(57)【要約】  本開示は、ヒト乳透過物と、分画したヒト全乳から得られるヒト乳透過物を含有する組成物とを特徴とする。本発明のオリゴ糖の豊富な透過物および透過組成物は、腸管内菌叢を確立または維持するため、そして炎症性腸疾患の症状を治療するための早期および満期産児の栄養補充剤として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳およびヒト乳透過物を含む、栄養組成物。
【請求項２】
前記乳が、ヒト乳である、請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項３】
前記乳が、非ヒト乳である、請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項４】
前記非ヒト乳が、ウシ乳である、請求項３に記載の栄養組成物。
【請求項５】
前記透過物が、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ヒト乳が、ヒト脱脂乳である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
ビタミンおよびミネラルをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
濃縮または希釈されたヒト乳透過物を含む、栄養組成物。
【請求項９】
前記透過物が、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記透過物が、ヒト脱脂乳から液体をろ過することによって得られる、請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
ビタミンおよびミネラルをさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
濃縮または希釈ヒト乳透過物を製造する方法であって、
（ａ）ヒト乳を入手する工程と、
（ｂ）前記乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、
（ｃ）前記脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、
（ｄ）前記透過物を保持する工程と、
（ｅ）前記透過物を希釈、濃縮または乾燥する工程と
を含む方法。
【請求項１３】
前記（ｅ）の希釈工程が、前記透過物に非ヒト乳組成物を添加することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記非ヒト乳組成物が、ウシ乳である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記（ｅ）の希釈工程が、前記透過物に水または緩衝液を添加することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記（ｅ）の濃縮工程が、逆浸透を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
工程（ｄ）の後に、前記透過物にビタミンおよびミネラルを添加することをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記ろ過が、限外濾過を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
（ｆ）生物汚染度を低下させる工程をさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】
前記生物汚染度の低下が、低温殺菌または無菌ろ過を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ヒト乳オリゴ糖を含む透過組成物を対象に投与する方法であって、
（ａ）ヒト乳を入手する工程と、
（ｂ）前記乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、
（ｃ）前記脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、
（ｄ）前記透過物を保持する工程と、
（ｅ）前記透過物を前記対象に投与する工程と
を含む方法。
【請求項２２】
前記対象が、ヒト早期産児またはヒト満期産児である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記組成物が、経口的または局所的に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物が、栄養管を介して経口投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
対象において有益な腸管内菌叢を確立する方法であって、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項２６】
前記対象がヒトである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記対象がヒト早期産児またはヒト満期産児である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記対象が、出生後に配合物を与えられたヒト早期産児、または出生後に配合物を与えられた満期産児である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記組成物が、有益な腸管内菌叢を確立するために有用な他の組成物の前、同時、または後に投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
前記他の組成物が、プロバイオティクス細菌または植物性多糖類である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記組成物が、非ヒト乳配合物と併用して投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項３２】
前記組成物が、非ヒト乳配合物との混合物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３３】
前記組成物が、ヒト乳の限外ろ過透過物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３４】
前記透過物が、ヒト乳のろ過によって得られる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記透過物が、ヒト脱脂乳のろ過によって得られる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記有益な腸管内菌叢の確立が、前記腸管にビフィズス菌または乳酸菌またはその両方を生息させることを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項３７】
感染症を有するか、または感染症の発生のリスクのある対象を治療する方法であって、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項３８】
前記感染症の症状が、細菌、細菌毒素、またはウィルスによって生じる、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記対象が、ヒトである、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記対象が、ヒト新生児、乳児、子供、または成人である、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記治療が、前記感染症の少なくとも１つの症状を改善させることを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記治療が、有益な腸内細菌の発達を促進することを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４３】
前記有益な腸内細菌が、ビフィズス菌または乳酸菌またはその両方である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
炎症性腸疾患を患っている対象を治療する方法であって、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項４５】
前記炎症性腸疾患が、クローン病、過敏性腸疾患、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、非定型的大腸炎、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン蓄積大腸炎および偽膜性大腸炎のうちの１つまたは複数である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記対象が、ヒトである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記対象が、ヒト新生児、乳児、子供、または成人である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記治療が、前記炎症性腸疾患の少なくとも１つの症状を改善させることを含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４９】
前記治療が、有益な腸内細菌の発達を促進することを含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５０】
前記有益な腸内細菌が、ビフィズス菌または乳酸菌またはその両方である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
栄養補充剤を製造する方法であって、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を入手して、前記組成物により非ヒト乳配合物を補充することを含む方法。
【請求項５２】
前記組成物が、濃縮または希釈されたヒト乳透過組成物である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記透過組成物が、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
前記透過組成物が、ヒト乳の脱脂部分から液体をろ過することによって得られる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
濃縮または希釈されたヒト乳透過物を製造する方法であって、
（ａ）ヒト乳を入手する工程と、
（ｂ）前記乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、
（ｃ）前記脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、
（ｄ）前記透過物を保持する工程と、
（ｅ）前記透過物を希釈、濃縮または乾燥する工程と
を含む方法。
【請求項５６】
前記（ｅ）の希釈工程が、前記透過物に非ヒト乳組成物を添加することを含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記非ヒト乳組成物が、ウシ乳である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記（ｅ）の希釈工程が、脱イオン水または緩衝液を添加することを含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
前記（ｅ）の濃縮工程が、逆浸透を含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項６０】
工程（ｄ）の後に、前記透過物にビタミンおよびミネラルを添加することをさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項６１】
前記ろ過が、限外濾過を含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項６２】
（ｆ）生物汚染度を低下させる工程をさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項６３】
前記生物汚染度の低下が、低温殺菌または無菌ろ過を含む、請求項６２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明者：Joseph Fournell、Scott Eaker、Scott Elster、David J. Rechtman
【０００２】
本出願は、２００８年１２月５日に出願された米国仮特許出願第６１／１９３，５４６号および２００８年１２月２日に出願された米国仮特許出願第６１／１１９，１７６号の優先権を主張し、これらはいずれもその全体が本明細書中に援用される。
【０００３】
技術分野
本開示は、ヒト乳透過組成物、例えばヒト乳オリゴ糖を含む組成物と、このような組成物の製造および使用方法とに関する。
【背景技術】
【０００４】
背景
ヒト乳は、一般に、その栄養組成および免疫的利益のために、早期および満期産児の選り抜きの食物である。ヒト乳の供給源は、例えば、ドナーまたは乳児の母親であり得る。しかしながら、生のドナー乳または従来のように加工されたドナー乳の栄養価は様々であり、ほとんどの場合、早期産児の必要性を満たすのに十分でない。さらに、生のドナー乳の細菌汚染、ウィルス汚染および他の汚染の可能性が存在する。母親自身の乳でさえ、早産児にとって栄養的に十分でないことが多い。多くの場合、種々の補充剤（supplement）、例えばオリゴ糖で強化された乳を早期産児に与えることが望ましい。ヒト乳オリゴ糖を含有する組成物は、種々の障害および疾患（例えば、感染症または免疫不全）を有するか、またはその発生のリスクがある乳児、子供、および成人、ならびに適切な腸管内菌叢の発達および／または維持を必要としている乳児、子供、および成人のための補充剤としても有用であり得る。
【発明の概要】
【０００５】
概要
本開示は、ヒト乳透過組成物、例えばヒトオリゴ糖、ペプチド、および他の小分子を含む組成物、ならびにこのような組成物の製造および使用方法を特徴とする。透過組成物は種々のレベルの栄養成分を含有することができ、早期および満期産児、ならびに種々の障害および／または疾患のある子供および成人への供給に使用することができる。本組成物は、特に、ヒト乳のろ過した部分から生成される。本発明者らは、驚くことに、透過物（有意の栄養価が欠けている廃棄物であると考えらえていた）が、ヒトオリゴ糖を含む高い生物活性の内容物を含有することを発見した。米国特許出願第１１／９４７，５８０（２００８／０１２４４３０）号に記載される透過物およびヒト乳製品のオリゴ糖の内容は、天然および濃縮のいずれの場合も、母乳と比較してサイズおよび組成に関して実質的に異ならないことが分かった。透過物が得られる出発材料は、貯蔵した（pooled）ヒト乳なので、透過物および他の加工したヒト乳製品（例えば、米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載されるもの）は、個々の母乳よりも多様なオリゴ糖を含有し得る。従って、透過物を非ヒト（例えば、ウシ）および／またはヒトの乳に添加して、その栄養価および／または免疫価を増大させることができる。また、透過物を用いて、感染症と戦い、炎症性腸疾患を治療し、適切な腸管内菌叢の発達および維持を助けることもできる。また、透過物を希釈または濃縮して、栄養補充剤などの形で使用することもできる。貯蔵ヒト乳を加工してそれを乳児（例えば、早産児）に投与することによって、透過物から同様の利益を得ることができる（例えば、米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載される貯蔵ヒト乳）。
【０００６】
本明細書で特徴とされる方法は、大量のドナー乳、例えば１ロットあたり約７５〜２，０００リットルの出発材料を加工するために使用される。
【０００７】
第１の態様では、本発明は、乳およびヒト乳透過物を含む組成物を提供する。一実施形態では、乳はヒト乳である。別の実施形態では、乳は非ヒト乳である。いくつかの実施形態では、非ヒト乳はウシ乳である。いくつかの実施形態では、組成物の透過物は、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる。いくつかの実施形態では、組成物は、ヒト脱脂乳から液体をろ過することによって得られる。いくつかの実施形態では、組成物は、ビタミンおよびミネラルをさらに含む。
【０００８】
第２の態様では、本発明は、濃縮または希釈されたヒト乳透過物を含む栄養組成物を提供する。一実施形態では、透過物は、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる。他の実施形態では、透過物は、ヒト脱脂乳から液体をろ過することによって得られる。いくつかの実施形態では、組成物は、ビタミンおよびミネラルをさらに含む。
【０００９】
第３の態様では、本発明は、（ａ）ヒト乳を入手する工程と、（ｂ）乳をクリームおよび脱脂物（skim）に分離する工程と、（ｃ）脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、（ｄ）透過物を保持する工程と、（ｅ）透過物を希釈、濃縮または乾燥する工程とを含む、濃縮または希釈ヒト乳透過物の製造方法を提供する。いくつかの実施形態では、（ｅ）の希釈工程は、透過物に非ヒト乳を添加することを含む。いくつかの実施形態では、非ヒト乳はウシ乳である。本発明の他の態様では、（ｅ）の希釈工程は、透過物に水または緩衝液を添加することを含む。いくつかの実施形態では、（ｅ）の濃縮工程は逆浸透を含む。いくつかの実施形態では、濃縮または希釈ヒト乳透過物の製造方法は、工程（ｄ）の後に、透過物にビタミンおよびミネラルを添加することをさらに含む。いくつかの実施形態では、工程（ｃ）のろ過は限外ろ過を含む。いくつかの実施形態では、濃縮または希釈ヒト乳透過物の製造方法は、（ｆ）生物汚染度を低下させる工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、生物汚染度の低下は、低温殺菌または無菌ろ過を含む。
【００１０】
第４の態様では、本発明は、ヒト乳オリゴ糖を含む透過組成物を対象に投与する方法を提供し、該方法は、（ａ）ヒト乳を入手する工程と、（ｂ）乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、（ｃ）脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、（ｄ）透過物を保持する工程と、（ｅ）透過物を対象に投与する工程とを含む。いくつかの実施形態では、対象はヒト早期または満期産児である。いくつかの実施形態では、組成物は局所的または経口的に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、栄養管を介して経口投与される。
【００１１】
第５の態様では、本発明は、対象において有益な腸管内菌叢を確立する方法を提供し、本方法は、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象はヒト早期または満期産児である。いくつかの実施形態では、ヒト早期または満期産児は、出生後に配合物を与えられる。いくつかの実施形態では、組成物は、有益な腸管内菌叢を確立するために有用な他の組成物の前、同時、または後に投与される。いくつかの実施形態では、有益な腸管内菌叢を確立するために有用な他の組成物は、プロバイオティクス細菌または植物性多糖類である。いくつかの実施形態では、組成物は、非ヒト乳配合物と併用して投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、非ヒト乳配合物との混合物である。いくつかの実施形態では、組成物はヒト乳の限外ろ過透過物である。いくつかの実施形態では、透過物は、ヒト乳のろ過によって得られる。いくつかの実施形態では、透過物は、ヒト脱脂乳のろ過によって得られる。いくつかの実施形態では、有益な腸管内菌叢の確立は、腸管にビフィズス菌（bifidobacteria）または乳酸菌（lactobacilli）またはその両方を生息させることを含む。
【００１２】
第６の態様では、本発明は、感染症を有するか、または感染症の発生のリスクのある対象を治療する方法を提供し、本方法は、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、感染症の症状は、細菌、細菌毒素またはウィルスによって生じる。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒト新生児、乳児、子供または成人である。いくつかの実施形態では、治療は、感染症の少なくとも１つの症状を改善させることを含む。いくつかの実施形態では、治療は、有益な腸内細菌の発達を促進することを含む。いくつかの実施形態では、有益な腸内細菌は、ビフィズス菌または乳酸菌またはその両方である。
【００１３】
第７の態様では、本発明は、炎症性腸疾患を患っている対象を治療する方法を提供し、本方法は、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、炎症性腸疾患は、クローン病、過敏性腸疾患、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、非定型的大腸炎（indeterminate colitis)、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン蓄積大腸炎および偽膜性大腸炎のうちの１つまたは複数である。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒト新生児、乳児、子供または成人である。いくつかの実施形態では、治療は、炎症性腸疾患の少なくとも１つの症状を改善させることを含む。いくつかの実施形態では、治療は、有益な腸内細菌の発達を促進することを含む。いくつかの実施形態では、有益な腸内細菌は、ビフィズス菌または乳酸菌またはその両方である。
【００１４】
第８の態様では、本発明は、ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物を入手して、この組成物により非ヒト乳配合物を補充することを含む、栄養補充剤の製造方法を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、濃縮または希釈されたヒト乳透過組成物である。いくつかの実施形態では、透過組成物は、ヒト乳から液体をろ過することによって得られる。いくつかの実施形態では、透過組成物は、ヒト乳の脱脂部分から液体をろ過することによって得られる。
【００１５】
第９の態様では、本発明は、（ａ）ヒト乳を入手する工程と、（ｂ）乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、（ｃ）脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、（ｄ）透過物を保持する工程と、（ｅ）透過物を希釈、濃縮または乾燥する工程とを含む、濃縮または希釈ヒト乳透過物の製造方法を提供する。いくつかの実施形態では、（ｅ）の希釈工程は、透過物に非ヒト乳組成物を添加することを含む。いくつかの実施形態では、非ヒト乳はウシ乳である。いくつかの実施形態では、（ｅ）の希釈工程は、脱イオン水または緩衝液を添加することを含む。いくつかの実施形態では、（ｅ）の濃縮工程は、逆浸透を含む。いくつかの実施形態では、本方法は、工程（ｄ）の後に、透過物にビタミンおよびミネラルを添加することをさらに含む。いくつかの実施形態では、工程（ｃ）のろ過は、限外濾過を含む。いくつかの実施形態では、本方法は、（ｆ）生物汚染度を低下させる工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、生物汚染度の低下は、低温殺菌または無菌ろ過を含む。
【００１６】
本明細書で援用される全ての特許、特許出願、および参考文献は参照によってその全体が援用される。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
図面の簡単な説明
【図１】ヒト乳透過物の製造方法の実施形態のチャートである。
【図２】サンプル４２、４８、４９、５３、および５４のオリゴ糖組成物の概要を示すチャートである。
【図３】ヒト乳ならびにサンプル４２、４８、５４（全て、バルク最終製品）、５３（限外ろ過透過物）、および４９（最初のドナー乳貯蔵物）中に見出される一般的なヒト乳オリゴ糖の棒グラフである。
【図４】ヒト乳中の遊離オリゴ糖の典型的な質量分析プロファイルを示すグラフである。丸い点はヒト乳オリゴ糖を表す。
【図５】サンプル４２（ＰＲＯＬＡＣＴ＋Ｈ２ＭＦ（商標））について得られる質量スペクトルプロファイルを示すグラフである（米国特許出願第１１／９４７，５８０号を参照）。丸い点はヒト乳オリゴ糖を表す。
【図６】サンプル５３（ＰＲＯＬＡＣＴ＋Ｈ２ＭＦ（商標）プロセス副産物または透過物）について得られる質量スペクトルプロファイルを示すグラフである（米国特許出願第１１／９４７，５８０号を参照）。丸い点はヒト乳オリゴ糖を表す。
【図７】採取されたヒト全乳から透過物を分離する方法の図形表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
詳細な説明
本開示は、ヒト乳透過組成物、例えば、ヒトオリゴ糖、ペプチド、および他の小分子を含む組成物と、このような組成物の製造および使用方法とを特徴とする。本組成物は種々のレベルの栄養成分を含有することができ、早期および満期産児、ならびに種々の障害および／または疾患のある子供および成人への供給または投与に使用することができる。本組成物は、特に、ヒト脱脂乳のろ過した部分から生成される。本発明者らは、驚くことに、透過物（有意の栄養価が欠けている廃棄物であると考えらえていた）が、ヒトオリゴ糖を含む高生物活性の内容物を含有することを発見した。透過物を得る出発材料は貯蔵ヒト乳なので、透過物は、個々の母乳よりも多くの別個の分子形態またはタイプのオリゴ糖を含有し得る。
【００１９】
透過物は、非ヒトまたはヒト乳に添加してその栄養価を増大させることができる。例えば、透過物は、２００７年１１月２９日に出願された米国特許出願第１１／９４７，５８０号（その内容は参照によってその全体が本明細書に援用される）に記載されるヒト乳強化剤および標準化乳組成物に添加することができる。透過物は、非ヒト乳配合物、例えばウシ乳配合物、またはヒトおよび非ヒト乳配合物の混合物に添加することもできる。理論により束縛されないが、本発明者らによって、ヒト乳オリゴ糖、ペプチド、および他の小分子を含む透過組成物は、早期産児または新生児において有益な腸管内菌叢の発達を促進するため、および、子供および成人において適切な腸管内菌叢を維持するために使用可能であると考えられる。透過物は、種々の障害および疾患（例えば、感染症または免疫不全）を有するか、またはその発生のリスクがある乳児、子供、および成人のための補充剤としても有用であり得る。透過物は、希釈または濃縮することができ、および／またはビタミンおよびミネラルで強化することができ、栄養補充剤などの形態で使用することができる。
【００２０】
本明細書で特徴とされる方法は、大量のドナー乳、例えば１ロットあたり約７５〜２，０００リットルの出発材料を加工するために使用される。本開示の組成物は、（例えば、生物汚染度を低下させるために）綿密な遺伝的スクリーニングおよび加工を受けたヒトドナー乳、例えば貯蔵乳から生成される。
【００２１】
「透過物（permeate）」（本明細書では、「透過組成物」または「乳加工副産物」または「乳副産物」とも称される）とは、ヒト乳（例えば、脱脂乳）のろ過（例えば、限外ろ過）によって加工された乳の一部を意味する。典型的には、限外ろ過において使用されるスクリーンサイズは、１Ｋｄａ〜１，０００Ｋｄａの大きさである。ろ過を通過した液体は有意な（significant)量のオリゴ糖を含有し、透過物と呼ばれる。
【００２２】
「全乳」とは、脂肪が除去されていない乳を意味する。
【００２３】
「脱脂乳」とは、脂肪の少なくとも７５％が除去された乳を意味する。
【００２４】
「早産児」、「早期産児」および「低出生体重（ＬＢＷ）乳児」という用語は同義的に使用され、３７週未満の在胎期間で生まれ、および／または２５００ｇｍ未満の出生体重を有する乳児を指す。
【００２５】
「満期産児」という用語は、３７週の在胎期間の後に生まれ、および／または２５００ｇｍよりも多い出生体重を有する乳児を指すために使用される。
【００２６】
「生物汚染度」とは、例えば、ウィルス、細菌、カビ、真菌など、乳中に存在し得る微生物学的汚染物質および病原体（通常、生きている）を意味する。
【００２７】
透過組成物および前記組成物の入手方法
本明細書で特徴とされる透過組成物は、ヒト乳、例えば貯蔵ドナー乳から得られる。ヒトドナー乳を入手およびスクリーニングする（ドナーの認定を含む）方法は、米国特許出願第１１／９４７，５８０号および米国特許出願第１１／５２６，１２７（２００７／００９８８６３）号に記載されており、これらの内容は参照によってその全体が本明細書に援用される。
【００２８】
図１は、ヒト乳透過物の入手方法の一実施形態を示す。上記のように、ドナー乳は、同定目的および汚染回避の両方のために注意深く分析される。ドナー乳は凍結され、所望されるときに解凍および貯蔵される。次にスクリーニング（図１の工程１）、例えば、遺伝的にスクリーニングされる（例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって）。遺伝的スクリーニングは、あらゆる汚染物質、例えばウィルス（例えば、ＨＩＶ−Ｉ、ＨＢＶ、および／またはＨＣＶ）を同定するために行われる。次に、乳は、例えば約２００ミクロンのフィルタによるろ過を受け（工程２）、熱処理される（工程３）。例えば、組成物は、約６３℃以上の温度で約３０分以上処理することができる。工程４において、乳はセパレータ（例えば、遠心分離機）に移され、脱脂物からクリームを分離する。脱脂物は第２の加工タンクに移され、ろ過工程（工程５）まで約２〜８℃に保たれる。任意選択により、工程４で脱脂物から分離されたクリームは再度分離を経て、より多くの脱脂物をもたらし得る。
【００２９】
クリームおよび脱脂物の分離（工程４）の後、所望の量のクリームを脱脂物に添加することができ、組成物はさらなるろ過、例えば限外ろ過（例えば、１〜１０００Ｋｄａの間の細孔サイズによる）を受ける（工程５）。この過程は、これまでは通常水であると考えられていたもの、あるいは透過物と称されるものをろ過することによって、脱脂乳中の栄養分を濃縮する。しかしながら、本発明者らは、透過物は有意な量のオリゴ糖を保持しており、例えば栄養補充剤として、あるいは本明細書に記載される他の方法で、それ自体が使用可能であることを発見した。
【００３０】
脱脂乳は、例えば米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載されるように、ヒト乳強化剤または標準化ヒト乳組成物のためにさらなる加工を受けることができる。例えば、脱脂物は、バルク最終製品を得るためにクリームとブレンドされ、低温殺菌され、生物汚染度のために加工される。透過物は保持され（工程６）、栄養補充剤として使用することができる。図７も「透過物」および「第２の透過物」の製造について示しており、後者は、「透過物」のさらなるろ過によって製造される。
【００３１】
透過物はさらに、加工（例えば、濃縮または希釈および／または低温殺菌）され得る。透過物は、将来の使用のために凍結および保存され得る。透過物は、逆浸透によって濃縮することもできるし、あるいは当業者によく知られている技術を用いて乾燥させることもできる。次に、得られた液体生成物は、低温殺菌されるか、無菌ろ過されるか、あるいは生物汚染度を低下させる他の工程を受けることが可能である。次に、生成物は、最終製品容器に充填されるであろう。
【００３２】
透過物は、ビタミンおよび／またはミネラル、例えばカルシウム、塩化物、亜鉛、銅、鉄、マンガン、マグネシウム、リン、カリウム、ナトリウム、セレン、クロム、モリブデン、ヨウ素、タウリン、カルニチン、コリン、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビオチン、葉酸、パントテン酸、ナイアシン、およびｍ−イノシトールで補充することもできる。ビタミンおよびミネラルは、例えば乳児の適切な栄養摂取および発育のために重要である。微量ミネラルは、細胞分裂、免疫機能および成長に関連する。いくつかの重要な微量ミネラルとしては、銅、マグネシウム、および鉄（例えばヘモグロビン、ミオグロビンおよび鉄含有酵素の合成のために重要である）が挙げられる。亜鉛は、例えば、成長のため、多数の酵素の活性のため、およびＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質の合成のために必要とされる。銅は、例えば、いくつかの酵素の活性のために必要である。マンガンは、例えば、骨および軟骨の発達のためのために必要とされ、多糖類および糖タンパク質の合成において重要である。ビタミンＡは、例えば、成長、細胞分化、視覚および免疫系の適切な機能性のために必須な脂溶性ビタミンである。ビタミンＤは、例えば、カルシウムおよびリン（より少ない程度）の吸収のため、および骨の発達のために重要である。ビタミンＥ（トコフェロール）は、細胞内の多価不飽和脂肪酸の過酸化を防止し、従って組織の損傷を防止する。葉酸は、例えば、アミノ酸およびヌクレオチドの代謝において役割を果たす。従って、透過組成物は、所望されるように、種々のミネラルおよび／またはビタミンで補充することができる。
【００３３】
用途
本開示は、ヒト乳透過物を含む組成物およびこのような組成物の使用方法を特徴とする。透過組成物は、例えば、上記のように、脱脂乳から液体をろ過することによって得ることができる。組成物は、以下の実施例１で記載されるようにフコシル化および／またはシアリル化された有意な数のヒトオリゴ糖を含有する。ヒト乳はペプチドおよび他の小分子も含有し、これらは、透過物中にも存在することが可能であり、例えば、限外ろ過における細孔サイズを変えることにより得ることができる。透過物は貯蔵ヒト乳に由来するので、個々の母乳中で見出されるよりも多くの形態のオリゴ糖を含有し得る。透過組成物は、単独で使用することもできるし、あるいは他の乳組成物、例えば、米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載されるヒト乳組成物および非ヒト乳配合物と併用して使用することもできる。透過物または透過物が補充されたヒトおよび非ヒト乳配合物は、例えば、適切な腸管内菌叢の発達を促進するため、免疫不全を特徴とする状態を治療するため、および感染症を治療または予防するために、早期産児または満期産児に投与することができる。透過物は、有益な腸管内菌叢を促進するため、免疫不全を特徴とする状態を治療するため、および感染症を治療または予防するために、単独であるいはプロバイオティクスと併用して、子供および成人にも投与することができる。透過組成物は、例えば経口的に、または皮膚の状態を治療するために局所的に投与することができる。
【００３４】
ヒト乳オリゴ糖
多数の因子が新生児、例えば早産で生まれた乳児の臨床結果に影響を与え得る。早期産児は、脆弱な免疫系、未熟な消化器系を有し、総カロリーおよび特定の栄養の必要性が増大している（概して、満期産児と比較した場合）。従って、このような乳児に提供される栄養は、その成長および発達において重要な因子である。ヒト乳は、その栄養組成および免疫的利益のために、早期および満期産児のための理想的な食物であると長い間認識されてきた。しかしながら、全ての母親が自分の赤ん坊に授乳する（または搾乳器を使用して自分の乳を保存する）ことができる、あるいはそうするとは限らない。例えば、特定の疾患（例えば、活動性結核）を有する母親、あるいは放射性同位体、代謝拮抗薬、または化学療法剤を投与されている母親は、自分の乳児に授乳できないかもしれない。さらに、母親自身の乳は、早期産児を維持するのに十分な栄養含量を含有していないかもしれない。ドナー乳の使用も、このような乳は早期産児のための適正な栄養を含有しないかもしれないので問題となり得る。
【００３５】
本開示は、貯蔵ヒト乳由来のオリゴ糖を含む透過組成物、および例えば、ヒト早産児、満期産児、子供、および成人に利益を与えるためのこのような組成物の使用方法を特徴とする。
【００３６】
ヒト乳オリゴ糖は、還元末端にラクトースを含有し、非還元末端に通常フコースまたはシアル酸を含有する炭水化物である（Morrow et al., J. Nutrit. 135:1304-07, 2005）。これらの末端糖は、細菌の選択的成長、およびオリゴ糖と腸管内腔中の細菌性病原体を含む他の分子または細胞との相互作用に最も強く影響を与える残基である。例えば、シアル酸は脳ガングリオシドの構造的および機能的な成分であり、乳児の神経学的発達に関与している。オリゴ糖は、遊離していてもよいし、あるいは糖タンパク質、糖脂質などとして結合されていてもよく、グリカンに分類される。これらは、ラクトースおよび脂質の次に、３番目に多いヒト乳の固体成分を構成する（Morrowら）。しかしながら、これらの乳オリゴ糖の大部分は乳児によって消化することができず、乳児の便中にほとんどそのまま見出すことができる。本開示は、ヒト乳の加工の廃棄物であるとこれまで考えられていたヒト乳透過物（これは、提供された乳の貯蔵物に由来するので、実際に、様々な種類のオリゴ糖を含有する）中に存在するこれらのオリゴ糖の種々の使用を説明する。透過物または透過物から得られた組成物は、例えば、有益な腸管内菌叢を促進するため、感染症と戦うため、免疫不全を特徴とする状態の症状を改善するため、およびさらなる栄養を提供するために使用することができる（単独で、あるいはヒトおよび非ヒト乳配合物と組み合わせて、あるいは薬物またはプレバイオティクスと組み合わせて）。これらの組成物は、早期産児から、子供、そして成人までの様々な年令のレシピエントに有益であり得る。
【００３７】
腸管内菌叢
ヒト腸管内菌叢、すなわち腸内で見出される細菌は、特定の多糖類の消化および腸粘膜の免疫系の発達を含む種々の機能を果たす。腸内細菌は、腸粘膜に関連するリンパ系組織を刺激して、病原体に対する抗体を産生することができ、役に立つ種だけが残され、乳児期に耐性が発達する。
【００３８】
正常な胎児の胃腸管は無菌である。出生時およびその後すぐに、乳児の腸は種々の細菌によってコロニーが形成される。細菌の源は、母体および／または環境であり得る。出生後に、哺乳および接触によって種々の細菌が母親から乳児に移行し得る。ほとんどの乳児の胃腸管は、最初に、多数の大腸菌（E. coli）および連鎖球菌（Streptococci）によってコロニーが形成される。最終的には、母乳栄養の赤ん坊はビフィズス菌によって支配されるようになるが、人工栄養の乳児は、腸内細菌科（Enterobacteriaceae）、腸球菌（Enterococci）、ビフィズス菌、バクテロイデス（Bacteroides）、およびクロストリジウム（Clostridia）を含む様々な細菌を腸内に有する。固形食の導入および離乳の後、母乳栄養の乳児の細菌叢は、人工栄養の乳児のものと同様になる。およそ２歳までには、子供の便の細菌叢は、成人のものと同様である。
【００３９】
腸管内菌叢の重要性を考えると、出生時に有益な細菌集団を発達させ、幼児期および成人期を通してそれを維持することが非常に重要である。本明細書で特徴とされる組成物および方法は、このような有益な腸管内菌叢の確立および維持において役立つ。
【００４０】
ヒト乳オリゴ糖、例えばヒト乳透過物を含む組成物、またはヒト乳透過物に由来する組成物は、早期産児、満期産児、子供、および成人に投与することができる。これらは、単独で、あるいは共生組成物を形成するために、有益な腸管内菌叢の確立に役立つ他の組成物（例えば、プロバイオティクス細菌またはプレバイオティクス植物性多糖類）と組み合わせて投与することができる。これらは、ヒト乳配合物（例えば、米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載される組成物）または非ヒト乳粉ミルクの一部として投与することができる。理論により束縛されないが、本発明の透過組成物は、乳酸菌および／またはビフィズス菌による腸のコロニー形成を促進することができると考えられる。乳酸菌およびビフィズス菌はいずれも、プロバイオティクス−その宿主を保護して疾患を予防する細菌として知られている。ビフィズス菌は、消化を助け、アレルギーの発生率の低下および癌予防に関連する嫌気性細菌である。乳酸菌は、ラクトースおよび他の糖を乳酸に転化し、抗炎症および抗癌特性を有し得る細菌である。
【００４１】
さらに、ヒト乳オリゴ糖を含有する本発明のヒト乳透過物またはヒト乳透過物に由来する組成物は、炎症性腸疾患の治療のために子供または成人に投与することができる。炎症性腸疾患は、クローン病、過敏性腸疾患、潰瘍性大腸炎、非定型的大腸炎、顕微鏡的大腸炎、およびコラーゲン蓄積大腸炎などの、関連するが別個の胃腸管の慢性炎症性障害を包含する集合的な用語である。活動性クローン病を患っている患者は、その便中の回復可能なビフィズス菌が健康な個人と比較して著しく少ないことが分かっている。このビフィズス菌数の低下は、β−Ｄガラクトシダーゼの産生および活性のレベルの低下と直接関連することが観察された（Favier, C. et at, Dig. Dis. Sci. 1997;42:817-822）。β−Ｄガラクトシダーゼは、ビフィズス菌により産生される酵素である。これらの結果は、ビフィズス菌株が健康な腸管の細菌叢のバランスを維持するのに重要な役割を果たし得るという、他の研究で提示される示唆を支持する。従って、本発明によると、本発明のオリゴ糖の豊富な透過物による腸内ビフィズス菌のコロニー形成のコロニー促進は、症性腸疾患の症状の改善において有用であり得る。同様に、本発明の組成物は、偽膜性大腸炎（Ｃ．ディフィシレ（C. difficile）関連大腸炎としても知られている）（Ｃ．ディフィシレ（C. difficile）の毒素産生菌株による正常な菌叢の過成長のために長期にわたる広範囲の抗生物質治療の一般的な合併症）の治療においても有用であり得る。本発明の透過組成物は、プロバイオティクス配合物、抗炎症薬、または免疫調節物質を含む炎症性腸疾患のための他の任意の治療の前、治療中、または治療後に投与することができる。
【００４２】
感染
ヒト乳オリゴ糖は、種々の抗感染機能を果たす、例えば病原体の結合を阻止すると考えられる。従って、本明細書で特徴とされ、かつ、様々な種類のヒト乳オリゴ糖を含有する（これらは貯蔵ヒト乳に由来するので）透過組成物は、乳児、子供、および成人を種々のタイプの感染症から保護するために使用することができる。例えば、本発明の組成物が投与された早期および満期産児は、感染性下痢、壊死性腸炎（ＮＥＣ）、気道感染、菌血症、髄膜炎などから保護され得る。子供および成人も組成物の投与から同様に利益を得ることができる。組成物は、その症状を改善および／または除去するために感染の発生後に投与することもできるし、あるいは感染の前に投与することもできる（リスクがあると考えられる個人に対して）。組成物は、経口または局所（例えば、皮膚感染および他の皮膚状態を治療するため）を含む種々の手段によって投与することができる。
【００４３】
一般に、本明細書で特徴とされる透過組成物は、ヒト乳に由来するオリゴ糖、ペプチド、または他の小分子の適用によって改善または除去され得る状態または障害のために、対象、例えば様々な年齢のヒト対象に投与することができる。
【００４４】
キット
また本開示は、本明細書に記載されるヒト乳透過組成物、および組成物と生のヒト乳または非ヒト乳とを混合するための容器を含むキットも特徴とする。容器は、ボトル、例えば適切な希釈を助けるための目盛付きボトル、シリンジ、缶、および当該技術分野で知られている他の容器を含むことができる。
【００４５】
本開示の実施形態は、本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載される以外の方法で実行され得る。従って、実施形態は全ての点で例示的であり、限定的ではないと考えられるべきである。
【実施例】
【００４６】
実施例１．ヒト乳透過物の採取および分析
米国中のスクリーニングされたドナーから母乳を採取し、−２０℃で最大１２か月間保存した。貯蔵ドナーヒト乳を加工し、種々のサンプルをそのオリゴ糖組成について分析した。２０〜５０人のドナー由来の貯蔵物を用いて、米国特許出願第１１／９４７，５８０号に記載されるヒト乳強化組成物を製造した。
【００４７】
加工の前に、最初の貯蔵ドナー乳のサンプルを分析のために取り分けた（表ＩＩＩのサンプル４９）。貯蔵乳をスクリーニングし、ろ過し、熱処理し、脱脂物およびクリームに分離し、脱脂物を限外ろ過した。ろ過した組成物（透過物）の一部を分析のために取り分けた（表ＩＶのサンプル５３）。脱脂物をクリームとブレンドし、低温殺菌した。バルク最終製品の一部を分析のために取り分けた（表Ｉ、ＩＩ、およびＶのそれぞれサンプル４２、４８、および５４）。
【００４８】
分析のために取り分けた各乳サンプル（０．５ｍＬ）を０．５ｍＬの純水で希釈し、４０００ｒｐｍ、４℃で３０分間遠心分離して、脂肪を分離した。透過物を希釈せずに分析した。無脂肪画分を４体積の（２：１）クロロホルム−メタノール溶液（ｖ／ｖ）で処理した。エマルジョンを３５００ｒｐｍ、４℃で３０分間遠心分離し、下側のクロロホルム層および変性タンパク質を廃棄した。上層を採取し、２体積の純粋なエタノールを添加し、タンパク質画分を４℃で一晩沈殿させた。
【００４９】
４℃、３５００ｒｐｍで３０分間の遠心分離によってタンパク質を分離した後、透明な上部溶液を採取し、凍結乾燥した。得られた粉末（凍結乾燥したオリゴ糖の豊富な画分）をオリゴ糖分析のために使用した。脱イオン水中で１．０Ｍの水素化ホウ素ナトリウムを用いて、オリゴ糖をアルジトール形態に還元し、４２℃で一晩インキュベートした。反応の後、非多孔性黒鉛化炭素カートリッジ（ＧＣＣ−ＳＰＥ）を用いる固相抽出によって、オリゴ糖を汚染物質から精製した。脱塩のための非多孔性黒鉛化炭素カートリッジ（１５０ｍｇの床重量、４ｍＬの管サイズ）は、Alltech（米国イリノイ州ディアフィールド）から購入した。speedvac遠心分離機を用いて溶媒の蒸発を行った。
【００５０】
固相抽出。使用の前に、各ＧＣＣ−ＳＰＥカートリッジを、０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中８０％のアセトニトリル（ｖ／ｖ）３カラム体積で洗浄した後、３カラム体積の脱イオン水で洗浄した。オリゴ糖混合物をカートリッジに添加した後、８カートリッジ体積の脱イオン水で洗浄することにより塩および残留ペプチドを除去した。次に、水中１０％のアセトニトリル（ｖ／ｖ）および水中２０％のアセトニトリル（ｖ／ｖ）を用いてオリゴ糖をカラムから溶出させた。各画分（６ｍＬ）を採取し、ＭＳ分析の前に真空で蒸発させた。
【００５１】
質量分析。外部ＭＡＬＤＩ源、７．０テスラ超電導磁石およびパルスＮｄ：ＹＡＧレーザー（３５５ｎｍ）を備えたＨｉＲｅｓＭＡＬＤＩ（IonSpec Corp.、カリフォルニア州アーバイン）において、マトリックス支援レーザー脱離／イオン化（ＭＡＬＤＩ）フーリエ変換−イオンサイクロトロン共鳴質量分析（ＦＴ  ＩＣＲ  ＭＳ）を実施した。マトリックスとして２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢ）を用いた（５０％アセトニトリル／５０％水（ｖ／ｖ）溶液中、５ｍｇ／１００μＬ）。オリゴ糖溶液（１μＬ）をＭＡＬＤＩプローブに適用した後、０．０１ＭのＮａＣｌ（０．５μＬ）およびマトリックス溶液（１μＬ）を添加した。サンプルを空気流中で乾燥させ、質量分析を行った。
【００５２】
上記の種々のサンプルの組成は表Ｉ〜ＩＶに示され、概要は図２に示される。実験的な質量：電荷比（ｍ／ｚ  ｅｘｐｅ）をヒト乳中の既知のオリゴ糖に対して計算された質量：電荷比（ｍ／ｚ  ｃａｌ）と適合させた。特定のサンプルの質量分析プロファイルは表ＩＩＩ〜Ｖに示される（ヒト乳サンプルは表ＩＩＩに、バルク製品は表ＩＶに、透過物は表Ｖに示される。５つのサンプルの質量分析によって、典型的にはヒト乳の、サイズ、組成、存在量が様々であるオリゴ糖の非常に複雑な混合物が明らかになった。
【００５３】
同定されたオリゴ糖は、２つの主な種類由来のものであった：（１）ガラクトース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ラクトース、およびフクトース（Ｈｅｘ、ＨｅｘＮＡｃおよびＦｕｃ）を含有する天然オリゴ糖、ならびに（２）Ｎ−アセチルノイラミン酸（ＮｅｕＡＣ）を添加した同じオリゴ糖組成物を含有するアニオン性オリゴ糖。過去の研究（Ninonuevo et al, J. Agric. Food Chem. 2008, 54:7471-7480）により、ろ過していない乳中の特定のオリゴ糖の総数および相対存在量における個人間の多様性が確認された。従って、分析した乳サンプル（天然または濃縮）は、全てのサンプルが、表面上、異なるドナー由来のヒト乳において一般的であることが既に分かっているオリゴ糖の大部分を示すことを確認した。
【００５４】
【表１】
2012510476.tif 000002
【００５５】
【表２】
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【００５６】
【表３】
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【００５７】
【表４】
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【００５８】
【表５】
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【００５９】
加工したヒト乳製品（強化剤またはサンプル４２、４８、および５４）および透過物（サンプル５３）は、ヒト乳中に一般に見出される全ての範囲のオリゴ糖を含有するようである。これらのサンプル中に存在する個々のオリゴ糖の選択および量は、個々のドナーによるばらつきを平均するドナー貯蔵物中の相対量を反映する。
【００６０】
従って、本発明によると、透過物は、早期産児、乳児、子供、および成人のための栄養または免疫補充剤として使用することができるヒト乳オリゴ糖の貴重な供給源である。
【００６１】
実施例２．貯蔵透過物サンプルのオリゴ糖プロファイル
６つの貯蔵透過物サンプルを特定のオリゴ糖含量について分析した（表ＶＩ）。貯蔵透過物サンプルのそれぞれは、実施例１において上記した方法によって多数のドナーから得た貯蔵乳に由来した。実施例１において上記した方法によって、採取した透過物サンプルを質量分析により分析し、表示される特定のオリゴ糖の存在（１）または不在（０）を検出した。オリゴ糖は、表ＶＩにおいてその質量／電荷比によって表される。
【００６２】
【表６】
2012510476.tif 000007
【００６３】
特定のオリゴ糖に関してサンプル間に重なりが存在する（すなわち、オリゴ糖７３２、８７８、１０９７、１２４３および１３８９は６つ全てのサンプル中に存在する）が、特定のサンプル中に存在するが、他のサンプル中には存在しないオリゴ糖も多数あるようである（すなわち、オリゴ糖９３５は透過物番号２３および５３中には存在するが、透過物番号５、１１、２８または４７中には存在しない）。従って、表示される実質的に全てまたは全てのオリゴ糖種を有する組成物を得るためには、貯蔵透過物サンプルのさらなる貯蔵が必要となり得る。
【００６４】
実施例３．透過組成物の投与
上記のように、本発明者らによって、貯蔵乳由来のヒト乳透過組成物は個々の母乳中に見出されるよりも幅広い種類のオリゴ糖の供給源なので、様々な種類の栄養および免疫的利益を提供することができると考えられる。またこれらは、種々のタイプのペプチドおよび他の有益な小分子も含有し得る。
【００６５】
単離したヒト乳透過組成物は早期産児および満期産児の両方の乳児に投与されて、適切な腸管内菌叢の発達を促進し、感染症を改善および／または除去するであろう。研究では、以下ものを受けた、乳児を含む５つの群に分けた乳児が調査されるであろう：
１．母乳および強化剤
２．牛乳および透過物
３．牛乳およびビフィズス菌株１
４．牛乳およびビフィズス菌株２
５．牛乳および乳に由来しないフルクトースオリゴ糖。
【００６６】
乳児の便の組成は、その腸管内菌叢の内容を決定するために監視され得る。病原体（例えば、細菌、細菌毒素、およびウィルス）によって生じる感染症を患っている乳児は、特に、透過組成物の経口投与から利益を得るであろう。牛乳および透過物を受けている乳児由来の腸管内菌叢は、母乳および強化剤を受けている乳児由来の腸管内菌叢を最もよく模倣することが予想される。
【００６７】
本明細書に記載される本発明の他の変形および実施形態は、本発明の範囲または特許請求の範囲の趣旨から逸脱することなく、当業者には今や明らかであろう。
【図１】
2012510476.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】平成23年7月25日(2011.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト乳からろ過されたヒト乳透過物を含む、ヒトに投与するための栄養補充剤。
【請求項２】
前記ヒト乳透過物は、２以上のドナーから貯蔵されたヒト乳からろ過される、請求項１に記載の栄養補充剤。
【請求項３】
前記補充剤中のヒト乳透過物は、濃縮または希釈されているか、そのままである、請求項１に記載の栄養補充剤。
【請求項４】
記補充剤中のヒト乳透過物は、濃縮されている、請求項３に記載の栄養補充剤。
【請求項５】
ビタミンおよびミネラルをさらに含む、請求項１に記載の栄養補充剤。
【請求項６】
ヒト乳透過物を製造する方法であって、
（ａ）ヒト乳を入手する工程と、
（ｂ）前記乳をクリームおよび脱脂物に分離する工程と、
（ｃ）前記脱脂物をろ過して、透過物を得る工程と、
（ｄ）前記透過物を保持する工程と、
（ｅ）前記透過物を希釈、濃縮または乾燥する工程と
を含む方法。
【請求項７】
前記（ｅ）の濃縮工程が、逆浸透を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記透過物にビタミンおよびミネラルを添加することをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記ろ過が、限外濾過を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記透過物を低温殺菌する工程をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記透過物からオリゴ糖を精製する工程をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
ヒト乳透過組成物を含む、対象において有益な腸管内菌叢を確立するための組成物。
【請求項１３】
前記有益な腸管内菌叢が、ビフィズス菌、乳酸菌、またはその両方を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
腸管内菌叢を確立するための第２の組成物の投与前または投与後に投与される、請求項１２に記載の組成物
【請求項１５】
前記第２の組成物が、植物性多糖類、プロバイオティクス細菌、またはその両方を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
ヒト乳透過物を含む、炎症性腸疾患を治療するための組成物。
【請求項１７】
前記炎症性腸疾患が、クローン病、過敏性腸疾患、潰瘍性大腸炎、非定型的大腸炎、顕微鏡的大腸炎、またはコラーゲン蓄積大腸炎である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ヒト乳透過組成物が、非ヒト乳配合物と混合されるか、非ヒト乳配合物と併用して投与される、請求項１２または１６に記載の組成物。
【請求項１９】
前記対象が、早産児、乳児、または成人である、請求項１２または１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ヒト乳透過物が、経口的に、または栄養管を介して投与される、請求項１２または１６に記載の組成物。
【国際調査報告】
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