【手続補正書】
【提出日】令和2年10月21日(2020.10.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含む、接着細胞を複数の他の細胞から分離する方法：
ａ）複数の他の細胞および接着細胞を含む粗流体組成物を、ＤＬＤ分離を促進するように結合する１つまたは複数の担体と接触させる工程であって、前記接着細胞が、接触により、または接触後に担体と少なくとも部分的に会合して、担体会合化接着細胞複合体を生成し、前記担体会合化接着細胞複合体が、前記複数の他の細胞における細胞に対して増加したサイズを含み、前記担体会合化接着細胞複合体のサイズが、臨界サイズ以上であり、かつ前記複数の他の細胞における細胞が前記臨界サイズ未満のサイズを含む、工程；
ｂ）前記粗流体組成物をデバイスにアプライする工程であって、前記デバイスが、行をなして配列された障害物のアレイを含み、前記行が、お互いに対して横方向へシフトされ、前記行が、前記臨界サイズ以上の粒子を第１の方向へ、および前記臨界サイズ未満の粒子を第２の方向へ偏向させるように構成される、工程；ならびに
ｃ）前記担体会合化接着細胞複合体を含む前記試料を前記デバイスに流す工程であって、前記担体会合化接着細胞複合体が前記障害物により前記第１の方向に偏向され、かつ前記複数の他の細胞における細胞が前記第２の方向に偏向され、それにより、前記担体会合化接着細胞複合体を前記複数の他の細胞から分離する、工程；
ｄ）分離された担体会合化接着細胞複合体を含む流体組成物を収集する工程。
【請求項２】
前記接着細胞が、前記接着細胞および複数の他の細胞を含む粗流体組成物の一部として患者から収集され、前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記接着細胞に初めて担体を結合させるまで、３時間より長く経過していない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記接着細胞に初めて担体を結合させるまで、２時間より長く経過していない、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記接着細胞に初めて担体を結合させるまで、１時間より長く経過していない、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記接着細胞または前記担体会合化細胞複合体が初めて前記デバイスから収集されるまで、４時間より長く経過していない、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記接着細胞または前記担体会合化細胞複合体が初めて前記デバイスから収集されるまで、４時間より長く経過していない、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記担体が、前記接着細胞と特異的に結合する抗体またはアクチベーターを表面上に含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記担体の直径が、前記接着細胞の直径と少なくとも同じ長さである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記担体の全部の直径が、前記接着細胞の直径の少なくとも２倍の長さである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記担体の全部の直径が、前記接着細胞の直径の少なくとも１０倍の長さである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記担体の全部の直径が、１０〜６００μｍである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記接着細胞が、ＭＲＣ−５細胞；ＨｅＬａ細胞；Ｖｅｒｏ細胞；ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞；Ｌ９２９細胞；Ｓｆ２１細胞；Ｓｆ９細胞；Ａ５４９細胞；Ａ９細胞；ＡｔＴ−２０細胞；ＢＡＬＢ／３Ｔ３細胞；ＢＨＫ−２１細胞；ＢＨＬ−１００細胞；ＢＴ細胞；Ｃａｃｏ−２細胞；Ｃｈａｎｇ細胞；Ｃｌｏｎｅ  ９細胞；Ｃｌｏｎｅ  Ｍ−３細胞；ＣＯＳ−１細胞；ＣＯＳ−３細胞；ＣＯＳ−７細胞；ＣＲＦＫ細胞；ＣＶ−１細胞；Ｄ−１７細胞；Ｄａｕｄｉ細胞；ＧＨ１細胞；ＧＨ３細胞；ＨａＫ細胞；ＨＣＴ−１５細胞；ＨＬ−６０細胞；ＨＴ−１０８０細胞；ＨＥＫ細胞、ＨＴ−２９細胞；ＨＵＶＥＣ細胞；Ｉ−１０細胞；ＩＭ−９細胞；ＪＥＧ−２細胞；Ｊｅｎｓｅｎ細胞；Ｊｕｒｋａｔ細胞；Ｋ−５６２細胞；ＫＢ細胞；ＫＧ−１細胞；Ｌ２細胞；ＬＬＣ−ＷＲＣ  ２５６細胞；ＭｃＣｏｙ細胞；ＭＣＦ７細胞；ＷＩ−３８細胞；ＷＩＳＨ細胞；ＸＣ細胞；Ｙ−１細胞；ＣＨＯ細胞；Ｒａｗ  ２６４．７細胞；ＨＥＰ  Ｇ２細胞；ＢＡＥ−１細胞；ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞、およびそれらの任意の誘導体からなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記接着細胞が幹細胞である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
以下の工程を含む、活性化細胞を複数の他の細胞から分離する方法：
ａ）活性化の能力がある細胞および複数の他の細胞を含む粗流体組成物を、１つまたは複数の担体と接触させる工程であって、少なくとも１つの担体が細胞アクチベーターを含み、前記細胞アクチベーターが、接触により、または接触後に、前記細胞アクチベーターによる活性化の能力がある細胞と少なくとも部分的に会合して、担体会合化細胞複合体を生成し、前記細胞アクチベーターによる活性化の能力がある細胞との前記細胞アクチベーターの会合が、前記活性化の能力がある細胞を少なくとも部分的に活性化し、前記担体会合化細胞複合体が、前記複数の他の細胞における細胞に対して増加したサイズを含み、前記担体会合化細胞複合体のサイズが臨界サイズ以上であり、かつ前記複数の他の細胞における細胞が前記臨界サイズ未満のサイズを含む、工程；
ｂ）前記試料をデバイスにアプライする工程であって、前記デバイスが、行をなして配列された障害物のアレイを含み、前記行が、お互いに対して横方向へシフトされ、前記行が、前記臨界サイズ以上の粒子を第１の方向へ、および前記臨界サイズ未満の粒子を第２の方向へ偏向させるように構成される、工程；ならびに
ｃ）前記試料を前記デバイスに流す工程であって、前記担体会合化細胞複合体が前記障害物により前記第１の方向に偏向され、かつ前記複数の他の細胞における細胞が前記第２の方向に偏向され、それにより、前記活性化細胞を前記複数の他の細胞の他の細胞から分離する、工程；
ｄ）分離された担体会合化細胞複合体を含む流体組成物を収集する工程。
【請求項１５】
前記活性化の能力がある細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、制御性Ｔ細胞、マクロファージ、樹状細胞、顆粒球、自然リンパ球系細胞、巨核球、ナチュラルキラー細胞、栓球、滑膜細胞、β細胞、肝臓細胞、膵臓細胞、ＤＥ３溶原化細胞、酵母細胞、植物細胞、および幹細胞からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
細胞アクチベーターがタンパク質である、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記タンパク質が抗体である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記タンパク質が、ＣＤ３、ＣＤ２８、抗原、ヘルパーＴ細胞、受容体、サイトカイン、糖タンパク質、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記細胞アクチベーターが、インスリン、ＩＰＴＧ、ラクトース、アロラクトース、脂質、グリコシド、テルペン、ステロイド、アルカロイド、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記活性化の能力がある細胞が、前記活性化の能力がある細胞および複数の他の細胞を含む粗流体組成物の一部として患者から収集され、前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記活性化の能力がある細胞に担体を結合させるまで、４時間より長く経過していない、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記活性化の能力がある細胞に担体を結合させるまで、３時間より長く経過していない、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、前記活性化の能力がある細胞に担体を結合させるまで、２時間より長く経過していない、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、工程ｃ）が完了するまで、４時間より長く経過していない、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記粗流体組成物の患者からの取得が完了した時点から、工程ｃ）が完了するまで、３時間より長く経過していない、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記担体の全部の直径が、前記活性化の能力がある細胞と少なくとも同じ長さである、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記担体の全部の直径が、前記活性化の能力がある細胞の直径の少なくとも２倍の長さである、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記担体の全部の直径が、請求項１４〜２４のいずれか一項における担体会合化細胞複合体の直径の少なくとも１０倍の長さである、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記担体の直径が、１０〜６００μｍである、請求項１４〜２４のいずれか一項に記載の方法。