【手続補正書】
【提出日】令和2年11月9日(2020.11.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
間葉系細胞および上皮細胞を含む細胞構築物を含む複数のチャンネルを含むハイドロゲルを含む組成物。
【請求項２】
(a) ハイドロゲル、細胞構築物、および/もしくはチャンネルが、少なくとも1種の追加の細胞型をさらに含み、任意で、ハイドロゲル、細胞構築物、および/もしくはチャンネルの中の少なくとも1種の追加の細胞型が、皮膚線維芽細胞、内皮細胞、前脂肪細胞、免疫細胞、メラノサイト、もしくは幹細胞である、
(b) ハイドロゲル、細胞構築物、および/もしくはチャンネルが、少なくとも1種の毛包成熟因子を含み、任意で、少なくとも1種の毛包成熟因子が、線維芽細胞増殖因子（FGF）、Wntアゴニスト、もしくはそれらの組み合わせであり、FGFが、任意で、FGF5、FGF7、FGF9、FG10、もしくはそれらの組み合わせであり、かつWntアゴニストが、任意で、CHIR99021、LiCl、SB-216763、もしくはCAS 853220-52-7である、
(c) 細胞構築物がメラノサイトをさらに含む、
(d) 細胞構築物が、実質的に直線状である、もしくは曲線状である、
(e) 細胞構築物の表面が不規則である、
(f) 間葉系細胞が細胞構築物の一方の末端に区分されており、上皮細胞が細胞構築物の他方の末端に区分されている、
(g) 細胞構築物が長さ約50〜約10,000μmおよび直径約50〜約2000μmである、もしくは長さ約4〜約10mmおよび直径約50〜約750μmである、
(h) 間葉系細胞と上皮細胞との比が10:1〜1:10である、もしくは1:2〜1:1である、
(i) 間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、
(j) 細胞構築物が嚢胞をさらに含み、任意で、嚢胞が真皮乳頭細胞を含む、
(k) 上皮細胞が皮膚上皮細胞であり、任意で、皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、
(l) 間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、
(m) ハイドロゲルが、コラーゲン、ヒアルロン酸もしくはその塩、フィブリン、アルギン酸、アガロース、キトサン、もしくはそれらの組み合わせを含み、任意で、ハイドロゲルがアルギン酸を含む、
(n) ハイドロゲルが架橋されている、または
(o) (a)〜(n)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて有する、
請求項1記載の組成物。
【請求項３】
請求項1または2記載の組成物と、(a)キットの使用説明書または(b)キットの使用説明書および細胞構築物を植え込むための器具とを含むキット。
【請求項４】
間葉系細胞および上皮細胞のハイドロゲル内への沈着を含む、請求項1または2記載の組成物を作製する方法。
【請求項５】
ハイドロゲル内への針の挿入ならびに針の先端からの間葉系細胞および上皮細胞の押し出しと同時の針の引き抜きによって、間葉系細胞および上皮細胞の混合物をハイドロゲル内に沈着させる、請求項4記載の方法。
【請求項６】
(a) 間葉系細胞が針の先端に区分され、任意で、間葉系細胞を針の先端から沈着させ、次いで上皮細胞を針から沈着させて、チャンネルの下端に間葉系細胞を有しチャンネルの上端に上皮細胞を有する区分された細胞構築物を提供し、かつさらに任意で、細胞の沈着の前に、最初に上皮細胞が針に充填され、次いで間葉系細胞が針の先端に充填される、または
(b) 針が、少なくとも2種の異なる細胞型のための少なくとも2種の異なるインプットの共通軸の周囲に同心流を提供する2種以上の別々の材料経路を有する同軸デバイスであり、コアから間葉系細胞が押し出され、同軸針のマントル層から上皮細胞が押し出され、任意で、針のコアから間葉系細胞を沈着させ、次いで同軸針のマントル層から上皮細胞を沈着させて、チャンネルの下端に間葉系細胞を有しチャンネルの上端に上皮細胞を有する区分された細胞構築物を提供する、
請求項5記載の方法。
【請求項７】
(a) 間葉系細胞および上皮細胞を、押し出し化合物をさらに含む1種もしくは複数種の組成物の一部として沈着させ、任意で、押し出し化合物が、アルギン酸、ハイドロゲル、コラーゲン、Novogel（登録商標）、Matrigel（登録商標）、細胞外マトリックス成分、もしくは水溶性架橋性生分解性ポリマーを含む、
(b) 細胞構築物を成熟させる工程をさらに含み、任意で、細胞構築物を1〜42日間もしくは7〜21日間成熟させる、
(c) 細胞構築物をハイドロゲルから取り出す工程をさらに含む、
(d) 少なくとも1本の針と、針と流体連通した1もしくは複数のリザーバーであって、間葉系細胞、上皮細胞、もしくはそれらの混合物を含む、1もしくは複数のリザーバーと、少なくとも1本の針の内容物を押し出すための手段と、ハイドロゲルの表面に対して針を位置付ける作動手段とを含む自動デバイスによって、沈着が制御され、任意で、該自動デバイスが複数の構築物をハイドロゲルに沈着させ、かつ／もしくは該自動デバイスが、少なくとも1本の針の内容物を押し出すための手段と通信接続されたコンピュータプロセッサを含む、
(e) 間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、
(f) 上皮細胞をスフェロイドとして沈着させない、
(g) 針がベベルを有し、任意で、針が約10〜約45度もしくは約30度のベベルを有する、
(h) 針の内径が約150μm〜約1000μmであり、任意で針の外径が約250μm〜約1250μmである、
(i) ハイドロゲルが架橋されている、または
(j) (a)〜(i)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて含む、
請求項4〜6のいずれか一項記載の方法。
【請求項８】
間葉系細胞および上皮細胞を含み、円柱形である、請求項１記載の組成物の細胞構築物。
【請求項９】
(a) メラノサイトをさらに含む、
(b) 実質的に直線状もしくは曲線状である、
(c) 細胞構築物の表面が不規則である、
(d) 間葉系細胞が細胞構築物の一方の末端に区分されており、上皮細胞が細胞構築物の他方の末端に区分されている、
(e) 長さ約50μm〜約10,000μmおよび直径約50μm〜約2000μmである、もしくは長さ約4mm〜約10mmおよび直径約50μm〜約750μmである、
(f) 間葉系細胞と上皮細胞との比が10:1〜1:10である、もしくは1:2〜1:1である、
(g) 間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、
(h) 嚢胞をさらに含み、任意で、嚢胞が真皮乳頭細胞を含む、
(i) 上皮細胞が皮膚上皮細胞であり、任意で、皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、
(j) 間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、または
(k) (a)〜(j)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて有する、
請求項8記載の細胞構築物。
【請求項１０】
請求項8または9記載の細胞構築物の少なくとも1つを、個体の皮膚内に植え込む工程を含む、個体における毛髪回復の美容的方法であって、任意で、
(a) 皮膚が頭皮である、
(b) 植え込みが手動もしくは自動である、
(c) 細胞構築物の少なくとも1つが、皮膚内への針の挿入によって植え込まれ、任意で、針が、少なくとも2種の異なる細胞型のための少なくとも2種の異なるインプットの共通軸の周囲に同心流を提供する2種以上の別々の材料経路を有する同軸デバイスであり、コアから間葉系細胞が押し出され、同軸針のマントル層から上皮細胞が押し出される、または
(d) (a)〜(c)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて含む、
方法。
【請求項１１】
複数のヒト細胞を含む第1のバイオインクおよび第1のアウトレットを含む、第1のディスペンサ；
複数のヒト細胞を含む第2のバイオインクおよび第2のアウトレットを含む、第2のディスペンサ；
第1のモジュール、第2のモジュール、および共通のアウトレットを含む、共通のディスペンスモジュール
を含み、
第1のモジュールが第1のディスペンサと流体連通しており、第1のモジュールが第1のインレット、第1のボディ、および第1のディスペンスチップを含み；
第2のモジュールが第2のディスペンサと流体連通しており、第2のモジュールが第2のインレット、第2のボディ、および第2のディスペンスチップを含み；かつ
共通のアウトレットが第1のディスペンスチップおよび第2のディスペンスチップを含み、第1のディスペンスチップが第2のディスペンスチップと実質的に平行しており、第1のディスペンスチップが第1のバイオインクの少なくとも一部分を沈着させるためのものであり、第2のディスペンスチップが第2のバイオインクの少なくとも一部分を沈着させるためのものである、
バイオプリンターシステムと共に使用するための分配システム。
【請求項１２】
(a) 第1のモジュールおよび第2のモジュールが対称的な配置を形成する、
(b) 受容面をさらに含み、任意で受容面が半固体材料であり、任意で半固体材料が、(i)コラーゲン、ヒアルロン酸、ヒアルロナン、フィブリン、アルギン酸、アガロース、キトサン、およびそれらの組み合わせに由来するハイドロゲルを含むか、もしくは(ii) 任意でヒト組織構築物である細胞構築物である、
(c) 第2のバイオインクが、第1のバイオインクと異なるヒト細胞の組成を有し、任意で第1のバイオインクが、第2のバイオインクに存在しない少なくとも1種の細胞型を含み、任意で第1のバイオインクが、任意で真皮乳頭細胞である間葉系細胞を含む、
(d) 第2のバイオインクが上皮細胞を含み、任意で上皮細胞が皮膚上皮細胞であり、任意で皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、
(e) 第1のバイオインクがゲルをさらに含み、任意でゲルがハイドロゲルである、
(f) 第1のモジュールおよび第2のモジュールが、それぞれ第1のバイオインクおよび第2のバイオインクを吸引することができる、
(g) 第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが、それぞれ第1のバイオインクおよび第2のバイオインクを吸引することができる、
(h) 第1のディスペンサが第2のディスペンサと実質的に平行している、
(i) 第1のディスペンサが第1のモジュールに取り付けられており、第2のディスペンサが第2のモジュールに取り付けられている、
(j) 第1のディスペンサが第1のモジュールから分離可能な単位であり、第2のディスペンサが第2のモジュールから分離可能な単位である、
(k) 第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが押し出しによるディスペンサである、
(l) 第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが空気圧駆動式ディスペンサである、
(m) 共通のアウトレットが約0.4mm〜約2.0mm、任意で約1.0mmの直径を含む、
(n) 細胞構築物がヒト組織構築物である、または
(o) (a)〜(n)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて含む、
請求項11記載のシステム。
【請求項１３】
共通のアウトレットを半固体材料の中へ第1の所定の距離だけ降下させる工程であって、共通のアウトレットが第1のディスペンスチップおよび第2のディスペンスチップを含み、共通のアウトレットが半固体材料の中へ降下する際、共通のアウトレットが、半固体材料の中へ降下した共通のアウトレットの領域と等しい半固体材料の領域に取って代わる、工程；
第1のディスペンスチップを使用して、所定の量の第1のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第1のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第1の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程；ならびに
第2のディスペンスチップを使用して、所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第2のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第2の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程
を含み、分配された所定の量の第1のバイオインクおよび分配された所定の量の第2のバイオインクが半固体材料内で細胞構築物を形成する、
細胞構築物を作製する方法であって、任意で、
全工程が約75秒〜約120秒で実施され、かつ／または第1の上昇工程において、第1の所定の距離が半固体材料の最大の深さとおよそ等しい、
方法。
【請求項１４】
(a) 所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる前に、所定の量の第1のバイオインクを第1のディスペンスチップを使用して吸引する工程であって、任意で、吸引される第1のバイオインクの所定の量が約1.0μL〜約1.5μLである、工程、
(b) 所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させた後に、所定の量の第2のバイオインクを第2のディスペンスチップを使用して吸引する工程であって、任意で、吸引される第2のバイオインクの所定の量が約2.0μL〜約3.5μLである、工程、
(c) 所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる前に、所定の時間、共通のアウトレットのいかなる作動も一時停止する工程であって、任意で、一時停止の所定の時間が約5秒〜約15秒である、工程、
(d) 所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させた後に、所定の時間、共通のアウトレットのいかなる作動も一時停止する工程であって、任意で、一時停止の所定の時間が約5秒〜約15秒である、工程、
(e) 所定の量の第1のバイオインクの分配の前に、共通のアウトレットを半固体材料内で所定の長さだけ上昇させる工程、
(f) 所定の量の第2のバイオインクの分配の前に、共通のアウトレットを所定の長さだけ水平方向に移動させる工程であって、任意で、水平方向の所定の長さが約0.1mm〜約0.5mmである、工程、
(g) 所定の量の第2のバイオインクの分配の後に、共通のアウトレットを所定の長さだけ水平方向に移動させる工程；および共通のアウトレットを半固体材料の外へ垂直方向に移動させる工程、
(h) 請求項13の工程を繰り返す工程；および所定の量の第1のバイオインクの2回目の分配の前に、第2のバイオインクを第2のディスペンスチップから吸引して第2のモジュールへ戻す工程、または
(i) (a)〜(h)いずれかの１もしくは複数の工程の組み合わせ
をさらに含む、請求項13記載の方法。
【請求項１５】
(a) 半固体材料がハイドロゲル、アルギン酸、もしくは細胞構築物である、
(b) 第1のバイオインクが、第2のバイオインクと異なるヒト細胞の組成を有し、任意で、第1のバイオインクが第2のバイオインクに存在しない少なくとも1種の細胞型を含む、
(c) 第1のバイオインクが、任意で真皮乳頭細胞である、間葉系細胞を含む、
(d) 第2のバイオインクが、任意で皮膚上皮細胞である、上皮細胞を含み、任意で皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、
(e) 第1のディスペンスチップが第2のディスペンスチップと実質的に平行している、
(f) 第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが押し出しによるディスペンサである、
(g) 第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが空気圧駆動式ディスペンサである、
(h) 第1のバイオインクの所定の量が約0.5μL〜約1.0μLである、
(i) 第2のバイオインクの所定の量が約2.0μL〜約3.0μLである、
(j) 分配された第1のバイオインクが約0.5mm〜約1.0mmの長さを有する実質的な直線を形成する、
(k) 分配された第2のバイオインクが約2.5mm〜約3.0mmの長さを有する実質的な直線を形成する、
(l) 第1の上昇工程において、所定の上昇の距離が約1.0mm〜約2.0mmである、
(m) 共通のアウトレットによる沈着の際に1種もしくは複数種のバイオインクを沈着させることによって、共通のアウトレットが上昇する間に勾配を作出する工程をさらに含み、任意で、勾配が、1種もしくは複数種のバイオインクの中の1種もしくは複数種の細胞型の異なる細胞濃度、1種もしくは複数種のバイオインクの中の異なる細胞型、もしくは1種もしくは複数種のバイオインクの中の異なる細胞型かつ1種もしくは複数種のバイオインクの中の1種もしくは複数種の細胞型の異なる細胞濃度に基づく、または
(n) (a)〜(m)いずれかの１もしくは複数の特徴を組み合わせて含む、
請求項13または14記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
共通のアウトレットを半固体材料の中へ第1の所定の距離だけ降下させる工程であって、共通のアウトレットが第1のディスペンスチップおよび第2のディスペンスチップを含み、第1のディスペンスチップが第2のディスペンスチップと実質的に平行しており、共通のアウトレットが半固体材料の中へ降下する際、共通のアウトレットが、半固体材料の中へ降下した共通のアウトレットの領域と等しい半固体材料の領域に取って代わる、工程；第1のディスペンスチップを使用して、所定の量の第1のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第1のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第1の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程；ならびに第2のディスペンスチップを使用して、所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第2のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第2の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程：を含む、細胞構築物を作製する方法であって、分配された所定の量の第1のバイオインクおよび分配された所定の量の第2のバイオインクが半固体材料内で細胞構築物を形成する方法が、さらに開示される。
[本発明1001]
間葉系細胞および上皮細胞を含む細胞構築物を含む複数のチャンネルを含むハイドロゲルを含む組成物。
[本発明1002]
ハイドロゲル、細胞構築物、および/またはチャンネルが、少なくとも1種の追加の細胞型をさらに含む、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
ハイドロゲル、細胞構築物、および/またはチャンネルの中の少なくとも1種の追加の細胞型が、皮膚線維芽細胞、内皮細胞、前脂肪細胞、免疫細胞、メラノサイト、または幹細胞である、本発明1001または1002の組成物。
[本発明1004]
ハイドロゲル、細胞構築物、および/またはチャンネルが、少なくとも1種の毛包成熟因子を含む、本発明1001〜1003のいずれかの組成物。
[本発明1005]
少なくとも1種の毛包成熟因子が、線維芽細胞増殖因子（FGF）、Wntアゴニスト、またはそれらの組み合わせである、本発明1004の組成物。
[本発明1006]
FGFが、FGF5、FGF7、FGF9、FG10、またはそれらの組み合わせである、本発明1005の組成物。
[本発明1007]
Wntアゴニストが、CHIR99021、LiCl、SB-216763、またはCAS 853220-52-7である、本発明1005の組成物。
[本発明1008]
細胞構築物がメラノサイトをさらに含む、本発明1001〜1007のいずれかの組成物。
[本発明1009]
細胞構築物が実質的に直線状である、本発明1001〜1008のいずれかの組成物。
[本発明1010]
細胞構築物が曲線状である、本発明1001〜1008のいずれかの組成物。
[本発明1011]
細胞構築物の表面が不規則である、本発明1001〜1010のいずれかの組成物。
[本発明1012]
間葉系細胞が細胞構築物の一方の末端に区分されており、上皮細胞が細胞構築物の他方の末端に区分されている、本発明1001〜1011のいずれかの組成物。
[本発明1013]
細胞構築物が長さ50〜10,000μmおよび直径50〜2000μmである、本発明1001〜1012のいずれかの組成物。
[本発明1014]
細胞構築物が長さ4〜10mmおよび直径50〜750μmである、本発明1001〜1012のいずれかの組成物。
[本発明1015]
間葉系細胞と上皮細胞との比が10:1〜1:10である、本発明1001〜1014のいずれかの組成物。
[本発明1016]
間葉系細胞と上皮細胞との比が1:2〜1:1である、本発明1001〜1014のいずれかの組成物。
[本発明1017]
間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、本発明1001〜1016のいずれかの組成物。
[本発明1018]
細胞構築物が嚢胞をさらに含む、本発明1001〜1017のいずれかの組成物。
[本発明1019]
嚢胞が真皮乳頭細胞を含む、本発明1018の組成物。
[本発明1020]
上皮細胞が皮膚上皮細胞である、本発明1001〜1019のいずれかの組成物。
[本発明1021]
皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、本発明1020の組成物。
[本発明1022]
間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、本発明1001〜1021のいずれかの組成物。
[本発明1023]
ハイドロゲルが、コラーゲン、ヒアルロン酸もしくはその塩、フィブリン、アルギン酸、アガロース、キトサン、またはそれらの組み合わせを含む、本発明1001〜1022のいずれかの組成物。
[本発明1024]
ハイドロゲルがアルギン酸を含む、本発明1023の組成物。
[本発明1025]
ハイドロゲルが架橋されている、本発明1001〜1024のいずれかの組成物。
[本発明1026]
本発明1001〜1025のいずれかの組成物とキットの使用説明書とを含むキット。
[本発明1027]
細胞構築物を植え込むための器具をさらに含む、本発明1026のキット。
[本発明1028]
間葉系細胞および上皮細胞のハイドロゲル内への沈着を含む、本発明1001〜1025のいずれかの組成物を作製する方法。
[本発明1029]
ハイドロゲル内への針の挿入ならびに針の先端からの間葉系細胞および上皮細胞の押し出しと同時の針の引き抜きによって、間葉系細胞および上皮細胞の混合物をハイドロゲル内に沈着させる、本発明1028の方法。
[本発明1030]
ハイドロゲル内への1本または複数本の針の挿入ならびに針の先端からの間葉系細胞および上皮細胞の押し出しと同時の針の引き抜きによって、間葉系細胞および上皮細胞をハイドロゲル内に沈着させる、本発明1029の方法。
[本発明1031]
間葉系細胞が針の先端に区分される、本発明1030の方法。
[本発明1032]
間葉系細胞を針の先端から沈着させ、次いで上皮細胞を針から沈着させて、チャンネルの下端に間葉系細胞を有しチャンネルの上端に上皮細胞を有する区分された細胞構築物を提供する、本発明1031の方法。
[本発明1033]
細胞の沈着の前に、最初に上皮細胞が針に充填され、次いで間葉系細胞が針の先端に充填される、本発明1032の方法。
[本発明1034]
針が、少なくとも2種の異なる細胞型のための少なくとも2種の異なるインプットの共通軸の周囲に同心流を提供する2種以上の別々の材料経路を有する同軸デバイスであり、同軸針のコアから間葉系細胞が押し出され、マントル層から上皮細胞が押し出される、本発明1030の方法。
[本発明1035]
針のコアから間葉系細胞を沈着させ、次いで同軸針のマントル層から上皮細胞を沈着させて、チャンネルの下端に間葉系細胞を有しチャンネルの上端に上皮細胞を有する区分された細胞構築物を提供する、本発明1034の方法。
[本発明1036]
間葉系細胞および上皮細胞を、押し出し化合物をさらに含む1種または複数種の組成物の一部として沈着させる、本発明1028〜1035のいずれかの方法。
[本発明1037]
押し出し化合物が、アルギン酸、ハイドロゲル、コラーゲン、Novogel（登録商標）、Matrigel（登録商標）、細胞外マトリックス成分、または水溶性架橋性生分解性ポリマーを含む、本発明1036の方法。
[本発明1038]
細胞構築物を成熟させる工程をさらに含む、本発明1028〜1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
細胞構築物を1〜42日間成熟させる、本発明1038の方法。
[本発明1040]
細胞構築物を7〜21日間成熟させる、本発明1038の方法。
[本発明1041]
細胞構築物をハイドロゲルから取り出す工程をさらに含む、本発明1028〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
少なくとも1本の針と、
針と流体連通した1または複数のリザーバーであって、間葉系細胞、上皮細胞、またはそれらの混合物を含む、1または複数のリザーバーと、
少なくとも1本の針の内容物を押し出すための手段と、
ハイドロゲルの表面に対して針を位置付ける作動手段と
を含む自動デバイスによって、沈着が制御される、本発明1028〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
自動デバイスが複数の構築物をハイドロゲルに沈着させる、本発明1042の方法。
[本発明1044]
自動デバイスが、少なくとも1本の針の内容物を押し出すための手段と通信接続されたコンピュータプロセッサを含む、本発明1042または1043の方法。
[本発明1045]
間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、本発明1028〜1044のいずれかの方法。
[本発明1046]
上皮細胞をスフェロイドとして沈着させない、本発明1028〜1045のいずれかの方法。
[本発明1047]
針がベベルを有する、本発明1028〜1046のいずれかの方法。
[本発明1048]
針が10〜45度のベベルを有する、本発明1047の方法。
[本発明1049]
針が約30度のベベルを有する、本発明1047の方法。
[本発明1050]
針の内径が150〜1000μmである、本発明1028〜1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
針の外径が約250μm〜約1250μmである、本発明1050の方法。
[本発明1052]
ハイドロゲルが架橋されている、本発明1028〜1051のいずれかの方法。
[本発明1053]
間葉系細胞および上皮細胞を含む円柱形の細胞構築物。
[本発明1054]
メラノサイトをさらに含む、本発明1053の細胞構築物。
[本発明1055]
実質的に直線状である、本発明1053または1054の細胞構築物。
[本発明1056]
曲線状である、本発明1054または1054の細胞構築物。
[本発明1057]
細胞構築物の表面が不規則である、本発明1053〜1054のいずれかの細胞構築物。
[本発明1058]
間葉系細胞が細胞構築物の一方の末端に区分されており、上皮細胞が細胞構築物の他方の末端に区分されている、本発明1053〜1057のいずれかの細胞構築物。
[本発明1059]
長さ50〜10,000μmおよび直径50〜2000μmである、本発明1053〜1058のいずれかの細胞構築物。
[本発明1060]
長さ4〜10mmおよび直径50〜750μmである、本発明1053〜1059のいずれかの細胞構築物。
[本発明1061]
間葉系細胞と上皮細胞との比が10:1〜1:10である、本発明1053〜1060のいずれかの細胞構築物。
[本発明1062]
間葉系細胞と上皮細胞との比が1:2〜1:1である、本発明1053〜1061のいずれかの細胞構築物。
[本発明1063]
間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、本発明1053〜1062のいずれかの細胞構築物。
[本発明1064]
嚢胞をさらに含む、本発明1053〜1063のいずれかの細胞構築物。
[本発明1065]
嚢胞が真皮乳頭細胞を含む、本発明1064の細胞構築物。
[本発明1066]
上皮細胞が皮膚上皮細胞である、本発明1053〜1065のいずれかの細胞構築物。
[本発明1067]
皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、本発明1066の細胞構築物。
[本発明1068]
間葉系細胞および上皮細胞がヒト細胞である、本発明1053〜1067のいずれかの方法。
[本発明1069]
本発明1053〜1068のいずれかの細胞構築物の少なくとも1つを、個体の皮膚内に植え込む工程を含む、個体における毛髪回復の方法。
[本発明1070]
皮膚が頭皮である、本発明1069の方法。
[本発明1071]
植え込みが手動である、本発明1069または1070の方法。
[本発明1072]
植え込みが自動である、本発明1069または1070の方法。
[本発明1073]
間葉系細胞および上皮細胞を含む組成物を個体の皮膚内に植え込む工程を含む、個体における毛髪回復の方法。
[本発明1074]
組成物が、皮膚内への針の挿入によって植え込まれる、本発明1073の方法。
[本発明1075]
針が、少なくとも2種の異なる細胞型のための少なくとも2種の異なるインプットの共通軸の周囲に同心流を提供する2種以上の別々の材料経路を有する同軸デバイスであり、同軸針のコアから間葉系細胞が押し出され、マントル層から上皮細胞が押し出される、本発明1073の方法。
[本発明1076]
皮膚が頭皮である、本発明1073〜1075のいずれかの方法。
[本発明1077]
植え込みが手動である、本発明1073〜1076のいずれかの方法。
[本発明1078]
植え込みが自動である、本発明1073〜1076のいずれかの方法。
[本発明1079]
複数のヒト細胞を含む第1のバイオインクおよび第1のアウトレットを含む、第1のディスペンサ；
複数のヒト細胞を含む第2のバイオインクおよび第2のアウトレットを含む、第2のディスペンサ；
第1のモジュール、第2のモジュール、および共通のアウトレットを含む、共通のディスペンスモジュール
を含み、
第1のモジュールが第1のディスペンサと流体連通しており、第1のモジュールが第1のインレット、第1のボディ、および第1のディスペンスチップを含み；
第2のモジュールが第2のディスペンサと流体連通しており、第2のモジュールが第2のインレット、第2のボディ、および第2のディスペンスチップを含み；かつ
共通のアウトレットが第1のディスペンスチップおよび第2のディスペンスチップを含み、第1のディスペンスチップが第2のディスペンスチップと実質的に平行しており、第1のディスペンスチップが第1のバイオインクの少なくとも一部分を沈着させるためのものであり、第2のディスペンスチップが第2のバイオインクの少なくとも一部分を沈着させるためのものである、
バイオプリンターシステムと共に使用するための分配システム。
[本発明1080]
第1のモジュールおよび第2のモジュールが対称的な配置を形成する、本発明1079のシステム。
[本発明1081]
受容面をさらに含む、本発明1079〜1080のいずれかのシステム。
[本発明1082]
受容面が半固体材料を含む、本発明1081のシステム。
[本発明1083]
半固体材料が、コラーゲン、ヒアルロン酸、ヒアルロナン、フィブリン、アルギン酸、アガロース、キトサン、およびそれらの組み合わせに由来するハイドロゲルを含む、本発明1082のシステム。
[本発明1084]
半固体材料が細胞構築物である、本発明1082のシステム。
[本発明1085]
第2のバイオインクが、第1のバイオインクと異なるヒト細胞の組成を有する、本発明1079〜1084のいずれかのシステム。
[本発明1086]
第1のバイオインクが、第2のバイオインクに存在しない少なくとも1種の細胞型を含む、本発明1085のシステム。
[本発明1087]
第1のバイオインクが間葉系細胞を含む、本発明1086のシステム。
[本発明1088]
間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、本発明1087のシステム。
[本発明1089]
第2のバイオインクが上皮細胞を含む、本発明1079〜1088のいずれかのシステム。
[本発明1090]
上皮細胞が皮膚上皮細胞である、本発明1089のシステム。
[本発明1091]
皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、本発明1090のシステム。
[本発明1092]
第1のバイオインクがゲルをさらに含む、本発明1079〜1091のいずれかのシステム。
[本発明1093]
ゲルがハイドロゲルである、本発明1092のシステム。
[本発明1094]
第1のモジュールおよび第2のモジュールが、それぞれ第1のバイオインクおよび第2のバイオインクを吸引することができる、本発明1079〜1093のいずれかのシステム。
[本発明1095]
第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが、それぞれ第1のバイオインクおよび第2のバイオインクを吸引することができる、本発明1079〜1094のいずれかのシステム。
[本発明1096]
第1のディスペンサが第2のディスペンサと実質的に平行している、本発明1079〜1095のいずれかのシステム。
[本発明1097]
第1のディスペンサが第1のモジュールに取り付けられており、第2のディスペンサが第2のモジュールに取り付けられている、本発明1079〜1096のいずれかのシステム。
[本発明1098]
第1のディスペンサが第1のモジュールから分離可能な単位であり、第2のディスペンサが第2のモジュールから分離可能な単位である、本発明1079〜1097のいずれかのシステム。
[本発明1099]
第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが押し出しによるディスペンサである、本発明1079〜1098のいずれかのシステム。
[本発明1100]
第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが空気圧駆動式ディスペンサである、本発明1079〜1099のいずれかのシステム。
[本発明1101]
共通のアウトレットを半固体材料の中へ第1の所定の距離だけ降下させる工程であって、共通のアウトレットが第1のディスペンスチップおよび第2のディスペンスチップを含み、共通のアウトレットが半固体材料の中へ降下する際、共通のアウトレットが、半固体材料の中へ降下した共通のアウトレットの領域と等しい半固体材料の領域に取って代わる、工程；
第1のディスペンスチップを使用して、所定の量の第1のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第1のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第1の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程；ならびに
第2のディスペンスチップを使用して、所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる工程であって、第2のバイオインクが複数のヒト細胞を含み、共通のアウトレットが第2の所定の距離だけ上昇する間に沈着が起こる、工程
を含み、分配された所定の量の第1のバイオインクおよび分配された所定の量の第2のバイオインクが半固体材料内で細胞構築物を形成する、
細胞構築物を作製する方法。
[本発明1102]
所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる前に、所定の量の第1のバイオインクを第1のディスペンスチップを使用して吸引する工程をさらに含む、本発明1101の方法。
[本発明1103]
所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させた後に、所定の量の第2のバイオインクを第2のディスペンスチップを使用して吸引する工程をさらに含む、本発明1101〜1102のいずれかの方法。
[本発明1104]
所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させる前に、所定の時間、共通のアウトレットのいかなる作動も一時停止する工程をさらに含む、本発明1101〜1103のいずれかの方法。
[本発明1105]
所定の量の第2のバイオインクを半固体材料内に沈着させた後に、所定の時間、共通のアウトレットのいかなる作動も一時停止する工程をさらに含む、本発明1101〜1104のいずれかの方法。
[本発明1106]
所定の量の第1のバイオインクの分配の前に、共通のアウトレットを半固体材料内で所定の長さだけ上昇させる工程をさらに含む、本発明1101〜1105のいずれかの方法。
[本発明1107]
所定の量の第2のバイオインクの分配の前に、共通のアウトレットを所定の長さだけ水平方向に移動させる工程をさらに含む、本発明1101〜1106のいずれかの方法。
[本発明1108]
所定の量の第2のバイオインクの分配の後に、共通のアウトレットを所定の長さだけ水平方向に移動させる工程；および
共通のアウトレットを半固体材料の外へ垂直方向に移動させる工程
をさらに含む、本発明1101〜1107のいずれかの方法。
[本発明1109]
本発明1101の工程を繰り返す工程；および
所定の量の第1のバイオインクの2回目の分配の前に、第2のバイオインクを第2のディスペンスチップから吸引して第2のモジュールへ戻す工程
をさらに含む、本発明1101〜1108のいずれかの方法。
[本発明1110]
半固体材料がハイドロゲルである、本発明1101〜1100のいずれかの方法。
[本発明1111]
半固体材料がアルギン酸である、本発明1101〜1109のいずれかの方法。
[本発明1112]
半固体材料が細胞構築物である、本発明1101〜1109のいずれかの方法。
[本発明1113]
第1のバイオインクが、第2のバイオインクと異なるヒト細胞の組成を有する、本発明1101〜1112のいずれかの方法。
[本発明1114]
第1のバイオインクが、第2のバイオインクに存在しない少なくとも1種の細胞型を含む、本発明1113の方法。
[本発明1115]
第1のバイオインクが間葉系細胞を含む、本発明1101〜1114のいずれかの方法。
[本発明1116]
間葉系細胞が真皮乳頭細胞である、本発明1115の方法。
[本発明1117]
第2のバイオインクが上皮細胞を含む、本発明1101〜1116のいずれかの方法。
[本発明1118]
上皮細胞が皮膚上皮細胞である、本発明1117の方法。
[本発明1119]
皮膚上皮細胞がケラチノサイトである、本発明1118の方法。
[本発明1120]
第1のディスペンスチップが第2のディスペンスチップと実質的に平行している、本発明1101〜1119のいずれかの方法。
[本発明1121]
第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが押し出しによるディスペンサである、本発明1101〜1120のいずれかの方法。
[本発明1122]
第1のディスペンサおよび第2のディスペンサが空気圧駆動式ディスペンサである、本発明1101〜1120のいずれかの方法。
[本発明1123]
第1のバイオインクの所定の量がおよそ0.5〜1.0マイクロリットル（μL）である、本発明1101〜1122のいずれかの方法。
[本発明1124]
第2のバイオインクの所定の量がおよそ2.0〜3.0マイクロリットル（μL）である、本発明1101〜1123のいずれかの方法。
[本発明1125]
分配された第1のバイオインクがおよそ0.5〜1.0ミリメートルの長さを有する実質的な直線を形成する、本発明1101〜1124のいずれかの方法。
[本発明1126]
分配された第2のバイオインクがおよそ2.5〜3.0ミリメートルの長さを有する実質的な直線を形成する、本発明1101〜1125のいずれかの方法。
[本発明1127]
一時停止の所定の時間がおよそ5〜15秒である、本発明1104〜1105のいずれかの方法。
[本発明1128]
第1の上昇工程において、所定の上昇の距離がおよそ1.0〜2.0ミリメートル（mm）である、本発明1101〜1127のいずれかの方法。
[本発明1129]
吸引される第1のバイオインクの所定の量がおよそ1.0〜1.5マイクロリットル（μL）である、本発明1102の方法。
[本発明1130]
吸引される第2のバイオインクの所定の量がおよそ2.0〜3.5マイクロリットル（μL）である、本発明1103の方法。
[本発明1131]
吸引される第2のバイオインクの所定の量がおよそ1.0〜1.5マイクロリットル（μL）である、本発明1109の方法。
[本発明1132]
本発明1101の全工程がおよそ75〜120秒で実施される、本発明1101の方法。
[本発明1133]
水平方向の所定の長さがおよそ0.1〜0.5ミリメートル（mm）である、本発明1107の方法。
[本発明1134]
第1の上昇工程において、第1の所定の距離が半固体材料の最大の深さとおよそ等しい、本発明1101の方法。
[本発明1135]
共通のアウトレットによる沈着の際に1種または複数種のバイオインクを沈着させることによって、共通のアウトレットが上昇する間に勾配を作出する工程をさらに含む、本発明1101〜1134のいずれかの方法。
[本発明1136]
勾配が1種または複数種のバイオインクの中の1種または複数種の細胞型の異なる細胞濃度に基づく、本発明1135の方法。
[本発明1137]
勾配が1種または複数種のバイオインクの中の異なる細胞型に基づく、本発明1135のいずれかの方法。
[本発明1138]
勾配が、1種または複数種のバイオインクの中の異なる細胞型に基づき、かつ1種または複数種のバイオインクの中の1種または複数種の細胞型の異なる細胞濃度に基づく、本発明1135のいずれかの方法。
[本発明1139]
共通のアウトレットがおよそ0.4〜2.0ミリメートル（mm）の直径を含む、本発明1079〜1100のいずれかのシステム。
[本発明1140]
共通のアウトレットがおよそ1.0ミリメートルの直径を含む、本発明1139のシステム。
[本発明1141]
細胞構築物がヒト組織構築物である、本発明1084のシステム。
[本発明1142]
細胞構築物がヒト組織構築物である、本発明1079の方法。
[本発明1143]
細胞構築物がヒト組織構築物である、本発明1090の方法。