において既知の処理で調製されることがある。
【０１９１】
適当な賦形剤の実施例には、ラクトース、デキトロース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、ある義なーと、トラガカントゴム、ゼラチン、珪酸カルシウム、結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、及びメチルセルロースが含まれる。製剤は、加えて、タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱油のような平滑剤、湿潤剤、乳化剤及び沈殿防止剤、メチルベンゾエート及びプロピルヒドロキシベンゾエートのような防腐剤、甘味料及び香料を含む。本発明の組成物は、当業者において既知の手順を使用して患者に投与した後、活性成分の維持またはゆっくりとした放出を素早く提供するために製剤されることがある。
【０１９２】
組成物は、単位剤形に製剤されることがあり、各剤形は、活性成分の約５から約１０００ｍｇ（１ｇ）、より通常には、約１００から約５００ｍｇを含む。用語「単位剤形」は、対象となるヒト及び他の哺乳類において単一投与として適当な物理的に個別な単位に関するものであり、各単位は、適当な医薬賦形剤に関連して、所望の治療的効果を生成するため計算された活性材料の規定量を含む。
【０１９３】
活性化合物は、広い投与範囲において有効であることができ、通常、薬学的に有効な量において投与されることができる。例えば、それらを必要とする患者（例えば成人）の治療に用いられるものとして本発明の活性化合物の投与は、投与経路及び投与頻度によって、１日あたり０．１ｇから３０００ｍｇも範囲であることがある。このような投与量は、１日あたり０．００１から５０ｍｇ／ｋｇに相当することもある。実施形態によっては、それらを必要とする患者（例えば成人）の治療に用いられる本発明の活性化合物の投与量は、１日あたり１から２０００ｍｇ、１日あたり１から１０００ｍｇ、１日あたり１０から１０００ｍｇ、１日あたり１０から５００ｍｇの範囲であることがある。しかしながら、実際に投与される化合物の量が、通常、治療される条件、投与経路の選択、投与される実際の化合物、年齢、体重、及び個々の患者の反応、患者の症状の重症度などを含む関連した状況に従って、医師によって決定されることはよく理解されている。
【０１９４】
錠剤のような固体化合物を調製するために、主要な活性成分は、本発明の均質な混合物を含む固体予備処方組成物を形成するために、医薬賦形剤と混合されることがある。これらの予備処方組成物が均一なものであるとき、組成物が、錠剤、丸薬及びカプセルのような等しく有効な単位剤形に直ちに細分できるように、活性成分は、組成物の全体にわたって典型的には均一に分散する。この固体予備処方は、例えば、本発明の活性成分の約０．１から１０００ｍｇを含む前記のタイプの単位剤形に細分される。
【０１９５】
本発明の錠剤または丸薬は、長期にわたる作用の効果を生成する剤形を提供するために被覆されていることがあり、そうでなければ、調合されることがある。例えば、錠剤または丸薬は、内部投与及び外部投与構成成分からなり、後者は前者のエンベロープとなる。２つの構成成分は、胃での分解に抵抗し、十二指腸内をそのまま通過し、または放出を遅らせることに役立つ、腸溶層によって分離される。様々な材料が、このような腸溶層または被覆のために使用され、このような材料は、数多くのポリマー性の酸、及び、シェラック、セチルアルコール及び酢酸セルロースのような物質とポリマー性の酸の混合物を含む。
【０１９６】
本発明の化合物及び組成物が経口投与または注射に組み込まれることができる液状形態は、水溶液、適宜風味付けされたシロップ、水性または油性懸濁液、及び、エリキシル剤及び類似の賦形剤と同様に、綿実油、ゴマ油、ココナッツ油、または落花生油のような食用油で風味をつけたエマルジョンを含む。
【０１９７】
吸入または吹送のための組成物は、溶液及び薬学的に許容可能な懸濁液、水性または有機性溶媒、またはそれらの混合物、粉末を含む。液体または固体組成物は、上記に記載された適当な薬学的に許容可能な賦形剤を含むことがある。実施形態によっては、当該組成物は、局所的または全身での効果のために、経口または鼻呼吸経路によって投与される。組成物は、不活性ガスの使用によって霧状にされることができる。霧状溶液は、霧状にする装置から直接に求引されることができ、または、霧状にする装置は、フェイスマスクテントまたは間欠的陽圧呼吸機に直接取り付けることができる。溶液、懸濁液または粉末組成物は、適当な方法によって製剤を届ける装置から経口的に、または鼻腔から投与されることがある。
【０１９８】
患者に投与された化合物または組成物の量は、何が投与されるのか、予防または治療のように投与の目的、患者の状態、投与の方法などによって変化する。治療的適用において、組成物は、疾患の症状及びその複雑化を治療する、または少なくとも部分的に抑制するのに十分な量を、既に疾患を患っている患者に投与されることができる。有効量は、疾患の重症度、年齢、体重及び患者の全身症状などの要因によって、主治医の判断がなされるのと同様に、治療される疾患状態に依存する。
【０１９９】
患者に投与される組成物は、前記の医薬組成物の形であることができる。これらの組成物は従来の殺菌技術によって殺菌される、または、濾過で殺菌されることもある。水溶液は、そのまま使用されるために包装される、または凍結乾燥され、凍結乾燥された調製は、投与の前に滅菌水性担体と結合される。調製された化合物のｐＨは典型的には３から１１の間であり、より好適には５から９、最も好適には７から８である。特定の前記賦形剤、担体または安定剤の使用が、医薬的塩類の形成につながることは理解されているであろう。
【０２００】
本発明の化合物の治療的投与量は、例えば、治療がなされる特定の使用、化合物の投与の方法、患者の健康及び状態、及び処方医師の判断によって変化することがある。薬学的組成物における本発明の化合物の比率または濃度は、投与量、化学的性質（例えば疎水性）及び投与経路を含む要因の複数によって変化することがある。例えば、本発明の化合物は、非経口投与のための化合物の約０．１から約１０％  ｗ／ｖを含む水性生理的緩衝液において提供されることがある。いくつかの典型的投与量の範囲は、１日あたり体重の約１ｇ／ｋｇから約１ｇ／ｋｇである。実施形態によっては、投与量の範囲は、１日あたり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇである。投与量は、疾患または障害のタイプ及び進行の範囲、特定の患者の全身的健康状態、選択された化合物の相対的な生物学的有効性、賦形剤の製剤及びその投与経路のような変数によるものと思われる。有効量は、生体外または動物モデル試験系に由来する用量反応曲線から推定されることができる。
【０２０１】
本発明の組成物はさらに、化学療法剤、ステロイド剤、抗炎症化合物、または免疫抑制剤、上記にリストされた例のような１つまたはそれ以上の付加的医薬品を含む。
【０２０２】
標識された化合物または分析方法
本発明の他の態様は、放射性イメージングだけでなく、ヒトを含む組織試料において酵素を局所化及び数量化するため、及び、標識された化合物の結合の阻害によって配位子を同定するため、生体外および生体内の両方での分析においても役に立つ本発明の標識された化合物（放射性標識、蛍光性標識など）に関するものである。従って、本発明は、標識された化合物を含む酵素分析を含む。
【０２０３】
本発明の実施形態は、さらに本発明の同位体的に標識された化合物を含む。「同位体的に」または「放射性標識された」化合物は、１つまたはそれ以上の原子が、自然で代表的な（つまり自然発生）原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子によって変換されるまたは置換される本発明の化合物である。本発明の化合物に組み込まれることのある適当な放射性核種は、非限定的であるが、２Ｈ（重水素、Ｄとも書かれる）、３Ｈ（三重水素、Ｔとも書かれる）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉを含む。放射性標識された化合物に組み込まれる放射性核種は、その放射性標識された化合物の特異的適用による。放射性標識された化合物に組み込まれる放射性核種は、放射性標識された化合物の特異的適用に依存する。例えば、生体外標識化受容体及び競合分析においては、３Ｈ、１４Ｃ、８２Ｂｒ、１２５Ｉ、１３１Ｉまたは３５Ｓが一般的に最も有用である。放射性イメージング適用においては、１１Ｃ、１８Ｆ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒまたは７７Ｂｒが一般的に最も有用である。
【０２０４】
「放射性標識化合物」は少なくとも１つの放射性核種を組み込まれた化合物であると理解されている。実施形態によっては、放射性核種は、３Ｈ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３５Ｓ及び８２Ｂｒから選択される。
【０２０５】
実施形態によっては、本発明の標識された化合物は蛍光標識を含む。
【０２０６】
有機化合物への放射性同位体及び蛍光標識の導入のための方法は、当業者において既知である。
【０２０７】
本発明の標識された化合物（放射性標識、蛍光標識、など）は、化合物を同定／評価するためのスクリーニング分析において用いられることがある。例えば、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞と接触させたときの濃度変化を監視し、標識化を追うことによって、標識された新規に合成または同定された化合物（つまり、テスト化合物）は、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞（またはベータ−アミロイドオリゴマーの１つまたはそれ以上の存在下での神経細胞）と結合する能力を評価されることができる。他の実施例において、（標識された）テスト化合物は、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞（つまり標準化合物）と結合すると知られている他の化合物の結合を減少させる能力において評価される。従って、ベータ−セクレターゼまたは神経細胞と結合することにおいて標準化合物と競合するテスト化合物の能力は、その結合親和性と直接的に相互に関連がある。逆に、他のスクリーニング分析によっては、標準化合物は標識され、テスト化合物は標識されていない。従って、標識された標準化合物の濃度は、標準化合物及びテスト化合物間での競合を評価するために監視され、及び、テスト化合物の相対的結合親和性はこのように確認される。
【０２０８】
キット
本発明の実施形態は、例えば、認知機能低下及び／またはアルツハイマー疾患の治療及び予防において、本発明の化合物の治療的有効量からなる医薬組成物を含む１つまたそれ以上の含有物を含む有用な医薬キットを含む。このようなキットは、さらに、所望の場合、例えば、１つまたはそれ以上の薬学的に許容可能な担体による容器、付加的な容器などのような１つまたはそれ以上の様々な従来医薬キット成分を含むことがあり、このことは、当業者にとって直ちに明らかである。挿入物としてまたはラベルとして、投与される成分の分量、投与のためのガイドライン、及び／または成分を混合するためのガイドラインを含む使用説明書も、キットに含まれることがある。
【０２０９】
本発明は具体的な実施例においてより詳細に記述される。以下の実施例は、具体的な目的のために与えられるものであって、いかなる方法においても本発明を限定することを意図したものではない。当業者は、基本的に同じ結果を得るために変えられるまたは修飾されることができる様々な重要ではないパラメータを直ちに認識する。実施例の特定の化合物は、アミロイド生成、アミロイド組み立て、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減することが、本明細書で提供された分析の１つまたはそれ以上によって発見された。さらなる実施形態によっては、実施例の特定の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上を阻害、治療、または軽減することが、本明細書で提供された分析の１つまたはそれ以上によって発見された。
【０２１０】
実施形態によっては、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）結合及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上の阻害に関して、１００μＭ、５０μＭ、２０μＭ、１５μＭ、１０μＭ、５μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭまたは１０ｎＭ以下のＩＣ５０値を有する。実施形態によっては、本発明の化合物は、ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果の阻害に関して、１００μＭ、５０μＭ、２０μＭ、１５μＭ、１０μＭ、５μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭまたは１０ｎＭ以下のＩＣ５０値を有する。
【０２１１】
ニューロン（例えば脳内のニューロン）でのＡベータオリゴマーの活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）結合、及びアミロイド堆積の１つまたはそれ以上に対する本発明の化合物の阻害割合は、１０ｎＭから１０μＭの濃度で測定された。実施形態によっては、測定された阻害割合は、約１％から約２０％、約２０％から約５０％、約１％から約５０％、または約１％から約８０％である。
【０２１２】
本発明は、本発明を制限するためではなく、実例として提供される以下の実施例に関して、特定の態様において評価されることがある。以下の実施例において参照なされる材料、試薬などは、特に明記がない限り、商業的供給源から入手可能である。
【０２１３】
材料及び方法
ジンジャー油
このジンジャーの根から抽出される軽質油は、超臨界ＣＯ２抽出により得た。
【０２１４】
ジンジャー樹脂油
この重質の剰余油は、続けて行った超臨界ＣＯ２抽出により得た。
【０２１５】
実施例１
Ａ．ジンジャー油の条件抽出：ジンジャー油と４−クロロベンジルアミンとの反応と、それに続く水素化ホウ素ナトリウムの還元及びカラムクロマトグラフィーを用いた分画化
ジンジャー油（１０ｇ）をトルエン（２５０ｍｌ）に溶解させ、４−クロロベンジルアミンを加えた。混合物を窒素ガスの存在下に置き、１６時間ディーン・スターク蒸留により水を除去しつつ、灌流しながら加熱した。ここで、ディーン・スターク・トラップを取り除き、反応混合物を氷浴上で０℃まで冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（１０ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶かした溶液を、少量ずつ３０分間かけて強く撹拌しながら加えた。添加が完了した後、混合物を１６時間灌流しながら加熱した。ここで、反応混合物を室温まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムの飽和水溶液（３００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を回転蒸発器によって濃縮し、水性の残留物を水とクロロホルムに分離した。クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、次いでろ過して濃縮した。生成物を、次いで、１００％クロロホルムからクロロホルム：メタノールが５：１まで濃度勾配を付けたシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて分画化した。生成物を、比較的極性の画分の中から薄層クロマトグラフィーによって検出した。生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、次いで高真空において一晩乾燥させ、淡褐色の油状物質を得た（０．６７２ｇ）。
【０２１６】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣＩ３）δ：７．３０−７．２４（ｍ，４Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６６−６．６２（ｍ，２Ｈ），４．２５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．７３（ｍ，１Ｈ），２．６６−２．５１（ｍ，１Ｈ），１．８６−１．７８（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．６２−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣＩ３）δ：１４６．６，１４３．８，１３３．９１３２．８，１２９．９，１２９．７，１２８．６，１２０．８，１１４．５，１１０．９，５５．８，５１．９，５０．２，３８．５，３１．９，３１．６，２９．７，２６．９，２２．６，１９．９．Ａｎａｌｙｔｉｃ  ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：ｍ／ｚ  ３２０．２。
【０２１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．１０−７．３０（ｍ，４Ｈ），６．６３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．５８（ｍ，１Ｈ），６．４８（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５８（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），１．７３（ｍ，１Ｈ），１．４９（ｍ，１Ｈ），１．０４（ｄ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１４７．５，１４５．３，１３７．２，１３３．３１３２．６，１２９．９，１２８．１  ，１２０．４，１１４．７，１１１．６，５４．９，５１．３，４９．２，３７．７，３１．５，１８．０。
【０２１８】
還元アミノ化において用いた、ジンジャー油の４−クロロベンジルアミンに対する重量比は、約３：１（２．７：１〜３．３：１）である。１ＨＮＭＲにより測定した化学シフトは、例えば、０．２ｐｐｍまでは変動する可能性がある。１３ＨＮＭＲにより測定した化学シフトは、例えば、０．５ｐｐｍまでは変動する可能性がある。分析マススペクトルは、＋／−０．３の実験誤差を含む可能性がある。
【０２１９】
純度決定
生成物の純度を、ＨＰＬＣによって測定した。保持時間の最大ピークは２．２２分であり、約８０％、８５％、９０％、又は９５％より高い純度を示した。使用したＨＰＬＣ条件は以下の通りである。
【０２２０】
ＨＰＬＣ条件：
移動相Ａ：水中に、１３．３ｍＭギ酸アンモニウム／６．７ｍＭギ酸
移動相Ｂ：水／ＣＨ３ＣＮ（１／９、重量比）中に、６ｍＭギ酸アンモニウム／３ｍＭギ酸
カラム：Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｆｕｓｉｏｎ−ＲＰ  １００Ａ  Ｍｅｒｃｕｒｙ，２ｘ２０ｍｍ，２．５ミクロン（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｐａｒｔ  Ｎｏ  ００Ｍ−４４２３−Ｂ０＿ＣＥ）
勾配プログラム：ＲＴ＝２．２２分
【０２２１】
【表１】
2012523418.tif 000016
【０２２２】
生成物の純度は１Ｈ  ＮＭＲによっても測定され、９０％又は９５％より高い純度を持つ単一の化合物であることを示した。
【０２２３】
化合物例１（又は例化合物１）の構造は以下のように決定されている。
【０２２４】
【化１５】
2012523418.tif 000017
【０２２５】
Ｂ．還元アミノ化による合成。
【０２２６】
【化１６】
2012523418.tif 000018
【０２２７】
バリニルアセトン（５００ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）をトルエン（２５０ｍＬ）に溶解させ、４−クロロベンジルアミン（３．８２ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素ガスの存在下に置き、１６時間ディーン・スターク蒸留により水を除去しつつ、灌流しながら加熱した。ここで、ディーン・スターク・トラップを取り除き、反応混合物を氷浴上で０℃まで冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（５ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶かした溶液を、少量ずつ３０分間かけて強く撹拌しながら加えた。添加が完了した後、混合物を１６時間灌流しながら加熱した。ここで、反応混合物を室温まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムの飽和水溶液（３００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を回転蒸発器によって濃縮し、水性の残留物を水とクロロホルムに分離した。クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、次いでろ過して濃縮した。生成物を、次いで、クロロホルム中５％アンモニア−メタノールの移動相を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーを使って精製した。生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、次いで高真空において一晩乾燥させ、淡褐色の油状物質を得た（６．１６ｇ、７５％）。生成物についての１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、及びマススペクトルは、実施例１、実施例Ａのものとほとんど同一であった（条件抽出法によって行った）。
【０２２８】
実施例２
Ａ．ジンジャー油の条件抽出：ジンジャー油と４−トリフルオロメチルベンジルアミンとの反応と、それに続く水素化ホウ素ナトリウムの還元及びカラムクロマトグラフィーを用いた分画化
ジンジャー油（１０ｇ）をトルエン（２５０ｍｌ）に溶解させ、４−トリフルオロメチルベンジルアミンを加えた。混合物を窒素ガスの存在下に置き、１６時間ディーン・スターク蒸留により水を除去しつつ、灌流しながら加熱した。ここで、ディーン・スターク・トラップを取り除き、反応混合物を氷浴上で０℃まで冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（１０ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶かした溶液を、少量ずつ３０分間かけて強く撹拌しながら加えた。添加が完了した後、混合物を１６時間灌流しながら加熱した。ここで、反応混合物を室温まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムの飽和水溶液（３００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を回転蒸発器によって濃縮し、水性の残留物を水とクロロホルムに分離した。クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、次いでろ過して濃縮した。生成物を、次いで、１００％クロロホルムからクロロホルム：メタノールが５：１まで濃度勾配を付けたシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて分画化した。生成物を、比較的極性の画分の中から薄層クロマトグラフィーによって検出した。生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、次いで高真空において一晩乾燥させ、淡褐色の油状物質を得た（０．６７２ｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．５７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｍ，２Ｈ），５．１６−４．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），３．９０（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ），２．７６−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．６７−２．５５（ｍ，２Ｈ），１．８４−１．７７（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。１３  ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣＩ３）δ：１４６．７，１４４．６，１４３．９，１３４．０，１２９．１，１２８．４，１２７．５，１２５．４，１２５．３，１２３．２，１２０．８，１１４．６，１１１．０，５５．７，５２．１，５０．６，３８．８，３２．０，２０．１．ＭＳ（Ｃｌ）ｍ／ｚ  ３５３（Ｍ＋）。
【０２２９】
還元アミノ化において用いた、ジンジャー油の４−トリフルオロメチルベンジルアミンに対する重量比は、約３：１（２．７：１〜３．３：１）である。１ＨＮＭＲにより測定した化学シフトは、例えば、０．２ｐｐｍまでは変動する可能性がある。１３ＨＮＭＲにより測定した化学シフトは、例えば、０．５ｐｐｍまでは変動する可能性がある。分析マススペクトルは、＋／−０．３の実験誤差を含む可能性がある。
【０２３０】
純度決定
生成物の純度を、ＨＰＬＣによって測定した。保持時間の最大ピークは２．２２分であり、約８０％、８５％、９０％、又は９５％より高い純度を示した。使用したＨＰＬＣ条件は以下の通りである。
【０２３１】
ＨＰＬＣ条件：
移動相Ａ：水中に、１３．３ｍＭギ酸アンモニウム／６．７ｍＭギ酸
移動相Ｂ：水／ＣＨ３ＣＮ（１／９、重量比）中に、６ｍＭギ酸アンモニウム／３ｍＭギ酸
カラム：Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｆｕｓｉｏｎ−ＲＰ  １００Ａ  Ｍｅｒｃｕｒｙ，２ｘ２０ｍｍ，２．５ミクロン（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社  Ｐａｒｔ  Ｎｏ  ００Ｍ−４４２３−Ｂ０＿ＣＥ）
勾配プログラム：ＲＴ＝２．２２分
【０２３２】
【表２】
2012523418.tif 000019
【０２３３】
生成物の純度は１Ｈ  ＮＭＲによっても測定され、９０％又は９５％より高い純度を持つ単一の化合物であることを示した。
【０２３４】
化合物例２（又は例化合物２）の構造は以下のように決定されている。
【０２３５】
【化１７】
2012523418.tif 000020
【０２３６】
Ｂ．還元アミノ化による合成。
【０２３７】
【化１８】
2012523418.tif 000021
【０２３８】
バリニルアセトン（５００ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）をトルエン（２５０ｍＬ）に溶解させ、４−トリフルオロメチルベンジルアミン（４．７３ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素ガスの存在下に置き、１６時間ディーン・スターク蒸留により水を除去しつつ、灌流しながら加熱した。ここで、ディーン・スターク・トラップを取り除き、反応混合物を氷浴上で０℃まで冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（５ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶かした溶液を、少量ずつ３０分間かけて強く撹拌しながら加えた。添加が完了した後、混合物を１６時間灌流しながら加熱した。ここで、反応混合物を室温まで冷却し、水素化ホウ素ナトリウムの飽和水溶液（３００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を回転蒸発器によって濃縮し、水性の残留物を水とクロロホルムに分離した。クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、次いでろ過して濃縮した。生成物を、次いで、クロロホルム中５％アンモニア−メタノールの移動相を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーを使って精製した。生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、次いで高真空において一晩乾燥させ、淡褐色の油状物質を得た（６．７２ｇ、７４％）。生成物についての１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、及びマススペクトルは、実施例２、実施例Ａのものとほとんど同一であった（条件抽出法によって行った）。
【０２３９】
実施例ＡＡ：エキソサイトーシスアッセイ／ＭＴＴアッセイ
Ｅ１８  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの受精卵由来の一次ニューロンを、３８４ウェルプレートのＮＢ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）中に最適化した濃度で蒔いた。ニューロンは１週間に２回、ＮＢ培地にＮ２サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を与えながら、３週間培養を維持した。試験化合物を細胞に加え、続いてＶｅｈｉｃｌｅ又はＡベータオリゴマーを調製物（１．５μＭ）を加え、１〜２４時間、３７℃、５％ＣＯ２下で培養した。ＭＴＴ試薬（３−（４，５−ジメチルチザオール−２イル）−２，５ジフェニルテトラゾリウム臭化物）（Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ社）を、リン酸緩衝食塩水で５ｍｇ／５ｍＬとなるよう希釈した。ＭＴＴラベル試薬１０μＬを各ウェルに加え、３７℃で１時間培養し、次いで撮像した。
【０２４０】
各プレート上において化合物がＡベータの存在下及び非存在下でテストされるように、各アッセイプレートを整えた。このデザインは、毒性のある、又は代謝的に活性な化合物を、スクリーニングカスケードの中の早い段階で（一次スクリーニングの段階で）除去するものである。スクリーニングのプレートレイアウトについての統計的成績が評価され、現時点での成績が維持されていれば、スクリーニングは開始されるであろう。
【０２４１】
エキソサイートシスアッセイ／ＭＴＴアッセイの同様の手順を文献の中で見つけることが出来る。例えば、Ｌｉｕ  Ｙ，ｅｔ．ａｌ．，"Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００４  Ｎｏｖ；９１（３）：６４８−５６、Ｌｉｕ  Ｙ，ａｎｄ  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ  Ｄ．"Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ３−（４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ  （ＭＴＴ）  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ＭＴＴ  ｆｏｒｍａｚａｎ  ｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ．"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．１９９７  Ｄｅｃ；６９（６）：２２８５−９３、及び、Ｌｉｕ  Ｙ，ａｎｄ  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ  Ｄ．"Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｙ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ"Ｃｕｒｒ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｒｅｓ．２００６  Ａｐｒ；３（２）：１２９−３５、を参照のこと。
【０２４２】
実験コントロール：
ポジティブコントロールは、既報の方法に従って作製したＡベータ１−４２オリゴマー（例えば、Ｄａｈｌｇｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｉｌｌａｒ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ  ａｆｆｅｃｔ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ"Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００２  Ａｕｇ  ３０；２７７（３５）：３２０４６−５３．Ｅｐｕｂ  ２００２  Ｊｕｎ  １０．、ＬｅＶｉｎｅ  Ｈ  ３ｒｄ．"Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｂｅｔａ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｌｉｇｏｍｅｒ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｔ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ"Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００４  Ｄｅｃ  １；３３５（１）：８１−９０、Ｓｈｒｅｓｔｈａ  ｅｔ．ａｌ，"Ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｄｖｅｒｓｅｌｙ  ａｆｆｅｃｔｓ  ｓｐｉｎｅ  ｎｕｍｂｅｒ  ａｎｄ  ｍｏｔｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ"Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６  Ｎｏｖ；３３（３）：２７４−８２．Ｅｐｕｂ  ２００６  Ｓｅｐ  ８、Ｐｕｚｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，"Ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ／ｃＧＭＰ／ｃＡＭＰ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５  Ｊｕｌ  ２０；２５（２９）：６８８７−９７、Ｂａｒｇｈｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｇｌｏｂｕｌａｒ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｌｉｇｏｍｅｒ  −  ａ  ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ  ａｎｄ  ｓｔａｂｌｅ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００５  Ｎｏｖ；９５（３）：８３４−４７．Ｅｐｕｂ  ２００５  Ａｕｇ  ３１、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ａ  ｂｅｔａ  １−４２  Ａｒｃｔｉｃ  ａｎｄ  Ａ  ｂｅｔａ  １−４２ｗｔ．ＦＥＢＳ  Ｊ．２００６  Ｊｕｎ；２  ７３（１２）：２６１８−３０、を参照のこと）、並びに脳由来のＡベータオリゴマー（例えば、Ｗａｌｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｏｔｅｎｔｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｎａｔｕｒｅ（２００２）．４１６，５３５−５３９、Ｌｅｓｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ  ｉｍｐａｉｒｓ  ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｍａｒ  １６；４４０（７０８２）：３５２−７、Ｓｈａｎｋａｒ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｄｉｍｅｒｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｄｉｒｅｃｔｌｙ  ｆｒｏｍ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｂｒａｉｎｓ  ｉｍｐａｉｒ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔ  Ｍｅｄ．２００８  Ａｕｇ；１４（８）：８３７−４２．Ｅｐｕｂ  ２００８  Ｊｕｎ  ２２、を参照のこと）から成る。ネガティブコントロールは、溶媒（ｖｅｈｉｃｌｅ）処理ニューロン、並びに２８μＭ濃度のメマンチンで処理したニューロンを含む。メマンチンは、この用量においてオリゴマーの効果の５０％を抑制する。これらのコントロールは、各プレートにおいて、プレート毎のアッセイの性能を測定するための、正規化ツールとして働く。
【０２４３】
一次ニューロン培養：
最適な細胞密度を、Ａベータオリゴマーへの細胞応答をエキソサイートシスアッセイを読み出しとして用い、免疫組織学的解析を用いて培養細胞中のグリアとニューロンの相対比率を調べることで決定した。培養細胞は免疫組織学的及び画像処理ベースの定量化によって週ベースでモニターされ、ニューロン対グリア（グリア細胞）のパーセンテージをモニターした。インビトロにおいて２１日時点（２１ＤＩＶ：２１  ｄａｙｓ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）のスクリーニングで、グリア（ＧＦＡＰ陽性）対ニューロン（ＭＡＰ２に対する抗体による染色に陽性）が２０％より大きい培養細胞は除去した。
【０２４４】
Ａベータオリゴマーの調製：
ヒトアミロイドペプチド１−４２を、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｐｅｐｔｉｄｅ社から、品質管理解析によるロット選択を行なって得た。オリゴマー調製における品質管理解析は、オリゴマーのサイズ範囲及び相対濃度を決定するウェスタンブロットと、毒性を示さずにエキソサイトーシスを促進することを確認するＭＩＴアッセイから成る。毒性は、ＤＮＡ結合色素のＤＡＰＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）によって可視化される核の形態の定量化による、それぞれの画像ベースアッセイにおいてモニターされる。断片化した核は、アポトーシスの後期段階だと考えられる（Ｍａｎｊｏ  ａｎｄ  Ｊｏｒｉｓ  ’９５）。異常なペプチドのサイズ範囲を示したペプチドのロット、又は１．５μＭの標準的な濃度においてニューロンに対する有意な毒性を示したペプチドのロットは除外される。
【０２４５】
プレートベースのコントロール：
再フォーマットしたプレートが、溶媒で処理したニューロンとＡベータオリゴマーで処理したニューロンとの間で、最低でも統計的に有意な２倍の分離度（ｐ<０．０１、Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定、不均一分散）を定期的に達成し、プレート間で１０％のＣＶ以下で、最新の成績と同等であったとき、アッセイの最適化は完成するであろう。
【０２４６】
統計ソフトウェア及び解析：
データ処理及び解析は、画像解析ソフトウェアであるＣｅｌｌｏｍｉｃｓ  ＶＴＩと、自動化データベースソフトウェアであるＳＴＯＲＥとを用いて行われる。３週間の培養後の、低い動的範囲とウェル毎のニューロンの変動とが理由で、統計比較は対ごとのＴｕｒｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ解析を用いて行い、化合物＋ＡベータオリゴマーとＡベータオリゴマーのみとの間の分離度、並びに化合物のみと溶媒との間の分離度の、有意性を決定する。これらの統計解析は、ハイスループットスクリーニングにおいて過去２０年間使われてきたＺ’統計量よりも、動物行動試験において見られるものに類似したものである。成熟した一次ニューロンが、より近い形で電気生理学的に媒介される成人脳におけるシグナル伝達ネットワークを近似していることが、このスクリーニング戦略の正当性を示している。多数の反復スクリーニングに検定力分析を行うことは、偽陰性を最小化し（例えば、Ｎ＝４）、投与応答を確認するスクリーニングに対する実際のヒットから偽陽性を識別する負担を移すことが出来るであろう。化合物の順位付けは、２次アッセイの作用機序と、該化合物の構造の物理化学的な性質とに基づいて行われる。特定の試験化合物は、Ａベータオリゴマーの効果を著しく後退させるが、ニューロンの代謝には影響しない。
【０２４７】
化合物例１をＭＴＴアッセイにおいて投与したところ、ＥＣ５０が１０μＭで、Ａベータオリゴマーにより誘導されるエキソサイトーシスの増加を阻害したことは、化合物例１が、神経細胞に対するＡベータオリゴマーの活性又は効果を、阻害又は軽減することを示している。
【０２４８】
実施例ＢＢ：結合アッセイ
各試験化合物をプレートに加え、続いて１又は複数のＡベータ１−４２オリゴマーを加えた。このプレートを、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中３．７％パラホルムアルデヒドによって１５分間かけて固定した。次いで、このプレートを、ＰＢＳにより各５分間で３回洗浄した。このプレートを、ＰＢＳ中５％ヤギ血清及び０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ＣＡＳ番号：９００２−９３−１）中で、室温で１時間かけてブロックした。一次抗体（抗ＭＡＰ２ポリクローナル、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社＃ＡＢ５６２２、抗βアミロイド６Ｅ１０モノクローナル、Ｃｏｖａｎｃｅ社＃ＳＩＧ−３９３００）を、ＰＢＳ中５％ヤギ血清中に１：１０００で希釈した。一次抗体を、４℃で一晩か又は室温で１時間のどちらかで恒温放置した。次いで、このプレートを、ＰＢＳにより各５分間で３回洗浄した。二次抗体（Ａｌｅｘ  Ｆｌｏｒ  ４８８ポリクローナル、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社＃Ａ１１００８、Ａｌｅｘ  Ｆｌｏｒ  ６４７モノクローナル、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社＃Ａ２１２３５）を、ＰＢＳ中５％ヤギ血清中に１：１０００で希釈した。ニ次抗体を、室温で１時間恒温放置した。このプレートを、ＰＢＳで１回洗浄した。次いで、ＤＡＰＩ（４’，６’−ジアミジノ−２−フェニルインドール、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を０．０３μｇ／μｌで入れて、室温で５分間恒温放置し、次いでＰＢＳで洗浄した。画像処理を解析のために行った。
【０２４９】
結合アッセイのための類似の手順を、文献中に見つけることが出来る。例えば、Ｌｏｏｋ  ＧＣ，ｅｔ．ａｌ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ＡＤＤＬ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｕｒｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｒｅｓ．２００７  Ｄｅｃ；４（５）：５６２−７．Ｒｅｖｉｅｗ．を参照のこと。
【０２５０】
Ａベータオリゴマーの調製：
ヒトアミロイドペプチド１−４２を、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｐｅｐｔｉｄｅ社から、品質管理解析によるロット選択を行なって得た。既報の方法に従って作製したＡベータ１−４２オリゴマー（例えば、Ｄａｈｌｇｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｉｌｌａｒ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ  ａｆｆｅｃｔ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ"Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００２  Ａｕｇ  ３０；２７７（３５）：３２０４６−５３．Ｅｐｕｂ  ２００２  Ｊｕｎ  １０．、ＬｅＶｉｎｅ  Ｈ  ３ｒｄ．"Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｂｅｔａ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｌｉｇｏｍｅｒ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｔ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ"Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００４  Ｄｅｃ  １；３３５（１）：８１−９０、Ｓｈｒｅｓｔｈａ  ｅｔ．ａｌ，"Ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｄｖｅｒｓｅｌｙ  ａｆｆｅｃｔｓ  ｓｐｉｎｅ  ｎｕｍｂｅｒ  ａｎｄ  ｍｏｔｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ"Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６  Ｎｏｖ；３３（３）：２７４−８２．Ｅｐｕｂ  ２００６  Ｓｅｐ  ８、Ｐｕｚｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，"Ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ／ｃＧＭＰ／ｃＡＭＰ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５  Ｊｕｌ  ２０；２５（２９）：６８８７−９７、Ｂａｒｇｈｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，"Ｇｌｏｂｕｌａｒ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｌｉｇｏｍｅｒ  −  ａ  ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ  ａｎｄ  ｓｔａｂｌｅ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ"Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００５  Ｎｏｖ；９５（３）：８３４−４７．Ｅｐｕｂ  ２００５  Ａｕｇ  ３１、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ａ  ｂｅｔａ  １−４２  Ａｒｃｔｉｃ  ａｎｄ  Ａ  ｂｅｔａ  １−４２ｗｔ．ＦＥＢＳ  Ｊ．２００６  Ｊｕｎ；２  ７３（１２）：２６１８−３０、を参照のこと）、並びに脳由来のＡベータオリゴマー（例えば、Ｗａｌｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｏｔｅｎｔｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｎａｔｕｒｅ（２００２）．４１６，５３５−５３９、Ｌｅｓｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ  ｉｍｐａｉｒｓ  ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｍａｒ  １６；４４０（７０８２）：３５２−７、Ｓｈａｎｋａｒ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍｙｌ���ｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｄｉｍｅｒｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｄｉｒｅｃｔｌｙ  ｆｒｏｍ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｂｒａｉｎｓ  ｉｍｐａｉｒ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔ  Ｍｅｄ．２００８  Ａｕｇ；１４（８）：８３７−４２．Ｅｐｕｂ  ２００８  Ｊｕｎ  ２２、を参照のこと）がポジティブコントロールとして働く。オリゴマー調製における品質管理解析は、オリゴマーのサイズ範囲及び相対濃度を決定するウェスタンブロットと、毒性を示さずにエキソサイトーシスを促進することを確認するＭＩＴアッセイから成る。毒性は、ＤＮＡ結合色素のＤＡＰＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）によって可視化される核の形態の定量化による、それぞれの画像ベースアッセイにおいてモニターされる。断片化した核は、アポトーシスの後期段階だと考えられる（Ｍａｎｊｏ  ａｎｄ  Ｊｏｒｉｓ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｏｎｃｏｓｉｓ，ａｎｄ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ．Ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ．Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  １９９５；１４６：３−１６）。異常なペプチドのサイズ範囲を示したペプチドのロット、又は標準的な濃度においてニューロンに対する有意な毒性を示したペプチドのロットは除外される。
【０２５１】
画像処理：
画像は、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ  ＶＴＩ自動化顕微鏡プラットフォームにおいて、Ｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇアルゴリズムを用いて、撮影、解析された。統計解析については、不均一分散のＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ対比較を用いた。
【０２５２】
ウェスタンブロッティング：
Ａベータ１−４２を含むサンプルを、非還元レーンマーカーサンプル緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ社＃１８５９５９４）中に１：５で希釈した。３０マイクロリットル（μＬ）のサンプルを、１８ウェルが成型された４−１５％Ｔｒｉｓ−ＨＣｌゲル（ＢＩＯＲＡＤ社＃３４５−００２８）に入れた。ＢＩＯ−ＲＡＤ  Ｃｒｉｔｅｒｉａｎ  成型ゲルシステムにおいて、Ｔｒｉｓ−Ｇｌｙｃｉｎｅ緩衝液を用いて１２５ボルト（Ｖ）９０分間で電気泳動を行った。このゲルを、Ｔｒｉｓ−Ｇｌｙｃｉｎｅ／１０％メタノール緩衝液中０．２μＭニトロセルロース膜に、３０Ｖ１２０分でブロットした。この膜を、ＰＢＳ溶液中で５分間沸騰させ、ＴＢＳ／５％ミルク溶液を用いて４℃で一晩かけてブロックした。この膜を、ＴＢＳ／１％ミルク溶液で１０μｇ／ｍＬになるよう希釈した６Ｅ１０−ＨＲＰ（Ｃｏｖａｎｃｅ社＃ＳＩＧ−３９３４５）で、室温で１時間かけて標識した。膜を、ＴＢＳ／０．０５％ｔｗｅｅｎ−２０の溶液で各４０分間３回洗浄し、ＥＣＬ試薬（ＢＩＯ−ＲＡＤ＃１６２−０１１２）で５分間反応を進展させた。画像撮像は、Ａｌｐｈａ  Ｉｎｎｏｔｅｃｈ  ＦｌｕｏｒＣｈｅｍ  Ｑ定量的イメージングシステム上で行い、ＡｌｐｈａＶｉｅｗ  Ｑソフトウェアを用いて解析した。
【０２５３】
薬物動態研究：
薬物動態研究は、ワシントン州ＲｅｄｍｏｎｄのＣＥＲＥＰ社において、標準的なプロトコルに従って実施された：血漿サンプルをアセトニトリル沈殿を用いて処理し、ＨＰＬＣ−ＭＳ又はＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって解析した。ピーク領域を記録し、未知の血漿サンプル中の試験化合物の濃度を、それぞれの検量線を用いて決定した。報告可能なアッセイの線形範囲を、定量下限（ＬＬＱ：ｌｏｗｅｒ  ｌｉｍｉｔ  ｏｆ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ）とともに決定した。
【０２５４】
ＮＭＲ分光分析及び質量分光分析：
活性のある分画を、１Ｈ  ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ社５００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光分析計）を用いて解析し、精製した化合物は、１次元及び二次元の１ＨＮＭＲ実験及び１３ＣＮＭＲ実験の組み合わせを用いて特徴決定した。こうしたＮＭＲ手法と、低解像度の質量分光分析を用いた分子量の決定と、高解像度の質量分光分析（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ）を用いた物質組成の決定とを組み合わせることで、構造の証拠を得た。
【０２５５】
化合物例１は、前記結合アッセイ（画像処理アルゴリズムを用いた）によると、Ａベータオリゴマーリガンドのニューロンへの結合を、部分的に２４％まで阻害することを示した。
【０２５６】
実施例ＣＣ：薬物動態学研究
薬物動態研究は、以下に示すプロトコルに従って実施された：血漿サンプルをアセトニトリル沈殿を用いて処理し、ＨＰＬＣ−ＭＳ又はＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって解析した。ピーク領域を記録し、未知の血漿サンプル中の試験化合物の濃度を、それぞれの検量線を用いて決定した。報告可能なアッセイの線形範囲を、定量下限（ＬＬＱ：ｌｏｗｅｒ  ｌｉｍｉｔ  ｏｆ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ）とともに決定した。例えば、化合物例１は、ラットの血漿において、静注によって１ｍｇ／Ｋｇで注入されたとき、４６分の半減期を持つと決定された。
【０２５７】
実施例ＤＤ：小分子のＡベータオリゴマーの阻害剤を検出するための一次ニューロンベースの機能スクリーニングアッセイ
インビトロで少なくとも３週間培養したラットの一次ニューロンを、このスクリーニングアッセイに基づいて選択した。これらのニューロンは成人脳におけるニューロンに特有のシナプスタンパク質を全て発現しており、活動依存的な電気シグナルの複雑なネットワークを形成している。こうした培養物中のニューロン及びグリアは、損傷の無い脳回路に優れた情報登録を行う分子シグナルネットワークを有しており、そのため過去２０年間にわたって学習と記憶についてのモデルシステムとして使用されてきた（例えば、Ｋａｅｃｈ  Ｓ，  Ｂａｎｋｅｒ  Ｇ．  Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ．  Ｎａｔ  Ｐｒｏｔｏｃ．  ２００６；１（５）：２４０６−１５．Ｅｐｕｂ  ２００７  Ｊａｎ  １１、を参照のこと；また、Ｃｒａｉｇ  ＡＭ，Ｇｒａｆ  ＥＲ，Ｌｉｎｈｏｆｆ  ＭＷ．Ｈｏｗ  ｔｏ  ｂｕｉｌｄ  ａ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｓｙｎａｐｓｅ：ｃｌｕｅｓ  ｆｒｏｍ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６  Ｊａｎ；２９（１）：８−２０．Ｅｐｕｂ  ２００５  Ｄｅｃ  ７．Ｒｅｖｉｅｗ、も参照のこと）。急性実験の脳又は器官培養の脳の切片のような、より複雑なシステムは非常に有用であるが、ハイスループットスクリーニングには適さない。不死化又はガン化した神経細胞はハイスループットスクリーニングに適しているが、一次ニューロン培養の電気生理学的な状態に依存したシグナル伝達を再現せず、病状の最初期の顕在化時のオリゴマーを原因とするシグナル伝達の微妙な変化を正確にモデルしている可能性は低い（例えば、Ｇｏｒｔｚ  Ｐ，Ｆｌｅｉｓｃｈｅｒ  Ｗ，Ｒｏｓｅｎｂａｕｍ  Ｃ，Ｏｔｔｏ  Ｆ，Ｓｉｅｂｌｅｒ  Ｍ．Ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｎｅｔｗｏｒｋ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｔｅｒａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｎｅｕｒｏｎｓ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．２００４  Ａｕｇ  ２０；１０１８（１）：１８−２５、を参照のこと）。このために、ハイスループットスクリーニングにおいて使用可能であることと、インビボで起きていることを忠実に再現していることを理由に、一次ニューロン培養が選ばれた。
【０２５８】
還元されたホルマザンは、最初に細胞内の小胞において見られる（図１Ａ）。標識された小胞で満たされたニューロンと、それに続く色素のエンドサイトーシスと不溶性の紫色の生成物への還元。（図１Ａ中の棒目盛＝２０ミクロン）。最終的なホルマザンのエキソサイトーシスは、インビトロの成熟海馬ニューロンにおいてＡベータオリゴマーによって促進された（図１Ｂ）。エキソサイトーシスによって押し出された不溶性の紫色の色素によって覆われたニューロンの顕微鏡写真例。培養の水性環境において沈殿した色素と、ニューロン表面に形成された針状結晶。（図１Ｂ）。エンドサイトーシスの速度は、Ａベータオリゴマーの存在下で変化した。（図１Ｃ）。エキソサイトーシスの速度は、Ａベータオリゴマーの存在下で変化した（図１Ｄ）。
【０２５９】
シナプス及び記憶の欠損、並びに広範囲ではない細胞死が、アルツハイマー病の再初期段階で目立って見られるので、オリゴマー活性を抑制する小分子を発見するためには、そうした変化を測定するアッセイを用いることが出来る。前記ＭＩＴアッセイは、培養中の毒性を測定するのに用いることが出来る。黄色のテトラゾリウム塩が細胞によってエンドサイトーシスされ、エンドソーム経路中で不溶性の紫色のホルマザンに還元された。紫色のホルマザンの濃度は、培養中で活発に代謝をしている細胞の数を反映しており、ホルマザン量の減少は、培養中の細胞死又は代謝的な毒性の尺度として捉えられた。顕微鏡を用いて観察すると、紫色のホルマザンは最初、細胞に満たされた細胞内小胞において見られた（図１Ａ）。時間とともに、この小胞はエキソサイトーシスされ、ホルマザンは針状の結晶として細胞膜の外表面に沈着し、不溶性のホルマザンが水性溶媒環境に露出された。致死量以下のＡベータオリゴマーに対して、エンドサイトーシス速度には影響を与えない一方で、ホルマザンのエキソサイトーシス速度を選択的に促進させるように、細胞は応答するが、これらはインビトロの成熟一次ニューロンで観察可能であり、これらの形態的な変化は自動化顕微鏡及び画像処理によって定量化出来る。テトラゾリウム塩の培養ウェルへの添加後の、ある時点において、溶媒処理の細胞は図１Ａで見られる様子であったが、その一方でＡベータオリゴマー処理の細胞は、図１Ｂで見られる様子であった。こうした環境下において、還元ホルマザンの総量に全体的な変化はなく、その形態において変化があっただけであった。このアッセイは、細胞死を引き起こさない低濃度のオリゴマーに対しても感度を持っている。
【０２６０】
膜輸送が介在するニューロン表面の受容体発現の、Ａベータオリゴマーを介した減少が、オリゴマーによる、シナプス可塑性（長期増強）の電気生理学的尺度の低下と、それによる学習と記憶の低下との根拠となっていることについては、証拠が示されている（Ｋａｍｅｎｅｔｚ  Ｆ，Ｔｏｍｉｔａ  Ｔ，Ｈｓｉｅｈ  Ｈ，Ｓｅａｂｒｏｏｋ  Ｇ，Ｂｏｒｃｈｅｌｔ  Ｄ，Ｉｗａｔｓｕｂｏ  Ｔ，Ｓｉｓｏｄｉａ  Ｓ，Ｍａｌｉｎｏｗ  Ｒ．ＡＰＰ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｎ．２００３  Ｍａｒ  ２７；３７（６）：９２５−３７、及び、Ｈｓｉｅｈ  Ｈ，Ｂｏｅｈｍ  Ｊ，Ｓａｔｏ  Ｃ，Ｉｗａｔｓｕｂｏ  Ｔ，Ｔｏｍｉｔａ  Ｔ，Ｓｉｓｏｄｉａ  Ｓ，Ｍａｌｉｎｏｗ  Ｒ．ＡＭＰＡＲ  ｒｅｍｏｖａｌ  ｕｎｄｅｒｌｉｅｓ  Ａベータ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｓｐｉｎｅ  ｌｏｓｓ．Ｎｅｕｒｏｎ．２００６  Ｄｅｃ  ７；５２（５）：８３１−４３、を参照のこと）。オリゴマーによって誘導される膜輸送速度の変化を、ホルマザンの形態変化によって測定する手法は、Ａベータオリゴマー阻害薬を発見するために細胞株に用いられてきており（Ｍａｅｚａｗａ  Ｉ，Ｈｏｎｇ  ＨＳ，Ｗｕ  ＨＣ，Ｂａｔｔｉｎａ  ＳＫ，Ｒａｎａ  Ｓ，Ｉｗａｍｏｔｏ  Ｔ，Ｒａｄｋｅ  ＧＡ，Ｐｅｔｔｅｒｓｓｏｎ  Ｅ，Ｍａｒｔｉｎ  ＧＭ，Ｈｕａ  ＤＨ，Ｊｉｎ  ＬＷ．Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｔｒｉｃｙｃｌｉｃ  ｐｙｒｏｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００６  Ｊｕｌ；９８（１）：５７−６７；  Ｌｉｕ  Ｙ，Ｓｃｈｕｂｅｒｔ  Ｄ．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ３−（４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ  （ＭＴＴ）  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ＭＴＴ  ｆｏｒｍａｚａｎ  ｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．１９９７  Ｄｅｃ；６９（６）：２２８５−９３；  Ｌｉｕ  Ｙ，Ｄａｒｇｕｓｃｈ  Ｒ，Ｂａｎｈ  Ｃ，Ｍｉｌｌｅｒ  ＣＡ，Ｓｃｈｕｂｅｒｔ  Ｄ．Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００４  Ｎｏｖ；９１（３）：６４８−５６；  Ｌｉｕ  Ｙ，Ｓｃｈｕｂｅｒｔ  Ｄ．Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｙ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｃｕｒｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｒｅｓ．２００６  Ａｐｒ；３（２）：１２９−３５；  Ｒａｎａ  Ｓ，Ｈｏｎｇ  ＨＳ，Ｂａｒｒｉｇａｎ  Ｌ，Ｊｉｎ  ＬＷ，Ｈｕａ  ＤＨ．Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  ｏｆ  ｔｒｉｃｙｃｌｉｃ  ｐｙｒｏｎｅｓ  ａｎｄ  ｐｙｒｉｄｉｎｏｎｅｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａベータ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｄ��ｃｅｄ  ＭＣ６５  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ．Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２００９  Ｆｅｂ  １；  １９（３）：６７０−４．Ｅｐｕｂ  ２００８  Ｄｅｃ  ２４、及び、Ｈｏｎｇ  ＨＳ，Ｍａｅｚａｗａ  Ｉ，Ｂｕｄａｍａｇｕｎｔａ  Ｍ，Ｒａｎａ  Ｓ，Ｓｈｉ  Ａ，Ｖａｓｓａｒ  Ｒ，Ｌｉｕ  Ｒ，Ｌａｍ  ＫＳ，Ｃｈｅｎｇ  ＲＨ，Ｈｕａ  ＤＨ，Ｖｏｓｓ  ＪＣ，Ｊｉｎ  ＬＷ．Ｃａｎｄｉｄａｔｅ  ａｎｔｉ−Ａベータ  ｆｌｕｏｒｅｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ａｎａｌｏｇｓ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ａｇｉｎｇ．２００８  Ｎｏｖ  １８．（Ｅｐｕｂ  ａｈｅａｄ  ｏｆ  ｐｒｉｎｔ））、また、インビボでげっ歯類において脳中のＡベータ濃度を低下させる薬を発見するために用いられてきた（Ｈｏｎｇ  ＨＳ，Ｒａｎａ  Ｓ，Ｂａｒｒｉｇａｎ  Ｌ，Ｓｈｉ  Ａ，Ｚｈａｎｇ  Ｙ，Ｚｈｏｕ  Ｆ，Ｊｉｎ  ＬＷ，Ｈｕａ  ＤＨ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｗｉｔｈ  ａ  ｔｒｉｃｙｃｌｉｃ  ｐｙｒｏｎｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００９  Ｆｅｂ；１０８（４）：１０９７−１１０８）。
【０２６１】
エキソサイトーシスアッセイを、インビトロで３週間生育した成熟一次ニューロン培養に使用するために適合させた。Ａベータオリゴマーは投与応答的な、紫色の還元ホルマザンで満たされた細胞内小胞（斑点）の減少を引き起こし（図２Ａ、四角；３μＭ投与が図２Ｃと対応している）、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ  ＶＴＩ自動化顕微鏡システムによって測定された。Ａベータオリゴマーの増加は、最終的に明白な毒性をもたらした。従って、向神経活性のＡベータオリゴマーの濃度は、細胞死を引き起こす濃度よりも非常に低かった。この減少は、オリゴマー添加の前に、化学量論的な量の抗Ａベータモノクローナル抗体６Ｅ１０（ＩｇＧ）を培養に加えることで、阻害することが出来る（図２Ａ、丸；この丸は図２Ｄの画像と対応している；抗体のみ（下向き三角）はニューロンに影響を与えていない）。Ａベータオリゴマーの効果を阻害すると報告されていた幾つかの化合物を試験した。試験した化合物には、糖アルコールのシノ−イノシトール（ＡＺＤ−１０３）、拮抗剤のＭＫ−８０１が含まれるが、そのどれもが活性を示さなかった（Ｆｅｎｉｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，’０７、Ｃａｌａｂｒｅｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，’０６、ＬｅＣｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，’０７）。
【０２６２】
このアッセイは、化合物の準備とアッセイプレートへの刻印を行う自動化液体処理ロボットで用いる、３８４ウェルのマイクロタイタープレートにおける性能に最適化されており、通常的に、溶媒処理ニューロンとＡベータオリゴマー処理ニューロンとの間に統計的に有意な２倍の分離（Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定、不均一分散）を達成した。最初に化合物をニューロンに添加し、続いてオリゴマーを添加した。このように構成したとき、このアッセイはオリゴマーの破壊によって、オリゴマーのニューロンへの結合を阻害、又はオリゴマーの結合により開始するシグナル伝達の作用機序を相殺するように働く化合物を、検出することが出来た。
【０２６３】
もし化合物がＡベータの介在する膜輸送の変化を有意に阻害するが、それら単体で投与されたときには膜輸送に有意に影響しなかった場合、その化合物は活性を持つと見なした。図２Ｂに例を示す；化合物例２は、ＥＣ５０が７μＭで、膜輸送へのオリゴマーの影響を抑制する。
【０２６４】
図２Ａは、Ａベータ４２オリゴマー処理によるエキソシトーシスの促進によって引き起こされる、細胞内ホルマザン充填小胞（ｐｕｎｃｔａ）の、用量依存的な減少を示している。オリゴマーの効果は、抗ＡベータＩｇＧにより阻害された（丸及び上向き三角；丸は化学量論的な量のＩｇＧ、つまり３μＭのＡβ及び１．５μＭのＩｇＧを示す；上向き三角は、準化学量論的な量のＩｇＧ、つまり３μＭのＡβ及び０．５μＭのＩｇＧを示す）。ＩｇＧそれのみ（下向き三角）は効果を持たない。図２Ｂは、例化合物２を示しており、これは膜輸送へのオリゴマーの効果を抑制している。図２Ｃは、インビトロでの２１ＤＩＶの海馬ニューロンの代表的な顕微鏡写真を示しており、これはオリゴマーの膜輸送への効果を示している（図２Ａの３μＭのデータ点と対応している）。また、図２Ｄは、抗Ａベータ抗体による阻害を示している（図２Ａの丸と対応している）。データは３実験を平均したものである。図２Ｄ中のスケールバーは２０ミクロンである。
【０２６５】
実施例ＥＥ：恐怖条件付けアッセイ
化合物例２を、動物モデルにおいて、恐怖条件付けとして知られる記憶依存的な行動課題により試験した。この研究のプロトコルは、公開されているプロトコロに基づいて設計された（Ｐｕｚｚｏ  Ｄ，Ｐｒｉｖｉｔｅｒａ  Ｌ，Ｌｅｚｎｉｋ  Ｅ，Ｆａ  Ｍ，Ｓｔａｎｉｓｚｅｗｓｋｉ  Ａ，Ｐａｌｍｅｒｉ  Ａ，Ａｒａｎｃｉｏ  Ｏ．Ｐｉｃｏｍｏｌａｒ  ａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ  ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｍｅｍｏｒｙ  ｉｎ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００８  Ｄｅｃ  ３１；２８（５３）：１４５３７−４５．）。文脈依存的な記憶の形成は、海馬などの内側側頭葉の構造の統合性に依存している。このアッセイにおいて、マウスを、ある特定の目立った文脈（条件付け刺激；ＣＳ（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ  ｓｔｉｍｕｌｕｓ））が忌避事象、この場合では足への軽度の電気刺激（非条件付け刺激；ＵＳ（ｕｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ  ｓｔｉｍｕｌｕｓ））に関連付けされるように訓練した。良い学習成績を示した動物は、同じ文脈の中に戻したとき、すくむ動作を示すことが多くなるであろう。このすくみは、新規の文脈中では起きない。文脈中におかれて増加するすくみは、動物における強い海馬依存的な記憶の形成を示している。恐怖条件付けアッセイにおいて試験される記憶は、水溶性Ａβの上昇に影響される。
【０２６６】
図３は、訓練中のＡベータオリゴマーの投与（"ａ"とラベルされたバー）が、溶媒の投与（"ｂ"とラベルされたバー）に比べて、動物が２４時間後に試験されたときの記憶の欠損に繋がるという結果を示している。例化合物２は、Ａベータオリゴマーが介する膜輸送への効果を阻止するのに効果的であった（図３）。Ａベータオリゴマーの投与に先立って動物に投与したとき、例化合物２は、投与量依存的にオリゴマーの記憶への影響を阻害した。この化合物は、オリゴマーが介する記憶の欠損を、２ｐｍｏｌの投与量で完全に阻害した（図３、"ｄ"とラベルされたバー）。ここで示された行動への有効性は、膜輸送アッセイが、どの化合物が、オリゴマーによる行動学的な記憶の損失を治療するのに有効であるかを予測することが出来ることを実証している。この記憶のための恐怖条件付けモデルを、本明細書で記述されるように行った。
【０２６７】
図３は、文脈依存的恐怖条件付け記憶課題において、Ａベータが、溶媒に比べて、記憶形成に有意な欠損を生み出す（ｐ<０．０５）ことを示している。図３は、２ｐｍｏｌの化合物例２とＡベータ（２００ｎＭ）の投与が、Ａベータの記憶への影響を完全に阻害したことを示している（ｐ<０．０５、一要因の分散分析、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ補正による事後比較）。化合物のみでは、何の効果も示さなかった（データ不掲載）。いずれの投与量においても、有害な行動変化は見られなかった。
【０２６８】
実施例ＦＦ：膜輸送アッセイ
Ａベータ会合体を、アルツハイマー病（ＡＤ：Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）の患者又は正常な患者から単離した。このＡベータ会合体を、膜輸送を調整する能力について試験した。ＡＤ患者から単離したＨＭＷ（>１００ｋＤａ）のＡベータ会合体は、膜輸送に影響しなかった（データ不掲載）。ＡＤ患者から単離したＩＭＷ（１０−１００ｋＤａ）のＡベータ会合体は、膜輸送に有意に影響した（図４）。年齢を一致させた正常な個人から単離したＩＭＷのＡベータ会合体は、膜輸送に影響しなかった（図４）。化合物例２は、年齢を一致させた正常な個人から単離したＡベータ会合体に影響しなかった（図４）。化合物例２は、ＡＤ患者脳由来のＡベータ会合体の、膜輸送への影響を有意に阻害した（図４）。
【０２６９】
本発明をその特定の好適な変形に関してかなり詳細に記載したが、他の変形をとることも可能である。従って、本発明の精神と範囲は、本明細書において記載されている好適な変形の説明に限定されるものではない。
【０２７０】
明細書において開示される全ての特徴であって、要約及び図面、並びに任意の方法又は過程における全ての工程を含む前記特徴は、少なくともこの種の特徴及び／又は工程の幾つかが排他的である組合せを除いて、いかなる組合せにも組み込むことが出来る。別途明白に記述されない限り、明細書において開示される、要約及び図面を含む、各特徴は、同じ、等価な、又は類似の目的にかなっている代わりの特徴と置き換えることが出来る。このように、別途明白に記述されない限り、開示される各特徴は、一般的な一連の等価であるか類似の特徴の、一つの実施例に過ぎない。本明細書において記載されている本発明の変形の他に、様々な本発明の変形が、前述の説明から当業者にとって明らかであろう。こうした変形は、添付の請求の範囲に含まれることも意味している。
【０２７１】
本出願の各引例は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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