【手続補正書】
【提出日】平成21年9月25日(2009.9.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量をモニターする又は評価する工程を含む、患者の敗血症の診断又は予後を実施するためのデータを取得する方法であって、前記診断又は予後が、敗血症の発病より前に行われる、前記方法。
【請求項２】
前記リゾホスファチジルコリンが、式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物である、請求項１記載の方法：
【化１】
2009510450.tif 000001
（式中、Rは、C10-C22アシルである）。
【請求項３】
RがC14-C22アシル、好ましくはC16-C20アシル、より好ましくはC16-C18アシルである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
ある期間にわたって、患者の体液又は組織中の複数の総リゾホスファチジルコリン量を測定する工程を含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記リゾホスファチジルコリンが1-O-パルミトイル-2-リゾ-sn-グリセロ-3-ホスホコリン及び1-O-ステアロイル-2-リゾ-sn-グリセロ-3-ホスホコリンを含む、請求項４記載の方法。
【請求項６】
総遊離リゾホスファチジルコリン及び／又は総結合リゾホスファチジルコリンが、前記総リゾホスファチジルコリン量を示す、請求項４記載の方法。
【請求項７】
前記リゾホスファチジルコリンが、式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物である、請求項４記載の方法：
【化２】
2009510450.tif 000002
（式中、Rは、C10-C22アシルである）。
【請求項８】
RがC14-C22アシル、好ましくはC16-C20アシル、より好ましくはC16-C18アシルである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
Rが飽和アシル、好ましくはC16飽和アシル又はC18飽和アシルである、請求項７記載の方法。
【請求項１０】
Rが分枝のないC16-C18 アシル、好ましくはパルミトイル又はステアロイルである、請求項７記載の方法。
【請求項１１】
量が減少することが敗血症についてのリスクが増加していることを示す、又は、量が増加することが敗血症についてのリスクが減少することを示す、あるいは、量が減少することが敗血症の診断を示す、又は、量が増加することが敗血症の診断に対して示す、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１２】
前記患者がSIRS陽性である、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１３】
１以上のバイオマーカーの測定をさらに含み、該バイオマーカーがリゾホスファチジルコリン以外である、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１４】
前記量が分光法、クロマトグラフィー、免疫アッセイ法、電気泳動法又は酵素アッセイ法によって測定される、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１５】
前記体液又は組織が血液、血漿、唾液、血清、痰、尿、細胞、細胞抽出物又は組織生検である、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１６】
前記体液又は組織が血液である、請求項４又は７記載の方法。
【請求項１７】
患者の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量を、敗血症を有する個体の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量を示す参照量に対して比較する工程を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
前記リゾホスファチジルコリンが、式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物である、請求項１７記載の方法：
【化３】
2009510450.tif 000003
（式中、Rは、C10-C22アシルである）。
【請求項１９】
RがC14-C22アシル、好ましくはC16-C20アシル、より好ましくはC16-C18アシルである、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
前記量の間の相違が敗血症についてのリスクと逆相関する、請求項１７又は１８記載の方法。
【請求項２１】
前記参照量がカットオフ参照量である、請求項１７又は１８記載の方法。
【請求項２２】
前記カットオフ参照量未満の量が、敗血症の診断を示す、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記量が敗血症の発病の12、24、36又は48時間前に測定される、請求項１７又は１８記載の方法。
【請求項２４】
前記患者がSIRS陽性である、請求項１７又は１８記載の方法。
【請求項２５】
前記個体がSIRS陽性である、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記個体が敗血症陽性である、請求項２４記載の方法。
【請求項２７】
患者の敗血症の診断又は予後を実施するためのデータを取得する方法であって、
患者の体液又は組織由来のサンプルを：
リゾホスファチジルコリンを反応させてグリセロホスファチジルコリンを形成することができる酵素又は試薬；
グリセロホスファチジルコリンを反応させてコリンを形成することができる酵素又は試薬；
コリン、水及び酸素を反応させてペルオキシドを形成することができる酵素又は試薬；及び
ペルオキシダーゼ及び該ペルオキシダーゼの蛍光発生基質；
と、蛍光産物の形成のために適切な条件下で接触させることによって患者のリゾホスファチジルコリンを検出する工程を含み、
前記蛍光産物がリゾホスファチジルコリンを示し、
前記診断又は予後が、敗血症の発病より前に行われる、前記方法。
【請求項２８】
リゾホスファチジルコリンを反応させてグリセロホスファチジルコリンを形成することができる前記酵素又は試薬がリゾホスホリパーゼである、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
リゾホスファチジルコリンをグリセロホスファチジルコリンに変換することができる前記酵素又は試薬がEC 3.1.1.5である、請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
グリセロホスファチジルコリンを反応させてコリンを形成することができる前記酵素又は試薬がグリセロホスファチジルコリンジエステラーゼである、請求項２７記載の方法。
【請求項３１】
グリセロホスファチジルコリンを反応させてコリンを形成することができる前記酵素又は試薬がEC 3.1.4.2である、請求項２７記載の方法。
【請求項３２】
コリンを反応させてペルオキシドを形成することができる前記酵素又は試薬がコリンオキシダーゼである、請求項２７記載の方法。
【請求項３３】
コリンを反応させてペルオキシドにすることができる前記酵素又は試薬がEC 1.1.3.17である、請求項２７記載の方法。
【請求項３４】
前記ペルオキシダーゼが西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項２７記載の方法。
【請求項３５】
前記蛍光発生基質が10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジンであり、かつ前記蛍光産物が7-ヒドロキシ-3H-フェノキサジン-3-オンである、請求項２７記載の方法。
【請求項３６】
前記蛍光産物が蛍光検出によって検出される、請求項２７記載の方法。
【請求項３７】
前記サンプルを、リゾホスホリパーゼ、グリセロホスファチジルコリンジエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及び10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジンと、7-ヒドロキシ-3H-フェノキサジン-3-オンの形成のために適切な条件下で接触させ、7-ヒドロキシ-3H-フェノキサジン-3-オンがリゾホスファチジルコリンを示す、請求項２７記載の方法。
【請求項３８】
前記サンプルを、EC 3.1.1.5、EC 3.1.4.2、EC 1.1.3.17、西洋ワサビペルオキシダーゼ及び10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジンと、7-ヒドロキシ-3H-フェノキサジン-3-オンの形成のために適切な条件下で接触させ、7-ヒドロキシ-3H-フェノキサジン-3-オンがリゾホスファチジルコリンを示す、請求項２７記載の方法。
【請求項３９】
前記蛍光産物の量が前記リゾホスファチジルコリン量を示す、請求項２７記載の方法。
【請求項４０】
前記患者の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量が、敗血症を有する複数の個体の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量を示す参照量に対して比較される、請求項１７記載の方法。
【請求項４１】
前記患者の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量を、体液又は組織中の内部標準と比較する工程を含む、請求項１記載の方法。
【請求項４２】
敗血症の治療の効果をモニターするためのデータを取得する方法であって、治療を評価するために、前記敗血症のための治療を受けている患者の体液又は組織中の総リゾホスファチジルコリン量をモニターする工程を含む、前記方法。
【請求項４３】
1種以上の臨床測定値を使用する工程をさらに含む、請求項１又は２記載の方法。
【請求項４４】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-からなる群から選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
前記臨床測定値が敗血症のための臨床重症度モデルに従い、前記臨床モデルが急性生理機能及び慢性健康評価、急性生理機能及び慢性健康評価II、急性生理機能及び慢性健康評価III、死亡率予測モデル、簡易急性生理機能スコア、多臓器機能障害スコア、経時的器官不全評価スコア、ロジスティック器官機能障害スコア、並びに素因、感染、反応及び器官機能障害の概念からなる群から選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４６】
１種の臨床測定値が測定される、請求項４３記載の方法。
【請求項４７】
呼吸数が測定される、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
温度が測定される、請求項４６記載の方法。
【請求項４９】
複数種の臨床測定値が測定される、請求項４３記載の方法。
【請求項５０】
呼吸数及び温度が測定される、請求項４９記載の方法。
【請求項５１】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーを測定することをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項５２】
前記患者の体液又は組織中の複数の式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物の量を測定する工程：
【化４】
2009510450.tif 000004
（式中、Rは、C10-C22アシルである）；及び
前記患者の１種以上の臨床測定値を測定する工程
を含む、請求項１記載の方法。
【請求項５３】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-濃度からなる群から選択される、請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
１種の臨床測定値が測定される、請求項５２記載の方法。
【請求項５５】
呼吸数が測定される、請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
温度が測定される、請求項５４記載の方法。
【請求項５７】
複数種の臨床測定値が測定される、請求項５２記載の方法。
【請求項５８】
呼吸数及び温度が測定される、請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
前記患者がSIRS陰性である、請求項４３又は５２記載の方法。
【請求項６０】
前記患者がSIRS陽性である、請求項４３又は５２記載の方法。
【請求項６１】
前記量が分光法、クロマトグラフィー、免疫アッセイ法、電気泳動法又は酵素アッセイ法によって測定される、請求項４３又は５２記載の方法。
【請求項６２】
前記体液又は組織が血液、血漿、唾液、血清、痰、尿、細胞、細胞抽出物又は組織生検である、請求項４３又は５２記載の方法。
【請求項６３】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーを測定することをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項５２記載の方法。
【請求項６４】
前記患者の１種以上の臨床測定値をモニターする、又は評価する工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項６５】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-濃度からなる群から選択される、請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
１種の臨床測定値がモニターされる、又は評価される、請求項６４記載の方法。
【請求項６７】
呼吸数がモニターされる、又は評価される、請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
温度がモニターされる、又は評価される、請求項６６記載の方法。
【請求項６９】
複数種の臨床測定値がモニターされる、又は評価される、請求項６４記載の方法。
【請求項７０】
呼吸数及び温度がモニターされる、又は評価される、請求項６９記載の方法。
【請求項７１】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーをモニターする、又は評価することをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項６４記載の方法。
【請求項７２】
前記患者の１種以上の臨床測定値をモニターして前記治療を評価する工程をさらに含む、請求項４２記載の方法。
【請求項７３】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-濃度からなる群から選択される、請求項７２記載の方法。
【請求項７４】
１種の臨床測定値がモニターされる、請求項７２記載の方法。
【請求項７５】
呼吸数がモニターされる、請求項７４記載の方法。
【請求項７６】
温度がモニターされる、請求項７４記載の方法。
【請求項７７】
複数種の臨床測定値がモニターされる、請求項７２記載の方法。
【請求項７８】
呼吸数及び温度がモニターされる、請求項７７記載の方法。
【請求項７９】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーをモニターすることをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項７２記載の方法。
【請求項８０】
前記患者の体液又は組織中の式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物の量をモニターする、又は評価する工程：
【化５】
2009510450.tif 000005
（式中、Rは、C10-C22アシルである）；及び
前記患者の１種以上の臨床測定値をモニターする、又は評価する工程
を含む、請求項１記載の方法。
【請求項８１】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-濃度からなる群から選択される、請求項８０記載の方法。
【請求項８２】
１種の臨床測定値がモニターされる、又は評価される、請求項８０記載の方法。
【請求項８３】
呼吸数がモニターされる、又は評価される、請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
温度がモニターされる、又は評価される、請求項８２記載の方法。
【請求項８５】
複数種の臨床測定値がモニターされる、又は評価される、請求項８０記載の方法。
【請求項８６】
呼吸数及び温度がモニターされる、又は評価される、請求項８５記載の方法。
【請求項８７】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーをモニターする、又は評価することをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項８０記載の方法。
【請求項８８】
敗血症のための治療を受けている患者の体液又は組織中の式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物の量をモニターする工程：
【化６】
2009510450.tif 000006
（式中、Rは、C16-C18アシルである）；及び
前記患者の１種以上の臨床測定値をモニターして、前記治療を評価する工程
を含む、請求項１記載の方法。
【請求項８９】
前記臨床測定値が、呼吸数、温度、心拍数、白血球数、単球数、リンパ球数、顆粒球数、好中球数、総好中球に対する未成熟好中球の比、血小板数、血清クレアチニン濃度、尿素濃度、乳酸濃度、塩基過剰、pO2及びHCO3-濃度からなる群から選択される、請求項８８記載の方法。
【請求項９０】
１種の臨床測定値がモニターされる、請求項８８記載の方法。
【請求項９１】
呼吸数がモニターされる、請求項９０記載の方法。
【請求項９２】
温度がモニターされる、請求項９０記載の方法。
【請求項９３】
複数種の臨床測定値がモニターされる、請求項８８記載の方法。
【請求項９４】
呼吸数及び温度がモニターされる、請求項９３記載の方法。
【請求項９５】
前記患者の体液又は組織中の１以上のバイオマーカーをモニターすることをさらに含み、該バイオマーカーが内毒素、細菌DNA、プロテインC、プロカルシトニン、LBP-LPS-結合タンパク質、フィブリン分解産物、抗トロンビンIII、二量体D、HLA-DR、CD-64、Eセレクチン、コルチゾール、ACTH、CD-14、sTNF-RI、sTNF-RII、TNF、IL-6、IL-8及びIL-10、D-二量体、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤-I、可溶性トロンボモジュリン、トロンビンで活性化可能な線維素溶解阻害剤、プロテインS、抗トロンビン、及びTNF-αからなる群から選択される、請求項８８記載の方法。
【請求項９６】
リゾホスホリパーゼ、グリセロホスファチジルコリンジエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及び該ペルオキシダーゼの蛍光発生基質を含む、患者の敗血症の診断又は予後あるいはモニタリングのためのキットであって、前記診断又は予後が敗血症の発病より前に行われる、前記キット。
【請求項９７】
EC 3.1.1.5、EC 3.1.4.2、EC 1.1.3.17、西洋ワサビペルオキシダーゼ及び10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジンを含む、請求項９６記載のキット。
【請求項９８】
前記リゾホスファチジルコリンが、式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物である、請求項９６記載のキット：
【化７】
2009510450.tif 000007
（式中、Rは、C10-C22アシルである）。
【請求項９９】
前記構成物が式（I）の化合物に選択的に結合することができる抗体を含む、請求項９８記載のキット。
【請求項１００】
敗血症の診断又は予後のための装置であって、
該装置は、患者の体液又は組織中の式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物の量を測定することができ：
【化８】
2009510450.tif 000008
（式中、Rは、C10-C22アシルである）、かつ
該量を、敗血症を有する個体の体液又は組織中の前記化合物の量を示す参照量と比較することができ、
該装置は、リゾホスホリパーゼ、グリセロホスファチジルコリンジエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及び該ペルオキシダーゼの蛍光発生基質を含み、
前記診断又は予後が敗血症の発病より前に行われる、前記装置。
【請求項１０１】
患者の体液又は組織中の式（I）記載の化合物又はその塩若しくは溶媒和物の量を測定することができる第１の装置：
【化９】
2009510450.tif 000009
（式中、Rは、C10-C22アシルである）；及び
該量を、敗血症を有する個体の体液又は組織中の前記化合物の量を示す参照量と比較することができる第２の装置
を含む、敗血症の診断又は予後のためのシステムであって、
前記第１の装置が、リゾホスホリパーゼ、グリセロホスファチジルコリンジエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及び該ペルオキシダーゼの蛍光発生基質を含み、
前記診断又は予後が敗血症の発病より前に行われる、前記システム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２１】
（結果）
参加日、T-60、T-36及びT-12（敗血症の発病の臨床的疑いの日）間隔における、29人の敗血症及び22人のSIRS対象についての総LPC濃度を図7に示してある。図7から分かるように、大部分のSIRS患者についての総LPC濃度は、参加の日から次第に増加し、最初のショック外傷からそれぞれのSIRS患者の段階的な回復を示している。一方で、大部分の敗血症患者についての総LPC濃度は、下がり、又は敗血症の発病の臨床的疑いの日の2日前（T-12）のレベルになる。