【手続補正書】
【提出日】令和2年7月3日(2020.7.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックを提供し、
（ｂ）該ＤＰＰＣ、ＤＰＰＡ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックの１つまたは複数のカルシウム濃度を測定し、
（ｃ）該ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、および／またはＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックを非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成し、
（ｄ）該リン脂質溶液を水性溶媒と合わせて、リン脂質懸濁液を形成すること
を含み、
所望により、ここで該ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、および／またはＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックは合わされた測定カルシウム濃度が低い、リン脂質懸濁液を製造する方法。
【請求項２】
（ａ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、ＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、および非水性溶媒を合わせて、リン脂質溶液を形成し、ここで
（ｉ）該ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、ＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、および非水性溶媒の各々が、特徴のあるカルシウム濃度を有し、該ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、ＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、および非水性溶媒の合わされた特徴のあるカルシウム濃度が低いカルシウム濃度であるか、または
（ｉｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、ＤＰＰＡストック、およびＤＰＰＣストックの１つ、２つ、または３つ全てが、特徴のあるカルシウム濃度を有し、該特徴のあるカルシウム濃度に基づいて選択されてもよく、合わされた特徴のあるカルシウム濃度が低いカルシウム濃度であり、
（ｂ）該リン脂質溶液を水性溶媒と合わせて、リン脂質懸濁液を形成すること
を含む、リン脂質懸濁液を製造する方法。
【請求項３】
（ａ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックのカルシウム濃度を測定し、
測定されたカルシウム濃度が低いＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックをＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、および非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成するか、
（ｂ）ＤＰＰＣストックのカルシウム濃度を測定し、
測定されたカルシウム濃度が低いＤＰＰＣストックをＤＰＰＡストック、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、および非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成するか、
（ｃ）ＤＰＰＡストックのカルシウム濃度を測定し、
測定されたカルシウム濃度が低いＤＰＰＡストックをＤＰＰＣストック、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、および非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成するか、
（ｄ）非水性溶媒のカルシウム濃度を測定し、
測定されたカルシウム濃度が低い非水性溶媒をＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックと合わせて、リン脂質溶液を形成するか、または
（ｅ）カルシウムを含まないか、その濃度が低いことで特徴のあるＭＰＥＧ５０００-ＤＰＰＥストックを選択し、
該ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストック、ＤＰＰＡストック、ＤＰＰＣストック、および非水性溶媒を合わせて、リン脂質溶液を形成すること、および
該リン脂質溶液を水性溶媒と合わせて、リン脂質懸濁液を形成すること
を含む、リン脂質懸濁液を製造する方法。
【請求項４】
（ａ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックをカルシウムの低いまたはカルシウム不含の条件においてプロピレングリコール（ＰＧ）含有非水性溶媒と個々に合わせて、リン脂質溶液を形成し、
（ｂ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックを低カルシウムまたはカルシウム不含の条件において順序非依存方式でＰＧ含有非水性溶媒と連続的に組み合わせて、リン脂質溶液を形成し、
（ｃ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックをメタノールおよびトルエン不含条件において合わせて、リン脂質ブレンドを形成し、該リン脂質ブレンドを低カルシウムまたはカルシウム不含の条件においてＰＧ含有非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成し、
（ｄ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックをブレンド溶媒と合わせて、リン脂質ブレンドを形成し、該ブレンド溶媒を蒸発させて、乾燥リン脂質ブレンドを形成し、該乾燥リン脂質ブレンドを低カルシウムまたはカルシウム不含の条件においてＰＧ含有非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成し、
（ｅ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、およびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥストックをブレンド溶媒と合わせて、リン脂質ブレンドを形成し、該リン脂質ブレンドを、第２のブレンド溶媒を使用して、ＭＴＢＥ不含条件において沈殿させ、該沈殿したリン脂質ブレンドを低カルシウムまたはカルシウム不含の条件において非水性溶媒と合わせて、リン脂質溶液を形成し、
該リン脂質溶液を水性溶媒と合わせて、リン脂質懸濁液を形成すること
を含む、リン脂質懸濁液を製造する方法。
【請求項５】
（ａ）リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスと合わせて、リン脂質封入ガス微小球を含む超音波造影剤を形成し、
（ｂ）該超音波造影剤を投与した対象の１つまたは複数のコントラスト強調された超音波コントラスト画像を得ること
を含み、該リン脂質懸濁液が、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法によって製造される、対象を画像化する方法。
【請求項６】
（ａ）１つまたは複数のリン脂質および非水性溶媒を合わせて、リン脂質溶液を形成し、ここで
（ｉ）該リン脂質および／または該非水性溶媒の１つまたは複数が、特徴のある低いカルシウム濃度を有するか、または
（ｉｉ）該リン脂質および／または該非水性溶媒の１つまたは複数が、低いカルシウム濃度を有し、その合体がメタノールおよびトルエン不含ならびにメチルｔ−ブチルエーテル不含条件において生じ、
（ｂ）前記リン脂質溶液を水性溶液と合わせて、リン脂質懸濁液を形成し、
（ｃ）前記リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して、脂質封入ガス微小球を形成すること
を含む、脂質封入ガス微小球を製造する方法。
【請求項７】
（ａ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥを非水性溶媒中で合わせてリン脂質溶液を形成し、ここで
（ａ）その合体がメタノールおよびトルエン不含ならびにメチルｔ−ブチルエーテル不含条件において生じ、ここでＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥの二価金属イオン濃度が１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満であるか、または
（ｂ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択される
ことを含む、超音波造影剤を製造するのに有用なリン脂質溶液の製造方法。
【請求項８】
（ａ）非水性溶媒がプロピレングリコール、グリセロール、またはプロピレングリコールとグリセロールであり、および／または
（ｂ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが、５−１５％：７７−９０％：５−１５％の％モル比で、所望により１０％：８２％：８％（１０：８２：８）の％モル比で配合され、および／または
（ｃ）ＤＰＰＡの二価金属イオン濃度が７８０ｐｐｍ未満であり、ＤＰＰＣの二価金属イオン濃度が９０ｐｐｍ未満であり、および／または
（ｄ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが
（ｉ）二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるプロピレングリコール、
（ｉｉ）二価金属イオン濃度が５.１ｐｐｍ未満であるグリセロール、または
（ｉｉｉ）二価金属イオン濃度が２.６ｐｐｍ未満である、プロピレングリコールとグリセロールの１：１混合液
中にて合わされ、および／または
（ｅ）二価金属イオン濃度が
（ｉ）カルシウムおよびマグネシウム濃度であるか、または
（ｉｉ）カルシウム濃度であり、および／または
（ｆ）リン脂質溶液の二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満である
請求項７に記載の方法。
【請求項９】
さらには、リン脂質溶液を水性溶媒と合わせ、超音波造影剤を製造するのに有用なリン脂質懸濁液を形成することを含み、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液を容器に入れてもよく、
所望によってさらには、
（ｉ）パーフルオロカーボンガスを該容器に導入してもよく、または
（ｉｉ）該容器がパーフルオロカーボンガスを含んでいてもよく、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化し、脂質封入ガス微小球を形成してもよく、および
所望により、パーフルオロカーボンガスがパーフルオロプロパンガスであってもよい、
請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項９の方法によって製造されたリン脂質懸濁液を、パーフルオロカーボンガスの存在下で活性化して脂質封入ガス微小球を形成することを含み、ここで該パーフルオロカーボンガスがパーフルオロプロパンガスであるところの、超音波造影剤の製造方法。
【請求項１１】
（ａ）リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小球を形成し、ここで該リン脂質懸濁液は
（ｉ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥを、プロピレングリコール中に、１０：８２：８の％モル比で有し、そのＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択される、リン脂質溶液であって、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液、または
（ｉｉ）メタノールおよびトルエン不含条件、およびメチルｔ−ブチルエーテル不含条件下で製造され、ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥをプロピレングリコール中で１０：８２：８の％モル比で有し、そのＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有する、リン脂質溶液であって、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液
を含み、
（ｂ）該脂質封入ガス微小体を投与した対象の超音波画像を得、
所望により、該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい、
ことを含む、対象を超音波コントラスト画像化する方法。
【請求項１２】
（ａ）リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小球を形成し、ここで該リン脂質懸濁液は
（ｉ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥを、プロピレングリコール中に、１０：８２：８の％モル比で有し、そのＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択される、リン脂質溶液であって、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液、または
（ｉｉ）メタノールおよびトルエン不含条件、およびメチルｔ−ブチルエーテル不含条件下で製造され、ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥをプロピレングリコール中で１０：８２：８の％モル比で有し、そのＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有する、リン脂質溶液であって、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液
を含み、
所望により、該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい、
ことを含む、脂質封入ガス微小体を形成する方法。
【請求項１３】
（ａ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥを、プロピレングリコール中で合わせ、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液を形成すること、ここで
（ｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択され、
（ｉｉ）合体がメタノールおよびトルエン不含ならびにメチルｔ−ブチルエーテル不含条件において生じ、ここでＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥの二価金属イオン濃度が１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満であり、
（ｂ）リン脂質溶液を水溶液と合わせ、リン脂質懸濁液を形成すること、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液は容器に入れられてもよく、所望によりここで該容器はパーフルオロカーボンガスを含んでも、またはパーフルオロカーボンガスを該容器に導入してもよく、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小体を形成してもよく、
所望により、ここで該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい、
を含む、リン脂質懸濁液の製造方法。
【請求項１４】
（ａ）１または複数のリン脂質を非水性溶媒と、メタノールおよびトルエン不含およびメチルｔ−ブチルエーテル不含条件下で合わせ、二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であるリン脂質溶液を形成すること、および
（ｂ）該リン脂質溶液を水溶液と合わせてリン脂質懸濁液を形成すること、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液を容器に入れることを含んでもよく、所望により、ここで該容器がパーフルオロカーボンガスを含んでいてもよく、あるいはパーフルオロカーボンガスが該容器に導入されてもよく、
所望によってさらには、該リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小体を形成してもよく、
所望により、ここで該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい
を含む、脂質封入ガス微小体を製造するのに有用なリン脂質懸濁液の製造方法。
【請求項１５】
（ａ）水性溶媒をリン脂質溶液と合わせ、リン脂質懸濁液を形成し、該リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小体を形成することを含み、ここで該リン脂質溶液がＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥおよびプロピレングリコールを含み、合わせた二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であり、ここで
（ｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択されるか、または
（ｉｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有し、メタノールおよびトルエン不含条件およびメチルｔ−ブチルエーテル不含条件下で形成され、
（ｂ）該脂質封入ガス微小体を投与した対象の超音波画像を得、
所望により、ここで該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい、
ことを含む、対象を超音波コントラスト画像化する方法。
【請求項１６】
（ａ）水性溶媒をリン脂質溶液と合わせ、リン脂質懸濁液を形成し、該リン脂質懸濁液をパーフルオロカーボンガスで活性化して脂質封入ガス微小体を形成することを含み、ここで該リン脂質溶液がＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥおよびプロピレングリコールを含み、合わせた二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であり、ここで
（ｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有するものとして選択されるか、または
（ｉｉ）ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが１００万分の１１５部（ｐｐｍ）未満の二価金属イオン濃度を有し、メタノールおよびトルエン不含条件およびメチルｔ−ブチルエーテル不含条件下で形成され、
所望により、ここで該二価金属イオン濃度が
（１）カルシウム濃度、または
（２）カルシウムおよびマグネシウム濃度であってもよい、
脂質封入ガス微小体の形成方法。
【請求項１７】
（ａ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが、各々、５−１５％、７７−９０％および５−１５％のモルパーセントで存在し、および／または
（ｂ）ＤＰＰＡ、ＤＰＰＣおよびＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥが、約１０：８２：８の％モル比で存在し、および／または
（ｃ）パーフルオロカーボンガスがパーフルオロプロパンガスであり、および／または
（ｄ）ＤＰＰＡの二価金属イオン濃度が７８０ｐｐｍ未満であり、ＤＰＰＣの二価金属イオン濃度が９０ｐｐｍ未満であり、プロピレングリコールの二価金属イオン濃度が０.７ｐｐｍ未満であり、
（ｅ）リン脂質溶液がＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥおよびプロピレングリコールを含み、水性溶媒が水、プロピレングリコールおよびグリセロールを含み、ここでリン脂質懸濁液がＤＰＰＡ、ＤＰＰＣ、ＭＰＥＧ５０００−ＤＰＰＥ、プロピレングリコール、水およびグリセロールを含み、所望によりここで
（ｉ）水、グリセロールおよびプロピレングリコールが、リン脂質懸濁液中で約８：１：１の割合で存在し、および／または
（ｉｉ）水性溶媒が１または複数の塩をさらに含み、および／または
（ｉｉｉ）水性溶媒が１または複数の緩衝液をさらに含む、
請求項１１−１６のいずれか一項に記載の方法。