(57)【要約】  本発明は、薬理活性を有する新規化合物、それらを調製するためのプロセス、それらを含む医薬組成物、及び様々な障害の治療におけるそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩：
【化１】
2012530107.tif 000085
（式中、
Ｘは、ＣＨ又はＮであり、
Ｒ１は、ＯＲ３、ＮＨＲ４、Ｒ５、ＮＲ６Ｒ７、Ｒ８、又はフッ素化されていてもよいＣ（３−６）シクロアルキルであり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ（１−２）アルコキシ、及びＣ（１−３）アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、Ｏが挿入されていてもよく、且つＦで置換されていてもよいＣ（１−５）アルキル又はＦで置換されていてもよい（ＣＨ２）（０−１）Ｃ（３−５）シクロアルキルであり、
Ｒ５は、Ｆで置換されていてもよいＣ（１−６）アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７は、Ｏが挿入されていてもよく、且つＦによって置換されていてもよいＣ（１−５）アルキル及びフッ素化されていてもよいＣ（３−５）シクロアルキルから独立して選択され、但しＲ６及びＲ７における炭素数が合計して６を超えず、
Ｒ８は、すべて窒素原子を介して結合される、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、及びモルホリニルから選択されるＦによって置換されていてもよい３〜６員窒素含有ヘテロシクリル環であり、
Ａは、以下のものから選択される二環式環であり、
【化２】
2012530107.tif 000086
Ｒ９は水素又はＣ（１−３）アルキルであり、
Ｒ１０は水素、Ｃ（１−４）アルキル、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＯＨ、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＯＲ１２、Ｃ（２−４）アルキルＯＣＯＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＲ１２、又はＣＯＣ（１−４）ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ１０は、Ａ環への結合点で少なくとも２個の炭素原子のアルキル鎖を含む場合、ハロゲン、ＳＯ２Ｃ（１−３）アルキル、若しくは少なくとも１個のＯＨにより置換されていてもよく、
Ｒ１１、Ｒ１２、及びＲ１３は独立して、水素、又はＦ若しくはヒドロキシルにより場合により置換されていてもよく、Ｏが挿入されていてもよいＣ（１−３）アルキルから選択され、
Ｒ１１及びＲ１２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって４〜６員ヘテロシクリル環を形成し、ここで前記４〜６員ヘテロシクリル環は酸素原子を含んでいてもよく、Ｆ及びＯＨから独立して選択される１個又は２個の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１２及びＲ１３は、それらが結合している原子と一緒になって不飽和の５〜７員ヘテロシクリル環を形成してもよく、ここで、前記５〜７員ヘテロシクリル環は酸素原子を含んでいてもよく、Ｆ及びＯＨから独立して選択される１又は２個の置換基により置換されていてもよく、
ｎは１又は２であり、および
Ｒ２及びＲ９は、それらがＣ（１−３）アルキルである場合、フッ素で置換されていてもよい）。
【請求項２】
ＸがＣＨ又はＮであり、
Ｒ１がＯＲ３であり、
Ｒ３がイソプロピルであり、
Ｒ２がクロロまたはシアノであり、
Ａが（ａ）又は（ｂ）であり、
Ｒ９が水素又はメチルであり、および
ｎが２である、
式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩。
【請求項３】
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパンアミド
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１−プロパノール
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−［２−（メチルスルホニル）エチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
３−［１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−｛５−［５−（３−ヒドロキシプロピル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−グリシル−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グリシル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸
２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオール
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−ヒドロキシプロパン酸メチル
（２Ｓ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオール
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１，１−ジメチルエチル）アセトアミド
から選択される請求項１又は２に記載の化合物、又はその塩若しくはエステル。
【請求項４】
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸又はその塩若しくはエステルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオールである請求項１に記載の化合物、又はその塩若しくはエステル。
【請求項６】
Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される病態又は障害の治療のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項７】
前記病態又は障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記病態が乾癬である、請求項７記載の使用。
【請求項９】
Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される病態又は障害の治療において使用する薬剤を製造するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
前記病態又は障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記病態が、乾癬である、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を患者に投与することを含む、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介され得る、ヒトを含む哺乳動物における病態又は障害の治療方法。
【請求項１４】
前記病態が乾癬である、請求項１３に記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬理活性を有する新規化合物、それらを調製するためのプロセス、それらを含有する医薬組成物及び様々な障害の治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
スフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）は、スフィンゴシンキナーゼによるスフィンゴシンのリン酸化によって形成される生理活性脂質メディエーターであり、血液中に高レベルで見られる。これは、血小板や肥満細胞などの造血起源のものを包含する多くの細胞型によって産生され、分泌される（Ｏｋａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ  １９９８  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７３（４２）：２７１０４；  Ｓａｎｃｈｅｚ  ａｎｄ  Ｈｌａ  ２００４，  ＪＣｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ９２：９１３）。これは、細胞増殖、分化、運動性、血管新生、ならびに炎症細胞及び血小板の活性化の調節をはじめとする広範囲の生物学的作用を有する（Ｐｙｎｅ  ａｎｄ  Ｐｙｎｅ  ２０００，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．  ３４９：３８５）。Ｓ１Ｐ反応性受容体の５つのサブタイプ、Ｓ１Ｐ１（Ｅｄｇ−１）、Ｓ１Ｐ２（Ｅｄｇ−５）、Ｓ１Ｐ３（Ｅｄｇ−３）、Ｓ１Ｐ４（Ｅｄｇ−６）、及びＳ１Ｐ５（Ｅｄｇ−８）が記載されており、受容体のＧタンパク質共役内皮分化遺伝子ファミリーの一部を形成する（Ｃｈｕｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００２  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５４：２６５，  Ｓａｎｃｈｅｚ  ａｎｄ  Ｈｌａ  ２００４  Ｊ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ９２：９１３）。これらの５つの受容体は様々なｍＲＮＡ発現を示し、Ｓ１Ｐ１−３は広範囲に発現され、Ｓ１Ｐ４はリンパ様組織及び造血組織上で発現され、そしてＳ１Ｐ５は主に脳において、そして程度は低いが脾臓で発現される。それらは、Ｇタンパク質の様々なサブセットを経てシグナルを送り、様々な生物学的反応を促進する（Ｋｌｕｋ  ａｎｄ  Ｈｌａ  ２００２  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １５８２：７２，  Ｓａｎｃｈｅｚ  ａｎｄ  Ｈｌａ  ２００４，  Ｊ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ９２：９１３）。
【０００３】
Ｓ１Ｐ１受容体について提案されている役割としては、リンパ球輸送、サイトカイン誘導／抑制及び内皮細胞に対する影響が挙げられる（Ｒｏｓｅｎ  ａｎｄ  Ｇｏｅｔｚｌ  ２００５  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ５：５６０）。Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストは、誘発された疾患の重症度を軽減するために、ＭＳの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルをはじめとする多くの自己免疫及び移植動物モデルで用いられてきた（Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００３  ＪＢＣ  ２７７：２１４５３；  Ｆｕｊｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ  ２００３  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ３０５：７０；  Ｗｅｂｂ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ  １５３：１０８；  Ｒａｕｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｊ  Ｍａｇｎ  Ｒｅｓｏｎ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２０：１６）。この活性は、リンパ系中を通るリンパ球循環に対するＳ１Ｐ１アゴニストの影響により媒介されることが報告されている。Ｓ１Ｐ１アゴニストで治療すると、動物モデルにおける可逆性末梢リンパ球減少症をはじめとするリンパ節などの二次リンパ様器官内でリンパ球の排出（ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ）が起こる（Ｃｈｉｂａ  ｅｔ  ａｌ  １９９８，  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １６０：５０３７，  Ｆｏｒｒｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ３０９：７５８；  Ｓａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  ＪＢＣ  ２７９：１３８３９）。アゴニストに関して公開されたデータは、化合物処理によって、インターナリゼーションにより細胞表面からのＳ１Ｐ１受容体の損失が誘発され（Ｇｒａｌｅｒ  ａｎｄ  Ｇｏｅｔｚｌ  ２００４  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １８：５５１；  Ｍａｔｌｏｕｂｉａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｎａｔｕｒｅ  ４２７：３５５；  Ｊｏ  ｅｔ  ａｌ  ２００５  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  １２：７０３）、免疫細胞上のＳ１Ｐ１受容体のこのような減少が、リンパ節から血流中へと戻るＴ細胞の移動が減る一因となることを示唆する。
【０００４】
Ｓ１Ｐ１遺伝子欠失は胚の死を引き起こす。リンパ球遊走及び輸送におけるＳ１Ｐ１受容体の役割を調べる実験は、標識されたＳ１Ｐ１欠損Ｔ細胞の野生型マウス中への養子移入を含む。これらの細胞は、二次リンパ様器官からの放出が減少していた（Ｍａｔｌｏｕｂｉａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｎａｔｕｒｅ  ４２７：３５５）。
【０００５】
Ｓ１Ｐ１は、内皮細胞接合調節における役割にも起因する（Ａｌｌｅｎｄｅ  ｅｔ  ａｌ  ２００３  １０２：３６６５，  Ｂｌｏｏｄ  Ｓｉｎｇｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ    ２００５  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １９：１６４６）。この内皮作用に関して、Ｓ１Ｐ１アゴニストは単離されたリンパ節に対して影響を及ぼし、免疫不全の調節における役割に介在し得ることが報告されている。Ｓ１Ｐ１アゴニストは、リンパ節を排液させたり、リンパ球の放出を防止したりするリンパ洞の内皮ストロマ「ゲート」を閉じさせた（Ｗｅｉ  ｗｔ  ａｌ  ２００５，  Ｎａｔ．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６：１２２８）。
【０００６】
免疫抑制化合物ＦＴＹ７２０（ＪＰ１１０８００２６−Ａ）は、動物及び人間において循環性リンパ球を減少させ、免疫不全の動物モデルにおいて疾患調節活性を有し、そして再発寛解型多発性硬化症の寛解率を低下させることが証明されている（Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００２  ＪＢＣ  ２７７：２１４５３，  Ｍａｎｄａｌａ  ｅｔ  ａｌ  ２００２  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９６：３４６，  Ｆｕｊｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ  ２００３  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ３０５：４５６５８，  Ｂｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ４：１０１９，  Ｗｅｂｂ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １５３：１０８，  Ｍｏｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ  ２００５  ＥｕｒＪ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３５：３５７０，  Ｃｈｉｂａ  ２００５  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  １０８：３０８，  Ｋａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００３，  移植  ７６：１０７９，  Ｋａｐｐｏｓ  ｅｔ  ａｌ  ２００６  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３３５：１１２４）。この化合物は、スフィンゴシンキナーゼによってインビボでリン酸化されて、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４及びＳ１Ｐ５受容体でアゴニスト活性を有する分子を得る、プロドラッグである。臨床試験は、ＦＴＹ７２０での治療の結果、治療の最初の２４時間で徐脈が起こることを示している（Ｋａｐｐｏｓ  ｅｔ  ａｌ  ２００６  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３３５：１１２４）。徐脈は、多くの細胞ベース及び動物実験に基づいて、Ｓ１Ｐ３受容体でのアゴニズムによると考えられている。これらは、Ｓ１Ｐ３ノックアウト動物の使用を含み、これらは野生型マウスと異なり、ＦＴＹ７２０投与及びＳ１Ｐ１選択性化合物の使用の後に徐脈を示さない。（Ｈａｌｅ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １４：３５０１，  Ｓａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ  ２００４  ＪＢＣ  ２７９：１３８３９，  Ｋｏｙｒａｋｈ  ｅｔ  ａｌ  ２００５  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５：５２９）。
【０００７】
それ故、徐脈を誘発する傾向が低減されていると予想されるＳ１Ｐ３を上回る選択性を有するＳ１Ｐ１受容体アゴニスト化合物が必要とされている。
【０００８】
以下の特許出願は、Ｓ１Ｐ１アゴニストとしてのオキサジアゾール誘導体を記載している：ＷＯ０３／１０５７７１、ＷＯ０５／０５８８４８、ＷＯ０６／０４７１９５、ＷＯ０６／１００６３３、ＷＯ０６／１１５１８８、ＷＯ０６／１３１３３６、ＷＯ０７／０２４９２２及びＷＯ０７／１１６８６６。
【０００９】
以下の特許出願は、Ｓ１Ｐ受容体アゴニストとしてのテトラヒドロイソキノリニル−オキサジアゾール誘導体を記載している：ＷＯ０６／０６４７５７、ＷＯ０６／００１４６３、ＷＯ０４／１１３３３０。
【００１０】
ＷＯ０８／０６４３７７は、Ｓ１Ｐ１受容体活性を有するベンゾシクロヘプチル類似体を記載している。
【００１１】
Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストを提供する、構造的に新規な化合物のクラスが見いだされた。
【００１２】
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2012530107.tif 000002
（式中、Ｘは、ＣＨ又はＮであり、
Ｒ１は、ＯＲ３、ＮＨＲ４、Ｒ５、ＮＲ６Ｒ７、Ｒ８、又はフッ素化されていてもよいＣ（３−６）シクロアルキルであり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ（１−２）アルコキシ、及びＣ（１−３）アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、Ｏが挿入されていてもよく、且つＦで置換されていてもよいＣ（１−５）アルキル又はＦで置換されていてもよい（ＣＨ２）（０−１）Ｃ（３−５）シクロアルキルであり、
Ｒ５は、Ｆで置換されていてもよいＣ（１−６）アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７は、Ｏが挿入されていてもよく、且つＦで置換されていてもよいＣ（１−５）アルキル及びフッ素化されていてもよいＣ（３−５）シクロアルキルから独立して選択され、但しＲ６及びＲ７における炭素数が合計して６を超えず、
Ｒ８は、すべて窒素原子を介して結合される、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル及びモルホリニルから選択されるＦによって置換されていてもよい３〜６員窒素含有ヘテロシクリル環であり、Ａは、以下のものから選択される二環式環であり、
【化２】
2012530107.tif 000003
Ｒ９は、水素又はＣ（１−３）アルキルであり、
Ｒ１０は、水素、Ｃ（１−４）アルキル、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＯＨ、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＯＲ１２、Ｃ（２−４）アルキルＯＣＯＮＲ１１Ｒ１２Ｃ（２−４）アルキルＮＲ１３ＣＯＲ１２又はＣＯＣ（１−４）ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ１０は、Ａ環への結合点で少なくとも２個の炭素原子のアルキル鎖を含む場合、これはハロゲン、ＳＯ２Ｃ（１−３）アルキル、又は少なくとも１個のＯＨにより置換されていてもよく、
Ｒ１１、Ｒ１２、及びＲ１３は、水素又はＦ若しくはヒドロキシルにより置換されていてもよく、Ｏが挿入されてもよいＣ（１−３）アルキルから独立して選択され、
Ｒ１１及びＲ１２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって４〜６員ヘテロシクリル環を形成し、ここで４〜６員ヘテロシクリル環は、酸素原子を含んでいてもよく、Ｆ及びＯＨから独立して選択される１又は２個の置換基により置換されていてもよく、
Ｒ１２及びＲ１３は、それらが結合している原子と一緒になって、不飽和の５〜７員ヘテロシクリル環を形成してもよく、ここで、５〜７員ヘテロシクリル環は酸素原子を含んでいてもよく、Ｆ及びＯＨから独立して選択される１又は２個の置換基により置換されていてもよく、
ｎは１又は２であり、
Ｒ２及びＲ９は、それらがＣ（１−３）アルキルである場合、フッ素で置換されていてもよい）、又はその薬学上許容可能な塩を提供する。
【００１３】
一実施形態では、ＸはＣＨである。別の実施形態では、ＸはＮである。
【００１４】
一実施形態では、Ｒ１はＯＲ３である。
一実施形態では、Ｒ３はイソプロピルである。
一実施形態では、Ｒ２はクロロ又はシアノである。
一実施形態では、Ａは（ａ）又は（ｂ）である。
一実施形態では、Ｒ９は水素又はメチルである。
一実施形態では、ｎは２である。
【００１５】
一実施形態では、
ＸはＣＨ又はＮであり、
Ｒ１はＯＲ３であり、
Ｒ３はイソプロピルであり、
Ｒ２はクロロ又はシアノであり、
Ａは（ａ）又は（ｂ）であり、
Ｒ９は水素又はメチルであり、および
ｎは２である。
【００１６】
本発明さらに、式（ＩＡ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩を提供する：
【化３】
2012530107.tif 000004
ＸはＣＨ又はＮであり、
Ｒ１はＯＲ３であり、
Ｒ２はハロゲン又はシアノであり、
Ｒ３はＣ（１−５）アルキルであり、
Ａは、以下のものから選択される二環式環であり、
【化４】
2012530107.tif 000005
Ｒ９は水素又はＣ（１−３）アルキルであり、
Ｒ１０は、水素、Ｃ（１−４）アルキル、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＯＨ、Ｃ（１−４）アルキルＣＯＮＲ１１Ｒ１２又はＣＯＣ（１−４）ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ１０は、Ａ環への結合点で少なくとも２個の炭素原子のアルキル鎖を含む場合、これはハロゲン、ＳＯ２Ｃ（１−３）アルキル、ＯＣ（１−３）アルキル又は少なくとも１個のＯＨで置換されていてもよく、
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３は、水素又はＦ若しくはヒドロキシルで置換されていてもよく、Ｏが挿入されてもよいＣ（１−３）アルキルから独立して選択され、そして
ｎは１又は２である。
【００１７】
一実施形態では、ＸはＣＨ又はＮである。
一実施形態では、Ｒ１はＯＲ３である。
一実施形態では、Ｒ３はイソプロピルである。
一実施形態では、Ｒ２はクロロ又はシアノである。
一実施形態では、Ａは（ａ）又は（ｂ）である。
一実施形態では、Ｒ９は水素又はメチルである。
一実施形態では、Ｒ１０は、水素、１個若しくは２個のＯＨで置換されたＣ（３）アルキル、Ｃ（２）アルキルＳＯ２Ｃ（１）アルキル、Ｃ（１−３）アルキルＣＯＯＨ、Ｃ（１−２）アルキルＣＯＮＲ１１Ｒ１２、又はＣＯＣ（１−４）ＮＲ１１Ｒ１２である。
一実施形態では、Ｒ１１は水素であり、Ｒ１２は水素、１個若しくは２個のメチル基及びＯＨで置換されたＣ（２）アルキル又は１個若しくは２個のＯＨで置換されたＣ（２−３）アルキルである。
一実施形態では、ｎは１又は２である。
【００１８】
一実施形態では、
ＸはＣＨ又はＮであり、
Ｒ１はＯＲ３であり、
Ｒ３はイソプロピルであり、
Ｒ２はクロロまたはシアノであり、
Ａは（ａ）又は（ｂ）であり、
Ｒ９は水素又はメチルであり、
Ｒ１０は、水素、１個若しくは２個のＯＨで置換されたＣ（３）アルキル、Ｃ（２）アルキルＳＯ２Ｃ（１）アルキル、Ｃ（１−３）アルキルＣＯＯＨ、Ｃ（１−２）アルキルＣＯＮＲ１１Ｒ１２、又はＣＯＣ（１−４）ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ１１は水素であり、Ｒ１２は水素、１個若しくは２個のメチル基及びＯＨで置換されたＣ（２）アルキル又は１個若しくは２個のＯＨで置換されたＣ（２−３）アルキルであり、そして
ｎは１又は２である。
【００１９】
「アルキル」という用語は、１つの基として又はたとえばアルコキシ若しくはヒドロキシアルキルなどの基の一部として、あらゆる異性体形態における直線状又は分枝アルキル基を指す。「Ｃ（１−６）アルキル」という用語は、少なくとも１個で最高６個までの炭素原子を含む、前記定義のアルキル基を指す。そのようなアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、又はｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。そのようなアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｉｓｏ−プロポキシ、ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ及びｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。
【００２０】
好適なＣ（３−６）シクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、「ハロゲン」という用語は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、又はヨウ素（Ｉ）を指し、「ハロ」という用語は、ハロゲン：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）及びヨード（−Ｉ）を指す。
【００２２】
「置換された」という用語は、置換された原子及び置換基の許容される価数と置換が合致し、置換の結果、安定な化合物（すなわち、転位、環化、又は脱離によるなど、自発的に変化しないもの）が得られるという暗黙の仮定を包含する。ある実施形態では、そのような置換が原子の許容される価数と合致する限り、１個の原子が２以上の置換基で置換されていてもよい。ある実施形態では、Ｆ又はＯＨで置換されていてもよいアルキル基は複数の炭素原子で複数回置換されていてもよい。
【００２３】
ある式（Ｉ）の化合物では、置換基の性質に応じて、キラル炭素原子が存在し、したがって式（Ｉ）の化合物は立体異性体として存在してもよい。本発明は、エナンチオマー、ジアステレオマー及びそれらの混合物、例えばラセミ体をはじめとする式（Ｉ）の化合物の立体異性体形態などのあらゆる光学異性体に及ぶ。異なる立体異性体形態は、通常の方法によって互いに分離若しくは分割することができるか、又は任意の所定の異性体は、通常の立体選択的若しくは不斉合成によって得ることができる。
【００２４】
本発明のいくつかの化合物は、様々な互変異性型で存在することができ、本発明は全てのそのような互変異性型を包含すると理解されるべきである。
【００２５】
本発明のある化合物は酸性基及び塩基性基の両方を含み、したがってあるｐＨ値で双性イオンとして存在することができると理解される。
【００２６】
好適な本発明の化合物は：
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパンアミド
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１−プロパノール
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−［２−（メチルスルホニル）エチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
３−［１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］アセトアミド
５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−｛５−［５−（３−ヒドロキシプロピル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−グリシル−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−（５−｛５−［Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グリシル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
５−［５−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸
２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオール
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−ヒドロキシプロパン酸メチル
（２Ｓ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオール
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１，１−ジメチルエチル）アセトアミド
又はそれらの薬学上許容可能な塩若しくはエステルである。
【００２７】
好適には、式（Ｉ）の化合物は、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸又はその塩若しくはエステルである。
【００２８】
好適には、式（Ｉ）の化合物は、２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール又はその塩若しくはエステルである。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物の薬学上許容可能な誘導体には、受容者に投与されると、（直接的若しくは間接的に）式（Ｉ）の化合物又はその活性代謝物若しくは残基を提供することができる任意の式（Ｉ）の化合物の任意の薬学上許容可能な塩、エステル又はそのようなエステルの塩が含まれる。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物は塩を形成することができる。医薬における使用に関して、式（Ｉ）の化合物の塩は薬学的に許容されなければならないことは言うまでもない。好適な薬学上許容可能な塩は当業者には明らかであり、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．，  １９７７，  ６６，  １−１９に記載されているもの、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸又はリン酸などの無機酸；及びコハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸又はナフタレンスルホン酸などの有機酸と形成される酸付加塩などを包含する。いくつかの式（Ｉ）の化合物は、１当量以上の酸と酸付加塩を形成することができる。本発明は、その範囲内にあらゆる可能な化学量論的形態及び非化学量論的形態を包含する。塩は、無機塩基及び有機塩基をはじめとする薬学上許容可能な塩基から調製することもできる。無機塩基由来の塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第２鉄、第１鉄、リチウム、マグネシウム、第２マンガン塩、第１マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが挙げられる。薬学上許容可能な有機塩基由来の塩としては、第１、第２、及び第３アミン；天然に存在する置換アミンを包含する置換アミン；及び環状アミンの塩が挙げられる。特定の薬学上許容可能な有機塩基としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ、トロメタモール）などが挙げられる。塩は、塩基性イオン交換樹脂、例えばポリアミン樹脂から形成することもできる。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機及び有機酸を包含する薬学上許容可能な酸から調製することができる。そのような酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。
【００３１】
薬学上許容可能な酸付加塩は、通常どおり、適切な酸又は酸誘導体との反応により調製することができる。塩基との薬学上許容可能な塩は、通常どおり、適切な無機又は有機塩基との反応によって調製することができる。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物は、結晶又は非結晶形態で調製することができ、結晶性である場合は、場合により水和又は溶媒和されていてもよい。本発明は、その範囲内に化学量論的水和物または溶媒和物ならびに様々な量の水及び／又は溶媒を含む化合物を包含する。
【００３３】
本発明の範囲内に含まれるのは、式（Ｉ）の化合物の全ての塩、溶媒和物、水和物、複合体、多形体、プロドラッグ、放射性標識誘導体、立体異性体及び光学異性体である。
【００３４】
Ｓ１Ｐ１受容体についての本発明の化合物の効力及び有効性は、本明細書中に記載する様なヒトクローン化受容体に関して実施されるＧＴＰγＳアッセイによって決定することができる。式（Ｉ）の化合物は、本明細書中に記載する機能的アッセイを用いて、Ｓ１Ｐ１受容体でアゴニスト活性を示した。
【００３５】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩はしたがってＳ１Ｐ１受容体により媒介される病態または障害の治療において有用である。特に、式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍、及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病の治療において有用である。
【００３６】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩はしたがって紅斑性狼瘡の治療において有用である。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩はしたがって乾癬の治療において有用である。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩はしたがって多発性硬化症の治療において有用である。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩はまた、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、脊髄筋萎縮症、ポリグルタミン伸長疾患、血管性認知症、ダウン症候群、ＨＩＶ認知症、認知症、緑内障を含む眼性疾患、加齢黄斑変性、白内障、外傷性眼損傷、糖尿病性網膜症、外傷性脳損傷、脳卒中、タウオパシー及び難聴の治療においても有用であり得る。
【００４０】
本明細書中で用いられる「治療」とは、確立された症状の予防並びに緩和を包含すると理解されるべきである。
【００４１】
したがって、本発明は、治療物質として、特に、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される病態又は障害の治療において用いられる式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩も提供する。特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍、及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病の治療において治療物質として用いられる式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩も提供する。
【００４２】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、紅斑性狼瘡の治療において治療物質として有用である。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、乾癬の治療において治療物質として有用である。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、多発性硬化症の治療において治療物質として有用である。
【００４５】
本発明は、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される可能性があるヒトをはじめとする哺乳動物における病態又は障害の治療方法であって、患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を投与することを含む方法を更に提供する。特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍、及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病の治療方法であって、患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。
【００４６】
本発明は、紅斑性狼瘡の治療方法であって、患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。
【００４７】
本発明は、乾癬の治療方法であって、患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。
【００４８】
本発明は、多発性硬化症の治療方法であって、患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。
【００４９】
別の態様では、本発明は、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される病態または障害の治療において用いられる薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩の使用を提供する。
【００５０】
特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症性疾患、喘息、炎症性神経疾患、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血−再灌流傷害、固形腫瘍、及び腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛状態、急性ウイルス性疾患、炎症性腸疾患、インシュリン依存性糖尿病及びインシュリン非依存性糖尿病の治療において用いられる薬剤の製造において用いられる式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩を提供する。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、紅斑性狼瘡の治療において用いられる薬剤の製造において有用である。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、乾癬の治療において用いられる薬剤の製造において有用である。
【００５３】
式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学上許容可能な塩は、多発性硬化症の治療において用いられる薬剤の製造において有用である。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容可能な塩を療法において使用するために、それらは通常、標準的な薬務にしたがって医薬組成物に処方されるであろう。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩、及び薬学上許容可能な担体又は賦形剤を含む医薬組成物も提供する。
【００５５】
さらなる態様では、本発明は、医薬組成物を調製するためのプロセスを提供し、このプロセスは、式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容可能な塩及び薬学上許容可能な担体又は賦形剤を混合することを含む。
【００５６】
好適には周囲温度及び大気圧で混合することにより調製することができる本発明の医薬組成物は、通常、経口、非経口又は直腸投与に適応され、よって、錠剤、カプセル、経口液体製剤、粉末、顆粒、ロゼンジ、再構成可能な粉末、注射可能若しくは注入可能な溶液若しくは懸濁液又は坐剤の形態であってよい。経口投与可能な組成物が一般的に好ましい。
【００５７】
経口投与用錠剤及びカプセルは、単位投与形態であってもよく、通常の賦形剤、例えば結合剤（例えばアルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；フィラー（例えば、ラクトース、微結晶性セルロース又はリン酸水素カルシウム）；錠剤成形用潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプン又はデンプングリコール酸ナトリウム）；及び許容可能な湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を含んでもよい。錠剤は、通常の薬務で周知の方法に従ってコーティングしてもよい。
【００５８】
経口液体製剤は、例えば、水性若しくは油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ又はエリキシルの形態であってもよいし、或いは、水又は他の好適なビヒクルで使用前に再構成される乾燥製品の形態であってもよい。そのような液体製剤は、通常の添加剤、例えば懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体又は水素化食用脂）、乳化剤（例えば、レシチン又はアカシア）、非水性ビヒクル（食用油、例えばアーモンド油、油性エステル、エチルアルコール又は分別植物油を包含し得る）、防腐剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル若しくはプロピル又はソルビン酸）、及び所望により、通常の香味料又は着色剤、緩衝塩及び甘味料を必要に応じて含んでもよい。経口投与用製剤は、活性化合物の制御放出をもたらすために好適に処方することができる。
【００５９】
非経口投与に関して、流体単位投与形態は、本発明の化合物又はその薬学上許容可能な塩及び無菌ビヒクルを用いて調製される。注射用処方は、本発明の化合物又はその薬学上許容可能な誘導体及び無菌ビヒクルを利用し、場合により防腐剤を添加して、例えばアンプル中で単位投与形態において、又は複数回投与量で提供することができる。組成物は、油性若しくは水性ビヒクル中懸濁液、溶液又はエマルジョンなどの形態をとってもよく、懸濁剤、安定剤及び／又は分散剤などの処方剤を含んでもよい。或いは、活性成分は、使用前に好適なビヒクル、例えば無菌パイロジェンフリー（ｐｙｒｏｇｅｎ−ｆｒｅｅ）水で構成される粉末形態であってよい。化合物は、使用されるビヒクル及び濃度に応じて、ビヒクル中に懸濁することができるか、又は溶解することができるかのいずれかである。溶液を調製する際に、化合物を注射用に溶解させることができ、好適なバイアル又はアンプル中に充填し、密封する前にろ過滅菌することができる。有利には、局部麻酔薬、防腐剤及び緩衝剤などのアジュバントをビヒクル中に溶解させる。安定性を増すために、バイアル中に充填し、水を真空下で除去した後に、組成物を凍結することができる。非経口懸濁液は、化合物を溶解させる代わりにビヒクル中に懸濁させ、滅菌をろ過によって行うことができない以外は、実質的に同じ方法で調製される。化合物は、無菌ビヒクル中に懸濁させる前にエチレンオキシドに暴露することよって滅菌することができる。有利には、界面活性剤又は湿潤剤を組成物中に含めて、化合物の均一な分配を促進する。
【００６０】
ローションは、水性又は油性基剤を用いて処方することができ、１以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、又は着色剤も含むであろう。滴剤は、１以上の分散剤、安定剤、可溶化剤又は懸濁剤も含む水性又は非水性基剤を配合することができる。それらは防腐剤を含んでもよい。
【００６１】
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩は、例えば、カカオバター又は他のグリセリド等の通常の坐剤基剤を含む、坐剤又は停留浣腸などの直腸組成物に処方することもできる。
【００６２】
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩は、デポ製剤として処方することもできる。そのような長時間作用性処方は、移植（例えば、皮下若しくは筋肉内）によるか、又は筋肉内注射によって投与することができる。したがって、例えば、本発明の化合物は、好適なポリマー若しくは疎水性材料（例えば許容される油中エマルジョンとして）又はイオン交換樹脂を配合してもよいし、或いはやや難溶性の誘導体として、例えばやや難溶性の塩として処方してもよい。
【００６３】
鼻内投与に関して、式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩は、好適な定量若しくは単位投与装置による投与用溶液として、或いは好適な送達装置を用いた投与に適した担体を含む粉末ミックスとして、処方することができる。したがって、式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩は、経口、頬側、非経口、局所（眼及び鼻を包含する）、デポ若しくは直腸投与用、又は吸入若しくは吹送（口若しくは鼻のいずれかを通して）による投与に適した形態で処方することができる。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩は、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、ペッサリー、エアゾル又は滴剤（例えば、点眼剤、点耳剤、若しくは点鼻剤）の形態で局所投与用に処方することができる。軟膏及びクリームは、例えば水性又は油性を用い、好適な増粘剤及び／又はゲル化剤を添加して処方することができる。眼投与用軟膏は、滅菌された成分を用いて無菌的に製造することができる。
【００６５】
組成物は、投与方法に応じて、０．１重量％〜９９重量％、好ましくは１０〜６０重量％の活性材料を含むことができる。前記障害の治療において用いられる化合物の用量は、障害の重症度、患者の体重、及び他の同様の因子によって通常どおりに変化するであろう。しかし、一般的指針として、好適な用量は、０．０５〜１０００ｍｇ、１．０〜５００ｍｇ又は１．０〜２００ｍｇであってよく、そのような単位用量を、１日２回以上、例えば１日２回又は３回投与することができる。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬学上許容可能な塩を、他の活性成分と組み合わせた配合剤で用いることができる。例えば、本発明の化合物を、シクロスポリンＡ、メトトレキサート、ステロイド、ラパマイシン、炎症誘発性サイトカイン阻害剤、生物学的製剤若しくは他の治療活性化合物を含む免疫調節薬と組み合わせて用いることができる。
【００６７】
本発明は、１以上の原子が自然界で通常見出される原子質量又は質量数と異なる原子質量又は質量数を有する原子で置換されている以外は、式Ｉ及び以下で記載するものと同じである、同位体標識化合物も包含する。本発明の化合物中に組み入れることができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素、及び塩素の同位体、例えば３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、１２３Ｉ及び１２５Ｉが挙げられる。
【００６８】
前記同位体及び／又は他の原子の他の同位体を含む本発明の化合物及び前記化合物の薬学上許容可能な塩は本発明の範囲内に含まれる。本発明の同位体標識化合物、例えば３Ｈ、１４Ｃなどの放射性同位体が組み入れられるものは、薬剤及び／又は基質組織分布アッセイで有用である。トリチウム化、すなわち３Ｈ、及び炭素１４、すなわち１４Ｃ同位体は、それらの調製の簡便性及び検出可能性のために特に好適である。１１Ｃ及び８Ｆ同位体はＰＥＴ（ポジトロン放出断層撮影）で特に有用であり、１２５Ｉ同位体はＳＰＥＣＴ（単光子放射型コンピューター断層撮影法）で特に有用である（すべて脳画像化において有用である）。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体での置換によって、より高い代謝安定性、例えばインビボ半減期の増加又は必要投与量の低減のためにある治療的利点が得られ、それ故、状況によっては好ましい可能性がある。同位体で標識された式（Ｉ）の化合物及び本発明の以下のものは、一般的に、容易に入手可能な同位体標識試薬を非同位体標識試薬と置換することにより、下記スキーム及び／又は実施例で開示される手順を実施することによって調製することができる。
【００６９】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を調製するためのプロセスを提供する。
【００７０】
本明細書中で引用される特許及び特許出願を包含するが、これらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかのごとく具体的かつ個別に本明細書中に参照することによって組み入れられるように表示されているかのごとく本明細書中に組み入れられる。
【００７１】
以下の説明および実施例は、本発明の化合物の調製を例示する。
【００７２】
略語：
ｇ          グラム
ｍｇ          ミリグラム
ｍｌ          ミリリットル
ｕｌ          マイクロリットル
ＢＯＣ２Ｏ          ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネート
ＭｅＣＮ          アセトニトリル
ＭｅＯＨ          メタノール
ＥｔＯＨ          エタノール
Ｅｔ２Ｏ          ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ          酢酸エチル
ＤＢＵ          １，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン
ＤＣＭ          ジクロロメタン
ＤＩＡＤ          アゾジカルボン酸ジイソプロピル
ＤＩＰＥＡ          ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥ          １，２−ビス（メチルオキシ）エタン
ＤＭＦ          Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ          ジメチルスルホキシド
ｄ６ＤＭＳＯ          重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＤＡＣ          Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣ          Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣｌ          Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＨＡＴＵ          ２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタナミニウム
ＨＯＢＴ／ＨＯＢｔ          ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＩＰＡ          イソプロピルアルコール
ＭｅＯＤ          重水素化メタノール
ＮＣＳ          Ｎ−クロロスクシンイミド
ＰＰｈ３          トリフェニルホスフィン
ＰｙＢＯＰ          ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＨＦ          テトラヒドロフラン
ＴＦＡ          トリフルオロ酢酸
ｄｂａ          ジベンジリデンアセトン
ＲＴ          室温
℃          セ氏温度
Ｍ          モル濃度
Ｈ          プロトン
ｓ          一重項
ｄ          二重項
ｔ          三重項
ｑ          四重項
ＭＨｚ          メガヘルツ
ＭｅＯＤ          重水素化メタノール
ＬＣＭＳ          液体クロマトグラフィー質量分析法
ＬＣ／ＭＳ          液体クロマトグラフィー質量分析法
ＭＳ          質量分析法
ＥＳ          エレクトロスプレー
ＭＨ＋          質量イオン＋Ｈ＋
ＭＤＡＰ          質量分離自動化分取液体クロマトグラフィー
ｓａｔ．          飽和
ＳＣＸ          固相カチオン交換クロマトグラフィー
【００７３】
ＬＣＭＳ法
特に別段の記載がない限り、ホルメート法によりＬＣＭＳを得た。
ホルメート法
ＬＣ条件
ＵＰＬＣ法を、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム（５０ｍｍ×２．１ｍｍ、ｉ．ｄ．１．７μｍ充填直径）上、４０℃で実施した。
使用した溶媒は次のとおりであった：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖの水中ギ酸溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖのアセトニトリル中ギ酸溶液
使用した勾配は次のとおりであった：
【表１】
2012530107.tif 000006
ＵＶ検出は２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長からの合計シグナルであった。
ＭＳ条件
ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ
イオン化モード：オルタネートスキャン陽性及び陰性エレクトロスプレー
スキャン範囲：１００〜１０００ＡＭＵ
スキャン時間：０．２７秒
インタースキャンディスプレー：０．１０秒
【００７４】
ホルメート法５分
ＬＣ条件
ＨＰＬＣ分析を、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム（３０ｍｍ×４．６ｍｍ、ｉ．ｄ．３．５μｍ充填直径）上、３０℃で実施した。
使用した溶媒は次のとおりであった：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖの水中ギ酸溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖのアセトニトリル中ギ酸溶液
使用した勾配は次のとおりであった：
【表２】
2012530107.tif 000007
2012530107.tif 000008
ＵＶ検出は、２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長からの合計シグナルであった。
ＭＳ条件
ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ
イオン化モード：オルタネートスキャン陽性及び陰性エレクトロスプレー
スキャン範囲：１００〜１０００ＡＭＵ
スキャン時間：０．５０秒
インタースキャンディスプレー：０．２０秒
【００７５】
ＨｐＨ法
ＬＣ条件
ＵＰＬＣ法を、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラム（５０ｍｍ×２．１ｍｍ、ｉ．ｄ．１．７μｍ充填直径）上、４０℃で実施した。
使用した溶媒は次のとおりであった：
Ａ＝１０ｍＭの水中炭酸水素アンモニウム（アンモニア溶液でｐＨ１０に調節）
Ｂ＝アセトニトリル
使用した勾配は次のとおりであった：
【表３】
2012530107.tif 000009
ＵＶ検出は２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長から得られた合計シグナルであった。
ＭＳ条件
ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ
イオン化モード：オルタネートスキャン陽性及び陰性エレクトロスプレー
スキャン範囲：１００〜１０００ＡＭＵ
スキャン時間：０．２７秒
インタースキャンディスプレー：０．１０秒
【００７６】
ＭＤＡＰ法
ホルメート法
ＬＣ条件
ＨＰＬＣ分析を、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム（１００ｍｍ×１９ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）上又はＳｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム（１５０ｍｍ×３０ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）上のいずれかで周囲温度にて実施した。
使用した溶媒は次のとおりであった：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖの水中ギ酸溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖのアセトニトリル中ギ酸溶液
１５又は２５分（延長試験）のいずれかにわたる勾配として、２０ｍｌ／分（１００ｍｍ×１９ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）又は４０ｍｌ／分（１５０ｍｍ×３０ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）の流量で実施
ＵＶ検出は２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長から得られた合計シグナルであった。
ＭＳ条件
ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ
イオン化モード：オルタネートスキャン陽性及び陰性エレクトロスプレー
スキャン範囲：１００〜１０００ＡＭＵ
スキャン時間：０．５０秒
インタースキャンディスプレー：０．２０秒
【００７７】
ＨｐＨ法
ＬＣ条件
ＨＰＬＣ分析を、Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（１００ｍｍ×１９ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）又はＸｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（１００ｍｍ×３０ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）のいずれかで周囲温度にて実施した。
使用した溶媒は次のとおりであった：
Ａ＝１０ｍＭの水中重炭酸アンモニウム、アンモニア溶液でｐＨ１０に調節
Ｂ＝アセトニトリル
１５又は２５分（延長試験）のいずれかにわたる勾配として、２０ｍｌ／分（１００ｍｍ×１９ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）又は４０ｍｌ／分（１００ｍｍ×３０ｍｍ、ｉ．ｄ．５μｍ充填直径）の流量で実施。
ＵＶ検出は２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長から得られた合計シグナルであった。
ＭＳ条件
ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ
イオン化モード：オルタネートスキャン陽性及び陰性エレクトロスプレー
スキャン範囲：１００〜１０００ＡＭＵ
スキャン時間：０．５０秒
インタースキャンディスプレー：０．２０秒
【００７８】
一般化学
以下で記載する方法は例示目的で記載され、実施例の調製における中間体は、必ずしも記載された特定のバッチから調製したものでなくてもよい。
【００７９】
調製１
５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン
【化５】
2012530107.tif 000010
フラスコに、３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸（ＣＡＳ番号：２１３５９８−０７−３、Ｂｏａｏｐｈａｒｍａから市販、２５ｇ、１１６ミリモル）及びヒドラジンカルボチオアミド（ＣＡＳ番号：７９−１９−６、Ａｌｄｒｉｃｈから市販、１５．９２ｇ、１７５ミリモル）を入れた。オキシ塩化リン（ＣＡＳ番号：１００２５−８７−３、Ａｌｄｒｉｃｈから市販、５０ｍｌ、５５６ミリモル）を次に注意深く添加し、結果として得られた混合物を２０分間室温で、９０℃で１８時間攪拌した。混合物を、氷と水との激しく撹拌された混合物（１ｌ）に非常に注意深く滴下した。結果として得られた混合物を１０ＭのＮａＯＨ水溶液で塩基性化（ｐＨ１２）し、氷／水浴で冷却しながら３０分間撹拌した。残存する油状スラッジをろ過により集め、次いでＤＣＭ（１ｌ）中に溶解させた。有機相を生理食塩水で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮して、５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（９．８ｇ、３１．２％収率）を褐色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップ（調製２）で使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２７０．０５
【００８０】
調製１  別の手順
５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン
【化６】
2012530107.tif 000011
リン酸トリクロリド（１７．４１ｇ、１１４ミリモル）をヒドラジンカルボチオアミド（５．１７ｇ、５６．８ミリモル）及び３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド（１４ｇ、３７．８ミリモル）の混合物に添加し、混合物を９０℃で３時間加熱した。試料を採取し、氷と１０ＭのＮａＯＨとの混合物中にクエンチし、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。熱のスイッチを切り、混合物を室温で一晩静置し、次いで氷浴中で冷却して、５Ｍの冷ＮａＯＨ溶液に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（２×２００ｍＬ）で抽出し、溶媒を乾燥し、そして蒸発させて、ベージュ色固体を得た。生成物をエタノール（１２０ｍＬ）中ですべて溶解するまで加熱し、次いで氷浴中で冷却し、沈殿した固体を濾過により集め、真空中で乾燥して、５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（４．６５ｇ、４５．６％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．７９（ｄ，  Ｊ＝２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６３（ｄｄ，  Ｊ＝８．７，  １．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０（ｓ，  ２Ｈ），  ７．２５（ｄ，  Ｊ＝８．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７５（ｓｐｔ，  Ｊ＝５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．３２（ｄ，  Ｊ＝５．８  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【００８１】
調製２
２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール
【化７】
2012530107.tif 000012
フラスコに、臭化第２銅（１５．７３ｇ、７０．４ミリモル）及び亜硝酸ｔ−ブチル（７．２６ｇ、７０．４ミリモル）を入れ、次いでＣＨ３ＣＮ（３００ｍＬ）で満たした。結果として得られた混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで少量に分けた５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（調製１）（９．５ｇ、３５．２ミリモル）のスラリーで１時間にわたって処理した。結果として得られた混合物を室温で１時間、次いで６０℃で１時間攪拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残留物をＡｃＯＥｔ（４００ｍＬ）中に溶解させ、水（５０ｍＬ）を添加して、濃厚懸濁液を得、これを、セライトを通してろ過した。濾液を水（４００ｍＬ）、次いで生理食塩水（３００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：０から３０％の勾配）により精製して、２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール（４．４ｇ、３７％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．３３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３３、３３５
【００８２】
調製２  別の手順
２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール
【化８】
2012530107.tif 000013
臭化第２銅（８．２０ｇ、３６．７ミリモル）及び亜硝酸１，１−ジメチルエチル（４．３６ｍｌ、３６．７ミリモル）をアセトニトリル中に溶解させ、混合物を１０分間撹拌し、次いで５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（調製１）（４．５ｇ、１６．６８ミリモル）を少量ずつ３０分にわたって添加した。暗褐色混合物を室温で１時間攪拌した。混合物を真空中で蒸発させて、黒色残留物を得た。これをＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で摩砕し、薄いセライトパッドを通してろ過し、パッドをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で洗浄し、合した溶媒を２ＭのＨＣｌ（１００ｍＬ）及び生理食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、そして蒸発させて、２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾールを褐色固体（５．４２ｇ、９７％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．３２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３５、３３７
１Ｈ  ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．９４（ｄ，  Ｊ＝２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７６（ｄｄ，  Ｊ＝８．６，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２（ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６９（ｓｐｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．４４（ｄ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【００８３】
調製３
５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾン
【化９】
2012530107.tif 000014
ヒドラジン水和物（１．５９０ｍｌ、５１．０ミリモル）を、２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール（調製２）（１．７０３ｇ、５．１０ミリモル）のｉ−ＰｒＯＨ（２０ｍＬ）中混合物に添加し、結果として得られた混合物を１０５℃、窒素下で２４時間撹拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：０から５％の勾配）により残留物を精製して、５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾン（６１７ｍｇ、４２％）をクリームイエロー色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２８５、２８７
【００８４】
調製３  別の手順
５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾン
【化１０】
2012530107.tif 000015
２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール（３３ｇ、９９ミリモル）をイソプロパノール（３００ｍＬ）中に窒素下で懸濁させた。ヒドラジン水和物（３１．０ｍｌ、９８９ミリモル）を添加し、混合物を１０５℃まで一晩加熱し、水（１００ｍＬ）を添加し、溶媒を真空中で蒸発させて、半分の容積にし、そして固体生成物をろ過により集めて、５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾンをオレンジ色固体（２３．６ｇ、８４％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９５分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２８５、２８７
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００  ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．７９（ｄ，  Ｊ＝２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６３（ｄｄ，  Ｊ＝８．７，  １．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０（ｓ，  ２Ｈ），  ７．２５（ｄ，  Ｊ＝８．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７５（ｓｐｔ，  Ｊ＝５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．３２（ｄ，  Ｊ＝５．８  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【００８５】
調製４
３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化１１】
2012530107.tif 000016
４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（ＣＡＳ番号：７９０９９−０７−３、Ａｌｄｒｉｃｈから市販、５ｇ、２５．０９ミリモル）及びピロリジン（４．１５ｍｌ、５０．２ミリモル）をトルエン（３０ｍＬ）中に溶解させ、結果として得られた混合物を、ディーン・スターク装置を用いて窒素下で３時間還流させ、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残留物を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）中に溶解させ、次いで無水酢酸（５．２１ｍｌ、５５．２ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を室温、窒素下で一晩静置した。水（６ｍｌ、３３３ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を１時間還流させ、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残留物を水（２０ｍＬ）中に溶解させ、水性相をＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で２回抽出した。合した有機抽出物を５％ｗ／ｗのＨＣｌ水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、真空中で濃縮して、３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（５．３ｇ、８８％）を黄色油状物として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
【００８６】
調製４  別の手順
３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化１２】
2012530107.tif 000017
４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（２３．６ｇ、１１８ミリモル）及びピロリジン（１９．５９ｍｌ、２３７ミリモル）をトルエン（３０ｍＬ）中に溶解させ、反応混合物を１３０℃、Ｎ２下で、ディーン・スタークトラップを用いて加熱して、水を除去した。５時間後、反応をＲＴまで冷却させ、溶媒を蒸発させて、黄色油状物を得た。これを１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中に溶解させ、次いで無水酢酸（２４．６ｍｌ、２６１ミリモル）を添加し、反応を室温、Ｎ２下で一晩静置した。水（３０．０ｍｌ、１６６５ミリモル）を赤橙色溶液に添加し、混合物をＮ２下で３時間還流加熱し、次いで反応を室温まで冷却させた。混合物を約５０％の容積まで蒸発させ、この溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機相を５％のＨＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして蒸発させて、３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（２３．５ｇ、８２％収率）を黄色油状物として得、これを精製することなく使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０２分；［Ｍ−Ｈ］−＝２４０
１Ｈ  ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）１５．６７（ｓ，  １Ｈ），  ４．１９（ｂｒ．  ｓ．，  ２Ｈ），  ３．５９（ｔ，  Ｊ＝５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４５（ｔ，  Ｊ＝５．８  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ２．１４（ｓ，  ３Ｈ），  １．４９（ｓ，  ９Ｈ）
【００８７】
調製５
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化１３】
2012530107.tif 000018
５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾン（調製３）（２６０ｍｇ、０．９１２ミリモル）及び３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製４）（２００ｍｇ、０．８２９ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５ｍＬ）中に溶解させ、結果として得られた混合物を１５０℃で１時間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：５から５０％の勾配）により残留物を精製して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（２４５ｍｇ、６０％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．５８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８９．９、４９１．９
【００８８】
調製５  別の手順
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化１４】
2012530107.tif 000019
３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製４）（１９．５７ｇ、８１ミリモル）及び５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２（３Ｈ）−オンヒドラゾン（調製３）（２３．１ｇ、８１ミリモル）をエタノール（３００ｍＬ）中に懸濁させ、酢酸（０．５ｍＬ）を添加し、次いで懸濁液を３時間還流加熱した。混合物を４０分にわたって室温まで冷却させ、次いでろ過し、固体をエタノールで洗浄して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（１９．２ｇ、４８．３％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．５７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９０、４９２
１Ｈ  ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．９７（ｄ，  Ｊ＝２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７６（ｄｄ，  Ｊ＝８．６，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３（ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６８（ｓｐｔ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３５  −  ４．５４（ｍ，  ２Ｈ），  ３．６０  −  ３．８８（ｍ，  ２Ｈ），  ２．８１（ｂｒ．  ｓ．，  ２Ｈ），  ２．７０（ｓ，  ３Ｈ），  １．５１（ｓ，  ９Ｈ），  １．４４（ｄ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【００８９】
調製６
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル
【化１５】
2012530107.tif 000020
ＤＢＵ（０．０８５ｍｌ、０．５６２ミリモル）を、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（７３ｍｇ、０．１８７ミリモル）及び２−プロペン酸１，１−ジメチルエチル（０．１３６ｍｌ、０．９３６ミリモル）のＤＭＦ（５ｍＬ）中溶液に、室温、窒素下で添加した。結果として得られた混合物をこの温度で２１時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＡｃＯＥｔ中に溶解させ、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。水性相をＡｃＯＥｔで抽出し、合した有機相を飽和生理食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（２５ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：５０％）により残留物を精製して、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（８４ｍｇ、８７％）を淡黄色油状物として得、これは静置すると凝固した。
ＬＣＭＳ：保持時間１．１２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１８、５２０
【００９０】
調製６  別の手順
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル
【化１６】
2012530107.tif 000021
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（３１．４ｇ、７２．５ミリモル）及び２−プロペン酸１，１−ジメチルエチル（１３．９３ｇ、１０９ミリモル）及び２，３，４，６，７，８，９，１０−オクタヒドロピリミド［１，２−ａ］アゼピン（３３．１ｇ、２１７ミリモル）をＤＭＦ中で合し、一晩室温で撹拌した。混合物を水（７００ｍｌ）で希釈して、高密度の白色固体を得、これをろ過により集め、水（１００ｍｌ）で洗浄した。生成物を、若干困難であったが熱ＥｔＯＡｃ（１Ｌ）中に溶解させ、次いで水（２×３００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、そして蒸発させて、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（３６．８ｇ、９８％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．１３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１８，  ５２０
１Ｈ  ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．９８（ｄ，  Ｊ＝２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７６（ｄｄ，  Ｊ＝８．６，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３（ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６８（ｓｐｔ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．５１（ｓ，  ２Ｈ），  ２．９２（ｔ，  Ｊ＝７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７９  −  ２．８７（ｍ，  ４Ｈ），  ２．６６（ｓ，  ３Ｈ），  ２．５３（ｔ，  Ｊ＝７．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．４７（ｓ，  ９Ｈ），  １．４４（ｄ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【００９１】
調製７
５−（５−アミノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化１７】
2012530107.tif 000022
フラスコに、３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸（ＣＡＳ番号：２５８２７３−３１−３、Ｂｏａｏｐｈａｒｍａから市販、２０．９ｇ、１０２ミリモル）及びヒドラジンカルボチオアミド（ＣＡＳ番号：７９−１９−６、Ａｌｄｒｉｃｈから市販、１３．９ｇ、１５３ミリモル）を入れ、次いでオキシ塩化リン（ＣＡＳ番号：１００２５−８７−３、Ａｌｄｒｉｃｈから市販、９０ｇ、５８７ミリモル）を添加した。結果として得られた混合物を９０℃で３時間攪拌し、次いで室温まで冷却し、温度が決して３５℃より高く上昇しないように、氷浴で冷却した５ＭのＮａＯＨ水溶液に、非常に慎重に少量ずつ添加した。結果として得られた混合物をｐＨ１０まで塩基性化し（５ＭのＮａＯＨ水溶液を使用）、次いで３０分間撹拌した。形成された沈殿をろ過により集め、ＤＣＭ（１ｌ）及びＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中に溶解させた。有機相を水（５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮して、５−（５−アミノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（２６．３ｇ、９９％収率）を淡黄色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２６１．１３
【００９２】
調製８
５−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化１８】
2012530107.tif 000023
臭化第２銅（１９．６３ｇ、８８ミリモル）及び亜硝酸ｔ−ブチル（１０．４４ｍｌ、８８ミリモル）をＣＨ３ＣＮ（４００ｍＬ）中に溶解させ、結果として得られた混合物を室温で１０分間撹拌した。５−（５−アミノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製７）（１３ｇ、４０．０ミリモル）を次いで少量ずつ３０分にわたって添加した。結果として得られた混合物を室温で１時間、７０℃で２時間攪拌し、次いで冷却し、そして真空中で濃縮した。残留物をＡｃＯＥｔ（６００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中に溶解させ、還流温度で１時間攪拌した。不溶物質を、シリカパッドを通してろ過し、ＡｃＯＥｔ（２×２００ｍＬ）で洗浄した。合した有機相を１ＭのＨＣｌ水溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。物質をＤＣＭ（１００ｍＬ）中シリカカートリッジ（３３０ｇ）上に負荷し、フラッシュクロマトグラフィー（ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：０から１００％の勾配）により精製して、５−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリルを淡黄色固体（８．８ｇ、６７．９％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．１４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３２４、３２６
【００９３】
調製９
５−（５−ヒドラジノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化１９】
2012530107.tif 000024
５−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製８）（０．５ｇ、１．５４２ミリモル）及びヒドラジン水和物（０．２４０ｍｌ、７．７１ミリモル）のｉ−ＰｒＯＨ（１０ｍＬ）中溶液を、１００℃、窒素下で撹拌した。２時間後、反応混合物は凝固し、これを室温まで冷却した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）を添加し、結果として得られた溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。相分離器カートリッジを用いて二層を分離し、有機相を真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：２．５から１０％の勾配）により残留物を精製して、５−（５−ヒドラジノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（２７２ｍｇ、６４％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２７６
【００９４】
調製９  別の手順
５−（５−ヒドラジノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化２０】
2012530107.tif 000025
５−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製８）（７．８ｇ、２４．０６ミリモル）をイソプロパノール（６０ｍＬ）中に窒素下で懸濁させた。ヒドラジン水和物（７．５５ｍｌ、２４１ミリモル）を添加し、混合物を１０５℃まで一晩加熱した。溶媒を真空中で蒸発させ、水を添加し、そして固体生成物をろ過により集めて、５−（５−ヒドラジノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリルを淡緑色固体（６．２ｇ、９４％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８５分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝２７６
【００９５】
調製１０
２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化２１】
2012530107.tif 000026
５−（５−ヒドラジノ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製９）（２７４ｍｇ、０．９９５ミリモル）及び３−アセチル−４−オキソ−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製４）（２４０ｍｇ、０．９９５ミリモル）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５ｍＬ）中混合物を１５０℃で１時間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（２５ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：１０から５０％の勾配）により残留物を精製して、２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（１６５ｍｇ、３４％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．４２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８０．９
【００９６】
調製１１
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル
【化２２】
2012530107.tif 000027
ＤＢＵ（０．０５３ｍｌ、０．３５５ミリモル）を、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（４５ｍｇ、０．１１８ミリモル）及び２−プロペン酸１，１−ジメチルエチル（０．０８６ｍｌ、０．５９１ミリモル）のＤＭＦ（５ｍＬ）中溶液に室温、窒素下で添加し、結果として得られた混合物をこの温度で一晩撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液間で分配し、層を分離した。相分離器カートリッジを用いて有機相を乾燥し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（１２ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：１０から７０％の勾配）により残留物を精製して、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（４６ｍｇ、７６％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０９．０
【００９７】
調製１２
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ｂ）
【化２３】
2012530107.tif 000028
２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール（調製２）（２ｇ、５．９９ミリモル）、２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（ＣＡＳ番号：２３０３０１−１１−８、Ｂｉｏｂｌｏｃｋｓから市販、１．６０６ｇ、７．１９ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．１１４ｇ、０．５９９ミリモル）及びＣｓ２ＣＯ３（３．９１ｇ、１１．９９ミリモル）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中混合物を１６０℃で１時間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで水（４００ｍＬ）及びＡｃＯＥｔ（４００ｍＬ）間で分配した。２層を分離し、有機相を水（４００ｍＬ）で洗浄し、次いで相分離カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮した。２０カラム容積の溶媒によりシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（６５ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：７から２０％の勾配）によって残留物を精製した。適切な画分を合し、濃縮して、異性体の混合物を得た。１８カラム容積の溶媒によりシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：１０から２０％の勾配）によって物質をさらに精製した。適切な画分を合し、濃縮して、１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，３ａ，４，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ｂ、２１４ｍｇ、９％；ＬＣＭＳ：保持時間１．５８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７６、４７８）をクリーム色固体として得、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ａ、２４７ｍｇ、８％；ＬＣＭＳ：保持時間１．５５分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７６、４７８）を白色固体として得た。
【００９８】
調製１３
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル
【化２４】
2012530107.tif 000029
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンビストリフルオロ酢酸塩（実施例６）（１００ｍｇ、０．１６６ミリモル）、４−ブロモブタン酸エチル（０．０７２ｍｌ、０．４９７ミリモル）及びＫ２ＣＯ３（５７．２ｍｇ、０．４１４ミリモル）のＤＭＦ（３ｍｌ）中混合物を８０℃で１時間撹拌し、次いでさらなる４−ブロモブタン酸エチル（０．０２４ｍｌ、０．１６６ミリモル）を添加した。結果として得られた混合物を８０℃でさらに３０分間撹拌し、次いでＡｃＯＥｔ及び水間で分配した。有機相を水で洗浄し、次いで相分離器カートリッジに通し、有機相を真空中で濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏで摩砕し、形成された固体をろ過し、真空下（約１５ミリバール）で乾燥して、４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル（４６ｍｇ、５７％）をクリーム色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９０、４９２
【００９９】
調製１４
２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化２５】
2012530107.tif 000030
５−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製８）（７００ｍｇ、２．１５９ミリモル）、２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（ＣＡＳ番号：２３０３０１−１１−８、Ｂｉｏｂｌｏｃｋｓから市販、５７９ｍｇ、２．５９ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（４１．１ｍｇ、０．２１６ミリモル）及びＣｓ２ＣＯ３（１４０７ｍｇ、４．３２ミリモル）のＤＭＦ（１４ｍｌ）中混合物を１６０℃で６０分間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いでさらに３０分間１６０℃で撹拌した。混合物を水（１５０ｍＬ）及びＡｃＯＥｔ（１５０ｍＬ）間で分配した。２相を分離し、水性相をＡｃＯＥｔ（１５０ｍＬ）で抽出した。合した有機相を、相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮した。１５カラム体積によりシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：１０から４０％の勾配）によって残留物を精製した。１５カラム体積によりさらにシリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（２５ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：１０から３５％の勾配）によって物質を精製し、適切な画分を合して、２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（３１５ｍｇ、３１％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．３９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６７．２
【０１００】
調製１５
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸エチル
【化２６】
2012530107.tif 000031
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロ酢酸塩（実施例１１）（８０ｍｇ、０．１６７ミリモル）、ＤＢＵ（０．０７５ｍｌ、０．５００ミリモル）及び２−プロペン酸エチル（０．０９０ｍｌ、０．８３３ミリモル）の混合物をＤＭＦ（７ｍｌ）中、室温で一晩撹拌し、次いでＡｃＯＥｔ及び水間で分配した。有機相を水で洗浄し、次いで相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏで摩砕し、形成された沈殿をろ過して、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸エチル（１９ｍｇ、２４％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９６分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６７．１６
【０１０１】
調製１６
４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル
【化２７】
2012530107.tif 000032
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロ酢酸塩（実施例１１）（５０ｍｇ、０．１０４ミリモル）、４−ブロモブタン酸エチル（０．０４５ｍｌ、０．３１２ミリモル）及びＫ２ＣＯ３（３６．０ｍｇ、０．２６０ミリモル）のＤＭＦ（３ｍＬ）中混合物を８０℃で１時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ及び水間で分配した。有機相を水で洗浄し、次いで相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮して、４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル（１６４ｍｇ、１０７％）を黄色油状物として得、これをさらに精製することなく実施例１３の調製で使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８１．１８
【０１０２】
調製１７
４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル
【化２８】
2012530107.tif 000033
０℃の２，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン塩酸塩（ＣＡＳ番号：９２８７７４−９８−５、Ａｌｌｉｃｈｅｍから市販、１ｇ、５．７６ミリモル）のＤＭＦ（６ｍＬ）及び水（２ｍＬ）中溶液をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．３３７ｍｌ、５．７６ミリモル）及び２ＮのＮａＯＨ水溶液（２．８８ｍｌ、５．７６ミリモル）で処理した。結果として得られた混合物を２時間激しく撹拌し、室温まで温め、次いで真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液間で分配し、層を分離した。相分離器カートリッジを用いて有機相を乾燥し、真空中で濃縮して、４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（１．２５ｇ、８８％）を黄色油状物として得、これを次のステップでさらに精製することなく使用した。
【０１０３】
調製１８
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（１Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ｂ）
【化２９】
2012530107.tif 000034
２−ブロモ−５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール（調製２）（２３６ｍｇ、０．７０８ミリモル）、Ｃｓ２ＣＯ３（３０８ｍｇ、０．９４４ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（２７．０ｍｇ、０．１４２ミリモル）及び４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１７）（１１２ｍｇ、０．４７２ミリモル）のＤＭＦ（２ｍｌ）中混合物を１５０℃で１時間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残留物をＡｃＯＥｔ及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液間で分配し、２層を分離した。水性相をＡｃＯＥｔで抽出し、合した有機相を生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空中で濃縮した。シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー（２５ｇ、ｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ：３から５０％の勾配）により残留物を精製して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ａ）と１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（１Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ｂ）（９３ｍｇ、４０％）との混合物（１Ｈ  ＮＭＲによると２：１比）を灰白色固体として得、これを次のステップでさらに精製することなく使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間１．５８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９０、４９２
【０１０４】
調製１９
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ｂ）
【化３０】
2012530107.tif 000035
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（１Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１８ｂ）（２：１比）（９３ｍｇ、０．１９０ミリモル）の１，４−ジオキサン（２ｍｌ）中懸濁液を室温で、４ＮのＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液（１ｍｌ、４．００ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物をこの温度で２時間攪拌した。さらに４ＮのＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液（２ｍｌ、８ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物をさらに３．５時間攪拌した。さらに４ＮのＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液（１ｍｌ、４ミリモル）を再度添加し、混合物を４８時間室温で撹拌し、次いでＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で希釈し、ＳＣＸカートリッジ（２０ｇ）上に負荷し、次いで連続してＭｅＯＨ（７５ｍＬ）及び２ＮのＮＨ３のＭｅＯＨ中溶液（７５ｍＬ）で溶出させた。アンモニア画分を真空中で濃縮して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ｂ）（８０ｍｇ、１０８％）の混合物（１Ｈ  ＮＭＲによると４：３比）を無色泡状物として得、これを次のステップでさらに精製することなく使用した。
【０１０５】
調製２０
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸メチル
【化３１】
2012530107.tif 000036
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ａ）及び１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン（調製１９ｂ）（４：３比）（８０ｍｇ、０．２０５ミリモル）、４−ブロモブタン酸エチル（０．０３５ｍｌ、０．２４６ミリモル）及びＫ２ＣＯ３（５６．７ｍｇ、０．４１０ミリモル）のＤＭＦ（３．５ｍｌ）中混合物を１００℃、窒素下で２．５時間攪拌し、次いで室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ（２０ｍｌ）中に溶解させ、有機相を水（２０ｍｌ）で洗浄した。層を分離し、相分離器カートリッジを用いて有機相を乾燥し、そして真空中で濃縮した。１８回注入（１００ｕＬ、ＤＭＳＯ／ＭｅＯＨ（１：９９）、４．７ｍｇのローディング）により、勾配３０〜６０Ｂ％を用いて２４分にわたって２０ｍＬ／分の流量、周囲温度で、Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢフェニルカラム（７．０ｕｍ、１５０×２１．２ｍｍＩＤ）を用いた逆相質量分離分取ＨＰＬＣにより、残留物を精製した（移動相「Ａ」：０．１％ｖ／ｖ水中ＴＦＡ；移動相「Ｂ」：ＭｅＣＮ＋０．１％ｖ／ｖのＴＦＡ）。適切な画分を濃縮して、４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸メチル（２３ｍｇ、２３％）を無色泡状物として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．１１分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９０．２
【０１０６】
調製２１
５−｛５−［５−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化３２】
2012530107.tif 000037
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３ａ）（２４５ｍｇ、０．５ミリモル）、２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−オン（３２２ｍｇ、２．５ミリモル）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（５２５ｍｇ、２．５ミリモル）のジクロロメタン（１０ｍｌ）中混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（３×１０ｍｌ）で抽出した。合した有機物を乾燥し、蒸発させた（２４５ｍｇ、１００％）。残留物をさらに精製することなく実施例２５ａの調製で使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９５
【０１０７】
調製２２
｛２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−オキソエチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
【化３３】
2012530107.tif 000038
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２ｍＬ）中Ｎ−ＢＯＣグリシン（２１．２６ｍｇ、０．１２１ミリモル）及びＨＡＴＵ（５７．７ｍｇ、０．１５２ミリモル）に、ＤＩＰＥＡ（０．０５３ｍｌ、０．３０３ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロアセテート（実施例３、別の調製法）（５０ｍｇ、０．１０１ミリモル）を添加し、反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。残留物をジクロロメタン（２×１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）間で分配した。有機物を合し、水（５×１０ｍＬ）で洗浄し、疎水性フリット上で乾燥し、そして蒸発させて、粗生成物｛２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−オキソエチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（８８ｍｇ、０．１４７ミリモル）を得、実施例３２の調製においてさらに精製することなく使用した。
ＬＣＭＳ：保持時間１．２３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３８
【０１０８】
調製２３
［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸１，１−ジメチルエチル
【化３４】
2012530107.tif 000039
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（５００ｍｇ、１．０１ミリモル）、ブロモ酢酸ｔ−ブチル（２０７ｍｇ、１．０６ミリモル）及び炭酸カリウム（４１９ｍｇ、３．０３ミリモル）のアセトニトリル（１５ｍＬ）中混合物を５０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応混合物を冷却し、水（１５ｍＬ）で希釈した。混合物を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合した抽出物を乾燥し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー［０〜３％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、生成物を無色泡状物（４７０ｍｇ、９４％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９５
【０１０９】
調製２４
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
【化３５】
2012530107.tif 000040
２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−オン（０．６６０ｇ、５．０７ミリモル）を、乾燥ジクロロメタン（ＤＣＭ）（５ｍＬ）中２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン塩酸塩（実施例１ｂ）（０．４７０ｇ、１．１０２ミリモル）に添加し、反応を室温で３０分間撹拌した。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１．０６０ｇ、５．００ミリモル）を次いで添加し、反応を一晩攪拌した。反応混合物を重炭酸ナトリウムの飽和溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出し、次いで減圧下で濃縮して、褐色がかった黄色の油状物を得、静置するとこれは固体（８２９ｍｇ）になった。固体を少量のＤＣＭ中に溶解させ、（１００ｇ）シリカカートリッジ上に負荷し、８カラム容積の酢酸エチル／シクロヘキサン勾配（３０〜８０％）及び２ＣＶの８０％酢酸エチル／シクロヘキサン混合物及び５ＣＶの酢酸エチル／シクロヘキサン勾配（８０〜１００％）で溶出させた。カートリッジを再度６ＣＶの酢酸エチル／シクロヘキサン勾配（８０〜１００％）で溶出させた。集めた純粋な画分を合し、減圧下で濃縮して、褐色がかった黄色の固体（３７４ｍｇ、５７％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０４、５０６
【０１１０】
実施例１ａ
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
【化３６】
2012530107.tif 000041
トリフルオロ酢酸（０．５ｍｌ、６．４９ミリモル）を、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製５）（２４５ｍｇ、０．５００ミリモル）のＤＣＭ（５ｍｌ）中溶液に室温、窒素下で添加し、結果として得られた混合物をこの温度で１時間攪拌した。さらに、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ、１２．９８ミリモル）を次いで添加し、結果として得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭとともに同時蒸発させ、高真空下で一晩乾燥した。試料をＤＣＭ中ＳＣＸカートリッジ（５０ｇ）上に負荷し、次いでＭｅＯＨで、続いて２ＮのＮＨ３のＭｅＯＨ中溶液で溶出させた。適切な画分を合し、真空中で濃縮して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（１８０ｍｇ、９２％）を黄色油状物として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９０．１０
【０１１１】
実施例１ｂ
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン塩酸塩
【化３７】
2012530107.tif 000042
ＤＣＭ（５ｍＬ）中２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（３５．５ｇ、７２．４ミリモル）を、ＨＣｌ（１８１ｍｌ、７２４ミリモル）のジオキサン中溶液に添加し、混合物を３０分間撹拌し、次いでエーテルで希釈し、混合物を２０分間撹拌した。懸濁液をろ過し、そして固体生成物をろ過により集めて、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン塩酸塩を無色固体（３２．５ｇ、９５％収率）として得た。
ＬＣＭＳ：ＨｐＨ法  保持時間１．２５分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９０、３９２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  １．３４（ｄ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ６  Ｈ）２．６５（ｓ，  ３  Ｈ）２．９８（ｔ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ２  Ｈ）３．４０  −  ３．４８（ｍ，  ２  Ｈ）３．５７（ｓ，  ２  Ｈ）４．２１（ｓ，  ２  Ｈ）４．７３  −  ４．９３（ｍ，  １  Ｈ）７．３６（ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １  Ｈ）７．９０（ｄｄ，  Ｊ＝８．６，  ２．３  Ｈｚ，  １  Ｈ）８．０４（ｄ，  Ｊ＝２．３  Ｈｚ，  １  Ｈ）９．５２（ｂｒ．  ｓ．，  ２  Ｈ）
【０１１２】
実施例２ａ
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸トリフルオロ酢酸塩
【化３８】
2012530107.tif 000043
トリフルオロ酢酸（０．５ｍｌ、６．４９ミリモル）を、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（調製６）（８４ｍｇ、０．１６２ミリモル）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に室温、窒素下で添加し、結果として得られた混合物をこの温度で５時間攪拌し、次いでＤＣＭで希釈し、真空中で濃縮した。残留物をＡｃＯＥｔとｃ−ヘキサンとの混合物で摩砕し、形成された固体をろ過し、真空下で乾燥して、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸トリフルオロ酢酸塩（６３ｍｇ、６８％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９６分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６２．１４
【０１１３】
実施例２ｂ
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸塩酸塩
【化３９】
2012530107.tif 000044
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（調製６）（３６ｇ、６９．５ミリモル）をＴＨＦ（５００ｍＬ）と２ＭのＨＣｌ（６００ｍＬ）との混合物中に懸濁させ、濃厚懸濁液を５０℃で１８時間加熱し、白色懸濁液を得た。混合物を室温まで冷却し、次いでろ過し、固体を水（２×５０ｍＬ）で洗浄して、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸塩酸塩を無色固体（３０．３５ｇ、８８％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９０分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６２、４６４
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ８．０４（１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．５  Ｈｚ）７．９０（１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝９．０，  ２．５  Ｈｚ）７．３６（１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝９．０  Ｈｚ）４．８３（１  Ｈ，  ｓｐｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ）３．５７  −  ４．７０（４  Ｈ，  ｍ）３．４０  −  ３．５２（２  Ｈ，  ｍ）３．０８（２  Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ）２．９１（２  Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝７．５  Ｈｚ）２．６５（３  Ｈ，  ｓ）１．３４（６  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ）
【０１１４】
実施例３ａ
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル
【化４０】
2012530107.tif 000045
トリフルオロ酢酸（０．５０３ｍｌ、６．５２ミリモル）を、２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１０）（１６５ｍｇ、０．３４３ミリモル）のＤＣＭ（２ｍＬ）中溶液に室温、窒素下で添加し、結果として得られた混合物をこの温度で２時間撹拌し、次いでＤＣＭ（１０ｍｌ）で希釈し、真空中で濃縮した。残留物をＳＣＸカートリッジ（１０ｇ）上に負荷し、次いでＭｅＯＨ、続いて２ＮのＮＨ３のＭｅＯＨ中溶液で溶出させた。合したアンモニア画分を真空中で濃縮して、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（１１９ｍｇ、９１％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３８１．１８
【０１１５】
実施例３ｂ
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロアセテート
【化４１】
2012530107.tif 000046
ＴＦＡ（２０ｍＬ、２６０ミリモル）を２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１０）（５．３ｇ、１１．０３ミリモル）のＤＣＭ（２００ｍＬ）中溶液に添加し、溶液を３時間撹拌し、次いで真空中で蒸発させ、残留物をメタノール（２５ｍＬ）中に溶解させ、エーテル（７５ｍＬ）で希釈した。結果として得られた懸濁液を２０分間撹拌し、次いでろ過して、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロアセテートをクリーム色固体（４．３０ｇ、７９％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３８１
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，  ４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）９．１０  −  ９．２７（ｍ，  ２Ｈ），  ８．３４（ｄ，  Ｊ＝２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２３  −  ８．２７（ｍ，  １Ｈ），  ７．４８（ｄ，  Ｊ＝９．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．８７  −  ５．０１（ｍ，  １Ｈ），  ４．２４（ｓ，  ２Ｈ），  ３．４４  −  ３．５１（ｍ，  ２Ｈ），  ２．９４  −  ３．０２（ｍ，  ２Ｈ），  ２．６６（ｓ，  ３Ｈ），  １．３７（ｄ，  Ｊ＝６．１  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【０１１６】
実施例４
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸トリフルオロ酢酸塩
【化４２】
2012530107.tif 000047
トリフルオロ酢酸（０．３４８ｍｌ、４．５２ミリモル）を、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸１，１−ジメチルエチル（調製１１）（４６ｍｇ、０．０９０ミリモル）のＤＣＭ（２ｍｌ）中溶液に、室温、窒素下で添加し、結果として得られた混合物をこの温度で７時間攪拌し、次いでＤＣＭで希釈し、真空中で濃縮した。残留物をｃ−ヘキサン／ＡｃＯＥｔ１：１で摩砕して、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸トリフルオロ酢酸塩（２５ｍｇ、４８％）を灰白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８６分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５３．０
【０１１７】
実施例５
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパンアミド
【化４３】
2012530107.tif 000048
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（２５ｍｇ、０．０６６ミリモル）及び２−プロペンアミド（４．６７ｍｇ、０．０６６ミリモル）をアセトニトリル（１．５ｍＬ）中に溶解させた。シリカゲル（５００ｍｇ、８．３２ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を６０℃、窒素下で５時間攪拌し、次いで室温で１６時間撹拌した。さらに２−プロペンアミド（１ｍｇ、０．０１４ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を６０℃、窒素下で４時間攪拌し、次いでセライトカラムを通してろ過した。不溶物質をＤＣＭ、ＭｅＯＨ及びＡｃＯＥｔで洗浄し、合した有機相を真空中で濃縮した。残留物をＭＤＡＰ（ホルメート法）により精製して、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパンアミド（２５ｍｇ、８４％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５２．０
【０１１８】
実施例６ａ
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンビストリフルオロ酢酸塩
【化４４】
2012530107.tif 000049
トリフルオロ酢酸（２．０ｍｌ）を、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ａ）（９７０ｍｇ、２．０３８ミリモル）のＤＣＭ（２０ｍｌ）中溶液に添加し、結果として得られた混合物を室温で３時間攪拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏで摩砕し、形成された沈殿をろ過し、真空下（約１５ミリバール）で乾燥して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンビストリフルオロ酢酸塩（９５３ｍｇ、７７％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７６．１６
【０１１９】
実施例６ｂ
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩
【化４５】
2012530107.tif 000050
トリフルオロ酢酸（０．１４２ｍｌ、１．８３８ミリモル）を、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ａ）（３５ｍｇ、０．０７４ミリモル）のＤＣＭ（２ｍｌ）中溶液に添加し、結果として得られた混合物を室温で１６時間攪拌し、次いで真空中で濃縮して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩（３５ｍｇ、９７％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０４分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７６．２０
【０１２０】
実施例７
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
【化４６】
2012530107.tif 000051
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル（調製１３）（４５ｍｇ、０．０９２ミリモル）のＴＨＦ）（２ｍＬ）及び水（１．０ｍＬ）中溶液をＬｉＯＨ（４．４ｍｇ、０．１８４ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物を室温で２時間攪拌し、次いでＡｃＯＥｔ中に溶解させた。有機相を連続して飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、次いで水で洗浄した。有機相及び水を、相分離器カートリッジを用いて分離し、そして有機相を真空中で濃縮して、４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸（２６ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６２．２１
【０１２１】
実施例８
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
【化４７】
2012530107.tif 000052
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩（実施例６）（３２ｍｇ、０．０８５ミリモル）、２−プロペン酸１，１−ジメチルエチル（０．０２５ｍｌ、０．１７０ミリモル）及びトリエチルアミン（０．０３６ｍｌ、０．２５５ミリモル）のｎ−ＢｕＯＨ（１．５ｍＬ）及びＴＨＦ（０．５ｍＬ）中混合物を１００℃で２時間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却し、ＳＣＸカラム（５ｇ）上に負荷し、次いでＭｅＯＨ（１００ｍＬ）及び１ＭのＮＨ３のＭｅＯＨ中溶液（１００ｍＬ）で連続して溶出させた。アンモニア画分を真空中で濃縮し、残留物をＤＣＭ（１ｍＬ）中に溶解させ、トリフルオロ酢酸（９．７１ｍｇ、０．０８５ミリモル）で処理した。結果として得られた混合物を室温で１時間攪拌し、次いで真空中で濃縮した。ＭＤＡＰ（ホルメート法）により残留物を精製して、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸（８ｍｇ、２１％）を白色油性固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９６分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４８．２
【０１２２】
実施例９
３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１−プロパノール
【化４８】
2012530107.tif 000053
室温、窒素下の２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンビストリフルオロ酢酸塩（実施例６）（３０ｍｇ、０．０５０ミリモル）のＤＭＦ（１．５ｍｌ）中溶液を、水素化ナトリウム（鉱油中６０％ｗ／ｗ、６．９５ｍｇ、０．１７４ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物をこの温度で３０分間撹拌した。３−ブロモ−１−プロパノール（４．７８μｌ、０．０５５ミリモル）を次いで添加し、結果として得られた混合物をこの温度で４０時間攪拌した。さらに３−ブロモ−１−プロパノール（４．３４μｌ、０．０５０ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を室温でさらに１６時間攪拌し、次いでＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を連続して飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及び生理食塩水で洗浄し、相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏで摩砕し、形成された固体をろ過し、真空下（約１５ミリバール）で乾燥して、３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１−プロパノール（１．１ｍｇ、５％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３４．１０
【０１２３】
実施例１０
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−［２−（メチルスルホニル）エチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン
【化４９】
2012530107.tif 000054
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンビストリフルオロ酢酸塩（実施例６）（３０ｍｇ、０．０５０ミリモル）、Ｋ２ＣＯ３（１４．４２ｍｇ、０．１０４ミリモル）及び（メチルスルホニル）エテン（１０．８８μｌ、０．１２４ミリモル）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）中混合物を室温で４８時間撹拌した。さらなる（メチルスルホニル）エテン（８．７μｌ、０．１０ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＭｅＯＨで摩砕し、形成された沈殿をろ過し、真空下（約１５ミリバール）で乾燥して、２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−［２−（メチルスルホニル）エチル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（１２．７ｍｇ、５３％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８２、４８４
【０１２４】
実施例１１
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロ酢酸塩
【化５０】
2012530107.tif 000055
室温で２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１４）（３１５ｍｇ、０．６７５ミリモル）のＤＣＭ（７ｍＬ）中溶液をトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）で処理し、結果として得られた混合物をこの温度で１．５時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏで摩砕し、形成された沈殿をろ過し、真空下（約１５ミリバール）で乾燥して、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリルトリフルオロ酢酸塩（２９１ｍｇ、９０％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８５分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３６７
【０１２５】
実施例１２
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
【化５１】
2012530107.tif 000056
３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸エチル（調製１５）（１８ｍｇ、０．０３９ミリモル）のＴＨＦ（１ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）中溶液を室温にてＬｉＯＨ（１．８５ｍｇ、０．０７７ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物をこの温度で２時間攪拌した。さらにＬｉＯＨ（０．９ｍｇ、０．０４ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を室温でさらに４５分間撹拌した。１当量過剰の水酸化リチウム（０．９２４ｍｇ、０．０３９ミリモル）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌させ、次いでＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を連続して飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液及び水で洗浄した。合した水性層を２回ＤＣＭで抽出し、合した有機相を、相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮して、３−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸（１８ｍｇ、１０６％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９１分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３９
【０１２６】
実施例１３
４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸
【化５２】
2012530107.tif 000057
４−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］ブタン酸エチル（調製１６）（５０ｍｇ、０．１０４ミリモル）のＴＨＦ（２ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中溶液をＬｉＯＨ（５．０ｍｇ、０．２０８ミリモル）で室温にて処理し、結果として得られた混合物をこの温度で４．５時間攪拌した。さらなるＬｉＯＨ（１０．０ｍｇ、０．４１６ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物を同じ温度で１６時間撹拌し、次いでＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を連続して飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液及び水で洗浄し、次いで相分離器カートリッジを用いて乾燥し、真空中で濃縮して、（８ｍｇ、１７％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５３
【０１２７】
実施例１４
１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩
【化５３】
2012530107.tif 000058
１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製１２ｂ）（３５ｍｇ、０．０７４ミリモル）のＤＣＭ（２ｍｌ）中溶液を、室温にてトリフルオロ酢酸（０．１４ｍｌ、１．８３８ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物をこの温度で１６時間攪拌した。さらにトリフルオロ酢酸（０．１４ｍｌ、１．８３８ミリモル）を添加し、結果として得られた混合物をさらに２時間室温で撹拌し、次いで真空中で濃縮して、１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩（３０ｍｇ、８３％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間１．０６分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７６
【０１２８】
実施例１５
３−［１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸
【化５４】
2012530107.tif 000059
１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジントリフルオロ酢酸塩（実施例１４）（１４ｍｇ、０．０３７ミリモル）、アクリル酸ｔ−ブチル（１０．８μｌ、０．０７４ミリモル）及びトリエチルアミン（０．０２ｍｌ、０．１１２ミリモル）のｎ−ＢｕＯＨ（１．５ｍＬ）及びＴＨＦ（０．５ｍＬ）中溶液を１００℃で６０分間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却した。さらにアクリル酸ｔ−ブチル（１０．８μｌ、０．０７４ミリモル）を添加し、混合物を再度１１０℃で６０分間、マイクロ波照射下で撹拌し、次いで室温まで冷却し、ＳＣＸカートリッジ（５ｇ）上に負荷し、次いで連続してＭｅＯＨ及び２ＮのＮＨ３のＭｅＯＨ中溶液で溶出させた。アンモニア画分を真空中で濃縮し、残留物をＤＣＭ（１ｍｌ）中に溶解させ、次いでトリフルオロ酢酸（４．２５ｍｇ、０．０３７ミリモル）で処理した。結果として得られた混合物を室温で１６時間攪拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＭＤＡＰ（ホルメート法）で精製して、３−［１−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−１，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］プロパン酸（６ｍｇ、３６％）を白色油性固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４８、４５０
【０１２９】
実施例１６
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸リチウム塩
【化５５】
2012530107.tif 000060
４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸メチル（調製２０）（２３ｍｇ、０．０４７ミリモル）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（０．５００ｍＬ）中溶液を１ＮのＬｉＯＨ水溶液（０．０４７ｍｌ、０．０４７ミリモル）で処理し、結果として得られた混合物を６５℃、窒素下で３時間攪拌し、次いで室温まで一晩冷却し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（２ｍｌ）中に溶解させ、結果として得られた懸濁液を超音波処理した。不溶物質をろ過し、有機相を真空中で濃縮して、４−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−４，５，７，８−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］アゼピン−６（２Ｈ）−イル］ブタン酸リチウム塩リチウム塩（２２ｍｇ、９７％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７６、４７８
【０１３０】
実施例１８
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］アセトアミド
【化５６】
2012530107.tif 000061
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸（実施例３９）（９５ｍｇ、０．２１７ミリモル）及びＨＡＴＵ（９９ｍｇ、０．２６０ミリモル）に、ＤＩＰＥＡ（０．１１４ｍｌ、０．６５０ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。２−アミノ−１，３−プロパンジオール塩酸塩（２７．６ｍｇ、０．２１７ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で一晩攪拌した。試料を１：１酢酸エチル：ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）間で分配した。有機画分を合し、疎水性フリットにより乾燥し、窒素流下で濃縮した。残留物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（ＨｐＨ法）により精製した。溶媒を窒素流下で乾燥して、粗生成物（６０ｍｇ）を得た。試料を１：１酢酸エチル：ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）間で分配して、過剰の塩化アンモニウムを除去した。有機物を合し、疎水性フリットにより乾燥し、窒素流下で蒸発させて、２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］アセトアミド（３２ｍｇ、２９％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１２
【０１３１】
以下の化合物を、［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸（実施例３９）（９５ｍｇ、０．２１７ミリモル）から同様にして調製した。
【表４】
2012530107.tif 000062
2012530107.tif 000063
2012530107.tif 000064
【０１３２】
実施例２４ａ
５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化５７】
2012530107.tif 000065
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（１５０ｍｇ、０．３ミリモル）、２−ブロモエタノール（４０ｍｇ、２３μｌ、０．３２ミリモル）及び炭酸カリウム（１２６ｍｇ、０．９ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中混合物を５０℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が不完全であることを示したが、とにかく仕上げ処理した。反応混合物を冷却し、ろ過した。溶媒を濾液から蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー［０〜１０％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、生成物を淡黄色固体（３５ｍｇ、２７％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７８分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２５
【０１３３】
実施例２４ｂ
５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル塩酸塩ＧＳＫ２４３４７２７Ｂ
【化５８】
2012530107.tif 000066
５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（実施例２４ａ）（１０２ｍｇ、０．２４ミリモル）のメタノール（５ｍＬ）中撹拌溶液に、１Ｍエーテル中塩化水素（１．２ｍｌ、１．２ミリモル）を添加した。混合物を５分間室温で撹拌した後、窒素流下で蒸発させ、次いで真空中で乾燥して、５−｛５−［５−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル塩酸塩をクリーム色固体（１００ｍｇ、９０％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８１分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２５
【０１３４】
実施例２５ａ
５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化５９】
2012530107.tif 000067
２Ｍの塩酸（３ｍＬ）を、５−｛５−［５−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製２１）（２４５ｍｇ、０．５ミリモル）のＴＨＦ（３ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。反応混合物を室温で２４時間攪拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。合した抽出物を水及び生理食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー［５〜１０％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（９５ｍｇ、４２％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５５
【０１３５】
実施例２５ｂ
５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル塩酸塩
【化６０】
2012530107.tif 000068
５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（実施例２５ａ）（６．０ｍｇ、０．０１３ミリモル）のメタノール（２ｍＬ）中撹拌溶液に、１Ｍのエーテル中塩化水素（０．１０ｍｌ、０．１００ミリモル）を添加した。混合物を５分間室温で撹拌した後、窒素流下で蒸発させ、次いで真空中で乾燥して、５−（５−｛５−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル塩酸塩（５．３ｍｇ、８２％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５５
【０１３６】
実施例２６
５−（５−｛５−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化６１】
2012530107.tif 000069
Ｄ−グリセルアルデヒド（９１ｍｇ、１．０１ミリモル）を、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（１００ｍｇ、０．２０ミリモル）の１，２−ジクロロエタン（２ｍＬ）、ＴＨＦ（２ｍＬ）及びメタノール（１ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いでナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２１４ｍｇ、１．０１ミリモル）で処理した。反応混合物を室温で一晩攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。合した抽出物を水及び生理食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー［０〜５％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、生成物を得た。ジエチルエーテルで摩砕して、無色固体（４９ｍｇ、５３％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５５
【０１３７】
実施例２７
５−（５−｛５−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化６２】
2012530107.tif 000070
Ｌ−グリセルアルデヒド（１８２ｍｇ、２．０２ミリモル）を、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（２００ｍｇ、０．４ミリモル）のジクロロメタン（５ｍＬ）及びメタノール（１ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。１５分間撹拌した後、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４２９ｍｇ、２．０２ミリモル）を添加し、撹拌を一晩室温で続けた。飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。合した抽出物を生理食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー［２〜１０％メタノール／ジクロロメタン］に２回かけ、純粋な画分を合して、５−（５−｛５−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル］−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリルを無色固体（２０ｍｇ、１１％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５５
【０１３８】
実施例２８
５−｛５−［５−（３−ヒドロキシプロピル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化６３】
2012530107.tif 000071
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル（実施例３）（１５０ｍｇ、０．３ミリモル）、３−ブロモ−１−プロパノール（４５ｍｇ、２９μｌ、０．３２ミリモル）及び炭酸カリウム（１２６ｍｇ、０．９ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中混合物を５０℃で２４時間攪拌した。反応混合物を冷却し、ろ過した。溶媒を濾液から蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー［０〜１０％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、生成物を淡黄色固体（４４ｍｇ、３３％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．７９分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３９
【０１３９】
実施例２９
５−［５−（５−グリシル−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化６４】
2012530107.tif 000072
ジクロロメタン（２ｍＬ）中｛２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−オキソエチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（調製２２）（８８ｍｇ、０．１６ミリモル）に、トリフルオロ酢酸（０．２８ｍｌ、３．６８ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をアミノプロピルＳＰＥカートリッジ（２ｇ）に直接かけ、１０％ジクロロメタン中メタノールを用いて溶出させた。適切な画分を合し、蒸発させた。残留物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解させ、ＭＤＡＰ（ＨｐＨ法）により精製した。画分を集め、重炭酸ナトリウム溶液及び酢酸エチル間で分配した。有機層を分離し、疎水性フリットを通してろ過した。溶媒を蒸発させて、５−［５−（５−グリシル−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（２５ｍｇ、３３％収率）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３８
【０１４０】
実施例３０
５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル
【化６５】
2012530107.tif 000073
５−｛５−［５−（ブロモアセチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製２２）（７５ｍｇ、０．１５０ミリモル）、ヨウ化カリウム（３ｍｇ、０．０１８ミリモル）及び炭酸カリウム（５１．７ｍｇ、０．３７４ミリモル）をアセトニトリル（２ｍＬ）中に室温で溶解させた。（２Ｒ）−２−アミノ−１−プロパノール（０．０５８ｍｌ、０．７５ミリモル）を添加し、１６時間攪拌した。混合物をＤＣＭ及び水間で分配し、有機物を抽出し、水性物をＤＣＭで洗浄した。合した有機抽出物を疎水性フリットで乾燥し、そして蒸発させて、残留物を得、これをＭＤＡＰにより精製した（ＨｐＨ法）。この溶液を吹き飛ばし、残留物をメタノール（２ｍＬ）中に溶解させ、エーテル中塩酸（１Ｍ、２００μｌ）に添加することによって塩に変えた。試料を、メタノール（２ｍＬ）中に溶解させ、アンモニア（０．８８Ｍ、１００μｌ）を添加することによって、遊離塩基に戻した。これにより、生成物５−［５−（５−｛Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］グリシル｝−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（２５ｍｇ、３２％収率）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９６
【０１４１】
以下の化合物を、５−｛５−［５−（ブロモアセチル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製２２）（７５ｍｇ、０．１５０ミリモル）及び適切なアミンから出発して同様の方法で調製した；
【表５】
2012530107.tif 000074
2012530107.tif 000075
2012530107.tif 000076
【０１４２】
実施例３８
［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸
【化６６】
2012530107.tif 000077
トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を、［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸１，１−ジメチルエチル（調製２３）（４７０ｍｇ、０．９５ミリモル）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中撹拌溶液にゆっくりと添加した。反応混合物を室温で４時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をトルエンから再蒸発させた（×２）。残留物をジエチルエーテルで摩砕して、［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸を灰白色固体（４６７ｍｇ、８９％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８１分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３９
【０１４３】
実施例３９ａ
２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール
【化６７】
2012530107.tif 000078
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（１５０ｍｇ、０．３９ミリモル）、２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−オン（０．１８４ｍｌ、１．５４ミリモル）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３２６ｍｇ、１．５４ミリモル）をジクロロメタン（ＤＣＭ）（５ｍＬ）中に溶解させ、ＲＴ、Ｎ２下で２日間撹拌した。混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで混合物を相分離カートリッジ上で分離し、塩素化相を真空下で蒸発させて、暗褐色油状物を得た。油状物をＳＣＸカートリッジ（１０ｇ）上に負荷し、メタノール（２×２０ｍＬ）で洗浄し、生成物をメタノール中アンモニア（２Ｍ、２×２０ｍＬ）で溶出させ、溶媒を真空下で蒸発させた。同じプロセスを用いてＳＣＸを通した洗浄を繰り返した、残留物をＤＣＭで摩砕し、ろ過して、固体の２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール（６５ｍｇ、３６％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８７分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６４
【０１４４】
実施例３９ｂ
２−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，３−プロパンジオール塩酸塩
【化６８】
2012530107.tif 000079
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（６ｍＬ）中２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−５−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（調製２４）（３７４ｍｇ、０．７４２ミリモル）に、２Ｍの水性塩酸（６．００ｍｌ、１９７ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で２日間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、黄色固体（３６０ｍｇ、９２％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９０分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６４，  ４６６
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：１０．４９（ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．０４（ｄ，  Ｊ＝２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９０（ｄｄ，  Ｊ＝９．０，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３６（ｄ，  Ｊ＝９．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．８３（ｓｐｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５０  −  ４．５４（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８３  −  ３．９６（ｍ，  ５Ｈ），  ３．５０  −  ３．６５（ｍ，  １Ｈ），  ３．４０  −  ３．４８（ｍ，  １Ｈ），  ３．１５  −  ３．２７（ｍ，  １Ｈ），  ２．９９  −  ３．１０（ｍ，  １Ｈ），  ２．６６（ｓ，  ３Ｈ），  １．３４（ｄ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，  ６Ｈ）
【０１４５】
実施例４０
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオールギ酸塩
【化６９】
2012530107.tif 000080
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（１５０ｍｇ、０．３９ミリモル）、（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロパナール（１３９ｍｇ、１．５４ミリモル）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３２６ｍｇ、１．５４ミリモル）をジクロロメタン（ＤＣＭ）（４．５ｍＬ）及びメタノール（０．５ｍＬ）中にＲＴ、Ｎ２下で溶解させ、２日間撹拌した。さらなるアルデヒド（７０ｍｇ、２当量）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１６３ｍｇ、２当量）をさらなるＭｅＯＨ（１ｍＬ）及びＤＣＭ（１ｍＬ）とともに添加し、そして撹拌を３日間続けた。混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで混合物を相分離カートリッジ及び塩素化相上で分離し、そして真空下で蒸発させて、暗褐色油状物を得、これを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（ホルメート法）により精製した。溶媒を真空下で蒸発させて、灰白色固体（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオールギ酸塩（９７ｍｇ、４９．４％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８２分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６４
【０１４６】
実施例４１
（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−ヒドロキシプロパン酸メチル
【化７０】
2012530107.tif 000081
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（１４８ｍｇ、０．３８ミリモル）、（２Ｒ）−２−オキシランカルボン酸メチル（０．０４０ｍｌ、０．４５５ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（０．１９９ｍｌ、１．１４ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１ｍＬ）中に溶解させ、マイクロ波中１６０℃で３０分間加熱した。反応を一晩冷却させ、次いで飽和重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に抽出した。混合物を相分離カートリッジ上で分離し、塩素化相を真空下で蒸発させて、褐色残留物を得た。残留物を、０．５〜５％ジクロロメタン−メタノールの勾配を用いてＢｉｏｔａｇｅ  ＳＰ４シリカゲルＳＮＡＰ（５０ｇ）カラムにより精製した。適切な画分を合し、そして真空下で蒸発させて、灰白色ガラス状固体の（２Ｒ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−２−ヒドロキシプロパン酸メチル（１４４ｍｇ、７７％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４９２
【０１４７】
実施例４２
（２Ｓ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオールギ酸塩
【化７１】
2012530107.tif 000082
２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン（実施例１）（１５０ｍｇ、０．３９ミリモル）、（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロパナール（１３９ｍｇ、１．５４ミリモル）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３２６ｍｇ、１．５３９ミリモル）をジクロロメタン（４．５ｍＬ）及びメタノール（０．５ｍＬ）中にＲＴ、Ｎ２下で溶解させ、２日間撹拌した。さらに（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロパナール（７０ｍｇ、２当量）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１６３ｍｇ、２当量）をさらなるＭｅＯＨ（１ｍＬ）及びＤＣＭ（１ｍＬ）とともに添加し、そして撹拌を３日間続けた。混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで混合物を相分離カートリッジ及び塩素化相上で分離し、そして真空下で蒸発させて、暗褐色油状物を得、これを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（ホルメート法）により精製した。溶媒を真空下で蒸発させて、灰白色固体を得た。生成物画分を合し、そして蒸発させて、黄色固体（２Ｓ）−３−［２−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−１，２−プロパンジオールギ酸塩（１９ｍｇ、１０％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．９１分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６４
【０１４８】
実施例４３
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル塩酸塩
【化７２】
2012530107.tif 000083
２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，５，７−テトラヒドロ−６Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製２５）（１０ｍｇ、０．０２ミリモル）、ジオキサン（０．５ｍＬ）及びジオキサン中塩化水素（４Ｍ、０．５ｍＬ）の混合物を室温で一晩攪拌した。ジエチルエーテル（５ｍＬ）を添加した。沈殿をろ過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、灰白色固体の２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［５−（３−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ベンゾニトリル塩酸塩（８ｍｇ、９２％）を得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝３８１
【０１４９】
実施例４４
２−［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１，１−ジメチルエチル）アセトアミド
【化７３】
2012530107.tif 000084
２−アミノ−２−メチルプロパン−１−オール（６５ｍｇ、０．７２ミリモル）を、［２−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メチル−２，４，６，７−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル］酢酸（実施例３８）（２００ｍｇ、０．３６ミリモル）、ＨＡＴＵ（１６５ｍｇ、０．４３ミリモル）、及びＮ−エチルモルホリン（８３ｍｇ、０．７２ミリモル）のＤＭＦ（５ｍＬ）中撹拌混合物に添加した。反応混合物を室温で４８時間攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合した抽出物を水及び生理食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー［０〜４％メタノール／ジクロロメタン］にかけて、生成物を淡黄色固体（１２０ｍｇ、６５％）として得た。
ＬＣＭＳ：保持時間０．８３分；［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１０
【０１５０】
Ｓ１Ｐ１  ＧＴＰγＳアッセイ用膜調製物
全てのステップを４℃で実施した。２００ｍｌの緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１ｍＭのロイペプチン、２５μｇ／ｍｌのバシトラシン、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＰＭＳＦ、２μＭのペプスタチンＡ）中１５秒の２バーストで、細胞をガラス製ワーリングブレンダー内で均質化した。ブレンダーを最初のバースト後５分間及び最後のバースト後１０〜４０分間氷中に差し込んで、泡を消散させた。材料を次いで５００ｇで２０分間回転させ、上清を３６分間４８，０００ｇで回転させた。ペレットを、ＰＭＳＦ及びペプスタチンＡを含まない以外は前記と同じ緩衝液中に再懸濁させた。材料を０．６ｍｍの針を通して強制的に注入し、必要な容積にし、（通常、もとの細胞ペレットの容積×４）、等分し、そして−８０℃で貯蔵した。
【０１５１】
Ｓ１Ｐ１  ＧＴＰγＳアッセイ
Ｓ１Ｐ１発現ＲＨ７７７７膜（１．５μｇ／ウェル）膜（１．５μｇ／ウェル）を、２３Ｇ針中を通過させることによって均質化した。これらを次いでアッセイ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １０ｍＭ、ＮａＣｌ  １００ｍＭ、ＫＯＨ  ５Ｍを用いてｐＨを７．４に調節）中ＷＧＡコーティングされたＳＰＡビーズ（０．１２５ｍｇ／ウェル）に付着させた。ＧＤＰ  １０μＭ  ＦＡＣ及びサポニン  ９０μｇ／ｍｌ  ＦＡＣも添加した。
３０分間氷上でプレカップリングさせた後、ビーズ及び膜懸濁液を、０．１μｌの化合物を含む白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４ウェルプレート中に分注した（５μｌ／ウェル）。アッセイ緩衝液中で調製した、５μｌ／ウェルの［３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（最終放射性リガンド濃度：Ｓ１Ｐ１について０．５ｎＭ又はＳ１Ｐ３について０．３ｎＭ）をプレートに添加した。最終アッセイカクテル（１０．１μｌ）を次いで密封し、遠心分離機で回転させ、次いでＶｉｅｗｌｕｘ装置で直ちに読み取った。
実施例１〜１６は、このアッセイでｐＥＣ５０＞６を有していた。
【０１５２】
別法として、氷上で３０分間プレカップリングの後、ビーズ及び膜懸濁液を、アッセイ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭＭｇＣｌ２  １０ｍＭ、ＮａＣｌ  １００ｍＭ、ＫＯＨ  ５Ｍを用いてｐＨ７．４に調節）中３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（０．５ｎＭ最終放射性リガンド濃度）と１：１比で混合した。ビーズ、膜及び放射性リガンド懸濁液を、０．１μｌの試験化合物の１００％ＤＭＳＯ中溶液を含む白色Ｇｒｅｉｎｅｒポリプロピレン低容積３８４ウェルプレート（１０μｌ／ウェル）中に分注した。最終アッセイカクテル（１０．１μｌ）を次いで密封し、遠心分離機で回転させ、次いでＶｉｅｗｌｕｘ装置で直ちに読み取った。
前記Ｓ１Ｐ１アッセイで試験した場合、実施例１〜１２、１４〜１６及び２５〜２７のいずれか１つでは、≧６のｐＥＣ５０を有していた。実施例３〜５、７、８、１２及び２５〜２６は、≧７のｐＥＣ５０を有していた。実施例２は８のｐＥＣ５０を有していた。
【０１５３】
Ｓ１Ｐ３  ＧＴＰγＳアッセイ
Ｓ１Ｐ３発現ＲＢＬ膜（１．５μｇ／ウェル）を、２３Ｇ針を通過させることによって均質化した。これらを次いで、アッセイ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １０ｍＭ、ＮａＣｌ  １００ｍＭ、ＫＯＨ  ５Ｍを用いてｐＨを７．４に調節）中、ＷＧＡコーティングされたＳＰＡビーズ（０．１２５ｍｇ／ウェル）に付着させた。ＧＤＰ  １０μＭ  ＦＡＣ及びサポニン  ９０μｇ／ｍｌ  ＦＡＣも添加した。
氷上で３０分プレカップリングした後、ビーズ及び膜懸濁液を、０．１μｌの化合物を含む白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４ウェルプレート中に分注した（５μｌ／ウェル）。アッセイ緩衝液中で調製した、５μｌ／ウェル［３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（最終放射性リガンド濃度：Ｓ１Ｐ１について０．５ｎＭ又はＳ１Ｐ３について０．３ｎＭ）を次いでプレートに添加した。最終アッセイカクテル（１０．１μｌ）を次いで密封し、遠心分離機で回転させ、次いでＶｉｅｗｌｕｘ装置で直ちに読み取った。
実施例１〜１６はこのアッセイでｐＥＣ５０＜６を有していた。
【０１５４】
Ｓ１Ｐ３  ＧＴＰγＳアッセイのための別の膜調製法
すべてのステップを４℃で実施した。２００ｍｌの緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１ｍＭのロイペプチン、２５μｇ／ｍｌのバシトラシン、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＰＭＳＦ、２μＭのペプスタチンＡ）中１５秒の２バーストで、細胞をガラス製ワーリングブレンダー内で均質化した。ブレンダーを最初のバースト後５分間、そして最後のバースト後１０〜４０分間氷中に差し込んで、泡を消散させた。材料を次いで５００ｇで２０分間回転させ、上清を４８，０００ｇで３６分間回転させた。結果として得られたペレットを、ＰＭＳＦ及びペプスタチンＡを含まないが、１０％ｗ／ｖのスクロースを含む同じ緩衝液中に再懸濁させた。膜懸濁液を次いで、ＰＭＳＦ及びペプスタチンＡを含まないが、４０％ｗ／ｖのスクロースを含む緩衝液の最上部上に積層し、１００，０００ｇで６０分間回転させた。２つのスクロース層間の濁った界面を除去し、ＰＭＳＦ及びペプスタチンＡを含まない緩衝液中に再懸濁させた。材料を４８，０００ｇで４５分間回転させた。結果として得られた細胞ペレットを、必要とされる体積のＰＭＳＦ及びペプスタチンＡを含まない緩衝液（通常、もとの細胞ペレットの４倍の体積）中に再懸濁させ、等分し、−８０℃で貯蔵した。
【０１５５】
別のＳ１Ｐ３精製膜ＧＴＰγＳアッセイ
スクロース勾配によって精製されたＳ１Ｐ３発現ＲＢＬ膜（０．４４μｇ／ウェル）を、２３Ｇ針に通すことによって均質化した。これらを次いでアッセイ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １０ｍＭ、ＮａＣｌ  １００ｍＭ、ＫＯＨ  ５Ｍを用いてｐＨ７．４に調節）中ＷＧＡコーティングされたＳＰＡビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ０．５ｍｇ／ウェル）に付着させた。２μｇ／ウェルのサポニンを添加した。
氷上で３０分間プレカップリングさせた後、５μＭのＧＤＰ最終アッセイ濃度をビーズ及び膜懸濁液に添加した。ビーズ、膜、サポニン及びＧＤＰ懸濁液を、アッセイ緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １０ｍＭ、ＮａＣｌ  １００ｍＭ、ＫＯＨ  ５Ｍを用いてｐＨを７．４に調節）中で作製した［３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、０．３ｎＭの最終放射性リガンド濃度）と混合した。ビーズ、膜及び放射性リガンド懸濁液を、試験化合物の１００％ＤＭＳＯ中溶液０．５μｌを含む白色Ｇｒｅｉｎｅｒポリプロピレン３８４ウェルプレート（４５μｌ／ウェル）中に分注した。最終アッセイカクテル（４５．５μｌ）を次いで密封し、遠心分離機で回転させ、次いでプレートを室温で３時間インキュベーションした後、Ｖｉｅｗｌｕｘ装置で読み取った。
前記Ｓ１Ｐ３アッセイのうちのいずれか１つで試験した場合、実施例１〜１５及び１８〜４４は＜６のｐＥＣ５０を有していた。実施例１、３〜８、９〜１５及び１８〜４４は＜５のｐＤＣ５０を有していた。
【０１５６】
Ｓ１Ｐ−１β−Ａｒｒｅｓｔｉｎｄ動員アッセイ
β−Ａｒｒｅｓｔｉｎ動員アッセイを、化学発光検出アッセイにおいてＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  ＣＨＯ−Ｋ１  ＥＤＧ１  β−Ａｒｒｅｓｔｉｎ細胞系（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いて実施した。この細胞系は、Ａｒｒｅｓｔｉｎ動員により会合して機能的β−ガラクトシダーゼ酵素を形成する、β−Ａｒｒｅｓｔｉｎ２及びβ−ガラクトシダーゼの相補部分と融合したＳ１Ｐ１（それぞれ、「ＥＡ」及び「プロリンク」）を安定して発現する。
細胞を、成長培地（１０％熱不活性化ＵＳＡ  ＦＢＳ、１％のＬ−グルタマックス、８００μｇ／ｍｌのジェネティシン及び３００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンを添加したＦ１２栄養ＨＡＭＳ）中で８０％コンフルエンシーまで増殖させた。細胞を、Ｅｎｚｙｍｅ  Ｆｒｅｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｇｉｂｃｏ）を用いてフラスコから収集し、Ｏｐｔｉｍｅｍ溶液（Ｇｉｂｃｏ）でフラスコから洗浄した。細胞を次いで１０００ｒｐｍで２〜３分間遠心分離し、アッセイ緩衝液（２０ｍｌ／ＬのＨＥＰＥＳ、４．７ｍｌ／ＬのＮａＨＣＯ３、０．１％ｎのプルロン酸Ｆ−６８溶液、０．１％のＢＳＡを追加したＳｉｇｍａキットＨ１３８７から調製し、１×１０６細胞／ｍｌで水酸化ナトリウムを用いてｐＨ７．４に調節）中に再懸濁させた。細胞を、化合物（１００ｎｌ／ウェルの試験化合物の１００％ＤＭＳＯ中溶液）を含むアッセイプレート中に１×１０４細胞／ウェルで分注し、３７℃／５％ＣＯ２で９０分間、続いて１５分間室温でインキュベートした。５μｌの検出ミックス（１部のＧａｌａｃｔｏｎ  Ｓｔａｒ、５部のＥｍｅｒａｌｄ  ＩＩ、１９部のアッセイ緩衝液；ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ）をウェルごとに添加し、プレートを室温で６０分間インキュベートした。Ｖｉｅｗｌｕｘプレートリーダーを用いて発光を定量化した。
実施例１〜１６及び１８〜４４は≧６のｐＥＣ５０を有していた。実施例３、１５、１８〜２４、２７〜１９、３１、３３、３７〜４０及び４２は≧７のｐＥＣ５０を有していた。実施例２、４、５、７、８，１２，１３、２５、２６、３０、３２、３４〜３６及び４１は≧８のｐＥＣ５０を有していた。
【国際調査報告】
2012530107.tif 000087
2012530107.tif 000088