【手続補正書】
【提出日】令和1年12月2日(2019.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キトサン、第１の多糖、および第２の多糖の混合物に由来する水吸収性で多孔質の溶解可能なスポンジを含む物品であって、第１の多糖および第２の多糖がキトサンと異なり、前記スポンジが、圧縮試験に従って、少なくとも２０ｇの湿潤圧縮強度または乾燥圧縮強度を示し、溶解試験に従って、１日以上の溶解速度を示すように、第１の多糖および第２の多糖が異なる数平均分子量特徴を有する、物品。
【請求項２】
（ａ）キトサン、第１の多糖および第２の多糖を混合して溶液を形成するステップであって、第１の多糖および第２の多糖が、キトサンと異なり、第１の多糖および第２の多糖が異なる数平均分子量特徴を有し、溶液が、２２５  １／ｓおよび２５℃で少なくとも０．０５Ｐａ／ｓの粘度を有する、ステップと、
（ｂ）溶液を凍結するステップと、
（ｃ）凍結した溶液を凍結乾燥して、水吸収性で多孔質の溶解可能なスポンジを形成するステップであって、前記スポンジが、圧縮試験に従って、少なくとも２０ｇの湿潤圧縮強度または乾燥圧縮強度を示し、溶解試験に従って、１日以上の溶解速度を示すように、第１の多糖および第２の多糖が異なる数平均分子量特徴を有する、ステップと
を含む方法。
【請求項３】
前記スポンジが、少なくとも部分的に水和している場合、接着力試験に従って、少なくとも２０ｇ以上の粘膜接着力を示し、圧縮試験に従って、少なくとも１００ｇの湿潤圧縮強度もしくは乾燥圧縮強度を示す、請求項１に記載の物品。
【請求項４】
前記スポンジが、少なくとも部分的に水和している場合、対数減少試験に従って、少なくとも４対数減少の２４時間〜１４日間の抗菌効果を有する、請求項１に記載の物品。
【請求項５】
第１の多糖、第２の多糖またはその両方が、セルロース、寒天、アルギネート、カラギーナン、セルロースキチン、コンドロイチン硫酸、デキストラン、ガラクトマンナン、グリコーゲン、ヒアルロン酸、デンプンまたはこれらの組合せを含む、請求項１に記載の物品。
【請求項６】
第１の多糖、第２の多糖またはその両方が、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、またはカルボキシメチルセルロースを含み、好ましくは、第１の多糖および第２の多糖が、ヒドロキシエチルセルロースを含む、請求項５に記載の物品。
【請求項７】
キトサンが、キトサン塩酸塩であり、第１の多糖および第２の多糖が、ヒドロキシエチルセルロースを含み、前記スポンジが、抗菌性である、請求項１に記載の物品。
【請求項８】
前記スポンジが、鼻ステントである、請求項１に記載の物品。
【請求項９】
前記スポンジが、非水性溶媒、酸、塩基、緩衝剤、抗菌剤、および治療剤をさらに含む、請求項１に記載の物品。
【請求項１０】
第１の多糖が１３０万以上の数平均分子量を有する、および第２の多糖が５００，０００〜１３０万未満の数平均分子量を有する、請求項１に記載の物品。
【請求項１１】
キトサンが、キトサン塩酸塩であり、第１の多糖および第２の多糖が、ヒドロキシエチルセルロースを含み、前記スポンジが、抗菌性である、請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記スポンジが、鼻ステントである、請求項２に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
[0025]キトサンは、開示された溶解可能なスポンジを形成するのに有用な成分の１つとして（第１の多糖および第２の多糖とともに）用いられる多糖である。キトサンは、キトサンの誘導体および修飾キトサンを含む。キトサンおよびその塩（クエン酸塩、硝酸塩、乳酸塩、リン酸塩、塩化物塩およびグルタミン酸塩を含む）の非限定的な例は、ＫｉｔｏＺｙｍｅ  Ｓ．Ａ．、Ｆｌｕｋａ  Ｃｈｅｍｉｅ  ＡＧ、ｔｈｅ  ＮｏｖａＭａｔｒｉｘ  ｕｎｉｔ  ｏｆ  ＦＭＣ  ＢｉｏＰｏｌｙｍｅｒ  ＡＳ、Ｈｅｐｐｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｈｉｔｏｓａｎ  ＧｍｂＨおよびＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．を含む様々な商業的供給源から得ることができる。また、キトサンは、加水分解によるキチン（ポリ−Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン）の脱アセチル化を介してＮ−アセチル基を除去することにより合成されてもよい。得られたオリゴマーまたはポリマーは、複数の繰り返し単位（例えば、約２〜約１００００繰り返し単位、約６０〜約６００繰り返し単位、または選択された最終用途で所望され得る当該の他の量）を有する。繰り返し単位の一部または全部は、脱アセチル化アミノ基を含有し（例えば、全繰り返し単位の約３０〜約１００％または約６０〜約１００％）、残りの繰り返し単位（もしあれば）は、アセチル化アミノ基を含有する。キトサンは、グルコサミンモノマーからなるカチオン性ポリマーであり、様々な数平均分子量、例えば、約４００〜約２０００ｋＤａ、約１０〜約５００ｋＤａ、または約１０〜約１００ｋＤａを有することができる。例えば、キトサンは、約５０ｋＤａ未満の数平均分子量を有する超低分子量材料、約５０〜約２００ｋＤａの数平均分子量を有する低分子量材料、約２００〜約５００ｋＤａの数平均分子量を有する中間分子量材料、または約５００ｋＤａ超の数平均分子量を有する高分子量材料であってよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
[0046]  実施例
[0047]溶解および圧縮試験：１２ｍｌ（Ｍｏｎｏｊｅｔ）シリンジのプランジャーを外し、キャップをシリンジのLUERTMコネクター端に配置する。８ｃｍのスポンジを半分に切断し、シリンジの開口端に配置し、スポンジを底まで押し下げる。次いで、リゾチーム（１ｇ／Ｌ）と共に１×ＰＢＳ溶液約８ｍｌをシリンジ／スポンジに添加し、スポンジを水和する。次いで、水和したスポンジを、試験まで３７℃のオーブンに入れる。この構成により、患者においてｉｎ  ｖｉｖｏで見られる界面に類似する空気／液界面が生成される。１０．２ｋｇのロードセルを、１２ｍｍのスペーサーブロックを用いて、ＭＴＳ機（ＭＴＳ、Ｅｄｅｎ  Ｐｒａｉｒｉｅ、ＭＮ）に取り付ける。プログラム試験速度を２．５４ｃｍ／ｍｉｎ（１インチ／ｍｉｎ）に設定し、次いで、上部圧縮プラテンがスペーサーブロックの上部にぴったり接触するまでそれを下げる（０ｇ力）。プラテンが所定の位置についたら、力および変位の両方をゼロにする。スポンジをシリンジからとり下部圧縮プラテン上に配置する。変位がゼロになるまで、上部プラテンを下方に調整する。スポンジは、上部圧縮プラテンに接触していてはならない。指定された試験速度率で自動プログラムを実行し、試料を１０ｍｍに圧縮する最大圧縮強度（ｇ）を記録する。経時的なスポンジの圧縮に必要とされる力は、スポンジの溶解時間（経時的な溶解）を表す。経時的に、スポンジは、圧縮強度なしで透明なゼリー様物質に次第に溶解するものとし、その時点で完全に溶解したとみなされる。行われる試験に応じて、スポンジを水で毎日洗浄して溶解の促進を補助してもよい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
[0048]乾燥圧縮試験は、上と同じ技術を用いて行われるが、スポンジを、試験前に水和せず、シリンジまたはリゾチーム溶液を使用しない。
[0049]接着力試験：８ｃｍのスポンジ１つを半分に切断し、各半分を個々のトレーに配置し、スポンジを水（８ｍｌ）で水和する。次いで、試料を、室温で終夜乾燥させる。次いで、黒の軟質ＯＯゴム半球（直径２インチ）を、ソーセージケーシングからのコラーゲンで覆い、ＭＴＳ機にいれる。表面の水分を試験前にペーパータオルで拭き取る。ペーパータオルで拭き取ることにより、スポンジ上の過剰な水を除去する。次いで、スポンジを下部球に配置し、そこで球およびスポンジを、０．４５ｋｇの力までＭＴＳ機で圧縮する。次いで、上部のコラーゲンで覆われた半球を下部半球上のスポンジから分離するのに必要とされる力（ｇ）の量を決定することにより、接着力を測定する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
[0058]実施例１０：治療剤を使用した溶解試験：治療剤を使用して、実施例１に従って製造したスポンジを水和し、スポンジを上に示した溶解試験に従って評価した。局所ステロイドであるトリアムシノロン（ステロイドであるケナログ４０中の有効成分）を使用して、上の実施例１に従って製造したスポンジを水和した。トリアムシノロンは、上に示した溶解試験用の水／食塩水と置き換わった。図３に示す結果は、スポンジが１４日以内に溶解したことを示している。さらに、図３は、洗浄液中に存在する薬物が、溶解時間にわたってスポンジに存在したままであり、経時的にスポンジから徐々に溶出することを示している。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
[0059]検証されたＨＰＬＣ法およびＺｏｒｂａｘ  Ｄｉｏｌ、ＰＮ８２０９５０−９１１、４．６×１２．５ｍｍ、４μｍガードカラムと共にＺｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８「Ａｇｉｌｅｎｔ」、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ４．６×１５０ｍｍ、５μｍ、ＰＮ９９３９６７−９０２、ＳＮ  ＵＳＫＨ０３１０２７カラムを用いて、平均薬物濃度を評価した。ＨＰＬＣ法は、試験濃度範囲（８８μｇ、４４μｇ、２２μｇ、１１μｇ、５．５μｇ、結果Ｒ２＝０．９９）にわたる直線性、各々結果Ｒ２＝０．９である、５つの異なる濃度の三連の繰り返し性、５つの濃度及び三連の（結果Ｒ２＝０．９）日内精度、８８μｇ／ｍｌ〜５．５μｇ／ｍｌ（標的投与量４０μｇ／ｍｌ）の試験範囲および８０％超の精度について検証された。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
本発明の態様
態様１
キトサン、１３０万以上の数平均分子量を有する第１の多糖、および５００，０００〜１３０万未満の数平均分子量を有する第２の多糖の混合物に由来する溶解可能なスポンジを含む物品であって、第１の多糖および第２の多糖が、キトサンと異なり、溶解可能なスポンジが、圧縮試験に従って、少なくとも２０ｇの湿潤圧縮強度または乾燥圧縮強度の１つまたは複数を示す、物品。
態様２
溶解可能なスポンジが、少なくとも部分的に水和している場合、粘膜接着性である、態様１に記載の物品。
態様３
溶解可能なスポンジが、接着力試験に従って、少なくとも２０ｇ以上の粘膜接着力を示す、態様２に記載の物品。
態様４
溶解可能なスポンジが、水和すると溶解し始める、態様１に記載の物品。
態様５
溶解可能なスポンジが、圧縮試験に従って、少なくとも１００ｇの湿潤圧縮強度もしくは乾燥圧縮強度の１つもしくは複数、または溶解試験に従って、１日以上の溶解速度を示す、態様１に記載の物品。
態様６
溶解可能なスポンジが、少なくとも部分的に水和している場合、対数減少試験に従って、少なくとも４対数減少の２４時間〜１４日間の抗菌効果を有する、態様１に記載の物品。
態様７
第１の多糖、第２の多糖またはその両方が、セルロース、寒天、アルギネート、カラギーナン、セルロース、キチン、コンドロイチン硫酸、デキストラン、ガラクトマンナン、グリコーゲン、ヒアルロン酸、デンプンまたはこれらの組合せを含む、態様１に記載の物品。
態様８
セルロースが、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、またはカルボキシメチルセルロースを含む、態様７に記載の物品。
態様９
第１の多糖および第２の多糖が、ヒドロキシエチルセルロースを含む、態様１に記載の物品。
態様１０
溶解可能なスポンジが、解剖学的ステントまたは鼻ステントである、態様１に記載の物品。
態様１１
鼻ステントが、洞腔内の組織の接着を防止する、態様１０に記載の物品。
態様１２
キトサンが、キトサン塩酸塩である、態様１に記載の物品。
態様１３
溶解可能なスポンジが、抗菌性である、態様１２に記載の物品。
態様１４
溶解可能なスポンジが、機械的溶解または化学的溶解により分解する、態様１に記載の物品。
態様１５
非水性溶媒、酸、塩基、緩衝剤、抗菌剤、治療剤および他のアジュバントをさらに含む、態様１に記載の物品。
態様１６
溶解可能なスポンジが、溶解および圧縮試験に従って決定された圧縮強度を示さなくなるまで、治療剤の少なくとも一部が、経時的に溶解可能なスポンジ中に存在する、態様１５に記載の物品。
態様１７
溶解可能なスポンジが、イオン化放射線により滅菌される、態様１に記載の物品。
態様１８
溶解可能なスポンジが、３０秒未満での水中での完全な水和、または流体吸収性試験に従ってその初期乾燥重量の１０倍超の流体吸収性の１つまたは複数を示す、態様１に記載の物品。
態様１９
スポンジが、約４〜約６の範囲のｐＨ値を有する、態様１に記載の物品。
態様２０
（ａ）キトサン、第１の多糖および第２の多糖を混合して溶液を形成するステップであって、第１の多糖が、１３０万以上の数平均分子量を有し、第２の多糖が、５００，０００〜１３０万未満の数平均分子量を有し、第１の多糖および第２の多糖が、キトサンと異なり、溶液が、２２５  １／ｓおよび２５℃で少なくとも０．０５Ｐａ／ｓの粘度を有する、ステップと、
（ｂ）溶液を凍結するステップと、
（ｃ）凍結した溶液を凍結乾燥してスポンジを形成するステップであって、スポンジが、圧縮試験に従って、少なくとも２０ｇの湿潤圧縮強度または乾燥圧縮強度の１つまたは複数を示す、ステップと
を含む方法。
態様２１
スポンジを密封パッケージに包装するステップと、パッケージ中のスポンジをイオン化放射線を使用して滅菌するステップとをさらに含む、態様２０に記載の方法。
態様２２
凍結前に溶液のｐＨを約４〜約６の範囲のｐＨに調整するステップをさらに含む、態様２０に記載の方法。
態様２２
第１の多糖および第２の多糖が、ヒドロキシエチルセルロースを含む、態様２０に記載の方法。
態様２３
イオン化放射線が、γ線、紫外線、Ｘ線またはＥビーム放射線を含む、態様２１に記載の方法。
態様２４
スポンジをパッケージから取り出すステップと、スポンジを水和して、粘膜接着性である柔軟なスポンジを形成するステップとをさらに含む、態様２１に記載の方法。
態様２５
スポンジが、接着力試験に従って、少なくとも２０ｇ以上の粘膜接着力を示す、態様２４に記載の方法。
態様２６
スポンジが、水和すると溶解可能である、態様２４に記載の方法。
態様２７
溶液が、０．５重量％以上の固体含有量を有する、態様２０に記載の方法。
態様２８
態様２０に記載の方法により製造された物品。
態様２９
粘膜組織に態様１に記載の溶解可能なスポンジを適用するステップを含む、粘膜組織を治療するための方法。
[0062]好ましい実施形態を説明する目的で、本明細書において特定の実施形態を例示および説明してきたが、当業者であれば、同様の目的を達成することが予想される、多種多様な代替のまたは均等な実施形態が、本発明の範囲から逸脱せずに示され、説明された特定の実施形態に置き換えられ得ることを理解されるであろう。本出願は、本明細書で考察した好ましい実施形態のいかなる改変または変形を包含することが意図される。したがって、本発明は、特許請求の範囲およびその均等物によってのみ制限されることが明白に意図される。