【手続補正書】
【提出日】令和2年9月15日(2020.9.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（a）pHトリガーポリペプチド（pH-triggered polypeptide）（pHLIPペプチド）と、
（b）フルオロフォアであって、近赤外（NIR）フルオロフォア、シアニンフルオロフォア、または光音響造影イメージング剤（optoacoustic contrast imaging agent）である、該フルオロフォアと
を含む、pHLIPフルオロフォア化合物。
【請求項２】
以下の構造:
2020500926.tif 000001
を有する、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
前記pHLIPペプチドが配列LFPTXTLL（SEQ ID NO:1）におけるアミノ酸を含み、Xがプロトン化可能アミノ酸であり、かつ前記フルオロフォアがNIRフルオロフォアを含む、請求項1記載の化合物。
【請求項４】
XがDである、請求項3記載の化合物。
【請求項５】
前記フルオロフォアがインドシアニングリーン（ICG）を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項６】
前記pHLIPペプチドが配列:
2020500926.tif 000002
を含み、ここで、
i）Yが、溶媒和エネルギー
2020500926.tif 000003
を有する非極性アミノ酸、またはGlyであり、
ii）Xがプロトン化可能アミノ酸であり、かつ
iii）n、m、I、j、l、h、g、fが1〜8の整数である、
請求項1記載の化合物。
【請求項７】
前記pHLIPペプチドが水中で約7.5または7.75のpHで、ある正味の負電荷を有する、請求項1記載の化合物。
【請求項８】
前記pHLIPペプチドが対数尺度で約4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、または7未満の酸解離定数（pKa）を有する、請求項1記載の化合物。
【請求項９】
前記pHLIPペプチドが少なくとも1つの人工プロトン化可能アミノ酸を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１０】
前記pHLIPペプチドが少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、または40個の遺伝的にコードされたアミノ酸を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１１】
前記pHLIPペプチドが少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、または40個の非遺伝的にコードされたアミノ酸を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１２】
前記pHLIPペプチドが少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、または40個のD-アミノ酸を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１３】
前記pHLIPペプチドが少なくとも8個のアミノ酸を含み、前記pHLIPペプチドの該8個のアミノ酸の少なくとも2、3、または4個が非極性であり、前記pHLIPペプチドの少なくとも8個のアミノ酸の少なくとも1、2、3、または4個がプロトン化可能である、請求項1記載の化合物。
【請求項１４】
前記フルオロフォアがシアニンフルオロフォアである、請求項1記載の化合物。
【請求項１５】
前記フルオロフォアがNIRフルオロフォアである、請求項1記載の化合物。
【請求項１６】
前記フルオロフォアが光音響造影イメージング剤を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１７】
（a）配列LFPTXTLL（SEQ ID NO:1）におけるアミノ酸を含むpHLIPペプチドであって、Xがプロトン化可能アミノ酸であり、該pHLIPペプチドが、pH8.0と比較してpH5.0で膜脂質二重層に対してより高い親和性を有する、該pHLIPペプチドと、
（b）pHLIPペプチドのN末端から数えて1番目または2番目のアミノ酸に共有結合している、インドシアニングリーン（ICG）と
を含む、請求項1記載の化合物。
【請求項１８】
XがDである、請求項17記載の化合物。
【請求項１９】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000004
におけるアミノ酸を含み、そのシステインに前記ICGが共有結合している、請求項17記載の化合物。
【請求項２０】
以下の構造:
2020500926.tif 000005
を含む、請求項19記載の化合物。
【請求項２１】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000006
におけるアミノ酸を含み、そのN末端アラニンに前記ICGが共有結合している、請求項17記載の化合物。
【請求項２２】
以下の構造:
2020500926.tif 000007
を含む、請求項21記載の化合物。
【請求項２３】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000008
におけるアミノ酸を含み、そのリジンに前記ICGが共有結合している、請求項17記載の化合物。
【請求項２４】
以下の構造:
2020500926.tif 000009
を含む、請求項23記載の化合物。
【請求項２５】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000010
におけるアミノ酸を含み、そのシステインに前記ICGが共有結合している、請求項17記載の化合物。
【請求項２６】
以下の構造:
2020500926.tif 000011
を含む、請求項25記載の化合物。
【請求項２７】
前記pHLIPペプチドが人工プロトン化可能アミノ酸を含む、請求項17記載の化合物。
【請求項２８】
人工プロトン化可能アミノ酸が少なくとも1、2、3、4または5つのカルボキシル基を含む、請求項27記載の化合物。
【請求項２９】
プロトン化可能アミノ酸がアスパラギン酸またはガンマカルボキシグルタミン酸を含む、請求項17記載の化合物。
【請求項３０】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000012
におけるアミノ酸を含む、請求項17記載の化合物。
【請求項３１】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000013
におけるアミノ酸を含む、請求項30記載の化合物。
【請求項３２】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000014
におけるアミノ酸を含む、請求項31記載の化合物。
【請求項３３】
前記pHLIPペプチドが配列
2020500926.tif 000015
におけるアミノ酸を含む、請求項32記載の化合物。
【請求項３４】
前記pHLIPペプチドが配列:
2020500926.tif 000016
におけるアミノ酸を含む、請求項33記載の化合物。
【請求項３５】
前記pHLIPペプチドのアミノ酸配列がSEQ ID NO:15〜24に記載のアミノ酸配列のそれぞれと100％、99％、または95％未満同一である、請求項17記載の化合物。
【請求項３６】
前記pHLIPペプチドが20〜30個のアミノ酸を含む、請求項17記載の化合物。
【請求項３７】
請求項1記載の化合物と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項３８】
D-グルコースをさらに含む、請求項37記載の組成物。
【請求項３９】
口内洗浄剤を含む、請求項38記載の組成物。
【請求項４０】
請求項1記載の化合物を含む、対象における罹患組織または損傷組織を検出するための薬学的組成物であって、以下の工程を含むように用いられることを特徴とする、薬学的組成物:
（a）請求項1記載の化合物を対象に投与する工程;
（b）該対象をフルオロフォアの励起波長を含む電磁放射線と接触させる工程;および
（c）該化合物から放射される電磁放射線を検出する工程であって、該放射線の検出が罹患組織の存在を示す、該検出する工程。
【請求項４１】
罹患組織または損傷組織が、がん組織、前がん性組織、炎症組織、虚血組織、関節炎組織、嚢胞性線維性組織、微生物に感染した組織、またはアテローム硬化性組織である、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項４２】
罹患組織ががん組織であり、該がん組織が対象の膀胱、上部尿路、腎臓、前立腺、乳房、頭、首、口腔、膵臓、肺、肝臓、子宮頸部、卵巣、または脳にある、請求項41記載の薬学的組成物。
【請求項４３】
前がん性組織またはがん組織から放射される放射線のレベルが、正常な非がん性組織から放射される放射線のレベルよりも少なくとも20％大きい、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項４４】
前記身体の臓器が腎臓または膀胱を含む、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
請求項1記載の化合物を含む、対象における体液の動きを検出するための薬学的組成物であって、以下の工程を含むように用いられることを特徴とする、薬学的組成物:
（a）請求項1記載の化合物を対象に投与する工程;
（b）該対象をフルオロフォアの励起波長を含む電磁放射線と接触させる工程;および
（c）該化合物から放射される電磁放射線を検出する工程であって、該放射線の検出が体液の存在を示す、該検出する工程。
【請求項４６】
体液が血液を含む、請求項45記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
血液が身体内腔内、血管腔内、毛細管腔内、静脈内腔内、動脈内腔内、または固形組織内を循環している、請求項46記載の薬学的組成物。
【請求項４８】
体液がリンパ液を含む、請求項45記載の薬学的組成物。
【請求項４９】
前記化合物が、膀胱内注入、静脈内投与、腹腔内投与、局所投与、粘膜投与、経口投与、動脈内投与、脳内投与、脳室内投与、髄腔内投与、心臓内投与、陰茎海綿体内投与、骨内投与、眼内投与、硝子体内投与、筋肉内投与、皮内投与、経皮投与、経粘膜投与、病巣内投与、皮下投与、皮膚上投与、羊膜外投与、膣内投与、膀胱内投与、または経鼻投与を介して対象に投与される、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項５０】
前記化合物が、前記化合物を含む液体、粉末、または噴霧剤を対象の表面に適用することによって投与される、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項５１】
前記表面が、手術を介してアクセスされる対象の身体内の部位を含む、請求項50記載の薬学的組成物。
【請求項５２】
前記化合物から放射される電磁放射線がインビボで検出される、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
前記化合物から放射される電磁放射線がエクスビボで検出される、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
工程（c）によって同定されたがんまたは前がん性の細胞または組織を外科的に除去する工程をさらに含む、請求項40記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
工程が、蛍光血管造影を含む、請求項47記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
眼科的処置、心胸郭手術、バイパス冠動脈手術、脳神経外科手術、肝胆道手術、再建手術、胆嚢摘除術、結腸直腸切除術、脳手術、筋肉灌流、創傷もしくは外傷手術、または腹腔鏡手術中に行われる、請求項47記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
下記の工程を含む、生物学的試料中のフルオロフォアをエクスビボで検出するための方法:
（a）対象からの生物学的試料を請求項1記載の化合物と接触させる工程;
（b）該生物学的試料をフルオロフォアの励起波長を含む電磁放射線と接触させる工程;および
（c）フルオロフォアから放射される電磁放射線を検出する工程。
【請求項５８】
前記生物学的試料が、組織生検標本、液体生検標本、外科的に除去された組織、外科的に除去された液体、または血液を含む、請求項57記載の方法。