【手続補正書】
【提出日】令和2年3月9日(2020.3.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーと、
該ポリマーの表面上に共有結合的に固定化されており、スキャフォールドへの内皮細胞および／または内皮前駆細胞の付着を増大させ、かつ式I：
2019519256.tif 000001
の化合物である、ペプチドリガンドと
を含む、スキャフォールドであって、
式中、
X2、X6、およびX7は各々独立してアミノ酸であり、X2、X6、およびX7のうちの少なくとも1つはD-アミノ酸であり；
R1は、H、C1-6アルキル、-C(O)R1a、およびL-Aからなる群より選択され；
R1aは、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、C1-6アルキル-NH2、C1-6アルキル-C(O)N(H)-C1-6ヘテロアルキル、シクロアルキル、C1-6アルキル-シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、C1-6アルキル-ヘテロシクロアルキル、アリール、C1-6アルキル-アリール、ヘテロアリール、およびC1-6アルキル-ヘテロアリールからなる群より選択され、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリール基、およびアリール基は、ハロゲン、-NO2、-OH、-CN、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、およびC1-6ハロアルコキシからなる群より選択されるメンバーで置換されていてもよく；
R2は、H、C1-6アルキル、およびL-Aからなる群より選択され；
Lはリンカーであり；かつ
Aは活性物質である、スキャフォールド。
【請求項２】
R1およびR2が各々独立して、H、C1-6アルキル、およびL-Aからなる群より選択され；
Lがリンカーであり；
Aが活性物質であり；
X2が、Gly、Ala、Sar、およびβ-アラニン、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択され；
X6が、Asp、Val、Leu、Ile、Met、Phe、Asn、Glu、Gln、His、Lys、Arg、Gly、Ala、Ser、Thr、Tyr、Trp、Pro、Aad、Bec、Bmc、Bmp、Phe(4COOH)、Hyp、HoSer、Tha、Ahch、Actp、Akch、Tyr(diI)、Trp、Thz、2Thi、3Thi、Cit、HoCit、Aib、Nglu、およびFua、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択され；かつ
X7が、Val、Leu、Ile、Met、Phe、Asn、Glu、Gln、His、Lys、Arg、Asp、Gly、Ala、Ser、Thr、Tyr、Trp、Pro、Bmp、HoSer、Nglu、HoCit、Bec、Aad、Hyp、Ahch、Phe(4COOH)、Akch、Aecc、Abu、Phe(3,4-diOMe)、Cpa、2-Thi、Thz、Phg、Phe(4-NO2)、Nle、(NMe)Phe、Aic、Chg、Bta、Bpa、Nal2、Nal1、Tic、Ppca、Cha、Bipa、Deg、Dpg、Acpc、Bmc、Cit、Sar、Tha、Pra、Actp、Aib、Agl、Acbc、Fua、Nva、Thi、Trp、Bug、Ach、(NMe)Val、Cpeg、(CαMe)Phe、Tyr(diI)、Phe(2-Cl)、Bua、HoPhe、HoLeu、Sta、Ing、Phe(4-CF3)、Oic、Dpa、Phe(4-t-Bu)、HoCha、およびPhe(3,4-diCl)、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択される、請求項1に記載のスキャフォールド。
【請求項３】
前記ペプチドリガンドが、式Ia：
2019519256.tif 000002
の化合物であり、
式中、
X6およびX7は各々独立してD-アミノ酸であり；
R1は、H、C1-6アルキル、および-C(O)R1aからなる群より選択され；
R1aは、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、C1-6アルキル-NH2、C1-6アルキル-C(O)N(H)-C1-6ヘテロアルキル、シクロアルキル、C1-6アルキル-シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、C1-6アルキル-ヘテロシクロアルキル、アリール、C1-6アルキル-アリール、ヘテロアリール、およびC1-6アルキル-ヘテロアリールからなる群より選択され、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリール基、およびアリール基は、ハロゲン、-NO2、-OH、-CN、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、およびC1-6ハロアルコキシからなる群より選択されるメンバーで置換されていてもよく；かつ
R2は、HおよびC1-6アルキルからなる群より選択される、請求項1に記載のスキャフォールド。
【請求項４】
(a) R1およびR2が各々独立して、HおよびC1-6アルキルからなる群より選択されるか；
(b) X6が、DAsp、DSer、DGlu、およびDCitからなる群より選択され；かつ
X7が、DVal、DPhe、DGlu、DSer、DBug、DBta、DAgl、DPra、D(NMe)Val、D(CαMe)Val、DAbu、DIng、DIle、DTha、DAsp、およびDNal1からなる群より選択されるか；または
(c) X6が、DAspおよびDSerからなる群より選択され；かつ
X7が、DVal、DGlu、DPhe、DSer、DBug、およびDBtaからなる群より選択される、
請求項3に記載のスキャフォールド。
【請求項５】
(a) 前記ペプチドリガンドが、cGRGDdvc、cGRGDsfc、cGRGDdfc、cGRGDsec、cGRGDdsc、cGRGDd-DBug-c、cGRGDd-DBta-c、Ac-cGRGDdvc、(β-アラニン)-cGRGDdvc、(Ebes)-cGRGDdvc、cGRGDd-DAgl-c、cGRGDd-DPra-c、cGRGDd-DBug-c、cGRGDd-D(NMe)Val-c、cGRGDd-D(CαMe)Val-c、cGRGDd-DAbu-c、cGRGDd-DNal1-c、cGRGDd-DNal2-c、およびcGRGDd-DBta-cからなる群より選択されるか；
(b) 前記ペプチドリガンドが、cGRGDdvc、cGRGDsfc、cGRGDdfc、cGRGDsec、cGRGDdsc、cGRGDd-DBug-c、およびcGRGDd-DBta-cからなる群より選択されるか；または
(c) 前記ペプチドリガンドがcGRGDdvc（LXW7）である、
請求項3に記載のスキャフォールド。
【請求項６】
前記ペプチドリガンドが、前記細胞上のインテグリンαvβ3に結合する、請求項1に記載のスキャフォールド。
【請求項７】
(a) 前記ポリマーが、ポリ(L-乳酸)（PLLA）、ポリカプロラクトン（PCL）、乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）、ヒドロキシアパタイト（HA）、ラクチド-ε-カプロラクトン共重合体（PLCL）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）、オリゴ糖、タンパク質、ポリケチド、ペプトイド、ヒドロゲル、ポリ(グリコール)、ポリラクタート、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるか；または
(b) 前記ポリマーがコーティングをさらに含み、かつ前記ペプチドリガンドが該コーティングに共有結合的に付着しており、任意に該コーティングがパリレンポリマーである、
請求項1に記載のスキャフォールド。
【請求項８】
内皮細胞、内皮前駆細胞、および／または骨形成原細胞が、前記スキャフォールド上に播種されている、請求項1に記載のスキャフォールド。
【請求項９】
請求項1に記載のスキャフォールドを含む、操作された組織。
【請求項１０】
コーティングポリマーと、
該コーティングポリマーに共有結合的に付着している、請求項1に記載のペプチドリガンドと
を含む、コーティングであって；任意に
(a) 該ペプチドリガンドがcGRGDdvc（LXW7）であるか；または
(b) 該コーティングポリマーがパリレンポリマーである、
前記コーティング。
【請求項１１】
請求項1に記載のスキャフォールドを対象中に移植する工程を含む、該対象における組織再生のために内皮細胞および／または内皮前駆細胞の内皮化および血管新生を改善するための方法における使用のための、請求項1に記載のスキャフォールドであって；任意に
(a) ペプチドリガンドが、前記スキャフォールドへの内皮細胞および／または内皮前駆細胞の動員を増大させるか；または
(b) ペプチドリガンドが、前記スキャフォールド上での内皮細胞および／または内皮前駆細胞の増殖を増大させる、
前記スキャフォールド。
【請求項１２】
請求項1に記載のスキャフォールドを対象中に移植する工程を含む、該対象における骨欠損を修復するための方法における使用のための、請求項1に記載のスキャフォールドであって；任意に内皮細胞および骨形成原細胞が、移植の前に該スキャフォールド上に播種される、前記スキャフォールド。
【請求項１３】
コーティングポリマーに官能基を付与する工程；
該コーティングポリマーを表面に接着させる工程；および
ペプチドリガンドを、該コーティングポリマーに共有結合的に付着させる工程であって、該ペプチドリガンドが、請求項1に記載のペプチドリガンド、または官能基を付与されたその誘導体である、工程
を含む、該表面をコーティングする方法。
【請求項１４】
(a) 前記ペプチドリガンドが、cGRGDdvc（LXW7）、または官能基を付与されたその誘導体であるか；
(b) 前記コーティングポリマーがパリレンポリマーであるか；
(c) 前記コーティングポリマーの官能基付与が、該コーティングポリマーへのアルキン官能基の導入を含み、任意に該ペプチドリガンドが、アジド官能基を用いて官能基を付与されているか；
(d) 前記表面がスキャフォールドポリマー、プラスチック、金属、またはガラスを含み、任意に該スキャフォールドポリマーが、ポリ(L-乳酸)（PLLA）、ポリカプロラクトン（PCL）、乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）、ヒドロキシアパタイト（HA）、ラクチド-ε-カプロラクトン共重合体（PLCL）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）、オリゴ糖、タンパク質、ポリケチド、ペプトイド、ヒドロゲル、ポリ(グリコール)、ポリラクタート、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるか；
(e) 前記表面が、ステント、シャント、パッチ、グラフト、インプラント、心臓弁もしくはカテーテルの形態を有するか；または
(f) 前記表面への前記コーティングポリマーの接着が化学蒸着（CVD）を含む、
請求項13に記載の方法。
【請求項１５】
前記表面への前記コーティングポリマーの接着の前に、該表面を活性化する工程
をさらに含み、任意に前記表面の活性化が、マイクロ波プラズマの適用を含む、請求項13に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
また、コーティングポリマーに官能基を付与する工程、および該コーティングポリマーを表面に接着させる工程を含む、表面をコーティングする方法も提供される。方法は、さらに、式Iのペプチドリガンドをコーティングポリマーに共有結合的に付着させる工程を含む。
[本発明1001]
ポリマーと、
該ポリマーの表面上に共有結合的に固定化されており、スキャフォールドへの内皮細胞および／または内皮前駆細胞の付着を増大させ、かつ式I：
2019519256.tif 000003
の化合物である、ペプチドリガンドと
を含む、スキャフォールドであって、
式中、
X2、X6、およびX7は各々独立してアミノ酸であり、X2、X6、およびX7のうちの少なくとも1つはD-アミノ酸であり；
R1は、H、C1-6アルキル、-C(O)R1a、およびL-Aからなる群より選択され；
R1aは、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、C1-6アルキル-NH2、C1-6アルキル-C(O)N(H)-C1-6ヘテロアルキル、シクロアルキル、C1-6アルキル-シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、C1-6アルキル-ヘテロシクロアルキル、アリール、C1-6アルキル-アリール、ヘテロアリール、およびC1-6アルキル-ヘテロアリールからなる群より選択され、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリール基、およびアリール基は、ハロゲン、-NO2、-OH、-CN、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、およびC1-6ハロアルコキシからなる群より選択されるメンバーで置換されていてもよく；
R2は、H、C1-6アルキル、およびL-Aからなる群より選択され；
Lはリンカーであり；かつ
Aは活性物質である、スキャフォールド。
[本発明1002]
R1およびR2が各々独立して、H、C1-6アルキル、およびL-Aからなる群より選択され；
Lがリンカーであり；
Aが活性物質であり；
X2が、Gly、Ala、Sar、およびβ-アラニン、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択され；
X6が、Val、Leu、Ile、Met、Phe、Asn、Glu、Gln、His、Lys、Arg、Asp、Gly、Ala、Ser、Thr、Tyr、Trp、Pro、Aad、Bec、Bmc、Bmp、Phe(4COOH)、Hyp、HoSer、Tha、Ahch、Actp、Akch、Tyr(diI)、Trp、Thz、2Thi、3Thi、Cit、HoCit、Aib、Nglu、およびFua、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択され；かつ
X7が、Val、Leu、Ile、Met、Phe、Asn、Glu、Gln、His、Lys、Arg、Asp、Gly、Ala、Ser、Thr、Tyr、Trp、Pro、Bmp、HoSer、Nglu、HoCit、Bec、Aad、Hyp、Ahch、Phe(4COOH)、Akch、Aecc、Abu、Phe(3,4-diOMe)、Cpa、2-Thi、Thz、Phg、Phe(4-NO2)、Nle、(NMe)Phe、Aic、Chg、Bta、Bpa、Nal2、Nal1、Tic、Ppca、Cha、Bipa、Deg、Dpg、Acpc、Bmc、Cit、Sar、Tha、Pra、Actp、Aib、Agl、Acbc、Fua、Nva、Thi、Trp、Bug、Ach、(NMe)Val、Cpeg、(CαMe)Phe、Tyr(diI)、Phe(2-Cl)、Bua、HoPhe、HoLeu、Sta、Ing、Phe(4-CF3)、Oic、Dpa、Phe(4-t-Bu)、HoCha、およびPhe(3,4-diCl)、ならびにそれらの立体異性体からなる群より選択される、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1003]
前記ペプチドリガンドが、式Ia：
2019519256.tif 000004
の化合物であり、
式中、
X6およびX7は各々独立してD-アミノ酸であり；
R1は、H、C1-6アルキル、および-C(O)R1aからなる群より選択され；
R1aは、C1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、C1-6アルキル-NH2、C1-6アルキル-C(O)N(H)-C1-6ヘテロアルキル、シクロアルキル、C1-6アルキル-シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、C1-6アルキル-ヘテロシクロアルキル、アリール、C1-6アルキル-アリール、ヘテロアリール、およびC1-6アルキル-ヘテロアリールからなる群より選択され、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリール基、およびアリール基は、ハロゲン、-NO2、-OH、-CN、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、およびC1-6ハロアルコキシからなる群より選択されるメンバーで置換されていてもよく；かつ
R2は、HおよびC1-6アルキルからなる群より選択される、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1004]
R1およびR2が各々独立して、HおよびC1-6アルキルからなる群より選択される、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1005]
X6が、DSer、DAsp、DGlu、およびDCitからなる群より選択され；かつ
X7が、DPhe、DGlu、DSer、DBug、DBta、DVal、DAgl、DPra、D(NMe)Val、D(CαMe)Val、DAbu、DIng、DIle、DTha、DAsp、およびDNal1からなる群より選択される、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1006]
X6が、DAspおよびDSerからなる群より選択され；かつ
X7が、DGlu、DPhe、DSer、DVal、DBug、およびDBtaからなる群より選択される、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1007]
前記ペプチドリガンドが、cGRGDsfc、cGRGDdfc、cGRGDsec、cGRGDdsc、cGRGDd-DBug-c、cGRGDd-DBta-c、cGRGDdvc、Ac-cGRGDdvc、(β-アラニン)-cGRGDdvc、(Ebes)-cGRGDdvc、cGRGDd-DAgl-c、cGRGDd-DPra-c、cGRGDd-DBug-c、cGRGDd-D(NMe)Val-c、cGRGDd-D(CαMe)Val-c、cGRGDd-DAbu-c、cGRGDd-DNal1-c、cGRGDd-DNal2-c、およびcGRGDd-DBta-cからなる群より選択される、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1008]
前記ペプチドリガンドが、cGRGDsfc、cGRGDdfc、cGRGDsec、cGRGDdsc、cGRGDdvc、cGRGDd-DBug-c、およびcGRGDd-DBta-cからなる群より選択される、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1009]
前記ペプチドリガンドがcGRGDdvc（LXW7）である、本発明1003のスキャフォールド。
[本発明1010]
前記ペプチドリガンドが、前記細胞上のインテグリンαvβ3に結合する、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1011]
前記ポリマーが、ポリ(L-乳酸)（PLLA）、ポリカプロラクトン（PCL）、乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）、ヒドロキシアパタイト（HA）、ラクチド-ε-カプロラクトン共重合体（PLCL）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1012]
前記ポリマーがコーティングをさらに含み、かつ前記ペプチドリガンドが該コーティングに共有結合的に付着している、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1013]
前記コーティングがパリレンポリマーである、本発明1012のスキャフォールド。
[本発明1014]
内皮細胞、内皮前駆細胞、および／または骨形成原細胞が、前記スキャフォールド上に播種されている、本発明1001のスキャフォールド。
[本発明1015]
本発明1001のスキャフォールドを含む、操作された組織。
[本発明1016]
コーティングポリマーと、
該コーティングポリマーに共有結合的に付着している、本発明1001のペプチドリガンドと
を含む、コーティング。
[本発明1017]
前記ペプチドリガンドがcGRGDdvc（LXW7）である、本発明1016のコーティング。
[本発明1018]
前記コーティングポリマーがパリレンポリマーである、本発明1016のコーティング。
[本発明1019]
本発明1001のスキャフォールドを対象中に移植する工程を含む、該対象における組織再生のために内皮細胞および／または内皮前駆細胞の内皮化および血管新生を改善するための方法。
[本発明1020]
前記ペプチドリガンドが、前記スキャフォールドへの内皮細胞および／または内皮前駆細胞の動員を増大させる、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記ペプチドリガンドが、前記スキャフォールド上での内皮細胞および／または内皮前駆細胞の増殖を増大させる、本発明1019の方法。
[本発明1022]
本発明1001のスキャフォールドを対象中に移植する工程を含む、該対象における骨欠損を修復するための方法。
[本発明1023]
内皮細胞および骨形成原細胞が、移植の前に前記スキャフォールド上に播種される、本発明1022の方法。
[本発明1024]
コーティングポリマーに官能基を付与する工程；
該コーティングポリマーを表面に接着させる工程；および
ペプチドリガンドを、該コーティングポリマーに共有結合的に付着させる工程であって、該ペプチドリガンドが、本発明1001のペプチドリガンド、または官能基を付与されたその誘導体である、工程
を含む、該表面をコーティングする方法。
[本発明1025]
前記ペプチドリガンドが、cGRGDdvc（LXW7）、または官能基を付与されたその誘導体である、本発明1024の方法。
[本発明1026]
前記コーティングポリマーがパリレンポリマーである、本発明1024の方法。
[本発明1027]
前記コーティングポリマーの官能基付与が、該コーティングポリマーへのアルキン官能基の導入を含む、本発明1024の方法。
[本発明1028]
前記ペプチドリガンドが、アジド官能基を用いて官能基を付与されている、本発明1027の方法。
[本発明1029]
前記表面がスキャフォールドポリマーを含む、本発明1024の方法。
[本発明1030]
前記スキャフォールドポリマーが、ポリ(L-乳酸)（PLLA）、ポリカプロラクトン（PCL）、乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）、ヒドロキシアパタイト（HA）、ラクチド-ε-カプロラクトン共重合体（PLCL）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、本発明1029の方法。
[本発明1031]
前記表面への前記コーティングポリマーの接着が化学蒸着（CVD）を含む、本発明1024の方法。
[本発明1032]
前記表面への前記コーティングポリマーの接着の前に、該表面を活性化する工程
をさらに含む、本発明1024の方法。
[本発明1033]
前記表面の活性化が、マイクロ波プラズマの適用を含む、本発明1032の方法。