【手続補正書】
【提出日】令和2年7月17日(2020.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外来核酸を含む腫瘍溶解性ワクシニアウイルスであって、前記外来核酸は、STAT3媒介性遺伝子活性化を調節するタンパク質又はその断片をコードする、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項２】
タンパク質又はその断片が、STAT3認識ドメイン又は前記認識ドメイン内のブロッキング断片を含み、場合により、
(i)ブロッキング断片が、STAT3媒介性遺伝子活性化を調節し、又は
(ii)ブロッキング断片が、配列番号1のアミノ酸126〜176を含む、
請求項1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項３】
タンパク質又はその断片が、SOCS3タンパク質若しくはその断片、TCPTPタンパク質若しくはその断片、又はドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質若しくはその断片を含む、請求項1又は2に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項４】
タンパク質又はその断片が、PIAS3タンパク質又はその断片を含む、請求項1又は2に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項５】
外来核酸が、
(i) PIAS3タンパク質をコードし、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択される核酸配列に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であり、又は
(ii) PIAS3タンパク質断片をコードし、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択される核酸配列の核酸断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、
請求項4に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項６】
(i) PIAS3タンパク質が、配列番号1〜7及び24〜27からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含み、並びに／又は
(ii) PIAS3タンパク質断片が、配列番号1〜7及び24〜27のうちいずれか1つに由来するアミノ酸断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、
請求項4に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項７】
タンパク質又はその断片が、SOCS3タンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、場合により、
(i) SOCS3タンパク質又はその断片が、ヒトSOCS3タンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、
(ii) SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28及び30からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含み、並びに／又は
(iii) SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、
請求項1から3のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項８】
タンパク質又はその断片が、TCPTPタンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、場合により、
(i) TCPTPタンパク質又はその断片が、ヒトTCPTPタンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、
(ii) TCPTPタンパク質又はその断片が、配列番号32及び34からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含み、並びに／又は
(iii) TCPTPタンパク質又はその断片が、配列番号32のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、
請求項1から3のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項９】
タンパク質又はその断片が、ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、場合により、
(i)ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、ヒトドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片及びその保存的置換を含み、並びに／又は
(ii)ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、配列番号36及び38からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、
請求項1から3のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項１０】
外来核酸が、細胞透過性タンパク質をさらにコードし、場合により、
(i)細胞透過性タンパク質が、HIV-1のTATタンパク質又はその断片、YopM、トランスポータン、ペネトラチン、ポリアルギニン又はそれらの任意の組合せを含み、
(ii)外来核酸が、配列番号12、13、15、17、19、21及び23に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である配列又はその断片をさらに含み、並びに／又は
(iii)外来核酸が、TATタンパク質又はその断片をコードし、TATタンパク質又はその断片が、配列番号11、14、16、18、20及び22に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%同一である配列並びにその保存的置換又はその断片並びにその保存的置換を含む、
請求項1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【請求項１１】
請求項1から10のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス及び賦形剤を含む医薬組成物であって、場合により、
(i)賦形剤が、緩衝剤、安定剤、抗酸化剤、結合剤、希釈剤、分散剤、レートコントロール剤、滑沢剤、流動促進剤、崩壊剤、可塑剤、保存剤又はそれらの任意の組合せのうち1以上を含み、さらに場合により、賦形剤が、リン酸水素二ナトリウム二水和物、リン酸二水素ナトリウム二水和物、塩化ナトリウム、ミオイノシトール、ソルビトール又はそれらの任意の組合せを含み、
(ii)医薬組成物が、保存剤を含まないものであり、
(iii)医薬組成物が、保存剤、希釈剤及び担体のうち1種以上をさらに含み、及び／又は
(iv)医薬組成物が、さらなる有効成分又はその塩をさらに含み、さらに場合により、さらなる有効成分が、さらなる腫瘍溶解性ワクシニアウイルスを含む、
医薬組成物。
【請求項１２】
請求項1から10のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルスを製造するための方法であって、(i)ワクシニアウイルス塩基核酸配列を、請求項1から10のいずれか一項に記載の外来核酸配列と作動可能に連結することによって、修飾されたワクシニアウイルスDNAベクターを作製するステップ、(ii)哺乳動物細胞を、修飾されたワクシニアウイルスDNAベクターを用いてトランスフェクトするステップ、(iii)ウイルス複製に適した条件において哺乳動物細胞を培養するステップ、及び(iv)ウイルス粒子を回収するステップを含み、
場合により、哺乳動物細胞が、HeLa細胞、293細胞又はVero細胞を含み、
さらに場合により、修飾されたワクシニアウイルスDNAベクター中の外来核酸が、細胞外エンベロープウイルス(EEV)を主に含有するウイルス粒子の集団を促進する、
方法。
【請求項１３】
癌又は腫瘍の治療における使用のための、請求項1から10のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ウイルス、又は請求項11に記載の医薬組成物であって、
場合により腫瘍溶解性ウイルス又は医薬組成物がさらなる療法と組み合わせて使用される、
腫瘍溶解性ウイルス又は医薬組成物。
【請求項１４】
さらなる療法が、化学療法、放射線照射、さらなるウイルスを用いる腫瘍溶解性ウイルス療法、少なくとも1つの免疫調節性タンパク質、STAT3阻害剤、抗癌剤を用いる治療、又はそれらの任意の組合せを含み、
場合により、少なくとも1つの免疫調節性タンパク質が、免疫チェックポイント阻害剤を含み、さらに場合により、免疫チェックポイント阻害剤が、抗CTLA4抗体、抗PD-1抗体、抗PDL1抗体、TLRアゴニスト、又はそれらの任意の組合せを含む、
請求項１３に記載の腫瘍溶解性ウイルス又は医薬組成物。
【請求項１５】
癌患者を癌療法に対して少なくとも部分的に再感作させる使用のための、腫瘍細胞内のワクシニアウイルスの複製を増強する薬物と組み合わされる、請求項1から10のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ウイルス、又は請求項11に記載の医薬組成物であって、
場合により、癌療法が、化学療法、放射線照射、ウイルス療法、少なくとも1つの免疫調節性タンパク質を用いる治療、又はそれらの任意の組合せを含み、
さらに場合により、少なくとも1つの免疫調節性タンパク質が、免疫チェックポイント阻害剤を含み、さらに場合により、免疫チェックポイント阻害剤が、抗CTLA4抗体、抗PD-1抗体、抗PDL1抗体、TLRアゴニスト、又はそれらの任意の組合せを含む、
腫瘍溶解性ウイルス又は医薬組成物。
【請求項１６】
腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、約106PFU/mL〜約108PFU/mLの腫瘍溶解性ワクシニアウイルスを含む投与量で投与される、請求項13から15のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物。
【請求項１７】
外来核酸が、配列番号8〜10、29、31、33、35、37及び39〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列に由来するヌクレオチドの非連続ストレッチを含む核酸断片を含み、又は、
外来核酸が、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号29、配列番号31、配列番号33、配列番号35、配列番号37、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、又は配列番号43に記載のヌクレオチド配列を含む、
請求項1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号8〜10、29、31、33、35、37及び39〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列からなる群から選択され得るヌクレオチド配列に由来するヌクレオチドの非連続ストレッチを含み得る核酸断片を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号8のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含むことができ、外来核酸は、配列番号9のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号10のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号29のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含むことができ、外来核酸は、配列番号31のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号33のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号35のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号37のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号39のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号40のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号41のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号42のヌクレオチド配列を含み得る。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスは、外来核酸を含み、外来核酸は、配列番号43のヌクレオチド配列を含み得る。
本発明はまた、以下に関する。
［項目１］
外来核酸を含む腫瘍溶解性ワクシニアウイルスであって、前記外来核酸は、STAT3媒介性遺伝子活性化を調節するタンパク質又はその断片をコードする、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２］
外来核酸が、タンパク質をコードする、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３］
外来核酸が、断片をコードする、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４］
タンパク質又はその断片が、STAT3認識ドメイン又は前記認識ドメイン内のブロッキング断片を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５］
ブロッキング断片を含み、ブロッキング断片が、STAT3媒介性遺伝子活性化を調節する、項目4に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目６］
タンパク質又はその断片が、SOCS3タンパク質若しくはその断片、TCPTPタンパク質若しくはその断片、又はドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質若しくはその断片である、項目1から5のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目７］
タンパク質又はその断片が、PIAS3タンパク質又はその断片である、項目1から5のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目８］
外来核酸が、PIAS3タンパク質又はその断片の発現の増加のためにコドン最適化されている、項目7に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目９］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択される核酸配列に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、項目7又は8に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１０］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、項目7から9のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１１］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択される核酸配列の全長に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、項目7から9のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択される核酸配列の画分に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、項目7から9のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３］
PIAS3タンパク質断片をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列の核酸断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、項目7又は8に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１４］
PIAS3タンパク質断片をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列の核酸断片を含む、項目7、8又は13に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１５］
核酸断片が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列に由来するヌクレオチドの連続ストレッチを含む、項目13又は14に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１６］
ヌクレオチドの連続ストレッチが、3ヌクレオチド〜552ヌクレオチドの長さを有する、項目15に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１７］
核酸断片が、配列番号8〜10及び40〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列に由来する非連続ヌクレオチドを含む、項目13又は14に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１８］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1〜7及び24〜27からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目7から17のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１９］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目7から18のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２０］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1〜7及び24〜27からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目7から19のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２１］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1のアミノ酸配列の全長に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目7から20のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２２］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1〜7及び24〜27からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長の画分に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目7から17のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２３］
PIAS3タンパク質をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質が、配列番号1のアミノ酸配列の全長の画分に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目7から17及び22のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２４］
PIAS3タンパク質断片をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質断片が、配列番号1〜7及び24〜27のうちいずれか1つに由来するアミノ酸断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目7から21及び22から23のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２５］
PIAS3タンパク質断片をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質断片が、配列番号1に由来するアミノ酸断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目7から17及び22から24のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２６］
PIAS3タンパク質又はその断片が、配列番号6のアミノ酸配列のアミノ酸400〜523及びその保存的置換を含む、項目7に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２７］
STAT3活性を調節するタンパク質又はその断片が、SOCS3タンパク質又はその断片及びその保存的置換である、項目1から6のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２８］
SOCS3タンパク質又はその断片が、ヒトSOCS3タンパク質又はその断片及びその保存的置換を含む、項目27に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目２９］
SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28及び30からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目27又は28に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３０］
SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目27又は28に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３１］
SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28及び30からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目27から30のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３２］
SOCS3タンパク質又はその断片が、配列番号28及び30からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長の画分に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目27から30のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３３］
STAT3活性を調節するタンパク質又はその断片が、TCPTPタンパク質又はその断片及びその保存的置換である、項目1から6のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３４］
TCPTPタンパク質又はその断片が、ヒトTCPTPタンパク質又はその断片及びその保存的置換である、項目33に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３５］
TCPTPタンパク質又はその断片が、配列番号32及び34からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目33又は34に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３６］
TCPTPタンパク質又はその断片が、配列番号32のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列及びその保存的置換を含む、項目33から35のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３７］
TCPTPタンパク質又はその断片が、配列番号32及び34からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目33から36のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３８］
TCPTPタンパク質又はその一部が、配列番号32及び34からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長の画分に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目33から36に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目３９］
STAT3活性を調節するタンパク質又はその断片が、ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片及びその保存的置換である、項目1から6のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４０］
ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、ヒトドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片及びその保存的置換である、項目39に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４１］
ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、配列番号36及び38からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目39又は40に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４２］
ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、配列番号36及び38からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目39から41のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４３］
ドミナントネガティブ突然変異体STAT3タンパク質又はその断片が、配列番号36及び38からなる群から選択されるアミノ酸配列の全長の一部に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸配列並びにその保存的置換を含む、項目39から42のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４４］
外来核酸が、細胞透過性タンパク質をさらにコードする、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４５］
細胞透過性タンパク質をさらにコードする外来核酸を含み、細胞透過性タンパク質が、HIV-1のTATタンパク質又はその断片、YopM、トランスポータン、ペネトラチン、ポリアルギニン又はそれらの任意の組合せを含む、項目44に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４６］
細胞透過性タンパク質をさらにコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号12、13、15、17、19、21及び23に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である配列又はその断片をさらに含む、項目44又は45に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４７］
細胞透過性タンパク質をさらにコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号12、13、15、17、19、21及び23の全長に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である配列をさらに含む、項目44から46のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４８］
細胞透過性タンパク質をさらにコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号12、13、115、17、19、21及び23の長さの画分に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である配列をさらに含む、項目44から47のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目４９］
TATタンパク質又はその断片をコードする外来核酸を含み、TATタンパク質又はその断片が、配列番号11、14、16、18、20及び22に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%同一である配列並びにその保存的置換又はその断片並びにその保存的置換を含む、項目44から48のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５０］
STAT3活性を調節するタンパク質又はその断片が、配列番号11のアミノ酸配列に対して少なくとも約85%相同であるアミノ酸を有する細胞透過性ペプチドにコンジュゲートされる、項目1から49のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５１］
STAT3活性を調節するタンパク質又はその断片が、配列番号11のアミノ酸配列を含む細胞透過性ペプチドにコンジュゲートされる、項目1から49のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５２］
タンパク質又はその断片が、ブロッキング断片を含み、ブロッキング断片が、配列番号1のアミノ酸126〜176を含む、項目4に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５３］
タンパク質又はその断片が、PIAS3タンパク質又はその断片を含み、PIAS3タンパク質又はその断片が、配列番号1のアミノ酸129〜316、133〜316、132〜177、126〜176又は400〜528を含む、項目52に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５４］
外来核酸が、ワクシニアウイルスゲノム中に挿入される、項目1から53のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５５］
外来核酸が、ワクシニアウイルスゲノムのチミジンキナーゼ遺伝子座中に挿入される、項目54に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５６］
細胞外エンベロープウイルス(EEV)である、項目1から55のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５７］
腫瘍細胞中のM2マクロファージ内で複製する、項目1から56のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５８］
腫瘍細胞中のM2マクロファージ内で複製して、細胞外エンベロープウイルス(EEV)を主に含有するウイルスの集団を生成する、項目1から57のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目５９］
M2マクロファージ内で複製することによって免疫抑制を部分的に避ける、項目57又は58に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目６０］
項目1から59のいずれか一項に規定される腫瘍溶解性ワクシニアウイルス及び賦形剤を含む医薬組成物。
［項目６１］
賦形剤が、緩衝剤、安定剤、抗酸化剤、結合剤、希釈剤、分散剤、レートコントロール剤、滑沢剤、流動促進剤、崩壊剤、可塑剤、保存剤又はそれらの任意の組合せのうち1以上を含む、項目60に記載の医薬組成物。
［項目６２］
賦形剤が、リン酸水素二ナトリウム二水和物、リン酸二水素ナトリウム二水和物、塩化ナトリウム、ミオイノシトール、ソルビトール又はそれらの任意の組合せを含む、項目61に記載の医薬組成物。
［項目６３］
保存剤を含まない、項目60から62のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［項目６４］
保存剤、希釈剤及び担体のうち1種以上をさらに含む、項目60から63のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［項目６５］
さらなる有効成分又はその塩をさらに含む、項目60から64のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［項目６６］
さらなる有効成分を含み、さらなる有効成分が、さらなる腫瘍溶解性ワクシニアウイルスである、項目65に記載の医薬組成物。
［項目６７］
項目1から59のいずれか一項に規定される腫瘍溶解性ワクシニアウイルスを製造するための方法であって、(i)ワクシニアウイルス塩基核酸配列を、項目1から59のいずれか一項に規定される外来核酸配列と作動可能に連結することによって、修飾されたワクシニアウイルスDNAベクターを作製するステップ、(ii)哺乳動物細胞を、修飾されたワクシニアウイルスDNAベクターを用いてトランスフェクトするステップ、(iii)ウイルス複製に適した条件において哺乳動物細胞を培養するステップ、及び(iv)ウイルス粒子を回収するステップを含む、方法。
［項目６８］
哺乳動物細胞が、HeLa細胞、293細胞又はVero細胞を含む、項目67に記載の方法。
［項目６９］
修飾されたワクシニアウイルスDNAベクター中の項目1から59のいずれか一項に規定される外来核酸が、細胞外エンベロープウイルス(EEV)を主に含有するウイルス粒子の集団を促進する、項目67又は68に記載の方法。
［項目７０］
癌を治療する方法であって、治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
［項目７１］
治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、癌が、固形腫瘍、白血病又はリンパ腫である、項目70に記載の方法。
［項目７２］
腫瘍を治療する方法であって、治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
［項目７３］
治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、腫瘍が、固形腫瘍、白血病又はリンパ腫である、項目72に記載の方法。
［項目７４］
癌又は腫瘍を治療する方法であって、治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、さらなる療法と組み合わせてそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
［項目７５］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、化学療法、放射線照射、さらなるウイルスを用いる腫瘍溶解性ウイルス療法、免疫調節性タンパク質を用いる治療、STAT3阻害剤、抗癌剤又はそれらの任意の組合せを含む、項目74に記載の方法。
［項目７６］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、同時に又は逐次投与される、項目74又は75に記載の方法。
［項目７７］
さらなる療法の逐次投与を含み、さらなる療法が、項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与する前に投与される、項目74、75又は76に記載の方法。
［項目７８］
さらなる療法の逐次投与を含み、さらなる療法が、項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与した後に投与される、項目74、75又は76に記載の方法。
［項目７９］
癌患者を癌療法に対して少なくとも部分的に再感作させる方法であって、治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、腫瘍細胞内のワクシニアウイルスの複製を増強する薬物と組み合わせてそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
［項目８０］
治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、癌療法が、化学療法、放射線照射、ウイルス療法、免疫調節性タンパク質を用いる治療又はそれらの組合せを含む、項目79に記載の方法。
［項目８１］
癌細胞において毒性効果をもたらす方法であって、治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、癌細胞の集団に投与することを含む、方法。
［項目８２］
治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、癌細胞の集団中の全ての癌細胞が、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスに感染するわけではない、項目81に記載の方法。
［項目８３］
非感染癌細胞の成長が、直接感染なしで阻害される、項目82に記載の方法。
［項目８４］
腫瘍溶解性ワクシニアウイルスの感染力を決定する方法であって、(i)対象から第1の生体サンプルを採取し、第1の生体サンプルにおけるSTAT3のレベルを決定するステップ、(ii)有効な治療上有効量の項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を、単独で又はさらなる療法と組み合わせて対象に投与するステップ、(iii)ステップ(ii)における投与の約2時間〜約72時間後に対象から第2の生体サンプルを採取し、第2の生体サンプルにおけるSTAT3タンパク質のレベルを検出するステップを含む、方法。
［項目８５］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、化学療法、放射線照射、さらなるウイルスを用いる腫瘍溶解性ウイルス療法、免疫調節性タンパク質を用いる治療、STAT3阻害剤、抗癌剤又はそれらの任意の組合せを含む、項目84に記載の方法。
［項目８６］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、同時に又は逐次投与される、項目84又は85に記載の方法。
［項目８７］
さらなる療法の逐次投与を含み、さらなる療法が、項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与する前に投与される、項目84、85又は86に記載の方法。
［項目８８］
さらなる療法の逐次投与を含み、さらなる療法が、項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与した後に投与される、項目84、85又は86に記載の方法。
［項目８９］
単独での又はさらなる療法と組み合わせた腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物の投与前(ステップi)及び後(ステップiii)に、STAT3のレベルを決定することを含み、STAT3のレベルが、ステップ(i)においてよりもステップ(iii)において低い場合に、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスが感染性であると決定される、項目84から88のいずれか一項に記載の方法。
［項目９０］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、約106PFU/mL〜約108PFU/mLの腫瘍溶解性ワクシニアウイルスを含む投与量で投与される、項目70から89のいずれか一項に記載の方法。
［項目９１］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、第1の期間の間、初期用量で、第2の期間の間、中間用量で、第3の期間の間、高用量で独立に投与される、項目70から90のいずれか一項に記載の方法。
［項目９２］
初期の、中間の及び高用量の投与を独立に含み、初期用量が、中間用量よりも低く、中間用量が、高用量よりも低い、項目91に記載の方法。
［項目９３］
第1、第2及び第3の期間が各々、約1週〜約3週である、項目91又は92に記載の方法。
［項目９４］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス及び医薬組成物が独立に、約1mL〜約5mL、約5mL〜10mL、約15mL〜約20mL、約25mL〜約30mL、約30mL〜約50mL、約50mL〜約100mL、約100mL〜150mL、約150mL〜約200mL、約200mL〜約250mL、約250mL〜約300mL、約300mL〜約350mL、約350mL〜約400mL、約400mL〜約450mL、約450mL〜500mL、約500mL〜750mL又は約750mL〜1000mLの容量で投与される液体投与形を含む、項目70から93のいずれか一項に記載の方法。
［項目９５］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、液体投与形、固体投与形、吸入可能投与形、経鼻投与形で、リポソーム製剤、ナノ粒子を含む投与形、マイクロ粒子を含む投与形、ポリマー投与形又はそれらの任意の組合せで投与される、項目70から94のいずれか一項に記載の方法。
［項目９６］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、約1週、約2週、約3週、約4週、約6週、約7週、約8週、約9週、約10週又は約12週の間投与される、項目70から95のいずれか一項に記載の方法。
［項目９７］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、1日に1回、1日に2回、週に1回、2週に1回又は3週に1回投与される、項目70から96のいずれか一項に記載の方法。
［項目９８］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物が、静脈内に又は腫瘍内注射によって投与される、項目70から97のいずれか一項に記載の方法。
［項目９９］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することを含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物の投与が、第1の用量の投与から約1時間〜約3日後に第1のピークウイルス負荷及び約3日〜約7日後に第2のピークウイルス負荷をもたらす、項目70から98のいずれか一項に記載の方法。
［項目１００］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、約1週、約2週、約3週、約4週、約6週、約7週、約8週、約9週、約10週又は約12週の間投与される、項目74から99のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０１］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、1日に1回、週に1回、2週に1回又は3週に1回投与される、項目73から100のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０２］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、液体投与形、固体投与形、吸入可能投与形、経鼻投与形で、リポソーム製剤、ナノ粒子を含む投与形、マイクロ粒子を含む投与形、ポリマー投与形又はそれらの任意の組合せで投与される、項目73から101のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０３］
さらなる療法の投与を含み、さらなる療法が、経口的に、静脈内に、腫瘍内注射によって、又は放射線照射によって投与される、項目73から102のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０４］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物のそれを必要とする対象への投与を含み、対象がヒトである、項目70から103のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０５］
対象からの第1及び第2の生体サンプルの採取を含み、第1及び第2の生体サンプルが、ヒト組織サンプルである、項目104に記載の方法。
［項目１０６］
対象からの第1及び第2の生体サンプルの採取を含み、対象がヒトであり、第1及び第2の生体サンプルが、ヒト対象から得た血液又は血漿である、項目105に記載の方法。
［項目１０７］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物のそれを必要とする対象への投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物の投与の前に、対象が、癌又は腫瘍を有すると診断されている、項目70から106のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０８］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物のそれを必要とする対象への投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物の投与の前に、対象が、癌又は腫瘍を有すると診断される、項目70から107のいずれか一項に記載の方法。
［項目１０９］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の、さらなる療法と組み合わせたそれを必要とする対象への投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物又はさらなる療法の投与の前に、対象が、癌又は腫瘍を有すると診断されている、項目70から108のいずれか一項に記載の方法。
［項目１１０］
項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の、さらなる療法と組み合わせたそれを必要とする対象への投与を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は医薬組成物の投与の前に、対象が、癌又は腫瘍を有すると診断される、項目70から109のいずれか一項に記載の方法。
［項目１１１］
外来核酸を含むウイルスであって、前記外来核酸が、STAT3媒介性遺伝子活性化を調節するタンパク質又はその断片をコードする、ウイルス。
［項目１１２］
外来核酸配列を含み、ワクシニアウイルスである、項目111に記載のウイルス。
［項目１１３］
外来核酸を含み、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスが、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスである、項目112に記載のウイルス。
［項目１１４］
タンパク質又はその断片が、PIAS3タンパク質又はその断片である、項目111から113のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１１５］
PIAS3タンパク質又はその断片をコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号8〜10からなる群から選択される核酸配列又はその断片に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約96%、少なくとも約97%、少なくとも約98%、少なくとも約99%又は100%相同である、項目114に記載のウイルス。
［項目１１６］
PIAS3タンパク質又はその断片をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質又はその断片が、配列番号1〜7及び24〜27のいずれか1つに由来するアミノ酸に対して少なくとも約85%、約90%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%又は100%相同であるアミノ酸配列又はその断片を含む、項目111から115のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１１７］
外来核酸が、HIV-1のTATタンパク質又はその断片をさらにコードする、項目111から116のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１１８］
TATタンパク質をさらにコードする外来核酸を含み、外来核酸が、配列番号12又はその断片に対して約85%、約90%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%又は100%相同である配列をさらに含む、項目117に記載のウイルス。
［項目１１９］
TATタンパク質又はその断片をさらにコードする外来核酸を含み、TAT又はその断片タンパク質が、配列番号11又はその断片に対して約85%、約90%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%又は100%同一である配列を含む、項目111から118のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１２０］
PIAS3タンパク質又はその断片をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質又はその断片が、配列番号1のアミノ酸129〜316、133〜316、132〜177、126〜176又は400〜528を含む、項目111から119のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１２１］
PIAS3タンパク質又はその断片をコードする外来核酸を含み、PIAS3タンパク質又はその断片が、配列番号1のアミノ酸126〜176を含む、項目111から120のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１２２］
STAT3媒介性遺伝子活性化を調節するタンパク質又はその断片が、STAT3阻害剤である、項目1から59のいずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２３］
STAT3媒介性遺伝子活性化を調節するタンパク質又はその断片が、STAT3阻害剤である、項目111から122のいずれか一項に記載のウイルス。
［項目１２４］
対象が、項目1から59いずれか一項に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス又は項目60から66のいずれか一項に記載の医薬組成物の投与の前、それと同時に又はその後にケトン食を投与される、項目70から89のいずれか一項に記載の方法。
［項目１２５］
外来核酸が、配列番号8〜10、29、31、33、35、37及び39〜43からなる群から選択されるヌクレオチド配列からなる群から選択されるヌクレオチド配列に由来するヌクレオチドの非連続ストレッチを含む核酸断片を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２６］
外来核酸が、配列番号8のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２７］
外来核酸が、配列番号9のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２８］
外来核酸が、配列番号10のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１２９］
外来核酸が、配列番号29のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３０］
外来核酸が、配列番号31のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３１］
外来核酸が、配列番号33のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３２］
外来核酸が、配列番号35のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３３］
外来核酸が、配列番号37のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３４］
外来核酸が、配列番号39のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３５］
外来核酸が、配列番号40のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３６］
外来核酸が、配列番号41のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３７］
外来核酸が、配列番号42のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。
［項目１３８］
外来核酸が、配列番号43のヌクレオチド配列を含む、項目1に記載の腫瘍溶解性ワクシニアウイルス。