(57)【要約】本発明は、ＩＦＮ作用物質治療時に、ＩＦＮ作用物質の活性を増強し、及び／又はＩＦＮ作用物質の副作用を軽減する作用を有する、優れたＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤として、有効成分としてグリシンを含むＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤を提供する。さらに本発明は、ＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤を含有する抗ウイルス剤、ウイルス性肝炎治療剤、抗腫瘍剤、自己免疫疾患治療剤及び食品組成物などを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤。
【請求項２】
インターフェロン作用物質がインターフェロンである請求項１に記載の増強剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗ウイルス剤。
【請求項４】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウイルス性肝炎治療剤。
【請求項５】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウイルス性肝炎に起因する肝硬変治療剤。
【請求項６】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
【請求項７】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする自己免疫疾患治療剤。
【請求項８】
請求項１又は２に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする食品組成物。
【請求項９】
有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤。
【請求項１０】
インターフェロン作用物質治療がウイルス性肝炎に対するインターフェロン作用物質治療である請求項９に記載の副作用軽減剤。
【請求項１１】
ウイルス性肝炎がＣ型肝炎である請求項１０に記載の副作用軽減剤。
【請求項１２】
インターフェロン作用物質治療がインターフェロン作用物質及びリバビリン作用物質の併用を含む治療である請求項９に記載の副作用軽減剤。
【請求項１３】
インターフェロン作用物質及び／又はリバビリン作用物質の副作用を軽減することを特徴とする請求項１２に記載の副作用軽減剤。
【請求項１４】
請求項９〜１３のいずれか１項に記載の副作用軽減剤を含有することを特徴とする食品組成物。
【請求項１５】
有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする抗ウイルス剤。
【請求項１６】
有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするウイルス性肝炎治療剤。
【請求項１７】
グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬。
【請求項１８】
抗ウイルス用である請求項１７に記載の医薬。
【請求項１９】
ウイルス性肝炎治療用である請求項１７に記載の医薬。
【請求項２０】
ウイルス性肝炎がＣ型慢性肝炎である請求項１９に記載の医薬。
【請求項２１】
腫瘍治療用である請求項１７に記載の医薬。
【請求項２２】
自己免疫疾患治療用である請求項１７に記載の医薬。
【請求項２３】
有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、請求項１７に記載の医薬。
【請求項２４】
有効成分としてさらにリバビリン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、請求項２３に記載の医薬。
【請求項２５】
有効成分としてのグリシン及びインターフェロン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。
【請求項２６】
有効成分としてのグリシン、インターフェロン作用物質及びリバビリン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。
【請求項２７】
グリシンを有効成分とするインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤。
【請求項２８】
インターフェロン誘導遺伝子が、ＰＫＲ遺伝子又は２−５ＡＳ１遺伝子である請求項２７に記載の増強剤。
【請求項２９】
グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質の活性を増強する方法。
【請求項３０】
インターフェロン作用物質がインターフェロンである請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質治療における副作用を軽減する方法。
【請求項３２】
グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン誘導遺伝子の発現を増強する方法。
【請求項３３】
インターフェロン作用物質の活性増強剤を製造するための、グリシンの使用。
【請求項３４】
インターフェロン作用物質がインターフェロンである、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
インターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤を製造するための、グリシンの使用。
【請求項３６】
インターフェロン誘導遺伝子発現増強剤を製造するための、グリシンの使用。
【請求項３７】
有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤、および該剤のインターフェロン作用物質の活性増強への使用に関する説明を記載した記載物を含む商業的パッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、インターフェロン作用物質の活性増強作用を有するインターフェロン作用物質の活性増強剤、インターフェロン作用物質治療の副作用を軽減する副作用軽減剤、グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬、及びそれらの医薬組成物に関する。
【背景技術】  インターフェロン（以下、ＩＦＮとも称する）は抗ウイルス作用、細胞増殖抑制作用、免疫調節作用など多彩な生物活性を有するサイトカインであり、臨床的には、抗ウイルス剤としてＢ型慢性肝炎及びＣ型慢性肝炎に、抗腫瘍剤として慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、ＨＴＬＶ−１脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などにＩＦＮ療法として使用されている。
しかし、その使用の際には、間質性肺炎、肺線維症、抑うつ、自殺企画、意識障害、痙攣、見当識障害、せん妄、錯乱、幻覚、躁状態、妄想、精神分裂病症状、失神、痴呆様症状、難聴、興奮、自己免疫現象、糖尿病、肝障害、腎障害、再生不良性貧血、汎血球現象、無顆粒球症、白血球減少、血小板減少、ショック、心筋症、心筋梗塞、心不全、狭心症、心室性頻脈、消化管出血、消化性潰瘍、虚血性大腸炎、脳出血、敗血症、網膜症、発熱、頭痛、頭重感、全身倦怠感、筋肉痛、悪寒、戦慄、関節痛、眠気、不安、不眠、焦燥、めまい、知覚異常、神経過敏、発疹、蕁麻疹、そう痒感、顆粒球減少、リンパ球増多、好酸球増多、単球増多、ＡＳＴの上昇、ＡＬＴの上昇、ＡＬＰの上昇、γ−ＧＴＰの上昇、ＬＤＨの上昇、ＢＵＮの上昇、クレアチニンの上昇、蛋白尿、血尿、浮腫、頻脈、動悸、血圧上昇、顔面潮紅、食欲不振、悪心、嘔吐、消化不良、胸やけ、腹部膨満感、腹痛、下痢、便秘、口内炎、口唇炎、口渇、脱毛、紅班、湿疹、脳波異常、麻痺、下腿痙直、四肢の痺れ、緊張亢進、無力症、肺塞栓症、肺水腫、胸膜炎、胸水、血痰、鼻炎、呟嗽、呼吸困難、喀痰増加、網膜出血、網膜微小循環障害、眼痛、注射部位反応、耳鳴り、アルブミン減少、血清総蛋白減少、体重減少、味覚異常、ほてり、胸部痛、背部痛、咽頭痛、不正出血、嗅覚障害、電解質異常、性欲減退、多汗などの副作用が報告されている（飯野四郎  編著、慢性肝炎最新の治療（中外医学社）ｐ１５４（２００１年）参照）。これらの副作用は、インターフェロン治療を受けている患者にとって大きな問題であり、治療中の患者にも、これから治療を受ける患者にも治療に対する不安を引き起こしている。よってこれらの副作用が軽減された治療剤が必要とされている。
Ｃ型肝炎ウイルス（以下、ＨＣＶとも称する）の持続感染は、慢性肝炎を引き起こし、２０数年の経過の中で肝硬変、そして最終的には肝細胞癌発症に至る。そのＨＣＶに対し唯一の抗ＨＣＶ治療として行われてきたＩＦＮ療法の著効率（本発明において、著効率はＩＦＮ治療終了後２４週における血中ＨＣＶ  ＲＮＡ陰性化率（％）と定義する）は治療を行った全症例に対し、２０％程度、ＨＣＶが遺伝子型Ｉｂかつ高ウイルス量の難治性Ｃ型慢性肝炎に限っては１０％未満と低い。リバビリン（Ｒｉｂａｖｉｒｉｎ、以下Ｒｉｂとも称す）はＩＦＮと異なる作用機序で抗ウイルス活性を示す抗ウイルス剤である。単独ではＨＣＶに対して効果を示さないが、ＩＦＮとＲｉｂとの併用療法にすると、全症例に対する著効率は５０％程度、難治性患者に対して３０％程度に改善する（日本肝臓学会  編、慢性肝炎の治療ガイド（文光堂）、ｐ３０、ｐ３４（２００４年）参照）。しかしながら、全ての治療患者に有効な治療効果を示すまでにはいまだ至っていない。よってさらに優れた効果を有するＩＦＮの活性増強剤が必要とされているのが現状である。
また、ＩＦＮとＲｉｂの併用療法時には、ＩＦＮによる副作用の他にＲｉｂによる副作用発現が加わることになる。Ｒｉｂによる副作用として最も特徴的なものは溶血性貧血であるが、その程度が重篤な場合はＲｉｂの減量もしくは投与中止が必要となる。よって、ＩＦＮ＋Ｒｉｂ併用療法において、その抗ウイルス効果を維持したままＲｉｂを減量、あるいは完全に置き換えることが可能な薬剤も必要とされている。
一方グリシンは、抗炎症作用、細胞保護作用、免疫調節作用などの作用があることが知られているが（ゼット・ツォングら（Ｚ．Ｚｈｏｎｇ），カレント・オピニオン・イン・クリニカル・ニュートリション＆メタボリック・ケア（Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ  Ｍｅｔａｂ  Ｃａｒｅ．）６，２２９−４０（２００３年）参照）、ＩＦＮの活性を増強する作用やＩＦＮの副作用を軽減する作用を有するという報告はない。
【発明の開示】
本発明が解決しようとする課題は、ＩＦＮ作用物質治療時に、ＩＦＮ作用物質の活性を増強する優れたＩＦＮ作用物質の活性増強剤及びＩＦＮ作用物質の副作用を低減する副作用軽減剤を提供することである。
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、グリシンがＩＦＮ作用物質の活性を増強するとともに、グリシン単独でもＩＦＮ様活性を示すことを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は以下の通りである。
（１）有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤。
（２）インターフェロン作用物質がインターフェロンである上記（１）に記載の増強剤。
（３）上記（１）又は（２）記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗ウイルス剤。
（４）上記（１）又は（２）記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウイルス性肝炎治療剤。
（５）上記（１）又は（２）記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウイルス性肝炎に起因する肝硬変治療剤。
（６）上記（１）又は（２）記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
（７）上記（１）又は（２）記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする自己免疫疾患治療剤。
（８）上記（１）又は（２）に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする食品組成物。
（９）有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤。
（１０）インターフェロン作用物質治療がウイルス性肝炎に対するインターフェロン作用物質治療である上記（９）記載の副作用軽減剤。
（１１）ウイルス性肝炎がＣ型肝炎である上記（１０）記載の副作用軽減剤。
（１２）インターフェロン作用物質治療がインターフェロン作用物質及びリバビリン作用物質の併用を含む治療である上記（９）記載の副作用軽減剤。
（１３）インターフェロン作用物質及び／又はリバビリン作用物質の副作用を軽減することを特徴とする上記（１２）記載の副作用軽減剤。
（１４）上記（９）〜（１３）のいずれかに記載の副作用軽減剤を含有することを特徴とする食品組成物。
（１５）有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする抗ウイルス剤。
（１６）有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするウイルス性肝炎治療剤。
（１７）グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬。
（１８）抗ウイルス用である上記（１７）に記載の医薬。
（１９）ウイルス性肝炎治療用である上記（１７）に記載の医薬。
（２０）ウイルス性肝炎がＣ型慢性肝炎である上記（１９）に記載の医薬。
（２１）腫瘍治療用である上記（１７）に記載の医薬。
（２２）自己免疫疾患治療用である上記（１７）に記載の医薬。
（２３）有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、上記（１７）に記載の医薬。
（２４）有効成分としてさらにリバビリン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、上記（２３）に記載の医薬。
（２５）有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。
（２６）有効成分としてグリシン、インターフェロン作用物質及びリバビリン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。
（２７）グリシンを有効成分とするインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤。
（２８）インターフェロン誘導遺伝子が、ＰＫＲ遺伝子又は２−５ＡＳ１遺伝子である上記（２７）に記載の増強剤。
（２９）グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質の活性を増強する方法。
（３０）インターフェロン作用物質がインターフェロンである、上記（２９）に記載の方法。
（３１）グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質治療における副作用を軽減する方法。
（３２）グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン誘導遺伝子の発現を増強する方法。
（３３）インターフェロン作用物質の活性増強剤を製造するための、グリシンの使用。
（３４）インターフェロン作用物質がインターフェロンである、上記（３３）に記載の使用。
（３５）インターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤を製造するための、グリシンの使用。
（３６）インターフェロン誘導遺伝子発現増強剤を製造するための、グリシンの使用。
（３７）有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤、および該剤のインターフェロン作用物質の活性増強への使用に関する説明を記載した記載物を含む商業的パッケージ。
【図面の簡単な説明】  図１は、グリシン投与によるＰＢＭＣ中のＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ）の発現上昇を示す。（平均値±標準偏差：＊＊＊Ｐ＜０．００５：ｔ検定）
図２は、グリシン投与によるＰＢＭＣ中のＩＦＮ誘導遺伝子（２−５ＡＳ１）の発現上昇を示す。（平均値±標準偏差：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１：ｔ検定）
図３は、グリシン投与による肝臓中のＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ）の発現上昇を示す。（各群２例の平均値）
図４は、グリシン投与による肝臓中のＩＦＮ誘導遺伝子（２−５ＡＳ１）の発現上昇を示す。（各群２例の平均値）
【発明を実施するための最良の形態】＜グリシン＞
本発明においてグリシンは、必ずしも遊離アミノ酸として用いられる必要はなく、無機酸塩、有機酸塩、生体内で加水分解可能なエステル体などの形態で用いてもよい。また、２以上のグリシン又は他のアミノ酸をペプチド結合させたペプチド類の形態で用いてもよい。
＜インターフェロン作用物質の活性増強剤＞
本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤は、グリシン単味であってもよいが、後述の製剤用担体や一般的な食品素材を含有していてもよい。
本発明におけるＩＦＮ作用物質としては、ＩＦＮのほか、生体内でＩＦＮ様の作用を奏する物質であれば特に限定されない。ＩＦＮとしては、例えばＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β及びＩＦＮ−γ、ＩＦＮの化学修飾体などが挙げられる。ＩＦＮ−αには２０種類以上の亜型があるといわれており、１６５〜１６６個のアミノ酸からなるものと１７２個のアミノ酸からなるものに大きく分けられる。分子量は、１．７〜２．３万の間にあり、前者は糖鎖を有するが後者は糖鎖を持たない。ＩＦＮ−αには天然型と、遺伝子組み換えによって大腸菌で産生された遺伝子組み換え型とがあり、後者は糖鎖を持たない。天然型ＩＦＮ−α製剤には、オーアイエフ（登録商標）、ＩＦＮ−αモチダ、スミフェロン（登録商標）などがある（成人１日あたり２５０万〜６００万国際単位投与）。遺伝子組み換え型ＩＦＮ−α製剤としては、アドバフェロン（登録商標）、ロフェロン（登録商標）、キャンフェロン（登録商標）Ａ、イントロン（登録商標）Ａなどがある（成人１日あたり３００万〜１８００万国際単位投与）。ＩＦＮ−βは１６６個のアミノ酸からなり亜型は存在しない。天然型ＩＦＮ−β製剤には、フェロン（登録商標）、ＩＦＮβモチダ（成人１日あたり１００万〜３００万国際単位投与）、遺伝子組み換え型ＩＦＮ−β製剤には、ベタフェロン（登録商標）などがある（成人１日あたり８００万国際単位投与）。天然型ＩＦＮ−γ製剤には、オーガンマ（登録商標）（成人１日あたり１００万国際単位投与）、遺伝子組み換え型ＩＦＮ−γ製剤としては、ビオガンマ（登録商標）、イムノマックス（登録商標）−γなどがある（成人１日あたり２００万〜４００万国際単位投与）。また、ＩＦＮの化学修飾体には、インターフェロンをポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾した、例えばＰＥＧ−インターフェロン−α２ａ（ペガシス（登録商標）（成人１日あたり１８０μｇ投与））やＰＥＧ−インターフェロン−α２ｂ（ＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）（成人１日あたり１．５μｇ投与））などの製剤がある。更に、ＩＦＮ作用物質はＩＦＮ様生物活性を惹起するものであれば良く、必ずしも上記ＩＦＮと同一のアミノ酸配列を有するものでなくても良い。また抗体、ペプチド、低分子であってもよい。これらのうち、ＩＦＮ製剤が好ましく、その中でもＩＦＮ−α製剤が特に好ましい。
ＩＦＮ作用物質の活性増強とはＩＦＮ作用物質治療の作用を増強することをいい、その結果として得られる、ＩＦＮ作用物質治療患者の著効率改善、治療期間の短縮、ＩＦＮ作用物質投与量の減量なども含むものとする。ＩＦＮ作用物質によって発現誘導される遺伝子には例えばＰＫＲ（二本鎖ＲＮＡ依存性プロテインキナーゼ）や２−５ＡＳ１（オリゴアデニル酸合成酵素１）などがあるが、ＩＦＮ作用物質の活性増強作用はそれらの発現量を調べることで確認することが可能である。特にＰＫＲ、２−５ＡＳ１の発現誘導によってＩＦＮ生物活性の一つである抗ウイルス活性が発揮されることが知られているので、これらの遺伝子発現が増強されれば、ＩＦＮ作用物質の活性が増強されることは明らかである。
本発明においてＩＦＮ作用物質治療とは、ＩＦＮ作用物質を投与することによって疾患を治療することを指す。また、本発明におけるＩＦＮ作用物質治療にはＩＦＮ作用物質とそれ以外の薬剤とを併用する場合も含まれ、例えばＩＦＮ作用物質とＲｉｂ作用物質の併用治療が例示される。
本発明におけるＲｉｂ作用物質としては、Ｒｉｂのほか、Ｒｉｂの類縁体、例えばＶｉｒａｍｉｄｉｎｅ（Ｗａｔｓｏｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  ｄｒｕｇｓ  ２００２，３，（５）  ６８０−６８３）など、生体内でインターフェロンの抗ウイルス効果を増強するＲｉｂ様作用を奏する物質であれば特に限定されない。
本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤を含有する医薬組成物は、抗ウイルス剤、ウイルス性肝炎治療剤、抗腫瘍剤、自己免疫疾患治療剤として使用できる。抗ウイルス剤の場合、治療対象となるウイルス性疾患は、ＩＦＮ作用物質治療が行われている疾患が好ましく、例えばＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ＨＴＬＶ−１ウイルスであり、特にＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）疾患治療であることが好ましい。ウイルス性肝炎治療剤の場合、ＨＢｅ抗原陽性でかつＤＮＡポリメラーゼ陽性のＢ型活動性肝炎のウイルス血症の改善、Ｃ型慢性肝炎におけるウイルス血症の改善に使用でき、特にＣ型慢性肝炎患者の治療に有用である。さらに、ウイルス性肝炎に起因する肝硬変にも使用することができる。また、抗腫瘍剤の場合、慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、ＨＴＬＶ−１脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などの治療に使用できる。さらに、自己免疫疾患治療剤の場合、多発性硬化症などの治療に使用できる。
＜副作用軽減剤＞
本発明のＩＦＮ作用物質治療における副作用軽減剤は、有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする、ＩＦＮ作用物質治療の副作用を軽減する副作用軽減剤である。
本発明の副作用軽減剤は、グリシン単独であってもよいが、後述の製剤用担体や一般的な食品素材を含有していてもよい。
ＩＦＮ作用物質治療における副作用軽減とは、ＩＦＮ作用物質投与に伴って発症する間質性肺炎、肺線維症、抑うつ、自殺企画、意識障害、痙攣、見当識障害、せん妄、錯乱、幻覚、躁状態、妄想、精神分裂病症状、失神、痴呆様症状、難聴、興奮、自己免疫現象、糖尿病、肝障害、腎障害、再生不良性貧血、汎血球現象、無顆粒球症、白血球減少、血小板減少、ショック、心筋症、心筋梗塞、心不全、狭心症、心室性頻脈、消化管出血、消化性潰瘍、虚血性大腸炎、脳出血、敗血症、網膜症、発熱、頭痛、頭重感、全身倦怠感、筋肉痛、悪寒、戦慄、関節痛、眠気、不安、不眠、焦燥、めまい、知覚異常、神経過敏、発疹、蕁麻疹、そう痒感、顆粒球減少、リンパ球増多、好酸球増多、単球増多、ＡＳＴの上昇、ＡＬＴの上昇、ＡＬＰの上昇、γ−ＧＴＰの上昇、ＬＤＨの上昇、ＢＵＮの上昇、クレアチニンの上昇、蛋白尿、血尿、浮腫、頻脈、動悸、血圧上昇、顔面潮紅、食欲不振、悪心、嘔吐、消化不良、胸やけ、腹部膨満感、腹痛、下痢、便秘、口内炎、口唇炎、口渇、脱毛、紅班、湿疹、脳波異常、麻痺、下腿痙直、四肢の痺れ、緊張亢進、無力症、肺塞栓症、肺水腫、胸膜炎、胸水、血痰、鼻炎、呟嗽、呼吸困難、喀痰増加、網膜出血、網膜微小循環障害、眼痛、注射部位反応、耳鳴り、アルブミン減少、血清総蛋白減少、体重減少、味覚異常、ほてり、胸部痛、背部痛、咽頭痛、不正出血、嗅覚障害、電解質異常、性欲減退、多汗などの副作用を軽減する作用をいう。ＩＦＮ作用物質の活性が増強された結果として、ＩＦＮ作用物質の投与量の減少が可能となるなどによって、副作用が軽減される場合も含む。
本発明におけるＩＦＮ作用物質治療においては、前述の通り、Ｒｉｂ作用物質を併用してもよいが、Ｒｉｂ作用物質投与に伴う溶血性貧血、全身倦怠感、うつ、不眠などの精神症状、めまいなどの神経症状、食欲低下、吐き気などの消化器症状、筋肉痛、湿疹、掻痒感などが軽減される場合も、本発明の副作用軽減に含まれる。
＜抗ウイルス剤・ウイルス性肝炎治療剤＞
本発明において、グリシンは単独で、あるいは他の抗ウイルス剤、肝炎治療剤などと配合して、抗ウイルス剤、又はウイルス性肝炎治療剤として使用することができる。治療対象として適応するウイルス疾患としては、例えばＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ＨＴＬＶ−１ウイルスが挙げられる。また、ウイルス性肝炎治療剤として用いる場合、ＨＢｅ抗原陽性でかつＤＮＡポリメラーゼ陽性のＢ型活動性肝炎のウイルス血症の改善、Ｃ型慢性肝炎におけるウイルス血症の改善に使用でき、特にＣ型慢性肝炎患者の治療に有用である。さらに、ウイルス性肝炎に起因する肝硬変にも使用することができる。グリシンと配合する抗ウイルス剤としては、前述のＩＦＮ作用物質、Ｒｉｂ作用物質のほか、ラミブジンなどの合成薬などが挙げられ、グリシンと配合する肝炎治療剤としては、ウルソデオキシコール酸、小柴胡湯などが挙げられる。
＜医薬・医薬組成物＞
本発明の医薬には、グリシンとＩＦＮ作用物質を含有する医薬組成物、又はグリシンとＩＦＮ作用物質が別個に製剤化されたもののいずれもが含まれる。
本発明の医薬は、Ｂ型慢性肝炎、Ｃ型慢性肝炎、慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、ＨＴＬＶ−１脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などの疾患に対して使用できる。
＜製剤＞
本発明の医薬及びＩＦＮ作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤、抗ウイルス剤などの薬剤は、例えば、グリシン又は（及び）ＩＦＮ作用物質を自体公知の方法に従って、薬理学的に許容される担体と混合して医薬組成物、例えば注射剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、クリーム剤、坐剤等として、経口又は非経口（例、局所、直腸、静脈投与等）で投与することができる。
本発明における医薬及びＩＦＮ作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤は、薬理学的に許容される担体や添加剤を用いて自体公知の方法により各種製剤として製剤化することができる。製剤としては、例えば、注射剤（筋注用、静注用）、経管液剤などの液剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの固形剤などが挙げられる。
用いられる製剤用担体としては、例えば、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、澱粉、結晶セルロース、炭酸カルシウム、カオリン、デンプン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、エタノール、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム塩、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アセチルセルロース、白糖、酸化チタン、安息香酸、パラオキシ安息香酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、アラビアゴム、トラガント、メチルセルロース、卵黄、界面活性剤、白糖、単シロップ、クエン酸、蒸留水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、マクロゴール、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、ブドウ糖、塩化ナトリウム、フェノール、チメロサール、パラオキシ安息香酸エステル、亜硫酸水素ナトリウム等があり、製剤の形に応じて、本発明の医薬又は薬剤に含有して使用される。
＜投与方法・投与量＞
本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤、抗ウイルス剤、医薬組成物において、グリシンの投与量は患者の病態、年齢、投与方法などによって異なるが、成人の１日量として通常０．１〜５０ｇ／日程度、好ましくは２．５〜４０ｇ／日程度、より好ましくは３〜３０ｇ／日程度とし、これを必要に応じて１〜５回に分割して投与する。
ＩＦＮ作用物質の投与量は、患者の病態、年齢、投与方法などによって異なるが、成人１日量として１００万〜２０００万国際単位程度、あるいは成人１日量として２０〜４００μｇ程度とする。またＲｉｂ作用物質の投与量は、成人１日量として２００〜２０００ｍｇ程度とする。
本発明において、グリシンとＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質は、それぞれ別々の製剤としてもよく、又は、グリシンとＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質を同時に含有する医薬組成物である配合剤としてもよい。
１製剤中のグリシンの配合量は、通常０．０２〜５０ｇ程度、好ましくは０．４〜４０ｇ程度、より好ましくは０．６〜３０ｇ程度とする。
１製剤中のＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質の配合量は、それぞれ薬剤ごとに設定する。
配合剤中のグリシンとＩＦＮ作用物質の比率はグリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が２ｘ１０４〜２ｘ１０８国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．４〜４０００μｇであり、好ましくは、グリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が２．５ｘ１０４〜８ｘ１０６国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．５〜１６０μｇであり、より好ましくは、グリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が３ｘ１０４〜７ｘ１０６国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．７〜１３０μｇである。
さらに本発明は、グリシン及びＩＦＮ作用物質に加えて、Ｒｉｂ作用物質を含有する医薬組成物の提供も可能である。本発明の医薬組成物がグリシン、ＩＦＮ作用物質及びＲｉｂ作用物質を含む場合、医薬組成物中のグリシン、ＩＦＮ作用物質及びＲｉｂ作用物質の比率はグリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が２ｘ１０４〜２ｘ１０８国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．４〜４０００μｇであり、Ｒｉｂ作用物質が４ｍｇ〜２０ｇであり、好ましくは、グリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が２．５ｘ１０４〜８ｘ１０６国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．５〜１６０μｇであり、Ｒｉｂ作用物質が５〜８００ｍｇであり、より好ましくは、グリシン１ｇに対し、ＩＦＮ作用物質が３ｘ１０４〜７ｘ１０６国際単位あるいはＩＦＮ作用物質が０．７〜１３０μｇ、Ｒｉｂ作用物質が７ｍｇ〜７００ｍｇである。
グリシンと、ＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質がそれぞれ別々の製剤である場合、グリシンは、疾病の治療のために単独で投与するか、あるいはＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質との併用を目的として、ＩＦＮ作用物質と同時又はＩＦＮ作用物質投与の前後のいずれかに投与することができる。併用時の投与方法及び投与量は、併用する薬剤の種類や効果によって適宜決定する。
グリシンとＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質を、時間差をおいて投与する場合、時間差は投与する有効成分、剤形、投与方法により異なるが、例えば、グリシンを先に投与する場合、グリシンを投与した後５分〜１４日以内、好ましくは１０分〜７日以内にＩＦＮ作用物質を投与する方法が挙げられる。ＩＦＮ作用物質を先に投与する場合、ＩＦＮ作用物質を投与した後、５分〜１２０時間以内、好ましくは１０分〜８０時間以内にグリシンを投与する方法が挙げられる。
上記本発明で使用する有効成分であるグリシンの投与量（摂取量）について算出する際、本発明で目的とする各種の疾患異常の治療、予防等の目的で使用される薬剤の有効成分として前記の算定範囲が決められているので、これとは別目的で、例えば通常の食生活の必要から、或いは別の疾患の治療目的で、摂取又は投与されるアミノ酸についてはこれを前記算定に含める必要はない。
例えば、通常の食生活から摂取される一日あたりのグリシンの量を前記本発明における有効成分の一日あたりの投与量から控除して算定する必要はない。
＜医薬キット・食品組成物＞
また、本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤又は副作用軽減剤を、例えば有効量のＩＦＮ製剤や、Ｒｉｂ製剤、又はＩＦＮ製剤とＲｉｂ製剤の両方などと組み合わせて、一体包装されるような医薬用キットとすることができる。
本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤及び／又は副作用軽減剤は、食品組成物に含有させることも可能である。上記医薬品組成物を参考として、食品組成物として好ましい栄養成分、添加物等の食品素材を添加して常法により作成すればよい。
＜インターフェロン誘導遺伝子増強剤＞
さらに、本発明のインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤とは、グリシンを有効成分とすることを特徴とするインターフェロン誘導遺伝子の発現を増強する増強剤である。
本発明におけるインターフェロン誘導遺伝子とは、インターフェロンによって産生が誘導されるものであれば特に限定されないが、例えばＰＫＲ遺伝子及び２−５ＡＳ１などが挙げられる。
本発明の薬剤とその用途への使用に関する説明を記載した記載物を含むパッケージにおいて、記載物としては、用途・効能や投与方法などに関する説明事項を記載したいわゆる能書などが挙げられる。
【実施例】  次に、実施例により本発明をさらに詳細に述べる。なお、以下の実施例は、本発明を説明するものであって、本発明をこれに限定するものではない。
（実施例１）
グリシン投与によるＰＢＭＣにおけるＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ、２−５ＡＳ１）発現の増強
４週齢雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット８匹をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｊａｐａｎ  Ｉｎｃ．（Ｙｏｋｏｈａｍａ，Ｊａｐａｎ）から購入し、ＣＲＦ−１飼料（Ｏｒｉｅｎｔａｌ  Ｙｅａｓｔ；Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）と水道水を自由摂取させた。またこれらの動物を金網底のケージに１ケージ当たり４匹ずつ入れ飼育した。動物室は温度２３±３℃に保ち、明期を７：００〜１９：００とした。四塩化炭素とｏｌｉｖｅ  ｏｉｌを１対１で混合した液体を８匹のラットに週２回２ｍｌ／ｋｇ（四塩化炭素換算量１ｍｌ／ｋｇ）で計５回皮下投与し慢性肝炎を惹起させた。最終日投与の一時間後、グリシン２ｇ／ｋｇ又は生理食塩水を１０ｍｌ／ｋｇで各々４匹ずつに経口投与した。２４時間後、エーテル麻酔下において全ラットの下大静脈から２．５ｍｌ採血し、ＰＢＳ２．５ｍｌと混和し、Ｌｙｍｐｈｏｌｙｔｅ−Ｒａｔ（コスモバイオ社）にて末梢血単核球（ＰＢＭＣ）画分を分離した。細胞数をカウントし、５ｘ１０５／ｍｌに調整した後、１ｍｌ／ｗｅｌｌずつ１２ｗｅｌｌプレートにまき３７℃、５％ＣＯ２９５％Ａｉｒのインキュベーターで培養した。
ＩＦＮ添加群には、終濃度１０００ＩＵ／ｍｌになるようＩＦＮ（Ｈｕｍａｎ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ＩＦＮ−α（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社））を添加した。３時間後、ＩＦＮ添加群及びＩＦＮ無添加群の上清を吸引し、ＩＳＯＧＥＮ（日本ジーン）を１ｍｌ／ｗｅｌｌで添加しプロトコールの指示通りｍＲＮＡを抽出した。抽出したＲＮＡにｄＮＴＰｍｉｘ、ＯｌｉｇｏｄＴ、ＤＴＴ、逆転写酵素を添加し、遺伝子増幅装置にてｃＤＮＡを合成した。ｃＤＮＡにＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ及び２−５ＡＳ１）およびコントロールとしてＧＡＰＤＨ遺伝子の各プライマー、ＳＹＢＲ  ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を添加し、ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ増幅・検出システム（ＡＢＩ７７００）にて遺伝子発現量を定量した。結果はＧＡＰＤＨ遺伝子発現量に対するＰＫＲ遺伝子あるいは２−５ＡＳ１遺伝子の発現量の比率として表した。図１、図２に結果を示す。
四塩化炭素投与により慢性肝炎を誘発したモデルラットのＰＢＭＣ培養時にＩＦＮを添加することより、ＩＦＮ誘導遺伝子であるＰＫＲ及び２−５ＡＳ１の発現誘導が認められた。また、この時ラットにグリシンをあらかじめ２ｇ／ｋｇ経口投与しておくことにより、ＰＢＭＣ培養時のＰＫＲ及び２−５ＡＳ１の発現は有意に増強された。また、ＩＦＮ非添加条件においてグリシン投与群では非投与群に比べＰＫＲ及び２−５ＡＳ１の発現は統計学的に有意な高値を示した。
（実施例２）
グリシン投与による肝臓のＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ、２−５ＡＳ１）発現の増強
４週齢雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｊａｐａｎ  Ｉｎｃ．（Ｙｏｋｏｈａｍａ，Ｊａｐａｎ）から購入し、ＣＲＦ−１飼料（Ｏｒｉｅｎｔａｌ  Ｙｅａｓｔ；Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）と水道水を自由摂取させた。またこれらの動物を金網底のケージに１ケージ当たり４匹ずつ入れ飼育した。動物室は温度２３±３℃に保ち、明期を７：００〜１９：００とした。四塩化炭素とｏｌｉｖｅ  ｏｉｌを１対１で混合した液体をラットに週２回２ｍｌ／ｋｇ（四塩化炭素換算量１ｍｌ／ｋｇ）で計５回皮下投与し慢性肝炎を惹起させた。最終投与の翌日、各２匹のラットにグリシン２ｇ／ｋｇ又は生理食塩水を１０ｍｌ／ｋｇで経口投与し、３０分後ＩＦＮを２ｘ１０６Ｕ／ｋｇ尾静脈より静脈内投与した。ＩＦＮ投与３時間後エーテル麻酔下にて肝臓を採取し、液体窒素に浸漬した。肝臓の一部にＩＳＯＧＥＮ（日本ジーン）を１ｍｌ添加しプロトコールの指示通りｍＲＮＡを抽出した。抽出したＲＮＡにｄＮＴＰｍｉｘ、ＯｌｉｇｏｄＴ、ＤＴＴ、逆転写酵素を添加し、遺伝子増幅装置にてｃＤＮＡを合成した。ｃＤＮＡにＩＦＮ誘導遺伝子（ＰＫＲ及び２−５ＡＳ１）およびコントロールとしてＧＡＰＤＨ遺伝子の各プライマー、ＳＹＢＲ  ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を添加し、ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ増幅・検出システム（ＡＢＩ７７００）にて遺伝子発現量を定量した。結果はＧＡＰＤＨ遺伝子発現量に対するＰＫＲ遺伝子あるいは２−５ＡＳ１遺伝子の発現量の比率として表した。図３、図４に結果を示した。
四塩化炭素投与により慢性肝炎を誘発したモデルラットにおいて、ＩＦＮを静脈内投与した際の肝臓におけるＰＫＲ及び２−５ＡＳ１の発現は、ラットにあらかじめ２ｇ／ｋｇのグリシンを経口投与しておくことにより、有意に増強された。
【産業上の利用可能性】  本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤又はＩＦＮ作用物質治療における副作用軽減剤をＩＦＮ作用物質と併用すると、ＩＦＮ作用物質による副作用を低減し、また、著効率を顕著に向上させることができる。そのため、ＩＦＮ作用物質の投与量を減量し、あるいは投与期間を短縮することも可能であり、副作用などのために適応できなかった患者にも適応を拡大することができる。また、副作用の軽減によって、逆に投与量を増量あるいは投与期間を延長するような投与形態の選択も可能となるため、治療方針の幅を広げることも可能である。
また、ＩＦＮ作用物質のＲｉｂ作用物質による併用治療の場合にも、本発明のＩＦＮ作用物質の活性増強剤又は副作用軽減剤を同時に使用することにより、ＩＦＮ作用物質ばかりでなくＲｉｂ作用物質の副作用をも軽減することができる。そのため、Ｒｉｂ作用物質の副作用のために治療を断念又は中断せざるを得なかった患者にも適応を広げることができる。
さらにグリシンは、単独投与によってもＩＦＮ様作用を発現することから、単にＩＦＮ作用物質の活性を増強又は副作用を軽減するに止まらず、ＩＦＮ作用物質及び／又はＲｉｂ作用物質の投与量自体を軽減し、場合によってはＩＦＮ作用物質併用治療におけるＲｉｂ作用物質をグリシンと置き換えることや、グリシン単独を有効成分とするウイルス性疾患治療剤とすることも可能である。
ＩＦＮ作用物質やＲｉｂ作用物質がウイルス性肝炎に代表されるウイルス性疾患の重要な治療剤でありながら、副作用や著効率の点で必ずしも満足のいくものではなかった現状において、本発明のＩＦＮ作用物質治療成績をさらに向上させる上で極めて有用である。
本発明のＩＦＮ誘導遺伝子発現増強剤は、それ自体上記と同様に医薬としての使用のほか、生理学・生物化学分野における実験試薬として利用可能である。
本出願は、日本で出願された特願２００４−２７５９９７号を基礎としており、それらの内容は本明細書に全て包含されるものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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