【手続補正書】
【提出日】令和2年10月16日(2020.10.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩の固相ペプチド合成方法であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、前記方法は、
（ａ）Ｆｍｏｃで保護され、任意選択でさらに適切に側鎖保護された、アミノ酸、ジペプチド及び／又はオリゴペプチドをＣ末端からＮ末端へ線状に段階的にカップリングさせることにより、固体支持体上でジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドを合成する工程であって、配列番号１の２４位に対応する位置でのグリシン残基の付加はＦｍｏｃ−（Ｄｍｂ）Ｇｌｙ−ＯＨによって媒介される工程；
（ｂ）固体支持体からジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドを切断し、そのペプチドを脱保護する工程；さらにその後、
（ｃ）ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドの有機酸化的フォールディングを実施して、天然のジスルフィド結合を形成する工程
を含む方法。
【請求項２】
工程（ａ）は、
（ｉ）固体支持体に結合した第１のアミノ酸から保護化学基を除去することにより、第１のアミノ酸を脱保護する工程；
（ｉｉ）第２のアミノ酸上の化学基を活性化して、第１のアミノ酸とカップリングさせるための第２のアミノ酸を調製する工程；
（ｉｉｉ）活性化された第２のアミノ酸を脱保護された第１のアミノ酸にカップリングさせて、第１及び第２のアミノ酸からペプチドを形成する工程；及び
（ｉｖ）ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドが合成されるまで、複数のアミノ酸の脱保護及びカップリングを連続的に行い、ペプチド鎖を成長させる工程
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
マイクロ波エネルギーを印加することによって、前記脱保護、前記活性化、及び前記カップリングのうちの少なくとも１つを加速することを含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
有機酸化的フォールディングは非水性条件で行われ、有機溶媒中で行われる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
有機酸化的フォールディングは、システアミン（還元剤）とシスタミン（酸化剤）のレドックス剤ペア、及び／又はモルホリンを含む有機溶媒中でジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドをフォールディングすることを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
有機酸化的フォールディングは４℃で行われる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
フォールディングされたジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの塩を精製することを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩を組換え的に調製する方法であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、前記方法は、
（ａ）ポリヌクレオチドを含む宿主細胞を提供する工程であって、前記ポリヌクレオチドは、配列番号６５に記載のアミノ酸配列を有するマルトース結合タンパク質、配列番号６６に記載のアミノ酸配列を有するエンテロキナーゼ切断配列、及びジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの塩を含むポリペプチドをコードしている工程；
（ｂ）前記ポリペプチドの産生を可能にする条件下において増殖培地中で宿主細胞を培養し、培地から前記ポリペプチドを回収する工程；及び
（ｃ）エンテロキナーゼを用いて前記ポリペプチドを切断することにより、ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの塩を生成する工程
を含む方法。
【請求項９】
前記ポリペプチドは配列番号６７〜８０のいずれか１つに記載のアミノ酸配列を有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
エンテロキナーゼ切断の前に、組換え生産されたポリペプチドを精製することをさらに含む、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
エンテロキナーゼ切断後に、陰イオン交換クロマトグラフィー及び／又は逆相クロマトグラフィーにより、ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの塩を精製することをさらに含む、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、α１−アドレナリン受容体アンタゴニスト及び血管弛緩薬として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１３】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、一酸化窒素増強剤として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１４】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、抗血栓剤として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１５】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、抗アテローム性動脈硬化剤として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１６】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、ドキソルビシン誘発心毒性に対する保護剤として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１７】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分を、抗不安剤として、又は老化防止及び強壮剤として含む医薬組成物であって、前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドは、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、医薬組成物。
【請求項１８】
ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチド又はそれらの薬学的に許容される塩、あるいは、クロマトグラフィー、サイズ排除、又は精製に関連する方法による人参植物もしくはジンセンチド又はそのジンセンチド様ペプチドを含む植物からの濃縮画分の使用であって、（ｉ）配列番号１〜６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列；又は（ｉｉ）（ｉ）のペプチドとその全配列にわたって少なくとも６５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する前記ジンセンチド又はジンセンチド様ペプチドの、栄養補助剤、健康補助剤、又は化粧品原料としての使用。