(57)【要約】本発明は、一群のポリカチオン性両親媒性環式オリゴ糖に関する。当該一群のポリカチオン性両親媒性環式オリゴ糖は、その分子構造のおかげで、細胞内部への分子トランスポーターとして使用することができる。さらに、本発明はまた、医薬の調合における上記化合物の使用、遺伝子治療のためのこの医薬の使用、及び上記化合物のうちの一つを含んでいる薬学的組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、又はその有機若しくは無機の塩。
【化１】
2012523489.tif 000006
（但し、ｎは４、５又は６であり；Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水素、炭素数が１から２０の範囲のアルキル基又はアシル基から独立に選択され、Ｒ１及びＲ２のうち少なくとも１つは水素ではなく；Ｘは−ＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＹＲ３から選択され；Ｙは、Ｏ及びＳから選択され、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｐ及びｑは、それぞれ、１から１０の範囲の値を独立に取り得る。Ｒ４及びＲ５は、それぞれ、水素、及び−（ＣＨ２）ｒ−［（ＮＨ）−（ＣＨ２）ｓ］ｔ−ＮＨ−Ｒ６から選択され、ｒは１から１０の範囲の値を取り得、ｓは２から１０の範囲の値を取り得、ｔは０から４の範囲の値を取り得、Ｒ６は、水素、蛍光色素、及び細胞のレセプターによって認識され得るリガンドを含んでいるＧ基から選択される。）
【請求項２】
Ｒ１及びＲ２は、炭素数が２から１４の範囲のアルキル基又はアシル基である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
Ｘは、−ＣＨ２−である、請求項１又は２に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
Ｘは、−ＣＨ２ＹＲ３であり、Ｙは硫黄であり、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｐは２であり、かつｑは１である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
Ｒ４及びＲ５は、−（ＣＨ２）ｒ−［（ＮＨ）−（ＣＨ２）ｓ］ｔ−ＮＨ２であり、ｒの値は１であり、ｓの値は２であり、かつｔの値は０から４の範囲である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
上記塩は、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩及びトリフルオロメタンスルホン酸塩からなる群より選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項７】
上記塩は、塩化物、臭化物及びヨウ化物からなる群より選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項８】
上記塩は、塩化物である、請求項６に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項９】
ｎは５である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１０】
以下の群から選択される、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物：
ヘプタキス［６−（４−アミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル］シクロマルトヘプタオース、
ヘプタキス［６−（２−（４−アミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、及び、
ヘプタキス［６−（２−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース。
【請求項１１】
Ｒ６は、蛍光色素である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６は、単糖若しくはオリゴ糖、モノクローナル抗体又は葉酸誘導体から選択されるリガンドを含んでいるＧ基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１３】
最終化合物に含まれるＧ基の数が１から７の範囲である、請求項１〜１２の何れか１項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１４】
単糖若しくはオリゴ糖は、マンノース、ガラクトース、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、シアル酸、ラクトース、又は、これらのうちの何れか若しくは組み合わせによって形成されるオリゴ糖から選択される、請求項１２又は１３に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１５】
Ｒ６は、以下の式のＧ基である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
【化２】
2012523489.tif 000007
【請求項１６】
原核細胞又は真核細胞の内側への少なくとも一つの分子のトランスポーターとしての、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１７】
上記分子は、核酸、核酸ペプチド、ペプチド、タンパク質、糖タンパク質、炭水化物、脂質又は糖脂質を含んでなるリストのうちの一つである、請求項１６に記載の化合物の使用。
【請求項１８】
上記分子は、核酸である、請求項１７に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
上記分子は、ＤＮＡである、請求項１８に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
上記細胞は、真核細胞である、請求項１６〜１９のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
医薬の調合のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項２２】
遺伝子治療のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項２３】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を含んでいる、薬学的組成物。
【請求項２４】
薬学的に許容される担体をさらに含んでいる、請求項２３に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
他の活性成分をさらに含んでいる、請求項２３又は２４に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、分子生物学分野、及び生体医学分野に関連する。詳細には、一群のポリカチオン性両親媒性環式オリゴ糖、その細胞内部への分子トランスポーターとしての使用、医薬の調合における当該化合物の使用、遺伝子治療のための当該医薬の使用、及び当該化合物の何れかを含んでいる薬学的組成物に関する。
【０００２】
〔背景技術〕
機能性因子を正確に配列させるための分子鋳型として、大環式化合物を使用することは、生体内で生じる超分子事象を模倣、または、妨げ得る人工レセプターまたはリガンドを設計するための興味深い戦略である。この点に関し、シクロマルトオリゴ糖（シクロデキストリン、ＣＤ）は、上記目的について有利な大環式の基本骨格となり得る。なぜなら、シクロマルトオリゴ糖は、生体適合性、利用性、及びよく分化した面を有する対称な管構造を併せ持ち、又、管理された化学的機能化に感受性が高いためである（Vargas-Berenguel et al. 2007. Mini-Rev. Org. Chem. 4, 1-14; Garcia Fernandez et al. 2006. J. Incl. Phenom. Macrocycl. yhyuyujjuChem. 56, 149-159）。さらに、シクロデキストリン誘導体は、内部空洞に他の分子を含み、封入複合体を形成する能力を有している。例えば、ＤＮＡプラスミド（ｐＤＮＡ）を効果的に複合化及び放出し得る、高い生体適合性及び効果を有するポリカチオン性ポリマーに、化学的に修飾されたシクロデキストリンが組み込まれている（Davis and Brewster. 2004. Nat. Rev. Drug. Discov. 3, 1023-1035）。対応する粒子の表面は、シクロデキストリンの空洞と相互作用し得る化学物質との非共有結合によってさらなる修飾を受け得る。
【０００３】
上述した例は、他の分子の複合化及び移送のためのポリカチオン性シクロデキストリン誘導体についての興味を（特に、他の分子がアニオン性である場合について）引き立てる。しかし、高分子性及び多分散性は、（特に、医薬の分野における）用途の開発に対して大きな制約を課す。分子的性質を有するシクロデキストリン誘導体のいくつかの例が、天然環式オリゴ糖の第１級水酸基の官能基化によって調製されている。しかし、それらの誘導体は、ＤＮＡのような生体分子を保護し、標的細胞に導くことの効果が比較的低い（Srinivasacchari et al. 2008. J. Am. Chem. Soc. 130, 4618-4627; Mourtzis et al. 2008. Chem. Eur. J. 14, 4188-4200）。当該効果は、ポリカチオン性シクロデキストリンに両親媒性を付与することによって向上させることもできるが（Diaz-Moscoso et al. 2008. Chem. Commun. 2001-2003）、このタイプの化合物の調製は非常に制限されている。なぜなら、シクロデキストリンにおける多重合成手法は、一般に効率が低いためである。ゆえに、効率よく調製することができ、かつ、他の分子（特に、核酸（ＤＮＡ又はＲＮＡ）のようなポリアニオン性分子を含む）を効果的に複合化して移送することができる、ポリカチオン性両親媒性シクロデキストリンの新規構造を開発することが求められている。
【０００４】
〔発明の説明〕
本発明の発明者らは、分子を細胞に導入する理想的な担体としての特性を有する一群のポリカチオン性両親媒性大環式誘導体を見出した。
【０００５】
本発明の第１の形態は、式（Ｉ）の化合物、又はその有機若しくは無機の塩である：
【０００６】
【化１】
2012523489.tif 000002
【０００７】
（但し、ｎは４、５又は６であり；Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水素、炭素数が１から２０の範囲のアルキル基又はアシル基から独立に選択され、Ｒ１及びＲ２のうち少なくとも１つは水素ではなく；Ｘは−ＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＹＲ３から選択され；Ｙは、Ｏ及びＳから選択され、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｐ及びｑは、それぞれ、１から１０の範囲の値を独立に取り得る。Ｒ４及びＲ５は、それぞれ、水素、及び−（ＣＨ２）ｒ−［（ＮＨ）−（ＣＨ２）ｓ］ｔ−ＮＨ−Ｒ６から選択され、ｒは１から１０の範囲の値を取り得、ｓは２から１０の範囲の値を取り得、ｔは０から４の範囲の値を取り得、Ｒ６は、水素、蛍光色素、及び細胞のレセプターによって認識され得るリガンドを含んでいるＧ基から選択される。）
本発明において、「アルキル」という語は、直鎖状又は分岐状の炭化水素鎖ラジカルを指し、当該炭化水素鎖ラジカルは炭素及び水素原子からなり、不飽和結合を含むか、含んでおらず、炭素原子を１〜２０個の範囲で含んでおり、単結合によって残りの分子と結合しており、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル等である。アルキルラジカルは、任意に、１つ以上の置換基、例えば、アリル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アシル、アルコキシカルボキシル、アミノ、ニトロ、メルカプト、アルキルチオ等と置換され得る。
【０００８】
本発明において、「アシル」という語は、ヒドロキシ基の除去によって得られるカルボン酸誘導体を指している。アシル基は一般式Ｒａ−ＣＯ−を有しており、Ｒａは上記のアルキル基（好ましくは、炭素数が１から２０の範囲のアルキル基）を指す。なお、アルキルは上述したように定義されているものとして理解される。
【０００９】
本発明において、「細胞レセプター」という語は、分子又は「リガンド」を、特に認識するか、又はこれらと相互作用する細胞表面の構成要素を指す。細胞レセプターによるリガンドの相互作用は、例えば、任意の標的細胞に対する選択的送達のために好ましい。
【００１０】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｒ１及びＲ２が、炭素数が２から１４の範囲のアルキル基又はアシル基である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１１】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｘが、−ＣＨ２−である式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１２】
他の好ましい実施形態において、本発明は、Ｘが、−ＣＨ２ＹＲ３であり、Ｙは硫黄であり、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｐ−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｐは２であり、かつｑは１である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１３】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｒ４及びＲ５が、−（ＣＨ２）ｒ−［（ＮＨ）−（ＣＨ２）ｓ］ｔ−ＮＨ２であり、ｒの値は１であり、ｓの値は２であり、かつｔの値は０から４の範囲である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１４】
好ましい実施形態において、本発明は、上記塩が、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩及びトリフルオロメタンスルホン酸塩からなる群より選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１５】
好ましい実施形態において、本発明は、上記塩が、塩化物、臭化物及びヨウ化物からなる群より選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。さらに好ましくは、上記塩は、塩化物である。
【００１６】
他の好ましい実施形態において、本発明は、ｎが５である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１７】
好ましい実施形態において、本発明は、以下の群から選択される：ヘプタキス［６−（４−アミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル］シクロマルトヘプタオース、ヘプタキス［６−（２−（４−アミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース、及びヘプタキス［６−（２−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース。
【００１８】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｒ６が、蛍光色素である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１９】
本発明において、「蛍光色素」という語は、分子の部分であって、当該分子を蛍光性にするものを指す。蛍光色素は、特定の波長のエネルギーを吸収し、他のより高い波長において（すなわち、より低エネルギーで）エネルギーを再放出する、上記分子の官能基を指す。放出されるエネルギー量及びその波長は、蛍光色素それ自体及びその化学的環境の両方に依存している。本発明において使用され得る蛍光色素のいくつかの例は、ローダミン、フルオレセイン又はダンシルであるが、これらに限定されない。
【００２０】
他の好ましい実施形態において、本発明は、Ｒ６は、単糖、オリゴ糖、モノクローナル抗体又は葉酸誘導体から選択されるリガンドを含んでいるＧ基である、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２１】
さらに好ましくは、上記単糖若しくはオリゴ糖は、マンノース、ガラクトース、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、シアル酸、ラクトース、又は、これらのうち何れか若しくは組み合わせによって形成されるオリゴ糖から選択される。
【００２２】
本発明において、「単糖」という語は、もっとも単純なグルコシドを指し、当該グリコシドは、加水分解されておらず（つまり他の化合物を生じさせるために分解されておらず）、炭素原子を３から６個の範囲で含んでいる。それらの経験的な式は、（ＣＨ２Ｏ）ｎ（但し、ｎ≧３）である。単糖の炭酸化された鎖（carbonated chain）は分岐が無く、１つの炭素原子以外はアルコール基（−ＯＨ）を含んでいる。残りの炭素原子はカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）と結合している。このカルボニル基が鎖の末端にある場合には、それはアルデヒド基（−ＣＨＯ）であり、その単糖はアルドースと呼ばれる。アルドースの例は、グリセルアルデヒド、エリトロース、トレオロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロースが挙げられるが、これらに限定されない。カルボニル炭素がその他の場所にある場合には、それはケトン（−ＣＯ−）であり、単糖はケトースと呼ばれる。ケトースの例は、ジヒドロキシアセトン、エリトルロース、リブロース、キシルロース、シコース、フルクトース、ソルボース及びタガトースが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
本発明において、「オリゴ糖」という語は、Ｏ−グリコシド結合によって結合している単糖から形成されており、モノマー単位の数が３から１０の範囲であるポリマーを指している。二糖はオリゴ糖の中で注目に値し、それらはＯ−グリコシド結合（水分子の脱離を伴う）により、２つの同一又は相違する単糖の結合によって形成されるオリゴ糖であり、ヘミアセタール又はヘミケタールのＯＨ基に応じてα又はβであり得るモノカルボン又はジカルボンである。もっとも一般的な二糖は、グルコース、フルクトース、ラクトース、マルトース、イソマルトース、トレハロース及びセロビオースであるが、これらに限定されない。
【００２４】
より好ましい実施形態において、Ｒ６は、以下の式のＧ基である。
【００２５】
【化２】
2012523489.tif 000003
【００２６】
本発明の他の形態は、細胞内部に少なくとも１つの分子を移送する担体としての式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００２７】
本明細書において使用されているように、「トランスポーター」又は「キャリー」という語は、細胞内部に分子を移送する本発明の化合物の能力に関する。本明細書の実施例２において、細胞透過性トランスポーターとして行動する本発明の化合物の潜在能力を説明する分子として、核酸は使用される。しかし、本発明の化合物を用いて、導入され得る分子は非常に多様であり、例えば、核酸、ペプチド核酸、ペプチド、タンパク質、糖タンパク、炭水化物、脂質、グリコ脂質、蛍光プローブ又は医薬が挙げられるが、これらに限定されない。実施例２において、ＤＮＡプラスミドは野生型のチャイニーズハムスターの卵巣細胞に投与されている（ＣＨＯ−ｋ１、番号ＡＴＣＣ  ＣＣＬ−６１）。しかし、本発明の化合物は他の型の真核細胞、および原核細胞に分子を導入する際にも有用である。
【００２８】
本発明のこの形態の好ましい実施形態は、細胞内部への核酸のトランスポーターとしての、本発明の化合物の使用に関する。
【００２９】
核酸はデオキシリボ核酸であり得、例えば、二本鎖ＤＮＡ、一本鎖ＤＮＡ若しくは環状ＤＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。また、核酸はリボ核酸であり得、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）若しくはシグナル阻害ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の化合物は、一種類より多い分子（例えば、２つの異なるＤＮＡ配列）を導入するためにも使用され得る。
【００３０】
より好ましい実施形態において、核酸はＤＮＡである。さらに好ましい実施形態において、ＤＮＡは二重鎖ＤＮＡである。さらに一層好ましい実施形態において、二重鎖ＤＮＡは環状である。
【００３１】
他のより好ましい実施形態において、核酸はＲＮＡである。さらに好ましい実施形態において、ＲＮＡはシグナル阻害ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である。
【００３２】
核酸トランスポーターはまた、ベクターとも呼ばれる。本発明において使用されるように、「ベクター」という語は、外在性の核酸を細胞内部に移送し、それによって細胞内部へ核酸の担体移送を可能にする工程において使用されるシステムを指す。
【００３３】
従って、本発明の化合物は形質転換試薬又はトランスフェクション試薬として使用され得る。本明細書において使用されるように、「形質転換」という語は、原核細胞への外在性の核酸の導入を指している。本明細書において使用されるように、「形質転換試薬」という語は、原核細胞の内部への核酸の透過性トランスポーターを指している。本明細書において使用されるように、「トランスフェクション」という語は、真核細胞への外在性の核酸の導入を指している。本明細書において使用されるように、「トランスフェクション試薬」という語は、真核細胞の内部への核酸の透過性トランスポーターを指している。
【００３４】
本観点における本発明の好ましい実施形態は、原核細胞の内部への核酸の形質転換試薬としての、式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００３５】
本発明のこの形態の好ましい実施形態は、真核細胞の内部への核酸のトランスフェクション試薬としての、式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００３６】
本発明の化合物は、生物（好ましくは哺乳類、さらに好ましくは人間）の細胞内に、治療能力を有する少なくとも１つの分子を移送するために使用され得る。実施例２は、真核細胞への核酸を導入する本発明の化合物の能力を示している。従って、本発明の化合物は、遺伝子治療という脈絡の中で、予防用の、診断用の又は治療用の核酸を移送することができるベクターとして有用である。
【００３７】
本発明の他の形態は、医薬の調合のための、本発明の化合物の使用に関する。
【００３８】
本発明の他の形態は、遺伝子治療のための、上記の医薬の使用に関する。
【００３９】
本明細書において使用されるように、「遺伝子治療のための医薬」という語は、インビボ又はエクスビボのいずれかを問わず、予防用の、診断用の又は治療用の核酸を、動物の細胞、好ましくは人間の細胞に移送し、続いてインビボにおいてそれを発現させるすることを目的とする一群の製造工程によって得られる生産物を指す。遺伝子導入は、送達機構（distribution system）の一部を構成する発現システムを表し、ウイルス又は非ウイルス起源のベクターとして知られており、動物細胞に含まれ得る。遺伝子治療医薬は、以下のネイキッド核酸、非ウイルス性ベクター、ウイルス性ベクター又は遺伝子的に修正された細胞が含まれるが、これらに限定されない。それらは同種異系細胞（他の人間に由来する）又は異種細胞（動物に由来する）と同様に自己細胞（患者の細胞に由来する）に基づく遺伝子治療医薬であり得る。
【００４０】
本発明の他の形態は、本発明の化合物を含んでいる、薬学的組成物に関する。本発明のこの形態の好ましい実施形態において、薬学的組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含んでいる。本発明のより好ましい実施形態において、薬学的組成物は、薬学的に許容される担体と共に、他の活性成分をさらに含んでいる。
【００４１】
本明細書に使用されているように、「活性成分（active principle）」、「有効成分（active substance）」、「薬学的有効成分（pharmaceutically active substance）」、「活性成分（active ingredient）」又は「薬学的活性成分（pharmaceutically active ingredient）」という語は、病気の診断、治療、軽減、処置若しくは予防において、薬理活性又は他の様々な効果を潜在的に提供する、あるいは、人間若しくは他の動物の体の構造又は機能に影響を与える、任意の成分を指している。
【００４２】
本発明の薬学的組成物は、従来技術において知られている様々な形態における投与のために形成され得る。以下に限定されないが、非経口、腹腔内、静脈内、皮内、硬膜外、髄腔内、基質内、間接内、滑液嚢内（intrasinovial）、鞘内、病巣内、動脈内、嚢内、心臓内、筋肉内、鼻腔内、頭蓋内、皮下、眼窩内又は局所的投与を含んでいる様々な形態において、このような組成物及び／又はその製剤は、動物（より好ましくは人間を含む哺乳類）に投与され得る。
【００４３】
治療的に効果的な量を得るための服用量は、様々な要素（例えば、動物の年齢、体重、性別又は耐性等）に依存している。本明細書において使用されている意味では、「治療的に効果的な量」という表現は、望ましい効果を作り出す薬学的に効果的な組成物の量を指し、一般的に、他の要因とともに、上記薬学的組成物及び達成すべき治療的効果の特性によって決定され得る。上記組成物において使用され得る薬学的に許容される「アジュバント」又は「担体」は、従来技術において知られている担体である。
【００４４】
明細書及び請求項を通じて、「含んでいる」という語及びその変形は、他の技術的特徴、添加剤、構成要素又は工程を除外することを意図していない。当業者にとって、本発明の他の目的、長所及び特質は、本明細書から部分的に生じ得、本発明の実施から部分的に生じ得る。以下の図、及び例は、例示を目的として提供されており、本発明の範囲を制限することを意図していない。
【００４５】
〔図面の説明〕
図１は、剛性（rigid）ポリカチオン性両親媒性βＣＤ誘導体＜９＞〜＜１１＞の合成を模式的に説明する図である。
【００４６】
図２は、軟質（flexible）ポリカチオン性両親媒性βＣＤ誘導体＜１６＞及び＜１７＞の合成を模式的に説明する図である。
【００４７】
図３は、（ａ）Ｎ／Ｐ比を漸増させたときの、ｐＤＮＡに対する、両親媒性のβＣＤ誘導体（＜９＞〜＜１１＞、＜１６＞及び＜１７＞）、及び非両親媒性のβＣＤ誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）の結合性を示すゲル電気泳動シフトアッセイ、並びに（ｂ）バンドの濃さの数量化を説明する図である。
【００４８】
図４は、ポリカチオン性両親媒性シクロデキストリン（＜９＞〜＜１１＞、＜１６＞及び＜１７＞）と複合体化され、ＤＮａｓｅＩによって処置されているｐＤＮＡサンプルに対応する、弛緩型の超ねじれ構造のｐＤＮＡの電気泳動バンドの合計の相対強度（非処置ｐＤＮＡの値を１００とする）の数量化を表す図である。データは平均値の標準偏差を示す（ｎ＝４）。非両親媒性の誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）についてのデータが、比較のために含められている。
【００４９】
図５は、ｐＤＮＡと＜９＞〜＜１１＞，＜１６＞および＜１７＞との複合体のＣＨＯ−ｋ１細胞へのインビトロ遺伝子導入の効率性を、ポリカチオン性の非両親媒性の誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）由来の複合体、リポフェクタミン（商標）２０００（ＬＰ）をベースとしたポリプレックス、及びネイキッドＤＮＡ（コントロール）と比較して示す図である。データは平均値の標準偏差を示す（ｎ＝８）。
【００５０】
〔実施例〕
この特許文章において提供される以下の具体例は、本発明の性質を説明するために使用される。これらの例は例証的な目的だけを含み、本発明の請求項の限定としては解釈されるべきではない。そのため、以下に記載されている実施例は本出願の範囲を限定せずに発明を説明するものである。
【００５１】
〔実施例１；化合物の化学合成〕
（材料）
本発明の化合物の調製に使用されている以下の誘導体は、文献に記載されている方法に従い調製された：ヘプタキス（６−アジド−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル）シクロマルトヘプタオース（＜１＞）（Ｄｅｆａｙｅ３０ら、国際公開第ＷＯ２００８００９８３１号パンフレット）、ヘプタキス（６−アジド−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル）シクロマルトヘプタオース（＜２＞）（Ｄｅｆａｙｅ３０ら、国際公開第ＷＯ２００８００９８３１号パンフレット）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）プロパルギルアミン（＜３＞）（Wu et al. 2007. J. Org. Chem. 72,2897-2905）、ビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］アミン（Westerberg et al. 1989. J. Med.Chem. 32, 236-243）、及びヘプタキス［６−（２−アミノエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］−シクロマルトヘプタオースヘプタヒドロクロリド（＜５＞）（Diaz-Moscoso et al. 2008. Chem. Commun. 2001-2003）。
【００５２】
３−［ビス−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）アミノ］プロペン（＜４＞）は、下記のようにビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］アミンから調製された。つまり、臭化プロパルギル（０．９０ｍｌ、８．６ｍｍｏｌ、３．０当量）を、ビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］アミン（８７２ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（１．２ｍｌ、８．６ｍｍｏｌ、３．０当量）のＣＨ３ＣＮ（１５ｍｌ）溶液に添加した。そして、混合物を室温において、２時間攪拌した。そして、溶媒を真空下で除去し、残留物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）に溶解し、水（３×３０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。結果得られた残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが３０：１）により精製した。生成量：５６７ｍｇ（５８％）；Ｒｆ＝０．２２（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが５０：１）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ４．９３（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ），３．４２（ｄ，２  Ｈ，４ＪＨ，Ｈ＝２．４Ｈｚ，ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ），３．２０（ｑ，４Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝５．７Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．６４（ｔ，４Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．２０（ｔ，１Ｈ，Ｃ≡ＣＨ），１．４５（ｓ，１８Ｈ，ＣＭｅ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５６．０（ＣＯ），７９．２（Ｃｑ），７７．９（Ｃ≡ＣＨ），７３．４（Ｃ≡ＣＨ），５２．８（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），４１．８（ＨＣ≡ＣＣＨ２），３８．０（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２８．４（ＣＭｅ３）．ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ３６４．２［Ｍ＋Ｎａ］＋，３４２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５３】
プラスミドｐＥＧＦＰ−Ｎ３（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号：Ｕ５７６０９）はＣｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）から入手した。この４７２９塩基対のプラスミドは、赤色偏移した、野生型ＧＦＰの変異体をエンコードしている。プラスミドは、トランスフェクションされたバクテリアから慣習的な工程を用いて精製された（Sterzel et al. 1985. Anal. Biochem. 147, 462-467）。ＤＮＡ濃度は、ヘキスト３３２５８染色を用いて蛍光工程により測定された。
【００５４】
（対応するｔｅｒｔ−ブチルカルバメートの形態で保護されている、剛性スペーサー（式（Ｉ）、Ｘ＝ＣＨ２）を用いた本発明の化合物の前駆体の調製）
ヘプタキス［６−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜６＞）：
Ｃｕｌ（ＥｔＯ）３Ｐ（７１ｍｇ、２００μｍｏｌ、０．３当量）及びＤＩＰＥＡ（０．３４ｍｌ、０，２９ｍｍｏｌ、１当量）を、＜１＞（７６５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及びＮ−ブトキシカルボニルプロパルギルアミン（３、４０５ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ、１．３当量）のアセトン（１０ｍｌ）溶液に添加し、反応混合物を３時間還流した。溶媒を、減圧下において蒸発させ、結果として生じた残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが５０：１から２０：１へと変化）によって精製した。生成量:８７１ｍｇ（８１％）．Ｒｆ０．４７（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが１５：１）；［α］Ｄ＝＋２４．７（ｃ１．０，ＣＨＣｌ３）．１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ７．６２（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．４５（ｓ，７Ｈ，Ｈ−１），５．４０（ｓ，７Ｈ，ＮＨＢｏｃ），５．３８（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝８．０Ｈｚ，Ｈ−３），４．８６（ｄａ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１３．７Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．７５（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝２．１Ｈｚ，Ｈ−２），４．５７（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−６ｂ），４．４８（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−５），４．２９（ｄｄ，７Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１５．２Ｈｚ，ＪＣＨ，ＮＨ＝５．４Ｈｚ，ＣＨａＮＨＢｏｃ），４．１８（ｄｄ，７Ｈ，ＪＣＨ，ＮＨ＝３．０Ｈｚ，ＣＨｂＮＨＢｏｃ），３．５５（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．０Ｈｚ，Ｈ−４），２．３６−２．１３（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．５７（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４０（ｓ，６３Ｈ，ＣＭｅ３），１．３０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），０．９０（ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ１７２．９，１７１．６（ＣＯエステル），１５５．８（ＣＯカルバメート），１４５．２（Ｃ−４トリアゾール），１２４．６（Ｃ−５トリアゾール），９６．４（Ｃ−１），７９．５（Ｃ−４，Ｃｑ），７０．１（Ｃ−３），６９．８（Ｃ−５），６９．６（Ｃ−２），５０．２（Ｃ−６），３６．１（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），３３．８（ＣＨ２ＣＯ），３１．４，３１．２（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２８．３（ＣＭｅ３），２４．３（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．３（ＣＨ２ＣＨ３），１３．８（ＣＨ３）．ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１９０８．１［Ｍ＋２Ｎａ］２＋。
【００５５】
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エトキシアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デトキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜７＞）。
【００５６】
Ｃｕｌ（ＥｔＯ）３Ｐ（１５ｍｇ、４１μｍｏｌ、０．１当量）を、＜１＞（１５６ｍｇ、５８μｍｏｌ）及び３−ビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］アミノプロピン（＜４＞、１８２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ、１．３当量）のアセトン（１０ｍｌ）溶液に添加し、反応混合物を３時間還流した。そして、溶媒を、真空下において蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが３０：１から９：１へと変化）によって精製した。生成量：２５６ｍｇ（８７％）；Ｒｆ＝０．６１（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨが９：１）；［α］Ｄ＝＋２５．９（ｃ１．０，ＣＨ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３２３Ｋ）：δ７．７３（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．４４（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝３．２Ｈｚ，Ｈ−１），５．３６（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝８．７Ｈｚ，Ｈ−３），５．２１（ｓａ，１４Ｈ，ＮＨＢｏｃ）４．９０（ｄａ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１３．６Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．７５（ｄｄ，１４Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６ｂ），４．５１（ｍ，７Ｈ，Ｈ−５），３．７８，３．７４（２ｄ，１４Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１５．６Ｈｚ，ＣＨ２Ｎ），３．５３（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．５Ｈｚ，Ｈ−４），３．１６（ｑ，２８Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝５．６Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．５６（ｔ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．４５−２．１３（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．６０（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４４（ｓａ，１２６Ｈ，ＣＭｅ３），１．３０−１．２０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），０．９４，０．９３（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．２Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝６．８Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３２３Ｋ）：δ１７２．７，１７１．５（ＣＯエステル），１５６．０（ＣＯカルバメート），１４３．６（Ｃ−４トリアゾール），１２５．４（Ｃ−５トリアゾール），９６．５（Ｃ−１），７８．８（Ｃ−４，Ｃｑ），７０．０（Ｃ−３），６９．７（Ｃ−５），６９．３（Ｃ−２），５３．０（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），５０．０（Ｃ−６），４８．０（ＣＨ２Ｎ），３８．５（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），３３．８，３３．５（ＣＨ２ＣＯ），３１．１，３１．０（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２８．３（ＣＭｅ３），２４．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．１（ＣＨ２ＣＨ３），１３．６（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２５５８．２［Ｍ＋２Ｎａ］２＋，１７１３．６［Ｍ＋３Ｎａ］３＋。
【００５７】
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル］シクロマルトヘプタオース（＜８＞）：
ヘプタキス［６−アジド−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル］シクロヘプタキオース（＜２＞、５０ｍｇ、１１μｍｏｌ）、３−ビス［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］アミノプロピン（＜４＞、３４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、１．３当量）、Ｃｕｌ（ＥｔＯ）３Ｐ（３ｍｇ、８μｍｏｌ、０．１当量）及びＮ−エチルジイソプロピルアミン（１３μｌ、８０μｍｍｏｌ、１当量）のアセトン（５ｍｌ）溶液を、６時間還流した。そして、溶媒を、減圧下において蒸発させ、無定形固体を得るために、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが３０：１から９：１へと変化）によって精製した。生成量：６１．３ｍｇ（８０％）であり、［α］Ｄ＝＋２６．２（ｃ０．９，ＣＨ２Ｃｌ２）；Ｒｆ＝０．５１（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが９：１）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３３３Ｋ）：δ７．２８（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．４５（ｓ，７Ｈ，Ｈ−１），５．３８（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．２Ｈｚ，Ｈ−３），５．１９（ｓａ，１４Ｈ，ＮＨＢｏｃ），４．９０（ｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１３．７Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．７５（ｄｄ，１４Ｈ，Ｊ１，２＝３．６Ｈｚ，Ｈ−２，Ｈ−６ｂ），４．５３（ｍ，７Ｈ，Ｈ−５），３．７８（２ｄ，１４Ｈ，２ＪＨａ，Ｈｂ＝１５．７Ｈｚ，ＣＨ２Ｎ），３．５５（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．１Ｈｚ，Ｈ−４），３．１８（ｑａ，２８Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝５．２Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．５８（ｓａ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．４４−２．１５（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．６０−１．５４（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４６（ｓ，１２６Ｈ，ＣＭｅ３），１．３８−１．２９（ｍ，２８０Ｈ，（ＣＨ２）１０），０．９２（ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝６．５Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ１７２．９，１７１．７（ＣＯエステル），１５６．２（ＣＯカルバメート），１４３．６（Ｃ−４トリアゾール），１２５．７（Ｃ−５トリアゾール），９６．６（Ｃ−１），７９．０（Ｃ−４，Ｃｑ），７０．１（Ｃ−３），６９．７（Ｃ−５，Ｃ−２），５３．１（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），５０．１（Ｃ−６），４８．０（ＣＨ２Ｎ），３８．４（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），３４．０，３３．７（ＣＨ２ＣＯ），３１．９（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２），２９．８−２８．９（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２（ＣＨ２）７），２８．５（ＣＭｅ３），２４．６（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．５（ＣＨ３ＣＨ２），１４．０（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２２２８．６［Ｍ＋２Ｎａ＋Ｈ］３＋，１６８１．２［Ｍ＋Ｋ＋２Ｎａ＋Ｈ］４＋。
【００５８】
（ＸがＣＨ２である場合の、式（Ｉ）の、剛性スペーサーを備えたポリカチオン性両親媒性大環式誘導体の調製のための一般的工程（化合物＜９＞〜＜１１＞））
対応するヘプタカルバメート又はテトラデカカルバメート（＜６＞〜＜８＞、３３μｍｏｌ）を、ＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、２ｍｌ）を用いて室温で２時間処理し、溶媒を溜去し、希釈したＨＣｌ溶液において凍結乾燥させることにより、純粋な＜９＞〜＜１１＞を得た。
【００５９】
ヘプタキス［６−（４−アミノメチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース  ヘプタヒドロクロライド（＜９＞）：
化合物＜９＞は、式（Ｉ）に相当し、ｎ＝５であり、Ｒ１基及びＲ２基は、同一であり、共にヘキサノイル（ＣＨ３（ＣＨ２）４ＣＯ−）で表され、ＸはＣＨ２であり、Ｒ４及びＲ５は同一であり、共に水素であり、対応するヘプタヒドロクロライド塩の形態である。
【００６０】
生成量：１０６．４ｍｇ（９９％）；［α］Ｄ＝＋３１．５（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ７．９８（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．４９（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．３Ｈｚ，Ｈ−３），５．４６（ｓ，７Ｈ，Ｈ−１），４．８８（ｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１４．０Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．７８（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝２．１Ｈｚ，Ｈ−２），４．６５（ｓ，７Ｈ，Ｈ−６ｂ），４．５３（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−５），３．９１（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨ２），３．６７（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．５Ｈｚ，Ｈ−４），２．４７−２．２１（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．６４（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．３６（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），０．９４（ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ１７４．３，１７３．４（ＣＯエステル），１４５．５（Ｃ−４トリアゾール），１２６．８（Ｃ−５トリアゾール），９８．１（Ｃ−１），７８．８（Ｃ−４），７１．５（Ｃ−５），７１．１（Ｃ−３，Ｃ−２），５１．６（Ｃ−６），３６．５（ＣＨ２ＮＨ２），３５．０，３４．９（ＣＨ２ＣＯ），３２．５，３２．４（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２５．５（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２３．４（ＣＨ２ＣＨ３），１４．２（ＣＨ３）；（ＥＳＩ）ＭＳ：ｍ／ｚ１０２３．９［Ｍ＋３Ｈ］３＋，１５３５．３［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【００６１】
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース  テトラデカヒドロクロライド（＜１０＞）：
化合物＜１０＞は、式（Ｉ）に相当し、ｎ＝５であり、Ｒ１基及びＲ２基が、同一であり、共にヘキサノイル（ＣＨ３（ＣＨ２）４ＣＯ−）であり、ＸはＣＨ２であり、Ｒ４及びＲ５は、同一であり、共に水素であり、対応するテトラデカヒドロクロライド塩の形態である。
【００６２】
生成量：１３６．４ｍｇ（９９％）；［α］Ｄ＝＋１８．５（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ８．１１（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．６０（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．９Ｈｚ，Ｈ−３），５．５９（ｓ，７Ｈ，Ｈ−１），５．１５（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１５．２Ｈｚ，Ｊ５，６ａ＝２．５Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．５８（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ５，６ｂ＝３．０Ｈｚ，Ｈ−６ｂ），４．５７（ｍ，１４Ｈ，Ｊ１，２＝３．５Ｈｚ，Ｈ−２，Ｈ−５），３．９１，３．８９（２ｄ，１４Ｈ，２ＪＨａ，Ｈｂ＝１５．３Ｈｚ，ＣＨ２Ｎ），３．５４（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．９Ｈｚ，Ｈ−４），３．１５（ｔ，２８Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝６．０Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨ２），２．８３（ｔ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），２．４９−２．１７（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．７３−１．５８（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．３７（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），０．９４，０．９２（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．１Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝６．９Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ１７５．７，１７４．６（ＣＯエステル），１４４．６（Ｃ−４トリアゾール），１２９．７（Ｃ−５トリアゾール），９９．２（Ｃ−１），７９．４（Ｃ−４），７３．０（Ｃ−２），７２．９（Ｃ−５），７１．７（Ｃ−３），５３．０（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），５２．６（Ｃ−６），４８．３（ＣＨ２Ｎ），３９．４（ＣＨ２ＮＨ２），３６．３，３６．２（ＣＨ２ＣＯ），３３．９，３３．７（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２６．８（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２４．７（ＣＨ２ＣＨ３），１５．６（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１８３７［Ｍ＋２Ｈ］２＋，１２２５．０［Ｍ＋３Ｈ］３＋，９１９．０［Ｍ＋４Ｈ］４＋，７３５．４［Ｍ＋５Ｈ］５＋。
【００６３】
ヘプタキス［６−（４−（２，２−ジアミノエチル）アミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ミリストイル］シクロマルトヘプタオース（＜１１＞）：
化合物＜１１＞は、式（Ｉ）に相当し、ｎ＝５であり、Ｒ１基及びＲ２基が、同一であり、共にミリストイル（テトラデカノイル；ＣＨ３（ＣＨ２）１２ＣＯ−）であり、ＸはＣＨ２であり、Ｒ４及びＲ５は、同一であり、対応するテトラデカヒドロクロライド塩の形態である。
【００６４】
生成量;１７８．８ｍｇ（９９％）；［α］Ｄ＝＋３０．７（ｃ０．９，ＣＨ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ８．１２（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．６１（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．３Ｈｚ，Ｈ−３），５．６０（ｓ，７Ｈ，Ｈ−１），５．１３（ｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１３．９Ｈｚ，Ｈ−６ａ），４．９７（ｄ，７Ｈ，Ｈ−６ｂ），４．５７（ｍ，１４Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−５），３．９０（２ｄ，１４Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１５．３Ｈｚ，ＣＨ２Ｎ），３．５５（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝９．２Ｈｚ，Ｈ−４），３．１６（ｔ，２８Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝５．５Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨ２），２．８２（ｔ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），２．５０−２．１５（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．８０−１．５５（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．５０−１．２５（ｍ，２８０Ｈ，ＣＨ３（ＣＨ２）１０ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），０．９３（ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ１７２．９，１７１．８（ＣＯエステル），１４２．０（Ｃ−４トリアゾール），１２６．９（Ｃ−５トリアゾール），９６．６（Ｃ−１），７６．７（Ｃ−４），７０．４（Ｃ−５，Ｃ−２），６９．１（Ｃ−３），５０．４（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），４９．９（Ｃ−６），４５．７（ＣＨ２Ｎ），３６．７（ＣＨ２ＮＨ２），３３．６（ＣＨ２ＣＯ），３１．７，２９．８−２９．１，２２．３（ＣＨ３（ＣＨ２）１０ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２４．６，２４．５（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１３．０（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２６２２．０［Ｍ＋２Ｈ］２＋，１７４８．４［Ｍ＋３Ｈ］３＋，１３１１．７［Ｍ＋４Ｈ］４＋，１０４９．７［Ｍ＋５Ｈ］５＋。
【００６５】
（Ｘが−ＣＨ２Ｓ（ＣＨ２）２-である場合の、式（Ｉ）の、軟質スペーサーを備える本発明の化合物の前駆物質の調製（化合物＜１２＞〜＜１５＞））
ヘプタキス［６−（２−クロロアセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１２＞）：
Ａｒ雰囲気下で、ＤＭＡＰ（２７０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、２当量）を、ヘプタヒドロクロライド＜５＞（５００ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のドライＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液に分包的に添加し、混合物を１５分間攪拌した。そして、クロロ酢酸無水物を添加し（５７０ｍｇ、３，３６ｍｍｏｌ、３当量）、反応を室温において夜通し攪拌して行わせた。そして、溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、わずかに酸性の水（３×２０ｍｌ）、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（３×２０ｍｌ）および水（３×２０ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、ろ過し、濃縮した。そして、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが３０：１）によって精製した。生成量：３２５ｍｇ（５９％）；Ｒｆ＝０．５３（９：１ｏｆＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ）；［α］Ｄ＝＋８０．３（ｃ１．０，ＣＨ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ，３１３Ｋ）δ５．３５（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．５Ｈｚ，Ｈ−３），５．１４（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝４Ｈｚ，Ｈ−１），４．８０（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−２）４．２１（ｍ，７Ｈ，Ｊ４，５＝９．０Ｈｚ，Ｊ５，６ａ＝２．５Ｈｚ，Ｊ５，６ｂ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−５）４．１１（２ｄ，１４Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１５．０Ｈｚ，ＣＨ２Ｃｌ），３．８２（ｔ，７Ｈ，Ｈ−４），３．５５（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．１６（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１４．０Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．１０（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−６ｂ），２．８５（２ｄｔ，１４Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１３．５Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝６．５Ｈｚ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），２．４３−２．１７（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．７０−１．５７（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．３６−１．２９（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ３），０．９２（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．０Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）δ１７３．３，１７１．７（ＣＯエステル），１６６．５（ＣＯアミド），９６．６（Ｃ−１），７８．６（Ｃ−４），７１．３（Ｃ−５），７０．５（Ｃ−２）７０．３（Ｃ−３），４２．７（ＣＨ２Ｃｌ），３９．４（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３４．１，３３．８（ＣＨ２ＣＯ，Ｃ−６），３２．９（ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），３１．４，３１．３（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２４．３（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．３（ＣＨ２ＣＨ３），１３．８（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１１７５．３［Ｍ＋３Ｎａ］３＋，１７５２［Ｍ＋２Ｎａ］２＋，３４７７．７［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００６６】
ヘプタキス［６−（２−アジドアセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１３＞）：
Ａｒ雰囲気下で、ＮａＮ３（４３ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ、３当量）を、＜１２＞（１０９ｍｇ、３１μｍｏｌ）のドライＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液に添加し、混合物を夜通し攪拌した。そして、溶媒を真空下で蒸発させ、残留物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、水（３×１５ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。結果として得られた残留物を、カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが５０：１から３０：１へと変化）によって精製した。生成量：９３．２ｍｇ（８９％），Ｒｆ＝０．４８（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨが９：１），［α］Ｄ＝＋９４．０（ｃ１．０，ＣＨ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ５．３４（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．６Ｈｚ，Ｈ−３），５．１２（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１），４．８０（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−２）４．１７（ｍ，７Ｈ，Ｈ−５）４．０２（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｎ３），３．８２（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．７Ｈｚ，Ｈ−４）３．５１（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．１０（ｍ，１４Ｈ，Ｈ−６ａ，Ｈ−６ｂ），２．８２（２ｄｔ，１４Ｈ，２ＪＨ，Ｈ＝１３．８Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），２．４４−２．１２（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ）１．６２−１．５５（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．３４−１．３０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ３），０．９２（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝１１．１Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝１１．４Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）δ１７３．７，１７２．０（ＣＯエステル），１６７．７（ＣＯアミド），９６．７（Ｃ−１），７８．８（Ｃ−４），７１．５（Ｃ−５），７０．８（Ｃ−２），７０．５（Ｃ−３），５２．８（ＣＨ２Ｎ３），３９．２（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３４．３，３４．１（ＣＨ２ＣＯ），３３．８（Ｃ−６），３３．１（ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），３１．７，３１．６（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２４．７（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．７（ＣＨ２ＣＨ３），１４．２（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１７７４．６［Ｍ＋２Ｎａ］２＋。
【００６７】
ヘプタキス［６−（２−（４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１４＞）：
（ＥｔＯ）３ＰＣｕｌ（３ｍｇ、９μｍｏｌ、０．１当量）及びＤＩＰＥＡ（１５μｌ、９０μｍｏｌ、１当量）を、＜１３＞（４５ｍｇ、１３μｍｏｌ）及び＜３＞（４０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１．３当量）のアセトン（５ｍｌ）溶液に添加し、混合物を４時間還流した。そして、溶媒を、減圧下で蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨが２０：１から９：１へと変化）によって精製した。生成量：５３ｍｇ（８９％），Ｒｆ＝０．４（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨが９：１）；［α］Ｄ＝＋６７．６（ｃ１．０，Ｈ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ，３２３Ｋ）δ７．９０（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．３２（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝８．５Ｈｚ，Ｈ−３），５．１５（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１），５．１３（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＣＯＮＨ），４．８７（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−２），４．３４（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），４．２８（ｍ，７Ｈ，Ｈ−５），３．８４（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝８．０Ｈｚ，Ｈ−４），３．５４（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．４０（ｍ，７Ｈ，Ｈ−６ａ），３．０８（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１３．９Ｈｚ，Ｊ５，６ｂ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−６ｂ），２．８８（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），２．５０−２．２２（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．７０−１．５７（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４２（ｓ，６３Ｈ，ＣＭｅ３），１．４０−１．３０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ３），０．９６，０．９５（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１７４．５，１７３．３（ＣＯエステル），１６７．９（ＣＯアミド），１５８．１（ＣＯカルバメート），１４７．４（Ｃ−４トリアゾール），１２５．７（Ｃ−５トリアゾール），９８．３（Ｃ−１），８０．６（Ｃ−４，Ｃｑ），７２．９（Ｃ−５），７２．１（Ｃ−３），７１．６（Ｃ−２），５３．４（ＣＨ２ＣＯＮＨ），４０．７（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３７．０（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），３５．１（ＣＨ２ＣＯ），３２．６，３２．５（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ，Ｃ−６），２８．９（ＣＭｅ３），２５．５（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２３．４（ＣＨ２ＣＨ３），１４．４（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：（ｍ／ｚ）４６０６．９［Ｍ＋Ｎａ］＋，２３１７．９［Ｍ＋２Ｎａ］２＋，１５５２．２［Ｍ＋３Ｎａ］３＋。
【００６８】
ヘプタキス［６−（２−（４−（２，２−ビス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１５＞）：
Ｃｕｌ（ＥｔＯ）３Ｐ（４ｍｇ、１０μｍｏｌ、０．１当量）及びＤＩＰＥＡ（１７μｌ、０．１ｍｍｏｌ、１当量）を、＜１３＞（４８ｍｇ、１４μｍｏｌ）及び＜４＞（４４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、１．３当量）のアセトン（５ｍｌ）溶液に添加し、反応混合物を３時間還流した。そして、溶媒を、真空下で除去し、＜１５＞を得るために、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨが３０：１から９：１へと変化）によって精製した。生成量：６５ｍｇ（７９％），Ｒｆ＝０．３６（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨが９：１）；［α］Ｄ＝＋５１．５（ｃ１．０，ＣＨ２Ｃｌ２）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ７．８１（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．３４（ｓ，１４Ｈ，ＮＨＢｏｃ）５．２６（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝７．９Ｈｚ，Ｈ−３），５．１０（ｍ，２１Ｈ，ＣＨ２ＣＯＮＨ，Ｈ−１），４．７６（ｄａ，７Ｈ，Ｈ−２），４．１４（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−５），３．８１（ｓａ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），３．７２（ｔａ，７Ｈ，Ｊ４，５＝６．９５Ｈｚ，Ｈ−４），３．４４（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．１８（ｓａ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．９８（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−６ａ），２．８０（ｓａ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），２．７３（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−６ｂ），２．５８（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．４２−２．１０（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．６５−１．５０（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４２（ｓ，１２６Ｈ，ＣＭｅ３），１．３８−１．２０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ３），０．９５−０．８４（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．３Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３１３Ｋ）：δ１７３．４，１７１．６（ＣＯエステル），１６６．０（ＣＯアミド），１５６．３（ＣＯカルバメート）１４４．１（Ｃ−４トリアゾール），１２５．１（Ｃ−５トリアゾール），９６．６（Ｃ−１），７９．１（Ｃ−４，Ｃｑ），７１．４（Ｃ−５），７０．４（Ｃ−３，Ｃ−２），５３．３（ＣＨ２ＣＯＮＨ），５２．４（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），４８．３（ＣＨ２Ｎ），３９．４（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３８．４（ＣＨ２ＮＨＢｏｃ）３４．０，３３．８（ＣＨ２ＣＯ），３２．９（Ｃ−６，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），３１．３，３１．２（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２８．５（ＣＭｅ３），２４．３（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．３（ＣＨ２ＣＨ３），１３．８（ＣＨ３）；ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２９６９．７［Ｍ＋２Ｎａ］２＋，２９５９．０［Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ］２＋。
【００６９】
（Ｘが−ＣＨ２Ｓ（ＣＨ２）２−である場合の、式（Ｉ）の、軟質スペーサーを備えたポリカチオン性両親媒性大環式誘導体の調製のための一般的工程（化合物＜１６＞及び＜１７＞））
対応するヘプタカルバメート又はテトラデカカルバメート（＜１４＞又は＜１５＞、１９μｍｏｌ）を、ＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、２ｍｌ）を用いて室温で２時間処理し、溶媒を溜去し、希釈したＨＣｌ溶液において凍結乾燥させることにより、純粋な＜１６＞及び＜１７＞を得た。
【００７０】
ヘプタキス［６−（２−（４−アミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１６＞）：
化合物＜１６＞は、式（Ｉ）に相当し、ｎ＝５、Ｒ１基及びＲ２基は、同一であり、共にヘキサノイル（ＣＨ３（ＣＨ２）４ＣＯ−）で表され、ＸはＣＨ２Ｓ（ＣＨ２）２であり、Ｒ４及びＲ５は同一であり、共に水素であり、対応するヘプタヒドロクロライド塩の形態である。
【００７１】
生成量７２ｍｇ（９１％）,［α］Ｄ＝＋２２．１（ｃ０．８，ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３２３Ｋ）：δ８．２１（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．３４（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝７．９Ｈｚ，Ｈ−３），５．２６（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＣＯＮＨ），５．１６（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝３．２Ｈｚ，Ｈ−１），４．８５（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−２），４．３３（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨ２），４．２９（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−５），３．８７（ｔ，７Ｈ，Ｊ４，５＝７．９Ｈｚ，Ｈ−４），３．５４（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．４２（ｄａ，７Ｈ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１１．４Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．１２（ｄｄ，７Ｈ，Ｊ５，６ｂ＝４．３Ｈｚ，Ｈ−６ｂ），２．９１（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ），２．５０−２．２０（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．６５（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４５−１．３０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３，ＣＨ２ＣＨ３），１．００−０．９２（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝７．３Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝６．９Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００．３ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ１７３．３，１７１．９（ＣＯエステル），１６６．３（ＣＯアミド），１３９．７（Ｃ−４トリアゾール），１２６．０（Ｃ−５トリアゾール），９６．８（Ｃ−１），７９．２（Ｃ−４），７１．２（Ｃ−５），７０．４（Ｃ−３），７０．１（Ｃ−２），５１．８（ＣＨ２ＣＯＮＨ），３９．１（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３４．９（ＣＨ２ＮＨ２），３３．６（ＣＨ２ＣＯ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ，Ｃ−６），３１．５，３１．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），２４．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２２．０（ＣＨ２ＣＨ３），１３．０，１２．８（ＣＨ３）。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ１９７６．６［Ｍ＋２Ｎａ］２＋，１３１７．８［Ｍ＋３Ｎａ］３＋，９８８．１［Ｍ＋２Ｈ＋２Ｎａ］４＋。
【００７２】
ヘプタキス［６−（２−（４−（２，２−ジアミノエチルアミノメチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）アセトアミドエチルチオ）−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ヘキサノイル］シクロマルトヘプタオース（＜１７＞）:
化合物＜１７＞は、式（Ｉ）に相当し、ｎ＝５、Ｒ１基及びＲ２基は同一であり、共にヘキサノイル（ＣＨ３（ＣＨ２）４ＣＯ−）で表され、ＸはＣＨ２Ｓ（ＣＨ２）２であり、Ｒ４及びＲ５は２−アミノエチル（ＮＨ２（ＣＨ２）２）であり、対応するヘプタヒドロクロライド塩の形態である。
【００７３】
生成量は８１．０ｍｇ（９１％）。［α］Ｄ＝＋３９．６（ＭｅＯＨにおいて、ｃ１．０）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ８．０５（ｓ，７Ｈ，＝ＣＨ），５．３６（ｔ，７Ｈ，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝８．７Ｈｚ，Ｈ−３）５．２１（ｓ，１４Ｈ，ＣＨ２ＣＯＮＨ），５．１７（ｄ，７Ｈ，Ｊ１，２＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１），４．８３（ｄｄ，７Ｈ，Ｈ−２），４．２１（ｓａ，７Ｈ，Ｈ−５），３．９０（ｓａ，２１Ｈ，ＣＨ２Ｎ，Ｈ−４），３．５２（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３．１５（ｔ，１４Ｈ，ＣＨ２ＮＨ２，３ＪＨ，Ｈ＝５．５Ｈｚ），３．１１（ｍ，７Ｈ，Ｈ−６ａ），２．８８（ｍ，２１Ｈ，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ，Ｈ−６ｂ），２．８４（ｔ，７Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），２．５０−２．２２（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），１．７３−１．５８（ｍ，２８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），１．４３−１．３０（ｍ，５６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３），０．９９−０．９１（２ｔ，４２Ｈ，３ＪＨ，Ｈ＝６．９Ｈｚ，３ＪＨ，Ｈ＝５．８Ｈｚ，ＣＨ３）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３１３Ｋ）：δ１７６．０，１７４．７（ＣＯエステル），１６９．２（ＣＯアミド），１４５．４（Ｃ−４トリアゾール），１２８．５（Ｃ−５トリアゾール），９９．５（Ｃ−１），８１．８（Ｃ−４），７４．５（Ｃ−５），７３．０（Ｃ−３，Ｃ−２），５４．４（ＣＨ２ＣＯＮＨ），５３．４（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），４９．１（ＣＨ２Ｎ），４２．０（ＣＨ２ＮＨｃｙｓｔ），３９．６（ＣＨ２ＮＨ２）３６．４，３６．３（ＣＨ２ＣＯ），３３．８，３３．７（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），３２．０（Ｃ−６，ＣＨ２Ｓｃｙｓｔ）２６．８（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ），２４．７（ＣＨ２ＣＨ３），１５．７，１５．６（ＣＨ３）．
【００７４】
（マクロファージ細胞膜に存在するマンノース／フコースレセプターによって生物学的に認識され得るリガンドとしての、マンノース単位の組み込み）
【００７５】
【化３】
2012523489.tif 000004
【００７６】
２−エチル−イソチオシアネート  α−Ｄ５−マンノピラノシド（＜１０＞におけるＮＨ２基に対して０．０５、０．１５、０．３０又は０．５０当量に一致する２．２ｍｇ、６．７ｍｇ、１３．３ｍｇ又は２２．３ｍｇ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を、化合物＜１０＞（５０ｍｇ、１２μｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（４７μｌ、０．３４ｍｍｏｌ、２当量）の乾燥ＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に添加し、混合物を室温で夜通し攪拌した。この時間が経過した時点で、溶媒を真空下で除去し、結果として生じた残留物を、溶離液として水が用いて、ゲル−排除クロマトグラフィー（Ｓｅｐａｄｅｘ  Ｇ−２５）によって精製した。白い泡としてマンノースに組み込む対応する付加物を得るために、精製した生成物を０．１Ｎ  ＨＣＬで希釈し、凍結乾燥した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，３２３Ｋ）δ８．６０−８．４０（ｍ，＝ＣＨ），５．８０−５．６０（ｍ，Ｈ−１，Ｈ−３），５．３０−５．００（ｍ，Ｈ−６ａ，Ｈ−６ｂ），５．００−４．５０（Ｈ−２，Ｈ−５，Ｈ−１’），４．２０−３．６０（ＣＨ２−トリアゾール，Ｈ−４，Ｈ−２’，ＣＨａＯ，Ｈ−６ａ’，Ｈ−３’，ＣＨｂＯ，ＣＨ２ＮＨＣＯ，Ｈ−６ｂ’，Ｈ−４ｍ，Ｈ−５’），３．５０−２．９０（ＣＨ２ＮＨ２，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），２．７０−２．３０（ＣＯＣＨ２），１．７９（ＣＯＣＨ２ＣＨ２），１．５０（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），１．０７（ＣＨ３）。
【００７７】
（ＥＳＩ−ＭＳデータ（添加試薬のパーセンテージの関数として組み込まれている、マンノース単位の数「ｍ」が示されている）
５％試薬について、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ７３５．６［Ｍ＋５Ｈ］５＋，９１８．８［Ｍ＋４Ｈ］４＋，９４４．６［Ｍ＋２Ｋ＋Ｎａ＋Ｈ］４＋，９８５．３［Ｍ（１ｍ）＋５Ｈ］５＋，１０５１．８［Ｍ（２ｍ）＋４Ｈ］４＋，１２２５［Ｍ＋３Ｈ］３＋，１３１３．４［Ｍ（１ｍ）＋３Ｈ］３＋。
【００７８】
１５％試薬について、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ７３５．４［Ｍ＋５Ｈ］５＋，１０５２［Ｍ（２ｍ）＋４Ｈ］４＋，１１１８．１［Ｍ（３ｍ）＋４Ｈ］４＋，１４０１．７［Ｍ（２ｍ）＋３Ｈ］３＋，１４９０．１［Ｍ（３ｍ）＋３Ｈ］３＋。
【００７９】
３０％試薬について、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ［Ｍ（３ｍ）＋５Ｈ］５＋，９４６．９［Ｍ（４ｍ）＋５Ｈ］５＋，１０５１［Ｍ（２ｍ）＋４Ｈ］４＋，１１１６．５［Ｍ（３ｍ）＋４Ｈ］４＋，１１８３．１［Ｍ（４ｍ）＋４Ｈ］４＋，１２４９．６［Ｍ（５ｍ）＋４Ｈ］４＋，１４００．２［Ｍ（２ｍ）＋３Ｈ］３＋，１５７７［Ｍ（４ｍ）＋３Ｈ］３＋，１６６４．８［Ｍ（５ｍ）＋３Ｈ］３＋。
【００８０】
５０％試薬について、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ［Ｍ（６ｍ）＋５Ｈ］５＋，１１０６．９［Ｍ（７ｍ）＋５Ｈ］５＋，［Ｍ（６ｍ）＋４Ｈ］４＋，１３８２．９［Ｍ（７ｍ）＋４Ｈ］４＋，１４４９．４［Ｍ（８ｍ）＋４Ｈ］４＋，１５１５．９［Ｍ（９ｍ）＋４Ｈ］４＋。
【００８１】
〔実施例２：ポリカチオン性両親媒性大員環とプラスミドＤＮＡとの複合体の調製〕
（ポリカチオン性両親媒性βＣＤ（シクロデキストリン）誘導体及びプラスミドｐＥＧＤＰ−Ｎ３からの複合体の調製）
ＤＮＡ複合体の調製及びトランスフェクション分析のため使用されるプラスミドｐＥＧＦＰ−Ｎ３は、４７２９−ｂｐ（塩基対）プラスミドである。使用されるポリカチオン性両親媒性βＣＤ誘導体の量を、選択されたＣＤ誘導体における望ましいＤＮＡ濃度、０．０２ｍｇ／ｍｌ（５０μＭ  リン酸塩）、Ｎ／Ｐ比、分子量及び正電荷の数に基づいて計算した。Ｎ／Ｐ比が５、１０、３０及び５０において、実験を行った。ＤＮＡを、５０μＭの最終リン酸塩濃度まで、ミリＱ水において希釈し、次に、望ましい量のＣＤ誘導体を、２０−ｍｇ／ｍｌ溶液（１：２のＭｅ２ＳＯおよび水）から添加した。調製液をボルテックスで数分間攪拌し、３０分間培養した。
【００８２】
〔実施例３：新規ポリカチオン性ＣＤの特性分析〕
ｐＤＮＡを複合体化し、保護し、トランスフェクションさせる新規ポリカチオン性両親媒性ＣＤの能力を、ゲル電気泳動シフトアッセイ、ＤＮａｓｅの作用に対する保護アッセイ、及び真核細胞におけるプラスミドｐＥＧＦＰのトランスフェクション効率の分析により分析した。詳細を以下に示す。
【００８３】
（ゲル電気泳動遅延時間アッセイ（Gel electrophoresis lag-time assay））
ポリカチオン性両親媒性ＤＮＡ−βＣＤ複合体の結合能力を、ゲル電気泳動によって分析した。βＣＤ誘導体のストック溶液を、１：２のＭｅ２ＳＯおよび水によって調製し、ＤＮＡを１５０ｍＭ  ＮａＣｌ溶液に溶解させた。ｐＥＧＦＰ−Ｎ３のＤＮＡ（０．１μｇ／μｌで１０μｌ）を、０から１０の範囲のＮ／Ｐ比率を用いて、同容量のβＣＤ誘導体に混合し、室温で３０分間培養した後に、ローディングバッファー（２μｌ）を添加した。各サンプルの一分割単位（５μｌ）について、ＴＡＥバッファー（４０ｍＭ  トリス酢酸塩、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中でのアガロースゲル電気泳動（０．８％  ｗ／ｖ）を行った。電気泳動は、７Ｖ／ｃｍで行った。電気泳動後に、ゲルを臭化エチジウムで着色した。そして、バンドの濃度の数量化を、ＮＩＨイメージソフトウェア（Rasband et al. 1995. Microbeam Analysis Soc. J. 4, 137-149）を用いて行った。なお、ネイキッドＤＮＡのバンドの濃度に１００の値を割り当てた。
【００８４】
（ＤＮａｓｅ保護アッセイ）
ｐＥＧＦＰ−Ｎ３のＤＮＡ（０．１μｇ／μｌで１０μｌ）を、Ｎ／Ｐ＝５の条件を用いて、同容量のβＣＤ誘導体のストック溶液に混合し、室温で３０分間培養した。１５μｌのＤＮａｓｅＩ溶液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中に０．１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ８、２０００Ｕ／ｍｇ）を混合物に添加し、３７℃で４５分間培養した。酵素分解の後、２０μｌの１０％ＳＤＳ溶液を添加し、サンプルを８５℃で２時間培養した。最終的に、各サンプル一分割単位（２０μｌ）において、ＴＡＥバッファーでのアガロースゲル電気泳動（０．８％  ｗ／ｖ）を行った。
【００８５】
（細胞培養、及びＤＮＡトランスフェクションアッセイ）
野生型のチャイニーズハムスター（ＣＨＯ−ｋ１;番号ＡＴＣＣ  ＣＣＬ−６１）の卵巣細胞を、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で培養した。培地には、１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清、２ｍＭのグルタミンプラス、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン及び０．１μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを添加しておいた。トランスフェクションに先だって、細胞をウェルプレートに播種し、２４時間培養することにより、細胞集密が８０〜９０％に達するようにした。トランスフェクション実験のため、プラスミドｐＥＧＦＰ−Ｎ３（１μｇ）を、対応するＣＤ誘導体と混合した。混合は、０．１から２０の範囲のＮ／Ｐ比で、室温にて２０分間行い、最終容量を２０μｌとした。混合物を、血清を含まないＤＭＥＭによって０．５ｍｌまで希釈し、各ウェルに添加した。非トランスフェクト細胞及びネイキッドｐＥＧＦＰ−Ｎ３をネガティブコントロールとして使用した。ポジティブコントロールとして、１μｌのリポフェクトアミン（商標）２０００（インビトロジェン）及び１．０μｇのＤＮＡを用いて、製造者の指示に従い、トランスフェクション実験を行った。そして、細胞を、ＤＮＡ−ポリカチオン性両親媒性βＣＤ混合物と共に、１８時間培養した。続いて、トランスフェクション培地を除去し、１０％ＦＢＳを加えたＤＭＥＭによって、さらに４８時間、細胞を培養した。
【００８６】
（蛍光測定及びタンパク質アッセイ）
トランスフェクションされた細胞を、ＰＢＳ及び６００μｌの０．５％トリトンＸ−１００  ＰＢＳ溶液を用いて三回洗浄した。プレートを室温において１０分間攪拌し、溶解物を回収した。そして、蛍光を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＲＦ−５３０１ＰＣ蛍光光度計を用いて、４６０ｎｍ（５ｎｍ）の励起波長及び５１０ｎｍ（１０ｎｍ）の発光波長にて数量化した。また、タンパク質濃度を、Ｂｉｏ−Ｒａｄタンパク質アッセイ（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用いて測定した。
【００８７】
様々なＮ／Ｐ値（プラスミドにおけるリン酸塩基数に対する、ＣＤ担体におけるプロトン化可能な窒素数の割合）における、新規ポリカチオン性両親媒性ＣＤの、ｐＤＮＡ（ＧＦＰをエンコードするｐＥＧＦＰ−Ｎ３プラスミド）との複合体形成能についてのデータ、対応する複合体における、ＤＮａｓｅの作用に対するプラスミドの保護の程度、及び、トランスフェクション（ＣＨＯ−ｋ１細胞）を促進する効率を、図３、４及び５にそれぞれ示す。単一の面のみが変性されたβＣＤ誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）は、本発明のポリカチオン性両親媒性大員環とｐＤＮＡとの間の相互作用における両親媒性の影響を評価するためのコントロール化合物として使用した。ｐＤＮＡのコンパクト化、及びＤＮａｓｅによる分解に対する保護において、樹枝状構造（＜１９＞）はヘプトアミン誘導体（＜１８＞）より効率的であったが、両者とも、遺伝子導入を十分な程度まで促進することはできなかった。
【００８８】
【化４】
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【００８９】
テトラデカヘキサノイル化されたヘプタカチオン性誘導体（＜９＞）は、非両親媒性の類似化合物（＜１８＞）に比べて、向上したｐＤＮＡとの複合体形成能力を示した。それにもかかわらず、プラスミドは、対応する＜９＞とｐＤＮＡとの複合体においても、依然ＤＮａｓｅ感受性であり、トランスフェクションレベルは低いままである。両親媒性によって与えられる利点は、一連の枝分かれしたポリカチオン性両親媒性誘導体（＜１９＞、＜１０＞及び＜１１＞）において比較した際により明確になる。化合物＜１０＞は、ヘキサノナート鎖を有しており、Ｎ／Ｐ値が４より高い環境に対してｐＤＮＡを確実に完全に保護する＜１０＞とｐＤＮＡとの複合体をもたらす。さらに、それら複合体は、リポフェクトアミン（商標）２０００により得られたものと同等の、非常に高いトランスフェクション効率を示した。ヘキサノナートからテトラデカノナートへのアシル鎖の長さの増加は、＜１１＞のデータに示されるように、複合体形成効率に影響がなかったが、トランスフェクション能力を大きく減少させた。これは、疎水性および親水性のバランスを調整可能であることの重要性（ポリカチオン性両親媒性ＣＤ−ＤＮＡナノ粒子の形成を最適化するためだけでなく、細胞内への移行および遺伝子発現を行うさらなる工程のためにも重要であること）を強調する。式（Ｉ）の化合物におけるこの調整の容易さ及び有効性が、本発明の重要な特徴である。
【００９０】
化合物＜１６＞及び＜１７＞は、＜１０＞及び＜１１＞のβＣＤの第一面及び第二面におけるポリアミノトリアゾール／テトラデカ−Ｏ−ヘキサノイルの修飾をそれぞれ再現する。しかし、化合物＜１６＞及び＜１７＞は、大環状コアとトリアゾール環との間にスペーサーアームを組み込む。これは、そのシステムにより大きな柔軟性をもたらす。対応するデータの分析は、＜１６＞とｐＤＮＡとの複合体の安定性、ＤＮａｓｅの作用に対する保護の効率性、及びＤＮＡトランスフェクションの効率性が、対応する＜１０＞とｐＤＮＡとの複合体に比べて、穏やかに向上していることを示した。意外にも、＜１１＞及び＜１７＞についてのデータは、同様の傾向を示さなかった。この場合において、剛性モチーフは柔軟性構造よりも有利であった。
【００９１】
以上のように、示された実施例は、分子及び生体分子（特に、核酸のようなポリアニオン性の化合物）の細胞の内部への移送システムとして、本発明のポリカチオン性両親媒性大員環の有用性を説明している。本発明において重視すべき点は、本発明のポリカチオン性両親媒性大員環が、非常に効果的な合成工程を組み合わせることによって調整され得ることである。当該合成工程は十分に均一な大員環を入手可能にする。上記実施例において説明された、分子多様性を目指す双方向的な戦略は、構造活性及び最適化研究を実行するのに特に適している。示されているように、分子の柔軟性、電荷密度並びに疎水性及び親水性バランスは、本発明の化合物において正確に調製され得る臨界パラメータである。
【図面の簡単な説明】
【００９２】
【図１】剛性ポリカチオン性両親媒性βＣＤ誘導体＜９＞〜＜１１＞の合成を模式的に説明する図である。
【図２】柔軟性ポリカチオン性両親媒性βＣＤ誘導体＜１６＞及び＜１７＞の合成を模式的に説明する図である。
【図３】（ａ）Ｎ／Ｐ比を漸増させたときの、ｐＤＮＡに対する、両親媒性のβＣＤ誘導体（＜９＞〜＜１１＞、＜１６＞及び＜１７＞）、及び非両親媒性のβＣＤ誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）の結合性を示すゲル電気泳動シフトアッセイ、並びに（ｂ）バンドの濃さの数量化を説明する図である。
【図４】ポリカチオン性両親媒性シクロデキストリン（＜９＞〜＜１１＞、＜１６＞及び＜１７＞）と複合体化され、ＤＮａｓｅＩによって処置されているｐＤＮＡサンプルに対応する、弛緩型の超ねじれ構造のｐＤＮＡの電気泳動バンドの合計の相対強度（非処置ｐＤＮＡの値を１００とする）の数量化を表す図である。データは平均値の標準偏差を示す（ｎ＝４）。非両親媒性の誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）についてのデータが、比較のために含められている。
【図５】ｐＤＮＡと＜９＞〜＜１１＞，＜１６＞および＜１７＞との複合体のＣＨＯ−ｋ１細胞へのインビトロ遺伝子導入の効率性を、ポリカチオン性の非両親媒性の誘導体（＜１８＞及び＜１９＞）由来の複合体、リポフェクタミン（商標）２０００（ＬＰ）をベースとしたポリプレックス、及びネイキッドＤＮＡ（コントロール）と比較して示す図である。データは平均値の標準偏差を示す（ｎ＝８）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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