(57)【要約】本発明は、一般的に、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに交差反応性、及び二重特異性の抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆの抗体、及びその使用に関する。
2012501186.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに結合し、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方の生物学的機能を阻害する抗原結合性ドメインを含む抗体、又はその機能的断片。
【請求項２】
生物学的機能が炎症誘発性活性である請求項１の抗体。
【請求項３】
ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域の少なくとも一つが：
（ａ）配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）又はＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、
（ｂ）配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）又はＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）又はＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含むＣＤＲＬ３
からなる群から選択される、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域を含む軽鎖可変ドメインを含む請求項１の抗体、又はその親和性成熟変異体又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項４】
前記ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域が：
（ａ）配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）又はＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、
（ｂ）配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）又はＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）  配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）又はＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含むＣＤＲＬ３
からなる群から選択される請求項３に記載の抗体、又はその親和性成熟変異体又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項５】
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含み、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）を含む請求項４に記載の抗体、又はその親和性成熟変異体又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項６】
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号２７）を含み、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含む請求項４に記載の抗体、又はその親和性成熟変異体又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項７】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＡＫＬＴ（配列番号：３０）を含む請求項５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項８】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む請求項７に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項９】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＹＹＩＹＰＡＴ（配列番号：３１）を含む請求項５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１０】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む請求項９に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１１】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＨＮＤＬＰＬＴ（配列番号：３２）を含む請求項５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１２】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＶＩＳＳＳＬＡ（配列番号：３３）を含み、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＦＬＹＳ（配列番号：３４）をむ請求項１１に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１３】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＰＲＳＴ（配列番号：７５）を含む請求項５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１４】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む請求項１３に記載の抗体。
【請求項１５】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＹＹＳＴＴＴＴ（配列番号：７６の残基２−８）を含む請求項５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１６】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む、請求項１５に記載の抗体。
【請求項１７】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＳＱＮＰＱＴＴ（配列番号の残基３−９：７７）を含む請求項１５に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項１８】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む請求項１７に記載の抗体。
【請求項１９】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＦＳＱＨＩＴ（配列番号：７８）を含む請求項６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項２０】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＲＩＫＲＹＬＡ（配列番号：８９）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む請求項１９に記載の抗体。
【請求項２１】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＷＨＴＴ（配列番号：７９）を含む請求項６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項２２】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む請求項２１に記載の抗体。
【請求項２３】
前記親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＬＰＩＴ（配列番号：８０）を含む請求項６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項２４】
前記親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含み；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）をを含む請求項２３に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項２５】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む重鎖可変ドメインをさらに含む請求項３ないし２４の何れか一項に記載の抗体であって、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域の少なくとも一つが：
（ａ）ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）、ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）、ＧＦＳＦＴＳＹＭＭＳ（配列番号：８１）、ＧＦＳＦＰＳＹＦＩＳ（配列番号：８２）及びＧＦＴＦＹＤＹＤＩＳ（配列番号：８８）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ１；
（ｂ）ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）、ＰＤＳＹＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：９０）、ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）、ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）、ＥＳＧＡＴＤＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８３）、ＶＳＧＡＴＶＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８４）ＹＤＧＹＡＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８５）及びＬＤＧＹＳＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８６）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ２；及び
（ｃ）配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）又はＥＧＹＹＹＳＴＳＩＫＹＹＰＷ（配列番号：８７）を含むＣＤＲＨ３、からなる群から選択される抗体、又はその機能的断片。
【請求項２６】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む重鎖可変ドメインをさらに含む請求項３ないし２４の何れか一項に記載の抗体であって、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域の少なくとも一つが：
（ａ）ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）及びＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）（ＧＦＳＦＴＳＹＭＭＳ（配列番号：８１）及びＧＦＳＦＰＳＹＦＩＳ（配列番号：８２））からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ１；
（ｂ）ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）、ＰＤＡＹＴＹ  ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３９）、ＰＤＳＹＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：９０）、ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）、ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）、ＥＳＧＡＴＤＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８３）及びＶＳＧＡＴＶＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８４）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ２；及び
（ｃ）配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）及びＥＧＹＹＹＳＴＳＩＫＹＹＰＷ（配列番号：８７）を含むＣＤＲＨ３、からなる群から選択される抗体、
又はその機能的断片。
【請求項２７】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項３に記載の抗体であって、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含み、
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）を含み、及び
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、又はその機能的断片。
【請求項２８】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項３に記載の抗体であって、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含み、
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項２９】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項７又は請求項８に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３０】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項９又は１０に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＳＦＳＧＩＤＹＤＩＳ（配列番号：９１）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３１】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項１１又は１２に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３２】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項７又は８に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＡＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４２）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３３】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項７又は８に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＳＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４３）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３４】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含む請求項９又は１０に記載の抗体であって、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＳＦＳＧＩＤＹＤＩＳ（配列番号：９１）を含み、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）を含み、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む抗体、
又はその機能的断片。
【請求項３５】
前記抗体が基本的にＹＷ２４１．４７、ＹＷ２７８．１５、ＹＷ２７９．１からなる群から選択される交差反応性抗体、又はその親和性成熟変異体、又は前記抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片と同じＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆのエピトープと結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３６】
前記親和性成熟変異体が抗体ＹＷ２７８．１５．１８、ＹＷ１７８．１５．２、ＹＷ２７８．１５．３、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓ及びＹＷ２７８．１５．２．Ｄ５４Ｅからなる群から選択される、請求項３４に記載の抗体。
【請求項３７】
実質的に同じ結合親和性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する抗原結合性ドメインを含む請求項１に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項３８】
少なくとも約１０−１０から１０−１１Ｍの結合親和性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する抗原結合性ドメインを含む請求項１に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項３９】
モノマー及びホモダイマー又はヘテロダイマーとしてのＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する抗原結合性ドメインを含む請求項１の抗体、又はその機能的断片。
【請求項４０】
ヒト及び齧歯類のＩＬ−１７Ａ／Ｆの両方に結合する請求項１に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項４１】
炎症性又は免疫関連疾患における脱髄を減少することができる、請求項１の抗体。
【請求項４２】
モノクローナルである、請求項１ないし４１の何れか一項に記載の抗体。
【請求項４３】
キメラ、ヒト化又はヒトである、請求項４２に記載の抗体、又はその断片。
【請求項４４】
前記断片がＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片；ダイアボディー；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体からなる群から選択される請求項４３に記載の抗体。
【請求項４５】
ＩＬ−１７Ａと結合する第一の抗原結合部位及びＩＬ−１７Ｆと結合する第二の抗原結合部位を含む二重特異性抗体であって、
（１）前記第一の抗原結合部位は、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む重鎖可変ドメインを含み、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは、
（ａ）配列ＴＳＹＥＩＳ（配列番号：４５）を含むＣＤＲＨ１、
（ｂ）配列ＷＶＧＳＩＹＬＷＧＧ（配列番号：４６）を含むＣＤＲＨ２、及び
（ｃ）配列ＡＲＦＧＱＲＹＡ（配列番号：４７）を含むＣＤＲＨ３からなる群から選択され、及び
（２）前記第二の抗原結合部位は、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む第二の重鎖可変ドメインを含み、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは、
（ａ）配列ＴＳＰＹＩＳ（配列番号：４８）を含むＣＤＲＨ１、
（ｂ）配列ＷＶＡＳＩＦＹＹＳＧ（配列番号：４９）を含むＣＤＲＨ２、及び
（ｃ）配列ＡＲＧＧＹＧＹＮＱＷＦＹＳＩＹＱＳＹ（配列番号：５０）を含むＣＤＲＨ３からなる群から選択される、抗体、
又はその親和性成熟変異体、又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項４６】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む請求項４５に記載の二重特異性抗体であって、  
（１）前記第一の抗原結合部位において
（ａ）ＣＤＲＨ１は配列ＴＳＹＥＩＳ（配列番号：４５）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＨ２は配列ＷＶＧＳＩＹＬＷＧＧ（配列番号：４６）を含み、及び
（ｃ）ＣＤＲＨ３は配列ＡＲＦＧＱＲＹＡ（配列番号：４７）を含み、及び
（２）前記第二の抗原結合部位において
（ａ）ＣＤＲＨ１は配列ＴＳＰＹＩＳ（配列番号：４８）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＨ２は配列ＷＶＡＳＩＦＹＹＳＧ（配列番号：４９）を含み、及び
（ｃ）ＣＤＲＨ３は配列ＡＲＧＧＹＧＹＮＱＷＦＹＳＩＹＱＳＹ（配列番号：５０）を含む抗体、
又はその親和性成熟変異体、又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項４７】
ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域を含む軽鎖可変ドメインをさらに含む請求項４５に記載の二重特異性抗体であって、前記ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域の少なくとも一つは：  
（ａ）配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、
（ｂ）配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）配列ＹＹＳＳＰＬＴ（配列番号：２１の残基９１−９７）を含むＣＤＲＬ３からなる群から選択される抗体、
又はその親和性成熟変異体、又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項４８】
前記軽鎖可変ドメインが
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含み、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含み、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＹＹＳＳＰＬＴ（配列番号：２１の残基９１−９７）を含む請求項４７に記載の二重特異性抗体、又はその親和性成熟変異体、又は前記抗体又は前記親和性成熟変異体の機能的断片。
【請求項４９】
実質的に同じ結合親和性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する請求項４５又は４６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項５０】
少なくとも約１０−１０から１０−１１Ｍの結合親和性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する請求項４５又は４６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項５１】
モノマー及びホモダイマー又はヘテロダイマーの両方のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する請求項４５及び４６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項５２】
ヒト及び齧歯類のＩＬ−１７Ａ／Ｆの両方に結合する請求項４５又は４６に記載の抗体、又はその機能的断片。
【請求項５３】
炎症性又は免疫関連疾患における脱髄を減少することができる請求項４５又は４６に記載の抗体。
【請求項５４】
モノクローナルである請求項４５又は４６に記載の抗体。
【請求項５５】
キメラ、ヒト化又はヒトである請求項５４に記載の抗体、又はその断片。
【請求項５６】
前記断片がＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片；ダイアボディー；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体からなる群から選択される請求項５５に記載の抗体。
【請求項５７】
約１０：１から約１：１０の抗体とＩＬ−１７Ａのモル比においてＩＬ−１７Ａの生物学的機能を阻害する、請求項１ないし５６の何れか一項に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項５８】
約１：１から約１：５の抗体とＩＬ−１７Ａのモル比においてＩＬ−１７Ａの生物学的機能を阻害する、請求項５７に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項５９】
約１：１から約１：３の抗体とＩＬ−１７Ａのモル比においてＩＬ−１７Ａの生物学的機能を阻害する、請求項５７に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６０】
約１：１から約１：２の抗体とＩＬ−１７Ａのモル比においてＩＬ−１７Ａの生物学的機能を阻害する、請求項５７に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６１】
約１０：１から約１：１０の抗体とＩＬ−１７Ｆのモル比においてＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項１ないし５６の何れか一項に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６２】
約１：１から約１：５の抗体とＩＬ−１７Ｆのモル比においてＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６１に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６３】
約１：１から約１：３の抗体とＩＬ−１７Ｆのモル比においてＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６２に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６４】
約１：１から約１：２の抗体とＩＬ−１７Ｆのモル比においてＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６３に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６５】
約１０：１から約１：１０の抗体とヘテロダイマーのモル比においてヘテロダイマーの形態のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項１ないし５６の何れか一項に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６６】
約１：１から約１：５の抗体とヘテロダイマーのモル比においてヘテロダイマーの形態のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６５に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６７】
約１：１から約１：３の抗体とヘテロダイマーのモル比においてヘテロダイマーの形態のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６６に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６８】
約１：１から約１：２の抗体とヘテロダイマーのモル比においてヘテロダイマーの形態のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、請求項６７に記載の交差反応性又は二重特異性抗体。
【請求項６９】
請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体の重鎖をコード化する単離された核酸分子、又はその断片。
【請求項７０】
請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体の軽鎖をコード化する単離された核酸分子、又はその断片。
【請求項７１】
請求項６９の核酸を含む組換え宿主細胞。
【請求項７２】
請求項７０の核酸を含む組換え宿主細胞。
【請求項７３】
請求項６９及び７０の核酸を含む組換え宿主細胞。
【請求項７４】
真核性の宿主細胞である、請求項７１ないし７３の何れか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項７５】
前記真核性の宿主細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項７４に記載の組換え宿主細胞。
【請求項７６】
原核性の宿主細胞である、請求項７１ないし７３の何れか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項７７】
前記原核性の宿主細胞がＥ．ｃｏｌｉ細胞である、請求項７６に記載の組換え宿主細胞。
【請求項７８】
製薬的に許容可能な賦形剤との混合してなる、請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体又は抗体断片を含んでいる医薬組成物。
【請求項７９】
必要としている哺乳動物患者に、請求項１ないし６８の何れか一項に記載の交差反応性又は二重特異性抗体又はその機能的断片の有効量を投与することを含む、炎症性又は免疫関連疾患の治療のための方法。
【請求項８０】
前記炎症性又は免疫関連疾患が、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、若年型慢性関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（強皮症）、特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）、シェーグレン症候群、全身性血管炎、サルコイドーシス、自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間ヘモグロビン尿症）、自己免疫性血小板減少症（溶血性血小板減少性紫斑病、免疫媒介血小板減少症）、甲状腺炎（バセドウ病、橋本甲状腺炎、若年型リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）、糖尿病、免疫媒介腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）、中枢及び末梢神経系の脱髄疾患、例えば多発性硬化症、特発性脱髄多発神経障害又はギラン・バレー症候群、及び慢性炎症性脱髄性多発神経障害、肝胆道疾患例えば感染性肝炎（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ型肝炎、及び他の非肝親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、及び硬化性胆管炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）、グルテン過敏性腸疾患、及びウィップル病、水疱性皮膚病を含む自己免疫又は免疫媒介皮膚疾患、多形滲出性紅斑及び接触性皮膚炎、乾癬  、アレルギー性疾患、例えば喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症及び蕁麻疹、肺の免疫疾患例えば好酸球性肺炎、特発性肺線維症及び過敏性肺炎、拒絶反応及び移植片対宿主病を含む移植関連疾患 、ウイルス性疾患、例えばＡＩＤＳ（ＨＩＶ感染）、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ型肝炎、ヘルペス等、細菌感染症、真菌感染症、原虫感染症及び寄生虫症を含む感染症からなる群から選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記炎症性又は免疫関連疾患が、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）及び喘息からなる群から選択される請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
（ａ）容器；（ｂ）前記容器上のラベル；及び（ｃ）前記容器に含まれる請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体を含む組成物を含む製品であって、前記容器上のラベルは前記化合物が炎症性又は免疫関連疾患を治療するために用いることができることを示す、製品。
【請求項８３】
炎症性又は免疫関連疾患の治療のための医薬の調製における、請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体の使用。
【請求項８４】
炎症性又は免疫関連疾患の治療における使用のための、請求項１ないし６８の何れか一項に記載の抗体を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、一般的にＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと交差反応性の抗体及び二重特異性抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体及びその使用に関連する。
【０００２】
発明の背景
インターロイキン−１７（ＩＬ−１７）は、ＩＬ−６、ＩＬ−８、Ｇ−ＣＳＦ及びＭＣＰ−１を含む他の炎症性サイトカイン及びケモカインを産生するように上皮細胞、内皮細胞及び線維芽細胞細胞を刺激する、Ｔ細胞由来の炎症誘発性分子である［Yao, Z. et al., J. Immunol., 122(12): 5483-5486 (1995)；Yao, Z. et al, Immunity, 3(6): 811-821 (1995)；Fossiez, F., et al., J. Exp. Med., 183(6): 2593-2603 (1996)；Kennedy, J., et al., J. Interferon Cytokine Res., 16(8): 611-7 (1996)；Cai, X. Y., et al., Immunol. Lett, 62(1): 51-8 (1998)；Jovanovic, D.V., et al., J. Immunol., 160(7): 3513-21 (1998)；Laan, M., et al., J. Immunol., 162(4): 2347-52 (1999)；Linden, A., et al., Eur Respir J, 15(5): 973-7 (2000)；及びAggarwal, S. and Gurney, A. L., J Leukoc Biol. 71(1): 1-8 (2002)参照］。ＩＬ−１７も、ＴＮＦ−α及びＩＬ−１を含む他のサイトカインと協同し、さらにケモカイン発現を誘導する（Chabaud, M., et al., J. Immunol. 161(1): 409-14 (1998)）。インターロイキン１７（ＩＬ−１７）は、様々な形の細胞に対して多面的な生物学的活性を示す。ＩＬ−１７もまた、ＩＣＡＭ−１表面発現、Ｔ細胞増殖及びＣＤ３４＋ヒト前駆細胞の好中球への分化を誘導する能力を有する。ＩＬ−１７は、骨代謝にも関係することが示されており、骨移植組織のルースニング及び関節リウマチなどの、活性化Ｔ細胞の存在及びＴＮＦ−α産生により特徴づけられる病的状態において重要な役割を果たすことが示唆されている（Van Bezooijen et al., J. Bone Miner. Res., 14: 1513-1521 [1999]）。関節リウマチ患者から由来する滑液組織の活性化Ｔ細胞は、正常個体又は骨関節炎患者に由来するそれらより多くのＩＬ−１７を分泌することが見いだされた（Chabaud et al., Arthritis Rheum., 42: 963-970 [1999]）。この炎症誘発性サイトカインが関節リウマチにおける滑膜炎に活発に寄与することが示唆された。その炎症誘発性の役割とは別に、ＩＬ−１７は、さらにもう一つのメカニズムによって関節リウマチの病理学に寄与するようである。例えば、ＩＬ−１７は骨芽細胞の破骨細胞分化因子（ＯＤＦ）ｍＲＮＡの発現を誘導することが示されている（Kotake et al., J. Clin. Invest., 103: 1345-1352 [1999]）。ＯＤＦは、骨吸収に関与する破骨細胞への前駆細胞の分化を刺激する。ＩＬ−１７のレベルが関節リウマチ患者の滑液において有意に増加するので、ＩＬ−１７誘導性破骨細胞形成が関節リウマチの骨吸収において重要な役割を果たしているように見える。ＩＬ−１７が、多発性硬化症（Matusevicius et al., Mult. Scler., 5: 101-104 (1999)；Kurasawa, K., et al., Arthritis Rheu 43(11): 2455-63 (2000)）及び乾癬（Teunissen, M. B., et al., J Invest Dermatol 111(4): 645-9 (1998)；Albanesi, C., et al., J Invest Dermatol 115(1): 81-7 (2000)；及びHomey, B., et al., J. Immunol. 164(12:6621-32 (2000)）のような特定の他の自己免疫疾患において重要な役割を演じることもまた考えられる。
【０００３】
ＩＬ−１７はさらに、細胞内シグナルによって、ヒトマクロファージにおいてカルシウム流入及び［ｃＡＭＰ］ｉの減少を刺激することが示されている（Jovanovic et al, J. Immunol., 160:3513 [1998]）。ＩＬ−１７で処理された繊維芽細胞は、ＮＦ−κＢの活性化を誘導するが［Yao et al., Immunity, 3:811 (1995)、Jovanovic et al.、前掲］、それで処理されたマクロファージはＮＦ−κＢ及びマイトジェン活性化プロテインキナーゼを活性化する（Shalom-Barek et al, J. Biol. Chem., 273:27467 [1998]）。さらに、ＩＬ−１７は、骨及び軟骨成長に関与する、哺乳類のサイトカイン様第７因子と配列類似性を共有する。ＩＬ−１７ポリペプチドが配列類似性を共有する他のタンパク質は、ヒト胚由来インターロイキン関連因子（ＥＤＩＲＦ）及びインターロイキン−２０である。
【０００４】
ＩＬ−１７の広範な効果と一致して、ＩＬ−１７の細胞表面レセプターは多くの組織及び細胞型において広く発現することが見いだされた（Yao et al., Cytokine, 2:794 [1997]）。ヒトＩＬ−１７レセプター（ＩＬ−Ｒ）（８６６アミノ酸）のアミノ酸配列から、一つの膜貫通領域及び長い５２５アミノ酸の細胞内ドメインを有するタンパク質であることが予測されるが、レセプターの配列は特有であり、サイトカイン／増殖因子レセプターファミリーの受容体の何れとも類似していない。これは、ＩＬ−１７の他の既知のタンパク質に対する類似性の欠如と共に、ＩＬ−１７及びそのレセプターがシグナル伝達タンパク質レセプターの新規なファミリーの一部であり得ることを示す。ＩＬ−１７活性がその特有の細胞表面レセプター（ヒトＩＬ−１７Ｒと表す）への結合に媒介されることが証明されたが、これまでの研究では、ＩＬ−１７レセプターポリペプチドの可溶性形態とＴ細胞との接触によりＰＨＡ、コンカナバリンＡ及び抗ＴＣＲモノクローナル抗体によって誘導されるＴ細胞増殖及びＩＬ−２産生が阻害されたことが示されていた（Yao et al., J. Immunol., 155:5483-5486 [1995]）。このように、既知のサイトカインレセプター（特にＩＬ−１７レセプター）に相同性を有する新規なポリペプチドの同定及び特徴付けに対する重要な関心が存在する。
【０００５】
インターロイキン１７は現在、新たなサイトカインのファミリーのプロトタイプメンバーとして認識されている。ヒト及び他の脊椎動物のゲノムの大規模な配列決定により、ＩＬ−１７に明確に関連したさらなる遺伝子コード化タンパク質の存在が明らかとなり、サイトカインの新規なファミリーが明らかとなった。ヒト及びマウスでは、ＩＬ−１７Ｂ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−１７Ｅ及びＩＬ−１７Ｆ、及び新規なレセプターＩＬ−１７ＲＨ１、ＩＬ−１７ＲＨ２、ＩＬ−１７ＲＨ３及びＩＬ−１７ＲＨ４を含む少なくとも６つのＩＬ−１７ファミリーメンバーが存在する（２００１年６月２８日に公開されたＷＯ０１／４６４２０参照）。ＩＬ−１７メンバーの一つ（ＩＬ−１７Ｆと表す）は、ヒトＩＬ−１７レセプター（ＩＬ−１７Ｒ）に結合することが示された（Yao et al., Cytokine, 9(11): 794-800 (1997)）。初期の特性評価は、これらの新しく同定された分子のいくつかがＩＬ−１７の様に免疫機能を調整する能力を有することを示唆する。これらの因子のいくつかで同定された強力な炎症作用及び主要なヒト疾患との新たな関連性は、これらのタンパク質が炎症プロセスにおいて重要な役割を有し、治療上の介入への機会を提供し得ることを示唆する。
【０００６】
ヒトＩＬ−１７Ｆをコード化する遺伝子は、ＩＬ−１７に隣接して位置する（Hymowitz, S. G., et al., Embo J, 20(19): 5332-41 (2001)）。ＩＬ−１７とＩＬ−１７Ｆは、４４％のアミノ酸同一性を共有しているが、ＩＬ−１７ファミリーの他のメンバーはより限られた１５から２７％のアミノ酸同一性を共有しており、ＩＬ−１７及びＩＬ−１７ＦがＩＬ−１７ファミリの中で異なるサブグループを形成していることを示唆している（Starnes, T., et al., J Immunol. 167(8): 4137-40 (2001)；Aggarwal, S. and Gurney, A. L., J. Leukoc Biol, 71(l): 1-8 (2002)）。ＩＬ−１７Ｆは、ＩＬ−１７と類似した生物作用を有するようであり、多種多様な細胞でＩＬ−６、ＩＬ−８及びＧ−ＣＳＦの産生を促進することができる。ＩＬ−１７に類似して、軟骨基質放出を誘導し、新しい軟骨基質合成を阻害することができる（２００２年１１月２８日に公開されたＵＳ２００２−０１７７１８８−Ａ１参照）。したがって、ＩＬ−１７Ｆは、ＩＬ−１７の様に炎症性疾患の病態に潜在的に寄与しているかもしれない。最近、これらの著者は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１７Ｆがインターロイキン２３（ＩＬ−２３）の作用によってＴ細胞において誘導されることを観察した（Aggarwal, S., et al., J. Biol. Chem., 278(3): 1910-4 (2003)）。ＩＬ−１７及びＩＬ−１７Ｆが類似した染色体局在及び重要な配列類似性を共有するという観察、及びＩＬ−１７及びＩＬ−１７Ｆが特定の刺激に応答して同じ細胞集団において誘導されるという観察は、ＩＬ−１７及びＩＬ−１７Ｆの共有結合性ヘテロダイマー（ここではＩＬ−１７Ａ／Ｆと表される）で構成される新規のヒトサイトカインの同定を導いた。
【０００７】
ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆは、現在、Ｔｈ１７Ｔ細胞サブセットによって分泌される主要な炎症誘発性サイトカインとして認識されている。それらは、体のほとんどすべての細胞型を標的とし、炎症及び組織障害を誘導する。
【０００８】
ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆは疑いなく新規なサイトカインであり、タンパク質構造及び細胞ベース活性アッセイの両方においてヒトＩＬ−１７及びＩＬ−１７Ｆと識別可能である。精製された組換えヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆを標準として使用することにより、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆ−特異的なＥＬＩＳＡが開発された。この特異的なＥＬＩＳＡを使用して、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆの誘導された発現が検出され、ＩＬ−１７Ａ／Ｆが培養下で活性化ヒトＴ細胞から自然に産生されることを確認した。したがって、ＩＬ−１７Ａ／Ｆは疑いなく新規なサイトカインであり、単離された活性化ヒトＴ細胞の天然生成物である（その組換え形態はタンパク質構造及び細胞ベースアッセイにおいて、関連するサイトカインと異なっており、かつ識別可能であることが特徴付けられている）。
【０００９】
ＩＬ−１７Ａ／Ｆは米国出願公開番号２００６０２７０００３（２００６年１１月３０日公開）及び２００７０１６０５７６（２００７年７月１２日公開）において開示される。ＩＬ−１７Ａ／Ｆは、様々な免疫媒介性疾患の治療標的として記載されてきた（Chang and Dong, Cell Res. 17(5): 435-40 (2007)）；マウスＴｈ１７細胞によって製造されるＩＬ−１７Ａ／Ｆタンパク質は気道好中球動員を誘導することが示されており、したがって、気道好中球増多症においてインビボで機能を有していた（Liang et al., J Immunol 179(11): 7791-9 (2007)）；及び、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆヘテロダイマーサイトカインは、ＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＣレセプター複合体を介してシグナル伝達することが報告されていた（Wright et al., J Immunol 181(4): 2799-805 (2008)）。
【００１０】
ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの炎症誘発性特性を鑑みて、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆを高い活性でブロックすることができる交差反応性及び二重特異性抗体を作製することは望ましい。そのような交差反応性及び二重特異性抗体は、自己免疫疾患を含む炎症性及び免疫関連性の疾患の治療及び癌の治療において新しい治療機会を提供する。
【００１１】
発明の開示
本発明は、少なくとも部分的には、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと交差反応性の抗体の産生及び特性評価に基づく。本発明はさらに、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに結合する二重特異性抗体に関する。
【００１２】
一つの態様では、本発明は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに結合し、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する、抗原結合ドメインを含む抗体又はその機能的断片に関し、生物学的機能は、例えば炎症誘発性活性である。
【００１３】
ある実施態様において、抗体は、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域のうちの少なくとも１つが：  
（ａ）配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）又はＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、
（ｂ）配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）又はＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）又はＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含むＣＤＲＬ３からなる群から選択されるＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域を含む軽鎖可変ドメインを含む抗体、又はその親和性成熟変異体、又はその抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片である。
【００１４】
もう一つの実施態様では、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域の各々は：  
（ａ）配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）又はＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、  
（ｂ）配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）又はＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）又はＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含むＣＤＲＬ３からなる群から選択される。
【００１５】
もう一つの実施態様では、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む、  
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は、配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）を含む。
【００１６】
さらに別の実施態様では、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含む、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号２７）を含む、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は、配列ＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）を含む。
【００１７】
さらなる態様では、親和性成熟変異体においてＣＤＲＬ３は、配列ＳＹＴＡＫＬＴ（配列番号：３０）を含む。
【００１８】
なお更なる実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む、及び
ＣＤＲＬ３は配列ＹＹＩＹＰＡＴ（配列番号：３１）又はその機能的断片を含んでもよい。
【００１９】
さらに別の実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む、及びＣＤＲＬ３は配列ＨＮＤＬＰＬＴ（配列番号：３２）を含んでもよい。
【００２０】
さらなる実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＶＩＳＳＳＬＡ（配列番号：３３）を含む、及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＧＡＳＦＬＹＳ（配列番号：３４）を含む。
【００２１】
もう一つの実施態様では、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＰＲＳＴ（配列番号：７５）又はその機能的断片を含む。
【００２２】
さらにもう一つの実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲ２は、配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む。
【００２３】
さらなる態様であ、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＱＹＹＳＴＴＴＴ（配列番号：７６）又はその機能的断片を含む。
【００２４】
なお更なる実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲ２は、配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む。
【００２５】
異なる実施態様では、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＱＱＳＱＮＰＱＴＴ（配列番号：７７）又はその機能的断片を含む。
【００２６】
さらなる実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）を含む。
【００２７】
もう一つの実施態様では、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＦＳＱＨＩＴ（配列番号：７８）又はその機能的断片を含む。
【００２８】
さらに別の実施形態では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＲＩＫＲＹＬＡ（配列番号：８９）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む。
【００２９】
さらなる態様では、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＷＨＴＴ（配列番号：７９）又はその機能的断片を含む。
【００３０】
なお更なる実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む。
【００３１】
異なる実施態様では、親和性成熟変異体において、ＣＤＲＬ３は配列ＲＹＳＬＰＩＴ（配列番号：８０）又はその機能的断片を含む。
【００３２】
さらに別の実施態様では、親和性成熟変異体において、
（ａ）ＣＤＲＬ１は、配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含む；及び
（ｂ）ＣＤＲＬ２は、配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む。
【００３３】
更なる実施態様において、抗体はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む重鎖可変ドメイン又はその機能的断片を含み、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは：
（ａ）  ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）、ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）、ＧＦＳＦＴＳＹＭＭＳ（配列番号：８１）、ＧＦＳＦＰＳＹＦＩＳ（配列番号：８２）及びＧＦＴＦＹＤＹＤＩＳ（配列番号：８８）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ１；
（ｂ）ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）、ＰＤＡＹＴＹ  ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３９）、ＰＤＳＹＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：９０）、ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）、ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）、ＥＳＧＡＴＤＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８３）、ＶＳＧＡＴＶＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８４）ＹＤＧＹＡＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８５）及びＬＤＧＹＳＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８６）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ２；及び
（ｃ）配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）及びＥＧＹＹＹＳＴＳＩＫＹＹＰＷ（配列番号：８７）を含むＣＤＲＨ３、
からなる群から選択される。  
【００３４】
なお更なる実施態様において、抗体はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む重鎖可変ドメイン又はその機能的断片を含み、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは：
（ａ）ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）、ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）、ＧＦＳＦＴＳＹＭＭＳ（配列番号：８１）及びＧＦＳＦＰＳＹＦＩＳ（配列番号：８２）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ１、
（ｂ）ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）、ＰＤＡＹＴＹ  ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３９）、ＰＤＳＹＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：９０）、ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）、ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）、ＥＳＧＡＴＤＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８３）及びＶＳＧＡＴＶＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：８４）からなる群から選択される配列を含むＣＤＲＨ２；及び
（ｃ）  配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）又はＥＧＹＹＹＳＴＳＩＫＹＹＰＷ（配列番号：８７）を含むＣＤＲＨ３、
からなる群から選択される。
【００３５】
もう一つの実施態様では、本発明はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む抗体であって、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号：２４）、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号：２６）、
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＳＹＴＴＰＰＴ（配列番号：２８）、及び
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）、
又はその機能的断片を含む。
【００３６】
もう一つの実施態様では、本発明はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む抗体であって、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）、
（ｃ）ＣＤＲ３は配列ＲＹＳＱＰＩＴ（配列番号：２９）、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）、
又はその機能的断片を含む。
【００３７】
さらなる態様において、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＣＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３８）含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
なおさらなる実施態様において、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＳＦＳＧＩＤＹＤＩＳ（配列番号：９１）を含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＹＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４１）を含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
【００３８】
さらなる実施態様において、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＴＦＴＤＹＤＩＳ（配列番号：３５）含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＳＤＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：３７）を含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
もう一つの実施態様では、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＡＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４２）を含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
【００３９】
さらに他の実施態様では、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＧＦＳＦＩＤＹＤＩＳ（配列番号：３６）を含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＰＤＳＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４３）を含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
【００４０】
さらなる態様において、抗体はさらに、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域をさらに含み、
（ｄ）ＣＤＲＨ１は配列ＳＦＳＧＩＤＹＤＩＳ（配列番号：９１）を含む、
（ｅ）ＣＤＲＨ２は配列ＹＥＧＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号：４４）を含む、及び
（ｆ）ＣＤＲＨ３は配列ＹＬＹＷＳＹＶ（配列番号：４０）を含む。
【００４１】
もう一つの実施態様では、抗体は基本的に、ＹＷ２４１．４７、ＹＷ２７８．１５、ＹＷ２７９．１又は親和性成熟変異体又はそのような抗体又はそのような親和性成熟変異体の機能的断片からなる群から選択される交差反応性抗体と同じＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆのエピトープと結合する。
【００４２】
さらに他の実施態様では、親和性成熟変異体は、抗体ＹＷ２７８．１５．１８、ＹＷ１７８．１５．２、ＹＷ２７８．１５．３、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓ及びＹＷ２７８．１５．２．Ｄ５４Ｅからなる群から選択される。
【００４３】
さらなる態様において、抗体は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと実質的に同じ結合親和性で結合する抗原結合性ドメイン、又はその機能的断片を含む。
【００４４】
なお更なる実施態様において、抗体は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと少なくとも約１０−１０から１０−１１Ｍの結合親和性で結合する抗原結合性ドメイン、又はその機能的断片を含む。
【００４５】
さらなる実施態様において、本発明は、モノマー及びホモダイマーの両方又はヘテロダイマーとしてのＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する抗原結合性ドメイン、又はその機能的断片を含む抗体に関する。
【００４６】
さらなる態様において、本発明は、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆ及びヒト以外の霊長類ＩＬ−１７Ａ／Ｆと結合する抗体、又はその機能的断片に関する。ヒト以外の霊長類は、例えば、カニクイザル（Ｃｙｎｏ）又はアカゲザルであり得る。もう一つの実施態様では、抗体は、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆ及び場合によってヒト以外の霊長類ＩＬ−１７Ａ／Ｆと結合するが、齧歯類、例えばラット又はマウスＩＬ−１７Ａ／Ｆとは結合しない。
【００４７】
なお更なる実施態様において、抗体は、炎症性又は免疫関連疾患における脱髄を減少させることが可能である。
【００４８】
本発明の抗体は、モノクローナルであってもよく、キメラ、ヒト化又はヒトであってもよい。
【００４９】
本発明の抗体断片は、これに限定されるものではないが，Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片；ダイアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；及び、抗体断片から形成された多重特異性抗体が含まれる。
【００５０】
異なる態様において、本発明は、ＩＬ−１７Ａに結合する第一の抗原結合部位、及びＩＬ−１７Ｆに結合する第二の抗原結合部位を含む二重特異性抗体又はその親和性成熟変異体、又は抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片に関し、
（１）第一の抗原結合部位はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む第一の重鎖可変ドメインを含み、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは
（ａ）配列ＴＳＹＥＩＳ（配列番号：４５）を含むＣＤＲＨ１、
（ｂ）配列ＷＶＧＳＩＹＬＷＧＧ（配列番号：４６）を含むＣＤＲＨ２、及び
（ｃ）配列ＡＲＦＧＱＲＹＡ（配列番号：４７）を含むＣＤＲＨ３、
からなる群から選択され、及び
（２）  第二の抗原結合部位はＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域を含む第二の重鎖可変ドメインを含み、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域のうちの少なくとも１つは
（ａ）配列ＴＳＰＹＩＳ（配列番号：４８）を含むＣＤＲＨ１、
（ｂ）配列ＷＶＡＳＩＦＹＹＳＧ（配列番号：４９）を含むＣＤＲＨ２、及び
（ｃ）配列ＡＲＧＧＹＧＹＮＱＷＦＹＳＩＹＱＳＹ（配列番号：５０）を含むＣＤＲＨ３、
からなる群から選択される。
【００５１】
一実施態様において、二重特異性抗体は、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３領域、又はその親和性成熟変異体、又は抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片を含み、
（１）第一の抗原結合部位において
（ａ）ＣＤＲＨ１は配列ＴＳＹＥＩＳ（配列番号：４５）を含む
（ｂ）ＣＤＲＨ２は配列ＷＶＧＳＩＹＬＷＧＧ（配列番号：４６）を含む、及び
（ｃ）ＣＤＲＨ３は配列ＡＲＦＧＱＲＹＡ（配列番号：４７）を含む、及び
（２）第二の抗原結合部位において
（ａ）ＣＤＲＨ１は配列ＴＳＰＹＩＳ（配列番号：４８）を含む、
（ｂ）ＣＤＲＨ２は配列ＷＶＡＳＩＦＹＹＳＧ（配列番号：４９）を含む、及び
（ｃ）ＣＤＲＨ３は配列ＡＲＧＧＹＧＹＮＱＷＦＹＳＩＹＱＳＹ（配列番号：５０）を含む。
【００５２】
もう一つの実施態様では、二重特異性抗体はＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域を含む軽鎖可変ドメインをさらに含み、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３領域のうちの少なくとも１つは：  
（ａ）配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含むＣＤＲＬ１、
（ｂ）配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含むＣＤＲＬ２、及び
（ｃ）配列ＹＹＳＳＰＬＴ（配列番号の残基９１−９７：２１）を含むＣＤＲＬ３、
又はその親和性成熟変異体、又は抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片からなる群から選択される。
【００５３】
さらに他の実施態様では、二重特異性抗体又は親和性成熟変異体、又は抗体又は親和性成熟変異体の機能的断片の軽鎖可変ドメインにおいて、
（ａ）ＣＤＲＬ１は配列ＳＩＳＳＹＬＡ（配列番号：２５）を含む、
（ｂ）ＣＤＲＬ２は配列ＧＡＳＳＲＡＳ（配列番号：２７）を含む、及び
（ｃ）ＣＤＲＬ３は配列ＹＹＳＳＰＬＴ（配列番号：２１の残基９１−９７）を含む。
【００５４】
さらなる実施態様において、二重特異性抗体又はその機能的断片は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと実質的に同じ結合親和性で結合する。
【００５５】
なお更なる実施態様において、二重特異性抗体又はその機能的断片は、少なくとも約１０−１０〜１０−１１Ｍの結合親和性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆと結合する。
【００５６】
さらなる実施態様において、二重特異性抗体又はその機能的断片は、モノマー及びホモダイマー又はヘテロダイマーの両方としてのＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに結合する。
【００５７】
さらに他の実施態様では、二重特異性抗体又はその機能的断片は、ヒト及び非ヒト霊長類ＩＬ−１７Ａ／Ｆと結合し、非ヒト霊長類は、例えばカニクイザル（Ｃｙｎｏ）又はアカゲザルであってもよい。もう一つの実施態様では、抗体はヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆ、場合により非ヒト霊長類ＩＬ−１７Ａ／Ｆと結合するが、齧歯類、例えばラット又はマウスＩＬ−１７Ａ／Ｆとは結合しない。
【００５８】
異なる実施態様において、二重特異性抗体又はその機能的断片は、炎症性又は免疫関連疾患における脱髄を減少させることが可能である。
【００５９】
前記の通り、二重特異性抗体もまたモノクローナル、キメラ、ヒト化又はヒトであり得、抗体断片は、これに限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２Ｆｖ断片；ダイアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体を含む。
【００６０】
異なる態様において、本発明は先に記載された交差反応性及び二重特異性抗体であって、抗体とＩＬ−１７Ａのモル比が約１０：１から約１：１０、又は約５：１  から約１：５、又は約１：１から約１：５、又は約１：１から約１、又は約１：１から約１：２において、ＩＬ−１７Ａの生物学的機能を阻害する抗体に関し、ＩＬ−１７ＡはＩＬ−１７Ａホモダイマーを表す。
【００６１】
更なる態様において、本発明は、先に記載された交差反応性及び二重特異性抗体であって、抗体とＩＬ−１７Ｆのモル比が約１０：１から約１：１０、又は約５：１  から約１：５、又は約１：１から約１：５、又は約１：１から約１：３、又は約１：１から約１：２において、ＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する抗体に関し、ＩＬ−１７ＦはＩＬ−１７Ｆホモダイマーを表す。
【００６２】
なお更なる態様において、本発明は、先に記載された交差反応性及び二重特異性抗体であって、抗体とヘテロダイマーのモル比が約１０：１から約１：１０、又は約５：１  から約１：５、又は約１：１から約１：５、又は約１：１から約１：３、又は約１：１から約１：２において、ヘテロダイマーの形態のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの生物学的機能を阻害する抗体に関する。
【００６３】
別の態様においては、先に記載されているように、本発明は交差反応性又は二重特異性抗体又は抗体断片の軽鎖をコード化する単離された核酸分子に関する。
【００６４】
さらに他の態様では、先に記載されているように、本発明は交差反応性又は二重特異性抗体又は抗体断片の軽鎖をコード化している核酸分子を含む組換え宿主細胞に関する。宿主細胞は、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞及び大腸菌細胞を含む真核性又は原核生物であってもよい。
【００６５】
本発明はさらに、先に記載されるように、薬学的に許容可能な賦形剤との混合物として、交差反応性又は二重特異性抗体又は抗体断片を含む医薬品組成物に関する。
【００６６】
さらに、本発明は、必要とする哺乳類の対象に本発明の交差反応性又は二重特異性抗体又はその機能的断片の有効量を投与することを含む、炎症性又は免疫関連疾患の治療方法に関する。哺乳類の対象は、好ましくはヒト患者である。
【００６７】
炎症性又は免疫に関連する症状は、例えば、全身性エリトマトーデス、関節リウマチ、青少年の慢性的な関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（ｓｃｉｅｒｏｄｅｒｍａ）、特発の炎症性ミオパシ（皮膚筋炎、多発性筋炎）、シェーグレン症候群、全身性血管炎、サルコイドーシス、自己免疫溶血性貧血（免疫性のはん血球減少症、発作性夜間ヘモグロビン尿症）、自己免疫血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫介在性血小板減少症）、甲状腺炎（甲状腺機能亢進症、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性の甲状腺炎）、真正糖尿病、免疫介在性腎臓病（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）、本部及び末梢神経系（例えば多発性硬化症、特発の脱髄性多発性神経炎、又は、ギラン‐バレー症候群及び慢性的な炎症性脱髄性多発性神経炎）の脱髄疾患、感染性肝炎（Ａ型肝炎、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ及び他の非肝指向性ウイルス）のような胆道系疾患、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆管萎縮症、肉芽腫性の肝炎及び硬化性胆管炎、潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患（ＩＢＤ）：クローン病、グルテン過敏性腸症及びホイップル病、水疱性の皮膚病を含む自己免疫又は免疫介在性皮膚病、多形性紅斑及び接触皮膚炎、乾癬、喘息、アレルギー性鼻炎、過敏性皮膚炎、食品性過敏症及び蕁麻疹のようなアレルギー疾患、エオジン好性の肺炎、特発の肺線維症及び過敏性肺臓炎のような肺の免疫学的疾患、移植片拒絶を含む移植に関連する疾患及び移植片対宿主疾患、エイズ（ＨＩＶ感染症）、Ａ型肝炎、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ、ヘルペスなどのウィルス性疾患、細菌感染症、真菌感染、原虫感染及び寄生虫感染症を含む感染症からなる群から選択される。
【００６８】
好ましい実施態様において、炎症性又は免疫関連疾患は、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）及び喘息からなる群から選択される。
【００６９】
なおさらなる態様として、本発明は：（ａ）容器；（ｂ）容器上のラベル；及び（ｃ）容器に入った本発明の交差反応性又は二重特異性抗体を含む組成物、を含む製品であって、前記容器上のラベルには前記組成物が炎症性又は免疫関連疾患の治療に用い得ることが示されている、製品に関する。
【００７０】
本発明はさらに、炎症性又は免疫関連疾患の治療のための医薬の調製における、ここに記載される抗体の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】図１は、天然配列ヒトＩＬ−１７ＡｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１）である。
【図２】図２は、図１に示された配列番号：１のコード化配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２）を示す。
【図３】図３は、天然配列ヒトＩＬ−１７ＦｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３）である。
【図４】図４は、図３に示された配列番号：３のコード化配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４）を示す。
【図５Ａ】図５Ａは、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体であるＹＷ２４８．６５、ＹＷ２４０．２７、ＹＷ２４１．４７、ＹＷ２７１．２５、ＹＷ２７８．１５、ＹＷ２７８．２７、ＹＷ２７８．５７、ＹＷ２７８．６０、ＹＷ２７９．１及びＹＷ２８０．３（配列番号：５−１４）の軽鎖配列のアラインメントを示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体であるＹＷ２４８．６５、ＹＷ２４０．２７、ＹＷ２４１．４７、ＹＷ２７１．２５、ＹＷ２７８．１５、ＹＷ２７８．２７、ＹＷ２７８．５７、ＹＷ２７８．６０、ＹＷ２７９．１及びＹＷ２８０．３の重鎖配列のアラインメントを示す（配列番号：５１−６０）。
【図５Ｃ】図５Ｃは、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体であるＹＷ２７８．１５．７、ＹＷ２７８．１５．８、ＹＷ２７８．１５．９、ＹＷ２７９．１．２０、ＹＷ２７９．１．２１及びＹＷ２７９．１．２２の軽鎖配列のアラインメントを示す（配列番号：６３−６８）。
【図５Ｄ】図５Ｄは、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体であるＹＷ２７８．１５．７、ＹＷ２７８．１５．８、ＹＷ２７８．１５．９、ＹＷ２７９．１．２０、ＹＷ２７９．１．２１及びＹＷ２７９．１．２２の重鎖配列のアラインメントを示す（配列番号：６９−７４）。
【図６】図６は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆの交差反応性抗体であるＹＷ２７８．１５（配列番号：９）及びその親和性成熟変異体ＹＷ２７８．１５．１８（配列番号：１５）、ＹＷ２７８．１５．２（配列番号：１６）及びＹＷ２７８．１５．３（配列番号：１７）の軽鎖配列のアラインメントに示す。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列が囲まれている。
【図７】図７は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆの交差反応性抗体であるＹＷ２７８．１５（配列番号：９２）及びその親和性成熟変異体ＹＷ２７８．１５．１８（配列番号：９３）、ＹＷ２７８．１５．２（配列番号：９４）、ＹＷ２７８．１５．２．Ｄ５４Ｅ（配列番号：９５）、ＹＷ２７８．１５．３（配列番号：９２）、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ（配列番号：１８）及びＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓ（配列番号：１９）の重鎖配列のアラインメントを示す。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列が囲まれている。注：ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ及びＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓは、ＹＷ２７８．１５．１８と同じ軽鎖を有する。
【図８Ａ−Ｂ】図８Ａ及び８Ｂは、３つの親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体について行われたＢＩＡｃｏｒｅイムノアッセイの結果を示す。Ａ．溶液中の組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７Ｆ及びヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆとの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。Ｂ．溶液中の組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７Ｆ、ｃｙｎｏＩＬ−１７Ａ（図８Ｂ）及びヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆとの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。
【図９】図９は、ＹＷ２７８．１５．１８と比較した、２つのさらなる親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体について行われたＢＩＡｃｏｒｅイムノアッセイの結果を示す。溶液中の組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７Ｆ及びヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆとの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。
【図１０】図１０は、３つの親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体について行われたＢＩＡｃｏｒｅイムノアッセイの結果を示す。アカゲザルＩＬ−１７Ａへの結合親和性は、最後の列に示される。
【図１１】図１１は、ＩＬ−１７Ａ特異性抗体であるＹＷ２６４．２１の軽鎖可変領域配列（配列番号：２０）及びＩＬ−１７Ｆ特異性抗体であるＹＷ２６５．０１の軽鎖可変領域配列（配列番号：２１）のアラインメントを示す。
【図１２】図１２は、ＩＬ−１７Ａ特異性抗体であるＹＷ２６４．２１の重鎖可変領域配列（配列番号：２２）及びＩＬ−１７Ｆ特異性抗体であるＹＷ２６５．０１の重鎖可変領域配列（配列番号：２３）のアラインメントを示す。
【図１３Ａ−Ｂ】図１３Ａ及び１３Ｂは、いくつかのＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体につてのＩＣ５０及びＩＣ９０データ、及び標的ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの活性を阻害するために必要な抗体モル比を示す。
【図１４】図１４は、抗ＩＬ−１７Ａ抗体であるＹＷ２６４．１及び抗ＩＬ−１７Ｆ抗体であるＹＷ２６５．０１と比較した、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ二重特異性抗体についてのＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆ結合親和性データを示す。
【図１５】図１５は、抗体ＹＷ２６４．０３（配列番号：６１）を含むＩＬ−１７Ａ／Ｆ二重特異性抗体の軽鎖可変領域配列（配列番号：６１及び２０−２１）の他のアラインメントを示す。
【図１６】図１６は、ＹＷ２６４．０３（配列番号：６２）を含むＩＬ−１７Ａ／Ｆ二重特異性抗体の重鎖可変領域配列（配列番号：６２及び２２−２３）の他のアラインメントである。
【図１７】図１７は、ＩＬ−１７Ｆダイマーに結合するＦａｂを示す。
【図１８】図１８は、ＩＬ−１７Ｆダイマー上のＦａｂのエピトープを示す。
【００７２】
Ｉ．定義
特に定義されない限り、ここに用いられる技術、記号及び他の科学的な用語の全ては、本発明が関係する当業者によって共通して理解される意味を有することを目的とする。場合によって、共通して理解さる意味を有する用語は、明確性及び／又は参考のために本明細書において定義され、本明細書におけるそのような定義の混入は必ずしもその分野において一般によく理解されていることに対して実質的な相違点を表すために解釈されるべきではない。本明細書に記載又は参照される技術及び手法は、例えばSambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2nd. edition (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Yに記載される広く利用されている分子クローニング方法論などの従来方法論を用いてよく理解され、一般的に用いられている。適切に、市販のキットの及び試薬の使用に関連した手法は、一般的に、特に明記しない限り製造業者が定義したプロトコル及び／又はパラメーターに従って実行される。
【００７３】
「天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド」は、天然由来の対応するＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドと同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる。このような天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドは、自然から単離することもできるし、組換え又は合成手段により生産することもできる。「天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド」という用語には、特に、特定のＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの自然に生じる切断又は分泌形態（例えば、細胞外ドメイン配列）、自然に生じる変異形態（例えば、選択的にスプライシングされた形態）及びそのポリペプチドの自然に生じる対立遺伝子変異体が含まれる。本発明の種々の実施態様において、ここに開示されている天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドは、関連する図に示されている完全長アミノ酸配列を含有する成熟又は完全長天然配列ポリペプチドである。開始及び終止コドンは、太い書体及び下線で図中に示さている。しかし、関連する図に開示されているＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドがメチオニン残基で開始すると図のアミノ酸位置１において示されている一方で、図のアミノ酸位置１より上流又は下流のいずれかに位置する他のメチオニン残基が、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの開始アミノ酸残基として用いられることが考えられるし可能である。
【００７４】
ここに開示する種々のＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの「シグナルペプチド」の適切な位置は、本明細書と添付の図面に示される。しかし、注記するように、シグナルペプチドのＣ−末端境界は変化しうるが、ここで最初に定義したようにシグナルペプチドＣ−末端境界のいずれかの側で約５アミノ酸未満である可能性が最も高く、シグナルペプチドのＣ−末端境界は、そのような型のアミノ酸配列成分を同定するのに日常的に使用される基準に従って同定しうる（例えば、Nielsenら, IL-17A/Ft. Eng. 10: 1-6 (1997)及びvon Heinjeら, Nucl. Acids. Res. 14: 4683-4690 (1986)）。さらに、幾つかの場合には、分泌ポリペプチドからのシグナルペプチドの切断は完全に均一ではなく、１つ以上の分泌種をもたらすことも認められる。シグナルペプチドがここに定義されるシグナルペプチドのＣ−末端境界の何れかの側の約５アミノ酸未満内で切断されるこれらの成熟ポリペプチド、及びそれらをコードするポリヌクレオチドは、本発明で考慮される。
【００７５】
「ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド変異体」とは、上記又は下記に定義されるように、ここに開示される完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド、ここに開示されたシグナルペプチドを欠く完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、又はここに開示された完全長ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの他の断片と、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有する活性ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを意味する。このようなＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド変異体には、例えば、完全長天然アミノ酸配列のＮ−又はＣ−末端において一つ又は複数のアミノ酸残基が付加、もしくは欠失されたＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドが含まれる。通常、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド変異体は、ここに開示される完全長天然アミノ酸配列、ここに開示されたシグナルペプチドを欠く完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、又はここに開示された完全長ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの特に同定された他の断片と、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％のアミノ酸配列同一性、そして、あるいは少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有している。通常は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリペプチドは、少なくとも約１０アミノ酸長、あるいは少なくとも約２０アミノ酸長、あるいは少なくとも約３０アミノ酸長、あるいは少なくとも約４０アミノ酸長、あるいは少なくとも約５０アミノ酸長、あるいは少なくとも約６０アミノ酸長、あるいは少なくとも約７０アミノ酸長、あるいは少なくとも約８０アミノ酸長、あるいは少なくとも約９０アミノ酸長、あるいは少なくとも約１００アミノ酸長、あるいは少なくとも約１５０アミノ酸長、あるいは少なくとも約２００アミノ酸長、あるいは少なくとも約３００アミノ酸長、又はそれ以上である。
【００７６】
ここに定義されるＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに対してここで同定されている「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入し、如何なる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドのアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の技量の範囲にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ又はＭｅｇａｌｉｇｎ（DNASTAR）ソフトウエアのような公に入手可能なコンピュータソフトウエアを使用することにより達成可能である。当業者であれば、比較される配列の完全長に対して最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。しかし、ここでの目的のためには、％アミノ酸配列同一性値は、ＡＬＩＧＮ−２プログラム用の完全なソースコードが下記の表１に提供されている配列比較プログラムＡＬＩＧＮ−２を使用することによって得られる。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムはジェネンテク社によって作成され、下記の表１に示したソースコードは米国著作権事務所，ワシントンＤ．Ｃ．，２０５５９に使用者用書類とともに提出され、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２はGenentech, Inc., South San Francisco, Calif.から好適に入手可能であり、下記の表１に提供されたソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４．０Ｄでの使用のためにコンパイルされる。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され変動しない。
【００７７】
アミノ酸配列比較にＡＬＩＧＮ−２が用いられる状況では、与えられたアミノ酸配列Ａの、与えられたアミノ酸配列Ｂとの、又はそれに対する％アミノ酸配列同一性（あるいは、与えられたアミノ酸配列Ｂと、又はそれに対して或る程度の％アミノ酸配列同一性を持つ又は含む与えられたアミノ酸配列Ａと言うこともできる）は次のように計算される：
分率Ｘ／Ｙの１００倍
ここで、Ｘは配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２のＡ及びＢのアラインメントによって同一であると一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、ＹはＢの全アミノ酸残基数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと異なる場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。
【００７８】
特に断らない限りは、ここでの全ての％アミノ酸配列同一性値は上記のようにＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムを用いて得られる。しかしながら、％アミノ酸配列同一性値は、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２コンピュータプログラム（Altschulら, Methods in Enzymology 266: 460-480(1996)）を用いて決定してもよい。さらに、殆どのＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２検索パラメータは初期値に設定される。初期値に設定されない、即ち調節可能なパラメータは以下の値に設定する：オーバーラップスパン＝１、オーバーラップフラクション＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝１１、及びスコアリングマトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ２が用いられた場合には、、％アミノ酸配列同一性値は、（ａ）天然ポリペプチドから誘導された配列を有する対象とするポリペプチドのアミノ酸配列と、対象とする比較アミノ酸配列（即ち、対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの比較対象である配列であり、ポリペプチド変異体であってもよい）との間の、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２によって決定した一致する同一アミノ酸残基の数を、（ｂ）対象とするポリペプチドの残基の総数で除した商によって決定される。例えば、「アミノ酸配列Ｂに対して少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性を持つ又は持っているアミノ酸配列Ａを含んでなるポリペプチド」という表現では、アミノ酸配列Ａは対象である「比較タンパク質」のアミノ酸配列であり、アミノ酸配列Ｂが対象であるポリペプチドのアミノ酸配列である。
【００７９】
また、％アミノ酸配列同一性は、配列比較プログラムＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２（Altschulら, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402 (1997)）を用いて決定してもよい。ＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２配列比較プログラムは、http://www.ncbi.nlm.nih.govからダウンロードでき、又は別な方法で米国国立衛生研究所、ベセスダ、メリーランドから得ることができる。ＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２は幾つかの検索パラメータを使用し、それら検索パラメータの全ては初期値に設定され、例えば、ｕｎｍａｓｋ＝可、鎖＝全て、予測される発生＝１０、最小低複合長＝１５／５、マルチパスｅ−値＝０．０１、マルチパスの定数＝２５、最終ギャップアラインメントのドロップオフ＝２５、及びスコアリングマトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２を含む。
【００８０】
アミノ酸配列比較にＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２が用いれれる状況では、与えられたアミノ酸配列Ａの、与えられたアミノ酸配列Ｂとの、又はそれに対する％アミノ酸配列同一性（あるいは、与えられたアミノ酸配列Ｂと、又はそれに対して或る程度の％アミノ酸配列同一性を持つ又は含む与えられたアミノ酸配列Ａと言うこともできる）は次のように計算される：
分率Ｘ／Ｙの１００倍
ここで、Ｘは配列アラインメントプログラムＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２のＡ及びＢのアラインメントによって同一であると一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、ＹはＢの全アミノ酸残基数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと異なる場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。
【００８１】
「ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリヌクレオチド」又は「ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体核酸配列」とは、下記に定義されるように、活性ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドをコードし、且つここに開示する完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、ここに開示するシグナルペプチドを欠いた完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、又はここに開示する完全長ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列の他の任意の断片をコードする核酸配列と少なくとも約８０％の核酸配列同一性を有する核酸分子である。通常、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリペプチドは、ここに開示する完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、ここに開示するシグナルペプチドを欠いた完全長天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列、又はここに開示する完全長ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド配列の他の任意の断片と、少なくとも約８０％の核酸配列同一性、好ましくはあるいは少なくとも約８１％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％の核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％の核酸配列同一性、そして、あるいは少なくとも約９９％の核酸配列同一性を有している。変異体は、天然ヌクレオチド配列を含まない。
【００８２】
通常は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリヌクレオチドは、少なくとも約３０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約６０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約９０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約１２０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約１５０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約１８０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約２１０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約２４０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約２７０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約３００ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約４５０ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約６００ヌクレオチド長、あるいは少なくとも約９００ヌクレオチド長、又はそれ以上である。
【００８３】
ここで同定されるＩＬ−１７Ａ／Ｆコード化核酸配列に対する「パーセント（％）核酸配列同一性」は、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入し、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ配列のヌクレオチドと同一である候補配列中のヌクレオチドのパーセントとして定義される。パーセント核酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の知る範囲にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ又はＭｅｇａｌｉｇｎ（DNASTAR）ソフトウエアのような公に入手可能なコンピュータソフトウエアを使用することにより達成可能である。ここでの目的のためには、％アミノ酸配列同一性値は、ＡＬＩＧＮ−２プログラム用の完全なソースコードが下記の表１に提供されている配列比較プログラＡＬＩＧＮ−２を使用することによって得られる。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムはジェネンテク社によって作成され、下記の表１に示したソースコードは米国著作権事務所，ワシントン  Ｄ．Ｃ．，２０５５９に使用者用書類とともに提出され、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２はジェネンテク社、サウス  サン  フランシスコ，  カリフォルニアから好適に入手可能であり、下記の表１に提供されたソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４．０Ｄでの使用のためにコンパイルされる。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され変動しない。
【００８４】
核酸配列比較にＡＬＩＧＮ−２が用いられる状況では、与えられた核酸配列Ｃの、与えられた核酸配列Ｄとの、又はそれに対する％核酸配列同一性（あるいは、与えられたアミノ酸配列Ｄと、又はそれに対して或る程度の％核酸配列同一性を持つ又は含む与えられた核酸配列Ｃと言うこともできる）は次のように計算される：
分率Ｗ／Ｚの１００倍
ここで、Ｗは配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２のＣ及びＤのアラインメントによって同一であると一致したスコアの核酸残基の数であり、ＺはＤの全核酸残基数である。核酸配列Ｃの長さがアミノ酸配列Ｄの長さと異なる場合、ＣのＤに対する％核酸配列同一性は、ＤのＣに対する％核酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。
【００８５】
特に断らない限りは、ここでの全ての％核酸配列同一性値は、直上のパラグラフに示したようにＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムを用いて得られる。しかしながら、％核酸配列同一性値は、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２コンピュータプログラム（Altschulら, Methods in Enzymology 266: 460-480 (1996)）を用いて決定してもよい。さらに、殆どのＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２検索パラメータは初期値に設定される。初期値に設定されない、即ち調節可能なパラメータは以下の値に設定する：オーバーラップスパン＝１、オーバーラップフラクション＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝１１、及びスコアリングマトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２が用いられた場合、％核酸配列同一性値は、（ａ）天然配列ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸から誘導された配列を有する対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子の核酸配列と、対象とする比較核酸配列（即ち、対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子が比較されるＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド変異体であってもよい配列）との間の、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２によって決定した一致する同一核酸残基の数を、（ｂ）対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子のヌクレオチドの総数で除した商によって決定される。例えば、「核酸配列Ｂに対して少なくとも８０％の核酸配列同一性を持つ又は持っている核酸配列Ａを含んでなるポリペプチド」という表現では、核酸配列Ａが対象とする比較核酸配列であり、核酸配列Ｂが対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子の核酸配列である。
【００８６】
また、％核酸配列同一性は、配列比較プログラムＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２（Altschulら, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402 (1997)）を用いて決定してもよい。ＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２配列比較プログラムは、http://www.ncbi.nlm.nih.govからダウンロードでき、又は別な方法で米国国立衛生研究所、ベセスダ、メリーランドから得ることができる。ＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２は幾つかの検索パラメータを使用し、それら検索パラメータの全ては初期値に設定され、例えば、ｕｎｍａｓｋ＝可、鎖＝全て、予測される発生＝１０、最小低複合長＝１５／５、マルチパスｅ−値＝０．０１、マルチパスの定数＝２５、最終ギャップアラインメントのドロップオフ＝２５、及びスコアリングマトリクス＝ＢＬＯＳＵＭ６２を含む。
【００８７】
核酸配列比較にＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２が用いられる状況では、与えられた核酸配列Ｃの、与えられた核酸配列Ｄとの、又はそれに対する％核酸配列同一性（あるいは、与えられた核酸配列Ｄと、又はそれに対して或る程度の％核酸配列同一性を持つ又は含む与えられた核酸配列Ｃと言うこともできる）は次のように計算される：
分率Ｗ／Ｚの１００倍
ここで、Ｗは配列アラインメントプログラムＮＣＢＩ−ＢＬＡＳＴ２のＣ及びＤのアラインメントによって同一であると一致したスコアの核酸残基の数であり、ＺはＤの全核酸残基数である。核酸配列Ｃの長さが核酸配列Ｄの長さと異なる場合、ＣのＤに対する％核酸配列同一性は、ＤのＣに対する％核酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。
【００８８】
他の実施態様では、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリペプチドヌクレオチドは、活性ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドをコードし、好ましくは緊縮性ハイブリダイゼーション及び洗浄条件下で、ここに開示する完全長ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイゼーションする核酸分子である。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリペプチドは、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ変異体ポリヌクレオチドにコードされるものであってもよい。
【００８９】
「単離された」とは、ここで開示された種々のポリペプチドを記述するために使用するときは、その自然環境の成分から同定され分離され及び／又は回収されたポリペプチドを意味する。その自然環境の汚染成分とは、そのポリペプチドの診断又は治療への使用を典型的には妨害する物質であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質様又は非タンパク質様溶質が含まれる。好ましい実施態様において、ポリペプチドは、（１）スピニングカップシークエネーターを使用することにより、少なくとも１５残基のＮ末端あるいは内部アミノ酸配列を得るのに充分なほど、あるいは、（２）クーマシーブルーあるいは好ましくは銀染色を用いた非還元あるいは還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによる均一性まで精製される。単離されたポリペプチドには、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換え細胞内のインサイツのタンパク質が含まれる。しかしながら、通常は、単離されたポリペプチドは少なくとも１つの精製工程により調製される。
【００９０】
「単離された」ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸は、同定され、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドをコードする核酸の天然源に通常付随している少なくとも１つの汚染核酸分子から分離された核酸分子である。単離されたＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子は、天然に見出される形態あるいは設定以外のものである。ゆえに、単離されたＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子は、天然の細胞中に存在するＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子とは区別される。しかし、単離されたＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドコード化核酸分子は、例えば、核酸分子が天然細胞のものとは異なった染色体位置にあるＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを通常発現する細胞に含まれるＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド核酸分子を含む。
【００９１】
「コントロール配列」という表現は、特定の宿主生物において作用可能に結合したコード配列を発現するために必要なＤＮＡ配列を指す。例えば原核生物に好適なコントロール配列は、プロモーター、場合によってはオペレータ配列、及びリボソーム結合部位を含む。真核生物の細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル及びエンハンサーを利用することが知られている。
【００９２】
核酸は、他の核酸配列と機能的な関係にあるときに「作用可能に結合し」ている。例えば、プレ配列あるいは分泌リーダーのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に参画するプレタンパク質として発現されているなら、そのポリペプチドのＤＮＡに作用可能に結合している；プロモーター又はエンハンサーは、配列の転写に影響を及ぼすならば、コード配列に作用可能に結合している；又はリボソーム結合部位は、もしそれが翻訳を容易にするような位置にあるなら、コード配列と作用可能に結合している。一般的に、「作用可能に結合している」とは、結合したＤＮＡ配列が近接しており、分泌リーダーの場合には近接していて読みフェーズにあることを意味する。しかし、エンハンサーは必ずしも近接している必要はない。結合は簡便な制限部位でのライゲーションにより達成される。そのような部位が存在しない場合は、従来の手法に従って、合成オリゴヌクレオチドアダプターあるいはリンカーが使用される。
【００９３】
ハイブリダイゼーション反応の「緊縮性」は、当業者によって容易に決定され、一般的にプローブ長、洗浄温度、及び塩濃度に依存する経験的な計算である。一般に、プローブが長くなると適切なアニーリングのための温度が高くなり、プローブが短くなると温度は低くなる。ハイブリダイゼーションは、一般的に、相補的鎖がその融点に近いがそれより低い環境に存在する場合における変性ＤＮＡの再アニールする能力に依存する。プローブとハイブリダイゼーション可能な配列との間の所望の相同性の程度が高くなると、使用できる相対温度が高くなる。その結果、より高い相対温度は、反応条件をより緊縮性にするが、低い温度は緊縮性を低下させる。さらに、緊縮性は塩濃度に逆比例する。ハイブリダイゼーション反応の緊縮性の更なる詳細及び説明は、Ausubel at al., Current IL-17A/Ftocols in Molecular Biology, Wiley Interscience Publishers, (1995)参照のこと。
【００９４】
ここで定義される「ストリンジェント条件」又は「高度のストリンジェンシー条件」は、（１）洗浄に低イオン強度及び高温度を用いる、例えば、５０℃で、０．０１５Ｍの塩化ナトリウム／０．００１５Ｍのクエン酸ナトリウム／０．１％のドデシル硫酸ナトリウム；（２）ハイブリダイゼーション中にホルムアミド等の変性剤を用いる、例えば、４２℃で、５０％（ｖ／ｖ）ホルムアミドと０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％フィコール／０．１％のポリビニルピロリドン／５０ｍＭのｐＨ６．５のリン酸ナトリウムバッファー、及び７５０ｍＭの塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウム；又は（３）４２℃で、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５ＭのＮａＣｌ、０．０７５Ｍのクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％のピロリン酸ナトリウム、５×デンハード液、超音波処理サケ精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）、０．１％ＳＤＳ、及び１０％の硫酸デキストラン溶液を用い、４２℃で、０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）中にて洗浄及び５５℃の５０％ホルムアミド、ついで５５℃で、ＥＤＴＡを含む０．１×ＳＳＣからなる１０分間高ストリンジェンシー洗浄を用いるものによって同定される。
【００９５】
「中程度のストリンジェント条件」は、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (New York: Cold Spring Harbor Press, 1989)に記載されているように同定され、上記のストリンジェントより低い洗浄溶液及びハイブリダイゼーション条件（例えば、温度、イオン強度及び％ＳＤＳ）の使用を含む。中程度のストリンジェント条件は、２０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（１５０ｍＭのＮａＣｌ、１５ｍＭのクエン酸三ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×デンハード液、１０％硫酸デキストラン、及び２０ｍｇ／ｍｌの変性剪断サケ精子ＤＮＡを含む溶液中にて３７℃での終夜インキュベーション、次いで１×ＳＳＣ中にて約３７−５０℃でのフィルターの洗浄といった条件である。当業者であれば、プローブ長などの因子に適合させる必要に応じて、どのようにして温度、イオン強度等を調節するかを認識する。
【００９６】
「エピトープタグ」なる用語は、ここで用いられるときは、「タグポリペプチド」に融合したＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド、又はそれらのドメイン配列を含んでなるキメラポリペプチドを指す。タグポリペプチドは、その抗体が産生され得るエピトープ、又は幾つかの他の試薬によって同定できるエピトープを提供するに十分な数の残基を有しているが、その長さは対象とするＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの活性を阻害しないよう充分に短い。また、タグポリペプチドは、好ましくは、抗体が他のエピトープと実質的に交差反応をしないようにかなり独特である。適切なタグポリペプチドは、一般に、少なくとも６のアミノ酸残基、通常は約８〜約５０のアミノ酸残基（好ましくは約１０〜約２０の残基）を有する。
【００９７】
ここで用いられる「イムノアドヘシン」なる用語は、異種タンパク質（「アドヘシン」）の結合特異性と免疫グロブリン定常ドメインとを結合した抗体様分子を指す。構造的には、イムノアドヘシンは、所望の結合特異性を持ち、抗体の抗原認識及び結合部位以外である（即ち「異種の」）アミノ酸配列と、免疫グロブリン定常ドメイン配列との融合物を含む。イムノアドヘシン分子のアドへシン部分は、典型的には少なくともレセプター又はリガンドの結合部位を含む隣接アミノ酸配列である。イムノアドヘシンの免疫グロブリン定常ドメイン配列は、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３又はＩｇＧ−４サブタイプ、ＩｇＡ（ＩｇＡ−１及びＩｇＡ−２を含む）、ＩｇＥ、ＩｇＤ又はＩｇＭなどの任意の免疫グロブリンから得ることができる。
【００９８】
「アンタゴニスト」なる用語は最も広い意味で用いられ、ここに開示した天然ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの生物学的活性を阻止、阻害、又は中和する任意の分子を指す。同様に「アゴニスト」なる用語は最も広い意味で用いられ、ここに開示した天然ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの生物学的活性を模倣する任意の分子を指す。好適なアゴニスト又はアンタゴニスト分子は特に、アゴニスト又はアンタゴニスト抗体又は抗体断片、天然ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの断片又はアミノ酸配列変異体、ペプチド、有機小分子、などを含む。ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドのアゴニスト又はアンタゴニストの同定方法は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを候補アンタゴニスト又はアゴニストと接触させ、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに通常は関連している一つ又は複数の生物学的活性の変化を測定することを含んでもよい。
【００９９】
「治療」とは、治癒的処置、予防的療法及び防止的療法の両方を意味し、患者は標的とする病理学的状態又はしっかんを防止又は低下（減少）させられる。治療が必要なものとは、既に疾患に罹っているもの、並びに疾患に罹りやすいもの又は疾患が防止されているものを含む。
【０１００】
「慢性」投与とは、急性様式とは異なり連続的な様式での薬剤を投与し、初期の治療効果（活性）を長時間に渡って維持することを意味する。「間欠」投与とは、中断無く連続的になされるのではなく、むしろ本質的に周期的になされる処理である。
【０１０１】
治療の対象のための「哺乳動物」は、ヒト、家庭及び農業用動物、動物園、スポーツ、又はペット動物、例えばイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ウサギなどを含む哺乳類に分類される任意の動物を意味する。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【０１０２】
一つ又は複数の治療薬と「組み合わせた」投与とは、同時（同時期）及び任意の順序での連続した投与を含む。
【０１０３】
ここで用いられる「担体」は、製薬的に許容されうる担体、賦形剤、又は安定化剤を含み、用いられる用量及び濃度でそれらに暴露される細胞又は哺乳動物に対して非毒性である。生理学的に許容されうる担体は、水性ｐＨ緩衝溶液であることが多い。生理学的に許容されうる担体の例は、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸塩のバッファー；アスコルビン酸を含む酸化防止剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；疎水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリシン；グルコース、マンノース又はデキストランを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；マンニトール又は祖ルビトール等の糖アルコール；ナトリウム等の塩形成対イオン；及び／又は非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商品名）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商品名）を含む。
【０１０４】
「抗体」という用語は最も広い意味において使用され、例えば、単一の抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆモノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、及び中和抗体を含む）、多エピトープ（ｐｏｌｙｅｐｉｔｏｐｉｃ）特異性を持つ抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体組成物、ポリクローナル抗体、一本鎖抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体、及び所望する生物学的又は免疫学的活性を示す限りは抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体の断片（下記を参照）を包含する。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、ここでの抗体と相互に置き換え可能に用いられる。
【０１０５】
「単離された抗体」とは、その自然環境の成分から同定され分離され及び／又は回収されたものを意味する。その自然環境の汚染成分とは、抗体の診断又は治療への使用を妨害する物質であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質様又は非タンパク質様溶質が含まれる。好ましい実施態様では、抗体は、（１）ローリー（Ｌｏｗｒｙ）法によって定量して９５重量％以上の、最も好ましくは９９重量％以上の抗体まで、（２）スピニングカップシークエネーターを使用することにより、少なくとも１５のＮ末端あるいは内部アミノ酸配列の残基を得るのに充分な程度まで、あるいは（３）クーマシーブルーあるいは好ましくは銀染色を用いた還元又は非還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによる均一性まで精製される。単離された抗体には、組換え体細胞内のインサイツの抗体が含まれるが、これは抗体の自然環境の少なくとも一つの成分が存在しないからである。しかしながら、通常は、単離された抗体は少なくとも一つの精製工程により調製される。
【０１０６】
基本的な４−鎖抗体ユニットは２つの同一の軽（Ｌ）鎖と２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロ四量体の糖タンパクである（ＩｇＭ抗体は、基本的なヘテロ四量体ユニットとそれに付随するＪ鎖と称される付加的なポリペプチドの５つからなり、よって１０の抗原結合部位を有するが、分泌されたＩｇＡ抗体は重合して、基本的４−鎖ユニットとそれ付随するＪ鎖のうち２−５つを含む多価集合を形成可能である）。ＩｇＧの場合、４−鎖ユニットは一般的に約１５００００ダルトンである。それぞれのＬ鎖は１つの共有ジスルフィド結合によってＨ鎖に結合するが、２つのＨ鎖はＨ鎖のアイソタイプに応じて一又は複数のジスルフィド結合により互いに結合している。それぞれのＨ及びＬ鎖はまた規則的な間隔を持った鎖内ジスルフィド結合を持つ。それぞれのＨ鎖は、α及びγ鎖の各々に対しては３つの定常ドメイン（ＣＨ）が、μ及びεアイソタイプに対しては４つのＣＨドメインが続く可変ドメイン（ＶＨ）をＮ末端に有する。それぞれのＬ鎖は、その他端に定常ドメイン（ＣＬ）が続く可変ドメイン（ＶＬ）をＮ末端に有する。ＶＬはＶＨと整列し、ＣＬは重鎖の第一定常ドメイン（ＣＨ１）と整列している。特定のアミノ酸残基が、軽鎖及び重鎖可変ドメイン間の界面を形成すると考えられている。ＶＬとＶＨは共同して対になって、単一の抗原結合部位を形成する。異なるクラスの抗体の構造及び特性は、例えばBasic and Clinical Immunology, 8th edition, Daniel P. Stites, Abba I. Terr and Tristram G. Parslow (eds.), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, ７１頁及び６章を参照のこと。
【０１０７】
任意の脊椎動物種からのＬ鎖には、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる２つの明確に区別される型の一つを割り当てることができる。また、その重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンには異なったクラス又はアイソタイプを割り当てることができる。ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭという免疫グロブリンの５つの主要なクラスがあり、それぞれα、δ、ε、γ及びμと呼ばれる重鎖を有する。さらにγ及びαのクラスは、ＣＨ配列及び機能等の比較的小さな差異に基づいてサブクラスに分割され、例えば、ヒトにおいては次のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２が発現する。
【０１０８】
「可変」という用語は、可変ドメインのある部分が抗体の間で配列が広範囲に異なることを意味する。Ｖドメインは抗原結合性を媒介し、その特定の抗原に対する特定の抗体の特異性を定める。しかし、可変性は可変ドメインの１１０−アミノ酸スパンを通して均等には分布されていない。代わりに、Ｖ領域は、それぞれ９−１２アミノ酸長である「高頻度可変領域」と称される極度の可変性を有するより短い領域によって分離された１５−３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる比較的不変の伸展からなる。天然重鎖及び軽鎖の可変ドメイン各々は、大きなβ−シート配置をとり、３つの高頻度可変領域により接続された４つのＦＲ領域を含み、それはループ状の接続を形成し、β−シート構造の一部を形成することもある。各鎖の高頻度可変領域はＦＲにより他の鎖からの高頻度可変領域とともに極近傍に保持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与している（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ED. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)）。定常ドメインは抗体の抗原への結合に直接は関係ないが、種々のエフェクター機能、例えば抗体依存性細胞障害（ＡＤＣＣ）における抗体の寄与を示す。
ここで使用される場合、「高頻度可変領域」なる用語は、抗原結合性の原因となる抗体のアミノ酸残基を意味する。高頻度可変領域は「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基（すなわち、ＶＬにおいては、およそ残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）及び８９−９７（Ｌ３）、及びＶＨにおいては、およそ１−３５（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）及び９５−１０２（Ｈ３）；Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest,5版 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991)）及び／又は「高度可変ループ」からの残基（例えば、ＶＬにおいては、およそ残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）及び９１−９６（Ｌ３）、及びＶＨにおいては、およそ２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）及び９６−１０１（Ｈ３）；Chothia and Lesk J.Mol.Biol. 196:901-917 (1987)）を含んでなる。
【０１０９】
ここで使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を意味する、すなわち、集団に含まれる個々の抗体が、少量で存在しうる自然に生じる可能性のある突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、一つの抗原部位に対している。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物と比べて、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。その特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体によって汚染されずに合成される点で有利である。「モノクローナル」との修飾詞は、抗体を何か特定の方法で生成しなければならないことを意味するものではない。例えば、本発明において有用なモノクローナル抗体は、最初にKohler et al., Nature 256, 495 (1975)により記載されたハイブリドーマ法によって作ることができ、あるいは組換えＤＮＡ法によって、細菌、真核細胞動物又は植物細胞から作ることができる（例えば、米国特許第４８１６５６７号参照）。また「モノクローナル抗体」は、例えばClackson et al., Nature 352:624-628(1991)、及びMarks et al., J. Mol. Biol. 222:581-597(1991)に記載された技術を用いてファージ抗体ライブラリーから単離することもできる。
【０１１０】
ここで、モノクローナル抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の一部が、特定の種由来の抗体、あるいは特定の抗体クラス又はサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一であるか又は相同性があり、鎖の残りの部分が他の種由来の抗体、あるいは他の抗体クラス又はサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一であるか又は相同である「キメラ」抗体、並びにそれが所望の生物的活性を有する限りこのような抗体の断片を特に含む（米国特許第４８１６５６７号；及びMorrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855(1984)）。ここで対象のキメラ抗体には、非ヒト霊長類（例えば旧世界ザル、類人猿等）から由来する可変ドメイン抗原−結合配列及びヒト定常領域配列を含む「プリマタイズ(primatized)」抗体を含む。
【０１１１】
「無傷」の抗体は、抗原−結合部位、並びにＣＬ及び少なくとも重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含むものである。定常ドメインは天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）又はそれらのアミノ酸配列変異体であってよい。好ましくは、無傷の抗体は一又は複数のエフェクター機能を有する。
【０１１２】
「抗体断片」は、無傷の抗体の一部、好ましくは無傷の抗体の抗原結合又は可変領域を含む。抗体断片の例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ（diabodies）；直鎖状抗体（米国特許第５６４１８７０号、実施例２；Zapata et al., Protein Eng. 8(10): 1057-1062 [1995]）；単鎖抗体分子；及び抗体断片から形成された多重特異性抗体を含む。
【０１１３】
抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗体結合断片と、容易に結晶化する能力を反映して命名された残留「Ｆｃ」断片を産生する。Ｆａｂ断片は全長Ｌ鎖とＨ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、及び一つの重鎖の第一定常ドメイン（ＣＨ１）からなる。各Ｆａｂ断片は抗原結合性に関して一価である、すなわち単一の抗原−結合部位を有する。抗体のペプシン処理により、単一の大きなＦ（ａｂ’）２断片が生じ、これは２価の抗原結合部位を持つ２つのジスルフィド結合されたＦａｂ断片にほぼ対応し、抗原を交差結合させることができるものである。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの一又は複数のシステインを含むＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に幾つかの残基が付加されていることによりＦａｂ断片と相違する。Ｆａｂ’−ＳＨは、ここでは定常ドメインのシステイン残基（類）が遊離のチオール基を持つＦａｂ’を表す。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、通常はＦａｂ’断片の対として生成され、それらの間にヒンジシステインを有する。抗体断片の他の化学的結合も知られている。
【０１１４】
Ｆｃ断片はジスルフィドにより一緒に保持されている双方のＨ鎖のカルボキシ末端部位を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域の配列により決定され、その領域は、所定の型の細胞に見出されるＦｃレセプター（ＦｃＲ）によって認識される部位である。
【０１１５】
「Ｆｖ」は、完全な抗原−認識及び−結合部位を含む最小の抗体断片である。この断片は、密接に非共有結合した１本の重鎖と１本の軽鎖の可変領域の二量体からなる。これら２つのドメインの折り畳みから、抗原結合のためのアミノ酸残基に寄与し、抗体に対する抗原結合特異性を付与する６つの高頻度可変ループ（Ｈ及びＬ鎖から、それぞれ３つのループ）が生じる。しかしながら、単一の可変ドメイン（又は抗原に特異的な３つのＣＤＲのみを含んでなるＦｖの半分）でさえ、結合部位全体よりは低い親和性であるが、抗原を認識し結合する能力を持つ。
【０１１６】
「ｓＦｖ」又は「ｓｃＦｖ」とも略称される「単鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖内に結合したＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドはＶＨ及びＶＬドメイン間にポリペプチドリンカーをさらに含み、それはｓＦＶが抗原結合に望まれる構造を形成するのを可能にする。ｓＦｖの概説については、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994);Borrebaeck 1995、以下を参照のこと。
【０１１７】
「ダイアボディ（diabodies）」という用語は、鎖間ではなく鎖内でＶドメインを対形成させ、結果として二価の断片、すなわち２つの抗原−結合部位を有する断片が得られるように、ＶＨとＶＬドメインとの間に、短いリンカー（約５−１０残基）を持つｓＦｖ断片（前の段落を参照）を構築することにより調製される小型の抗体断片を意味する。二重特異性ダイアボディは２つの「交差」ｓＦｖ断片のヘテロダイマーであり、そこでは２つの抗体のＶＨ及びＶＬドメインが異なるポリペプチド鎖上に存在する。ダイアボディは、例えば、欧州特許第４０４０９７号；国際公開９３／１１１６１号；及びHollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 6444-6448 (1993)により十分に記載されている。
【０１１８】
非ヒト（例えば齧歯類）抗体の「ヒト化」形とは、非ヒト抗体から得られた最小配列を含むキメラ抗体である。大部分において、ヒト化抗体は、レシピエントの高頻度可変領域の残基が、マウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類のような所望の抗体特異性、親和性及び能力を有する非ヒト種（ドナー抗体）の高頻度可変領域の残基によって置換されたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見出されない残基を含んでいてもよい。これらの修飾は抗体の特性をさらに洗練するために行われる。一般的に、ヒト化抗体は、全て又はほとんど全ての高頻度可変ループが非ヒト免疫グロブリンのものに一致し、全て又はほとんど全てのＦＲがヒト免疫グロブリン配列である、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体は、状況に応じて免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒトの免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部を含む。さらなる詳細は、Jones et al., Nature 321, 522-525(1986)；Riechmann et al., Nature 332, 323-329(1988)；及びPresta, Curr. Op. Struct. Biol. 2, 593-596(1992)を参照のこと。
【０１１９】
「種依存性抗体」、例えば哺乳動物抗−ヒトＩｇＥ抗体は、二番目の哺乳動物種からの抗原の相同体に対して有している結合親和性よりも、一番目の哺乳動物種からの抗原に対してより強力な結合親和性を有する抗体である。通常、種依存性抗体は、ヒト抗原（すなわち、約１×１０−７Ｍ以下、好ましくは約１×１０−８以下、最も好ましくは約１×１０−９Ｍ以下の結合親和性（Ｋｄ）値を有する）と「特異的に結合」するが、そのヒト抗原に対する結合親和性よりも、少なくとも約５０倍、又は少なくとも約５００倍、又は少なくとも約１０００倍弱い、二番目の非ヒト哺乳動物種からの抗原の相同体に対する結合親和性を有する。種依存性抗体は、上にて定義した種々の型の抗体のいずれでもあることが可能だが、好ましくはヒト化又はヒト抗体である。
【０１２０】
「ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合オリゴペプチド」はここで記載される様なＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに好ましくは特異的に結合するオリゴペプチドである。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合オリゴペプチドは、既知のオリゴペプチド合成方法論を用いて化学的に合成することができ、あるいは組み換え技術を用いて調製及び精製することができる。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合オリゴペプチドは通常、少なくとも約５のアミノ酸長であり、或いは少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１−７３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９又は１００のアミノ酸長以上であり、このようなオリゴペプチドはここに記載される様なＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに対して好ましくは特異的に結合する能力がある。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合オリゴペプチドは、よく知られた技術を用いて過度の実験をすることなしに同定することができる。この点において、ポリペプチド標的に特異的に結合する能力のあるオリゴペプチドのオリゴペプチドライブラリーを検索する技術は当分野でよく知られていることを注記する（例えば、米国特許第５５５６７６２号、同第５７５０３７３号、同第４７０８８７１号、同第４８３３０９２号、同第５２２３４０９号、同第５４０３４８４号、同第５５７１６８９号、同第５６６３１４３号；ＰＣＴ公開第ＷＯ８４／０３５０６号、及びＷＯ８４／０３５６４号；Geysen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81:3998-4002 (1984);Geysen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 82:178-182 (1985);Geysen et al., in Synthetic Peptides as Antigens, 130-149 (1986);Geysen et al., J. Immunol. Meth., 102:259-274 (1987);Schoofs et al., J. Immunol., 140:611-616 (1988), Cwirla,S.E. et al.(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87:6378;Lowman,H.B. et al. (1991) Biochemistry, 30:10832;Clackson,T. et al. (1991) Nature, 352:624;Marks,J.D. et al. (1991) J. Mol. Biol., 222:581;Kang,A.S. et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:8363、及びSmith, G.P. (1991) Current Opin. Biotechnol., 2:668参照）。
【０１２１】
「ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合有機分子」とは、ここに記載されるようなＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに、好ましくは特異的に、結合する、ここに定義されるようなオリゴペプチド又は抗体以外の有機分子である。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合有機分子は既知の方法（例えばＰＣＴ公開第ＷＯ００／００８２３号及びＷＯ００／３９５８５号参照）を用いて同定され、化学的に合成されうる。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ結合有機分子は通常、約２０００ダルトン未満の大きさであり、あるいは約１５００、７５０、５００、２５０又は２００ダルトン未満の大きさであり、ここに記載される様なＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドに、好ましくは特異的に結合する能力のあるこのような有機分子は、よく知られた技術を用いて過度の実験をすることなしに同定されうる。この点において、ポリペプチド標的に結合する能力のある分子の有機分子ライブラリーを検索する技術は当分野でよく知られていることを注記する（例えばＰＣＴ公開第ＷＯ００／００８２３号及びＷＯ００／３９５８５号参照）。
【０１２２】
対象の抗原、例えば腫瘍関連ポリペプチド抗原標的と「結合する」抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子は、その抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子がその抗原を発現している細胞又は組織を標的とする診断及び／又は治療剤として有用であり、他のタンパク質と有意には交差反応しないように十分な親和性でその抗原と結合するものである。そのような実施態様では、抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子の「非標的」タンパク質との結合の程度は、蛍光標示式細胞分取器（ＦＡＣＳ）分析又は放射免疫沈降（ＲＩＡ）によって定量して、その特定の標的タンパク質との抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子の結合の約１０％よりも低い。標的分子への抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子の結合に関して、特定のポリペプチド又は特定のポリペプチド標的上のエピトープと「特異的に結合」又は「特異的に結合する」、又はそれに対して「特異的である」という用語は、非特異的な相互作用とは測定して異なる結合を意味する。特異的な結合は、例えば、一般に結合活性を持たない類似した構造の分子であるコントロール分子の結合性と比較して、分子の結合性を定量することによって測定することができる。例えば、特異的な結合性は、標的、例えば過剰の非標識標的に類似したコントロール分子とも競合にとって定量することができる。この場合、プローブに対する標識標的の結合が過剰の非標識標的によって競合的に阻害されるならば、特異的結合が表示される。ここで使用される特定のポリペプチド又は特定のポリペプチド標的上のエピトープと「特異的に結合」又は「特異的に結合する」、又はそれに対して「特異的である」という用語は、例えば標的に対して少なくとも約１０−４Ｍ、あるいは少なくとも約１０−５Ｍ、あるいは少なくとも約１０−６Ｍ、あるいは少なくとも約１０−７Ｍ、あるいは少なくとも約１０−８Ｍ、あるいは少なくとも約１０−９Ｍ、あるいは少なくとも約１０−１０Ｍ、あるいは少なくとも約１０−１１Ｍ、あるいは少なくとも約１０−１２Ｍ、あるいはそれ以上のＫｄを持つ分子によって示されうる。一実施態様では、「特異的に結合する」という用語は、如何なる他のポリペプチド又はポリペプチドエピトープへ実質的に結合することなく分子が特定のポリペプチド又は特定のポリペプチドのエピトープに結合する結合を意味する。
【０１２３】
「ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを発現する腫瘍細胞の成長を阻害する」抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子、又は「成長阻害」抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子は、適切なＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを発現又は過剰発現する癌細胞の測定可能な程の成長阻害を引き起こすものである。好ましい成長阻害抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子は、一般的には、試験された抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子で処理されていない腫瘍細胞であるコントロールである、適切なコントロールと比較して、２０％より多く、好ましくは約２０％から約５０％、そしてさらに好ましくは５０％よりも多く（例えば、約５０％から約１００％）でＩＬ−１７Ａ／Ｆ発現腫瘍細胞の成長を阻害する。一実施態様では、成長阻害は、細胞培養で約０．１から３０μｇ／ｍｌ又は約０．５ｎＭから２００ｎＭの抗体濃度で測定することができ、抗体への腫瘍細胞の曝露の後、成長阻害を１−１０日で確かめる。インビボでの腫瘍細胞の成長阻害は、種々の方法で確かめることができる。約１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ体重の抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体の投与が、最初の抗体の投与から約５日から３ヶ月内、好ましくは約５から３０日内に腫瘍の大きさ又は腫瘍細胞増殖に減少を引き起こす場合、抗体はインビボで成長阻害性である。
【０１２４】
「アポトーシスを誘発する」抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子は、アネキシンＶの結合、ＤＮＡの断片化、細胞収縮、小胞体の拡張、細胞断片化、及び／又は膜小胞の形成（アポトーシス体と呼ばれる）等により決定されるようなプログラム細胞死を誘発するものである。細胞は、通常、ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドを過剰発現しているものである。好ましくは、細胞は腫瘍細胞、例えば前立腺、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、肺、腎臓、結腸、膀胱細胞である。アポトーシスに伴う細胞のイベントを評価するために種々の方法が利用できる。例えば、ホスファチジルセリン（ＰＳ）転位置をアネキシン結合により測定することができ；ＤＮＡ断片化はＤＮＡラダーリングにより評価することができ；ＤＮＡ断片化に伴う細胞核／クロマチン凝結は低二倍体細胞の何らかの増加により評価することができる。好ましくは、アネキシン結合アッセイにおいて、アポトーシスを誘発する抗体、オリゴペプチド又は他の有機分子は、未処理細胞の約２〜５０倍、好ましくは約５〜５０倍、最も好ましくは約１０〜５０倍のアネキシン結合を誘発するという結果を生じるものである。
【０１２５】
抗体の「エフェクター機能」とは、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域又はアミノ酸配列変異体Ｆｃ領域）に帰する生物学的活性を意味し、抗体のアイソタイプにより変わる。抗体のエフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞障害；Ｆｃレセプター結合性；抗体依存性細胞媒介性細胞障害（ＡＤＣＣ）；貪食作用；細胞表面レセプター（例えば、Ｂ細胞レセプター）のダウンレギュレーション；及びＢ細胞活性化が含まれる。
【０１２６】
「抗体依存性細胞媒介性細胞障害」又は「ＡＤＣＣ」とは、ある種の細胞障害細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球及びマクロファージ）上に存在するＦｃレセプター（ＦｃＲｓ）と結合した分泌Ｉｇにより、これらの細胞障害エフェクター細胞が抗原−担持標的細胞に特異的に結合し、続いて細胞毒により標的細胞を死滅させることを可能にする細胞障害性の形態を意味する。抗体は細胞障害細胞を「備えて」おり、これはこのような死滅には絶対に必要なものである。ＡＤＣＣを媒介する主要な細胞ＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現するのに対し、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞でのＦｃＲの発現は、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991)  の４６４頁の表３に要約されている。対象の分子のＡＤＣＣ活性をアッセイするために、米国特許第５５００３６２号又は同第５８２１３３７号に記載されているようなインビトロＡＤＣＣアッセイを実施することができる。このようなアッセイにおいて有用なエフェクター細胞には、末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）が含まれる。代わりとして、もしくは付加的に、対象の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Clynes et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95:652-656 (1998)において開示されているような動物モデルにおいて、インビボで評価することが可能である。
【０１２７】
「Ｆｃレセプター」又は「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合するレセプターを記載するものである。好適なＦｃＲは天然配列ヒトＦｃＲである。さらに好適なＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマレセプター）と結合するもので、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスのレセプターを含み、これらのレセプターの対立遺伝子変異体、選択的にスプライシングされた形態のものも含まれる。ＦｃγＲＩＩレセプターには、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性型レセプター」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害型レセプター」）が含まれ、主としてその細胞質ドメインは異なるが、類似のアミノ酸配列を有するものである。活性型レセプターＦｃγＲＩＩＡは、細胞質ドメインにチロシン依存性免疫レセプター活性化モチーフ（ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｂａｓｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆ  ；ＩＴＡＭ）を含んでいる。阻害型レセプターＦｃγＲＩＩＢは、細胞質ドメインにチロシン依存性免疫レセプター阻害性モチーフ（ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｂａｓｅｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆ  ；ＩＴＩＭ）を含んでいる（Daeron, Annu. Rev. immunol. 15:203-234 (1997)を参照）。ＦｃＲｓに関しては、  Ravetch and Kinet, Annu.Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)；Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994)；及びde Haas et al., J.Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995)に概説されている。将来的に同定されるものも含む他のＦｃＲｓはここでの「ＦｃＲ」という言葉によって包含される。また、該用語には、母性ＩｇＧｓが胎児に受け継がれる要因となっている新生児性レセプターＦｃＲｎ（Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) Kim et al., J. Immunol.24:249 (1994)）も含まれる。
【０１２８】
「ヒトエフェクター細胞」とは、一又は複数のＦｃＲｓを発現し、エフェクター機能を実行する白血球のことである。その細胞が少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行することが望ましい。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例として、末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞障害性Ｔ細胞及び好中球が含まれるが、ＰＢＭＣとＮＫ細胞が好適である。エフェクター細胞は天然源、例えば血液から単離してもよい。
【０１２９】
「補体依存性細胞障害」もしくは「ＣＤＣ」は、補体の存在下で標的を溶解することを意味する。典型的な補体経路の活性化は補体系（Ｃｌｑ）の第１補体が、同族抗原と結合した（適切なサブクラスの）抗体に結合することにより開始される。補体の活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを、例えばGazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996)に記載されているように実施することができる。
【０１３０】
「標識」なる語は、ここで用いられる場合、「標識」抗体が生成されるように、抗体に直接又は間接的に抱合している検出可能な化合物又は組成物を意味する。標識は、それ自身検出可能でもよく（例えば、放射性標識又は蛍光標識）、又は酵素標識の場合、検出可能な基質化合物又は組成物の化学変換を触媒してもよい。
【０１３１】
「固相」とは、本発明の抗体がそれに付着することのできる非水性マトリクスを意味する。ここに意図する固相の例は、部分的又は全体的に、ガラス（例えば、孔制御ガラス）、多糖類（例えばアガロース）、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリビニルアルコール及びシリコーンから形成されたものを含む。或る種の実施態様では、内容に応じて、固相はアッセイプレートのウェルを構成することができ；その他では精製カラム（例えばアフィニティクロマトグラフィーカラム）とすることもできる。また、この用語は、米国特許第４，２７５，１４９号に記載されたような、別個の粒子の不連続な固相も包含する。
「リポソーム」は、種々の型の脂質、リン脂質及び／又は界面活性剤からなる小型の小胞であり、哺乳動物への薬物（ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド又はその抗体など）の輸送に有用である。リポソームの成分は、通常は生体膜の脂質配列に類似する二層形式に配列させる。
【０１３２】
「小分子」とは、ここで、約５００ダルトン未満の分子量を持つと定義される。
【０１３３】
用語「調節」手段とは、シグナル伝達経路のレベルに作用（例えば上方制御する、下方制御する、又はその他の方法で制御する）ことを意味する。シグナル伝達の制御下における細胞プロセスは、これらに限定されるものではないが、特異的遺伝子の転写、正常細胞機能、例えば代謝、増殖、分化、接着、アポトーシス及び生存、並びに形質転換、分化の遮断及び転移等の異常プロセスを含む。
【０１３４】
ここでの目的に対する「活性な」又は「活性」とは、天然又は天然に生じるＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの生物学的及び／又は免疫学的活性を保持するＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドの形態を意味し、その中で、「生物学的」活性とは、天然又は天然発生ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドが保持する抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘発する能力以外の、天然又は天然発生ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドによって引き起こされる生物機能（阻害又は刺激）を意味し、「免疫」活性とは、天然又は天然発生ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドが保持する抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘発する能力を意味する。好ましい生物活性には、ＮＦ−κＢの活性化を誘導すること、並びに炎症誘発性ケモカインＩＬ−８の生産の刺激が含まれる。その他の好ましい生物活性には、末梢血単核細胞又はＣＤ４＋の刺激が含まれる。その他の生物活性には、例えば、ＴＨＰ１細胞からのＴＮＦ−αの放出が含まれる。その他の活性には、関節軟骨でのマトリックス合成の増大が含まれる。あるいは、その他の活性には、マトリックス合成の阻害と並んで関節軟骨マトリックスの破壊の促進が含まれる。その他の好ましい生物活性には、炎症性腸疾患の軽度から重度の段階の間、又は発作中のインターロイキン１７シグナル伝達経路のレベルを調節することが含まれる。
【０１３５】
「免疫学的」活性とは、単に、天然又は天然発生ＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチドによって保持されている抗原性エピトープに対する抗体の生成を誘導する能力を意味する。
【０１３６】
「変性軟骨性疾患」は主に軟骨マトリックスの破壊によって特徴づけられる多くの疾患を記述している。更なる症状には、一酸化窒素の生成及びプロテオグリカン分解の上昇が含まれる。この定義に包含される疾患の例には、例えば関節炎（例えば、変形性関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎）が含まれる。
【０１３７】
「免疫関連疾患」という用語は、哺乳動物の免疫系の構成成分が哺乳動物の病的状態を引き起こし、媒介し、或いは寄与する疾患を意味する。また、免疫反応の刺激又は処置が、疾患の進行に対して改善的な効果を有するような疾患をも含む。この用語には、免疫媒介炎症誘発性疾患、非免疫媒介炎症誘発性疾患、感染性疾患、免疫不全性疾患、腫瘍形成等が含まれる。
【０１３８】
「Ｔ細胞媒介疾患」という用語は、Ｔ細胞が哺乳動物の病的状態を直接、又は間接に媒介する、或いは寄与する疾患を意味する。Ｔ細胞媒介疾患は、細胞媒介効果、リンホカイン媒介効果等、そして例えば、Ｔ細胞によって分泌されたリンホカインによってＢ細胞が刺激された場合に、Ｂ細胞と関連している効果にさえも関連している。
【０１３９】
そのうちの免疫又はＴ細胞媒介であり、本発明によって治療することが可能な免疫関連及び炎症性疾患の例には、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎、若年型慢性関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（強皮症）、特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）、シェーグレン症候群、全身性血管炎、サルコイドーシス、自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間ヘモグロビン尿症）、自己免疫性血小板減少症（溶血性血小板減少性紫斑病、免疫媒介血小板減少症）、甲状腺炎（バセドウ病、橋本甲状腺炎、若年型リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）、糖尿病、免疫媒介腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）、中枢及び末梢神経系の脱髄疾患例えば多発性硬化症、特発性脱髄多発神経障害又はギラン・バレー症候群、及び慢性炎症性脱髄性多発神経障害、肝胆道疾患例えば感染性肝炎（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ型肝炎、及び他の非肝親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、及び硬化性胆管炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）、グルテン過敏性腸疾患、及びウィップル病、水疱性皮膚病を含む自己免疫又は免疫媒介皮膚疾患、多形滲出性紅斑及び接触性皮膚炎、乾癬  、アレルギー性疾患例えば喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症及び蕁麻疹、肺の免疫疾患例えば好酸球性肺炎、特発性肺線維症及び過敏性肺炎、拒絶反応及び移植片対宿主病を含む移植関連疾患が含まれる。感染症疾患には、ウイルス性疾患、例えばＡＩＤＳ（ＨＩＶ感染）、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ型肝炎、ヘルペス等、細菌感染症、真菌感染症、原虫感染症及び寄生虫症が含まれる。
【０１４０】
「有効量」とは、特に定まった目的を達成することを引き起こすＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド及び／又はアゴニスト／アンタゴニストの濃度又は量である。さらには、「治療的有効量」とは、定まった治療的有効量を達成するために効果的なＩＬ−１７Ａ／Ｆポリペプチド及び／又はアゴニスト／アンタゴニストの濃度又は量である。また、この量は実験的に確定してもよい。
【０１４１】
ここで用いられる「細胞傷害性剤」は、細胞の機能を阻害又は抑制し、及び／又は細胞破壊を起こす物質を意味する。この用語は、放射性同位元素（例えば、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０及びＲｅ１８６）、化学治療薬、及び細菌、真菌、植物又は動物由来の酵素活性毒素又はその断片を意味する。
【０１４２】
ＩＩ．詳細な説明
本発明は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体、及びＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに特異的に結合する二重特異性抗体を調製する方法を提供する。ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆは、Ｔｈ１７Ｔ細胞サブセットによって分泌される主要な炎症誘発性サイトカインである。それらは、身体のほとんどすべての細胞型を標的とし、組織炎症及び組織障害を誘導する。炎症及び特に関節リウマチ（ＲＡ）や炎症性腸疾患（ＩＢＤ）などの自己免疫疾患のような免疫関連疾患におけるこれらのサイトカインの関与により、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方をブロックすることが可能な抗体を製造することが望ましい。本発明は、そのような抗体を提供する。より詳細には、本発明は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆとの交差反応性抗体及びＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方と結合特異性を有する二重特異性抗体を提供する。
【０１４３】
組換え抗体作成のための一般的な方法
本明細書に記載される抗体及び他の組換えタンパク質は、組換えＤＮＡ技術の周知技術によって製造することができる。したがって、特に本明細書で同定される抗体を除いて、熟練した専門家は、例えば下記で記載されている技術を用いて、興味がある抗原に対する抗体を作り出すことができるであろう。
【０１４４】
本発明によって製造される抗体は、興味がある２つの抗原、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対している。本発明のＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性及び二重特異性抗体はファージディスプレイ技術を用いて作り出されたが、二重特異性抗体及び２つの異なる抗原に結合する抗原結合領域を有する抗体の作製する既知の他の技術も用いることができる。
【０１４５】
交差反応性抗体
一実施態様によると、ＩＬ−１７Ａに特異性を有する抗体は、ＩＬ−１７Ａに対する特異性を維持しながら、ＩＬ−１７Ｆに特異性をもたらすように多様化される。あるいは、ＩＬ−１７Ｆに特異性を有する抗体は、ＩＬ−１７Ｆに対する特異性を維持しながら、ＩＬ−１７Ａに特異性をもたらすように多様化される。総称において、この方法は、（１）多様化の前に、第一のＩＬ−１７タンパク質（ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆ）のエピトープに結合可能な抗体の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む抗体のＶＬのアミノ酸配列を多様化する、及び（２）第一のＩＬ−１７タンパク質（ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆ）のエピトープ及び第二のＩＬ−１７タンパク質（ＩＬ−１７Ｆ又はＩＬ−１７Ａ）のエピトープと結合可能な多様化された抗体を選択する工程を含む。この方法の詳細な説明は、２００８年３月２０日に公開された出願中の出願公開番号２００８００６９８２０において提供され、その全体の開示は本明細書に明白に引用されたものとする。ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体を製造するための特異的な製造及び選別方法は、実施例１に例示される。  
【０１４６】
二重特異性抗体
他の実施態様によれば、２つのＩＬ−１７ポリペプチド（ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆ）に特異性を有する抗体は、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆを注射されたヒト以外の哺乳動物、例えばマウス又はラットから単離される。
【０１４７】
二重特異性抗体を作るための方法は、その分野において周知である。従来の完全長二重特異性抗体の製造は、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づき、２つの鎖は異なる特異性を有する（Millstein et al., Nature, 305:537-539 (1983)）。免疫グロブリン重鎖および軽鎖の任意組合せのため、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は１０の異なる抗体分子の潜在的な混合物を製造し、一つのみが正しい二重特異性構造を有する。通常アフィニティークロマトグラフィ・ステップによって行われる正しい分子の精製は、かなり煩雑で、製品収量は低い。同様の手法が、ＷＯ９３／０８８２９及びTraunecker et al., EMBO J., 10:3655-3659 (1991)において開示される。
【０１４８】
Ｗ０９６／２７０１１に記載されている他の手法によれば、一対の抗体分子間の境界面は、組換え細胞培養物から回収されるヘテロダイマーの割合を最大にするように設計され得る。好ましい境界面は、抗体定常ドメインのＣＨ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法では、第一の抗体分子の境界面の一つ以上の小さいアミノ酸側鎖は、より大きい側鎖（例えばチロシン又はトリプトファン）と置換される。大きい側鎖と同一又は類似した大きさの補償的「キャビティ」は、より小さいアミノ酸側鎖（例えばアラニン又はスレオニン）で大きいアミノ酸側鎖を置換することによって、第二の抗体分子の境界面に作成される。これは、他の望ましくない最終生産物（例えばホモダイマー）よりもヘテロダイマーの産生を増加させるためのメカニズムを提供する。
【０１４９】
二重特異性抗体は、架橋又は「ヘテロコンジュゲート」抗体を含む。例えば、ヘテロコンジュゲートにおける抗体の一つはアビジンと、その他はビオチンと結合することができる。そのような抗体は、例えば、免疫系細胞が望ましくない細胞を標的とするため（米国特許第４，６７６，９８０号）、及びＨＩＶ感染症の治療のため（ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３及びＥＰ０３０８９）に提唱された。ヘテロコンジュゲート抗体は、あらゆる便利な架橋法を用いて作製してもよい。多くの架橋技術とともに、適切な架橋剤はその分野で既知であり、米国特許第４，６７６，９８０号において開示される。
【０１５０】
二重特異性抗体の作製方法の検討のために、例えばHolliger, P. and Winter, G., Curr. Opin. Biotechnol. 4, 446-449 (1993)；Carter, P. et al., J. Hematotherapy 4,463-470 (1995)；及びPluckthun, A. and Pack, P., Immunotechnology 3, 83-105 (1997)を参照のこと。二重特異性及び／又は二価性は、フレキシブルなリンカー、ロイシンジッパーのモチーフ、ヘテロ二量体化を介して２つのｓｃＦｖ分子を融合させることによって、及び二価単一特異性ダイアボディ及び関連する構造を形成するようなｓｃＦｖ分子の結合によって達成された。
【０１５１】
したがって、例えば、二重特異性抗体を作製するために、２つの単一特異性の抗体（例えば抗ＩＬ−１７Ａ及び抗ＩＬ−１７Ｆ抗体）から始めることができる。抗体の２本のアームは、二重特異性抗体を形成するために、分離及び共有結合で再結合することができる。そのような二重特異性抗体は、各々の親分子の共通のＦｃ部分及び一つのＦａｂ部分を含み得る。したがって、１つのＦａｂ部分はリセプターサブユニットの一つに特異的であり、その他は異なるレセプターサブユニットに特異的である。もちろん、出発材料は、完全な二価抗体である必要はない。例えば、それらは、断片、例えばＦａｂ断片又は一つ以上の重鎖ＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメインをさらに含むＦａｂ断片（例えばＦ（ａｂ’）２断片）であり得る。
【０１５２】
二重特異性抗体は、化学結合を用いても調製することができる。Brennan et al., Science 229:81 (1985)は、Ｆ（ａｂ’）２断片を作製するための完全な抗体をタンパク質分解で切断する手法を記載している。これらの断片は、近接のジチオールを安定化し、分子間ジスルフィド形成を妨げるために、ジチオール錯化剤亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元される。作製されたＦａｂ’断片は、チオニトロベンゾアート（ＴＮＢ）誘導体に変換される。Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の一つは、メルカプトエチルアミンでの還元によってＦａｂ’−チオール再変換され、二重特異性抗体を形成するために等モル量の他のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合される。さらなる実施態様において、Ｅ．ｃｏｌｉから直接に回収されるＦａｂ’−ＳＨ断片は、二重特異性抗体を形成するためにビトロで化学的に結合され得る。Shalaby et al., J. Exp. Med. 175: 217-225 (1992)。
【０１５３】
二重特異性抗体は、架橋又は「ヘテロコンジュゲート」抗体を含む。例えば、ヘテロコンジュゲートにおける抗体の一つはアビジンと、その他はビオチンと結合することができる。ヘテロコンジュゲート抗体は、あらゆる便利な架橋法を用いて作製してもよい。多くの架橋技術とともに、適切な架橋剤はその分野で既知であり、米国特許第４，６７６，９８０号において開示される。  
【０１５４】
二重特異性抗体は、ロイシンジッパーを用いても製造されてきた。Kostelny et al., J. Immunol. 148(5): 1547-1553 (1992)。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質のロイシンジッパーペプチドは、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結された。抗体ホモダイマーは、モノマーを形成するためにヒンジ領域で還元され、ついで抗体ヘテロダイマーを形成するために再酸化された。この方法は、抗体ホモダイマー作成のためにも利用することができる。Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993)によって記載されている「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体断片を作製するための他のメカニズムを提供した。断片は、同じ鎖上の２つのドメイン間でペアリングするには短いリンカーによって、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続される重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。したがって、一つの断片のＶＨ及びＶＬドメインは、他の断片の相補的なＶＬ及びＶＨドメインとペアリングすることが強制され、それにより２つの抗原結合部位を形成する。単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）ダイマーの使用によって二重特異性抗体断片を製作するための他のストラテジーも報告されている。Gruber et al., J. Immunol. 152:5368 (1994)を参照。あるいは、二重特異性抗体は、Zapata et al. Protein Eng. 8(10): 1057-1062 (1995)に記載されるように製造される「直鎖状抗体」であってもよい。  
【０１５５】
２つのポリペプチド鎖（例えば抗体成分）を化学的に結合（クロスリンク）させるために、あらゆる種々の従来法を用いることができる。共有結合は、既存の側鎖（例えばシステイン残基間のＳ‐Ｓ結合の形成）の直接的な濃縮、又は外部の架橋分子の取り込みによって達成し得る。多くの二価又は多価の薬剤は、ポリペプチドの結合に有用である。抗体を化学的に架橋させるために用いられるいくつかの方法の記載については、例えばCao et al. (1988) Bioconjugate Chemistry 9, 635-644；Shalaby et al. (1992) J. Exp. Med. 175, 217-225；Glennie et al. (1987) J. Immunol. 139, 2367-2375；Jung et al. (1991) Eur. J. Immunol. 21, 2431-2435；VanDijk et al. (1989) Int. J. Cancer 44, 738-743；Pierce ImmunoTechnology Catalog & Handbook (1991) E8-E39；Karpovsky et al. (1984) J. Exp. Med. 160, 1686；Liu et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 8648；Kranz et al. (1981), PNAS 78, 5807；Perez et al. (1986), J. Exp. Med. 163, 166-178；Brennan (1986) Biotech. 4, 424；及び米国特許番号４，６７６，９８０、６，０１０，９０２及び５，９５９，０８３を参照のこと。
【０１５６】
さらに、例えばWhitlow et al. (1991), Methods: A Companion to Methods in Enzymology, Vol. 2, page 97；Bird et al. (1988), Science 242, 423-426；米国特許番号４，９４６，７７８；Pack et al. (1993), Bio/Technology 11, 1271-77；及びSandhu (1992), Crit. Rev. Biotech. 12, 437に記載されるように、組換え技術は、単鎖二重特異性抗体を作製するために用いることができる。特に、二重特異性単鎖抗体を作製するための方法は、例えば、米国特許番号５，８９２，０２０；Gruber et al. (1994). J. Immunol. 152, 5368-74；Mallender et al. (1994). Biochemistry 33, 10100-10108；Winter et al. (1991). Nature 349, 293-299；Schmidt et al. (1996). International Journal of Cancer 65, 538-546；及びThirion et al. (1996). Eur. J. of Cancer Prevention 5, 507-511に記載されている。
【０１５７】
二重特異性抗体を製作するための特定の方法は、本明細書の実施例２に記載されている。
【０１５８】
抗体の組換え生産
抗体の組換え生産のために、それをコード化している核酸は、単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）又は発現のための複製可能なベクターに挿入されてもよい。もう一つの実施態様では、抗体は、明確にここに引用される米国特許番号５，２０４，２４４などに記載されるように、相同組み換えによって製造されてもよい。モノクローナル抗体をコード化しているＤＮＡは、容易に単離され、従来法用いて（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコード化している遺伝子に特異的に結合可能なオリゴヌクレオチドプローブを用いることにより）配列決定される。多くのベクターが利用可能である。ベクター成分は一般的に、限定されるものではないが、以下の一つ以上を含む：シグナル配列、複製開始点、一つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモータ及び転写終結配列（例えば１９９６年７月９日に発行された米国特許番号５，５３４，６１５に記載され、本明細書に明確に援用される）。
【０１５９】
抗体鎖をコード化するＤＮＡをクローニング又は発現するのに適切な宿主細胞には、哺乳動物宿主細胞が含まれる。哺乳動物宿主細胞に対する興味は大きく、培養（組織培養）における脊椎動物細胞の普及は日常的な手法になった。有用な哺乳類宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）；ヒト胚腎臓株（２９３細胞又は懸濁培養における増殖のためにサブクローニングされた２９３細胞、Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）；チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ、Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)）；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)）；サル腎培養細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頚癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；  ＴＲＩ細胞（Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383: 44-68 (1982)）；トレポネーマ抗原５細胞；  ＦＳ４細胞；及びヒト肝癌株（Ｈｅｐ  Ｇ２）である。
【０１６０】
宿主細胞は、抗体産生のための発現又はクローニングベクターで形質転換され、プロモーターを誘導するのに適するように改良された従来の培養液中で培養され、トランスフォーマントを選択し、又は所望の配列をコード化している遺伝子を増幅される。
【０１６１】
哺乳動物宿主細胞は、種々の培地で培養されてもよい。Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０（Sigma）、最少必須培地（ＭＥＭ）（Sigma）、ＲＰＭＩ−１６４０（Sigma）、及びダルベッコの修正イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Sigma）などの商業的に入手可能な培地が宿主細胞を培養するのに適している。そのほかにHam et al., Meth. Enz. 58: 44 (1979)、Barnes et al., Anal. Biochem.102: 255 (1980)、米国特許番号４，７６７，７０４；４，６５７，８６６；４，９２７，７６２；４，５６０，６５５；又は５，１２２，４６９；ＷＯ９０／０３４３０；ＷＯ８７／００１９５；又は米国再発行特許番号３０，９８５に記載されるあらゆる培地は、宿主細胞のための培養培地として用いられ得る。これらの培地の何れかは、必要に応じてホルモン及び／又はその他の増殖因子（例えばインスリン、トランスフェリン又は上皮増殖因子）、塩（例えば塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及びリン酸塩）、バッファー（例えばＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えばアデノシン及びチミジン）、抗生物質（例えばＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ）、微量元素（通常マイクロモル濃度の範囲の終濃度で存在する無機化合物として定義される）及びグルコース又は等価エネルギー供給源で補充されてもよい。他のあらゆる必要なサプリメントも当業者に公知の適切な濃度で含まれてもよい。培養条件（例えば温度、ｐＨなど）は、発現のために選択される宿主細胞で以前に用いられたもので、通常の熟練した職人にとって明白である。
【０１６２】
細胞から調製される抗体組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ、ゲル電気泳動、透析及びアフィニティークロマトグラフィを用いて精製することができ、アフィニティークロマトグラフィは好ましい精製技術である。アフィニティーリガンドとしてのプロテインＡの適合性は、抗体に存在するあらゆる免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡはヒト１、ヒト２及びヒト４重鎖に基づく抗体を精製するために用いることができる（Lindmark et al., J. Immunol. Meth. 62:1-13 (1983)）。
【０１６３】
タンパク質Ｇは全てのマウス・アイソタイプ及びヒト３に推奨される（Guss et al., EMBO J. 5:15671575 (1986)）。アフィニティーリガンドが付着するマトリックスは多くの場合アガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。制御細孔ガラスやポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定なマトリックスは、アガロースで達成できるものより早い流速及び短い処理時間を可能にする。抗体はＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸＴＭ樹脂（J. T. Baker、Phillipsburg, N.J.）は精製に有用である。イオン交換カラム上の分割法、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィ、ヘパリンＳＥＰＨＡＲＯＳＥＴＭでのクロマトグラフィ、陰イオン又は陽イオン交換樹脂（例えばポリアスパラギン酸列）でのクロマトグラフィ、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、疎水性相互作用クロマトグラフィ及び硫安沈殿などの他のタンパク質精製技術もまた、回収される抗体に依存して、利用可能である。
【０１６４】
あらゆる予備的な精製工程に続いて、興味がある抗体及び混入物を含む混合物は、所望の純度レベルを達成するために、さらなる精製工程を受けてもよい。
【０１６５】
ヒト化抗体は、ヒト以外の供給源から導入される一つ以上のアミノ酸残基を有する。これらのヒト以外のアミノ酸残基は、多くの場合「輸入」残基と称され、それは一般的に「輸入」可変ドメインから取り込まれる。ヒト化は基本的に、Winter及び協力者（Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986)；Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988)；Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988)）の方法に続いて、齧歯類のＣＤＲ又はＣＤＲ配列を対応するヒト抗体の配列と置換することによって行うことができる。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、実質的に完全なヒト可変ドメインがヒト以外の種からの対応配列によって置換されたキメラ抗体（米国特許番号４，８１６，５６７）ではない。実際には、ヒト化抗体は、一般的に、いくつかのＣＤＲ残基及びおそらくいくつかのＦＲ残基が齧歯類の抗体の類似した部位の残基によって置換されたヒト抗体である。
【０１６６】
ヒト化抗体を製作する際に用いられるヒト可変ドメイン（軽鎖及び重鎖）の選択は、抗原性を減少させるために非常に重要である。いわゆる「ベストフィット」方法によれば、齧歯類の抗体の可変ドメインの配列は、既知のヒト可変ドメイン配列の完全なライブラリーに対してスクリーニングが行われる。齧歯類の配列に最も近いヒト配列は、ヒト化抗体のヒトＦＲとして受け入れられる（Sims et al., J. Immunol., 151:2296 (1993)）。他の方法は、軽鎖または重鎖の特定のサブグループの全てのヒト抗体の共通配列から誘導される特定のフレームワークを使用する。同じフレームワークはいくつかの異なるヒト化抗体で用いられてもよい（Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992)；Presta et al., J. Immnol., 151:2623 (1993)）。
【０１６７】
抗体が抗原に対する高親和性及び他の有利な生物学的性質を保持してヒト化されることは、さらに重要である。この目的を達成するために、好ましい方法によれば、ヒト化抗体は、親の及びヒト化配列の三次元モデルを用いた親の配列及び様々な概念上のヒト化産物の解析のプロセスによって調製される。三次元免疫グロブリンモデルは、共通に利用可能であり、当業者からよく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の有望な三次元立体配置的構造を例示及び表示するコンピュータープログラムは利用可能である。これらの表示の検査は、候補免疫グロブリン配列の機能の残基のあり得る役割の解析（すなわち候補免疫グロブリンの抗原と結合する能力に影響を与える残基の解析）を可能とする。このような方法で、所望の抗体特性（例えば、増加した標的抗原に対する親和性）が達成されるために、ＦＲ残基はレシピエント及び輸入配列から選択され、組み合わせることができる。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合への影響に直接的及び最も実質的に関与する。
【０１６８】
あるいは、免疫処置に応じて、内因性の免疫グロブリン生産の非存在下でヒト抗体の完全なレパートリーを製造することが可能なトランスジェニック動物（例えばマウス）を製造することは現在可能である。例えば、キメラ及び生殖細胞系変異体マウスの抗体重鎖Ｊ領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合の欠失により内因性の抗体産生の完全な阻害が生じることが記載されてる。そのような生殖細胞系変異体マウスのヒト生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子配列の転移は、抗原負荷に対するヒト抗体の生産を生じる。Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993)；Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993)；Bruggermann et al., Year in Immuno., 7:33 (1993)；及びDuchosal et al. Nature 355:258 (1992)を参照のこと。ヒト抗体はファージ−ディスプレイライブラリーからも誘導することができる（Hoogenboom et al., J. Mol. Biol., 227:381 (1991)；Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991)；Vaughan et al. Nature Biotech 14:309 (1996)）。
【０１６９】
治療上の用途
本発明の抗体は、ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆの産生と関連した炎症性及び免疫関連疾患の治療において有用である。上記したように、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの炎症誘発性特性からみて、高い活性でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆをブロックすることができる交差反応性及び二重特異性抗体は自己免疫疾患を含む炎症性及び免疫関連疾患の治療の新しい治療上の機会を提供する。
【０１７０】
本発明の交差反応性及び二重特異性抗体に標的とされる例示的な炎症性及び免疫関連疾患は、免疫性又はＴ細胞媒介であってもよいが、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、若年型慢性関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（強皮症）、特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）、シェーグレン症候群、全身性血管炎、サルコイドーシス、自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間ヘモグロビン尿症）、自己免疫性血小板減少症（溶血性血小板減少性紫斑病、免疫媒介血小板減少症）、甲状腺炎（バセドウ病、橋本甲状腺炎、若年型リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）、糖尿病、免疫媒介腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）、中枢及び末梢神経系の脱髄疾患、例えば多発性硬化症、特発性脱髄多発神経障害又はギラン・バレー症候群、及び慢性炎症性脱髄性多発神経障害、肝胆道疾患例えば感染性肝炎（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ型肝炎、及び他の非肝親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、及び硬化性胆管炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）、グルテン過敏性腸疾患、及びウィップル病、水疱性皮膚病を含む自己免疫又は免疫媒介皮膚疾患、多形滲出性紅斑及び接触性皮膚炎、乾癬  、アレルギー性疾患、例えば喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症及び蕁麻疹、肺の免疫疾患例えば好酸球性肺炎、特発性肺線維症及び過敏性肺炎、拒絶反応及び移植片対宿主病を含む移植関連疾患、ウイルス性疾患、例えばＡＩＤＳ（ＨＩＶ感染）、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥ型肝炎、ヘルペス等、細菌感染症、真菌感染症、原虫感染症及び寄生虫症を含む感染症を含む。
【０１７１】
特定の実施態様において、抗体は、関節リウマチ（ＲＡ）、潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、喘息又は他のアレルギー性又は自己免疫性の疾患を治療するために用いられる。
【０１７２】
用量及び製剤
本明細書に記載される抗体又は抗体断片組成物は、製剤化され、服用され、望ましい医療と一致した方法で投与される。この状況において考慮すべき因子として、治療される特定の疾患、治療される特定の哺乳動物、個人の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与計画及び医師に既知の他の因子が含まれる。投与される抗体又は抗体断片の「治療上有効量」は、そのような考慮により決定され、上掲の疾患やコンディションの何れかの標的疾患を予防、改善又は治療するのに必要な最小量である。抗体又は抗体断片は、必ずではないが場合によって、標的疾患を予防又は治療するために現在用いられる一つ以上の薬剤と共に製剤化される。他の薬剤の有効量は、製剤中の抗体又は抗体断片の量、疾患又は治療の型及び上記の他の因子に依存する。これらは一般的にこれまでと同じ用量及び投与経路で用いられるか、従来用いられていた用量のの約１から９９％で用いられる。
【０１７３】
一般に、標的疾患の治療には、標的疾患に関連する一つ以上の症状又は医学的問題を減少させることが含まれる。例えば、標的疾患が炎症性の疾患又はコンディションである場合、治療は炎症を減少する、及び／又は炎症と関連する一つ以上の症状を軽減することができる。
【０１７４】
関節リウマチの場合、症状としては、これに限定されるものではないが、筋肉及び関節の痛み、硬直、腫脹、関節痛又は圧痛が含まれ、それらの一つ以上は本明細書の抗体の投与によって軽減することができる。
【０１７５】
さらに、本発明の交差反応性及び二重特性抗ＩＬ１７Ａ／Ｆ抗体は、標的疾患の物理的な発現を予防、減少又は遅らせることができる。例えば、標的疾患が関節リウマチである場合、治療は構造損傷（例えば骨浸食及び疾患の関節障害特性）の進行を予防する、少なくする、減らす又は遅らせ得る。この目安として、本発明の交差反応性及び二重特異性抗体は、中程度から重篤な活性の関節リウマチ（ＲＡ）を患う患者を治療するために、例えばＲｉｔｕｘａｎ（登録商標）（ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）の単独又はメトトレキセートとの組み合わせなどの臨床診療において用いられる他の治療様式と組み合わせることができる。本発明の抗体と組み合わせて用いることができる他の治療の選択肢としては、これに限定されるものではないが、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、コルチコステロイド及びＴＮＦアンタゴニスト治療（例えばエタナーセプト、インフリキシマブ又はアダリムマブ）が含まれる。
【０１７６】
標的疾患が潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む炎症性腸疾患（ＩＢＤ）である場合、治療は炎症及び／又は腹痛、下痢又は便秘、疲労及び熱を含む髄判症状の一つ以上の進行を予防する、少なくする、減らす又は遅らせ得る。本発明の交差反応性及び二重特異性抗体での治療は、アミノサリチル酸、コルチコステロイド、抗生物質及び他の生物学の治療選択肢（例えばエタナーセプト、インフリキシマブ又はアダリムマブなどのＴＮＦアンタゴニスト治療）を含むＩＢＤの管理のための従来の治療と組み合わせることができる。
【０１７７】
治療製剤は、所望の純度を有する有効成分を、選択的な生理学的に許容可能な担体、賦形剤又は安定化剤と混合することによって、その分野において公知の標準法を用いて調製される（Remington's Pharmaceutical Sciences (20.sup.th edition), ed. A. Gennaro, 2000, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, Pa.）。許容可能な担体は、食塩水又はバッファー（例えばリン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸）；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質（例えば血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリン）；親水性ポリマー（例えばポリビニルピロリドン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース又はデキストリンを含む単糖、二糖及び他の炭水化物；キレート剤（例えばＥＤＴＡ）；糖アルコール（例えばマンニトール又はソルビトール）；塩形成対イオン（例えばナトリウム）；及び／又は非イオン性界面活性剤（例えばＴＷＥＥＮＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＴＭ又はＰＥＧ）を含む。
【０１７８】
場合によって、しかし好ましくは、製剤は、製薬的に許容可能な塩、好ましくは塩化ナトリウムを、好ましくは生理的濃度で含む。場合によって、本発明の製剤は、製薬的に許容可能な防腐剤を含み得る。いくつかの実施態様において、防腐剤の濃度は、０．１から２．０％（一般的にｖ／ｖ）に及ぶ。適切な防腐剤には、製薬技術において公知のものが含まれる。ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、メチルパラベン及びプロピルパラベンが、好ましい防腐剤である。場合によって、本発明の製剤は、０．００５〜０．０２％の濃度で、製薬的に許容可能な界面活性剤を含むことができる。
【０１７９】
本明細書の製剤は、治療される特定の適応症に必要とされる複数の活性体（好ましくは各々に悪影響を与えない相補的な活性を有する）をも含んでもよい。そのような分子は、意図された目的のために有効な量で組合せて適切に存在する。
【０１８０】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術又は界面重合法（それぞれ例えばヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタキシレート）マイクロカプセル）で調製されるマイクロカプセル、コロイド薬物送達システム（例えばリポソーム、アルブミン・ミクロスフィア、ミクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）又はマクロエマルジョンに入り込まれてもよい。そのような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences（上掲）に開示される。
【０１８１】
徐放性製剤が調製されてもよい。徐放性製剤の適切な例は、抗体を含む固体の疎水性ポリマーの半透性マトリックス（フィルムなどの造形品又はマイクロカプセルの形態）を含む。徐放性マトリックスの例は、ポリエステル類、ヒドロゲル（例えばポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリラート）又はポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（米国特許番号３，７７３，９１９）、Ｌ−グルタミン酸及びγエチル−Ｌ−グルタミン酸塩のコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸グリコール酸コポリマー（例えばＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴＴＭ（注射可能な乳酸グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドをからなるミクロスフィア））及びポリＤ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含む。エチレン−酢酸ビニル及び乳酸グリコール酸のようなポリマーが１００日以上の間の分子の放出を可能にするが、特定のヒドロゲルはより短い時間タンパク質を放出する。カプセル化された抗体が長い間身体の中に残る場合、それらは３７℃の湿気に暴露される結果として、変性又は凝集し、生物学的活性の損失及び免疫原性の変化の可能性が生じ得る。関与するメカニズムに応じて、合理的なストラテジーが安定化のために考案され得る。例えば、凝集メカニズムがチオ・ジスルフィド相互交換によって分子間Ｓ−Ｓ結合形成であることを発見される場合、安定化はスルフヒドリル残基を改変することによって、酸性溶液から凍結乾燥することによって、水分含量を制御することによって、及び適切な添加物を用いることによって、及び特定のポリマーマトリックス組成物を開発することによって達成してもよい。
【０１８２】
本明細書に記載される抗体及び抗体断片は、ヒト対象へ、ボーラス投与としての静脈注射により、又は一定時間の連続的な点滴により、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内（intracerobrospinal）、皮下、関節内、滑液内、クモ膜下腔内、経口又は吸入による経路により投与される。広範囲な副作用又は毒性が本明細書に記載される抗体の拮抗作用に関連している場合、局所投与が特に望まれる。エクスビボのストラテジーもまた、治療的応用に用い得る。エクスビボのストラテジーは、対象から得られた細胞に抗体又は抗体断片をコード化するポリヌクレオチドでトランスフェクション又は形質転換することが関与する。トランスフェクションされた、又は形質転換された細胞は、対象へと戻される。細胞は、これに限定されるものではないが、造血細胞（例えば骨髄細胞、マクロファージ、単核細胞、樹状細胞、Ｔ細胞又はＢ細胞）、繊維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、ケラチノサイト又は筋細胞を含む、広範囲にわたる型の何れであってもよい。
【０１８３】
製品及びキット  
本発明の他の実施態様は、本発明の抗体によって標的とされる疾患又は状態の治療に有用な材料を含む製品である。製品は、容器、及び容器上の、又は容器に付随するラベル又は添付文書を含む。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどを含む。容器はガラス又はプラスチックのような様々な材料で形成することができる。容器は状態の治療に有効な活性剤を含む組成物を収容しており、滅菌された出入口を有している（例えば、容器は皮下注射針により貫通可能なストッパーを具備する静脈溶液用のバック又はバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも一つの活性薬剤は、本発明の交差反応性又は二重特異性の抗体又は抗体フラグメント抗体である。ラベル又は添付文書は、組成物が特定の状態を治療するために用いられることを示す。ラベル又は添付文書は、患者に抗体組成物を投与するための説明書をさらに含む。本明細書に記載されている組み合わせ治療法を含む製品及びキットもまた意図される。
【０１８４】
添付文書は、適応、使用法、用量、投与、禁忌及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告についての情報を含む治療用製品の市販パッケージに習慣的に含まれる説明書を意味する。一実施態様において、添付文書は、組成物が関節炎（例えば関節リウマチ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、他の自己免疫性疾患又は喘息のようなアレルギー状態の様々な形態を含む、上記のあらゆる状態などの炎症性又は免疫関連症状の治療に用いられることを示す。
【０１８５】
さらに、製品は、製薬的に許容可能なバッファー（例えば注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸塩緩衝食塩水、リンゲル液及びブドウ糖溶液）を含む第二の容器をさらに含んでもよい。それは、他のバッファー、希釈液、フィルター、針及びシリンジを含む商業的及び使用者の見地から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０１８６】
前述の明細書は、当業者が発明を実施するのに十分であると考えられる。以下の実施例は例示目的のためにのみ提供されるものであって、本発明の範囲を決して限定することを意図するものではない。実際、本明細書に示され、記載されるものに加えて、本発明の様々な変更は、前述の記載から当業者に明白であり、添付の特許請求の範囲の範囲内に入るであろう。
【０１８７】
実施例において言及される市販の試薬は、特に明記しない限り製造業者の説明書に従って用いられた。以下の実施例及び明細書の全体にわたって、ＡＴＣＣ受託番号により同定されるそれらの細胞の供給源は、アメリカンタイプカルチャーコレクション、Manassas、VAである。特に明記しない限り、本発明は、上記及び以下の教科書に記載される組換えＤＮＡ技術の標準手順を用いる：Sambrook et al.、前掲；Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (Green Publishing Associates and Wiley Interscience, N.Y., 1989)；Innis et al., PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications (Academic Press, Inc.: N.Y., 1990)；Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Press: Cold Spring Harbor, 1988)；Gait, Oligonucleotide Synthesis (IRL Press: Oxford, 1984)；Freshney, Animal Cell Culture, 1987；Coligan et al., Current Protocols in Immunology, 1991。
【実施例】
【０１８８】
以下の実施例は、例証することを目的に提供されたものであり、いかなる形であれ本発明の範囲を限定することを目的としない。
本願明細書において引用される全ての特許及び文献は、その全てが本願明細書に引用されるものとする。
【０１８９】
実施例１
抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体
【０１９０】
材料及び方法
抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体を同定するためのライブラリーソーティング及びスクリーニング
ヒトＩＬ−１７Ａ（R&D Systems、cat# 317-IL-050/CF）及びＩＬ−１７Ｆ（R&D Systems、cat# 317-IL-050/CF）は、ライブラリーソーティングのための抗原として用いられた。従来の選別のために、ファージライブラリーは、ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆの何れかに対して４回ソーティングされた。他の選別のために、ファージライブラリーは、別の回でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対して交換可能にソーティングされた。Ｎｕｎｃ  ９６  ｗｅｌｌ  Ｍａｘｉｓｏｒｐイミュノプレートは、４℃、オーバーナイトで標的抗原（１０μｇ／ｍｌ）でコーとされ、室温で、１時間、ファージブロッキングバッファーＰＢＳＴ（リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）及び１％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び０．０５％（ｖ／ｖ）ｔｗｅｅｎ−２０）でブロッキングされた。抗体ファージライブラリーＶＨ（Lee et al., J. Immunol. Meth. 284:119-132, 2004参照）及びＶＨ／ＶＬ（Liang et al., JMB. 366: 815-829, 2007参照）は、別々に抗原プレートに添加され、室温、オーバーナイトでインキューベートされた。翌日、抗原でコートされたプレートは、ＰＢＴ（０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０−ＰＢＳ）で１０回洗浄され、結合したファージは３０分間５０ｍＭＨＣｌ及び５００ｍＭ  ＮａＣｌで溶出され、同量の１ＭＴｒｉｓ塩基（ｐＨ７．５）で中和された。回収されたファージは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＸＬ−１  Ｂｌｕｅ細胞において増幅された。後の選別において、抗原でコートされたプレートと抗体ファージのインキュベーションを２−３時間に減少し、プレート洗浄の厳密性を段階的に増加した。
【０１９１】
４回のパニングの後、有意な濃縮が観察された。９６のクローンは、ヒトＩＬ−１７  Ａ及びＩＬ−１７  Ｆに特異的に結合したかどうかを決定するために、それぞれＶＨ及びＶＨ／ＶＬライブラリーソーティングから選別された。これらのクローンの可変領域は、固有の配列クローンを同定するためにＰＣＲで配列決定された。
【０１９２】
ファージ抗体の親和性は、スポット競合ＥＬＩＳＡを用いてランク付けされた。ファージ抗体ＩＣ５０値はさらに、競合的ファージ−結合ＥＬＩＳＡを用いて決定された。最も高いＩＣ５０を有するヒトＩＬ−１７  Ａ及びＩＬ−１７  Ｆの両方と結合する固有のファージ抗体は、選択され、インビトロでの細胞アッセイの評価のために完全長ＩｇＧに再フォーマットされた。
【０１９３】
重要なクローンは、それぞれＬＰＧ３及びＬＰＧ４ベクターにそれぞれのクローンのＶＬ及びＶＨ領域をクローニングすることによってＩｇＧに再フォーマットされて、哺乳動物ＣＨＯ細胞において一過性に発現させ、プロテインＡカラムで精製した。
【０１９４】
交差反応性抗体のＩＣ５０／９０の決定
ヒト新生児包皮繊維芽細胞（Invitrogen）は、第一日目に２ｘ１０４細胞／１５０μｌ培地／ウェルで、９６ウェルプレートに接種された。培地は、二日目にサイトカイン／抗体を含む培地（１５０μｌ）で置き換えられた。組換えヒトＩＬ−１７Ａは、５ｎｇ／ｍｌで用いられた。組換えヒトＩＬ−１７Ｆは、５０ｎｇ／ｍｌで用いられた。組換えヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆヘテロダイマーは、社内で精製され、２５ｎｇ／ｍｌで用いられた。上清は２４時間後に採取され、Ｇ−ＣＳＦ誘導を測定するためにＧ−ＣＳＦ  ＥＬＩＳＡが行われた。データは、同じソフトウェアを用いて算出されるＰＲＩＳＭ及びＩＣ５０／９０値でプロットされた。
【０１９５】
ＶＨライブラリーに由来するクローンの親和性改善のためのライブラリー構築
全てのＣＤＲ−Ｌ３位置の終止コドン（ＴＡＡ）を含み、Ｍ１３バクテリオファージの表面上に一価性のＦａｂを提示するファージミドｐＷ０７０３（ファージミドｐＶ０３５０−２ｂに由来する（Lee et al., J. Mol. Biol 340, 1073-1093 (2004)）は、親和性成熟のためのＶＨライブラリーから重要なクローンの重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を移植させるためのライブラリーテンプレートとしての役割を果たす。ハードソフトランダム化ストラテジー及びソフトランダム化ストラテジーの両方が、親和性成熟のために用いられた。ハードランダム化のために、３つの軽鎖ＣＤＲの選択位置を伴う軽鎖ライブラリーが、天然ヒト抗体を模倣するために設計されたアミノ酸を用いてランダム化され、設計されたＤＮＡ縮重はLee et al.（J. Mol. Biol 340, 1073-1093 (2004)）に記載される。ソフト・ランダム化のために、ＣＤＲ−Ｌ３の位置９１−９４及び９６、ＣＤＲ−Ｈ１の位置２８−３１及び３４−３５、ＣＤＲ−Ｈ２の位置５０、５２及び５３−５８、ＣＤＲ−Ｈ３の位置９５−９９及び１００Ａの残基が標的とされ；及びＣＤＲループの２つの異なる組合せであるＬ３／Ｈ１／Ｈ２及びＬ３／Ｈ３は、ランダム化のために選択された。選択された位置でおよそ５０％の突然変異率を導入するソフトランダム化コンディションを成し遂げるために、突然変異誘発性のＤＮＡは野生型ヌクレオチドを支持する塩基の７０−１０−１０−１０混合物で合成された（Gallop et al., Journal of Medicinal Chemistry 37:1233-1251 (1994)）。
【０１９６】
親和性改善を作り出すためのファージソーティングストラテジー
親和性改善選別のために、ファージライブラリーは１回目にプレートソーティングを受け、４又は５回の溶液ソーティングが続いた。ライブラリーは、個々にヒトＩＬ−１７  Ａ及びＩＬ−１７  Ｆそれぞれに対してソートされた。１回目のプレートソーティングのために、ライブラリーは１％ＢＳＡ及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０中で約３Ｏ．Ｄ．／ｍｌを入力されたファージと共に標的コートプレート（ＮＵＮＣ  Ｍａｘｉｓｏｒｐプレート）に対して室温で２時間ソートされた。１回目のプレートソーティングの後、選別の厳密性を増加させるために溶液ソーティングが行われた。溶液ソーティングのために、１回目のプレートソーティングから増殖させた１Ｏ．Ｄ．／ｍｌファージは、１００ｎＭビオチン化標的タンパク質と共に室温で、３０分間の１％  Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（Pierce Biotechnology）及び０．０５％  Ｔｗｅｅｎ２０を含む１００μｌバッファにおいてインキューベートされた（濃度は、親のクローンファージＩＣ５０値に基づく）。混合物はさらに１％  Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋで１０倍希釈され、１００μｌ／ウェルはビオチン化標的がファージと結合するように、穏やかな振盪で室温で１５分間、ニュートラアビジンでコートされたウェル（５μｇ／ｍｌ）に適用された。ウェルは、ＰＢＳ−０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で１０回洗浄された。バックグラウンド結合を決定するために、ビオチン化されていない標的を有するファージを含むコントロールウェルは、ニュートラアビジンでコートされたプレート上で捕捉された。結合したファージは、２０分間０．１ＮＨＣｌで溶出され、１ＭＴｒｉｓｐＨ１１の１／１０量で中和され、滴定され、次回のために増殖された。次に、さらに選別厳密性を増加させて５回の溶液ソーティングが実行された。１回目は室温で１０ｎＭから１ｎＭにビオチン化標的タンパク質濃度を減少させることによるオン−レート（ｏｎ−ｒａｔｅ）選別であり、２回目は室温でより弱い結合物を競合するために過剰量の非ビオチン化標的タンパク質（１００倍以上）を添加することによるオフ−レート（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）選別である。同様に、ファージ入力は、より低いバックグラウンドファージ結合に減少した（０．１ー０．５  Ｏ．Ｄ／ｍｌ）。
【０１９７】
ハイスループット親和性スクリーニングＥＬＩＳＡ（シングルスポット競合）
コロニーは、５又は６回目のスクリーニングから選択された。コロニーは、９６ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ）において、５０μｇ／ｍｌカルベニシリン及び１Ｅ１０／ｍｌＫＯ７を含む２ＹＴ培地の１５０μｌ／ウェルで、３７℃、オーバーナイトで増殖させた。同じプレートから、ＸＬ−１感染親ファージのコロニーがコントロールとして選択された。９６ウェルＮｕｎｃ  Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートは、４℃で２時間又は室温でオーバーナイトで、１００μｌ／ウェルのヒトＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆで別々にＰＢＳ中でコートされた。プレートは、６５μｌの１％ＢＳＡで３０分間、さらに４０μｌの１％Ｔｗｅｅｎ２０で３０分間ブロッキングされた。
【０１９８】
ファージ上清は、１００μｌ総容積の１０ｎＭ標的タンパク質の存在下又は非存在下においてＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫測定法）バッファー（０．５％ＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）で１：１０に希釈され、室温で少なくとも１時間、Ｆプレート（ＮＵＮＣ）においてインキュベートされた。標的タンパク質を含む、又は含まない７５μｌの混合物は、標的タンパク質でコートされたプレートに並んで移し替えられた。プレートは、標的タンパク質でコートされたプレートが結合していないファージを捕捉できるように、１５分間穏やかに振盪された。プレートは、ＰＢＳ−０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で少なくとも５回洗浄された。結合は、ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）がコンジュゲートされた抗Ｍ１３抗体をＥＬＩＳＡバッファーに添加する（１：５０００）ことによって定量化され、３０分間室温でインキューベートされた。プレートは、ＰＢＳ−０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で少なくとも５回洗浄された。次に、１００μｌ／ウェルの比率が１：１である３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）ペルオキシダーゼ基質及びペルオキシダーゼ溶液Ｂ（Ｈ２Ｏ２）（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ−Ｐｅｒｒｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Gaithersburg, MD））がウェルに添加され、室温で５分間インキューベートされた。反応は、それぞれのウェルに１００μｌの１Ｍリン酸（Ｈ３ＰＯ４）を添加することによって止められ、室温で５分間インキューベートを可能とした。それぞれのウェルの黄色のＯＤ（光学濃度）は、４５０ｎｍでの標準ＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて決定された。光学密度減少（％）は、以下の方程式によって算出された。
ＯＤ４５０ｎｍ減少（％）＝［（競合物を伴うウェルのＯＤ４５０ｎｍ）／（競合物を伴わないウェルのＯＤ４５０ｎｍ）］×１００
【０１９９】
親のファージ（１００％）のウェルのＯＤ４５０ｎｍ減少（％）と比較して、ヒト及びマウスの両方の標的に対して５０％未満のＯＤ４５０ｎｍ減少（％）を有するクローンは、配列分析のために選択された。特有のクローンは、親のクローンとの比較によりヒトＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対する結合親和性（ファージＩＣ５０）を決定するためのファージ調製のために選択された。それから、最も親和性が改良されたクローンは、抗体産生及び更なるＢＩＡｃｏｒｅ結合動力学解析及び他のインビトロ又はインビボアッセイのために、ヒトＩｇＧ１に再フォーマットされた。
【０２００】
抗ＩＬ−１７  Ａ／Ｆ抗体の特性評価（Ｂｉａｃｏｒｅ）
抗ＩＬ−１７  Ａ／Ｆ  ＩｇＧの結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−３０００計測器を用いてＳｕｒｆａｃｅ  Ｐｌａｓｍｏｎ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＳＲＰ）によって測定された。抗ＩＬ−１７  Ａ／ＦヒトＩｇＧは、約２００反応単位を達成するために、ＣＭ５バイオセンサーチップ上にコートされたマウス抗ヒトＦｃ抗体（GE Healthcare、cat# BR-1008-39）により捕捉された。キネティクス測定のために、ヒトＩＬ−１７Ａ（R&D Systems、cat# 317-IL-050/CF）、ＩＬ−１７Ｆ（R&D、cat# 1335-IL-025/CF）、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ（GNE）、アカゲザルＩＬ−１７Ｆ（GNE）、ＣｙｎｏＩＬ−１７Ａ（ＰＵＲ１７２００）の二倍階段希釈物（０．９８ｎＭから１２５ｎＭ）は、ＰＢＴバッファー（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）と共に、２５℃、３０ｌ／分の流速で注射された。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）は、単純１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡｃｏｒｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．２）を用いて算出された。平衡解離定数（ＫＤ）は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎ比として算出された。
【０２０１】
結果
上記したように、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ１７−Ｆは、Ｔｈ１７  Ｔ細胞サブセットにより分泌される主要な炎症誘発性サイトカインである。それらは、身体のほとんどすべての細胞型を標的とし、組織炎症及び組織障害を誘導する。本実施例に記載されている研究の目的は、高い活性及び異種間反応性を有する、ＩＬ−１７Ａ及びＦをブロックすることができる交差反応性抗体を作り出すことであった。
【０２０２】
交差反応性抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆクローンの軽鎖可変領域配列は、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列を含め、図５Ａ（配列番号：５−１４）に示される。交差反応性抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆクローンの重鎖可変領域配列は、図５Ｂ（配列番号：５１−６０）に示される。同定された交差反応性クローンの中で、ＹＷ２４１．４７、ＹＷ２７８．１５及びＹＷ２７９．１は、モノダイマー及びヘテロダイマー両方の形態で、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方に特に強い結合を示した。交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５及び２７９．１が、ＩＬ−１７Ａ及びＦに対してほとんど等しいブロッキングを示すことは、注目すべきである。これらのうちで、交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５は、親和性成熟のために選択された。
【０２０３】
ＹＷ２７８．１５及びＹＷ２７９．１の親和性成熟変異体を含む更なる交差反応性抗１７Ａ／Ｆ抗体の軽鎖可変領域配列は、図５Ｃ（配列番号：６３−６８）に示される。
【０２０４】
ＹＷ２７８．１５及びＹＷ２７９．１の親和性成熟変異体を含む更なる交差反応性抗Ａ／Ｆ抗体の重鎖可変領域配列は、図５Ｄ（配列番号：６９−７４）に示される。
【０２０５】
図６は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５（配列番号：９）及びその親和性成熟変異体ＹＷ２７８．１５．１８（配列番号：１５）、ＹＷ２７８．１５．２（配列番号：１６）及びＹＷ２７８．１５．３（配列番号：１７）の軽鎖配列のアラインメントを示す。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列が囲まれている。
【０２０６】
図７は、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５（配列番号：９２）及びその親和性成熟変異体ＹＷ２７８．１５．１８（配列番号：９３）、ＹＷ２７８．１５．２（配列番号：９４）、２７８．１５．２．Ｄ５４Ｅ（配列番号：９５）、ＹＷ２７８．１５．３（配列番号：９２）、ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ（配列番号：１８）及びＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓ（配列番号：１９）の重鎖配列のアラインメントを示す。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列が囲まれている。ＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ａ及びＹＷ２７８．１５．１８Ｃ５５Ｓは、ＹＷ２７８．１５．１８と同じ軽鎖を有し、抗体重鎖におけるＣ５５Ａ及びＣ５５Ｓ変異は製造を容易にするために導入された。
【０２０７】
図８Ａは、３つの親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５．２、ＹＷ２７８．１５．１８及びＹＷ２７８．１５．３について行われたＢＩＡｃｏｒｅＴＭイムノアッセイの結果を示す。溶液中での組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７ＦヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。
【０２０８】
図８Ｂは、親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５．２．Ｄ５４Ｅ；ＹＷ２７８．１５．３；ＹＷ２７８．１５．９；ＹＷ２７９．１．２０；ＹＷ２７９．１．２１；ＹＷ２７９．１．２２について行われたＢＩＡｃｏｒｅＴＭイムノアッセイの結果を示す。溶液中での組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７Ａ、ｃｙｎｏ  ＩＬ−１７Ｆ、ヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。
【０２０９】
図９は、２つの更なる親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体ＹＷ２７８．１５．１８．Ｃ５５Ａ及びＹＷ２７８．１５．１８．Ｃ５５Ｓについて行われたＢＩＡｃｏｒｅＴＭイムノアッセイのＹＷ２７８．１５．１８と比較した結果を示す。溶液中での組換えヒトＩＬ−１７Ａ（ｒｈＩＬ−１７Ａ）、組換えヒトＩＬ−１７Ｆ（ｒｈＩＬ−１７Ｆ）、ｃｙｎｏＩＬ−１７ＦヒトＩＬ−１７Ａ／Ｆの結合親和性（Ｋｄ（Ｍ））は、最後の列に示される。
【０２１０】
図１０は、３つの親和性成熟ＩＬ−１７Ａ／Ｆ交差反応性抗体について、標的としてアカゲザルＩＬ−１７Ａを用いて行われたＢＩＡｃｏｒｅＴＭイムノアッセイの結果を示す。アカゲザルＩＬ−１７Ａへの結合親和性は、最後の列に示される。
【０２１１】
図１３Ａ及び１３Ｂは、反復アッセイにおいて決定されるように、一組の交差反応性抗体についてのＩＣ５０及びＩＣ９０データを示す。抗体と標的サイトカインとのモル比もまた示される。
【０２１２】
結果は、ＹＷ２７８．１５及び２７９．１の親和性がＣＤＲランダム化を通してＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆの両方に対して改良されたことを示す。試験された交差反応性抗体の中で、ＹＷ２７８．１５．２及びＹＷ２７８．１５．１８は、親和性及び細胞ブロッキング活性において最高の改善を示した。ＹＷ２７８．１５．２及びＹＷ２７８．１５．１８の両方は、ＩＬ１７−Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対して類似した活性を有する。
【０２１３】
実施例２
抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ二重特異性抗体
【０２１４】
材料及び方法
抗ＩＬ−１７Ａ／Ｆ抗体を同定するためのライブラリーソーティング及びスクリーニング
ヒトＩＬ−１７Ａ（R&D Systems、cat# 317-IL-050/CF）及びＩＬ−１７Ｆ（R&D Systems、cat# 1335-IL-025/CF）は、ライブラリーソーティングのために抗原として用いられた。従来の選別のために、ファージライブラリーは、ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆの何れかに対して４回ソーティングされた。
【０２１５】
他の選別のために、ファージライブラリーは、別の回でＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対して交換可能にソーティングされた。Ｎｕｎｃ  ９６  ｗｅｌｌ  Ｍａｘｉｓｏｒｐイミュノプレートは、４℃、オーバーナイトで標的抗原（１０μｇ／ｍｌ）でコートされ、室温で、１時間、ファージブロッキングバッファーＰＢＳＴ（リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）及び１％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び０．０５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ−２０）でブロッキングされた。抗体ファージライブラリーＶＨ（Lee et al., J. Immunol. Meth. 284:119-132, 2004参照）及びＶＨ／ＶＬ（Liang et al., JMB. 366: 815-829, 2007参照）は、別々に抗原プレートに添加され、室温、オーバーナイトでインキューベートされた。翌日、抗原でコートされたプレートは、ＰＢＴ（０．０５％Ｔｅｗｗｎ−２０−ＰＢＳ）で１０回洗浄され、結合したファージは３０分間５０ｍＭＨＣｌ及び５００ｍＭ  ＮａＣｌで溶出され、同量の１ＭＴｒｉｓ塩基（ｐＨ７．５）で中和された。回収されたファージは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＸＬ−１  Ｂｌｕｅ細胞において増幅された。後の選別において、抗原でコートされたプレートと抗体ファージのインキュベーションを２−３時間に減少し、プレート洗浄の厳密性を段階的に増加した。
【０２１６】
４回のパニングの後、有意な濃縮が観察された。９６のクローンは、ヒトＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに特異的に結合したかどうかを決定するために、それぞれＶＨ及びＶＨ／ＶＬライブラリーソーティングから選別された。これらのクローンの可変領域は、固有の配列クローンを同定するためにＰＣＲで配列決定された。
【０２１７】
ファージ抗体の親和性は、スポット競合ＥＬＩＳＡを用いてランク付けされた。ファージ上清は、１００μｌ総容積の５０ｎＭ標的タンパク質の存在下又は非存在下においてＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫測定法）バッファー（０．５％ＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）で１：５に希釈され、室温で少なくとも１時間、Ｆプレート（ＮＵＮＣ）においてインキュベートされた。標的タンパク質を含む、又は含まない７５μｌの混合物は、標的タンパク質でコートされたプレートに並んで移し替えられた（１ｕｇ／ｍｌのＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆでオーバーナイトでコートされた）。プレートは、標的タンパク質でコートされたプレートが結合していないファージを捕捉できるように、１５分間穏やかに振盪された。プレートは、ＰＢＳ−０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で少なくとも１０回洗浄された。結合は、ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）がコンジュゲートされた抗Ｍ１３抗体をＥＬＩＳＡバッファーに添加する（１：５０００）ことによって定量化され、３０分間室温でインキューベートされた。プレートは、ＰＢＳ−０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で少なくとも１０回洗浄された。次に、１００μｌ／ウェルの比率が１：１である３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）ペルオキシダーゼ基質及びペルオキシダーゼ溶液Ｂ（Ｈ２Ｏ２）（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ−Ｐｅｒｒｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  （Gaithersburg, MD））がウェルに添加され、室温で５分間インキューベートされた。反応は、それぞれのウェルに１００μｌの０．１Ｍリン酸（Ｈ３ＰＯ４）を添加することによって止められ、室温で５分間インキューベートを可能とした。それぞれのウェルの黄色のＯＤ（光学濃度）は、４５０ｎｍでの標準ＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて決定された。光学密度減少（％）は、以下の方程式によって算出された。
ＯＤ４５０ｎｍ減少（％）＝［（競合物を伴うウェルのＯＤ４５０ｎｍ）／（競合物を伴わないウェルのＯＤ４５０ｎｍ）］×１００
【０２１８】
親のファージ（１００％）のウェルのＯＤ４５０ｎｍ減少（％）と比較して、ＩＬ−１７Ａ又はＩＬ−１７Ｆの何れかの標的に対して６０％未満のＯＤ４５０ｎｍ減少（％）を有するクローンは、個々のクローンのＶＬ及びＶＨ領域をＬＰＧ３及びＬＰＧ４ベクターにそれぞれクローニングされ、哺乳動物ＣＨＯ細胞で一過性で発現させ、プロテインＡカラムで精製することにより、完全長ヒトＩｇＧ１に再フォーマットされた。二重特異性抗体（抗体の一つのアームはＩＬ−１７Ａに特異的で、その他はＩＬ−１７Ｆに特異的である）ｋｎｏｂ−ａｎｄ−ｈｏｌｅ技術を用いて構築された（Merchant et al., Nature Biotechnology, 16:677-681, 1998及びAtwell S. et al., J Mol Biol 270(1): 2635 (1997)参照）。これらの単一特異性及び二重特異性抗体は、インビトロでの細胞アッセイ及びＢＩＡｃｏｒｅ結合動力学解析の評価のために用いられた。    
【０２１９】
抗ＩＬ−１７  Ａ／Ｆ抗体（Ｂｉａｃｏｒｅ）の特性評価
抗ＩＬ−１７  Ａ／Ｆ  ＩｇＧの結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅＴＭ−３０００計測器を用いて、Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｐｌａｓｍｏｎ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＳＲＰ）によって測定された。抗ＩＬ−１７Ａ／ＦヒトＩｇＧは、２００反応単位（ＲＵ）を達成するために、ＣＭ５バイオセンサーチップ上にコートされたマウス抗ヒトＦｃ抗体（GE Healthcare、cat# BR-1008-39）により捕捉された。キネティクス測定値のために、ヒトＩＬ−１７Ａ（R&D Systems, cat# 317-IL-050/CF）又はＩＬ−１７Ｆ（R&D, cat# 1335-IL-025/CF）の二倍階段希釈物（５００ｎＭから０．２４５ｎＭ）は、２５℃、３０ｌ／分の流速で、ＰＢＴバッファ（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）と共に注射された。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）は、単純１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡｃｏｒｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．２）を用いて算出された。平衡解離定数（ＫＤ）は、ｋｏｆｆ／ｋｏｎ比として算出された。
【０２２０】
結果
図１１は、ＩＬ−１７Ａ特異的抗体ＹＷ２６４．２１（配列番号：２０）及びＩＬ−１７Ｆ特異抗体ＹＷ２６５．０１（配列番号：２１）の軽鎖可変領域配列のアラインメントを示す。
【０２２１】
図１２は、ＩＬ−１７Ａ特異抗体ＹＷ２６４．２１（配列番号：２２）及びＩＬ−１７Ｆ特異抗体ＹＷ２６５．０１（配列番号：２３）の重鎖可変領域配列のアラインメントを示す。
【０２２２】
図１４は、抗ＩＬ−１７Ａ抗体ＹＷ２６４．２１及び抗ＩＬ−１７Ｆ抗体ＹＷ２６５．０１と比較したＩＬ−１７Ａ／Ｆ二重特異性抗体のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆに対する結合親和性のデータを示す。
【０２２３】
図１５は、ＩＬ−１７Ａ特異的抗体ＹＷ２６４．２１（配列番号：２０）及びＹＷ２６４．０３（配列番号：６１）及びＩＬ−１７Ｆ特異的抗体ＹＷ２６５．０１（配列番号：２１）の軽鎖可変領域配列のアラインメントを示す。
【０２２４】
図１６は、ＩＬ−１７Ａ特異抗体ＹＷ２６４．２１（配列番号：２２）及びＹＷ２６４．０３（配列番号：６２）及びＩＬ−１７Ｆ特異抗体ＹＷ２６５．０１（配列番号：２３）の重鎖可変領域配列のアラインメントを示す。
【０２２５】
実施例３
ＩＬ−１７Ｆ−Ｆａｂ複合体の結晶構造
【０２２６】
材料及び方法
タンパク質発現：
ＩＬ−１７Ｆは、Hymowitz SG, et al., EMBO J., 2001, 20:5332-5341に記載されるように、発現及び精製された。簡潔に、ＩＬ−１７Ｆコード化ＤＮＡは、Ｎ末端Ｈｉｓ−タグ及びトロンビン切断部位を導入するためにｐＥＴ１５ｂ（Novagen）部位にサブクローニングされた。他のＰＣＲステップの後、コード化領域は、バキュロウイルス導入ベクターｐＡｃＧＰ６７Ｂ（PharMingen）にサブクローニングされ、ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄ  ＤＮＡ（PharMingen）と共にＳｆ９細胞に共同トランスフェクションされ、組換えウイルスは単離され、Ｓｆ９細胞において増殖された。タンパク質産生のために、Ｈｉ５細胞を増殖されたバキュロウイルスで感染させた。培地は遠心によって採取され、ｐＨは７．０に調整された。培地は、ろ過され、Ｎｉ−ＮＴＡカラムにロードされた。ＩＬ−１７Ｆを含む画分は、イミダゾールで溶出され、プールされ、４℃、オーバーナイトでトロンビンと共にＰＢＳ（ｐＨ  ６．５）に透析された。タンパク質試料は濃縮され、トロンビン及びＨｉｓ−タグはサイズ排除カラムでの精製によって取り除かれた。
【０２２７】
ＹＷ２７８．１５．１８．Ｃ５５ＳのＦａｂフラグメント（今後「ｆａｂ」と称する）は、大腸菌において発現され、プロテインＧ−セファロースを用いて精製され、０．５８％酢酸で溶出された。Ｆａｂを含む画分は、２０ｍＭ  ＭＥＳ  ｐＨ  ５．５及びＮａＣｌ勾配でＳＰ  ＨｉＴｒａｐカラム（GE Healthcare）を用いて精製された。最終的なバッファーは、２５ｍＭトリス、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．５であった。
【０２２８】
複合体の精製：  
精製されたｆａｂは、過剰な精製組換えＩＬ１７Ｆと混合された。複合体は、サイズ排除カラムの通過によって精製された。複合体を含む画分は、プールされ、２５ｍｇ／ｍＬまで濃縮された。
【０２２９】
結晶化：
ＩＬ−１７Ｆ−ｆａｂ複合体は、ハンギングドロップを用いた蒸気拡散法を用いて結晶化された。ハンギングドロップは、１９℃で２ｕｌのタンパク質及び２ｕｌのウェル溶液（４０％ＭＰＤ、５％ＰＥＧ８０００及び０．１ＭＮａカコジル酸  ｐＨ６．５）を混合することによって準備された。結晶は、５日間のインキュベーション後に成長し、洗浄され、液体窒素の母液で直接凍結された。  
【０２３０】
結晶学的データ及び精密化：
結晶学的データは、Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｓｙｎｃｈｔｒｏｎ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙで収集されたビームライン１１−１であった。データセットはＨＫＬパッケージのプログラムを用いて処理された（ＨＫＬ、Charlottesville, VA）。ＲＥＦＭＡＣ５（ＣＣＰ４）での精密化に続くサーチモデルように、構造はヒト化４Ｄ５Ｆａｂの変異体（ＰＤＢコード１ＦＶＥ）を用いたプログラムＰＨＡＳＥＲ（ＣＣＰ４）を用いた分子置換によって解き明かされた。最終的なモデルは、ラマチャンドランプロットで最恵の又は許可された領域の全ての残基の９９．６％、及び十分に許可されたか承認されなかった何れかの領域の０．６％（６つの残基）のみを伴う優れた幾何学を有する。
【０２３１】
表１  Ｘ−線データ収集及び精密化統計値
【表１】
2012501186.tif 000003
【０２３２】
図１７はＩＬ−１７Ｆダイマーに結合するＦａｂを示し、図１８はＦａｂに対するＩＬ−１７Ｆダイマーのエピトープを示す。エピトープは、システインノットに集中しており、大部分はＩＬ１７Ａ及びＩＬ１７Ｆの間で保存される（括弧の残基は、Ｆ及びＡの配列の相違点である）。
【０２３３】
前述の明細書は、当業者が発明を実施するのに十分であると考慮される。記載された実施態様は特定の本発明の態様の一つの具体例として意図されたものであり、機能的に均等なあらゆる構成が本発明の範囲内であることから、本発明は記載された構成によってその範囲が限定されるものではない。実際、ここに示され、記載されるものに加えて発明の様々な変更は、前述の記載から当業者には明白であり、添付の特許請求の範囲の範囲内にある。
【図１】
2012501186.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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