【手続補正書】
【提出日】令和1年12月13日(2019.12.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターであって、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸トランスフェラーゼ（ＧＮＰＴＡＢ）をコードする核酸および少なくとも１つのＡＡＶ逆位末端反復配列（ＩＴＲ）を含み、そして、場合により、ここで：
（ａ）該ＧＮＰＴＡＢは、アルファサブユニットおよびベータサブユニットを含む；
（ｂ）該ＧＮＰＴＡＢは、プロモーターと作動可能に連結されている；
（ｃ）該ＧＮＰＴＡＢは、ヒトＧＮＰＴＡＢである；
（ｄ）該ＧＮＰＴＡＢは、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または少なくとも約９５％同一であるアミノ酸配列を含む；
（ｅ）該ＧＮＰＴＡＢは、配列番号１のアミノ酸配列を含む；および／または
（ｆ）該ＡＡＶ末端反復配列は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ  ＤＪ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶまたはマウスＡＡＶ血清型ＩＴＲである；
前記ｒＡＡＶベクター。
【請求項２】
請求項１に記載のｒＡＡＶベクターであって、ここで、該ベクターは：
（ａ）ＣＭＶエンハンサー／ニワトリベータアクチン（ＣＢＡ）プロモーター、場合により、ここで：
（ｉ）該ＣＢＡプロモーターは、改変型ＣＢＡプロモーター、場合により、切断型ＣＢＡプロモーターである、および／もしくは
（ｉｉ）該ＣＭＶエンハンサーは、短縮型ＣＭＶエンハンサーである；
（ｂ）イントロン、場合により、ＭＶＭイントロン；
（ｃ）ポリアデニル化配列、場合により、ウシ成長ホルモンポリアデニル化配列；
ならびに／または
（ｄ）２つのＩＴＲ；
を含む、前記ｒＡＡＶベクター。
【請求項３】
請求項１または２に記載のｒＡＡＶベクターを含むｒＡＡＶ粒子であって、ここで、該ｒＡＡＶ粒子はキャプシドを含み、場合により、該ｒＡＡＶ粒子は：
（ａ）ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ２／２−７ｍ８、ＡＡＶ  ＤＪ、ＡＡＶ２  Ｎ５８７Ａ、ＡＡＶ２  Ｅ５４８Ａ、ＡＡＶ２  Ｎ７０８Ａ、ＡＡＶ  Ｖ７０８Ｋ、ヤギＡＡＶ、ＡＡＶ１／ＡＡＶ２キメラ、ウシＡＡＶ、マウスＡＡＶまたはｒＡＡＶ２／ＨＢｏＶ１血清型キャプシド；および／または
（ｂ）（１）同じＡＡＶ血清型に由来する少なくとも１つのＩＴＲおよびキャプシド、もしくは
（２）該ｒＡＡＶウイルス粒子のキャプシドとは異なるＡＡＶ血清型に由来する少なくとも１つのＩＴＲ、場合により、該ｒＡＡＶウイルス粒子は、ＡＡＶ８キャプシドおよびＡＡＶ２  ＩＴＲを含む、
前記ｒＡＡＶ粒子。
【請求項４】
請求項３に記載のｒＡＡＶ粒子であって、該ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターをコードする核酸ならびにＡＡＶ  ｒｅｐ機能およびｃａｐ機能をコードする核酸を、宿主細胞にトランスフェクトすること、ならびにＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を提供することによって産生され、場合により、ここで、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を、宿主細胞にトランスフェクトすることによって提供され、または、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能を提供するＡＡＶヘルパーウイルスを宿主細胞に感染させることによって提供され、場合により、該ＡＡＶヘルパーウイルスは、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、
前記ｒＡＡＶ粒子。
【請求項５】
請求項３に記載のｒＡＡＶ粒子であって、該ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターをコードする核酸ならびにＡＡＶ  ｒｅｐ機能およびｃａｐ機能をコードする核酸を含むＡＡＶ産生細胞によって産生され、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を提供し、場合により、ここで、該ＡＡＶ産生細胞は、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を含む、または、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能を提供するＡＡＶヘルパーウイルスをＡＡＶ産生細胞に感染させることによって提供され、場合により、該ＡＡＶヘルパーウイルスは、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、
前記ｒＡＡＶ粒子。
【請求項６】
請求項３〜５のいずれか１項に記載のｒＡＡＶ粒子を含む医薬組成物。
【請求項７】
哺乳動物におけるムコリピドーシスＩＩ型（ＭＬ  ＩＩ）またはムコリピドーシスＩＩＩ型（ＭＬ  ＩＩＩ）を治療するために使用する、請求項６に記載の医薬組成物であって、場合により、ここで、該治療は、ＭＬ  ＩＩもしくはＭＬ  ＩＩＩの１つまたはそれ以上の症状を緩和し、または進行を遅延させ、ここで、該ＭＬ  ＩＩもしくはＭＬ  ＩＩＩの１つまたはそれ以上の症状は、骨格異常、認知障害、粗大および微細運動能力の発達の遅延、難聴、筋緊張の欠如、膨隆した腹部、臍ヘルニア、気道の進行性粘膜肥厚、頻繁な呼吸器感染、僧帽弁の肥厚および機能不全、便秘または下痢である、前記医薬組成物。
【請求項８】
ムコリピドーシスＩＩ型（ＭＬ  ＩＩ）またはムコリピドーシスＩＩＩ型（ＭＬ  ＩＩＩ）を有する哺乳動物の、身体のサイズ、骨塩量、または骨密度を、維持し、その減少を防止し、または増加させるために使用する、請求項６に記載の医薬組成物であって、ここ
で、該ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターを含み、該ｒＡＡＶベクターは、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸トランスフェラーゼ（ＧＮＰＴＡＢ）をコードする核酸および少なくとも１つのＡＡＶ  ＩＴＲを含み、該ＧＮＰＴＡＢの発現は、体重増加の維持、減少の防止、もしくは増加、身長の維持もしくは増加、および／または、骨塩量もしくは骨密度の維持、減少の防止、もしくは増加をもたらす、前記医薬組成物。
【請求項９】
哺乳動物におけるＭＬ  ＩＩもしくはＭＬ  ＩＩＩの１つまたはそれ以上の症状を緩和し、または進行を遅延させるために使用する、請求項６に記載の医薬組成物であって、ここで、該ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターを含み、該ｒＡＡＶベクターは、ＧＮＰＴＡＢをコードする核酸および少なくとも１つのＡＡＶ  ＩＴＲを含み；該ＭＬ  ＩＩもしくはＭＬ  ＩＩＩの１つまたはそれ以上の症状は、骨格異常、認知障害、粗大および微細運動能力の発達の遅延、難聴、筋緊張の欠如、膨隆した腹部、臍ヘルニア、気道の進行性粘膜肥厚、頻繁な呼吸器感染、僧帽弁の肥厚および機能不全、便秘または下痢である、前記医薬組成物。
【請求項１０】
請求項７〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、ここで：
（ａ）ＧＮＰＴＡＢは、プロモーターと作動可能に連結されている；
（ｂ）ＧＮＰＴＡＢは、ヒトＧＮＰＴＡＢである；
（ｃ）ＧＮＰＴＡＢは、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも約８０％同一であるアミノ酸配列を含む；
（ｄ）ＧＮＰＴＡＢは、配列番号１のアミノ酸配列を含む；および／または
（ｅ）ＡＡＶ末端反復配列は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ  ＤＪ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶまたはマウスＡＡＶ血清型ＩＴＲである；
前記医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の医薬組成物であって、ベクターは：
（ａ）ＣＭＶエンハンサー／ニワトリベータアクチン（ＣＢＡ）プロモーター、場合により、ここで：
（ｉ）該ＣＢＡプロモーターは、改変型ＣＢＡプロモーター、場合により、切断型ＣＢＡプロモーターである、および／もしくは
（ｉｉ）該ＣＭＶエンハンサーは、短縮型ＣＭＶエンハンサーである；
（ｂ）イントロン、場合により、ＭＶＭイントロン；
（ｃ）ポリアデニル化配列、場合により、ウシ成長ホルモンポリアデニル化配列；
ならびに／または
（ｄ）２つのＩＴＲ；
を含む、前記医薬組成物。
【請求項１２】
請求項７〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、ここで、ｒＡＡＶ粒子は、キャプシドを含み、場合により、該ｒＡＡＶ粒子は：
（ａ）ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ２／２−７ｍ８、ＡＡＶ  ＤＪ、ＡＡＶ２  Ｎ５８７Ａ、ＡＡＶ２  Ｅ５４８Ａ、ＡＡＶ２  Ｎ７０８Ａ、ＡＡＶ  Ｖ７０８Ｋ、ヤギＡＡＶ、ＡＡＶ１／ＡＡＶ２キメラ、ウシＡＡＶ、マウスＡＡＶまたはｒＡＡＶ２／ＨＢｏＶ１血清型キャプシド；および／または
（ｂ）（１）同じＡＡＶ血清型に由来する少なくとも１つのＩＴＲおよびキャプシド、もしくは
（２）該ｒＡＡＶウイルス粒子のキャプシドとは異なるＡＡＶ血清型に由来する少な
くとも１つのＩＴＲ、場合により、該ｒＡＡＶウイルス粒子は、ＡＡＶ８キャプシドおよびＡＡＶ２  ＩＴＲを含む、
前記医薬組成物。
【請求項１３】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、ここで、ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターをコードする核酸ならびにＡＡＶ  ｒｅｐ機能およびｃａｐ機能をコードする核酸を、宿主細胞にトランスフェクトすること、ならびにＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を提供することによって産生され、場合により、ここで、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を、宿主細胞にトランスフェクトすることによって提供され、または、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能を提供するＡＡＶヘルパーウイルスを宿主細胞に感染させることによって提供され、場合により、該ＡＡＶヘルパーウイルスは、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、前記医薬組成物。
【請求項１４】
請求項７〜１３のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、ここで、ｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶベクターをコードする核酸ならびにＡＡＶ  ｒｅｐ機能およびｃａｐ機能をコードする核酸を含むＡＡＶ産生細胞によって産生され、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を提供し、場合により、ここで、該ＡＡＶ産生細胞は、ＡＡＶヘルパー機能をコードする核酸を含む、または、該ＡＡＶヘルパー機能は、ＡＡＶヘルパー機能を提供するＡＡＶヘルパーウイルスをＡＡＶ産生細胞に感染させることによって提供され、場合により、該ＡＡＶヘルパーウイルスは、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、前記医薬組成物。
【請求項１５】
哺乳動物は、ヒトであり、場合により、小児の対象、または若年成人である、
請求項７〜１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項７〜１５のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、ここで：
（ａ）ｒＡＡＶ粒子は、静脈内、腹腔内、動脈内、筋肉内、皮下または肝臓内に投与される；
（ｂ）ｒＡＡＶ粒子は、２つ以上の場所に投与される；
（ｃ）投与は、繰り返される；および／または
（ｄ）ｒＡＡＶウイルス粒子は、医薬組成物中にある；
前記医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１または２に記載のｒＡＡＶベクター、請求項３〜５のいずれか１項に記載のｒＡＡＶ粒子、または請求項６に記載の医薬組成物、を含むキットであって、場合により、１つもしくはそれ以上の緩衝液もしくは薬学的に許容される賦形剤、ならびに／または、ＭＬ  ＩＩおよび／もしくはＭＬ  ＩＩＩの治療における使用のための説明書をさらに含む、前記キット。
【請求項１８】
ムコリピドーシスＩＩ（ＭＬ  ＩＩ）の動物モデルを生成させる方法であって、該動物のＧＮＰＴＡＢ遺伝子の少なくとも１つのアレルにおいて、エクソン１２およびエクソン２０の間に欠失を導入することを含み、場合により、ここで、該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子の少なくとも１つのアレルは、エクソン１２およびエクソン２０にまたがる欠失を含み、ならびに／または、該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子の一部は、レポーターおよび／もしくは選択的マーカーをコードする遺伝子によって置き換えられており、場合により、該選択的マーカーは、ネオマイシンに対する耐性を付与し、さらに、場合により、ここで、該動物は：
（ａ）該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子中の欠失についてホモ接合性となるように掛け合わされる；（ｂ）該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子中の欠失についてヘテロ接合性となるように掛け合わされる；ならびに／または
（ｃ）哺乳動物、場合によりげっ歯類、場合によりマウスであり、さらに場合により該マウスは、１２９／Ｓｖおよび／もしくはＣ５７Ｂｌ／６に由来する遺伝的背景を有する；前記方法。
【請求項１９】
ムコリピドーシスＩＩ（ＭＬ  ＩＩ）の動物モデル、場合により請求項１８に記載の方法で作成された動物モデルであって、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸トランスフェラーゼ（ＧＮＰＴＡＢ）遺伝子の少なくとも１つのアレルは、エクソン１２およびエクソン２０の間に位置する欠失を含み、場合により、ここで、該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子の少なくとも１つのアレルは、エクソン１２およびエクソン２０にまたがる欠失を含み、ならびに／または、該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子の一部は、レポーターおよび／もしくは選択的マーカーをコードする遺伝子によって置き換えられており、場合により、該選択的マーカーは、ネオマイシンに対する耐性を付与し、さらに、場合により、ここで、該動物は：
（ａ）該ＧＮＰＴＡＢ遺伝子中の欠失についてホモ接合性またはヘテロ接合性であり；ならびに／または
（ｂ）哺乳動物、場合によりげっ歯類、場合によりマウスであり、さらに場合により該マウスは、１２９／Ｓｖおよび／もしくはＣ５７Ｂｌ／６に由来する遺伝的背景を有する；前記動物モデル。
【請求項２０】
ムコリピドーシスＩＩ（ＭＬ  ＩＩ）の治療のための薬剤を評価するための方法であって、請求項１９に記載の動物モデルに、該薬剤、場合により小分子、ポリペプチド、抗体、核酸または組換えウイルス粒子、を投与することを含み、ここで、ＭＬ  ＩＩの１つまたはそれ以上の症状の緩和は、該薬剤がＭＬ  ＩＩの有益な治療を提供することを示し、場合により、ここで、該ＭＬ  ＩＩの症状は、体重の減少、骨密度の減少、骨塩量の減少、骨格異常、認知障害、粗大および微細運動能力の発達の遅延、難聴、筋緊張の欠如、膨隆した腹部、臍ヘルニア、気道の進行性粘膜肥厚、頻繁な呼吸器感染、僧帽弁の肥厚および機能不全、便秘ならびに／または下痢である、前記方法。