(57)【要約】  ０．０１〜０．９９の置換度（ＤＳ）、及び、ＤＳ＋ＤＢが少なくとも１、又はＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２が少なくとも１．２０となるような特定のブロック度（ＤＢ）を有する置換セルロースと、キシログルカンと非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有するグリコシル加水分解酵素であって、ＧＨファミリー５、１２、４４又は７４から選択されるグリコシル加水分解酵素と、任意に１つ以上の洗濯補助成分とを含む、洗濯処理組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
洗濯処理組成物又はその成分である、組成物であって、
０．０１〜０．９９の置換度（ＤＳ）、及びＤＳ＋ＤＢが少なくとも１．００、又はＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２が少なくとも１．２０となるようなブロック度（ＤＢ）を有する置換セルロースと、
キシログルカンと非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有するグリコシル加水分解酵素であって、ＧＨファミリー５、１２、４４又は７４から選択されるグリコシル加水分解酵素と、
任意に、１つ以上の洗濯補助成分とを含む、組成物。
【請求項２】
前記置換セルロースが、少なくとも０．５５の置換度（ＤＳ）を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記置換セルロースが、少なくとも０．３５のブロック度（ＤＢ）を有する、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記置換セルロースが、１．０５〜２．００のＤＳ＋ＤＢを有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記置換セルロースが、明細書中の「試験方法３」に従う粘度試験において、２重量％水溶液で少なくとも１００ｍＰａ．ｓの粘度を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記置換セルロースが、その骨格に少なくとも１つの、分枝状、直鎖状又は環状、置換又は無置換、飽和又は不飽和アルキル、アミン（一級、二級、三級）、アンモニウム塩、アミド、ウレタン、アルコール、カルボン酸、トシレート、スルホン酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、シリコーン、及びそれらの混合物からなる群から選択される置換基により置換されるグルコース単位を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記置換セルロースが、カルボキシメチルセルロースである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記グリコシル加水分解酵素が、親キシログルカナーゼの単離変異体であり、前記変異体が、位置番号６８、１２３、１５６、１１８、２００、１２９、１３７、１９３、９２、８３、１４９、３４、３４０、３３２、９、７６、３３１、３１０、３２４、４９８、３９５、３６６、１、３７４、７、１４０、８、１４、２１、２１１、３７、４５、１３、７８、８７、４３６、１０１、１０４、１１１、３０６、１１７、１１９、４１４、１３９、２６８、１４２、１５９、１６４、１０２、１６８、１７６、１８０、４８２、１８３、２０２、２０６、２１７、４、２２２、１９、２２４、２２８、２３２、２、２４０、２４４、５、２４７、２４９、３２８、２５２、２５９、４０６、２６７、２６９、２７５、１７９、１６６、２７８、２８１、２８８、２９８、３０１、１８、３０２、１６５、８０、３０３、３１６、１６９、３２２、１２０、１４６、３４２、３４８、１４７、３５３、３８０、４６８、３８２、３８３、３８、３８４、３８９、３９１、１０、３９２、３９６、１７７、３９７、３９９、４０９、２３７、４１３、２５３、４１５、４１８、４０、４４３、４４５、１４８、４４９、２２５、４５０、４５４、３、４５５、４５６、２９９、４６１、４７０、２０４、４７６、４８８、３４７、及び５０７からなる群から選択される１つ以上の位置の親キシログルカナーゼの改変を含み、この位置はアミノ酸配列番号３の位置に対応しており、ここで、
ａ．前記改変が、
ｉ．前記位置を占める前記アミノ酸の下流へのアミノ酸の挿入、及び／又は
ｉｉ．前記位置を占める前記アミノ酸の欠失、及び／又は
ｉｉｉ．前記位置を占める前記アミノ酸の異なるアミノ酸での置換であり、
ｂ．前記親キシログルカナーゼが、ファミリー４４のキシログルカナーゼであり、かつ
ｃ．前記変異体が、キシログルカナーゼ活性を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記変異体が、Ｑ６８Ｈ，Ｎ，Ｌ；Ｓ１２３Ｐ，Ｔ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ，Ｖ，Ｉ，Ｋ，Ｗ，Ｌ，Ｍ；Ｋ１１８Ａ，Ｒ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ，Ｓ，Ｄ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ，Ｓ；Ｑ１３７Ｅ；Ｈ１９３Ｔ，Ｓ，Ｄ；Ｔ９２Ｖ，Ｉ，Ａ，Ｓ；Ａ８３Ｅ；Ｑ１４９Ｅ；Ｌ３４Ｆ，Ｉ，Ｖ；Ｒ３４０Ｔ，Ｎ；Ｓ３３２Ｐ；Ｔ９Ｄ；Ｓ７６Ｗ，Ｖ，Ｉ，Ｋ，Ｒ，Ｔ；Ｎ３３１Ｆ，Ｃ；Ｍ３１０Ｉ，Ｖ，Ｌ；Ｄ３２４Ｎ；Ｇ４９８Ａ，Ｄ；Ｄ３９５Ｇ及びＤ３６６Ｈからなる群から選択される１つ以上の置換を含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記変異体が、Ｑ６８Ｈ；Ｓ１２３Ｐ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ；Ｋ１１８Ａ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ；Ｑ１３７Ｅ；Ｈ１９３Ｔ；Ｔ９２Ｖ及びＮ３３１Ｆからなる群から選択される１つ以上の置換を含む、請求項９に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の置換度及び特定のブロック度（blockiness）を有する置換セルロース、及び、グリコシル加水分解酵素を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
衣類及び他の繊維などの物品が洗浄されるとき、洗浄性能は汚れの布地への再付着に影響され得る。汚れの再付着は、繊維の全体的な灰色化として兆候を現す。１９３０年代にすでに、置換多糖であるカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が再付着防止剤として特に適しており、洗濯用水中で再付着問題を軽減するために使用し得る可能性が発見されていた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
今日では多くの種類の市販の置換セルロースが存在するが、洗濯組成物において用いられるこれらの置換セルロースは過去数十年間と実質的に同じもののままである。
【０００４】
ここで発明者は、驚くべきことに、特定の置換度（ＤＳ）及びブロック度（ＤＢ）を有する特定の種類の置換セルロースが、特定のグリコシル加水分解酵素と組み合わされるとき、再付着防止性能及び汚れ遊離性能に関し、予想外の改善が得られることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の一実施形態では、本発明は洗濯処理組成物又はその成分である、組成物であって、
−０．０１〜０．９９の置換度（ＤＳ）、及び、ＤＳ＋ＤＢが少なくとも１．００、又はＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２が少なくとも１．２０となるようなブロック度（ＤＢ）を有する置換セルロースと、
−キシログルカンと非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有するグリコシル加水分解酵素であって、ＧＨファミリー５、１２、４４又は７４から選択されるグリコシル加水分解酵素と、
−任意に、１つ以上の洗濯補助成分とを含む組成物に関する。
【０００６】
この洗濯処理組成物は洗濯洗剤組成物又は布地ケア組成物であり得る。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
置換セルロース
本明細書で使用される用語「セルロース類」は天然セルロース類及び合成セルロース類を含む。セルロース類は植物から抽出されるか、又は微生物により生産される。
【０００８】
本発明の洗濯処理組成物は置換セルロースを含む。この置換セルロースは本質的にグルコース単位から構成されるセルロース骨格を含む。
【０００９】
この置換セルロース置換度、ＤＳ、は０．０１〜０．９９である。この置換セルロースの置換度及びブロック度の和、ＤＳ＋ＤＢ、は少なくとも１であってよい。この置換セルロースのＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２は少なくとも１．１０であってよい。
【００１０】
置換セルロースは同一又は異なる置換基により置換されてよい。
【００１１】
本発明の組成物は少なくとも重量により０．００１％、又は更に少なくとも０．０１％の置換セルロースを含み得る。とりわけ本組成物は重量により０．０３％〜２０％、特に０．１％〜１０％、又は更に０．３％〜３％、例えば１〜１．５％の置換セルロースを含み得る。
【００１２】
置換セルロースは無置換のグルコース単位を含み得る。無置換のグルコース単位は全ての水酸基が無置換のままのグルコース単位である。置換セルロースにおいて、無置換のグルコース単位のグルコース単位の総計に対する重量比は０．０１〜０．９９であってよい。
【００１３】
置換セルロースは置換グルコース単位を含む。置換グルコース単位はその少なくとも１つの水酸基が置換されているグルコース単位である。置換セルロースにおいて、置換グルコース単位のグルコース単位総計に対する重量比は０．０１〜０．９９であってよい。
【００１４】
セルロース骨格
セルロース骨格は実質的に直線状である。実質的に直線状であることにより、ポリマーの少なくとも９７％、例えば少なくとも９９％（重量により）、又は全てのグルコース単位がセルロース骨格の主鎖内にあることが理解される。
【００１５】
セルロース類は実質的にβ−１，４連結骨格を有する。実質的にβ−１，４連結骨格であるということは、ポリマーの少なくとも９７％、例えば少なくとも９９％（重量により）、又は全グルコース単位がβ−１，４連結により結合されることである、と理解されるべきである。存在する場合、セルロース骨格の残余のグルコース単位はα−又はβ−及び１〜２、１〜３、１〜４、１〜６又は２〜３連結及びそれらの混合物などのさまざまな様式で結合され得る。
【００１６】
セルロース骨格は本質的にグルコース単位により構成される。本質的にグルコース単位により構成されるということは、重量により９５％又は９７％、例えば９９％を超える、又は更に１００％のグルコース単位を含むことと理解されるべきである。
【００１７】
β−１，４連結を介して別のセルロースモノマーに結合されるセルロースのモノマーを、下の図（Ｉ）に示す。
【化１】
2012508304.tif 000002
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は置換基により置換され得るセルロースモノマー水素原子の位置を示す。
【００１８】
置換基
置換セルロースは少なくとも１つの置換されている骨格のグルコース単位を含む。適切な置換基は、分枝状、直鎖状又は環状、置換又は無置換、飽和又は不飽和アルキル、アミン（一級、二級、三級）、アンモニウム塩、アミド、ウレタン、アルコール、カルボン酸、トシレート、スルホン酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、シリコーン、及びそれらの混合物よりなる群から選択することができる。
【００１９】
この置換はグルコース単位の任意の水酸基に起き得る。例えば、図（Ｉ）に示されるようにグルコース単位がβ−１，４連結により結合される場合、置換はグルコース単位の位置２、３、及び／又は６に起き得る。グルコースの水酸基−ＯＨは置換−Ｏ−Ｒ又は−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ基により置換され得る。
【００２０】
Ｒは陰イオン性、陽イオン性、又は非イオン性基であってよい。Ｒは、Ｒ１、Ｎ（Ｒ２）（Ｒ３）、シリコーン部分、ＳＯ３−、ＰＯ３−であって、Ｒ２及びＲ３は互いに独立して水素原子又はＣ１〜６アルキル並びにＲ１は直鎖状又は分枝状、典型的には直鎖状、飽和又は不飽和、典型的には飽和、置換又は無置換、典型的には置換、環状又は非環状、典型的には非環状、脂肪族又は芳香族、典型的には脂肪族Ｃ１〜Ｃ３００、典型的にはＣ１〜Ｃ３０、Ｃ１〜Ｃ１２、又はＣ１〜Ｃ６の炭化水素ラジカルであってその炭化水素主鎖にＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選ばれるヘテロ原子が挿入され得るものよりなる群から選ばれ得る。Ｒ１は、アミノ（一級、二級、又は三級）、アミド、−ＯＨ、−ＣＯ−ＯＲ４、−ＳＯ３−、Ｒ４、−ＣＮ、及び−ＣＯ−Ｒ４からなる群から選択される１つ以上のラジカルにより置換され得、式中、Ｒ４は水素原子又は好適にはナトリウム若しくはカリウムイオンであるアルカリ金属イオンを表す。
【００２１】
Ｒその酸又は好適にはナトリウム塩形態（以下の式で与えられている）又はカリウム塩形態である以下の陰イオン性基であってよい。
【００２２】
−Ｔ−ＣＯ２Ｎａ
−Ｔ−ＳＯ３Ｎａ
−ＰＯ３Ｎａ
−ＳＯ３Ｎａ
式中、ＴはＣ１〜６アルキル、より好適にはＣ１〜４アルキルである。
【００２３】
Ｒ置換基は以下の陽イオン性基であってよい。
【化２】
2012508304.tif 000003
式中、ＴはＣ１〜６アルキル、又はＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２であり、それぞれのＡ、Ｂ、及びＣはＣ１〜６アルキル又はヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキルであり、Ｘはハロゲン化物又はトシレートなどの対イオンである。
【００２４】
Ｒは以下の非イオン性基であってよい。
−Ａ
−Ｔ−ＯＨ
−Ｔ−ＣＮ
−Ｃ（＝Ｏ）Ａ
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＡ
−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ａ）Ｂ
−Ｃ（＝Ｏ）ＯＡ
−（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＺ
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＺ
−（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｎＺ
−（ＣＨ２Ｏ）ｎＺ
式中：Ａ及びＢはＣ１〜３０アルキルであり；ＴはＣ１〜６アルキルであり；ｎ＝１〜１００であり；ＺはＨ又はＣ１〜６アルキルである。
【００２５】
Ｒはヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、又はスルホアルキル基又はその塩であってよい。Ｒは５−ヒドロキシメチル基などのヒドロキシＣ１〜４アルキル、カルボキシＣ１〜４アルキル基などのカルボキシＣ１〜６アルキル、又はスルホエチル基などのスルホ−Ｃ２〜４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３０アルカノイル又はその塩（例えばナトリウム塩）を表すことができる。
【００２６】
例示的実施形態において、−Ｏ−Ｒは−Ｏ−ＣＨ２ＯＨ、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、及びそれらの塩（例えばナトリウム塩）から選択される、基を表す。好適には、この置換基はカルボキシメチル基である。
【００２７】
この置換基は便益基（benefit group）であることができ、好適な便益基としては香水、香水粒子、酵素、蛍光増白剤、撥油剤、撥水剤、汚れ遊離剤、撥汚れ剤、布地更新染料、色相染料、染料中間体、染料定着剤を含む染料類、潤滑剤、布地柔軟化剤、光退色阻害剤、抗しわ／アイロン剤、保形剤、紫外線吸収剤、日焼け防止剤、抗酸化剤、しわ防止剤、抗菌剤、皮膚便益剤（skin benefit agent）、抗真菌剤、昆虫駆除剤、光脱色剤、光開始剤、感覚剤、酵素阻害剤、漂白触媒、体臭中和剤、フェロモン、及びそれらの混合物が挙げられる。
【００２８】
置換度（ＤＳ）。
本発明の置換セルロースは０．０１〜０．９９のＤＳを有する。
【００２９】
セルロース性ポリマー化学の当業者が理解するように、用語「置換度」（又はＤＳ）がセルロース骨格のセルロース単位の官能基の平均置換度を指す。したがって、セルロース骨格のそれぞれのグルコース単位が３つの水酸基を有するために、置換セルロースの最大置換度は３である。ＤＳ値は典型的にはセルロース骨格に沿った化学基の置換の均一性には関係せず、及びセルロース骨格の分子量にも関係付けられない。置換セルロースの置換度は少なくとも０．０２、又は０．０５、特に少なくとも０．１０、又は０．２０、又は更に０．３０でもあり得る。典型的に、セルロース骨格の置換度は０．５０〜０．９５、特に０．５５〜０．９０、又は０．６０〜０．８５、又は更に０．７０〜０．８０でもあり得る。
【００３０】
ＤＳの測定法は置換基の官能性により変化し得る。当業者は所与の置換セルロースの置換度と測定する方法を知り得るか又は決定し得る。例として、カルボキシメチルセルロースのＤＳの測定法がこの後に開示される。
【００３１】
試験方法１：ＣＭＣポリマー置換度（ＤＳ）の評価
ＤＳは、全ての有機物を除くために高温（６５０℃）で４５分間ＣＭＣを灰まで燃焼させることにより決定された。残渣の無機灰分を蒸留水に溶解し及びメチルレッドを加えた。サンプルがピンクになるまで０．１Ｍ塩酸で滴定した。ＤＳは、滴定した酸の量（ｂ  ｍＬ）及びＣＭＣ（Ｇ  ｇ）の量を用いて、下式を用いて計算された：
ＤＳ＝０．１６２＊｛（０．１＊ｂ／Ｇ）／［１−（０．０８＊０．１＊（ｂ／Ｇ）］｝
代替的に置換セルロースのＤＳは伝導度測定法又は１３Ｃ  ＮＭＲにより測定できる。両方のアプローチに関する実験プロトコールはＤにおいて与えられる。Ｃａｐｉｔａｎｉら、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，２０００，ｖ４２，ｐｐ２８３〜２８６。
【００３２】
ブロック度（ＤＢ）
本発明の置換セルロースは、ＤＢ＋ＤＳが少なくとも１であるか、又はＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２が少なくとも１．２０であるかのいずれかのようなＤＢを有する。
【００３３】
セルロース性ポリマー化学の当業者が理解するように、用語「ブロック度」（ＤＢ）とはセルロース骨格上にどのような置換（又は無置換の）グルコース単位が存在するかの程度を指す。より低いＤＢを有する置換セルロースは、無置換のグルコース単位がセルロース骨格に沿ってより均一に分布されているものとして特徴付けられ得る。より高いＤＢを有する置換セルロースは無置換のグルコース単位がセルロース骨格に沿ってより塊となって分布されているものとして特徴付けられ得る。
【００３４】
より具体的には、置換及び無置換のグルコース単位を含む置換セルロースにおいて、置換セルロースのＤＢはＢ／（Ａ＋Ｂ）に等しく、ここでＡは少なくとも１つの置換グルコース単位に直接連結した無置換のグルコース単位の数を表し、及びＢは置換グルコース単位に直接連結していない（即ち無置換のグルコース単位のみに直接連結した）無置換のグルコース単位の数を表す。
【００３５】
典型的に、この置換セルロースは少なくとも０．３５、又は更に０．４０〜０．９０、０．４５〜０．８０、又は更に０．５０〜０．７０のＤＢを有する。
【００３６】
置換セルロースは少なくとも１のＤＢ＋ＤＳを有し得る。典型的には置換セルロースは１．０５〜２．００、又は１．１０〜１．８０、又は１．１５〜１．６０、又は１．２０〜１．５０、又は更に１．２５〜１．４０のＤＢ＋ＤＳを有する。
【００３７】
０．０１〜０．２０又は０．８０〜０．９９のＤＳを有する置換セルロースは、少なくとも１、典型的には１．０５〜２．００、又は１．１０〜１．８０、又は１．１５〜１．６０、又は１．２０〜１．５０、又は更に１．２５〜１．４０のＤＢ＋ＤＳを有し得る。
【００３８】
０．２０〜０．８０のＤＳを有する置換セルロースは少なくとも０．８５、典型的には０．９０〜１．８０、又は１．００〜１．６０、又は１．１０〜１．５０、又は１．２０〜１．４０のＤＳを有し得る。
【００３９】
置換セルロースは少なくとも１．２０のＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２を有し得る。典型的には置換セルロースは、１．２２〜２．００、又は１．２４〜１．９０、又は１．２７〜１．８０、又は１．３０〜１．７０、又は更に１．３５〜１．６０のＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２を有し得る。
【００４０】
０．０１〜０．２０のＤＳを有する置換セルロース、は１．０２又は１．０５〜１．２０のＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２を有し得る。
【００４１】
０．２０〜０．４０のＤＳを有する置換セルロース、は１．０５又は１．１０〜１．４０のＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２を有し得る。
【００４２】
０．４０〜１．００又は０．６０〜１．００又は０．８０〜１．００のＤＳを有する置換セルロースは、１．１０〜２．００、又は１．２０〜１．９０、又は１．２５〜１．８０、又は１．２０〜１．７０、又は更に１．３５〜１．６０のＤＢ＋２ＤＳ−ＤＳ２を有し得る。
【００４３】
ＤＢを測定する方法は置換基の官能性により変化する。当業者は所与の置換セルロースの置換度と測定する方法を知り得るか又は決定し得る。例として、置換セルロースのＤＢを測定する方法がこの後で与えられる。
【００４４】
試験方法２：置換セルロースのブロック度（ＤＢ）の評価
置換セルロースの場合、ＤＢは、市販のエンドグルカナーゼ酵素（Ｅｃｏｎａｓｅ  ＣＥ，ＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓ、ドイツ、ダルムスタット（Darmstadt））による特定の酵素加水分解後に放出される無置換グルコース単位の量（Ａ）を、酸による加水分解後に放出される合計無置換グルコース単位の量（Ａ＋Ｂ）で割ったものに一致する。この酵素活性は、ポリマー鎖中で別の無置換グルコース単位に直接結合する無置換グルコース単位に対して特異的である。置換セルロースブロック度の更なる説明及び測定は、Ｖ．Ｓｔｉｇｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，２００６，１３，ｐｐ７０５〜７１２にその詳細が与えられている。
【００４５】
酵素分解は緩衝液中で、ｐＨ  ４．８、５０℃で３日間、酵素（Ｅｃｏｎａｓｅ  ＣＥ）により行われる。２５ｍＬの置換セルロースのサンプルに対して、２５０μＬの酵素が用いられる。この分解はサンプルを９０℃に加熱し及び１５分間高温に保つことにより停止される。置換様式及びブロック度の両方のための酸加水分解は、過塩素酸（７０％  ＨＣｌＯ４により室温で１５分、及び６．４％  ＨＣｌＯ４により１２０℃で３時間）により実行される。サンプルは陰イオン交換クロマトグラフィーとパルス状電流測定検出（Pulsed Amperiometric Detection）（ＰＡＤ検出器：ＢｉｏＬＣ５０（Ｄｉｏｎｅｘ、カリフォルニア州サニーベール（Sunnyvale）））により分析された。このＨＰＡＥＣ／ＰＡＤシステムはＣ１３  ＮＭＲにより較正される。単糖類は、３５℃でＰＡ−１分析用カラムにより０．２ｍＬ／ｍｉｎの流速の１００ｍＭ  ＮａＯＨを溶出剤として使用し、酢酸ナトリウムの増加勾配（３０分間で０〜１Ｍ酢酸ナトリウムまで増加）により分離される。それぞれのサンプルは３〜５回分析され、及びその平均が求められた。少なくとも１つの置換グルコースに直接結合する無置換のグルコースの数（Ａ）、及び置換グルコースに直接結合していない無置換のグルコースの数（Ｂ）が推定され、及び置換セルロースのサンプルのＤＢが、ＤＢ＝Ｂ／（Ａ＋Ｂ）により計算される。
【００４６】
置換セルロースの粘度。
置換セルロースは重量により２％が水に溶解されたとき、２５℃で、少なくとも１００ｍＰａ．ｓにおいて、典型的には、例えば２５０〜５０００、又は５００〜４０００、１０００〜３０００又は１５００〜２０００ｍＰａ．ｓの粘度を有する。セルロースの粘度は以下の試験方法に従って測定され得る。
【００４７】
試験方法３：置換セルロースの粘度の評価。
重量により２％のセルロース溶液をセルロースを水に溶解して調製する。この溶液の粘度を２５℃でＨａａｋｅ  ＶＴ５００粘度計により５ｓ−１のせん断率で測定する。それぞれの測定は１分間で２０の測定点について採取し平均することにより行われる。
【００４８】
置換セルロースの分子量。
典型的に、本発明のセルロースは、１０，０００〜１０，０００，０００、例えば２０，０００〜１，０００，０００、典型的には５０，０００〜５００，０００、又は更に６０，０００〜１５０，０００ｇ／ｍｏｌの範囲にわたる分子量を有する。
【００４９】
置換セルロースの重合度（ＤＰ）。
置換セルロースは１０〜７０００、又は少なくとも２０のグルコース単位総数を有し得る。本発明において有用な適切な置換セルロースとしては、４０を上回る、好適には約５０〜約１００，０００、より好適には約５００〜約５０，０００の重合度（ＤＰ）のセルロースが挙げられる。
【００５０】
置換セルロースのグルコース単位の総数は、例えば１０〜１０，０００、又は２０〜７５００、例えば５０〜５０００、及び典型的には１００〜３０００、又は１５０〜２０００である。
【００５１】
合成
本発明で用いられる置換セルロースはポリマー化学分野の当業者によく知られたさまざまな経路により合成できる。例えば、カルボキシアルキルエーテルにより連結されたセルロース類はセルロースを適切なハロアルカン酸と反応させることにより調製でき、カルボキシアルキルエステルにより連結されたセルロースは、セルロースを無水コハク酸などの適切な無水物と反応させることにより調製でき、及びスルホアルキルエーテルにより連結されたセルロース類は、セルロースを適切なアルケニルスルホン酸と反応させることにより調製できる。
【００５２】
当業者は、例えば、反応溶媒、反応剤の添加速度、及び置換セルロース合成の間の媒体のアルカリ度を選択することにより、より高いブロック度を持つ置換セルロースを得ることができる。Ｖ．Ｓｔｉｇｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，２００６，１３，ｐｐ７０５〜７１２、Ｎ．Ｏｌａｒｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｐｈｙｓｉｃｓ，２００１，２０２，ｐｐ  ２０７〜２１１、Ｊ．Ｋｏｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐａｐｉｅｒ（Ｈｅｉｄｅｌｂｕｒｇ），１９９８，５２，ｐｐ７０４〜７１２、Ｇ．Ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｌｙｍｅｒ，１９９８，３９，ｐｐ３１５５〜３１６５に記載されるように、この合成プロセスを最適化してＤＢを制御することができる。ブロック性特性を有するカルボキシメチルセルロース及びヒドロキシエチルセルロースの製造方法は、ＰＣＴ国際公開特許ＷＯ  ２００４／０４８４１８（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）及びＰＣＴ国際公開特許ＷＯ  ０６／０８８９５３（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）に開示されている。
【００５３】
好適な置換セルロース
置換セルロースは、硫酸セルロース、酢酸セルロース、スルホエチルセルロース、シアノエチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、及びヒドロキシプロピルセルロースより成る群から選ばれることができる。とりわけこの置換セルロースはカルボキシメチルセルロースである。
【００５４】
好適な置換セルロース誘導体の制限しない例としては、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、スルホエチルセルロース、スルホプロピルセルロース、硫酸セルロース、リン酸化されたセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシプロピルセルロース、スルホエチルヒドロキシエチルセルロース、スルホエチルヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルメチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルメチルセルロース、スルホエチルメチルヒドロキシエチルセルロース、スルホエチルメチルセルロース、カルボキシメチルエチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、スルホエチルエチルヒドロキシエチルセルロース、スルホエチルエチルセルロース、カルボキシメチルメチルヒドロキシプロピルセルロース、スルホエチルメチルヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルドデシルセルロース、カルボキシメチルドデコイルセルロース、カルボキシメチルシアノエチルセルロース、及びスルホエチルシアノエチルセルロースのナトリウム又はカリウム塩が挙げられる。
【００５５】
セルロースはメチル及びヒドロキシエチルセルロースなどの２以上の異なる置換基により置換された置換セルロースであってよい。
【００５６】
グリコシル加水分解酵素
グリコシル加水分解酵素は、キシログルカンと非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性有し、グリコシル加水分解酵素は、ＧＨファミリー５、１２、４４又は７４の中から選択される。
【００５７】
キシログルカンに対する酵素活性は、下記に詳しく記述される。非晶質セルロース基質に対する酵素活性は、下記に詳しく記述される。
【００５８】
グリコシル加水分解酵素は好ましくは、グリコシル加水分解酵素ファミリー４４に属する。グリコシル加水分解酵素（ＧＨ）ファミリーの定義は、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．１９９１，ｖ２８０，３０９〜３１６により更に詳しく記述されている。
【００５９】
グリコシル加水分解酵素は好ましくは、少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、配列Ｎｏ．１と同一の配列を有する。
【００６０】
本発明の目的のため、２つのアミノ酸配列間の同一性の度合は、ＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １６：２７６〜２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラム、好ましくはバージョン３．０．０以降で実行される、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３〜４５３）を用いて決定される。使用される所望によるパラメータは、ギャップ開始ペナルティが１０、ギャップ伸長ペナルティが０．５、ＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＥＭＢＯＳＳバージョンＢＬＯＳＵＭ６２）置換マトリックスである。「最長同一（longest identity）」と標識されたＮｅｅｄｌｅ出力（−ｎｏｂｒｉｅｆオプションを使用して得られる）が、同一性パーセントとして使用され、次のように計算される。（同一残基×１００）／（アライメント長さ−アライメント中のギャップの合計数）。
【００６１】
好適なグリコシル加水分解酵素は、パエニバチルス・ポリザイマ（polyzyma）（野生型）から得られた国際公開特許第ＷＯ  ０１／０６２９０３号に記載されているＸＹＧ１００６などのＧＨファミリー４４グリコシル加水分解酵素又はその変異体、バチルス・リケニフォルミス（野生型）から得られた国際公開特許第ＷＯ  ９９／０２６６３号に記載されている配列番号１などのＧＨファミリー１２グリコシル加水分解酵素又はその変異体、バチルス・アガラドヘレンス（野生型）から得られたＧＨファミリー５グリコシル加水分解酵素又はその変異体、パエニバチルス（野生型）から得られた国際公開特許第ＷＯ  ０１／０６４８５３号に記載されているＸＹＧ１０３４及びＸＹＧ１０２２などのＧＨファミリー５グリコシル加水分解酵素又はその変異体、ジョネシアｓｐ．（野生型）から得られた国際公開特許第ＷＯ  ２００２／０７７２４２号に記載されているＸＹＧ１０２０などのＧＨファミリー７４グリコシル加水分解酵素又はその変異体、並びにトリコデルマ・リーセイ（野生型）から得られた国際公開特許第ＷＯ０３／０８９５９８号の配列番号２に、より詳細に記載された酵素などのＧＨファミリー７４グリコシル加水分解酵素又はその変異体からなる群から選択される。
【００６２】
好ましいグリコシル加水分解酵素は、パエニバチルス・ポリキシマ（野生型）から得られたＸＹＧ１００６などのＧＨファミリー４４グリコシル加水分解酵素からなる群から選択されるか、又はその変異型である。
【００６３】
極めて好ましいグリコシル加水分解酵素は、親キシログルカナーゼの単離された変異体であり、前記変異体が、位置番号６８、１２３、１５６、１１８、２００、１２９、１３７、１９３、９２、８３、１４９、３４、３４０、３３２、９、７６、３３１、３１０、３２４、４９８、３９５、３６６、１、３７４、７、１４０、８、１４、２１、２１１、３７、４５、１３、７８、８７、４３６、１０１、１０４、１１１、３０６、１１７、１１９、４１４、１３９、２６８、１４２、１５９、１６４、１０２、１６８、１７６、１８０、４８２、１８３、２０２、２０６、２１７、４、２２２、１９、２２４、２２８、２３２、２、２４０、２４４、５、２４７、２４９、３２８、２５２、２５９、４０６、２６７、２６９、２７５、１７９、１６６、２７８、２８１、２８８、２９８、３０１、１８、３０２、１６５、８０、３０３、３１６、１６９、３２２、１２０、１４６、３４２、３４８、１４７、３５３、３８０、４６８、３８２、３８３、３８、３８４、３８９、３９１、１０、３９２、３９６、１７７、３９７、３９９、４０９、２３７、４１３、２５３、４１５、４１８、４０、４４３、４４５、１４８、４４９、２２５、４５０、４５４、３、４５５、４５６、２９９、４６１、４７０、２０４、４７６、４８８、３４７、及び５０７からなる群から選択される１つ以上（いくつか）の位置における改変を含み、ここで、キシログルカナーゼ活性を有する変異体は、親キシログルカナーゼのアミノ酸配列との同一性の度合が少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも８５％、更により好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも約９７％、最も好ましくは少なくとも９８％、及び更により好ましくは９９％であるアミノ酸配列を含む。位置の番号付けは、配列番号３のアミノ酸配列に関連している。好ましくは、上記で特定した位置の１つ以上における改変を含む変異体は、親キシログルカナーゼと比べて、洗剤、好ましくは液体洗剤中での増加した安定性を有する。
【００６４】
好ましい実施形態において、変異体は、改変の次の組合せの１つ以上（いくつか）のを含む。
【００６５】
Ｖ１＊＋Ｖ２＊＋Ｈ３＊；
Ｖ１Ｑ＋＊１ａＥ＋＊１ｂＶ；
Ｈ３Ａ；
Ｈ３Ａ＋Ｈ４３６Ａ；
Ｋ８Ａ，Ｑ，Ｓ；
Ｔ９Ｄ；
Ｔ９Ｄ＋Ｌ３４Ｆ＋Ａ８３Ｅ＋Ｑ１４９Ｅ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｓ３３２Ｐ＋Ｒ３４０Ｔ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｄ３３Ｅ＋Ｍ４０Ｌ＋Ａ４１Ｔ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｙ７３Ｆ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｓ２６９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｅ３３３Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｔ３７４Ａ＋Ｓ４１６Ａ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｇ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２＊；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｄ３３Ｅ＋Ｍ４０Ｌ＋Ａ４１Ｔ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｖ２１９Ａ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｓ４１６Ａ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｎ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ｖ４５０Ｉ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｓ＋Ｖ４７７Ｉ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｄ３３Ｅ＋Ｍ４０Ｌ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｎ１６８Ｋ＋Ｔ１７２Ａ＋Ｖ２１９Ａ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｓ２６９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｅ３３３Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｎ４１５Ｓ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｈ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ｓ５２２Ｐ＋Ｐ５２３Ｖ＋Ｖ５２４Ｅ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｄ３３Ｅ＋Ｍ４０Ｌ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｔ３７４Ａ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｓ４１６Ａ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｎ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ｖ４５０Ｉ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｇ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２Ｐ＋Ｐ５２３Ｖ＋Ｖ５２４Ｅ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｄ３３Ｅ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｎ１６８Ｋ＋Ｔ１７２Ａ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｅ３３３Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｓ４１６Ａ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｈ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｓ＋Ｖ４７７Ｉ＋Ｅ４８９Ａ＋Ａ４９０Ｖ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２＊；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｍ４０Ｌ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｓ２６９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｔ３２０Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｔ３７４Ａ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｎ４１５Ｓ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｈ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ
＋Ｉ４７３Ｓ＋Ｖ４７７Ｉ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２Ｐ＋Ｐ５２３Ｖ＋Ｖ５２４Ｅ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ１０４Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｎ１５３Ｋ＋Ｒ１５６Ｑ＋Ｖ２１９Ａ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｓ２６９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｅ３３３Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｎ４１５Ｓ＋Ｄ４２０Ｇ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｈ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ｖ４５０Ｉ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｇ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２＊；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｔ１０４Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｑ＋Ｖ１５９Ａ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｎ１６８Ｋ＋Ｔ１７２Ａ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ；
Ｉ１０Ｖ＋Ｆ１７Ｓ＋Ｙ５３Ｈ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｔ１７２Ｖ＋Ａ１７７Ｔ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｓ２６９Ｎ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｓ４１６Ａ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｈ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｄ４４４Ｙ＋Ａ４６９Ｅ＋Ｋ４７０Ｔ＋Ｉ４７３Ｇ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２＊；
Ｋ１３Ａ＋Ｋ１２９Ａ；
Ｋ１３Ａ＋Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｋ１３Ａ，Ｒ；
Ｋ１８Ｒ；
Ｒ２０Ａ；
Ｋ２１Ｑ＋Ｋ１２９Ａ；
Ｋ２１Ｑ，Ｒ，Ｔ；
Ｑ３２Ｈ＋Ｍ４０Ｌ＋Ｒ４９Ｇ＋Ｄ６５Ｅ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｔ９２Ａ＋Ｌ１０２Ｑ＋Ｔ１０４Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｋ２０２Ｅ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｔ３７４Ａ；
Ｄ３３Ｖ＋Ｑ６８Ｈ＋Ｎ１６８Ｈ＋Ｖ４５０Ｉ；
Ｌ３４Ｆ，Ｉ，Ｍ，Ｖ；
Ｌ３４Ｉ＋Ｋ１２９Ａ；
Ｄ３７Ｇ，Ｎ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｅ３８Ｉ，Ｖ；
Ｍ４０Ｌ＋Ａ４１Ｔ＋Ｑ６７Ｍ＋Ｎ７２Ｓ＋Ｓ７６Ｄ＋Ｇ７８Ａ＋Ｑ８２Ｋ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｎ１５３Ｋ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｄ２４９Ｎ＋Ｖ２７２Ａ＋Ｉ３３７Ｌ＋Ｍ３５６Ｌ＋Ｖ３９７Ａ＋Ｎ４１５Ｓ＋Ｔ４２１Ｉ＋Ｓ４２４Ｎ＋Ｎ４４１Ｄ＋Ｖ４５０Ｉ＋Ｅ４８９Ａ＋Ａ４９０Ｖ＋Ｔ５１７Ａ＋Ｓ５２２＊；
Ｍ４０Ｖ；
Ｌ４５Ｉ；
Ｑ６８Ｈ，Ｍ，Ｎ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｒ１５６Ｖ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ｒ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｙ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ｒ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ｓ＋Ｒ１５６Ｆ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｇ２７４Ｄ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１２９Ａ，Ｔ＋Ｒ１５６Ｋ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｖ，Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｓ７６Ｗ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ａ，Ｄ，Ｉ，Ｓ，Ｖ，Ｙ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｎ＋Ｄ９７Ｎ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｓ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｇ２７４Ｄ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ａ２２４Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｅ４４６Ｋ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｎ３３１Ｈ，Ｋ，Ｑ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｎ１４０Ｆ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｋ４７０Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｄ３２４Ｎ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｋ４７０Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｌ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ，Ｒ＋Ｒ１５６Ｙ，Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｓ１２３Ｐ，Ｔ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ｒ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｓ４８４Ｃ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｖ，Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｖ，Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｆ，Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ；
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｓ７６Ｅ，Ｉ，Ｋ，Ｍ，Ｒ，Ｔ，Ｖ，Ｗ；
Ｓ７６Ｗ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｓ７６Ｗ＋Ｇ２００Ｐ＋Ａ２２４Ｐ；
Ｇ７８Ａ＋Ｋ１１８Ａ＋＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｇ７８Ａ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｇ７８Ａ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｇ７８Ａ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１６９Ａ；
Ｇ７８Ａ，Ｎ，Ｓ；
Ｇ７８Ａ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｇ７８Ａ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｇ７８Ａ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１６９Ａ；
Ｌ８０Ｖ；
Ａ８３Ｄ，Ｅ，Ｈ，Ｉ，Ｌ，Ｎ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｙ；
Ｋ８７Ｑ；
Ｋ８７Ｖ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｋ１６９Ａ；
Ｔ９２Ｉ，Ｖ；
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１０１Ａ＋Ｋ１２９Ａ；
Ｋ１０１Ｒ；
Ｋ１０１Ｒ＋Ｌ１０２Ｉ；
Ｔ１０４Ａ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ａ１１７Ｓ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｐ１１１Ｑ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｆ１４６Ｌ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ａ２２４Ｐ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ＋Ｎ３９９Ｉ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１６９Ａ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ４７０Ｔ；
Ｋ１１８Ａ，Ｒ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１１８Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｄ１１９Ｌ；
Ｇ１２０Ａ；
Ｓ１２３Ｐ，Ｔ；
Ｓ１２３Ｔ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ，Ｆ，Ｉ，Ｋ，Ｒ，Ｓ，Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｋ１６９Ａ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｋ１７６Ｐ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｋ２７５Ｑ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｋ４４５Ｓ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｋ４７０Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ４７０Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｖ１３９Ｋ＋Ｎ１４０Ｆ＋Ｑ１４７Ｓ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ａ１７７Ｔ＋Ｖ１７９Ｉ＋Ａ１８３Ｓ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ａ３２８Ｇ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ２４７Ｇ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ２４９Ｇ，Ｎ，Ｓ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ３０３Ｉ，Ｋ，Ｓ，Ｖ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ３２４Ｎ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ３６６Ｈ＋Ｔ３７４Ａ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｄ４６１Ｎ，Ｑ，Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｅ２８８Ｑ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｇ２０４Ｔ＋Ｒ２１１Ｋ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１６４Ｎ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ４３６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｉ１０Ｖ＋Ｖ１４Ｉ＋Ｄ１９Ｅ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｉ２２２Ｖ＋Ａ２２４Ｐ＋Ｖ２２８Ｉ＋Ｖ２３２Ａ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１７６Ｐ，Ｓ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ２７５Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ３２２Ｉ＋Ｋ４５４Ｑ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ４０６Ｎ＋Ｎ４１５Ｇ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ４５４Ｑ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｌ３８０Ｆ＋Ｎ３８３Ｙ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｎ３８９Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｎ２９８Ｆ＋Ｅ２９９Ｎ＋Ｇ３０１Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｎ３０２Ｋ＋Ｄ３０３Ｌ，Ｓ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｐ５０７Ａ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｒ２６７Ｈ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｒ４０９Ｌ，Ｔ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｓ４４３Ｄ＋Ｋ４４５Ｓ＋Ｌ４４９Ｉ＋Ｖ４５０Ｉ＋Ｓ４５５Ｎ＋Ｍ４５６Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｔ２４４Ｄ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｈ１６４Ｎ＋Ｆ１６５Ｙ；
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｖ２５９Ｉ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ｌ２６８Ｋ＋Ｓ２６９Ａ；
Ｑ１３７Ｄ，Ｅ；
Ｎ１４０Ｆ；
Ｋ１４２Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｆ１４６Ｃ＋Ｈ１６４Ｃ；
Ｆ１４６Ｋ，Ｌ；
Ｆ１４６Ｌ＋Ｋ３２２Ｉ；
Ｌ１４８Ｋ＋Ｎ１６８Ｄ；
Ｑ１４９Ｅ；
Ｒ１５６Ａ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｉ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｗ，Ｙ；
Ｒ１５６Ｙ＋Ｎ３３１Ｆ；
Ｖ１５９Ｍ；
Ｈ１６４Ａ，Ｎ；
Ｌ１６６Ｉ；
Ｎ１６８Ｄ；
Ｋ１６９Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｋ１７６Ｐ；
Ａ１７７Ｅ，Ｔ；
Ｋ１８０Ｒ；
Ｈ１９３Ａ，Ｄ，Ｓ，Ｔ；
Ｒ１９７Ａ，Ｌ；
Ｈ１９９Ａ；
Ｇ２００Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｈ，Ｉ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｗ，Ｙ；
Ｇ２００Ｐ＋Ａ２２４Ｐ；
Ｋ２０２Ｎ，Ｑ，Ｒ；
Ｓ２１４Ｅ；
Ｋ２１７Ａ；
Ａ２２１Ｋ；
Ｇ２２５Ｓ；
Ｖ２３２Ａ；
Ｇ２３７Ａ，Ｓ，Ｖ；
Ｋ２４０Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｋ２５２Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｇ２５３Ａ；
Ｒ２６７Ａ；
Ｌ２６８Ｉ；
Ｋ２７５Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｌ２７８Ｉ；
Ｆ２８１Ｌ；
Ｍ２９０Ｒ；
Ｒ２９５Ａ；
Ｋ３０６Ａ，Ｒ；
Ｋ３０７Ｑ；
Ｍ３１０Ｉ，Ｌ，Ｖ；
Ｍ３１０Ｖ＋Ｎ３９９Ｉ；
Ｒ３１４Ａ；
Ｇ３１６Ｉ；
Ｋ３２２Ａ，Ｒ；
Ｄ３２４Ｎ；
Ｎ３３１Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｐ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｗ，Ｙ；
Ｓ３３２Ｍ，Ｐ；
Ｓ３３２Ｐ＋Ｖ３９７Ｉ；
Ｒ３４０Ａ，Ｎ，Ｔ；
Ｋ３４２Ａ；
Ｖ３４５Ｉ；
Ｋ３４７Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｄ３４８Ｇ；
Ｋ３５３Ｑ，Ｒ；
Ｄ３６６Ｈ；
Ｍ３７３Ｑ；
Ｔ３７４Ａ；
Ｌ３８０Ｆ；
Ｋ３８２Ａ；
Ｎ３８３Ｙ；
Ｎ３８９Ａ，Ｆ，Ｎ，Ｖ；
Ｗ３９１Ｖ；
Ｋ３９２Ｇ，Ｑ；
Ｄ３９５Ｇ；
Ｇ３９６Ｐ；
Ｖ３９７Ｓ；
Ｎ３９９Ｉ；
Ｋ４０６Ｎ；
Ｇ４１３Ａ，Ｓ；
Ｋ４１４Ａ；
Ｎ４１５Ｓ；
Ｔ４１７Ｋ；
Ｆ４１８Ｉ；
Ｖ４３１Ｅ；
Ｈ４３６Ａ；
Ｎ４４１Ｇ＋Ａ４４２Ｅ＋Ｓ４４３Ｄ；
Ｓ４４３Ｅ，Ｋ，Ｑ；
Ｋ４４５Ａ，Ｒ，Ｓ；
Ｋ４４５Ｃ＋Ｋ４７０Ｃ；
Ｈ４４８Ａ；
Ｋ４５４Ｒ；
Ｓ４６７Ｒ＋Ｇ４６８Ｓ＋Ａ４６９Ｔ；
Ｇ４６８Ｓ，Ｙ；
Ｋ４７０Ｐ，Ｒ，Ｔ；
Ｉ４７３Ｔ；
Ｋ４７６Ｑ；
Ｋ４８２Ａ，Ｑ，Ｒ；
Ｋ４８８Ａ，Ｑ，Ｒ，Ｔ；
Ａ４９０Ｒ；
Ｇ４９８Ａ，Ｄ，Ｓ；
Ｒ５００Ａ，Ｔ，Ｖ；
Ｈ５１２Ａ；
Ｔ５１７Ａ＋Ｇ５１８Ｄ；又は
Ｇ５１８Ｄ。
【００６６】
一態様において、本発明の変異体のアミノ酸改変の数は、好ましくは総数で５５、好ましくは５２、より好ましくは５０、より好ましくは４０、より好ましくは３０、より好ましくは２０、より好ましくは１５、より好ましくは１０、より好ましくは９、より好ましくは８、更により好ましくは７、更により好ましくは６、更により好ましくは５、更により好ましくは４、更により好ましくは３、及び最も好ましくは２つの改変、及び最も好ましくは１つの改変を含む。別の態様において、改変の総数は１、好ましくは２、より好ましくは３、更により好ましくは４、更により好ましくは５、更により好ましくは６、更により好ましくは７、更により好ましくは８、更により好ましくは９、最も好ましくは１０である。改変は、ｉ）この位置を占めるアミノ酸の下流へのアミノ酸の挿入、ｉｉ）この位置を占めるアミノ酸の欠失、又はｉｉｉ）この位置を占めるアミノ酸の異なるアミノ酸での置換、の形態であり得る。改変は互いに独立して行われてもよく、例えば、親キシログルカナーゼと比較した場合に、第１の位置では挿入が存在してもよく、第２の位置では置換が存在し、第３の位置では欠失が存在する。好ましい実施形態において、変異体は置換のみを含む。
【００６７】
本発明の一態様において、変異を起こすべき位置はコンセンサス配列分析に基づいて特定される。分析は、配列番号３を、配列番号５及び配列番号７、並びに、配列番号３のファミリー４４グリコシドヒドロラーゼ領域と３０％同一であるＵｎｉＰｒｏｔデータベースからのその他の配列とアラインメントすることによって実施される。得られたコンセンサス配列が図１に示されている。コンセンサス配列１はアラインメントからの所定の位置に最も豊富なアミノ酸を含む配列であり、コンセンサス配列２は所定の位置に２番目に豊富なアミノ酸を含む配列であり、以下同様である。本発明の一態様において、配列番号３の１つ以上（いくつか）の残基は、コンセンサス配列１若しくはコンセンサス配列２又はコンセンサス配列３あるいはコンセンサス配列４からの対応する残基によって置換される。本発明の一態様において、変異体は、位置番号１０、１９、６８、８０、８９、１０４、１１１、１１７、１２３、１２９、１３７、１３９、１４０、１４７、１５６、１５９、１６４、１６５、１７７、１７９、１８３、２００、２０４、２１１、２２２、２２４、２２５、２２８、２３２、２５９、２６７、２６８、２６９、２８１、３２８、３４５、３６６、３７４、３８０、３８３、３８４、４０６、４１５、４３６、４４３、４４５、４４９、４５０、４５５、４５６、４８８及び５０７からなるコンセンサス配列分析によって特定された５２の位置の群から選択される１つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。好ましい実施形態において、改変は、Ｉ１０Ｖ、Ｄ１９Ｅ、Ｑ６８Ｈ、Ｌ８０Ｖ、Ｇ８９Ａ、Ｔ１０４Ａ、Ｐ１１１Ｑ、Ａ１１７Ｓ、Ｓ１２３Ｐ、Ｋ１２９Ｔ、Ｑ１３７Ｅ、Ｖ１３９Ｋ、Ｎ１４０Ｆ、Ｑ１４７Ｓ、Ｒ１５６Ｙ、Ｖ１５９Ｍ、Ｈ１６４Ｎ、Ｆ１６５Ｙ、Ａ１７７Ｔ、Ｖ１７９Ｉ、Ａ１８３Ｓ、Ｇ２００Ｐ、Ｇ２０４Ｔ、Ｒ２１１Ｋ、Ｉ２２２Ｖ、Ａ２２４Ｐ、Ｇ２２５Ｓ、Ｖ２２８Ｉ、Ｖ２３２Ａ、Ｖ２５９Ｉ、Ｒ２６７Ｋ、Ｌ２６８Ｋ、Ｓ２６９Ａ、Ｆ２８１Ｌ、Ａ３２８Ｇ、Ｖ３４５Ｉ、Ｄ３６６Ｈ、Ｔ３７４Ａ、Ｌ３８０Ｆ、Ｎ３８３Ｙ、Ｄ３８４Ｇ、Ｋ４０６Ｎ、Ｎ４１５Ｇ、Ｈ４３６Ｙ、Ｓ４４３Ｄ、Ｋ４４５Ｓ、Ｌ４４９Ｉ、Ｖ４５０Ｉ、Ｓ４５５Ｎ、Ｍ４５６Ｙ、Ｋ４８８Ｔ及びＰ５０７Ａからなる群から選択される置換、又はいくつかの置換である。
【００６８】
本発明の別の態様において、変異体は、正電荷を有し、かつ２０オングストロームのカルシウムイオン内に位置する親のペプチドのミノ酸を、中性又は負に荷電されるアミノ酸に変更することによって生成される。本発明の好ましい変異体は、カルシウムイオンからの２０オングストローム以内の総電荷がより負にされている変異体を包含する。そのような変異体においては、正に荷電されたアミノ酸は、その適用条件下で中性又は負に荷電されるアミノ酸で置換されている。従って、好ましい変異体は、「化学安定性」条件又は適用条件下で部分的に又は十分に正に荷電されるアミノ酸残基、即ち負又は中性のアミノ酸で置換されたＬｙｓ、Ａｒｇ又はＨｉｓを有していてもよい。好ましい置換アミノ酸は、Ａｓｐ及びＧｌｕのように負に荷電されているアミノ酸、又はＡｌａ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ及びＰｈｅのように中性のアミノ酸であり得る。本発明の好ましい変異体は、位置番号４９、８７、１１８、１２９、１３４、１４２、１５６、１６９及び１９７からなる群から選択される１つ以上の位置の改変を含む。好ましい実施形態において、改変は、位置番号８７、１１８、１２９、１３４、１４２、１５６、及び１６９からなる群から選択される１つ以上の位置における置換である。好ましい実施形態において、置換は、Ｋ８７Ａ；Ｋ１２９Ａ，Ｓ，Ｆ，Ｉ；Ｋ１１８Ａ；Ｋ１４２Ａ，Ｑ、Ｒ１５６Ｙ，Ｆ，Ｖ，Ｉ，Ｋ，Ｗ，Ｌ，Ｍ及びＫ１６９Ｑ，Ａからなる群から選択される。
【００６９】
一態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８、１２３、１５６、１１８、２００、１２９、１３７、１９３、９２、７６、又は３３１に対応する１つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。好ましくは、変異体は、位置６８の置換と、位置番号１２３、１５６、１１８、２００、１２９、１３７、１９３、９２、８３、１４９、３４、３４０、３３２、９、７６、３３１、３１０、３２４、４９８、３９５及び３６６からなる群から選択される１つ以上の追加位置の１つ以上の置換とを含む。
【００７０】
別の態様において、変異体は、位置１５６の置換と、位置番号１０、１３、１４、１９、３７、６８、７８、９２、１１８、１２３、１２９、１３７、１３９、１４０、１４７、１５９、１６４、１６５、１６９、１７６、１７７、１７９、１８３、２００、２０４、２１１、２２２、２２４、２４４、２４７、２４９、２５９、２６７、２６８、２６９、２７５、２８８、２９９、３０１、３０２、３０３、３１０、３２４、３２８、３３１、３６６、３８０、３８３、３８４、３８９、４０６、４０９、４１５、４３６、４４３、４４５、４４９、４５０、４５４、４５５、４５６、４６１、４７０及び５０７からなる群から選択される１つ以上の追加位置の１つ以上の置換とを含む。
【００７１】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８、１２３、１５６、１１８、２００、１２９、１３７、１９３、９２、７６、又は３３１に対応する２つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。好ましくは、変異体は、位置６８、１２３、１５６、１１８、２００、又は１２９の置換を含む。更により好ましくは、変異体は、位置１２９及び位置１５６の置換を含む。
【００７２】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８又は１２３又は１５６又は１１８又は２００又は１２９又は１３７又は１９３又は９２又は７６又は３３１に対応する３つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。
【００７３】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８又は１２３又は１５６又は１１８又は２００又は１２９又は１３７又は１９３又は９２又は７６又は３３１に対応する４つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。
【００７４】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８又は１２３又は１５６又は１１８又は２００又は１２９又は１３７又は１９３又は９２又は７６又は３３１に対応する５つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。
【００７５】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８又は１２３又は１５６又は１１８又は２００又は１２９又は１３７又は１９３又は９２又は７６又は３３１に対応する６つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。
【００７６】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８又は１２３又は１５６又は１１８又は２００又は１２９又は１３７又は１９３又は９２又は７６又は３３１に対応する７つ以上（いくつか）の位置の改変を含む。
【００７７】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置１２９及び１５６及び３３１及び２００及び１１８に対応する位置の改変を含む。
【００７８】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、位置６８及び１２９及び１５６及び３３１及び２００及び１１８に対応する位置の改変を含む。
【００７９】
別の態様において、親キシログルカナーゼの変異体は、６８及び９２及び１２９及び１５６及び３３１及び２００及び１１８に対応する位置の改変を含む。
【００８０】
別の態様において、変異体は、Ｑ６８Ｈ，Ｎ，Ｌ；Ｓ１２３Ｐ，Ｔ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ，Ｖ，Ｉ，Ｋ，Ｗ，Ｌ，Ｍ；Ｋ１１８Ａ，Ｒ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ，Ｓ，Ｄ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ，Ｓ；Ｑ１３７Ｅ；Ｈ１９３Ｔ，Ｓ，Ｄ；Ｔ９２Ｖ，Ｉ，Ａ，Ｓ；Ａ８３Ｅ；Ｑ１４９Ｅ；Ｌ３４Ｆ，Ｉ，Ｖ；Ｒ３４０Ｔ，Ｎ；Ｓ３３２Ｐ；Ｔ９Ｄ；Ｓ７６Ｗ，Ｖ，Ｉ，Ｋ，Ｒ，Ｔ；Ｎ３３１Ｆ，Ｃ；Ｍ３１０Ｉ，Ｖ，Ｌ；Ｄ３２４Ｎ；Ｇ４９８Ａ，Ｄ；Ｄ３９５Ｇ及びＤ３６６Ｈからなる群から選択される１つ以上（いくつか）の置換を含む。好ましくは、置換は、Ｑ６８Ｈ；Ｓ１２３Ｐ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ；Ｋ１１８Ａ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ；Ｑ１３７Ｅ；Ｈ１９３Ｔ；Ｔ９２Ｖ及びＮ３３１Ｆからなる群から選択される。より好ましくは、置換は、Ｑ６８Ｈ；Ｓ１２３Ｐ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ；Ｋ１１８Ａ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ；Ｑ１３７Ｅ；Ｔ９２Ｖ及びＮ３３１Ｆからなる群から選択される。より好ましくは、変異体は、９若しくは８、７、６、５、４、３、２、又は１つの位置の置換を含有し、ここで置換は、Ｑ６８Ｈ；Ｓ１２３Ｐ；Ｒ１５６Ｙ，Ｆ；Ｋ１１８Ａ；Ｇ２００Ｐ，Ｅ；Ｋ１２９Ｔ，Ａ；Ｑ１３７Ｅ；Ｔ９２Ｖ及びＮ３３１Ｆからなる群から選択される。
【００８１】
更なる態様において、変異体は、以下の置換の組合せの１つ以上（いくつか）を含む。
【００８２】
Ｑ６８Ｈ
Ｓ１２３Ｐ
Ｒ１５６Ｙ
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ
Ｓ１２３Ｔ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ
Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ｒ＋Ｒ１５６Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ
Ｑ６８Ｈ＋Ｒ１５６Ｆ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｒ１５６Ｙ
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｇ７８Ａ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１２９Ｔ＋Ｒ１５６Ｋ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１６９Ａ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｇ７８Ａ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｇ７８Ａ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｋ１６９Ａ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｍ３１０Ｖ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｈ１９３Ｔ＋Ｄ３６６Ｈ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｓ１２３Ｐ，Ｔ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
Ｑ６８Ｈ＋Ｔ９２Ｖ＋Ｋ１１８Ａ＋Ｋ１２９Ａ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｒ１５６Ｙ＋Ｇ２００Ｐ＋Ａ２２４Ｐ＋Ｎ３３１Ｆ
【００８３】
好ましい実施形態において、上記変異体の全ては、グルコシル加水分解酵素のファミリー４４に属する親キシログルカナーゼの変異体であり、より好ましくは、親キシログルカナーゼは配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも７５％同一性を有するキシログルカナーゼから選択される、より好ましくは、親キシログルカナーゼは、配列番号２、配列番号３、配列番号５及び配列番号７からなる群から選択され、最も好ましくは、親キシログルカナーゼは配列番号３から成る。
【００８４】
キシログルカン基質に対する酵素活性
ｐＨ  ７．５において下記のアッセイに従い、純粋な酵素が５００００  ＸｙｌｏＵ／ｇを超える特異的活性を有している場合、その酵素はキシログルカンに対して活性を有していると見なされる。
【００８５】
キシログルカナーゼ活性は、Ｍｅｇａｚｙｍｅ（アイルランド）から入手したＡＺＣＬ−キシログルカンを基質（青色基質）として使用して測定する。
【００８６】
０．２％の青色基質溶液を、１．５ｍＬ容のＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ内で撹拌しながら、ｐＨ  ７．５、２０℃の０．１Ｍリン酸緩衝液に懸濁し（各０．７５ｍＬ）、５０マイクロリットルの酵素溶液を加え、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ内で、１２００ｒｐｍで混合しながら２０分間４０℃で保温する。保温後、１４，０００ｒｐｍで４分間遠心分離して、着色した溶液を固体から分離し、分光光度計を用いて１ｃｍキュベット内で、上清の吸光度を６００ｎｍで測定する。ＸｙｌｏＵ単位は、６００ｎｍにおいて１ｃｍキュベット内で０．２４の吸光度をもたらす酵素の量として定義される。
【００８７】
ＸｙｌｏＵ活性の計算には、０．１〜０．８の吸光度値のみが使用される。吸光度値の測定値がこの範囲外となった場合、これに応じて最初の酵素濃度の最適化を行うべきである。
【００８８】
非晶質セルロース基質に対する酵素活性
ｐＨ  ７．５において下記のアッセイに従い、純粋な酵素が２００００  ＥＢＧ／ｇを超える特異的活性を有している場合、その酵素は非晶質セルロースに対して活性を有していると見なされる。緩衝剤として用いる化学物質及び基質は、少なくとも試薬等級の市販製品であった。
【００８９】
エンドグルカナーゼ活性アッセイの材料：
０．１Ｍリン酸塩緩衝液、ｐＨ  ７．５
Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ  Ｃ錠剤（アイルランドのＭｅｇａｚｙｍｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌより入手）。
ガラスマイクロファイバーフィルター、ＧＦ／Ｃ、直径９ｃｍ（Ｗｈａｔｍａｎより入手）。
【００９０】
方法：
試験管中で、１ｍＬのｐＨ  ７．５緩衝液と５ｍＬの脱イオン水を混合する。
【００９１】
１００マイクロリットルの酵素試料（又は酵素試料を既知の重量：重量希釈率で希釈したもの）を加える。各試験管にＣｅｌｌａｚｙｍｅ  Ｃ錠剤を１錠加え、試験管にキャップをして、ボルテックスミキサーで１０秒間混合する。この試験管を、温度４０℃のサーモスタット付き水浴に入れる。１５分後、３０分後及び４５分後に、試験管を転倒混和することにより試験管の内容物を混合し、水浴に戻す。６０分後、試験管の内容物を転倒混和し、次にＧＦ／Ｃフィルターで濾過する。この濾液をきれいな試験管に回収する。
【００９２】
分光光度計を用い、吸光度（Ａｅｎｚ）を５９０ｎｍで測定する。ブランク値（Ａｗａｔｅｒ）は、マイクロリットルの酵素試料の代わりに１００μＬの水を加えることにより決定される。
【００９３】
Ａｄｅｌｔａ＝Ａｅｎｚ−Ａｗａｔｅｒを計算する。
【００９４】
Ａｄｅｌｔａは＜０．５でなければならない。これより高い値が得られた場合は、異なる酵素希釈率で繰り返す。
【００９５】
ＤＦＯ．１を決定する（ＤＦＯ．１は、Ａｄｅｌｔａ＝０．１を得るのに必要な希釈率である）。
【００９６】
単位の定義：１エンドβグルカナーゼ活性単位（１ＥＢＧ）は、上述のアッセイ条件において、Ａｄｅｌｔａ＝０．１０を得る酵素量である。よって例えば、所定の酵素試料を、希釈率１００で希釈後にＡｄｅｌｔａ＝０．１０を得た場合、その酵素試料は１００ＥＢＧ／ｇの活性を有する。
【００９７】
洗濯補助成分
洗濯処理組成物は任意に洗濯補助成分を更に含む。この洗濯補助成分は置換セルロースを得るために必要な成分とは異なる。例えば、この洗濯補助成分はセルロース骨格及び置換基を反応させ置換セルロースを得るために用いられる溶媒ではない。これらの追加的補助成分の正確な性質及びその組み込み濃度は、組成物の物理的形状及び用いられる作業の性質に依存する。適切な補助物質としては、限定はしないが、界面活性剤、ビルダー、凝集助剤、キレート剤、染料移転阻害剤、酵素、酵素安定剤、触媒物質、漂白活性化剤、過酸化水素、過酸化水素源、あらかじめ生成された過酸、ポリマー性分散剤、粘土汚れ除去／再付着防止剤、漂白剤、石鹸起泡抑制剤、染料、香水、構造弾性化剤、布地柔軟剤、キャリア、ヒドロトロープ、プロセス助剤、及び／又は顔料が挙げられる。下記開示に加えて、このような他の補助剤の好適な例、及び使用濃度は、米国特許第５，５７６，２８２号、同第６，３０６，８１２（Ｂ１）号及び同第６，３２６，３４８（Ｂ１）号に見られ、これらは参照により組み込まれる。かかる１つ以上の補助剤は以下に詳細が記載されるように存在できる。
【００９８】
酵素−好適には本発明の組成物は更に酵素を含む。好適な酵素の例としては、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、ペクテートリアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、追加のβ−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ及びアミラーゼ、又はこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の組成物は、特にエンド−β−１，４−グルカナーゼ活性を有する追加の酵素（Ｅ．Ｃ．３．４．１．４）を含み得る。適切な追加のエンド−β−１，４−グルカナーゼ酵素の非限定例としては、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）、Ｅｎｄｏｌａｓｅ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）、ＫＡＣ（Ｋａｏ）、Ｐｕｒａｄａｘ  ＨＡ（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）、Ｐｕｒａｄａｘ  ＥＧ−Ｌ（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）、Ｂｉｏｔｏｕｃｈブランドで販売されているＭｅｌａｎｏｃａｒｐｕｓ  Ａｌｂｏｍｙｃｅｓ内因性の２０ｋＤａのエンド−β−１，４−グルカナーゼ（ＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓ）、及びそれらの変異体及び混合物が挙げられる。適切な酵素はＰＣＴ国際公開特許ＷＯ２００７／０２５５４９Ａ１の４ページ１５行〜１１ページ２行に掲載されている。
【００９９】
洗濯洗剤成分中に存在する場合、前述の酵素は、酵素タンパク重量により、組成物の約０．００００１％〜約２％、約０．０００１％〜約１％又は更に約０．００１％〜約０．５％又は０．０２％存在することができる。
【０１００】
界面活性剤−本発明による組成物は、界面活性剤又は界面活性剤系を含んでもよい。本発明の組成物は、界面活性剤系の重量により、０．０１％〜９０％、例えば１〜２５、又は２〜２０、又は４〜１５、又は５〜１０％を含み得る。界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、双性イオン性界面活性剤、半極性非イオン性界面活性剤及びこれらの混合物から選択してもよい。
【０１０１】
陰イオン性界面活性剤
典型的に、本組成物は１〜５０ｗｔ％又は２〜４０ｗｔ％の陰イオン性界面活性剤を含む。
【０１０２】
適切な陰イオン性界面活性剤は典型的にはカーボネート、リン酸塩、ホスホン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、カルボン酸塩、及びそれらの混合物よりなる群から選ばれる１つ以上の部分を含む。陰イオン性界面活性剤は、１つ以上の直鎖状又は分枝状、随意に１モルのＣ８〜１８アルキル硫酸酸塩及び／又はＣ８〜１８アルキルスルホン酸塩当たり１〜９モルのＣ１〜４アルキレンオキシドと縮合できるＣ８〜１８アルキル硫酸酸塩及び／又はＣ８〜１８アルキルスルホン酸塩の１つか複数の混合物であってよい。
【０１０３】
好適な陰イオン性洗剤用界面活性剤は、直鎖状又は分枝状、置換又は無置換のＣ１２〜１８アルキル硫酸塩；直鎖状又は分枝状、置換又は無置換のＣ１０〜１３アルキルベンゼンスルホン酸塩、好適には直鎖状Ｃ１０〜１３アルキルベンゼンスルホン酸塩；及びそれらの混合物よりなる群から選ばれる。高度に好適なものは、直鎖状Ｃ１０〜１３アルキルベンゼンスルホン酸塩である。高度に好適なものは、入手可能な直鎖状Ｃ１０〜１３アルキルベンゼンスルホン酸塩、好適には市販の直鎖状アルキルベンゼン（ＬＡＢ）のスルホン化により得られたものであり、適切なＬＡＢとしてはＳａｓｏｌからＩｓｏｃｈｅｍ（登録商標）の商標名で供給され、又はＰｅｔｒｅｓａからＰｅｔｒｅｌａｂ（登録商標）の商標名で供給される低分子２−フェニルＬＡＢであり、他の適切なＬＡＢとしてはＳａｓｏｌからＨｙｂｌｅｎｅ（登録商標）の商標名で供給されるポリマー性２−フェニルＬＡＢなどの高分子量１２−フェニルＬＡＢが挙げられる。
【０１０４】
アルコキシル化アニオン性界面活性剤
本組成物は、アルコキシル化アニオン性界面活性剤を含んでよい。アルコキシル化アニオン性界面活性剤が存在する場合、一般に、洗剤組成物全体を基準にして、０．１重量％〜４０重量％、例えば１重量％〜３重量％の量で存在する。
【０１０５】
典型的に、アルコキシル化された陰イオン性洗剤用界面活性剤は直鎖状又は分枝状、置換又は無置換の、１〜３０、好適には３〜７の平均アルコキシル化度を有するＣ１２〜１８アルキルアルコキシル化硫酸塩である。
【０１０６】
好適なアルコキシル化アニオン性洗浄界面活性剤は、ＣｏｇｎｉｓによるＴｅｘａｐａｎ  ＬＥＳＴ（商標）、ＳａｓｏｌによるＣｏｓｍａｃｏｌ  ＡＥＳ（商標）、ＳｔｅｐｈａｎによるＢＥＳ１５１（商標）、Ｅｍｐｉｃｏｌ  ＥＳＣ７０／Ｕ（商標）、及びこれらの混合物である。
【０１０７】
非イオン性洗浄界面活性剤
本発明の組成物は、非イオン性界面活性剤を含んでよい。非イオン性洗浄性界面活性剤（類）が存在する場合、一般的に、０．５重量％〜２０重量％、又は２重量％〜４重量％の量で存在する。
【０１０８】
非イオン性洗剤用界面活性剤は：アルキルポリグルコシド及び／又はアルキルアルコキシレートアルコール；ＳｈｅｌｌからのＮＥＯＤＯＬ（登録商標）非イオン性界面活性剤などのＣ１２〜Ｃ１８アルキルエトキシレート；アルコキシレート単位がエチレンオキシ単位、プロピレンオキシ単位又はその混合物である、Ｃ６〜Ｃ１２アルキルフェノールアルコキシレート；ＢＡＳＦからのＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）などのＣ１２〜Ｃ１８アルコール及びＣ６〜Ｃ１２アルキルフェノールのエチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックポリマーとの縮合体；米国特許第６，１５０，３２２号により詳細が記載されるようなＣ１４〜Ｃ２２中鎖分枝状アルコール、ＢＡ、；米国特許第６，１５３，５７７号、同第６，０２０，３０３号及び同第６，０９３，８５６号により詳細が記載されるような、Ｃ１４〜Ｃ２２中鎖分枝状アルキルアルコキシレート、ＢＡＥｘであって、式中、ｘ＝１〜３０であるもの；米国特許第４，５６５，６４７号により詳細が記載されるようなアルキルセルロース類、特に米国特許第４，４８３，７８０号及び同第４，４８３，７７９号により詳細が記載されるようなアルキルポリグリコシド；米国特許第５，３３２，５２８号、ＰＣＴ国際公開特許ＷＯ  ９２／０６１６２号、同ＷＯ  ９３／１９１４６号、同ＷＯ  ９３／１９０３８号、及び同ＷＯ  ９４／０９０９９号に詳細が記載されるようなポリヒドロキシ脂肪酸アミド；米国特許第６，４８２，９９４号及びＰＣＴ国際公開特許ＷＯ  ０１／４２４０８号により詳細が記載されるようなエーテルでキャップされたポリ（オキシアルキル化）アルコール界面活性剤；及びそれらの混合物からなる群から選択することができる。
【０１０９】
カチオン性洗浄性界面活性剤
発明の１態様では、前記洗剤組成物は陽イオン性界面活性剤を含まない。しかしながら、本組成物は所望により、カチオン性洗浄界面活性剤を含んでもよい。存在する場合、組成物は０．１重量％〜１０重量％、又は１重量％〜２重量％のカチオン性洗浄性界面活性剤を含むことが好ましい。
【０１１０】
適切な陽イオン性洗剤用界面活性剤は、アルキルピリジニウム化合物、アルキル四級アンモニウム化合物、アルキル四級ホスホニウム化合物、及びアルキル三級スルホニウム化合物である。カチオン性洗浄性界面活性剤は、米国特許第６，１３６，７６９号により詳細が記載されるようなアルコキシラート第四級アンモニウム（ＡＱＡ）界面活性剤、米国特許第６，００４，９２２号により詳細が記載されるようなジメチルヒドロキシエチル四級アンモニウム界面活性剤、国際公開第９８／３５００２号、同第９８／３５００３号、同第９８／３５００４号、同第９８／３５００５号及び同第９８／３５００６号により詳細が記載されるようなポリアミンカチオン性界面活性剤、米国特許第４，２２８，０４２号、同第４，２３９，６６０号、同第４，２６０，５２９号、及び同第６，０２２，８４４号により詳細が記載されるようなカチオン性エステル界面活性剤、米国特許第６，２２１，８２５号及び国際公開第００／４７７０８号により詳細が記載されるようなアミノ界面活性剤、特にアミドプロピルジメチルアミン、並びにこれらの混合物からなる群より選択することができる。
【０１１１】
非常に好ましいカチオン性洗浄界面活性剤は、モノ−Ｃ８〜１０アルキルモノヒドロキシエチルジメチル四級アンモニウムクロライド、モノ−Ｃ１０〜１２アルキルモノヒドロキシエチルジメチル四級アンモニウムクロライド、及びモノ−Ｃ１０アルキルモノヒドロキシエチルジメチル四級アンモニウムクロライドである。Ｐｒａｅｐａｇｅｎ  ＨＹ（Ｃｌａｒｉａｎｔの商標名）などのカチオン性界面活性剤は、有用であり得、泡増強剤としても有用であり得る。
【０１１２】
ビルダー−洗濯洗剤成分は１つ以上のビルダーを含み得る。ビルダーが使用される場合、その対象の組成物は典型的にはビルダーの重量により１％〜約４０％、典型的には２〜２５％、又は更に約５％〜約２０％、又は８〜１５％のビルダーを含む。
【０１１３】
本発明の洗濯洗剤成分は０〜２０％、特に１５％又は１０％未満の、例えば５％未満のゼオライトを含む。とりわけ、本洗濯洗剤成分は０〜２０％、特に１５％又は１０％未満の、例えば５％未満のアルミノケイ酸塩ビルダーを含む。
【０１１４】
本発明の洗濯洗剤成分は０〜２０％、特に１５％又は１０％未満の、例えば５％未満のリン酸塩ビルダー及び／又はケイ酸塩ビルダー及び／又はゼオライトビルダーを含み得る。
【０１１５】
本発明の洗濯洗剤成分は、０〜２０％、特に１５％又は１０％未満の、例えば５％未満の炭酸ナトリウムを含み得る。
【０１１６】
ビルダーとしては、ポリリン酸のアルカリ金属、アンモニウム及びアルカノールアンモニウム塩、ケイ酸のアルカリ金属塩、Ｃｌａｒｉａｎｔ（登録商標）のＳＫＳ−６などの層状ケイ酸塩、炭酸のアルカリ土類金属塩及びアルカリ金属塩、ゼオライトなどのアルミノケイ酸塩ビルダー、及びポリカルボン酸塩化合物、エーテルヒドロキシポリカルボン酸塩、マレイン酸無水物とエチレン又はビニルメチルエーテルとの共重合体、１，３，５−トリヒドロキシベンゼン−２，４，６−トリスルホン酸、及びカルボキシメトキシコハク酸、脂肪酸、エチレンジアミン四酢酸及びニトリロ三酢酸などのさまざまなポリ酢酸のアルカリ金属、アンモニウム及び置換アンモニウム塩、と同様にメリト酸、コハク酸、クエン酸、オキシジコハク酸、ポリマレイン酸、ベンゼン１，３，５−トリカルボン酸、カルボキシメチルオキシコハク酸などのポリカルボン酸塩、及びそれらの可溶性塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１７】
洗濯洗剤成分のリン酸塩ビルダー、アルミノケイ酸塩ビルダー、ポリカルボン酸ビルダー、及び追加的なケイ酸塩ビルダーの合計量は、重量により０〜２５％、又は更に１〜２０％、特に１〜１５％、特に２〜１０％、例えば３〜５％であり得る。
【０１１８】
本組成物は更に他の任意のビルダー、ケラント（chelant）、又は例えば、金属イオン封鎖、錯体形成、沈殿又はイオン交換により溶液からカルシウムイオンを除去する任意のものを含み得る。特に本組成物は、２５℃の温度下で、０．１Ｍのイオン強度で、少なくとも５０ｍｇ／ｇのカルシウム結合能力、及び少なくとも３．５０のカルシウム結合定数、ｌｏｇ  Ｋ  Ｃａ２＋を有する物質を含み得る。
【０１１９】
本発明の組成物において、リン酸塩ビルダー、アルミノケイ酸塩ビルダー、ポリカルボン酸ビルダー、追加的なケイ酸塩ビルダー、並びに５０ｍｇ／ｇ以上のカルシウム結合能力及びを上回るカルシウム結合定数を有する他の物質は、重量により０〜２５％、又は更に１〜２０％、特に１〜１５％、特に２〜１０％、例えば３〜５％含まれてよい。
【０１２０】
凝集助剤−本組成物は凝集助剤を更に含むことができる。本組成物は凝集助剤を実質的に含まないこともできる。典型的には、凝集補助剤はポリマーである。典型的には凝集助剤は、エチレンオキシド、アクリルアミド、アクリル酸及びそれらの混合物よりなる群から選ばれるモノマー単位を含むポリマーである。典型的には凝集助剤はポリエチレンオキシドである。典型的には凝集助剤は少なくとも１００，０００Ｄａ、特に１５０，０００Ｄａ〜５，０００，０００Ｄａ又は更に２００，０００Ｄａ〜７００，０００Ｄａの分子量を有する。典型的に、本組成物少なくとも重量により本組成物の０．３％の凝集助剤を含む。
【０１２１】
漂白剤−本発明の組成物は１つ以上の漂白剤を含み得る。一般に、漂白剤を使用する場合、本発明の化合物は、対象となる洗剤組成物の、約０．１重量％〜約５０重量％、又は更には約０．１重量％〜約２５重量％の漂白剤を含んでもよい。存在する場合、適切な漂白剤は、漂白触媒を含み、適切な漂白触媒はＷＯ２００８／０３４６７４Ａ１、４６ページ２３行〜４９ページ１７行に掲載されており、光脱色剤としては、例えばビタミンＫ３及び亜鉛又はアルミニウムフタロシアニンスルホン酸塩であり、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）及びノナノイルオキシベンゼンスルホン酸塩（ＮＯＢＳ）などの漂白活性化剤であり、過酸化水素；あらかじめ生成された過酸；過ホウ酸のナトリウム塩（通常、一又は四水和物）、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩、過ケイ酸塩、及びそれらの混合物などのアルカリ金属塩を含む無機過酸化水素付加物などの過酸化水素源であって、随意に被覆され、その適切な被覆はアルカリ金属などの無機塩を含むもの、及びそれらの混合物である。
【０１２２】
過酸化水素供給源及び過酸又は漂白活性化剤の量は、有効酸素（該過酸化物供給源より供給される）対過酸のモル比が、１：１〜３５：１、又は更に２：１〜１０：１となるように選択し得る。
【０１２３】
蛍光増白剤−本組成物は淡い色の品目が洗浄し得るための蛍光増白剤などの組成物を含み得る。存在する場合、洗濯洗剤成分においての使用に適切な任意の蛍光増白剤が本発明の組成物において用いられ得る。最も普通に用いられる蛍光増白剤はジアミノスチルベン−スルホン酸誘導体、ジアリールピラゾリン誘導体及びビスフェニル−ジスチリル誘導体に属するものである。
【０１２４】
代表的な蛍光増白剤は、Ｐａｒａｍｏｕｎｔ  Ｍｉｎｅｒａｌｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ）から供給されるＰａｒａｗｈｉｔｅ  ＫＸ；Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ  ＡＧ、（Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から供給されるＴｉｎｏｐａｌ（登録商標）ＤＭＳ及びＴｉｎｏｐａｌ（登録商標）ＣＢＳである。Ｔｉｎｏｐａｌ（登録商標）ＤＭＳは４，４’−ビス−（２−モルホリノ−４−アニリノ−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベンジスルホン酸塩の二ナトリウム塩である。Ｔｉｎｏｐａｌ（登録商標）ＣＢＳは２，２’−ビス−（フェニル−スチリル）ジスルホン酸の二ナトリウム塩である。
【０１２５】
布地色調剤−蛍光増白剤は少なくともいくらかの可視光を放射する。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部を吸収するため、表面の色合いを変える。好適な布地色調剤としては、染料及び染料−粘土複合体が挙げられ、顔料も包含してよい。適切な染料としては、小分子染料及びポリマー染料が挙げられる。適切な小分子染料としては、色指数分類（Colour Index）（Ｃ．Ｉ．）において、ダイレクト・ブルー、ダイレクト・レッド、ダイレクト・バイオレット、アシッド・ブルー、アシッド・レッド、アシッド・バイオレット、ベーシック・ブルー、ベーシック・バイオレット及びベーシック・レッド、又はそれらの混合物に適合する染料より成る群から選ばれる小分子染料が挙げられる。適切な色相染料はＷＯ２００８／１７５７０Ａ１、４ページ１５行〜１１ページ１８行、及びＷＯ２００８／０７３１８Ａ２、９ページ１８行２１ページ２行に掲載されている。
【０１２６】
ポリマー性分散剤−本発明の組成物は追加的なポリマー性分散剤を含み得る。適切なポリマー性分散剤としては、約２，０００〜約１０，０００の平均分子量を有するアクリル酸系ポリマー；約２，０００〜約１００，０００の平均分子量及び約３０：１〜約１：１のアクリル酸対マレイン酸のセグメント比率を有するアクリル酸／マレイン酸系共重合体；マレイン酸／アクリル酸／ビニルアルコール３重合体；約５００〜約１００，０００、好適には約１，０００〜約５０，０００、より好適には約１，５００〜約１０，０００ｍの分子量を有するポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；及び水に溶解性又は分散性のアルコキシル化ポリアルキレンアミン物質などのポリマー性ポリカルボキシレート、置換（四級化された、及び酸化されたものを含む）ポリアミンポリマー、及びポリエチレングリコールが挙げられる。これらのポリマー性分散剤は、含まれる場合には、典型的には、約５％以下、好適には約０．２％〜約２．５％、より好適には約０．５％〜約１．５％の濃度である。
【０１２７】
ポリマー性汚れ遊離剤−本発明の組成物は、ポリマー性汚れ遊離剤を含有することもできる。ポリマー性汚れ遊離剤、又は「ＳＲＡ」は、ポリエステル及びナイロンなどの疎水性繊維の表面を親水化するための親水性部分と、疎水性繊維上に付着して、洗浄及びすすぎサイクルの完了までその上に密着し続けて、親水性部分のためのアンカーとして働く疎水性部分とを有する。これによって、後の洗浄手順で、ＳＲＡでの処置の後に浮かび上がるシミをより容易に落とすことができるようになる。好ましいＳＲＡは、オリゴマーのテレフタレートエステル；テレフタロイル及びオキシアルキレンオキシの繰り返し単位であるオリゴマーのエステル骨格、並びに骨格に共有結合するアリル由来のスルホン酸化末端部分からなる実質的に直鎖状のエステルオリゴマーのスルホン酸化生成物；非イオン性の末端キャップされた１，２−プロピレン／ポリオキシエチレンテレフタレートポリエステル；テレフタロイル（Ｔ）、スルホイソフタロイル（ＳＩＰ）、オキシエチレンオキシ及びオキシ−１，２−プロピレン（ＥＧ／ＰＧ）の単位を含み、好ましくは末端がキャップ（ＣＡＰ）されている、実験式（ＣＡＰ）２（ＥＧ／ＰＧ）５（Ｔ）５（ＳＩＰ）１を有するオリゴマー、好ましくは、１つのスルホイソフタロイル単位、５つのテレフタロイル単位、定めた比率の、好ましくは約０．５：１〜約１０：１のオキシエチレンオキシ及びオキシ−１，２−プロピレンオキシ単位、及び、２−（２−ヒドロキシエトキシ）−エタンスルホン酸ナトリウム由来の２つの末端キャップ単位を含むオリゴマーなどの修飾イセチオネート；（１）（ａ）ジヒドロキシスルホン酸、ポリヒドロキシスルホン酸、エステル結合の形成により少なくとも三官能性であり、分枝状オリゴマー骨格をもたらす単位、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの単位と、（ｂ）テレフタロイル部分である少なくとも１つの単位と、（ｃ）１，２−オキシアルキレンオキシ部分である少なくとも１つの非スルホン酸化単位とを含む、骨格、及び、（２）非イオン性キャップ単位、アニオン性キャップ単位から選択される１つ以上のキャップ単位、例えば、アルコキシル化、好ましくはエトキシル化イセチオネート、アルコキシル化プロパンスルホン酸、アルコキシル化プロパンジスルホン酸、アルコキシル化フェノールスルホン酸、スルホアロイル（sulfoaroyl）誘導体、及びこれらの混合物、を含むオリゴマーのエステルを含む。好ましいのは、次の実験式のエステルである。
【０１２８】
（（ＣＡＰ）ａ（ＥＧ／ＰＧ）ｂ（ＤＥＧ）ｃＰＥＧ）ｄ（Ｔ）ｅ（ＳＩＰ）ｆ（ＳＥＧ）ｇ（Ｂ）ｈ）
式中、ＣＡＰ、ＥＧ／ＰＧ、ＰＥＧ、Ｔ及びＳＩＰは上記で定義したようなものであり、ＤＥＧはジ（オキシエチレン）オキシ単位を表し、ＳＥＧはグリセリンのスルホエチルエーテルから誘導される単位及び関連部分の単位を表し、Ｂは少なくとも三官能性であって、それによって、エステル結合が形成され、結果的に分枝状オリゴマー骨格となる分岐単位を表し、ａは約１〜約１２であり、ｂは約０．５〜約２５であり、ｃは０〜約１２であり、ｄは０〜約１０であり、ｂ＋ｃ＋ｄの合計は約０．５〜約２５であり、ｅは約１．５〜約２５であり、ｆは０〜約１２であり、ｅ＋ｆの合計は約１．５〜約２５であり、ｇは約０．０５〜約１２であり、ｈは約０．０１〜約１０であり、かつａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、及びｈは、エステル１モル当たりの対応する単位の平均モル数を表し、かつエステルが約５００〜約５，０００の範囲の分子量を有し、ＭＥＴＨＯＣＥＬ（登録商標）としてＤｏｗから入手可能なヒドロキシエーテルセルロース性ポリマーなどのセルロース誘導体であり；Ｃ１〜Ｃ４アルキルセルロース及びＣ４ヒドロキシアルキルセルロース（米国特許第４，０００，０９３号、１９７６年１２月２８日発行、Ｎｉｃｏｌら）であり、かつ約１．６〜約２．３の無水グルコース単位当たりの平均置換度（メチル）及び２０℃にて２％水溶液として測定して約８０〜約１２０センチポアズの溶液粘度を有するメチルセルロースエーテルである。このような材料は、Ｓｈｉｎｅｔｓｕ  Ｋａｇａｋｕ  Ｋｏｇｙｏ  ＫＫ製のメチルセルロースエーテルの商標名である、ＭＥＴＯＬＯＳＥ  ＳＭ１００（登録商標）及びＭＥＴＯＬＯＳＥ  ＳＭ２００（登録商標）として入手可能である。
【０１２９】
酵素安定剤−種々の技法によって、洗剤で使用する酵素を安定化させることができる。本明細書に用いられる酵素は、カルシウムイオン及び／又はマグネシウムイオンを酵素に供給する、最終組成物中のカルシウム及び／又はマグネシウムイオンの水溶性供給源の存在によって安定化させることができる。プロテアーゼを含む水性組成物の場合、更に安定性を改善するために、可逆性蛋白質分解酵素抑制剤（ホウ素化合物など）を添加することができる。
【０１３０】
触媒的金属錯体−本発明の組成物は触媒的金属錯体を含み得る。存在する場合、含金属漂白触媒の１種類は、規定された漂白触媒活性の、銅、鉄、チタニウム、ルテニウム、タングステン、モリブデン、又はマンガン陽イオンなどの遷移金属陽イオン、亜鉛又はアルミニウム陽イオンなどの少量の漂白触媒活性又はまったく漂白触媒活性のない補助的な金属陽イオン、及び触媒及び補助金属陽イオンのために規定された安定性定数を有する隔離剤（sequestrate）、特にエチレンジアミン四酢酸、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）並びにそれらの水溶性塩を含む触媒システムである。このような触媒は、米国特許第４，４３０，２４３号に開示されている。
【０１３１】
所望する場合、本明細書の組成物はマンガン化合物を用いて接触可能である。かかる化合物及び使用量は、当該技術分野で周知であり、例えば、米国特許第５，５７６，２８２号に開示されているマンガン系触媒が挙げられる。
【０１３２】
本明細書において有用なコバルト漂白触媒は既知であり、例えば、米国特許第５，５９７，９３６号、米国特許第５，５９５，９６７号に記載される。このようなコバルト触媒は、例えば米国特許第５，５９７，９３６号及び米国特許第５，５９５，９６７号に教示されているような、既知の手順によって容易に調製される。
【０１３３】
本明細書の組成物はまた、配位子の遷移金属錯体（例えば、ビスピドン（bispidone）（国際公開特許第０５／０４２５３２  Ａ１号）及び／又は大多環状剛性配位子（「ＭＲＬ」と略される）を適切に含んでもよい。実際問題として、限定するためではないが、本明細書の組成物及び工程は、水性洗浄媒体において、少なくとも１億分の１のオーダーの活性ＭＲＬ種を提供するように調整することができ、典型的には、約０．００５ｐｐｍ〜約２５ｐｐｍ、約０．０５ｐｐｍ〜約１０ｐｐｍ、又は更に約０．１ｐｐｍ〜約５ｐｐｍのＭＲＬを洗浄溶液中に提供する。
【０１３４】
本遷移金属漂白触媒における適切な遷移金属としては、例えばマンガン、鉄、及びクロムが挙げられる。好適なＭＲＬとしては、５，１２−ジエチル−１，５，８，１２−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカンが挙げられる。
【０１３５】
適した遷移金属ＭＲＬは、既知の手順、例えば、国際公開第００／３２６０１号、及び米国特許第６，２２５，４６４号にて教示される手順によって容易に調製される。
【０１３６】
柔軟化システム−本発明の組成物は、所望により洗浄中に柔軟化するために、柔軟化剤を、並びに、随意に凝集剤及び酵素を更に含んでもよい。
【０１３７】
布地柔軟性増強成分−通常は、本組成物は更に、帯電ポリマー布地柔軟性増強成分を含む。組成物が粘土及びシリコーン粒子を含む場合、粘土及びシリコーン粒子を得るために、帯電ポリマー布地柔軟性増強成分が、プロセスの工程（ｉｉ）において粘土及びシリコーンに接触させられることが好ましい（上記参照）。帯電ポリマー布地柔軟性増強成分を粘土及びシリコーンと十分に混合すると、得られた組成物の布地柔軟化効果が更に改善する。
【０１３８】
着色剤−本発明の組成物は、着色剤、好適には染料又は色素を含んでもよい。詳細には、好ましい染料は、洗濯サイクル中に酸化によって消失されるものである。染料が貯蔵中に分解しないことを確実にするために、染料は４０℃までの温度で安定であることが好ましい。組成物中での染料の安定性は、組成物の水分含有量を確実にできるだけ低くすることによって向上させることができる。可能ならば、染料又は顔料は、織物繊維に結合したり織物繊維と反応したりするべきではない。着色剤が織物繊維と反応してしまう場合、織物に付与される色は、洗濯液中に存在する酸化剤との反応によって消失されるべきである。これは、特に数回の洗浄を通した織物の着色を回避するためである。とりわけ好適な染料としては、限定はされないが、ＢＡＳＦからのＢａｓａｃｉｄ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ  ９７０及びＡｌｂｉｏｎからのＭｏｎａｓｔｒａｌ  ｂｌｕｅが挙げられる。
【０１３９】
洗濯処理組成物
本洗濯処理組成物は好適には洗濯洗剤成分又は布地ケア組成物である。
【０１４０】
本洗濯処理組成物は溶媒を含み得る。適切な溶媒としては、水及び他の親油性流体である溶媒が挙げられる。好適な親油性流体の例としては、シロキサン、他のシリコーン、炭化水素、グリコールエーテル、グリセリンエーテルのようなグリセリン誘導体、ペルフルオロ化アミン、ペルフルオロ化及びハイドロフルオロエーテル溶媒、低揮発性の非フッ素化有機溶媒、ジオール溶媒、環境に優しいその他の溶媒、並びにこれらの混合物が挙げられる。
【０１４１】
本洗濯処理組成物は、例えば特定の形態においては、好適には自由流れ微粒子形態であるが、この組成物は任意の液体又は固体形態であってもよい。固形組成物は、凝集体、粒塊、フレーク、押出品、棒、錠剤又はこれらの任意の組み合わせの形態であることができる。本固形組成物は、乾式混合、アグロメレーション、圧縮、スプレー乾燥、総造粒（pan-granulation）、球形化又はこれらのあらゆる組み合わせなどの方法によって製造されることができる。本固形組成物は、好ましくは３００ｇ／Ｌ〜１，５００ｇ／Ｌ、好ましくは５００ｇ／Ｌ〜１，０００ｇ／Ｌのバルク密度を有する。
【０１４２】
置換セルロースは乾燥添加成分として又は噴霧乾燥又は噴出により形成される洗濯粒子を経由して加えられることができる。
【０１４３】
本洗濯処理組成物は、更に液体、ゲル、ペースト、分散物、好適にはコロイド状分散物又はそれらの任意の組み合わせの形状であってよい。液体組成物は環境条件（２０℃及び０．１ＭＰａ（１気圧））で２０ｓ−１のせん断率により測定された場合、典型的には５００ｍＰａ．ｓ〜３，０００ｍＰａ．ｓの粘度を有し、及び典型的には８００ｇ／Ｌ〜１３００ｇ／Ｌの密度を有する。組成物が分散体の形態であれば、典型的には１マイクロメートル〜５，０００マイクロメートル、好適には１マイクロメートル〜５０マイクロメートルの体積平均粒径を有する。分散体を形成する粒子は、通常、粘土であり、及び存在する場合にはシリコーンである。典型的には、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｍｕｌｔｉｓｉｚｅｒを使用して分散体の体積平均粒径を測定する。
【０１４４】
本洗濯処理組成物は錠剤のみでなく、組成物がポリビニルアルコールフィルムなどのフィルムにより少なくとも部分的に封入され、好適には完全に封入される単位用量包装袋を含む単位用量形態であることができる。
【０１４５】
本洗濯処理組成物は、例えば洗剤活性物に浸漬された不織シートなどの不溶性基質の形態であることもできる。
【０１４６】
本洗濯処理組成物は洗濯プロセスの間に布地を洗浄及び／又は柔軟化することができる。典型的に、洗濯処理組成物は、自動洗濯機での使用のために製剤されるが、手洗いでの使用のために製剤されることもできる。
【０１４７】
本明細書に開示されている寸法及び値は、列挙した正確な数値に厳しく制限されるものとして理解すべきではない。それよりむしろ、特に指定されない限り、各こうした寸法は、列挙された値とその値周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味することを意図する。例えば、「４０ｍｍ」として開示された寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することを意図する。
【０１４８】
以下の実施例は、実例としてのみ提供されるのであって、本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１４９】
（実施例１〜６）
以下のものは手洗い又はトップ・ローディング式洗濯機による布地洗濯に適切な、本発明に従い製造された顆粒状洗濯洗剤成分である。
【表１】
2012508304.tif 000004
【０１５０】
（実施例７〜１２）
以下のものはフロント・ローディング式洗濯機による布地洗濯に適切な、本発明に従い製造された顆粒状洗濯洗剤成分である。
【表２】
2012508304.tif 000005
【０１５１】
例示的な組成物１〜１２において、成分の濃度は重量％であり、及び成分の略称は以下の意味を有する。
【０１５２】
ＬＡＳ：Ｃ１１〜Ｃ１２の平均脂肪族炭素鎖長を有する直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩、
ＨＢ−ＣＭＣ１：Ｎｏｖｉａｎｔ  ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  ＣＰＫｅｌｃｏ（オランダ、アルンヘム（Arnhem））より供給される、１７４０ｍＰａ．ｓの粘度（２％溶液として）、置換度０．７６及びブロック度０．５０を有するカルボキシメチルセルロース。
【０１５３】
＊キシログルカンと非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有する本発明によるグリコシル加水分解酵素であって、このグリコシル加水分解酵素は、ＧＨファミリー５、１２、４４又は７４から選択され、洗剤組成物１００ｇあたりの活性酵素をｍｇで表される。
【０１５４】
本明細書に開示されている寸法及び値は、列挙した正確な数値に厳しく制限されるものとして理解すべきではない。それよりむしろ、特に指定されない限り、各こうした寸法は、列挙された値とその値周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味することを意図する。例えば、「４０ｍｍ」として開示された寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することを意図する。
【図１（ｐａｒｔ１）】
2012508304.tif 000006
【図１（ｐａｒｔ２）】
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【図１（ｐａｒｔ３）】
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【図１（ｐａｒｔ４）】
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【図１（ｐａｒｔ５）】
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【図１（ｐａｒｔ６）】
2012508304.tif 000011
【図１（ｐａｒｔ７）】
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【図２（ｐａｒｔ１）】
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【図２（ｐａｒｔ２）】
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【配列表】
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【国際調査報告】
2012508304.tif 000015
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