【手続補正書】
【提出日】令和1年6月14日(2019.6.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
1つのLセグメント及び2つのSセグメント、並びに発癌性ウイルスの抗原又は腫瘍関連ウイルスの抗原をコードするヌクレオチド配列を含む、三セグメントアレナウイルスウイルスベクターであって、該発癌性ウイルス又は腫瘍関連ウイルスが、サイトメガロウイルス、B型肝炎ウイルス、又はC型肝炎ウイルスではなく、該三セグメントアレナウイルスウイルスベクターの増殖が、I型インターフェロン受容体、II型インターフェロン受容体及び組換え活性化遺伝子1(RAG1)を欠き、かつ104 PFUの該三セグメントアレナウイルスウイルスベクターに感染させたマウスにおける持続感染の70日後に、複製可能二セグメントウイルスベクターをもたらさない、
前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２】
2つの別々のセグメントの代わりに、一方のみに2つのアレナウイルスORFを結合させた2つのSセグメントのセグメント間の組換えが、ウイルスプロモーター活性を抑制する、請求項1記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項３】
前記発癌性ウイルスが、ヒトパピローマウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス、エプスタイン-バーウイルス、メルケル細胞ポリオーマウイルス、又はヒトTリンパ好性ウイルスである、請求項1又は2記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項４】
前記ヌクレオチド配列が、ヒトパピローマウイルス(HPV)抗原をコードする、請求項1〜3のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項５】
前記HPV抗原が、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68、HPV73、又はHPV82の抗原である、請求項4記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項６】
前記HPV抗原が、HPVタンパク質E7、HPVタンパク質E6、HPVタンパク質E1、HPVタンパク質E2、HPVタンパク質E3、HPVタンパク質E4、HPVタンパク質E5、HPVタンパク質L1及びHPVタンパク質L2からなる群から選択される、請求項4項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項７】
前記HPV抗原が、
a. HPV16タンパク質E6又はその抗原性断片;
b. HPV16タンパク質E7又はその抗原性断片;
c. HPV18タンパク質E6又はその抗原性断片;及び
d. HPV18タンパク質E7又はその抗原性断片
からなる群から選択される、請求項6記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項８】
前記HPV抗原が、2つのHPVタンパク質又はその抗原性断片の融合物である、請求項4記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項９】
前記2つのHPVタンパク質が、
a. HPV16タンパク質E6又はその抗原性断片;
b. HPV16タンパク質E7又はその抗原性断片;
c. HPV18タンパク質E6又はその抗原性断片;及び
d. HPV18タンパク質E7又はその抗原性断片
からなる群から選択される、請求項8記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１０】
前記2つのHPVタンパク質が同じではない、請求項8又は9記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１１】
前記HPV抗原が、HPV16タンパク質E7とHPV16タンパク質E6との融合タンパク質である、請求項9記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１２】
前記融合タンパク質が、配列番号10のアミノ酸配列と少なくとも80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、少なくとも99％、又は100％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項11記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１３】
前記抗原が、
(i) Rb結合部位に変異を有するHPVタンパク質E7;
(ii) Rb結合部位及びジンクフィンガーモチーフに変異を有するHPVタンパク質E7;又は
(iii) ジンクフィンガーモチーフに変異を有するHPVタンパク質E6
であるか、又はこれを含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１４】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号10のアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードする、請求項1記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１５】
前記2つのSセグメントのうちの1つが、
a. NPをコードするORFが、アレナウイルスの5'UTRの制御下にあるSセグメント;
b. Zタンパク質をコードするORFが、アレナウイルスの5'UTRの制御下にあるSセグメント;
c. Lタンパク質をコードするORFが、アレナウイルスの5'UTRの制御下にあるSセグメント;
d. GPをコードするORFが、アレナウイルスの3'UTRの制御下にあるSセグメント;
e. Lタンパク質をコードするORFが、アレナウイルスの3'UTRの制御下にあるSセグメント;及び
f. Zタンパク質をコードするORFが、アレナウイルスの3'UTRの制御下にあるSセグメントからなる群から選択され、
任意に、該アレナウイルスの3'UTRが、該アレナウイルスのSセグメント又は該アレナウイルスのLセグメントの3'UTRであり、該アレナウイルスの5'UTRが、該アレナウイルスのSセグメント又は該アレナウイルスのLセグメントの5'UTRである、請求項1〜14のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１６】
前記2つのSセグメントのうちの1つが、前記抗原をコードする第1のヌクレオチド配列を含み、前記2つのSセグメントのうちの他のSセグメントが、前記抗原をコードする第2のヌクレオチド配列を含む、請求項1〜15のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１７】
前記第1のヌクレオチド配列及び前記第2のヌクレオチド配列の両方が、HPV抗原をコードする、請求項16記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１８】
前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクターが、全4つのアレナウイルスORFを含み、該三セグメントアレナウイルスウイルスベクターが、感染性であり、かつ複製可能である、請求項1〜17のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項１９】
1つのLセグメント及び2つのSセグメントを含む三セグメントアレナウイルスウイルスベクターであって、第1のSセグメントが、アレナウイルスの3'UTRの制御下の位置にGPをコードするORFと、アレナウイルスの5'UTRの制御下の位置に配列番号10と少なくとも80％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするORFを担持するように改変されており、かつ第2のSセグメントが、アレナウイルスの3'UTRの制御下の位置にNPをコードするORFと、アレナウイルスの5'UTRの制御下の位置に配列番号10と少なくとも80％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするORFを担持するように改変されている、前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２０】
1つのLセグメント及び2つのSセグメントを含む三セグメントアレナウイルスウイルスベクターであって、第1のSセグメントが、アレナウイルスの5'UTRの制御下の位置にGPをコードするORFと、アレナウイルスの3'UTRの制御下の位置に配列番号10と少なくとも80％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするORFを担持するように改変されており、かつ第2のSセグメントが、アレナウイルスの5'UTRの制御下の位置にNPをコードするORFと、アレナウイルスの3'UTRの制御下の位置に配列番号10と少なくとも80％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするORFを担持するように改変されている、前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２１】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10のアミノ酸配列と少なくとも85％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２２】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10と少なくとも90％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２３】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10と少なくとも95％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２４】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10と少なくとも99％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２５】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10と少なくとも100％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２６】
前記第1のSセグメント又は第2のSセグメントのポリペプチドが、配列番号10のアミノ酸配列からなる、請求項19又は20記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２７】
前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクターが、
(i). 弱毒化される;
(ii). 二セグメントアレナウイルスウイルスベクターと同じ指向性を有する;
(iii). LCMVに由来し、任意に、該LCMVがMP株、アームストロング株、もしくはアームストロングクローン13株である;又は
(iv). ピチンデウイルスに由来する、請求項1〜26のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項２８】
請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクターを含む宿主細胞。
【請求項２９】
請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクターをインビトロで作製する方法であって、
a. 宿主細胞に、Lセグメント及び2つのSセグメントの1以上のcDNAをトランスフェクトすること;
b. 該宿主細胞を、ウイルス形成に好適な条件下で維持すること;及び
c. 前記アレナウイルスウイルスベクターを収集すること
を含む、前記方法。
【請求項３０】
(i).1つのLセグメント及び2つのSセグメントの転写が、双方向プロモーターを使用して行われる;
(ii).前記方法が、アレナウイルスポリメラーゼをコードする1以上の核酸を前記宿主細胞にトランスフェクトすることをさらに含み、任意に、該アレナウイルスポリメラーゼがLタンパク質である;
(iii).前記方法が、前記NPタンパク質をコードする1以上の核酸を前記宿主細胞にトランスフェクトすることをさらに含む;又は
(iv).前記Lセグメント及び前記2つのSセグメントの転写がそれぞれ、
a. RNAポリメラーゼIプロモーター;
b. RNAポリメラーゼIIプロモーター;及び
c. T7プロモーターからなる群から選択されるプロモーターの制御下にある、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター及び医薬として許容される担体を含む、ワクチン又は医薬組成物。
【請求項３２】
患者におけるヒトパピローマウイルス感染を治療又は予防する方法に使用するための請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、又は請求項31記載のワクチン又は医薬組成物であって、該方法が、該三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、該ワクチン、又は該医薬組成物を該患者に投与することを含む、前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター又はワクチン又は医薬組成物。
【請求項３３】
(i).前記方法が、前記患者における既存のHPVの力価を低下させる;
(ii).前記方法が、抗原特異的CD8＋T細胞応答を誘導する;
(iii).前記HPV感染が症候性である;
(iv).前記HPV感染が無症候性である;又は
(v).前記方法が、前記HPV感染の重症度もしくは頻度を低下させるか、又はその症状を予防し、任意に、該症状が、子宮頸癌、肛門癌、外陰癌、膣癌、陰茎癌、HPV陽性の口咽頭癌(OSCC)、一般的な疣贅、足底の疣贅、爪下又は爪周囲の疣贅、性器疣贅、尖圭コンジローム又は性病疣贅、呼吸器乳頭腫症、及び疣贅状表皮発育異常症からなる群から選択される、請求項32記載の使用のための三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物。
【請求項３４】
患者におけるヒトパピローマウイルス感染を治療又は予防する方法に使用するための請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、又は請求項31記載のワクチン又は医薬組成物であって、該方法が、請求項1〜27又は31のいずれか一項記載の第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物を該患者に投与すること、及び請求項1〜27又は31のいずれか一項記載の第2の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物を該患者に投与することを含み、任意に、該第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター及び第2の三セグメントアレナウイルスウイルスベクターが同じ抗原を発現する、前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター又はワクチン又は医薬組成物。
【請求項３５】
対象において免疫応答を誘導する方法に使用するための請求項1〜27のいずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、又は請求項31記載のワクチン又は医薬組成物であって、該方法が、請求項1〜27又は31のいずれか一項記載の第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物を該患者に投与すること、及び請求項1〜27又は31のいずれか一項記載の第2の異なる三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物を該患者に投与することを含み、任意に、該第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター及び第2の三セグメントアレナウイルスウイルスベクターが同じ抗原を発現する、前記三セグメントアレナウイルスウイルスベクター又はワクチン又は医薬組成物。
【請求項３６】
前記第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物、及び前記第2の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物が、前記患者に同時に投与される、請求項34又は35記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項３７】
前記第1の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物が、前記患者に投与され、次いで、前記第2の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター、ワクチン又は医薬組成物が、該患者に一定期間の後に投与される、請求項34又は35記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクター。
【請求項３８】
患者におけるヒトパピローマウイルス(HPV)感染を治療又は予防するための医薬品の製造における請求項1〜27いずれか一項記載の三セグメントアレナウイルスウイルスベクターの使用。
【請求項３９】
(i). 前記治療が、前記患者における既存のHPVの力価の低下をもたらす;
(ii). 前記治療又は予防が、抗原特異的CD8＋T細胞応答を誘導する;
(iii). 前記HPV感染が症候性である;
(iv). 前記HPV感染が無症候性である;又は
(v). 前記治療又は予防が、前記HPV感染の重症度もしくは頻度を低下させるか、又はその症状を予防し、任意に、該症状が、子宮頸癌、肛門癌、外陰癌、膣癌、陰茎癌、HPV陽性の口咽頭癌(OSCC)、一般的な疣贅、足底の疣贅、爪下又は爪周囲の疣贅、性器疣贅、尖圭コンジローム又は性病疣贅、呼吸器乳頭腫症、及び疣贅状表皮発育異常症からなる群から選択される、請求項38記載の使用。