(57)【要約】医療装置に広域スペクトル抗菌活性を付与する方法。医療装置は、消毒薬などの第１の抗菌成分、その後抗生物質の混合物などの第２の抗菌成分と連続的に接触される。前記第１の成分はクロルヘキシジンなどのグアニジウム化合物であってもよい。前記第２の成分はミノサイクリンなどのテトラサイクリンと、リファンピンなどのリファマイシンとの混合物であってもよい。本発明によると、医療装置に広域スペクトル抗菌活性を付与する方法が提供される。医療装置は、消毒薬などの第１の抗菌成分（たとえば、グアニジウム化合物）を含む溶液、および抗生物質の組み合わせ（たとえば、テトラサイクリンとリファマイシンとの組み合わせ）などの第２の抗菌成分を含む溶液と連続的に接触される。
2012520745.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
医療装置に抗菌活性を付与するための方法であって：
消毒薬を含む第１の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記医療装置の少なくとも一部分を、前記第１の抗菌成分が前記医療装置の部分をコーティングするか、または前記医療装置の部分に含浸されるような条件下で、前記第１の抗菌成分の前記溶液と接触させること；
少なくとも１つの抗生物質を含む第２の抗菌成分の溶液を準備すること；ならびに
前記医療装置の前記部分を、前記第２の抗菌成分が、コーティングしたまたは含浸された前記第１の抗菌成分を有する前記医療装置の前記部分にコーティングを形成するような条件下で、前記第２の抗菌成分の前記溶液と接触させること
を含み、前記第１および第２の抗菌成分はそれぞれ、前記医療装置への細菌生物および真菌生物の付着を阻害するのに効果的な濃度で前記医療装置にコーティングされる
方法。
【請求項２】
前記第２の抗菌成分の前記溶液は前記第１の接触ステップ後に前記第１の抗菌成分の前記溶液と組み合わされ、前記第２の接触ステップは前記組み合わされた溶液を用いて行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記消毒薬はグアニジウム化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抗生物質はテトラサイクリンおよびリファマイシンのうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記抗生物質はテトラサイクリンとリファマイシンとの混合物を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含み、前記少なくとも１つの抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記第２の抗菌成分の前記溶液はアルカリ化剤を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第１の抗菌成分の前記溶液は浸透剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶液のうちの少なくとも１つは前記組み合わせステップの前に加熱される、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記溶液はそれぞれ前記組み合わせステップの前に加熱される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの溶液は約３０℃〜７０℃の間の温度に加熱される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記消毒薬はクロルヘキシジンを含み、前記少なくとも１つの抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも３０分間接触され、前記接触は約３０℃〜７０℃の間の温度で行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも１時間接触される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも３時間接触される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
広域スペクトル抗菌活性を非金属医療装置に付与するための方法であって：
クロルヘキシジンを含む第１の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記非金属医療装置の少なくとも一部分を、前記第１の抗菌成分が前記医療装置の部分に含浸されるような方法で、前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも約１時間の期間接触させること；
ミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む第２の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記第２の抗菌成分の前記溶液を前記第１の抗菌成分の前記溶液と組み合わせること；ならびに
コーティングされた前記非金属医療装置の前記含浸された部分を、前記第２の抗菌成分が前記医療装置の前記含浸された部分にコーティングを形成するように、前記組み合わせた溶液と接触させることを含み、前記抗菌成分は前記医療装置への細菌および／または真菌生物の付着を阻害するのに効果的な濃度で前記医療装置に適用される、
方法。
【請求項１８】
医療装置であって：
支持体であって、前記支持体に適用される第１の抗菌成分および第２の抗菌成分を有し、前記第１の抗菌成分は前記支持体にコーティングされるか、または含浸され、前記第２の抗菌成分は前記支持体および前記第１の抗菌成分にコーティングされ、前記第１の抗菌成分は消毒薬を含み、前記第２の抗菌成分は少なくとも１つの抗生物質を含む、支持体
を含む、医療装置。
【請求項１９】
前記消毒薬はグアニジウム化合物を含み、前記抗生物質はテトラサイクリンおよびリファマイシンのうちの少なくとも１つを含む、請求項１８に記載の医療装置。
【請求項２０】
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含み、前記抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、請求項１９に記載の医療装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は全般的に、医療装置に抗菌活性を付与する方法に関する。より詳細には、本発明は、医療装置を消毒薬などの第１の抗菌成分および抗生物質の混合物などの第２の抗菌成分と連続的に接触させることにより広域スペクトル抗菌活性を付与する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代の内科的疾患に対処する際、中心静脈カテーテル（ＣＶＣ：ｃｅｎｔｒａｌ  ｖｅｎｏｕｓ  ｃａｔｈｅｔｅｒ）などの留置医療装置は今や、専門医が使用する不可欠な道具になっている。こうしたカテーテル、ならびに腹膜カテーテル、心血管装置、整形外科用インプラント、陰茎インプラントおよび他の補綴具など他の留置医療装置から得られる利益により、専門医は、従来の手段ではこれまで対処できなかった疾患、または限られた方法でしか対処できなかった疾患に対処することが可能になった。
【０００３】
最近の推計によれば、米国では現在、毎年５００万本を超えるＣＶＣが患者に挿入されていることが示唆されており、集中治療室（ＩＣＵ：ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  ｃａｒｅ  ｕｎｉｔ）における使用日数は１，５００万本ＣＶＣ日（所定の期間において所定の集団の全患者に使用されるＣＶＣの合計日数）と推定される。しかしながら、ＣＶＣの使用中にカテーテル関連血流感染（ＣＲＢＳＩ：ｃａｔｈｅｔｅｒ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）が起こることがある。カテーテルの表面または他の部分の微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）のコロニー形成は、ＣＶＣの除去および／または交換、ならびに結果として生じる任意の感染性状態の積極的な処置の必要など患者に重大な問題を引きこする恐れがある。
【０００４】
報告によれば、米国では年間、２５０，０００〜４００，０００例の血管カテーテル関連菌血症および真菌血症が発症していることが示されている。こうした感染症は生命を脅かす恐れがあり、一般に処置することが難しい。ＩＣＵでは約８０，０００例のＣＲＢＳＩが発症し、ＣＲＢＳＩは、ＩＣＵにおける１，０００カテーテル日当たり平均５．３件である。重症患者のＣＶＣ感染に起因する死亡率は約１２〜２５％の範囲であり、入院期間が１０〜２０日の範囲で延長され、１エピソード当たり約４，０００ドルから５６，０００ドルの費用が追加されると推定される。ＣＲＢＳＩのほぼ７０％はグラム陽性生物が原因で、特にコアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）およびＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓなどのブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）により引き起こされる。
【０００５】
微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）のコロニー形成の防止にかなりの関心および研究が向けられている。コロニー形成を抑制または防止するのに十分な静菌作用または殺菌作用を発揮するように、カテーテルの表面に抗生物質などの抗菌剤をコーティングすることもある。細菌のコロニー形成を防止する初期の一方法は、カテーテルをバンコマイシンでコーティングするものであった。バンコマイシンは、ブドウ球菌全身感染症、特にメチシリン耐性Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓおよびＳ．ａｕｒｅｕｓなどの処置に選択すべき抗生物質と考えられていた。しかしながら、バンコマイシンはインビトロおよびヒト組織で非付着性のブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）に対して活性を示すものの、異物に付着してバイオフィルムの層内に存在するタイプのブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）に対しては活性でないのが一般的である。バイオフィルム（粘液または繊維状のグリコカリックス（ｇｌｙｃｏｃａｌｉｘ））は付着性のブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）をバンコマイシンから保護し、グリコペプチド抗生物質（バンコマイシンおよびテイコプラニン）の活性を阻害する遮蔽物の役割を果たすと考えられる。さらに、高度にコロニー形成した表面（カテーテルなど）に予防的にバンコマイシンを使用することは、バンコマイシン耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）の出現を促す恐れもあるため嫌われていた。加えて、バンコマイシンは、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓなどの真菌に活性がなかった。
【０００６】
カテーテル関連の感染に関する他の調査では、細菌により生成される付着性のバイオフィルムが、ブドウ球菌およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓについて、通常全身的にまたは組織において効果のある抗生物質に対して耐性を促進することが示された。この問題の証拠は、液体懸濁液で増殖させた同一菌株の最小殺菌濃度（ＭＢＣ：ｍｉｎｉｍｕｍ  ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）の５０倍を超える抗生物質レベルでバイオフィルム内に存在するＰｓｅｕｄｏｍａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細胞をトブラマイシンが死滅させることができないことによって立証された。非特許文献１。本文書において参照される刊行物および特許文書はすべて参照によってその全体を援用する。同様に、室内培養は非常に感受性が強かったβ−ラクタム系抗生物質による６週間の集中的な抗菌化学療法でも、心内膜ペースメーカーに生じたＳ．ａｕｒｅｕｓ菌血症の高頻度の再発を防止できなかった。ペースメーカーリードの先端を直接検査したところ、粘稠な粘液に囲まれたバイオフィルム内でブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）が増殖しており、バイオフィルムが組織内濃度の非常に高い抗生物質から細菌を保護することが明らかになった。その後のインビトロ研究から、バイオフィルム付着性の細菌は、同じ菌株のバイオフィルムに覆われてない細胞を死滅させるのに必要なＭＢＣより５０〜１００倍高い抗生物質レベルに抵抗性があることが示された。非特許文献２。
【０００７】
抗生物質で植込み型装置をコーティングするもう１つの知られた方法は、最初にベンザルコニウムクロリドで所定の表面をコーティングし、続いて抗生物質組成物のイオン結合を行うものである。たとえば、非特許文献３、および特許文献１を参照されたい。他の方法では、消毒薬組成物クロルヘキシジン（ＣＨＸ：ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ）を単独で、またはスルファジアジン銀と組み合わせて（ＣＨＳＳ）カテーテルのコーティングを行っている。なお他の知られている方法では、最初にトリドデシルメチルアンモニウムクロリド（ＴＤＭＡＣ）界面活性剤の層を、続いて抗生物質コーティング層を医療装置の表面に適用または吸収させるものである。
【０００８】
医療装置を抗生物質でコーティングする他の方法は、多くの特許に記載されている。こうした特許として、特許文献２（ｐＫａが６未満で負電荷を持つ基と、この負電荷を持つ基に結合したカチオン性抗生物質とを含む医療装置支持体）；特許文献３（医療装置の表面材料のマトリックスに吸収された膨張剤に抗生物質を溶解させる）；特許文献４（イオン性ヒドロゲルで医療装置を構築してから、抗生物質を吸引またはイオン結合させる）；特許文献５（医療装置のポリマー表面層に抗生物質を積層する）；および特許文献６（インプラントの表面にシリコーン油膜を適用してから、シリコーン膜を有する表面を抗生物質の粉末と接触させる）がある。
【０００９】
上記の参考文献に記載された方法は細菌感染の程度を最小化するのに様々なでレベルで成功を収めたとはいえ、多くの場合、保護できる範囲が望ましいとは言い難く、保護作用が持続する期間も望ましいとは言い難い場合が多い。
【００１０】
特許文献７には、抗生物ミノサイクリンおよびリファンピン（Ｍ／Ｒ）などの抗生物質の組み合わせを含む抗菌組成物で装置の表面がコーティングされた植込み型医療装置が教示されている。この特許文献７では、こうした抗菌物質の組み合わせを留置医療装置の表面に適用すると、バイオフィルム関連のブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、特にＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓおよびＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓを死滅させるのに非常に効果的であることが明らかになった。この抗菌組成物は、メチシリン感受性および耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）に対してその活性が特に効果的であり、さらにｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ種、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ種およびＢａｃｉｌｌｕｓ種など他のグラム陽性生物に対しても広域スペクトル阻害活性を示すことが明らかになった。この抗菌組成物はＣＲＢＳＩの約６０〜７０％を占めるタイプの耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）に対して好ましい活性を示すと推定されている。
【００１１】
特許文献７に記載されている抗菌物質の組み合わせなどの抗菌組成物でコーティングした留置装置は一般に最初の埋植時に特定の細菌に対して効果的保護作用を示すものの、保護作用の有効性は次第に低下する。装置の使用中、抗菌組成物が装置の表面から周辺組織に溶出する可能がある。一定の期間をかけて装置がもはや最適レベルの保護作用を得られなくなる程度まで、装置に残存する抗菌物質の量が減少するかもしれない。
【００１２】
特許文献８には、抗菌物質、または特許文献７に開示されたミノサイクリンおよびリファンピン（Ｍ／Ｒ）の組み合わせなどの抗菌物質の組み合わせを含浸させた医療用インプラントが教示されている。特許文献７に記載されているようにインプラントにコーティングするのではなく、こうした抗菌物質を医療用インプラントに含浸させると、多くの場合、コーティングしたカテーテルにより得られる保護作用持続期間を超える期間の保護作用が得られた。
【００１３】
特許文献７および特許文献８に開示された抗菌物質をコーティングしたカテーテル、および含浸させたカテーテルは、他の市販されているカテーテルと比較して抗菌活性が著しく向上することが明らかになった。インビトロおよび動物試験では、Ｍ／Ｒをコーティングしたカテーテル、および含浸させたカテーテルは、上述のＣＨＳＳコーティングしたカテーテルと比較してブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）に対して長時間にわたり優れた活性を示すことが明らかになっている。３７℃の血清の場合、ＣＨＳＳコーティングしたカテーテルのＳ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗菌活性の半減期は３日、これに対してＭ／Ｒ含浸カテーテルでは２５日で、インキュベーションから３０日後の阻止帯は≧１５ｍｍであった。一般にＣＲＢＳＩと関連している他のグラム陽性生物（たとえば、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｔｉｕｍｉ）の場合、阻止帯の平均値は３１であった。
【００１４】
別の研究では、既存の抗菌カテーテルと比較してカテーテル関連微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）病原体に対するＭ／Ｒ含浸カテーテルの利益が明らかになった。この研究によれば、血清に浸してから２８日後、ＣＨＳＳを含浸させたＣＶＣと、銀、白金および炭素を含浸させたＣＶＣとは１４日以内に、メチシリン耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）に対する抗菌活性を失った。これに対し、Ｍ／Ｒを含浸させたＣＶＣは、少なくとも２８日間ＭＲＳＡに対するその活性を維持した。非特許文献４。
【００１５】
なお別の研究では、Ｍ／Ｒコーティングしたカテーテルは、ブドウ球菌付着に対する顕著な保護作用および抑制作用を示すと共に、非コーティングカテーテルに対してだけでなくＣＨＳＳならびに銀、白金および炭素（ＳＰＣ）コーティングしたカテーテルと比較して、バンコマイシン耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ種（ＶＲＳＡ）、Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ種およびＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ種に対する抗菌物質の持続性がより長くなることが示された。Ｍ／ＲコーティングしたＣＶＣ、およびＣＨＳＳコーティングしたＣＶＣは、多剤耐性Ｅｎｉｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓに対する抗付着性および抗菌物質の持続性について同程度であるが、ＳＰＣカテーテルおよび非コーティングカテーテルよりも優れていた。（非特許文献５）。
【００１６】
特許文献７および特許文献８の抗菌物質をコーティングしたカテーテルおよび含浸させたカテーテルは市販されている他のカテーテルよりも著しい改善を示すものの、いくつかの課題をなお抱えている。たとえば、ミノサイクリンおよびリファンピンの組み合わせは耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）のほか、いくつかの耐性グラム陰性菌に対して抗菌活性が明らかになっているとはいえ、Ｍ／Ｒの抗菌物質の組み合わせは、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａと、Ｃａｎｄｉｄａ  ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、およびより耐性が強いＣａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉなどの真菌とに対して著しい活性を示さなかった。（非特許文献４，上掲）。Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａは、カテーテル関連菌血症を引き起こす最も病原性の強いグラム陰性菌と考えられる。Ｃａｎｄｉｄａ  ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓおよびＣａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉは、非常に高率の罹患率および死亡率を伴うカテーテル関連カンジダ血症の発症に関係していると考えられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】米国特許第４，４４２，１３３号明細書
【特許文献２】米国特許第４，８９５，５６６号明細書
【特許文献３】米国特許第４，９１７，６８６号明細書
【特許文献４】米国特許第４，１０７，１２１号明細書
【特許文献５】米国特許第５，０１３，３０６号明細書
【特許文献６】米国特許第４，９５２，４１９号明細書
【特許文献７】米国特許第５，２１７，４９３号明細書
【特許文献８】米国特許第５，６２４，７０４号明細書
【非特許文献】
【００１８】
【非特許文献１】Ｎｉｃｋｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．２７：６１９−６２４（１９８５）
【非特許文献２】Ｋｈｏｕｒｙ，Ａ．Ｅ．ａｎｄ  Ｃｏｓｔｅｒｏｎ  Ｊ．Ｗ．，「Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｂｉｏｆｉｌｍｓ  ｉｎ  Ｎａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ」，Ｄｉａｌｏｇｕｅｓ  ｉｎ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｕｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１４：２−５（１９９１）
【非特許文献３】Ｓｏｌｏｍｏｎ，Ｄ．Ｄ．ａｎｄ  Ｓｈｅｒｅｒｔｚ，Ｒ．Ｊ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，６：３４３−３５２（１９８７）
【非特許文献４】Ｈａｎｎａ  Ｈ，ｅｔ  ａｌ．，「Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｅｆｆｉｃａｃｉｅｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｄｕｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｖｅｎｏｕｓ  ｃａｔｈｅｔｅｒｓ．」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，５０（１０）：３２８３−８（２００６）
【非特許文献５】Ｈａｃｈｅｍ  Ｒ，Ｃｈｅｍａｌｙ  ＲＦ，Ｊｉａｎｇ  Ｙ，Ｒｅｉｔｚｅｌ  Ｒ，Ｄｖｏｒａｋ  Ｔ，Ｒａａｄ  Ｉ．Ａｎｔｉ−ａｄｈｅｒｅｎｃｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｄｕｒａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ−ｃｏａｔｅｄ  ｃａｔｈｅｔｅｒｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ（ＭＤＲ）ｂａｃｔｅｒｉａ．ＩＮ：Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ４７ｔｈ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ．（Ｓｅｐｔ．１７−２０，２００７）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１９】
以下に限定されるものではないが、耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、ＭＤＲグラム陰性菌（ＭＤＲ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなど）および耐性Ｃａｎｄｉｄａ（たとえばＣ．ｋｒｕｓｅｉ）などに対して有効な広域スペクトル抗感染保護作用を医療装置に与える方法がなお求められている。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、クロルヘキシジンおよび／またはミノサイクリン／リファンピンでコーティングした／それらを含浸させた様々なポリウレタンカテーテルへのＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの付着を図示する。
【図２】図２は、クロルヘキシジンおよび／またはミノサイクリン／リファンピンでコーティングした／それらを含浸させた様々なポリウレタンカテーテルへのＣ．ｋｒｕｓｅｉの付着を図示する。
【図３】図３は、クロルヘキシジンおよび／またはミノサイクリン／リファンピンでコーティングした／それらを含浸させた様々なポリウレタンカテーテルへのメチシリン耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）の付着を図示する。
【図４】図４は、クロルヘキシジンおよび／またはミノサイクリン／リファンピンでコーティングした／それらを含浸させた様々なポリウレタンカテーテルへのＭＤＲ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの付着を図示する。
【図５】図５は、クロルヘキシジンジアセテート（ＣＨＤ：ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ  ｄｉａｃｅｔａｔｅ）および／またはミノサイクリン／リファンピンでコーティングした／それらを含浸させたシリコーン乳房インプラントへのＭＲＳＥの付着を図示する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明によると、医療装置に広域スペクトル抗菌活性を付与する方法が提供される。医療装置は、消毒薬などの第１の抗菌成分（たとえば、グアニジウム化合物）を含む溶液、および抗生物質の組み合わせ（たとえば、テトラサイクリンとリファマイシンとの組み合わせ）などの第２の抗菌成分を含む溶液と連続的に接触される。
【００２２】
本発明はさらに、本発明の方法により形成される医療装置に関する。この医療装置は、消毒薬（たとえば、クロルヘキシジン）を単独で、抗生物質の混合物（たとえば、ミノサイクリンおよびリファンピン）を単独で、あるいはさらに消毒薬と抗生物質との同時混合物でコーティングした／それを含浸させた医療装置と比較して、たとえば、耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓのほか、耐性Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、ならびにＣａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉおよびＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの付着を防止する際に広域スペクトル抗菌活性を発揮できる。
【００２３】
「抗菌医療装置」および「医療装置」という用語は、本明細書で使用する場合、前述のように抗菌物質と連続的に接触させられ、被検体の疾病または他の健康に関連する状態の診断、処置、および／または予防に使用されることが意図されている機器、器具、道具、機械、仕掛け、インプラント、または構成要素もしくは付属物を含む他の類似のもしくは関連する物品をいう。被検体は、哺乳動物などの任意の脊椎動物であってもよい。抗菌医療装置の非限定的な例として、末梢血管に挿入可能な中心静脈カテーテル、透析カテーテル、長期留置中心静脈カテーテル、末梢静脈カテーテル、シングルルーメンおよびマルチルーメン短期型中心静脈カテーテル、動脈カテーテル、肺動脈Ｓｗａｎ−Ｇａｎｚカテーテルおよび同種のものなど血管カテーテル；尿道カテーテル、他の長期導尿装置、組織結合型導尿装置、腎臓用ステント、陰茎プロテーゼ、人工血管、血管アクセスポート、創傷部排液用チューブ、水頭症シャント、脳室ドレナージカテーテル、神経および硬膜外カテーテル、神経刺激装置、腹膜透析カテーテル、ペースメーカーカプセル、人工尿道括約筋、小型または暫間的人工関節、拡張器、心臓弁、整形プロテーゼ、脊髄製品、手術部位修復メッシュ（たとえば、ヘルニアメッシュ）、気管内チューブ、胆管ステント、消化管チューブ、手袋（ラテックス、非ラテックスおよびニトリルなど）、他の医療用衣、カルテ、ベッドレール、コンドーム、結腸直腸管インプラント、男性および女性用再生インプラント、美容または再建インプラント（たとえば、乳房、頤、頬、殿部、鼻）、聴診器のドラムなどの医療装置外囲器およびパウチ、整形外科用インプラント（たとえば、関節（膝、腰、肘、肩、足首）、プロテーゼ、外固定ピン、髄内ロッドおよび釘、脊椎インプラント）、微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）の侵入および／または活性の対象になり得る他の医療および留置装置；ならびに金属性装置、たとえば心臓ペースメーカー、除細動器、電子デバイスのリード、アダプター、リード延長部、植込み型輸液装置、植込み型パルス発生器、植込み型生理学的モニタリング装置、植込み型パルス発生器または植込み型輸液装置を皮下に配置するための装置、ならびに植込み型輸液装置に補充するための装置（たとえば替え針およびポートアクセスカニューレ）がある。
【００２４】
「抗菌剤」という用語は、本明細書で使用する場合、細菌微生物または真菌微生物などの微生物の増殖または複製を防止または抑制する、あるいは微生物を死滅させることができる抗生物質または消毒薬などの薬をいう。
【００２５】
「抗生物質」という用語は、本明細書で使用する場合、細菌の増殖または複製を防止または抑制する、あるいは細菌を死滅させることができる化合物または薬をいう。こうした薬は一般に被検体の全身性感染症の処置に適用される。本明細書に言及される非限定的な抗生物質のクラスとして、ミノサイクリンなど当業者に知られる任意のテトラサイクリン、およびリファンピンなど当業者に知られる任意のリファマイシンがある。
【００２６】
「消毒薬」という用語は、本明細書で使用する場合、微生物（細菌、真菌、原虫およびウイルスなど）の増殖または複製を防止または抑制する、あるいは微生物を死滅させることができるが、通常吸収、浸透または全身毒性に関連する制限のため一般に被検体の全身性感染症の処置には適用されない化合物または薬をいう。使用してもよい非限定的な消毒薬のクラスとして、クロルヘキシジンなどのグアニジウム化合物がある。
【００２７】
ミノサイクリンは、テトラサイクリンから得られる半合成抗生物質である。ミノサイクリンは主に静菌的であり、タンパク質合成の阻害によりその抗菌作用を発揮する。ミノサイクリンはヒドロクロリド塩として市販されおり、黄色の結晶性粉末として存在し、水に可溶で、アルコール、ケトン、エーテル、アルデヒド、アセトニトリル、酢酸、塩化メチレンおよびクロロホルムなどの有機溶剤には溶けにくい。ミノサイクリンは、様々なグラム陽性およびグラム陰性生物に対して活性である。
【００２８】
リファンピンは、カビＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｉｃから生成される大環状抗生物質化合物リファマイシンＢの半合成誘導体である。リファンピンは、細菌のＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ活性を阻害し、性質は殺菌的である。リファンピンは赤褐色の結晶性粉末として市販されており、水に極めて溶けにくく、アルコール、ケトン、エーテル、アルデヒド、アセトニトリル、酢酸、塩化メチレンおよびクロロホルムなどの酸性水溶液および有機溶液には溶けやすい。リファンピンは、様々なグラム陽性およびグラム陰性菌に対して広域スペクトル活性を有する。
【００２９】
クロルヘキシジンは、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）および他のグラム陽性菌のほか、様々な真菌に対して活性である消毒洗浄剤薬である。クロルヘキシジンは水にも、アルコール、ケトン、エーテル、アルデヒド、アセトニトリル、酢酸、塩化メチレンおよびクロロホルムなどの有機溶液にも可溶である。本明細書で使用する場合、クロルヘキシジンという用語は、クロルヘキシジンの塩を含むことがある。
【００３０】
「有機溶媒」という用語は、本明細書で使用する場合、抗菌剤を溶解するのに使用できる溶媒をいい、特にアルコール（たとえば、メタノール、エタノール）、ケトン（たとえば、アセトン、メチルエチルケトン）、エーテル（たとえば、テトラヒドロフラン）、アルデヒド（たとえば、ホルムアルデヒド）、アセトニトリル、酢酸、塩化メチレンおよびクロロホルムが挙げられる。
【００３１】
「浸透剤」という用語は、本明細書で使用する場合、グアニジウム化合物などの抗菌剤の医療装置マトリックスへの浸透を促進し得る有機化合物などの薬をいう。こうした化合物の非限定的な例として、エステル（たとえば、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル（ＢＡ：Ｂｕｔｙｌ  Ａｃｅｔａｔｅ）、酢酸アミルおよびこれらの組み合わせ）、ケトン（たとえば、アセトンおよびメチルエチルケトン）、塩化メチレンおよびクロロホルムがある。
【００３２】
「アルカリ化剤」という用語は、本明細書で使用する場合、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア水（たとえば、２７％水酸化アンモニウム）、ジエチルアミンおよびトリエチルアミンなど有機および無機塩基をいう。
【００３３】
「細菌生物および真菌生物」という用語は、本発明で使用する場合、以下に限定されるものではないが、すべての球状、桿状およびらせん状細菌など細菌および真菌のあらゆる属および種を意味する。細菌の非限定的な例として、グラム陽性菌およびグラム陰性バチルスのなかでもブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）（たとえば、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、Ｅｎｔｅｒｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉが挙げられる。真菌生物の非限定的な例として、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓおよびＣａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉが挙げられる。
【００３４】
本発明の方法による処理に適した医療装置は一般には、ゴム、プラスチック、ポリエチレン、ポリウレタン、シリコーン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ：ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙｌｅｎｅ）、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ：ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｔｅｒｅｐｈｔｈａｌａｔｅ）、ラテックス、ニトリルおよび他のポリマー、ならびにエラストマー材料などの非金属材料のほか、チタンなどの金属ならびにステンレス鋼およびニチノールなどの金属合金を含む。当業者であれば、本明細書に記載するような非金属、金属および金属合金のリストが例示的なものにとどまり、限定的であることを意図するものではないことを理解するであろう。本明細書に記載するような処理に適した他の材料も本発明の範囲内にある。
【００３５】
本発明の特徴は、医療装置を第１の抗菌成分と、その後第２の抗菌成分と連続的に処理する、すなわち接触させることを含む。好ましい実施形態では、第１の抗菌成分はグアニジウム化合物（たとえば、クロルヘキシジン、アレキシジンおよびヘキサミジン）などの消毒薬を含む。好ましい実施形態では、第２の抗菌成分は、テトラサイクリンとリファマイシンとの混合物など抗生物質の混合物を含む。好ましくは、第２の抗菌成分は、ミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む。
【００３６】
本明細書に記載の少なくともいくつかの実施形態では、組成物を加熱することにより１つまたは複数の接触ステップを行う。本明細書で使用する場合、「加熱」とは、熱源の非存在下での組成物の温度と比較して熱源の適用により組成物の温度が上昇することをいう。加熱は、当業者に知られる任意の方法により行えばよい。接触ステップにおいて加熱が存在すると、抗菌剤が医療装置に付着しやすくなると考えられる。
【００３７】
本明細書に記載の少なくともいくつかの実施形態では、医療装置を抗菌成分と連続的に接触させてから洗浄する。本明細書で使用する場合、「洗浄」とは、物質を除去するために医療装置に液体を適用することをいう。たとえば、洗浄はさらに、医療装置の表面を脱イオン水に接触させることと定義してもよい。接触の結果、医療装置に結合しなかった抗菌剤および溶媒を除去することができる。医療装置の洗浄には、当業者に知られる任意の方法を適用してもよい。洗浄は、たとえば、当業者に知られる任意の方法により、洗浄溶液を用いて装置をリンスすること、浸漬すること、あるいは漬けることを含んでもよい。
【００３８】
抗菌物質と医療装置との接触に関し、本明細書に具体的に記載されていない追加の詳細については、たとえば、すべて参照によって援用する米国特許第５，２１７，４９３号、同第５，６２４，７０４号、同第５，９０２，２８３号および同第７，６５１，６６１号、さらに米国特許出願公開第２００５／０１９７６３４号、同第２００３／００７８２４２号および同第２００７／０１５４６２１号で確認することができる。
【００３９】
抗菌医療装置が非金属である（すなわち、抗菌医療装置が金属または金属合金でない）場合、必須ではないが、第１の抗菌成分を非金属装置のマトリックスに含浸させることが好ましい。非金属医療装置の表面を第１の抗菌成分でコーティングしても当初は微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）に対して保護作用を与えるものではないが、抗菌成分が一定の期間にわたり医療装置の表面から周辺環境に溶出することにより、コーティングの有効性が低下することがある。第１の抗菌成分、たとえば、クロルヘキシジンを非金属装置のマトリックスに含浸させると、同じ抗菌物質でコーティングした装置と比較して、通常装置はこの成分により与えられる抗菌能力をより長期間保持することが可能になる。第１の抗菌成分の溶液には、抗菌物質の装置マトリックスへの浸透を促進するため浸透剤および／またはアルカリ化剤を加えてもよい。第１の抗菌化合物の個々の適用が特定の深さまで支持体に浸透したかどうかを通常判定する必要はない。したがって、場合によっては、第１の抗菌化合物によるこの処理は、コーティングといっても、あるいは含浸といってもよい。第１の抗菌成分のコーティングまたは含浸の後、装置を第２の抗菌成分でコーティングする。
【００４０】
抗菌医療装置が金属または金属合金である場合、通常第１の抗菌成分を医療装置上にコーティングする。次いでこのステップの後、非金属装置の場合と同じ要領で装置を第２の抗菌成分でコーティングする。第１の抗菌成分でコーティングした結果、金属または金属合金マトリックスへの一定量の浸出または含浸が起こることもあるが、一般に浸出または含浸を達成するために何らかの具体的な措置を講じるは必要ない。
【００４１】
好ましい実施形態では、クロルヘキシジン（ＣＨＸ）またはクロルヘキシジンの塩（たとえば、クロルヘキシジンジアセテート（ＣＨＤ：ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ  ｄｉａｃｅｔａｔｅ））を好適な有機溶媒に溶解して第１の抗菌成分を調製してもよい。この溶液に医療装置の少なくとも一部分を、ＣＨＸをその医療装置の部分のマトリックスに含浸させるのに十分な条件下で入れる。第２の抗菌成分は、最初にアルカリ化剤を有機溶媒に溶解し、次いでミノサイクリンおよびリファンピン（Ｍ／Ｒ）を有機溶媒／アルカリ化剤に連続的に溶解して調製してもよい。ＣＨＸ含浸装置をＭ／Ｒコーティングするのに好適な条件下、医療装置を含む第１の溶液に第２の溶液を加えてもよい。あるいは、上述のように２つ溶液を組み合わせる代わりに、含浸後に第１の溶液から医療装置を取り出し、次いでコーティングのため第２の溶液に入れてもよい。
【００４２】
第１および第２の各溶液については、好ましくはそれぞれの溶液を混合する前に約３０℃〜７０℃、一層好ましくは、約４５℃の温度に加熱する。第１の溶液を加熱すると、医療装置のマトリックスへのＣＨＸの飽和度が改善する。第２の溶液を加熱すると、Ｍ／Ｒ抗菌物質が医療装置に付着しやすくなる。
【００４３】
以下の例は、第１および第２の抗菌成分の非金属支持体への適用に関するものである。当業者であれば、抗菌成分の金属または金属合金支持体への適用は、わずかに変更しただけの前述のような類似の手順によっても実施できること理解するであろう。以下の例は、例示のみを目的として提供するものであり、いかなる意味でも本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【実施例】
【００４４】
実施例１
この例では、中心静脈カテーテル（ＣＶＣ）片の抗菌活性を比較するため比較試験を行った。公知の方法に従い３つの陽性対照サンプルを調製した。本発明の方法に従い５つの本発明のサンプルを調製した。
【００４５】
当業者であれば、以下の例に記載されているような第１の抗菌成分、この場合クロルヘキシジンの溶液、および第２の抗菌成分、この場合ミノサイクリン／リファンピンの各濃度は例示的なものにすぎず、他の濃度、さらにはＣＨＸとＭ／Ｒとの他の比率を代わりに使用してもよいことを理解するであろう。この方法の教示内容を利用する場合、ある目的で使用することを意図している個々の医療装置に抗菌活性を付与するのに使用する適切な濃度および適用条件を得る際、必要とされる実験はごくわずかである。
【００４６】
陽性対照サンプル１．以下の手順に従いポリウレタン中心静脈カテーテル（ＣＶＣ）にミノサイクリン／リファンピン（Ｍ／Ｒ）を含浸させた：
処方：
メタノールに溶解させたＮａＯＨ−１０ｍｇ／ｍＬ
ミノサイクリン−１５ｍｇ／ｍＬ
リファンピン−３０ｍｇ／ｍＬ
メタノール−１５％
酢酸ブチル−８５％
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００４７】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００４８】
この溶液を、４５℃で１時間連続的に撹拌しながらカテーテルを浸してカテーテル片に含浸させる。
【００４９】
含浸後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてこのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。含浸させたカテーテルを６０℃で一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で激しく３回洗浄する。カテーテル片をペーパータオルで拭き過剰な水を除去する。次いでカテーテルを６０°でさらに４時間乾燥させる
陽性対照サンプル２．以下の手順に従いポリウレタンＣＶＣにクロルヘキシジンを含浸させた：
処方：
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１００％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００５０】
１ｇのＣＨＸを５０ｍＬの酢酸ブチルに加える。室温で１時間を撹拌してＣＨＸを溶解する。室温で１時間撹拌させながらカテーテル片にＣＨＸ＋ＢＡ溶液を含浸させる
カテーテル片に含浸させた後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてこのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。ＣＨＸ含浸カテーテルを６０℃で一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で激しく３回洗浄する。カテーテル片をペーパータオルで拭き過剰な水を除去する。次いでカテーテルを６０°でさらに４時間乾燥させる
陽性対照サンプル３．以下の手順に従いポリウレタンＣＶＣをミノサイクリン／リファンピン＋クロルヘキシジン溶液で同時にコーティングした：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００５１】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。室温で１時間を撹拌してＣＨＸを溶解する。同時に以下のとおりＭ／Ｒ溶液を調製する。
【００５２】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００５３】
Ｍ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液をＣＨＸのＢＡ溶液に加える。４５℃で１時間連続的に撹拌しながらカテーテル片をコーティングする。
【００５４】
コーティング後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてこのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを６０℃で一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で激しく３回洗浄する。カテーテル片をペーパータオルで拭き過剰な水を除去する。次いでカテーテルを６０°でさらに４時間乾燥させる
本発明のサンプル１．ポリウレタンＣＶＣを、本発明の方法に従い以下のとおり１時間ＣＨＸにより前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）した：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００５５】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸを溶解する。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片をコーティングする。同時にＭ／Ｒ溶液を以下のとおり調製する。
【００５６】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００５７】
ＣＨＸによる１時間のコーティング後、ＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片に、Ｍ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液を加える。４５℃で１時間連続的に撹拌しながらカテーテル片をコーティングする。
【００５８】
コーティング後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてこのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを４５℃で一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で激しく３回洗浄する。カテーテル片をペーパータオルで拭き過剰な水を除去する。次いでカテーテルを４５℃でさらに４時間乾燥させる
本発明のサンプル２．ポリウレタンＣＶＣを本発明の方法に従い以下のとおり２時間ＣＨＸにより前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）してコーティングした：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００５９】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸを溶解する。４５℃で２時間撹拌してＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片をコーティングする。１時間後、以下のとおりＭ／Ｒ溶液の調製を始める。
【００６０】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００６１】
ＣＨＸで２時間コーティングした後、ＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片にＭ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液を加える。４５℃で連続的に撹拌しながらＭ／Ｒ＋ＣＨＸ溶液中でカテーテルをさらに１時間インキュベートする。
【００６２】
合計３時間のコーティング時間後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてカテーテルのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを４５℃のインキュベーターで一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で３回激しく洗浄する。ペーパータオルで過剰な水を除去する。次いでカテーテルを４５℃でさらに４時間乾燥させる。
【００６３】
本発明のサンプル３．ポリウレタンＣＶＣを、本発明の方法に従い以下のとおり３時間ＣＨＸにより前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）してコーティングした：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００６４】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸを溶解する。４５℃で３時間撹拌してＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片をコーティングする。２時間後、以下のとおりＭ／Ｒ溶液の調製を始める。
【００６５】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００６６】
ＣＨＸで３時間コーティングした後、ＣＨＸ＋ＢＡ中のカテーテル片にＭ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液を加える。４５℃で連続的に撹拌しながら、Ｍ／Ｒ＋ＣＨＸ溶液中でカテーテルをさらに１時間インキュベートする。
【００６７】
合計４時間のコーティング時間後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてカテーテルのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを４５℃のインキュベーターで一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で３回激しく洗浄する。ペーパータオルで過剰な水を除去する。次いでカテーテルを４５℃でさらに４時間乾燥させる。
【００６８】
本発明のサンプル４．ポリウレタンＣＶＣを、本発明の方法に従い以下のとおり４時間ＣＨＸにより前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）してコーティングした：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００６９】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸを溶解する。４５℃で４時間撹拌してＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片をコーティングする。３時間後、以下のとおりＭ／Ｒ溶液の調製を始める。
【００７０】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００７１】
ＣＨＸによる４時間のコーティング後、ＣＨＸ＋ＢＡ中のカテーテル片にＭ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液を加える。４５℃で連続的に撹拌しながらＭ／Ｒ＋ＣＨＸ溶液中でカテーテルをさらに１時間インキュベートする。
【００７２】
合計５時間のコーティング時間後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてカテーテルのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを４５℃のインキュベーターで一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で３回激しく洗浄する。ペーパータオルで過剰な水を除去する。
次いでカテーテルを４５℃でさらに４時間乾燥させる。
【００７３】
本発明のサンプル５．ポリウレタンＣＶＣを、本発明の方法に従い以下のとおり５時間ＣＨＸにより前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）してコーティングした：
処方：
１０ｍｇ／ｍＬのＮａＯＨ
２０ｍｇ／ｍＬのクロルヘキシジン（ＣＨＸ）
１５ｍｇ／ｍＬのミノサイクリン
３０ｍｇ／ｍＬのリファンピン
１５％メタノール（ＭｅｔＯＨ）
８５％酢酸ブチル（ＢＡ）
手順：
＊＊注記−計算はすべて最終容量５０ｍＬの溶液に基づく。
【００７４】
１ｇのＣＨＸを４２．５ｍＬの酢酸ブチルに加える。４５℃で１時間撹拌してＣＨＸを溶解する。４５℃で５時間撹拌してＣＨＸ＋ＢＡ溶液中のカテーテル片をコーティングする。４時間後、以下のとおりＭ／Ｒ溶液の調製を始める。
【００７５】
１ペレットのＮａＯＨ（約１０ｍｇ／ｍＬ）を７．５ｍＬのメタノールに加え、溶解するまで４５℃で撹拌する。溶解したならば、このＮａＯＨ／ＭｅｔＯＨ溶液に、４５℃で１時間にわたり連続的に撹拌しながら０．７５ｇのミノサイクリンを小分けにして加える。この溶液に、４５℃で１５分にわたり連続的に撹拌しながら１．５ｇのリファンピンを小分けにして加える。
【００７６】
ＣＨＸによる５時間のコーティング後、ＣＨＸ＋ＢＡ中のカテーテル片にＭ／ＲのＭｅｔＯＨ溶液を加える。４５℃で連続的に撹拌しながらＭ／Ｒ＋ＣＨＸ溶液中でカテーテルをさらに１時間をインキュベートする。
【００７７】
合計６時間のコーティング時間後、カテーテルを溶液から取り出し、エアフラッシュしてカテーテルのルーメンから過剰なコーティング溶液を除去する。コーティングしたカテーテルを４５℃のインキュベーターで一晩乾燥させる。翌日、カテーテルを脱イオン水で３回激しく洗浄する。ペーパータオルで過剰な水を除去する。
次いでカテーテルを４５℃でさらに４時間乾燥させる。
【００７８】
陽性対照サンプル１〜３および本発明のサンプル１〜５でそれぞれＣＶＣを処理した後、何らかの細菌生物および真菌生物の処理済みＣＶＣへの付着を測定するため試験を行った。各群から６つのカテーテル片（ｎ＝６）について試験した。これらの試験は、以下の刊行物に記載されているバイオフィルム付着プロトコルから改変した：Ｋｕｈｎ  ＤＭ，Ｇｅｏｒｇｅ  Ｔ，Ｃｈａｎｄｒａ  Ｊ，Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ  ＰＫ，ａｎｄ  Ｇｈａｎｎｏｕｍ  ＭＡ．「Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｎｄｉｄａ  Ｂｉｏｆｉｌｍｓ：Ｕｎｉｑｕｅ  Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ  Ｂ  Ｌｉｐｉｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎｓ」，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，４６，１７７３−８０（２００２）；Ｈａｎｎａ  Ｈ，Ｂａｈｎａ  Ｐ，Ｒｅｉｔｚｅｌ  Ｒ，Ｄｖｏｒａｋ  Ｔ，Ｃｈａｉｂａｎ  Ｇ，Ｈａｃｈｅｍ  Ｒ，Ｒａａｄ  Ｉ．「Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｅｆｆｉｃａｃｉｅｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｄｕｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｖｅｎｏｕｓ  ｃａｔｈｅｔｅｒｓ」，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，５０（１０），３２８３−８（２００６）；Ｃｈａｉｂａｎ  Ｇ，Ｈａｎｎａ  Ｈ，Ｄｖｏｒａｋ  Ｔ，Ｒａａｄ  Ｉ．「Ａ  Ｒａｐｉｄ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  Ｉｍｐｒｅｇｎａｔｉｎｇ  Ｅｎｄｏｔｒａｃｈｅａｌ  Ｔｕｂｅｓ  ａｎｄ  Ｕｒｉｎａｒｙ  Ｃａｔｈｅｔｅｒｓ  ｗｉｔｈ  Ｇｅｎｄｉｎｅ：Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ  Ａｇｅｎｔ」，Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，５５（１）：５１−６（２００５）；ａｎｄ  Ｒａａｄ  Ｉ，Ｒｅｉｔｚｅｌ  Ｒ，Ｊｉａｎｇ  Ｙ，Ｃｈｅｍａｌｙ  ＲＦ，Ｄｖｏｒａｋ  Ｔ，Ｈａｃｈｅｍ  Ｒ．「Ａｎｔｉ−ａｄｈｅｒｅｎｃｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｄｕｒａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ−ｃｏａｔｅｄ  Ｃａｔｈｅｔｅｒｓ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｂａｃｔｅｒｉａ」，Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，６２（４）：７４６−５０（２００８）。上記のすべてを参照によって本明細書に援用する。
【００７９】
以下の試験では、７本のＦｒｅｎｃｈ  ＣＶＣ（Ｃｏｏｋ  Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｂｌｏｏｍｉｎｇｔｏｎ，ＩＮ）を１ｃｍ片に切断し、上記のように処理した。最初に各片を、１ｍｌのドナー血漿を含む２４ウェル組織培養プレートの各ウェルに加え、２４時間３７℃でインキュベートした。翌日、血漿を除去して捨て、Ｍｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎブロスを用いて最終濃度５．５×１０５細胞／ｍｌとして１ｍｌの細菌または真菌（Ｃａｎｄｉｄａ）溶液と交換した。このプレートを２４時間３７℃でインキュベートした。次いで培地を除去して捨てた。培地を１ｍｌの０．９％無菌食塩水溶液と交換し、各片を振盪させながら３７℃で３０分間洗浄した。次いでカテーテル片を無菌木製棒で慎重に取り出し、５ｍｌの０．９％食塩水溶液を含む別の無菌密閉管に入れ、カテーテル片を１５分間超音波で分解した。超音波処理後、チューブをボルテックスし、１００μｌの微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）溶液（１：５０希釈）をＴＳＡ＋５％ヒツジ血液プレートに広げて細菌サンプルについて試験するか、あるいはＳａｂａｒｏｕｄ  Ｄｅｘｔｒｏｓｅ  Ａｇａｒ（ＳＡＢ）プレートに広げて酵母について試験した。各プレートを反転して３７℃で２４時間インキュベートした。次いで２４時間後コロニーをカウントした。１００コロニーを超える生のコロニー数があれば、＞１００と見なした。希釈倍率（１：５０）を考慮に入れ、最終的なカウント数をカテーテル片当たりのコロニー形成単位と定義した。
【００８０】
図１〜図４に試験結果をグラフで示す。図１に示すように、クロルヘキシジン溶液で少なくとも１時間前処理し、その後ミノサイクリンおよびリファンピンを加えたカテーテルは、カテーテル表面へのＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの付着から防止および保護を行う際、非コーティング対照カテーテルのサンプルだけでなく、それぞれＣＨＸを単独でコーティングした、Ｍ／Ｒを単独でコーティングした、さらにＭ／Ｒ＋ＣＨＸを同時に一緒に混合してコーティングした陽性対照サンプルより非常に効果的である。ＣＨＸで少なくとも２時間前処理した本発明のサンプルは、対照サンプルより著しく効果的であった（Ｐ≦０．０２）。Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓは、大部分のカテーテル関連カンジダ血症に関係している。
【００８１】
図２に示すように、クロルヘキシジンで少なくとも１時間前処理し、その後をミノサイクリンおよびリファンピンを加えたカテーテルは、カテーテル表面へのＣａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉの付着から防止および保護を行う際、非コーティング対照サンプルだけでなく、それぞれＣＨＸを単独でコーティングした、Ｍ／Ｒを単独でコーティングした陽性対照サンプルより著しく効果的であった（Ｐ≦０．０１）。Ｍ／ＲとＣＨＸとを一緒に混合した陽性対照サンプル（陽性対照３）と比較すると、劇的とは言えないものの、それでも顕著な結果が得られた。
【００８２】
図３に示すように、ＣＨＸで少なくとも１時間前飽和させた本発明のサンプルは、メチシリン耐性Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）の付着からカテーテルを完全に防止および保護する際に、Ｍ／Ｒを単独でコーティングしたカテーテルとは同等またはそれ以上に、ＣＨＸを単独でコーティングしたカテーテルまたは非コーティングカテーテルとは著しく優れて非常に効果的であった。ＣＨＸで少なくとも２時間前処理（ｐｒｅｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）した本発明のサンプルについては、対照サンプルよりより著しく効果的であった（Ｐ≦０．０１）。ＣＨＸで２時間前処理したカテーテル間には、それぞれ３時間、４時間および５時間前処理したカテーテルと比較して測定可能な差はまったくないようであった。
【００８３】
同様に、上記の図４は、ＣＨＸで少なくとも１時間の期間前処理した本発明のサンプルが、耐性Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの付着から防止および保護を行う際、非コーティングカテーテル、ＣＨＸを単独でコーティングした、Ｍ／Ｒを単独でコーティングした、またはさらにＭ／Ｒ＋ＣＨＸを同時に一緒に混合してコーティングしたカテーテルより優れて非常に効果的であったことを示す。耐性Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの付着から防止および保護を行う際、ＣＨＸによる前処理を少なくとも２時間行うと、カテーテルは非常に効果的であることが明らかになった（Ｐ≦０．０１）。図４では、前処理期間が４時間を超える場合、５時間でほぼ完全に予防されることが観察される。
【００８４】
前述したように、医療装置を加熱下、消毒薬化合物（この場合、ＣＨＸ）で前処理し、その後装置を前述のような抗生物質（この場合、Ｍ／Ｒ）成分に曝露することにより、医療装置に広域スペクトルの抗菌保護作用が付与される。この広域スペクトル保護作用は、Ｍ／Ｒを単独で、ＣＨＸを単独で、またはさらにＭ／Ｒ＋ＣＨＸを同時に一緒に混合してコーティングしたカテーテルより優れてＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｋｒｕｓｅｉおよびａｌｂｉｃａｎｓなどの耐性細菌および真菌の付着を防止することができる。さらに、この新規な前処理カテーテルは、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）（の付着）に対する優れた抗菌活性を維持し、ミノサイクリン／リファンピンまたはクロルヘキシジンで単独処理したカテーテルより改善を示した。
【００８５】
ＣＨＸ単独では、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ種およびＣａｎｄｉｄａ種に対するそれ自身の活性はほとんどない。さらに、ＣＨＸをミノサイクリンおよびリファンピンと単純に同時に混合し、その組み合わせた（ＣＨＸ＋Ｍ／Ｒ）溶液でカテーテルを処理する場合、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃ．ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ、Ｓ．ａｕｒｅｕｓまたはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対する活性がほとんどないことが示されると考えられる。Ｍ／Ｒコーティングしたカテーテルは、カテーテル関連血流感染（ＣＲＢＳＩ）を引き起こし得る最も病原性の強い生物、すなわちＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａおよびＣａｎｄｉｄａに対する活性がない。本前処理法によりカテーテルにＣＨＸを含浸させるまたは他の方法でコーティングし、続いてカテーテルをミノサイクリン／リファンピンでコーティングすれば、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、およびＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのグラム陰性菌、ならびに真菌（Ｃａｎｄｉｄａなど）などＣＲＢＳＩを引き起こし得る微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）病原体に対して広域スペクトル活性を持つ抗菌カテーテルが得られる。
【００８６】
実施例２
この例では、シリコーン乳房インプラント片の比較試験を行った。使用に際しては、微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）バイオフィルムの形成リスクを抑えるため、手術の直前に手術室でコーティング溶液をインプラントに適用してもよい。前述のとおり、抗菌物質を含浸させた医療装置は、感染症の発生率を顕著に抑制および防止することが明らかになった。インプラントによる豊胸または乳房再建はＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓのコロニー形成と関連があり、多くの場合、被膜拘縮が起こる。
【００８７】
コーティングの手順：下記に記載する比較試験では、シリコーン乳房インプラントシェルの片を以下の要領でコーティングした：
陽性対照サンプル：
３００ｍｇのミノサイクリンおよび６００ｍｇのリファンピンを２０ｍＬのＭｅｔＯＨに溶解させた。各片をＭ／Ｒ溶液で６０分間コーティングした。次いで各片を周囲条件で１０分間乾燥させた。
【００８８】
試験用溶液中の薬剤の濃度は、ミノサイクリン１５ｍｇ／ｍＬおよびリファンピン３０ｍｇ／ｍＬであった
本発明のサンプル：
４００ｍｇのクロルヘキシジンジアセテート（ＣＨＤ）を１０ｍＬのメタノール（ＭｅｔＯＨ）に溶解させた。各片をＣＨＤ溶液で３０分間コーティングした。同時に、３００ｍｇのミノサイクリンおよび６００ｍｇのリファンピンを別の１０ｍＬのＭｅｔＯＨに溶解させた。最初の３０分のコーティング後、ＣＨＤ溶液にＭ／Ｒ溶液を加え、各片をさらに３０分間コーティングした。次いで各片を周囲条件で１０分間乾燥させた。
【００８９】
前飽和および最終溶液中の薬剤の濃度は以下のとおりであった：
Ａ．前飽和−ＭｅｔＯＨ中にＣＨＤ４０ｍｇ／ｍＬ
Ｂ．最終溶液−ＣＨＤ２０ｍｇ／ｍＬ、ミノサイクリン１５ｍｇ／ｍＬ、およびリファンピン３０ｍｇ／ｍＬ
Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｋｕｈｎ法プロトコルに従い抗菌有効性を判定した。試験は３回ずつ行った。コーティングしたカテーテル片を、様々な生物を含むＭｕｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎブロスを用いて５．０×１０５細胞と２４時間インキュベートし、さらに２４時間インキュベートした。インキュベーション後、細菌接種材料を捨てて、１ｍＬの０．９％無菌生理食塩水中で３０分間撹拌しながら各片を洗浄した。次いで各片を無菌の棒で取り出し、５ｍＬの０．９％無菌生理食塩水に浸し、１５分間超音波で分解した。超音波処理後、各サンプルを５秒間ボルテックスし、各片の１００μＬの液体を段階希釈し、Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ  Ｓｏｙ  Ａｇａｒ＋５％ヒツジ血液（細菌用）またはＳａｂｏｕｒａｕｄ  Ｄｅｘｔｒｏｓｅ  Ａｇａｒ（酵母用）に広げて定量培養した。次いでプレートを反転して３７Ｃ°で２４時間インキュベートし、増殖したコロニーをカウントした。試験した個別の生物は、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ（ＭＲＳＥ  Ｆｒｉｅｔａｓ）を含んでいた。
【００９０】
この試験結果を下記表１および図５に示す。
【００９１】
【表１】
2012520745.tif 000003
前述したように、インプラント片を消毒薬化合物（この場合、ＣＨＤ）で前処理し、その後処理済みの各片を抗生物質（この場合、Ｍ／Ｒ）に曝露すると、非コーティング対照およびＭ／Ｒ溶液に浸した陽性対照と比較して、各片に付与される抗菌保護作用が増強された（図５）。
【００９２】
したがって、前述の詳細な説明は限定としてではなく例示として見なされるものであり、かつ本発明の精神および範囲を規定することを意図するものは、あらゆる等価物を含む以下の特許請求の範囲であることが理解されることを意図している。
【図１】
2012520745.tif 000004
【図２】
2012520745.tif 000005
【図３】
2012520745.tif 000006
【図４】
2012520745.tif 000007
【図５】
2012520745.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成23年11月22日(2011.11.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
以下に限定されるものではないが、耐性ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、ＭＤＲグラム陰性菌（ＭＤＲ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなど）および耐性Ｃａｎｄｉｄａ（たとえばＣ．ｋｒｕｓｅｉ）などに対して有効な広域スペクトル抗感染保護作用を医療装置に与える方法がなお求められている。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
医療装置に抗菌活性を付与するための方法であって：
消毒薬を含む第１の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記医療装置の少なくとも一部分を、前記第１の抗菌成分が前記医療装置の部分をコーティングするか、または前記医療装置の部分に含浸されるような条件下で、前記第１の抗菌成分の前記溶液と接触させること；
少なくとも１つの抗生物質を含む第２の抗菌成分の溶液を準備すること；ならびに
前記医療装置の前記部分を、前記第２の抗菌成分が、コーティングしたまたは含浸された前記第１の抗菌成分を有する前記医療装置の前記部分にコーティングを形成するような条件下で、前記第２の抗菌成分の前記溶液と接触させること
を含み、前記第１および第２の抗菌成分はそれぞれ、前記医療装置への細菌生物および真菌生物の付着を阻害するのに効果的な濃度で前記医療装置にコーティングされる
方法。
（項目２）
前記第２の抗菌成分の前記溶液は前記第１の接触ステップ後に前記第１の抗菌成分の前記溶液と組み合わされ、前記第２の接触ステップは前記組み合わされた溶液を用いて行われる、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記消毒薬はグアニジウム化合物を含む、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含む、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記抗生物質はテトラサイクリンおよびリファマイシンのうちの少なくとも１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記抗生物質はテトラサイクリンとリファマイシンとの混合物を含む、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含み、前記少なくとも１つの抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、項目３に記載の方法。
（項目８）
前記第２の抗菌成分の前記溶液はアルカリ化剤を含む、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記第１の抗菌成分の前記溶液は浸透剤を含む、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記溶液のうちの少なくとも１つは前記組み合わせステップの前に加熱される、項目２に記載の方法。
（項目１１）
前記溶液はそれぞれ前記組み合わせステップの前に加熱される、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記少なくとも１つの溶液は約３０℃〜７０℃の間の温度に加熱される、項目１０に記載の方法。
（項目１３）
前記消毒薬はクロルヘキシジンを含み、前記少なくとも１つの抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも３０分間接触され、前記接触は約３０℃〜７０℃の間の温度で行われる、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも１時間接触される、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記医療装置は前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも３時間接触される、項目１４に記載の方法。
（項目１７）
広域スペクトル抗菌活性を非金属医療装置に付与するための方法であって：
クロルヘキシジンを含む第１の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記非金属医療装置の少なくとも一部分を、前記第１の抗菌成分が前記医療装置の部分に含浸されるような方法で、前記第１の抗菌成分の前記溶液と少なくとも約１時間の期間接触させること；
ミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む第２の抗菌成分の溶液を準備すること；
前記第２の抗菌成分の前記溶液を前記第１の抗菌成分の前記溶液と組み合わせること；ならびに
コーティングされた前記非金属医療装置の前記含浸された部分を、前記第２の抗菌成分が前記医療装置の前記含浸された部分にコーティングを形成するように、前記組み合わせた溶液と接触させることを含み、前記抗菌成分は前記医療装置への細菌および／または真菌生物の付着を阻害するのに効果的な濃度で前記医療装置に適用される、
方法。
（項目１８）
医療装置であって：
支持体であって、前記支持体に適用される第１の抗菌成分および第２の抗菌成分を有し、前記第１の抗菌成分は前記支持体にコーティングされるか、または含浸され、前記第２の抗菌成分は前記支持体および前記第１の抗菌成分にコーティングされ、前記第１の抗菌成分は消毒薬を含み、前記第２の抗菌成分は少なくとも１つの抗生物質を含む、支持体
を含む、医療装置。
（項目１９）
前記消毒薬はグアニジウム化合物を含み、前記抗生物質はテトラサイクリンおよびリファマイシンのうちの少なくとも１つを含む、項目１８に記載の医療装置。
（項目２０）
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンを含み、前記抗生物質はミノサイクリンとリファンピンとの混合物を含む、項目１９に記載の医療装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
表面から微生物を低減するための方法であって、前記方法は：
ａ）前記表面の少なくとも一部分を、グアニジウム化合物を含む第１の溶液と接触させること；および
ｂ）次に、前記表面の前記部分を、抗生物質を含む第２の溶液と、前記表面の少なくとも一部を前記抗生物質でコーティングするかまたは含浸させるのに十分な条件で、接触させること
を含む、方法。
【請求項２】
前記グアニジウム化合物は、クロルヘキシジン、アレキシジンおよびヘキサミジンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗生物質はリファンピン、テトラサイクリン、およびミノサイクリンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第２の溶液は、第２の抗生物質を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記第２の溶液は、リファンピンおよびミノサイクリンを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
工程（ａ）または（ｂ）における接触は、前記第１の溶液または前記第２の溶液を約３０℃〜７０℃の間の温度に加熱することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
工程（ａ）および（ｂ）における接触は、前記第１の溶液および前記第２の溶液を約３０℃〜７０℃の間の温度に加熱することを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
工程（ｂ）の後に、前記表面を水で洗浄することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
工程（ｂ）の後に、前記表面を乾燥または硬化させることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記表面は医療装置上にある、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記医療装置は、非金属医療装置である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
工程（ｂ）は、前記抗生物質を前記第１の溶液に加えて、前記第２の溶液を形成することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ａ）は、少なくとも１時間の期間、前記第１の溶液を前記表面へ接触させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
工程（ａ）は、少なくとも３時間の期間、前記第１の溶液を前記表面へ接触させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
医療装置であって、前記医療装置の表面の少なくとも一部分は、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法により、グアニジウム化合物および抗生物質でコーティングされるかまたは含浸されている、医療装置。
【請求項１７】
前記医療装置は、非金属医療装置である、請求項１６に記載の医療装置。
【請求項１８】
前記グアニジウム化合物はクロルヘキシジンであり；そして前記抗生物質はリファンピンおよびミノサイクリンを含む、請求項１６に記載の医療装置。
【国際調査報告】
2012520745.tif 000009
2012520745.tif 000010