【手続補正書】
【提出日】令和2年1月15日(2020.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体を調製する方法であって、抗体をコードするＣＨＯグリコシル化突然変異細胞株から前記抗体を発現させることを含み、ここで、前記ＣＨＯ細胞により産生される抗体上のＮ−グリカンが、Ｎ−アセチルグルコサミンである末端糖を有するように、前記ＣＨＯ細胞株に対して変異導入されている、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、前記突然変異が、少なくともＵＤＰ−Ｇａｌゴルジ輸送体における下方制御をもたらす、方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法であって、前記突然変異が、少なくともＣＭＰ−シアル酸ゴルジ輸送体における下方制御、ＧｌｃＮＡｃ−ＴＶの下方制御または誤った局在化、ＧｌｃＮＡｃ−ＴＩＩＩの上方制御およびそれらの組み合わせをさらに提供する、方法。
【請求項４】
請求項１〜３の何れか１項に記載の方法であって、前記細胞株が生産細胞株である、方法。
【請求項５】
請求項１〜４の何れか１項に記載の方法であって、前記細胞株がＬｅｃ３．２．８、Ｌｅｃ４．８、Ｌｅｃ４Ａ．８、Ｌｅｃ８およびＬｅｃ１０．８を含む群から選択される、方法。
【請求項６】
請求項１〜５の何れか１項に記載の方法であって、前記ＣＨＯ突然変異細胞株から発現される前記抗体上のＮ−グリカンにおいてＮ−アセチルグリコサミン基質を酵素トランスフェラーゼの存在下で反応性糖と反応させて、前記グリカンに対して前記反応性糖残基を付加させる段階をさらに含む、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、前記トランスフェラーゼが、１または２個のアミノ酸が置換されているか、欠失しているかまたは付加されているその突然変異体型を含むＧａｌＴ酵素である、方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、前記ＧａｌＴ酵素が、Ｙ２８９Ｌ、Ｙ２８９Ｎ、Ｙ２８９ＩおよびＲ２２８Ｋを含む群から選択される突然変異型である、方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、前記ＧＡＬＴ酵素が突然変異Ｙ２８９Ｌを有する、方法。
【請求項１０】
請求項６に記載の方法であって、前記反応性糖がケトン、アルキニル、アジドから選択される化学官能基を含む、方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、前記反応性糖がガラクトサミンの誘導体である、方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法であって、前記反応性糖がＧａｌＡｚまたはケト−Ｇａｌ残基を含む、方法。
【請求項１３】
請求項６〜１２の何れか１項に記載の方法であって、前記反応性糖が、転移型の酵素基質ＵＤＰ−ＧａｌＸであり、ＵＤＰがウリジン−二リン酸を表し、Ｇａｌがガラクトース残基を表し、Ｘがアルデヒド、アルキニルまたはアジドの形態の官能基を表す、方法。
【請求項１４】
請求項６〜１３の何れか１項に記載の方法であって、酵素転移によりグリカンに付加されたガラクトース残基中のアルデヒド、アルキニルまたはアジド官能基にペイロードをコンジュゲートするさらなる段階を含む、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、前記ペイロードが、毒素、薬物分子（細胞毒性剤など）、ポリマー、抗体またはそれらの結合断片を含む群から選択される、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本開示は、治療における、特に癌の治療における使用のための、本明細書中で開示される抗体または抗体分子または組成物にも拡大する。
本発明の実施形態を、以下、さらに記載する：
［項１］
抗体をコードするＣＨＯグリコシル化突然変異細胞株から前記抗体を発現させることを含む方法であって、前記ＣＨＯ細胞により産生される抗体上のＮ−グリカンが、Ｎ−アセチルグルコサミンである末端糖を有するように、前記ＣＨＯ細胞株に対して変異導入されている、方法。
［項２］
上記項１に記載の方法であって、前記突然変異が、少なくともＵＤＰ−Ｇａｌゴルジ輸送体における下方制御をもたらす、方法。
［項３］
上記項２に記載の方法であって、前記突然変異が、少なくともＣＭＰ−シアル酸ゴルジ輸送体における下方制御、ＧｌｃＮＡｃ−ＴＶの下方制御または誤った局在化、ＧｌｃＮＡｃ−ＴＩＩＩの上方制御およびそれらの組み合わせをさらに提供する、方法。
［項４］
上記項１〜３の何れか１項に記載の方法であって、Ｎ−グランス（Ｎ−ｇｌａｎｓ）上の末端糖残基がＮ−アセチルグルコサミンである、方法。
［項５］
上記項１〜４の何れか１項に記載の方法であって、前記細胞株が生産細胞株である、方法。
［項６］
上記項１〜５の何れか１項に記載の方法であって、前記細胞株がＬｅｃ３．２．８、Ｌｅｃ４．８、Ｌｅｃ４Ａ．８、Ｌｅｃ８およびＬｅｃ１０．８を含む群から選択される、方法。
［項７］
上記項１〜４の何れか１項に記載の方法であって、前記ＣＨＯ突然変異細胞株から発現される前記抗体上のＮ−グリカンにおいてＮ−アセチルグリコサミン基質を酵素触媒の存在下で反応性糖と反応させて、前記グリカンに対して前記反応性糖残基を付加させる段階をさらに含む、方法。
［項８］
上記項７に記載の方法であって、前記酵素がトランスフェラーゼである、方法。
［項９］
上記項８に記載の方法であって、前記トランスフェラーゼが、１または２個のアミノ酸が置換されているか、欠失しているかまたは付加されているその突然変異体型を含むＧａｌＴ酵素である、方法。
［項１０］
上記項９に記載の方法であって、前記ＧａｌＴ酵素が、Ｙ２８９Ｌ、Ｙ２８９Ｎ、Ｙ２８９ＩおよびＲ２２８Ｋを含む群から選択される突然変異型である、方法。
［項１１］
上記項１０に記載の方法であって、前記ＧＡＬＴ酵素が突然変異Ｙ２８９Ｌを有する、方法。
［項１２］
上記項７に記載の方法であって、前記反応性糖がケトン、アルキニル、アジドから選択される化学官能基を含む、方法。
［項１３］
上記項１２に記載の方法であって、前記反応性糖がガラクトサミンの誘導体である、方法。
［項１４］
上記項１３に記載の方法であって、前記反応性糖がＧａｌＡｚまたはケト−Ｇａｌ残基を含む、方法。
［項１５］
上記項７〜１４の何れか１項に記載の方法であって、前記反応性糖が、転移型の酵素基質ＵＤＰ−ＧａｌＸであり、ＵＤＰがウリジン−二リン酸を表し、Ｇａｌがガラクトース残基を表し、Ｘがアルデヒド、アルキニルまたはアジドの形態の官能基を表す、方法。
［項１６］
上記項７〜１５の何れか１項に記載の方法であって、酵素転移によりグリカンに付加されたガラクトース残基中のアルデヒド、アルキニルまたはアジド官能基にペイロードをコンジュゲートするさらなる段階を含む、方法。
［項１７］
上記項１６に記載の方法であって、前記ペイロードが、毒素、薬物分子（細胞毒性剤など）、ポリマー、抗体またはそれらの結合断片を含む群から選択される、方法。
［項１８］
上記項１７に記載の方法であって、前記薬物分子が、メイタンシノイド、例えばＮ２’−デアセチル−Ｎ２’−（３−メルカプト−１−オキソプロピル）−メイタンシン（ＤＭ１）、Ｎ２’−デアセチル−Ｎ２’−（４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン（ＤＭ３）およびＮ２’−デアセチル−Ｎ２’（４−メチル−４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン（ＤＭ４）を含む群から選択される、方法。
［項１９］
上記項１７に記載の方法であって、前記ペイロードが毒素である、方法。
［項２０］
上記項１７に記載の方法であって、前記ポリマーが天然ポリマー、例えばデンプンまたはアルブミンなど、または合成ポリマー、例えばＰＥＧなどである、方法。
［項２１］
上記項１６〜２０の何れか１項に記載の方法であって、使用されるコンジュゲーション化学がクリック化学である、方法。
［項２２］
上記項２１に記載の方法であって、前記クリック化学が銅フリー化学である、方法。
［項２３］
上記項１〜２２の何れか１項から得られるかまたは得ることが可能な分子。