【手続補正書】
【提出日】令和2年8月13日(2020.8.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非イオン性サーファクタント及びポリペプチドを含む組成物中の前記非イオン性サーファクタントを定量する方法であって、定量中の前記非イオン性サーファクタントと前記ポリペプチドとの間の干渉が低減され、この方法は、
ａ）前記組成物をミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料に適用し、ここで前記組成物は移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液中で前記クロマトグラフィー材料上にロードされ、移動相Ａは水中の酸を含み、移動相Ｂはメタノール中の酸を含み、ここで前記ポリペプチドは前記クロマトグラフィー材料に特異的及び非特異的に結合するステップと、
ｂ）移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液を用いて前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料から前記特異的に結合したポリペプチドを溶出させ、ここで移動相Ｂ対移動相Ａの比率はステップａ）と比較して増大しているステップと、
ｃ）移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液を用いて前記クロマトグラフィー材料から前記非イオン性サーファクタント及び前記非特異的に結合したポリペプチドを溶出し、ここで移動相Ｂ対移動相Ａの比率はステップｃ）と比較して増大しているステップと、
ｄ）前記非イオン性サーファクタントを定量し、ここで、定量中の前記非イオン性サーファクタントと前記ポリペプチドとの間の干渉は減少しているステップと、
を包含する、方法。
【請求項２】
ステップａ）における移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、約１０：９０である；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｂ）において約４０：６０に増大される；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｃ）において約１００：０に増大される、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
移動相Ａが、水中約２％の酸を含む、且つ／又は移動相Ｂが、メタノール中約２％の酸を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記酸がギ酸又は酢酸である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記クロマトグラフィーの流速が、約１．２５ｍＬ／分である、且つ／又はステップｂ）が、前記クロマトグラフィーが開始されてから約１分後に始まり、前記クロマトグラフィーが開始されてから約３．４分後に終わる、且つ／又はステップｃ）が、前記クロマトグラフィーが開始されてから約３．５分後に始まり、前記クロマトグラフィーが開始されてから約４．６分後に終わる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記非イオン性サーファクタントがポロキサマー（Ｐ１８８）またはポリソルベートであり、任意選択的にポリソルベート２０またはポリソルベート８０であり、任意選択的に前記組成物中の前記非イオン性サーファクタントの濃度が、約０．００１％〜１．０％（ｗ／ｖ）の範囲にある、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料が、逆相の強陰イオン交換ポリマーを含み、任意選択的に前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料が、四級アミン部分を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
非イオン性サーファクタント及びポリペプチドを含む組成物中の前記非イオン性サーファクタントを定量する方法であって、ここで、前記方法は、
ａ）前記組成物をミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料に適用するステップであって、前記組成物を移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液中で前記クロマトグラフィー材料にロードし、移動相Ａが水中の水酸化アンモニウムを含み、移動相Ｂが有機溶媒中の水酸化アンモニウムを含むステップと、
ｂ）移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液を用いて前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料から前記ポリペプチドを溶出させ、ここで移動相Ｂ対移動相Ａの比率はステップａ）と比較して増大しているステップと、
ｃ）移動相Ａ及び移動相Ｂを含む溶液を用いて前記クロマトグラフィー材料から前記非イオン性サーファクタントを溶出し、ここで移動相Ｂ対移動相Ａの比率はステップｃ）と比較して増大しているステップと、
ｄ）前記非イオン性サーファクタントを定量するステップと、
を包含する、方法。
【請求項９】
移動相Ｂの前記有機溶媒が、メタノールである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ステップａ）における移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、約１０：９０である；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｂ）において約４５：５５に増大される；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｃ）において約１００：０に増大される、
請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
移動相Ａが、水中に約２％の水酸化アンモニウムを含む、且つ／又は移動相Ｂが、メタノール中に約２％の水酸化アンモニウムを含む、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記クロマトグラフィーの流速が、約１．４ｍＬ／分である；且つ／又は
ステップｂ）が、前記クロマトグラフィーが開始されてから約１分後に始まり、前記クロマトグラフィーが開始されてから約４．４分後に終わる；且つ／又は
ステップｃ）が、前記クロマトグラフィーが開始されてから約４．５分後に始まり、前記クロマトグラフィーが開始されてから約７．６分後に終わる、
請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記非イオン性サーファクタントがポリソルベートであり、任意選択的にポリソルベート２０またはポリソルベート８０であり、さらに任意選択的に前記組成物中のポリソルベートの濃度は、約０．００１％〜１．０％（ｗ／ｖ）の範囲にある、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
移動相Ａが、水中若しくは４３％メタノール中に約２％の水酸化アンモニウムを含む；且つ／又は
移動相Ｂの前記有機溶媒が、アセトニトリルであり、任意選択的に移動相Ｂが、アセトニトリル中に約２％の水酸化アンモニウムを含む、
請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
ステップａ）における移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、約１０：９０である；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｂ）において約４０：６０に増大される；且つ／又は
移動相Ｂ対移動相Ａの比率が、ステップｃ）において１００：０に増大される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記非イオン性サーファクタントがポロキサマーであり、任意選択的に前記ポロキサマーがポロキサマーＰ１８８である；且つさらに任意選択的に、前記組成物中のポロキサマーの濃度が、約０．００１％〜１．０％（ｗ／ｖ）の範囲にある、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記組成物がさらにＮ−アセチルトリプトファン及び／またはメチオニンを含み、
任意選択的に、前記組成物中のＮ−アセチルトリプトファンの濃度が約０．１ｍＭ〜約１０ｍＭの範囲である、且つ／又は前記組成物中のメチオニンの濃度が、約０．１ｍＭ〜約１００ｍＭの範囲である、
請求項８〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記組成物中のポリペプチド濃度が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬである、且つ／又は製剤が、約４．５〜約７．５のｐＨを有する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記組成物が、安定剤、緩衝液、及び等張化剤からなる群より選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、且つ／又は前記組成物が、対象への投与に適切な薬学的製剤である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ポリペプチドが、融合タンパク質、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、多重特異性抗体、糖鎖操作抗体、抗体断片、抗体薬物コンジュゲート、ＴＨＩＯＭＡＢ（商標）、ＴＨＩＯＭＡＢ（商標）薬物コンジュゲートである、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、逆相の強陽イオン交換ポリマーを含む、且つ／又は前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、スルホン酸部分を含む、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料又は前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、固体支持体を含み、任意選択的に前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料又は前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、カラムに入れられる、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ミックスモード陰イオン交換クロマトグラフィー材料又は前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）材料である、且つ／又は前記ミックスモード陽イオン交換クロマトグラフィー材料が、Ｏａｓｉｓ（登録商標）ＭＣＸクロマトグラフィー材料である、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
非イオン性サーファクタントが、蒸発光散乱法（ＥＬＳＤ）によって、または荷電エアロゾル検出器（ＣＡＤ）を使用することによって定量される、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。