【事件の表示】
　特願２０１０−２２２３４８「試料中の測定対象物質の測定方法、測定試薬及び測定値差の改善方法」拒絶査定不服審判事件〔平成２４年　４月１９日出願公開、特開２０１２−　７８１６１〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯 
　本願は、平成２２年９月３０日に出願された特許出願であって、平成２６年１月１７日付けで拒絶理由が通知され、同年４月１８日に意見書及び手続補正書が提出されが、同年５月９日付けで拒絶査定がなされ、これに対し、同年９月２日に拒絶査定不服審判が請求されるとともに，それと同時に手続補正がなされたものである。 
 　  
第２　平成２６年９月２日付けの手続補正についての補正の却下の決定 
 ［補正の却下の決定の結論］  
　平成２６年９月２日付けの手続補正（以下、「本件補正」という。）を却下する。 
 　  
 ［理由］  
１　本件補正について 
（１）本件補正後の請求項１に記載された発明 
　本件補正は、補正前の特許請求の範囲（平成２６年４月１８日付けの手続補正により補正されたもの。）の請求項１を、次のとおりに補正することを含むものである。（下線は補正箇所を示す。） 
「　　【請求項１】
　測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体と、試料とを接触させ、これにより、当該特異的結合物質を固定化した担体の当該特異的結合物質と試料中に含まれていた測定対象物質との特異的結合反応を行わせ、これより生成した当該特異的結合物質を固定化した担体と測定対象物質との複合体凝集物を測定することにより、試料中の測定対象物質を測定する際に、当該特異的結合物質を固定化した担体と試料との接触の前又はこれと同時に、当該特異的結合物質を固定化していない担体と試料とを接触させることを特徴とする、
生体試料と水系溶媒試料との間の
 　 
（２）本件補正の目的について 
　特許請求の範囲の請求項１についての上記の補正は、本件補正前の「試料の種類による測定値差の改善方法」という記載を、試料の種類について限定して、「生体試料と水系溶媒試料との間の測定値差の改善方法」と補正するものであるから、上記補正は、特許法第１７条の２第５項第２号の特許請求の範囲の減縮を目的とするものに該当すると認められる。 
　そこで、本件補正後の請求項１に記載された発明（以下、「補正発明」という。）が特許出願の際に独立して特許を受けることができるものであるか（同法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に適合するか否か）について以下に検討する。
 　  
２　独立特許要件についての検討 
（１）引用刊行物１及びその記載事項  
　原査定の拒絶の理由に引用され、本願出願日前に頒布された特開２００４−３４７６１４号公報（以下、「刊行物１」という。）には、非特異反応抑制剤、免疫測定試薬及び免疫測定方法について、次の事項が図面とともに記載されている。（下線は当審で付与。）  
ア　「【請求項１】
  
被測定物質に対する抗体又は抗原を固定化した担体を用いる免疫測定方法において用いられ
免疫学的に反応しない抗原を固定化した不溶性担体
非特異反応抑制剤
　
イ　「【請求項７】
  被測定物質を含む
試料を請求項１
記載の非特異反応抑制剤によって予め処理した後免疫反応させるか
請求項１
記載の非特異反応抑制剤の存在下で被測定物質を含む試料を免疫反応させる
　
ウ　「【００１６】
  上記
免疫学的に反応しない抗原としては
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
　
エ　「【００７３】
（実施例１）
（１）非特異反応抑制剤用抗体の調製
  正常家兎血清１０ｍＬを２５℃で攪拌しながら硫酸ナトリウム１．８ｇを加えた。・・・上清をＰＢＳで平衡化した陽イオン交換樹脂であるＤＥＡＥ−セルロースカラムに通し、ＩｇＧ画分液を採取した。得られたＩｇＧ画分液を濃縮した。
【００７４】
（２）特異抗体の調製
  ＨＢｓ抗原として、サブタイプＡｄ、タンパク質濃度１ｍｇ／ｍＬ、純度９５％以上（ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ  ＩＮＣ．社製）のものを、兎１匹に対して・・・その後、得られたＩｇＧ画分液を、ＨＢｓ抗原を固定化したアガロースゲルを充填したカラムに通しアフィニティー精製を行い、ＨＢｓ抗原に特異性を持つＩｇＧ成分のみを含む特異抗体液を得た。その後、得られた特異抗体液を濃縮した。
【００７５】
（３）非特異反応抑制剤の懸濁液の作成
  
非特異反応抑制剤用抗体を
ＰＢＳに溶解した液
ポリスチレンラテックス
攪拌
遠心分離することにより洗浄
得られた沈殿物に
ＰＢＳを１０ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、非特異反応抑制剤の懸濁液を調製
　
オ　「【００７６】
（実施例２）
（１）
ＨＢＳ抗体感作ラテックス液の調製
  実施例１（２）の特異抗体を１．０ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解した液１．２５ｍＬに、平均粒径が０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０重量％、積水化学社製）１．０ｍＬとＰＢＳ３．７５ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液にＢＳＡを２．０重量％含有するＰＢＳを６ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した後、１８，０００ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操作は３回行った。えられた
沈殿物に実施例１（３）の非特異反応抑制剤の懸濁液を
ＰＢＳを９９ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、ＨＢｓ抗体感作ラテックス液を調製した。
【００７７】
（２）検体希釈液の調製
  ＰＢＳにポリエチレングリコール（和光純薬製、平均分子量；５０万）を０．３重量％、及びＢＳＡを０．５重量％の濃度になるように溶解した。
【００７８】
（３）
ＨＢｓ抗原測定用試薬
  本実施例のＨＢｓ抗原測定用試薬は、上記（１）項のＨＢｓ抗体感作ラテックス液からなる第１試薬と、上記（２）項の検体希釈液からなる第２試薬とから構成される２試薬系の試薬である。
【００７９】
（４）標準ＨＢｓ抗原液
  ＨＢｓ抗原を０、５０、１００、３００、５００ＩＵ／ｍＬ濃度で含むヒト血清を使用した。
【００８０】
（５）
ＨＢｓ抗原陰性検体及びＨＢｓ抗原陽性検体
  ＨＢＳ抗原陰性検体（健常人血清）１０検体と、ＨＢＳ抗原陽性検体（Ｂ型肝炎感染者血清）５検体を使用した。
【００８１】
（６）
測定方法
  上記（４）の標準ＨＢｓ抗原液２０μＬに、上記（２）項の検体希釈液１５０μＬを混合し、３７℃で適時保持した後、上記（１）のＨＢｓ抗体感作ラテックス液１５０μＬを添加攪拌した。この後、１分後及び５分後の波長７５０ｍｎでの吸光度を測定し、この間の吸光度の変化量を吸光度変化量（ΔＯ．Ｄ．）とした。測定は日立自動分析装置７１５０形を使用した．
  
標準ＨＢＳ抗原液を測定して、予め検量線を作成
検体の吸光度変化量と上記検量線から検体中のＨＢｓ抗原濃度を算出した。
　
カ　「【００８２】
（実施例３）  
ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例２における（１）ＨＢＳ抗体感作ラテックス液の調製及び（２）検体希釈液の調製の項を、次のようにして行ったことを除いては．実施例２と同様にしてＨＢｓ抗原測定用試薬を作成した。
（１）ＨＢｓ抗体感作ラテックス液の調製
  実施例１（２）の特異抗体を１．０ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解した液１．２５ｍＬに、平均粒径が０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０重量％、積水化学社製）１．０ｍＬとＰＢＳを３．７５ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液にＢＳＡを２．０重量％含有するＰＢＳを６ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した後、１８，０００ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操作は３回行った。えられた沈殿物にＢＳＡを０．５重量％含有するＰＢＳを１００ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、ＨＢｓ抗体感作ラテックス液を調製した。
【００８３】
（２）検体希釈液の調製
  ＰＢＳに実施例１の非特異反応抑制剤の懸濁液を１体積％、ポリエチレングリコール（和光純薬製、平均分子量；５０万）を０．３重量％、及びＢＳＡを０．５重量％の濃度になるように溶解した。
　
キ　「【００８４】
（実施例４）  
ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例２における（１）ＨＢｓ抗体感作ラテックス液の調製、（４）標準ＨＢｓ抗原液、及び、（５）検体の項を、次のようにして行ったことを除いては、実施例２と同様にしてＨＢｓ抗原測定用試薬を作成した。
（１）ＨＢｓ抗体感作ラテックス液の調製
  実施例１（２）の特異抗体を１．０ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解した液１．２５ｍＬに、平均粒径が０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０重量％、積水化学杜製）１．０ｍＬとＰＢＳ３．７５ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液にＢＳＡを２．０重量％含有するＰＢＳを６ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した後、１８，０００ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操作は３回行った。えられた沈殿物にＢＳＡを０．５重量％含有するＰＢＳを１００ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、ＨＢｓ抗体感作ラテックス液を調製した。
【００８５】
（４）標準ＨＢｓ抗原液
  ＨＢｓ抗原を０、５０、１００、３００、５００ＩＵ／ｍＬ濃度で含むヒト血清１. ６ｍＬに実施例１の非特異反応抑制剤の懸濁液０. １２ｍＬを添加混合して使用した。
【００８６】
（５）
ＨＢＳ抗原陰性検体及びＨＢＳ抗原陽性検体
  ＨＢｓ抗原陰性検体（健常人血清）１０検体と、ＨＢｓ抗原陽性検体（Ｂ型肝炎感染者血清）５検体を１. ６ｍＬに実施例１の非特異反応抑制剤の懸濁液０. １２ｍＬを添加混合して使用した。
　
ク　「【００８７】
（比較例１）  ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例２における（１）ＨＢｓ抗体感作ラテックス液の調製の項を、次のようにして行ったことを除いては、実施例２と同様にしてＨＢｓ抗原測定用試薬を作成した。
【００８８】
（１）ＨＢＳ抗体感作ラテックス液の調製
  実施例１（２）の特異抗体を１. ０ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解した液１. ２５ｍＬに、平均粒径が０. ３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０重量％、積水化学社製）１. ０ｍＬとＰＢＳ３. ７５ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液にＢＳＡを２. ０重量％含有するＰＢＳを６ｍＬ添加し、２５℃にて６０分間攪拌した後、１８，０００ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操作は３回行った。
えられた沈殿物にＢＳＡを０．５重量％含有するＰＢＳを１００ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、ＨＢｓ抗体感作ラテックス液を調製した。」
　
ケ　「【０１２０】
（実施例１０）  
非特異反応抑制剤の懸濁液の作成
  
ＢＳＡを
ＰＢＳに溶解した液１０ｍＬに
ポリスチレンラテックス
とＰＢＳ９ｍＬを添加し
攪拌
遠心分離することにより洗浄
得られた沈殿物
ＰＢＳを１０ｍＬ添加し、ラテックスを懸濁させ、非特異反応抑制剤の懸濁液を作成
【０１２１】
（実施例１１）  
ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例２（１）ＨＢｓ抗体感作ラテックス液の調製において、実施例１（３）の非特異反応抑制剤の懸濁液の代わりに、
実施例１０の非特異反応抑制剤の懸濁液を使用し
ＨＢｓ抗原の測定を行った
【０１２２】
（実施例１２）  
ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例３（２）
検体希釈液の調製において
実施例１０の非特異反応抑制剤の懸濁液を使用
ＨＢｓ抗原の測定を行った
【０１２３】
（実施例１３）  ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  実施例４（４）標準ＨＢｓ抗原液の調製において、実施例１の非特異反応抑制剤の懸濁液の代わりに、
実施例１０の非特異反応抑制剤の懸濁液を使用
ＨＢｓ抗原の測定を行った
【０１２４】
（比較例４）  ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定
  比較例１の
検体希釈液の調製において
比較例１と同様にして、ＨＢｓ抗原の測定を行った
【０１２５】
  実施例１１〜１３及び比較例４の結果を表４に示した。
  
表４は
ＨＢｓ抗原陰性検体及びＨＢｓ抗原陽性検体を測定したときの測定値
  なお、実施例１１〜１３及び比較例４におけるカットオフポイントを８ＩＵ／ｍＬに設定し、８ＩＵ／ｍＬ未満を陰性、８ＩＵ／ｍＬ以上を陽性と判定した。
【０１２６】
　
【０１２７】
  表４から明らかなように、
ＨＢｓ抗原陰性検体中の数例で実施例１１〜１３では陰性判定されているにもかかわらず、比較例４では陽性と判定され、非特異凝集反応が起こっていることが示唆される
　
（２）刊行物１−１発明 
（ア）刊行物１の「免疫測定方法」には、上記（１）ア、イ、ウに記載されているように、「被測定物質を含む試料を、免疫学的に反応しない抗原を固定化した不溶性担体からなる非特異反応抑制剤によって予め処理した後免疫反応させるか、該非特異反応抑制剤の存在下で被測定物質を含む試料を免疫反応させる」免疫測定方法が含まれ、その具体例として、上記（１）ケに、非特異反応抑制剤としてＢＳＡを固定化したポリスチレンラテックスを用い、ラテックス凝集法により試料中のＨＢｓ抗原を測定したことが記載されている。
　
（イ）ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定は、上記（１）のオの「実施例２」を引用して記載している同ケの「実施例１１」、同カの「実施例３」を引用して記載している同ケの「実施例１２」、同キの「実施例４」を引用して記載している同ケの「実施例１３」にも記載されているように、測定対象物質であるＨＢｓ抗原に結合する特異的結合物質であるＨＢｓ抗体を固定化した担体であるＨＢｓ抗体感作ラテックスと、試料を接触させ、これにより、ＨＢｓ抗体感作ラテックスのＨＢｓ抗体と試料中に含まれていたＨＢｓ抗原との特異的反応を行わせ、これにより生成したＨＢｓ抗体感作ラテックスとＨＢｓ抗原との複合体凝集物を測定することにより、試料中のＨＢｓ抗原を測定する方法であることは、免疫測定方法における技術常識である。
　
（ウ）その際の非特異反応抑制剤である、ＨＢｓ抗体を固定化していないＢＳＡを固定化したポリスチレンラテックスの使用方法としては、上記（１）カの「実施例３」を引用して記載している同ケの「実施例１２」、同キの「実施例４」を引用して記載している同ケの「実施例１３」にも記載されているように、試料希釈液又は試料自体に該非特異反応抑制剤を添加して、ＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触前に、該非特異反応抑制剤と試料とを接触させることも、同オの「実施例２」を引用して記載している同ケの「実施例１１」にも記載されているように、該非特異反応抑制剤をＨＢｓ抗体感作ラテックスに添加してＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触と同時に、該非特異反応抑制剤と試料とを接触させることも、刊行物１には記載されている。
　
（エ）上記（ア）〜（ウ）を勘案して、補正発明の記載に倣って整理すると、刊行物１には、次の発明が記載されていると認められる。 
「ＨＢｓ抗体感作ラテックスと、試料とを接触させ、これにより、当該ＨＢｓ抗体感作ラテックスのＨＢｓ抗体と試料中に含まれていたＨＢｓ抗原との特異結合反応を行わせ、これにより生成したＨＢｓ抗体感作ラテックスとＨＢｓ抗原との複合体凝集物を測定することにより、試料中のＨＢｓ抗原を測定する際に、ＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触の前又はこれと同時に、ＢＳＡを固定化したポリエチレンラテックスと試料を接触させることを含む方法。」（以下、「刊行物１−１発明」という。）
　
（３）対比・判断 
ア　対比
　そこで、補正発明と刊行物１−１発明とを対比する。
（ア）刊行物１−１発明の「ＨＢｓ抗原」、「ＨＢｓ抗体感作ラテックス」は、それぞれ、補正発明の「測定対象物質」、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体」に相当する。
  
（イ）そして、補正発明における「当該特異的結合物質を固定化していない担体」については、本願明細書に次のように記載されている。（下線は当審で付与。）
「【００３２】
〔４〕
測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体
【００３３】
  本発明における、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」は、前記の
「測定対象物質に結合する特異的結合物質」を固定化していない担体
【００３４】
  この「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」における
担体
の材質は
ポリスチレン
【００３５】
  この
非固定化用担体は
ラテックス粒子であることが特に好ましい
【００３６】
  なお、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体」における「担体」と、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」における「担体」（非固定化用担体）は、同一の材質のものが好ましい。
【００３７】
  また、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」の自然凝集や、非特異的反応等を抑制するために処理を行う必要があれば、
「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」の表面に、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
を接触させ被覆させること等の公知の方法により処理して、非固定化用担体のブロッキング処理（マスキング処理）等を行ってもよい
　
　そうすると、刊行物１−１発明の「ＢＳＡを固定化したポリエチレンラテックス」は、補正発明の「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」に相当する。
　
（ウ）したがって、補正発明と刊行物１−１発明とは、次の一致点で一致し、次の相違点において相違する：  
（一致点）  
　「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体と、試料とを接触させ、これにより、当該特異的結合物質を固定化した担体の当該特異的結合物質と試料中に含まれていた測定対象物質との特異的結合反応を行わせ、これより生成した当該特異的結合物質を固定化した担体と測定対象物質との複合体凝集物を測定することにより、試料中の測定対象物質を測定する際に、当該特異的結合物質を固定化した担体と試料との接触の前又はこれと同時に、当該特異的結合物質を固定化していない担体と試料とを接触させる、
ことを含む方法。」である点。
　
（相違点）
　補正発明は、さらに「生体試料と水系溶媒試料との間の測定値差の改善方法」であるのに対し、刊行物１−１発明では、そのような特定がない点。
　
イ　判断
　上記相違点についての検討する。 
（ア）補正発明の「生体試料」と「水系溶媒試料」について、本願明細書に次のように記載されている。
「【０１６４】
２．試料
（１）
水系溶媒試料
  参考例１の（１）で調製したＳＣＣＡ１を、４％ＢＳＡを含む
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）にて希釈し、下記の水系溶媒試料Ａ２、水系溶媒試料Ａ３、及び水系溶媒試料Ａ４をそれぞれ調製した。
  また、この４％ＢＳＡを含む
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を、ＳＣＣＡ１濃度が０ｎｇ／ｍＬである水系溶媒試料Ａ１とした
【０１６５】
（ａ）水系溶媒試料Ａ１（ＳＣＣＡ１濃度：０ｎｇ／ｍＬ）
（ｂ）水系溶媒試料Ａ２（ＳＣＣＡ１濃度：５ｎｇ／ｍＬ）
（ｃ）水系溶媒試料Ａ３（ＳＣＣＡ１濃度：１５ｎｇ／ｍＬ）
（ｄ）水系溶媒試料Ａ４（ＳＣＣＡ１濃度：３０ｎｇ／ｍＬ）
【０１６６】
（２）
生体試料
  参考例１の（１）で調製した
ＳＣＣＡ１を
ヒト血清にて希釈し、下記の生体試料Ａ１、生体試料Ａ２、及び生体試料Ａ３をそれぞれ調製した。
【０１６７】
（ａ）生体試料Ａ１（ＳＣＣＡ１濃度：５ｎｇ／ｍＬ）
（ｂ）生体試料Ａ２（ＳＣＣＡ１濃度：１５ｎｇ／ｍＬ）
（ｃ）生体試料Ａ３（ＳＣＣＡ１濃度：３０ｎｇ／ｍＬ）」
　
　上記記載によれば、補正発明における「生体試料」には、既知量の測定対象物質をヒト血清と混合して調製したヒト血清を含む標準溶液が含まれ、「水系溶媒試料」には、既知量の測定対象物質をリン酸緩衝生理食塩水等と混合して調製したヒト血清を含まない標準溶液が含まれるものと認められる。
　
（イ）これらの生体試料と水系溶媒試料に含まれるＳＣＣＡ１の濃度を、測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体を含まない試薬と含む試薬を用いて測定した結果が、本願明細書に、
「【０１７３】
（ｆ）  以上の測定結果において、第１試薬として第１試薬（担体不含）を用いた場合の測定結果を表１及び図１に示し、第１試薬として第１試薬（担体含有）を用いた場合の測定結果を表２及び図２に示した。」と記載されているように、以下の表１，２と図１，２で示されている。
【表１】
【表２】
【図１】
【図２】
　そして、この結果について本願明細書では、
「【０１８２】
  ところで、試料の種類により測定値差が生じるのは、生体試料中に、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体」に吸着する物質が存在し、これにより当該特異的結合反応に負の影響を与えたためと考えられる。そして、前記の通り「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」と試料とを接触させることにより、生体試料に由来する非特異的物質の影響を受けずに測定できるようになったものと推察される。」という考察を行っており、測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体を使用しない場合の段落【１７６】の表１と図１に示されたグラフでは、生体試料と水系溶媒試料との測定値がＳＣＣＡ１濃度が大きくなるにつれて測定値差が大きくなるのに対し、測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体を使用した場合の段落【１７７】の表２と図２に示されたグラフでは、生体試料と水系溶媒試料との測定値がＳＣＣＡ１濃度が大きくなるにつれても、測定値差は僅かになっていることが示されている。
　
（ウ）ところで、ヒト血清には、試料と接触させて抗原抗体反応を行わせる試料中の測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体に非特異吸着をする等により測定値のノイズとなる夾雑タンパク質が多く含まれていて、測定の精度等を低下させる原因となることは、本願出願前の周知事項にすぎない（必要ならば、例えば、特開２０１０−１１７１８９号公報の特に段落【０００６】、特開２００５−１８８９８７号公報の特に段落【０００５】等参照）。
　
（エ）そして、特異的結合反応を行わせる免疫測定において、測定値を求めるための標準曲線について、血清の存在による影響を、血清を含む標準溶液試料と血清を含まない緩衝液等の水系溶媒を使用して作成した標準溶液試料や、含まれる血清の量を変化させた標準溶液の測定値を比較して調べることも、例えば次の周知例等に記載されているように、必要に応じて行われている本願出願前の周知の事項である（以下の周知例において下線は当審において付与した。）。
　周知例Ａ：特表２０００−５１０５８１号公報、特に
「実施例２  トロンボスポンジン用ＥＬＩＳＡアッセイの開発
  直接捕獲、酵素結合免疫ソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を最初に展開して、トロンボスポンジンのカラム画分をアッセイした。ポリクローナル硫酸アンモニウム画分（約８０％ＩｇＧ）のトロンボスポンジン抗体は、ＥＬＩＳＡプレートをコートするために用いられ、トロンボスポンジン精製を行うために十分であった。それを標準トロンボスポンジンで換算したところ、矛盾する結果が得られることがわかったが、おそらくプレートの違いと時間によるものであった。イムロン４プレートを注文し、コーティングとブロッキング手順を以下のように標準化した：４℃で一晩、２０μｇ／ｍＬ  Ａｂ；トリス緩衝化生理食塩水（ＴＢＳ）プラス３％ＢＳＡを含有するブロッキング緩衝液で３回洗浄し；次いで、室温で１時間、ブロッキング緩衝液を用いてブロックする。コートされたプレートを、４℃で一晩、緩衝液中のトロンボスポンジン標品でインキュベートし、洗浄して非結合蛋白質を除去し、次いでシグマモノクローナルＡｂ（１：１０００）と反応させ、アルカリ性ホスファターゼ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（１：６，０００；室温で１時間）を用いて展開した。強いシグナルと滑らかで、再現性のある照準曲線を得たが、該曲線はより高い濃度ではフラットになった（図１）。
  血清希釈物を前記ＥＬＩＳＡに使用し、血清を緩衝液で１：１以上に希釈した際に滑らかな希釈曲線を得た；未希釈の血清は、シグナルを強く減少させた。全ての凝固血液については直接的なアッセイを用いることが望ましいので、
未希釈血清を用いた際のシグナルが減少する問題を調べるのに、様々な試験を試みた
トロンボスポンジンの標準曲線を緩衝液で作成すると、血清中でインキュベートされていないプレートで作成した標準曲線に比べ、約５０％までシグナルが減少されていることがわかった。これらの結果は、血清が、競争的に吸着することにより、プレートから抗体を除去していることを示した
　
周知例Ｂ：特開昭５９−１４１０６６号公報、特に
「（ａ）分析法標準曲線
　プールした正常な人血清（ＩＬＳ、ニューベリーストリート、ロンドンＥｃ１、英国）にプリミドンを溶解することにより分析法標準を調製した。
　各血清標準１０μｌに最終濃度（１２０ｎモル／ｌ）を生ずるようにエリスロシン−ラベルプリミドン１００μｌを加え、続いて抗プリミドン免疫グロブリンを加えた（１８．６倍希釈）。室温で３０分間インキュベーション後、希釈剤緩衝液１．４ｍｌを加えた（免疫グロブリンの最終希釈：３００倍）室温で更に５分後、りん光と遅延螢光を測定した。
　結果の標準曲線（第２図）は血清標準中のプリミドンは限定量のプリミドンに対する抗体へ結合のためラベルしたプリミドンと競合することを示す。ラベルしない薬剤が存在すればする程、結合反応の完了後遊離のままである（抗体非結合）ラベルしたプリミドンの比率が大きくなり、そしてそれ故にりん光及び遅延螢光信号が大きくなる。
　
標準曲線に関する血清の効果を下記の方法でチェックした。各プリミドン血清標準１０μｌに希釈剤緩衝液１００μｌ又はプールした正常な人血清１００μｌの何れかを加え
　この結果（第３図）は
分析法混合物中に人血清１００μｌまでの余分の存在は標準曲線に無視し得る効果を有することを示す
　
周知例Ｃ：国際公開２００８／０１２３３８号、特に　
「EXAMPLE 6: Sandwich Immunoassay Formats for Quantifying and Detecting GDF8
（当審訳：例６：ＧＤＦ８を定量化および検出するためのサンドイッチ免疫アッセイ様式）」（第９５頁２３行）
「Example 6.6　The use of serum versus assay buffer for the generation of standard curves
　　Normal mouse serum and GDF-8 KO mouse serum was used in this study. These sera, along with normal human serum and THST buffer, were utilized to generate standard curves using mature GDF-8 protein, see Figure 15. The difference in slope between standard curves generated in serum vs. buffer explains why the observed vs. predicted values in spike/recovery experiments differ so drastically (Figure 16) when buffer is the medium used for generation of standard curves. The reduced slope of the standard curve in serum compared to standard curve in buffer highlights the matrix effects of serum on the signal produced and suggests that standard curves should be generated in serum. KO mouse serum is not available in quantities necessary for assay development and normal mouse serum has high endogenous levels of GDF-8 that would interfere with prediction of GDF-8 in unknown serum samples. Normal human serum also has endogenous levels of GDF-8, albeit lower than normal mouse, that also adds an unwanted interference factor. A possible alternative would be to deplete a pool of normal human serum of GDF-8 for use as an assay calibration matrix.　（当審訳：例６．６　検量線を作成するための血清対アッセイ緩衝液の使用
  正常なマウス血清およびＧＤＦ−８ＫＯマウス血清を本研究で研究した。これらの血清を、
正常なヒト血清およびＴＨＳＴ緩衝液と共に利用して、成熟ＧＤＦ−８タンパク質を用いた検量線を作成した
血清で作成した検量線と緩衝液で作成したものとの間の傾きの差異により、緩衝液を検量線の作成の媒体として使用した場合に添加／回収実験の観察値対予測値が劇的に異なっていた理由が説明される
　
（オ）血清は、上記（ウ）のように夾雑タンパク質を多く含むため、血清を含む標準試料と血清を含まない水性溶媒で調製した標準試料とでは、試料中の測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体に対する非特異吸着を生じる可能性から、両者の測定値の間に相違が生じることは当然予想されることである。
　そして、刊行物１−１発明では、非特異反応抑制剤となる測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体を併用して、ＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料と接触させる方法であるから、血清の存在による非特異反応も抑制され、血清の存在による影響が低減することが、当業者に普通に期待される事項と認められる。
　そうすると、刊行物１−１発明において、ヒト血清を添加し調製した血清を含む標準試料である生体試料及び血清を含まない水性溶媒で調製した標準溶液である水系溶媒試料を試料として、試料中の測定対象物質を測定して、血清の影響による両者の測定値の間の測定値差を改善してみようとすることは、当業者が必要に応じて適宜なし得る範囲の事項にすぎない。
　
(カ)補正発明の効果は、刊行物１及び上記周知事実から当業者が予測し得るものであって、格別顕著なものとはいえない。
　
ウ　小括 
　以上のとおりであるから、補正発明は、刊行物１−１発明及び周知事実に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許出願の際独立して特許を受けることができないものである。 
 　  
（４）まとめ  
　したがって、本件補正は、特許法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に違反するものであり、同法第１５９条第１項で読み替えて準用する第５３条第１項の規定により却下されるべきものである。  
  
第３　本願発明について  
１　本願発明  
　平成２６年９月２日付けの手続補正は上記のとおり却下されたので、本願の請求項１ないし７に係る発明は、同年４月１８日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１ないし７に記載された事項により特定されるものであって、その請求項１は以下のとおりのものである。（以下、「本願発明」という。） 　  
　
「　【請求項１】 
　測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体と、試料とを接触させ、これにより、当該特異的結合物質を固定化した担体の当該特異的結合物質と試料中に含まれていた測定対象物質との特異的結合反応を行わせ、これより生成した当該特異的結合物質を固定化した担体と測定対象物質との複合体凝集物を測定することにより、試料中の測定対象物質を測定する際に、当該特異的結合物質を固定化した担体と試料との接触の前又はこれと同時に、当該特異的結合物質を固定化していない担体と試料とを接触させることを特徴とする、試料の種類による測定値差の改善方法。」
　
２　引用刊行物及びその記載事項  
（１）引用刊行物１及びその記載事項  
　原査定の拒絶の理由に引用された刊行物１とその記載事項は、上記第２の２（１）に記載したとおりである。
　
（２）刊行物１に記載された発明（その２） 
（ア）刊行物１の「免疫測定方法」には、上記第２の２（１）ア、イ、ウに記載されているように、「被測定物質を含む試料を、免疫学的に反応しない抗原を固定化した不溶性担体からなる非特異反応抑制剤によって予め処理した後免疫反応させるか、該非特異反応抑制剤の存在下で被測定物質を含む試料を免疫反応させる」免疫測定方法が含まれ、その具体例として、上記第２の２（１）ケに、非特異反応抑制剤としてＢＳＡを固定化したポリスチレンラテックスを用い、ラテックス凝集法により試料中のＨＢｓ抗原を測定したことが記載されている。
　
（イ）ラテックス凝集法によるＨＢｓ抗原の測定は、上記第２の２（１）オの「実施例２」を引用して記載している同ケの「実施例１１」、同カの「実施例３」を引用して記載している同ケの「実施例１２」、同キの「実施例４」を引用して記載している同ケの「実施例１３」にも記載されているように、測定対象物質であるＨＢｓ抗原に結合する特異的結合物質であるＨＢｓ抗体を固定化した担体であるＨＢｓ抗体感作ラテックスと、試料を接触させ、これにより、ＨＢｓ抗体感作ラテックスのＨＢｓ抗体と試料中に含まれていたＨＢｓ抗原との特異的反応を行わせ、これにより生成したＨＢｓ抗体感作ラテックスとＨＢｓ抗原との複合体凝集物を測定することにより、試料中のＨＢｓ抗原を測定する方法であることは、免疫測定方法における技術常識である。
　
（ウ）その際の非特異反応抑制剤であるＨＢｓ抗体を固定化していないＢＳＡを固定化したポリスチレンラテックスの使用方法としては、上記第２の２（１）カの「実施例３」を引用して記載している同ケの「実施例１２」、同キの「実施例４」を引用して記載している同ケの「実施例１３」にも記載されているように、試料希釈液又は試料自体に該非特異反応抑制剤を添加して、ＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触前に、該非特異反応抑制剤と試料とを接触させることも、同オの「実施例２」を引用して記載している同ケの「実施例１１」にも記載されているように、該非特異反応抑制剤をＨＢｓ抗体感作ラテックスに添加してＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触と同時に、該非特異反応抑制剤と試料とを接触させることも、刊行物１には記載されている。
　
（エ）そして、上記第２の２（１）ケの「実施例１１〜１３」及び非特異反応抑制剤を使用しない同クの「比較例１」を引用して記載している同ケの「比較例２」によるＨＢｓ抗原の測定値について、「実施例１１〜１３及び比較例４の結果を表４に示した。表４は、実施例１１〜１３及び比較例４の試薬により、ＨＢｓ抗原陰性検体及びＨＢｓ抗原陽性検体を測定したときの測定値（ＩＵ／ｍＬ）を示す。」、「表４から明らかなように、ＨＢｓ抗原陰性検体中の数例で実施例１１〜１３では陰性判定されているにもかかわらず、比較例４では陽性と判定され、非特異凝集反応が起こっていることが示唆される。」と、ＨＢｓ抗原陰性検体とＨＢｓ抗原陽性検体という異なる種類の試料について比較、検討され、陽性検体では非特異反応抑制剤を使用しない場合でも誤判定されなかったものの、陰性検体では非特異反応抑制剤を使用すると、陽性と誤判定される測定値が改善されて、陰性と判定される測定値になることが記載されている。
　
（オ）これら（ア）〜（エ）を勘案して、補正発明の記載に倣って整理すると、刊行物１には、次の発明が記載されていると認められる。 
「ＨＢｓ抗体感作ラテックスと、試料とを接触させ、これにより、当該ＨＢｓ抗体感作ラテックスのＨＢｓ抗体と試料中に含まれていたＨＢｓ抗原との特異結合反応を行わせ、これにより生成したＨＢｓ抗体感作ラテックスとＨＢｓ抗原との複合体凝集物を測定することにより、試料中のＨＢｓ抗原を測定する際に、ＨＢｓ抗体感作ラテックスと試料との接触の前又はこれと同時に、ＢＳＡを固定化したポリエチレンラテックスと試料を接触させて、ＨＢｓ抗原陰性検体の場合とＨＢｓ抗原陽性検体の場合の測定値の間にあった誤判定が生じる測定値差が改善される方法。」（以下、「刊行物１−２発明」という。）
　
３　対比・判断 
　そこで、本願発明と刊行物１−２発明とを対比する。
（ア）刊行物１−２発明の「ＨＢｓ抗原」、「ＨＢｓ抗体感作ラテックス」は、それぞれ、本願発明の「測定対象物質」、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体」に相当する。
  
（イ）そして、本願発明における「当該特異的結合物質を固定化していない担体」については、本願明細書には次のように記載されている。（下線は当審で付与。）
「【００３２】
〔４〕
測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体
【００３３】
  本発明における、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」は、前記の
「測定対象物質に結合する特異的結合物質」を固定化していない担体
【００３４】
  この「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」における
担体
の材質は
ポリスチレン
【００３５】
  この
非固定化用担体は
ラテックス粒子であることが特に好ましい
【００３６】
  なお、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化した担体」における「担体」と、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」における「担体」（非固定化用担体）は、同一の材質のものが好ましい。
【００３７】
  また、「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」の自然凝集や、非特異的反応等を抑制するために処理を行う必要があれば、
「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」の表面に、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
を接触させ被覆させること等の公知の方法により処理して、非固定化用担体のブロッキング処理（マスキング処理）等を行ってもよい
　
　そうすると、刊行物１−２発明の「ＢＳＡを固定化したポリエチレンラテックス」は、本願発明の「測定対象物質に結合する特異的結合物質を固定化していない担体」に相当する。
　
（ウ）また、刊行物１−２発明の「ＨＢｓ抗原陰性検体」と「ＨＢｓ抗原陽性検体」とは、試料の種類が異なることは明らかであって、「ＨＢｓ抗原陰性検体の場合とＨＢｓ抗原陽性検体の場合の測定値の間にあった誤判定が生じる測定値差が改善される方法」は、本願発明の「試料の種類による測定値差の改善方法」に相当する。
　
（エ）そうすると、本願発明と刊行物１−２発明との間には、相違するところがなく、本願発明は刊行物１に記載された発明である。  
 　  
 第４　むすび  
　以上のとおり、本願発明は、刊行物１に記載された発明であるから、特許法第２９条第１項第３号に該当し、特許を受けることができない。 
　したがって、他の請求項について論及するまでもなく、本願は拒絶すべきものである。
  
　よって、結論のとおり審決する。