【手続補正書】
【提出日】令和2年4月10日(2020.4.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＴＧＦ  ｍＲＮＡ配列に対する配列相補性を有し、かつ１９〜３１ヌクレオチド（ｎｔ）の長さを有するアンチセンス鎖、及び前記アンチセンス鎖に対する配列相補性を有する、１５〜１７ｎｔの長さのセンス鎖を含むＲＮＡ複合体であって、前記アンチセンス鎖及び前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖の５'末端及び前記センス鎖の３'末端が平滑末端を形成する複合体を形成する、前記ＲＮＡ複合体。
【請求項２】
前記アンチセンス鎖が５’−ＵＣＵＵＣＣＡＧＵＣＧＧＵＡＡＧＣＣＧＣＧＡＧＧＧＣＡＧＧ−３’のヌクレオチド配列を有する、請求項１に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項３】
前記センス鎖が１６ｎｔの長さを有し、かつ５’−ＣＵＵＡＣＣＧＡＣＵＧＧＡＡＧＡ−３’のヌクレオチド配列を有する、請求項１又は２に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項４】
前記センス鎖が、表１、表２及び表３に列挙されるセンス鎖配列から選択される配列を有し、かつ前記アンチセンス鎖が、表１、表２及び表３に列挙されるアンチセンス鎖配列から選択される配列を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項５】
前記ＲＮＡ複合体が、細胞によるＣＴＧＦ発現を阻害することができ、かつ前記細胞は上皮細胞、肺胞細胞、Ａ５４９細胞、ＨａＣａＴ細胞、又はＨｓ６８細胞であってよい、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項６】
前記ＲＮＡ複合体が化学修飾を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項７】
前記化学修飾が、２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシド、ホスホロチオエート結合又は疎水性部分である、請求項６に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項８】
前記ＲＮＡ複合体が疎水性部分を含み、前記疎水性部分はコレステロール部分であってもよく、前記コレステロール部分は、前記センス鎖の３’末端に結合していてもよい、請求項７に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項９】
前記ＲＮＡ複合体が２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含み、
前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記センス鎖上に位置し、及び／又は
前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記アンチセンス鎖の３'末端に位置し、及び／又は
前記アンチセンス鎖の前記３'末端領域が複数の２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含み、及び／又は
前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記センス鎖上；及び前記アンチセンス鎖の前記３'末端に位置し、及び／又は
前記センス鎖が複数の２’−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含み、前記アンチセンス鎖の３’末端領域が複数の２’−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含む、
請求項６〜８のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１０】
前記ＲＮＡ複合体が少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項９に記載のＲＮＡ複合体であって、
前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも５％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも１０％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも１５％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも２０％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも５％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも１０％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも１５％がホスホロチオエート結合であってもよい、又は
前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも２０％がホスホロチオエート結合であってもよい、
請求項９に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１１】
前記ＲＮＡ複合体が、表２、表３、又は表６に列挙された中から選択される修飾ＲＮＡ複合体である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１２】
前記修飾ＲＮＡ複合体は、
【数１】
2019513384.tif 000001
のヌクレオチド配列を有する前記アンチセンス鎖を有し、ここで前記ヌクレオチド配列中の下線を引いた文字は２’−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを表し、アスタリスク（＊）はホスホロチオエート結合を表す、請求項１１に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１３】
前記修飾ＲＮＡ複合体は、
【数２】
2019513384.tif 000002
のヌクレオチド配列を有する前記アンチセンス鎖を有し、ここで前記ヌクレオチド配列中の下線を引いた文字は２’−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを表し、アスタリスク（＊）はホスホロチオエート結合を表し、ｃｈｏｌはコレステロールトリエチレングリコールを表す、請求項１１又は１２に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１４】
前記ＲＮＡ複合体が、送達ビヒクルの非存在下で細胞の細胞膜を透過することができる、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のＲＮＡ複合体及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１６】
特発性肺線維症の治療用の、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記ＲＮＡ複合体を、特発性肺線維症の治療用の第２の薬剤とともに使用し、その第２の薬剤が増殖因子阻害剤であってもよい、請求項１５又は１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
細胞によるＣＴＧＦ発現を阻害するための、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ＲＮＡ複合体が気道に投与される、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記ＲＮＡ複合体が非経口的、静脈内、又は吸入により投与される、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
特定の態様では、本明細書は、ヒト対象におけるＣＴＧＦ遺伝子発現を阻害する方法であって、本明細書で提供するＲＮＡ複合体または医薬組成物を対象に投与することを含む、方法を記載する。特定の態様では、本明細書は、ＩＰＦのヒト対象を治療する方法であって、本明細書に記載のＲＮＡ複合体または医薬組成物を対象に投与することを含む、方法を提供する。
本発明は以下の態様も提供する。
［１］ＣＴＧＦ  ｍＲＮＡ配列に対する配列相補性を有する、少なくとも１９ヌクレオチド（ｎｔ）の長さのアンチセンス鎖、及び前記アンチセンス鎖に対する配列相補性を有する、１５〜１７ｎｔの長さのセンス鎖を含むＲＮＡ複合体であって、前記アンチセンス鎖及び前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖の５'末端及び前記センス鎖の３'末端が平滑末端を形成する複合体を形成する、前記ＲＮＡ複合体。
［２］前記アンチセンス鎖が１９〜２１ｎｔの長さである、上記［１］のＲＮＡ複合体。
［３］前記アンチセンス鎖が１９ｎｔの長さである、上記［１］に記載のＲＮＡ複合体。
［４］前記アンチセンス鎖が２０ｎｔの長さである、上記［１］に記載のＲＮＡ複合体。
［５］前記アンチセンス鎖が２１ｎｔの長さである、上記［１］に記載のＲＮＡ複合体。
［６］前記アンチセンス鎖が少なくとも２４ｎｔの長さである、上記［１］に記載のＲＮＡ複合体。
［７］前記センス鎖が１５ｎｔの長さである、上記［１］から［６］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［８］前記センス鎖が１６ｎｔの長さである、上記［１］から［６］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［９］前記センス鎖が１７ｎｔの長さである、上記［１］から［６］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［１０］前記センス鎖が、表１、表２及び表３に列挙されるセンス鎖配列から選択される配列を有する、上記［１］から［９］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［１１］前記アンチセンス鎖が、表１、表２及び表３に列挙されるアンチセンス鎖配列から選択される配列を有する、上記［１］から［９］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［１２］ＣＴＧＦ  ｍＲＮＡ配列に対する配列相補性を有する、少なくとも２１ヌクレオチド（ｎｔ）の長さのアンチセンス鎖、及び前記アンチセンス鎖に対する配列相補性を有する、１６ｎｔの長さのセンス鎖を含むＲＮＡ複合体であって、前記アンチセンス鎖及び前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖の５'末端及び前記センス鎖の３'末端が平滑末端を形成する複合体を形成する、前記ＲＮＡ複合体。
［１３］前記アンチセンス鎖が２１〜３１ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１４］前記アンチセンス鎖が２１ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１５］前記アンチセンス鎖が２３ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１６］前記アンチセンス鎖が２５ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１７］前記アンチセンス鎖が２７ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１８］前記アンチセンス鎖が２９ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［１９］前記アンチセンス鎖が３１ｎｔの長さである、上記［１２］に記載のＲＮＡ複合体。
［２０］前記センス鎖が１６ｎｔの長さである、上記［１２］から［１９］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［２１］前記センス鎖が、表６に列挙されるセンス鎖配列から選択される配列を有する、上記［１２］から［２０］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［２２］前記アンチセンス鎖が、表６に列挙されるアンチセンス鎖配列から選択される配列を有する、上記［１２］から［２０］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［２３］前記ＲＮＡ複合体が、細胞におけるＣＴＧＦ発現を阻害することができる、上記［１］から［２２］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［２４］前記細胞が上皮細胞である、上記［２３］に記載のＲＮＡ複合体。
［２５］前記細胞が肺胞細胞である、上記［２３］に記載のＲＮＡ複合体。
［２６］前記細胞がＡ５４９細胞である、上記［２３］に記載のＲＮＡ複合体。
［２７］前記細胞がＨａＣａＴ細胞である、上記［２３］に記載のＲＮＡ複合体。
［２８］前記細胞がＨｓ６８細胞である、上記［２３］に記載のＲＮＡ複合体。
［２９］前記ＲＮＡ複合体が化学修飾を含む、上記［１］から［２８］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［３０］前記化学修飾が、２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシド、ホスホロチオエート結合又は疎水性部分である、上記［２９］に記載のＲＮＡ複合体。
［３１］前記ＲＮＡ複合体が疎水性部分を含む、上記［３０］に記載のＲＮＡ複合体。
［３２］前記疎水性部分がコレステロール部分である、上記［３１］に記載のＲＮＡ複合体。
［３３］前記コレステロール部分が、前記センス鎖の３'末端に結合している、上記［３２］に記載のＲＮＡ複合体。
［３４］前記ＲＮＡ複合体が２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含む、上記［２９］から［３０］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［３５］前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記センス鎖上に位置する、上記［３４］に記載のＲＮＡ複合体。
［３６］前記センス鎖が複数の２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含む、上記［３５］に記載のＲＮＡ複合体。
［３７］前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記アンチセンス鎖の３'末端に位置する、上記［３４］に記載のＲＮＡ複合体。
［３８］前記アンチセンス鎖の前記３'末端領域が複数の２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含む、上記［３７］に記載のＲＮＡ複合体。
［３９］前記２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドが前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖の前記３'末端に位置する、上記［３４］に記載のＲＮＡ複合体。
［４０］前記センス鎖が複数の２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含み、前記アンチセンス鎖の３'末端領域が複数の２'−Ｏ−メチル化ヌクレオシドを含む、上記［３９］に記載のＲＮＡ複合体。
［４１］前記ＲＮＡ複合体がホスホロチオエート結合を含む、上記［２９］から［４０］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［４２］前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも５％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］に記載のＲＮＡ複合体。
［４３］前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中の前記リボヌクレオチド間の結合の少なくとも１０％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］に記載のＲＮＡ複合体。
［４４］前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中の前記リボヌクレオチド間の結合の少なくとも１５％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］に記載のＲＮＡ複合体。
［４５］前記ＲＮＡ複合体の前記センス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも２０％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］に記載のＲＮＡ複合体。
［４６］前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中のリボヌクレオチド間の結合の少なくとも５％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］から［４５］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［４７］前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中の前記リボヌクレオチド間の結合の少なくとも１０％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］から［４５］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［４８］前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中の前記リボヌクレオチド間の結合の少なくとも１５％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］から［４５］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［４９］前記ＲＮＡ複合体の前記アンチセンス鎖中の前記リボヌクレオチド間の結合の少なくとも２０％がホスホロチオエート結合である、上記［４１］から［４５］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［５０］前記ＲＮＡ複合体が、表２、表３、又は表６に列挙される修飾ＲＮＡ複合体である、上記［４９］に記載のＲＮＡ複合体。
［５１］前記ＲＮＡ複合体が、送達ビヒクルの非存在下で細胞の細胞膜を透過することができる、上記［４１］から［５０］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［５２］前記ＲＮＡ複合体が、細胞毒性ではない、上記［１］から［５１］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体。
［５３］上記［１］から［５２］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体と前記細胞を接触させることを含む、細胞においてＣＴＧＦ発現を阻害する方法。
［５４］前記細胞がＡ５４９、Ｈｓ６８、ＨａＣａＴ、上皮細胞又は肺胞細胞である、上記［５３］に記載の方法。
［５５］前記細胞が、ヒト対象の気道に存在する、上記［５３］に記載の方法。
［５６］対象における特発性肺線維症を治療する方法であって、上記［１］から［５２］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体を前記対象に投与することを含む、前記方法。
［５７］前記ＲＮＡ複合体を前記対象の気道に投与することを含む、上記［５６］に記載の方法。
［５８］前記ＲＮＡ複合体を静脈内投与する、上記［５６］に記載の方法。
［５９］前記ＲＮＡ複合体を非経口的に投与する、上記［５６］に記載の方法。
［６０］前記ＲＮＡ複合体を吸入により投与する、上記［５６］又は［５７］に記載の方法。
［６１］上記［１］から［５２］のいずれかに記載のＲＮＡ複合体及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
［６２］前記医薬組成物が、吸入による投与のために製剤化される、上記［６１］に記載の医薬組成物。
［６３］前記医薬組成物が、吸入器を使用する投与のために製剤化される、上記［６１］に記載の医薬組成物。
［６４］上記［６１］から［６３］のいずれかに記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、前記対象における特発性肺線維症の治療方法。
［６５］前記医薬組成物を、前記対象の気道に投与することを含む、上記［６４］に記載の方法。
［６６］前記医薬組成物が吸入器中にある、上記［６５］に記載の方法。
［６７］前記医薬組成物を、非経口的に又は静脈内に投与することを含む、上記［６４］に記載の方法。
［６８］前記医薬組成物を、経口投与することを含む、上記［６４］に記載の方法。
［６９］前記対象が、前記医薬組成物を自己投与する、上記［６４］から［６８］のいずれかに記載の方法。
［７０］特発性肺線維症の前記治療のための第２の薬剤を投与することをさらに含む、上記［６４］から［６９］のいずれかに記載の方法。
［７１］前記第２の薬剤が増殖因子阻害剤である、上記［７０］に記載の方法。