【手続補正書】
【提出日】令和2年6月9日(2020.6.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の体積を有する溶液であって、デキストロースを含む低ｐＨ流体ベースと、アルブミンと、を含む溶液を含み、
前記溶液中のアルブミンの濃度が約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの間である、生体成長に影響する組成物。
【請求項２】
前記組成物のｐＨが５．０〜７．４の間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物のｐＨが４．１〜７．２の間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物のｐＨが４．１〜６．２の間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物のｐＨが５．０〜６．２の間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物のｐＨを改変するように構成されるベースをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
重炭酸ナトリウムをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
重炭酸カルシウムをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記アルブミンが、市販ヒト血清に由来する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記アルブミンが、ドナー由来血清に由来する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記アルブミンが、ヒト臍帯血に由来する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約５０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約５０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約１０５ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含有しない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記低ｐＨ流体ベースが、デキストランをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記低ｐＨ流体ベースが、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記低ｐＨ流体ベースが、ＣｒｙｏＧｏｌｄ（商標）又はその同等物をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
幹細胞をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記幹細胞が、非増殖細胞集団からなる、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記幹細胞が、造血性幹細胞（ＨＳＣ）を含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２３】
前記幹細胞が、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２４】
生単核球をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約１００，０００個〜約７５００万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約７５０，０００個〜約３０００万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約１０００万個〜約３０００万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２８】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約１０００万個〜約２０００万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２９】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約２５０万個〜約１０２０万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項３０】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約９８０万個〜約１０２０万個の間の生単核球を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項３１】
前記単核球が、単一ドナーの臍帯血のみに由来する、請求項２４に記載の組成物。
【請求項３２】
１つ又は複数の生物活性剤をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、１つ又は複数のサイトカインを含む、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
１つ又は複数の前記サイトカインが、マクロファージ炎症タンパク質アルファ（ＭＩＰ−１α）、マクロファージ炎症タンパク質ベータ（ＭＩＰ−１β）、及びインターフェロンガンマ誘導性タンパク質１０（ＩＰ−１０）を含むケモカイン、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン４（ＩＬ−４）、インターロイキン５（ＩＬ−５）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン７（ＩＬ−７）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、及びインターロイキン１３（ＩＬ−１３）を含むインターロイキン、インターフェロンアルファ（ＩＮＦα）を含むインターフェロン、リンホカイン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、幹細胞因子（ＫＬ）、並びに腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）からなる群から選択される、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、１つ又は複数の増殖因子を含む、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３６】
１つ又は複数の前記増殖因子が、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、神経増殖因子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ−２）を含む線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、インスリン様増殖因子、ｄｅｓ（１−３）−ＩＧＦ−Ｉ（脳ＩＧＦ−Ｉ）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３）及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）からなる群から選択される、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
前記アルブミンが第１のドナーの臍帯血に由来し、１つ又は複数の生物活性剤が少なくとも第２のドナーに由来する、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３８】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、市販ヒトアルブミン又は市販ヒトアルブミン血清から取得される又は由来する、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記アルブミン及び１つ又は複数の前記生物活性剤が、単一ドナーの臍帯血に由来する、請求項３２に記載の組成物。
【請求項４０】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、マクロファージ炎症タンパク質アルファ（ＭＩＰ−１α）、マクロファージ炎症タンパク質ベータ（ＭＩＰ−１β）、インターフェロンガンマ誘導性タンパク質１０（ＩＰ−１０）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン４（ＩＬ−４）、インターロイキン５（ＩＬ−５）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン７（ＩＬ−７）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン９（ＩＬ−９）、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン１３（ＩＬ−１３）、インターロイキン１５（ＩＬ−１５）、インターロイキン１７（ＩＬ−１７）、インターロイキン１８（ＩＬ−１８）、インターロイキン２１（ＩＬ−２１）、インターロイキン２２（ＩＬ−２２）、インターロイキン２３（ＩＬ−２３）、インターロイキン２７（ＩＬ−２７）、インターロイキン３１（ＩＬ−３１）、インターフェロンアルファ（ＩＮＦα）、リンホカイン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、幹細胞因子（ＫＬ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、神経増殖因子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ−２）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、インスリン様増殖因子、ｄｅｓ（１−３）−ＩＧＦ−Ｉ（脳ＩＧＦ−Ｉ）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、エオタキシン、ＣＸＣリガンド１（ＧＲＯα）、インターロイキン１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−１ＲＡ）、インターロイキン１アルファ（ＩＬ−１α）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、胎盤増殖因子（ＰＬＧＦ）、ケモカインリガンド５（ＲＡＮＴＥＳ）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、ストローマ細胞由来因子（ＳＤＦ１α）、及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦβ）からなる群から選択される、請求項３２に記載の組成物。
【請求項４１】
第１の体積を有する溶液であって、デキストロースを含む低ｐＨ流体ベースと、保護剤と、を含む溶液を含み、
ｐＨが４．１〜７．２の間である、生体成長に影響する組成物。
【請求項４２】
前記保護剤が、アルブミンを含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記保護剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４４】
前記保護剤が、デキストランを含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４５】
前記保護剤が、デキストラン及びアルブミンを含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４６】
前記保護剤が、ＣｒｙｏＧｏｌｄ（商標）又はその同等物を含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４７】
前記組成物が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含有しない、請求項４１、４２、４４、４５又は４６に記載の組成物。
【請求項４８】
前記保護剤が、凍結保護特性を有する、請求項４１〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
前記保護剤が、タンパク質保護特性を有する、請求項４１〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記保護剤及びデキストロースの組み合わせが、タンパク質保護特性を有する、請求項４１〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５１】
前記保護剤及びデキストロースの組み合わせが、凍結保護特性を有する、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５２】
前記アルブミンが、市販ヒト血清に由来する、請求項４２又は４５に記載の組成物。
【請求項５３】
前記アルブミンが、ドナー由来血清又はヒト臍帯血に由来する、請求項４２又は４５に記載の組成物。
【請求項５４】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項４２、５２又は５３に記載の組成物。
【請求項５５】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約８０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５６】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約１０５ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５７】
前記溶液中のアルブミンの濃度が、約１５ｍｇ／ｍｌ〜約３０ｍｇ／ｍｌの間である、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５８】
前記組成物のｐＨが、４．１〜６．２の間である、請求項４１〜５７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５９】
前記組成物のｐＨが、５．０〜７．２の間である、請求項４１〜５７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６０】
幹細胞をさらに含む、請求項４１〜５９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６１】
前記幹細胞が、非増殖細胞集団からなる、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６２】
前記幹細胞が、造血性幹細胞（ＨＳＣ）を含む、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６３】
前記幹細胞が、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含む、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６４】
前記組成物が、生単核球を含む、請求項４１〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６５】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約２５０万個〜約１０２０万個の間の生単核球を含む、請求項６４に記載の組成物。
【請求項６６】
前記組成物が、１ｍｌ当たり約９８０万個〜約１０２０万個の間の生単核球を含む、請求項６４に記載の組成物。
【請求項６７】
１つ又は複数の生物活性剤をさらに含む、請求項４１〜６６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６８】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、１つ又は複数のサイトカインを含む、請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
１つ又は複数の前記サイトカインが、マクロファージ炎症タンパク質アルファ（ＭＩＰ−１α）、マクロファージ炎症タンパク質ベータ（ＭＩＰ−１β）、及びインターフェロンガンマ誘導性タンパク質１０（ＩＰ−１０）を含むケモカイン、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン４（ＩＬ−４）、インターロイキン５（ＩＬ−５）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン７（ＩＬ−７）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、及びインターロイキン１３（ＩＬ−１３）を含むインターロイキン、インターフェロンアルファ（ＩＮＦα）を含むインターフェロン、リンホカイン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、幹細胞因子（ＫＬ）、並びに腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）からなる群から選択される、請求項６８に記載の組成物。
【請求項７０】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、１つ又は複数の増殖因子を含む、請求項６７に記載の組成物。
【請求項７１】
１つ又は複数の前記増殖因子が、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、神経増殖因子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ−２）を含む線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、インスリン様増殖因子、ｄｅｓ（１−３）−ＩＧＦ−Ｉ（脳ＩＧＦ−Ｉ）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３）及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）からなる群から選択される、請求項７０に記載の組成物。
【請求項７２】
アルブミンが第１のドナーの臍帯血に由来し、１つ又は複数の生物活性剤が少なくとも第２のドナーに由来する、請求項６７〜７１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７３】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、市販ヒトアルブミン又は市販ヒトアルブミン血清から取得される又は由来する、請求項７２に記載の組成物。
【請求項７４】
アルブミン及び１つ又は複数の前記生物活性剤が、単一ドナーの臍帯血に由来する、請求項６７〜７１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７５】
前記単核球が、単一ドナーの臍帯血のみに由来する、請求項６４〜６６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７６】
前記低ｐＨ流体ベースが、ＬＭＤ（デキストラン４０）又はその同等化合物を含む、請求項４１〜７５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７７】
前記低ｐＨ流体ベースが、ＬＭＤ（デキストラン４０）からなる、請求項４１〜７５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７８】
幹細胞の中の生存細胞のパーセンテージが、７０％より多い、請求項６０〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７９】
幹細胞の中の生存細胞のパーセンテージが、８５％より多い、請求項６０〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８０】
幹細胞の中の生存細胞のパーセンテージが、９５％より多い、請求項６０〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８１】
対象への移植のために構成される、生体成長に影響する組成物を作製する方法であって、
ヒト臍帯血を含み、第１の体積ＶＵＣを有する試料であって、ヒト臍帯血が赤血球、赤血球以外の細胞、及び非細胞物質を含む試料を得るステップと、
ヒト臍帯血を含む前記試料を、体積ＶＰＣを有する、ある量のＰｒｅｐａＣｙｔｅ−ＣＢ又はその同等物と組み合わせるステップであって、上清が形成されるように、ＶＵＣ／ＶＰＣ比が約０．６０〜約１．７５の間であるステップと、
容器内で、上清の少なくとも一部を、単核球を単離するために構成される試薬の層に積層するステップであって、前記上清の少なくとも一部が体積ＶＳを有し、前記試薬の前記層が体積ＶＲを有し、前記試薬の前記層の前記体積ＶＲが、前記上清の少なくとも一部の前記体積ＶＳの少なくとも６７％であるステップと、
前記容器の内容物に十分な遠心力をかけるステップであって、力ベクトルを前記容器の閉鎖端に向けて、単核球を実質的に含む少なくとも１つの新しい層を形成させるステップと、
単核球を実質的に含む前記層の少なくとも一部を、乳酸加リンゲル液又はその同等物と組み合わせて、単核球溶液を作り出すステップと、
前記単核球溶液の少なくとも一部中の生細胞の総数ＮＬを決定するステップであって、前記単核球溶液の少なくとも一部が体積ＶＭを有するステップと、
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであって、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づく、ステップと、
を含む方法。
【請求項８２】
アルブミンを添加するステップを更に含む、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１００，０００個〜７５００万個の間となる、請求項８１に記載の方法。
【請求項８４】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり７５０，０００個〜３０００万個の間となる、請求項８１に記載の方法。
【請求項８５】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１０００万個〜３０００万個の間となる、請求項８１に記載の方法。
【請求項８６】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１０００万個〜２０００万個の間となる、請求項８１に記載の方法。
【請求項８７】
前記組成物のｐＨを決定するステップをさらに含む、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
前記組成物のｐＨを、４．１〜８．５の間であるように調整するステップをさらに含む、請求項８７に記載の方法。
【請求項８９】
積層する前記ステップにおける前記試薬の前記層の前記体積ＶＲが、前記上清の少なくとも一部の前記体積ＶＳの少なくとも７５％である、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
積層する前記ステップにおける前記試薬の前記層の前記体積ＶＲが、前記上清の少なくとも一部の前記体積ＶＳの少なくとも８５％である、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記試料を組み合わせる前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．７５〜約１．２５の間である、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記試料を組み合わせる前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．６０〜約１．１０の間である、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記試料を組み合わせる前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約１．２５〜約１．７５の間である、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９４】
前記単核球溶液が幹細胞を含む、請求項８１〜９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
前記組成物を低温貯蔵するステップを更に含む、請求項８１〜９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
デキストロース溶液中の前記低分子量デキストランが、ＬＭＤ（デキストラン４０）を含む、請求項８１〜９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記組成物が１又は複数の生物活性剤を含む、請求項８１〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
１つ又は複数の生物活性剤が、１つ又は複数のサイトカインを含む、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
１つ又は複数の生物活性剤が、１つ又は複数の増殖因子を含む、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、ヒト臍帯血を含む試料に由来する、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０１】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、ヒト臍帯血を含む試料ではないヒト臍帯血に由来する、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０２】
１つ又は複数の生物活性剤が、市販ヒトアルブミン又は市販ヒトアルブミン血清に由来する、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０３】
対象への移植のために構成される、生体成長に影響する組成物を作製する方法であって、
ヒト臍帯血を含み、第１の体積ＶＵＣを有する試料であって、ヒト臍帯血が赤血球、赤血球以外の細胞、及び非細胞物質を含む試料を得るステップと、
ヒト臍帯血を含む前記試料を、第１のフレキシブル容器において体積ＶＰＣを有する、ある量のＰｒｅｐａＣｙｔｅ−ＣＢ又はその同等物と混合するステップであり、ＶＵＣ／ＶＰＣ比が約０．６０〜約１．７５の間であるステップと、
混合物を前記第１のフレキシブル容器において、上清が形成されるまで少なくとも２０分間残存させるステップと、
上清の少なくとも一部を、前記第１のフレキシブル容器から第２のフレキシブル容器へと、前記第１のフレキシブル容器と前記第２のフレキシブル容器を連結するコンジットを介して進めるステップと、
前記第２のフレキシブル容器の内容物に十分な遠心力をかけるステップであって、単核球を実質的に含む少なくとも１つの新しい層を形成させるステップと、
単核球を実質的に含む前記層の少なくとも一部を、試薬と組み合わせて、単核球溶液を作り出すステップと、
前記単核球溶液の少なくとも一部中の生細胞の総数ＮＬを決定するステップであり、前記単核球溶液の少なくとも一部が体積ＶＭを有するステップと、
組み合わせた組成物にアルブミンを添加するステップと、
を含む方法。
【請求項１０４】
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであり、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づいて、１ｍｌ当たり１００，０００個〜７５００万個の間の生単核球の濃度を有する調整組成物を作り出すステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであり、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づいて、１ｍｌ当たり７５０，０００個〜３０００万個の間の生単核球の濃度を有する調整組成物を作り出すステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０６】
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであり、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づいて、１ｍｌ当たり１０００万個〜３０００万個の間の生単核球の濃度を有する調整組成物を作り出すステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０７】
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであり、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づいて、１ｍｌ当たり１０００万個〜２０００万個の間の生単核球の濃度を有する調整組成物を作り出すステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０８】
前記組成物のｐＨを決定するステップをさらに含む、請求項１０３〜１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０９】
前記組成物のｐＨを、４．１〜８．５の間であるように調整するステップをさらに含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記ｐＨが、４．１〜７．２の間である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記ｐＨが、５．０〜６．２の間である、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記試料を混合する前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．７５〜約１．２５の間である、請求項１０３〜１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１３】
前記試料を混合する前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．６０〜約１．１０の間である、請求項１０３〜１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１４】
前記試料を混合する前記ステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約１．２５〜約１．７５の間である、請求項１０３〜１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
対象への移植のために構成される、生体成長に影響する組成物を作製する方法であって、
ヒト臍帯血を含み、第１の体積ＶＵＣを有する試料であって、ヒト臍帯血が赤血球、赤血球以外の細胞、及び非細胞物質を含む試料を得るステップと、
ヒト臍帯血を含む前記試料を、体積ＶＰＣを有する、ある量のＰｒｅｐａＣｙｔｅ−ＣＢ又はその同等物と組み合わせるステップであり、上清が形成されるように、ＶＵＣ／ＶＰＣ比が約０．６０〜約１．７５の間であるステップと、
容器内で、上清の少なくとも一部を、単核球を単離するために構成される試薬の層に積層するステップであり、前記上清の少なくとも一部がカラム高ＣＨＳを有し、前記試薬の前記層がカラム高ＣＨＲを有し、カラム高ＣＨＲが、前記上清の少なくとも一部のカラム高ＣＨＳの少なくとも６７％であるステップと、
前記容器の内容物に十分な遠心力をかけるステップであって、力ベクトルを前記容器の閉鎖端に向けて、単核球を実質的に含む少なくとも１つの新しい層を形成させるステップと、
単核球を実質的に含む前記層の少なくとも一部を、乳酸加リンゲル液又はその同等物と組み合わせて、単核球溶液を作り出すステップと、
前記単核球溶液の少なくとも一部中の生細胞の総数ＮＬを決定するステップであり、前記単核球溶液の少なくとも一部が体積ＶＭを有するステップと、
デキストロース溶液中の体積ＶＤの低分子量デキストランを、前記単核球溶液の少なくとも一部に添加するステップであって、前記体積ＶＤが、生細胞の総数ＮＬに少なくとも部分的に基づく、ステップと、
を含む方法。
【請求項１１６】
アルブミンを添加するステップを更に含む、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１００，０００個〜７５００万個の間となる、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１８】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり７５０，０００個〜３０００万個の間となる、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１９】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１０００万個〜３０００万個の間となる、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１２０】
前記添加するステップにより、生単核球の濃度が１ｍｌ当たり１０００万個〜２０００万個の間となる、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１２１】
前記組成物のｐＨを決定するステップをさらに含む、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
前記組成物のｐＨを、４．１〜８．５の間であるように調整するステップをさらに含む、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
カラム高ＣＨＲが、前記上清の少なくとも一部のカラム高ＣＨＳの少なくとも７５％である、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
カラム高ＣＨＲが、前記上清の少なくとも一部のカラム高ＣＨＳの少なくとも８５％である、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２５】
前記試料を組み合わせるステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．７５〜約１．２５の間である、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記試料を組み合わせるステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約０．６０〜約１．１０の間である、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記試料を組み合わせるステップにおけるＶＵＣ／ＶＰＣ比が、約１．２５〜約１．７５の間である、請求項１１５〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
前記単核球溶液が幹細胞を含む、請求項１１５〜１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
前記組成物を低温貯蔵するステップを更に含む、請求項１１５〜１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
デキストロース溶液中の前記低分子量デキストランが、ＬＭＤ（デキストラン４０）を含む、請求項１１５〜１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３１】
前記組成物が１又は複数の生物活性剤を含む、請求項１１５〜１３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３２】
１つ又は複数の生物活性剤が、１つ又は複数のサイトカインを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
１つ又は複数の生物活性剤が、１つ又は複数の増殖因子を含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３４】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、ヒト臍帯血を含む試料に由来する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３５】
１つ又は複数の前記生物活性剤が、ヒト臍帯血を含む試料ではないヒト臍帯血に由来する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３６】
１つ又は複数の生物活性剤が、市販ヒトアルブミン又は市販ヒトアルブミン血清に由来する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３７】
前記ｐＨを調整するステップの後に、ｐＨが４．１〜７．２の間である、請求項８８、１０９、又は１２２に記載の方法。
【請求項１３８】
前記ｐＨを調整するステップの後に、ｐＨが４．１〜６．２の間である、請求項８８、１０９、又は１２２に記載の方法。
【請求項１３９】
前記ｐＨを調整するステップが、重炭酸ナトリウム粉末を添加するステップを含む、請求項８８、１０９、又は１２２に記載の方法。
【請求項１４０】
前記アルブミンを添加するステップが、約１０ｍｇ〜約１５０ｍｇの間のアルブミンを、組み合わせた組成物の１ｍｌ当たり添加するステップを含む、請求項８２、１０３、又は１１６に記載の方法。
【請求項１４１】
前記アルブミンを添加するステップが、約１５ｍｇ〜約３０ｍｇの間のアルブミンを、組み合わせた組成物の１ｍｌ当たり添加するステップを含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４２】
前記アルブミンを添加するステップが、約８０ｍｇ〜約１５０ｍｇの間のアルブミンを、組み合わせた組成物の１ｍｌ当たり添加するステップを含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４３】
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が、前記組成物に添加されない、請求項８１〜１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
かける前記ステップが、遠心分離で回転させるステップを含む、請求項８１〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
前記遠心力をかけるステップが、海面での重力加速度の少なくとも約３５０倍を前記内容物にかけるステップを含む、請求項８１〜１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
単核球を単離するために構成される試薬が、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＲＥＭＩＵＭ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ  Ｍｅｄｉａを含む、請求項８１〜１０２及び１１５〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４７】
前記単核球溶液が、非増殖細胞集団を実質的に含む、請求項８１〜１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４８】
前記単核球溶液が、非プール細胞集団を実質的に含む、請求項８１〜１４３及び１４７のいずれか一項に記載の方法。