(57)【要約】  本発明は、神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌の治療または予防に有用な式（Ｉ）の三重置換フェナントロリン誘導体の新規ファミリー、それらの医薬としての使用、特に神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌の治療のための医薬としての使用、およびこれらの化合物を含んでなる医薬組成物に関する。2012511544.tif 000068
2012511544.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2012511544.tif 000067
（上記式中、
Ｒ１は、−Ｏ−Ｒ４および−Ｓ−Ｒ５から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ＨおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよび−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｒ６から選択され、ｎは、１、２、３、４、５、６から選択され、Ｒ６は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３は、水素およびＣ１−Ｃ６アルコキシルから選択され、
但し、Ｒ２およびＲ３の一方はＨであり、他方はＨとは異なる）
の化合物、またはその任意の塩、溶媒和物、立体異性体もしくは互変異性体。
【請求項２】
Ｒ４およびＲ５が、Ｈおよびメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が水素、フルオロ、メチル、メトキシおよび−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３から選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が、水素およびメトキシルから選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
オキシム基−ＣＨ＝ＮＯＨの二重結合がＥ配座である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物が、下記の化合物
５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
４−ヒドロキシ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
医薬として用いるための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態の治療または予防に用いるための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項９】
癌の治療または予防に用いるための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１０】
神経変性疾患が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、統合失調症、ハンチントン病、脳卒中および虚血のような脳損傷、多発性硬化症、癲癇、フリードライヒ運動失調、海綿状脳症、アミロイドーシス、血管性痴呆、タウオファティーズ(tauophaties)、進行性核上性麻痺、皮質基底核変性症、前頭側頭葉変性症、亜急性硬化性全脳炎性パーキンソン症候群振顫麻痺、脳炎後パーキンソン症候群、拳闘家脳炎(pugilistic encephalitis)、グアム・パーキンソン痴呆複合、ピック病、前頭側頭型認知症、ＡＩＤＳ関連痴呆、多発性硬化症、鬱病、統合失調症および双極性障害のような気分障害、脳卒中および脳損傷後の機能回復の促進、特に外傷性脳損傷から選択される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１１】
血液疾患が、サラセミア、貧血、再生不良性貧血、ダイアモンド−ブラックファン貧血、鎌状赤血球症、正常な赤血球輸血を必要とする血液障害、骨髄異形成症候群、鉄によって誘発される心機能不全、鉄によって誘発される心不全、および糖尿病から選択される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
癌が、腸、肝臓、胃、乳、肺、卵巣、前立腺、脳神経膠腫、リンパ、皮膚、色素、甲状腺、白血病および多発性骨髄癌から選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態を治療または予防する方法であって、このような治療を必要とする患者に請求項１に記載の式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、またはその塩、溶媒和物、その立体異性体もしくは互変異性体、またはその医薬組成物の治療上有効量を投与してなる、方法。
【請求項１４】
癌を治療または予防する方法であって、このような治療を必要とする患者に請求項１に記載の式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、またはその塩、溶媒和物、その立体異性体もしくは互変異性体、またはその医薬組成物の治療上有効量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１５】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、その塩もしくは溶媒和物、またはその互変異性体と、少なくとも１種類の薬学上許容可能なキャリヤーとを含んでなる、医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその任意の塩または溶媒和物の、生物学的アッセイの試薬、好ましくは薬物動態アッセイ、血液脳関門交差アッセイ、キレート化アッセイ、過酸化水素によって誘発される細胞死からの保護、６−ＯＨＤＡによって誘発される細胞死からの保護、Ａβ毒性からの神経保護、およびβ−アミロイド分泌の抑制に対するアッセイのための反応性物としての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態、特にアルツハイマー病（ＡＤ）、または癌の治療および／または予防のための幾つかの三重置換フェナントロリン誘導体の使用に関する。更に、新規な三重置換フェナントロリン誘導体、そのような誘導体の製造方法およびそれらを含んでなる医薬組成物が提供される。
【０００２】
発明の背景
ＡＤおよびパーキンソン病（ＰＤ）は、世界中で数百万人が罹っている最も頻繁見られる進行性の神経変性疾患である。かなりの割合の患者は、双方の本質から共通の臨床的および病理学的症状を共有しているので、これは共通の病理学的機構の存在を示していると思われる。
【０００３】
酸化ストレスは、アテローム性動脈硬化症、パーキンソン病およびＡＤなどの多くの疾患に関係していることが知られており、また老化や癌においても重要であることがある。
【０００４】
酸素ラジカルスーパーオキシド（Ｏ２−）または過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）などの反応性酸素種（ＲＯＳ）は、通常の代謝過程中に生成し、幾つかの有用な機能を行っている（「反応性酸素種と中枢神経系」（Reactive oxygen species and the central nervous system）, Halliwell B., J. Neurochem., 1992, 59, 1609-1623）。細胞は、これらの酸化剤のレベルを調節する幾つかの機構、例えばスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）、グルタチオンまたはビタミンＥを備えている。正常な生理学的条件では、ＲＯＳとこれらの抗酸化機構の間に均衡が存在する。ＲＯＳの過剰な生成および抗酸化性防御の効率の喪失により、細胞の酸化ストレスを生じ、従って細胞において病理学的状態を生じ、組織損傷を引き起こす可能性がある。この事象は、代謝活性が高率であるためニューロンでは更に劇的に起こると考えられ、従って一連の変性過程、疾患および症候群、例えば、ＡＤ、ＰＤ、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）および統合失調症に関連していると考えられる（「グルタチオン、酸化ストレスおよび神経変性」（Glutathione, oxidative stress and neurodegeneration）, Schulz et al., Eur. J. Biochem., 2000, 267, 4904-4911）。また、ハンチントン病（「ハンチントン病における酸化的損傷」（Oxidative damage in Huntington' disease）, Segovia J. and Perez-Severiano F, Methods Mol. Biol., 2004, 207, 321-334）、脳卒中および虚血などの脳損傷（「急性脳血管発作に関する酸化ストレス」（Oxidative stress in the Context of Acute Cerebrovascular Stroke）, El Kossi et al., Stroke, 2000, 31, 1889-1892）、糖尿病（「糖尿病での治療ターゲットとしての酸化ストレス：論争の再訪（Oxidative stress as a therapeutic target in diabetes: revisiting the controversy）」, Wiernsperger NF, Diabetes Metab., 2003, 29, 579-85）、多発性硬化症（「多発性硬化症の病因における酸化ストレスの役割：有効な抗酸化剤療法の必要性」（The role of oxidative stress in the pathogesis of multiple sclerosis: the need for effective antioxidant therapy）, Gilgun-Sherki Y. et al., J. Neurol., 2004, 251 (3), 261-8）、癲癇（「癲癇における酸化性外傷：抗酸化剤療法の可能性（Oxidative injury in epilepsy: potential for antioxidant therapy ?）」, Costello D.J. and Delanty N., Expert. Rev. Neurother., 2004, 4(3), 541-553）、アテローム性動脈硬化症（「アテローム発生の酸化ストレス仮説」（The oxidative stress hypothesis of atherogenesis）, Iuliano L., Lipids, 2001, 36 suppl, S41-44）、フリードライヒ運動失調（「フリードライヒ運動失調における酸化ストレス、ミトコンドリア機能不全および細胞ストレス応答（Oxidative stress, mitochondrial dysfuntion and cellular stress response in Friedreich's ataxia）」, Calabrese et al., J. Neurol. Sci., 2005, 233, 145-162）、心不全（「酸素、酸化ストレス、低酸素症および心不全」（Oxygen, oxidative stress, hypoxia and heart failure）， Giordano F.J. et al., J. Clin. Invest,; 2005, 115(3), 500-508）、癌（「癌細胞におけるＲＯＳストレスおよび治療上の重要性」（ROS stress in cancer cells and therapeutic implications）, Pelicano et al., Drug Resistance Updates, 2004, 7(2), 97-110）、および腫瘍進行（「腫瘍進行におけるＲＯＳのシグナル伝達機構」（The signaling mechanism of ROS in tumor progression）, Wu W.S., Cancer and metastasis reviews, 2006, 25(4), 695-705)のような他の疾患または病理学的状態も、酸化ストレスに関係づけられている。抗酸化機構を高めることによる治療は、上記疾患の幾つかの進行を遅らせることがある。
【０００５】
もう一つのタイプの細胞ストレスは、小胞体（ＥＲ）ストレスである。ＥＲは、脳槽および微小管によって形成されている広範な網状組織によって表され、かつ核エンベロープからすべての真核生物細胞の細胞表面まで伸張している細胞内小器官である。ＥＲは、幾つかの生命の維持に必要な機能を行っており、粗面ＥＲは、タンパク質合成およびタンパク質の正確な折り畳みのための転写後変化の場所であり、ＥＲは、タンパク質を細胞内の適切な目的地に運ぶための一般的な輸送経路であり、またＣａ２＋貯蔵器官でもある。ＥＲの機能が乱れると、ＥＲ中に折り畳まれていないタンパク質が蓄積し、一般にＥＲストレスと呼ばれる状態を誘発する。これらの乱れは、生化学的不均衡によって引き起こされるだけでなく、ＥＲのＣａ２＋ホメオスタシスの乱れによっても引き起こされる可能性がある。幾つかの研究（「グリコーゲンシンターゼキナーゼ３β（ＧＳＫ３β）は、６−ヒドロキシドーパミンによって誘発されるニューロン死をもたらす」（Glycogen synthase kinase 3β（GSK3β） mediates 6-hydroxydopamine-induced neuronal death）, Chen et al., FASEB J. 2004, 18(10), 1162-4)は、ＥＲストレスが、ＡＤ患者で生じる神経変性過程に関与する酵素である、酵素グリコーゲンシンターゼキナーゼ３βを活性化することを明らかにしている。
【０００６】
腫瘍細胞死は、異常な悪性細胞の排除に重要な事象であり、天然の腫瘍抑制の重要な機構を提供する。これらの微妙に調和した過程を無力化する異常性は、癌クローンが生理学的制御系および治療介入のいずれも回避するのに成功するという強力な利点を提供する。現在利用可能なデータは、悪性細胞の除去が古典的アポトーシス経路(ミトコンドリアおよび/または死受容体経路)によって変化することが多いことを示しており、代わりのアポトーシスおよび非アポトーシス経路が腫瘍細胞死に効果的に寄与することがあるという証拠が増してきている。これらの機構の中では、実験的証拠は、ストレスシグナル伝達閾値を超過した場合には、ＥＲおよびゴルジ体が生存促進性（回復）機構並びに細胞自殺プログラムのいずれも活性化できることを示している。従って、様々な細胞内区画間のタンパク質輸送のバランスが脆弱であることにより、例外的な治療機会が提供されると考えられる（「ＥＲ−ゴルジ網状組織−抗癌治療の将来のターゲット」（ER-Golgi network - a future target for anti-cancer therapy）, Wlodkowic D. et al., 2009, Leukemia Research, 33 (11), 1440-1447)。
【０００７】
カテコールアミン作動性神経毒６−ヒドロキシドーパミン（６−ＯＨＤＡ）は、パーキンソン病に罹っている患者で内因的に形成される。６−ＯＨＤＡには、２つの作用方法が有り、それは、容易にフリーラジカルを形成すること、およびミトコンドリア呼吸鎖複合体ＩおよびＩＶの強力な阻害薬であることである。６−ＯＨＤＡモデルは、ヒトにおける、特にＰＤについての、ＤＡ変性を特徴とする神経化学および行動欠損の広汎なスペクトルを生じさせるのに用いられる(例えば、「６−ヒドロキシドーパミン神経毒性の機構」（Mechanism of 6-hydroxydopamine neurotoxicity）, Glinka Y et al., J Neural Transm Suppl., 1997, 50, 55-66; 「パーキンソン病の治療回復のための急性動物対慢性動物モデルの実行」（The implementation of acute versus chronic animal models for treatment discovery in Parkinson's disease）, Willis GL et al., Rev Neurosci., 2004, 15(1), 75-87)。
【０００８】
神経変性疾患の共通のサインは、幾つかのシグナル伝達経路を冒し、最終的にはニューロン死をもたらす誤って折り畳まれたタンパク質の蓄積および沈着である。幾人かの著者(「ERストレスおよび神経変性疾患」（ER stress and neurodegenerative diseases）, Lindholm et al., Cell Death and Differentiation, 2006, 13, 385-392)は、ＥＲストレスはＰＤ、ＡＤ、ＡＬＳおよび伝染性海綿状脳症（ＴＳＥ）のような幾つかの神経変性疾患に関係すると考えている。
【０００９】
上記の内容を考慮すれば、神経変性疾患を治療するための新規な医薬化合物を開発するための興味深い方法は、細胞の酸化ストレスを阻害する化合物のデザインであることがある。
【００１０】
アミロイドベータ（Ａβ）は、ＡＤ患者の脳におけるアミロイド斑の主成分であるペプチドである。同様な斑は、レビー小体型痴呆症のある種の変異体および筋肉疾患である封入体筋炎で見られる。Ａβは、脳アミロイド血管障害において脳血管をコーティングする集合体も形成する。
【００１１】
Ａβは、β−およびγ−セクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の連続的開裂後に形成される。開裂が起こる場所によって、Ａβ４２またはＡβ４０が生成される。ＡＰＰは、膜貫通糖タンパク質である。ＡＰＰにおける常染色体優性突然変異は、恐らくは異常タンパク質分解プロセシングの結果として遺伝性の早発性ＡＤを引き起こす。総Ａβレベルの増加は、家族性および散在性ＡＤのいずれかの病因に関係づけられている（「アルツハイマー病におけるシナプス変化の予測変量としての可溶性アミロイドβペプチド濃度」（Soluble Amyloid β peptide Concentration as a predictor of synaptic change in Alzheimer's Disease）, L. et al., The American Journal of Pathology,1999, Lue, L155(3), 853-662 )。
【００１２】
研究者の大多数によって受け容れられている「アミロイド仮説」によれば、斑はＡＤの病理に相当する。タウタンパク質の細胞内沈着物もこの疾患で見られており、また関係づけられることもある。成熟線維（fibril）よりもむしろアミロイド経路で形成するオリゴマーが、細胞毒性種であることがある。
【００１３】
従って、アミロイドβ分泌の阻害薬の開発は、ＡＤ、ＰＤ、ハンチントン病、ＴＳＥ、プリオン病、クロイツフェルト−ヤコブ病およびウシ海綿状脳症のようなアミロイドーシスが関与している疾患の治療法を見出すための最新の方法である。
【００１４】
一方、鉄キレート剤は、サラセミア、貧血、再生不良性貧血、骨髄異形成症候群、糖尿病、ダイアモンド-ブラックファン貧血、鎌状赤血球症、正常な赤血球輸血を必要とする血液障害、鉄によって誘発される心機能不全、および鉄によって誘発される心不全など幾つかの種類の血液疾患の治療に用いられる。
【００１５】
鉄のような金属は、単一電子が金属によって受容されまたは供与されることがある酸化還元サイクリング（redox cycling）が可能である。この作用は、反応性ラジカルを生成しかつ反応性酸素種を生成することができる反応を触媒する。最も重要な反応は、恐らくはフェントン反応およびハーバー-ワイス反応であり、ここでヒドロキシルラジカルは還元鉄と過酸化水素から生成される。次いで、ヒドロキシルラジカルにより、アミノ酸(例えば、フェニルアラニンからメタチロシンおよびオルトチロシンの形成)、炭水化物を修飾し、脂質過酸化を開始し、かつ核塩基を酸化することができる。反応性酸素種を生成するほとんどの酵素は、これらの金属の１つを含んでいる。複合体形成していない形態(タンパク質または他の保護金属複合体ではない)の生物学的系にこのような金属が含まれていると、酸化ストレスのレベルを有意に上げることができる。従って、本発明による状態の治療のためのキレート化リガンドは、Ｆｅ（ＩＩＩ）よりはＦｅ（ＩＩ）の選択を示すことが望ましい。
【００１６】
鉄キレート剤であるデフェロキサミンおよびデフェリプロンは、それぞれ１９７０年代および１９８０年代末にヒトに用いられ、また最近では新規薬剤であるデフェラシロクスがヒトに用いられている。デフェロキサミンは、重症型サラセミア、鎌状赤血球症、および他の血液障害であって、ただ皮下投与だけが可能な血液障害について有効であることが明らかになっている（「重症型サラセミアにおける輸血用鉄過負荷用の経口キレート剤デフェラシロクスおよびデフェリプロン：新たなデータ、新たな疑問」（Oral chelators deferasirox and deferiprone for transfusional iron overload in thalassemia major: new data, new questions）, Neufeld E.L., Blood, 2006, 107(9), 3436-3441）。輸血による慢性的鉄過負荷に対して米国で承認されているデフェラシロクスは、ほどほど良好な効果を示している（「鉄キレート化療法の新たな進歩」（New advances in iron chelation therapy）, Cohen, A.R., Hematology, 2006, 42-47）。デフェリプロンとデフェロキサミンとの組合せ療法も、用いられている。
【００１７】
しかしながら、副作用はこれらの薬剤の使用と関連しており、デフェリプロンは消化器症状、侵食性関節炎、好中球減少症および幾つかの場合には顆粒球減少症を引き起こすことが多く、デフェリプロン療法は全血球算定と点滴用の補助供給(ancillary supplies)が毎週必要であり、細心の観察が必要であり、デフェロキサミンは消化器症状と関節痛を示し、デフェラシロクスは高価である。従って、低価格で生産されて用いられかつ副作用を少なくしたこれらの血液疾患に用いられる追加の治療用鉄キレート剤が、未だ必要とされている。
【００１８】
その上、キレート化薬剤およびキレート剤金属複合体は、癌の予防、診断および治療に有用な剤として記載されている。癌細胞および正常細胞は、成長および増殖には、鉄、銅および亜鉛のような必須金属イオンを必要とする。キレート剤は、これらの金属と、また細胞サイクル制御、脈管形成および転移抑制に関連した他の分子との調節に関連したタンパク質の制御を介して癌細胞の代謝経路をターゲットとすることができる。他のターゲットとしては、ＤＮＡ合成に関与するリボヌクレオチドレダクターゼのような特異タンパク質の阻害、鉄および銅触媒中心によって引き起こされるＤＮＡに対するフリーラジカルによる損傷の阻害、免疫低下状態の癌患者における微生物成長の阻害、および癌を引き起こす放射性および他の毒性金属の除染が挙げられる。多くの実験的キレート剤が抗癌剤として有効であることが示されているが、少数の、例えば、デクスラゾキサン、デフェロキサミン（ＤＦＯ）およびトリアピンのみが臨床試験または臨床適用の段階に到達している(「金属代謝および毒性経路を制御するキレート剤:癌予防、診断および治療における適用」（Chelators controlling metal mrtabolism and toxicity pathways: applications in cancer preventation, diagnosis and treatment）, Kontoghiorghes G.J. et al., Hemoglobin, 2008, 32(1-2), 217-27)。
【００１９】
フェナントロリン誘導体が良好な鉄キレート化特性を示すことは、周知である。幾つかのフェナントロリン誘導体は、特許ＰＬ７６３４５号明細書に示されている。鉄金属のキレート化に優れた特性を示し、血液学的な上記疾患を治療し、かつ癌を予防し、診断し、治療する能力を高めることができる新規なフェナントロリン誘導体を見出すことが特に推奨される。
【発明の概要】
【００２０】
本発明者らは、新規なファミリーの化合物、すなわち、下記式（Ｉ）によって詳細に定義される三重置換フェナントロリン誘導体であって、酸化ストレス、特に過酸化水素による細胞死および６−ヒドロキシドーパミンによる細胞死から保護し、Ａβ毒性からの神経保護効果を有し、かつＡβ分泌を阻害する特性を示す誘導体を見出した。それらは、例えば、神経変性疾患または状態の治療または予防に有用であることがある。加えて、これらの化合物は、特異的鉄（ＩＩ）キレート剤として作用することを特徴とし、従って、血液疾患および癌の治療に用いることもできる。更に、これらの化合物は、活性濃度よりかなり高い濃度でも細胞生育力に影響しない。
【００２１】
従って、第一の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2012511544.tif 000003
（上記式中、
Ｒ１は、−Ｏ−Ｒ４および−Ｓ−Ｒ５から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ＨおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよび−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｒ６から選択され、ｎは１、２、３、４、５、６から選択され、Ｒ６は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３は、水素およびＣ１−Ｃ６アルコキシルから選択され、
但し、Ｒ２およびＲ３の一方はＨであり、他方はＨとは異なる）
の化合物、またはその任意の塩、溶媒和物、立体異性体もしくは互変異性体に関する。
【００２２】
もう一つの態様によれば、本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2012511544.tif 000004
（上記式中、
Ｒ１は、−Ｏ−Ｒ４および−Ｓ−Ｒ５から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ＨおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ２は水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよび−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｒ６から選択され、ｎは、１、２、３、４、５、６から選択され、Ｒ６は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３は、水素およびＣ１−Ｃ６アルコキシルから選択され、
但し、Ｒ２およびＲ３の一方はＨであり、他方はＨとは異なる）
の化合物、またはその任意の塩、溶媒和物、立体異性体もしくは互変異性体の神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌の治療または予防のための医薬の調製における使用に関する。
【００２３】
本発明の更なる態様は、神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌の治療または予防に用いるための上記で定義した式（Ｉ）の化合物である。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物は、β−アミロイド分泌を調節する必要がある生物学的アッセイに用いることができる。従って、もう一つの態様では、本発明は、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、またはその任意の塩または溶媒和物の、生物学的アッセイの試薬、好ましくは薬物動態アッセイ、血液脳関門交差アッセイ、キレート化アッセイ、過酸化水素によって誘発される細胞死からの保護、６−ＯＨＤＡによって誘発される細胞死からの保護、Ａβ毒性からの神経保護およびβ−アミロイド分泌の阻害に対するアッセイの反応性物(reactive)としての使用に関する。
【００２５】
本発明の更なる態様は、神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌を、治療しまたは予防する方法であって、このような治療を必要とする患者に上記で定義した式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、その塩、溶媒和物、その立体異性体もしくは互変異性体、またはその医薬組成物の治療上有効量を投与することを含んでなる前記方法に関する。
【００２６】
本発明のもう一つの態様は、上記で定義した式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、その塩または溶媒和物、またはその立体異性体もしくは互変異性体と、少なくとも１種類の薬学上許容可能なキャリヤーとを含んでなる医薬組成物に関する。
【００２７】
更なる態様によれば、本発明は、医薬として用いるための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、その塩、溶媒和物、またはその立体異性体もしくは互変異性体に関する。
【００２８】
更なる態様によれば、本発明は、式Ｉの化合物、その塩または溶媒和物、またはその立体異性体もしくは互変異性体の合成方法に関する。
【発明の具体的な説明】
【００２９】
式（Ｉ）の化合物の上記定義において、下記の用語は、下記に示される意味を有する。
【００３０】
「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は、炭素と水素原子からなり、不飽和を含まず、１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜３個の炭素原子を有し、単結合、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルなどによって分子の残りの部分に結合されている、直線状または分岐状の炭化水素鎖ラジカルを表す。
【００３１】
「Ｃ１−Ｃ６アルコキシル」は、式−ＯＲａのラジカルであって、Ｒａは上記で定義した「Ｃ１−Ｃ６アルキル」ラジカル、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシなどであるものを表す。
【００３２】
「ハロゲン」は、ブロモ、クロロ、ヨードまたはフルオロを表す。
【００３３】
式Ｉの化合物
本発明の一実施形態は、式（Ｉ）
（上記式中、
Ｒ１は、−Ｏ−Ｒ４および−Ｓ−Ｒ５から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ＨおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよび−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｒ６から選択され、ｎは、１、２、３、４、５、６から選択され、およびＲ６はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３は、水素およびＣ１−Ｃ６アルコキシルから選択され、
但し、Ｒ２およびＲ３の一方はＨであり、他方はＨとは異なる）
の化合物、またはその任意の塩、溶媒和物、立体異性体もしくは互変異性体に関する。
【００３４】
好ましい実施形態によれば、Ｒ４およびＲ５は、Ｈおよびメチルから選択される。
【００３５】
もう一つの好ましい実施形態によれば、Ｒ２は、水素、フルオロ、メチル、メトキシおよび−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３から選択される。
【００３６】
更に好ましい実施形態によれば、Ｒ３は、水素およびメトキシルから選択される。
【００３７】
好ましくは、オキシム基−ＣＨ＝ＮＯＨの二重結合は、下記の構造式（Ｉａ）
【化３】
2012511544.tif 000005
に準じて、Ｅ配座を示す。
【００３８】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、下記の化合物：
５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
４−ヒドロキシ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
から選択される。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物は、塩、好ましくは薬学上許容可能な塩の形態であってもよく、または溶媒和物の形態であってもよい。「薬学上許容可能な塩」という用語は、患者に投与したときに、本明細書に記載の化合物を（直接的にまたは間接的に）提供することができる任意の塩を表す。しかしながら、薬学上許容可能でない塩も、薬学上許容可能な塩の調製に有用であることがあるので、本発明の範囲内にあると理解されるであろう。好ましくは、「薬学上許容可能な」とは、生理学的に許容でき、かつ、典型的にはヒトに投与したときに急性胃蠕動、眩暈などのアレルギー性または同様の不都合な反応を生じない分子実体または組成物を表す。好ましくは、本明細書で用いられるように、「薬学上許容可能な」という用語は、連邦または州政府の監督官庁によって認可され、または合衆国薬局方または動物、更に詳細にはヒトにおいて使用するための一般に認められている薬局方に記載されていることを意味する。
【００４０】
本発明による「溶媒和物」という用語は、非共有結合を介して結合している別の分子（恐らく極性溶媒）を有する本発明による任意の形態の活性化合物を意味するものと理解すべきである。溶媒和物の例としては、水和物およびアルコラート、例えば、メタノラートが挙げられる。好ましくは、溶媒和物は、薬学上許容可能な溶媒和物である。
【００４１】
塩および溶媒和物は、当該技術分野で知られている方法によって調製することができる。例えば、本明細書で提供される化合物の薬学上許容可能な塩は、通常の化学的方法によって塩基性残基を含む親化合物から合成される。一般的には、このような塩は、例えば、水または有機溶媒、またはこれら２つの混合物中で、これらの化合物の遊離塩基形態を適当な塩基または酸の化学量論的量と反応させることによって調製される。一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水媒質が好ましい。酸付加塩の例としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩のような鉱酸付加塩、および例えば、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩のような有機酸付加塩が挙げられる。
【００４２】
１つの好ましい薬学上許容可能な形態は、医薬組成物における形態のような結晶形態である。塩および溶媒和物の場合には、付加イオンおよび溶媒残基も無毒でなければならない。本発明の化合物は、様々な多形形態で存在することがあり、本発明はすべてのこれらの形態を包含するものと解釈される。
【００４３】
本発明の化合物は、１種類以上の同位体濃縮原子の存在のみが異なる化合物を包含することも意味する。例えば、水素を重水素または三重水素により置換、または炭素を１３Ｃまたは１４Ｃ濃縮炭素により置換、または窒素を１５Ｎ濃縮窒素により置換したことを除き現在の構造を有する化合物は、本発明の範囲内にある。
【００４４】
上記式（Ｉ）によって表される本発明の化合物は、不斉中心の存在による鏡像異性体またはジアステレオ異性体、または多重結合の存在による異性体（例えば、Ｚ、Ｅ）を包含してもよい。単一異性体、鏡像異性体またはジアステレオ異性体およびそれらの混合物も、本発明の範囲内にある。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物の使用
本発明の枠内において、「神経変性疾患または状態」という表現は、神経変性が起こる任意の疾患または状態を意味する。このような疾患または状態としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、統合失調症、ハンチントン病、脳卒中および虚血のような脳損傷、多発性硬化症、癲癇、フリードライヒ運動失調、海綿状脳症、アミロイドーシス、血管性痴呆、タウオファティーズ（tauophaties）、進行性核上性麻痺、前頭側頭葉変性症、亜急性硬化性全脳炎性パーキンソン症候群、脳炎後パーキンソン症候群、拳闘家脳炎（pugilistic encephalitis）、グアム・パーキンソン痴呆複合、ピック病、皮質基底核変性症、前頭側頭型認知症、ＡＩＤＳ関連痴呆、多発性硬化症、鬱病、統合失調症および双極性障害のような気分障害、脳卒中および脳損傷後の機能回復の促進、特に外傷性脳損傷から選択される任意の疾患または状態が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の好ましい態様では、神経変性疾患または状態はアルツハイマー病である。
【００４６】
本発明の枠内では、「血液疾患または状態」という表現は、血液および血液形成組織の障害が起こる任意の疾患または状態を意味する。好ましい実施形態では、血液疾患または状態は、サラセミア、貧血、再生不良性貧血、ダイアモンド−ブラックファン貧血、鎌状赤血球症、正常な赤血球輸血を必要とする血液障害、骨髄異形成症候群、鉄によって誘発される心機能不全、鉄によって誘発される心不全および糖尿病より選択され、更に好ましくはサラセミア、貧血、再生不良性貧血、骨髄異形成症候群および糖尿病から選択される。
【００４７】
本発明の枠内では、「癌」という表現としては、腸、肝臓、胃、乳、肺、卵巣、前立腺、脳神経膠腫、リンパ、皮膚、色素、甲状腺、白血病および多発性骨髄癌が挙げられる。
【００４８】
好ましい実施形態によれば、Ｒ４およびＲ５は、Ｈおよびメチルから選択される。
【００４９】
もう一つの好ましい実施形態によれば、Ｒ２は、水素、フルオロ、メチル、メトキシおよび−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３から選択される。
【００５０】
更にもう一つの好ましい実施形態によれば、Ｒ３は、水素およびメトキシルから選択される。
【００５１】
好ましくは、オキシム基−ＣＨ＝ＮＯＨの二重結合は、下記の構造式（Ｉａ）
【化４】
2012511544.tif 000006
によるＥ配座を示す。
【００５２】
特定態様では、本発明で用いられる式（Ｉ）の化合物は、下記の化合物：
５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム、
４−ヒドロキシ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム
から選択される。
【００５３】
本発明で用いられる化合物は、組合せ療法を提供するための少なくとも１種類の他の薬剤と共に用いられてもよい。少なくとも１種類の他の薬剤は、同じ組成物の部分を形成し、または同一時間または異なる時間に投与するための個別の組成物として提供されてもよい。
【００５４】
更なる態様によれば、本発明は、神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態または癌を、治療または予防する方法であって、このような治療を必要とする患者に、上記で定義した式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、その塩もしくは溶媒和物、その立体異性体もしくは互変異性体、またはその医薬組成物の治療上有効量を投与することを含んでなる前記方法に関する。
【００５５】
本明細書に関して「治療」または「治療する」という用語は、疾患または前記疾患に関連する１種類以上の症状を予防し、寛解しまたは除去する目的で、本発明による化合物または処方物を投与することを意味する。「治療」は、この疾患の生理学的後遺症を予防すること、寛解することまたは除去することも包含する。
【００５６】
本明細書に関して「寛解する」という用語は、主観的(患者のまたはについての感覚)または客観的(パラメーター測定)に治療した患者の状態についての任意の改善を意味するものと理解される。
【００５７】
医薬組成物
更なる態様によれば、本発明は、上記で定義した式（Ｉ）の少なくとも１種類の化合物、その塩もしくは溶媒和物、またはその立体異性体もしくは互変異性体と、少なくとも１種類の薬学上許容可能なキャリヤーを含んでなる医薬組成物に関する。
【００５８】
上記のように、この組成物は、組合せ療法を提供するため少なくとも１種類の他の薬剤を更に含んでいてもよい。少なくとも他の薬剤は、任意の生物活性化合物、特に神経変性疾患もしくは状態または血液疾患もしくは状態、または癌の治療に有用であることが知られている任意の他の薬剤でよい。
【００５９】
「キャリヤー」という用語は、活性成分を投与するのに用いる希釈剤、アジュバント、賦形剤またはビヒクルを表す。このような薬学キャリヤーは、滅菌液体、例えば、水、および石油、動物、植物または合成起源などの油、例えば落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などであることができる。水または水性食塩溶液、および水性デキストロースおよびグリセロール溶液は、キャリヤーとして好ましく用いられ、特に注射用溶液のキャリヤーとして好ましく用いられる。適当な薬学キャリヤーは、「レミントンの薬科学」（Remington's Pharmaceutical Sciences）E.W. Martin著、１９９５年に記載されている。
【００６０】
好ましくは、本発明のキャリヤーは、連邦または州政府の監督官庁によって認可され、または合衆国薬局方または動物、更に詳細にはヒトにおいて使用するための一般に認められている薬局方に記載されている。
【００６１】
本発明の医薬組成物の投与に所望な薬学形態を製造するのに必要なキャリヤーおよび補助物質は、とりわけ選択された投与薬学形態によって変化する。医薬組成物の投与の前記薬学形態は、当業者に知られている通常の方法によって製造される。様々な活性成分の投与方法、用いられる賦形剤、およびそれらの製造方法の報告は、「専門生薬学」（Tratado de Farmacia Galenica）, C. Fauli i Trillo, Luzan 5, S.A. de Ediciones, 1993に見出すことができる。
【００６２】
医薬組成物の例としては、経口、局所または非経口投与のための任意の固形物(錠剤、丸薬、カプセル、顆粒剤など)または液体(溶液、懸濁液またはエマルション)組成物が挙げられる。
【００６３】
好ましい実施形態では、医薬組成物は経口形態である。経口投与に適当な投与形態は、錠剤およびカプセルであることがあり、結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントゴムまたはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、砂糖、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤化用滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム；崩壊剤、例えば澱粉、ポリビニルピロリドン、澱粉グリコール酸ナトリウムまたは微晶質セルロース；または薬学上許容可能なラウリル硫酸ナトリウムのような湿潤剤など、当該技術分野で知られている通常の賦形剤を含むことができる。
【００６４】
固形の経口組成物は、通常のブレンディング、充填または錠剤化の方法によって調製してもよい。反復ブレンディング操作を用いて、活性剤をそれらの組成物中に多量の充填剤を用いて分配してもよい。このような操作は、当該技術分野では通常のことである。錠剤は、例えば湿式または乾式顆粒によって調製し、かつ場合によっては通常の薬務において周知の方法に準じて、特に腸溶性コーティングを用いてコーティングしてもよい。
【００６５】
医薬組成物は、滅菌溶液、懸濁液または適当な単位投薬形態での凍結乾燥物のような非経口投与に適合させることもできる。増量剤、緩衝剤または界面活性剤などの適当な賦形剤を用いることができる。
【００６６】
上記の処方物は、スペインおよび合衆国薬局方や同様な参照テキストに記載されまたは言及されているような標準的方法を用いて調製される。
【００６７】
本発明の化合物または組成物は、静脈内点滴、経口製剤、ならびに腹腔内および静脈内投与など任意の適当な方法によって投与してもよい。患者の便宜と、治療を行う疾患の多くの慢性的特性のため、経口投与が好ましい。
【００６８】
一般に、本発明の化合物の有効投与量は、選択される化合物の相対的効力、治療を行う障害の重篤度、および患者の体重によって変化する。しかしながら、活性化合物は、典型的には１日１回以上、例えば、１日１、２、３または４回、０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の典型的総日量で投与される。
【００６９】
更なる態様によれば、本発明は、医薬として用いるための上記で定義した式（Ｉ）の化合物、その塩もしくは溶媒和物、またはその立体異性体もしくは互変異性体に関する。
【００７０】
式（Ｉ）の化合物の合成
本発明の化合物は、下記に示す一般的スキームに従って調製することができる。
【化５】
2012511544.tif 000007
【００７１】
従って、本発明の化合物は、当該技術分野で知られている反応の組合せによって調製すしてもよい。
【００７２】
特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物のアルデヒド基−ＣＨＯを、ヒドロキシルアミンの存在下にて、オキシム基に転換することを含んでなる方法によって調製することができる。この反応は、好ましくは極性のプロトン性溶媒中で塩基の存在下にて起こる。もう一つの好ましい実施形態によれば、反応は、エタノールなどのアルコールと、水酸化ナトリウムなどの水溶性ナトリウム塩の混合物中で行われる。
【００７３】
特定の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ）のアルコールの酸化によって調製することができる。反応は、アルコールをアルデヒドに酸化するための当業者に周知の酸化剤の存在下にて行われる。最適な試薬の選定は、当業者の日常的実験の問題である。しかしながら、好ましい実施形態によれば、酸化反応は、塩化オキサリルと、ＤＭＳＯとの存在下にて行われ、次いで塩基、例えばトリエチルアミンにより処理される。
【００７４】
特定の実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＶ）の化合物のカルボキシレート基の還元によって調製することができる。反応は、カルボキシレートをアルコールに還元するための当業者に周知の還元剤の存在下にて行われる。最適な試薬の選定は、当業者の日常的実験の問題である。しかしながら、好ましい実施形態によれば、還元は、ＮａＢＨ４の存在下にて行われる。
【００７５】
特定の態様では、式（ＩＶ）の化合物は、式（Ｖ）の化合物の芳香族化によって調製することができる。この反応を行う多数の試薬は、当業者に周知である。最適な試薬の選定は、当業者の日常的実験の問題である。しかしながら、好ましい実施形態によれば、芳香族化は、ＰＯＣｌ３の存在下にて加熱し、式（ＩＶ）（式中、Ｒ１は塩素である）の化合物を提供することによって行われる。
【００７６】
好ましい実施形態によれば、このような化合物は、それぞれ式−ＯＲ４または−ＳＲ５の対応するアルコキシドまたはチオレートのナトリウム塩との反応によって式（ＩＶ）（式中、Ｒ１は−Ｏ−Ｒ４または−Ｓ−Ｒ５である）の化合物に変換することができる。あるいは、前記変換を、式（ＩＩＩ）、（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物について行うことができる。
【００７７】
更なる実施形態によれば、芳香族化は、塩基と、式Ｒ４Ｘ（式中、Ｘはハロゲンである）のハロゲン化アルキルの存在下にて行うことができる。最適な試薬の選定は、当業者の日常的実験の問題である。しかしながら、好ましい実施形態によれば、塩基は、ハロゲン化ナトリウムであり、ハロゲン化アルキルは、ヨウ化アルキルである。
【００７８】
特定の実施形態では、式（Ｖ）の化合物は、式（ＶＩ）の化合物の加熱下での環化によって調製することができる。更なる実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、メチルアセチレンジカルボキシレートの存在下にて、式（ＶＩＩ）のアミンのアルキル化によって調製することができる。
【００７９】
特定の実施形態では、式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）の化合物のニトロ基の還元によって調製することができる。反応は、ニトロ基をアミンに還元するための当業者に周知の還元剤の存在下で行われる。最適な試薬の選定は、当業者の日常的実験の問題である。しかしながら、好ましい実施形態によれば、還元は、塩化スズ二水和物の存在下にて行われる。
【００８０】
特定の実施形態では、式（ＶＩＩＩ）の化合物は、酸媒質中で式（ＩＸ）の化合物をグリセロールと縮合することによって調製することができる。
【実施例】
【００８１】
本実施例では、式（Ｉ）の下記化合物が参照されている。
【表１】
2012511544.tif 000008
【００８２】
化合物の合成
本発明による式（Ｉ）の化合物は、以下に詳説する一般的調製方法に従って調製した。
【００８３】
下記において、表１に列挙した構造を有する化合物Ａ〜Ｆの特定の合成を説明する。中間体化合物は、アラビア数字で命名した。
【００８４】
すべての用いた反応物は、市販品である。
【００８５】
例１
フェナントロリン誘導体Ｂの合成
反応工程図：
【化６】
2012511544.tif 000009
【００８６】
１．６−フルオロ−８−ニトロ−キノリン（２８）の合成
【化７】
2012511544.tif 000010
グリセロール（３８．０ｍｌ、５１８．５ｍｍｏｌ）を、１４０〜１５０℃で１時間加熱した。４−フルオロ−２−ニトロフェニル−アミン（３０．０ｇ、１９２ｍｍｏｌ）と、ＮａＩ（０．９ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を加え、Ｈ２ＳＯ４（２３．５ｍｌ、４４１．６ｍｍｏｌ）を添加漏斗から徐々に加えながら、混合物を１１０℃まで冷却した。温度を１５０℃まで再び上げ、反応を３時間攪拌した。反応を室温まで冷却し、水およびＣＨ２Ｃｌ２を加えた。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、ニトロキノリン２８（１４．９ｇ、４０％）を黄褐色固形生成物として得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【００８７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.05 (dd, 1H, J= 1.76, 4.24 Hz); 8.23 (dd, 1H, J=1.65, 8.43 Hz); 7.86 (dd, 1H, J=2.75, 7.95 Hz); 7.70 (dd, 1H, J=2.78, 8.07 Hz); 7.58 (dd, 1H, J=4.35, 8.68 Hz). 
【００８８】
２．６−フルオロ−８−アミノ−キノリン（２９）の合成
【化８】
2012511544.tif 000011
ニトロキノリン２８（１４．９ｇ、７７．９ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍｌ）溶液にＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（５３．０ｇ、２３３．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応を、２時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、反応混合物を１ＮＮａＯＨを加えることによってｐＨ１０に調整した。スズ塩を濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で４回洗浄した。合わせた有機液体を、水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させて、アミノキノリン２９（１０．６ｇ、８４％）を褐色油状生成物として得た。
【００８９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.68 (dd, 1H, J=1.56, 4.16 Hz); 7.99 (dd, 1H, J=1.65, 8.23 Hz); 7.37 (dd, 1H, J= 4.32, 8.23 Hz); 6.73 (dd, 1H, J= 2.6, 9.31 Hz); 6.66 (d, 1H, J= 2.61, 10.55 Hz)。
【００９０】
３．２−（６−フルオロ−キノリン−８−イルアミン）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（３０）の合成
【化９】
2012511544.tif 000012
メチルアセチレンジカルボキシレート（８．８ｍｌ、７２．０ｍｍｏｌ）を、アミノキノリン２９（１０．６ｇ、６５．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８０ｍｌ）溶液に０℃で加えた。混合物を室温で１８時間攪拌し、黄色沈澱を生じた。固形生成物を濾過して、ＭｅＯＨおよびヘキサンで洗浄し、中間体３０（１１．３ｇ、５７％）を生じ、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【００９１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 11.07 (br, 1H); 8.86 (dd, 1H, J= 1.6, 4.23 Hz); 8.07 (dd, 1H, J=1.60, 8.30 Hz); 7.46 (dd, 1H, J=4.23, 8.30 Hz); 7.04 (dd, 1H, J=2.50, 8.81 Hz); 6.65 (dd, 1H, J=2.48, 10.27 Hz); 5.66 (s, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.80 (s, 3H).
【００９２】
４．５−フルオロ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（３１）
【化１０】
2012511544.tif 000013
キノリン誘導体３０（６．７ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）のジフェニルエーテル（２０ｍｌ）溶液を、還流ジフェニルエーテル（１００ｍｌ）に徐々に加えた（１２分間）。反応混合物を更に１０分間還流した後、室温まで放冷した。生成物を、ヘキサン（３００ｍｌ）を加えて沈澱させた。粗生成物を濾過して、ヘキサンおよびエチルエーテルで洗浄した。得られた固形生成物を熱ＭｅＯＨで処理し、化合物３１を焼結漏斗から完全に溶出させた。溶媒を蒸発させた後、得られた褐色固形生成物エチルエーテルで洗浄し、所望の生成物３１（２．４ｇ、４０％）を褐色固形生成物として得た。
【００９３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.89 (dd, 1H, J=1.43, 4.29 Hz); 8.16 (dd, 1H, J= 1.53, 8.28 Hz); 7.65 (dd, 1H, J= 4.31, 8.28 Hz); 7.24 (d, 1H, J=14.97 Hz); 7.16 (s, 1H); 4.99 (s, 3H).
【００９４】
５．５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（３２）の合成
【化１１】
2012511544.tif 000014
フェナントロロン３１（５００ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）と、ＮａＨ（鉱油中６０％、５．５０ｍｍｏｌ、２２０ｍｇ）とのＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に、ヨウ化メチル（０．４５ｍｌ、７．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室温で１８時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、粗生成物を水とＣＨ２Ｃｌ２に分配した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧留去した。得られた固形生成物をエーテルで洗浄し、フェナントロリン３２（２８６ｍｇ、５４％）を単離し、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【００９５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.23 (dd, 1H, J=1.19, 4.18 Hz); 8.09 (dd, 1H, J= 1.63, 8.11 Hz); 7.94 (s, 1H); 7.67 (dd, 1H, J= 4.37, 8.08 Hz); 7.47 (d, 1H, J=12.23 Hz); 4.17 (s, 3H); 4.10 (s, 3H). 
【００９６】
６．５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］−フェナントロリン−２−イル］−メタノール（３３）
【化１２】
2012511544.tif 000015
エステル３２（４４５ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：５、４０ｍｌ）の混合物に０℃で溶解したものに、固形ＮａＢＨ４（７２ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。反応を放置して室温に戻し、１時間攪拌した。反応混合物を水に空け、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。合わせた有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、アルコール３３（３４６ｍｇ、７７％）を褐色固形生成物として得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【００９７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.13 (dd, 1H); 8.23 (dd, 1H, J= 1.58, 8.14 Hz); 7.67 (dd, 1H, J=4.34, 7.73 Hz); 7.38 (d, 1H, J=12.3 Hz); 7.23 (s, 1H); 5.14 (s, 2H); 4.14 (s, 3H).
【００９８】
７．５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルバルデヒド（３４）の合成
【化１３】
2012511544.tif 000016
２．０Ｍ塩化オキサリルの乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１．３４ｍｌ、２．６８ｍｍｏｌ）溶液に、ジメチルスルホキシドの乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．３８ｍｌ、５．３６ｍｍｏｌ）溶液を−７８℃で窒素下にて徐々に加えた。混合物を３５分間攪拌し、５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］−フェナントロリン−２−イル］−メタノール３３（３４６ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）に溶解したものを加えた。−７８℃で２時間攪拌した後、トリエチルアミン（１．１１ｍｌ、８．０４ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を室温で２時間攪拌した。反応混合物を水、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、所望のアルデヒド３４（３２０ｍｇ、９３％）を赤褐色固形生成物として得た。
【００９９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.48 (s, 1H); 9.23 (dd, 1H, J=1.99, 4.73 Hz); 8.23 (dd, 1H, J=1.70, 8.10 Hz); 7.75 (s, 1H); 7.70 (dd, 1H, J= 4.30, 8.15 Hz); 7.52 (d, 1H, J=12.26 Hz); 4.19 (s, 3H). 
【０１００】
８．５−フルオロ−４−メトキシ−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ｂ）の合成
【化１４】
2012511544.tif 000017
アルデヒド誘導体３４（３２０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍｌ）溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（４３４ｍｇ、６．２５ｍｍｏｌ）の水（４０ｍｌ）溶液を加え、混合物を３５℃で加熱した。１０％ＮａＯＨ溶液を加えてｐＨ６とし、３５℃で１時間攪拌し、室温で冷却した。水を加えて、沈殿物を濾過して、水で洗浄し、乾燥して、アルドキシムＢ（１５２ｍｇ、４５％）を白色固形生成物として得た。
【０１０１】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm): 12.01 (s, 1H); 9.06 (dd, 1H, J=1.72, 4.25 Hz); 8.42 (dd, 1H, J=1.69, 8.14 Hz); 8.33 (s, 1H); 7.78 (dd, 1H, J= 4.27, 8.16 Hz); 7.74 (d, 1H, J=13.09 Hz); 7.66 (s, 1H); 3.32 (s, 3H). 
【０１０２】
例２
フェナントロリン誘導体Ｃの合成
【化１５】
2012511544.tif 000018
【０１０３】
１．４−（２−メトキシ−エトキシ）−２−ニトロ−フェニルアミン（３５）の合成
【化１６】
2012511544.tif 000019
４−アミン−３−ニトロフェノール（３０．０ｇ、１９５ｍｍｏｌ）と、Ｋ２ＣＯ３（５３．８ｇ、３９０ｍｍｏｌミリモル）とのＤＭＦ溶液に、１−ブロモ−２−メトキシ−エタン（２０．０ｍｌ、２１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応を５０℃まで４時間加熱した。溶媒を減圧留去し、残渣を水とＣＨ２Ｃｌ２に分配した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、所望の純粋な生成物３５（３３．８ｇ、８１％）を橙色固形生成物として得た。
【０１０４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 7.99 (s, NH2); 7.52 (d, 1H, J=2.92 Hz); 7.09 (dd, 1H, J= 6.12, 9.08 Hz); 6.76 (d, 1H, J= 9.15 Hz); 4.06 (m, 2H); 3.71 (m, 2H); 3.42(s, 3H).
【０１０５】
２．６−（２−メトキシ−エトキシ）−８−ニトロ−キノリン（３６）の合成
【化１７】
2012511544.tif 000020
グリセロール（３１．５ｍｌ、４３１．０ｍｍｏｌ）を１４０〜１５０℃で１時間加熱し、４−（２−メトキシ−エトキシ）−２−ニトロ−フェニルアミン３５（３３．３８ｇ、１５９．６ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（０．４８ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１１０℃まで冷却し、Ｈ２ＳＯ４（１９．６ｍｌ、３６７．０ｍｍｏｌ）を添加漏斗から滴加した。反応を１５０℃まで３時間加熱し、室温に冷却し、水およびＣＨ２Ｃｌ２で分液漏斗に移した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル／ヘキサン１：１）によって精製し、純粋なキノリン３６（２．２１ｇ、６％）を褐色油状生成物として得た。
【０１０６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.87 (dd, 1H, J= 1.62, 4.26 Hz); 8.10 (dd, 1H, J=1.63, 8.4 Hz); 7.73 (d, 1H, J=2.71 Hz); 7.45 (dd, 1H, J=4.24, 8.4 Hz); 7.29 (d, 1H, J= 2.72 Hz); 4.27 (m, 2H); 3.81 (m, 2H); 3.46 (s, 3H).
【０１０７】
３．６−（２−メトキシ−エトキシ）−８−アミノ−キノリン（３７）の合成
【化１８】
2012511544.tif 000021
ニトロキノリン３６（２．２１ｇ、８．９ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍｌ）溶液に、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（６．００ｇ、２６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応を２時間還流し、室温まで冷却し、１ＮＮａＯＨを加えることによってｐＨ１０に調整した。スズ塩を濾別し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。合わせた有機液体を、水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、アミノキノリン３７（１．５０ｇ、７８％）を褐色油状生成物として得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１０８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.58 (dd, 1H, J=2.58, 4.22 Hz); 7.93 (dd, 1H, J=1.6, 8.3 Hz); 7.31(dd, 1H, J= 4.21, 8.28 Hz); 6.63 (d, 1H, J= 2.55 Hz); 6.47 (d, 1H, J= 2.57 Hz); 4.19 (m, 2H); 3.79 (m, 2H); 3.47 (s, 3H).
【０１０９】
４．２−［６−（２−メトキシ−エトキシ）キノリン−８−イルアミン）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（３８）の合成
【化１９】
2012511544.tif 000022
メチルアセチレンジカルボキシレート（０．９４ｍｌ、７．７ｍｍｏｌ）を、アミノキノリン３７（１．５２ｇ、７．０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍｌ）溶液に、０℃で加えた。混合物を室温で１８時間攪拌し、黄色沈澱を生じた。固形生成物を濾過して、ＭｅＯＨおよびヘキサンで洗浄し、中間体３８（１．４１ｇ、５１％）を得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１１０】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.91 (br, 1H); 8.75 (dd, 1H, J= 1.60, 4.16 Hz); 7.99 (dd, 1H, J= 1.60, 8.29 Hz); 7.38 (dd, 1H, J= 4.25, 8.27 Hz); 6.74 (d, 1H, J=2.45 Hz); 6.64 (d, 1H, J= 2.47 Hz); 5.58 (s, 1H); 4.20 (m, 2H); 3.79 (m, 8H), 3.46 (s, 3H).
【０１１１】
５．５−（２−メトキシ−エトキシ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（３９）の合成
【化２０】
2012511544.tif 000023
キノリン誘導体３８（１．４１ｇ、３．６ｍｍｏｌ）のジフェニルエーテル（１０ｍｌ）溶液を、還流ジフェニルエーテル（６０ｍｌ）に徐々に加えた（１２分間）。反応混合物を更に１０分間還流した後、室温まで放冷した。生成物を、ヘキサンを加えて沈澱させた。残渣を濾過し、ヘキサンおよびエチルエーテルで洗浄した。得られた固形生成物を熱ＭｅＯＨで処理し、化合物３９を焼結漏斗から完全に溶出させた。溶媒を蒸発させた後、得られた褐色固形生成物エチルエーテルで洗浄し、所望の生成物３９（０．７０ｇ、６０％）を暗褐色固形生成物として得た。
【０１１２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.79 (dd, 1H); 8.06 (dd, 1H, J= 1.54, 8.24 Hz); 7.55 (dd, 1H, J= 4.31, 8.23 Hz); 7.24 (d, 1H, J=14.96 Hz); 6.86 (s, 1H); 4.33 (m, 2H); 4.06 (s, 3H); 3.96 (m, 2H); 3.56 (s, 3H).
【０１１３】
６．４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（４０）の合成
【化２１】
2012511544.tif 000024
フェナントロロン３９（７０３ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）と、ＮａＨ（鉱油中６０％、２５８ｍｇ、６．４５ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に、ヨウ化メチル（０．４５ｍｌ、７．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室温で１８時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、粗生成物を粗生成物を水およびＣＨ２Ｃｌ２に分配した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧留去した。得られた固形生成物をエーテルで洗浄し、フェナントロリン４０（２７２ｍｇ、３７％）を褐色油状生成物として単離し、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１１４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.07 (dd, 1H); 8.09 (dd, 1H, J= 1.44, 8.08 Hz); 7.87 (s, 1H); 7.57 (dd, 1H, J= 4.37, 8.08 Hz); 7.06 (s, 1H); 4.34 (m, 2H); 4.13 (s, 3H); 4.09 (s, 3H); 3.96 (m, 2H); 3.55 (s, 3H).
【０１１５】
７．［４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］−フェナントロリン−２−イル］−メタノール（４１）の合成
【化２２】
2012511544.tif 000025
エステル４０（２７２ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：５、４０ｍｌ）の混合物に０℃で溶解したものに、固形ＮａＢＨ４（３６ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。反応を室温まで戻し、１時間攪拌した。反応混合物を水に空け、ＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。合わせた有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、アルコール４１（２１０ｍｇ、８４％）を褐色油状生成物として得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１１６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.97 (dd, 1H); 8.08 (dd, 1H); 7.87 (s, 1H); 7.53 (dd, 1H); 7.16 (s, 1H); 6.96 (s, 1H); 5.10 (s, 2H); 4.34 (m, 2H); 4.06 (s, 3H); 3.96 (m, 2H); 3.56 (s, 3H) 
【０１１７】
８．４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（４２）の合成
【化２３】
2012511544.tif 000026
２．０Ｍ塩化オキサリルの乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．６７ｍｌ、１．３４ｍｍｏｌ）溶液に、ジメチルスルホキシドの乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．１９ｍｌ、２．６８ｍｍｏｌ）溶液を−７８℃で窒素下にて徐々に加えた。混合物を３５分間攪拌し、［４−メトキシ−５−（２−メトキシエトキシ）［１，１０］−フェナントロリン−２−イル］メタノール４１（２１０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）溶液を加えた。−７８℃で２時間攪拌後、トリエチルアミン（０．５６ｍｌ、４．０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素下にて室温で２時間攪拌した。反応混合物を水、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、所望のアルデヒド４２（１９８ｍｇ、９７％）を褐色固形生成物として得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１１８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.45 (s, 1H); 9.08 (dd, 1H, J=1.46, 4.27 Hz); 8.09 (dd, 1H, J=1.34, 8.12 Hz); 7.67 (s, 1H); 7.58 (dd, 1H, J= 4.32, 8.04 Hz); 7.08 (s, 1H); 4.32 (m, 2H); 4.11 (s, 3H); 3.91(m, 2H); 3.53 (s, 3H). 
【０１１９】
９．４−メトキシ−５−（２−メトキシ−エトキシ）−［１，１０］−フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ｃ）の合成
【化２４】
2012511544.tif 000027
アルデヒド誘導体４２（１９８ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のエタノール（４０ｍｌ）溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２２５ｍｇ、３．２５ｍｍｏｌ）の水（４０ｍｌ）溶液を加えた。１０％ＮａＯＨ溶液を加えて、ｐＨ６とし、混合物を室温で１時間攪拌した。水を加えて、反応をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧留去し、所望のアルドキシムＣ（６９ｍｇ、３２％）を白色固形生成物として得た。
【０１２０】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm): 11.95 (s, 1H); 8.90 (dd, 1H, J=1.72, 4.22 Hz); 8.30 (s, 1H); 8.27 (dd, 1H, J=1.72, 8.21 Hz); 7.67 (dd, 1H, J= 4.27, 8.11 Hz); 7.58 (s, 1H); 7.30 (s, 1H); 4.29 (m, 2H); 4.03 (s, 3H); 3.84 (m, 2H); 3.43 (s, 3H). 
【０１２１】
例３
フェナントロリン誘導体Ｅの合成
【化２５】
2012511544.tif 000028
【０１２２】
１．５−クロロ−８−ニトロ−キノリン（４３）の合成
【化２６】
2012511544.tif 000029
１６０℃まで１時間予備加熱して１１０℃まで冷却したグリセロール（１１．４ｍｌ、１５６．５ｍｍｏｌ）に、５−クロロ−２−ニトロアニリン（１０．００ｇ、５８．０ｍｍｏｌ）とヨウ化ナトリウム（０．１７ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１１０℃で激しく攪拌し、均質なタールを得た。反応混合物を再度１５０℃まで加熱し、９５〜９８％硫酸（７．１ｍｌ、１３３．３ｍｍｏｌ）を滴加した。１５０℃で４５分間攪拌した後、反応を室温まで放冷し、ＣＨ２Ｃｌ２と５０％Ｈ２ＳＯ４に分配した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、乾固した。残渣をＭｅＯＨ／ヘキサン（１：５）で洗浄し、所望の生成物４３（７．３３ｇ、６１％）を橙色固形生成物として得た。
【０１２３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.12 (H-2, dd, 1H, J=1.6および4.2 Hz), 8.67 (H-4, dd, 1H, J=1.6および8.6 Hz), 7.99 (H-7, d, 1H, J=8.1 Hz), 7.71 (H-6, d, 1H, J=8.1 Hz), 7.68 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.6 Hz).
【０１２４】
２．５−メトキシ−８−ニトロ−キノリン（４４）の合成
【化２７】
2012511544.tif 000030
ナトリウムメトキシド（７．３ｇ、１３５．７ｍｍｏｌ）と、５−クロロ−８−ニトロキノリン４３（６．７ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）とを、無水ＭｅＯＨ（８０ｍｌ）中で混合したものを、電子レンジ（出力：２５０Ｗ、ランプ時間(ramp time)：５分間）で、１００℃で１０分間加熱した。溶媒を一部蒸発させ、ＣＨ２Ｃｌ２および水を加えた。有機層を集めて、水および塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。残渣をＭｅＯＨ／ヘキサン（３：５０）で処理し、５−メトキシ−８−ニトロキノリン４４（５．８ｇ、８３％）を褐色固形生成物として得た。
【０１２５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.08 (H-2, dd, 1H, J=1.8および4.2 Hz), 8.63 (H-4, dd, 1H, J=1.8および8.6 Hz), 8.19 (H-7, d, 1H, J=8.6 Hz), 7.51 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.6 Hz), 6.84 (H-6, d, 1H, J=8.6 Hz), 4.09 (OCH3, s, 3H).
【０１２６】
３．５−メトキシ−キノリン−８−イルアミン（４５）の合成
【化２８】
2012511544.tif 000031
５−メトキシ−８−ニトロキノリン４４（５．８ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）と、ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏ（１９．３ｇ、８５．６ｍｍｏｌ）とを、エタノール（１２０ｍｌ）に懸濁したものを、１時間加熱還流した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１０％ＮａＯＨで処理して、ｐＨ１１とした。有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル／ヘキサン、０〜４０％）によって精製し、最終的アミン４５（２．７ｇ、５３％）を褐色固形生成物として得た。
【０１２７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.79 (H-2, dd, 1H, J=1.7および4.2 Hz), 8.51 (H-4, dd, 1H, J=1.7および8.5 Hz), 7.38 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.5 Hz), 6.89 (H-7, d, 1H, J=8.2 Hz), 6.73 (H-6, d, 1H, J=8.2 Hz), 3.95 (OCH3, s, 3H).
【０１２８】
４．２−（５−メトキシキノリン−８−イルアミノ）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（４６）の合成
【化２９】
2012511544.tif 000032
５−メトキシキノリン−８−イルアミン４５（２．７ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）の４℃のメタノール（２０ｍｌ）溶液に、ジメチルアセチレンジカルボキシレート（２．１ｍｌ、１６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、３時間攪拌して、室温まで温度を上昇させた。溶媒を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨおよびヘキサンで洗浄し、橙色固形生成物を得て、これを真空乾燥した（３．８ｇ、７９％）。
【０１２９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.63 (NH, s, 1H), 8.90 (H-2, dd, 1H, J=1.7および4.2 Hz), 8.53 (H-4, dd, 1H, J=1.7および8.4 Hz), 7.41 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.4 Hz), 6.95 (H-7, d, 1H, J=8.3 Hz), 6.73 (H-6, d, 1H, J=8.3Hz), 5.44 (s, 1H, CH=), 3.96 (OCH3, s, 3H), 3.77 (CO2CH3, s, 3H), 3.69 (CO2CH3, s, 3H).
【０１３０】
５．６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（４７）の合成
【化３０】
2012511544.tif 000033
２−（５−メトキシキノリン−８−イルアミノ）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル４６（３．８ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）のジフェニルエーテル（２５ｍｌ）溶液を、２５０℃で１５分間還流した。反応混合物を室温まで温度上昇させた後、ヘキサンを加えて褐色固形生成物（３．０ｇ、８８％）を得て、これを濾過して、真空乾燥した。
【０１３１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.92 (NH, s, 1H), 8.97 (H-9, dd, 1H, J=1.6および4.3 Hz), 8.66 (H-7, dd, 1H, J=1.6および8.5 Hz), 7.66 (H-8, dd, 1H, J=4.3および8.5 Hz), 7.59 (H-3, s, 1H), 7.26 (H-5, s, 1H), 4.11 (OCH3, s, 3H), 4.08 (OCH3, s, 3H).
【０１３２】
６．４−クロロ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（４８）の合成
【化３１】
2012511544.tif 000034
固形の６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル４７（２．０１ｇ、７．０７ｍｍｏｌ）、ＰＯＣｌ３（１８ｍｌ）を徐々に加え、混合物を２時間加熱還流した。反応を室温まで冷却し、溶媒を蒸発させた。得られた固形生成物をＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３で処理し、分液漏斗に移した。水層を更にＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。得られた残渣をエチルエーテルで処理し、濾過して乾燥し、クロロ誘導体４８を淡褐色固形生成物（２．０２ｇ、９５％）として得た。
【０１３３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.89 (d, 1H, J=5.0 Hz), 9.19 (d, 1H, J=8.3 Hz), 8.54 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H, J=5.0および8.3Hz), 7.55 (s, 1H), 4.27 (s, 3H), 4.15 (s, 3H).
【０１３４】
７．（４−クロロ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（４９）の合成
【化３２】
2012511544.tif 000035
４−クロロ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル４８（２．０２ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）を０℃で冷却した混合物ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：５、３００ｍｌ）に溶解したものに、固形のＮａＢＨ４（０．７１ｇ、１９．８０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で３時間および室温で１８時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、有機層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、合わせた有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、残渣をエチルエーテルで洗浄し、アルコール４９（１．７２ｇ、９４％）を淡褐色固形生成物として得た。
【０１３５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.17 (d, 1H, J=2.6 Hz), 8.70 (dd, 1H, J=1.7Hzおよび8.2 Hz), 7.78 (s, 1H), 7.66 (dd, 1H, J=4.4および8.2 Hz), 7.36 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.16 (s, 3H).
【０１３６】
８．（６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（５０）の合成
【化３３】
2012511544.tif 000036
固形のナトリウムチオメチレート（２．１８ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−６−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール４９（１．７２ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３００ｍｌ）溶液に加え、反応混合物を３時間加熱還流した。溶媒をロータリーエバポレーターで留去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３に分配した。有機層を塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、真空濃縮した。固形残渣をエチルエーテルで処理し、濾過して、乾燥し、所望の材料５０（０．７４ｇ、４２％）を淡褐色固形生成物として得た。
【０１３７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.04 (s, 1H), 8.62 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.56 (s, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.04 (s, 2H), 4.11 (s, 3H), 2.63 (s, 3H).
【０１３８】
９．６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（５１）の合成
【化３４】
2012511544.tif 000037
２．０Ｍ塩化オキサリルの−７８℃の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２．５６ｍｌ、５．１２ｍｍｏｌ）溶液に、ジメチルスルホキシド（０．７３ｍｌ、１０．２４ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍｌ）溶液を窒素下にて徐々に加えた。混合物を３０分間攪拌し、（６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール５０（７３８ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）溶液を加えた。−７８℃で５０分間攪拌した後、トリエチルアミン（２．１３ｍｌ、１５．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を放置して室温まで上昇させ、窒素下にて１８時間攪拌した。反応混合物を水、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、アルデヒド５１（２８５ｍｇ、３９％）を褐色固形生成物として得た。
【０１３９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.46 (s, 1H), 9.31 (dd, 1H, J=1.5および4.3 Hz), 8.75 (d, 1H, J=7.4 Hz), 8.01 (s, 1H), 7.74 (dd, 1H, J=4.3および8.2 Hz), 7.26 (s, 1H), 4.19 (s, 3H), 2.75 (s, 3H).
【０１４０】
１０．６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ｅ）の合成
【化３５】
2012511544.tif 000038
６−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド５１（２８５ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）のエタノール（１５ｍｌ）溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（６９０ｍｇ、１０．２０ｍｍｏｌ）の水（２０ｍｌ）溶液を加え、混合物を６０℃で加熱した。１０％ＮａＯＨを加えてｐＨ６とし、反応混合物を６０℃で３０分間攪拌し、０℃に冷却した。生成する沈澱物を濾過し、水およびエチルエーテルで連続して洗浄し、アルドキシムＥ（１２０ｍｇ、４０％）を淡黄色固形生成物として得た。
【０１４１】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm): 11.81 (s, 1H), 9.14 (dd, 1H, J=1.6および4.2 Hz), 8.64 (dd, 1H, J=1.7および8.3 Hz), 8.30 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80 (dd, 1H, J=4.3および8.3Hz), 7.19 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 2.71 (s, 3H).
【０１４２】
13C-RMN (400MHz, DMSO-d6, ppm): 153.59, 151.59, 149.92, 149.91, 149.67, 147.33, 146.41, 141.034, 131.21, 126.73, 124.10, 123.43, 97.42, 56.79, 14.27.
【０１４３】
MS (ES+): m/z = 302 (M+H)+.
【０１４４】
例４
フェナントロリン誘導体Ｆの合成
【化３６】
2012511544.tif 000039
【０１４５】
１．２−ヒドロキシメチル−６−メトキシ−１Ｈ−［１，１０］フェナントロリン−４−オン（５２）の合成
【化３７】
2012511544.tif 000040
固形のＮａＢＨ４（１．２０ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル４７（０．４０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を０℃で冷却したＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、１０ｍｌ）の混合物に溶解したものに滴加した。混合物を０℃で３時間攪拌した後、室温まで上昇させ、更に２４時間攪拌した。ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：３）で希釈した後、混合物を水で洗浄し、有機層を分離して、蒸発乾固させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（０〜５０％）中７ＮＮＨ３ＯＨ）によって精製し、所望のアルコール５２（０．２５ｇ、６８％）を褐色固形生成物として得た。
【０１４６】
1H-NMR (400 MHz, MeOD/CDCl3, 1/1, ppm): 8.84 (H-9, dd, 1H, J=1.3および4.3 Hz), 8.43 (H-7, dd, 1H, J=1.3および8.5 Hz), 7.55 (H-8, dd, 1H, J=4.3および8.5 Hz), 7.28 (H-3, s, 1H), 6.32 (H-5, s, 1H), 4.77 (OCH2, s, 2H), 3.98 (OCH3, s, 3H).
【０１４７】
２．６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（５３）の合成
【化３８】
2012511544.tif 000041
２．０Ｍ塩化オキサリルを−７８℃で無水ＣＨ２Ｃｌ２（２７０μｌ、０．５４ｍｍｏｌ）に溶解したものに、無水ＤＭＳＯ（７７μｌ、１．０８ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）溶液を窒素下にて加え、２０分間攪拌した。次いで、２−ヒドロキシメチル−６−メトキシ−１Ｈ−［１，１０］フェナントロリン−４−オン５２（６８．５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：４、２．５ｍｌ）の混合物に溶解したものを反応混合物に加え、攪拌を−７８℃で更に５０分間継続した。最後に、トリエチルアミン（２２５μｌ、１．６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、反応混合物を３時間で室温まで温度上昇させた。最終溶液をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、０〜５０％）によって精製し、アルデヒド５３を含む混合物を得て、これを更に精製することなく次の段階で用いた。
【０１４８】
３．６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ｆ）の合成
【化３９】
2012511544.tif 000042
ヒドロキシルアミン塩酸塩（２３０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）の水（１ｍｌ）溶液を、エタノール／ＣＨ２Ｃｌ２（３：１、２ｍｌ）に溶解した６−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（上記段階で得た混合物）の溶液に加え、室温で４８時間攪拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２および水で希釈し、有機層を分離し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（０〜５０％）中７ＮＮＨ３ＯＨ）によって精製し、不純な固形生成物を得て、これをＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３に再溶解し、エチルエーテルで沈澱させ、純粋なアルドキシムＦ（６．２ｍｇ、４％）を得た。
【０１４９】
1H-NMR (400 MHz, MeOD/CDCl3, 1/1, ppm): 9.02 (H-9, d, 1H, J= 4.0 Hz), 8.72 (H-7, d, 1H, J= 8.0 Hz), 8.19 (H-5, s, 1H), 7.77 (H-8, m, 1H), 7.52 (H-3, s, 1H), 6.68 (CH=, s, 1H), 4.12 (OCH3, s, 3H).
【０１５０】
MS (ES+): m/z = 270.
【０１５１】
例５
フェナントロリン誘導体Ｄの合成
【化４０】
2012511544.tif 000043
【０１５２】
１．６−メチル−８−ニトロキノリン（５４）の合成
【化４１】
2012511544.tif 000044
１６０℃に１時間予備加熱して１１０℃まで冷却したグリセロール（６．５ｍｌ、８９．０ｍｍｏｌ）に、４−メチル−２−ニトロアニリン（５．００ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（０．１０ｇ、０．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を激しく攪拌して１５０℃まで加熱し、９５〜９８％硫酸（４．２ｍｌ、７８．０ｍｍｏｌ）を滴加した。１５０℃で４５分後、混合物を室温まで温度上昇させた後、ＣＨ２Ｃｌ２および水に分配した。有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をＭｅＯＨ／ヘキサン（１：１０）で洗浄し、ニトロキノリン５４（４．０７ｇ、６５％）を橙色固形生成物として得て、これを真空乾燥した。
【０１５３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.00 (H-2, dd, 1H, J=1.3および4.2 Hz), 8.16 (H-4, dd, 1H, J=1.3および8.3Hz), 7.89 (H-7, s, 1H), 7.80 (H-5, s, 1H), 7.50 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.3 Hz), 2.61 (CH3, s, 3H).
【０１５４】
２．６−メチル−キノリン−８−イルアミン（５５）の合成
【化４２】
2012511544.tif 000045
６−メチル−８−ニトロキノリン（１５．０ｇ、８０．０ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（５４．０ｇ、２４０．０ｍｍｏｌ）をエタノール（３００ｍｌ）に懸濁したものを、１時間加熱還流した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１０％ＫＯＨでｐＨ１１まで処理した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル／ヘキサン、０〜３０％）によって精製した。アミン５５（９．９ｇ、７９％）を、黄色固形生成物として単離した。
【０１５５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.69 (H-2, dd, 1H, J=1.6および4.1 Hz), 7.96 (H-4, dd, 1H, J=1.6および8.3 Hz), 7.33 (H-3, dd, 1H, J=4.1および8.3 Hz), 6.94 (H-5, s, 1H), 6.79 (H-7, s, 1H), 4.91 (NH2, ws, 2H), 2.43 (CH3, s, 3H).
【０１５６】
３．２−（６−メチル−キノリン−８−イルアミノ）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（５６）の合成
【化４３】
2012511544.tif 000046
６−メチル−キノリン−８−イルアミン５５（４．８ｇ、３０．２ｍｍｏｌ）の４℃でのＭｅＯＨ（１５ｍｌ）溶液に、ジメチルアセチレンジカルボキシレート（４．５ｍｌ、３６．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、１時間攪拌して、室温まで温度を上昇させた。沈澱物を濾過して、ＭｅＯＨおよびヘキサンで十分に洗浄し、所望の化合物５６を黄色固形生成物（８．６ｇ、９５％）として得た。
【０１５７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.89 (NH, s, 1H), 8.83 (H-2, dd, 1H, J=1.7および4.2 Hz), 8.02 (H-4, dd, 1H, J=1.7および8.3 Hz), 7.38 (H-3, dd, 1H, J=4.2および8.3 Hz), 7.23 (H-5, s, 1H), 6.79 (H-7, s, 1H), 5.54 (CH=, s, 1H), 3.80 (CO2CH3, s, 3H), 3.74 (CO2CH3, s, 3H), 2.46 (CH3, s, 3H).
【０１５８】
４．５−メチル−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（５７）の合成
【化４４】
2012511544.tif 000047
２−（６−メチルキノリン−８−イルアミノ）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（８．６ｇ、２８．６ｍｍｏｌ）のジフェニルエーテル（５０ｍｌ）溶液を１０個の反応装置に分配し、それぞれの装置を電子レンジ（出力：２５０Ｗ、ランプ時間：５分間）で２３０℃にて１０分間加熱した。反応混合物を合わせて、濾過した。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した後、濾液を蒸発させ、褐色油状生成物を得て、これはヘキサンを加えることによって沈澱した。固形生成物を順次にヘキサン、ＭｅＯＨおよびエチルエーテルで洗浄し、最終生成物５７（５．７ｇ、７４％）を褐色固形生成物として得た。
【０１５９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 11.07 (NH, s, 1H), 8.87 (H-9, d, 1H, J=4.3 Hz), 8.11(H-7, d, 1H, J=8.1 Hz), 7.59 (H-8, dd, 1H, J=4.3および8.1Hz), 7.31 (H-3, s, 1H), 7.10 (H-6, s, 1H), 4.07 (OCH3, s, 3H), 3.01 (CH3, s, 3H).
【０１６０】
５．４−クロロ−５−メチル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（５８）の合成
【化４５】
2012511544.tif 000048
ＰＯＣｌ３（３．７ｍｌ、４０．４ｍｍｏｌ）を、５−メチル−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル５７（５．７ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（８０ｍｌ）溶液に加えた。反応混合物を室温で５時間攪拌し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、固形Ｋ２ＣＯ３を加えてｐＨ１０とした。水およびＣＨ２Ｃｌ２を加え、混合物を分液漏斗に移した。有機層を塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、１〜２０％）によって精製し、クロロ誘導体５８（４．１ｇ、６８％）を淡褐色固形生成物として得た。
【０１６１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.15 (H-9, dd, 1H, J=1.5および4.3 Hz), 8.43 (H-3, s, 1H), 8.10 (H-7, dd, 1H, J=1.5および8.1 Hz), 7.66 (H-6, s, 1H), 7.61 (H-8, dd, 1H, J=4.3および8.1Hz), 4.07 (OCH3, s, 3H), 3.06 (CH3, s, 3H).
【０１６２】
６．（４−クロロ−５−メチル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（５９）の合成
【化４６】
2012511544.tif 000049
固形水素化ホウ素ナトリウム（０．２４ｇ、６．３ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−５−メチル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル５８（１．００ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を予め氷浴で０℃に冷却したＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、２０ｍｌ）の混合物に溶解したものに滴加した。添加は、０℃で３時間攪拌しながら行った。反応混合物を室温まで温度上昇させ、水を加えた。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発乾固させた。残渣をエチルエーテルで処理し、アルコール５９を暗赤色固形生成物（０．７７ｇ、８５％）として得た。
【０１６３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.04 (H-9, d, 1H, J= 4.2 Hz), 8.12 (H-7, dd, 1H, J=1.3および8.0 Hz), 7.78 (H-3, s, 1H), 7.58 (H-8, dd, 1H, J=4.2および8.0 Hz), 7.56 (H-6, s, 1H), 5.13 (OCH2, s, 2H), 3.07 (OCH3, s, 3H).
【０１６４】
７．（５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（６０）の合成
【化４７】
2012511544.tif 000050
（４−クロロ−５−メチル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール５９（１００．０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍｌ）に７０℃で溶解したものに、ナトリウムチオメトキシド（８２．０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３ｍｌ）溶液を加えた。攪拌を７０℃で１５分間行い、水を加えた。混合物をＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）で希釈し、有機層を分離し、塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（０〜５０％）中７ＮＮＨ３ＯＨ）によって精製し、所望の生成物６０を淡褐色固形生成物（３０．３ｍｇ、２９％）として得た。
【０１６５】
1H-NMR (400 MHz, MeOD, ppm): 8.97 (H-9, dd, 1H, J= 1.6および4.4 Hz), 8.25 (H-7, dd, 1H, J=1.7および8.1 Hz), 7.68 (H-8, dd, 1H, J=4.4および8.1 Hz), 7.55 (H-3, s, 1H), 7.52 (H-6, s, 1H), 4.95 (OCH2, s, 2H), 3.05 (SCH3, s, 3H), 2.64 (CH3, s, 3H).
【０１６６】
８．５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（６１）の合成
【化４８】
2012511544.tif 000051
２．０Ｍ塩化オキサリルの−７８℃のＣＨ２Ｃｌ２（６００μｌ、１．２ｍｍｏｌ）溶液に、無水ＤＭＳＯ（１７０μｌ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃で２０分間攪拌した。次いで、（５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール６０（１６１．０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍｌ）溶液を加え、攪拌を−７８℃で５０分間行った。最後に、トリエチルアミン（０．５ｍｌ、３．６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、反応混合物を室温まで温度上昇させた。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、０〜５０％）によって精製し、アルデヒド６１を淡褐色固形生成物（５１．４ｍｇ、３２％）として得た。
【０１６７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.48 (CHO, s, 1H), 9.20 (H-9, dd, 1H, J= 1.7および4.3 Hz), 8.15 (H-7, dd, 1H, J=1.7および8.1 Hz), 7.98 (H-3, s, 1H), 7.66 (H-6, s, 1H), 7.65 (H-8, dd, 1H, J=4.3および8.1 Hz), 3.16 (SCH3, s, 3H), 2.69 (CH3, s, 3H).
【０１６８】
９．５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ｄ）の合成
【化４９】
2012511544.tif 000052
ヒドロキシルアミン塩酸塩（１３３．０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）の水（２ｍｌ）溶液を、５−メチル−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド６１（５１．４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）をエタノール／ＣＨ２Ｃｌ２（５／１．５、６．５ｍｌ）の混合物に溶解したものに加えた。攪拌は、室温で１６時間行った。反応混合物を水およびＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、有機層を分離し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、０〜５０％）によって精製し、アルドキシムＤを淡褐色固形生成物（８．４ｍｇ、１５％）として得た。
【０１６９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3/MeOD, 3/1, ppm): 9.00 (H-9, dd, 1H, J= 1.5および4.0 Hz), 8.50 (H-3, s, 1H), 8.28 (H-7, dd, 1H, J= 1.4および8.0 Hz), 7.96 (H-6, s, 1H), 7.70 (H-8, dd, 1H, J= 4.0および8.0 Hz), 7.62 (CH=, s, 1H), 3.15および3.13 (SCH3, sおよびs, 3H), 2.72および2.66 (CH3, sおよびs, 3H).
【０１７０】
例６
フェナントロリン誘導体Ａの合成
【化５０】
2012511544.tif 000053
【０１７１】
１．６−メトキシ−キノリン−８−イルアミン（６２）の合成
【化５１】
2012511544.tif 000054
ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（３９．７８ｇ、１７６．３ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−８−ニトロ−キノリン（１８．００ｇ、８８．１ｍｍｏｌ）のエタノール（２００ｍｌ）溶液に加えた。混合物を約２時間加熱還流し、生成する溶液を１ＮＮａＯＨで塩基性にした。スズ塩を濾別し、母液をＣＨ２Ｃｌ２で数回抽出した。合わせた有機層を乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）蒸発させ、６−メトキシ−８−アミノ−キノリン６２（１５．００ｇ、９８％）を褐色固形生成物として得た。
【０１７２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.59 (dd, J = 4.21, 1.65 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 8.29, 1.64 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.28, 4.20 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 2.57 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 2.57 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H).
【０１７３】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 158.79, 145.01, 144.97, 135.38, 134.72, 129.83, 121.77, 101.55, 94.53, 55.20.
【０１７４】
２．２−（６−メトキシ−キノリン−８−イルアミノ）−ブト−２−エン二酸ジメチルエステル（６３）の合成
【化５２】
2012511544.tif 000055
ジメチルアセチレンジカルボキシレート（６．０ｍｌ、４８．９ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−キノリン−８−イルアミン（７．７５ｇ、４４．５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍｌ）溶液に加えた。混合物を、室温で３時間攪拌した。溶媒を留去した後、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル／ヘキサン、３：１）によって精製し、純粋な化合物６３（４．２０ｇ、３０％）を黄色固形生成物として得た。
【０１７５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.95 (s, 1H), 8.73 (dd, J = 4.22, 1.65 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 8.30, 1.63 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 8.28, 4.22 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 2.48 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 2.46 Hz, 1H), 5.55 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78 (s, 6H).
【０１７６】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 169.07, 165.01, 157.69, 146.42, 145.83, 137.75, 136.34, 134.71, 129.50, 122.08, 106.64, 99.07, 96.36, 55.41, 52.85, 51.36.
【０１７７】
３．５−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（６４）の合成
【化５３】
2012511544.tif 000056
キノリン誘導体６３（４．２０ｇ、１３．２８ｍｍｏｌ）を、ジフェニルエーテル（４０ｍｌ）中で２４０℃で２０分間加熱した。溶液を室温に冷却し、ヘキサンを加えて褐色ペーストを得て、これを濾過した後、熱メタノールで溶出した。メタノール性溶液を濃縮して暗褐色固形生成物を得て、これをエチルエーテルで粉砕して、所望の生成物６４（０．７５ｇ、２０％）を淡褐色固形生成物として得た。
【０１７８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm) 8.78 (d, J = 4.13 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.23, 1.31 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.23, 4.30 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 2.17 (s, 1H).
【０１７９】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm) 146.77, 146.69, 141.67, 134.59, 134.53, 130.16, 124.68, 118.86, 117.30, 98.81, 86.29, 53.62.
【０１８０】
４．４−クロロ−５−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル（６５）の合成
【化５４】
2012511544.tif 000057
ＰＯＣｌ３（１５ｍｌ）をフェナントロリン誘導体６５（０．８９ｇ、３．１３ｍｍｏｌ）に加え、混合物を室温で３時間攪拌した。減圧留去した後、残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３および塩水で連続的に洗浄した。乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、純粋なクロロフェナントロリン中間体６５（１．００ｇ、１００％）を褐色固形生成物として得た。
【０１８１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 9.28 (d, J = 3.63 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 7.98 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.84 (dd, J = 7.02, 4.58 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.12 (s, 3H).
【０１８２】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 164.48, 154.82, 147.69, 143.49, 139.01, 130.02, 129.68, 127.43, 124.88, 123.21, 118.84, 103.96, 56.38, 53.58.
【０１８３】
５．（４−クロロ−５−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（６６）の合成
【化５５】
2012511544.tif 000058
固形の水素化ホウ素ナトリウム（０．２５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−５−メトキシ−［１，１０］フェナントロリン−２−カルボン酸メチルエステル６５（１．００ｇ、３．３ｍｍｏｌ）を０℃に冷却したＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：５、５０ｍｌ）の混合物に溶解したものに少しずつ加えた。混合物を、０℃で１時間および室温で１８時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、水および塩水で連続的に洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、純粋なアルコール６６（７１０ｍｇ  ７８％）を褐色固形生成物として得た。
【０１８４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.91 (s, 1H), 8.09 (dd, J = 8.06, 1.19 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 8.03, 4.40 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.06 (s, 3H).
【０１８５】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 160.86, 153.98, 147.66, 141.89, 134.82, 129.69, 129.29, 123.87, 123.53, 120.14, 118.85, 102.34, 65.05, 55.74. 
【０１８６】
６．（５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−イル）−メタノール（６７）の合成
【化５６】
2012511544.tif 000059
クロロ誘導体６６（７１０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）の無水ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）溶液に、固形のナトリウムチオメトキシド（９０６ｍｇ、１２．９ｍｍｏｌ）を加えた。生成する混合物を、８時間加熱還流した。溶媒を減圧留去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３および塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、純粋な化合物６７（５００ｍｇ、７０％）を褐色固形生成物として得た。
【０１８７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 8.87 (d, J = 2.86 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.17 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 7.95, 4.28 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.07 (s, 3H), 2.49 (s, 3H).
【０１８８】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 159.49, 155.12, 150.90, 147.51, 134.36, 129.69, 128.98, 123.35, 123.17, 118.85, 114.45, 100.82, 65.59, 55.37, 16.168.
【０１８９】
７．５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒド（６８）の合成
【化５５】
2012511544.tif 000060
２．０Ｍ塩化オキサリルの−７８℃の無水ＣＨ２Ｃｌ２（１．４ｍｌ、２．８ｍｍｏｌ）溶液に、無水ＤＭＳＯ（０．４ｍｌ、５．６ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）溶液を窒素下にて滴加した。−７８℃で２０分間攪拌した後、アルコール誘導体６７（４００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）溶液を滴加した。溶液を−７８℃で５０分間攪拌し、トリエチルアミン（１．２ｍｌ、８．４ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。５分後に、混合物を室温まで温度上昇させ、５時間攪拌した。水を加え、混合物を分液漏斗に移した後、有機層を水および塩水で洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、純粋なアルデヒド６８（３７５ｍｇ、９４％）を褐色固形生成物として得た。
【０１９０】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 10.49 (s, 1H), 9.11 (dd, J = 4.35, 1.68 Hz, 1H), 8.15 (dd, J = 8.10, 1.67 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.63 (dd, J = 8.09, 4.36 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.12 (s, 3H), 2.61 (s, 3H).
【０１９１】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 194.355, 152.809, 150.630, 148.493, 134.554, 134.510, 129.708, 129.133, 123.955, 123.195, 118.867, 113.629, 103.696, 55.622, 16.366.
【０１９２】
８．５−メトキシ−４−メチルスルファニル−［１，１０］フェナントロリン−２−カルバルデヒドオキシム（Ａ）の合成
【化５８】
2012511544.tif 000061
アルデヒド６８（３３０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）のエタノール（１６ｍｌ）懸濁液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（８０１ｍｇ、１１．６ｍｍｏｌ）の水（８ｍｌ）溶液を加え、混合物を６０℃で加熱した。１０％ＮａＯＨ溶液を加えてｐＨ６とし、反応を６０℃で１時間攪拌し、０℃で冷却した。沈澱物が形成し、これを濾過して水で洗浄し、所望のなアルドキシムＡ（２３３ｍｇ、７０％）を淡褐色固形生成物として得た。
【０１９３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, ppm): 11.98 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.31 (d, J = 6.68 Hz, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (dd, J = 7.53, 3.71 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.05 (s, 3H), 2.54 (s, 3H).
【０１９４】
13C NMR (100 MHz, CDCl3, ppm): 154.053, 150.819, 149.909, 148.876, 147.384, 134.456, 129.938, 128.818, 123.710, 120.327, 118.498, 112.746, 102.459, 55.695, 15.324.
【０１９５】
MS (ES-): m/z = 298.
【０１９６】
生物学
例７
試験化合物の細胞生育力に対する潜在的効果を、乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）活性放出の定量によってＳＨ−ＳＹ５Ｙヒト神経芽腫細胞で評価した。ＳＨ−ＳＹ５Ｙヒト神経芽腫細胞を、９６穴培養プレートに１０４細胞／ウェルで播種した。次いで培地を除き、細胞を様々な濃度の化合物と共に２４時間インキュベーションした。化合物を、新鮮な培地で１μＭから出発して最大１，０００μＭまでの増加濃度で試験し、化合物が細胞生育力を有意に損なう最小濃度を見出した。２４時間後に、培地を除き、ウェルの底に付着した細胞を５０μｌの１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００／Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓを加えることによって室温で５分間溶解した。ＬＤＨ放出定量については、Ｒｏｃｈｅ細胞毒性検出キット(Cat. No. 11 644 793 001)を、用いた。ＬＤＨ活性は、参照波長６２０ｎｍを用いて、４９２ｎｍにおける吸光度によって測定した。
【０１９７】
表２では、それぞれの化合物について、細胞生育力を試験した最大濃度を第二欄に示している。第三欄には、この最大濃度で、化合物が細胞生育力に影響するまたはしないを示している（細胞死＞２０％）。いずれの化合物も、活性が見られた濃度で、１０００倍濃度の場合のほとんどにおいても細胞生育力に効果は全く見られなかった。従って、これらの結果は、試験化合物は、活性濃度を十分上回る濃度で細胞生育力に影響しないことを明らかに示している。
【０１９８】
【表２】
2012511544.tif 000062
【０１９９】
例８
過酸化水素によって誘発される細胞死からの保護
このアッセイの目的は、細胞にとって極めて有害でありかつその蓄積によってＤＮＡ、タンパク質および脂質などの細胞標的を酸化して突然変異誘発および細胞死を生じる過酸化水素によって誘発される酸化ストレスにヒト神経芽腫細胞を暴露するときに、式（Ｉ）の化合物の神経保護効果を測定することである。
【０２００】
ＳＨ−ＳＹ５Ｙヒト神経芽腫細胞を、９６穴の培養プレートに１０４細胞／ウェルの密度で播種する。細胞を様々な濃度の化合物に１時間暴露した後、１００μＭＨ２Ｏ２で２４時間処理した。既知の酸化防止剤の５ｍＭＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）をポジティブコントロールとして用いて、１時間予備インキュベーションした後、Ｈ２Ｏ２で処理した。２４時間後、培地を除き、ウェルの底に付着した細胞に５０μｌの１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００／Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｐｅｓを加えて、室温にて５分間溶解する。ＬＤＨ放出定量には、Ｒｏｃｈｅ細胞毒性検出キット(Cat. No. 11 644 793 001)を、用いた。
【０２０１】
Ｈ２Ｏ２からの保護を測定した化合物Ａ〜Ｅの最小濃度を、表３に示す。
【０２０２】
【表３】
2012511544.tif 000063
【０２０３】
例９
６−ＯＨＤＡによって誘発される細胞死からの保護
この実験の目的は、６−ＯＨＤＡによって引き起こされる毒性に対する式（Ｉ）の化合物の保護効果を測定することである。この毒素は、パーキンソン病で見られるのと同様の細胞死を誘発し、ドーパミン作動性ニューロンを破壊する（「パーキンソン病のモデルとしてのＭＰＴＰおよび６−ヒドロキシドーパミンによって誘発される神経変性：神経保護の方法」（MPTP and 6-hydroxydopamine-induced neurodegeneration as models for Parkinson's disease: neuroprotective strategies）； Grunblatt E, et al.; J Neurol. 2000 Apr; 247 Suppl 2:II95-102）。
【０２０４】
実験の２または３日前に、ＳＨ−ＳＹ５Ｙヒト神経芽腫細胞を９６穴培養プレートni
１０４細胞／ウェルの密度で播種する。細胞を６−ＯＨＤＡによる処理に暴露し、最後に細胞をＬＤＨ定量によって測定する。ポジティブコントロールとして、ＮＡＣを用いた。
【０２０５】
ＮＡＣおよび式（Ｉ）の化合物を２時間予備インキュベーションした後、７５μＭ６−ＯＨＤＡで１６時間処理した。このアッセイは、１０％ウシ胎児血清を含む培地で行う。
【０２０６】
６−ＯＨＤＡによって誘発される細胞死からの神経保護を、表４に示す。それぞれの化合物について、神経保護効果が示される式（Ｉ）の化合物の最小濃度。
【０２０７】
【表４】
2012511544.tif 000064
【０２０８】
例１０
Ａβ毒性に対する神経保護
化合物の潜在的神経保護を評価するため、９６穴プレートで培養したＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を様々な濃度の化合物で１時間予備処理した後、２００μＭＡβ２５−３５（Neosystem）に２４時間暴露して、広汎な酸化ストレスと細胞死を誘発した。次に、この毒性から保護する化合物の能力を、比色ＬＤＨアッセイを用いて細胞内ＬＤＨを測定することによって評価する。
【０２０９】
Ａβの神経毒性活性はアミノ酸２５〜３５内にあることは広く認められている（例えば、Yankner BA et al., (1990)「アミロイドβタンパク質の神経栄養および神経毒性効果:タキキニン神経ペプチドによる逆転」（Neurotrophic and neurotoxic effects of amyloid β protein: reversal by tachykinin neuropeptides）; Science 250:279-282参照)。
【０２１０】
表５には、試験化合物がＡβ２５−３５毒性に対する神経保護を示す最小濃度を示す。
【０２１１】
【表５】
2012511544.tif 000065
【０２１２】
例１３
Ａβ（１−４０）分泌の抑制
Ａβ分泌を定量するため、ＥＬＩＳＡに基づく方法を用いた。このアッセイは、「サンドイッチ複合体」を形成する２種類の異なるエピトープでの選択的モノクローナル抗Ａβ抗体による抗原の検出にあり、これは基質またはクロモゲンＴＭＢの試料のペプチド量に直接比例する着色生成物への転換を触媒するペルオキシダーゼと接合した二次抗体の結合による比色測定によって検出される。Ａβ産生は、市販の比色キットＨ−ａｍｕｌｏｉｄ  ｂ−３０  ＥＬＩＳＡ(The Genetics Company)を用いるＥＬＩＳＡによって分析した。
【０２１３】
Ａβ（１−４０）は、細胞上清から定量した。ＡＰＰトランスフェクション細胞系を、実験に用いた：ＣＨＯ７Ｗ（ヒトＡＰＰ７５１  ｗｔ  ｃＤＮＡで安定的にトランスフェクションした）。細胞は、２％ウシ胎児血清、１％ペニシリン−ストレプトマイシン、１％Ｌ−グルタミンおよび２００μｇ／ｍｌＧ４１８を補足したＤＭＥＭからなる培養培地で増殖させた。細胞を、９６穴培養マイクロプレートに５０００細胞／ウェルで播種し、様々な濃度の様々な化合物による処理を、播種の２４時間後に行う。
【０２１４】
表６に、それぞれの試験化合物がβ−アミロイド分泌を阻害する化合物の最小濃度を示す。
【０２１５】
【表６】
2012511544.tif 000066
【国際調査報告】
2012511544.tif 000069
2012511544.tif 000070