【手続補正書】
【提出日】令和1年12月25日(2019.12.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）少なくとも１つのキメラ抗原受容体、および
（ｂ）少なくとも１つの染色体外アデノウイルスゲノムを含む、
単離された、操作された免疫細胞であって、ここで
前記アデノウイルスゲノムが、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子の領域中に少なくとも１つの欠失を有し、前記キメラ抗原受容体をコードする、細胞。
【請求項２】
前記キメラ抗原受容体が標的に結合し、必要に応じて、前記結合が、
（ｉ）ＭＨＣ非依存性；または
（ｉｉ）ＭＨＣ依存性
である、請求項１に記載の細胞。
【請求項３】
前記結合が、疾患関連標的に特異的であり、必要に応じて、前記疾患ががんであり、さらに必要に応じて、前記がんが、
（ｉ）固形腫瘍；または
（ｉｉ）液性腫瘍
である、請求項２に記載の細胞。
【請求項４】
前記受容体が、標的抗原に結合する、請求項１から３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５】
二次受容体をさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６】
前記染色体外アデノウイルスゲノムが、アデノウイルス血清型５（Ａｄ５）である、請求項１から５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７】
前記アデノウイルスゲノムが、初期領域１（Ｅ１）遺伝子の領域中の欠失、初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項８】
前記アデノウイルスゲノムが、初期領域１（Ｅ１）遺伝子、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子、および初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失を含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項９】
医薬組成物に製剤化される、請求項１から８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１０】
併用療法を必要とする被験体を処置するための併用療法の方法において使用するための、請求項１から９のいずれか一項に記載の細胞を含む組成物。
【請求項１１】
免疫細胞を調製する方法であって、前記方法は、細胞を、少なくとも１つの外因性キメラ抗原受容体配列を含む少なくとも１つの操作された染色体外アデノウイルスベクターとｅｘ  ｖｉｖｏで接触させるステップを含み、前記染色体外アデノウイルスベクターは、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子の領域中の少なくとも１つの遺伝子欠失を有する、方法。
【請求項１２】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の細胞、または請求項１１により調製された細胞を含む医薬組成物。
【請求項１３】
状態の処置を必要とする被験体において状態を処置する方法において使用するための、請求項１２に記載の医薬組成物であって、前記方法は、治療有効量の請求項１２に記載の医薬組成物を被験体に投与するステップを含む、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
他の目的、特性、および利点は、以下の詳細な説明から明白になるだろう。しかしながら、当業者であれば、本発明の趣旨および範囲内の種々の変更および改変は、本明細書の詳細な説明から明白になるため、詳細な説明および特定の例は、特定の実施形態を示すものであるが、例示のために提示されているに過ぎないことが理解されるべきである。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
（ａ）少なくとも１つの操作された受容体、および
（ｂ）少なくとも１つの染色体外アデノウイルスゲノムを含む、
細胞であって、ここで
前記アデノウイルスゲノムが、アデノウイルス遺伝子の領域中に少なくとも１つの欠失を有し、前記操作された受容体をコードする、細胞。
（項目２）
前記操作された受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、もしくはＢ細胞受容体（ＢＣＲ）、またはそれらの誘導体である、項目１に記載の細胞。
（項目３）
前記操作された受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、項目１および２に記載の細胞。
（項目４）
前記ＣＡＲが第一世代ＣＡＲである、項目２および３に記載の細胞。
（項目５）
前記ＣＡＲが第二世代ＣＡＲである、項目２および３に記載の細胞。
（項目６）
前記ＣＡＲが第三世代ＣＡＲである、項目２および３に記載の細胞。
（項目７）
前記ＣＡＲが、細胞外部分、膜貫通部分、および細胞内部分を含む、項目２から６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目８）
前記細胞内部分が、少なくとも１つのＴ細胞共刺激ドメインを含む、項目７に記載の細胞。
（項目９）
前記Ｔ細胞共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＴＮＦＲＳ９（４−１ＢＢ）、ＴＮＦＲＳＦ４（ＯＸ４０）、ＴＮＦＲＳＦ８（ＣＤ３０）、ＣＤ４０ＬＧ（ＣＤ４０Ｌ）、ＩＣＯＳ、ＩＴＧＢ２（ＬＦＡ−１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＫＬＲＣ２（ＮＫＧ２Ｃ）、ＴＮＦＲＳ１８（ＧＩＴＲ）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＨＶＥＭ）、またはそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目８に記載の細胞。
（項目１０）
前記操作された受容体が標的に結合する、項目１から９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１）
前記結合が、ＭＨＣ非依存性である、項目１０に記載の細胞。
（項目１２）
前記結合が、ＭＨＣ依存性である、項目１０に記載の細胞。
（項目１３）
前記結合が、疾患関連標的に特異的である、項目１０から１２に記載の細胞。
（項目１４）
前記疾患が、がんである、項目１３に記載の細胞。
（項目１５）
前記がんが、固形腫瘍である、項目１４に記載の細胞。
（項目１６）
前記がんが、液性腫瘍である、項目１４に記載の細胞。
（項目１７）
前記受容体が、標的抗原に結合する、項目１から１６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１８）
前記標的抗原が、腫瘍細胞ネオ抗原、腫瘍ネオエピトープ、腫瘍特異的抗原、腫瘍関連抗原、組織特異的抗原、細菌抗原、ウイルス抗原、酵母抗原、真菌抗原、原生動物抗原、寄生生物抗原、マイトジェン、またはそれらの組み合わせである、項目１７に記載の細胞。
（項目１９）
前記標的抗原が、がん胎児抗原（ＣＥＡ）、ヒト上皮増殖因子受容体１（ＨＥＲ１）、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、ヒト上皮増殖因子受容体３（ＨＥＲ３）、ヒト上皮増殖因子受容体４（ＨＥＲ４）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ムチン１（ＭＵＣ１）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、ＰＳＭＡ、Ｂｒａｃｈｙｕｒｙ、葉酸受容体アルファ、ＷＴ１、ｐ５３、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＢＡＧＥ、ＤＡＭ−６、−１０、ＧＡＧＥ−１、−２、−８、ＧＡＧＥ−３、−４、−５、−６、−７Ｂ、ＮＡ８８−Ａ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＲＴ−１、ＭＣ１Ｒ、Ｇｐ１００、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ＡＲＴ−４、ＣＡＭＥＬ、Ｃｙｐ−Ｂ、ＢＲＣＡ１、ＢＲＡＣＨＹＵＲＹ（ＴＩＶＳ７−２、多型）、ＢＲＡＣＨＹＵＲＹ（ＩＶＳ７  Ｔ／Ｃ多型）、Ｔ  ＢＲＡＣＨＹＵＲＹ、Ｔ、ｈＴＥＲＴ、ｈＴＲＴ、ｉＣＥ、ＭＵＣ１（ＶＮＴＲ多型）、ＭＵＣ１ｃ、ＭＵＣ１ｎ、ＭＵＣ２、ＰＲＡＭＥ、Ｐ１５、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−３、ＡＦＰ、β−カテニン／ｍ、カスパーゼ−８／ｍ、ＣＤＫ−４／ｍ、ＥＬＦ２Ｍ、ＧｎＴ−Ｖ、Ｇ２５０、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ＫＩＡＡ０２０５、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、ミオシン／ｍ、ＲＡＧＥ、ＳＡＲＴ−２、ＴＲＰ−２／ＩＮＴ２、７０７−ＡＰ、アネキシンＩＩ、ＣＤＣ２７／ｍ、ＴＰＩ／ｍｂｃｒ−ａｂｌ、ＥＴＶ６／ＡＭＬ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｐｍｌ／ＲＡＲα、もしくはＴＥＬ／ＡＭＬ１、もしくはそれらの修飾バリアント、スプライスバリアント、機能的エピトープ、エピトープアゴニスト、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目１７から１８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２０）
前記受容体が、腫瘍関連細胞に結合する、項目１から１９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２１）
前記腫瘍関連細胞が、線維芽細胞、がん幹細胞、周皮細胞、および間質細胞からなる群より選択される、項目２０に記載の細胞。
（項目２２）
二次受容体をさらに含む、項目１から２１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２３）
前記二次受容体が、コクサッキーアデノウイルス受容体である、項目２２に記載の細胞。
（項目２４）
前記染色体外アデノウイルスゲノムが、アデノウイルス血清型５（Ａｄ５）である、項目１から２３のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２５）
アデノウイルス遺伝子の領域中の前記欠失が、初期領域１（Ｅ１）遺伝子の領域中の欠失、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子中の欠失、初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失、またはそれらの組み合わせである、項目１から２４のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２６）
アデノウイルス遺伝子の領域中の前記欠失が、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子の領域中の欠失である、項目１から２５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２７）
アデノウイルス遺伝子の領域中の前記欠失が、初期領域１（Ｅ１）遺伝子、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子、および初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失である、項目１から２６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２８）
外因性遺伝子をさらに含む、項目１から２７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２９）
前記外因性遺伝子が、自殺遺伝子、サイトカイン遺伝子、抗血管新生遺伝子、代謝遺伝子、または低酸素遺伝子を含むリストから選択される、項目２８に記載の細胞。
（項目３０）
内因性遺伝子欠失をさらに含む、項目１から２９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３１）
免疫細胞である、項目１から３０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３２）
前記免疫細胞がＴ細胞である、項目３１に記載の細胞。
（項目３３）
前記Ｔ細胞が、エフェクター（ＴＥＦＦ）細胞、エフェクターメモリー（ＴＥＭ）細胞、セントラルメモリー（ＴＣＭ）、Ｔメモリー幹（ＴＳＣＭ）、ナイーブ（ＴＮ）、またはＣＤ４＋もしくはＣＤ８＋である、項目３２に記載の細胞。
（項目３４）
霊長類細胞である、項目１から３３のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３５）
ヒト細胞である、項目１から３４のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３６）
ｅｘ  ｖｉｖｏで増大される、項目１から３５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３７）
医薬組成物に製剤化される、項目１から３６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３８）
それを必要とする被験体を処置するための併用療法の一部である、項目１から３７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目３９）
前記操作された受容体が、それを必要とする前記被験体のゲノムに組み込まれている、項目１から３８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目４０）
細胞を調製する方法であって、細胞を、少なくとも１つの外因性受容体配列を含む少なくとも１つの操作された染色体外ベクターとｅｘ  ｖｉｖｏで接触させるステップを含む、方法。
（項目４１）
前記染色体外ベクターが、アデノウイルスベクターである、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記アデノウイルスベクターが、アデノウイルス血清型５（Ａｄ５）である、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記ベクターが、少なくとも１つの遺伝子欠失を有する、項目４０から４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記欠失が、初期領域１（Ｅ１）遺伝子および初期領域３（Ｅ３）遺伝子の領域中の欠失である、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記欠失が、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子中の欠失、初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失、またはそれらの組み合わせである、項目４３に記載の方法。
（項目４６）
前記ベクターが、初期領域１（Ｅ１）遺伝子、初期領域２ｂ（Ｅ２ｂ）遺伝子、および初期領域３（Ｅ３）遺伝子中の欠失を含有する、項目４０から４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記ベクターが、中空ベクターではない、項目４０から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記外因性受容体の前に、少なくとも１つの二次受容体を導入するステップをさらに含む、項目４０から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記二次受容体が、コクサッキーアデノウイルス受容体である、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記外因性受容体配列が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、もしくはＢ細胞受容体（ＢＣＲ）、またはそれらの誘導体を含むリストから選択される、項目４０から４９のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記外因性受容体配列が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記ベクターが、第２の外因性遺伝子配列をさらに含む、項目４０から５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記外因性遺伝子配列が、自殺遺伝子、サイトカイン遺伝子、抗血管新生遺伝子、代謝遺伝子、および低酸素遺伝子からなる群より選択される、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記第２の外因性遺伝子配列が、誘導可能な自殺遺伝子配列を含む、項目４０から５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５５）
前記誘導可能な自殺遺伝子配列が、誘導可能なカスパーゼ９遺伝子配列、またはＥＧＦ受容体Ｒ配列の部分である、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記外因性受容体配列が、少なくとも１つのベクターを用いて前記細胞内に導入される、項目４０から５５のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記細胞が、ｅｘ  ｖｉｖｏで活性化されている、項目４０から５６のいずれか一項に記載の方法。
（項目５８）
前記活性化が、前記外因性受容体配列が導入される前に生じる、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
前記活性化が、抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）、抗ＣＤ２８、少なくとも１つのサイトカイン、またはそれらの任意の組み合わせで実施される、項目５７から５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記サイトカインが、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン−２１（ＩＬ−２１）、またはそれらの任意の組み合わせを含む、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
前記細胞を増大させるステップをさらに含む、項目４０から６０に記載の方法。
（項目６２）
前記細胞が、それを必要とする被験体に対して自系である、項目４０から６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
前記細胞が、それを必要とする被験体に対して同種異系である、項目４０から６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
それを必要とする前記被験体が、前記アデノウイルスベクターに対して既存免疫を有する、項目６２から６３のいずれか一項に記載の方法。
（項目６５）
前記細胞が、医薬品および医薬部外品の製造管理および品質管理規則（ＧＭＰ）準拠の試薬である、項目４０から６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
前記試薬が、がんを処置するための併用療法の一部である、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
項目１から３９のいずれか一項に記載の細胞、または項目４０から６６のいずれか一項により調製された細胞を含む医薬組成物。
（項目６８）
状態の処置を必要とする被験体において状態を処置する方法であって、治療有効量の項目６７に記載の医薬組成物を被験体に投与するステップを含む、方法。
（項目６９）
前記医薬組成物が、静脈内投与される、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記医薬組成物が、腫瘍に局所投与される、項目６８に記載の方法。
（項目７１）
１つもしくは複数の追加の治療剤を投与するステップ、または１つもしくは複数の追加の療法で前記被験体を処置するステップをさらに含む、項目６８から７０のいずれか一項に記載の方法。
（項目７２）
１つまたは複数の追加の療法での前記被験体の処置が、移植を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
１つまたは複数の追加の療法での前記被験体の処置が、免疫療法を含む、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記医薬組成物が、前記被験体に対して自系である、項目６８から７３のいずれか一項に記載の方法。
（項目７５）
前記医薬組成物が、前記被験体に対して同種異系である、項目６８から７４のいずれか一項に記載の方法。
（項目７６）
操作されたナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の集団を含む医薬組成物を、前記被験体に投与するステップをさらに含む、項目６８から７５のいずれかに記載の方法。
（項目７７）
前記操作されたＮＫ細胞が、ＫＩＲ（キラー細胞阻害受容体）の発現を本質的に欠如するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞、高親和性ＣＤ１６バリアントを発現するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞、および１つまたは複数のＣＡＲ（キメラ抗原受容体）を発現するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞、またはそれらの任意の組み合わせを含む、項目７６に記載の方法。
（項目７８）
前記操作されたＮＫ細胞が、前記ＫＩＲの発現を本質的に欠如するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞を含む、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記操作されたＮＫ細胞が、高親和性ＣＤ１６バリアントを発現するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞を含む、項目７７に記載の方法。
（項目８０）
前記操作されたＮＫ細胞が、１つまたは複数のＣＡＲを発現するように改変されている１つまたは複数のＮＫ細胞を含む、項目７７に記載の方法。
（項目８１）
前記ＣＡＲが、腫瘍ネオ抗原、腫瘍ネオエピトープ、ＨＰＶ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＷＴ１、ｐ５３、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＢＡＧＥ、ＤＡＭ−６、ＤＡＭ−１０、葉酸受容体アルファ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７Ｂ、ＮＡ８８−Ａ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＲＴ−１、ＭＣ１Ｒ、Ｇｐ１００、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ＡＲＴ−４、ＣＡＭＥＬ、ＣＥＡ、Ｃｙｐ−Ｂ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＢＲＣＡ１、Ｂｒａｃｈｙｕｒｙ、Ｂｒａｃｈｙｕｒｙ（ＴＩＶＳ７−２、多型）、Ｂｒａｃｈｙｕｒｙ（ＩＶＳ７  Ｔ／Ｃ多型）、Ｔ  Ｂｒａｃｈｙｕｒｙ、Ｔ、ｈＴＥＲＴ、ｈＴＲＴ、ｉＣＥ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１（ＶＮＴＲ多型）、ＭＵＣ１ｃ、ＭＵＣ１ｎ、ＭＵＣ２、ＰＲＡＭＥ、Ｐ１５、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−３、ＡＦＰ、β−カテニン／ｍ、カスパーゼ−８／ｍ、ＣＤＫ−４／ｍ、ＥＬＦ２Ｍ、ＧｎＴ−Ｖ、Ｇ２５０、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ＫＩＡＡ０２０５、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、ミオシン／ｍ、ＲＡＧＥ、ＳＡＲＴ−２、ＴＲＰ−２／ＩＮＴ２、７０７−ＡＰ、アネキシンＩＩ、ＣＤＣ２７／ｍ、ＴＰｌ／ｍｂｃｒ−ａｂｌ、ＥＴＶ６／ＡＭＬ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｐｍｌ／ＲＡＲα、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、またはそれらの任意の組み合わせに対するＣＡＲである、項目７７または８０に記載の方法。