【手続補正書】
【提出日】令和2年5月20日(2020.5.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＩＶに感染した細胞を処置する方法において使用するための、形質導入された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む組成物であって、前記形質導入されたＰＢＭＣは、
（ａ）ＨＩＶに感染した被験体からＰＢＭＣを得るステップであって、前記被験体が、治療有効量の第１の刺激剤で過去に免疫化されている、ステップと、
（ｂ）前記ＰＢＭＣを、治療有効量の第２の刺激剤と接触させる、または接触させたステップであって、前記接触がｅｘ  ｖｉｖｏで行われる、ステップと、
（ｃ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、前記ＰＢＭＣからＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を陽性選択する、または陽性選択したステップと、
（ｄ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、少なくとも１つの遺伝子エレメントをコードするウイルス送達系を用いて前記ＰＢＭＣに形質導入する、または形質導入したステップであって、少なくとも１つのコードされる遺伝子エレメントが、
配列番号３１と少なくとも８０％の配列同一性を有する配列；または
（ｉ）配列番号１と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｉｉ）配列番号２と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｉｉｉ）配列番号３と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の少なくとも２つ、もしくは
（ｉｖ）配列番号９７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｖ）配列番号６と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｖｉ）配列番号７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の各々
を含む、ステップと、
（ｅ）少なくとも１日間にわたって、前記形質導入されたＰＢＭＣを培養する、または培養したステップ
とを含む、方法によって産生される、組成物。
【請求項２】
前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞が、前記ＰＢＭＣから少なくとも１つの物理的選択方法を使用して陽性選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記形質導入されたＰＢＭＣが、約１〜約３５日間までにわたって培養される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
被験体に注入される、または注入されたことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記被験体がヒトである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤の少なくとも１つがペプチドを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記ペプチドがｇａｇペプチドを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤の少なくとも１つが、ワクチンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記ワクチンがＨＩＶワクチンを含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはそのバリアントを含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤が同じである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ウイルス送達系がレンチウイルス粒子を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、発現した場合にＨＩＶ  ＲＮＡ配列をターゲティングすることができる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、配列番号３１、配列番号１または配列番号９７のいずれか１つを含む場合、前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、発現した場合にケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができる、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
配列番号３１；または
配列番号１、配列番号２および配列番号３の少なくとも２つ；または
配列番号９７、配列番号６および配列番号７の各々
を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
被験体においてＨＩＶ感染を処置する方法において使用するための、形質導入された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む組成物であって、前記形質導入されたＰＢＭＣが、
（ａ）前記被験体から白血球を取り出す、または取り出したステップであって、前記被験体が、治療有効量の第１の刺激剤で過去に免疫化されているステップと、
（ｂ）前記白血球からＰＢＭＣをｅｘ  ｖｉｖｏで精製する、または精製したステップと、
（ｃ）前記ＰＢＭＣからＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を陽性選択する、または陽性選択したステップと、
（ｄ）前記ＰＢＭＣを治療有効量の第２の刺激剤とｅｘ  ｖｉｖｏで接触させる、または接触させたステップと、
（ｅ）少なくとも１つの遺伝子エレメントをコードするウイルス送達系を用いて前記ＰＢＭＣにｅｘ  ｖｉｖｏで形質導入する、または形質導入したステップであって、前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、
配列番号３１と少なくとも８０％の配列同一性を有する配列；または
（ｉ）配列番号１と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｉｉ）配列番号２と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｉｉｉ）配列番号３と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の少なくとも２つ、もしくは
（ｉｖ）配列番号９７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｖ）配列番号６と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｖｉ）配列番号７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の各々
を含む、ステップと、
（ｆ）少なくとも１日間にわたって、形質導入された前記ＰＢＭＣを培養する、または培養したステップ
とを含む、方法によって産生される、組成物。
【請求項１９】
前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞が、前記ＰＢＭＣから少なくとも１つの物理的選択方法を使用して陽性選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記形質導入されたＰＢＭＣが、約１〜約３５日間までにわたって培養される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
前記被験体に注入される、または注入されたことを特徴とする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２２】
前記被験体がヒトである、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤の少なくとも１つがペプチドである、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ペプチドがｇａｇペプチドを含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤の少なくとも１つが、ワクチンを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ワクチンがＨＩＶワクチンを含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはそのバリアントを含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤が同じである、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ウイルス送達系がレンチウイルス粒子を含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、ＨＩＶ  ＲＮＡ配列をターゲティングすることができる少なくとも１つの低分子ＲＮＡを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項３１】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、配列番号３１、配列番号１または配列番号９７のいずれか１つを含む場合、前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができる低分子ＲＮＡも含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、請求項３０または３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
配列番号３１；または
配列番号１、配列番号２および配列番号３の少なくとも２つ；または
配列番号９７、配列番号６および配列番号７の各々
を含む、請求項３３に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２９】
以上、本発明の好ましい実施形態のうちのいくつかを記載し、具体的に例示したが、本発明がこのような実施形態に限定されることは意図していない。本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、これに様々な改変を行ってよい。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ＨＩＶに感染した細胞を処置する方法であって、
（ａ）ｅｘ  ｖｉｖｏで行われる、ＨＩＶに感染した被験体から単離された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を治療有効量の刺激剤と接触させるステップと、
（ｂ）少なくとも１つの遺伝子エレメントをコードするウイルス送達系を前記ＰＢＭＣにｅｘ  ｖｉｖｏで形質導入するステップであって、前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができる低分子ＲＮＡ、またはＨＩＶ  ＲＮＡ配列をターゲティングすることができる少なくとも１つの低分子ＲＮＡを含む、ステップと、
（ｃ）少なくとも１日間にわたって、形質導入された前記ＰＢＭＣを培養するステップとを含む、方法。
（項目２）
前記ＰＢＭＣからＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を陽性選択するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞が、少なくとも１つの物理的選択方法を使用して陽性選択される、項目２に記載の方法。
（項目４）
形質導入された前記ＰＢＭＣを被験体に注入するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記被験体がヒトである、項目４に記載の方法。
（項目６）
前記刺激剤がペプチドを含む、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記ペプチドがｇａｇペプチドを含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記刺激剤がワクチンを含む、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記ワクチンがＨＩＶワクチンを含む、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはそのバリアントを含む、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができる低分子ＲＮＡと、ＨＩＶ  ＲＮＡ配列をターゲティングすることができる少なくとも１つの低分子ＲＮＡとを含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記ＨＩＶ  ＲＮＡ配列が、ＨＩＶ  Ｖｉｆ配列、ＨＩＶ  Ｔａｔ配列、またはそれらのバリアントを含む、項目１または１１に記載の方法。
（項目１３）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、項目１または１１に記載の方法。
（項目１４）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、配列番号１と少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％のパーセント同一性を有するマイクロＲＮＡを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１６）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、配列番号１を含む、項目１３に記載の方法。
（項目１７）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、
ａ．配列番号２と少なくとも８０％、もしくは少なくとも８５％、もしくは少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％のパーセント同一性、または
ｂ．配列番号３と少なくとも８０％、もしくは少なくとも８５％、もしくは少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％のパーセント同一性
を有するマイクロＲＮＡを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１８）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、配列番号２または配列番号３を含む、項目１３に記載の方法。
（項目１９）
前記マイクロＲＮＡクラスターが、配列番号３１と少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、項目１４に記載の方法。
（項目２０）
前記マイクロＲＮＡクラスターが、配列番号３１を含む、項目１４に記載の方法。
（項目２１）
被験体においてＨＩＶ感染を処置する方法であって、
（ａ）有効量の第１の刺激剤で前記被験体を免疫化するステップと、
（ｂ）前記被験体から白血球を取り出し、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を精製するステップと、
（ｃ）前記ＰＢＭＣを治療有効量の第２の刺激剤とｅｘ  ｖｉｖｏで接触させるステップと、
（ｄ）少なくとも１つの遺伝子エレメントをコードするウイルス送達系を前記ＰＢＭＣにｅｘ  ｖｉｖｏで形質導入するステップと、
（ｅ）少なくとも１日間にわたって、形質導入された前記ＰＢＭＣを培養するステップとを含む、方法。
（項目２２）
前記ＰＢＭＣからＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を陽性選択するステップをさらに含む、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞が、少なくとも１つの物理的選択方法を使用して陽性選択される、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
形質導入された前記ＰＢＭＣを前記被験体に注入するステップをさらに含む、項目２１に記載の方法。
（項目２５）
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤が同じである、項目２１に記載の方法。
（項目２６）
前記第１の刺激剤および前記第２の刺激剤のうちの少なくとも１つが、ＨＩＶワクチンを含む、項目２１に記載の方法。
（項目２７）
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはそのバリアントを含む、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記ウイルス送達系がレンチウイルス粒子を含む、項目２１に記載の方法。
（項目２９）
前記少なくとも１つの遺伝子エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができる低分子ＲＮＡ、またはＨＩＶ  ＲＮＡ配列をターゲティングすることができる少なくとも１つの低分子ＲＮＡを含む、項目２１に記載の方法。
（項目３０）
被験体においてＨＩＶ感染を処置する方法であって、
（ａ）有効量の第１の刺激剤で前記被験体を免疫化するステップと、
（ｂ）前記被験体から白血球を取り出し、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を精製するステップと、
（ｃ）前記ＰＢＭＣからＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を陽性選択するステップと、
（ｄ）前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞を治療有効量の第２の刺激剤とｅｘ  ｖｉｖｏで接触させるステップと、
（ｄ）少なくとも１つの遺伝子エレメントをコードするウイルス送達系を前記ＨＩＶ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞にｅｘ  ｖｉｖｏで形質導入するステップと、
（ｅ）少なくとも１日間にわたって、形質導入された前記ＰＢＭＣを培養するステップとを含む、方法。