【手続補正書】
【提出日】令和2年10月25日(2020.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂質ナノ粒子であって、
（ｉ）式ＩＩＩを有するカチオン性脂質：
【化１】
2020504764.tif 000001
又はその薬学的に許容可能な塩、互変異性体若しくは立体異性体［式中：
Ｌ１又はＬ２は、各々独立に、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−であり；
Ｇ１及びＧ２は、各々独立に、非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン又はＣ１〜Ｃ１２アルケニレンであり；
Ｇ３は、Ｃ１〜Ｃ２４アルキレン、Ｃ１〜Ｃ２４アルケニレン、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキレン、又はＣ３〜Ｃ８シクロアルケニレンであり；
Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、以下の構造のうちの一つを持ち；
2020504764.tif 000002
Ｒ３は、Ｈ、ＯＲ５、ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ４、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４又は−ＮＲ５Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４であり；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルである］；及び
（ｉｉ）少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質をコードするｍＲＮＡ配列を含み、前記ｍＲＮＡ化合物が前記脂質ナノ粒子に封入されているか、又はそれと会合しているｍＲＮＡ化合物と；任意選択で
（ｉｉｉ）式（ＩＶ）を有するＰＥＧ脂質：
【化５】
2020504764.tif 000003
［式中、Ｒ８及びＲ９は、各々独立に、１０〜３０個の炭素原子を含む直鎖又は分枝状飽和又は不飽和アルキル鎖であり、アルキル鎖は任意選択で１つ以上のエステル結合によって分断されており；
及びｗは３０〜６０の範囲の平均値を有する］
を更に含み、好ましくは
Ｒ８及びＲ９は、飽和アルキル鎖であり；さらに好ましくは
前記ＰＥＧ脂質が、
2020504764.tif 000004
；
2020504764.tif 000005
；
2020504764.tif 000006
；又は
2020504764.tif 000007
であり、
ｎは前記ＰＥＧ脂質の平均分子質量が約２５００ｇ／ｍｏｌとなるように選択される整数である、脂質ナノ粒子。
【請求項２】
請求項１に記載の脂質ナノ粒子であって、式中：
Ｇ３がＣ１〜Ｃ２４アルキレン又はＣ１〜Ｃ２４アルケニレンであり；及び
Ｒ３がＨ又はＯＲ５であり、好ましくはＲ３がＯＨであり、任意選択で
前記カチオン性脂質が、構造ＩＩＩ−１〜ＩＩＩ−３６：
2020504764.tif 000008
2020504764.tif 000009
2020504764.tif 000010
2020504764.tif 000011
2020504764.tif 000012
2020504764.tif 000013
2020504764.tif 000014
2020504764.tif 000015
2020504764.tif 000016
2020504764.tif 000017
2020504764.tif 000018
から選択され、さらに好ましくは、
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000019
；
2020504764.tif 000020
；
2020504764.tif 000021
；
2020504764.tif 000022
又は
2020504764.tif 000023
である脂質ナノ粒子。
【請求項３】
前記ｍＲＮＡ配列が人工ｍＲＮＡ配列であり；及び／又は
前記少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質をコードする前記ｍＲＮＡ配列の前記コード領域が配列修飾を含み、好ましくは
前記配列修飾が、前記配列のＧ／Ｃ含量修飾、コドン修飾、コドン最適化又はＣ最適化から選択され、さらに好ましくは
前記ｍＲＮＡ配列の前記コード領域のＧ／Ｃ含量が、前記野生型ｍＲＮＡの対応するコード配列のＧ／Ｃ含量と比較して増加しているか、又は前記ｍＲＮＡ配列の前記コード領域のＣ含量が、前記野生型ｍＲＮＡの対応するコード配列のＣ含量と比較して増加しているか、又は前記ｍＲＮＡ配列の前記コード領域におけるコドン使用がヒトコドン使用に適合されているか、又はコドン適合指数（ＣＡＩ）が前記ｍＲＮＡ配列の前記コード領域において増加しており又は最大化されており、ここで前記ｍＲＮＡ配列のコードされるアミノ酸配列は、好ましくは、前記野生型ｍＲＮＡのコードされるアミノ酸配列と比較して修飾されていない、請求項１〜２のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項４】
前記ｍＲＮＡ配列が少なくとも１つのヒストンステムループを更に含み；
好ましくは前記ヒストンステムループが、配列番号２２４３０５に係る核酸配列及び／又は最も好ましくは配列番号２２４３０６に係るＲＮＡ配列を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項５】
前記ｍＲＮＡ配列が、好ましくは５’から３’方向に、以下のエレメント：
ａ）５’−ＣＡＰ構造、好ましくはｍ７ＧｐｐｐＮ、
ｂ）少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質をコードする少なくとも１つのコード領域、
ｃ）好ましくは１０〜２００、１０〜１００、４０〜８０又は５０〜７０アデノシンヌクレオチドからなる、ポリ（Ａ）テール、
ｄ）任意選択で、好ましくは１０〜２００、１０〜１００、２０〜７０、２０〜６０又は１０〜４０シトシンヌクレオチドからなる、ポリ（Ｃ）テール、及び
ｅ）任意選択で、好ましくは配列番号２２４３０６に係るＲＮＡ配列を含む、ヒストンステム−ループ
を含み、；及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が３’−ＵＴＲエレメントを含み、
好ましくは、前記少なくとも１つの３’−ＵＴＲエレメントが、安定ｍＲＮＡを提供する遺伝子の３’−ＵＴＲ又はその相同体、断片若しくは変異体に由来する核酸配列を含む、又はそれからなり、
好ましくは、前記３’−ＵＴＲエレメントが、配列番号２２４２９７に係る核酸配列の対応するＲＮＡ配列、その相同体、断片、又は変異体を好ましくは含む、α−グロビン遺伝子の３’−ＵＴＲに由来する核酸配列を含み、及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が５’−ＵＴＲエレメントを含み；
好ましくは、前記５’−ＵＴＲエレメントが、好ましくは５’−ＴＯＰモチーフが欠損した、ＴＯＰ遺伝子の５’−ＵＴＲ、好ましくは対応するＲＮＡ配列、その相同体、断片、又は変異体に由来する核酸配列を含む、又はそれからなり；
好ましくは、前記５’−ＵＴＲエレメントが、好ましくは５’ＴＯＰモチーフが欠損した、リボソームタンパク質をコードするＴＯＰ遺伝子の５’−ＵＴＲ、好ましくは対応するＲＮＡ配列又はその相同体、断片若しくは変異体に由来する核酸配列を含む、又はそれからなり；
好ましくは、前記５’−ＵＴＲエレメントが、好ましくは５’−ＴＯＰモチーフが欠損した、より好ましくは配列番号２２４２８７に係る核酸配列の対応するＲＮＡ配列を含む、又はそれからなる、リボソームラージタンパク質（ＲＰＬ）をコードするＴＯＰ遺伝子の５’−ＵＴＲ又はその相同体、断片若しくは変異体に由来する核酸配列を含む、又はそれからなり；
好ましくは、ＴＯＰ遺伝子の５’−ＵＴＲに由来する前記５’−ＵＴＲエレメントが、配列番号２２４２８７又は２２４２８９に係る核酸配列の対応するＲＮＡ配列を含む、又はそれからなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項６】
前記抗原ペプチド又はタンパク質が、病原性抗原、腫瘍抗原、アレルゲン性抗原又は自己免疫性自己抗原又はその断片若しくは変異体に由来し；
好ましくは前記病原性抗原がインフルエンザ又は狂犬病ウイルスに由来する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項７】
前記抗原ペプチド又はタンパク質が、インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）又はノイラミニダーゼ（ＮＡ）又はその断片若しくは変異体に由来し、任意選択で
前記抗原ペプチド又はタンパク質が、インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）の少なくとも１つの完全長タンパク質及び／又はノイラミニダーゼ（ＮＡ）の少なくとも１つの完全長タンパク質又はその変異体である、請求項６に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項８】
前記病原性抗原がＡ型インフルエンザウイルスに由来し、
前記Ａ型インフルエンザウイルスが、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、Ｈ１６、Ｈ１７及びＨ１８からなる群から選択される赤血球凝集素（ＨＡ）によって特徴付けられるインフルエンザウイルスから選択され；及び／又は
前記Ａ型インフルエンザウイルスが、Ｎ１、Ｎ２、Ｎ３、Ｎ４、Ｎ５、Ｎ６、Ｎ７、Ｎ８、Ｎ９、Ｎ１０、及びＮ１１からなる群から選択されるノイラミニダーゼ（ＮＡ）によって特徴付けられるインフルエンザウイルスから選択され；及び／又は
前記Ａ型インフルエンザウイルスが、Ｈ１Ｎ１、Ｈ１Ｎ２、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ１、Ｈ３Ｎ２、Ｈ３Ｎ８、Ｈ５Ｎ１、Ｈ５Ｎ２、Ｈ５Ｎ３、Ｈ５Ｎ８、Ｈ５Ｎ９、Ｈ７Ｎ１、Ｈ７Ｎ２、Ｈ７Ｎ３、Ｈ７Ｎ４、Ｈ７Ｎ７、Ｈ７Ｎ９、Ｈ９Ｎ２、及びＨ１０Ｎ７、好ましくはＨ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２、Ｈ５Ｎ１からなる群から選択される、請求項７に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項９】
前記ｍＲＮＡ配列が、インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体及びインフルエンザウイルスのノイラミニダーゼ（ＮＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み、好ましくは
前記ｍＲＮＡ配列が、Ｈ１Ｎ１、Ｈ１Ｎ２、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ１、Ｈ３Ｎ２、Ｈ３Ｎ８、Ｈ５Ｎ１、Ｈ５Ｎ２、Ｈ５Ｎ３、Ｈ５Ｎ８、Ｈ５Ｎ９、Ｈ７Ｎ１、Ｈ７Ｎ２、Ｈ７Ｎ３、Ｈ７Ｎ４、Ｈ７Ｎ７、Ｈ７Ｎ９、Ｈ９Ｎ２、及びＨ１０Ｎ７、好ましくはＨ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２、Ｈ５Ｎ１からなる群から選択されるＡ型インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質及び／又はノイラミニダーゼ（ＮＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含む、請求項７又は８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１０】
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号１〜１４０３１又は配列番号２２４３０９又は２２４３１０に係るＡ型インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み、好ましくは
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号３２０１３〜４６０４３、６４０２５〜７８０５５、２２４０８５〜２２４１０６、９６０３７〜１１００６７、１２８０４９〜１４２０７９、１６００６１〜１７４０９１、１９２０７３〜２０６１０３に係るＲＮＡ配列と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列から選択される少なくとも１つのＲＮＡ配列又はその断片若しくは変異体を含み；及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号１４０３２〜２６３９７、２２４３０９、又は２２４３１０に係るＡ型インフルエンザウイルスのノイラミニダーゼ（ＮＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み；又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号４６０４４〜５８４０９、２２４３１１、２２４３１２、７８０５６〜９０４２１、２２４１１３、２２４３１３〜２２４３１７、１１００６８〜１２２４３３、１４２０８０〜１５４４４５、１７４０９２〜１８６４５７、２０６１０４〜２１８４６９に係るＲＮＡ配列と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列から選択される少なくとも１つのＲＮＡ配列又はその断片若しくは変異体を含む、請求項７〜９のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１１】
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号２６３９８〜２８５７６に係るＢ型インフルエンザウイルスの赤血球凝集素（ＨＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み、好ましくは
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号５８４１０〜６０５８８、９０４２２〜９２６００、２２４１０７〜２２４１１２、１２２４３４〜１２４６１２、１５４４４６〜１５６６２４、１８６４５８〜１８８６３６、２１８４７０〜２２０６４８に係るＲＮＡ配列と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列から選択される少なくとも１つのＲＮＡ配列又はその断片若しくは変異体を含み；及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号２８５７７〜３０５０４に係るＢ型インフルエンザウイルスのノイラミニダーゼ（ＮＡ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み；又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号６０５８９〜６２５１６、９２６０１〜９４５２８、１２４６１３〜１２６５４０、１５６６２５〜１５８５５２、１８８６３７〜１９０５６４、２２０６４９〜２２２５７６に係るＲＮＡ配列と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列から選択される少なくとも１つのＲＮＡ配列又はＲＮＡ配列の混合物又はその断片若しくは変異体を含む、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１２】
前記ｍＲＮＡ配列が、狂犬病ウイルスの糖タンパク質Ｇ（ＲＡＶ−Ｇ、ＲＡＶＢＶ−Ｇ又はＲＡＢＶ−Ｇ）、核タンパク質Ｎ（ＲＡＶ−Ｎ）、リンタンパク質Ｐ（ＲＡＶ−Ｐ）、マトリックスタンパク質Ｍ（ＲＡＶ−Ｍ）又はＲＮＡポリメラーゼＬ（ＲＡＶ−Ｌ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片、変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み；好ましくは
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号３０５０５〜３２０１２に係る狂犬病ウイルスの糖タンパク質Ｇ（ＲＡＶ−Ｇ、ＲＡＶＢＶ−Ｇ又はＲＡＢＶ−Ｇ）に由来する少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質又はその断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのコード領域を含み；及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号６２５１７〜６４０２４、２２４２７０、２２４２７４、９４５２９〜９６０３６、２２４２７１〜２２４２７３、１２６５４１〜１２８０４８、１５８５５３〜１６００６０、１９０５６５〜１９２０７２、２２２５７７〜２２４０８４に係るＲＮＡ配列と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列から選択される少なくとも１つのＲＮＡ配列又はその断片若しくは変異体を含み；及び／又は
前記ｍＲＮＡ配列が、配列番号２２４０８５〜２２４１０６、２２４１１４〜２２４２３５、２２４０８５〜２２４１０６、２２４１１４〜２２４２３５、２２４１０７〜２２４１１２、２２４２３６〜２２４２６３、２２４１０７〜２２４１１２、２２４１０７〜２２４１１２、２２４２３６〜２２４２６３、２２４１１３、２２４２６４〜２２４２６６、２２４３０９〜２２４３４７、２２４３０９、２２４３１０、２２４３１１、２２４３１２、２２４１１３、２２４３１３〜２２４３１７、２２４１１３、２２４３１１〜２２４３１７、２２４２６４〜２２４２６６、２２４３１８〜２２４３４７、２２４３４８〜２２４３５７、２２４３４８〜２２４３５７、２２４２７０〜２２４２８４、２２４２７０、２２４２７１〜２２４２７３、２２４２７０〜２２４２７３、２２４２７４〜２２４２８４、２２４３５８〜２２４３６２、２２４３５８、２２４３５９、２２４３６０、２２４３５９、２２４３６０、２２４３６１、２２４３６２、２２４３６３、２２４３６４に係るＲＮＡ配列、好ましくは配列番号２２４１１４〜２２４２３５、２２４２３６〜２２４２６３、２２４２６４〜２２４２６６、２２４３１８〜２２４３４７、２２４３４８〜２２４３５７、２２４２７４〜２２４２８４、２２４３６１、２２４３６２、２２４３６３、２２４３６４に係る少なくとも１つのコード領域、最も好ましくは配列番号２２４１１８、配列番号２２４１１７、配列番号２２４１８１、配列番号２２４２３６、配列番号２２４２００、配列番号２２４１６６、配列番号２２４２３６、配列番号２２４２４６、配列番号２２４３１８、配列番号２２４３３６、配列番号２２４３４８、配列番号２２４２７６、配列番号２２４２８０に係る少なくとも１つのコード領域と同一又は少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一のＲＮＡ配列又はその断片若しくは変異体を含む、請求項６に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１３】
前記ｍＲＮＡ化合物が少なくとも２つのｍＲＮＡ配列を含み、前記少なくとも２つのｍＲＮＡ配列が２つの異なる抗原ペプチド及び／又はタンパク質をコードする；及び／又は
少なくとも２つの異なるｍＲＮＡ化合物であって、各々が少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質をコードするｍＲＮＡ配列を含む化合物を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１４】
（ｉｖ）中性脂質；及び／又は
（ｖ）ステロイド又はステロイド類似体
を更に含み；好ましくは
前記中性脂質が、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）及びジオレオイルホスファチジルエタノールアミン４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１カルボキシレート（ＤＯＰＥ−ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１６−Ｏ−モノメチルＰＥ、１６−Ｏ−ジメチルＰＥ、１８−１−ｔｒａｎｓ  ＰＥ、１−ステアロイル（ｓｔｅａｒｉｏｙｌ）−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン（ｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｅｔｈａｎｏｌ）アミン（ＳＯＰＥ）、及び１，２−ジエライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ｐｈｏｐｈｏｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）（ｔｒａｎｓＤＯＰＥ）を含む群から選択され；及び／又は
前記中性脂質が１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）であり、前記カチオン性脂質とＤＳＰＣとのモル比が任意選択で約２：１〜８：１の範囲であり；及び／又は
前記ステロイドがコレステロールであり、前記カチオン性脂質とコレステロールとのモル比が任意選択で約２：１〜１：１の範囲である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子であって、
前記ＰＥＧ脂質が、
2020504764.tif 000024
であり、
ｎは前記ＰＥＧ脂質の平均分子質量が約２５００ｇ／ｍｏｌとなるように選択される整数である、脂質ナノ粒子。
【請求項１６】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子であって、
前記ＰＥＧ脂質が、
2020504764.tif 000025
であり、
ｎは前記ＰＥＧ脂質の平均分子質量が約２５００ｇ／ｍｏｌとなるように選択される整数である、脂質ナノ粒子。
【請求項１７】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子であって、
前記ＰＥＧ脂質が、
2020504764.tif 000026
であり、
ｎは前記ＰＥＧ脂質の平均分子質量が約２５００ｇ／ｍｏｌとなるように選択される整数である、脂質ナノ粒子。
【請求項１８】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子であって、
前記ＰＥＧ脂質が、
2020504764.tif 000027
であり、
ｎは前記ＰＥＧ脂質の平均分子質量が約２５００ｇ／ｍｏｌとなるように選択される整数である、脂質ナノ粒子。
【請求項１９】
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000028
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２０】
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000029
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２１】
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000030
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２２】
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000031
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２３】
前記カチオン性脂質が、
2020504764.tif 000032
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子の調製方法であって、
（ｉ）以下を提供するステップ
ａ）上記に定義するとおりの式ＩＩＩのカチオン性脂質：
【化１３】
2020504764.tif 000033
又はその薬学的に許容可能な塩、互変異性体若しくは立体異性体；
及び、任意選択で
ｂ）以下の式（ＩＶ）
【化１４】
2020504764.tif 000034
を有するＰＥＧ脂質；
［式中、Ｒ８及びＲ９は、各々独立に、１０〜３０個の炭素原子を含む直鎖又は分枝状飽和又は不飽和アルキル鎖であり、アルキル鎖は任意選択で１つ以上のエステル結合によって分断されており；
及びｗは３０〜６０の範囲の平均値を有する］
ｃ）少なくとも１つの抗原ペプチド又はタンパク質をコードするｍＲＮＡ配列を含む少なくとも１つのｍＲＮＡ化合物であって、任意選択でヌクレオシド修飾を含まない、詳細には塩基修飾を含まないｍＲＮＡ化合物；及び
ｄ）任意選択でステロイド；及び
ｅ）任意選択で中性脂質；
（ｉｉ）前記カチオン性脂質及び任意選択の前記ＰＥＧ脂質及び任意選択で前記中性脂質及び／又は前記ステロイド若しくはステロイド誘導体をエタノールに可溶化するステップ；
（ｉｉｉ）前記エタノール性脂質溶液と前記ｍＲＮＡポリヌクレオチドを含む水溶液とを混合するステップ
（ｉｖ）前記エタノールを除去するステップ；及び任意選択で
（ｖ）前記脂質ナノ粒子を分離又は精製するステップ
を含む方法。
【請求項２５】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの脂質ナノ粒子を含む；又は
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の第１及び第２の脂質ナノ粒子を少なくとも含み、前記第２の脂質ナノ粒子に含まれる前記ｍＲＮＡ化合物が、前記第１の脂質ナノ粒子に含まれる前記ｍＲＮＡ化合物と異なる；及び
薬学的に許容可能なアジュバント又は賦形剤を任意選択で更に含む、医薬組成物。
【請求項２６】
医薬剤の製造に使用するための、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子又は請求項２５に記載の医薬組成物であって；好ましくは
前記医薬剤が、それを必要としている対象の免疫応答を治療的又は予防的に生じさせるためのものである；又は
前記医薬剤が、癌又は腫瘍疾患、感染症疾患、アレルギー、又は自己免疫疾患又はそれに関連する障害の予防用又は治療用である、脂質ナノ粒子又は医薬組成物。
【請求項２７】
前記医薬剤がワクチンであり、好ましくは
前記医薬剤が、腫瘍、インフルエンザ又は狂犬病ワクチンであり、好ましくは
前記医薬剤が、狂犬病治療に使用される狂犬病ワクチンである、請求項２６に記載の医薬剤の製造に使用するための脂質ナノ粒子又は医薬組成物。
【請求項２８】
前記医薬剤が非経口投与用であり、非経口投与が注射を含む、請求項２６〜２７のいずれか一項に記載の医薬剤の製造に使用するための脂質ナノ粒子又は医薬組成物。
【請求項２９】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子又は請求項２５記載の医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む、前記対象において免疫応答を生じさせる方法に用いる、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子又は請求項２５記載の医薬組成物。
【請求項３０】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子又は請求項２５に記載の医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む、前記対象の癌又は腫瘍疾患、感染症疾患、アレルギー、又は自己免疫疾患又はそれに関連する障害を予防又は治療するための方法に用いる、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子又は請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記脂質ナノ粒子が、４７．４：１０：４０．９：１．７（カチオン性脂質、ＤＳＰＣ、コレステロール及びＰＥＧ−脂質）のモル比（ｍｏｌ％）を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項３２】
前記脂質ナノ粒子が、
（ｉ）インフルエンザＡ／香港／４８０１／２０１４（Ｈ３Ｎ２）のＨＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号１３８５３、１３８５４、１３８５５、及び１３８５６からなる群から選択される）；及び／又は
（ｉｉ）インフルエンザＡ／カリフォルニア／０７／２００９（Ｈ１Ｎ１）のＨＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号１３８３６、１３８３７、１３８３８、１３８３９、１３８４０、１３８４１、１３８４２、１３８４３、及び１３８４４からなる群から選択される）；及び／又は
（ｉｉｉ）インフルエンザＢ／プーケット／３０３７／２０１３（ＥＰＩ５４０６７１）のＨＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号２８５３０、２８５３１、及び２８５３２からなる群から選択される）；及び／又は
（ｉｖ）インフルエンザＢ／ブリスベン／６０／２００８のＨＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号２８５２４、２８５２５、２８５２６、２８５２７、２８５２８、及び２８５２９からなる群から選択される）；及び／又は
（ｖ）インフルエンザＡ／香港／４８０１／２０１４（Ｈ３Ｎ２）のＮＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号２６２５１、２６２５２、２６２５３、及び２６２５４からなる群から選択される）；及び／又は
（ｖｉ）インフルエンザＡ／カリフォルニア／７／２００９（Ｈ１Ｎ１）ｐｄｍ０９のＮＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号２６２３８、２６２３９、２６２４０、２６２４１、２６２４２及び２６２４３からなる群から選択される）；及び／又は
（ｖｉｉ）インフルエンザＢ／ブリスベン／６０／２００８のＮＡタンパク質をコードするｍＲＮＡ（好ましくは、配列番号３０４５５、３０４５６、３０４５７、３０４５８、３０４５９、及び３０４６０からなる群から選択される）
を含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子。