【手続補正書】
【提出日】令和1年11月21日(2019.11.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適な滅菌された組成物を生成するための方法であって、
ａ）
ｉ．少なくとも１つのカスパーゼ阻害剤、および
ｉｉ．Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体より選択される少なくとも１つの化合物
を含む組成物を提供するステップ；ならびに
ｂ）滅菌のために前記組成物を照射するステップ
を含む方法。
【請求項２】
滅菌のために前記組成物を照射するステップが、以下：
ａ）前記組成物が、イオン化照射により照射される；
ｂ）前記組成物が、ガンマ線照射、電子ビーム照射、もしくはＸ線により照射される；
ｃ）前記組成物が、ガンマ線照射もしくはＸ線により照射される；
ｄ）前記組成物が、ガンマ線照射により照射される；
ｅ）前記組成物が、５ｋＧｙから３５ｋＧｙ、６ｋＧｙから３０ｋＧｙ、７ｋＧｙから２６ｋＧｙ、約８ｋＧｙから約２５ｋＧｙ、もしくは約８ｋＧｙから約１５ｋＧｙの照射線量で照射される；
ｆ）前記組成物か、５ｋＧｙから３５ｋＧｙ、６ｋＧｙから３０ｋＧｙ、７ｋＧｙから２６ｋＧｙ、約８ｋＧｙから約２５ｋＧｙ、もしくは約８ｋＧｙから約１５ｋＧｙの照射線量でガンマ線照射により照射される；
ｇ）前記組成物が、８ｋＧｙから２５ｋＧｙ、もしくは８ｋＧｙから１５ｋＧｙの照射線量でガンマ線照射により照射される；および／または
ｈ）照射による滅菌の結果、前記組成物の無菌性保証水準（ＳＡＬ）が１０−６以下になる
の特徴の１つ以上を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、固体形態で調製される；
ｂ）前記組成物が、固体形態で調製され、照射前に溶解されて、水性であることが好ましい液体組成物が提供される；
ｄ）前記組成物が、液体形態で調製され照射される；
ｅ）前記組成物が、水性である；
ｆ）前記組成物が、酸性ｐＨを有する；
ｇ）前記組成物が、ｐＨ４．０から７．０、ｐＨ４．１から６．９、ｐＨ４．２から６．８、ｐＨ４．３から６．６、ｐＨ４．４から６．３、ｐＨ４．５から６．０、またはｐＨ４．５から５．５を有する、および／または
ｈ）前記組成物が緩衝されている
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体より選択される前記少なくとも１つの化合物を、２０ｍｇ／ｍｌ未満、１５ｍｇ／ｍｌ以下、１０ｍｇ／ｍｌ以下、７ｍｇ／ｍｌ以下、３ｍｇ／ｍｌ以下、または１．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度で含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、
ｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６、アスコルビン酸、およびトロロックスより選択される化合物；
ｉｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、アスコルビン酸、およびトロロックスより選択される化合物；
ｉｉｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６、およびアスコルビン酸より選択される化合物；
ｉｖ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、およびアスコルビン酸より選択される化合物；または
ｖ．Ｎ−アセチル−システイン
を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ａ）
ｉ．好ましくは請求項１３に記載の少なくとも１つのカスパーゼ阻害剤、および
ｉｉ．
ａａ）０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度のＮ−アセチル−システイン；
ａｂ）還元型であることが好ましい、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌまたは０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度のグルタチオン；
ａｃ）２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度のアスコルビン酸；
ａｄ）０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度のビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６；
ａｅ）０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度のトロロックス
の少なくとも１つを含む組成物を提供するステップ；ならびに
ｂ）滅菌のために前記組成物を照射するステップ
を含み、
前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインをａａ）に記載の濃度で含むことが好ましい、
請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射される、および／または、前記組成物が、滅菌のためにガンマ線照射により照射される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを含む；
ｂ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを、０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；
ｃ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを含み、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される；および／または
ｄ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを、０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、水性液体形態で滅菌される
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、グルタチオンを含む；
ｂ）前記組成物が、グルタチオンを還元型として含む；
ｃ）前記組成物が、グルタチオンを、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌ、または０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい；
ｄ）前記組成物が、グルタチオンを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌され、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい；および／または
ｅ）前記組成物が、グルタチオンを、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌ、または０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、水性液体形態で滅菌され、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを含み、前記水溶性ビタミンが、アスコルビン酸、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ６、葉酸塩または葉酸、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびパントテン酸より選択されることが好ましく、前記組成物が、アスコルビン酸を含むことがさらに好ましい；
ｂ）前記組成物が、アスコルビン酸、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ６、葉酸塩または葉酸、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびパントテン酸より選択されることが好ましく、アスコルビン酸であることがさらに好ましい少なくとも１つの水溶性ビタミンを、２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度で含む；
ｃ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｄ）前記組成物が、アスコルビン酸を含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｅ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度で含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｆ）前記組成物が、アスコルビン酸を２０ｍｇ／ｍｌ未満の濃度で含み、前記濃度が、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌより選択されてもよく、また、前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される；
ｇ）前記組成物が、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６を０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；ならびに／または
ｈ）前記組成物が、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６を０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される
の特徴の１つ以上を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体を含み、前記水溶性ビタミンＥ誘導体は、トロロックスであることが好ましい；
ｂ）前記組成物が、トロロックスを含む；
ｃ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、さらに好ましくはトロロックスを、０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；
ｄ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、好ましくはトロロックスを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｅ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、必要に応じてトロロックスを、０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記カスパーゼ阻害剤が、以下：
ａ）前記カスパーゼ阻害剤が、汎カスパーゼ阻害剤である；
ｂ）前記カスパーゼ阻害剤が、改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｃ）前記カスパーゼ阻害剤が、好ましくはカルボキシル末端においてＯ−フェノキシ（ＯＰｈ）基で改変されている改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｄ）前記カスパーゼ阻害剤が、好ましくはＮ末端においてグルタミン（Ｑ）基で改変されている改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｅ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈ、Ｂｏｃ−Ｄ−（ＯＭｅ）−ＦＭＫおよびＺ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯＭｅ）−ＦＭＫから成る群より選択される；
ｆ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈおよびＺ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯＭｅ）−ＦＭＫから成る群より選択される；ならびに／または
ｇ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈである
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が、
ａ）抗凝固薬および／またはキレート剤、好ましくはＥＤＴＡ；
ｂ）安定化剤としてポリ（オキシエチレン）ポリマー；および／または
ｃ）少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミド
のうちの１つ以上をさらに含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記組成物が、少なくとも１つのポリ（オキシエチレン）ポリマーをさらに含み、必要に応じて、前記組成物が、以下：
ａ）前記ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、ポリエチレングリコール、好ましくは非置換ポリエチレングリコールである；
ｂ）前記組成物が、少なくとも１５００の分子量を有する高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含む；
ｃ）前記組成物が、１５００未満の分子量を有する少なくとも１つのポリ（オキシエチレン）ポリマー、好ましくは１０００以下の分子量を有する低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーを含み、さらに好ましくは、前記分子量は、１００から８００、１５０から７００、２００から６００および２００から５００より選択される範囲に存する；
ｄ）前記組成物が、少なくとも１５００の分子量を有する高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマー、および、高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーの分子量より少なくとも１００、好ましくは少なくとも２００、少なくとも３００または少なくとも４００低い少なくとも１つのさらなるポリ（オキシエチレン）ポリマーであって、好ましくは１０００以下の分子量を有する低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーである、さらなるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含む；ならびに／または
ｅ）前記組成物が、高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーおよび低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含み、前記高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、１５００から５００００、１５００から４００００、２０００から３００００、２５００から２５０００、３０００から２００００、３５００から１５０００および４０００から１２５００より選択される範囲に存する分子量を有し、かつ／または、前記低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、１０００以下の分子量を有し、好ましくは、前記分子量は、１００から１０００、１５０から８００、１５０から７００、２００から６００および２００から５００より選択される範囲に存する
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記組成物が、少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミドをさらに含み、必要に応じて、前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、式１
【化６】
2019500023.tif 000001
（式中、Ｒ１は、水素残基またはアルキル残基、好ましくはＣ１−Ｃ５アルキル残基、Ｃ１−Ｃ４アルキル残基またはＣ１−Ｃ３アルキル残基、さらに好ましいＣ１−Ｃ２アルキル残基であり、Ｒ２およびＲ３は同一であり、もしくは異なり、水素残基、および線状もしくは分岐した様式に配列された１〜２０原子の炭素鎖長を有する炭化水素残基、好ましくはアルキル残基から選択され、Ｒ４は、酸素、硫黄もしくはセレン残基であり、好ましくは、Ｒ４は酸素である）
に従う少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミドを含む；ならびに／または
ｂ）前記組成物が、Ｎ，Ｎ−ジアルキルプロパンアミド、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルプロパンアミド、および／もしくはブタンアミド
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記組成物が、式１
【化７】
2019500023.tif 000002
（式中、Ｒ１は、水素残基またはアルキル残基、好ましくはＣ１−Ｃ５アルキル残基、Ｃ１−Ｃ４アルキル残基またはＣ１−Ｃ３アルキル残基、さらに好ましいＣ１−Ｃ２アルキル残基であり、Ｒ２およびＲ３は同一であり、または異なり、水素残基、および線状または分岐した様式に配列された１〜２０原子の炭素鎖長を有する炭化水素残基、好ましくはアルキル残基から選択され、Ｒ４は、酸素、硫黄またはセレン残基であり、好ましくは、Ｒ４は酸素である）
に従う少なくとも１つの化合物を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
式１に従う前記少なくとも１つの化合物が、第一級、第二級または第三級カルボン酸アミドである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記滅菌された組成物が、以下：
ｉ）細胞含有試料に含まれている細胞内核酸の安定化に好適であり、好ましくは、細胞内ＲＮＡおよび／または細胞内ＤＮＡを安定化する；
ｉｉ）細胞含有試料中に存在する核酸の分解を、安定化に起因して低減させる；
ｉｉｉ）試料に含有されている細胞におけるトランスクリプトームおよび／または転写レベルの安定化に好適であり、好ましくは、ｃ−ｆｏｓ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−８およびｐ５３より選択される１つ以上のマーカー遺伝子の転写レベルを、安定化すると少なくとも１２時間にわたって、少なくとも２４時間にわたっておよび好ましくは少なくとも４８時間にわたって安定化するのに好適である
の特徴の１つ以上を有する、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記滅菌された組成物により有核細胞または一般の細胞の溶解が誘導されない、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記滅菌された組成物が、核酸−核酸架橋、タンパク質−核酸架橋および／またはタンパク質−タンパク質架橋を誘導する架橋剤を含まず、また、ホルムアルデヒド放出剤の使用を含まない、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記滅菌された組成物が、以下：
ａ）安定化により、安定化された細胞含有試料から細胞を単離することが可能になる；
ｂ）前記細胞含有試料が血液試料であり、血液試料に含有されている細胞が安定化される；
ｃ）前記細胞含有試料が血液試料であり、白血球が安定化される；
ｄ）細胞の形態が保存される；
ｅ）有核細胞の形態が保存される；
ｆ）前記試料が血液試料であり、含有されるリンパ球および／もしくは単球が安定化される；
ｇ）細胞表面エピトープが保存される；ならびに／または
ｈ）細胞表面タンパク質が保存される
の安定化特性を有する、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
滅菌可能な組成物であって、滅菌された形態の前記組成物が、生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適であり、前記組成物が、請求項１から１６のいずれか一項または請求項１７から２２のいずれか一項に記載されているものであり、好ましくは前記組成物が滅菌されている、滅菌可能な組成物。
【請求項２４】
細胞含有生体試料に含まれている細胞外核酸集団を安定化するための方法であって、
ａ）請求項１から１６のいずれか一項もしくは請求項１７から２２のいずれか一項に記載の方法に従って生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適な滅菌された組成物を得る、または滅菌された形態の請求項２３に記載の組成物を得るステップ；および
ｂ）前記細胞含有生体試料を、安定化のために前記滅菌された組成物と接触させるステップ
を含む方法。
【請求項２５】
安定化された細胞含有生体試料から細胞外核酸を単離するための方法であって、
ａ）請求項２４に記載の方法に従って細胞含有生体試料を安定化するステップ；および
ｂ）細胞外核酸を単離するステップ
を含む方法。
【請求項２６】
生体試料の細胞外核酸集団またはその成分の安定化に好適な組成物を照射による滅菌中に防護するための、Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体から成る群より選択される少なくとも１つの化合物の使用。
【請求項２７】
安定化された細胞含有生体試料から核酸を単離するための方法であって、
ａ）細胞含有生体試料を安定化するステップであり、安定化が、
ｉ）請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法に従って滅菌された組成物を得ること；または
ｉｉ）滅菌されている、請求項２３に記載の組成物を得ること；および
前記細胞含有生体試料を前記滅菌された組成物と接触させること
を含む、ステップ；ならびに
ｂ）前記安定化された試料から核酸を単離するステップ
を含む方法。
【請求項２８】
ａａ）ステップｂ）が、細胞内核酸、好ましくは細胞内ＲＮＡおよび／またはゲノムＤＮＡなどの細胞内ＤＮＡを単離することを含む；
ｂｂ）ステップｂ）が、細胞外核酸を単離することを含む；
ｃｃ）前記方法が、前記安定化された試料から細胞を取り出し、取り出された細胞から核酸を単離するステップを含む
の特徴の１つ以上を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
安定化された細胞含有生体試料から細胞を単離するための方法であって、
ａ）細胞含有生体試料を安定化するステップであり、安定化が、
ｉ）請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法に従って滅菌された組成物を得ること；または
ｉｉ）滅菌されている、請求項２３に記載の組成物を得ること；および
前記細胞含有生体試料を前記滅菌された組成物と接触させること
を含むステップ；ならびに
ｂ）前記安定化された試料から細胞を単離するステップを含む方法。
【請求項３０】
請求項２３に記載の組成物を含む試料採集デバイスであって、必要に応じて、前記採集デバイスは滅菌されている、かつ／または必要に応じて、前記試料採集デバイスが容器または試料採集チューブである、採集デバイス。
【請求項３１】
前記組成物が、
ｉ．好ましくは請求項１３に記載の少なくとも１つのカスパーゼ阻害剤、および
ｉｉ．
ａａ）０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度のＮ−アセチル−システイン；
ａｂ）還元型であることが好ましい、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌまたは０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度のグルタチオン；
ａｃ）２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度のアスコルビン酸；
ａｄ）０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度のビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６；
ａｅ）０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度のトロロックス
の少なくとも１つを含む、請求項３０に記載の採集デバイス。
【請求項３２】
前記採集デバイスが滅菌されており、好ましくは前記採集デバイスおよびそこに含まれる前記組成物が一緒に滅菌されている、請求項３０または３１に記載の採集デバイス。
【請求項３３】
前記組成物が、前記採集デバイスに採集する試料量の安定化をもたらすのに有効な量で前記採集デバイスに含まれ、必要に応じて、前記安定化組成物は、液体であり、前記生体試料と、１０：１から１：２０、５：１から１：１５、１：１から１：１０、１：４から１：１０、および１：５から１：９より選択される体積比、特に約１：６から１：８で接触させられる、請求項３０から３２のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３４】
排気されている、請求項３０から３３のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３５】
固体または液体いずれかの形態の定義された量の前記安定化組成物が予め充填されており、定義された真空度が与えられ、セプタムで封止されている、請求項３０から３４のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３６】
前記採集デバイスが、開口上部と、底部と、チャンバーを規定するそれらの間に広がる側壁とを有し、ここで、前記組成物は前記チャンバーに含まれており、必要に応じて、前記組成物は水性液体であり、ここで、前記採集デバイスはチューブであり、前記底部は閉鎖底部であり、前記採集デバイスは前記開口上部にクロージャーをさらに備え、前記チャンバーは減圧下にあり、好ましくは、前記クロージャーは針またはカニューレでの貫入が可能であり、指定体積の液体試料を前記チャンバーに引き込むように前記減圧が選択される、請求項３０から３５のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３７】
前記採集デバイスが、滅菌されており、請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法によって得ることができる、かつ／または得られた滅菌された組成物を含み、ここで、前記滅菌された試料採集デバイスは、請求項１から２２の１つまたは複数の方法によって得ることができる、かつ／または得られている、請求項３０から３６のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３８】
ｉ）  前記採集デバイスが、滅菌された形態の前記組成物および細胞含有生体試料を含む、かつ／または
ｉｉ）  前記採集デバイスが、滅菌された形態の前記組成物を含み、ここで、前記組成物は液体であり、細胞含有生体試料と混合されており、
必要に応じて、前記細胞含有生体試料は、全血である、かつ／または細胞外核酸を含む、
請求項３０から３７のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【請求項３９】
前記採集デバイスのチャンバーに患者由来の生体試料、好ましくは血液が直接採集され、好ましくは引き込まれることを特徴とする、請求項３０から３８のいずれか一項に記載の採集デバイス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
本出願の他の目的、特徴、利点および態様は、以下の記載および添付の特許請求の範囲から当業者に明らかになる。しかし、以下の記載、添付の特許請求の範囲および特定の実施例は、本出願の好ましい実施形態を示すものであるが、単に実例として与えるものに過ぎないことを理解されたい。開示されている発明の主旨および範囲内の種々の変化および改変は、以下を読むことにより当業者には容易に明らかになろう。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適な滅菌された組成物を生成するための方法であって、
ａ）
ｉ．少なくとも１つのカスパーゼ阻害剤、および
ｉｉ．Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体より選択される少なくとも１つの化合物
を含む組成物を提供するステップ；ならびに
ｂ）滅菌のために前記組成物を照射するステップ
を含む方法。
（項目２）
滅菌のために前記組成物を照射するステップが、以下：
ａ）前記組成物が、イオン化照射により照射される；
ｂ）前記組成物が、ガンマ線照射、電子ビーム照射、もしくはＸ線により照射される；
ｃ）前記組成物が、ガンマ線照射もしくはＸ線により照射される；
ｄ）前記組成物が、ガンマ線照射により照射される；
ｅ）前記組成物が、５ｋＧｙから３５ｋＧｙ、６ｋＧｙから３０ｋＧｙ、７ｋＧｙから２６ｋＧｙ、約８ｋＧｙから約２５ｋＧｙ、もしくは約８ｋＧｙから約１５ｋＧｙの照射線量で照射される；
ｆ）前記組成物か、５ｋＧｙから３５ｋＧｙ、６ｋＧｙから３０ｋＧｙ、７ｋＧｙから２６ｋＧｙ、約８ｋＧｙから約２５ｋＧｙ、もしくは約８ｋＧｙから約１５ｋＧｙの照射線量でガンマ線照射により照射される；
ｇ）前記組成物が、８ｋＧｙから２５ｋＧｙ、もしくは８ｋＧｙから１５ｋＧｙの照射線量でガンマ線照射により照射される；および／または
ｈ）照射による滅菌の結果、前記組成物の無菌性保証水準（ＳＡＬ）が１０−６以下になる
の特徴の１つ以上を有する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、固体形態で調製される；
ｂ）前記組成物が、固体形態で調製され、照射前に溶解されて、水性であることが好ましい液体組成物が提供される；
ｄ）前記組成物が、液体形態で調製され照射される；
ｅ）前記組成物が、水性である；
ｆ）前記組成物が、酸性ｐＨを有する；
ｇ）前記組成物が、ｐＨ４．０から７．０、ｐＨ４．１から６．９、ｐＨ４．２から６．８、ｐＨ４．３から６．６、ｐＨ４．４から６．３、ｐＨ４．５から６．０、またはｐＨ４．５から５．５を有する、および／または
ｈ）前記組成物が緩衝されている
の特徴の１つ以上を有する、項目１から２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４）
前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射される、項目１から３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体より選択される前記少なくとも１つの化合物を、２０ｍｇ／ｍｌ未満、１５ｍｇ／ｍｌ以下、１０ｍｇ／ｍｌ以下、７ｍｇ／ｍｌ以下、３ｍｇ／ｍｌ以下、または１．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度で含む、項目１から４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記組成物が、
ｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６、アスコルビン酸、およびトロロックスより選択される化合物；
ｉｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、アスコルビン酸、およびトロロックスより選択される化合物；
ｉｉｉ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６、およびアスコルビン酸より選択される化合物；
ｉｖ．Ｎ−アセチル−システイン、還元型であることが好ましいグルタチオン、およびアスコルビン酸より選択される化合物；または
ｖ．Ｎ−アセチル−システイン
を含む、項目１から５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
ａ）
ｉ．好ましくは項目１３に記載の少なくとも１つのカスパーゼ阻害剤、および
ｉｉ．
ａａ）０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度のＮ−アセチル−システイン；
ａｂ）還元型であることが好ましい、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌまたは０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度のグルタチオン；
ａｃ）２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度のアスコルビン酸；
ａｄ）０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度のビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６；
ａｅ）０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度のトロロックス
の少なくとも１つを含む組成物を提供するステップ；ならびに
ｂ）滅菌のために前記組成物を照射するステップ
を含み、
前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインをａａ）に記載の濃度で含むことが好ましい、
項目１から６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射される、および／または、前記組成物が、滅菌のためにガンマ線照射により照射される、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを含む；
ｂ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを、０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；
ｃ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを含み、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される；および／または
ｄ）前記組成物が、Ｎ−アセチル−システインを、０．０５ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから１ｍｇ／ｍｌ、または０．３ｍｇ／ｍｌから０．８ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、水性液体形態で滅菌される
の特徴の１つ以上を有する、項目１から８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、グルタチオンを含む；
ｂ）前記組成物が、グルタチオンを還元型として含む；
ｃ）前記組成物が、グルタチオンを、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌ、または０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい；
ｄ）前記組成物が、グルタチオンを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌され、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい；および／または
ｅ）前記組成物が、グルタチオンを、０．０３ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌから４ｍｇ／ｍｌ、または０．４ｍｇ／ｍｌから１．３ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、水性液体形態で滅菌され、前記グルタチオンは、還元型であることが好ましい
の特徴の１つ以上を有する、項目１から９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを含み、前記水溶性ビタミンが、アスコルビン酸、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ６、葉酸塩または葉酸、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびパントテン酸より選択されることが好ましく、前記組成物が、アスコルビン酸を含むことがさらに好ましい；
ｂ）前記組成物が、アスコルビン酸、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ６、葉酸塩または葉酸、ビタミンＢ１２、ビオチンおよびパントテン酸より選択されることが好ましく、アスコルビン酸であることがさらに好ましい少なくとも１つの水溶性ビタミンを、２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度で含む；
ｃ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｄ）前記組成物が、アスコルビン酸を含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｅ）前記組成物が、少なくとも１つの水溶性ビタミンを２０ｍｇ／ｍｌ未満、例えば、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌなどの濃度で含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｆ）前記組成物が、アスコルビン酸を２０ｍｇ／ｍｌ未満の濃度で含み、前記濃度が、０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌから１３ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌから１２ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌより選択されてもよく、また、前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される；
ｇ）前記組成物が、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６を０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；ならびに／または
ｈ）前記組成物が、ビタミンＢ、好ましくはビタミンＢ６を０．１ｍｇ／ｍｌから１５ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１４ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌから１１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌから７．５ｍｇ／ｍｌ、または０．２ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、前記組成物が、液体形態、好ましくは水性形態で照射により滅菌される
の特徴の１つ以上を含む、項目１から１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体を含み、前記水溶性ビタミンＥ誘導体は、トロロックスであることが好ましい；
ｂ）前記組成物が、トロロックスを含む；
ｃ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、さらに好ましくはトロロックスを、０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度で含む；
ｄ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、好ましくはトロロックスを含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される；
ｅ）前記組成物が、水溶性ビタミンＥ誘導体、必要に応じてトロロックスを、０．５ｍｇ／ｍｌから５ｍｇ／ｍｌ、０．７５ｍｇ／ｍｌから３ｍｇ／ｍｌ、０．９ｍｇ／ｍｌから２ｍｇ／ｍｌ、または１ｍｇ／ｍｌから１．４ｍｇ／ｍｌの濃度で含み、液体形態、好ましくは水性形態で滅菌される
の特徴の１つ以上を有する、項目１から１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記カスパーゼ阻害剤が、以下：
ａ）前記カスパーゼ阻害剤が、汎カスパーゼ阻害剤である；
ｂ）前記カスパーゼ阻害剤が、改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｃ）前記カスパーゼ阻害剤が、好ましくはカルボキシル末端においてＯ−フェノキシ（ＯＰｈ）基で改変されている改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｄ）前記カスパーゼ阻害剤が、好ましくはＮ末端においてグルタミン（Ｑ）基で改変されている改変カスパーゼ特異的ペプチドを含む；
ｅ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈ、Ｂｏｃ−Ｄ−（ＯＭｅ）−ＦＭＫおよびＺ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯＭｅ）−ＦＭＫから成る群より選択される；
ｆ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈおよびＺ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯＭｅ）−ＦＭＫから成る群より選択される；ならびに／または
ｇ）前記カスパーゼ阻害剤が、Ｑ−ＶＤ−ＯＰｈである
の特徴の１つ以上を有する、項目１から１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記組成物が、
ａ）抗凝固薬および／またはキレート剤、好ましくはＥＤＴＡ；
ｂ）安定化剤としてポリ（オキシエチレン）ポリマー；および／または
ｃ）少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミド
のうちの１つ以上をさらに含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記組成物が、少なくとも１つのポリ（オキシエチレン）ポリマーをさらに含み、必要に応じて、前記組成物が、以下：
ａ）前記ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、ポリエチレングリコール、好ましくは非置換ポリエチレングリコールである；
ｂ）前記組成物が、少なくとも１５００の分子量を有する高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含む；
ｃ）前記組成物が、１５００未満の分子量を有する少なくとも１つのポリ（オキシエチレン）ポリマー、好ましくは１０００以下の分子量を有する低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーを含み、さらに好ましくは、前記分子量は、１００から８００、１５０から７００、２００から６００および２００から５００より選択される範囲に存する；
ｄ）前記組成物が、少なくとも１５００の分子量を有する高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマー、および、高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーの分子量より少なくとも１００、好ましくは少なくとも２００、少なくとも３００または少なくとも４００低い少なくとも１つのさらなるポリ（オキシエチレン）ポリマーであって、好ましくは１０００以下の分子量を有する低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーである、さらなるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含む；ならびに／または
ｅ）前記組成物が、高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーおよび低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーであるポリ（オキシエチレン）ポリマーを含み、前記高分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、１５００から５００００、１５００から４００００、２０００から３００００、２５００から２５０００、３０００から２００００、３５００から１５０００および４０００から１２５００より選択される範囲に存する分子量を有し、かつ／または、前記低分子量ポリ（オキシエチレン）ポリマーが、１０００以下の分子量を有し、好ましくは、前記分子量は、１００から１０００、１５０から８００、１５０から７００、２００から６００および２００から５００より選択される範囲に存する
の特徴の１つ以上を有する、項目１から１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記組成物が、少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミドをさらに含み、必要に応じて、前記組成物が、以下：
ａ）前記組成物が、式１
【化６】
2019500023.tif 000003
（式中、Ｒ１は、水素残基またはアルキル残基、好ましくはＣ１−Ｃ５アルキル残基、Ｃ１−Ｃ４アルキル残基またはＣ１−Ｃ３アルキル残基、さらに好ましいＣ１−Ｃ２アルキル残基であり、Ｒ２およびＲ３は同一であり、もしくは異なり、水素残基、および線状もしくは分岐した様式に配列された１〜２０原子の炭素鎖長を有する炭化水素残基、好ましくはアルキル残基から選択され、Ｒ４は、酸素、硫黄もしくはセレン残基であり、好ましくは、Ｒ４は酸素である）
に従う少なくとも１つの第一級、第二級または第三級アミドを含む；ならびに／または
ｂ）前記組成物が、Ｎ，Ｎ−ジアルキルプロパンアミド、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルプロパンアミド、および／もしくはブタンアミド
の特徴の１つ以上を有する、項目１から１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記組成物が、式１
【化７】
2019500023.tif 000004
（式中、Ｒ１は、水素残基またはアルキル残基、好ましくはＣ１−Ｃ５アルキル残基、Ｃ１−Ｃ４アルキル残基またはＣ１−Ｃ３アルキル残基、さらに好ましいＣ１−Ｃ２アルキル残基であり、Ｒ２およびＲ３は同一であり、または異なり、水素残基、および線状または分岐した様式に配列された１〜２０原子の炭素鎖長を有する炭化水素残基、好ましくはアルキル残基から選択され、Ｒ４は、酸素、硫黄またはセレン残基であり、好ましくは、Ｒ４は酸素である）
に従う少なくとも１つの化合物を含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
式１に従う前記少なくとも１つの化合物が、第一級、第二級または第三級カルボン酸アミドである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記滅菌された組成物が、以下：
ｉ）細胞含有試料に含まれている細胞内核酸の安定化に好適であり、好ましくは、細胞内ＲＮＡおよび／または細胞内ＤＮＡを安定化する；
ｉｉ）細胞含有試料中に存在する核酸の分解を、安定化に起因して低減させる；
ｉｉｉ）試料に含有されている細胞におけるトランスクリプトームおよび／または転写レベルの安定化に好適であり、好ましくは、ｃ−ｆｏｓ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−８およびｐ５３より選択される１つ以上のマーカー遺伝子の転写レベルを、安定化すると少なくとも１２時間にわたって、少なくとも２４時間にわたっておよび好ましくは少なくとも４８時間にわたって安定化するのに好適である
の特徴の１つ以上を有する、項目１から１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記滅菌された組成物により有核細胞または一般の細胞の溶解が誘導されない、項目１から１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記滅菌された組成物が、核酸−核酸架橋、タンパク質−核酸架橋および／またはタンパク質−タンパク質架橋を誘導する架橋剤を含まず、また、ホルムアルデヒド放出剤の使用を含まない、項目１から２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記滅菌された組成物が、以下：
ａ）安定化により、安定化された細胞含有試料から細胞を単離することが可能になる；
ｂ）前記細胞含有試料が血液試料であり、血液試料に含有されている細胞が安定化される；
ｃ）前記細胞含有試料が血液試料であり、白血球が安定化される；
ｄ）細胞の形態が保存される；
ｅ）有核細胞の形態が保存される；
ｆ）前記試料が血液試料であり、含有されるリンパ球および／もしくは単球が安定化される；
ｇ）細胞表面エピトープが保存される；ならびに／または
ｈ）細胞表面タンパク質が保存される
の安定化特性を有する、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
滅菌可能な組成物であって、滅菌された形態の前記組成物が、生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適であり、前記組成物が、項目１から１６のいずれか一項または項目１７から２２のいずれか一項に記載されているものであり、好ましくは前記組成物が滅菌されている、滅菌可能な組成物。
（項目２４）
細胞含有生体試料に含まれている細胞外核酸集団を安定化するための方法であって、
ａ）項目１から１６のいずれか一項もしくは項目１７から２２のいずれか一項に記載の方法に従って生体試料の細胞外核酸集団の安定化に好適な滅菌された組成物を得る、または滅菌された形態の項目２３に記載の組成物を得るステップ；および
ｂ）前記細胞含有生体試料を、安定化のために前記滅菌された組成物と接触させるステップ
を含む方法。
（項目２５）
安定化された細胞含有生体試料から細胞外核酸を単離するための方法であって、
ａ）項目２４に記載の方法に従って細胞含有生体試料を安定化するステップ；および
ｂ）細胞外核酸を単離するステップ
を含む方法。
（項目２６）
生体試料の細胞外核酸集団またはその成分の安定化に好適な組成物を照射による滅菌中に防護するための、Ｎ−アセチル−システインまたはグルタチオンであるチオアルコール、水溶性ビタミン、および水溶性ビタミンＥ誘導体から成る群より選択される少なくとも１つの化合物の使用。
（項目２７）
安定化された細胞含有生体試料から核酸を単離するための方法であって、
ａ）細胞含有生体試料を安定化するステップであり、安定化が、
ｉ）項目１から２２のいずれか一項に記載の方法に従って滅菌された組成物を得ること；または
ｉｉ）滅菌されている、項目２３に記載の組成物を得ること；および
前記細胞含有生体試料を前記滅菌された組成物と接触させること
を含む、ステップ；ならびに
ｂ）前記安定化された試料から核酸を単離するステップ
を含む方法。
（項目２８）
ａａ）ステップｂ）が、細胞内核酸、好ましくは細胞内ＲＮＡおよび／またはゲノムＤＮＡなどの細胞内ＤＮＡを単離することを含む；
ｂｂ）ステップｂ）が、細胞外核酸を単離することを含む；
ｃｃ）前記方法が、前記安定化された試料から細胞を取り出し、取り出された細胞から核酸を単離するステップを含む
の特徴の１つ以上を有する、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
安定化された細胞含有生体試料から細胞を単離するための方法であって、
ａ）細胞含有生体試料を安定化するステップであり、安定化が、
ｉ）項目１から２２のいずれか一項に記載の方法に従って滅菌された組成物を得ること；または
ｉｉ）滅菌されている、項目２３に記載の組成物を得ること；および
前記細胞含有生体試料を前記滅菌された組成物と接触させること
を含むステップ；ならびに
ｂ）前記安定化された試料から細胞を単離するステップを含む方法。