(57)【要約】  本発明は、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む医薬組成物であり、有効量の前記医薬組成物がＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドを１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇまたは１００ｍｇ含む医薬組成物を提供する。また、本発明の医薬組成物の投与方法も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含んでなる医薬組成物であって、有効量の前記医薬組成物が、１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇまたは１００ｍｇのＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドを含む、医薬組成物。
【請求項２】
ＧＬＰ−１活性を有する前記少なくとも１つのポリペプチドが、少なくとも１つのＧＬＰ−１作動薬を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記少なくとも１つのＧＬＰ−１作動薬が、インクレチンホルモンおよび／またはその断片、変異体および／もしくは複合物、ならびにインクレチン模倣薬および／またはその断片、変異体および／もしくは複合物からなる群から選択される、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ＧＬＰ−１活性を有する前記少なくとも１つのポリペプチドが、ヒト血清アルブミンと融合したヒトＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および／または変異体を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および変異体がＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含む、請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および変異体が、ヒト血清アルブミンに遺伝的に融合している、請求項３〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および変異体が、ヒト血清アルブミンに直列かつ遺伝的に融合している少なくとも２つのＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含む、請求項３〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記少なくとも２つのＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））がヒト血清アルブミンのＮ末端で遺伝的に融合している、請求項５〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＧＬＰ−１活性を有する前記少なくとも１つのポリペプチドが、配列番号１を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ヒトに７日に１回投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む前記医薬組成物が、ヒトに１４日に１回投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む前記医薬組成物が、ヒトに４週間に１回投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む前記医薬組成物が、ヒトに月１回投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
少なくとも３０ｍｇ／ｍＬの配列番号１を含んでなる、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
３０ｍｇ／ｍＬの配列番号１、リン酸ナトリウム、トレハロース、マンニトール、ＴＷＥＥＮ８０および水からなり、かつ、ｐＨ７．２で維持される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
５０ｍｇ／ｍＬの配列番号１、リン酸ナトリウム、トレハロース、マンニトール、ＴＷＥＥＮ８０および水からなり、かつ、ｐＨ７．２で維持される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドをヒトに投与する方法であって、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記ヒトに投与することを含んでなる、方法。
【請求項１８】
前記医薬組成物が皮下投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記医薬組成物が、少なくとも１つの０．３２ｍＬ注射、少なくとも１つの０．６５ｍＬ注射、および少なくとも１つの１．０ｍＬ注射からなる群から選択される皮下注射として投与される、請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記医薬組成物が、２回の注射で同時投与される、請求項１７〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記医薬組成物が、前記ヒトにおけるＨｂＡ１ｃを低下させる、請求項１７〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記医薬組成物が、前記ヒトにおける血清グルコースを低下させる、請求項１７〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ＧＬＰ−１活性を有する前記少なくとも１つのポリペプチドの血清半減期が約５日間である、請求項１７〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ヒトが高血糖を呈する、請求項１７〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ヒトが糖尿病を呈する、請求項１７〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ヒトがＩＩ型真性糖尿病を呈する、請求項１７〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記医薬組成物の投与により、前記ヒトにおいて体重低下が引き起こされる、請求項１７〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
ＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドが、前記ヒトの下肢、腕、または腹部に皮下投与される、請求項１７〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ヒトが、本発明の医薬組成物の投与前にメトホルミンを投与されている、請求項１７〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記医薬組成物が単一療法として投与される、請求項１７〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記医薬組成物が、少なくとも１つの第二の血糖降下剤と同時投与される、請求項１７〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記少なくとも１つの第二の血糖降下剤が、ＧＬＰ−１作動薬、インクレチンホルモン、インクレチン模倣薬、インスリン分泌増強剤、スルホニル尿素、メグリチニド、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トラザミド、グリピジド、グリクラジド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリキドン、グリメピリド、ＧＬＰ−１分解阻害剤、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、グルコース活用増強剤、グリタゾン、チアゾリジンジオン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ｐＰＡＲ作動薬、肝臓内糖新生降下剤、メトホルミン、グルコース吸収遅延化剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、インスリングラルギンおよび／またはインスリンから選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドが、前記ヒトに、初回用量３０ｍｇで投与され、続いて最大５０ｍｇまで増量される、請求項１７〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記ヒトが少なくとも１つの心血管障害に罹患している、請求項１７〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＧＬＰ−１活性および／もしくはＧＬＰ−１作動薬を有する化合物を使用する医薬組成物ならびに持続性血糖降下剤の投与方法ならびに処置レジメンに関する。
【背景技術】
【０００２】
血糖降下剤は、血糖濃度を低下させるために、１型糖尿病と２型糖尿病の両方の処置に使用し得る。インスリン分泌性ペプチドは、糖尿病処置用の潜在的な治療薬とみなされている。インスリン分泌性ペプチドとしては、インクレチンホルモン、例えば、胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）およびグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、ならびにその断片、変異体、および／もしくは複合物が挙げられるが、これらに限定されない。インスリン分泌性ペプチドは、例えば、エキセンディン３およびエキセンディン４も含む。ＧＬＰ−１は、食物摂取に反応して腸内Ｌ細胞から分泌される３６個のアミノ酸長のインクレチンホルモンである。ＧＬＰ−１は、生理的およびグルコース依存的にインスリン分泌を刺激し、グルカゴン分泌を低下させ、胃内容排出を阻害し、食欲を低下させ、ならびにβ細胞増殖を刺激することが示されている。非臨床経験において、ＧＬＰ−１はグルコース依存性インスリン分泌に重要な遺伝子転写を刺激することにより、およびβ細胞新生を促進することにより、持続したβ細胞反応能を促進する（Ｍｅｉｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｄｒｕｇｓ．  ２００３；  １７  （２）：  ９３−１０２）。
【０００３】
健常個体において、ＧＬＰ−１は、膵臓からのグルコース依存性インスリン分泌を刺激することにより食後の血糖値を調節する重要な役割を担い、末梢におけるグルコース吸収を高める。また、ＧＬＰ−１はグルカゴン分泌を抑制して、肝臓内糖産出を低下させる。加えて、ＧＬＰ−１は胃内容排出の遅延化および小腸運動の緩慢化も行い、食物吸収を遅延化する。
【０００４】
２型真性糖尿病（Ｔ２ＤＭ）者は、食後の正常なＧＬＰ−１上昇が欠けているか、または上昇度が抑えられている（Ｖｉｌｓｂｏｌｌ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｉａｂｅｔｅｓ．  ２００１．  ５０；  ６０９−６１３）。したがって、外因性ＧＬＰ−１、インクレチンホルモン、またはインクレチン模倣薬を投与する１つの理論的根拠は、食事関連インスリン分泌を増強し、グルカゴン分泌を低下させ、および／または胃腸運動を緩慢化するために、内因性ＧＬＰ−１を増強、置換または補足することである。天然ＧＬＰ−１の血清半減期は非常に短い（５分未満）。したがって、天然ＧＬＰ−１を糖尿病の治療処置として外因的に投与することは現時点で実行可能ではない。エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（商標登録））などの市販のインクレチン模倣薬は、Ｔ２ＤＭ患者に皮下投与時（５μｇまたは１０μｇ、１日２回）、空腹時および食後のグルコース濃度を低下させることにより、血糖管理を改善する。
【０００５】
したがって、血糖降下剤の有効量を週１回または月１回投与する方法が未だなく、必要とされている。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】配列番号１。
【図２】ＨｂＡ１ｃおよびＡＤＡの目標血糖値に対するアルビグルチド、エクセナチドおよびプラセボの効果。
【図３】ＨｂＡ１ｃおよびＡＤＡの目標血糖値に対するアルビグルチド、エクセナチドおよびプラセボの効果。
【図４】アルビグルチド、エクセナチドおよびプラセボを投与した患者間の有害事象としての悪心および嘔吐の時間経過。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む医薬組成物を提供し、ここで有効量の前記医薬組成物は１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇまたは１００ｍｇのＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドを含む。
【０００８】
本発明は、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドをヒトに投与する方法をさらに提供し、本方法は、本発明の医薬組成物をヒトに投与することを含む。
【０００９】
定義
本明細書で使用する「ＧＬＰ−１作動薬組成物」とは、インスリン分泌を刺激できるか、あるいはインスリン値を上昇させることができる任意の組成物（インクレチンホルモンおよびインクレチン模倣薬が挙げられるが、これらに限定されない）を意味する。
【００１０】
本明細書で使用する「インクレチンホルモン」とは、哺乳動物においてインスリン分泌を増強するか、あるいはインスリン値を上昇させる任意のホルモンを意味する。インクレチンホルモンの１つの例はＧＬＰ−１である。ＧＬＰ−１は、食物摂取に反応して腸内Ｌ細胞から分泌されるインクレチンである。健常個体において、ＧＬＰ−１は、膵臓からのグルコース依存性インスリン分泌を刺激することにより食後の血糖値を調節する重要な役割を担い、末梢におけるグルコース吸収を高める。また、ＧＬＰ−１はグルカゴン分泌を抑制して、肝臓内糖産出を低下させる。加えて、ＧＬＰ−１は胃内容排出時間の遅延化および小腸運動の緩慢化も行い、食物吸収を遅延化する。ＧＬＰ−１はグルコース依存性インスリン分泌に関わる遺伝子転写を刺激することにより、およびβ細胞新生を促進することにより持続したβ細胞反応能を促進する（Ｍｅｉｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｄｒｕｇｓ  ２００３；  １７  （２）：  ９３−１０２）。
【００１１】
本明細書で使用する「ＧＬＰ−１活性」とは、血中および／または血漿グルコースを低下させること、グルコース依存性インスリン分泌を刺激すること、あるいはインスリン値を上昇させること、グルカゴン分泌を抑制すること、フルクトースアミンを低下させること、脳へのグルコース送達および新陳代謝を増大すること、胃内容排出を遅延化すること、ならびにβ細胞の反応能および／もしくは新生を促進することが挙げられるが、これらに限定されない天然ヒトＧＬＰ−１の活性の１つ以上を意味する。これらの活性のすべておよびＧＬＰ−１活性と関連した他の活性は、ＧＬＰ−１活性を有する組成物またはＧＬＰ−１作動薬により直接的または間接的に引き起こし得る。例として、インスリン産生の刺激は、哺乳動物における血漿グルコース値を間接的に低下し得るのに対し、ＧＬＰ−１活性を有する組成物は直接的または間接的にグルコース依存性を刺激し得る。
【００１２】
本明細書で使用する「インクレチン模倣薬」とは、インスリン分泌を増強できるか、あるいはインスリン値を上昇させることができる化合物である。インクレチン模倣薬は、哺乳動物においてインスリン分泌を刺激すること、β細胞新生を増大すること、β細胞アポトーシスを阻害すること、グルカゴン分泌を阻害すること、胃内容排出を遅延化すること、および満腹感を誘発することが可能であり得る。インクレチン模倣薬としては、ＧＬＰ−１活性を有する任意のポリペプチド（エキセンディン３およびエキセンディン４が挙げられるが、これらに限定されない）、任意のその断片および／または変異体および／または複合物を挙げ得るが、これらに限定されない。
【００１３】
本明細書で使用する「血糖降下剤」とは、血糖を降下できる任意の化合物または血糖を降下できる化合物を含む組成物を意味する。血糖降下剤としては、任意のＧＬＰ−１作動薬（インクレチンホルモンまたはインクレチン模倣薬、ＧＬＰ−１および／またはその断片、変異体および／もしくは複合物が挙げられる）を挙げ得るが、これらに限定されない。他の血糖降下剤としては、インスリン分泌増強剤（例えば、スルホニル尿素（ＳＵ）およびメグリチニド）、ＧＬＰ−１分解阻害剤（例えば、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤）、グルコース活用増強剤（例えば、グリタゾン、チアゾリジンジオン（ＴＺＤ）および／またはｐＰＡＲ作動薬）、肝臓内糖新生抑制剤（例えば、メトホルミン）、およびグルコース吸収遅延化剤（例えば、α−グルコシダーゼ阻害剤）が挙げられるが、これらに限定されない。スルホニル尿素の例としては、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トラザミド、グリピジド、グリクラジド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリキドン、およびグリメピリドが挙げられるが、これらに限定されない。グリタゾンの例としては、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１４】
「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」とは、一般に、非修飾ＲＮＡもしくはＤＮＡまたは修飾ＲＮＡもしくはＤＮＡであり得る任意のポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを指す。「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」としては、単鎖および二重鎖ＤＮＡ、単鎖および二重鎖領域、または単鎖、二重鎖および三重鎖領域、単鎖および二重鎖ＲＮＡの混合物であるＤＮＡ、ならびに単鎖および二重鎖領域、（単鎖または、より典型的には、二重鎖、または三重鎖領域、または単鎖および二重鎖領域の混合物であり得る）ＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子の混合物であるＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。加えて、本明細書で使用する「ポリヌクレオチド」とは、ＲＮＡもしくはＤＮＡ、またはＲＮＡとＤＮＡの両方を含む三重鎖領域を指す。かかる領域の鎖は、同じ分子に由来してもよいし、異なる分子に由来してもよい。この領域は１つ以上の分子をすべて含み得るが、より典型的には、一部の分子の領域のみを含む。三重らせん状領域の１つの分子は、しばしばオリゴヌクレオチドである。本明細書で使用する「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」という用語は、１つ以上の修飾塩基を含む上記のＤＮＡまたはＲＮＡも含む。したがって、安定性または他の理由のために修飾した骨格のＤＮＡまたはＲＮＡは、本明細書で意図する用語の「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」である。さらに２例のみ挙げると、異常な塩基（イノシンなど）、または修飾塩基（トリチル化塩基など）を含むＤＮＡまたはＲＮＡは、本明細書において使用される用語のポリヌクレオチドである。当業者に知られている多くの有用な目的に適う多種多様の修飾がＤＮＡおよびＲＮＡに行われていることが理解されるであろう。本明細書で使用する「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」という用語は、ポリヌクレオチドのかかる化学的、酵素的もしくは代謝的修飾形態、ならびにウイルスおよび細胞（例えば、単純細胞および複雑細胞が挙げられる）のＤＮＡおよびＲＮＡ特性の化学的形態を包含する。「ポリヌクレオチド（１つまたは複数）」は、しばしばオリゴヌクレオチド（１つまたは複数）と呼ばれる短いポリヌクレオチドも包含する。
【００１５】
「ポリペプチド」とは、ペプチド結合または修飾ペプチド結合により互いに結合した２つ以上のアミノ酸、すなわち、ペプチド同配体を含む任意のペプチドまたはタンパク質を指す。「ポリペプチド」とは、一般的にペプチド、オリゴペプチドまたはオリゴマーと呼ばれる短鎖と、一般にタンパク質と呼ばれるより長い鎖との両方を指す。ポリペプチドは、２０個の遺伝子コードアミノ酸以外のアミノ酸を含んでよい。「ポリペプチド」とは、天然プロセス（翻訳後のプロセシングなど）、または当技術分野において周知である化学的修飾技術のいずれかにより修飾されたアミノ酸配列を含む。かかる修飾は、基礎的な文章およびより詳細な研究論文、ならびに膨大な研究文献に詳述されている。修飾は、ポリペプチドの任意の場所（ペプチド骨格、アミノ酸側鎖およびアミノ末端もしくはカルボキシ末端を含む）で生じ得る。所定のポリペプチドのいくつかの部位に同じ種類の修飾が同程度または異なる程度で存在し得ることが理解されるであろう。また、所定のポリペプチドは、多くの種類の修飾を含んでよい。ポリペプチドは、ユビキチン化に起因した分岐であってもよいし、分岐を伴うまたは伴わない環状であってもよい。環状、分岐および分岐環状ポリペプチドは、翻訳後の天然プロセスに起因してもよいし、合成方法により生成されてもよい。修飾としては、アセチル化、アシル化、ＡＤＰリボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形態、脱メチル化、共有架橋形態、システイン形態、ピログルタミン酸形態、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形態、水酸化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化反応、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、転移ＲＮＡ媒介性のアミノ酸のタンパク質への付加（アルギニル化、およびユビキチン化など）が挙げられる。例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ  −  ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，  ２ｎｄ  Ｅｄ．，  Ｔ．    Ｅ．    Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，  Ｗ．    Ｈ．    Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９３  ａｎｄ  Ｗｏｌｄ，  Ｆ．，  Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ：  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ，  ｐｇｓ．    １−１２  ｉｎ  ＰＯＳＴＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ  ＣＯＶＡＬＥＮＴ  ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ  ＯＦ  ＰＲＯＴＥＩＮＳ，  Ｂ．    Ｃ．    Ｊｏｈｎｓｏｎ，  Ｅｄ．，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８３；  Ｓｅｉｆｔｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  “Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｎｏｎｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｆａｃｔｏｒｓ”，  Ｍｅｔｈ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  （１９９０）  １８２：６２６−６４６およびＲａｔｔａｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：  Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎ���  Ａｇｉｎｇ”，  Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  （１９９２）  ６６３：４８−６２を参照されたい。
【００１６】
本明細書において使用される「変異体」という用語は、参照ポリヌクレオチドまたは参照ポリペプチドとはそれぞれ異なるが、本質的な特性を保持するポリヌクレオチドまたはポリペプチドである。ポリヌクレオチドの典型的な変異体は、別の参照ポリヌクレオチドとヌクレオチド配列が異なる。変異体のヌクレオチド配列の変化により、参照ポリヌクレオチドにコードされたポリペプチドのアミノ酸配列が変化してもしなくてもよい。以下に論じるように、ヌクレオチド変化により、参照配列にコードされたポリペプチドのアミノ酸が置換、付加、欠失、融合および切断されてよい。ポリペプチドの典型的な変異体は、別の参照ポリペプチドとアミノ酸配列が異なる。一般に、参照ポリペプチド配列とその変異体の相違は、両者が全体的に近似し、同じ領域が多いように限定される。変異体と参照ポリペプチドのアミノ酸配列は、１つ以上の置換、付加、欠失の任意の組み合わせにより異なってよい。置換または挿入したアミノ酸残基は、遺伝子コードにコードされたものであってもなくてもよい。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの変異体は、天然（対立遺伝子変異体など）であってもよく、天然では知られていない変異体であってもよい。ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの非天然変異体は、変異誘発技術により生成してもよいし、直接合成してもよい。変異体としては、１つ以上のアミノ酸側鎖の化学的修飾を有するポリペプチドまたはその断片も挙げ得るが、これらに限定されない。化学的修飾としては、化学的部分の付加、新規結合の生成、および化学的部分の除去が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸側鎖の修飾としては、リジン−ε−アミノ基のアシル化、アルギニン、ヒスチジン、もしくはリジンのＮ−アルキル化、グルタミン酸もしくはアスパラギン酸カルボン酸基のアルキル化、ならびにグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の脱アミドが挙げられるが、これらに限定されない。末端アミノ基の修飾としては、脱アミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキル、およびＮ−アシル修飾が挙げられるが、これらに限定されない。末端カルボキシ基の修飾としては、アミド、低級アルキルアミド、ジアルキルアミド、および低級アルキルエステル修飾が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、１つ以上の側鎖、または末端基が、通常のタンパク質化学者に知られている保護基により保護され得る。
【００１７】
本明細書で使用する「断片」とは、ポリペプチドに関して使用される場合、完全な天然ポリペプチドのアミノ酸配列とすべてではないが部分的に同じであるアミノ酸配列を有するポリペプチドである。断片は、「独立」していてもよいし、単一のより大きなポリペプチドにおける単一の連続領域として部分または領域を形成するより大きなポリペプチドに含まれていてもよい。例として、天然ＧＬＰ−１の断片は、天然アミノ酸１〜３６位のアミノ酸７〜３６位を含む。さらに、ポリペプチドの断片は、天然配列の一部の変異体であってもよい。例えば、天然ＧＬＰ−１のアミノ酸７〜３０位を含むＧＬＰ−１の断片は、その一部の配列内にアミノ酸置換を有する変異体であってもよい。
【００１８】
本明細書で使用する「複合物」または「複合した」とは、互いに結合している２つの分子を指す。例えば、第一のポリペプチドは、第二のポリペプチドに共有結合していてもよいし非共有結合していてもよい。第一のポリペプチドは、化学的リンカーにより共有結合していてもよいし、第二のポリペプチドに遺伝的に融合していてもよく、ここで第一ポリペプチドと第二ポリペプチドは共通のポリペプチド骨格を共有する。
【００１９】
本明細書で使用する「直列方向の」とは、同じ分子の一部として互いに隣接する２つ以上のポリペプチドを指す。それらは共有結合か非共有結合のいずれかで結合していてよい。２つ以上の直列方向のポリペプチドは、同じポリペプチド骨格部分を形成していてよい。直列方向のポリペプチドは、順方向であっても逆方向であってもよく、および／または他のアミノ酸配列により分離されていてもよい。
【００２０】
本明細書で使用する、血中または血漿グルコースを「低下させる（ｒｅｄｕｃｅ）」または「低下させる（ｒｅｄｕｃｉｎｇ）」とは、血糖降下剤を投与後の患者の血中に観察された血糖量の低下を指す。血中または血漿グルコースの低下は、個体当たりでまたは対象群の平均変化として測定かつ評価できる。さらに、血中または血漿グルコースの平均低下は、処置対象群において、ベースラインからの平均変化および／またはプラセボ投与対象間の血中または血漿グルコースの平均変化と比較した平均変化として測定かつ評価できる。
【００２１】
本明細書で使用する「ＧＬＰ−１活性の増強」とは、天然ＧＬＰ−１と関連する任意のおよびすべての活性の増大を指す。例として、ＧＬＰ−１活性の増強は、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを対象に投与後に測定でき、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの投与前の同じ対象のＧＬＰ−１活性と比較、またはプラセボを投与した第二の対象と比較できる。
【００２２】
本明細書で使用する「血糖上昇に関連した疾患」としては、１型および２型糖尿病、グルコース不耐性、および高血糖が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
本明細書で使用する「同時投与」または「同時投与する」とは、同じ患者に対する２つ以上の化合物の投与または同じ化合物の２回以上の投与を指す。かかる化合物の同時投与は、同時もしくはほぼ同時（例えば、同じ時間内）であってもよいし、投与間隔が数時間もしくは数日間以内であってもよい。例えば、第一の化合物を週１回投与して、第二の化合物を連日同時投与してもよい。
【００２４】
本明細書で使用する「最大血漿濃度」または「Ｃｍａｘ」とは、哺乳動物に物質（例えば、ＧＬＰ−１活性またはＧＬＰ−１作動薬を有するポリペプチド）を投与後にその哺乳類の血漿中で観察された、その物質の最高濃度を意味する。
【００２５】
本明細書で使用する「濃度曲線下面積」または「ＡＵＣ」とは、時間に対する血漿中物質濃度プロットによる曲線下面積である。ＡＵＣは時間間隔中の即時的濃度の積分の測定値であることができ、質量×時間／容量の単位であり、これはモル濃度×時間（ｎＭ×日数など）としても表すことができる。ＡＵＣは、典型的には台形の方法（例えば、線形、線形対数）により算出される。ＡＵＣは通常、ゼロから無限大までの時間間隔で与えられ、他の時間間隔は指定される（例えば、ＡＵＣ（ｔ１，ｔ２）、ここでｔ１およびｔ２は間隔の開始および終了時である）。したがって、本明細書で使用する「ＡＵＣ０−２４ｈ」とは２４時間にわたるＡＵＣを指し、「ＡＵＣ０−４ｈ」とは４時間にわたるＡＵＣを指す。
【００２６】
本明細書で使用する「加重平均ＡＵＣ」とは、時間ＡＵＣが算出される時間間隔で分割されるＡＵＣである。例えば、加重平均ＡＵＣ０−２４ｈとは、２４時間で分割したＡＵＣ０−２４ｈを示す。
【００２７】
本明細書で使用する「信頼区間」または「ＣＩ」とは、測定値または試験が所定の確率ｐの対応に収まる区間であり、ここでｐとは、９０％または９５％ＣＩを指し、相加平均、幾何学平均、または最小二乗平均のいずれかの付近で算出される。本明細書で使用する、幾何学平均とは、累乗を介して逆変換した自然対数変換値の平均であり、最小二乗平均とは、同様に幾何学平均である場合もない場合もあるが、固定効果を用いた分散分析（ＡＮＯＶＡ）モデルから引き出される。
【００２８】
本明細書で使用する「変動係数（ＣＶ）」とは、分散測定値であり、これは平均に対する標準偏差の比率として定義する。ＣＶは、先の計算値に１００を乗じた百分率（％）（％ＣＶ）として報告する。
【００２９】
本明細書で使用する「Ｔｍａｘ」とは、物質を哺乳動物に投与後、その哺乳動物においてその物質の血漿中濃度が最大に達することが観察された時間を指す。
【００３０】
本明細書で使用する「血清または血漿半減期」とは、哺乳動物に投与した物質の半分の量が、正常な生物学的プロセスにより哺乳動物の血清または血漿から代謝されるまたは排出されるために要される時間を指す。
【００３１】
本明細書で使用する「用量」とは、哺乳動物（ヒトを含む）に投与してよい任意の量の治療化合物を指す。有効量とは、治療化合物の意図した効果の少なくとも１つを誘発する上で十分な量の化合物の用量である。例えば、有効量のＧＬＰ−１作動薬は、ヒトに投与時、ヒトにおいて少なくとも１種類のＧＬＰ−１活性（前記ヒトにおけるインスリン産生の増大などが挙げられるが、これに限定されない）を誘発する。当技術分野において理解されるように、有効量の治療化合物を代替的な評価項目により測定できる。したがって、別の例としては、有効量のＧＬＰ−１作動薬を、ヒトにおける血清グルコースを低下させる能力により測定できる。
【００３２】
本明細書で使用する「心血管障害」としては、動動脈瘻、動静脈瘻、大脳動静脈先天異常、先天性心疾患、肺動脈弁閉鎖症、およびシミター症候群などの心血管異常が挙げられるが、これらに限定されない。先天性心疾患としては、大動脈縮窄、三房心、冠血管異常、十字交叉心臓、右胸心、動脈管開存症、エブスタイン奇形、アイゼンメンガー複合体、左心室発育不全症候群、左胸心、ファロー四徴症、大血管転位症、両大血管右室起始症、三尖弁閉鎖症、動脈幹遺残症、および心中隔欠損症（大動脈肺動脈中隔欠損症、心内膜床欠損症、リュタンバッシェ症候群、ファロー三徴症、心室中隔欠損症など）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
心血管障害としてはまた、慢性心不全、不整脈、カルチノイド心疾患、高心拍出量、低心拍出量、心タンポナーデ、心内膜炎（細菌性を含む）、心臓動脈瘤、心停止、うっ血性心不全、うっ血性心筋症、糖尿病性心筋症、発作性呼吸困難、心浮腫、心肥大、うっ血性心筋症、左室肥大、右室肥大、梗塞後心破裂、心室中隔破裂、心臓弁膜症、心筋疾患、心筋虚血、心嚢液貯留、心膜炎（収縮性および結核性を含む）、心膜気腫、心膜切開後症候群、肺心症、リウマチ性心疾患、心室機能障害、充血、心血管系妊娠合併症、シミター症候群、心血管梅毒、および心血管結核などの心疾患も挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
不整脈としては、洞不整脈、心房細動、心房粗動、徐脈、期外収縮、アダムス・ストークス症候群、脚ブロック、洞ブロック、ＱＴ延長症候群、副収縮、ラウン・ギャノン・レバイン症候群、マハイム型早期興奮症候群、ウォルフ・パーキンソン・ホワイト症候群、洞不全症候群、頻拍、および心室細動が挙げられるが、これらに限定されない。頻拍としては、発作頻拍、上室頻拍、頻脈性固有心室調律、房室結節リエントリー性頻拍、異所性心房頻拍、異所性房室接合部頻拍、洞房結節リエントリー性頻拍、洞頻拍、多形性心室頻拍、および心室頻拍が挙げられる。
【００３５】
心臓弁膜症としては、大動脈弁閉鎖不全、大動脈弁狭窄、心雑音、大動脈弁逸脱、僧帽弁逸脱、三尖弁逸脱、僧帽弁閉鎖不全、僧帽弁狭窄、肺動脈弁閉鎖、肺動脈弁閉鎖不全、肺動脈弁狭窄、三尖弁閉鎖、三尖弁閉鎖不全、および三尖弁狭窄が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
心筋疾患としては、アルコール性心筋症、糖尿病性心筋症、うっ血性心筋症、肥大性心筋症、大動脈弁下部狭窄症、肺動脈弁下部狭窄症、拘束性心筋症、シャーガス心筋症、心内膜線維弾性症、心内膜心筋線維症、カーンズ症候群、心筋再灌流傷害、および心筋炎が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
心筋虚血としては、狭心症、冠動脈瘤、冠動脈硬化、冠動脈血栓症、冠攣縮、心筋梗塞および心筋収縮不全などの冠疾患が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
心血管疾患としては、動脈瘤、血管異形成、血管腫症、細菌性血管腫症、ヒッペル・リンダウ病、クリッペル・トレノーネイ・ウェーバー症候群、スタージ・ウェーバー症候群、血管神経性浮腫、大動脈疾患、高安動脈炎、大動脈炎、ルリーシュ症候群、動脈閉塞疾患、動脈炎、動脈内膜炎、結節性多発性動脈炎、脳血管障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性網膜症、塞栓症、血栓症、紅痛症、痔、肝静脈閉塞症、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管疾患、静脈炎、肺静脈閉塞症、レイノー病、クレスト症候群、網膜静脈閉塞、シミター症候群、上大静脈症候群、毛細血管拡張症、毛細血管拡張性運動失調、遺伝性出血性末梢血管拡張症、精索静脈瘤、静脈瘤、静脈瘤性潰瘍、脈管炎、および静脈不全などの血管疾患も挙げられる。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本発明は、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドを含む医薬組成物を提供し、ここで有効量の前記医薬組成物は１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇまたは１００ｍｇのＧＬＰ−１活性を有する前記ポリペプチドを含む。いくつかの態様では、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは少なくとも１つのＧＬＰ−１作動薬を含む。ＧＬＰ−１作動薬は、インクレチンホルモンおよび／またはその断片、変異体および／もしくは複合物、ならびにインクレチン模倣薬および／またはその断片、変異体および／もしくは複合物からなる群から選択できる。インクレチンホルモンには、ヒトＧＬＰ−１および／またはその断片、変異体および／もしくは複合物が含まれる。
【００４０】
本発明の実施形態は、ＧＬＰ−１またはその断片、変異体、および／もしくは複合物であり得るが、これらに限定されないポリペプチドを含む。本発明のＧＬＰ−１断片および／または変異体および／もしくは複合物は、典型的にはＧＬＰ−１活性を少なくとも１つ有する。ＧＬＰ−１またはその断片、変異体、および／もしくは複合物は、ヒト血清アルブミンを含み得る。ヒト血清アルブミンは、ＧＬＰ−１またはその断片および／もしくは変異体に複合していてよい。ヒト血清アルブミンは、注射前、インクレチンホルモン（ＧＬＰ−１など）および／もしくはインクレチン模倣薬（エキセンディン３およびエキセンディン４など）および／またはその断片および／もしくは変異体に化学的リンカーを介して複合していてもよいし、インビボで天然ヒト血清アルブミンに化学的に結合していてもよい（例えば、それらの全体を参照することにより本明細書に組み込まれる米国特許第６，５９３，２９５号および米国特許第６，３２９，３３６号を参照されたい）。あるいは、ヒト血清アルブミンは、ＧＬＰ−１および／またはその断片および／もしくは変異体、または他のＧＬＰ−１作動薬（エキセンディン３またはエキセンディン４など）および／またはその断片および／もしくは変異体に遺伝的に融合していてよい。ヒト血清アルブミンと融合したＧＬＰ−１ならびにその断片および／または変異体の例は、ＷＯ２００３／０６００７１号、ＷＯ２００３／５９９３４号、ＷＯ２００５／００３２９６号、ＷＯ２００５／０７７０４２号および米国特許第７，１４１，５４７号（それらの全体を参照することにより本明細書に組み込まれる）に提示されている。
【００４１】
ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは、ヒトＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および／または変異体を含み得る。ヒトＧＬＰ−１の天然に生じた２つの断片を配列番号２に示す。
7   8   9   10  11  12  13   14  15  16   17
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-
18  19  20  21  22  23  24  25  26  27   28
Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-
29  30  31  32  33  34  35  36  37
Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa（配列番号２）
ここで３７位のＸａａはＧｌｙ（以下、「ＧＬＰ−１（７−３７）」として示される）、または−ＮＨ２（以下、「ＧＬＰ−１（７−３６）」として示される）である。ＧＬＰ−１断片としては、ヒトＧＬＰ−１のアミノ酸７〜３６位（ＧＬＰ−１（７−３６））を含む、あるいはそれからなるＧＬＰ−１分子を挙げ得るが、これらに限定されない。ＧＬＰ−１の変異体またはその断片としては、野生型ＧＬＰ−１または配列番号２に示されるＧＬＰ−１の天然に生じた断片における１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ以上のアミノ酸置換を挙げ得るが、これらに限定されない。変異体ＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１の断片としては、野生型ＧＬＰ−１のアラニン８に類似のアラニン残基の置換であり、かかるアラニンがグリシンに変異している（以下、「Ａ８Ｇ」として示される）（例えば、それらの全体を参照することにより本明細書に組み込まれる米国特許第５，５４５，６１８号に開示の突然変異体を参照されたい）を挙げ得るが、これらに限定されない。
【００４２】
いくつかの態様では、ＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および変異体がＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含み、ヒト血清アルブミンに遺伝的に融合している。さらなる実施形態では、本発明のポリペプチドは、ヒト血清アルブミンまたはその変異体のＮ末端またはＣ末端に融合した１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれ以上の直列方向のＧＬＰ−１分子および／またはその断片および／もしくは変異体を含む。他の実施形態では、かかるＡ８Ｇポリペプチドは、アルブミンまたはその変異体のＮ末端またはＣ末端に融合している。ヒト血清アルブミンのＮ末端に融合した２つの直列方向のＧＬＰ−１（７−３６）（Ａ８Ｇ）断片および／または変異体の例としては、配列番号１が挙げられ、これを図１に示す。別の態様では、ＧＬＰ−１の少なくとも１つの断片および変異体は、ヒト血清アルブミンに直列かつ遺伝的に融合した少なくとも２つのＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含む。少なくとも２つのＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））は、ヒト血清アルブミンのＮ末端で遺伝的に融合していてよい。ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドは、配列番号１を含んでよい。
【００４３】
ＧＬＰ−１の変異体（７−３７）は、例えば、通常はＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨの２２位に見出されるグリシンがグルタミン酸と置換されているＧＬＰ−１変異体を示すＧｌｕ２２−ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨとして示し得る；Ｖａｌ８−Ｇｌｕ２２−ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨは、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨの通常は８位に見出されるアラニンおよび通常は２２位に見出されるグリシンがそれぞれバリンおよびグルタミン酸と置換されているＧＬＰ−１化合物を示す。ＧＬＰ−１の変異体の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない。
【化１】
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【００４４】
ＧＬＰ−１の変異体としては、ＧＬＰ−１の１つ以上のアミノ酸側鎖が化学的修飾されているＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１断片も挙げ得るが、これらに限定されない。化学的修飾としては、化学的部分の付加、新規結合の生成、および化学的部分の除去が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸側鎖の修飾としては、リジン−ε−アミノ基のアシル化、アルギニン、ヒスチジン、もしくはリジンのＮ−アルキル化、グルタミン酸もしくはアスパラギン酸カルボン酸基のアルキル化、ならびにグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の脱アミドが挙げられるが、これらに限定されない。末端アミノ基の修飾としては、脱アミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキル、およびＮ−アシル修飾が挙げられるが、これらに限定されない。末端カルボキシ基の修飾としては、アミド、低級アルキルアミド、ジアルキルアミド、および低級アルキルエステル修飾が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、１つ以上の側鎖、または末端基は、通常のタンパク質化学者に知られている保護基により保護し得る。
【００４５】
ＧＬＰ−１断片または変異体は、１つ以上のアミノ酸が前記断片または変異体のＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＮ末端および／またはＣ末端に付加しているポリペプチドを含んでよい。アミノ酸がＮ末端またはＣ末端に付加しているＧＬＰ−１中のアミノ酸は、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨ中の対応するアミノ酸と同数で示される。例えば、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＮ末端に２つのアミノ酸を付加して得られるＧＬＰ−１化合物のＮ末端アミノ酸は５位である；およびＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＣ末端に１つのアミノ酸を付加して得られるＧＬＰ−１化合物のＣ末端アミノ酸は３８位である。したがって、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨにおけるこれらＧＬＰ−１化合物の両方において、１２位はフェニルアラニンに占められ、２２位はグリシンに占められる。Ｎ末端にアミノ酸を付加したＧＬＰ−１のアミノ酸１〜６位は、ＧＬＰ−１（１−３７）ＯＨの対応する位置のアミノ酸と同じであってもよいし、保守的置換されていてもよい。Ｃ末端にアミノ酸を付加したＧＬＰ−１のアミノ酸３８〜４５位は、グルカゴンまたはエキセンディン４の対応する位置のアミノ酸と同じであってもよいし、保守的置換であってもよい。
【００４６】
別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、ヒトに１日１回、隔日１回、７日ごとに１回、１４日ごとに１回、４週間ごとに１回、および／または月１回投与できる。別の態様では、医薬組成物は少なくとも３０ｍｇ／ｍＬの配列番号１を含む。別の態様では、医薬組成物は、３０ｍｇ／ｍＬの配列番号１、リン酸ナトリウム、トレハロース、マンニトール、ＴＷＥＥＮ８０および水からなり、ｐＨ７．２で維持する。別の態様では、医薬組成物は、５０ｍｇ／ｍＬの配列番号１、リン酸ナトリウム、トレハロース、マンニトール、ＴＷＥＥＮ８０および水からなり、ｐＨ７．２で維持する。
【００４７】
別の態様では、ＧＬＰ−１活性を有する少なくとも１つのポリペプチドをヒトに投与する方法を提供し、本方法は、本発明の医薬組成物をヒトに投与することを含む。医薬組成物は皮下投与できる。医薬組成物は、少なくとも１つの０．３２ｍＬ注射、少なくとも１つの０．６５ｍＬ注射、および少なくとも１つの１．０ｍＬ注射、からなる群から選択される皮下注射として投与できる。いくつかの態様では、医薬組成物を２回の注射で同時投与し、これは同じ医薬組成物の同用量であっても異なる用量であってもよい。本発明の医薬組成物を投与する注射部位は、同じでも異なってもよい。本発明の皮下注射は単回注射として投与してよく、これは全用量を単回で注射することを意味し、単回注射の容量はすべて一度に投与する。単回注射は、数分および／または数時間および／または数日間にわたり投与し得る連続投与とは異なる。単回注射は、複数回投与してよく、これは１日１回、週１回、２週間ごとに１回、月１回および／またはそれより長い間隔の単回注射を意味する。
【００４８】
別の態様では、医薬組成物は、前記ヒトにおけるＨｂＡ１ｃおよび／または前記ヒトにおける血清グルコースを低下させる。ＧＬＰ−１活性を有する前記少なくとも１つのポリペプチド（例えば、配列番号１）の血清半減期は約５日間である。別の態様では、ヒトは、上昇グルコース値と関連した疾患（高血糖、糖尿病、２型糖尿病を挙げ得る）に罹患している。さらに別の態様では、本発明の医薬組成物はヒトに投与時、ヒトにおいて体重低下を引き起こす。
【００４９】
別の実施形態では、本発明の医薬組成物は、単一療法として投与する。さらに別の実施形態では、医薬組成物は少なくとも１つの第二の血糖降下剤と同時投与する。第二の血糖降下剤は、ＧＬＰ−１作動薬、インクレチンホルモン、インクレチン模倣薬、インスリン分泌増強剤、スルホニル尿素、メグリチニド、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トラザミド、グリピジド、グリクラジド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリキドン、グリメピリド、ＧＬＰ−１分解阻害剤、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、グルコース活用増強剤、グリタゾン、チアゾリジンジオン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ｐＰＡＲ作動薬、肝臓内糖新生抑制剤、メトホルミン、グルコース吸収遅延化剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、インスリングラルギンおよび／またはインスリンから選択し得る。いくつかの態様では、第二の血糖降下剤はメトホルミンである。本発明のいくつかの態様では、前記ヒトにＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを３０ｍｇの初回用量で投与後、最大５０ｍｇまで増量する。医薬組成物は、現行療法が奏効しなくなったヒトに投与できることを当業者は理解するであろう。すなわち、対象は、現行療法からの休薬期間を設けて、同時にまたは連続して本発明の医薬組成物による療法を開始してよい。
【００５０】
当技術分野において理解されるように、薬物動態データ（活性化合物の血中、血漿中および／または他の組織中濃度など）を収集、測定かつ評価するために、様々な方法を用いてよい。当技術分野においてさらに理解されるように、様々な薬力学データ（血中および／または血漿中および／または他の組織中のグルコース、インスリン、Ｃペプチド、グルカゴンおよび他の生物指標値などが挙げられるが、これらに限定されない）を収集、測定かつ評価するために、様々な方法を用いてよい。
【００５１】
本明細書に記載の薬物動態（例えば、これらに限定されないが、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、Ｔｍａｘ、血清半減期）および薬力学（例えば、これらに限定されないが、血清および／または血漿中の血糖値および／またはＨｂＡ１ｃ値）変数を測定および計算する様々な方法を当業者は理解するであろう。さらに、本明細書に記載の統計比較（例えば、これらに限定されないが、ベースラインから処置後までの変化の比較および／もしくは処置群間の比較）ならびに／または薬物動態および薬力学変数の分析を行う様々な方法を当業者は理解するであろう。さらに、薬物動態、薬力学および他の臨床データを収集および分析する他の様々な方法を当業者は理解し使用できるであろう。
【００５２】
さらに、本発明は、医薬組成物ならびに本発明の医薬組成物の作製方法および医薬組成物の使用方法を含む。本発明の医薬組成物は、上昇グルコース、肥満症、心血管障害（心筋梗塞、および慢性心不全が挙げられるが、これらに限定されない）、および／または記憶喪失と関連した任意の疾患または状態の任意の症状の悪化の処置に、または処置、予防および／もしくは予防のために予防的に使用できる。
【実施例】
【００５３】
以下の実施例は、本発明の様々な態様を例証するが、これらに限定されない。以下の実施例において、別段の記載のない限り、配列番号１は本明細書において、２．８％マンニトール、４．２％トレハロース二水和物、０．０１％ポリソルベート８０、１０〜２０ｍｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）を含む凍結乾燥形態から５０ｍｇ／ｍＬに製剤化したアルビグルチド（ＡＬＢ）とも呼ぶ。配列番号１を含む組成物は、各投薬において必要に応じて注射液で希釈した。
【実施例１】
【００５４】
２型糖尿病におけるアルビグルチド、長時間作用型ＧＬＰ−１模倣薬の可能性：週１回、隔週および月１回の投薬を調査する無作為化対照試験
本試験は、食事および運動、またはメトホルミンの単一療法で十分に管理されていない２型糖尿病患者において、３つの時間的スケジュールで投与した長時間作用型ＧＬＰ−１受容体作動薬であるアルビグルチド（ＡＬＢ）の漸増用量の有効性、安全性および忍容性を評価するために設計された。アルビグルチド（ＡＬＢ）は、ヒトアルブミンに融合したＤＰＰ−４耐性ＧＬＰ−１二量体からなる。ＡＬＢの半減期は約５日間であるため、週１回またはより低頻度の投薬の可能性を有する。類似した平均ベースライン特徴を有する２型糖尿病対象３５６例（５３．４歳、糖尿病の罹患期間５年間、ＢＭＩ３２ｋｇ／ｍ２、Ａ１Ｃ８．０％）を対象としたこの無作為化多施設二重盲検並行群間試験において、患者にプラセボ、アルビグルチド［週１回（４、１５または３０ｍｇ）、隔週（２週に１回；１５、３０または５０ｍｇ）または月１回（５０または１００ｍｇ）］、または非盲検的な活性基準としてエクセナチド（メトホルミン投与患者における分類につき１日２回のみ）を１６週間にわたり皮下投与後、１１週間の休薬期間を設けた。主要転帰測定値は、プラセボと比較した、ベースラインから１６週目までのＡ１Ｃ変化とした。
【００５５】
成績調査により、２型糖尿病において血糖管理を改善する早期介入は、微小血管の合併症を抑え（ＵＫ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｓｔｕｄｙ  （ＵＫＰＤＳ）  （ＵＫＰＤＳ  ３３）．Ｌａｎｃｅｔ  ３５２：８３７−８５３，  １９９８；  Ｇｅｒｓｔｅｉｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５８：２５４５−２５５９，  ２００８；  Ｐａｔｅｌ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５８：２５６０−２５７２，  ２００８；およびＡｂｒａｉｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｏｂｅｓ  Ｍｅｔａｂ  ２００８；ＤＯＩ：  １０．１１１１／ｊ．１４６３−１３２６．２００８．００９３３．ｘ）、大血管にとって長期的な利益をもたらし得ること（Ｈｏｌｍａ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５９：１５７７−１５８９，  ２００８）が示された。多数の利用可能な療法にも関わらず、半分以上の２型糖尿病患者が米国糖尿病協会（ＡＤＡ）の目標Ａ１Ｃ値（７％未満）に達し損ねている（Ｓａｙｄａｈ，  ｅｔ  ａｌ．  ＪＡＭＡ  ２９１：３３５−３４２，  ２００４；  Ｓａａｄｄｉｎｅ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  １４４（７）：４６５−４７４，  ２００６；  Ｏｎｇ  ＫＬ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  １８：２２２−２２９，  ２００８）。さらに、体重増加および治療誘発性の血糖降下エピソード（Ｃａｒｖｅｒ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｅｄｕｃ  ３２：９１０−９１７，  ２００６  ａｎｄ  Ｋａｈｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５５：２４２７−２４４３，  ２００６）が、血糖管理を達成する上で大きな障害となっている（Ｂｒａｙ  ＧＭ．  Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ．  Ａｍ  Ｊ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｙｓｔ  Ｐｈａｒｍ  ６３：４１１−４１８，  ２００６）。抗糖尿病療法は、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）に基づき、天然ＧＬＰ−１のグルコース依存性インスリン分泌を刺激する能力を保持し、食後のグルカゴン分泌の不適切な上昇を抑制する（Ｄｒｕｃｋｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  ８４：３４３４−３４３８，  １９８７；  Ｋｒｅｙｍａｎｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｌａｎｃｅｔ  ２：１３００−１３０４，  １９８７）。また、天然ＧＬＰ−１は、Ｔ２ＤＭ患者において、胃内容排出の緩慢化および食物摂取を低下させ、中等度の体重低下を引き起こす。（Ｈｏｌｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｏｌｅｄ  Ｍｅｄ  １４（４）：１６１−１６８，  ２００８）。しかしながら、天然ＧＬＰ−１はジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）により急速に不活性化し（半減期１〜２分）、治療の可能性は制限される（Ｄｅａｃｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２７１（３  Ｐｔ  １）：Ｅ４５８−Ｅ４６４，  １９９６）。エクセナチド（半減期：２．４時間）はメトホルミン、スルホニル尿素またはチアゾリジンジオン（ＢＹＥＴＴＡ（商標登録）エクセナチド注射との併用で血糖管理を改善する。処方情報については、ＤｅＦｒｏｎｚｏ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２８：１０９２−１１００，  ２００５；  Ｋｅｎｄａｌｌ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２８：１０８３−１０９１，  ２００５；  Ｚｉｎｍａｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  １４６：４７７−４８５，  ２００７；  Ｂｕｓｅ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２７：２６２８−２６３５，  ２００４）。中等度の体重低下および血糖管理の改善にも関わらず、胃腸（ＧＩ）の忍容性が不良であること、ならびに１日２回の注射が必要であることから、しばしば中止される（Ｆｉｎｅｍａｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｍｅｔａｂ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖ  ２０：４１１−４１７，  ２００４）。
【００５６】
アルビグルチドは、ヒトアルブミンに類似する２つのＤＰＰ−４耐性ヒトＧＬＰ−１を融合して開発されたＧＬＰ−１受容体作動薬である（Ｍａｔｔｈｅｗｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．  ２００８；ＤＯＩ：  １０．１２１０／ｊｃ．２００８−１５１８）。ＡＬＢの半減期は長い（約５日間）ため、週１回またはより低頻度の投薬が可能であり得る。本試験は、広範囲の用量（４〜１００ｍｇ）および広範囲のスケジュール（週１回〜月１回）を調査して血糖管理および有害事象プロファイルを評価するように設計された。ＧＬＰ−１受容体作動薬の臨床観点を得るために、エクセナチドを非盲検的基準として使用した。
【００５７】
研究設計および方法
プロトコル
この第ＩＩ相試験は、２００７年４月〜２００８年５月、米国（１０６施設）、メキシコ（９施設）、チリ（２施設）、およびドミニカ共和国（１施設）の計１１８施設で施行された前向き、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、並行群間試験であった。スクリーニング前に３ヶ月以上、２型糖尿病に罹患していると診断された男性および出産の可能性のない女性１８〜７５歳を登録対象とした。対象は、薬剤未投与（食事および運動）、または食事および運動ならびにメトホルミン単一療法で処置されており、前スクリーニング（スクリーニング来院前の１週間）前に３ヶ月超安定していた。メトホルミン単一療法で処置された対象のみ、エクセナチド群（盲検化と一致）に登録可能とした。追加の試験対象患者基準は、スクリーニング時にＢＭＩ≧２０および≦４０ｋｇ／ｍ２およびＡ１Ｃ≧７％および≦１０％などであった。
【００５８】
除外基準は、スクリーニング前３ヶ月以内の任意の経口糖尿病単一療法（メトホルミンを除く）、もしくはスクリーニング前１ヶ月未満のインスリンで、７日間超使用していない；５年間未満の膵炎；有意な心血管、脳血管、腎臓もしくは肝胆道疾患；スクリーニング時の空腹時血清トリグリセリド≧８００ｍｇ／ｄＬ（９ｍｍｏｌ／Ｌ）；ならびに臨床的に有意であるとみなされた血液プロファイルなどであった。脂質降下剤を投与中の対象は、登録前３ヶ月間に同用量で維持されていなければならないとした。一般市販薬であるやせ薬の処方は許可しなかった。
【００５９】
試験プロトコルは治験審査委員会により承認され、医薬品の臨床試験の実施の基準およびヘルシンキ宣言に従い施行された。前スクリーニング時にすべての対象から書面にてインフォームドコンセントを得た。効果安全性評価委員会の独立した専門家により、安全性データを進行中に評価した。
【００６０】
無作為化
対象を、二重盲検プラセボ（アルビグルチド群と一致）；アルビグルチド週１回（４、１５または３０ｍｇ）、隔週（１５、３０または５０ｍｇ）もしくは月１回（５０または１００ｍｇ）；または非盲検エクセナチド（５μｇを１日２回４週間投与後に、１０μｇを１日２回１２週間投与）の処置群計１０群中１群に無作為化した。アルビグルチドおよびプラセボを医師の診察室で１６週間にわたり投与した。アルビグルチド４ｍｇ投与対象に１．０ｍＬ（４ｍｇ／ｍＬ溶液）投与した。アルビグルチド１５ｍｇ、３０ｍｇ、または５０ｍｇ投与対象に０．３２ｍＬ、０．６５ｍＬ、または１．０ｍＬ（５０ｍｇ／ｍＬ溶液）投与した。アルビグルチド１００ｍｇ投与対象に１．０ｍＬを２回注射した（５０ｍｇ／ｍＬ溶液、１インチ超の間隔）。プラセボ容量は活性剤処置と一致させた。アルビグルチド／プラセボを、３０Ｇ針を用いて腹部に皮下注射した。３０分以上後に対象を観察して注射部位反応をモニタリングした。エクセナチド投与対象に医師の診察室で処置を開始した後、添付文書に従い自己投与させた。１６週間後、対象を１１週間の休薬相におき、主に安全性および免疫原性を評価した。
【００６１】
評価
治療中：
Ａ１Ｃおよび空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）測定を、スクリーニング時、ベースライン時、ならびに２週目（ＦＰＧのみ）、４週目、５週目、７週目、８週目、９週目、１２週目、１５週目、および１６週目に実施した。空腹時フルクトースアミン、Ｃペプチド、グルカゴン、インスリンおよび脂質をベースラインおよび８週目、１２週目、および１６週目に測定した。恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ）を用いてβ細胞機能を算出した（Ｍａｔｔｈｅｗｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ  ２８：４１２−４１９，  １９８５）。
【００６２】
試験期間を通して、有害事象評価および安全性分析（心電図、バイタルサイン測定および身体検査を含む）を行った。悪心および嘔吐の発現および罹患期間をモニタリングした。免疫原性評価を、ベースライン時ならびに１週目、４週目、８週目、および１２週目、および１６週目に採取した試料にて実施した。ＥＬＩＳＡを介して、試料中の抗アルビグルチド抗体をスクリーニングした（Ｍａｔｔｈｅｗｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．  ２００８；  ＤＯＩ：  １０．１２１０／ｊｃ．２００８−１５１８）。血漿試料を回収し、アルビグルチドの薬物動態（ＰＫ）を特性化した（ベースライン時ならびに４週目、５週目、７週目、８週目、９週目、１２週目、１５週目、および１６週目にＥＬＩＳＡにより定量化）。ＮＯＮＭＥＭソフトウェア（Ｉｃｏｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，  Ｅｌｌｉｃｏｔｔ  Ｃｉｔｙ，  ＭＤ）による非線形混合効果モデリングアプローチを用いて集団ＰＫ分析を実施した。
【００６３】
１１週間の休薬：
免疫原性評価を２０週目、２３週目、および２７週目に検討した；Ａ１ＣおよびＦＰＧを１７週目、１８週目、２０週目、２３週目、および２７週目に得た；空腹時フルクトースアミン、Ｃペプチド、グルカゴン、インスリン、および脂質プロファイルを２０週目および２７週目に得た；ならびにアルビグルチド濃度を１７週目、１８週目、２０週目、２３週目、および２７週目に得た。
【００６４】
統計的分析
主要目的は、アルビグルチドの安全性および有効性における用量反応を評価することであった。各処置群で計画した対象３０例で、各処置群の平均反応の９５％両側信頼区間は、標準偏差（ＳＤ）１．０％と仮定して、Ａ１Ｃ測定尺度上０．３６％の半値幅であった。
【００６５】
有効性の主要評価項目は、プラセボと比較した、各スケジュール（週１回、隔週、および月１回）範囲内で異なる用量間のベースラインから１６週目までのＡ１Ｃ変化であった。主要分析は処置群およびメトホルミンによる前療法に主な効果のあるＡＮＣＯＶＡモデルとし、ベースラインＡ１Ｃを調節した。用量反応は、ＡＮＣＯＶＡモデルフレームワーク内の対比を用いて検討した。ペアワイズ比較を同じＡＮＣＯＶＡモデルにおいて実施した。副次評価項目を同様に分析した。低血糖症の応答解析および発現は群の統計により要約した。エクセナチド（非盲検）に対する正式な統計比較は行わなかった。安全性および忍容性データを分類別に収集した。
【００６６】
主要評価項目の少なくとも１つのベースライン後評価、その後の最終観察を用いて無作為に割り付けたすべての対象として定義した、包括解析集団において比較した。安全性集団は、無作為化後に任意の薬剤を少なくとも１回投与した、すべての無作為化した患者を包含した。８週目、投与目的で、独立した統計分析群による暫定的な分析を実施した；連日の作業責務を負う試験担当医および試験要員に対して盲検を維持した。暫定的に推定した仮説の正式な検証は行わず、暫定的な分析結果に基づいて試験を早期に終了することも変更することもなかった。
【００６７】
背景メトホルミン（ＭＥＴ）処置に基づく、患者の空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）低下およびＨｂＡ１ｃ低下についても評価した。
【００６８】
結果
対象の性質およびベースライン特徴
計７７４例の対象をスクリーニングした。無作為化した対象３６１例中、３５６例（平均５３歳、ＢＭＩ３２．１ｋｇ／ｍ２）に処置を行い、安全性分析対象とした；３４５例の対象を有効性分析対象とし、２５５例が１６週間の試験を完了した。離脱率は群間で類似し、最も頻発した離脱理由は有害事象であった。離脱に至った有害事象のうち最も頻発した（患者２例以上に発現した）ものは、高血糖（０〜１１．８％）、胃腸事象（０〜１１．４％）、注射部位関連事象（０〜９．７％）および高トリグリセリド血症（５．７％）などであった。他の離脱理由は、追跡調査不能、プロトコル違反、および自発的な離脱などであった。
【００６９】
ベースラインの人口統計および特徴は群間で同等であった。糖尿病の平均罹患期間は５年間であり、ベースラインのＡ１Ｃ値（平均８．０％）は群間で均等に分布した。プラセボまたはアルビグルチド投与対象における薬剤未投与対象（２５．７〜３４．４％）または単一療法としてメトホルミンを投与した対象の割合は類似した。すべてのエクセナチド投与対象が背景メトホルミン単一療法上にあった。群の人種および民族（４３．８〜６４．５％白人；米国およびラテンアメリカクリニック出身対象はそれぞれ、８７．１％および１２．９％）、空腹時グルカゴン（９４．４〜１０８．９ｎｇ／Ｌの範囲）、ならびに脂質代謝異常、高血圧、および冠動脈疾患率（それぞれ、５０．０〜８０．０％；４７．１〜６７．６％；および０〜１５．２％の範囲）は類似した。
【００７０】
有効性
１６週間後、各用量スケジュール範囲のアルビグルチドは、Ａ１Ｃを概して用量依存的に有意に低下させた（表１、図２Ａ）。各処置スケジュールにおける最高用量投与対象のベースラインからの平均Ａ１Ｃ低下は、プラセボ（−０．１７％）またはエクセナチド（−０．５４％）と比較し、３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回においてそれぞれ、−０．８７％、−０．７９％および−０．８７％であった。最高用量群の（ＡＮＣＯＶＡモデルに基づく）Ａ１Ｃ低下は、プラセボと比較して統計的に有意であった：３０ｍｇ週１回−０．６２％（９５％ＣＩ  −１．０３、−０．２２）、Ｐ＝０．００３；５０ｍｇ隔週−０．５７％（９５％ＣＩ  −０．９６、−０．１９）、Ｐ＝０．００３；および１００ｍｇ月１回−０．６０％（９５％ＣＩ、−０．９９、−０．２２）Ｐ＝０．００２。予想通り、ベースラインＡ１Ｃ≧８．５％の対象では、数値的により大きなＡ１Ｃ低下が観察された。
【００７１】
１６週目、Ａ１ＣおよびＦＰＧは、すべてのアルビグルチド投薬スケジュール範囲で用量依存的に低下した。Ａ１Ｃ低下は、プラセボ（−０．２％）と比較し、アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回で類似した（それぞれ、−０．９、−０．８および−０．９％；ｐ＜０．００５）。結果を、表１および表２に要約する。全群におけるベースラインからのＨｂＡ１ｃおよび米国糖尿病協会の血糖値目標平均変化を図２および図３に示す。
【表１】
2012511586.tif 000003
【表２】
2012511586.tif 000004
ＦＰＧ、空腹時血漿グルコース；Ａ１Ｃ、グリコシル化ヘモグロビン；ＳＤ、標準偏差。
プラセボと比較して*ｐ＜０．０５
臨床基準を得るために†エクセナチドを使用した；統計分析は行わなかった。
【００７２】
アルビグルチドで体重低下（−０．９〜−１．８ｋｇ）が観察された。実証されている低血糖症はアルビグルチドで増大しなかった；最も頻繁に報告されたＡＥは、悪心、嘔吐および頭痛などであった。胃腸ＡＥの発現が最も少なかったのは、週１回アルビグルチド３０ｍｇ投与群であった。膵炎を発現した対象はなかった。ほとんどの皮膚反応は小さく、注射部位に局所的であった。抗ＡＬＢ抗体陽性が対象８例（２．５％）に生じ、プラセボ群１例、ベースライン時陽性２例が含まれた。
【００７３】
１６週目、血糖管理のためのＡＤＡ目標（Ａ１Ｃ７．０％未満）に達した対象の割合は、各用量スケジュール範囲の増量と共に増大した；３つのスケジュール間において、アルビグルチドの最高用量群でＡ１Ｃ目標に達した対象の割合は類似した。したがって、アルビグルチド３０ｍｇ週１回（５２％）、５０ｍｇ隔週（５３％）、および１００ｍｇ月１回（４８％）投与対象の方が、プラセボおよびエクセナチド投与対象のそれぞれ、２０．０％および３５．３％と比較して、より多くＡ１Ｃ７．０％未満に達した（図２Ｂ）。
【００７４】
アルビグルチド誘発性のＦＰＧの経時的変化により、各投薬スケジュールのアルビグルチドは１６週間にわたりＦＰＧの用量依存的な低下を誘発したことが示され、プラセボ投与対象では、ＦＰＧに変化は観察されなかった。迅速なＦＰＧ低下が観察され、評価項目である１６週目のＦＰＧ低下は、各最高用量群で類似した（図３Ｃ）。１６週目、ＦＰＧのベースラインからの変化はプラセボと比較して統計的に有意な低下を示した［アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回用量において、それぞれ、−１．３８（Ｐ＝０．０１）、−１．１６（Ｐ＝０．０３）、および−１．１７（Ｐ＝０．０２）ｍｍｏｌ／Ｌ］。アルビグルチド４ｍｇおよび１５ｍｇ週１回用量レジメンによりＦＰＧは低下したが、効果は低かった。特に、月１回投薬レジメン投与対象では、経時的に最も大きなＦＰＧ変動が観察された（図３Ｃ）。エクセナチドは経時的に比較的一貫したＦＰＧプロファイルに関連し、これは最高用量のアルビグルチドで見られたＦＰＧ低下より数値的に小さかった（図３Ｃ）。
【００７５】
空腹時インスリン、グルカゴン値のいずれも、一貫した変化または有意な変化を示さなかった。（ＨＯＭＡ−Ｂにより評価した）β細胞機能の小さな改善をアルビグルチド投与対象に認めた。
【００７６】
体重低下について、群間に有意差はなかった。各時間的スケジュールのアルビグルチド最高用量レジメン投与対象において、一貫した体重低下の傾向（平均体重低下−１．１〜−１．７ｋｇの範囲）が認められた。これらの体重低下はプラセボ投与群の体重低下（−０．７ｋｇ）を数値的に超えたが、エクセナチドによる体重低下（−２．４ｋｇ）より小さかった。アルビグルチドおよびエクセナチドにより、平均収縮期血圧および拡張期血圧は低下する傾向にあったが、血漿リポタンパク質プロファイルは有意に変化しなかった。
【００７７】
アルビグルチド群およびプラセボ群の６５．６〜７４．３％に背景メトホルミン（ＭＥＴ）を投与した。１６週間後、背景ＭＥＴ対象は、空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）低下を、アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回用量ならびにプラセボで、それぞれ、−１．２６、−２．１０、−１．８０および−０．０７ｍｍｏｌ／Ｌ、集団全体と比較して、それぞれ、−１．４４、−１．３２、−１．２２および−０．１０ｍｍｏｌ／Ｌ発現した。エクセナチドはＦＰＧを−０．８０ｍｍｏｌ／Ｌ低下させた。
【００７８】
ＭＥＴ対象において、各用量スケジュールにおけるアルビグルチド最高用量群は１６週間にわたり同様にＨｂＡ１ｃを有意に低下させた。プラセボと比較して、アルビグルチド３０ｍｇ週１回、−０．７８％、アルビグルチド５０ｍｇ隔週−０．８３％、およびアルビグルチド１００ｍｇ月１回−０．７７％（−０．０５％、ｐ＜０．０５）であり、エクセナチドはＨｂＡ１ｃを−０．５４％低下させた。集団全体において、ＨｂＡ１ｃは、アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回投薬により、プラセボ（−０．１７％）と比較して、それぞれ、−０．８７、−０．７９および−０．８７％低下した（ｐ＜０．００５）。
【００７９】
ＭＥＴ患者間で、ＨｂＡ１ｃ  ７％未満達成率は、プラセボ群１５％およびエクセナチド群３５％と比較しアルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回投与対象で、それぞれ、４３％、５０％および４６％であった。アルビグルチドによる体重低下は、ＭＥＴ群（−０．４〜−２．１ｋｇ）および集団全体（−０．９〜−１．８ｋｇ）の両方で観察された。実証されている低血糖症はアルビグルチドで増大せず、最も一般的に報告されたＡＥは胃腸事象であった。ＭＥＴ対象の悪心または嘔吐率はアルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回用量投与患者で、それぞれ、１８．２％、４７．８％および５６．５％であり、全体の試験集団と比較してそれぞれ、２９．０％、５４．３％および５５．９％であった。エクセナチド群では悪心または嘔吐は４５．７％発現した。
【００８０】
安全性および忍容性
少なくとも１つの有害事象を報告した患者の百分率は群間で類似した（６７〜８５％）。最も頻繁に報告された有害事象は、悪心（１１．８〜５４．３％）、嘔吐（０〜４１．２％）、頭痛（５．９〜２３．５％）、めまい（５．７〜１４．３％）、鼻咽頭炎（５．７〜１１．４％）、背痛（０〜１４．３％）、インフルエンザ（０〜９．７％）、上気道感染（０〜１５．２％）、および局所皮膚反応（２．９〜２８．６％）などであった。
【００８１】
悪心および／または嘔吐を発現した対象の割合は、アルビグルチド≦３０ｍｇ投与対象で、（他の用量レジメン範囲の）より高用量の投与対象の割合と比較して低かった。３０ｍｇ週１回群において悪心および／または嘔吐を発現した対象は、５０ｍｇ隔週対象群５４．３％および１００ｍｇ月１回患者群５５．９％と比較して、２９．０％であった。エクセナチド群で悪心および／または嘔吐を発現した患者の百分率も、アルビグルチド３０ｍｇ週１回群で示されたよりも数値的に高かった（４５．７％）。
【００８２】
悪心および／または嘔吐の時間経過の検討（図４）により、各週で悪心および／または嘔吐を発現する対象の割合は、３０ｍｇ週１回群で低く（１０％未満）、試験過程を通じて減少したことが示され、８週間後に悪心または嘔吐は報告されなかった（図４Ｃ）。アルビグルチド５０ｍｇ隔週用量の投与患者における悪心および／または嘔吐の割合はアルビグルチド３０ｍｇ週１回投与対象における割合よりも高かったが、これら有害事象の発現は試験期間にわたって低下した（図４Ｄ）。アルビグルチド１００ｍｇ月１回用量投与対象はより高率の悪心および／または嘔吐も発現し、発現ピークはそれぞれの月１回用量投与後に生じた。全体率は、１００ｍｇ月１回で他のいずれのアルビグルチド群よりも高かった（図４Ｅ）。エクセナチドによる悪心および／または嘔吐の発現は２週目までに２０％に達し、発現は増大して５週目に発現ピーク２９％（標識に基づく滴定により）に達した後、やはり試験期間にわたり低下した（図４Ｂ）。
【００８３】
他の有害事象は、ＧＩ関連事象ほど一般的ではなく、群間で類似し、用量依存的傾向はなかった。実証されている低血糖症は、プラセボ（３．９％）およびエクセナチド（２．９％）と比較してアルビグルチド（０〜３．１％）で増大しなかった。心関連有害事象（対象８例）は、群間にわたって分布し、用量依存的傾向はなかった。膵炎エピソードは報告されなかった。
【００８４】
１１週間の処置後、抗アルビグルチド抗体の発現をモニタリングするために休薬期間を設けた。計８例（２．５％）の対象において、ベースライン測定後、プラセボおよびアルビグルチド群において少なくとも１回、抗アルビグルチド抗体陽性を確認した。しかしながら、試験した２例の対象（４ｍｇ週１回群および１５ｍｇ週１回群の各１例）がアルビグルチド処置前に陽性であり、１例のプラセボ投与対象が陽性であった。アルビグルチド週１回および隔週群において、残り５例のアルビグルチド陽性対象が検出された。抗アルビグルチド抗体の出現は大部分が一過性であり、対象１例が２７週目に陽性のままであった。抗体は非中和、低力価であり、５例中４例の対象がＧＬＰ−１との交差反応を示した。抗アルビグルチド抗体の存在と、有効性または安全性のいずれかとの間に明らかな関連性はなかった。
【００８５】
本試験において注射部位の局所皮膚反応が観察された。ほとんどが小さく、注射部位に局所的であり、プラセボ（５．９％）およびエクセナチド（２．９％）と比較してアルビグルチド群（２．９〜２８．２％）でより一般的であった。注射部位反応は、アルビグルチド３０ｍｇ用量の投与対象において１人当たり１回、およびアルビグルチドのより高用量の投与対象において１人当たり約２回生じる傾向にあった。いずれの皮膚反応もＩｇＥ抗体陽性とも中和抗体とも関連しなかった。皮膚反応は反復投薬時に悪化せず、用量関連のように見えなかった。アルビグルチドに起因する全身アレルギー反応は観察されなかった。
【００８６】
薬物動態
アルビグルチドは、約５日間の半減期を示した。アルビグルチド値は、初回投与から約４〜５週間以内に安定した。循環アルビグルチド濃度は、より高用量かつ低頻度のアルビグルチド投与時により大きなピーク／トラフ変動が観察された。
【００８７】
結論
本試験において、今後の試験に向けてレジメンの潜在的用量を同定するために、長時間作用型ＧＬＰ−１受容体作動薬であるアルビグルチドの用量および時間依存的効果について検討した。各用量スケジュール範囲のアルビグルチドは、プラセボと有意に異なった用量依存的Ａ１Ｃ低下と関連しているように見えた。各スケジュール（アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週、および１００ｍｇ月１回）に使用した最大用量は、Ａ１Ｃにおいて類似した反応を誘発し、Ａ１Ｃの平均ベースライン８．０％から約０．８〜０．９％の範囲内で有用な低下をもたらした。
【００８８】
アルビグルチドは１６週目、プラセボと比較してＦＰＧも有意に低下させた。最初の評価時（投与後２週間）にＦＰＧ低下が観察された。先行試験において、早くも単回投与後２日目にＦＰＧ低下が観察された。
【００８９】
血糖反応の変動性は、アルビグルチドの循環濃度に関連すると考えられた。半減期約５日間および一貫した治療反応に達する上で十分な用量（すなわち、３０ｍｇ）の週１回投薬により、一貫したＦＰＧ低下がもたらされた；ＦＰＧにおいて、隔週または月１回投薬後、類似したＡ１Ｃ低下にも関わらず、大きな変動が観察された。
【００９０】
アルビグルチド３０ｍｇ週１回投薬により、比較基準のエクセナチドより好ましい悪心および嘔吐プロファイルを伴い、ＦＰＧ低下の安定的かつ一貫した改善が誘発された。隔週で投与時、アルビグルチド５０ｍｇも血糖指標を改善したが、ＧＩ有害事象率がより高く、これはおそらくはより高い初回用量に関連した。すべての投薬スケジュールにおいて、悪心および嘔吐率は経時的に低下した。隔週レジメンにおける漸増用量滴定はより低頻度のＧＩ事象に至り得、これについては今後の試験で検討されるであろう。しかしながら、月１回投与時では、アルビグルチド（５０または１００ｍｇ）投薬間で安定的にＦＰＧを低下させるようには見えず、より高いＧＩ事象率と関連した。隔週および月１回レジメンにおける増大したＦＰＧ変動およびＧＩ事象は、低頻度の投薬に起因するアルビグルチド濃度の変動による可能性が高かった。まとめると、本試験における有効性および安全性プロファイルにより、アルビグルチドの少なくとも３０ｍｇ週１回投薬は、好ましいＧＩ忍容性を伴う迅速かつ持続した血糖管理をもたらすことが示唆される。今後の試験は、隔週スケジュールが、初回の週１回レジメンに奏効し忍容する患者において、維持される魅力的な選択肢かどうかを調査するために設計し得る。
【００９１】
機構的に、アルビグルチドとエクセナチドの忍容性プロファイルが異なる理由は不明であるが、薬物動態差（アルビグルチドおよびエクセナチドのＴｍａｘはそれぞれ約３日間対２．１時間）に起因し得、これによりアルビグルチド３０ｍｇ週１回の４〜５回投与後に長い半減期（約５日間）および安定状態に達する。アルビグルチドのゆっくりとした蓄積は、短期作用性ＧＬＰ−１模倣薬においてしばしば観察されたＧＩ忍容性を改良し得る。加えて、アルビグルチドは比較的、中枢神経系に浸透しないため（Ｂａｇｇｉｏ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５３：２４９２−２５００，  ２００４）、悪心および嘔吐に関してエクセナチドより良好なプロファイルを有し得る。
【００９２】
体重低下はアルビグルチド群間で類似し、数値的にエクセナチド基準群未満であった。しかしながら、体重および心代謝変数に対する真の効果を決定するためには、より大規模でより長期の試験が必要である。
【００９３】
中和抗体の出現または即時型超過敏反応の発現の可能性があるため、アルビグルチドの免疫原性について精密にモニタリングした。本試験では、抗アルビグルチド抗体が対象２．５％（ｎ＝８）で検出された。しかしながら、ベースラインの対象２例で検出された抗アルビグルチド抗体力価陽性の観察から、この免疫原性率は過大評価であり得ることが示唆される。ヒトＧＬＰ−１と約５０％相同のエクセナチド（Ｄｒｕｃｋｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  ８４：３４３４−３４３８，  １９８７）は、１日２回投与（ＤｅＦｒｏｎｚｏ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２８：１０９２−１１００，  ２００５；  Ｋｅｎｄａｌｌ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２８：１０８３−１０９１，  ２００５；  Ｚｉｎｍａｎ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  １４６：４７７−４８５，  ２００７；  Ｂｕｓｅ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２７：２６２８−２６３５，  ２００４）および週１回（Ｄｒｕｃｋｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｌａｎｃｅｔ  ３７２：１２４０−１２５０，  ２００８）処方後の処置下の抗体発現（４０％超）と関連する。抗体形成により、特に高値の抗エクセナチド抗体を発現する患者間で有効性が軽減され得る（Ｄｒｕｃｋｅｒ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｌａｎｃｅｔ  ３７２：１２４０−１２５０，  ２００８）。
【００９４】
用量およびスケジュールを確認するこの第ＩＩ相試験には制限がある。第一に、各群の患者数が第ＩＩＩ相試験と比較して相対的に少ない。第二に、対象の総数に対して、有害事象、追跡調査不能、および自発的な離脱による脱落率が高かった。第三に、活性剤処置期間が１６週間であったため、反応の程度または持続性に関する完全な評価は決定できない。最後に、ＧＩ有害事象の頻度およびＦＰＧ反応の変動を軽減し得る隔週および月１回投薬の漸増用量は試験されなかった。
【００９５】
まとめると、アルビグルチドは週１回および隔週で投与時、グルコース管理を用量依存的に改善する。月１回のより高用量のアルビグルチドは効果的であるが、それらの使用は、より高頻度のＧＩ関連有害事象に拘束される。結論として、２型糖尿病に罹患している対象において、アルビグルチドの週１回投与は、プラセボと比較して血糖管理を有意に改善し、低血糖症または免疫学的反応リスクを増大せずに、許容可能な安全性および忍容性プロファイルと中等度の体重低下を伴う。結論として、週１回のアルビグルチドは、好ましい安全性および忍容性プロファイルを伴い血糖管理を有意に改善した；隔週のアルビグルチドはＴ２ＤＭ患者において維持される選択肢としての可能性を有し得る。
【００９６】
アルビグルチドは背景ＭＥＴを投与されている患者において効果的であり、エクセナチドよりも数値的に高いＨｂＡ１ｃおよびＦＰＧ低下がもたらされた。忍容性は３０ｍｇ週１回のアルビグルチド群で最も好ましかった。
【実施例２】
【００９７】
２型糖尿病に罹患している対象におけるアルビグルチドの胃腸有害事象プロファイル
胃腸（ＧＩ）有害事象はＧＬＰ−１療法のアドヒアランスを限定し得る。悪心および嘔吐（Ｎ＆Ｖ）の時間経過を、１６週間の無作為化、多施設、二重盲検、並行群間試験において評価した；２型糖尿病（Ｔ２Ｄ）に罹患している対象３５６例に、プラセボ（ＰＢＯ）、アルビグルチド（ＡＬＢ）［週１回（４、１５または３０ｍｇ）、隔週（１５、３０または５０ｍｇ）または月１回（５０または１００ｍｇ）］またはエクセナチド（Ｅｘ、非盲検）を１６週間にわたり投与した。プラセボおよびエクセナチドにおけるＮ＆Ｖの併発は、それぞれ、１１．８％および４５．７％であった。Ｎ＆Ｖの併発は、アルビグルチド３０ｍｇ週１回、５０ｍｇ隔週および１００ｍｇ月１回投与対象で２９％、５４．３％および５５．９％報告された（平均期間：２．３、３．３および５．８日間）。Ｎ＆Ｖ発現率は、高頻度かつ低用量のアルビグルチドにおいて、低頻度かつ高用量のアルビグルチドと比較し、より低かった。すべての３０ｍｇ週１回事象が軽度であった；５０ｍｇ隔週または１００ｍｇ月１回群の９０％超が軽度／中等度であった。Ｎ＆Ｖはアルビグルチド曝露と相関し、時間の経過と共に低下した。Ｎ＆Ｖを下表３に要約する。
【表３】
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【００９８】
図４は、「有害事象としての悪心および嘔吐の時間経過」を示す。１６週間の試験の各週の間の悪心を伴うもしくは伴わない嘔吐（灰色帯）または悪心（白色帯）有害事象の発現対象の百分率を、Ａ）プラセボ、Ｂ）エクセナチド、Ｃ）アルビグルチド３０ｍｇ週１回、Ｄ）アルビグルチド５０ｍｇ隔週、ならびにＥ）アルビグルチド１００ｍｇ月１回を示す。
【００９９】
結論として、アルビグルチド３０ｍｇ週１回は、他のアルビグルチドレジメンおよびエクセナチドと比較して好ましいＮ＆Ｖプロファイルを示す。
【実施例３】
【０１００】
２型糖尿病に罹患している日本人対象におけるアルビグルチドの安全性、薬物動態および薬力学：第Ｉ／第ＩＩ相試験
アルビグルチド（ＡＬＢ）は、週１回、隔週１回（２週に１回）および月１回投与時に白人／ラテンアメリカ系集団における糖血症指標を改善することが示された長時間作用型ＧＬＰ−１模倣薬である。２型糖尿病（Ｔ２Ｄ）に罹患している日本人対象におけるアルビグルチドの薬物動態、薬力学および安全性／忍容性を、この２８日間、単盲検、無作為化、プラセボ（ＰＢＯ）対照試験で評価した；４０例の対象（平均５４．５歳、ＢＭＩ  ２４．５ｋｇ／ｍ２、Ａ１Ｃ  ６．３〜１０．３％の範囲）にアルビグルチド：１５ｍｇまたは３０ｍｇ週１回；５０ｍｇ隔週；または１００ｍｇ月１回を投与した（腹部皮下）。アルビグルチドは概して忍容性良好であった；ＧＩ事象は１００ｍｇ月１回を除く全用量においてプラセボと同程度であり、３０ｍｇ週１回群で数値的に最も低かった。１００ｍｇ月１回群において、最も一般的であったＡＥは、鼓腸（ｎ＝３、３８％）、嘔吐（ｎ＝３、３８％）および悪心（ｎ＝２、２５％）であった。重篤なＡＥは報告されなかった。アルビグルチドの血漿ｔ１／２は５．３日間、ＣＬ／Ｆは６８．７ｍＬ／時間、およびＶ／Ｆは１２．６Ｌであった。ＦＰＧおよび加重平均ＡＵＣ０−４グルコースは、早くも３日目に改善した。２９週目、１００ｍｇ月１回用量を除く全用量のアルビグルチドがＦＰＧおよびＡＵＣ０−４グルコースにおいて、プラセボと比較してベースラインからの有意な変化を示した。アルビグルチドは、２９日目および４３日目、全用量でＡ１Ｃも有意に低下した。結果を下表４に要約する。
【表４】
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【０１０１】
結論として、週１回／隔週のアルビグルチドは、Ｔ２Ｄに罹患している日本人対象において好ましい安全性および忍容性プロファイルを伴い血糖管理を有意に改善した。
【実施例４】
【０１０２】
インスリングラルギンと併用投与したアルビグルチド
２型糖尿病に罹患している対象において、インスリングラルギンと摂食前リスプロインスリンとの併用と比較し、アルビグルチドをインスリングラルギンと併用した週１回皮下注射として投与する。試験対象は、２型糖尿病と歴史的診断され、経口抗真性糖尿病薬と併用したもしくは併用しないインスリングラルギンまたは他の中間作用型インスリンもしくは長時間作用型インスリンの６ヶ月以上かつ５年未満の使用にも関わらず十分に管理されていない対象であり、グリコシル化ヘモグロビン値７％未満に達することができない対象とする。また、対象も自発的であり、基礎インスリンと摂食前インスリンとの両方の集中的レジメンを追求できなければならない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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