【手続補正書】
【提出日】令和2年8月12日(2020.8.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非コードＲＮＡ分子をコードする転写可能なＤＮＡ配列を含む組換えＤＮＡコンストラクトであって、前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質が、配列番号９、配列番号１２、配列番号１５、配列番号３０、または配列番号３３に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記転写可能なＤＮＡ配列が、植物発現性プロモーターに機能可能なように連結される、前記組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項２】
前記非コードＲＮＡ分子が、配列番号７、配列番号８、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１４、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３１、または配列番号３２の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含む、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項３】
前記非コードＲＮＡ分子が含む配列が、（ｉ）単子葉もしくは穀類の植物もしくは植物細胞の内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有し、前記内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質が、配列番号９に対して少なくとも８０％の同一性を有し、及び／または（ｉｉ）単子葉もしくは穀類の植物もしくは植物細胞の内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有し、前記内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質が、配列番号１５に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項４】
前記非コードＲＮＡ分子が含む配列が、（ｉ）配列番号７もしくは配列番号８の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有し、及び／または（ｉｉ）配列番号１３もしくは配列番号１４の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有する、請求項３に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項５】
前記植物発現性プロモーターが、維管束プロモーターである、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項６】
前記維管束プロモーターが、下記のもののうちの１つを含む、請求項５に記載の組換えＤＮＡコンストラクト：スクロース合成酵素プロモーター、スクローストランスポータープロモーター、Ｓｈ１プロモーター、ツユクサ黄斑ウイルス（ＣｏＹＭＶ）プロモーター、コムギ矮化ジェミニウイルス（ＷＤＶ）長鎖遺伝子間領域（ＬＩＲ）プロモーター、トウモロコシ縞葉枯病ジェミニウイルス（ＭＳＶ）コートタンパク質（ＣＰ）プロモーター、イネ黄色条斑１（ＹＳ１）様プロモーター、またはイネ黄色条斑２（ＯｓＹＳＬ２）プロモーター。
【請求項７】
前記植物発現性プロモーターが、葉プロモーターである、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項８】
前記葉プロモーターが、下記のもののうちの１つを含む、請求項７に記載の組換えＤＮＡコンストラクト：ＲｕＢｉｓＣＯプロモーター、ＰＰＤＫプロモーター、ＦＤＡプロモーター、Ｎａｄｈ−Ｇｏｇａｔプロモーター、クロロフィルａ／ｂ結合タンパク質遺伝子プロモーター、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ（ＰＥＰＣ）プロモーター、またはＭｙｂ遺伝子プロモーター。
【請求項９】
前記植物発現性プロモーターが、構成的プロモーターである、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１０】
前記構成的プロモーターが、アクチンプロモーター、ＣａＭＶ３５ＳプロモーターもしくはＣａＭＶ１９Ｓプロモーター、植物ユビキチンプロモーター、植物Ｇｏｓ２プロモーター、ＦＭＶプロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＭＭＶプロモーター、ＰＣＬＳＶプロモーター、Ｅｍｕプロモーター、チューブリンプロモーター、ノパリン合成酵素プロモーター、オクトピン合成酵素プロモーター、マンノピン合成酵素プロモーター、またはトウモロコシアルコール脱水素酵素、あるいはその機能性部分からなる群から選択される、請求項９に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１１】
前記転写可能なＤＮＡ配列がコードする前記非コードＲＮＡ分子が、植物細胞においてプロセシングまたは切断を受けることで成熟ｍｉＲＮＡまたは成熟ｓｉＲＮＡを形成する前駆体ｍｉＲＮＡまたは前駆体ｓｉＲＮＡである、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１２】
前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡ３オキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡ３オキシダーゼタンパク質が、配列番号３０または配列番号３３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１３】
前記非コードＲＮＡ分子が、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３１、または配列番号３２の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有する配列を含む、請求項１２に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１４】
前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質が、配列番号１２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１５】
前記非コードＲＮＡ分子が、配列番号１０または配列番号１１の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも９０％の相補性を有する配列を含む、請求項１４に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１６】
前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡ２０オキシダーゼタンパク質が、配列番号３、配列番号６、配列番号９、配列番号１２、配列番号１５、配列番号１８、配列番号２１、配列番号２４、配列番号２７、配列番号３０、及び配列番号３３のうちの１つまたは複数に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１７】
前記非コードＲＮＡ分子が、配列番号１、配列番号２、配列番号４、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３１、及び配列番号３２のうちの１つまたは複数の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含む、請求項１６に記載の組換えＤＮＡコンストラクト。
【請求項１８】
非コードＲＮＡ分子をコードする転写可能なＤＮＡ配列を含む組換えＤＮＡコンストラクトであって、前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質が、配列番号９、配列番号１２、配列番号１５、配列番号３０、または配列番号３３に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記転写可能なＤＮＡ配列が、植物発現性プロモーターに機能可能なように連結される、前記組換えＤＮＡコンストラクトを含む、穀類のトランスジェニック植物、トランスジェニック植物部分、またはトランスジェニック植物細胞。
【請求項１９】
前記トランスジェニック植物が、対照植物と比較して下記の形質のうちの１つまたは複数を有する、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物：草高の低下、柄直径／茎直径の増加、耐倒伏性の改善、茎の折損の減少、根の深化、葉面積の増加、樹冠閉鎖の早期化、気孔コンダクタンスの上昇、雌穂高の低下、葉の水分含量の増加、乾燥耐性の改善、窒素利用効率の改善、通常条件下または窒素もしくは水を制限するストレス条件下での葉におけるアントシアニンの含量及び面積の減少、雌穂重量の増加、収穫指数の増加、収量の増加、種子数の増加、種子重量の増加、及び／または多収性の増加。
【請求項２０】
前記トランスジェニック植物の高さが、野生型対照植物と比較して少なくとも１０％低い、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２１】
前記トランスジェニック植物の１つまたは複数の茎節間の柄直径または茎直径が、野生型対照植物の同一の１つまたは複数の節間の柄直径または茎直径と比較して少なくとも５％大きい、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２２】
前記トランスジェニック穀類植物が、トウモロコシ植物であり、前記トランスジェニックトウモロコシ植物の雌穂の下の第１の節間、第２の節間、第３の節間、及び／または第４の節間のうちの１つまたは複数の柄直径または茎直径が、野生型対照植物の同一の節間と比較して少なくとも５％大きい、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２３】
前記トランスジェニック植物の茎または柄の少なくとも１つの節間組織における１つまたは複数の活性型ＧＡのレベルが、野生型対照植物の同一の節間組織と比較して低い、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２４】
前記トランスジェニック植物の茎または柄の少なくとも１つの節間組織における１つまたは複数の活性型ＧＡのレベルが、野生型対照植物の同一の節間組織と比較して少なくとも５％低い、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２５】
前記トランスジェニック植物が、少なくとも１つの雌性器官または雌穂に顕著な異型を全く有さない、請求項１８に記載のトランスジェニック穀類植物。
【請求項２６】
トランスジェニック穀類植物の作出方法であって、（ａ）非コードＲＮＡ分子をコードする転写可能なＤＮＡ配列を含む組換えＤＮＡコンストラクトであって、前記非コードＲＮＡ分子が、単子葉または穀類の植物または植物細胞の内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質をコードするｍＲＮＡ分子の少なくとも１９の連続ヌクレオチドに対して少なくとも８０％の相補性を有する配列を含み、前記内在性のＧＡオキシダーゼタンパク質が、配列番号９、配列番号１２、配列番号１５、配列番号３０、または配列番号３３に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記転写可能なＤＮＡ配列が、植物発現性プロモーターに機能可能なように連結される、前記組換えＤＮＡコンストラクトでの、外植体の少なくとも１つの細胞の形質転換と、（ｂ）前記形質転換された外植体からの、前記トランスジェニック穀類植物の再生または発育と、を含む、前記方法。
【請求項２７】
前記穀類植物が、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ介在性の形質転換、または微粒子銃を介して形質転換される、請求項２６に記載の方法。