【手続補正書】
【提出日】令和2年4月23日(2020.4.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
i．B細胞成熟抗原（BCMA）ポリペプチドに結合する抗体または抗体フラグメントを含む細胞外抗原結合ドメインと、
ii．膜貫通ドメインと、
iii．細胞内ドメイン
を含んでいて、ヒトBCMAのN末端の残基13〜32の1個以上のアミノ酸を含むエピトープに結合する、単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項２】
前記細胞外抗原結合ドメインが、
- 配列番号２５（RYWFS）と配列が少なくとも80％一致する重鎖相補性決定領域1（H-CDR1）と、
- 配列番号２６（EINPSSSTINYAPSLKDK）と配列が少なくとも80％一致する重鎖相補性決定領域2（H-CDR2）と、
- 配列番号２７（SLYYDYGDAYDYW）と配列が少なくとも80％一致する重鎖相補性決定領域3（H-CDR3）
を含む可変重鎖（VH）と、
- 配列番号２８（KASQSVESNVA）と配列が少なくとも80％一致する軽鎖相補性決定領域1（L-CDR1）と、
- 配列番号２９（SASLRFS）と配列が少なくとも80％一致する軽鎖相補性決定領域2（L-CDR2）と、
- 配列番号３０（QQYNNYPLTFG）と配列が少なくとも80％一致する軽鎖相補性決定領域3（L-CDR3）
を含む可変軽鎖（VL）を含む、請求項1に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項３】
- RYWX1S （H-CDR1；配列番号３４）（ただしX1は、I, F, L, V, Y. C, G, A, S, Tである）と、
- EINPX2X3STINYAPSLKDK （H-CDR2；配列番号３５）（ただしX2X3は、SS、NS、TS、GS、KS、RS、SD、SN、DEである）と、
- SLYX4DYGDAX5DYW（H-CDR3；配列番号３６）（ただしX4は、Y、L、A、V、F、I、Wである、および／またはX5はY、L、F、I、V、A、Cである）
というCDR配列を含むVHドメインと、
- KASQSVX1X2NVA（L-CDR1；配列番号３７）（ただしX1X2は、ES、SS、TS、QS、HS、DHである）と、
- SASLRFS（L-CDR2；配列番号２９）と、
- QQYNNYPLTFG（L-CDR3；配列番号３０）
というCDR配列を含むVLドメインを含む、請求項1または2に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項４】
以下の配列：
i．H-CDR1：RYWFS （配列番号２５）と、
ii．H-CDR2：EINPSSSTINYAPSLKDK （配列番号２６）と、
iii．H-CDR3：SLYYDYGDAYDYW （配列番号２７）と、
iv．L-CDR1：KASQSVESNVA （配列番号２８）と、
v．L-CDR2：SASLRFS （配列番号２９）と、
vi．L-CDR3：QQYNNYPLTFG （配列番号３０）
を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項５】
配列番号11と配列が少なくとも80％一致するVHドメインと；
配列番号12と配列が少なくとも80％一致するVLドメインを含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項６】
配列番号11の少なくともW36、E50、L99、Y100、Y101、A106又は配列番号２５〜２７の少なくともCDR配列と、配列番号12の少なくともS31、A34、S50、L53、Q89、Y91、Y94、L96、又は配列番号２８〜３０の少なくともCDR配列を含む、請求項5に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項７】
配列番号11に記載のVHドメインと、配列番号12に記載のVLドメインを含む、請求項5に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項８】
請求項1〜７のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチドにおいて、そのCARが、遺伝子改変された免疫細胞で発現するとき、その免疫細胞が、そのCARを通じて非ホジキンリンパ腫（B-NHL）の表面上のBCMAに結合して活性化されることによりそのB-NHLに対する細胞傷害活性を誘導する、単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項９】
前記B-NHLが、JeKo-1細胞系、DOHH-2細胞系、SU-DHL4細胞系、JVM-3細胞系、またはMEC-1細胞系である、請求項８に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、前記VHドメインと前記VLドメインの間に位置するリンカーポリペプチドを含む、請求項1〜10のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１１】
前記リンカーの選択が、Whitlowリンカー、Gly-Serリンカー、配列番号13または14と配列が少なくとも80％一致するリンカーからなされる、請求項11に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１２】
前記細胞外抗原結合ドメインと前記膜貫通ドメインの間に位置するスペーサペプチドを含んでいて、そのスペーサの選択が、
a．IgG1-CD28 スペーサ（配列番号15；PAEPKSPDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPK
DTLMIARTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKK）
b．IgG1Δ- 4-1BB スペーサ（配列番号16；PAEPKSPDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFP
PKPKDTLMIARTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSSLSPGKK）
c．IgG4 (Hi-CH2-CH3) スペーサ（配列番号17；ESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPP
KPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK）
d．IgG4 (Hi-CH3) スペーサ（配列番号18；ESKYGPPCPPCPGQPREPQVYTLPPSQE
EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK)
e．IgG4 (Hi) スペーサ（配列番号19；ESKYGPPCPPCP）
f．配列番号15〜19のいずれか1つと配列が少なくとも80％一致するスペーサ
からなされる、請求項1〜12のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１３】
前記膜貫通ドメインが、CD8α、CD28、配列番号20または21と配列が少なくとも80％一致する膜貫通ドメインから選択される、請求項1〜12のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１４】
前記細胞内ドメインが、4-1BBの共刺激シグナルドメイン、CD28の共刺激シグナルドメイン、又は配列番号22または23と配列が少なくとも80％一致する共刺激ドメインを含む、請求項１〜１３のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１５】
CD3ζのシグナル伝達ドメイン、または配列番号24と配列が少なくとも80％一致するシグナル伝達ドメインを含む、請求項1〜15のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１６】
4-1BBと、CD28共刺激ドメインと、CD3ζのシグナル伝達／活性化ドメインを含むタンデム式共刺激シグナル伝達ドメインを含む、請求項1〜16のいずれか1項に記載の単離されたキメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチド。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の単離キメラ抗原受容体（CAR）ポリペプチドをコードする、単離された核酸分子。
【請求項１８】
請求項17に記載の核酸分子、および／または請求項1〜16のいずれか1項に記載のCARを発現する、細胞。
【請求項１９】
前記細胞が、前記CARが結合するBCMAに応答する細胞内ドメインによるシグナル伝達を介して活性化される、請求項１８に記載の細胞。
【請求項２０】
前記細胞が、Tリンパ球とNK細胞からなるグループから選択される、請求項１８又は１９に記載の細胞。
【請求項２１】
前記Tリンパ球が細胞傷害性Tリンパ球である、請求項20に記載の細胞。
【請求項２２】
病原性B細胞の存在に関連する医学的障害の治療に利用するための、請求項19〜21のいずれか1項に記載の細胞を含む医薬製剤。
【請求項２３】
前記医学的障害が、病原性B細胞の存在に関連する、医薬として利用するための請求項２２に記載の医薬製剤。
【請求項２４】
前記医学的障害が、形質細胞の疾患、成熟B細胞の疾患、および／または記憶B細胞の疾患である、医薬として利用するための、請求項22に記載の免疫細胞。
【請求項２５】
前記医学的障害が多発性骨髄腫である、医薬として利用するための、請求項22に記載の医薬製剤。
【請求項２６】
前記医学的障害が非ホジキンリンパ腫である、医薬として利用するための、請求項22に記載の医薬製剤。
【請求項２７】
前記医学的障害が自己抗体依存性自己免疫疾患である、医薬として利用するための、請求項22に記載の医薬製剤。
【請求項２８】
前記医学的障害が全身性エリテマトーデス（SLE）または関節リウマチである、薬として利用するための、請求項26に記載の医薬製剤。