【手続補正書】
【提出日】令和2年10月14日(2020.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エンテロウイルスＤ６８（ＥＶ−Ｄ６８）若しくはその改変形、又は単離された核酸分子を含む、被験体における腫瘍を治療するための医薬組成物であって、
前記核酸分子は、以下の：
（１）ＥＶ−Ｄ６８又はその改変形のゲノム配列又はｃＤＮＡ配列と、
（２）前記ゲノム配列又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列と、
から選択される配列を含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記ＥＶ−Ｄ６８は、野生型ＥＶ−Ｄ６８である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
１つ以上の以下の特徴：
（１）前記ＥＶ−Ｄ６８は、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するゲノム配列を有すること、又は
（２）前記ＥＶ−Ｄ６８は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するｃＤＮＡ配列を有すること、
によって特徴づけられる、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記改変形は、改変ＥＶ−Ｄ６８であり、そのゲノムが前記野生型ＥＶ−Ｄ６８のゲノムと比較して、以下の：
（１）非翻訳領域における１つ以上の突然変異と、
（２）１つ以上の外因性核酸の挿入と、
（３）１つ以上の内因性遺伝子の欠失又は突然変異と、
（４）前記３つの項目の任意の組み合わせと、
から選択される１つ以上の改変を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記非翻訳領域における１つ以上の改変が、５’非翻訳領域（５’ＵＴＲ）における内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）配列の外因性ＩＲＥＳ配列との置換を含む、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記外因性ＩＲＥＳ配列がヒトライノウイルス２（ＨＲＶ２）の内部リボソーム進入部位配列である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記１つ以上の外因性核酸が、サイトカインをコードする核酸配列、抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドをコードする核酸配列、及びマイクロＲＮＡの標的配列から選択される、請求項４〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
１つ以上の以下の特徴：
（１）前記サイトカインがＧＭ−ＣＳＦであること；
（２）前記抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドがＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１に対するｓｃＦｖであること；
（３）前記マイクロＲＮＡがｍｉＲ−１３３及び／又はｍｉＲ−２０６から選択されること、
によって特徴付けられる、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記改変ＥＶ−Ｄ６８は、以下の特徴：
（１）前記改変ＥＶ−Ｄ６８のゲノム配列は、配列番号１３〜配列番号１６に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有すること、及び、
（２）前記改変ＥＶ−Ｄ６８のｃＤＮＡ配列は、配列番号８〜配列番号１１に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有すること、
の１つを有する、請求項４〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
以下の特徴：
（１）前記単離された核酸分子は、前記ＥＶ−Ｄ６８若しくはその改変形のゲノム配列からなること、又は
（２）前記単離された核酸分子は、前記ＥＶ−Ｄ６８若しくはその改変形のゲノム配列のｃＤＮＡ配列、又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列を含むベクターであること、
の１つによって特徴づけられる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記単離された核酸分子は、配列番号１２〜配列番号１６のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列を有するか、又は、配列番号１、配列番号８〜配列番号１１のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列若しくはその相補的配列を含むベクターである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ＥＶ−Ｄ６８若しくはその改変形、又は前記単離された核酸分子は、抗腫瘍活性を有する追加の薬学的活性剤と組み合わせて投与される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記追加の薬学的活性剤は、追加の腫瘍溶解性ウイルス、化学療法剤又は免疫療法剤から選択される、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記追加の薬学的活性剤は、以下の１つ以上；
（１）前記追加の腫瘍溶解性ウイルスは、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、パルボウイルス、レオウイルス、ニューカッスル病ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、麻疹ウイルス又はそれらの任意の組み合わせから選択されること、
（２）、前記化学療法剤は、５−フルオロウラシル、マイトマイシン、メトトレキサート、ヒドロキシ尿素、シクロホスファミド、ダカルバジン、ミトキサントロン、アントラサイクリン類、エトポシド、白金化合物、タキサン類又はそれらの任意の組み合わせから選択されること、
（３）前記免疫療法剤は、免疫チェックポイント阻害薬、腫瘍特異的標的化抗体又はそれらの任意の組み合わせから選択されること、
によって特徴づけられる、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
以下の特徴：
（１）前記腫瘍は、子宮頸癌、卵巣癌、子宮内膜癌、肺癌、肝臓癌、腎臓癌、神経芽細胞腫、神経膠腫、乳癌、黒色腫、前立腺癌、膀胱癌、膵臓癌、胃癌、結腸直腸癌、食道癌、甲状腺癌、喉頭癌、骨肉腫、造血器悪性腫瘍から選択されること、
（２）前記被験体は、哺乳動物であること、
の少なくとも１つを有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
改変ＥＶ−Ｄ６８であって、前記改変ＥＶ−Ｄ６８のゲノムは、野生型ＥＶ−Ｄ６８のゲノムと比較して以下の：
（１）非翻訳領域における１つ以上の突然変異と、
（２）１つ以上の外因性核酸の挿入と、
（３）１つ以上の内因性遺伝子の欠失又は突然変異と、
（４）前記３つの項目の任意の組み合わせと、
から選択される１つ以上の改変を有する、改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項１７】
請求項１６に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８であって、
非翻訳領域における１つ以上の突然変異が、５’非翻訳領域（５’ＵＴＲ）における内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）配列の外因性ＩＲＥＳ配列との置換を含む、改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項１８】
前記外因性ＩＲＥＳ配列がヒトライノウイルス２（ＨＲＶ２）の内部リボソーム進入部位配列である、請求項１７に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項１９】
前記１つ以上の外因性核酸は、サイトカインをコードする核酸、抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドをコードする核酸、及びマイクロＲＮＡの標的配列から選択される、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項２０】
１つ以上の以下の特徴：
（１）前記サイトカインがＧＭ−ＣＳＦであること；
（２）前記抗腫瘍タンパク質又はポリペプチドが、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１に対するｓｃＦｖであること；
（３）前記マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１３３及び／又はｍｉＲ−２０６から選択されること；
によって特徴づけられる、請求項１９に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項２１】
前記改変ＥＶ−Ｄ６８は、以下の特徴：
（１）前記改変ＥＶ−Ｄ６８のゲノム配列は、配列番号１３〜配列番号１６に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有すること、及び、
（２）前記改変ＥＶ−Ｄ６８のｃＤＮＡ配列は、配列番号８〜配列番号１１に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有すること、
の少なくとも１つを有する、請求項１６〜２０のいずれか一項に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８。
【請求項２２】
単離された核酸分子であって、
（１）請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の改変ＥＶ−Ｄ６８のゲノム配列又はｃＤＮＡ配列と、
（２）前記ゲノム配列又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列と、
からなる群から選択される配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項２３】
前記単離された核酸分子は、以下の特徴の１つ：
（１）前記単離された核酸分子は、前記改変ＥＶ−Ｄ６８のゲノム配列からなるか、又は
（２）前記単離された核酸分子は、前記改変ＥＶ−Ｄ６８のｃＤＮＡ配列若しくは前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列を含むベクターである、
ことに特徴づけられる、請求項２２に記載の単離された核酸分子。
【請求項２４】
前記単離された核酸分子は、配列番号１２〜配列番号１６のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列を有するか、又は、配列番号１、配列番号８〜配列番号１１のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列又はその相補的配列を含むベクターである、請求項２３に記載の単離された核酸分子。