(57)【要約】  本発明は、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む新規な組み合わせに関する。抗糖尿病薬は、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター、例えば、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰａｓｅｓ）阻害剤、非低分子模倣化合物およびグルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）阻害剤、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、肝グルコース産生の調節異常に作用する薬剤、例えば、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐａｓｅ）阻害剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ）阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニストおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害剤、インスリン感受性増強薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、胃内容排出阻害剤、インスリンおよびα２−アドレナリンアンタゴニストからなる群より選択することができ、特にＩＬ１βが介在する代謝症状、例えば、グルコース耐性異常（ＩＧＴ）の症状、空腹時血漿グルコース異常の症状、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満および骨粗鬆症、特に糖尿病、具体的には１型糖尿病または２型糖尿病の予防、進行遅延または治療において、抗ＩＬ−１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを同時に、別々に、または、続けて使用する。本発明はまた、本発明の組み合わせを含む医薬組成物、並びに、ＩＬ１βが介在する代謝症状（例えば、糖尿病）の予防、進行遅延もしくは治療のために、または、ベータ細胞機能の機能改善のために当該組み合わせを使用する処置方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療上有効量の抗ＩＬ１βモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせ。
【請求項２】
前記抗糖尿病薬が、ＧＳＫ−３阻害剤、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト、ベータ−３ＡＲアゴニスト、ＵＣＰアゴニスト、抗糖尿病性チアゾリジンジオン（グリタゾン）、非グリタゾン系ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニスト、抗糖尿病性バナジウム含有化合物およびビグアナイド薬からなる群より選択される、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
前記ビグアナイド薬が、メトホルミン、フェンホルミンおよびブホルミンまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項２に記載の組み合わせ。
【請求項４】
前記抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片が、ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項５】
前記ヒトモノクローナル抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片が以下の特性を有する、請求項４に記載の組み合わせ：
ａ）ＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体へ結合する；
ｂ）ＩＬ１βに対する選択性を有する；
ｃ）３×１０−１０Ｍ以下のＫｄでヒトＩＬ１βへ結合する；または
ｄ）ＩＬ１経路の活性化を阻害する。
【請求項６】
前記抗ＩＬ１βモノクローナル抗体がＡＣＺ８８５である、請求項５に記載の組み合わせ。
【請求項７】
前記治療上有効量の抗ＩＬ１βモノクローナル抗体が１．５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項８】
２型糖尿病の予防、進行遅延または治療に使用する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項９】
ベータ細胞の機能を向上させるために使用する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項１０】
前記抗ＩＬ１βモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片と、前記少なくとも１種の抗糖尿病薬とを、同時に、別々に、または、続けて投与する、請求項８または９のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組み合わせと、薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１２】
２型糖尿病を予防、進行遅延もしくは治療する方法、または、患者のベータ細胞機能を向上させる方法であって、当該方法を必要とする患者に、治療上有効量の請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせまたは請求項１１に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１３】
ｉ）請求項６に記載の抗ＩＬ１β抗体；
ｉｉ）メトホルミン；および
ｉｉｉ）使用説明書
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む新規な組み合わせに関する。抗糖尿病薬は、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター、例えば、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰａｓｅｓ）阻害剤、非低分子模倣化合物およびグルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）阻害剤、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、肝グルコース産生の調節異常に作用する薬剤、例えば、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐａｓｅ）阻害剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ）阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニストおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害剤、インスリン感受性増強薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、胃内容排出阻害剤、インスリンおよびα２−アドレナリンアンタゴニストからなる群より選択することができ、特にＩＬ１βが介在する代謝症状、例えば、グルコース耐性異常（ＩＧＴ）の症状、空腹時血漿グルコース異常の症状、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満および骨粗鬆症、特に糖尿病、具体的には１型糖尿病または２型糖尿病の予防、進行遅延または治療において、抗ＩＬ−１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを同時に、別々に、または、続けて使用する。本発明はまた、本発明の組み合わせを含む医薬組成物、並びに、ＩＬ１βが介在する代謝症状（例えば、糖尿病）の予防、進行遅延もしくは治療のために、または、ベータ（β）細胞機能の機能改善のために当該組み合わせを使用する処置方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン１（ＩＬ１）は、免疫系の細胞によって産生され、炎症応答の急性期の介在物質として作用するサイトカインである。ＩＬ１、特にＩＬ１βの不適切な産生または過剰産生は、様々な疾患や障害、例えば、敗血症、敗血症性もしくは内毒素性ショック、アレルギー、喘息、虚血、卒中、関節リウマチおよび前糖尿病または糖尿病の病理と関連している。前糖尿病または糖尿病に関しては、異なる人種での研究から、グルコース耐性が正常な被験者や低下した被験者では、膵臓のβ細胞が経口グルコース耐性の主要な決定因子であることが判明しており、また、全ての集団で、正常からグルコース耐性異常への進行とこれに続く２型糖尿病への進行が、インスリン感受性の低下やβ細胞機能の低下と関連していることが判明している（非特許文献１）。
【０００３】
糖尿病等のＩＬ１、特にＩＬ１βに伴う疾患または症状を治療するために、代替または改良された治療方法が常に求められている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Kahn, S. E., 2003, Diabetologia 46(1):3-19
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、一つの態様において、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬と含む組み合わせを提供する。
【０００６】
本発明は、さらなる態様において、２型糖尿病の予防、進行遅延または治療に使用する、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせを提供する。
【０００７】
本発明また、膵臓のβ細胞の機能を向上させるのに使用する、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせを提供する。
【０００８】
また、さらなる態様において、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬と抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬と、薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤とを含む医薬組成物を提供する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、２型糖尿病を予防、進行遅延もしくは治療する方法、または、患者のβ細胞機能を向上させる方法であって、当該方法を必要とする患者に、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせを投与することを含む前記方法を提供する。
【００１０】
本発明また、さらなる態様において、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬と、使用説明書とを含むキットを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１Ａ】図１Ａは、用量漸増評価を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、用量応答の直線的な低下傾向を示す。
【図２Ａ】図２Ａは、ＯＧＴＴ−グルコースを示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ＯＧＴＴ−Ｃ−ペプチドを示す。
【図２Ｃ】図２Ｃは、ＯＧＴＴ−グルカゴンを示す。
【図３Ａ】図３Ａは、ＡＣＺ８８５の静脈内単回投与（１０ｍｇ／ｋｇ）を示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、空腹時血漿グルコースを示す。
【図４Ａ】図４Ａは、空腹時血漿グルコースを示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ピーク血漿グルコースを示す。
【図４Ｃ】図４Ｃは、ヘモグロビンＡ１ｃを示す。
【図５】図５は、ＡＣＺ８８５の重鎖可変領域（配列番号１）の核酸配列および推定アミノ酸配列を示す。
【図６】図６は、ＡＣＺ８８５の軽鎖可変領域（配列番号２）の核酸配列および推定アミノ酸配列を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の組み合わせは、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含むものである。
【００１３】
抗糖尿病薬は、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター、例えば、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰａｓｅｓ）阻害剤、非低分子模倣化合物およびグルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）阻害剤、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、肝グルコース産生の調節異常に作用する薬剤、例えば、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐａｓｅ）阻害剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ）阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニストおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害剤、インスリン感受性増強薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、胃内容排出阻害剤、インスリンおよびα２−アドレナリンアンタゴニスト、または、このような化合物の薬学的に許容される塩からなる群より選択することができる。
【００１４】
好ましくは、抗糖尿病薬は、ＧＳＫ−３阻害剤、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト、ベータ（β）−３ＡＲアゴニスト、インスリン、ＵＣＰアゴニスト、抗糖尿病性チアゾリジンジオン（グリタゾン）、非グリタゾン系ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニスト、抗糖尿病性バナジウム含有化合物、ビグアナイド薬（例えば、メトホルミン）からなる群より選択される。
【００１５】
用語「抗糖尿病薬」は、以下、併用相手と云う場合もある。本明細書中、用語「抗糖尿病薬」とは、ＩＬ−１介在性疾患または症状、例えば、１型糖尿病または２型糖尿病等を治療するのに適した薬剤を含むことを意味する。
【００１６】
併用相手と組み合わされる抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、ＩＬ１βへ特異的に結合する抗体またはその抗原結合性断片である。
【００１７】
好ましくは、抗体またはその抗原結合性断片は、ヒトＩＬ１βへ結合するヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片である。
【００１８】
好ましくは、抗体またはその抗原結合性断片は、以下の特性のうち少なくとも１つを有する：
ａ）ＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体へ結合する；
ｂ）ＩＬ１βに対する選択性を有する；
ｃ）３×１０−１０Ｍ以下のＫｄでヒトＩＬ１βへ結合する；
ｄ）ＩＬ１経路の活性化を阻害する。
【００１９】
好ましくは、抗体またはその抗原結合性断片は、ヒトＩＬ１βリガンドとＩＬ−１β受容体との結合を阻害し、かつ、以下の特性のうち少なくとも１つを有する：
ａ）ＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体への結合に関して基準抗体と交叉競合する；
ｂ）ＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体への結合に関して基準抗体と競合する；
ｃ）基準抗体と同一のＩＬ１βリガンドのエピトープまたはＩＬ１β受容体へ結合する；
ｄ）基準抗体と実質的に同一のＫｄでＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体へ結合する；
ｅ）基準抗体と実質的に同一の解離速度（off rate）でＩＬ１βリガンドまたはＩＬ１β受容体へ結合する；
（ここで、基準抗体には、超可変領域であるＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を順番に含む少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む抗原結合部位が含まれ、ＣＤＲ１のアミノ酸配列はＶａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ａｓｎであり、ＣＤＲ２のアミノ酸配列はＩｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙであり、ＣＤＲ３のアミノ酸配列はＡｓｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏである）；
および、これらに直接相当するもの。
【００２０】
好ましくは、抗体またはその抗原結合性断片はヒトＩＬ１βの結合を阻害し、抗体またはその抗原結合性断片には、
ａ）超可変領域であるＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を順番に含む免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）であって、ＣＤＲ１のアミノ酸配列はＶａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ａｓｎであり、ＣＤＲ２のアミノ酸配列はＩｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙであり、ＣＤＲ３のアミノ酸配列はＡｓｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏである、前記ドメインと
ｂ）超可変領域であるＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’を順番に含む免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）であって、ＣＤＲ１’のアミノ酸配列はＡｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓであり、ＣＤＲ２’のアミノ酸配列はＡｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒであり、ＣＤＲ３’のアミノ酸配列はＧｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏである、前記ドメインと、
これらに直接相当するもの
を含む少なくとも１つの抗原結合部位が含まれる。
【００２１】
特に明記しない限り、本明細書中では、いずれのポリペプチド鎖もＮ末端で始まってＣ末端で終わるアミノ酸配列を有するものとして記載する。
【００２２】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、好ましくはＷＯ０２／１６４３６（引用により全内容が本明細書に含まれるものとする）に記載されているような抗体である。特に、本明細書中で参照する配列番号は全て、ＷＯ０２１６４３６に実際に開示されている配列と関連する。
【００２３】
抗体またはその抗原結合性断片がＶＨおよびＶＬドメインの双方を含む場合、これらのドメインは同一のポリペプチド分子上に存在してもよく、あるいは、好ましくは各ドメインは異なる鎖上に存在してもよく、ＶＨドメインは免疫グロブリン重鎖またはその断片の一部であり、ＶＬは免疫グロブリン軽鎖またはその断片の一部である。
【００２４】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片とは、ＩＬ１β抗原（単独でも、他の分子、例えば足場系の分子と会合した状態でも）と結合または相互作用もしくは会合可能な分子を意味する。結合反応の判定は、標準的な方法（定性系のアッセイ）、例えば、ＩＬ１βとその受容体との結合の阻害を判定するバイオアッセイ、または、特異性に関連性はないが同一のアイソタイプである抗体（例えば、抗ＣＤ２５抗体）を使用するネガティブコントロール試験を基準とした任意の種類の結合アッセイによって行うことができる。有利には、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片とＩＬ１βとの結合は、競合結合アッセイで判定可能である。
【００２５】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片の例としては、Ｂ細胞またはハイブリドーマによって産生されるような抗体や断片およびキメラ抗体、ＣＤＲグラフト化もしくはヒト抗体、または、その任意の断片、例えば、Ｆ（ａｂ’）２およびＦａｂ断片、並びに、一本鎖抗体またはシングルドメイン抗体が挙げられる。
【００２６】
一本鎖抗体は、抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメインを、通常１０〜３０アミノ酸、好ましくは１５〜２５アミノ酸からなるペプチドリンカーによって共有結合したものからなる。従って、このような構造には重鎖および軽鎖の定常部は含まれず、小型のペプチドスペーサーであれば、定常部丸ごとよりも抗原性が低いはずであると考えられる。
【００２７】
「キメラ抗体」とは、重鎖または軽鎖または双方の定常領域がヒト由来であり、重鎖および軽鎖双方の可変ドメインが非ヒト（例えば、マウス）由来であるか、または、ヒト由来であっても異なるヒト抗体に由来する抗体を意味する。
【００２８】
「ＣＤＲグラフト化抗体」とは、超可変領域（ＣＤＲ）がドナー抗体、例えば、非ヒト（例えば、マウス）抗体または異なるヒト抗体に由来し、免疫グロブリンの残りの部分（例えば、定常領域や、可変ドメインの高度に保存された部分、即ち、フレームワーク領域）の全てまたは実質的に全てがアクセプター抗体（例えば、ヒト由来の抗体）に由来する抗体を意味する。しかしながら、ＣＤＲグラフト化抗体は、フレームワーク領域中（例えば、超可変領域に隣接するフレームワーク領域の部分）にドナー配列のアミノ酸を数個含んでいてもよい。
【００２９】
「ヒト抗体」とは、重鎖および軽鎖双方の定常領域および可変領域が全てヒト由来であるか、または、ヒト由来の配列と実質的に同一である抗体を意味し、必ずしも同一の抗体に由来するわけではなく、マウス免疫グロブリンの可変部および定常部の遺伝子がヒトの対応物と置き換わっているマウス産生抗体、例えば、一般的に見てＥＰ０５４６０７３Ｂ１、ＵＳＰ５５４５８０６、ＵＳＰ５５６９８２５、ＵＳＰ５６２５１２６、ＵＳＰ５６３３４２５、ＵＳＰ５６６１０１６、ＵＳＰ５７７０４２９、ＥＰ０４３８４７４Ｂ１およびＥＰ０４６３１５１Ｂ１に記載のものが挙げられる。
【００３０】
従って、好ましいキメラ抗体では、重鎖および軽鎖双方の可変ドメインがヒト由来であり、例えば、配列番号１および配列番号２に示すＡＣＺ８８５抗体（カナキヌマブとも呼ばれる）の重鎖および軽鎖可変ドメインである。
【００３１】
本明細書中、用語「抗原結合性断片」とは、ＩＬ１β抗原（単独でも、他の分子、例えば足場系の分子と会合した状態でも）と結合または相互作用もしくは会合する能力を保持する１つ以上の抗体断片を云う。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片でも果たせることが判っている。抗体の、用語「抗原結合性断片」に包含される結合性断片の例としては以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：
ｉ）抗原結合性断片であるＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；
ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結した２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；
ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；
ｉｖ）抗体（Ａｂ）の同一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；
ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ward et al., 1989, Nature341;544-546）；および
ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）。
【００３２】
好ましくは、抗原結合性断片はＡＣＺ８８５に由来する。
【００３３】
一本鎖抗体も、抗体の、用語「抗原結合性断片」に包含されるものとする。一本鎖抗体の他の形態、例えばダイアボディも包含される。ダイアボディは二価であり、ＶＬおよびＶＨドメインが一本のポリペプチド鎖上で発現する二重特異性抗体であるが、同一鎖上の２つのドメインが対合してしまうほど短いリンカーを使用しているため、当該ドメインを強制的に別の鎖の相補性ドメインと対合させて２つの抗原結合部位を作出する（Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448）。
【００３４】
定常領域ドメインには、好ましくは、適切なヒト定常領域ドメイン、例えば「Sequences of Proteins of Immunological Interest」Kabat E. A. et al（米国保健福祉省、公衆衛生局、国立衛生研究所）に記載されているものも含まれる。超可変領域は任意の種類のフレームワーク領域と連結可能であるが、好ましくはヒト由来である。適切なフレームワーク領域は、Kabat E. A. et al.（前掲）に記載されている。好ましい重鎖フレームワークはヒト重鎖フレームワークであり、例えば、配列番号１に示すＡＣＺ８８５抗体の重鎖フレームワークである。ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４領域から順番になる。同様に、配列番号２には、ＦＲ１’、ＦＲ２’、ＦＲ３’およびＦＲ４’領域から順番になる、好ましいＡＣＺ８８５軽鎖フレームワークを示す。
【００３５】
従って、本発明は、１位のアミノ酸で始まり１１８位のアミノ酸で終わる配列番号１に示すアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有する第一ドメインを含むか、または、前記第一ドメインと、１位のアミノ酸で始まり１０７位のアミノ酸で終わる配列番号２に示すアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有する第二ドメインとを含む、少なくとも１つの抗原結合部位を含む抗体またはその抗原結合性断片を含む組み合わせを提供する。
【００３６】
全てのヒトに元々存在するタンパク質に対して生成したモノクローナル抗体は、通常非ヒトシステム（例えば、マウス）で開発されたものであり、そのままでは通常非ヒトタンパク質である。その結果、ハイブリドーマによって産生されるような異種抗体をヒトへ投与した場合、主に異種免疫グロブリンの定常部によって仲介される望ましくない免疫応答が惹起される。このため、長期間にわたって投与することができないため、このような抗体の利用には明らかに限界がある。従って、ヒトへ投与した際に実質的な同種異系応答を惹起しにくい、一本鎖抗体、シングルドメイン抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、とりわけヒト抗体を使用するのが特に好ましい。
【００３７】
以上のことから、本発明のより好ましい抗体または抗原結合性断片は、少なくとも以下のものを含むヒト抗ＩＬ１β抗体：
ａ）以下のものを含む免疫グロブリン重鎖またはその断片：
（ｉ）超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を順番に含む可変ドメインと、
（ｉｉ）ヒト重鎖の定常部またはその断片
（ここで、ＣＤＲ１のアミノ酸配列はＶａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ａｓｎであり、ＣＤＲ２のアミノ酸配列はＩｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙであり、ＣＤＲ３のアミノ酸配列はＡｓｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏである）；および
ｂ）以下のものを含む免疫グロブリン軽鎖またはその断片：
（ｉ）上記超可変領域と必要に応じてＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’の超可変領域も順番に含む可変ドメインと、
（ｉｉ）ヒト軽鎖の定常部またはその断片
（ここで、ＣＤＲ１’のアミノ酸配列はＡｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓであり、ＣＤＲ２’のアミノ酸配列はＡｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒであり、ＣＤＲ３’のアミノ酸配列はＨｉｓ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏである）；
並びに、これらに直接相当するものから選択される。
【００３８】
あるいは、当該組み合わせの抗体または抗原結合性断片は、以下のものを含む抗原結合部位を含む一本鎖結合性分子：
ａ）超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を順番に含む第一ドメイン（当該超可変領域は配列番号１に示すアミノ酸配列を有する）、
ｂ）超可変領域ＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’を含む第二ドメイン（当該超可変領域は配列番号２に示すアミノ酸配列を有する）、および
ｃ）第一ドメインのＮ末端と第二ドメインのＣ末端とへ結合した、または、第一ドメインのＣ末端と第二ドメインのＮ末端とへ結合したペプチドリンカー；
並びに、これらに直接相当するものから選択することも可能である。
【００３９】
当該技術分野で周知なように、アミノ酸配列の軽微な変化、例えば、１個、数個または複数個のアミノ酸の欠失、付加または置換によって、元のタンパク質と実質的に同一の特性を有するアレル体を誘導することができる。
【００４０】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、天然および／または非天然アミノ酸を含むことができる。本明細書中、用語「天然および非天然アミノ酸」とは、合成類似体または天然由来ペプチド（Ｄ体およびＬ体を含む）を調製する際にペプチド化学の当業者によって一般に利用される、天然由来のアミノ酸と、タンパク質を構成しない他のα−アミノ酸との両方を云う。天然由来のアミノ酸はグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、メチオニン、トレオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、シスレイン、プラリン、ヒスチジン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニン、オルニチン、リシンおよびγ−カルボキシグルタミン酸である。非天然α−アミノ酸の例としては、ヒドロキシリシン、シトルリン、キヌレニン、メチオニンスルフェート、アミノアラニン、フェニルグリシン、ビニルアラニン、その他が挙げられる。
【００４１】
本発明では、配列を最適にアライメントしてアミノ酸配列中のギャップや挿入を非同一残基としてカウントした場合に、少なくとも８０％同一のアミノ酸残基を似たような位置に有していれば、アミノ酸配列は互いに少なくとも８０％相同であると考える。
【００４２】
ヒトＩＬ１βとその受容体との結合の阻害は、様々なアッセイ、例えばＷＯ０２／１６４３６に記載のアッセイで簡便に試験可能である。
【００４３】
本明細書中、用語「同程度」とは、基準分子と等価分子とが、統計的に見て、上述のアッセイの１つにおいて本質的に同一のＩＬ１β結合阻害曲線を示すことを意味する。例えば、本発明のＩＬ１β結合性分子は、典型的には、上述のようにアッセイした際に、ＩＬ１βとその受容体との結合の阻害に対して、対応の基準分子のＩＣ５０の±５倍以内、好ましくは実質的に同一のＩＣ５０を有する。
【００４４】
例えば、使用するアッセイは、可溶性ＩＬ１受容体または標的エピトープと、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片とによるＩＬ１β結合の競合阻害アッセイであってよい。
【００４５】
最も好ましくは、本発明の組み合わせに含まれる抗ＩＬ１β抗体は、少なくとも以下のものを含む：
ａ）１位のアミノ酸で始まり１１８位のアミノ酸で終わる配列番号１に示すアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有する可変ドメインと、ヒト重鎖の定常部とを含む１つの重鎖；および
ｂ）１位のアミノ酸で始まり１０７位のアミノ酸で終わる配列番号２に示すアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有する可変ドメインと、ヒト軽鎖の定常部とを含む１つの軽鎖。
【００４６】
最も好ましくは、本発明の組み合わせに含まれるＩＬ１β結合性分子はＡＣＺ８８５である。
【００４７】
ヒト重鎖の定常部はγ１、γ２、γ３、γ４、μ、α１、α２、δまたはε型であってよく、好ましくはγ型であり、より好ましくはγ１型であるのに対し、ヒト軽鎖の定常部はκまたはλ型（λ１、λ２およびλ３サブタイプを含む）であってよいが、好ましくはκ型である。これらの全ての定常部のアミノ酸配列はKabat et al.（前掲）に記載されている。
【００４８】
本発明の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、ＷＯ０２／１６４３６等に記載されているような組換えＤＮＡ技術によって生成可能である。
【００４９】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片が、成熟ヒトＩＬ１βのＧｌｕ６４残基（成熟ヒトＩＬ１βの残基Ｇｌｕ６４はヒトＩＬ１β前駆体の残基１８０に相当）を含むループを含むヒトＩＬ１βの抗原性エピトープに対して結合特異性を有することも、本発明の範囲内である。このエピトープは、ＩＬ１ベータ受容体の認識部位の外側にあり、そのため、このエピトープに対する抗体（例えば、ＡＣＺ８８５抗体）が、ヒトＩＬ１βとその受容体との結合を阻害できることは予想外である。従って、このような抗体またはその抗原結合性断片を糖尿病（特に１型または２型糖尿病）の治療に用いることは、本発明の組み合わせに含まれる。
【００５０】
従って、さらなる実施態様において、本発明には、成熟ヒトＩＬ１βの残基Ｇｌｕ６４を含むループを含むヒトＩＬ１βの抗原性エピトープに対する抗原結合特異性を有し、かつ、ＩＬ−１βとその受容体との結合を阻害し得る、糖尿病（特に１型または２型糖尿病）の治療ための抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片を含む組み合わせが含まれる。
【００５１】
さらなる実施態様において、本発明は、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせを意図し、
ｉ）Ｇｌｕ６４を含むループを含む成熟ヒトＩＬ１βの抗原性エピトープに対する結合特異性を有し、かつ、ＩＬ１βとその受容体との結合を阻害し得る、糖尿病の予防および／または治療のための抗体またはその抗原結合性断片；
ｉｉ）Ｇｌｕ６４を含むループを含む成熟ヒトＩＬ１βの抗原性エピトープに対する結合特異性を有し、かつ、ＩＬ１βとその受容体との結合を阻害し得る抗体またはその抗原結合性断片の有効量を患者へ投与することを含む、患者の糖尿病を予防および／または治療する方法；
ｉｉｉ）  Ｇｌｕ６４を含むループを含む成熟ヒトＩＬ１βの抗原性エピトープに対する結合特異性を有し、かつ、ヒトＩＬ１βとその受容体との結合を阻害し得る抗体またはその抗原結合性断片を、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤または担体と組み合わせて含む、患者の糖尿病を治療するための医薬組成物
を含む。
【００５２】
本記載の目的では、抗体またはその抗原結合性断片が、ＡＣＺ８８５抗体と実質的に同程度にＩＬ１βとその受容体との結合を阻害し得る場合、即ち、実施例で開示する標準的なＢＩＡｃｏｒｅ分析等で測定した解離平衡定数（ＫＤ）が１０ｎＭ以下、例えば１ｎＭ以下、好ましくは１００ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは約１０ｐＭである場合、抗体は「ヒトＩＬ１βの結合を阻害し得る」。
【００５３】
従って、さらなる態様において本発明は、ＩＬ１βへの結合のＫＤが約１０ｎＭ、１ｎＭ、好ましくは１００ｐＭ、より好ましくは５０ｐＭ以下、より好ましくは４０ｐＭ以下、より好ましくは３０ｐＭ以下、より好ましくは約１０ｐＭであるＩＬ１βへの抗体またはその抗原結合性断片の糖尿病（特に２型糖尿病）の治療への使用を提供する。本発明のこの態様には、Ｇｌｕ６４を含むループを含む成熟ヒトＩＬ１βの抗原決定基に対して結合特異性を有する上述したような高親和性抗体またはその抗原結合性断片についての使用、方法および組成物も含まれる。
【００５４】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片には、保存的修飾を導入することが可能である。本明細書中、用語「保存的修飾」とは、抗ＩＬ１β抗体またはそのアミノ酸配列を含有する抗原結合性断片の結合特性に顕著に影響または変化を与えないアミノ酸修飾を指すものとする。このような保存的修飾としては、アミノ酸の置換、付加および欠失が挙げられる。修飾は、当該技術分野で公知の標準的な技術、例えば、部位特異的変異処理やＰＣＲによる変異処理によって開示の抗体へ導入することができる。保存的アミノ酸置換とは、アミノ酸残基を類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置き換えるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当該技術分野で定義済みである。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電の極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。従って、開示の抗体またはその抗原結合性断片のＣＤＲ領域内の１個以上のアミノ酸残基を、同じ側鎖ファミリーの他のアミノ酸残基で置き換えることが可能であり、改変した抗体またはその抗原結合性断片を、保持されている機能について試験することが可能である。保持されている機能を試験するためのアッセイは当業者に公知である。様々な場合で、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片の重鎖および軽鎖は、必要に応じてシグナル配列を含んでいてもよい。
【００５５】
本発明の態様の一つによれば、ＩＬ１介在性疾患（特に１型および／または２糖尿病）を予防、進行遅延もしくは治療する方法、または、患者のベータ細胞機能を向上させる方法であって、当該方法を必要とする患者に、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬と含む組み合わせを治療上有効量で投与することを含む前記方法が提供される。
【００５６】
本出願では、用語「ＩＬ１介在性疾患」には、直接的か間接的かに拘わらず、ＩＬ１が疾患または医学的症状において、その因果関係、発症、進行、残留または病理などの役割を果たす全ての疾患および医学的症状が包含される。このような疾患としては、敗血症、敗血症性もしくは内毒素性ショック、アレルギー、喘息、骨喪失、虚血、卒中、関節リウマチおよび糖尿病（例えば、１型糖尿病または２型糖尿病）が挙げられる。
【００５７】
本発明の方法の一つの好ましい実施態様によれば、ＩＬ１介在性疾患は１型糖尿病および／または２型糖尿病である。
【００５８】
本記載では、用語「治療」とは、予防または防止処置、並びに、治癒または疾患緩和処置の双方を指し、疾患に罹患する危険性のある患者または疾患に罹患した疑いのある患者、並びに、発症した患者または疾患もしくは医学的症状に罹患したと診断された患者の処置を含み、かつ、臨床上の再発を抑えることを含む。
【００５９】
当該組み合わせの成分である抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、簡便には、非経口、静脈内（例えば、前肘（antercubital）静脈または他の末梢静脈）、筋肉内または皮下へ投与する。好ましくは、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は静脈内へ投与する。治療には、典型的には、本発明の抗体またはその抗原結合性断片を２〜３ヶ月に１回、好ましくは１ヶ月に１回、好ましくはより短い頻度（less frequently）（例えば週に１回）で投与することが含まれる。治療レジメンは医師により症例ごとに応じて決定、修正または変更可能である。
【００６０】
本発明の組み合わせの成分である抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、従来の方法で製造可能である。
【００６１】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、好ましくは、凍結乾燥された形態で提供する。即時投与の場合には、本発明の組み合わせのこの成分を適切な水性担体、例えば、注射用滅菌水または滅菌緩衝化生理食塩水に溶解する。ボーラス注射ではなく輸注（infusion）での投与用に溶液を大量に作るのが望ましいと考えられる場合には、製剤化の際にヒト血清アルブミンまたは患者自身のヘパリン化血液を生理食塩水へ添加するのが有利である。このような生理学的に不活性なタンパク質を過剰に存在させることで、輸液と一緒に使用される容器やチューブの壁に吸着して抗体が目減りするのを防ぐ。アルブミンを使用する場合、適切な濃度は生理食塩水溶液の０．５〜４．５重量％である。
【００６２】
本発明の組み合わせのもう一方の成分は、少なくとも１種の抗糖尿病薬（上述したように併用相手とも云う）である。用語「抗糖尿病薬」は本明細書中では用語「抗糖尿病性化合物」と区別なく使用され、この２つは同じ意味を持つ、即ち、ＩＬ−１介在性疾患または症状（例えば、１型糖尿病および／または２型糖尿病等）を治療するのに適した併用相手を意味すると理解されたい。
【００６３】
少なくとも１種の併用相手は、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター、例えば、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰａｓｅｓ）阻害剤、非低分子模倣化合物およびグルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）阻害剤、肝グルコース産生の調節異常に作用する化合物、例えば、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐａｓｅ）阻害剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ）阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニストおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害剤、インスリン感受性増強薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、胃内容排出阻害剤、インスリンおよびα２−アドレナリンアンタゴニスト、または、このような化合物の薬学的に許容される塩および必要に応じて少なくとも１種の薬学的に許容される担体からなる群より選択することができる。
【００６４】
「ＰＴＰａｓｅ阻害剤」の例としては、米国特許第６，０５７，３１６号、米国特許第６，００１，８６７号、ＷＯ９９／５８５１８、ＷＯ９９／５８５２２、ＷＯ９９／４６２６８、ＷＯ９９／４６２６７、ＷＯ９９／４６２４４、ＷＯ９９／４６２３７、ＷＯ９９／４６２３６、ＷＯ９９／１５５２９およびPoucheret et al., Mol. Cell Biochem. 1998, 188, 73-80に開示のものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６５】
「非低分子模倣化合物」の例としては、Science1999, 284; 974-97（特にＬ−７８３，２８１）およびＷＯ９９／５８１２７（特にＣＬＸ−９０１）に開示のもの挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
「ＧＦＡＴ阻害剤」の例としては、Mol. Cell. Endocrinol. 1997,135(1), 67-77に開示のもの挙げられるが、これらに限定されない。
【００６７】
本明細書中、用語「Ｇ６Ｐａｓｅ阻害剤」とは、Ｇ６Ｐａｓｅの活性を低下または阻害することにより、肝臓でのグリコーゲン合成を低下または阻害する化合物または組成物を意味する。このような化合物の例は、ＷＯ００／１４０９０、ＷＯ９９／４００６２、ＷＯ９８／４０３８５、ＥＰ６８２０２４およびDiabetes 1998, 47, 1630-1636に開示されている。
【００６８】
本明細書中、用語「Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ阻害剤」とは、Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅの活性を低下または阻害することにより、肝臓でのグリコーゲン合成を低下または阻害する化合物または組成物を意味する。このような化合物の例は、ＷＯ００／１４０９５、ＷＯ９９／４７５４９、ＷＯ９８／３９３４４、ＷＯ９８／３９３４３およびＷＯ９８／３９３４２に開示されている。
【００６９】
本明細書中、用語「ＧＰ阻害剤」とは、ＧＰの活性を低下または阻害することにより、肝臓でのグリコーゲン分解を低下または阻害する化合物または組成物を意味する。このような化合物の例は、ＥＰ９７８２７９、米国特許第５９９８４６３号、ＷＯ９９／２６６５９、ＥＰ８４６４６４、ＷＯ９７／３１９０１、ＷＯ９６／３９３８４、ＷＯ９６３９３８５に開示されており、特にProc. Natl. Acad Sci USA 1998, 95, 1776-1781に記載のＣＰ−９１１４９である。
【００７０】
本明細書中、用語「グルカゴン受容体アンタゴニスト」は、ＷＯ９８／０４５２８に記載の化合物（特にＢＡＹ２７−９９５５）や、Bioorg Med. Chem. Lett 1992, 2, 915-918（特にＣＰ−９９，７１１）、J. Med. Chem. 1998, 41, 5150-5157（特にＮＮＣ９２−１６８７）およびJ. Biol Chem. 1999, 274; 8694-8697（特にＬ−１６８，０４９）に記載の化合物、また、ＵＳ５，８８０，１３９、ＷＯ９９／０１４２３、ＵＳ５，７７６，９５４、ＷＯ９８／２２１０９、ＷＯ９８／２２１０８、ＷＯ９８／２１９５７およびＷＯ９７／１６４４２に開示の化合物に特に関する。
【００７１】
本明細書中、用語「ＰＥＰＣＫ阻害剤」とは、ＰＥＰＣＫの活性を低下または阻害することにより、肝臓でのグリコーゲン合成を低下または阻害する化合物または組成物を意味する。このような化合物の例は、米国特許第６，０３０，８３７号およびMol. Biol. Diabetes 1994, 2, 283-99に開示されている。
【００７２】
本明細書中、用語「ＰＤＨＫ阻害剤」とは、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ阻害剤を意味し、Aicher et al., J. Med. Chem. 42 (1999) 2741-2746に開示の化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
本明細書中、用語「インスリン感受性増強薬」とは、インスリンに対する組織感受性を増強する任意かつ全ての薬理学的に活性な化合物を意味する。インスリン感受性増強薬としては、例えば、ＧＳＫ−３阻害剤、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト、ベータ−３ＡＲアゴニスト、ＵＣＰアゴニスト、抗糖尿病性チアゾリジンジオン（グリタゾン）、非グリタゾン系ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニスト、抗糖尿病性バナジウム含有化合物およびビグアナイド薬（例えば、メトホルミン）が挙げられる。
【００７４】
ビグアナイド薬（例えば、メトホルミン）は通常、５００ｍｇ、７５０ｍｇ、８５０ｍｇ、１０００ｍｇおよび２０００ｍｇ以上を含有する剤形で投与される。好ましくは、メトホルミンは１０００ｍｇ／日以上の投与量で投与される。
【００７５】
インスリン感受性増強薬は、好ましくは、抗糖尿病性チアゾリジンジオン、抗糖尿病性バナジウム含有化合物およびビグアナイド薬であるメトホルミンからなる群より選択される。
【００７６】
一つの好ましい実施態様では、インスリン感受性増強薬はメトホルミンである。
【００７７】
メトホルミン（ジメチルジグアニド）およびその塩酸塩の調製は最新技術であり、最初に開示したのはEmil A. WernerおよびJames Bell（J. Chem. Soc. 121, 1922, 1790-1794）である。メトホルミンは、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥＴＭ等の商標名で販売されている形態で使用が可能である。
【００７８】
「ＧＳＫ−３阻害剤」の例としては、ＷＯ００／２１９２７およびＷＯ９７／４１８５４に開示のものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７９】
「ＲＸＲアゴニスト」とは、ＲＸＲホモダイマーまたはヘテロダイマーと組み合わせた際に、当業者に公知のアッセイで測定してＲＸＲの転写調節活性を増加させる化合物または組成物を意味し、このようなアッセイとしては、米国特許第４，９８１，７８４号、同第５，０７１，７７３号、同第５，２９８，４２９号、同第５，５０６，１０２号、ＷＯ８９／０５３５５、ＷＯ９１／０６６７７、ＷＯ９２／０５４４７、ＷＯ９３／１１２３５、ＷＯ９５／１８３８０、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０４３９９、ＰＣＴ／ＵＳ９４／０３７９５およびＣＡ２，０３４，２２０（引用により本明細書に含まれるものとする）に記載または開示の「同時トランスフェクション」または「シス−トランス」アッセイが挙げられるが、これらに限定されない。ＲＸＲアゴニストとしては、ＲＸＲをＲＡＲよりも優先的に活性化する化合物（即ち、ＲＸＲ特異的アゴニスト）や、ＲＸＲとＲＡＲの両方を活性化する化合物（即ち、パンアゴニスト）が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、ある特定の細胞状況（cellular context）でのみＲＸＲを活性化する化合物（即ち、部分アゴニスト）も挙げられる。以下の文献、特許および特許出願に開示または記載されたＲＸＲアゴニスト活性を有する化合物も、引用によりに含まれるものとする：米国特許第５，３９９，５８６号および同第５，４６６，８６１号、ＷＯ９６／０５１６５、ＰＣＴ／ＵＳ９５／１６８４２、ＰＣＴ／ＵＳ９５／１６６９５、ＰＣＴ／ＵＳ９３／１００９４、ＷＯ９４／１５９０１、ＰＣＴ／ＵＳ９２／１１２１４、ＷＯ９３／１１７５５、ＰＣＴ／ＵＳ９３／１０１６６、ＰＣＴ／ＵＳ９３／１０２０４、ＷＯ９４／１５９０２、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０３９４４、ＷＯ９３／２１１４６、仮出願第６０，００４，８９７号および同第６０，００９，８８４号、Boehm, et al., J. Med. Chem. 38(16):3146-3155, 1994、Boehm, et al., J. Med. Chem. 37(18):2930-2941, 1994、Antras et al., J. Biol. Chem. 266:1157-1161 (1991)、Salazar-Olivo et al., Biochem. Biophys. Res. Commun.204:157-263 (1994)およびSafanova, Mol. Cell. Endocrin. 104:201-211 (1994)。ＲＸＲ特異的アゴニストとしては、ＬＧ１００２６８（即ち、２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−シクロプロピル］−ピリジン−５−カルボン酸）およびＬＧＤ１０６９（即ち、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−２−カルボニル］−安息香酸）、並びに、これらの類似体、誘導体および薬学的に許容される塩が挙げられるが、これらに限定されない。ＬＧ１００２６８およびＬＧＤ１０６９の構造および合成は、Boehm, et al., J. Med. Chem. 38(16):3146-3155, 1994（引用により本明細書に含まれるものとする）に開示されている。パンアゴニストとしては、ＡＬＲＴ１０５７（即ち、９−シスレチノイン酸）、並びに、その類似体、誘導体および薬学的に許容される塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８０】
「ベータ−３ＡＲアゴニスト」の例としては、ＣＬ−３１６，２４３（Lederle Laboratories）やＷＯ９９／２９６７２、ＷＯ９８／３２７５３、ＷＯ９８／２０００５、ＷＯ９８／０９６２５、ＷＯ９７／４６５５６、ＷＯ９７／３７６４６および米国特許第５，７０５，５１５号に開示のものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
本明細書中、用語「ＵＣＰアゴニスト」とは、ＵＣＰ−１、ＵＣＰ−２およびＵＣＰ−３のアゴニストを意味する。ＵＣＰはVidal-Puig et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 235(1) pp. 79-82 (1997)に開示されている。このようなアゴニストは、ＵＣＰの活性を増加させる化合物または組成物である。
【００８２】
抗糖尿病性チアゾリジンジオン（グリタゾン）は、例えば、（Ｓ）−（（３，４−ジヒドロ−２−（フェニル−メチル）−２Ｈ−１−ベンゾピラン−６−イル）メチル−チアゾリジン−２，４−ジオン（エングリタゾン）、５−｛［４−（３−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−１−オキソプロピル）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ダルグリタゾン）、５−｛［４−（１−メチル−シクロヘキシル）メトキシ）−フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（シグリタゾン）、５−｛［４−（２−（１−インドリル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＲＦ２１８９）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−エトキシ）］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＢＭ−１３．１２４６）、５−（２−ナフチルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＹ−３１６３７）、ビス｛４−［（２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニル）メチル］フェニル｝メタン（ＹＭ２６８）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−２−ヒドロキシエトキシ］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＤ−５０７５）、５−［４−（１−フェニル−１−シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンジル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＮ−１０８）、５−｛［４−（２−（２，３−ジヒドロインドール−１−イル）エトキシ）フェニルメチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロ−フェニル］）−２−プロピニル］−５−フェニルスルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロフェニル］）−２−プロピニル］−５−（４−フルオロフェニル−スルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−｛［４−（２−（メチル−２−ピリジニル−アミノ）−エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ロシグリタゾン）、５−｛［４−（２−（５−エチル−２−ピリジル）エトキシ）フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（ピオグリタゾン）、５−｛［４−（（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（トログリタゾン）、５−［６−（２−フルオロ−ベンジルオキシ）ナフタレン−２−イルメチル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＭＣＣ５５５）、５−｛［２−（２−ナフチル）−ベンゾオキサゾール−５−イル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（Ｔ−１７４）および５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）ベンズアミド（ＫＲＰ２９７）である。
【００８３】
好ましくは、抗糖尿病性チアゾリジンジオンは下記式Ｉの化合物：
【００８４】
【化１】
2012526080.tif 000002
【００８５】
［式中、
Ｍは、ナフチル、ベンゾオキサゾリル、ジヒドロベンゾピラニル、インドール、フェニル（ハロゲンで置換されていてもよい）またはフェニルエチニル（ハロゲンで置換されていてもよい）を表し；
Ｒβ１はハロゲンまたは−ＱＲβ４基を表し、ここで
Ｑは酸素、低級アルキレン、カルボニルまたは−ＮＨ−であってよく、
Ｒβ４は、
ナフチル；
未置換または２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニルで置換されたフェニル；または
未置換または以下の基で置換された低級アルキルまたはヒドロキシ低級アルキルであり：
ａ）インドールまたは２，３−ジヒドロインドール、
ｂ）ピリジル、低級アルキル−ピリジル、Ｎ−低級アルキル−Ｎ−ピリジルアミノまたはハロゲンフェニル、
ｃ）未置換ジヒドロベンゾピラニルまたはヒドロキシと低級アルキルとで置換されたジヒドロベンゾピラニル、
ｄ）低級アルキルとフェニルとで置換されたオキサゾリル、
ｅ）未置換シクロアルキルまたは低級アルキルで置換されたシクロアルキル、または
ｆ）アリールシクロアルキルカルボニル；
Ｒβ２は、水素またはトリフルオロメチルフェニル−低級アルキルカルバモイルを表し；
Ｒβ３は、水素またはアリールスルホニルを表す］
または、その薬学的に許容される塩である。
【００８６】
好ましくは、式ＶＩＩＩの化合物は、（Ｓ）−（（３，４−ジヒドロ−２−（フェニル−メチル）−２Ｈ−１−ベンゾピラン−６−イル）メチル−チアゾリジン−２，４−ジオン（エングリタゾン）、５−｛［４−（３−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−１−オキソプロピル）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ダルグリタゾン）、５−｛［４−（１−メチル−シクロヘキシル）メトキシ）−フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（シグリタゾン）、５−｛［４−（２−（１−インドリル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＲＦ２１８９）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−エトキシ）］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＢＭ−１３．１２４６）、５−（２−ナフチルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＹ−３１６３７）、ビス｛４−［（２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニル）メチル］フェニル｝メタン（ＹＭ２６８）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−２−ヒドロキシエトキシ］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＤ−５０７５）、５−［４−（１−フェニル−１−シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンジル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＮ−１０８）、５−｛［４−（２−（２，３−ジヒドロインドール−１−イル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロ−フェニル］）−２−プロピニル］−５−フェニルスルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロフェニル］）−２−プロピニル］−５−（４−フルオロフェニル−スルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［６−（２−フルオロ−ベンジルオキシ）ナフタレン−２−イルメチル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＭＣＣ５５５）、５−｛［２−（２−ナフチル）−ベンゾオキサゾール−５−イル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（Ｔ−１７４）および５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）ベンズアミド（ＫＲＰ２９７）またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される。
【００８７】
より好ましくは、式ＶＩＩＩの化合物は、５−｛［４−（２−（メチル−２−ピリジニル−アミノ）−エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ロシグリタゾン）、５−｛［４−（２−（５−エチル−２−ピリジル）エトキシ）フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（ピオグリタゾン）および５−｛［４−（（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（トログリタゾン）、ＭＣＣ５５５、Ｔ−１７４およびＫＲＰ２９７、特にロシグリタゾン、ピオグリタゾンおよびトログリタゾン、または、その薬学的に許容される塩からなる群より選択される。
【００８８】
グリタゾンである５−｛［４−（２−（５−エチル−２−ピリジル）エトキシ）フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（ピオグリタゾン、ＥＰ０１９３２５６Ａ１）、５−｛［４−（２−（メチル−２−ピリジニル−アミノ）−エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ロシグリタゾン、ＥＰ０３０６２２８Ａ１）、５−｛［４−（（３，４−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ）−フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（トログリタゾン、ＥＰ０１３９４２１）、（Ｓ）−（（３，４−ジヒドロ−２−（フェニル−メチル）−２Ｈ−１−ベンゾピラン−６−イル）メチル−チアゾリジン−２，４−ジオン（エングリタゾン、ＥＰ０２０７６０５Ｂ１）、５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）ベンズアミド（ＫＲＰ２９７、ＪＰ１００８７６４１−Ａ）、５−［６−（２−フルオロ−ベンジルオキシ）ナフタレン−２−イルメチル］チアゾリジン−２，４−ジオン（ＭＣＣ５５５、ＥＰ０６０４９８３Ｂ１）、５−｛［４−（３−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−１−オキソプロピル）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ダルグリタゾン、ＥＰ０３３２３３２）、５−（２−ナフチルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＹ−３１６３７、ＵＳ４，９９７，９４８）、５−｛［４−（１−メチル−シクロヘキシル）メトキシ）−フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（シグリタゾン、ＵＳ４，２８７，２００）はそれぞれ各物質について括弧内に示した文献に一般的および具体的に開示されており、各場合とも特に化合物の請求項および実施例の最終生成物に開示されており、最終生成物、医薬品および請求項の内容はこれらの刊行物を引用することで本出願に含まれるものとする。ＤＲＦ２１８９および５−｛［４−（２−（２，３−ジヒドロインドール−１−イル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオンの調製は、B.B. Lohray et al., J. Med. Chem. 1998, 41, 1619-1630；１６２７頁と１６２８頁のＥｘａｍｐｌｅ  ２ｄおよび３ｇに記載されている。５−［３−（４−クロロフェニル］）−２−プロピニル］−５−フェニルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオンおよび本明細書で言及されるＡがフェニルエチニルである他の化合物の調製は、J. Wrobel et al., J. Med. Chem. 1998, 41, 1084-1091に記載の方法に従って行うことができる。
【００８９】
特に、ＭＣＣ５５５はＥＰ０６０４９８３Ｂ１の４９頁３０〜４５行に開示された通りに製剤化が可能であり；エングリタゾンはＥＰ０２０７６０５Ｂ１の６頁５２行〜７頁６行に開示された通りに、または、２４頁の実施例２７または２８と同様にして製剤化が可能であり；ダルグリタゾンおよび５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−エトキシ）］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＢＭ−１３．１２４６）は、ＥＰ０３３２３３２Ｂ１の８頁４２〜５４行に開示された通りに製剤化が可能である。ＡＹ−３１６３７はＵＳ４，９９７，９４８の４欄３２〜５１行に開示された通りに投与可能であり、ロシグリタゾンはＥＰ０３０６２２８Ａ１の９頁３２〜４０行に開示された通りに投与可能であり、後者は好ましくはマレイン酸塩として投与する。ロシグリタゾンは、ＡＶＡＮＤＩＡＴＭ等の商標名で販売されている形態で投与することができる。トログリタゾンは、ＲｅＺｕｌｉｎＴＭ、ＰＲＥＬＡＹＴＭ、ＲＯＭＯＺＩＮＴＭ（英国）またはＮＯＳＣＡＬＴＭ（日本）等の商標名で販売されている形態で投与することができる。ピオグリタゾンはＥＰ０１９３２５６Ａ１の実施例２に開示された通りに投与可能であり、好ましくは一塩酸塩の形態で投与する。個々の患者のニーズに対応して、ピオグリタゾンをＡＣＴＯＳＴＭ等の商標名で販売されている形態で投与することができる。シグリタゾンは、例えば、ＵＳ４，２８７，２００の実施例１３に開示された通りに製剤化が可能である。
【００９０】
非グリタゾン系ＰＰＡＲγアゴニストは、特にＮ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｌ−チロシン類似体、例えばＧＩ−２６２５７０およびＪＴＴ５０１である。
【００９１】
本明細書中、用語「ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニスト」とは、同時にＰＰＡＲγアゴニストであり、かつ、ＰＰＡＲαアゴニストである化合物を意味する。好ましいＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニストは、特にω−［（オキソキナゾリニルアルコキシ）フェニル］アルカノエートおよびその類似体であり、とりわけＷＯ９９／０８５０１に記載の化合物ＤＲＦ−５５４１５８およびFukui, Diabetes 2000, 49(5), 759-767に記載の化合物ＮＣ−２１００である。
【００９２】
好ましくは、抗糖尿病性バナジウム含有化合物は、二座モノプロトン性キレート剤(bidentate monoprotic chelant）の生理学的に許容されるバナジウム錯体であり、当該キレート剤はα−ヒドロキシピロンまたはα−ヒドロキシピリジノン、特にＵＳ５，８６６，５６３の実施例に開示のもの（実施例は引用により本明細書に含まれるものとする）またはその薬学的に許容される塩である。
【００９３】
インスリン分泌促進薬は、膵β細胞からのインスリンの分泌を促進する特性を有する薬理学的に活性な化合物である。インスリン分泌促進薬の例としては、グルカゴン受容体アンタゴニスト（上記参照）、スルホニル尿素誘導体、インクレチンホルモン、特にグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）またはＧＬＰ−１アゴニスト、β細胞イミダゾリン受容体アンタゴニスト、並びに、短時間作用型インスリン分泌促進薬、例えば、抗糖尿病性フェニル酢酸誘導体、抗糖尿病性Ｄ−フェニルアラニン誘導体およびT. Page et al., Br. J. Pharmacol. 1997, 122, 1464-1468に記載のＢＴＳ６７５８２が挙げられる。
【００９４】
スルホニル尿素誘導体は、例えば、グリソキセピド、グリブリド、グリベンクラミド、アセトヘキサミド、クロロプロパミド、グリボルヌリド、トルブタミド、トラザミド、グリピザイド、カルブタミド、グリキドン、グリヘキサミド、フェンブタミドまたはトルシクラミドであり、好ましくはグリメピリドまたはグリクラジドである。トルブタミド、グリベンクラミド、グリクラジド、グリボルヌリド、グリキドン、グリソキセピドおよびグリメピリドは、ＲＡＳＴＩＮＯＮ  ＨＯＥＣＨＳＴＴＭ、ＡＺＵＧＬＵＣＯＮＴＭ、ＤＩＡＭＩＣＲＯＮＴＭ、ＧＬＵＢＯＲＩＤＴＭ、ＧＬＵＲＥＮＯＲＭＴＭ、ＰＲＯ−ＤＩＡＢＡＮＴＭおよびＡＭＡＲＹＬＴＭの商標名でそれぞれ販売されている形態等で投与可能である。
【００９５】
ＧＬＰ−１は、例えばW.E. Schmidt et al., Diabetologia 28, 1985, 704-707およびＵＳ５，７０５，４８３に記載のインスリン分泌刺激タンパク質である。本明細書中、用語「ＧＬＰ−１アゴニスト」とは、ＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２の変異体および類似体を意味し、特にＵＳ５，１２０，７１２、ＵＳ５，１１８，６６６、ＵＳ５，５１２，５４９、ＷＯ９１／１１４５７およびC. Orskov et al., J. Biol. Chem. 264 (1989) 12826に開示されている。用語「ＧＬＰ−１アゴニスト」には、特にＧＬＰ−１（７−３７）（Ａｒｇ３６のカルボキシ末端のアミド官能基がＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２分子の３７位でＧｌｙに置換）様の化合物、その変異体および類似体が含まれ、例えば、ＧＬＮ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、Ｄ−ＧＬＮ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、アセチルＬＹＳ９−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＬＹＳ１８−ＧＬＰ−１（７−３７）、特にＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨ、ＶＡＬ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＹ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＴＨＲ８−ＧＬＰ−１（７−３７）、ＭＥＴ８−ＧＬＰ−１（７−３７）および４−イミダゾプロピオニル−ＧＬＰ−１が挙げられる。ＧＬＰアゴニスト類似体であるエキセンジン−４（Greig et al., Diabetologia 1999, 42, 45-50に記載）も特別に好ましい。
【００９６】
本明細書中、用語「β細胞イミダゾリン受容体アンタゴニスト」とは、ＷＯ００／７８７２６およびWang et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996; 278; 82-89に記載されているような化合物（例えば、ＰＭＳ８１２）を意味する。
【００９７】
抗糖尿病性フェニル酢酸誘導体は、好ましくは式ＩＩの化合物：
【００９８】
【化２】
2012526080.tif 000003
【００９９】
［式中、
Ｒδ１は、未置換またはＣ１−Ｃ３アルキルで一置換もしくは二置換された、分岐していないＣ４−Ｃ６アルキレンイミノ基であり；
Ｒδ２は、水素、ハロゲン、メチルまたはメトキシであり；
Ｒδ３は、水素、Ｃ１−Ｃ７アルキル、または、未置換またはハロゲン、メチルもしくはメトキシで置換されたフェニルであり；
Ｒδ４は、水素、アリル、アセチルまたはプロピオニル、または、未置換もしくはフェニルで置換されたＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｗは、メチル、ヒドロキシメチル、ホルミル、カルボキシ、または、２〜５個の炭素原子を含むアルコキシカルボニルであって、アルコキシ基のアルキル部分が未置換またはフェニルで置換されているアルコキシカルボニルである］
または、その薬学的に許容される塩である。
【０１００】
最も好ましくは、式ＩＩの化合物はレパグリニドまたはその薬学的に許容される塩である。
【０１０１】
抗糖尿病性Ｄ−フェニルアラニン誘導体は、好ましくは式ＩＩＩの化合物：
【０１０２】
【化３】
2012526080.tif 000004
【０１０３】
［式中、Ｐｈはフェニルを意味し、
Ｒγ１は、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ６−Ｃ１２アリール、Ｃ６−Ｃ１２アリールアルキル、
【０１０４】
【化４】
2012526080.tif 000005
【０１０５】
−ＣＨ２ＣＯ２Ｒγ３、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＯＣＯ−Ｒγ３および−ＣＨ２−ＯＣＯ−Ｃ（ＣＨ３）３から選択され；
Ｒγ２は、Ｃ６−Ｃ１２アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはシクロアルケニル（いずれの基も１個以上の置換基を有していてもよい）を含む群から選択され；
Ｒγ３は、水素およびＣ１−Ｃ５アルキルから選択される（但し、Ｒγ１およびＲγ３が双方とも水素である場合、Ｒγ２は置換または未置換フェニルまたはナフチル以外である）］
または、その薬学的に許容される塩、または、ヒトもしくは動物の体内で当該化合物に変換可能な前駆体である。
【０１０６】
Ｒγ２がヘテロアリールを表す場合、Ｒγ２は好ましくはキノリニル、ピリジルまたは２−ベンゾフラニルである。
【０１０７】
最も好ましくは、抗糖尿病性Ｄ−フェニルアラニン誘導体はナテグリニドまたはその薬学的に許容される塩である。
【０１０８】
ナテグリニド（Ｎ−［（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシル）−カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニン、ＥＰ１９６２２２およびＥＰ５２６１７１）およびレパグリニド（（Ｓ）−２−エトキシ−４−｛２−［［３−メチル−１−［２−（１−ピペリジニル）フェニル］ブチル］アミノ］−２−オキソエチル｝安息香酸、ＥＰ０１４７８５０Ａ２（特に６１頁の実施例１１）およびＥＰ０２０７３３１Ａ１）はそれぞれ各物質について括弧内に示した文献に一般的および具体的に開示されており、各場合とも特に化合物の請求項および実施例の最終生成物に開示されており、最終生成物、医薬品および請求項の内容はこれらの刊行物を引用することで本出願に含まれるものとする。本明細書中、用語「ナテグリニド」には、結晶修飾体（多形体）、例えば、ＥＰ０５２６１７１Ｂ１またはＵＳ５，４８８，５１０にそれぞれ開示のものが含まれ、その内容は本出願、特に請求項８〜１０の内容、並びに、Ｂ型結晶修飾体に関して言及する際に含まれるものとする。好ましくは、本発明では、Ｂ型またはＨ型、より好ましくはＨ型を使用する。レパグリニドは、ＮｏｖｏＮｏｒｍＴＭ等の商標名で販売されている形態で投与することができる。ナテグリニドは、ＳＴＡＲＬＩＸＴＭ等の商標名で販売されている形態で使用することができる。
【０１０９】
α−グルコシダーゼ阻害剤は、非吸収性の複合糖質を吸収性の単糖類へ分解する小腸のα−グルコシダーゼ酵素を阻害する薬理学的に活性な化合物である。このような化合物の例は、アカルボース、Ｎ−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロピル）バリオラミン（ボグリボース）および１−デオキシノジリマイシン誘導体のミグリトールである。アカルボースは、４”，６”−ジデオキシ−４”−［（１Ｓ）−（１，４，６／５）−４，５，６−トリヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−２−シクロ−ヘキセニルアミノ｝マルトトリオースである。アカルボースの構造はＯ−４，６−ジデオキシ−４−｛［１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ］−４，５，６−トリヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−２−シクロヘキセン−１−イル］−アミノ｝−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｄ−グルコピラノースとしても記載できる。アカルボース（ＵＳ４，０６２，９５０およびＥＰ０２２６１２１）は括弧内に示した文献に一般的および具体的に開示されており、特に化合物の請求項および実施例の最終生成物に開示されており、最終生成物、医薬品および請求項の内容はこれらの刊行物を引用することで本出願に含まれるものとする。個々の患者のニーズに対応して、アカルボースをＧＬＵＣＯＢＡＹＴＭ等の商標名で販売されている形態で投与することができる。ミグリトールは、ＤＩＡＳＴＡＢＯＬ  ５０ＴＭ等の商標名で販売されている形態で投与することができる。
【０１１０】
α−グルコシダーゼ阻害剤は好ましくは、アカルボース、ボグリボースおよびミグリトールからなる群より選択される。
【０１１１】
「胃内容排出阻害剤」のＧＬＰ−１以外の例としては、J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000, 85(3), 1043-1048（特にＣＣＫ−８）およびDiabetes Care 1998; 21; 897-893（特にアミリンおよびその類似体、例えばプラムリンチド）に開示のもの挙げられるが、これらに限定されない。アミリンは、O.G. Kolterman et al., Diabetologia 39, 1996, 492-499等にも記載されている。
【０１１２】
「α２−アドレナリンアンタゴニスト」の例としては、Diabetes 36, 1987, 216-220に記載のミダグリゾールが挙げられるが、これに限定されない。
【０１１３】
同様に、引用特許文献に開示された対応する立体異性体や対応する多形体（例えば、結晶修飾体）も含まれる。
【０１１４】
本発明の非常に好ましい実施態様では、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、（Ｓ）−１−［（３−ヒドロキシ−１−アダマンチル）アミノ］アセチル−２−シアノ−ピロリジンおよび（Ｓ）−１−｛２−［５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチル−アミノアセチル｝−２−シアノ−ピロリジンから選択され、さらに抗糖尿病性化合物は、ナテグリニド、レパグリニド、メトホルミン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、グリソキセピド、グリブリド、グリベンクラミド、アセトヘキサミド、クロロプロパミド、グリボルヌリド、トルブタミド、トラザミド、グリピザイド、カルブタミド、グリキドン、グリヘキサミド、フェンブタミド、トルシクラミド、グリメピリドおよびグリクラジド、または、このような化合物の薬学的に許容される塩からなる群より選択される。
【０１１５】
用語「予防」とは、当該組み合わせを健常患者へ予防的に投与し、本明細書に記載の症状の発生を抑えることを意味する。また、用語「予防」とは、当該組み合わせを、治療対象の症状（特に糖尿病）の前段階にある患者へ予防的に投与することを意味する。
【０１１６】
本明細書中、用語「進行遅延」とは、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む本発明の組み合わせを、治療対象の医学的症状（特に糖尿病、さらには２型糖尿病）の前段階にあり、かつ、対応の症状が既に形成されていると診断されている患者へ投与することを意味する。
【０１１７】
ＰＴＰａｓｅ阻害剤、ＧＳＫ−３阻害剤、非低分子模倣化合物、ＧＦＡＴ阻害剤、Ｇ６Ｐａｓｅ阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニスト、ＰＥＰＣＫ阻害剤、Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ阻害剤、ＧＰ阻害剤、ＲＸＲアゴニスト、ベータ−３ＡＲアゴニスト、ＰＤＨＫ阻害剤、胃内容排出阻害剤およびＵＣＰアゴニストの調製および製剤化の例は、本明細書中で列挙した各物質について示した特許および出願に開示されている。
【０１１８】
コード番号、一般名または商品名によって特定されている活性物質の構造は、標準的な解説書である「メルクインデックス」の現行版から、または、Patents International（例えば、IMS World Publications）等のデータベースから取得可能である。その対応する部分の内容は、引用により本明細書に含まれるものとする。当業者であれば、これらの参考文献に基づいて活性物質を特定することが十分に可能であり、同様に、活性物質を製造し、かつ、薬学的な指標および特性を標準的な試験モデルにてインビトロおよびインビボの双方で試験することも可能である。
【０１１９】
本発明の組み合わせにおいて意図される抗糖尿病薬または抗糖尿病性化合物は、薬学的に許容される塩として存在可能である。これらの化合物が、例えば、少なくとも１つの塩基性中心を有する場合、酸付加塩を形成することができる。対応の酸付加塩は、必要に応じて追加の塩基性中心を有するよう形成することもできる。酸基（例えば、ＣＯＯＨ）を有する化合物も、塩基と塩を形成することができる。例えば、組み合わせるべき化合物は、ナトリウム塩として、マレイン酸塩または二塩酸塩として存在可能である。活性成分またはその薬学的に許容される塩は、水和物の形態で使用することもでき、また、結晶化に使用する他の溶剤を含んでいてもよい。
【０１２０】
併用相手は好ましくは、インスリンシグナル伝達経路モジュレーター、例えば、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰａｓｅｓ）阻害剤、非低分子模倣化合物およびグルタミン−フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼ（ＧＦＡＴ）阻害剤、肝グルコース産生の調節異常に作用する化合物、例えば、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６Ｐａｓｅ）阻害剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｆ−１，６−ＢＰａｓｅ）阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ（ＧＰ）阻害剤、グルカゴン受容体アンタゴニストおよびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＨＫ）阻害剤、インスリン感受性増強薬、インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、胃内容排出阻害剤、インスリンおよびα２−アドレナリンアンタゴニスト、または、このような化合物の薬学的に許容される塩からなる群より選択される。
【０１２１】
好ましくは、併用相手はＧＳＫ−３阻害剤、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト、ベータ−３ＡＲアゴニスト、ＵＣＰアゴニスト、抗糖尿病性チアゾリジンジオン（グリタゾン）、非グリタゾン系ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαデュアルアゴニスト、抗糖尿病性バナジウム含有化合物、ビグアナイド薬およびメトホルミンからなる群より選択される。
【０１２２】
さらに別の態様によれば、本発明は、抗ＩＬ１βモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせであって、抗ＩＬ１βモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを同時に、別々に、または、続けて投与する前記組み合わせに関する。
【０１２３】
用語「同時」とは、本発明において使用する場合、当該組み合わせの少なくとも２つの成分を同一の経路で同時にまたは実質的に同時に投与することを意味する。
【０１２４】
用語「別々に」とは、本発明において使用する場合、当該組み合わせの少なくとも２つの成分を同時にまたは実質的に同時に異なる経路で投与することを意味する。
【０１２５】
用語「続けて」とは、本発明において使用する場合、当該組み合わせの少なくとも２つの成分を異なる時点で投与することを意味し、投与経路は同一でも、異なっていてもよい。特に、この場合の投与方法は、当該組み合わせの成分のうちの１つ（例えば、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片）の全量投与を、残りの成分またはその他の投与を開始する前に行うことを意味する。従って、当該組み合わせの活性成分の１つを、残りの活性成分を投与する前に数ヶ月にわたって投与することが可能である。この場合、同時処置は行われない。当該組み合わせの各活性成分を交互に数週間にわたって投与することも考えられる。
【０１２６】
本発明は、２型糖尿病を予防、進行遅延もしくは治療する方法、または、患者のベータ細胞機能を向上させる方法であって、当該方法を必要とする患者に、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種の抗糖尿病薬とを含む組み合わせを治療上有効量で投与することを含む前記方法を提供する。
【０１２７】
別の態様によれば、同時に、別々に、または、続けて使用するための、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、少なくとも１種のさらなる併用相手と、必要に応じて少なくとも１種の、即ち、１種以上、例えば２種の薬学的に許容される担体とを含む組み合わせ製剤は、「キット」または「キット・オブ・パーツ（kit of parts）」の形態である。当該キットには、ラベルまたは使用説明書を備えるものとする。ラベルまたは説明書は、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と少なくとも１種のさらなる併用相手とを独立して投与する、または、当該成分を区別できる量で様々に組み合わせて使用する、即ち、異なる時点に、同時に、または、続けて使用するための手引きを提供することができる。一つの実施態様では、キットのラベルまたは説明書には、本明細書に記載の用量、後続の投与回数および投薬の間隔のいずれかに従って、あるいは、本明細書に記載の用量、後続の投与回数および投薬の間隔のいずれかの組み合わせに従って、抗体または断片を投与するための説明書が含まれる。
【０１２８】
本明細書中、用語「薬学的に許容される担体」とは、生理学的に適合性のある任意かつ全ての溶剤、分散媒、コーティング、抗細菌・抗真菌剤、等張剤、および、吸収亢進剤または吸収遅延剤等を意味する。このような薬学的に許容される担体の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、アセテート緩衝液（塩化ナトリウム含有）、デキストロース、グリセロール、ＰＥＧ、エタノール等、並びに、これらの組み合わせである。薬学的に許容される担体物質の別の例は、界面活性剤、湿潤剤、または、微量物質もしくは補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、抗体またはその断片の貯蔵寿命や有効性を高める保存剤または緩衝剤である。
【０１２９】
本発明の組み合わせの抗体は、当該技術分野で公知の様々な方法で投与できるが、多くの治療用途にとって好ましい投与経路／投与形態は皮下、筋肉内、皮内または静脈内輸注である。当業者には明らかなように、投与経路および／または投与形態は、どのような結果を望むかに応じて変わる。ある実施態様では、抗体を急激な放出から保護する担体を用いて抗体組成物を調製すればよく、例としては制御放出製剤、例えば、インプラント、経皮パッチおよびマイクロカプセル送達システムが挙げられる。生分解性・生体適合性のポリマーが使用可能であり、例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸が挙げられる。このような製剤を調製する多くの方法は特許されているか、または、通常当業者に公知である。例えば、Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems(J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1978))を参照されたい。
【０１３０】
キット・オブ・パーツのパーツを次いで、例えば、同時に投与するか、または、時間をずらして（即ち、キット・オブ・パーツの任意のパーツについて異なる時点で同一または異なる時間間隔で）投与することができる。好ましくは、時間間隔は、パーツの併用による処置疾患または処置症状に対する効果が、成分のいずれか一つのみを用いて得られる効果よりも大きくなるよう選択する。ある実施態様では、本発明の組み合わせの抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は、例えば、不活性希釈剤または吸収可能な食用担体を用いて経口投与することができる。化合物（および必要に応じて他の成分）は、硬質または軟質ゼラチンカプセルへ封入したり、錠剤へ圧縮したり、被験者の食事へ直接混ぜ込むこともできる。治療目的の経口投与の場合、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片は賦形剤と配合して内服錠、バッカル錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、カシェ剤等の形態で使用することができる。本発明の化合物を非経口投与以外で投与するには、不活性化を防ぐ材料で化合物を被覆するか、または、化合物をこのような材料と一緒に投与する必要がある。
【０１３１】
本発明はまた、「治療上有効量」または「予防上有効量」の抗体またはその抗原結合性部分に関する。「治療上有効量」とは、必要な投与量および必要な期間にて、所望の治療結果を達成するのに有効な量を云う。治療上有効量の抗体またはその抗原結合性部分は、個人の疾患の状態、年齢、性別および体重、並びに、個人に所望の応答を惹起する抗体または抗体部分の能力といった要因に応じて変わる。治療上有効量はまた、治療上有利な作用が抗体または抗体部分のいずれの毒性または有害作用にも勝る量である。「予防上有効量」とは、必要な投与量および必要な期間にて、所望の予防結果を達成するのに有効な量を云う。典型的には、予防用量を疾患前または疾患の初期段階で被験者に使用するため、予防上有効量は治療上有効量より少ない量であってよい。
【０１３２】
本発明の組み合わせの各成分の治療上有効量を、同時にまたは続けてまたは別々に投与することが可能である。例えば、本発明の治療方法は、（ｉ）抗体またはその抗原結合性断片の投与と、（ｉｉ）少なくとも１種のさらなる併用相手の投与とを同時に、続けて、または、別々に、合計して治療上有効量で、好ましくは相乗効果量で、例えば、本明細書に記載の用法に相当する一日投与量で投与することを含んでいてもよい。
【０１３３】
用法を調整して最適な所望の応答（例えば、治療または予防応答）を得ることができる。例えば、一回に大量投与したり、複数回に分けて経時的に投与したり、または、治療状況の危急に応じて用量を比例的に増減したりすることができる。投与の簡便性と投与量の均一性の面から、非経口組成物を投与単位剤形で製剤化するのが特に有利である。本明細書中、「投与単位剤形」とは、治療対象の被験哺乳動物それぞれで物理的に異なるが、単位投与量として適した単位を云い、各単位には、所望の治療効果をもたらすよう計算された所定量の活性化合物が必要な薬学的担体と共に含まれる。本発明の投与単位剤形は、（ａ）抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片に特有の特性と達成すべき特定の治療または予防効果、および、（ｂ）個人の感受性を治療するために、このような抗体を配合する分野に特有の制限に応じて特定され、かつ、直接左右される。
【０１３４】
抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片の適切な投与量は、当然のことながら、使用する特定の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片、宿主、投与形態および治療中の症状の性質や重篤度等に応じて変わる。しかしながら、予防に使用する場合、満足のいく結果は、通常体重１ｋｇ当たり約０．０５ｍｇ〜約１０ｍｇ、より一般的には体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ〜約５ｍｇの投与量で得られると考えられる。予防に使用する際の投薬の頻度は、通常、約１週間に１回〜約３ヶ月に１回の範囲、より一般的には約２週間に１回〜約１０週間に１回の範囲、例えば、４〜８週間に１回である。
【０１３５】
限定するわけではないが、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量のさらなる範囲は、０．０２５〜５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１〜２５、０．１〜１０または０．１〜３ｍｇ／ｋｇである。一部の実施態様では、製剤は、５ｍｇ／ｍＬの抗体を２０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ５．５）、１４０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０の緩衝液に含有する。他の実施態様では、例えば静脈内に使用する場合、製剤は、１０ｍｇ／ｍｌの抗体を２．７３ｍｇ／ｍｌの酢酸ナトリウム三水和物、４５ｍｇ／ｍｌのマンニトール、０．０２ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、０．２ｍｇ／ｍｌのポリソルベート８０中（氷酢酸でｐＨ５．５へ調整）に含有する。他の実施態様では、例えば皮下または皮内に使用する場合、製剤は、５０ｍｇ／ｍｌの抗体を２．７３ｍｇ／ｍｌの酢酸ナトリウム三水和物、４５ｍｇ／ｍｌのマンニトール、０．０２ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物、０．４ｍｇ／ｍｌのポリソルベート８０中（氷酢酸でｐＨ５．５へ調整）に含有する。投与量の値は、緩和すべき症状の種類や重篤度に伴って変わる場合があることに注意されたい。個々のニーズや組成物を投与する者または組成物の投与を管理する者の専門的な判断に応じて、いずれの特定の被験者に対しても特定の用法を経時的に調整すべきである点、本明細書に記載の投与量の範囲が例示に過ぎず、請求項に記載の組成物の範囲または実施を制限するものではない点をさらに理解されたい。
【０１３６】
好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．０３ｍｇ／ｋｇである。
【０１３７】
より好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．１ｍｇ／ｋｇである。
【０１３８】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．３ｍｇ／ｋｇである。
【０１３９】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は１．５ｍｇ／ｋｇである。
【０１４０】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は１０ｍｇ／ｋｇである。
【０１４１】
好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．０３ｍｇ／ｋｇであり、メトホルミンの量は１０００ｍｇ／日以上である。
【０１４２】
より好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．１ｍｇ／ｋｇであり、メトホルミンの量は１０００ｍｇ／日以上である。
【０１４３】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は０．３ｍｇ／ｋｇであり、メトホルミンの量は１０００ｍｇ／日以上である。
【０１４４】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は１．５ｍｇ／ｋｇであり、メトホルミンの量は１０００ｍｇ／日以上である。
【０１４５】
より一層好ましい実施態様では、抗体またはその抗原結合性断片の治療上または予防上有効量は１０ｍｇ／ｋｇであり、メトホルミンの量は１０００ｍｇ／日以上である。
【０１４６】
本発明の一つの態様によれば、本発明の組み合わせと、使用説明書と、必要に応じて用量を選択するための説明書とを含むキットまたはキット・オブ・パーツが提供される。
【０１４７】
当該キットはさらに、１種以上の追加の試薬（例えば、免疫抑制試薬、細胞傷害剤もしくは放射性毒性剤）、または、１種以上の追加の開示のヒト抗体またはその抗原結合性断片（例えば、第一のヒト抗体とは別個の、ＩＬ１β抗原のエピトープに結合する相補的な活性を有するヒト抗体）と、最低でも１種類のさらなる併用相手とを含有する。
【０１４８】
好ましくは、本発明の組み合わせによって少なくとも１つの有利な作用が見られ、例えば、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と少なくとも１種のさらなる併用相手との作用の相互増強、追加の有利な作用、少ない副作用、当該組み合わせの成分のうちの１つまたは各々が有効投与量でなくても得られる併用治療効果、特に、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と少なくとも１種のさらなる併用相手との間の相乗作用（例えば、相加効果よりも大きい作用）などが見られる。
【０１４９】
予想外にも、治療上有効な組み合わせを患者へ投与する場合、１．５ｍｇ／ｋｇの抗ＩＬ１β抗体と約１０００ｍｇ／日以上の用量のメトホルミン（例えば、１５００ｍｇ／日または２０００ｍｇ／日）とを組み合わせて投与すると、抗ＩＬ１β抗体またはメトホルミンの各々一方を単独で試験した場合（対照患者群）に比べ、患者群においてヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）が統計学的に有意に低下することが観察された。この知見は驚くべきであり、かつ、予想外であった。
【０１５０】
また、長期（例えば、１ヶ月以上、好ましくは２ヶ月以上、より好ましくは４ヶ月以上、より一層好ましくは６ヶ月以上）にわたる治療を受けている患者が、Ｔ２ＤＭ患者における膵臓のベータ細胞機能の改善の指標である食後グルコース（ＰＰＧ）を維持していることも予想外にも観察された。
【０１５１】
本発明の態様のうちの一つによれば、患者の膵臓のベータ細胞機能を向上させるために使用する、治療上有効量の抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、メトホルミンとを含む組み合わせが提供される。
【０１５２】
ＩＬ１、特にＩＬ１βが介在する症状（例えば、糖尿病）の性質は多因子的である。ある一定の状況下では、作用機序の異なる薬物を組み合わせればよい。しかしながら、作用機序は異なるが、同様の領域で作用する薬物を任意に組み合わせても、有利な作用を持つ組み合わせが必ずしも得られるわけではないことを、当然考慮すべきである。
【０１５３】
さらに驚くべきことは、実験から以下の知見が得られたことである：抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と少なくとも１種のさらなる併用相手とを組み合わせて投与すると、有利な（特に相乗的な）治療効果だけでなく、併用処置に由来する別の利益も得られ、例えば、効力が驚くほど持続する、治療処置が一層広がる、糖尿病に関連する疾患や症状に対して驚くほど有利な作用（例えば、体重増加が少ない）が見られる、などである。
【０１５４】
本発明の組み合わせは、最も重要な抗糖尿病療法（例えば、メトホルミン）を受けた結果消化器系の副作用を示す患者にも有利である。このような消化器系の副作用は、メトホルミンを使うにしてもその用量や効力にも影響を及ぼしかねない。有利には、本発明の組み合わせは、メトホルミンに伴う消化器系の副作用の軽減だけでなく、より高用量のメトホルミンの許容に繋がり、従って、より有効な糖尿病療法をもたらすことができる。
【０１５５】
さらなる利益は、当該組み合わせの個々の成分（例えば、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と、本発明に従って組み合わせるべき少なくとも１種のさらなる併用相手）をより低用量で、低減型の剤形（reduced dosage form）（例えば、投与量を少なくするだけでなく、頻度も減らして適用する剤形）に使用したり、望ましくない副作用の発生を減らすために使用することができる点にある。この点は、主要な事項の一つであり、治療対象の患者が望む要件であると認められる。
【０１５６】
確立した試験モデル、特に本明細書に記載の試験モデルによって、抗ＩＬ１β抗体またはその抗原結合性断片と少なくとも１種のさらなる併用相手との組み合わせが、ＩＬ１βが介在する症状（特に糖尿病、とりわけ２型糖尿病）をより効果的に予防または好ましくは治療することを示すことができる。
【０１５７】
当業者であれば、該当する動物試験モデルを選択して、本明細書に示す治療適応症と有利な作用を証明することが十分可能である。薬理活性は、例えば、マウスまたは本明細書に記載の臨床研究において本質的にはインビボ試験を行うことで実証可能である。
【０１５８】
本明細書中で特に定義しない限り、本発明に関連して使用する科学用語および技術用語は、当業者に通常理解される意味を有するものとする。さらに、文脈上要求されない限り、単数形の用語には複数形が含まれるものとし、複数形の用語には単数形が含まれるものとする。一般に、本明細書に記載する細胞・組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学およびタンパク質・核酸化学、並びに、ハイブリダイゼーションに関連して使用する専門用語やこれらの技術は、当該技術分野で周知かつ通常に使用されるものである。
【実施例】
【０１５９】
以下の実施例において例を挙げて本発明をさらに記載する。
【０１６０】
方法および例示
血中グルコースの制御に関するマウスでのインビボ試験
ＩＣＲ−ＣＤＩマウス（オス、５週齢、体重：約２０ｇ）を１８時間絶食させた後、被験動物として使用する。本発明の組み合わせと、活性成分単独とを０．５％ＣＭＣ−０．１４Ｍ塩化ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）に懸濁する。このようにして得られた溶液を一定の容量でへ被験動物へ経口投与する。所定時間後、対照群に対する血中グルコースの減少率（％）を求める。インビトロ試験のさらなる詳細は、Osborn et al., 2008（引用により全内容が本明細書に含まれるものとする）題名：Treatment with Interleukin 1 beta antibody improves glycemic control in diet-induced obesityにおいて入手可能である。
【０１６１】
ヘモグロビンＡ１ｃ
ヘモグロビンＡ１ｃアッセイは、コバンス中央研究所サービス（Covance Central Laboratory Services；ＣＬＳ）にてＦＤＡ認可のＢｉｏ−Ｒａｄ  ＶａｒｉａｎｔＴＭ分析装置で行う。この分析装置は、イオン交換高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）とマイクロコンピュータ技術の原理を利用したものである。検出は４１５ｎｍと６９０ｎｍの２つの波長で行い、ベースラインを安定させる。吸光度変化のクロマトグラムを保持時間に対してプロットする。各クロマトグラムのプリントアウトには、各検出ピークを同定したレポートの他、各ピークの相対的な比率と保持時間も表示される。
【０１６２】
当該方法は、アッセイ間の精度が１．７〜２．１％ＣＶであり、アッセイ内の精度が０．９〜１．１％である（サンプルのアッセイを１５回繰り返し行って変動係数を評価することにより判定）。
【０１６３】
高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）
ＣＲＰは「急性期」タンパク質の一つであり、その血清中またはタンパク質レベルは、感染性・非感染性の炎症過程（例えば、関節リウマチ、心臓血管疾患および末梢血管疾患）に対する通常の非特異的応答時に上昇する。ＣＲＰは肝臓で合成され、血清中または血漿中に微量で存在する。
【０１６４】
Ｃ反応性タンパク質ＨＳアッセイは、コバンス中央研究所サービスにてシーメンスＢＮＩＩ比濁計を用いた免疫比濁分析により行う。ＣＲＰを含むサンプルと混合すると、抗ＣＲＰモノクローナル抗体で被覆したポリスチレン粒子が凝集する。比濁計の散乱光強度は、サンプルのＣＲＰ含量に依存するため、既知濃度の標品の希釈物との比較からＣＲＰ濃度を求めることができる。
当該方法は、アッセイ間の精度が２．１〜５．７％ＣＶであり、アッセイ内の精度が２．３〜４．４％である（サンプルのアッセイを１０回繰り返し行って変動係数を評価することにより判定）。ＣＲＰの精度は米国病理医協会（College of American Pathologists；ＣＡＰ）の心臓リスク調査との比較により評価する。
【０１６５】
血漿グルコース
グルコースアッセイはヘキソキナーゼ酵素法である。ヘキソキナーゼは、アデノシン三リン酸によるグルコースのリン酸化を触媒する。グルコース−６−リン酸は次いでＮＡＤの存在下で酵素のグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼによって６−ホスホグルコネートへ酸化される。当該反応時に形成したＮＡＤＰＨ量は、検体中のＤ−グルコース量に相当し、吸光度の増加量により光分析的に測定する。
【０１６６】
当該方法は、アッセイ間の精度が５．１〜６．２％ＣＶであり、アッセイ内の精度が１．７〜２．５％である（サンプルのアッセイを５０回繰り返し行って変動係数を評価することにより判定）。当該方法はグルコース特異的であり、他の炭水化物はいずれも酸化されない。
【０１６７】
Ｃペプチド
膵臓のベータ細胞では、プロインスリン分子が切断されてインスリンとＣペプチドを形成する。Ｃペプチドは３１個のアミノ酸からなるポリペプチドであり、ベータ細胞の分泌顆粒内に貯蔵され、インスリンと等モル量で血液循環へ放出される。
【０１６８】
Ｃペプチドを判定することで、糖尿病患者の内在性インスリンの分泌予備量を評価するが、インスリン自身よりも信頼性の高いインスリン分泌の指標と考えられる。
【０１６９】
ＡＤＶＩＡケンタウルスＣペプチドアッセイは、直接的な化学発光技術を用いた二部位サンドイッチイムノアッセイであり、一定量の２種類の抗体を用いる。第一の抗体（Ｌｉｔｅ試薬中）は、アクリジニウムエステルで標識されたモノクローナルマウス抗Ｃペプチド抗体である。第二の抗体（固相中）は、モノクローナルマウス抗Ｃペプチド抗体である。固相中のストレプトアビジンを共有結合させる。患者サンプルに存在するＣペプチドの量と当該システムで検出される相対発光量（ＲＬＵ）との間には直接的な関係が存在する。
【０１７０】
当該方法は、アッセイ間の精度が１．６９〜１．８１％ＣＶであり、アッセイ内の精度が３．７〜４．１％である（サンプルのアッセイを２０回繰り返し行って変動係数を評価することにより判定）。精度は米国病理医協会（ＣＡＰ）のリガンドとの比較により評価する。
【０１７１】
グルカゴン
グルカゴンは、膵ランゲルハンス島のアルファ細胞によって分泌されるホルモンである。低血糖に応答して分泌され、血中グルコースを増加させる。血液中で血清グルコースレベルが上昇するにつれ、ネガティブフィードバック機構によりグルカゴンが阻害される。ミリポア／ＬＩＮＣＯグルカゴンラジオイムノアッセイキットではＩ１２５標識グルカゴンとグルカゴン抗血清を用い、二重抗体／ＰＥＧ技術により血漿中のグルカゴンレベルを判定する。当該抗体は膵グルカゴンに特異的である。濃度を増加させた未標識抗原標品を用いて標準曲線を準備し、この曲線から未知サンプル中の抗原量を算出することができる。
【０１７２】
当該方法は、アッセイ間の精度が７．３〜１３．５％ＣＶであり、アッセイ内の精度が４．０〜６．８％である（アッセイを繰り返し行って変動係数を評価することにより判定）。精度は米国病理医協会（ＣＡＰ）のリガンドとの比較により評価する。
【０１７３】
実施例
実施例１  臨床研究の設計
２型糖尿病患者の静脈内に投与したＡＣＺ８８５の安全性、忍容性、薬物動態および薬力学を検討する多施設無作為化二重盲検プラセボ対照用量漸増試験。本検討の目的は、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）患者において、ＡＣＺ８８５を５回投与（静脈内投与）した際の薬物動態および薬力学的作用をプラセボと比較することである。
【０１７４】
並行群のＴ２ＤＭ被験者にはメトホルミンを安定的に投与した（８５０ｍｇ／日以上）。ベースライン、投与後４週目および１２週目にＯＧＴＴを行った。
【０１７５】
検討の第一の目的
・  Ｔ２ＤＭ患者のグリセミック指数およびＯＧＴＴに対するグルコース応答に及ぼすＡＣＺ８８５のＰＤ作用を評価すること。
第二の目的
・  β細胞分泌能およびインスリン感受性に及ぼすＡＣＺ８８５の薬力学的作用を評価すること。
・  グリセミック指数に及ぼすＡＣＺ８８５の単回静脈内投与（０．０３、０．１、０．３、１．５または１０ｍｇ／ｋｇ）の効力の持続期間を評価すること。
・  Ｔ２ＤＭにおけるＡＣＺ８８５の薬物動態作用を評価すること。
コホート１は１５人のＴ２ＤＭ患者からなり、投与用量は０．３ｍｇ／ｋｇのＡＣＺ８８５またはプラセボとし、主な評価は安全性および忍容性とした。
【０１７６】
以下のコホートは、薬力学、薬物動態、薬理ゲノミクスおよび薬理遺伝学の評価に含めた。
【０１７７】
・  コホート２（ｎ＝９０；１：１＝ＡＣＺ８８５：Ｐｌｂ）には、ＡＣＺ８８５（１０ｍｇ／ｋｇ）またはプラセボを単回投与した。
【０１７８】
・  コホート３（ｎ＝９６）には、ＡＣＺ８８５（０．１、０．３、１．５ｍｇ／ｋｇ）またはプラセボを単回投与した（１：１：１：１）。
【０１７９】
・  コホート４（ｎ＝３０；２：１＝ＡＣＺ８８５：Ｐｌｂ）には、ＡＣＺ８８５（０．０３ｍｇ／ｋｇ）またはプラセボを単回投与した。
【０１８０】
統計的分析：
本検討は、単回静脈内投与後に患者を２４週間（１６８日間）追跡するよう設計した。
【０１８１】
処置を分類変数とし、ベースラインを共変量とした共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）を用い、これらのパラメータについて処置を比較する。
【０１８２】
実施例２  ＨｂＡ１ｃレベルおよびｈｓＣＲＰレベルの結果
メトホルミンを安定的に投与したＴ２ＤＭ被験者では、０．０３、０．１、０．３、１．５ｍｇ／ｋｇのＡＣＺ８８５で処置後４週目に、以下の結果が得られた：
・  １．５ｍｇ／ｋｇの用量でヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）が統計学的に有意に減少した（図１Ａ）。
・  図１Ｂに示すように、高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓＣＲＰ）が（用量に比例して）直線的に低下した。
【０１８３】
実施例３  グルコースレベル、Ｃペプチドレベルおよびグルカゴンレベルの結果
４時間間隔の曲線下面積（ＡＵＣ０−４ｈ）を比較することで、他のＯＧＴＴパラメータでも用量漸増と一致する明確な傾向が報告された：グルコース（図２Ａ）、Ｃペプチド（図２Ｂ）およびグルカゴン（図２Ｃ）。
【０１８４】
実施例４  空腹時血漿グルコースの結果
【０１８５】
メトホルミンを安定的に投与したＴ２ＤＭ被験者では、１０ｍｇ／ｋｇのＡＣＺ８８５で処置後４週目に、図３Ａに示すように、ＯＧＴＴ後の血漿ＡＵＣグルコースが統計学的に有意に減少し、空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）が減少した。
【０１８６】
ＯＧＴＴグルコース：ＡＣＺ８８５を１０ｍｇ／ｋｇ単回投与した４週間後に、プラセボと比較して食後グルコースが有意に低下したことが報告された（図３Ｂ）。
【０１８７】
実施例５  グリセミックパラメータ
さらに、ＡＣＺ８８５を１０ｍｇ／ｋｇ静脈内へ単回投与した際のグリセミックパラメータに及ぼす薬力学的作用について投与後６ヶ月にわたる推移を図４Ａ、４Ｂおよび４Ｃに示す。
【０１８８】
空腹時血漿グルコース：
空腹時血漿グルコースに及ぼす作用は、処置群では投与後４週目で統計学的に有意となり、４週〜１２週にかけて減少した（図４Ａ）。
【０１８９】
ピーク血漿グルコース：
ＯＧＴＴ後のピーク血漿グルコースの低下は、処置群では４週目で統計学的に有意となり、１２週目でも維持されていた（図４Ｂ）。記号（＊）は、ベースラインからの変化量についてＡＣＺ８８５（１０ｍｇ／ｋｇ）をプラセボと比較した場合にＰ＜０．０５であることを示す。
【０１９０】
ヘモグロビンＡ１ｃ：
処置群では、４週〜１２週にかけてＨｂＡ１ｃのさらなる低下が観察された（−０．３２％  ｐ＝０．０３２）（図４Ｃ）。記号（＊）は、ベースラインからの変化量についてＡＣＺ８８５（１０ｍｇ／ｋｇ）をプラセボと比較した場合にＰ＜０．０５であることを示す。
【０１９１】
結論：
・  ＡＣＺ８８５（１．５ｍｇ／ｋｇ）では４週目にＨｂＡ１ｃの有意な低下が観察された。これらの結果から、ＡＣＺ８８５の単回投与により、プラセボと比較して統計学的に有意なＨｂＡ１ｃの低下をもたらし得ることが明らかである。
【０１９２】
・  ｈｓＣＲＰの用量応答は、４週目で直線的な減少傾向を示した。これらの結果からも、４週目でピーク血漿グルコース（ＰＰＧ、ＯＧＴＴ後）が低下することが明らかである。
【０１９３】
・  食後グルコース、Ｃペプチド、プロインスリンまたはグルカゴンにおいてプラセボと比較して、統計学的に有意ではないながらも投与後４週目で明確な傾向が観察された。
【０１９４】
・  単回投与後に効力が持続することが報告された：１０ｍｇ／ｋｇのＡＣＺ８８５を単回投与することで、プラセボと比較してＨｂＡ１ｃが統計学的に有意に低下し（−０．３２％  ｐ＝０．０３２）、かつ、ピーク血漿グルコース（ＰＰＧ、ＯＧＴＴ後）の低下が４週目で観察され、１２週目でも維持されていた。
【０１９５】
ＯＧＴＴ後のピークグルコースレベルの逸脱が改善することでも分かるように、ＰＰＧが長期間維持されることからＴ２ＤＭ患者におけるベータ細胞機能の改善が明らかである。
【０１９６】
これらの予備的なデータは、ＨｂＡ１ｃの向上から分かるように、かつ、投与後４週目のＯＧＴＴ後パラメータの傾向に裏付けられるように、Ｔ２ＤＭ患者におけるベータ細胞機能の改善を示唆するものである。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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