【手続補正書】
【提出日】令和2年8月6日(2020.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インフルエンザウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）タンパク質を含む組換えタンパク質であって、
ヘッド領域のアミノ酸配列の少なくとも９５％がリンカー配列で置き換えられており、
ＨＡタンパク質のステム領域におけるヘリックスＡの長さが、ヘリックスＡへのアミノ酸残基の付加によって伸長されている、
組換えタンパク質。
【請求項２】
ＨＡタンパク質のステム領域におけるヘリックス間ループが、野生型ＨＡタンパク質におけるヘリックス間ループと比較して、該ヘリックス間ループの配列から１つもしくは複数またはすべてのアミノ酸残基が除去されているために短い、請求項１に記載の組換えタンパク質。
【請求項３】
ＨＡタンパク質のステム領域が、（ｉ）ＨＡタンパク質において新たなイオン相互作用もしくは塩架橋を形成するか、または（ii）ＨＡタンパク質において既存のイオン相互作用もしくは塩架橋を強化する、１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１または２に記載の組換えタンパク質。
【請求項４】
ＨＡタンパク質のステム領域が、ＨＡタンパク質において疎水性パッキングを増加させる１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の組換えタンパク質。
【請求項５】
ＨＡタンパク質が、配列番号４におけるＧ３９、Ｔ４６、Ｎ５４、Ｔ５８、Ｌ３３１、Ｎ３３８、Ｑ３９２、Ｋ３９６、Ｌ３９７、Ｌ４００、Ｓ４３８、Ｎ４４０、Ｅ４４８、Ｔ４５２およびＮ４６１からなる群から選択される１つまたは複数の位置に対応するＨＡタンパク質のアミノ酸位置において１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の組換えタンパク質。
【請求項６】
リンカー配列が、インフルエンザＨＡタンパク質のヘッド領域由来の５個未満の連続アミノ酸残基を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の組換えタンパク質。
【請求項７】
組換えタンパク質が、自己集合性の単量体サブユニットタンパク質に連結されている、請求項１〜６のいずれかに記載の組換えタンパク質。
【請求項８】
ＨＡタンパク質が、インフルエンザウイルスＨＡタンパク質のステム領域に由来する第１のアミノ酸配列、およびインフルエンザウイルスＨＡタンパク質のステム領域に由来する第２のアミノ酸配列を含み、
リンカー配列が、第１のアミノ酸配列のカルボキシル末端を、第２のアミノ酸配列のアミノ末端へ、共有結合により連結し、
第１のアミノ酸配列が、配列番号２７、配列番号２８および配列番号２９からなる群から選択される配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含み、
第２のアミノ酸配列が、配列番号３０、配列番号３１および配列番号３２からなる群から選択される配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含む、
請求項１〜７のいずれかに記載の組換えタンパク質。
【請求項９】
第２のアミノ酸配列が、配列番号３０と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含み、配列番号３０のアミノ酸残基７３〜１０８はリンカーペプチドで置き換えられている、請求項８に記載の組換えタンパク質。
【請求項１０】
融合タンパク質が、配列番号４７〜１５９からなる群から選択される配列と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の組換えタンパク質。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の組換えタンパク質をコードする核酸分子。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれかに記載の組換えタンパク質を含むナノ粒子。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれかに記載の組換えタンパク質、請求項１１に記載の核酸分子、または請求項１２に記載のナノ粒子を含むキット。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれかに記載の組換えタンパク質、または請求項１２に記載のナノ粒子を含む、個体へのインフルエンザウイルスに対するワクチン接種用の医薬組成物。
【請求項１５】
抗インフルエンザ抗体を検出する方法であって、
ａ．抗インフルエンザ抗体の存在に関して試験される試料の少なくとも一部を、請求項１〜１０のいずれかに記載の組換えタンパク質、または請求項１２に記載のナノ粒子に接触させること；および
ｂ．ナノ粒子／抗インフルエンザ抗体複合体の存在を検出すること
を含み、
ナノ粒子／抗体複合体の検出は、試料が抗インフルエンザ抗体を含むことを示す、
方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８３】
本発明はまた、抗インフルエンザ抗体を検出するために適したキットも含む。適した検出手段は、本発明のナノ粒子を利用する、本書に開示される技術を含む。キットはまた、ナノ粒子または他の指標分子に選択的に結合する抗体などの検出可能なマーカーも含み得る。キットはまた、緩衝液、ラベル、容器、添付文書、チューブ、バイアル、シリンジ等などの、しかしこれらに限定されない、関連する構成要素を含み得る。
本発明の実施形態を、以下、さらに記載する：
［項１］
グループ２インフルエンザヘマグルチニン（ＨＡ）タンパク質を含む組換えタンパク質であって、ヘッド領域のアミノ酸配列が、インフルエンザＨＡタンパク質のヘッド領域に由来する５個未満の連続アミノ酸を含むリンカーで置き換えられており、タンパク質の哺乳動物への投与が、哺乳動物におけるグループ２インフルエンザＨＡタンパク質に対する免疫応答を誘発する、組換えタンパク質。
［項２］
組換えタンパク質が、グループ２インフルエンザウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）タンパク質のステム領域に由来する第１のアミノ酸配列と、グループ２インフルエンザウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）タンパク質のステム領域に由来する第２のアミノ酸配列とを含み、
第１および第２のアミノ酸配列が、リンカー配列によって共有結合により連結され、
第１のアミノ酸配列が、ヘッド領域配列のアミノ末端の上流のアミノ酸配列に由来する少なくとも２０個の連続アミノ酸残基を含み、
第２のアミノ酸配列が、ヘッド領域配列のカルボキシル末端の下流のアミノ酸配列に由来する少なくとも２０個の連続アミノ酸残基を含む、
上記項１に記載の組換えタンパク質。
［項３］
単量体サブユニットに連結している、上記項１または２に記載の組換えタンパク質。
［項４］
単量体サブユニットタンパク質が、フェリチンまたはルマジンシンターゼに由来する、上記項３に記載の組換えタンパク質。
［項５］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質を含むナノ粒子であって、インフルエンザＨＡタンパク質の三量体を表面上に提示する、ナノ粒子。
［項６］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含むタンパク質を含む免疫原性組成物。
［項７］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質、または上記項５に記載のナノ粒子、およびアジュバントを含むワクチン組成物。
［項８］
上記項７に記載のワクチン組成物の免疫学的有効量を、必要とするヒトに投与することを含む、ヒトにおいてインフルエンザウイルス感染の病理学的作用を阻止または低減する方法。
［項９］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質をコードする核酸。
［項１０］
ＤＮＡである、上記項９に記載の核酸。
［項１１］
上記項１０に記載の核酸を含むベクター。
［項１２］
上記項１１に記載のベクターを含む宿主細胞。
［項１３］
細菌細胞、酵母細胞、または哺乳動物細胞である、上記項１２に記載の宿主細胞。
［項１４］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質を含む医薬組成物。
［項１５］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質、上記項５に記載のナノ粒子、上記項６に記載の免疫原性組成物、上記項７に記載のワクチン組成物、上記項９に記載の核酸分子、または上記項１１に記載のベクターの予防または治療有効量を対象に投与することを含む、ワクチン接種方法。
［項１６］
上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質、上記項５に記載のナノ粒子、上記項６に記載の免疫原性組成物、上記項７に記載のワクチン組成物、上記項９に記載の核酸分子、または上記項１１に記載のベクターの予防または治療有効量を、必要とする対象に投与することを含む、インフルエンザ関連疾患の処置方法。
［項１７］
生理学的に許容される担体と組み合わせた、上記項１〜４のいずれか一項に記載の組換えタンパク質を含むワクチン。
［項１８］
抗インフルエンザ抗体を検出する方法であって、
ａ．抗インフルエンザ抗体の存在に関して試験される試料の少なくとも一部を、上記項５に記載のナノ粒子に接触させること；および
ｂ．ナノ粒子／抗インフルエンザ抗体複合体の存在を検出すること
を含み、
ナノ粒子／抗体複合体の検出は、試料が抗インフルエンザ抗体を含むことを示す、方法。