(57)【要約】ポジトロン放出放射性核種を含む脂肪酸アナログ（ＦＡＡ）分子、その塩、およびＦＡＡ−トリグリセリドが開示される。脂肪酸および脂肪酸トリグリセリドの合成の方法、ならびにそれらの分布および代謝を画像化する方法も開示される。
2012526129.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造
【化１】
2012526129.tif 000121
の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２】
前記脂肪酸アナログが、
【化２】
2012526129.tif 000122
である、請求項１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項３】
Ｘがフッ素である、請求項１または請求項２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項４】
少なくとも１つの原子が放射性同位体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項５】
少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性同位体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項６】
Ｘが１８Ｆである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項７】
ｍ＝２である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項８】
ｎ＝１４である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項９】
ｎ＝１４であり、ｍ＝２であり、Ｘが１８Ｆである、請求項１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１０】
【化３】
2012526129.tif 000123
から成る群から選択される構造の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１１】
構造
【化４】
2012526129.tif 000124
である、請求項１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１２】
構造
【化５】
2012526129.tif 000125
である、請求項１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１３】
Ｘがフッ素原子である、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１４】
少なくとも１つの原子が放射性同位体である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１５】
少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性核種である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１６】
Ｘが１８Ｆである、請求項１０〜１５のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１７】
ｍ＝２である、請求項１０〜１６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１８】
ｎ＝１４である、請求項１０〜１７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１９】
構造
【化６】
2012526129.tif 000126
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、請求項１１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２０】
構造
【化７】
2012526129.tif 000127
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、請求項１２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２１】
構造
【化８】
2012526129.tif 000128
の１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩であって、式中、Ｒは、
【化９】
2012526129.tif 000129
から成る群から選択され、式中、ｎが１０〜２４の整数である、１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩。
【請求項２２】
ｎ＝１４である、請求項２１に記載の１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬまたはその塩。
【請求項２３】
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、およびヘキサンと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【請求項２４】
ｎ＝１４である、請求項２３に記載のＢｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【請求項２５】
【化１０】
2012526129.tif 000130
を合成する方法であって、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項２６】
ｎ＝１４である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
【化１１】
2012526129.tif 000131
を合成する方法であって、
【化１２】
2012526129.tif 000132
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項２８】
ｎ＝１４である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
【化１３】
2012526129.tif 000133
を合成する方法であって、
【化１４】
2012526129.tif 000134
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３０】
ｎ＝１４である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
【化１５】
2012526129.tif 000135
を合成する方法であって、
【化１６】
2012526129.tif 000136
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３２】
ｎ＝１４である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化１７】
2012526129.tif 000137
を得ること、
ｃ）前記
【化１８】
2012526129.tif 000138
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化１９】
2012526129.tif 000139
を得ること、ならびに
ｄ）前記
【化２０】
2012526129.tif 000140
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させて、
【化２１】
2012526129.tif 000141
を得ること
をさらに含む、請求項３１または請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
【化２２】
2012526129.tif 000142
を合成する方法であって、
【化２３】
2012526129.tif 000143
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数である、方法。
【請求項３５】
ｎ＝１４である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２４】
2012526129.tif 000144
を得ること、ならびに
ｃ）前記
【化２５】
2012526129.tif 000145
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化２６】
2012526129.tif 000146
を得ること
をさらに含む、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
【化２７】
2012526129.tif 000147
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２８】
2012526129.tif 000148
を得ること、ならびに
前記
【化２９】
2012526129.tif 000149
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化３０】
2012526129.tif 000150
を得ること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３８】
ｎ＝１４である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
【化３１】
2012526129.tif 000151
を合成する方法であって、
【化３２】
2012526129.tif 000152
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４０】
ｎ＝１４である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化３３】
2012526129.tif 000153
を得ること、
前記
【化３４】
2012526129.tif 000154
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化３５】
2012526129.tif 000155
を得ること、ならびに
前記
【化３６】
2012526129.tif 000156
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させて、
【化３７】
2012526129.tif 000157
を得ること
をさらに含む、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】
【化３８】
2012526129.tif 000158
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、
【化３９】
2012526129.tif 000159
と接触させて、
【化４０】
2012526129.tif 000160
を形成すること、および
前記
【化４１】
2012526129.tif 000161
を、
【化４２】
2012526129.tif 000162
と接触させること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４３】
ｎ＝１４である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
【化４３】
2012526129.tif 000163
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、ＮａＮ３と接触させて、Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を形成すること、および
前記Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を、
【化４４】
2012526129.tif 000164
と接触させること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４５】
ｎ＝１４である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
【化４５】
2012526129.tif 000165
を合成する方法であって、
【化４６】
2012526129.tif 000166
を、ＴＭＳ−ＣｌおよびＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化４７】
2012526129.tif 000167
を形成すること、
前記
【化４８】
2012526129.tif 000168
を、ＮａＯＨおよびエタノールと接触させて、
【化４９】
2012526129.tif 000169
を形成すること、
前記
【化５０】
2012526129.tif 000170
を、
【化５１】
2012526129.tif 000171
およびＤＣＣ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化５２】
2012526129.tif 000172
を形成すること、ならびに
前記
【化５３】
2012526129.tif 000173
を、ＴＢＡＦ、次いで、Ｔｆ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させ、その後、標識化すること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４７】
ｎ＝１４である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
【化５４】
2012526129.tif 000174
を合成する方法であって、
【化５５】
2012526129.tif 000175
を、
【化５６】
2012526129.tif 000176
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４９】
ｎ＝１４である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
【化５７】
2012526129.tif 000177
を合成する方法であって、
【化５８】
2012526129.tif 000178
を、
【化５９】
2012526129.tif 000179
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項５１】
ｎ＝１４である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
哺乳動物中の脂肪酸分布を判定する方法であって、前記哺乳動物に、
【化６０】
2012526129.tif 000180
から成る群から選択される放射性標識脂肪酸アナログまたはその塩を投与すること、ならびに前記哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供することを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数である、方法。
【請求項５３】
ｍ＝２である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
ｎ＝１４である、請求項５２または請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
画像データを、デジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、請求項５２〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記脂肪酸分布をコンピュータディスプレイ上に画像で表示することをさらに含む、請求項５１〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
哺乳動物中の脂肪酸トリグリセリドの分布を画像化する方法であって、
前記哺乳動物に、
【化６１】
2012526129.tif 000181
から成る群から選択される放射性標識脂肪酸トリグリセリドアナログまたはその塩を投与すること、ならびに
前記哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供すること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項５８】
ｎ＝１４である、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
画像データを、デジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、請求項５７または請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
脂肪酸トリグリセリド分布をコンピュータディスプレイ上に表示することをさらに含む、請求項５７〜５９のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権陳述
本出願は、２００９年５月４日に出願された、米国仮出願第号６１／１７５，０６５の利益およびそれに対する優先権を主張し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
政府支援
本研究の少なくとも一部は、ＮＩＨ助成金ＨＬ６９１００によって支援された。政府は、本発明におけるある種の権利を有し得る。
【０００３】
序論
本教示は、脂肪酸および脂肪酸トリグリセリドの分布および代謝を画像化するために使用することができる追跡子の分野である。
【０００４】
トリグリセリドとの脂肪酸（ＦＡ）の複合体（ＦＡ−ＴＧ）を含む脂肪酸の分布は、心臓組織等の様々な組織において高い臨床的有意性を有する。
【背景技術】
【０００５】
ヒト等の対象中の脂肪酸の分布を画像化するための多くのプローブおよび方法が開発されている。
【０００６】
インビボでのエクスビボ調製物における心筋基質代謝を画像化するために、３１Ｐおよび１３Ｃ磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）が使用されている１、５〜７（非特許文献１、非特許文献５〜７）。しかしながら、磁気共鳴法の生来の低信号対雑音比、限られた空間分解能、ボクセル内信号汚染、および長い捕捉時間のため、インビボ心筋代謝の評価は、前壁心筋のみに限定される。
【０００７】
放射性標識１５−（ｐ−ヨードフェニル）−ペンタデカン酸（ＩＰＰＡ）は、単光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）を用いてＦＡ代謝を画像化するための放射性追跡子として使用されている８〜１１（非特許文献８〜１１）。しかしながら、ＳＰＥＣＴシステムは、ＦＡ代謝の質の高い画像化および定量化を可能にする、ＩＰＰＡの迅速な代謝回転を活用する時間分解能を有さない。
【０００８】
ＢＭＩＰＰ等のＩＰＰＡの分枝アナログもまた、ＦＡ代謝のための追跡子として開発されている１０、２〜１４（非特許文献１０、非特許文献２〜１０）。しかしながら、ＳＰＥＣＴが、非標識ＦＡ使用と比較して、光子減衰に対して比較的弱い時間および空間分解能ならびに不正確な補正、かつＢＭＩＰＰの不完全な代謝をもたらすため、心筋基質使用の定量化は困難または不可能である。
【０００９】
１１Ｃ−パルミテートは、心臓中のＦＡ代謝のＰＥＴ画像化のための放射性追跡子として使用されている２（非特許文献２）。しかしながら、画像の質は、概して低いと見なされている。加えて、放射性標識代謝物補正が、高い頻度で必要とされている。最後に、炭素−１１放射性同位体の短半減期（約２０分間）は、サイクロトロンおよび放射性薬剤生産装置等のソースへの迅速なアクセスを必要とする。
【００１０】
１４−（Ｒ，Ｓ）−１８Ｆ−フルオロ−６−チアヘプタデカン酸（ＦＴＨＡ）は、ＦＡ代謝のＰＥＴ画像化のための放射性追跡子として使用されている１５、１６（非特許文献１５、非特許文献１６）。しかしながら、１８Ｆ−ＦＴＨＡの摂取および保持は、低酸素症によるβ−酸化の阻害に反応しにくい１７（非特許文献１７）。
【００１１】
１８Ｆ−フルオロ−チア−パルミテート（ＦＴＰ）は、代謝トラッピング機能のＰＥＴ画像化のためのプローブである１７（非特許文献１７）。ＦＴＰの堆積は、標準の酸素化および低酸素条件下のβ−酸化に比例している。しかしながら、ＦＴＰは、心筋ＦＡ摂取と酸化を識別しない１８（非特許文献１８）。さらに、これらの過程の定量化は、ＦＴＰおよび非標識ＦＡの動態における本質的相違の補正を必要とする１８（非特許文献１８）。
【００１２】
トランス−９（ＲＳ）−［Ｆ−１８］−フルオロ−３，４（ＲＳ，ＲＳ）メチレンヘプタデカン酸（１８Ｆ−ＦＣＰＨＡ）は、Ｃ３−Ｃ４でシクロプロピル基およびＣ９でフッ化アルキルを含む構造とともに説明されている１９（非特許文献１９）。しかしながら、心筋動態への血漿基質の変化、作業負荷、および血流の影響は未知である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
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【非特許文献１６】DeGrado TR,Coenen HH,Stocklin G.14(R,S)-[18F]fluoro-6-thia-heptadecanoic acid (FTHA):evaluation in mouse of a new probe of myocardial utilization of long chain fatty acids.J Nucl Med.Oct 1991;32(10):1888-1896
【非特許文献１７】DeGrado TR,Wang S,Holden JE,Nickles RJ,Taylor M,Stone CK.Synthesis and preliminary evaluation of(18)F-labeled 4-thia palmitate as a PET tracer of myocardial fatty acid oxidation.Nucl Med Biol.Apr 2000;27(3):221-231
【非特許文献１８】DeGrado TR,Kitapci MT,Wang S,Ying J,Lopaschuk GD.Validation of 18F-fluoro-4-thia-palmitate as a PET probe for myocardial fatty acid oxidation:effects of hypoxia and composition of exogenous fatty acids.J Nucl Med.Jan 2006;47(1):173-181
【非特許文献１９】Shoup TM,Elmaleh DR,Bonab AA,Fischman AJ.Evaluation of trans-9-18F-fluoro-3,4-Methyleneheptadecanoic acid as a PET tracer for myocardial fatty acid imaging.J Nucl Med.Feb 2005;46(2):297-304
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
したがって、心筋ＦＡ代謝正確かつ包括的な測定を提供する放射性追跡子の必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは、本教示の様々な態様における構造を有する脂肪酸アナログ（ＦＡＡ）化合物およびその塩を開発した。様々な形態では、ｎは１０〜２４の整数であり得、ｍは１〜１０の整数であり得、Ｘはハロゲンであり得る。
【化１】
2012526129.tif 000003
いくつかの形態では、本教示の脂肪酸アナログまたはその塩は、構造を有し得る。
【化２】
2012526129.tif 000004
【００１６】
本教示の脂肪酸アナログまたはその塩は、少なくとも１つの放射性同位体を含み得る。いくつかの形態では、放射性同位体は、ポジトロン放出放射性同位体であり得る。いくつかの形態では、ｎは独立して１４であり、ｍは独立して２であり、Ｘは、１８Ｆ放射性同位体等のフッ素原子であり得る。いくつかの形態では、ｎ＝１４であり、ｍ＝２であり、Ｘは１８Ｆである。
【００１７】
様々な態様では、本教示の化合物またはその塩を、ヒト哺乳動物を含む哺乳動物等の対象中の脂肪酸分布のためのプローブとして使用することができる。ヒト等の対象哺乳動物への投与に続く、本教示の放射性追跡子の分布を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査または単光子放出コンピュータ断層撮影等の熟練者に既知の方法で判定することができる。ある特定の形態では、本教示の脂肪酸アナログまたはその塩は、１１Ｃ−パルミテートの心筋動態をそっくりに模倣する心筋動態を提供し得る。
【００１８】
様々な態様では、本教示は、脂肪酸アナログ−トリグリセリド（ＦＡＡ−ＴＧ）およびその塩も含む。いくつかの形態では、ＦＡＡ−ＴＧは、脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）であり得る。いくつかの形態では、ＦＡＡ−ＴＧまたはＦＡＡ−ＶＬＤＬは、１８Ｆ等の放射性同位体を含み得る。したがって、本教示は、いくつかの形態において、１８Ｆ−ＦＡＡ−ＴＧおよび１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ等の様々な１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリドを含む。いくつかの実施形態では、本教示の１８Ｆ−ＦＡＡ−ＴＧもしくは１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬまたはその塩は、構造
【化３】
2012526129.tif 000005
を有し得、Ｒは、
【化４】
2012526129.tif 000006
であり得、式中、ｎは１０〜２４の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００１９】
本教示の様々な態様では、本発明者らは、脂肪酸アナログ、ならびに脂肪酸アナログを合成するのに有用な様々な中間体を合成する諸方法を開示する。
【００２０】
いくつかの態様では、本発明者らは、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する諸方法を開示する。これらの方法は、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、ヘキサンと接触させることを含み得、ｎは１０〜２４の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２１】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化５】
2012526129.tif 000007
を合成する諸方法を開示する。これらの方法は、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させることを含み得、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２２】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化６】
2012526129.tif 000008
を合成する諸方法を開示する。これらの方法は、
【化７】
2012526129.tif 000009
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させることを含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２３】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化８】
2012526129.tif 000010
を合成する諸方法を開示する。これらの方法は、
【化９】
2012526129.tif 000011
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、ＣＨ３ＣＮと接触させることを含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２４】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化１０】
2012526129.tif 000012
を合成する諸方法を開示する。これらの方法は、
【化１１】
2012526129.tif 000013
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み得、
式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。Ｋ２．２．２は、４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（登録商標），Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  Ｎ．Ｖ．，Ｆａｉｒｌａｗｎ，ＮＪ）である。
【００２５】
いくつかの形態では、これらの方法は、ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、ｂ）該Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化１２】
2012526129.tif 000014
を得ることと、ｃ）該
【化１３】
2012526129.tif 000015
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化１４】
2012526129.tif 000016
を得ることと、ｄ）該
【化１５】
2012526129.tif 000017
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させて、
【化１６】
2012526129.tif 000018
を得ることと、をさらに含み得る。
【００２６】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化１７】
2012526129.tif 000019
を合成する諸方法を開示する。様々な形態では、これらの方法は、
【化１８】
2012526129.tif 000020
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させることを含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得、ｍは１〜１０の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２７】
いくつかの形態では、これらの方法は、ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させてＢｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、ｂ）該Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化１９】
2012526129.tif 000021
を得ることと、ｃ）該
【化２０】
2012526129.tif 000022
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化２１】
2012526129.tif 000023
を得ることと、をさらに含み得る。
【００２８】
いくつかの形態では、本教示は、
【化２２】
2012526129.tif 000024
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、該Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２３】
2012526129.tif 000025
を得ることと、該
【化２４】
2012526129.tif 000026
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化２５】
2012526129.tif 000027
を得ることと、を含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００２９】
いくつかの態様では、本発明者らは、
【化２６】
2012526129.tif 000028
を合成する諸方法を開示する。様々な形態では、これらの方法は、
【化２７】
2012526129.tif 000029
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み得、ｎは１０〜２４の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。加えて、いくつかの形態では、これらの方法は、Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、該Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２８】
2012526129.tif 000030
を得ることと、該
【化２９】
2012526129.tif 000031
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化３０】
2012526129.tif 000032
を得ることと、該
【化３１】
2012526129.tif 000033
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させて、
【化３２】
2012526129.tif 000034
を得ることと、をさらに含み得る。
【００３０】
様々な態様では、本教示は、
【化３３】
2012526129.tif 000035
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、
【化３４】
2012526129.tif 000036
と接触させて、
【化３５】
2012526129.tif 000037
を得ることと、該
【化３６】
2012526129.tif 000038
を、
【化３７】
2012526129.tif 000039
と接触させることと、を含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００３１】
様々な態様では、本教示は、
【化３８】
2012526129.tif 000040
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、を含み得る。Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、ＮａＮ３と接触させて、Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を形成することを含み得、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００３２】
様々な態様では、本教示は、
【化３９】
2012526129.tif 000041
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、
【化４０】
2012526129.tif 000042
を、ＴＭＳ−ＣｌおよびＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化４１】
2012526129.tif 000043
を形成することと、該
【化４２】
2012526129.tif 000044
を、ＮａＯＨおよびエタノールと接触させて、
【化４３】
2012526129.tif 000045
を形成することと、該
【化４４】
2012526129.tif 000046
を、
【化４５】
2012526129.tif 000047
およびＤＣＣ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化４６】
2012526129.tif 000048
を形成することと、該
【化４７】
2012526129.tif 000049
を、ＴＢＡＦ、次いで、Ｔｆ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させ、その後、標識化することと、を含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００３３】
様々な態様では、本教示は、
【化４８】
2012526129.tif 000050
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、
【化４９】
2012526129.tif 000051
を、
【化５０】
2012526129.tif 000052
と接触させることを含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００３４】
様々な態様では、本教示は、
【化５１】
2012526129.tif 000053
を合成する諸方法を含む。様々な形態では、これらの方法は、
【化５２】
2012526129.tif 000054
を、
【化５３】
2012526129.tif 000055
と接触させることを含み得、式中、ｎは１０〜２４の整数である。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。
【００３５】
本教示のいくつかの態様では、「クリック」アナログを、図１に概説されるように調製することができる。いくつかの形態では、ＩＰＰＡの４−ヨードフェニル環を、「クリック」または「逆クリック」標識化手順から作成される対応する１，２，３−トリアゾール部分に置換することができる。標識化のための標的化合物および前駆体の合成が本明細書に開示される。
【００３６】
本教示のいくつかの態様では、本発明者らは、実験動物、ペット動物、家畜動物、またはヒト等の哺乳動物中の脂肪酸分布を判定する諸方法を開示する。様々な形態では、これらの方法は、哺乳動物に、
【化５４】
2012526129.tif 000056
等の選択された放射性標識脂肪酸アナログまたはその塩を投与することと、哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）またはＳＰＥＣＴ等の熟練者に既知の他のポジトロン検出方法に供することと、を含み得る。いくつかの形態では、ｍは２であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。様々な形態では、走査から得られる画像化データを、デジタルコンピュータ上で記録し、既知のアルゴリズムを用いる分析等の熟練者に既知の諸方法を用いて分析することができる。いくつかの形態では、アルゴリズムを用いる分析を、デジタルコンピュータを用いて達成することができる。いくつかの実施形態では、諸方法は、コンピュータディスプレイ上の画像として、対象哺乳動物中の脂肪酸分布を表示することをさらに含み得る。
【００３７】
いくつかの態様では、本教示は、哺乳動物中の脂肪酸トリグリセリドの分布を画像化する諸方法を含む。様々な形態では、該諸方法は、哺乳動物に、
【化５５】
2012526129.tif 000057
等の放射性標識脂肪酸トリグリセリドアナログまたはその塩を投与することと、哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査またはＳＰＥＣＴ等の他のポジトロン画像化方法に供することと、を含み、式中、ｎは１０〜２４の整数であり得る。いくつかの形態では、ｎは１４であり得る。いくつかの形態では、走査から得られる画像化データを、デジタルコンピュータ上に保存することができる。いくつかの実施形態では、これらの方法は、熟練者に既知のアルゴリズムを用いて、画像データを分析に供することをさらに含み得る。いくつかの形態では、アルゴリズムを、デジタルコンピュータ上に保存することができる。いくつかの形態では、該諸方法は、コンピュータディスプレイ上に、対象哺乳動物中の脂肪酸トリグリセリド分布を表示することをさらに含み得る。
【００３８】
態様
本発明者らの開示は、以下の態様を含む。
【００３９】
態様１．  構造
【化５６】
2012526129.tif 000058
の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４０】
態様２．  前記脂肪酸アナログは、
【化５７】
2012526129.tif 000059
である、態様１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４１】
態様３．  Ｘがフッ素である、態様１または態様２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４２】
態様４．  少なくとも１つの原子が放射性同位体である、態様１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４３】
態様５．  少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性同位体である、態様１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４４】
態様６．  Ｘが１８Ｆである、態様１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４５】
態様７．  ｍ＝２である、態様１〜６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４６】
態様８．  ｎ＝１４である、態様１〜７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４７】
態様９．  ｎ＝１４であり、ｍ＝２であり、Ｘが１８Ｆである、態様１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４８】
態様１０．
【化５８】
2012526129.tif 000060
から成る群から選択される構造の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【００４９】
態様１１．  構造
【化５９】
2012526129.tif 000061
である、態様１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５０】
態様１２．  構造
【化６０】
2012526129.tif 000062
である、態様１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５１】
態様１３．  Ｘがフッ素原子である、態様１０〜１２のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５２】
態様１４．  少なくとも１つの原子が放射性同位体である、態様１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５３】
態様１５．  少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性核種である、態様１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５４】
態様１６．  Ｘが１８Ｆである、態様１０〜１５のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５５】
態様１７．  ｍ＝２である、態様１０〜１６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５６】
態様１８．  ｎ＝１４である、態様１０〜１７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５７】
態様１９．  構造
【化６１】
2012526129.tif 000063
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、態様１１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５８】
態様２０．  構造
【化６２】
2012526129.tif 000064
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、態様１２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【００５９】
態様２１．  構造
【化６３】
2012526129.tif 000065
の１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩であって、式中、Ｒは、
【化６４】
2012526129.tif 000066
から成る群から選択され、式中、ｎが１０〜２４の整数である、１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩。
【００６０】
態様２２．  ｎ＝１４である、態様２１に記載の１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬまたはその塩。
【００６１】
態様２３．  Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、およびヘキサンと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【００６２】
態様２４．  ｎ＝１４である、態様２３に記載のＢｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【００６３】
態様２５．
【化６５】
2012526129.tif 000067
を合成する方法であって、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００６４】
態様２６．  ｎ＝１４である、態様２５に記載の方法。
【００６５】
態様２７．
【化６６】
2012526129.tif 000068
を合成する方法であって、
【化６７】
2012526129.tif 000069
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００６６】
態様２８．  ｎ＝１４である、態様２７に記載の方法。
【００６７】
態様２９．
【化６８】
2012526129.tif 000070
を合成する方法であって、
【化６９】
2012526129.tif 000071
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００６８】
態様３０．  ｎ＝１４である、態様２９に記載の方法。
【００６９】
態様３１．
【化７０】
2012526129.tif 000072
を合成する方法であって、
【化７１】
2012526129.tif 000073
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００７０】
態様３２．  ｎ＝１４である、態様３１に記載の方法。
【００７１】
態様３３．
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化７２】
2012526129.tif 000074
を得ることと、
ｃ）前記
【化７３】
2012526129.tif 000075
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化７４】
2012526129.tif 000076
を得ることと、
ｄ）前記
【化７５】
2012526129.tif 000077
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させて、
【化７６】
2012526129.tif 000078
を得ることと、をさらに含む、態様３１または態様３２に記載の方法。
【００７２】
態様３４．
【化７７】
2012526129.tif 000079
を合成する方法であって、
【化７８】
2012526129.tif 000080
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数である、方法。
【００７３】
態様３５．  ｎ＝１４である、態様３４に記載の方法。
【００７４】
態様３６．
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化７９】
2012526129.tif 000081
を得ることと、
ｃ）前記
【化８０】
2012526129.tif 000082
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化８１】
2012526129.tif 000083
を得ることと、をさらに含む、態様３４または３５に記載の方法。
【００７５】
態様３７．
【化８２】
2012526129.tif 000084
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化８３】
2012526129.tif 000085
を得ることと、
前記
【化８４】
2012526129.tif 000086
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化８５】
2012526129.tif 000087
を得ることと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００７６】
態様３８．  ｎ＝１４である、態様３７に記載の方法。
【００７７】
態様３９．
【化８６】
2012526129.tif 000088
を合成する方法であって、
【化８７】
2012526129.tif 000089
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００７８】
態様４０．  ｎ＝１４である、態様３９に記載の方法。
【００７９】
態様４１．
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ることと、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化８８】
2012526129.tif 000090
を得ることと、
前記
【化８９】
2012526129.tif 000091
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化９０】
2012526129.tif 000092
を得ることと、
前記
【化９１】
2012526129.tif 000093
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させて、
【化９２】
2012526129.tif 000094
を得ることと、をさらに含む、態様３９または４０に記載の方法。
【００８０】
態様４２．
【化９３】
2012526129.tif 000095
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、
【化９４】
2012526129.tif 000096
と接触させて、
【化９５】
2012526129.tif 000097
を形成することと、
前記
【化９６】
2012526129.tif 000098
を、
【化９７】
2012526129.tif 000099
と接触させることと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００８１】
態様４３．  ｎ＝１４である、態様４２に記載の方法。
【００８２】
態様４４．
【化９８】
2012526129.tif 000100
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、ＮａＮ３と接触させて、Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を形成することと、
前記Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を、
【化９９】
2012526129.tif 000101
と接触させることと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００８３】
態様４５．  ｎ＝１４である、態様４４に記載の方法。
【００８４】
態様４６．
【化１００】
2012526129.tif 000102
を合成する方法であって、
【化１０１】
2012526129.tif 000103
を、ＴＭＳ−ＣｌおよびＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化１０２】
2012526129.tif 000104
を形成することと、
前記
【化１０３】
2012526129.tif 000105
を、ＮａＯＨおよびエタノールと接触させて、
【化１０４】
2012526129.tif 000106
を形成することと、
前記
【化１０５】
2012526129.tif 000107
を、
【化１０６】
2012526129.tif 000108
およびＤＣＣ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化１０７】
2012526129.tif 000109
を形成することと、
前記
【化１０８】
2012526129.tif 000110
を、ＴＢＡＦ、次いで、Ｔｆ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させ、その後、標識化することと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００８５】
態様４７．  ｎ＝１４である、態様４６に記載の方法。
【００８６】
態様４８．
【化１０９】
2012526129.tif 000111
を合成する方法であって、
【化１１０】
2012526129.tif 000112
を、
【化１１１】
2012526129.tif 000113
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００８７】
態様４９．  ｎ＝１４である、態様４８に記載の方法。
【００８８】
態様５０．
【化１１２】
2012526129.tif 000114
を合成する方法であって、
【化１１３】
2012526129.tif 000115
を、
【化１１４】
2012526129.tif 000116
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００８９】
態様５１．  ｎ＝１４である、態様５０に記載の方法。
【００９０】
態様５２．  哺乳動物中の脂肪酸分布を判定する方法であって、前記哺乳動物に、
【化１１５】
2012526129.tif 000117
から成る群から選択される放射性標識脂肪酸アナログまたはその塩を投与することと、前記哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供することと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数である、方法。
【００９１】
態様５３．  ｍ＝２である、態様５２に記載の方法。
【００９２】
態様５４．  ｎ＝１４である、態様５２または態様５３に記載の方法。
【００９３】
態様５５．  画像データを、デジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、態様５２〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【００９４】
態様５６．  前記脂肪酸分布をコンピュータディスプレイ上に画像で表示することをさらに含む、態様５１〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【００９５】
態様５７．  哺乳動物中の脂肪酸トリグリセリドの分布を画像化する方法であって、
前記哺乳動物に、
【化１１６】
2012526129.tif 000118
から成る群から選択される放射性標識脂肪酸トリグリセリドアナログまたはその塩を投与することと、
前記哺乳動物を、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供することと、を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【００９６】
態様５８．  ｎ＝１４である、態様５７に記載の方法。
【００９７】
態様５９．  画像データを、デジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、態様５７または態様５８に記載の方法。
【００９８】
態様６０．  脂肪酸トリグリセリド分布をコンピュータディスプレイ上に表示することをさらに含む、態様５７〜５９のいずれか１項に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００９９】
【図１】ｐ−ＩＰＰＡに基づく１８Ｆ標識脂肪酸アナログの設計において使用される方策を示す。
【図２】化合物
【化１１７】
2012526129.tif 000119
の合成経路を示す。試薬：ａ：トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、ヘキサン、２時間、ｂ：４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、ｔ−アミルアルコール、アルゴン、反応時間２４時間、ｃ：Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２、６ｐｓｉ、５時間、ｄ：１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、ｅ：ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水、ｆ：エタン−１，２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、ＣＨ３ＣＮ還流３時間、ｇ：［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨ。
【図３】本教示のいくつかの１８Ｆ−ＦＡＡ化合物の調製において使用される、「従来の」（上）および「逆」（下）クリックケミストリーを示す。
【図４】１１Ｃ−パルミテート（上）および化合物［１８Ｆ］５（下）を供給して研究されたラットから得られた心筋ｍｉｃｒｏＰＥＴ画像を示す。画像は、横断軸上に表示される。合成画像、および個別のＲＧＢカラーチャネルの画像が示される。
【図５】１１Ｃ−パルミテート（上）ならびに１８Ｆ−ＦＡＡ（下）に対する血液（投与量）および心筋時間放射能曲線（ＴＡＣ）（前壁および側壁）を示す。
【図６】いくつかの１８Ｆ−標識トリグリセリドアナログの構造を示す。
【図７】各々がフェニル部分を含む、１８Ｆ−標識ＦＡアナログ１２および１３に関する合成スキームを示す。
【図８】各々がフェニル部分を含む、１８Ｆ−標識トリグリセリドアナログ１４および１５に関する合成スキームを示す。
【図９】各々がトリアゾール部分を含む、１８Ｆ−標識トリグリセリドアナログ１，２−Ｐａｌ−［１８Ｆ］９および１，２−Ｐａｌ−［１８Ｆ］１０に関する合成スキームを示す。
【発明を実施するための形態】
【０１００】
心筋脂肪酸（ＦＡ）酸化は、心臓の中で最も重要なエネルギー源であると考えられる。しかしながら、ブドウ糖および乳酸塩等の全体の酸化代謝に対する他の基質の寄与比率は、両方ともに有意であり、かつ極めて可変であり、血漿基質環境、神経液性環境、および心仕事量のレベル等の多数の要素に依存している。したがって、心筋基質使用における可塑性は、心臓の健康への鍵であり得る。１つの基質のほぼ排他的使用をもたらす可塑性の喪失は、様々な心臓病の過程において、心室機能不全の発生に関与することが示されている。
【０１０１】
心筋ＦＡ代謝は、アルブミン（ＦＡ−ＡＬＢ）に結合するＦＡの形態またはトリグリセリド（ＦＡ−ＴＧ）（カイロミクロン（ＦＡ−ＣＭ）または超低密度リポタンパク質（ＦＡ−ＶＬＤＬ）の形態のいずれか）の形態のいずれかでＦＡの血漿送達に依存しており、毛細管内皮上に位置するリポタンパク質リパーゼ（ＬＰＬ）を介するＦＡの放出が続くと考えられる。さらに、加速した脂肪酸酸化または過度の脂質蓄積のいずれかの可能性のある副作用を仮定して、本発明者らは、ＦＡ−ＴＧから生じるＦＡを追跡することができるＰＥＴ放射性追跡子の必要性を感じている。いくつかの実施形態では、本発明者らは、非標識パルミテートの動態と同様の動態を有する１８Ｆ−ＦＡＡを開示し、トリグリセリドの１−位置内に取り込まれる１８Ｆ−ＦＡＡをさらに開示する。
【０１０２】
本発明者らは、いくつかの実施形態において、心臓病の病因および変化する心筋ＦＡ代謝の分岐をよりよく描写する我々の能力をさらに拡張する画像化アプローチを開発した。本発明者らは、心筋ＦＡ代謝の複数の態様の評価を可能にする放射性追跡子を開発した。例えば、本発明者らは、現在利用可能なＴＧからのＦＡの寄与を測定する非侵襲法が存在しないこと認識した。したがって、彼らは、いくつかの実施形態において、１８Ｆ−ＦＡＡを有するＲ１位置の放射性標識ＶＬＤＬ（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）を開発した。彼らは、心臓画像化におけるその使用および心筋ＦＡ代謝の異常の有無のラットモデルシステムにおける動態特性をさらに開示する。彼らは、血液および心筋組織中の放射性標識代謝物の生産を測定し、かつそれらの全身のインビボ分布を判定するために化合物を用いることをさらに開示する。
【０１０３】
したがって、本発明者らは、１８Ｆ等のポジトロンエミッタを含む脂肪酸アナログである放射性標識追跡子、または８Ｆ等のポジトロンエミッタを含む放射性標識超低密度リポタンパク質トリグリセリド（ＶＬＤＬ）を開示する。
【０１０４】
本教示のいくつかの態様は、ＩＰＰＡのヨード基を２−フルオロエトキシ基に置換することを含む。いくつかの形態では、２−フルオロエトキシ置換は、ｐ−ＩＰＰＡにおけるヨード基への等比体積置換も表し得る。ＩＰＰＡのいくつかの２−フルオロエトキシアナログを合成するために使用される方策（図１）が、図２に示される。本教示いくつかの形態では、
【化１１８】
2012526129.tif 000120
等の対応する１８Ｆ−標識アナログを、対応するトシル前駆体から高い放射化学的収率（約８５％）で合成することができる。
【０１０５】
本明細書に記載の諸方法は、熟練者に周知の検査手技を活用し、ガイダンスは、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，２００１、Ｓｐｅｃｔｏｒ，Ｄ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，１９９８、およびＨａｒｌｏｗ，Ｅ．，Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，１９９９、Ｈｅｄｒｉｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７０、Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ，Ｗ．，ａｎｄ  Ｃｏｌｄｈａｍ，Ｉ．，Ｍｏｄｅｒｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ），Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｕ．Ｋ．，２００４、Ｃｕｒａｔｉ，Ｗ．Ｌ．，Ｉｍａｇｉｎｇ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｕ．Ｋ．，１９９８、Ｗｅｌｃｈ，Ｍ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｒｅｄｖａｎｌｙ，Ｃ．Ｓ．，ｅｄｓ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ：Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００３等の実験マニュアルおよび教科書で見出すことができる。
【０１０６】
本明細書に記載の実験において、全ての試薬を市販業者から購入し、別途提示されない限り、さらなる精製なしに使用した。全ての反応を、乾燥溶媒を有する不活性アルゴン雰囲気下の空気および水分のない標準技術等の熟練者に周知の標準条件下で実行することができる。
【０１０７】
本教示の様々な実施形態では、ＩＰＰＡに基づく１８Ｆ−標識脂肪酸を合成する諸方法を、図１に提供することができる。このアプローチは、ＩＰＰＡのヨード基を、２−フルオロエトキシ基に置換することを含む。いくつかの態様では、２−フルオロエトキシ置換は、ｐ−ＩＰＰＡにおけるヨード基への等比体積置換であり得る。図１に示されるＩＰＰＡの２−フルオロエトキシアナログ合成および対応する１８Ｆ−標識アナログ［１８Ｆ］５を、対応するトシル前駆体から高い放射化学的収率（８５％）で合成することができる。様々な態様では、化合物を、［１８Ｆ］炭酸フッ化物／カリウムおよび４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（登録商標），Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  Ｎ．Ｖ．，Ｆａｉｒｌａｗｎ，ＮＪ）と反応させることによって、１８Ｆを化合物中に取り込みことができる。反応条件は熟練者に周知である。いくつかの形態では、反応条件は、溶媒として、１１０℃で５〜１０分間、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）を用いることを含み得る。
【０１０８】
他の実施形態では、２つの「クリック」アナログを、図３に概説されるように合成することができる。これらの合成において、ＩＰＰＡの４−ヨードフェニル環を、「クリック」および「逆クリック」標識化手順から作成される対応する１，２，３−トリアゾール部分に置換することができる。様々な形態では、クリックケミストリー反応は、［１８Ｆ］２−フルオロ−１−アジドエタン等の中間体を用いて、［１８Ｆ］９を得ることができる。他の形態では、「逆クリック」アプローチは、例えば、［１８Ｆ］１０等の化合物を得るために、１８Ｆ−放射性標識をアセチレン前駆体中に取り込むことができ、１，３−双極性付加環化反応へのアジド部分が脂肪酸基に付着し得る修正クリック反応を含み得る。
【０１０９】
放射性標識トリグリセリドの合成およびパッケージング。ある特定の実施形態は、ＶＬＤＬ−ＴＧ中に取り込むことができる放射性標識ＴＧを含む。これらの実施形態は、上述の１８Ｆ−ＦＡＡをトリグリセリドの１−位置内に取り込むことを含み得る。標的ＴＧの構造の例が図６に示される。いくつかの形態では、標的化合物の合成のための出発原料は、市販の１，２−ジパルミトイルグリセロールであり得る。１，２−ジ−パルミトイルグリセロールのＴＧアナログへの変換を、図７および図８に記載の一連の反応を用いて達成することができる。
【０１１０】
いくつかの形態において、ＴＧの２−位置はキラル中心であり得るため、本教示は、１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］５，１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］９および１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］１０等のＦＡＡ−トリグリセリドアナログを合成し、かつ鏡像異性混合物として評価することができる実施形態を含む。したがって、いくつかの形態では、キラルＨＰＬＣ等の熟練者に既知の標準の方法を用いて、ラセミ混合物を（＋）−および（−）−異性体に分類することができる。
【実施例】
【０１１１】
結果が過去形で表されない限り、実験の提示は、任意のプロトコルまたは実験が実施されたか、または実行されなかったことを暗示しない。どの実施例も、本開示の範囲を制限すると見なされるべきではない。
【０１１２】
実施例１：小動物の画像化
動物調製。全ての動物処置を、ワシントン大学動物研究委員会（Ａｎｉｍａｌ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）によって確立された研究動物のケアおよび使用に関するガイドライン（Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｃａｒｅ  ａｎｄ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｉｍａｌｓ）に従って実施する。動物調製を、以前に説明されているように実行する２４〜２６。ラットを代謝ケージ内に収容し、誘導チャンバを介して投与された２％〜２．５％のイソフルレンの吸入によって麻酔する。特注設計のノーズコーンを介して１％〜１．５％のイソフルレンを送達することによって、画像化セッションを通して麻酔を維持することができる。静脈アクセスは、右頸静脈を介する。水循環ブランケットおよび加熱ランプを用いて体温を維持することができる。該過程を通して、心拍数および呼吸速度を監視することができる。
【０１１３】
ＰＥＴ取得。動物を、特注設計のアクリル拘束デバイス内に確保し、小動物画像化ＰＥＴスキャナの視野内に設置することができる。画像化取得は、右頸静脈カテーテルを介する追跡子のボーラス注入の５秒後に開始する。画像化プロトコルは、１１Ｃ−パルミテート（５−７ｍＣＩ）、続いて１８Ｆ−ＦＡＡ、または１８Ｆ−ＶＬＤＬ（５−７ｍＣｉ）単独のｍｉｃｒｏＰＥＴ画像の動的取得から成る。１１Ｃ−パルミテートおよび１８Ｆ−ＦＡＡまたは１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬのいずれかの動的画像取得は、それぞれ、３０分間および６０分間であり得る。画像化セッションの総使用時間は、約３時間であり得る。３つの動脈全血試料を該研究を通して収集し、動物の代謝状態を確認するために、全血ブドウ糖（５μＬ）、遊離脂肪酸（２０μＬ）、およびインスリン（５μＬ）レベルを測定する。
【０１１４】
画像処理／分析。動的画像は、心臓への２．５倍ズームおよび１画像化セッションにつき４０フレームのフィルタ逆投影を用いて再構成することができる。入力関数は、以前に説明されているハイブリッド画像血液サンプリングアルゴリズムを適用することによって再構成される２５。関心の心筋部位を設置して、心筋時間放射能曲線（ＴＡＣ）を作り出す。決定的な特性（例えば、高さおよび形状）、ならびに同様の動態に基づく指数関数曲線適合アルゴリズムの両方に関して、１８Ｆ−ＦＡＡおよび１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ血液ならびに心筋ＴＡＣを、１１Ｃ−パルミテートＴＡＣと比較することができる。
【０１１５】
実施例２：大動物の画像化
動物調製。目的のために育てられた約６〜１０ｋｇの雄ビーグル犬を絶食させ、麻酔し、以前に報告されているように装着する３、４。１本の大腿静脈にカニューレ挿入して、薬物を投与する。動脈血サンプリングおよび動脈血圧の監視のために、カテーテルを大腿動脈を介して胸大動脈に設置する。静脈血試料を得るために、冠状静脈洞カテーテルを、以前に説明されているように、蛍光透視ガイダンス下で右外頸静脈を介して設置することができる２８。過程を通して、ＥＣＧ、動脈血圧、および心拍数を監視することができる。全ての測定を、ｍｉｃｒｏＰＥＴ  Ｆｏｃｕｓ２２０上で実行することができる。全ての手順は研究動物のケアおよび使用に関するガイドラインに従って実施される。
【０１１６】
ＰＥＴ画像化プロトコル。２つの画像化プロトコルを用いることができる。
プロトコル１．透過走査を最初に実行して、光子減衰を補正することができる。透過走査の後に、５分間の動的データ収集の即時開始とともに、５〜７ｍＣｉの１５Ｏ−水を静脈内ボーラスとして投与することができる。１５Ｏ−水を減衰させた後、５〜７ｍＣｉの１１Ｃ−パルミテートを静脈内投与することができ、その後に６０分間のデータ収集が続く。１１Ｃ−パルミテートを減衰させた後、５〜７ｍＣｉのＦＡアナログを投与することができ、その後に６０分間のデータ収集が続く。１１Ｃ−パルミテート投与と同時に、１３Ｃ−パルミテートの一定注入（０．１ｕｍｏｌ／ｋｇ／分）を開始し、処置の最後まで継続して、トリグリセリドプールを標識化することができる。１１Ｃ−パルミテート、１１ＣＯ２、および１８Ｆ−代謝物を、ＡＣＳ血液の対になったサンプリングによってアッセイすることができる。血漿インスリンおよび基質を、事前設定された間隔でアッセイすることができる。結果的に、絶食状態（低貯蔵での適度のＦＡ摂取および酸化、ｎ＝５）、正常血糖高インスリンクランプ（より高い分別貯蔵での低摂取および酸化、ｎ＝５）の間、またはドブタミンの投与（１０μｇ／ｋｇ／分、低貯蔵での高摂取および酸化、ｎ＝５）の間のいずれかの静止条件下で、合計１５匹のイヌを研究することができる。全ての介入を定期的に実行することができ、複数の追跡子研究を実行するために必要な基質環境および心仕事量における安定性を示すことができる２１、２２、２７。以前に報告した手順を用いて、心筋組織を得ることができる２１、２２。画像化プロトコルが完了した後、左開胸切開を介して開胸することができる。心膜を切開することができ、心臓が露出する。左冠動脈前下行枝の主要な対角枝の各側上を約４〜５ｃｍ平行切開する。切開間の心筋を、アルミニウムトングを用いて隆起および凍結クランプし、液体Ｎ２で冷却し、かつ-８０℃で保存することができる。
【０１１７】
プロトコル２：本画像化プロトコルおよび介入は、１８Ｆ−ＦＡＡの代わりに５〜７ｍＣｉのＦＴＰを投与することができること、かつその後６０分間の動的画像化が続くことを除いて、プロトコル１と同一であり得る。プロトコル１にあるように、１５Ｏ−水および１１Ｃ−パルミテートを画像化を伴って投与することができる。１３Ｃ−パルミテートを用いて、安定同位体測定を実行することができる。放射性標識代謝物および非標識基質ならびにインスリンの血液サンプリングを実行することができる。心筋組織を処置の最後に得ることができる。
【０１１８】
実施例３
本実施例は、我々の方策の実行可能性を示し、ＩＰＰＡの２−フルオロエトキシアナログの最初の６０分間の動態を、同一動物における１１Ｃ−パルミテートの動態と比較した（図４）。両方の放射性追跡子を６０分間画像化した。合成の心筋ｍｉｃｒｏＰＥＴ画像を、１１Ｃ−パルミテート（上）、および１８Ｆ−ＦＡＡで標識された新規の脂肪酸アナログ（下）を供給して研究されたラットから得た。画像は、横断軸上で表示され、追跡子注入の２０〜３０分後に得られたデータを表す。１８Ｆ−ＦＡＡ画像は、１１Ｃ−パルミテート画像よりも優れた質およびより高い追跡子アクティビティを示した。図４は、個々のｍｉｃｒｏＰＥＴ画像を示す。上列（１８−１３３３０および１９−１２０１１）は１１Ｃ−パルミテート画像であり、下列（１８−２２１３５および１９−２１９５２）は１８Ｆ−ＦＡＡ画像である。信号強度の増加は、緑色から黄色、黄色から赤色（最高）で表される。比較的同様の追跡子動態が見られた（図５）。
【０１１９】
実施例４
本実施例は、１１Ｃ−パルミテート（上）ならびに１８Ｆ−ＦＡＡ（下）に対する血液（投与量）および心筋時間放射能曲線（ＴＡＣ）（前壁および側壁）を示す。心筋ＴＡＣは、３回の連続的ＲＯＩから得られた平均的追跡子アクティビティを表す（図５）。心筋動態の差異を視覚的に強めるために、Ｙ軸に対して対数尺度を用いた。
【０１２０】
いくつかの差異が見られるが、両方の放射性追跡子は、急速な二相ウォッシュアウトで有意な追跡子摂取を示した。例えば、１１Ｃ−パルミテートと比較すると、１８Ｆ−ＦＡＡは、早期の停滞期、その後より緩徐な早期の追跡子クリアランス（０．１７±０．０１対０．３０±０．０２、Ｐ＜０．０００１）、および有意に高い後期のクリアランス（０．０．００３０±０．０００５対０．０００６±０．０００１３、Ｐ＜０．０１）を示した。追跡子クリアランスは、１８Ｆ−ＦＡＡでは追跡子注入の６０分後にまだ優勢であったが、１１Ｃ−パルミテートにおいてはそうではなく、追跡子が追跡子注入の２５分後に血液および心筋の両方で増加した。これらのデータは、様々な実施形態において、これらの化合物の性質および心筋ＦＡ代謝を評価するための方法論におけるそれらの使用を示す。
【０１２１】
実施例５
本実施例は、いくつかの実施形態において、インビボで１１Ｃ−パルミテートのように行動し得るが、１１Ｃの半減期よりも長い半減期を有するポジトロン放出放射性核種を含有する放射性標識脂肪酸アナログの調製を示す。先の研究は、１２３Ｉ−ＩＰＰＡが、１１Ｃ−パルミテートの組織時間放射能曲線（ＴＡＣ）と同様の組織時間放射能曲線（ＴＡＣ）を示すことを示した。すなわち、両方の放射性追跡子は、酸化（急速なウォッシュアウト相）および貯蔵（緩徐なウォッシュアウト相）を表す、心臓からの二相ウォッシュアウト動態を示す。したがって、開発された方策は、ポジトロン放出放射性核種、フッ素−１８との１２３Ｉ放射性標識の置換を伴う。ｐ−ＩＰＰＡの１８Ｆ−標識アナログを作製するための１つの方策は、ヨウ素原子を［１８Ｆ］２−フルオロエトキシ基（［１８Ｆ］５）に置換することであり得る。本方策は、受容体ベースのＰＥＴ放射性追跡子の合成において使用されており、２−フルオロエトキシ基がインビボ脱フッ素に対して安定していることを予測することができる。スキーム１（図２）に示されるように、［１８Ｆ］５は、高収率（約８５％）および高比活性度（合成の最後の時点で約６，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）で合成された。スキーム１では、合成ステップは、ａ）トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、ヘキサン、２時間、ｂ）４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、ｔ−アミルアルコール、アルゴン、反応時間２４時間、ｃ）Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２、６ｐｓｉ、５時間、ｄ）１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、ｅ）ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水、ｆ）エタン−１，２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、ＣＨ３ＣＮ還流３時間、ｇ）［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨであり、Ｋ２．２．２は、４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（登録商標）、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  Ｎ．Ｖ．，Ｆａｉｒｌａｗｎ，ＮＪ）である。いくつかの実施形態では、本発明者らは、図３に示されるように、「クリック」および「逆」クリックアナログの合成を開示する。いくつかの形態では、クリックおよび逆クリック反応の放射化学的収率は、出発［１８Ｆ］フッ化物に基づいて８０％を超え得る。
【０１２２】
実施例６
本実施例は、標識化に関する「クリックケミストリー」手順を用いることを示す（図３）。第１の方策は、中間体、［１８Ｆ］２−フルオロ−１−アジドエタンを用いる「従来の」クリックケミストリー反応を含み、［１８Ｆ］９を得る２９。第２のアプローチは、１８Ｆ−放射性標識をアセチレン前駆体中に取り込むことができる「修正」クリック反応を含む。１，３−双極性付加環化反応に必要なアジド部分を脂肪酸基に付着し、［１８Ｆ］１０を得ることができる。
【０１２３】
実施例７
本実施例は、ＶＬＤＬ−ＴＧ中に取り込むことができる放射性標識ＴＧの調製を示す。方策は、１８Ｆ−ＦＡＡをトリグリセリドの１−位置内に取り込むことを含み得る。標的ＴＧの例示的な構造が図６に示される。標的化合物の合成のための出発原料は、市販の１，２−ジパルミトイルグリセロールであり得る。１，２−ジ−パルミトイルグリセロールのＴＧアナログへの変換を、図７、図８、および図９に記載の一連の反応を用いて達成することができる。
ＴＧの２−位置はキラル中心であり、アナログ１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］５，１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］９および１，２−ｐａｌ−［１８Ｆ］１０を最初に合成し、鏡像異性混合物として評価することができることが指摘されるべきである。キラルＨＰＬＣ等の日常的な方法を用いて、ＴＧをその（＋）−および（−）−異性体に分類することができる。
【０１２４】
実施例８
本実施例は、放射性標識トリグリセリドのパッケージングを示す。いくつかの形態では、放射性標識ＴＧを、熟練者に既知の諸方法、例えば、Ｇｏｒｍｓｅｎらによって説明される諸方法で、エクスビボ投与のために「パッケージ」することができる２０。いくつかの形態では、無菌法を用いて、血液（３〜５ｍＬ）および（２０〜３０ｍＬ）を、それぞれ、ドナーラットおよびイヌから得ることができる。いくつかの形態では、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）を、超遠心分離法（Ｂｅｃｋｈａｍ（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）を介して分離することができる。ＶＬＤＬ浮遊物を、修正パスツールピペットを用いてＭｉｌｌｉｐｏｒｅＲフィルタ（直径０．２２ｍｍの細孔の大きさ）を通過させて除去し、４℃で最大１週間まで保存することができる。使用日当日、１８Ｆ−ＦＡＡ−ＴＧを、３７℃で３０分間の水浴で、超音波処理によってＶＬＤＬ複合体中に取り込むことができる。結果として得られる溶液を、ボーラス注入の前に再び０．２２μｍのフィルタを通過させることができる。いくつかの態様では、代表的な試料を試験し、無発熱原性および無菌性を保証することができる。いくつかの態様では、そのようなエクスビボ標識ＶＬＤＬ−ＴＧ粒子が、電気泳動特性、コレステロール対ＴＧの比率、アポリポタンパク質Ｂ−１００（ａｐｏＢ−１００）濃縮物、およびサイズ排除ＨＰＬＣ上での移動度に関して、自然ＶＬＤＬと区別不可能であり得ることを示すために、追加の対照実験を実施することができる。いくつかの形態では、より大量の血液（すなわち、５０〜６０ｍＬ）から単離されるＶＬＤＬを用いて追跡子の全てを摂取することができることを除いて、類似の手順を用いて１３Ｃ−ＶＬＤＬを調製することができる。
【０１２５】
実施例９
本実施例は、画像処理および分析を示す。本実施例では、動的画像は、心臓への２．５倍ズームおよび１つの画像化セッションにつき２０〜４０フレームのフィルタ逆投影を用いて再構成することができる。データ再構成（画像のフィルタ解像度は１０ｍｍである）を、Ｓｉｌｉｃｏｎ  Ｇｒａｐｈｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒシステム上で実行し、画像分析のために、画像分析ソフトウェアパッケージとともにイーサネットを介してＳｕｎ  Ｕｌｔｒａ１０ワークステーションに移すことができる。心筋画像を、追跡子動態および灌流ならびに代謝の局所値を得ることができる直交面に再設定することができる。加えて、灌流およびＦＡ代謝についての前外側部分値を得ることができ、次いで、トリグリセリドの組織測定と相関させる目的で、イヌ毎の値を得るために平均化することができる。局所値を用いて、局所変動性およびパラメータ推定値における偏りを評価することができる。
【０１２６】
実施例１０
本実施例は、局所灌流および代謝の測定を示す。
灌流。心筋灌流の測定は、ＦＡ代謝を測定するため、かつ基質使用のフィック測定を計算するために、コンパートメントモデルの必要な要素であり得る。測定を、１５Ｏ−水動態の十分に検証されたモデリングアプローチを用いて実行することができる２３、３０〜３２。
【０１２７】
実施例１１
本実施例は、Ｆ−１８放射性標識追跡子に関する分析および動態モデリング方策を示す。いくつかの実施形態では、これらの１８Ｆ−ＦＡＡ放射性追跡子の分析は、２つのステップに従い得る。
【０１２８】
ステップ１．ラットのｍｉｃｒｏＰＥＴ画像ならびに動態質的および半定量分析。分析戦略は、１）主に心筋内に分布される追跡子対心筋内および血液内の両方に分布される追跡子等の、心筋追跡子分布の類似点／相違点を評価するための画質の可視化、２）血液および心筋ＴＡＣの類似点／相違点の可視化、ならびに３）摂取およびクリアランス追跡子速度においての全体の類似点／相違点における相違点を評価するために、心筋曲線を多指数関数に適合させることができる「曲線ストライピング」を含む。
【０１２９】
ステップ２．十分に管理されたイヌモデルにおける１８Ｆ−ＦＡＡＰＥＴ動態のコンパートメントモデルの開発および検証。ＰＥＴ代謝追跡子を検証するために用いられ得るいくつかの計量的手法が、本過程中で使用される２１、２２、２８。第一に、ＡＣＳデータを用いて、ａ）血液および心筋１８Ｆ代謝物を同定し、ｂ）研究中の１８Ｆ−ＦＡＡの心筋代謝に対するそれらの寄与を定量化し、かつｃ）これらの１８Ｆ代謝物を、血液中の１１Ｃ−パルミテート代謝物および組織中の１３Ｃ−パルミテート代謝物ならびに血液および組織中の１３Ｃ−ＶＬＤＬ等の他の代謝物と比較することができる。第二に、これらの観察に基づいて、予備的モデルが設計、実装、および研究された代謝および心仕事量状態の広い範囲にわたって試験される。次に、（１８Ｆ−代謝物に補正された）ＰＥＴ血液および心筋ＴＡＣを研究中の該モデルに適合させて、モデルの移動速度（ｋｎ、ｍｉｎ−１）を推定することができる。この時点で、いくつかの数学的ツールを用いて、実装された該モデルが１８Ｆ−ＦＦＡ追跡子動態の忠実な表現であるかを評価することができる。これらの数学的ツールには、推定された心筋ＴＡＣがどの程度ＰＥＴ  ＴＡＣに適合するかを評価するための適合度分析、および追跡子代謝の変化をどの程度モデルパラメータによって追跡することができるかを評価するためのパラメータ感度分析が含まれる。これらの判断基準に基づいて、モデルを再設計するか、または容認することができる。容認された場合、モデルの移動速度から計算された画分、または代謝画分および心筋血流の産物から計算された流動（ｍＬ／ｇ／分）、あるいは代謝流動および血漿ＦＡレベルの産物から計算された総合的な代謝速度（ｎｍｏｌ／ｇ／分）のいずれかとしての代謝測定を、ＡＣＳ測定と比較することができる。最後に、ＦＡ代謝のモデル由来推定値を、適切な既知の基準（例えば、１１Ｃ−パルミテートおよび１３Ｃ−ＶＬＤＬ）と比較することによって、該モデルの生物学的検証を実行することができる。
【０１３０】
実施例１２
本実施例は、ＦＴＰとのＦＡ摂取の定量化を示す。ＦＴＰは組織内に本質的に不可逆的に結合されるため、Ｐａｔｌａｋ解析を実行して、以前に報告されているように心筋ＦＡ摂取を計算することができる１７、１８。血漿放射性標識代謝物の存在に対して、動脈入力関数を補正することができる１７、１８。ＡＣＳで実行されるフィック法によって測定される１１Ｃ−パルミテートと比較した、ＦＴＰの分画摂取における差異に基づいてＬＣ値を計算することができる。注目すべきことに、ＦＡ摂取を判定するために上述のコンパートメントモデルアプローチを検討することもでき、かつ酸化を、本追跡子を用いて分離することができる。
【０１３１】
実施例１３
ＰＥＴ画像化から切り離して、最適な画像化特性を保証するため、および最終的にヒト使用のために開発された放射性医薬品の線量測定推定値を実行するために必要な情報を得るために、インビボ分布研究を実施することができる。関心の臓器を取り出し、放射能をガンマカウンターで計数することができる。ガンマカウンターのｎＣｉに対する数の標準曲線の勾配（すなわち、放射能の数／ｎＣｉ）から皮内／臓器％および皮内／ｇ組織％を計算することができる。動物を、上述のようにイソフルレンを用いて麻酔する。放射性追跡子（フッ素−１８に対して５０〜１００μＣｉ）を、尾静脈注射を介して投与することができる。該動物を、放射性追跡子の注入後１０、３０、６０、および２４０分の時点で、麻酔過剰摂取によって安楽死させることができる。
【０１３２】
実施例１４
本実施例は、血漿分析を示す。これらの実験では、血液試料を乾燥したシリンジ内に収集し、ＥＤＴＡ被覆バキュテナー管内に移し、よく混合し、以前に説明されているように、アッセイへの準備が整うまで氷中に保存することができる３３。５℃で５分間の遠心分離後、血漿の０．５ｍＬは、標識脂質画分の抽出のために、ガラス試験管に移すことができる。抽出溶媒（１Ｎ  ＨＣｌ−ｎ−ヘプタン−イソプロパノール１／１０／４０ｖ／ｖ）を添加し、該管をボルテックスし、その後に、水／ｎ−ヘプタンの添加および遠心分離（４０００ｒｐｍ、４分間）が続き、有機層から水層を分離する。放射能に関して両方の相を計数することができる。試料を非エステル化ＦＡ、ＴＧ、およびリン脂質の存在に関して分析することができる。アプローチは、ＳＰＥ、Ｂｏｎｄ  Ｅｌｕｔはそれらの１つである様々な供給源から入手可能なアミノプロピル結合相（ＳＰＥ−ＮＨ２カラム）の使用を含むことができる。初めに３００〜５００ｍｇの樹脂を含有するカートリッジを用いて作業を行うことができ、市販の真空ラック上に配置することができる。下部の試験管を必要に応じて変えて、異なる画分を収集することができ、次に、これらの選択画分を蒸発させて少容量に再構成して、検証ステップの一環としてＨＰＬＣで分析するか、あるいは検証後に、ガンマカウンター上で直接計数して、放射能を定量化することができる。
【０１３３】
異なる脂質画分の抽出：次に、上述の有機層の一部を、先にヘプタンで調整されたＳＰＥ−ＮＨ２カラムに通過させることができる。ヘプタン−イソプロパノール（１：２  ｖ／ｖ）（ＴＧおよび他の中性脂肪）、ジエチルエーテル（遊離ＦＡ）、およびメタノール（リン脂質）中の２％の酢酸と連続的に溶出して、ＴＧ、遊離ＦＡ、リン脂質の分離を実行することができる。管の各ラックを提案された順に変えることができる。試料の大きさ、樹脂の量、および注入した総放射能に基づいて、溶媒の組成物および量を最適化することができる。ＳＰＥ−ＮＨ２を用いて、第１の抽出画分の中性成分を、ＴＧ、コレステロール、ジグリセリドおよびモノグリセリドに分けることができる。遊離ＦＡおよびリン脂質に関して、ＨＰＬＣ検証を、アセトニトリル−ＴＨＦ−水−酢酸溶媒混合物を用いて、特殊カラム（ウォーターズＦＡ分析カラム）で実行することができる。ＴＧのＨＰＬＣ分析のために、ＲＩ検出器で、ジクロロメタン／アセトニトリルまたはアセトン／アセトニトリルを用いてＣ−１８分析的カラムを試験することができる３４。ＨＰＬＣカラムは、信頼のおける標準を用いて、各画分の最善の分離のために最適化することができる。当業者は、短命のＣ−１１代謝物の保持時間を著しく低減させるために、Ｚｏｒｂａｘ  Ｋｉｔ  ＳＢ−Ｃ１８／ＳＢ−ＣＮ／ＳＢ−フェニル  ５μｍ  ４．６×１５０ｍｍ  ＨＰＬＣカラムによって提供されるキット等の、脂質を特異的に標的化する方法開発のための市販のキットを検討することができる。
【０１３４】
実施例１５
本実施例は、心臓組織分析を示す。これらの実験を、心臓組織中の放射性標識ＦＡ化合物およびそれらの代謝物の分布を判定するために実施することができる。代謝物分析を、Ｄｅｇｒａｄｏらによって説明されるようなＦｏｌｃｈ様式の抽出手順によって実行することができる１７。ラットの心臓を、上述のインビボ分布研究と同時に摘出することができる。それらを、０℃の７ｍＬクロロホルム／メタノール（２：１）中で、完全に均質化および超音波分解（２０秒間）することができる。尿素（４０％、１．７５ｍＬ）および５％の硫酸（１．７５ｍＬ）を添加し、混合物をさらに２０秒間超音波分解することができる。１０分間の遠心分離後、水性、有機、およびタンパク質の間期画分を分離し、計数することができる。以前に説明されているように、放射性標識ジグリセリド、ＦＡ、ＴＧ、コレステロールエステルにおいて、有機相をシリカゲルＴＬＣでさらに分析することができる１７。組織分析のＴＬＣで得られる結果の検証を、以前に開発されたＨＰＬＣ法を用いて行うことができる。
【０１３５】
実施例１６
本実施例は、血漿１３Ｃ−パルミテートまたは１３Ｃ−ＶＬＤＬ濃縮の測定を示す。１３Ｃ−パルミテートまたは１３Ｃ−ＶＬＤＬ濃縮の測定において、血漿を遠心分離によって分離し、６０℃で１５分間超加熱してリポタンパク質リパーゼ活性を破壊し、その後の分析まで８０℃で保存することができる。１３Ｃ−パルミテート濃縮を、以前に説明されているメチルエステル誘導体を用いて、ガスクロマトグラフ質量分析法（ＧＣＭＳ、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ５９７３Ｎ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）を介して測定することができる３５。１３Ｃ−ＶＬＤＬ濃縮を、最初にＶＬＤＬトリグリセリドを他の脂質クラスから分離した後に、Ｐａｔｔｅｒｓｏｎらによって説明されるような超遠心分離法を介して同様に判定することができる３６。
【０１３６】
実施例１７
本実施例は、血液１３ＣＯ２濃縮および含有量の測定を示す。これらの実験において、従来の同位体比質量分析（ＩＲＭＳ、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＭＡＴ  Ｄｅｌｔａ＋  ＸＬ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて、血液１３ＣＯ２濃縮を、０．５ｍＬの６Ｎで、０．５ｍＬの血液からタンパク質を除去し、ヘッドスペースガスを分析することによって測定することができる。血液ＣＯ２含有量を、血漿ｐＣＯ２、ｐＨ、温度、およびヘモグロビン濃度の測定から計算することができる３７。次に、血液１３ＣＯ２含有量を、１３ＣＯ２濃縮および全体のＣＯ２含有量の産物として計算することができる。
【０１３７】
実施例１８
本実施例は、組織１３Ｃ−トリグリセリドならびに１３Ｃ−リン脂質濃縮および含有量の測定を示す。１３Ｃ−パルミテートまたは１３Ｃ−ＶＬＤＬのいずれかから、心筋ＴＧまたはリン脂質貯蔵所内への１３Ｃの取り込みを判定するために、凍結組織試料を液体Ｎ２下で粉末化し、クロロホルム：メタノール（２：１）を用いて抽出し、その後の分析まで８０℃で保存することができる。少量の粗脂質抽出物を用いて、市販のキット（Ｌ型トリグルセリドＨおよびリン脂質Ｃキット、Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＵＳＡ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡ）で総トリグルセリドおよびリン脂質含有量を測定することができる。固相抽出法ならびにガスクロマトグラフ燃焼ＩＲＭＳ（Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＭＡＴ  Ｄｅｌｔａ＋ＸＬ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）で判定されるトリグリセリドおよびリン脂質画分中のパルミテートの１３Ｃ：１２Ｃ比率を用いて、残余物を精製することができる。次に、組織含有量（μｍｏｌ／ｇ単位）を対応する濃縮物（追跡子：被追跡子比率）で乗じることによって、トリグリセリドまたはリン脂質中の総１３Ｃパルミテート含有量を得ることができる。次に、前駆体（すなわち、１３Ｃ−パルミテートまたは１３Ｃ−ＶＬＤＬ）濃縮物および追跡子注入の持続時間とともにこれらのデータを用いて、トリグリセリドまたはリン脂質合成（μｍｏｌ／ｇ／分単位）の実際の速度を計算することができる。
【０１３８】
実施例１９
本実施例は、血漿基質およびインスリンの測定を示す。これらの実験において、血漿ブドウ糖および乳酸塩レベルを、２３００ＳＴＡＴ  Ｐｌｕｓ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＹＳＩ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｙｅｌｌｏｗ  Ｓｐｒｉｎｇｓ，ＯＨ）を用いて酵素的にアッセイすることができる。血漿遊離ＦＡレベルを、酵素比色法（Ｗａｋｏ  ＮＥＦＡ  Ｃキット、Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＵＳＡ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡ）を用いて測定することができる。血漿インスリンを、放射免疫アッセイ（Ｌｉｎｃｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｃｈａｒｌｅｓ，ＭＯ）によって測定することができる。
【０１３９】
実施例２０
本実施例は、画像化プロトコルを示す。プロトコル１：これらの実験において、全ての画像化研究は、ｍｉｃｒｏＦｏｃｕｓ２２０上で実行することができる。心電図、動脈血圧、および血液ガス値を連続的に監視することができる。透過走査を最初に実行して、光子減衰を補正することができる。透過走査の後に、５分間の動的データ収集の即時開始とともに、５〜７ｍＣｉの１５Ｏ−水を静脈内ボーラスとして投与することができる。１５Ｏ−水を減衰させた後、５〜７ｍＣｉの１１Ｃ−パルミテートを静脈内投与することができ、その後に６０分間のデータ収集が続く。１１Ｃ−パルミテートを減衰させた後、５〜７ｍＣｉのＦＡアナログを投与することができ、その後に６０分間のデータ収集が続く。１１Ｃ−パルミテート投与と同時に、１３Ｃ−パルミテートの一定注入（０．１ｕｍｏｌ／ｋｇ／分）を開始し、処置の最後まで継続して、トリグリセリドプールを標識化することができる。１１Ｃ−パルミテート、１１ＣＯ２、および１８Ｆ−代謝物を、ＡＣＳ血液の対になったサンプリングによってアッセイすることができる。血漿インスリンおよび基質を、事前設定された間隔でアッセイすることができる。ここでの目標は、主にＴＧ（およびより低い程度のリン脂質および中性脂質）の貯蔵ならびにβ酸化に関して、心筋ＦＡ利用の速度および抽出ＦＡの代謝的運命の両方における広範囲を達成することであり得る。結果的に、絶食状態（低貯蔵での適度のＦＡ摂取および酸化、ｎ＝５）、正常血糖高インスリンクランプ（より高い分別貯蔵での低摂取および酸化、ｎ＝５）の間、またはドブタミンの投与（１０μｇ／ｋｇ／分、低貯蔵での高摂取および酸化、ｎ＝５）の間のいずれかの静止条件下で、合計１５匹のイヌを研究することができる。次に、我々が以前に報告した手順を用いて心筋組織を得ることができる２１、２２。画像化プロトコルが完了した後、左開胸切開を介して開胸することができる。心膜を切開することができ、心臓が露出する。左冠動脈前下行枝の主要な対角枝の各側上を約４〜５ｃｍ平行切開することができる。切開間の心筋を、アルミニウムトングを用いて隆起および凍結クランプし、液体Ｎ２で冷却し、かつ-８０℃で保存することができる。この処置は、凍結前に連続した組織の灌流を可能にし、安定したグリコーゲン貯蔵を保証することができる。動物を、左心房または左心室カテーテルを介して与えられるチオペンタールナトリウム（少なくとも６０ｍｇ／ｋｇ）、続いて１〜２分間後に、６０ｍＬの飽和ＫＣｌの過剰摂取で安楽死させることができる。
【０１４０】
プロトコル２：本画像化プロトコルおよび介入は、１８Ｆ−ＦＡＡの代わりに５〜７ｍＣｉのＦＴＰを投与することができること、かつその後６０分間の動的画像化が続くことを除いて、プロトコル１と同一である。プロトコル１にあるように、１５Ｏ−水および１１Ｃ−パルミテートを、画像化を伴って投与することができる。１３Ｃ−パルミテートを用いて、安定同位体測定を実行することができる。放射性標識代謝物および非標識基質ならびにインスリンの血液サンプリングを実行することができる。心筋組織を処置の最後に得ることができる。
【０１４１】
実施例２１
本実施例は、データ分析を示す。
我々の１１Ｃ−ブドウ糖およびＬ−３−１１Ｃ−乳酸塩モデルの開発において、２０の試料サイズおよび２３匹のイヌを用いた２２、２８。プロトコル１において、単変量解析を実行して、心筋摂取のフィック導出値および１８Ｆ−ＦＡＡのその心筋クリアランスの測定（酸化の測定値としての）が、基質およびホルモンの有効性における変化を追跡するかを判定することができる。事後Ｓｃｈｅｆｆｅ試験との相違の分析を用いて、グループ分けしたデータ間の差異を比較することができる。そうした場合、次に、これらの値を、１１Ｃ−パルミテート摂取および１１ＣＯ２生産の同様の測定と相関させることができる。摂取値の比較は、１８Ｆ−ＦＡＡを用いてＬＣを心筋ＦＡ摂取の判定に含むことができるかを判定する助けにもなり得る。次に、上述のモデリングパラダイムを採用して、１８Ｆ−ＦＡＡの心筋動態に基づくコンパートメントモデルを開発することができる。ＦＡ摂取、酸化、ならびに貯蔵等の様々なモデリングパラメータの単変量解析を実行して、基質およびホルモンの有効性の変化を追跡するかを判定することができる。標準の回帰分析を用いて、１８Ｆ−ＦＡＡを（従属変数として）用いるＦＡ摂取、酸化、および貯蔵の断層撮影推定値を、１１Ｃ−パルミテートを（独立変数として）用いるＰＥＴ導出値と比較することができる。さらに、ＦＡ貯蔵の測定速度を、１３Ｃ−パルミテートのＴＧおよびリン脂質への取り込みの直接定められた速度と相関させることができる。
【０１４２】
プロトコル２に関して、ＦＡ摂取のパトラック由来ＦＴＰ速度が基質およびホルモンの有効性の変化を追跡するかを判定するために、単変量解析を実行することができる。標準の回帰分析を使用して、ＦＴＰを（従属変数として）用いる摂取の断層撮影推定値を、１１Ｃ−パルミテートを（独立変数として）用いる摂取のフィック由来測定値と比較することができる。加えて、ＬＣ値を３回の介入に関して計算し、これらの条件下におけるその安定性を判定することができる。ＦＴＰで測定された摂取パラメータがより酸化を示すかを判定するために、ＦＡ摂取のＦＴＰ由来測定と１１ＣＯ２生産との同様の比較を実行することができる。さらに、（ＦＴＰでの）ＦＡ摂取および（プロトコル１からの１８Ｆ−ＦＡＡでの）ＦＡ摂取のＰＥＴ導出値と、１１Ｃ−パルミテートを用いたフィック導出値との間の相関関係を比較して、１８Ｆ−ＦＡＡが研究された条件下でＦＡ摂取のより正確な測定をもたらすかを判定することができる。先に述べたように、ＦＴＰとの可能性のあるコンパートメントモデリングアプローチも検討することができる。ＦＡ摂取、酸化、および可能性は高くないが貯蔵の値を、それぞれ、１１Ｃ−パルミテートおよび１３Ｃ−パルミテートの組織測定を用いて、フィック導出値と比較することができる。
【０１４３】
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２８．Ｈｅｒｒｅｒｏ  Ｐ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍｅｒ  ＣＪ，Ｄｅｎｃｅ  Ｃ，Ｏｅｌｌｅｒｉｃｈ  ＷＦ，Ｇｒｏｐｌｅｒ  ＲＪ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ＰＥＴ  ａｎｄ  １−ｃａｒｂｏｎ−１１−ｇｌｕｃｏｓｅ．Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．Ｊａｎ−Ｆｅｂ  ２００２；９（１）：５−１４。
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３０．Ｂｅｒｇｍａｎｎ  ＳＲ，Ｆｏｘ  ＫＡ，Ｒａｎｄ  ＡＬ，ＭｃＥｌｖａｎｙ  ＫＤ，Ｗｅｌｃｈ  ＭＪ，Ｍａｒｋｈａｍ  Ｊ，Ｓｏｂｅｌ  ＢＥ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｇｉｏｎａｌ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｗｉｔｈ  Ｈ２１５Ｏ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．Ｏｃｔ  １９８４；７０（４）：７２４−７３３。
３１．Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  ＬＲ，Ｅｙｓｔｅｒ  Ｄ，Ｄａｖｉｌａ−Ｒｏｍａｎ  ＶＧ，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ  ＡＬ，Ｓｃｈｅｃｈｔｍａｎ  ＫＢ，Ｈｅｒｒｅｒｏ  Ｐ，Ｇｒｏｐｌｅｒ  ＲＪ．Ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ  ｏｒａｌ  ｅｓｔｒｏｇｅｎ  ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ａｕｇｍｅｎｔ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  ｗｏｍｅｎ．Ａｍ  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．Ｏｃｔ  ２００１；１４２（４）：６４１−６４７。
３２．Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎ  Ｍ，Ｈｅｒｒｅｒｏ  Ｐ，ＭｃＧｉｌｌ  ＪＢ，Ｂｅｎｎｉｋ  Ｊ，Ｈｅｅｒｅ  Ｂ，Ｌｅｓｎｉａｋ  Ｄ，Ｄａｖｉｌａ−Ｒｏｍａｎ  ＶＧ，Ｇｒｏｐｌｅｒ  ＲＪ．Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｐｌａｓｍａ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ａｎｄ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｏｎ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｕｓ．Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．Ｊｕｌ  ５  ２００５；４６（１）：４２−４８。
３３．Ｇｕｉｄｕｃｃｉ  Ｌ，Ｊａｒｖｉｓａｌｏ  Ｍ，Ｋｉｓｓ  Ｊ，Ｎａｇｒｅｎ  Ｋ，Ｖｉｌｊａｎｅｎ  Ａ，Ｎａｕｍ  ＡＧ，Ｇａｓｔａｌｄｅｌｌｉ  Ａ，Ｓａｖｕｎｅｎ  Ｔ，Ｋｎｕｕｔｉ  Ｊ，Ｓａｌｖａｄｏｒｉ  ＰＡ，Ｆｅｒｒａｎｎｉｎｉ  Ｅ，Ｎｕｕｔｉｌａ  Ｐ，Ｉｏｚｚｏ  Ｐ．［１１Ｃ］ｐａｌｍｉｔａｔｅ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｃｒｏｓｓ  ｔｈｅ  ｓｐｌａｎｃｈｎｉｃ  ｂｅｄ  ｉｎ  ａｒｔｅｒｉａｌ，ｐｏｒｔａｌ  ａｎｄ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｖｅｎｏｕｓ  ｐｌａｓｍａ  ｄｕｒｉｎｇ  ｆａｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｅｕｇｌｙｃｅｍｉｃ  ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉａ．Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ．Ｍａｙ  ２００６；３３（４）：５２１−５２８。
３４．Ｍｏｒｅｄａ  Ｗ，Ｐｅｒｅｚ−Ｃａｍｉｎｏ  ＭＣ．Ｃｅｒｔ  Ａ．Ｇｒａｓａｓ  ｙ  Ａｃｅｉｔｅｓ．２００３；５４：１７５−１７９。
３５．Ｃｏｇｇａｎ  ＡＲ，Ｋｉｓｒｉｅｖａ−Ｗａｒｅ  Ｚ，Ｄｅｎｃｅ  ＣＳ，Ｅｉｓｅｎｂｅｉｓ  Ｐ，Ｇｒｏｐｌｅｒ  ＲＪ，Ｈｅｒｒｅｒｏ  Ｐ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｕｓｉｎｇ［１−１１Ｃ］ｐａｌｍｉｔａｔｅ  ａｎｄ  ＰＥＴ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｗｉｔｈ  ｄｉｒｅｃｔ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ。審査中。
３６．Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ  ＢＷ，Ｍｉｔｔｅｎｄｏｒｆｅｒ  Ｂ，Ｅｌｉａｓ  Ｎ，Ｓａｔｙａｎａｒａｙａｎａ  Ｒ，Ｋｌｅｉｎ  Ｓ．Ｕｓｅ  ｏｆ  ｓｔａｂｌｅ  ｉｓｏｔｏｐｉｃａｌｌｙ  ｌａｂｅｌｅｄ  ｔｒａｃｅｒｓ  ｔｏ  ｍｅａｓｕｒｅ  ｖｅｒｙ  ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ−ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ．Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．Ｆｅｂ  ２００２；４３（２）：２２３−２３３。
３７．Ｄｏｕｇｌａｓ  ＡＲ，Ｊｏｎｅｓ  ＮＬ，Ｒｅｅｄ  ＪＷ．Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｗｈｏｌｅ  ｂｌｏｏｄ  ＣＯ２  ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｊｕｌ  １９８８；６５（１）：４７３−４７７。
【０１４４】
全ての引用される参考文献は、参照により本明細書に組み込まれ、各々が本明細書で完全に説明されるかのようにその全体において組み込まれる。本明細書における参考文献の引用を、かかる参考文献の引用が本発明の特許性に関連する先行技術であるということの承認として解釈されるべきではない。
【図１】
2012526129.tif 000182
【図２】
2012526129.tif 000183
【図３】
2012526129.tif 000184
【図４】
2012526129.tif 000185
【図５】
2012526129.tif 000186
【図６】
2012526129.tif 000187
【図７】
2012526129.tif 000188
【図８】
2012526129.tif 000189
【図９】
2012526129.tif 000190
【手続補正書】
【提出日】平成24年8月16日(2012.8.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造
【化１】
2012526129.tif 000191
の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２】
前記脂肪酸アナログが、
【化２】
2012526129.tif 000192
である、請求項１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項３】
Ｘがフッ素である、請求項１または請求項２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項４】
少なくとも１つの原子が放射性同位体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項５】
少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性同位体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項６】
Ｘが１８Ｆである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項７】
ｍ＝２である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項８】
ｎ＝１４である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項９】
ｎ＝１４であり、ｍ＝２であり、Ｘが１８Ｆである、請求項１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１０】
【化３】
2012526129.tif 000193
から成る群から選択される構造の脂肪酸アナログまたはその塩であって、式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数であり、Ｘがハロゲンである、脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１１】
構造
【化４】
2012526129.tif 000194
である、請求項１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１２】
構造
【化５】
2012526129.tif 000195
である、請求項１０に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１３】
Ｘがフッ素原子である、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１４】
少なくとも１つの原子が放射性同位体である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１５】
少なくとも１つの原子がポジトロン放出放射性核種である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１６】
Ｘが１８Ｆである、請求項１０〜１５のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１７】
ｍ＝２である、請求項１０〜１６のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１８】
ｎ＝１４である、請求項１０〜１７のいずれか１項に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項１９】
構造
【化６】
2012526129.tif 000196
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、請求項１１に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２０】
構造
【化７】
2012526129.tif 000197
であり、式中、ｎ＝１４であり、ｍ＝２である、請求項１２に記載の脂肪酸アナログまたはその塩。
【請求項２１】
構造
【化８】
2012526129.tif 000198
の１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩であって、式中、Ｒは、
【化９】
2012526129.tif 000199
から成る群から選択され、式中、ｎが１０〜２４の整数である、１８Ｆ−脂肪酸アナログ−超低密度リポタンパク質トリグリセリド（１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬ）またはその塩。
【請求項２２】
ｎ＝１４である、請求項２１に記載の１８Ｆ−ＦＡＡ−ＶＬＤＬまたはその塩。
【請求項２３】
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタン、ＴＨＦ、およびヘキサンと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【請求項２４】
ｎ＝１４である、請求項２３に記載のＢｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を合成する方法。
【請求項２５】
【化１０】
2012526129.tif 000200
を合成する方法であって、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項２６】
ｎ＝１４である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
【化１１】
2012526129.tif 000201
を合成する方法であって、
【化１２】
2012526129.tif 000202
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項２８】
ｎ＝１４である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
【化１３】
2012526129.tif 000203
を合成する方法であって、
【化１４】
2012526129.tif 000204
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３０】
ｎ＝１４である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
【化１５】
2012526129.tif 000205
を合成する方法であって、
【化１６】
2012526129.tif 000206
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３２】
ｎ＝１４である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化１７】
2012526129.tif 000207
を得ること、
ｃ）前記
【化１８】
2012526129.tif 000208
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化１９】
2012526129.tif 000209
を得ること、ならびに
ｄ）前記
【化２０】
2012526129.tif 000210
を、エタン−１−２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホナート）、Ｋ２ＣＯ３、およびＣＨ３ＣＮと接触させて、
【化２１】
2012526129.tif 000211
を得ること
をさらに含む、請求項３１または請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
【化２２】
2012526129.tif 000212
を合成する方法であって、
【化２３】
2012526129.tif 000213
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数であり、ｍが１〜１０の整数である、方法。
【請求項３５】
ｎ＝１４である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ａ）Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
ｂ）前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［Ｈｐ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２４】
2012526129.tif 000214
を得ること、ならびに
ｃ）前記
【化２５】
2012526129.tif 000215
を、Ｐｄ／ｃおよびＥｔＯＡｃと接触させて、
【化２６】
2012526129.tif 000216
を得ること
をさらに含む、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
【化２７】
2012526129.tif 000217
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化２８】
2012526129.tif 000218
を得ること、ならびに
前記
【化２９】
2012526129.tif 000219
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化３０】
2012526129.tif 000220
を得ること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項３８】
ｎ＝１４である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
【化３１】
2012526129.tif 000221
を合成する方法であって、
【化３２】
2012526129.tif 000222
を、［１８Ｆ］ＫＦ／Ｋ２．２．２／Ｋ２ＣＯ３／ＣＨ３ＣＮ、次いで、ＮａＯＨと接触させることを含み、
式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４０】
ｎ＝１４である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
Ｂｒ−（ＣＨ２）１４−ＣＯＯＨ  １を、トリメチルシリルジアゾメタンおよびＴＨＦと接触させて、Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を得ること、
前記Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＣＨ３  ２を、４−ベンジルオキシフェニルボロン酸、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＨＰ（ｔ−Ｂｕ）２Ｍｅ］ＢＦ４、ＫＯｔ−Ｂｕ、およびｔ−アミルアルコールと接触させて、
【化３３】
2012526129.tif 000223
を得ること、
前記
【化３４】
2012526129.tif 000224
を、Ｐｄ／ｃ、ＥｔＯＡｃ、Ｈ２と接触させて、
【化３５】
2012526129.tif 000225
を得ること、ならびに
前記
【化３６】
2012526129.tif 000226
を、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、続いて、ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨＣｌ２、水と接触させて、
【化３７】
2012526129.tif 000227
を得ること
をさらに含む、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】
【化３８】
2012526129.tif 000228
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、
【化３９】
2012526129.tif 000229
と接触させて、
【化４０】
2012526129.tif 000230
を形成すること、および
前記
【化４１】
2012526129.tif 000231
を、
【化４２】
2012526129.tif 000232
と接触させること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４３】
ｎ＝１４である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
【化４３】
2012526129.tif 000233
を合成する方法であって、
Ｂｒ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ  １を、ＮａＮ３と接触させて、Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を形成すること、および
前記Ｎ３（ＣＨ２）ｎＣＯＯＣＨ３  ８を、
【化４４】
2012526129.tif 000234
と接触させること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４５】
ｎ＝１４である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
【化４５】
2012526129.tif 000235
を合成する方法であって、
【化４６】
2012526129.tif 000236
を、ＴＭＳ−ＣｌおよびＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化４７】
2012526129.tif 000237
を形成すること、
前記
【化４８】
2012526129.tif 000238
を、ＮａＯＨおよびエタノールと接触させて、
【化４９】
2012526129.tif 000239
を形成すること、
前記
【化５０】
2012526129.tif 000240
を、
【化５１】
2012526129.tif 000241
およびＤＣＣ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させて、
【化５２】
2012526129.tif 000242
を形成すること、ならびに
前記
【化５３】
2012526129.tif 000243
を、ＴＢＡＦ、次いで、Ｔｆ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２と接触させ、その後、標識化すること
を含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４７】
ｎ＝１４である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
【化５４】
2012526129.tif 000244
を合成する方法であって、
【化５５】
2012526129.tif 000245
を、
【化５６】
2012526129.tif 000246
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項４９】
ｎ＝１４である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
【化５７】
2012526129.tif 000247
を合成する方法であって、
【化５８】
2012526129.tif 000248
を、
【化５９】
2012526129.tif 000249
と接触させることを含み、式中、ｎが１０〜２４の整数である、方法。
【請求項５１】
ｎ＝１４である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
哺乳動物をポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供することを含む哺乳動物中の脂肪酸分布の判定方法に使用するための薬剤であって、
【化６０】
2012526129.tif 000250
（式中、ｎは１０〜２４の整数であり、ｍは１〜１０の整数である）から成る群から選択される放射性標識脂肪酸アナログまたはその塩を含む薬剤。
【請求項５３】
ｍ＝２である、請求項５２に記載の薬剤。
【請求項５４】
ｎ＝１４である、請求項５２または請求項５３に記載の薬剤。
【請求項５５】
判定方法が、画像データをデジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、請求項５２〜５４のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項５６】
判定方法が、前記脂肪酸分布をコンピュータディスプレイ上に画像で表示することをさらに含む、請求項５１〜５５のいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項５７】
哺乳動物をポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）走査に供することを含む哺乳動物中の脂肪酸トリグリセリドの分布の画像化方法に使用するための薬剤であって、
【化６１】
2012526129.tif 000251
（式中、ｎは１０〜２４の整数である）から成る群から選択される放射性標識脂肪酸トリグリセリドアナログまたはその塩を含む薬剤。
【請求項５８】
ｎ＝１４である、請求項５７に記載の薬剤。
【請求項５９】
画像化方法が、画像データをデジタルコンピュータのアルゴリズムによる分析に供することをさらに含む、請求項５７または請求項５８に記載の薬剤。
【請求項６０】
画像化方法が、脂肪酸トリグリセリド分布をコンピュータディスプレイ上に表示することをさらに含む、請求項５７〜５９のいずれか１項に記載の薬剤。
【国際調査報告】
2012526129.tif 000252
2012526129.tif 000253
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