【手続補正書】
【提出日】令和2年5月18日(2020.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトシトリンポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含むメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）からなる脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、ここでそれを必要とする対象に単回静脈内投与として投与される時に、
（ｉ）アンモニアの血中及び／または血漿中レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、または少なくとも１２０時間にわたって、ＩＩ型シトルリン血症（ＣＴＬＮ２）を有する対象の対照基準である血中及び／または血漿中アンモニアレベルと比較して、少なくとも２分の１、少なくとも３分の１、少なくとも５分の１、少なくとも１０分の１、少なくとも１５分の１、少なくとも２０分の１、もしくは少なくとも５０分の１低減させるのに十分であり、及び／または
（ｉｉ）トリグリセリドの血中、血漿中、及び／または肝臓中レベルを、投与後少なくとも２４時間、投与後少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、ＣＴＬＮ２を有する対象の対照基準である血中及び／または血漿中トリグリセリドレベルと比較して、少なくとも１．５分の１、少なくとも２分の１、少なくとも３分の１、少なくとも４分の１、少なくとも５分の１、少なくとも１０分の１、もしくは少なくとも２０分の１低減させるのに十分である、医薬組成物。
【請求項２】
ヒトシトリンポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡからなる脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、ここでそれを必要とする対象に単回静脈内投与として投与される時に、
（ｉ）アンモニアの血中及び／または血漿中レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、または少なくとも１２０時間にわたって、対象のベースラインレベルまたはアンモニアの基準血中及び／または血漿中レベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％低減させるのに十分であり、及び／または
（ｉｉ）トリグリセリドの血中、血漿中、及び／または肝臓中レベルを、投与後少なくとも２４時間にわたって、投与後少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、または少なくとも１２０時間にわたって、対象のベースラインレベルまたは基準血中及び／または血漿中トリグリセリドレベルと比較して、少なくとも３０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％低減させるのに十分である、医薬組成物。
【請求項３】
ヒトシトリンポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡからなる脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、ここでそれを必要とする対象に単回静脈内投与として投与される時に、
（ｉ）肝シトリン活性レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、正常生理学的シトリン活性レベル以上に増加させるのに十分であり、及び／または
（ｉｉ）肝シトリン活性レベルを、投与の少なくとも２４時間後、少なくとも４８時間後、少なくとも７２時間後、または少なくとも９６時間後、前記正常肝シトリン活性レベルの５０％以上に増加させるのに十分である、医薬組成物。
【請求項４】
（ａ）ヒトシトリンポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡ、および（ｂ）送達剤を含む医薬組成物であって、ここで該送達剤が、式（ＩＩ）の化合物：
【化１】
2019519511.tif 000001
またはその塩もしくは立体異性体であり、式中、
ｌは、１、２、３、４、及び５から選択され、
Ｍ１は、結合またはＭ’であり、
Ｒ４は、非置換Ｃ１−３アルキル、または−（ＣＨ２）ｎＱであり、式中、ｎは、２、３、もしくは４であり、Ｑは、ＯＨ、−ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｒ８、−ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであり、
Ｍ及びＭ’は独立に、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、
Ｒ２及びＲ３は独立に、Ｈ、Ｃ１−１４アルキル、及びＣ２−１４アルケニルからなる群から選択される、医薬組成物。
【請求項５】
前記化合物が、化合物１〜化合物２３２、それらの塩及び立体異性体、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記化合物が、化合物１８、その塩もしくは立体異性体、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
送達剤が、更に、リン脂質、構造脂質、およびＰＥＧ脂質を含む、請求項４〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
（ａ）リン脂質が
１，２−ジリノレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、
１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロホスホコリン（ＤＭＰＣ）、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、
１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、
１，２−ジウンデカノイル−ｓｎ−グリセロホスホコリン（ＤＵＰＣ）、
１−パルミトイル２オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、
１，２−ジオクタデセニル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、
１−オレオイル−２−コレステリルヘミスクシノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、
１−ヘキサデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（Ｃ１６リゾＰＣ）、
１，２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、
１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＭＥ  １６：０  ＰＥ）、
１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジリノレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ラク−（１−グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、
スフィンゴミエリン、及びそれらの任意の混合物からなる群から選択され；および／または
（ｂ）構造脂質が、コレステロール、フェコステロール、シトステロール、エルゴステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、トマチジン、ウルソール酸、α−トコフェロール、及びそれらの任意の混合物からなる群から選択される
請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記ＯＲＦが、配列番号５〜２９、１２９、１３２、１３５、及び１３８からなる群から選択される配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
（ｉ）５’末端キャップ；
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）；
（ｉｉｉ）ヒトシトリンポリペプチドをコードするＯＲＦであって、配列番号５〜２９、１２９、１３２、１３５、及び１３８からなる群から選択される配列
と少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、ＯＲＦ；
（ｉｖ）３’ＵＴＲ、及び
（ｖ）ポリＡ領域、
を含む、ｍＲＮＡ。
【請求項１１】
前記ＯＲＦが、配列番号５〜２９、１２９、１３２、１３５、及び１３８からなる群から選択される配列と、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、請求項１０に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１２】
前記ＯＲＦが、配列番号５〜２９、１２９、１３２、１３５、及び１３８からなる群から選択されるヌクレオチド配列と１００％同一である、請求項１０に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１３】
ＯＲＦのウラシル含有量が、理論的最小値の、１１８％と１２２％の間、１１７％と１２３％の間、１１６％と１２４％の間、１１５％と１２５％の間、１１４％と１２６％の間、１１３％と１２７％の間、１１２％と１２８％の間、１１１％と１２９％の間、１１０％と１３０％の間、１０９％と１３１％の間、１０８％と１３２％の間、１０７％と１３３％の
間、１０６％と１３４％の間にある、請求項１０に記載のｍＲＡ。
【請求項１４】
前記５’ＵＴＲが、配列番号３０のヌクレオチド配列を含む、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１５】
前記３’ＵＴＲが、配列番号１０５、配列番号１４７または配列番号１４８のヌクレオチド配列を含む、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１６】
配列番号７５にて示されるｍｉＲ−１４２−３ｐ結語部位を含む、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１７】
５’末端キャップがＣａｐｌである、請求項１０〜１６のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１８】
ポリ−Ａ領域の長さが８０〜２５０残基である、請求項１０〜１７のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１９】
請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡを含む医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡを含む脂質ナノ粒子。
【請求項２１】
ヒト対象においてＣＴＬＮ２を治療するのに用いるための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、または請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２２】
ヒト対象においてＣＴＬＮ２の徴候または兆候の発症を防止または遅らせるのに用いるための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、または請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２３】
ヒト対象においてアンモニアおよび／またはトリグリセリドレベルを低減させるのに用いるための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、または請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２４】
ヒト対象においてシトリン活性のレベルを増大させるのに用いるための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、または請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。