【手続補正書】
【提出日】令和1年11月15日(2019.11.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）フェニルアラニンアンモニアリアーゼ（ＰＡＬ）をコードする１つまたは複数の遺伝子であって、温度調節プロモーター、ＩＰＴＧ誘導性プロモーター、ラムノース誘導性プロモーター、アラビノース誘導性プロモーター、および、ＰｓｓＢプロモーターから選択される誘導可能なプロモーターに作動可能に連結している遺伝子と、
ｂ）フェニルアラニントランスポーターをコードする１つまたは複数の遺伝子であって、天然ではフェニルアラニントランスポーター遺伝子に付随していない誘導可能なプロモーターに作動可能に連結している遺伝子と、を含む、遺伝子操作された細菌。
【請求項２】
Ｌ−アミノ酸デアミナーゼ（ＬＡＡＤ）をコードする１つまたは複数の遺伝子であって、天然ではＬＡＡＤ遺伝子に付随していない誘導可能なプロモーターに作動可能に連結している遺伝子をさらに含む、請求項１に記載の細菌。
【請求項３】
前記ＰＡＬをコードする前記遺伝子は、温度調節プロモーターに作動可能に連結されている、請求項１また２に記載の細菌。
【請求項４】
前記ＰＡＬをコードする前記遺伝子は、ＩＰＴＧ誘導性プロモーターに作動可能に連結されている、請求項１または２に記載の細菌。
【請求項５】
ＬａｃＩリプレッサーをコードする遺伝子を更に含む、請求項１、２、または４に記載の細菌。
【請求項６】
（ａ）前記ＰＡＬをコードする前記遺伝子に作動可能に連結されたプロモーターおよび前記フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子に作動可能に連結されたプロモーターが、同じプロモーターの別個のコピーであるか；
（ｂ）前記ＰＡＬをコードする前記遺伝子および前記フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子が、同じプロモーターの同じコピーに作動可能に連結されている、請求項１〜５のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項７】
ＬＡＡＤをコードする遺伝子が、前記ＰＡＬをコードする前記遺伝子に作動可能に連結されたプロモーターおよび前記フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子に作動可能に連結されたプロモーターとは異なるプロモーターに作動可能に連結されている、請求項２〜６のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項８】
前記フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子に作動可能に連結されたプロモーターが、低酸素または嫌気性条件下で誘導されるプロモーター；温度調節プロモーター；および、アラビノース、ＩＰＴＧ、テトラサイクリン、またはラムノースにより誘導されるプロモーターから選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項９】
前記ＬＡＡＤをコードする前記遺伝子に動作可能に連結する前記プロモーターが、低酸素または嫌気性条件下で誘導されるプロモーター；温度調節プロモーター；および、アラビノース、ＩＰＴＧ、テトラサイクリン、またはラムノースにより誘導されるプロモーターから選択される、請求項２〜８のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１０】
前記温度調節プロモーターが３７℃〜４２℃の間の温度で誘導される、請求項１〜３、６〜９のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１１】
前記温度調節プロモーターがラムダＣＩ誘導性プロモーターである、請求項１〜３、６〜１０のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１２】
温度感受性ＣＩリプレッサー突然変異体をコードする１つまたは複数の遺伝子を更に含む、請求項１〜３、６〜１１のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１３】
温度感受性ＣＩリプレッサー突然変異体がＣＩ８５７である、請求項１２に記載の細菌。
【請求項１４】
前記フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子および／または前記ＬＡＡＤをコードする前記遺伝子が、ＦＮＲ応答性プロモーター；または、アラビノース、ＩＰＴＧ、トラサイクリン、もしくはラムノースにより誘導されるプロモーターの制御下にある、請求項２〜１３のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１５】
フェニルアラニントランスポーターをコードする前記遺伝子、ＰＡＬをコードする前記遺伝子、および／またはＬＡＡＤをコードする前記遺伝子が、
（ａ）前記細菌における染色体上に位置するか、
（ｂ）前記細菌におけるプラスミド上に位置する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１６】
前記温度感受性ＣＩリプレッサー突然変異体をコードする遺伝子およびＬＡＡＤをコードする前記遺伝子が、同じプロモーターの制御下にある、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１７】
前記ＰＡＬが、アナベナ・バリアビリス（Ａｎａｂａｅｎａ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ）（ＰＡＬ１）またはフォトラブダス・ルミネセンス（Ｐｈｏｔｏｒｈａｂｄｕｓ  ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｓ）（ＰＡＬ３）に由来する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１８】
前記フェニルアラニントランスポーターがＰｈｅＰである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項１９】
前記細菌がプロバイオティクス細菌である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項２０】
前記細菌が、バクテロイデス属、ビフィドバクテリウム属、クロストリジウム属、エシェリキア属、ラクトバチルス属、およびラクトコッカス属からなる群から選択される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項２１】
前記細菌が、大腸菌株Ｎｉｓｓｌｅである、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項２２】
前記細菌が、前記細菌が哺乳動物の消化管に存在する場合に相補される遺伝子の栄養要求株である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項２３】
前記細菌が、ジアミノピメリン酸またはチミジンにおける栄養要求株である、請求項２２に記載の細菌。
【請求項２４】
前記細菌が、前記細菌に対して有毒な物質をコードする遺伝子を更に含み、前記遺伝子が、環境要因の有無またはシグナルによって直接的または間接的に誘導されるプロモーターの制御下にある、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか一項に記載の細菌、および薬学的に許容される担体を含む薬学的に許容される組成物。
【請求項２６】
経口投与用に製剤化された、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
高フェニルアラニン血症を低減させるか、または高フェニルアラニン血症に関連する疾患を治療する方法に使用するための、請求項２５または２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記疾患が、フェニルケトン尿症、古典的または典型的フェニルケトン尿症、異型フェニルケトン尿症、永続的軽度高フェニルアラニン血症、非フェニルケトン尿症高フェニルアラニン血症、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ欠損症、補因子欠損症、ジヒドロプテリジンレダクターゼ欠損症、テトラヒドロプテリンシンターゼ欠損症、瀬川病、および肝疾患からなる群から選択される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
高フェニルアラニン血症を低減させるか、または高フェニルアラニン血症に関連する疾患を治療するための薬剤の製造における、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の細菌の使用。
【請求項３０】
前記疾患が、フェニルケトン尿症、古典的または典型的フェニルケトン尿症、異型フェニルケトン尿症、永続的軽度高フェニルアラニン血症、非フェニルケトン尿症高フェニルアラニン血症、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ欠損症、補因子欠損症、ジヒドロプテリジンレダクターゼ欠損症、テトラヒドロプテリンシンターゼ欠損症、瀬川病、および肝疾患からなる群から選択される、請求項２９に記載の使用。