【手続補正書】
【提出日】令和2年2月26日(2020.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子をゲノムに含有する齧歯類であって、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のヌクレオチド配列と、同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子のヌクレオチド配列とを含み、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ座位に位置付けられ、かつ、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のゲノム配列から前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子の前記ヌクレオチド配列への置換から生じ、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のプロモーターの制御下にあり、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、（ｉ）前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子によりコードされるヒトＴＭＰＲＳＳタンパク質の外部ドメインと少なくとも９０％の配列が同一な外部ドメインと、（ｉｉ）前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子によりコードされる内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓタンパク質の細胞質部分および膜貫通部分と少なくとも９０％の配列が同一な細胞質部分および膜貫通部分とを含有するヒト化Ｔｍｐｒｓｓタンパク質をコードする、齧歯類。
【請求項２】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子である、請求項１に記載の齧歯類。
【請求項３】
前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでを含有する、請求項２に記載の齧歯類。
【請求項４】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子は、
（ｉ）前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子のコードエクソン１〜２と、
（ｉｉ）前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子のコードエクソン３の５’部分および前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン３の３’部分を含むエクソン３と、
（ｉｉｉ）前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３とを含有し、前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子は、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子によりコードされる齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２タンパク質の細胞質部分および膜貫通部分と少なくとも９０％の配列が同一な細胞質部分および膜貫通部分と、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子によりコードされるヒトＴＭＰＲＳＳ２タンパク質の外部ドメインと少なくとも９０％の配列が同一な外部ドメインとを含有するヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２タンパク質をコードしている、請求項２に記載の齧歯類。
【請求項５】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子である、請求項１に記載の齧歯類。
【請求項６】
前記ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでを含有する、請求項５に記載の齧歯類。
【請求項７】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子は、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子のコードエクソン１からコードエクソン３までと、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでとを含有する、請求項５に記載の齧歯類。
【請求項８】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子である、請求項１に記載の齧歯類。
【請求項９】
前記ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のコードエクソン３からコードエクソン１０の終止コドンまでを含有する、請求項８に記載の齧歯類。
【請求項１０】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子は、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子のコードエクソン１〜２と、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のコードエクソン３からコードエクソン１０までとを含有する、請求項８に記載の齧歯類。
【請求項１１】
前記齧歯類は、前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子に関してホモ接合性である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の齧歯類。
【請求項１２】
前記齧歯類がマウスである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の齧歯類。
【請求項１３】
前記齧歯類がラットである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の齧歯類。
【請求項１４】
ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子を有する齧歯類を作製する方法であって、
（ａ）  齧歯類胚性幹細胞中の内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ座位内にゲノム断片を挿入する工程であって、前記ゲノム断片は、同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子のヌクレオチド配列を含有しており、それによって、ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子が形成され、ここで前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ座位の齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のプロモーターの制御下にあり、かつ、ヒト化Ｔｍｐｒｓｓタンパク質をコードし、前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓタンパク質は、（ｉ）前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子によりコードされるヒトＴＭＰＲＳＳタンパク質の外部ドメインと少なくとも９０％の配列が同一な外部ドメインと、（ｉｉ）前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ座位の前記齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子によりコードされる齧歯類Ｔｍｐｒｓｓタンパク質の細胞質部分および膜貫通部分と少なくとも９０％の配列が同一な細胞質部分および膜貫通部分とを含有する、工程、
（ｂ）  （ａ）の前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子を含有する齧歯類胚性幹細胞を取得する工程、および、
（ｃ）  （ｂ）の前記齧歯類胚性幹細胞を使用して齧歯類を作製する工程、を含む、方法。
【請求項１５】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子は、（ｉ）内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子のコードエクソン１〜２と、（ｉｉ）内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子のコードエクソン３の５’部分およびヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン３の３’部分を含むエクソン３と、（ｉｉｉ）ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３までとを含有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子のコードエクソン１からコードエクソン３までと、ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでとを含有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子のコードエクソン１〜２と、ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のコードエクソン３からコードエクソン１０までとを含有する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記齧歯類がマウスである、請求項１４〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記齧歯類がラットである、請求項１４〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
インフルエンザＡウイルス感染症の治療における化合物の治療有効性を評価する方法であって、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の齧歯類を提供する工程、
前記齧歯類にインフルエンザＡウイルスと候補化合物を投与する工程、および、
前記齧歯類におけるインフルエンザＡウイルス感染の存在と重症度をモニタリングし、前記候補化合物の治療有効性を決定する工程、を含む、方法。
【請求項２４】
前記候補化合物は、ヒトＴＭＰＲＳＳタンパク質に特異的な抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の齧歯類の単離された細胞または組織であって、前記細胞または組織のゲノムは前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子を含有する、単離された細胞または組織。
【請求項２６】
ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子を含有する単離された齧歯類胚性幹（ＥＳ）細胞であって、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のヌクレオチド配列と、同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子のヌクレオチド配列とを含み、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ座位に位置付けられ、かつ、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のゲノム配列から前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子の前記ヌクレオチド配列への置換から生じ、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子のプロモーターの制御下にあり、
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は、（ｉ）前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子によりコードされるヒトＴＭＰＲＳＳタンパク質の外部ドメインと少なくとも９０％の配列が同一な外部ドメインと、（ｉｉ）前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子によりコードされる内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓタンパク質の細胞質部分および膜貫通部分と少なくとも９０％の配列が同一な細胞質部分および膜貫通部分とを含有するヒト化Ｔｍｐｒｓｓタンパク質をコードする、単離された齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項２７】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ２遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子であり、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ２遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでを含有する、請求項２６に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項２８】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ４遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子であり、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ４遺伝子のコードエクソン４からコードエクソン１３の終止コドンまでを含有する、請求項２６に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項２９】
前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子はヒト化Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子であり、前記内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子は内因性齧歯類Ｔｍｐｒｓｓ１１ｄ遺伝子であり、前記同族ヒトＴＭＰＲＳＳ遺伝子はヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子であり、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のヌクレオチド配列は、前記ヒトＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ遺伝子のコードエクソン３からコードエクソン１０の終止コドンまでを含有する、請求項２６に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項３０】
前記齧歯類ＥＳ細胞は、前記ヒト化Ｔｍｐｒｓｓ遺伝子に関してホモ接合性である、請求項２６〜２９のいずれか一項に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項３１】
前記齧歯類ＥＳ細胞がマウスＥＳ細胞である、請求項２６〜３０のいずれか一項に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項３２】
前記齧歯類ＥＳ細胞がラットＥＳ細胞である、請求項２６〜３０のいずれか一項に記載の齧歯類ＥＳ細胞。
【請求項３３】
請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の齧歯類ＥＳ細胞を含む齧歯類胚。