【事件の表示】
　特願２０１１−　３６１０２「連続的灌流および交互接線流による細胞培養の方法」拒絶査定不服審判事件〔平成２３年　６月３０日出願公開、特開２０１１−１２５３４８〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
１　手続の経緯
　本願は，平成１７年３月４日（パリ条約による優先権主張外国庁受理　平成１６年３月５日(2004.3.5)　欧州特許庁(EP)　平成１６年３月５日(2004.3.5)　欧州特許庁(EP)　平成１６年９月２７日(2004.9.27)　欧州特許庁(EP)　平成１６年９月２７日(2004.9.27)　欧州特許庁(EP))を国際出願日とする，特願２００７−５０１２３９号の一部を，特許法第４４条第１項の規定により平成２３年２月２２日に新たな特許出願として分割したものであって，平成２５年９月２７日付けで拒絶査定がなされたところ，これに対して，平成２６年１月３１日に拒絶査定不服審判の請求がなされたものである。
　その後，当審において平成２７年５月１９日付けで拒絶理由が通知され，同年１０月２６日付けで手続補正書及び意見書が提出されたものである。
　
２　本願発明
　本願請求項１〜６に係る発明は，平成２７年１０月２６日付け手続補正書で補正された特許請求の範囲の請求項１〜６に記載の事項により特定される発明であると認める。
　そのうち，請求項１に係る発明(以下，「本願発明」という。)は，当審において(a)〜(e)付与して分節すると，次の事項により特定されるものである。
「　【請求項１】
(a)　細胞培養培地及び，
(b)灌流培養時に凝集体を容易に又は本質的に形成する動物細胞の懸濁液を含む灌流培養物であって，
(c)前記動物細胞が前記灌流培養物中に少なくとも80×106細胞/mlの生存細胞密度で存在し，
(d)前記動物細胞がPER.C6（登録商標）細胞である，
(e)灌流培養物。」
　
３　当審の拒絶理由の概要
　平成２７年５月１９日付けの当審の拒絶理由の一つは，概ね，
(理由2)この出願の下記の請求項に係る発明は，その出願の優先日前日本国内又は外国において頒布された下記の刊行物に記載された発明又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった発明に基いて，その出願の優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　　　　　　　　　　　　　　記
　以下，本願請求項１〜７に係る発明を「本願発明１〜７」という。
刊行物１：国際公開第００／０４６３５４号公報
刊行物２：特開平５−１５３９７３
というものである。
　
４　引用刊行物記載の事項
　上記当審の拒絶理由で引用され，本願優先日前に頒布された刊行物である刊行物１及び刊行物２には，次の事項が記載されている。
　なお，翻訳及び下線は当審によるものである。
(１)　刊行物１記載の事項
(刊１−１)「
細胞培養過程中，細胞密度が増加すると酸素要求が増加
剪断力が増加してしまう
剪断に関連する細胞死
　したがって，それは，
必要とされる栄養素の供給及び阻害性廃棄物の除去手段を提供すること
は酸素供給から剪断に関連する細胞死を減少または制限する
いう要求に応える酸素供給を提供する
　
(刊１−２)「発明の目的および概要
　
本発明の目的は
高密度まで，細胞
増殖させるための装置
を提供することであり得る
　その
装置および方法は，同時に
透析過程は，中空糸フィルタのような半透膜を通した増殖中の細胞の循環を使用してもよく，細胞培地と「再生」培地及び培地(当審注：複数形)と称される追加培地の外部供給源との間で小分子の交換が行われる。
　その装置および方法は，互換性のある成分のモジュラーセットを提供し得る。この互換性は，性能を改良するために行われる細胞培養の異なるフェーズの間において最適化を提供し，そして，細胞培養操業を中断することなしに機能不全のコンポーネントを迅速に交換する性能を提供する。
　
中空糸フィルターの比較的小径の管材料を通る細胞の循環は
いかなる凝集した細胞をも崩壊させる追加の利点を提供する
凝集の内部細胞は，外部細胞のように，栄養と酸素を容易に吸収できずそして廃棄物を除去できないので，凝集した細胞は，産物の産生においては有効ではない
(刊１−３)「このバイオリアクターシステム及び方法における中空糸フィルター（図３）は，血液が，吸収したばかりの栄養素を取得する消化管を通って循環し，そして，追加され又は除去される代謝廃棄物がぞれぞれ循環する血液から加えられたり除去されたりする肝臓及び腎臓のような器官を通過する血管によく似て作用する。」(明細書42頁1〜5行)
　
(刊１−４)「実施例８−
CHO哺乳類細胞
　
例えば哺乳類細胞のような，昆虫細胞以外の細胞の高密度の増殖を支持する本発明の能力を測定するために，そして，これにより組換えタンパク質の発現が改良されることを示すため
ヒトマクロファージコロニー刺激因子を発現するように遺伝子操作されたチャイニーズハムスターの細胞系(M-CSF CHO細胞)
本発明の高密度装置（図１，実施例１）が組み立てられ，そして，細胞はその中に導入され，そして，本発明による実験を行った。
中空糸フィルタを通して50ml/分で循環させた
5日目までに13.6×10
6
細胞/mlの密度
　
(刊１−５)図１
　　
(刊１−６)図１１
 　
(２)　刊行物２記載の事項
(刊２−１)「【００１０】以上の構成において，操作手順を説明する。まず，培養槽1には培地を添加し，細胞を接種する。次に培養槽1に培地を一定流量で添加し，細胞分離装置12を用いて細胞を培養槽1内に残したまま，培地のみを一定流量で抜き出す。
細胞の増殖にともない培養槽1内の細胞密度が増加してくるが，これと同時にCHO細胞のような若干の付着性を有する細胞の場合には細胞同志が相互に付着することにより細胞凝集塊を形成し始める
　
５　刊行物１に記載の発明
　刊行物１には，「高密度まで，細胞産物及び／又は細胞の増殖のための装置及び／又は方法を提供することにある」(刊１−２)という目的の下，図１(刊１−５)に記載のような，インライン酸素注入装置である中空糸で構成される酸素供給装置151や中空糸透析装置300を有する高密度透析バイオリアクターが開発されたことが記載されている。
　
　その内，実施例８(刊１−４)は，「例えば哺乳類細胞のような，昆虫細胞以外の細胞の高密度の増殖を支持する本発明の能力を測定するために」(刊１−４)に行われた実施例であり，「本発明の高密度装置（図１，実施例１）が組み立てられ，そして，細胞はその中に導入され，そして，本発明による実験を行った。」(刊１−４)ものである。
　
　実施例８で使用された図１(刊１−５)に記載の中空糸酸素供給装置と中空糸透析装置を有する高密度装置及び実施例８(刊１−４)に付した下線を整理すると，刊行物１には，次の発明(以下，「引用発明」という。)が記載されていると認められる。
　
「ヒトマクロファージコロニー刺激因子を発現するように遺伝子操作されたチャイニーズハムスターの細胞系(M-CSF CHO細胞)を，HyQ PF CHO培地を使用して，中空糸酸素供給装置と中空糸透析装置を有する高密度装置を用い培養することにより，約24時間ごとに2倍になり，5日目までに13.6×106細胞/mlの密度となった，M-CSF CHO細胞の培養物。」
　
６　対比
　本願発明と引用発明を対比する。
（１）　本願発明(a)の特定事項について
　引用発明の「HyQ PF CHO培地」は，本願発明の「(a)　細胞培養培地」に相当する。
　
（２）　本願発明(b)及び(e)の特定事項について
　引用発明の「中空糸透析装置」は，「このバイオリアクターシステム及び方法における中空糸フィルター（図３）は，血液が，吸収したばかりの栄養素を取得する消化管を通って循環し，そして，追加され又は除去される代謝廃棄物がぞれぞれ循環する血液から加えられたり除去されたりする肝臓及び腎臓のような器官を通過する血管によく似て作用する。」(刊１−３)と記載されているように，培地から代謝廃棄器物の除去，及び，栄養素の追加を行うものであるから，引用発明の「中空糸酸素供給装置と中空糸透析装置を有する高密度装置」は，灌流培養装置といえる。
　よって，引用発明の「中空糸酸素供給装置と中空糸透析装置を有する高密度装置」で培養された「M-CSF CHO細胞の培養物」は，本願発明の「(e)灌流培養物」に相当する。
　
　また，引用発明の「M-CSF CHO細胞」の遺伝子操作される前のCHO細胞は，刊行物２に「細胞凝集塊を形成し始める」(刊２−１)と記載されているように，凝集性の細胞である。
　引用発明の「M-CSF CHO細胞」は，M-CSFを発現するように遺伝子操作されているが，M-CSFが細胞凝集性を低下させるような技術常識はないので，CHO細胞と同様の凝集性を有するものといえ，引用発明の「M-CSF CHO細胞の培養物」は，本願発明の「(b)灌流培養時に凝集体を容易に又は本質的に形成する動物細胞の懸濁液を含む灌流培養物」に相当する。
　
（３）　本願発明(c)の特定事項について
　引用発明の「5日目までに13.6×106細胞/mlの密度となった，M-CSF CHO細胞の培養物」と，本願発明の「(c)前記動物細胞が前記灌流培養物中に少なくとも80×106細胞/mlの生存細胞密度で存在」することとは，「(c)前記動物細胞が前記灌流培養物中に高密度で存在」する点で共通する。
　
（４）　本願発明(d)の特定事項について
　本願発明の「PER.C6（登録商標）細胞」は，ヒト由来の細胞である。
　そうすると，引用発明の「M-CSF CHO細胞」は，チャイニーズハムスター由来の細胞であり，本願発明の「(d)前記動物細胞がPER.C6（登録商標）細胞」とは，「(d)前記動物細胞が哺乳類細胞」である点で共通する。
　
（４）　小括
　以上のことを総合すると，両発明の間には，次の一致点及び相違点がある。
(一致点)
「(a)　細胞培養培地及び，
(b)　灌流培養時に凝集体を容易に又は本質的に形成する動物細胞の懸濁液を含む灌流培養物であって，
(c)　前記動物細胞が前記灌流培養物中に高密度で存在し，
(d)　前記動物細胞が哺乳類細胞である，
(e)　灌流培養物。」　
　
(相違点)
　哺乳類細胞及び細胞密度が本願発明ではそれぞれ「PER.C6（登録商標）細胞」であり，「少なくとも80×106細胞/mlの生存細胞密度」で存在するのに対して，引用発明は「M-CSF CHO細胞」であり，「5日目までに13.6×106細胞/mlの密度」となったものである点。
　
７　当審の判断
（１）　相違点について
　引用発明では「約24時間ごとに2倍になり，5日目までに13.6×106細胞/mlの密度となった」と特定されているように，所定の時間毎に2倍となる対数増殖期は5日目でも，図１１(刊１−６)のごとく終わっていない。そのまま培養を続ければ，80×106細胞/mlの生存細胞密度になるまで培養し得るであろうことは当業者が予想するところである。
　
　また，上記「５　刊行物１に記載の発明」で述べたとおり，引用発明は，「高密度まで，細胞産物及び／又は細胞の増殖のための装置及び／又は方法を提供することにある」(刊１−２)という目的の下，「例えば哺乳類細胞のような，昆虫細胞以外の細胞の高密度の増殖を支持する本発明の能力を測定するために，そして，これにより組換えタンパク質の発現が改良されることを示すために，以下の実験を行った」(刊１−４)とする，実施例８(刊１−４)に基づくものである。
　このことに照らせば，引用発明は「M-CSF CHO細胞」に限らず，他の哺乳類細胞の培養に適用し得ることは明らかなことである。
　
　一方，PER.C6細胞は，例えば下記刊行物Ａに「
PER.C6細胞は
懸濁液成長可能
　なお，刊行物Ｂの(刊Ｂ−１)には，「細胞の凝集を減少させる」「ポリアニオン性化合物またはポリアニオン性化合物」を添加して培養する好ましい細胞として「PER-C6細胞」が挙げられており，PER-C6細胞が凝集性の細胞であることも普通に知られている。
　
刊行物Ａ：特表２００２−５４１８５４号公報）
(刊Ａ−１)「【００４３】
　所望の免疫グロブリンを単離し易い清潔で，かつ安全な生産系を持つためには，本発明による方法を使用することが好ましく，それによって，前記ヒト細胞は，他のアデノウイルス配列を含まない。本発明の方法と使用に対して最も好ましい細胞は，ECACC no.96022940下で寄託されたようなPER.C6又はその誘導体である。PER.C6は，例えば，アデノウイルスE1領域によって不死化した形質転換ヒト293細胞より，取り扱いにおいて特により安定であることが判明した。
PER.C6細胞は，大規模で，懸濁液成長可能で，及び成長因子無関係の良好な方法であると証明されて，広範に特徴つけられ，提供されている
　
刊行物Ｂ：特表２０００−５１７１８８号公報
(刊Ｂ−１)「交換培地
　本発明はまた，化学的に規定された，無タンパク質の真核生物（例えば，哺乳動物）細胞培養培地（これは，Fe2+および／もしくはFe3+キレートならびに／またはZn2+塩，ならびに必要に応じて少なくとも１つの本明細書中で規定されるポリアニオン性化合物またはポリカチオン性化合物を含む）交換培地を提供する。これは，
懸濁培養
PER-C6細胞
ポリアニオン性化合物またはポリアニオン性化合物が
細胞の凝集を減少させるに有効な量で共に存在する
PER-C6細胞
　
　そうすると，細胞を高密度で効率よく培養しようとすることは，細胞培養における自明な課題であるから，引用発明において，「M-CSF CHO細胞」に代えて，市販の懸濁培養に適したヒト由来の細胞である「PER.C6（登録商標）細胞」を，懸濁培養装置である「中空糸酸素供給装置と中空糸透析装置を有する高密度装置」を用いて培養することは，当業者が容易に想到し得るものといえる。
　
　そして，引用発明の「中空糸酸素供給装置」の酸素供給時における「剪断に関連する細胞死を減少」させるとともに，「細胞密度が増加」することに伴い増加する「酸素要求」に見合う酸素を供給する機能(刊１−１)，引用発明の「中空糸透析装置」の「必要とされる栄養素の供給及び阻害性廃棄物の除去」(刊１−１)を行う機能，及び，引用発明の「中空糸透析装置」の「栄養と酸素を容易に吸収できずそして廃棄物を除去できない」(刊１−２)凝集細胞に対して，「いかなる凝集した細胞をも崩壊させる」(刊１−２)ことで栄養と酸素の供給を促すという機能に鑑みれば，引用発明において，「M-CSF CHO細胞」に代えて「PER.C6（登録商標）細胞」を培養しても，「M-CSF CHO細胞」の培養から予測し得る80×106細胞/ml程度の生存細胞密度まで培養できるであろうと当業者であれば思うものといえ，本願発明は，それを確かめた程度のものに過ぎない。
　
　以上のことから，引用発明の「中空糸酸素供給装置」及び「中空糸透析装置」の機能に照らし，引用発明において，「M-CSF CHO細胞」に代えて「PER.C6（登録商標）細胞」を培養することにより，相違点に記した本願発明の特定事項のごとく構成することは，当業者が容易になし得たことといえる。
　
（２）　本願発明の効果について
　本願発明の効果は，刊行物１から当業者が予測し得るものであって，格別顕著なものとはいえない。
　
８　むすび
　以上のとおり，本願発明は，刊行物１に記載された発明に基づいて，当業者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであって，他の請求項に係る発明について検討するまでもなく，本願は拒絶すべきものである。
　よって，結論のとおり審決する。