(57)【要約】  本発明は、悪性腫瘍を治療するための治療剤として有用であるＩＡＰの新規インヒビターを提供し、ここで、該化合物は一般式Ｉを有し、ここで、Ｘ１、Ｘ２、Ｙ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ６’及びＲ９はここに記載の通りである。
2012500272.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
2012500272.tif 000058
［上式中、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立してＯ又はＳであり；
Ｙは、結合、（ＣＲ７Ｒ７）ｍ、Ｏ又はＳであり；
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４は、それぞれ独立してＮ又はＣＱであり；
Ｑは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここで該アルキル、炭素環及びヘテロ環は、一又は複数のヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、置換されていてもよいアルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；ここで、アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；
Ｒ１はＨ、ＯＨ又はアルキルであり；又はＲ１及びＲ２は共同して５−８員のヘテロ環を形成し；
Ｒ２はアルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環、又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオン、メルカプト、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ、スルホニル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものであり、ここで、該アルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ及びスルホニルは、ヒドロキシ、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アルコキシ、ヒドロキシアルコキシ及びアルコキシアルコキシで置換されていてもよく；
Ｒ３はＨ又は、ハロゲンもしくはヒドロキシルで置換されていてもよいアルキルであり；又はＲ３及びＲ４は共同して３−６員のヘテロ環を形成し；
Ｒ３’はＨであり、又はＲ３及びＲ３’は共同して３−６員の炭素環を形成し；
Ｒ４及びＲ４’は、独立してＨ、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、炭素環、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ又はヘテロシクロアルキルオキシカルボニルであり；ここで、各アルキル、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ及びヘテロシクロアルキルオキシカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルキル、アルコキシ、アミノ、イミノ及びニトロで置換されていてもよく；又はＲ４及びＲ４’は共にヘテロ環を形成し；
Ｒ５はＨ又はアルキルであり；
Ｒ６及びＲ６’はそれぞれ独立して、Ｈ、アルキル、アリール又はアラルキルであり；
Ｒ７は、Ｈ、シアノ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、ニトロ、カルボキシル、アミジノ、グアニジノ、アルキル、炭素環、ヘテロ環又は-Ｕ-Ｖであり；ここで、Ｕは、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-であり、Ｖは、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここで、アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；
Ｒ８は、Ｈ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり、ここで、該アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)又は-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；該アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ(=Ｏ)、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アルキル又はアシルであり；及び
ｍは０から４であり；
但し、化合物は２-[(２Ｒ)-１-[Ｎ-メチル-Ｌ-アラニル-(２Ｓ)-２-シクロヘキシルグリシル]-２-ピロリジニル]-１Ｈ-インドール以外である］
の化合物。
【請求項２】
Ｚ１、Ｚ３及びＺ４がそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ２がＮである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
一の実施態様においてＺ１及びＺ３がそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ２及びＺ４がそれぞれＮである請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｑが、アルキル、炭素環又はヘテロ環で置換されていてもよい炭素環又はヘテロ環であり；ここで、何れのアルキル、炭素環又はヘテロ環もハロゲン、アミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、アルキルチオ、アシルオキシ、アシルオキシアルコキシ、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アルキルスルフィニル、及びアルキルスルフィニルアルキルで置換されていてもよく；ここで、前記の何れのアルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基も-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよい請求項１に記載の化合物。;
【請求項５】
Ｑが、ＩＩＩａ−ＩＩＩｓ：
2012500272.tif 000059
2012500272.tif 000060
からなる群から選択される炭素環又はヘテロ環であり、該式中、ｎは１−４であり；ＴはＯ、Ｓ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７であり；ＷはＯ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が、アルキル、シクロアルキル又はヘテロ環である請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が、ｔ-ブチル、イソプロピル、シクロヘキシル、テトラヒドロピラン-４-イル、Ｎ-メチルスルホニルピペリジン-４-イル、テトラヒドロチオピラン-４-イル、テトラヒドロチオピラン-４-イル(ここで、Ｓは酸化形態ＳＯ又はＳＯ２である)、シクロヘキサン-４-オン、４-ヒドロキシシクロヘキサン、４-ヒドロキシ-４-メチルシクロヘキサン、１-メチル-テトラヒドロピラン-４-イル、２-ヒドロキシプロパ-２-イル、ブタ-２-イル、チオフェン-３-イル、ピペリジン-４-イル、Ｎ-アセチルピペリジン-４-イル、Ｎ-ヒドロキシエチルピペリジン-４-イル、Ｎ-(２-ヒドロキシアセチル)ピペリジン-４-イル、Ｎ-(２-メトキシアセチル)ピペリジン-４-イル、ピリジン-３-イル、フェニル及び１-ヒドロキシエタ-１-イルからなる群から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ３がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４がＨ又はメチルであり、Ｒ４'がＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ５がＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６及びＲ６’が双方ともＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ１及びＸ２が双方ともＯである請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１がＨであり；Ｒ２が、イソプロピル、ｔ-ブチル、シクロヘキシル又はピランであり；Ｒ３がメチルであり；Ｒ3’がＨであり；Ｒ４がメチルであり、Ｒ４'がＨであり；Ｒ５がＨであり；Ｘ１及びＸ２が双方ともＯであり；Ｒ６及びＲ６’が双方ともＨである請求項２に記載の化合物。
【請求項１５】
細胞にアポトーシスを誘導する方法において、請求項１に記載の化合物を前記細胞内に導入することを含む方法。
【請求項１６】
アポトーシスシグナルに対して細胞を感作させる方法において、請求項１に記載の化合物を前記細胞中に導入することを含む方法。
【請求項１７】
前記アポトーシスシグナルが、シタラビン、フルダラビン、５-フルオロ-２'-デオキシウイリジン、ゲムシタビン、メトトレキサート、ブレオマイシン、シスプラチン、シクロホスファミド、アドリアマイシン(ドキソルビシン)、ミトキサントロン、カンプトテシン、トポテカン、コルセミド、コルヒチン、パクリタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、タモキシフェン、フェナステリド、タキソテール、及びマイトマイシンＣからなる群から選択される化合物又は放射線に前記細胞を接触させることにより誘導される請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記アポトーシスシグナルが、Ａｐｏ２Ｌ／ＴＲＡＩＬに前記細胞を接触させることにより誘導される請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
カスパーゼタンパク質へのＩＡＰタンパク質の結合を阻害する方法において、請求項１の化合物に前記ＩＡＰタンパク質を接触させることを含む方法。
【請求項２０】
哺乳動物におけるＩＡＰの過剰発現に関連した疾患又は症状を治療する方法において、請求項１に記載の化合物の有効量を前記哺乳動物に投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（優先権の主張）
この出願は、その内容を出典明示によりここに援用する２００８年８月１６日出願の米国仮出願第６１／０８９５０８号の優先権を主張する。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、哺乳動物における治療及び／又は予防に有用な有機化合物、特に癌の治療に有用なＩＡＰタンパク質のインヒビターに関する。
【背景技術】
【０００３】
アポトーシス又はプログラム細胞死は、無脊椎動物並びに脊椎動物の発達かつホメオスタシスにおいて重要な役割を担っている遺伝的及び生化学的に調節されるメカニズムである。時期尚早の細胞死に至るアポトーシスにおける異常は、様々な発達障害に関連している。細胞死の欠如を生じるアポトーシスにおける欠乏症は、癌及び慢性ウイルス感染に関連している(Thompson 等, (1995) Science 267, 1456-1462)。
【０００４】
アポトーシスにおいて鍵となるエフェクター分子の一つはカスパーゼ(システイン含有のアルパラギン酸特異性プロテアーゼ)である。カスパーゼはアルパラギン酸残基の後を切断する強力なプロテアーゼで、ひとたび活性化されると、細胞内から生存細胞タンパク質を消化する。カスパーゼはこのように強力なプロテアーゼであるため、このファミリーのタンパク質を厳格にコントロールすることが、時期尚早の細胞死を防止するために必要である。一般的に、カスパーゼは、活性であるためにはタンパク質分解プロセシングを必要とする大抵は不活性なチモーゲンとして合成される。このタンパク質分解プロセシングは、カスパーゼが調節される唯一の方法である。第２のメカニズムは、カスパーゼに結合してこれを阻害するファミリーのタンパク質を介する。
【０００５】
カスパーゼを阻害する分子ファミリーは、アポトーシスのインヒビター(ＩＡＰ)(Deveraux 等, J Clin Immunol (1999), 19:388-398)である。ＩＡＰは、抗アポトーシス遺伝子 (Crook 等 (1993) J Virology 67, 2168-2174)のＰ３５タンパク質に置き換わるその機能的能力により、元々はバキュロウイルス中に発見された。ＩＡＰはショウジョウバエからヒトまでの範囲にわたる生物において記述されている。それらの由来にかからわず、構造的には、ＩＡＰは１〜３のバキュロウイルスＩＡＰ反復(ＢＩＲ)ドメインを含み、そのほとんどがまたカルボキシル末端ＲＩＮＧフィンガーモチーフを有する。ＢＩＲドメイン自体は、亜鉛イオン(Hinds 等, (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 648-651)を配位するシステイン及びヒスチジン残基を持つ４つのαヘリックスと３つのβストランドを含む約７０の残基の亜鉛結合ドメインである。カスパーゼを阻害し、よってアポトーシスを阻害することにより、抗アポトーシス効果をもたらすと考えられているのはＢＩＲドメインである。一例として、ヒトＸ-染色体連鎖ＩＡＰ(ＸＩＡＰ)は、カスパーゼ３、カスパーゼ７、及びカスパーゼ９(Deveraux 等, (1998) EMBＯ J. 17, 2215-2223)のＡｐａｆ-１-チトクロムＣ媒介性活性を阻害する。カスパーゼ３及び７はＸＩＡＰのＢＩＲ２ドメインにより阻害される一方、ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインはカスパーゼ９活性の阻害の原因である。ＸＩＡＰはほとんどの成人及び胎児組織(Liston等, Nature, 1996, 379(6563):349)に遍在的に発現しており、ＮＣＩ６０株化細胞パネル(Fong等, Genomics, 2000, 70:113; Tamm 等, Clin. Cancer Res. 2000, 6(5):1796)の多数の腫瘍細胞株で過剰発現している。腫瘍細胞におけるＸＩＡＰの過剰発現は、多様なアポトーシス誘発性刺激からの保護を付与することが証明され、化学療法(LaCasse 等, Ｏncogene, 1998, 17(25):3247)に対する耐性を促進させる。これに一致して、急性骨髄性白血病(上掲のTamm等)を患っている患者においては、ＸＩＡＰタンパク質レベルと生存率との間に強い相関関係があることが示されている。アンチセンスオリゴヌクレオチドによるＸＩＡＰ発現のダウンレギュレーションが、インビトロ及びインビボの双方において、広範囲のアポトーシス誘発剤により誘導される死に対し腫瘍細胞を感作させることが示されている(Sasaki 等, Cancer Res., 2000, 60(20):5659; Lin 等, Biochem J., 2001, 353:299; Hu 等, Clin. Cancer Res., 2003, 9(7):2826)。また、Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ-誘導性ペプチドも、種々のアポトーシス誘発剤により誘導されるアポトーシスに対し、多数の異なる腫瘍細胞株を感作させることが示されている(Arnt等, J. Biol. Chem., 2002, 277(46):44236; Fulda 等, Nature Med., 2002, 8(8):808; Guo 等, Blood,2002, 99(9):3419; Vucic 等, J. Biol. Chem.,2002, 277(14):12275; Yang 等, Cancer Res., 2003, 63(4):831)。
【０００６】
メラノーマＩＡＰ(ＭＬ-ＩＡＰ)は、ほとんどの正常な成人組織においては検出されないＩＡＰであるが、メラノーマにおいては強くアップレギュレートされている(Vucic 等, (2000) Current Bio 10:1359-1366)。タンパク質構造の決定により、ヒトＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１及びｃＩＡＰ２に存在する対応ドメインに対し、ＭＬ-ＩＡＰ ＢＩＲ及びＲＩＮＧフィンガードメインには有意の相同性があることが示された。ＭＬ-ＩＡＰのＢＩＲドメインは、ＸＩＡＰ、ｃ-ＩＡＰ１及びｃ-ＩＡＰ２のＢＩＲ２及びＢＩＲ３に対して最も多くの類似点を有していると思われ、欠損分析により決定されるところでは、アポトーシス阻害の原因であるとも思われる。更に、Vucic等は、ＭＬ-ＩＡＰが、化学治療剤誘発性アポトーシスを阻害可能であることがを証明した。アドリアマイシン及び４-tertブチルフェノール(４-ＴＢＰ)等の薬剤を、ＭＬ-ＩＡＰが過剰発現しているメラノーマの細胞培養系において試験し、正常なメラノサイトコントロールと比較されたが、化学治療剤は細胞の殺傷においてあまり効果的ではなかった。ＭＬ-ＩＡＰが抗アポトーシス活性を生ずるメカニズムは、部分的にはカスパーゼ３及び９の阻害を介する。ＭＬ-ＩＡＰはカスパーゼ１、２、６又は８を効果的には阻害しなかった。
【０００７】
アポトーシスは、複数の相互作用する要因を有する厳密にコントロールされた経路であるため、ＩＡＰ自体が調節されるという発見は特異なことではなかった。ショウジョウバエDrosophilaにおいて、Reaper(ｒｐｒ)、Head Involution Defective(ｈｉｄ)及びＧＲＩＭタンパク質が、ＩＡＰのショウジョウバエファミリーと物理的に相互作用し、その抗アポトーシス活性を阻害する。哺乳動物では、タンパク質ＳＭＡＣ／ＤＩＡＢＬＯが、ＩＡＰをブロックするように作用し、アポトーシスを進行させる。正常なアポトーシス中、ＳＭＡＣは活性型にプロセシングされ、ミトコンドリアから細胞質中に放出され、そこでＩＡＰに物理的に結合し、ＩＡＰがカスパーゼへ結合するのを阻害することが示された。ＩＡＰのこの阻害により、カスパーゼは活性なままであり、よってアポトーシスを進行させることができる。興味深いことに、ＩＡＰインヒビター間の配列相同性から、プロセシングされた活性タンパク質のＮ末端に４アミノ酸のモチーフが存在することが示されている。このテトラペプチドは、ＢＩＲドメインの疎水性ポケットに結合すると思われ、カスパーゼに結合するＢＩＲドメインを破壊する(Chai 等, (2000) Nature 406:855-862, Liu 等, (2000) Nature 408:1004-1008, Wu 等, (2000) Nature 408 1008-1012)。
【発明の概要】
【０００８】
本発明の一態様では、一般式（Ｉ）
2012500272.tif 000003
［上式中、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立してＯ又はＳであり；
Ｙは結合、（ＣＲ７Ｒ７）ｍ、Ｏ又はＳであり；
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４は、それぞれ独立してＮ又はＣＱであり；
Ｑは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここで該アルキル、炭素環及びヘテロ環は、一又は複数のヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、置換されていてもよいアルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；ここで、アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ又はアルキルであり；Ｒ１及びＲ２は共同して５−８員のヘテロ環を形成し；
Ｒ２は、アルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオン、メルカプト、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ、スルホニル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものであり、ここで、該アルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ及びスルホニルは、ヒドロキシ、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アルコキシ、ヒドロキシアルコキシ及びアルコキシアルコキシで置換されていていもよく；
Ｒ３はＨ又は、ハロゲンもしくはヒドロキシルで置換されていてもよいアルキルであり；又はＲ３及びＲ４は共同して３−６員のヘテロ環を形成し；
Ｒ３’はＨであり、又はＲ３及びＲ３’は共同して３−６員の炭素環を形成し；
Ｒ４及びＲ４’は、独立してＨ、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、炭素環、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ又はヘテロシクロアルキルオキシカルボニルであり；ここで、各アルキル、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ及びヘテロシクロアルキルオキシカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルキル、アルコキシ、アミノ、イミノ及びニトロで置換されていてもよく；又はＲ４及びＲ４’は共にヘテロ環を形成し；
Ｒ５はＨ又はアルキルであり；
Ｒ６及びＲ６’はそれぞれ独立して、Ｈ、アルキル、アリール又はアラルキルであり；
Ｒ７は、Ｈ、シアノ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、ニトロ、カルボキシル、アミジノ、グアニジノ、アルキル、炭素環、ヘテロ環又は-Ｕ-Ｖであり；ここで、Ｕは、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-であり、Ｖはアルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここで、アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；
Ｒ８は、Ｈ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり、ここで、該アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)又は-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；該アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ(=Ｏ)、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環、で置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アルキル又はアシルであり；及び
ｍは０から４である］
を有する新規のＩＡＰタンパク質インヒビターが提供される。
【０００９】
本発明の他の態様では、式Ｉの化合物と、担体、希釈剤又は賦形剤を含有する組成物が提供される。
【００１０】
本発明の他の態様では、細胞にアポトーシスを誘導させる方法であって、式Ｉの化合物を前記細胞に導入することを含む方法が提供される。
【００１１】
本発明の他の態様では、アポトーシスシグナルに対して細胞を感作（過敏化）させる方法であって、式Ｉの化合物を前記細胞に導入することを含む方法が提供される。
【００１２】
本発明の他の態様では、カスパーゼタンパク質へのＩＡＰタンパク質の結合を阻害する方法であって、前記ＩＡＰタンパク質を式Ｉの化合物に接触させることを含む方法が提供される。
【００１３】
本発明の他の態様では、哺乳動物におけるＩＡＰタンパク質の過剰発現に関連した病気又は症状を治療する方法であって、有効量の式Ｉの化合物を前記哺乳動物に投与することを含む方法が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
「アシル」とは、Ｒが、Ｈ、アルキル、炭素環、ヘテロ環、炭素環置換アルキル又はヘテロ環置換アルキルであり、ここで、アルキル、アルコキシ、炭素環及びヘテロ環がここに定められたものである式-Ｃ(Ｏ)-Ｒにより表されるカルボニル含有置換基を意味する。アシル基には、アルカノイル(例えばアセチル)、アロイル(例えばベンゾイル)、及びヘテロアロイルが含まれる。
【００１５】
「アルキル」とは、特定しない限りは、１２までの炭素原子を有する分枝状又は非分枝状で飽和又は不飽和(すなわちアルケニル、アルキニル)の脂肪族炭化水素基を意味する。例えば「アルキルアミノ」等、他の用語の一部として使用される場合、アルキル部分は飽和した炭化水素鎖であるが、不飽和の炭化水素炭素鎖、例えば「アルケニルアミノ」及び「アルキニルアミノ」も含まれる。特定のアルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ-プロピル、イソプロピル、ｎ-ブチル、イソ-ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ｎ-ペンチル、２-メチルブチル、２,２-ジメチルプロピル、ｎ-ヘキシル、２-メチルペンチル、２,２-ジメチルブチル、ｎ-ヘプチル、３-ヘプチル、２-メチルヘキシル等である。「低級アルキル」「Ｃ１-Ｃ４アルキル」及び「１〜４の炭素原子のアルキル」なる用語は同義語であって、交換可能に使用され、メチル、エチル、１-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、１-ブチル、sec-ブチル又はｔ-ブチルを意味する。特定しない限りは、置換アルキル基は、１、例えば同一でも異なっていてもよい２、３又は４の置換基を有していてよい。置換基の例は、特に定めない限りは、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、アルコキシ、ニトロ、シアノ、アミジノ、グアニジノ、尿素、スルホニル、スルフィニル、アミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アミノカルボニル、アシルアミノ、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、炭素環、ヘテロ環である。上述した置換アルキル基の例には、限定されるものではないが；シアノメチル、ニトロメチル、ヒドロキシメチル、トリチルオキシメチル、プロピオニルオキシメチル、アミノメチル、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル、アルキルオキシカルボニルメチル、アリルオキシカルボニルアミノメチル、カルバモイルオキシメチル、メトキシメチル、エトキシメチル、t-ブトキシメチル、アセトキシメチル、クロロメチル、ブロモメチル、ヨードメチル、トリフルオロメチル、６-ヒドロキシヘキシル、２,４-ジクロロ(ｎ-ブチル)、２-アミノ(イソ-プロピル)、２-カルバモイルオキシエチル等が含まれる。またアルキル基は、炭素環基で置換されていてもよい。具体例には、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、及びシクロヘキシルメチル基、並びに対応する-エチル、-プロピル、-ブチル、-ペンチル、-ヘキシル基等が含まれる。置換アルキルには、置換メチル、例えば、「置換Ｃｎ−Ｃｍアルキル」基と同じ置換基で置換されたメチル基が含まれる。置換メチル基の例には、ヒドロキシメチル、保護されたヒドロキシメチル(例えばテトラヒドロピラニルオキシメチル)、アセトキシメチル、カルバモイルオキシメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、カルボキシメチル、ブロモメチル及びヨードメチル等の基が含まれる。
【００１６】
「アミジン」は、Ｒが、Ｈ、アルキル、炭素環、ヘテロ環、炭素環置換されたアルキル又はヘテロ環置換されたアルキルであり、アルキル、アルコキシ、炭素環及びヘテロ環がここに定められたものである、-Ｃ(ＮＨ)-ＮＨＲ基を意味する。特定のアミジンは-ＮＨ-Ｃ(ＮＨ)-ＮＨ２基である。
【００１７】
「アミノ」とは、Ｒが、Ｈ、アルキル、炭素環、ヘテロ環、炭素環置換されたアルキル又はヘテロ環置換されたアルキルであり、アルキル、アルコキシ、炭素環及びヘテロ環がここに定められたものである、第１級(すなわち-ＮＨ２)、第２級(すなわち-ＮＲＨ)及び第３級(すなわち-ＮＲＲ)アミンを意味する。特定の第２級及び第３級アミンはアルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、ジアリールアミン、アラルキルアミン及びジアラルキルアミンであり、ここでアルキルはここに定められた通りであり、置換されていてもよいものである。特定の第２級及び第３級アミンは、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、フェニルアミン、ベンジルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジプロピルアミン及びジイソプロピルアミンである。
【００１８】
ここで使用される「アミノ保護基」とは、化合物上の他の官能基に対して反応が行われている間、アミノ基をブロック又は保護するのに通常用いられる基の誘導体を意味する。このような保護基の例には、カルバメート類、アミド類、アルキル及びアリール基、イミン類、並びに所望するアミン基を再生するのに除去可能な多くのＮ-ヘテロ原子誘導体が含まれる。特定のアミノ保護基はＢｏｃ、Ｆｍｏｃ及びＣｂｚである。これらの基の更なる例は、T. W. Greene及びP. G. M. Wuts, 「Protective Groups in Organic Synthesis」, 第2版, John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, 1991, 第7章; E. Haslam,「Protective Groups in Organic Chemistry」, J. G. W. McOmie編, Plenum Press, New York, NY, 1973, 第5章, 及びT.W. Greene, 「Protective Groups in Organic Synthesis」, John Wiley and Sons, New York, NY, 1981に見出される。「保護されたアミノ」なる用語は、上述のアミノ保護基の一つで置換されたアミノ基を意味する。
【００１９】
「アリール」とは、単独で又は他の用語の一部として使用される場合、示された炭素原子数を有するか、又は数が示されていない場合は、１４までの炭素原子を有する縮合又は非縮合の炭素環式芳香族基を意味する。特定のアリール基は、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタセニル等(Lang's Handbook of Chemistry (Dean, J.A.編)13版, 表7-2[1985]を参照)である。特定のアリールはフェニルである。置換フェニル又は置換アリールとは、他に特定しない限りは、ハロゲン(Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ)、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アルキル(例えばＣ１−Ｃ６アルキル)、アルコキシ(例えばＣ１−Ｃ６アルコキシ)、ベンジルオキシ、カルボキシ、保護されたカルボキシ、カルボキシメチル、保護されたカルボキシメチル、ヒドロキシメチル、保護されたヒドロキシメチル、アミノメチル、保護されたアミノメチル、トリフルオロメチル、アルキルスルホニルアミノ、アルキルスルホニルアミノアルキル、アリールスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノアルキル、ヘテロシクリルスルホニルアミノ、ヘテロシクリルスルホニルアミノアルキル、ヘテロシクリル、アリール、又は他の特定された基から選択される１、２、３、４又は５、例えば１−２、１−３又は１−４の置換基で置換されたフェニル基又はアリール基を意味する。これらの置換基における一又は複数のメチン(ＣＨ)及び／又はメチレン(ＣＨ２)基は、ついで上述したようなものと同様の基で置換され得る。「置換フェニル」なる用語の例には、限定されるものではないが、モノ-又はジ(ハロ)フェニル基、例えば２-クロロフェニル、２-ブロモフェニル、４-クロロフェニル、２,６-ジクロロフェニル、２,５-ジクロロフェニル、３,４-ジクロロフェニル、３-クロロフェニル、３-ブロモフェニル、４-ブロモフェニル、３,４-ジブロモフェニル、３-クロロ-４-フルオロフェニル、２-フルオロフェニル等；モノ-又はジ(ヒドロキシ)フェニル基、例えば４-ヒドロキシフェニル、３-ヒドロキシフェニル、２,４-ジヒドロキシフェニル、それらの保護されたヒドロキシ誘導体等；ニトロフェニル基、例えば３-又は４-ニトロフェニル；シアノフェニル基、例えば４-シアノフェニル；モノ-又はジ(低級アルキル)フェニル基、例えば、４-メチルフェニル、２,４-ジメチルフェニル、２-メチルフェニル、４-(イソ-プロピル)フェニル、４-エチルフェニル、３-(ｎ-プロピル)フェニル等；モノ又はジ(アルコキシ)フェニル基、例えば３,４-ジメトキシフェニル、３-メトキシ-４-ベンジルオキシフェニル、３-メトキシ-４-(１-クロロメチル)ベンジルオキシ-フェニル、３-エトキシフェニル、４-(イソプロポキシ)フェニル、４-(t-ブトキシ)フェニル、３-エトキシ-４-メトキシフェニル等；３-又は４-トリフルオロメチルフェニル；モノ-又はジカルボキシフェニル又は(保護されたカルボキシ)フェニル基、例えば４-カルボキシフェニル；モノ-又はジ(ヒドロキシメチル)フェニル又は(保護されたヒドロキシメチル)フェニル、例えば３-(保護されたヒドロキシメチル)フェニル又は３,４-ジ(ヒドロキシメチル)フェニル；モノ-又はジ(アミノメチル)フェニル又は(保護されたアミノメチル)フェニル、例えば２-(アミノメチル)フェニル又は２,４-(保護されたアミノメチル)フェニ��；あるいはモノ-又はジ(Ｎ-(メチルスルホニルアミノ))フェニル、例えば３-(Ｎ-メチルスルホニルアミノ))フェニルが含まれる。また、「置換フェニル」なる用語は、その置換基が異なっている二置換フェニル基、例えば３-メチル-４-ヒドロキシフェニル、３-クロロ-４-ヒドロキシフェニル、２-メトキシ-４-ブロモフェニル、４-エチル-２-ヒドロキシフェニル、３-ヒドロキシ-４-ニトロフェニル、２-ヒドロキシ-４-クロロフェニル等、並びにその置換基が異なっている三置換フェニル基、例えば３-メトキシ-４-ベンジルオキシ-６-メチルスルホニルアミノ、３-メトキシ-４-ベンジルオキシ-６-フェニルスルホニルアミノ、及びその置換基が異なっている四置換フェニル基、例えば３-メトキシ-４-ベンジルオキシ-５-メチル-６-フェニルスルホニルアミノを表す。特定の置換フェニル基には、２-クロロフェニル、２-アミノフェニル、２-ブロモフェニル、３-メトキシフェニル、３-エトキシ-フェニル、４-ベンジルオキシフェニル、４-メトキシフェニル、３-エトキシ-４-ベンジルオキシフェニル、３,４-ジエトキシフェニル、３-メトキシ-４-ベンジルオキシフェニル、３-メトキシ-４-(１-クロロメチル)ベンジルオキシ-フェニル、３-メトキシ-４-(１-クロロメチル)ベンジルオキシ-６-メチルスルホニルアミノフェニル基が含まれる。縮合アリール環はまた、置換アルキル基と同様の方式において、ここで特定した任意の、例えば１、２又は３の置換基で置換されていてもよい。
【００２０】
「カルボシクリル」、「カルボサイクリック」、「炭素環」及び「カルボシクロ」は、単独で及びカルボシクロアルキル基のような複合基中の一部として使用される場合には、飽和又は不飽和で芳香族又は非芳香族であってよい、３〜１４の炭素原子、例えば３〜７の炭素原子を有する単環式、二環式、又は三環式の脂肪族環を意味する。特定の飽和したカルボサイクリック基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル基である。特定の飽和した炭素環はシクロプロピルである。他の特定の飽和した炭素環はシクロヘキシルである。特定の不飽和炭素環は、芳香族、例えば上述したアリール基、特にフェニルである。「置換カルボシクリル」、「炭素環」及び「カルボシクロ」なる用語は、「置換アルキル」基と同じ置換基により置換されたこれらの基を意味する。
【００２１】
ここで使用される「カルボキシ-保護基」とは、化合物上の他の官能基に対して反応が行われている間、カルボン酸基をブロック又は保護するのに通常用いられるカルボン酸基のエステル誘導体の一つを意味する。そのようなカルボン酸保護基の例には、４-ニトロベンジル、４-メトキシベンジル、３,４-ジメトキシベンジル、２,４-ジメトキシベンジル、２,４,６-トリメトキシベンジル、２,４,６-トリメチルベンジル、ペンタメチルベンジル、３,４-メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリル、４,４'-ジメトキシベンズヒドリル、２,２',４,４'-テトラメトキシベンズヒドリル、アルキル、例えばt-ブチル又はt-アミル、トリチル、４-メトキシトリチル、４,４'-ジメトキシトリチル、４,４',４"-トリメチトキシトリチル、２-フェニルプロプ-２-イル、トリメチルシリル、t-ブチルジメチルシリル、フェナシル、２,２,２-トリクロロエチル、ベータ-(トリメチルシリル)エチル、ベータ-(ジ(ｎ-ブチル)メチルシリル)エチル、ｐ-トルエンスルホニルエチル、４-ニトロベンジルスルホニルエチル、アリル、シンナミル、１-(トリメチルシリルメチル)プロプ-１-エン-３-イル等の部分が含まれる。誘導体化カルボン酸が、分子の他の位置に対する引き続く反応の条件に対して安定であり、適当な時点で分子の残りの部分を破壊することなく除去できる限り、用いられるカルボキシ保護基の種は重要ではない。特に、カルボキシ-保護された分子を強い求核塩基、例えば水酸化リチウム又はＮａＯＨ、又はＬｉＡｌＨ４等の高活性化金属水素化物を用いる還元条件を施さないことが重要である。(このような過酷な除去条件は、下記に検討するアミノ-保護基及びヒドロキシ-保護基を除去する際でもまた避けるべきである。)特定のカルボン酸保護基は、アルキル(例えば、メチル、エチル、ｔ-ブチル)、アリル、ベンジル及びｐ-ニトロベンジル基である。セファロスポリン、ペニシリン及びペプチド分野で使用されるのと同様のカルボキシ-保護基も、カルボキシ基置換基の保護に使用できる。これらの基の更なる例は、T. W. Greene及びP. G. M. Wuts,「Protective Groups in Organic Synthesis」, 第2版, John Wiley & Sons, Inc., New York, N.Y., 1991, 第5章；E. Haslam,「Protective Groups in Organic Chemistry」, J.G.W. McOmie編, Plenum Press, New York, N.Y., 1973, 第5章,及びT.W. Greene,「Protective Groups in Organic Synthesis」, John Wiley and Sons, New York, NY, 1981, 第5章に見出される。「保護されたカルボキシ」なる用語は、上述したカルボキシ-保護基の一つで置換されたカルボキシ基を意味する。
【００２２】
「グアニジン」とは、Ｒが、Ｈ、アルキル、炭素環、ヘテロ環、炭素環置換されたアルキル又はヘテロ環置換されたアルキルであり、ここでアルキル、アルコキシ、炭素環及びヘテロ環がここに定められたものである、-ＮＨ-Ｃ(ＮＨ)-ＮＨＲ基を意味する。特定のグアニジンは-ＮＨ-Ｃ(ＮＨ)-ＮＨ２基である。
【００２３】
ここで使用される「ヒドロキシ-保護基」とは、化合物上の他の官能基に対して反応が行われている間、ヒドロキシ基をブロック又は保護するのに通常用いられるヒドロキシ基の誘導体を意味する。このような保護基の例には、テトラヒドロピラニルオキシ、ベンゾイル、アセトキシ、カルバモイルオキシ、ベンジル、及びシリルエーテル(例えば、ＴＢＳ、ＴＢＤＰＳ)基が含まれる。これらの基の更なる例は、T.W. Greene及びP.G.M. Wuts,「Protective Groups in Organic Synthesis」、第2版, John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, 1991, 第2-3章；E. Haslam, 「Protective Groups in Organic Chemistry」，J.G.W. McOmie編, Plenum Press, New York, NY, 1973, 第5章、及びT.W. Greene, 「Protective Groups in Organic Synthesis」，John Wiley & Sons, New York, NY, 1981に見出される。「保護されたヒドロキシ」なる用語は、上述したヒドロキシ-保護基の一つで置換されたヒドロキシ基を意味する。
【００２４】
「ヘテロサイクリック基」、「ヘテロサイクリック」、「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」又は「ヘテロシクロ」は、単独で及びヘテロシクリルアルキル基のような複合基中の一部として使用される場合には、交換可能に使用され、一般に５から約１４の環原子の、指定された原子数を有する任意の単環式、二環式又は三環式の飽和又は不飽和の芳香族(ヘテロアリール)又は非芳香族環を意味し、ここで環原子は炭素及び少なくとも一のヘテロ原子(窒素、硫黄又は酸素)、例えば１〜４のヘテロ原子である。典型的には、５員環は０〜２の二重結合を有し、６員又は７員環は０〜３の二重結合を有し、窒素又は硫黄ヘテロ原子は場合によっては酸化されていてもよく(例えばＳＯ、ＳＯ２)、任意の窒素へテロ原子は場合によっては第４級化されていてもよい。特定の非芳香族ヘテロ環は、モルホリニル(モルホリノ)、ピロリジニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、２,３-ジヒドロフラニル、２Ｈ-ピラニル、テトラヒドロピラニル、チイラニル、チエタニル、テトラヒドロチエタニル、アジリジニル、アゼチジニル、１-メチル-２-ピロリル、ピペラジニル及びピペリジニルである。「ヘテロシクリルアルキル」基は、上述したようなアルキル基に共有結合した上述したようなヘテロ環基である。硫黄又は酸素原子と１〜３の窒素原子を有する特定の５員ヘテロ環は、チアゾリル、特にチアゾール-２-イル及びチアゾール-２-イル-Ｎ-オキシド、チアジアゾリル、特に１,３,４-チアジアゾール-５-イル及び１,２,４-チアジアゾール-５-イル、オキサゾリル、例えばオキサゾール-２-イル、及びオキサジアゾリル、例えば１,３,４-オキサジアゾール-５-イル、及び１,２,４-オキサジアゾール-５-イルである。２〜４の窒素原子を有する特定の５員環ヘテロ環には、イミダゾリル、例えばイミダゾール-２-イル；トリアゾリル、例えば１,３,４-トリアゾール-５-イル；１,２,３-トリアゾール-５-イル、１,２,４-トリアゾール-５-イル、及びテトラゾリル、例えば１Ｈ-テトラゾール-５-イルが含まれる。特定のベンゾ縮合した５員ヘテロ環は、ベンゾオキサゾール-２-イル、ベンゾチアゾール-２-イル及びベンズイミダゾール-２-イルである。特定の６員ヘテロ環は１〜３の窒素原子と場合によっては硫黄又は酸素原子を有し、例えばピリジル、特にピリド-２-イル、ピリド-３-イル、及びピリド-４-イル；ピリミジル、例えばピリミド-２-イル及びピリミド-４-イル；トリアジニル、例えば１,３,４-トリアジン-２-イル、及び１,３,５-トリアジン-４-イル；ピリダジニル、特にピリダジン-３-イル、及びピラジニルである。ピリジン-Ｎ-オキシド類、及びピリダジン-Ｎ-オキシド類、及びピリジル、ピリミド-２-イル、ピリミド-４-イル、ピリダジニル、及び１,３,４-トリアジン-２-イル基が特定の基である。「置換されていてもよいヘテロ環」のための置換基、例えば先に検討した５員及び６員環系の更なる例は、米国特許第４２７８７９３号に見出すことができる。特定の実施態様では、このような置換されていてもよいヘテロ環基は、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換されたアルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ及びグアニジノで置換される。
【００２５】
「ヘテロアリール」とは、単独で及びヘテロアラルキル基等の複合基中の一部として使用される場合、指定された原子数を有する任意の単環式、二環式又は三環式の芳香族環系を意味し、ここで少なくとも一の環は、窒素、酸素及び硫黄の群から選択される１〜４のヘテロ原子を有する５員、６員又は７員環であり、特定の実施態様では、少なくとも一のヘテロ原子は窒素である(Lang's Handbook of Chemistry, 上掲)。上述した任意のヘテロアリール環がベンゼン環に縮合している任意の二環式の基も定義に含まれる。特定のヘテロアリールには、窒素又は酸素ヘテロ原子が導入されている。次の環系：チエニル、フリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、チアトリアゾリル、オキサトリアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、チアジニル、オキサジニル、トリアジニル、チアジアジニル、オキサジアジニル、ジチアジニル、ジオキサジニル、オキサチアジニル、テトラジニル、チアトリアジニル、オキサトリアジニル、ジチアジアジニル、イミダゾリニル、ジヒドロピリミジル、テトラヒドロピリミジル、テトラゾロ[１,５-ｂ]ピリダジニル及びプリニル、並びにベンゾ-縮合誘導体、例えばベンゾオキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル及びインドリルが、「ヘテロアリール」なる用語で示される(置換された又は未置換の)ヘテロアリール基の例である。特定の「ヘテロアリール」は；１,３-チアゾール-２-イル、４-(カルボキシメチル)-５-メチル-１,３-チアゾール-２-イル、４-(カルボキシメチル)-５-メチル-１,３-チアゾール-２-イルのナトリウム塩、１,２,４-チアジアゾール-５-イル、３-メチル-１,２,４-チアジアゾール-５-イル、１,３,４-トリアゾール-５-イル、２-メチル-１,３,４-トリアゾール-５-イル、２-ヒドロキシ-１,３,４-トリアゾール-５-イル、２-カルボキシ-４-メチル-１,３,４-トリアゾール-５-イルのナトリウム塩、２-カルボキシ-４-メチル-１,３,４-トリアゾール-５イル、１,３-オキサゾール-２-イル、１,３,４-オキサジアゾール-５-イル、２-メチル-１,３,４-オキサジアゾール-５-イル、２-(ヒドロキシメチル)-１,３,４-オキサジアゾール-５-イル、１,２,４-オキサジアゾール-５-イル、１,３,４-チアジアゾール-５-イル、２-チオール-１,３,４-チアジアゾール-５-イル、２-(メチルチオ)-１,３,４-チアジアゾール-５-イル、２-アミノ-１,３,４-チアジアゾール-５-イル、１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-メチル-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(１-(ジメチルアミノ)エト-２-イル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(カルボキシメチル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(カルボキシメチル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イルのナトリウム塩、１-(メチルスルホン酸)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(メチルスルホン酸)-１Ｈ-テトラゾール-５-イルのナトリウム塩、２-メチル-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１,２,３-トリアゾール-５-イル、１-メチル-１,２,３-トリアゾール-５-イル、２-メチル-１,２,３-トリアゾール-５-イル、４-メチル-１,２,３-トリアゾール-５-イル、ピリド-２-イル-Ｎ-オキシド、６-メトキシ-２-(ｎ-オキシド)-ピ��ダズ-３-イル、６-ヒドロキシピリダズ-３-イル、１-メチルピリド-２-イル、１-メチルピリド-４-イル、２-ヒドロキシピリミド-４-イル、１,４,５,６-テトラヒドロ-５,６-ジオキソ-４-メチル-アス-トリアジン-３イル、１,４,５,６-テトラヒドロ-４-(ホルミルメチル)-５,６-ジオキソ-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-アストリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-アス-トリアジン-３-イルのナトリウム塩、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-２-メチル-アストリアジン-３-イルのナトリウム塩、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-２-メチル-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-メトキシ-２-メチル-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-２-メチル-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-２,６-ジメチル-アス-トリアジン-３-イル、テトラゾロ[１,５-ｂ]ピリダジン-６-イル及び８-アミノテトラゾロ[１,５-ｂ]-ピリダジン-６-イルである。「ヘテロアリール」の他の基には：４-(カルボキシメチル)-５-メチル-１,３-チアゾール-２-イル、４-(カルボキシメチル)-５-メチル-１,３-チアゾール-２-イルのナトリウム塩、１,３,４-トリアゾール-５-イル、２-メチル-１,３,４-トリアゾール-５-イル、１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-メチル-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(１-(ジメチルアミノ)エト-２-イル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(カルボキシメチル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(カルボキシメチル)-１Ｈ-テトラゾール-５-イルのナトリウム塩、１-(メチルスルホン酸)-１Ｈ-テトラゾール-５-イル、１-(メチルスルホン酸)-１Ｈ-テトラゾール-５-イルのナトリウム塩、１,２,３-トリアゾール-５-イル、１,４,５,６-テトラヒドロ-５,６-ジオキソ-４-メチル-アス-トリアジン-３-イル、１,４,５,６-テトラヒドロ-４-(２-ホルミルメチル)-５,６-ジオキソ-アス-トリアジン-３-イル、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-２-メチル-アス-トリアジン-３-イルのナトリウム塩、２,５-ジヒドロ-５-オキソ-６-ヒドロキシ-２-メチル-アス-トリアジン-３-イル、テトラゾロ[１,５-ｂ]ピリダジン-６-イル、及び８-アミノテトラゾロ[１,５-ｂ]ピリダジン-６-イルが含まれる。ヘテロアリール基は、ヘテロ環で記載したように置換されていてもよい。
【００２６】
「インヒビター」とは、カスパーゼタンパク質へのＩＡＰタンパク質の結合を低減又は防止、もしくはＩＡＰタンパク質によるアポトーシスの阻害を低減又は防止する化合物を意味する。あるいは、「インヒビター」は、カスパーゼとのＸ-ＩＡＰの結合相互作用又はＳＭＡＣとのＭＬ-ＩＡＰの結合相互作用を防止する化合物を意味する。
【００２７】
特定しない限りは、「置換されていてもよい」とは、基が、未置換であるか、又はその基について列挙された一又は複数(例えば０、１、２、３又は４)の置換基で置換されていてもよいことを意味し、該置換基は同一でも異なっていてもよい。ある実施態様では、置換されていてもよい基は１の置換基を有している。他の実施態様では、置換されていてもよい基は２の置換基を有している。他の実施態様では、置換されていてもよい基は３の置換基を有している。
【００２８】
「薬学的に許容可能な塩」には、酸及び塩基との付加塩の双方が含まれる。「薬学的に許容可能な酸付加塩」は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸等、及びギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ-トルエンスルホン酸、サリチル酸等の有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、アリール脂肪族(araliphatic)、ヘテロ環、カルボキシル及びスルホンクラスのものから選択され得る有機酸を用いて形成され、遊離塩基の生物学的効能と性質とを保持し、生物学的に又は他の形で所望されないものではない塩を意味する。
【００２９】
「薬学的に許容可能な塩基付加塩」には、無機塩基、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩等から誘導されるものが含まれる。特定の塩基付加塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウムの塩である。薬学的に許容可能な無毒の有機塩基から誘導される塩には、第１級、第２級及び第３級アミン、自然に生じる置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２-ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペリジン(piperizine)、ピペリジン(piperidine)、Ｎ-エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等が含まれる。特定の無毒の有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン及びカフェインである。
【００３０】
「スルホニル」とは、Ｒが、Ｈ、アルキル、炭素環、ヘテロ環、炭素環置換されたアルキル又はヘテロ環置換されたアルキルであり、ここでアルキル、アルコキシ、炭素環及びヘテロ環はここに定められたものである、-ＳＯ２-Ｒ基を意味する。特定のスルホニル基は、アルキルスルホニル(すなわち-ＳＯ２-アルキル)、例えばメチルスルホニル；アリールスルホニル、例えばフェニルスルホニル；アラルキルスルホニル、例えばベンジルスルホニルである。
【００３１】
ここで使用される「及びその塩及び溶媒和物」なる語句は、本発明の化合物が塩及び溶媒和物の一又は混合物中に存在しうることを意味する。例えば本発明の化合物は、一つの特定の塩又は溶媒和形態中で実質的に純粋であり得、又は２又はそれ以上の塩又は溶媒和物形態の混合物でありうる。
【００３２】
本発明は、一般式(Ｉ）
2012500272.tif 000004
［上式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｙ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ５、Ｒ６及びＲ６’及びＲ９はここに記載の通りであり、但し、化合物は２-[(２Ｒ)-１-[Ｎ-メチル-Ｌ-アラニル-(２Ｓ)-２-シクロヘキシルグリシル]-２-ピロリジニル]-１Ｈ-インドール以外である］
を有する新規化合物を提供する。本発明の化合物は、他に特定されない限り、その塩、溶媒和物及び多形を含む。
【００３３】
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立してＯ又はＳである。特定の実施態様では、Ｘ１及びＸ２は共にＯである。他の特定の実施態様では、Ｘ１及びＸ２は共にＳである。他の特定の実施態様では、Ｘ１がＳであり、Ｘ２はＯである。他の特定の実施態様では、Ｘ１がＯであり、Ｘ２はＳである。
【００３４】
Ｙは結合、（ＣＲ７Ｒ７）ｍ、Ｏ又はＳである。ある実施態様では、Ｙは結合、（ＣＲ７Ｒ７）ｍ、Ｏ又はＳであり；ここでｍは１又は２であり、Ｒ７はここに定義されるもの又はＨ、ハロゲン、アルキル、アリール、アラルキル、アミノ、アリールアミノ、アルキルアミノ、アラルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ又はアラルキルオキシである。特定の実施態様では、Ｙは（ＣＨＲ７）ｍ、Ｏ又はＳであり；ここでｍは１又は２及びＲ７はＨ、ハロゲン、アルキル、アリール、アラルキル、アミノ、アリールアミノ、アルキルアミノ、アラルキルアミノ、アルコキシ、アリールオキシ又はアラルキルオキシである。特定の実施態様では、ＹはＣＨ２である。特定の実施態様では、ｍは１である。特定の実施態様では、Ｙは結合である。特定の実施態様では、ｍは１であり、ＹはＣＨＲ７であり、ここでＲ７はアラルキルオキシ、例えばベンジルオキシである。特定の実施態様では、ｍは１であり、ＹはＣＨＲ７であり、ここでＲ７はＦである。特定の実施態様では、ｍは１であり、ＹはＣＨＲ７であり、ここでＲ７はアラルキルアミノ、例えばベンジルアミノである。他の特定の実施態様では、ＹはＯである。他の特定の実施態様では、ＹはＳである。
【００３５】
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４はそれぞれ独立してＮ又はＣＱである。ある実施態様では、Ｚ１はＮである。ある実施態様ではＺ１はＣＱである。ある実施態様ではＺ２はＮである。ある実施態様ではＺ２はＣＱである。ある実施態様ではＺ３はＮである。ある実施態様ではＺ３はＣＱである。ある実施態様ではＺ４はＮである。ある実施態様では、Ｚ４はＣＱである。ある実施態様では、Ｚ１はＮである。実施態様では、Ｚ１はＱである。
【００３６】
ある実施態様では、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４はそれぞれ独立してＣＱである。ある実施態様では、Ｚ１、Ｚ２及びＺ３はそれぞれＣＱでありＺ４はＮである。ある実施態様では、Ｚ１、Ｚ２及びＺ４はそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ３はＮである。ある実施態様は、Ｚ１、Ｚ３及びＺ４はそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ２はＮである。ある実施態様では、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４はそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ１はＮである。ある実施態様では、Ｚ１及びＺ３はそれぞれ独立してＣＱであり、Ｚ２及びＺ４はそれぞれＮである。
【００３７】
ＱはＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここで該アルキル、炭素環及びヘテロ環は一又は複数のヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、置換されてもよい、アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよく；アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよい。「置換されていてもよいアルキル」「置換されていていもよい炭素環」及び「置換されていてもよいヘテロ環」の置換基は、Ｑ中の前述のアルキル、炭素環及びヘテロ環基と同様に置換される。特定の実施態様では、このような「置換されていてもよいアルキル」の置換基はヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ及びグアニジノである。特定の実施態様では、このような置換されていてもよい炭素環及びヘテロ環基は、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ及びグアニジノで置換される。特定の実施態様では、Ｑは炭素環又はヘテロ環であって、ハロゲン、アミノ、オキソ、アルキル、炭素環又はヘテロ環で置換されていてもよいものであり；ここで、アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；ここで、前述のアルキル、炭素環又はヘテロ環はハロゲン、アミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、アルキルチオ、アシルオキシ、アシルオキシアルコキシ、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アルキルスルフィニル及びアルキルスルフィニルアルキルで置換されていていもよい。特定の実施態様では、Ｑは一つの例のみがＨ以外である。特定の実施態様では、Ｑの２又はそれ以下がＨ以外である。特定の実施態様では、Ｑの一つのみがＨ以外であり、式ＩＩＩ−１からＩＩＩ−１６又はＩＩＩａからＩＩＩｓの基である。特定の実施態様では、Ｑの２つがＨ以外であり、ここで、一つのみが式ＩＩＩ−１からＩＩＩ−１６又はＩＩＩａからＩＩＩｓの基である。
【００３８】
特定の実施態様では、式ＩＩＩ−１からＩＩＩ−１６又はＩＩＩａからＩＩＩｓ
2012500272.tif 000005
2012500272.tif 000006
からなる群から選択されるＱは炭素環又はヘテロ環であり、ここで、ｎは１−４、例えば１−３、例えば１−２、例えば１であり；ＴはＯ、Ｓ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７であり；ＷはＯ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７であり；Ｒ７及びＲ８はここに定義された通りである。ある実施態様では、一つのＱが一般式ＩＩＩ−１からＩＩＩ−１６の基である。
【００３９】
特定の実施態様では、Ｑは、ＩＩＩａ−ＩＩＩｓ：
2012500272.tif 000007
2012500272.tif 000008
2012500272.tif 000009
からなる群から選択される炭素環又はヘテロ環であり、ここで、ｎは１−４、例えば１−３、例えば１−２、例えば１であり；ＴはＯ、Ｓ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７であり；ＷはＯ、ＮＲ８又はＣＲ７Ｒ７であり；Ｒ７及びＲ８はここに定義された通りである。特定の実施態様では、ＱはＩＩＩａからＩＩＩｉの何か一つであり、ここでＲ８はＨであり、Ｒ７はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｍｅ、メトキシ、ヒドロキシエトキシ、メトキシエトキシ、アセトキシエトキシ、メチルスルホニル、メチルスルホニルメチル、フェニル及びモルホリン-４-イルからなる群から選択される。他の特定の実施態様では、ＱはＩＩＩｄである。特定の実施態様では、Ｑは４位がＲ７で置換されているＩＩＩｄである。他の特定の実施態様では、Ｑは５位がＲ７で置換されているＩＩＩｄである。特定の実施態様では、ＱはＦ、Ｍｅ、ｉＰｒ、フェニル、次の通りに置換されたフェニル：２-Ｃｌ、３-Ｃｌ、４-Ｃｌ、２-Ｆ、３-Ｆ又は４-Ｆ置換、ベンジル、ピリド-３-イル又はピリド-４-イルである。ある実施態様では、一つのＱは一般式ＩＩＩａからＩＩＩｓの基である。
【００４０】
Ｒ１はＨ、ＯＨ又はアルキルであり；又はＲ１及びＲ２は共同して５−８員のヘテロ環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ１はＨである。特定の実施態様では、Ｒ１及びＲ２は共同して６員環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ１及びＲ２は共同して７員環を形成する。他の特定の実施態様では、Ｒ１及びＲ２は共同して８員環を形成する。他の特定の実施態様では、Ｒ１及びＲ２は共同して７員環を形成し、ＹはＳである。他の特定の実施態様では、Ｒ１はＨであり、ＹはＣＨ２である。他の特定の実施態様では、Ｒ１はＨであり、ＹはＳである。他の特定の実施態様では、Ｒ１がＨであり、ＹはＯである。
【００４１】
Ｒ２はアルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオン、メルカプト、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ、スルホニル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものであり、ここで該アルキル、アシル、アルコキシ、アルキルチオ及びスルホニルはヒドロキシ、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アルコキシ、ヒドロキシアルコキシ及びアルコキシアルコキシで置換されていてもよい。ある実施態様では、Ｒ２はアルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオン、メルカプト、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、スルホニル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものである。特定の実施態様では、Ｒ２はアルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれがハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオン、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、アシル、アルキルチオ、アシル、ヒドロキシアシル、メトキシアシル、スルホニル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものである。ある実施態様では、Ｒ２はアルキル、炭素環、カルボシクリルアルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルで、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルキル、アルコキシ、アシル、アミノ及びニトロで置換されていてもよいものである。特定の実施態様では、Ｒ２はアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロ環又はヘテロシクリルアルキルである。特定の実施態様では、Ｒ２はアルキル、シクロアルキル又はヘテロ環である。特定の実施態様では、Ｒ２は、t-ブチル、イソプロピル、シクロヘキシル、テトラヒドロピラン-４-イル、Ｎ-メチルスルホニルピペリジン-４-イル、テトラヒドロチオピラン-４-イル、テトラヒドロチオピラン-４-イル(ここでＳは酸化形態ＳＯ又はＳＯ２で存在)、シクロヘキサン-４-オン、４-ヒドロキシシクロヘキサン、４-ヒドロキシ-４-メチルシクロヘキサン、１-メチル-テトラヒドロピラン-４-イル、２-ヒドロキシプロパ-２-イル、ブタ-２-イル、チオフェン-３-イル、ピペリジン-４-イル、Ｎ-アセチルピペリジン-４-イル、Ｎ-ヒドロキシエチルピペリジン-４-イル、Ｎ-(２-ヒドロキシアセチル)ピペリジン-４-イル、Ｎ-(２-メトキシアセチル)ピペリジン-４-イル、ピリジン-３-イル、フェニル、テトラヒドロフラン-２-イル-カルボニル、メトキシエタノン、２-メトキシエトキシエタノン及び１-ヒドロキシエタ-１-イルからなる群から選択される。本発明の実施態様では、Ｒ２はt-ブチル、イソプロピル、シクロヘキシル、シクロペンチル、フェニル又はテトラヒドロピラン-４-イルである。特定の実施態様ではＲ２はフェニルである。特定の実施態様では、Ｒ２はシクロヘキシルである。他の実施態様ではＲ２はテトラヒドロピラン-４-イルである。他の特定の実施態様では、Ｒ２はイソプロピル(すなわちバリンアミノ酸側鎖)である。他の特定の実施態様では、Ｒ２はt-ブチルである。特定の実施態様では、Ｒ２は、それが含むアミノ酸又はアミノ酸アナログが、Ｌ配置にあるように配向される。
【００４２】
Ｒ３はＨ又は、ハロゲン又はヒドロキシルで置換されていてもよいアルキルであり；又はＲ３及びＲ４は共同して３−６員のヘテロ環を形成する。ある実施態様では、Ｒ３はＨ又はアルキルであり；又はＲ３及びＲ４は共同して３−６員のヘテロ環を形成する。ある実施態様では、Ｈ又はメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルである。特定の実施態様では、Ｒ３はＨ又はメチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ３はメチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ３はフルオロメチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ３はエチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ３はヒドロキシエチルである。特定の実施態様では、Ｒ３はフルオロメチルである。特定の実施態様では、Ｒ３はヒドロキシエチルである。他の実施態様では、Ｒ３はそれが含むアミノ酸又はアミノ酸アナログが、Ｌ配置にあるように配向される。特定の実施態様では、Ｒ３及びＲ４はそれらが依存する原子と共に３−６員のヘテロ環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ３及びＲ４は、共同してアゼチジン環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ３及びＲ４は共同してピロリジンを形成する。
【００４３】
Ｒ３’はＨであり、又はＲ３及びＲ３’は共同して３−６員の炭素環を形成する。ある実施態様では、Ｒ３’はＨである。他の実施態様ではＲ３及びＲ３’は共同して３−６員の炭素環、例えばシクロプロピル環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ３及びＲ３’は共にメチルである。
【００４４】
Ｒ４及びＲ４’は独立してＨ、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、炭素環、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ又はヘテロシクロアルキルオキシカルボニルであり；ここで各アルキル、カルボシクロアルキル、カルボシクロアルキルオキシ、カルボシクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロ環、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ及びヘテロシクロアルキルオキシカルボニルはハロゲン、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルキル、アルコキシ、アミノ、イミノ及びニトロで置換されていてもよく；又はＲ４及びＲ４’は共同してヘテロ環を形成する。ある実施態様では、Ｒ４及びＲ４’は独立してＨ、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルであり、ここで、各アルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルはハロゲン、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシル、アルキル、アルコキシ、アミノ及びニトロに置換されていてもよく；又はＲ４及びＲ４’は共同してヘテロ環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ４及びＲ４’は共同してヘテロ環、例えばアゼチジン環又はピロリジン環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ４及びＲ４’は共にＨである。他の特定の実施態様では、Ｒ４はメチルであり、Ｒ４’はＨである。特定の実施態様では、Ｒ４及びＲ４’のうちの一つはヒドロキシル（ＯＨ）であり、もう一方がＨである。他の実施態様では、Ｒ４及びＲ４’のうちの一つがＮＨ２、ＭＨＭｅ及びＮＨＥｔのようなアミノであり、もう一方がＨである。特定の実施態様では、Ｒ４’はＨであり、Ｒ４はＨ、アルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルである。特定の実施態様では、Ｒ４は、
2012500272.tif 000010
2012500272.tif 000011
からなる群から選択される。
【００４５】
Ｒ５はＨ又はアルキルである。特定の実施態様では、Ｒ５はＨ又はメチルである。特定の実施態様では、Ｒ５はＨである。他の特定の実施態様では、Ｒ５はメチルである。
【００４６】
Ｒ６及びＲ６’はそれぞれ独立してＨ、アルキル、アリール又はアラルキルである。特定の実施態様では、Ｒ６はアルキル、例えばメチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ６はアリール、例えばフェニルである。他の特定の実施態様では、Ｒ６はアラルキル、例えばベンジルである。特定の実施態様では、Ｒ６及びＲ６’は同じであり、例えば両方ともアルキル、例えば両方ともメチルである。他の特定の実施態様では、Ｒ６はメチルであり、Ｒ６’はＨである。
【００４７】
Ｒ７はそれぞれの場合において独立してＨ、シアノ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、ニトロ、カルボキシル、アミジノ、グアニジノ、アルキル、炭素環、ヘテロ環又は-Ｕ-Ｖであり;ここで、Ｕは、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-であり、Ｖは、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり；ここでアルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基はＯ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)-、-Ｃ(Ｏ)-、-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-、-ＳＯ２-ＮＲ８-、-ＮＲ８-ＳＯ２-、-ＮＲ８-Ｃ(Ｏ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-ＮＲ８-、-ＮＲ８-Ｃ(ＮＨ)-、-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-又は-Ｏ-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられてもよく；アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよい。「置換されていていもよい炭素環」又は「置換されていてもよいヘテロ環」の置換基はここに定義された通りである。特定の実施態様では、このような炭素環及びヘテロ環基は、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ及びグアニジノで置換されてもよい。ある実施態様では、Ｒ７はＨ、ハロゲン、アルキル、ハロアルキル、アリール、アラルキル、アミノ、アリールアミノ、アルキルアミノ、アラルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、アリールオキシ又はアラルキルオキシである。
【００４８】
Ｒ８は、Ｈ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり、ここで該アルキルの一又は複数のＣＨ２又はＣＨ基は、-Ｏ-、-Ｓ-、-Ｓ(Ｏ)-、Ｓ(Ｏ)２、-Ｎ(Ｒ８)又は-Ｃ(Ｏ)-で置き換えられていてもよく；該アルキル、炭素環及びヘテロ環は、ヒドロキシル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ(=Ｏ)、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ、グアニジノ、置換されていてもよい炭素環又は置換されていてもよいヘテロ環で置換されていてもよい。「置換されていていもよい炭素環」又は「置換されていてもよいヘテロ環」はここに定義された通りである。特定の実施態様では、このような炭素環及びヘテロ環基はヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、アシル、ハロゲン、メルカプト、オキソ、カルボキシル、アシル、ハロ-置換アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ、アミジノ及びグアニジノで置換される。特定の実施態様では、Ｒ８はＨ、アルキル又はアシルである。ある実施態様では、Ｒ８はメチルである。他の実施態様では、Ｒ８はアセチルである。特定の実施態様では、Ｒ８はＨである。ある実施態態様では、Ｒ７はＨ、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシル、カルボキシル、アルキル、ハロアルキル又はアラルキルである。特定の実施態様では、Ｒ７はハロゲン、例えばＣｌ又はＦである。特定の実施態様では、Ｒ７はＨである。Ｒ７及びＲ８に対して定義された置換基並びに他の全ての可変基は許容される価数を持つことが理解される。
【００４９】
Ｒ９はＨ、アルキル又はアシルである。ある実施態様では、Ｒ９はＨである。ある実施態様では、Ｒ９はアルキルである。ある実施態様では、Ｒ９はアシルである。ある実施態様ではＲ９はメチルである。ある実施態様ではアセチルである。
【００５０】
ｍは０から４である。ある実施態様では、ｍは０である。ある実施態様では、ｍは１である。ある実施態様では、ｍは２である。ある実施態様では、ｍは３である。ある実施態様では、ｍは４である。
【００５１】
本発明の化合物は一又は複数の不斉炭素原子を含む。従って、化合物はジアステレオマー、エナンチオマー又はそれらの混合物として存在し得る。化合物の合成は、出発物質又は中間体として、ラセミ体、ジアステレオマー又はエナンチオマーを使用しうる。ジアステレオマー化合物はクロマトグラフィー又は結晶化法により分離されうる。同様に、エナンチオマー混合物は、同技術又は当該分野で知られた他の技術を使用して分離されうる。不斉炭素原子の各々がＲ又はＳ配置で存在し得、これらの配置の双方が本発明の範囲内である。
【００５２】
特定の実施態様では、本発明の化合物は一般式ＩＩａ−ＩＩｄ
2012500272.tif 000012
［上式中、Ｑ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ９はここに記載の通りであり、Ｑ’はＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、ニトロ、アルキル、炭素環又はヘテロ環であり、ここで該アルキル、炭素環及びヘテロ環はハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ及びニトロで置換されていてもよい。］を有する。ある実施態様では、Ｑ’はＨである。ある実施態様では、Ｑ’はアルキル、例えばメチル、エチル、プロピル及びイソプロピルである。ある実施態様では、Ｑ’はハロゲンである。ある実施態様では、Ｑ’はＦである。
【００５３】
また本発明は、上述の化合物のプロドラッグも包含する。適用可能である場合、適切なプロドラッグには、放出され、例えば加水分解されて、生理学的条件下で親化合物を生じる既知のアミノ-保護及びカルボキシ-保護基が含まれる。特定のクラスのプロドラッグは、アミノ、アミジノ、アミノアルキレンアミノ、イミノアルキレンアミノ又はグアニジノ基の窒素原子が、ヒドロキシ(ＯＨ)基、アルキルカルボニル(-ＣＯ-Ｒ)基、アルコキシカルボニル(-ＣＯ-ＯＲ)、アシルオキシアルキル-アルコキシカルボニル(-ＣＯ-Ｏ-Ｒ-Ｏ-ＣＯ-Ｒ)基で、Ｒが一価又は二価の基であり、上述の通りであるもの、又は式-Ｃ(Ｏ)-Ｏ-ＣＰ１Ｐ２-ハロアルキルを有する基で、ここでＰ１及びＰ２は同一か又は異なっており、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、シアノ、ハロ低級アルキル又はアリールであるもので置換された化合物である。特定の実施態様では、窒素原子は、本発明の化合物のアミジノ基の窒素原子の一つである。これらのプロドラッグ化合物は、上述した本発明の化合物を活性化アシル化合物と反応させ、本発明の化合物中の窒素原子を活性化アシル化合物のカルボニルに結合させることで調製される。適切な活性化カルボニル化合物はカルボニル炭素に結合する良好な脱離基を有しており、アシルハロゲン化物、アシルアミン類、アシルピリジニウム塩、アシルアルコキシド、特にアシルフェノキシド、例えばｐ-ニトロフェノキシアシル、ジニトロフェノキシアシル、フルオロフェノキシアシル、及びジフルオロフェノキシアシルを含む。反応は一般的に発熱反応で、例えば−７８から約５０℃の低い温度にて不活性溶媒中で行われる。反応は通常はまた無機塩基、例えば炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウム、あるいは有機塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン等を含むアミンの存在下で行われる。プロドラッグを調製する一方法は、その内容の全体が出典明示によりここに援用される（ＰＣＴ公開ＷＯ９８４６５７６に対応する）１９９７年４月１５日に出願の米国特許出願第０８／８４３３６９号に記載されている。
【００５４】
式Ｉの特定の化合物は、次のものを含む：
2012500272.tif 000013
2012500272.tif 000014
2012500272.tif 000015
本発明の化合物は異なった共鳴形態で存在し得、そのような共鳴形態の全てが本発明の範囲にある。
【００５５】
合成
本発明の化合物は、商業的に入手可能な出発物質及び試薬から、標準的な有機合成技術を使用して調製される。本発明の化合物の調製に使用される合成手順は、化合物に存在している特定の置換基に依存しており、有機合成において標準とされる種々の保護及び脱保護工程が必要であるが、次の一般スキームには例証しない場合もあることが理解されるであろう。特定の一般合成スキームでは、本発明の化合物は、典型的なアミドカップリング手順を用いて、アミノ酸残基アナログ類をカップリングさせることにより、調製されうる。Ｘ１、Ｘ２、Ｙ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ６’及びＲ９がここに定義された通りであり、Ｐｒが適切な保護基であるスキーム１において、アミン-保護アミノ酸残基アナログがカップリングされ、連続して脱保護されて最終化合物が得られる。
2012500272.tif 000016
【００５６】
アミノ酸アナログは、任意の順序でカップリングされ得、当該分野で常套的である固相支持体を使用して調製されうることが理解される。例えば、スキーム２は他のアミノ酸残基アナログカップリング経路を例示する。
2012500272.tif 000017
【００５７】
アザインドール中間体はスキーム３に従って調製され得、ここでＹ、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ６’及びＲ９はここに定義された通りである。
2012500272.tif 000018
2012500272.tif 000019
【００５８】
Ｒ４又はＲ４’がＨ以外である本発明の化合物は、標準的な有機化学技術、例えば出発アミノ酸残基アナログ、例えばＮＨ２-ＣＨ(Ｒ３)-Ｃ(Ｏ)-ＯＨを、適切なアルデヒド又はケトンと反応させて所望のＲ４及びＲ４’置換基を得る還元的アミノ化によって、調製することができる。スキーム４を参照。ついで、得られたＲ４／Ｒ４’置換アミノ酸中間体は、標準的なペプチドカップリング技術を使用して、次のアミノ酸中間体又は化合物の残部にコンジュゲートされうる。
2012500272.tif 000020
【００５９】
特定の実施態様では、アラニンを、１-メチルインドール-２-カルボキシアルデヒドと反応させ、１％のＨＯＡｃ／ＤＭＦに溶解させたシアノ水素化ホウ素ナトリウムを用いて還元させ、本発明の化合物の調製に使用されうるＮ置換アラニン残基を得る。スキーム５を参照。
2012500272.tif 000021
【００６０】
あるいは、Ｒ４／Ｒ４’置換基を導入するための還元的アミノ化手順が、化合物調製の最終工程である。
【００６１】
本発明の化合物がＨ以外のＲ４又はＲ４’置換基を含む場合、それらは所望するアミンで、離脱基を導入する適切な酸中間体を置換することによっても調製され得る。例えば、Ｂｒ-ＣＨ(Ｒ３)-Ｃ(Ｏ)-ＯＨは、スキーム６に従って、アミンＲ４-ＮＨ２又はＲ４-ＮＨ-Ｒ４’で置換される。
2012500272.tif 000022
【００６２】
あるいは、Ｒ４又はＲ４’置換基を導入する置換反応は、スキーム７に例証されるように化合物の調製の最終工程として実施され得る。
2012500272.tif 000023
【００６３】
特定の実施態様では、次のアミン類がスキーム６及び７で使用される：
2012500272.tif 000024
2012500272.tif 000025
【００６４】
Ｘ１及びＸ２の何れかが硫黄である本発明の化合物、すなわちチオアミドが導入された化合物は、確立された有機化学技術に従って調製されうる。例えば、Ｘ２が硫黄である化合物は、スキーム８に従って、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸残基アナログＮＨ２-ＣＨ(Ｒ２)-ＣＯＯＨから出発し、これをＴＨＦに溶解させ、−２５℃で冷却し、ＤＩＰＥＡを加え、続いてイソブチルクロロギ酸を加えて、調製されうる。１０分後、ジアミン、４-ニトロベンゼン-１，２-ジアミンを加え、反応混合物を−２５℃で２時間、ついで室温で一晩、連続的に攪拌する。ＴＨＦを吸引し、ついで混合物に５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーを施して生成物を得る。Ｆｍｏｃ-アラニン誘導体、五硫化リン及び炭酸ナトリウムをＴＨＦ中で混合し、一晩攪拌する。溶液を濃縮し、８０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いた直接のクラマトグラフィーで活性化チオアラニンを得る。ついで、活性化チオアラニン及び亜硝酸ナトリウムを酢酸中で混合し、Ｈ２Ｏで希釈する。得られた沈殿物を濾過し、乾燥させて生成物を得る。チオアラニンをＡ環置換プロリンアミノ酸残基アナログに、双方をＤＭＦ中に溶解させることによって、カップリングさせる。ついで、チオアミド生成物を２０％のＰＩＰ／ＤＭＡで１５分間脱保護し、Ｒ４／Ｒ４’-Ｎ-ＣＨ(Ｒ３)-ＣＯＯＨにコンジュゲートさせるために使用することができる。
【００６５】
適応症
本発明の化合物は、カスパーゼへのＩＡＰタンパク質の結合、特にカスパーゼ３及び７とのＸＩＡＰの結合相互作用を阻害する。本化合物はまたＭＬ-ＩＡＰのＳｍａｃタンパク質への結合を阻害する。従って、本発明の化合物は、特に癌細胞において、アポトーシスシグナルに対して細胞を過敏化させ、又は細胞にアポトーシスを誘導するのに有用である。本発明の化合物は、ＩＡＰタンパク質を過剰発現する細胞にアポトーシスを誘導させるのに有用である。あるいは、本発明の化合物は、例えばＢｃｌ-２のアップレギュレーション又はＢａｘ／Ｂａｋのダウンレギュレーションにより、ミトコンドリアからのＳｍａｃの放出が阻害されるように、ミトコンドリアアポトーシス経路が破壊されるアポトーシスを細胞に誘導するのに有用である。より広義には、本化合物は、アポトーシスを受けるのに失敗した全ての癌タイプの治療に使用することができる。このような癌のタイプの例には、神経芽細胞種、腸癌腫、例えば直腸癌、結腸癌、家族性大腸腺腫症癌、及び遺伝性非ポリポーシス大腸癌、食道癌、口唇癌、咽頭癌、下咽頭癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、腎臓癌、腎実質癌、卵巣癌、頸部癌、子宮体癌、子宮内膜癌、絨毛癌、膵癌、前立腺癌、精巣癌、乳癌、尿癌(urinary carcinoma)、黒色腫、脳腫瘍、例えば神経膠芽腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽腫、及び末梢神経外胚葉性腫瘍、ホジキンリンパ腫、非-ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、急性リンパ性白血病(ＡＬＬ)、慢性リンパ性白血病(ＣＬＬ)、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)、慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)、成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、肝細胞癌、胆嚢癌、気管支癌、小細胞肺癌、非-小細胞肺癌、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、頭蓋咽頭腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫、及び形質細胞腫が含まれる。
【００６６】
ある実施態様では、本発明の化合物は、ここに記載された時間分解蛍光共鳴エネルギー転移（ＴＲ-ＦＲＥＴ）アッセイ又は蛍光偏光アッセイのような結合アッセイで測定してｃＩＡＰ１に対してＸＩＡＰに選択的に結合する。特定の実施態様では、本発明の化合物は、ｃＩＡＰ１に対して、ＸＩＡＰへの結合親和性が＞１０倍大きい。他の特定の実施態様では、本発明の化合物は、ＸＩＡＰに対する結合親和性が＞１０００倍大きい。
【００６７】
本発明の化合物は、アポトーシスシグナルに対して細胞を過敏化させるのに有用である。従って、本化合物は、放射線治療、又は細胞増殖抑制剤又は抗悪性腫瘍剤による化学療法の前、同時又は後に投与され得る。適切な細胞増殖を抑制する化学療法用化合物には、限定されるものではないが、(ｉ)代謝拮抗剤、例えばシタラビン、フルダラビン、５-フルオロ-２'-デオキシウイリジン(uiridine)、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素又はメトトレキサート；(ｉｉ)ＤＮＡ-断片化剤、例えばブレオマイシン、(ｉｉｉ)ＤＮＡ-架橋剤、例えばクロランブシル、シスプラチン、シクロホスファミド又はナイトロジェンマスタード；(ｉｖ)挿入剤、例えばアドリアマイシン(ドキソルビシン)又はミトキサントロン；(ｖ)タンパク質合成インヒビター、例えばＬ-アスパラギナーゼ、シクロヘキシミド、ピューロマイシン又はジフテリア毒素；(ｖｉ)トポイソメラーゼＩ毒素、例えばカンプトテシン又はトポテカン；(ｖｉｉ)トポイソメラーゼＩＩ毒素、例えばエトポシド(ＶＰ-１６)又はテニポシド；(ｖｉｉｉ)微小管に対する薬剤(microtubule-directed agents)、例えばコルセミド、コルヒチン、パクリタキセル、ビンブラスチン又はビンクリスチン；(ｉｘ)キナーゼインヒビター、例えばフラボピリドール(flavopiridol)、スタウロスポリン、ＳＴＩ５７１(ＣＰＧ ５７１４８Ｂ)又はＵＣＮ-０１(７-ヒドロキシスタウロスポリン)；(ｘ)種々の治験薬、例えばチオプラチン(thioplatin)、ＰＳ-３４１、フェニルブチラート、ＥＴ-１８-ＯＣＨ３、又はファルネシルトランスフェラーゼインヒビター(Ｌ-７３９７４９、Ｌ-７４４８３２)；ポリフェノール類、例えばケルセチン、レスベラトロール、ピセタノール、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸及びその誘導体；(ｘｉ)ホルモン類、例えばグルココルチコイド類又はフェンレチニド(fenretinide)；(ｘｉｉ)ホルモンアンタゴニスト、例えばタモキシフェン、フェナステリド、又はＬＨＲＨアンタゴニストが含まれる。特定の実施態様では、本発明の化合物は、シスプラチン、ドキソルビシン、タキソール、タキソテール、及びマイトマイシンＣからなる群から選択される細胞増殖抑制化合物と同時投与される。特定の実施態様では、細胞増殖抑制化合物はドキソルビシンである。
【００６８】
本発明で使用可能な他のクラスの活性化合物は、デスレセプターに結合することによりアポトーシスを誘導する又は過敏化可能なもの(「デスレセプターアゴニスト」)である。このようなデスレセプターのアゴニストには、デスレセプターリガンド、例えば腫瘍壊死因子ａ(ＴＮＦ-α)、腫瘍壊死因子β(ＴＮＦ-β、リンホトキシン-β)、ＬＴ-β(リンホトキシン-β)、ＴＲＡＩＬ(Ａｐｏ２Ｌ、ＤＲ４リガンド)、ＣＤ９５(Ｆａｓ、ＡＰＯ-１)リガンド、ＴＲＡＭＰ(ＤＲ３、Ａｐｏ-３)リガンド、ＤＲ６リガンド、並びに任意の該リガンドの断片及び誘導体が含まれる。ある実施態様では、デスレセプターリガンドはＴＮＦ-αである。特定の実施態様では、デスレセプターリガンドはＡｐｏ２Ｌ／ＴＲＡＩＬである。更に、デスレセプターアゴニストは、デスレセプターに対するアゴニスト抗体、例えば抗ＣＤ９５抗体、抗ＴＲＡＩＬ-Ｒ１(ＤＲ４)抗体、抗ＴＲＡＩＬ-Ｒ２(ＤＲ５)抗体、抗ＴＲＡＩＬ-Ｒ３抗体、抗ＴＲＡＩＬ-Ｒ４抗体、抗ＤＲ６抗体、抗ＴＮＦ-Ｒ１抗体、及び抗ＴＲＡＭＰ(ＤＲ３)抗体、並びに該抗体の何れかの断片及び誘導体を含む。
【００６９】
アポトーシスに対して細胞を過敏化させる目的では、本発明の化合物は、放射線治療と組合せて使用することもできる。「放射線治療」なる語句は、腫瘍の処置に、電磁気又は微粒子放射線を使用することを意味する。放射線治療は、標的領域に送達される高線量の放射線により、腫瘍及び正常組織の双方において再生細胞を死亡させるという原理に基づく。放射線投与計画は、放射線吸収量(ｒａｄ)、時間及び分割に関して一般的に定められており、腫瘍学者により注意深く定められなくてはならない。患者が受容する放射線の量は種々の検討事項に依存するが、最も重要な２つの検討事項は、体の他の重要な構造体又は器官に対する腫瘍の位置と、腫瘍の広がり程度である。放射線治療剤の例は、限定されるものではないが、放射線治療において提供されるものであり、当該分野で知られている(Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, Principles I and Practice of Oncology, 24875 (Devita等, 4版, vol 1, 1993)。放射線治療における近年の進歩には、３次元原体外照射、強度変調放射線治療(ＩＭＲＴ)、定位的放射線治療及び近接放射療法(組織内照射治療)が含まれ、後者は、インプラントされる「シード」として、腫瘍中に直接放射線源が配される。これらの新規な処置法により、より多くの線量の放射線が腫瘍に送達せしめられ、標準的な外照射療法と比較した場合に、それらの効果が増大するものとなっている。
β放出放射性核種を有する電離放射線は、電離粒子(電子)の中程度の線エネルギー付与(ＬＥＴ)及びその中距離(典型的には組織においては数ミリメートル)のため、放射線治療への応用において最も有用であると思われる。γ線は、より長い距離において低レベルの線量を送達する。α粒子は全く正反対で、非常に高いＬＥＴ線量を送達するが、極度に制限された範囲を有し、よって、処置される組織の細胞と密接に接触させなければならない。また、α放射体は一般的に重金属であり、実施可能な化学は限定され、処置される領域から放射性核種が漏出する危険性も存在する。処置される腫瘍に応じて、全種類の放射体が、本発明の範囲に入ると考えられる。
【００７０】
更に、本発明は非電離放射線のタイプ、例えば紫外線(ＵＶ)照射、高エネルギーの可視光線、マイクロ波照射(温熱治療)、赤外線(ＩＲ)照射及びレーザーを含む。本発明の特定の実施態様においては、ＵＶ線が適用される。
【００７１】
また本発明は、本発明の化合物と、治療的に不活性な担体、希釈剤又は賦形剤を含有する薬学的組成物又は医薬、並びにこのような組成物及び医薬を調製するために、本発明の化合物を使用する方法も含む。典型的には、本発明の方法に使用される式Ｉの化合物は、周囲温度、適切なｐＨで、所望する純度にて、生理学的に許容可能な担体、すなわち生薬投与形態で使用される用量及び濃度でレシピエントに非毒性である担体と混合することにより製剤化される。製剤のｐＨは、主として化合物の濃度及び特定の用途に依存するが、何れでも約３から約８の範囲でありうる。ｐＨ５の酢酸バッファー中での製剤が適切な実施態様である。ある実施態様では、ここで使用される阻害化合物は滅菌される。通常、化合物は固形組成物として保存されるが、凍結乾燥製剤又は水溶液も許容可能である。
【００７２】
本発明の組成物は、良好な医療行為と一致した様式にて、製剤化、用量決定及び投与されるであろう。ここで考慮される要因には、処置される特定の疾患、処置される特定の哺乳動物、個々の患者病状、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、及び医師に知られている他の要因が含まれる。投与される化合物の「有効量」は、このような考慮により決定され、カスパーゼのＩＡＰの相互作用を阻害し、アポトーシスを誘導させ、又はアポトーシスシグナルに対して悪性細胞を過敏化させるのに必要な最小量である。このような量は、正常細胞、又は全体として哺乳動物に毒性のある量以下である。
【００７３】
一般的に、一回当たりに非経口投与される本発明の化合物の当初の薬学的に有効な量は、一日当たり患者の体重に対して約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であり、使用される化合物の典型的な当初の範囲は、０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ／日である。経口単位用量形態、例えば錠剤及びカプセルは、本発明の化合物を約２５から約１０００ｍｇ含みうる。
【００７４】
本発明の化合物は、経口、局所、経皮、非経口、皮下、腹膜内、肺内、及び鼻孔内、局部的治療が所望されている場合は病巣内への投与を含む、任意の適切な手段により投与されうる。非経口的注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹膜内、又は皮下投与が含まれる。適切な経口投与形態の例は、約２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２５０ｍｇ又は５００ｍｇの本発明の化合物を、約９０〜３０ｍｇの無水ラクトース、約５〜４０ｍｇのクロスカルメロース(croscarmellose)ナトリウム、約５〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)Ｋ３０、及び約１〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムと共に含む錠剤である。パウダー状の成分をまず最初に混合し、次にＰＶＰの溶液と混合する。得られた組成物を乾燥し、顆粒化し、ステアリン酸マグネシウムと混合し、一般的な装置を使用して錠剤の形態に圧密化することができる。エアゾール製剤は、リン酸バッファー等の適切なバッファー溶液に、例えば５〜４００ｍｇの本発明の化合物を溶解させ、所望するならば、塩類、例えば塩化ナトリウム等の等張剤(tonicifier)を添加することにより調製することができる。典型的には、不純物及び汚染物を除去するために、例えば０．２ミクロンのフィルターを使用して溶液を濾過する。
【実施例】
【００７５】
本発明は、次の実施例を参照することにより、更に十分に理解されるであろう。しかしながら、それらは本発明の範囲を限定すると解釈されてはならない。試薬及び溶媒は商業的供給源から得、受け取ったまま使用した。他に断らない限り、クロマトグラフィーによる精製は、Teledyne-Isco, Inc. Lincoln, NebraskaのCombiFlash Companionシステムでプレパックされたシリカゲルカラムを使用して実証した。化合物の同一性と純度はＬＣＭＳ及び１Ｈ ＮＭＲ分析で調べた。
【００７６】
ここで使用される略語は以下の通りである：
ＡｃＯＨ：酢酸；
ＡＣＮ：アセトニトリル；
Ｃｈｇ：シクロヘキシルグリシン；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；
ＤＭＡＰ：４-ジメチルアミノピリジン；
ＤＭＥ：１,２-ジメトキシエタン；
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；
ＥＤＣ：１-エチル-３-(３-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド；
ＥＥＤＱ：２-エトキシ-１-エトキシカルボニル-１,２-ジヒドロキノリン；
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；
ＥｔＯＨ：エタノール；
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析；
ＨＡＴＵ：Ｏ-(７-アゾベンゾトリアゾール-１-イル)-１,１,３,３-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート；
ＨＯＢｔ：Ｎ-ヒドロキシベンゾトリアゾール；
ＨＢＴＵ：２-(１Ｈ-ベンゾトリアゾール-１-イル)-１,１,３,３-テトラメチル-ウロニウムヘキサフルオロホスファート；
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；
ＭｅＯＨ：メタノール；
ＮＢＳ：Ｎ-ブロモスクシンアミド；
ＴＡＳＦ：トリス(ジメチルアミノ)スルホニウムジフルオロトリメチルシリカート；
ＴＥＡ：トリエチルアミン；
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
【００７７】
実施例１  ２-[tert-ブトキシカルボニル-(１Ｈ-ピロール-２-イルメチル)-アミノ]-プロピオン酸
2012500272.tif 000026
2012500272.tif 000027
アラニンエチルエステルｂ(５ｇ、３２．５ｍｍｏｌ)、ピロール-２-カルボキシアルデヒドａ(３．１ｇ、３２．５ｍｍｏｌ)、シアノホウ化水素ナトリウム(２．０４ｇ、３２．５ｍｍｏｌ)及びＡｃＯＨ(１％)をＤＭＦ中で混合し、一晩攪拌した。反応体をＨ２Ｏで失活させ、ＤＭＦを蒸発させた。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、０．１ＮのＮａＯＨで洗浄し、乾燥させ、濃縮して２．５ｇの生成物ｃを得た。得られたエステルｃ(２．５ｇ、１２．８ｍｍｏｌ)、ジ-tert-ブチルジカーボナート(３．０６ｇ、１４ｍｍｏｌ)を、ＮａＨＣＯ３と共にＴＨＦ、Ｈ２Ｏ中で混合し、一晩攪拌した。ＴＨＦを蒸発させ、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＮのＮａＯＨ、飽和ＮＨ４Ｃｌ及びブラインで洗浄した。乾燥後、混合物を濃縮し、３．３ｇのＢｏｃ-保護されたエステルｄを得た。Ｂｏｃ-保護されたエステルｄ(１．６７ｇ、５．６ｍｏｌ)、水酸化リチウム一水和物(２８４ｍｇ、６．７７ｍｍｏｌ)を、０℃で、ＴＨＦ及びＨ２Ｏ中で混合した。ＴＨＦを吸引し、溶液を希Ｈ２ＳＯ４で酸性化させ、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相を組合せ、乾燥させ、蒸発させて、生成物２-[tert-ブトキシカルボニル-(１Ｈ-ピロール-２-イルメチル)-アミノ]-プロピオン酸ｅを得た。
【００７８】
実施例２  テトラヒドロピラニルグリシン
2012500272.tif 000028
テトラヒドロピラニルグリシンを、NovaBiochemから購入するか、又は文献：Ghosh, A. K.; Thompson, W. J.; holloway, M. K.; McKee, S. P.; Duong, T. T.; Lee, H. Y.; Munson, P. M.; Smith, A. M.; Wai, J. M; Darke, P. L.; Zugay, J. A.; Emini, E. A.;Schleife, W. A.; Huff, J. R.; Anderson, P. S. J. Med. Chem, 1993, 36, 2300-2310に従い合成した。
【００７９】
実施例３  ピペリジニルグリシン
2012500272.tif 000029
ピペリジニルグリシンを、Shieh等(Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425）により記載された手順に従い合成した。
【００８０】
実施例４  ４,４-ジフルオロシクロヘキシルグリシン
2012500272.tif 000030
４,４-ジフルオロシクロヘキシルグリシンを、米国特許出願第２００３０２１６３２５号に記載された手順に従い作製した。
【００８１】
実施例５  Ｂｏｃ(Ｓ)-２-アミノ-２-(４-ヒドロキシシクロヘキシル)酢酸
2012500272.tif 000031
Sheih等(Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425)により記載された手順に従い、ケトンａ(８．４ｇ)とＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)の溶液を、Ｎ-Ｃｂｚ-ホスホノグリシンメチルエステルｂ、ＴＭＧ(４．５ｍＬ)及びＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)の溶液に添加した。溶液を室温で４８時間維持し、ついで、１ＮのＨＣｌ(３×５０ｍＬ)、ブライン(１×５０ｍＬ)で洗浄し、乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、濃縮した。残留物をセライトに吸着させ、クロマトグラフィーにより精製し、ついで、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶させて更に精製し、５．２ｇの生成物ｃを得た。
【００８２】
2012500272.tif 000032
Sheih(Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425)により記載された手順に従い、エネアミドｃ(５．０ｇ)、(Ｓ,Ｓ)-Ｍｅ-ＢＰＥ-Ｒｈ(Ｉ)(１．５ｇ、Strem Chemicals, Newburyport, MA)、及びＭｅＯＨ(１００ｍＬ)の溶液を、７０ｐｓｉのＨ２下、４８時間激しく振揺した。減圧下で溶媒を除去した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、更なるＥｔＯＡｃと共にＳｉＯ２を通して濾過した。減圧下で溶媒を除去し、無色の固形物として４．０ｇの生成物ｄを得た。
2012500272.tif 000033
【００８３】
Ｃｂｚ-カルバメートｄ(４．０ｇ) Ｂｏｃ２Ｏ、(２．９ｇ)、２０％のＰｄ(ＯＨ)２・Ｃ(１．０ｇ)及びＭｅＯＨ(３０ｍＬ)の混合物を、Ｈ２の雰囲気下、６時間保持した。混合物を、ＭｅＯＨと共にセライトを通して濾過した。減圧下で溶媒を除去し、４．５ｇの残留物ｅを得、これを直接取り上げた。
2012500272.tif 000034
【００８４】
上述の残留物ｅを、Ｈ２Ｏ(１０ｍＬ)、ＡｃＯＨ(３０ｍＬ)、ＴＨＦ(５ｍＬ)、及びジクロロ酢酸(３ｍＬ)に溶解させ、室温で一晩保持した。水(５ｍＬ)を添加し、ＨＰＬＣ-ＭＳによりモニターして、加水分解が完了するまで保持した。ガスの発生が止まるまで、固形のＮａ２ＣＯ３を注意深く添加し、混合物をＮａＨＣＯ３水で希釈し、１０％のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭで抽出した。組合せた有機相をブラインで１回洗浄し、乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、濃縮した。残留物をクロマトグラフィーにより精製して、２．９ｇの生成物ｆを得た。
【００８５】
2012500272.tif 000035
ケトンｆ(１．５ｇ) ＭｅＯＨ(５０ｍＬ)の混合物を、０℃で２０分、ＮａＢＨ４(２９０ｍｇ)で処理した。１０％のクエン酸水を用いて、混合物を〜ｐＨ１まで酸性化させ、減圧下でＭｅＯＨを除去した。残留物を水で希釈し、２０％のＥｔＯＡｃ／ＤＣＭで抽出した。組合せた有機相をブラインで１回洗浄し、乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、濃縮した。残留物をクロマトグラフィーにより精製し、１．１７ｇの生成物ｇと０．２３ｇの生成物ｈを得た。
【００８６】
2012500272.tif 000036
エステルｇ(１．１７ｇ) ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ(１６０ｍｇ)、ＴＨＦ(３ｍＬ)及び水(４．５ｍＬ)の混合物を、室温で一晩激しく攪拌した。混合物をブラインで希釈し、ＥｔＯＡｃで徹底的に抽出した。組合せた有機相をブラインで１回洗浄し、乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、濃縮して、酸ｉ(５２５ｍｇ)を得た。
【００８７】
実施例６  Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-シクロプロピルメチル-Ｌ-アラニン
2012500272.tif 000037
Ｌ-アラニンメチルエステルヒドロクロリドａ(５ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)とシクロプロパンカルボキシアルデヒドｂ(２．６７ｍｌ、３５．８ｍｍｏｌ)を、５０ｍｌのＴＨＦｗ／１％ＡｃＯＨに懸濁させた。５ｍＬのＣＨ３ＯＨを添加して、濁った溶液を透明にした。ＮａＣＮＢＨ４(２．２５ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物を一晩攪拌した。１ＮのＮａＯＨ水を添加することにより反応を失活させ、ＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濃縮乾固した。３０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するクロマトグラフィー(ニンヒドリンにより染色)により粗物質を精製し、化合物ｃ(１ｇ、１８％)を得た。化合物ｃ(１ｇ、６．３７ｍｍｏｌ)及びジ-ｔ-ｂｏｃジカーボナート(２．１ｇ、９．５５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(２０ｍｌ)とＨ２Ｏ(２０ｍｌ)で希釈し、ＮａＨＣＯ３(１．３ｇ、１５．９ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を一晩攪拌して完全にした。減圧下でＴＨＦを除去し、水相をＥｔＯＡｃで３回抽出した。組合せた有機相を１ＮのＮａＯＨ、飽和ＮＨ４Ｃｌ、続いてブラインにより洗浄し、濃縮乾固した。Ｂｏｃ-保護された化合物ｄ(１．３９ｇ、５．４０ｍｍｏｌ)を、ＴＨＦ(２０ｍｌ)とＨ２Ｏ(２０ｍｌ)にＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ(１．１４ｇ、２７ｍｍｏｌ)が入ったものと共に、室温で一晩攪拌した。ＴＨＦを取り除き、１０％のクエン酸を添加することにより、水相をｐＨ＝４に調節し、ついでＥｔＯＡｃで３回抽出した。組合せた有機層をブラインで洗浄し、濃縮した。０％−５０％のアセトニトリル／Ｈ２Ｏにより溶離する逆相Ｃ-１８カラムにより、粗物質を精製し、白色の固形物として純粋な化合物ｅ(７９４ｍｇ)を得た。
【００８８】
実施例７  Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチル-Ｌ-アラニン-Ｌ-シクロヘキシルグリシン
2012500272.tif 000038
ＤＣＭ(５０ｍＬ)とＤＩＰＥＡ(５．６ｍＬ、３２ｍｍｏｌ)にＦｍｏｃ-Ｌ-シクロヘキシルグリシン(３．６ｇ、９．６ｍｍｏｌ)を溶解させた溶液を、２-クロロトリチルクロリド樹脂(５ｇ、８ｍｍｏｌ)に添加し、室温で３時間、穏やかに攪拌した。樹脂をＤＣＭで４回、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＤＩＰＥＡ(１７：２：１)で３回、ＤＣＭで３回、ジメチルアセトアミド(ＤＭＡ)で２回洗浄した。１５分、２０％のピペリジン／ＤＭＡ(５０ｍＬ)で樹脂を処理することにより、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＤＭＡで６回洗浄した。Ｂｏｃ-Ｎ-メチルアラニン(３．３ｇ、１６ｍｍｏｌ)、ＨＢＴＵ(６．１ｇ、１６ｍｍｏｌ)、及びＤＩＰＥＡ(５．６ｍＬ、３２ｍｍｏｌ)及びＤＭＡ／ＤＣＭ(１：１、５０ｍＬ)の溶液を樹脂に添加し、室温で２時間、穏やかに攪拌した。樹脂をＤＭＡで５回、ＤＣＭで２回洗浄し、減圧下で乾燥させた。室温で２時間、ＨＯＡｃ／ＴＦＥ／ＤＣＭ(１：１：３、１００ｍＬ)と共に穏やかに攪拌することにより、ジペプチドを樹脂から切断した。樹脂を濾過により除去し、溶液を濃縮した。ヘキサン(１５倍体積)で共沸することにより、残留ＡｃＯＨを除去した。固形残留物を逆相ＨＰＬＣ(Ｃ１８、ＭｅＣＮ-Ｈ２Ｏ、０．１％のＴＦＡ)により精製し、凍結乾燥により溶媒を除去し、白色粉末として１．２ｇ(４３％)のジペプチド-Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチル-Ｌ-アラニン-Ｌ-シクロヘキシルグリシンを得た。
【００８９】
実施例８  Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチル-Ｌ-アラニン-Ｌ-デヒドロピラニルグリシン
2012500272.tif 000039
Ｎ-Ｃｂｚ-デヒドロピラニルグリシンメチルエステルａ(Burk, M. J.;Gross, M. F.; Martinez, J. P. J. Am Chem. Soc. 1995, 117, 9375、及びそこでの参考文献)(５．２ｇ、１７ｍｍｏｌ)、５％のＰｄ・Ｃ(５００ｍｇ)、ＭｅＯＨ(７５ｍＬ)及びＴＨＦ(２５ｍＬ)の混合物を、２４時間、Ｈ２雰囲気下で保持した。混合物をセライトを通して濾過し、セライトをＭｅＯＨで洗浄し、減圧下で濃縮し、無色の油として定量的収率のアミンｂを得、これを直接使用した。
【００９０】
2012500272.tif 000040
上で調製されたアミンｂを、ＣＨ２Ｃｌ２(４０ｍＬ)、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液(４０ｍＬ)と組合せ、０℃まで冷却した。ついで、ベンジルオキシカルボニルクロリド(３．０ｍＬ)を滴下し、混合物を一晩激しく攪拌した。相を分離させ、水性相をＣＨ２Ｃｌ２(３×２０ｍＬ)で抽出した。組合せた有機相をブライン(１×５０ｍＬ)で洗浄し、乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、セライトに吸着させ、クロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、１２０ｇのシリカカラム、勾配溶離５−５５％のＥｔＯＡｃ-ヘキサン)を実施し、４．１５ｇ(８０％)のラセミのＣｂｚ-ピラニルグリシンメチルエステルを得た。１０％のＥｔＯＨ-ヘキサンを用いて溶出させるChiracel ＯＤカラムでエナンチオマーを分離した。これらの条件下で所望のＳ-エナンチオマーｃが最初に溶出する。
【００９１】
2012500272.tif 000041
(Ｓ)-Ｎ-Ｃｂｚ-ピラニルグリシンｃメチルエステル(２．４ｇ、７．８２ｍｍｏｌ)１０％のＰｄ・Ｃ(７００ｍｇ)、ＭｅＯＨ(８０ｍＬ)の混合物を、２４時間、１気圧のＨ２下で保持した。混合物を、ＭｅＯＨと共にセライトを通して濾過し、減圧下で濃縮し、無色の油として、１．３５ｇ(１００％)のアミンｄを得た。また、ピラニルグリシンは、Ghoshの手順(Ghosh, A. K.; Thompson, W. J.; Holloway, M. K.; McKee, S. P.; Duong, T. T.; Lee, H. Y.; Munson, P. M.; Smith, A. M.; Wai, J. M.; Darke, P. L.; Zugay, J. A.; Imini, E. A.; Schleif, W. A.; Huff, J. R.; Anderson, P. S. J. Med. Chem., 1993, 36, 2300)に従い、エナンチオピュアな形態で合成することができる。
【００９２】
2012500272.tif 000042
アミンｄ(１．３５ｇ、７．８ｍｍｏｌ)、Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチルアラニンｅ(１．７４ｇ、８．６ｍｍｏｌ)、ＥＤＣ(１．６５ｇ  ８．８ｍｍｏｌ)及びＭｅＣＮ(５０ｍＬ)の混合物を、室温で一晩保持した。減圧下でＭｅＣＮを除去し、残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、０．５ＮのＨＣｌ(３×１０ｍＬ)、０．５ＮのＮａＯＨ(３×１０ｍＬ)で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、濾過し、濃縮し、透明な油として、２．１ｇ(７５％)の保護されたジペプチドｆを得た。
【００９３】
2012500272.tif 000043
エステルｆ(２．１０ｇ、５．８６ｍｍｏｌ)とＴＨＦ(５０ｍＬ)の０℃の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ(１．２３ｇ、２９．３ｍｍｏｌ)と水(２ｍＬ)を添加した。混合物を０℃で２時間保持し、ついで、冷浴を取り除き、混合物を一晩攪拌した。ついで、減圧下でほとんどのＴＨＦを取り除き、残留物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、０．５ＮのＨＣｌで洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、濾過し、濃縮し、無色の固形物として、１．５３ｇ(７８％)のジペプチド-Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチル-Ｌ-アラニン-Ｌ-デヒドロピラニルグリシンｇを得た。
【００９４】
実施例９  Ｎ-Ｂｏｃ-保護環状スルホニルアミノ酸
2012500272.tif 000044
Shiehの一般的な手順[Shieh, W-C.; Xue, S.; Reel, N.; Wu, R.; Fitt, J.; Repic, O. Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425]に従って合成した硫化物ａ(８１０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ)をメタノール(２５ｍＬ)に溶解させた。オキソン(４．５ｇ)を脱イオン化した水(２５ ｍＬ)に溶解した。基質のメタノール溶液を−１０℃に冷却しながら、オキソン水溶液を反応物にゆっくりと加えた。反応を氷上に維持し、一晩攪拌し、徐々に室温まで温めた。脱イオン化水を、反応を約１５０ｍＬまで希釈するのに使用し、ついで９０％ＥｔＯＡｃ-ヘキサンに注ぎ、抽出した。有機相を乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、セライトに吸着させ、クロマトグラフィー(ISCO CombiFlash、４０ｇのカラム、５−９０％のＥｔＯＡｃ-ヘキサン）で３０分以上かけて精製し、生成物スルホンｂを８０４ｍｇ(２．２７ｍｍｏｌ、９１％)を得た。
2012500272.tif 000045
Burkの一般的な手順[Burk, M. J.; Gross, M. F.; Martinez, J. P. J. Am. Chem. Soc. 1995, 117, 9375-9376.]に従って、アルケンｂ(７７４ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ)、無水メタノール(４０ｍＬ)、及び［(Ｓ,Ｓ)-Ｍｅ-ＢＰＥ-Ｒｈ(ＣＯＤ)］＋ＯＴｆ−(５００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)を窒素をパージしたＰａｒｒ振とうフラスコ中で混合した。Ｐａｒｒフラスコを排気し続いて６０ｐｓｉで水素ガスを充填し、激しく一晩攪拌した。メタノールを減圧下で除去し、粗物質を、酢酸エチルを用いたシリカゲルの小プラグを通して濾過した。溶媒を蒸発させて、＞９８％の収率で生成物ｃを７３０ｍｇ(２．０ｍｍｏｌ、９４％)得た。
2012500272.tif 000046
Ｚ-保護アミノエステルｃ(８０４ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ)をメタノール(１６ｍＬ)に溶解した。この溶液にＢＯＣ-酸無水物(１．５ｇ、６．８ｍｍｏｌ)を加え、２０％Ｐｄ(ＯＨ)２・Ｃ(２５０ｍｇ)を続いて加えた。反応フラスコから家庭用掃除機により全ての空気を除去し、混合物を５分間激しく攪拌した。ついでフラスコに水素ガスを満たし、室温で６時間激しく攪拌した。水素雰囲気を除いたのち、混合物をメタノールを使用してセライトによって濾過し、粗物質ｄを溶媒を蒸発させて得た(５０８ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ、収率７０％)。
2012500272.tif 000047
エステルｄ(５０８ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ)をＴＨＦ８ｍＬに溶解した。脱イオン化水(４ｍＬ)を加え、ついでＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ(１２０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で一晩攪拌し、水性の１ＮのＨＣｌを用いて酸性化し、酢酸エチル(３×２５ｍＬ)中で抽出した。有機抽出物を更にＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、濾過し、濃縮してＮ-Ｂｏｃ-保護環状スルホニルアミノ酸ｅを３７２ｍｇ(１．２１ｍｍｏｌ、収率７８％)得、これを精製しないで用いた。
【００９５】
実施例１０  Ｎ-Ｂｏｃ-Ｎ-メチル-Ｌ-グリシン
2012500272.tif 000048
Griggの一般的な精製法[Blaney, P.; Grigg, R.; Rankovic, Z.; Thornton-Pett, M.; Xu, J. Tetrahedron, 2002, 58, 1719-1737]に従って、丸底フラスコに水酸化ナトリウム(４８０ｍｇの油中６０％分散液、１２．０ｍｍｏｌ、４．０当量)を入れ、窒素を１５分間パージした。ＴＨＦ(６．０ｍＬ)をフラスコに加え、懸濁液を、氷水浴を用いて０℃に冷却した。別のフラスコにＢＯＣ-グリシンａ(５２５ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)、乾燥ＴＨＦ(６．０ｍＬ)及びヨウ化エチル(１．０ｍＬ、１２ｍｍｏｌ、４当量)を入れた。混合物をＴＨＦ中のＮａＨ懸濁液に滴下して加え、０℃で激しく攪拌した。１時間攪拌した後、反応を室温まで温め一晩攪拌した。反応を再び０℃に冷却し、メタノール(４ｍＬ)をかなりゆっくり加え、過剰な水素化物をクエンチした。脱イオン化水を加えて混合物を希釈し、減圧下でメタノールを除去した。不純物を９０％のＥｔＯＡｃ-ヘキサンで抽出し、ついで固形クエン酸をｐＨが２−３になるまで加えて水性層を酸性化した。生成物を９０％の酢酸エチル−ヘキサンで抽出した。この有機層を乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)させ、濾過した。減圧下で溶媒を除去して、定量的収率の生成物ｂを得た。
【００９６】
実施例１１  Ｎ-Ｂｏｃ-フルオロ-Ｌ-アラニン
2012500272.tif 000049
未保護のアミノ酸ａ(７７５ｍｇ、７．２４ｍｍｏｌ)と炭酸ナトリウム(１．６９ｇ、１６．０ｍｍｏｌ)の混合物を脱イオン化水及びＴＨＦ(各々１５ｍＬ)の１：１溶液に溶解した。この混合物にＢＯＣ-酸無水物ｂ(１．７３ｇ、７．９６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で一晩攪拌し、ＴＨＦを減圧下で除去した。ついで混合物を飽和水性クエン酸によりｐＨ２−３になるまで酸性化させ、１０％の酢酸エチル-ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、濾過し、減圧下で濃縮して、更なる精製なしに使用される透明なＢＯＣ-保護アミノ酸ｃ(１．４０ｇ、６．７ｍｍｏｌ、９３％)を得た。
【００９７】
実施例１２  (Ｓ)-tert-ブチル ２-エチニルピロリジン-１-カルボキシレート
2012500272.tif 000050
ジメチル(２-オキソプロピル)-ホスホネートａ(１１．５ｇ、６９ｍｍｏｌ)を０℃で２００ｍＬの無水ＴＨＦ中の水酸化ナトリウム懸濁液に穏やかに加えた。混合物を０℃で１時間攪拌した。ついで５０ｍＬのＴＨＦに溶解したトルエンスルホニルアジド（１５．０ｇ、７６ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。混合物を３０分攪拌し、セライトで濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を、濃縮し、シリカゲルに吸着し、フラッシュクロマトグラフィーで(ＳｉＯ２、４０％から１００％の酢酸エチル／ヘキサン）精製して、８．５ｇ(６４％)の化合物ｂを黄色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ １９３ (Ｍ＋Ｈ)。
【００９８】
2012500272.tif 000051
Hinkleの一般的な手順(Hinkle, K.W. 等, Tet. Lett., 45, 2004, 5597-5599)に従って、Ｗｅｉｎｒｅｂアミドｃ(９．７ｇ、 ３７．６ｍｍｏｌ)を１００ｍＬのＤＣＭに溶かし、溶液を−７８℃に冷却した。ＤＩＢＡＬ溶解液(９４ｍＬのヘプタン中の１Ｍ溶液、９４ｍｍｏｌ)を２０分かけてゆっくり加えた。２０分後、反応を３０ｍＬの無水メタノールを加えてクエンチした。カリウム炭酸(１１．４ｇ、８２．７ｍｍｏｌ)を加え、ついで試薬ｂ(１０．１ｇ、５２．６ｍｍｏｌ)を加え、５０ｍＬのメタノールに溶解した。混合物を室温まで穏やかに温めながら一晩攪拌した。Ｒｏｃｈｅｌｌｅの塩（酒石酸カリウムナトリウムを加え、混合物を８時間攪拌した。水相を３×１００ｍＬのエーテルで抽出した。組み合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油をフラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、０％から３０％の酢酸エチル／ヘキサン)で精製し、４．６ｇ(６３％)の化合物ｄ(Ｓ)-tert-ブチル ２-エチニルピロリジン-１-カルボキシレートを無色な油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ １９６ (Ｍ＋Ｈ)。
【００９９】
実施例１３  (Ｓ)-７-フェニル-２-(ピロリジン-２-イル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｃ]ピリジン
2012500272.tif 000052
化合物ｂ(２３ｇ、７．９ｍｍｏｌ)、テトラキス（トリフェフェニルホスフィン）パラジウム(５９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ)及びヨウ化銅(９５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ)を無水ＴＨＦ中で懸濁した。トリエチルアミン(５．６ｍＬ、４０．８ｍｍｏｌ)を加え、アルキンａ(２．０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ)を続いて加え、１５ｍＬのＴＨＦに溶解させた。混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物をセライトで濾過し、エーテルで洗浄した。濾液をシリカゲルで濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、０％から６０％の酢酸エチル／ヘキサン)で精製して、２．０ｇ(８０％)の化合物ｃをオレンジ色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３２２ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１００】
化合物ｃ(２．０ｇ、６．２ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(８ｍＬ)に溶解し、ＣｕＩ(１８０ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を１１０℃に加熱し、４８時間攪拌した。室温まで混合物を冷やし、４０ｍＬのＤＣＭで希釈し、１００ｍＬの水で洗浄した。水性相を２×４０ｍＬのＤＣＭで抽出した。組み合わせた有機相をブライン(１００ｍＬ)で洗浄し、でＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。粗油をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサンから酢酸エステル)で精製して７４０ｍｇ(３７％)の化合物ｄを黄色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３２２ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０１】
化合物ｄ(７４０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ)、フェニルボロン酸(４２１ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ)、テトラキス（トリフェフェニルホスフィン）パラジウム(２１３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ)及び炭酸カリウム(４７０ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(８ｍＬ)中に懸濁させた。脱酸素化水(０．７ｍＬ)を加え、窒素を混合物に５分間バブリングさせる。ついで混合物を１１０℃に加熱し１時間攪拌した。溶液を室温まで冷却し、３０ｍＬのＤＣＭで希釈し、水(５０ｍＬ)で洗浄した。水相をＤＣＭ(２×２５ｍＬ)で抽出した。組み合わせた有機相をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油をシリカゲルに吸着し、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ、ヘキサンから酢酸エチル)で精製して６６０ｍｇ(７９％)の化合物ｅを黄色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３６４ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０２】
化合物ｅ(６６０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ)を１,４-ジオキサン(４５ｍＬ、１８０ｍｍｏｌ)中の４ＮのＨＣｌ溶解液に溶かし、３０分間室温で攪拌した。ついで溶液を濃縮し、５３９ｍｇ(１００％)のｆ(Ｓ)-７-フェニル-２-(ピロリジン-２-イル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｃ]ピリミジンを黄色の固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ２６４ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０３】
実施例１４  (Ｓ)-４-フェニル-６-(ピロリジン-２-イル)-５Ｈ-ピロロ[３,２-ｄ]ピリミジン
2012500272.tif 000053
化合物ａ(４５０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ)、４,６-ジクロロ-５-アミノピリミジンｂ(１,１ｇ、６．９ｍｍｏｌ)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム(１３３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ)及びヨウ化銅(２２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ)をトリエチルアミン(５ｍＬ)に溶解させた。混合物を８０℃で２時間攪拌した。ついで反応混合物を室温にまで冷却し、セライトで濾過し、エーテルで洗浄した。濾液をシリカゲルに吸着し、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、０％から６０％の酢酸エチル／ヘキサン)で精製し、４５２ｍｇ(６１％)の化合物ｃを黄色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３２３ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０４】
化合物ｃ(３３０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(２ｍＬ)で溶解した。ヨウ化銅(２９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を２時間１１０℃で攪拌した。混合物を室温まで冷やし、２０ｍＬのＤＣＭで希釈し、シリカゲルに吸着して、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサンから酢酸エチル)で３２０ｍｇ(９７％)の化合物ｄを黄色の油として得た。
【０１０５】
化合物ｄ(３２０ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ)、フェニルボロン酸、テトラキス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム及び炭酸カリウムをＤＭＦ中に懸濁した。脱酸素水を加え、窒素を混合物に５分間バブリングした。ついで混合物を１１０℃まで加熱し、１時間攪拌した。溶液を室温まで冷やし、３０ｍＬのＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。水相をＤＣＭ(２×)で抽出した。組み合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油をシリカゲルに吸着し、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサンから酢酸エチル)で精製し、３５１ｍｇ(９６％)のｅを黄色の油として得た。
ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３６５ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０６】
化合物ｅ(３５０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ)を１,４-ジオキサン中の４ＮのＨＣｌ溶解液に溶解させ、室温で３０分攪拌した。ついで溶液を濃縮して２８１ｍｇ(９７％)のｆ(Ｓ)-４-フェニル-６-(ピロリジン-２-イル)-５Ｈ-ピロロ[３,２-ｄ]ピリミジンを薄い黄色の固形物として得た。ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ２６５ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０７】
実施例１５  (Ｓ)-２-メチル-４-フェニル-６-(ピロリジン-２-イル)-５Ｈ-ピロロ[３,２-ｄ]ピリミジン
2012500272.tif 000054
化合物ａ(４５０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ)、４,６-ジクロロ-５-アミノピリミジンｂ(３．２ｇ、１８．０ｍｍｏｌ)、テトラキス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム及びヨウ化銅をトリエチルアミンに溶解した。混合物を８０℃で２時間攪拌した。反応混合物を続いて室温まで冷やし、セライト上で濾過し、エーテルで洗浄した。濾液をシリカゲルで濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、０％から６０％の酢酸エチル／ヘキサン)で精製して、１．８ｇ(９０％)の化合物ｃを黄色の油として得た。ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３３７ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０８】
化合物ｃ(１．８ｇ、５．３ｍｍｏｌ)をＤＭＦに溶解した。ヨウ化銅を加え、混合物を１１０℃で２時間攪拌した。混合物を室温まで冷やして、２０ｍＬのＤＣＭで希釈し、シリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサンから酢酸エチル)で精製して、１．７５ｇ(９７％)の化合物ｄを黄色の油として得た。ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３３７ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１０９】
化合物ｄ(７００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ)、フェニルボロン酸、テトラキス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム及び炭酸カリウムをＤＭＦ中に懸濁した。脱酸素水を加え、窒素を混合物に５分間バブリングさせた。混合物を１１０℃に加熱し、１時間攪拌した。その溶液を室温まで冷やし、ＤＣＭで希釈し、水（５０ｍＬ）で洗浄した。水相をＤＣＭで抽出した（２×）。組み合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、ヘキサンから酢酸エチル)で精製して、７８５ｍｇ(９９％)のｅを黄色の油として得た。ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３７９ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１１０】
化合物ｅ(７８５ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ)を１,４-ジオキサン中の４ＮのＨＣｌ溶解液に溶解し、３０分室温で攪拌した。ついで溶液を濃縮し、５４０ｍｇ(８２％)のｆ(Ｓ)-２-メチル-４-フェニル-６-(ピロリジン-２-イル)-５Ｈ-ピロロ[３,２-ｄ]ピリミジンを淡い黄色の固形物として得た。ＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ２７９ (Ｍ＋Ｈ)。
【０１１１】
実施例１６  ＩＡＰ阻害アッセイ
2012500272.tif 000055
化合物ａ(４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(２．０ｍＬ)に溶かし、水酸化ナトリウム(７．０ｍｇの油中６０％懸濁液、０．１６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で１０分攪拌し、ヨードメタン(１６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ)を加え、混合物をついで４５分攪拌した。ついで混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(２０ｍＬ)で洗浄した。濾液をシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー(１００％のヘキサンから１００％のＥｔＯＡｃ)によって精製して、２４ｍｇ(５８％)の化合物ｂを白色固形物として得た。ＬＣＭＳ： ｍ／ｚ ＝ ３７８
【０１１２】
実施例１７  ＩＡＰ阻害アッセイ
以下の実験においては、１１０残基の１１がＸＩＡＰ ＢＩＲ３に見出されるものに相当し、残りがＭＬ-ＩＡＰ-ＢＩＲに相当するＭＬＸＢＩＲ３ＳＧと呼ばれるキメラＢＩＲドメインを使用した。キメラタンパク質ＭＬＸＢＩＲ３ＳＧは、天然ＢＩＲドメインの何れよりも有意に良好にカスパーゼ-９に結合してこれを阻害することが示されたが、天然ＭＬ-ＩＡＰ-ＢＩＲのものに類似した親和性を有する成熟Ｓｍａｃ及びＳｍａｃ-ベースのペプチドに結合した。キメラＢＩＲドメインＭＬＸＢＩＲ３ＳＧのカスパーゼ-９阻害の改善度合いは、ＭＣＦ７細胞に形質移入した場合に、ドキソルビシン誘導アポトーシスの阻害の増加と相関していた。
【０１１３】
ＭＬＸＢＩＲ３ＳＧ配列：
ＭＧＳＳＨＨＨＨＨＨＳＳＧＬＶＰＲＧＳＨＭＬＥＴＥＥＥＥＥＥＧＡＧＡＴＬＳＲＧＰＡＦＰＧＭＧＳＥＥＬＲＬＡＳＦＹＤＷＰＬＴＡＥＶＰＰＥＬＬＡＡＡＧＦＦＨＴＧＨＱＤＫＶＲＣＦＦＣＹＧＧＬＱＳＷＫＲＧＤＤＰＷＴＥＨＡＫＷＦＰＧＣＱＦＬＬＲＳＫＧＱＥＹＩＮＮＩＨＬＴＨＳＬ（配列番号：１）
【０１１４】
類似するｃＩＡＰ１-ＢＩＲ３／ＸＩＡＰ-ＢＩＲ３とｃＩＡＰ２-ＢＩＲ３／ＸＩＡＰ-ＢＩＲ３キメラタンパク質、ｃＩＡＰ１ＸＢＩＲ３及びｃＩＡＰ２ＸＢＩＲ３をそれぞれＭＬＸＢＩＲ３ＳＧと同じような様式で遺伝子操作、発現、精製した。ＭＬＸＢＩＲ３ＳＧとの場合と同様に、これらのＢＩＲドメインのアミノ酸配列は天然ｃＩＡＰペプチド結合部位を保持している。
ｃＩＡＰ１ＸＢＩＲ３配列：
ＭＱＴＨＡＡＲＭＲＴＦＭＹＷＰＳＳＶＰＶＱＰＥＱＬＡＡＡＧＦＹＹＶＧＲＮＤＤＶＫＣＦＳＣＤＧＧＬＲＣＷＥＳＧＤＤＰＷＶＥＨＡＫＷＦＰＧＣＥＦＬＩＲＭＫＧＱＥＹＩＮＮＩＨＬＴＨＳＬ（配列番号：２）
ｃＩＡＰ２ＸＢＩＲ３配列：
ＭＱＴＨＡＡＲＦＫＴＦＦＮＷＰＳＳＶＬＶＮＰＥＱＬＡＡＡＧＦＹＹＶＧＮＳＤＤＶＫＣＦＳＣＤＧＧＬＲＣＷＥＳＧＤＤＰＷＶＱＨＡＫＷＦＰＧＣＥＹＬＩＲＩＫＧＱＥＹＩＮＮＩＨＬＴＨＳＬ（配列番号：３）
【０１１５】
蛍光偏光ペプチド結合アッセイ
偏光実験を、Keating, S.M., Marsters, J, Beresini, M., Ladner, C., Zioncheck, K., Clark, K., Arellano, F., 及びBodary., S.(2000), Proceedings of SPIE : In Vitro Diagnostic Instrumentation (Cohn, G.E.編)pp128-137, Bellingham, WAの手順に従い、アナリストＨＴ９６-３８４(Molecular Devices Corp.)で実施した。最初の偏光実験はＩＡＰタンパク質ＢＩＲドメインと蛍光プローブとの間の解離定数(Ｋｄ)を決定するため実施した。蛍光偏光親和実験のための試料を、偏光用バッファー(５０ｍＭのトリス[ｐＨ７．２]、１２０ｍＭのＮａＣｌ、１％のウシグロブリン、５ｍＭのＤＴＴ及び０．０５％のオクチルグルコシド)において、連続希釈のＭＬＸＢＩＲ３ＳＧ、ＸＩＡＰ-ＢＩＲ３、ｃＩＡＰ１ＸＢＩＲ３又はｃＩＡＰ２ＸＢＩＲ３を、５ｎＭの５-カルボキシフルオレセイン(５-ＦＡＭ)−コンジュゲートＡＶＰジ-フェニルアラニン-ＡＫＫ(ＡＶＰ-ジＰｈｅ-ＦＡＭ)に添加することにより調製した。得られた反応物を３８４ウェルのブラックＨＥ９６プレート(Molecular Devices Corp.; Sunnyvale, CA)において室温で３０分インキュベートし、フルオレセインフルオロフォア(λｅｘ＝４８５ｎｍ；λｅｍ＝５３０ｎｍ)用の標準的なフィルターを用い、反応を読み取った。蛍光偏光値をタンパク質濃度の関数としてプロットし、Kaleidographソフトウエア(Synergy Software、Reading, PA)を使用しデータを４パラメータ式にフィットさせることによって、５０％有効濃度５０(ＥＣ５０)値を得た。見かけのＫｄ値はＥＣ５０値から決定した。
2012500272.tif 000056
【０１１６】
アンタゴニストに対する阻害定数(Ｋｉ値)を、偏光用バッファーにおいて１：３連続希釈のアンタゴニスト、及び５ｎＭのＡＶＰ-ジＰｈｅ-ＦＡＭプローブを含むウェルに、０．０６μＭのＭＬＸＢＩＲ３ＳＧ、０．５μＭのＸ-ＩＡＰ ＢＩＲ３、０．２μＭのＣ-ＩＡＰ１ ＢＩＲ３又は０．４μＭのＣ-ＩＡＰ-２ ＢＩＲ３を添加することにより決定した。１０分から３０分のインキュベート後、それぞれの試料のフルオロセイン偏光値を読み取った。蛍光偏光値をアンタゴニスト濃度の関数としてプロットし、Kaleidographソフトウエア(Synergy Software, Reading, PA)を使用し、データを４パラメータ等式にあてはめることで５０％阻害（ＩＣ５０）値を得た。ＩＣ５０値から、アンタゴニストのＫｉ値を決定した(Keating 等 2000)。このアッセイで試験された本発明の化合物は、表１に示すようなＫｉ及びＩＣ５０値を示した。（全ての値はｎＭである。）
【０１１７】
2012500272.tif 000057
【配列表】
2012500272000001.app
【国際調査報告】
2012500272.tif 000061
2012500272.tif 000062
2012500272.tif 000063
2012500272.tif 000064
2012500272.tif 000065