【手続補正書】
【提出日】令和2年1月10日(2020.1.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
上皮成長因子受容体変異体III(ＥＧＦＲｖIII)結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインを含むＥＧＦＲｖIII特異的キメラ抗原受容体(ＣＡＲ)であって、ＥＧＦＲｖIII結合ドメインが：
（ａ）４２Ｇ９の重鎖可変(ＶＨ)相補性決定領域１(ＶＨ  ＣＤＲ１)、ＶＨ相補性決定領域２(ＶＨ  ＣＤＲ２)、およびＶＨ相補性決定領域３(ＶＨ  ＣＤＲ３)の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含む重鎖可変(ＶＨ)領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号７４〜７６のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号７７〜７８のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号７９のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
４２Ｇ９の軽鎖可変(ＶＬ)相補性決定領域１(ＶＬ  ＣＤＲ１)、ＶＬ相補性決定領域２(ＶＬ  ＣＤＲ２)、およびＶＬ相補性決定領域３(ＶＬ  ＣＤＲ３)の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含む軽鎖可変(ＶＬ)領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１５８のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｂ）３２Ａ１０のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号８０〜８２のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号８３〜８４のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号８５のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
３２Ａ１０のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１５９のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１６０のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｃ）２０Ｂ９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号８０〜８２のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号８６〜８７のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号７９のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
２０Ｂ９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１６２のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１６３のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１６４のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｄ）１４Ｃ１１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号８８〜９０のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号９１〜９２のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号８５のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
１４Ｃ１１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１６５のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１６３のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｅ）３０Ｄ８のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号１０９〜１１１のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号１１２〜１１３のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号１１４のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
３０Ｄ８のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１８２のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１８３のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１８４のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｆ）２０Ｅ１２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号１１５〜１１７のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号１１８〜１１９のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号１２０のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
２０Ｅ１２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１８５のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１８６のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１８４のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｇ）２６Ｂ９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号１２１〜１２３のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号１２４〜１２５のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号１２６のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
２６Ｂ９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１８７のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１８８のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１８９のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｈ）Ｃ６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号１３７〜１３９のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号１４０〜１４１のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号１４２のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
Ｃ６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１９５のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１９６のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１９７のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域；または
（ｉ）１２Ｂ２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、およびＶＨ  ＣＤＲ３の順で含むＶＨ領域であって、ＶＨ  ＣＤＲ１は配列番号７４〜７６のうちの１つのアミノ酸配列を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は配列番号１０２〜１０３のうちの１つのアミノ酸配列を含み、およびＶＨ  ＣＤＲ３は配列番号１０４のアミノ酸配列を含む、ＶＨ領域、および
１２Ｂ２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の３つの相補性決定領域を、Ｎ末端からＣ末端の方向にＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、およびＶＬ  ＣＤＲ３の順で含むＶＬ領域であって、ＶＬ  ＣＤＲ１は配列番号１７６のアミノ酸配列を含み、ＶＬ  ＣＤＲ２は配列番号１７２のアミノ酸配列を含み、およびＶＬ  ＣＤＲ３は配列番号１７７のアミノ酸配列を含む、ＶＬ領域、
を含む、ＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項２】
細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む、請求項１に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項３】
細胞内シグナル伝達ドメインが第１細胞内シグナル伝達ドメインであり、ＣＡＲが第２細胞内シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項１または２に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項４】
第１細胞内シグナル伝達ドメインがＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含み、第２細胞内シグナル伝達ドメインが４−１ＢＢシグナル伝達ドメインを含む、請求項３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項５】
請求項１に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲをコードする核酸配列を含む、単離ポリヌクレオチド。
【請求項６】
請求項５に記載のポリヌクレオチドを含む、組換え発現ベクター。
【請求項７】
その細胞表面膜において請求項１に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲを発現する、単離された操作された免疫細胞。
【請求項８】
免疫細胞が健常ドナーから得られる、請求項７に記載の単離された操作された免疫細胞。
【請求項９】
免疫細胞が患者から得られる、請求項７に記載の単離された操作された免疫細胞。
【請求項１０】
請求項７に記載の単離された操作された免疫細胞を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
ＥＧＦＲｖIII結合ドメインが一本鎖可変断片(ｓｃＦｖ)である、請求項１に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１２】
ｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（４２Ｇ９）；
ｉｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（３２Ａ１０）；
ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（２０Ｂ９）；
ｉｖ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（１４Ｃ１１）；
ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（３０Ｄ８）；
ｖｉ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（２０Ｅ１２）；
ｖｉｉ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（２６Ｂ９）；
ｖｉｉｉ）配列番号４８のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（Ｃ６）；および
ｉｘ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＶＨ領域および配列番号３１のアミノ酸配列を含むＶＬ領域（１２Ｂ２）、
からなる群から選択されるＶＨ領域およびＶＬ領域を含む一本鎖可変断片(ｓｃＦｖ)を含む細胞外リガンド結合ドメインを含む、請求項１に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１３】
ｓｃＦｖが、配列番号５３〜５７および５９〜６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１４】
ｓｃＦｖが、配列番号５３のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１５】
ｓｃＦｖが、配列番号５４のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１６】
ｓｃＦｖが、配列番号５５のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１７】
ｓｃＦｖが、配列番号５６のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１８】
ｓｃＦｖが、配列番号５７のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項１９】
ｓｃＦｖが、配列番号５９のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項２０】
ｓｃＦｖが、配列番号６０のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項２１】
ｓｃＦｖが、配列番号６１のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲ。
【請求項２２】
請求項２〜４および１１〜２１のいずれか１項に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲをコードする核酸配列を含む、単離ポリヌクレオチド。
【請求項２３】
請求項２２に記載のポリヌクレオチドを含む、単離発現ベクター。
【請求項２４】
その細胞表面膜において請求項２〜４および１１〜２１のいずれか１項に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲを発現する、単離された操作された免疫細胞。
【請求項２５】
請求項２２のポリヌクレオチドまたは請求項２３の発現ベクターを含む、単離された操作された免疫細胞。
【請求項２６】
免疫細胞が健常ドナーから得られる、請求項２４または２５に記載の単離された操作された免疫細胞。
【請求項２７】
免疫細胞が患者から得られる、請求項２４または２５に記載の単離された操作された免疫細胞。
【請求項２８】
請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の単離された操作された免疫細胞を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
医薬としての使用のための、請求項７〜９および２４〜２７のいずれか１項に記載の単離された操作された免疫細胞。
【請求項３０】
請求項７〜９および２４〜２７のいずれか１項に記載の単離された操作された免疫細胞の、がんを治療するための医薬の製造のための使用。
【請求項３１】
がんが多形神経膠芽腫、未分化星状細胞腫、巨細胞膠芽腫、膠肉腫、未分化乏突起神経膠腫、未分化上衣腫、未分化乏突起星状細胞腫、脈絡嚢癌腫、未分化神経節膠腫、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、髄膜腫、髄上皮腫、上衣芽細胞腫、髄芽細胞腫、テント上原始神経外胚葉腫瘍、非定型奇形腫／ラブドイド腫瘍、混合膠腫、頭頚部がん、非小細胞肺がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、髄芽細胞腫、結腸直腸がん、肛門がん、子宮頸部がん、腎臓がん、皮膚がん、膵臓がん、肝臓がん、膀胱がん、胃がん、甲状腺がん、中皮腫、子宮がん、リンパ腫および白血病からなる群から選択される、ＥＧＦＲｖIII関連がんである、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
免疫細胞を操作する方法であって、
ａ．免疫細胞を用意し；そして
ｂ．少なくとも１つの請求項１〜４および１１〜２１のいずれか１項に記載のＥＧＦＲｖIII特異的ＣＡＲを細胞の表面において発現させること、
を含む方法。