(57)【要約】  骨盤底修復のための組織エンジニアリングデバイスが開示される。より具体的には、不織布フェルトに少なくとも部分的に埋め込まれている中央部分を有するインプラントからなる組織エンジニアリングデバイスが開示される。
2012511955.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
不織布フェルト内に少なくとも部分的に埋め込まれている中央部分を有するインプラントを含む、組織エンジニアリングデバイス。
【請求項２】
前記不織布フェルトが２枚の不織布繊維詰め物で構成される、請求項１に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項３】
前記不織布繊維詰め物が繊維で構成される、請求項２に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項４】
前記繊維が、ラクチド、グリコリド、イプシロン−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン及びトリメチレンカーボネートからなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及び／又はコポリマーで構成される、請求項３に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項５】
前記ホモポリマー及び／又はコポリマーが、ラクチド、グリコリド、及びｐ−ジオキサノンからなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及び／又はコポリマーである、請求項４に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項６】
前記インプラントが、前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底の修復に好適である、請求項１に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項７】
前記インプラントが前側修復に好適であり、中央部分、第１セットのストラップ様インプラント延長部、及び第２セットのインプラント延長部を含み、前記第１及び前記第２セットのストラップ様インプラント延長部が、前記インプラントの両側から外側へ延びる、請求項６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項８】
前記インプラントが尖端部及び後側の骨盤底修復に好適であり、中央部分と、前記インプラントの両側から外側へ延びる２本のストラップ様インプラント延長部と、を含む、請求項６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項９】
前記インプラントが前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底修復に好適であり、第１セットのストラップ様インプラント延長部と、第２セットのインプラント延長部とを含む前側部分で、前記第１及び前記第２セットのストラップ様インプラント延長部が前記インプラントの両側から外側へ延びている、前側部分と、前記インプラントの両側から外側へ延びる２本のストラップ様インプラント延長部を含む後側部分と、を有する中央部分を含む、請求項６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項１０】
前記インプラントが、前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底修復に好適であり、前縁、後縁、並びに第１及び第２側縁を有する中央本体部分を含み、前記前縁は、前記前縁から内側へ延在し前記前縁に沿って実質的に中央に位置する陥凹を有し、前記後縁は、前記後縁から外側へ延び前記後縁に沿って実質的に中央に位置するタブ要素を有し、
前記中央本体部分の前記後縁の第１及び第２端領域から第１及び第２遠位端方向へ外側に延びる第１及び第２のストラップ様延長部を含み、前記第１及び第２ストラップ様延長部は、ある角度で外側へ延びることにより前記中央本体部分と組み合わせて実質的に「Ｙ」字形状のインプラントを形成し、前記第１及び第２ストラップ様延長部それぞれの前記第１及び第２遠位端に配置された第１及び第２ポケットを含み、前記第１及び第２ポケットはそれぞれ前記ストラップ様延長部の前記遠位端に実質的に近接した閉じた端を有し、その近位にあり、かつ前記中央本体部分に向かって開口している開放端を有する、請求項６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【請求項１１】
（ａ）中央部分を有する、骨盤底修復のためのインプラントを提供する工程と、
（ｂ）２枚の不織布繊維詰め物を提供する工程と、
（ｃ）前記不織布繊維詰め物を望ましい形状に切断する工程と、
（ｄ）前記インプラントの前記中央部分の両面それぞれに、前記切断した不織布繊維詰め物を配置する工程と、
（ｅ）水力絡合により、前記不織布繊維詰め物を前記インプラントに接合することにより、前記不織布フェルト内に前記インプラントの前記中央部分を少なくとも部分的に埋め込む工程と、を含む、組織エンジニアリングデバイスの製造方法。
【請求項１２】
（ａ）中央部分を有する、骨盤底修復のためのインプラントを提供する工程と、
（ｂ）２枚の不織布繊維詰め物を提供する工程と、
（ｃ）前記不織布繊維詰め物を望ましい形状に切断する工程と、
（ｄ）前記インプラントの前記中央部分の両面それぞれに、前記切断した不織布繊維詰め物を配置する工程と、
（ｅ）ニードルパンチングにより、前記不織布繊維詰め物を前記インプラントに接合することにより、前記不織布フェルト内に前記インプラントの前記中央部分を少なくとも部分的に埋め込む工程と、を含む、組織エンジニアリングデバイスの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、組織の修復及び再生の分野に関する。より具体的には、本発明は骨盤底修復のためのデバイスとその作製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
人間は時に、外科的介入による修復を必要とするような、筋骨格組織などの組織に対する損傷を受けることがある。このような修復は、損傷組織の縫合によって、及び／又はインプラントを損傷組織に噛み合わせることによって影響を受け得る。インプラントは、損傷組織に構造上の支持を提供することができ、その上に細胞が成長することが可能な基材としての役割を果たすので、治癒を促進することができる。
【０００３】
かなり一般的な組織損傷の一例は、骨盤底の損傷である。これは、出産中又はその合併症により起こり得る、重篤な可能性のある医学的状態であり、膀胱膣筋膜の損傷を持続させることがある。そのような損傷は、膀胱のヘルニアである膀胱瘤を引き起こすことがある。同様の医学的状態には、直腸瘤（直腸のヘルニア）、腸瘤（直腸膣窩又は膀胱膣窩を通って腸が突出）、及び腸膀胱ヘルニア（膀胱と腸の両方が突出する二重ヘルニア）が挙げられる。これらの状態は重篤な医学的問題になり得、生理学的及び心理学的の両面で患者に深刻かつマイナスの影響を与え得る。
【０００４】
このような状態は、通常、突出臓器又は臓器の突出部分を正常な位置に戻す外科的処置によって治療される。突出部位の修復にはしばしば、メッシュ様のパッチが使用される。
【０００５】
このような状態の治療には、さまざまな既知のデバイス及び技法が従来技術において記述されている。例えば、欧州特許出願第０  ９５５  ０２４  Ａ２号は、骨盤底筋肉を収縮させて骨盤底を持ち上げるのに使用される医療用デバイスである膣内セットについて記述している。
【０００６】
加えて、Ｔｒｉｐら（ＰＣＴ国際公開特許ＷＯ  ９９  １６３８１号）は、織地、編地、非編地、又は編組地の生体適合性ポリマーで形成され、複数の開口部が中に形成された生体適合性修復パッチについて記述している。このパッチはさまざまな生体吸収性材料、並びに感染の可能性を減らし得る及び／又は生体適合性を増大させ得る、他の材料でコーティングすることができる。
【０００７】
他の強化材料は、米国特許第５，８９１，５５８号（Ｂｅｌｌら）及び欧州特許出願第０  ２７４  ８９８  Ａ２号（Ｈｉｎｓｃｈ）に開示されている。Ｂｅｌｌらは、組織の修復及び再構築に使用することができるバイオポリマー発泡体及び発泡体作成物について記述している。Ｈｉｎｓｃｈは、１つ以上の布地強化要素が中に埋め込まれた、再吸収性材料で作製された連続気泡発泡体様のインプラントについて記述している。このインプラント材料は、潜在的に有用であるものの、組織修復インプラントとして効果的に使用するには、十分な強度及び構造的一体性に欠けていると考えられている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
既存の技術にもかかわらず、骨盤底への埋め込みに伴う応力に耐える十分な構造的一体性を有し、同時に、組織の内殖を促進し、組織の再生を誘導し、かつ内殖組織とスカフォールドとの一体化を強化するような、組織修復インプラントのニーズが引き続き存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
出願者らは本明細書において、骨盤底修復のための組織エンジニアリングデバイスを開示する。この組織エンジニアリングデバイスはインプラントからなり、このインプラントの中央部分は不織布フェルト内に少なくとも部分的に埋め込まれている。この不織布フェルトは、実質的な組織内殖が望ましい場所に配置される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】前側インプラントの一例の平面図。
【図２】後側インプラントの一例の平面図。
【図３】前側インプラントの別の一例の平面図。
【図４】後側インプラントの別の一例の平面図。
【図５ａ】不織布フェルトに埋め込まれた中央部分を備えた、前側又は膀胱瘤欠陥の修復に好適なインプラントの代表的な一実施形態の平面図。
【図５ｂ】不織布フェルトに埋め込まれた中央部分を備えた、尖端部、後側／直腸瘤欠陥の修復に好適なインプラントの一代表例の平面図。
【図５ｃ】不織布フェルトに埋め込まれた中央部分を備えた、前側又は後側欠陥の修復に好適なインプラントの一代表例の平面図。
【図６】不織布フェルトに埋め込まれた中央部分を備えた、前側、後側及び／又は尖端部の欠陥の修復に好適なインプラントの一代表例の平面図。
【図７】９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布フェルトに埋め込まれたＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュインプラントの代表的なＳＥＭ顕微鏡写真。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
出願者らは本明細書において、中央部分が不織布フェルト内に少なくとも部分的に埋め込まれているインプラントを含む、骨盤底修復のための組織エンジニアリングデバイスを開示する。
【００１２】
インプラントには、骨盤底修復に好適なものが含まれる。そのようなインプラントには、米国特許第７１３１９４４号並びに米国公開番号第ＵＳ２００６００５８５７５号及び同第ＵＳ２００６０１３０８４８号が含まれ、これらは参考として本明細書に組み込まれる。
【００１３】
図１〜６は、骨盤底修復に使用するための代表的なインプラントを示す。図１を参照し、前側修復に好適なインプラント１０には、下部１２及び上部１４が含まれる。２つの区別された部分が識別されているが、前側インプラント１０は好ましくは、任意の好適な生体適合性メッシュ材料の単一シートで作製されることが理解されよう。したがって、さまざまな部分の仮想的境界線は、前側インプラント１０の検討及び議論を容易にするため、図１に点線（仮想線）で示されている。
【００１４】
ここで図１に戻り、下部１２は全体に漏斗様の形状を有し、長さ範囲約２ｃｍ〜約５ｃｍの直線の下縁１６と、長さ範囲約８ｃｍ〜約１４ｃｍの仮想境界線１８（図１では点線で示されている）と、女性患者の骨盤の解剖学的形状に似せた複雑な（すなわち複合した）１対の弓形の凹形側縁２０、２２とによって画定されている。角部２４、２６はそれぞれ、下縁１６が凹形側縁２０、２２に合流するところで形成される。下縁１６は、最長約３ｃｍまで延長することができることに注意されたい（図１に点線で示されている）。
【００１５】
下縁１６と仮想境界線１８との間の距離Ｄ１はまた、患者の骨盤の解剖学的形状の関数として選択されるが、典型的には約４ｃｍ〜約８ｃｍの範囲に収まる。もちろん、前側インプラント１０が作製されるメッシュ布地の性質は、個々の患者のニーズに合わせて外科医が下部１２のサイズ及び形状を改変できるようなものである。換言すれば、前側インプラント１０の下部１２は手術野でカスタムフィットさせることができる。
【００１６】
更に図１を参照し、上部１４は全体にドーム様の形状を有し、下部１２との仮想境界線１８と、患者の膀胱頸部に接触しないように選択されたある半径（例えば約２ｃｍ〜約４ｃｍ）及び弓形長さ（例えば約２ｃｍ〜約４ｃｍ）を有する曲線上縁２８と、骨盤筋膜腱弓（ＡＴＦＰ）に似せた複雑な弓形形状を有する１対の凸形側縁３０、３２とによって画定されている。上部１４の凸形側縁３０、３２はそれぞれ、下部１２の凹形側縁２０、２２と合流して、それぞれ角３４、３６を形成し、また上縁２８が凸形側縁３０、３２と合流したところで角３８、４０が形成される。
【００１７】
仮想境界線１８と上縁２８との間、前側インプラント１０の中央線に沿って測定される距離Ｄ２は、患者の骨盤の解剖学的形状の関数として選択される。典型的に、距離Ｄ２は約３ｃｍ〜約５ｃｍの範囲に収まる。下部１２と同様、上部１４は、個々の患者のニーズに合わせて手術野でカスタムフィットできるよう適合される。よって、上部１４の形状及びサイズは、外科手技の過程で外科医により製造後改変の対象になることが理解されるべきである。
【００１８】
引き続き図１を参照し、ストラップ様のインプラント延長部４２、４４は、上部１４の両側から外側に延びる。より具体的には、ストラップ様インプラント延長部４２は上部１４の凸形側縁３０から外方向へ横に延び、一方、ストラップ様インプラント延長部４４は上部１４の凸形側縁３２から外方向へ横に延びている。ストラップ様のインプラント延長部４２、４４の機能については後で詳しく記述されるが、これらは典型的に、幅が約０．５ｃｍ〜２ｃｍの範囲、及び長さが約７ｃｍ〜約１５ｃｍの範囲である。ストラップ様インプラント延長部４２、４４は、好ましくは図１に示されるようにわずかな湾曲を有しているが、これらは、前側インプラント１０の凸形側縁３０、３２からそれぞれ直線状に延在することもできる。前述のように、外科医は、例えばハサミ又はその他の好適な切断具によって、ストラップ様インプラント延長部４２、４４の幅及び長さを容易に改変することができる。
【００１９】
仮想境界線４６、４８は、全体に中央長手方向軸（Ｌ）に平行に延在しており、前側インプラント１０の本体を、１つの内側領域Ａ１と、その内側領域Ａ１の両側面に位置する２つの外側領域Ａ２、Ａ３とに分割する。領域Ａ１、Ａ２、及びＡ３は厳密なものではない。概して、領域Ａ１は、本明細書で詳細が後述されている外科的手技に従って中央又は中間膀胱瘤の修復のために機能する前側インプラント１０の部分を指し、一方、領域Ａ２、Ａ３は、同じ手技に従って横方向の膀胱瘤の修復のために機能する前側インプラント１０の部分を指す。
【００２０】
ここで図２を参照し、後側インプラント５０には、下部５２、上部５４、及びテープ部分５６が含まれる。前側インプラント１０と同様、後側インプラント５０は、任意の好適な生体適合性メッシュ材料の単一シートで作製される。後側インプラント５０は、前側インプラント１０とは別個のものとして区別して図２に示されているが、後側インプラント５０は、後で詳しく記述されるように、前側インプラント１０と共に一体形成できることが理解されよう。図１の前側インプラント１０で記述した場合と同様に、図２の後側インプラント５０のさまざまな仮想境界線は、検討及び議論を容易にするため、点線（仮想線）で示されている。
【００２１】
ここで図２に戻り、テープ部分５６は下部５２と上部５４との間に挿入されており、仮想線６０、６２、６４及び６６で囲まれてかつ長さ約５ｃｍ、幅約０．５〜２ｃｍのほぼ矩形である仮想中央領域５８を有している。テープ部分５６には、仮想中央領域５８の両側から外側に延びる１対のストラップ様インプラント延長部６８、７０も含まれる。このストラップ様インプラント延長部６８、７０の機能については後で詳しく記述されるが、ストラップ様インプラント延長部６８、７０の端が仙棘靱帯に取り付けられる場合は典型的には、幅は約０．５ｃｍ〜約２ｃｍの範囲、長さは約４ｃｍであり、又はストラップ様インプラント延長部６８、７０が仙棘靱帯の通過の有無を問わず臀部から骨盤底を通過する場合には約２０ｃｍである。ストラップ様インプラント延長部６８、７０は、好ましくは図２に示されるようにわずかな湾曲を有しているが、これらは、後側インプラント５０の両側から直線状に延在することもできる。後側インプラント５０が作製されるメッシュ布地の性質により、外科医は、個々の患者のニーズに合わせてストラップ様インプラント延長部６８、７０の幅及び長さを容易に改変できる。
【００２２】
なおも図２を参照し、全体に三角形をしている下部５２は、テープ部分５６から下向きに垂れ下がっている。より具体的には、下部５２は、長さ約１．５ｃｍ〜約３．５ｃｍの範囲を有する直線の下縁７２と、直線状又はわずかに凹形の１対の下向きに収束する側縁７４、７６とによって画定されている。側縁７４、７６の長さは典型的に、約８ｃｍ〜約１２ｃｍの範囲であるが、側縁７４、７６の長さを含む下部５２の物理的寸法は、患者の骨盤の解剖学的形状の関数であることが当業者には理解されよう。より具体的には、下部５２のサイズ及び形状は、直腸瘤修復の目的に合わせて具体的に選択される。また、下部５２の形状及びサイズは、外科医による製造後改変の対象になることも、当業者には理解されよう。直腸瘤修復は必要ないが膣円蓋懸垂が必要な場合は、下部５２と上部５４との両方を後側インプラント５０から除去し、テープ部分５６を残して、膣円蓋懸垂を実施する。
【００２３】
図２を引き続き参照し、上部５４は、上縁７８の自由端で画定され、あるいはさもなければ長さ約３ｃｍ、幅約１ｃｍのほぼ矩形であり、これがテープ部分５６から上向きに延びている。上部５４の主な目的は、後側インプラント５０を前側インプラント１０に取り付ける手段を提供することである。よって、前側インプラント１０が必要ない患者については、その患者に後側インプラント５０を挿入する前に、外科医は後側インプラント５０の上部５４を取り除くことができることが理解されよう。外科医は、例えば後側インプラント５０を前側インプラント１０に接合する場合など、患者のニーズに合わせて上部５４のサイズ及び形状を違うように改変することもまた、理解されよう。例えば、上縁７８は（図２の点線で示すように）約３ｃｍほど延長して、後側インプラント５０を前側インプラント１０に接合するのを容易にすることができる。あるいは、そのような接合は、前述のように前側インプラント１０の下縁１６を延長することによっても容易にすることができる。
【００２４】
前側インプラント１０と後側インプラント５０との両方とも、上述のように大きなメッシュ布地から切断又は型抜きすることができる。必要に応じて、切断したフィラメントの切断端は、当該技術分野において既知の任意の好適な技法によってほつれ防止処理を行うことができる。
【００２５】
前側インプラント１０及び後側インプラント５０は、さまざまな標準形状及びサイズ（例えば小、中及び大）で提供され得る。これらの標準インプラントを特定の患者の骨盤の解剖学的形状と比較した後、外科医は、患者のニーズに最もよく適合するものを選択する。選択したインプラントのサイズ及び／又は形状に対する何らかの改変が必要な場合は、外科医が手術野において行うことができる。
【００２６】
前側インプラント１０は、膀胱瘤の前側修復を行うのに使用され、一方、後側インプラント５０は、直腸瘤の後側修復を行うのに使用される。膣円蓋懸垂は、前側インプラント１０及び／又は後側インプラント５０を使用して実施することができる。これらの治療はすべて、下記に詳しく検討される。
【００２７】
下記には、上述の２つの代替実施形態の説明を示し、図１０及び１１に図示されている。これらの代替の実施形態の記述において、図１及び２の実施形態に関して上述された要素に対応する要素は、対応する番号に１００を加えた番号で示される。他に特記のない限り、図１０及び１１の代替実施形態は、それぞれ図１及び２と同様に構成及び操作される。
【００２８】
図３を参照し、前側インプラント１１０が示されていが、図１の前側インプラント１０に比べ、この主な違いには、前側インプラント１１０の一方の側に２本のストラップ様インプラント延長部１４２と、前側インプラント１１０の反対側に２本のストラップ様インプラント延長部１４４とが提供されていることが含まれる。ストラップ様インプラント延長部１４２の両方とも、患者の片側の閉鎖孔を通り抜け、一方でストラップ様インプラント延長部１４４の両方とも、患者のもう一方の側の閉鎖孔を通り抜ける。ストラップ様インプラント延長部１４２はそれぞれ、身体の一方の側の会陰部（鼠経部）の２つの小さな皮膚切開のうち対応する一方を通って患者の身体から外に出る。同様に、ストラップ様インプラント延長部１４４はそれぞれ、身体のもう一方の側の会陰部（鼠経部）の２つの小さな皮膚切開のうち対応する一方を通って患者の身体から外に出る。前側インプラント１０と比べ、前側インプラント１１０は、ストラップ様インプラント延長部１４２、１４４の余分なセットが提供されている結果、使用中により大きな横方向の支持がもたらされる。この余分のセットの位置により、前側インプラント１１０を、前側インプラント１０に特徴的である角３４、３６及び３８、４０なしで製造することが可能になる。
【００２９】
図４を参照し、後側インプラント１５０が示されているが、図２の後側インプラント５０に比べ、その主な違いには、ストラップ様インプラント延長部１６８、１７０が、後側インプラント１５０の中央長手方向軸（Ｌ）に対して鋭角を形成していることが含まれる。この角度は、患者の体内に埋め込まれたときに後側インプラント１５０が縮んだ場合の、直腸を締め付ける度合を低減するように具体的に選択される。
【００３０】
図５ａは、図１〜３に示されるインプラントに実質的に類似の、前側で又は直腸瘤修復に使用するのに好適なメッシュを示す。インプラント８１の中央部分８３は、患者の膀胱と膣との間の低張力又は無張力の場所に配置され、これにより間にある筋膜を強化し、膀胱が膣方向に押し付けられるのを防ぐよう設計されている。インプラント８１には、インプラントの反対側から外側に延びる、第１セットのストラップ様インプラント延長部８５、８７と、第２セットのストラップ様インプラント延長部８９、９１とが含まれる。インプラント延長部８５、８７、８９、９１の両セットとも、患者の骨盤筋膜腱弓（ＡＴＦＰ）近くの位置から、閉塞膜を通り、閉鎖孔を通って体外へ出る。上述の経路に沿った組織内のインプラント延長部の経路は、摩擦により、及び最終的にはインプラント内での組織内殖により、インプラントを定位置に固定する。
【００３１】
図２及び図４に示されるインプラントに実質的に類似の、尖端部、後側／直腸瘤修復のための代表的なインプラントを、図５ｂに示す。インプラント８０には、患者の直腸と膣との間の低張力又は無張力の場所に配置し、これにより直腸と膣との間にある筋膜を強化し、直腸が膣方向に押し付けられるのを防ぐよう設計されている、中央部分８２が含まれる。インプラント８０には、両側から外側に延びる２本のストラップ様インプラント延長部８４、８６が含まれる。これらのインプラント延長部は、患者の仙棘靭帯を通って延び、肛門近辺の大臀筋を通って体外に出てるよう設計されている。
【００３２】
図５ｃは、前側及び後側の両方の修復に好適なインプラントを示す。組み合わせインプラントのうち、前側部分９３及び後側部分９５のそれぞれの部分は、上述した個別のインプラントそれぞれに実質的に類似である。
【００３３】
ここで図６を参照し、インプラント２００は、前側、後側、及び／又は尖端部の膣欠陥を修復するための特定の用途を有して提供される。
【００３４】
インプラント２００は、前縁２１０及び後縁２１１、並びに、図示されるようにわずかに弧状であり得る第１側縁２１２及び第２側縁２１３を有する、中央部分２０１を有する。前縁２１０は、その内側に向かって延在する陥凹２２０を有し、後縁は、そこから外側に向かって延びるタブ要素２１５を有する。図示されるように、この陥凹及びタブ要素は両方ともそれぞれ、前縁及び後縁に沿って実質的に中央にあり、これがインプラントを適切に配置するのに役立つ。加えて、タブ要素２１５は、必要に応じて子宮に接合するための追加材料を提供する。中央部分は好ましくは、膀胱と、膣の上側２／３との間、あるいは、直腸と、膣の上側２／３との間のいずれかに配置するために、好ましいサイズ及び形状にされる。
【００３５】
このインプラントは更に、中央部分から第１及び第２遠位端２０４、２０５へと外側に向かって延びる、第１及び第２ストラップ様インプラント延長部２０２、２０３を有する。ストラップ様インプラント延長部は、中央本体部分の後縁２１１の第１端領域２２１及び第２端領域１２２から、ある角度で外側に延びており、これにより、中央本体部分２０１と組み合わせてＹ字形のインプラントを実質的に形成する。図６に示されるように、好ましい一実施形態において、ストラップ様インプラント延長部の上面２２３、２２４を実質的に対称的に縦断する線Ａ及びＢ、並びに中央本体部分の上面２２５を実質的に対称的に縦断する線Ｃは、中央本体部分内で交叉する。
【００３６】
第１及び第２のストラップ様インプラント延長部２０２、２０３はそれぞれ更に、それぞれの遠位端にポケット２０６、２０７を含む。各ポケットは、ストラップ様インプラント延長部の遠位端２０４、２０５に実質的に隣接した閉じた端２３０、２３１と、２つの閉じた側面と、その閉じた端に近位の開放端２３６、２３７と、を有し、図示されるように開放端開口部は中央部分２０１に向いている。好ましくは、この第１及び第２ポケットとその下にあるストラップ様延長部は、図６に示されるように、開放端から閉じた端に向かって内側に先細になっている。
【００３７】
好ましい一実施形態において、前縁２１０は長さａが約３０ｍｍ、後縁２１１は長さｂが約８０ｍｍである。更に、ストラップ様延長部２０２、２０３は好ましくは、長さｃ１、ｃ２が約４０ｍｍであり、インプラント２００は、全体の幅ｄが約１０．５ｃｍ、全体の長さｅが約９ｃｍである。
【００３８】
上述のインプラントは、任意の好適な生体適合性材料で構成されてよく、吸収性又は非吸収性、合成又は天然又はこれらの組み合わせであってよい。好ましくはこのインプラントはメッシュタイプの材料であり、一実施形態においては、例えばＥｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ）からＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳの名で製造及び販売されている押出成形ポリプロピレンフィラメントの編地で構成されている。別の一実施形態において、このメッシュは部分的に吸収性であり、押出成形ポリプロピレンフィラメントと、グリコリド及びイプシロン−カプロラクトンのセグメント化ブロック共重合体フィラメントＭＯＮＯＣＲＹＬ（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ））との編地で構成される。これには例えば、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ）からＵＬＴＲＡＰＲＯの名で製造及び販売されているものがある。これらの材料は、米国ＦＤＡにより、さまざまな用途用で人体内への埋め込みが認可されている。
【００３９】
インプラントの中央部分は上述のように、少なくとも部分的に、２枚の不織布繊維詰め物の間に挟まれ、これら詰め物を次に一緒にもつれさせる処理をすることにより、インプラントの中央部分を少なくとも部分的に不織布フェルト内に埋め込まれた状態にする。この不織布フェルトは、インプラントの中央部分に配置される。インプラントの中央部分は、修復が必要な組織を支えるインプラント部分となる。図１に示されるインプラント１０の中央部分には、上部１４及び下部１２が含まれ、インプラント１１０の中央部分には、上部１１４及び下部１１２が含まれる。図２に示されるインプラント５０の中央部分には、下部５２、上部５４、及びテープ部分５６が含まれ、一方、インプラント１５０の中央部分には、下部１５２、上部１５４、及びテープ部分１５６が含まれる。図５ａ〜５ｃ及び図６に示されるインプラントの中央部分は、前述されている。不織布フェルトは、インプラントのストラップ様インプラント延長部には配置されない。不織布フェルト層は、組織内殖を強化するのに必要な構造を提供する。
【００４０】
不織布繊維詰め物は、繊維業界で既知のさまざまな技法によって形成することができる。不織布繊維詰め物は、紡績、織布又は編布以外のプロセスによって作製される。例えば、不織布繊維詰め物は、紡績、織布又は編布を含むプロセスによって作製された紡績糸、スクリム、網、繊維又はフィラメントから調製することができる。紡績糸、スクリム、網、繊維及び／又はフィラメントは、けん縮されて、互いのもつれを強化されてよい。このようなけん縮された紡績糸、スクリム、網、繊維及び／又はフィラメントは、次いで、もつれるのに十分長い短繊維に切断されてよい。この短繊維を毛羽立てて不織布繊維詰め物を形成してよく、次にこれをもつれさせてもよく、又はカレンダー処理してもよい。更に、短繊維をよじってもよく、又はパイル加工してもよい。不織布繊維詰め物の製造に既知である他の方法を用いてよいが、それらにはエアレイイング、湿式形成及びステッチボンディングのような加工が挙げられる。
【００４１】
不織布繊維詰め物は繊維で構成される。不織布繊維詰め物の作製に使用される繊維は、単繊維、紡績糸、糸、編組、又は繊維の束であり得る。上述の任意の構造において、材料の機械的特性は、繊維製品の密度若しくは質感を変えることによって、又は不織布を作製するのに使用する繊維中に粒子を埋め込むことによって、変えることができる。本発明に使用される不織布繊維詰め物の密度は、１〜１０ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは２〜６ｍｇ／ｃｍ２である。
【００４２】
不織布繊維詰め物を作製するのに使用される繊維は、生体適合性、生体吸収性のポリマーから作製される。好適な生体適合性、生体吸収性のポリマーの例としては、脂肪族ポリエステル、ポリ（アミノ酸）、コポリ（エーテル−エステル）、ポリアルキレンオキサレート、ポリアミド、チロシン誘導ポリカーボネート、ポリ（ポリイミノカーボネート）、ポリオルトエステル、ポリオキサエステル、ポリアミドエステル、アミン基含有ポリオキサエステル、ポリ（無水物）、ポリホスファゼン、生体分子（すなわち、例えばコラーゲン、エラスチン、生体吸収性澱粉などのバイオポリマー）及びこれらのブレンドからなる群から選択されるポリマーが挙げられる。
【００４３】
本発明の目的のため、脂肪族ポリエステルには、ラクチド（乳酸、Ｄ−、Ｌ−、及び／又はｍｅｓｏ−ラクチドを含む）、グリコリド（グリコール酸を含む）、イプシロン−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン（１，４−ジオキサン−２−オン）、トリメチレンカーボネート（１，３−ジオキサン−２−オン）、トリメチレンカーボネートのアルキル誘導体、及びこれらの混合物からなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及びコポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、この繊維は、ラクチド、グリコリド、及びｐ−ジオキサン、及びこれらのブレンドからなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及びコポリマーから構成される。更に別の一実施形態において、この繊維は９０／１０ポリ（グリコリド−ｃｏ−ラクチド）（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）で構成される。更に別の一実施形態において、この繊維は、（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）繊維対ポリ（ｐ−ジオキサン）（ＰＤＯ）繊維の比が５０：５０の繊維で構成される。
【００４４】
不織布繊維詰め物は、メッシュインプラントの中央部分を２枚の不織布詰め物の２層の間に少なくとも部分的に挟み込むことによって、インプラントと組み合わせられる。不織布繊維詰め物は、空気絡合、ニードルパンチング、水力絡合、及び同様の方法などのプロセスを介してインプラントに接合することができ、これによりインプラントの中央部分の少なくとも一部分が不織布フェルトに埋め込まれる。これらのプロセスではそれぞれ、エアジェット、ニードル又は鉤付きニードル、及びウォータージェットを使用して、不織布フェルトの繊維と骨盤底デバイスとの間の連結を提供する。ジェット作用及びニードルパンチングにより、組織内殖のためのチャンネルが更に提供される。
【００４５】
一実施形態において、不織布繊維詰め物はニードルパンチングを介してインプラントに接合される。この方法は、不織布繊維詰め物をインプラントの中央部分の各面に配置することによって、２枚の不織布繊維詰め物の間にインプラントの中央部分を少なくとも部分的に挟み込むことを必要とする。この作成物を次にニードルパンチ機に通すことによって、一連の鉤付きニードルが作成物を貫通し、繊維を引っ張ることによって、この２枚の不織布繊維詰め物層を絡み合わせ、インプラントの中央部分を少なくとも部分的に、不織布フェルト内に埋め込む。ニードルパンチ通過の回数は、作成物の最終的な厚さ、密度、及び層間剥離耐性に依存する。例えば、ニードルパンチ通過の回数は、約１回〜約１０回の範囲であり得る。一実施形態において、好ましい通過回数は約２回である。
【００４６】
別の一実施形態において、不織布繊維詰め物は、水力絡合を介してメッシュインプラントの中央部分に接合される。この方法は、インプラントの中央部分の各面に配置された２枚の不織布繊維詰め物の間にインプラントの中央部分を少なくとも部分的に挟み込むことを必要とする。この作成物は、裏材メッシュ上に配置され、次にコンベアベルト又は開放表面ドラムの上に置かれる。ベルト／ドラムによって、一連のウォータージェットの中を作成物が通過する。高圧のウォータージェットを使用することにより、不織布フェルトの繊維がメッシュを通って押し込まれて絡まり、水はすぐに消散する。ベルト／ドラムの下を真空にすることにより、過剰な水が除去される。ウォータージェットを通過したら、作成物を裏返して、もう１回ウォータージェットを通過させる。絡合後、この作成物を乾燥させ、残った水を除去する。
【００４７】
全体のデバイスの厚さ、密度及び層間剥離耐性に影響するプロセス変数はたくさんあるが、これには、水圧、ウォータージェット通過の回数、裏材メッシュの孔径、及びベルト／ドラム速度が挙げられる。水圧は、約３４４７ｋＰａ（５００ｐｓｉ）〜約３０００ｐｓｉの範囲であり得る。一実施形態において、水圧は約１０３４２ｋＰａ（１５００ｐｓｉ）〜１３７９０ｋＰａ（２０００ｐｓｉ）の範囲である。ウォータージェット通過の回数は、シート各面について約１回〜約１０回の範囲であり得る。一実施形態において、ウォータージェット通過は各面について約３回〜約６回の範囲である。裏材メッシュ孔径は、約２００×２００マイクロメートル〜２０００×２０００マイクロメートルの範囲であり得る。一実施形態において、メッシュ孔径は、約４００×４００マイクロメートル（ＡＳＴＭ  ＃４０メッシュ）の範囲である。ベルト／ドラム速度は、３．０メートル／分（１０ｆｔ／分）〜１８．３メートル／分（６０ｆｔ／分）の範囲であり得る。一実施形態において、ベルト／ドラム速度は、約１０．７メートル／分（３５ｆｔ／分）〜約１３．７メートル／分（４５ｆｔ／分）の範囲である。
【００４８】
インプラントの中央部分は、少なくとも部分的に、不織布繊維詰め物の間に挟まれている。不織布繊維詰め物の間にインプラントの中央部分を部分的に挟み込むには、接合の前に、覆われるインプラント領域に合うように不織布繊維詰め物をあらかじめ切断すること；不織布繊維詰め物でデバイス全体を覆い、望ましい領域にその不織布繊維詰め物を接合してから、余分の不織布繊維詰め物をトリミングすること；又は、メッシュシートに不織布繊維詰め物を接合してから、インプラントの形状に切り抜くこと、によって達成することができる。不織布フェルト又はメッシュインプラントの切断は、レーザー若しくはダイカットによって、又はハサミなどの機械的手段を使用することによって、達成可能である。
【００４９】
組織エンジニアリングデバイスの合計厚さは、０．５〜３ミリメートルであり得、好ましくは０．６〜１．２ミリメートルであり得る。本発明の不織布の合計密度は、５０ｍｇ／ｍＬ〜３０００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは５０ｍｇ／ｍＬ〜３００ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは６０ｍｇ／ｍＬ〜９０ｍｇ／ｍＬであり得る。
【００５０】
本明細書に記述されている骨盤底修復治療のための組織エンジニアリングデバイスは、抗癒着性バリア、生物活性剤、細胞、刻んだ組織及び細胞可溶化物を組み込むことによって、更に強化することができる。
【００５１】
一実施形態において、本発明のデバイスには、手術後の組織癒着を防ぐための抗癒着性バリアを組み込むことができる。好適な抗癒着性バリアには、ヒアルロン酸及びその誘導体；ポリ（エチレングリコール）；酸化された再生セルロース（膜又はゲルの形態で）；及び同様物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
一実施形態において、１つ以上の生物活性剤を、本明細書に記述されている組織エンジニアリングデバイス内に組み込むか、及び／又はこれに適用することができる。一実施形態において、生物活性剤はインプラントに組み込まれるか、又はコーティングされる。別の実施形態では、生物活性剤は不織布フェルト層に組み込まれる。
【００５３】
好適な生物活性剤としては、感染予防剤（例えば、抗菌剤及び抗生物質）、炎症を緩和する製剤（例えば、抗炎症薬）、酸化再生セルロースのような、接着形成を防ぐ又は最低限にする製剤（例えば、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．から入手可能なＩＮＴＥＲＣＥＥＤ及びＳＵＲＧＩＣＥＬ）及びヒアルロン酸、免疫系を抑制する製剤（例えば、免疫抑制剤）、異種又は同種異系の増殖因子、タンパク質（マトリックスタンパク質を含む）、ペプチド、抗体、酵素、血小板、血小板の豊富な血漿、糖タンパク質、ホルモン（例えばエストロゲンクリーム）、サイトカイン、グリコサミノグリカン、核酸、鎮痛剤、ウイルス、ウイルス粒子、及び細胞型、走化性物質、抗生物質、及びステロイド及び非ステロイド鎮痛剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
本発明の組織エンジニアリングデバイスに、生存組織を含めることもできる。供給源は様々であってよく、組織は様々な形状を有することができるが、一実施形態では、組織は、組織再生の有効性を高め、かつ治癒反応を促進する微細分化された組織断片の形態である。別の実施形態では、生活組織は、組織再生及び／又は再形成の能力がある生存細胞を含有する健常組織から採取可能な、組織切片又はストリップの形態であってよい。
【００５５】
組織エンジニアリングデバイスには、その中に細胞を組み込むこともできる。好適な細胞型としては、骨細胞、骨芽細胞、破骨細胞、線維芽細胞、幹細胞、多能性細胞、軟骨細胞前駆体、軟骨細胞、内皮細胞、マクロファージ、白血球、含脂肪細胞、単球、形質細胞、マスト細胞、臍帯細胞、間質細胞、間葉幹細胞、上皮細胞、筋芽細胞、腱細胞、靭帯線維芽細胞、神経細胞、骨髄細胞、滑膜細胞、胚幹細胞、脂肪組織由来前駆細胞、末梢血前駆細胞、成体組織から単離される幹細胞、遺伝子組換え細胞、軟骨細胞とその他の細胞の組み合わせ、骨細胞とその他の細胞の組み合わせ、滑膜細胞とその他の細胞の組み合わせ、骨髄細胞とその他の細胞の組み合わせ、間葉細胞とその他の細胞の組み合わせ、間質細胞とその他の細胞の組み合わせ、幹細胞とその他の細胞の組み合わせ、胚幹細胞とその他の細胞の組み合わせ、成体組織から単離される前駆細胞とその他の細胞の組み合わせ、末梢血前駆細胞とその他の細胞の組み合わせ、成体組織から単離される幹細胞とその他の細胞の組み合わせ、遺伝子組換え細胞とその他の細胞の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
組織エンジニアリングデバイスはまた、核酸、ウイルス、又はウイルス粒子が関心対象の遺伝子を送達する遺伝子療法でも使用することができるが、これは、少なくとも１つの関心対象の遺伝子産物を特定の細胞又は細胞型にエンコードする。したがって、生物活性剤は、核酸（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はオリゴヌクレオチド）、ウイルス、ウイルス粒子、又は非ウイルスベクターであってよい。ウイルス及びウイルス粒子は、ＤＮＡ又はＲＮＡウイルスであってもよく、ＤＮＡ又はＲＮＡウイルス由来であってもよい。関心対象の遺伝子産物は、好ましくは、タンパク質、ポリペプチド、干渉リボ核酸（ｉＲＮＡ）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００５７】
適用可能な核酸及び／又はウイルス性因子（すなわち、ウイルス又はウイルス粒子）が強化された細胞マトリックスに組み込まれたら、デバイスを特定の部位に移植して、望ましいタイプの生物学的反応を引き出すことができる。次に、核酸又はウイルス性因子は細胞に取り込まれることでき、この核酸又はウイルス性因子がコード化する任意のタンパク質が、この細胞によって局所的に生成され得る。一実施形態では、核酸又はウイルス性因子は、細分化組織懸濁液の組織片内の細胞に取り込まれることでき、又は代替実施形態では、核酸又はウイルス性因子は、傷害組織部位を取り囲む組織の中の細胞に取り込まれることできる。生成されるタンパク質は、上記の種類のタンパク質であることができ、又は損傷若しくは疾患を治癒する、感染と闘う、若しくは炎症反応を軽減する組織の能力を向上させるのを容易にする同様のタンパク質であってよいことがを、当業者は認識されよう。組織修復過程又はその他の通常の生物学的過程に悪影響を与える可能性がある不必要な遺伝子産物の発現を阻止するために、核酸を使用することも可能である。ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びウイルス剤は、多くの場合、遺伝子発現ノックアウトとしても知られるこのような発現阻止機能を達成するために使用される。
【００５８】
下記の実施例は本発明の原理及び実践の説明のためであり、これらに限定されるものではない。本発明の範囲及び趣旨内の多くの追加の実施形態は、ひとたびこの開示の利益を得ると、当業者に明らかになるであろう。
【実施例】
【００５９】
実施例１：ニードルパンチングによる骨盤底修復用組織エンジニアリングデバイスの製造（ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布）
９０／１０（ｍｏｌ  ％）ポリ（グリコリド−ｃｏ−ラクチド）（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）繊維の不織布繊維詰め物（密度２ｍｇ／ｃｍ２）が、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ＬＬＣ（Ｃｏｖｅｎｔｒｙ，ＲＩ）で調製された。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ（Ｅｔｈｉｃｏｎ  Ｉｎｃ（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ））の１５ｃｍ×１５ｃｍ片を、そのメッシュの各面に不織布詰め物を配置することによって、不織布繊維詰め物の間に挟んだ。この作成物を次に、ニードルパンチ機に通して繊維詰め物を連結させ、これによりメッシュを不織布フェルト内に埋め込んだ。ニードルパンチに２回通して、デバイスを作製した。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布スカフォールドは、厚さ１．１７ｍｍ、密度７５ｍｇ／ｃｃであった。
【００６０】
試料を走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）で分析した。試料を顕微鏡のスタッドに装着し、ＥＭＳ  ５５０スパッタコーター（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｈａｔｆｉｅｌｄ，ＰＡ））を用いて金の薄層をコーティングした。ＳＥＭ解析は、ＪＥＯＬ  ＪＳＭ−５９００ＬＶ  ＳＥＭ（ＪＥＯＬ（Ｐｅａｂｏｄｙ，ＭＡ））を用いて行った。各試料について表面を検査した。代表的なＳＥＭ顕微鏡写真を図７に示す。このＳＥＭは、メッシュの太いポリプロピレン繊維が、不織布フェルトの９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ繊維内に連結されているのを示している。
【００６１】
実施例２：ニードルパンチングによる骨盤底修復用組織エンジニアリングデバイスの製造（ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布）
９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ繊維の不織布繊維詰め物（密度２ｍｇ／ｃｍ２）が、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ＬＬＣ（Ｃｏｖｅｎｔｒｙ，ＲＩ）で調製された。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ（Ｅｔｈｉｃｏｎ  Ｉｎｃ（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ））の１５ｃｍ×１５ｃｍ片を、そのメッシュの各面に不織布詰め物を配置することによって、不織布繊維詰め物の間に挟んだ。この作成物を次に、ニードルパンチ機に通して繊維詰め物を連結させ、これによりメッシュを不織布フェルト内に埋め込んだ。ニードルパンチに２回通して、デバイスを作製した。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布スカフォールドは、厚さ１．０３ｍｍ、密度７１ｍｇ／ｃｃであった。
【００６２】
上述のように調製された組織エンジニアリングデバイスを、破裂試験用に４ｃｍ×４ｃｍに切断した。デバイスの破裂試験は、ミューレン破裂試験装置を使用して評価された。試料を試験装置のクランプ領域に置いた。このクランプを作動させて、試料をゴム製試験隔膜上の位置に保持した。ゴム製隔膜に水圧液で圧力をかけ、一定の速度で圧力を増大させて、クランプ固定されたメッシュに対して隔膜を膨張させた。試料が破裂するまで隔膜の加圧を続けた。破裂点での圧力（ｋＰａ（平方インチ当たりポンド））を、破裂強度として記録した。データは、ｎ＝５での平均±標準偏差を示す。
【表１】
2012511955.tif 000003
【００６３】
実施例３：ニードルパンチングによる骨盤底修復用組織エンジニアリングデバイスの製造（ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ＋不織布詰め物は（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）繊維：ＰＤＯ繊維を５０：５０の比で有する）
９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ繊維とポリジオキサノン（ＰＤＯ）繊維を５０：５０の比で有する不織布繊維詰め物（密度１ｍｇ／ｃｍ２）が、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ＬＬＣ（Ｃｏｖｅｎｔｒｙ，ＲＩ）で調製された。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ（Ｅｔｈｉｃｏｎ  Ｉｎｃ（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ））の１５ｃｍ×１５ｃｍ片を、そのメッシュの各面に不織布詰め物を配置することによって、不織布繊維詰め物の間に挟んだ。この作成物を次に、ニードルパンチ機に通して繊維詰め物を連結させ、これによりメッシュを不織布フェルト内に埋め込んだ。ニードルパンチに２回通して、デバイスを作製した。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ＋（５０：５０）（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）：ＰＤＯ不織布スカフォールドは、厚さ０．９７ｍｍ、密度６０ｍｇ／ｃｃであった。
【００６４】
実施例４：コラーゲンフィブリル付着
実施例１に記述したスカフォールドに、下記の手順に従ってヒト線維芽細胞を播種した：スカフォールドのダイ打ち抜きディスク（６ｍｍ）をエチレンオキシドで滅菌し、２４ウェル低結合プレートのウェルに入れた。スカフォールドディスクをＤＭＥＭ培地で洗い、ヒト線維芽細胞を播種し、次に２１日間３７℃の加湿インキュベーター中（９５％空気：５％  ＣＯ２）でインキュベートした。細胞を播種したディスクをホルマリンで固定した後、パラフィンに埋め込んだ。
【００６５】
断面をシリウスレッドで染色し、付着したコラーゲンの複屈折パターンを見るため、偏光顕微鏡で観察した。不織布スカフォールドの繊維内に十分に一体化した、新たに合成されたコラーゲンフィブリルがしっかりと付着していたことが見出された。
【００６６】
実施例５：ウサギ筋膜修復研究
実施例１及び３で調製された組織エンジニアリングデバイスを、骨盤底修復に関して、ニュージーランドホワイト（ＮＺＷ）ウサギの筋膜内モデルにおいて評価した。
【００６７】
動物管理
本研究に使用された動物は、動物福祉法最終規定（Final Rules of the Animal Welfare Act regulations）（９  ＣＦＲ）、実験動物の人道的管理と使用に関する公衆衛生局規範（Public Health Service Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals）、及び実験動物の管理と使用のガイド（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）の該当するすべての条項に準拠して取扱いと管理が行われた。この研究における動物の管理又は使用を含むプロトコル、及び任意の改正又は手順は、このような手順の開始前に、試験機関の動物の管理及び使用委員会（Institutional Animal Care and Use Committee）により査察及び承認された。
【００６８】
動物は、ＵＳＤＡ規制に適合するステンレススチール製のケージに個別に収容された。１２時間明／１２時間暗の光周期が維持された。室温は標的範囲（１６〜２２℃（６１〜７２°Ｆ））以内、標的湿度３０〜７０％  ＲＨに維持された。動物には標準のウサギ用固形飼料を１日に少なくとも２回与え、十分な水を制約なしに与えた。
【００６９】
材料及び方法
動物
手順はすべて、無菌条件下で実施された。手術の前に、適切な薬剤を投与し、ケタミンを使用して全身麻酔が導入された。全身麻酔は酸素中に供給されたイソフルランで維持された。少なくとも長さ３ｃｍの１本の中線切開を、動物の背面上、尾部から最終肋骨まで行った。別に、背の右側面と左側面の両方の表面の浅筋膜において、中線から約１ｃｍ外れた位置に、２本の切開を行った。この中央から外れた切開の長さは少なくとも３ｃｍであった。中線から約２〜３ｃｍ離れ、尾部から最終肋骨まで、深筋膜に約１ｃｍ×２ｃｍの欠損を形成した。試験物品（１ｃｍ×２ｃｍ）をこの欠損内に配置し、寸法に合わせてトリミングした。材料は、連続パターンで５−０  ＰＤＳで定位置に縫合した。
【００７０】
試験材料
組織エンジニアリングデバイスは、実施例１及び３に記述されているようにニードルパンチングで調製された。試験材料を２×３ｃｍの切片に切り、エチレンオキシドで滅菌した。メッシュのみの対照として用いたＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳは、２×３ｃｍの切片にトリミングされ、滅菌された。
【００７１】
組織内殖の評価
埋め込みから６０（±２）日後及び１２０（±２）日後、動物をペントバルビタールナトリウム溶液の静脈内過用量注入によって安楽死させた後、大腿部血管を切ることによって放血させた。次に、動物本来の組織を境界線として、インプラント部位を摘出した。各インプラントを横断方向に二分し、頭部端をプラスチック材料に接合し、１０％の中性緩衝ホルマリン内で固定した。各インプラントの頭端のホルマリン固定後、この部位をトリミングして、インプラント材料が最大量になるような面で、１つの断面を得た。トリミングされた標本はパラフィン埋め込みの処理を行い、ヘマトキシリン及びエオシン染色されたスライド／ブロックを得た。
【００７２】
病理学者により、組織病理学的評価が実施された。平均の節間結合組織厚さ（ＩＣＴ）が、メッシュ節間のほぼ中点で測定され、（脈管、脂肪、及び組織のより純粋な細胞要素に対して）結合組織のコラーゲン性部分に限定された。
【００７３】
結果
６０日及び１２０日の平均ＩＣＴを下記に示す。データは、ｎ＝４での平均±標準偏差を示す。記号（＊）は、ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳ対照材料との統計的有意差を示す（ｐ＜０．０５、Ｔｕｋｅｙの多重比較検定）。
【表２】
2012511955.tif 000004
【００７４】
結論
組織エンジニアリングデバイスは、６０日時点で、メッシュ単独よりも大きな組織内殖を呈した。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布内のＩＣＴは、１２０日時点でメッシュ単独と同様であった。１２０日時点での組織エンジニアリングデバイス間のＩＣＴの差は、不織布材料の分解速度の差によるものである可能性がある。
【００７５】
実施例６：水力絡合による骨盤底修復用組織エンジニアリングデバイスの製造（ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布）
９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡの不織布繊維詰め物（密度２ｍｇ／ｃｍ２）が、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ＬＬＣ（Ｃｏｖｅｎｔｒｙ，ＲＩ）で製造された。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ（３０ｃｍ×３０ｃｍ）は、メッシュの各面に不織布フェルトを配置することによって、不織布フェルトの間に挟んだ。この作成物をＡＳＴＭ＃４０裏材メッシュ上に置き、１０３４２ｋＰａ（１５００ｐｓｉ）、ドラム速度１２．２ｍ／分（４０ｆｔ／分）、各面を３回通過させて、水力絡合させた。水力絡合で繊維詰め物が連結され、これによりメッシュが不織布フェルト内に埋め込まれた。組織エンジニアリングデバイス試料を次に、滅菌ガンマワイプのシート２枚の間に挟んで水気を取り、次に冷気のヘアドライヤーでブロードライすることにより乾燥させた。試料は次に減圧下で保管された。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布スカフォールドは、厚さ０．６８ｍｍ、密度７３ｍｇ／ｃｃであった。
【００７６】
破裂試験のため、試料を４ｃｍ×４ｃｍに切った。実施例２の記述に従い、破裂強度試験を実施した。データは、ｎ＝５での平均±標準偏差を示す。
【表３】
2012511955.tif 000005
【００７７】
水力絡合によって製造されたＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布の組織エンジニアリングデバイスは、ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ単独よりも大きい破裂強度を示した。
【００７８】
実施例７：水力絡合による骨盤底修復用組織エンジニアリングデバイスの製造（（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）繊維：ＰＤＯ繊維の比）
９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ繊維とＰＤＯ繊維を５０：５０の比で有する不織布繊維詰め物（密度２．６ｍｇ／ｃｍ２）が、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ＬＬＣ（Ｃｏｖｅｎｔｒｙ，ＲＩ）で調製された。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ（３０ｃｍ×３０ｃｍ）は、メッシュの各面に不織布フェルトを配置することによって、不織布フェルトの間に挟んだ。この作成物をＡＳＴＭ＃４０裏材メッシュ上に置き、１０３４２ｋＰａ（１５００ｐｓｉ）、ドラム速度１２．２ｍ／分（４０ｆｔ／分）、各面を３回通過させて、水力絡合させた。組織エンジニアリングデバイス試料を次に、滅菌ガンマワイプのシート２枚の間に挟んで水気を取り、次に冷気のヘアドライヤーでブロードライすることにより乾燥させた。試料は減圧下で保管された。ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋（５０：５０）（９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ）：ＰＤＯの不織布スカフォールドは、厚さ０．６８ｍｍ、密度７８ｍｇ／ｃｃであった。
【００７９】
実施例８：水力絡合された組織エンジニアリングデバイスの、厚さ及び層間剥離抵抗性に対する、メッシュサイズ、水圧、及び通過の回数の影響
組織エンジニアリングデバイスは、実施例６に記述されているように、ＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ及び９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布繊維詰め物材料で製造された。加工パラメーターは下表に記載のように変えた。各試料の厚さは、フェデラルゲージで測定した。メッシュインプラントからの不織布フェルトの剥離耐性は、５．１ｃｍ（２インチ）×１５．２ｃｍ（６インチ）試料で２．５４ｃｍ（１インチ）の層間剥離を開始し、機械的テスター（Ｉｎｓｔｒｏｎ（Ｎｏｒｗｏｏｄ，ＭＡ））を使用して試料に沿って層間剥離を拡大するのに必要な力を測定した。厚さと層間剥離抵抗のデータは、下表にｎ＝４での平均±標準偏差として示されている。
【表４】
2012511955.tif 000006
＊  メッシュの大きい、中程度の、及び細かい目開きはそれぞれ、孔径２２００×２０００マイクロメートル、８００×６００マイクロメートル、及び４３０×４００マイクロメートルとして定義される。
＊＊  層間剥離の拡大は起こらなかった。層内の不織布繊維が引っ張られて分離した
【００８０】
この結果は、細かい目開きの裏材メッシュで水力絡合によって製造されたＵＬＴＲＡＰＲＯメッシュ＋９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布スカフォールドは、不織布フェルトの層間剥離を呈さなかったことを示している。水力絡合の通過回数が増加すると、層間剥離耐性も増加する。水圧を低下させると、層間剥離耐性も低下する。小さな孔径の裏材メッシュを使用すると、作成物の厚さが減少する。
【００８１】
実施例９：ブタ筋膜修復研究
メッシュ内での組織内殖増加における、実施例６及び７で調製された組織エンジニアリングデバイスの有効性を、ブタ筋膜モデルで評価した。異なる分解速度を備えた不織布部分を有する２つの異なる組織エンジニアリングデバイスを試験し、メッシュのみの対照と比較した。デバイスは、腹直筋前の腹側上の筋膜に縫合され、３〜５ヶ月時点でメッシュ内の組織内殖を組織学的に評価した。
【００８２】
動物管理
本研究に使用された動物は、動物福祉法最終規定（Final Rules of the Animal Welfare Act regulations）（９  ＣＦＲ）、実験動物の人道的管理と使用に関する公衆衛生局規範（Public Health Service Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals）、及び実験動物の管理と使用のガイド（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）の該当するすべての条項に準拠して取扱いと管理が行われた。この研究における動物の管理又は使用を含むプロトコル、及び任意の改正又は手順は、このような手順の開始前に、試験機関の動物の管理及び使用委員会（Institutional Animal Care and Use Committee）により査察及び承認された。
【００８３】
この研究ではメスのユカタンミニブタが選択された。その理由は、ヒトの解剖学的構造に相対的に類似であるため筋膜修復研究について確立された種であること、及び該当する規制機関によってそのような研究が承認されていることである。手術部位である腹直筋前のアンレー埋め込みでは、大きな（６×１０ｃｍ）メッシュの配置を行う。これはヘルニア及び骨盤底修復に使用される臨床的メッシュサイズと同様である。動物は、ＵＳＤＡ規制に適合するステンレススチール製のケージに個別に収容された。１２時間明／１２時間暗の光周期が維持された。室温は標的範囲（１６〜２２℃（６１〜７２°Ｆ））以内、標的湿度３０〜７０％  ＲＨに維持された。動物には標準のブタ用固形飼料（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ  ５０８４）を１日に少なくとも２回与え、十分な水を制約なしに与えた。
【００８４】
材料及び方法
動物
手順はすべて、無菌条件下で実施された。３〜５ｍｇ／ｋｇテラゾール（登録商標）、０．５ｍｇ／ｋｇキシラジン、及び０．０１１ｍｇ／ｋｇグリコピロレートの筋肉内注射用混合液で麻酔が導入された。麻酔誘導後、１〜３％イソフルランの準閉回路吸入によって麻酔が維持された。手術部位（腹部）は毛刈りして無毛とし、二酢酸クロルヘキシジンでスクラブし、アルコールですすぎ、乾燥させ、ヨウ素１％の水性ヨードフォア溶液を塗布した。手術手技の前に、動物全体をドレープで覆った。中線で皮膚切開を行い、前側腹壁で皮膚及び皮下組織を左右対称に完全に切開して、６×１０ｃｍ試験物品（片側当たりインプラント１枚）の配置のために斜筋の間の筋膜を露出させた。インプラントを筋膜の上に置き、メッシュと中線との間は約２．５４〜５．１ｃｍ（１〜２インチ）あけて、染色された断続縫合（ＶＩＣＲＹＬ＊  ２−０、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ））で固定した。皮下組織及び皮膚を吸収性の連続縫合（ＶＩＣＲＹＬ＊  ２−０、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．）で再接合し、皮膚接着剤（Ｄｅｒｍａｂｏｎｄ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．）を皮膚表面に塗布した。手術後５〜７日間、腹部周辺に弾性結合剤を配置した。
【００８５】
試験材料
組織エンジニアリングデバイスは、実施例６及び７に記述されているように水力絡合で調製された。作成物は、連続するイソプロパノール浴及び水浴で洗浄し、真空乾燥させた。この作成物を６×１０ｃｍシートに切り、エチレンオキシドで滅菌した。メッシュのみの試料は６×１０ｃｍに切り、同様にエチレンオキシドで滅菌した。
【００８６】
９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ及びＰＤＯ繊維はそれぞれ、約７０日及び２１０日で吸収された。生体内で３ヶ月時点で、実施例６の試験材料の不織布部分は完全に吸収され、実施例７の試験材料はスカフォールドの約５０％が残存する。
【００８７】
メッシュ内の組織内殖の評価
手術後３ヶ月及び５ヶ月時点で、ペントバルビトール（１００ｍｇ／ｋｇ）の静脈内注射によってブタを安楽死させた。インプラント部位を露出させ、インプラントを四分割した。各メッシュの内側−頭側の四半分を、動物本来の組織を境界線として、下にある筋肉組織と共に摘出した。摘出部分は１０％の緩衝ホルマリン内で固定し、長手方向にトリミングした。次に、評価のため、摘出部分をヘマトキシリン及びエオシンで処理して染色した。
【００８８】
平均の節間結合組織厚さ（ＩＣＴ）が、メッシュ節間のほぼ中点で測定され、（脈管、脂肪、及び組織のより純粋な細胞要素に対して）結合組織のコラーゲン性部分に限定された。ＩＣＴ測定の後、結合組織の密な部分の厚さを測定した。次のような形態が、「密な」部分として測定される領域を説明する：コラーゲンが物理的により厚い束又は凝集塊を形成し、これはわずかに若い組織で、あまり整った外観ではなく、細胞性がわずかに高い傾向があった。「密でない」部分の形態はその逆であった：コラーゲンが非常に細い束を形成し、互いに分離し、しばしば複屈折率の高い（コラーゲンの組織化／成熟度を示す）傾向があった。密な結合組織の割合（％ＤＣＴ）は、密な組織の厚さをＩＣＴで割ることにより算出され、パーセンテージで表わされた。
【００８９】
３ヶ月及び５ヶ月の平均ＩＣＴを下記に示す。データは、ｎ＝７での平均±標準偏差を示す。記号（＊）は、ＵｌｔｒａＰｒｏメッシュ材料との統計的有意差を示す（ｐ＜０．０５、Ｔｕｋｅｙの多重比較検定）。
【表５】
2012511955.tif 000007
【００９０】
３ヶ月及び５ヶ月の平均％ＤＣＴを下記に示す。データは、ｎ＝７での平均±標準偏差を示す。記号（＊）は、ＵｌｔｒａＰｒｏメッシュ材料との統計的有意差を示す（ｐ＜０．０５、Ｔｕｋｅｙの多重比較検定）。
【表６】
2012511955.tif 000008
【００９１】
結論
組織エンジニアリングデバイスは、メッシュ単独よりも大きな組織内殖を呈した。３ヶ月と５ヶ月の両時点において、組織エンジニアリングデバイス内の節間組織は、より厚く密であった。スカフォールドは、より多くの組織内殖を誘発する可能性があり、一旦不織布部分が完全に吸収されるとその組織が維持され得ることが示された。
【００９２】
実施例１０：骨盤底脱出治療のための組織エンジニアリングデバイスの製造
骨盤底修復のための組織エンジニアリングデバイスが、水力絡合、及び不織布絡合を局所的に行うテンプレートを用いて製造された。ＧＹＮＥＭＥＳＨ  ＰＳメッシュを、図５ｃに示される形状にあらかじめ切り、このメッシュの各面に９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ詰め物を配置することによって２枚の詰め物の間に挟み込んだ。メッシュ−詰め物作成物を次に、その形状に切り抜いておいたプラスチック製マスク内に挟み、デバイスのコア部分に合わせて配置した（図５ｃの灰色部分）。この構成物をＡＳＴＭ  ＃４０裏材メッシュ上に置き、１５００ｐｓｉ、ドラム速度１２．２ｍ／分（４０ｆｔ／分）、各面を３回通過させて、水力絡合させた。テンプレートにより、デバイスのコアのみにウォータージェットをさらすことが可能になり、これにより絡合をその領域のみに制限した。絡合の完了後、メッシュで強化された不織布スカフォールドをテンプレートから外し、デバイスを得た。別の方法としては、組織エンジニアリングデバイスは、前述の図１〜６で他に示されている形状で作製することができる。
【００９３】
実施例１１：骨盤底脱出治療のための成形されたメッシュ強化不織布の製造
骨盤底用の組織エンジニアリングデバイスが、水力絡合により製造された。９０／１０  ＰＧＡ／ＰＬＡ不織布フェルトの１０ｃｍ×３５ｃｍストリップ２枚を、ポリグレカプロン−２５／ポリプロピレンメッシュの６５ｃｍ×３５ｃｍシートの中線に合わせて配置した。ストリップは、メッシュの両面に配置した。この構成物をＡＳＴＭ  ＃４０裏材メッシュ上に置き、１５００ｐｓｉ、ドラム速度１２．２ｍ／分（４０ｆｔ／分）、各面を３回通過させて、水力絡合させた。水力絡合されたシートをレーザー切断し（Ｋｅｙｅｎｃｅ  ＭＬ−Ｇ９３００  ３０ワットレーザーカッター、出力３０％、２回通過、１５０ｍｍ／ｓ）、図１ｃの形状にした。別の方法としては、組織エンジニアリングデバイスは、前述の図１〜６で他に示されている形状で作製することができる。
【００９４】
〔実施の態様〕
（１）  不織布フェルト内に少なくとも部分的に埋め込まれている中央部分を有するインプラントを含む、組織エンジニアリングデバイス。
（２）  前記不織布フェルトが２枚の不織布繊維詰め物で構成される、実施態様１に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（３）  前記不織布繊維詰め物が繊維で構成される、実施態様２に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（４）  前記繊維が、ラクチド、グリコリド、イプシロン−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン及びトリメチレンカーボネートからなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及び／又はコポリマーで構成される、実施態様３に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（５）  前記ホモポリマー及び／又はコポリマーが、ラクチド、グリコリド、及びｐ−ジオキサノンからなる群から選択されるモノマーの、ホモポリマー及び／又はコポリマーである、実施態様４に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（６）  前記インプラントが、前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底の修復に好適である、実施態様１に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（７）  前記インプラントが前側修復に好適であり、中央部分、第１セットのストラップ様インプラント延長部、及び第２セットのインプラント延長部を含み、前記第１及び前記第２セットのストラップ様インプラント延長部が、前記インプラントの両側から外側へ延びる、実施態様６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（８）  前記インプラントが尖端部及び後側の骨盤底修復に好適であり、中央部分と、前記インプラントの両側から外側へ延びる２本のストラップ様インプラント延長部と、を含む、実施態様６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（９）  前記インプラントが前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底修復に好適であり、第１セットのストラップ様インプラント延長部と、第２セットのインプラント延長部とを含む前側部分で、前記第１及び前記第２セットのストラップ様インプラント延長部が前記インプラントの両側から外側へ延びている、前側部分と、前記インプラントの両側から外側へ延びる２本のストラップ様インプラント延長部を含む後側部分と、を有する中央部分を含む、実施態様６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
（１０）  前記インプラントが、前側、後側、及び／又は尖端部の骨盤底修復に好適であり、前縁、後縁、並びに第１及び第２側縁を有する中央本体部分を含み、前記前縁は、前記前縁から内側へ延在し前記前縁に沿って実質的に中央に位置する陥凹を有し、前記後縁は、前記後縁から外側へ延び前記後縁に沿って実質的に中央に位置するタブ要素を有し、
前記中央本体部分の前記後縁の第１及び第２端領域から第１及び第２遠位端方向へ外側に延びる第１及び第２のストラップ様延長部を含み、前記第１及び第２ストラップ様延長部は、ある角度で外側へ延びることにより前記中央本体部分と組み合わせて実質的に「Ｙ」字形状のインプラントを形成し、前記第１及び第２ストラップ様延長部それぞれの前記第１及び第２遠位端に配置された第１及び第２ポケットを含み、前記第１及び第２ポケットはそれぞれ前記ストラップ様延長部の前記遠位端に実質的に近接した閉じた端を有し、その近位にあり、かつ前記中央本体部分に向かって開口している開放端を有する、実施態様６に記載の組織エンジニアリングデバイス。
【００９５】
（１１）  （ａ）中央部分を有する、骨盤底修復のためのインプラントを提供する工程と、
（ｂ）２枚の不織布繊維詰め物を提供する工程と、
（ｃ）前記不織布繊維詰め物を望ましい形状に切断する工程と、
（ｄ）前記インプラントの前記中央部分の両面それぞれに、前記切断した不織布繊維詰め物を配置する工程と、
（ｅ）水力絡合（hydroenanglement）により、前記不織布繊維詰め物を前記インプラントに接合することにより、前記不織布フェルト内に前記インプラントの前記中央部分を少なくとも部分的に埋め込む工程と、を含む、組織エンジニアリングデバイスの製造方法。
（１２）  （ａ）中央部分を有する、骨盤底修復のためのインプラントを提供する工程と、
（ｂ）２枚の不織布繊維詰め物を提供する工程と、
（ｃ）前記不織布繊維詰め物を望ましい形状に切断する工程と、
（ｄ）前記インプラントの前記中央部分の両面それぞれに、前記切断した不織布繊維詰め物を配置する工程と、
（ｅ）ニードルパンチングにより、前記不織布繊維詰め物を前記インプラントに接合することにより、前記不織布フェルト内に前記インプラントの前記中央部分を少なくとも部分的に埋め込む工程と、を含む、組織エンジニアリングデバイスの製造方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
2012511955.tif 000014
【図５ｃ】
2012511955.tif 000015
【図６】
2012511955.tif 000016
【図７】
2012511955.tif 000017
【国際調査報告】
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