【手続補正書】
【提出日】令和1年12月5日(2019.12.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体９（ＴＬＲ９）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）アゴニストからなる群から選択される１つまたは複数の活性化剤への曝露によって活性化された哺乳動物の同種異系間葉系幹細胞の即時注入集団、１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤、ならびに１つまたは複数の抗微生物剤の有効量を含む、組成物であって、同種異系間葉系幹細胞の前記集団が、前記１つまたは複数の活性化剤との少なくとも２時間のｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏのインキュベーションによって活性化されている、組成物。
【請求項２】
静脈内投与のために製剤化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
同種異系間葉系幹細胞の前記集団が、骨髄、脂肪組織、臍帯血、組織生検または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）から得られるかまたはそれに由来する、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組織生検が皮膚生検または歯科生検である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記ＴＬＲ３アゴニストが、ポリアデニル酸−ポリウリジル酸（ポリ（Ａ：Ｕ）、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸（ｐＩＣ）およびＵＶ不活性化ウイルス粒子からなる群から選択される、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＵＶ不活性化ウイルス粒子がポックスウイルス粒子である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＴＬＲ９アゴニストが、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ  ＯＤＮ）、阻害性オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）、精製ＤＮＡ、および精製または合成プラスミドＤＮＡからなる群から選択される、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記ＴＬＲ４アゴニストが、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）およびモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）または加熱殺菌グラム陰性菌からなる群から選択される、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記活性化剤が１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ｐＩＣ）である、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記１つまたは複数の抗微生物剤が殺菌性抗生物質または静菌性抗生物質である、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記殺菌性抗生物質が、ペニシリン誘導体（ペナム）、セファロスポリン（セファム）、モノバクタム、カルバペネム、バンコマイシン、ダプトマイシン、フルオロキノロン、メトロニダゾール、ニトロフラントイン、コトリモキサゾール、テリスロマイシンおよびアミノグリコシド抗生物質からなる群から選択され、
前記静菌性抗生物質が、テトラサイクリン抗生物質、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、クリンダマイシンおよびリネゾリドからなる群から選択され、
前記テトラサイクリン抗生物質が、テトラサイクリン、ドキシサイクリンおよびミノサイクリンからなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記哺乳動物の同種異系間葉系幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
哺乳動物における多剤耐性（ＭＤＲ）細菌による慢性感染創傷の治癒を強化する、前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
哺乳動物における慢性感染創傷の処置における使用のための前出の請求項のいずれか一項に記載の組成物であって、前記哺乳動物に活性化間葉系幹細胞の有効量が投与されることを特徴とし、
前記活性化間葉系幹細胞が、前記感染創傷において細菌クリアランスを誘導するか、細菌負荷を低減するか、または細菌クリアランスを誘導し、かつ細菌負荷を低減し、
前記活性化間葉系幹細胞が、活性化されなかった間葉系幹細胞と比較して増加した抗微生物活性を有する、組成物。
【請求項１５】
前記活性化間葉系幹細胞が前記哺乳動物への静脈内投与に好適である、請求項１４に記載の使用のための組成物。
【請求項１６】
前記感染創傷が、擦過傷、裂傷、挫傷、振盪、刺創、皮膚切り傷、外科的創傷、銃創、熱傷、サンバーン、凍傷、化学的創傷、咬刺傷、虫刺傷および電気創傷からなる群から選択される、請求項１４または１５に記載の使用のための組成物。
【請求項１７】
前記活性化間葉系幹細胞が、活性化されていない間葉系幹細胞と比較して高い抗微生物活性を有する、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１８】
前記活性化間葉系幹細胞が、前記創傷の発生時または発生後に投与される、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
本出願の他の特徴および利点は、実施例と共に以下の詳細な記載から明らかとなる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体９（ＴＬＲ９）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）アゴニスト、核オリゴ二量体化ドメイン（ＮＯＤ）受容体アゴニスト、ＲＩＧ−Ｉ受容体（ＲＬＲ）アゴニスト、サイトゾルＤＮＡセンサー（ＣＤＳ）アゴニストおよびＳＴＩＮＧ受容体アゴニストからなる群から選択される１つまたは複数の活性化剤への曝露によって活性化された同種異系間葉系幹細胞の即時注入集団、ならびに１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む組成物。
（項目２）
静脈内投与のために製剤化されている、項目１に記載の組成物。
（項目３）
同種異系間葉系幹細胞の前記集団が、骨髄、脂肪組織、臍帯血、組織生検または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）から得られるかまたはそれに由来する、項目２に記載の組成物。
（項目４）
前記組織生検が皮膚生検または歯科生検である、項目３に記載の組成物。
（項目５）
同種異系間葉系幹細胞の前記集団が、前記１つまたは複数の活性化剤との少なくとも２時間のインキュベーションによって活性化されている、項目１に記載の組成物。
（項目６）
前記インキュベーションがｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏで行われる、項目５に記載の組成物。
（項目７）
前記ＴＬＲ３アゴニストが、ポリアデニル酸−ポリウリジル酸（ポリ（Ａ：Ｕ）、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸（ｐＩＣ）およびＵＶ不活性化ウイルス粒子からなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目８）
前記ＵＶ不活性化ウイルス粒子がポックスウイルス粒子である、項目７に記載の組成物。
（項目９）
前記ＴＬＲ９アゴニストが、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ  ＯＤＮ）、阻害性オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）、精製ＤＮＡ、および精製または合成プラスミドＤＮＡからなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１０）
前記ＴＬＲ４アゴニストが、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）およびモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）または加熱殺菌グラム陰性菌からなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１１）
前記ＮＯＤ受容体アゴニストが、ＮＯＤ１、ＮＯＤ２およびＮＯＤ１／２混合アゴニストからなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１２）
前記ＮＯＤ１受容体アゴニストが、ジペプチドＩＥ−ＤＡＰ（ｉＥ−ＤＡＰ（γ−Ｄ−Ｇｌｕ−ｍＤＡＰ）である、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
前記ＮＯＤ２受容体アゴニストが、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ）およびその合成誘導体からなる群から選択される、項目１１に記載の組成物。
（項目１４）
前記合成誘導体がミラブチドである、項目１３に記載の組成物。
（項目１５）
前記ＮＯＤ１／２混合アゴニストが、グラム陽性菌および合成分子ＭｕｒＮＡｃ−Ｌ−Ａｌａ−ガンマ−Ｄ−Ｇｌｕ−ｍＤＡＰ（ＰＧＮ様分子）からなる群から選択される、項目１１に記載の組成物。
（項目１６）
前記ＲＬＲ受容体アゴニストが、二本鎖ＲＮＡ、合成ｐＡＴ  ＲＮＡおよび合成ｐＩＣ
ＲＮＡからなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１７）
前記ＣＤＳアゴニストが細菌から単離された二本鎖ＤＮＡである、項目１に記載の組成物。
（項目１８）
前記ＳＴＩＮＧ受容体アゴニストが、環式ジヌクレオチド；３，３環式ｇＡＭＰ；２，３環式ｇＡＭＰ；２，２環式ｇＡＭＰ；環式二ＧＭＰ；および環式二ＵＭＰからなる群から選択される、項目１に記載の組成物。
（項目１９）
前記活性化剤が１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ｐＩＣ）である、項目２に記載の組成物。
（項目２０）
１つまたは複数の抗微生物剤の有効量をさらに含む、項目１に記載の組成物。
（項目２１）
前記１つまたは複数の抗微生物剤が殺菌性抗生物質である、項目２０に記載の組成物。
（項目２２）
前記殺菌性抗生物質が、ペニシリン誘導体（ペナム）、セファロスポリン（セファム）、モノバクタム、カルバペネム、バンコマイシン、ダプトマイシン、フルオロキノロン、メトロニダゾール、ニトロフラントイン、コトリモキサゾール、テリスロマイシンおよびアミノグリコシド抗生物質からなる群から選択される、項目２１に記載の組成物。
（項目２３）
前記１つまたは複数の抗微生物剤が静菌性抗生物質である、項目２０に記載の組成物。
（項目２４）
前記静菌性抗生物質が、テトラサイクリン抗生物質、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、クリンダマイシンおよびリネゾリドからなる群から選択される、項目２３に記載の組成物。
（項目２５）
前記テトラサイクリン抗生物質が、テトラサイクリン、ドキシサイクリンおよびミノサイクリンからなる群から選択される、項目２４に記載の組成物。
（項目２６）
前記同種異系間葉系幹細胞が哺乳動物の間葉系幹細胞である、項目２０に記載の組成物。
（項目２７）
前記同種異系間葉系幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、項目２６に記載の組成物。
（項目２８）
哺乳動物におけるＭＤＲ細菌による慢性感染創傷の治癒を強化する、項目１に記載の組成物。
（項目２９）
哺乳動物における慢性感染創傷を処置する方法であって、前記哺乳動物に活性化間葉系幹細胞の有効量を投与することを含む方法。
（項目３０）
前記活性化間葉系幹細胞が、前記感染創傷において細菌クリアランスを誘導するか、細菌負荷を低減するか、または細菌クリアランスを誘導し、かつ細菌負荷を低減する、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記活性化間葉系幹細胞が前記哺乳動物に静脈内投与される、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記間葉系幹細胞が、骨髄、脂肪組織、臍帯血、組織生検、血液または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）から得られるかまたはそれに由来する、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
前記ｉＰＳＣ細胞が組織生検または血液細胞に由来する、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記生検が皮膚生検または歯科生検である、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記間葉系幹細胞が、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体９（ＴＬＲ９）アゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）アゴニスト、核オリゴ二量体化ドメイン（ＮＯＤ）受容体アゴニスト、ＲＩＧ−Ｉ受容体（ＲＬＲ）アゴニスト、サイトゾルＤＮＡセンサー（ＣＤＳ）アゴニストおよびＳＴＩＮＧ受容体アゴニストからなる群から選択される１つまたは複数の活性化剤とのインキュベーションによってｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏで活性化される、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
前記ＴＬＲ３アゴニストが、ポリアデニル酸−ポリウリジル酸（ポリ（Ａ：Ｕ）、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸（ｐＩＣ）およびＵＶ不活性化ウイルス粒子からなる群から選択される、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記ＵＶ不活性化ウイルス粒子がポックスウイルス粒子である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記ＴＬＲ９アゴニストが、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ  ＯＤＮ）、阻害性オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）、精製ＤＮＡ、および精製または合成プラスミドＤＮＡからなる群から選択される、項目３５に記載の方法。
（項目３９）
前記ＴＬＲ４アゴニストが、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）およびモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）または加熱殺菌グラム陰性菌からなる群から選択される、項目３５に記載の方法。
（項目４０）
前記ＮＯＤ受容体アゴニストが、ＮＯＤ１、ＮＯＤ２およびＮＯＤ１／２混合アゴニストからなる群から選択される、項目３５に記載の方法。
（項目４１）
前記ＮＯＤ１受容体アゴニストが、ジペプチドＩＥ−ＤＡＰ（ｉＥ−ＤＡＰ（γ−Ｄ−Ｇｌｕ−ｍＤＡＰ）である、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記ＮＯＤ２受容体アゴニストが、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ）およびその合成誘導体からなる群から選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４３）
前記合成誘導体がミラブチドである、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記ＮＯＤ１／２混合アゴニストが、グラム陽性菌および合成分子ＭｕｒＮＡｃ−Ｌ−Ａｌａ−ガンマ−Ｄ−Ｇｌｕ−ｍＤＡＰ（ＰＧＮ様分子）からなる群から選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４５）
前記ＲＬＲ受容体アゴニストが、二本鎖ＲＮＡ、合成ｐＡＴ  ＲＮＡおよび合成ｐＩＣ  ＲＮＡからなる群から選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４６）
前記ＣＤＳアゴニストが細菌から単離された二本鎖ＤＮＡである、項目４０に記載の方法。
（項目４７）
前記ＳＴＩＮＧ受容体アゴニストが、環式ジヌクレオチド；３，３環式ｇＡＭＰ；２，３環式ｇＡＭＰ；２，２環式ｇＡＭＰ；環式二ＧＭＰ；および環式二ＵＭＰからなる群から選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４８）
前記活性化剤が１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ｐＩＣ）である、項目３５に記載の方法。
（項目４９）
前記間葉系幹細胞が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ｐＩＣ）との少なくとも２時間のインキュベーションによって活性化されている、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
間葉系幹細胞の前記有効量が前記哺乳動物の体重１ｋｇにつき細胞数２×１０６である、項目３１に記載の方法。
（項目５１）
前記細胞が１５分間にわたって静脈内カテーテルで投与される、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
１つまたは複数の抗微生物剤の有効量の投与をさらに含む、項目３１に記載の方法。
（項目５３）
前記１つまたは複数の抗微生物剤が殺菌性抗生物質である、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記殺菌性抗生物質が、ペニシリン誘導体（ペナム）、セファロスポリン（セファム）、モノバクタム、カルバペネム、バンコマイシン、ダプトマイシン、フルオロキノロン、メトロニダゾール、ニトロフラントイン、コトリモキサゾール、テリスロマイシンおよびアミノグリコシド抗生物質からなる群から選択される、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記間葉系幹細胞が哺乳動物の間葉系幹細胞である、項目２９に記載の方法。
（項目５６）
前記哺乳動物の間葉系幹細胞が同種異系間葉系幹細胞である、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記哺乳動物の間葉系幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
前記活性化間葉系幹細胞が、前記哺乳動物における感染創傷の治癒を強化する、項目５２に記載の方法。
（項目５９）
前記感染創傷が、擦過傷、裂傷、挫傷、振盪、刺創、皮膚切り傷、外科的創傷、銃創、熱傷、サンバーン、凍傷、化学的創傷、咬刺傷、虫刺傷および電気創傷からなる群から選択される、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
前記活性化間葉系幹細胞が、活性化されていない間葉系幹細胞と比較して高い抗微生物活性を有する、項目３５に記載の方法。
（項目６１）
前記活性化間葉系幹細胞が、前記創傷の発生時または発生後に投与される、項目３１に記載の方法。