【手続補正書】
【提出日】令和2年9月7日(2020.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトプログラム細胞死１（ＰＤ−１）遺伝子の標的部位を切断するＩ−ＯｎｕＩホーミングエンドヌクレアーゼ（ＨＥ）バリアントを含む、ポリペプチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドが、
（ａ）前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片；
（ｂ）対応する野生型Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥと比較して、１、２、３、４、５、６、７、もしくは８個のＮ末端アミノ酸を欠く、前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片；または
（ｃ）対応する野生型Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥと比較して、１、２、３、４、もしくは５個のＣ末端アミノ酸を欠く、前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片
を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ａ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｖ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｉ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｔ、Ａ７０Ｙ、Ａ７０Ｌ、Ｓ７２Ｄ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｒ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｓ７８Ｔ、Ｋ８０Ｒ、Ｋ８０Ｃ、Ｋ８０Ｅ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｆ、Ｔ８２Ｙ、Ｉ１００Ｖ、Ｖ１３２Ａ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５５Ｇ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも３５個、もしくは好ましくは少なくとも４０個以上を含む、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換：
（ａ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ａ、Ｔ４８Ｖ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｄ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｒ、Ｉ１００Ｖ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ；
（ｂ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｖ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｄ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｃ、Ｉ１００Ｖ、Ｖ１３２Ａ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５５Ｇ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ；
（ｃ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｔ、Ｋ８０Ｒ、Ｉ１００Ｖ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ；
（ｄ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｅ、Ｔ８２Ｆ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ
（ｅ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｌ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｙ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ；または
（ｆ）Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｙ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅ
のうち少なくとも３５個、もしくはさらに好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、配列番号６〜１４および６０〜６３のいずれか１つのアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、もしくはさらにより好ましくは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドが、配列番号３０に記載のポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項７】
ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメイン、好ましくは、約９．５個のＴＡＬＥ反復単位〜約１５．５個のＴＡＬＥ反復単位を含むＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインをさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号３１に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記ポリペプチドが、配列番号３２に記載のポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
ペプチドリンカー、もしくはウイルス性自己切断型２Ａペプチド、およびＴｒｅｘ２  ３’−５’エキソヌクレアーゼまたはその生物学的に活性な断片をさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項１１に記載のポリヌクレオチド、または請求項１２に記載のベクターを含む、細胞。
【請求項１４】
遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカインからなる群から選択される遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１３に記載の細胞。
【請求項１５】
前記細胞が、造血細胞、Ｔ細胞、ＣＤ３＋細胞、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、免疫エフェクター細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、請求項１３または請求項１４に記載の細胞。
【請求項１６】
請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０８２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０８２３】
全般に、以下の特許請求の範囲において、使用された用語は、本明細書および特許請求の範囲に開示されている特定の実施形態への特許請求の範囲に限定するものと解釈されるべきではないが、そのような特許請求の範囲が権利を与える等価物の完全な範囲とともに全ての可能な実施形態を含むものと解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は、本開示によって限定されない。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ヒトプログラム細胞死１（ＰＤ−１）遺伝子の標的部位を切断するホーミングエンドヌクレアーゼ（ＨＥ）バリアントを含む、ポリペプチド。
（項目２）
前記ＨＥバリアントが、ＬＡＧＬＩＤＡＤＧホーミングエンドヌクレアーゼ（ＬＨＥ）バリアントである、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３）
前記ポリペプチドが、前記ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片を含む、項目１または項目２に記載のポリペプチド。
（項目４）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、１、２、３、４、５、６、７、または８個のＮ末端アミノ酸を欠く、項目３に記載のポリペプチド。
（項目５）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、４個のＮ末端アミノ酸を欠く、項目４に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、８個のＮ末端アミノ酸を欠く、項目４に記載のポリペプチド。
（項目７）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、１、２、３、４、または５個のＣ末端アミノ酸を欠く、項目３に記載のポリペプチド。
（項目８）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、Ｃ末端アミノ酸を欠く、項目７に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、２個のＣ末端アミノ酸を欠く、項目７に記載のポリペプチド。
（項目１０）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＡａｂＭＩ、Ｉ−ＡａｅＭＩ、Ｉ−ＡｎｉＩ、Ｉ−ＡｐａＭＩ、Ｉ−ＣａｐＩＩＩ、Ｉ−ＣａｐＩＶ、Ｉ−ＣｋａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＶ、Ｉ−ＣｐａＭＶ、Ｉ−ＣｐａＶ、Ｉ−ＣｒａＭＩ、Ｉ−ＥｊｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｉＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＬｔｒＩＩ、Ｉ−ＬｔｒＩ、Ｉ−ＬｔｒＷＩ、Ｉ−ＭｐｅＭＩ、Ｉ−ＭｖｅＭＩ、Ｉ−ＮｃｒＩＩ、Ｉ−Ｎｃｒｌ、Ｉ−ＮｃｒＭＩ、Ｉ−ＯｈｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＶ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩＩ、Ｉ−ＰｎｏＭＩ、Ｉ−ＳｃｕＭＩ、Ｉ−ＳｍａＭＩ、Ｉ−ＳｓｃＭＩ、およびＩ−Ｖｄｉ１４１Ｉからなる群から選択されるＬＨＥのバリアントである、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１１）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、およびＳｍａＭＩからなる群から選択されるＬＨＥのバリアントである、項目１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１２）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥバリアントである、項目１〜１１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１３）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１〜５のＩ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片の１９、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５９、６８、７０、７２、７５、７６、７７、７８、８０、８２、１６８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、１９７、１９９、２０１、２０３、２２３、２２５、２２７、２２９、２３１、２３２、２３４、２３６、２３８、および２４０からなる群から選択されるアミノ酸位置のＤＮＡ認識界面中に１つ以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１４）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１〜５のＩ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片の１９、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５９、６８、７０、７２、７５、７６、７７、７８、８０、８２、１６８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、１９７、１９９、２０１、２０３、２２３、２２５、２２７、２２９、２３１、２３２、２３４、２３６、２３８、および２４０からなる群から選択されるアミノ酸位置のＤＮＡ認識界面中に少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１５）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の２６、２８、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５９、６８、７０、７２、７５、７６、７８、８０、１３８、１４３、１５９、１６８、１７８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９７、１９９、２０１、２０３、２０７、２２３、２２４、２２５、２２７、２２９、２３２、２３６、および２３８位からなる位置群から選択される少なくとも１つの位置に少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１６）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｋ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｎ５９Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｑ、Ｓ７２Ｒ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｋ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ａ、Ｓ２０１Ｍ、Ｔ２０３Ｇ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｉ２２４Ｔ、Ｋ２２５Ｒ、Ｋ２２９Ｉ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１７）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｋ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｑ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｋ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ａ、Ｔ２０３Ｇ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｋ２２５Ｒ、Ｋ２２９Ｉ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１８）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｎ５９Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｒ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ａ、Ｔ２０３Ｇ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｉ２２４Ｔ、Ｋ２２５Ｒ、Ｋ２２９Ｉ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１９）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｎ５９Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｑ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ａ、Ｔ２０３Ｇ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｉ２２４Ｔ、Ｋ２２５Ｒ、Ｋ２２９Ｉ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２０）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｎ５９Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｑ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ａ、Ｔ２０３Ｇ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｋ２２５Ｒ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２１）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｅ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｐ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｉ、Ｖ３７Ｐ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｄ、Ｎ５９Ｄ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｑ、Ｎ７５Ｓ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｒ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｈ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｉ、Ｉ１８６Ａ、Ｓ１８８Ｒ、Ｋ１８９Ｒ、Ｓ１９０Ｐ、Ｋ１９１Ａ、Ｌ１９２Ｓ、Ｇ１９３Ｐ、Ｑ１９７Ｒ、Ｖ１９９Ｒ、Ｓ２０１Ｍ、Ｔ２０３Ｇ、Ｙ２２３Ｒ、Ｋ２２５Ｒ、Ｆ２３２Ｋ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２２）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、６８、７０、７２、７５、７６、７８、８０、１００、１３２、１３８、１４３、１５５、１５９、１７８、１８０、１８４、１８６、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、２０１、２０３、２０７、２２３、２２５、２２７、２３２、２３６、２３８、および２４０位からなる位置群から選択される少なくとも１つの位置に少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２３）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ａ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｖ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｉ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｔ、Ａ７０Ｙ、Ａ７０Ｌ、Ｓ７２Ｄ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｒ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｓ７８Ｔ、Ｋ８０Ｒ、Ｋ８０Ｃ、Ｋ８０Ｅ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｆ、Ｔ８２Ｙ、Ｉ１００Ｖ、Ｖ１３２Ａ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５５Ｇ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２４）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ａ、Ｔ４８Ｖ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｄ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｒ、Ｉ１００Ｖ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２５）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｖ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｄ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｃ、Ｉ１００Ｖ、Ｖ１３２Ａ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５５Ｇ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２６）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｓ７８Ｔ、Ｋ８０Ｒ、Ｉ１００Ｖ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２７）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｙ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｅ、Ｔ８２Ｆ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２８）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｌ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｙ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２９）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン１標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｇ、Ｒ２８Ｓ、Ｒ３０Ｌ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｇ、Ｓ３６Ｔ、Ｖ３７Ｇ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｈ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｔ、Ｔ４８Ｍ、Ｖ６８Ｓ、Ａ７０Ｔ、Ｓ７２Ｎ、Ｎ７５Ｈ、Ａ７６Ｙ、Ｋ８０Ｖ、Ｔ８２Ｙ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｎ１８４Ｒ、Ｉ１８６Ｒ、Ｋ１８９Ｎ、Ｓ１９０Ｖ、Ｋ１９１Ｎ、Ｌ１９２Ａ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｒ、Ｓ２０１Ｅ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｇ、Ｆ２３２Ｒ、Ｄ２３６Ｑ、Ｖ２３８Ｒ、およびＴ２４０Ｅのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３０）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン２標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の２４、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４１、４２、４４、４６、４８、６８、７０、７２、７４、７５、７６、７８、８０、８２、１１６、１３８、１４３、１５９、１６８、１７８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、１９９、２０３、２０７、２２５、２２７、２２９、２３２、２３６、および２３８位からなる位置群から選択される少なくとも１つの位置に少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３１）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン２標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片のＳ２４Ｃ、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｙ、Ｒ２８Ｈ、Ｒ３０Ｓ、Ｎ３２Ｖ、Ｎ３２Ｌ、Ｋ３４Ｎ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３５Ｔ、Ｓ３６Ｒ、Ｖ３７Ｓ、Ｖ３７Ｔ、Ｇ３８Ｒ、Ｇ３８Ｋ、Ｓ４０Ｒ、Ｔ４１Ａ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ｅ、Ｑ４６Ａ、Ｔ４８Ｅ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｎ、Ｓ７２Ｉ、Ｄ７４Ｎ、Ｎ７５Ｔ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｓ、Ａ７６Ｒ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｔ８２Ｇ、Ｔ８２Ｒ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｎ、Ｆ１８２Ｙ、Ｎ１８４Ｈ、Ｉ１８６Ｋ、Ｋ１８９Ｇ、Ｓ１９０Ｒ、Ｋ１９１Ｔ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｙ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ａ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｋ２２５Ｎ、Ｋ２２５Ｔ、Ｋ２２７Ｗ、Ｋ２２７Ｓ、Ｋ２２９Ａ、Ｋ２２９Ｐ、Ｆ２３２Ｒ、Ｗ２３４Ａ、Ｗ２３４Ｄ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｒ位からなる位置群から選択される少なくとも１つの位置に少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３２）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン２標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｌ２６Ｑ、Ｒ２８Ｙ、Ｒ３０Ｓ、Ｎ３２Ｖ、Ｋ３４Ｎ、Ｓ３５Ｎ、Ｓ３６Ｒ、Ｖ３７Ｓ、Ｇ３８Ｒ、Ｓ４０Ｒ、Ｔ４１Ａ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｒ、Ｑ４６Ａ、Ｔ４８Ｅ、Ａ７０Ｎ、Ｓ７２Ｉ、Ｎ７５Ｔ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｔ８２Ｇ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｎ、Ｆ１８２Ｙ、Ｎ１８４Ｈ、Ｉ１８６Ｋ、Ｋ１８９Ｇ、Ｓ１９０Ｒ、Ｋ１９１Ｔ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｙ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ａ、Ｋ２０７Ｒ、Ｋ２２５Ｎ、Ｋ２２７Ｗ、Ｋ２２９Ａ、Ｆ２３２Ｒ、Ｗ２３４Ａ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｒのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３３）
前記ＨＥバリアントが、ＰＤ−１エクソン５標的部位を切断し、配列番号１〜５のいずれか１つ、またはその生物学的に活性な断片の、以下のアミノ酸置換、Ｓ２４Ｃ、Ｒ２８Ｈ、Ｎ３２Ｌ、Ｋ３４Ｒ、Ｓ３５Ｔ、Ｖ３７Ｔ、Ｇ３８Ｋ、Ｓ４０Ｒ、Ｅ４２Ｒ、Ｇ４４Ｓ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｅ、Ｖ６８Ｉ、Ａ７０Ｎ、Ｓ７２Ｉ、Ｄ７４Ｎ、Ｎ７５Ｒ、Ａ７６Ｒ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｔ８２Ｒ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｎ、Ｆ１８２Ｙ、Ｎ１８４Ｈ、Ｉ１８６Ｋ、Ｋ１８９Ｇ、Ｓ１９０Ｒ、Ｋ１９１Ｔ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｒ、Ｑ１９５Ｙ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｋ２２５Ｔ、Ｋ２２７Ｓ、Ｋ２２９Ｐ、Ｆ２３２Ｒ、Ｗ２３４Ｄ、Ｄ２３６Ｅ、およびＶ２３８Ｒのうち少なくとも５個、少なくとも１５個、好ましくは少なくとも２５個、より好ましくは少なくとも３５個、もしくはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上、または全てを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３４）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６〜１４および６０〜６３のいずれか１つのアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、もしくはさらにより好ましくは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１〜３３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３５）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３６）
前記ＨＥバリアントが、配列番号７に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３７）
前記ＨＥバリアントが、配列番号８に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３８）
前記ＨＥバリアントが、配列番号９に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３９）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１０に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４０）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１１に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４１）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１２に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４２）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１３に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４３）
前記ＨＥバリアントが、配列番号１４に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４４）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６０に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４５）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６１に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４６）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６２に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４７）
前記ＨＥバリアントが、配列番号６３に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４８）
前記ポリペプチドが、配列番号２５に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目１〜２１および３０〜３９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目４９）
前記ポリペプチドが、配列番号３０に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目１〜１４、２２〜２９、４０〜４１、および４４〜４７のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目５０）
前記ポリペプチドが、配列番号３５に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目１〜１４、３０〜３３および４２〜４３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目５１）
ＤＮＡ結合ドメインをさらに含む、項目１〜５０のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目５２）
前記ＤＮＡ結合ドメインが、ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインおよびジンクフィンガーＤＮＡ結合ドメインからなる群から選択される、項目５１に記載のポリペプチド。
（項目５３）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、約９．５個のＴＡＬＥ反復単位〜約１５．５個のＴＡＬＥ反復単位を含む、項目５２に記載のポリペプチド。
（項目５４）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、ＰＤ−１遺伝子内のポリヌクレオチド配列に結合する、項目５２または項目５３に記載のポリペプチド。
（項目５５）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号２６に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目５２〜５４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目５６）
前記ポリペプチドが、配列番号２７に記載のポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する項目５５に記載のポリペプチド。
（項目５７）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号３１に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目５２〜５４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目５８）
前記ポリペプチドが、配列番号３２に記載のポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、項目５７に記載のポリペプチド。
（項目５９）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号３６に記載のポリヌクレオチド配列に結合する、項目５２〜５４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目６０）
前記ポリペプチドが、配列番号３７に記載のポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、項目５９に記載のポリペプチド。
（項目６１）
前記ジンクフィンガーＤＮＡ結合ドメインが、２、３、４、５、６、７、または８個のジンクフィンガーモチーフを含む、項目５２に記載のポリペプチド。
（項目６２）
ペプチドリンカー、およびエンドプロセシング酵素またはその生物学的に活性な断片をさらに含む、項目１〜６１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目６３）
ウイルス性自己切断型２Ａペプチド、およびエンドプロセシング酵素またはその生物学的に活性な断片をさらに含む、項目１〜６１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目６４）
前記エンドプロセシング酵素またはその生物学的に活性な断片が、５’−３’エキソヌクレアーゼ、５’−３’アルカリエキソヌクレアーゼ、３’−５’エキソヌクレアーゼ、５’フラップエンドヌクレアーゼ、ヘリカーゼ、またはテンプレート非依存性ＤＮＡポリメラーゼ活性を有する、項目６２または項目６３に記載のポリペプチド。
（項目６５）
前記エンドプロセシング酵素が、Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６２〜６４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目６６）
前記ポリペプチドが、配列番号１５〜２３、および６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１〜６５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目６７）
前記ポリペプチドが、配列番号１５に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目６８）
前記ポリペプチドが、配列番号１６に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目６９）
前記ポリペプチドが、配列番号１７に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７０）
前記ポリペプチドが、配列番号１８に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７１）
前記ポリペプチドが、配列番号１９に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７２）
前記ポリペプチドが、配列番号２０に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７３）
前記ポリペプチドが、配列番号２１に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７４）
前記ポリペプチドが、配列番号２２に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７５）
前記ポリペプチドが、配列番号２３に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７６）
前記ポリペプチドが、配列番号６４に記載のアミノ酸配列、またはその生物学的に活性な断片を含む、項目６６に記載のポリペプチド。
（項目７７）
前記ポリペプチドが、配列番号２５、２７、３０、３２、３５、または３７に記載のポリヌクレオチド配列で、ヒトＰＤ−１遺伝子を切断する、項目１〜６１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目７８）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
（項目７９）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ｍＲＮＡ。
（項目８０）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ｃＤＮＡ。
（項目８１）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ベクター。
（項目８２）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、細胞。
（項目８３）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、細胞。
（項目８４）
項目８１に記載のベクターを含む、細胞。
（項目８５）
項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドにより導入される１つ以上のゲノム編集を含む、細胞。
（項目８６）
前記細胞が、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうち１つ以上をコードするポリヌクレオチドを含む、項目８２〜８５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目８７）
前記ポリヌクレオチドが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、項目８６に記載の細胞。
（項目８８）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターが、短ＥＦ１αプロモーター、長ＥＦ１αプロモーター、ヒトＲＯＳＡ２６遺伝子座、ユビキチンＣ（ＵＢＣ）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１（ＰＧＫ）プロモーター、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＡＧ）プロモーター、β−アクチンプロモーター、および負の制御領域が欠失した骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサーのｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目８７に記載の細胞。
（項目８９）
前記ポリヌクレオチドが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結され、その間で分散され、および／または隣接する１つ以上の自己切断型ウイルス性ペプチドをさらにコードする、項目８６〜８８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９０）
前記自己切断型ウイルス性ペプチドが、２Ａペプチドである、項目８９に記載の細胞。
（項目９１）
前記ポリヌクレオチドが、異種ポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目８６〜９０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９２）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、免疫抑制因子に対抗する酵素機能を含む、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９３）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、キヌレニナーゼ活性を含む、項目９２に記載の細胞。
（項目９４）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、
（ａ）免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインであって、任意に、抗体もしくはその抗原結合断片である、細胞外ドメイン、
（ｂ）免疫抑制因子および膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメイン、または
（ｃ）免疫抑制因子、膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメインと、免疫抑制シグナルを前記細胞に伝達できない修飾細胞内ドメインと、を含む、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９５）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、優性ネガティブＴＧＦβＲＩＩ受容体である、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９６）
前記免疫力エンハンサーは、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー分子（ＢｉＴＥ）、免疫賦活因子、およびフリップ受容体からなる群から選択される、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目９７）
前記免疫賦活因子が、サイトカイン、ケモカイン、細胞毒素、サイトカイン受容体、およびそのバリアントからなる群から選択される、項目９６に記載の細胞。
（項目９８）
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、およびＩＬ−２１からなる群から選択される、項目９７に記載の細胞。
（項目９９）
前記サイトカインが、内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結された、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、およびＩＬ−２１からなる群から選択される、項目９７に記載の細胞。
（項目１００）
前記サイトカインがＩＬ−７であり、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目９７に記載の細胞。
（項目１０１）
前記サイトカインがＩＬ−１２であり、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目９７に記載の細胞。
（項目１０２）
前記サイトカインがＩＬ−１５であり、内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目９７に記載の細胞。
（項目１０３）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインと、フレーム内でＰＤ−１膜貫通ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目９６に記載の細胞。
（項目１０４）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインと、ＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、フレーム内で前記ＰＤ−１細胞外ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目９６に記載の細胞。
（項目１０５）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインと、フレーム内で前記ＰＤ−１細胞外ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインと、を含む、項目９６に記載の細胞。
（項目１０６）
前記遺伝子操作された抗原受容体が、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカインからなる群から選択される、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１０７）
前記遺伝子操作された受容体が、ＰＤ−１遺伝子に統合されない、項目１０６に記載の細胞。
（項目１０８）
免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうち１つ以上をコードする前記ポリヌクレオチドが、前記ＰＤ−１遺伝子に統合される、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１０９）
免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうち１つ以上をコードする前記ポリヌクレオチドを含むドナー修復テンプレートが、項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドによって導入されるＤＮＡ２本鎖切断部位で前記ＰＤ−１遺伝子に統合される、項目８６〜９１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１０）
前記細胞が、造血細胞である、項目８２〜１０９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１１）
前記細胞が、Ｔ細胞である、項目８２〜１１０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１２）
前記細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋細胞である、項目８２〜１１１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１３）
前記細胞が、免疫エフェクター細胞である、項目８２〜１１２のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１４）
前記細胞が、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目８２〜１１３のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１５）
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、項目８２〜１１３のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１６）
前記細胞の源が、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺問題（ｉｓｓｕｅ）、感染部位由来組織、復水、胸水、脾臓組織、または腫瘍である、項目８２〜１１５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１７）
前記細胞が、１つ以上の修飾ＰＤ−１対立遺伝子を含む、項目８２〜１１６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１１８）
前記１つ以上の修飾ＰＤ−１対立遺伝子が、機能不全であるか、または実質的に低減されたＰＤ−１機能および／もしくは細胞内シグナル伝達を有する、項目１１７に記載の細胞。
（項目１１９）
前記細胞が、前記１つ以上の修飾ＰＤ−１対立遺伝子に導入される免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする核酸を含む、項目８２〜１１８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１２０）
前記細胞が、前記１つ以上の修飾ＰＤ−１対立遺伝子に導入される免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする核酸を含み、前記細胞が、前記１つ以上の修飾ＰＤ−１対立遺伝子に導入されていない遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、項目８２〜１１８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１２１）
項目８２〜１２０のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、複数の細胞。
（項目１２２）
項目８２〜１２１のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、組成物。
（項目１２３）
項目８２〜１２１のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞と、生理学的に許容される担体と、を含む、組成物。
（項目１２４）
細胞内のヒトＰＤ−１遺伝子を編集する方法であって、項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを前記細胞に導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＰＤ−１遺伝子の標的部位で２本鎖切断を作り出す、方法。
（項目１２５）
細胞内のヒトＰＤ−１遺伝子を編集する方法であって、項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを前記細胞に導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＰＤ−１遺伝子の標的部位で２本鎖切断を作り出し、前記切断が非相同末端結合（ＮＨＥＪ）によって修復される、方法。
（項目１２６）
細胞内のヒトＰＤ−１遺伝子を編集する方法であって、項目１〜７７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと、ドナー修復テンプレートとを前記細胞に導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＰＤ−１遺伝子の標的部位で２本鎖切断を作り出し、前記ドナー修復テンプレートが、前記２本鎖切断（ＤＳＢ）の前記部位での相同組換え修復（ＨＤＲ）によって前記ヒトＰＤ−１遺伝子に組込まれる、方法。
（項目１２７）
前記細胞が、造血細胞である、項目１２４〜１２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２８）
前記細胞が、Ｔ細胞である、項目１２４〜１２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２９）
前記細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋細胞である、項目１２４〜１２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３０）
前記細胞が、免疫エフェクター細胞である、項目１２４〜１２９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３１）
前記細胞が、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目１２４〜１３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３２）
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、項目１２４〜１３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３３）
前記細胞の源が、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺問題（ｉｓｓｕｅ）、感染部位由来組織、復水、胸水、脾臓組織、または腫瘍である、項目１２４〜１３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３４）
前記ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドが、ｍＲＮＡである、項目１２４〜１３３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３５）
３’−５’エキソヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドが、前記細胞に導入される、項目１２４〜１３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３６）
Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片をコードするポリヌクレオチドが、前記細胞に導入される、項目１２４〜１３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３７）
前記ドナー修復テンプレートが、野生型ＰＤ−１遺伝子と比較して、１つ以上の変異を含むＰＤ−１遺伝子またはその部分をコードする、項目１２４〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３８）
前記ドナー修復テンプレートが、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうち１つ以上をコードする、項目１２４〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３９）
前記ドナー修復テンプレートが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、項目１３８に記載の方法。
（項目１４０）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターが、短ＥＦ１αプロモーター、長ＥＦ１αプロモーター、ヒトＲＯＳＡ２６遺伝子座、ユビキチンＣ（ＵＢＣ）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１  （ＰＧＫ）プロモーター、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＡＧ）プロモーター、β−アクチンプロモーター、および負の制御領域が欠失した骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサーのｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目１３９に記載の方法。
（項目１４１）
前記ドナー修復テンプレートが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結され、その間で分散され、および／または隣接する１つ以上の自己切断型ウイルス性ペプチドをさらにコードする、項目１３８〜１４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４２）
前記自己切断型ウイルス性ペプチドが、２Ａペプチドである、項目１４１に記載の方法。
（項目１４３）
前記ドナー修復テンプレートが、異種ポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目１３８〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４４）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、免疫抑制因子に対抗する酵素機能を含む、項目１３８〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４５）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、キヌレニナーゼ活性を含む、項目１４４に記載の方法。
（項目１４６）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、
（ａ）免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインであって、任意に、抗体もしくはその抗原結合断片である、細胞外ドメイン、
（ｂ）免疫抑制因子および膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメイン、または
（ｃ）免疫抑制因子、膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメインと、免疫抑制シグナルを前記細胞に伝達できない修飾細胞内ドメインと、を含む、項目１３８〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４７）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、優性ネガティブＴＧＦβＲＩＩ受容体である、項目１３８〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４８）
前記免疫力エンハンサーは、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー分子（ＢｉＴＥ）、免疫賦活因子、およびフリップ受容体からなる群から選択される、項目１３８〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４９）
前記免疫賦活因子が、サイトカイン、ケモカイン、細胞毒素、サイトカイン受容体、およびそのバリアントからなる群から選択される、項目１４８に記載の方法。
（項目１５０）
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、およびＩＬ−２１からなる群から選択される、項目１４９に記載の方法。
（項目１５１）
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、およびＩＬ−２１からなる群から選択され、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目１４９に記載の方法。
（項目１５２）
前記サイトカインがＩＬ−７であり、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目１４９に記載の方法。
（項目１５３）
前記サイトカインがＩＬ−１２であり、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目１４９に記載の方法。
（項目１５４）
前記サイトカインがＩＬ−１５であり、前記内在性ＰＤ−１プロモーターに作動可能に連結する、項目１４９に記載の方法。
（項目１５５）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインと、フレーム内で前記ＰＤ−１膜貫通ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目１４８に記載の方法。
（項目１５６）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインと、ＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、フレーム内で前記ＰＤ−１細胞外ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目１４８に記載の方法。
（項目１５７）
前記フリップ受容体が、ＰＤ−１細胞外ドメインと、フレーム内で前記ＰＤ−１細胞外ドメインのＣ末端に融合されたＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインと、を含む、項目１４８に記載の方法。
（項目１５８）
前記遺伝子操作された抗原受容体が、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカインからなる群から選択される、項目１３８〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５９）
前記ドナー修復テンプレートが、前記ＤＳＢのヒトＰＤ−１遺伝子配列５´に相同な５´相同アームと、前記ＤＳＢのヒトＰＤ−１遺伝子配列３´に相同な３´相同アームとを含む、項目１３８〜１５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６０）
前記５´および３´相同アームの長さが、約１００ｂｐ〜約２５００ｂｐから独立して選択される、項目１５９に記載の方法。
（項目１６１）
前記５´および３´相同アームの前記長さが、約６００ｂｐ〜約１５００ｂｐから独立して選択される、項目１５９または項目１６０に記載の方法。
（項目１６２）
前記５´相同アームが約１５００ｂｐであり、前記３´相同アームが約１０００ｂｐである、項目１５９〜１６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６３）
前記５´相同アームが約６００ｂｐであり、前記３´相同アームが約６００ｂｐである、項目１５９〜１６２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６４）
ウイルス性ベクターが、前記ドナー修復テンプレートを前記細胞に導入するために使用される、項目１５９〜１６３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６５）
前記ウイルスベクターが、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）またはレトロウイルスである、項目１６４に記載の方法。
（項目１６６）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２由来の１つ以上のＩＴＲを有する、項目１６５に記載の方法。
（項目１６７）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、およびＡＡＶ１０からなる群から選択される血清型を有する、項目１６５または項目１６６に記載の方法。
（項目１６８）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２またはＡＡＶ６の血清型を有する、項目１６５〜１６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６９）
前記レトロウイルスが、レンチウイルスである、項目１６５に記載の方法。
（項目１７０）
前記レンチウイルスが、インテグラーゼ欠損レンチウイルス（ＩＤＬＶ）である、項目１６９に記載の方法。
（項目１７１）
項目１２２または項目１２３に記載の組成物の有効量を対象に投与することを含む、癌、感染疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、および免疫不全、またはそれらに関連する状態の少なくとも１つの症状を治療、予防、または改善する方法。
（項目１７２）
項目１２２または項目１２３に記載の組成物の有効量を前記対象に投与することを含む、固形癌を治療する方法。
（項目１７３）
前記固形癌が、肝臓癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、膀胱癌、脳癌、肉腫、頭頸部癌、骨癌、甲状腺癌、腎臓癌、または皮膚癌を含む、項目１７２に記載の方法。
（項目１７４）
項目１２２または項目１２３に記載の組成物の有効量を前記対象に投与することを含む、血液系腫瘍を治療する方法。
（項目１７５）
前記血液系腫瘍が、白血病、リンパ腫、または多発性骨髄腫である、項目１７４に記載の方法。