【手続補正書】
【提出日】令和2年6月29日(2020.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリペプチド鎖(a)、(b)、(c)および(d)を含む、一価の非対称タンデムFab二重特異性抗体(MAT-Fab抗体)であって:
(a)が、(アミノ末端からカルボキシル末端へ)VLA-CL-VHB-CH1-ヒンジ-CH2-CH3m1を含む重ポリペプチド鎖(重鎖)であり、
ここで、
VLAは、ヒト免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであって、ヒト軽鎖定常ドメインであるCLに直接融合されており、
VLA-CLは、第一の抗原またはエピトープであるＡを認識する第一のFab結合ユニットの免疫グロブリン軽鎖構成部分であり、かつ、VHBに直接融合されており、
VHBは、ヒト免疫グロブリン重鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン重鎖CH1定常ドメインであるCH1に直接融合されており、
VHB-CH1は、第二の抗原またはエピトープであるＢを認識する第二のFab結合ユニットの免疫グロブリン重鎖構成部分であり、かつ、ヒンジ-CH2に直接融合されており、
ヒンジ-CH2は、免疫グロブリン重鎖のヒンジ-CH2領域であり、かつ、CH3m1に直接融合されており、
CH3m1は、第一のヒト免疫グロブリン重鎖CH3定常ドメインであって、1以上のノブ-イントゥ-ホール(KiH)突然変異を変異導入されて、CH3m1定常ドメイン中に構造的ノブまたは構造的ホールを形成しており、
ＡおよびＢは、異なる抗原であるか、または同じ抗原の異なるエピトープであり;
(b)が、VHA-CH1を含む第一のMAT-Fab軽鎖であり、
ここで、
VHAは、ヒト免疫グロブリン重鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン重鎖CH1定常ドメインであるCH1に直接融合されており、
VHA-CH1は、前記第一のFab結合ユニットの免疫グロブリン重鎖構成部分であり;
(c)が、VLB-CLを含む第二のMAT-Fab軽鎖であり、
ここで、
VLBは、ヒト免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン軽鎖CLドメインであるCLに直接融合されており、
VLB-CLは、前記第二のFab結合ユニットの免疫グロブリン軽鎖構成部分であり;かつ
(d)が、ヒンジ-CH2-CH3m2を含むFcポリペプチド鎖(Fc鎖)であり、
ここで、
ヒンジ-CH2は、免疫グロブリン重鎖のヒンジ-CH2領域であり、かつ、CH3m2に直接融合されており、
CH3m2は、第二のヒト免疫グロブリン重鎖CH3定常ドメインであって、1以上のノブ-イントゥ-ホール(KiH)突然変異を変異導入されて、CH3m2定常ドメイン中に構造的ノブまたは構造的ホールを形成しており;
但し:
重鎖のCH3m1ドメインが構造的ノブを形成するよう突然変異されているとき、Fc鎖のCH3m2ドメインが、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合に有利に働く相補的な構造的ホールを形成するよう突然変異されており;
重鎖のCH3m1ドメインが構造的ホールを形成するよう突然変異されているとき、Fc鎖のCH3m2ドメインが、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合に有利に働く相補的な構造的ノブを形成するよう突然変異されており;
該MAT-Fab抗体が、任意で、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合におけるジスルフィド結合形成に有利に働くシステイン残基を導入する突然変異を、CH3m1ドメインおよびCH3m2ドメインに含む、
MAT-Fab抗体。
【請求項２】
CH3m1ドメインまたはCH3m2ドメイン中の、構造的ノブを形成する1以上のKiH突然変異が、トレオニン残基からチロシン残基への変化またはトレオニン残基からトリプトファン残基への変化であり、および
構造的ホールを形成するCH3m1ドメインまたはCH3m2ドメイン中の突然変異が、チロシン残基からトレオニン残基への変化、または、トレオニン残基からセリン残基への変化と、ロイシン残基からアラニン残基への変化と、チロシン残基からバリン残基への変化との組み合わせである、
請求項1記載のMAT-Fab抗体。
【請求項３】
トレオニン残基からチロシン残基へ変化させるKiH突然変異が、MAT-Fab抗体の重鎖のCH3m1ドメインのトレオニンをSEQ ID NO:1の位置610のチロシンへ変化させ、および
チロシン残基からトレオニン残基へ変化させる突然変異が、MAT-Fab抗体のFc鎖のCH3m2ドメインのチロシンをSEQ ID NO:4の位置213のトレオニンへ変化させるか、または
トレオニン残基からトリプトファン残基へ変化させるKiH突然変異が、MAT-Fab抗体の重鎖のCH3m1ドメインのトレオニンをSEQ ID NO:5の位置610のトリプトファンへ変化させ、および
トレオニン残基からセリン残基への変化と、ロイシン残基からアラニン残基への変化と、チロシン残基からバリン残基への変化との組み合わせが、MAT-Fab抗体のFc鎖のCH3m2ドメインのトレオニンのSEQ ID NO:8の位置172のセリンへ変化と、MAT-Fab抗体のFc鎖のCH3m2ドメインのロイシンのSEQ ID NO:8の位置174のアラニンへ変化と、MAT-Fab抗体のFc鎖のCH3m2ドメインのチロシンのSEQ ID NO:8の位置213のバリンへ変化との組み合わせである、
請求項2記載のMAT-Fab抗体。
【請求項４】
CH3m1ドメインおよびCH3m2ドメインの各々が、セリンまたはチロシン残基をシステインと置き換えてCH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの間のジスルフィド結合形成を促進する突然変異をさらに含む、請求項1乃至3のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体。
【請求項５】
MAT-Fab抗体の重鎖のCH3m1ドメインが、SEQ ID NO:5の位置598のセリンからシステインへの変化を含み、および
MAT-Fab抗体のFc鎖のCH3m2ドメインが、SEQ ID NO:8の位置155のチロシンからシステインへの変化を含む、請求項4記載のMAT-Fab抗体。
【請求項６】
重鎖(a)およびFc鎖(d)のCH2ドメインが各々、少なくとも1つのFcエフェクター機能を低減または排除する1以上の突然変異を含む、請求項1乃至5のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体。
【請求項７】
重鎖のCH2ドメインおよびFc鎖のCH2ドメインが各々、(EUナンバリングで)ロイシン234をアラニンへ変化させ、またロイシン235をアラニンへ変化させる2つの突然変異を含む、請求項6記載のMAT-Fab抗体。
【請求項８】
(a)SEQ ID NO:1またはSEQ ID NO:5のアミノ酸残基23〜691からなるアミノ酸配列を含む重鎖、
(b)SEQ ID NO:2またはSEQ ID NO:6のアミノ酸残基20〜244からなるアミノ酸配列を含む第一の軽鎖、
(c)SEQ ID NO:3またはSEQ ID NO:7のアミノ酸残基21〜235からなるアミノ酸配列を含む第二の軽鎖、および
(d)SEQ ID NO:4またはSEQ ID NO:8のアミノ酸残基23〜253からなるアミノ酸配列を含むFc鎖
を含む、請求項1記載のMAT-Fab抗体。
【請求項９】
異なる抗原が、異なるサイトカインである、請求項1または2記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１０】
異なるサイトカインが、IL-12とTWEAK、IL-13とIL-lβ、TNFαとBlys、およびTNFαとIL-12p40からなる群より選択される、請求項9記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１１】
異なる標的抗原が、以下からなる抗原ペアの群より選択される、請求項1乃至3のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体:
CD20とCD3、CD3とCD19、CD3とFc-ガンマ-RIIIA、CD3とTPBG、CD3とEpha10、CD3とIL-5Rα、CD3とTASCTD-2、CD3とCLEC12A、CD3とプロミニン-1、CD3とIL-23R、CD3とROR1、CD3とIL-3Rα、CD3とPSA、CD3とCD8、CD3とグリピカン3、CD3とFAP、CD3とEphA2、CD3とENPP3、CD3とCD33、CD3とCD133、CD3とEpCAM、CD3とCD19、CD3とHer2、CD3とCEA、CD3とGD2、CD3とPSMA、CD3とBCMA、CD3とA33、CD3とB7-H3、CD3とEGFR、CD3とP-カドヘリン、CD3とHMW-MAA、CD3とTIM-3、CD3とCD38、CD3とTAG-72、CD3とSSTR、CD3とFRA、CD16とCD30、CD64とHer2、CD137とCD20、CD138とCD20、CD19とCD20、CD38とCD20、CD20とCD22、CD40とCD20、CD47とCD20、CD137とEGFR、CD137とHer-2、CD137とPD-1、CD137とPD-L1、PD-1とPD-L1、VEGFとPD-L1、Lag-3とTIM-3、OX40とPD-1、TIM-3とPD-1、TIM-3とPD-L1、EGFRとDLL-4、VEGFとEGFR、HGFとVEGF、VEGFとAng2、EGFRとcMet、PDGFとVEGF、VEGFとDLL-4、OX40とPD-L1、ICOSとPD-1、ICOSとPD-L1、Lag-3とPD-1、Lag-3とPD-L1、Lag-3とCTLA-4、ICOSとCTLA-4、CD138とCD40、CD38とCD138、CD38とCD40、CD-8とIL-6、CSPGとRGM A、CTLA-4とBTN02、CTLA-4とPD-1、IGFlとIGF2、IGFl/2とErb2B、IGF-IRとEGFR、EGFRとCD13、IGF-IRとErbB3、EGFR-2とIGFR、第IXa因子とMet、第X因子とMet、VEGFR-2とMet、VEGF-Aとアンジオポエチン-2(Ang-2)、MAGとRGM A、NgRとRGM A、NogoAとRGM A、OMGpとRGM A、PD-L1とCTLA-4、PD-1とTIM-3、RGM AとRGM B、Te38とTNFα、TNFαとCD-22、TNFαとCTLA-4、TNFαとGP130、およびTNFαとRANKリガンド。
【請求項１２】
同じ抗原の異なるエピトープが、VEGFの第一のエピトープとVEGFの異なる第二のエピトープ、またはHer2の第一のエピトープとHer2の第二の異なるエピトープである、請求項1乃至3のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１３】
MAT-Fab抗体が結合する異なる抗原の一方が、エフェクター細胞の表面上に発現される抗原であり、MAT-Fab抗体が結合する他方の抗原が、ヒト対象にとって有害であると見なされる標的細胞の表面上に発現される障害関連抗原であり、
エフェクター細胞が、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、単球、好中球、およびマクロファージからなる群より選択され、および
有害な標的細胞が、腫瘍細胞、自己反応性細胞、およびウイルス感染細胞からなる群より選択される、
請求項1乃至3のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１４】
エフェクター細胞上の抗原が、CD3、CD16、およびCD64からなる群より選択される、請求項13記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１５】
有害な標的細胞の表面上に発現される障害関連抗原が、腫瘍細胞上に発現される腫瘍関連抗原である、請求項14記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１６】
腫瘍関連抗原が、CD19、CD20、ヒト上皮成長因子受容体2(HER2)、がん胎児性抗原(CEA)、上皮細胞接着分子(EpCAM)、および受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)からなる群より選択される、請求項15記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１７】
腫瘍細胞が、急性リンパ芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(NHL)、前駆B細胞リンパ芽球性白血病/リンパ腫、成熟B細胞新生物、B細胞慢性リンパ球性白血病/小リンパ球性リンパ腫、B細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚濾胞中心リンパ腫、辺縁帯B細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、形質細胞性骨髄腫、移植後リンパ増殖性疾患、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、および未分化大細胞型リンパ腫からなる群より選択されるがん障害の悪性B細胞である、請求項15記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１８】
治療剤、造影剤、および細胞毒性剤からなる群より選択される作用物質にコンジュゲートされており、
造影剤が、放射性標識、酵素、蛍光標識、発光標識、生物発光標識、磁気標識、ビオチン、ストレプトアビジン、およびアビジンからなる群より選択され、および
治療剤または細胞毒性剤が、代謝拮抗剤、アルキル化剤、抗生物質、成長因子、サイトカイン、抗血管新生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、毒素、およびアポトーシス剤からなる群より選択される、
請求項1乃至17のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体。
【請求項１９】
請求項1乃至18のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体と、薬学的に許容し得る担体とを含む、医薬組成物。
【請求項２０】
非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹部内、嚢内、軟骨内、腔内(intracavitary)、腔内(intracelial)、小脳内、側脳室内、結腸内、子宮頸部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、経膣、直腸、頬側、舌下、鼻腔内、および経皮からなる群より選択される少なくとも1つの様式による個体への投与のために調製される、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項1乃至17のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体の該重鎖、該第一のMAT-Fab軽鎖、該第二のMAT-Fab軽鎖、および該Fc鎖をコードする、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２２】
請求項21記載の単離された核酸を含む、ベクター。
【請求項２３】
pcDNA、pTT pTT3、pEFBOS、pBV、pJV、pcDNA3.1 TOPO、pEF6 TOPO、およびpBJからなる群より選択される、請求項22記載のベクター。
【請求項２４】
請求項22または23記載のベクターを含む、真核宿主細胞または原核宿主細胞である、単離された宿主細胞。
【請求項２５】
真核宿主細胞が、哺乳動物宿主細胞、昆虫宿主細胞、植物宿主細胞、真菌宿主細胞、真核藻類宿主細胞、線虫宿主細胞、原生動物宿主細胞、および魚類宿主細胞からなる群より選択される、請求項24記載の単離された宿主細胞。
【請求項２６】
哺乳動物宿主細胞が、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、COS細胞、ベロ細胞、SP2/0細胞、NS/0骨髄腫細胞、ヒト胎児腎臓(HEK293)細胞、ベビーハムスター腎臓(BHK)細胞、HeLa細胞、ヒトB細胞、CV-1/EBNA細胞、L細胞、3T3細胞、HEPG2細胞、PerC6細胞、およびMDCK細胞からなる群より選択される、請求項25記載の単離された宿主細胞。
【請求項２７】
請求項1乃至17のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体の該重鎖、該第一のMAT-Fab軽鎖、該第二のMAT-Fab軽鎖、および該Fc鎖をコードする１以上の発現ベクターを含む単離された哺乳動物宿主細胞。
【請求項２８】
宿主細胞が、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、請求項27記載の単離された哺乳動物宿主細胞。
【請求項２９】
請求項24乃至28のいずれか一項記載の宿主細胞を、MAT-Fab抗体を生産するのに十分な条件下で、培養培地中にて培養する工程を含む、MAT-Fab抗体を生産する方法。
【請求項３０】
請求項29記載の方法に従って生産される、MAT-Fab抗体。
【請求項３１】
個体における疾患または障害を処置するための医薬の製造における請求項1乃至17または30のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体の使用。
【請求項３２】
エフェクター細胞上の抗原に結合しかつヒト対象にとって有害である標的細胞上に発現される障害関連抗原に結合する障害の処置における使用のための請求項1乃至8、11乃至17または30のいずれか一項記載のMAT-Fab抗体であって、エフェクター細胞と標的細胞との両方へのMAT-Fab抗体の結合が、エフェクター細胞と有害な標的細胞との相互作用を媒介し、障害に対する処置を提供し、
エフェクター細胞が、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、単球、好中球、およびマクロファージからなる群より選択され、および
有害な標的細胞が、腫瘍細胞、自己反応性細胞、およびウイルス感染細胞からなる群より選択される、
MAT-Fab抗体。
【請求項３３】
エフェクター細胞上に発現される抗原が、T細胞上に発現されるCD3であり、腫瘍細胞上の腫瘍関連抗原が、悪性B細胞上のCD20である、請求項32記載の使用のためのMAT-Fab抗体。
【請求項３４】
MAT-Fab抗体が、
(a)SEQ ID NO:1またはSEQ ID NO:5のアミノ酸残基23〜691からなるアミノ酸配列を含む重鎖、
(b)SEQ ID NO:2またはSEQ ID NO:6のアミノ酸残基20〜244からなるアミノ酸配列を含む第一の軽鎖、
(c)SEQ ID NO:3またはSEQ ID NO:7のアミノ酸残基21〜235からなるアミノ酸配列を含む第二の軽鎖、および
(d)SEQ ID NO:4またはSEQ ID NO:8のアミノ酸残基23〜253からなるアミノ酸配列を含むFc鎖
を含む、請求項33記載の使用のためのMAT-Fab抗体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
二量化したFc領域の存在のおかげで、本発明のMAT-Fab二重特異性抗体を、IgG抗体などの天然に存在する抗体分子と同様のやり方で、そのFc領域で標識してもよい。
[本発明1001]
ポリペプチド鎖(a)、(b)、(c)および(d)を含む、一価の非対称タンデムFab二重特異性抗体(MAT-Fab抗体)であって:
(a)が、(アミノ末端からカルボキシル末端へ)VLA-CL-VHB-CH1-ヒンジ-CH2-CH3m1を含む重ポリペプチド鎖(重鎖)であり、
ここで、
VLAは、ヒト免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであって、ヒト軽鎖定常ドメインであるCLに直接融合されており、
VLA-CLは、第一の抗原またはエピトープを認識する第一のFab結合ユニットの免疫グロブリン軽鎖構成部分であり、かつ、VHBに直接融合されており、
VHBは、ヒト免疫グロブリン重鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン重鎖CH1定常ドメインであるCH1に直接融合されており、
VHB-CH1は、第二の抗原またはエピトープを認識する第二のFab結合ユニットの免疫グロブリン重鎖構成部分であり、かつ、ヒンジ-CH2に直接融合されており、
ヒンジ-CH2は、免疫グロブリン重鎖のヒンジ-CH2領域であり、かつ、CH3m1に直接融合されており、
CH3m1は、第一のヒト免疫グロブリン重鎖CH3定常ドメインであって、1以上のノブ-イントゥ-ホール(KiH)突然変異を変異導入されて、CH3m1定常ドメイン中に構造的ノブまたは構造的ホールを形成しており;
(b)が、VHA-CH1を含む第一のMAT-Fab軽鎖であり、
ここで、
VHAは、ヒト免疫グロブリン重鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン重鎖CH1定常ドメインであるCH1に直接融合されており、
VHA-CH1は、前記第一のFab結合ユニットの免疫グロブリン重鎖構成部分であり;
(c)が、VLB-CLを含む第二のMAT-Fab軽鎖であり、
ここで、
VLBは、ヒト免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであって、ヒト免疫グロブリン軽鎖CLドメインであるCLに直接融合されており、
VLB-CLは、前記第二のFab結合ユニットの免疫グロブリン軽鎖構成部分であり;かつ
(d)が、ヒンジ-CH2-CH3m2を含むFcポリペプチド鎖(Fc鎖)であり、
ここで、
ヒンジ-CH2は、免疫グロブリン重鎖のヒンジ-CH2領域であり、かつ、CH3m2に直接融合されており、
CH3m2は、第二のヒト免疫グロブリン重鎖CH3定常ドメインであって、1以上のノブ-イントゥ-ホール(KiH)突然変異を変異導入されて、CH3m2定常ドメイン中に構造的ノブまたは構造的ホールを形成しており;
但し:
重鎖のCH3m1ドメインが構造的ノブを形成するよう突然変異されているとき、Fc鎖のCH3m2ドメインが、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合に有利に働く相補的な構造的ホールを形成するよう突然変異されており;
重鎖のCH3m1ドメインが構造的ホールを形成するよう突然変異されているとき、Fc鎖のCH3m2ドメインが、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合に有利に働く相補的な構造的ノブを形成するよう突然変異されており;
該MAT-Fab抗体が、任意で、CH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの対合におけるジスルフィド結合形成に有利に働くシステイン残基を導入する突然変異を、CH3m1ドメインおよびCH3m2ドメインに含む、
MAT-Fab抗体。
[本発明1002]
CH3m1ドメインまたはCH3m2ドメイン中の、構造的ノブを形成する1以上のKiH突然変異が、トレオニン残基からチロシン残基への変化またはトレオニン残基からトリプトファン残基への変化である、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1003]
トレオニン残基からチロシン残基へ変化させるKiH突然変異が、CH3ドメインの位置21のトレオニンをチロシンへ変化させる、本発明1002のMAT-Fab抗体。
[本発明1004]
トレオニン残基からトリプトファン残基へ変化させるKiH突然変異が、CH3ドメインの位置21のトレオニンをトリプトファンへ変化させる、本発明1002のMAT-Fab抗体。
[本発明1005]
構造的ノブを形成するKiH突然変異が、重鎖のCH3m1ドメイン中にある、本発明1002〜1004のいずれかのMAT-Fab抗体。
[本発明1006]
構造的ホールを形成するCH3m1ドメインまたはCH3m2ドメイン中の突然変異が、チロシン残基からトレオニン残基への変化、または、トレオニン残基からセリン残基への変化と、ロイシン残基からアラニン残基への変化と、チロシン残基からバリン残基への変化との組み合わせである、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1007]
チロシン残基をトレオニン残基へ変化させる突然変異が、CH3ドメインの位置62のチロシンをトレオニンへ変化させる、本発明1006のMAT-Fab抗体。
[本発明1008]
トレオニン残基からセリン残基への変化と、ロイシン残基からアラニン残基への変化と、チロシン残基からバリン残基への変化との組み合わせが、CH3ドメインの位置21のトレオニンからセリンへの変化と、CH3ドメインの位置23のロイシンからアラニンへの変化と、CH3ドメインの位置62のチロシンからバリンへの変化との組み合わせである、本発明1006のMAT-Fab抗体。
[本発明1009]
構造的ホールを形成する1以上のKiH突然変異が、Fc鎖のCH3m2ドメイン中にある、本発明1006〜1008のいずれかのMAT-Fab抗体。
[本発明1010]
CH3m1ドメインおよびCH3m2ドメインの各々が、アミノ酸残基をシステインと置き換えてCH3m1ドメインとCH3m2ドメインとの間のジスルフィド結合形成を促進する突然変異をさらに含む、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1011]
突然変異が、セリンからシステインへの変化またはチロシンからシステインへの変化である、本発明1010のMAT-Fab抗体。
[本発明1012]
セリン残基からシステイン残基の変化が、CH3ドメインの位置9のセリンをシステインへ変化させる、本発明1011のMAT-Fab抗体。
[本発明1013]
チロシン残基からシステイン残基の変化が、CH3ドメインの位置4のチロシンをシステインへ変化させる、本発明1011のMAT-Fab抗体。
[本発明1014]
CH3m1ドメインが、CH3ドメインの位置9のセリンをシステインへ変化させる突然変異を含み、CH3m2ドメインが、CH3ドメインの位置4のチロシンをシステインへ変化させる突然変異を含む、本発明1010のMAT-Fab抗体。
[本発明1015]
重鎖(a)およびFc鎖(d)のCH2ドメインが各々、少なくとも1つのFcエフェクター機能を低減または排除する1以上の突然変異を含む、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1016]
重鎖のCH2ドメインおよびFc鎖のCH2ドメインが各々、(EUナンバリングで)ロイシン234をアラニンへ変化させ、またロイシン235をアラニンへ変化させる2つの突然変異を含む、本発明1015のMAT-Fab抗体。
[本発明1017]
(a)表1のアミノ酸配列を含む重鎖、
(b)表2のアミノ酸配列を含む第一の軽鎖、
(c)表3のアミノ酸配列を含む第二の軽鎖、および
(d)表4のアミノ酸配列を含むFc鎖
を含む、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1018]
(a)表5のアミノ酸配列を含む重鎖、
(b)表6のアミノ酸配列を含む第一の軽鎖、
(c)表7のアミノ酸配列を含む第二の軽鎖、および
(d)表8のアミノ酸配列を含むFc鎖
を含む、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1019]
2種の異なるエピトープに結合する、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1020]
2種の異なる標的抗原に結合する、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1021]
2種の異なる標的抗原が、2種の異なる標的サイトカインである、本発明1020のMAT-Fab抗体。
[本発明1022]
2種の異なるサイトカインが、リンホカイン、モノカイン、およびポリペプチドホルモンからなる群より選択される、本発明1021のMAT-Fab抗体。
[本発明1023]
2種の異なる標的抗原が、以下からなる抗原ペアの群より選択される、本発明1020のMAT-Fab抗体:
CD20とCD3、CD3とCD19、CD3とFc-ガンマ-RIIIA、CD3とTPBG、CD3とEpha10、CD3とIL-5Rα、CD3とTASCTD-2、CD3とCLEC12A、CD3とプロミニン-1、CD3とIL-23R、CD3とROR1、CD3とIL-3Rα、CD3とPSA、CD3とCD8、CD3とグリピカン3、CD3とFAP、CD3とEphA2、CD3とENPP3、CD3とCD33、CD3とCD133、CD3とEpCAM、CD3とCD19、CD3とHer2、CD3とCEA、CD3とGD2、CD3とPSMA、CD3とBCMA、CD3とA33、CD3とB7-H3、CD3とEGFR、CD3とP-カドヘリン、CD3とHMW-MAA、CD3とTIM-3、CD3とCD38、CD3とTAG-72、CD3とSSTR、CD3とFRA、CD16とCD30、CD64とHer2、CD137とCD20、CD138とCD20、CD19とCD20、CD38とCD20、CD20とCD22、CD40とCD20、CD47とCD20、CD137とEGFR、CD137とHer-2、CD137とPD-1、CD137とPDL-1、PD-1とPD-L1、VEGFとPD-L1、Lag-3とTIM-3、OX40とPD-1、TIM-3とPD-1、TIM-3とPDL-1、EGFRとDLL-4、VEGFとEGFR、HGFとVEGF、VEGFの第一のエピトープとVEGFの異なる第二のエピトープ、VEGFとAng2、EGFRとcMet、PDGFとVEGF、VEGFとDLL-4、OX40とPD-L1、ICOSとPD-1、ICOSとPD-L1、Lag-3とPD-1、Lag-3とPD-L1、Lag-3とCTLA-4、ICOSとCTLA-4、CD138とCD40、CD38とCD138、CD38とCD40、CD-8とIL-6、CSPGとRGM A、CTLA-4とBTN02、CTLA-4とPD-1、IGFlとIGF2、IGFl/2とErb2B、IGF-IRとEGFR、EGFRとCD13、IGF-IRとErbB3、EGFR-2とIGFR、Her2の第一のエピトープとHer2の第二の異なるエピトープ、第IXa因子とMet、第X因子とMet、VEGFR-2とMet、VEGF-Aとアンジオポエチン-2(Ang-2)、IL-12とTWEAK、IL-13とIL-lβ、MAGとRGM A、NgRとRGM A、NogoAとRGM A、OMGpとRGM A、PDL-1とCTLA-4、PD-1とTIM-3、RGM AとRGM B、Te38とTNFα、TNFαとBlys、TNFαとCD-22、TNFαとCTLA-4、TNFαとGP130、TNFαとIL-12p40、およびTNFαとRANKリガンド。
[本発明1024]
MAT-Fab抗体が結合する2種の異なる標的抗原の一方が、エフェクター細胞の表面上に発現される抗原であり、MAT-Fab抗体が結合する他方の標的抗原が、ヒト対象にとって有害であると見なされる標的細胞の表面上に発現される障害関連抗原である、本発明1020のMAT-Fab抗体。
[本発明1025]
エフェクター細胞が、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、単球、好中球、およびマクロファージからなる群より選択される、本発明1024のMAT-Fab抗体。
[本発明1026]
エフェクター細胞上の抗原が、CD3、CD16、およびCD64からなる群より選択される、本発明1024のMAT-Fab抗体。
[本発明1027]
有害な標的細胞が、腫瘍細胞、自己反応性細胞、およびウイルス感染細胞からなる群より選択される、本発明1024のMAT-Fab抗体。
[本発明1028]
有害な標的細胞の表面上に発現される障害関連抗原が、腫瘍細胞上に発現される腫瘍関連抗原である、本発明1024のMAT-Fab抗体。
[本発明1029]
腫瘍関連抗原が、CD19、CD20、ヒト上皮成長因子受容体2(HER2)、がん胎児性抗原(CEA)、上皮細胞接着分子(EpCAM)、および受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)からなる群より選択される、本発明1028のMAT-Fab抗体。
[本発明1030]
腫瘍細胞が悪性B細胞である、本発明1028のMAT-Fab抗体。
[本発明1031]
悪性B細胞が、急性リンパ芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(NHL)、前駆B細胞リンパ芽球性白血病/リンパ腫、成熟B細胞新生物、B細胞慢性リンパ球性白血病/小リンパ球性リンパ腫、B細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚濾胞中心リンパ腫、辺縁帯B細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、形質細胞性骨髄腫、移植後リンパ増殖性疾患、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、および未分化大細胞型リンパ腫からなる群より選択されるがん障害の細胞である、本発明1030のMAT-Fab抗体。
[本発明1032]
エフェクター細胞上の抗原が、T細胞上のCD3であり、腫瘍細胞上の腫瘍関連抗原が、悪性B細胞上のCD20である、本発明1028のMAT-Fab抗体。
[本発明1033]
治療剤、造影剤、および細胞毒性剤からなる群より選択される作用物質にコンジュゲートされている、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1034]
造影剤が、放射性標識、酵素、蛍光標識、発光標識、生物発光標識、磁気標識、ビオチン、ストレプトアビジン、およびアビジンからなる群より選択される、本発明1033のMAT-Fab抗体。
[本発明1035]
放射性標識が、3H、14C、35S、90Y、99Tc、111In、131I、177Lu、166Ho、および153Smからなる群より選択される、本発明1034のMAT-Fab抗体。
[本発明1036]
治療剤または細胞毒性剤が、代謝拮抗剤、アルキル化剤、抗生物質、成長因子、サイトカイン、抗血管新生剤、抗有糸分裂剤、アントラサイクリン、毒素、およびアポトーシス剤からなる群より選択される、本発明1033のMAT-Fab抗体。
[本発明1037]
結晶化形態の、本発明1001のMAT-Fab抗体。
[本発明1038]
(a)本発明1037の結晶化されたMAT-Fab抗体、
(b)賦形剤成分、および
(c)ポリマー担体
を含む、結晶化されたMAT-Fab抗体の放出のための組成物。
[本発明1039]
賦形剤成分が、アルブミン、スクロース、トレハロース、ラクチトール、ゼラチン、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、メトキシポリエチレングリコール、およびポリエチレングリコールからなる群より選択される、本発明1038の結晶化されたMAT-Fab抗体の放出のための組成物。
[本発明1040]
ポリマー担体が、ポリ(アクリル酸)、ポリ(シアノアクリラート)、ポリ(アミノ酸)、ポリ(無水物)、ポリ(デプシペプチド)、ポリ(エステル)、ポリ(乳酸)、ポリ(乳酸-グリコール酸共重合体)またはPLGA、ポリ(b-ヒドロキシブチラート)、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(ジオキサノン); ポリ(エチレングリコール)、ポリ(ヒドロキシプロピル)メタクリルアミド、ポリ[(オルガノ)ホスファゼン]、ポリ(オルトエステル)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(ビニルピロリドン)、無水マレイン酸/アルキルビニルエーテル共重合体、プルロニックポリオール、アルブミン、アルギナート、セルロースおよびセルロース誘導体、コラーゲン、フィブリン、ゼラチン、ヒアルロン酸、オリゴ糖、グリコサミノグリカン、硫酸化多糖、それらのブレンド、ならびにそれらの共重合体からなる群のうちの1種以上から選択されるポリマーである、本発明1038または1039の結晶化されたMAT-Fab抗体の放出のための組成物。
[本発明1041]
本発明1001、1017、および1018のいずれかのMAT-Fab抗体と、薬学的に許容し得る担体とを含む、医薬組成物。
[本発明1042]
非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹部内、嚢内、軟骨内、腔内(intracavitary)、腔内(intracelial)、小脳内、側脳室内、結腸内、子宮頸部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、経膣、直腸、頬側、舌下、鼻腔内、および経皮からなる群より選択される少なくとも1つの様式による個体への投与のために調製される、本発明1041の医薬組成物。
[本発明1043]
本発明1001のMAT-Fab抗体のポリペプチドの1つ、2つ、3つ、または4つをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1044]
本発明1043の単離された核酸を含む、ベクター。
[本発明1045]
pcDNA、pTT pTT3、pEFBOS、pBV、pJV、pcDNA3.1 TOPO、pEF6 TOPO、およびpBJからなる群より選択される、本発明1044のベクター。
[本発明1046]
本発明1045のベクターを含む、単離された宿主細胞。
[本発明1047]
本発明1044のベクターを含む、単離された宿主細胞。
[本発明1048]
原核宿主細胞または真核宿主細胞である、本発明1047の単離された宿主細胞。
[本発明1049]
原核宿主細胞である、本発明1048の宿主細胞。
[本発明1050]
原核宿主細胞が細菌宿主細胞である、本発明1049の宿主細胞。
[本発明1051]
細菌宿主細胞が大腸菌(Escherichia coli)細胞である、本発明1050の宿主細胞。
[本発明1052]
真核宿主細胞である、本発明1048の宿主細胞。
[本発明1053]
真核宿主細胞が、哺乳動物宿主細胞、昆虫宿主細胞、植物宿主細胞、真菌宿主細胞、真核藻類宿主細胞、線虫宿主細胞、原生動物宿主細胞、および魚類宿主細胞からなる群より選択される、本発明1052の宿主細胞。
[本発明1054]
哺乳動物宿主細胞である、本発明1053の宿主細胞。
[本発明1055]
哺乳動物宿主細胞が、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、COS細胞、ベロ細胞、SP2/0細胞、NS/0骨髄腫細胞、ヒト胎児腎臓(HEK293)細胞、ベビーハムスター腎臓(BHK)細胞、HeLa細胞、ヒトB細胞、CV-1/EBNA細胞、L細胞、3T3細胞、HEPG2細胞、PerC6細胞、およびMDCK細胞からなる群より選択される、本発明1054の宿主細胞。
[本発明1056]
哺乳動物宿主細胞が、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、COS細胞、またはヒト胎児腎臓(HEK293)細胞である、本発明1055の宿主細胞。
[本発明1057]
真核宿主細胞が真菌細胞である、本発明1053の宿主細胞。
[本発明1058]
真菌細胞が、アスペルギルス属(Aspergillus)、ニューロスポーラ属(Neurospora)、サッカロミセス属(Saccharomyces)、ピキア属(Pichia)、ハンゼヌラ属(Hansenula)、シゾサッカロミセス属(Schizosaccharomyces)、クルイベロミセス属(Kluyveromyces)、ヤロウイア属(Yarrowia)、およびカンジダ属(Candida)からなる群より選択される、本発明1057の宿主細胞。
[本発明1059]
サッカロミセス属宿主細胞が、サッカロミセス・セレヴィシエ(Saccharomyces cerevisiae)細胞である、本発明1058の宿主細胞。
[本発明1060]
真核宿主細胞が昆虫細胞である、本発明1053の宿主細胞。
[本発明1061]
昆虫細胞がSf9昆虫細胞である、本発明1060の宿主細胞。
[本発明1062]
本発明1047〜1061のいずれかの宿主細胞を、結合タンパク質を生産するのに十分な条件下で、培養培地中にて培養する工程を含む、MAT-Fab抗体を生産する方法。
[本発明1063]
本発明1062の方法に従って生産される、MAT-Fab抗体。
[本発明1064]
本発明1001のMAT-Fab抗体を個体に投与する工程を含む、個体における疾患または障害を処置する方法であって、MAT-Fab抗体が、個体にとって有害である標的細胞の表面上に発現されるエピトープまたは抗原に結合し、有害な標的細胞へのMAT-Fab抗体の結合が、疾患または障害に対する処置を提供する、方法。
[本発明1065]
エフェクター細胞上の抗原に結合しかつヒト対象にとって有害である標的細胞上に発現される障害関連抗原に結合する本発明1001のMAT-Fab抗体を、ヒト対象に投与する工程を含む、ヒト対象における障害を処置する方法であって、エフェクター細胞と標的細胞との両方へのMAT-Fab抗体の結合が、エフェクター細胞と有害な標的細胞との相互作用を媒介し、障害に対する処置を提供する、方法。
[本発明1066]
エフェクター細胞が、T細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞、単球、好中球、およびマクロファージからなる群より選択される、本発明1065の方法。
[本発明1067]
エフェクター細胞上に発現される抗原が、CD3、CD16、およびCD64からなる群より選択される、本発明1065の方法。
[本発明1068]
有害な標的細胞が、腫瘍細胞、自己反応性細胞、およびウイルス感染細胞からなる群より選択される、本発明1065の方法。
[本発明1069]
有害な標的細胞の表面上に発現される障害関連抗原が、腫瘍細胞上に発現される腫瘍関連抗原である、本発明1065の方法。
[本発明1070]
腫瘍細胞上に発現される腫瘍関連抗原が、CD19、CD20、ヒト上皮成長因子受容体2(HER2)、がん胎児性抗原(CEA)、上皮細胞接着分子(EpCAM)、および受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)からなる群より選択される、本発明1069の方法。
[本発明1071]
腫瘍細胞が悪性B細胞である、本発明1069の方法。
[本発明1072]
悪性B細胞が、急性リンパ芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫(NHL)、前駆B細胞リンパ芽球性白血病/リンパ腫、成熟B細胞新生物、B細胞慢性リンパ球性白血病/小リンパ球性リンパ腫、B細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚濾胞中心リンパ腫、辺縁帯B細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、形質細胞性骨髄腫、移植後リンパ増殖性疾患、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、および未分化大細胞型リンパ腫からなる群より選択されるがん障害の細胞である、本発明1071の方法。
[本発明1073]
エフェクター細胞上に発現される抗原が、T細胞上に発現されるCD3であり、腫瘍細胞上の腫瘍関連抗原が、悪性B細胞上のCD20である、本発明1069の方法。
[本発明1074]
MAT-Fab抗体が、表1〜4のアミノ酸配列または表5〜8のアミノ酸配列を含む4つのポリペプチド鎖を含む、本発明1073の方法。