【手続補正書】
【提出日】令和2年3月3日(2020.3.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子に改変を含む細胞であって、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ及びＦｒａｎｃｉｓｃｅｌｌａ由来ＣＲＩＳＰＲ１（Ｃｐｆ１）ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼと、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子を標的化するｇＲＮＡと、を含む複合体を送達することにより改変されている細胞。
【請求項２】
複合体が、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子中の部位を標的化し、当該部位が、標的化ドメインと（Ｔ）ｘＮ配列とを含み、ｘが、１−１０であり、かつＮがＡ、Ｇ、Ｃ、又はＴである、請求項１に記載の細胞。
【請求項３】
改変が、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子の全体又は一部における欠損／挿入又は変異を含む、請求項１又は２に記載の細胞。
【請求項４】
ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子の少なくとも２つに改変を含む、請求項１−３の何れか一項に記載の細胞。
【請求項５】
改変された細胞内でのＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子の発現が調節されている、請求項１−４の何れか一項に記載の細胞。
【請求項６】
請求項１−５の何れか一項に記載の細胞であって：
（ａ）ＣＤ８＋Ｔ細胞、中枢記憶Ｔ細胞、エフェクター記憶Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫ  Ｔ細胞）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、及び幹細胞記憶Ｔ細胞からなる群から選択されるＴ細胞；
（ｂ）リンパ系前駆細胞；
（ｃ）造血幹細胞；
（ｄ）ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）；
（ｅ）樹状細胞；又は
（ｆ）誘導多能性幹（ｉＰＳ）細胞又はｉＰＳ細胞に由来する細胞
である細胞。
【請求項７】
Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞である、請求項６に記載の細胞。
【請求項８】
ＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＣＤ８＋未感作Ｔ細胞、中枢記憶Ｔ細胞、又はエフェクター記憶Ｔ細胞である、請求項７に記載の細胞。
【請求項９】
操作された細胞である、請求項１−８の何れか一項に記載の細胞。
【請求項１０】
操作された細胞が、操作されたキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞又は操作されたＴＣＲ（Ｔ細胞受容体）Ｔ細胞である、請求項９に記載の細胞。
【請求項１１】
改変が、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子の第１のエキソン内にある、請求項１−１０の何れか一項に記載の細胞。
【請求項１２】
改変が、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子のコード配列の、開始コドンの下流５００ｂｐ内にある、請求項１−１０の何れか一項に記載の細胞。
【請求項１３】
（ａ）ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子の配列に相補的な標的化ドメインを含むｇＲＮＡ分子；及び
（ｂ）Ｃｐｆ１  ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼ
を含む組成物に細胞を接触させることを含む、細胞を改変するｅｘ  ｖｉｖｏの方法。
【請求項１４】
接触させることが、エレクトロポレーションにより、組成物を細胞内に導入することを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
組成物が、ｇＲＮＡ分子とＣｐｆ１  ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼとを含むリボヌクレオプロテイン（ＲＮＰ）複合体を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
組成物が、ｇＲＮＡ分子と、細胞内でＣｐｆ１  ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼを発現することができる核酸と、を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
細胞が、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子に改変を含み、改変が、Ｃｐｆ１  ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼと、ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子を標的化するｇＲＮＡ分子と、を含む複合体を送達することにより行われる、細胞の集団。
【請求項１８】
細胞が：
（ａ）ＣＤ８＋Ｔ細胞、中枢記憶Ｔ細胞、エフェクター記憶Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫ  Ｔ細胞）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、及び幹細胞記憶Ｔ細胞からなる群から選択されるＴ細胞；
（ｂ）リンパ系前駆細胞；
（ｃ）造血幹細胞；
（ｄ）ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）；
（ｅ）樹状細胞；又は
（ｆ）誘導多能性幹（ｉＰＳ）細胞又はｉＰＳ細胞に由来する細胞
からなる群から選択される、請求項１７に記載の集団。
【請求項１９】
Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞である、請求項１８に記載の集団。
【請求項２０】
ＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＣＤ８＋未感作Ｔ細胞、中枢記憶Ｔ細胞、又はエフェクター記憶Ｔ細胞である、請求項１９に記載の集団。
【請求項２１】
改変された細胞が、操作された細胞である、請求項１７−２０の何れか一項に記載の集団。
【請求項２２】
操作された細胞が、操作されたキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞又は操作されたＴＣＲ（Ｔ細胞受容体）Ｔ細胞である、請求項２１に記載の集団。
【請求項２３】
表１の配列番号１−３７０７に記載の群から選択される標的化ドメインを含む、ｇＲＮＡ。
【請求項２４】
（ａ）
（ｉ）Ｃｐｆ１  ＲＮＡ誘導ヌクレアーゼ；及び
（ｉｉ）ＦＡＳ、ＢＩＤ、ＣＴＬＡ４、ＰＤＣＤ１、ＣＢＬＢ、ＰＴＰＮ６、Ｂ２Ｍ、ＴＲＡＣ、及びＴＲＢＣ遺伝子からなる群から選択される遺伝子由来の標的ドメインに相補的な標的化ドメインを含むｇＲＮＡ分子
を用いて、ｅｘ  ｖｉｖｏ又はｉｎ  ｖｉｔｒｏで、対象の細胞を改変すること；並びに
（ｂ）改変した細胞を対象に戻すこと
を含む、がんを有する対象を治療する方法。
【請求項２５】
がんが、リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、びまん性大細胞リンパ腫（ＤＬＣＬ）、多発性骨髄腫、腎細胞がん（ＲＣＣ）、神経芽細胞腫、結腸直腸がん、乳がん、卵巣がん、メラノーマ、肉腫、前立腺がん、肺がん、食道がん、肝細胞がん、膵臓がん、星細胞腫、中皮腫、頭頸部がん、及び髄芽細胞腫からなる群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ＴＲＡＣ、ＴＲＢＣ、及びＢ２Ｍ遺伝子からなる群から選択される１又はそれ以上の遺伝子に改変を含む、改変された免疫細胞であって、１又はそれ以上の遺伝子が、Ｃｐｆ１  ＲＮＡ誘導エンドヌクレアーゼと、１又はそれ以上のｇＲＮＡと、を含むＲＮＰ複合体を用いて改変され、ｇＲＮＡが、ＴＲＡＣ、ＴＲＢＣ、及びＢ２Ｍ遺伝子からなる群から選択される１又はそれ以上の遺伝子の核酸配列に相補的な標的化ドメインを含む、免疫細胞。
【請求項２７】
ＲＮＰ複合体が、エレクトロポレーションにより、免疫細胞内に送達される、請求項２６に記載の改変された免疫細胞。