【手続補正書】
【提出日】令和1年12月12日(2019.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
同じウイルス種の3つ以上の臨床分離株のパネルの、2つ以上の腫瘍細胞株の腫瘍細胞を死滅させる能力をインビトロで比較し、2つ以上の腫瘍細胞株を、前記パネル中の1つ以上の参照臨床分離株よりもインビトロで迅速に及び/又は低用量で死滅させることができる臨床分離株を選択することによって選択された臨床分離株であるか、又はそれに由来する、腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項２】
(a)改変された臨床分離株、
(b)単純ヘルペスウイルス(HSV)、
(c)HSV1、及び/又は
(d)臨床分離株HSV1の、
受託番号ECCAC16121904を有するRH018A株、
受託番号ECCAC16121902を有するRH004A株、
受託番号ECCAC16121907を有するRH031A株、
受託番号ECCAC16121908を有するRH040B株、
受託番号ECCAC16121903を有するRH015A株、
受託番号ECCAC16121905を有するRH021A株、
受託番号ECCAC16121906を有するRH023A株、又は
受託番号ECCAC16121909を有するRH047A株
である、請求項1に記載のウイルス。
【請求項３】
受託番号ECCAC16121904を有するRH018A株である、請求項2に記載のウイルス。
【請求項４】
臨床分離株が改変された臨床分離株であり、臨床分離株がHSV1の、
受託番号ECCAC16121904を有するRH018A株、
受託番号ECCAC16121902を有するRH004A株、
受託番号ECCAC16121907を有するRH031A株、
受託番号ECCAC16121908を有するRH040B株、
受託番号ECCAC16121903を有するRH015A株、
受託番号ECCAC16121905を有するRH021A株、
受託番号ECCAC16121906を有するRH023A株、又は
受託番号ECCAC16121909を有するRH047A株であり、
(a)1つ以上のウイルス遺伝子の発現を欠失し、又は変更するような改変、
(b)正常組織における複製を阻害するが、依然として腫瘍における複製を可能にする1つ以上のウイルス遺伝子における1つ以上の突然変異、例えば、HSVによる機能性ICP34.5、ICP6及び/又はチミジンキナーゼの発現を阻止する突然変異、及び/又は
(c)融合誘導性タンパク質及び/又は免疫刺激分子などの1以上の異種遺伝子を発現するような改変
を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項５】
ウイルスが、
(a)機能的ICP34.5を発現しない、
(b)機能的ICP47を発現しない、及び/又は
(c)US11遺伝子を前初期遺伝子として発現する、
請求項1〜4のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項６】
パネルが、5つ以上の異なる臨床分離株、10以上の異なる臨床分離株、又は20以上の異なる臨床分離株を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項７】
腫瘍細胞株が、U87MG(グリオーマ)、HT29(結腸直腸)、LNCaP(前立腺)、MDA-MB-231(乳房)、SK-MEL-28(メラノーマ)、Fadu(扁平上皮癌)、MCF7(乳房)、A549(肺)、MIAPACA-2(膵臓)、CAPAN-1(膵臓)、及びHT1080(線維肉腫)からなる群から選択されるヒト腫瘍細胞株である、請求項1〜6のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項８】
(a)1以上の免疫刺激分子又は1以上の免疫刺激分子をコードする遺伝子、及び/又は(b)1以上の融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子を含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項９】
（a）融合誘導性タンパク質が、
(i)水疱性口内炎ウイルス(VSV)Gタンパク質、シンシチン-1、シンシチン-2、シミアンウイルス5(SV5)Fタンパク質、麻疹ウイルス(MV)Hタンパク質、MV Fタンパク質、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)Fタンパク質、及びRペプチドが欠失しているテナガザル(gibbon ape)白血病ウイルス(GALV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、Mason-Pfizerサルウイルス(MPMV)及びウマ感染性貧血ウイルス(EIAV)由来の糖タンパク質からなる群から選択されるか、又は
(ii)テナガザル白血病ウイルス(GALV)由来の糖タンパク質であり、R膜貫通ペプチドが突然変異又は除去されている(GALV-R-)、及び/又は
（b）免疫刺激分子が、
(i)GM-CSF、IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、IL-24、I型インターフェロン、インターフェロンガンマ、III型インターフェロン、TNFアルファ、TGFベータのアンタゴニスト、免疫チェックポイントアンタゴニスト、又は免疫増強経路のアゴニスト、例えば、CD40、ICOS、GITR、4-1-BB、OX40又はflt3のアゴニスト、場合によりCD40リガンド(CD40L)、ICOSリガンド、GITRリガンド、4-1-BBリガンド、OX40リガンド若しくはflt3リガンドである、
(ii)GM-CSF、又はCD40、ICOS、GITR、4-1-BB、OX40若しくはflt3のアゴニスト、場合によりGITRL、ICOSL、4-1-BBL、OX40L又はCD40L、又は免疫刺激分子が、GM-CSF及びCD40、ICOS、GITR、4-1-BB、OX40若しくはflt3のアゴニスト、場合によりGITRL、OX40L、4-1-BBL、ICOSL又はCD40Lである、
請求項8に記載のウイルス。
【請求項１０】
(a)融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子及び/又は免疫刺激分子をコードする遺伝子が、それぞれ別々の制御調節下で、挿入、又は部分的な若しくは完全な欠失のいずれかによって、任意選択的に互いに関して背中合わせの向きで、ICP34.5をコードする遺伝子座に挿入されている、及び/又は
(b)融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子の配列及び/又は免疫刺激分子をコードする遺伝子の配列が、標的細胞における発現レベルを増加させるようにコドン最適化されている、請求項1〜9のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項１１】
3つの異種遺伝子を発現するウイルスであって、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びMMLV由来などのレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターにより駆動される、及び/又は3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結される、ウイルス。
【請求項１２】
(a)3つの異種遺伝子であって、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びMMLV由来などのレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターによって駆動される、及び/又は3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結される、3つの異種遺伝子、又は
(b)CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びMMLV由来などのレトロウイルスLTRプロモーターの各々によってそれぞれ駆動される、及び/又はBGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列の各々によってそれぞれ終結される、4つの異種遺伝子
を発現する、請求項1〜11のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項１３】
(a)HSV、
(b)HSV1、又は
(c)ポックスウイルス
である、請求項11又は12に記載のウイルス。
【請求項１４】
請求項1〜13のいずれか1項に記載のウイルス及び医薬として許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１５】
治療によってヒト又は動物の体を処置する方法に使用するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載のウイルスを含む組成物。
【請求項１６】
がんを処置する方法に使用するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載のウイルスを含む組成物。
【請求項１７】
方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、請求項16に記載の組成物。
【請求項１８】
さらなる抗がん剤が、免疫共阻害経路のアンタゴニスト、免疫共刺激経路のアゴニスト、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、任意選択的に腫瘍溶解性ウイルス、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤、並びにそれらの組み合わせからなる群から選択され、場合により免疫共阻害経路のアンタゴニストが、CTLA-4阻害剤、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、CD47阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤若しくはCEACAM1阻害剤であり、及び/又は免疫共刺激経路のアゴニストが、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストである、請求項17に記載の組成物。
【請求項１９】
(a)さらなる抗がん剤が抗体である、
(b)方法が、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤及び免疫共阻害経路のさらなるアンタゴニスト、又は免疫共刺激経路のアゴニストを投与することを含む、
(c)ウイルス及びさらなる抗がん剤が別々又は同時に投与される、及び/又は
(d)がんが固形腫瘍である、
請求項16〜18のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項２０】
がんを処置する方法において使用するための医薬の製造における、請求項1〜13のいずれか1項に記載のウイルスの使用。
【請求項２１】
方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、請求項20に記載の使用。
【請求項２２】
腫瘍溶解性ウイルスを選択する方法であって、
（i）同じウイルス株の3つ以上の臨床分離株のパネルの、2つ以上の腫瘍細胞株を死滅させる能力をインビトロで比較するステップ、
（ii）ウイルスのパネルのそれぞれの腫瘍細胞を死滅させる能力をスコア化するステップ、
（iii）最も良いスコアの1つを有するウイルスを選択するステップ、
（iv）任意選択的に、1つ以上のウイルス遺伝子を不活性化するようにウイルスを改変するステップ、及び/又は
（v）任意選択的に、1つ以上の免疫刺激分子をコードする遺伝子及び/又は1つ以上の融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子を発現するようにウイルスを改変するステップ
を含む方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９２】
記載された投与経路及び投薬量は、熟練した医師が最適な投与経路及び投薬量を容易に決定することができるため、指針としてのみ意図される。用量は、様々なパラメータに従って、特に腫瘍の位置、腫瘍の大きさ、処置される患者の年齢、体重及び状態、並びに投与経路に従って決定され得る。好ましくは、ウイルスは、腫瘍への直接注射によって投与される。ウイルスはまた、血管内又は体腔内への注射によって投与され得る。最適な投与経路は、腫瘍の位置及び大きさに依存する。複数回の用量は、免疫学的又は臨床的効果を達成するために必要とされ得、これは、必要に応じて、典型的には、2日〜12週間の間隔、好ましくは3日〜3週間の間隔で投与される。処置されている腫瘍のタイプの応答速度及び特定の患者の応答、また、与えられ得る任意の併用療法に依存して、最大5年以上好ましくは最大1カ月〜2年間の反復投与が与えられ得る。本発明の様々な実施形態を以下に示す。
１．同じウイルス種の3つ以上の臨床分離株のパネルの、2つ以上の腫瘍細胞株の腫瘍細胞を死滅させる能力をインビトロで比較し、2つ以上の腫瘍細胞株を、前記パネル中の1つ以上の参照臨床分離株よりもインビトロで迅速に及び/又は低用量で死滅させることができる臨床分離株を選択することによって選択された臨床分離株であるか、又はそれに由来する、腫瘍溶解性ウイルス。
２．改変された臨床分離株である、上記1に記載のウイルス。
３．単純ヘルペスウイルス(HSV)である、上記1又は2に記載のウイルス。
４．HSV1である、上記3に記載のウイルス。
５．仮受託番号ECCAC16121904を有するRH018A株、
仮受託番号ECCAC16121902を有するRH004A株、
仮受託番号ECCAC16121907を有するRH031A株、
仮受託番号ECCAC16121908を有するRH040B株、
仮受託番号ECCAC16121903を有するRH015A株、
仮受託番号ECCAC16121905を有するRH021A株、
仮受託番号ECCAC16121906を有するRH023A株、又は
仮受託番号ECCAC16121909を有するRH047A株
である、上記1に記載のウイルス。
６．仮受託番号ECCAC16121904を有するRH018A株である、上記5に記載のウイルス。
７．ウイルスが、
(a)機能的ICP34.5を発現しない、
(b)機能的ICP47を発現しない、及び/又は
(c)US11遺伝子を前初期遺伝子として発現する、
上記3〜6のいずれかに記載のウイルス。
８．パネルが、5つ以上の異なる臨床分離株を含む、上記1〜7のいずれかに記載のウイルス。
９．パネルが、10以上の異なる臨床分離株を含む、上記1〜8のいずれかに記載のウイルス。
１０．パネルが、20以上の異なる臨床分離株を含む、上記1〜9のいずれかに記載のウイルス。
１１．細胞株が、U87MG(グリオーマ)、HT29(結腸直腸)、LNCaP(前立腺)、MDA-MB-231(乳房)、SK-MEL-28(メラノーマ)、Fadu(扁平上皮癌)、MCF7(乳房)、A549(肺)、MIAPACA-2(膵臓)、CAPAN-1(膵臓)、及びHT1080(線維肉腫)からなる群から選択されるヒト腫瘍細胞株である、上記1〜10のいずれかに記載のウイルス。
１２．(a)1以上の免疫刺激分子又は1以上の免疫刺激分子をコードする遺伝子、及び/又は(b)1以上の融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子を含む、上記1〜11のいずれかに記載のウイルス。
１３．（a）融合誘導性タンパク質が、水疱性口内炎ウイルス(VSV)Gタンパク質、シンシチン-1、シンシチン-2、シミアンウイルス5(SV5)Fタンパク質、麻疹ウイルス(MV)Hタンパク質、MV Fタンパク質、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)Fタンパク質、及びRペプチドが欠失しているテナガザル(gibbon ape)白血病ウイルス(GALV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、Mason-Pfizerサルウイルス(MPMV)又はウマ感染性貧血ウイルス(EIAV)由来の糖タンパク質からなる群から選択される、及び/又は
（b）免疫刺激分子が、GM-CSF、IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、IL-24、I型インターフェロン、インターフェロンガンマ、III型インターフェロン、TNFアルファ、TGFベータのアンタゴニスト、免疫チェックポイントアンタゴニスト、又は免疫増強経路のアゴニスト、例えば、CD40リガンド(CD40L)、ICOSリガンド、GITRリガンド、4-1-BBリガンド、OX40リガンド若しくはflt3リガンド若しくはこれらのいずれかの改変バージョンである、上記12に記載のウイルス。
１４．(a)融合誘導性タンパク質が、テナガザル白血病ウイルス(GALV)由来の糖タンパク質であり、R膜貫通ペプチドが突然変異又は除去されている(GALV-R-)、及び/又は
(b)免疫刺激分子が、GM-CSF、GITRL、ICOSL、4-1-BBL、OX40L又はCD40L、又はそれらの改変バージョンであるか、又は免疫刺激分子が、GM-CSF及びGITRL、OX40L、4-1-BBL、ICOSL又はCD40L、又はそれらの改変バージョンである、上記1〜13のいずれかに記載のウイルス。
１５．(a)融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子及び/又は免疫刺激分子をコードする遺伝子が、それぞれ別々の制御調節下で、挿入、又は部分的な若しくは完全な欠失のいずれかによって、任意選択的に互いに関して背中合わせの向きで、ICP34.5をコードする遺伝子座に挿入されている、及び/又は
(b)融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子の配列及び/又は免疫刺激分子をコードする遺伝子の配列が、標的細胞における発現レベルを増加させるようにコドン最適化されている、上記11〜14のいずれかに記載のウイルス。
１６．3つの異種遺伝子を発現するウイルスであって、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターにより駆動されるウイルス。
１７．3つの異種遺伝子を発現し、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターによって駆動される、上記1〜16のいずれかに記載のウイルス。
１８．CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びレトロウイルスLTRプロモーターの各々によってそれぞれ駆動される4つの異種遺伝子を発現する、上記16又は17に記載のウイルス。
１９．レトロウイルスLTRがMMLV由来である、上記16〜18のいずれかに記載のウイルス。
２０．3つの異種遺伝子を発現するウイルスであって、3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結されるウイルス。
２１．3つの異種遺伝子を発現し、3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結される、上記1〜20のいずれかに記載のウイルス。
２２．BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列の各々によってそれぞれ終結される4つの異種遺伝子を発現する、上記20又は21に記載のウイルス。
２３．(a)HSV、
(b)HSV1、又は
(c)ポックスウイルス
である、上記16〜22のいずれかに記載のウイルス。
２４．上記1〜23のいずれかに記載のウイルス及び医薬として許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
２５．治療によってヒト又は動物の体を処置する方法に使用するための、上記1〜23のいずれかに記載のウイルス。
２６．がんを処置する方法に使用するための、上記1〜23のいずれかに記載のウイルス。
２７．方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、上記26に記載の使用のためのウイルス。
２８．さらなる抗がん剤が、免疫共阻害経路のアンタゴニスト、免疫共刺激経路のアゴニスト、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、任意選択的に腫瘍溶解性ウイルス、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤、並びにそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記27に記載の使用のためのウイルス。
２９．免疫共阻害経路のアンタゴニストが、CTLA-4阻害剤、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、CD47阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤若しくはCEACAM1阻害剤であり、及び/又は免疫共刺激経路のアゴニストが、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストである、上記28に記載の使用のためのウイルス。
３０．さらなる抗がん剤が抗体である、上記26〜29のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
３１．方法が、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤及び免疫共阻害経路のさらなるアンタゴニスト、又は免疫共刺激経路のアゴニストを投与することを含む、上記26〜30のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
３２．ウイルス及びさらなる抗がん剤が別々に投与される、上記26〜31のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
３３．ウイルス及びさらなる抗がん剤が同時に投与される、上記26〜32のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
３４．がんが固形腫瘍である、上記26〜33のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
３５．上記1〜23のいずれかに記載のウイルスを滅菌バイアル、アンプル又はシリンジ中に含む製造物。
３６．治療有効量の上記1〜23のいずれかに記載のウイルス又は上記24に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、がんを処置する方法。
３７．治療有効量のさらなる抗がん剤を、それを必要とする患者に投与することをさらに含む、上記36に記載の方法。
３８．さらなる抗がん剤が、免疫共阻害経路のアンタゴニスト、免疫共刺激経路のアゴニスト、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、任意選択的に腫瘍溶解性ウイルス、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤、並びにそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記37に記載の方法。
３９．免疫共阻害経路のアンタゴニストが、CTLA-4阻害剤、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、CEACAM阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤、若しくはCD47阻害剤であり、及び/又は免疫共刺激経路のアゴニストが、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストである、上記38に記載の方法。
４０．さらなる抗がん剤が抗体を含む、上記38又は39に記載の方法。
４１．ウイルス及びさらなる抗がん剤が別々に投与される、上記37〜40のいずれかに記載の方法。
４２．ウイルス及びさらなる抗がん剤が同時に投与される、上記37〜40のいずれかに記載の方法。
４３．がんが固形腫瘍である、上記37〜42のいずれかに記載の方法。
４４．がんを処置する方法において使用するための医薬の製造における、上記1〜23のいずれかに記載のウイルスの使用。
４５．方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、上記44に記載の使用。
４６．腫瘍溶解性ウイルスを選択する方法であって、
（i）同じウイルス株の3つ以上の臨床分離株のパネルの、2つ以上の腫瘍細胞株を死滅させる能力をインビトロで比較するステップ、
（ii）ウイルスのパネルのそれぞれの腫瘍細胞を死滅させる能力をスコア化するステップ、
（iii）最も良いスコアの1つを有するウイルスを選択するステップ、
（iv）任意選択的に、1つ以上のウイルス遺伝子を不活性化するようにウイルスを改変するステップ、及び/又は
（v）任意選択的に、1つ以上の免疫刺激分子をコードする遺伝子及び/又は1つ以上の融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子を発現するようにウイルスを改変するステップ
を含む方法。