【手続補正書】
【提出日】令和1年12月11日(2019.12.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞内に１以上の鉄結合タンパク質と薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識との複合体を含む、CD45+リンパ球、CD45+顆粒球、CD45+単球および／またはCD45+単球-マクロファージ、（以下、「CD45+白血球細胞」という）を含む単離された標的化送達系。
【請求項２】
１以上の標識、または放射性標識またはそれらの結合体および組み合わせを含むCD45+白血球細胞を含む単離された標的化送達系。
【請求項３】
CD45+白血球細胞がCD34+造血前駆細胞から産生され得る、請求項１または２に記載の単離された標的化送達系。
【請求項４】
(i)  リンパ球は、CD3+およびCD4+またはCD8+ Tリンパ球、またはCD19+、CD20+、CD21+、CD19+ CD20+、CD19+CD21+、CD20+CD21+、もしくはCD19+ CD20+CD21+ Bリンパ球、またはナチュラルキラー（NK）細胞からなる群から選択され、
(ii)  顆粒球は、好中球、もしくはCD66 b+好中球、好酸球および好塩基球、もしくはCD193+好酸球からなる群より選択され、
(iii)  単球は、CD11b+単球であり、もしくは、CD11b+ CD14+単球、CD11b+CD16+単球、CD11b+ CD14+CD16+単球、CD11b+ CD14+MHCII+単球、CD11b+ CD14+CD115+単球、CD11b+ CD114+単球、CD11b+CD116+単球、CD11b+CCR1+単球、CD11b+ CCR2+単球、CD11b+CX3CR+単球、CD11b+CXR4+単球、CD11b+ CXR6+単球およびCD11b+CD14+ CD33+単球からなる群から選択されるが、
単球はIFN調節因子8（IRF8）、核因子インターロイキン（IL）-3調節タンパク質（NFIL3）、塩基性ロイシンジッパー転写因子ATF様3（BATF3）または転写因子RelB（NF-KBサブユニット）-RELB、Spi-1プロトオンコジーン（PU/1）、組換え結合タンパク質サプレッサーオブヘアレス（RBPJ）、IFN調節因子4（IRF4）または転写因子E2-2（TCF4としても知られる）の転写因子によって分化が制御される樹状細胞ではなく、
(iv)  分化した単球は、マクロファージ、活性化マクロファージ、もしくはCD11 b+マクロファージ、もしくはCD11b+ CD16+マクロファージ、CD11b+CD32+マクロファージ、CD11b+ CD64+マクロファージ、CD11b+CD68+マクロファージ、もしくは、CD11b+ CD86+M1マクロファージ、またはiNOSを産生するマクロファージ、 および／または分泌性インターロイキン12（IL-12）を産生するマクロファージまたはCD11b+CCR2+ M2マクロファージ、CD11b+CD204+M2マクロファージ、CD11b+ CD206+M2マクロファージ、CD11b+ CD204+ CD206+M2マクロファージ、CD11b+主要組織適合性複合体II+（MHC II+）（低発現または高発現）M2マクロファージ、CD11b+ CD200R+M2マクロファージ、CD11b+ CD163+ M2マクロファージ、またはアルギナーゼおよび／またはインターロイキン10（IL-10）を産生および／または分泌する活性化マクロファージからなる群から選択され、分化した単球-マクロファージは、Lox1+、CXCR7+およびNRF2+を発現する泡沫細胞ではなく、または、
(v)  単球マクロファージまたは活性化単球マクロファージは、少なくとも1つのケモカイン受容体、もしくはCCR1、CCR2+、CXCR4+、およびCXCR6+からなる群から選択されるケモカイン受容体、または少なくとも１つの増殖因子受容体、もしくはマクロファージコロニー刺激因子受容体（CD115）、顆粒球コロニー刺激因子受容体（CD114）、および顆粒球マクロファージコロニー刺激因子受容体（CD116およびCD131からなる）からなる群から選択される増殖因子受容体を発現し、これらの特徴の単球は、炎症状態および癌を治療するのに適しており、
任意の単球-マクロファージは、
a.  CD34+造血前駆細胞から産生される、
b.  少なくとも１つの誘導因子、またはＭ１もしくはＭ２誘導因子、または少なくとも１つのＭ２誘導因子、と単球／単球−マクロファージをインビトロでインキュベートすることによって産生でき、または、Ｍ１誘導因子と単球／単球−マクロファージをインビトロでインキュベートすることによって産生できるものであって、Ｍ１誘導因子はＬＰＳ、INF-γならびにウイルス感染および細菌感染からなる群から選択され、またはM2誘導因子と単球／単球−マクロファージをインビトロでインキュベートすることによって産生できるものであって、M2誘導因子は、IL-4、IL-10、IL-13、抗原と抗体の免疫複合体、ＩｇＧ、熱活性化ガンマ−グロブリン、糖質コルチコイド、TGF-β、IL-1R、CCL-2、IL-6、M-CSF、PPARγアゴニスト、白血球抑制因子、アデノシンまたは蠕虫感染および真菌感染からなる群から選択され、
c.  以下の抗原のうち少なくとも１つの発現によって特徴付けられる：TfR+、CD163+、TIM-2+、CD14+、CD16+、CD33+、および／またはCD115+
d.  以下の抗原のうち少なくとも１つの発現によって特徴付けられる：TfR+、CD163+、TIM-2+、CXCR4+、CD14+、および／またはCD16+、および／または
e.  貪食作用する能力を有する、
ものである、請求項３に記載の単離された標的化送達系。
【請求項５】
リンパ球は、
(i)  血液、脾臓、または骨髄から入手可能であるか、またはCD34+前駆細胞から生産可能である、
(ii)  免疫学的に能力のあるリンパ球である、
(iii)  抗原特異的T細胞受容体を発現する、および／または
(iv)  以下の抗原のうち少なくとも1つの発現によって特徴付けられる： (a) CD3+ および CD4+ または CD8+、または (b): CD19+、CD20+、CD21+、CD19+ CD20+、CD19+CD21+、CD20+ CD21+、またはCD19+ CD20+ CD21+ 抗原、およびまたは免疫グロブリンを産生可能である、
請求項４に記載の単離された標的化送達系。
【請求項６】
顆粒球は、
(i)  血液、脾臓または骨髄から得ることが可能であるか、または、CD34+前駆細胞から生産可能である、
(ii)  以下のCD66b+および／またはCD193+の少なくとも１つの発現によって特徴づけられる、
(iii)  その細胞質中に顆粒が存在することを特徴とする多形核白血球である、および／または
(iv)  以下のTfR+、CD163+、TIM-2+、および／またはCXCR4+の少なくとも１つの発現によって特徴づけられる、
請求項４に記載の単離された標的化送達系。
【請求項７】
NK細胞は、
(i)  血液、脾臓または骨髄から得ることが可能であるか、またはCD34+前駆細胞から産生可能であるか、および／または
(ii)  CD3発現の欠失および以下のCD56+および／またはCD94+、CD158a+ CD158f+CD314+CD335+の少なくとも１つの発現によって特徴づけられる、
請求項４に記載の単離された標的化送達系。
【請求項８】
活性化マクロファージは、
(i)  単球またはマクロファージを、マクロファージ上の発現マーカーを変更することができる因子でインビトロでインキュベートすることによって産生され得るものであり、または、単球またはマクロファージを、マクロファージ上の発現マーカーを変更することができる因子でインビトロでインキュベートすることによって産生され得るものであって、
(a)  少なくとも１つのM1誘導因子で、M1誘導因子は、ＬＰＳ、INF-γならびにウイルス感染および細菌感染からなる群から選択され、
(b)  少なくとも１つのM2誘導因子で、M2誘導因子は、IL-4、IL-10、IL-13、抗原と抗体の免疫複合体、ＩｇＧ、熱活性化ガンマ−グロブリン、糖質コルチコイド、TGF-β、IL-1R、CCL-2、IL-6、M-CSF、PPARγアゴニスト、白血球抑制因子、アデノシンおよび蠕虫感染および真菌感染からなる群から選択され、
(c)  またはサイトカイン、もしくはIL-10およびIL-12、ケモカインを分泌するマクロファージの能力、および/またはiNOS、アルギナーゼまたは他の免疫調節酵素を産生するマクロファージの能力を変化させることができる因子で、
(ii)  以下の抗原：CD64、CD86、CD16、CD32、MHCIIの高発現、および／またはiNOSおよび／またはIL-12の産生の少なくとも1つの発現を特徴とする、
(iii)  マクロファージの貪食能を誘導することができる因子との単球またはマクロファージのインビトロインキュベーションによって産生される、
(iv)  以下の抗原の少なくとも１つの発現によって特徴づけられる：CD204、CD206、CD200R；CCR2、トランスフェリン受容体 (TfR)、CXC-モチーフケモカイン受容体4 (CXCR4)、CD163、および／またはＴ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン2(TIM-2)、および／またはMHCIIの低発現を示す、
(v)  貪食する能力を有する；および／または
(vi)  サイトカイン分泌、もしくはIL-12もしくはIL-10の分泌、または誘導型一酸化窒素合成酵素（iNOS）（もしくは他の前炎症性化合物）、アルギナーゼまたは他の免疫抑制性／抗炎症性化合物の産生が可能である、
請求項４に記載の単離された標的化送達系。
【請求項９】
鉄結合タンパク質は、フェリチン、もしくは重（Ｈ）型フェリチン、軽（Ｌ）フェリチンおよび／またはミトコンドリアフェリチン；ヘモグロビン、もしくはヘモグロビンＡ、ヘモグロビンＡＳ、ヘモグロビンＳＣ、ヘモグロビンＣ、ヘモグロビンＤ、ヘモグロビンＥ、ヘモグロビンＦ、ヘモグロビンＨ；ヘモグロビン−ハプトグロビン複合体、ヘモペキシン、トランスフェリン；およびラクトフェリンからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系。
【請求項１０】
薬学的に活性な物質は、タンパク質、核酸、１．５ｋＤ未満の分子量を有する非タンパク質非核酸化合物、もしくは抗癌剤、もしくは細胞分裂阻害薬、細胞毒性剤およびそれらのプロドラッグ；抗動脈硬化薬；および抗炎症薬；光感作化合物；ウイルス、もしくは腫瘍溶解性ウイルス；および細胞に損傷を与える量のγ線を放射もするα線またはβ線を放射する放射性同位体、もしくは、ルテチウム−１７７、イッテルビウム−９０、ヨウ素−１３１、サマリウム−１５３、リン−３２、セシウム−１３１、パラジウム−１０３、ラジウム−２３３、ヨウ素−１２５、およびホウ素−１０からなる群から選択される、または細胞に損傷を与える量のα線を放射する放射性同位体、もしくはアクチニウム２２５、ビスマス２１３、鉛２１２、およびポロニウム２１２からなる群から選択される、またはナノ粒子に結合した上記化合物または同位体の複合体である、任意の
（i）抗癌薬は、アポトーシス誘導薬、アルキル化物質、代謝拮抗剤、抗生物質、エポチロン、核内受容体アゴニストおよびアンタゴニスト、抗アンドロゲン、抗エストロゲン、白金化合物、ホルモン、抗ホルモン、インターフェロン、細胞周期依存性プロテインキナーゼ（CDK）の阻害剤、シクロオキシゲナーゼおよび／またはリポキシゲナーゼの阻害剤、生体脂肪酸、プロスタノイドおよびロイコトリエンを含む生体脂肪酸誘導体、プロテインキナーゼ阻害剤、プロテインホスファターゼ阻害剤、脂質キナーゼ阻害剤、白金配位錯体、エチレンイミン、メチルメラミン、トリアジン、ビンカアルカロイド、ピリミジン類似体、プリン類似体、アルキルスルホン酸塩、葉酸類似体、アントラセンジオン、置換尿素、およびメチルヒドラジン誘導体、エン-ジイン抗生物質、メイタンシノイド、オーリスタチン誘導体、免疫チェックポイント阻害剤、および腫瘍特異的タンパク質またはマーカーの阻害剤、もしくはＲｈｏ−ＧＤＰ解離阻害剤、もしくはＧｒｐ９４、またはＡＸＬ阻害剤からなる群から選択され、
（ii）抗癌薬は、アセジアスルホン、アクラルルビシン、アンバゾン、アミノグルテチミド、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン、バノキサントロン、ベンダムスチン、ブレオマイシン、ブスルファン、フォリン酸カルシウム、カルボプラチン、カルペシタビン、カルムスチン、セレコキシブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダプソン、ダウノルビシン、ジブロムプロパミジン、ジエチルスチルベストロール、ドセタキセル、ドキソルビシン、エンジイン、エピルビシン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、エストラムシンホスフェート、エストロゲン、エチニルエストラジオール、エトポシド、フラボピリドール、フロキスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミドホスフェストロール、フラゾリドン、ゲムシタビン、ゴナドトロピン放出ホルモン類似体、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシメチルニトロフラントイン、ヒドロキシプロゲステロンカプロート、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イドクスウリジン、イホスファミド、インターフェロンα、イリノテカン、ロイプロリド、ロムスチン、ルルトテカン、硫酸マフェニドオラミド、メクロレタミン、酢酸メドロキシプロゲステロン、メガストロアセテート、メルファラン、メパクリン、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトロニダゾール、マイトマイシンＣ、ミトポドジド、ミトタン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、ナリジクス酸、ニフラテル、ニフロキサジド、ニフララジン、ニフルチモックス、ニムスチン、ニノラゾール、ニトロフラントイン、ニトロジェンマスタード、オレオムチン、オキソリン酸、ペンタミジン、ペントスタチン、フェナゾピリジン、フタルスルファチアゾール、ピポブロマン、プレドニムスチン、プレドニゾン、プレシン、プロカルバジン、ピリメタミン、ラルチトレックスド（raltitrexed）、ラパマイシン、ロフェコキシブ、ロシグリタゾン、サラゾスルファピリジン、スクリフラビニウムクロライド（scriflavinium chloride）、セムスチン、ストレプトゾシン、スルファカルバミド、スルファセタミド、スルファクロピリダジン、スルファジアジン、スルファジクラミド、スルファジメトキシン、スルファエチドール、スルファフラゾール、スルファグアニジン、スルファグアノール、スルファメチゾール、スルファメトキサゾール、コ-トリモキサゾール、スルファメトキシジアジン、スルファメトキシピリダジン、スルファモキソール、スルファニルアミド、スルファペリン、スルファフェナゾール、スルファチアゾール、スルフイソミジン、スタウロスポリン、タモキシフェン、タキソール、テニポシド、ターチポシド、テストラクトン、テストステロンプロピオネート、チオグアニン、チオテパ、チニダゾール、トポテカン、トリアジコン、トレオスルファン、トリメトプリム、トロホスファミド、UCN-01、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンブラスチン、ビノレルビン、およびゾルビシンからなる群から選択され、または、アウリスタチン、バノキサントロン、ベンダムスチン、クロラムブシル、チャリセアマイシン（chaliceamycin）、ダイナマイシンＡ、メイタンシン、メルファラン、メルタンシン、およびネオカジノスタチンからなる群から選択され、
（iii）免疫調節薬は、免疫細胞の活性を活性化または阻害し、または、免疫調節薬は、リガンドもしくはパターン認識受容体、もしくはＴｏｌｌ様受容体、ＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）、ＲＩＧ−１様受容体（ＲＬＲ）のアンタゴニストであり、
（iv）抗癌薬は、増殖阻害タンパク質、または細胞周期阻害剤、または増殖促進タンパク質に特異的に結合する抗体もしくは抗体様結合タンパク質または、増殖促進タンパク質またはｓｉＲＮＡもしくはＤＮＡザイムに特異的に結合する抗体または抗体様結合タンパク質、もしくは抗体様結合タンパク質をコードする核酸であり、
（v）薬学的に活性な物質は、低酸素活性化プロドラッグであり、もしくはベンゾトリアジンＮ−オキシド、アパジコン（EO9）、チラパザミン（TPN）、SN30000、PR-104A、TH-302、TH-4000、AQ4Nからなる群から選択され、または、
（vi）薬学的に活性な物質は、抗原または抗原をコードする核酸である、
請求項１〜９のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系。
【請求項１１】
標識は、
（i）蛍光染料、蛍光発光同位体、放射性同位体、検出可能なポリペプチド、または検出可能なポリペプチドをコードする核酸および造影剤からなる群から選択され、または造影剤は、Gd、Eu、WおよびMnから選択される常磁性剤、もしくはGd、Eu、WおよびMnから選択される常磁性剤であって、フェリハイドライドを含む、または、
（ii）二価もしくは三価の金属カチオンと錯体を形成するキレート剤を含む、または、キレート剤は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ，Ｎ’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン-１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、トリエチレンテトラミン（ＴＥＴＡ）、イミノ二酢酸、ジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’−ペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）および６−ヒドラジノピリジン−３−カルボン酸（HYNIC）からなる群から選択される、
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系。
【請求項１２】
（i）放射性同位体／蛍光放出同位体は、アルファ線放出同位体、ガンマ線放出同位体、オージェ電子放出同位体、Ｘ線放出同位体、蛍光同位体、例えば 65Tb、蛍光放出同位体、例えば18F、51Cr、67Ga、68Ga、89Zr、111In、99mTc、140La、175Yb、153Sm、166Ho、88Y、90Y、149Pm、177Lu、47Sc、142Pr、159Gd、212Bi、72As、72Se、97Ru、109Pd、105Rh、101m15Rh、119Sb、128Ba、123I、124I、131I、197Hg、211At、169Eu、203Pb、212Pb、64Cu、67Cu、188Re、186Re、198Auおよび199Agならびに、タンパク質、ペプチド、小分子阻害剤、抗体または他の化合物と上記との結合体および組み合わせからなる群から選択され、
（ii）蛍光染料は、以下のクラスの蛍光染料からなる群から選択される：キサンテン、アクリジン、オキサジン、シニン、スチリル染料、クマリン、ポルフィン、金属−配位子−錯体、蛍光タンパク質、ナノクリスタル、ペリレンおよびフタロシアニンならびにこれらの種類の染料の結合体および組合せ、または、
（iii）検出可能なポリペプチドは、自己蛍光タンパク質、もしくは緑色蛍光タンパク質、または改変された吸着および／または発光スペクトルを有するその任意の構造的変異体である、
請求項１１に記載の単離された標的化送達系。
【請求項１３】
（ｉ）  複合体中に含まれる鉄結合タンパク質と薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識との間の結合は共有結合および／または非共有結合である、および／または
（ｉｉ）  複合体中に含まれる薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識は鉄結合タンパク質またはその多量体によって捕捉／封入されている、
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系。
【請求項１４】
ａ）  精製された鉄結合タンパク質を提供すること、
ｂ）  薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識を共有結合的または非共有結合的に連結し、および／または、薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識を鉄結合タンパク質中に封入すること、
ｃ）  CD45+白血球細胞を提供すること、および
ｄ１）  鉄結合タンパク質と、工程ｂ）で産生された薬学的に活性な物質、標識または薬学的に活性な物質と標識の複合体がCD45+白血球細胞に少なくとも部分的に負荷されるまで、工程ｂ）で産生した鉄結合タンパク質の存在下でCD45+白血球細胞をインキュベートすること、および／または
ｄ２）  CD45+白血球細胞が少なくとも部分的に標識で標識されるまで、標識の存在下でCD45+白血球細胞をインキュベートすること、
の工程を含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系の製造方法。
【請求項１５】
医薬または診断剤の製造に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系または請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系または請求項１４に記載の方法によって産生可能な単離された標的化送達系と薬学的に許容される担体および／または適切な賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１７】
腫瘍、もしくは固形腫瘍および／またはその転移、もしくは乳がん、膵臓がん、膀胱がん、肺がん、大腸がん、または、低酸素領域を有する腫瘍、炎症性疾患または虚血領域、または皮膚創傷または臓器梗塞（心臓）または虚血性網膜の後の虚血領域の予防、治療もしくは診断に使用するための、または予防的または治療的ワクチン接種のための、感染性疾患もしくは癌を予防または治療するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の単離された標的化送達系または請求項１４に記載の方法によって産生可能な単離された標的化送達系。