【手続補正書】
【提出日】令和2年4月13日(2020.4.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５’から３’の方向で、逆方向末端反復（ＩＴＲ）、筋特異的制御要素、キメライントロン配列、配列番号７のヌクレオチド配列、ポリＡテール、およびＩＴＲを含む、組換えＡＡＶｒｈ．７４ベクター。
【請求項２】
前記筋特異的制御要素が配列番号１０または配列番号１１のヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の組換えＡＡＶｒｈ．７４ベクター。
【請求項３】
前記ヌクレオチド配列と前記筋特異的制御要素との間にキメライントロン配列をさらに含み、前記キメライントロン配列は配列番号９のヌクレオチド８４４〜９９３として記載されるものである、請求項１または２に記載の組換えＡＡＶｒｈ．７４ベクター。
【請求項４】
前記ヌクレオチド配列３’にポリＡテールをさらに含み、前記ポリＡテールの前記配列は配列番号９のヌクレオチド４５８５〜４６４０として記載されるものである、請求項１に記載の組換えＡＡＶｒｈ．７４ベクター。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶｒｈ．７４ベクターおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
【請求項６】
筋ジストロフィーの治療のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物または請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
筋ジストロフィーに罹患している対象における線維症を軽減または予防するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物または請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
筋ジストロフィーに罹患している対象における筋力を増加するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物または請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が、前記対象において線維症が観察される前に、または前記対象において筋力が減少する前に、または前記対象において筋肉量が減少する前に投与される、請求項６〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記対象が、デュシェンヌ型筋ジストロフィーまたはベッカー型筋ジストロフィーに罹患している、請求項６〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物または薬剤が、筋肉内投与、静脈内注射、非経口投与、または全身投与用に製剤化される、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
機能性マイクロジストロフィンタンパク質の産生方法において使用するための請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物であって、前記方法が宿主細胞を請求項１〜４のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターで感染させることと、前記宿主細胞中に機能性マイクロジストロフィンタンパク質を発現させることとを含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
さらに、本発明の薬剤のいずれかは、ｍｉＲ−２９を発現するｒＡＡＶベクター及びマイクロジストロフィンを発現するｒＡＡＶベクターが同時投与される、またはマイクロジストロフィンを発現するｒＡＡＶの直前にｍｉＲ２９を発現するｒＡＡＶベクターを投与して連続投与される、またはマイクロジストロフィンを発現するｒＡＡＶの直後にｍｉＲ２９を発現するｒＡＡＶベクターを投与して連続投与される、併用療法であってもよい。あるいは、薬剤は、ｍｉＲ−２９を発現するｒＡＡＶの投与後の約１〜５時間以内に投与されマイクロジストロフィンを発現するＡＡＶベクターの投与を含み、または薬剤は、ｍｉＲ−２９ｃを発現するｒＡＡＶの投与前の約１〜５時間以内に投与されるマイクロジストロフィンを発現するＡＡＶベクターを含む。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
ａ）配列番号７のヌクレオチド配列と少なくとも８５％の同一性を有し、機能性マイクロジストロフィンタンパク質をコードするヌクレオチド配列、
ｂ）配列番号７のヌクレオチド配列、または
ｃ）配列番号９のヌクレオチド配列を含む、組換えＡＡＶベクター。
(項目２)
前記ベクターが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶｒｈ７４、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、またはＡＡＶ１３である、項目１に記載の組換えＡＡＶベクター。
(項目３)
前記ポリヌクレオチド配列が、筋特異的制御要素に作動可能に連結される、項目１または２に記載の組換えＡＡＶベクター。
(項目４)
前記筋特異的制御要素が、ヒト骨格アクチン遺伝子要素、心臓アクチン遺伝子要素、筋細胞特異的エンハンサー結合因子ｍｅｆ、筋クレアチンキナーゼ（ＭＣＫ）、短縮ＭＣＫ（ｔＭＣＫ）、ミオシン重鎖（ＭＨＣ）、Ｃ５−１２、マウスクレアチンキナーゼエンハンサー要素、骨格速筋トロポニンＣ遺伝子要素、遅筋心臓トロポニンＣ遺伝子要素、遅筋トロポニンＩ遺伝子要素、低酸素誘発性核因子、ステロイド誘発性要素、またはグルココルチコイド応答要素（ｇｒｅ）である、項目３に記載の組換えＡＡＶベクター。
(項目５)
前記筋特異的制御要素が、配列番号１０または配列番号１１のヌクレオチド配列を含む、項目３または４に記載の組換えＡＡＶベクター。
(項目６)
項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む、組成物。
(項目７)
治療有効量の項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物を投与することを含む、筋ジストロフィーまたはジストロフィン異常症を治療する方法。
(項目８)
治療有効量の項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物を投与することを含む、筋ジストロフィーまたはジストロフィン異常症に罹患している対象における線維症を軽減または予防する方法。
(項目９)
治療有効量の項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物を投与することを含む、筋ジストロフィーまたはジストロフィン異常症に罹患している対象における筋力または筋肉量を増加する方法。
(項目１０)
前記組換えＡＡＶベクターまたは前記組成物が、筋肉内注射、静脈内注射、非経口投与、または全身投与により投与される、項目７〜９のいずれか一項に記載の方法。
(項目１１)
前記組換えＡＡＶが、前記対象において線維症が観察される前に、または前記対象において筋力が減少する前に、または前記対象において筋肉量が減少する前に投与される、項目７〜１０のいずれか一項に記載の方法。
(項目１２)
前記筋ジストロフィーが、デュシェンヌ型筋ジストロフィーまたはベッカー型筋ジストロフィーである、項目７〜１１のいずれか一項に記載の方法。
(項目１３)
筋ジストロフィーの治療のための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物。
(項目１４)
筋ジストロフィーに罹患している対象における線維症を軽減または予防するための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物。
(項目１５)
筋ジストロフィーに罹患している対象における筋力を増加するための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターを含む組成物。
(項目１６)
前記組成物が、前記対象において線維症が観察される前に、または前記対象において筋力が減少する前に、または前記対象において筋肉量が減少する前に投与される、項目１３〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
(項目１７)
前記対象が、デュシェンヌ型筋ジストロフィーまたはベッカー型筋ジストロフィーに罹患している、項目１３〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
(項目１８)
筋ジストロフィーの治療用の薬剤の調製のための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物の使用。
(項目１９)
筋ジストロフィーに罹患している対象における線維症の軽減または予防用の薬剤の調製のための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物の使用。
(項目２０)
筋ジストロフィーに罹患している対象における筋力または筋肉量の増加用の薬剤の調製のための、項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターまたは項目６に記載の組成物の使用。
(項目２１)
前記薬剤が、前記対象において線維症が観察される前に、または前記対象において筋力が減少する前に、または前記対象において筋肉量が減少する前に投与される、項目１６〜１８のいずれか一項に記載の使用。
(項目２２)
前記対象が、デュシェンヌ型筋ジストロフィーまたはベッカー型筋ジストロフィーに罹患している、項目１８〜２１のいずれか一項に記載の使用。
(項目２３)
前記組成物または薬剤が、筋肉内投与、静脈内注射、非経口投与、または全身投与用に製剤化される、項目１３〜２２のいずれか一項に記載の組成物または使用。
(項目２１)
宿主細胞を項目１〜５のいずれか一項に記載の組換えＡＡＶベクターで感染させることと、前記宿主細胞中に機能性マイクロジストロフィンタンパク質を発現させることとを含む、機能性マイクロジストロフィンタンパク質の産生方法。