【手続補正書】
【提出日】令和2年4月6日(2020.4.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体を含む、造血細胞移植前に造血幹細胞及び造血前駆細胞を除去するための医薬組成物であって、
ＦＬＴ３と結合する前記二重特異性抗体の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１であり、ＦＬＴ３と結合する前記二重特異性抗体の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号２であり、
前記二重特異性抗体が、ＣＤ４５、ＣＤ３、ＦＬＴ３、ＣＤ１９、ＣＤ３３の１つまたは複数を発現する細胞集団の末梢血レベルを少なくとも９０％低減し、且つ
前記二重特異性抗体が、前記患者を前処置またはコンディショニングするプロトコールの毒性を低減する、
前記医薬組成物。
【請求項２】
（ａ）二重特異性抗体が、ヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体を含むか、或いは
（ｂ）二重特異性抗体またはその抗原結合部分が、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、およびＩｇＤアイソタイプからなる群から選択されるアイソタイプを含むか、或いは
（ｃ）二重特異性抗体が、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．０５ｍｇ／ｋｇ〜２ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．３ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇの量で投与されるか、或いは
（ｄ）二重特異性抗体が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＬＬ）、ＣＭＬ、末梢Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、非悪性の遺伝性および後天性骨髄障害、多発性骨髄腫、またはＳＣＩＤを患っている患者に投与されるか、或いは
（ｅ）二重特異性抗体が、鎌状赤血球貧血、ベータサラセミアメジャー、難治性Ｄｉａｍｏｎｄ−Ｂｌａｃｋｆａｎ貧血、骨髄異形成症候群、特発性重症再生不良性貧血、発作性夜間ヘモグロビン尿症、赤芽球癆、ファンコニ貧血、無巨核球症および先天性血小板減少症から選択される非悪性の遺伝性および後天性骨髄障害を患っている患者に投与されるか、或いは
（ｆ）医薬組成物が抗腫瘍剤をさらに含むか、或いは
（ｇ）二重特異性抗体がヒト化抗体である、
請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体を調製する方法であって、Ｆｌｔ３モノクローナル抗体のＦａｂ抗原結合断片のＣ末端をＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続するステップ、およびヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体（ＵＣＨＴ１）の単鎖可変断片（ＳｃＦｖ）をＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続するステップを含む方法。
【請求項４】
ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体であって、ＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続されている、Ｆｌｔ３モノクローナル抗体のＦａｂ抗原結合断片のＣ末端、およびＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続されている、ヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体（ＵＣＨＴ１）の単鎖可変断片（ＳｃＦｖ）を含む組換え単鎖二重特異性抗体。
【請求項５】
Ｆａｂ抗原結合断片の重鎖結合ドメインのアミノ酸配列が配列番号１（Ｈ３１１３）であり、且つＦａｂ抗原結合断片の軽鎖結合ドメインのアミノ酸配列が配列番号２（Ｌ３１３３）である、請求項４に記載の組換え単鎖二重特異性抗体。
【請求項６】
ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号５であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号７である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項７】
（ａ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｂ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｃ）抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞が前記結合した抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、
請求項６に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項８】
ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号９であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１１である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項９】
（ａ）抗体またはその断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｂ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｃ）抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞が前記結合した抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、
請求項８に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項１０】
ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１３であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１５である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項１１】
（ａ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｂ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｃ）抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞が前記結合した抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、
請求項１０に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項１２】
ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１７であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１９である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【請求項１３】
（ａ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｂ）抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間であるか、或いは
（ｃ）抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞が前記結合した抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、
請求項１２に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
別の態様によると、記載した本発明は、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１３であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１５である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片を用意する。
別の態様によると、記載した本発明は、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１７であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１９である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片を用意する。
別の実施形態によると、抗体またはその断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）は、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間である。別の実施形態によると、抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）は、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間である。別の実施形態によると、細胞上のヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合するＦＬＴ３抗体は、細胞が結合抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である。
なお、本発明としては、以下の態様も好ましい。
〔１〕  造血細胞移植のためにそれを必要とする患者を前処置またはコンディショニングする方法であって、
ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体を用意するステップ、および
二重特異性抗体を含む治療量の医薬組成物を患者に投与するステップ
を含み、
治療量が、
ＣＤ４５、ＣＤ３、ＦＬＴ３、ＣＤ１９、ＣＤ３３の１つまたは複数を発現する細胞集団の末梢血レベルを少なくとも９０％低減する、および
患者を前処置またはコンディショニングするプロトコールの毒性を低減する
のに有効である、方法。
〔２〕  ＦＬＴ３を結合する二重特異性抗体の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１であり、ＦＬＴ３を結合する二重特異性抗体の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号２である、〔１〕に記載の方法。
〔３〕  二重特異性抗体が、ヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体を含む、〔１〕に記載の方法。
〔４〕  二重特異性抗体またはその抗原結合部分が、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、およびＩｇＤアイソタイプからなる群から選択されるアイソタイプを含む、〔１〕に記載の方法。
〔５〕  前記有効量が、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．０５ｍｇ／ｋｇ〜２ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．３ｍｇ／ｋｇ、より良くは０．１ｍｇ／ｋｇを含む、〔１〕に記載の方法。
〔６〕  それを必要とする患者が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＬＬ）、ＣＭＬ、末梢Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞種、非悪性の遺伝性および後天性骨髄障害、多発性骨髄腫、またはＳＣＩＤを患っている、〔１〕に記載の方法。
〔７〕  非悪性の遺伝性および後天性骨髄障害が、鎌状赤血球貧血、ベータサラセミアメジャー、難治性Ｄｉａｍｏｎｄ−Ｂｌａｃｋｆａｎ貧血、骨髄異形成症候群、特発性重症再生不良性貧血、発作性夜間ヘモグロビン尿症、赤芽球癆、ファンコニ貧血、無巨核球性および先天性血小板減少症から選択される、〔１〕に記載の方法。
〔８〕  組成物が抗腫瘍剤をさらに含む、〔１〕に記載の方法。
〔９〕  二重特異性抗体がヒト化抗体である、〔１〕に記載の方法。
〔１０〕  ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体を調製する方法であって、Ｆｌｔ３モノクローナル抗体のＦａｂ抗原結合断片のＣ末端をＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続するステップ、およびヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体（ＵＣＨＴ１）の単鎖可変断片（ＳｃＦｖ）をＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続するステップを含む方法。
〔１１〕  ヒトＦＬＴ３とヒトＣＤ３の両方に結合する組換え単鎖二重特異性抗体であって、ＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続されている、Ｆｌｔ３モノクローナル抗体のＦａｂ抗原結合断片のＣ末端、およびＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに接続されている、ヒトＣＤ３のサブユニットと反応するモノクローナル抗体（ＵＣＨＴ１）の単鎖可変断片（ＳｃＦｖ）を含む組換え単鎖二重特異性抗体。
〔１２〕  Ｆａｂ抗原結合断片の重鎖結合ドメインのアミノ酸配列が配列番号１（Ｈ３１１３）であり、Ｆａｂ抗原結合断片の軽鎖結合ドメインのアミノ酸配列が配列番号２（Ｌ３１３３）である、〔１１〕に記載の組換え単鎖二重特異性抗体。
〔１３〕  ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号５であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号７である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１４〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）から２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間である、〔１３〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１５〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）から２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間である、〔１４〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１６〕  細胞上のヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合するＦＬＴ３抗体が、細胞が結合抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、〔１３〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１７〕  ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号９であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１１である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１８〕  抗体またはその断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間である、〔１７〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔１９〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間である、〔１８〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２０〕  細胞上のヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合するＦＬＴ３抗体が、細胞が結合抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、〔１７〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２１〕  ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１３であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１５である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２２〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間である、〔２１〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２３〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間である、〔２２〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２４〕  細胞上のヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合するＦＬＴ３抗体が、細胞が結合抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、〔２１〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２５〕  ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の軽鎖のアミノ酸配列が配列番号１７であり、ヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合する抗体またはその断片の抗原結合部分の重鎖のアミノ酸配列が配列番号１９である、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２６〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１ｎｇ／ｍＬ（６．２５ｐＭ）と２，０００ｎｇ／ｍＬ（１２．５ｎＭ）の間である、〔２５〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２７〕  抗体またはその抗原結合断片の有効濃度の最大半量（ＥＣ50）が、１０ｎｇ／ｍＬ（６２．５ｐＭ）と２００ｎｇ／ｍＬ（１．２５ｎＭ）の間である、〔２６〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
〔２８〕  細胞上のヒトＦＬＴ３／ＦＬＫ２受容体タンパク質に結合するＦＬＴ３抗体が、細胞が結合抗体または抗原結合断片を内部移行させるのに有効である、〔２５〕に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。