(57)【要約】  本発明はＮ−｛［（１Ｓ、４Ｓ、６Ｓ）−３−（２−ピリジニルカルボニル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル］メチル｝−２−ヘテロアリールアミン誘導体、およびそれらの医薬品としての使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩：
【化１】
2012510493.tif 000053
［式中、
Ｈｅｔは、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、またはピラジニルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり、前記ヘテロアリール基は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、およびシアノからなる群から独立に選択される１、２、または３個の置換基により置換されていてもよく；
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、Ｃ１−４アルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＣＨ２ＳＯ２、フェニル、または、Ｎ、Ｏ、もしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノにより置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、フェニル、または、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノにより置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノであり；
ｍは、０または１であり；および
ｎは、０または１である］。
【請求項２】
Ｈｅｔが、ハロＣ１−４アルキルにより置換される、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項３】
Ｈｅｔが、トリフルオロメチルにより置換される、請求項２に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項４】
Ｈｅｔが、ピリジニルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項５】
Ｈｅｔが、ピリミジニルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項６】
Ｈｅｔが、トリフルオロメチルまたはシアノにより置換されるピリジニルである、請求項４に記載の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項７】
ｍが０であり、かつ、ｎが０である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項８】
ｍが１であり、かつ、ｎが０である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項９】
Ｒ１が、ＣＨ３である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１０】
Ｒ２が、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、フェニル、ピリミジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリニル、ピリダジニル、ピラジニルまたはピリジニルである、請求項１〜６、８または９のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項１１】
Ｒ２が、ピリミジニルである、請求項１０に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１２】
Ｈｅｔがトリフルオロメチルにより置換されるピリジニルであり、ｍが１であり、ｎが０であり、Ｒ１がＣＨ３であり、かつ、Ｒ２がピリミジニルである、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１３】
Ｈｅｔがトリフルオロメチルにより置換されるピラジニルであり、ｍが１であり、ｎが０であり、Ｒ１がＣＨ３であり、かつ、Ｒ２がピリミジニルである、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１４】
下記からなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩：
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン；および
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン。
【請求項１５】
治療に使用するための、請求項１〜１４のいずれか一項で定義される化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項１６】
ヒトオレキシン受容体のアンタゴニストが必要とされる疾患または障害の治療に用いるための、請求項１〜１４のいずれか一項で定義される化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項１７】
疾患または障害が、睡眠障害、うつ病もしくは気分障害、不安障害、物質関連障害、または摂食障害である、請求項１６に記載の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項１８】
疾患または障害が、睡眠障害である、請求項１７に記載の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項１９】
睡眠障害が、原発性不眠症（３０７．４２）、原発性過眠症（３０７．４４）、ナルコレプシー（３４７）、呼吸関連睡眠障害（７８０．５９）、概日リズム睡眠障害（３０７．４５）および他に分類されない睡眠異常（３０７．４７）等の睡眠異常；悪夢障害（３０７．４７）、夜驚症（３０７．４６）、夢遊病（３０７．４６）および他に分類されない睡眠時随伴症（３０７．４７）等の睡眠時随伴症のような原発性睡眠障害；他の精神障害関連不眠症（３０７．４２）および他の精神障害関連過眠症（３０７．４４）等の他の精神障害関連睡眠障害；一般的病状による睡眠障害、特に、神経障害、神経因性疼痛、むずむず脚症候群、心肺疾患等の疾患関連睡眠障害；並びに不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型のサブタイプを含む物質誘発睡眠障害；睡眠時無呼吸および時差ぼけ症候群からなる群から選択される、請求項１８に記載の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【請求項２０】
ヒトオレキシン受容体のアンタゴニストが必要とされる疾患または障害の治療に用いるための薬剤の製造における、請求項１〜１４のいずれか一項で定義される化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩の使用。
【請求項２１】
疾患または障害が、睡眠障害、うつ病もしくは気分障害、不安障害、物質関連障害、または摂食障害である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
疾患または障害が、睡眠障害である、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
睡眠障害が、原発性不眠症（３０７．４２）、原発性過眠症（３０７．４４）、ナルコレプシー（３４７）、呼吸関連睡眠障害（７８０．５９）、概日リズム睡眠障害（３０７．４５）および他に分類されない睡眠異常（３０７．４７）等の睡眠異常；悪夢障害（３０７．４７）、夜驚症（３０７．４６）、夢遊病（３０７．４６）および他に分類されない睡眠時随伴症（３０７．４７）等の睡眠時随伴症のような原発性睡眠障害；他の精神障害関連不眠症（３０７．４２）および他の精神障害関連過眠症（３０７．４４）等の他の精神障害関連睡眠障害；一般的病状による睡眠障害、特に、神経障害、神経因性疼痛、むずむず脚症候群、心肺疾患等の疾患関連睡眠障害；並びに不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型のサブタイプを含む物質誘発睡眠障害；睡眠時無呼吸および時差ぼけ症候群からなる群から選択される、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
患者における、ヒトオレキシン受容体のアンタゴニストが必要とされる疾患または障害の治療方法であって、それを必要としている患者に、有効量の請求項１〜１４で定義される化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩を投与することを含んでなる、方法。
【請求項２５】
疾患または障害が、睡眠障害、うつ病もしくは気分障害、不安障害、物質関連障害、または摂食障害である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
疾患または障害が、睡眠障害である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
睡眠障害が、原発性不眠症（３０７．４２）、原発性過眠症（３０７．４４）、ナルコレプシー（３４７）、呼吸関連睡眠障害（７８０．５９）、概日リズム睡眠障害（３０７．４５）および他に分類されない睡眠異常（３０７．４７）等の睡眠異常；悪夢障害（３０７．４７）、夜驚症（３０７．４６）、夢遊病（３０７．４６）および他に分類されない睡眠時随伴症（３０７．４７）等の睡眠時随伴症のような原発性睡眠障害；他の精神障害関連不眠症（３０７．４２）および他の精神障害関連過眠症（３０７．４４）等の他の精神障害関連睡眠障害；一般的病状による睡眠障害、特に、神経障害、神経因性疼痛、むずむず脚症候群、心肺疾患等の疾患関連睡眠障害；並びに不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型のサブタイプを含む物質誘発睡眠障害；睡眠時無呼吸および時差ぼけ症候群からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ａ）請求項１〜１１のいずれか一項で定義される化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩と、ｂ）１以上の薬学的に許容可能なキャリアとを含んでなる、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｎ−｛［（１Ｓ、４Ｓ、６Ｓ）−３−（２−ピリジニルカルボニル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル］メチル｝−２−ヘテロアリールアミン誘導体およびその医薬品としての使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの医学的に重要な生物学的課程がＧタンパク質、および／または第二のメッセンジャーを含む信号変換経路関連タンパク質により媒介されている。
ヒト７−膜透過型Ｇタンパク質結合神経ペプチド受容体、オレキシン１（ＨＦＧＡＮ７２）、をコードしたポリペプチドおよびポリヌクレオチドは特定されており、EP875565、EP875566、およびWO96/34877で開示されている。第二の神経ペプチド受容体、オレキシン２（ＨＦＧＡＮＰ）をコードしたポリペプチドおよびポリヌクレオチドは特定され、EP893498で開示されている。
オレキシン１受容体、例えば、オレキシンＡ（Ｌｉｇ７２Ａ）のリガンドであるポリペプチドをコードしているポリペプチド、およびポリヌクレオチドは、EP849361で開示されている。
オレキシンリガンドと受容体システムは、発見以来十分特性解明がなされてきた（例えば、Sakurai、T.etal(1998)Cell、92pp573to585;Smartetal(1999)BritishJournalofPharmacology128pp1to3;Willieetal(2001)Ann.Rev.Neurosciences24pp429to458;Sakurai(2007)NatureReviewsNeuroscience8pp171to181;OhnoandSakurai(2008)Front.Neuroendocrinology29pp70to87)を参照）。これらの研究から、オレキシンおよびオレキシン受容体は、後述の通り、哺乳類動物の多くの重要な生理学的役割を果たし、種々の疾患や障害に対する治療的処置開発の可能性を広げることが明らかになった。
【０００３】
実験により、リガンドオレキシンＡの中枢投与により、４時間の間の自由摂取ネズミの食料摂取量が刺激されることが明らかになった。この摂取量増加は、賦形剤だけを受けた対照ネズミよりも約４倍多かった。これらのデータから、オレキシンＡは食欲の内在性調節剤になる可能性があることを示唆している（Sakurai、T.etal(1998)Cell、92pp573to585;Peyronetal(1998)J.Neurosciences18pp9996to10015;Willieetal(2001)Ann.Rev.Neurosciences24pp429to458)）。従って、オレキシンＡ受容体のアンタゴニストは肥満症や糖尿病の治療に有効である可能性がある。この裏付けとして、オレキシン受容体アンタゴニストSB334867がネズミの嗜好性に基づく摂食を減らし（Whiteetal(2005)Peptides26pp2231to2238）、また、高脂肪性ペレットの自己投与を弱める（Nairetal(2008)BritishJournalofPharmacology、publishedonline28January2008）可能性が明らかになった。
【０００４】
肥満症や摂食障害の新しい治療法の研究が重要な課題となっている。ＷＨＯの定義によれば、西欧風社会では、３９例の試験の被験者の平均３５％が体重超過で、さらに２２％が医学的に肥満である。米国の全医療費の５．７％が肥満の帰結であると推定されている。２型糖尿病患者の約８５％が肥満体である。ダイエットと運動は全糖尿病に有効である。診断された糖尿病の発症率は、西側諸国では、典型的には５％で、同じ程度の数の診断未確定者がいると推定されている。肥満症と２型糖尿病の発症率は増加しており、効果がないか、心臓血管系作用を含む毒性リスクがあるかのいずれかの現在の治療法の不備を示している。スルホニル尿素、またはインシュリンを使った糖尿病の治療は、低血糖症を引き起こし、一方、メトホルミンは、消化管副作用を引き起こす。２型糖尿病の治療薬でこの病気の長期的合併症を減らせた事例は今までなかった。インシュリン増感剤は多くの糖尿病に有効であると思われるが、これには抗肥満作用はない。
【０００５】
食物摂取時の役割と同じく、オレキシンシステムは睡眠と覚醒に関係している。ネズミの睡眠／脳波では、正常睡眠期間の始めに投与した場合、オレキシン受容体のアゴニストであるオレキシンＡの中枢投与によって、逆説睡眠（レム睡眠）の減少と徐波睡眠２を大きく犠牲にして用量依存性の覚醒状態が多くなることが明らかになった（(Haganetal(1999)Proc.Natl.Acad.Sci.96pp10911to10916)）。睡眠と覚醒におけるオレキシンシステムの役割は、現在十分に確証されている（Sakurai(2007)NatureReviewsNeuroscience8pp171to181;OhnoandSakurai(2008)Front.Neuroendocrinology29pp70to87;Chemellietal(1999)Cell98pp437to451;Leeetal(2005)J.Neuroscience25pp6716to6720;Piperetal(2000)EuropeanJNeuroscience12pp726-730andSmartandJerman(2002)PharmacologyandTherapeutics94pp51to61）。そのため、、オレキシン受容体のアンタゴニストは不眠症を含む睡眠障害の治療に有用となる可能性がある。このことは、例えば、ＳＢ３３４８６７のような、ネズミ（例えば、Smithetal(2003)NeuroscienceLetters341pp256to258を参照）、またさらに最近のイヌおよびヒト（Brisbare-Rochetal(2007)NatureMedicine13(2)pp150to155）におけるオレキシン受容体アンタゴニストの研究により、裏付けられている。
【０００６】
さらに、最近の研究で、麻薬の常用や薬物乱用等の報酬探求行動に関連した疾患のようなモチベーション障害の治療におけるオレキシンアンタゴニストの役割が示唆されている（Borglandetal(2006)Neuron49(4)pp589-601;Boutreletal(2005)Proc.Natl.Acad.Sci.102(52)pp19168to19173;Harrisetal(2005)Nature437pp556to559）。
国際特許出願：WO99/09024、WO99/58533、WO00/47577およびWO00/47580でフェニル尿素誘導体、およびWO00/47576でキノリニルシンアミド誘導体が、オレキシン受容体アンタゴニストとして開示されている。
WO01/96302、WO02/44172、WO02/89800、WO03/002559、WO03/002561、WO03/032991、WO03/037847、WO03/041711、WO08/038251、WO09/003993、WO09/003997およびWO09/124956のすべてで環状アミン誘導体が開示されている。
【０００７】
WO08/038251には、オレキシンアンタゴニストとして、３−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサンが開示されている。現在、我々は、Ｎ−｛［（１Ｓ、４Ｓ、６Ｓ）−３−（２−ピリジニルカルボニル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル］メチル｝−２−ヘテロアリールアミン誘導体が、例えば、高い効力、良好な脳透過性、および良い生物学的利用能を含む有益な特性を有することが分かっている。この性質によって、Ｎ−｛［（１Ｓ、４Ｓ、６Ｓ）−３−（２−ピリジニルカルボニル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル］メチル｝−２−ヘテロアリールアミン誘導体が、２型（インシュリン非依存）糖尿病患者、睡眠障害、不安症、鬱病、統合失調症、薬物依存症、または強迫行為を含む肥満に対する予防または治療のための潜在的医薬品として非常に魅力的になっている。さらに、これらの化合物は、脳卒中、特に、虚血性脳卒中、または出血性脳卒中の治療に有用であり、および／または、嘔吐反応の抑止、すなわち、悪心と嘔吐の治療に有用である。
【０００８】
従って、本発明は式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容可能なこれらの塩：
【化１】
2012510493.tif 000002
［式中、
Ｈｅｔは、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、またはピラジニルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり、前記ヘテロアリール基は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、およびシアノからなる群から独立に選択される１、２、または３個の置換基により置換されていてもよく；
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、Ｃ１−４アルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＣＨ２ＳＯ２、フェニル、または、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基はＣ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノにより置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、フェニル、または、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基はＣ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノにより置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノであり；
ｍは０または１であり；および
ｎは０または１である］
を提供する。
【０００９】
一実施形態では、
Ｈｅｔは、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、またはピラジニルからなる群から選択されるヘテロアリール基であり、前記ヘテロアリール基は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、およびシアノからなる群から独立に選択される置換基により置換されていてもよく；
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、Ｃ１−４アルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＳＯ２、Ｃ３−８シクロアルキルＣＨ２ＳＯ２、フェニル、または、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基はＣ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノから選択される１つまたは２つの置換基により置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、フェニル、または、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１、２、もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であって、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基はＣ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノから選択される１つまたは２つの置換基により置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキル、ハロ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロＣ１−４アルキル、ハロＣ１−４アルコキシ、またはシアノであり；
ｍは０または１であり；および
ｎは０または１である；
化合物、または、薬学的に許容可能なこれらの塩を提供する。
【００１０】
一実施形態では、Ｈｅｔは、ハロＣ１−４アルキルで置換されている。
一実施形態では、Ｈｅｔは、トリフルオロメチルで置換されている。
一実施形態では、Ｈｅｔは、ピリジニルである。
一実施形態では、Ｈｅｔは、ピリダジニルである。
一実施形態では、Ｈｅｔは、ピラジニルである。
一実施形態では、Ｈｅｔは、ピリミジニルである。
別の実施形態では、Ｈｅｔは、トリフルオロメチルまたはシアノで置換されたピリジニルである
別の実施形態では、Ｈｅｔは、１つまたは２つのＣＨ３基で置換されたピリミジニルである。
一実施形態では、ｍとｎが両方とも０である。
一実施形態では、ｍが１で、ｎが０である。
一実施形態では、Ｒ１はＣＨ３である。
別の実施形態では、Ｒ１はＣＨ３で、ｍとｎが両方とも０である。
一実施形態では、Ｒ２はメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
別の実施形態では、Ｒ２はフェニル、ピリミジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリニル、ピリダジニル、ピラジニルまたはピリジニルである。
さらなる実施形態ではＲ２はフルオロで置換されたフェニルである。
またさらなる実施形態では、Ｒ２はメチルで置換されたオキサジアゾリル、オキサゾリルまたはチアゾリルである。
またさらなる実施形態では、Ｒ２はエチルで置換されたオキサジアゾリル、オキサゾリルまたはチアゾリルである。
一実施形態では、ｍが１で、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、およびＲ２がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
一実施形態では、Ｈｅｔがピリジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
別の実施形態では、Ｈｅｔがトリフルオロメチル、またはシアノで置換されたピリジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
一実施形態では、Ｈｅｔがピリミジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
別の実施形態では、Ｈｅｔが１つ又は２つのメチル基により置換されたピリミジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシである。
さらなる実施形態では、ＨｅｔはハロＣ１−４アルキルで置換されたピリジニル、Ｒ１がＣ１−４アルキル、Ｒ２がエトキシ、プロポキシまたはピリミジニル、ｍが１，およびｎが０である。
またさらなる実施形態では、Ｈｅｔがトリフルオロメチルで置換されたピリジニル、Ｒ１がメチル、Ｒ２がエトキシ、プロポキシまたはピリミジニル、ｍが１，ｎが０である。
一実施形態では、Ｈｅｔがトリフルオロメチルで置換されたピリジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がピリミジニルである。
一実施形態では、Ｈｅｔがトリフルオロメチルで置換されたピラジニル、ｍが１、ｎが０、Ｒ１がＣＨ３、Ｒ２がピリミジニルであるか、または薬学的に許容可能なこれらの塩である。
一実施形態では、ＨｅｔがＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシおよびシアノからなる群から独立に選択される１，２または３個の置換基により置換されていてもよいピリジニル、Ｒ１がＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシ，シアノ，Ｃ１−４アルキルＳＯ２，Ｃ３−８シクロアルキルＳＯ２，Ｃ３−８シクロアルキルＣＨ２ＳＯ２、Ｒ２がＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシ，シアノ，フェニル、またはＮ，ＯもしくはＳから選択される１，２，もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であり、ここでフェニルまたはヘテロシクリル基がＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシまたはシアノで置換されていてもよく、ｍが１，ｎが０である。
別の実施形態では、ＨｅｔがＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシおよびシアノから選択される１個の置換基により置換されるピリジニル、Ｒ１がＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシ、シアノ、Ｒ２がＣ１−４アルコキシ、またはＮ，ＯもしくはＳから選択される１，２，もしくは３個の原子を含む５もしくは６員環ヘテロシクリル基であり、ここでヘテロシクリル基がＣ１−４アルキル，ハロ，Ｃ１−４アルコキシ，ハロＣ１−４アルキル，ハロＣ１−４アルコキシまたはシアノで置換されていてもよく、ｍが１，ｎが０である。
【００１１】
一実施形態では、本発明は、下記からなる群から選択された式（Ｉ）の化合物を提供する：
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン；
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン；および
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン；
または薬学的に許容可能なこれらの塩。
【００１２】
Ｈｅｔ基（ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、またはピラジニル）が、アミノメチルリンカーとの間で、このリンカー中の窒素原子と前記ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、またはピラジニル環の任意の炭素原子、または適切な窒素原子の間の結合によって結合していてもよい。Ｈｅｔ基がリンカー中の窒素原子とＨｅｔ基環中の炭素原子の間の結合によりリンカーと結合するのが好ましい。
Ｒ１またはＲ２がヘテロ環式基の場合、Ｎ、ＯまたはＳから選択される１、２または３個の原子を含む５または６員環ヘテロシクリル基であってもよい。このようなヘテロ環式基の例としては、ピリミジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリニル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリジニル、フラニル,チエニル,ピロリル,チアジアゾリル,トリアジニルおよびイソチアゾリルが含まれる。
Ｒ１またはＲ２がヘテロ環式基の場合、前記基はピリジル環と、前記ピリジル環の炭素原子と炭素またはヘテロ間環式基の適切なヘテロ原子との間の結合により、結合していてもよい。例えば、Ｒ２がトリアゾリル基である場合には、ピリジル環への結合は、ピリジル感の炭素原子と、トリアゾリル基の、ａ）２つの炭素の内の１つ、または、ｂ）３つの窒素原子の内の１つとの間の結合によるものであってもよい。
化合物がＣ１−４アルキル基を含む場合、単独であれ、Ｃ１−４アルコキシ等のより大きな基の一部であれ、アルキル基は直鎖、分岐、または環状、あるいはこれらの組み合わせのいずれであってもよい。
Ｃ１−４アルキルの例には、メチルまたはエチルがある。
ハロＣ１−４アルキルの例には、トリフルオロメチル（すなわち、−ＣＦ３）が含まれる。
Ｃ１−４アルコキシの例には、メトキシ、エトキシが含まれる。
ハロＣ１−４アルコキシの例には、トリフルオロメトキシ（すなわち、−ＯＣＦ３）が含まれる。
ハロゲンまたは「ハロ」（例えば、ハロＣ１−４アルキルのように使われる場合）はフルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを意味する。本発明は、本明細書で前に詳述した基と置換基の全組み合わせを包含するものと理解されるべきである。
【００１３】
医薬としての利用には、式（Ｉ）の化合物の塩は薬学的に許容される必要があることは理解されたい。薬学的に許容される適切な塩は当業者には明らかである。薬学的に許容される塩には、Berge、BighleyandMonkhouseJ.Pharm.Sci(1977)66、pp1-19に記載されたものが含まれる。このような薬学的に許容される塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸、等の無機酸の塩、およびコハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、p-トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸、等の有機酸の塩が含まれる。シュウ酸塩、ギ酸塩、等の他の塩も、例えば、式（Ｉ）の化合物の単離に使用可能であり、これは本発明の別の態様となる。
【００１４】
式（Ｉ）の特定の化合物は、等価またはそれ以上の酸と酸付加塩を形成可能である。可能なすべての化学量論的および化学非量論的形式が本発明の範囲に含まれる。
式（Ｉ）の化合物は結晶の形態または非晶質の形態で調製され、結晶の形態の場合は、例えば、水和物のような溶媒和物も任意に選択可能である。本発明の範囲には、化学量論的溶媒和物（例えば、水和物）並びに可変量の溶媒（例えば、水）を含む化合物が含まれる。
【００１５】
本明細書で使われる「薬学的に許容可能な誘導体」には、任意の薬学的に許容される式（Ｉ）の化合物のエステルまたはこのエステルの塩が含まれ、被験者に投与された場合式（Ｉ）の化合物または活性代謝物やその残渣を（直接、または間接的に）供給できる。
【００１６】
式（Ｉ）の化合物の不斉中心は、シス（１Ｓ、４Ｓ、６Ｓ）配置になっている。本発明は、任意の互変異性型またはそれらの混合物も包含する。
【００１７】
また、本発明の対象には、１つまたは多数の原子が、天然に最もよく認められる原子量と原子番号とは異なる原子量と原子番号を有する原子と置換されているという事実のほかは、式（Ｉ）で列挙されるものと同等な同位体標識化合物も含まれる。本発明の化合物に組み込まれる同位体の例としては、、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、１２３Ｉ、または１２５Ｉ、等の水素、炭素、窒素、酸素、フッ素、ヨウ素、および塩素がある。
【００１８】
前述の同位体、および／または、他の原子の他の同位体を含む本発明の化合物および前記化合物の薬学的に許容可能な塩は、本発明の範囲に含まれる。本発明の、例えば、３Ｈや１４Ｃ等の放射性同位体を組み込んで、同位体で標識した化合物は、薬剤、および／または、基質の組織分布アッセイに有用である。トリチウム、すなわち３Ｈ、および炭素１４、すなわち１４Ｃ同位体は、調製が簡単で検出しやすいため好ましい。１１Ｃと１８Ｆは特にＰＥＴ（ポジトロンＣＴ）に有用である。
式（Ｉ）の化合物は医薬組成物として使用することが意図されているため、実質的に純粋な状態で提供されるのが好ましく、例えば、少なくとも６０％純度、より好適には少なくとも７５％純度、そして好ましくは少なくとも８５％純度、特別には少なくとも９８％純度（％は重量ベースに対する重量で）である。不純な化合物の製剤は、より純粋な形態の医薬組成物調製のために使用可能である。
本発明のさらなる態様に従って、式（Ｉ）の化合物およびその誘導体の調製法が提供される。次のスキームにより、本発明の化合物の一部の合成経路について詳細に説明する。次のスキームでは、反応基を保護基により保護し、また十分確立された方法に従って脱保護することができる。
【００１９】
スキーム
本発明のさらなる態様に従って、式（Ｉ）の化合物およびその塩の調製法が提供される。次のスキームは、本発明の化合物を合成するために使うことができる合成スキームの例である。
【化２】
2012510493.tif 000003
【化３】
2012510493.tif 000004
スキーム２
スキームで、Ｈｅｔ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｍ、およびｎは式（Ｉ）で与えられた意味を有する。
【００２０】
本発明の特定の化合物は、標準的化学手法により本発明の他の化合物に転換可能であることは、当業者には理解されるであろう。
スキームに使われる出発物質は、市販品として入手可能であり、文献に記載されており、また既知の方法により合成できる。フェニルメチル［（３Ｓ）−５−オキソテトラヒドロ−３−フラニル］カルバマート（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃４１９２４９から入手可能），（２Ｓ）−２−アミノ−４−ペンテン酸（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃２８５０１３から入手可能）および２，５−ジオキソ−１−ピロリジニルＮ−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝グリシナート（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃１５４２３から入手可能）。
薬学的に許容可能な塩は、従来の方法で、適切な酸または酸誘導体と反応させることにより合成できる。
本発明は、人間医学または獣医学での使用を目的とした式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００２１】
式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、ヒトオレキシン受容体のアンタゴニストが必要な疾患や障害の治療および予防に有用であると思われる。
式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、原発性不眠症（３０７．４２）、原発性過眠症（３０７．４４）、ナルコレプシー（３４７）、呼吸関連睡眠障害（７８０．５９）、概日リズム睡眠障害（３０７．４５）および他に分類されない睡眠異常（３０７．４７）、等の睡眠異常；悪夢障害（３０７．４７）、夜驚症（３０７．４６）、夢遊病（３０７．４６）および他に分類されない睡眠時随伴症（３０７．４７）、等の睡眠時随伴症のような原発性睡眠障害；他の精神障害関連不眠症（３０７．４２）および他の精神障害関連過眠症（３０７．４４）、等の他の精神障害関連睡眠障害；一般的病状による睡眠障害、特に、神経障害、神経因性疼痛、むずむず脚症候群、心肺疾患、等の疾患関連睡眠障害；および不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型のサブタイプを含む物質誘発睡眠障害；睡眠時無呼吸および時差ぼけ症候群、からなる群より選択された睡眠障害の治療および予防に有用であると思われる。
【００２２】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、原発性不眠症（３０７．４２）、概日リズム睡眠障害（３０７．４５）および他に分類されない睡眠異常（３０７．４７）、他の精神障害関連不眠症（３０７．４２）および一般的病状による睡眠障害、等の他の精神障害関連睡眠障害、特に、神経障害、神経因性疼痛、むずむず脚症候群、心肺疾患、等の疾患関連睡眠障害；および不眠症型、過眠症型、睡眠時随伴症型および混合型、等のサブタイプを含む物質誘発睡眠障害の治療と予防のために有用であると思われる。
【００２３】
さらに、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、大うつ病性障害、躁病エピソード、混合エピソードおよび軽躁病を含むうつ病および気分障害；大うつ病性障害、気分変調性障害（３００．４）、他に分類されないうつ病性障害（３１１）を含むうつ病性障害；双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害（軽躁病を伴う再発性大うつ病性障害）（２９６．８９）、気分循環性障害（３０１．１３）および他に分類されない双極性障害（２９６．８０）を含む双極性障害；一般的病状による気分障害（２９３．８３）（抑鬱性特徴、大抑鬱様エピソード、躁病性特徴および混合特徴を伴うサブタイプを含む）を含むその他の気分障害、物質誘発気分障害（抑鬱性特徴、躁病特徴および混合特徴を伴うサブタイプを含む）および他に分類されない気分障害（２９６．９０）の治療と予防のために有用であると思われる。
【００２４】
さらに、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、パニック発作を含む不安障害;広場恐怖症の無いパニック障害(300.01)および広場恐怖症のあるパニック障害(300.21)を含むパニック障害;広場恐怖症;パニック障害歴の無い広場恐怖症(300.22)、動物型、自然環境型、血液・注射・外傷型、状況型およびその他の型等のサブタイプを含む特定恐怖症(300.29、以前の単純恐怖症)、社会恐怖症(社会不安障害、300.23)、強迫性障害(300.3)、外傷後ストレス障害(309.81)、急性ストレス障害(308.3)、全般性不安障害(300.02)、一般的病状による不安障害(293.84)、物質誘発不安障害、分離不安障害(309.21)、不安を伴う適応障害(309.24)および他に分類されない不安障害(300.00)の治療と予防のために有用であると思われる。
【００２５】
さらに、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、物質依存症、物質渇望および物質乱用、等の物質使用障害；薬物中毒、薬物離脱、物質誘発せん妄、物質誘発持続性認知症、物質誘発持続性健忘障害、物質誘発精神病、物質誘発気分障害、物質誘発不安障害、物質誘発性機能障害、物質誘発睡眠障害、および幻覚剤持続性知覚障害（フラッシュバック）、等の物質誘発障害；アルコール依存症（３０３．９０）、アルコール中毒（３０５．００）、アルコール中毒（３０３．００）、アルコール離脱（２９１．８１）、アルコール中毒せん妄、アルコール離脱せん妄、アルコール誘発持続性認知症、アルコール誘発持続性健忘障害、アルコール誘発精神病、アルコール誘発気分障害、アルコール誘発不安障害、アルコール誘発性機能障害、アルコール誘発睡眠障害、および他に分類されないアルコール関連障害（２９１．９）、等のアルコール関連障害；アンフェタミン依存症（３０４．４０）、アンフェタミン乱用（３０５．７０）、アンフェタミン中毒（２９２．８９）、アンフェタミン離脱（２９２．０）、アンフェタミン中毒せん妄、アンフェタミン誘発精神病、アンフェタミン誘発気分障害、アンフェタミン誘発不安障害、アンフェタミン誘発性機能障害、アンフェタミン誘発睡眠障害、および他に分類されないアンフェタミン関連障害（２９２．９）、等のアンフェタミン（または、アンフェタミン様）関連障害；カフェイン中毒（３０５．９０）、カフェイン誘発不安障害、カフェイン誘発睡眠障害、および他に分類されないカフェイン関連障害（２９２．９）、等のカフェイン関連障害；大麻依存症（３０４．３０）、大麻乱用（３０５．２０）、大麻中毒（２９２．８９）、大麻中毒せん妄、大麻誘発精神病、大麻誘発不安障害、および他に分類されない大麻関連障害（２９２．９）、等の大麻関連障害；コカイン依存症（３０４．２０）、コカイン乱用（３０５．６０）、コカイン中毒（２９２．８９）、コカイン離脱（２９２．０）、コカイン中毒せん妄、コカイン誘発精神病、コカイン誘発気分障害、コカイン誘発不安障害、コカイン誘発性機能障害、コカイン誘発睡眠障害、および他に分類されないコカイン関連障害（２９２．９）、等のコカイン関連障害；幻覚剤依存症（３０４．５０）、幻覚剤乱用（３０５．３０）、幻覚剤中毒（２９２．８９）、幻覚剤持続性知覚障害（フラッシュバック）（２９２．８９）、幻覚剤中毒せん妄、幻覚剤誘発精神病、幻覚剤誘発気分障害、幻覚剤誘発不安障害および他に分類されない幻覚剤関連障害（２９２．９）、等の幻覚剤関連障害；吸入剤依存症（３０４．６０）、吸入剤乱用（３０５．９０）、吸入剤中毒（２９２．８９）、吸入剤中毒せん妄、吸入剤−誘発持続性認知症、吸入剤誘発精神病、吸入剤誘発気分障害、吸入剤誘発不安障害、および他に分類されない吸入剤関連障害（２９２．９）、等の吸入剤−関連障害；ニコチン依存症（３０５．１）、ニコチン離脱（２９２．０）および他に分類されないニコチン関連障害（２９２．９）、等のニコチン関連障害；オピオイド依存症（３０４．００）、オピオイド乱用（３０５．５０）、オピオイド中毒（２９２．８９）、オピオイド離脱（２９２．０）、オピオイド中毒せん妄、オピオイド誘発精神病、オピオイド誘発気分障害、オピオイド誘発性機能障害、オピオイド誘発睡眠障害および他に分類されないオピオイド関連障害（２９２．９）等のオピオイド関連障害；フェンシクリジン依存症（３０４．６０）、フェンシクリジン乱用（３０５．９０）、フェンシクリジン中毒（２９２．８９）、フェンシクリジン中毒せん妄、フェンシクリジン誘発精神病、フェンシクリジン誘発気分障害、フェンシクリジン誘発不安障害および他に分類されないフェンシクリジン関連障害（２９２．９）、等のフェンシクリジン（または、フェンシクリジン様）関連障害；鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬依存症（３０４．１０）、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬乱用（３０５．４０）、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬中毒（２９２．８９）、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬離脱（２９２．０）、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬中毒せん妄、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬離脱せん妄、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬持続性認知症、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬持続性健忘障害、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬誘発精神病、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬誘発気分障害、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬誘発不安障害、鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬誘発性機能障害、鎮静剤、睡眠、または抗不安薬誘発睡眠障害および他に分類されない鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬関連障害（２９２．９）、等の鎮静剤、睡眠剤、または抗不安薬関連障害；多剤依存症（３０４．８０）等の多剤関連障害；およびタンパク質同化ステロイド、硝酸塩吸入、および亜酸化窒素、等の他の（または未知の）物質関連障害を含む物質関連障害の治療と予防のために有用であると思われる。
【００２６】
さらに、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、神経性過食症、過食、２型（インシュリン非依存性の）糖尿病患者に観察される肥満を含む肥満症、等の摂食障害の治療と予防のために有用であると思われる。
さらに、、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、脳卒中、特に、虚血性脳卒中、または出血性卒中の治療と予防のために、および／または、嘔吐反応、すなわち、悪心と嘔吐、の遮断のために有用であると思われる。
上記一覧の疾患名の後にある括弧の数字は、ＤＳＭ−ＩＶ（精神疾患の診断と統計マニュアル、第４刷、米国精神医学会発行）による分類コードである。本明細書に記載の障害の種々のサブタイプは本発明の一部として意図されている。
【００２７】
また、本発明は、患者の疾患と障害、例えば前に記載の疾患と障害、の治療方法も提供し、これには、前記患者に有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。
また、本発明は、疾患と障害、例えば前に記載の疾患と障害、の治療と予防のために式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
また、本発明は、疾患と障害、例えば前に記載の疾患と障害、の治療と予防のために使用する薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００２８】
治療に使われる場合は、本発明の化合物は、通常、医薬組成物として投与される。本発明は、また、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩および薬学的に許容可能なキャリアを含む医薬組成物も提供する。
式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、経口、非経口、バッカル、舌下、経鼻、直腸、または経皮投与、等の任意の簡便法で、それぞれの投与法に適合した医薬組成物にして投与してもよい。
経口投与時に活性である式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、液体、または固体、例えばシロップ、懸濁液、エマルジョン、錠剤、カプセル、またはトローチ剤、として処方してもよい。
液体製剤は、通常、適切な液体キャリア、例えば、水、エタノール、またはグリセリン等の水性溶媒、またはポリエチレングリコールまたはオイル等の非水性溶媒、に入れた有効成分の懸濁液または溶液から構成される。
また、製剤は、懸濁剤、保存剤、香味料、および／または、着色剤も含む。
錠剤の形状の組成物は、マグネシウムステアラート、デンプン、ラクトース、スクロースおよびセルロース、等の日常的に固形製剤に使われている任意の適切な製薬用キャリアを使って調製してもよい。
カプセル形状の組成物は、通常のカプセル化手法、例えば、有効成分含有ペレットを標準的キャリアで作り、ついで堅いゼラチンカプセルに充填する；あるいは、分散液または懸濁液を任意の適切な製薬用キャリア、例えば水性ガム、セルロース、ケイ酸塩またはオイル、で作り、分散液または懸濁液を柔らかいゼラチンカプセルに充填する、等により調製できる。
典型的な非経口組成物は、無菌水性キャリアまたは非経口で許容可能なオイル、例えばポリエチレングリコール、ポリビニルピロリジン、レシチン、ピーナッツオイルまたはゴマ油、に入れた有効成分の溶液または懸濁液から構成される。あるいは、その溶液を凍結乾燥し、投与の直前に適切な溶媒で再構成してもよい。
経鼻投与用組成物としては、簡便にエアロゾル、ドロップ、ゲルおよび粉末として製剤してもよい。エアロゾル製剤は、通常、薬学的に許容可能な水性または非水性溶媒に入れた有効成分の溶液または微細懸濁液を含み、単回または多数回用量を無菌の密封容器に入れて提供される。この容器は、噴霧装置での使用のためカートリッジまたはリフィルの形をとる。あるいは、この密封容器は、一回用量の鼻吸入器または定量バルブ付きエアロゾル投薬器のような使い捨て型分注装置であってもよい。投薬形態がエアロゾル投薬器を含む場合は、圧縮空気またはフルオロクロロヒドロ炭素やヒドロフルオロ炭素、等の有機噴霧剤のような噴霧剤が含まれる。エアロゾル投与形態は、ポンプ噴霧器の形であってもよい。
バッカルや舌下投与に適切な組成物には、有効成分が砂糖、およびアカシア、トラガントまたはゼラチンおよびグリセリン、等のキャリアと一緒に製剤された状態の錠剤、トローチ剤、および芳香錠が含まれる。
直腸投与組成物は、ココアバターのような通常の座薬基剤を含む座薬の形式が都合が良い。
経皮投与に適した組成物には、軟膏、ゲル、およびパッチが含まれる。
一実施形態では、組成物は、錠剤、カプセルまたはアンプルのような単位剤形に入れられる。
【００２９】
組成物は、投与法に応じて、重量で０、１％〜１００％、例えば、重量で１０〜６０％、の活性物質を含んでもよい。組成物は、投与法に応じて、重量で０％〜９９％、例えば、重量で４０％〜９０％、のキャリアを含んでもよい。組成物は、投与法に応じて、０．０５ｍｇ〜１０００ｍｇ、例えば、１、０ｍｇ〜５００ｍｇ、の活性物質を含んでもよい。組成物は、投与法に応じて、５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、例えば、１００ｍｇ〜４００ｍｇ、のキャリアを含んでもよい。前述の疾患の治療に使われる用量は疾患の重症度、患者の体重、その他の類似因子により通常の場合と同じく変動する。しかし、一般的指針としては、適切な単位用量は、０．０５〜１０００ｍｇ、より適切には１．０〜５００ｍｇでよく、この単位用量は一日あたり一回より多く、例えば、一日あたり２、または３回、投与してもよい。このような治療を、数週間、または数ヶ月に渡って行ってもよい。
【００３０】
オレキシンＡ（Sakurai、T.etal(1998)Cell、92pp573-585）はオレキシン１またはオレキシン２のリガンドの活性化を阻害する化合物のスクリーニング手法に使うことが可能である。
通常、このようなスクリーニング手法によりオレキシン１またはオレキシン２受容体をその表面に発現する適切な細胞が得られる。このような細胞には、哺乳類動物、酵母、ショウジョウバエ、または大腸菌由来の細胞が含まれる。特に、オレキシン１またはオレキシン２をコードしているポリヌクレオチドは細胞に形質移入し、受容体を発現させるために使われる。発現受容体は、次に、それぞれに見合った試験化合物および、オレキシン１またはオレキシン２受容体リガンドと接触させられ、機能的反応の阻害が観察される。１つのこのようなスクリーニング手法では、WO92/01810に記載されているように、形質移入されてオレキシン１またはオレキシン２受容体を発現するメラニン保有細胞が使用される。
別のスクリーニング手法では、オレキシン１またはオレキシン２受容体をコードしたＲＮＡをツメガエル卵母細胞に導入し、過渡的に受容体を発現させる。次いで、受容体卵母細胞は受容体リガンドおよび試験化合物と接触させられ、リガンドによる受容体の活性化を阻害すると考えられている化合物のスクリーニングの場合には、続いて阻害信号の検出が行われる。
別の方法では、表面にそれぞれに見合ったオレキシン１またはオレキシン２受容体を有する細胞に対するオレキシン１またはオレキシン２受容体リガンドの結合の阻害を測定することにより受容体の活性化を阻害する化合物のスクリーニングが行われる。この方法は、オレキシン１またはオレキシン２受容体をコードしたＤＮＡを真核生物細胞に形質導入し、その細胞表面に受容体を発現させ、標識したオレキシン１またはオレキシン２受容体リガンド存在下、その細胞または細胞膜標本を化合物と接触させる。リガンドが放射性標識を含んでもよい。受容体に結合した標識リガンドの量を、例えば放射線を測定することにより、測定する。
さらに別のスクリーニング手法では、オレキシン１またはオレキシン２受容体リガンドのオレキシン１またはオレキシン２受容体との交互作用にそれぞれに応じて影響を与えることで細胞間カルシウムイオンや他のイオンの動員を阻害する試験化合物の高いスループットスクリーニングを目的としてＦＲＩＰＲ装置が使われる。
【００３１】
本明細書および以降で記載の請求項の全体を通じ、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、用語「含む（comprise）」およびその変形の「comprises」や「comprising」は、表明された全体またはステップ、または全体やステップのグループの包含を意味し、または他の任意の全体またはステップ、または全体やステップのグループの除外を意味しないことを理解されるべきである。
これに制限されるものではないが、本明細書に引用された特許、特許出願を含むすべての出版物は、本明細書で完全に記載されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。
【００３２】
以下の実施例は、特定の式（Ｉ）の化合物またはその塩の調製について説明する。記載例１から４０は、式（Ｉ）の化合物またはその塩を作るために使用する中間体の調製について説明する。
これ以降の進め方で、通常、各出発原料の後に記載例に対する参照がある。これは、単に当分野の化学者の支援のために提供されているに過ぎない。出発原料は必ずしも参照された記載例に従って調製されなくてもよい。
収率は、別の記載がなければ、生成物の純度が１００％として計算された。
【００３３】
これ以降の実施例に記載された化合物は、第一歩として、すべて立体化学的に純粋な出発原料から調製されている。記載例と実施例の化合物の立体化学は、これらの絶対中心配置が維持されるという仮定のもとに割り付けられている。記載例と実施例の化合物の相対的立体化学は、相対的立体化学が下記のキラル中間体の回転フレーム２ＤＲＯＥＳＹ実験を使って決定されるように相対的立体化学が維持されるという仮定のもとに割り付けられている。キラル中間体：フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ８）および１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２７）。一部の実施例では、相対的立体化学は最終化合物でも確認されている。化合物は、ＡＣＤ／ＮａｍｅＰＲＯ６．０２化学物質命名ソフトウエア（ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎｃ．社、トロント、オンタリオ、Ｍ５Ｈ２Ｌ３、カナダ）を使って命名している。
【００３４】
プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルはＶａｒｉａｎの装置の４００、５００または６００ＭＨｚ、またはＢｒｕｋｅｒの装置の４００ＭＨｚで記録した。化学シフトは残留溶媒のラインを内部標準として使って、ｐｐｍ（δ）で示した。分裂パターンは、ｓ、１重線；ｄ、２重線；ｔ、３重線；ｑ、４重線；ｍ、多重線；ｂ、ブロード、のように表した。ＮＭＲスペクトルは、２５〜９０℃の範囲で記録した。２つ以上の配座異性体が検出された場合は、通常、最も多いものに対する化学シフトを記載した。
【００３５】
特に指定のない限り、ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ（保持時間）＝ｘ分、のように表示されるＨＰＬＣ解析は、Ｌｕｎａ３ｕＣ１８（２）１００Ａカラム（５０ｘ２．０ｍｍ、３μｍ粒径）［移動相と傾斜：１００％（水＋０．０５％ＴＦＡ）→９５％（アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡ）で８分間。カラム温度＝４０℃。流速＝１ｍＬ／ｍｉｎ。ＵＶ検出波長＝２２０ｎｍ］を使ってＡｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズで実施した。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ、３分法）、のように示される他のＨＰＬＣ解析は、ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢ−Ｃ１８カラム（５０ｘ３．０ｍｍ、１．８μｍ粒径）［移動相と傾斜：１００％（水＋０．０５％ＴＦＡ）〜９５％（アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡ）を２．５分、保持０．５分。カラム温度Ｔ＝６０℃。流速＝１．５ｍＬ／ｍｉｎ。ＵＶ検出波長＝２２０ｎｍ］を使って行われた。
【００３６】
記載した化合物の特性解析で、「ＭＳ」は、直接試料導入質量分析計による質量スペクトルまたはＵＰＬＣ／ＭＳやＨＰＬＣ／ＭＳ分析によるピークに関連した質量スペクトルを指し、ここで使った質量分析計については以下に記載する。
直接試料導入質量スペクトル（ＭＳ）はＡｇｉｌｅｎｔＭＳＤ１１００質量分析計を使いＥＳ（＋）およびＥＳ（−）イオン化モード［ＥＳ（＋）：質量範囲：１００−１０００ａｍｕ。導入溶媒：水＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ／ＣＨ３ＣＮ５０／５０。ＥＳ（−）：質量範囲：１００−１０００ａｍｕ。導入溶媒：水＋０．０５％ＮＨ４ＯＨ／ＣＨ３ＣＮ５０／５０］で実施した。
ピークに関連したＵＶとＭＳスペクトルは、ＨＰＬＣ装置Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズを、正／負エレクトロスプレーイオン化モードおよび酸とアルカリ両傾斜条件［酸性傾斜ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋ｏｒ−）：ＳｕｐｅｌｃｏｓｉｌＡＢＺ＋Ｐｌｕｓカラム（３３ｘ４．６ｍｍ、３μｍ）で分析。移動相：Ａ−水＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ。傾斜（標準法）：ｔ＝０分０％（Ｂ）、０％（Ｂ）→９５％（Ｂ）５分＋１．５分間持続、９５％（Ｂ）→０％（Ｂ）０、１分、停止時間８。５分。コラム温度＝室温。流速＝１ｍＬ／ｍｉｎ。傾斜（ファストモード）：ｔ＝０分０％（Ｂ）、０％（Ｂ）→９５％（Ｂ）３分持続１分間、９５％（Ｂ）→０％（Ｂ）０．１分、停止時間４．５分。カラム温度＝室温。流速＝２ｍＬ／ｍｉｎ。塩基性傾斜ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋または−）：ＸＴｅｒｒａＭＳＣ１８カラム（３０ｘ４．６ｍｍ、２．５μｍ）で分析。移動相：Ａ−５ｍＭＮＨ４ＨＣＯ３水溶液＋アンモニア（ｐＨ１０）／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ。傾斜：ｔ＝０分０％（Ｂ）、０％（Ｂ）→５０％（Ｂ）０．４分、５０％（Ｂ）→９５％（Ｂ）３．６分持続１分、９５％（Ｂ）→０％（Ｂ）０．１分、停止時間５．８分。カラム温度＝室温。流速＝１．５ｍＬ／ｍｉｎ］で作動させたＡｇｉｌｅｎｔＬＣ／ＭＳＤ１１００質量分析計と連結して測定した。質量範囲ＥＳ（＋または−）：１００〜１０００ａｍｕ。ＵＶ検出範囲：２２０〜３５０ｎｍ。記載化合物の特性解析欄の「ＬＣ−ＭＳ」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
【００３７】
合計イオン電流（ＴＩＣ）および、ＤＡＤ、ＵＶ、クロマトグラフィー痕跡、並びに、ピーク関連ＭＳとＵＶスペクトルは、２９９６ＰＤＡ検出器を備えＷａｔｅｒｓＭｉｃｒｏｍａｓｓＺＱＴＭ質量分析計（［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋ｏｒ−）：ＡｃｑｕｉｔｙＴＭＵＰＬＣＢＥＨＣ１８カラム（５０ｘ２１ｍｍ、１．７μｍ粒径）、カラム温度４０℃、を使って解析を実施］の正／負エレクトロスプレーイオン化モードで稼働する）と連結したＵＰＬＣ／ＭＳＡｃｑｕｉｔｙＴＭシステムで測定した。移動相：Ａ−水＋０．１％ＨＣＯＯＨ／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ＋０．０７５％ＨＣＯＯＨ、流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、傾斜：ｔ＝０分３％Ｂ、ｔ＝０．０５分６％Ｂ、ｔ＝０．５７分７０％Ｂ、ｔ＝１．４分９９％Ｂ、ｔ＝１．４５分３％Ｂ）。記載化合物の特性解析欄の「ＵＰＬＣ」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
【００３８】
［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋または−）：ＡｃｑｕｉｔｙＴＭＵＰＬＣＢＥＨＣ１８カラム（５０ｘ２．１ｍｍ、１．７μｍ粒径）カラム温度４０℃、を使って解析を実施］。移動相：Ａ−水＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ＋０．０６％または０．１％ＨＣＯ２Ｈ。傾斜：ｔ＝０分３％Ｂ、ｔ＝１．５分１００％Ｂ、ｔ＝１．９分１００％Ｂ、ｔ＝２分３％Ｂ停止時間２分。カラム温度＝４０℃。流速＝１．０ｍＬ／ｍｉｎ。質量範囲：ＥＳ（＋）：１００−１０００ａｍｕまたはＥＳ（＋）：５０−８００ａｍｕ。ＥＳ（−）：１００−８００ａｍｕ。ＵＶ検出範囲：２１０−３５０ｎｍ。記載化合物の特性解析欄の「ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＩＰＱＣ）」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋または−）：ＡｃｑｕｉｔｙＴＭＵＰＬＣＢＥＨＣ１８カラム（５０ｘ２．１ｍｍ、１．７μｍ粒径）カラム温度４０℃、を使って解析を実施］。移動相：Ａ−水＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ＋０．０６％または０．１％ＨＣＯ２Ｈ。傾斜：ｔ＝０分３％Ｂ、ｔ＝０．０５分６％Ｂ、ｔ＝０．５７分７０％Ｂ、ｔ＝１．０６分９９％Ｂ持続０．３８９分、ｔ＝１．４５分３％Ｂ、停止時間１．５分。カラム温度＝４０℃。流速＝１．０ｍＬ／ｍｉｎ。質量範囲：ＥＳ（＋）：１００−１０００ａｍｕまたはＥＳ（＋）：５０−８００ａｍｕ、ＥＳ（−）：１００−８００ａｍｕ。ＵＶ検出範囲：２１０−３５０ｎｍ。記載化合物の特性解析欄の「ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００またはＧＥＮ＿ＱＣまたはＦＩＮＡＬ＿ＱＣ）」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋または−）：ＡｃｑｕｉｔｙＴＭＵＰＬＣＢＥＨＣ１８カラム（５０ｘ２．１ｍｍ、１．７μｍ粒径）カラム温度４０℃、を使って解析を実施］。移動相：Ａ−水＋０．１％ＨＣＯ２Ｈ／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ＋０．０６％または０．１％ＨＣＯ２Ｈ。傾斜：ｔ＝０分３％Ｂ、ｔ＝１．０６分９９％Ｂ、ｔ＝１．４５分９９％Ｂ、ｔ＝１．４６分３％Ｂ、停止時間１．５分。カラム温度＝４０℃。流速＝１．０ｍＬ／ｍｉｎ。質量範囲：ＥＳ（＋）：１００−１０００ａｍｕ。ＥＳ（−）：１００−８００ａｍｕ。ＵＶ検出範囲：２１０−３５０ｎｍ。記載化合物の特性解析欄の「ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ＿ＳＳ）」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
合計イオン電流（ＴＩＣ）および、ＤＡＤ、ＵＶ、クロマトグラフィー痕跡、並びに、ピーク関連ＭＳとＵＶスペクトルは、２９９６ＰＤＡ検出器を備えＷａｔｅｒｓＭｉｃｒｏｍａｓｓＺＱＴＭ質量分析計（［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋ｏｒ−）：ＡｃｑｕｉｔｙＴＭＵＰＬＣＢＥＨＣ１８カラム（５０ｘ２１ｍｍ、１．７μｍ粒径）、カラム温度４０℃、を使って解析を実施］の正／負エレクトロスプレーイオン化モードで稼働する）と連結したＵＰＬＣ／ＭＳＡｃｑｕｉｔｙＴＭシステムで測定した。移動相：Ａ−１０ｍＭＮＨ４ＨＣＯ３水溶液（アンモニアでｐＨ１０に調整）／Ｂ−ＣＨ３ＣＮ。傾斜：ｔ＝０分３％Ｂ、ｔ＝１．０６分９９％Ｂ持続０．３９分、ｔ＝１．４６分３％Ｂ、停止時間１．５分。カラム温度＝４０℃。流速＝１．０ｍＬ／ｍｉｎ。質量範囲：ＥＳ（＋）：１００−１０００ａｍｕまたはＥＳ（＋）：５０−８００ａｍｕ。ＥＳ（−）：１００−１０００ａｍｕ。ＵＶ検出範囲：２２０−３５０ｎｍ。記載化合物の特性解析欄の「ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣまたはＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００）」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
【００３９】
特に指定のない限り、分取ＬＣ−ＭＳ精製は、Ｗａｔｅｒｓ社のＭＤＡＰ（ＭａｓｓＤｅｔｅｃｔｏｒＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）装置（ＭＤＡＰＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ）で行われた。
［ＬＣ／ＭＳ−ＥＳ（＋）：ＧｅｍｉｎｉＣ１８ＡＸＩＡカラム（５０ｘ２１ｍｍ、５μｍ粒径）を使って解析を実施。移動相：Ａ−ＮＨ４ＨＣＯ３溶液、１０ｍＭ、ｐＨ１０；Ｂ−ＣＨ３ＣＮ。流速：１７ｍＬ／ｍｉｎ］。傾斜は都度特殊条件を適用。
分取ＬＣ−ＭＳ精製は、Ｗａｔｅｒｓ社のＭＤＡＰ（ＭａｓｓＤｅｔｅｃｔｏｒＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）装置でも実施された。記載化合物の特性解析欄の「ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ」の表示によりこの手法が使用されたことが示される。
マイクロ波照射を使う反応に対しては、ＰｅｒｓｏｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＥｍｒｙｓＴＭＯｐｔｉｍｉｚｅｒを使った。
【００４０】
多くの調製において、精製には、Ｂｉｏｔａｇｅマニュアルフラッシュクロマトグラフィー（Ｆｌａｓｈ＋）、Ｂｉｏｔａｇｅ自動フラッシュクロマトグラフィー（Ｈｏｒｉｚｏｎ、ＳＰ１およびＳＰ４）、ＣｏｍｐａｎｉｏｎＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（ＩＳＣＯ）自動フラッシュクロマトグラフィー、ＦｌａｓｈＭａｓｔｅｒＰｅｒｓｏｎａｌまたはＶａｃＭａｓｔｅｒｓｙｓｔｅｍｓを使用した。
フラッシュクロマトグラフィーはシリカゲル２３０〜４００メッシュ（Ｍｅｒｃｋ社、ダルムシュタット、ドイツから入手）、ＶａｒｉａｎＭｅｇａＢｅ−Ｓｉプレパックドカートリッジ、プレパックドＢｉｏｔａｇｅシリカカートリッジ(例えば、ＢｉｏｔａｇｅＳＮＡＰカートリッジ)、ＫＰ−ＮＨプレパックドフラッシュカートリッジまたはＩＳＣＯＲｅｄｉＳｅｐＳｉｌｉｃａカートリッジ上で行った。
ＳＰＥ−ＳＣＸカートリッジは、Ｖａｒｉａｎ社から入手したイオン交換固相抽出カラムである。ＳＰＥ−ＳＣＸカートリッジと一緒に使った溶出剤は、ＤＣＭおよびＭｅＯＨまたはＭｅＯＨのみで、これに続いて２ＮのアンモニアのＭｅＯＨ溶液である。
ＳＰＥ−Ｓｉカートリッジは、Ｖａｒｉａｎ社から入手したシリカ固相抽出カラムである。
【００４１】
次の表に、ここで使われている略語のリストを示す：
【表１】
2012510493.tif 000005
【００４２】
記載例
記載例１：（３Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸（Ｄ１）
【化４】
2012510493.tif 000006
５００ｍｌ丸底フラスコ中で、フェニルメチル［（３Ｓ）−５−オキソテトラヒドロ−３−フラニル］カルバマート（４．３ｇ，１８．２８ｍｍｏｌ，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃４１９２４９から入手可能）を水（１００ｍｌ）とアセトン（１００ｍｌ）に溶解し、この溶液にＣｓ２ＣＯ３（１０．７２ｇ，３２．９ｍｍｏｌ）を添加後、室温で５時間攪拌した。次にこの溶液を分液ロートに移し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍｌ）で洗浄した。水性相を２ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ＝２に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（５ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、溶媒を減圧下除去して白色固体の標記化合物Ｄ１（３．７８ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２５４（Ｍ＋１）。Ｃ１２Ｈ１５ＮＯ５の理論値：２５３。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１２．１１（ｂｓ，１Ｈ），７．４１−７．０７（ｍ，５Ｈ），５．１７−４．９２（ｍ，２Ｈ），３．９５−３．６２（ｍ，１Ｈ），３．４２−３．２２（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．３４−２．２３（ｍ，１Ｈ）。
【００４３】
記載例２：（３Ｓ）−４−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸（Ｄ２）
【化５】
2012510493.tif 000007
２５０ｍｌ丸底フラスコ中で、（３Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸Ｄ１（３．７５ｇ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、この溶液にイミダゾール（３．０２ｇ，４４．４ｍｍｏｌ）とＴＢＤＰＳＣｌ（７．６１ｍｌ，２９．６ｍｍｏｌ）を添加後、室温で１５時間攪拌した。この反応混合物を水（３００ｍｌ）を入れた分液ロートに移し、２ＭＨＣｌ水溶液を添加してｐＨ＝２に下げた後、ＥｔＯＡｃ（５ｘ５０ｍｌ）で抽出した。集めた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）後、減圧下揮発成分を除去して微黄色オイルを得た。この粗製オイルを、ＴＨＦ（５０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１０ｍｌ）と共に２５０ｍｌの丸底フラスコに入れた。この溶液に、Ｋ２ＣＯ３水溶液（９ｇのＫ２ＣＯ３を水１０ｍｌに溶解）を添加し室温で３時間攪拌した。揮発成分を真空下除去して，得られた粘稠オイルを水（２００ｍｌ）で希釈後、分液ロートに入れた。相が分離し、有機相に水（２００ｍｌ）を添加した後、２ＭＨＣｌ水溶液を加えてｐＨ＝２に調整した。相分離を起こし、水性相をＥｔＯＡｃ（５ｘ５０ｍｌ）で逆抽出した。集めた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、減圧下溶媒を除去してオイルを得、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００／０〜９０／１０）で精製し、画分を集め無色のオイルの標記化合物Ｄ２（５．２ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４９２（Ｍ＋１）。Ｃ２８Ｈ３３ＮＯ５Ｓｉの理論値：４９１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．０５−８．２８（ｍ，４Ｈ），７．７２−８．００（ｍ，１１Ｈ），５．４７−５．５９（ｍ，２Ｈ），４．６４−４．８０（ｍ，１Ｈ），４．１７−４．３４（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．０６−３．２０（ｍ，１Ｈ），１．４１−１．５８（ｍ，９Ｈ）。
【００４４】
記載例３：メチル（３Ｓ）−４−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノアート（Ｄ３）
【化６】
2012510493.tif 000008
１０００ｍｌ丸底フラスコ中で、（３Ｓ）−４−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸Ｄ２（１５ｇ）をＤＭＦ（２００ｍｌ）に溶解し、これにＤＩＰＥＡ（２８．８ｍｌ，１６５ｍｍｏｌ）とＴＢＴＵ（１１．４６ｇ，３５．７ｍｍｏｌ）を添加後、室温で２０分攪拌した。この茶色の溶液にＭｅＯＨ（１１ｍｌ）を添加し室温で３０分攪拌した。この反応混合物を食塩水（６００ｍｌ）の入った分液ロートに移しＥｔＯＡｃ（５ｘ２００ｍｌ）で抽出した。有機相を水（３ｘ１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）後、真空下で濃縮してオレンジ色のオイルを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１００／０〜８０／２０）で精製し黄色固体の標記化合物Ｄ３（１３．９ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：５０６（Ｍ＋１）。Ｃ２９Ｈ３５ＮＯ５Ｓｉ理論値：５０５。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．６９−７．２９（ｍ，１５Ｈ），５．４−５．２６（ｍ，１Ｈ），５．１１（ｍ，２Ｈ），４．２５−４．１４（ｍ，１Ｈ），３．８２−３．６８（ｍ，２Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），２．７９−２．５２（ｍ，２Ｈ），１．０８（ｓ，９Ｈ）。
【００４５】
記載例４：フェニルメチル［（１Ｓ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−オキソプロピル］カルバマート（Ｄ４ａ，Ｄ４ｂ，Ｄ４ｃ）
【化７】
2012510493.tif 000009
５００ｍｌ丸底フラスコ中で、メチル（３Ｓ）−４−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−３−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノアートＤ３（６．２８ｇ）をＤＣＭ（７９ｍｌ）に溶解し−７８℃に冷却した。この溶液に、１ＭＤＩＢＡＬ−ＨのＴＨＦ溶液（６２．１ｍｌ，６２．１ｍｍｏｌ）を滴下し、−７８℃で１時間攪拌した。次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（２００ｍｌ）を添加した後、そのまま室温まで暖めた。得られた混合物をセライト充填層で濾過しゲル状固体をＤＣＭ（５ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下濃縮して黄色オイルを得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＳＰ４，ＳＮＡＰ３４０ｇ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１００／０〜５０／５０）で精製し２つの生成物を回収した。
Ａ）白色固体の標記化合物Ｄ４ａ（３．７ｇ）、ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝７．５９分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４７６（Ｍ＋１）。Ｃ２８Ｈ３３ＮＯ４Ｓｉの理論値：４７５。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：９．７３（ｓ，１Ｈ），７．７４−７．３０（ｍ，１５Ｈ），５．２４−５．０（ｍ，３Ｈ），４．３６−４．１１（ｍ，１Ｈ），３．９１−３．６５（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．６１（ｍ，２Ｈ），１．０８（ｓ，９Ｈ）；および
Ｂ）無色オイルのフェニルメチル［（１Ｓ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−ヒドロキシプロピル］カルバマート（１ｇ）。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝７．３３分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４７８（Ｍ＋１）。Ｃ２８Ｈ３５ＮＯ４Ｓｉの理論値：４７７。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．７４−７．３０（ｍ，１５Ｈ），５．２４−４．９９（ｍ，３Ｈ），４．０−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．２１−２．９６（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．９１（ｍ，２Ｈ），１．０８（ｓ，９Ｈ）。
２５０ｍｌ丸底フラスコ中で、フェニルメチル［（１Ｓ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−ヒドロキシプロピル］カルバマート（１ｇ，２．０９４ｍｍｏｌをＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、これにＮａＨＣＯ３（０．５２８ｇ，６．２８ｍｍｏｌ）とＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（０．９７７ｇ，２．３０３ｍｍｏｌ）を添加後、室温で４．５時間攪拌した。この反応混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液の入った分液ロートに移し、ＤＣＭ（４ｘ４０ｍｌ）で抽出後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下溶媒を除去して淡黄色オイルを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＳＰ４ＳＮＡＰ５０ｇ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１／０〜８／２）で精製して、画分を集め無色オイルの標記化合物Ｄ４ｂ（０．９７０ｇ）を得た。Ｄ４ａ（３．７ｇ）とＤ４ｂ（０．９７０ｇ）を一緒にして標記化合物Ｄ４ｃ（４．６７ｇ）を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝７．５９分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４７６（Ｍ＋１）。Ｃ２８Ｈ３３ＮＯ４Ｓｉの理論値：４７５。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：９．７３（ｓ，１Ｈ），７．７４−７．３０（ｍ，１５Ｈ），５．２４−５．０（ｍ，３Ｈ），４．３６−４．１１（ｍ，１Ｈ），３．９１−３．６５（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．６１（ｍ，２Ｈ），１．０８（ｓ，９Ｈ）。
【００４６】
記載例５：メチル（２Ｚ，５Ｓ）−６−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−５−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−２−ヘキセノアート（Ｄ５）
【化８】
2012510493.tif 000010
５００ｍｌ丸底フラスコ中で、メチル｛ビス［（２，２，２−トリフルオロエチル）オキシ］ホスホリル｝アセタート（２．０７７ｍｌ，９．８２ｍｍｏｌ）と１８−クラウン−６−エーテル（１２．９８ｇ，４９．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍｌ）に溶解し、−７８℃で冷却した。この溶液に、０．５ＭのＫＨＭＤＳトルエン溶液（１９．６４ｍｌ，９．８２ｍｍｏｌ）をゆっくり添加して、この温度時に３０分保持後、フェニルメチル［（１Ｓ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−オキソプロピル］カルバマートＤ４ｃ（４．６７ｇ）をＴＨＦ（５０ｍｌ）に溶かした溶液を滴下し、−７８℃で３０分攪拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３００ｍｌ）を添加した後、分液ロートに移しＥｔＯＡｃ（３ｘ８０ｍｌ）で抽出した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して黄色オイルを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＳＰ４ＳＮＡＰ３４０ｇ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１００／０〜８０／２０）で精製し画分を集めて無色オイルの標記化合物Ｄ５（３．５８ｇ）を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝８．０４分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：５３２（Ｍ＋１）。Ｃ３１Ｈ３７ＮＯ５Ｓｉの理論値：５３１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．７４−７．３０（ｍ，１５Ｈ），６．３２−６．２０（ｍ，１Ｈ），５．９０−５．７５（ｍ，１Ｈ），５．２５−５−１８（ｍ，１Ｈ），５．０８（ｍ，２Ｈ），４．０−３．８３（ｍ，１Ｈ），３．７６−３．５６（ｍ，５Ｈ），３．１８−２．７６（ｍ，２Ｈ），１．０７（ｓ，９Ｈ）。
【００４７】
記載例６：フェニルメチル［（１Ｓ，３Ｚ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−５−ヒドロキシ−３−ペンテン−１−イル］カルバマート（Ｄ６）
【化９】
2012510493.tif 000011
５００ｍｌ丸底フラスコ中で、メチル（２Ｚ，５Ｓ）−６−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−５−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−２−ヘキセノアート（Ｄ５）（３．５８ｇ）を無水ＤＣＭ（１２２ｍｌ）に溶解し、−７８℃で冷却した。この溶液に、１ＭのＤＩＢＡＬ−ＨのＴＨＦ溶液（３３．７ｍｌ，３３．７ｍｍｏｌ）を滴下し、−７８℃で５時間攪拌した。次に、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（２５０ｍｌ）を加え、反応混合物をセライト充填層で濾過後、固形分をＤＣＭ（５ｘ２００ｍｌ）で洗浄し、生成した濾液を分液ロートに移した。相分離させ、水性相をＤＣＭ（３ｘ１００ｍｌ）で逆抽出した。集めた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下溶媒を除去してオイルを得た。この粗製物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＳＰ４ＳＮＡＰ３４０ｇ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１００／０〜８０／２０）で精製し画分を集めて標記化合物Ｄ６（３．３ｇ）を無色の粘稠オイルとして得た。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．７４−７．３０（ｍ，１５Ｈ），５．７１（ｍ，１Ｈ），５．５２（ｍ，１Ｈ），５．８０−５．６１（ｍ，１Ｈ），５６１−３．３６（ｍ，１Ｈ），５．２０−４．９４（ｍ，２Ｈ），４．２５−３．９８（ｍ，２Ｈ），３．９１−３７２（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．５８（ｍ，２Ｈ），２．５０−２．２６（ｍ，２Ｈ），１．０７（ｓ，９Ｈ）。
【００４８】
記載例７：フェニルメチル（（１Ｓ）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−１−｛［２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル］メチル｝エチル）カルバマート（Ｄ７）
【化１０】
2012510493.tif 000012
２５ｍｌの丸底フラスコ中に、１Ｍジエチル亜鉛のヘキサン溶液（６５．５ｍｌ，６５．５ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（８２ｍｌ）を加え、０℃で冷却した。この溶液に、ＴＦＡ（５．０５ｍｌ，６５．５ｍｍｏｌ）を滴下し、０℃で２０分攪拌した。次いで、ジヨードメタン（５．２９ｍｌ，６５．５ｍｍｏｌ）を滴下し、さらに２０分か攪拌した。５ｍｌ丸底フラスコ中で、フェニルメチル［（１Ｓ，３Ｚ）−１−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−５−ヒドロキシ−３−ペンテン−１−イル］カルバマート（Ｄ６）（３．３ｇ）をＤＣＭ（８２ｍｌ）に溶解し、得られた溶液を先に調製したジエチル亜鉛／ＴＦＡ／ＣＨ２Ｉ２のＤＣＭ溶液に０℃で滴下した。生成した溶液を室温で３０分攪拌し、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３００ｍｌ）で反応停止させた。この懸濁液を、分液ロートに移し、ＤＣＭ（４ｘ３０ｍｌ）で抽出後、有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮して、オイルを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＳＰ４ＳＮＡＰ３４０ｇ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１００／０〜５０／５０）で精製して次の２つの生成物を得た：
Ａ）単一ジアステレオ異性体１（Ｄ７）（１．３７ｇ）ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝７．５２分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：５１８（Ｍ＋１）。Ｃ３１Ｈ３９ＮＯ４Ｓｉの理論値：。１ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．２９−７．７１（ｍ，１５Ｈ），５．５４−５．６３（ｄ，１Ｈ），５．０３−５．２１（ｍ，２Ｈ），４．０１−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．８６−３．６６（ｍ，３Ｈ），３．４３−３．２６（ｔ，１Ｈ），２．８０−２．７０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１．９６−１．８１（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．３７（ｍ，１Ｈ），１．１７−１．０９（ｍ，１Ｈ），１．０８（ｓ，９Ｈ），０．７４−０．５９（ｍ，２Ｈ），−０．０７（ｍ，１Ｈ）；および
Ｂ）単一ジアステレオ異性体２（１．２６ｇ）。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝７．３８分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：５１８（Ｍ＋１）。Ｃ３１Ｈ３９ＮＯ４Ｓｉの理論値：５１７。
【００４９】
記載例８：フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ８）
【化１１】
2012510493.tif 000013
フェニルメチル（（１Ｓ）−２−｛［（１，１ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝−１−｛［２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル］メチル｝エチル）カルバマート単一ジアステレオ異性体１（Ｄ７）（１．１８ｇ）をＤＣＭ（３５ｍｌ）とＴＥＡ（０．９５３ｍｌ，６．８４ｍｍｏｌ）に加えた氷冷溶液に、塩化メシル（０．３５５ｍｌ，４．５６ｍｍｏｌ）を添加し、３時間攪拌した。次に、減圧下溶媒を除去して，得られた白色固体をＤＭＦ（４７ｍｌ）に溶解後、この溶液を０℃に冷却し、ＮａＨ（０．７３０ｇ，１８．２５ｍｍｏｌ，８当量）添加して、氷浴を止めた。一晩攪拌後、さらにＮａＨ（０．３６５ｇ，９．１２ｍｍｏｌ，４当量）を氷冷混合物に加え、室温で３時間攪拌した。ＵＰＬＣ測定で出発物質と所望生成物が１：１で存在することが分かったため、室温でＮａＨ（０．１８０ｇ，４．５ｍｍｏｌ，１．９７当量）を添加し、２．５時間攪拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３００ｍｌ）を加え、ＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍｌ）で抽出後、有機相を分離させ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過、濃縮して黄色オイルを得、これをＢｉｏｔａｇｅＳＰ４（シリカゲル，ＳＮＡＰ１００ｇカラム；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１／０〜９／１の傾斜で溶出）で精製し，画分を集めて無色オイルの標記化合物Ｄ８（０．９３０ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：５００（Ｍ＋１）。Ｃ３１Ｈ３７ＮＯ３Ｓｉの理論値：４９９。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．７６−７．３１（ｍ，１５Ｈ），５．１６−４．８４（ｍ，２Ｈ），４．３７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），３．８３−３．６８（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．５２（ｍ，２Ｈ），２．３７−２．２２（ｍ，２Ｈ），１．３９−１．１８（ｍ，１Ｈ），１．１３−１．０１（ｍ，１Ｈ），０．９５（ｓ，９Ｈ），０．９２−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．７９−０．７０（ｍ，１Ｈ），０．３３−０．０４（ｍ，１Ｈ）。
【００５０】
記載例９：フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ９）
【化１２】
2012510493.tif 000014
フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ８）（０．９３０ｇ）をピリジン（１４ｍｌ）に加えた氷冷溶液に、ＨＦ−ピリジン（２．６４２ｍｌ，３０．４ｍｍｏｌ）を添加し、生成した混合物を０℃で２０分攪拌後、ゆっくり室温まで暖め、３０分攪拌した。水（２００ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）を添加し、１５分攪拌した。有機相を分離させ、水性相をＥｔＯＡｃ（６ｘ５ｍｌ）で抽出した。集めた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過、減圧下で濃縮して、オイルを得、これをＣｏｍｐａｎｉｏｎＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（シリカゲル，ＳＮＡＰ１００ｇカラム；２０ＣＶのＤＣＭ／ＭｅＯＨ９８／２で溶出）で精製した。画分を集めて濃縮し標記化合物Ｄ９（０．４４７ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２６２（Ｍ＋１）。Ｃ１５Ｈ１９ＮＯ３の理論値：２６１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．５１−７．２４（ｍ，５Ｈ），５．２０−５．０（ｍ，２Ｈ），４．７３−４．４８（ｍ，１Ｈ），４．４３−４．１７（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．５１（ｍ，１Ｈ），３．５１−２．３５（ｍ，２Ｈ），２．４６−２．２４（ｍ，２Ｈ），１．２０−０．９５（ｍ，２Ｈ），０．９５−０．５９（ｍ，2H),0.21-0.09(m,1H)。
【００５１】
記載例１０：フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−ホルミル−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ１０）
【化１３】
2012510493.tif 000015
フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ９）（０．４４７ｇ）をＤＣＭ（１３ｍｌ）に加えた溶液に、ＮａＨＣＯ３（０．５７５ｇ，６．８４ｍｍｏｌ）とＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（０．７９８ｇ，１．８８２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で攪拌した。ＴＬＣ（シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ１／１，２，４−ジニトロフェニルイドラジン）測定の結果、出発物質が存在しなかったので、ＮａＨＣＯ３／５％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３飽和溶液（６０ｍｌ）とＤＣＭ（１０ｍｌ）を反応混合物に添加し、３０分攪拌した。水性相をＤＣＭ（３ｘ１０ｍｌ）で逆抽出し、２相系を相分離器カートリッジを通した。減圧下有機溶媒をを蒸発させ黄色オイルを得、これをＢｉｏｔａｇｅＳＰ４（シリカゲル，ＳＮＡＰ２５ｇ；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ，２５ＣＶ、１／０〜７／３）で精製して画分を集め標記化合物Ｄ１０（０．３７０ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２６０（Ｍ＋１）。Ｃ１５Ｈ１７ＮＯ３理論値：２５９。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：９．５０−９．３８（ｍ，１Ｈ），７．４８−７．１８（ｍ，５Ｈ），５．１９−４．９３（ｍ，２Ｈ），４．３１−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．２８−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．３０−２．１５（ｍ，１Ｈ），１．７７−１．３０（ｍ，１Ｈ），１．２１−０．８４（ｍ，２Ｈ），０．５６−０．７５（ｍ，１Ｈ），０．２２−−０．０３（ｍ，１Ｈ）。
【００５２】
記載例１１：フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジニル］アミノ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ１１）
【化１４】
2012510493.tif 000016
フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−ホルミル−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ１０）（０．３７０ｇ）をＤＣＭ（３．５ｍｌ）に加えた溶液に、ＡｃＯＨ（０．４０８ｍｌ，７．１３ｍｍｏｌ）と５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（０．３９３ｇ，２．４ｍｍｏｌ，１．３当量）を添加した。一時間攪拌後、イミンへの転換が完了していなかったので、さらに５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（０．２３１ｇ，１．４２５ｍｍｏｌ，１当量）を添加し、３．５時間の攪拌を追加した。反応系を０℃に冷却しトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（２．４１９ｇ，１１．４１ｍｍｏｌ）を添加して粘稠な懸濁液を得て、氷浴を取り除き、ＤＣＭ（２２．５ｍｌ）を加えて、得られた懸濁液を一晩攪拌した。反応混合物にＮａ２ＣＯ３の飽和水溶液（５０ｍｌ）とＤＣＭ（２０ｍｌ）を添加し、１５分間激しく攪拌した。有機相を分離させ、水性相をＮａ２ＣＯ３（５０ｍｌ）とＤＣＭ（２０ｍｌ）で逆抽出した。集めた有機層を相分離器カートリッジを通して乾燥し、減圧下濃縮して黄色オイルを得、これをＣｏｍｂｉＦｌａｓｈＣｏｍｐａｎｉｏｎ（シリカゲル，ＳＮＡＰ５０ｇカラム；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ，８／２）で精製し画分を集めて標記化合物Ｄ１１（０．２７５ｇ）を無色オイルとして得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝５．１１分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４０６（Ｍ＋１）。Ｃ２１Ｈ２２Ｆ３Ｎ３Ｏ２の理論値：４０５。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：８．２５−８．０（ｍ，１Ｈ），７．６５−７．４４（ｍ，１Ｈ），７．４４−７．１８（ｍ，６Ｈ），６．７３−６．３５（ｍ，１Ｈ），５．１８−４．９９（ｍ，１Ｈ），４．４０−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．５４−３．３６（ｍ，２Ｈ），２．４８−２．３７（ｍ，１Ｈ），２．２９−２．１５（ｍ，１Ｈ），１．１６−０．９４（ｍ，２Ｈ），０．０．８９−０．７６（ｍ，１Ｈ），０．７４−０．５９（ｍ，１Ｈ），０．２７−０．０９（ｍ，１Ｈ）。
【００５３】
記載例１２：Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（Ｄ１２）
【化１５】
2012510493.tif 000017
２５０ｍｌの水素添加フラスコ中で、フェニルメチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジニル］アミノ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ１１）（０．２７５ｇ）をＭｅＯＨ（２０ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（０．０７２２ｇ，０．０６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を大気圧下水素添加した。２５分後、ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ）測定の結果、ｒｔ＝０．９９分、観察されたピーク：２８４（Ｍ＋１）の主要副産物が認められた。Ｐｄ／Ｃをセライト充填層で濾別し、減圧下溶媒を除去して灰色がかった白色の半固体を得た。これを無水ＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（０．０７２２ｇ，０．０６８ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を大気圧下５０分間（合計時間）水素添加した。Ｐｄ／Ｃをセライト充填層で濾別し、減圧下溶媒を除去して黄色固体を得、これをＢｉｏｔａｇｅＳＰ４（ＮＨ２５＋Ｍカラム；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ：１／０〜７５／２５を１５ＣＶ，７５／２５を３ＣＶ，〜０／１を２０ＣＶで溶出）で精製して標記化合物Ｄ１２（０．１００ｇ）を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝３．１９分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２７２（Ｍ＋１）。Ｃ１３Ｈ１６Ｆ３Ｎ３の理論値：２７１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．２２−８．３２（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．２１−７．２８（ｍ，１Ｈ），６．６０（ｄ，１Ｈ），３．１２−３．２６（ｍ，１Ｈ），２．８９−３．１０（ｍ，３Ｈ），２．３７−２．４７（ｍ，１Ｈ），１．８３−１．９４（ｍ，１Ｈ），１．０５−１．１８（ｍ，１Ｈ），０．６９−０．９８（ｍ，２Ｈ），０．４２−０．５２（ｍ，１Ｈ），０．２８−０．３９（ｍ，１Ｈ）。
【００５４】
記載例１３：［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］メタノール（Ｄ１３）
【化１６】
2012510493.tif 000018
２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−３−ピリジノール（１．５ｇ，１０．７８ｍｍｏｌ，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃１４４４２８から入手可能），Ｋ２ＣＯ３（７．４５ｇ，５３．９ｍｍｏｌ）およびヨードエタン（１．７２４ｍｌ，２１．５６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍｌ）に溶解し、室温で一晩攪拌した。水とＥｔＯＡｃを添加し、２相を分離させた。合わせた有機相を食塩水／氷で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過、減圧下濃縮して淡黄色固体の粗製標記化合物Ｄ１３（１．６７ｇ）を得た。この粗製物はこれ以上精製せずに次のステップに供した。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：１６８（Ｍ＋１）。Ｃ９Ｈ１３ＮＯ２理論値：１６７。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：６．９６−７．０７（ｍ，２Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｑ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｔ，３Ｈ）。
【００５５】
記載例１４：[6-メチル-3-(プロピルオキシ)-2-ピリジニル]メタノールを記載例１３で記述したものと類似の方法で調製した。記載例１４の化合物を、2-(ヒドロキシメチル)-6-メチル-3-ピリジノールと適切な求電子試薬を使ってＯ‐アルキル化を行うことにより得た。これは単に当分野の化学者の便宜のために提供されているものである。出発物質は、必ずしも参照しているバッチから調製される必要は無い。
【表２】
2012510493.tif 000019
【００５６】
記載例１５：３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジンカルボン酸（Ｄ１５）
【化１７】
2012510493.tif 000020
［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］メタノールＤ１３（１．６７ｇ，記載例１３で得られた物質）をアセトニトリル（５０ｍｌ）およびリン酸バッファ（３８ｍｌ）に加えた溶液に、ＴＥＭＰＯ（０．２２ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）を添加し、３５℃に加熱した。ＮａＣｌＯ２（４．５１ｇ，４９．９０ｍｍｏｌ）を水（１０ｍｌ）に入れた溶液、およびＮａＣｌＯ（１３ｗｔ％水溶液，１８．９６ｍｌ，３９．９０ｍｍｏｌ）を同時に、１時間かけて添加した。生成した反応混合物を３５℃で４時間攪拌し、水（４０ｍｌ）を加え、１ＭのＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝８に調整した。この混合物を、氷冷したチオ硫酸ナトリウム飽和水溶液（１００ｍｌ）に注ぎ込み、さらに３０分攪拌した。１ＭのＨＣｌ水溶液でｐＨ＝３に調整し、水性相をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下濃縮して標記化合物Ｄ１５（１．６４ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：１８２（Ｍ＋１）。Ｃ９Ｈ１１ＮＯ３の理論値：１８１。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１２．５０−１３．２６（ｂｓ．，１Ｈ），７．４９（ｄ，１Ｈ），７．３１（ｄ，１Ｈ），４．０８（ｑ，２Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），１．２９（ｔ，３Ｈ）。
【００５７】
記載例１６：６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジンカルボン酸（Ｄ１６）
【化１８】
2012510493.tif 000021
５００ｍｌ丸底フラスコ中で、［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］メタノールＤ１４（３．５０ｇ）を水（１６ｍｌ）に懸濁させ、ＫＭｎＯ４（６．１０ｇ，３８．６０ｍｍｏｌ）とＫＯＨ（１Ｍ水溶液，１９ｍｌ，１９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で２時間攪拌後、１ＭのＨＣｌ水溶液でｐＨ＝４に調整し、次にＭｅＯＨ（１００ｍｌ）を添加した。固形分を濾別して、揮発成分を減圧下除去し、水性相をＤＣＭで２回抽出した。集めた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下濃縮して標記化合物Ｄ１６（２ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：１９６（Ｍ＋１）。Ｃ１０Ｈ１３ＮＯ２の理論値：１９５。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１２．９６（ｂｓ，１Ｈ），７．４９（ｄ，１Ｈ），７．３１（ｄ，１Ｈ），３．９８（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），１．６０−１．８０（ｍ，２Ｈ），０．９６（ｔ，３Ｈ）。
【００５８】
記載例１７：３−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）−６−メチル−２−ピリジンカルボニトリル（Ｄ１７）
【化１９】
2012510493.tif 000022
２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（３．４９ｍｌ，２０．５２ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２５ｍｌ）に溶解し、アルゴン雰囲気下の−３０℃で攪拌し、ＢｕＬｉの１．６Ｍヘキサン溶液（１３．３３ｍｌ，２１．３３ｍｍｏｌ）を５分かけて添加した（温度が−２５℃を超えることはなかった）。黄色溶液を−３０℃で２０分攪拌し、次に−７８℃に冷却して、トリス（１−メチルエチル）ボラート（４．３８ｍｌ，１８．９６ｍｍｏｌ）を５分かけて添加した（温度が−７３℃を超えることはなかった）。
−７８℃で１０分後、６−メチル−２−ピリジンカルボニトリル（２．０ｇ，１６．９３ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１４ｍｌ）に加えた溶液を、内部温度が−７３℃より低くなるよう維持しながら滴下（２０分かけて）して、混合物が暗褐色になった。この混合物を−７３℃で２時間攪拌した後、ＡｃＯＨ（２．３７４ｍｌ，４１．５ｍｍｏｌ）を−７３℃で滴下して反応を停止させた（温度が−６０℃を超えることはなく、混合物はブリリアントオレンジ色になった）。冷却浴を外し、混合物を室温になるまで置いた。この間混合物は粘稠になり、新たなＴＨＦ（８ｍｌ）を加え、攪拌状態を改善する必要があった。混合物を室温で１０分攪拌後、２，２−ジメチル−１，３−プロパンジオール（２．４０９ｇ，２３．１３ｍｍｏｌ）を一度に添加して、室温で一晩攪拌した。溶媒を蒸発させ、オレンジ色の残渣をＤＣＭ（１００ｍｌ）とＫＨ２ＰＯ４の１０％水溶液（１００ｍｌ）に溶解した。相を分離させ、水性相をＤＣＭ（５０ｍｌ）で逆抽出した。合わせた有機相をＫＨ２ＰＯ４の１０％水溶液（５０ｍｌ）で洗浄し、ＤＣＭを蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏ（１００ｍｌ）に溶解し、ＮａＯＨ０．０５Ｍ（５ｘ５０ｍｌ，水性相中ではボロン酸エステル）で抽出した。水性相を一緒にして、ｐＨをＫＨ２ＰＯ４の１０％水溶液（５０ｍｌ）を用いてｐＨ＝４とｐＨ＝５の間に調整した。得られた黄色溶液をＡｃＯＥｔ（３ｘ２００ｍｌ）で抽出した。全有機相を一緒にし乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して標記化合物Ｄ１７（２．２９ｇ）を得た。この化合物は黄色オイルで、静置により固化する。Ｃ１２Ｈ１５ＢＮ２Ｏ２の理論値：２３０。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．９７−８．１５（ｍ，１Ｈ），７．３１−７．３６（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｍ，４Ｈ），２．５２−２．７３（ｓ，３Ｈ），０．９７−１．１０（ｍ，６Ｈ）。
【００５９】
記載例１８：６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボニトリル（Ｄ１８）
【化２０】
2012510493.tif 000023
Ａ）３−ブロモ−６−メチル−２−ピリジンカルボニトリル（４ｇ，２０．３０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍｌ）に加え−７０℃（内部温度）に冷却した溶液に、イソプロピルマグネシウムクロリド−ＬｉＣｌ（３７．９ｍｌ，３６．５ｍｍｏｌ）を何回かに分けて（合計１０分かけて）添加した。反応系をその温度に１５分保持し、次にゆっくり、合計１時間かけて−４０℃に暖めた。次いで、−７８℃に冷却し、塩化亜鉛（３．３２ｇ，２４．３６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温まで１時間かけて暖めた。Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（２．３４６ｇ，２．０３０ｍｍｏｌ），２−クロロピリミジン（３ｇ，２６．２ｍｍｏｌ）を添加して、出発物質のクロロピリジンが完全に消費されるまで（２時間）混合物を還流した（外部温度１００℃）。反応混合物を室温まで冷却し、１０℃に冷却した水（２００ｍｌ）中に注ぎ込み、ＥｔＯＡｃ（５ｘ２００ｍｌ）で抽出した。大量のコロイド物質と水を含む、集めた有機相を食塩水（２００ｍｌ）で洗浄した。水性相をグーチ濾過器を使って濾過し、固形物をさらにＥｔＯＡｃ（２ｘ３００ｍｌ）で洗浄した。集めた有機相をＮａ２ＳＯ４上で一晩乾燥し、濾過，濃縮して粗製物（７ｇ）を得、これを精製して（ＢｉｏｔａｇｅＳｐ１、２４０ｇシリカＡｎｏｌｇｉｘカラム，２５ｇプレカラム付き）黄色固体の標記化合物Ｄ１８（１．８ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ＿ＳＳ）：ｒｔ＝０．５８分，観察されたピーク：１９７（Ｍ＋１）。Ｃ１１Ｈ８Ｎ４の理論値：１９６。
Ｂ）Ｄ１８を作る別のルート：３−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）−６−メチル−２−ピリジンカルボニトリルＤ１７（５０．６ｍｇ）を窒素雰囲気下バイアル中で１，４−ジオキサン（１ｍｌ）に溶解し、２−ブロモピリミジン（４２．０ｍｇ，０．２６４ｍｍｏｌ），ＣｓＦ（６７ｍｇ，０．４４１ｍｍｏｌ），Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（１２ｍｇ，１０．３８μｍｏｌ）およびＣｕＩ（７ｍｇ，０．０３７ｍｍｏｌ）を順に添加した。次にバイアルにフタをして６５℃で１時間攪拌後、減圧下溶媒を除去し、残渣をＡｃＯＥｔ（１０ｍｌ）とＮａＨＣＯ３（飽和溶液，１０ｍｌ）の間で分配した。相分離させ、水性相をＡｃＯＥｔ（２ｘ１０ｍｌ）で抽出した。有機画分を一緒にし、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧下濃縮してオレンジ色の油状残渣を得、これを精製して（Ｂｉｏｔａｇｅ，Ｓｎａｐ２５ｇシリカゲルカラム，ＡｃＯＥｔ／Ｃｙ純Ｃｙ〜５０：５０、１０ＣＶで）、淡黄色固体の標記化合物Ｄ１８（２７．６ｍｇ）を得た。
【００６０】
記載例１９：６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボン酸（Ｄ１９）
【化２１】
2012510493.tif 000024
Ａ）６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボニトリル（Ｄ１８）（０．８ｇ）を６ＭのＨＣｌ水溶液（４０ｍｌ，２４０ｍｍｏｌ）中、８０℃で３時間反応させ、次に真空下溶媒を除去して生成した粗製物を精製し（７０ｇＶａｒｉａｎＣ１８カラム、ＭｅＯＨ（１２０ｍｌ），次に水（１２０ｍｌ）でコンディショニング，水中負荷、水（２００ｍｌ）で洗浄，１００％ＭｅＯＨで生成物を溶出）、黄色固体の標記化合物Ｄ１９（０．６ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ＿ＳＳ）：ｒｔ＝０．３０分，観察されたピーク：２１６（Ｍ＋１）。Ｃ１１Ｈ９Ｎ３Ｏ２の理論値：２１７。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１３．０７（ｂｓ，１Ｈ），８．７８−９．０１（ｍ，２Ｈ），８．３９（ｍ，１Ｈ），７．３９−７．６７（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．６７（ｓ，３Ｈ）。
Ｂ）Ｄ１９を作る別の方法：６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボニトリル（Ｄ１８）（０．４８１ｇ）をＥｔＯＨ（５ｍｌ）中に懸濁し、ＮａＯＨ（０．４９０ｇ，１２．２６ｍｍｏｌ）を水（５ｍｌ）に加えた溶液を添加した。黄色混合物を１００℃で一晩攪拌した。黄色溶液を２５℃に冷却し、６ＭのＨＣｌ（１．０ｍｌ）を滴下しｐＨ＝４．５にした。溶媒を除去して得た黄色粉末を真空下、５０℃で１．５時間乾燥し、標記化合物Ｄ１９（１．２４２ｇ）を得た。
【００６１】
記載例２０：（２Ｓ）−２−アミノ−４−ペンテン−１−オール（Ｄ２０）
【化２２】
2012510493.tif 000025
２０Ｌ反応器中で、（２Ｓ）−２−アミノ−４−ペンテン酸（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃２８５０１３から入手可能）（２００ｇ，１３１９ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（３２００ｍｌ）に加えて０℃、窒素雰囲気下で攪拌した懸濁液に、１ＭのＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ溶液（１６００ｍｌ，１６００ｍｍｏｌ）を１．５時間かけて滴下した（内部温度を０℃〜５℃に維持して）。反応混合物を２５℃で２時間攪拌した（白色懸濁液）。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１／１，ＡｃＯＨ０．５％ニンヒドリン）のチェックで、反応が完了していることが明らかになった。反応混合物を０℃に冷却し、水６０．７ｍｌ（１ｇのＬｉＡｌＨ４に対し１ｍｌのＨ２Ｏに相当）＋１ＮのＮａＯＨ６０．７ｍｌ（１ｇのＬｉＡｌＨ４に対し１ＭのＮａＯＨの１ｍｌに相当）＋水１８２ｍｌ（１ｇのＬｉＡｌＨ４に対し３ｍｌのＨ２Ｏに相当）を順に添加して反応を停止させた。懸濁液を室温で１時間攪拌し、析出物を硫酸ナトリウムを通して濾過し（グーチ濾過器ｎ３使用）、Ｅｔ２Ｏ（６Ｌ）とＤＣＭ（４Ｌ）で洗浄した。粗製物の溶媒を留去して、淡いオレンジ色オイルの粗製標記化合物Ｄ２０（１１０ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：１０２（Ｍ＋１）。Ｃ５Ｈ１１ＮＯの理論値：１０１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．３９（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）１．８１−１．９６（ｍ，１Ｈ）２．０６−２．１９（ｍ，１Ｈ）２．５９−２．７３（ｍ，１Ｈ）３．１４（ｄｄ，１Ｈ）３．２６（ｄｄ，１Ｈ）４．４８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）４．９１−５．０９（ｍ，２Ｈ）５．７１−５．９２（ｍ，１Ｈ）。
【００６２】
記載例２１：１，１−ジメチルエチル（２−｛［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−３−ブテン−１−イル］アミノ｝−２−オキソエチル）カルバマート（ノン−プレフェレドナム）（Ｄ２１）
【化２３】
2012510493.tif 000026
５Ｌ反応器中で、（２Ｓ）−２−アミノ−４−ペンテン−１−オール（Ｄ２０）（記載例Ｄ２０で調製された粗製標記化合物１１０ｇ）をＴＨＦ（６６０ｍｌ）とＭｅＯＨ（４４０ｍｌ）に加え、０℃（内部温度＋５℃）で攪拌した溶液に、トリエチルアミン（１８２ｍｌ，１３０５ｍｍｏｌ）お帯２，５−ジオキソ−１−ピロリジニルＮ−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝グリシナート（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社＃１５４２３から入手可能）（２３７ｇ，８７０ｍｍｏｌ）を、何回かに分けて、１５分かけて添加した。反応混合物を２℃（内部温度）で３時間攪拌した。ＴＬＣ（ＴＬＣ−ＮＨ２，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９５／５，過マンガン酸カリウム）でチェックした結果、出発物質が残っていることが分かった。さらに２，５−ジオキソ−１−ピロリジニルＮ−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝グリシナート（６０ｇ，２２０ｍｍｏｌ）を添加し、２℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ＴＬＣ−ＮＨ２，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９５／５，過マンガン酸カリウム）チェックでは、出発物質の残余があったが、後処理を実行した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３４００ｍｌ）とＡｃＯＥｔ（１３７５ｍｌ）に注ぎ込み、相分離させ、水性層をＡｃＯＥｔ（１３７５ｍｌ）で逆抽出した。合わせた有機層をＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１０３１ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、留去して粗製物（２６８ｇ，黒茶）を得た。この残渣をＥｔ２Ｏ（６８７ｍｌ）と２５℃で１時間練和した。これを濾過し（グーチ濾過器ｎ３）、Ｅｔ２Ｏ（２００ｍｌ）で洗浄し、真空下乾燥して薄茶色の標記化合物Ｄ２１（８７ｇ）を得た。母液（黒茶）を留去して，残渣をクロマトグラフィーにかけて残余の茶色の生成物（３４ｇ）を得、これをＥｔ２Ｏ（２００ｍｌ）と練和した。固形分を濾過しＥｔ２Ｏで洗浄、真空下で乾燥して、薄茶色の標記化合物Ｄ２１の追加バッチ（２６ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２５９（Ｍ＋１）。Ｃ１２Ｈ２２Ｎ２Ｏ４の理論値：２５８。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．４７（ｓ，９Ｈ）２．２２−２．４３（ｍ，２Ｈ）２．６８−２．８３（ｍ，１Ｈ）３．５０−３．８６（ｍ，４Ｈ）３．９４−４．０９（ｍ，１Ｈ）５．００−５．２５（ｍ，３Ｈ）５．６４−５．８９（ｍ，１Ｈ）６．１７−６．４４（ｍ，１Ｈ）。
【００６３】
記載例２２：１，１−ジメチルエチル｛２−［（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−オキソエチル｝カルバマート（ノン−プレフェレドナム）（Ｄ２２）
【化２４】
2012510493.tif 000027
１，１−ジメチルエチル（２−｛［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−３−ブテン−１−イル］アミノ｝−２−オキソエチル）カルバマート（ノン−プレフェレドナム）（Ｄ２１）（３７ｇ）をトルエン（３７０ｍｌ）に加え、２５℃で攪拌した懸濁液に、２，２−ビス（メチルオキシ）プロパン（３７０ｍｌ，３０２０ｍｍｏｌ）とｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３．７ｇ，１９．４５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１．５時間還流（内部温度８５℃、オイル浴１０５℃）により攪拌した（透明溶液）。ＴＬＣチェック（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９５／５）で反応が完了していることが分かった。溶媒を留去して茶色のオイルを得、これをクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ７５Ｌ，シリカ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ８／２，７／３で溶出）にかけ黄色オイルの標記化合物Ｄ２２（３０ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．６９分，観察されたピーク：２９９（Ｍ＋１）。Ｃ１５Ｈ２６Ｎ２Ｏ４理論値：２９８。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．４６（ｓ，９Ｈ）１．５４（ｓ，３Ｈ）１．６７（ｓ，３Ｈ）２．３０−２．４９（ｍ，２Ｈ）３．７１−４．０５（ｍ，５Ｈ）５．０４−５．２２（ｍ，２Ｈ）５．３７−５．５２（ｍ，１Ｈ）５．６５−５．８１（ｍ，１Ｈ）。
【００６４】
記載例２３：トリフルオロメタンスルホン酸−｛２−［（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−オキソエチル｝アミン（１：１）（Ｄ２３）
【化２５】
2012510493.tif 000028
１，１−ジメチルエチル｛２−［（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−オキソエチル｝カルバマート（ノン−プレフェレドナム）（Ｄ２２）（２８．６７ｇ）をＤＣＭ（３００ｍｌ）に溶解し、そこに２，６−ジメチルピリジン（２７．９ｍｌ，２４０ｍｍｏｌ），続いてトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート（３４．７ｍｌ，１９２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３０分攪拌した。反応を２ｍｌの水で停止させ、減圧下溶媒を除去して残渣をＢｉｏｔａｇｅ７５Ｌカラム（［ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００：０次に９８：２その次に９６：４その次に８５：１５］で溶出）にかけた。溶媒を留去して標記化合物Ｄ２３（２１ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＦＩＮＡＬ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．３６分，観察されたピーク：１９９（Ｍ＋１−ＣＨＦ３Ｏ３Ｓ）。Ｃ１０Ｈ１８Ｎ２Ｏ２ＣＨＦ３Ｏ３Ｓ理論値：３４８。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．４０（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），２．１７−２．４３１．４０（ｍ，２Ｈ），３．６８−３．９８（ｍ，４Ｈ），３．９９−４．０９（ｍ，１Ｈ），４．８３−５．４０（ｍ，２Ｈ），５．５８−５．９７（ｍ，１Ｈ），７．６３−８．３６（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）。
【００６５】
記載例２４：（４Ｓ）−３−（ジアゾアセチル）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン（Ｄ２４）
【化２６】
2012510493.tif 000029
トリフルオロメタンスルホン酸−｛２−［（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−オキソエチル｝アミン（１：１）（Ｄ２３）（６７．０ｇ）をＤＣＭ（６７０ｍｌ）とｐＨ＝５バッファ溶液（６７０ｍｌ）に溶解し、２℃（内部温度）に冷却した。この反応混合物に、亜硝酸ナトリウム（２６．５ｇ，３８５ｍｍｏｌ）を水（１３４ｍｌ）に加えた溶液を２℃で３０分かけ滴下した。この反応混合物を３℃で２．５時間攪拌した。水性相をＤＣＭ（１ｘ６７０ｍｌ，１ｘ３３５ｍｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥し、留去して（浴温度３０℃）、４３ｇの粗製物を得た。この粗製物をシリカパッド［（２３０−４００Ｍｅｓｈ）Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ８／２，７／３，６／４で溶出］で精製して標記化合物Ｄ２４（３６．５８ｇ）を淡黄色オイルとして得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．５９分，観察されたピーク：２１０（Ｍ＋１）。Ｃ１０Ｈ１５Ｎ３Ｏ２の理論値：２０９。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．５８（ｓ，３Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）２．２５−２．５０（ｍ，２Ｈ）３．４３−３．７０（ｍ，１Ｈ）３．８２−４．０１（ｍ，２Ｈ）４．８４（ｓ，１Ｈ）５．０９−５．２４（ｍ，２Ｈ）５．６３−５．８４（ｍ，１Ｈ）。
【００６６】
記載例２５：（５ａＳ，６ａＳ，７ａＳ）−３，３−ジメチルヘキサヒドロ−５Ｈ−シクロプロパ［ｄ］［１，３］オキサゾロ［３，４−ａ］ピリジン−５−オン、および（５ａＲ，６ａＲ，７ａＳ）−３，３−ジメチルヘキサヒドロ−５Ｈ−シクロプロパ［ｄ］［１，３］オキサゾロ［３，４−ａ］ピリジン−５−オン（Ｄ２５Ａｓｙｎ／Ｄ２５Ｂａｎｔｉ）
【化２７】
2012510493.tif 000030
（４Ｓ）−３−（ジアゾアセチル）−２，２−ジメチル−４−（２−プロペン−１−イル）−１，３−オキサゾリジン（Ｄ２４）（３６．５ｇ）をＤＣＭ（３６５ｍｌ）に溶解し、酢酸ロジウム（ＩＩ）ダイマー（３．８５ｇ，８．７２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１８３ｍｌ）中懸濁液に、２５℃で２．５時間かけて滴下した。得られた混合物を２５℃で３０分攪拌した。ＴＬＣ（Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１／１）測定の結果、出発物質は残っていなかった。この混合物を濾過し（グーチ濾過器ｎ３）、濃縮して２回クロマトグラフィー（シリカ２３０−４００Ｍｅｓｈ，Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ７／３，６／４で溶出）に供して３つの画分を得、ｎ−ヘプタン（各画分に対し４０ｍｌ）で練和後、次の３つのバッチを得た：
Ｄ２５Ｂ／Ｄ２５Ａ９５：３（１０．３ｇ，ａｎｔｉ異性体が主成分ａｎｔｉ／ｓｙｎ９５／３）ＨＰＬＣ（ｗａｌｋｕｐ）：ｒｔ１＝３．０９分ｒｔ２＝３．１４分；
Ｄ２５Ａ／Ｄ２５Ｂ３１：６８（４．４７ｇ，ａｎｔｉ／ｓｙｎ比率が約３１／６８）ＨＰＬＣ（ｗａｌｋｕｐ）：ｒｔ１＝３．０５分ｒｔ２＝３．１１分；
Ｄ２５Ａ／Ｄ２５Ｂ（１０．５ｇ，Ｄ２５Ａｓｙｎ異性体が主成分）。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋｕｐ）：ｒｔ１＝３．０８分ｒｔ２＝３．１６分。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ３．８７−４．０２（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｔ，１Ｈ），２．２９−２．３８（ｍ，１Ｈ），１．５７（ｓ，３Ｈ），１．４５−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．３６−１．４２（ｍ，１Ｈ），１．１２−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．０６−１．１２（ｍ，０Ｈ），０．４５−０．５４（ｍ，１Ｈ）。
この第３バッチＤ２５Ａ／Ｄ２５Ｂの６６２ｍｇをフラッシュクロマトグラフィー（Ｓｎａｐ−５０ｇシリカゲルカラム，ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ、１００％Ｃｙ〜３０：７０）で精製した。この精製で、ほぼ純粋なｃｉｓ異性体（標記化合物Ｄ２５Ａ）（２９８ｍｇ）が白色固体として得られ、また、ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体（７５／２５）混合物バッチ（３４７ｇ）が無色オイルとして得られた。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．４８分，観察されたピーク：１８２（Ｍ＋１）。Ｃ１０Ｈ１５ＮＯ２の理論値：１８１。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ３．９８−４．１０（ｍ，２Ｈ）３．３６−３．４５（ｍ，１Ｈ）２．３７−２．４７（ｍ，１Ｈ）１．６６（ｓ，３Ｈ）１．５３−１．６１（ｍ，１Ｈ）１．５２（ｓ，３Ｈ）１．４２−１．５０（ｍ，１Ｈ）１．１４−１．２９（ｍ，２Ｈ）０．５９（ｍ，１Ｈ）。
【００６７】
記載例２６：（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−２−オン（Ｄ２６）
【化２８】
2012510493.tif 000031
（５ａＳ，６ａＳ，７ａＳ）−３，３−ジメチルヘキサヒドロ−５Ｈ−シクロプロパ［ｄ］［１，３］オキサゾロ［３，４−ａ］ピリジン−５−オンＤ２５（３．５６ｇ）を、２５０ｍｌ丸底フラスコ中でＨＣｌ（２５ｍｌ，１５０ｍｍｏｌ）（６Ｍ水溶液）溶解し、４０℃で４時間攪拌後、反応は完結した。ｒｏｔａｖａｐｏｒ（浴温度：４０℃）を使って溶媒を減圧下留去した。油状残渣をトルエンで取り除き、残渣を高真空下３時間乾燥し、白色固体の標記化合物Ｄ２６（２．８４３ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＩＰＱＣ）：ｒｔ＝０．３１分，観察されたピーク：１４２（Ｍ＋１）。Ｃ７Ｈ１１ＮＯ２の理論値：１４１。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ０．５６−０．６８（ｍ，１Ｈ）０．９３−１．０５（ｍ，１Ｈ）１．３０−１．３９（ｍ，１Ｈ）１．３９−１．４８（ｍ，１Ｈ）１．５７−１．６７（ｍ，１Ｈ）１．９８−２．０９（ｍ，１Ｈ）３．１７−３．２９（ｍ，２Ｈ）３．３１−３．４０（ｍ，１Ｈ）６．８９−７．１３（ｍ，１Ｈ）。
【００６８】
記載例２７：１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２７）
【化２９】
2012510493.tif 000032
（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−２−オンＤ２６（３．８３９ｇ）をＴＨＦ（４０ｍｌ）に懸濁させ、ＢＨ３．ＴＨＦ（１ＭＴＨＦ溶液，１３６ｍｌ，１３６ｍｍｏｌ）をゆっくり（５分かけて）添加し、２時間還流して攪拌した。混合物を室温に冷却し、続いて氷／水浴で０℃に冷却した。ＭｅＯＨ（２５ｍｌ）をゆっくり添加し、ガス放出が止まった時点でＨＣｌ（３Ｍ水溶液，１４０ｍｌ，４２０ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、再度８５℃で１時間攪拌した。混合物を再度室温に冷却した。
第２の反応混合物の調製：（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−２−オンＤ２６（３．８３９ｇ）をＴＨＦ（０．５ｍＬ）に懸濁させ、ＢＨ３．ＴＨＦ（３．６ｍＬ，３．６０ｍｍｏｌ）をゆっくり（１分かけて）添加し、２時間還流して攪拌した。第２の混合物を室温に冷却し、ＨＣｌ（３．６ｍＬ，１０．８０ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、再度７５℃で１時間攪拌した。混合物を再度室温に冷却し、これを最初の混合物に加え単一の混合物を形成した。
ＮａＯＨ（３Ｍ水溶液，１４０ｍｌ，４２０ｍｍｏｌ）を酸性混合物にゆっくり添加し、ｐＨを約１０にした。Ｂｏｃ２Ｏ（７．１３ｍｌ，３０．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍｌ）に加えた溶液を添加し、得られた２相混合物を室温で１．５時間激しく攪拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加し、層を分離させた。水性相をＥｔＯＡｃ（３ｘ１００ｍｌ）で抽出後、全有機画分を一緒にした。これを食塩水（３ｘ１５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧下留去して粗製目標物質（１４ｇ）を淡黄色オイルとして得た。この物質をＢｉｏｔａｇｅ（Ｓｎａｐ−３４０ｇシリカゲルカラム，純Ｃｙ〜ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ７０：３０）で精製して無色オイルの標記化合物Ｄ２７（５．６９５ｇ）を得た。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：２２８（Ｍ＋１）１２８（Ｍ＋１−Ｂｏｃ）。Ｃ１２Ｈ２１ＮＯ３の理論値：２２７。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ４．４３（ｔ，１Ｈ），４．００−４．２０（ｍ，１Ｈ），３．３４−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．２５−３．３１（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２３（ｍ，１Ｈ），２．００−２．１０（ｍ，１Ｈ），１．３０（ｓ，９Ｈ），０．８６−０．９９（ｍ，２Ｈ），０．６６−０．７７（ｍ，１Ｈ），０．５１−０．６１（ｍ，１Ｈ），−０．０４−０．０５（ｍ，１Ｈ）。
【００６９】
記載例２８：１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−［（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）メチル］−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２８）
【化３０】
2012510493.tif 000033
１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２７）（３１０ｍｇ）、トリフェニルホスフィン（１０７３ｍｇ，４．０９ｍｍｏｌ）およびフタルイミド（５０２ｍｇ，３．４１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７ｍｌ）に溶解した。この混合物を５０℃にし、ＤＩＡＤ（０．７９６ｍｌ，４．０９ｍｍｏｌ）を滴下した。これを５０℃で１時間攪拌し、１ｍｌの水を添加した。揮発成分を真空除去して、得られた粗製物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーカラムサイズ１０ｇ；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ＝８：２〜Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ＝５：５〜ＥｔＯＡｃ１００％を使用）で精製して標記化合物Ｄ２８（４８８ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．８０分，観察されたピーク：３５７（Ｍ＋１）。Ｃ２０Ｈ２４Ｎ２Ｏ４の理論値：３５６。
【００７０】
記載例２９：１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（アミノメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２９）
【化３１】
2012510493.tif 000034
１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−［（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）メチル］−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２８）（１．８ｇ）をＥｔＯＨ（８ｍｌ）に溶解し、ヒドラジン（２．４７６ｍｌ，５０．５ｍｍｏｌ）を注意深く添加して室温で２時間攪拌した。全揮発成分を減圧下除去して、固形物残渣をＳＣＸクロマトグラフィー（カラムサイズ２０ｇＭｅＯＨ１００％〜ＭｅＯＨ／ＮＨ３２Ｍを使用）で精製した。この生成物は純度が低かったので、シリカーＮＨクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ−カラムサイズ２８ｇＥｔＯＡｃ１００％を溶出剤として使用）で再度精製し、標記化合物Ｄ２９（７９３ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．４６分，観察されたピーク：２２７（Ｍ＋１）。Ｃ１２Ｈ２２Ｎ２Ｏ２の理論値：２２６。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ４．４１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）３．６６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）２．９０−２．６５（ｍ，２Ｈ）２．４２−２．１７（ｍ，２Ｈ）１．６０−１．４０（ｍ，１１Ｈ）１．２１−１．０８（ｍ，１Ｈ）１．０６−０．８４（ｍ，２Ｈ）０．８１−０．６８（ｍ，１Ｈ）０．３０−０．０４（ｍ，１Ｈ）。
【００７１】
記載例３０：１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジニル］アミノ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ３０）
【化３２】
2012510493.tif 000035
Ａ）１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（アミノメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２９）（１９７ｍｇ）、２−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ピラジン（３９５ｍｇ，１．７４１ｍｍｏｌ），ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１２５ｍｇ，１．３０６ｍｍｏｌ）、臭化テトラブチルアンモニウム（３３７ｍｇ，１．０４５ｍｍｏｌ），酢酸パラジウム（ＩＩ）（１９．５４ｍｇ，０．０８７ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（５４．２ｍｇ，０．０８７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（８ｍｌ）に溶解した。これを１００℃、ＭＷｓｙｓｔｅｍ（２０分ｘ２）で攪拌した。冷却後、セライト充填層で濾過し、２０ｍｌのＥｔＯＡｃで希釈し、２０ｍｌの食塩水で洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し真空下濃縮して粗製物を得、これをシリカクロマトグラフィー（カラムサイズ２５ｇ，Ｃｙ：ＥｔＯＡｃ＝８：２〜２：８を使用）で精製し、標記化合物Ｄ３０（１００ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．８７分，観察されたピーク：３７３（Ｍ＋１）。Ｃ１７Ｈ２３Ｆ３Ｎ４Ｏ２の理論値：３７２。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．２５（ｓ，１Ｈ）７．８９（ｓ，１Ｈ）４．３７−４．０２（ｍ，２Ｈ）３．４８−３．３０（ｍ，２Ｈ）２．５３−２．２０（ｍ，２Ｈ）２．０７（ｓ，９Ｈ）１．３０−１．１５（ｍ，１Ｈ）１．０５−０．７２（ｍ，３Ｈ）０．３０−０．０３（ｍ，１Ｈ）。
Ｂ）１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（アミノメチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ２９）（４００ｍｇ）と２−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ピラジン（４０１ｍｇ，１．７６７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍｌ）に溶解し、炭酸ナトリウム（３７５ｍｇ，３．５３ｍｍｏｌ）を添加後、５０℃で２時間加熱した。真空下ＤＭＦを濃縮し，残渣をＤＣＭ（３ｍｌ）に溶解してＮａＨＣＯ３飽和溶液（４ｍｌ）で洗浄した。有機相を相分離器チューブで濾過し、真空下濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ−カラムサイズ２５ｇＳＮＡＰ、Ｃｙ：ＥｔＯＡｃ＝８：２〜２：８を溶出剤として使用）で精製して標記化合物Ｄ３０（３００ｍｇ）を得た。
【００７２】
記載例３１：Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン（Ｄ３１）
【化３３】
2012510493.tif 000036
１，１−ジメチルエチル（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−４−（｛［５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジニル］アミノ｝メチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボキシラート（Ｄ３０）（１００ｍｇ）をＤＣＭ（４ｍｌ）に溶解し、これにＴＦＡ（２ｍｌ，２６．０ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で２時間反応させた。真空下溶媒を除去し粗製物をＳＣＸクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ１００％〜ＭｅＯＨ／ＮＨ３２Ｍを使用）で精製し、標記化合物Ｄ３１（５７ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．４８分，観察されたピーク：２７３（Ｍ＋１）。Ｃ１２Ｈ１５Ｆ３Ｎ４の理論値：２７２。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ０．２２−０．２９（ｍ，１Ｈ）０．６７−０．７６（ｍ，１Ｈ）０．８２−０．９２（ｍ，１Ｈ）１．０２−１．１３（ｍ，１Ｈ）１．２４−１．３５（ｍ，１Ｈ）２．０１−２．１２（ｍ，１Ｈ）２．６３−２．７２（ｍ，１Ｈ）２．９５−３．０６（ｍ，１Ｈ）３．１７（ｄｄ，１Ｈ）３．２６（ｄ，１Ｈ）３．５３−３．６３（ｍ，１Ｈ）５．９６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．９１−７．９６（ｍ，１Ｈ）８．２６−８．３１（ｍ，１Ｈ）。
【００７３】
記載例３２：２−メチルフロ［３，４−ｂ］ピリジン−５，７−ジオン（Ｄ３２）
【化３４】
2012510493.tif 000037
１００ｍｌ丸底フラスコ中に、６−メチル−２，３−ピリジンジカルボン酸（１０ｇ，５５．２ｍｍｏｌ）と無水酢酸（２６ｍｌ，２７６ｍｍｏｌ）を添加し、窒素雰囲気下１００℃で５時間加熱した。次に、揮発成分を真空除去し、微褐色固体の標記化合物Ｄ３２（８．２ｇ）を得た。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．４１（ｄ，１Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），２．７３（ｓ，３Ｈ）。
【００７４】
記載例３３：６−メチル−２−［（メチルオキシ）カルボニル］−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３３）
【化３５】
2012510493.tif 000038
２−メチルフロ［３，４−ｂ］ピリジン−５，７−ジオン（Ｄ３２）（３ｇ）を何回かに分け、５分かけてＭｅＯＨ（２０ｍｌ）に添加した。混合物を０℃で３０分、次に室温で２．５時間攪拌した。溶液を減圧下濃縮して、残渣をトルエン（５０ｍｌ）から再結晶させた。固形分を濾過し、高真空下３０分乾燥して標記化合物Ｄ３３の第１のバッチ（１．１６ｇ）を薄茶色固体として得た。トルエン溶液から、新たな固体が析出した。これを濾過し高真空下３０分乾燥して標記化合物Ｄ３３の第２のバッチ（３５２ｍｇ）を淡黄色固体として得た。次にトルエン溶液を減圧下留去して残渣をトルエン（２５ｍｌ）から再度再結晶させた。固形物を濾過し、高真空下３０分乾燥して標記化合物Ｄ３３の第３のバッチ（６１５ｍｇ）を淡黄色固体として得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．２３分，観察されたピーク：１９５（Ｍ＋１）。Ｃ９Ｈ９ＮＯ４の理論値：１９６。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１３．６１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．０９−８．３１（ｍ，１Ｈ），７．５１（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ）。
【００７５】
記載例３４：メチル３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３４）
【化３６】
2012510493.tif 000039
６−メチル−２−［（メチルオキシ）カルボニル］−３−ピリジンカルボン酸（Ｄ３３）（１．１５ｇ）をトルエン（４０ｍｌ）に懸濁させ、ＤＩＰＥＡ（１．２５ｍｌ，７．１６ｍｍｏｌ）を添加して固形分を完全に溶解した。これを室温で１０分攪拌し、ジフェニルアジドホスファート（１．３５ｍｌ，６．２６ｍｍｏｌ）を一度に添加後、１時間還流して攪拌した。この溶液を室温まで冷却しｔ−ＢｕＯＨ（２．５ｍｌ，２６ｍｍｏｌ）を一度に添加し、７０℃で１時間攪拌した後、室温まで冷却しＥｔ２Ｏ（５０ｍｌ）を添加して、得られた溶液をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄した。水性相を合わせ、Ｅｔ２Ｏで逆抽出した。２つの有機溶液を一緒にし、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧下濃縮して淡黄色オイルの粗製目標物を得た。これをシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ，ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ、１０／９０〜７０／３０；Ｓｎａｐ−１００ｇカラム）で精製して白色固体の標記化合物Ｄ３４（１．３１５ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．６８分，観察されたピーク：２６７（Ｍ＋１）。Ｃ１３Ｈ１８Ｎ２Ｏ４の理論値：２６６。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１０．１３（ｂｓ．，１Ｈ），８．７７（ｄ，１Ｈ），７．３４（ｄ，１Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），１．５３−１．５６（ｍ，９Ｈ）。
【００７６】
記載例３５：メチル３−アミノ−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３５）
【化３７】
2012510493.tif 000040
メチル３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３４）（１．３ｇ）をＤＣＭ（８０ｍｌ）に溶解し、０℃で攪拌した。ＴＦＡ（５ｍｌ，６４．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に加えた溶液を冷却した混合物に３分かけて滴下した。得られた溶液を０℃で３０分攪拌し、室温で一晩静置した。ＴＦＡ（４ｍｌ，５１．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に溶解し、これを３分かけて添加し、室温で５時間攪拌した。この溶液をＳＣＸ−２５ｇカラムに注入し、カラムを溶出し、減圧下溶媒を留去して白色固体の標記化合物Ｄ３５（７７０ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．４４分，観察されたピーク：１６７（Ｍ＋１）。Ｃ８Ｈ１０Ｎ２Ｏ２の理論値：１６６。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．１４（ｄ，１Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ），３．９９（ｓ，３Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ）。
【００７７】
記載例３６：メチル３−ヨード−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３６）
【化３８】
2012510493.tif 000041
メチル３−アミノ−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３５）（７６８ｍｇ）に６ＭのＨＣｌ水溶液（４．５ｍｌ，２７．０ｍｍｏｌ）添加し得られた淡黄色混合物を水（４ｘ５ｍｌ）で順に希釈して、０℃（内部温度）で冷却した。
亜硝酸ナトリウム（４８０ｍｇ，６．９６ｍｍｏｌ）を水（２ｍｌ）に加えた溶液を混合物に１分かけて添加した。次に０℃で３０分攪拌し、ＫＩ（１．６９ｇ，１０．１８ｍｍｏｌ）を（２ｍｌ）に加えた溶液を１分かけて添加し、暗紫色外皮を形成させた（中程度のガス放出あり）。混合物を１時間攪拌継続し、この間温度が０℃から＋５℃まで変化した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）をこの攪拌混合物に添加し、暗色固体を溶解させた。水（５０ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）を添加し、全混合物を分液ロートに入れた。全有機相を一緒にしＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄した。酸性水性相を、前に使ったＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加して中和し、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。全有機相を一緒にして、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧下濃縮して粗製目標物質を暗褐色／青紫色オイルとして得た。この物質をシリカクゲルロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ４Ｓｎａｐ−１００ｇカラム，ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ、１０／９０〜３０／７０）で精製して薄茶色固体の標記化合物Ｄ３６（１．１ｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．６８分，観察されたピーク：２７８（Ｍ＋１）。Ｃ８Ｈ８ＩＮＯ２の理論値：２７７。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．１２（ｄ，１Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），２．５８（ｓ，３Ｈ）。
【００７８】
記載例Ｄ３７：メチル６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３７）
【化３９】
2012510493.tif 000042
ねじぶた付きバイアル中で、メチル３−ヨード−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３６）（２００ｍｇ）、１Ｈ−ピラゾール（９８ｍｇ，１．４４４ｍｍｏｌ），（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（２０．５４ｍｇ，０．１４４ｍｍｏｌ），ビス（銅（Ｉ）トリフルオロメタンスルホナート），ベンゼン錯体（１８．１７ｍｇ，０．０３６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４７０ｍｇ，１．４４４ｍｍｏｌ）の混合物にＤＭＦ（１．５ｍｌ）を添加した。この混合物を真空／窒素を３回繰り返して脱気し震盪を加えながら１２０℃で１時間加熱した。反応混合物を減圧下蒸発乾固した。残渣を水／ＭｅＯＨ（１：１，３ｍｌ）に溶解し、４ＭのＨＣｌ溶液でｐＨ＝２に酸性化した。得られた混合物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３：１，２０ｍｌ）で練和し、濾過後、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３：１，５ｍｌ）でさらに洗浄した。濾液をＴＭＳ−ジアゾメタン溶液（ヘキサン中２Ｍ溶液）で処理し酸を再エステル化した。反応混合物を減圧下濃縮して残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳｎａｐ１０ｇカラム，ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ、２０／８０〜５０／５０、および次にＢｉｏｔａｇｅＫＰ−ＮＨＳｎａｐ１１ｇカラム，ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ均一濃度の１／９９）で２回精製し標記化合物Ｄ３７（１０７ｍｇ）を無色のガムとして得た。
ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００）：ｒｔ＝０．５１分，観察されたピーク：２１８（Ｍ＋１）。Ｃ１１Ｈ１１Ｎ３Ｏ２の理論値：２１７。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ７．６３−７．８６（ｍ，３Ｈ），７．３９（ｍ，１Ｈ），６．４８（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｓ，３Ｈ）。
【００７９】
記載例Ｄ３８：６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジンカルボン酸（Ｄ３８）
【化４０】
2012510493.tif 000043
メチル６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３７）（１０６ｍｇ）とＬｉＯＨ（１７．５３ｍｇ，０．７３２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／水（２：１，６ｍｌ）に加えた溶液を一晩攪拌した。この混合物を減圧下濃縮して残渣を水（２ｍｌ）に溶解し、１ＭのＨＣｌでｐＨ＝２に調整した。これをプレコンディショニングしたＣ１８カラム（５ｇ，水、次にＭｅＯＨで溶出）に注入し、メタノール画分を減圧下濃縮して白色固体の標記化合物Ｄ３８（９８ｍｇ）を得た。
ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００）：ｒｔ＝０．３０分，観察されたピーク：１６０［（Ｍ−ＣＯ２）＋１］。Ｃ１０Ｈ９Ｎ３Ｏ２の理論値：２０３。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｍｅｔｈａｎｏｌ−ｄ４）δｐｐｍ７．７７−８．０３（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｍ，１Ｈ），６．５５（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ）。
【００８０】
記載例３９：メチル６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３９）
【化４１】
2012510493.tif 000044
マイクロ波バイアル中で、メチル３−ヨード−６−メチル−２−ピリジンカルボキシラートＤ３６（１００ｍｇ），１Ｈ−１，２，３−トリアゾ−ル（４９．９ｍｇ，０．７２２ｍｍｏｌ），（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（１０．２７ｍｇ，０．０７２ｍｍｏｌ），ＣｕＩ（３．４４ｍｇ，０．０１８ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２３５ｍｇ，０．７２２ｍｍｏｌ）の混合物にＤＭＦ（１．５ｍｌ）に添加した。混合物を真空／窒素の置換を３回繰り返して脱気し、シングルモードマイクロ波反応装置中、１２０℃で２０分間マイクロ波照射を行った。この混合物をシングルモードマイクロ波反応装置中、１２０℃でさらに４０分間マイクロ波照射を行った。反応混合物を冷却し濾過後、ＥｔＯＡｃで洗浄した。固形分をｐＨ＝３バッファ溶液（５ｍｌ）に溶解し、この溶液のＵＰＬＣのチェックでかなりの量の６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジンカルボン酸が含まれていることが分かった。水性相を繰り返しＤＣＭで抽出後、合わせたＤＣＭ抽出液をＭｅＯＨ（５０ｍｌ）で希釈してＴＭＳ−ジアゾメタンで処理した。揮発成分を留去し黄色残渣を得、これをシリカゲルのフラッシュクロマトフラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ，ＳＮＡＰ１０ｇカラム，１０％−５０％ＥｔＯＡｃ／Ｃｙ）で精製して白色固体の標記化合物Ｄ３９（３８ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００）：ｒｔ＝０．５７分，観察されたピーク：２１９（Ｍ＋１）。Ｃ１０Ｈ１０Ｎ４Ｏ２の理論値：２１８。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．２０（ｄ，１Ｈ），７．８７（ｓ，２Ｈ），７．４４（ｄ，１Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），２．７１（ｓ，３Ｈ）。
【００８１】
記載例４０：６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジンカルボン酸（Ｄ４０）
【化４２】
2012510493.tif 000045
メチル６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジンカルボキシラート（Ｄ３９）（３６ｍｇ）とＬｉＯＨ（５．９３ｍｇ，０．２４７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／水（２：１，３ｍｌ）に加えた溶液を、一晩攪拌した。この混合物を減圧下濃縮し、残渣を水（２ｍｌ）に溶解して、１ＭのＨＣｌ水溶液で中和し、プレコンディショニングしたＣ１８：５ｇカラム（カラムを水、次にＭｅＯＨで溶出）に注入した。メタノール画分を減圧下濃縮して、白色固体の標記化合物Ｄ４０（３４ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＢａｓｉｃＱＣ＿ＰＯＳ＿５０−８００）：ｒｔ＝０．３０分。観察されたピーク：２０５（Ｍ＋１）。Ｃ９Ｈ８Ｎ４Ｏ２の理論値：２０４。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ（ｐｐｍ）８．２４（ｄ，１Ｈ），７．９９（ｓ，２Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ），２．６７（ｓ，３Ｈ）。
【００８２】
実施例
以下の実施例で、化合物の相対的立体化学は、その化合物が合成された、前段の中間体から派生したものである。さらに、一部の実施例では、相対的立体化学は、最終の化合物についても確認されている。最終化合物は、特定の実施例に基づく種々の配座異性体の混合物となっている。例えば、Ｅ１は、前段の中間体Ｄ８の立体化学から派生したＳＹＮ相対的立体化学に割り付けられている。この生成物は配座異性体の混合物として存在する。
【００８３】
実施例１：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン塩酸塩（Ｅ１）
【化４３】
2012510493.tif 000046
６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジンカルボン酸Ｄ１６（０．０２１５ｇ）をＤＭＦ（１．５ｍｌ）に加えた溶液に、ＴＢＴＵ（０．０４９７ｇ，０．１５５ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．１１６ｍｌ，０．６６４ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間攪拌した。この溶液に、Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミンＤ１２（０．０３０ｇ）をＤＭＦ（０．５ｍｌ）に加えた溶液を添加し、１．５時間攪拌した。ＥｔＯＡｃ（５ｍｌ）とＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１０ｍｌ）を添加し、水性相をＥｔＯＡｃで抽出した。相分離後、有機層を相分離器カートリッジを通し、減圧下濃縮した。得られた茶色のオイルをＢｉｏｔａｇｅＳＰ４（ＮＨ１２＋Ｍカラム；Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ，１／０〜７／３：５ＣＶ，７／３：２０ＣＶ）で精製した。画分を集め濃縮して標記化合物Ｅ１の［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミンの遊離塩基（０．０３８ｇ）を白色固体として得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝４．４６分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４４９（Ｍ＋１）。Ｃ２３Ｈ２７Ｆ３Ｎ４Ｏ２の理論値：４４８。１ＨＮＭＲ［ＳＹＮ相対的立体化学は前段の中間物Ｄ８から派生したものである。この生成物は配座異性体の混合物として存在する。割り付けは主要成分に対し与えられている。］
１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．２４−８．３１（ｍ，１Ｈ），７．６１−７．７３（ｍ，１Ｈ），７．１５−７．４８（ｍ，３Ｈ），６．６０−６．８８（ｍ，１Ｈ），４．０６−４．２５（ｍ，１Ｈ），３．８９−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．５７−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．３５−３．４３（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．６６（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．３３−２．４３（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．６７（ｍ，２Ｈ），１．００−１．２４（ｍ，２Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ），０．８０−０．８６（ｍ，１Ｈ），０．６１−０．６９（ｍ，１Ｈ），０．１６−０．２３（ｍ，１Ｈ）。
Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（プロピルオキシ）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（０．０３６ｇ）をＤＣＭ（１ｍｌ）に加えた溶液に、ＨＣｌ（Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ溶液）（０．１６１ｍｌ，０．１６１ｍｍｏｌ）を添加し、３０分攪拌した。減圧下溶媒を除去して黄色固体を得、これをＥｔ２Ｏ（３ｘ１ｍｌ）で練和した。溶媒を吸引除去して残渣を真空下４０℃で一晩乾燥して白色固体の標記化合物Ｅ１（０．０３８ｇ）を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝４．４８分。ＭＳ：（ＥＳ／＋）ｍ／ｚ：４４９（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。Ｃ２３Ｈ２７Ｆ３Ｎ４Ｏ２ＨＣｌの理論値：４８４。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．２９−８．４５（ｍ，１Ｈ），７．７７−７．８９（ｍ，１Ｈ），７．５８−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．４２（ｍ，１Ｈ），６．８５−７．０４（ｍ，１Ｈ），４．１３−４．２１（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．０２（ｍ，２Ｈ），３．３７−３．７０（ｍ，３Ｈ），２．６０−２．７４（ｍ，１Ｈ），２．３８−２．４８（ｍ，４Ｈ），１．５６−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．０２−１．３２（ｍ，２Ｈ），０．８２−０．９６（ｍ，４Ｈ），０．６４−０．７３（ｍ，１Ｈ），０．２０−０．２８（ｍ，１Ｈ）。
【００８４】
実施例２：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（Ｅ２）
【化４４】
2012510493.tif 000047
実施例１の記載と類似の方法により、Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミンＤ１２（０．０３０ｇ）と３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジンカルボン酸Ｄ１５（０．０２０ｇ）を反応させ、標記化合物の遊離塩基（０．０４４ｇ，０．１０１ｍｍｏｌ，９２％収率）を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝４．１４分。ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ／＋）：４３５（Ｍ＋１）。Ｃ２２Ｈ２５Ｆ３Ｎ４Ｏ２の理論値：４３４。１ＨＮＭＲ［ＳＹＮ相対的立体化学は前段の中間物Ｄ８から派生したものである。この生成物は配座異性体の混合物として存在する。割り付けは主要成分に対し与えられている。］（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：８．２６（ｍ，１Ｈ），７．７２−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．４７（ｍ，３Ｈ），６．８３−６．６１（ｍ，１Ｈ），４．２４−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．１０−３．８８（ｍ，２Ｈ），３．６７−３．３４（ｍ，３Ｈ），２．６７−２．５６（ｍ，１Ｈ），２．４３−２．３７（ｓ，３Ｈ），２．４３−２．３４（ｍ，１Ｈ），１．２３−１．１９（ｍ，３Ｈ），１．２０−０．８（ｍ，３Ｈ），０．７２−０．５８（ｍ，１Ｈ），０．１５−０．２４（ｍ，１Ｈ）。
実施例１の記載と類似の方法により、遊離塩基から出発して、Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［３−（エチルオキシ）−６−メチル−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（０．０４１５ｇ）の標記化合物Ｅ２を得た。ＨＰＬＣ（ｗａｌｋ−ｕｐ）：ｒｔ＝４．１６分。ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ／＋）：４３５（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。Ｃ２２Ｈ２５Ｆ３Ｎ４Ｏ２ＨＣｌの理論値：４７０。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ：８．５−６．０（ｍ，６Ｈ），５．０−２．５（ｍ，７Ｈ），２．５−０．０（ｍ，１２Ｈ）。
【００８５】
実施例３：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン（Ｅ３）
【化４５】
2012510493.tif 000048
６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボン酸Ｄ１９（９９ｍｇ），ＤＩＰＥＡ（０．０６６ｍｌ，０．３７６ｍｍｏｌ）およびＮ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミンＤ１２（３４ｍｇ）をＤＣＭ（３ｍｌ）に加え、窒素雰囲気下室温で攪拌した溶液に、ＴＢＴＵ（６０．４ｍｇ，０．１８８ｍｍｏｌ）を一度に添加した。この反応混合物を室温で５時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加し、水性相をＤＣＭで抽出して、疎水性フリット上で相を分離させ、合わせた有機溶媒を除去して組成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカ−ＮＨ１１ｇカラム，勾配溶出Ｃｙ〜Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ２：８を３０分，流速３０ｍｌ／分）で精製した。得られた生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ−ＮＨ１１ｇカラム、勾配溶出Ｃｙ〜Ｃｙ／ＥｔＯＡｃ１：１を２０分，流速３０ｍｌ／分）で二度目の精製を行い標記化合物Ｅ３（２１ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ（ＡｃｉｄＧＥＮ＿ＱＣ）：ｒｔ１＝０．６８分，観察されたピーク：４６９（Ｍ＋１）。Ｃ２４Ｈ２３Ｆ３Ｎ６Ｏの理論値：４６０．１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ０．０８−０．１６（ｍ，１Ｈ），０．７３−０．８１（ｍ，１Ｈ），０．８２−１．３２（ｍ，３Ｈ），２．４６−２．５８（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），３．５２−３．６９（ｍ，２Ｈ），３．７０−３．８０（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．６６（ｍ，１Ｈ），６．３８−６．５０（ｍ，１Ｈ），６．７４−７．０１（ｍ，１Ｈ），７．０８（ｔ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．４７（ｄ，１Ｈ），８．３３（ｓ，１Ｈ），８．５４−８．６４（ｍ，３Ｈ）。
【００８６】
実施例４：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン（Ｅ４）
【化４６】
2012510493.tif 000049
６−メチル−３−（２−ピリミジニル）−２−ピリジンカルボン酸Ｄ１９（６６．２ｍｇ）を室温で無水ＤＣＭ（０．５ｍｌ）に加えた溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０３８ｍｌ，０．２２０ｍｍｏｌ）を添加し、続けてＴＢＴＵ（３８．９ｍｇ，０．１２１ｍｍｏｌ）添加した。混合物は約１０分で完全に溶解した。３０分後、［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミンＤ３１（３０ｍｇ）を無水ｄｒｙＤＣＭ（０．５ｍｌ）に加えた溶液を滴下し、１６時間反応を継続させた。反応混合物をＤＣＭ（１０ｍｌｓ）とＮａＨＣＯ３（１５ｍｌ）に飽和溶液に取り込み、水性層をＤＣＭ（２ｘ１０ｍｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を食塩水（１ｘ１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥、濾過、濃縮して粗製物を得た。これをシリカ−ＮＨクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ−カラムサイズ１１ｇ，ＥｔＯＡｃ１００％を溶出剤として使用）で精製した。回収した生成物は、純粋ではなかったのでＣ１８相［Ｓｎａｐ６０ｇ，水（ＨＣＯＯＨ０．５％）：アセトニトリル（ＨＣＯＯＨ０．５％）＝９５：５〜５：９５で溶出］で再度精製し、標記化合物Ｅ４（２５ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．８６分，観察されたピーク：４７０（Ｍ＋１）。Ｃ２３Ｈ２２Ｆ３Ｎ７Ｏの理論値：４６９。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．８６−８．７９（ｍ，２Ｈ），８．５１−８．４７（ｍ，１Ｈ），８．４１−８．３７（ｍ，１Ｈ），８．１３−７．８１（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．３８（ｍ，２Ｈ）４．２４−４．１２（ｍ，１Ｈ）３．８２−３．６６（ｍ，２Ｈ），３．６４−３．５５（ｍ，１Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），２．６８−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．４６−２．３９（ｍ，１Ｈ），１．２０−１．０２（ｍ，２Ｈ），０．９９−０．８９（ｍ，１Ｈ），０．６８−０．５９（ｍ，１Ｈ），０．２３−０．１６（ｍ，１Ｈ）。
【００８７】
実施例５：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン（Ｅ５）
【化４７】
2012510493.tif 000050
６−メチル−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−２−ピリジンカルボン酸Ｄ３８（２４．６３ｍｇ）を１ｍｌのＤＭＦに溶解し，ＴＢＴＵ（４６．０ｍｇ，０．１４３ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．０２５ｍｌ，０．１４３ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を室温で３０分攪拌した。Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミンＤ３１（３０ｍｇ）を１ｍｌのＤＭＦに溶解し、これを前記混合物に添加して室温で一晩攪拌した。ＮａＨＣＯ３飽和溶液を添加し、水性層をＤＣＭで抽出した。有機層を集め相分離器を通して乾燥し、減圧下濃縮して粗製物を得、これをＳＣＸクロマトグラフィー（カラムサイズ５ｇ）で精製した。２回目の精製をシリカ−ＮＨクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ−カラムサイズ１１ｇ，Ｃｙ：ＥｔＯＡｃ＝５：５〜ＥｔＯＡｃを使用）で行い、標記化合物Ｅ５（２２ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．８１分、および０．８５分（回転異性体が存在），観察されたピーク：４５８（Ｍ＋１）。Ｃ２２Ｈ２２Ｆ３Ｎ７Ｏの理論値：４５７。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ８．２９（ｓ，１Ｈ），７．８５−７．７７（ｍ，３Ｈ），７．５２（ｓ，１Ｈ），７．３８−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．０５−６．８９（ｍ，１Ｈ）６．３５−６．３０（ｍ，１Ｈ）４．５８−４．３７（ｍ，１Ｈ），３．７７−３．６６（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．３７（ｍ，２Ｈ），２．６５（ｓ，３Ｈ），２．５０−２．３６（ｍ，２Ｈ），１．４２−０．８３（ｍ，３Ｈ），０．８２−０．７１（ｍ，１Ｈ），０．１５−０．０６（ｍ，１Ｈ）。
【００８８】
実施例６：Ｎ−［（（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−｛［６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジニル］カルボニル｝−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イル）メチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミン（Ｅ６）
【化４８】
2012510493.tif 000051
６−メチル−３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）−２−ピリジンカルボン酸Ｄ４０（３３．０ｍｇ）を１ｍｌのＤＣＭに溶解し，ＴＢＴＵ（６１．３ｍｇ，０．１９１ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．０３３ｍｌ，０．１９１ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を室温で３０分攪拌した。Ｎ−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタ−４−イルメチル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピラジンアミンＤ３１（４０ｍｇ）を１ｍｌのＤＣＭに溶解し、この溶液を添加して反応混合物を室温で一晩攪拌した。ＮａＨＣＯ３飽和溶液を添加し、水性層をＤＣＭで抽出した。有機層を集め相分離器を通して乾燥し、真空下濃縮して粗製物を得、これをＳＣＸクロマトグラフィー（カラムサイズ５ｇ）で精製した。２回目の精製をシリカ−ＮＨクロマトグラフィー（ＢｉｏｔａｇｅＳＰ−カラムサイズ２５ｇ，Ｃｙ：ＥｔＯＡｃ＝５：５〜ＥｔＯＡｃを使用）で行い、標記化合物Ｅ６（３０ｍｇ）を得た。ＵＰＬＣ：（ＡｃｉｄＦｉｎａｌ＿ＱＣ）：ｒｔ＝０．７６分、および０．８０分（回転異性体が存在），観察されたピーク：４５９（Ｍ＋１）。Ｃ２１Ｈ２１Ｆ３Ｎ８Ｏの理論値：４５８。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ８．３８（ｓ，１Ｈ）８．２８−８．２２（ｍ，１Ｈ）８．０８−８．０６（ｓ，２Ｈ），７．９０−７．７８（ｍ，２Ｈ），７．５７−７．５１（ｍ，１Ｈ）４．２０−４．０８（ｍ，１Ｈ）３．７６−３．４０（ｍ，３Ｈ），２．６８−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），２．４４−２．３５（ｍ，１Ｈ），１．２８−０．９５（ｍ，２Ｈ），０．９２−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．６８−０．６０（ｍ，１Ｈ），０．２４−０．１８（ｍ，１Ｈ）。
【００８９】
実施例７：ＦＬＩＰＲを使ったヒトオレキシン１および２受容体に対するアンタゴニストのアフィニティの測定
細胞培養
組換え型ヒトオレキシン１またはヒトオレキシン２受容体を安定に発現しているチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）付着細胞、あるいは組換え型ラットオレキシン１またはラットオレキシン２受容体を安定に発現しているラット好塩基球性白血病細胞（ＲＢＬ）をＡｌｐｈａＭｉｎｉｍｕｍＥｓｓｅｎｔｉａｌＭｅｄｉｕｍ培地(Gibco/Invitrogen社、カタログno.;22571-020)に、１０％の脱補体ウシ胎仔血清(LifeTechnologies社、カタログno.10106-078)および４００μｇ／ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎＧ４１８(Calbiochem社、カタログno.345810)を添加して、培養、維持を行った。細胞は、３７℃で空気：ＣＯ２＝９５％：５％の雰囲気下、単層として成長した。
実施例１と２の化合物の試験のために使われたヒトオレキシン１、ヒトオレキシン２、ラットオレキシン１、およびラットオレキシン２受容体の配列は、ヒトオレキシン１受容体の配列が、位置２８０のアミノ酸残基がグリシンではなく、アラニンであることを除いて、
Sakurai、T.etal(1998)Cell、92pp573to585に報告されている。実施例３〜６の化合物の試験に使った受容体の配列は、オレキシン１受容体の配列が前述のSakuraiの報告と同じであることを除いて、上記と同じである。
ＦＬＩＰＲＴＭを使った［Ｃａ２＋］ｉの測定
細胞を、ブラッククリアーボトムの３８４ウエルプレートに入れた上記の培地中に播いて（密度：ウエル当たり２０、０００細胞）、一晩維持した（９５％：５％空気：ＣＯ２、３７℃）。実験当日には、培地を廃棄して、細胞を、プロベネシド２．５ｍＭを添加した標準バッファ（ＮａＣｌ、１４５ｍＭ；ＫＣｌ、５ｍＭ；ＨＥＰＥＳ、２０ｍＭ；グルコース、５．５ｍＭ；ＭｇＣｌ２、１ｍＭ；ＣａＣｌ２、２ｍＭ）で３回洗浄した。次いで、プレートを、暗所で２μＭのＦＬＵＯ−４ＡＭ色素と３７℃で６０分間インキュベートし、細胞にＦＬＵＯ−４ＡＭを取り込ませた。取り込まれたＦＬＵＯ−４ＡＭは、その後細胞内エステラーゼによりＦＬＵＯ−４に転換され、このものは、細胞と離れなくなる。インキュベーション後、細胞を標準バッファで３回洗浄して細胞外色素を除去し、洗浄後各ウエルに３０μＬのバッファを残した。
本発明の化合物を、１．６６ｘ１０−５Ｍ〜１．５８ｘ１０−１１Ｍの最終アッセイ濃度範囲で試験した。本発明の化合物を、ストック濃度の１０ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した。ストック溶液はＤＭＳＯで連続的に希釈され、各希釈物の１μＬを３８４ウエル化合物プレートに移した。化合物を細胞に導入する直前に、バッファ溶液（５０μｌ／ウエル）をこのプレートに添加した。細胞のアゴニスト刺激を行わせるために、ヒトオレキシンＡ（ｈＯｒｅｘｉｎＡ）を含むプレートを、使用する直前に最終濃度にバッファで希釈した。このｈＯｒｅｘｉｎＡの最終濃度は、この試験システムのｈＯｒｅｘｉｎＡアゴニスト効力に対して計算したＥＣ８０に等しい。この値は、その実験日と同日のｈＯｒｅｘｉｎＡの濃度反応曲線試験（少なくとも１６回の繰り返し）により得られる。
次にロードした細胞を試験化合物と共に３７℃で１０分インキュベートした後、ＦＬＩＰＲＴＭ（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ社、英国）中に置いて、細胞の蛍光（λｅｘ＝４８８ｎｍ、λＥＭ＝５４０ｎｍ）をモニターした(SullivanE、TuckerEM、DaleIL.Measurementof[Ca2+]iusingthefluometricimagingplatereader(FLIPR).In:LambertDG(ed.)、CalciumSignalingProtocols.NewJersey:HumanaPress、1999、125-136)。蛍光のベースライン読み値を５〜１０秒間採取し、ＥＣ８０ｈＯｒｅｘｉｎＡ溶液の１０μＬを添加した。次いで蛍光を４〜５分かけて読み取った。
データ解析
ＦＬＩＰＲの機能的反応をピーク蛍光強度からベースライン蛍光強度を差し引いて測定し、同じプレート上の非阻害オレキシンＡ誘導反応のパーセンテージとして表した。繰り返しカーブフィッティングとパラメーター推定は、４パラメーター論理モデルと、マイクロソフトＥｘｅｌを使って行った(BowenWP、JermanJC.Nonlinearregressionusingspreadsheets.TrendsPharmacol.Sci.1995;16:413-417)。アンタゴニストアフィニティ値（ＩＣ５０）を、改良Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ補正(ChengYC、PrusoffWH.Relationshipbetweentheinhibitionconstant(Ki)andtheconcentrationofinhibitorwhichcauses50percentinhibition(IC50)ofanenzymaticreaction.Biochem.Pharmacol.1973、22:3099-3108)を使って官能基ｐＫｉに変換した。
【数１】
2012510493.tif 000052
ここで、［ａｇｏｎｉｓｔ］はアゴニストの濃度、ＥＣ５０はアゴニストの用量反応曲線から得られた５０％活性を示すアゴニスト濃度、ｎは用量反応曲線の傾斜、を表す。ｎ＝１の場合、よく知られたＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの簡単な式になる。
実施例１〜６の化合物を、実施例７の方法に従って試験した。全化合物のヒトクローン化オレキシン１受容体で、８．６〜９．５のｆｐＫｉ値が得られ、また、ヒトクローン化オレキシン２受容体で、７．５〜９．３のｆｐＫｉ値が得られた。
【国際調査報告】
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