【手続補正書】
【提出日】令和2年9月18日(2020.9.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）およびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含むブロックコポリマーを含むポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号１１の配列を含むかもしくは配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む組成物。
【請求項２】
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）ジブロックコポリマーを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）−ポリ（プロピレングリコール）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧ）テトラブロックコポリマーを含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーが、ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧトリブロックコポリマーのＰＬＡとの化学的コンジュゲーションから形成される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
ＰＬＡの分子量が、約１０，０００〜約１００，０００ダルトンである、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＴＮＦ−αタンパク質またはその部分が、配列番号９または配列番号１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記単離された核酸が、配列番号１１の配列を含むか、または、前記単離された核酸が、配列番号９もしくは配列番号１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
カチオン性ペプチドを更に含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
細胞透過性ペプチドを更に含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
カチオン性の細胞透過性ペプチドを更に含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項８から１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
Ｃ環化されたポリカチオン性ペプチド（配列番号８）を更に含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記細胞透過性またはカチオン性ペプチドおよび前記単離された核酸が複合体化される、請求項８から１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
ドキソルビシン、ダウノルビシン、デシタビン、イリノテカン、ＳＮ−３８、シタラビン、ドセタキセル、トリプトリド、ゲルダナマイシン、１７−ＡＡＧ、５−ＦＵ、オキサリプラチン、カルボプラチン、タキソテール、メトトレキサート、パクリタキセル、インデノイソキノリンおよびボルテゾミブからなる群から選択される化学療法剤または標的化された抗がん剤を更に含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
がん、自己免疫性疾患、炎症性疾患、代謝障害、発達障害、心血管疾患、肝疾患、腸疾患、感染性疾患、内分泌疾患および神経障害からなる群から選択される疾患の治療に使用するための、
ａ）ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）およびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含むブロックコポリマーを含むポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号１１の配列を含むかもしくは配列番号９もしくは１０の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む医薬組成物。
【請求項１６】
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）ジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、請求項１、２および５から１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）−ポリ（プロピレングリコール）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧ）テトラブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ポリマーナノ粒子が、前記ポリマーナノ粒子の外側に付着した標的化部分を更に含み、前記標的化部分が抗体、ペプチドまたはアプタマーである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーまたはＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成されたポリマーナノ粒子であって、サイトカインもしくはその部分、または前記サイトカインもしくはその部分をコードする単離された核酸を負荷しているポリマーナノ粒子。
【請求項２０】
前記サイトカインが、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一である、請求項１９に記載のポリマーナノ粒子。
【請求項２１】
前記単離された核酸が、カチオン性の細胞透過性ペプチドと複合体化される、請求項１９または２０に記載のポリマーナノ粒子。
【請求項２２】
前記カチオン性の細胞透過性ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択される、請求項２１に記載のポリマーナノ粒子。
【請求項２３】
表５に記載のテトラブロックコポリマーを含む、請求項１から２２のいずれかに記載のポリマーナノ粒子。
【請求項２４】
それを必要とする対象においてがんを治療するための医薬組成物であって、
ａ）ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーを含むポリマーから形成されたポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む、医薬組成物。
【請求項２５】
前記医薬組成物が、ドキソルビシン、ダウノルビシン、デシタビン、イリノテカン、ＳＮ−３８、シタラビン、ドセタキセル、トリプトリド、ゲルダナマイシン、１７−ＡＡＧ、５−ＦＵ、オキサリプラチン、カルボプラチン、タキソテール、メトトレキサート、パクリタキセル、インデノイソキノリンおよびボルテゾミブからなる群から選択される化学療法剤または標的化された抗がん剤を更に含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記がんが、乳がん、前立腺がん、非小細胞肺がん、転移性結腸がん、膵がんまたは血液悪性腫瘍である、請求項２４または２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記がんが、ＰＤ−１不応性腫瘍を含む、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
細胞においてＴＮＦ発現を誘導する方法において使用するためのポリマーナノ粒子を含む組成物であって、前記方法は、前記細胞を、ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーを含むポリマーから形成された前記ポリマーナノ粒子と接触させることを含み、前記ポリマーナノ粒子が、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質またはその部分をコードする単離された核酸を含む、組成物。
【請求項２９】
前記ＴＮＦ−αタンパク質またはその部分が、配列番号９と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の医薬組成物または請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記単離された核酸が、配列番号９と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質またはその部分をコードする、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の医薬組成物または請求項２８に記載の組成物。
【請求項３１】
前記単離された核酸が、カチオン性の細胞透過性ペプチドと複合体化される、請求項２４から２７および２９から３０のいずれか一項に記載の医薬組成物または請求項２８から３０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記カチオン性の細胞透過性ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択される、請求項３１に記載の医薬組成物または組成物。
【請求項３３】
前記ナノ粒子が、ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、請求項２４から２７および２９から３２のいずれか一項に記載の医薬組成物または請求項２８から３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ナノ粒子が、ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、請求項２４から２７および２９から３２のいずれか一項に記載の医薬組成物または請求項２８から３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記ポリマーナノ粒子が、表５に記載のテトラブロックコポリマーを含む、請求項３４に記載の医薬組成物または組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本明細書において提供される組成物または方法のいずれかの様々な実施形態では、ナノ粒子は、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）およびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含むブロックコポリマーと、ＴＮＦ−αタンパク質またはＴＮＦ−αタンパク質をコードする単離された核酸とから形成される。一実施形態では、ナノ粒子は、一定の期間にわたりタンパク質または単離された核酸を放出する。更なる実施形態では、一定の期間は少なくとも１日〜２０日である。方法の様々な実施形態では、一定の期間は約５日〜１０日である。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ａ）ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）およびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含むブロックコポリマーを含むポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号１１の配列を含むかもしくは配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む組成物。
（項目２）
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）ジブロックコポリマーを含む、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）−ポリ（プロピレングリコール）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧ）テトラブロックコポリマーを含む、項目１または２に記載の組成物。
（項目４）
前記ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーが、ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧトリブロックコポリマーのＰＬＡとの化学的コンジュゲーションから形成される、項目３に記載の組成物。
（項目５）
ＰＬＡの分子量が、約１０，０００〜約１００，０００ダルトンである、項目１から４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６）
前記ＴＮＦ−αタンパク質またはその部分が、配列番号９または配列番号１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１から５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７）
前記単離された核酸が、配列番号１１の配列を含むか、または、前記単離された核酸が、配列番号９もしくは配列番号１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする、項目１から５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目８）
カチオン性ペプチドを更に含む、項目１から７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９）
細胞透過性ペプチドを更に含む、項目１から７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０）
カチオン性の細胞透過性ペプチドを更に含む、項目１から７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１）
前記ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、項目８から１０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２）
Ｃ環化されたポリカチオン性ペプチド（配列番号８）を更に含む、項目１から７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３）
前記細胞透過性またはカチオン性ペプチドおよび前記単離された核酸が複合体化される、項目８から１２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４）
ドキソルビシン、ダウノルビシン、デシタビン、イリノテカン、ＳＮ−３８、シタラビン、ドセタキセル、トリプトリド、ゲルダナマイシン、１７−ＡＡＧ、５−ＦＵ、オキサリプラチン、カルボプラチン、タキソテール、メトトレキサート、パクリタキセル、インデノイソキノリンおよびボルテゾミブからなる群から選択される化学療法剤または標的化された抗がん剤を更に含む、項目１に記載の組成物。
（項目１５）
がん、自己免疫性疾患、炎症性疾患、代謝障害、発達障害、心血管疾患、肝疾患、腸疾患、感染性疾患、内分泌疾患および神経障害からなる群から選択される疾患の治療に使用するための、
ａ）ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）およびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含むブロックコポリマーを含むポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号１１の配列を含むかもしくは配列番号９もしくは１０の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む医薬組成物。
（項目１６）
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）ジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、項目１、２および５から１５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７）
前記ポリマーナノ粒子が、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）−ポリ（プロピレングリコール）−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧ）テトラブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、項目１から１５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８）
前記ポリマーナノ粒子が、前記ポリマーナノ粒子の外側に付着した標的化部分を更に含み、前記標的化部分が抗体、ペプチドまたはアプタマーである、項目１から１７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１９）
ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーまたはＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成されたポリマーナノ粒子であって、サイトカインもしくはその部分、または前記サイトカインもしくはその部分をコードする単離された核酸を負荷しているポリマーナノ粒子。
（項目２０）
前記サイトカインが、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一である、項目１９に記載のポリマーナノ粒子。
（項目２１）
前記単離された核酸が、カチオン性の細胞透過性ペプチドと複合体化される、項目１９または２０に記載のポリマーナノ粒子。
（項目２２）
前記カチオン性の細胞透過性ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択される、項目２１に記載のポリマーナノ粒子。
（項目２３）
表５に記載のテトラブロックコポリマーを含む、項目１から２２のいずれかに記載のポリマーナノ粒子。
（項目２４）
それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、
ａ）ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーを含むポリマーから形成されたポリマーナノ粒子と、
ｂ）配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分、または、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質もしくはその部分をコードする単離された核酸と
を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む方法。
（項目２５）
前記医薬組成物が、ドキソルビシン、ダウノルビシン、デシタビン、イリノテカン、ＳＮ−３８、シタラビン、ドセタキセル、トリプトリド、ゲルダナマイシン、１７−ＡＡＧ、５−ＦＵ、オキサリプラチン、カルボプラチン、タキソテール、メトトレキサート、パクリタキセル、インデノイソキノリンおよびボルテゾミブからなる群から選択される化学療法剤または標的化された抗がん剤を更に含む、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記がんが、乳がん、前立腺がん、非小細胞肺がん、転移性結腸がん、膵がんまたは血液悪性腫瘍である、項目２４または２５に記載の方法。
（項目２７）
前記がんが、ＰＤ−１不応性腫瘍を含む、項目２４から２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
細胞においてＴＮＦ発現を誘導する方法であって、前記細胞を、ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーを含むポリマーから形成された有効量のポリマーナノ粒子と接触させることを含み、前記ポリマーナノ粒子が、配列番号９の配列と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質またはその部分をコードする単離された核酸を含む、方法。
（項目２９）
前記ＴＮＦ−αタンパク質またはその部分が、配列番号９と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含む、項目２４から２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記単離された核酸が、配列番号９と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＴＮＦ−αタンパク質またはその部分をコードする、項目２４から２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記単離された核酸が、カチオン性の細胞透過性ペプチドと複合体化される、項目２４から３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記カチオン性の細胞透過性ペプチドが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８およびポリアルギニンからなる群から選択される、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記ナノ粒子が、ＰＬＡ−ＰＥＧジブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、項目２４から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
前記ナノ粒子が、ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＰＰＧ−ＰＥＧテトラブロックコポリマーから本質的になるポリマーから形成される、項目２４から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
前記ポリマーナノ粒子が、表５に記載のテトラブロックコポリマーを含む、項目３４に記載の方法。