【手続補正書】
【提出日】令和2年3月27日(2020.3.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
a）インプラント材料；及び
b）足場を有する人工骨組織移植片
を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片であって、
足場上に播種された細胞から構成され、インプラント材料への細胞の接着を促進するよう培養される、移植片。
【請求項２】
a）1つまたは複数の組織形成細胞集団；
b）1つまたは複数の足場；及び
c）インプラント材料
を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片を作製するためのキット。
【請求項３】
インプラント材料がチタンまたは鋼鉄を含む、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項４】
組織移植片が、（i）幹細胞、任意で人工多能性幹細胞由来の細胞；または（ii）前駆細胞、任意で間葉系前駆細胞由来の細胞を含む、請求項1記載の移植片。
【請求項５】
足場が、（i）約0.3ミリメートル〜約10ミリメートル；または（ii）1センチメートル未満の厚さを有する、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項６】
足場が脱細胞化骨組織から本質的になる、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項７】
骨組織が（i）ウシ骨組織または（ii）ヒト骨組織である、請求項6記載の移植片。
【請求項８】
足場が1つまたは複数の合成材料を含み；任意で合成材料が、セラミック、セメント、ポリマー複合材料またはこれらの任意の組み合わせを含む、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項９】
足場が機能化されている、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項１０】
足場が、インプラント材料に適応した1つまたは複数の開口部を含む、請求項1記載の移植片または請求項2記載のキット。
【請求項１１】
培養が静的条件下で行われる、請求項1記載の移植片。
【請求項１２】
培養が動的条件下で行われる、請求項1記載の移植片。
【請求項１３】
培養が、（i）約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9または約10週間行われる；または（ii）10週間より長く行われる、請求項1記載の移植片。
【請求項１４】
培養が培養容器中で行われる、請求項1記載の移植片。
【請求項１５】
培養容器が、バイオリアクター、スピナーフラスコ、回転式容器、灌流もしくは加圧システムまたはこれらの任意の組み合わせを含む、請求項14記載の移植片。
【請求項１６】
組織移植片が骨移植片である、請求項1記載の移植片。
【請求項１７】
組織移植片が血管形成される、請求項1記載の移植片。
【請求項１８】
組織移植片が2つまたはそれ以上の細胞型を含む、請求項1記載の移植片。
【請求項１９】
足場が、カスタマイズされた形状及び／またはサイズを有する、請求項1記載の移植片。
【請求項２０】
足場に播種された細胞が、インプラント材料の周囲での新しい組織の形成を促進する、請求項1記載の移植片。
【請求項２１】
インプラント材料に対する組織の分子的及び／または生物学的反応を決定するために分析され、
任意で分析が、以下：
a）インプラント材料と組織移植片との融合；
b）組織移植片の量及び／もしくは質；
c）インプラント材料と組織移植片との相互作用；
d）インプラント材料への及び／もしくはインプラント材料上での及び／もしくはインプラント材料の周囲での細胞の遊走；
e）細胞接着、細胞形態、細胞生存率及び／もしくは細胞増殖；
f）組織移植片における遺伝子及び／もしくはタンパク質の発現及び／もしくは放出；
g）インプラント材料と組織移植片との相互作用の強さ；または
h）インプラント材料の生物力学
の1つまたは複数を決定することを含む、
請求項1記載の移植片。
【請求項２２】
分析が、コンピュータ断層撮影（CT）法、マイクロトモグラフィー（マイクロCT）法、顕微鏡法、電子顕微鏡法、走査電子顕微鏡法、免疫組織化学法、組織学法またはこれらの任意の組み合わせを含む、請求項21記載の移植片。
【請求項２３】
各組織形成細胞集団が足場に事前適用されている、請求項2記載のキット。
【請求項２４】
少なくとも1つの細胞集団が、（i）幹細胞由来の細胞を含み、任意で幹細胞が人工多能性幹細胞である；または（ii）前駆細胞由来の細胞を含む、請求項2記載のキット。
【請求項２５】
組織移植片を形成するために足場上で1つまたは複数の細胞集団を培養する段階を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片を製造する方法であって、
組織移植片が、インプラント材料への細胞の接着を促進するようインプラント材料と共に培養される、
方法。
【請求項２６】
組織移植片が骨移植片である、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
組織移植片が軟骨移植片である、請求項25記載の方法。
【請求項２８】
組織移植片が血管形成される、請求項25記載の方法。
【請求項２９】
組織移植片が、（i）約1センチメートルまたはそれ未満；あるいは（ii）約0.3ミリメートル〜約10ミリメートルの厚さを有する、請求項25記載の方法。
【請求項３０】
足場が、コンピュータ支援製造、3次元印刷、注型、フライス加工、レーザ切断、ラピッドプロトタイピングまたはこれらの任意の組み合わせを用いて生成される、請求項25記載の方法。
【請求項３１】
細胞が人工多能性幹細胞由来である、請求項25記載の方法。
【請求項３２】
細胞が、（i）骨形成細胞及び／または骨形成細胞に分化することができる細胞；（ii）血管形成細胞及び／または血管形成細胞に分化することができる細胞；または（iii）内皮前駆細胞を含む、請求項25記載の方法。
【請求項３３】
インプラント材料に組織移植片を結合させる段階を含み、任意で、（i）インプラント材料に結合させる前に、組織移植片に細胞が播種される；（ii）インプラント材料に結合させた後に、組織移植片に細胞が播種される；（iii）インプラント材料と組織移植片とが、ねじ込み結合される；（iv）インプラント材料と組織移植片とが、手作業により結合されるまたは機械化されたツールを介して結合される；あるいは（v）組織移植片に穴をあけ、その穴にインプラント材料を挿入することによって、インプラント材料と組織移植片とが結合される、請求項1〜22のいずれか一項記載の骨-インプラントハイブリッド移植片を形成する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
いくつかの実施形態において、本発明が提供する方法、組成物、及び装置、並びにそこから製造された組織は、治療目的（病理学的または外傷性組織欠陥の修復等）、美容目的、または、モデル系での疾病の研究もしくは治療法の開発用を含めて、様々な用途に有用でありうる。
[本発明1001]
a）インプラント材料；及び
b）足場を有する人工骨組織移植片
を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片であって、
足場上に播種された細胞から構成され、インプラント材料への細胞の接着を促進するよう培養される、移植片。
[本発明1002]
インプラント材料がチタンまたは鋼鉄を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1003]
組織移植片が幹細胞または前駆細胞由来の細胞を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1004]
組織移植片が人工多能性幹細胞由来の細胞を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1005]
足場が約0.3ミリメートル〜約10ミリメートルの厚さを有する、本発明1001の移植片。
[本発明1006]
足場が1センチメートル未満の厚さを有する、本発明1001の移植片。
[本発明1007]
足場が脱細胞化骨組織から本質的になる、本発明1001の移植片。
[本発明1008]
骨組織がウシ骨組織である、本発明1007の移植片。
[本発明1009]
骨組織がヒト骨組織である、本発明1007の移植片。
[本発明1010]
足場が1つまたは複数の合成材料を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1011]
合成材料が、セラミック、セメント、ポリマー複合材料またはこれらの任意の組み合わせを含む、本発明1010の移植片。
[本発明1012]
足場が機能化されている、本発明1001の移植片。
[本発明1013]
足場が、インプラント材料に適応した1つまたは複数の開口部を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1014]
培養が静的条件下で行われる、本発明1001の移植片。
[本発明1015]
培養が動的条件下で行われる、本発明1001の移植片。
[本発明1016]
培養が、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9または約10週間行われる、本発明1001の移植片。
[本発明1017]
培養が10週間より長く行われる、本発明1001の移植片。
[本発明1018]
培養が培養容器中で行われる、本発明1001の移植片。
[本発明1019]
培養容器が、バイオリアクター、スピナーフラスコ、回転式容器、灌流もしくは加圧システムまたはこれらの任意の組み合わせを含む、本発明1001の移植片。
[本発明1020]
組織移植片が骨移植片である、本発明1001の移植片。
[本発明1021]
組織移植片が血管形成される、本発明1001の移植片。
[本発明1022]
組織移植片が2つまたはそれ以上の細胞型を含む、本発明1001の移植片。
[本発明1023]
足場が、カスタマイズされた形状及び／またはサイズを有する、本発明1001の移植片。
[本発明1024]
足場に播種された細胞が、インプラント材料の周囲での新しい組織の形成を促進する、本発明1001の移植片。
[本発明1025]
細胞が間葉系前駆細胞を含む、本発明1003の移植片。
[本発明1026]
インプラント材料に対する組織の分子的及び／または生物学的反応を決定するために分析される、本発明1001の移植片。
[本発明1027]
分析が、以下：
a）インプラント材料と組織移植片との融合；
b）組織移植片の量及び／もしくは質；
c）インプラント材料と組織移植片との相互作用；
d）インプラント材料への及び／もしくはインプラント材料上での及び／もしくはインプラント材料の周囲での細胞の遊走；
e）細胞接着、細胞形態、細胞生存率及び／もしくは細胞増殖；
f）組織移植片における遺伝子及び／もしくはタンパク質の発現及び／もしくは放出；
g）インプラント材料と組織移植片との相互作用の強さ；または
h）インプラント材料の生物力学
の1つまたは複数を決定することを含む、本発明1026の移植片。
[本発明1028]
分析が、コンピュータ断層撮影（CT）法、マイクロトモグラフィー（マイクロCT）法、顕微鏡法、電子顕微鏡法、走査電子顕微鏡法、免疫組織化学法、組織学法またはこれらの任意の組み合わせを含む、本発明1027の移植片。
[本発明1029]
a）1つまたは複数の組織形成細胞集団；
b）1つまたは複数の足場；及び
c）インプラント材料
を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片を作製するためのキット。
[本発明1030]
各組織形成細胞集団が足場に事前適用されている、本発明1029のキット。
[本発明1031]
インプラント材料がチタンである、本発明1029のキット。
[本発明1032]
少なくとも1つの細胞集団が、幹細胞または前駆細胞由来の細胞を含む、本発明1029のキット。
[本発明1033]
少なくとも1つの細胞集団が、人工多能性幹細胞由来の細胞を含む、本発明1029のキット。
[本発明1034]
各足場が約0.3ミリメートル〜約10ミリメートルの厚さを有する、本発明1029のキット。
[本発明1035]
各足場が1センチメートル未満の厚さを有する、本発明1029のキット。
[本発明1036]
各足場が脱細胞化骨組織から本質的になる、本発明1029のキット。
[本発明1037]
足場が機能化されている、本発明1029のキット。
[本発明1038]
骨組織がウシ骨組織である、本発明1036のキット。
[本発明1039]
骨組織がヒト骨組織である、本発明1036のキット。
[本発明1040]
足場が1つまたは複数の合成材料を含む、本発明1029のキット。
[本発明1041]
合成材料が、セラミック、セメント、ポリマー複合材料またはこれらの任意の組み合わせを含む、本発明1040のキット。
[本発明1042]
足場が、インプラント材料に適応した1つまたは複数の開口部を含む、本発明1029のキット。
[本発明1043]
組織移植片を形成するために足場上で1つまたは複数の細胞集団を培養する段階を含む、骨-インプラントハイブリッド移植片を製造する方法であって、
組織移植片が、インプラント材料への細胞の接着を促進するようインプラント材料と共に培養される、
方法。
[本発明1044]
組織移植片が骨移植片である、本発明1043の方法。
[本発明1045]
組織移植片が軟骨移植片である、本発明1043の方法。
[本発明1046]
組織移植片が血管形成される、本発明1043の方法。
[本発明1047]
組織移植片が約1センチメートルまたはそれ未満の厚さを有する、本発明1043の方法。
[本発明1048]
組織移植片が約0.3ミリメートル〜約10ミリメートルの厚さを有する、本発明1043の方法。
[本発明1049]
足場が、コンピュータ支援製造、3次元印刷、注型、フライス加工、レーザ切断、ラピッドプロトタイピングまたはこれらの任意の組み合わせを用いて生成される、本発明1043の方法。
[本発明1050]
細胞が人工多能性幹細胞由来である、本発明1043の方法。
[本発明1051]
細胞が、骨形成細胞及び／または骨形成細胞に分化することができる細胞を含む、本発明1043の方法。
[本発明1052]
細胞が、血管形成細胞及び／または血管形成細胞に分化することができる細胞を含む、本発明1043の方法。
[本発明1053]
細胞が内皮前駆細胞を含む、本発明1043の方法。
[本発明1054]
インプラント材料に組織移植片を結合させる段階を含む、本発明1001〜1028のいずれかの骨-インプラントハイブリッド移植片を形成する方法。
[本発明1055]
インプラント材料に結合させる前に、組織移植片に細胞が播種される、本発明1055の方法。
[本発明1056]
インプラント材料に結合させた後に、組織移植片に細胞が播種される、本発明1055の方法。
[本発明1057]
インプラント材料と組織移植片とが、ねじ込み結合される、本発明1055の方法。
[本発明1058]
インプラント材料と組織移植片とが、手作業により結合されるまたは機械化されたツールを介して結合される、本発明1055の方法。
[本発明1059]
組織移植片に穴をあけ、その穴にインプラント材料を挿入することによって、インプラント材料と組織移植片とが結合される、本発明1055の方法。