【誤訳訂正書】
【提出日】令和1年12月19日(2019.12.19)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
治療アプローチの一部として、自己免疫患者の活性化Ｔ細胞内のＰＧＣ−１α発現を上方制御することができるアゴニストを同定することができる。本発明において、ＭＳ患者から単離されたＴ細胞においてＰＧＣ−１α発現の上方制御を誘導するために、これらのＴ細胞内でのＩＦＮ−βの効果が実証された。ＰＧＣ−１α発現レベルは、ＩＦＮ−β処置においてほぼ正常化することが可能であり、ＰＧＣ−１αは治療的処置プロセスを監視するためのマーカーとしても適していることが実証される。さらに、ＰＧＣ−１α発現の誘導がＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化を防止し、その後、ＩＬ−６の存在下でもＴｒｅｇ媒介性抑制に対するその感受性を回復させることが見出された。さらに、ＩＦＮ−β処置は、Ｔ細胞機能の回復に関連するＰＧＣ−１αの正常化された発現プロファイルを誘導し、ＰＧＣ−１αがＴｒｅｇによる抑制の伝達における主要制御因子であることを実証した。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
また、本発明は、炎症疾患または自己免疫状態の検出のためのインビトロスクリーニング方法にも関し、本方法は、自己免疫疾患または状態を患っている患者からのＴｒｅｇ耐性ＣＤ４＋Ｔ細胞内のペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γコアクチベータ１α、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ（ＰＧＣ−１α）の発現レベルを測定することにより、機能性遺伝子発現プロファイルを作成するステップと、得られた遺伝子発現プロファイルを健常対照からのＴｒｅｇ感受性ＣＤ４＋Ｔ細胞からの発現プロファイルと比較するステップとを含む。特に、本発明のスクリーニング方法は、ＭＳ患者の活性化Ｔ細胞における発現プロファイルを健常者の発現プロファイルと比較したときに、多発性硬化症などのいくつかの自己免疫疾患の早期検出を可能にする。また、本発明のスクリーニング方法は、Ｔｒｅｇ耐性に関連する同様の自己免疫疾患または状態、例えば、関節リウマチ、リウマチ熱、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、自己免疫性炎症性腸疾患、Ｉ型糖尿病、重症筋無力症、乾癬、尋常性天疱瘡、類天疱瘡などの検出のためにも使用可能であることも認められる。さらに実証されるように、Ｔ細胞機能の改善はＰＧＣ−１α発現の正常化と相関があり、Ｔｒｅｇ活性の回復は、多発性硬化症または他の言及された自己免疫障害のいずれかなどの自己免疫障害の処置のための有望な治療的アプローチであることが示される。Ｔｒｅｇ耐性の影響を受けたＴ細胞からＴｒｅｇ感受性の影響を受けたＴ細胞への移行は、ＰＧＣ−１α、またはＨＮＦ４Ａ、Ｈｄａｃ、ＲＯＲＡ、ＥＳＲＲＡ、ＬＰＩＮ１などの他のバイオマーカー分子のいずれかの発現レベルと相関がある。加えて、ＩＬ−６発現レベルは、ＰＧＣ−１αが下方制御されたＭＳ患者からの活性化Ｔ細胞内で有意に増大する。他方で、健常者の活性化Ｔ細胞内において、ＩＬ−６Ｒ発現は有意に低減され、ＰＧＣ−１αは上方制御される。上述のように、活性化ＭＳ  Ｔ細胞におけるＰＧＣ−１αの下方制御は、増強されたＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化およびＴｒｅｇ媒介性抑制に対するＴ細胞の無応答性に関連している。他方で、ＰＧＣ−１α発現の誘導は、ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化を防止し、その後、ＩＬ−６の存在下でもＴｒｅｇ媒介性抑制に対するその感受性を回復させるのに十分であった。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２４】
ＩＦＮ−β治療はＭＳ患者のＴ細胞においてＰＧＣ−１α発現を正常化し、Ｔｒｅｇ応答性を回復させる
ＩＦＮ−βは再発寛解型ＭＳの処置における１つの標準的治療であるが、ＩＦＮ−βがその効果を発揮するメカニズムは完全には理解されていない（Ｄｕｂｏｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。本発明者らは、ＩＦＮ−β治療がＴｒｅｇ調節に関してもＭＳ患者のＴ細胞機能を回復させるかどうかを分析した。ここで、ＩＦＮ−βによる４か月間の処置は、Ｔｒｅｇ媒介性抑制に対する末梢Ｔ細胞の感受性をほぼＨＣからのＴ細胞のレベルまで改善することが見出された（図５Ａ）。これは、ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化の低減（図５Ｂ）およびＩＬ−６Ｒ発現の低下（図５Ｃ）と相関がある抑制に対する感受性を回復させた。ＰＧＣ−１αの正常化と相関があるＴ細胞応答性を回復させるかどうかを決定するために、ＩＦＮ−β治療を用いてまたは用いずに、ＭＳ患者のＴ細胞においてＰＧＣ−１α  ｍＲＮＡ発現を分析した。ＰＧＣ−１αは、治療を受けていないＭＳ患者において活性化後に強力に下方制御された（図５Ｄ）が、ＩＦＮ−β処置を経験した患者において、ＨＣからの活性化Ｔ細胞における発現に匹敵するＰＧＣ−１αの有意な上方制御が見出された。これは、治療の成功を予測するための診断ツールとしてのＰＧＣ−１αの可能性を実証する。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
本明細書で提示されるデータは、ＰＧＣ−１αが適切なバイオマーカー分子であり、Ｔ細胞特異的であり、Ｔｒｅｇに対するＴ細胞感受性と直接相関があることを実証する。ＰＧＣ−１αの発現はＭＳ患者の活性化Ｔ細胞内のＩＬ−６に応答して下方制御され、低レベルのＰＧＣ−１αはＴｒｅｇ耐性と相関がある。治療で誘導されるＰＧＣ−１αの上方制御は、Ｔｒｅｇ機能に対するその感受性の耐性のために使用することができる。従って、末梢Ｔ細胞におけるＰＧＣ−１α発現の下方制御はＴｒｅｇ耐性を示し、Ｔｒｅｇ耐性関連の自己免疫状態または障害の同定を可能にする。また、ＰＧＣ−１α下方制御がＩＬ−６により直接誘導可能であり、新しい治療戦略の開発を可能にすることも実証される。他方で、ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔのリン酸化は同族プロモーターへのＰＧＣ−１αの補充を防止し、糖尿病患者において糖新生および脂肪酸酸化を促進するその能力が損なわれる。アゴニストによるＰＧＣ−１αの上方制御は、他方でＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔのリン酸化を制限し、ＩＬ−６の存在下でもＴ細胞感受性をもたらした。ＩＦＮ−βは、ＩＬ−６経路を介するシグナル伝達を弱めることにより、ＭＳ患者における自己侵襲的なＴ細胞の免疫調節を有意に改善し、従って、Ｔｒｅｇ媒介性の抑制に対するその感受性が回復される。Ｔ細胞機能の改善は、ＰＧＣ−１α発現のほぼ健常者のレベルへの正常化と相関があり、ＰＧＣ−１αが治療的アプローチを監視するための適切なマーカーであることが実証される。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
また、結果は、Ｔ細胞機能の調節不全に関係する分子を発見するために先進的生物情報学的分析が有益であるという強力な証拠も提供する。活性化ＭＳ  Ｔ細胞におけるＰＧＣ−１αの下方制御は、増強されたＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化およびＴｒｅｇ媒介性抑制に対するＴ細胞の無応答性と関係がある。他方で、ＰＧＣ−１α発現の誘導は、ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化を防止し、その後、ＩＬ−６の存在下でもＴｒｅｇ媒介性抑制に対するその感受性を回復させるのに十分であった。さらに、ＩＦＮ−β処置は、Ｔ細胞機能の回復に関連するＰＧＣ−１αの正常化された発現プロファイルを誘導し、ＰＧＣ−１αがＴｒｅｇによる抑制の伝達における主要制御因子であることが実証された。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
マイクロアレイ解析
製造業者の説明書に従ってＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒ，ＲＮｅａｓｙ  ＭｉｎｉキットおよびＲＮａｓｅ−Ｆｒｅｅ  ＤＮａｓｅ  Ｓｅｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いて、Ｔ細胞から全ＲＮＡを抽出および精製した。ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いてＲＮＡの完全性を検証した。Ａｍｂｉｏｎ  ＷＴ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、１００ｎｇの全ＲＮＡから相補ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）を合成した。次に、ｃＤＮＡを断片化し、遺伝子チップＷＴ  Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ｌａｂｅｌｌｉｎｇおよびコントロールキット（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）を用いてビオチン化した。ビオチン化ｃＤＮＡ断片を遺伝子チップＨｕｍａｎ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ  Ａｒｒａｙ  ２．０にハイブリダイズし、次にマイクロアレイを洗浄し、遺伝子チップＨｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈ  ａｎｄ  Ｓｔａｉｎ  Ｋｉｔ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）を用いてＦｌｕｉｄｉｃｓ  Ｓｔａｔｉｏｎ  ４５０（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）で染色した。次に、遺伝子チップＳｃａｎｎｅｒ  ３０００（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）を用いて遺伝子チップを分析した。Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃｏｎｓｏｌｅ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ）からのＲｏｂｕｓｔ  Ｍｕｌｔｉｃｈｉｐ  Ａｖｅｒａｇｅ法（ＲＭＡ）を用いて、ハイブリダイゼーション強度に対応する蛍光シグナルを正常化した。本発明者らは、ポリクローナル刺激により、３個体の培地において２倍を超える変化である転写の相違を示す遺伝子プローブを選別した（ウェルチのｔ検定：Ｐ＜０．０５）。次に、差別的に発現された遺伝子を表すデータベースをＩｎｇｅｎｕｉｔｙ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  Ａｎａｌｙｓｉｓ（ＩＰＡ）に適用した。Ｕｐｓｔｒｅａｍ  Ａｎａｌｙｓｉｓにおいて機能および転写制御の予測のために活性化ｚスコアを用いた。ｚスコアは、Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙ  Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ  Ｂａｓｅに収集された実験的に観察された転写変化事象から得られる統合情報を用いて、各経路に属する遺伝子プローブにおける発現プロファイルから計算される。フィッシャーの正確確率検定を用いて各経路の有意性を評価した（Ｐ≦０．０５）。２よりも下（阻害）または上（活性化）のｚスコアは有意であると考えられる。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３４】
ＲＴ−ＰＣＲおよびｑＲＴ−ＰＣＲ
製造業者の説明書に従ってＲｎｅａｓｙ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて２ｘ１０６細胞からＲＮＡを抽出した。Ｓｅｎｓｉｓｃｒｉｐｔ  ＲＴ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）による逆転写によってｃＤＮＡを生成し、定量的ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ，７３００  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ）およびＱｕａｎｔｉＦＡＳＴ  ＰＣＲ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）により増幅した。相対的なＩＬ−６  ｍＲＮＡ（ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｐｒｉｍｅｒ，Ｑｉａｇｅｎ）発現レベルをＥＦ１−αまたはβ−Ａｃｔｉｎに正常化した。相対的なＰＰＡＲＧＣ１α、ＩＲＦ８、ＦＧＦ１９、ＨＮＦ４Ａ、Ｈｄａｃ、ＲＯＲＡ  ｍＲＮＡを、製造業者の説明書に従ってＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｐｒｉｍｅｒ  Ａｓｓａｙ（Ｑｉａｇｅｎ）により分析し、発現レベルをβ−ＡＣＴに正常化した。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
図２：ｑＲＴ−ＰＣＲにより、ＭＳ  Ｔ細胞のＴｒｅｇ耐性と関係がある潜在的な分子としてＰＧＣ−１αが同定される
ＭＳ患者（赤色）またはＨＣ（黒色）からのＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞を未刺激のままにするか、またはプレート結合抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ｍＡｂにより活性化した。ＦＧＦ１９、ＨＮＦ４Ａ、Ｈｄａｃ、ＲＯＲＡ、ＩＲＦ８およびＰＰＡＲＧＣ  ｍＲＮＡの発現レベルをｑＲＴ−ＰＣＲにより検出した。ハウスキーピング遺伝子としてβ−アクチンを使用した。４回の独立した実験が、四分位範囲、ＨＣ  Ｔ細胞に対するｐ値と共に中央値として示される。Ｂ）ＭＳ患者（赤色）もしくはＨＣ（黒色）からの全Ｔ細胞（左側パネル）またはＣＤ４＋もしくはＣＤ８＋のいずれかのＴ細胞（右側パネル）を未刺激のままにするか、またはプレート結合抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ｍＡｂにより活性化した。ＰＰＡＲＧＣ１Ａ  ｍＲＮＡの発現レベルをｑＲＴ−ＰＣＲにより検出した。β−アクチンをハウスキーピング遺伝子として使用した。６〜１１回の独立した実験が、四分位範囲、ＨＣ  Ｔ細胞に対するｐ値と共に中央値として示される。左側：休止Ｔ細胞に正常化された活性化ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞内のＰＰＡＲＧＣ１Ａの発現レベルが示される。右側：ハウスキーピング遺伝子β−アクチンに正常化された休止ＣＤ３＋Ｔ細胞内のＰＰＡＲＧＣ１Ａの発現レベルが示される。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３８】
図３：ＩＬ−６は活性化Ｔ細胞におけるＰＧＣ−１αの下方制御を誘導し、それによりＴｒｅｇ耐性を媒介する
Ａ）上側パネル：ＣＤ３＋Ｔ細胞およびＴｒｅｇをＩＬ−６の存在下（灰色）または非存在下（黒色）で共培養し、抗ＣＤ３ｍＡｂにより刺激した。３日目に３Ｈ−Ｔｄｒの取込みにより増殖を決定し、３回の測定の平均±ＳＥＭで示した。４回の独立した実験の１つが示される。下側パネル：ＩＬ−６と共に（灰色）またはＩＬ−６を伴わずに（黒色）ＨＣからのＰＢＭＣを２４時間培養し、徹底的に洗浄し、およびＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞を単離した。細胞を未刺激のままにするか、またはプレート結合抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ｍＡｂにより４時間活性化した。休止Ｔ細胞に正常化された活性化ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞（ＴＣ）における（ＰＰＡＲＧＣ１Ａ）ＰＧＣ−１α  ｍＲＮＡの発現レベルが示される。β−アクチンをハウスキーピング遺伝子として使用した。バーは、４回の実験の平均、ＩＬ−６を伴わないＴＣに対するｐ値を表す。Ｂ）ＩＬ−６と共に（黒色）またはＩＬ−６を伴わずに（灰色）、２４時間の培養後にＣＤ３＋Ｔ細胞内でフローサイトメトリーによりＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化を分析した。Ｃ）ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化のフローサイトメトリーによる決定。ＩＬ−６の存在下（灰色）または非存在下（黒色）、またはＩＬ−６およびＩＬ−６ＲｍＡｂの存在下（灰色、白色ストライプ）で、ＨＣからのＴ細胞を２４時間インキュベートした。Ｔ細胞内のｐＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔの平均蛍光強度（ＭＦＩ）が示される（５回の独立した実験の１つの代表的な結果）。Ｄ）ＩＬ−６の存在下（灰色）またはＩＬ−６およびＶＩＩＩ阻害薬の存在下（ストライプ、０．０１、０．１および１μＭ）でＨＣからのＰＢＭＣを２４時間培養した。ＣＤ３＋Ｔ細胞内でフローサイトメトリーによりＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化を分析した。１つの代表的な実験の標準偏差を含む、ＭＦＩ値の算術平均が示される（ｎ＝６）。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
図５：ＭＳ患者からのＴ細胞のＴｒｅｇ耐性はＩＦＮ−β治療後に改善され、ＰＧＣ−１αの上方制御と相関がある
Ａ）治療を受けていないＭＳ患者（黒色）、ＩＦＮ−β処置されたＭＳ患者（青色）またはＨＣ（白色）からのＴｒｅｇ欠乏ＰＢＭＣを同種異系Ｔｒｅｇと共に共培養し、抗ＣＤ３ｍＡｂにより刺激した。３日目に３Ｈ−Ｔｄｒの取込みによりＴ細胞の増殖を決定した。ボックスプロットは、ＰＢＭＣ単独の増殖に正常化されたＴｒｅｇ（１：１比）の存在下における抑制の割合を中央値として、四分位範囲（ｎ＝１５）、ＨＣまたは治療を受けていないＭＳの抑制に対するＰ値と共に示し、ファミリーワイズエラー率を回避するためにボンフェローニ補正を使用し、（ｐ＊）で示した。Ｂ）治療を受けていないＭＳ患者（赤色）、ＩＦＮ−β処置したＭＳ患者（青色）またはＨＣ（黒色）からのＣＤ３＋Ｔ細胞内でＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化をフローサイトメトリーにより決定した。灰色のヒストグラムはＭＳのアイソタイプ対照を示す。下側パネルは、６回の異なる実験のＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔリン酸化のＭＦＩ、ＭＳのＭＦＩに対するｐ値を示す。Ｃ）ＨＣ（黒色）、治療を受けていないＭＳ患者（赤色）、またはＩＦＮ−β処置されたＭＳ患者（青色）からのＰＢＭＣ内のＩＬ−６Ｒ発現をフローサイトメトリーにより決定した。ボックスプロットは、６人の独立したドナーのＣＤ３＋Ｔ細胞内のＩＬ−６Ｒ＋細胞の割合を示し、治療を受けていないＭＳまたはＨＣのＩＬ−６Ｒ発現に対するｐ値が示される。Ｄ）治療を受けていないＭＳ患者、ＩＦＮ−β処置したＭＳ患者、またはＨＣからのＣＤ３＋Ｔ細胞を未刺激のままにするか、またはプレート結合抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ｍＡｂにより４時間活性化した。活性化Ｔ細胞内のＰＧＣ−１α  ｍＲＮＡの発現レベルをｑＲＴ−ＰＣＲにより検出した。β−アクチンをハウスキーピング遺伝子として使用した。６回の独立した実験は中央値として四分位範囲（ｎ＝６）と共に示され、ＨＣまたは治療を受けていないＭＳのＴＣの発現レベルに対するｐ値が示され、ファミリーワイズエラー率を回避するためにボンフェローニ補正を使用し、ｐ＊で示した。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体外で活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞内のペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γコアクチベータ１α、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ（ＰＧＣ−１α）の発現レベルを測定することにより、Ｔｒｅｇ耐性と呼ばれる、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に対するＣＤ４＋Ｔ細胞の低下した応答性を検出するための方法。
【請求項２】
前記ＰＧＣ−１αの発現レベルが活性化Ｔｒｅｇ感受性ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞のＰＧＣ−１α発現レベルと比較され、前記活性化Ｔｒｅｇ感受性ＣＤ４＋Ｔ細胞と比較された活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞内のＰＧＣ−１αの下方制御がＴｒｅｇ耐性を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＰＧＣ−１αの上方制御がＴｒｅｇ媒介性抑制に対する活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞の応答性と相関する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｔｒｅｇ耐性がＴ細胞受容体（ＴＣＲ）刺激後の促進されたＩＬ−６産生、ＰＫＢ／ｃ−Ａｋｔの増強されたリン酸化および／または増大されたＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）発現に関連する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ＣＤ４＋Ｔ細胞の低下した応答性が、ＩＦＮ−βを用いて活性化Ｔｒｅｇ耐性Ｔ細胞内のＰＧＣ−１α発現を正常化することによって回復される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ＰＧＣ−１αに加えて、Ｔｒｅｇ耐性Ｔ細胞の上流制御因子ＨＮＦ４Ａ、Ｈｄａｃ、ＲＯＲＡ、ＥＳＲＲＡ、ＬＰＩＮ１の発現レベルがＣＤ４＋Ｔ細胞内で決定され、かつＴｒｅｇ感受性Ｔ細胞と比較される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
自己免疫疾患または状態を検出するためのインビトロスクリーニング方法であって、患者からの活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞内のペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γコアクチベータ１α、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ（ＰＧＣ−１α）の発現レベルを測定することにより、機能性遺伝子発現プロファイルを作成するステップと、前記得られた遺伝子発現プロファイルを健常対照からのＴｒｅｇ感受性ＣＤ４＋Ｔ細胞からの発現プロファイルと比較するステップとを含むインビトロスクリーニング方法。
【請求項８】
前記機能性遺伝子発現プロファイルの作成が、
ａ．Ｔ細胞からＲＮＡを抽出および精製するステップと、
ｂ．ＲＮＡテンプレートからｃＤＮＡを合成するステップと、
ｃ．ｃＤＮＡをマーカー分子で標識化し、かつ遺伝子チップにハイブリダイズするステップと、
ｄ．前記マーカー分子の強度を検出することにより、前記遺伝子チップを分析するステップと
を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＰＧＣ−１αに加えて、Ｔｒｅｇ耐性Ｔ細胞の上流制御因子ＨＮＦ４Ａ、Ｈｄａｃ、ＲＯＲＡ、ＥＳＲＲＡ、ＬＰＩＮ１の発現レベルがＣＤ４＋Ｔ細胞内で決定され、かつＴｒｅｇ感受性Ｔ細胞と比較される、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に対するＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞の低下した応答性が請求項２〜６のいずれか一項に記載の方法によって検出される、請求項７〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記自己免疫疾患または状態が関節リウマチ、リウマチ熱、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、自己免疫性炎症性腸疾患、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、乾癬、尋常性天疱瘡、類天疱瘡である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
Ｔｒｅｇ耐性と呼ばれる、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に対するＣＤ４＋Ｔ細胞の低下した応答性を検出するための活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞を用いた生体外スクリーニング系における、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γコアクチベータ１α、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ（ＰＧＣ−１α）の使用。
【請求項１３】
自己免疫性患者から単離された活性化Ｔ細胞内のＰＧＣ−１α発現を上方制御するアゴニストを同定するためのＰＧＣ−１αの使用。
【請求項１４】
自己免疫障害または状態の治療的処置プロセスを監視するためのＰＧＣ−１αの使用。