【手続補正書】
【提出日】平成21年2月26日(2009.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．ＴＶＥＭＦバイオリアクタの培養チャンバ内に、末梢血ＣＤ３４＋幹細胞を含有する末梢血混合物を配置する工程と；
ｂ．ＴＶＥＭＦ拡張された末梢血幹細胞組成を調製するために、前記培養チャンバを前記長手方向の中心軸の周りを回転させ、前記末梢血混合物にＴＶＥＭＦを受けさせることにより、前記末梢血ＣＤ３４＋幹細胞をＴＶＥＭＦ拡張する工程と、を含有するＴＶＥＭＦ拡張された末梢血幹細胞組成を調製するプロセス。
【請求項２】
前記ＴＶＥＭＦが、約０．０５〜約６．０ガウスであることを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項３】
ＴＶＥＭＦ拡張された末梢血ＣＤ３４＋幹細胞の数が、前記ＴＶＥＭＦバイオリアクタ内に配置された末梢血ＣＤ３４＋幹細胞の数の７倍よりも多くなるまで、前記ＴＶＥＭＦ拡張が継続されることを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項４】
前記末梢血混合物へ前記末梢血を添加するのに先立って、末梢血貯蔵設備から解凍された低温保存末梢血を集めることをさらに含有する、請求項１にかかるプロセス。
【請求項５】
ＴＶＥＭＦ拡張に先立って、前記末梢血混合物から有毒物質を除去する工程をさらに含有する、請求項１にかかるプロセス。
【請求項６】
前記末梢血混合物における唯一の細胞は、末梢血幹細胞であることを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項７】
前記末梢血ＣＤ３４＋幹細胞が、他の末梢血成分から分離されていることを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項８】
前記末梢血混合物が、他の末梢血成分から分離されたバッフィーコートをさらに含有することを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項９】
前記末梢血混合物が、赤血球を含まない末梢血を含有することを特徴とする、請求項１にかかるプロセス。
【請求項１０】
ＴＶＥＭＦ拡張された末梢血ＣＤ３４＋幹細胞、および、請求項１にかかるプロセスによって調製された許容可能なキャリアを含有する組成。
【請求項１１】
請求項１０の組成であって、
前記許容可能なキャリアが、プラズマ(plasma)、血液、アルブミン、細胞培養培地、バッファおよび低温保存薬から成る群の少なくとも一つであり；
前記組成が、さらに、任意で、成長因子、銅キレート剤、およびホルモンの少なくとも一つを含有することを特徴とする、組成。
【請求項１２】
前記成長因子が存在する場合はＧ−ＣＳＦであり、前記銅キレート剤が存在する場合はＤ−ペニシラミンであることを特徴とする、請求項１１の組成。
【請求項１３】
６０〜８０％アミノ酸−グルコース溶液中の、２０〜４０％ジメチルスルホキシド溶液；１５〜２５％ヒドロキシエチルでんぷん溶液；４〜６％グリセロール、３〜５％グルコースおよび６〜１０％デキストランＴ１０；１５〜２５％ポリエチレングリコール；および７５〜８５％アミノ酸−グルコース溶液、から成る群から選択される低温保存薬の総量を、前記組成が含有することを特徴とする、請求項１１にかかる組成。
【請求項１４】
前記組成が、有毒物質を含まないことを特徴とする、請求項１１の組成。
【請求項１５】
治療上効果がある量の、請求項１のＴＶＥＭＦ拡張された末梢血ＣＤ３４＋幹細胞および薬剤として許容可能なキャリアを含有する組成を哺乳類に投与する工程を含有する、哺乳類の組織を治療する方法。
【請求項１６】
治療される組織が、人間の組織であることを特徴とする、請求項１５の方法。
【請求項１７】
ＴＶＥＭＦ拡張される前の前記末梢血幹細胞の源が、哺乳類であることを特徴とする、請求項１５の方法。
【請求項１８】
治療される組織が、肝臓組織、心臓組織、造血組織、血管、皮膚組織、筋肉組織、腸組織、膵臓組織、中枢神経系細胞、骨、軟骨組織、結合組織、肺の組織、脾臓組織および脳組織から成る群から選択される少なくとも一つであることを特徴とする、請求項１５の方法。
【請求項１９】
哺乳類へ投与されるＴＶＥＭＦ拡張末梢血ＣＤ３４＋幹細胞の量が、１０７〜１０９幹細胞／ｍｌを有する組成の少なくとも２０ｍｌであることを特徴とする、請求項１５の方法。
【請求項２０】
治療上効果がある量の、請求項１のＴＶＥＭＦ拡張された末梢血ＣＤ３４＋幹細胞および薬剤として許容可能なキャリアを含有する組成を哺乳類に投与する工程を含有する、哺乳類の病気を処置する方法。
【請求項２１】
前記病気が、正常な血球製造および成熟、過剰増殖性の幹細胞 疾患、再生不良性貧血、汎血球減少症、血小板減少症、赤芽球癆、薬物、放射線、感染症、特発性によるブラックファン−ダイアモンド(Blackfan-Diamond)症候群の不全または機能障害に起因する病気；造血悪性腫瘍、急性リンパ性（リンパ球）白血病、慢性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、 急性悪性骨髄硬化、多発性骨髄腫、真性赤血球増加症、原発性骨髄線維症、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫；悪性充実性腫瘍、悪性黒色腫、胃癌、卵巣癌、乳癌、小細胞肺癌、上皮性悪性腫瘍、網膜芽細胞腫、睾丸癌、膠芽細胞腫、横紋筋肉腫、神経芽細胞腫、ユーイング肉腫、リンパ腫の患者における免疫抑制；自己免疫疾患、関節リウマチ、1型糖尿病、慢性肝炎、多発性硬化、および全身性エリテマトーデス；遺伝性（先天性）疾患、貧血、家族性再生不全、ファンコーニ症候群、ブルーム症候群、赤芽球癆(ＰＲＣＡ)、先天性異常角化症、ブラックファン−ダイアモンド(Blackfan-Diamond)症候群、先天性異常造血性症候群I-IV、コークマン−ダイアモンド（Chwachmann-Diamond）症候群、ジヒドロ葉酸還元酵素欠損症、ホルムアミノ（formamino）転移酵素欠損症、レッシュ・ナイハン症候群、先天性球状赤血球症、先天性楕円赤血球症、先天性ストマトサイト増加症、先天性Ｒｈ陰性（null）病、発作性夜間血色素尿（症）、Ｇ６ＰＤ(グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ)、突然変異体（variants）１、２、３、ピルビン酸キナーゼ欠損症、先天性エリスロポエチン過敏症、欠損症、鎌状赤血球病および特性、α、β、γメタ地中海貧血ヘモグロビン血症、先天性免疫疾患、重症の重症複合型免疫不全症(ＳＣＩＤ)、不全リンパ球症候群、イオノフォア 反応性結合、免疫欠損症、免疫欠損症とキャッピング異常（capping abnormality）との結合、ヌクレオシド・ホスホリラーゼ欠損症、顆粒球アクチン欠損症、小児無顆粒球症、ゴーシェ病、アデノシン・デアミナーゼ欠損症、コストマン症候群、細網異形成症、先天性白血球機能障害症候群；大理石骨病、骨髄硬化、後天性溶血性貧血、後天性免疫不全、原発性または続発性免疫不全の原因となる遺伝性疾患、細菌感染(例えばブルセラ症、リステリア病、結核症、ハンセン病)、寄生虫感染症(例えばマラリア、リーシュマニア症)、真菌感染症、リンパ球様細胞セットにおける不適合に伴う疾患、および老化した食細胞疾患による正常な機能が損なわれた免疫機能、コストマン無顆粒球症、慢性肉芽腫症、チェディアック・東症候群、好中性アクチン欠損症、好中球膜ＧＰ−１８０欠損症、代謝性蓄積症、ムコ多糖症、ムコリピドーシス、免疫メカニズムに伴う混合型疾患、ウィスコット・アルドリッチ症候群およびα１-抗トリプシン欠損症から成る群の少なくとも一つから選択される病気であることを特徴とする、請求項２０の方法。
【請求項２２】
ＴＶＥＭＦ拡張された幹細胞を、病状用テストシステムへ導入することを含有する、病状を調査する方法。
【請求項２３】
前記病状が、正常な血球製造および成熟、過剰増殖性の幹細胞 疾患、再生不良性貧血、汎血球減少症、血小板減少症、赤芽球癆、薬物、放射線、感染症、特発性によるブラックファン−ダイアモンド(Blackfan-Diamond)症候群の不全または機能障害に起因する病気；造血悪性腫瘍、急性リンパ性（リンパ球）白血病、慢性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、 急性悪性骨髄硬化、多発性骨髄腫、真性赤血球増加症、原発性骨髄線維症、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫；悪性充実性腫瘍、悪性黒色腫、胃癌、卵巣癌、乳癌、小細胞肺癌、上皮性悪性腫瘍、網膜芽細胞腫、睾丸癌、膠芽細胞腫、横紋筋肉腫、神経芽細胞腫、ユーイング肉腫、リンパ腫の患者における免疫抑制；自己免疫疾患、関節リウマチ、1型糖尿病、慢性肝炎、多発性硬化、および全身性エリテマトーデス；遺伝性（先天性）疾患、貧血、家族性再生不全、ファンコーニ症候群、ブルーム症候群、赤芽球癆(ＰＲＣＡ)、先天性異常角化症、ブラックファン−ダイアモンド(Blackfan-Diamond)症候群、先天性異常造血性症候群I-IV、コークマン−ダイアモンド（Chwachmann-Diamond）症候群、ジヒドロ葉酸還元酵素欠損症、ホルムアミノ（formamino）転移酵素欠損症、レッシュ・ナイハン症候群、先天性球状赤血球症、先天性楕円赤血球症、先天性ストマトサイト増加症、先天性Ｒｈ陰性（null）病、発作性夜間血色素尿（症）、Ｇ６ＰＤ(グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ)、突然変異体（variants）１、２、３、ピルビン酸キナーゼ欠損症、先天性エリスロポエチン過敏症、欠損症、鎌状赤血球病および特性、α、β、γメタ地中海貧血ヘモグロビン血症、先天性免疫疾患、重症の重症複合型免疫不全症(ＳＣＩＤ)、不全リンパ球症候群、イオノフォア 反応性結合、免疫欠損症、免疫欠損症とキャッピング異常（capping abnormality）との結合、ヌクレオシド・ホスホリラーゼ欠損症、顆粒球アクチン欠損症、小児無顆粒球症、ゴーシェ病、アデノシン・デアミナーゼ欠損症、コストマン症候群、細網異形成症、先天性白血球機能障害症候群；大理石骨病、骨髄硬化、後天性溶血性貧血、後天性免疫不全、原発性または続発性免疫不全の原因となる遺伝性疾患、細菌感染(例えばブルセラ症、リステリア病、結核症、ハンセン病)、寄生虫感染症(例えばマラリア、リーシュマニア症)、真菌感染症、リンパ球様細胞セットにおける不適合に伴う疾患、および老化した食細胞疾患による正常な機能が損なわれた免疫機能、コストマン無顆粒球症、慢性肉芽腫症、チェディアック・東症候群、好中性アクチン欠損症、好中球膜ＧＰ−１８０欠損症、代謝性蓄積症、ムコ多糖症、ムコリピドーシス、免疫メカニズムに伴う混合型疾患、ウィスコット・アルドリッチ症候群およびα１-抗トリプシン欠損症から成る群の少なくとも一つであることを特徴とする、請求項２２の方法。
【請求項２４】
ＴＶＥＭＦ拡張された哺乳類からの骨髄幹細胞であって、
前記骨髄幹細胞が、回転するＴＶＥＭＦバイオリアクタ内でＴＶＥＭＦ拡張されたものであり、
ＴＶＥＭＦ拡張後の、前記ＴＶＥＭＦバイオリアクタ内のＴＶＥＭＦ拡張された骨髄幹細胞の数は、ＴＶＥＭＦ拡張前のＴＶＥＭＦバイオリアクタ内の骨髄幹細胞の数の少なくとも７倍であることを特徴とする、哺乳類からの骨髄幹細胞。