【手続補正書】
【提出日】令和2年6月8日(2020.6.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナノキャリアに結合体化された、ＤＮＡを標的化する標的化部分を有する粒子を含む活性な作用物質を被包するためのナノキャリアであって、前記標的化部分が、ＤＮＡ、ヌクレオチド、ヌクレオシドまたは核酸塩基に結合する、抗体またはそれに由来するバリアント、フラグメントもしくは融合タンパク質である、ナノキャリア。
【請求項２】
ＤＮＡを標的化する前記標的化部分が、可変フラグメント（Ｆｖ）である、請求項１に記載のナノキャリア。
【請求項３】
前記Ｆｖが、ｓｃＦｖ、ジｓｃＦｖまたはトリｓｃＦｖである、請求項２に記載のナノキャリア。
【請求項４】
前記標的化部分が、
配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）および配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗体（３Ｅ１０）、またはそのバリアント、フラグメント、融合タンパク質である、
配列番号１４に示されているようなアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体（５Ｃ６）、またはそのバリアント、フラグメント、融合タンパク質である、
配列番号１および２から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むｓｃＦｖ、またはそのバリアント、フラグメント、融合タンパク質である、
配列番号１１、１２または１３のアミノ酸配列を含む、
請求項１〜３のいずれか１項に記載のナノキャリア。
【請求項５】
前記標的化部分が、３Ｅ１０または５Ｃ６のヒト化型またはキメラ型である、請求項４に記載のナノキャリア。
【請求項６】
前記標的化部分が、
抗体３Ｅ１０または５Ｃ６の一価、二価もしくは三価または多価の一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、
抗体３Ｅ１０または５Ｃ６のダイアボディ、トリアボディ、テトラボディまたは他の多量体である、または
抗体３Ｅ１０もしくは５Ｃ６またはそのバリアントのＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、ＶＬ、ＶＨ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディまたは他の構成要素もしくは誘導体である、
請求項４または請求項５に記載のナノキャリア。
【請求項７】
前記ナノキャリアが、ポリマー粒子、リポソーム、多層ベシクルおよび微小気泡からなる群より選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載のナノキャリア。
【請求項８】
前記ポリマー粒子が、
ポリマーナノ粒子、あるいは
１種またはそれを超える生分解性のポリエステルまたはポリ無水物、
１種またはそれを超えるポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、または
ＰＬＧＡ−ポリ（ε−カルボベンゾキシル−Ｌ−リジン）（ＰＬＬ）
から形成されているポリマーナノ粒子
から形成されている、請求項７に記載のナノキャリア。
【請求項９】
前記ナノキャリアが、酸化鉄、金属粒子、金またはこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載のナノキャリア。
【請求項１０】
前記活性な作用物質が、タンパク質、ペプチド、炭水化物、多糖、核酸分子またはオリゴヌクレオチドからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載のナノキャリア。
【請求項１１】
前記標的化部分が、細胞透過性である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のナノキャリア。
【請求項１２】
前記標的化部分が、腫瘍の微小環境においてグルタチオンの存在下において切断され得るジスルフィド結合によって前記ナノキャリアに連結されている、請求項１１に記載のナノキャリア。
【請求項１３】
前記ナノキャリア中に被包されている１種またはそれを超える活性な作用物質をさらに含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のナノキャリア。
【請求項１４】
前記活性な作用物質が、抗血管新生剤、抗増殖薬、化学療法剤、細胞傷害剤、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、放射線増感剤、放射性同位体、治療用タンパク質、治療用遺伝子、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、あるいはそれらの組み合わせである、請求項１３に記載のナノキャリア。
【請求項１５】
前記活性な作用物質が、ＰＡＲＰ阻害剤である、請求項１３に記載のナノキャリア。
【請求項１６】
前記ＰＡＲＰ阻害剤が、Ｏｌａｐａｒｉｂ（Ｃ２４Ｈ２３ＦＮ４Ｏ３）である、請求項１５に記載のナノキャリア。
【請求項１７】
有効量の請求項１〜１６のいずれか１項に記載のナノキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
癌の処置するための請求項１７に記載の薬学的組成物であって、癌の処置を必要とする被験体に有効量の前記薬学的組成物が投与されることを特徴とする、薬学的組成物。
【請求項１９】
前記癌が、脳に位置する、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
−脳卒中および心筋梗塞を含むがこれらに限定されない虚血、
−創傷治癒を含むがこれに限定されない傷害、
−感染症、
−自己免疫疾患または遺伝疾患、
−筋ジストロフィ、または
−リソソーム蓄積疾患または糖原病
を処置するための、請求項１７に記載の薬学的組成物であって、それを必要とする被験体に有効量の前記薬学的組成物が投与されることを特徴とする、薬学的組成物。
【請求項２１】
前記活性な作用物質が、抗血管新生剤、抗増殖薬、化学療法剤、細胞傷害剤、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、放射線増感剤、放射性同位体、治療用タンパク質、治療用遺伝子、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、治療用タンパク質、治療用遺伝子、血流を増加させる作用物質、凝固を減少させる作用物質、動脈拡張を誘導する作用物質、血栓溶解を誘導するかもしくは増加させる作用物質、アポトーシスを抑制するかまたはその他の方法で虚血細胞の生存を促進する作用物質、免疫調節物質、創傷治癒を促進する作用物質、アポトーシスを抑制するかまたはその他の方法で傷害細胞の生存を促進する作用物質、抗微生物剤、抗ウイルス薬、抗菌剤、抗寄生生物薬、免疫抑制剤、補充タンパク質、補充遺伝子、補充筋タンパク質、ジストロフィン、ユートロフィン、ミオチューブラリン、補充酵素あるいはそれらの組み合わせである、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
腫瘍からのＤＮＡ放出を増加させるように設計された放射線治療または化学療法による腫瘍の処置後に投与されることを特徴とする、請求項１８または１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
癌、組織損傷、傷害または虚血の部位または複数の部位を検出するための請求項１７に記載の薬学的組成物であって、それを必要とする被験体に有効量の前記薬学的組成物が投与されることを特徴とし、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、ＰＥＴ−ＣＴ、骨スキャン、ＭＲＩ、ＣＴ、心エコー検査、超音波およびＸ線を含むがこれらに限定されない画像診断法または核医学法を用いて検出可能な作用物質である、薬学的組成物。
【請求項２４】
活性な作用物質およびＤＮＡを標的化する標的化部分を被包するためのナノキャリアを含む薬学的組成物であって、前記標的化部分が、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体（３Ｅ１０）、またはＤＮＡに結合するそのヒト化バリアント、フラグメントまたは融合タンパク質であり、前記活性な作用物質が、タンパク質、ペプチド、炭水化物、多糖、核酸分子またはオリゴヌクレオチドである、薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
癌、組織損傷、傷害または虚血の部位を検出する方法も提供される。その方法は、通常、それを必要とする被験体に、有効量の、薬学的に許容され得るキャリア中の標的化ナノキャリアを投与する工程を含む。それらのナノキャリアには、通常、画像診断法または核医学法を用いて検出可能な作用物質、例えば、ＰＥＴ−ＣＴ、骨スキャン、ＭＲＩ、ＣＴ、心エコー検査、超音波またはＸ線によって検出可能な作用物質がローディングされている。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ナノキャリアに結合体化された、ＤＮＡを標的化する標的化部分を有する粒子を含む活性な作用物質を被包するためのナノキャリア。
（項目２）
前記標的化部分が、ＤＮＡ、ヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸塩基またはヌクレオソームに結合する、抗体またはそれに由来するバリアント、フラグメントもしくは融合タンパク質である、項目１に記載のナノキャリア。
（項目３）
ＤＮＡを標的化する前記標的化部分が、可変フラグメント（Ｆｖ）である、項目１または項目２に記載のナノキャリア。
（項目４）
前記Ｆｖが、ｓｃＦｖ、ジｓｃＦｖまたはトリｓｃＦｖである、項目３に記載のナノキャリア。
（項目５）
前記標的化部分が、配列番号２に示されているようなアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体（３Ｅ１０）もしくは配列番号１４に示されているようなアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１８に示されているアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体（５Ｃ６）、またはそのバリアント、フラグメント、融合タンパク質である、項目１〜４のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目６）
前記標的化部分が、３Ｅ１０または５Ｃ６のヒト化型またはキメラ型である、項目５に記載のナノキャリア。
（項目７）
前記標的化部分が、抗体３Ｅ１０または５Ｃ６の一価、二価もしくは三価または多価の一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、項目５または項目６に記載のナノキャリア。
（項目８）
前記標的化部分が、抗体３Ｅ１０または５Ｃ６のダイアボディ、トリアボディ、テトラボディまたは他の多量体である、項目５または項目６に記載のナノキャリア。
（項目９）
前記標的化部分が、抗体３Ｅ１０もしくは５Ｃ６またはそのバリアントのＦａｂ、（Ｆａｂ’）２、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、ＶＬ、ＶＨ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディまたは他の構成要素もしくは誘導体である、項目５または項目６に記載のナノキャリア。
（項目１０）
前記ｓｃＦｖが、配列番号１および２から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ならびに配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目４、７または９のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目１１）
前記標的化部分が、配列番号１１、１２または１３のアミノ酸配列を含む、項目４に記載のナノキャリア。
（項目１２）
前記ナノキャリアが、ポリマー粒子、リポソーム、多層ベシクルおよび微小気泡からなる群より選択される、項目１〜１１のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目１３）
前記ポリマー粒子が、ポリマーナノ粒子である、項目１２に記載のナノキャリア。
（項目１４）
前記ポリマーナノ粒子が、１種またはそれを超える生分解性のポリエステルまたはポリ無水物から形成されている、項目１３に記載のナノキャリア。
（項目１５）
前記生分解性のポリエステルまたはポリ無水物が、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）からなる群より選択される、項目１４に記載のナノキャリア。
（項目１６）
前記ポリマーナノ粒子が、ＰＬＧＡ−ポリ（ε−カルボベンゾキシル−Ｌ−リジン）（ＰＬＬ）から形成されている、項目１３に記載のナノキャリア。
（項目１７）
前記標的化部分が、細胞透過性である、項目１〜１６のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目１８）
前記標的化部分が、細胞透過性でない、項目１〜１６のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目１９）
前記標的化部分が、標的部位において放出され、活性な作用物質として働くことができる、項目１〜１８のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目２０）
前記標的化部分が、腫瘍の微小環境においてグルタチオンの存在下において切断され得るジスルフィド結合によって前記ナノキャリアに連結されている、項目１９に記載のナノキャリア。
（項目２１）
前記ナノキャリア中に被包されている１種またはそれを超える活性な作用物質をさらに含む、項目１〜２０のいずれか１項に記載のナノキャリア。
（項目２２）
前記活性な作用物質が、抗血管新生剤、抗増殖薬、化学療法剤、細胞傷害剤、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、放射線増感剤、放射性同位体、治療用タンパク質、治療用遺伝子、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、あるいはそれらの組み合わせである、項目２１に記載のナノキャリア。
（項目２３）
前記活性な作用物質が、ＰＡＲＰ阻害剤である、項目２２に記載のナノキャリア。
（項目２４）
前記ＰＡＲＰ阻害剤が、Ｏｌａｐａｒｉｂ（Ｃ２４Ｈ２３ＦＮ４Ｏ３）である、項目２３に記載のナノキャリア。
（項目２５）
有効量の項目１〜２４のいずれか１項に記載のナノキャリアを含む、薬学的組成物。
（項目２６）
癌の処置を必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、癌を処置する方法。
（項目２７）
前記１種またはそれを超える活性な作用物質が、抗血管新生剤、抗増殖薬、化学療法剤、細胞傷害剤、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、放射線増感剤、放射性同位体、治療用タンパク質、治療用遺伝子、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、あるいはそれらの組み合わせである、項目２６に記載のナノキャリア。
（項目２８）
前記癌が、脳に位置する、項目２６または２７に記載の方法。
（項目２９）
脳卒中および心筋梗塞を含むがこれらに限定されない虚血を処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、血流を増加させるか、凝固を減少させるか、動脈拡張を誘導するか、血栓溶解を誘導するかもしくは増加させるか、アポトーシスを抑制するか、またはその他の方法で虚血細胞の生存を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３０）
傷害を処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症薬、抗感染薬、サイトカイン、ケモカイン、免疫調節物質、創傷治癒を促進するか、アポトーシスを抑制するか、またはその他の方法で傷害細胞の生存を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３１）
感染症を処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、抗ウイルス薬、抗菌剤、抗寄生生物薬、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症薬、抗感染薬、サイトカイン、ケモカイン、免疫調節物質、創傷治癒を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３２）
自己免疫疾患または遺伝疾患を処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、免疫抑制剤、補充タンパク質、補充遺伝子、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症薬、抗感染薬、サイトカイン、ケモカイン、免疫調節物質、創傷治癒を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３３）
筋ジストロフィを処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、ジストロフィンまたはユートロフィンまたはミオチューブリンを含む補充筋タンパク質、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症薬、抗感染薬、サイトカイン、ケモカイン、免疫調節物質、創傷治癒を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３４）
リソソーム蓄積疾患または糖原病を処置する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、前記１種またはそれを超える活性な作用物質は、治療用タンパク質、治療用遺伝子、抗体またはそのフラグメントもしくはバリアント、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、遺伝子改変剤、遺伝子発現改変剤、補充酵素、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症薬、抗感染薬、サイトカイン、ケモカイン、免疫調節物質、創傷治癒を促進する作用物質、あるいはそれらの組み合わせである、方法。
（項目３５）
前記組成物が、全身投与される、項目２６〜３４のいずれか１項に記載の方法。
（項目３６）
少なくとも１日空けた前記薬学的組成物の２回またはそれを超える投与を含む、項目２５〜３５のいずれか１項に記載の方法。
（項目３７）
腫瘍からのＤＮＡ放出を増加させるように設計された放射線治療または化学療法による腫瘍の処置後の前記薬学的組成物の投与を含む、項目２６〜２８のいずれか１項に記載の方法。
（項目３８）
癌、組織損傷、傷害または虚血の部位または複数の部位を検出する方法であって、前記方法は、それを必要とする被験体に有効量の項目２５に記載の薬学的組成物を投与する工程を含み、１種またはそれを超える活性な作用物質は、画像診断法または核医学法を用いて検出可能な作用物質である、方法。
（項目３９）
前記画像診断法または核医学法が、ＰＥＴ−ＣＴ、骨スキャン、ＭＲＩ、ＣＴ、心エコー検査、超音波およびＸ線からなる群より選択される、項目３８に記載の方法。