【手続補正書】
【提出日】令和2年3月31日(2020.3.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞密度が少なくとも２５ｇ／ｌであり、かつ厚さが１〜３０ｍｍである、糸状真菌バイオマット。
【請求項２】
細胞密度が少なくとも５０ｇ／Ｌ又は少なくとも７５ｇ／Ｌ又は少なくとも１２０ｇ／Ｌ又は少なくとも１８０ｇ／Ｌである、請求項１に記載のバイオマット。
【請求項３】
バイオマットが、気中菌糸層及び人工培地と接触する底部層を含む互いと接触する少なくとも２つの構造的に異なる細胞層を含み、ここで、気中菌糸層が底部層よりも密度が低い、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項４】
引き裂かれることなく扱って持ち上げて移動させるのに十分な引張強度及び構造一体性を有する、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項５】
少なくとも４０％のタンパク質含有量を有する、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項６】
少なくとも３９％の脂質含有量を有する、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項７】
糸状菌がフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、フシスポリウム（Ｆｕｓｉｓｐｏｒｉｕｍ）、プソイドフザリウム（Ｐｓｅｕｄｏｆｕｓａｒｉｕｍ）、ジベレラ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ）、スポロトリチェラ（Ｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｅｌｌａ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ目内のケカビ．ｓｐ、フィラメントを産生することができる酵母；及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項８】
糸状菌がフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種及びクモノスカビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）種からなる群から選択される、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項９】
糸状菌がＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）又はリゾプス・オリゴスポラス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ）である、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１０】
糸状菌がＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）である、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１１】
バイオマットが固形分５％−２０％を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１２】
上部気中菌糸層の厚さに対する底部層の厚さの比が少なくとも０．４１である、請求項３−１１のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１３】
バイオマットが気中菌糸層及び下部層の間に遷移層をさらに含む、請求項３−１２のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１４】
バイオマットの引張強度が少なくとも０．２ｋｇ／マット幅（ｃｍ）である、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１５】
バイオマットが平均フィラメント長が０．０５ｃｍ−２ｃｍである、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１６】
バイオマットが糸状菌より産生されたトリプトファン、システイン、メチオニン、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、リシン、チロシン及びバリンから選択されるアミノ酸を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１７】
バイオマットが全ての必須アミノ酸を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１８】
バイオマットが約２０％分岐鎖アミノ酸を含むタンパク質を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項１９】
バイオマットが表面発酵法により産生される、先行する請求項のいずれか一項に記載のバイオマット。
【請求項２０】
請求項１−１８のいずれか一項に記載のバイオマットを含む、食品。
【請求項２１】
食品がヒト食品、魚飼料及び動物飼料からなる群から選択される、請求項２０に記載の食品。
【請求項２２】
（ａ）有効量の少なくとも１つの糸状菌の生物学的に純粋な培養物を人工成長培地に播種するステップ；
（ｂ）播種した糸状菌をインキュベートして成長培地の表面で糸状真菌バイオマットを産生するステップ；及び
（ｃ）場合により糸状菌バイオマットを採取するステップを含む、
糸状菌バイオマットを製造する方法。
【請求項２３】
人工成長培地がグリセロール、酸ホエイ、デンプン、コーンスティープリカー、ジャガイモ廃棄物、サトウダイコン廃棄物、デキストロース、グルコース、マルトース、ガラクトース、マンノース、コーンシロップ、野菜スクラップ、及び牛の肥育池水からなる群から選択される炭素源を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
人工成長培地が農業廃棄物、医療用有機廃棄物、都市有機廃棄物、食品加工廃棄物、バイオ燃料製造廃棄物、工業廃棄物、リグノセルロースを含有する廃棄物、乳製品廃棄物、屠殺場廃棄物及びこれらの組み合わせからなる群から選択される廃棄物を含む炭素源を含む、請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
人工成長培地が単糖類、二糖類及びこれらの組み合わせからなる群から選択される炭素源を含む、請求項２２−２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
人工成長培地がグリセロール、糖、乾燥小麦蒸留可溶物、コーンスティープリカー、牛の肥育池水、酸ホエイ、植物廃棄物、コーンシロップ及びこれらの組み合わせからなる群から選択される炭素源を含む、請求項２２−２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
人工成長培地が約１８．６ａｔｍの浸透圧を有する、請求項２２−２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
人工成長培地が約０．３６８のイオン強度を有する、請求項２２−２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
人工成長培地が硝酸アンモニウム、尿素、リン酸二水素カリウム、塩化カルシウム、硫酸マグネシウム、及び酵母抽出物を含む、請求項２２−２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
人工成長培地が硫酸第一鉄、硫酸亜鉛、塩化マンガン、塩化コバルト、硫酸銅及びホウ酸をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ステップ（ａ）が少なくとも１つの糸状菌の浮遊細胞を人工成長培地に播種するステップを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
７．５％（体積：体積）の浮遊細胞が人工成長培地に播種される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
人工成長培地が窒素源を含む、請求項２２−３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
窒素源が硝酸塩、アンモニウム塩、タンパク質、ペプチド、尿素、窒素を含む廃液、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
人工成長培地が炭素及び窒素を含み、Ｃ：Ｎの比が約７．５：１以下である、請求項２２−３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
人工成長培地が炭素及び窒素を含み、Ｃ：Ｎの比が約７．５：１を超える、請求項２２−３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
（ａ）肥育池水をｐＨ２．６に調整するステップ；
（ｂ）調整した肥育池水にＭＫ７株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）を播種するステップ；及び
（ｃ）肥育池水の表面に糸状菌バイオマットを産生するステップ、を含み；
ここで、バイオマットが肥育池水から除去した炭素及び窒素を含有する、
肥育池水から炭素及び窒素を除去する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
また、糸状菌バイオマットを採取する方法、糸状菌によって産生された有用なタンパク質、アミノ酸及び／又は脂質の単離及び／又は精製も提供される。これらのタンパク質、アミノ酸及び／又は脂質は、食品、魚飼料、動物飼料、油、脂肪酸、医薬品、栄養補助食品、殺真菌剤、除草剤、殺酵母剤、殺虫剤、バイオ潤滑剤に、及び他の価値が付加された製品のための原料として使用することができる。
本発明は、以下の態様を含む；
［項１］
糸状菌バイオマットを製造する方法であって、
（ａ）有効量の少なくとも１種類の糸状菌の浮遊細胞を人工成長培地に播種するステップ、
（ｂ）撹乱のない状態で、所定期間、前記播種済成長培地をインキュベートするステップ、
（ｃ）糸状菌バイオマットを製造するステップ、及び
（ｄ）場合により、前記糸状菌バイオマットを採取するステップを含む、上記方法；
［項２］
糸状菌バイオマットを製造する方法であって、
（ａ）人工成長培地に、７．５％（体積：体積）の少なくとも１種類の糸状菌の浮遊細胞を播種するステップ、
（ｂ）撹乱のない状態で、所定期間、前記播種済成長培地をインキュベートするステップ、
（ｃ）糸状菌バイオマットを製造するステップ、及び
（ｄ）場合により、前記糸状菌バイオマットを採取するステップを含む、上記方法；
［項３］
前記少なくとも１種類の糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種及びクモノスカビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）種からなる群から選択される、項１又は２に記載の方法；
［項４］
前記少なくとも１種類の糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）又はリゾプス・オリゴスポラス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ）である、項１〜３のいずれか一項に記載の方法；
［項５］
前記少なくとも１種類の糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）である、項１〜４のいずれか一項に記載の方法；
［項６］
前記人工培地が約１８．６ａｔｍの浸透圧を有する、項１〜５のいずれか一項に記載の方法；
［項７］
前記人工培地が約０．３６８のイオン強度を有する、項１〜６のいずれか一項に記載の方法；
［項８］
バイオマット細胞密度が少なくとも２５ｇ／Ｌ（乾燥重量／培地（Ｌ））である少なくとも１つの細胞層を含む、糸状菌バイオマット；
［項９］
前記糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種及びクモノスカビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）種からなる群から選択される、項８に記載の糸状バイオマット；
［項１０］
前記糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）又はリゾプス・オリゴスポラス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ）である、項８又は９に記載の糸状バイオマット；
［項１１］
前記糸状菌が、ＭＫ７と命名された菌株（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０６９８）である、項８〜１０のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１２］
フィラメントが、空気：バイオマット界面及び／又はバイオマット：培地界面に対して平行に主に組織化されている、項８〜１１のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１３］
前記バイオマットが、少なくとも２つの構造的に異なる細胞層を含み、１つの細胞層は人工培地及び少なくとも１つのもう一方の細胞層と接触する、項８〜１２のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１４］
前記細胞層間の構造差が、層内の細胞の密度である、項８〜１３のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１５］
前記１つの細胞層が、空気及び少なくとも１つのもう一方の細胞層と接触している、項８〜１４のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１６］
前記バイオマットが、３つの構造的に異なる細胞層を含む、項８〜１５のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１７］
前記バイオマットの引張強度が、少なくとも０．２ｋｇ／マット幅（ｃｍ）である、項８〜１６のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１８］
細胞密度が少なくとも５０ｇ／ｌ又は少なくとも７５ｇ／ｌである、項８〜１７のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；
［項１９］
前記バイオマットは、タンパク質含有量が少なくとも４０％である、項８〜１８のいずれか一項に記載の糸状バイオマット；または
［項２０］
前記バイオマットは、脂質含有量が少なくとも３９％である、項８〜１９のいずれか一項に記載の糸状バイオマット。