【手続補正書】
【提出日】令和2年3月13日(2020.3.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
使用場所で細菌芽胞を発芽させる方法であって、
栄養−発芽性組成物と、細菌種の芽胞が前記栄養−発芽性組成物の中に含まれない場合は細菌種の芽胞と、を準備するステップと、
前記栄養−発芽性組成物及び芽胞を、使用場所又はその近傍で、約３５℃〜６０℃の範囲の温度に加熱するステップと、
発芽した芽胞溶液を生成するために、約２〜６０分の培養期間の間、前記範囲の温度を維持するステップと、
発芽した芽胞溶液を使用場所に分配するステップと、を含み、
前記使用場所は、動物の飼料、動物用の水、動物の寝床、植物、池、廃水システム又は排水を含み、
前記加熱するステップ及び前記維持するステップは、酸素の存在下で行われ、
前記栄養−発芽性組成物が、（１）１又は２種以上のＬ−アミノ酸と、（２）燐酸塩緩衝剤、ＨＥＰＥＳ、Ｔｒｉｓ塩基、又はそれらの組合せを含む１又は２種以上の緩衝剤と、（３）工業用防腐剤と、（４）任意選択的にカリウムイオン源と、を含む、方法。
【請求項２】
栄養−発芽性組成物は濃縮された液体の形態であり、
栄養−発芽性組成物に希釈剤を加えるステップと、
培養期間中、希釈された栄養−発芽性組成物と細菌芽胞とを混合するステップと、をさらに含み、
希釈された栄養−発芽性組成物の濃度が、約０．１％〜１０％である、請求項１の方法。
【請求項３】
温度範囲は、約４１℃〜４４℃である、請求項１の方法。
【請求項４】
Ｌ−アミノ酸は、Ｌ−アラニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−バリン、Ｌ−システイン、大豆タンパク質の加水分解物、又はそれらの組合せである、請求項１、２又は３の方法。
【請求項５】
濃縮された栄養−発芽性組成物は、１又は２種以上のＬ−アミノ酸を合計で約１７．８ｇ／Ｌ〜８９ｇ／Ｌ含み、希釈された栄養−発芽性組成物の濃度は、濃縮された栄養−発芽性組成物の約４％である、請求項２の方法。
【請求項６】
栄養−発芽性組成物は、バチルス種の芽胞をさらに含む、請求項５の方法。
【請求項７】
塩化ナトリウム、Ｄ−アラニン、又はそれらの組合せをさらに含む、請求項６の方法。
【請求項８】
栄養−発芽性組成物は、約２９ｇ／Ｌ〜１１７ｇ／Ｌの塩化ナトリウム又は約８ｇ／Ｌ〜１１６ｇ／ＬのＤ−アラニン又はそれらの組合せを含む、請求項７の方法。
【請求項９】
細菌種は、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・サブチリス、バチルス・アミロリケファシエンス、バチルス・ポリミキサ、バチルス・チューリンゲンシス、バチルス・メガテリウム、バチルス・コアグランス、バチルス・レンタス、バチルス・クラウジ、バチルス・シルクランス、バチルス・フィルムス、バチルス・ラクティス、バチルス・ラテロスポルス、バチルス・ラエボラクティクス、バチルス・プミルス、バチルス・シンプレックス、バチルス・スファエリクス又はそれらの組合せである、請求項１、２、３、４、５、６、７、又は８の方法。
【請求項１０】
バチルス種は、消費する動物の消化管、廃水又は排水ラインの中の有機物の分解を補助する酵素を産生する能力を有し、前記酵素は、アミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、ウレアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、又はそれらの組合せを含む、請求項６の方法。
【請求項１１】
栄養−発芽性組成物は、
１又は２種以上のＬ−アミノ酸を約８．９〜１３３．５ｇ／Ｌと、
１又は２種以上の工業用防腐剤を合計で約０．８〜３．３ｇ／Ｌと、
１又は２種以上の燐酸塩緩衝剤を合計で約４０〜１２６ｇ／Ｌ、又はＴｒｉｓ塩基を約１５〜６１ｇ／Ｌ、又はＨＥＰＥＳを約３２．５〜９７．５ｇ／Ｌ、又はそれらの組合せと、
任意選択的に、Ｄ−グルコース、又はＤ−フルクトース、又はそれらの組合せを約１８〜５４ｇ／Ｌと、
任意選択的に、ＫＣｌを約７．４〜２２．２ｇ／Ｌと、
を含む濃縮液体である、請求項１乃至１０の何れかの方法。
【請求項１２】
栄養−発芽性組成物に希釈剤を加えるステップと、
培養期間中、希釈された栄養−発芽性組成物と細菌芽胞とを混合するステップと、をさらに含む、請求項１１の方法。
【請求項１３】
希釈された栄養−発芽性組成物の濃度は、約０．１％〜１０％である、請求項１２の方法。
【請求項１４】
細菌芽胞の発芽を補助する栄養−発芽性組成物であって、
Ｌ−アミノ酸と、
燐酸塩緩衝剤、ＨＥＰＥＳ、Ｔｒｉｓ塩基、又はそれらの組合せを含む１又は２種以上の緩衝剤と、
１又は２種以上の工業用防腐剤と、
任意選択的にＤ−グルコース、又は任意選択的にＤ−フルクトース、又は任意選択的にＤ−グルコース及びＤ−フルクトースの両方と、
任意選択的にカリウムイオン源と、を含む、栄養−発芽性組成物。
【請求項１５】
Ｌ−アミノ酸は、Ｌ−アラニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−バリン、Ｌ−システイン、大豆タンパク質の加水分解物、又はそれらの組合せである、請求項１４の栄養−発芽性組成物。
【請求項１６】
１又は２種以上のＬ−アミノ酸を合計で約１７．８ｇ／Ｌ〜８９ｇ／Ｌ含む、請求項１４の栄養−発芽性組成物。
【請求項１７】
バチルス・リケニフォルミス、バチルス・サブチリス、バチルス・アミロリケファシエンス、バチルス・ポリミキサ、バチルス・チューリンゲンシス、バチルス・メガテリウム、バチルス・コアグランス、バチルス・レンタス、バチルス・クラウジ、バチルス・シルクランス、バチルス・フィルムス、バチルス・ラクティス、バチルス・ラテロスポルス、バチルス・ラエボラクティクス、バチルス・プミルス、バチルス・シンプレックス、バチルス・スファエリクス又はそれらの組合せからなる芽胞と、任意選択的に発芽阻害剤と、をさらに含む、請求項１４、１５、又は１６の栄養−発芽性組成物。
【請求項１８】
発芽阻害剤又は防腐剤は、約２９ｇ／Ｌ〜１１７ｇ／Ｌの塩化ナトリウム、約８ｇ／Ｌ〜１１６ｇ／ＬのＤ−アラニン、メチルクロロイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン、又はそれらの組合せを含む、請求項１７の栄養−発芽性組成物。
【請求項１９】
バチルス種は、消費する動物の消化管、廃水又は排水ラインの中の有機物の分解を補助する酵素を産生する能力を有し、前記酵素は、アミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、ウレアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、又はそれらの組合せを含む、請求項１７の栄養−発芽性組成物。
【請求項２０】
栄養−発芽性組成物は、
１又は２種以上のＬ−アミノ酸を約８．９〜１３３．５ｇ／Ｌと、
１又は２種以上の工業用防腐剤を合計で約０．８〜３．３ｇ／Ｌと、
１又は２種以上の燐酸塩緩衝剤を合計で約４０〜１２６ｇ／Ｌ、又はＴｒｉｓ塩基を約１５〜６１ｇ／Ｌ、又はＨＥＰＥＳを約３２．５〜９７．５ｇ／Ｌ、又はそれらの組合せと、
任意選択的に、Ｄ−グルコース、又はＤ−フルクトース、又はそれらの組合せを約１８〜５４ｇ／Ｌと、
任意選択的に、ＫＣｌを約７．４〜２２．２ｇ／Ｌと、
を含む濃縮液体である、請求項１４の組成物。
【請求項２１】
燐酸塩緩衝剤は、約１０〜３０ｇ／Ｌの燐酸一ナトリウムと、約３０〜９０ｇ／Ｌの燐酸二ナトリウムとを含む、請求項２０の組成物。
【請求項２２】
栄養−発芽性組成物は、フルクトース若しくはグルコースを含まず、及び／又は、工業用防腐剤は、プロピルパラベン、メチルパラベン、メチルクロロイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン若しくはそれらの組合せを含む、請求項１乃至１３の何れかの方法。
【請求項２３】
培養期間は２〜５分間であり、及び／又は、芽胞は、栄養−発芽性組成物と共に加熱する前に熱活性化されていない、請求項１乃至１３の何れかの方法。
【請求項２４】
工業用保存剤はＧＲＡＳ標準に適合し、栄養−発芽性組成物はカリウムイオン源を含む、請求項１乃至１３の何れかの方法。
【請求項２５】
栄養−発芽性組成物は、フルクトース若しくはグルコースを含まず、及び／又は、工業用防腐剤は、プロピルパラベン、メチルパラベン、メチルクロロイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン若しくはそれらの組合せを含む、請求項１４乃至２１の何れかの組成物。
【請求項２６】
工業用保存剤はＧＲＡＳ標準に適合し、栄養−発芽性組成物はカリウムイオン源を含む、請求項１４乃至２１の何れかの組成物。