【手続補正書】
【提出日】令和2年6月12日(2020.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的細胞においてヒトATP結合カセット、サブファミリーA、メンバー4（ABCA4）タンパク質を発現させるためのアデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターシステムであって、前記AAVベクターシステムは第1の核酸配列を含む第1のAAVベクターと第2の核酸配列を含む第2のAAVベクターとを含み、
第1の核酸配列はABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分を含み、第2の核酸配列はABCA4 CDSの3'末端部分を含み、前記5'末端部分及び前記3'末端部分は合わせてABCA4 CDS全体を包含し、
第1の核酸配列は配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド105〜3597に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、
第2の核酸配列は配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド3806〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、
第1の核酸配列及び第2の核酸配列はそれぞれ他方と配列が重複する領域を含み、並びに
前記配列が重複する領域は、配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド3598〜3805に対応する核酸配列の少なくとも約20個の連続ヌクレオチドを含む、前記AAVベクターシステム。
【請求項２】
前記配列が重複する領域は長さが20〜550ヌクレオチド、好ましくは長さが50〜250ヌクレオチド、好ましくは長さが175〜225ヌクレオチド、好ましくは長さが195〜215ヌクレオチドである、請求項１記載のAAVベクターシステム。
【請求項３】
前記配列が重複する領域は、配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド3598〜3805に対応する核酸配列の少なくとも約50個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約75個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約100個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約150個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約200個の連続ヌクレオチド、好ましくは全208個の連続ヌクレオチドを含む、請求項１又は２に記載のAAVベクターシステム。
【請求項４】
第1の核酸配列が配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド105〜3805に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、且つ、
第2の核酸配列が配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド3598〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列を含む、
請求項１〜３のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項５】
第1の核酸配列がABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分に作動可能に連結されたGRK1プロモーターを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項６】
第1の核酸配列がABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分の上流に位置する非翻訳領域（UTR）を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項７】
第2の核酸配列が転写後応答エレメント（PRE）、好ましくはウッドチャック肝炎ウイルス転写後応答エレメント（WPRE）を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項８】
第2の核酸配列がウシ成長ホルモン（bGH）ポリアデニル化配列を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項９】
第1のAAVベクターが配列番号9の核酸配列を含み、且つ、第2のAAVベクターが配列番号10の核酸配列を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
【請求項１０】
標的細胞においてヒトABCA4タンパク質を発現させるための方法であって、
機能的ABCA4タンパク質が標的細胞において発現されるように、請求項１〜９のいずれか一項に記載の第1のAAVベクター及び第2のAAVベクターを標的細胞に形質導入するステップ
を含む、前記方法。
【請求項１１】
ABCA4 CDSの5'末端部分を含む核酸配列を含むAAVベクターであって、前記ABCA4 CDSの5'末端部分が配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド105〜3805に対応する連続ヌクレオチドの配列から成る、前記AAVベクター。
【請求項１２】
配列番号9の核酸配列を含む、請求項１１記載のAAVベクター。
【請求項１３】
ABCA4 CDSの3'末端部分を含む核酸配列を含むAAVベクターであって、前記ABCA4 CDSの3'末端部分が配列番号1又は配列番号2のヌクレオチド3598〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列から成る、前記AAVベクター。
【請求項１４】
配列番号10の核酸配列を含む、請求項１３記載のAAVベクター。
【請求項１５】
請求項１〜６又は９のいずれか一項に記載の第1の核酸配列を含む核酸。
【請求項１６】
請求項１〜４又は７〜９のいずれか一項に規定される第2の核酸配列を含む核酸。
【請求項１７】
配列番号9の核酸配列を含む核酸。
【請求項１８】
配列番号10の核酸配列を含む核酸。
【請求項１９】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の第1のAAVベクター、及び請求項１〜９のいずれか一項に記載の第2のAAVベクターを含む、キット。
【請求項２０】
請求項１５記載の核酸及び請求項１６記載の核酸、又は請求項１７記載の核酸及び請求項１８記載の核酸を含む、キット。
【請求項２１】
請求項１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２２】
遺伝子治療に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム、請求項１９若しくは請求項２０に記載のキット、又は請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２３】
網膜細胞の分解を特徴とする疾患の予防若しくは治療において使用するための、好ましくはシュタルガルト病の予防若しくは治療において使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム、請求項１９若しくは請求項２０に記載のキット、又は請求項２１記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
配列番号9に対して少なくとも90％（例えば、少なくとも90、95、96、97、98、99、99.1、99.2、99.3、99.4、99.5、99.6、99.7、99.8、99.9又は100％）の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸、及び配列番号10に対して少なくとも90％（例えば、少なくとも90、95、96、97、98、99、99.1、99.2、99.3、99.4、99.5、99.6、99.7、99.8、99.9又は100％）の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸もまた本発明によって提供される。
本発明はまた、以下に関する。
［項目１］
標的細胞においてヒトABCA4タンパク質を発現させるためのアデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターシステムであって、前記AAVベクターシステムは第1の核酸配列を含む第1のAAVベクターと第2の核酸配列を含む第2のAAVベクターとを含み、
第1の核酸配列はABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分を含み、第2の核酸配列はABCA4 CDSの3'末端部分を含み、前記5'末端部分及び前記3'末端部分は合わせてABCA4 CDS全体を包含し、
第1の核酸配列は配列番号1のヌクレオチド105〜3597に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、
第2の核酸配列は配列番号1のヌクレオチド3806〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、
第1の核酸配列及び第2の核酸配列はそれぞれ他方と配列が重複する領域を含み、並びに  前記配列が重複する領域は、配列番号1のヌクレオチド3598〜3805に対応する核酸配列の少なくとも約20個の連続ヌクレオチドを含む、前記AAVベクターシステム。
［項目２］
前記配列が重複する領域は長さが20〜550ヌクレオチド、好ましくは長さが50〜250ヌクレオチド、好ましくは長さが175〜225ヌクレオチド、好ましくは長さが195〜215ヌクレオチドである、項目１記載のAAVベクターシステム。
［項目３］
前記配列が重複する領域は、配列番号1のヌクレオチド3598〜3805に対応する核酸配列の少なくとも約50個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約75個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約100個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約150個の連続ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約200個の連続ヌクレオチド、好ましくは全208個の連続ヌクレオチドを含む、項目１又は２に記載のAAVベクターシステム。
［項目４］
第1の核酸配列が配列番号1のヌクレオチド105〜3805に対応する連続ヌクレオチドの配列を含み、且つ、
第2の核酸配列が配列番号1のヌクレオチド3598〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列を含む、
項目１〜３のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目５］
第1の核酸配列がABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分に作動可能に連結されたGRK1プロモーターを含む、項目１〜４のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目６］
第1の核酸配列がABCA4コーディング配列（CDS）の5'末端部分の上流に位置する非翻訳領域（UTR）を含む、項目１〜５のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目７］
第2の核酸配列が転写後応答エレメント（PRE）、好ましくはウッドチャック肝炎ウイルス転写後応答エレメント（WPRE）を含む、項目１〜６のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目８］
第2の核酸配列がウシ成長ホルモン（bGH）ポリアデニル化配列を含む、項目１〜７のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目９］
第1のAAVベクターが配列番号9の核酸配列を含み、且つ、第2のAAVベクターが配列番号10の核酸配列を含む、項目１〜８のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム。
［項目１０］
標的細胞においてヒトABCA4タンパク質を発現させるための方法であって、
機能的ABCA4タンパク質が標的細胞において発現されるように、項目１〜９のいずれか一項に規定される第1のAAVベクター及び第2のAAVベクターで標的細胞を形質導入するステップ
を含む、前記方法。
［項目１１］
ABCA4 CDSの5'末端部分を含む核酸配列を含むAAVベクターであって、前記ABCA4 CDSの5'末端部分が配列番号1のヌクレオチド105〜3805に対応する連続ヌクレオチドの配列から成る、前記AAVベクター。
［項目１２］
配列番号9の核酸配列を含む、項目１１記載のAAVベクター。
［項目１３］
ABCA4 CDSの3'末端部分を含む核酸配列を含むAAVベクターであって、前記ABCA4 CDSの3'末端部分が配列番号1のヌクレオチド3598〜6926に対応する連続ヌクレオチドの配列から成る、前記AAVベクター。
［項目１４］
配列番号10の核酸配列を含む、項目１３記載のAAVベクター。
［項目１５］
項目１〜９のいずれか一項に規定される第1の核酸配列を含む核酸。
［項目１６］
項目１〜９のいずれか一項に規定される第2の核酸配列を含む核酸。
［項目１７］
配列番号9の核酸配列を含む核酸。
［項目１８］
配列番号10の核酸配列を含む核酸。
［項目１９］
項目１〜９のいずれか一項に規定される第1のAAVベクター、及び項目１〜９のいずれか一項に規定される第2のAAVベクターを含む、キット。
［項目２０］
項目１５記載の核酸及び項目１６記載の核酸、又は項目１７記載の核酸及び項目１８記載の核酸を含む、キット。
［項目２１］
項目１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む、医薬組成物。
［項目２２］
遺伝子治療に使用するための、項目１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム、項目１９若しくは項目２０に記載のキット、又は項目２１記載の医薬組成物。
［項目２３］
網膜細胞の分解を特徴とする疾患の予防若しくは治療において使用するための、好ましくはシュタルガルト病の予防若しくは治療において使用するための、項目１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム、項目１９若しくは項目２０に記載のキット、又は項目２１記載の医薬組成物。
［項目２４］
それを必要とする対象に有効量の項目１〜９のいずれか一項に記載のAAVベクターシステム、項目１９若しくは項目２０に記載のキット、又は項目２１記載の医薬組成物を投与することを含む、網膜細胞の分解を特徴とする疾患、好ましくはシュタルガルト病を予防又は治療する方法。