(57)【要約】  粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１８．４°に回折ピークを有すること等を特徴とする、式【化１】2006054456.tif 000016で表されるＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの新たなβ型結晶は、緩衝液や各種有機溶媒に対する溶解性が高い等、良好な物性を有し、抗腫瘍剤、活性化リンパ球抑制剤または摂食亢進剤として使用する医薬組成物の有効成分として適している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１８．４°に回折ピークを有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°に回折ピークをさらに有する、請求項１記載のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１５．４°に回折ピークをさらに有する、請求項１または２記載のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項４】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１３．３°に回折ピークをさらに有する、請求項１から３のいずれかに記載のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２０．４°に回折ピークをさらに有する、請求項１から４のいずれかに記載のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２０．０°に回折ピークをさらに有する、請求項１から５のいずれかに記載のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶。
【請求項７】
請求項１から６のいずれかに記載の結晶を有効成分とする医薬組成物。
【請求項８】
抗腫瘍、活性化リンパ球抑制または摂食亢進のための請求項７記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍活性を有する二環式へテロ環含有スルホンアミド化合物であるＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶およびその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
二環式へテロ環含有スルホンアミド化合物は、抗腫瘍剤として有用であり、中でもＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド（以下、化合物（１）と略記することもある。）は顕著な抗腫瘍活性（特許文献１参照）、活性化リンパ球抑制作用（特許文献２参照）または摂食亢進作用（特許文献３参照）を示しす。
【化１】
2006054456.tif 000002
化合物（１）は公知化合物であり、特許文献１の実施例１９に製造方法の開示があるが、「表題化合物３４９ｍｇを得た。・・・・（エタノール−ｎ−ヘキサンから再結晶）」と記載され、該結晶の物性値としては、融点と核磁気共鳴スペクトルが開示されているのみで、他の結晶多形の存在については開示も示唆もされていない。【０００３】
【特許文献１】国際公開ＷＯ９５／０７２７６号パンフレット
【特許文献２】国際公開ＷＯ０３／０２２２７１号パンフレット
【特許文献３】国際公開ＷＯ０３／０２２２７２号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
医薬品の原薬結晶の物性は、薬物のバイオアベイラビリティー、原薬の純度、製剤の処方等に大きな影響を与える。従って、医薬品の開発においては、製造方法において晶析し得る結晶多形について、どの結晶多形が医薬品として最も優れているかを、研究する必要がある。
そこで、本発明は、国際公開ＷＯ９５／０７２７６号パンフレットに記載した化合物（１）の結晶とは異なる結晶多形であって、より医薬製剤に適した結晶を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
医薬品の原薬結晶の物性は薬物のバイオアベイラビリティー、原薬の純度、製剤の処方等に大きな影響を与えることから、原薬の結晶多形およびその物性は、医薬品開発において重要な要素となる。
すなわち、本発明者は、化合物（１）において、結晶多形としてとり得る結晶形を把握するため、種々検討を行った結果、特許文献１に記載された結晶（以下、α型結晶と示す。）以外に再結晶条件を検討することにより、本出願に係わる新規な結晶（以下、β型結晶と示す。）を見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１８．４°に回折ピークを有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
好ましくは、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°に回折ピークをさらに有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
好ましくは、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１５．４°に回折ピークをさらに有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
好ましくは、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１３．３°に回折ピークをさらに有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
好ましくは、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２０．４°に回折ピークをさらに有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
好ましくは、本発明は、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２０．０°に回折ピークをさらに有する、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶に関する。
更に本発明は、上記のいずれかの結晶を有効成分とする医薬組成物に関する。好ましくは、本発明は、抗腫瘍、活性化リンパ球抑制または摂食亢進のための医薬組成物に関する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明により、例えばアセトニトリル−水（１：１）またはイソプロパノール−水（１：１）を再結晶溶媒とし、溶媒蒸発法を用いることにより、特許文献１（国際公開ＷＯ９５／０７２７６号パンフレット）の実施例１９に記載された製造方法により得られた結晶（α型結晶）とは異なる新たな結晶（β型結晶）を、単一の結晶態様として得ることが可能となった。本発明の結晶は、緩衝液（例えば Britton-Robinson Buffer 等）、各種有機溶媒（例えばエタノール、酢酸エチル等）に対する溶解性は、α型結晶と比較し高い等、良好な物性を有し、抗腫瘍剤、活性化リンパ球抑制剤または摂食亢進剤として使用する医薬組成物の有効成分に適している。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、参考例４で得られた化合物（１）：α型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図２】図２は、実施例１で得られた化合物（１）：β型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【０００８】
次に、本発明のβ型結晶およびその製造法について詳細に説明する。
本発明の結晶は、化合物（１）の結晶であって、粉末Ｘ線回折［回折角度（２θ）］において、例えば、
（１）１８．４°
（２）１０．２°
（３）１５．４°
（４）１３．３°
（５）２０．４°
（６）２０．０°に回折ピークを有していることが特徴である。【０００９】
これらの粉末Ｘ線回折における特徴的ピークは、β型結晶に特有のものであるり、α型結晶では観察されない。
一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）は±０．２°の範囲内で誤差が生じ得るから、上記の回折角度の値は±０．２°程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、粉末Ｘ線回折におけるピークの回折角度が完全に一致する結晶だけでなく、ピークの回折角度が±０．２°程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。
本明細書において、「回折角度（２θ±０．２°）１８．４°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１８．２°〜１８．６°に回折ピークを有する」ということを意味し、「回折角度（２θ±０．２°）１０．２°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１０．０°〜１０．４°に回折ピークを有する」ということを意味し、「回折角度（２θ±０．２°）１５．４°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１５．２°〜１５．６°に回折ピークを有する」ということを意味し、「回折角度（２θ±０．２°）１３．３°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１３．１°〜１３．５°に回折ピークを有する」ことを意味し、「回折角度（２θ±０．２°）２０．４°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）２０．２°〜２０．６°に回折ピークを有する」ということを意味し、「回折角度（２θ±０．２°）２０．０°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１９．８°〜２０．２°に回折ピークを有する」ことを意味する。【００１０】
各種再結晶溶媒を用いたβ型結晶の晶析方法
本発明のβ型結晶は、上記特許文献１（国際公開第９５／０７２７６号パンフレット）の実施例１９にしたがって化合物（１）を製造し、この化合物（１）（α型結晶）を所定の溶媒に溶解させ、室温に放置し、結晶を晶析させることにより製造することができる。【００１１】
晶析に使用する化合物（１）は、結晶性がよいので、通常、実施例１９の条件下では、α型結晶で得られるが、どのような形態であってもよく、水和物でも無水物でもよく、非晶質でも結晶質（複数の結晶多形からなるものを含む）でもよく、これらの混合物であってもよい。【００１２】
晶析に使用する溶媒は、例えばアセトンなどのアルキルケトン系溶媒、アセトニトリル、例えばエタノール、イソプロパノールなどのアルコール系溶媒および水からなる群より選ばれる１種の溶媒または２種以上の溶媒の混合溶媒を挙げることができ、好ましくは例えばアセトニトリル、イソプロパノールおよび水からなる群より選ばれる１種の溶媒または２種以上の溶媒の混合溶媒であり、特に例えばアセトニトリル−水、イソプロパノール−水が好適である。
アセトニトリル−水、イソプロパノール−水の混合溶媒を使用する場合の混合比（容量比）は、好ましくは例えば５：１〜１：５であり、より好ましくは例えば３：１〜１：３であり、さらに好ましくは例えば２：１〜１：２である。最も好適にはアセトニトリル−水（１：１）、イソプロパール−水（１：１）の混合溶媒を用いた溶媒蒸発法が挙げられる。また、アセトニトリル、イソプロパールを用いた蒸気拡散法も挙げられる。【００１３】
溶媒の使用量は、化合物（１）が加熱により溶解する量を下限とし、結晶の収量が著しく低下しない量を上限として適宜選択することができ、好ましくは化合物（１）の重量に対する容量比で例えば５〜５０倍量（ｖ／ｗ）である。再結晶溶媒の量として、好ましくは、例えば５〜３０倍量（ｖ／ｗ）であり、より好ましくは、再結晶溶媒としてアセトニトリル−水（１：１）を用いる場合には約１０倍量（ｖ／ｗ）であり、再結晶溶媒としてイソプロパノール−水（１：１）を用いる場合には約１０倍量（ｖ／ｗ）である。【００１４】
化合物（１）を加熱して溶解する温度は、溶媒に応じて化合物（１）が溶解する温度を適宜選択すればよいが、好ましくは例えば再結晶溶媒の還流温度から１５℃であり、より好ましくは例えば３５〜１５℃である。
晶析時の冷却速度を変えると、態様の異なる結晶（多形）を与えうるので、結晶の品質や粒度等への影響を考慮して適宜冷却速度を調整して実施することが望ましく、好ましくは例えば４０〜５℃／時間の速度での冷却、より好ましくは例えば２５〜１５℃／時間の速度での冷却することが好ましい。
最終的な晶析温度は、結晶の収量と品質等から適宜選択することができるが、好ましくは例えば１０〜−２５℃である。【００１５】
結晶晶析において、種結晶（少量のβ型のＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの結晶）を加えても、加えなくてもよい。種結晶を加える温度は特に限定されず、好ましくは例えば６０℃以下であり、より好ましくは例えば５５〜０℃、さらに好ましくは例えば５５〜１５℃であり、最も好ましくは約２５℃である。【００１６】
晶析した結晶は、通常の濾過操作で分離し、必要に応じて溶媒で洗浄し、さらに乾燥して、目的の結晶を得ることができる。結晶の洗浄に使用する溶媒は、晶析溶媒と共通であり、好ましくはアセトニトリル−水（１：１）の混合溶媒またはイソプロパノール−水（１：１）の混合溶媒である。【００１７】
結晶の乾燥方法
濾過操作で分離した結晶は、適宜、大気下に放置することにより、または加熱することにより、乾燥することができる。
乾燥時間は、残留溶媒が所定の量を下回るまでの時間を製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。また、乾燥は通風下でも減圧下でも行うことができる。減圧度は、製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。得られた結晶は、乾燥後、必要に応じて大気中に放置することもできる。【００１８】
上記の方法によって得られたβ型結晶は単一の結晶形からなり、この結晶形は安定であって、容易に他の結晶形や非晶質に転移することがなく、また吸湿性もない等の良好な物性を有しており、製剤化にも適している。
化合物（１）の抗腫瘍剤としての使用に関しては特許文献１に詳細に開示されており、化合物（１）の活性化リンパ球抑制剤および自己免疫疾患治療剤としての使用に関しては特許文献２に詳細に開示されており、化合物（１）の摂食亢進剤および食欲不振症治療剤としての使用に関しては特許文献３に詳細に開示され、良好な成績を得ている。同様に本発明のβ型結晶も例えば各種腫瘍の治療剤、活性化リンパ球抑制剤、自己免疫疾患治療剤、摂食亢進剤または食欲不振症治療剤の有効成分として使用することができる。【００１９】
本発明の化合物（１）の結晶は、医薬として使用する場合は、経口もしくは非経口的に、例えば抗腫瘍剤、活性化リンパ球抑制剤、自己免疫疾患治療剤、摂食亢進剤または食欲不振症治療剤として投与される。投与量は、例えば症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、医薬製剤の性質、調剤、種類、有効成分の種類等によって異なり、特に限定されず、通常成人１日あたり例えば１０〜６０００ｍｇ、好ましくは約５０〜４０００ｍｇ、さらに好ましくは約１００〜３０００ｍｇであり、これを通常１日１〜３回に分けて投与する。【００２０】
経口用固形製剤を調製する場合は、主薬に賦形剤さらに必要に応じて例えば結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により、例えば錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤等とする。賦形剤としては、例えば乳糖、コーンスターチ、白糖、ぶどう糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素などが、結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、例えばココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、龍脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤、顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングすることは勿論差し支えない。注射剤を調製する場合には、必要により主薬に例えばｐＨ調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、保存剤などを添加し、常法により例えば静脈、皮下、筋肉内注射剤とする。その際必要により、常法により凍結乾燥物とすることもある。懸濁化剤としては、例えばメチルセルロース、ポリソルベート８０、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートなどを挙げることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下に、参考例、実施例および試験例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。【００２２】
参考例１
Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド（α型結晶）の製造
（１）４−スルファモイルベンゼンスルホニルクロリド
【化２】
2006054456.tif 000003
４−アミノベンゼンスルホンアミド６．４ｇ（３７．２ミリモル）を水１２．５ｍｌと濃塩酸６．３ｍｌの混液に加え攪拌した。これに亜硝酸ナトリウム２．５６ｇ（３７．１ミリモル）の飽和水溶液を０℃以下で滴下した。反応液を二酸化イオウ飽和酢酸液（二酸化イオウを酢酸３５ｍｌに飽和させ、塩化第二銅・２水和物１．５ｇを加えた液）に氷冷、攪拌下加えた。１０分後反応液を氷水に注ぎ、沈澱を濾取、水洗した。沈澱をテトラヒドロフランに溶解し、硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮乾固し、表題化合物３．５ｇを得た。【００２３】
（２）７−ブロモ−１Ｈ−インドール
【化３】
2006054456.tif 000004
２−ブロモニトロベンゼン５．０５ｇ（２５ミリモル）のテトラヒドロフラン溶液（２５０ｍｌ）に窒素雰囲気下−４０℃でビニルマグネシウムブロミド１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液１００ｍｌ（１００ミリモル）を加え、そのまま４０分間攪拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液５００ｍｌ中に注ぎ、エチルエーテルで抽出した。硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、表題化合物２．８９ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):6.56(1H,dd,J=2.9,1.8Hz),6.94(1H,t,J=7.8Hz),7.30(1H,d,J=7.8Hz),7.40(1H,t,J=2.9Hz),7.56(1H,d,J=7.8Hz),11.16-11.46(1H,brm)【００２４】
（３）７−アミノ−１Ｈ−インドール
【化４】
2006054456.tif 000005
上記（２）の化合物２．７０ｇ（１３．８ミリモル）のテトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）に窒素雰囲気下−７０℃でｎ−ブチルリチウム２．５Ｍヘキサン溶液１６．５ｍｌ（４１．３ミリモル）を滴下し、−７０℃で１５分間、ついで−２０〜−１０℃で３０分間攪拌した。−７０℃に再び冷却後、ジフェニルホスホリルアジド３．９ｍｌ（１８ミリモル）を滴下し、−７０℃で１時間、ついで−４０℃で１時間攪拌した。ナトリウム  ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウム  ハイドライド３．４Ｍトルエン溶液２２．３ｍｌ（７５．８ミリモル）を−４０℃で加えた後、−３０〜−２０℃で３０分間、ついで室温で３０分間攪拌した。ｐＨ７．０リン酸緩衝液を加え、不溶物を濾取し、濾液をエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、表題化合物１．２９ｇを得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):5.01(2H,br s),6.25-6.33(2H,m),6.70(1H,dd,J=7.9,7.3Hz),6.78(1H,dd,J=7.9,0.7Hz),7.23(1H,t,J=2.7Hz),10.48-10.72(1H,brm)【００２５】
（４）Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド（α型結晶）
【化５】
2006054456.tif 000006
上記（３）により得られた７−アミノ−１Ｈ−インドール  ８６０ｍｇ（６．５ミリモル）をテトラヒドロフラン５ｍｌに溶解させ、ピリジン５ｍｌを加え、氷冷する。０℃にて１０分間攪拌した後、参考例２で得られた４−スルファモイルベンゼンスルホニルクロリド１．８３ｇ（７．１６ミリモル）を加え、室温にて攪拌する。酢酸エチルと１Ｎ塩酸を加えて有機層を分取し、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣をシリカカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１．５／１〜１／１）で精製し、Ｎ−（１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド１．８１２ｇを得た。
この化合物１．８１２ｇ（５．１７ミリモル）をジクロロメタン１５０ｍｌとジメチルホルムアミド１２ｍｌの混合溶媒に溶解し、窒素雰囲気下攪拌しながらＮ−クロロコハク酸イミド７１８ｍｇ（５．２７ミリモル）を加えた。室温で１時間攪拌後、チオ硫酸ナトリウム水溶液と酢酸エチルを加えて有機層を分取し、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１〜２／１）で精製し、表題化合物１．９２６ｇを得た。
融点：２２０℃付近から部分的に黒く着色し始め、２４０℃付近より徐々に分解（エタノール−ｎ−ヘキサンから再結晶）
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):6.75(1H,d,J=7.6Hz),6.96(1H,dd,J=8.0,7.6Hz),7.29(1H,d,J=7.6Hz),7.50(1H,d,J=2.8Hz),7.58(2H,s),7.90-7.98(4H,m),10.23(1H,s),11.07-11.17(1H,m)【００２６】
α型結晶の粉末Ｘ線結晶回折
上記晶析方法により得られた結晶（α型結晶）について，試料を、めのう乳鉢を用いて粉砕した後、粉末Ｘ線回折の試料台に載せ、以下の条件で分析した。
得られた粉末Ｘ線回折パターンを図１に示した。
【表１】
2006054456.tif 000007
【００２７】
実施例１
Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド（β型結晶）
【化６】
2006054456.tif 000008
参考例１の（３）により得られた７−アミノ−１Ｈ−インドール８６０ｍｇ（６．５ミリモル）をテトラヒドロフラン５ｍｌに溶解させ、ピリジン５ｍｌを加え、反応液を氷冷する。０℃にて、反応液を１０分間攪拌した後、反応液に参考例２で得られた４−スルファモイルベンゼンスルホニルクロリド１．８３ｇ（７．１６ミリモル）を加え、室温にて反応液を攪拌する。反応液に酢酸エチルと１Ｎ塩酸を加えて、有機層を分取し、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１．５／１〜１／１）で精製し、Ｎ−（１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド１．８１２ｇを得た。【００２８】
この化合物１．８１２ｇ（５．１７ミリモル）をジクロロメタン１５０ｍｌとジメチルホルムアミド１２ｍｌの混合溶媒に溶解し、窒素雰囲気下攪拌しながらＮ−クロロコハク酸イミド７１８ｍｇ（５．２７ミリモル）を加えた。室温で１時間攪拌後、チオ硫酸ナトリウム水溶液と酢酸エチルを加えて有機層を分取し、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１〜２／１）で精製し、表題化合物１．９２６ｇを得た。
このＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド９９．９１ｍｇをイソプロパノール−水（１：１）の混合溶媒１００ｍｌに溶解し、室温、常圧、暗所にて溶媒を蒸発させ、β型結晶（４９．１２ｍｇ）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):6.75(1H,d,J=7.6Hz),6.96(1H,dd,J=8.0,7.6Hz),7.29(1H,d,J=7.6Hz),7.50(1H,d,J=2.8Hz),7.58(2H,s),7.90-7.98(4H,m),10.23(1H,s),11.07-11.17(1H,m)【００２９】
β型結晶の粉末Ｘ線結晶回折
上記晶析方法により得られた結晶（β型結晶）について、試料を、めのう乳鉢を用いて粉砕した後、粉末Ｘ線回折の試料台に載せ、以下の表２に記載する条件で分析した。
得られた粉末Ｘ線回折パターンを図２に示した。
【表２】
2006054456.tif 000009
【００３０】
図２の粉末Ｘ線回折パターンから、β型結晶は、粉末Ｘ線回折［回折角度（２θ）］において、例えば、１８．４°、１０．２°、１５．４°、１３．３°、２０．４°、２０．０°に回折ピークを有していることが特徴であることが分かる。【００３１】
実施例２
各種再結晶溶媒を用いたα型およびβ型結晶の晶析状況
次に、溶媒蒸発法および温度勾配法により、各種再結晶溶媒を用いて再結晶を試みた。その結果を表３および表４に示した。
１．溶媒蒸発法
（１）実験方法：
約１００ｍｇのＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドをビーカーに秤量し、２５℃にて溶解するまで、表３に記載された各種溶媒を加えた。そのビーカーを穴の空いたアルミホイルで覆い、真空状態に置いた。２５℃、暗室下にて溶媒を留去し、分離した結晶を集め、粉末Ｘ線回折を行った。【００３２】
（２）結果：
溶媒蒸発法では、表３に示されているように、再結晶溶媒として、例えばアセトン、アセトニトリル、イソプロパノール、アセトン−水（１：１）、メタノール−水（１：１）、エタノール−水（１：１）などを用いた場合はα型結晶が選択的に、例えばアセトニトリル−水（１：１）、イソプロパノール−水（１：１）などを用いた場合はβ型結晶が選択的に晶析した。
【表３】
2006054456.tif 000010
【００３３】
２．温度勾配法
（１）実験方法：
約１００ｍｇのＮ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドを丸底フラスコに秤量し、加熱条件化一旦溶解させ、室温下放置し、析出した結晶を濾取し、５０℃にて乾燥させ、粉末Ｘ線回折を行った。なお、溶媒としては表４に記載の各種の溶媒を使用し、油浴の温度は、アセトンの場合は、８４．９℃、アセトン−水（１：１）の場合は９３．５℃、その他の場合は１００℃であった。【００３４】
（２）結果：
温度勾配法では、表４に示したように、再結晶溶媒として、例えばアセトン、アセトニトリル、イソプロパノール、メタノール、エタノール、アセトン−水（１：１）、アセトニトリル−水（１：１）、イソプロパノール−水（１：１）、メタノール−水（１：１）、エタノール−水（１：１）などを用いた場合は、α型結晶が選択的に晶析した。
【表４】
2006054456.tif 000011
【００３５】
試験例１
有機溶媒および緩衝液に対するα型結晶およびβ結晶の溶解性
次に、本発明のβ型結晶の有用性を示すために、有機溶媒および緩衝液に対する溶解性をα型結晶と比較して検討した。その結果を表５ないし表８に示す。
（１）試験方法：
有機溶媒および緩衝液（Britton-Robinson Buffer:Ionic strength(I)=0.3）への溶解性を調べた。
すなわち、ＵＳＰ２５（U.S. PHARMACOPEIA 25(USP25),p8,General Notices,Solubility）に記載されている方法により、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド結晶の種々の有機溶媒、Britton-Robinson buffer(pH3,5,7,9,11,I=0.3)への溶解性を評価した。２５℃条件下で１０ｍｇの試料（Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミド）を、３０分以内に溶解するに要する溶媒量を記録した。本検討では、容器を５分おきに３０秒間激しく浸透し、溶解を目視にて確認した。【００３６】
（２）結果：
得られた結果は表５ないし表８に示した。
【表５】
2006054456.tif 000012
【表６】
2006054456.tif 000013
【表７】
2006054456.tif 000014
【表８】
2006054456.tif 000015
【００３７】
（２）結果：
表５から表８の結果から分かるように、β型結晶の及び緩衝液（Britton-Robinson Buffer:Ionic strength(I)=0.3）への溶解性はα型結晶よりも高い。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明により、Ｎ−（３−クロロ−１Ｈ−インドール−７−イル）−４−スルファモイルベンゼンスルホンアミドの新たなβ型結晶を、単一の結晶態様として得ることが可能となった。本発明のβ型結晶は、緩衝液（例えば Britton-Robinson Buffer 等）、各種有機溶媒（例えばエタノール、酢酸エチル等）に対する溶解性は、α型結晶と比較し高い等、良好な物性を有し、抗腫瘍剤、活性化リンパ球抑制剤または摂食亢進剤として使用する医薬組成物の有効成分として適している。
【図１】
2006054456.tif 000017
【図２】
2006054456.tif 000018
【国際調査報告】
2006054456.tif 000019
2006054456.tif 000020