(57)【要約】  クルクミン類似体であって、ＬＡＴ１トランスポータによる血液脳関門を通過する類似体の輸送を増加させる、アミノ酸部分により修飾された天然クルクミンであるクルクミン類似体。
2012512247.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
【請求項２】
３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
【請求項３】
１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
【請求項４】
１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
【請求項５】
３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
【請求項６】
クルクミン類似体であって、ＬＡＴ１トランスポータによる血液脳関門を通過する前記類似体の輸送を増加させる、アミノ酸部分により修飾された天然クルクミンであるクルクミン類似体。
【請求項７】
ａ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｂ）１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｃ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、及び
ｄ）３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、からなる群から選択される少なくとも１つの構造を含むクルクミン類似体。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
アルツハイマー病（ＡＤ）において、細胞内膜からのβアミロイドタンパク質前駆体の異常な切断は、多くの場合、正常なクリアランス工程により完全には除去されないタンパク質Ａβ  １−４２を生成する。可溶性βアミロイドオリゴマーは、高い神経毒性を有することが報告されている。更に、時間とともにこの可溶性タンパク質の集合は、βアミロイドタンパク質Ａβプラークとして脳組織内に沈着して、神経細胞の局所破壊をもたらす。Ａβプラークの沈着はまた、プラークを異物として認識する小膠細胞及びマクロファージによる炎症性応答を誘発するとも考えられている。これらの細胞は、炎症促進性サイトカイン及び活性酸素種（ＲＯＳ）を放出することにより、プラーク沈着に応答すると考えられる。炎症性応答は、脳組織を有害なプラークから浄化する目的で誘発され得るが、現在では、この炎症も局所神経組織を障害し、それによりＡＤを悪化させると考えられている。βアミロイドの可溶性オリゴマー又は「ＡＤＤＬ」は、ＡＤ発病に関係する神経毒性種である。Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，７，Ｆｅｂ．１８．，２００５，５８９２〜５９０１。
【０００２】
書籍「Ｔｈｅ  Ｍｅｍｏｒｙ  Ｃｕｒｅ」（２００３，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮＹ，ＮＹ）にて、Ｍａｊｉｄ  Ｆｏｔｕｈｉ博士は：「アルツハイマー病を処置する魔法の薬物を探求している製薬会社は、クルクミンに高い注目を払う必要がある」と記述している。
【０００３】
０．１〜１．０μＭのクルクミンは、アミロイドβオリゴマーのインビトロ形成を阻害し、かつ分化した神経芽腫細胞内でＡβ１〜４２オリゴマーのインビトロ毒性を遮断することが報告されている。Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，７，Ｆｅｂ．１８．，２００５，５８９２〜５９０１。クルクミンはまた、アルツハイマーのトランスジェニックマウスの飼料中に、１６０ｐｐｍの低用量で提供された際に、可溶性βアミロイドの量を４３％低下させた。Ｌｉｍ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００１，Ｎｏｖ．１，２１（２１），８３７０〜７。
【０００４】
クルクミンはまた、βアミロイドの沈着を有益に低下させるように思われる。中年のメスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおいて、５００ｐｐｍの飼料クルクミンはβアミロイド注入により誘導されたアミロイドβ沈着を約８０％低下させた。Ｆｒａｕｔｓｃｈｙ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２２，２００１，９９３〜１００５。クルクミンはまた、アルツハイマーのトランスジェニックマウスの飼料中に１６０ｐｐｍの低用量で提供された際に、βアミロイドプラーク負荷を約３０〜４０％低下させた。Ｌｉｍ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００１，Ｎｏｖ．１，２１（２１），８３７０〜７。このことは、ＡＤを原因とする酸化及び炎症性損傷が、アミロイドβ沈着に対する小膠細胞応答に関連していると考えられるため、有利である。
【０００５】
その可溶性βアミロイドに対する有益な作用に加えて、クルクミンは、相当の抗酸化性の性質を有し、また炎症促進性サイトカインの発現も阻害する。Ｆｒａｎｋ，Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，２００５，Ｏｃｔ．−Ｄｅｃ．１７，４，２６９〜８６、及びＣｏｌｅ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２６Ｓ（２００５）Ｓ１３３〜Ｓ１３６。
【０００６】
クルクミンはＡＤの多数の標的に有効に作用することができるため、年齢７０〜７９歳のインドの人口における４．４倍低いＡＤの発病率は、食事によるクルクミン消費の高さが原因であると仮定されている。Ｌｉｍ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．，Ｎｏｖ．１，２００１，２１（２１），８３７０〜７７。８０歳又はそれを超える年齢の人々において、インドにおける年齢調整アルツハイマー有病率は、米国の割合のおよそ１／４（４％対１５．７％）である。Ｆｒａｕｔｓｃｈｙ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２２，２００１，９９３〜１００５。クルクミンは、総説において、長期ＡＤ研究に関する最も有望な候補の１つとして確認されている。Ｆｒａｎｋ，Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，２００５，Ｏｃｔ．〜Ｄｅｃ．１７，４，２６９〜８６、及びＣｏｌｅ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２６Ｓ（２００５）Ｓ１３３〜Ｓ１３６。クルクミンは、現在、ＵＣＬＡアルツハイマーセンターにおいて、軽度から中程度のＡＤ患者の処置におけるＦＤＡ承認ＩＮＤ臨床試験の対象である。Ｃｏｌｅ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２６Ｓ（２００５）Ｓ１３３〜Ｓ１３６。
【０００７】
上述したＡＤ症状に対するクルクミンのインビボ効果は、食事内のクルクミンの提供により達成されたため、クルクミンは、有効に血管脳関門を横断できると思われる。クルクミンは高い親油性を有するため、血液脳関門を容易に横断することが期待される。Ｆｒａｕｔｓｃｈｙ，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ，２２，２００１，９９３〜１００５。実際に、インビボ研究において、加齢Ｔｇマウスに末梢注入されたクルクミンが、血管脳関門を横断し、アミロイドプラークに結合することが示されたことが報告されている。Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，７，Ｆｅｂ．１８．２００５，５８９２〜５９０１。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
クルクミンの有益な効果にも関わらず、本発明者らはクルクミンの経口送達に関連して、多数のバイオアベイラビリティ上の問題が存在することに注目してきた。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
第一に、クルクミンはヒト消化管を容易に貫通せず、また腸をベースとする代謝及び拒絶に付されるため、血漿に入る経口クルクミンは１％未満である。第二に、血流に入る少量のクルクミンは、肝臓及び腎臓により急速に代謝される。したがって、クルクミンが高い親油性を有していても（したがって容易に血液脳関門を通過しても）、非常に少量の経口投与されたクルクミンのみが血清及び脳組織中に到達しない。１つの研究において、１日当たり３．６ｇまでのクルクミンの摂取では、約１０ｎＭのみの程度の血漿クルクミン濃度しか提供しないことが見出された。Ｓｈａｒｍａ，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００４，Ｏｃｔ．１５，１０（２０）６８４７〜５４。２つ目の研究では、１日当たり６〜８ｇまでのクルクミンの摂取では、約０．５１〜１．７７μＭのピーク血清クルクミン濃度を提供することが見出された。３つ目に、４，０００〜８，０００ｍｇ／日の範囲内の高いクルクミンの経口用量により、おそらくクルクミンの代謝産物により引き起こされる頭痛、発疹及び下痢などの問題が起きることが報告されている。したがって、上記に引用した血漿クルクミン濃度（１０ｎＭ〜１．７７μＭ）は、クルクミンの経口投与の実際の上限を表すものと思われる。Ｙａｎｇ（前出）は、５μＭを超えるクルクミン濃度は、経口投与により脳内にもたらされない可能性があると結論付けている。事実、Ｗａｎｇは、クルクミン３０ｍｇ／ｋｇの注射が、約０．１５ｎｇ／ｍｇのみの脳組織内でのピーククルクミン濃度をもたらすことを報告しており、これは約０．４０μＭである。
【００１０】
更に、経口クルクミンによる患者の消化管及び肝臓の薬物代謝酵素系への障害性により、最近では患者安全性に関する懸念を引き起こしている：「これらのデータ及び阻害剤の予測される組織濃度から、経口的に投与されたクルクミノイド／ピペリン混合物は、腸粘膜内におけるＣＹＰ３Ａ、ＣＹＰ２Ｃ９、ＵＧＴ、及びＳＵＬＴによる代謝を抑制する可能性が最も高いと予測される」Ｖｏｌａｋ，Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ．２００８  Ｍａｙ  １４。別の研究者は、「以上をまとめると、天然の抗酸化物質の潜在的薬効は、実際の重篤な副作用の危険性、並びに「影響なし」のより軽度の可能性を正当化できない」と結論している、Ｍａｎｃｕｓｏ，「Ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ」Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ．Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００７，Ｖｏｌ．１６，Ｎｏ．１２，Ｐａｇｅｓ１９２１〜１９３１。
【００１１】
約１μＭ程度の脳組織濃度において、全てではないがいくつかのクルクミンの有益な治療的特性が実現されると思われる。例えば、０．１〜１．０μＭのクルクミンが、アミロイドβオリゴマーのインビトロ形成を阻害し、かつ分化した神経芽腫細胞内でＡβ１〜４２オリゴマーのインビトロ毒性を遮断することが報告されている。Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，７，Ｆｅｂ．１８．，２００５，５８９２〜５９０１。しかしながら、より高いクルクミン濃度でのみ実現される、クルクミンのＡＤ関連の治療的特性もまた多数存在するように思われる。例えば、Ｙａｎｇは、０．２５〜４μＭの濃度のクルクミンは有毒なβアミロイドオリゴマーのインビトロでの形成を最小限阻止するのみであるが、１６〜６４μＭの濃度のクルクミンは、有毒なβアミロイドオリゴマーの形成を完全に阻止することを報告している。Ｙａｎｇは、クルクミンがβアミロイドの銅結合を阻害する可能性を有することにも注目しているが、クルクミンの銅に対する結合活性と、脳内での可能な濃度とがＣＮＳ  βアミロイド金属結合を直接変更するに十分であるか否かは明確でないと結論付けている。
【００１２】
本発明は、有効量のクルクミンを含有する製剤の鼻腔内投与に関する。詳細には、本発明は、有効量のクルクミンを含有する製剤を、篩板を横切って鼻粘膜へ、そして脳内へと鼻腔内投与して、例えばＡＤなどの神経変性疾患を処置することに関する。
【００１３】
本発明の目的は、クルクミンを鼻腔経路により投与して、クルクミンを鼻粘膜を介して脳へ送達することによりクルクミンの脳バイオアベイラビリティを改善し、またその有益な効果に必要とされる用量を低下させることにある。クルクミンは高い親油性を有するため、鼻腔の高い位置にある鼻粘膜を容易に通過し、嗅神経細胞に入ることにより脳に至る。この送達モードは、より少量のクルクミンを循環内へ通過させるため、クルクミンの代謝産物の血漿濃度が低くなり、したがって副作用が低下するであろう。鼻腔内送達は、鼻粘膜を介した受動拡散により脳への薬物バイオアベイラビリティを改善し、それにより経口投与されたクルクミンの血漿及び脳濃度を有意に低下させる大量の肝臓の初回通過代謝を回避する。したがって、副作用を低下させる小用量のクルクミンを投与することができ、薬物はより耐性に優れ、より有効になるであろう。クルクミンなどの親油性薬物は、一般に、経口又は静脈内投与後と比較して鼻腔内投与後に高い脳レベルを達成する。したがって、クルクミンの鼻腔投与経路は、脳（作用部位）内でのクルクミンの有効性を高める助けとなり得る。加えて、クルクミンは肝臓により大量に代謝されるため、鼻腔経路による投与は、同様に肝臓により大量に代謝される他の薬物との薬物相互作用を低減する助けとなり得る。最後に、鼻腔投与されたクルクミンは、鼻粘膜を介して、辺縁系を介して海馬及び扁桃体に接続する嗅球内へと受動的に拡散するため、クルクミンの鼻腔内投与は、脳の海馬及び扁桃体に優先的に沈着すると思われる。これらの領域は、アルツハイマー病の起源部位であると思われる。
【００１４】
したがって、本発明では、クルクミンを哺乳動物の脳に投与するための方法が提供され、その方法は：
ａ）クルクミンを含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用し、ここでクルクミンは鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送される、ことを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１ａ】本発明の新規なクルクミンプロドラッグ（１）〜（３０）を開示している。
【図１ｂ】本発明の新規なクルクミンプロドラッグ（１）〜（３０）を開示している。
【図１ｃ】本発明の新規なクルクミンプロドラッグ（１）〜（３０）を開示している。
【図１ｄ】これらのプロドラッグを作製するための親化合物の候補である、好ましいクルクミン類似体（３１）〜（３４）を開示している。  図２〜図１６は、クルクミンと、様々な他の天然ポリフェノールとのハイブリッドである、様々なクルクミン誘導体を開示している。これら誘導体のそれぞれは、クルクミンの中間のジケトン構造がフェノール基で置き換えられているトリフェノール化合物である。得られた化合物は、クルクミンの２つのフェノール間の間隔を保持し、また追加のポリフェノールのビフェノール間隔も所有している。
【図２】クルクミン、レスベラトロル、及び２つのクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの構造を開示している。ハイブリッドのそれぞれがどのようにクルクミン及びレスベラトロル（reveratrol）のそれぞれのフェノール間の間隔を保持しているかに注目されたい。
【図３】クルクミン−レスベラトロルＩハイブリッドの作製方法を開示している。
【図４】クルクミン−レスベラトロルＩＩハイブリッドの作製方法を開示している。
【図５】中央フェノール基及び側部フェノール基のそれぞれにおいて３つのヒドロキシル基を有するクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示している。
【図６】クルクミン、レスベラトロル及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのフェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【図７】図６のクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示している。
【図８】図６のハイブリッドと同様であるが、ベースのクルクミン分子のメトキシ基が保持されている。
【図９】クルクミン、オキシレスベラトロル及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びトリヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【図１０】クルクミン、ピセタノール及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びトリヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【図１１】クルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【図１２】クルクミン、ＢＤＭＣ、レスベラトロル及びそれらのクルクミンハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのフェノールがハイブリッドで表され、ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びヒドロキシ又はジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【図１３】ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びヒドロキシ中央フェノール基を有する図１２の化合物の作製方法を提供している。
【図１４】ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びジヒドロキシ中央フェノール基を有する図１２の化合物の作製方法を提供している。
【図１５】クルクミン、ピセタノール及びこれらのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物のヒドロキシルの大部分がハイブリッドで表され、２つの天然化合物が共有している位置において、末端フェノール基にジヒドロキシル及び中央フェノール基に単一ヒドロキシルを提供している。
【図１６】図１５の化合物の作製方法を提供している。
【図１７】クルクミン、３，３’，４’フィセチン及びクルクミン−３，３’，４’フィセチンハイブリッドの構造を開示し、ここで、クルクミン及び３，３’，４’フィセチン化合物のヒドロキシルの全てがハイブリッドで表され、末端フェノール基にジヒドロキシル、それぞれの二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。
【図１８】図１７のクルクミン−３，３’，４’フィセチンハイブリッドの作製方法を開示している。
【図１９】クルクミン、ホノキオール及びクルクミン−ホノキオールハイブリッドの構造を開示し、ここで、クルクミン及びホノキオール化合物の全てのヒドロキシルはハイブリッドで表され、末端フェノール基に単一ヒドロキシル、それぞれの二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。
【図２０】図１９のクルクミン−ホノキオールハイブリッドの作製方法を開示している。
【図２１】図１３のホノキオールハイブリッドの作製方法を開示しており、ここで、天然化合物のヒドロキシルの全てはハイブリッドで表され、２つの天然化合物が共有している位置における末端フェノール基に単一ヒドロキシル、中央フェノール基にヒドロキシル、それぞれのクルクミン二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。
【図２２】図１５の３，３’，４’フィセチンハイブリッドの作製方法を開示しており、ここで、天然化合物のフェノールの全てはハイブリッドで表され、末端フェノール基に単一ヒドロキシル、２つの天然化合物が共有している位置におけるヒドロキシル中央フェノール基、それぞれのクルクミン二重結合の代わりに更なるヒドロキシルを提供している。
【図２３】本発明の帯電したクルクミンプロドラッグをＡＤ患者に送達する典型的なイオン導入システムを開示している。
【図２４ａ】本発明の分子（３９）の作製方法を開示している。分子（３９）は、天然メトキシル基をヒドロキシル基で置換し、ジケトン基をフェニル基で置換し、側部フェニル基にアミノ酸部分を追加することによる、天然クルクミン分子の修飾を表す。
【図２４ｂ】本発明の分子（４２）の作製方法を開示している。分子（４２）は、天然メトキシル基を脱離し、ジケトン基をヒドロキシフェニル基で置換し、側部フェニル基にアミノ酸部分を追加することによる、天然クルクミン分子の修飾を表す。
【図２５ａ】本発明の分子（４５）の作製方法を開示している。分子（４５）は、天然メトキシル基を脱離し、ジケトン基をアミノ酸部分を有するヒドロキシフェニル基で置換することによる、天然クルクミン分子の修飾を表す。
【図２５ｂ】本発明の分子（４１ｃ）の作製方法を開示している。分子（４５）は、天然メトキシル基を脱離し、ジケトン基をアミノ酸部分を有するヒドロキシフェニル基で置換することによる、天然クルクミン分子の修飾を表す。
【図２６ａ】２つの天然クルクミノイド分子（３１、３３）及びこれらの分子のハイブリッド（分子（３５））を開示している。
【図２６ｂ】ハイブリッド分子（３５）の作製方法を開示している。
【図２７ａ】分子（３５）の変異体である分子（４６）の２つの作製方法を示し、中央のフェニル芳香環により、分子がより強固に作製される。
【図２７ｂ】分子（３５）の変異体である分子（４６）の２つの作製方法を示し、中央のフェニル芳香環により、分子がより強固に作製される。
【図２８】図１３で合成された分子の別の作製方法を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本明細書で使用されるように、クルクミンは、ジフェルロイルメタン又は（Ｅ，Ｅ）−１，７−ビス（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−１，６−ヘプタジエン−３，５，−ジオンとしても既知である。クルクミンは、天然源である、ショウガ科（Zingiberaceae）の一員である多年生草本クルクマ・ロンガ（Curcuma longa L.）に由来する場合がある。スパイスのターメリックは、クルクマ・ロンガの根茎から抽出され、ヒンドゥー及び漢方医学で使用される伝統的な医学処置に長い間関連してきた。ターメリックは、これらの伝統的な処置方法において経口又は局所投与された。
【００１７】
いくつかの実施形態において、クルクミンは鼻腔内投与されて、少なくとも０．１μＭ、より好ましくは少なくとも１μＭ、より好ましくは少なくとも５μＭ、より好ましくは少なくとも２０μＭの脳組織濃度を提供する。
【００１８】
理論に縛られるものではないが、少なくとも約０．２ｍｇ／ｋｇの連日鼻腔内用量が、上記に引用した脳組織濃度を提供するのに十分であろうと考えられる。より好ましくは、用量は、少なくとも１ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは少なくとも１０ｍｇ／ｋｇである。
【００１９】
クルクミンを含む製薬学的組成物を、上記に引用した濃度で、クルクミンが鼻粘膜を介して吸収されて、哺乳動物の脳に輸送される哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用すると、脳組織内でこれらのより高い濃度のクルクミンが達成されると考えられる。
【００２０】
分子は、親油性が大きい程、その鼻粘膜及び血管脳関門を横切る傾向が高くなることが既知である。この点において、クルクミンのオクタノ−ル：水分配係数（ｌｏｇ１０  ＰＣ）は３．２９であることが報告されている。したがって、クルクミンは非常に親油性であり、鼻粘膜及び血管脳関門を受動拡散によって容易に横切るはずである。
【００２１】
更に血管脳関門が、例えば薬物などの多数の重要な分子を流出するｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）トランスポータを含むことは既知である。したがって、これらのポンプのクルクミンに向かう挙動は、クルクミンが鼻粘膜及び血管脳関門を横断するか否かの問題に関係する。クルクミンはＰ−ｇｐの発現を低下させることが報告されている（Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００６，Ａｐｒ．１４，７１（８）１１４６〜５４）ことより、クルクミンはこれらのＰ−ｇｐポンプに拮抗すると考えられる。そのＰ−ｇｐ発現を低下させる能力に加えて、クルクミンが肝Ｐ−ｇｐの機能を調節できることが示唆されている。低い濃度のＰｇｐを含有する新たに撒かれた肝細胞、及び高い濃度のＰｇｐを含有する７２時間培養した肝細胞の両方において、Ｐｇｐ仲介による輸送に関する特定の機能的試験に相当するローダミン−１２３（Ｒ−１２３）流出が、クルクミンにより用量依存的に阻害された（Ｒｏｍｉｔｉ  Ｎ，Ｔｏｎｇｉａｎｉ  Ｒ，Ｃｅｒｖｅｌｌｉ  Ｆ，Ｃｈｉｅｌｉ  Ｅ．Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｕｒｃｕｍｉｎ  ｏｎ  Ｐ−ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｒａｔ  ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．１９９８；６２：２３４９〜５８）。
【００２２】
クルクミン（ｌｏｇ１０  ＰＣ）のオクタノ−ル：水分配係数が３．２９であり、またクルクミンはＰ−ｇｐに拮抗することが示されているため、クルクミンは血管脳関門を容易に横断すると考えられる。この点において、これらのクルクミンの特性を、ヒドロキシジンのそれと比較することは有益である。Ｋａｎｄｉｍａｌｌａ，Ｉｎｔ’ｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，３０２（２００５）１３３〜１４４により、ヒドロキシジンＨＣｌは分子量４４７．８を有し、ｌｏｇ  Ｄｏｃｔ／ｐＨ  ７．４のオクタノ−ル：水分配係数はたった２．３７〜２．８７であり、Ｐ−ｇｐを阻害する能力を有することが報告されている。Ｋａｎｄｉｍａｌｌａによれば、「Ｐ−ｇｐを阻害する（その）能力と結合した（ヒドロキシジン）の親油性により、（それは）鼻粘膜を横切って自由に浸透する」。クルクミンは更にヒドロキシジンと比較して小さい分子量を有し、有意に、より高い親油性を有し、ｐ−ｇｐの機能及び発現の両方を低下させることができるため、クルクミンは鼻粘膜及び血管脳関門をヒドロキシジンよりも更に容易に通過できるはずであると合理的に結論される。
【００２３】
クルクミン（ＭＷ＝３６８）及びカルバマゼピン（ＭＷ＝２３６）は類似する分子量を有し、それぞれ親油性が高いため、カルバマゼピン脳濃度において鼻腔内カルバマゼピンの効果は非常に有益である。Ｂａｒａｋａｔ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００６，Ｊａｎ．５８（１）６３〜７２、は、鼻腔内投薬（１２μｇ／ｇ）により得られたカルバマゼピンのピーク脳組織濃度は、経口投薬により得られたものと比較して約４倍高かったことを報告している。
【表１】
2012512247.tif 000003
【００２４】
したがって、クルクミンがカルバマゼピンと同様のモル量で脳に入るとすれば（合理的に期待されるように）、得られる濃度は、有毒なオリゴマー形成とＡβ金属結合の効果との両方が完全に阻止され得る。クルクミンの０．２ｍｇ／ｋｇを超える更に高い投与量が使用される場合、得られる脳組織濃度は、更に高くなることが期待されるであろう。
【００２５】
クルクミンの用量は、その鼻粘膜との接触を高めるために粘膜付着剤と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、親水性ポリマー、ヒドロゲル及び熱可塑性ポリマーよりなる群から選択される。好ましい親水性ポリマーには、セルロースベースのポリマー（例えばメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースなど）、カルボマーキトサン及び植物ゴムが挙げられる。
【００２６】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、水溶性高分子量セルロースポリマーである。高分子量セルロースポリマーは、少なくとも約２５，０００、好ましくは少なくとも約６５，０００、より好ましくは少なくとも約８５，０００の平均分子量を有するセルロースポリマーを指す。使用される正確な分子量のセルロースポリマーは、一般に、所望の放出プロファイルに依存するであろう。例えば、約２５，０００の平均分子量を有するポリマーは、約８時間までの持続放出時間を有するコントロールリリース組成物に有用である一方、約８５，０００の平均分子量を有するポリマーは、約１８時間までの持続放出時間を有するコントロールリリース組成物に有用である。より長い放出時間を有する組成物中での使用には、更に大きい分子量のセルロースポリマーが想定される。例えば、１８０，０００又はそれ以上の平均分子量を有するポリマーは、２０時間又はそれ以上の持続放出時間を有するコントロールリリース組成物に有用である。
【００２７】
コントロールリリース担体層は、好ましくは、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）及びそれらの混合物よりなる群から選択される水溶性セルロースポリマー、好ましくは高分子量セルロースポリマーからなる。これらの中でも、最も好ましい水溶性セルロースポリマーは、ＨＰＭＣである。好ましくはＨＰＭＣは、高分子量ＨＰＭＣであり、特定の分子量が選択されて所望の放出プロファイルを提供する。
【００２８】
ＨＰＭＣは、好ましくは、少なくとも約２５，０００、より好ましくは少なくとも約６５，０００、最も好ましくは少なくとも約８５，０００の平均分子量を有する高分子量ＨＰＭＣである。ＨＰＭＣは、好ましくは、８０％以上のＨＰＭＣ粒子が８０メッシュ篩を通るような粒径を有する微粒子からなる。ＨＰＭＣは、組成物の全重量に基づき、約４〜約２４重量％、好ましくは約６〜約１６重量％、より好ましくは約８〜約１２重量％の量で含まれることができる。
【００２９】
クルクミンを鼻粘膜に送達するのにヒドロゲルを使用することもできる。「ヒドロゲル」は、有機ポリマー（天然又は合成）が硬化又は固化して、水又は他の溶液の分子を捕捉してゲルを形成する３次元開放格子構造を形成する物質である。固化は、例えば、凝集、凝固、疎水性相互作用又は架橋により起こり得る。本発明で使用されるヒドロゲルは、急速に固化してクルクミンを適用部位に保持し、それにより部位からの望ましくない移動を排除する。ヒドロゲルは生体適合性でもあり、例えば、ヒドロゲル中に懸濁される細胞に対して無毒である。「ヒドロゲル−誘導物質組成物」は、所望のクルクミンを含有するヒドロゲルの懸濁液である。ヒドロゲル−誘導物質組成物は、明確で正確に制御できる密度を有する誘導物質の均一な分配を形成する。更に、ヒドロゲルは、非常に大きな密度の誘導物質を支持することができる。加えて、ヒドロゲルは栄養物及び老廃物を誘導物質へ及び誘導物質から拡散させ、このことは組織増殖を促進する。
【００３０】
本発明での使用に好適なヒドロゲルは、含水ゲル、すなわち、親水性及び水不溶性により特徴付けられるポリマーを含む。例えば、その開示が参照により本明細書に組み入れられるＣｏｎｃｉｓｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｅｄｓ．Ｍａｒｋら、Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９０の「ヒドロゲル」、４５８〜４５９頁を参照されたい。
【００３１】
好ましい実施形態において、ヒドロゲルは、微細な粉末状の合成ヒドロゲルである。好適なヒドロゲルは、例えば選択されたマトリクスポリマーとの適合性、及び生体適合性などの性質の最適な組み合わせを示す。ヒドロゲルには、以下の任意のものを挙げることができる：多糖、タンパク質、ポリホスファゼン、ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックポリマー、エチレンジアミンのポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックポリマー、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、アクリル酸及びメタクリル酸のコポリマー、ポリ（酢酸ビニル）、並びにスルホン化ポリマー。他の好ましいヒドロゲルには、ポリ（アクリル酸コアクリルアミド）コポリマー、カラギーナン、アルギン酸ナトリウム、グァーガム及び修飾グァーガムが挙げられる。
【００３２】
一般に、これらのポリマーは、少なくとも部分的に水性溶液、例えば、帯電した側基を有する水若しくはアルコール水溶液、又はその一価イオン塩に可溶である。カチオンと反応できる酸性側基を有する多数のポリマーの例、例えば、ポリ（ホスファゼン）、ポリ（アクリル酸）、及びポリ（メタクリル酸）が存在する。酸性基の例は、カルボン酸基、スルホン酸基、及びハロゲン化（好ましくはフッ素化）アルコール基を含む。アニオンと反応できる塩基性側基を有するポリマーの例は、ポリ（ビニルアミン）、ポリ（ビニルピリジン）、及びポリ（ビニルイミダゾール）である。
【００３３】
好ましい熱可塑性ポリマーには、ＰＶＡ、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレングリコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエーテル、及びハロゲン化ポリビニル、ポリメタクリル酸、ポリメチルメタクリル酸、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、及びナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチレングリコールコポリマーが挙げられる。
【００３４】
粘膜付着剤として使用し得る好適な他のポリマーには、脂肪族ポリエステル、ポリ（アミノ酸）、コポリ（エーテル−エステル）、ポリアルキレンオキサレート、ポリアミド、チロシン誘導ポリカーボネート、ポリ（ポリイミノカーボネート）、ポリオルトエステル、ポリオキサエステル、ポリアミドエステル、アミン基含有ポリオキサエステル、ポリ（アンヒドリド）、ポリホスファゼン、生体分子（すなわち、例えばコラーゲン、エラスチン、生体吸収性澱粉などのバイオポリマー）及びそれらのブレンドが挙げられる。本発明の目的において、脂肪族ポリエステルには、ラクチド（乳酸、Ｄ−、Ｌ−及びメソラクチドなど）、グリコリド（グリコール酸など）、ε−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン（１，４−ジオキサン−２−オン）、トリメチレンカーボネート（１，３−ジオキサン−２−オン）、トリメチレンカーボネートのアルキル誘導体、δ−バレロラクトン、β−ブチロラクトン、χ−ブチロラクトン、ε−デカラクトン、ヒドロキシブチレート、ヒドロキシバレレート、１，４−ジオキセパン−２−オン（その二量体１，５，８，１２−テトラオキサシクロテトラデカン−７，１４−ジオンなど）、１，５−ジオキセパン−２−オン、６，６−ジメチル−１，４−ジオキサン−２−オン、２，５−ジケトモルホリン、ピバロラクトン、χ，χ−ジエチルプロピオラクトン、エチレンカーボネート、エチレンオキサレート、３−メチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、３，３−ジエチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン、６，８−ジオキサビシクロオクタン−７−オンのホモポリマー及びコポリマー、並びにそれらのポリマーブレンドが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の目的において、ポリ（イミノカーボネート）には、Ｄｏｍｂら編「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ」、Ｈａｒｄｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ．２５１〜２７２（１９９７）にＫｅｍｎｉｔｚｅｒ及びＫｏｈｎにより記載されたポリマーが挙げられると理解される。本発明の目的において、コポリ（エーテル−エステル）には、Ｃｏｈｎ及びＹｏｕｎｅｓによるＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２２，ｐａｇｅｓ  ９９３〜１００９，１９８８に、及びＣｏｈｎによるＰｏｌｙｍｅｒ  Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ（ＡＣＳ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．３０（１），ｐａｇｅ  ４９８，１９８９に記載されているコポリエステル−エーテル（例えば、ＰＥＯ／ＰＬＡ）が挙げられると理解される。本発明の目的において、ポリアルキレンオキサレートには、米国特許第４，２０８，５１１号、同第４，１４１，０８７号、同第４，１３０，６３９号、同第４，１４０，６７８号、同第４，１０５，０３４号及び同第４，２０５，３９９号に記載されているものが挙げられる。Ｔｈｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．１３，ｐａｇｅｓ  ３１〜４１，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９８８でＡｌｌｃｏｃｋにより、及びｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ��ｏｌｙｍｅｒｓ、Ｄｏｍｂら編、Ｈａｒｄｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ．１６１〜１８２（１９９７）でＶａｎｄｏｒｐｅらにより記載されているような、ポリホスファゼン、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド、乳酸、グリコリド、グリコール酸、パラ−ジオキサノン、トリメチレンカーボネート及びε−カプロラクトンから形成されるコ−、ター−及びより高次の混合モノマーをベースとするポリマー。ポリアンヒドリドには、ＨＯＯＣ−Ｃ６Ｈ４−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−Ｃ６Ｈ４−ＣＯＯＨ（式中、ｍは２〜８の範囲内の整数である）の形態の二酸から誘導されたもの、及び１２個までの炭素からなる脂肪族α〜ω二酸を有するそのコポリマーが挙げられる。ポリオキサエステル、ポリオキサアミド、並びにアミン及び／又はアミド基を含有するポリオキサエステルは、以下の１つ以上にて記載されている：米国特許第５，４６４，９２９号、同第５，５９５，７５１号、同第５，５９７，５７９号、同第５，６０７，６８７号、同第５，６１８，５５２号、同第５，６２０，６９８号、同第５，６４５，８５０号、同第５，６４８，０８８号、同第５，６９８，２１３号、同第５，７００，５８３号、及び同第５，８５９，１５０号。ポリオルトエステルは、例えば、Ｄｏｍｂら編「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ」、Ｈａｒｄｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ．ｐｐ．９９〜１１８（１９９７）にＨｅｌｌｅｒにより記載されているものである。
【００３５】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、ポリ（乳酸）（「ＰＬＡ」）及びポリ（グリコール酸）（「ＰＧＡ」）、並びにそれらのコポリマーよりなる群から選択される。
【００３６】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤製剤は、グリココール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、Ｌ−リソホスホチジルコリン、ＤＭＳＯ及びプロテアーゼ阻害剤などの浸透促進剤を含有する。
【００３７】
いくつかの実施形態において、クルクミンは、特に例えば着臭剤などの鼻粘膜と結合する分子により標識される。
【００３８】
いくつかの実施形態において、クルクミンを含む製薬学的組成物は、製薬学的に許容され得る担体、親油性ミセル、リポソーム又はそれらの組み合わせを含む。好ましくは、親油性ミセル又はリポソームは、ガングリオシド、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン又はそれらの組み合わせを含む。
【００３９】
いくつかの実施形態において、製薬学的組成物は、神経細胞上の受容体部位に対して親和性を有する物質を含有する。
【００４０】
鼻腔内送達の特定の方法によれば、鼻腔内（例えば、嗅部及び／又は洞領域内）での製薬学的組成物の滞留時間を、例えば、吸収を高めるために、延長することが望ましいと思われる。そのため、製薬学的組成物は、所望により、鼻腔内での滞留時間を延長する薬剤である、生体接着性ポリマー、ゴム（例えば、キサンタンゴム）、キトサン（例えば、高純度カチオン性多糖）、ペクチン（又は鼻粘膜に適用された際に、ゲル様に増粘する又は乳化する任意の炭水化物）、ミクロスフェア（例えば、澱粉、アルブミン、デキストラン、シクロデキストリン）、ゼラチン、リポソーム、カルボマー、ポリビニルアルコール、アルギネート、アカシア、キトサン及び／又はセルロース（例えば、メチル若しくはプロピル；ヒドロキシル又はカルボキシ；カルボキシメチル又はヒドロキシルプロピル）とともに配合することができる。更なる手法として、投薬製剤の粘度を増大させることにより、薬剤の嗅上皮との接触を延長させる手段が提供することができる。製薬学的組成物は、鼻腔乳剤、軟膏又はゲルとして配合することができ、これらはそれらの粘度により局所適用における利点を付与する。
【００４１】
製薬学的組成物はまた、所望により、例えば酵素活性を阻害する、粘液粘度又は弾性を低下させる、粘膜毛様体クリアランス効果を低下させる、密着結合を開放する、及び／又は活性化合物を可溶化する薬剤などの吸収促進剤を含有することができる。化学的促進剤には、当該技術分野にて既知であり、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）、脂肪酸、胆汁酸塩、界面活性剤、及び／又は保存剤が挙げられる。浸透のための促進剤は、乏しい膜透過性、親油性の不足を呈する、及び／又はアミノペプチダーゼにより分解される化合物を配合する際に特に有用であることができる。製薬学的組成物中の吸収促進剤の濃度は、選択される薬剤及び製剤に応じて変動するであろう。
【００４２】
貯蔵寿命を延長するために、所望により製薬学的組成物に保存剤を加えることができる。好適な保存剤には、ベンジルアルコール、パラベン、チメロサール、クロロブタノール及び塩化ベンザルコニウム、並びにこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。保存剤の濃度は、使用する保存剤、配合される化合物、製剤などに応じて変動するであろう。いくつかの代表的な実施形態において、保存剤は２重量％又はそれ未満の量にて存在する。
【００４３】
製薬学的組成物は、所望により、例えば、欧州特許第０  ５０４  ２６３（Ｂ１）号に記載されている着臭剤を含んで臭気の感覚を提供し、組成物の吸入を補助して嗅上皮への送達を促進し、及び／又は嗅覚神経細胞による輸送を誘発することができる。
【００４４】
いくつかの実施形態において、クルクミンは、液体、粉末、スプレー、点鼻薬、ゲル、軟膏、又はそれらの組み合わせよりなる群から選択される製薬学的組成物で送達される。
【００４５】
いくつかの実施形態において、クルクミンは、ピペリンを含有する製薬学的組成物で送達される。
【００４６】
いくつかの実施形態において、本発明の方法は、製薬学的組成物を、例えば鼻粘膜などの、鼻腔の上部１／３内の嗅覚野に適用することを含む。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、製薬学的組成物を鼻腔の天井部に適用することを含む。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、チューブ、カテーテル、注射器、パックテイル、綿球、粘膜下注入、鼻腔内スプレー容器、又はそれらの組み合わせを使用することにより製薬学的組成物を適用することを含む。
【００４７】
送達のために、先端に取り付けられた細長い半可撓性チューブを有する、点鼻薬を圧搾可能な標準的なスプレー容器が提供される。チューブの外径は１ミリメートル未満であり、好ましくは０．５ｍｍ未満、より好ましくは０．２５ｍｍ未満である。チューブの退出孔が、好ましくはチューブの先端近辺の周壁に位置しており、それによりそこから退出するスプレーが上方に配向される。容器上には、退出孔が篩板に向かって上方に配向された際に指示するマーカーが存在する。
【００４８】
したがって、本発明によれば、鼻腔内スプレーデバイスが提供され、このデバイスは：
ａ）第一の開口部を有する中空容器、
ｂ）貫通孔と、第二の開口部を有する先端と、第三の開口部を有する基端とを有する可撓性チューブ、
ｃ）容器内に収容される有効量のクルクミンを含有する製剤、を備え、
このチューブの基端の第三の開口部は、中空容器の第一の開口部と流体連通している。
【００４９】
別の実施形態において、鼻腔内スプレーデバイスは：
ａ）第一の開口部を有する中空容器、
ｂ）貫通孔と、第二の開口部を有する側面と、第三の開口部を有する基端と、端面を有する先端とを有する可撓性チューブ、
ｃ）容器内に収容される有効量のクルクミンを含有する製剤、を備え、
【００５０】
このチューブの基端の第三の開口部は、中空容器の第一の開口部と流体連通している。
【００５１】
使用者は、チューブを鼻孔内壁の方へ配向し、チューブを内側へ鼻甲介上に案内するように上方へ向ける。チューブの長さは、使用者が容器の肩部を鼻孔に対して同一平面上とした際に、孔が篩板に隣接するように予め定められる。
【００５２】
チューブを鼻道を通して挿入することに対する安全性に懸念がある場合、チューブをバルーン様として、加圧により膨張して完全長となるようにすることもできる。
【００５３】
前鼻孔を介した送達
吸い込んだ空気の約１０％未満が、嗅細隙を介して移動することが報告されている。したがって、鼻腔に送達されたクルクミンの相当量が、鼻粘膜領域に存在しない。したがって、本発明の目的は、鼻粘膜に送達されるクルクミンの量を増大させることである。
【００５４】
文献にて、鼻腔内の気流を薄層として特徴づけると、鼻孔の前方１０％からの流線が嗅細隙に到達することが報告されている。
【００５５】
したがって、本発明のいくつかの実施形態において、少なくとも２５％のクルクミン含有製剤を、鼻孔の前方１０％内に送達する。好ましくは、少なくとも５０％のクルクミン含有製剤を、鼻孔の前方１０％内に送達する。より好ましくは、少なくとも７５％のクルクミン含有製剤を、鼻孔の前方１０％内に送達する。
【００５６】
いくつかの実施形態において、製剤の鼻孔の前方部内への重点的な送達が、実質的に鼻孔の前方１０％内に配置された案内チューブを提供することにより支援される。
【００５７】
いくつかの実施形態において、製剤の鼻孔の前方部への送達を支援するためのデバイスが提供され、このデバイスは：
ａ）鼻孔の開口部内に一致するように適合された環体、及び
ｂ）この環体から延び、鼻孔の前方１０％の領域内で環体に接続する案内チューブ、を備えている。
【００５８】
鼻孔のまさに開口部内の流線は、約９０°の角度で移動するため、案内チューブは、好ましくはその流線内へ製剤を送達する角度で配置される。環体は、好ましくは鼻孔の形状に対応する長円形である。
【００５９】
使用時、使用者は、製剤を含むスプレー容器を作動させると同時にゆっくり吸引する。製剤は、エアゾルとして薄層流で、案内チューブの前方部に送達される。製剤は案内チューブを通って移動し、エアゾルとして薄層流で後方端を退出する。したがって、製剤は、吸引により生成される吸い込んだ空気の薄層流線に従って鼻腔内に入るはずである。一旦これらの流線内に入ると、製剤は優先的に嗅細隙へ、したがって鼻粘膜へ移動する。
【００６０】
ヘリウム
いくつかの実施形態において、クルクミンは、空気中に上昇できるヘリウムを積載した微細気泡を介して鼻粘膜へ送達される。これは鼻粘膜が鼻腔の最も高い部分に位置する事実を利用する。理論的に、従来鼻腔内に送達されている適切な寸法のヘリウム充填微細気泡は、鼻腔内の最も高い地点−鼻粘膜に向かって上方に移動するはずである。一旦それらが配置されると、微細気泡は簡素な手持ちの非侵襲的超音波装置で破裂されて、それらの内容物を解放することができる。本発明は、鼻粘膜内に行き着くクルクミンの量を非常に増大させるであろう。
【００６１】
したがって、本発明によれば、神経治療薬を哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は：
ａ）神経治療薬（好ましくは、クルクミン）を含む、空気よりも軽い（好ましくはヘリウムガスを含む）複数の微細気泡を哺乳動物の鼻腔へ適用し、それにより微細気泡は哺乳動物の鼻腔の上部１／３に上昇し、その後神経治療薬が鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳へ輸送される、ことを含む。
【００６２】
他の実施形態において、クルクミンは、空気中に上昇できるヘリウムガスのボーラス内でエアゾルとして、鼻粘膜へ送達される。これも、鼻粘膜が鼻腔の最も高い部分に位置する事実を利用する。理論的に、従来鼻腔内に送達されているヘリウムボーラス及び内部のエアゾルは、鼻腔内の最も高い地点−鼻粘膜に集団で移動するはずである。一旦それらが配置されると、エアゾルは、鼻粘膜を含む鼻腔壁上に沈着することができる。本発明は、鼻粘膜内に行き着くクルクミンの量を非常に増大させるであろう。
【００６３】
したがって、本発明によれば、神経治療薬を哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は：
ａ）神経治療薬（好ましくは、クルクミン）のエアゾル液滴をヘリウムガスのボーラス内に提供し、
ｂ）製剤を哺乳動物の鼻腔に適用し、それにより製剤は、哺乳動物の鼻腔の上部１／３に上昇し、その後神経治療薬は鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳へ輸送される、ことを含む。
【００６４】
米国特許公開第２００３／０１９９５９４号（「Ｓｈａｈ」）は、組成物が７０％〜１００％のヘリウムを含み、組成物は例えば定量噴霧器などの鼻腔内スプレーデバイスに使用することができる、エアゾルとともに使用するための噴射組成物を開示している。Ｓｈａｈは、組成物が溶媒（例えばエタノールなどのアルコール）及び分散剤（例えばオレイン酸など）を更に含んでよいことを開示している。
【００６５】
したがって、本発明によれば、以下の製剤を包含する鼻腔内スプレーデバイスが提供され、この製剤は
ａ）有効量のクルクミンと、
ｂ）ヘリウムを含む噴射剤（好ましくは、少なくとも約７０重量％のヘリウム）と、
ｃ）（任意に）溶媒（例えば水又はエタノールなどのアルコール）と、
ｄ）（任意に）分散剤（例えばオレイン酸）と、を含む。
【００６６】
クルクミンプロドラッグ
治療化合物の高い親油性は、それを血管脳関門を容易に横断して脳組織を浸透できるものとするが、高い親油性はまた、通常、化合物が水に高い溶解性を有さないことも意味する。例えば、米国特許第２００３／０１５３５１２号は、親油性クルクミンが約０．００４ｍｇ／ｍｌのみの水溶性を有することを報告している。鼻腔内製剤は一般に５０μｌ〜２００μｌ（典型的には１００μｌ）の小用量で提供されるため、親油性化合物の十分な量を単回投与で提供して治療反応を生成することにおける課題が存在する可能性がある。
【００６７】
したがって、本発明の一態様は、治療化合物を水溶性プロドラッグの形態で提供することを含む。プロドラッグの高い水溶性により、大量のプロドラッグが単回投与で提供でき、鼻粘膜に入って鼻粘膜を横断して受動的に拡散する。プロドラッグが脳組織の境界に到達したら、このプロドラッグは（典型的には、脳エステラーゼによる化学的又は酵素的加水分解反応を介して）親油性親分子に代謝されて、脳組織容積内に拡散し、治療効果を提供することができる。
【００６８】
したがって、本発明によれば、クルクミンを哺乳動物の脳に投与するための方法が提供され、方法は：
ａ）水溶性クルクミンプロドラッグを含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用することであって、クルクミンプロドラッグが鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送されること、を含む。
【００６９】
いくつかの実施形態において、親油性親化合物は、追加された極性部分、又は永久荷電を有するエステルを形成することにより水溶性が付与されたフェノールである。好ましくは、エステルは極性部分を有する。好ましくは、極性部分は、第三級又は第四級窒素を含む。
【００７０】
したがって、いくつかの実施形態において、エステルは、極性部分としてアミノアルカンカルボン酸を含む。これらの化合物は、窒素化合物とカルボキシル基との間にアルカン基を有するエステル部分により特徴づけられる。好ましくは、部分は、末端アルキル基を有する。より好ましくは、アミノアルカンカルボン酸は、グリシネート部分、より好ましくは、例えばＮ，Ｎ，ジメチルグリシネートなどのメチル化グリシネート部分を含む。
【００７１】
したがって、本発明によれば、アミノアルキルカルボン酸部分を含むクルクミンエステルプロドラッグが提供される。好ましくは、アミノアルキルカルボン酸部分は、アミノアルカンカルボン酸部分を含む。いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸は、グリシネート部分を含む。そのような化合物を形成する方法は、Ｐｏｐ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．１３（１）１９９６，６２〜６９に見出される。
【００７２】
以下、図１ａ〜図１ｃを参照すると、（１）〜（３０）で表示された、本発明の新規なクルクミンプロドラッグが提供される。
【００７３】
したがって、いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、１つの末端メチル基（１）、２つの末端メチル基（２）、（１７）、（２０）、又は３つの末端メチル基（３）（１９）を含む。
【００７４】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、１つの末端エチル基（５）、２つの末端エチル基（６）（１８）、又は３つの末端エチル基（８）を含む。
【００７５】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、末端エチル基及び末端メチル基；末端エチル基及び２つの末端メチル基（１０）；又は２つの末端エチル基及び末端メチル基（９）を含む。
【００７６】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、末端プロピル基を含む。
【００７７】
いくつかの実施形態において、プロドラッグは、化合物（３）、（８）〜（１４）、（１７）〜（２０）のように、塩の形態である。好ましくは、塩には塩化物（１４）（１７）（１８）（２０）、ヨウ化物（１９）及び臭化物よりなる群から選択されるアニオンが挙げられる。
【００７８】
いくつかの実施形態において、プロドラッグは、エタン（１７〜１８）又はプロパン（１９〜２０）基がカルボキシル基と窒素基との間に位置するするエステル部分により特徴づけられ、好ましくは末端アルキル基を有する。
【００７９】
いくつかの実施形態において、プロドラッグは、カルボキシル基と窒素基との間に位置するアルカンが置換されている、エステル部分により特徴づけられる。いくつかの実施形態において、これは、カルボキシル基と窒素基との間に位置する末端エチル基（７）である。好ましくは、その部分は、第二の末端アルキル基を有する。
【００８０】
いくつかの実施形態において、クルクミンプロドラッグは、カルバモイル部分、好ましくは（カルボキシメチル）カルバモイル部分（１６）を含む。（１６）の（カルボキシメチル）カルバモイル部分は、Ｍｕｌｈｏｌｌａｎｄ，Ａｎｎａｌｓ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，１２，２４５〜８（２００１）に従って作製することができる。
【００８１】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、窒素複素環（２１、２３）を含む。いくつかの実施形態において、複素環は、酸素（２３）を含む。部分（２３）は、Ｐｏｐ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１３，３，４６９〜４７５（１９９６）、及びＴｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４に開示されている手順に従って作製することができる。部分（２１）は、Ｔｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４に開示されている手順に従って作製することができる。Ｐｏｐ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１３，３，４６９〜４７５（１９９６）は、（２１、２３）の様な窒素複素環部分を有するデキサナビノールが、約５〜７ｍｇ／ｍｌの溶解度を有することを開示している。
【００８２】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、Ｌ−プロリン基（１５）を含む。部分（１５）は、Ａｌｔｏｍａｒｅ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，２０，２００３，１７〜２６、及びＴｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４に開示されている手順に従って作製することができる。Ａｌｔｏｍａｒｅは、プロポフォールのＬ−プロリンエステルが、約１．１ｍｍｏｌ／ｍｌの溶解度を有するプロドラッグを提供することを報告している。
【００８３】
いくつかの実施形態において、アミノアルカンカルボン酸部分は、ベンゾエート基（２２）を含む。部分（２２）は、Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，８，９，１０８７〜１０９３，（１９９１）に開示されている手順に従って作製することができる。Ｂｕｎｄｇａａｒｄは、グリシネート部分のカルボキシルとアミノ基との間にベンゾエート部分（２２）を提供することにより、アシクロビルの溶解度がｐＨ約７にて１．４ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌに、及びｐＨ約５にて約３００ｍｇ／ｍｌに増大することを開示している。
【００８４】
他のクルクミングリシンエステルは、Ｍｉｓｈｒａ、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３（２００５）１４７７〜８６頁；Ｋｕｍａｒ、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｎｏ．４４，２０００，ｐｐ．７５〜７６；Ｋａｐｏｏｒ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．，２００７，Ａｐｒ．１８，２４８（２）２４５〜５０；Ｔｏｎｇ、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ  １７（３）２７９〜１８７  Ｍａｒｃｈ  ２００６；及びＭｉｓｈｒａ、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄ．Ｂｉｏｌｏｇｙ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３８，（２００５）１３５３〜１３６０に開示されている。
【００８５】
望ましいプロドラッグの特性
本発明のクルクミンプロドラッグは、３つの特質を有する必要がある：水に対する高い溶解性、水中での高い安定性、及び脳内での急速なクルクミンへの変換。
【００８６】
溶解度
文献は、グリシネート含有部分が、フェノール化合物に大幅により高い水溶性を付与し、典型的には親化合物の溶解度を２５〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲に増大させることを報告している。グリシネートによるそれらのエステル化による低溶解度フェノールに付与される溶解度の増大の例を、以下に示す：
【表２】
2012512247.tif 000004
（ａ）Ｐｏｐ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，８８，１１，１９９９，１１５６
（ｂ）Ｔａｋａｔａ、Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．，２００２，４３，２１９６
（ｃ）Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５
（ｄ）Ｈｕｓｓａｉｎ、Ｊ．ＰｈａｒｍＳｃｉ．，９１：７８５〜７８９，２００２
（ｅ）Ｔａｋａｔａ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，２１，１，１９９５，１８〜２３（溶解度は５０ｍＭと報告）
（ｆ）Ｋａｏ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１７，８，２０００，９７８〜９８４
【００８７】
更に、ｐＨは、フェノールの窒素含有エステルの溶解度に多大な影響を与えるように思われる。文献に報告されている、フェノールの窒素含有エステルの溶解度に対するｐＨの影響を、以下の表に示す：
【表３】
2012512247.tif 000005
（ａ）Ｔｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４。
（ｂ）Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，８，９，１０８７〜１０９３，（１９９１）。
【００８８】
文献は、殆どの場合、酸性ｐＨ（約４〜５）中でのエステルの付与が、水に対するその溶解度を約１０倍増大させることを示す。
【００８９】
また、特別なクラスのグリシネート様部分は、フェノール化合物の水溶性を更に増大させるように思われる。詳細には、フェノール化合物の水溶性を１００〜１０００ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度に増大させる追加の酸素を所有する多数のグリシネート様部分が存在する。そのような化合物の例を、下記に示す。
【００９０】
これらの化合物の試験は、それぞれが酸素含有部分によるアミンの末端置換により特徴づけられることを明らかにしている。これらは特に
ａ）（カルボキシメチル）カルバモイル部分（Ｍｕｌｌｈｏｌｌａｎｄ、Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，１２，２４５〜２４８（２００１））、
ｂ）Ｎ−アシルオキシメチル部分（Ｎｅｉｌｓｅｎ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，２００５，Ａｐｒｉｌ，２４，５，４３３〜４０）、又は、
ｃ）（オキシアルキル）アセトアミド部分（米国特許第５０７３６４１号）、
ｄ）グリシンベンゾエート（国際公開第９０／０８１２８号）、により特徴づけられる。
【００９１】
理論に縛られるものではないが、これらの部分は、適切な濃度において、ミセルを生成する界面活性剤として作用することができると思われる。実際に、（ジヒドロキシエチル）グリシネート部分が界面活性剤として作用し（米国特許第６８３１１０８号）、（カルボキシメチル）カルバモイル部分がミセルを生成することができることが報告されている（Ｓｈａｍｓｉ、Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２００５，２６，４１３８〜５２）。一実施形態において、プロドラッグ部分は、窒素及び末端酸素の両方を含有し、双性イオンを形成する。
【００９２】
したがって、本発明によれば、ミセルのクルクミンプロドラッグを含有する製剤が提供される。
【００９３】
（カルボキシメチル）カルバモイル部分（Ｍｕｌｌｈｏｌｌａｎｄ）は、高い溶解度（＞２０ｍｇ／ｍｌ）を有することから特に興味深い。その血中での急速な加水分解（ｔ１／２＝０．３９時間）は、脳エステラーゼによっても急速に加水分解されることを示すことができる。最後に、これは水中で比較的安定（ｔ１／２＝１６．９時間）であるように思われ、したがって酸性の水性溶液中で非常に安定であると思われる。
【００９４】
プロドラッグを塩に変換することは、同様にその水に対する溶解度を増大させることが報告されている。例えば、グリシン様エステルプロドラッグに関する国際公開第９０／０８１２８号は、それらのプロドラッグを塩に変換することにより、１５ｗ／ｖ％までの水溶性が生じることを報告している。Ｊｅｎｓｅｎ、Ａｃｔａ  Ｐｈａｒｍ．Ｎｏｒｄ．，３，（１）３１〜４０（１９９１）は、１つのアミノアルキルベンゾエートエステルの二塩化物塩が、２０℃で４０％  ｖ／ｖを超える水溶性を有することを見出したことを報告している。最後に、米国特許第４，４８２，７２２号は、メトラゾールグリシネートの付加塩が、約３０％の水溶性を有することを報告している。
【００９５】
安定性
本発明の製剤は望ましくは水性鼻腔スプレーの形態で使用されるため、本発明のエステルプロドラッグは、相当な時間中、水中で安定な状態に留まる必要がある。グリシネートエステルは、中性の水性溶液と比較して酸性の水性溶液中でより安定であるように思われる。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５は、フェノールエステルの安定性はｐＨにより影響を受け、僅かに酸性のｐＨ（ｐＨ  ３〜５）にて、１つのフェノールエステル（１７−ＤＭＡＢＥ２ＨＣｌ）は、溶液剤形に配合されるに十分な貯蔵寿命を有し、プロドラッグの製薬学的鼻腔スプレー溶液は、ｐＨ  ４にて、２５℃で約１９カ月の貯蔵寿命を有するであろうことを報告している。同様に、Ｋａｏ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１７，８，２０００，９７８〜９８４は、ｐＨ  ４．４におけるＬ−ドーパブチルエステルに関する最大の安定性、すなわちｐＨ４．４、（０．０５Ｍリン酸緩衝液）及び１０℃で１０％分解に関する見積もり時間を２．７年と計算し、僅かな酸性ｐＨ（ｐＨ  ３〜５）にて、エステルは溶液剤形に配合されるのに十分な、貯蔵寿命上の安定性を有するであろうと報告している。最後に、ベンゾエート含有グリシン様エステルプロドラッグに関するＰＣＴ国際公開第９０／０８１２８号は、１つのヒドロコルチゾン系プロドラッグが、ｐＨ  ４．０の水性溶液中で、それぞれ２５℃及び２０℃にて６．０及び１０．２年の貯蔵寿命を所有したことを報告している。
【００９６】
したがって、本発明のいくつかの実施形態において、クルクミン製剤は、ｐＨを約３．０〜５．５、好ましくはｐＨを約３．５〜５、好ましくはｐＨを約４〜５に設定する緩衝液を含有する。本発明のいくつかの実施形態において、クルクミン製剤は、ｐＨを約３〜４に設定する緩衝液を含有する。製剤のｐＨをこれらの範囲内に設定することにより、製剤は商業的に満足し得る貯蔵寿命を有することができると思われる。
【００９７】
また、本発明のいくつかの実施形態において、以下の製剤を包含する鼻腔内スプレーデバイスが提供され、この製剤は
ａ）有効量のクルクミンと、
ｂ）３〜５．５のｐＨに設定された緩衝剤と、を含む。
【００９８】
変換速度
プロドラッグが脳に到達したら、エステル化されたプロドラッグが非常に急速にその親化合物に変換されることが望ましい。単純に言えば、プロドラッグは、脳から排出される前に、脳エステラーゼにより親化合物に変換される必要がある。プロドラッグが親化合物に十分に急速に変換されるか否かを理解するためには、脳又はＣＳＦ内におけるプロドラッグの滞留時間を知ることが重要である。
【００９９】
鼻腔内に導入された化合物の濃度対時間のプロファイルを再考すると、２つの相モデルにより特徴づけられる挙動が現れる。第一の相において、薬物は、急速にピーク濃度に到達した後、約１〜２時間以内にピーク濃度の約１０〜２５％に急速に低下する。第二の相は、次の２４時間にわたる非常に遅い薬物濃度の低下により特徴づけられる。
【０１００】
したがって、薬物の濃度が、１〜２時間の範囲内に存在する（すなわち、ピーク濃度の約１０〜２５％）と概算される場合、薬物は脳内に約２４時間存在すると仮定することができる。したがって、有用であるためには、脳内でのプロドラッグの親化合物への変換速度は、約１２時間を超えない半減期ｔ１／２により特徴づけられるはずである。
【０１０１】
少なくとも３つの例にて、文献は、グリシネート含有フェノールエステルの脳ホモジネートによる親化合物への変換速度を報告している。これらの報告書の２つは、非常に急速な変換である。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５は、エストラジオールグリシネートエステルの親エストラジオールへの約１〜２分での急速な変換を報告している。Ｋａｏ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１７，８，２０００，９７８〜９８４は、ベンジルＬ−ドーパエステル（Ｌ−ドーパ親がグリシネート部分を含む）の約１分での急速な変換を報告している。
【０１０２】
約１２時間を超えない半減期ｔ１／２により特徴づけられる、プロドラッグの親への変換速度を有することが望ましく、また文献はグリシネートエステルの親フェノール化合物への約１〜２分での急速変換の半減期を報告しているため、グリシネートプロドラッグは、脳内で完全に親プロドラッグに変換されることを仮定するべきことが明らかである。一研究者（Ｔｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４）が、プロポフォールグリシネートエステルの親プロポフォールへの比較的非常に遅い変換を報告していることに留意するべきである。しかしながら、関係する構造−活性の関係を再考することにより、プロポフォールのヒドロキシル部分は、プロポフォールの隣接するイソプロピル基により大きく立体的に妨害されていることが示される。理論に縛られるものではないが、これらのプロポフォールグリシネートのエーテル性酸素の大きな立体障害が、グリシネートエステルからプロポフォールへの遅い変換の理由であると考えられる。
【０１０３】
対照的に、ベンジルＬ−ドーパエステル及びエストラジオールグリシネートエステルの両方のエーテル性酸素は、立体障害の遭遇が非常に少なく、それゆえ、脳エステラーゼは、エーテル性酸素に対してその分子の少なくとも一面から自由に接近する機会を有する。その結果、脳エステラーゼによる加水分解が、遥かに急速に起こることができる。
【０１０４】
クルクミングリシネートエステルにより同様の分析を行い、Ｌ−ドーパ及びエストラジオールと同様、クルクミングリシネートエステルは遥かに小さい立体障害に遭遇し、それゆえ脳エステラーゼは、クルクミングリシネートエステルのエーテル性酸素に対してその分子の少なくとも一面から自由に接近する機会を有することが明らかとなっている。
【０１０５】
更に、別の研究グループが、プロポフォールジメチルグリシネートエステルの親への遥かに速い変換を報告しており、Ｔｒａｐａｎｉグループはこの相違を認識しているように思われる。Ａｌｔｏｍａｒｅ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，２０，２００３  １７〜２６を参照されたい。
【０１０６】
最後に、Ｋａｏの論文が、脳ホモジネート中と血漿中でのＬ−ドーパエステルのＬ−ドーパへの変換に関する非常に類似した半減期を報告していることは注目に値する。脳ホモジネート及び血漿中でのプロポフォールグリシネートエステルのプロポフォールへの変換に関する半減期の高い一致もまた、Ｔｒａｐａｎｉにより報告されている。血漿中での変換を、脳ホモジネート中でのグリシネートエステルの変換を合理的に概算するのに使用する場合、血漿中でのグリシネート含有フェノールエステルの親フェノール化合物への変換に関して更に文献を閲覧することができる。表ＩＩＩに報告された文献は、下記を報告している。
【表４】
2012512247.tif 000006
（ａ）Ｐｏｐ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ，８８，１１，１９９９，１１５６
（ｂ）Ｋａｏ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１７，８，２０００，９７８〜９８４
（ｃ）Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，８，９，（１９９１）１０８７〜１０９３
（ｄ）Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５
（ｅ）Ｔｒａｐａｎｉ、Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１７５（１９９８）１９５〜２０４
（ｆ）Ｔａｋａｔａ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，２１，１，１９９５，１８〜２３
【０１０７】
したがって、血漿中での変換に関する文献報告を使用して、脳ホモジネート中でのグリシネートエステルの可能性のある変換時期を合理的に概算すると、脳内でのグリシネート含有フェノールエステルの親フェノール化合物への変換は、再度、非常に急速であると思われる。
【０１０８】
したがって、非立体障害フェノールグリシネートエステルは、脳ホモジネート中で急速に親フェノールに変換されるため、またジメチルグリシネートフェノールエステルは血漿中で急速に変換されるため、グリシネート含有クルクミンエステルの親クルクミン化合物への変換速度は、脳環境内で急速であると考えられる。
【０１０９】
プロドラッグの製造方法
Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５は、以下のアミノ−アルカン−カルボン酸部分を含むエステルの製造方法を教示している：３−Ｎ，ＮジメチルアミノブチルエステルＨＣｌ（３−ＤＭＡＢＥ２ＨＣｌ）；３−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノプロピオニルエステル塩酸塩（ＤＥＡＰＥ２ＨＣｌ）；３−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアミノブチルエステルイオダイド（３−ＴＭＡＢＥ２イオダイド）及び１７−Ｎ，ＮジメチルアミノブチルエステルＨＣｌ（１７−ＤＭＡＢＥ２ＨＣｌ）；
【０１１０】
いくつかの実施形態において、水溶性エステルプロドラッグは、フェノール親化合物をジメチルグリシンと反応させることにより形成される。文献は、フェノール親化合物をジメチルグリシンと反応させることにより、親油性フェノール化合物を水溶性にすることを報告している。例えば、Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５は、親化合物のジメチルグリシンエステルを形成することにより、１７Ｂ−エストラジオールの水溶性を０．００８ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌへ（１００倍増加）増大させることを報告している。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍは更に、このエステルはラット脳ホモジネートにより容易に加水分解されて親化合物を提供し、かつプロドラッグの鼻腔内投与は、プロドラッグの同等の静脈内用量と比較して、５〜８倍高い１７Ｂ−エストラジオールのＣＳＦ濃度をもたらしたことを見出した。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍは、プロドラッグが１７Ｂ−エストラジオールの脳への標的を定めた鼻腔内送達を提供することを結論付けた。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、親フェノール化合物からの水溶性エステルプロドラッグの形成は、Ｈｕｓｓａｉｎ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，９１，３，Ｍａｒｃｈ  ２００２，７８５〜７８９に記載されている方法に実質的に従って行われる。詳細には、ジメチルグリシンＨＣｌ及び塩化オキサリルを、ＨＣｌガスの発生が停止するまで、穏やかに４０℃に温める。次に、窒素ガスを溶液全体にバブリングして未反応塩化オキサリルを除去する。得られた酸塩化物をジメチルホルムアミドに溶解し、親フェノール化合物の塩化メチレン溶液に攪拌しながら滴加する。反応混合物を３時間還流する。次にエステルを単離し、ＨＣｌ塩に変換する。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、親化合物からの水溶性エステルプロドラッグの形成は、Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５に記載されている方法に実質的に従って行われる。詳細には、４−（ジメチルアミン）酪酸塩酸塩（２．０ｇ、０．０１２ｍｏｌ）又は３−（ジメチルアミン）プロピオン酸塩酸塩（２．２ｇ、０．０１２ｍｏｌ）を出発物質として使用する。アミノ酸を塩化オキサリル（１．６ｍＬ、０．０１８ｍｏｌ）とともに、透明な黄色溶液が形成されるまで、穏やかに短時間還流する。次に、溶液混合物を窒素流により非常に穏やかにフラッシュして過剰な塩化オキサリルを除去し、固体を残留させる（酸塩化物）。
【０１１３】
３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノブチルエステル塩酸塩（３−ＤＭＡＢＥ２ＨＣｌ）；３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノプロピオニルエステル塩酸塩（３−ＤＥＡＰＥ２ＨＣｌ）；及び３−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアミノブチルエステルイオダイド（３−ＴＭＡＢＥ２イオダイド）を部分として有するフェノールエステルは、好適な酸塩化物の後、Ｈｕｓｓｉａｎ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１９８８，５，１，４４〜４７に報告されている手順に従って合成される。アルコールエステル、１７−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノブチルエステル塩酸塩（１７−ＤＭＡＢＥ２ＨＣｌ）は、酸塩化物を、反応が発熱性であるために氷浴中で１０ｍＬのＮ，Ｎ，ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中にゆっくり溶解することにより調製される。次に、親フェノール化合物を塩化メチレン中に溶解し、酸塩化物のＤＭＦ溶液を、攪拌しながら親フェノール化合物溶液に滴加する；反応混合物を４５分間穏やかに還流した後、濾過する。濾液をビュッヒモデルのロータリーエバポレーター（ニューヨーク州、ウェストベリー（Westbury））を使用して蒸発させた後、少量の、８０：２０のＣＨＣｌ３とＭｅＯＨの中に再溶解する。混合物の内容物を分離し、シリカゲルカラムを使用して精製する。溶媒混合物を蒸発させ、生成物を少量の塩化メチレン中に再溶解した後、攪拌しながら塩化水素ガスを溶液全体に注意深くバブリングする。十分なジエチルエーテルを加えてエステル塩酸塩を沈殿させて溶液を混濁させた後、混合物を冷蔵庫内にて４℃で一夜置いておく。最終生成物を、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃモデルＤ７５ポンプ（イリノイ州、シカゴ（Chicago））を使用して、真空デシケーター内で室温での溶媒蒸発により収集し、使用時まで、デシケーター内で保管する。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、親化合物からの水溶性エステルプロドラッグの形成は、Ｔａｋａｔａ、Ｊ．Ｌｉｐｉｄ．Ｒｅｓ．，２００２，４３，２１９６〜２２０４に記載されている方法に従って実質的に行われる。詳細には、親フェノール化合物（４．８ｍｍｏｌ）の乾燥ピリジン溶液に、５．７ｍｏｌのＮ，Ｎ，−ジメチルグリシンＨＣｌ及び５．７ｍｍｏｌのジシクロヘキシルカルボジイミドを加える。反応混合物を室温で２０時間攪拌し、形成したジシクロヘキシル尿素を濾過により除去する。溶媒を蒸発させた後、残留物を１００ｍｌの水で処理し、重炭酸ナトリウムでアルカリ性にする。次に、溶液を酢酸エチル（１００ｍｌ×３）で抽出する。有機層を酢酸エチルとともに無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させる。残留物をｎ−ヘキサン酢酸エチル（８：２、ｖ／ｖ）を溶離液として使用したフラッシュカラムパックしたＷａｋｏｇｅｌ  ＬＰ４０、６０Ａにより分画する。単離されたエステルを、３％  ＨＣｌジオキサン溶液を含有するイソプロピルエーテル中に直接収集し、沈殿させ、アセトンから再結晶化させて、親フェノール化合物のＨＣｌ塩を得る。
【０１１５】
脳濃度
クルクミンの水溶性プロドラッグの鼻腔内導入が、高濃度のクルクミンを脳に送達できる証拠は、Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍ、ＡＡＰＳ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  Ｔｅｃｈ，２００２，３，１，ａｒｔｉｃｌｅ  ５のエストラジオールをベースとする研究に見出されている。１７β−エストラジオールは、ほぼｌｏｇ  Ｐ＝３．１〜４．０のオクタノール／水分配係数を有する２７２ダルトンのフェノールである。したがって、エストラジオールは、それぞれが親油性であり、フェノール小分子であるという点でクルクミンと類似している。また、クルクミンと同様、１７β−エストラジオールも、乏しいバイオアベイラビリティによる不都合を有している。更に、Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍは、エストラジオールが水に対して高い溶解度を有さないため、有効用量（０．１ｍｌ中０．１ｍｇ）の鼻腔投与にとって非実用的なものとなっていると報告している。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍは、エストラジオールをジメチルグリシネート部分で修飾して、エストラジオールの水溶性を０．００８ｍｇ／ｍｌから約０．８ｍｇ／ｍｌに（１００倍増加）増大させ、またエストラジオールを３−ＤＥＡＰＥ２ＨＣｌ部分で修飾して、エストラジオールの水溶性を０．００８ｍｇ／ｍｌから約２０ｍｇ／ｍｌに（１０００倍超増加）増大させることを報告している。したがって、水に対する溶解度が約０．００４ｍｇ／ｍｌに過ぎないクルクミンの様な親油性のフェノール小分子の溶解度は、非常に増大させることができる。
【０１１６】
ヒトに関する鼻腔内用量の典型的な容積は、０．２ｍｌまでであり得るため、また上記の表Ｉでは、２０ｍｇ／ｍｌの程度での溶解度の増大が報告されているため、鼻腔投与は約２０ｍｇ／ｍｌ×０．２ｍｌ＝４ｍｇ／用量までの最大負荷量を達成することが期待できる。１日２度の鼻孔毎の２回投与により、１日当たり８用量が提供されるため、約３２ｍｇ／日までのエストラジオールを鼻腔投与できると考えられる。この量は、約０．５ｍｇ／ｋｇに近い全身濃度を提供する。
【０１１７】
更に、Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍは、０１ｍｇ／ｋｇの１７β−エストラジオールの水溶性プロドラッグの鼻腔導入は、約３０ｎｇ／ｍｌ（１７−ＤＭＡＢＥ２−ＨＣｌに関する）〜約６６ｎｇ／ｍｌ（３−ＤＭＡＢＥ２−ＨＣｌに関する）のエストラジオール（estrdiol）のピーク脳脊髄液（ＣＳＦ）濃度を生じ、これは約０．０７５μＭ〜０．１５μＭの化合物のモル濃度を提供することを報告している。Ａｌ−Ｇｈａｎａｎｅｅｍの薬物動態学的結果は、２０ｍｇ／ｋｇのＬ−ドーパの水溶性エステルプロドラッグの鼻腔導入が、約１０〜２０μｇ／ｍｌピーク脳脊髄液（ＣＳＦ）濃度を生じることを報告したＫａｏの結果と非常によく一致する。したがって、エストラジオール又はクルクミンなどの親油性の小分子フェノール化合物の水溶性プロドラッグの０．５ｍｇ／ｋｇ鼻腔導入は、約０．７５μＭまでのＣＳＦ濃度を提供すると思われる。０．１〜１．０μＭのクルクミンは、アミロイドβオリゴマーのインビトロ形成を阻害し、分化した神経芽腫細胞内でＡβ１〜４２オリゴマーのインビトロ毒性を遮断する（Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，７，Ｆｅｂ．１８．，２００５，５８９２〜５９０１）ことが報告されているため、クルクミンの水溶性プロドラッグの鼻腔内導入は、アルツハイマー病に対する治療的利益を提供するであろうクルクミンの脳濃度を達成する、実現可能な投与計画を可能とするであろうと思われる。
【０１１８】
二重相クルクミン
いくつかの実施形態において、クルクミンは、２つの別個の製剤相の中に存在する。第一の相は、好ましくは、クルクミンを鼻粘膜に急速に送達する急速放出相である。クルクミンの急速送達は、例えばＵＧＴ及びＰ４５０などの、クルクミンを代謝する酵素系を一時的に無効にする効果を有するであろう。第二の相は、クルクミンを鼻粘膜にゆっくり送達する遅延放出相である。一旦これらの酵素系が一時的に無効にされると、酵素による代謝妨害が実質的に存在しない環境内で、遅延放出相がクルクミンをゆっくり放出する。
【０１１９】
したがって、本発明によれば、以下の製剤が提供され、この製剤は、
ａ）有効量のクルクミンを含有し、酵素系を一時的に無効にする第１の急速放出相と、
ｂ）有効量のクルクミンを含有し、神経変性疾患を治療する第２の遅延放出相と、を含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態において、第一の急速放出相相は、粘膜付着剤、及び例えばハッカ油などの油よりなる群から選択することができる。ハッカ油は、独立してＵＧＴ及びＰ４５０酵素を阻害する特質を有する。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、第二の遅延放出相は、リポソーム及び熱可塑性ポリマー（例えばＰＬＧＡなど）よりなる群から選択することができる。
【０１２２】
本発明によれば、
ａ）クルクミンを含有するポリマー微粒子デポーと、
ｂ）粘膜付着剤と、を含む製剤が提供される。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、ポリマー微粒子デポー上のコーティングとして存在する。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、別個の微粒子として存在する。
【０１２５】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、キトサン及びセルロースよりなる群から選択される化合物を含有する。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、粘膜付着剤は、クルクミンを更に含有する。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、ポリマー微粒子デポーは、リポソームである。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、ポリマー微粒子デポーは、熱可塑性生体吸収性ポリマーである。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、クルクミンは、ミクロスフェア内に収容される。Ｋｕｍａｒ、Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｐｈｉｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００２  Ａｐｒ．４６（２）２０９〜２１７は、クルクミンが、アルブミン又はキトサンのいずれかのミクロスフェア内に負荷された場合、破裂効果とそれに続く遅延放出により特徴づけられる二相放出パターンが起きることを報告している。この二相効果は、クルクミンの第一の用量が放出されて鼻粘膜内の酵素活性を阻害し、続いて第二の用量がゆっくり放出されて、嗅覚神経細胞により取り込まれ、脳に輸送されるという言及した願望とよく一致している。いくつかの実施形態において、クルクミンは、二相放出効果を示すミクロスフェア内に収容される。
【０１３０】
クルクミンによる酵素阻害
クルクミンは酵素による代謝を受け易いが、クルクミンは、まさにそれらの酵素の阻害剤としても公知である。例えば、Ｈｏｎｇ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，２００３  Ｏｃｔ．１０，３１０（１）２２２〜７は、ｈＰｇＰ、ｈＭＲＰ１及びｈＭＲＰ２遺伝子でトランスフェクトした細胞内でのＥＧＣＧのクルクミンによる共処置が、これらの細胞内でＥＧＣＧの蓄積を増大させたことを報告している。
【０１３１】
クルクミンは、多剤耐性タンパク質１（ＭＲＰ１）、多剤耐性タンパク質２（ＭＲＰ２）の両方に影響を与えることが報告されている。クルクミンは、ＩＣ５０値１５μＭ〜５μＭでＭＲＰ−１及びＭＲＰ−２により仲介される輸送の両方を阻害したように思われる。ＷｏｒｔｅｌＢｏｅｒ、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．，２００３  Ｄｅｃ．１６：１２，１６４２〜５１。ＷｏｒｔｅｌＢｏｅｒは、ＭＲＰ阻害と、ＭＲＰ阻害剤の代謝との間の複雑な相互作用も認識した。Ｃｈｅａｒｗａｅ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００６，Ｆｅｂ．５７（３）３７６〜８８は、約１４．５μＭのＩＣ５０でＭＲＰ１を阻害するクルクミンを報告している。
【０１３２】
注目すべきは、Ｈｏｎｇ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２００３  Ｏｃｔ．１０，３１０（１）２２２〜７が、クルクミンによるＭＲＰの阻害が、ＭＤＣＫＩＩ／ＭＲＰ１及びＨＴ−２９細胞内にて緑茶カテキンＥＧＣＧの量を有意に増大させたことを報告していることである。したがって、クルクミンは治療効果を提供し、またＥＧＣＧのバイオアベイラビリティを増大させることができるため、クルクミンとＥＧＣＧの両方を同一の製剤中に提供することには特別な利点が存在する。
【０１３３】
クルクミンは、主にグルクロン酸抱合を介して代謝されるように思われる。Ｐａｎ、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．，１９９９，２７，１，４８６〜４９４。しかしながら、クルクミンはグルクロン酸抱合を阻害することも繰り返し示されている。Ｂａｓｕ、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．，２００４，Ｊｕｌ．３２（７）７６８〜７３頁は、クルクミンがヒトＬＳ１８０結腸細胞及びマウス十二指腸の両方の中で、ＭＰＡグルクロン酸抱合を一時的に阻害することを報告している。Ｂａｓｕ，ＰＮＡＳ，Ｍａｙ  ３，２００５，１０２（１８）６２８５〜９０は、クルクミンに対する暴露後の細胞内ＵＧＴ１ａ７及びＵＧＴ１Ａ１０活性の阻害を報告している。Ｂａｓｕ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９，Ｊａｎ．９，２００４，１４２９〜１４４１は、クルクミンは可逆的にＵＧＴを標的として、阻害を生じることを報告している。一般に、クルクミンは、暴露から約１〜２時間後に、ＵＧＴ活性の最大阻害を与えるように思われる。Ｂａｓｕ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，３０３（２００３）９８〜１０４（図１）は、クルクミンによるＵＧＴ１Ａ１の阻害は、暴露から約１時間後に約９５％に到達することができ、約１０時間後に対照値の約８０％に戻ることを報告している。Ｎａｇａｎｕｍａ、Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，２００６  Ｊｕｌ．２９（７）１４７６〜９は、クルクミンによるＣａｃｏ−２細胞内での１−ナフトールとの結合が、ＵＧＴ活性を中程度に阻害することを報告している。
【０１３４】
クルクミンによるＵＧＴの強力な阻害により、クルクミンは癌化学療法用の前処置として提案されており、かつＭＰＡ投与前のクルクミンを用いた経口前処置によるグルクロン酸抱合の一時的な阻害が、マウスにおいて、抗原刺激による脾臓細胞障害性Ｔ−リンパ球増殖の免疫抑制を６倍増大させたことが報告されている。
【０１３５】
しかしながら、クルクミンによるＵＧＴ活性の増大を報告する一研究者（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｌｏｇｔ、Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２４，１０，１６５１〜５６，２００３）が存在する。
【０１３６】
クルクミンによるグルクロン酸抱合阻害は可逆的であるため、クルクミンは、薬物−薬物相互作用の懸念を有さずに、後のクルクミンの治療的用量による酵素活性の阻害のための、鼻粘膜の前処置に使用することができると思われる。
【０１３７】
したがって、いくつかの実施形態において、クルクミンの第一用量が患者に鼻腔内投与され（鼻粘膜内の酵素活性を阻害し）た後、クルクミンの第二用量が、第一用量の少なくとも約１５分後、患者に鼻腔内投与され（脳に移動され）る。
【０１３８】
シトクロムｐ４５０酵素は鼻粘膜内で顕著であることが周知である。Ｏｅｔａｒｉ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９６，Ｊａｎ．１２，５１（１）３９〜４５頁は、クルクミンが、ラット肝臓内でＰ４５０を強力に阻害することを報告している。Ｔｈａｐｌｉｙａｌ、Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ．２００１，Ｊｕｎｅ  ３９（６）５４１〜７は、インビトロ及びインビボの両方での、クルクミンによるシトクロムＰ４５０イソ酵素の阻害を報告した。
【０１３９】
Ｚｈｏｕ、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｖ．，２００４  Ｆｅｂ．３６（１）５７〜１０４は、クルクミンがＰｇｐの阻害剤であることを報告している。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、ピペリンがグルクロン酸抱合阻害剤として使用されている。Ｒｅｅｎ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９３，Ｊｕｌ．２０，４６（２）２２９〜３８頁は、ピペリンをグルクロン酸抱合の強力な阻害剤として報告している。Ｓｈｏｂａ、Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．，１９９８  Ｍａｙ  ６４（４）３５３〜６は、ピペリンの前投与が、ヒト内でクルクミンのバイオアベイラビリティを２０００％増大させることを報告している。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤は、ピペリンの類似体である。好ましくは、ピペリン類似体は、アンチエピレプシリンである。アンチエピレプシリンの投与はセロトニン合成の増大にも有効であり（Ｌｉｕ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９８４  Ｄｅｃ．１，３３（２３）３８８３〜６）、抗てんかん薬として研究されている（Ｗａｎｇ、Ｂｒａｉｎ  Ｄｅｖ．１９９９  Ｊａｎ．２１（１）３６〜４０）。したがって、その鼻腔内投与は、有意な問題に繋がらないはずである。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤は、界面活性剤である。Ｋｕｒｋｅｌａ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００３  Ｆｅｂ．７；２７８（６）３５３６〜４４は、数種のＵＧＴ酵素が、界面活性剤、すなわちＴｏｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００によりほぼ完全に阻害されたことを報告している。好ましくは、界面活性剤は非イオン性界面活性剤である。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤は、例えばＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）などの粘液溶解剤である。Ｔａｋａｔｓｕｋａ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，２００６  Ｊｕｎ  １９，３１６（１〜２）１２４〜３０は、粘液溶解剤（ＮＡＣ）と界面活性剤Ｔｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００）との同時投与が腸吸収を相乗的に上昇させることを報告している。更に、粘膜に対する損傷は可逆的であることが報告された。
【０１４４】
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤は、ＮＳＡＩＤである。好ましい実施形態において、ＮＳＡＩＤは、ニフルム酸である。Ｍａｎｏ、Ｂｉｏｐｈａｒｍ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｐｏｓ．，２００６  Ｊａｎ．２７（１）１〜６は、特にＵＧＴ活性に対するＮＳＡＩＤ及びニフルム酸の阻害効果を報告している。
【０１４５】
緩衝液による酵素阻害
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤として低ｐＨ緩衝液が使用される。Ｂａｓｕ、ＰＮＡＳ，Ｍａｙ  ３，２００５，１０２，１８，６２８５〜９０は、ＵＧＴ１Ａ７による親油性物質の最大グルクロン酸抱合は、ｐＨ範囲６〜９において最大となり、ｐＨ  ５にてＵＧＴ１Ａ７によるグルクロン酸抱合活性はほぼゼロとなることを報告している。同様に、Ｂａｓｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９，Ｊａｎ．９，２００４，１４２９〜４１は、ｐＨがＵＧＴ活性のレベルを劇的に変更することができ、ｐＨ５はＵＧＴ１Ａ７及びＵＧＴ１Ａ１０のそれぞれに関してほぼ全てのグルクロン酸抱合活性を阻害することを報告している。したがって、低ｐＨの製剤は、グルクロン酸抱合活性を完全に阻害するのに有効であると思われる。本発明のいくつかの実施形態において、クルクミン製剤は、ｐＨを約３．０〜５．５、好ましくはｐＨを約３．５〜５、好ましくはｐＨを約４〜５に設定する緩衝液を含有する。本発明のいくつかの実施形態において、クルクミン製剤は、ｐＨを約３〜４に設定する緩衝液を含有する。これらの引用範囲を下回ると、製剤の酸性の性質が鼻腔を刺激する危険性がある。この範囲を上回ると、グルクロン酸抱合の阻害が極小となり得る。米国特許第６，１８７，３３２号（「Ｇｅｒｎ）」）は、ヒト鼻内で長期間そのｐＨを維持することができる、ｐＨ  ４〜５の緩衝した流動鼻腔スプレー製剤を開示している。Ｇｅｒｎは、クエン酸及びリン酸緩衝剤を含有する製剤を開示している。
【０１４６】
したがって、本発明によれば、以下の製剤を包含する鼻腔内スプレーデバイスが提供され、この製剤は、
ａ）有効量のクルクミンと、
ｂ）ヒト鼻内で長期間製剤のｐＨを４〜５に維持することができる、４〜５のｐＨを有する緩衝剤（好ましくは、シトレート又はホスフェート）と、を含む。
【０１４７】
吸収促進剤
いくつかの実施形態において、吸収促進剤は、胆汁塩である。Ｃｈａｖａｎｐａｔｉｌ、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ，２００５  Ｍａｙ，６０（５）３４７〜９。好ましい実施形態において、胆汁塩は、デオキシコール酸ナトリウム、カプリン酸ナトリウム、及びタウログリココール酸ナトリウム、並びにＥＤＴＡよりなる群から選択される。
【０１４８】
いくつかの実施形態において、グルクロン酸抱合阻害剤としてマグネシウム＋２が使用される。Ｗｏｎｇ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，（１９６８）１１０，９９は、約１０ｍＭを超えるＭｇ＋２濃度は、約８５％のグルクロン酸抱合酵素活性の阻害に有効であったことを報告している。
【０１４９】
冷却
ＵＧＴ酵素は温度に対して非常に高い感受性を有するように、本発明者らにより認識される。したがって、粘膜内層の温度を低下させることは、ＵＧＴによるクルクミンの酵素的グルクロン酸抱合を低下させるのを期待するのは合理的である。実際に、Ｃａｓｔｕｍａ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，（１９８９）２５８，７２３〜７３１により、モルモットの正常な肝臓ミクロソーム内のＵＤＰ−グルクロン酸転移酵素の酵素活性は、ミクロソームの温度を約３７℃から約１０℃に低下させた際に約３倍低下したことが報告されている。
【０１５０】
したがって、本発明者らは、鼻粘膜を一時的に冷却してクルクミンのグルクロン酸抱合を阻害することに基づいて本発明を考案した。
【０１５１】
一実施形態において、本発明の製剤は、例えばメントールなどの冷却薬剤を含有する。
【０１５２】
一実施形態において、本発明の製剤は、吸熱性の溶質を含有する。好ましい実施形態において、吸熱性溶質は、吸熱工程により水に溶解する強塩、酸又は塩基である。より好ましくは、吸熱性溶質は、塩である。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、吸熱性溶質は、重炭酸ナトリウム（ΔＨ＝＋１９．１ｋＪ／ｍｏｌ）、炭酸水素カリウム（ΔＨ＝＋５．３ｋｃａｌ／ｍｏｌ）、硫酸カリウム（ΔＨ＝＋２３．７ｋＪ／ｍｏｌ）、塩化カリウム（ΔＨ＝＋１７．２ｋＪ／ｍｏｌ）、塩化ナトリウム（ΔＨ＝＋３．９ｋＪ／ｍｏｌ）、及びリン酸二水素カリウム（ΔＨ＝＋１９．６ｋＪ／ｍｏｌ）からなる群から選択してよい。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、吸熱性溶質は、硫酸マグネシウムであってよく、これは冷却及びグルクロン酸抱合阻害の両方を促進するであろう。
【０１５５】
したがって、本発明によれば、以下の製剤を包含する鼻腔内スプレーデバイスが提供され、この製剤は、
ａ）有効量のクルクミンと、
ｂ）吸熱性溶質（好ましくは硫酸マグネシウム）と、を含む。
【０１５６】
クルクミンは、水溶性に乏しいことが周知である。鼻粘膜は水性ベースのため、鼻粘膜を横切った製剤からのクルクミンの輸送には問題がある。
【０１５７】
したがって、鼻粘膜を横切ったクルクミンの輸送を増大させるため、いくつかの実施形態において、クルクミンは、有効量のクルクミン−混和性溶媒を含有する製剤中で送達される。好ましくは、溶媒は、ＤＭＳＯ及びエタノールよりなる群から選択される。クルクミンは、ＤＭＳＯ及びエタノールに対して非常に高い溶解性を有することが周知である。この製剤が鼻粘膜に適用されると、溶媒が鼻粘膜内の水と混合し、クルクミンをその混合物中に可溶とする。
【０１５８】
好ましい実施形態において、溶媒は、ＤＭＳＯである。ＤＭＳＯは、無毒であり、かつ血管脳関門を一時的に開放することもできる。Ｋｌｅｉｎｄｉｅｎｓｔ、Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒ．Ｓｕｐｐｌ．２００６，９６，２５８〜６２、及びＳｃｈｅｌｄ、Ｒｅｖ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．，１９８９  Ｎｏｖ−Ｄｅｃ．；１１  Ｓｕｐｐｌ  ７；Ｓ１６６９〜９０。
【０１５９】
したがって、本発明によれば、以下の製剤を包含する鼻腔内スプレーデバイスが提供され、この製剤は、
ａ）有効量のクルクミンと、
ｂ）ＤＭＳＯ及びエタノールからなる群から選択される溶媒と、を含む。
【０１６０】
溶解度の増大
いくつかの実施形態では、ポリエチレングリコール６０００（ＰＥＧ  ６０００）又はポリビニルピロリドンＫ−３０（ＰＶＰ  Ｋ３０）により形成されたものなどの固体ディスパージョンを用いて、クルクミンの水に対する溶解度を増大させる。Ｒｕａｎ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．２００５  Ｊｕｌ  １；３８（３）：４５７〜６４。Ｐａｒａｄｋａｒ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２００４  Ｍａｒ  １；２７１（１〜２）：２８１〜６。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、β−シクロデキストリン（ＢＣＤ）及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）により形成されるものなどの包接複合体を用いて、水に対するクルクミンの溶解度を増大させる。Ｒｕａｎ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．２００５  Ｊｕｌ  １；３８（３）：４５７〜６４。
【０１６２】
いくつかの実施形態において、クルクミンは、ＰＣＴ国際出願公開ＷＯ２００８０５１４７４号、及び２００６年１０月１９日に出願された米国特許仮出願第６０／８６２，０５７号（総じて「Ｓａｆａｖｙ」）に従って製造されたクルクミン−ＰＥＧ抱合体の形で送達されてよく、これらの明細書は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。Ｓａｆａｖｙは、これらクルクミン−ＰＥＧ抱合体の１つの水溶性が約１．５ｇ／ｍｌであると報告している。
【０１６３】
他のクルクミン類似体
ＡＤを処置する能力を向上させるか又はあまり影響を与えないかのいずれかのクルクミン及びその機能的断片の修飾も、用語「クルクミン」に含まれる。そのような修飾には、例えば、１つ又はそれ以上の官能基の付加、削除、又は置換が挙げられる。これらの修飾は、クルクミン又はその機能的断片の構造、立体配座又は機能的活性を向上させるか又は有意に変更しないかのいずれかであろう。加えて、クルクミン又はその機能的断片は、その精製を補助し、その活性にあまり影響を与えないエピトープタグ又は他の配列の付加により修飾することができる。本明細書に使用されるように、クルクミンに関連した用語「機能的断片」は、酸化を阻害する、又はβアミロイドオリゴマーの形成を阻止するために維持するクルクミンの任意の部分を意味することが意図される。所望であれば、機能的断片は、酸化又はオリゴマー形成を阻害する能力と有利に協働する活性を有するクルクミンの領域を含むことができる。
【０１６４】
本発明によれば、公知のクルクミン類似体を使用することもできる。
【０１６５】
いくつかの実施形態において、クルクミン類似体は、米国特許出願公開第２００６／００６７９９８号に見出されるものである。
【０１６６】
クルクミンは、エタノール、アルカリ、ケトン、酢酸及びクロロホルムに可溶である。クルクミンは、水に不溶である。したがってクルクミンは親油性であり、一般に脂質、例えば本発明のコロイド状薬物送達システムに使用される多数のものと容易に結合する。特定の実施形態において、クルクミンは、金属キレートとして配合することもできる。
【０１６７】
本明細書で使用されるように、クルクミン類似体は、クルクミンに対する構造的類似性により、癌細胞上にクルクミンと同様の抗増殖又は抗アポトーシス効果を示す化合物である。クルクミンと同様の抗癌効果を有し得るクルクミン類似体には、Ａｒ−トゥメロン、メチルクルクミン、デメトキシクルクミン、ビスデメトキシクルクミン、ナトリウムクルクミネート、ジベンジルメタン、アセチルクルクミン、フェルロイルメタン、テトラヒドロクルクミン、１，７−ビス（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−１，６−ヘプタジエン−３，５−ジオン（クルクミン１）、１，７−ビス（ピペロニル）−１，６−ヘプタジエン−３，５−ジオン（ピペロニルクルクミン）１，７−ビス（２−ヒドロキシナフチル）−１，６−ヘプタジエン−２，５−ジオン（２−ヒドロキシルナフチルクルクミン）、１，１−ビス（フェニル）−１，３，８，１０−ウンデカテトラエン−５，７−ジオン（シンナミルクルクミン）及び同様物が挙げられる（Ａｒａｕｊｏ及びＬｅｏｎ、２００１；Ｌｉｎら、２００１；Ｊｏｈｎら、２００２；Ｉｓｈｉｄａら、２００２年も参照されたい）。クルクミン類似体には、クルクミンの（Ｚ、Ｅ）及び（Ｚ、Ｚ）異性体などのクルクミン異性体もまた挙げてよい。関連した実施形態において、クルクミンと同様の抗癌効果を有するクルクミン代謝産物も本発明に使用することができる。既知のクルクミン代謝産物には、テトラヒドロクルクミン及びヘキサヒドロクルクミンのグルクロニド、及びジヒドロフェルラ酸が挙げられる。特定の実施形態において、クルクミン類似体又は代謝産物は、金属キレート、特に銅キレートとして配合することができる。他の好適なクルクミン誘導体、本発明に使用するのに好適なクルクミン類似体及びクルクミン代謝産物は、当業者に明らかであろう。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、クルクミン類似体は、米国特許出願公開第２００５／０１８１０３６号に見出されるものである。
【０１６９】
商業的なクルクミンは、３つの主な成分：クルクミン（７７％）、デメトキシクルクミン（１７％）、及びビスデメトキシクルクミン（３％）を含み、これらは、多くの場合「クルクミノイド」と称される。本明細書で使用されるように、「クルクミン」は、これら商業的なクルクミン３つの主な成分の任意の１つ又はそれ以上、及びこれらの薬剤の任意の活性誘導体を含むと定義される。これは、クルクミンの天然及び合成誘導体、並びにクルクミノイドを含み、２つ以上のクルクミノイド又はクルクミン誘導体の任意の組み合わせを含む。クルクミン誘導体及びクルクミノイドには、参照により本明細書に特に組み込まれる米国特許出願公開第２００２００１９３８２号に開示されている誘導体が挙げられる。
【０１７０】
いくつかの実施形態において、クルクミン類似体は、米国特許出願公開第２００５／０２６７２２１号に見出されるものである。
【０１７１】
特定の態様において、１，７，−ビス（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−１，６−ヘプタジ−エン−３，５−ジオンは、本発明に使用してよいクルクミンである。使用してよい他のクルクミン類似体（クルクミノイド）には、例えば、デメトキシクルクミン、ビスデメトキシクルクミン、ジヒドロクルクミン、テトラヒドロクルクミン、ヘキサヒドロクルクミン、ジヒドロキシテトラヒドロクルクミン、ヤクチノンＡ及びヤクチノンＢ、並びにそれらの塩、酸化剤、還元剤、配糖体及びそれらのエステルが挙げられる。それらの類似体は、その両方がその全体において参照により本明細書に組み入れられる米国特許出願第２００３０１４７９７９号、及び米国特許第５，８９１，９２４号に記載されている。
【０１７２】
使用してよい他のクルクミン類似体（クルクミノイド）には、ジヒドロキシクルクミン及びＮＤＧＡが挙げられる。
【０１７３】
クルクミン類似体の更なる例には、（ａ）フェルラ酸、（すなわち、４−ヒドロキシ−３−メトキシ桂皮酸；３，４−メチレンジオキシ桂皮酸；及び３，４−ジメトキシ桂皮酸）；（ｂ）芳香族ケトン（すなわち、４−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−ブテン−２−オン；ジンゲロン（zingerone）；−４−（３，４−メチレンジオキシフェニル−２−ブタノン；４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−３−ブテン−２−オン；４−ヒドロキシバレロフェノン；４−ヒドロキシベンジラクトン；４−ヒドロキシベンゾフェノン；１，５−ビス（４−ジメチルアミノフェン−イル）−１，４−ペンタジエン−３−オン）；（ｃ）芳香族ジケトン（すなわち、６−ヒドロキシジベンゾイルメタン）（ｄ）コーヒー酸化合物（すなわち、３，４−ジヒドロキシ桂皮酸）；（ｅ）桂皮酸；（ｆ）芳香族カルボン酸（すなわち、３，４−ジヒドロキシヒドロ桂皮酸；２−ヒドロキシ桂皮酸；３−ヒドロキシ桂皮酸及び４−ヒドロキシ桂皮酸）；（ｇ）芳香族ケトカルボン酸（すなわち、４−ヒドロキシフェニルピルビン酸）；並びに（ｈ）芳香族アルコール（すなわち、４−ヒドロキシフェネチルアルコール）が挙げられるが、これらに限定されない。本発明で使用できるこれらの類似体及び他の代表的な類似体は、更にその全体が参照により本明細書に組み入れられる国際公開第９５１８６０６号及び同第０１０４０１８８号に記載されている。
【０１７４】
クルクミン又はその類似体は、植物から精製され、又は周知の、当業者により使用される方法を用いて化学的に合成され得る。植物由来のクルクミン及び／又はその類似体は、ショウガ科クルクマ属（Zingiberaceae Curcuma）、例えばクルクマ・ロンガ（Curcuma longa）（ターメリック）、クルクマ・アロマチカ（Curcuma aromatica）（野生ターメリック）、クルクマ・ゼドアリア（Curcuma zedoaria）（ゼドアリー（zedoary））、クルクマ・キサントリザ（Curcuma xanthorrhiza）、マンゴージンジャー（mango ginger）、インドネシアン・アロールート（Indonesian arrowroot）、イエロー・ゼドアリー（yellow zedoary）、ブラック・ゼドアリー（black zedoary）及びガランガル（ｇａｌａｎｇａｌ）などの植物からの抽出物により得ることができる。ターメリックからクルクミノイドを単離する方法は、当該技術分野にて周知である（Ｊａｎａｋｉ及びＢｏｓｅ，１９６７）。また更に、クルクミンは商業的に入手してもよく、例えばクルクミンは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｃｏ（ミズーリー州、セントルイス（St. Louis））から得てもよい。
【０１７５】
本発明で使用するべきクルクミン及びその類似体の調製には、任意の従来の方法を使用することができる。例えば、クルクミンを本質的に含有する食品添加物であるターメリック色素は、ターメリック根茎の乾燥製品から、高温でエタノールにより、高温の油及び脂肪若しくはプロピレングリコールにより、又は室温〜高温でヘキサン若しくはアセトンにより、抽出して生成することができる。代替的に、それらは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる特開２０００−２３６８４３号、特開平１１−２３５１９２号及び特開平６−９４７９号、並びに米国特許出願第２００３０１４７９７９号に開示されている方法により生成することができる。
【０１７６】
特定の実施形態において、少なくとも１つのクルクミン及び／又はその類似体の精製製品を使用してよい。代替的に、製薬学的又は食品として許容し得ない不純物を含有しない限り、その半精製又は粗製品を使用してよい。
【０１７７】
好ましい類似体
βアミロイドに対するクルクミン類似体の有効性についての限られた試験が存在する。Ｐａｒｋ、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，６５，９，Ｓｅｐｔ．２００２は、βアミロイド傷害に対するＰＣ１２細胞のインビトロ保護を提供する以下のクルクミン類似体の能力に関する試験を報告している。
４’’−（３’’’−メトキシ−４’’’−ヒドロキシフェニル）−２’’−オキソ−３’’−エンブタニル３−（３’−メトキシ−４’ヒドロキシフェニル）プロピオネート（３１）；
１−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−７−（４−ヒドロキシフェニル）−１，６−ヘプタジエン−３，５−ジオン（デメトキシクルクミン）（３２）；
１，７−ビス（４−ヒドロキシフェニル）−１，６−ヘプタジエン−３，５−ジオン（ビスデメトキシクルクミン）、（３３）；及び、
１，７−ビス（４−ヒドロキシフェニル）−１−ヘプテン−３，５−ジオン（３４）。
【０１７８】
これら化合物のそれぞれを、図１ｄに示す。Ｐａｒｋは、表ＩＶに示すように、以下の結果を報告している：
【表５】
2012512247.tif 000007
ａＥＤ５０は、５０％の細胞生存率の達成に要するサンプル濃度を表す。
【０１７９】
Ｐａｒｋのデータの解析により、化合物（３１）〜（３４）のそれぞれは、クルクミンよりも強力なβアミロイドに対する神経保護剤であり、化合物（３１）及び化合物（３４）は、５〜１０倍のオーダーでより強力であることが明らかとなる。したがって、好ましい実施形態において、化合物（３１）〜（３４）のそれぞれは、クルクミンプロドラッグの製造及び使用のために、親化合物として単独で使用され、又は組み合わせて使用される。親化合物のそれぞれは、Ｐａｒｋにて開示された方法により得てよい。
【０１８０】
Ｋｉｍ、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｅｔｔ．３０３（２００１）５７〜６１は同様に、以下のクルクミン類似体のβアミロイド傷害に対するＰＣ１２細胞をインビトロ保護する能力に関する試験を、表Ｖに報告している。
【表６】
2012512247.tif 000008
【０１８１】
Ｋｉｍのデータの解析により、デメトキシクルクミン及びビスデメトキシクルクミン化合物のそれぞれが、クルクミンよりも強力なβアミロイドに対する神経保護剤であり、デメトキシクルクミン及びビスデメトキシクルクミン化合物が１．５〜２倍のオーダーでより強力であることが明らかとなる。このデータは、上記のＰａｒｋにより報告されたデメトキシクルクミン及びビスデメトキシクルクミンの相対的な有効性と実質的に一致する。
【０１８２】
Ｃｈｅｎ、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，２００６  Ｆｅｂ  １；４０（３）：５２６〜３５より、化合物ヒドロキシクルクミン及びジヒドロキシクルクミンは、Ｍａｚｕｍｄｅｒ、「Ｃｕｒｃｕｍｉｎ  ａｎａｌｏｇｓ  ｗｉｔｈ  ａｌｔｅｒｅｄ  ｐｏｔｅｎｃｉｅｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ＨＩＶ−１  ｉｎｔｅｇｒａｓｅ  ａｓ  ｐｒｏｂｅｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｃｔｉｏｎ」  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０（１９９７），ｐｐ．３０５７〜３０６３に記載されるように、クルクミンのＡｌＣｌ３−ピリジンとの脱メチル化反応により得ることができる。
【０１８３】
クルクミンのフェニル環置換類似体は、Ｍａｚｕｍｄｅｒ、「Ｃｕｒｃｕｍｉｎ  ａｎａｌｏｇｓ  ｗｉｔｈ  ａｌｔｅｒｅｄ  ｐｏｔｅｎｃｉｅｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ＨＩＶ−１  ｉｎｔｅｇｒａｓｅ  ａｓ  ｐｒｏｂｅｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｃｔｉｏｎ」Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０（１９９７），ｐｐ．３０５７〜３０６３；米国特許第６，９００，３５６号（Ｇｏｋａｒａｊｕ）（この明細書が、その全体を参照として本明細書に組み込まれる）；及びＲｏｕｇｈｌｅｙ、「Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｕｒｃｕｍｉｎ」Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１（１９７３），ｐｐ．２３７９〜２３８８に記載されるような利用可能な方法に基づき、２，４−ペンタンジオンの２当量の置換ベンズアルデヒドとの縮合により合成できる。
【０１８４】
一般に、Ｃｈｅｎ、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，２００６  Ｆｅｂ  １；４０（３）：５２６〜３５に記載されるように、２，４−ペンタンジオン（１．０ｇ、０．０１モル）及び酸化ホウ素（０．４９ｇ、０．００７モル）をＥｔＯＡｃ（１０ｍｌ）に溶解し、４０℃で０．５時間撹拌し、続いて対応するベンズアルデヒド（０．０２モル）及びホウ酸トリブチル（４．６ｇ、０．０２モル）を添加し、更に０．５時間撹拌してよい。続いて、ＥｔＯＡｃ（１０ｍｌ）中のｎ−ブチルアミン（１ｍｌ）を３０分間かけて滴状に添加することができる。４０℃で更に４時間撹拌した後、混合物を一晩放置し、反応を完了させることができる。次いで混合物をＨＣｌ（０．４Ｎ、１５ｍｌ）で加水分解してよく、水層をＥｔＯＡｃで３回抽出することができる。混合有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥することができる。減圧下で溶媒を除去した後、残りのペーストをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、シクロヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で精製し、ＥｔＯＨから再結晶させて純粋なクルクミン類似体を得ることができる。
【０１８５】
他の疾病
他の実施形態において、本発明は、有効量のクルクミンを含有する製剤を、篩板を横断して脳内へと鼻腔内投与して、脳卒中を処置することに関する。
【０１８６】
他の実施形態において、本発明は、有効量のクルクミンを含有する製剤を、篩板を横断して脳内へと鼻腔内投与して、多発性硬化症を処置することに関する。
【０１８７】
他のポリフェノールプロドラッグ
いくつかの実施形態において、クルクミンは、第二の親油性治療薬剤、好ましくはレスベラトロルなどの別のポリフェノールと組み合わせられる。いくつかの実施形態において、クルクミンは、銀杏抽出物、レスベラトロル及び緑茶カテキンよりなる群から選択される別の化合物とともに製剤中に提供された後、鼻腔投与される。
【０１８８】
また本発明によれば、銀杏抽出物を哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は、
ａ）銀杏抽出物を含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用し、銀杏抽出物は鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送されること、を含む。
【０１８９】
また本発明によれば、レスベラトロルを哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は、
ａ）レスベラトロルを含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用し、ここで、レスベラトロルは鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送されること、を含む。
【０１９０】
また本発明によれば、緑茶カテキンを哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は、
ａ）カテキンを含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用し、ここで、カテキンは鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送されること、を含む。
【０１９１】
クルクミンに関する上述したプロドラッグの原理は、例えばフラボノイド種の化合物などの他の治療的フェノール化合物（好ましくは、治療的ポリフェノール化合物）にも適用することができる。好ましい実施形態において、この化合物はレスベラトロル、ヒスピジン、ゲニステイン、エラグ酸、１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３、緑茶カテキンＥＧＣＧ、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）からなる群から選択される。別の実施形態において、この化合物は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）である。また本発明によれば、フラボノイドプロドラッグを哺乳動物の脳に輸送するための方法が提供され、この方法は、
ａ）フラボノイドプロドラッグ（例えばレスベラトロルプロドラッグなど）を含有する製薬学的組成物を哺乳動物の鼻腔の上部１／３に適用し、フラボノイドプロドラッグは鼻粘膜を介して吸収され、哺乳動物の脳に輸送される、ことを含む。
【０１９２】
レスベラトロル
特に好ましい実施形態において、フラボノイドプロドラッグは、レスベラトロルである。
【０１９３】
通常、赤ワイン中に見出されるポリフェノール化合物であるレスベラトロルは、ＡＤ病理学の複数のメカニズムに影響を与えると思われることから、アルツハイマー病の可能な処置として推奨されている。Ａｎｅｋｏｎｄａ、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，５２，２００６，３１６〜２６。
【０１９４】
第一に、レスベラトロルは脳組織内のβアミロイドの量を低下させることが示されている。レスベラトロルがこれを達成するメカニズムは、論議の対象となっている。最近の一論文はレスベラトロルがＢＡＣＥ１酵素の特異的な阻害剤であると結論付けており、ＩＣ５０は約１５μＭである。Ｊｅｏｎ、Ｐｈｙｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００６  Ｎｏｖ．２（Ｅ−ｐｕｂ）。他の最近の論文は、プロテオソームが関与するメカニズムを介して、レスベラトロルがβアミロイドの細胞内分解を促進することによってβアミロイド含有量を低下させることを報告している。Ｍａｒａｍｂａｕｄ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０（４５），３７３７７〜８２。
【０１９５】
第二に、レスベラトロルは、βアミロイド線維の形成を阻害すると考えられる。Ｒｉｖｉｅｒｅ、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００６  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １（Ｅ−ｐｕｂ）。
【０１９６】
第三に、２０μＭのレスベラトロルは、ラット海馬神経において、βアミロイドが誘発する神経毒性に対して神経保護効果を有し、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）の活性化を介してこの神経防護作用を提供すると考えられる。Ｈａｎ、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００４，１４１，９９７〜１００５。Ｈａｎ、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２００６  Ｊｕｌ．３１８（１）２３８〜４５（Ｅｐｕｂ  ２００６年３月３０日）は、ラット脳内のレスベラトロルに関する特定の血漿膜結合部位の存在を報告し（Ｋｉ＝１０２ｎＭ）、βアミロイド誘導の神経毒性に対するラット海馬細胞の保護におけるレスベラトロル類似体の有効性が、それらの明らかな親和性と相関することに注目している。
【０１９７】
レスベラトロルがＰＫＣを介して作用するという仮定は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の非アミロイド生成性プロセシングも、ＰＫＣの活性化を介して作用すると考えられるため特に興味深い。
【０１９８】
第四に、アルツハイマー病のいくつかの仮説には、脳の重金属の高い濃度による酸化が含まれる。レスベラトロルに関して、レスベラトロルは銅の非常に強力なキレート化剤であることが報告されている。Ｂｅｌｇｕｅｎｄｏｕｚ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５３，１３４７〜１３５５，１９９７。
【０１９９】
第五に、Ａｎｅｋｏｎｄａ、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，５２，２００６，３１６〜２６は、加齢メカニズムとＡＤは複雑に関連し、これらのメカニズムは、カロリー制限管理とカロリー制限模倣物の両方により調節でき、その主要なメディエーターがＳＩＲＴ１タンパク質であることを報告している。Ｈｏｗｉｔｚ、Ｎａｔｕｒｅ，２００３，４２５，１９１〜１９６は、試験した小分子の中でもレスベラトロルが最高レベルのＳＩＲＴ１活性化を示したことを報告している。Ｃｈｅｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，４８，４０３６４〜７４は、レスベラトロルが小膠細胞内でＮＦ−ＫＢシグナル伝達を顕著に低下させることを見出し、この利益を、レスベラトロルによるＳＩＲＴ１の誘導に帰した。同様に、Ｋｉｍ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，２００６  Ｊｕｎ．，１７，６，１０６９〜７５は、ＮＦ−ＫＢ活性の調節が、βアミロイド誘導による神経毒性に対するレスベラトロルの神経保護作用に関係することを報告している。
【０２００】
第六に、レスベラトロルは周知の酸化防止剤であり、５〜２５μＭのレスベラトロルは、培養された海馬細胞を酸化窒素関連の神経毒性に対して保護する能力を示している。Ｂａｓｔｉａｎｅｔｔｏ、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，２０００，１３１，７１１〜７２０。同様に、Ｓａｖａｓｃａｎ、Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｇｙ，２００３  Ｎｏｖ−Ｄｅｃ．，４９（６）３８０〜３は、レスベラトロルが、βアミロイド関連の酸化ストレスに対する細胞生存率を維持し、細胞内フリーラジカル捕捉剤グルタチオンを高めることによりその抗酸化作用を発揮することを報告している。
【０２０１】
レスベラトロルのバイオアベイラビリティは、よく研究されている。レスベラトロルは腸及び肝臓内でグルクロン酸抱合を極めて受け易いように思われるため、レスベラトロルの経口バイオアベイラビリティは「ほぼゼロ」であると結論付けられている。Ｗｅｎｚｅｌ、Ｍｏｌ．Ｎｕｔｒ．Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓ．，２００５，４９，４７２〜４８１。したがって、トランス−レスベラトロルがヒト血清中にて遊離形態ではなくグルクロニド形態で存在することが見出されたことから、Ｖｉｔａｇｌｉｏｎｅ、Ｍｏｌ．Ｎｕｔｒ．Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓ．，２００５  Ｍａｙ  ４９（５），４９５〜５０４は、レスベラトロルの食事による消費の健康上の効果に関するいくつかの疑問を提示している。したがって、トランス−レスベラトロルに関する鼻腔内の原理は、支持されると思われる。
【０２０２】
それにも関わらず、レスベラトロルは脳に到達すると、相当の滞留時間を有すると思われる。Ｅｌ−Ｍｏｈｓｅｎ、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２００６，９６，６２〜７０は、胃内投与から約１８時間後の脳内のレスベラトロル濃度は尚、２時間にて測定したものの４３％であったことを報告している。Ｗａｎｇ、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，９５８（２００２），４３９〜４４７は、レスベラトロルの腹腔内投与が、その投与から４時間後に脳内でピーク濃度を与えることを報告している。
【０２０３】
トランス−レスベラトロルは、約２２８の分子量を有し、非常に親油性が高い（約３．１４のオクタノ−ル−水分配係数Ｌｏｇ  Ｐを有する）。しかしながら、その水に対する溶解度は非常に低い（＜０．０１ｍｏｌ／Ｌ）。したがって、トランス−レスベラトロルに関するプロドラッグの原理は、支持されると思われる。
【０２０４】
ハイブリッド
この節では、クルクミンと他のポリフェノールとの間のハイブリッドを表す、本発明の他のクルクミノイド（curcminoid）薬を開示する。
【０２０５】
図２〜図１６は、クルクミンと、様々な他の天然ポリフェノールとのハイブリッドである様々なクルクミン誘導体を開示する。これら誘導体のそれぞれは、クルクミンの中間のジケトン構造がフェノール基で置き換えられているトリフェノール化合物である。得られた化合物は、クルクミンの２つのフェノール間の間隔を保持し、また追加のポリフェノールのビフェノール間隔も所有している。
【０２０６】
図２は、ルクミン、レスベラトロル、及び２つのクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの構造を開示している。それぞれのハイブリッドがどのようにクルクミン及びレスベラトロルのそれぞれのフェノール間の間隔を保持しているかに注目されたい。
【０２０７】
図３は、クルクミン−レスベラトロルＩハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２０８】
図４は、クルクミン−レスベラトロルＩＩハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２０９】
図５は、中央フェノール基及び側部フェノール基のそれぞれにおいて３つのヒドロキシル基を有するクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２１０】
図６は、クルクミン、レスベラトロル及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのフェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【０２１１】
図７は、図６のクルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２１２】
図８は、図６のハイブリッドと同様であるが、ベースのクルクミン分子のメトキシ基が維持されている。
【０２１３】
図９は、クルクミン、オキシレスベラトロル及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びトリヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【０２１４】
図１０は、クルクミン、ピセタノール及びそのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びトリヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【０２１５】
図１１は、クルクミン−レスベラトロルハイブリッドの作製方法を開示し、ここで、天然化合物の全てのヒドロキシル／フェノールがハイブリッドで表され、トリヒドロキシル側部フェノール基及びジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【０２１６】
図１２は、クルクミン、ＢＤＭＣ、レスベラトロル及びそれらのクルクミンハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物の全てのフェノールがハイブリッドで表され、ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びヒドロキシ又はジヒドロキシル中央フェノール基を提供している。
【０２１７】
Ｎａｒｌａｗａｒ、Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎ．Ｄｉｓ．，２００７，４（２〜３）８８〜９３は、ある種のクルクミンのオキサゾール及びピラゾール類似体が、低いマイクロモル範囲において、γ−セクレターゼの阻害剤として作用することを報告している。興味深いことに、これらのオキサゾール及びピラゾール類似体は、天然クルクミンと実質的に同等の抗酸化活性を有することが報告されている。Ｓｅｌｖａｍ、Ｂｉｏｏｒｇ．＆  Ｍｅｄｉｃ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １５（２００５）１７９３〜１７９７。したがってこれらの分子は、アルツハイマー病の治療薬として非常に有益な場合がある。これらクルクミンのオキサゾール及びピラゾール類似体の一般的特徴は、天然クルクミンの２，４ジケトン要素を環状Ｎ−含有複素環に置換することである。この環状要素は、分子の回転自由度を低下させると考えられる。
【０２１８】
２，４ジケトン要素の位置に環状要素を持つ別のこのような分子を図１２に示す。図１２のクルクミノイドが、アルツハイマー病に対する優れた性能（天然クルクミンと比較して）を有するであろうことが考えられるのには、少なくとも４つの理由がある。
【０２１９】
第１に、クルクミノイドの元のメトキシ置換基を脱離することは、このクルクミノイドが、上記（３３）に示すＢＤＭＣの様な挙動をより示すことを意味する。Ｐａｒｋ及びＣｈｅｎにより先に報告されたように、ＢＤＭＣは、βアミロイドによる毒性傷害を免れるのに、天然クルクミンの約２倍の効力がある。したがって、この図１２のクルクミノイドは、βアミロイドによる毒性傷害を免れるのに、天然クルクミンの約２倍の効力があるはずである。
【０２２０】
第２に、図１２のクルクミノイドのＢＤＭＣ様性質は、Ｆｉａｌａ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．２００７  Ｊｕｌ  ３１；１０４（３１）：１２８４９〜５４で報告されるように、ＡＤ患者の末梢マクロファージの先天性免疫応答の欠陥を修正するはずである。Ｆｉａｌａによれば、先天性免疫応答の活性化末梢マクロファージは、脳内アミロイドプラークの有利な排除に関与すると考えられている。しかし、多くのＡＤ患者において、これらマクロファージは、β−アミロイドの取り込みに欠陥があり、沈着したアミロイドプラークを排除できないようにして、脳内にプラークが増加し、小膠細胞が誘発する神経炎症の原因となる。生じた炎症により、βアミロイド産生が亢進し、それにより悪循環が誘導される。Ｆｉａｌａは、ＢＤＭＣは末梢マクロファージにおけるこの欠陥の修正に関与するクルクミノイドであり、０．１μＭの濃度で最適に作用することを報告している。
【０２２１】
第３に、図１２のクルクミノイドの中央環状要素は、この回転自由度を低下させ、それにより外側フェニル基のヒドロキシルが互いに離れている構造を固定すると考えられている。クルクミンとコンゴレッドとの間の構造類似性が、それぞれの分子の強力なアミロイド結合の理由であると報告されているため、最も強力なアミロイド結合体であるクルクミンの構造は、外側フェニル基のヒドロキシルが互いに離れていると考えられる。したがって、図１２のクルクミノイドは、天然クルクミンに優るアミロイド結合性を有するはずである。
【０２２２】
第４に、この分子の試験により、図１２に示すように、これは、一般にレスベラトロルの構造特性を実質上全て持つことが明らである。したがって、この図１２の分子が、クルクミンとレスベラトロルの両方の治療的性質を持つであろうと考えられる。マイクロモル量のレスベラトロルは、サーチュインの発現を顕著に亢進し（Ｈｏｗｔｉｚ、Ｎａｔｕｒｅ．２００３  Ｓｅｐ  １１；４２５（６９５４）：１９１〜６、サーチュインは、アミロイドプロセシングのα−アミロイド生成経路を増大させることが知られている（Ｑｉｎ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００６  Ａｕｇ  ４；２８１（３１）：２１７４５〜５４）。神経毒性を示すβ−アミロイドタンパク質の産生はβ−アミロイド経路を介して起こると考えられているため、これは都合がよい。
【０２２３】
したがって、この図１２の分子は、従来のクルクミンの利点を全て持つだけではなく、
ｉ）より良好な傷害回避性（ＢＤＭＣ特性による）
ｉｉ）より良好なマクロファージ活性化（ＢＤＭＣによる）
ｉｉｉ）より良好なアミロイドへの結合（回転自由度の低下）
ｉｖ）非アミロイド生成性プロセシング（レスベラトロル誘導性サーチュイン発現による）も持つと考えられる。
【０２２４】
注目すべきことに、Ｎａｒｌａｗａｒ、Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎ．Ｄｉｓ．，２００７，４（２〜３）８８〜９３では、クルクミンのオキサゾール及びピラゾール類似体は、その回転自由度の低下により、天然クルクミンの金属キレート化能を持たないであろうと予測されている。クルクミンのオキサゾール及びピラゾール類似体は天然クルクミンのキレート化能を持たないかもしれないが、図１２の分子はレスベラトロルのキレート化能を保持するであろうことが予測される。レスベラトロルは強力なキレート化剤であるため、図１２の分子は強力なキレート化能を持つと予測される。
【０２２５】
図１３は、ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びヒドロキシ中央フェノール基を有する、図１２の化合物の作製方法を提供てしている。図１３に示されるクルクミン類似体分子は、１−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンである。反応体の１つにおけるメトキシ基を単純に除去することにより、図１３に示すのと実質的に同様の方法で３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンを作製することができる。
【０２２６】
図１４は、ヒドロキシルデメトキシ側部フェノール基及びジヒドロキシ中央フェノール基を有する、図１２の化合物の作製方法を提供している。図１４に示されるクルクミン類似体分子は、１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンである。
【０２２７】
図１５は、クルクミン、ピセタノール及びこれらのハイブリッドを開示し、ここで、天然化合物のヒドロキシルの大部分がハイブリッドで表され、２つの天然化合物が共有している位置において、末端フェノール基にジヒドロキシル及び中央フェノール基に単一ヒドロキシルを提供している。Ｋｉｍ、Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．，２００７  Ｊａｎ；１０９５：４７３〜８２は、ピセタノール処理が、ＡβによるＰＣ１２細胞の処理により誘導されるＲＯＳの細胞内蓄積を減弱し、ヌクレオソーム間ＤＮＡ断片化、核凝縮、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の切断、及びカスパーゼ−３の活性化を含むＡβ−誘導性アポトーシス機構を阻害することを報告している。図１５に示されるクルクミン−ピセタノール類似体分子は、１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼンである。反応体の１つにおけるメトキシ基を単純に除去することにより、図１５に示すのと実質的に同様の方法で３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼンを作製することができる。
【０２２８】
図１６は、図１５の化合物の作製方法を提供している。
【０２２９】
図５、７、１１、１３、１４及び１６に示す最終分子の作製方法は、Ｙａｎｇ、Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌ，（２００７）６，３５〜４３に開示されるレスベラトロル（resveratol）類似体の作製方法の改変により得られる。
【０２３０】
したがって、いくつかの実施形態において、
ａ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｂ）１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｃ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、及び
ｄ）３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、からなる群から選択される少なくとも１つの構造を含むクルクミン類似体が利用される。
【０２３１】
いくつかの実施形態において、１−ジヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンを含むクルクミン類似体が提供される。いくつかの実施形態では、３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンを含むクルクミン類似体が提供される。いくつかの実施形態では、１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼンを含むクルクミン類似体が提供される。いくつかの実施形態では、１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼンを含むクルクミン類似体が提供される。いくつかの実施形態では、３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼンを含むクルクミン類似体が提供される。
【０２３２】
図１７は、クルクミン、３，３’，４’フィセチン及びクルクミン−３，３’，４’フィセチンハイブリッドの構造を開示し、ここで、クルクミン及び３，３’，４’フィセチン化合物のヒドロキシルの全てがハイブリッドで表され、末端フェノール基にジヒドロキシル及びそれぞれの二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。Ｍａｈｅｒ、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｒｅｓ．２００６  Ｏｃｔ；４０（１０）：１１０５〜１１は、一般にフィセチン、特に３，３’，４’フィセチンが強力な（低マイクロモル）神経栄養特性を有することを報告している。
【０２３３】
図１８は、図１７のクルクミン−３，３’，４’フィセチンハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２３４】
図１９は、クルクミン、ホノキオール及びクルクミン−ホノキオールハイブリッドの構造を開示し、ここで、クルクミン及びホノキオール化合物の全てのヒドロキシルはハイブリッドで表され、末端フェノール基に単一ヒドロキシル及びそれぞれの二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。Ｆｕｋｕｙａｍａ、Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２００２  Ａｐｒ  ２２；１２（８）：１１６３〜６は、ホノキオールが強力な神経栄養特性を有することを報告している。
【０２３５】
図２０は、図１９のクルクミン−ホノキオールハイブリッドの作製方法を開示している。
【０２３６】
図２１は、図１３のホノキオールハイブリッドの作製方法を開示しており、ここで、天然化合物のヒドロキシルの全てはハイブリッドで表され、２つの天然化合物が共有している位置における末端フェノール基に単一ヒドロキシル、中央フェノール基にヒドロキシル、及びそれぞれのクルクミン二重結合の代わりにヒドロキシルを提供している。
【０２３７】
図２２は、図１５の３，３’，４’フィセチンハイブリッドの作製方法を開示しており、ここで、天然化合物のフェノールの全てはハイブリッドで表され、末端フェノール基に単一ヒドロキシル、２つの天然化合物が共有している位置におけるヒドロキシル中央フェノール基、及びそれぞれのクルクミン二重結合の代わりに更なるヒドロキシルを提供している。
【０２３８】
経皮的イオン導入
いくつかの実施形態において、クルクミノイド薬は経皮的イオン導入により患者の血流に送達される。イオン導入は、可溶性塩のイオンの、電流による体組織内への導入を意味する。イオン導入送達システムでは、適用された電位勾配を用いて、イオン化薬物分子の経皮的送達を亢進する。
【０２３９】
好ましい実施形態では、帯電したクルクミノイドプロドラッグは、イオン導入により経皮的に投与される。好ましくは、イオン化した又はイオン化可能な薬物分子は、好ましくは帯電したクルクミングリシネートエステルであり、非修飾の親化合物よりも亢進したイオン導入経皮フラックスを示す。
【０２４０】
文献では、イオン的に帯電したプロドラッグの経皮的イオン導入が報告されている。特に、Ｌａｎｅｒｉ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１６，１２，１９９９，１８１８〜１８２４では、クルクミンの様な親油性多環式アルコールであるＤＨＥＡのプロドラッグをイオン導入で輸送する利点について調べられた。Ｌａｎｅｒｉは、ＰＲＯ２（トリメチルグリシネートプロドラッグ部分を有するＤＨＥＡのイオン性プロドラッグ）のイオン導入フラックスが、０．０７１４μモルｃｍ−２ｈ−１、つまり約２０μｇ／（ｃｍ２．ｈ）であることを報告している。同様に、米国特許第５６２２９４４号（ＡＬＺＡ）は、クルクミンの様な親油性多環式アルコールテストステロンのイオン性プロドラッグのイオン導入での輸送について報告している。米国特許第５６２２９４４号は、テストステロン−１７β−スタキドリンエステル塩化物（複素環式（hetereocyclic）アミンプロドラッグ部分を有するテストステロン）のイオン導入フラックスが約４０μｇ／（ｃｍ２．ｈ）であることを報告している。いずれの場合にも、研究者は、プロドラッグが貯蔵リザーバ中に実質的にないことを見出し、これは皮膚系エステラーゼがプロドラッグのエステル部分を切断し、それにより元の薬物が貯蔵リザーバに侵入できることを示した。したがって、皮膚系エステラーゼがクルクミンプロドラッグのエステル部分を切断することにより、元のクルクミン薬がそれを受け入れる血流中に侵入できると考えられる。
【０２４１】
したがって、イオン的に帯電したクルクミンプロドラッグ又は類似体の経皮的イオン導入により、クルクミンが血流内に製薬学的に有意な量で安全に送達されると考えられる。
【０２４２】
経皮的イオン導入により送達される薬物の予測される濃度は、以下の式により確認できる。
【数１】
2012512247.tif 000009
式中、濃度は、（μｇ／ｌ）で示され、
フラックスは、μｇ／（ｃｍ２．ｈ）で示され、
表面積は、（ｃｍ２）で示され、
クリアランスは、（ｌ／ｈｒ）で示される。
【０２４３】
一般に文献では、帯電した小分子の経皮的イオン導入により、表ＶＩに示す以下の概算範囲のフラックスを発生させることが報告されている。
【表７】
2012512247.tif 000010
ａ．米国特許第５６２２９４４号（ＡＬＺＡ）（４ｍＭと報告される）
ｂ．Ｌａｎｅｒｉ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１６，１２，１９９９，１８１８〜１８２４
ｃ．Ｍｕｒｔｈｙ、Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．２００７  Ｆｅｂ；９６（２）：３０５〜１１
ｄ．Ｆａｎｇ、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ．２００２  Ｍａｒ  ２０；２３５（１〜２）：９５〜１０５
ｅ．Ｎｕｇｒｏｈｏ、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，１０３，２，２１  Ｍａｒｃｈ  ２００５，３９３〜４０３
ｆ．Ｄｅｎｅｔ、Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．２００３  Ｄｅｃ；２０（１２）：１９４６〜５１
【０２４４】
上で示したように、グリシネート系クルクミンプロドラッグが、上記表の上側で用いた薬物濃度範囲を上回る２５〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲の水溶解度を達成できると結論することは理にかなっている。したがって、帯電したクルクミンの経皮的イオン導入は、最悪の場合でも、表ＶＩの上側で報告された値と少なくとも同様のフラックス、つまり約３５μｇ／（ｃｍ２．ｈ）の範囲を発生させると結論することは、非常に理にかなっている。
【０２４５】
一般に文献では、帯電した小分子の経皮的イオン導入に使用される電極は、以下の表ＶＩＩの範囲の大きさに含まれることが報告されている。
【表８】
2012512247.tif 000011
ａ  米国特許第５６２２９４４号（ＡＬＺＡ）
ｂ  Ｌａｎｅｒｉ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１６，１２，１９９９，１８１８〜１８〜２４
【０２４６】
したがって、帯電したクルクミンの経皮的イオン導入は、５０ｃｍ２の表面積（約３平方インチ）を有する電極で達成できると結論することは理にかなっている。
【０２４７】
Ｖａｒｅｅｄ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｅｐｉｄｉｏｌ．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  Ｐｒｅｖ．，２００８  Ｊｕｎ；１７（６）１４４１〜７は、健康なヒトボランティアにおけるクルクミン抱合体代謝産物の薬物動態について報告しており、約１１ｇの投与量（Ｄ）において、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）が約３０μｇ／ｍｌ・ｈｒと推定されることが判明した。しかし、この値は遊離クルクミンではなく、抱合クルクミンに関するものであると思われる。それにもかかわらず、Ｖａｒｅｅｄが、遊離クルクミンではなく、実質的に抱合されたクルクミンをヒト被験者で発見したことから、クルクミンの経皮輸送が消化管及び肝臓による精密な代謝を避けるであろうと考えられるため、Ｖａｒｅｅｄによるデータは有用である。
【０２４８】
したがって、クリアランス（Ｃｌ）は以下の式：
Ｃｌ＝Ｄ／ＡＵＣにより求められるため、
ヒトにおけるクルクミンのクリアランス（Ｃｌ）が約１１ｇ／（３０μｇ／ｍｌ・ｈｒ）、つまり約３５０Ｌ／ｈｒであると合理的に推定できる。Ｃｌ＝３５０Ｌ／ｈｒのクリアランス値は、クルクミン単独又はクルクミンとピペリンのラット経口投与を用いて、Ｓｈｏｂａ，Ｐｌａｎａ  Ｍｅｄ．１９９８  Ｍａｙ；６４（４）：３５３〜６で報告された、４９５Ｌ／ｈｒ及び７１３Ｌ／ｈｒの値と実質的に同等である。
【０２４９】
したがって、以下の解析は、３５０Ｌ／ｈｒのクリアランス値を使用する。３５０Ｌ／ｈｒの値は、皮膚移行環境がないであろうクルクミンの経口投与で起こる相当量の代謝を反映すると、イオン導入については控えめな見積もり値であると思われる。それどころか、ピペリンは消化管及び肝臓の薬物酵素系を抑制し、それによりイオン導入で期待されるような、代謝干渉が実質的にない状態の輸送をもたらすため、Ｓｈｏｂａにより報告されたクルクミンとピペリンの経口投与における７．３３Ｌ／ｈｒのクリアランス値が、イオン導入の設定においてより予測できるものであると思われる。それにもかかわらず、以下の解析は、３５０Ｌ／ｈｒのクリアランス値を使用する。
【０２５０】
フラックス、表面積及びクリアランスのそれぞれの値が与えられているとき、経皮的イオン導入により合理的に達成できるクルクミンの予測血漿濃度は、以下の式で算出できる。
【数２】
2012512247.tif 000012
【０２５１】
したがって、経皮的イオン導入により達成できる最低のクルクミン血漿濃度の場合、０．０１２μＭ、つまり約５ｎｇ／ｍｌと予測できる。
【０２５２】
クルクミンは、血液脳関門をかなり容易に通過するため、クルクミンは、血液中と少なくとも実質的に同じ脳内濃度に達すると考えられる。クルクミンの文献により、この想定は支持される。例えば、Ｙａｎｇ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０（７），５８９２〜５９０１（２００５）は、血漿中の濃度が１．６μＭを生じる投与の１時間後に、約１．１μＭのマウス脳内クルクミン濃度を測定したと報告している。同様に、Ｂｅｇｕｍ、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．２００８  Ａｐｒ  １６．では、クルクミンのマウスへの腹腔内及び筋肉内投において、脳内クルクミン濃度が血漿中よりも約５倍高いことを報告している。したがって、０．０１２μＭの血漿濃度を達成できるクルクミンプロドラッグ又は類似体のイオン導入は、少なくとも約０．０１２μＭの脳内濃度も達成できると結論することは理にかなっている。したがって、ＡＤ患者は、イオン導入輸送の有益な利点を得ることを期待してよい。
【０２５３】
したがって、いくつかの実施形態において、患者（好ましくは、ＡＤ患者）にクルクミノイドを送達する方法が提供され、この方法は、
ａ）帯電したクルクミノイド（好ましくは、帯電したクルクミノイドプロドラッグ）を患者の皮膚を通過してイオン導入的に送達する工程、を含む。
【０２５４】
経皮的イオン導入が、アルツハイマーの患者において０．０１２μＭの血漿濃度をもたらすことができると予測されているもの、簡単な変更により、結果生じる血漿及び濃度の実質的な上昇をもたらすことができると考えられる。これらには、イオン性プロドラッグの価数、イオン導入電流の大きさ、及び薬物のリザーバ濃度の変更を含む。これらそれぞれの値について、ここで以下に説明する。
【０２５５】
一般に、イオン導入のリザーバ内の薬物濃度の上昇は、薬物のフラックスの直線的増加をもたらす。例えば、５−ＯＨ−ＤＡＰＴの濃度を０．２５から０．５、１．３及び２．３ｍｇ／ｍｌに上昇させると、フラックスが３９．１から、それぞれ７８．４、１８７．６及び３１８．２ｎｍｏｌ／（ｃｍ・ｈ）に直線的に増加する結果となった。Ｎｕｇｒｏｈｏ、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，１０３，２，２１  Ｍａｒｃｈ  ２００５，３９３〜４０３。上で示したように、グリシネート系クルクミン（curcmin）プロドラッグが、２５〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲の水溶解度を達成できると結論することは理にかなっている。このより高い範囲は、表ＶＩの上側で報告された薬物リザーバ濃度よりも約１０倍高い。したがって、イオン導入をもたらすのに使用するクルクミンプロドラッグのリザーバ濃度を約２５〜５０ｍｇ／ｍｌに増加させることができ、その結果フラックス及びクルクミン血漿濃度は、それぞれ約４００μｇ／（ｃｍ２．ｈ）及び約６０ｎｇ／ｍｌ、つまり約０．１４μＭに増加すると考えることは理にかなっている。したがって、約０．１４μＭの脳内クルクミン濃度は、イオン導入により実現することができる。
【０２５６】
この０．１４μＭの血漿値と報告された血漿中クルクミン活性を比較すると、ＡＤ患者がイオン導入輸送の有益な利点を得ることが期待できることが明らかになる。例えば、Ｆｉａｌａ、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．２００７  Ｊｕｌ  ３１；１０４（３１）：１２８４９〜５４では、０．１μＭが、βアミロイドを排除するためのＡＤ患者のマクロファージを刺激するＢＤＭＣの最適量であることが報告されている。したがって、０．１４μＭの血漿濃度は、Ｆｉａｌａにより、βアミロイドを排除するためのＡＤ患者のマクロファージを刺激するＢＤＭＣの最適量であると報告される０．１μＭをわずかに超える。
【０２５７】
６０ｎｇ／ｍｌのクルクミン血漿濃度の推定値は、当該技術分野において報告されているいくつかのイオン導入駆動の血漿薬物値とも一致している。実際に、文献では、帯電した分子の経皮的イオン導入により、０．５μＭ範囲（〜２００ｎｇ／ｍｌ）に近い血清濃度をもたらすことができると報告されている。例えば、Ｂｅｎｄｅｒ、Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ．２００１；５１（６）：４８９〜９２は、１００ｍｇのエトフェナメートをヒトに２０分間イオン導入すると、約２００ｎｇ／ｍｌの血清濃度をもたらすことを報告している。Ｃｏｎｊｅｅｖａｒａｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．２００３  Ｓｅｐ；２０（９）：１４９６〜５０１では、ラットにおけるプロプラノロールの１０ｍｇ／ｍｌパッチによる、０．１ｍＡ／ｃｍ２の電流密度を用いたイオン導入は、約２００ｎｇ／ｍｌの血清濃度Ｃｍａｘをもたらすと報告されている。
【０２５８】
Ａｂｌａ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ，２００５  Ｄｅｃ；２２（１２）：２０６９〜７８は、イオンの価数が高くなるほどイオン導入フラックスが高くなることを報告している。より高い価数の分子はイオン導入によりより容易に輸送されるため、クルクミン分子のヒドロキシ基の１つだけではなく両方を、帯電したグリシネート部分に置換することが有利である。
【０２５９】
したがって、いくつかの実施形態において、イオン導入送達に特に好適なクルクミン類似体（１’）〜（３０’）が提供され、ここで、クルクミンベース分子のヒドロキシル基のそれぞれが、極性又は帯電した部分で置換される（すなわち、親クルクミン分子の２つのＯＨ基のそれぞれがＯＲ基で置換される）。イオン導入に使用される実施形態では、親クルクミン分子のヒドロキシル基のそれぞれが、帯電した部分、好ましくはアンモニウムグリシネートで置換される。いくつかの実施形態において、クルクミン分子のヒドロキシル基のそれぞれがトリメチルグリシネート部分で置換され、クルクミンジ（トリメチルグリシネート）ジクロリドを生成する。
【０２６０】
したがって、二価クルクミン塩の使用によるだけで、得られるフラックス及びクルクミン血漿濃度が、それぞれ２倍の約８００μｇ／（ｃｍ２．ｈ）及び約０．３μＭになり得ると考えることは理にかなっている。
【０２６１】
米国特許第５，６２２，９４４号では、イオン導入による投与では、薬物又はプロドラッグの送達率は加える電流量に比例することが報告されている。その文献では、イオン導入をもたらすのに使用する電流のアンペアを２倍にすると、薬物フラックスが２倍になり得ると報告している。イオン導入をもたらすのに使用する電流を約０．５ｍＡ／ｃｍ２に増加できると考えることは理にかなっているため、結果得られるフラックス及びクルクミン血漿濃度は、それぞれ約８００μｇ／（ｃｍ２．ｈ）及び０．３μＭに上昇させることができる。
【０２６２】
クルクミンは親油性が高いため、脳組織などの脂肪組織に生物濃縮することが予想される。したがって、患者脳内のクルクミン濃度が患者血漿中クルクミン濃度よりも高いと予測することは理にかなっている。上で報告したように、Ｙａｎｇ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０（７），５８９２〜５９０１（２００５）は、投与１時間後に測定したとき、マウス脳内クルクミン濃度（１．１μＭ）が血漿濃度（１．６μＭ）とほぼ同じであったと報告しており、一方、Ｂｅｇｕｍ、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．２００８  Ａｐｒ  １６．では、マウスにおけるクルクミンの腹腔内及び筋肉内投与では、マウスにおいて、クルクミン濃度が血漿中よりも脳内で約５〜１３倍高いと報告している。理論に束縛されるものではないが、Ｂｅｇｕｍにより報告された数値が、特に３：１〜１３：１の脳／血漿比をもたらすＢｅｇｕｍの長期投与の結果において、生物濃縮をより反映していると考えられる。したがって、８倍の生物濃縮係数を考慮する場合、クルクミンプロドラッグ又は類似体のイオン導入により、
ａ）０．０１２μＭの血漿クルクミン濃度が約０．１μＭの脳内濃度をもたらすこと（プロドラッグの溶解度が最低の約２〜５ｍｇ／ｍｌの場合を仮定）、
ｂ）０．１４μＭの血漿クルクミン濃度が約１．１μＭの脳内クルクミン濃度をももたらすこと（プロドラッグの溶解度が約２５〜５０ｍｇ／ｍｌを仮定）、を引き起こすことができると結論することは理にかなっている。
【０２６３】
上記で説明したように、クルクミンのイオン導入送達は、最悪の場合でも、約０．０１２μＭ（５μｇ／ｌ）の血清／血漿濃度をもたらし、約０．３μＭ（１５０μｇ／ｌ）の血清／血漿濃度に達することができる可能性がある。これらの値は、０．００６μｇ／ｍｌ及び０．１８μｇ／ｍｌ（ピペリンを追加した２ｇ／日の経口クルクミンをボランティアに投与した、Ｓｈｏｂａ、Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ．１９９８Ｍａｙ；６４（４）：３５３〜６で報告される経口クルクミンでの血清Ｃｍａｘ値）と本質的に同等である。したがって、Ｃｍａｘ値のみに基づくと、イオン導入は実質的に経口投与と同等であると考えることができる。
【０２６４】
更に、イオン導入送達は、２つの主要な点で経口クルクミン−ピペリンに優ると思われる。クルクミンをイオン導入で送達する第１の大きな利点は、血流へのイオン導入送達が、ボーラスではなく、むしろ１日２４時間絶えず起こることである。対照的に、Ｓｈｏｂａのようなクルクミンの経口送達では、血流中での持続が約１時間未満である、急上昇する送達をもたらすことが多い。したがって、イオン導入は、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）生物学的利用能の観点から、経口送達よりも２４倍の利点をもたらすことができる。実際に表ＶＩＩＩでは、２４時間ＡＵＣを比較できる。
【表９】
2012512247.tif 000013
【０２６５】
したがって、ＡＵＣ値のみに基づくと、クルクミンイオン導入は実質的にクルクミン経口投与より優れると考えることができる。
【０２６６】
ピペリンとの経口投与に対するイオン導入の第２の大きな利点は、ピペリンが消化管及び肝臓の代謝酵素系の非特異的阻害剤であるという点にある。したがって、クルクミン−ピペリン錠に加えて他の薬剤を飲んだ患者において、生来の酵素系を阻害するピペリンにより、摂取した他の薬剤全ても、更により生物学的に利用できるようになり、したがって更により強力になることが判明する場合がある。したがって、イオン導入クルクミンは、クルクミンとピペリンの経口投与より更に安全である場合がある。
【０２６７】
したがって、イオン導入クルクミンは、患者の消化管及び肝臓における精密な薬物代謝酵素系を阻害することなく、Ｓｈｏｂａが報告するよりも更に大量のクルクミンを送達することができ得る。
【０２６８】
米国特許出願公開第２００３／１５７１５５号によれば、経皮処方は、好ましくはそれらの物理化学的特性により、皮膚のバリアを容易に透過できる有効成分の投与に用いられる。このため、有効成分は、親油性角質層及びその下層の親水性生体表皮の両方に対する十分な溶解度を有していなくてはならない。Ｆｌｙｎｎ  Ｇ．、Ｓｔｅｗａｒｔ  Ｂ．、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．１３：１６９〜１８５（１９８８）は、インビトロにおけるオクタノール／水（Ｏ／Ｗ）分配係数と皮膚透過性との間の良好な相関を説明しており、分配係数が約１００（ｌｏｇ  Ｐ＝２）の有効成分が、経皮投与向けの候補であると推奨している。同様に、Ｇｕｙ、Ｆｕｎｄａｍ．Ａｐｐｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．１７：５７５〜５８３（１９９１）では、最大透過率の対数とオクタノール／水分配係数の対数との間に、ｌｏｇ  Ｐ＝２が頂点の放物線様依存を示す。したがって、約２のＯ／Ｗ  ＰＣ  ｌｏｇ  Ｐを有する分子は経皮的送達にふさわしい候補物質であるはずと思われる。
【０２６９】
理論に束縛されるものではないが、帯電したクルクミンプロドラッグの分配係数は、経皮的送達に特に有利な範囲内にあると考えられる。天然クルクミンは、約ｌｏｇ  Ｐ＝３のＯ／Ｗ分配係数を有し、ＤＨＥＡのＰＲＯ２プロドラッグへの変換により、ＤＨＥＡのＯ／Ｗ分配係数がｌｏｇ  Ｐ＝１．５４からｌｏｇ  Ｐ＝０．７９まで減少する（すなわち、ｌｏｇ  Ｐの減少が約０．７５）ことが知られている。トリメチルグリシネート部分で修飾したクルクミンが、ＤＨＥＡの場合と同様の影響をクルクミンの親油性に及ぼす場合、トリメチルグリシネートクルクミンのｌｏｇ  Ｐ  Ｏ／Ｗ分配係数は約ｌｏｇ  Ｐ＝２．５になるはずである。この値は経皮的送達に最適な約ｌｏｇ  Ｐ＝２に近いため、Ｏ／Ｗ分配係数ｌｏｇ  Ｐが約２．５であるクルクミングリシネートプロドラッグは、経皮的送達にふさわしい候補物質であるはずと思われる。
【０２７０】
したがって、本発明のいくつかの実施形態において、クルクミノイドプロドラッグは、約１〜３、好ましくは約１．５〜２．５、より好ましくは１．７〜２．３のｌｏｇ  Ｐ  Ｏ／Ｗ分配係数を有する。
【０２７１】
本発明のプロドラッグを投与するのに典型的なイオン導入装置を図２３に示す。イオン導入薬物送達システムは、一般に、電源（典型的には電池）、制御回路、電極、及び２つの電解質含有リザーバの４つの基本的構成要素からなる。図２３を例として使用すると、従来の構成では、それぞれアノード及びカソードである１１及び１３で示されるように、２つの電極が被験者の皮膚に密接するように配置される。両電極は、被験者の特定の皮膚領域に置かれる。１つの電極はプロドラッグを含有するリザーバ、つまりドナーリザーバ１５に接触し、もう一方は、塩化ナトリウムなどの生体適合性電解質溶液を含有する接地リザーバ１７内に含まれる。図において、帯電したクルクミンプロドラッグは、「ＣＵＲ−ＧＬＹ＋  Ａ−」で表され、「ＣＵＲ−ＧＬＹ＋」は複合体の帯電したクルクミンエステル部分を表す。図において、「Ａ−」は複合体の対イオンである。
【０２７２】
プロドラッグに接触する電極は、一般に「活性」電極１１と呼ばれる。活性電極は、電気勾配を加えることにより、プロドラッグがそこから体内に入る電極である。本発明の好ましい実施形態において、プロドラッグはクルクミンの正に帯電した四級アンモニウム誘導体であり、活性電極はアノードである。負に帯電したクルクミンプロドラッグのイオン導入送達において、活性電極はカソードである。
【０２７３】
第２のリザーバに含まれる別の電極は、接地電極１３と呼ばれることが多く、体内を通って電気回路を閉じるよう働く。場合によっては、電極の極性を周期的に逆転することにより、交流方式で両リザーバから同じ薬物を送達することができる。
【０２７４】
イオン導入送達装置には、様々な電極材料、例えばプラチナから銀−塩化銀に及ぶ材料を使用することができる。電極の選択は、他の事項よりも、投与されるプロドラッグの性質に依存するであろう。
【０２７５】
活性リザーバ１５は、典型的には、被験者に経皮的に投与されるプロドラッグ種（活性種及び付属する対イオンの両方を含む）の溶液を含有するであろう。プロドラッグは、水溶液、又は親水性ゲル若しくはゲルマトリックス内に含有されてよい。場合によっては、活性リザーバは、半固体、発泡体として、又は吸収性材料と処方されてプロドラッグを含有する。接地リザーバは同様に、水溶液、又は高分子マトリックス内に塩イオンを含有してよい。
【０２７６】
典型的には、活性リザーバは、リザーバ環境を電極と同じ電荷に維持するよう、緩衝剤も含む。多くの場合、活性プロドラッグに対立する電荷を持つ緩衝剤が使用されるであろう。場合によっては、プロドラッグ塩の対イオンに応じて、プロドラッグ塩が自身の緩衝剤として作用することができる。一般に、最高輸送効率を達成するために、クルクミンプロドラッグ以外の全てのイオン性種の濃度を最小限にする。
【０２７７】
本発明のいくつかの実施形態において、イオン導入装置は、任意に選択的透過性膜を含む。この膜は２つのリザーバを隔てる領域に配置してよく、別の方法としては、皮膚表面から活性リザーバの内容物を隔ててもよい。このような膜を提供する好適な材料としては、天然及び合成ポリマーが挙げられる。
【０２７８】
クルクミン／化学修飾剤複合体を被験者にイオン導入により投与する場合、２つの電極の接続により、電気的エネルギー源１９、例えば電池への回路が閉じられる。電気的制御モジュールを利用して適用した電流を制御し、場合によっては、様々な時間間隔、又はフィードバック制御された薬物送達を可能にする集積回路を備えてよい。
【０２７９】
経皮的イオン導入送達は、電流を流すことにより達成される。イオン導入による投与では、薬物又はプロドラッグの送達率は加える電流量に比例する。
【０２８０】
本発明の帯電したクルクミンプロドラッグのイオン導入による投与では、被験者の痛み閾値より小さい適切な電流の強さが選択される。電流は、典型的には電極表面が０．５ｍＡ／ｃｍ２未満である電流密度で、患者が快適に許容する範囲内でなくてはならない。続いて電流は適切な時間で流される。
【０２８１】
本発明の好ましい実施形態において、電位の印加により、活性電極（この場合はアノード）で正に帯電したプロドラッグイオンがドナーリザーバから流出し、皮膚を通過して体内に入る。同時に、被験者の体内の負に帯電したイオンが、体内からドナーリザーバ内に移動する。接地電極（この場合カソード）において、負に帯電したイオンが皮膚内に入り、一方、被験者の体内から正に帯電したイオンが接地リザーバ内に移動する。電気的中性を維持するため、イオンが皮膚の一方から他の方へ移動するにつれ、正電極において酸化が、負電極において還元が起こる。複合体が皮膚を通過して血流に輸送されると、活性体である親クルクミンを放出するため切断が起こる。
【０２８２】
アミノ−クルクミン
別の方法として、クルクミン類似体は、ａ）高い溶解度をもたらし、イオン導入送達を可能にする初期イオン型、ｂ）ＬＡＴ１トランスポータによる血液脳関門を超えての輸送が可能な中間アミノ酸型、及びｃ）カルボン酸切断後の脳内最終活性型を取る。この方法について、ここで詳細を記載する。
【０２８３】
ａ．初期イオン型
まず、クルクミン類似体は、高い溶解度をもたらし、イオン導入送達を可能にする初期イオン型を有する。この点において、クルクミンがヒドロキシフェニル基を持つレボドパにやや関連していることを理解することは有用である。クルクミンの様に、レボドパは限界溶解度を持つという欠点がある。しかし、Ｋａｏ、Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．２０００  Ａｕｇ；１７（８）：９７８〜８４では、双性イオン性レボドパ（３６）の溶解度が、以下に示すように、カルボン酸基をエステルに変換し、カチオン性レボドパエステル分子（３７）を形成することにより、大いに向上することを報告した。
【化１】
2012512247.tif 000014
【０２８４】
Ｋａｏ（上記）は、このようなレボドパエステルの溶解度が２５０ｍｇ／ｍｌ付近であると報告した。したがって、クルクミン分子が修飾され１対のレボドパエステル分子を適度に模倣するとき、結果得られるプロドラッグ類似体（３８）が、２５０ｍｇ／ｍｌ付近と匹敵する溶解度を有するであろうと結論することは理にかなっている。
【化２】
2012512247.tif 000015
【０２８５】
更に、プロドラッグ類似体（３８）はカチオン性であるため、上述のように、イオン導入送達を適用できる。
【０２８６】
ｂ．中間アミノ酸型
カチオン性クルクミンエステルが血流に（好ましくはイオン導入により）送達されると、血液性エステラーゼがその末端基を切断し、以下に示すカルボン酸含有類似体（３９）を生成する。
【化３】
2012512247.tif 000016
【０２８７】
この分子を調べると、３つの分子の全てがエチルヒドロキシフェニル側鎖を伴うアミノ酸骨格鎖を有するという点で、レボドパ及びチロシンの両方との著しい類似性があることが明らかとなる。レボドパ及びチロシンの両方ともＬＡＴ１アミノ酸トランスポータにより血液脳関門を通過して輸送され、Ｇｙｎｔｈｅｒ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００８，５１，９３２〜３６、及びＵｃｈｉｎｏ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６１，７２９〜７３７，２００２の両方がそれぞれ、他の大型中性芳香族アミノ酸様化合物が、ＬＡＴ１トランスポータにより血液脳関門を通過して良好に輸送されることを報告していることから、本アミノ酸クルクミン類似体などのその他大型中性フェノール性アミノ酸様化合物が、同様に、ＬＡＴ１トランスポータにより血液脳関門を通過して良好に輸送されると予測することは理にかなっている。
【０２８８】
類似体（３９）作製の１つの方法を図２４ａに示す。プロドラッグ分子（３８）は実質的に同様の方法で作製できる。
【０２８９】
ｃ．最終脳内活性型
アミノ酸クルクミン類似体（３９）が脳に達すると、レボドパのように、カルボキシラーゼの攻撃を受け、カルボン酸基の切断をもたらすであろう。生じた分子（４０）は、以下に示すように、エチルアミノ要素を持つヒドロキシフェニル基を有するという点でドーパミンに類似性がある。
【化４】
2012512247.tif 000017
【０２９０】
（利点）
上記クルクミン類似体分子（４０）がアルツハイマー病治療に有利であると考えられるいくつかの理由がある。
【０２９１】
第１には、クルクミン類似体（４０）は、メチルアミノ要素を持つヒドロキシフェニル基を有するという点でドーパミン様性質を有することが知られている。Ｏｎｏ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．，２００６  Ｍａｒ．，４８（４）：２７５〜８５；ｅｐｕｂ  ２００５  Ｄｅｃ．１５は、ドーパミンが、クルクミンより約１０倍強いβ−アミロイド凝集の阻害能を持つことを報告している。したがって、クルクミン類似体（４０）は、クルクミンよりも約１０倍強力なはずである。
【０２９２】
更に、Ｉｒｉｅらによる最近の発表では、この抗凝集性に対して説明することができる。Ｉｒｉｅ、Ｊ．Ｂｉｏｓｃｉ  ＆  Ｂｉｏｅｎｇ．，９９，５，４３７〜４４７（２００５）では、βＡ１〜４２による酸化におけるメチオニン及びチロシンの役割を調べ、以下に示すような、メチオニン残基（Ｍｅ３５）の約１５オングストローム内にチロシン１０（「Ｙ１０」）残基をもたらす、β−アミロイドが最初に２回転構造をとることを報告している。
【化５】
2012512247.tif 000018
【０２９３】
Ｉｒｉｅらは、この短い１５Åの距離により、チロシンからメチオニンへの電子を移動させることができると仮説を立てている。更にＩｒｉｅらは、Ｃ末端カルボキシル基がメチオニンラジカルを安定させると考えている。Ｍｕｒａｋａｍｉ、ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ，２００７，８，２３０８〜２３１４。
【０２９４】
クルクミン分子の長さは約１５Åであるため、（理論に束縛されるものではないが）２回転βＡ１〜４２内のチロシン／メチオニンの距離をクルクミンが架橋できると考えられる。更に文献からは、クルクミンのヒドロキシル化フェニル環が、チロシン（tyrsoine）のヒドロキシル基及びメチオニンのイオウの両方と結合を形成できることが判明する。Ｓｔｉｔｅｓ、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，９７（５），１２３３〜１２５０（１９９７）；Ｊｅａｎ、「Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  Ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓ」ＰｌｏＳ  ＯＮＥ，３（３）：ｅ１８３４（２００８）；Ａｕｌｄ、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９３）２，２１８７〜９７；Ｐａｌ、Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ＆  Ｄｙｎａｍｉｃｓ，１９，１，（２００１）；Ｔａｔｋｏ、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００４）１３：２５１５〜２５２２；Ｚａｕｈａｒ、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，５３，３，２３３〜２４８（２０００）。したがって、２回転βＡ１〜４２内のチロシン／メチオニンの距離を架橋することにより、クルクミンは２回転βＡ１〜４２に結合できる。これを以下に示す。
【化６】
2012512247.tif 000019
【０２９５】
クルクミン類似体の中央部に極性Ｎ−基が存在することで、この結合構造の安定化を更に促進することができる。したがって、２回転βＡ１〜４２を横切る分子内架橋が、βアミロイドの凝集を阻害できる。
【０２９６】
したがって、上記の分子（３８）は、いくつかの利点を有し、これらの利点としては、
ａ）その初期型の水溶性が高く、イオン導入送達に適用できること、
ｂ）その中間型が、ＬＡＴ１能動輸送系により血液脳関門（ＢＢＢ）を通って輸送できること、
ｃ）その最終脳内活性型がＦｉａｌａにより提唱されるＢＤＭＣ型を有するように、メトキシ基が容易に除去できること、
ｄ）その最終脳内活性型が、非常に強いオリゴマー妨害性を持つと確認されているドーパミン様アミノ基を持つこと、
ｅ）その最終脳内活性型が、Ｉｒｉｅらにより報告されるアミロイド内メチオニン−チロシン距離である１５オングストロームと実質的に同等の長さを有し、メチオニン及びチロシンのそれぞれと結合を形成し、それによりβアミロイドの凝集を阻害できるβアミロイドを横切る分子内架橋を形成できるヒドロキシルを持つ芳香族基を有すること、
ｆ）その最終脳内活性型が、Ｍａｎｄｅｌｋｏｗ、Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．，２００７，１７，１７８３〜９０で報告されるタウ内システイン２９０−チロシン３１０距離である１９オングストロームと実質的に同等の長さを有し、ヒドロキシルを持つ芳香族基システイン２９０及びチロシン３１０のそれぞれと結合を形成し、それによりタウの凝集を阻害できるタウを横切る分子内架橋を形成できるヒドロキシルを持つ芳香族基を有すること、である。
【０２９７】
上記ａ）〜ｆ）の性質を有する別のクルクミン類似体（４１ｃ）を図２５ａに示す。
【０２９８】
本発明の別の好ましいクルクミン類似体（図示せず）は、分子（３８）〜（４０）のメトキシ基の除去を含む。
【０２９９】
界面活性クルクミン
ａ．初期イオン型
ＬＡＴ１能動輸送系の利用が可能と考えられる別の関連する実施形態では、以下の分子（４２）に示すように、帯電したアミノ酸部分がフェノール性ヒドロキシル基の脂肪族鎖の反対側にあるように、クルクミン分子が修飾される。
【化７】
2012512247.tif 000020
【０３００】
このクルクミン分子（４２）も（上記分子（３８）のように）１対のレボドパエステル分子を適度に模倣するため、プロドラッグ（４２）が、２５０ｍｇ／ｍｌ付近と匹敵する溶解度を有するであろうと結論することもまた理にかなっている。更に、そのカチオン特性が、イオン導入送達に大いに適用できるようにするはずである。
【０３０１】
ｂ．中間アミノ酸型
カチオン性クルクミンエステルプロドラッグ（４２）が血流に（好ましくはイオン導入により）送達されると、上述と同様の方法により血液性エステラーゼがその末端基を切断し、以下に示すカルボン酸含有分子（４３）を生成する。
【化８】
2012512247.tif 000021
【０３０２】
この分子（４３）を調べると、３つの分子の全てがエチルヒドロキシフェニル側鎖を伴うアミノ酸骨格鎖を有するという点で、レボドパ及びチロシンの両方との著しい類似性があることが明らかとなる。レボドパ及びチロシンの両方ともＬＡＴ１アミノ酸トランスポータにより血液脳関門を通過して輸送されることから、本アミノ酸クルクミン類似体（４３）が、同様に、ＬＡＴ１能動トランスポータにより血液脳関門を通過して良好に輸送されるとみなすことは理にかなっている。
【０３０３】
分子（４３）作製の１つの方法を図２４ｂに示す。分子（４２）は実質的に同様の方法で作製できる。
【０３０４】
ｃ．最終脳内活性型
アミノ酸クルクミン類似体（４３）が脳に達すると、レボドパのように、それは、同様にカルボキシラーゼの攻撃を受け、そのカルボン酸基の切断をもたらすであろう。生じた分子（４４）は、以下に示すように、メチルアミノ要素を持つヒドロキシフェニル基を有するという点でドーパミンに類似性がある。
【化９】
2012512247.tif 000022
【０３０５】
その他の好ましい実施形態では、分子（４２）〜（４４）内のメトキシ基の復元、又は分子（４２）〜（４４）の除かれたメトキシ基のヒドロキシル基との置換が含まれる。
【０３０６】
−界面活性クルクミンの利点
上記分子（４４）がアルツハイマー病治療に有利であると考えられるいくつかの理由がある。
【０３０７】
第１には、クルクミン類似体（４４）は、メチルアミノ要素を持つヒドロキシフェニル基を有するという点でドーパミン様性質を有することが知られている。Ｏｎｏ（上記）は、ドーパミンが、クルクミンより約１０倍強いβ−アミロイド凝集の阻害能を持つことを報告している。
【０３０８】
第２に、Ｒｅｉｎｋｅ、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．，２００７，７０，２０６〜２１５により、クルクミンが以下の方法でβアミロイドにおそらく結合し、ここで、中央の疎水性部分がβアミロイドの疎水性部分に結合し、側部ヒドロキシルが極性ポケットにそのように存在すると報告されている。
【化１０】
2012512247.tif 000023
【０３０９】
以下に示すように、非極性脂肪族鎖がβアミロイドの疎水性部分に対して留まるように、追加された極性部分が分子を有利に方向づけるため、クルクミン類似体分子（４４）はクルクミンの結合能を上げると考えられる。
【化１１】
2012512247.tif 000024
【０３１０】
したがって、上記の分子（４４）は、いくつかの利点を有し、これらの利点としては、
ａ）その初期型の水溶性が高く、イオン導入送達に適用できること、
ｂ）その中間型が、ＬＡＴ１能動輸送系によりＢＢＢを通って輸送できること、
ｃ）その最終脳内活性型が、Ｆｉａｌａにより提唱されるＢＤＭＣ型を有すること、
ｄ）その最終脳内活性型が、非常に強いオリゴマー妨害性を持つと確認されているドーパミン様アミノ基を持つこと、
ｅ）最終脳内活性型の追加された極性部分が、分子のβアミロイド結合の維持を助けること、である。
【０３１１】
分子（４４）は追加されたドーパミン様部分が側部フェノール基上に存在することを示すが、ドーパミン様部分は、中央フェノール基（存在する場合）に有利に追加され、同様にその分子への結合を更に増加させることもできると考えられる。このような分子を以下の分子（４５）として示す。
【化１２】
2012512247.tif 000025
【０３１２】
分子（４５）作製の１つの方法を図２５ａに示す。（４５）のエステル系プロドラッグ類似体は、実質的に同様の方法で作製できる。
【０３１３】
したがって、いくつかの実施形態において、クルクミン類似体であって、ＬＡＴ１トランスポータによる血液脳関門を通過する類似体の輸送を増加させる、アミノ酸部分により修飾された天然クルクミンであるクルクミン類似体が提供される。
【０３１４】
そのいくつかの実施形態において、アミノ酸部分は、天然クルクミンの少なくとも１つの側部フェノール基上に存在する。分子（３９）は、この実施形態の実施例である。
【０３１５】
そのいくつかの実施形態において、このようなアミノ酸部分は、天然クルクミンのそれぞれの側部フェノール基上に存在する。分子（４３）は、この実施形態の実施例である。
【０３１６】
そのいくつかの実施形態において、天然クルクミンのジケトン基が芳香族基で置換され、アミノ酸部分は置換芳香族基上に存在する。分子（４１ｃ）及び（４５）は、この実施形態の実施例である。
【０３１７】
天然類似体ハイブリッド
次に図２６ａを参照すると、アルツハイマー病の治療において、天然クルクミノイド分子は塩基性クルクミンより効力が強い場合があると、上記で報告されている。特に、クルクミノイド（３１）及び（３３）は、βアミロイド傷害に対するＰＣ１２細胞へのインビトロ保護の提供において、天然クルクミンよりもそれぞれ５倍及び３倍効力が強いと報告された。分子（３１）はそのトランス配置によりクルクミンと異なり、一方、分子（３３）はクルクミンのメトキシ基を持たないと観察される。これらの性質の両方を同一の分子（３５）内に置けることが更に観察される。理論に束縛されるものではないが、分子（３５）は、分子（３１）及び（３３）のそれぞれの効力面の利点を持ち、βアミロイド傷害に対するＰＣ１２細胞へのインビトロ保護の提供において、天然クルクミンよりも最大約１５倍効力が高い場合があると考えられる。
【０３１８】
図２６ｂは、分子（３５）の作製方法を示す。この方法は、米国特許第５，６７９，８６４号（Ｋｒａｃｋｏｖ）に記載されるクルクミン類似体の製造方法に基づくものであり、この明細書がその全体を参照として本明細書に組み込まれる。
【０３１９】
図２７ａ、ｂは、トランス−クルクミン分子（３５）の変異体である分子（４６）の２つの作製方法を示し、ジケトン部分の中央フェニル環との置換により、分子がより強固に作製される。
【０３２０】
図２８は、図１３で合成された分子の別の作製方法を示す。図２８のこの方法は、米国特許第５，６７９，８６４号（Ｋｒａｃｋｏｖ）に記載されるクルクミン類似体の製造方法に一部基づくものであり、この明細書がその全体を参照として本明細書に組み込まれる。
【０３２１】
〔実施の態様〕
（１）  １−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
（２）  ３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
（３）  １，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
（４）  １−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
（５）  ３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン。
（６）  クルクミン類似体であって、ＬＡＴ１トランスポータによる血液脳関門を通過する前記類似体の輸送を増加させる、アミノ酸部分により修飾された天然クルクミンであるクルクミン類似体。
（７）  ａ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｂ）１，３−ジヒドロキシル４，６−ビス（４’−ヒドロキシルスチリル）ベンゼン、
ｃ）１−ヒドロキシル３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、及び
ｄ）３，５−ビス（３’，４’−ジヒドロキシルスチリル）ベンゼン、からなる群から選択される少なくとも１つの構造を含むクルクミン類似体。
【図１Ａ】
2012512247.tif 000026
【図１Ｂ】
2012512247.tif 000027
【図１Ｃ】
2012512247.tif 000028
【図１Ｄ】
2012512247.tif 000029
【図２】
2012512247.tif 000030
【図３】
2012512247.tif 000031
【図４】
2012512247.tif 000032
【図５】
2012512247.tif 000033
【図６】
2012512247.tif 000034
【図７】
2012512247.tif 000035
【図８】
2012512247.tif 000036
【図９】
2012512247.tif 000037
【図１０】
2012512247.tif 000038
【図１１】
2012512247.tif 000039
【図１２】
2012512247.tif 000040
【図１３】
2012512247.tif 000041
【図１４】
2012512247.tif 000042
【図１５】
2012512247.tif 000043
【図１６】
2012512247.tif 000044
【図１７】
2012512247.tif 000045
【図１８】
2012512247.tif 000046
【図１９】
2012512247.tif 000047
【図２０】
2012512247.tif 000048
【図２１】
2012512247.tif 000049
【図２２】
2012512247.tif 000050
【図２３】
2012512247.tif 000051
【図２４Ａ】
2012512247.tif 000052
【図２４Ｂ】
2012512247.tif 000053
【図２５Ａ】
2012512247.tif 000054
【図２５Ｂ】
2012512247.tif 000055
【図２６Ａ】
2012512247.tif 000056
【図２６Ｂ】
2012512247.tif 000057
【図２７Ａ】
2012512247.tif 000058
【図２７Ｂ】
2012512247.tif 000059
【図２８】
2012512247.tif 000060
【国際調査報告】
2012512247.tif 000061