【手続補正書】
【提出日】令和2年11月4日(2020.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
臍帯から乾燥羊膜組織グラフトを調製する方法であって、
内腔を有する臍帯の羊膜に長手方向の切れ目を入れて、前記内腔の内容物を露出させるステップと、
前記内腔から血管及びワルトン膠質を取り除いて、創面切除された羊膜を形成するステップと、
前記創面切除された羊膜を保持液中で洗浄するステップと、
前記洗浄された羊膜をすすぎ液で１回以上すすぐステップと、
前記すすいだ羊膜を乾燥させるステップと、
を含む方法。
【請求項２】
前記保持液中で前記創面切除された羊膜を洗浄する前に、前記保持液中で前記創面切除された羊膜をインキュベートするステップ、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記保持液は、
ツイーン２０：約０．４〜約０．６％（ｖ／ｖ）と、
抗菌性化合物と、
ＮａＣｌ：約７〜約１０ｇ／Ｌと、
ｐＨが約６．０〜約８．０の緩衝剤と、
を含む、
請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記保持液は、
約０．５％（ｖ／ｖ）のツイーン２０と、
約０．０５％（ｗ／ｖ）のポリヘキサメチレンビグアニドヒドロクロリド、約０．０１％&#12316;約１．５％（ｗ／ｖ）のグルコン酸クロルヘキシジン、抗生物質の濃度、または抗カビ剤の濃度と、
ＮａＣｌ：約９ｇ／Ｌと、
ｐＨが約６．７±０．１の緩衝剤と、
を含む、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記創面切除された羊膜を洗浄する前記ステップは、前記創面切除された羊膜を前記保持液中で攪拌するステップを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記創面切除された羊膜を洗浄する前記ステップは約３時間にわたって実施され、攪拌は、毎分約５０回転〜約３００回転で実施される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記すすぎ液は、ｐＨが約７〜約８．８であり、
ＮａＣｌ：約７〜約１１ｇ／Ｌと、
無水Ｎａ２ＨＰＯ４：約０．２〜約１．５ｇ／Ｌと、
ＫＨ２ＰＯ４：約０．１〜約０．２ｇ／Ｌと、
を含む、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記すすぎ液は、ｐＨが約７．４であり、約９ｇ／ＬのＮａＣｌと、約０．８ｇ／Ｌの無水Ｎａ２ＨＰＯ４と、約０．１４ｇ／ＬのＫＨ２ＰＯ４とを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記すすぎステップは、３〜５回、前記すすぎ液中で実施される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
各すすぎステップは、毎分約５０回転〜毎分約３００回転で実施される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記創面切除された羊膜は、前記洗浄ステップまで、約４℃で保管される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記乾燥ステップは、約３０〜約４０℃の温度で圧力下において実施される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
臍帯から乾燥羊膜を取得する方法であって、
羊膜を取得するステップと、
血管及びワルトン膠質を取り除いて、創面切除された羊膜を形成するステップと、
前記創面切除された羊膜を保持液中で洗浄するステップと、
前記洗浄された羊膜をすすぎ液で１回以上すすぐステップと、
前記すすいだ羊膜を乾燥させるステップと、
を含む方法。
【請求項１４】
前記創面切除された羊膜は冷凍状態で取得され、前記冷凍された羊膜を解凍するステップを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記保持液中で前記創面切除された羊膜を洗浄する前に、前記保持液中で前記創面切除された羊膜をインキュベートするステップ、を含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記保持液中で前記創面切除された羊膜をインキュベートするステップを含み、
前記保持液は、
ツイーン２０：約０．４〜約０．６％（ｖ／ｖ）と、
抗菌性化合物と、
ＮａＣｌ：約７〜約１０ｇ／Ｌと、
ｐＨが約６．０〜約８．０の緩衝剤と、
を含む、
請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記保持液は、
約０．５％（ｖ／ｖ）のツイーン２０と、
約０．０５％（ｗ／ｖ）のポリヘキサメチレンビグアニドヒドロクロリド、約０．０１％&#12316;約１．５％（ｗ／ｖ）のグルコン酸クロルヘキシジン、抗生物質の濃度、または抗カビ剤の濃度と、
ＮａＣｌ：９ｇ／Ｌと、
ｐＨが６．７±０．１の緩衝剤と、
を含む、
請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記創面切除された羊膜を洗浄する前記ステップは、前記創面切除された羊膜を前記保持液中で攪拌するステップを含む、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記創面切除された羊膜を洗浄する前記ステップは約３時間にわたって実施され、前記攪拌は、毎分約５０回転〜約３００回転で実施される、請求項１8に記載の方法。
【請求項２０】
前記すすぎ液は、ｐＨが約７〜約８．８であり、
ＮａＣｌ：約７〜約１１ｇ／Ｌと、
無水Ｎａ２ＨＰＯ４：約０．２〜約１．５ｇ／Ｌと、
ＫＨ２ＰＯ４：約０．１〜約０．２ｇ／Ｌと、
を含む、
請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記すすぎ液は、ｐＨが約７．４であり、約９ｇ／ＬのＮａＣｌと、約０．８ｇ／Ｌの無水Ｎａ２ＨＰＯ４と、約０．１４ｇ／ＬのＫＨ２ＰＯ４とを含む、請求項１３〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記すすぎステップは、３〜５回、すすぎ液中で実施される、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
各すすぎステップは、毎分約１００回転〜毎分約２００回転で、約１０分にわたって実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記創面切除された羊膜は、前記洗浄ステップまで、約４℃で保管される、請求項１３〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記乾燥ステップは、約３０〜約４０℃の温度で圧力下において実施される、請求項１３〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法で調製される羊膜組織グラフト。
【請求項２７】
単膜の臍帯羊膜を備え、滑らかな表面がワルトン膠質によって形成され、羊膜組織グラフトが約２０％未満の水分と約１５０μｍ〜約２５０μｍの厚さを有する、羊膜組織グラフト。
【請求項２８】
前記洋膜組織グラフトがグリセロールを含まない、請求項２７に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項２９】
単膜の羊膜を備える、請求項２７〜２８のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３０】
８−０  ＵＳＰの縫合糸で縫合されるように構成された、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３１】
前記厚さの変動が２０％以下である、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３２】
前記羊膜組織グラフトの上皮側の上、または前記羊膜組織グラフトのストロマ側の上、のいずれかに、しるしを有し、
前記しるしが、前記羊膜組織グラフトの前記上皮側と前記羊膜組織グラフトの前記ストロマ側とを区別する、請求項２７〜３１のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３３】
前記しるしは、突出である、請求項３２に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３４】
前記突出は、矩形、正方形、又は三角形のタブである、請求項３３に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３５】
前記突出は、鉗子で掴まれるように構成されている、請求項３３〜３４のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３６】
前記羊膜組織グラフトの形成に使用される前記羊膜中に存在するものと同等レベルの１つ以上の生物活性化合物を含む、請求項２７〜３５のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３７】
前記１つ以上の生物活性化合物は、インターロイキン、組織性メタロプロテアーゼ阻害因子、表皮細胞成長因子、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、血管内皮成長因子、またはトランスフォーミング成長因子を１つ以上含む、請求項３６に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３８】
前記羊膜組織グラフトが組織又は器官の上に配置されると、前記羊膜組織グラフトが前記組織又は前記器官の形状に順応して粘着する、請求項２７〜３７のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項３９】
前記羊膜組織グラフトは、前記組織又は器官の形状に順応して粘着した後に、ユーザによって姿勢変換された場合に、壊れたり、ばらばらになったりしない、請求項３８に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項４０】
前記羊膜組織グラフトは、前記組織又は前記器官の上に配置された後、その場所に少なくとも８週間とどまる、請求項２７〜３９のいずれか一項に記載の羊膜組織グラフト。
【請求項４１】
前記羊膜組織グラフトは、前記組織又は前記器官の上に配置された後、その場所に少なくとも１６週間とどまる、請求項４０に記載の羊膜組織グラフト。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
最終的な保持ステップとして、窒素パージに代わるソリューションも可能であり、例えば、加熱要素をシャットオフして真空を維持するソリューションが可能である。このプロトコルの下で作られる試料は、特性評価試験用として適切である。
〔付記１〕
臍帯から乾燥羊膜組織グラフトを調製する方法であって、
ａ）内腔を有する臍帯の羊膜に長手方向の切れ目を入れて、前記内腔の内容物を露出させるステップと、
ｃ）前記内腔の前記内容物のうちの血管及びワルトン膠質を取り除いて、創面切除された羊膜を形成するステップと、
ｄ）任意選択で、前記創面切除された羊膜を保持液中でインキュベートするステップと、
ｅ）前記創面切除及びインキュベート（実施された場合）された羊膜を前記保持液で洗浄するステップと、
ｆ）前記洗浄された羊膜をすすぎ液で１回以上すすぐステップと、
ｇ）前記すすいだ羊膜を乾燥させるステップと、
を含む方法。
〔付記２〕
前記長手方向の切れ目は、前記臍帯の全長に沿って入れられる、付記１に記載の方法。
〔付記３〕
前記保持液は、
ａ）ツイーン２０：０．４〜０．６％（ｖ／ｖ）、好ましくは約０．５％（ｖ／ｖ）と、
ｂ）抗菌性化合物と、
ｃ）ＮａＣｌ：７〜１０ｇ／Ｌと、
ｄ）ｐＨが６．５〜７．０の緩衝剤と、
を含む、
付記１又は２に記載の方法。
〔付記４〕
前記保持液は、
ａ）０．５％（ｖ／ｖ）のツイーン２０と、
ｂ）約０．０５％（ｗ／ｖ）のポリヘキサメチレンビグアニドヒドロクロリドと、
ｃ）ＮａＣｌ：９ｇ／Ｌと、
ｄ）ｐＨが６．７±０．１の適切な緩衝剤と、
を含む、
付記１〜３のいずれか一項に記載の方法。
〔付記５〕
前記洗浄ステップは、前記創面切除された羊膜を前記保持液中で攪拌するステップを含む、付記１〜４のいずれか一項に記載の方法。
〔付記６〕
前記洗浄ステップは約３時間にわたって実施され、前記攪拌は、毎分約１００〜２００回転実施される、付記１〜５のいずれか一項に記載の方法。
〔付記７〕
前記すすぎ液は、
ａ）ＮａＣｌ：７〜１０ｇ／Ｌと、
ｂ）無水Ｎａ２ＨＰＯ４：０．５〜１．５ｇ／Ｌと、
ｃ）ＫＨ２ＰＯ４：０．１〜０．２ｇ／Ｌと、
を含み、
ｐＨが約７．４である、
付記１〜６のいずれか一項に記載の方法。
〔付記８〕
前記すすぎ液は、約９ｇ／ＬのＮａＣｌと、約０．７９５ｇ／Ｌの無水Ｎａ２ＨＰＯ４と、約０．１４４ｇ／ＬのＫＨ２ＰＯ４とを含み、ｐＨが約７．４である、付記１〜７のいずれか一項に記載の方法。
〔付記９〕
前記すすぎステップは、３〜５回、前記すすぎ液中で実施される、付記１〜８のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１０〕
各すすぎステップは、約１００〜２００ＲＰＭで、約１０分にわたって実施される、付記９に記載の方法。
〔付記１１〕
前記創面切除された羊膜は、前記洗浄ステップまで、約４℃で保管される、付記１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１２〕
前記乾燥ステップは、１５〜５０ｍＢａｒの圧力下で、３０〜４０℃の温度で、約１５時間にわたって実施される、付記１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１３〕
臍帯から乾燥羊膜を取得する方法であって、
ａ）部分的に創面切除された羊膜を取得するステップと、
ｂ）血管及びワルトン膠質を取り除いて、創面切除された羊膜を形成するステップと、
ｃ）任意選択で、前記創面切除された羊膜を保持液中でインキュベートするステップと、
ｄ）前記創面切除及びインキュベート（実施された場合）された羊膜を前記保持液中で洗浄するステップと、
ｅ）前記洗浄された羊膜をすすぎ液で１回以上すすぐステップと、
ｆ）前記すすいだ羊膜を乾燥させるステップと、
を含む方法。
〔付記１４〕
前記部分的に創面切除された羊膜は冷凍状態で取得され、前記冷凍された、部分的に創面切除された羊膜を解凍するステップを含む、付記１３に記載の方法。
〔付記１５〕
前記解凍ステップは、２４℃で、約１０〜１５時間にわたって実施される、付記１４に記載の方法。
〔付記１６〕
前記保持液は、
ａ）ツイーン２０：０．４〜０．６％（ｖ／ｖ）、好ましくは約０．５％（ｖ／ｖ）と、
ｂ）抗菌性化合物と、
ｃ）ＮａＣｌ：７〜１０ｇ／Ｌと、
ｄ）ｐＨが６．５〜７．０の緩衝剤と、
を含む、
付記１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１７〕
前記保持液は、
ａ）０．５％（ｖ／ｖ）のツイーン２０と、
ｂ）約０．０５％（ｗ／ｖ）のポリヘキサメチレンビグアニドヒドロクロリドと、
ｃ）ＮａＣｌ：９ｇ／Ｌと、
ｄ）ｐＨが６．７±０．１の適切な緩衝剤と、
を含む、
付記１３〜１６のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１８〕
前記洗浄ステップは、前記創面切除された羊膜を前記保持液中で攪拌するステップを含む、付記１３〜１７のいずれか一項に記載の方法。
〔付記１９〕
前記洗浄ステップは約３時間にわたって実施され、前記攪拌は、毎分約１００〜２００回転実施される、付記１8に記載の方法。
〔付記２０〕
前記すすぎ液は、
ａ）ＮａＣｌ：７〜１０ｇ／Ｌと、
ｂ）無水Ｎａ２ＨＰＯ４：０．５〜１．５ｇ／Ｌと、
ｃ）ＫＨ２ＰＯ４：０．１〜０．２ｇ／Ｌと、
を含み、
ｐＨが約７．４である、
付記１３〜１９のいずれか一項に記載の方法。
〔付記２１〕
前記すすぎ液は、約９ｇ／ＬのＮａＣｌと、約０．７９５ｇ／Ｌの無水Ｎａ２ＨＰＯ４と、約０．１４４ｇ／ＬのＫＨ２ＰＯ４とを含み、ｐＨが約７．４である、付記１３〜２０のいずれか一項に記載の方法。
〔付記２２〕
前記すすぎステップは、３〜５回、すすぎ液中で実施される、付記１３〜２１のいずれか一項に記載の方法。
〔付記２３〕
各すすぎステップは、約１００〜２００ＲＰＭで、約１０分にわたって実施される、付記２２に記載の方法。
〔付記２４〕
前記創面切除された羊膜は、前記洗浄ステップまで、約４℃で保管される、付記１３〜２３のいずれか一項に記載の方法。
〔付記２５〕
前記乾燥ステップは、１５〜５０ｍＢａｒの圧力下で、３０〜４０℃の温度で、約１５時間にわたって実施される、付記１３〜２４のいずれか一項に記載の方法。
〔付記２６〕
付記１〜２５のいずれか一項に記載の方法で調製される羊膜組織グラフト。
〔付記２７〕
単膜の臍帯羊膜と、円滑な稼働の為の十分なワルトン膠質と、２０％未満の水分と、１５０〜２５０μｍの厚さと、を含む羊膜組織グラフト。
〔付記２８〕
グリセロールを含まない、付記２７に記載の組織グラフト。
〔付記２９〕
本質的には、単膜の羊膜と、円滑な稼働の為の十分なワルトン膠質と、２０％未満の水分と、１５０〜２５０μｍの厚さと、からなる、付記２７〜２８のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３０〕
８−０  ＵＳＰの縫合糸で縫合される為の十分な強度を有する、付記２７〜２９のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３１〕
厚さの変動が２０％以下である、付記２７〜３０のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３２〕
前記組織グラフトの上皮側と前記組織グラフトのストロマ側とを区別するしるしを含む、付記２７〜３１のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３３〕
前記しるしは、前記グラフトの特定の領域からの突出である、付記３２に記載の組織グラフト。
〔付記３４〕
前記突出は、矩形、正方形、又は三角形のタブである、付記３３に記載の組織グラフト。
〔付記３５〕
前記突出は、鉗子で掴まれることに適するように設計されている、付記３３〜３４のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３６〕
前記組織グラフトの形成に使用される前記羊膜中に存在する生物活性化合物と同等レベルの生物活性化合物を含む、付記２７〜３５のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３７〕
前記生物活性化合物として、インターロイキン、組織性メタロプロテアーゼ阻害因子、表皮細胞成長因子、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、血管内皮成長因子、トランスフォーミング成長因子などがある、付記３６に記載の組織グラフト。
〔付記３８〕
前記組織グラフトは、組織又は器官の上に配置されると、前記組織又は器官の形状に順応して粘着する、付記２７〜３７のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記３９〕
前記組織グラフトは、前記組織又は器官の形状に順応して粘着した後に、ユーザによって姿勢変換された場合に、壊れたり、ばらばらになったりせずに姿勢を変える、付記３８に記載の組織グラフト。
〔付記４０〕
前記組織グラフトは、前記組織又は前記器官の上に配置された後、その場所に少なくとも８週間、１０週間、１２週間、１６週間、又はそれ以上とどまる、付記２７〜３９のいずれか一項に記載の組織グラフト。
〔付記４１〕
前記組織グラフトは、前記組織又は前記器官の上に配置された後、その場所に少なくとも１６週間とどまる、付記４０に記載の組織グラフト。