【手続補正書】
【提出日】令和2年9月7日(2020.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物ヘモグロビンおよび自己組織化微粒子を含み、前記微粒子が、２つ以上の酸性基を有する酸と親水性溶媒に可溶な有機塩基とを含む、血液代替製剤。
【請求項２】
血液代替製剤が、自己組織化微粒子によって架橋された哺乳動物ヘモグロビンを含む安定な重合ヘモグロビン溶液を含む、請求項１に記載の血液代替製剤。
【請求項３】
微粒子が、０．５〜１０μｍの粒径を有する、請求項１又は２に記載の血液代替製剤。
【請求項４】
酸および塩基中の酸性基対塩基性基のモル比が０．６〜１．４：１である、請求項１から３のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項５】
微粒子が、２つ以上の酸性基を有する酸と、有機塩基とを含み、親水性溶媒中でビス酸と有機塩基とを接触させることを含むプロセスによって得ることができ、酸は親水性溶媒に不溶または難溶であり、有機塩基は親水性溶媒に可溶である、請求項１から４のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項６】
溶媒が、水溶液と、水相内の油中水型エマルジョンとから選択される、請求項５に記載の血液代替製剤。
【請求項７】
酸がビス酸を含む、請求項１から６のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項８】
酸がビス脂肪族酸を含む、請求項７に記載の血液代替製剤。
【請求項９】
酸が、一般式ＨＯＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨの化合物を含み、ｎはビス酸が水に難溶または不溶となるのに十分なほど大きい、請求項１から８のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項１０】
有機塩基が、塩基性を有する脂肪族アミン若しくは芳香族アミンまたは他の窒素含有塩基を含む、請求項１から９のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項１１】
有機塩基が、アルキル化アミンおよびアルキル化ポリアミンのうちの１つまたは複数を含む、請求項１から１０のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項１２】
微粒子が多重ラメラ構造を含む、請求項１から１１のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項１３】
酸がヘモグロビンと反応して架橋種を形成する、請求項１から１２のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
【請求項１４】
安定な重合ヘモグロビン溶液の製造における、２つ以上の酸性基を有する酸と有機塩基とを含む自己組織化微粒子の使用であって、塩基がヘモグロビンによって置換可能であり、それによってヘモグロビンが酸と共有結合する、使用。
【請求項１５】
安定な重合ヘモグロビン溶液を製造する方法であって、２つ以上の酸性基を有する酸と有機塩基とを含む自己組織化微粒子を提供すること、およびヘモグロビンを微粒子と接触させて塩基を置き換えることを含む方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
（例１０）
ヘモグロビンを含有する架橋自己組織化微粒子の調製
水酸化テトラエチルアンモニウム（ＴＥＡ．ＯＨ）（４．２ｃｍ3の３５％溶液、１０ｍｍｏｌ）を水（２０ｃｍ3）に加え、ブラシル酸（１．２２ｇ、５ｍｍｏｌ）をこの溶液に加えた。ブラシル酸は直ちに溶解してＳｐｈｅｒｉＳｏｍｅｓを形成した。ヒトヘモグロビン（１．８３ｇ）を水（２００ｃｍ3）に溶解し、ブラシル酸／ＴＥＡ．ＯＨ  ＳｐｈｅｒｉＳｏｍｅｓの溶液に加えた。混合物を０．５μｍのカートリッジに通して濾過し、試料を顕微鏡上に配置した。直径約３μｍの微小球が依然として存在していた。ＥＤＣＩ（２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０．１８ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液を水（２５ｃｍ3）に溶解し、上記の溶液に加えた。架橋反応を一晩放置し、得られた粒子を接線流濾過（ＴＦＦ）によって洗浄した。上清は無色であることが認められ、ヘモグロビンがＳｐｈｅｒｉＳｏｍｅｓ中に組み込まれたことを確認した。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕哺乳動物ヘモグロビンおよび自己組織化微粒子を含む血液代替製剤。
〔２〕微粒子が、２つ以上の酸性基を有する酸と親水性溶媒に可溶な有機塩基とを含む、前記〔１〕に記載の血液代替製剤。
〔３〕血液代替製剤が、自己組織化微粒子によって架橋された哺乳動物ヘモグロビンを含む安定な重合ヘモグロビン溶液を含む、前記〔１〕または〔２〕に記載の血液代替製剤。
〔４〕微粒子が、０．５〜１０μｍ、好ましくは１〜５μｍの粒径を有する、前記〔１〕から〔３〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔５〕酸および塩基中の酸性基対塩基性基のモル比が０．６〜１．４：１である、前記〔１〕から〔４〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔６〕酸性基対塩基性基のモル比が０．７〜１．３：１である、前記〔１〕から〔５〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔７〕微粒子が、２つ以上の酸性基を有する酸と、有機塩基とを含み、親水性溶媒中でビス酸と有機塩基とを接触させることを含むプロセスによって得ることができ、酸は親水性溶媒に不溶または難溶であり、有機塩基は親水性溶媒に可溶である、前記〔１〕から〔６〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔８〕溶媒が水溶液を含む、前記〔７〕に記載の血液代替製剤。
〔９〕溶媒が、水相内に油中水型エマルジョンを含む、前記〔７〕に記載の血液代替製剤。
〔１０〕酸がビス酸を含む、前記〔１〕から〔９〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１１〕酸がビス脂肪族酸を含む、前記〔１０〕に記載の血液代替製剤。
〔１２〕酸が、末端カルボン酸が疎水性である領域によって連結しているビスカルボン酸脂肪酸を含む、前記〔１〕から〔１１〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１３〕酸性基同士が飽和もしくは不飽和脂肪族鎖、または置換飽和もしくは置換不飽和脂肪族鎖によって隔てられている、前記〔１〕から〔１２〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１４〕酸が、一般式ＨＯＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨの化合物を含み、ｎはビス酸が水に難溶または不溶となるのに十分なほど大きい、前記〔１〕から〔１３〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１５〕ｎが、少なくとも５であり、４０以下である、前記〔１４〕に記載の血液代替製剤。
〔１６〕酸がブラシル酸、セバシン酸および／またはアゼライン酸を含む、前記〔１〕から〔１５〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１７〕有機塩基が、塩基性を有する脂肪族アミンまたは芳香族アミンまたは他の窒素含有塩基を含む、前記〔１〕から〔１６〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１８〕有機塩基が、アルキル化アミンおよびアルキル化ポリアミンのうちの１つまたは複数を含む、前記〔１〕から〔１７〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔１９〕有機塩基が、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエタノール、４−ジメチルアミノピリジン、イミダゾール、１−メチルアミダゾール、ポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロリド）（ＰＤＡＣ）、ジデシルジメチルアンモニウムクロリド（ＤＤＡＣ）、ドデシルジプロピレントリアミン（ＤＤＰＴ）およびポリεリシンのうちの１つまたは複数を含む、前記〔１〕から〔１８〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔２０〕微粒子が多重ラメラ構造を含む、前記〔１〕から〔１９〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔２１〕酸がヘモグロビンと反応して架橋種を形成する、前記〔１〕から〔２０〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔２２〕有機塩基が別の反応性塩基と置き換えられ、別の反応性塩基が次に反応して架橋種を形成する、前記〔１〕から〔２１〕のいずれか１項に記載の血液代替製剤。
〔２３〕安定な重合ヘモグロビン溶液の製造における、２つ以上の酸性基を有する酸と有機塩基とを含む自己組織化微粒子の使用であって、塩基がヘモグロビンによって置換可能であり、それによってヘモグロビンが酸と共有結合する、使用。
〔２４〕安定な重合ヘモグロビン溶液を製造する方法であって、２つ以上の酸性基を有する酸と有機塩基とを含む自己組織化微粒子を提供すること、およびヘモグロビンを微粒子と接触させて塩基を置き換えることを含む方法。