【手続補正書】
【提出日】令和2年3月24日(2020.3.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における痙縮の治療における使用のための組成物であって、GAD65（グルタミン酸デカルボキシラーゼ）遺伝子およびVGAT（小胞GABA輸送体）遺伝子をアップレギュレートし、それにより対象における痙縮を治療する、組成物。
【請求項２】
GAD65遺伝子およびVGAT遺伝子のアップレギュレーションがGAD65遺伝子およびVGAT遺伝子の脊髄特異的なアップレギュレーションである、請求項1記載の使用のための組成物。
【請求項３】
GAD65遺伝子およびVGAT遺伝子を発現するGAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドを含むウイルスベクターを含み、それにより痙縮が低減される、請求項1記載の使用のための組成物。
【請求項４】
GAD65およびVGATが過剰発現される、請求項3記載の使用のための組成物。
【請求項５】
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター（AV）、またはアデノ随伴ベクター（AAV）である、請求項3記載の使用のための組成物。
【請求項６】
AAVがAAV9である、請求項5記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記ウイルスベクターが、対象の脊髄実質に、対象の髄腔内空間に、対象の脊髄軟膜下空間に、または対象の末梢痙直筋肉に直接投与するためのものである、請求項3記載の使用のための組成物。
【請求項８】
脊髄損傷を有する対象の治療における使用のためのウイルスベクターであって、ウイルスベクターが、GAD65およびVGATを発現するGAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドを含み、それにより脊髄損傷が治療され、任意で脊髄損傷誘導の痙縮が治療される、使用のためのウイルスベクター。
【請求項９】
GAD65およびVGATが過剰発現される、請求項8記載の使用のためのウイルスベクター。
【請求項１０】
レンチウイルスベクター、AV、またはAAVであり、任意でAAVがAAV9である、請求項8記載の使用のためのウイルスベクター。
【請求項１１】
対象の脊髄実質に、対象の髄腔内空間に、対象の脊髄軟膜下空間に、または対象の末梢痙直筋肉に直接投与するためのものである、請求項8記載の使用のためのウイルスベクター。
【請求項１２】
GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターを含む、ベクター。
【請求項１３】
レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびAAVベクターからなる群より選択されるウイルスベクターである、請求項12記載のベクター。
【請求項１４】
AAV9-UBI-GAD65+VGATである、請求項13記載のベクター。
【請求項１５】
請求項12記載のベクターを含有する、単離された哺乳動物宿主細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
別の局面において本発明は、GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターまたは制御配列を含む発現カセットを提供する。GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターのような制御配列を含むAAV9などのベクターも提供される。
[本発明1001]
GAD65（グルタミン酸デカルボキシラーゼ）遺伝子およびVGAT（小胞GABA輸送体）遺伝子をアップレギュレートする段階を含み、それにより対象における痙縮を治療する、対象における痙縮を治療する方法。
[本発明1002]
GAD65遺伝子およびVGAT遺伝子のアップレギュレーションがGAD65遺伝子およびVGAT遺伝子の脊髄特異的なアップレギュレーションである、本発明1001の方法。
[本発明1003]
GAD65遺伝子およびVGAT遺伝子のアップレギュレーションが、GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドを含むウイルスベクターを対象に投与する段階を含み、ここでGAD65およびVGATが発現され、それにより痙縮が低減される、本発明1001の方法。
[本発明1004]
GAD65およびVGATが過剰発現される、本発明1003の方法。
[本発明1005]
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター（AV）、またはアデノ随伴ベクター（AAV）である、本発明1003の方法。
[本発明1006]
前記ベクターがレンチウイルスベクターである、本発明1005の方法。
[本発明1007]
前記ベクターがAAVである、本発明1005の方法。
[本発明1008]
AAVがAAV9である、本発明1007の方法。
[本発明1009]
前記ウイルスベクターが、対象の脊髄実質に、対象の髄腔内空間に、対象の脊髄軟膜下空間に、または対象の末梢痙直筋肉に直接投与される、本発明1003の方法。
[本発明1010]
必要とする対象に、GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドを含むウイルスベクターを治療的有効量で投与する段階を含み、それにより対象における痙縮を治療する、対象における痙縮を治療する方法。
[本発明1011]
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、AV、またはAAVである、本発明1010の方法。
[本発明1012]
前記ベクターがAAVである、本発明1011の方法。
[本発明1013]
AAVがAAV9である、本発明1012の方法。
[本発明1014]
前記ベクターが、対象の脊髄実質に、対象の髄腔内空間に、対象の脊髄軟膜下空間に、または対象の末梢痙直筋肉に直接投与される、本発明1010の方法。
[本発明1015]
GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドを含むウイルスベクターを投与する段階を含み、ここでGAD65およびVGATが発現され、それにより脊髄損傷が治療される、脊髄損傷を有する対象を治療するための治療計画。
[本発明1016]
GAD65およびVGATが過剰発現される、本発明1015の治療計画。
[本発明1017]
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、AV、またはAAVである、本発明1015の治療計画。
[本発明1018]
前記ベクターがレンチウイルスベクターである、本発明1017の治療計画。
[本発明1019]
前記ベクターがAAVである、本発明1017の治療計画。
[本発明1020]
AAVがAAV9である、本発明1019の治療計画。
[本発明1021]
前記ベクターが、対象の脊髄実質に、対象の髄腔内空間に、対象の脊髄軟膜下空間に、または対象の末梢痙直筋肉に直接投与される、本発明1015の治療計画。
[本発明1022]
GAD65およびVGATをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターを含む、ベクター。
[本発明1023]
レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびAAVベクターからなる群より選択されるウイルスベクターである、本発明1022のベクター。
[本発明1024]
AAV9-UBI-GAD65+VGATである、本発明1023のベクター。
[本発明1025]
本発明1022のベクターを含有する、単離された哺乳動物宿主細胞。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
ヒトGAD65についての付加的な核酸配列およびアミノ酸配列は当技術分野において公知である。例えば以下のアミノ酸配列（SEQ ID NO:1）を提供する、GenBankアクセッション番号:Q05329、ヒトグルタミン酸デカルボキシラーゼ2（GAD2/GAD65）を参照のこと：
2019510047.tif 000001
。
例えば以下の核酸配列（SEQ ID NO.2）を提供する、Genbankアクセッション番号:X69936、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（GAD2/GAD65）についてのホモサピエンスmRNAも参照のこと：
2019510047.tif 000002