【手続補正書】
【提出日】令和2年3月23日(2020.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＣＤ４０に結合するアゴニスト単離モノクローナル抗体であって、
（ａ）Ｆｃ受容体の結合とは無関係に、
（ｂ）ＣＤ４０発現細胞の抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）を誘導することなく、
（ｃ）ＣＤ４０発現細胞の補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）を誘導することなく、かつ／または
（ｄ）Ｆｃ受容体の結合とは無関係に、かつＣＤ４０Ｌと相乗作用を示すことが可能で、
のいずれかで、ＡＰＣを直接活性化し、かつ／または抗原に対する免疫反応を増大させる、抗体。
【請求項２】
以下の性質：
（ａ）細胞アポトーシスを誘導すること、
（ｂ）ＩＬ−１２ｐ４０の発現の増大により測定される細胞のＴ細胞刺激活性を促進すること、
（ｃ）ＨＬＡ−ＤＲ  Ｖ４５０、ＣＤ５４  ＰＥ、ＣＤ８６  ＡＰＣ、およびＣＤ８３
ＢＶ５１０、ＣＤ１９  Ｖ５００、ＣＤ５４  ＰＥ、ＨＬＡ−ＤＲ  Ｖ４５０、ＣＤ２３  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＣＤ６９  ＡＰＣ、ＣＤ８６  ＡＰＣ、ＣＤ３８  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５およびＣＤ７１  ＰＥからなる群から選択される少なくとも１つの細胞表面マーカーの発現の増大により測定されるＢ細胞活性化を促進すること、
（ｄ）１０−１０Ｍもしくはそれ未満の平衡解離定数ＫｄでヒトＣＤ４０に結合すること、
（ｅ）カニクイザルＣＤ４０と交差反応すること、および／または
（ｆ）ヒトＣＤ４０に結合してＮＦｋＢ駆動型レポーター細胞株を用いて測定される細胞活性化を生じること、
の少なくとも１つを更に示す、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
ＩｇＧ２重鎖定常領域を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
ヒトＣＤ４０に結合し、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む単離抗体であって、前記重鎖可変領域および軽鎖可変領域が、
（ａ）配列番号１７および１８、
（ｂ）配列番号３および４、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列をそれぞれ含む、単離抗体。
【請求項５】
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号１７および／または１８、
（ｂ）配列番号３および／または４、
（ｃ）配列番号３１および／または３２、
（ｄ）配列番号４５および／または４６、
（ｅ）配列番号５９および／または６０、
（ｆ）配列番号７３および／または７４、
（ｇ）配列番号８７および／または８８、または
（ｈ）配列番号１０１および／または１０２
に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域を含む、単離抗体。
【請求項６】
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号１７および１８、
（ｂ）配列番号３および４、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域からの、１つまたはそれより多くのそれらの保存的配列改変を含むＣＤＲ配列を含む、単離抗体。
【請求項７】
ヒトＣＤ４０に結合し、配列番号１３５および１３６に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖および軽鎖を含む、単離抗体。
【請求項８】
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号１９、２１、２３をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号２５、２７、２９をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｂ）配列番号５、７、９をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号１１、１３、１５をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｃ）配列番号３３、３５、３７をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号３９、４１、４３をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｄ）配列番号４７、４９、５１をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号５３、５５、５７をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｅ）配列番号６１、６３、６５をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号６７、６９、７１をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｆ）配列番号７５、７７、７９をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号８１、８３、８５をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｇ）配列番号８９、９１、９３をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号９５、９７、９９をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、または
（ｈ）配列番号１０３、１０５、１０７をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号１０９、１１１、１１３をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列
を含む、単離抗体。
【請求項９】
（ａ）配列番号１７および１８、
（ｂ）配列番号３および４、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む抗体とヒトＣＤ４０上の同じエピトープに結合するか、または前記抗体と、ヒトＣＤ４０に対する結合について競合する、単離抗体。
【請求項１０】
（ａ）ヒトＣＤ４０の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（配列番号１３３）のアミノ酸残基１〜５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基；あるいは
（ｂ）ヒトＣＤ４０の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（配列番号１３３）のアミノ酸残基１〜５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基、ならびにヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸２５、２６、２８および３０からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸；あるいは
（ｃ）ヒトＣＤ４０の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（配列番号１３３）のアミノ酸残基１〜５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基、ならびにヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸２５、２６、２８および３０からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸、ならびに／あるいはヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３、３４および３６からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸；あるいは
（ｄ）ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３および３６；あるいは
（ｅ）ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３、３４および３６
に結合する、アゴニスト単離モノクローナル抗体。
【請求項１１】
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）の５位のアラニンのスレオニンへの置換が、抗体の結合をヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも３０％、またはヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも５０％、またはヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも８０％低下させる、請求項１０に記載の抗体。
【請求項１２】
ＣＤ４０Ｌと組み合わされる場合に相乗作用を示す、請求項１０に記載の抗体。
【請求項１３】
前記相乗作用が、
（ａ）Ｒａｍｏｓ細胞とインキュベートされる場合のＣＤ９５の発現の誘導の増大である；
（ｂ）ヒトＢ細胞とインキュベートされる場合のＢ細胞増殖の増大である；
（ｃ）樹状細胞とインキュベートされる場合のＩＬ１２ｐ４０の発現の誘導の増大である；または
（ｄ）ＣＤ９５の発現に関して測定される、請求項１２に記載の抗体。
【請求項１４】
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸残基１３〜１５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基あるいはヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸３３、３４および３６からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸に結合する、アゴニスト単離モノクローナル抗体。
【請求項１５】
ヒト抗体である、および／またはヒト定常領域を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１６】
抗原結合フラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、またはｓｃＦｖフラグメントである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１７】
抗原に連結された、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体を含む、分子結合体。
【請求項１８】
前記抗体と異なる結合特異性を有する第２の分子に連結された、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体を含む、二重特異性分子。
【請求項１９】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体の軽鎖、重鎖、または軽鎖と重鎖の両方の可変領域をコードする、単離核酸。
【請求項２０】
請求項１９に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。
【請求項２１】
請求項２０に記載の発現ベクターで形質転換された、細胞。
【請求項２２】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体、請求項１７に記載の分子結合体、または請求項１８に記載の二重特異性分子と、担体と、を含む、組成物。
【請求項２３】
アジュバントならびに／あるいは１種またはそれより多くの他の抗体を更に含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記１種以上の他の抗体が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−４、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ  （ＣＤ１３７）、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、ＤＲ３またはＣＤ２８Ｈに結合する、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
対象において抗原に対する免疫反応を誘導または促進するための、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体、請求項１７に記載の分子結合体、または請求項１８に記載の二重特異性分子を含む組成物、あるいは請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記組成物が前記抗原と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記抗原が、前記組成物から同時に、別々に、または順次投与されることを特徴とする、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
ＣＤ４０発現細胞の増殖を阻害するための、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体、請求項１７に記載の分子結合体、または請求項１８に記載の二重特異性分子を含む組成物、あるいは請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
対象の疾患を治療するための、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体、請求項１７に記載の分子結合体、または請求項１８に記載の二重特異性分子を含む組成物、あるいは請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３０】
前記疾患が、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、バーキットリンパ腫および辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫からなる群から選択される癌である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記抗体が、ヒトＣＤ４０に対するＣＤ４０Ｌの結合をブロックしない、請求項２５〜３０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記組成物が、１またはそれより多くの治療剤と組み合わせて前記対象に投与されることを特徴とする、請求項２５〜３１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記治療剤が別の抗体である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記別の抗体が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、および／または抗ＣＴＬＡ−４抗体である、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記第１の抗体と前記第２の抗体とが同時に投与されることを特徴とする、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３６】
前記第１の抗体と前記第２の抗体とが順次投与されることを特徴とする、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３７】
対象において抗原に対する免疫反応を誘導または促進するために使用するための、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体を含む組成物。
【請求項３８】
癌の治療用の薬剤の製造における、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体の使用。
【請求項３９】
癌の治療用の、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗体を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲より明らかとなろう。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ヒトＣＤ４０に結合するアゴニスト単離モノクローナル抗体であって、
（ａ）Ｆｃ受容体の結合とは無関係に、
（ｂ）ＣＤ４０発現細胞の抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）を誘導することなく、
（ｃ）ＣＤ４０発現細胞の補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）を誘導することなく、かつ／または
（ｄ）Ｆｃ受容体の結合とは無関係に、かつＣＤ４０Ｌと相乗作用を示すことが可能で、
のいずれかで、ＡＰＣを直接活性化し、かつ／または抗原に対する免疫反応を増大させる、抗体。
（項目２）
以下の性質：
（ａ）細胞アポトーシスを誘導すること、
（ｂ）ＩＬ−１２ｐ４０の発現の増大により測定される細胞のＴ細胞刺激活性を促進すること、
（ｃ）ＨＬＡ−ＤＲ  Ｖ４５０、ＣＤ５４  ＰＥ、ＣＤ８６  ＡＰＣ、およびＣＤ８３
ＢＶ５１０、ＣＤ１９  Ｖ５００、ＣＤ５４  ＰＥ、ＨＬＡ−ＤＲ  Ｖ４５０、ＣＤ２３  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＣＤ６９  ＡＰＣ、ＣＤ８６  ＡＰＣ、ＣＤ３８  ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５およびＣＤ７１  ＰＥからなる群から選択される少なくとも１つの細胞表面マーカーの発現の増大により測定されるＢ細胞活性化を促進すること、
（ｄ）１０−１０Ｍもしくはそれ未満の平衡解離定数ＫｄでヒトＣＤ４０に結合すること、
（ｅ）カニクイザルＣＤ４０と交差反応すること、および／または
（ｆ）ヒトＣＤ４０に結合してＮＦｋＢ駆動型レポーター細胞株を用いて測定される細胞活性化を生じること、
の少なくとも１つを更に示す、項目１に記載の抗体。
（項目３）
ＩｇＧ２重鎖定常領域を含む、項目１に記載の抗体。
（項目４）
ヒトＣＤ４０に結合し、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む単離抗体であって、前記重鎖可変領域および軽鎖可変領域が、
（ａ）配列番号３および４、
（ｂ）配列番号１７および１８、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列をそれぞれ含む、抗体。
（項目５）
前記重鎖可変領域および軽鎖可変領域が、
（ａ）配列番号３および４、
（ｂ）配列番号１７および１８、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列をそれぞれ含む、項目４に記載の抗体。
（項目６）
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号３および／または４、
（ｂ）配列番号１７および／または１８、
（ｃ）配列番号３１および／または３２、
（ｄ）配列番号４５および／または４６、
（ｅ）配列番号５９および／または６０、
（ｆ）配列番号７３および／または７４、
（ｇ）配列番号８７および／または８８、または
（ｈ）配列番号１０１および／または１０２
に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域を含む、単離抗体。
（項目７）
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号３および４、
（ｂ）配列番号１７および１８、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域からのＣＤＲ配列を含む、単離抗体。
（項目８）
ヒトＣＤ４０に結合し、配列番号１７および１８に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、単離抗体。
（項目９）
ヒトＣＤ４０に結合し、配列番号１３５および１３６に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖および軽鎖を含む、単離抗体。
（項目１０）
ヒトＣＤ４０に結合し、
（ａ）配列番号５、７、９をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号１１、１３、１５をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｂ）配列番号１９、２１、２３をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号２５、２７、２９をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｃ）配列番号３３、３５、３７をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号３９、４１、４３をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｄ）配列番号４７、４９、５１をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号５３、５５、５７をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｅ）配列番号６１、６３、６５をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号６７、６９、７１をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｆ）配列番号７５、７７、７９をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号８１、８３、８５をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、
（ｇ）配列番号８９、９１、９３をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号９５、９７、９９をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、または
（ｈ）配列番号１０３、１０５、１０７をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および／または配列番号１０９、１１１、１１３をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列
を含む、単離抗体。
（項目１１）
ヒトＣＤ４０に結合し、配列番号１９、２１、２３をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列、および配列番号２５、２７、２９をそれぞれ含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む、単離抗体。
（項目１２）
（ａ）配列番号３および４、
（ｂ）配列番号１７および１８、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む抗体とヒトＣＤ４０上の同じエピトープに結合する、単離抗体。
（項目１３）
（ａ）配列番号３および４、
（ｂ）配列番号１７および１８、
（ｃ）配列番号３１および３２、
（ｄ）配列番号４５および４６、
（ｅ）配列番号５９および６０、
（ｆ）配列番号７３および７４、
（ｇ）配列番号８７および８８、または
（ｈ）配列番号１０１および１０２
に記載されるアミノ酸配列をそれぞれ有する重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む抗体と、ヒトＣＤ４０に対する結合について競合する、単離抗体。
（項目１４）
抗体３Ｃ３または３Ｇ５と同じエピトープに結合する、アゴニスト単離モノクローナル抗体。
（項目１５）
ヒトＣＤ４０の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（配列番号１３３）のアミノ酸残基１〜５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基に結合する、アゴニスト単離モノクローナル抗体。
（項目１６）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸２５、２６、２８および３０からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸に更に結合する、項目１５に記載の抗体。
（項目１７）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３、３４および３６からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸に結合する、項目１５または１６に記載の抗体。
（項目１８）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３および３６に結合する、項目１７に記載の抗体。
（項目１９）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸５、３３、３４および３６に結合する、項目１８に記載の抗体。
（項目２０）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）の５位のアラニンのスレオニンへの置換が、抗体の結合をヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも３０％低下させる、項目１５〜１９のいずれか１項に記載の抗体。
（項目２１）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）の５位のアラニンのスレオニンへの置換が、抗体の結合をヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも５０％低下させる、項目２０に記載の抗体。
（項目２２）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）の５位のアラニンのスレオニンへの置換が、抗体の結合をヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）への結合と比較して少なくとも８０％低下させる、項目２０に記載の抗体。
（項目２３）
ＣＤ４０Ｌと組み合わされる場合に相乗作用を示す、項目１４〜１９のいずれか１項に記載の抗体。
（項目２４）
前記相乗作用が、Ｒａｍｏｓ細胞とインキュベートされる場合のＣＤ９５の発現の誘導の増大である、項目２３に記載の抗体。
（項目２５）
前記相乗作用が、ヒトＢ細胞とインキュベートされる場合のＢ細胞増殖の増大である、項目２３に記載の抗体。
（項目２６）
前記相乗作用が、樹状細胞とインキュベートされる場合のＩＬ１２ｐ４０の発現の誘導の増大である、項目２３に記載の抗体。
（項目２７）
前記相乗作用が、ＣＤ９５の発現に関して測定される、項目２３に記載の抗体。
（項目２８）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸残基１３〜１５および３３〜３６内の１つまたはそれより多くの残基に結合する、アゴニスト単離モノクローナル抗体。
（項目２９）
ヒトＣＤ４０のＥＣＤ（配列番号１３３）のアミノ酸３３、３４および３６からなる群から選択される１つまたはそれより多くのアミノ酸に結合する、項目２８に記載の抗体。
（項目３０）
ヒト抗体である、項目１〜２９のいずれか１項に記載の抗体。
（項目３１）
ヒト定常領域を含む、項目１〜３０のいずれか１項に記載の抗体。
（項目３２）
抗原結合フラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、またはｓｃＦｖフラグメントである、項目１〜３０のいずれか１項に記載の抗体。
（項目３３）
抗原に連結された、項目１〜３２のいずれか１項に記載の抗体を含む、分子結合体。
（項目３４）
前記抗体と異なる結合特異性を有する第２の分子に連結された、項目１〜３２のいずれか１項に記載の抗体を含む、二重特異性分子。
（項目３５）
項目１〜３２のいずれか１項に記載の抗体の軽鎖、重鎖、または軽鎖と重鎖の両方の可変領域をコードする、単離核酸。
（項目３６）
項目３５に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。
（項目３７）
項目３６に記載の発現ベクターで形質転換された、細胞。
（項目３８）
項目１〜３４のいずれか１項に記載の抗体、分子結合体、または二重特異性分子と、担体と、を含む、組成物。
（項目３９）
アジュバントを更に含む、項目３８に記載の組成物。
（項目４０）
１種またはそれより多くの他の抗体を更に含む、項目３８に記載の組成物。
（項目４１）
前記１種以上の他の抗体が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−４、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ  （ＣＤ１３７）、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、ＤＲ３またはＣＤ２８Ｈに結合する、項目４０に記載の組成物。
（項目４２）
対象において抗原に対する免疫反応を誘導または促進するための方法であって、抗原に対する免疫反応を誘導または促進するうえで有効な量の、項目１〜３４および３８〜４１のいずれか１項に記載の前記抗体、分子結合体、組成物、または二重特異性分子を前記対象に投与することを含む、方法。
（項目４３）
前記抗原を投与する工程を更に含む、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記抗原が、前記抗体、組成物、または二重特異性分子から同時に、別々に、または順次投与される、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
ＣＤ４０発現細胞の増殖を阻害する方法であって、ＣＤ４０発現細胞の増殖を阻害するうえで有効な量の、項目１〜３４および３８〜４１のいずれか１項に記載の前記抗体、組成物、または二重特異性分子と前記細胞を接触させることを含む、方法。
（項目４６）
対象の疾患を治療するための方法であって、前記疾患を治療するうえで有効な量の、項目１〜３４および３８〜４１のいずれか１項に記載の前記抗体、組成物、または二重特異性分子を前記対象に投与することを含む、方法。
（項目４７）
前記疾患が、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、バーキットリンパ腫および辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫からなる群から選択される癌である、項目４６に記載の方法。
（項目４８）
前記抗体が、ヒトＣＤ４０に対するＣＤ４０Ｌの結合をブロックしない、項目４２〜４７のいずれか１項に記載の方法。
（項目４９）
１またはそれより多くの治療剤を前記対象に投与することを更に含む、項目４２〜４
８のいずれか１項に記載の方法。
（項目５０）
前記治療剤が別の抗体である、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記抗体が、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、および／または抗ＣＴＬＡ−４抗体である、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記第１の抗体と前記第２の抗体とが同時に投与される、項目５０に記載の方法。
（項目５３）
前記第１の抗体と前記第２の抗体とが順次投与される、項目５０に記載の方法。
（項目５４）
対象において抗原に対する免疫反応を誘導または促進するために使用するための、項目１〜３２のいずれか１項に記載の抗体。
（項目５５）
癌の治療用の薬剤の製造における、項目１〜３２のいずれか１項に記載の抗体の使用。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
【図１】図１は、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＱＫｅ装置（Ｐａｌｌ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ社、カリフォルニア州、メンローパーク）を製造者のガイドラインにしたがって使用してバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）により測定した、抗体３Ｃ３、３Ｇ５、１Ｂ４、３Ｂ６、および６Ｈ６の平衡解離定数（ＫＤ）および反応結合速度定数（ｋｏｎ）および解離速度定数（ｋｏｆｆ）の値を示す。
【図２】図２は、ＥＬＩＳＡで吸光度（ＯＤ４５０）を用い、組換え精製ヒトＣＤ４０をコートしたマイクロタイタープレートへのヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３、３Ｇ５、１Ｂ４、３Ｂ６、および６Ｈ６を含む）の結合を抗体濃度の関数として示したグラフである。
【図３】図３は、ヒトＣＤ４０抗体濃度（３Ｃ３、３Ｇ５、１Ｂ４、３Ｂ６、および６Ｈ６）の関数として、フローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として精製ヒトＰＢＭＣ（左）およびカニクイザルＰＢＭＣ（右）に対する結合を示したグラフである。
【図４Ａ】図４Ａおよび４Ｂは、ＥＬＩＳＡによる、ＣＤ４０タンパク質への可溶性ＣＤ４０リガンド（ｓＣＤ４０Ｌ）の結合に対するヒトＣＤ４０抗体の影響を示したグラフである。
【図４Ｂ】図４Ａおよび４Ｂは、ＥＬＩＳＡによる、ＣＤ４０タンパク質への可溶性ＣＤ４０リガンド（ｓＣＤ４０Ｌ）の結合に対するヒトＣＤ４０抗体の影響を示したグラフである。
【図５】表面にヒトＣＤ４０を発現しているＲａｊｉ細胞上のＣＤ４０に対するヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３、３Ｇ５、１Ｂ４、３Ｂ６、および６Ｈ６）の結合のフローサイトメトリーによる分析である。
【図６】図６は、表面にヒトＣＤ４０を発現しているＲａｍｏｓ細胞上のＣＤ４０に対するヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３、３Ｇ５、１Ｂ４、３Ｂ６、および６Ｈ６）の結合のフローサイトメトリーによる分析である。
【図７】図７Ａおよび７Ｂは、ヒトＣＤ４０抗体によるＲａｍｏｓ細胞上のＣＤ９５の誘導を示すグラフである。
【図８Ａ】図８Ａおよび８Ｂは、示される以下のマーカー、すなわち、ＣＤ５４、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ８６、ＣＤ８３、および％ＣＤ８３＋細胞の発現レベルの変化に基づいた、ヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３および３Ｇ５）による樹状細胞（ＤＣ）の活性化を示すグラフである。
【図８Ｂ】図８Ａおよび８Ｂは、示される以下のマーカー、すなわち、ＣＤ５４、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ８６、ＣＤ８３、および％ＣＤ８３＋細胞の発現レベルの変化に基づいた、ヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３および３Ｇ５）による樹状細胞（ＤＣ）の活性化を示すグラフである。
【図９】図９Ａおよび９Ｂは、ヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３および３Ｇ５）によるＩＬ−１２ｐ４０の誘導を示すグラフである。
【図１０Ａ】図１０Ａおよび１０Ｂは、示される以下のマーカー、すなわち、ＣＤ５４、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ２３、％ＣＤ２３  ＋細胞、ＣＤ６９、ＣＤ８６、ＣＤ３８、およびＣＤ７１の発現レベルの変化に基づいた、ヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３および３Ｇ５）によるＢ細胞の活性化を示すグラフである。
【図１０Ｂ】図１０Ａおよび１０Ｂは、示される以下のマーカー、すなわち、ＣＤ５４、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ２３、％ＣＤ２３  ＋細胞、ＣＤ６９、ＣＤ８６、ＣＤ３８、およびＣＤ７１の発現レベルの変化に基づいた、ヒトＣＤ４０抗体（３Ｃ３および３Ｇ５）によるＢ細胞の活性化を示すグラフである。
【図１１Ａ】図１１Ａおよび１１Ｂは、ＣＤ４０を発現しているルシフェラーゼレポーター細胞株を用いた、ヒトＣＤ４０抗体によるＮＦｋＢ活性化を示すグラフである。
【図１１Ｂ】図１１Ａおよび１１Ｂは、ＣＤ４０を発現しているルシフェラーゼレポーター細胞株を用いた、ヒトＣＤ４０抗体によるＮＦｋＢ活性化を示すグラフである。
【図１２】ＣＤ４０ヒト抗体クローン３Ｃ３および３Ｇ５の腹腔内投与（０．３ｍｇ／投与）による処理後のＳＣＩＤマウス腫瘍モデル（Ｒａｊｉ細胞）における腫瘍増殖および生存率の結果を示すグラフである。
【図１３】ＣＤ４０ヒト抗体クローン３Ｃ３および３Ｇ５の腹腔内投与（０．３ｍｇ／投与）による処理後のＳＣＩＤマウス腫瘍モデル（Ｒａｍｏｓ細胞）における腫瘍増殖および生存率の結果を示すグラフである。
【図１４Ａ】図１４Ａおよび１４Ｂは、示されるＣＤ４０抗体またはアイソタイプコントロール（ＩｇＧ２）とインキュベートした標識されたＰＢＭＣのＴ細胞増殖を示すグラフである。
【図１４Ｂ】図１４Ａおよび１４Ｂは、示されるＣＤ４０抗体またはアイソタイプコントロール（ＩｇＧ２）とインキュベートした標識されたＰＢＭＣのＴ細胞増殖を示すグラフである。
【図１５】ＣＤ４０抗体３Ｃ３および３Ｇ５を用いた、Ｆｃ受容体相互作用とは無関係なＣＤ４０への結合を示すグラフである。
【図１６】ＣＤ４０抗体３Ｃ３および３Ｇ５を用いたＮＦｋｂ活性化を示すグラフである。
【図１７】ＣＤ４０抗体３Ｃ３および３Ｇ５を用いたＲａｍｏｓ細胞上のＣＤ９５の誘導を示すグラフである。
【図１８】抗ＣＤ４０／抗原融合ＡＰＣターゲティングワクチンコンストラクトの一例の概略図を示す。
【図１９】Ｒａｍｏｓ細胞上のＣＤ９５発現に対するＣＤ４０抗体３Ｃ３と可溶性ＣＤ４０Ｌとの相乗作用を示すグラフである。
【図２０】Ｎ末端ヒトκ系軽鎖およびＣ末端Ｆｌａｇタグを有する、アミノ酸残基１〜１７３にわたった完全長細胞外ドメイン（ＥＣＤ）をコードした可溶性ＣＤ４０のｃＤＮＡの概略図である。
【図２１】サルＣＤ４０  ＥＣＤのアミノ酸配列（配列番号１３９）（上）およびマウスＣＤ４０  ＥＣＤのアミノ酸配列（下）とヒトＣＤ４０  ＥＣＤのアミノ酸配列（配列番号１３３）とのアラインメントを示す。生成するフラグメントが示されている（配列番号１３３のヌクレオチド１〜９４、配列番号１４０〜１４７）。
【図２２】異なる点突然変異またはそれらの組み合わせを有するヒトＣＤ４０  ＥＣＤフラグメントＡ（アミノ酸残基１〜５、上）またはヒトＣＤ４０  ＥＣＤフラグメントＤ（アミノ酸残基３３〜３６、下）に対するＣＤ４０抗体３Ｃ３の結合を示すグラフである。
【図２３Ａ】図２３Ａ〜２３Ｃは、示した時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定されたアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ、２３Ａ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ、２３Ｂ）、およびクレアチンキナーゼ（２３Ｃ）のレベルを示すグラフである。
【図２３Ｂ】図２３Ａ〜２３Ｃは、示した時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定されたアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ、２３Ａ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ、２３Ｂ）、およびクレアチンキナーゼ（２３Ｃ）のレベルを示すグラフである。
【図２３Ｃ】図２３Ａ〜２３Ｃは、示した時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定されたアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ、２３Ａ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ、２３Ｂ）、およびクレアチンキナーゼ（２３Ｃ）のレベルを示すグラフである。
【図２４】図２４は、示した時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理したサルの血液で測定されたＩＬ−１２（ｐｇ／ｍＬ）のレベルを示すグラフである。
【図２５Ａ】図２５Ａ〜２５Ｃは、示される時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定された白血球（２５Ａ）、好中球（２５Ｂ）、およびリンパ球（２５Ｃ）の量を示すグラフである。
【図２５Ｂ】図２５Ａ〜２５Ｃは、示される時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定された白血球（２５Ａ）、好中球（２５Ｂ）、およびリンパ球（２５Ｃ）の量を示すグラフである。
【図２５Ｃ】図２５Ａ〜２５Ｃは、示される時点においてＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理する前後にサルで測定された白血球（２５Ａ）、好中球（２５Ｂ）、およびリンパ球（２５Ｃ）の量を示すグラフである。
【図２６】図２６は、ＣＤ４０抗体３Ｃ３または３Ｇ５で処理したサルにおけるＢ細胞の量の、時間（日数）にともなうベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。
【図２７】図２７は、２ｍｇ（左）または０．２ｍｇ（右）のＣＤ４０抗体３Ｃ３（四角）、３Ｇ５（菱形）、または生理食塩水（丸）で処理後のベースラインと比較してのＢ細胞上でのＨＬＡ−ＤＲの発現を示すグラフである。
【図２８】図２８は、細胞をいずれかの抗ＣＤ４０ｍＡｂ  ３Ｃ３の存在下で培養した場合のＢ細胞の増殖を示すグラフである。
【図２９】図２９および３０は、Ｂ細胞における抗ＣＤ４０ｍＡｂ  ３Ｃ３とＣＤ４０Ｌとの組み合わせの相乗作用を示すグラフである。
【図３０】図２９および３０は、Ｂ細胞における抗ＣＤ４０ｍＡｂ  ３Ｃ３とＣＤ４０Ｌとの組み合わせの相乗作用を示すグラフである。
【図３１】図３１は、抗ＣＤ４０ｍＡｂ  ３Ｃ３とインキュベートした場合の全血中のサイトカイン応答を示した表である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９０】
【表１−１】
2019521645.tif 000001
【表１−２】
2019521645.tif 000002
【表２−１】
2019521645.tif 000003
【表２−２】
2019521645.tif 000004
【表３−１】
2019521645.tif 000005
【表３−２】
2019521645.tif 000006
抗体３Ｃ３の重鎖および軽鎖の完全なアミノ酸配列は以下のとおりである。
軽鎖配列（リーダー配列は除去してある）（配列番号１３６）
【化１】
2019521645.tif 000007
重鎖配列（リーダー配列は除去してある）（配列番号１３５）
【化２】
2019521645.tif 000008
それぞれの場合で、可変配列はイタリック体で示し、定常ドメインは太字で示している。定常ドメイン配列は、Ｃ末端のリシンを除去したＩｇＧ２配列である。
同じ定常ドメイン配列を、上記に示したそれぞれの可変配列とともに他の抗体で使用した。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３３５】
実施例２１
全血中のサイトカイン応答
全血を１０μｇ／ｍＬのアイソタイプコントロールまたは３Ｃ３、またはポジティブコントロールとしてＬＰＳと一晩インキュベートした。翌日、血漿を回収し、サイトカインをＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社）により測定した。結果を図３１に示すが、この結果は、炎症性サイトカインの有意な産生が見られなかったことを示している。
均等物
当業者であれば、通常の実験以上のことを行うことなく、本明細書に記載される発明の特定の実施形態の多くの均等物が認識されるか、または確認できるであろう。かかる均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されるものとする。
配列表
【表７−１】
2019521645.tif 000009
【表７−２】
2019521645.tif 000010
【表７−３】
2019521645.tif 000011
【表７−４】
2019521645.tif 000012
【表７−５】
2019521645.tif 000013
【表７−６】
2019521645.tif 000014
【表７−７】
2019521645.tif 000015
【表７−８】
2019521645.tif 000016
【表７−９】
2019521645.tif 000017
【表７−１０】
2019521645.tif 000018