(57)【要約】本明細書で開示されるのは、慢性腎疾患、及び／又は、代謝不均衡を治療するための組成物及び方法である。具体的には、本明細書で例示されるのは、内皮の一酸化窒素（ＮＯ）、又は、内皮の機能を改善する併用薬剤と、ＲＡＳ阻害薬との共投与を含む方法である。また、メタボリック症候群の１又は複数の診断基準のような、慢性腎疾患の１つの段階の症状、及び、代謝不均衡の症状の少なくとも１つを示す患者を治療する方法が開示される。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
代謝不均衡の少なくとも１つの症状を示す患者の慢性腎疾患を治療するのに有用な治療組成物であって、前記組成物は、ＲＡＳ阻害薬、及び、ＮＯミメティックを備えることを特徴とする慢性腎疾患を治療するのに有用な治療組成物。
【請求項２】
前記ＮＯミメティックは、ニコランジルであることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記代謝不均衡の少なくとも１つの症状は、ウエスト周囲の増加、トリグリセリド上昇、ＨＤＬコレステロールの減少、高血圧、又は、空腹時血中ブドウ糖の増加を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記代謝不均衡の少なくとも１つの症状は、高血圧、及び、空腹時血中ブドウ糖の増加であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
粉末、顆粒、タブレット、丸剤、又は、カプセルを含む固体の剤形で配合された請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
液体の懸濁剤、又は、溶液で配合された請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記慢性腎疾患は、第１段階、第２段階、又は、第３段階のＣＫＤであることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
代謝不均衡の少なくとも１つの症状を示す患者の慢性腎疾患を治療する方法であって、該方法は、治療上有効な量のＲＡＳ阻害薬、及び、併用薬剤を共投与することを備える慢性腎疾患を治療する方法。
【請求項９】
前記ＲＡＳ阻害薬は、ＡＣＥ阻害薬、又は、アンギオテンシン受容体遮断薬であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記併用薬剤は、尿酸低下薬剤であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記尿酸低下薬剤は、キサンチン酸化酵素阻害薬であることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記キサンチン酸化酵素阻害薬は、アロプリノール、又は、フェブキソスタットであることを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記併用薬剤は、ＮＯミメティックであることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＮＯミメティックは、Ｌ−アルギニン、又は、ニコランジルであることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＲＡＳ阻害薬、及び、前記併用薬剤は、経口で投与されることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＲＡＳ阻害薬、及び、前記併用薬剤は、非経口的に投与されることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＲＡＳ阻害薬、及び、前記併用薬剤は、粉末、顆粒、タブレット、丸剤、又は、カプセルを含む固体の剤形で共に投与されることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＲＡＳ阻害薬は、第１の投与方法に従って投与され、かつ、前記併用薬剤は、前記第１の方法と異なる第２の投与方法に従って投与されることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１９】
前記代謝不均衡の少なくとも１つの症状は、ウエスト周囲の増加、トリグリセリド上昇、ＨＤＬコレステロールの減少、高血圧、又は、空腹時血中ブドウ糖の増加を含むことを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項２０】
前記代謝不均衡の少なくとも１つの症状は、空腹時血中ブドウ糖の増加であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項２１】
前記慢性腎疾患は、第１段階、第２段階、第３段階、第４段階、第５段階、又は、第６段階のＣＫＤであることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項２２】
前記慢性腎疾患は、第１段階、第２段階、第３段階、又は、第４段階のＣＫＤであることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項２３】
代謝不均衡の少なくとも１つの症状を示す患者の慢性腎疾患を治療する方法であって、前記方法は、治療上有効な量のニコランジルを投与することを備えることを特徴とする慢性腎疾患を治療する方法。
【請求項２４】
ＡＣＥ阻害薬、及び／又は、アンギオテンシン受容体遮断薬とニコランジルを共投与することをさらに備えることを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
治療上有効な量のＲＡＳ阻害薬、及び、尿酸低下薬剤又は酸化防止剤、あるいは、尿酸低下薬剤及び酸化防止剤の組合わせを含む糖尿病性腎症を治療するのに有用な組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２００８年１０月１９日出願の米国仮特許出願第６１／１０６，６０２号に対する優先権を主張するものであり、これは、全体として本明細書に盛り込まれる。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、現在、米国人口の８％に影響を与え、その有病率は増加している。糖尿病の最も重篤な合併症のうちの１つは腎症の進行である。これは、透析又は移植を必要とする末期腎疾患に進行する場合がある。現在、糖尿病性腎症のための治療法として、アンギオテンシン変換酵素阻害薬（ＡＣＥＩ）、及び、アンギオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）が好まれる。利点は、血圧降下作用と一部分独立していると考えられる（非特許文献１〜４）。しかしながら、最近の研究は、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢが網膜症を妨げる利点を有するにもかかわらず、１型糖尿病性腎症の進行を遅らせるには有効ではないことを示唆している（非特許文献５）。また、他のグループは、ＡＣＥ阻害薬が、顕性腎症を有する２型糖尿病で本来想定されるほど有効ではないことを報告している（非特許文献６〜８）。これらの所見は、糖尿病のラットでの腎症予防におけるＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの周知の予防効果とは対照的である（非特許文献９，１０）。
【０００３】
糖尿病性腎症におけるＡＣＥ阻害薬の効果の欠如を説明する機序は知られていない。しかしながら、ＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢを投与されている糖尿病性腎症の患者の何人かは、アルドステロンレベルにおいて逆説上昇に発展する（「アルドステロンブレイクスルー」と呼ばれる）（非特許文献１１，１２，１３）。ＡＣＥ阻害薬の使用の際、アルドステロン阻害薬の添加が提案されているが（非特許文献１４）、これらの治療は、しばしばカリウム過剰血症によって制限されている。これは、両者の治療が組み合わせられる場合に一般的である。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、内皮の一酸化窒素の不足が、糖尿病腎症におけるＡＣＥ阻害薬及び／又はＡＲＢの不応答を引き起こす基礎的要素であるという本発明者ら発見に基づく。本発明は、糖尿病性腎症の予防及び治療におけるＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの有効性を高めるための新しい方法を提供する。具体的には、これは、糖尿病の状態においてＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの不応答についての機序を明らかにしている一連の発見に基づく。
【０００５】
任意の新しい治療薬の開発は、大抵の場合、最初は、標的となる疾患の動物モデルにおけるこれらの薬剤の有効性に基づく。この点では、糖尿病性腎症の多数のモデルが、ラット及びマウスにおいて報告されている。しかしながら、最近まで、これらのモデルでヒト糖尿病性腎症に似たものはなかった。１型糖尿病のモデル（ストレプトゾトシンに誘導された糖尿病のラット等）、及び、２型糖尿病のモデル（ｄｂ  ｄｂマウス）が周知であるが、これらのモデルは、単なる軽症のタンパク尿、並びに、糸球体間質の膨張及び基底膜肥厚のような糖尿病性腎症の初期の変化に関連付けられる。重要なことに、これらのモデルは、ヒト糖尿病性腎症で観察される臨床症状（ネフローゼ蛋白尿、糸球体濾過率（ＧＦＲ）の進行性減少）、あるいは、顕微鏡的病変（メサンギウム融解、メサンギウムの結節、血管病変、又は、尿細管間質疾患）を進行しない。ヒト糖尿病性腎症の良好なモデルの不足は、この疾患の病因についての我々の理解を妨げ、また、新しい治療を試験することを困難にしている。実際、糖尿病性腎症の良好なモデルの不足の懸念により、ＮＩＨが、このような動物モデルを開発する具体的な目標を有するコンソーシアムを作る結果となった（非特許文献１５）。
【０００６】
本発明者ら（非特許文献１６〜１９（さらに２０を参照））は、内皮の一酸化窒素合成酵素が欠損して、従って内皮の一酸化窒素を生成することができないマウスを用いることにより、ヒト糖尿病性腎症に非常によく似た動物モデルを最近開発した。糖尿病がストレプトゾトシンを有するこれらのマウスにおいて誘導される場合、これらは、臨床症状（ネフローゼ蛋白尿、進行性腎不全、及び、早期死亡）、組織の症状（メサンギウムの膨張、結節、及び、メサンギウム融解、足細胞異常、血管病変、尿細管間質疾患を含む）、及び、分子の変化（ＴＧＦ−β及びＶＥＧＦ発現における増加）を含む、ヒト糖尿病性腎症の面をすべて進行させることを示している。本発明者らの知っている限りでは、これはまた、網膜症及び腎症の両方を自発的に発病させる最初の糖尿病のモデルである。重要なことに、これらのマウスにおける腎疾患は、ヒトにおいて報告されたのと同様に、インシュリン（非特許文献２１）、及び、有効な血圧低下（非特許文献１８）を妨げることができる。
【０００７】
他のモデルにおいて示されているように、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢが、糖尿病性腎症のこのモデルで有効だろうと初めは期待された（非特許文献９）。実際、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢは、ストレプトゾトシンを注射された野生型マウスにおける糖尿病性腎症の進行をブロックできることが再び裏付けられた。しかしながら、本発明者らが驚いたことに、この同じ治療は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスにおいては有効ではなかった。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、ＡＣＥ阻害薬が、野生型糖尿病（ＤＭ）マウスにおける血圧低下に有効であることを示すグラフを表す。図１において示されるのは、治療なし（ＴＸなし）、ＡＣＥ阻害薬であるエナラプリル（ＤＭエナラプリル）、及び、ＡＲＢであるテルミサルタン（ＤＭテルミサルタン）の効果である。ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの両方は、野生型糖尿病マウスにおいて血圧（ＢＰ）を大幅に低下させることができる。
【０００９】
【図２】ＡＣＥ阻害薬（エナラプリル）、及び、ＡＲＢ（テルミサルタン）は、また、野生型糖尿病（ＤＭ）マウスにおける、メサンギウムの膨張（Ａ）、及び、糸球体のＩＶ型コラーゲン沈着（Ｂ）を改善する。これらは糖尿病性腎症の初期の変化と考えられる。
【００１０】
【図３】図３は、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢが、内皮のＮＯ欠損糖尿病マウスの血圧低下にそれほど有効でないことを示すグラフを表す。３（Ａ）は、ＮｏｎＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウスでのＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの血圧への効果を示す。また、３（Ｂ）は、ＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウスでのＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの血圧への効果を示す。
【００１１】
【図４】ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢは、ｅＮＯＳＫＯマウスにおける糖尿病性腎症を妨げるのには有効ではない。ＤＭは、ＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウスにおけるメサンギウムの膨張を引き起こした（Ｂ）。これは、エナラプリル（Ｃ）、又は、テルミサルタン（Ｄ）によって妨げられなかった。ＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウスは、また、糸球体毛細血管微小動脈瘤（Ｅ）を有し、かつ、細胞外マトリックスの沈着の増加（Ｆ）を有するメサンギウム融解を示した。エナラプリル（Ｇ）、及び、テルミサルタン（Ｈ）のいずれの治療も、これらの進行した病変を妨げなかった。バー：２０μｍ。メサンギウムの膨張の定量分析（Ｍ）は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスではなく野生型糖尿病マウスにおいて、ＡＣＥ阻害薬（黒いバー）、及び、ＡＲＢ（灰色のバー）の有益な効果を確認した。バー：２０μｍ。白いバー＝治療なし、黒いバー＝エナラプリル、灰色のバー＝テルミサルタン。データは、平均として示される。
【００１２】
【図５】は、ｅＮＯＳＫＯマウスの糖尿病性腎症での、血圧及び腎機能へのＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの効果の欠如を示す表である。ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢは、野生型糖尿病マウスにおいて血圧及びタンパク尿を低下させるのに有効で、また、糖尿病でないｅＮＯＳＫＯマウスの血圧低下に有効である。しかしながら、１０週の糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスにおいては、ＡＣＥ阻害薬は有効ではなく、また、ＡＲＡＢは、最小限に血圧を低下させるだけしか有効ではなく、タンパク尿を顕著には減少させない。
【００１３】
【図６】図６は、ＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢでの治療によって、血清アルドステロンは、糖尿病の野生型マウス（Ａ）では抑制されるが、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウス（Ｂ）では抑制されないことを示すグラフを表す。
【００１４】
【図７】図７は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスの腎臓の免疫組織グラフであり、この糸球体におけるアルドステロンの増加を示す。糖尿病は、ｅＮＯＳＫＯマウスにおいてストレプトゾトシンを用いて誘導された。これは、エナラプリル（１０ｍｇ／ｋｇ  ＢＷ／日、黒いバー）、又は、テルミサルタン（２ｍｇ／ｋｇ  ＢＷ／日、灰色のバー）を用いて、４週間（６週〜１０週）治療された。
【００１５】
【図８】図８は、一酸化窒素ミメティック（亜硝酸塩）の供給により、ｅＮＯＳＫＯマウスの血圧異常を調整することができることを示すグラフである。
【００１６】
【図９】図９は、尿酸がヒト大動脈の内皮細胞において酸化ストレスを引き起こすことを示す免疫組織グラフ、及び、グラフである。緑色の蛍光は、酸化ストレスのためのマーカーの指標であり、過酸化物反応性プローブである、２’７’−ジクロロフルオレセイン二酢酸塩（ＤＣＦ−ＤＡ）染料を用いている（図９のＡ）。右側が、酸化ストレスの定量化である。オープンバーが対照、黒いバーが尿酸（１２ｍｇ／ｄｌ）、及び、右側のバーがアポシニン（ＮＡＤＰＨオキシダーゼに誘導されたオキシダントの阻害薬）を加えた尿酸である（図９のＢ）。
【００１７】
【図１０】図１０は、尿酸が内皮のＮＯレベルの低下を引き起こすことを示すグラフを表す。内皮のＮＯ（ブタの大動脈の内皮細胞においてＤＡＦの蛍光によって測定）への尿酸の様々な投与量の効果を示す。コースラ（Ｋｈｏｓｌａら）より（非特許文献３０）。
【００１８】
【図１１】図１１は、尿酸が、ヒト大動脈の内皮細胞において、ＡＴＰレベルを下げることを示す棒グラフである。尿酸（３．５ｍｇ／ｄｌ、７ｍｇ／ｄｌ、及び、１２ｍｇ／ｄｌ）は、培地に４８時間含まれていた。細胞の生存率（トリパンブルー排除）において変化は認められなかった。
【００１９】
【図１２】図１２は、尿酸が、ヒト大動脈の内皮細胞において、ミトコンドリア数を減少させることを示す画像及びグラフである。ミトコンドリア数は、対照細胞（図１２のＡ）及びＵＡで処理された細胞（図１２のＢ）において、Ｍｉｔｏｔｒａｃｋｅｒオレンジを用いて測定した。図１２のＣで示されるのは、尿酸１２ｍｇ／ｄｌの場合の、４８時間でのミトコンドリア密度への定量化された効果である。細胞の生存率への効果はないことが認められた。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明者らによって行なわれた最近の研究は、内皮細胞機能不全、及び、内皮のＮＯを改善する薬剤が、特に糖尿病性腎症において、代謝不均衡のための治療上、有益であることを明らかにする。これらの薬剤は、ミトコンドリアの機能の改善によって一部作用する。本発明に従って使用のために検討された薬剤は、尿酸を低下させる薬剤（ＵＡＬＡ）（例えば、キサンチン酸化酵素阻害薬（フェブキソスタット、アロプリノール）、尿酸排泄薬（ベンズヨーダロン、ベンズブロマロン、プロベネシド）、ウリカーゼ誘導体（ラスブリカーゼ、ＰＥＧ化ウリカーゼ）、及び、ＵＲＡＴ−１の、遺伝子ベースの治療（ウリカーゼ過剰発現）又は遮断（我々が血管内皮細胞で確認した輸送体））、長期作用型硝酸塩、Ｌ−アルギニン、及び、ニコランジルのようなＮＯミメティック、並びに、アスコルビン酸塩、Ｎアセチルシステイン、エピガロカテキンガレート、及び、エピカテキンのような酸化防止剤を含むが、これらに制限されない。
【００２１】
また、ＮＯを刺激する薬剤が、糖尿病性腎症の治療の際に、ＡＣＥ阻害薬、又は、レニン−アンギオテンシン経路を標的とする他の薬剤を用いることで、直接の相乗作用を有するであろうことも主張される。この組合わせは、血圧、腎の構造、及び、腎機能へのＡＣＥ阻害薬の効果を強化するだろう。
【００２２】
別の実施形態によれば、対象発明は、代謝不均衡を治療し、並びに／又は、糖尿病性腎症を治療し、かつ／又は、妨げるための併用療法であって、治療上有効な量の「ＲＡＳ阻害薬」、すなわち、レニン−アンギオテンシン経路を標的とする薬剤（ＡＣＥ阻害薬、レニン阻害薬、又は、アンギオテンシン受容体遮断薬を含むが、これらに限定されない）を投与することを備え、かつ、治療上有効な量の「併用薬剤」（尿酸を低下させる薬剤（ＵＡＬＡ）（例えば、キサンチン酸化酵素阻害薬（フェブキソスタット、アロプリノール）、尿酸排泄薬（ベンズヨーダロン、ベンズブロマロン、プロベネシド）、ウリカーゼ誘導体（ラスブリカーゼ、ＰＥＧ化ウリカーゼ）、及び、ＵＲＡＴ−１の、遺伝子ベースの治療（ウリカーゼ過剰発現）又は遮断（我々が血管内皮細胞で確認した輸送体））、長期作用型硝酸塩、Ｌ−アルギニン、及び、ニコランジルのようなＮＯミメティック、並びに、アスコルビン酸塩、Ｎアセチルシステイン、リポ酸、ビタミンｅ、及び、エピガロカテキンガレートのような酸化防止剤を含むが、これらに制限されない）を共投与することを備える併用療法に関する。本明細書で記述したＲＡＳ阻害薬又は併用薬剤に関して、このような薬剤の薬学的に許容される塩が用いられてもよいことが注記されるべきである。請求項におけるＲＡＳ阻害薬又は併用薬剤へのいかなる言及も、このような薬剤の対応する薬学的に許容される塩を、任意にあるいは追加で、含むよう解釈される。
【００２３】
個別の実施形態では、併用療法は、主要な活性成分として、ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤、あるいは、これらの薬学的に許容される塩を含む組成物を投与することにより、糖尿病性腎症を治療する、又は、妨げることを備える。より具体的な実施形態では、糖尿病性腎症を治療する、又は、妨げる方法は、ＡＣＥ阻害薬及びＮＯミメティックを投与することを備える。さらにより具体的な実施形態では、ＮＯミメティックはニコランジルである。
【００２４】
必要としている患者は、国立腎臓財団（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）によって定義されるような慢性腎疾患（ＣＫＤ）の古典的段階のうちの１つの症状を示しており、かつ／又は、代謝不均衡の症状を示している者である。より具体的な実施形態では、必要としている患者は、ＣＫＤの古典的段階の１つを経験し、かつ、メタボリック症候群の少なくとも２つの特徴を示している者である。
【００２５】
本発明の一定の態様では、代謝不均衡は、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β−細胞機能の遺伝子欠損、インシュリン作用における遺伝子欠損、外分泌膵の疾患、内分泌障害、薬物又は化学物質による誘発感染症、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病性の状態、及び、メタボリック症候群よりなる群から選ばれる。１つの態様では、代謝不均衡は、Ｉ型及び／又はＩＩ型を含む真性糖尿病である。
【００２６】
別の態様によれば、代謝不均衡はメタボリック症候群である。１つの態様では、メタボリック症候群の治療することは、１又は複数の診断基準を扱うことを備える。メタボリック症候群の症状を示す患者は、以下の診断基準の２つ以上を示す患者を含む。
−  ウエスト周囲の増加：
男性―４０インチ（１０２ｃｍ）以上
女性―３５インチ（８８ｃｍ）以上
−  トリグリセリド上昇：
１５０ｍｇ／ｄＬ以上
−  ＨＤＬ（「良好」）コレステロールの減少：
男性―４０ｍｇ／ｄＬ未満
女性―５０ｍｇ／ｄＬ未満
−  高血圧：
１３０／８５ｍｍＨｇ以上
−  空腹時血中ブドウ糖の増加：
１００ｍｇ／ｄＬ以上
【００２７】
さらに別の実施形態では、代謝不均衡は、空腹時血中ブドウ糖不良レベル（１００ｍｇ／ｄＬ以上）、又は、ブドウ糖不耐性（事前に測定したグルコースの摂取後２時間で、１４０ｍｇ／ｄＬ以上）に関係する前糖尿病性の状態である。
【００２８】
慢性腎疾患段階は下記に関する。
【００２９】
ＣＫＤの第１段階：糸球体濾過率（ＧＦＲ）が正常、又は、増加。ミクロアルブミン尿、／タンパク尿、血尿、あるいは、組織学的な変化によって反映された腎障害のある証拠。
【００３０】
ＣＫＤの第２段階：ＭＤＲＤ  ＧＦＲによって定義されるようなＧＦＲの穏やかな減少（８９〜６０ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２として定義）
【００３１】
ＣＫＤの第３段階：ＭＤＲＤ  ＧＦＲによって定義されるようなＧＦＲの中程度の減少（５９〜３０ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２）
【００３２】
ＣＫＤの第４段階：ＧＦＲ（２９〜１５ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２）の重篤な減少。
【００３３】
先の記述は、臨床医に容易に認識可能で、かつ、国立腎臓財団で詳述された、慢性腎疾患の臨床的に有用な段階を表わす：Ｋ／ＤＯＱＩ（ｋｉｄｎｅｙ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｑｕａｌｉｔｙ  ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ）  Ａｍ  Ｊ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ  ２００２；３９（Ｓｕｐｐｌ）１）：Ｓ１−Ｓ２６６。
【００３４】
別の実施形態において、慢性腎疾患の症状、及び、メタボリック症候群の診断基準の１つを示す患者を治療する。
【００３５】
ＡＣＥ阻害薬は、糖尿病腎症の最良の治療としてもてはやされている――しかしながら、最近の研究は、これらが糖尿病腎症では特異的に悪いかもしれないことを示唆する。本発明者らは、この理由、及び、この解決策を恐らく発見した。言いかえれば、内皮細胞機能不全を改善できれば、その際は、ＡＣＥ阻害薬がよりよく作用するだろう。
【００３６】
さらなる実施形態では、治療組成物の実施形態は、通常の手法に従って配合することができる。このような配合物は、活性成分であるＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を、賦形剤、希釈剤、及び、担体のような非活性な添加物とコポリマー混合／練合することによって通常生成することができる。本明細書では、非経口投与は、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、又は、点滴、及び、同種のものを含むことを意味する。注射用の無菌の水性懸濁液か油性懸濁液のような注射用の配合物は、当業者に公知の方法によって、適切な分散剤又は湿潤剤、及び、懸濁化剤を用いて生成することができる。このような注射用の無菌の配合物は、水溶液を含む、無毒で、非経口的に投与することができる希釈剤又は溶剤の無菌の注射液又は懸濁液でもよい。使用され得る許容できる媒体又は溶剤は、例えば、水、リンゲル液、等張生理食塩水、及び、同種のものでもよい。また、無菌の不揮発性の油は、通常、溶剤又は懸濁媒として用いられ得る。このような目的のために、天然に存在する、もしくは、合成の又は半合成のモノグリセリド、ジグリセリド、又は、トリグリセリドだけでなく、天然に存在する、もしくは、合成の又は半合成の脂肪油又は脂肪酸を含む、いかなる不揮発性の油あるいは脂肪酸も使用することができる。
【００３７】
適切な基剤（例えば、酪酸のポリマー、グリコール酸のポリマー、酪酸及びグリコール酸のコポリマー、酪酸のポリマー及びグリコール酸のポリマーの混合物、ポリグリセロール脂肪酸エステル、並びに、同種のもの）を、徐放性配合物を形成するために組み合わせてもよい。
【００３８】
別の実施形態では、経口投与のために固体の剤形は、例えば、上述のように、粉末、顆粒、タブレット、丸剤、カプセル、及び、同種のものでもよい。このような剤形の配合物は、活性化合物であるＲＡＳ阻害薬又は併用薬剤を、スクロース、乳糖（ラクトース）、セルロース酸サッカリド、マンニトール（Ｄ−マンニトール）、マルチトール、デキストラン、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン）、微結晶セルロース、寒天、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ペクチン、トラガカントゴム、アラビアゴム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成又は半合成高分子、あるいは、グリセリドのような非活性な添加物の少なくとも１つと混合及び／又は練合ことにより、生成することができる。このような剤形は、不活性の賦形剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、パラベン及びソルビン酸のような保存剤、アスコルビン酸、α−トコフェロール、及び、システインのような酸化防止剤、崩壊剤（例えば、クロスカルメロースナトリウム）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース）、増粘剤、緩衝剤、甘味料、矯味矯臭剤、香料、及び、同種のものを通常含む添加物を、さらに含有する。タブレット及び丸剤は、さらに腸コーティングされてもよい。経口の液体配合物は、例えば、薬学的に許容できる乳濁液、シロップ、エリキシル、懸濁液、溶液、及び、同種のものでもよい。これらは、水のような薬学的に通例の不活性の希釈剤、及び、所望の場合は添加物を含んでもよい。このような経口の液体配合物は、通例の方法に従い、必要ならば、活性成分、不活性の希釈剤、及び、他の添加物を混合することにより生成することができる。経口の配合物は、その量は剤形に応じて変化してもよいが、本発明の活性化合物の、約０．０１〜９９重量％、好ましくは、約０．１〜９０重量％、通常は、約０．５〜５０重量％を通常含む。
【００３９】
他の実施例では、直腸投与のための坐薬は、活性成分を、カカオ脂とポリエチレングリコールのように、周囲温度で固体であるが、胃管での温度で液体になり、直腸において溶けることで、活性成分を放出する適切な非刺激性賦形剤と混合することにより生成することができる。
【００４０】
ある患者における投与量は、年齢、体重、一般状態、性別、食事、投与時間、投与方法、排出率、薬の組合わせ、現在治療したその疾患の程度、及び、他の因子を考慮して決定される。
【００４１】
本発明の糖尿病性腎症の治療組成物は、低毒性であり、安全に用いることができる。また、その日用量は、患者の状態及び体重、化合物のタイプ、並びに、投与ルートに応じて変化する。そして、例えば、糖尿病性腎症に対して予防的に、かつ、治療上として用いられる際、これは、成人（６０ｋｇ）で、経口の配合物の場合、活性成分［ｌ］として約１〜５００ｍｇ、典型的には、約１０〜２００ｍｇでよく、非経口の配合物の場合、活性成分［ｌ］として約０．１〜１００ｍｇ、典型的には、約１〜５０ｍｇ、通常は、約１〜２０ｍｇでよい。これらの範囲内の投与量では毒性を示さなかった。
【００４２】
治療組成物で用いる適切なキサンチン酸化酵素阻害薬の例は、アロプリノール、ヒドロキシアカロン、ＴＥｌ−６７２０、カルプロフェン、フェブキソスタット、及び、ｙ−７００を含むが、これらに制限されない。米国特許第５，６１４，５２０号、及び、米国特許公報第２００５／００９０４７２号は、他の例の非限定的なリストのために引用される。代表的なＲＡＳ阻害薬は、以下のものを含む：カプトプリル、シラザプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、キナプリル、ラミプリル、ゾフェノプリル、カンデサルタンシレキセチル、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、タソサルタン、テルミサルタン、及び、バルサルタン、あるいは、その薬学的に許容される塩。
【００４３】
別の実施形態において、対象発明は、治療上有効な量のＲＡＳ阻害薬、又は、この薬学的に許容される塩の投与すること、かつ、治療上有効な量の併用薬剤、又は、この薬学的に許容される塩を共投与すること、を備える、糖尿病又はインシュリン無反応の対象においてＣＫＤの段階の１つを治療する方法であって、前記治療上有効な量の前記併用薬剤、又は、この薬学的に許容される塩は、内皮細胞機能不全、及び／又は、内皮のＮＯレベルを改善するのに十分な量を備えることを特徴とする、ＣＫＤの段階の１つを治療する方法に関する。
【００４４】
「共投与すること」あるいは「同時投与」という用語は、例えば、ＲＡＳ阻害薬の投与と共に併用薬剤を投与することに関して用いられた場合、両方が同時に生理的効果を達成することができるように、ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を投与することを指す。しかしながら、２つの薬剤は一緒に投与される必要はない。ある実施形態では、１つの薬剤の投与は、他方の投与に先行することができる。しかしながら、このような共投与することは、通常は、両方の薬剤が、任意の投与量に対するこれらの最大血清中濃度のかなりの割合（例えば、２０％以上、好ましくは、３０％又は４０％以上、より好ましくは、５０％又は６０％以上、最も好ましくは、７０％又は８０％又は９０％以上）で体内に（例えば、血漿中に）同時に存在する結果となる。
【００４５】
本発明の化合物及び併用薬物を投与の際に組み合わせる場合、本発明の併用配合物の投与方法は、特に制限されない。このような投与方法は、例えば、（１）ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を同時に配合することにより得られる単一の配合物の投与、（２）ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を別々に配合することにより得られる２つの配合物の同一のルートを経由しての同時投与、（３）ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を別々に配合すること得られる２つの配合物の同一のルートを経由しての連続投与、及び、間欠投与（４）ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を別々に配合することにより得られる２つの配合物の異なるルートを経由しての同時投与、（５）ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤を別々に（例えば、ＲＡＳ阻害薬又はこの薬剤組成物、その後、併用薬剤又はこの薬剤組成物、あるいは、逆の順序）を配合することにより得られる２つの配合物の異なるルートを経由しての連続投与及び間欠投与、並びに、同種のものである。
【００４６】
本発明の糖尿病性腎症の治療組成物は低毒性であり、それ故、ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤は、それ自体が知られている方法に従って、薬理学的に許容できる担体と混合され、薬剤組成物（例えば、タブレット（糖質コーティング錠、及び、フィルムコーティング錠を含む）、粉末、顆粒、カプセル（軟カプセル剤を含む）、溶液、注射配合物、坐薬、徐放性配合物、及び、同種のもの）を形成する。これらは、経口的に又は非経口的に（例えば、局所的に、直腸に、静脈内に）安全に投与することができる。注射配合物は、静脈内に、筋肉内に、皮下に、器官へ、あるいは、直接的に病変部位へ投与されてもよい。
【００４７】
本発明の併用配合物を生成するのに使用されてもよい、薬理学的に許容できる担体は、例えば、固形配合物では、添加剤、潤滑剤、結合剤、及び、崩壊剤、液体配合物では、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張性付与剤、緩衝剤、及び、鎮痛剤、のような製薬材料として慣習的に使用された様々な有機担体材料、及び、無機担体材料でもよい。さらに、通常の保存剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、吸着剤、湿潤剤のような他の添加物も、適切な量で添加されてもよい。
【００４８】
賦形剤は、例えば、ラクトース、糖質、Ｄ−マンニトール、デンプン、トウモロコシデンプン、結晶セルロース、光ケイ酸塩無水物、及び、同種のものでもよい。潤滑剤は、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイダルシリカ、及び、同種のものでもよい。
【００４９】
結合剤は、例えば、結晶セルロース、糖質、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デンプン、スクロース、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、及び、同種のものでもよい。
【００５０】
崩壊剤は、例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム、Ｌ−ヒドロキシプロピルセルロース、及び、同種のものでもよい。
【００５１】
溶剤は、例えば、注射用蒸留水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油、及び、同種のものでもよい。
【００５２】
溶解補助剤は、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、及び、同種のものでもよい。
【００５３】
懸濁化剤は、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、グリセリンモノステアリン酸塩、及び、同種のもののような界面活性剤、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及び、同種のもののような親水性ポリマーでもよい。
【００５４】
等張性付与剤は、例えば、グルコース、Ｄ−ソルビトール、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール、及び、同種のものでもよい。
【００５５】
緩衝剤は、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、及び、同種のものの緩衝液でもよい。
【００５６】
鎮痛剤は、例えば、ベンジルアルコールでもよい。
【００５７】
防腐剤は、例えば、ｐ−オキシ安息香酸塩、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸、及び、同種のものでもよい。
【００５８】
酸化防止剤は、亜硫酸塩、アスコルビン酸、リポ酸、α−トコフェロール、ＥＧＣＧ、及び、同種のものでもよい。
【００５９】
本発明の併用配合物中のＲＡＳ阻害薬と併用薬剤との割合は、標的及びルートに基づいて適切に選択され得る。例えば、ＡＣＥ阻害薬の量は、剤形に応じて変化してもよいが、全配合物に基づいて、通常は、約０．０１〜１００重量％、典型的には、約０．１〜５０重量％、より具体的には、約０．５〜２０の重量％である。ニコランジルの量は、剤形に応じて変化してもよいが、全配合物に基づいて、通常は、約０．０１〜１００の重量％、典型的には、約０．１〜５０重量％、より具体的には、約０．５〜２０重量％である。
【００６０】
本発明の併用配合物中に含まれる担体のような添加物の量は、剤形に応じて変化してもよいが、全配合物に基づいて、通常は、約１〜９９．９９重量％、好ましくは、約１０〜９０重量％である。
【００６１】
また、本発明の化合物、及び、併用薬物が別々に配合される場合、同様の量を使用してもよい。
【００６２】
このような配合物は、製薬のプロセスで通常使用されるような、それ自体が知られている方法によって生成することができる。
【００６３】
例えば、本発明の化合物、及び、併用薬物は、分散剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０（ＡＴＬＡＳ  ＰＯＷＤＥＲ，ＵＳＡ）、ＨＣＯ６０（ＮＩＫＫＯ  ＣＨＥＭＩＣＡＬＳ）、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、デキストリン）、安定剤（例えば、アスコルビン酸、ピロ亜硫酸ナトリウム）、界面活性剤（例えば、ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０，ｍａｃｒｏｇｏｌ）、可溶化剤（例えば、グリセリン、エタノール）、緩衝剤（リン酸及びこのアルカリ金属塩、クエン酸及びこのアルカリ金属塩、並びに、同種のもの）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース）、ｐＨ調製剤（例えば、塩酸、水酸化ナトリウム）、防腐剤（例えば、ｐ−オキシ安息香酸エチル、安息香酸、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール）、可溶化剤（例えば、濃グリセリン、メグルミン）、可溶化補助剤（例えば、プロピレングリコール、糖質）、鎮痛剤（例えば、グルコース、ベンジルアルコール）と共に、注射用水性配合物へと配合される、あるいは、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、及び、トウモロコシ油のような植物油中、並びに、プロピレングリコールのような可溶化補助剤中に、溶解、懸濁、もしくは、乳化して油性配合物を形成することにより、注射配合物を生成する。
【００６４】
経口剤形を得るためには、それ自体が知られている方法が使用して、本発明の化合物又は併用薬物を、例えば、賦形剤（例えば、ラクトース、糖質、デンプン）、崩壊剤（例えば、デンプン、炭酸カルシウム）、結合剤（例えば、デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース）、又は、流動促進剤（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００）と共に、所望の形状へ成形する。その後、必要であれば、矯味、腸の性質、又は、徐放性機能の目的で、それ自体が知られている方法でコーティングして、これにより経口剤形を得る。このようなコーティングは、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシメチルセルロース、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（Ｒｏｈｍ，ドイツ，メタクリル酸／アクリル酸コポリマー）、及び、着色剤（例えば酸化鉄レッド、二酸化チタン）でもよい。経口剤形は、瞬時解除性配合物、又は、徐放性配合物でもよい。
【００６５】
本発明の併用配合物の投与量は、投与方法及び持続期間と同様に、本発明の化合物のタイプ、対象の年齢、体重、状態、及び、剤形に応じて変化してもよいが、例えば、糖尿病及び／又はインシュリン抵抗性の症状、並びに／又は、ｃｋｄ（成人、体重：約６０ｋｇ）の段階の１つを経験している患者における日用量は、本発明の化合物として約０．０１〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、具体的には、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇ、特に、約１．５〜約３０ｍｇ／ｋｇである。これは、一度に、もしくは、複数回量で静脈内に投与される。投与量が上述したような様々な因子に応じて変化し得るのは当然のことである。また、より少ない量で十分な場合もあり、また、過度の量が必要であるべき場合もある。
【００６６】
併用薬物（例えば、ニコランジル）は、問題となる副作用を引き起こさない範囲内であれば任意の量で使用してもよい。併用薬物の日用量は、特に制限されず、投与の時間及び間隔、この薬剤配合物の特徴、調合、タイプ、及び、活性成分と同様に、疾患の重症度、対象の年齢、性別、体重、及び、感受性に応じて変化してもよい。また、哺乳動物における単位ｋｇ体重当たりの経口の日用量は、薬剤として、約０．００１〜２０００ｍｇ、好ましくは、約０．０１〜５００ｍｇ、より好ましくは、約０．１〜約１００ｍｇである。これは、通常、１〜４回量で投与される。
【００６７】
本発明の併用配合物を投与する場合、同時に投与してもよいが、併用薬物を最初に投与し、その後、本発明の化合物を投与することも可能である。あるいは、本発明の化合物を最初に投与し、その後、併用薬物を投与することも可能である。このような間欠投与を使用する場合、時間間隔は、投与された活性成分、剤形、及び、投与方法に応じて、変化してもよい。また、例えば、併用薬物を最初に投与する場合、本発明の化合物は、併用薬物の投与の後、１分〜３日以内、好ましくは、１０分〜１日以内、より好ましくは、１５分〜１時間以内に投与されてもよい。例えば、本発明の化合物を最初に投与する場合、その場合は、併用薬物は、本発明の化合物の投与の後、１分〜１日以内、好ましくは、１０分〜６時間以内、より好ましくは、１５分〜１時間以内に投与されてもよい。
【００６８】
好ましい投与方法において、例えば、経口の配合物として配合された約０．００１〜２００ｍｇ／ｋｇの併用薬物を日用量として経口的に与え、約１５分の後に、経口の配合物として配合された約０．００５〜１００ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物を日用量として経口的に与える。
【００６９】
さらなる薬理学的に活性な薬剤が、主要な活性薬剤である、ＲＡＳ阻害薬及び併用薬剤と共に供給されてもよい。１つの実施形態では、このような薬剤は、ベータ遮断薬、スタチン、及び、アスピリンを含むが、これらに制限されない。適切なスタチンは当業者に周知である。このようなスタチンは、アトルバスタチン（商標名リピトール，Ｐｆｉｚｅｒ）、シンバスタチン（商標名ゾコール，Ｍｅｒｃｋ）、プラバスタチン（商標名プラバコール，  Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、フルバスタチン（商標名レスコール，Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ロバスタチン（商標名メバコール，Ｍｅｒｃｋ）、ロスバスタチン（商標名クレストール，Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、及び、ピタバスタチン（三共）、並びに、同種のものを含むが、これらに制限されない。適切なベータ遮断薬は、心選択性（選択的ベータ１遮断薬）、例えば、アセブトロール、アテノロル、ベタキソロール、ビソプロロール、メトプロロール、及び、同種のものを含むが、これらに制限されない。適切な非選択的遮断薬（ベータ１及びベータ２を一様に遮断する）は、カルテオロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、チモロール、ラベタロール、及び、同種のものを含むが、これらに制限されない。
【００７０】
本発明は、以下の実施例にさらにサポートされるが、本発明を制限するようには意図されない。
【００７１】
混合溶剤のために示された値は、別段の定めがない限り、各々の溶剤の体積比である。％は、別段の定めがない限り、重量％である。シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにおける溶出溶媒の比は、別段の定めがない限り、体積比である。ここで使用された室温（周囲温度）は、通常、約２０〜約３０℃の温度を意味する。
【００７２】
糖尿病腎症及び／又はメタボリック症候群に関連する結果に対する併用療法の治療価値を証拠づける実施例
図１は、ＡＣＥ阻害薬が、野生型糖尿病（ＤＭ）マウスにおける血圧低下に有効であることを示すグラフである。図１において示されるのは、治療なし（ＴＸなし）、ＡＣＥ阻害薬であるエナラプリル（ＤＭエナラプリル）、及び、ＡＲＢであるテルミサルタン（ＤＭテルミサルタン）の効果である。ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの両方は、野生型糖尿病マウスにおいて血圧（ＢＰ）を大幅に低下させることができる。図２は、ＡＣＥ阻害薬（エナラプリル）、及び、ＡＲＢ（テルミサルタン）の投与が、また、野生型糖尿病（ＤＭ）マウスにおける、メサンギウムの膨張（Ａ）、及び、糸球体のＩＶ型コラーゲン沈着（Ｂ）を改善することを実証する。これらは糖尿病性腎症の初期の変化と考えられる。
【００７３】
その一方、ＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢを内皮の一酸化窒素を生成する能力を欠く糖尿病マウスに投与した場合、これらの薬剤の有効性が最小限であったということは、驚くべきで斬新な発見であった（図３〜５）。図３は、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの投与が、内皮のＮＯを欠く糖尿病マウスの血圧低下にそれほど有効でないことを示すグラフである。ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢは、内皮の一酸化窒素合成（ｅＮＯＳＫＯ）を欠く糖尿病でないマウスのＢＰ低下に対して有効である（図３のＡ）。その一方、血圧における最初の減少は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスにおいて８週で認められたが、これは持続されなかった（図３のＣ）。これは、非常に有効であるヒドララジンのような他の血圧降下薬と対照的である。また、エナラプリル５０ｍｇ／ｋｇの投与量でさえ、内皮の一酸化窒素合成を欠く糖尿病マウスのＢＰを低下させないことを我々が発見したことから、効果の欠如は投与量によらない。（図３のＣ）。
【００７４】
図４は、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢは、ｅＮＯＳＫＯマウスにおける糖尿病腎症を妨げるのには有効でないことを明らかにする組織学的スライド示す。ＤＭは、ＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウス（ｂ）においてメサンギウムの膨張を引き起こした。これは、エナラプリル（ｃ）、又は、テルミサルタン（ｄ）によって妨げられなかった。ＤＭ  ｅＮＯＳＫＯマウスは、また、糸球体毛細血管微小動脈瘤（ｅ）を有し、かつ、細胞外マトリックスの沈着の増加（ｆ）を有するメサンギウム融解を示した。エナラプリル（ｇ）、及び、テルミサルタン（ｈ）のいずれの治療も、これらの進行した病変を妨げなかった。バー：２０μｍ。メサンギウムの膨張の定量分析（Ｍ）は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスではなく野生型糖尿病マウスにおいて、ＡＣＥ阻害薬（黒いバー）、及び、ＡＲＢ（灰色のバー）の有益な効果を確認した。バー：２０μｍ。白いバー＝治療なし、黒いバー＝エナラプリル、灰色のバー＝テルミサルタン。図５は、ｅＮＯＳＫＯマウスにおける糖尿病腎症での、血圧及び腎機能へのＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの効果の結果を提供する表に関する。ＡＣＥ阻害薬とＡＲＢは、野生型糖尿病マウスにおいて、血圧及びタンパク尿を低下させるのに有効で、また、糖尿病でないｅＮＯＳＫＯマウスの血圧低下に有効である。しかしながら、１０週の糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスにおいては、ＡＣＥ阻害薬は有効ではなく、また、ＡＲＡＢは、最小限に血圧を低下させるだけしか有効でなく、タンパク尿を顕著には減少させない。
【００７５】
これらのデータは、ＡＣＥ及びＡＲＢの有効性に関して、内皮のＮＯの欠如と糖尿病との間に特定の相互作用があるという証拠を提供する――これは、これらの最近の薬剤が有効である、糖尿病又はｅＮＯＳ欠損症に関する単独の研究に基づいては予想されないだろう。
【００７６】
ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢが、内皮細胞機能不全（内皮のＮＯの欠如）の存在下で、糖尿病性腎症を防げることができないことは、内因性のレニン−アンギオテンシン系の抑制を有するアルドステロンブレイクスルーの存在によって説明され得る。この所見と一致して、本発明者らは、ＡＣＥ阻害薬、及び、ＡＲＢ治療が、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスではなく、野生型糖尿病マウスにおいて、血清アルドステロンを抑制することを発見した（図６）。さらに、ＡＣＥ阻害薬で治療された糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスでは、糸球体においてアルドステロンを同定した（図７）。
【００７７】
図６は、ＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢ治療が、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスにおいて血清アルドステロンを抑制しないが、糖尿病の野生型マウスにおいて抑制することを示すグラフを表す。図７は、糖尿病のｅＮＯＳＫＯマウスでは、糸球体におけるアルドステロンが増加することを示す免疫組織グラフである。糖尿病は、ｅＮＯＳＫＯマウスにおいてストレプトゾトシンで誘導された。これは、エナラプリル（１０ｍｇ／ｋｇ  ＢＷ／日、黒いバー）、又は、テルミサルタン（２ｍｇ／ｋｇ  ＢＷ／日、灰色のバー）を用いて、４週間（６週〜１０週）治療された（非特許文献２２）。エナラプリルで治療された糖尿病のｅＮＯＳＫＯの腎臓におけるアルドステロンのための免疫組織化学は、ウサギの多クローンのａｎｔｉ−アルドステロンのポリクローナル抗体（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ロックフォード，イリノイ州）を用いて検討された。この図において示されるように、このモデルにおいて、アルドステロンは糸球体に存在した。このデータは、アルドステロンが糸球体において合成されることを必ずしも意味しない一方、アルドステロンは、血管、特に、内皮の細胞中において生成し得る（非特許文献２３，２４）。陽性の緑の染色は、アルドステロンの存在を表す。
【００７８】
これらの研究は、内皮のＮＯの欠如（すなわち、重篤な減少）が、糖尿病性腎症の治療の際に、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢを効果がない状態にするという証拠を提供する。また、その機序は、アルドステロンブレイクスルーを介している可能性がある。また、これらは、ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢの応答性の欠如が、糖尿病単独、あるいは、内皮細胞機能不全（内皮のＮＯの欠如）単独の存在に基づいては期待されないこが、これらの相互作用では特異的であることを実証する。ＡＣＥ阻害薬の使用にもかかわらず、内皮細胞機能不全は、糖尿病において一般的であるが（非特許文献２５〜２７）、ＡＣＥ阻害薬の応答性をもたらす、内皮細胞機能不全と糖尿病との特異的な相互作用があることは誰も示唆していない。ｅＮＯＳＫＯマウス（野生型との比較）における唯一の異常は、内皮のＮＯの欠如であるため、これらのデータは、一酸化窒素の置換によって、このマウスの欠損が回復に向かうことを示唆する。
【００７９】
この点では、ｅＮＯＳＫＯマウスは、野生型対応物より高い基準血圧を有する。図８で示されるように、亜硝酸塩（ＮＯドナー）をｅＮＯＳＫＯマウスに与える場合、我々は野生型マウスと同じレベルに血圧を下げることができる。図８は、一酸化窒素ミメティック（亜硝酸塩）の供給により、ｅＮＯＳＫＯマウスの血圧異常を調整することができることを示すグラフを表す。亜硝酸塩は、ＮＯの代謝産物で、体内でＮＯに変換することができるので（非特許文献２８で検討）、亜硝酸ナトリウムがｅＮＯＳＫＯマウスの高血圧症を妨げ得るかどうか確かめるためにこれを試験した。４週間（５０ｍｇ／ｌの飲料水）の亜硝酸塩での治療により、ｅＮＯＳＫＯマウスの血圧は、野生型マウスにおいて見られるのと同様に低下した。
【００８０】
ＡＣＥ阻害薬及びＡＲＢに対して糖尿病腎症が不応答を引き起こす際に、内皮細胞機能不全が重要な役割を果たすとすると仮定すると、内皮のＮＯレベルを増加させる治療は、糖尿病性腎症においてＡＣＥ阻害薬と組み合わせる場合に有益となるだろう。糖尿病性腎症における内皮のＮＯ減少の主な原因は、酸化ストレスである（非特許文献２９）。従って、糖尿病性腎症においてＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢと組み合わせた場合、酸化防止剤は類がない利点があるはずである。酸化ストレスの別の原因は尿酸である。これのために、両者は、内皮細胞において、酸化ストレスを刺激することができ（図９）、また、内皮の一酸化窒素の減少を引き起こすことを我々は示した（非特許文献３０，３１）（図１０）。従って、キサンチン酸化酵素阻害薬（フェブキソスタット、及び、アロプリノール）、並びに、尿酸排泄薬（プロベネシド、ベンズヨーダロン、及び、ベンズブロマロン等）のような尿酸を低下させる薬剤は、特に、内皮の機能が一般的に損なわれると知られている尿酸レベル＞６ｍｇ／ｄｌの対象において、ＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢと組み合わせた場合も、糖尿病性腎症に有益であるはずである（非特許文献３２）。実際、尿酸が、１型糖尿病の対象において、顕性糖尿病性腎症の強力な予測因子であることが最近分かっている（非特許文献３３）。
【００８１】
内皮細胞機能不全を引き起こすために尿酸が作用する重要な機序のうちの１つは、ミトコンドリア及びミトコンドリアＤＮＡの減少を引き起こし、その結果、内皮の機能に必要なＡＴＰ貯蔵量の消耗をもたらすことである（図１１及び図１２）。図１１は、尿酸がヒト大動脈の内皮細胞においてＡＴＰレベルを下げることを示す。さらに、図１２は、尿酸がヒト大動脈の内皮細胞におけるミトコンドリア数を減少させることを示す。
【００８２】
ニコランジルのようなＮＯドナーが酸化ストレスに応答してミトコンドリアの損失を妨げることができるという所見は、ＮＯが、糖尿病の対象において、内皮の機能を改善し、かつ、ＡＣＥの応答性を高めることができるという機序を与える。従って、尿酸の増加のような、ＮＯ欠損症及び糖尿病性腎疾患に関係する状態は、ミトコンドリアの損失に関係することを示していることが分かっている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００８３】
【非特許文献１】１．ルイ  ＥＪ（Ｌｅｗｉｓ  ＥＪ），ハンシッカー  ＬＧ（Ｈｕｎｓｉｃｋｅｒ  ＬＧ），ベイン  ＲＰ（Ｂａｉｎ  ＲＰ），ローゼ  ＲＤ（Ｒｏｈｄｅ  ＲＤ）：「糖尿病性腎症へのアンギオテンシン転換酵素阻害の効果」（Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ−ｅｎｚｙｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｎ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．）  Ｔｈｅ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  １９９３，３２９：１４５６−１４６２
【非特許文献２】２．ブレンナー  ＢＭ（Ｂｒｅｎｎｅｒ  ＢＭ），クーパー  ＭＥ（Ｃｏｏｐｅｒ  ＭＥ），デ・ゼーヴ  Ｄ（ｄｅ  Ｚｅｅｕｗ  Ｄ），キーネ  ＷＦ（Ｋｅａｎｅ  ＷＦ），ミッチ  ＷＥ（Ｍｉｔｃｈ  ＷＥ），パービング  ＨＨ（Ｐａｒｖｉｎｇ  ＨＨ），リムッチ  Ｇ（Ｒｅｍｕｚｚｉ  Ｇ），スナッピン  ＳＭ（Ｓｎａｐｉｎｎ  ＳＭ），チャン  Ｚ（Ｚｈａｎｇ  Ｚ），シャハインハール  Ｓ（Ｓｈａｈｉｎｆａｒ  Ｓ）：「２型糖尿病及び腎症の患者における腎臓血管及び心臓血管の結果へのロサルタンの効果」（Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｌｏｓａｒｔａｎ  ｏｎ  ｒｅｎａｌ  ａｎｄ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ａｎｄ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ），Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００１，３４５：８６１−８６９
【非特許文献３】３．カーター  ＢＬ（Ｃａｒｔｅｒ  ＢＬ），マローン  ＤＣ（Ｍａｌｏｎｅ  ＤＣ），エリス  ＳＬ（Ｅｌｌｉｓ  ＳＬ），ドンブラウスキー  ＲＣ（Ｄｏｍｂｒｏｗｓｋｉ  ＲＣ）：「複雑な医薬品プロファイルを有する高血圧のベテランへの抗高血圧剤利用」（Ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ  Ｄｒｕｇ  Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ  Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ｗｉｔｈ  Ｃｏｍｐｌｅｘ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｆｉｌｅｓ），Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  （Ｇｒｅｅｎｗｉｃｈ）  ２０００，２：１７２−１８０
【非特許文献４】４．スカルシ  ＫＫ（Ｓｃａｒｓｉ  ＫＫ），ビョルンソン  ＤＣ（Ｂｊｏｒｎｓｏｎ  ＤＣ）：「糖尿病のメディケイド患者における腎保護的な薬剤としてのＡＣＥ阻害薬の使用」（Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ＡＣＥ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｓ  ｒｅｎｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃａｉｄ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉａｂｅｔｅｓ），Ａｎｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ  ２０００，３４：１００２−１００６
【非特許文献５】５．マウアー  Ｍ（Ｍａｕｅｒ  Ｍ），ジンマン  Ｂ（Ｚｉｎｍａｎ  Ｂ），ガードナー  Ｒ（Ｇａｒｄｉｎｅｒ  Ｒ），スイッサ  Ｓ（Ｓｕｉｓｓａ  Ｓ），シネイコ  Ａ（Ｓｉｎａｉｋｏ  Ａ），ストランド  Ｔ（Ｓｔｒａｎｄ  Ｔ），ドラムンド  Ｋ（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ  Ｋ），ドネリー  Ｓ（Ｄｏｎｎｅｌｌｙ  Ｓ），グッドイヤー  Ｐ（Ｇｏｏｄｙｅｒ  Ｐ），ギュブラー  ＭＣ（Ｇｕｂｌｅｒ  ＭＣ），クライン  Ｒ（Ｋｌｅｉｎ  Ｒ）：「１型糖尿病における、エナラプリル、及び、ロサルタンの腎臓並びに網膜の効果」（Ｒｅｎａｌ  ａｎｄ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｅｎａｌａｐｒｉｌ  ａｎｄ  ｌｏｓａｒｔａｎ  ｉｎ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ），Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００９，３６１：４０−５１
【非特許文献６】６．パーキンズ  ＢＡ（Ｐｅｒｋｉｎｓ  ＢＡ），フィコチェッロ  ＬＨ（Ｆｉｃｏｃｉｅｌｌｏ  ＬＨ），シルバ  ＫＨ（Ｓｉｌｖａ  ＫＨ），フィンケルシュタイン  ＤＭ（Ｆｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎ  ＤＭ），ウォーラム  ＪＨ（Ｗａｒｒａｍ  ＪＨ），クロリュースキ  ＡＳ（Ｋｒｏｌｅｗｓｋｉ  ＡＳ）：「１型糖尿病におけるミクロアルブミン尿の退行」（Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ  ｉｎ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ），Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００３，３４８：２２８５−２２９３
【非特許文献７】７．スイッサ  Ｓ（Ｓｕｉｓｓａ  Ｓ），ハチンソン  Ｔ（Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ  Ｔ），ブロフィー  ＪＭ（Ｂｒｏｐｈｙ  ＪＭ），ケズー  Ａ（Ｋｅｚｏｕｈ  Ａ）：「ＡＣＥ阻害薬の使用、及び、糖尿病における腎不全の長期的な危険性」（ＡＣＥ−ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｕｓｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｒｅｎａｌ  ｆａｉｌｕｒｅ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｅｓ），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００６，６９：９１３−９１９
【非特許文献８】８．ラジェンティー  Ｐ（Ｒｕｇｇｅｎｅｎｔｉ  Ｐ），モスコーニ  Ｌ（Ｍｏｓｃｏｎｉ  Ｌ），サンガリ  Ｆ（Ｓａｎｇａｌｌｉ  Ｆ），カジラギ  Ｆ（Ｃａｓｉｒａｇｈｉ  Ｆ），ガンバラ  Ｖ（Ｇａｍｂａｒａ  Ｖ），レムッチ  Ｇ（Ｒｅｍｕｚｚｉ  Ｇ），レムッチ  Ａ（Ｒｅｍｕｚｚｉ  Ａ）：「ＮＩＤＤＭにおける糸球体のサイズ選択的な機能不全は、ＡＣＥ阻害、又は、カルシウムチャネル遮断によって改善されない。」（Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｓｉｚｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ＮＩＤＤＭ  ｉｓ  ｎｏｔ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｄ  ｂｙ  ＡＣＥ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｒ  ｂｙ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｂｌｏｃｋａｄｅ），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  １９９９，５５：９８４−９９４
【非特許文献９】９．ザッツ  Ｒ（Ｚａｔｚ  Ｒ），ダン  ＢＲ（Ｄｕｎｎ  ＢＲ），マイヤー  ＴＷ（Ｍｅｙｅｒ  ＴＷ），アンダーソン  Ｓ（Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｓ），レンケ  ＨＧ（Ｒｅｎｎｋｅ  ＨＧ），ブレンナー  ＢＭ（Ｂｒｅｎｎｅｒ  ＢＭ）：「糸球体毛細血管高血圧症の薬理学的な改善による糖尿病糸球体症の予防」（Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｐａｔｈｙ  ｂｙ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ），Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９８６，７７：１９２５−１９３０
【非特許文献１０】１０．ザッツ  Ｒ（Ｚａｔｚ  Ｒ），マイヤー  ＴＷ（Ｍｅｙｅｒ  ＴＷ），レンケ  ＨＧ（Ｒｅｎｎｋｅ  ＨＧ），ブレンナー  ＢＭ（Ｂｒｅｎｎｅｒ  ＢＭ）：「糖尿病性糸球体症の病因における、代謝因子に対する血行力学因子の優位性」（Ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｃｅ  ｏｆ  ｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃ  ｒａｔｈｅｒ  ｔｈａｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｐａｔｈｙ），Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  １９８５，８２：５９６３−５９６７
【非特許文献１１】１１．ボンバック  ＡＳ（Ｂｏｍｂａｃｋ  ＡＳ），クレマー  ＰＪ（Ｋｌｅｍｍｅｒ  ＰＪ）：「アルドステロンブレイクスルーの発生、及び、関係」（Ｔｈｅ  ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈ），Ｎａｔ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒａｃｔ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００７，３：４８６−４９２
【非特許文献１２】１２．ホレンバーグ  ＮＫ（Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ  ＮＫ）：「腎損傷の発生及び進行におけるアルドステロン（Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｎａｌ  ｉｎｊｕｒｙ），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００４，６６：１−９
【非特許文献１３】１３．スクジョーエ  ＫＪ（Ｓｃｈｊｏｅｄｔ  ＫＪ），アンデルセン  Ｓ（Ａｎｄｅｒｓｅｎ  Ｓ），ロッシング  Ｐ（Ｒｏｓｓｉｎｇ  Ｐ），タルヌフ  Ｌ（Ｔａｒｎｏｗ  Ｌ），パービング  ＨＨ（Ｐａｒｖｉｎｇ  ＨＨ）：「糖尿病性腎症におけるレニン−アンギオテンシン−アルドステロン系の遮断の間のアルドステロンエスケープは、糸球体濾過率の低下促進に関連付けられる」（Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｅｓｃａｐｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｅｎｉｎ−ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｓｙｓｔｅｍ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｄｅｃｌｉｎｅ  ｉｎ  ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｒａｔｅ），Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ  ２００４，４７：１９３６−１９３９
【非特許文献１４】１４．サクライアン  ＭＧ（Ｓａｋｌａｙｅｎ  ＭＧ），ジェビー  ＬＫ（Ｇｙｅｂｉ  ＬＫ），タゾサ  Ｊ（Ｔａｓｏｓａ  Ｊ），ヤップ  Ｊ（Ｙａｐ  Ｊ）：「既にＡＣＥ阻害薬又はＡＲＢで治療中の糖尿病患者におけるタンパク尿に対するスピロノラクトンでの付加的療法の効果：無作為試験、プラセボ対照試験、二重盲検、クロスオーバー試験の結果」（Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｄｄｉｔｉｖｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  ｓｐｉｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅ  ｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎｕｒｉａ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ａｌｒｅａｄｙ  ｏｎ  ＡＣＥ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｒ  ＡＲＢ  ｔｈｅｒａｐｙ，ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ，ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ  ｔｒｉａｌ），Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｍｅｄ  ２００８，５６：７１４−７１９
【非特許文献１５】１５．ブレイヤー  ＭＤ（Ｂｒｅｙｅｒ  ＭＤ），ボッティンガー  Ｅ（Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  Ｅ），ブロシウス  ＦＣ  ３世（Ｂｒｏｓｉｕｓ  ＦＣ，３ｒｄ），コフマン  ＴＭ（Ｃｏｆｆｍａｎ  ＴＭ），ハリス  ＲＣ（Ｈａｒｒｉｓ  ＲＣ），ヘイリグ  ＣＷ（Ｈｅｉｌｉｇ  ＣＷ），シャルマー  Ｋ（Ｓｈａｒｍａ  Ｋ）：「糖尿病性腎症のマウスモデル」（Ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００５，１６：２７−４５
【非特許文献１６】１６．ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ），サトウ  Ｗ（Ｓａｔｏ  Ｗ），グルシャコヴァ  Ｏ（Ｇｌｕｓｈａｋｏｖａ）  Ｏ，ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），クラーク  Ｔ（Ｃｌａｒｋｅ  Ｔ），キャンベル−トムプソン  Ｍ（Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  Ｍ），ユザワ  Ｙ（Ｙｕｚａｗａ  Ｙ），アトキンソン  ＭＡ（Ａｔｋｉｎｓｏｎ  ＭＡ），ジョンソン  ＲＪ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＲＪ），クローカー  Ｂ（Ｃｒｏｋｅｒ  Ｂ）：「糖尿病の内皮の一酸化窒素合成酵素ノックアウトマウスは、進行した糖尿病性腎症を発病させる」（Ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｉｃｅ  ｄｅｖｅｌｏｐ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００７，１８：５３９−５５０
【非特許文献１７】１７．サトウ  Ｗ（Ｓａｔｏ  Ｗ），コスギ  Ｔ（Ｋｏｓｕｇｉ  Ｔ），チャン  Ｌ（Ｚｈａｎｇ  Ｌ），ロンカル  ＣＡ（Ｒｏｎｃａｌ  ＣＡ），ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），キャンベル−トムプソン  Ｍ（Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  Ｍ），ユザワ  Ｙ（Ｙｕｚａｗａ  Ｙ），アトキンソン  ＭＡ（Ａｔｋｉｎｓｏｎ  ＭＡ），グラント  ＭＢ（Ｇｒａｎｔ  ＭＢ），クローカー  ＢＰ（Ｃｒｏｋｅｒ  ＢＰ），ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ）：「進行した糖尿病性腎症における糸球体のマクロファージ浸潤に対するＶＥＧＦの極めて重要な役割」（Ｔｈｅ  ｐｉｖｏｔａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＶＥＧＦ  ｏｎ  ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ），Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２００８，８８：９４９−９６１
【非特許文献１８】１８．コスギ  Ｔ（Ｋｏｓｕｇｉ  Ｔ），ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），ナカヤマ  Ｔ（Ｎａｋａｙａｍａ  Ｔ），コナー  Ｔ（Ｃｏｎｎｏｒ  Ｔ），ユザワ  Ｙ（Ｙｕｚａｗａ  Ｙ），リー  Ｑ（Ｌｉ  Ｑ），ハウスヴァース  ＷＷ（Ｈａｕｓｗｉｒｔｈ  ＷＷ），グラント  ＭＢ（Ｇｒａｎｔ  ＭＢ），クローカー  ＢＰ（Ｃｒｏｋｅｒ  ＢＰ），キャンベル−トムプソン  Ｍ（Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  Ｍ），チャン  Ｌ（Ｚｈａｎｇ  Ｌ），アトキンソン  ＭＡ（Ａｔｋｉｎｓｏｎ  ＭＡ），シーガル  ＭＳ（Ｓｅｇａｌ  ＭＳ），ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ）：「血圧低下は、糖尿病のｅＮＯＳノックアウトマウスにおいて、尿細管間質障害ではなくメサンギウム融解、及び、メサンギウムの結節をブロックする」（Ｌｏｗｅｒｉｎｇ  ｂｌｏｏｄ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｂｌｏｃｋｓ  ｍｅｓａｎｇｉｏｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｍｅｓａｎｇｉａｌ  ｎｏｄｕｌｅｓ，ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｉｎｊｕｒｙ，ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｅＮＯＳ  ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｉｃｅ），Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  ２００９，１７４：１２２１−１２２９
【非特許文献１９】１９．コスギ  Ｔ（Ｋｏｓｕｇｉ  Ｔ），ナカヤマ  Ｔ（Ｎａｋａｙａｍａ  Ｔ），ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），マツノ  Ｓ（Ｍａｔｓｕｏ  Ｓ），ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ）：「ｅＮＯＳノックアウトマウスでの進行した糖尿病性腎症におけるレニン−アンギオテンシン遮断の効果：アルドステロン受容体拮抗薬での優れた保護」（Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｒｅｎｉｎ−Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｉｎ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｅＮＯＳ  Ｋｎｏｃｋｏｕｔ  Ｍｉｃｅ：Ｓｕｐｅｒｉｏｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ），Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  ｉｎ  ｐｒｅｓｓ，
【非特許文献２０】２０．チャオ  ＨＪ（Ｚｈａｏ  ＨＪ），ワン  Ｓ（Ｗａｎｇ  Ｓ），チェン  Ｈ（Ｃｈｅｎｇ  Ｈ），チャン  ＭＺ（Ｚｈａｎｇ  ＭＺ），タカハシ  Ｔ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ  Ｔ），フォゴ  ＡＢ（Ｆｏｇｏ  ＡＢ），ブレイヤー  ＭＤ（Ｂｒｅｙｅｒ  ＭＤ），ハリス  ＲＣ（Ｈａｒｒｉｓ  ＲＣ）：「内皮の一酸化窒素合成酵素欠損症は、糖尿病マウスにおいて腎症の加速をもたらす」（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｐｒｏｄｕｃｅｓ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｍｉｃｅ），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００６，１７：２６６４−２６６９
【非特許文献２１】２１．ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ），サトウ  Ｗ（Ｓａｔｏ  Ｗ），グルシャコヴァ  Ｏ（Ｇｌｕｓｈａｋｏｖａ  Ｏ），ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），クラーク  Ｔ（Ｃｌａｒｋｅ  Ｔ），キャンベル−トムプソン  Ｍ（Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  Ｍ），ユザワ  Ｙ（Ｙｕｚａｗａ  Ｙ），アトキンソン  Ｍ（Ａｔｋｉｎｓｏｎ  Ｍ），ジョンソン  ＲＪ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＲＪ），クローカー  Ｂ（Ｃｒｏｋｅｒ  Ｂ）：「糖尿病のｅＮＯＳノックアウトマウスは、進行した糖尿病性腎症を発病させる」（Ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｅＮＯＳ  ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｉｃｅ  ｄｅｖｅｌｏｐ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００７，１８：５３９−５５０
【非特許文献２２】２２．コスギ  Ｔ（Ｋｏｓｕｇｉ  Ｔ），ハイニッヒ  Ｍ（Ｈｅｉｎｉｇ  Ｍ），ナカヤマ  Ｔ（Ｎａｋａｙａｍａ  Ｔ），マツノ  Ｓ（Ｍａｔｓｕｏ  Ｓ），ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ）：「ｅＮＯＳノックアウトマウスでの進行した糖尿病性腎症におけるレニン−アンギオテンシン遮断のより少ない利点：アルドステロン受容体拮抗薬の優れた保護」（Ｌｅｓｓ  ｂｅｎｅｆｉｔ  ｏｆ  Ｒｅｎｉｎ−Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｉｎ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｅＮＯＳ  Ｋｎｏｃｋｏｕｔ  Ｍｉｃｅ：Ｓｕｐｅｒｉｏｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ），Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  Ｉｎ  ｐｒｅｓｓ，
【非特許文献２３】２３．オブラインターナー  Ｈ（Ｏｂｅｒｌｅｉｔｈｎｅｒ  Ｈ），ルートヴィヒ  Ｔ（Ｌｕｄｗｉｇ  Ｔ），リートミュラー  Ｃ（Ｒｉｅｔｈｍｕｌｌｅｒ  Ｃ），ヒレブラント  Ｕ（Ｈｉｌｌｅｂｒａｎｄ  Ｕ），アルバーマン  Ｌ（Ａｌｂｅｒｍａｎｎ  Ｌ），シェーファー  Ｃ（Ｓｃｈａｆｅｒ  Ｃ），シャヒーン  Ｖ（Ｓｈａｈｉｎ  Ｖ），シラーズ  Ｈ（Ｓｃｈｉｌｌｅｒｓ）  Ｈ：「ヒト内皮：アルドステロンのための標的」（Ｈｕｍａｎ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ：ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ），Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ２００４，４３：９５２−９５６
【非特許文献２４】２４．タケダ  Ｙ（Ｔａｋｅｄａ  Ｙ），ミヤモリ  Ｉ（Ｍｉｙａｍｏｒｉ  Ｉ），ヨネダ  Ｔ（Ｙｏｎｅｄａ  Ｔ），イキ  Ｋ（Ｉｋｉ  Ｋ），ハタケヤマ  Ｈ（Ｈａｔａｋｅｙａｍａ  Ｈ），ブレア  ＩＡ（Ｂｌａｉｒ  ＩＡ），シェイ  ＦＹ（Ｈｓｉｅｈ  Ｆ），タケダ  Ｒ（Ｔａｋｅｄａ  Ｒ）：「隔離されたラット血管におけるアルドステロンの生成」（Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｉｎ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｒａｔ  ｂｌｏｏｄ  ｖｅｓｓｅｌｓ），Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  １９９５，２５：１７０−１７３
【非特許文献２５】２５．ジャワ  Ａ（Ｊａｗａ  Ａ），ナチムス  Ｓ（Ｎａｃｈｉｍｕｔｈｕ  Ｓ），ペンダグラス  Ｍ（Ｐｅｎｄｅｒｇｒａｓｓ  Ｍ），アスナニ  Ｓ（Ａｓｎａｎｉ  Ｓ），フォンセカ  Ｖ（Ｆｏｎｓｅｃａ  Ｖ）：「アンギオテンシン変換酵素阻害薬療法にもかかわらず、２型真性糖尿病、及び、ミクロアルブミン尿、又は、タンパク尿を有するアフリカ系アメリカ人の患者において阻害された血管反応性」（Ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ａｆｒｉｃａｎ−Ａｍｅｒｉｃａｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｕｓ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ  ｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎｕｒｉａ  ｄｅｓｐｉｔｅ  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ），Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２００６，９１：３１−３５
【非特許文献２６】２６．パパイオアヌー  ＧＩ（Ｐａｐａｉｏａｎｎｏｕ  ＧＩ），サイプ  ＲＬ（Ｓｅｉｐ  ＲＬ），グレー  ＮＪ（Ｇｒｅｙ  ＮＪ），カッテン  Ｄ（Ｋａｔｔｅｎ  Ｄ），テイラー  Ａ（Ｔａｙｌｏｒ  Ａ），インズッチ  ＳＥ（Ｉｎｚｕｃｃｈｉ  ＳＥ），ヤング  ＬＨ（Ｙｏｕｎｇ  ＬＨ），チョン  ＤＡ（Ｃｈｙｕｎ  ＤＡ），デービー  ＪＡ（Ｄａｖｅｙ  ＪＡ），ワカース  ＦＪ（Ｗａｃｋｅｒｓ  ＦＪ），アイスカンダリアン  ＡＥ（Ｉｓｋａｎｄｒｉａｎ  ＡＥ），ラトナー  ＲＥ（Ｒａｔｎｅｒ  ＲＥ），ロビンソン  ＥＣ（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ＥＣ），キャロラン  Ｓ（Ｃａｒｏｌａｎ  Ｓ），エンゲル  Ｓ（Ｅｎｇｅｌ  Ｓ），ヘラー  ＧＶ（Ｈｅｌｌｅｒ  ＧＶ）：「２型真性糖尿病、及び、ミクロアルブミン尿を有する無症候性の患者における上腕動脈反応性（無症候性の糖尿病患者における虚血の検出―上腕動脈反応性研究から）」（Ｂｒａｃｈｉａｌ  ａｒｔｅｒｙ  ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｕｓ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ  （ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ  ｉｎ  Ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ  Ｄｉａｂｅｔｉｃｓ−ｂｒａｃｈｉａｌ  ａｒｔｅｒｙ  ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｓｔｕｄｙ）），Ａｍ  Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｌ  ２００４，９４：２９４−２９９
【非特許文献２７】２７．チャン  ＷＢ（Ｃｈａｎ  ＷＢ），チャン  ＮＮ（Ｃｈａｎ  ＮＮ），ライ  ＣＷ（Ｌａｉ  ＣＷ），ソー  ＷＹ（Ｓｏ  ＷＹ），ルオ  ＭＫ（Ｌｏ  ＭＫ），リー  ＫＦ（Ｌｅｅ  ＫＦ），チョウ  ＣＣ（Ｃｈｏｗ  ＣＣ），メトヴェリー  Ｃ（Ｍｅｔｒｅｗｅｌｉ  Ｃ），チャン  ＪＣ（Ｃｈａｎ  ＪＣ）：「顕性腎症及び中等度の腎不全を有するＩＩ型糖尿病患者における内皮をしのぐ血管の欠損」（Ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｆｅｃｔ  ｂｅｙｏｎｄ  ｔｈｅ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  ｉｎ  ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｏｖｅｒｔ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ａｎｄ  ｍｏｄｅｒａｔｅ  ｒｅｎａｌ  ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００６，７０：７１１−７１６
【非特許文献２８】２８．ブライアン  ＮＳ（Ｂｒｙａｎ  ＮＳ）：「一酸化窒素の生物学における亜硝酸塩：原因、又は、結果？システムベースの検討」（Ｎｉｔｒｉｔｅ  ｉｎ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ：ｃａｕｓｅ  ｏｒ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ？  Ａ  ｓｙｓｔｅｍｓ−ｂａｓｅｄ  ｒｅｖｉｅｗ），Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ２００６，４１：６９１−７０１
【非特許文献２９】２９．ムンツェル  Ｔ（Ｍｕｎｚｅｌ  Ｔ），シニング  Ｃ（Ｓｉｎｎｉｎｇ  Ｃ），ポスト  Ｆ（Ｐｏｓｔ  Ｆ），ワルンホルツ  Ａ（Ｗａｒｎｈｏｌｔｚ  Ａ），シュルツ  Ｅ（Ｓｃｈｕｌｚ  Ｅ）：「内皮細胞機能不全の病態生理学、診断、及び、予後との関連」（Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ），Ａｎｎ  Ｍｅｄ  ２００８，４０：１８０−１９６
【非特許文献３０】３０．コースラ  ＵＭ（Ｋｈｏｓｌａ  ＵＭ），ジャリコフ  Ｓ（Ｚｈａｒｉｋｏｖ  Ｓ），フィンチ  ＪＬ（Ｆｉｎｃｈ  ＪＬ），ナカガワ  Ｔ（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｔ），ロンカル  Ｃ（Ｒｏｎｃａｌ  Ｃ），ムー  Ｗ（Ｍｕ  Ｗ），クロトヴァ  Ｋ（Ｋｒｏｔｏｖａ  Ｋ），ブロック  ＥＲ（Ｂｌｏｃｋ  ＥＲ），パラバカール  Ｓ（Ｐｒａｂｈａｋａｒ  Ｓ），ジョンソン  ＲＪ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＲＪ）：「高尿酸血症は内皮細胞機能不全を誘導する」（Ｈｙｐｅｒｕｒｉｃｅｍｉａ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ），Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００５，６７：１７３９−１７４２
【非特許文献３１】３１．ジャリコフ  ＳＩ（Ｚｈａｒｉｋｏｖ  ＳＩ），クロトヴァ  Ｋ（Ｋｒｏｔｏｖａ  Ｋ），フー  Ｈ（Ｈｕ  Ｈ），ベイリス  Ｃ（Ｂａｙｌｉｓ  Ｃ），ジョンソン  ＲＪ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＲＪ），ブロック  ＥＲ（Ｂｌｏｃｋ  ＥＲ），パテール  ＪＭ（Ｐａｔｅｌ  ＪＭ）：「尿酸は、培養された肺動脈内皮細胞において、ＮＯを生成し、かつ、アルギナーゼ活動を増加させる」（Ｕｒｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  Ｎｏ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  Ａｒｇｉｎａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ），Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００８，
【非特許文献３２】３２．ゾッカリ  Ｃ（Ｚｏｃｃａｌｉ  Ｃ），マイオ  Ｒ（Ｍａｉｏ  Ｒ），マルマッチー  Ｆ（Ｍａｌｌａｍａｃｉ  Ｆ），セスティ  Ｇ（Ｓｅｓｔｉ  Ｇ），ペルティコーネ  Ｆ（Ｐｅｒｔｉｃｏｎｅ  Ｆ）：「本態性高血圧における、尿酸、及び、内皮細胞機能不全（Ｕｒｉｃ  ａｃｉｄ  ａｎｄ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ），Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２００６，１７：１４６６−１４７１
【非特許文献３３】３３．ホービンド  Ｐ（Ｈｏｖｉｎｄ  Ｐ），ロッシング  Ｐ（Ｒｏｓｓｉｎｇ  Ｐ），タルヌフ  Ｌ（Ｔａｒｎｏｗ  Ｌ），ジョンソン  ＲＪ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＲＪ），パービング  ＨＨ（Ｐａｒｖｉｎｇ  ＨＨ）：「１型糖尿病における糖尿病性腎症の進行のための予測因子としての血清尿酸：発端コホート研究（Ｓｅｒｕｍ  ｕｒｉｃ  ａｃｉｄ  ａｓ  ａ  ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ  ｆｏｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｔｙｐｅ  １  ｄｉａｂｅｔｅｓ：ａｎ  ｉｎｃｅｐｔｉｏｎ  ｃｏｈｏｒｔ  ｓｔｕｄｙ），Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２００９，５８：１６６８−１６７１
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図５】
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【図１０】
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【図１１】
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【図４】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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