(57)【要約】  本発明は、自己免疫疾患、炎症性疾患、マスト細胞媒介性疾患および移植片拒絶反応の予防および治療に有用な新規プリノンおよびプリンを提供する。該化合物は、一般式ＩおよびＩＩ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ９、Ｑ、Ａおよびｙは、本明細書において定義されている通りである］のものである。    【化１】2012500805.tif 000136
2012500805.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩまたはＩＩの化合物
【化１】
2012500805.tif 000129
［式中、
Ｑは、ＣＸおよび窒素からなる群から選択され、
Ｘは、水素、ハロゲンおよび電子求引基からなる群から選択され、
Ａは、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロアリールおよびアリールからなる群から選定され、
Ｒ１は、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、置換アリール、置換ヘテロシクリル、および−Ｖ−Ｒ７からなる群から選択され、ここで、前記置換アルキル、前記置換アリールまたは前記置換ヘテロシクリルは、各残基中最大３個のＨ原子が、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ハロアルコキシ、アルコキシカルボニルアミノ、アセトキシ、スルホニルアミノ、ヘテロシクリル、アルキルヘテロシクリル、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニルおよびトリチルで置き換えられている、アルキル、アリールまたはヘテロシクリルであり、
Ｒ２およびＲ３は、水素および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から、（ＣＲ２Ｒ３）の各出現について独立に選択され、
Ｒ４は、アルキル、ＯＨ、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリール、置換アルキル、置換ヘテロシクリルおよび置換アリールからなる群から選択され、ここで、前記置換アルキル、前記置換アリールまたは前記置換ヘテロシクリルは、各残基中最大３個のＨ原子が、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ハロアルコキシ、アルコキシカルボニルアミノ、アセトキシ、スルホニルアミノ、ヘテロシクリル、アルキルヘテロシクリル、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニルおよびトリチルで置き換えられている、アルキル、アリールまたはヘテロシクリルであり、
Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクリルおよび置換ヘテロシクリルから選定され、
Ｖは、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８−、−Ｏ−および−ＮＲ８−から選定され、
Ｒ８は、Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから選定されるか、または、それらが結合した窒素と一緒になった場合に、Ｒ７およびＲ８は４〜７員の窒素複素環を形成し、
Ｒ９は、水素、アルキルおよび置換アルキルから選定され、
ｙは、ゼロ、または１、２、３および４から選択される整数である］。
【請求項２】
Ｒ９が水素であり、Ｒ１が、アリール、置換アリール、ヘテロシクリルおよび置換ヘテロシクリルから選定される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、アルキル、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい、ピリジニル、ピラゾリル、ピリミジニル、イソキノリニル、アゼチジニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニルおよびフェニルから選定される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、アリール、置換アリール、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキルおよび置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから選定される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が−Ｖ−Ｒ７である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｖが−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８−であり、
Ｒ７が、−ＣＨ２ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよびＨから選定されるか、または、ＶＲ７が
【化２】
2012500805.tif 000130
である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｖが−Ｏ−および−ＮＲ８−から選定され、Ｒ７が（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、Ｒ８がＨである、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ９が水素であり、ｙがゼロであり、Ｒ４が、単環、二環、置換単環および置換二環から選択される残基であり、前記残基は少なくとも１個の酸素原子を含有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ４が、酸素複素環、ヒドロキシル置換シクロアルキル、アルコキシ置換アリール、およびヒドロキシル置換アリールから選定される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４が、
【化３】
2012500805.tif 000131
［式中、Ｒ６は水素またはフッ素であり、アスタリスクが付いている炭素はＲ絶対配置のものである］
から選定される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ９が水素であり、ｙが１〜４であり、Ｒ２およびＲ３がすべての出現において水素であり、Ｒ４がアルコキシまたはＯＨである、式ＩｂまたはＩＩｂ：
【化４】
2012500805.tif 000132
［式中、Ｒ５は水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである］
の、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ９が水素であり、ＱがＣＸであり、ｙがゼロである、式ＩｃまたはＩＩｃ：
【化５】
2012500805.tif 000133
の、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１が、ハロゲン、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アリール、置換アリールおよび−Ｖ−Ｒ７から選定される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｖが、−ＮＲ８−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８またはＯであり、
Ｒ７が、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルまたはアリールであり、
Ｒ８が水素もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであるか、または、それらが結合した窒素と一緒になった場合に、Ｒ７およびＲ８が４〜７員の窒素複素環を形成する、
請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ４が、テトラヒドロフラニル、ピラニル、ベンゾピラニル、ヒドロキシテトラリニル、オキセパニル、ヒドロキシシクロヘキシルおよびそれらのハロゲン化体から選定され、
Ｒ１が、ハロゲン、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ならびに、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、アルキル、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい、アゼチジニル、フェニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、ピリジニル、ピリミジニルおよびピラゾリルから選定され、
Ｘが、ハロゲン、シアノ、置換アルコキシおよび水素から選定される、
請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ９が水素であり、ＱがＣＸであり、ｙがゼロであり、Ｒ４がヒドロキシテトラリニルおよびヒドロキシシクロヘキシルである、式ＩｄまたはＩＩｄ：
【化６】
2012500805.tif 000134
［式中、Ｒ６はＨまたはハロゲンであり、Ｒ１は、ハロゲン、ならびに、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、アルキル、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい、アゼチジニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、フェニル、モルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、ピリジニル、ピリミジニルおよびピラゾリルから選定され、Ｘは、ハロゲン、シアノ、置換アルコキシおよび水素である］
の、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
ＱがＣＸであり、ｙがゼロであり、Ｒ９がアルキルまたは置換アルキルである式Ｉｅ：
【化７】
2012500805.tif 000135
の、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ４が、テトラヒドロフラン、ベンゾピラン、ヒドロキシテトラリン、オキセパン、ヒドロキシシクロヘキサンおよびそれらのハロゲン化体から選定される、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１が、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アリール、置換アリール、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキサミドおよびアミジノから選定され、Ｘが、ハロゲン、シアノ、水素またはアルコキシから選定される、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
薬学的に許容できる担体と、治療有効量の請求項１に記載の化合物とを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００８年８月２２日に出願された米国出願第１２／１９６，５１６号に関連し、該出願からの優先権を主張する。本出願は、２００６年１０月４日に出願された米国仮出願第６０／８２８，１６５号、２００６年１０月４日に出願された米国仮出願第６０／８２８，１６９号、２００７年１０月４日に出願された米国出願第１１／８６７，５６２号、および２００７年１０月４日に出願された米国出願第１１／８６７，３９７号に関連するが、該出願からの優先権を主張しない。
【０００２】
本発明は、免疫抑制剤として有用な、６−置換２−（ベンズイミダゾリル）プリンまたはプリノン誘導体および６−置換２−（イミダゾロ［４，５−ｃ］ピリジニル）プリンまたはプリノン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００３】
免疫抑制は、自己免疫疾患を治療する上で、また、臓器および組織の拒絶反応を予防する上で、重要な臨床的アプローチである。アザチオプリン、シクロスポリンおよびタクロリムスを包含する臨床的に利用可能な免疫抑制剤は、有効であるが、腎臓毒性、高血圧症、胃腸障害および歯肉炎を包含する望ましくない副作用を引き起こすことが多い。チロシンキナーゼＪａｋ３の阻害剤は、免疫抑制剤として有用であることが既知である（米国特許第６，３１３，１２９号を参照）。
【０００４】
非受容体細胞内チロシンキナーゼのヤヌスキナーゼ（Ｊａｋ）ファミリーのメンバーは、サイトカインシグナル伝達の成分である。これまでに、４つのファミリーメンバー：Ｊａｋ１、Ｊａｋ２、Ｊａｋ３およびＴｙｋ２が同定されている。Ｊａｋは、サイトカイン受容体によって媒介される細胞内シグナリングにおいて主要な役割を果たす。サイトカインとそれらの受容体との結合時に、Ｊａｋが活性化され、受容体をリン酸化して、他のシグナリング分子、特にシグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）ファミリーのメンバーのためのドッキング部位を作製する。Ｊａｋ１、Ｊａｋ２およびＴｙｋ２の発現は比較的偏在的であるのに対し、Ｊａｋ３の発現は時間的および空間的に制御されている。Ｊａｋ３は、造血系の細胞において主に発現され、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞および胸腺細胞において構成的に発現され、Ｔ細胞、Ｂ細胞および骨髄性細胞において誘導可能である（Ｏｒｔｍａｎｎら、１９９９およびＹａｍａｏｋａら、２００４において総説されている）。Ｊａｋ３はマスト細胞においても発現され、その酵素活性は、ＩｇＥ受容体／Ｆｃ．イプシロン．ＲＩ架橋結合によって増強される（ＭａｌａｖｉｙａおよびＵｃｋｕｎ、１９９９）。
【０００５】
経口で活性な特異的Ｊａｋ３阻害剤であるＣＰ−６９０，５５０は、有効な免疫抑制剤として作用し、心臓移植術のマウスモデルおよび腎臓移植術の霊長類モデルにおいて動物の生存を延長することが示されている（Ｃｈａｎｇｅｌｉａｎら、２００３）。さらに、異常なＪａｋ３活性は、小児がんの最も一般的な形態である皮膚Ｔ細胞性リンパ腫（セザリー症候群）および急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の白血病型に関係している。Ｊａｋ３阻害剤の同定は、白血病およびリンパ腫を治療する上での新たな臨床的アプローチの基礎を提供した（Ｕｃｋｕｎら、２００５において総説されている）。２つのジメトキシキナゾリン誘導体、ＷＨＩ−Ｐ１３１（ＪＡＮＥＸ−１）およびＷＨＩ−Ｐ１５４（ＪＡＮＥＸ−２）は、白血病細胞におけるＪａｋ３の選択的阻害剤であることが報告されている（Ｓｕｄｂｅｃｋら、１９９９）。
【０００６】
Ｊａｋ３は、マスト細胞媒介性アレルギー反応および炎症性疾患において役割を果たすことも示されており、喘息およびアナフィラキシー等の適応症において標的として働く。
【０００７】
したがって、Ｊａｋ３を阻害する化合物は、白血病およびリンパ腫、臓器および骨髄移植拒絶反応、マスト細胞媒介性アレルギー反応、ならびに炎症性疾患および障害等の適応症に有用である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
現在、一般式ＩおよびＩＩの化合物は、Ｊａｋ３の強力選択的な阻害剤であることが分かっている。
【００１０】
【化１】
2012500805.tif 000003
これらの化合物において、
Ｑは、ＣＸおよび窒素からなる群から選択され、
Ｘは、水素、ハロゲンおよび電子求引基からなる群から選択され、
Ａは、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロアリールおよびアリールからなる群から選定され、
Ｒ１は、ハロゲン、ＣＮ、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルおよび−Ｖ−Ｒ７からなる群から選択され、
Ｒ２およびＲ３は、水素および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から、（ＣＲ２Ｒ３）の各出現について独立に選択され、
Ｒ４は、アルキル、ＯＨ、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリール、置換アルキル、置換ヘテロシクリルおよび置換アリールからなる群から選択され、
Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクリルおよび置換ヘテロシクリルから選定され、
Ｖは、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８−、−Ｏ−および−ＮＲ８−から選定され、
Ｒ８は、Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから選定されるか、または、それらが結合した窒素と一緒になった場合に、Ｒ７およびＲ８は４〜７員の窒素複素環を形成し、
Ｒ９は、水素、アルキルおよび置換アルキルから選定され、
ｙは、ゼロ、または１、２、３および４から選択される整数である。
【００１１】
この属のメンバーは、Ｊａｋ３活性を阻害する上で有用であり、そのため、臨床的な免疫抑制が望まれる適応症において、および血液がんの治療において有用である。
【００１２】
別の態様において、本発明は、治療有効量の一般式ＩもしくはＩＩの少なくとも１つの化合物または薬学的に許容できるその塩と、薬学的に許容できる担体とを含む医薬組成物に関する。
【００１３】
別の態様において、本発明は、Ｊａｋ３チロシンキナーゼによって媒介される応答を変化させることによって疾患を治療するための方法に関する。該方法は、Ｊａｋ３を一般式ＩまたはＩＩの少なくとも１つの化合物と接触させるステップを含む。
【００１４】
また別の態様において、本発明は、それを必要とする対象において免疫系を抑制する方法であって、該対象に、治療有効量の一般式ＩまたはＩＩの少なくとも１つの化合物を投与するステップを含む方法に関する。免疫系の活性の抑制は、移植手術後の組織または臓器の拒絶反応を予防または治療するため、ならびに、免疫系の異常な活性から生じる疾患および障害、特に自己免疫障害および疾患を予防および治療するために望ましい。例示的な自己免疫障害は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、インスリン依存性糖尿病（Ｉ型）、橋本甲状腺炎およびグレーブス病、悪性貧血、アジソン病、慢性活動性肝炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬、強皮症ならびに重症筋無力症を包含する。
【００１５】
本発明の化合物は、マスト細胞媒介性アレルギー反応および炎症に関連する疾患および障害を予防および治療する上で有用である。
【００１６】
Ｊａｋ３阻害剤が有用である他の適応症は、白血病およびリンパ腫を包含する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書全体を通して、置換基は導入される際に定義され、それらの定義を保持する。
【００１８】
第１の態様において、本発明は、式：
【００１９】
【化２】
2012500805.tif 000004
のプリンおよびプリノンに関する。
【００２０】
属Ｉのメンバーは、好都合には、Ｑの値に基づいて２つの亜属に分けることができる。Ｑが窒素である場合、結合したイミダゾ［５，４−ｃ］ピリジンを有するプリノン（ｐｕｒ  ｉｎ  ｏｎｅｓ）の亜属が生じる。Ｑが炭素である場合、結合したベンズイミダゾールを有するプリノンの亜属が生じる。これらの亜属の構造を以下に示す。
【００２１】
【化３】
2012500805.tif 000005
【００２２】
同様に、属ＩＩのメンバーは、好都合には、Ｑの値に基づいて２つの亜属に分けることができる。Ｑが窒素である場合、結合したイミダゾ［５，４−ｃ］ピリジンを有するプリンの亜属が生じる。Ｑが炭素である場合、結合したベンズイミダゾールを有するプリンの亜属が生じる。これらの亜属の構造を以下に示す。
【００２３】
【化４】
2012500805.tif 000006
【００２４】
ある特定の実施形態において、Ｘは、水素、ハロゲン、または１個以下の炭素を含有する電子求引基であってよい。例は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を包含する。いくつかの実施形態において、ｙは１または２であり、Ｒ２およびＲ３は水素またはメチルである、特に、ｙは１であってよく、Ｒ２およびＲ３の両方が水素であってよく、Ｒ９は水素であってよく、Ｒ４は、アリール、ヘテロアリール、およびそれらの置換対応物であってよい。他の実施形態において、ｙは１〜４であってよく、Ｒ２およびＲ３はすべての出現において水素であってよく、Ｒ９は水素であってよく、Ｒ４はアルコキシまたはＯＨであってよい。これらの実施形態は、式ＩｂまたはＩＩｂ：
【００２５】
【化５】
2012500805.tif 000007
［式中、Ｒ５は水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである］
を有する。
【００２６】
また他の実施形態において、Ｒ９は水素であり、ｙはゼロであり、Ｒ４は、置換されていてもよい単環（ｍｏｎｏｃｙｃｌｅ）または二環（ｂｉｃｙｃｌｅ）から選択される残基である。この事例のＲ４残基は、少なくとも１個の酸素原子を含有する。より詳細には、Ｒ４は、酸素複素環、アミド、置換アルキルアミド、ハロゲン置換酸素複素環、ヒドロキシル置換シクロアルキル、ヒドロキシル置換アリール、または、メトキシシクロヘキシル、特にｔｒａｎｓ４−メトキシシクロヘキシル、もしくは
【００２７】
【化６】
2012500805.tif 000008
［式中、Ｒ６は水素またはフッ素である］等のアルコキシ置換シクロアルキルであってよい。クロマンにおいて、アスタリスクが付いている炭素は、Ｒ絶対配置：
【００２８】
【化７】
2012500805.tif 000009
のものであり得る。４−置換−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−１−オールにおいて、アスタリスクが付いている炭素原子は、いずれもＲ絶対配置：
【００２９】
【化８】
2012500805.tif 000010
のものであり得る。
【００３０】
他の実施形態において、Ａは水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。例えば、Ａは水素またはメチルであってよい。
【００３１】
他の実施形態において、Ｒ１は、（１）ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、ピリジニル、ピラゾリル、ピリミジニル、イソキノリニル、アゼチジニル、ピペリジニル、ピペリジニル（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｙｌ）、ピロリジニル、モルホリニル、アゼパニルおよびジアゼパニル、（２）アリール、置換アリール、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキルもしくは置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（３）ハロゲンもしくはＣＮ、または（４）−Ｖ−Ｒ７である。前述のものは、典型的には、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、アルキル、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい。
【００３２】
Ｒ１がＶＲ７である実施形態において、Ｖは−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８−であってよく、Ｒ７は、−ＣＨ２ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはＨであってよい。代替として、ＶＲ７は
【００３３】
【化９】
2012500805.tif 000011
であってよい。またＲ１がＶＲ７である場合、Ｖは−Ｏ−または−ＮＲ８−であってよく、Ｒ７は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであってよく、Ｒ８はＨであってよい。
【００３４】
前述の親属およびそれらの亜属の範囲内にある化合物はすべて、Ｊａｋ３阻害剤として有用である。
【００３５】
追加の実施形態において、式ＩｃおよびＩＩｃ：
【００３６】
【化１０】
2012500805.tif 000012
に示される通り、Ｒ９はＨであってよく、ＱはＣＸであってよく、Ｙはゼロであってよい。
【００３７】
式ＩｃおよびＩＩｃのいくつかの実施形態において、Ｒ１は、ハロゲン、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アリール、置換アリールまたは−Ｖ−Ｒ７から選定され、ここで、Ｖは、−ＮＲ８−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ８またはＯであり、Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルもしくはアリールであり、Ｒ８は、水素もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであるか、または、それらが結合した窒素と一緒になった場合に、Ｒ７およびＲ８は４〜７員の４〜７員の窒素複素環を形成する。
【００３８】
前述の実施形態の範囲内にある化合物の例は、
【００３９】
【化１１−１】
2012500805.tif 000013
【００４０】
【化１１−２】
2012500805.tif 000014
【００４１】
【化１１−３】
2012500805.tif 000015
を包含するがこれらに限定されない。
【００４２】
他の実施形態において、Ｒ４は、置換アルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルおよび置換アリール、例えば、テトラヒドロフラニル、ピラニル、ベンゾピラニル、ヒドロキシテトラリニル、オキセパニル、ヒドロキシシクロヘキシルおよびそれらのハロゲン化体から選定され、Ｒ１は、ハロゲン、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ならびに、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい、フェニル、アゼチジニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、ピリジニル、ピリミジニルおよびピラゾリルから選定され、Ｘは、ハロゲン、シアノおよび水素から選定される。
【００４３】
前述の実施形態の範囲内にある化合物の例は、
【００４４】
【化１２−１】
2012500805.tif 000016
【００４５】
【化１２−２】
2012500805.tif 000017
【００４６】
【化１２−３】
2012500805.tif 000018
【００４７】
【化１２−４】
2012500805.tif 000019
【００４８】
【化１２−５】
2012500805.tif 000020
【００４９】
【化１２−６】
2012500805.tif 000021
【００５０】
【化１２−７】
2012500805.tif 000022
を包含するがこれらに限定されない。
【００５１】
さらなる実施形態において、Ｒ９はＨであってよく、ＱはＣＸであってよく、ｙはゼロであってよく、Ｒ４は、ヒドロキシテトラリンおよびヒドロキシシクロヘキシルである、式ＩｄおよびＩＩｄ：
【００５２】
【化１３】
2012500805.tif 000023
［式中、Ｒ６はＨまたはハロゲンである］である。Ｒ１は、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ハロゲン、ならびに、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキサミド、アルキル、カルボキシ、スルホン、アルコキシおよびシアノで置換されていてもよい、アゼチジニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、フェニル、モルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、ピリジニル、ピリミジニルおよびピラゾリルから選択されてよく、Ｘは、ハロゲン、シアノ、置換アルコキシおよび水素である。
【００５３】
前述の実施形態の範囲内にある化合物の例は、
【００５４】
【化１４】
2012500805.tif 000024
を包含するがこれらに限定されない。
【００５５】
ある特定の実施形態において、Ｒ９はアルキルまたは置換アルキルであってよく、ＱはＣＸであってよく、ｙはゼロであってよく、式Ｉｅ：
【００５６】
【化１５】
2012500805.tif 000025
のものであってよい。
【００５７】
さらなる実施形態において、Ｒ４は、テトラヒドロフラン、ベンゾピラン、ヒドロキシテトラリン、オキセパン、ヒドロキシシクロヘキサンおよびそれらのハロゲン化体から選定されてよく、Ｒ１は、ハロゲン、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル、置換（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アリール、置換アリール、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキサミドおよびアミジノから選定されてよく、Ｘは、ハロゲン、シアノ、水素、アルコキシまたは置換アルコキシから選定されてよい。
【００５８】
前述の実施形態の範囲内にある化合物は、
【００５９】
【化１６−１】
2012500805.tif 000026
【００６０】
【化１６−２】
2012500805.tif 000027
【００６１】
【化１６−３】
2012500805.tif 000028
を包含するがこれらに限定されない。
【００６２】
定義
便宜上および明瞭にするために、本明細書、実施例および請求項において用いられるある特定の用語について、ここで記述する。
【００６３】
アルキルは、線状、分枝鎖または環状炭化水素構造およびそれらの組合せを包含することが意図されている。低級アルキルは、炭素原子１〜６個のアルキル基を指す。低級アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−およびｔ−ブチル等を包含する。好ましいアルキル基は、Ｃ２０以下のものであり、より好ましいのはＣ１〜Ｃ８アルキルである。シクロアルキルはアルキルのサブセットであり、炭素原子３〜８個の環状炭化水素基を包含する。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニル等を包含する。
【００６４】
Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素は、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールおよびそれらの組合せを包含する。例は、フェネチル、シクロヘキシルメチル、カンホリルおよびナフチルエチルを包含する。
【００６５】
アルコキシまたはアルコキシルは、酸素を介して親構造に結合している、炭素原子１〜８個の、直鎖、分枝鎖、環状配置およびそれらの組合せの基を指す。例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、シクロプロピルオキシ、シクロヘキシルオキシ等を包含する。低級アルコキシは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。オキサアルキルという用語は、当技術分野において理解されている通りであることが意図されている［Ｎａｍｉｎｇ  ａｎｄ  Ｉｎｄｅｘｉｎｇ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ発行、段落１９６を参照、但し、段落１２７（ａ）の制限は除く］、すなわち、オキサアルキルは、酸素が単結合を介してその隣接する原子と結合している（エーテル結合を形成している）化合物を指し、カルボニル基において見られるような二重結合した酸素を指さない。
【００６６】
アシルは、カルボニル官能基を介して親構造に結合している、炭素原子１〜８個の、直鎖、分枝鎖、環状配置、飽和、不飽和および芳香族、ならびにそれらの組合せの基を指す。アシル残基中の１個または複数の炭素は、親との結合点がカルボニルのままである限り、窒素、酸素または硫黄によって置き換えられていてよい。例は、アセチル、ベンゾイル、プロピオニル、イソブチリル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル等を包含する。低級アシルは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。
【００６７】
アリールおよびヘテロアリールは、Ｏ、ＮもしくはＳから選択される０〜３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員の芳香族もしくはヘテロ芳香族環、Ｏ、ＮもしくはＳから選択される０〜３個のヘテロ原子を含有する９もしくは１０員の二環式芳香族もしくはヘテロ芳香族環系、またはＯ、ＮもしくはＳから選択される０〜３個のヘテロ原子を含有する１３もしくは１４員の三環式芳香族もしくはヘテロ芳香族環系を意味する。６〜１４員の芳香族炭素環式環は、例えば、ベンゼンおよびナフタレン、ならびに、本発明の目的のために、テトラヒドロナフタレン（テトラリン）、インダンおよびフッ素等の縮合部分を包含し、その中の１個または複数の環は芳香族であるが、すべてである必要はない。５〜１０員の芳香族複素環式環は、例えば、イミダゾール、ピリジン、インドール、チオフェン、ベンゾピラノン、チアゾール、フラン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、ピリミジン、ピラジン、テトラゾールおよびピラゾールを包含する。
【００６８】
アリールアルキルは、アリール残基がアルキルを介して親構造に結合している置換基を指す。例は、ベンジル、フェネチル等である。
【００６９】
ヘテロアリールアルキルは、ヘテロアリール残基がアルキルを介して親構造に結合している置換基を指す。例は、例えば、ピリジニルメチル、ピリミジニルエチル等を包含する。
【００７０】
複素環は、１〜３個の炭素が、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられているシクロアルキルまたはアリール残基を意味する。窒素および硫黄ヘテロ原子は酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は四級化されていてもよい。複素環の例は、ピロリジン、ピラゾール、ピロール、インドール、キノリン、イソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ベンゾフラン、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキソール（置換基として出現する場合、一般にメチレンジオキシフェニルと称される）、テトラゾール、モルホリン、チアゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、チオフェン、フラン、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、ジオキサン、テトラヒドロフラン等を包含する。ヘテロアリールは、複素環が芳香族である複素環のサブセットであることに留意されたい。
【００７１】
ヘテロシクリル残基の例は、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソ−ピロリジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、４−ピペリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、イソチアゾリジニル、ベンズイミダゾリル、チアジアゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、オキサジアゾリル、トリアゾリルおよびテトラヒドロキノリニルを追加で包含する。窒素性複素環は、環中に少なくとも１個の窒素を含有する複素環であり、追加の窒素および他のヘテロ原子を含有し得る。
【００７２】
置換アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル等は、各残基中の最大３個のＨ原子が、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、ヘテロアリール、ベンゼンスルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロアルコキシ、カルボキシ、カルボアルコキシ（アルコキシカルボニルとも称される）、アルコキシカルボニルアミノ、カルボキサミド（アルキルアミノカルボニルとも称される）、シアノ、カルボニル、アセトキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、アルキルチオ、スルホキシド、スルホン、スルホニルアミノ、アシルアミノ、アミジノ、アリール、ベンジル、ヘテロシクリル、アルキルヘテロシクリル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニル、トリチルおよびベンジルオキシで置き換えられている、アルキル、アリール、シクロアルキルまたはヘテロシクリルを指す。親がそのような置換を可能にする複素環である場合、該用語は、オキシド、例えば、ピリジン−Ｎ−オキシド、チオピランスルホキシドおよびチオピラン−Ｓ，Ｓ−ジオキシドも包含する。上述の通り、単一炭素上の２個の水素をカルボニルによって置き換えてオキソ誘導体を形成することができる。特筆すべきオキソ置換アリール残基は、テトラロン（３，４−ジヒドロナフタレン−１（２Ｈ）−オン）およびインダノン（２，３−ジヒドロインデン−１−オン）を包含する。
【００７３】
用語「ハロゲン」および「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。
【００７４】
用語「電子求引基」は、０．２より大きいハメットσｍｅｔａを有する置換基を指す。そのような置換基の例は、シアン化物、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、塩素およびフッ素を包含する。
【００７５】
本明細書において記載されている化合物のいくつかは、１つまたは複数の不斉中心を含有し得、故に、鏡像異性体、ジアステレオマー、および絶対立体化学の観点から（Ｒ）−または（Ｓ）−と定義され得る他の立体異性形態を生じさせ得る。本発明は、すべてのそのような考えられる異性体、ならびにそれらのラセミおよび光学的に純粋な形態を包含するように意図されている。光学活性（Ｒ）−および（Ｓ）−異性体は、キラルシントンもしくはキラル試薬を使用して調製でき、または従来の技術を使用して分割できる。本明細書において記載されている化合物がオレフィン二重結合または他の幾何不斉中心を含有する場合で別段の指定がない限り、該化合物はＥおよびＺ幾何異性体の両方を包含することが意図されている。
【００７６】
同様に、すべての互変異性形態も包含されることが意図されている。互変異性化合物のエノール形態が存在する場合、該化合物のケト形態も本発明の範囲内である。６−置換２−（ベンズイミダゾリル）プリノンのケト−エノール互変異性の一例、および引き続いて本発明に従う前述のプリノンの互変異性体を以下に描写する。
【００７７】
【化１７】
2012500805.tif 000029
【００７８】
本明細書において使用されるラセミ、アンビスケールミック（ａｍｂｉｓｃａｌｅｍｉｃ）およびスケールミック（ｓｃａｌｅｍｉｃ）または鏡像異性的に純粋な化合物の図式表現は、Ｍａｅｈｒ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．第６２版、１１４〜１２０（１９８５）から取ったものであり、実線楔および破線楔は、キラル要素の絶対配置を表すために使用されており、波線は、それが表現する結合が生成し得る任意の立体化学的関係の否認を指定し、実線太線および破線太線は、示されている相対配置を指定する幾何記述子であり、楔の輪郭および点線または破線は、不定の絶対配置の鏡像異性的に純粋な化合物を表す。例えば、図式表現
【００７９】
【化１８】
2012500805.tif 000030
は、２つのトランス鏡像異性体のいずれかまたは両方を示す。
【００８０】
【化１９】
2012500805.tif 000031
【００８１】
本発明の化合物は放射性標識形態で存在し得ること、すなわち、該化合物は、自然界において通常見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を含有する１個または複数の原子を含有し得ることが認識されよう。水素、炭素、リン、フッ素、塩素およびヨウ素の放射性同位体は、それぞれ３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌおよび１２５Ｉを包含する。それらの放射性同位体および／または他の原子の放射性同位体を含有する化合物は、本発明の範囲内である。トリチウム化、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃ放射性同位体は、それらの調製の容易さおよび検出性によって特に好まれる。本発明の放射性標識化合物は、概して、当業者に周知の方法によって調製できる。好都合には、そのような放射性標識化合物は、非放射性標識試薬を容易に入手可能な放射性標識試薬で代用することにより実施例において開示されている手順を行うことによって調製できる。ＪＡＫ３酵素活性部位に対する高親和性により、本発明の放射性標識化合物は、ＪＡＫ３アッセイに有用である。
【００８２】
酸素性複素環は、環中に少なくとも１個の酸素を含有する複素環であり、追加の酸素および他のヘテロ原子を含有し得る。例示的な酸素性複素環は、テトラヒドロピラン、クロマン、ならびに
【００８３】
【化２０】
2012500805.tif 000032
等、それらの種々に置換された誘導体を包含する。
【００８４】
化学合成
「保護すること」、「脱保護すること」および「保護された」官能基に関連する術語は、本明細書の至る所で出現する。そのような術語は、当業者にはよく理解されており、一連の試薬による連続処理を要するプロセスの文脈において使用される。その文脈において、保護基は、そうしなければ反応してしまうがその反応が望ましくないプロセスステップ中に官能基をマスクするために使用される基を指す。保護基は、そのステップにおける反応を防止するが、その後、元の官能基を露出させるために除去され得る。除去または「脱保護」は、官能基が干渉するであろう反応（１つまたは複数）の完了後に起こる。故に、本発明のプロセスのように一連の試薬が指定されている場合、当業者は、「保護基」として適切であろう基を容易に想定することができる。その目的に適した基は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ著［Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１］等の化学分野における標準的な教科書で論じられている。
【００８５】
有機化学者によって利用される略語の総合リストは、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙの各巻の最初の号に掲載されている。典型的には「Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｌｉｓｔ  ｏｆ  Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓ」と題された表中に提示されているそのリストは、参照により本明細書に組み込まれる。
【００８６】
概して、本発明の化合物は、例えば後述する通りの一般的反応スキームにおいて説明されている方法により、またはその修正形態により、容易に入手可能な出発材料、試薬および従来の合成手順を使用して調製できる。これらの反応において、それ自体は既知であるが本明細書において述べられていない変形形態を活用することも可能である。出発材料は、例えば適切に置換されたベンズイミダゾール環化合物の場合、市販されているか、実施例において記載されている通りに合成されるか、または当業者に周知の方法によって取得できるかのいずれかである。
【００８７】
本発明は、活性剤として本明細書において記載されている化合物を含む医薬組成物をさらに提供する。
【００８８】
本明細書において使用される場合、「医薬組成物」は、本明細書において記載されている化合物の１つもしくは複数、またはその生理学的に許容できる塩もしくは溶媒と、生理学的に適切な担体および添加剤等の他の化学成分との調製物を指す。故に、本発明に従って使用するための医薬組成物は、添加剤と、活性化合物の加工を容易にする助剤とを含む１種または複数の生理学的に許容できる担体を使用する従来の様式で、薬学的に使用され得る調製物に製剤化できる。適正な製剤は、選定される投与経路によって決まる。
【００８９】
Ｊａｋ−３を阻害する化合物は、医薬組成物として製剤化され得、ヒト患者等の哺乳類対象に、選定された投与経路、すなわち、経口、または静脈内、筋肉内、局所、経皮もしくは皮下経路による非経口に適合させた様々な形態で投与され得る。
【００９０】
経口投与のために、化合物は、活性化合物を当技術分野において周知の薬学的に許容できる担体と組み合わせることによって容易に製剤化され得る。そのような担体により、本発明の化合物を、患者による経口摂取用の錠剤、丸剤、糖衣錠剤、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤等として製剤化することが可能になる。経口使用のための薬理学的調製物は、固体添加剤を使用し、得られた混合物を場合により摩砕し、必要に応じて適切な助剤を添加した後で顆粒の混合物を加工して錠剤または糖衣錠剤の核を取得することによって作製され得る。適切な添加剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトールもしくはソルビトールを包含する糖類、例えばトウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、バレイショデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、ナトリウムカルボメチルセルロース等のセルロース調製物、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）等の生理学的に許容できるポリマー等の充填剤である。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天もしくはアルギン酸等の崩壊剤、またはアルギン酸ナトリウム等のその塩を添加してよい。
【００９１】
加えて、腸溶性コーティングは、本発明の化合物の胃の環境への曝露を防止するために望ましいことがあるため、有用であり得る。経口で使用され得る医薬組成物は、ゼラチンで作られた押し込み型カプセル剤、ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトール等の可塑剤で作られた軟密封カプセル剤を包含する。押し込み型カプセル剤は、活性成分を、ラクトース等の充填剤、デンプン等の結合剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、ならびに場合により安定剤と混和して含有し得る。
【００９２】
軟カプセル剤において、活性化合物は、脂肪油、流動パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール等の適切な液体に溶解または懸濁され得る。加えて、安定剤を添加してよい。経口投与用のすべての製剤は、選定された投与経路に適した投薬量であるべきである。
【００９３】
注射のために、本発明の化合物は、水溶液中、好ましくはハンクスもしくはリンゲル液等の生理学的に適合性の緩衝剤または生理食塩緩衝液中に製剤化され得る。経粘膜および経皮投与のためには、障壁に浸透するのに適切な浸透剤を組成物中に使用してよい。例えばＤＭＳＯまたはポリエチレングリコールを包含するそのような浸透剤は、当技術分野において既知である。
【００９４】
吸入による投与のために、本発明に従って使用するための化合物は、好都合には、加圧パックまたはネブライザーから、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロ−テトラフルオロエタンまたは二酸化炭素を使用して、エアゾールスプレー調製物の形態で送達される。加圧エアゾール剤の場合、投薬単位は、定量を送達するための弁を設けることによって決定できる。吸入器または注入器において使用するための、例えばゼラチン製のカプセル剤およびカートリッジは、化合物とラクトースまたはデンプン等の適切な散剤基剤との混合粉体を含有して製剤化され得る。
【００９５】
非経口投与用の医薬組成物は、水溶性形態の活性成分の水溶液を包含する。加えて、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁剤として調製できる。適切な親油性溶媒またはビヒクルは、ゴマ油等の脂肪油、またはオレイン酸エチル、トリグリセリドもしくはリポソーム等の合成脂肪酸エステルを包含する。水性注射懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストラン等、懸濁剤の粘性を増加させる物質を含有し得る。場合により、懸濁剤は、適切な安定剤または高濃度溶液の調製を可能にするために化合物の溶解性を増加させる作用物質を含有してもよい。
【００９６】
本発明の化合物は、例えばココアバターまたは他のグリセリド等の従来の坐剤基剤を使用して、坐剤または停留浣腸剤等の直腸組成物中に製剤化してもよい。
【００９７】
治療される状態の重症度および応答性に応じて、投薬は、持続放出組成物の単回投与であってもよく、治療の経過は、数日間〜数週間、または治癒が達成されるまでもしくは病状の減退が実現されるまで持続する。投与される組成物の量は、当然ながら、治療されている対象、疾病の重症度、投与の様式、処方医師の判断を包含する多くの要因によって決まることになる。本発明の化合物は、経口的にまたは注射により、１日当たり０．００１〜２５００ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。成人の用量範囲は、概して０．００５ｍｇ〜１０ｇ／日である。錠剤、または不連続単位で提供される他の形態の調製物は、好都合には、そのような投薬量またはその複数回分で有効な本発明の化合物の量、例えば、５ｍｇ〜５００ｍｇ、通常はおよそ１０ｍｇ〜２００ｍｇを含有する単位を含有し得る。患者に投与される化合物の正確な量は、担当医の責任となる。しかしながら、用いられる用量は、患者の年齢および性別、治療されている正確な障害、ならびにその重症度を包含する複数の要因によって決まることになる。また、投与経路は、状態およびその重症度に応じて変動し得る。
【００９８】
本明細書において使用される場合、また当業者には理解されるように、「化合物」への言及は、その化合物の塩、溶媒和物および包接錯体を包含することが意図されている。用語「溶媒和物」は、適切な溶媒の分子が結晶格子に組み込まれている固体状の式ＩまたはＩＩの化合物を指す。治療的投与に適した溶媒は、投与される投薬量で生理学的に忍容である。治療的投与に適した溶媒の例は、エタノールおよび水である。水が溶媒である場合、溶媒和物は水和物と称される。概して、溶媒和物は、化合物を適切な溶媒に溶解し、冷却してまたは抗溶媒を使用して溶媒和物を単離することによって形成される。溶媒和物は、典型的には周囲条件下で乾燥されるかまたは共沸される。包接錯体は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版（１９９５）、第１巻、１７６〜１７７頁において記載されている。最も一般的に用いられる包接錯体は、シクロデキストリンとの包接錯体であり、天然および合成のすべてのシクロデキストリン錯体は、請求項内に具体的に包括されている。
【００９９】
用語「薬学的に許容できる塩」は、無機の酸および塩基ならびに有機の酸および塩基を包含する薬学的に許容できる非毒性の酸または塩基から調製される塩を指す。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機および有機酸を包含する薬学的に許容できる非毒性の酸から調製できる。本発明の化合物に適した薬学的に許容できる酸付加塩は、酢酸、ベンゼンスルホン酸（ベシレート）、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸（ｅｔｈｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ）、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモン酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸等を包含する。化合物が酸性側鎖を含有する場合、本発明の化合物に適した薬学的に許容できる塩基付加塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から作られた金属塩、またはリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）およびプロカインから作られた有機塩を包含する。
【０１００】
用語「予防すること」は、本明細書において使用される場合、発作を阻止しまたは鈍麻させるために予め薬剤を投与することを指す。医学分野（本方法の請求項が対象としている）の当業者であれば、用語「予防する」が絶対的用語ではないことを認識する。医学分野において、該用語は、状態の可能性または重篤度を実質的に減少させるための薬物の予防的投与を指すと理解されており、これが本明細書において意図されている意義である。
【０１０１】
本発明の製剤は、特に上述した成分に加えて、問題となる製剤の種類を考慮して、当技術分野において慣習的な他の作用物質を包含し得ること、例えば、経口投与に適した製剤は、香味剤を包含し得ることを理解すべきである。
【０１０２】
組成物は、活性成分を含有する１つまたは複数の単位剤形を含有し得る、パッケージングデバイスまたはディスペンサーで提示され得る。パッケージングデバイスの例は、ブリスターパック等の金属またはプラスチック箔および吸入用のネブライザーを包含する。パッケージングデバイスまたはディスペンサーには、投与の説明書が添付されていてよい。適合性の医薬担体中に製剤化された本発明の化合物を含む組成物を、適切な容器に入れ、指定されている状態の治療のラベルを貼付してもよい。
【０１０３】
適応症
本発明の化合物は、Ｊａｋ３の活性を阻害する上で、またはＪａｋ３媒介性活性を阻害する上で有用であり、骨髄移植を包含する組織および臓器移植用の免疫抑制剤として、ならびに自己免疫および炎症性疾患、およびそれらから生じる合併症の治療において有用である。超急性、急性および慢性臓器移植拒絶反応が治療され得る。超急性拒絶反応は、移植術の数分以内に起こる。急性拒絶反応は、概して移植の６〜１２か月以内に起こる。超急性および急性拒絶反応は、免疫抑制剤で治療した場合、典型的には可逆である。臓器機能の漸進的喪失を特徴とする慢性拒絶反応は、移植術後いつでも起こり得るため、移植レシピエントにとって目下の懸案事項である。
【０１０４】
臓器特異的（主として１つの臓器に向けられる）および非臓器特異的（複数の臓器に影響を及ぼす）の２種類に分類され得る、約７５の異なる既知の自己免疫障害がある。
【０１０５】
臓器特異的自己免疫障害の例は、膵臓に影響を及ぼすインスリン依存性糖尿病（Ｉ型）、甲状腺に影響を及ぼす橋本甲状腺炎およびグレーブス病、胃に影響を及ぼす悪性貧血、副腎に影響を及ぼすクッシング病およびアジソン病、肝臓に影響を及ぼす慢性活動性肝炎、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、セリアック病、乾癬、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、ならびに強直性脊椎炎である。
【０１０６】
非臓器特異的自己免疫障害の例は、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性ループス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ）および重症筋無力症である。
【０１０７】
Ｉ型糖尿病は、ランゲルハンス島のインスリン分泌β細胞に対する自己反応性Ｔ細胞の選択的攻撃の結果として起こる。この疾患においてＪａｋ３を標的化することは、Ｊａｋ経路を介してシグナルを送る複数のサイトカインが、β細胞のＴ細胞媒介性自己免疫性破壊に関与していることが既知であるという知見に基づく。実際に、Ｊａｋ３阻害剤のＪＡＮＥＸ−ｌは、Ｉ型糖尿病のＮＯＤマウスモデルにおける自然発症自己免疫疾患の発病を予防することが示された。
【０１０８】
移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）は、しばしば同種骨髄移植術（ＢＭＴ）に続く、ドナーＴ細胞惹起性病態である。実質的な実験および臨床研究は、ドナーＴ細胞がＧＶＨＤの主要なメディエーターおよびエフェクターであることを実証した。Ｊａｋ３はＧＶＨＤの誘発において中心的な役割を果たしており、Ｊａｋ３阻害剤のＪＡＮＥＸ−ｌによる治療はＧＶＨＤの重症度を減じることが示された（Ｃｅｔｋｏｖｉｃ−ＣｖｒｌｊｅおよびＵｃｋｅｎ、２００４において総説されている）。
【０１０９】
マスト細胞はＪａｋ３を発現し、Ｊａｋ３は、炎症性メディエーターの放出を包含するＩｇＥ媒介性マスト細胞応答の中心的な調節因子である。Ｊａｋ３は、マスト細胞媒介性アレルギー反応の治療における妥当な標的であることが示された。
【０１１０】
マスト細胞活性化に関連するアレルギー性障害は、アレルギー性鼻炎（花粉症）、アレルギー性蕁麻疹（じんましん）、血管性浮腫、アレルギー性喘息およびアナフィラキシー、すなわち「アナフィラキシー（ａｎａｐｈｙｌａｔｉｃ）ショック」等のＩ型即時過敏性反応を包含する。これらの障害は、Ｊａｋ３活性の阻害によって、例えば、本発明によるＪａｋ３阻害剤の投与によって治療または予防される。本発明によれば、Ｊａｋ３阻害剤は、予防的に、すなわち、急性アレルギー反応の発症前に投与され得、または該反応の発症後に、または両方の時に投与され得る。
【０１１１】
組織および臓器の炎症は、広範な障害および疾患において起こり、ある特定の変形形態では、受容体のサイトカインファミリーの活性化に起因する。Ｊａｋ３の活性化に関連する例示的な炎症性疾患は、非限定的な様式で、放射線曝露による皮膚炎、喘息、アレルギー性炎症および慢性炎症を包含する。
【０１１２】
本発明のＪａｋ３阻害剤は、皮膚がんならびにリンパ腫および白血病等の血液悪性腫瘍を包含するある特定の悪性腫瘍を治療する上でも有用である。
【０１１３】
下記の実施例は、本発明をさらに記述し、説明のみを目的として使用されるものであり、開示されている本発明を限定するものとしてみなされるべきではない。
【実施例】
【０１１４】
下記の略語および用語は、全体を通して指定されている意味を有する。
Ａｃ＝アセチル
Ｂｕ＝ブチル
ＤＣＭ＝ジクロロメタン＝塩化メチレン＝ＣＨ２Ｃｌ２
ＤＥＡＤ＝アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＩＣ＝ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥＡ（ＥｔＯＡｃ）＝酢酸エチル
ＧＣ＝ガスクロマトグラフィー
ｈ＝時間
ＨＯＡｃ＝酢酸
ＨＯＢｔ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｍｅ＝メチル
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）２Ｃｈ２＝ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノフェロセン］−パラジウム
Ｐｈ＝フェニル
ＰｈＯＨ＝フェノール
ＲＴ＝室温
ｓａｔ’ｄ＝飽和
ｓ−＝第二級
ｔ−＝第三級
ＴＢＤＭＳ＝ｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＭＯＦ＝オルトギ酸トリメチル
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
トシル＝ｐ−トルエンスルホニル
Ｔｒｔ＝トリフェニルメチル
【０１１５】
以下の実施例は、本発明の化合物、前駆体および中間体の合成について記述する。
【０１１６】
実験の部
経路Ａ
【０１１７】
【化２１】
2012500805.tif 000033
【０１１８】
６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン
２，５−ジアミノ−４，６−ジクロロピリミジン（６ｇ、３３．５ｍｍｏｌ）、４−アミノテトラヒドロピラン（３．３９ｇ、３３．５ｍｍｏｌ、１当量）、重炭酸ナトリウム（９．８５ｇ、１１７．２ｍｍｏ１、３．５当量）およびＩ−ブタノール（１２０ｍＬ）を、密閉管中１５０℃で一緒に加熱した。３日後、反応が完了したと思われたとき（ＨＰＬＣによる）、反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９５／５  塩化メチレン／メタノールから９０／１０  塩化メチレン／メタノールでの段階的溶離）によって精製して、７．１ｇ（８７％収率）の所望生成物を桃色固体として得た。代替手順において、水（３００ｍＬ）を残留物に添加し（クロマトグラフィー精製前）、混合物を室温で３０分間撹拌した。真空下での濾過、沈殿物の水での徹底的な洗浄、続いて真空オーブン中６０℃における桃色固体の徹底的な乾燥により、高純度所望生成物を７８％収率で提供した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 4.21-4.12 (m, 1H), 4.01-3.96 (m, 2H), 3.53 (td, J = 11.7,2.2
Hz, 2H), 2.01-1.96 (m, 2H), 1.60 (tdd, J = 12.1, 11.7, 4.6 Hz, 2H); MS (EI) m/z
244.3 (MH)+.
【０１１９】
２−アミノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
Ａｒ下−７８℃の９００ｍＬの無水ＴＨＦ中の６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（１ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中のホスゲンの溶液（トルエン中のホスゲンの２０％溶液３．８ｍＬ、７ｍｍｏｌ、１．７当量、２６ｍＬの無水ＴＨＦで希釈したもの）を４０分間かけて滴下添加した。反応混合物を１６時間かけて室温まで次第に加温させた。これを空気で３０分間パージし、次いで溶媒を真空除去して、１．２ｇ（９７％収率）の所望生成物（ＨＣｌ塩）を白色固体として得た。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 11.40 (s, 1H), 7.00 (br s, 2H), 4.50-4.37 (m, 1H), 4.12-4.04
(m, 2H), 3.50 (app t, 2H), 2.68-2.55 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H); MS (EI) m/z
270.3 (MH)+.
【０１２０】
２−アミノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンへの代替経路
１７０ｍＬの無水ＴＨＦ中の６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（５．１ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）の溶液に、１，１−カルボニルジイミダゾール（２０．４ｇ、１２６ｍｍｏｌ）を固体として小分けにして添加した。反応混合物を室温で２０〜３０分間撹拌した（ＨＰＬＣおよびＭＳにより反応の完了を確認した）。溶媒を真空除去した。水（２５０ｍＬ）を残留物に添加し、混合物を室温で１０分間撹拌した。形成された固体を真空下で濾過し、徹底的に乾燥させて、４．６７ｇ（８３％収率）の所望生成物を桃色固体として得た。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 11.40 (s, IH), 7.00 (br s, 2H), 4.50-4.37 (m, 1H), 4.12-4.04
(m, 2H), 3.50 (app t, 2H), 2.68-2.55 (m, 2H), 1.78-1.71 (m,2H); MS (EI) m/z
270.3 (MH)+.
【０１２１】
ブッフバルト・ハートウィッグパラジウム触媒Ｃ−Ｎクロスカップリングの一般的手順
すべてのガラス製品を、真空オーブン中６０℃で、反応前１日間乾燥させた。炭酸セシウムおよび２−アルニノ（ａｒｎｉｎｏ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンを、高真空下６０℃で、実験前１日間乾燥させた。オーブン乾燥したバイアルに、２−アルニノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１当量）、新たに磨砕した（ｇｒｏｕｎｄｅｄ）炭酸セシウム（１．４当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（０．１５当量）および臭化アリール（１．３当量）、続いて無水トルエン（０．２５Ｍ溶液）を投入した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、８０〜１００℃で１７〜２２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。残留物のカラムクロマトグラフィーにより、所望生成物を得た。
【０１２２】
６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
オーブン乾燥したバイアルに、無水トルエン（３ｍＬ）中の２−アルニノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（５０ｍｇのＨＣＩ塩、０．１８６ｍｍｏｌ、１当量）、次いで新たに磨砕した炭酸セシウム（８５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、１．４当量）を、Ａｒ下室温で撹拌しながら添加した。２０分後、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１２．５ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ、０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（１７．３ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ、０．１５当量）および１−ブロモ−５−フルオロ−２−ニトロベンゼン（Ｏａｋｗｏｏｄ）（５３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、１．３当量）を固体として、続いてＤＩＥＡ（５０ｕｌ、１．５当量）を添加した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、８０℃で１８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、塩化メチレン中５％のメタノールで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、フィルターを塩化メチレン中５％のメタノールで繰り返し洗浄した。濾液を真空濃縮し、得られた残留物を、分取ＴＬＣ（シリカゲル、塩化メチレン中４．２５％のメタノール）を使用して精製して、所望生成物を黄色固体（４５．３ｍｇ、６０％収率）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 10.90 (s, 1H), 8.89 (dd, 1H), 8.45 (dd, IH), 8.10 (br s, 1H),
6.92-6.83 (m, 1H),4.75-4.60 (m, 1H), 4.28 (dd, 2H), 3.65 (app t, 2H), 2.82
(tdd, 2H), 1.90 (br d, 2H); MS (EI) m/z 409.1 (MH)+.
【０１２３】
６−クロロ−２−（５−クロロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
Ａｒ下のオーブン乾燥した二口フラスコに、ラセミＢＩＮＡＰ（２．２７ｇ、３．６４ｍｍｏｌ、０．３５当量）、続いて無水トルエン（２０ｍＬ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（１．０５ｇ、１．５６ｍｍｏｌ、０．１５当量）を添加し、混合物をＡｒ下室温で１５分間撹拌した。深黄色のペーストが形成される。次いで、２−ブロモ−４−クロロ−１ニトロベンゼン（３．１９ｇ、１３．５２ｍｍｏｌ、１．３当量）、２−アミノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（２．８０ｇ、１０．４ｍｍｏｌ、１．０当量）および炭酸セシウム（５．０８ｇ、１５．６ｍｍｏｌ、１．５当量）を固体としてＡｒ下で、続いて無水トルエン（２２ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌し、次いで１００℃で１７時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、トルエン（４５０ｍＬ）で希釈し、セライトに通過させた。濾液を真空濃縮して、暗褐色残留物を得た。フラッシュクロマトグラフィー精製（シリカゲル、塩化メチレン中１〜５％のメタノールでの段階的溶離）、続いて熱酢酸エチルからの再結晶により、所望生成物を鮮黄色固体（１．６３ｇ、３７％収率）として高純度で得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3 + CD3OD)
δ, ppm: 9.05 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.06 (d, IH),
4.56-4.52 (m, 1H), 4.16 (dd, 2H), 3.58 (app t, 2H), 2.72 (tdd, 2H), 1.81 (br d,
2H); MS (EI) m/z 425.2 (MH)+.
【０１２４】
３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）−４−ニトロベンゾニトリル
Ａｒ下のオーブン乾燥した二口フラスコに、ラセミＢＩＮＡＰ（２．５９ｇ、４．１７ｍｍｏｌ、０．３５当量）、続いて無水トルエン（２０ｍＬ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（１．２０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ、０．１５当量）を添加し、混合物をＡｒ下室温で１５分間撹拌した。深黄色のペーストが形成される。次いで、３−ブロモ−４−ニトロ−ベンゾニトリル（３．５１ｇ、１５．４７ｍｍｏｌ、１．３当量）、２−アミノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（３．２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ、１．０当量）および炭酸セシウム（５．８１ｇ、１７．８ｍｍｏｌ、１．５当量）を固体としてＡｒ下で、続いて無水トルエン（２７ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で１０分間撹拌し、次いで１００℃で２２時間撹拌した（ＬＣ−ＭＳは反応が完了したことを示す）。反応混合物を室温に冷却し、トルエン（４５０ｍＬ）で希釈し、セライトに通過させた。濾液を真空濃縮して、暗褐色残留物を得た。１００ｍＬのアセトニトリル／１００ｍＬの水の混合物を使用して残留物から所望生成物を鮮橙色固体として再結晶させた。再結晶を繰り返して、１．４９ｇの所望生成物（３０％収率）の高純度での単離をもたらした。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ., ppm: 10.40 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 7.85 (br s, 1H),
7.31 (d, 1H), 4.65-4.50 (m, 1H), 4.19 (dd, 2H), 3.55 (app t, 2H), 2.70 (tdd,
2H), 1.90 (br d, 2H); MS (EI) m/z 416.2 (MH)+.
【０１２５】
６−クロロ−２−（５−置換−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン中のニトロフェニル基の鉄粉による還元の一般的手順
６−クロロ−２−（５−置換−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１当量）に、氷酢酸、水およびエタノール（比率１／２．５／５ｖｏｌ）、続いて鉄粉（１０当量）を添加し、得られた混合物を９０℃で１５分間加熱した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応混合物を室温まで冷却させ、濃水酸化アンモニウム溶液を添加してｐＨを塩基性にし、混合物を１０分間撹拌した。水層を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去して、所望生成物を得た。この材料をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０１２６】
２−（２−アミノ−５−クロロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。氷酢酸、水およびエタノール（５７ｍＬ／１４２ｍＬ／２８５ｍＬ）を使用して、６−クロロ−２−（５−クロロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。MS (EI) m/z 395.2 (MH)+.
【０１２７】
６−クロロ−２−（５−置換−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン中のニトロフェニル基の触媒的水素化による還元の一般的手順
６−クロロ−２−（５−置換−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１当量）に、酢酸エチルおよびＰｔ触媒、０．５％硫黄（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）（活性炭上５％、０．０５当量）を、水素（１気圧）下室温で１８時間撹拌しながら添加した（ＨＰＬＣモニタリング）。セライトの小型プラグ上での反応混合物の濾過、酢酸エチルおよびメタノールでの徹底的な洗浄、溶媒の蒸発および乾燥により所望生成物を提供し、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０１２８】
２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
０．４９ｍｍｏｌスケールで１６０ｍｇ、８６％収率。６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。MS (EI) m/z 379.3 (MH)+.
【０１２９】
４−アミノ−３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７−Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリル
淡黄色固体。０．４９ｍｍｏｌスケールで８６％収率。典型的な手順において、３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）−４−ニトロベンゾニトリル（０．４９ｍｍｏｌ）に、酢酸エチル（２０ｍＬ）およびＰｔ触媒、０．５％硫黄（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）（９５．５ｍｇ、活性炭上５％、４．８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ、０．０５当量）を、水素（１気圧）下室温で１８時間撹拌しながら添加した（ＨＰＬＣモニタリング）。セライトの小型プラグ上での反応混合物の濾過、酢酸エチルおよびメタノールでの徹底的な洗浄、溶媒の蒸発および乾燥により所望生成物を提供し、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。２．９５ｍｍｏｌスケールで定量的収率。触媒を、１２〜１５等分した１００ｍＬの塩化メチレン／イソプロパノールの１／１（ｖ）溶液で洗浄して、所望生成物を回収した。MS (EI) m/z 386.1 (MH)+.
【０１３０】
ベンズイミダゾール環を閉じるための一般的手順
粗製の２−（２−アミノ−５−置換−フェニルアミノ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１当量）を含有するフラスコに、無水メタノール、続いて無水オルトギ酸トリメチル（過剰）およびメタンスルホン酸（触媒量）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で２時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。溶媒を真空除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望生成物を得た。
【０１３１】
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。無水メタノール（１０ｍＬ）中の２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１６０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）から、無水オルトギ酸トリメチル（１ｍＬ）およびメタンスルホン酸（５滴）を使用し、Ａｒ下室温で２時間撹拌（ＨＰＬＣモニタリング）して合成した。溶媒を真空除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン中２％のメタノールから塩化メチレン中１０％のメタノールでの段階的溶離）によって精製して、所望生成物（１２０ｍｇ、７３％収率）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.03 (s, 1H), 8.40-8.20 (m, 1H), 7.82-7.72 (m,
1H), 7.17-7.11 (m, 1H), 4.72-4.58 (m, 1H), 4.28-4.13 (m, 2H), 3.70-3.62 (m,
2H), 2.90-2.72 (m, 2H), 1.90-1.78 (m, 2H); MS (EI) m/z 389.2 (MH)+.
【０１３２】
６−クロロ−２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。２ステップ（還元およびベンズイミダゾール閉環）、２．４７ｍｍｏｌスケールで４６％収率。２−（２−アミノ−５−クロロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3 + CD3OD)
δ, ppm: 9.08 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.40
(d, 1H), 4.65-4.58 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H), 3.62 (appt, 2H), 2.82-2.76 (m,
2H), 1.93 (br d, 2H); MS (EI) m/z 405.2 (MH)+.
【０１３３】
３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
淡黄色固体。７３％収率（０．４２ｍｍｏｌスケール）。４−アミノ−３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリルから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3 + CD3OD)
δ, ppm: 9.27 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.71
(d, 1H), 4.72-4.58 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H), 3.64-3.62 (m, 2H), 2.82-2.78 (m,
2H), 1.90-1.85 (m, 2H); MS (EI) m/z 396.2 (MH)+.
【０１３４】
方法１
６−クロロプリノンと（ヘテロ）アリールボロン酸とのクロスカップリング反応の一般的手順
エタノール（２ｍＬ）を、６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（２５ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）、（ヘテロ）アリールボロン酸（０．１２８ｍｍｏｌ、２当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（７ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ、０．１当量）およびＮａ２ＣＯ３の２Ｍ水溶液（２００μＬ）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加し、混合物をマイクロ波オーブン中１５０℃で３０分間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物をエタノールで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を得た。
【０１３５】
【化２２】
2012500805.tif 000034
【０１３６】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。ＴＦＡ塩。５６％収率。ピリジン−４−イルボロン酸から調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.22 (br s, 1H), 8.97 (br m, 2H), 8.37 (d, 1H), 8.22 (br m,
2H), 7.91-7.82 (m, 1H), 7.28-7.19 (m, 1H), 4.83-4.71 (m, 1H), 4.35-4.23 (m,
2H), 3.69 (app t, 2H), 3.01-2.82 (m, 2H), 1.92 (br d, 2H); MS (EI) m/z 432.2
(MH)+.
【０１３７】
【化２３】
2012500805.tif 000035
【０１３８】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
ＴＦＡ塩。１０％収率。１Ｈ−ピラゾール−４−ボロン酸から調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.22 (br s, 1H), 8.47-8.30 (m, 3H), 7.83-7.72 (m, 1H),
7.23-7.11 (m, 1H), 4.73-4.61 (m, 1H), 4.25-4.13 (m, 2H), 3.61 (app t, 2H),
2.92-2.73 (m, 2H), 1.83 (br d, 2H); MS (EI) m/z 421.4 (MH)+.
【０１３９】
方法２
６−クロロプリノンと脂肪族ベンジルアミンとの置き換え（ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ）反応の一般的手順
１ｍＬのＤＭＳＯに溶解した０．０４９ｍｍｏｌの６−クロロ−２−（６−置換−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンに、１ｍＬの１−ブタノール、続いて脂肪族／ベンジルアミン（０．２ｍｍｏｌ、４当量）を添加し、反応混合物を１１０℃で１８時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応が完了したら、混合物を室温に冷却させ、アセトニトリルで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過した。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒蒸発および乾燥後、所望生成物を得た。
【０１４０】
【化２４】
2012500805.tif 000036
【０１４１】
３−（６−（アゼチジン−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
白色固体。1H
NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 11.13 (br s,
1H), 9.24 (s, 1H), 8.86 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.96 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.75 (dd,
1H), 4.60-4.40 (m, 1H), 4.34 (t, 4H), 4.05-4.00 (dd, 2H), 3.51-3.38 (dd, 2H),
2.61-2.42 (m, 4H), 1.72 (br d, 2H); MS (EI) m/z 417.1 (MH)+.
【０１４２】
【化２５】
2012500805.tif 000037
【０１４３】
３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
白色固体。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.17 (s, 1H), 8.87 (br s, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.64 (dd, 1H),
4.71 (t, 4H), 4.62-4.52 (m, 1H), 4.17 (dd, 2H), 3.58 (app t, 2H), 2.84-2.68 (m,
2H), 1.79 (br d, 2H); MS (EI) m/z 453.1 (MH)+.
【０１４４】
【化２６】
2012500805.tif 000038
【０１４５】
３−（６−（シクロプロピルメチルアミノ）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
淡黄色固体。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.23 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.63 (dd, 1H),
4.62-4.44 (m, 1H), 4.18 (dd, 2H), 3.60 (app t, 2H), 3.52 (d, 2H), 2.87-2.73 (m,
2H), 1.83 (br d, 2H), 1.26-1.20 (m, 1H), 0.67-0.61 (dd, 2H), 0.37 (d, 2H); MS
(EI) m/z 431.2 (MH).
【０１４６】
【化２７】
2012500805.tif 000039
【０１４７】
３−（６−モルホリノ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
白色固体。1H
NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ,
ppm: 9.19 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 4.72-4.58 (m, 1H),
4.19 (dd, 2H), 3.91-3.87 (m, 4H), 3.79-3.75 (m, 4H), 3.60 (app t, 2H),
2.99-2.78 (m, 2H), 1.83 (br d, 2H); MS (EI) m/z 447.1 (MH) +.
【０１４８】
【化２８】
2012500805.tif 000040
【０１４９】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体（ＴＦＡ塩）。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.17 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.37 (d, 1H),
4.85-4.64 (m, 1H), 4.78-4.53 (m, 3H), 4.23-4.17 (m, 4H), 3.62 (appt, 2H),
2.88-2.76 (m, 2H), 1.83 (br d, 2H); MS (EI) m/z 442.1 (MH)+.
【０１５０】
【化２９】
2012500805.tif 000041
【０１５１】
３−（９（（１Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−１−イル）−６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
前述のプリノンの合成は、第１のステップが、（１Ｒ，４Ｒ）−４−（２，５−ジアミノ−６−クロロピリミジン−４−イルアミノ）−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−１−オールを得るための２，５−ジアミニオ（ｄｉａｍｉｎｉｏ）−４，６−ジクロロピリミジンと（１Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−１−オール）との反応を要するという修正を加えた経路Ａに提示されている反応シーケンスに従って遂行される。アルコールに適した保護を使用すべきである。次いで、後続の反応シーケンスを提示されている通りに行って、アルコールの脱保護後、所望生成物を得る。
【０１５２】
【化３０】
2012500805.tif 000042
【０１５３】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体（ＨＣｌ塩）。収率５７％。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 10.07 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 4.79
(app t, 4H), 4.65-4.60 (m, 1H), 4.23-4.17 (m, 2H), 3.63 (appt, 2H), 2.85-2.78
(m, 2H), 1.86 (br d, 2H); MS (EI) m/z 462.1 (MH)+.
【０１５４】
【化３１】
2012500805.tif 000043
【０１５５】
６−（アゼチジン−１−イル）−２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体（ＴＦＡ塩）。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.07 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.35 (d, 1H),
4.65-4.60 (m, 1H), 4.43 (app t, 4H), 4.23-4.17 (m, 2H), 3.62 (appt, 2H),
2.85-2.78 (m, 2H), 2.68-2.53 (m, 2H), 1.83 (br d, 2H); MS (EI) m/z 426.1 (MH)+.
【０１５６】
【化３２】
2012500805.tif 000044
【０１５７】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル−）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.20 (br s, 1H), 8.40-8.31 (m, 1H), 7.78-7.68 (m, 1H),
7.20-7.15 (m, 1H), 5.46 (d, JH-C-F=52.6 HZ, 1H), 4.67-4.57 (m, 1H),
4.21-3.90 (m, 6H), 3.61 (appt, 2H), 2.84-2.76 (m, 2H), 2.48-2.16 (m, 2H), 1.81
(br d, 2H); MS (EI) m/z 442.1 (MH)+.
【０１５８】
【化３３】
2012500805.tif 000045
【０１５９】
６−（４，４−ジフルオロピペリジン−１−イル）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.34 (s, 1H), 8.31-8.27 (m, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.27-7.20
(m, 1H), 4.67-4.57 (m, 1H), 4.20 (dd, 2H), 3.91 (t, 4H), 3.63 (appt, 2H),
2.91-2.76 (m, 2H), 2.25-2.11 (m, 4H), 1.84 (br d, 2H); MS (EI) m/z 474.0 (MH)+.
【０１６０】
【化３４】
2012500805.tif 000046
【０１６１】
６−（シクロブチルアミノ）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.09 (s, 1H), 8.37-8.33 (m, 1H), 7.75-7.69 (m, 1H), 7.17-7.14
(m, 1H), 4.73-4.67 (m, 1H), 4.64-4.57 (m, 1H), 4.19 (dd, 2H), 3.62 (appt, 2H),
2.87-2.76 (m, 2H), 2.59-2.55 (m, 2H), 2.09-1.81 (m, 6H); MS (EI) m/z 424.2 (MH)+.
【０１６２】
方法３
６−クロロプリノンとハロゲン化有機亜鉛とのクロスカップリング反応の典型的手順
ＴＨＦ（３ｍＬ）を、６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．２ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５当量）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加した。混合物を室温で１０分間撹拌し、次いで、ＴＨＦ中の有機亜鉛試薬の０．５Ｍ溶液（１５当量）を室温で滴下添加した。室温での撹拌を１５分間続け、続いて５０℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却させ、溶媒を真空除去し、アセトニトリルを残留物に添加し、混合物をナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過した。分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を得た。
【０１６３】
【化３５】
2012500805.tif 000047
【０１６４】
６−シクロブチル−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色半固体、ＴＨＦ中の臭化シクロブチル亜鉛の０．５Ｍ溶液を使用して調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.26 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 7.79-7.73 (m, 1H),
7.22-7.16 (m, 1H), 4.73-4.67 (m, 1H), 4.19 (dd, 2H), 3.94-3.82 (m, 1H), 3.63
(appt, 2H), 2.90-2.76 (m, 2H), 2.70-2.57 (m, 2H), 2.53-2.42 (m, 2H), 2.31-2.08
(m, 2H), 1.98-1.83 (m, 2H); MS (EI) m/z 409.1 (MH)+.
【０１６５】
方法４
６−クロロプリノンとアルコールとの置き換え反応の一般的手順
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．１２８ｍｍｏｌ）を乾燥マイクロ波バイアルに仕込んだ。これに、脂肪族または芳香族アルコール（１〜１０当量）、炭酸セシウム（１０当量）およびＤＭＦを添加した。密閉反応管を、２００℃で４時間マイクロ波加熱に供した。反応の完了をＬＣ−ＭＳによって確認した。溶媒を高真空下で除去し、残留物をＭｅＯＨに溶解し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過した。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒蒸発および乾燥後、所望生成物を得た。
【０１６６】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−ピリジン−３−イルオキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
【０１６７】
【化３６】
2012500805.tif 000048
３−ヒドロキシピリジン（１２．２ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ、１当量）を使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.20 (br s, 2H), 8.10 (d, 2H), 7.80 (br m, 2H), 7.45 (br m,
1H), 7.15 (br m, 1H), 4.80-4.63 (m, 1H), 4.18 (dd, 2H), 3.65 (app t, 2H),
2.90-2.72 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 2H); MS (EI) m/z 448.1 (MH)+.
【０１６８】
６−シクロブトキシ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
【０１６９】
【化３７】
2012500805.tif 000049
シクロブタノール（１０μＬ、１．２８ｍｍｏｌ、１０当量）を使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.01 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 7.77 (dd, 1H),
7.16 (td, 1H), 5.54-5.44 (m, 1H), 4.68-4.56 (m, 1H), 4.22 (dd, 2H), 3.62 (appt,
2H), 2.89-2.72 (m, 2H), 2.70-2.58 (m, 2H), 2.40-2.24 (m, 2H), 2.06-1.92 (m,
1H), 1.92-1.80 (m, 3H); MS (EI) m/z 425.1 (MH)+.
【０１７０】
変形形態Ｂ
Ｎ−７アルキル化／メチル化の典型的手順
ＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）中の２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１５ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリスチレン担持ＢＥＭＰ（２−ｔｅｒｔ．ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（Ｆｌｕｋａ、２．２ｍｍｏｌ／ｇ充填）（４当量）、続いてヨウ化アルキル／ヨードメタン（６当量）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合の完了をＨＰＬＣおよびＭＳによって確認した。反応混合物を濾過し、樹脂をＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ×２）およびＭｅＯＨ（５ｍＬ×２）で洗浄した。洗浄液と濾液とを合わせ、真空濃縮して、所望化合物を得た。
【０１７１】
【化３８】
2012500805.tif 000050
【０１７２】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−７−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。1H
NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ,
ppm: 9.22 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.73 (br d, 1H), 7.37 (br d, 1H), 4.79 (app t,
4H), 4.65-4.60 (m, 1H), 4.23-4.13 (m, 2H), 3.65 (appt, 2H), 3.57 (s, 3H),
2.85-2.78 (m, 2H), 1.82 (br d, 2H); MS (EI) m/z 476.2 (MH)+.
【０１７３】
【化３９】
2012500805.tif 000051
【０１７４】
２−（ベンジルチオ）−６−クロロ−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン
ＴＨＦ（６０ｍＬ）およびＤＩＥＡ（９．９ｍＬ、７．３６ｇ、５７ｍｍｏｌ、２当量）中の２−（ベンジルチオ）−４，６−ジクロロ−５−ニトロピリミジン（ＷＯ０１／５８９０６Ａ１）（９ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４−アミノテトラヒドロピラン（２．７７ｇ、２７．４ｍｍｏｌ、０．９６当量）の溶液を１５分間かけて滴下添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、溶媒を真空除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、４／１  ヘキサン／酢酸エチルでの溶離）によって精製して、蒸発および乾燥後、所望生成物を黄色固体（７．５９ｇ、７０％収率）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.86 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.36-7.27 (m,
3H), 4.38 (s, 2H), 4.31-4.20 (m, 1H), 3.96 (dt, J=11.7, 3.5 Hz, 2H), 3.47 (ddd,
J=11.7, 11.3, 2.2 Hz, 2H), 1.92 (br dd, J=12.4, 2.2 Hz, 2H), 1.66-1.52 (m, 2H).
【０１７５】
２−（ベンジルチオ）−６−クロロ−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンとハロゲン化有機亜鉛とのクロスカップリング反応の一般的手順
Ａｒ下のオーブン乾燥したフラスコ中、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１５２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、０．０５当量）を、ＴＨＦ（２６ｍＬ）中の２−（ベンジルチオ）−６−クロロ−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン（ａ−ｍｉｎｅ）（１ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に添加した。混合物をＡｒ下で１０分間撹拌し、次いで、これを０℃に冷却し、ハロゲン化有機亜鉛試薬（ＴＨＦ中０．５Ｍ溶液、１．５当量）を、Ａｒ下３０分間以内で滴下添加した。次いで、反応混合物を室温まで加温し、その後５０℃に３日間加熱した。反応が完了したら、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に注ぎ入れた。酢酸エチル（３×１００ｍＬ）への抽出、合わせた有機層のブライン（１×１００ｍＬ）での洗浄、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）および溶媒真空除去により褐色残留物を得、これをカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望生成物を得た。
【０１７６】
２−（ベンジルチオ）−６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン
黄色固体。０．８１ｇ、６８％収率。２−クロロフェニル亜鉛ヨージド、ＴＨＦ中０．５Ｍ（７．９ｍＬ、３．９５ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して合成した。カラムクロマトグラフィー精製：シリカゲル、６／１  ヘキサン／酢酸エチルでの溶離。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 8.20 (br d, 1H), 7.42-7.27 (m, 9H), 4.41 (s, 2H), 4.41-4.32
(m, 1H, 4.41 ppmと重複), 4.02-3.94 (m, 2H), 3.55-3.47 (m,
2H), 1.99-1.94 (m, 2H), 1.64-1.56 (m, 2H); MS (EI) m/z 457.1 (MH)+.
【０１７７】
４−（２−（ベンジルチオ）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリル
０．３９ｇ、３３％収率。４−シアノフェニル亜鉛ブロミド、ＴＨＦ中０．５Ｍ（８ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して合成した。カラムクロマトグラフィー精製：シリカゲル、９／１〜４／１  ヘキサン／酢酸エチルでの段階的溶離。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.88 (br d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.41-7.27 (m,
5H), 4.41 (s, 2H), 4.41-4.32 (m, 1H, 4.41 ppmと重複),
4.02-3.96 (m, 2H), 3.55-3.46 (m, 2H), 1.99-1.94 (m, 2H), 1.64-1.55 (m, 2H); MS
(EI) m/z 448.1 (MH)+.
【０１７８】
２−（ベンジルチオ）−６−置換−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンの２−（ベンジルスルホニル）−６−置換−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンへの酸化の一般的手順
塩化メチレン（２０ｍＬ）中のｍＣＰＢＡ（４．１１ｍｍｏｌ、２．３当量）の溶液を、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、Ａｒ下、０℃の５０ｍＬの無水塩化メチレン中の２−（ベンジルチオ）−６−置換−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン（１．７８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に滴下添加した。次いで、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応が完了したら、混合物をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（６×１００ｍＬ）で繰り返し洗浄し、有機層を水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去した。
【０１７９】
２−（ベンジルスルホニル）−６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン
橙色固体。０．８７ｇ、定量的収率。２−（ベンジルチオ）−６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.92 (br d, 1H), 7.50-7.27 (m, 9H), 4.74 (s, 2H), 4.51-4.41
(m, 1H), 4.02-3.98 (m, 2H), 3.61-3.52 (m, 2H), 2.07-2.01 (m, 2H), 1.71-1.57 (m,
2H); MS (EI) m/z 489.2 (MH)+.
【０１８０】
４−（２−（ベンジルスルホニル）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリル
定量的収率。４−（２−（ベンジルチオ）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリルから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.96 (br d, 1H), 7.78 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.47-7.28 (m,
5H), 4.75 (s, 2H), 4.51-4.41 (m, 1H), 4.04-3.98 (m, 2H), 3.61-3.55 (m, 2H),
2.04-2.00 (m, 2H), 1.71-1.57 (m, 2H); MS (EI) m/z 480.2 (MH)+.
【０１８１】
２−（ベンジルスルホニル）−６−置換−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンのアンモニアでの置き換えの一般的手順
０℃の８０ｍＬ無水塩化メチレン中の２−（ベンジルスルホニル）−６−置換−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン（１．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液４ｍＬを滴下添加した。反応が完了したら（５〜１０分間）、溶媒を真空除去した。残留物を酢酸エチル／エチルエーテル  １００ｍＬ／１００ｍＬに溶かし、塩化アンモニウムの飽和水溶液（２×１００ｍＬ）、続いて炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、次いで真空濃縮した。
【０１８２】
６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン
淡黄色固体。０．４８ｇ、８７％収率。２−（ベンジルスルホニル）−６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 7.52-7.29 (m, 4H), 4.51-4.41 (m, 1H), 4.04-3.90
(m, 2H), 3.78-3.52 (m, 2H), 2.07-2.01 (m, 2H), 1.71-1.64 (m, 2H); MS (EI) m/z
350.3 (MH)+.
【０１８３】
４−（２−アミノ−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリル
淡黄色固体。７５％収率。４−（２−（ベンジルスルホニル）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリルから合成した。MS (EI) m/z 341.2 (MH)+.
【０１８４】
６−置換−５−ニトロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの還元の一般的手順
６−置換−５−ニトロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（１．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）に、酢酸エチル（７５ｍＬ）、続いてＰｔ触媒、０．５％硫黄、活性炭上５％（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）（３０４ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ、０．０５当量）を、水素（３５ｐｓｉ）下室温で６時間撹拌しながら添加した（ＨＰＬＣモニタリング）。セライトの小型プラグ上での反応混合物の濾過、酢酸エチルおよびメタノールでの徹底的な洗浄、溶媒の蒸発および残留物のカラムクロマトグラフィーにより、所望生成物を得た。
【０１８５】
６−（２−クロロフェニル）−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン
黄色固体。８４％変換に基づき０．２６ｇ、６３％収率。６−（２−クロロフェニル）−５−ニトロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンから合成した。シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー、９／１  塩化メチレン／酢酸エチルから４／１  塩化メチレン／酢酸エチルに最大１０％のメタノールを加えたものでの溶離。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 7.52-7.42 (m, 1H), 7.35-7.27 (m, 3H), 4.21-4.10 (m, 1H), 3.93-3.77
(m, 2H), 3.51-3.42 (m, 2H), 1.97-1.91 (m, 2H), 1.55-1.50 (m, 2H); MS (EI) m/z
320.2 (MH)+.
【０１８６】
６−置換−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミンからのプリノンの選択的形成の一般的手順
９０ｍＬの無水ＴＨＦ中の６−置換−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、Ａｒ下−７８℃の、ＴＨＦ中のホスゲンの溶液（トルエン中のホスゲンの２０％溶液０．５ｍＬ、０．９５ｍｍｏｌ、１．９当量、１０ｍＬの無水ＴＨＦで希釈したもの）に、３０分間かけて滴下添加した。反応混合物を室温まで次第に加温させ、次いで室温で３０分間撹拌した。これを空気で３０分間パージした。次いで溶媒を真空除去し、残留物を酢酸エチル／飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に溶かした。層を分離し、水層を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をまとめ、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去した。クロマトグラフィー精製により、所望生成物を得た。
【０１８７】
２−アミノ−６−（２−クロロフェニル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。１５０ｍｇ、８７％収率。６−（２−クロロフェニル）−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミンから合成した。シリカゲル上での分取ＴＬＣ精製、塩化メチレン中３％のメタノールでの溶離。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 7.57-7.41 (m, 4H), 4.58-4.47 (m, 1H), 4.15
(ddd, 2H), 3.58 (appt, J=11.7 Hz, 2H), 2.82 (ddd, 2H), 1.74 (br d, J=10.6 Hz,
2H); MS (EI) m/z 346.3 (MH)+.
【０１８８】
４−（２−アミノ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリル
４−（２，５−ジアミノ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−イル）ベンゾニトリルから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.98 (d, 2H), 7.82 (d, 2H), 7.42 (br d, 1H), 4.58-4.47 (m,
1H), 4.18-4.09 (m, 2H), 3.56 (app t, 2H), 2.93 (br s, 2H), 2.88-2.70 (m, 2H),
1.78-1.67 (m, 2H); MS (EI) m/z 337.3 (MH)+.
【０１８９】
ブッフバルト・ハートウィッグパラジウム触媒Ｃ−Ｎクロスカップリングの一般的手順
オーブン乾燥したバイアルに、２−アミノ−６−置換−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．２９ｍｍｏｌ、１当量）、新たに磨砕した炭酸セシウム（１３２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、１．４当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２０ｍｇ、０．００３ｍｍｏｌ、０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（２７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ、０．１５当量）および１−ブロモ−５−フルオロ−２−ニトロベンゼン（８３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、１．３当量）、続いて無水トルエン（２ｍＬ）を投入した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、８０℃で３日間加熱した。反応混合物を室温で終夜静置させ、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）に注ぎ入れた。この混合物に、飽和Ｎａ２ＥＤＴＡ水溶液（１０ｍＬ）を添加し、混合物を１０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、収集した有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空蒸発させた。残留物のシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー、４／２／１  ヘキサン／塩化メチレン／酢酸エチル中１％のメタノールでの溶離により、蒸発および乾燥後、所望生成物を得た。
【０１９０】
６−（２−クロロフェニル）−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
黄色固体。２２ｍｇ、１６％収率。２−アミノ−６−（２−クロロフェニル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 10.77 (s, 1H), 8.98 (dd, 1H), 8.34 (dd, 1H), 7.99 (s, 1H),
7.69-7.65 (m, 1H), 7.60-7.48 (m, 3H), 6.75-6.68 (m, 1H), 4.66-4.57 (m, 1H),
4.19 (dd, 2H), 3.59 (app t, J=11.7 Hz, 2H), 2.81 (ddd, 2H), 1.81 (br d, J=10.3
Hz, 2H); MS (EI) m/z 485.3 (MH)+.
【０１９１】
４−（２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリル
黄色固体。１５％収率。４−（２−アミノ−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリル（ｂ−ｅｎｚｏｎｉｔｒｉｌｅ）から合成した。MS (EI) m/z 476.2 (MH)+.
【０１９２】
６−置換−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン中のニトロフェニル基の鉄粉による還元の一般的手順
６−置換−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０４５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、氷酢酸（１ｍＬ）、水（２．５ｍＬ）およびエタノール（５ｍＬ）、続いて鉄粉（２６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、得られた混合物を９０℃で１５分間加熱した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応混合物を室温まで冷却させ、濃水酸化アンモニウム溶液を添加してｐＨを塩基性にし、混合物を１０分間撹拌した。水層を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去して、所望生成物を得た。この材料をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０１９３】
２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−（２−クロロフェニル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。２１ｍｇ、定量的収率。６−（２−クロロフェニル）−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。MS (EI) m/z 455.3 (MH)+.
【０１９４】
４−（２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリル
定量的収率。４−（２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリルから合成した。MS (EI) m/z 446.3 (MH)+.
【０１９５】
ベンズイミダゾール環を閉じるための一般的手順
粗製の２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−置換−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０４５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、無水メタノール（４ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（０．１ｍＬ）およびメタンスルホン酸（触媒量）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で３時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。分取ＴＬＣ精製（シリカゲル、塩化メチレン中２．５％のメタノールでの溶離）により、溶媒の蒸発および乾燥後、所望生成物を得た。
【０１９６】
６−（２−クロロフェニル）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。２ステップで１２ｍｇ、５７％収率。２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−（２−クロロフェニル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 9.12 (s, 1H), 8.32 (br d, 1H), 7.82-7.71 (m, 3H), 7.62-7.51
(m, 3H), 7.16-7.09 (m, 1H), 4.72-4.64 (m, 1H), 4.24-4.21 (m, 2H), 3.61 (app t,
J=11.7 Hz, 2H), 2.87-2.79 (m, 2H), 1.88 (br d, J=11.4 Hz, 2H); MS (EI) m/z
465.2 (MH)+.
【０１９７】
４−（２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリル
２ステップで１１％収率。４−（２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ベンゾニトリルから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.12 (s, 1H), 8.32 (br d, 1H), 8.18 (d, 2H),
7.93 (d, 2H), 7.85-7.72 (m, 1H), 7.22-7.13 (m, 1H), 4.68-4.62 (m, 1H),
4.27-4.16 (m, 2H), 3.62 (app t, 2H), 2.92-2.77 (m, 2H), 1.86 (br dd, 2H); MS
(EI) m/z 456.2 (MH)+.
【０１９８】
経路Ｃ
【０１９９】
【化４０】
2012500805.tif 000052
【０２００】
２−アミノ−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
無水エタノール（２ｍＬ）および無水１，４−ジオキサン（２ｍＬ）を、２−アミノ−６−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（調製経路Ａを参照、１００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ピリジン−４−ボロン酸（６９ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ３ＰＯ４（１５７ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１２．５ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、０．０５当量）およびＤ−ｔＢＰＦ１，１’−ビス（ジ−ｔブチルホスフィノ）フェロセン（８．８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、０．０５当量）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加し、混合物をマイクロ波オーブン中１５０℃で２．５時間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物をメタノール（２０ｍＬ）で希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を黄色固体（５９．２ｍｇ、５１％収率）ＴＦＡ塩として得た。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 8.92 (d, J=6.4 Hz, 2H), 8.17 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 2H),
4.87-4.55 (m, 1H), 4.10 (dd, J=11.4, 4.3 Hz, 2H), 3.56 (ddd, J=11.3, 6.5, 4.7
Hz, 2H), 2.74 (tdd, J=12.6, 12.5, 4.6 Hz, 2H), 1.77 (dd, J=12.4, 2.4 Hz, 2H); MS
(EI) m/z 313.3 (MH)+.
【０２０１】
２−（５−クロロ−２−ニトロフェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
オーブン乾燥したバイアルに、無水トルエン（１ｍＬ）中の２−アミノ−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（６８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１当量）、次いで新たに磨砕した炭酸セシウム（９９．４ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．４当量）を、Ａｒ下室温で撹拌しながら添加した。２０分後、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（２０．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ、０．１５当量）および１−ブロモ−５−クロロ−２−ニトロベンゼン（ＷＯ０２／０５３５４５Ａ１）（６７．６ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１．３当量）を固体として、続いて無水ＤＭＳＯ（１ｍＬ）を添加した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、マイクロ波オーブン中１７０℃で４５分間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル／塩化メチレンで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。得られた残留物を、分取ＴＬＣ（シリカゲル、塩化メチレン中７．５％のメタノール）を使用して精製して、所望生成物を褐色固体（１１ｍｇ、１１％収率）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.13 (s, 1H), 8.63 (br m, 2H), 8.13 (d, J=8.9
Hz, 1H), 7.83 (br m, 2H), 6.91 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.70-4.50 (m, 1H), 4.10-4.03
(m, 2H), 3.51-3.43 (m, 2H), 2.68-2.65 (m, 2H), 1.71-1.66 (m, 2H); MS (EI) m/z
468.4 (MH)+.
【０２０２】
２−（２−アミノ−５−クロロフェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
２−（５−クロロ−２−ニトロフェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、氷酢酸（０．５ｍＬ）、水（１．２５ｍＬ）およびエタノール（２．５ｍＬ）、続いて鉄粉（８．４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、得られた混合物を９０℃で１５分間加熱した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応混合物を室温まで冷却させ、濃水酸化アンモニウム溶液を添加してｐＨを塩基性にし、混合物を１０分間撹拌した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去して、所望生成物を淡黄色固体（定量的収率）として得た。この材料をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 438.3 (MH)+.
【０２０３】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
粗製の２−（２−アミノ−５−クロロフェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０１５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、無水メタノール（２．５ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（０．５ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（１ｍｇ）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で４時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒の蒸発および乾燥後、所望生成物（２ステップで１．２ｍｇ、１８％収率）を黄色固体として提供した。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.18 (s, 1H), 8.83 (br m, 2H), 8.71 (s, 1H), 8.07 (br m, 2H),
7.76 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J=8.9 Hz, 1H), 4.76-4.72 (m, 1H), 4.26-4.23
(m, 2H), 3.66 (app t, J=11.5 Hz, 2H), 2.90-2.87 (m, 2H), 1.91 (br d, J=12.8 Hz,
2H); MS (EI) m/z 448.3 (MH)+.
【０２０４】
経路Ｃ１
６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンへのアクセスを可能にするための一般的手順の修正形態
【０２０５】
【化４１】
2012500805.tif 000053
【０２０６】
２−（２−（２，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。２−アミノ−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（８６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）および臭化アリールとして市販の１−［２−ブロモ−４−（トリフルオロメトキシ）フェニル−２，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール］（Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ、１．３当量）を使用し、ブッフバルト・ハートウィッグパラジウム触媒Ｃ−Ｎクロスカップリングの一般的手順に準じて合成した。１１ｍｇ（５８％変換に基づき１２％収率）。MS (EI) m/z 566.4 (MH)+.
【０２０７】
２−（２−アミノ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
２−（２−（２，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０１８ｍｍｏｌ）を、エタノールおよび水（１．６ｍＬ／０．６ｍＬ）の混合物中、２０時間還流しながらヒドロキシルアミン塩酸塩（５当量）と反応させた。反応が完了したら（ＨＰＬＣおよびＭＳによってモニタリング）、溶媒を真空除去し、材料を徹底的に乾燥させ、さらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 488.4 (MH)+.
【０２０８】
６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−２−（６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
黄色油。ＴＦＡ塩。ベンズイミダゾール環を閉じるための一般的手順に準じて、２−（２−アミノ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンから合成した。1H NMR (300 MHz, CD3OD+CDCl3)
δ, ppm: 9.30 (br s, 1H), 9.00-8.85 (br m, 1H), 8.67 (s,
1H), 8.20-8.10 (m, 2H), 7.84-7.67 (m, 1H), 7.40-7.22 (m, 2H), 4.76-4.72 (m,
1H), 4.26-4.13 (m, 2H), 3.62 (app t, 2H), 2.90-2.80 (m, 2H), 1.90 (br d, 2H);
MS (EI) m/z 498.3 (MH)+.
【０２０９】
経路Ｄ
【０２１０】
【化４２】
2012500805.tif 000054
【０２１１】
６−クロロ−８−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン
０．２％（ｖ）氷酢酸を含有するＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（８ｍＬ）を、６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（調製経路Ａ）（４００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）に、続いてオルト酢酸トリエチル（０．８ｍＬ、５．３２ｍｍｏｌ、３．２当量）を添加し、反応混合物を蓋を閉めたバイアル中１６０℃で２日間加熱した。次いで、混合物を水に注ぎ入れ、重炭酸ナトリウムの飽和溶液を使用してｐＨを塩基性にした。塩化メチレンでの複数回抽出、合わせた有機層の水での洗浄、および溶媒の真空蒸発により暗褐色残留物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、４／２／１  ヘキサン／塩化メチレン／酢酸エチル中２％のメタノールから４／２／１  ヘキサン／塩化メチレン／酢酸エチル中３％のメタノールでの段階的溶離）によって精製して、３３０ｍｇ（７５％収率）の所望生成物を淡黄色固体として得た。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 4.67-4.57 (m, 1H), 4.11 (dd, J=11.5, 4.6 Hz, 2H), 3.61 (td,
J=12.0, 1.5 Hz, 2H), 2.91-2.76 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 1.86 (br dd, J=12.5, 2.4
Hz, 2H); MS (EI) m/z 268.1 (MH)+.
【０２１２】
代替手順において、反応は１０個のバイアルを使用し並行して行った。各バイアルに、６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（調製経路Ａ）（４００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（８ｍＬ）、氷酢酸（１６μＬ、０．２％ｖｏｌ）およびオルト酢酸トリエチル（０．８ｍＬ、５．３２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１６０℃で撹拌した。３日後、反応が完了し（ＬＣ−ＭＳによる）、所望生成物MS (EI) m/z 268.1 (MH)+およびアセチル化生成物MS (EI) m/z 310.2 (MH)+を含有する反応混合物を室温に冷却した。次いで、各バイアルに、ＨＣｌの１Ｍ水溶液１ｍＬを１００℃で撹拌しながら添加した。１００℃で１時間後、ＬＣ−ＭＳ分析は、清浄な反応物中に所望生成物のみを示した。室温に冷却すると、白色沈殿物が形成された。真空下での濾過、続いて小分けにしたメタノールでの沈殿物の洗浄により、所望生成物（１０個のバイアルの合わせた収量２．９８ｇ、６８％収率）を白色固体として純粋な形態で提供した。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 6.76 (s, 2H), 4.41 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.33
(s, 3H), 2.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H); MS (EI) m/z 268.1 (MH)+.
【０２１３】
８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン
無水エタノール（４ｍＬ）を、６−クロロ−８−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン（１４０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、ピリジン−４−イル−ボロン酸（９７ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（１０９ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（３０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加し、混合物をマイクロ波オーブン中１５０℃で３０分間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物をメタノール（８ｍＬ）で希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を橙色固体（１６０ｍｇ、９９％収率）として得た。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.09 (d, J=6.6 Hz, 2H), 8.95 (d, J=6.2 Hz, 2H), 4.61-4.52 (m,
1H), 4.11 (dd, J=11.5, 4.5 Hz, 2H), 3.61 (app t, J=11.3 Hz, 2H), 2.96-2.82 (m,
2H), 2.68 (s, 3H), 1.84 (dd, J=12.7, 2.3 Hz, 2H); MS (EI) m/z 311.3 (MH)+.
【０２１４】
Ｎ−（５−クロロ−２−ニトロフェニル）−８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２−Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン
オーブン乾燥したバイアルに、無水トルエン（１ｍＬ）中の８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン（５６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、１当量）、次いで新たに磨砕した炭酸セシウム（８２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．４当量）を、Ａｒ下室温で撹拌しながら添加した。１０分後、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１３．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（１７ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ、０．１５当量）および１−ブロモ−５−クロロ−２−ニトロベンゼン（ＷＯ０２／０５３５４５Ａ１）（５５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１．３当量）を固体として添加した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、マイクロ波オーブン中１７０℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル／塩化メチレンで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。得られた残留物を、分取ＴＬＣ（シリカゲル、塩化メチレン中７．５％のメタノール）を使用して精製して、所望生成物を黄色固体（１８ｍｇ、２１％収率）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.30 (s, 1H), 8.77 (br m, 2H), 8.64 (br m, 2H),
8.26 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.05 (d, J=7.9 Hz, 1H), 4.60-4.56 (m, 1H), 4.26-4.22
(m, 2H), 3.64 (app t, J=11.9 Hz, 2H), 2.94-2.90 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.91 (br
d, J=11.2 Hz, 2H); MS (EI) m/z 466.3 (MH)+.
【０２１５】
５−クロロ−Ｎ１−（８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル）ベンゼン−１，２−ジアミン
Ｎ−（５−クロロ−２−ニトロフェニル）−８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−アミン（１６．３ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、氷酢酸（１ｍＬ）、水（２．５ｍＬ）およびエタノール（５ｍＬ）、続いて鉄粉（２０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、得られた混合物を９０℃で１５分間加熱した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応混合物を室温まで冷却させ、濃水酸化アンモニウム溶液を添加してｐＨを塩基性にし、混合物を１０分間撹拌した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去して、所望生成物を淡黄色固体（定量的収率）として得た。この材料をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 436.4 (MH)+.
【０２１６】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン
粗製の５−クロロ−Ｎ１−（８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル）ベンゼン−１，２−ジアミン（０．０３５ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに、無水メタノール（２．５ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（０．５ｍＬ）およびメタンスルホン酸（触媒量）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で４時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒の蒸発および乾燥後、所望生成物（２ステップで３．５ｍｇ、２２％収率）を黄色油として提供した。ＴＦＡ塩。1H NMR (300 MHz, CD3OD+CDCl3)
δ, ppm: 9.32 (s, 1H), 8.91 (br m, 4H), 8.79 (s, 1H),
7.78 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.76-4.72 (m, 1H), 4.32-4.29
(m, 2H), 3.72 (app t, J=11.7 Hz, 2H), 3.08-3.05 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.02 (br
d, J=10.9 Hz, 2H); MS (EI) m/z 446.3 (MH)+.
【０２１７】
【化４３】
2012500805.tif 000055
【０２１８】
ｔｒａｎｓ−４−（２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−メチル−６−（ピリジン−４−イル）−９Ｈ−プリン−９−イル）シクロヘキサノール
前述のプリンの合成は、第１のステップが、６−クロロ−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミンの代わりにｔｒａｎｓ−４−（２，５−ジアミノ−６−クロロピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキサノールの反応を要するという修正を加えた経路Ｄに提示されている反応シーケンスに従って遂行される。ｔｒａｎｓ−４−（２，５−ジアミノ−６−クロロピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキサノールは、経路Ｊにおいて記載されている通りに調製される。
【０２１９】
経路Ｅ
【０２２０】
【化４４】
2012500805.tif 000056
【０２２１】
（Ｒ）−６−クロロ−Ｎ４−（８−フルオロクロマン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン
２，５−ジアミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１．５ｇ、８．３７ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−アミン塩酸塩（以下の調製を参照）（１．７ｇ、８．３７ｍｍｏｌ、１当量）、重炭酸ナトリウム（２．４６ｇ、２９．３ｍｍｏｌ、３．５当量）および１−ブタノール（３０ｍＬ）を、密閉管中１５０℃で一緒に加熱した。３日後、反応が完了したと思われたとき（ＨＰＬＣによる）、反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１／１  酢酸エチル／塩化メチレンでの溶離）によって精製して、２．０１ｇ（７８％収率）の所望生成物を黄色固体として得た。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 6.97-6.86 (m, 2H), 6.77-6.72 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.25 (m,
2H), 2.10 (m, 2H); MS (EI) m/z 310.1 (MH)+.
【０２２２】
８−フルオロクロマン−４−アミンの合成および光学分割は、ＷＯ２００６／１０８１０３Ａ１において記載されている通りに実施した。
【０２２３】
【化４５】
2012500805.tif 000057
【０２２４】
３−（２−フルオロフェノキシ）プロパン酸（２）
２−フルオロフェノール（１）（１５ｇ）、３−ブロモプロパン酸（２０ｇ）およびＮａＯＨ（１１ｇ）の混合物を、５０ｍＬの水中で還流させた。溶液を室温に冷却し、３Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。得られた沈殿物を濾過によって単離して、９．２７ｇの表題化合物を白色固体として産出した。濾液をＥｔＯＡｃで３回抽出して、２．５ｇの純度の低い化合物（２）を産出した。
【０２２５】
８−フルオロクロマン−４−オン（３）
塩化オキサリル（８．７９ｍＬ）および１滴のＤＭＦを、塩化メチレン（５０ｍＬ）中の３−（２−フルオロフェノキシ）プロパン酸（９．２７ｇ）の氷冷溶液に添加した。溶液を０℃で２時間撹拌し、塩化アルミニウム（７．３９ｇ、５５．４２ｍＭ）を添加し、溶液を室温で１６時間撹拌した。混合物を氷水上に注ぎ、塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機物を０．５Ｍ  ＮａＯＨおよびブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘで溶離）によって精製して、８−フルオロクロマン−４−オン（３）（８．２０ｇ、９８％）を得た。
【０２２６】
８−フルオロクロマン−４−アミン（５）
丸底フラスコに、８−フルオロクロマン−４−オン（８．２ｇ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３．７８ｇ）および酢酸ナトリウム（４．４６ｇ）を投入した。還流冷却器を付加し、フラスコをアルゴンでパージし、乾燥ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）を添加し、混合物を１８時間撹拌還流した。溶液を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機相を乾燥させ、蒸発させて中間体８−フルオロクロマン−４−オンオキシム（４）を得、これを５０ＰＳＩにてＥｔＯＨ中のラネーニッケルで還元して、表題アミン（５）（４．６９ｇ、５７％）を産出した。
【０２２７】
８−フルオロクロマン−４−アミンの分割（ＷＯ２００６／１０８１０３）
【０２２８】
【化４６】
2012500805.tif 000058
無水ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（７５ｍＬ）中の、８−フルオロクロマン−４−アミン（３．４０ｇ）、２−メトキシ酢酸メチル（２．４４ｇ）およびノボザイム４３５（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．６８ｇ）の混合物を、アルゴン下で２時間加熱還流した（このとき、ＨＰＬＣによるアシル化生成物対非アシル化生成物の比率は、１：１であった）。冷却時に形成された固体を濾過によって収集し、ＥｔＯＡｃに溶解した。混合物を濾過して生体触媒を除去し、０．５Ｍ  ＨＣｌで１回洗浄して消え残っているあらゆる（Ｓ）−アミンを除去した。溶媒を蒸発させ、生成物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから再結晶させて、（Ｒ）−Ｎ−（８−フルオロクロマン−４−イル）−２−メトキシアセトアミド（０．７８ｇ）を産出した。反応溶媒および再結晶母液を０．５Ｍ  ＨＣｌで３回洗浄し、濃縮して、追加の（Ｒ）−Ｎ−（８−フルオロクロマン−４−イル）−２−メトキシアセトアミド（０．８３ｇ）を産出した。合わせた酸性水層をＮａＯＨによって塩基性にし、塩化メチレンで抽出して、（Ｓ）−８−フルオロクロマン−４−アミン（５ａ）（１．６ｇ）を産出した。ＥｔＯＨ中８Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）中の（Ｒ）−Ｎ−（８−フルオロクロマン−４−イル）−２−メトキシアセトアミド（０．７８ｇ）の溶液を、４時間加熱還流した。冷却した反応混合物から溶媒を除去し、得られた固体を５０ｍＬの０．５Ｍ  ＮａＯＨに溶かし、ＮａＣｌ（ｓ）で塩析し、塩化メチレンで４回抽出して、（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−アミン（０．４８ｇ（８７％））（５ｂ）を産出した。％ｅｅをキラルＨＰＬＣによって確認した：キラルセルＯＤ−Ｈ（０．４６×２５ｃｍ分析カラム、Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）方法：定組成５％（０．０５％ＴＦＡ／ＥｔＯＨ）９５％（０．０５％ＴＦＡ／Ｈｅｘ）、保持時間＝７．２分（Ｓ）−鏡像異性体、保持時間＝９．２分（Ｒ）−鏡像異性体。
【０２２９】
（Ｒ）−２−アミノ−６−クロロ−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
Ａｒ下−７８℃の９００ｍＬの無水ＴＨＦ中の（Ｒ）−６−クロロ−Ｎ４−（８−フルオロクロマン−４−イル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（０．９ｇ、２．９１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中のホスゲンの溶液（トルエン中のホスゲンの２０％溶液２．６ｍＬ、４．９４ｍｍｏｌ、１．７当量、２６ｍＬの無水ＴＨＦで希釈したもの）を２０分間かけて滴下添加した。反応混合物を１６時間かけて室温まで次第に加温させた。これを空気で３０分間パージした。次いで溶媒を真空除去し、残留物を酢酸エチル／飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に溶かした。層を分離し、水層を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をまとめ、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６／１〜４／１  塩化メチレン／酢酸エチルでの段階的溶離）によって精製して、０．７８ｇ（８０％収率）の所望生成物を淡黄色固体として得た。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 7.13-7.06 (m, 1H), 6.90-6.82 (m, 1H), 6.75-6.72 (m, 1H),
5.92-5.82 (m, 1H), 4.80-4.73 (m, 1H), 4.50-4.42 (m, 1H), 3.20-3.05 (m, 1H),
2.42-2.30 (m, 1H); MS (EI) m/z 336.3 (MH)+.
【０２３０】
（Ｒ）−６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
オーブン乾燥したバイアルに、無水トルエン（２．５ｍＬ）中の（Ｒ）−２−アミノ−６−クロロ−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１５２ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１当量）、続いて新たに磨砕した炭酸セシウム（２０７ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ、１．４当量）を、Ａｒ下室温で撹拌しながら添加した。１０分後、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３０．３ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ、０．１当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（４２ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ、０．１５当量）および１−ブロモ−５−フルオロ−２−ニトロベンゼン（１３０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、１．３当量）を固体として添加した。バイアルをＡｒで３分間パージし、次いで蓋を閉め、８０℃で３日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、次いで飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）に注ぎ入れた。この混合物に、飽和Ｎａ２ＥＤＴＡ水溶液（１０ｍＬ）を添加し、混合物を１０分間撹拌した。次いで、反応混合物を酢酸エチル（４×２０ｍＬ）で抽出し、収集した有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空蒸発させた。残留物のシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（４／２／１  ヘキサン／塩化メチレン／酢酸エチル中１％のメタノールから４／２／１  ヘキサン／塩化メチレン／酢酸エチル中２％のメタノールでの段階的溶離）により、蒸発および乾燥後、所望生成物を橙色固体（７８％変換に基づき７６ｍｇ、４６％収率）として、３３ｍｇの回収された出発材料とともに得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 10.64 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.29-8.16 (m, 2H), 7.02-6.95 (m,
1H), 6.74-6.60 (m, 2H), 5.88-5.82 (m, 1H), 4.66-4.62 (m, 1H), 4.38 (app t,
J=11.0 Hz, 1H), 4.38-4.28 (br m, 1H, 4.38 ppmと重複),
2.96-2.92 (m, 1H), 2.26-2.23 (m, 1H); MS (EI) m/z 475.2 (MH)+.
【０２３１】
（Ｒ）−２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
（Ｒ）−６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（３１０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を含有する丸底フラスコに、氷酢酸（１５ｍＬ）、水（３７．５ｍＬ）およびエタノール（７５ｍＬ）、続いて鉄粉（３７０ｍｇ、６．５ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、得られた混合物を９０℃で１５分間加熱した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応混合物を室温まで冷却させ、濃水酸化アンモニウム溶液（３２ｍＬ）を添加してｐＨを塩基性にし、混合物を１０分間撹拌した。水層を酢酸エチル（５×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を真空除去して、所望生成物を桃色固体（定量的収率）として得た。この材料をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 445.2 (MH)+.
【０２３２】
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
（Ｒ）−２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．６５ｍｍｏｌ）を含有する丸底フラスコに、無水メタノール（４５ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（５ｍＬ）およびメタンスルホン酸（０．１ｍＬ）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で反応が完了するまで撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒の蒸発および乾燥後、所望生成物（２ステップで１８４ｍｇ、６２％収率）を白色固体として提供した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 9.38 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.84-7.79 (m, 1H), 7.64-7.60
(m, 1H), 7.20-7.13 (m, 1H), 7.10-7.03 (m, 1H), 6.79-6.67 (m, 2H), 5.97-5.92 (m,
1H), 4.68-4.62 (m, 1H), 4.51-4.40 (m, 1H), 2.95-2.83 (m, 1H), 2.41-2.36 (m,
1H); MS (EI) m/z 454.9 (MH)+.
【０２３３】
方法１
６−クロロプリノンとアリールボロン酸とのクロスカップリング反応の一般的手順
エタノール（１ｍＬ）を、６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（９．２ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、アリールボロン酸（０．０４ｍｍｏｌ、２当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２．３ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、０．１当量）およびＮａ２ＣＯ３の２Ｍ水溶液（２００μＬ）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加し、混合物をマイクロ波オーブン中１５０℃で３０分間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物をメタノール／塩化メチレンの１／１混合物で希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を得た。
【０２３４】
【化４７】
2012500805.tif 000059
【０２３５】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−６−フェニル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体（４．８ｍｇ、４８％収率）。フェニルボロン酸（５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ、２当量）から調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 10.28 (br s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.14-8.12 (m, 2H), 8.05-7.85
(m, 2H), 7.74-7.72 (m, 3H), 7.28-7.26 (m, 1H), 7.18-7.16 (m, 1H), 6.88-6.84 (m,
2H), 6.14-6.12 (m, 1H), 4.83-4.80 (m, 1H), 4.70-4.50 (m, 1H), 3.21-3.03 (m,
1H), 2.60-2.42 (m, 1H); MS (EI) m/z 497.1 (MH)+.
【０２３６】
方法２
６−クロロプリノンと脂肪族アミンとの置き換え反応の一般的手順
１０ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）の６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンに、０．６ｍＬの１−ブタノール、続いて脂肪族アミン（０．１ｍＬ）を添加し、反応混合物を１１０℃で１〜２時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応が完了したら、混合物を室温に冷却させ、アセトニトリルで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過した。分取ＨＰＬＣ精製により、溶媒蒸発および乾燥後、所望生成物を得た。
【０２３７】
【化４８】
2012500805.tif 000060
【０２３８】
６−（シクロプロピルメチルアミノ）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（−（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体（２．４ｍｇ、２２％収率）。アミノメチルシクロプロパン（０．１ｍＬ）を使用して調製した。反応時間９０分。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.01 (br s, 1H), 7.74-7.68 (m, 2H), 7.16-7.13 (m, 1H),
7.02-6.95 (m, 1H), 6.77-6.69 (m, 2H), 5.88-5.83 (m, 1H), 4.79-4.61 (m, 1H),
4.45-4.38 (m, 1H), 3.50 (d, J=6.9 Hz, 2H), 2.93-2.86 (m, 1H), 2.34-2.30 (m,
1H), 1.29-1.21 (m, 1H), 0.64-0.61 (m, 2H), 0.39-0.36 (m, 2H); MS (EI) m/z 490.1
(MH)+.
【０２３９】
【化４９】
2012500805.tif 000061
【０２４０】
６−（アゼチジン−１−イル）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体、７０％収率。アゼチジンを使用して調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 8.85 (br s, 1H), 7.75-7.67 (m, 2H), 7.13-6.90 (m, 2H),
6.78-6.67 (m, 2H), 5.90-5.84 (m, 1H), 4.73-4.67 (m, 1H), 4.45-4.41 (m, 5H),
3.00-2.95 (m, 1H), 2.63-2.55 (m, 2H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (EI) m/z 476.3 (MH)+.
【０２４１】
【化５０】
2012500805.tif 000062
【０２４２】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体、５６％収率。３−ヒドロキシアゼチジンを使用して調製した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 8.92 (br s, 1H), 7.66-7.60 (m, 2H), 7.09-7.02 (m, 1H),
6.98-6.92 (m, 1H), 6.71-6.60 (m, 2H), 5.83-5.76 (m, 1H), 4.78-4.62 (m, 1H),
4.59-4.52 (m, 3H), 4.40-4.32 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 2H), 2.93-2.82 (m, 1H),
2.29-2.22 (m, 1H); MS (EI) m/z 492.3 (MH)+.
【０２４３】
方法３
６−クロロプリノンとハロゲン化有機亜鉛とのクロスカップリング反応の一般的手順
ＴＨＦ（１．５ｍＬ）を、６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（２０ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（２．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、０．０５当量）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加した。混合物を室温で１０分間撹拌し、次いで、ＴＨＦ中の有機亜鉛試薬の０．５Ｍ溶液（１３２μＬ、０．０６６ｍｍｏｌ、１．５当量）を室温で滴下添加した。室温での撹拌を１５分間続け、続いて６４℃で１〜３日間撹拌した。反応混合物を室温に冷却させ、溶媒を真空除去し、アセトニトリルを残留物に添加し、混合物をナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過した。分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を得た。
【０２４４】
【化５１】
2012500805.tif 000063
【０２４５】
４−（２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−イル）ブタンニトリル
白色固体、１６％収率。ＴＨＦ中の３−シアノプロピル亜鉛ブロミドの０．５Ｍ溶液を使用して調製した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.01 (br s, 1H), 7.89-7.79 (m, 2H), 7.27-7.13 (m, 2H), 6.91
(br m, 2H), 6.08-6.02 (m, 1H), 4.79-4.74 (m, 1H), 4.61-4.54 (m, 1H), 3.20 (t,
J=7.2 Hz, 2H), 3.04-2.97 (m, 1H), 2.77 (t, J=6.93 Hz, 2H), 2.52-2.40 (m, 1H,
2.39 ppmと重複), 2.39 (t, J=7.1 Hz, 2H); MS (EI) m/z 488.1
(MH)+.
【０２４６】
【化５２】
2012500805.tif 000064
【０２４７】
６−ベンジル−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−８−フルオロクロマン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体、４９％収率。ＴＨＦ中の臭化ベンジル亜鉛の０．５Ｍ溶液を使用して調製した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.01 (br s, 1H), 7.67-7.64 (m, 2H), 7.44-7.41 (m, 2H),
7.37-7.32 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 1H), 7.17-7.11 (m, 1H), 7.03-6.97 (m, 1H),
6.77-6.69 (m, 2H), 5.93-5.87 (m, 1H), 4.63-4.57 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 1H),
4.24 (s, 2H), 2.91-2.80 (m, 1H), 2.39-2.33 (m, 1H); MS (EI) m/z 511.1 (MH)+.
【０２４８】
経路Ｆ
【０２４９】
【化５３】
2012500805.tif 000065
【０２５０】
２，４−ジクロロ−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン中の４−クロロ置換基のアミンによる選択的置き換えの一般的手順
Ａｒ下−７８℃の２ｍＬ無水ＴＨＦ中の２００ｍｇの２，４−ジクロロ−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン（ＳＰＥＣＳ）（０．７４ｍｍｏｌ）に、２ｍＬのＴＨＦ中のアミン（０．７４ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２８４μＭ、２１０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、２．２当量）の溶液を滴下添加した。反応混合物を−７８℃で２時間撹拌し、次いで、これを室温まで加温させ、周囲温度にて追加で２時間撹拌した（ＴＬＣモニタリング）。溶媒を真空除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望生成物を得た。
【０２５１】
２−クロロ−５−ニトロ−６−フェニル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン
淡黄色固体。１０４ｍｇ、４２％収率。４−アミノテトラヒドロピランを使用して合成した。シリカゲル上での精製、５／１  ヘキサン／酢酸エチルでの溶離。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 7.41-7.32 (m, 5H), 4.35-4.29 (m, 1H), 4.02-3.92
(m, 2H), 3.51 (br t, 2H), 2.01-1.94 (m, 2H), 1.66-1.56 (m, 2H).
【０２５２】
（Ｒ）−２−クロロ−Ｎ−（６−フルオロクロマン−４−イル）−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン−４−アミン
５２％収率。（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−アミンを使用して合成した。シリカゲル上での精製、７／３  ヘキサン／酢酸エチルでの溶離。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 7.62-7.43 (m, 6H), 7.01-6.93 (m, 2H), 6.88-6.82 (m, 1H),
5.61-5.53 (m, 1H), 4.37-4.28 (m, 1H), 4.26-4.17 (m, 1H), 2.45-2.33 (m, 1H),
2.22-2.13 (m, 1H); MS (EI) m/z 400.9 (MH)+.
【０２５３】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−５−ニトロ−６−フェニル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミン
５ｍＬのＴＨＦ中の１００ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）の２−クロロ−５−ニトロ−６−フェニル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンに、炭酸カリウム（２１３ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、５．１当量）、続いてベンズイミダゾール（１０６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、反応混合物を７０℃で撹拌した。２．５時間後、加熱を中断し、反応混合物を７０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、乾燥させた（無水ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、４／１  ヘキサン／酢酸エチルでの溶離）によって精製して、所望生成物（４８ｍｇ、３８％収率）を得た。LC-MS: tR=7.35分, MS (EI) m/z
417.2 (MH)+.
【０２５４】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−イル）−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン−４−アミン
（Ｒ）−２−クロロ−Ｎ−（６−フルオロクロマン−４−イル）−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン−４−アミンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 9.05 (s, 1H), 8.48-8.42 (m, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87-7.82 (m,
1H), 7.67-7.61 (m, 2H), 7.58-7.48 (m, 3H), 7.42-7.35 (m, 2H), 7.05-6.93 (m,
2H), 6.92-6.85 (m, 1H), 5.68-5.59 (m, 1H), 4.42-4.31 (m, 1H), 4.30-4.19 (m,
1H), 2.51-2.41 (m, 1H), 2.40-2.29 (m, 1H).
【０２５５】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−フェニル−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４，５−ジアミン
１０ｍＬのＴＨＦ中の４８ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）の２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−５−ニトロ−６−フェニル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン−４−アミンに、３０ｍＬの水中の３００ｍｇのＮａ２Ｓ２Ｏ４および１００ｍｇのＮａＨＣＯ３の溶液、続いて２ｍＬのメタノールを添加した。反応混合物を室温で撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。反応が完了したら、混合物を７０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（無水ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去して３０ｍｇ（６８％収率）の所望生成物を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 387.4 (MH)+.
【０２５６】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−Ｎ４−（（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−イル）−６−フェニルピリミジン−４，５−ジアミン
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−Ｎ−（（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−イル）−５−ニトロ−６−フェニルピリミジン（ｐｈｅｎ−ｙｌｐｙｒｉｍｉｄｉｎ）−４−アミンから合成した。MS (EI) m/z 453.3 (MH)+.
【０２５７】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−フェニル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
３ｍＬのＴＨＦ中の３０ｍｇ（０．０７８ｍｍｏｌ）の粗製の２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−フェニル−Ｎ４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリミジン（ｐ−ｙｒｉｍｉｄｉｎｅ）−４，５−ジアミンに、ＣＤＩ（３８ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、反応混合物を５０℃で１８時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残留物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、塩化メチレン中５％のメタノール）によって精製して、所望生成物（９．５ｍｇ、３０％収率）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 9.16 (br s, 1H), 8.68 (d, 1H), 8.06 (br m, 2H), 7.90 (d, 1H),
7.71-7.62 (m, 3H), 7.52-7.33 (m, 3H), 4.82-4.68 (m, 1H), 4.31-4.20 (m, 2H),
3.64 (app t, 2H), 3.01-2.82 (m, 2H), 1.89 (br d, 2H); MS (EI) m/z 413.2 (MH)+.
【０２５８】
【化５４】
2012500805.tif 000066
【０２５９】
２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−イル）−６−フェニル−７−Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
２６％収率。２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−Ｎ４−（（Ｒ）−６−フルオロクロマン−４−イル）−６−フェニル−ピリミジン−４，５−ジアミンから合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 10.72 (br s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.18-8.04 (m, 3H), 7.82-7.77
(m, 1H), 7.63-7.54 (m, 3H), 7.36-7.28 (m, 2H), 7.08-7.01 (m, 1H), 6.97-6.88 (m,
1H), 6.72-6.68 (m, 1H), 6.00-5.92 (m, 1H), 4.63-4.56 (m, 1H), 4.36 (td, 1H),
3.05-2.90 (m, 1H), 2.40-2.26 (m, 1H); MS (EI) m/z 479.1 (MH)+.
【０２６０】
経路Ｇ
【０２６１】
【化５５】
2012500805.tif 000067
【０２６２】
エチル２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−フルオロフェニルアミノ）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート
乾燥ジオキサン（３０ｍＬ）中のエチル２，６−ジクロロ−５−ニトロピリミジン−４−カルボキシレート（２．０ｇ、７．５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．９ｍＬ、２２．５ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加した。この溶液に、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−アミン塩酸塩（１．０４ｇ、７．５ｍｍｏｌ）をアリコートで添加し、反応混合物を室温にゆっくり加温し、３０分間撹拌した。これを０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．９ｍＬ、２２．５ｍｍｏｌ）、続いてｔｅｒｔ−ブチル−２−アミノ−４−フルオロフェニルカルバメート（１．６ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を滴下添加し、得られた混合物を６０℃に６時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、真空濃縮した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル中の酢酸エチルでの勾配溶離）を使用して精製して、所望生成物を黄色固体として得た。収率：５３０ｍｇ、１４％。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 9.91 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.59 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.61 (d,
J=7.7 Hz, 1H), 7.53 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.05 (m, 1H), 4.36 (q, J=7.1 Hz, 2H),
4.10 (m, 1H), 3.87 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.28 (t, J=12.2 Hz, 2H), 1.81-1.67 (m,
4H), 1.45 (s, 9H), 1.30 (t, J=7.0 Hz, 3H); LCMS (EI) m/z 521 (MH)+.
【０２６３】
エチル２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル−アミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート
エチル２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−フルオロフェニルアミノ）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート（５３０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン中のＴＦＡの３０％（ｖ）溶液で、室温にて撹拌しながら処理した。ＴＬＣモニタリングは、３時間で反応が完了したことを示した。溶媒を蒸発させ、残留物をメタノール中のオルトギ酸トリメチルの溶液（１：１（ｖ）、２０ｍＬ）で処理した。室温で１２時間撹拌後、橙色固体が形成された。橙色固体を濾過し、乾燥させて、所望生成物（３１０ｍｇ、７２％収率）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 9.11 (s, 1H), 8.85 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.08 (d, J=2.5 Hz, 1H),
7.84 (m, 1H), 7.33-7.27 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.60 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.96 (d,
J=11.0 Hz, 2H), 3.54 (t, J=7.3 Hz, 2H), 1.90-1.80 (m, 4H), 1.34 (t, J=7.1 Hz,
3H); LCMS (EI) m/z 431 (MH)+.
【０２６４】
エチル５−アミノ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル−アミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート
エチル２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−５−ニトロ−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル−アミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート（３１０ｍｇ、０．７１７ｍｍｏｌ）の水素化を、水素陽圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）を使用してエタノール中で実施した。１０時間後、触媒を濾過し、小分けにした塩化メチレンで洗浄し、合わせた濾液を濃縮して、所望のアミンを白色固体（２２０ｍｇ、７８％収率）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 8.97 (s, 1H), 8.47 (dd, J=2.6, 2.2 Hz, 1H), 7.74 (m, 1H),
7.60 (d, J=8.9 Hz, 2H), 7.16 (m, 1H), 6.74 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.37-4.32 (m,
3H), 3.94 (d, J=10.4 Hz, 2H), 3.55 (t, J=10.4 Hz, 2H), 2.01 (m, 2H), 1.58 (m,
2H), 1.42 (t, J = 7.1 Hz, 3H); LCMS (EI) m/z 401 (MH)+.
【０２６５】
エチル２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−カルボキシレート
乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のエチル５−アミノ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル−アミノ）ピリミジン−４−カルボキシレート（８００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、カルボニルジイミダゾール（２．０ｇ）を添加し、混合物を密閉管中６０℃で４８時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、水（２５ｍＬ）を残留物に添加した。濾過および白色固体の乾燥により、６００ｍｇ（５１％収率）の所望生成物を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 11.89 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.84 (dd, J=2.8, 2.4 Hz, 1H),
7.78 (dd, J=5.2, 5.2 Hz, 1H), 7.23 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.49 (q, J=6.8 Hz,
2H), 4.40 (dd, J=4.0, 3.0 Hz, 2H), 3.51 (t, J=11.6 Hz, 2H), 2.52 (m, 2H), 1.80
(d, J=2 Hz, 2H), 1.41 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (EI) m/z 427 (MH)+.
【０２６６】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−カルボン酸
濃ＨＣｌ水溶液（１５ｍＬ）中のエチル２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−カルボキシレート（６００ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、１００℃で６時間加熱した。混合物を濃縮し、残留物をジエチルエーテルで粉砕した。形成された固体を濾過し、乾燥させて、７をオフホワイトの固体として得た。収率：４１０ｍｇ、７３％。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 11.84 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.47 (dd, J=2.4, 2.4 Hz, 1H),
7.82 (dd, J=5.2, 4.8 Hz, 1H), 7.26 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.04 (q, J=3.6 Hz,
2H), 3.51 (t, J=11.6 Hz, 2H), 2.60-2.54 (m, 2H), 1.80 (d, J=9.8 Hz, 2H); LCMS
(EI) m/z 399 (MH)+.
【０２６７】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−９−（テトラヒドロ（ｔ−ｅｔｒａｈｙｄｒｏ）−２Ｈ−ピラン−４−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）中の２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−８−オキソ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−カルボン酸（２５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（８ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０５２ｍＬ、０．３７ｍｍｏｌ）、続いて酢酸エチル中のトリフェニルホスフィン（０．０５６ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温に到達させ、２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、重炭酸ナトリウムの飽和溶液を残留物に添加した。形成された固体を濾過し、乾燥させて、所望化合物を白色固体として得た。収率：１０ｍｇ、３４％。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm: 11.89 (s, 1H), 8.20 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.82 (dd, J=4.8, 4.8
Hz, 1H), 7.24 (t, J=6.94 Hz, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.03 (t, J=2.2 Hz, 2H), 3.68
(m, 2H), 3.68-3.48 (m, 4H), 2.64-2.55 (m, 2H), 1.79 (d, J=11.6 Hz, 2H), 1.66
(m, 4H), 1.55 (m, 2H); LCMS (EI) m/z 466 (MH)+.
【０２６８】
経路Ｈ
【０２６９】
【化５６】
2012500805.tif 000068
【０２７０】
６−クロロピリミジン−２，４，５−トリアミン塩酸塩は、ＷＯ９４／０７８９２において記載されている通りに調製した。２，５−ジアミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１０．８ｇ、６０．３ｍｍｏｌ）および濃アンモニア水溶液（３０ｍＬ）を、密閉管中１０５℃で１８時間一緒に加熱し、次いで室温に冷却した。水（１０ｍＬ）中の２．３４ｇのＮａＯＨを添加し、低体積に濃縮することによって過剰なアンモニアを揮散させた。希釈ＨＣｌ  ２Ｎ（３５ｍＬ）および水（１０ｍＬ）を添加し、加熱して溶解し、冷却して結晶化させ、次いで濾過して、所望の６−クロロピリミジン−２，４，５−トリアミン塩酸塩（８７％収率）を得た。MS (EI) m/z 160.1 (MH)+.
【０２７１】
２−アミノ−６−クロロ−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
４００ｍＬの無水ＴＨＦ中の２，４，５−トリアミン−６−クロロ−ピリミジン（６ｇ、３７ｍｍｏｌ）の溶液に、１，１−カルボニルジイミダゾール（３７ｇ、２２６ｍｍｏｌ）を固体として小分けにして添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した（ＨＰＬＣおよびＭＳにより反応の完了を確認した）。溶媒を真空除去した。水（３００ｍＬ）を残留物に添加し、混合物を室温で１０分間撹拌した。形成された固体を真空下で濾過し、徹底的に乾燥させて、４．２７ｇ（６１％収率）の所望生成物を鮮赤色固体として得た。MS (EI) m/z 186.1 (MH)+.
【０２７２】
３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）−４−ニトロベンゾニトリル
Ａｒ下のオーブン乾燥したマイクロ波フラスコに、２−アミノ−６−クロロ−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．６４ｇ、３．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）、続いて無水ジオキサン（１０ｍＬ）および無水エタノール（４ｍＬ）を添加し、Ｃｓ２ＣＯ３（Ａｌｄｒｉｃｈ、２．２５ｇ、６．９２ｍｍｏｌ、２当量）、３−ブロモ−４−ニトロ−ベンゾニトリル（１．０２ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．３当量）、キサントホス（Ｓｔｒｅｍ、０．６ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、０．３当量）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（Ｓｔｒｅｍ、０．３２ｇ、０．３５ｍｍｏｌ、０．１当量）をすべて固体として添加し、混合物をＡｒ下室温で３分間撹拌した。フラスコに蓋をし、マイクロ波中１４０℃で１５０分間加熱した（ＬＣ−ＭＳは反応が完了したことを示す）。反応混合物を室温に冷却し、次いで真空濃縮して暗褐色残留物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、段階的溶離３／１  酢酸エチル／ヘキサン、次いで４／１  酢酸エチル／ヘキサンに１％ＭｅＯＨ〜２０％ＭｅＯＨを加えたもの）によって精製して、所望生成物を橙色固体として４６％収率で得た。1H NMR (300 MHz, CD3COOD) δ, ppm: 9.31 (d, 1H), 8.36 (d, 1H), 7.43 (dd, 1H); MS (EI) m/z 332.0
(MH)+.
【０２７３】
４−アミノ−３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリル
３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）−４−ニトロベンゾニトリル（０．４１ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）に、氷酢酸（３０ｍＬ）、水（７５ｍＬ）およびエタノール（１５０ｍＬ）、続いて鉄粉（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．６９ｇ、１２．３ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、反応混合物を９０℃で１５分間撹拌（ＬＣ−ＭＳモニタリング）すると、透明な暗橙色溶液になった。これを室温に冷却し、次いで濃ＮＨ４ＯＨ（５０ｍＬ）を添加してｐＨを１１にした。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。酢酸エチル中へ、次いでＣＨ２Ｃｌ２中の２５％イソプロパノール（総体積２Ｌ）中への繰り返し抽出、合わせた有機抽出物の乾燥および溶媒の真空蒸発により、所望生成物を褐色固体として提供し、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 302.1 (MH)+.
【０２７４】
３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
無水ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の粗製の４−アミノ−３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリル（１．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（１５０ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（５ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（１００ｍｇ）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で３時間撹拌した（ＬＣ−ＭＳモニタリング）。溶媒を真空除去し、残留物を７ｍＬのＤＭＳＯに再溶解し、次いで４０ｍＬの水を添加した。形成された桃色固体を真空下で微細孔のブフナーフィルター漏斗を使用して濾過し、水で洗浄し、真空オーブン中６０℃で乾燥させて、０．２６ｇの所望生成物（２ステップで６７％収率）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.24 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.69
(d, 1H); MS (EI) m/z 312.2 (MH)+.
【０２７５】
光延反応に基づいてプリノンのＮ９位で分散させるための一般的手順
ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）およびＤＭＳＯ（１ｍＬ）中の３−（６−置換−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（０．２４ｍｍｏｌ、１．０当量）、対応するベンジルアルコールまたは第一級脂肪族アルコール（０．４２ｍｍｏｌ、１．７５当量）ならびに樹脂結合ＰＳ−トリフェニルホスフィン（３ｍｍｏｌ／ｇ、１７２ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、２．２当量）の混合物を、ジ−ｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（０．４２ｍｍｏｌ、１．７５当量）で室温にて処理した。混合物を室温で１〜３日間撹拌させた。次いで、反応混合物を濾過し、樹脂を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液および洗浄液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ精製に供して、所望のＮ９−置換プリノンを得た。
【０２７６】
【化５７】
2012500805.tif 000069
【０２７７】
３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（１−（ピリジン−３−イル）エチル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
黄色油（７３％変換に基づき２６％収率）。１−ピリジン−３−イル−エタノールおよび３−（６−クロロ−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリルを使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.27 (s, 1H), 9.20-9.00 (br m, 1H), 8.86 (d, 1H), 8.88-8.77
(m, 1H, 8.86 ppmと重複), 8.68 (s, 1H), 8.13 (br s, 1H),
7.87 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 6.17 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.19 (d, J=7.3 Hz, 3H); MS
(EI) m/z 417.1 (MH)+.
【０２７８】
【化５８】
2012500805.tif 000070
【０２７９】
３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−８−オキソ−９−（１−（ピリジン−３−イル）エチル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
白色半固体。５７％収率。３−（６−クロロ−８−オキソ−９−（１−（ピリジン−３−イル）エチル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（１９ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）および３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（３当量）から、６−クロロプリノンと脂肪族アミンとの置き換え反応の一般的手順に準じて合成した。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ, ppm: 9.27 (s, 1H), 9.20-9.00 (br m, 1H), 8.78 (d, 1H), 8.88-8.77
(m, 1H, 8.78 ppmと重複), 8.63 (s, 1H), 8.09 (br s, 1H),
7.88 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 6.13 (q, J=7.1 Hz, 1H), 4.78 (t, 4H), 2.16 (d,
J=7.1 Hz, 3H); MS (EI) m/z 474.0 (MH)+.
【０２８０】
【化５９】
2012500805.tif 000071
【０２８１】
３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−８−オキソ−９−（（テトラヒドロフラン−３−イル）メチル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
白色固体。１８％収率。３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（０．１２ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロ−３−フラン−メタノールから、光延反応に基づいてプリノンのＮ９位で分散させるための一般的手順に準じて合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.22 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.67
(d, 1H), 4.76 (t, 4H), 4.10-3.97 (m, 3H), 3.90-3.77 (m, 3H), 3.06-2.93 (m, 1H),
2.22-2.07 (m, 1H), 1.90-1.83 (m, 1H); IR (CHCl3), cm-1:
2979 (w), 1703 (s), 1367 (m), 1167 (m); MS (EI) m/z 453.1 (MH)+.
【０２８２】
経路Ｉ
【０２８３】
【化６０】
2012500805.tif 000072
【０２８４】
６−クロロ−Ｎ４−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン
２，５−ジアミノ−４，６−ジクロロピリミジン（６ｇ、３３．５ｍｍｏｌ）、ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシルアミン（４．３２ｇ、３３．５ｍｍｏｌ、１当量）、重炭酸ナトリウム（９．８５ｇ、１１７．２ｍｍｏｌ、３．５当量）および１−ブタノール（３５０ｍＬ）を、密閉管中１５０℃で一緒に加熱した。３日後、反応が完了したと思われたとき（ＨＰＬＣによる）、反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９６／４  塩化メチレン／メタノールから９０／１０  塩化メチレン／メタノールでの段階的溶離）によって精製して、所望生成物を褐色固体（６９％収率）として得た。MS (EI) m/z 272 (MH)+.
【０２８５】
２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
３００ｍＬの無水ＴＨＦ（オーブン乾燥したガラス製品を使用）中の６−クロロ−Ｎ４−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）ピリミジン−２，４，５−トリアミン（５．５ｇ、２０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、１，１−カルボニルジイミダゾール（新しく開封したボトル、１９．８ｇ、１２２．２ｍｍｏｌ、６当量）を固体として小分けにして添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した（ＨＰＬＣおよびＭＳにより反応の完了を確認した）。溶媒を真空除去した。水（２５０ｍＬ）を残留物に添加し、混合物を室温で１０分間撹拌した。形成された固体を真空下で濾過し、冷水で洗浄し、徹底的に乾燥させて、所望生成物を褐色固体（６７％収率）として得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 298 (MH)+.
【０２８６】
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）−４−ニトロベンゾニトリル
オーブン乾燥した２５０ｍＬの丸底フラスコに、無水トルエン（５０ｍＬ）中の２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（粗製、３．６５ｇ、１２．２８ｍｍｏｌ、１当量）、次いで新たに磨砕した炭酸セシウム（６ｇ、１８．４３ｍｍｏｌ、１．５当量）を、Ａｒ下室温で撹拌しながら添加した。Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．２４ｇ、１．８４ｍｍｏｌ、０．１５当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（２．６７ｇ、４．３ｍｍｏｌ、０．３５当量）および３−ブロモ−４−ニトロ−ベンゾニトリル（３．６ｇ、１５．９６ｍｍｏｌ、１．３当量）をすべて固体として添加した。反応は、アルゴン流下、１００℃で２日間加熱しながら実施した。反応混合物を室温に冷却し、次いで真空濃縮し、得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配溶離ヘキサン中１０％のＥｔＯＡｃ〜ヘキサン中５０％のＥｔＯＡｃ）を使用して精製して、所望生成物を橙色固体（５０％収率）として得た。MS (EI) m/z 444 (MH)+.
【０２８７】
【化６１】
2012500805.tif 000073
【０２８８】
６−クロロ−２−（５−クロロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（（ｔｒａｎｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９）−オン
上記手順を使用して合成した。収率３５％。MS (EI) m/z 453 (MH)+.
【０２８９】
４−アミノ−３−（６−クロロ−９−ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７−Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリル
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル−アミノ）−４−ニトロベンゾニトリル（１．３ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を５００ｍＬの丸底フラスコに仕込んだ。これに、鉄粉（１．６４ｇ、２９．３ｍｍｏｌ、１０当量）、続いてＣＨ３ＣＯＯＨ：Ｈ２Ｏ：ＥｔＯＨ（１：２．５：５の体積比）総体積２２５ｍＬを添加した。次いで、反応混合物を３０分間連続的に撹拌しながら９０℃に加熱した。反応の完了を分析的ＨＰＬＣおよびＭＳ分析によってモニターした（MH+ 414）。反応混合物を室温に冷却した。冷却した溶液に、飽和ＮＨ４ＯＨを、ｐＨが１１〜１２になるまで撹拌しながらゆっくり添加した。次いで、これをＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層を、複数回に分けた２００ｍＬのＥｔＯＡｃで、水層にいかなる所望化合物もなくなるまで（ＨＰＬＣによる）抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して薄褐色固体（８２％収率）を得、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 414 (MH)+.
【０２９０】
【化６２】
2012500805.tif 000074
【０２９１】
２−（２−アミノ−５−クロロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（（ｔｒａｎｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
上記手順を使用して合成した。MS (EI) m/z 423 (MH)+.
【０２９２】
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
２５ｍＬの無水メタノール中の４−アミノ−３−（６−クロロ−９−ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イルアミノ）ベンゾニトリル（１．０ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）の溶液に、オルトギ酸トリメチル（１ｍＬ、１０．８９ｍｍｏｌ、４．５当量）、続いて８〜１０滴のメタンスルホン酸を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応の完了をＨＰＬＣおよびＭＳによって確認した。反応混合物を高真空下で濃縮して、暗褐色固体（９７％粗収率）を得た。５０ｍｇの試料の分取ＨＰＬＣ精製により、純粋な所望化合物を２０％収率で得た。1H MR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.22 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.72
(dd, 1H), 4.54-4.40 (m, 1H), 3.58-3.40 (m, 1H, 3.51 ppmと重複), 3.51 (s, 3H), 2.62-2.44 (m, 2H), 2.37 (br d, 2H), 2.00 (br d,
2H), 1.59-1.41 (m, 2H); MS (EI) m/z 424.0 (MH)+.
【０２９３】
【化６３】
2012500805.tif 000075
【０２９４】
６−クロロ−２−（６−クロロ−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
上記手順を使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ., ppm: 9.03 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.38 (dd, 1H),
4.61-4.38 (m, 1H), 3.58-3.48 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.66-2.45 (m, 2H), 2.33 (br
d, 2H), 1.99 (br d, 2H), 1.52-1.38 (m, 2H); MS (EI) m/z 433.1 (MH)+.
【０２９５】
Ｎ−７アルキル化／メチル化の一般的手順
ＣＨ３ＣＮ（２５ｍＬ）中の３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（１．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリスチレン担持ＢＥＭＰ（２−ｔｅｒｔ．ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（ｄｉａｚａｐｈｏｓｐｈ−ｏｒｉｎｅ）（Ｆｌｕｋａ、２．２ｍｍｏｌ／ｇ充填）（４当量）、続いてヨウ化アルキル／ヨードメタン（６当量）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合の完了をＨＰＬＣおよびＭＳによって確認した。反応混合物を濾過し、樹脂をＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ×２）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ×２）で洗浄した。洗浄液および濾液を合わせ、真空濃縮して、所望化合物を得た。
【０２９６】
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
暗褐色固体（７６％粗収率）。３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル−）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（０．７ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（０．６ｍＬ、１０ｍｍｏｌ、６当量）を使用して合成した。MS (EI) m/z 438 (MH)+.
【０２９７】
【化６４】
2012500805.tif 000076
【０２９８】
６−クロロ−２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（ｔｒａｎｓ）４−メトキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
上記手順を使用して合成した。MS (EI) m/z 447 (MH)+.
【０２９９】
選択的脱メチル化の典型的手順
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
アルゴン流下のオーブン乾燥したフラスコに、クロロホルム中の３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン（ｐ−ｕｒｉｎ）−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（０．５５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）、続いてヨードトリメチルシラン（０．１ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。完了したら（ＨＰＬＣモニタリング）、反応物を水でゆっくりクエンチした。有機層を分離し、水層をＣＨＣｌ３（１５ｍｌ×３）およびＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮して、暗色固体（６６％粗収率）を得た。MS (EI) m/z 424 (MH)+.
【０３００】
【化６５】
2012500805.tif 000077
【０３０１】
６−クロロ−２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（（ｔｒａｎｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７−プリン−８（９Ｈ）−オン
上記手順を使用して合成した。MS (EI) m/z 433 (MH)+.
【０３０２】
６−クロロプリノンと（ヘテロ）アリールボロン酸とのクロスカップリング反応の典型的手順
【０３０３】
【化６６】
2012500805.tif 000078
【０３０４】
３−（９−（（ｔｒａｎｓ−４ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−６−（ピリジン−４−イル）８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２イル）３−Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
エタノール（３ｍＬ）を、３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル（１００ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）、ピリジン−４−ボロン酸ピナコールエステル（９７ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、２当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２７ｍｇ、０．０２３６ｍｍｏｌ、０．１当量）およびＮａ２ＣＯ３の２Ｍ水溶液（２００μＬ）を含有するアルゴンでパージしたバイアルに添加した。混合物をマイクロ波オーブン中１５０℃で３０分間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物をエタノールで希釈し、ナイロン０．４５μｍフィルターに通して濾過し、濾液を真空濃縮した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物（ＴＦＡ塩）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 9.30 (s, 1H), 9.04 (br s, 1H), 9.04-9.00 (br d, 2H, 9.04 ppmと重複), 8.05 (d, 1H), 7.76 (dd, 1H), 7.68 (br d, 2H), 4.74-4.60 (m, 1H),
4.20-4.08 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.84-2.67 (m, 2H), 2.42-2.31 (m, 2H),
2.17-2.04 (m, 2H), 1.82-1.64 (m, 2H), 1.36 (br s, 1H); 構造はnOeおよびFTIRで確認; MS
(EI) m/z 467.1 (MH)+.
【０３０５】
６−クロロプリノン中の塩素のアミンでの置き換えの典型的手順
【０３０６】
【化６７】
2012500805.tif 000079
【０３０７】
２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
６−クロロ−２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル−９−（（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１６６ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を、１−ブタノール（２ｍＬ）、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）およびＤＩＥＡ（２００μＬ）とともにシンチレーションバイアルに仕込んだ。次いで、これに３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（２２０ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ、４．５当量）を添加した。反応混合物を１１０℃で１８時間撹拌した。次いで、溶媒を高真空下で除去した。残留物をＭｅＯＨに溶解し、濾過した。残留物の分取ＨＰＬＣ精製により、蒸発および乾燥後、所望化合物を得た。白色固体（塩無し）。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ, ppm: 8.92 (s, 1H), 8.53 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.34 (dd, 1H), 4.71
(t, 4H), 4.53-4.41 (m, 1H), 4.07-3.93 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.69-2.51 (m, 2H),
2.27-2.15 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 2H, 1.56 ppmと重複), 1.56 (br s, 1H);構造はnOe、NOESYおよびFTIRで確認; MS
(EI) m/z 490.1 (MH)+.
【０３０８】
【化６８】
2012500805.tif 000080
【０３０９】
３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
上記手順を使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ, ppm: 9.15 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.66 (dd, 1H), 4.74
(t, 4H), 4.51-4.39 (m, 1H), 3.98-3.83 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.64-2.46 (m, 2H),
2.24-2.13 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.62-1.46 (m, 2H); 構造はnOeで確認; MS (EI) m/z 481.2 (MH)+.
【０３１０】
【化６９】
2012500805.tif 000081
【０３１１】
３−（６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリル
３−（６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−メトキシシクロヘキシル）−８−オキソ−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−２−イル）−３Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−カルボニトリルから、脱メチル化、続いて６−クロロプリノン中の塩素の３，３−ジフルオロアゼチジンでの置き換えによって合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.12 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.64
(dd, 1H), 4.71 (t, 4H), 4.46-4.32 (m, 1H), 3.98-3.83 (m, 1H), 2.64-2.46 (m,
2H), 2.24-2.15 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.62-1.46 (m, 2H); MS (EI) m/z 467.0
(MH)+.
【０３１２】
経路Ｊ
【０３１３】
【化７０】
2012500805.tif 000082
【０３１４】
ｔｒａｎｓ−４−（２，５−ジアミノ−６−クロロピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキサノール
２，５−ジアミノ−４，６−ジクロロピリミジン（１０．５ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）、ｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキサノール（６．７５ｇ、５８．６ｍｍｏｌ、１当量）、重炭酸ナトリウム（１７．２ｇ、２０５ｍｍｏｌ、３．５当量）および１−ブタノール（２１０ｍＬ）を、密閉管中１５０℃で一緒に加熱した。３日後、反応が完了したと思われたとき（ＬＣＭＳによる）、反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。室温で３０分間撹拌しながら水（１５０ｍＬ）を残留物に添加し、暗赤色固体を真空下で濾過して、乾燥後、１０ｇ（６６％収率）の所望生成物を得た。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 6.14 (d, 1H), 5.57 (s, 2H), 4.54 (d, 1H), 3.90 (s, 2H),
3.81-3.76 (m, 1H), 3.40-3.32 (m, 1H), 1.86-1.82 (m, 4H), 1.28-1.20 (m, 4H); MS
(EI) m/z 258.1 (MH)+.
【０３１５】
ｔｒａｎｓ−４−（２−アミノ−６−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロプリン−９−イル）シクロヘキシル−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート
４３０ｍＬの無水ＴＨＦ（オーブン乾燥したガラス製品を使用）中のｔｒａｎｓ−４−（２，５−ジアミノ−６−クロロピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキサノール（８．７ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）の溶液に、１，１−カルボニルジイミダゾール（新しく開封したボトル、３３ｇ、２０３ｍｍｏｌ）を固体として小分けにして添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した（ＨＰＬＣおよびＭＳにより反応の完了を確認した）。溶媒を真空除去した。水（１Ｌ）を残留物に添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。固体を真空下で濾過した。この手順を２回繰り返し、得られた固体を徹底的に乾燥させて、１０．６ｇ（８３％収率）の所望生成物を淡褐色固体として得た。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ, ppm: 11.3 (br s, 1H), 8.27 (br s, 1H), 7.60 (br s, 1H), 7.08 (br
s, 1H), 6.58 (s, 2H), 4.92-4.84 (m, 1H), 4.22-4.13 (m, 1H), 2.45-2.37 (m, 2H),
2.23-2.20 (m, 2H), 1.84-1.61 (m, 4H); MS (EI) m/z 378.4 (副, MH)+, 266.1 (フラグメント).
【０３１６】
ｔｒａｎｓ−４−（２−アミノ−６−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロプリン−９−イル）シクロヘキシルメチルカーボネート
無水メタノール（４００ｍＬ）中のｔｒａｎｓ−４−（２−アミノ−６−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロプリン−９−イル）シクロヘキシル−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート（１０．６ｇ、２８．１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、炭酸カリウム（１．１ｇ、１０％ｗｔ）を室温で撹拌しながら添加した。１５時間後、ＬＣ−ＭＳにより反応が完了したことが分かった。溶媒を真空除去し、水（１Ｌ）を室温で撹拌しながら添加した。真空下での濾過により、所望生成物を桃色固体（定量的収率）として得た。MS (EI) m/z 342.1 (MH)+.
【０３１７】
２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
ｔｒａｎｓ−４−（２−アミノ−６−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロプリン−９−イル）シクロヘキシルメチルカーボネート（１．４３ｇ）を８０ｍＬの０．５Ｎ  ＫＯＨ水溶液に溶解し、反応混合物を３０分間加熱還流した（ＬＣ−ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した）。次いで、反応混合物を氷浴中で冷却し、ＨＣｌの濃縮水溶液の滴下添加によってそのｐＨを７にした。薄桃色固体が沈殿した。これを真空下で濾過し、真空オーブン中６０℃で徹底的に乾燥させて、所望生成物を８６％収率で得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 8.48 (br s, 1H), 7.73 (s, 2H), 4.26-4.18 (m,
1H), 3.70-3.61 (m, 1H), 2.53-2.40 (m, 2H), 2.10-2.06 (m, 2H), 1.81-1.76 (m,
2H), 1.48-1.37 (m, 2H); MS (EI) m/z 284.1 (MH)+.
【０３１８】
２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンの代替的な１ステップ手順
ｔｒａｎｓ−４−（２−アミノ−６−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロプリン−９−イル）シクロヘキシル−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート（６３．９ｍｍｏｌ）を、０．５Ｎ  ＫＯＨ水溶液（６２０ｍＬ）に、室温で撹拌しながら懸濁させた。懸濁液は次第に暗赤色溶液になった。３０分後、ＬＣ−ＭＳにより反応が完了したことが分かった。ＨＣｌの濃縮水溶液の滴下添加により、反応混合物のｐＨを７にした。薄桃色固体が沈殿した。中和された反応混合物を、室温で１０分間撹拌しながら、水で２Ｌの体積まで希釈した。固体を真空下で濾過し、真空オーブン中６０℃で徹底的に乾燥させて、所望生成物（１７．０８ｇ、９４％収率）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 8.48 (br s, 1H), 7.73 (s, 2H), 4.26-4.18 (m,
1H), 3.70-3.61 (m, 1H), 2.53-2.40 (m, 2H), 2.10-2.06 (m, 2H), 1.81-1.76 (m,
2H), 1.48-1.37 (m, 2H); MS (EI) m/z 284.1 (MH)+.
【０３１９】
６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
すべてのガラス製品を、真空オーブン中６０℃で、反応前１時間乾燥させた。微細に磨砕した炭酸セシウムおよび微細に磨砕した２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンを、高真空下６０℃で、実験前１日間乾燥させた。Ａｒ下のオーブン乾燥した二口フラスコに、２−アミノ−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（６．７８ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１１．７１ｇ、３５．９ｍｍｏｌ、１．５当量）および無水トルエン（１００ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１５分間撹拌した。次いで、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２．４１ｇ、３．５９ｍｍｏｌ、０．１５当量）、ラセミＢＩＮＡＰ（５．２１ｇ、８．３６ｍｍｏｌ、０．３５当量）および１−ブロモ−５−フルオロ−２−ニトロベンゼン（６．８４ｇ、３１．０７ｍｍｏｌ、１．３当量）を固体としてＡｒ下で添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで１００℃で２日間撹拌した（ＬＣ−ＭＳは、所望生成物／出発材料  約８／１の比率を示す）。反応混合物を室温に冷却し、溶媒を真空除去した。暗褐色残留物を温ＣＨ３ＣＯＯＨ／ＥｔＯＨ（６０ｍＬ／６０ｍＬ）に溶解し、次いで水（７００ｍＬ）を添加した。暗黄色固体が沈殿し、真空下で濾過した。少量の暗黄色固体を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン  １／１〜３／１、次いで３／１  酢酸エチル／ヘキサン中最大２０％のメタノールでの勾配溶離）によって精製して、所望化合物を橙色固体として提供した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 10.67 (br s, 1H), 8.80 (dd, 1H), 8.37 (dd, 1H),
6.85-6.80 (m, 1H), 4.39-4.30 (m, 1H), 3.81-3.73 (m, 1H), 2.67-2.44 (m, 2H),
2.18-2.14 (m, 2H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.56-1.41 (m, 2H); MS (EI) m/z 423.3 (MH)+.
【０３２０】
２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
６−クロロ−２−（５−フルオロ−２−ニトロフェニルアミノ）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１３．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＯＯＨ：Ｈ２Ｏ：ＥｔＯＨ（１ｍＬ：２．５ｍＬ：５ｍＬ）に溶解し、鉄粉（１８ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。次いで、反応混合物を１５分間連続的に撹拌しながら９０℃に加熱した。反応の完了を分析的ＨＰＬＣおよびＭＳ分析によってモニターした。反応混合物を室温に冷却した。冷却した溶液に、飽和ＮＨ４ＯＨを、ｐＨが１１〜１２になるまで撹拌しながらゆっくり添加した。次いで、これをＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して白色固体（１２ｍｇ、９６％収率）を得、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 393 (MH)+.
【０３２１】
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
粗製の２−（２−アミノ−５−フルオロフェニルアミノ）−６−クロロ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（１２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに、無水メタノール（３ｍＬ）、続いて無水オルトギ酸トリメチル（０．５ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（触媒的）を添加し、反応混合物をＡｒ下室温で１８時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング）。水中１０％アセトニトリル溶液（総体積１０ｍＬ）を添加し、淡黄色固体が沈殿した。真空下での濾過により、所望生成物を淡黄色固体（１０．６ｍｇ、８８％収率）として提供した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.07 (br s, 1H), 8.30 (br d, 1H), 7.82-7.70 (m,
1H), 7.27-7.15 (m, 1H), 4.48-4.42 (m, 1H), 3.88-3.80 (m, 1H), 2.67-2.50 (m,
2H), 2.33-2.18 (m, 2H), 2.10-1.95 (m, 2H), 1.70-1.56 (m, 2H); MS (EI) m/z 403.1
(MH)+.
【０３２２】
【化７１】
2012500805.tif 000083
【０３２３】
６−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
淡黄色固体。ＴＦＡ塩。６−クロロプリノンと脂肪族アミンとの置き換え反応の一般的手順に準じ、３，３−ジフルオロアゼチジンを使用して合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 9.07 (br s, 1H), 8.42-8.25 (br m, 1H),
7.82-7.70 (m, 1H), 7.15 (br d, 1H), 4.71 (t, 4H), 4.48-4.38 (m, 1H), 3.88-3.80
(m, 1H), 2.67-2.50 (m, 2H), 2.27-2.15 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.62-1.50 (m,
2H); MS (EI) m/z 460.2 (MH)+.
【０３２４】
アルコールのテトラヒドロピラニル化の典型的手順
【０３２５】
【化７２】
2012500805.tif 000084
【０３２６】
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）シクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
ｐ−ＴｓＯＨ（０．１当量）を含有する無水クロロホルム／ＴＨＦ（３０ｍＬ／１５ｍＬ）中の６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシ−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．８ｍｍｏｌ）およびジヒドロピラン（１５当量）の溶液を、５０℃で１日間撹拌した（ＬＣＭＳは完全反応を示している）。反応混合物を真空濃縮し、残留物を中性アルミナ上でのカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望生成物を得た。MS (EI) m/z 487.3 (MH)+.
【０３２７】
Ｎ７−メチル化／アルキル化の典型的手順
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−７−メチル−９−（ｔｒａｎｓ−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）シクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
無水ＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中の６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）シクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリスチレン上のＢＥＭＰ（２．２ｍｍｏｌ／ｇ充填、４当量）およびヨードメタン（アルキル化には第一級ヨウ化アルキル／ヨウ化または臭化ベンジルを使用する）（６当量）を、室温で撹拌しながら添加した。１時間後、ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応混合物を真空下で濾過し、樹脂をＣＨ３ＣＮおよびメタノールで洗浄し、合わせた濾液および洗浄液を真空濃縮して所望生成物を淡黄色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。MS (EI) m/z 501.2 (MH)+.
【０３２８】
テトラヒドロピラニルエーテルの加水分解の典型的手順
６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
エタノール／水（４．５ｍＬ／０．５ｍＬ）中の６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−７−メチル−９−（ｔｒａｎｓ−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）シクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（０．０６ｍｍｏｌ）およびＰＰＴＳ（５ｍｇ）の溶液を、１時間撹拌還流した。溶媒を真空蒸発させ、残留物をクロマトグラフィーによって精製するか、または精製することなく次のステップにおいて使用し得た。MS (EI) m/z 417.0 (MH)+.
【０３２９】
【化７３】
2012500805.tif 000085
【０３３０】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
薄褐色固体。ＴＦＡ塩。６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オンおよびＳ−（＋）−３−フルオロピロリジン塩酸塩から、６−クロロプリノンと脂肪族アミンとの置き換え反応の一般的手順に準じて合成した。1H NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD)
δ, ppm: 8.99 (s, 1H), 8.27 (dd, 1H), 7.74 (dd, 1H),
7.15 (td, 1H), 5.47 (d, J=52.4 Hz, 1H), 4.51-4.42 (m, 1H), 4.19-3.83 (5Hの重複), 3.65 (s, 3H), 2.68-2.42 (3Hの重複),
2.29-2.03 (3Hの重複), 1.97-1.90 (m, 2H), 1.62-1.49 (m,
2H); MS (EI) m/z 470.3 (MH)+.
【０３３１】
【化７４】
2012500805.tif 000086
【０３３２】
６−（アゼチジン−１−イル）−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７−メチル−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
白色固体。1H
NMR (300 MHz, CDCl3+CD3OD) δ,
ppm: 9.05 (s, 1H), 8.32 (br d, 1H), 7.80-7.68 (br m, 1H), 7.20-7.08 (m, 1H),
4.51-4.42 (m, 1H), 4.34 (t, 4H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.68-2.50 (4Hの重複), 2.25-2.11 (m, 2H), 1.97-1.83 (m, 2H), 1.62-1.49 (m, 2H); MS (EI)
m/z 438.3 (MH)+.
【０３３３】
【化７５】
2012500805.tif 000087
【０３３４】
２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−６−ヒドロキシ−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン
撹拌子を含有するオーブン乾燥したバイアルに、Ｐｄ２ｄｂａ３（２ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、０．０２当量）、２−ジ−ｔ−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリ−イソプロピル−１，１’−ジフェニル（Ｓｔｒｅｍ、３．５ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ、０．０８当量）、ＫＯＨ（１７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、３当量）および６−クロロ−２−（６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−１−イル）−９−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシ−イル）−７Ｈ−プリン−８（９Ｈ）−オン（４０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、１当量）、続いて１，４−ジオキサン（０．３ｍＬ）および脱気水（０．３ｍＬ）を投入した。アルゴン気流を反応混合物に３分間通過させ、次いでバイアルの蓋を閉め、１００℃で加熱した。１６時間後、反応は完了したことが分かった。分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーにより、溶媒の蒸発後、所望生成物を白色固体として提供した。1H NMR (300 MHz, CD3OD+CDCl3)
δ, ppm: 9.04 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.80-7.65 (m, 1H),
7.15-7.08 (m, 1H), 4.42-4.30 (m, 1H), 3.84-3.77 (m, 1H), 2.70-2.60 (m, 2H),
2.25-2.11 (m, 2H), 1.97-1.83 (m, 2H), 1.62-1.40 (m, 2H); MS (EI) m/z 385.3 (MH)+.
【０３３５】
Ｊａｋ３キナーゼアッセイ
ヒトＪａｋ３  ｃＤＮＡをＰＣＲによって増幅させた。Ｊａｋ３の触媒ドメイン（５０８ａａ〜１１２４ａａ）をコードする断片を、ＧＳＴと５’末端で連結させた。この融合ＧＳＴ−Ｊａｋ３  ＤＮＡ断片を、ドナープラスミドｐＦａｓｔＢａｃ１（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １０３５９−０１６番）のＥｃｏＲＩ部位にクローン化した。昆虫細胞（Ｓｆ９）の形質転換、転位およびトランスフェクションは、メーカーの（ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ’ｓ）取扱説明書に従って実施した。組換えＧＳＴ−Ｊａｋ３を含有する細胞溶解物をキナーゼアッセイにおいて使用した。抗ＧＳＴ抗体（１０μｇ／ｍｌ、Ｓｉｇｍａ  Ｇ１４１７番）を３８４ウェルプレートに４℃で終夜コーティングした。ＧＳＴ−Ｊａｋ３（１：１００希釈物）を含有する細胞溶解物を抗ＧＳＴコーティングプレートに添加し、固定化抗ＧＳＴ抗体によってＧＳＴ−Ｊａｋ３を捕捉した。試験化合物および基質混合物（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７、０．５ｍＭのＮａ３ＶＯ４、２５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＤＴＴ、０．００５％のＢＳＡ、１μＭのＡＴＰおよび４．５μｇ／ｍｌのビオチニルポリ−Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｔｙｒ）をプレートに添加して、反応を開始させた。６０分間のインキュベーション後、４ｍＭのＥＤＴＡによって反応を停止させ、均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）技術を使用し、１７μｇ／ｍｌのＣｙ５−ストレプトアビジン（Ａｍｅｒｓｈａｍ、ＰＡ９２００５番）および２．７μｇ／ｍｌのユーロピウム結合抗ホスホチロシン抗体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＡＤ００６９番）を使用して、ビオチニルポリ−Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｔｙｒのリン酸化を検出した。
【０３３６】
Ｊａｋ３細胞アッセイ
細胞Ｊａｋ３アッセイには、マウスＦ７プレＢリンパ球細胞株を使用した。ヒトＩＬ−２Ｒβｃ  ｃＤＮＡは、Ｆ７細胞において安定に発現する（Ｋａｗａｈａｒａら、１９９５）。１０％ウシ胎仔血清プラスＩＬ−３を補充したＲＰＭＩ１６４０培地中にＦ７細胞を維持した。無血清培地中の細胞（３０，０００細胞／ウェル）を、細胞増殖アッセイ用の９６ウェルプレートに播種した。試験化合物を細胞に添加し、続いてＩＬ−２（最終２０ｎｇ／ｍｌ）を添加した。２４時間のインキュベーション後、生存細胞数を、セルタイターグロ発光細胞生存アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ７５７３番）によってメーカーの取扱説明書に従い決定した。
【０３３７】
マウスにおけるＩＬ−２誘発性ＩＦＮ−γ生成
ＩＬ−２の投与は、サイトカインのＮＫ分泌により、マウスにおける血清ＩＦＮ−γの増加を招く（Ｔｈｏｒｎｔｏｎ  Ｓ、Ｋｕｈｎ  Ｋ  Ａ、Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ  Ｆ  ＤおよびＨｉｒｓｃｈ  Ｒ．、ＮＫ  ｃｅｌｌｓ  ｓｅｃｒｅｔｅ  ｈｉｇｈ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ＩＦＮ−γ  ｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＩＬ−２、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００１  ３１：３３５５〜３３６０）。実験は、基本的にＴｈｏｒｎｔｏｎらのプロトコールに従って行い、試験化合物を投与して、達した阻害のレベルを決定する。要約すると、雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを試験前に１２〜１８時間絶食させ、但し水は常に自由に摂取できるようにする。ＩＬ−２の腹腔内注射の１時間前に試験化合物を強制飼養によって投与し、抗体を捕捉する。試験の終了時に、二酸化炭素吸入によってマウスを屠殺し、心穿刺によって終末血液試料を収集し、血清を生成する。血清は、ＩＦＮ−γについてアッセイするまで、キットメーカー（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ．ＴＭ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．）によって記載されている通りに冷凍保存する。
【０３３８】
いくつかの比較例を以下に示す。Ｊａｋ３に対するＩＣ５０はすべて１０μＭに満たない。
【０３３９】
Ｃ６置換プリンおよびプリノン
【０３４０】
【表１−１】
2012500805.tif 000088
【０３４１】
【表１−２】
2012500805.tif 000089
【０３４２】
【表１−３】
2012500805.tif 000090
【０３４３】
【表１−４】
2012500805.tif 000091
【０３４４】
【表１−５】
2012500805.tif 000092
【０３４５】
【表１−６】
2012500805.tif 000093
【０３４６】
【表１−７】
2012500805.tif 000094
【０３４７】
【表１−８】
2012500805.tif 000095
【０３４８】
【表１−９】
2012500805.tif 000096
【０３４９】
【表１−１０】
2012500805.tif 000097
【０３５０】
【表１−１１】
2012500805.tif 000098
【０３５１】
【表１−１２】
2012500805.tif 000099
【０３５２】
【表１−１３】
2012500805.tif 000100
【０３５３】
【表１−１４】
2012500805.tif 000101
【０３５４】
【表１−１５】
2012500805.tif 000102
【０３５５】
【表１−１６】
2012500805.tif 000103
【０３５６】
【表１−１７】
2012500805.tif 000104
【０３５７】
【表１−１８】
2012500805.tif 000105
【０３５８】
【表１−１９】
2012500805.tif 000106
【０３５９】
【表１−２０】
2012500805.tif 000107
【０３６０】
【表１−２１】
2012500805.tif 000108
【０３６１】
【表１−２２】
2012500805.tif 000109
【０３６２】
【表１−２３】
2012500805.tif 000110
【０３６３】
【表１−２４】
2012500805.tif 000111
【０３６４】
【表１−２５】
2012500805.tif 000112
【０３６５】
【表１−２６】
2012500805.tif 000113
【０３６６】
【表１−２７】
2012500805.tif 000114
【０３６７】
【表１−２８】
2012500805.tif 000115
【０３６８】
【表１−２９】
2012500805.tif 000116
【０３６９】
【表１−３０】
2012500805.tif 000117
【０３７０】
【表１−３１】
2012500805.tif 000118
【０３７１】
【表１−３２】
2012500805.tif 000119
【０３７２】
【表１−３３】
2012500805.tif 000120
【０３７３】
【表１−３４】
2012500805.tif 000121
【０３７４】
【表１−３５】
2012500805.tif 000122
【０３７５】
【表１−３６】
2012500805.tif 000123
【０３７６】
【表１−３７】
2012500805.tif 000124
【０３７７】
【表１−３８】
2012500805.tif 000125
【０３７８】
【表１−３９】
2012500805.tif 000126
【０３７９】
【表１−４０】
2012500805.tif 000127
【０３８０】
【表１−４１】
2012500805.tif 000128
前述の表において、１００ｎＭ未満のＩＣ５０は１と表現され、１００ｎＭ〜１ｕＭのＩＣ５０は２と表現され、１μＭより大きいＩＣ５０は３と表現される。
【国際調査報告】
2012500805.tif 000137
2012500805.tif 000138
2012500805.tif 000139