【手続補正書】
【提出日】令和2年5月29日(2020.5.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドであって、
支配的季節性免疫プロファイルを備えた改変ＨＡポリペプチド由来の改変頭部領域と、
パンデミック株由来のステム領域と、を含み、
必要に応じて、前記改変頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、もしくは６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９５％同一、例えば配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、もしくは６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９６％同一、例えば配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、もしくは６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９８％同一の配列を含む、または配列が配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、もしくは６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して同一であり、かつ／あるいは
必要に応じて、前記ステム領域が、Ａ／カリフォルニア／０７／２００９、Ａ／ニュージャージー／１０／１９７６、もしくはＡ／サウスカロライナ／１／１９１８、またはパンデミック免疫プロファイルを有する改変ＨＡポリペプチドなどの天然に存在するパンデミック株由来であり、必要に応じて、パンデミック免疫プロファイルを有する前記改変ＨＡポリペプチドが、コンピュータ最適化広域反応性抗原（ＣＯＢＲＡ）技術、モザイク技術、インフルエンザ株のインフルエンザコンセンサス配列ベースの組み合わせ、構造ドメインの欠失および／もしくは再配列、ドメインスワッピング、または複数のインフルエンザ株に含まれる中和エピトープもしくは交差反応性エピトープの組み合わせ、によって改変される、前記ポリペプチド。
【請求項２】
（ａ）支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められる一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位において、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が破壊されるように、一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入の各々が、パンデミック株の対応する配列由来である；あるいは
（ｂ）支配的パンデミック免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められる一つ以上の改変された推定Ｎ結合型グリコシル化部位を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上の改変された推定Ｎ結合型グリコシル化部位の各々が、季節性株の対応する配列に基づいて、アミノ酸の置換、欠失、または挿入によって改変されている、
組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
【請求項３】
前記ヘマグルチニンが、サブタイプＨ１Ｎ１などのＡ型インフルエンザに対応し、かつ／もしくは前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が、（ＣＡ０９ナンバリング）の１４２〜１４５位および／もしくは１７７〜１７９位に相当し、かつ／または
前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が、受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内にあり、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められており、
必要に応じて、前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、もしくは挿入が、表４もしくは表５から選択され、かつ／または
前記コンセンサス配列ＮｘＳ／Ｔｙをｚ１ｚ２ｚ３ｚ４に修飾することを含み、式中、
ｚ１は、Ｎ、Ｄ、Ｋ、またはＳであり、
ｚ２は、Ｙであるか、または変化せず、
ｚ３は、Ｅ、Ｄ、またはＮであり、
ｚ４は、Ｉ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、もしくはＴであるか、または変化せず、かつ／または
一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、もしくは挿入が誘導されるパンデミック株もしくは季節性株が、Ａ／カリフォルニア／０７／２００９およびＡ／サウスカロライナ／１／１９１８などの循環インフルエンザ株であり、かつ／または
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、もしくは挿入が、前記ＮｘＳ／Ｔｙコンセンサス配列の１〜５アミノ酸以内へのリジン（Ｋ）残基もしくはアルギニン（Ｒ）残基の挿入を含み、例えば前記リジン（Ｋ）残基もしくはアルギニン（Ｒ）残基が前記ＮｘＳ／Ｔｙコンセンサス配列の１〜５アミノ酸３’内にあり、かつ／もしくは前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、もしくは挿入が、Ａ／カリフォルニア／０７／２００９の１４７に相当する位置での挿入を含み、例えば１４７に相当する位置での前記挿入が、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）の挿入を含む、請求項２に記載の組換えインフルエンザヘマグルチニン。
【請求項４】
（ａ）支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ６０と２９１と（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の間に一つ以上のアミノ酸置換を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、表６から選択される一つ以上のアミノ酸置換などのパンデミック株の対応する配列由来であり、
必要に応じて、前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７と２６２と（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の間にあり、前記一つ以上のアミノ酸置換が表７から選択される、または
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６もしくは表７から選択される２個以上のアミノ酸置換、例えば表６もしくは表７から選択される３個以上、５個以上、１０個以上のアミノ酸置換を含む、もしくは前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６もしくは表７から選択される少なくとも２個、３個、４個、５個、もしくは１０個の連続する置換を含む、または
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、２４５、および／もしくは２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で、好ましくは１３７、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、および／もしくは２４５（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で、もしくは１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、および／もしくは２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる；あるいは
（ｂ）支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に一つ以上のアミノ酸置換を含み、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められている、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、循環インフルエンザウイルスなどのパンデミック株の対応する配列由来であり、
必要に応じて、前記一つ以上のアミノ酸置換が、受容体結合部位（ＲＢＳ）の１０オングストローム以内にある、もしくは前記一つ以上のアミノ酸置換が表８から選択され、例えば表８から２個以上、３個以上、５個以上、１０個以上のアミノ酸置換が選択される、または
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される少なくとも２個、３個、４個、５個、もしくは１０個の連続する置換を含み、好ましくは前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、および／もしくは２１４（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる；あるいは
（ｃ）支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ表９から選択される一つ以上のアミノ酸修飾を含む、改変頭部領域を備える、
組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
【請求項５】
支配的季節性免疫プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドまたは支配的パンデミック免疫プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが、ＣＯＢＲＡ（コンピュータ最適化広域反応性抗原：ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ  ｂｒｏａｄｌｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ）技術、モザイク技術、インフルエンザ株のインフルエンザコンセンサス配列ベースの組み合わせ、構造ドメインの欠失および／もしくは再配列、ドメインスワッピング、または複数のインフルエンザ株に含まれる中和エピトープもしくは交差反応性エピトープの組み合わせ、によって改変される、または前記組換えＨＡポリペプチドが、インフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発する、または前記組換えＨＡポリペプチドが、インフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対する、よりバランスの取れた免疫原性プロファイルによって特徴付けられている、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
【請求項６】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項７】
請求項６に記載の核酸を含むベクター。
【請求項８】
請求項７に記載のベクターを含む、ヒト細胞などの単離された細胞。
【請求項９】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチドを含み、必要に応じてインフルエンザノイラミニダーゼ（ＮＡ）タンパク質、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ｇａｇタンパク質、またはその両方をさらに含むインフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１０】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド、または請求項９に記載のインフルエンザＶＬＰを含む医薬組成物。
【請求項１１】
季節性およびパンデミックのインフルエンザウイルスに対して対象を免疫化するための、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域を選択することと、
前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域で、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域を置換し、それによって、変更された免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生成することと、を含み、必要に応じて、
（ａ）前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、
さらに支配的季節性免疫プロファイルを備えた前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の残基６３〜２７８、１２５〜２７７、または１３５〜２６９に相当し、好ましくは別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９（Ａ／カリフォルニア／０７／２００９ＨＡ配列）配列）の６３〜２７７の残基；
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１３５〜２６９の残基と、からなる群から選択され、必要に応じて、
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドが、野生型インフルエンザウイルス由来のＨＡポリペプチド、または配列番号５（ＤＯ１Ａの完全長配列）を含むものなどの改変ＨＡポリペプチドである；あるいは
（ｂ）前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、支配的パンデミック免疫プロファイルを備えた前記改変ＨＡポリペプチドの選択された頭部領域が、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９（Ａ／カリフォルニア／０７／２００９ＨＡ配列）配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１３５〜２６９の残基と、からなる群から選択され、必要に応じて、
別の免疫原性プロファイル（支配的季節性）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａの完全長配列）の残基６３〜２７８、１２５〜２７７、または１３５〜２６９を含み、
必要に応じて、前記方法が、前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価すること、および／または前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、
前記方法。
【請求項１３】
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域と比較して、前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域における一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位の有無を判定することと、
前記改変ＨＡポリペプチドの前記頭部領域に一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入を導入して、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する配列に基づいて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊するかまたは追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入し、それにより変更した免疫原性プロファイルを有する再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせることと、を含み、
必要に応じて、前記一つ以上の推定または追加のＮ結合型グリコシル化部位が、ＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められ、かつ／または前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が前記改変ＨＡポリペプチドに導入されて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがよりパンデミックになるように変更され、かつ／または前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が前記改変ＨＡポリペプチドに導入されて、追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがより季節性になるように変更され、必要に応じて、前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価することをさらに含み、必要に応じて、前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、方法。
【請求項１４】
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
（ａ）一つ以上のアミノ酸置換を受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に導入することであって、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められている、前記導入することを含んでおり、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、特定の位置のアミノ酸残基を、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する位置で観察されるアミノ酸残基と置き換えることを含み、
それにより、変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせ、必要に応じて、
別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが循環の季節性インフルエンザ株もしくはパンデミックインフルエンザ株由来である、もしくは前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがよりパンデミックになるように変更される、または
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがより季節性になるように変更される、かつ／または
前記方法が、前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価すること、および／もしくは前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む；あるいは
（ｂ）表４、表５、表６、表７、表８、もしくは表９に示されている修飾から選択される一つ以上の修飾を、前記改変ＨＡポリペプチドの一つ以上対応する位置に導入し、それにより変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせ、好ましくは前記一つ以上の修飾が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、２４５、および／もしくは２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で生じ、好ましくは前記一つ以上の修飾が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、および／もしくは２１４（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で生じ、
必要に応じて、前記一つ以上の修飾が、表４、表５、表６、表７、表８、もしくは表９で示した修飾から選択される２個以上、３個以上、４個以上、５個以上、もしくは１０個以上の修飾を含み、
必要に応じて、前記方法が、前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価すること、および／もしくは前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む；あるいは
（ｃ）前記方法が、
（ｉ）前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域を選択することと、前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域で、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域を置換することと、
（ｉｉ）別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域と比較して、前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域における一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位の有無を判定することと、前記改変ＨＡポリペプチドの前記頭部領域に一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、もしくは挿入を導入して、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する配列に基づいて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊もしくは改変するか、もしくは追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入することと、
（ｉｉｉ）一つ以上のアミノ酸置換を受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に導入することであって、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められており、前記一つ以上のアミノ酸置換の各々は、ある特定の位置のアミノ酸残基を、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する位置で観察されるアミノ酸残基と置き換えることを含む、前記導入することと、
（ｉｖ）表４、表５、表６、表７、表８、もしくは表９に示した修飾から選択される一つ以上修飾を、前記改変ＨＡポリペプチドの一つ以上の対応する位置に導入することと、
からなる群から選択される二つ以上の修飾を選択することを含み、
それにより、変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせる、
前記方法。
【請求項１５】
変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生成することが、パンデミックインフルエンザ株に対する抗頭部モノクローナル抗体の結合範囲を増大させることなどの季節性インフルエンザ株および／またはパンデミックインフルエンザ株に対する一つ以上の抗頭部モノクローナル抗体の結合を増大させることを含み、必要に応じて結合の増加が、哺乳類細胞の表面で発現した再設計されたＨＡポリペプチドに結合した前記モノクローナル抗体をフローサイトメトリーで検出することによって決定される、かつ／またはモノクローナル抗体の結合のレベルを定量化することをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１１から請求項１５のいずれか１項に記載の方法による再設計されたヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
【図６】推定Ｎ結合型グリコシル化部位（出現順に、それぞれ配列番号３２〜３５）と、リジンループ挿入部位（出現順に、それぞれ配列番号３６〜３７）と、ＲＢＳ部位周囲の残基の修飾とを図解したものである。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９３】
原理証明として評価された、季節性免疫プロファイルを備える改変ＨＡポリペプチドの残基の修飾について、表９に記載している。これらの修飾には、ＲＢＳ領域修飾と、上述のグリコシル化プロファイル修飾（例えば、グリコシル化部位の切除）との組み合わせが含まれる。これらの修飾によって、適正にフォールディングし、表面発現された組換えＨＡポリペプチドが得られた（図７）。再度、頭部領域の修飾が抗ステムｍＡｂへの結合のわずかな増加を誘導したのを観察し、１箇所での置換が、遠隔部位に広範囲のアロステリック効果を与えることができることを示した。再設計された組換えＨＡは、パンデミックと季節性の両方の特定の抗体によって認識された（図８）。興味深いことに、ＲＢＳ修飾は単独で季節性免疫プロファイルを改善した（図８、ＤＯ２ａ＿ｍ４〜ｍ５、「修飾されたＣＨ６５」）が、パンデミックプロファイルにはほとんど影響を及ぼさなかった。しかしながら、ＲＢＳ領域修飾とグリコシル化修飾を組み合わせることで、季節性とパンデミックの免疫プロファイルの両方が有意に改善した。（図８、ＤＯ２ａ＿ｍ７〜ｍ９、「Δグリコシル＋ｍＣＨ６５」）。このデータが示したのは、修飾は、季節性免疫プロファイル（「ｍＡｂ結合の増加」）を改良し、より多くのパンデミック免疫プロファイル（「範囲の増加」）を付与し、それによって、改変ＨＡポリペプチドの例（例えば、ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ）において抗原変異および抗原不連続変異に対処することができる全体的によりバランスの取れた免疫プロファイルをもたらしたことである。
【表９】
2019525733.tif 000001
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３０】
本明細書および特許請求の範囲で使用される冠詞「ａ」および「ａｎ」は、明確に反対の指示がない限り、複数の指示対象を含むと理解されるべきである。グループの一つまたは複数のメンバーとの間に「または」を含むクレームまたは説明は、グループメンバーの一つ、１以上、またはすべてが、文脈から逆のまたはそうでないことが示されていない限り、所与の製品またはプロセスに存在し、採用され、またはそうでなければ関連する場合に満足されると考えられる。本発明は、グループのちょうど一つのメンバーが所与の製品またはプロセスに存在し、使用され、または関連する実施形態を含む。本発明はまた、二つ以上の、またはグループメンバー全体が所与の製品またはプロセスに存在し、使用され、または関連する実施形態も含む。さらに、本発明は、別段の指示がない限り、または当業者には矛盾または不一致が生じることが明らかでない限り、列挙された請求項の一つ以上からの一つ以上の制限、要素、句、記述的用語などが、同じ基本クレーム（または関連する他の請求項）に従属する別の請求項に導入されるすべての変形、組み合わせ、および置換を包含することが理解されるべきである。要素がリスト（例えば、マーカッシュグループまたは類似のフォーマット）として提示される場合、要素の各サブグループも開示され、任意の要素がグループから除去され得ることが理解されるべきである。一般に、本発明または本発明の態様は、特定の要素、特徴などを含むものとして言及し、本発明の特定の実施形態または本発明の態様は、そのような要素、特徴などからなるか、またはそれらから本質的になることを理解されたい。簡潔にするために、これらの実施形態は、すべての場合において、本明細書中に多くの言葉で具体的に記載されているわけではない。特定の排除が明細書に列挙されているかどうかにかかわらず、本発明の任意の実施形態または態様は、特許請求の範囲から明白に除外することができることも理解されるべきである。本発明の背景を説明し、その実施に関するさらなる詳細を提供するために本明細書で参照される刊行物、ウェブサイトおよび他の参考資料は、参照により本明細書に組み込まれる。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドであって、
支配的季節性免疫プロファイルを備えた改変ＨＡポリペプチド由来の改変頭部領域と、
パンデミック株由来のステム領域と、を含む、前記ポリペプチド。
（項目２）
前記改変頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、または６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９５％同一の配列を含む、項目１に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド
（項目３）
前記配列が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、または６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９６％同一である、項目２に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目４）
前記配列が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、または６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して少なくとも９８％同一である、項目２または項目３に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目５）
前記配列が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の１３５〜２６９位、１２５〜２７７位、または６３〜２７８位に相当するアミノ酸に対して同一である、項目２から項目４のいずれか１項に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目６）
前記ステム領域が天然に存在するパンデミック株由来である、先行項目のいずれか１項に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目７）
前記天然に存在するパンデミック株がＡ／カリフォルニア／０７／２００９、Ａ／ニュージャージー／１０／１９７６、またはＡ／サウスカロライナ／１／１９１８から選択される、項目６に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目８）
前記ステム領域がパンデミック免疫プロファイルを有する改変ＨＡポリペプチド由来である、先行項目のいずれか１項に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目９）
パンデミック免疫プロファイルを有する前記改変ＨＡポリペプチドが、ＣＯＢＲＡ（コンピュータ最適化広域反応性抗原：ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ  ｂｒｏａｄｌｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ）技術、モザイク技術、インフルエンザ株のインフルエンザコンセンサス配列ベースの組み合わせ、構造ドメインの欠失および／もしくは再配列、ドメインスワッピング、または複数のインフルエンザ株に含まれる中和エピトープもしくは交差反応性エピトープの組み合わせ、によって改変される、項目８に記載の組換えインフルエンザＨＡポリペプチド。
（項目１０）
支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められる一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位において、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が破壊されるように、一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入の各々が、パンデミック株の対応する配列由来である、組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目１１）
支配的パンデミック免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められる一つ以上の改変された推定Ｎ結合型グリコシル化部位を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上の改変された推定Ｎ結合型グリコシル化部位が、季節性株の対応する配列に基づいて、アミノ酸の置換、欠失、または挿入によって改変されている、組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目１２）
前記ヘマグルチニンがＡ型インフルエンザに対応する、項目１０または項目１１に記載の組換えインフルエンザヘマグルチニン。
（項目１３）
前記Ａ型インフルエンザがサブタイプＨ１Ｎ１である、項目１２に記載の組換えインフルエンザヘマグルチニン。
（項目１４）
前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が、（ＣＡ０９ナンバリング）の１４２〜１４５位および／または１７７〜１７９位に相当する、項目１０から項目１３のいずれか１項に記載の組換えヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目１５）
前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位が、受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内にあり、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められている、項目１０から項目１３のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目１６）
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が、表４から選択される、項目１４に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目１７）
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が、表５から選択される、項目１４または項目１６に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目１８）
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が、前記コンセンサス配列ＮｘＳ／Ｔｙをｚ１ｚ２ｚ３ｚ４に修飾することを含み、式中、
ｚ１は、Ｎ、Ｄ、Ｋ、またはＳであり、
ｚ２は、Ｙであるか、または変化せず、
ｚ３は、Ｅ、Ｄ、またはＮであり、
ｚ４は、Ｉ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、もしくはＴであるか、または変化しない、項目１０から項目１７のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目１９）
一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が誘導されるパンデミック株または季節性株が、循環インフルエンザ株である、項目１０から項目１８のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２０）
前記循環インフルエンザ株が、Ａ／カリフォルニア／０７／２００９およびＡ／サウスカロライナ／１／１９１８からなる群から選択される、項目１９に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２１）
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が、前記ＮｘＳ／Ｔｙコンセンサス配列の１〜５アミノ酸以内へのリジン（Ｋ）残基またはアルギニン（Ｒ）残基の挿入を含む、項目１０から項目２０のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２２）
前記リジン（Ｋ）残基またはアルギニン（Ｒ）残基が前記ＮｘＳ／Ｔｙコンセンサス配列の１〜５アミノ酸３’内にある、項目２１に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２３）
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が、Ａ／カリフォルニア／０７／２００９の１４７に相当する位置での挿入を含む、項目１０から項目２１のいずれかに記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２４）
１４７に相当する位置での前記挿入が、リジン（Ｋ）またはアルギニン（Ｒ）の挿入を含む、項目２３に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２５）
支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ６０と２９１と（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の間に一つ以上のアミノ酸置換を含む、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、パンデミック株の対応する配列由来である、組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目２６）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６から選択される、項目２５に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２７）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７と２６２と（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の間にあり、前記一つ以上のアミノ酸置換が表７から選択される、項目２５に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２８）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６または表７から選択される２個以上のアミノ酸置換を含む、項目２５から項目２７のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目２９）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６または表７から選択される３個以上のアミノ酸置換を含む、項目２５から項目２８のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３０）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６または表７から選択される５個以上のアミノ酸置換を含む、項目２５から項目２９のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３１）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６または表７から選択される１０個以上のアミノ酸置換を含む、項目２５から項目３０のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３２）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表６または表７から選択される少なくとも２個、３個、４個、５個、または１０個の連続する置換を含む、項目２５から項目３１のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３３）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、２４５、および／または２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる、項目２５から項目３２のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３４）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、および／または２４５（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる、項目２５から項目３３のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３５）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、および／または２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる、項目２５から項目３３のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３６）
支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に一つ以上のアミノ酸置換を含み、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められている、改変頭部領域を備え、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、パンデミック株の対応する配列由来である、組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目３７）
前記パンデミック株が循環インフルエンザウイルスである、項目３６に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３８）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、受容体結合部位（ＲＢＳ）の１０オングストローム以内にある、項目３６に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目３９）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される、項目３６に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４０）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される２個以上のアミノ酸置換を含む、項目３８または項目３９に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４１）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される３個以上のアミノ酸置換を含む、項目３８から項目４０のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４２）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される５個以上のアミノ酸置換を含む、項目３８から項目４１のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４３）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される１０個以上のアミノ酸置換を含む、項目３８から項目４２のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４４）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、表８から選択される少なくとも２個、３個、４個、５個、または１０個の連続する置換を含む、項目３８から項目４３のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４５）
前記一つ以上のアミノ酸置換が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、および／または２１４（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で起こる、項目３８から項目４４のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４６）
支配的季節性免疫プロファイルを備えたＨＡポリペプチド由来であり、かつ表９から選択される一つ以上のアミノ酸修飾を含む、改変頭部領域を備えた、組換えインフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。
（項目４７）
支配的季節性免疫プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドまたは支配的パンデミック免疫プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが、ＣＯＢＲＡ（コンピュータ最適化広域反応性抗原：ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ  ｂｒｏａｄｌｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ）技術、モザイク技術、インフルエンザ株のインフルエンザコンセンサス配列ベースの組み合わせ、構造ドメインの欠失および／もしくは再配列、ドメインスワッピング、または複数のインフルエンザ株に含まれる中和エピトープもしくは交差反応性エピトープの組み合わせ、によって改変される、先行項目のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４８）
前記組換えＨＡポリペプチドが、インフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発する、先行項目のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目４９）
前記組換えＨＡポリペプチドが、インフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対する、よりバランスの取れた免疫原性プロファイルによって特徴付けられている、先行項目のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチド。
（項目５０）
先行項目のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチドをコードする単離された核酸。
（項目５１）
項目５０に記載の核酸を含むベクター。
（項目５２）
項目５１に記載のベクターを含む単離された細胞。
（項目５３）
前記細胞がヒトである、項目５２に記載の単離された細胞。
（項目５４）
項目１から項目４７のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチドを含むインフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
（項目５５）
インフルエンザノイラミニダーゼ（ＮＡ）タンパク質、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ｇａｇタンパク質、またはその両方をさらに含む、項目４９に記載のインフルエンザＶＬＰ。
（項目５６）
項目１から項目４７のいずれか１項に記載の組換えＨＡポリペプチドを含む医薬組成物。
（項目５７）
項目５４または項目５５に記載のインフルエンザＶＬＰを含む医薬組成物。
（項目５８）
季節性およびパンデミックのインフルエンザウイルスに対して対象を免疫化する方法であって、項目５６または項目５７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
（項目５９）
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域を選択することと、
前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域で、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域を置換し、それによって、変更された免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生成することと、を含む、前記方法。
（項目６０）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有する、項目５９の方法。
（項目６１）
支配的季節性免疫プロファイルを備えた前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａ配列）の残基６３〜２７８、１２５〜２７７、または１３５〜２６９に相当する、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９（Ａ／カリフォルニア／０７／２００９ＨＡ配列）配列）の６３〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の６３〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６４）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の６３〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６５）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１２５〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６６）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１２５〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６７）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１２５〜２７７の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６８）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１３５〜２６９の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目６９）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１３５〜２６９の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目７０）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１３５〜２６９の残基を含む、項目６１に記載の方法。
（項目７１）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドが、野生型インフルエンザウイルス由来のＨＡポリペプチドである、項目６１から項目７０のいずれか１項に記載の方法。
（項目７２）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドが、改変ＨＡポリペプチドである、項目６１から項目７０のいずれか１項に記載の方法。
（項目７３）
別の免疫原性プロファイル（支配的パンデミック）を備えた前記ＨＡポリペプチドが、配列番号５（ＤＯ１Ａの完全長配列）を含む、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有する、項目５９の方法。
（項目７５）
支配的パンデミック免疫プロファイルを備えた前記改変ＨＡポリペプチドの選択された頭部領域が、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９（Ａ／カリフォルニア／０７／２００９ＨＡ配列）配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の６３〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１２５〜２７７の残基と、
配列番号２（完全長野生型ＮＣ０９配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号３（完全長野生型ＳＣ１９１８配列）の１３５〜２６９の残基と、
配列番号４（完全長野生型ＮＪ１９７６配列）の１３５〜２６９の残基と、からなる群から選択される、項目７４に記載の方法。
（項目７６）
別の免疫原性プロファイル（支配的季節性）を備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する頭部領域が、配列番号１（ＳＭＡＲｔ＿ＤＯ２ａの完全長配列）の残基６３〜２７８、１２５〜２７７、または１３５〜２６９を含む、項目７４または項目７５に記載の方法。
（項目７７）
前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価することをさらに含む、項目５９から項目７６のいずれかに記載の方法。
（項目７８）
前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、項目５９から項目７６のいずれかに記載の方法。
（項目７９）
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域と比較して、前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域における一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位の有無を判定することと、
前記改変ＨＡポリペプチドの前記頭部領域に一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入を導入して、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する配列に基づいて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊するかまたは追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入し、それにより変更した免疫原性プロファイルを有する再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせることと、を含む方法。
（項目８０）
前記一つ以上の推定または追加のＮ結合型グリコシル化部位が、ＮｘＳ／Ｔｙ（ｘとｙはＰではない）のコンセンサス配列によって定められる、項目７９に記載の方法。
（項目８１）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が前記改変ＨＡポリペプチドに導入されて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊し、
前記再設計されたＨＡポリペプチドがよりパンデミックになるように変更される、項目７９または項目８０に記載の方法。
（項目８２）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、
前記一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入が前記改変ＨＡポリペプチドに導入されて、追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入し、
前記再設計されたＨＡポリペプチドがより季節性になるように変更される、項目７９または項目８０に記載の方法。
（項目８３）
前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価することをさらに含む、項目７９から項目８２のいずれか１項に記載の方法。
（項目８４）
前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、項目７９から項目８３のいずれか１項に記載の方法。
（項目８５）
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
一つ以上のアミノ酸置換を受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に導入することであって、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められている、前記導入することを含んでおり、
前記一つ以上のアミノ酸置換の各々が、特定の位置のアミノ酸残基を、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する位置で観察されるアミノ酸残基と置き換えることを含み、
それにより、変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせる、前記方法。
（項目８６）
別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが循環の季節性インフルエンザ株またはパンデミックインフルエンザ株由来である、項目８５に記載の方法。
（項目８７）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがよりパンデミックになるように変更される、項目８５または項目８６に記載の方法。
（項目８８）
前記改変ＨＡポリペプチドが支配的パンデミック免疫プロファイルを有し、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドが支配的季節性免疫プロファイルを有し、前記再設計されたＨＡポリペプチドがより季節性になるように変更される、項目８５または項目８６に記載の方法。
（項目８９）
前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価することをさらに含む、項目８５から項目８８のいずれか１項に記載の方法。
（項目９０）
前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、項目８５から項目８９のいずれか１項に記載の方法。
（項目９１）
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
表４、表５、表６、表７、表８、または表９に示されている修飾から選択される一つ以上の修飾を、前記改変ＨＡポリペプチドの一つ以上対応する位置に導入し、それにより変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせることを含む、前記方法。
（項目９２）
前記一つ以上の修飾が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２４４、２４５、および／または２６２（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で生じる、項目９１に記載の方法。
（項目９３）
前記一つ以上の修飾が、１３７、１４４、１４５、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１７７、２１０、２１１、２１２、２１３、および／または２１４（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置で生じる、項目９１または項目９２に記載の方法。
（項目９４）
前記一つ以上の修飾が、表４、表５、表６、表７、表８、または表９で示した修飾から選択される２個以上、３個以上、４個以上、５個以上、または１０個以上の修飾を含む、項目９１から項目９３のいずれか１項に記載の方法。
（項目９５）
前記再設計されたＨＡポリペプチドの発現および構造を評価することをさらに含む、項目９１から項目９４のいずれか１項に記載の方法。
（項目９６）
前記再設計されたＨＡポリペプチドがインフルエンザウイルスの季節性株とパンデミック株の両方に対して中和抗体を誘発するか否かを判定することをさらに含む、項目９１から項目９５のいずれか１項に記載の方法。
（項目９７）
改変ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドの免疫原性プロファイルを変更する方法であって、
（ｉ）前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域を選択することと、前記改変ＨＡポリペプチドの前記選択された頭部領域で、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域を置換することと、
（ｉｉ）別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する頭部領域と比較して、前記改変ＨＡポリペプチドの頭部領域における一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位の有無を判定することと、前記改変ＨＡポリペプチドの前記頭部領域に一つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または挿入を導入して、別の免疫原性プロファイルを備えた前記ＨＡポリペプチドの対応する配列に基づいて、前記一つ以上の推定Ｎ結合型グリコシル化部位を破壊もしくは改変するか、または追加のＮ結合型グリコシル化部位を挿入することと、
（ｉｉｉ）一つ以上のアミノ酸置換を受容体結合部位（ＲＢＳ）の１５オングストローム以内に導入することであって、前記ＲＢＳが、三次元（３−Ｄ）構造において、Ｗ１６７（ＣＡ０９ナンバリング）に相当する位置の１５オングストローム以内の全てのアミノ酸残基として定められており、前記一つ以上のアミノ酸置換の各々は、ある特定の位置のアミノ酸残基を、別の免疫原性プロファイルを備えたＨＡポリペプチドの対応する位置で観察されるアミノ酸残基と置き換えることを含む、前記導入することと、
（ｉｖ）表４、表５、表６、表７、表８、または表９に示した修飾から選択される一つ以上修飾を、前記改変ＨＡポリペプチドの一つ以上の対応する位置に導入することと、からなる群から選択される二つ以上の修飾を選択することを含み、
それにより、変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生じさせる、前記方法。
（項目９８）
変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生成することが、季節性インフルエンザ株および／またはパンデミックインフルエンザ株に対する一つ以上の抗頭部モノクローナル抗体の結合を増大させることを含む、項目５９から項目９７のいずれか１項に記載の方法。
（項目９９）
変更した免疫原性プロファイルを備えた再設計されたＨＡポリペプチドを生成することが、パンデミックインフルエンザ株に対する抗頭部モノクローナル抗体の結合範囲を増大させることを含む、項目９８に記載の方法。
（項目１００）
結合の増加を、哺乳類細胞の表面で発現した再設計されたＨＡポリペプチドに結合した前記モノクローナル抗体をフローサイトメトリーで検出することによって測定する、項目９８または項目９９に記載の方法。
（項目１０１）
モノクローナル抗体の結合のレベルを定量化することをさらに含む、項目１００に記載の方法。
（項目１０２）
項目５７から項目１０１のいずれか１項に記載の方法による再設計されたヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチド。