(57)【要約】本発明は、全体として、抗菌剤分野に関し、細菌による疾患の治療、抑制及び予防に関する。より詳細には、本発明は、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む組成物によってグラム陽性菌を抑制するための方法に関する。
2012509932.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラム陽性菌を不活性化させるための方法であって、前記グラム陽性菌を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む組成物に接触させることを含む方法。
【請求項２】
請求項１において、前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む、方法。
【請求項３】
請求項２において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、臭化セトリモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）からなる群から選択される、方法。
【請求項４】
請求項３において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）又は臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）である、方法。
【請求項５】
請求項２において、前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、方法。
【請求項６】
請求項５において、前記脂質のモル比が約０．１％〜約０．５％である、方法。
【請求項７】
請求項６において、前記脂質のモル比が約０．３％である、方法。
【請求項８】
請求項１又は２において、前記ｎＰＬＶがコレステロールを含まない、方法。
【請求項９】
請求項１又は２において、前記組成物がシクロデキストリン又はその誘導体を含む、方法。
【請求項１０】
請求項１又は２において、前記ｎＰＬＶがユニラメラ、少重膜又はマルチラメラ（多重層）である、方法。
【請求項１１】
請求項４において、前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１２】
請求項９において、前記誘導体が、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシイソブチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１３】
請求項１において、前記グラム陽性菌が、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、ブドウ状球菌（コアグラーゼ陰性）、肺炎連鎖球菌（ビリダンス連鎖球菌）、連鎖球菌（Ｂ群）、化膿連鎖球菌、腸球菌、炭疽菌、セレウス菌、ビフィズス菌、乳酸杆菌、リステリア菌、ノカルジア菌、ロドコッカス・エクイ菌（球桿菌）、豚丹毒菌、ジフテリア菌、座瘡プロピオンバクテリウム、放線菌、ボツリヌス菌、クロストリジウムディフィシレ、ウェルシュ菌、破傷風菌、モビルンカス属菌及びペプトストレプトコッカス属菌からなる群から選択される、方法。
【請求項１４】
対象物の抗菌活性を増加させるための方法であって、前記対象物を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む組成物に接触させることを含む方法。
【請求項１５】
請求項１４において、前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む、方法。
【請求項１６】
請求項１４において、前記対象物が、医療用機器、医療用装置及び病院用品からなる群から選択される、方法。
【請求項１７】
請求項１４において、前記対象物が、表面、手術用手袋、手術器具及びマスクからなる群から選択される、方法。
【請求項１８】
請求項１４において、前記組成物が水性懸濁液又はヒドロゲル内の分散液である、方法。
【請求項１９】
患者のグラム陽性菌関連疾患を治療、抑制又は予防するための方法であって、治療有効量の、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む医薬組成物を、必要に応じて１種以上の製薬学的に許容し得る担体と共に前記患者に投与することを含み、前記医薬組成物を前記グラム陽性菌に近接する位置に送達する方法。
【請求項２０】
請求項１９において、前記患者が哺乳動物である、方法。
【請求項２１】
請求項１９において、前記患者がヒトである、方法。
【請求項２２】
請求項１９において、前記前記疾患が感染である、方法。
【請求項２３】
請求項２２において、前記疾患が薬物耐性及び／又は多剤耐性細菌感染である、方法。
【請求項２４】
請求項２３において、前記疾患が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＭＲＣＮＳ）、バンコマイシン耐性大便連鎖球菌及び／又はバンコマイシン耐性エンテロコッカスフェシウムの１以上によるものである、方法。
【請求項２５】
請求項１９において、前記ｎＰＬＶを少なくとも１種の他の抗菌剤と共に共投与する、方法。
【請求項２６】
請求項２５において、前記少なくとも１種の他の抗菌剤が、アミノグルコシド、β−ラクタム抗生物質、セファロスポリン、マクロライド、各種抗生物質、ペニシリン、テトラサイクリン、抗真菌剤、抗マラリア薬、抗結核薬、抗細菌性、抗らい菌薬、各種抗感染症薬、キノロン、スルホンアミド、尿中抗感染症薬、経鼻抗生物質、点眼抗生物質、点眼抗細菌剤、キノロン点眼剤、スルホンアミド点眼剤、皮膚及び粘膜抗生物質、皮膚及び粘膜抗真菌剤、皮膚及び粘膜抗菌剤、皮膚及び粘膜各種抗感染症薬、皮膚及び粘膜疥癬虫撲滅薬抗疥癬薬及び殺シラミ薬、皮膚及び粘膜抗新生物薬、ニトロフラン及びオキサゾリジノンからなる群から選択される、方法。
【請求項２７】
請求項２５において、前記ｎＰＬＶを前記少なくとも１種の他の抗菌剤と同時又は順次投与する、方法。
【請求項２８】
請求項１９において、前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む、方法。
【請求項２９】
請求項２８において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、臭化セトリモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）からなる群から選択される、方法。
【請求項３０】
請求項２９において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）又は臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）である、方法。
【請求項３１】
少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、少なくとも１種の他の抗菌剤と、製薬学的に許容し得る担体又は希釈剤と、を含む抗菌組成物。
【請求項３２】
請求項３１において、少なくとも１種のシクロデキストリン又はその誘導体をさらに含む、抗菌組成物。
【請求項３３】
製薬学的に許容し得る量の少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、必要に応じて１種以上の製薬学的に許容し得る担体と、を含む医薬組成物。
【請求項３４】
請求項３３において、少なくとも１種のシクロデキストリン又はその誘導体をさらに含む、医薬組成物。
【請求項３５】
グラム陽性菌関連疾病の治療又は予防のための薬剤の調製における請求項３３又は３４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項３６】
患者のグラム陽性菌感染を治療、抑制又は予防するためのキットであって、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、試薬及び／又は取扱説明書と、を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全体として、抗菌剤分野に関し、細菌による疾患の治療、抑制及び予防に関する。より詳細には、本発明は、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む組成物によってグラム陽性菌を抑制するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗菌耐性は、近年急速に現れた世界的な臨床的及び公共的な健康問題であり、近い将来増加することは確実である。耐性は、共同体並びに細菌の伝染（感染）が大きく増加する医療環境における問題である。多剤耐性が深刻さを増しているため、医師は有効な治療がない感染に現在直面している。そのような感染の罹患率、死亡率及び財政的なコストにより、世界中（特に資源が限られている国々）の医療システムの負担が増加している。これらの問題に対処するための計画は、薬剤耐性の監視強化、抗菌薬の監視強化及び使用法の改良、専門的・公共的教育、新薬の開発並びに代替治療法の評価について強調している。
【０００３】
グラム陽性菌は、グラム染色によって濃い青又は紫に染まる菌である。通常、グラム陽性菌は、細胞壁構造の部品としてペプチドグリカン及び多糖類及び／又はテイコ酸を有することを特徴とする。ペプチドグリカンはムレインとも呼ばれ、短いペプチドを介して架橋したグリカン鎖のヘテロポリマーである。一般に、グラム陽性菌は内生芽胞型であり、通常は外毒素を放出する。
【０００４】
６種類のグラム陽性微生物が通常はヒトにおいて病原性を有する。これらのうち、連鎖球菌属とスタフィロコッカス属は球菌（丸い細菌）である。残りの微生物は桿菌であり、胞子を形成する能力に基づいて分類することができる。コリネバクテリウム属とリステリア属は胞子を形成しないが、バシラス属とクロストリジウム属は胞子を形成する。胞子形成細菌は呼吸に基づいて分類することができる。すなわち、バシラス属は通性嫌気性菌であり、クロストリジウム属は偏性嫌気性細菌である。
【０００５】
細菌感染による死亡率及び罹患率の上昇の主要な原因の１つは、薬剤耐性細菌の蔓延である。抗生物質耐性の深刻さの例は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）及び現在使用されているほぼ全ての抗生物質に耐性を有するようになったバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌の出現である。
【０００６】
ＭＲＳＡ感染を治療するためにバンコマイシンを多用した結果、米国における細菌感染の第３番目の原因であり、バンコマイシン耐性を有する腸球菌の新種が出現した。エンテロコッカス属は細菌性心内膜炎の症例の１５％の原因となっており、髄膜炎並びに尿路、胃及び腸の感染も引き起こす。これらのバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）による感染は現在の療法に反応しない場合が多く、多くの場合には致命的である。
【０００７】
リポソームは、医薬組成物又は化粧料組成物の供給のために医薬を輸送するために使用することができる。例えば、国際出願第ＷＯ９６／１２４７２号（Ｃｈｉｎｏｉｎ  Ｇｙｏｇｙｓｚｅｒ  Ｅｓ  Ｖｅｇｙｅｓｚｅｔｉ  Ｔｅｒｍｅｋｅｋ  Ｇｙａｒａ  ＲＴ  ｅｔ  ａｌ．）は、（−）−Ｎ−α−ジメチル−Ｎ−（２−プロピニルフェニルエチルアミン）（セレギリン）及び／又はその塩を活性成分として含むリポソーム組成物を開示している。国際出願第ＷＯ９６／１２４７２号に開示された組成物は、０．１〜４０重量％のセレギリン及び／又はその塩と、２〜４０重量％の脂質、好ましくリン脂質と、０〜１０重量％のコレステロールと、０〜２０重量％のアルコールと、０〜２５重量％のグリコールと、０〜３重量％の酸化防止剤と、０〜３重量％の保存剤と、０〜２重量％の粘度調節剤と、０〜５０重量％のシクロデキストリン又はシクロデキストリン誘導体と、３０〜９０重量％の水と、を含有する。国際出願第ＷＯ９６／１２４７２号は、アルツハイマー病、パーキンソン病、鬱病、発作、乗物酔い又は脊髄炎の治療のための前記組成物の投与についても開示している。
【０００８】
リン脂質及び非リン脂質はリポソームを製造するために使用することができる。リン脂質リポソームは非リン脂質リポソームと比較して非常に高価かつ不安定であり、予防に必要な量を用意することは困難である。また、リン脂質リポソームを製造するための方法は、細胞毒性の主要源である有機溶媒の使用を通常は必要とする。さらに、低いコレステロール含有量を有するリン脂質リポソームを製造することはより困難である。
【０００９】
国際特許出願第ＷＯ２００５／０３０１７０号（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ驕@Ｐａｓｔｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．）は、生体適合性リン脂質リポソーム（隠れリポソーム（ｆｕｒｔｉｖｅ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ）とも呼ばれる）の制御された破壊を開始し、リポソームを環境に放出する方法を開示している。放出剤（好ましくはα−シクロデキストリン）は生体適合性分子である。
【００１０】
米国特許第５，５６１，０６２号（Ｖａｒａｎｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．）は、（好ましくは非リン脂質を有する）少重膜脂質小胞を使用することによりエンベロープウイルスを不活性化させるｉｎ  ｖｉｔｒｏ法と不活性化を達成する際に有用な製剤を開示している。この方法は、主要な材料としての（好ましくは非リン脂質を有する）少重膜脂質小胞はエンベロープウイルスと融合することができ、融合直後にウイルスの核酸が変性するという知見に基づくものである。通常、少重膜脂質小胞は核酸退行物質を含む油溶液又は水溶液で満たされている。
【００１１】
欧州特許出願第１  ３０４  １０３  Ａｌ号（Ｄ．Ｆ．Ｈ  Ｗａｌｌａｃｈ）は、全脂質が非リン脂質である脂肪小胞及び特にＡＩＤＳの予防等の治療用途におけるそれらの賦形剤としての使用を開示している。開示された非リン脂質脂質小胞賦形剤は、コレステロール科から選択される二分子層修飾脂質を含む少なくとも１種の外部安定化二分子層と、小胞内水性空間（ｉｎｔｒａｖｅｓｉｃｕｌａｒ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｓｐａｃｅ）と、内部脂質単分子層によって取り囲まれた少なくとも１種の小胞内マイクロエマルション粒子と、を含む。ＨＩＶウイルスの不活性化は、非リン脂質脂質小胞とウイルスの膜との融合によって行われる。この融合性はおそらくは修飾性脂質二重層におけるコレステロールの存在によるものであり、コレステロール含有非リン脂質脂質小胞とＨＩＶウイルスの膜との間には脂質交換はない。上述したｎＰＬＶとエンベロープウイルスの膜との間の融合は、長い時間が必要となるためにエンベロープウイルスを生体内で不活性化させるには適していない。
【００１２】
国際公開第ＷＯ２００７／１３５５２３号は、非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む、エンベロープウイルスを不活性化するための組成物を開示している。不活性化作用は、非リン脂質脂質小胞によってエンベロープウイルスからコレステロールが抽出されるためと考えられる。非リン脂質脂質小胞は、ｎＰＬＶとエンベロープウイルスの膜との間の脂質交換を高める物質を含むことができ、コレステロールを含まないものであることができる。
【００１３】
上記文献は、細菌、特にグラム陽性菌に対するリポソームの作用について検討していない。エンベロープウイルスとグラム陽性菌は構造的に異なっている。グラム陽性菌はペプチドグリカン（Ｎ−アセチルグルコサミンとＮ−アセチルムラミン酸の繰り返し単位）からなる細胞壁を有するが、エンベロープウイルスはリポタンパク膜（エンベロープ）に取り囲まれている。本願発明者らは、非リン脂質脂質小胞はグラム陽性菌の増殖又は伝般を抑制することができることを見出した。この知見は、ウイルスに対する非リン脂質脂質小胞の作用は非リン脂質脂質小胞とウイルスエンベロープとの膜脂質交換によって媒介され、グラム陽性菌はペプチドグリカンからなる細胞壁を有することを考えると驚くべきものである。
【００１４】
生体外及び生体内において迅速かつ効率的にグラム陽性菌を抑制する新規な方法が求められている。
【発明の概要】
【００１５】
一実施形態において、本発明は、グラム陽性菌を不活性化させるための方法であって、前記グラム陽性菌を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む組成物に接触させることを含む方法に関する。特定の実施形態において、前記ｎＰＬＶは、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む。特定の実施形態において、前記第４級アンモニウム脂質は、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、臭化セトリモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）からなる群から選択される。
【００１６】
通常、前記脂質のモル比は約０．０１％〜約１％である。一実施形態において、前記モル比は約０．１％〜約０．５％である。特定の実施形態において、前記脂質のモル比は約０．３％である。
【００１７】
前記ｎＰＬＶは、ユニラメラ、少重膜又はマルチラメラ（多重層）であってもよい。ある実施形態では、前記ｎＰＬＶはコレステロールを含まない。別の実施形態において、前記ｎＰＬＶを含む組成物はシクロデキストリン又はその誘導体を含む。好ましくは、前記シクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。好適な誘導体は、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシイソブチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
本発明のｎＰＬＶ組成物は、あらゆるグラム陽性菌を不活性化させるために使用することができる。好ましくは、前記グラム陽性菌は、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、ブドウ状球菌（コアグラーゼ陰性）、肺炎連鎖球菌（ビリダンス連鎖球菌）、連鎖球菌（Ｂ群）、化膿連鎖球菌、腸球菌、炭疽菌、セレウス菌、ビフィズス菌、乳酸杆菌、リステリア菌、ノカルジア菌、ロドコッカス・エクイ菌（球桿菌）、豚丹毒菌、ジフテリア菌、座瘡プロピオンバクテリウム、放線菌、ボツリヌス菌、クロストリジウムディフィシレ、ウェルシュ菌、破傷風菌、モビルンカス属菌及びペプトストレプトコッカス属菌からなる群から選択される。
【００１８】
また、本発明は、１以上の対象物の抗菌活性を増加させるための方法であって、前記１以上の対象物を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む組成物に接触させることを含む方法に関する。一実施形態において、前記ｎＰＬＶは、第４級アンモニウム頭部基を含む第２の脂質を含む。別の実施形態において、消毒する前記対象物は、医療用機器、医療用装置及び病院用品からなる群から選択される。特定の実施形態において、前記対象物は、表面、手術用手袋、手術器具及びマスクからなる群から選択される。本発明の組成物は、水性懸濁液又はヒドロゲル内の分散液であってもよい。
【００１９】
また、本発明は、患者のグラム陽性菌関連疾患を治療、抑制又は予防するための方法であって、治療有効量の、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞を含む医薬組成物を、必要に応じて１種以上の製薬学的に許容し得る担体と共に前記患者に投与することを含み、前記医薬組成物を前記グラム陽性菌に近接する位置に送達する方法に関する。一実施形態において、前記患者はヒト等の哺乳動物である。別の実施形態において、前記疾患は、薬物耐性及び／又は多剤耐性細菌感染等の感染であり、例えば、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＭＲＣＮＳ）、バンコマイシン耐性大便連鎖球菌及び／又はバンコマイシン耐性エンテロコッカスフェシウムの１以上による感染である。特定の実施形態において、前記感染はグラム陽性菌による感染である。
【００２０】
一実施形態において、前記ｎＰＬＶは少なくとも１種の他の抗菌剤と共に共投与する。好適な抗菌剤としては、アミノグルコシド、β−ラクタム抗生物質、セファロスポリン、マクロライド、各種抗生物質、ペニシリン、テトラサイクリン、抗真菌剤、抗マラリア薬、抗結核薬、抗細菌性、抗らい菌薬、各種抗感染症薬、キノロン、スルホンアミド、尿中抗感染症薬、経鼻抗生物質、点眼抗生物質、点眼抗細菌剤、キノロン点眼剤、スルホンアミド点眼剤、皮膚及び粘膜抗生物質、皮膚及び粘膜抗真菌剤、皮膚及び粘膜抗菌剤、皮膚及び粘膜各種抗感染症薬、皮膚及び粘膜疥癬虫撲滅薬抗疥癬薬及び殺シラミ薬、皮膚及び粘膜抗新生物薬、ニトロフラン及びオキサゾリジノンが挙げられる。前記ｎＰＬＶは、前記少なくとも１種の他の抗菌剤と同時又は順次投与することができる。
【００２１】
また、本発明は、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、少なくとも１種の他の抗菌剤と、製薬学的に許容し得る担体又は希釈剤と、を含む抗菌組成物に関する。
【００２２】
また、本発明は、患者のグラム陽性菌感染を治療、抑制又は予防するためのキットであって、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、試薬及び／又は取扱説明書と、を含むキットに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】各種グラム陽性及びグラム陰性菌に対するｎＰＬＶを含む組成物の抑制作用を示す。ＰＣＥ：ポリオキシエチレンセチルエーテル、ＰＡ：パルミチン酸、ＨＴＡＢ：臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、ＤＨＡＢ：臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム。ｎＰＬＶを含む組成物はグラム陽性菌を抑制する。
【図２】ｎＰＬＶ０３（９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ））の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を示す。
【図３】ｎＰＬＶ０３及びｎＰＬＶ０４の組成物に使用される第４級アンモニウムイオン分子の概略図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本願明細書において、特に「複数」と記載していない場合には「少なくとも１」又は「１以上」を意味する。
【００２５】
本願明細書において使用する「リポソーム」及び「脂質小胞」という用語は、大部分が水によって構成される中心腔を取り囲む脂質シェルからなる小球を意味し、同じ意味で使用する。脂質は、タマネギ状構造の二分子層又はラメラ状である。
【００２６】
非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）とは、高い脂質含有率を有する材料からなる球状構造体である小胞を意味する。これらの脂質は好ましくは非リン脂質を含み、表２に記載する化合物からなる群から選択することができる。
【００２７】
本願明細書において使用する「ユニラメラ（一枚膜）」、「少重膜（ｐａｕｃｉｌａｍｅｌｌａｒ）」及び「マルチラメラ（多重層）（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ）」という用語は、リポソーム（特に本発明のｎＰＬＶ）の中心腔を取り囲む二分子層の数を意味する。ユニラメラｎＰＬＶは中心腔を取り囲む１つの二分子層からなり、マルチラメラｎＰＬＶは２以上の二分子層からなる。マルチラメラｎＰＬＶのサブクラスとみなされる少重膜ｎＰＬＶは２〜８個の二分子層からなる。
【００２８】
ｎＰＬＶの分子状二分子層（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｉｌａｙｅｒ）は、リン脂質二重層と類似する物理的構造を有する。例えば、Ｃ１６（ＰＥＧ）２エーテル小胞のＸ線回折では、両親媒性物質の水和二重層の膜厚（５．８〜６．１ｎｍ）を示す単純かつ主要な反射が見られ、リン脂質二重層と同様に高いコレスレロールレべルで小さな間隔が見られる。６．１ｎｍの間隔は２つの両親媒性分子の最大伸長と結合水層に対応する（Ｍｉｔｃｈｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３；Ａｄａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４）。Ｌａｎｔｚｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）は、蛍光移動法を使用してｌ−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン／Ｃ１２（ＰＥＧ）１〜８リポソームにおける界面活性剤Ｃ１２（ＰＥＧ）Ｎの表面を測定した。Ｎが１〜３の場合には、表面膨張はＣ１２（ＰＥＧ）Ｎの１分子あたりの液晶炭化水素相と同等である。Ｎが４〜８の場合には、界面活性剤の１分子あたりの表面積は次第に増加し、エチレングリコールセグメントあたり２つの水分子を有する分子の巻き上げ構成（ｒｏｌｌｅｄ  ｕｐ  ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ）を示唆している。また、１，２−テトラデシル又は１，２−ヘキサデシルホスファチジルコリンの水系分散液はＣ１６（ＰＥＧ）４の大部分を受容する（Ｍａｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８）。
【００２９】
本願明細書において使用する「相互作用」という用語は、直接的な接触によって、あるいは距離を置いて互いに影響を及ぼすことを意味する。
【００３０】
予期せぬことに、本願発明者らは、非リン脂質脂質小胞を含む組成物はグラム陽性菌を不活性化させることができることを見出した。この知見は、ウイルスに対する非リン脂質脂質小胞の作用は非リン脂質脂質小胞とウイルスエンベロープとの膜脂質交換によって媒介され、グラム陽性菌はペプチドグリカンからなる細胞壁を有すると仮定すれば驚くべきものである。グラム陽性菌種の例としては、例えば、ミクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、ラクトバシラス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、リステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、エリジペロスリックス属（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ）、プロピオン酸菌属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ユーバクテリウム属（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、コリネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）が挙げられる。
【００３１】
グラム陽性球菌の例としては、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）（例えば、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ））、ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）（例えば、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ））、腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）が挙げられる。グラム陽性桿菌の例としては、例えば、コリネバクテリア（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉａ）（ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）（ａｎｔｈｒａｘ）が挙げられる。グラム陽性枝分かれ微生物（ｂｒａｎｃｈｉｎｇ  ｏｒｇａｎｉｓｍ）の例としては放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）が挙げられる。グラム陽性菌の例としては、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、ハンセン菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ）、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコプラズマ肺炎菌（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、溶血連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．）が挙げられる。マイコバクテリウム属は抗酸菌染色性だが、系統的にはグラム陰性よりもグラム陽性に密接に関連付けられる。マイコプラズマ属はグラム陰性だが、系統的にはグラム陰性よりもグラム陽性に密接に関連付けられる（細胞壁がないため）。その他のグラム陽性菌は例えば、放線菌を除く全てのグラム陽性菌を記載した６節を含むＢｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ、ｖｏｌ．２に記載されている。これらの節において、細菌は、形状、内生芽胞形成能、抗酸性、酸素との関係、一時的に菌糸体を形成する能力及びその他の特性に基づいて分類されている。
【００３２】
また、ヒト医薬に関連するグラム陽性菌としては、以下の表１に記載するグラム陽性菌も挙げられる。
【００３３】
【表１】
2012509932.tif 000003
【００３４】
様々なグラム陽性菌が敗血症を引き起こし得る。敗血症に関与する最も一般的な微生物は、黄色ブドウ球菌、肺炎連鎖球菌、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、β型溶血連鎖球菌及び腸球菌だが、あらゆるグラム陽性菌が敗血症に関与し得る（例えば、Ｂｏｎｅ，（１９９３）Ｊ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  ８：５１−５９を参照）。従って、本発明の組成物及び方法は、グラム陽性細菌が関与する敗血症の治療又は予防計画の一部として使用することができる。
【００３５】
また、本発明の組成物及び方法は、薬剤耐性細菌によって引き起こされる細菌感染の治療又は予防計画の一部として使用することができる。そのような薬剤耐性細菌の例としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＭＲＣＮＳ）、バンコマイシン耐性大便連鎖球菌、バンコマイシン耐性エンテロコッカスフェシウム及び現在使用されているほぼ全ての抗生物質に耐性を示すバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌が挙げられる。
【００３６】
本願明細書に開示する非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）は好ましくは非リン脂質を含み、表２に記載する化合物からなる群から選択することができる。
【００３７】
【表２】
2012509932.tif 000004
【００３８】
より好ましくは、本発明の非リン脂質は、ポリオキシエチレンセチルエーテル（ＰＣＥ）、パルミチン酸（ＰＡ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、オレイン酸（ＯＡ）及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００３９】
一実施形態において、ｎＰＬＶは、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む。そのような第４級アンモニウム含有脂質はＮＲ４＋Ｂ−（式中、ＮＲ４＋は第４級アンモニウムカチオンを示し、Ｂ−はアニオンを示し、Ｒは同一又は異なるアルキル基であってもよい）で示される構造によって表すことができる。第４級アンモニウム脂質は、第４級アンモニウムカチオンとアニオンの塩である。第４級アンモニウムカチオンは、アンモニア又は他のアミンの完全アルキル化等の高知の方法によってすることが合成できる。多くの第４級アンモニウム脂質は市販されている。
【００４０】
第４級アンモニウム脂質の例としては、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、臭化セトリモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）が挙げられる。一実施形態において、第４級アンモニウム脂質は、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）及び臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）を含む。
【００４１】
非リン脂質脂質小胞における非第４級アンモニウム脂質の比率（例えば、モル比）は、約０．０１％〜約１％、好ましくは約０．１％〜約０．５％、より好ましくは約０．１％〜約０．３％である。一実施形態において、前記比率は０．３％である。
【００４２】
別の実施形態において、ｎＰＬＶはコレステロールを（実質的に）含有していなくてもよい（すなわち、コレステロール（又は微量のコレステロール）、例えば、ＰＥＧコレステロール、イオノゲンコレステロール、表面安定化コレステロール、β−シトステロール、エルゴステロール、フィトステロール等のコレステロール誘導体を含まない）。
【００４３】
通常、本発明のｎＰＬＶは組成物に含まれる。
【００４４】
一実施形態において、ｎＰＬＶを含む組成物は他の物質を含むことができる。特定の実施形態において、上記物質はシクロデキストリン又はステロイド誘発性急性調節（ＳｔＡＲ）タンパク質であってもよい。好ましくは、上記物質はシクロデキストリン又はその誘導体である。
【００４５】
シクロデキストリン（ＣＤ）は、小分子及び大きな化合物の一部と共に水溶性包接複合体を形成することができるグルコースの環状オリゴマーである。化学的には、シクロデキストリンは、α−（１，４）グルコシド結合によって結合した少なくとも６つのＤ−（＋）グルコピラノース単位を含む環状オリゴ糖である。環の大きさと溶解性が異なる３種類の天然シクロデキストリン（α−ＣＤ、β−ＣＤ、γ−ＣＤ）が存在する。これらの生体適合性を有するシクロデキストリン（環状オリゴ糖）は免疫応答を誘発せず、動物とヒトにおける毒性が低い。シクロデキストリンは薬剤の生物学的利用性を向上させる等の多くの目的のために医薬用途で使用されており、β−ＣＤは細胞膜からコレステロールを選択的に抽出することができる。高濃度のβ−ＣＤは細胞毒性を示し、細胞分解又は細胞死（アポプトーシス）を引き起こし得る。
【００４６】
シクロデキストリン（ＣＤ）の誘導体は米国特許第５，７６０，０１７号（発明者：Ｄｊｅｄａｉｎｉ−Ｐｉｌａｒｄら）及び国際出願公開第ＷＯ９１／１３１００号（発明者：Ｃｏａｔｅｓら）に開示されている。上記文献の開示内容はこの参照によって本願明細書に援用する。シクロデキストリン（ＣＤ）の誘導体の例としては、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシイソブチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリンが挙げられる。
【００４７】
通常、上記物質は組成物に添加される。この場合、適当な濃度のシクロデキストリン（ＣＤ）を水又はＰＢＳを使用して調製し、必要な濃度となるように組成物に添加する。
【００４８】
好ましくは、本発明の組成物におけるシクロデキストリン又はシクロデキストリン誘導体の濃度は０．０１ｍＭ〜５０ｍＭである。最も好ましくは、シクロデキストリン又はシクロデキストリン誘導体の濃度は０．１〜１０ｍＭである。そのような低濃度では、β−ＣＤの細胞の完全性は限定されている。
【００４９】
あるいは、上記物質はステロイド誘発性急性調節（ＳｔＡＲ）タンパク質であってもよい。ステロイド誘発性急性調節（ＳｔＡＲ）タンパク質は、ｃＡＭＰ−依存性経路を介した副腎・生殖腺細胞におけるステロイド生合成の調節における必須成分である。多くの場合、ｃＡＭＰによる転写誘導は、標的遺伝子のプロモーターに発見されたコンセンサスｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ；５’−ＴＧＡＣＧＴＣＡ−３’）によるｃＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）科の相互作用を介して行われる（Ｐｕｌａｋ  Ｒ．  Ｍａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．（２００２），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １６（１）：１８４〜１９９）。
【００５０】
ＳｔＡＲの欠失型（例えば、Ｎ６２  ＳｔＡＲ；Ｔｕｃｋｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００２及びＡｌｐｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００５）も、上記他の物質として使用することができる。ＳｔＡＲの欠失型はリン脂質リポソーム間のコレステロール移動を５〜１０倍高めることが明らかになっている。
【００５１】
好ましくは、ＳｔＡＲタンパク質は溶液として組成物に含まれる。
【００５２】
組成物は、液体、固体（粉末等）又は半固体であってもよい。
【００５３】
通常は、組成物に含まれるｎＰＬＶは０．２μｍ〜１０μｍの直径を有する。
【００５４】
ｎＰＬＶ（及び本発明のｎＰＬＶ）の製造方法については、米国特許第４，９１１，９２８号（実施例１）、米国特許第５，１４７，７２３号、米国特許第５，０３２，４５７号、米国特許第４，８９５，４５２号、米国特許出願第７６１，２５３号、国際公開第ＷＯ２００７／１３５５２３号に記載されており、上記文献の開示内容はこの参照によって本願明細書に援用する。
【００５５】
また、本発明は、薬学的に許容し得る量の本願明細書に開示するｎＰＬＶと、必要に応じて１種以上の薬学的に許容し得る担体と、を含む医薬組成物も含む。
【００５６】
別の実施形態において、医薬組成物は、上述したエンハンサー物質を含むことができる。好ましくは、エンハンサー物質は少なくとも１種のシクロデキストリン又はその誘導体である。
【００５７】
「製薬学的に許容し得る」とは、生理的に許容でき、ヒトに投与した際に異常高進や眩暈感等のアレルギー性又は同様な有害反応を通常は生じさせない分子及び組成物を意味する。
【００５８】
許容し得る担体、賦形剤、安定化剤は採用される投与量及び濃度において被投与者に無毒であり、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、その他の有機酸等の緩衝液；アスコルビン酸やメチオニン等の酸化防止剤；保存剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；低分子量（約１０未満の残基）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、イムノグロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジン等のアミノ酸；グルコース、マンノース、デキストリン等の単糖類、二糖類、その他の糖類；ＥＤＴＡ等のキレート化剤；蔗糖、マンニトール、トレハロース、ソルビトール等の糖類；ナトリウム等の塩形成対イオン；金属錯体が挙げられる。
【００５９】
医薬組成物は全身又は局所的に投与することができる。例えば、医薬組成物は、皮下、静脈内、皮内、腹腔内、鼻腔内、経皮的、筋肉内、口腔投与（好ましくは吸入）等の非経口投与、埋込型装置による投与又は蠕動手段による投与によって投与することができる。
【００６０】
本発明の医薬組成物は、生体吸収性マトリックスに組み込むか、含浸させることができ、マトリックスは懸濁液、ゲル又は固形担体として投与する。また、マトリックスはバイオポリマーを含むことができる。
【００６１】
生体内投与に使用される製剤が無菌である必要がある場合には、例えば本発明の組成物の調製に無菌化合物を使用することによって容易に達成される。
【００６２】
本発明の医薬組成物の好適な投与量は、被投与者の年令、性別、健康状態、体重、同時治療の種類、所望の作用に応じて異なる。
【００６３】
適正な投与形態は、疾病、ｎＰＬＶ、脂質交換を高める物質、投与方法に応じて異なる。例えば、気道への噴霧又はその他のエーロゾル手段が挙げられる。阻害溶液を局所的に塗布するためのその他の方法としては、クリーム、うがい薬、歯科用軟膏、目薬、溶液、軟膏、腟ゲル等のゲル、コンドーム潤滑剤等の潤滑剤が挙げられる。
【００６４】
細菌（グラム陽性菌等）感染の治療のための化合物の任意の用量は、約１〜５０又は１〜２０ｍｇ／ｋｇ（体重）／日、より一般的には０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／日である。製薬学的に許容し得る塩及びプロドラッグの有効用量範囲は、投与する親ヌクレオシドの重量に基づいて算出することができる。塩又はプロドラッグが活性を示す場合には、有効用量は、塩又はプロドラッグの重量を使用して推定するか、当業者に公知の他の手段によって推定することができる。
【００６５】
必要に応じて、活性成分は、活性化合物のピーク血漿濃度が約０．２〜７０Ｍ、例えば、約１．０〜１０μＭとなるように投与する。上記濃度は、例えば、必要に応じて生理的食塩水で希釈した活性成分の０．１〜５％溶液の静脈内注入又は活性成分のボーラス投与によって達成することができる。医薬組成物における活性化合物の濃度は、医薬の吸収率、不活性化及び排泄速率並びに当業者に公知のその他の要因に応じて異なる。また、特定の患者の場合には、各患者のニーズ並びに組成物を投与するか、組成物の投与を監督する者の専門的な判断に応じて特別の用量計画を調節すべきであり、本願明細書に記載する濃度範囲は一例であり、請求の範囲に記載する組成物の範囲又は実施を限定するものではない。活性成分は一度に投与するか、小用量に分割し、異なる時間間隔で投与することができる。
【００６６】
化合物は、適当な単位剤形（例えば、単位剤形あたり７〜３０００ｍｇ又は７０〜１４００ｍｇの活性成分を含む）で簡便に投与することができる。必要に応じて、５０〜１０００ｍｇの用量とすることができる。
【００６７】
また、本発明は、宿主、例えば、動物、通常はヒトの細菌感染を予防、抑制又は治療する方法であって、前記細菌感染がグラム陽性菌によるものである場合に、必要に応じて製薬学的に許容し得る担体又は希釈剤と共に、治療量の本発明のｎＰＬＶ組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００６８】
また、本発明は、グラム陽性菌を抑制するための方法であって、前記グラム陽性菌を、１種以上のｎＰＬＶを含む組成物に接触させる工程を含む方法を提供する。細胞内における細菌複製の抑制又は感染の治療は、細胞内における細菌複製が、発明の化合物又は組成物を投与していない同一の細胞におけるレべルよりも低いレベルに減少したことを示すことによって測定することができる。細菌複製の減少は、約８０％、８５％、９０％、９５％又は約９９．９％以上であることができる。細胞内における細菌複製レベルは、公知の方法によって調べることができる。例えば、細胞内における細菌複製レベルは、細胞又は細胞に関連する流体又は残屑内における、細菌タンパク質、細菌酵素又は細菌核酸等の細菌粒子の数又は細菌成分の量を評価することによって調べることができる。細胞内における感染性細菌の数は、例えば、プラークアッセイによって評価することができる。細胞内における細菌タンパク質又は酵素等の細菌成分のレベルは、タンパク質生化学の標準的な解析手法、例えば、細菌酵素活性分析又は細菌タンパク質のウェスタンブロッティング又は定量的ゲル電気泳動法を使用して評価することができる。細胞内における細菌核酸レベルは、ノーザンブロッティング、サザンブロッティング又はポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）等の標準的な解析手法を使用して評価することができる。本願明細書に開示する方法に使用できるｎＰＬＶとしては、上述したｎＰＬＶが挙げられる。
【００６９】
一実施形態において、グラム陽性菌を抑制するために使用するｎＰＬＶは、第４級アンモニウム頭部基を含む。脂質含有第４級アンモニウムについては本願明細書に開示されている。別の実施形態において、ｎＰＬＶ内における脂質含有第４級アンモニウムは、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）及び臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）を含む。別の実施形態において、ｎＰＬＶは、組成物に添加される他の物質を含むことができる。特定の実施形態において、上記物質はシクロデキストリン又はステロイド誘発性急性調節（ＳｔＡＲ）タンパク質であってもよい。好ましくは、上記物質はシクロデキストリン又はその誘導体である。シクロデキストリン又はその誘導体については本願明細書に開示されている。別の実施形態において、ｎＰＬＶはコレステロールを含んでいなくてもよい。
【００７０】
ｎＰＬＶによって抑制されるグラム陽性菌種の例は本願明細書に開示されている（例えば、ミクロコッカス属、ペプトコッカス属、ペプトストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、バシラス属、クロストリジウム属、ラクトバシラス属、リステリア属、エリジペロスリックス属、プロピオン酸菌属、ユーバクテリウム属、コリネバクテリウム属、連鎖球菌属（例えば、肺炎連鎖球菌）、スタフィロコッカス属（例えば、黄色ブドウ球菌）、エンテロコッカス属）。グラム陽性桿菌の例としては、例えば、コリネバクテリア（ジフテリア菌）、リステリア・モノサイトゲネス、炭疽菌、ブタ丹毒菌が挙げられる。グラム陽性枝分かれ微生物（ｂｒａｎｃｈｉｎｇ  ｏｒｇａｎｉｓｍ）の例としては放線菌が挙げられる。グラム陽性菌の例としては、炭疽菌、枯草菌、ボツリヌス菌、ウェルシュ菌、破傷風菌、ジフテリア菌、乳酸菌  、リステリア菌、ハンセン菌、結核菌、マイコプラズマ肺炎菌、黄色ブドウ球菌、連鎖球菌が挙げられる。マイコバクテリウム属は抗酸菌染色性だが、系統的にはグラム陰性よりもグラム陽性に密接に関連付けられる。マイコプラズマ属はグラム陰性だが、系統的にはグラム陰性よりもグラム陽性に密接に関連付けられる（細胞壁がないため）。その他のグラム陽性菌は例えば、放線菌を除く全てのグラム陽性菌を記載した６節を含むＢｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ、ｖｏｌ．２に記載されている。これらの節において、細菌は、形状、内生芽胞形成能、抗酸性、酸素との関係、一時的に菌糸体を形成する能力及びその他の特性に基づいて分類されている。一実施形態において、不活性化することができるグラム陽性菌としては、ヒト医薬に関連するグラム陽性菌（例えば、表１に記載するグラム陽性菌）が挙げられる。特定の実施形態において、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＭＲＣＮＳ）、バンコマイシン耐性大便連鎖球菌、バンコマイシン耐性エンテロコッカスフェシウム及びバンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌等の薬剤耐性細菌を不活性化するためにｎＰＬＶを使用することができる。
【００７１】
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は、一晩の培養後に微生物の目に見える成長を阻害する抗菌剤の最低濃度である。
【００７２】
通常、ＭＩＣは観点又はブロス（例えば、ＬＢブロス）希釈法によって測定することができる。ｎＰＬＶを含む組成物についてＭＩＣを測定する標準的な方法は、各種濃度のｎＰＬＶを含む組成物の存在下で、ＬＢブロス培地内において接種細菌（例えば、５×１０５細菌／ｍＬ）を一晩増殖させ、各培養試料を逐次希釈し、寒天平板培地に固定し、力価測定のために３７℃で一晩培養することを含む。そのような方法は、Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｎｉｍｕｍ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，Ｊｅｎｎｉｆｅｒ  Ｍ．  Ａｎｄｒｅｗｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ（２００１）４８，Ｓｕｐｐｌ．Ｓ１，５−１６に開示されている。また、ＭＩＣの測定ガイドラインは、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＣＬＳＩ）、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ＢＳＡＣ）又はＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ（ＥＵＣＡＳＴ）等から入手することができる。また、Ｅｔｅｓｔ  ｓｔｒｉｐｓ及びＯｘｏｉｄ  ＭＩＣＥｖａｌｕａｔｏｒ等の市販の方法もある。
【００７３】
ＭＩＣは、微生物の抗菌剤に対する耐性を確認する診断研究所において重要である。臨床的には、患者に投与する抗生物質の量及び種類が使用した抗生物質の量を決定するために最小発育阻止濃度を使用することができる。そのような判定により、特定の抗菌剤に対する微生物耐性が生じる可能性を低下させることができる。
【００７４】
様々なグラム陽性菌に対するｎＰＬＶのＭＩＣは、上述した標準的な方法又はその他の公知の方法を使用して測定することができる。得られたＭＩＣは、グラム陽性菌を抑制するために使用することができる各ｎＰＬＶの最低量を決定するために使用することができる。
【００７５】
また、本発明は、患者のグラム陽性菌関連疾病を治療又は予防する方法であって、グラム陽性菌に近接する位置において、本願明細書に記載する医薬組成物を前記患者に投与する工程を含む方法を提供する。投与形態としては、気道への噴霧又はその他のエーロゾル手段、クリーム、うがい薬、歯科用軟膏、溶液、軟膏、腟ゲル等のゲル、目薬、コンドーム潤滑剤等の潤滑剤、皮膚又は粘膜面（例えば、角膜、皮膚の切り傷又は擦傷、火傷、細菌感染部位）への外部投与のためのクリーム、ローション又は溶液が挙げられる。
【００７６】
本発明の組成物とグラム陽性菌の気道における相互作用は、細菌感染性（肺内での伝般（予防治療））を妨げる。生理学的処理により組成物と不活性化細菌を洗い流す。また、部分的又は完全に不活性化された細菌は、咳又はくしゃみによって体外に排出された場合に周囲に広がることは制限される（集団予防（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ））。
【００７７】
「治療する」という用語は治療を意味し、「予防する」という用語は予防的措置を意味する。治療を要する患者には、既に疾患を有する者及び疾患を予防すべき者が含まれる。治療対象の患者は、障害を有すると診断されたか、障害にかかりやすい可能性がある患者である。
【００７８】
好ましくは、患者は動物又はヒトである。
【００７９】
最も好ましくは、「動物」という用語は、家畜（例えば家禽）、動物園の動物、スポーツ用動物、イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、サル等のペット等を意味する。
【００８０】
また、本発明の範囲には、グラム陽性菌関連疾病の治療又は予防のための薬剤の調製における本願明細書に記載した医薬組成物の使用が含まれる。
【００８１】
また、本発明は、大規模生体適合性殺菌剤の調製における本発明の組成物の使用を含む。従って、本発明の組成物を必要に応じて希釈して水性懸濁液又はヒドロゲル内の分散液、ペースト又は噴霧剤を調製する。
【００８２】
本発明の殺菌剤は、上述した活性成分に加えて、所望の用途に応じてその他の通常使用される成分を含むことができる。特に、殺菌溶液のｐＨ範囲を６未満に保つために酸性化剤を使用することができる。プロトン化化合物及び／又はその他の活性成分のための適当な溶媒を使用することができる。溶媒は、好ましくは水又は水混和性有機溶媒である。溶液は、圧縮空気又は当業者に公知のその他の噴射剤を使用して容易に噴霧することができる。
【００８３】
本発明の殺菌剤は、病院、動物病院、歯科、診療所等の医学関連環境における表面消毒に好適である。本発明の溶液は手術器具の減菌に使用することが特に好ましい。また、これらの殺菌剤は、学校、交通機関、レストラン、ホテル、ランドリー等の公共区域でも有用である。また、殺菌剤は、トイレ、ボウル、キッチンの消毒薬として家庭で使用することもできる。本願明細書に開示する組成物を含む殺菌剤は、医療機器、手術器具、手術用手袋又はマスクを消毒するために使用することができる。また、殺菌剤は、医療スタッフ及び患者の手術部位を消毒するために外科手術の準備にも有用である。例えば、本発明の組成物によって手術器具をコーティングして外科手術前に無菌コーティングを準備することができる。
【００８４】
また、本発明は、抗菌コーティング剤の調製における本発明の組成物の使用を提供する。コーティング剤は、例えば、手術用手袋、手術用装置、手術用機器、男性用コンドーム、マスクをコーティングするか、細菌感染されやすい留置カテーテル及び同様なインプラントをコーティングするために使用することができる。
【００８５】
本発明の別の態様は、グラム陽性菌を抑制するためのキットであって、本発明のｎＰＬＶ組成物と、必要に応じて試薬及び／又は取扱説明書と、を含むキットを提供する。
【００８６】
細菌の薬剤耐性変異株が抗菌薬剤による長期処理後に現れる場合がある。細菌感染に対する医薬の効能は、例えば、主要な医薬とは活性の異なる部位において、第２及びおそらくは第３の抗菌剤と共に又は交互に化合物を投与することによって長期化、増大又は回復させることができる。あるいは、そのような併用又は交互療法により、医薬の薬物動態、生体内分布又はその他のパラメータを変化させることができる。通常は、細菌に対して多発同時的なストレスを引き起こす併用療法が典型的である。
【００８７】
従って、本発明のキットは、他の抗菌剤を含む医薬製剤をさらに含むことができる。好適な抗生物質製剤は、例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  ３０  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ），Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｏｎｔｖａｌｅ，  Ｎ．Ｊ．），（５３ｒｄ  Ｅｄ．），１９９９；Ｍａｙｏ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｕｎａｂｒｉｄｇｅｄ  Ｖｅｒｓｉｏｎ，  Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ（Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，Ｍｉｎｎ．），Ｊａｎｕａｒｙ  １９９８；Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ  Ａｎ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ（１１ｔｈ  Ｅｄ．），Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．（Ｒａｈｗａｙ，Ｎ．Ｊ．），  １９８９；Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｕｓｅ  Ｇｕｉｄｅ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｅｄｓｃｈ．ｗｉｓｃ．ｅｄｕ／ｃｌｉｎｓｃｉ／５ａｍｃｇ／ａｍｃｇ．ｈｔｍｌ；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｏｆ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｃｌａｓｓｅｓ，  Ｔｈｏｍａｓ  Ｊｅｆｆｅｒｓｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｈｔｔｐ：／／ｊｅｆｆｉｉｎｅ．ｔｊｕ．ｅｄｕ／ＣＷＩＳ／ＯＡＣ／ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ＿ｇｕｉｄｅ／ｉｎｔｒｏ．ｈｔｍｌ並びに本願明細書に引用する参考文献に開示されている。
【００８８】
抗生物質の例としては、例えば、スルホンアミド、ペニシリン、セファロスポリン、アミノグルコシド、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、マクロライド、リンコサミド、ストレプトグラミン、グリコペプチド、リファマイシン、ニトロイミジアゾール、キノロン、トリメトプリン、オキサゾリジノンエステル、リポペプチドが挙げられる。
【００８９】
具体的な化合物の例としては、例えば、Ａｍｉｋａｃｉｎ（硫酸アミカシン）、Ｃｒａｒａｍｙｅｉｎ（硫酸ゲンタマイシン）、Ｎｅｂｃｉｎ（硫酸トブラマイシン）、Ｎｅｔｒｏｍｙｃｉｎ（硫酸ネチルマイシン）、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ  Ｓｕｌｆａｔｅ、ＴＯＢＩ（トブラマイシン）、Ａｚａｃｔａｍ（アズトレオナム）、Ｃｅｆｏｔａｎ（セホテタン）、Ｌｏｒａｂｉｄ（ロラカルベフ）、Ｍｅｆｏｘｉｎ（セフォキシチン）、Ｍｅｒｒｅｍ（メロペネム）、Ｐｒｉｍａｘｉｎ（注射懸濁液用イミペナム及びシラスタチン）、Ａｎｃｅｆ（セファゾリン）、Ｃｅｃｌｏｒ（セファクロル）、Ｃｅｄａｘ（セフチブテン）、Ｃｅｆｉｚｏｘ（セフチゾキシムナトリウム）、Ｃｅｆｏｂｉｄ（セホペラゾンナトリウム）、Ｃｅｆｔｉｎ（セフロキシムアキセチル）、Ｃｅｆｚｉｌ（セフプロジル）、Ｃｅｐｔａｚ（セフタジダイム）、Ｃｌａｆｏｒａｎ（セホタキシム）、Ｄｕｒｉｃｅｆ（セファドロキシル一水和物）、Ｆｏｒｔａｚ（セフタジダイム）、Ｋｅｆｌｅｘ（セファレキシン）、Ｋｅｆｔａｂ（セファレキシンＨＣｌ）、Ｋｅｆｕｒｏｘ（セフロキシム）、Ｋｅｆｚｏｌ（セファゾリン）、Ｍａｎｄｏｌ（セファマンドールナファート）、Ｍａｘｉｐｉｍｅ（セフェピムＨＣｌ）、Ｍｏｎｏｃｉｄ（セホニシドナトリウム）、Ｏｍｎｉｃｅｆ（セフジニール）、Ｒｏｃｅｐｈｉｎ（セフトリアキソン）、Ｓｕｐｒａｘ（セフィキシム）、Ｔａｚｉｃｅｆ（セフタジダイム）、Ｔａｚｉｄｉｍｅ（セフタジダイム）、Ｖａｎｔｉｎ（セフポドキシムプロキセチル）、Ｚｉｎａｃｅｆ５（セフロキシム）、Ｂｉａｘｉｎ（クラリスロマイシン）、Ｄｙｎａｂａｃ（ジリトロマイシン）、Ｅ．Ｅ．Ｓ．  ２００（エリスロマイシンエチルサクシネート）、Ｅ．Ｅ．Ｓ．４００（エリスロマイシンエチルサクシネート）、Ｅｒｙ−Ｐｅｄ  ２００（エリスロマイシンエチルサクシネート）、ＥｒｙＰｅｄ  ４００（エリスロマイシンエチルサクシネート）、Ｅｒｙ−Ｔａｂ（エリスロマイシン遅延放出錠）、Ｅｒｙｔｈｒｏｃｉｎ  Ｓｔｅａｒａｔｅ（ステアリン酸エリスロマイシン）、Ｉｌｏｓｏｎｅ（エリスロマイシンエストレート）、ＰＣＥ  Ｄｉｓｐｅｒｔａｂ（錠剤内のエリスロマイシン粒子）、Ｐｅｄｉａｚｏｌｅ（経口懸濁剤用エリスロマイシンエチルサクシネート及びスルフイソキサゾールアセチル）、Ｔａｏ（トロレアンドマイシン）、Ｚｉｔｈｒｏｍａｘ（アジスロマイシン）、Ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ、Ｃｌｅｏｃｉｎ  ＨＣｌ（塩酸クリンダマイシン）、Ｃｌｅｏｔｉｎ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（クリンダマイシンフォスフェート）、Ｃｏｌｙ−Ｍｙｃｉｎ  Ｍ（コリスチンメタナトリウム）、Ｖａｎｃｏｃｉｎ  ＨＣｌ（塩酸バンコマイシン）、Ａｍｏｘｉｌ（アモキシシリン）、Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ（アモキシシリン／クラブラン酸塩カリウム）、Ｂｉｃｉｌｌｉｎ  Ｃ−Ｒ  ９００／３００（ペニシリンＧベンザチン及びペニシリンＧプロカイン懸濁液）、Ｂｉｃｉｌｌｉｎ  Ｃ−Ｒ（ペニシリンＧベンザチン及びペニシリンＧプロカイン懸濁液）、Ｂｉｃｉｌｌｉｎ  Ｌ−Ａ（ペニシリンＧベンザチン懸濁液）、Ｇｅｏｅｉｌｌｉｎ（カルベニシリンインタニルナトリウム）、Ｍｅｚｌｉｎ（無��メジロシリンナトリウム）、Ｏｍｎｉｐｅｎ（アンピシリン）、Ｐｅｎ−Ｖｅｅ  Ｋ（ペニシリンＶカリウム）、Ｐｆｉｚｅｒｐｅｎ（ペニシリンＧカリウム）、Ｐｉｐｒａｃｉｌ（ピペラシリンナトリウム）、Ｓｐｅｅｔｒｏｂｉｄ（バカンピシリン−ＨＣｌ）、Ｔｉｃａｒ（チカルシリンジナトリウム）、Ｔｉｍｅｎｔｉｎ（チカルシリン二ナトリウムとクラブラン酸カリウム）、Ｕｎａｓｙｎ（アンピシリンナトリウム／スルバクタムナトリウム）、Ｚｏｓｙｎ（ピペラシリンナトリウムとタゾバクタムナトリウム）、ジクロキサシリンナトリウム、Ａｃｈｒｏｍｙｃｉｎ  Ｖ（テトラサイクリンＨＣｌ）、Ｄｅｃｌｏｍｙｃｉｎ（デメクロサイクリンＨＣｌ）、Ｄｙｎａｃｉｎ（ミノサイクリン（ｍｉｎｏｃｙｌｃｉｎｅ）ＨＣｌ）、Ｍｉｎｏｃｉｎ（塩酸ミノサイクリン）、Ｍｏｎｏｄｏｘ（ドキシサイクリン一水和物カプセル剤）、Ｔｅｒｒａｍｙｃｉｎ（オキシテトラサイクリン（ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｌｉｎｅ））、Ｖｅｃｔｒｉｎ（塩酸ミノサイクリン）、Ｖｉｂｒａｍｙｃｉｎカルシウム（ドキシサイクリンナトリウム）、Ｖｉｂｒａｍｙｃｉｎヒクラート（ドキシサイクリンヒクラート）、Ｖｉｂｒａｍｙｃｉｎ一水和物（ドキシサイクリン一水和物）、Ｖｉｂｒａ−Ｔａｂｓ（ドキシサイクリン水和物）、Ｄｅｃｌｏｍｙｃｉｎ（デメクロサイクリンＨＣｌ）、Ｖｉｂｒａｍｙｃｉｎ（ドキシサイクリン）、Ｄｙｎａｃｉｎ（ミノサイクリン（Ｍｉｎｏｃｙｌｉｎｅ）ＨＣｌ）、Ｔｅｒｒａｍｙｃｉｎ（オキシテトラサイクリンＨＣｌ）、Ａｃｈｒｏｍｙｃｉｎ  Ｖカプセル５（テトラサイクリンＨＣｌ）、Ｌｉｎｃｏ−ｍｙｃｉｎｓ、Ｃｌｅｏｔｉｎ  ＨＣｌ（クリンダマイシンＨＣｌ）、Ａｂｅｌｃｅｔ（アンホテリシンＢ脂質錯体）、ＡｍＢｉｓｏｍｅ（アンホテリシンＢ）、Ａｍｐｈｏｔｅｃ（アンホテリシンＢコレステロールサルフェート錯体）、Ａｎｃｏｂｏｎ（フルシトシン）、Ｄｉｆｌｕｃａｎ（フルコナゾール）、Ｆｕｌｖｉｃｉｎ  Ｐ／ガンマ（超微小サイズグリセオフルビン）、Ｆｕｌｖｉｃｉｎ  Ｐ／Ｇ  １６５及び３３０（超微小サイズグリセオフルビン）、Ｇｒｉｆｕｌｖｉｎ  Ｖ（グリセオフルビン）、Ｇａｌｓ−ＰＥＧ（グリセオフルビン（ｇｘｉｓｅｏｆｕｌｖｉｎ）超微小サイズ）、Ｌａｍｉｓｉｌ（塩酸テルビナフィン）、Ｎｉｚｏｒａｌ（ケトコナゾール）、アンホテリシンＢ、Ｌｏｔｒｉｍｉｎ（クロトリマゾール）、Ｄａｐｓｏｎｅ錠剤（ダプソン）、Ｄｉｆｌｕｃａｎ（フルコナゾール）、Ｍｏｎｉｓｔａｔ−Ｄｅｒｍクリーム剤（ミコナゾール）、Ｍｙｃｏｓｔａｌｉｎ  ＣＲＣ  ．ａｍ（ニスタチン）、Ｓｐｏｒａｎｏｘ（イトラコナゾール）、Ａｒａｌｅｎ塩酸塩（クロロキンＨＣｌ）、Ａｒａｌｅｎホスファート（リン酸クロロキン）、Ｄａｔａｐｒｉｍ（ピリメタミン）、Ｌａｄａｍ（メフロキンＨＣｌ）、Ｐｌａｑｕｅｎｉｌ（硫酸ヒドロキシクロロキン（ｈｙｄｒｏｘｙｃｈｌｏｒｏｑｎｉｎｅ））、Ｃａｐａｓｔａｔサルフェート（硫酸カプレオマイシン）、Ｍｙａｍｂｕｔｏｌ（塩酸エタンブトール）、Ｍｙｃｏｂｕｔｉｎ（リファブチンカプセル剤）、Ｎｙｄｒａｚｉｄ（イソニアジド注射剤）、Ｐａｓｅｒ（アミノサリチル酸）、Ｐｒｉｆｉｉｎ（リファペンチン）、Ｐｙｒａｚｉｎａｍｉｄｅ錠剤（ピラチナミド）、Ｒｉｆａｄｉｎ（リファンピンカプセル剤）、Ｒｉｆａｄｉｎ  ＩＶ（リファンピン注射剤）、Ｒｉｆａｍａｔｅ（リファンピンとイソニアジド）、Ｒｉｆａｔｅｒ（リファンピン、イソニアジド及びピラチナミド）、Ｓｅｒｏｍｙｃｉｎ（シクロセリンカプセル剤）、硫酸ストレプトマイシン、Ｔｉｃｅ  ＢＣＧ（ＢＣＧワクチン）、シクロセリン（ｓｅｒｏｍｙｃｉｎカプセル剤）、Ｕｒｉｓｅｄ（メテナミン）、Ｔｒｅｃａｔｏｒ−ＳＣ（エチオナミド錠剤）、Ａｌｆｅｒｏｎ  Ｎ（インターフェロンアルファ−ｎ３）、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（硫酸インジナビル）、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ（ガンシクロビル）、Ｃｙｔｏｖｅｎｅ−ＩＶ（ガンシクロビルナトリウム）、Ｅｐｉｖｉｒ（ラミブジン）、Ｆａｍｖｉｒ（ファムシクロビル）、Ｆｌｕｍａｄｉｎｅ（リマンタジンＨＣｌ）、Ｆｏｓｃａｖｉｒ（フォスカルネット（ｆｏｓｃａｍｅｔ）ナトリウム）、Ｈｉｖｉｄ（ザルシタビン）、Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ（インターフェロンアルファ−２ｂ）、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（サキナビルメシラート）、Ｎｏｒｖｉｒ（リトナビル）、Ｒｅｂｅｔｒｏｌ（リバビリン）とイントロンＡ（インターフェロンアルファ−２ｂ）を含むＲｅｂｅｔｒｏｎ併用療法、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（デラビルジンメシラート）、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（ジドブジン（ｚｉｄｕｖｕｄｉｎｅ））、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ  ＩＶ（ジドブジン）、Ｓｙｍｍｅｔｒｅｌ（アマンタジンＨＣｌ）、Ｓｙｎａｇｉｓ（パリビズマブ）、Ｖａｌｔｒｅｘ（バラシクロビルＨＣｌ）、Ｖｉｄｅｘ（ジダノシン）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（ネルフィナビル（ｎｅｌｆｍａｖｉｒ）メシラート）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（ネビラピン）、Ｖｉｒａｚｏｌｅ（リバビリン）、Ｖｉｓｔｉｄｅ（シドフォビル）、Ｚｅｒｉｔ（スタブジン（ｄ４Ｔ））、Ｓｙｍｍｅｔｒｅｌシロップ剤（アマンタジンＨＣｌ）、Ｃｏｍｂｉｖｉｒ錠剤（ラミブジン（ｌａｍｉｄｕｖｉｎｅ））、Ｚｏｖｉｒａｘ（アシクロビル）、Ｄａｐｓｏｎｅ錠剤（ダプソン）、Ｄａｒａｐｒｉｍ（ピリメタミン）、Ｆｌａｇｙｌ  ３７５（メトロニダゾール）、Ｆｌａｇｙｌ  ＥＲ錠剤（メトロニダゾール）、Ｆｌａｇｙｌ  Ｉ．Ｖ．（メトロニダゾール）、Ｆｕｒｏｘｏｎｅ（フラゾリドン）、Ｍｅｐｒｏｎ（アトバコン）、Ｎｅｕｔｒｅｘｉｎ（トリメトレキセート（ｔｆｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ）グルクロナート）、Ｃｉｐｒｏ（シプロフロキサシンＨＣｌ）、Ｆｌｏｘｉｎ（オフロキサシン）、Ｌｅｖａｑｕｉｎ（レボフロキサシン）、Ｍａｚａｑｕｉｎ（ロメフロキサシン（ｌｏｍｅｆｉｏｘａｃｉｎ）ＨＣｌ）、Ｎｏｒｏｘｉｎ（ノルフロキサシン）、Ｐｅｎｅｔｒｅｘ（エノキサシン）、Ｒａｘａｒ（グレパフロキサシンＨＣｌ）、Ｔｒｏｖａｎ（トロバフロキサシン（ｔｒｏｖａｆｉｏｘａｃｉｎ）メシラート）、Ｚａｇａｍ（スパルフロキサシン）、Ｂａｃｔｒｉｍ．（トリメトプリムとスルファメトキサゾール）、Ｂａｃｔｒｉｍ  ＤＳ（トリメトプリムとスルファメトキサゾールのダブルストレングス）、Ｐｅｄｉａｚｏｌｅ（エチルコハク酸エリスロマイシンとスルフイソキサゾールアセチル）、Ｓｅｐｔｒａ（トリメトプリムとスルファメトキサゾール）、Ｓｅｐｔｒａ  ＤＳ（トリメトプリムとスルファメトキサゾール）、コトリモキサゾール、スルファジアジン、Ｂａｔｔｒｉｍ  Ｉ．Ｖ．注入剤（スルファメトキサゾール）、スルファピリジン及びＰｅｄｉａｚｏｌｅ（エチルコハク酸エリスロマイシンとスルフイソキサゾールアセチル）、Ｆｕｒａｄａｎｔｉｎ（ニトロフラントイン）、Ｍａｃｒｏｂｉｄ（ニトロフラントイン一水和物微結晶）、Ｍａｃｒｏｄａｎｔｉｎ（ニトロフラントイン微結晶）、Ｍｏｎｕｒｏｌサシェ（ホスホマイシントロメタミン）、ＮｅｇＧｒａｍカプレット（ナリジキシン酸）、Ｓｅｐｔｒａ（トリメトプリムとスルファメトキサゾール）、Ｓｅｐｔｒａ  ＤＳ（トリメトプリムとスルファメトキサゾール）、Ｕｒｉｓｅｄ（防腐剤メテナミン、メチレンブルー、サリチル酸フェニル、安息香酸及び副交感神経遮断薬（硫酸アトロピン）ヒヨスチアミンの組み合わせ）、（オキシテトラサイクリンＨＣｌ、スルファメチゾール及びフェナゾピリジンＨＣｌ）、（マンデル酸メテナミン）、Ｂａｃｔｒｏｂａｎ（ムピロシン）、眼用Ｃｈｌｏｒｏｍｙｃｅｔｉｎ（クロラムフェニコール（Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃａｌ））、Ｃｏｒｔｉｓｐｏｒｉｎ（ネオマイシンと硫酸ポリミキシン［３と酢酸ヒドロコルチゾンのクリーム剤）、Ｉｌｏｔｙｃｉｎ（エリスロマイシン眼軟膏剤）、ＮｅｏＤｅｃａｄｒｏｎ（硫酸ネオマイシン−リン酸デキサメタゾンナトリウム）、Ｐｏｌｙｔｒｉｍ（トリメトプリムと硫酸ポリミキシン（ｐｏｌｙｔｈｙｘｉｎ）［３の点眼剤）、Ｔｅｒｒａ−Ｃｏｒｔｒｉｌ（オキシテトラサイクリンＨＣｌと酢酸ヒドロコルチゾン）、Ｔｅｒｒａｍｙｃｉｎ（オキシテトラサイクリン）、ＴｏｂｒａＤｅｘ（トブラマイシンとデキサメタゾンの眼懸濁液及び軟膏剤）、Ｖｉｔａ−Ａ眼軟膏剤、（ビダラビン（ｖｉｄａｔａｂｉｎｅ））、（ノルフロキサシン点眼剤、Ｃｉｌｏｘａｎ点眼剤及び軟膏剤（シプロフロキサシンＨＣｌ）、Ｏｃｕｆｌｏｘ点眼剤（オフロキサシン）、Ｂｌｅｐｈａｍｉｄｅ眼軟膏剤（スルファセタミドナトリウムと酢酸プレドニゾロン）、Ｂｌｅｐｈａｍｉｄｅ眼懸濁液（スルファセタミドナトリウムと酢酸プレドニゾロン（ｐｒｅｄｒｄｓｏｌｏｎｅ））、Ａ／Ｔ／Ｓ（エリスロマイシン）、
Ｂａｃｔｒｏｂａｎ（ムピロシン）、Ｂｅｎｚａｍｙｃｉｎ（エリスロマイシン−過酸化ベンゾイル局所ゲル）、Ｂｅｔａｄｉｎｅ（ポビドン−ヨウ素（ｏｄｉｎｅ））、Ｃｌｅｏｔｉｎ  Ｔ（リン酸クリンダマイシン局所液剤）、Ｃｌｉｎｄｅｔｓ（リン酸クリンダマイシン綿撒糸）、Ｃｏｒｔｉｓｐｏｆｉｎ（ネオマイシン、硫酸ポリミキシンＢ及び酢酸ヒドロコルチゾンのクリーム剤）、Ｅｍｇｅｌ（エリスロマイシン）、Ｅｒｙｃｅｔｔｅ（エリスロマイシン局所液剤）、Ｇａｒａｍｙｃｉｎ（硫酸ゲンタマイシン）、Ｋｌａｒｏｎ（ナトリウムスルファセタミドローション剤）、Ｍｙｃｏｓｔａｔｉｎ（ニスタチンクリーム剤）、Ｔｈｅｒａｍｙｃｉｎ  Ｚ（エリスロマイシン局所液剤）、Ｔ−Ｓｔａｔ（エリスロマイシン）、クロロマイセチン（クロラムフェニコール眼軟膏剤）、Ｃｏｒｔｉｓｐｏｒｉｎ（ネオマイシン及び硫酸ポリミキシンＢ、バシトラシン亜鉛及びヒドロコルチゾン眼軟膏剤）、Ｉｌｏｔｙｃｉｎ（エリスロマイシン）、ＮｅｏＤｅｅａｄｒｏｎ（硫酸ネオマイシン−リン酸デキサメタゾンナトリウム）、Ｐｏｌｙｔｒｉｍ（トリメトプリム及び硫酸ポリミキシンＢ）、Ｔｅｒｒａ−Ｃｏｒｔｒｉｌ（オキシテトラサイクリンＨＣｌと酢酸ヒドロコルチゾン）、Ｔｅｒｒａｍｙｃｉｎ（オキシテトラサイクリン）、Ｅｘｅｌｄｅｒｍ（硝酸スルコナゾール）、ファンギゾン（アンホテリシンＢ経口懸濁液剤）、Ｌａｍｉｓｉｌ（塩酸テルビナフィン（ｔｅｒｂｉｎａｆｉｎｅ）クリーム剤）、Ｌｏｐｒｏｘ（シクロピロクスオラミン）、Ｌｏｔｒｉｍｉｎ（クロトリマゾール）、Ｌｏｔｒｉｓｏｎｅ（クロトリマゾールとジプロピオン酸（ｄｉｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）ベタメタゾン）、Ｍｅｎｔａｘ（ブテナフィンＨＣｌ）、Ｍｏｎｉｓｔａｔ−Ｄｅｎｎ（硝酸ミコナゾール）、Ｍｙｃｅｌｅｘ（クロトリマゾール）、Ｍｙｃｏｓｔａｔｉｎ（ニスタチン）、Ｎａｆｆｉｎ（ナフチフィン（ｎａｔｔｉｆｉｎｅ）ＨＣｌ）、Ｎｉｚｏｒａｌケトコナゾール（Ｏｃｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ）、Ｎｙｓｔｏｐ（ニスタチン）、Ｏｘｉｓｔａｔ（硝酸オキシコナゾール）、Ｓｅｌｓｕｎ  Ｒｘ（２．５％硫化セレンローション剤）、Ｓｐｅｃｔａｚｏｌｅ（硝酸エコナゾール）、Ｄｅｎａｖｉｒ（ペンシクロビルクリーム剤）、Ｚｏｖｉｒａｘ（アシクロビル）、Ｂｅｎｚａｓｈａｖｅ過酸化ベンゾイル（Ｃｏｅｎｚｏｙｌ））、Ｂｅｔａｄｉｎｅ（ポビドン−ヨウ素）、Ｂｅｔａｓｅｐｔ（グルコン酸クロルヘキシジン）、Ｃｅｔａｐｈｉｌ（石鹸代替品）、Ｃｌｏｒｐａｃｔｉｎ  ＷＣＳ−９０（ナトリウムオキシクロロセン）、Ｄａｐｓｏｎｅ錠剤（ダプソン）、Ｄｅｓｑｕａｍ−Ｅ過酸化ベンゾイル（Ｃｏｅｎｚｏｙｌ））、Ｄｅｓｑｕａｍ−Ｘ（過酸化ベンゾイル）、Ｈｉｂｉｃｌｅｎｓ（グルコン酸クロルヘキシジン）、Ｈｉｂｉｓｔａｔ（グルコン酸クロルヘキシジン（ｅｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ））、Ｉｍｐｒｅｇｏｎ（テトラクロロサリチルアニリド２％）、ＭｅｔｒｏＣｒｅａｍ（メトロニダゾール）、ＭｅｔｒｏＧｅｌ（メトロニダゾール）、Ｎｏｒｉｔａｔｅ（メトロニダゾール）、ｐＨｉｓｏＨｅｘ（ヘキサクロロフェン洗浄剤）、Ｓｕｌｆａｃｅｔ−Ｒ（ナトリウムスルフ���セタミド１０％と硫黄５％）、Ｓｕｌｆａｍｙｌｏｎ（酢酸マフェニド（ｍａｔｅｒｆｉｄｅ））、Ｔｆｉａｚ過酸化ベンゾイル（Ｃｏｅｎｚｏｙｌ））、Ｖａｎｏｘｉｄｅ−ＨＣ過酸化ベンゾイル（Ｃｏｅｎｚｏｙｌ）ヒドロコルチゾン）、Ａｃｔｉｃｉｎ（ペルメトリン）、Ｅｌｉｍｉｔｅ（ペルメトリン）、Ｅｕｒａｘ（クロタミトン）、Ｅｆｕｄｅｘ（フルオロウラシル）、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ、リファペンチン、キヌプリスチン／ダルフォプリスチン、モキシフロキサシン、ガチフロキサシン、リネゾリド、セフジトレンピボキシル、エルタペネム、ゲミフロキサシン、ダプトマイシン、テリチオマイシン及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【００９０】
あるいは、本発明のｎＰＬＶ組成物は、上記他の抗菌剤及びそれらの組み合わせをさらに含むことができる。
【００９１】
併用療法では、有効用量の２種以上の薬剤を同時に投与し、交互又は逐次段階療法では、有効用量の各薬剤を逐次又は順次投与する。用量は、医薬の吸収率、不活性化及び排泄速率並びに当業者に公知のその他の要因に応じて異なる。また、用量は軽減する症状の重症度に応じて異なる。また、特定の患者の場合には、各患者のニーズ並びに組成物を投与するか、組成物の投与を監督する者の専門的な判断に応じて特別の用量計画を調節すべきである。いくつかの実施形態においては、１０〜１５μＭ以下又は通常は１〜５μＭ未満のＥＣ５０を示す抗菌剤が望ましい。
【００９２】
通常、キットは、容器と、容器上又は容器内に設けられたラベル又は包装挿入物を含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器等が挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチック等の各種材料で形成することができる。容器は、症状を治療するために有効な組成物を保持し、無菌アクセス口（例えば、容器は静脈注射用溶液バッグ又は皮下注射針を貫通させることができるストッパーを有するバイアル又はエーロゾル噴霧装置であってもよい）を有することができる。ラベル又は包装挿入物は、組成物を細菌感染等の任意の症状を治療するために使用することを表示する。
【００９３】
あるいは又はさらに、キットは、静菌剤注射用蒸留水（ＢＷＦＩ）、燐酸緩衝食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液等の製薬学的に許容し得る緩衝液を含む第２（又は第３）の容器をさらに含むことができる。キット、その他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、注射器等の市販又はユーザーの見地から望ましいその他の材料をさらに含むことができる。
【００９４】
当業者には、具体的に説明した実施形態以外に本発明を容易に変更及び変形することができることは明らかであろう。本発明は、本発明の精神又は基本的特徴から逸脱することなく、そのような変更及び変形を含む。また、本発明は、本願明細書において参照又は例示した全ての工程、特徴、組成物及び化合物を個々又は一括して含み、複数の工程又は特徴の全ての組み合わせを含む。従って、本願の開示は例示した態様に限定されるものではなく、本発明は特許請求の範囲及び本発明の範囲に含まれる均等物の意味及び範囲に含まれるあらゆる変形を含む。
【００９５】
本願明細書において各種参考文献を引用しているが、各参考文献の内容は各参照によって本願明細書に援用するものとする。
【００９６】
上記説明は以下の実施例を参照することによりさらに十分に理解されるだろう。ただし、以下の実施例は本発明を実施する方法の例示に過ぎず、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００９７】
実施例１
材料及び方法
細菌株
グラム陽性菌の異なる菌株（黄色ブドウ球菌、枯草菌、ルテウス菌）及びグラム陰性菌の異なる菌株（大腸菌、緑膿菌）を使用した。細菌は、公知の標準プロトコルに従って増殖させ、保管した。
【００９８】
ｎＰＬＶの調製
使用した主要な脂質はポリオキシエチレンセチルエーテル（ＰＣＥ）であり、単独あるいは以下に記載するモル比でパルミチン酸（ＰＡ）、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）又は臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）と混合して使用した。
【００９９】
脂質混合物を５０℃に加熱し、２注射器法（２−ｓｙｒｉｎｇｅｓ  ｍｅｔｈｏｄ）を使用して５０℃に予熱したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）と混合した。次に、０．５ｇの脂質混合物を含有する注射器（１０ｍｌ）を、１０ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含有する第２の注射器（１０ｍｌ）に接続した（最終脂質濃度：５％）。次に、脂質混合物をＰＢＳを含有する注射器に注入し、混合物を約２０回素早く振って均質な懸濁液を得た。次に、位相差顕微鏡でｎＰＬＶの品質を確認した。ｎＰＬＶ０１：１００％ポリオキシエチレンセチルエーテル（ＰＣＥ）；ｎＰＬＶ０２：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％パルミチン酸（ＰＡ）；ｎＰＬＶ０３：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）；ｎＰＬＶ０４：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）からなる４種類のｎＰＬＶを調製した。ｎＰＬＶについて、５ｍＭシクロデキストリンを含むｎＰＬＶ及びシクロデキストリンを含まないｎＰＬＶを調製した。
【０１００】
不活性化アッセイ
細菌を寒天平板培地に固定した後、シクロデキストリンを含むか、シクロデキストリンを含まないｎＰＬＶ組成物を培地に添加した。１００μＬの各組成物を０．５ｍｇ／ｍＬ（５０ｍｇ総脂質）の濃度で添加した。寒天平板培地内で細菌を３７℃で一晩培養した。白斑によって増殖が阻害されたことが示された。
【０１０１】
実施例２−最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定
細菌株
枯草菌を実験に使用した。
【０１０２】
ｎＰＬＶの調製
ｎＰＬＶは実施例１と同様に調製した。
【０１０３】
アッセイ
各種濃度のｎＰＬＶ０３（９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ））の存在下で、ＬＢブロス培地内において接種枯草菌（５×１０５細菌／ｍＬ）を一晩増殖させた。次に、各培養試料を逐次希釈し、力価測定のために寒天平板培地に固定した。
【０１０４】
実施例３−結果
本願明細書に開示する組成物を使用して細菌を抑制する可能性を探るために、グラム陽性菌及びグラム陰性菌に対する組成物の抑制（阻害）作用について試験を行った。
【０１０５】
異なる脂質化合物を使用して以下の４種類のｎＰＬＶを合成した。すなわち、ｎＰＬＶ０１：１００％ポリオキシエチレンセチルエーテル（ＰＣＥ）；ｎＰＬＶ０２：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％パルミチン酸（ＰＡ）；ｎＰＬＶ０３：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）；ｎＰＬＶ０４：９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）である。また、各ｎＰＬＶについて、５ｍＭシクロデキストリンを含むｎＰＬＶ及びシクロデキストリンを含まないｎＰＬＶを調製した。
【０１０６】
図１から明らかなように、第４級アンモニウム（合計５０ｎｇ）を含む小胞は細菌の増殖を抑制した。この濃度における抑制作用は、シクロデキストリンの存在に依存しないように思われた。
【０１０７】
図２から明らかなように、ｎＰＬＶ０３（シクロデキストリンを使用せず）の最小発育阻止濃度は総脂質の２３．４ｍｇ／Ｌ（２３．４μｇ／ＬのＨＴＡＢ）だった。
【０１０８】
参考文献
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Wallach DFH1990a,. Lipid vesicles formed of surfactants and steroids.  U.S. Patent 4,197,951.
Wallach DFH. 1990b Paucilamellar lipid vesicles.  U.S. Patent 4,911,928.
Wallach DFH. 1992, Paucilamellar lipid vesicles.  U.S. Patent 5,147,723.
Wallach DFH. 1996, Paucilamellar lipid vesicles.  U.S. Patent 5,474,848
Wallach DFH., 1997, Hybrid paucilamellar lipid vesicles.  U.S. Patent 5,628,936.
Wallach DFH, Varanelli C., 1997, Lipid vesicle fusion as a method of transmitting a biologically active material to a cell. U.S .Patent 5,665,380. 
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Wallach DFH  New non-phospholipid vesicles (nPLV) and their use in cosmetic, therapeutic and prophylactic applications, 2001. European Patent application 1, 304,103, PCT, US extension 2005.
Working committee of the World Health organisation (Who). Avian influenza (H5N1) infection 
Wallach DFH  New non-phospholipid vesicles (nPLV) and their use in cosmetic, therapeutic and prophylactic applications, 2001. European Patent application 1, 304,103, PCT, US extension 2005.
【図２】
2012509932.tif 000005
【図３】
2012509932.tif 000006
【図１】
2012509932.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成22年9月14日(2010.9.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラム陽性菌を不活性化させるための方法であって、
前記グラム陽性菌を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む組成物に接触させることを含み、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、
前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、方法。
【請求項２】
請求項１において、
前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）からなる群から選択される、方法。
【請求項３】
請求項２において、
前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）又は臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）である、方法。
【請求項４】
請求項１において、
前記脂質のモル比が約０．１％〜約０．５％である、方法。
【請求項５】
請求項４において、
前記脂質のモル比が約０．３％である、方法。
【請求項６】
請求項１又は２において、
前記ｎＰＬＶがコレステロールを含まない、方法。
【請求項７】
請求項１又は２において、
前記組成物がシクロデキストリン又はその誘導体を含む、方法。
【請求項８】
請求項１又は２において、
前記ｎＰＬＶがユニラメラ、少重膜又はマルチラメラ（多重層）である、方法。
【請求項９】
請求項７において、
前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１０】
請求項７において、
前記誘導体が、ジメチル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシイソブチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１１】
請求項１において、
前記グラム陽性菌が、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、ブドウ状球菌コアグラーゼ陰性、肺炎連鎖球菌ビリダンス連鎖球菌、Ｂ群の連鎖球菌、化膿連鎖球菌、腸球菌、炭疽菌、セレウス菌、ビフィズス菌、乳酸杆菌、リステリア菌、ノカルジア菌、ロドコッカス・エクイ菌、豚丹毒菌、ジフテリア菌、座瘡プロピオンバクテリウム、放線菌、ボツリヌス菌、クロストリジウムディフィシレ、ウェルシュ菌、破傷風菌、モビルンカス属菌及びペプトストレプトコッカス属菌からなる群から選択される、方法。
【請求項１２】
対象物の抗菌活性を増加させるための方法であって、
前記対象物を、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む組成物に接触させることを含み、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、
前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、方法。
【請求項１３】
請求項１２において、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む、方法。
【請求項１４】
請求項１２において、
前記対象物が、医療用機器、医療用装置及び病院用品からなる群から選択される、方法。
【請求項１５】
請求項１２において、
前記対象物が、表面、手術用手袋、手術器具及びマスクからなる群から選択される、方法。
【請求項１６】
請求項１２において、
前記組成物が水性懸濁液又はヒドロゲル内の分散液である、方法。
【請求項１７】
患者のグラム陽性菌関連疾患を治療、抑制又は予防するための方法であって、
治療有効量の、少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）を含む医薬組成物を、必要に応じて１種以上の製薬学的に許容し得る担体と共に前記患者に投与することを含み、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、
前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、
前記医薬組成物を前記グラム陽性菌に近接する位置に送達する方法。
【請求項１８】
請求項１７において、
前記患者が哺乳動物である、方法。
【請求項１９】
請求項１７において、
前記患者がヒトである、方法。
【請求項２０】
請求項１７において、
前記前記疾患が感染である、方法。
【請求項２１】
請求項２０において、
前記疾患が薬物耐性及び／又は多剤耐性細菌感染である、方法。
【請求項２２】
請求項２１において、
前記疾患が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＲＳＥ）、メチシリン耐性コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ＭＲＣＮＳ）、バンコマイシン耐性大便連鎖球菌及び／又はバンコマイシン耐性エンテロコッカスフェシウムの１以上によるものである、方法。
【請求項２３】
請求項１７において、
前記ｎＰＬＶを少なくとも１種の他の抗菌剤と共に共投与する、方法。
【請求項２４】
請求項２３において、
前記少なくとも１種の他の抗菌剤が、アミノグルコシド、β−ラクタム抗生物質、セファロスポリン、マクロライド、各種抗生物質、ペニシリン、テトラサイクリン、抗真菌剤、抗マラリア薬、抗結核薬、抗細菌性、抗らい菌薬、各種抗感染症薬、キノロン、スルホンアミド、尿中抗感染症薬、経鼻抗生物質、点眼抗生物質、点眼抗細菌剤、キノロン点眼剤、スルホンアミド点眼剤、皮膚及び粘膜抗生物質、皮膚及び粘膜抗真菌剤、皮膚及び粘膜抗菌剤、皮膚及び粘膜各種抗感染症薬、皮膚及び粘膜疥癬虫撲滅薬抗疥癬薬及び殺シラミ薬、皮膚及び粘膜抗新生物薬、ニトロフラン及びオキサゾリジノンからなる群から選択される、方法。
【請求項２５】
請求項２３において、
前記ｎＰＬＶを前記少なくとも１種の他の抗菌剤と同時又は順次投与する、方法。
【請求項２６】
請求項１７において、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含む、方法。
【請求項２７】
請求項２６において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）、塩化セトリモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、コカミドプロピルベタイン（ＣＡＰＢ）、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ）からなる群から選択される、方法。
【請求項２８】
請求項２７において、前記脂質が、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）又は臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ）である、方法。
【請求項２９】
少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、少なくとも１種の他の抗菌剤と、製薬学的に許容し得る担体又は希釈剤と、を含む抗菌組成物であって、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、抗菌組成物。
【請求項３０】
請求項２９において、少なくとも１種のシクロデキストリン又はその誘導体をさらに含む、抗菌組成物。
【請求項３１】
製薬学的に許容し得る量の少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、必要に応じて１種以上の製薬学的に許容し得る担体と、を含み、グラム陽性菌関連疾患の治療のために使用される医薬組成物であって、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、医薬組成物。
【請求項３２】
請求項３１において、
少なくとも１種のシクロデキストリン又はその誘導体をさらに含む、医薬組成物。
【請求項３３】
患者のグラム陽性菌感染を治療、抑制又は予防するためのキットであって、
少なくとも１種の非リン脂質脂質小胞（ｎＰＬＶ）と、試薬及び／又は取扱説明書と、を含み、
前記ｎＰＬＶが、第４級アンモニウム頭部基を含む脂質を含み、前記脂質のモル比が約０．０１％〜約１％である、キット。
【手続補正書】
【提出日】平成23年8月15日(2011.8.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
【図１】各種グラム陽性及びグラム陰性菌に対するｎＰＬＶを含む組成物の抑制作用を示す。ＰＣＥ：ポリオキシエチレンセチルエーテル、ＰＡ：パルミチン酸、ＨＴＡＢ：臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、ＤＨＡＢ：臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム。ｎＰＬＶを含む組成物はグラム陽性菌を抑制する。図中凡例：「Ａ」はｎＰＬＶなし；「Ｂ」はｎＰＬＶ０１；「Ｃ」はｎＰＶ０２；「Ｄ」はｎＰＬＶ０３；「Ｅ」はｎＰＬＶ０４；「＋」は５ｍＭのヒドロキシ−β−シクロデキストリンあり；「−」はヒドロキシ−β−シクロデキストリンなし。
【図２】ｎＰＬＶ０３（９９．９％ＰＣＥ及び０．１％臭化ジメチルジヘキサデシルアンモニウム（ＤＨＡＢ））の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を示す。
【図３】ｎＰＬＶ０３及びｎＰＬＶ０４の組成物に使用される第４級アンモニウムイオン分子の概略図を示す。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１００】
不活性化アッセイ
細菌を寒天平板培地に固定した後、シクロデキストリンを含むか、シクロデキストリンを含まないｎＰＬＶ組成物を培地に添加した。１００μＬの各組成物を０．５ｍｇ／ｍＬ（５０ｍｇ総脂質）の濃度で添加した。寒天平板培地内で細菌を３７℃で一晩培養した。白斑によって増殖が阻害されたことが示された。ｎＰＬＶの培養品は、それぞれ、「Ａ」はｎＰＬＶなし；「Ｂ」はｎＰＬＶ０１；「Ｃ」はｎＰＶ０２；「Ｄ」はｎＰＬＶ０３；「Ｅ」はｎＰＬＶ０４；「＋」は５ｍＭのヒドロキシ−β−シクロデキストリンあり；「−」はヒドロキシ−β−シクロデキストリンなし；で示された。
【国際調査報告】
2012509932.tif 000008
2012509932.tif 000009
2012509932.tif 000010