【手続補正書】
【提出日】令和2年1月15日(2020.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換え微細藻類であって、多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現レベルを変更するように改変されており、前記改変は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３ならびに／またはこれらの機能的等価物の発現を変更する改変を含み、前記組換え微細藻類は、前記宿主微細藻類と比較した場合にＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現レベルが高くなるように改変されており、宿主微細藻類と比較した場合にエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）のレベルが高い脂質を産生する組換え微細藻類。
【請求項２】
ＰＦＡ１および／またはＰＦＡ３の発現は前記宿主微細藻類と比較して少なくとも１．５倍多い、請求項１に記載の組換え微細藻類。
【請求項３】
前記微細藻類はスキゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）またはトラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）である、請求項２に記載の組換え微細藻類。
【請求項４】
前記微細藻類は、ＰＦＡ１をコードする遺伝子および／またはＰＦＡ３をコードする遺伝子の多重コピーを含むように改変されている、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組換え微細藻類。
【請求項５】
前記微細藻類は前記ＰＦＡ１をコードする遺伝子の２〜１０コピーを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組換え微細藻類。
【請求項６】
微細藻類中で、オメガ−３  ＰＵＦＡに富む脂質を産生させる方法であって、
ａ）前記微細藻類を、多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現レベルを変更するように改変することであって、前記改変は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３ならびに／またはこれらの機能的等価物の発現を変更する改変を含み、前記組換え微細藻類を、前記宿主微細藻類と比較した場合にＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現レベルが高くなるように改変すること、ならびに
ｂ）前記改変微細藻類を培養すること
を含み、
宿主微細藻類と比較した場合にオメガ−３  ＰＵＦＡに富む脂質が産生される、
方法。
【請求項７】
組換え微細藻類であって、多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現レベルを変更するように改変されており、前記改変は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３ならびに／またはこれらの機能的等価物の発現を変更するよる改変を含み、前記組換え微細藻類は、前記宿主微細藻類と比較した場合にＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現レベルが高くなるように改変されており、宿主微細藻類と比較した場合にオメガ−３  ＰＵＦＡに富む脂質を産生する組換え微細藻類。
【請求項８】
前記脂質は前記宿主微細藻類と比較した場合にオメガ−３  ＰＵＦＡ：オメガ−６  ＰＵＦＡ比が高い、請求項７に記載の組換え微細藻類。
【請求項９】
微細藻類中で、オメガ−６  ＰＵＦＡのレベルが低い脂質を産生させる方法であって、
ａ）前記微細藻類を、多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現レベルを変更するように改変することであって、前記改変は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３ならびに／またはこれらの機能的等価物の発現を変更する改変を含み、ならびに
ｂ）前記改変微細藻類を培養すること
を含み、
宿主微細藻類と比較してオメガ−６  ＰＵＦＡのレベルが低い脂質が産生される、
方法。
【請求項１０】
組換え微細藻類であって、ａ）ポリペプチドをコードする遺伝子であって、前記ポリペプチドは異種多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）またはこの機能的等価物である、遺伝子と、ｂ）ポリペプチドをコードする遺伝子であって、前記ポリペプチドは異種ＰＵＦＡシンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）またはこの機能的等価物である、遺伝子と、ｃ）ポリペプチドをコードする遺伝子であって、前記ポリペプチドは異種ＰＵＦＡシンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）である、遺伝子とを含み、
前記ａ）、ｂ）およびｃ）の遺伝子は、有意なレベルのエイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５、ｎ−３）（ＥＰＡ）を有する脂質を産生するラビリンチュラ類に由来し、前記組換え微細藻類は、ＰＦＡ１および／またはＰＦＡ３の発現を増加させるように改変されている、組換え微細藻類。
【請求項１１】
前記異種ＰＦＡ１、前記異種ＰＦＡ２および前記異種ＰＦＡ３が由来するラビリンチュラ類は宿主微細藻類と比べて多くのＥＰＡを産生する、請求項１０に記載の組換え微細藻類。
【請求項１２】
組換え植物であって、前記組換え植物は、異種多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現を変更するように改変されており、前記改変は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および／もしくは多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現の変更を含み、前記組換え植物は、少なくとも１種のホスホパンテテイニルトランスフェラーゼ（ＰＰＴアーゼ）をコードするポリヌクレオチドをさらに含み、前記組換え植物は、ＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現レベルが高いように改変されており、前記改変された組換え植物は、宿主植物と比較してエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）のレベルが高い脂質を産生する、組換え植物。
【請求項１３】
前記組換え植物は、前記宿主植物と比較した場合にＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の発現レベルが高いように改変されている、請求項１２に記載の組換え植物。
【請求項１４】
変異微細藻類であって、前記微細藻類は、多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子の発現レベルを改変する変異プロセスを受けており、前記多価不飽和脂肪酸シンターゼをコードする遺伝子は、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット１（ＰＦＡ１）をコードするＰＦＡ１、多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット２（ＰＦＡ２）をコードするＰＦＡ２および多価不飽和脂肪酸シンターゼサブユニット３（ＰＦＡ３）をコードするＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物を含み、前記変異は、ＰＦＡ１および／もしくはＰＦＡ３またはこれらの機能的等価物の高い発現レベルを引き起こし、前記変異微細藻類は、野生型微細藻類と比較してエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）のレベルが高い脂質を産生する、変異微細藻類。