【手続補正書】
【提出日】令和2年8月20日(2020.8.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１８の参照ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）血清型Ｂ株４重鎖の受容体結合ドメイン（Ｂ４−ＨＣ）と比較して、アミノ酸配列改変を含む改変Ｂ４−ＨＣを含むポリペプチドであって、前記改変が、前記参照Ｂ４−ＨＣと比較して、前記改変Ｂ４−ＨＣのヒトＳｙｔＩＩへの増強した結合をもたらす、前記ポリペプチド。
【請求項２】
ａ）プロテアーゼドメインと；
ｂ）プロテアーゼ切断部位と；
ｃ）移行ドメインと；
ｄ）配列番号１８の参照ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）血清型Ｂ株４重鎖の受容体結合ドメイン（Ｂ４−ＨＣ）と比較して、アミノ酸配列改変を含む改変Ｂ４−ＨＣであって、前記改変が、前記参照Ｂ４−ＨＣと比較して、前記改変Ｂ４−ＨＣのヒトＳｙｔＩＩへの増強した結合をもたらす、前記改変Ｂ４−ＨＣと
を含む、ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド。
【請求項３】
第２部分に連結された、配列番号１８の参照ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）血清型Ｂ株４重鎖の受容体結合ドメイン（Ｂ４−ＨＣ）と比較して、アミノ酸配列改変を含む改変Ｂ４−ＨＣである第１部分を含む、キメラ分子であって、前記改変が、前記参照Ｂ４−ＨＣと比較して、前記改変Ｂ４−ＨＣのヒトＳｙｔＩＩへの増強した結合をもたらす、前記キメラ分子。
【請求項４】
前記改変が、置換変異Ｖ１１１３Ｋ、Ｓ１１１７Ｐ、Ｓ１１９６Ａ及びＩ１１９７Ｐを含む、請求項１に記載のポリペプチド、請求項２に記載のＢｏＮＴポリペプチド、または請求項３に記載のキメラ分子。
【請求項５】
i) 前記改変が、Ｑ１１９１Ｃ、Ｑ１１９１Ｖ、Ｑ１１９１Ｌ、Ｑ１１９１Ｙ、Ｑ１１９１Ｍ、Ｙ１１９９Ｗ、Ｙ１１９９Ｅ、Ｙ１１９９Ｈ、Ｗ１１７８Ｙ、Ｗ１１７８Ｑ、Ｗ１１７８Ａ、Ｗ１１７８Ｓ、Ｙ１１８３Ｃ、Ｙ１１８３Ｐ及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、１つ以上の置換変異をさらに含む、または
ii) 前記改変が、Ｑ１１９１Ｃ、Ｑ１１９１Ｖ、Ｑ１１９１Ｌ、Ｑ１１９１Ｙ、Ｑ１１９１Ｍ、Ｙ１１９９Ｗ、Ｙ１１９９Ｅ、Ｙ１１９９Ｈ、Ｗ１１７８Ｙ、Ｗ１１７８Ｑ、Ｗ１１７８Ａ、Ｗ１１７８Ｓ、Ｙ１１８３Ｃ及びＹ１１８３Ｐからなる群より選択される、２つの置換変異を含む、
請求項４に記載のポリペプチド、ＢｏＮＴポリペプチド、またはキメラ分子。
【請求項６】
前記改変が以下をさらに含む、請求項４に記載のポリペプチド、ＢｏＮＴポリペプチド、またはキメラ分子：
i) ２つ以上の置換変異であって、前記置換変異の１つが、Ｑ１１９１Ｍ、Ｑ１１９１Ｃ、Ｑ１１９１Ｖ、Ｑ１１９１Ｌ及びＱ１１９１Ｙからなる群より選択される前記置換変異、または
ii) ２つ以上の置換変異であって、前記置換変異の１つが、Ｙ１１９９Ｗ、Ｙ１１９９Ｅ、Ｙ１１９９Ｈ、Ｗ１１７８Ｙ、Ｗ１１７８Ｑ、Ｗ１１７８Ａ、Ｗ１１７８Ｓ、Ｙ１１８３Ｃ、Ｙ１１８３Ｐ、Ｙ１１９９ＦまたはＹ１１９９Ｌに対応する前記置換変異、または
iii) Ｑ１１９１Ｍ及びＷ１１７８Ｑ、Ｑ１１９１Ｃ及びＷ１１７８Ｑ、Ｑ１１９１Ｖ及びＷ１１７８Ｑ、Ｑ１１９１Ｌ及びＷ１１７８Ｑ、Ｑ１１９１Ｙ及びＷ１１７８Ｑ、Ｑ１１９１Ｍ及びＹ１１８３Ｐ、Ｑ１１９１Ｍ及びＹ１１８３Ｃ、Ｑ１１９１Ｃ及びＹ１１８３Ｐ、Ｑ１１９１Ｃ及びＹ１１８３Ｃ、Ｑ１１９１Ｖ及びＹ１１８３Ｐ、Ｑ１１９１Ｖ及びＹ１１８３Ｃ、Ｑ１１９１Ｌ及びＹ１１８３Ｐ、Ｑ１１９１Ｌ及びＹ１１８３Ｃ、Ｑ１１９１Ｙ及びＹ１１８３Ｐ、Ｑ１１９１Ｙ及びＹ１１８３Ｃ、Ｗ１１７８Ｑ及びＹ１１８３Ｐ、ならびにＷ１１７８Ｑ及びＹ１１８３Ｃに対応する２つの置換変異。
【請求項７】
前記２つの置換変異が以下に対応する、請求項６に記載のポリペプチドまたはＢｏＮＴポリペプチド：
i) Ｑ１１９１Ｍ及びＷ１１７８Ｑ、または
ii) Ｑ１１９１Ｍ及びＷ１１８３Ｐ、または
iii) Ｑ１１９１Ｍ及びＷ１１８３Ｃ。
【請求項８】
i) 前記改変が３つの置換変異をさらに含む、または
ii) 前記改変が３つの置換変異をさらに含み、かつ、前記３つの置換変異が、Ｑ１１９１、Ｗ１１７８及びＹ１１８３に対応する位置にある、または
iii) 前記改変が３つの置換変異をさらに含み、かつ、前記３つの置換変異が、Ｑ１１９１Ｍ、Ｗ１１７８Ｑ及びＹ１１８３Ｐに対応する、
請求項４に記載のポリペプチド、ＢｏＮＴポリペプチド、またはキメラ分子。
【請求項９】
Ｓ１２０１に対応する位置に置換変異をさらに含む、請求項４に記載の前記ＢｏＮＴポリペプチド。
【請求項１０】
i) 前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される血清型に由来する、または
ii) 前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される血清型に由来し、ここで、前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、血清型Ｂ株１に由来する、または
iii) 前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される血清型に由来し、ここで、前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、血清型Ａ株１に由来する、または
iv) 前記プロテアーゼドメイン、前記移行ドメイン及び前記プロテアーゼ切断部位が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される血清型に由来し、ここで、前記プロテアーゼ切断部位が、血清型Ａ、血清型Ｂに由来する、または血清型Ａ及びＢのキメラ切断部位である、
請求項２または４〜９のいずれか一項に記載のＢｏＮＴポリペプチド。
【請求項１１】
i) 前記第１部分と前記第２部分が共有結合的に連結される、または
ii) 前記第１部分と前記第２部分が非共有結合的に連結される、
請求項３〜６または８のいずれか一項に記載のキメラ分子。
【請求項１２】
i) 前記第２部分が、低分子、核酸、短いポリペプチド、及びタンパク質からなる群より選択される、または
ii) 前記第２部分が生物活性分子であり、任意で前記第２部分が治療用のポリペプチドまたは非ポリペプチド薬物である、
請求項３〜６または８のいずれか一項に記載のキメラ分子。
【請求項１３】
請求項１または４〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項２または４〜８のいずれか一項に記載のＢｏＮＴポリペプチド、もしくは請求項３〜６または８のいずれか一項に記載のキメラ分子をコードする、核酸。
【請求項１４】
請求項１３に記載の核酸を含む、核酸ベクター。
【請求項１５】
請求項１３に記載の核酸を含む、細胞。
【請求項１６】
請求項１または４〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項２または４〜８のいずれか一項に記載のＢｏＮＴポリペプチド、もしくは請求項３〜６または８のいずれか一項に記載のキメラ分子を発現する、細胞。
【請求項１７】
請求項１もしくは４〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項２もしくは４〜１０のいずれか一項に記載のボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、または請求項３〜６、８もしくは１１〜１２のいずれか一項に記載のキメラ分子、または請求項１４に記載の核酸ベクターを含む、薬学的組成物であって、任意で薬学的に許容し得る賦形剤をさらに含む、前記薬学的組成物。
【請求項１８】
請求項１７に記載の薬学的組成物、及び前記薬学的組成物の治療的投与のための説明書を含む、キット。
【請求項１９】
ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチドを産生するための方法であって、前記ＢｏＮＴポリペプチドが産生される条件下で請求項１６に記載の細胞を培養するステップを含む、前記方法。
【請求項２０】
以下のステップ：
前記培養物から前記ＢｏＮＴポリペプチドを回収すること、
前記ＢｏＮＴポリペプチドを精製すること、
前記ＢｏＮＴポリペプチドを活性化すること、及び／または
前記ＢｏＮＴポリペプチドを製剤化すること
の１つ以上をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
医薬における使用のための、請求項１もしくは４〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項２もしくは４〜１０のいずれか一項に記載のボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、請求項１７に記載の薬学的組成物、または請求項３〜６、８もしくは１１〜１２のいずれか一項に記載のキメラ分子。
【請求項２２】
望ましくないニューロン活動と関連した病態の治療における使用のための、請求項１もしくは４〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項２もしくは４〜１０のいずれか一項に記載のボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、請求項１７に記載の薬学的組成物、または請求項３〜６、８もしくは１１〜１２のいずれか一項に記載のキメラ分子。
【請求項２３】
前記病態が、痙攣性発声障害、痙性斜頸、喉頭ジストニア、口下顎発声障害、舌ジストニア、頸部ジストニア、上肢局所性ジストニア、眼瞼痙攣、斜視、片側顔面痙攣、眼瞼疾患、脳性麻痺、局所性痙縮及び他の発声障害、痙攣性大腸炎、神経因性膀胱、アニスムス、肢痙縮、チック、振戦、歯ぎしり、裂肛、アカラシア、嚥下障害及び他の筋緊張障害及び筋肉群の不随意運動を特徴とする他の障害、流涙、多汗症、唾液分泌過多、消化管分泌過多、分泌障害、筋痙攣による疼痛、頭痛、片頭痛、ならびに皮膚科学的または審美的／美容的な病態からなる群より選択される、請求項２２に記載のポリペプチド、ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、薬学的組成物、またはキメラ分子。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
好ましくは、対象は哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ、またはウシであってよいが、これらの例に限定されない。ヒト以外の哺乳動物は、望ましくないニューロン活動と関連した障害の動物モデルを表す対象として有利に使用することができる。加えて、本明細書に記載される方法及び組成物は、家畜及び／またはペットを治療するために用いることもできる。
[本発明1001]
ａ）プロテアーゼドメインと；
ｂ）プロテアーゼ切断部位と；
ｃ）移行ドメインと；
ｄ）ヒトＳｙｔＩＩに結合するボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）と
を含む、ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド。
[本発明1002]
前記改変受容体結合ドメインが、置換変異Ｖ1113Ｋ、Ｓ1117Ｐ、Ｓ1196Ａ及びＩ1197Ｐを含む、本発明1001のＢｏＮＴポリペプチド。
[本発明1003]
Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ、Ｑ1191Ｙ、Ｑ1191Ｍ、Ｙ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ、Ｙ1183Ｐ及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、血清型Ｂ株4における置換変異に対応する1つ以上の置換変異をさらに含む、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1004]
前記改変（Ｂ4−ＨＣ）が、Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ、Ｑ1191Ｙ、Ｑ1191Ｍ、Ｙ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ及びＹ1183Ｐからなる群より選択される、血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つの置換変異を含む、本発明1003のポリペプチド。
[本発明1005]
血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つ以上の置換変異をさらに含み、前記置換変異の1つが、Ｑ1191Ｍ、Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ及びＱ1191Ｙからなる群より選択される、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）を含む、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1006]
血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つ以上の置換変異をさらに含み、前記置換変異の1つが、血清型Ｂ株4におけるＹ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ、Ｙ1183Ｐ、Ｙ1199ＦまたはＹ1199Ｌに対応する、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1007]
血清型Ｂ株4における、Ｑ1191Ｍ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｃ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｖ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｌ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｙ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｃ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐ、ならびにＷ1178Ｑ及びＹ1183Ｃに対応する置換変異から選択される2つの置換変異をさらに含む、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1008]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1178Ｑに対応する、本発明1005のポリペプチド。
[本発明1009]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1183Ｐに対応する、本発明1005のポリペプチド。
[本発明1010]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1183Ｃに対応する、本発明1005のポリペプチド。
[本発明1011]
前記改変（Ｂ4−ＨＣ）が、3つの置換変異をさらに含む、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1012]
前記3つのさらなる置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191、Ｗ1178及びＹ1183に対応する位置にある、本発明1011のポリペプチド。
[本発明1013]
前記3つのさらなる置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191Ｍ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐに対応する、本発明1011のポリペプチド。
[本発明1014]
本発明1001〜1013のいずれかのＢｏＮＴポリペプチドをコードする、核酸。
[本発明1015]
本発明1014の核酸を含む、核酸ベクター。
[本発明1016]
本発明1014の核酸を含む、細胞。
[本発明1017]
本発明1001〜1013のいずれかのＢｏＮＴポリペプチドを発現する、細胞。
[本発明1018]
ａ）プロテアーゼドメインと；
ｂ）プロテアーゼ切断部位と；
ｃ）移行ドメインと；
ｄ）置換変異Ｖ1113Ｋ、Ｓ1117Ｐ、Ｓ1196Ａ及びＩ1197Ｐを含み、かつ、血清型Ｂ株4のＳ1201に対応する位置に置換変異をさらに含む、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）と
を含む、ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド。
[本発明1019]
前記プロテアーゼドメイン、移行ドメイン及びプロテアーゼ切断部位が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される血清型に由来する、本発明1001〜1013及び1018のいずれかのＢｏＮＴポリペプチド。
[本発明1020]
前記プロテアーゼドメイン、移行ドメイン及びプロテアーゼ切断部位が、血清型Ｂ株1に由来する、本発明1019のＢｏＮＴポリペプチド。
[本発明1021]
前記プロテアーゼドメイン及び移行ドメインが、血清型Ａ株1に由来する、本発明1019のＢｏＮＴポリペプチド。
[本発明1022]
前記プロテアーゼ切断部位が、血清型Ａ、血清型Ｂに由来する、または血清型Ａ及びＢのキメラ切断部位である、本発明1019のＢｏＮＴポリペプチド。
[本発明1023]
ヒトＳｙｔＩＩに結合するＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4重鎖の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）を含む、ポリペプチド。
[本発明1024]
前記改変受容体結合ドメインが、置換変異Ｖ1113Ｋ、Ｓ1117Ｐ、Ｓ1196Ａ及びＩ1197Ｐを含む、本発明1023のポリペプチド。
[本発明1025]
Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ、Ｑ1191Ｙ、Ｑ1191Ｍ、Ｙ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ、Ｙ1183Ｐ及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、血清型Ｂ株4における置換変異に対応する1つ以上の置換変異をさらに含む、本発明1024のポリペプチド。
[本発明1026]
前記改変（Ｂ4−ＨＣ）が、Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ、Ｑ1191Ｙ、Ｑ1191Ｍ、Ｙ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ及びＹ1183Ｐからなる群より選択される、血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つの置換変異を含む、本発明1025のポリペプチド。
[本発明1027]
血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つ以上の置換変異をさらに含み、前記置換変異の1つが、Ｑ1191Ｍ、Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ及びＱ1191Ｙからなる群より選択される、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）を含む、本発明1024のポリペプチド。
[本発明1028]
血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つ以上の置換変異をさらに含み、前記置換変異の1つが、血清型Ｂ株4におけるＹ1199Ｗ、Ｙ1199Ｅ、Ｙ1199Ｈ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ、Ｙ1183Ｐ、Ｙ1199ＦまたはＹ1199Ｌに対応する、本発明1024のポリペプチド。
[本発明1029]
血清型Ｂ株4における、Ｑ1191Ｍ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｃ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｖ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｌ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｙ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｃ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐ、ならびにＷ1178Ｑ及びＹ1183Ｃに対応する置換変異から選択される2つの置換変異をさらに含む、本発明1024のポリペプチド。
[本発明1030]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1178Ｑに対応する、本発明1027のポリペプチド。
[本発明1031]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1183Ｐに対応する、本発明1027のポリペプチド。
[本発明1032]
前記2つの置換変異が、血清型Ｂ株4におけるＱ1191Ｍ及びＷ1183Ｃに対応する、本発明1027のポリペプチド。
[本発明1033]
前記改変（Ｂ4−ＨＣ）が、3つの置換変異をさらに含む、本発明1024のポリペプチド。
[本発明1034]
前記3つのさらなる置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191、Ｗ1178及びＹ1183に対応する位置にある、本発明1033のポリペプチド。
[本発明1035]
前記3つのさらなる置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191Ｍ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐに対応する、本発明1033のポリペプチド。
[本発明1036]
本発明1022〜1035のいずれかのポリペプチドをコードする、核酸。
[本発明1037]
本発明1036の核酸を含む、核酸ベクター。
[本発明1038]
本発明1036の核酸を含む、細胞。
[本発明1039]
本発明1022〜1035のいずれかのポリペプチドまたはキメラ分子を発現する、細胞。
[本発明1040]
第2部分に連結された、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）である第1部分を含む、キメラ分子であって、前記改変Ｂ4−ＨＣがヒトＳｙｔＩＩに結合する、前記キメラ分子。
[本発明1041]
前記Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）が、置換変異Ｖ1113Ｋ、Ｓ1117Ｐ、Ｓ1196Ａ及びＩ1197Ｐを含む、本発明1040のキメラ分子。
[本発明1042]
前記Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）が、Ｑ1191Ｍ；Ｑ1191Ｃ；Ｑ1191Ｖ；Ｑ1191Ｌ；Ｑ1191Ｙ；Ｗ1178Ｙ；Ｗ1178Ｑ；Ｗ1178Ａ；Ｗ1178Ｓ；Ｙ1183Ｃ；Ｙ1183Ｐ及びこれらの組み合わせからなる群より選択される1つ以上の置換変異をさらに含む、本発明1041のキメラ分子。
[本発明1043]
前記改変Ｂ4−ＨＣが、Ｑ1191Ｍ、Ｑ1191Ｃ、Ｑ1191Ｖ、Ｑ1191Ｌ、Ｑ1191Ｙ、Ｗ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183Ｃ及びＹ1183Ｐからなる群より選択される2つの置換変異を含む、本発明1041のキメラ分子。
[本発明1044]
第2部分に連結された、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ血清型Ｂ株4の改変受容体結合ドメイン（Ｂ4−ＨＣ）である第1部分を含む、キメラ分子であって、前記改変Ｂ4−ＨＣが、血清型Ｂ株4における置換変異に対応する2つ以上の置換変異を含み、かつ、ヒトＳｙｔＩＩに結合し、前記置換変異の1つが、Ｑ1191Ｍ；Ｑ1191Ｃ；Ｑ1191Ｖ；Ｑ1191Ｌ及びＱ1191Ｙからなる群より選択される、前記キメラ分子。
[本発明1045]
前記置換変異の1つが、血清型Ｂ株4におけるＷ1178Ｙ、Ｗ1178Ｑ、Ｗ1178Ａ、Ｗ1178Ｓ、Ｙ1183ＣまたはＹ1183Ｐに対応する、本発明1044のキメラ分子。
[本発明1046]
2つの置換変異が、血清型Ｂ株4における、Ｑ1191Ｍ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｃ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｖ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｌ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｙ及びＷ1178Ｑ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｍ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｃ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｖ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｌ及びＹ1183Ｃ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｐ、Ｑ1191Ｙ及びＹ1183Ｃ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐ、またはＷ1178Ｑ及びＹ1183Ｃに対応する、本発明1044のキメラ分子。
[本発明1047]
前記改変（Ｂ−ＨＣ）が、3つの置換変異を含む、本発明1044のキメラ分子。
[本発明1048]
前記3つの置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191、Ｗ1178及びＹ1183に対応する位置にある、本発明1047のキメラ分子。
[本発明1049]
前記3つの置換変異が、血清型Ｂ株4のＱ1191Ｍ、Ｗ1178Ｑ及びＹ1183Ｐに対応する、本発明1047のキメラ分子。
[本発明1050]
前記第1部分と前記第2部分が共有結合的に連結される、本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。
[本発明1051]
前記第1部分と前記第2部分が非共有結合的に連結される、本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。
[本発明1052]
前記第2部分が、低分子、核酸、短いポリペプチド、及びタンパク質からなる群より選択される、本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。
[本発明1053]
前記第2部分が生物活性分子である、本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。
[本発明1054]
前記第2部分が治療用のポリペプチドまたは非ポリペプチド薬物である、本発明1053のキメラ分子。
[本発明1055]
本発明1040〜1049のいずれかのキメラポリペプチドをコードする、核酸。
[本発明1056]
本発明1055の核酸を含む、核酸ベクター。
[本発明1057]
本発明1055の核酸を含む、細胞。
[本発明1058]
本発明1040〜1049のいずれかのポリペプチドまたはキメラ分子を発現する、細胞。
[本発明1059]
本発明1001〜1013、1018〜1035のいずれかのボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチドもしくはポリペプチド、または本発明1040〜1054のいずれかのキメラ分子、または本発明1015、1037もしくは1056の核酸ベクターを含む、薬学的組成物。
[本発明1060]
薬学的に許容し得る賦形剤をさらに含む、本発明1059の薬学的組成物。
[本発明1061]
本発明1059の薬学的組成物、及び前記薬学的組成物の治療的投与のための説明書を含む、キット。
[本発明1062]
ボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチドを産生するための方法であって、前記ＢｏＮＴポリペプチドが産生される条件下で本発明1017、1039または1058の細胞を培養するステップを含む、前記方法。
[本発明1063]
以下のステップ：
培養物から前記ＢｏＮＴポリペプチドを回収すること、
前記ＢｏＮＴポリペプチドを精製すること、
前記ＢｏＮＴポリペプチドを活性化すること、及び／または
前記ＢｏＮＴポリペプチドを製剤化すること
の1つ以上をさらに含む、本発明1062の方法。
[本発明1064]
望ましくないニューロン活動と関連した病態を治療するための方法であって、治療上有効量の本発明1001〜1013、1018〜1035のいずれかのＢｏＮＴポリペプチド、または本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子を対象に投与し、それにより、望ましくないニューロン活動を示す1つ以上のニューロンと接触させ、それにより、前記病態を治療することを含む、前記方法。
[本発明1065]
前記病態が、痙攣性発声障害、痙性斜頸、喉頭ジストニア、口下顎発声障害、舌ジストニア、頸部ジストニア、上肢局所性ジストニア、眼瞼痙攣、斜視、片側顔面痙攣、眼瞼疾患、脳性麻痺、局所性痙縮及び他の発声障害、痙攣性大腸炎、神経因性膀胱、アニスムス、肢痙縮、チック、振戦、歯ぎしり、裂肛、アカラシア、嚥下障害及び他の筋緊張障害及び筋肉群の不随意運動を特徴とする他の障害、流涙、多汗症、唾液分泌過多、消化管分泌過多、分泌障害、筋痙攣による疼痛、頭痛、片頭痛、ならびに皮膚科学的または審美的／美容的な病態からなる群より選択される、本発明1064の方法。
[本発明1066]
医薬における使用のための、本発明1001〜1013、1018〜1035のいずれかのボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、本発明1059もしくは1060のうち一つの薬学的組成物、または本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。
[本発明1067]
望ましくないニューロン活動と関連した病態の治療における使用のための、本発明1001〜1013、1018〜1035のいずれかのボツリヌス神経毒素（ＢｏＮＴ）ポリペプチド、本発明1059もしくは1060のうち一つの薬学的組成物、または本発明1040〜1049のいずれかのキメラ分子。