【手続補正書】
【提出日】令和2年5月14日(2020.5.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトポルフォビリノゲン脱アミノ酵素（ＰＢＧＤ）ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含むメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を含む脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、前記組成物が、単回静脈内投与としてそれを必要とする対象に投与される時に、
（ｉ）アミノレブリン酸（ＡＬＡ）の尿中排泄を、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは参照ＡＬＡ排泄レベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％低減させるのに十分である、
（ｉｉ）ポルフォビリノゲン（ＰＢＧ）の尿中排泄を、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは参照ＰＢＧ排泄レベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％低減させるのに十分である、及び／または
（ｉｉｉ）ポルフィリンの尿中排泄を、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは参照ポルフィリン排泄レベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％低減させるのに十分である、前記医薬組成物。
【請求項２】
ヒトＰＢＧＤポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡを含む脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、前記組成物が、単回静脈内投与としてそれを必要とする対象に投与される時に、
（ｉ）血清中アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）レベルを、投与後少なくとも２４時間以内、少なくとも４８時間以内、少なくとも７２時間以内、少なくとも９６時間以内、もしくは少なくとも１２０時間以内にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは対照標準である血清中ＡＬＴレベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも４０％、少なくとも３０％、少なくとも２０％、もしくは少なくとも１０％低減させるのに十分である、
（ｉｉ）血清中アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは対照標準である血清中ＡＳＴレベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも４０％、少なくとも３０％、少なくとも２０％、もしくは少なくとも１０％低減させるのに十分である、及び／または
（ｉｉｉ）血清中ビリルビンレベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、前記対象のベースラインレベルもしくは対照標準である血清中ビリルビンレベルと比較して、少なくとも５０％、少なくとも４０％、少なくとも３０％、少なくとも２０％、もしくは少なくとも１０％低減させるのに十分である、前記医薬組成物。
【請求項３】
ヒトＰＢＧＤポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡを含む脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、前記組成物が、単回静脈内投与としてそれを必要とする対象に投与される時に、
（ｉ）肝ＰＢＧＤ活性レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも９６時間、もしくは少なくとも１２０時間にわたって、参照生理学的肝ＰＢＧＤ活性レベルもしくは超生理学的レベル以上に増加させるのに十分である、及び／または
（ｉｉ）肝ＰＢＧＤ活性レベルを、投与後少なくとも２４時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、もしくは少なくとも９６時間にわたって、正常な肝ＰＢＧＤ活性レベルの５０％以上に維持する、前記医薬組成物。
【請求項４】
医薬組成物であって、
（ａ）ヒトＰＢＧＤポリペプチドをコードするＯＲＦを含むｍＲＮＡおよび（ｂ）送達剤を含む脂質ナノ粒子を含む医薬組成物であって、前記送達剤が、式（ＩＩ）を有する化合物
【化１】
2019519601.tif 000001
（ＩＩ）
またはその塩もしくは立体異性体であり、式中、
ｌは、１、２、３、４、及び５から選択され、
Ｍ１は、結合またはＭ’であり、
Ｒ４は、非置換Ｃ１−３アルキル、または−（ＣＨ２）ｎＱであり、式中、ｎは、２、３、もしくは４であり、Ｑは、ＯＨ、−ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｎ（Ｒ）Ｒ８、−ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであり、
Ｍ及びＭ’は独立に、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、
Ｒ２及びＲ３は独立に、Ｈ、Ｃ１−１４アルキル、及びＣ２−１４アルケニルからなる群から選択される、医薬組成物。
【請求項５】
前記化合物が、化合物１〜化合物２３２、それらの塩及び立体異性体、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記化合物が、化合物１８、その塩もしくは立体異性体、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記送達剤が、更に、リン脂質、構造脂質、およびＰＥＧ脂質を含む、請求項４〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
（ａ）前記リン脂質が、１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２−ジウンデカノイル−ｓｎ−グリセロホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（１８：０のジエーテルＰＣ）、１−オレオイル−２−コレステリルヘミスクシノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１−ヘキサデシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（Ｃ１６Ｌｙｓｏ  ＰＣ）、１，２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＭＥ  １６：０  ＰＥ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの任意の混合物からなる群から選択され、
（ｂ）前記構造脂質が、コレステロール、フェコステロール、シトステロール、エルゴステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、トマチジン、ウルソル酸、アルファ−トコフェロール、及びそれらの任意の混合物からなる群から選択される、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記ＯＲＦが、配列番号９〜３３、及び８９〜１１７からなる群から選択される配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％もしくは１００％の配列同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ｍＲＮＡであって、
（ｉ）５’末端キャップ、
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、
（ｉｉｉ）配列番号９〜３３、及び８９〜１１７からなる群から選択される配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％もしくは１００％の配列同一性を有する、ヒトＰＢＧＤポリペプチドをコードするＯＲＦ、
（ｉｖ）３’ＵＴＲ、及び
（ｖ）ポリＡ尾部、
を含むｍＲＮＡ。
【請求項１１】
前記ＯＲＦが、配列番号９〜３３、及び８９〜１１７からなる群から選択される配列に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％もしくは１００％の配列同一性を有する、請求項１０に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１２】
前記ＯＲＦが、配列番号９〜３３、及び８９〜１１７からなる群から選択される配列に対して１００％同一である、請求項１０に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１３】
ＯＲＦのウラシル含有量が、理論的最小含有量の約１０５％〜約１４５％、約１０５％〜約１４０％、約１１０％〜約１４０％、約１１０％〜約１４５％、約１１５％〜約１３５％、約１０５％〜約１３５％、約１１０％〜約１３５％、約１１５％〜約１４５％、または約１１５％〜約１４０％である、請求項１０に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１４】
５’ＵＴＲが、配列番号３９のヌクレオチド配列を含む、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１５】
３’ＵＴＲが、配列番号１４９、配列番号１５０、または配列番号１５１のヌクレオチド配列を含む、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１６】
前記ｍＲＮＡが、配列番号３５に示されるｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位を含む、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１７】
前記５’末端キャップが、Ｃａｐ１である、請求項１０〜１６のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１８】
前記ポリＡ尾部が、８０〜２５０残基長である、請求項１０〜１７のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項１９】
請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡを含む、医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡを含む、脂質ナノ粒子。
【請求項２１】
ヒト対象の急性間欠性ポルフィリン症（ＡＩＰ）の治療における使用のための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、あるいは請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２２】
ヒト対象のＡＩＰの徴候または症状の発症の予防または遅延における使用のための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、あるいは請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２３】
ヒト対象のＡＬＡ、ＰＢＧ、及び／またはポルフィリン尿中排泄レベルの低減化における使用のための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、あるいは請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。
【請求項２４】
ヒト対象のＡＬＴ、ＡＳＴ、及び／または血清中ビリルビンレベルの低減化における使用のための、請求項１〜９または１９のいずれか１項に記載の医薬組成物、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載のｍＲＮＡ、あるいは請求項２０に記載の脂質ナノ粒子。