【手続補正書】
【提出日】令和2年6月10日(2020.6.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項８】
患者における細菌感染症を治療するための方法であって、前記患者に、治療有効量の請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩、またはその医薬組成物を投与することを含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】ヒドロキシアルキルチアジアゾール誘導体のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグ
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた抗菌活性を有し、特に水性製剤のための優れた溶解性を有し、安全性の面でも優れているヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグまたはその薬理上許容される塩を提供する。さらに本発明は、薬学的有効成分として、ヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグ、その多形体、またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物を提供する。特に、本発明は、感染症を治療および／または予防するために有用なヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグ、その多形、またはその薬理上許容される塩を提供する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトで疾患を引き起こすいくつかのグラム陽性菌種がある。その最も一般的な生物としては、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、コリネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、およびリステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）の種が挙げられる。一般的なグラム陽性生物による感染は、抗生物質耐性の増加傾向により、治療がより難しくなってきている。
そのような治療が困難な耐性菌の例としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、ＶＲＥ）が挙げられる。
【０００３】
黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）は、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群および敗血症などの様々な疾病を引き起こしうる。黄色ブドウ球菌は、院内感染の最も一般的な原因の１つである。肺炎球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、市中肺炎、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、髄膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、心内膜炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、および脳膿瘍などの多くの種類の感染症を引き起こしうる。エンテロコッカス属は、尿路感染症、菌血症、心内膜炎、憩室炎、および髄膜炎を引き起こしうる。
【０００４】
クロストリジウム・ディフィシル感染症（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、ＣＤＩ）は、もう１つの問題となっているグラム陽性菌感染症である。ＣＤＩ関連死は、高病原性ＮＡＰ１／０２７株の蔓延により増加している。現行の治療では２３％を超える再発に至り、この病原性株に対して限界がある。
グラム陰性菌のインフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）は、耳の感染症、菌血症、市中呼吸器感染症、肺炎、および急性細菌性髄膜炎を含むがこれらに限定されない、多くの種類の感染症を引き起こしうる。
細菌感染症の治療は、既存の抗生物質に対する耐性の発現、高病原性株の蔓延、およびより有効な新規の抗菌剤が入手不能であることにより、ますます困難で費用を要するようになっている。
上記事実に鑑み、本発明の発明者らは、新規の作用メカニズムを有する、新規のクラスの抗菌剤が存在すべきであると理解した。鋭意検討の後に、本発明の発明者らは、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを標的とする新規の化合物を発見し、それにより世界中の数百万人の患者の必要性を満たそうとしている。
【０００５】
新規の作用メカニズムを有する抗生物質の開発において、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットを標的とする合成阻害剤は当技術分野で知られている。例えば、ＷＯ２００５／０２６１４９（特許文献１）、ＷＯ２００６／０８７５４３（特許文献２）、ＷＯ２００６／０８７５４４（特許文献３）、ＷＯ２００６／０８７５４８（特許文献４）、ＷＯ２００６／０９２５９９（特許文献５）、ＷＯ２００６／０９２６０８（特許文献６）、ＷＯ２００８／１５２４１８（特許文献７）、ＷＯ２００８／０２０２２２（特許文献８）、ＷＯ２００８／０２０２２７（特許文献９）、ＷＯ２００８／０２０２２９（特許文献１０）、ＷＯ２０１０／０１３２２２（特許文献１１）、ＷＯ２０１０／０６７１２３（特許文献１２）、およびＷＯ２０１０／０６７１２５（特許文献１３）は、抗菌活性を有するピロール誘導体を記載している。ＷＯ２００７／０７１９６５（特許文献１４）は、二環式ヘテロ芳香族化合物を記載している。ＷＯ２０１４／５７４１５（特許文献１５）は、キノリン系化合物を記載している。これらの化合物は、不十分な活性、低い水溶性、および毒性の問題を有していた。さらに、引用した文献のいずれもイミダゾール誘導体を開示していない。
【０００６】
参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＷＯ２００９／０８４６１４（特許文献１６）は、イミダゾール誘導体を記載している。ＷＯ２００９／０８４６１４に開示される化合物は、良好な特性、例えば、十分なｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗菌活性を有し、細胞毒性を有しない。しかしながら、チアジアゾール置換基を有する化合物  Ｎｏ.１５０は、動物感染症モデルにおいて有効でなく、したがってヒトにおける使用に適さないという問題があった。
【０００７】
【化１】
2020511457.tif 000001
化合物  Ｎｏ.１５０（ＷＯ２００９／０８４６１４）
【０００８】
これに対して、前記化合物のチアジアゾール部分がヒドロキシアルキル置換基で置換されるように修飾されているそのヒドロキシアルキルチアジアゾール誘導体が、経口吸収のために十分な溶解性を有することが見出された。前記ヒドロキシアルキルチアジアゾール誘導体の構造は、以下の一般式（１’）
【０００９】
【化２】
2020511457.tif 000002
（式中、Ｒは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、
Ａは、以下の式：
【００１０】
【化３】
2020511457.tif 000003
を表し、但し、一般式（１’）には、例えば、イミダゾール環の異なる位置に水素を有する互変異性体が含まれる）
によって表される。
より詳細には、より好ましい化合物として、
【００１１】
【化４】
2020511457.tif 000004
（式中、Ｒは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、
Ａは、以下の式：
【００１２】
【化５】
2020511457.tif 000005
を表す）
の化合物が含まれる。
【００１３】
驚くべきことに、前記一般式（１’）のヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物は、十分なｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗菌活性を示し、細胞毒性がなく、経口吸収のための良好な水溶性を示すだけでなく、著しく良好な有効性と安全性を示し、したがってヒトにおける使用に適している。本発明は、好ましくは経口または静脈内使用のための、一般式（１’）のヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグを記載する。
【００１４】
このように、本発明は、細菌感染症、例えば、限定されないが、市中呼吸器感染症、院内感染、尿路感染症、およびクロストリジウム・ディフィシル感染症を引き起こす厄介な細菌による地球規模の深刻な健康問題に関する課題に対処する新たな抗生物質への大きな期待をもたらす。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】ＷＯ２００５／０２６１４９
【特許文献２】ＷＯ２００６／０８７５４３
【特許文献３】ＷＯ２００６／０８７５４４
【特許文献４】ＷＯ２００６／０８７５４８
【特許文献５】ＷＯ２００６／０９２５９９
【特許文献６】ＷＯ２００６／０９２６０８
【特許文献７】ＷＯ２００８／１５２４１８
【特許文献８】ＷＯ２００８／０２０２２２
【特許文献９】ＷＯ２００８／０２０２２７
【特許文献１０】ＷＯ２００８／０２０２２９
【特許文献１１】ＷＯ２０１０／０１３２２２
【特許文献１２】ＷＯ２０１０／０６７１２３
【特許文献１３】ＷＯ２０１０／０６７１２５
【特許文献１４】ＷＯ２００７／０７１９６５
【特許文献１５】ＷＯ２０１４／５７４１５
【特許文献１６】ＷＯ２００９／０８４６１４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明の発明者らが理解するように、感受性菌だけでなく、その耐性菌に対しても強力な抗菌活性を示し、同時に静脈内使用のための優れた溶解性を有する、新規の作用メカニズムを有する新たな抗生物質が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、優れた抗菌活性を有し、安全性の面でも優れているヒドロキシアルキルチアジアゾール化合物のＮ−ホスホノキシメチルプロドラッグ（本明細書において一般式（Ｉ）の化合物という）またはその薬理上許容される塩を提供する。一般式（Ｉ）の化合物の親化合物（生物学的に活性な形態）またはその薬理上許容される塩は、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害する。一態様では、本発明は、以下を提供する：
［１］一般式（Ｉ）：
【００１８】
【化６】
2020511457.tif 000006
（式中、Ｒは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、
Ａは、以下の式：
【００１９】
【化７】
2020511457.tif 000007
を表し、但し、一般式（Ｉ）には、位置異性体としてイミダゾール環の異なる位置にＮ−ホスホノキシメチル基が存在するものが含まれる）
によって表される化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［２］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２０】
【化８】
2020511457.tif 000008
を有する、［１］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
【００２１】
［３］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２２】
【化９】
2020511457.tif 000009
（式中、Ｒは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、
Ａ’は、以下の式：
【００２３】
【化１０】
2020511457.tif 000010
を表す）
を有する、［１］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
【００２４】
［４］Ａ’が、以下の式：
【００２５】
【化１１】
2020511457.tif 000011
を表す、［３］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［５］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２６】
【化１２】
2020511457.tif 000012
を有する、［１］または［３］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［６］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２７】
【化１３】
2020511457.tif 000013
を有する、［１］または［４］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［７］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２８】
【化１４】
2020511457.tif 000014
を有する、［１］または［４］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［８］一般式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：
【００２９】
【化１５】
2020511457.tif 000015
を有する、［１］または［４］に記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［９］Ｒがメチルを表す、［１］〜［８］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［１０］Ｒがエチルを表す、［１］〜［８］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［１１］化合物が、
［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１）、
［５−クロロ−４−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.２）、
（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.３）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.４）、
（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.５）、
（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.６）、
（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.７）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.８）、
［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.９）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１０）、その薬理上許容される塩
から選択される、［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の化合物またはその薬理上許容される塩。
【００３０】
［１２］図３に示されるパターンに実質的に一致する粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）スペクトルによって特徴づけられる、４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩の結晶形。
［１３］図４に示される曲線に実質的に一致する示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって特徴づけられる、４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩の結晶形。
［１４］図５に示されるパターンに実質的に一致する粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）スペクトルによって特徴づけられる、４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶形。
［１５］図６に示される曲線に実質的に一致する示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって特徴づけられる、［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶形。
［１６］治療有効量の［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
［１７］細菌感染症を治療または予防するために投与される、［１６］に記載の医薬組成物。
［１８］前記細菌感染症が、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、およびリステリア属の種から選択されるグラム陽性菌によって引き起こされる、［１６］に記載の医薬組成物。
［１９］前記細菌感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）から選択される耐性菌によって引き起こされる、［１６］に記載の医薬組成物。
［２０］前記細菌感染症が、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、尋常性ざ瘡、淋病、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔から選択される、［１６］に記載の医薬組成物。
［２１］前記細菌感染症が、市中呼吸器感染症、院内感染、またはクロストリジウム・ディフィシル感染症から選択される、［１６］に記載の医薬組成物。
［２２］患者に、治療有効量の［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩を投与することを含む、患者における細菌感染症を治療するための方法。
［２３］前記細菌感染症が、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、およびリステリア属の種から選択されるグラム陽性菌によって引き起こされる、［２２］に記載の方法。
［２４］前記細菌感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）から選択される耐性菌によって引き起こされる、［２２］に記載の方法。
［２５］前記細菌感染症が、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、尋常性ざ瘡、淋病、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔から選択される、［２２］に記載の方法。
［２６］前記細菌感染症が、市中呼吸器感染症、院内感染、またはクロストリジウム・ディフィシル感染症から選択される、［２２］に記載の方法。
［２７］細菌感染症を治療するための薬剤として使用するための、［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、またはその薬理上許容される塩。
［２８］前記細菌感染症が、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、およびリステリア属の種から選択されるグラム陽性菌によって引き起こされる、［２７］に記載の使用。
［２９］前記細菌感染症が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）から選択される耐性菌によって引き起こされる、［２７］に記載の使用。
［３０］前記細菌感染症が、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、尋常性ざ瘡、淋病、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔から選択される、［２７］に記載の使用。
［３１］前記細菌感染症が、市中呼吸器感染症、院内感染、またはクロストリジウム・ディフィシル感染症から選択される、［２７］に記載の使用。
［３２］細菌感染症のための治療剤の製造のための、［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の化合物、もしくはその位置異性体、その多形、またはその薬理上許容される塩の使用。
［３３］前記細菌感染症が、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、およびリステリア属の種から選択されるグラム陽性菌によって引き起こされる、［３２］に記載の使用。
［３４］耐性菌が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）から選択される、［３２］に記載の使用。
［３５］前記細菌感染症が、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、尋常性ざ瘡、淋病、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔から選択される、［３２］〜［３４］のいずれか１つに記載の使用。
［３６］前記細菌感染症が、市中呼吸器感染症、院内感染、またはクロストリジウム・ディフィシル感染症から選択される、［３５］に記載の使用。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】ラット、イヌおよびサルにおける化合物  Ｎｏ.１の変換効率を示す図である。
【図２】ラット、イヌおよびサルにおける化合物  Ｎｏ.２の変換効率を示す図である。
【図３】［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩の結晶形についての粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）パターンを示す図である。
【図４】［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩の結晶形についての示差走査熱量測定（ＤＳＣ）曲線を示す図である。
【図５】［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶形についての粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）パターンを示す図である。
【図６】［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶形についての示差走査熱量測定（ＤＳＣ）曲線を示す図である。  本発明の前述の態様、および実施形態、ならびに他の態様、目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明および添付の特許請求の範囲から明らかである。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本明細書で使用するとき、他に明確な言及がない限り、以下の定義を適用する。
「一般式（Ｉ）の化合物」は、特に断らない限り、その全ての塩や立体異性体を含むと同様に、式（Ｉ）によって記載される全ての化合物、その実施形態を指し、かつ含むと理解すべきである。単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が他のことを明確に指示していない限り、複数の参照物を含むことも留意すべきである。
本発明の一態様では、一般式（Ｉ）：
【００３３】
【化１６】
2020511457.tif 000016
（式中、Ｒ、ＡおよびＡ’は、上記で定義される通りである）
の化合物、その立体異性体、その位置異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
一般式（Ｉ）の化合物は、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体を有しうる。そのような位置異性体の全て、例えば：
【００３４】
【化１７】
2020511457.tif 000017
が、本発明の範囲内である。
一般式（Ｉ）の化合物は、以下の構造：
【００３５】
【化１８】
2020511457.tif 000018
を含む。
【００３６】
好ましい実施形態では、式（Ｉａ）：
【化１９】
2020511457.tif 000019
【００３７】
（式中、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体も含まれる）
の化合物、もしくはその位置異性体、もしくはその立体異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
【００３８】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）：
【００３９】
【化２０】
2020511457.tif 000020
【００４０】
（式中、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体も含まれる）
の化合物、もしくはその位置異性体、もしくはその立体異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｃ）：
【００４１】
【化２１】
2020511457.tif 000021
【００４２】
（式中、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体も含まれる）
の化合物、もしくはその位置異性体、その立体異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｄ）：
【００４３】
【化２２】
2020511457.tif 000022
【００４４】
（式中、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体も含まれる）
の化合物、その位置異性体、その立体異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｅ）：
【００４５】
【化２３】
2020511457.tif 000023
【００４６】
（式中、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルを表し、イミダゾール環の異なる位置にホスホノキシメチル基が存在する位置異性体も含まれる）
の化合物、その立体異性体、またはその薬理上許容される塩が提供される。
本発明は、第１の態様の範囲内で、背景の項目で指摘したような、本発明を完全にするための様々な好ましい実施形態を含むことを意図する。
例えば、一実施形態では、Ｒがメチルまたはエチルを表す、式（Ｉａ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その薬理上許容される塩が提供される。
別の実施形態では、Ｒがメチルまたはエチルを表す、式（Ｉｂ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その薬理上許容される塩が提供される。
別の実施形態では、Ｒがメチルまたはエチルを表す、式（Ｉｃ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その薬理上許容される塩が提供される。
別の実施形態では、Ｒがメチルまたはエチルを表す、式（Ｉｄ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その薬理上許容される塩が提供される。
別の実施形態では、Ｒがメチルまたはエチルを表す、式（Ｉｅ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その薬理上許容される塩が提供される。
本発明の特定の実施形態によれば、
［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１）、
［５−クロロ−４−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.２）、
（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.３）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.４）、
（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.５）、
（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.６）、
（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.７）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.８）、
［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.９）、
（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１０）、
その薬理上許容される塩
から選択される、式（Ｉ）の具体的な化合物が提供される。
好ましい実施形態では、図３に示されるパターンに実質的に一致する粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）スペクトルによって特徴づけられる、Ｉ型と称する４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩の結晶形が提供される。
Ｉ型は、図４に示される曲線に実質的に一致する示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によってさらに特徴づけられる。
好ましい実施形態では、図５に示されるパターンに実質的に一致する粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）スペクトルによって特徴づけられる、ＩＩ型と称する［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶形が提供される。
ＩＩ型は、図６に示される曲線に実質的に一致する示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によってさらに特徴づけられる。
別の好ましい実施形態では、Ｉ型およびＩＩ型は、表１に示される主要ＸＲＤピークによってさらに特徴づけられる。
【００４７】
【表１】
2020511457.tif 000024
【００４８】
本発明では、一般式（Ｉ）の化合物またはその塩は、時に位置異性現象を示す場合があり、本明細書における式および図面は、可能な位置異性形態の１つのみを表している場合があることを理解すべきである。本発明は、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害する位置異性形態の全てを包含し、式または図面で使用される位置異性形態の１つのみに限定されないことを理解すべきである。本明細書の式および図面は、可能な位置異性形態の１つのみを表している場合があり、本明細書は、式で示されうる形態だけではなく、式で示される化合物の全ての可能な位置異性形態も包含することを理解すべきである。同じことが、化合物の名称にも当てはまる。
【００４９】
本発明の一般式（Ｉ）によって表される化合物またはその薬理上許容される塩は、空気中に放置されるかまたは再結晶されるとき、水を吸収して吸着した水と会合しうるまたは水和物を形成しうる。そのような水含有化合物および塩も本発明に包含される。
本発明の一般式（Ｉ）によって表される化合物は酸性中心を有し、したがって「その薬理上許容される塩」は、化合物と塩基との反応によって形成されうる。
用語「薬理上許容される」は、本明細書で使用するとき、規制機関、例えば、欧州医薬品庁（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ａｇｅｎｃｙ、ＥＭＥＡ）、米国食品医薬品局（ＵＳ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ、ＦＤＡ）または任意の他の国立の規制機関により承認されるような、動物、好ましくはヒトへの投与に適した式（Ｉ）の化合物またはその医薬組成物を指す。
本発明の塩の好ましい例としては、限定されないが、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属塩、ならびにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、リジン、アルギニン、ベンザチン、コリン、トロメタミン、ジオラミン、エタノールアミン、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、グリシン、メグルミン、オラミンなどの非毒性アンモニウム、第四級アンモニウムおよびアミン塩が挙げられる。
一般式（Ｉ）によって表される化合物またはその薬理上許容される塩は、分子内に不斉炭素原子を有し、したがって、Ｒ配置またはＳ配置を有する立体異性体を含む。これらの立体異性体のそれぞれ、および立体異性体の任意の比率の全ての混合物も、本発明に包含される。そのような立体異性体は、所望に応じて、例えば、化合物（Ｉ）を適切な分割剤を使用して合成することによって、または合成された化合物（Ｉ）を通常の光学分割もしくは分離方法により光学的に分割することによって、またはジアステレオ選択的合成によって、調製することができる。
【００５０】
本発明の一般式（Ｉ）によって表される化合物またはその薬理上許容される塩には、光学異性体が含まれる。またこれらの光学異性体のそれぞれ、およびこれらの光学異性体の全ての混合物も、本発明によって包含される。
本発明の一般式（Ｉ）によって表される化合物またはその薬理上許容される塩には、ピペリジン環の３または４位での置換の種類に基づく立体異性体が含まれる。例えば、一般式（Ｉ）では、ｃｉｓ異性体は、下記：
【００５１】
【化２４】
2020511457.tif 000025
に示されるような好ましい異性体である。
【００５２】
本発明には、限定されないが、好ましい異性体：
【００５３】
【化２５】
2020511457.tif 000026
が含まれる。
【００５４】
上記に示されるような一部の化合物は、多形の特徴を示し、それゆえ本発明は、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害する全てのラセミ体、光学活性体、立体異性体形態、またはその混合物に加えて、多形も包含すると理解すべきである。
光学活性体は、当技術分野で公知の方法、例えば、ｉ）再結晶技術によるラセミ体の分割、ｉｉ）光学活性な出発物質からの合成、ｉｉｉ）キラル合成、ｉｖ）酵素分割、ｖ）生物変換、またはｖｉ）キラル固定相を使用するクロマトグラフィー分離などにより調製することができる。同様に、以下に記載の方法を含め、ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットに対する阻害効果を測定するために当技術分野で公知の任意の方法を利用することができる。
次に、一般式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、その多形、またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物が提供される。
本発明の化合物は、単独でまたは医薬組成物の形態で、通常ヒトを含む動物における細菌感染症を予防または治療するために使用しうる。したがって、予防または治療のために適切な投薬形態が必要となりうる。適切な投薬形態は、その使用または投与経路に依存する。一般的には、技術および製剤は、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、ＷｉｌｌａｍｓおよびＷｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、Ｐａ．、２００５（参照により本明細書に組み込まれる）において見出しうる。
【００５５】
したがって、別の態様では、本発明は、ヒトなどの温血動物における細菌感染症の治療に使用するための医薬組成物であって、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、その多形、またはその薬理上許容される塩を、薬理上許容される賦形剤または担体と共に含む医薬組成物を提供する。
【００５６】
本発明の医薬組成物は、経口使用（例えば、錠剤、トローチ剤、ハードもしくはソフトカプセル、水性もしくは油性懸濁液、乳化液、分散性粉末もしくは顆粒、シロップ、およびエリキシル剤）、局所使用（例えば、クリーム、軟膏、ゲル、および水性もしくは油性の溶液もしくは懸濁液）、吸入方法による投与（例えば、細粒粉末および液体エアロゾル）、エアレーション法による投与（例えば、粉砕された粉末）、または非経口投与（例えば、静脈内、皮下もしくは筋肉内投与のための、滅菌の水性もしくは油性溶液、および直腸投与のための坐剤）のための適切な形態でありうる。
本発明の医薬組成物は、当技術分野で周知の従来の医薬賦形剤を使用して、従来の手法により得ることができる。したがって、経口使用を意図した組成物は、例えば、１つまたは複数の着色剤、甘味剤、矯味剤、および／または保存剤を含有してもよい。
錠剤の調製に適した薬理上許容される賦形剤の例としては、限定されないが、不活性希釈剤（例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、および炭酸カルシウム）、顆粒化剤および崩壊剤（例えば、コーンスターチおよびアルギン酸）、結合剤（例えば、デンプン）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、およびタルク）、保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルおよびｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル）、ならびに酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸）が挙げられる。
そのように調製された錠剤は、それらの崩壊性、およびその後の有効成分の腸管吸収性を変更させるために、またはそれらの安定性および／もしくは外観を改善させるために、コーティングしなくてもまたはコーティングしてもよい。いずれの場合も、当技術分野で周知の従来のコーティング剤および手法を利用しうる。
経口使用を意図した医薬組成物は、ハードゼラチンカプセルの形態がありうる。この場合、有効成分は、不活性な固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリンと混合される。代替的に、ソフトゼラチンカプセルとして使用するために、有効成分は、水または油、例えばピーナッツ油、流動パラフィン、またはオリーブ油と混合される。
水溶液は、一般に、粉砕された形態の有効成分を、１つまたは複数の懸濁化剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、およびアラビアガム）、ならびに分散剤または湿潤剤（例えば、レシチン、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、ならびにエチレンオキシドと脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）と共に含む。
【００５７】
水溶液は、１つまたは複数の保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルおよびｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸）、着色剤、矯味剤、ならびに／または甘味剤（例えば、ショ糖、サッカリン、およびアスパルテーム）を含有してもよい。
油性懸濁液は、有効成分を、植物油（例えば、ピーナッツ油、オリーブ油、ゴマ油、もしくはココナッツ油）または鉱油（例えば、流動パラフィン）に懸濁させることにより調製してもよい。油性懸濁液は、ミツロウ、固形パラフィン、またはセチルアルコールなどの増粘剤を含有してもよい。口当たりのよい経口調製物を得るために、そこに上述のような甘味剤および矯味剤を加えてもよい。これらの組成物は、そこにアスコルビン酸などの酸化防止剤を加えて保存してもよい。
水を加えることによって水性懸濁液を生じさせるために適した分散性粉末および顆粒は、一般に、有効成分を、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤、および１つもしくは複数の保存剤と共に含む。適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は、上記の通りである。さらに付加的な賦形剤、例えば、甘味剤、矯味剤、および着色剤がそれに含有されてもよい。
さらに、本発明の医薬組成物は、油中水型乳化液の形態であってもよい。油相は、植物油（例えば、オリーブ油もしくはピーナッツ油）または鉱油（例えば、流動パラフィン）またはその任意の混合物でありうる。適切な乳化剤は、例えば、天然のガム（例えば、アラビアガムおよびトラガカントガム）、天然のリン脂質（例えば、ダイズおよびレシチン）、脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレエート）、ならびに部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）でありうる。乳化液は、甘味剤、矯味剤、および保存剤を含有してもよい。
シロップおよびエリキシルは、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテームまたはショ糖などの甘味剤と共に調製してもよく、粘滑剤、保存剤、矯味剤および／または着色剤を含有してもよい。
医薬組成物は、滅菌注射剤の形態であってもよい。注射剤は、上記の分散剤または湿潤剤および懸濁化剤の１つまたは複数を使用し、公知の手法に従って調製することができる。
さらに、滅菌注射製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中、例えば１，３−ブタンジオール溶液中の、滅菌注射溶液または懸濁液でありうる。
【００５８】
吸入法による投与に使用するための医薬組成物は、粉砕された固体を含有するエアロゾルとして、または液滴を含有するエアロゾルとして、有効成分を分配するよう調節されている従来の加圧されたエアロゾルの形態であってもよい。揮発性のフッ素系炭化水素または炭化水素などの従来のエアロゾル推進剤が使用されてもよい。エアロゾル装置は、有効成分の一定量を分配するよう適切に調節される。
調製に関するさらなる情報について、読者は、第２５．２章、第５巻、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｃｏｒｗｉｎ  Ｈａｎｓｃｈ；編集主幹；Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓ、１９９０）を参照しうる。
一投薬形態を製造するための１つまたは複数の賦形剤と共に含有される有効成分の量は、治療される宿主（ｈｏｓｔ）および特定の投与経路に従って変動することが必然的に予測される。例えば、ヒトへの経口投与を意図した調製物は、賦形剤の適切なおよび都合の良い量と共に、製剤化された有効成分を、例えば０．５ｍｇ〜２ｇ含むことが一般的に予測される。この状況において、賦形剤の量は、限定されないが、組成物の全重量の５〜９８重量％の範囲内で変動しうる。単位投薬形態は、一般的に、およそ１ｍｇ〜およそ５００ｍｇの有効成分を含むと予測される。投与経路および投与スケジュールに関するさらなる情報について、読者は、第２５．３章、第５巻、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｃｏｒｗｉｎ  Ｈａｎｓｃｈ；編集主幹；Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓ、１９９０）を参照しうる。
本発明の医薬組成物は、本明細書に開示の化合物に加えて、臨床的に有用な抗菌剤、例えば、限定されないが、マクロライド（例えば、エリスロマイシン、テリスロマイシン、ジリトロマイシン、ロキシスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、またはフィダキソマイシン）、キノロン（例えば、シプロフロキサシン、ノルフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン、またはシタフロキサシン）、β−ラクタム（例えば、アモキシシリン、セファレキシン、セファクロル、セフロキシム、セフダロキシム、セフェピム、セフトビプロール、またはセフェトリゾール）、アミノグリコシド（例えば、ゲンタマイシン、ネオマイシン、またはストレプトマイシン）、およびカルバペネム（例えば、メロペネムまたはイミペネム）ならびに／または他の抗感染症薬（例えば、抗真菌トリアゾールおよびアムホテリシン）から選択される１つまたは複数の公知の薬剤を含んでもよい。本発明の化合物と組み合わせて使用することができる他の活性薬剤としては、メトロニダゾールおよび／またはバンコマイシンが挙げられる。他の活性剤は、本発明の化合物と同時に、連続的に、または別個に共投与しうる。そのような活性剤の使用は、本発明の医薬組成物の治療有効性を広げることができる。
【００５９】
上述のように、特定の状態の治療的または予防的処置のために必要な用量の程度は、治療される宿主、投与経路、および治療される疾患の重症度に従って変動することが必然的に予測される。好ましくは、一日用量は、１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲内で使用される。しかしながら、上記のように、一日用量は変動することが必然的に予測される。したがって、最適用量は、患者に治療を提供する任意の一般的医療実施者により決定されうる。
特定の実施形態では、医薬組成物は、細菌感染症を治療または予防するために提供される。
別の特定の実施形態では、医薬組成物は、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、およびリステリア属の種から選択されるグラム陽性菌によって引き起こされる細菌感染症を治療または予防するために提供される。
別の特定の実施形態では、医薬組成物は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、およびバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）から選択される耐性菌によって引き起こされる細菌感染症を治療または予防するために提供される。
さらに別の特定の実施形態では、医薬組成物は、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、せつ、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔から選択される細菌感染症を治療または予防するために提供される。
記載されるように、一般式（Ｉ）の化合物は、治療用途を有し、細菌感染症を治療または予防するために使用しうる。
そのように本発明は、その別の態様では、患者における細菌感染症を治療または予防するための方法であって、前記患者に、治療有効量の一般式（Ｉ）の化合物、その位置異性体、その立体異性体、その多形、その水和物、もしくはその薬理上許容される塩、またはそれを含む医薬組成物を投与するステップを含む、方法を提供する。
さらなる態様によれば、本発明は、患者における細菌感染症の治療に使用することを意図した、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくはその位置異性体、もしくはその立体異性体、その多形、またはその薬理上許容される塩を提供する。
さらなる態様によれば、本発明は、抗菌薬治療を必要とする患者における細菌ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害するための方法を提供する。この方法は、有効量の一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくはその位置異性体、もしくはその立体異性体、その多形、またはその薬理上許容される塩を、患者に投与することを含む。
【００６０】
本発明のさらなる態様は、患者において抗菌効果を生じるための薬剤として使用することを意図した、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩を提供する。
本発明のさらなる態様は、患者における細菌ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害するための薬剤として使用することを意図した、式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩を提供する。
特定の一実施形態では、患者における細菌感染症を治療するための薬剤として使用することを意図した、式（Ｉ）の化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩が提供される。
さらなる態様によれば、本発明は、患者における細菌ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットの阻害に使用する薬剤の製造における、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩の使用を提供する。
【００６１】
特定の実施形態では、本発明は、患者における細菌感染症の治療に使用する薬剤の製造における、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩の使用を提供する。
さらなる態様によれば、本発明は、患者において抗菌効果を生じるための使用を意図した、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩を提供する。
さらなる態様によれば、本発明は、患者における細菌ＤＮＡジャイレースＧｙｒＢサブユニットおよび／またはトポイソメラーゼＩＶ  ＰａｒＥサブユニットを阻害するための使用を意図した、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩を提供する。
特定の実施形態によれば、本発明は、患者における細菌感染症を治療するための使用を意図した、一般式（Ｉ）によって表される化合物、もしくは位置異性体、もしくは立体異性体、多形、または薬理上許容される塩を提供する。
【００６２】
本明細書で使用するとき、用語「治療有効量」は、細菌感染症を治療または予防するために患者に投与されたとき、そのような治療または予防を有効にするために十分な、本発明の化合物の量を指す。
本明細書で使用するとき、用語「患者」は、以下で定義されるような細菌感染症に罹患している、ならびにそのような細菌感染症の治療および／または予防のための治療介入を必要とする、ヒトなどの対象を指す。
本明細書で使用するとき、用語「細菌感染症」は、耐性菌を含む、グラム陽性およびグラム陰性菌によって引き起こされる感染症を指す。最も一般的な生物として、スタフィロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、クロストリジウム属、バチルス属、コリネバクテリウム属、ヘモフィルス属、およびリステリア属の種が挙げられる。前記細菌により引き起こされる疾患としては、限定されないが、にきび、膿痂疹、おでき、蜂巣炎毛包炎、フルンケル、癰、熱傷様皮膚症候群、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、気管支炎、鼻炎、急性副鼻腔炎、中耳炎、結膜炎、菌血症、敗血症、骨髄炎、敗血症性関節炎、腹膜炎、心膜炎、蜂巣炎、脳膿瘍、尿路感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、尋常性ざ瘡、淋病、ガス壊疽、食中毒、破傷風、ボツリヌス中毒、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および結腸穿孔が挙げられる。
本発明の別の実施形態では、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、およびクロストリジウム・ディフィシルから選択される病原菌によって特に引き起こされる感染症を治療するための方法が提供される。
【００６３】
ＭＲＳＡは、ペニシリンなどの一般的抗生物質に耐性のある細菌である。ＭＲＳＡは、皮膚、血流および外科的創傷感染症ならびに肺炎を引き起こしうる。本明細書に開示の化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗菌活性、有効性、および耐性の出現頻度の面で、リネゾリドより優れている。
クロストリジウム・ディフィシル感染症（ＣＤＩ）は、大腸に定着する嫌気性細菌Ｃ．ディフィシルにより引き起こされる腸疾患である。Ｃ．ディフィシルは、芽胞およびその病理発生の要因となる毒素を産生する。ＣＤＩによる臨床症状は、下痢、および腹痛、ならびに重症の場合には、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、および死である。芽胞形成により、成功裡に治療された後でさえ頻繁に再発することも非常によくある。ＣＤＩの発生率は世界的に増加している。ＣＤＩ関連死は、米国および欧州において、高病原性ＮＡＰ１／０２７株の蔓延により増加している。
【００６４】
本発明の化合物は、高病原性ＮＡＰ１／０２７株に対して活性であり、それゆえ、ＭＲＳＡおよびＣＤＩなどの細菌感染症を治療する機会を提供する。
したがって、本発明は、ＭＲＳＡ感染症、市中呼吸器感染症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、およびその臨床症状、例えば、下痢、偽膜性大腸炎、中毒性巨大結腸、結腸穿孔、および敗血症の治療に使用するための化合物を提供する。
本発明の別の実施形態では、ＭＲＳＡによって引き起こされる感染症を治療するための方法が提供される。
本発明の別の実施形態では、ＣＤＩを治療するための方法が提供される。
本発明の別の実施形態では、ＰＲＳＰおよびＶＲＥによって引き起こされる感染症を治療するための方法が提供される。
グラム陰性菌のインフルエンザ菌は、限定されないが、耳の感染症、菌血症、市中呼吸器感染症、肺炎、および急性細菌性髄膜炎を含む多くの種類の感染症を引き起こしうる。驚くべきことに、本発明の化合物は、この病原菌に対して非常に有効であることが分かり、それゆえ、インフルエンザ菌によって引き起こされる前記感染症の治療に利用しうる。
したがって、本発明は、インフルエンザ菌によって引き起こされる市中呼吸器感染症、肺炎、菌血症、および急性細菌性髄膜炎などの疾患の治療に使用するための化合物を提供する。
アクネ菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）は、嫌気性増殖条件を好み、ざ瘡の病理発生に関与するグラム陽性ヒト皮膚共生生物であり、アクネ菌感染症と最も一般的に関連する尋常性ざ瘡などの皮膚疾患を引き起こしうる。さらにアクネ菌は、人工および生来の大動脈弁の心内膜炎、角膜感染症、および術後眼内炎に関連づけられている。また局所性頭蓋内感染症および様々な脳脊髄液シャント感染症の感染源としても認識されている。驚くべきことに、本発明の化合物は、この病原菌に対して非常に活性であり、それゆえ、前記感染症、好ましくは尋常性ざ瘡の治療に利用しうることが分かった。
淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）は、グラム陰性菌であり、淋菌に関連する最も一般的疾患である淋病を引き起こしうる。さらに、淋菌は、結膜炎、咽頭炎、直腸炎、尿道炎、前立腺炎、または精巣炎も引き起こしうる。驚くべきことに、本発明の化合物は、この病原菌に対して非常に活性であり、それゆえ、前記感染症、好ましくは淋病の治療に利用しうることが分かった。
【００６５】
特定の一実施形態では、限定されないが、市中呼吸器感染症、院内感染症、尿路感染症、尋常性ざ瘡、淋病およびクロストリジウム・ディフィシル感染症の疾患の治療に使用するための化合物が提供される。
次に、本発明の化合物の一般的な調製方法を示す。
一般に、本発明の化合物は、以下の一般的スキームおよび下記の実験的手法により、ならびに／または当業者の知識と組み合わされた追加のまたは代替的な公知のプロセスおよび手法により、調製することができる。以下の一般的スキームにより示される方法は、例証を目的としたものであり、本開示の範囲を限定すると解釈されるべきものではないことを理解すべきである。
したがって、別の態様では、本発明は、一般式（１）によって表される化合物またはその薬理上許容される塩を製造するための合成方法を提供する。
スキーム１では、本発明の化合物の一般的な調製方法を提供する：
【００６６】
【化２６】
2020511457.tif 000027
【００６７】
一般式（１）の化合物は、スキーム１のステップに従って調製することができる。第１のステップでは、式（１’）の化合物を、ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの適切な塩基の存在下でジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェートと室温で反応させて位置異性体の混合物を形成する。このようにして形成された位置異性体の混合物を、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルまたはジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒中、酢酸および水などの酸性条件下で加水分解にかけ、その後、分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用して分離して、純粋な位置異性体を得る。
【００６８】
式（１’）の化合物の一般的な調製方法
スキーム２では、式（１’）の化合物の一般的な調製方法を提供する。
【００６９】
【化２７】
2020511457.tif 000028
【００７０】
一般式（１’）の化合物は、スキーム２のステップに従って調製することができる。第１のステップでは、式（２）の化合物と式（３）の化合物（式中、Ｌは、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素から選択されるハロゲンなどの適切な脱離基を表し；Ｒ１はアルキル基を表す）との求核置換反応を、ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下で加熱して実施して、式（４）の化合物を得る。第２のステップでは、式（４）の中間体化合物のエステル基を、一般式（１’）の化合物へ、
（ａ）一般式（１’）のＡが
【００７１】
【化２８】
2020511457.tif 000029
であるときは、
【００７２】
テトラヒドロフランなどの適切な溶媒中、臭化メチルマグネシウムなどのメチル金属化合物の存在下（テトラヒドロフラン中）、２０℃以下、より好ましくは０℃以下で、アルキル化（グリニャール反応）することによって、
（ｂ）一般式（１’）のＡが
【００７３】
【化２９】
2020511457.tif 000030
であるときは、還元、酸化、続いてアルキル化することによって、変換する。
【００７４】
ここで、式（４）の化合物の還元は、室温でメタノールなどの適切な溶媒中、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤の存在下で実施して、アルコール中間体を得、このアルコール中間体を室温で塩化メチレンなどの適切な溶媒中、二酸化マンガンなどの酸化剤の存在下で酸化してアルデヒド中間体を得、このアルデヒド中間体を最終的に上記のようにアルキル化（グリニャール反応）にかける。
式（３）によって表される化合物は、市販されており、文献で既に知られており、または当技術分野で周知の標準的合成方法により合成される。
式（２）によって表される化合物は、下記に示す反応系列に従って調製することができる：
【００７５】
【化３０】
2020511457.tif 000031
【００７６】
式（２）の中間体化合物は、縮合反応、続いて脱保護により調製することができる。最初に、式（５）のイミダゾール化合物を、式（６）の化合物（式中、Ｒは、上記で定義される通りであり、Ｐｇは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、またはｐ−メトキシベンジルなどの保護基である）と、当技術分野で公知の適切なペプチドカップリング試薬または１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）などのカップリング剤の存在下で縮合する。そのような縮合反応は、時に、１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）またはジメチルアミノピリジンなどの触媒の存在下、および時にトリエチルアミンまたはジ−イソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドおよびジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中で、−４０℃〜８０℃の温度範囲で実施する。
第２のステップでは、式（７）の化合物を、メタノールなどの適切な溶媒中、酢酸エチル中塩化水素などの酸の存在下で、脱保護反応にかける。
式（５）のイミダゾール化合物は、文献（ＷＯ２００９／０８４６１４）で知られている。式（６）の化合物は、市販されており、または文献で知られている。また、当技術分野で記載されている手順、例えば、ＷＯ２００６／０８７５４３に記載の手順に従って製造することができる。
ある特定の場合には、式（６）の光学的に純粋な化合物を、以下に記載の手順によって調製することができる。
式（３）によって表される化合物のメチル化誘導体、例えばジメチル化化合物（３ａ）またはモノメチル化化合物（３ｂ）は、化合物（Ｉ）の合成中間体として好ましく利用される。
【００７７】
【化３１】
2020511457.tif 000032
【００７８】
これらの状況下で、（４ａ）または（４ｂ）などの式（４）のメチル化化合物が直接調製され、上記スキーム１に示されるようなアルキル化ステップが回避される。
【００７９】
【化３２】
2020511457.tif 000033
【００８０】
化合物（３ａ）または（３ｂ）の使用は、式（４）の化合物のアルキル化ステップでのカルボニル不純物の混入を防止することができることから有利である。
より詳細には、（３ａ）または（３ｂ）のブロモ誘導体（式（３ａ）または（３ｂ）中のＬが臭素である）が、反応に使用されることが好ましい。（３ａ）または（３ｂ）のブロモ誘導体は、化合物（３ａ）または（３ｂ）の対応するアミノ誘導体（式（３ａ）または（３ｂ）中のＬが−ＮＨ２である）の反応により、公知の方法で亜硝酸ナトリウムを（３ａ）および（３ｂ）のアミノ化合物と反応させて得られるジアゾニウム化合物を臭素化することによって得られる。化合物（３ａ）または（３ｂ）のアミノ誘導体は、オキシ塩化リン、五塩化リン、三塩化リンなどのリン塩素化剤の存在下に、ヒドラジンカルボチオアミドと２−（Ｒ２−Ｏ−）−２−メチルプロピオン酸または２−（Ｒ２−Ｏ−）−プロピオン酸とを反応させることによって得られる。反応に干渉しない任意の溶媒をこの反応に利用することができ、ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンなどのエーテル；ベンゼン、トルエン、キシレンなどの炭化水素；クロロホルム、１，２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素；酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチルなどのエステルが例示される。２−（Ｒ２−Ｏ−）−２−メチルプロピオン酸エステルまたは２−（Ｒ２−Ｏ−）−プロピオン酸エステルの（Ｒ２−Ｏ−）−部分に関して、この部分は、ヒドロキシ基の一部の保護基によって、２−ヒドロキシ−プロピオン酸エステルのヒドロキシ基を保護することから誘導されたものであることが好ましい。そのようなヒドロキシ基の保護基は、当技術分野で公知の基から選択することができ、メチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基などのアルキル基；ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基などのアラルキル基；アセチル基、ピバロイル基、ベンゾイル基などのアシル基が例示される。（Ｒ２−Ｏ−）−部分について、アシルオキシ基が好ましく用いられ、ベンゾイルオキシ基がより好ましく使用される。保護基Ｒ２の脱保護は、ヒドロキシ基を得るために実際に選択された保護基に応じた既知の方法によって行うことができる。（３ａ）または（３ｂ）のブロモ誘導体と化合物（２）との反応は、上記で説明した方法に従って行う。
【００８１】
好ましくは、式（１’）の化合物は、化合物（３ａ）または（３ｂ）のブロモ誘導体（式中、Ｌが臭素である）を使用して、スキーム３に従って得られる。
【００８２】
【化３３】
2020511457.tif 000034
【００８３】
このプロセスによれば、チアジアゾール部分が導入された後、イミダゾール部分が導入される。式（９）の化合物、特にジメチル化誘導体は、化合物（３ａ）と化合物（８）との反応により得られる。結果として得られる化合物（９）、特にジメチル化誘導体は、カルボン酸の固体塩として得られ、そのようなカルボン酸塩は、スラリー法または再結晶などの関連分野で周知の方法により精製された。化合物（９）のカルボン酸の塩としては、好ましくはプロピオン酸塩が例示される。これにより、合成中間体として使用される高純度の化合物（９）を得ることができ、高純度の式（１’）の化合物を得ることができるので、非常に有利である。化合物（９）のフリー体は、化合物（９）の塩を塩基で処理するなどの公知の方法により得ることができる。化合物（３ａ）と化合物（８）との反応は、上記で説明した条件により達成される。
【００８４】
ジメチル化誘導体である化合物（９）は、化合物（９）と４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボン酸（５）との反応により、化合物（４ａ）に変換することができる。この反応は、下記に説明される条件下で達成することができる。化合物（４ａ）からのＲ２の除去により、化合物（Ｉ）が得られる。この除去は、保護基Ｒ２に利用される既知の方法により達成することができる。
【００８５】
本明細書に記載の方法は、好ましくは、以下の実施形態を含むことが意図され、例えば、以下の式
【００８６】
【化３４】
2020511457.tif 000035
を有する５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル誘導体またはその立体異性体の調製に関して、以下の式
【００８７】
【化３５】
2020511457.tif 000036
（式中、Ｒは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基を表し、Ｒ１はアルキル基を表す）
の化合物またはその立体異性体の−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１のカルボニル炭素原子でのジメチル化を含む、方法が提供される。
別の実施形態では、以下の式
【００８８】
【化３６】
2020511457.tif 000037
の化合物またはその立体異性体を調製するための方法であって、
ｉ）以下の式：
【００８９】
【化３７】
2020511457.tif 000038
の化合物またはその立体異性体を、以下の式：
【００９０】
【化３８】
2020511457.tif 000039
（式中、Ｌは脱離基を表し、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を表し、Ｒは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基を表す）
の化合物と反応させて、以下の式
【００９１】
【化３９】
2020511457.tif 000040
の化合物またはその立体異性体を得るステップ、ならびに
ｉｉ）ステップｉ）で得られた化合物を脱保護するステップ
を含む、方法が提供される。
【００９２】
別の実施形態では、以下の式
【００９３】
【化４０】
2020511457.tif 000041
の化合物またはその立体異性体を調製するための方法であって、
ｉ）以下の式：
【００９４】
【化４１】
2020511457.tif 000042
の化合物またはその立体異性体を、以下の式
【００９５】
【化４２】
2020511457.tif 000043
の化合物と反応させて、以下の式
【００９６】
【化４３】
2020511457.tif 000044
の化合物またはその立体異性体を得るステップ、
ｉｉ）ステップｉ）で得られた化合物を、以下の式
【００９７】
【化４４】
2020511457.tif 000045
の化合物と反応させて、以下の式
【００９８】
【化４５】
2020511457.tif 000046
の化合物またはその立体異性体を得るステップ、ならびに次いで、
ｉｉｉ）ステップｉｉ）で得られた化合物を脱保護するステップを含み、ここで、Ｌ、ＲおよびＲ２は本明細書で定義される通りである、方法が提供される。
好ましい実施形態では、上記方法のいずれかで得られた化合物は、以下の構造式：
【００９９】
【化４６】
2020511457.tif 000047
を有する。
以下の式
【０１００】
【化４７】
2020511457.tif 000048
を有する５−（１−ヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル誘導体またはその立体異性体の調製に関して、
ｉ）以下の式：
【０１０１】
【化４８】
2020511457.tif 000049
の化合物またはその立体異性体を、水素化ホウ素ナトリウムなどの適切な還元剤の存在下で還元して、以下の式：
【０１０２】
【化４９】
2020511457.tif 000050
の化合物またはその立体異性体を得るステップ、
ｉｉ）ステップｉ）で得られた化合物を、適切な酸化剤を使用して酸化して、以下の式：
【０１０３】
【化５０】
2020511457.tif 000051
の化合物またはその立体異性体を得るステップ、ならびに
ｉｉｉ）グリニャール試薬を用いてホルミル基の炭素原子をメチル化するステップ
を含む、方法が提供される。
好ましい実施形態では、上記方法に従って得られた化合物は、以下の構造式：
【０１０４】
【化５１】
2020511457.tif 000052
を有する。
以下の式
【０１０５】
【化５２】
2020511457.tif 000053
を有する５−（１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル誘導体またはその立体異性体の調製に関して、以下の式
【０１０６】
【化５３】
2020511457.tif 000054
の化合物またはその立体異性体をボランと反応させ、その後、過酸化水素で処理することを含む、方法が提供される。
好ましい実施形態では、上記方法に従って得られた化合物は、構造式：
【０１０７】
【化５４】
2020511457.tif 000055
を有する。
以下の式
【０１０８】
【化５５】
2020511457.tif 000056
を有する５−［１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル誘導体またはその立体異性体の調製に関して、以下の式
【０１０９】
【化５６】
2020511457.tif 000057
の化合物またはその立体異性体を（ｌ−１，３，４−チアジアゾールの５−エテニル基で）ジヒドロキシル化することを含み、
ここで、ジヒドロキシル化は、シャープレス不斉ジヒドロキシル化である、方法が提供される。
好ましい実施形態では、上記方法で得られた化合物は、構造式：
【０１１０】
【化５７】
2020511457.tif 000058
を有する。
【０１１１】
一般的な有機化学者によって薬理上許容される塩を製造するために通常使用される合成方法は、この特許出願の範囲内である。
熟練した有機化学者は、下記の参照文献、その中に記載の例、以下に記載の例を使用して、必要な出発物質および生成物を得ることができるであろう。上記のような手法に必要な出発物質が市販されていないときは、構造的に類似した化合物の合成と類似の標準的有機化学技術、ならびに上記もしくは実施例に記載の手順の手法と類似の技術から選択される手法によって調製しうる。
合成方法のための多くの出発物質が市販されておりおよび／もしくは科学文献で広く報告されており、または科学文献で報告されている合成方法を適切に使用することによって市販製品から形成することができることに留意すべきである。反応条件または試薬の一般的な手引書として、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４巻（Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ発行、１９９２）を参照。
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の１つまたは複数の方法において場合に応じて指定されている還元剤、溶媒、保護基、有機リチウム試薬、および塩基に代えて、本明細書に記載されるような、任意の他の還元剤、溶媒、保護剤、有機リチウム試薬、および塩基を利用することもできることが理解されるべきである。
従来の保護基は、標準的技術（例証として、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、１９９１を参照）に従って使用することができる。
【０１１２】
アミノ基に適した保護基の例としては、アシル基、例えば、アルカノイル基（例えば、アセチル）、アルコキシカルボニル基（例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、およびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル）、ならびにアロイル基（例えば、ベンゾイル）、またはｐ−メトキシベンジルが挙げられる。
保護基の脱保護条件は、保護基の選択に従って必然的に異なる。したがって、例えば、アルカノイルなどのアシル基またはアルコキシカルボニル基またはアロイル基は、例えば、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウムまたは水酸化ナトリウム）などの適切な塩基で加水分解することにより除去しうる。代替的に、アルコキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基）は、例えば、塩酸、硫酸、リン酸またはトリフルオロ酢酸などの適切な酸を用いた処理により、除去しうる。アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル基）は、例えば、パラジウム担持触媒（例えば、活性炭）の存在下、水素で処理することにより、またはルイス酸、例えば、ボロントリス（トリフルオロアセテート）で処理することにより、除去しうる。
カルボキシル基に適した保護基の例としては、エステル形成可能な置換基、例えば、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、およびベンジル基が挙げられる。
保護基の脱保護条件は、保護基の選択に従って変わることが必然的に予測される。
したがって、例えば、メチルエステルまたはエチルエステル基は、例えば、水酸化ナトリウムなどの適切な塩基で加水分解することにより除去しうる。例えば、ｔｅｒｔ−ブチルエステル基は、例えば、トリフルオロ酢酸などの有機酸で処理することにより除去しうる。ベンジルエステル基は、例えば、パラジウム担持触媒（例えば、活性炭）の存在下で、水素化分解することにより除去しうる。
これらの保護基は、化学分野で周知の従来技術を使用して、任意の都合のよい合成段階で除去しうる。代替的に、保護基は、後続の反応ステップまたは後処理中に除去してもよい。全ての保護基の除去および薬理上許容される塩の形成は、通常の有機化学者の標準技術を使用する能力の範囲内である。
【０１１３】
本発明の化合物の光学活性体が必要とされるとき、この形態は、光学活性な出発物質（例えば、適切な反応ステップにおける不斉誘導体化によって形成されたもの）を上記手法のいずれか１つにかけることにより；または本発明の化合物もしくはその中間体のラセミ体を標準的な手法を使用して分割することにより；または形成される場合にはジアステレオマーをクロマトグラフィーによって分離することにより、得ることができる。さらに、酵素技術も光学活性化合物および／または中間体の生成に有用でありうる。
同様に、本発明の化合物の純粋なジアステレオマーが必要とされるとき、この異性体は、精製されたジアステレオマー混合物を出発物質として上記の手法のいずれか１つにかけることにより、またはジアステレオマーもしくはその中間体の混合物を標準的な手法を使用して分割することにより、得ることができる。
【０１１４】
収率は例としてのみ示され、必ずしも常に達成可能な最大値でとは限らない。
本発明の最終生成物の構造は、全体的に、ＮＭＲ（プロトン磁気共鳴スペクトルを指す）および／または質量スペクトル（ＥＳＩ方法、ＡＰＣＩ方法、またはＦＡＢ方法）によって決定した。プロトン磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルの化学シフトは、内部標準のテトラメチルシランに対して低磁場（δスケール）のｐｐｍで表され、結合定数（Ｊ）およびピーク多重度は以下のように示される（ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｄｄ、ダブルダブレット；ｄｔ、ダブルトリプレット；ｔ、トリプレット；ｑ、カルテット；ｍ、マルチプレット；ｂｒ、ブロード）。カチオンデータおよびアニオンデータは、ＥＳＩ法、ＡＰＣＩ法、またはＦＡＢ法によって必要に応じて質量スペクトルに組み込まれる。測定は、５８９ｎｍの回転角で実施した（２５℃）。
それぞれの中間体は、後続のステップで必要とされるレベルまで精製し、構造的に決定する（質量スペクトルまたはＮＭＲスペクトルによる同定を適切に決定するために、純度を、ＴＬＣもしくはＮＭＲによって評価する）。
化合物名の表記において、ｃｉｓ（±）またはｔｒａｎｓ（±）が使用されるときはｃｉｓまたはｔｒａｎｓ異性体のラセミ混合物を意味し、（−）または（＋）が言及されるときはＲ，ＲまたはＳ，Ｓの単一のエナンチオマーを意味すると理解されるべきである。
還元剤として、他に言及されていない限り、水素化錯体化合物、または水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムもしくはシアノ水素化ホウ素ナトリウムなどのホウ素含有化合物を使用することができる。さらに、パラジウム炭素、ラネーニッケル、酸化白金、水酸化パラジウムまたはパラジウム黒などの金属触媒を使用する接触還元を、好ましく使用することができる。
本発明によれば、溶媒は、他に言及されていない限り、極性非プロトン性および極性プロトン性溶媒を含む当技術分野で周知の極性および非極性溶媒を含む。極性溶媒の例としては、限定されないが、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ｎ−ブタノール、酢酸、ギ酸もしくは水、または非プロトン溶媒、例えば、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジオキサン、塩化メチレン、ジメチルスルホキシド、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、酢酸エチル、１，２−ジメトキシエタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルムまたはピリジンが挙げられる。極性溶媒には、水と上記溶媒のいずれかとの混合物、または上記溶媒の任意の２種以上の混合物も含まれる。非極性溶媒の例としては、限定されないが、トルエン、ベンゼン、クロロベンゼン、キシレン、およびヘキサンが挙げられる。
【０１１５】
塩基には、他に言及されていない限り、限定されないが、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸マグネシウム、炭酸バリウム、メチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはピリジンが含まれる。
ある特定の実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）の同位体標識化合物を包含する。指定される任意の特定の原子または元素の同位体は全て、本発明の範囲内にあると考えられる。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、限定されないが、水素（例えば、２Ｈまたは３Ｈ）、炭素（例えば、１３Ｃまたは１４Ｃ）、窒素（例えば、１３Ｎまたは１５Ｎ）、酸素（例えば、１５Ｏ、１７Ｏまたは１８Ｏ）、リン（例えば、３２Ｐまたは３３Ｐ）、硫黄（例えば、３５Ｓ）、ハロゲン（例えば、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉまたは１２５Ｉ）の同位体が含まれる。好ましい実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）の重水素（Ｄまたは２Ｈ）化合物を提供する。式（Ｉ）の同位体標識化合物は、同位体標識試薬を使用して、以下の一般的スキームおよびその方法に従って調製することができる。本発明の同位体標識（化合物）は、化合物および／または基質組織分布アッセイ（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）において役立ちうる。そのような同位体標識化合物の適用は当業者に周知であり、したがって本発明の範囲内である。
以下の略称を時々使用する場合がある。
ＴＬＣは、薄層クロマトグラフィーを意味する；ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する；ＴＨＦは、テトラヒドロフランを意味する；ＨＯＢＴは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを意味する；ＥＤＣＩは、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩を意味する；ＤＭＳＯ−Ｄ６は、重水素化ジメチルスルホキシドを意味する；ＣＤＣｌ３は、重水素化クロロホルムを意味する；ＣＤ３ＯＤは、重水素化メタノールを意味する；ＦＡＢは、高速原子衝突イオン化を意味する；ＥＳＩは、エレクトロスプレーイオン化を意味する；ＡＰＣＩは、大気圧化学イオン化を意味する。
【実施例】
【０１１６】
以下、本発明を、実施例および試験例を参照して詳細に記載するが、本発明の範囲はそれらに限定されない。本明細書に記載の手順、他の合成手順およびその修飾において任意の修飾を採用し、適応することができる。そのような修飾および代替手順の全てが、本出願の趣旨および範囲内である。
【０１１７】
（実施例１）［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１）および［５−クロロ−４−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.２）の合成：
【０１１８】
【化５８】
2020511457.tif 000059
【０１１９】
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
ジイソプロピルエチルアミン（２６．４ｇ、２０４ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（３９．２ｇ、１７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４００ｍＬ）中溶液に加え、ベンジルクロロホルメート（４３．５ｇ、２５５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍＬ）中溶液を氷冷下で滴下し、混合物を１時間さらに撹拌した。反応溶液を、水および１０％塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０、１００／１５、１００／３０）によって精製し、得られた精製物を酢酸エチル／ヘキサン混合溶媒を使用してさらに固化して、標題化合物（４０．０ｇ、６５％）を白色固体として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm: 7.29-7.40 (5H, m), 5.10 (2H, s), 5.04-5.16 (1H, m), 4.26-4.50 (1H, m), 3.91-4.22 (1H, m), 3.37 (3H, s), 3.25-3.37 (1H, m), 2.60-2.90 (2H, m), 1.63-1.76 (2H, m), 1.46 (9H, s).
質量スペクトル (ESI): m/z 365 (M+H)+.
【０１２０】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート
ステップ１で得られたｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（１００ｇ、２７４ｍｍｏｌ）を、光学活性カラム（ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ（登録商標）、溶出溶媒：ヘキサン／２−プロパノール＝９０／１０（ｖ／ｖ））を使用して光学分割した。第１溶出ピーク化合物（４９．５ｇ）および第２溶出ピーク化合物（４８．９ｇ）を無色の油状物質として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm: 7.29-7.40 (5H, m), 5.10 (2H, s) 5.04-5.16 (1H, m), 4.26-4.50 (1H, m), 3.91-4.22 (1H, m), 3.37 (3H, s), 3.25-3.37 (1H, m), 2.60-2.90 (2H, m), 1.63-1.76 (2H, m), 1.46 (9H, s). 
質量 (ESI): m/z 365 (M+H)+.
【０１２１】
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
１０％パラジウム炭素（１０８ｇ）を、ステップ２で得られた第２溶出ピーク化合物（２３０ｍｇ、０．６３１ｍｍｏｌ）のメタノール（７ｍＬ）溶液に加え、混合物を水素雰囲気下、室温で１時間３０分撹拌した。濾過により触媒を除去した反応溶液を、減圧下で濃縮して、標題化合物（１４１ｍｇ、９７％）を無色の油状物質として得た。
【０１２２】
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
上記ステップ３で得られたｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（２２４．４ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、文献（ＷＯ２００９／０８４６１４）に記載の方法により合成した４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキシレート（１４０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４４０ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）をジメチルアセトアミド中で混合し、混合物を７０℃で１時間加熱した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水で３回および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下で留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、標題化合物（２２２．４ｍｇ，７２％）を白色固体として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm: 10.90 (1H, br s), 7.45 (1H, br s), 4.19-4.35 (3H, m), 3.41 (3H, s), 3.32-3.39 (2H, m), 2.72-2.89 (1H, m), 2.68 (2H, q, J = 7.57 Hz), 1.79-1.91 (1H, m), 1.61-1.69 (1H, m), 1.47 (9H, s), 1.26 (3H, t, J = 7.57 Hz).
【０１２３】
ステップ５：エチル５−［（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレートの合成
塩化水素／酢酸エチル溶液（４Ｎ、３ｍＬ）を、ステップ４で得られたｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（１．０ｇ）の酢酸エチル（３ｍＬ）溶液に加え、混合物を室温で３０分間静置した。溶媒を減圧下で留去して、粗４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド塩酸塩を無色の非晶質固体として得た。
【０１２４】
上記で得られた粗４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド塩酸塩、エチル５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレート（０．６６ｇ）および炭酸水素ナトリウム（１．０５ｇ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）懸濁液を７０℃で３時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下で留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、標題化合物（１．４ｇ）を無色の固体として得た。
質量 (ESI): m/z 443 (M+H)+.
【０１２５】
ステップ６：４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１２６】
【化５９】
2020511457.tif 000060
【０１２７】
臭化メチルマグネシウム（１．１２ｍｏｌ／ｌのテトラヒドロフラン溶液、１０ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を、ステップ５で得られたエチル５−［（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレート（０．３５ｇ、０．７９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液に氷冷下で加え、混合物を室温で４０分間撹拌した。その混合物に飽和塩化アンモニウム溶液を加え、続いて酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。減圧下で濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル／メタノール）により精製して、標題化合物（０．４０ｇ、８８％）を無色の非晶質固体として得た。
1H-NMR (400MHz,CDCl3) δ: 11.29 (1H, s), 7.53 (1H, d, J = 9.16 Hz), 4.48-4.45 (1H, m), 4.27-4.22 (1H, m), 3.85-3.82 (1H, m), 3.52 (1H, s), 3.42 (3H, s), 3.31-3.24 (1H, m), 3.15-3.12 (1H, m), 2.92 (1H, s), 2.70 (2H, q, J = 7.64 Hz), 2.12-2.07 (1H, m), 1.81-1.79 (1H, m), 1.68 (6H, d, J= 2.29 Hz), 1.26 (3H, t, J = 7.64 Hz).
【０１２８】
ステップ７：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.１’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル［５−クロロ−４−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.２’）の合成
【０１２９】
【化６０】
2020511457.tif 000061
【０１３０】
４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（ステップ６、３０．０ｇ、６９．９ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）に室温で溶解させた。炭酸カリウム（３８．６ｇ、２７９．６ｍｍｏｌ、４当量）を反応混合物に加え、続いてジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（２２．６ｇ、８７．４ｍｍｏｌ、１．２５当量）を加えた。反応混合物を５５℃で一晩加熱した。反応完了後、反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、飽和食塩水溶液（４×４００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、４０℃で減圧下、濃縮した。粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中３％メタノール）にかけて、位置異性体の混合物（３８ｇ）を得た。位置異性体の混合物を、次のステップに直接用いた。
【０１３１】
ステップ８：［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１）および［５−クロロ−４−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.２）の合成
【０１３２】
位置異性体の混合物（ステップ７、３０．０ｇ、４６．１ｍｍｏｌ）を室温でメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３００ｍＬ）に溶解した。酢酸と水との混合物（１：１、それぞれ７．５ｍＬ）を反応混合物に加え、５０℃に加熱した。反応を、２４時間後、ＭＳ分析によりモニターした。酢酸と水との混合物（１：１、それぞれ７．５ｍＬ）を反応混合物にさらに加え、反応が完了するまで（３〜４日）反応を続けた。反応完了後、減圧下、溶媒を４０℃で留去し、酢酸エチル（３００ｍＬ）を反応混合物に加えると、化合物１および化合物２が微細な白色固体（２４．８ｇ）として沈殿した。このようにして形成された位置異性体を、分取ＨＰＬＣを使用して分離して、化合物１（１５ｇ）および化合物２（６．６ｇ）を得た。分離条件を表２に示す。
化合物  Ｎｏ.１：1H NMR (400 MHz, DMSO) δppm: 7.84(d, 1H, J=8.36), 6.15 (m, 2H), 5.94 (bs, 1H), 4.12 (m, 3H), 3.78 (d, 1H, J=13.4), 3.54 (bs, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.22 (m, 3H), 2.68 (q, 2H, J=7.48), 1.85 (m, 1H), 1.64 (m, 1H), 1.48 (s, 6H), 1.11 (t, 3H, J=7.48). 質量スペクトル(ESI): m/z 539.11 (M+H)+.
化合物  Ｎｏ.２：1H NMR (400 MHz, DMSO) δppm:7.81(d, 1H, J=8.52), 6.14 (d, 3H, J=7.16), 4.13 (m, 2H), 3.79 (m, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.24 (m, 2H), 2.5 (m, 4H), 1.85 (m, 1H), 1.67 (m, 1H), 1.48 (s, 6H), 1.13 (t, 3H, J=7.56). 質量スペクトル (ESI): m/z 538.81 (M+H)+.
【０１３３】
（実施例２）（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.３）および（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.４）の合成：
【０１３４】
【化６１】
2020511457.tif 000062
【０１３５】
ステップ１：４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシ−１−［５−（プロパ−１−エン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１３６】
【化６２】
2020511457.tif 000063
【０１３７】
実施例１、ステップ６で得た４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（１．０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を乾燥トルエン（５０ｍＬ）に室温で溶解し、続いてｐ−トルエンスルホン酸（３９ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えた。反応混合物を８０℃で一晩撹拌した。反応完了後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、減圧下、濃縮した。粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（メタノール−ジクロロメタン、５％）にかけて、標題化合物（５７５ｍｇ）を薄茶色固体として得た。
質量スペクトル (ESI) : m/z 411.11 (M+H)+.
【０１３８】
ステップ２：４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１３９】
【化６３】
2020511457.tif 000064
【０１４０】
ＡＤ−ミックス−α（登録商標）（２０．４ｇ、１．４ｇ／ｍｍｏｌ）のｔ−ブタノールおよび水（それぞれ３００ｍＬ）溶液に、メタンスルホンアミド（１．３８ｇ、１４．６ｍｍｏｌ））を加え、反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。上記ステップ１で得られた４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシ−１−［５−（プロパ−１−エン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］ピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（６．０ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を亜硫酸ナトリウム溶液でクエンチし、反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（１０％、ジクロロメタン中メタノール）を使用して精製して、４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（３．６ｇ）をオフホワイト色の非晶質固体として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm: 11.89 (s,1H), 7.64 (d,1H, J=8.96Hz), 4.37 (d, 1H, J=13.84Hz), 4.30-4.20 (m, 1H), 4.13 (d, 1H, J=11.4Hz), 3.80 (d, 1H, J=13.28Hz), 3.69 (d, 1H, J=11.36Hz), 3.50 (s, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.22 (dt, 1H, J=13.2, 3.0Hz), 3.11 (d, 1H, J=13.24Hz), 2.66 (q, 2H, J=15.16, 7.56Hz), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.23 (t, 3H, J=7.56Hz).
質量: m/z 445.10 (M+H)+.
【０１４１】
ステップ３：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.３’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.４’）の合成
【０１４２】
【化６４】
2020511457.tif 000065
【０１４３】
４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（２．０ｇ、４．４９ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に室温で溶解した。炭酸カリウム（１．８５ｇ、１３．４７ｍｍｏｌ、３当量）を反応混合物に加え、続いて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（１．４５ｇ、５．６１ｍｍｏｌ、１．２５当量）を加えた。反応混合物を５５℃で一晩加熱した。反応完了後、反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、飽和食塩水溶液（４×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、４０℃で減圧下、濃縮した。粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中３％メタノール）にかけて、最終混合物（２．８ｇ、位置異性体の混合物）を得た。位置異性体の混合物を、分取ＨＰＬＣを使用して分離して、化合物３’（７００ｍｇ）および化合物４’（３００ｍｇ）を無色の油として得た。分離条件を表２に示す。
【０１４４】
ステップ４：（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートおよび（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェートの合成
化合物  Ｎｏ.３’（７００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を、室温でジメチルスルホキシド（３ｍＬ）中に溶解した。酢酸と水との混合物（１：１、それぞれ０．５ｍＬ）を反応混合物に加え、５０℃で加熱した。反応を、２４時間後、ＭＳ分析によりモニターした。酢酸と水との混合物（１：１、それぞれ０．５ｍＬ）を反応混合物にさらに加え、反応が完了するまで３〜４日間反応を続けた。反応が完了した後、凍結乾燥剤を使用して減圧下、溶媒を除去して（４０℃）、化合物  Ｎｏ.３を白色固体（１５０ｍｇ）として得た。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm: 6.21(d, 2H, J=7.52), 4.23 (d, 2H, J=13.56), 3.88 (d, 1H, J=12.21), 3.65 (dd, 2H, J=18.3,11.2), 3.59 (bs, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.34 (m, 2H), 2.77 (q, 2H, J=7.48), 1.97 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.59, (s, 3H), 1.21 (t, 2H, J= 7.48). 質量: m/z 555.14 (M+H)+.
同様に、化合物４’（３００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を使用して、化合物  Ｎｏ.４（５０ｍｇ、白色固体）を調製した。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm: 6.12(m, 2H), 4.23 (t, 2H, J=11.56), 3.89 (m, 1H), 3.65 (dd, 3H, J=18.8,11.2), 3.59 (bs, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.53 (q, 2H, J=8.0), 2.01 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.17 (t, 3H, J=7.56). 質量: m/z 555.10 (M+H)+. 
【０１４５】
（実施例３）（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.５）および（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.６）の合成：
【０１４６】
【化６５】
2020511457.tif 000066
【０１４７】
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
ジイソプロピルエチルアミン（２６．４ｇ、２０４ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（３９．２ｇ、１７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液に加え、ベンジルクロロホルメート（４３．５ｇ、２５５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍＬ）溶液を氷冷下で滴下し、混合物を１時間さらに撹拌した。反応溶液を、水および１０％塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０、１００／１５、１００／３０）によって精製し、得られた精製物を酢酸エチル／ヘキサン混合溶媒を使用してさらに固化して、標題化合物（４０．０ｇ、６５％）を白色固体として得た。
1H-NMRスペクトル (400MHz, CDCl3) δ ppm: 7.29-7.40 (5H, m), 5.10 (2H, s), 5.04-5.16 (1H, m), 4.26-4.50 (1H, m), 3.91-4.22 (1H, m), 3.37 (3H, s), 3.25-3.37 (1H, m), 2.60-2.90 (2H, m), 1.63-1.76 (2H, m), 1.46 (9H, s).
質量スペクトル (ESI): m/z 365 (M+H)+.
【０１４８】
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート
ステップ１で得られたｔｅｒｔ−ブチルｃｉｓ（±）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（１００ｇ、２７４ｍｍｏｌ）を、光学活性カラム（ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ（登録商標）、溶出溶媒：ヘキサン／２−プロパノール＝９０／１０（ｖ／ｖ））を使用して光学分割した。第１溶出ピーク化合物（４９．５ｇ）および第２溶出ピーク化合物（４８．９ｇ）を無色の油状物質として得た。
1H-NMRスペクトル (400MHz, CDCl3) δppm: 7.29-7.40 (5H, m), 5.10 (2H, s) 5.04-5.16 (1H, m), 4.26-4.50 (1H, m), 3.91-4.22 (1H, m), 3.37 (3H, s), 3.25-3.37 (1H, m), 2.60-2.90 (2H, m), 1.63-1.76 (2H, m), 1.46 (9H, s). 
質量スペクトル (ESI): m/z 365 (M+H)+.
【０１４９】
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
１０％パラジウム炭素（１０８ｇ）を、ステップ２で得られた第２溶出ピーク化合物（２３０ｍｇ、０．６３１ｍｍｏｌ）のメタノール（７ｍＬ）溶液に加え、混合物を水素雰囲気下、室温で１時間３０分撹拌した。濾過により触媒を除去した反応溶液を、減圧下で濃縮して、標題化合物（１４１ｍｇ、９７％）を無色の油状物質として得た。
【０１５０】
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレートの合成
実施例１（ステップ４）と同じ操作を、上記ステップ３で得られたｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−アミノ−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（２２４．４ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、文献（ＷＯ２００９／０８４６１４）に記載の方法により合成した４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキシレート（１４０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４４０ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を使用して実施して、標題化合物（２２２．４ｍｇ、７２％）を白色固体として得た。
1H-NMRスペクトル (400MHz, CDCl3) δppm: 10.90 (1H, br s), 7.45 (1H, br s), 4.19-4.35 (3H, m), 3.41 (3H, s), 3.32-3.39 (2H, m), 2.72-2.89 (1H, m), 2.68 (2H, q, J = 7.57 Hz), 1.79-1.91 (1H, m), 1.61-1.69 (1H, m), 1.47 (9H, s), 1.26 (3H, t, J = 7.57 Hz).
【０１５１】
ステップ５：エチル５−［（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレートの合成
塩化水素／酢酸エチル溶液（４Ｎ、３ｍＬ）を、ステップ４で得られたｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（１．０ｇ）の酢酸エチル（３ｍＬ）溶液に加え、混合物を室温で３０分間静置した。溶媒を減圧下で留去して、粗４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド塩酸塩を無色の非晶質固体として得た。
【０１５２】
上記で得られた粗４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド塩酸塩、エチル５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレート（０．６６ｇ）および炭酸水素ナトリウム（１．０５ｇ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）懸濁液を７０℃で３時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下で留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、標題化合物（１．４ｇ）を無色の固体として得た。
質量スペクトル (ESI): m/z 443 (M+H)+.
【０１５３】
ステップ６：４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
水素化ホウ素ナトリウム（１．９ｇ）を、５回に分割して、上記ステップ５で得られたエチル５−［（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝３−メトキシピペリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−カルボキシレート（１．４ｇ）のメタノール（５０ｍＬ）溶液に氷冷下で加え、混合物を撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮し、水を残渣に加え、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムにより精製して、標題化合物（１．０ｇ）を非晶質固体として得た。
1H-NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm: 11.14 (1H, s), 7.53 (1H, d, J = 9.03 Hz), 4.88 (2H, s), 4.44-4.48 (1H, m), 4.23-4.27 (1H, m), 3.85-3.87 (1H, m), 3.51 (1H, s), 3.41 (3H, s), 3.28-3.31 (1H, m), 3.14-3.18 (1H, m), 2.80 (1H, br s), 2.70 (2H, q, J = 7.57 Hz), 2.05-2.12 (1H, m), 1.78-1.81 (1H, m), 1.26 (3H, t, J = 7.69 Hz).質量(ESI) : m/z 401 (M+H)+.
【０１５４】
ステップ７：４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１−ヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１５５】
【化６６】
2020511457.tif 000067
【０１５６】
二酸化マンガン（０．４２ｇ）を、上記のステップ６で得られた４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（ヒドロキシメチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．１ｇ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に加え、混合物を室温で一晩撹拌した。ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通じて濾過した後、反応溶液を減圧下に濃縮して、粗４−クロロ−５−エチル−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−ホルミル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドを非晶質固体として得た。
臭化メチルマグネシウム（１．１ｍｏｌ／Ｌのテトラヒドロフラン溶液、６ｍＬ）を、粗４−クロロ−５−エチル−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−ホルミル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドのテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に氷冷下で加え、混合物を撹拌した。水および１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え、続いて酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。減圧下での濃縮により得られた残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル／メタノール）により精製して、標題化合物（０．０５７ｇ）を非晶質固体として得た。
1H-NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm: 11.12 (1H, br s), 7.47-7.57 (1H, m), 5.07-5.18 (1H, m), 4.41-4.51 (1H, m), 4.19-4.31 (1H, m), 3.79-3.91 (1H, m), 3.51 (1H, br s), 3.41 (3H, s), 3.23-3.34 (1H, m), 3.15 (1H, br d, J = 14.65 Hz), 2.91 (1H, br s), 2.70 (2H, q, J = 7.52 Hz), 2.02-2.15 (1H, m), 1.75-1.84 (1H, m), 1.60-1.64 (3H, m), 1.26 (3H, t, J = 7.52 Hz).質量 (ESI) : m/z 415 (M+H)+.
【０１５７】
ステップ８：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.５’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.６’）の合成
【０１５８】
【化６７】
2020511457.tif 000068
【０１５９】
４−クロロ−５−エチル−Ｎ−｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１−ヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（１．０ｇ，２．４９ｍｍｏｌ）を室温でジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解した。炭酸セシウム（２．３４ｇ、７．２ｍｍｏｌ、３当量）を反応混合物に加え、続いて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（０．９３２ｇ、３．６１ｍｍｏｌ、１．５当量）を加えた。反応混合物を５５℃で一晩加熱した。反応完了後、反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、飽和食塩水溶液（４×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、４０℃で減圧下、濃縮した。粗反応混合物を、ジクロロメタン中３％メタノールを使用するカラムクロマトグラフィーにかけて、０．８１０ｇの位置異性体５’および６’の混合物を得た。
実施例２に記載される手順に従って、位置異性体５’および６’の混合物を、分取ＨＰＬＣを使用して分離し、続いて加水分解して、化合物  Ｎｏ.５および化合物  Ｎｏ.６をそれぞれ得る。
【０１６０】
（実施例４）（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.７）および（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.８）の合成：
【０１６１】
【化６８】
2020511457.tif 000069
【０１６２】
ステップ１：Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−｛［（４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−３−メトキシピペリジン−１−カルボキシレート（２ｇ、５．１７ｍｍｏｌ）の塩酸塩（１．９ｇ）を、酢酸エチル（２０ｍＬ）、塩酸溶液（２０ｍｌ、４Ｎジオキサン）を混合することによって調製した。混合物を室温で３０分間静置した後、混合物の溶媒を減圧下で留去して白色固体を得た。
この塩酸塩（０．１ｇ、０．３１ｍｍｏｌｅ）のアセトニトリル（５ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．１５ｍＬ、０．９３ｍｍｏｌ）および２，５−ジブロモ−１，３，４−チアジアゾール（０．１１ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（５ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌した。有機層を分離し、飽和食塩水溶液で洗浄し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中酢酸エチル、３０％）を使用して精製して、標題化合物（８４ｍｇ）をオフホワイト色のガムとして得た。
質量 (ESI) : m/z 451.07 (M+H)+.
【０１６３】
ステップ２：４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−エテニル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１６４】
【化６９】
2020511457.tif 000070
【０１６５】
Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−４−クロロ−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．０８ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ビニルトリブチルスズ（０．１７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）およびビストリフェニルホスフィンパラジウムジクロリド（０．０２５ｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を９０℃で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（５ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中酢酸エチル、４０％）を使用して精製して、標題化合物（２６ｍｇ）をオフホワイト色のガムとして得た。
質量 (ESI) : m/z 397.14 (M+H)+.
【０１６６】
ステップ３：４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１６７】
【化７０】
2020511457.tif 000071
【０１６８】
ＡＤ−ミックス−β（登録商標）（２４７ｍｇ、１．４ｇ／ｍｍｏｌ）のｔ−ブタノールおよび水（それぞれ３ｍＬ）溶液に、メタンスルホンアミド（０．０２ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−エテニル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．０７ｇ、０．１７ｍｍｏｌ；ステップ２で得られたもの）を反応混合物に加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を亜硫酸ナトリウム溶液でクエンチし、反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）および水（５ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノール、１０％）を使用して精製して、４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（３２ｍｇ）を白色固体として得た。
1H-NMR (400MHz, MeOD) δ ppm: 4.30-4.20 (m, 2H), 3.94-3.81 (m, 2H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.60-3.56 (bs, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.40-3.30 (m, 3H), 2.64 (q, 2H, J=15.2および7.6 Hz), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.81-1.79 (m, 1H), 1.21 (t, 3H, J=7.6 Hz).質量: m/z 430.88 (M+H)+.
【０１６９】
ステップ４：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.７’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.８’）の合成
【０１７０】
【化７１】
2020511457.tif 000072
【０１７１】
同様に、位置異性体の混合物（０．７ｇ）を、実施例３のステップ３に従って、４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．６００ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１．３５ｇ、４．１７ｍｍｏｌ、３当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（０．５３８ｇ、４．１７ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して調製した。
実施例２に記載の手順に従って、位置異性体７’および８’の混合物を、分取ＨＰＬＣを使用して分離し、続いて加水分解して、化合物  Ｎｏ.７および化合物  Ｎｏ.８をそれぞれ得る。
【０１７２】
（実施例５）［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.９）および（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１０）の合成
【０１７３】
【化７２】
2020511457.tif 000073
【０１７４】
ステップ１：４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１７５】
【化７３】
2020511457.tif 000074
【０１７６】
標題化合物を、実施例４のステップに従って調製した。ステップ３で、ＡＤ−ミックス−α（登録商標）（７４１ｍｇ、１．４ｇ／ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（０．０５ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）および４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−（５−エテニル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．２１ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を使用して、（１０５ｍｇ）の４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドを白色固体として得た。
1H-NMR (400MHz, MeOD) δ ppm: 4.30-4.20 (m, 2H), 3.93-3.81 (m, 2H), 3.75-3.71 (m, 1H), 3.60-3.55 (bs, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.40-3.30 (m, 3H), 2.64 (q, 2H, J=14.8および7.6 Hz), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.23 (t, 3H, J=7.6 Hz). 質量: m/z 430.84 (M+H)+.
ステップ２：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.９’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.１０’）の合成
【０１７７】
【化７４】
2020511457.tif 000075
【０１７８】
位置異性体９’および１０’の混合物（０．８１０ｇ）を、実施例３、ステップ３に記載の手順に従って、４−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド（０．６００ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１．３５ｇ、４．１７ｍｍｏｌ、３当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルホスフェート（０．５３８ｇ、４．１７ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して調製した。
実施例２に記載の手順に従って、位置異性体９’および１０’の混合物を、分取ＨＰＬＣを使用して分離し、続いて加水分解して、それぞれ化合物  Ｎｏ.９および化合物  Ｎｏ.１０を得る（分離条件を表２に示す）。
【０１７９】
【表２】
2020511457.tif 000076
【０１８０】
（実施例６）［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの合成
【０１８１】
ステップ１：［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの合成
［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（実施例１で取得）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、ナトリウムメトキシド（０．５９６ｍＬ、１当量）を室温で加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した後、減圧下、濃縮し、所望の［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの一ナトリウム塩を白色固体として得た（１．７３ｇ、９５．５％；融点：１４８〜１５０℃）。
【０１８２】
ステップ２：［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの合成
【０１８３】
［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（５００ｍｇ）の一ナトリウム塩を、酢酸エチル（１０ｍＬ）を含有する丸底フラスコ（１００ｍＬ）に移した。エタノール（３ｍＬ）を少しずつ（１ｍＬずつ）加え、フラスコを超音波処理して塩を完全に溶解した。透明な溶液を得た後、フラスコを綿栓で覆い、室温で一晩放置した。このように形成された固体を濾過し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、ＸＲＤ（図３、主要ピークを表２に列挙）およびＤＳＣ（図４）分析にかけた。
【０１８４】
（実施例７）［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートの合成
溶媒蒸気法を使用して、塩形態を調製した。［４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェート（５００ｍｇ）を含有する小バイアルを、エタノールアミン（１０ｍＬ）を含む外側バイアル中に入れた。外側バイアルを密封し、室温で５日間保持した。小バイアルを取り出し、溶媒を留去して、４−クロロ−５−エチル−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル］メチル二水素ホスフェートのジエタノールアミン塩の結晶を、淡黄色固体（５１０ｍｇ；融点：１７８〜１８２℃）として得た。
【０１８５】
（実施例８）［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.９）の合成
【０１８６】
【化７５】
2020511457.tif 000077
【０１８７】
ステップ１：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.３’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.４’）の分離
化合物  Ｎｏ.３’および化合物  Ｎｏ.４’の化合物混合物（７２０ｍｇ）を下記のカラム条件によって分離し、化合物  Ｎｏ.３’（２４８ｍｇ）および化合物  Ｎｏ.４’（１１５ｍｇ）を得た。
カラム：ＣＨＩＲＡＬ  ＡＲＴセルロース−ＳＣ（５μｍ）２５０×３０ｍｍ内径
溶出溶媒：ｎ−ヘキサン／エタノール（５０／５０）
検出：２７５ｎｍでのＵＶ。
【０１８８】
ステップ２：［４−クロロ−２−（｛（３Ｓ，４Ｒ）−１−［５−（１，２−ジヒドロキシエチル）−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.９）の合成
ジ−ｔｅｒｔブチルエステル（化合物  Ｎｏ.３’）（１１５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）のメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（８ｍｌ）溶液に、水（４ｍｌ）および酢酸（４ｍｌ）を加えた。混合物を室温で１日間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣ（カラム；Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＰＲＥＰ  ＯＤＳ  ２５０×３０ｍｍ内径、溶出溶媒；アセトニトリル／０．１％水溶液ＨＣＯ２Ｈ水溶液、検出；２７５ｎｍでのＵＶ）によって精製して、化合物  Ｎｏ.９（１４５ｍｇ、収率７０％）を無色固体として得た。
1H-NMR (CD3OD) δ ppm:1.23 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.80-1.83 (1H, m), 2.03 (1H, ddd, J = 25.0, 12.4, 4.4 Hz), 2.79 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.37-3.41 (3H, m), 3.44 (3H, s), 3.61 (1H, s), 3.74 (1H, dd, J = 11.5, 6.1 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 11.5, 4.6 Hz), 3.92 (1H, d, J = 13.8 Hz), 4.22-4.26 (2H, m), 6.29 (2H, d, J = 8.4 Hz).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O8PSの計算値: 540.1, 実測値: 539.1 (M-1).
【０１８９】
（実施例９）（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.１０）の合成
【０１９０】
【化７６】
2020511457.tif 000078
【０１９１】
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物  Ｎｏ.４’）の脱保護を、化合物  Ｎｏ.９の調製（実施例８）に記載されるように実施して、化合物  Ｎｏ.１０（５８．６ｍｇ、６２％）を無色の固体として得た。
1H-NMR  (CD3OD) δ ppm: 1.20 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.82 (1H, dd, J = 13.0, 3.8 Hz), 2.04 (1H, ddd, J = 24.8, 12.6, 4.6 Hz), 2.58 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.36 (1H, d, J = 1.5 Hz), 3.39 (1H, d, J = 1.5 Hz), 3.41 (1H, d, J = 3.1 Hz), 3.44 (3H, s), 3.62 (1H, s), 3.74 (1H, dd, J = 11.5, 5.4 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 11.5, 3.8 Hz), 3.92 (1H, d, J = 13.8 Hz), 4.22-4.31 (2H, m), 6.29 (2H, dd, J = 8.4, 3.1 Hz).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O8PSの計算値: 540.1, 実測値: 539.1 (M-1).
【０１９２】
（実施例１０）（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.３）の合成：
【０１９３】
【化７７】
2020511457.tif 000079
【０１９４】
ステップ１：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.７’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｒ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.８’）の分離
化合物  Ｎｏ.７’および化合物  Ｎｏ.８’の化合物混合物（６５５ｍｇ）を下記のカラム条件によって分離し、化合物  Ｎｏ.７’（２５１ｍｇ）および化合物  Ｎｏ.８’（１２９ｍｇ）を得た。
カラム：ＣＨＩＲＡＬ  ＡＲＴ  セルロース−ＳＣ（５μｍ）２５０×３０ｍｍ内径
溶出溶媒：ｎ−ヘキサン／エタノール（５０／５０）
検出：２７５ｎｍでのＵＶ
【０１９５】
ステップ２：（４−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−５−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.３）の合成
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物  Ｎｏ.７’）の脱保護を、化合物  Ｎｏ.９の調製（実施例８）で記載されるように実施して、化合物  Ｎｏ.３（１３５ｍｇ、６５％）を無色の固体として得た。
1H-NMR  (CD3OD) δ ppm: 1.23 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.77-1.85 (1H, m), 1.97-2.08 (1H, m), 2.79 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.35-3.42 (3H, m), 3.44 (3H, s), 3.61 (1H, s), 3.74 (1H, dd, J = 11.5, 6.1 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 11.5, 3.8 Hz), 3.93 (1H, d, J = 13.8 Hz), 4.21-4.27 (2H, m), 6.29 (2H, d, J = 8.4 Hz).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O8PSの計算値: 540.1, 実測値: 539.1 (M-1).
【０１９６】
（実施例１１）（５−クロロ−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシプロパン−２−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.４）の合成
【０１９７】
【化７８】
2020511457.tif 000080
【０１９８】
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物  Ｎｏ.８’）の脱保護を、化合物  Ｎｏ.９の調製（実施例８）で記載されるように実施して、化合物  Ｎｏ.４（４０．２ｍｇ、３８％）を無色の固体として得た。
1H-NMR (CD3OD) δ: 1.20 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.82 (1H, d, J = 9.2 Hz), 2.04 (1H, ddd, J = 25.0, 12.4, 4.4 Hz), 2.58 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.35 (1H, s), 3.37-3.42 (2H, m), 3.44 (3H, s), 3.61 (1H, s), 3.74 (1H, dd, J = 11.5, 5.4 Hz), 3.83 (1H, dd, J = 11.5, 4.6 Hz), 3.93 (1H, d, J = 13.8 Hz), 4.21-4.31 (2H, m), 6.28 (2H, dd, J = 8.4, 3.1 Hz).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O8PSの計算値: 540.1, 実測値: 539.1 (M-1).
【０１９９】
（実施例１２）（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.５）の合成
【０２００】
【化７９】
2020511457.tif 000081
【０２０１】
ステップ１：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.５’）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル｝カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチルホスフェート（化合物  Ｎｏ.６’）の分離
化合物  Ｎｏ.５’および化合物  Ｎｏ.６’の化合物混合物（１．３５ｍｇ）を下記のカラム条件によって分離して、化合物  Ｎｏ.５’（６６３ｍｇ）および化合物  Ｎｏ.６’（２３７ｍｇ）を得た。
カラム：ＣＨＩＲＡＬ  ＡＲＴセルロース−ＳＣ（５μｍ）２５０×３０ｍｍ内径
溶出溶媒：ｎ−ヘキサン／エタノール（５０／５０）
検出：２７５ｎｍでのＵＶ。
【０２０２】
ステップ２：（４−クロロ−５−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.５）の合成
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物  Ｎｏ.５’）の脱保護を、化合物  Ｎｏ.９の調製（実施例８）で記載されるように実施して、化合物  Ｎｏ.５（４１１ｍｇ、７５％）を無色の固体として得た。
1H-NMR (CD3OD) δ: 1.23 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.53 (3H, dd, J = 6.9, 1.5 Hz), 1.78-1.84 (1H, m), 2.03 (1H, ddd, J = 25.0, 12.4, 4.4 Hz), 2.79 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.34-3.42 (2H, m), 3.44 (3H, s), 3.61 (1H, s), 3.88-3.95 (1H, m), 4.21-4.27 (2H, m), 4.97 (1H, q, J = 6.1 Hz), 6.30 (2H, d, J = 8.4 Hz).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O7PSの計算値: 524.1, 実測値: 523.1 (M-1).
【０２０３】
（実施例１３）（５−クロロ−４−エチル−２−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−｛５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル｝−３−メトキシピペリジン−４−イル］カルバモイル｝−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル二水素ホスフェート（化合物  Ｎｏ.６）の合成
【０２０４】
【化８０】
2020511457.tif 000082
【０２０５】
ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物  Ｎｏ.６）の脱保護を、化合物  Ｎｏ.９の調製（実施例８）で記載されるように実施して、化合物  Ｎｏ.６（１４６ｍｇ、７５％）を無色の固体として得た。
1H-NMR (CD3OD) δ: 1.21 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.53-1.53 (3H, m), 1.80-1.85 (1H, m), 2.00-2.09 (1H, m), 2.58 (2H, q, J = 7.6 Hz), 3.34-3.42 (2H, m), 3.45 (3H, s), 3.62 (1H, brs), 3.89-3.95 (1H, m), 4.22-4.30 (2H, m), 4.95-5.00 (1H, m), 6.25-6.33 (2H, m).
QTOF-MS (ES, 負イオンモード): m/z C17H26ClN6O7PSの計算値: 524.1, 実測値: 523.1 (M-1).
【０２０６】
生物学的アッセイ
いくつかの様々なアッセイを利用することができる。後述のアッセイに加えて、当業者は、利用することができる他のアッセイを知っており、特定の用途のためにアッセイを改変することができる。そのようなアッセイおよびその改変は、本発明の趣旨および範囲内である。
【０２０７】
試験例１
水および中性バッファー中の溶解度を試験する方法
試験化合物の１０ｍｍｏｌ／Ｌ溶液をＤＭＳＯで調製し、１００μＬの１０ｍｍｏｌ／ＬのＤＭＳＯ原液を、１つは日本薬局方第一液（Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  Ｆｉｒｓｔ  Ｆｌｕｉｄ、ＪＰ１）、もう１つは日本薬局方第二液（Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｆｌｕｉｄ、ＪＰ２）のために、ラベルの付いたガラス管に二連で分配した。各管からＤＭＳＯを留去した後、５００μＬのＪＰ１液およびＪＰ２液を、各管にそれぞれ加えた。これらの管を１分間超音波処理し、５分毎に３０秒の間隔で振とう機に３０分間配置した。管を室温で１時間、暗所に置き、溶液をメンブランフィルターで濾過した。濾液を２倍および１０倍に希釈した。得られた試験溶液を分析し、ＵＰＬＣを使用して標準に対して定量した（標準の調製については、１０ｍｍｏｌ／ＬのＤＭＳＯ溶液を５０％のアセトニトリル水溶液で段階希釈して、１００μｍｏｌ／Ｌの標準溶液および５μｍｏｌ／Ｌの標準溶液の２つの溶液を調製する）。
【０２０８】
【表３】
2020511457.tif 000083
【０２０９】
親化合物：約５ｍｇの親化合物（プロドラッグの生物学的に活性な形態）を９５０μＬのリン酸バッファーに加え、２５℃で１時間激しく混合した。次いで、これらの試料を２５℃で４週間より長く保存し、濾過して未溶解の親化合物を除去した。次に、これらの溶液を５０％アセトニトリル水溶液で希釈した。得られた試験溶液をＨＰＬＣによってアッセイした。
プロドラッグ：約３０ｍｇのプロドラッグを１２０μＬのリン酸バッファーに加え、２５℃で１時間激しく混合した。振とう後、これらの溶液のｐＨを１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨ溶液でｐＨ７．０に調整した。次いで、純水で総量を２８０μＬに調整した。次に、これらの溶液を２５℃で４週間より長く保存し、濾過して未溶解の化合物を除去した。これらの溶液を５０％アセトニトリル水溶液で希釈した。得られた試験溶液をＨＰＬＣによってアッセイした。
【０２１０】
【表４】
2020511457.tif 000084
【０２１１】
試験例２
変換効率を試験する方法
化合物  Ｎｏ.１および化合物  Ｎｏ.２の変換効率の決定を、げっ歯類（マウスおよびラット）および非げっ歯類（サルおよびイヌ）で実施した。動物を各群２匹の動物で２つの群に分けた。１つの群にプロドラッグを静脈内（ＩＶ）投与し、もう１つの群に親化合物をＩＶ投与した。プロドラッグ（ｐｒｏｄｕｇ）の用量は、親化合物のモル当量とした。両方の動物群から、ＩＶ投与後０．０８３、０．３３、１、２、４、８および２４時間に、続けて採血を実施した。血液試料を遠心分離して血漿を採取した。血漿試料は、分析まで−８０℃で保存した。プロドラッグ投与動物の血漿試料を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して、両方の分析物（プロドラッグおよび親化合物）について同時に分析した。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェアにおいて、血漿濃度対時間プロファイルの曲線下面積（ＡＵＣ）を計算し、以下の式を用いて変換効率パーセンテージを決定した：変換効率パーセンテージ＝（（プロドラッグ投与試料からの）親化合物のＡＵＣｉｖ×１００／（（親化合物投与試料からの）親化合物のＡＵＣｉｖ。ラット、イヌおよびサルにおける化合物  Ｎｏ.１および番号２のＰＫプロファイルを表５および６にそれぞれ示す（図１および図２にも示す）。
【０２１２】
【表５】
2020511457.tif 000085
【０２１３】
【表６】
2020511457.tif 000086
【０２１４】
化合物  Ｎｏ.５および化合物  Ｎｏ.７の変換効率の決定をラットで実施した。動物を各群２匹の動物で２つの群に分けた。１つの群にプロドラッグをＩＶ投与し、もう１つの群に親化合物をＩＶ投与した。両方の動物群から、投与後０．０８、０．２５、０．５、１、２、４、７および２４時間に、続けて採血を実施した。血液試料を遠心分離して血漿を採取した。プロドラッグ投与動物の血漿試料を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを使用して、両方の分析物（プロドラッグおよび親化合物）について同時に分析した。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェアにおいて、血漿濃度対時間プロファイルのＡＵＣを計算し、以下の式を使用して変換効率パーセンテージを決定した：変換効率パーセンテージ＝（プロドラッグ投与試料からの親化合物のＡＵＣｉｖ）／（親化合物投与試料からの親化合物のＡＵＣｉｖ）／（親化合物の分子量）×（プロドラッグの分子量）×１００。ラットにおける化合物  Ｎｏ.５および化合物  Ｎｏ.７のＰＫプロファイルを表７に示す。
【０２１５】
【表７】
2020511457.tif 000087
【０２１６】
試験例３
ａ）ＭＲＳＡ５６２による肺感染症モデルマウスを使用して治療効果を試験するための方法
マウスを、体重１ｋｇ当たり１５０ｍｇおよび１００ｍｇの用量割合で、感染前の−４日目および−１日目の２回のシクロホスファミドの腹腔内注射（ＩＰ）により好中球減少にした。一晩増殖させたＭＲＳＡ５６２を新鮮なＢｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎブロスで１：１０に希釈し、５％ブタムチンと１：１で混合した。次いで、細菌懸濁液（３．１６×１０６／マウス／５０μＬ）を、事前麻酔した（キシラジン５ｍｇ／ｋｇとケタミン１００ｍｇ／ｋｇとの混合物）マウスに、Ｓｗｉｓｓマウス（４〜６週齢、Ｖｉｖｏ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、ハイデラバード、インド）（１群当たりｎ＝５マウス）の鼻孔にそれぞれ接種した。マウスに試験化合物を１回、２回および４回、それぞれ、２４、１２および６時間の間隔で投与した。肺における細菌の数を、試験化合物の初回投与直前の非治療群（プレ対照）、ならびに試験化合物投与および感染の翌日の非治療群（ポスト対照）、ならびに試験化合物投与群で決定した。肺における細菌数の変化を治療効果の指標として使用した。
例示化合物、例えば化合物  Ｎｏ.１は、この試験方法により、治療効果を示した。化合物  Ｎｏ.１は、６．２５ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ＳＣ  ｑ６ｈで、１時間プレ対照および２５時間ポスト対照と比較して、それぞれ１．３３ｌｏｇ１０および２．５２ｌｏｇ１０  ｋｉｌｌを示した。同様に１２．５ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ＳＣ、ｑ６ｈで、１時間プレ対照および２５時間ポスト対照と比較して、それぞれ１．７６ｌｏｇ１０および２．９５ｌｏｇ１０  ｋｉｌｌを示した。
【０２１７】
（ｂ）好中球減少マウス大腿部感染症モデルを使用して、ＭＲＳＡ０２５４１およびＶＲＥ  ＩＶ  ２５８  ２１０７６に対する化合物の治療効果を試験する方法
４〜６週齢のＳｗｉｓｓ  Ｗｅｂｓｔｅｒマウスをこの実験のために使用した（Ｖｉｖｏ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｌｉｍｉｔｉｄ、ハイデラバード、インド、１群当たりｎ＝５のマウス）。上記のようにマウスを好中球減少にした。Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス（ＭＨＢ）でのＭＲＳＡ０２５４１の一晩増殖培養液を０．５Ｍａｃ  Ｆａｒｌａｎｄに調整した。次いで、懸濁液を新鮮なＭＨＢで１：１００に希釈し、マウスの右大腿筋に１００μｌを筋肉内注射した（ｎ＝５／群）。ＶＲＥ  ＩＶ  ２５８−２１０７６の場合、培養液を１０％ブタムチンと１：１の割合で混合した。接種菌量を定量培養分析によって確認し、１ｍＬ当たり、ＭＲＳＡについては３×１０６ＣＦＵ、ＶＲＥ  ＩＶ２５８−２１０７６については２×１０６であることを見出した。感染から２時間後に治療を開始した。マウスに試験化合物を３〜２４時間の間隔で１〜８回投与した。大腿筋における細菌の数を、試験化合物の初回投与直前の非治療群（プレ対照）、試験化合物投与および感染の翌日の非治療群（ポスト対照）、ならびに試験化合物投与群について計数した。大腿における細菌数の変化を治療効果の指標として使用した。
例示化合物、例えば、化合物  Ｎｏ.１は、この試験方法によって、治療効果を示した。ＭＲＳＡ０２５４１に対して、化合物  Ｎｏ.１は、投与スケジュールに関係なく、２００ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ｑ２４ｈ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ｑ２４ｈおよび５０ｍｇ／ｋｇ／用量ｑ２４ｈならびにそれらの分割用量で殺菌性を示した。ＶＲＥ  ＩＶ−２５８  ２１０７６に対して、化合物  Ｎｏ.１は、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ｑ１２ｈ、２５ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ｑ６ｈ、１２．５ｍｇ／ｋｇ／ｄｏｓｅ、ｑ３ｈの分割用量で殺菌性を示した。
【０２１８】
ｃ）好中球減少性Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット大腿部感染症モデルを使用して、ＭＲＳＡ０２５４１に対する化合物の治療効果を試験する方法
４〜６週齢のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットをこの実験のために使用した（Ｖｉｖｏ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｌｉｍｉｔｉｄ、ハイデラバード、インド、１群当たりｎ＝４のラット）。ラットを、シクロホスファミドの腹腔内注射により、好中球減少にした。ＭＨＢでのＭＲＳＡ０２５４１の一晩増殖培養液を０．５Ｍａｃ  Ｆａｒｌａｎｄに調整した。次いで、懸濁液を新鮮なＭＨＢで１：１０に希釈し、ラットの右大腿筋肉に２００μｌを筋肉内注射した。接種菌量を定量培養分析によって確認し、ラット大腿筋あたり６×１０６ＣＦＵであることを見出した。感染の２時間後に治療を開始した。ラットに試験化合物を６時間の間隔で４回投与した。大腿における細菌の数を、試験化合物の初回投与直前の非治療群（２時間プレ対照）、薬物投与および感染の翌日の非治療群（２６時間ポスト対照）ならびに試験化合物投与群について計数した。大腿における細菌数の変化を治療効果の指標として使用した。
例示化合物、例えば、化合物  Ｎｏ.１は、この試験方法によって、治療効果を示した。化合物  Ｎｏ.１は、２５ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ  ｑｉｄで、２時間プレ対照および２６時間ポスト対照と比較して、それぞれ１ｌｏｇ１０および２．９９ｌｏｇ１０  ｋｉｌｌを示した。
【０２１９】
（ｄ）ハムスターＣＤＩモデルにおいて化合物の治療効果を試験する方法
化合物  Ｎｏ.１のｉｎ  ｖｉｖｏ薬効を、クロストリジウム・ディフィシル２００９１５５、ＮＡＰ１／０２７株により引き起こしたハムスターＣＤＩモデルで評価した。Ｓｙｒｉａｎハムスター（７〜９週齢、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ、ハイデラバード、インド）を、実験の少なくとも７日前に訓化した。ハムスターを、感染１日前にクリンダマイシン（３０ｍｇ／ｋｇ）の単回皮下注射でプライミングした。ＰＢＳで調製した１ｍＬの芽胞懸濁液（２〜３×１０５）の強制経口投与によりハムスターを感染させた。試験化合物を、経口投与には０．２５ｗ／ｖ％メチルセルロース溶液を、ＳＣ投与には１０％ＨＰβ−ＣＤを使用して調製し、感染の６時間後に、２４時間の間隔で５日間の治療を開始した。ハムスターに、０．０３〜０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量で５日間投与した。試験化合物投与群および非治療群（ビークル対照）で治療したハムスターの死および生存時間を１日１回３５日間記録し、比較した。生存時間の変化を治療効果の指標として使用した。
本明細書に開示の全ての化合物が、この試験方法において治療効果を示し、例えば、化合物  Ｎｏ.１および番号２は、０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで３５日目に１００％の生存を示した。