【手続補正書】
【提出日】令和2年8月14日(2020.8.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載された通りのビーズベクター及び方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３０】
当業者は、本開示が、対象物を実行するためならびに言及される結果および利点、ならびにそれに内在されるものを取得するために、十分に適合されていることを容易に理解する。その中での改変および他の用途が、当業者には思い当たるであろう。これらの改変は、本開示の精神に包含され、かつ本開示の非限定的実施形態を説明する特許請求の範囲により規定される。
本発明は、以下を提供する。
［１］  以下の構成要素：
(i) 抗CTLA4抗体をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 貪食されることができるビーズ粒子
を含む、ビーズベクター。
［２］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記１に記載のビーズベクター。
［３］  前記非感染性ウイルスがアデノウイルスである、上記２に記載のビーズベクター。
［４］  前記アデノウイルスが組み換えアデノウイルスである、上記３に記載のビーズベクター。
［５］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記２に記載のビーズベクター。
［６］  前記抗CTLA4抗体をコードする核酸が、DNAおよびRNAからなる群より選択される、上記１に記載のビーズベクター。
［７］  前記抗CTLA4抗体をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記１に記載のビーズベクター。
［８］  前記発現ベクターが、核プロモーターを含む、上記７に記載のビーズベクター。
［９］  前記核プロモーターがT7プロモーターを含む、上記８に記載のビーズベクター。
［１０］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記７に記載のビーズベクター。
［１１］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記１０に記載のビーズベクター。
［１２］  前記発現ベクターが、図8に示される配列を含む、上記７に記載のビーズベクター。
［１３］  抗CTLA4抗体が単一ドメイン抗体である、上記１に記載のビーズベクター。
［１４］  核酸保護成分をさらに含む、上記１に記載のビーズベクター。
［１５］  前記核酸保護成分が、プロタミン、ポリアルギニン、ポリリジン、ヒストン、ヒストン様タンパク質、合成ポリカチオン性高分子および該核酸配列中に含められる適切なパッケージング配列を含むレトロウイルスのコア粒子からなる群より選択される、上記１４に記載のビーズベクター。
［１６］  抗CTLA4抗体をコードする核酸およびリソソーム回避成分が、ストレプトアビジンとビオチンとの間の相互作用によりビーズ粒子に連結される、上記１に記載のビーズベクター。
［１７］  抗CTLA4抗体をコードする核酸およびリソソーム回避成分が、抗体結合によりビーズ粒子に連結される、上記１に記載のビーズベクター。
［１８］  前記リソソーム回避成分がアデノウイルスペントンタンパク質を含む、上記１に記載のビーズベクター。
［１９］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記１に記載のビーズベクター。
［２０］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記１に記載のビーズベクター。
［２１］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記１に記載のビーズベクター。
［２２］  以下の構成要素：
(i) 抗CTLA4抗体をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであり、かつ組成物が単球細胞により貪食されることを可能にするビーズ粒子
を含む、単球細胞への標的化された侵入のためのビーズベクター。
［２３］  前記単球細胞がマクロファージである、上記２２に記載のビーズベクター。
［２４］  前記マクロファージが腫瘍関連マクロファージ（TAM）である、上記２３に記載のビーズベクター。
［２５］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記２２に記載のビーズベクター。
［２６］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記２２に記載のビーズベクター。
［２７］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記２２に記載のビーズベクター。
［２８］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記２２に記載のビーズベクター。
［２９］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記２２に記載のビーズベクター。
［３０］  前記抗CTLA4抗体をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記２２に記載のビーズベクター。
［３１］  前記発現ベクターが、図8に示される配列を含む、上記３１に記載のビーズベクター。
［３２］  前記抗CTLA4抗体が単一ドメイン抗体である、上記２２に記載のビーズベクター。
［３３］  以下の構成要素：
(i) 抗CTLA4抗体をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであるビーズ粒子
を含むビーズベクターを、癌を有する患者に投与するステップを含む、患者での癌を治療する方法であって、該ビーズベクターの投与が該患者の癌を治療する、上記方法。
［３４］  前記癌がCTLA4リガンドを発現する、上記３３に記載の方法。
［３５］  前記癌が、低酸素微小環境を含む少なくとも1種の腫瘍を含む、上記３３に記載の方法。
［３６］  前記少なくとも1種の腫瘍が腫瘍関連マクロファージ（TAM）をさらに含む、上記３５に記載の方法。
［３７］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記３３に記載の方法。
［３８］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記３３に記載の方法。
［３９］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記３３に記載の方法。
［４０］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記３３に記載の方法。
［４１］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記３３に記載の方法。
［４２］  前記抗CTLA4抗体をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記３３に記載の方法。
［４３］  前記発現ベクターが、T7プロモーターを含む、上記４２に記載の方法。
［４４］  前記発現ベクターが、図8に示される配列を含む、上記４２に記載の方法。
［４５］  前記抗CTLA4抗体が単一ドメイン抗体である、上記３３に記載の方法。
［４６］  前記ビーズベクターが、皮内または皮下に投与される、上記３３に記載の方法。
［４７］  前記ビーズベクターが、標的リンパ節に近接して投与される、上記４６に記載の方法。
［４８］  以下の構成要素：
(i) PD-1細胞外ドメインをコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 貪食されることができるビーズ粒子
を含む、ビーズベクター。
［４９］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記４８に記載のビーズベクター。
［５０］  前記非感染性ウイルスがアデノウイルスである、上記４９に記載のビーズベクター。
［５１］  前記アデノウイルスが組み換えアデノウイルスである、上記５０に記載のビーズベクター。
［５２］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記４９に記載のビーズベクター。
［５３］  前記PD-1細胞外ドメインをコードする核酸が、DNAおよびRNAからなる群より選択される、上記４８に記載のビーズベクター。
［５４］  前記PD-1細胞外ドメインをコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記４８に記載のビーズベクター。
［５５］  前記発現ベクターが、核プロモーターを含む、上記５４に記載のビーズベクター。
［５６］  前記核プロモーターがCMVプロモーターを含む、上記５５に記載のビーズベクター。
［５７］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記５４に記載のビーズベクター。
［５８］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記５７に記載のビーズベクター。
［５９］  前記PD-1細胞外ドメインが哺乳動物PD-1細胞外ドメインを含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［６０］  前記PD-1細胞外ドメインがヒトPD-1細胞外ドメインを含む、上記５９に記載のビーズベクター。
［６１］  前記PD-1細胞外ドメインがマウスPD-1細胞外ドメインを含む、上記５９に記載のビーズベクター。
［６２］  核酸保護成分をさらに含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［６３］  前記核酸保護成分が、プロタミン、ポリアルギニン、ポリリジン、ヒストン、ヒストン様タンパク質、合成ポリカチオン性高分子および該核酸配列中に含められる適切なパッケージング配列を含むレトロウイルスのコア粒子からなる群より選択される、上記６２に記載のビーズベクター。
［６４］  PD-1細胞外ドメインをコードする核酸およびリソソーム回避成分が、ストレプトアビジンとビオチンとの間の相互作用によりビーズ粒子に連結される、上記４８に記載のビーズベクター。
［６５］  PD-1細胞外ドメインをコードする核酸およびリソソーム回避成分が、抗体結合によりビーズ粒子に連結される、上記４８に記載のビーズベクター。
［６６］  前記リソソーム回避成分がアデノウイルスペントンタンパク質を含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［６７］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［６８］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［６９］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記４８に記載のビーズベクター。
［７０］  以下の構成要素：
(i) PD-1細胞外ドメインをコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであり、かつ組成物が単球細胞により貪食されることを可能にするビーズ粒子
を含む、単球細胞への標的化された侵入のためのビーズベクター。
［７１］  前記単球細胞がマクロファージである、上記７０に記載のビーズベクター。
［７２］  前記マクロファージが腫瘍関連マクロファージ（TAM）である、上記７１に記載のビーズベクター。
［７３］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記７０に記載のビーズベクター。
［７４］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記７０に記載のビーズベクター。
［７５］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記７０に記載のビーズベクター。
［７６］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記７０に記載のビーズベクター。
［７７］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記７６に記載のビーズベクター。
［７８］  前記PD-1細胞外ドメインをコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記７０に記載のビーズベクター。
［７９］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記７８に記載のビーズベクター。
［８０］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記７９に記載のビーズベクター。
［８１］  前記PD-1細胞外ドメインが哺乳動物PD-1細胞外ドメインを含む、上記７０に記載のビーズベクター。
［８２］  前記PD-1細胞外ドメインがヒトPD-1細胞外ドメインを含む、上記８１に記載のビーズベクター。
［８３］  前記PD-1細胞外ドメインがマウスPD-1細胞外ドメインを含む、上記８１に記載のビーズベクター。
［８４］  以下の構成要素：
(i) PD-1細胞外ドメインをコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであるビーズ粒子
を含むビーズベクターを、癌を有する患者に投与するステップを含む、患者での癌を治療する方法であって、該ビーズベクターの投与が該患者の癌を治療する、上記方法。
［８５］  前記癌がPD-1リガンドを発現する、上記８４に記載の方法。
［８６］  前記癌が、低酸素微小環境を含む少なくとも1種の腫瘍を含む、上記８４に記載の方法。
［８７］  前記少なくとも1種の腫瘍が腫瘍関連マクロファージ（TAM）をさらに含む、上記８６に記載の方法。
［８８］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記８４に記載の方法。
［８９］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記８４に記載の方法。
［９０］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記８４に記載の方法。
［９１］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記８４に記載の方法。
［９２］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記９１に記載の方法。
［９３］  前記PD-1細胞外ドメインをコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記８４に記載の方法。
［９４］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記９３に記載の方法。
［９５］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記９４に記載の方法。
［９６］  前記PD-1細胞外ドメインが哺乳動物PD-1細胞外ドメインを含む、上記８４に記載の方法。
［９７］  前記PD-1細胞外ドメインがヒトPD-1細胞外ドメインを含む、上記９６に記載の方法。
［９８］  前記PD-1細胞外ドメインがマウスPD-1細胞外ドメインを含む、上記９６に記載の方法。
［９９］  以下の構成要素：
(i) 抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 貪食されることができるビーズ粒子
を含む、ビーズベクター。
［１００］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記９９に記載のビーズベクター。
［１０１］  前記非感染性ウイルスがアデノウイルスである、上記１００に記載のビーズベクター。
［１０２］  前記アデノウイルスが組み換えアデノウイルスである、上記１００に記載のビーズベクター。
［１０３］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記９９に記載のビーズベクター。
［１０４］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸が、DNAおよびRNAからなる群より選択される、上記９９に記載のビーズベクター。
［１０５］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記９９に記載のビーズベクター。
［１０６］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記１０５に記載のビーズベクター。
［１０７］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記１０６に記載のビーズベクター。
［１０８］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片が、抗PD-L1抗体またはその結合性断片である、上記９９に記載のビーズベクター。
［１０９］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸およびリソソーム回避成分が、ストレプトアビジンとビオチンとの間の相互作用によりビーズ粒子に連結される、上記９９に記載のビーズベクター。
［１１０］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸およびリソソーム回避成分が、抗体結合によりビーズ粒子に連結される、上記９９に記載のビーズベクター。
［１１１］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記９９に記載のビーズベクター。
［１１２］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記９９に記載のビーズベクター。
［１１３］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記９９に記載のビーズベクター。
［１１４］  以下の構成要素：
(i) 抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであり、かつ組成物が単球細胞により貪食されることを可能にするビーズ粒子
を含む、単球細胞への標的化された侵入のためのビーズベクター。
［１１５］  前記単球細胞がマクロファージである、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１１６］  前記マクロファージが腫瘍関連マクロファージ（TAM）である、上記１１５に記載のビーズベクター。
［１１７］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１１８］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１１９］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１２０］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１２１］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記１２０に記載のビーズベクター。
［１２２］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１２３］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記１２２に記載のビーズベクター。
［１２４］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記１２３に記載のビーズベクター。
［１２５］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片が、抗PD-L1抗体またはその結合性断片である、上記１１４に記載のビーズベクター。
［１２６］  以下の構成要素：
(i) 抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸、
(ii) リソソーム回避成分、および
(iii) 約0.5〜約2.5ミクロンであるビーズ粒子
を含むビーズベクターを、癌を有する患者に投与するステップを含む、患者での癌を治療する方法であって、該ビーズベクターの投与が該患者の癌を治療する、上記方法。
［１２７］  前記癌がPD-1リガンドを発現する、上記１２６に記載の方法。
［１２８］  前記癌が、低酸素微小環境を含む少なくとも1種の腫瘍を含む、上記１２６に記載の方法。
［１２９］  前記少なくとも1種の腫瘍が腫瘍関連マクロファージ（TAM）をさらに含む、上記１２８に記載の方法。
［１３０］  前記ビーズ粒子が強磁性粒子を含む、上記１２６に記載の方法。
［１３１］  前記ビーズ粒子がマイクロビーズまたはミクロスフェアを含む、上記１２６に記載の方法。
［１３２］  前記ビーズ粒子が酵母細胞壁粒子（YCWP）を含む、上記１２６に記載の方法。
［１３３］  前記リソソーム回避成分が、非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分である、上記１２６に記載の方法。
［１３４］  前記非感染性ウイルスまたはウイルスの非感染性成分が、非複製性である、上記１３３に記載の方法。
［１３５］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片をコードする核酸が、発現ベクター中にコードされる、上記１２６に記載の方法。
［１３６］  前記発現ベクターが、低酸素誘導型プロモーターを含む、上記１３５に記載の方法。
［１３７］  前記低酸素誘導型プロモーターが、HREx3＋Basal SV40プロモーターのキメラ型プロモーターを含む、上記１３６に記載の方法。
［１３８］  前記抗チェックポイントタンパク質抗体またはその結合性断片が、抗PD-L1抗体またはその結合性断片である、上記１２６に記載の方法。