【手続補正書】
【提出日】令和2年5月22日(2020.5.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１のフラビウイルスＥタンパク質融合ループの単離組換え類似体であって、
前記類似体は、配列番号１の天然フラビウイルスＥタンパク質融合ループ配列中に存在しないＮ連結グリカンのための少なくとも１つのグリコシル化部位を含み、前記少なくとも１つのグリコシル化部位は、置換されたＮ連結グリコシル化シークオンＡｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒであり、それにより、前記シークオンのＡｓｎ（Ｎ）残基は、天然フラビウイルスＥタンパク質融合ループアミノ酸配列の９８〜１１０位ＤＲＧＷＧＮＧＣＧＬＦＧＫの何れかを占め、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸残基であり、Ｓｅｒ／Ｔｈｒは、セリン残基又はトレオニン残基を示すことを特徴とするフラビウイルスＥタンパク質融合ループの単離組換え類似体。
【請求項２】
請求項１に記載のフラビウイルスＥタンパク質融合ループの単離組換え類似体であって、前記類似体が、天然フラビウイルスＥタンパク質融合ループ配列（配列番号１）中に存在しない２つのグリコシル化部位を含むことを特徴とするフラビウイルスＥタンパク質融合ループの単離組換え類似体。
【請求項３】
フラビウイルスＥタンパク質の単離組換え類似体において、請求項１又は２に記載のフラビウイルスＥタンパク質融合ループの類似体を含むことを特徴とするフラビウイルスＥタンパク質の単離組換え類似体。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の類似体において、それに付着された少なくとも１つのＮ連結グリカンを有することを特徴とする類似体。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項に記載の類似体において、組換えＤＮＡ配列又は組換えＲＮＡ配列の発現産物であることを特徴とする類似体。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の類似体において、Ｎ連結グリコシル化シークオンＡｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒを含み、それにより、前記シークオンのＡｓｎ（Ｎ）残基は、９８〜１０１位及び／又は１０６〜１１０位の何れかを占めることを特徴とする類似体。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか１項に記載の類似体において、Ｘは、以下の１３種のアミノ酸残基Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｈｒ又はＳｅｒの何れかであることを特徴とする類似体。
【請求項８】
請求項１乃至７の何れか１項に記載の類似体において、前記フラビウイルスＥタンパク質は、デングウイルスＥタンパク質であり、シークオンのＡｓｎ（Ｎ）残基は、前記フラビウイルスＥタンパク質融合ループのアミノ酸配列の１０１位、１０８位若しくは１０１位及び１０８位の両方を占めるか、又は、前記フラビウイルスＥタンパク質は、ジカＥタンパク質であり、シークオンのＡｓｎ（Ｎ）残基は、前記フラビウイルスＥタンパク質融合ループのアミノ酸配列の１００位を占めることを特徴とする類似体。
【請求項９】
請求項１乃至８の何れか１項に記載の類似体において、
前記フラビウイルスは、デングウイルスであり、前記類似体フラビウイルスＥタンパク質融合ループのアミノ酸配列９８〜１１０は、
2019520058.tif 000001
から選択され、又は
前記フラビウイルスは、ジカウイルスであり、前記類似体フラビウイルスＥタンパク質融合ループのアミノ酸配列９８〜１１０は、
2019520058.tif 000002
であることを特徴とする類似体。
【請求項１０】
単離組換えＤＮＡ配列又は単離組換えＲＮＡ配列であって、
（ａ）請求項１乃至９の何れか１項に記載のフラビウイルスＥタンパク質融合ループの類似体をコードする配列、
（ｂ）プラスミド若しくは線形ＤＮＡをベースとするワクチンである、前記（ａ）の単離組換えＤＮＡ配列、又は
（ｃ）哺乳類のプロモーターの制御下において、請求項１乃至９の何れか１項に記載のフラビウイルスＥタンパク質融合ループの類似体をコードする、前記（ａ）若しくは前記（ｂ）の単離組換えＤＮＡ配列
を含むことを特徴とする単離組換えＤＮＡ配列又は単離組換えＲＮＡ配列。
【請求項１１】
宿主細胞であって、
（ａ）請求項１０に記載のＤＮＡ配列又はＲＮＡ配列を含む、
（ｂ）請求項１０（ａ）に記載のＤＮＡ配列、請求項１０（ｂ）に記載のプラスミド若しくは線形ＤＮＡをベースとするワクチン免疫原、若しくは請求項１０（ｃ）に記載の単離組換えＤＮＡ配列を含む真核宿主細胞である、又は
（ｃ）（ｉ）請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体を発現し得る、若しくは（ｉｉ）請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体を発現及びグリコシル化し得る、前記（ａ）若しくは前記（ｂ）の宿主細胞である
ことを特徴とする宿主細胞。
【請求項１２】
請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体を作製する方法であって、請求項１１に記載の宿主細胞を前記類似体の発現に適した条件で培養するステップと、前記類似体を単離するステップとを備えることを特徴とする方法。
【請求項１３】
組成物であって、
（ａ）請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体と希釈剤とを含む、又は
（ｂ）前記組成物を接種された対象中で免疫反応を誘発し得、請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体を薬学的に許容される希釈剤、アジュバント及び／又は担体と一緒に含む免疫原性（ワクチン）組成物である
ことを特徴とする組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の組成物において、
（ｉ）ＤＥＮ−１の類似体、ＤＥＮ−２の類似体、ＤＥＮ−３の類似体、ＤＥＮ−４の類似体、及びジカの類似体から選択される１種若しくは複数のフラビウイルス類似体、
（ｉｉ）４種のデングウイルス血清型ＤＥＮ−１、ＤＥＮ−２、ＤＥＮ−３、及びＤＥＮ−４のそれぞれを表す４種のデング類似体、
（ｉｉｉ）ジカウイルス類似体、又は
（ｉｖ）４種のデング血清型ＤＥＮ−１、ＤＥＮ−２、ＤＥＮ−３、及びＤＥＮ−４のそれぞれを表す４種のデング類似体、並びにジカウイルス類似体
を含むことを特徴とする組成物。
【請求項１５】
請求項１乃至９の何れか１項に記載の類似体に特異的に結合し得る結合分子であって、前記結合分子が、抗体又はその断片、ドメイン抗体、タンパク質足場、及びアプタマーから選択されることを特徴とする結合分子。
【請求項１６】
請求項１乃至９、１３、１４又は１５の何れか１項に記載の類似体、組成物又は結合分子において、
（ａ）薬剤としての使用のためのもの
（ｂ）ワクチンとしての使用のためのもの
（ｃ）フラビウイルス感染の予防的処置若しくは治療的処置における使用のためのもの
（ｄ）フラビウイルス感染の予防的処置若しくは治療的処置のための薬剤の製造のためのもの
（ｅ）フラビウイルスによる感染から対象を防御するためのもの
（ｆ）診断薬としての使用のためのもの
であることを特徴とする類似体、組成物又は結合分子。
【請求項１７】
診断キットであって、請求項１乃至９、１３、１４又は１５の何れか１項に記載の類似体、組成物又は結合分子と、前記単離類似体又は結合分子を含有する免疫学的（抗原−抗体）複合体を検出し得る試薬とを含み、
任意に、１種若しくは複数のコントロール標準物質、及び／又は検体希釈剤、及び／又は洗浄緩衝液をさらに含み、
任意に、前記類似体及び／又は結合分子は、固体支持体、例えばマイクロプレートウェル上に固定されており、
任意に、前記単離類似体又は結合分子を含有する免疫学的複合体は、ＥＬＩＳＡによって又はラテラルフローによって検出される
ことを特徴とする診断キット。