【誤訳訂正書】
【提出日】令和1年9月13日(2019.9.13)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００１】
本発明は、インビボの術中（intra-operative）イメージングの分野に関する。より詳細には、本発明は、腫瘍および病理的な領域のガイド手術においてＣｙ５．５色素部分で標識されたアザビシクロアルカンベースの環式ペプチドを含む近赤外（ＮＩＲ）蛍光プローブＤＡ３６４の使用に関する。本発明はさらに、その外科的切除の間に腫瘍マージンを同定および画定するための、この蛍光プローブを術中イメージングに使用することを含む光学イメージング方法に関する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
しかしながら、近赤外蛍光ガイド手術の開発の主な制限は、蛍光光学イメージング用のＮＩＲ剤を術中臨床への応用に転換する際に直面する確認されている障害、有効なＮＩＲ蛍光プローブのアベイラビリティが低いことにある。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１９】
ガイド手術の場合、目的の腫瘍部位でのＮＩＲ蛍光プローブの優先的な蓄積は必要条件であるが、十分ではない。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２０】
外科的腫瘍切除の全期間にわたり腫瘍マージンを明確かつ鮮明に画定することができるように、ガイド手術に使用するＮＩＲＦ造影剤は、正常組織と病理的な組織との間の蛍光プローブの濃度差を明瞭で正確かつ永続的に表示しなければならない。同時に、出血（手術中に起こる）で放出される残存する造影剤が手術室を汚染し外科医の視野を混乱させることがないように、循環する（結合していない）蛍光プローブが手術前に血液系から完全に除去することが絶対に必要である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２１】
これらの結果を達成するために、画像ガイド手術に使用するのに適したＮＩＲ蛍光剤は、
−血液系における最適な持続時間、薬剤と標的との十分な接触時間を確保するのに十分な長さ（したがって、標的部位での効果的な蓄積）および同時に循環システムからの非結合薬剤の完全な除去；
−病理的な領域への薬剤の選択的取り込みと均一な分布の両方を含む、標的化腫瘍部位における選択的蓄積、および（腫瘍部位において）手術中の腫瘍領域全体の明確な画定を可能にする十分な保持；
−腫瘍マージンの汚染または浸潤組織の認識が損なわれるのを防ぐための、病理的な領域から正常組織に向かっての緩徐な放出速度および無視できる程度の（蛍光剤の）抽出および拡散；
を示し、加えて
−蛍光プローブは、励起光への長期間の暴露で退色しないまたは損なわれずに信号を提供しなければならない。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
本発明者らは、この化合物が、腫瘍のＮＩＲ蛍光イメージングガイド根治手術中に、腫瘍マージンのリアルタイムの検出および画定を提供する術中イメージングにおいて有効に使用されることを見出した。したがって、ＤＡ３６４の使用は、残存する腫瘍組織を残す、または正常な組織を不必要に除去する（局所的な神経支配および血管新生を傷つけるおそれのある関連リスクを伴う）危険性を減少させるのに役立つ。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３３】
より詳細には、一態様において、本発明は、切除すべき病理的な領域または腫瘍領域のマージンの術中検出および画定のための、患者における腫瘍または病理的な領域の手術、特に、ＮＩＲ蛍光ガイド根治手術におけるＤＡ３６４の使用に関する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
さらに別の態様では、本発明は、腫瘍マージンの術中（intraoperative or per-operative）の境界設定および画定のためのＤＡ３６４および蛍光の使用を含む、患者の腫瘍塊、部分（area）または領域（region）の根治手術のためのガイド手術プロトコールに関する。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３９】
外科医に有用なサポートを提供するために、ガイド手術で使用するための有効な造影剤は、全腫瘍部分を明確に検出し、その境界を正確に画定するために、実質的に均質な様式で目的の病理的な部位に選択的に蓄積することが可能でなければならない。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４７】
その結果、本発明のＮＩＲ剤は、一般的な使用、すなわち、それが示すかもしれないαvβ3インテグリン受容体の可能性のある減少したまたは不均一な発現に関係なく、外科医に切除すべき悪性領域のマージンのリアルタイムの信頼できる識別および画定を提供するための、患者のＮＩＲ蛍光ガイド根治手術に使用することを提案することができる。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
したがって、本発明の好ましい実施形態は、削除すべき病理的な部分のマージンのリアルタイムの識別および画定を提供するために、手術における、そして好ましくは腫瘍のガイド手術における造影剤ＤＡ３６４の使用に関する。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５１】
目的の腫瘍領域を検出し、画定するために造影剤としてＤＡ３６４を使用することを含む、本発明による根治手術は、例えば約６００〜約７００ｎｍの波長範囲で適切にフィルターにかけられた励起光を使用することによって得られる蛍光下で適切に実施される。特に好ましい実施形態によれば、本発明は、切除すべき病理的な部分の境界の術中のリアルタイムの検出および画定を行うためのＮＩＲ蛍光ガイド腫瘍手術における造影剤ＤＡ３６４の使用に関する。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６９】
好ましい実施形態では、本発明は、切除すべき病理的な部分のマージンのリアルタイムの検出および画定のための、ガイド手術、好ましくは個人の患者の腫瘍の近赤外蛍光ガイド手術において使用するための有効量のＤＡ３６４を含む医薬診断組成物に関する。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７０】
この点で、特に記載しない限り、本明細書で使用される「有効量」または「有効用量」なる語は、ＮＩＲ剤ＤＡ３６４のその意図された診断目的：すなわち、例えばリアルタイムの、つまり個人の患者の蛍光ガイド手術の間およびその手術の全期間にわたって、切除すべき腫瘍の部位、領域または組織および悪性浸潤の境界の明確な検出および画定、を達成するのに十分な任意の量を指す。例えば、適切な用量は、個人の患者の体重１ｋｇあたり約０．６〜約２５０ｎｍｏｌの蛍光プローブの範囲であり得、好ましくは１〜６０ｎｍ、より好ましくは１．７〜１７ｎｍｏｌ／ｋｇであり、患者あたり約０．０５〜２０．０ｍｇ、好ましくは０．０８〜５．０ｍｇ、および最も好ましくは０．１５〜１．５ｍｇの蛍光プローブの用量に相当する。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８４】
従って、本発明のさらなる態様は、個人の患者の腫瘍のガイド手術のための方法であって、
ｉ）個人の患者に適切な量の蛍光プローブＤＡ３６４を提供すること；
ｉｉ）根治手術の下で癌が疑われる腫瘍を含む目的の領域の術中蛍光ベースの光学イメージングを生成すること；
ｉｉｉ）蛍光下の腫瘍のマージンを特定すること；および
ｉｖ）腫瘍の根治手術を行うこと
を含む方法に関する。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８５】
好ましくは、本発明の手術方法は蛍光によりガイドされる。より好ましくは、本手術方法は、蛍光プローブＤＡ３６４を使用して腫瘍の術中検出を行い、腫瘍の境界の明確で正確な画定によりその根治的切除を可能にすることを含む、患者における目的領域のＮＩＲ蛍光ガイド手術のための方法である。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８６】
好ましい一実施形態によれば、目的領域の術中イメージングの実施および腫瘍のマージンの検出を含む、本発明のガイド外科手術方法の工程ｉｉ）およびｉｉｉ）は、蛍光の下で、例えば上に記載したとおりに便利に行なわれる。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８８】
一実施形態では、本発明のガイド外科手術方法は、有効量のＤＡ３６４蛍光プローブを個人の患者に投与し、次いでそれを適切な時間循環させることを含む工程ｉ）を含む。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８９】
好ましい実施形態では、本発明のガイド手術は、有効量の蛍光剤ＤＡ３６４で前処理された個人の患者において都合よく実施され；この点に関して、蛍光剤の個人の患者への適切な投与は、静脈内または動脈内、例えば根治手術の１週間以内、好ましくは４８時間以内、およびより好ましくはガイド根治手術前の約２４〜４８時間の枠内で都合よく実施される。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９１】
次いで、腫瘍領域のガイド外科手術は、腫瘍の同定された外科的マージンに従って、本発明の方法の工程ｉｖ）に従い外科医によって行われる。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９２】
本発明の蛍光ガイド外科手術方法は、場合により更なる工程ｖ）を含み、該工程は、行った治癒切除術の精度および有効性を蛍光下で検証し、および場合により、陰性のマージン（すなわち蛍光シグナルを有さない切除した腫瘍周辺のマージン）に達するまで、検出された腫瘍領域周囲のより大きなマージンに従って手術を繰り返すことを含む。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９３】
特に好ましい実施形態では、本発明は、腫瘍が前立腺腫瘍である個人の患者の腫瘍のＮＩＲ蛍光ガイド外科手術のための方法に関する。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９５】
したがって、腫瘍マージンのＮＩＲ蛍光術中検出、および個人の患者における腫瘍の外科的切除の標準化を可能にする、化合物ＤＡ３６４および蛍光を、根治手術を受けている腫瘍の術中（intraoperative or per-operative）の境界設定と画定に使用することを含むガイド外科手術のプロトコールにおいて有利な用途がある。
【誤訳訂正２４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９６】
したがって、さらなる実施形態では、本発明は、腫瘍マージンの術中イメージングおよび個人の患者における腫瘍のガイド根治手術のための標準化されたプロトコールに関し、該プロトコールは、
ａ）画像ガイド手術の前の、例えば１週間以内、好ましくは少なくとも２４時間以内、より好ましくは２４〜４８時間の時間枠内に、ＤＡ３６４蛍光プローブの有効量を個人の患者に投与すること；
ｂ）場合により切開（関連する身体領域の）し、および場合により介在している皮膚および組織を除去することにより、目的の腫瘍を含む個人の患者の身体領域を外科医の目視検査に曝露すること；
ｃ）蛍光下で前記個人の患者の身体領域の術中イメージングを生成し、腫瘍マージンを検出すること；
ｄ）検出されたマージンに従って腫瘍の治癒的切除を行うこと、
ｅ）切除されたマージンの状態を蛍光下で評価し、切除した腫瘍周辺の陰性マージンの存在を確認するか、
ｆ）腫瘍周囲のより広いマージンに従って切除を繰り返すか、あるいは
ｇ）切除された腫瘍周辺の陰性（非蛍光）マージンに達するまで工程ｅ）およびｆ）を繰り返すこと
を含み、これは本発明の追加の実施形態を構成する。
【誤訳訂正２５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０１】
腫瘍の術中検査およびガイド切除の間に本発明によって同定されたＮＩＲ剤による蛍光下で得られた腫瘍マージンの視覚的推定値の信頼性およびその外科的有効性を、同所性Mat-Ly-Lu前立腺腫瘍を有するラットモデルを用いて行った。
【誤訳訂正２６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０２】
ここでは、高いαvβ3発現を有する腫瘍に属さない前立腺癌を意図的に選択して、高いαvβ3インテグリン発現を有する腫瘍における最適な標的化および蓄積特性に加えて、さらに腫瘍領域の術中検査および腫瘍のガイド手術において外科医への効果的な支援を可能にするのに十分適した、これらの受容体の発現が減少または不均一な腫瘍にも優先的な蓄積をもたらすという、ＤＡ３６４によって示される予期せぬ能力を実証した。実際、当分野においては、前立腺癌で発現されるインテグリンの種類とそれらの濃度はいずれも、確実に認識されるところから遠く離れたパラメータであることが知られている。事実、前立腺癌におけるαvβ3インテグリンの発現は、強い場合から全くみられない場合まで、不定で、個人の患者に依存することが知られており（The Prostate 70: 1189-1195 (2010)）、その理由として、前立腺癌の標的化およびその検出は現在のところ、悪性前立腺細胞およびその転移の前立腺上皮によって専ら過剰発現される膜結合糖タンパク質である前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）の活性部位を利用することによって得られる（J. Med. Chem.2009, 52(2) 544-550およびTrans. Androl. Urol. 2013; 2(3): 254-264およびそれらの引用文献）ということがあるようである。
【誤訳訂正２７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０４】
実施例に詳細に示されているように、驚くべきことに、αvβ3インテグリンの発現が減少した腫瘍として分類され得る、上述したラット同所性のMAT-Ly-Lu前立腺腫瘍モデルの外科的処置におけるＤＡ３６４の有効性を評価した。低インテグリン過剰発現腫瘍に対する術中蛍光ガイド手術に使用されたＤＡ３６４の能力をさらに証明するこの結果は、αvβ3インテグリン受容体の減少したまたは不均一な発現を有する腫瘍を代表する適切なモデルとして前立腺腫瘍の選択を支持するものである。
【誤訳訂正２８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１１】
【図１】蛍光プローブＤＡ３６４のモル吸光係数の評価のための線形回帰を示す。
【図２】ＰＢＳ（左プロット；ex／em：674／694；SS：20nm）およびセロトニン（右プロット；694／704、SS：10nm）におけるＤＡ３６４の励起および発光スペクトルを示す。
【図３】ＤＡ３６４を用いたガイド外科手術中に得られた蛍光画像（パネルＡ、ＢおよびＣ）および白色光下で得られた対応する画像（パネルＤ、ＥおよびＦ）を示す。パネルＡおよびＤは無傷の前立腺を示し、パネルＢおよびＥは、右側葉の被膜（capsule）が除去された前立腺を示し、パネルＣおよびＦは処置終了後の術野を示す。
【図４】切除された組織サンプルを示す。パネルＡでは、組織サンプルを白色光下で画像化し、パネルＢは、対応するＮＩＲ蛍光画像を示す。
【図５】蛍光ベースの視覚分類の組織学的検証の結果を示す。パネルＡは、正常領域（低密度および低蛍光）および病理的領域（高密度および高蛍光）を示す前立腺癌のヘマトキシリン／エオシン染色切片の例を示す。パネルＣはＤＡＰＩによる蛍光染色を示し、白色で自動的に検出された非空領域（NO EMPTY AREA）はパネルＤに示されており、パネルＢは、LOWおよびFLUORESCENTサンプルからの切片で測定された組織パラメータTissue Densityについての組織学的結果と視覚的結果との間の対応のプロットを示す（p値＜０．００１、マン・ホイットニーのＵ検定）。
【図６】実施例６の実験で記録されたＤＡ３６４血漿濃度（循環血液中の遊離薬剤の濃度）時間曲線を示す。循環中のＤＡ３６４プローブの血漿区画からの迅速な排除がプロットに明確に示されている。
【図７】ＤＡ３６４および原形質膜染色ＷＧＡからのシグナルと重複して得られた組織スライド中のMat-Ly／Lu腫瘍細胞の黒白画像を示す。
【図８】ラット前立腺腫瘍Mat-Ly-Lu細胞およびヒト前立腺腫瘍ＰＣ３細胞における、内部参照として使用されるαvβ3インテグリン発現のフローサイトメトリーを示す。αvβ3インテグリンの発現は灰色のヒストグラムで示され、マウスＩｇＧ陰性対照のバックグラウンドはマーカーによって示される。数字は、特異的ｍＡｂで検出されたものからアイソタイプ適合対照Ｉｇで得られた値を差し引いて算出した陽性細胞のパーセンテージを示す。
【誤訳訂正２９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２７】
実施例７：ＮＩＲ蛍光プローブとしてＤＡ３６４を用いたラット前立腺腫瘍モデルにおける蛍光ガイド外科手術
本実施例は、ラットの同所性前立腺腫瘍モデルMat Ly-Lu（以下に示すように、αvβ3インテグリンの発現が減少した腫瘍）を用いた腫瘍塊の認識におけるＮＩＲ ＲＧＤ環状プローブＤＡ３６４の感受性を評価することを目的としている。
術中イメージングは、照射およびプローブから放出された信号の選択のための適切なフィルタを含む修正された外科用顕微鏡であるZeissシステムで行った。ラットの腫瘍性MatLyLu前立腺細胞を前立腺の右側葉に接種した。接種の３〜４日後、動物に、ＮＩＲ蛍光プローブのラット５〜２０ｎｍｏｌ／用量の範囲の用量を静脈注射し、２４時間後に画像化した。次いで腫瘍を蛍光シグナルガイドを通して切除した。前立腺左葉由来の組織を含む蛍光領域を取り囲む組織を組織学的比較のために切除した。すべてのサンプルを、通常の組織学的処理（ヘマトキシリンおよびエオシン染色）およびさらなる免疫標識によって分析した。
【誤訳訂正３０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３１】
蛍光ガイド手術実験
専用の外科用顕微鏡（Axio Zoom v16, Carl Zeiss Beteiligungs GmbH, Jena, Germany）を用いて腫瘍を取り出した。顕微鏡にPLANAPO Z0,5X/0.125 FWD 114 MM対物レンズを装着した。手術中、約2.5×2.5cm2の領域を可視化した。手術野への照明は、蛍光信号が必要でないときは冷光源（CL 9000 LED CAN（D））によって、腫瘍除去中はフィルター光（照明：HXP 200C（D）、フィルターセット：32 Cy 5.5シフトフリー（E））によって行った。
腫瘍移植後３〜４日に相当する手術前日に、５〜２０ｎｍｏｌ／ラットの範囲の用量でＤＡ３６４試験薬剤を動物に投与した。プローブ注射の２４時間後、動物をイソフルランガス０．５％（Ｏ２ ９９．５％）で麻酔し、手術台に仰向けに固定し、前立腺腫瘍を露出させた。
前立腺被膜を除去した後、前立腺腫瘍をフィルター光に曝露し、原発腫瘍の質量および病理的マージンの概要をみるため蛍光画像を取得した（図３、パネルＡおよびＤ参照）。次いで、蛍光を用いて切除をガイドすることにより、腫瘍塊の除去を腫瘍領域を取り囲む領域に蛍光シグナルがなくなるまで反復して行った（図３、パネルＢ、ＥおよびＣ、Ｆ参照）。蛍光シグナルの大部分は、移植領域、すなわち前立腺右側葉に閉じ込められていた。蛍光シグナルを囲む領域から組織サンプルを切除し、前立腺左葉、背葉および前葉を収集し、エクスビボでの蛍光画像を取得して、フルオロフォアの蓄積の原因となる組織学的パターンを調べた（図４）。注目すべきは、より安全な手術戦略のために少なくとも最小の非蛍光性の、陰性マージンを含むより大きな容積の切除が推奨されるものの、この実験的試験では、組織のサンプルを高強度の蛍光シグナルによって同定された腫瘍マージンに従い厳密に切除した。最終的に、収集した組織サンプルはすべて以下の組織学的分析のために処理した。実験の最後に、動物は過剰用量の麻酔によって犠牲にされた。
【誤訳訂正３１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３４】
イメージ分析
手術直後に採取したエクスビボ蛍光画像（図４）を用いて、切除された組織サンプルを２つの蛍光クラス、すなわち蛍光（FLUORESCENT）および非蛍光（NON FLUORESCENT）、に視覚的に分類した。２つの蛍光クラス間の分類は、組織サンプルの解剖学的起源を考慮することなく、蛍光シグナルのみに基づいた。組織サンプルが少なくとも強度が強く明るい蛍光発光によって特徴付けられた領域を含む場合に、蛍光クラスに割り当てた（例えば、図４のサンプル３、４および５参照）。それ以外の組織サンプル、すなわち蛍光を示さない（図４のサンプル１など）または腫瘍領域から離れた正常組織（図４のサンプル２など）で観察される自己蛍光と一致する蛍光を示すサンプル、はすべて非蛍光クラスとした。各画像について、蛍光シグナルを、全ピクセル強度範囲を用いピクセル強度でマッピングした。この分類手順は、外科医が腫瘍除去中に行う必要がある「正常な」（非蛍光）と「病理的な」（蛍光）組織の蛍光ベースの視覚的選択を再現することを意図した。
次に、各組織サンプルからの２つの組織学的切片の、その次元にかかわらず腫瘍領域を含む切片の同定が可能なＨ＆Ｅ染色によって、（ガイド手術中に採取した組織サンプルの）視覚的分類の結果を組織学的に確認した（図５パネルＡ）。腫瘍を含む組織サンプル（すなわち、試験した組織学的切片の少なくとも１つが腫瘍細胞を含んでいる組織サンプル）を陽性と分類し、腫瘍を含まないサンプルを陰性と分類した。次いで、本発明によって同定された化合物により可能な視覚的分類の感度の尺度と、腫瘍を含まない組織と腫瘍を含む組織の同定および分離におけるその信頼性を提供する分割表を用いて組織学的および視覚的分類を比較した。
採取した組織サンプルのさらなる分析もまた、核染色剤４’，６’−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）の蛍光に基づいて行った。一般的に言えば、この分析は、正常な前立腺の形態が腫瘍浸潤によって破壊され、それが自動閾値ベースの画像分析手順で容易に区別できる、正常組織および腫瘍組織の形態に存在する差異に依存している（図５パネルＣ、Ｄ）。正常な前立腺組織は、実際には、線維性間質に埋没した腺および管で主に構成され、組織の空の領域は前立腺の広い内腔を示し、上皮腺細胞および間質は前立腺の実質を示す。それに対し、腫瘍組織は、より典型的には、均一に詰まった細胞で構成される。この自動的な手順は、セクションの面積に対する、組織（非空領域）によって占有されるサンプルの面積の比として定義される組織密度を計算するというものであった。正常な組織は病理的な組織よりも低い組織密度によって特徴付けられる。
【誤訳訂正３２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
個人の患者のガイド手術における腫瘍マージンの検出および画定のための蛍光プローブの製造のための、次式で示される造影剤ＤＡ３６４の使用であって、該腫瘍がαｖβ３インテグリン受容体の減少または変化した発現を示す腫瘍である、使用。
【化１】
2018500338.tif 000001
【請求項２】
前記検出および画定が、根治手術下での病理的部分の外科的境界をリアルタイムに同定することを含んでなる、請求項１記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項３】
腫瘍マージンの検出および画定が蛍光下で行われる請求項１または２記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項４】
光の波長が６３０〜６９０ｎｍの範囲である、請求項３記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項５】
前記検出および画定が、
ｉ）有効量のＤＡ３６４が適切に前投与された患者における疑わしい腫瘍を含んでいる目的領域に、ＤＡ３６４造影剤を励起することが可能な光源を照射すること；および
ｉｉ）蛍光下で病理的部分または領域のマージンを同定すること
を含んでなる、請求項１〜４のいずれかに記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項６】
０．０５〜２０ｍｇの量の造影剤ＤＡ３６４が個人の患者に前投与される、請求項５記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項７】
造影剤の投与がガイド手術の４８時間以内に行われる、請求項５または６記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項８】
腫瘍マージンをリアルタイムに検出および画定するための術中光学イメージングのための造影剤ＤＡ３６４を含んでなる薬学的診断組成物の製造のための造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項９】
前記光学イメージングが、根治切除下で腫瘍部分のマージンをリアルタイムに検出および画定するための個人の患者の腫瘍のガイド手術において行われる、請求項８記載の薬学的診断組成物の製造のための造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項１０】
メラノーマ、神経膠腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、肉腫、卵巣癌、乳癌、肺癌、肝臓癌、結腸癌、頭頚癌および前立腺癌からなる群から選択される腫瘍の検出および画定のための、請求項２〜７のいずれか記載の蛍光プローブの製造のための造影剤ＤＡ３６４の使用。
【請求項１１】
前記腫瘍が前立腺癌である請求項１０記載の造影剤ＤＡ３６４の使用。