【手続補正書】
【提出日】令和2年10月9日(2020.10.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト形質転換成長因子ベータ受容体２（ＴＧＦβＲ２）遺伝子内の標的部位を切断するＩ−ＯｎｕＩホーミングエンドヌクレアーゼ（ＨＥ）バリアントを含む、ポリペプチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドが、
（ａ）前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片；
（ｂ）対応する野生型Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥと比較して、１、２、３、４、５、６、７、または８個のＮ末端アミノ酸を欠いている、前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片；または
（ｃ）対応する野生型Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥと比較して、１、２、３、４、または５個のＣ末端アミノ酸を欠いている、前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片
を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの以下のアミノ酸置換：Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０Ｒ、Ｓ１９０Ｇ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、Ｔ２４０Ｒ、およびＥ２６４Ｋのうちの少なくとも３５、または好ましくは少なくとも４０個以上を含む、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの以下のアミノ酸置換：
（ａ）Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０Ｒ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、およびＴ２４０Ｒ；または
（ｂ）Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０Ｒ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、Ｔ２４０Ｒ、およびＥ２６４Ｋ
のうちの少なくとも３５、または好ましくは少なくとも４０個以上を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記Ｉ−ＯｎｕＩ  ＨＥバリアントが、配列番号：６もしくは７に記載されるアミノ酸配列、またはそれらの生物学的に活性な断片と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、またはさらにより好ましくは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドが、配列番号：１１に記載されるポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項７】
ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメイン、好ましくは約９．５のＴＡＬＥ繰り返し単位〜約１５．５のＴＡＬＥ繰り返し単位を含むＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインをさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号：１２に記載されるポリヌクレオチド配列に結合する、請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記ポリペプチドが、配列番号：１３に記載されるポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
（ａ）ペプチドリンカーまたはウイルス自己切断型２Ａペプチド、および（ｂ）Ｔｒｅｘ２  ５´−３´エクソヌクレアーゼまたはそれらの生物学的に活性な断片をさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、必要に応じて前記ポリヌクレオチドがｍＲＮＡまたはｃＤＮＡである、ポリヌクレオチド。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項１１に記載のポリヌクレオチド、または請求項１２に記載のベクターを含む、細胞。
【請求項１４】
遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含み、必要に応じて前記遺伝子操作された抗原受容体が、遺伝子操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカインである、請求項１３に記載の細胞。
【請求項１５】
前記細胞が、造血細胞、Ｔ細胞、ＣＤ３＋細胞、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、免疫エフェクター細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、請求項１３または請求項１４に記載の細胞。
【請求項１６】
請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む組成物であって、必要に応じて生理学的に許容可能な担体を含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３４】
追加の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、白血病、リンパ腫、または多発性骨髄腫である。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ヒト形質転換成長因子ベータ受容体２（ＴＧＦβＲ２）遺伝子内の標的部位を切断するホーミングエンドヌクレアーゼ（ＨＥ）バリアントを含む、ポリペプチド。
（項目２）
前記ＨＥバリアントが、ＬＡＧＬＩＤＡＤＧホーミングエンドヌクレアーゼ（ＬＨＥ）バリアントである、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３）
前記ポリペプチドが、前記ＨＥバリアントの生物学的に活性な断片を含む、項目１または項目２に記載のポリペプチド。
（項目４）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、１、２、３、４、５、６、７、または８個のＮ末端アミノ酸を欠いている、項目３に記載のポリペプチド。
（項目５）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、４個のＮ末端アミノ酸を欠いている、項目４に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、８個のＮ末端アミノ酸を欠いている、項目４に記載のポリペプチド。
（項目７）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、１、２、３、４、または５個のＣ末端アミノ酸を欠いている、項目３に記載のポリペプチド。
（項目８）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、Ｃ末端アミノ酸を欠いている、項目７に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記生物学的に活性な断片が、対応する野生型ＨＥと比較して、２個のＣ末端アミノ酸を欠いている、項目７に記載のポリペプチド。
（項目１０）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＡａｂＭＩ、Ｉ−ＡａｅＭＩ、Ｉ−ＡｎｉＩ、Ｉ−ＡｐａＭＩ、Ｉ−ＣａｐＩＩＩ、Ｉ−ＣａｐＩＶ、Ｉ−ＣｋａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＶ、Ｉ−ＣｐａＭＶ、Ｉ−ＣｐａＶ、Ｉ−ＣｒａＭＩ、Ｉ−ＥｊｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｉＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＬｔｒＩＩ、Ｉ−ＬｔｒＩ、Ｉ−ＬｔｒＷＩ、Ｉ−ＭｐｅＭＩ、Ｉ−ＭｖｅＭＩ、Ｉ−ＮｃｒＩＩ、Ｉ−Ｎｃｒｌ、Ｉ−ＮｃｒＭＩ、Ｉ−ＯｈｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＶ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩＩ、Ｉ−ＰｎｏＭＩ、Ｉ−ＳｃｕＭＩ、Ｉ−ＳｍａＭＩ、Ｉ−ＳｓｃＭＩ、およびＩ−Ｖｄｉ１４１Ｉからなる群から選択されるＬＨＥのバリアントである、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１１）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、およびＳｍａＭＩからなる群から選択されるＬＨＥのバリアントである、項目１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１２）
前記ＨＥバリアントが、Ｉ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥバリアントである、項目１〜１１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１３）
前記ＨＥバリアントが、配列番号：１〜５に記載のＩ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片の１９、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５９、６８、７０、７２、７５、７６、７７、７８、８０、８２、１６８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、１９７、１９９、２０１、２０３、２２３、２２５、２２７、２２９、２３１、２３２、２３４、２３６、２３８、および２４０からなる群から選択されるアミノ酸位置にあるＤＮＡ認識インターフェースにおいて１つ以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１４）
前記ＨＥバリアントが、配列番号：１〜５に記載のＩ−ＯｎｕＩ  ＬＨＥアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片の１９、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５９、６８、７０、７２、７５、７６、７７、７８、８０、８２、１６８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９５、１９７、１９９、２０１、２０３、２２３、２２５、２２７、２２９、２３１、２３２、２３４、２３６、２３８、および２４０からなる群から選択されるアミノ酸位置にあるＤＮＡ認識インターフェースにおいて少なくとも５、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２５、より好ましくは少なくとも３５、またはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１５）
前記ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの位置：２６、３２、３４、３５、３６、３７、３８、４０、４２、４４、４６、４８、６８、７０、７５、７６、７８、８０、１１６、１３８、１４３、１５９、１６８、１７８、１８０、１８２、１８４、１８８、１９０、１９２、１９３、１９５、１９７、１９９、２０３、２０７、２２３、２２５、２２７、２３２、２４０、および２６４からなる位置群から選択される少なくとも１つの位置において少なくとも５、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２５、より好ましくは少なくとも３５、またはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上のアミノ酸置換を含む、項目１〜１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１６）
前記ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの以下のアミノ酸置換：Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０ＲもしくはＳ１９０Ｇ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、Ｔ２４０Ｒ、およびＥ２６４Ｋのうちの少なくとも５、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２５、より好ましくは少なくとも３５、またはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１７）
前記ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの以下のアミノ酸置換：Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０Ｒ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｒ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、およびＴ２４０Ｒのうちの少なくとも５、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２５、より好ましくは少なくとも３５、またはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１８）
前記ＨＥバリアントが、ＴＧＦβＲ２標的部位を切断し、配列番号：１〜５またはそれらの生物学的に活性な断片のいずれか１つの以下のアミノ酸置換：Ｌ２６Ｍ、Ｎ３２Ｒ、Ｋ３４Ｑ、Ｓ３５Ｒ、Ｓ３６Ｋ、Ｖ３７Ａ、Ｇ３８Ｎ、Ｓ４０Ｇ、Ｅ４２Ｓ、Ｇ４４Ｖ、Ｑ４６Ｅ、Ｔ４８Ｇ、Ｖ６８Ｋ、Ａ７０Ｒ、Ｎ７５Ｇ、Ａ７６Ｓ、Ｓ７８Ｒ、Ｋ８０Ｓ、Ｖ１１６Ｌ、Ｌ１３８Ｍ、Ｔ１４３Ｎ、Ｓ１５９Ｐ、Ｆ１６８Ｌ、Ｅ１７８Ｄ、Ｃ１８０Ｓ、Ｆ１８２Ｇ、Ｎ１８４Ｄ、Ｓ１８８Ｒ、Ｓ１９０Ｒ、Ｌ１９２Ｔ、Ｇ１９３Ｔ、Ｑ１９５Ｇ、Ｑ１９７Ｇ、Ｖ１９９Ｒ、Ｔ２０３Ｓ、Ｋ２０７Ｒ、Ｙ２２３Ｈ、Ｋ２２５Ｙ、Ｋ２２７Ｒ、Ｆ２３２Ｎ、Ｔ２４０Ｒ、およびＥ２６４Ｋのうちの少なくとも５、少なくとも１５、好ましくは少なくとも２５、より好ましくは少なくとも３５、またはさらにより好ましくは少なくとも４０個以上を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目１９）
前記ＨＥバリアントが、配列番号：６もしくは７に記載されるアミノ酸配列、またはそれらの生物学的に活性な断片と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、またはさらにより好ましくは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２０）
前記ＨＥバリアントが、配列番号：６に記載されるアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片を含む、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２１）
前記ＨＥバリアントが、配列番号：７に記載されるアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片を含む、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２２）
前記ポリペプチドが、配列番号：１１に記載されるポリヌクレオチド配列に結合する、項目１〜２１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２３）
ＤＮＡ結合ドメインをさらに含む、項目１〜２２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２４）
前記ＤＮＡ結合ドメインが、ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインおよび亜鉛フィンガーＤＮＡ結合ドメインからなる群から選択される、項目２３に記載のポリペプチド。
（項目２５）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、約９．５のＴＡＬＥ繰り返し単位〜約１５．５のＴＡＬＥ繰り返し単位を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目２６）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、前記ＴＧＦβＲ２遺伝子内のポリヌクレオチド配列に結合する、項目２４または項目２５に記載のポリペプチド。
（項目２７）
前記ＴＡＬＥ  ＤＮＡ結合ドメインが、配列番号：１２に記載されるポリヌクレオチド配列に結合する、項目２４〜２６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目２８）
前記ポリペプチドが、配列番号：１３に記載されるポリヌクレオチド配列に結合し、それを切断する、項目２７に記載のポリペプチド。
（項目２９）
前記亜鉛フィンガーＤＮＡ結合ドメインが、２、３、４、５、６、７、または８つの亜鉛フィンガーモチーフを含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３０）
ペプチドリンカーおよびエンドプロセシング酵素またはそれらの生物学的に活性な断片をさらに含む、項目１〜２９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３１）
ウイルス自己切断型２Ａペプチドおよびエンドプロセシング酵素またはそれらの生物学的に活性な断片をさらに含む、項目１〜３０のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３２）
前記エンドプロセシング酵素またはその生物学的に活性な断片が、５´−３´エクソヌクレアーゼ、５´−３´アルカリ性エクソヌクレアーゼ、３´−５´エクソヌクレアーゼ、５´フラップエンドヌクレアーゼ、ヘリカーゼ、またはテンプレート非依存性ＤＮＡポリメラーゼ活性を有する、項目３０または項目３１に記載のポリペプチド。
（項目３３）
前記エンドプロセシング酵素が、Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片を含む、項目３０〜３２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３４）
前記ポリペプチドが、配列番号：８もしくは配列番号：９に記載されるアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片を含む、項目１〜３３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３５）
前記ポリペプチドが、配列番号：８に記載されるアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片を含む、項目３４に記載のポリペプチド。
（項目３６）
前記ポリペプチドが、配列番号：９に記載されるアミノ酸配列またはそれらの生物学的に活性な断片を含む、項目３４に記載のポリペプチド。
（項目３７）
前記ポリペプチドが、配列番号：１１または１３に記載されるポリヌクレオチド配列で前記ヒトＴＧＦβＲ２遺伝子を切断する、項目１〜３６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
（項目３８）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
（項目３９）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ｍＲＮＡ。
（項目４０）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする、ｃＤＮＡ。
（項目４１）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、ベクター。
（項目４２）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、細胞。
（項目４３）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、細胞。
（項目４４）
項目４１に記載のベクターを含む、細胞。
（項目４５）
項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドによって導入された１つ以上のゲノム修飾を含む、細胞。
（項目４６）
前記細胞が、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうちの１つ以上をコードするポリヌクレオチドを含む、項目４２〜４５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目４７）
前記ポリヌクレオチドが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、項目４６に記載の細胞。
（項目４８）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターが、短ＥＦ１αプロモーター、長ＥＦ１αプロモーター、ヒトＲＯＳＡ２６遺伝子座、ユビキチンＣ（ＵＢＣ）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１（ＰＧＫ）プロモーター、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＡＧ）プロモーター、β−アクチンプロモーター、および骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー、負の制御領域の欠失、ｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目４７に記載の細胞。
（項目４９）
前記ポリヌクレオチドが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結され、それらの間に散在し、および／またはそれらに隣接する１つ以上の自己切断型ウイルスペプチドをさらにコードする、項目４６〜４８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５０）
前記自己切断型ウイルスペプチドが、２Ａペプチドである、項目４９に記載の細胞。
（項目５１）
前記ポリヌクレオチドが、異種ポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目４６〜５０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５２）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、免疫抑制因子に対抗する酵素機能を含む、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５３）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、キヌレニナーゼ活性を含む、項目５２に記載の細胞。
（項目５４）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、
（ａ）免疫抑制因子に結合し、任意に抗体もしくはその抗原結合断片である細胞外ドメイン、
（ｂ）免疫抑制因子および膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメイン、または
（ｃ）免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインと、膜貫通ドメインと、免疫抑制シグナルを前記細胞に伝達不可能である修飾細胞内ドメインと、を含む、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５５）
前記免疫抑制シグナルダンパーの前記細胞外ドメインおよび／または膜貫通ドメインが、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインおよび／または膜貫通ドメインである、項目５４に記載の細胞。
（項目５６）
前記免疫力エンハンサーが、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー分子（ＢｉＴＥ）、免疫賦活因子、およびフリップ受容体からなる群から選択される、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５７）
前記免疫賦活因子が、サイトカイン、ケモカイン、細胞毒素、サイトカイン受容体、およびそれらのバリアントからなる群から選択される、項目５６に記載の細胞。
（項目５８）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、ＴＧＦβＲ２膜貫通ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２膜貫通ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目５６に記載の細胞。
（項目５９）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、ＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目５６に記載の細胞。
（項目６０）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、同じく単離された細胞内ドメインと、を含む、項目５６に記載の細胞。
（項目６１）
前記遺伝子操作された抗原受容体が、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカイン（ｚｅｔａｋｉｎｅ）からなる群から選択される、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６２）
前記遺伝子操作された受容体が、前記ＴＧＦβＲ２遺伝子に一体化されない、項目６１に記載の細胞。
（項目６３）
免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうちの１つ以上をコードする前記ポリヌクレオチドが、前記ＴＧＦβＲ２遺伝子に一体化される、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６４）
免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうちの１つ以上をコードする前記ポリヌクレオチドを含むドナー修復テンプレートが、項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドによって導入されたＤＮＡ２本鎖の破断部位で前記ＴＧＦβＲ２遺伝子に一体化される、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６５）
前記細胞が、造血細胞である、項目４２〜６４のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６６）
前記細胞が、Ｔ細胞である、項目４２〜６５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６７）
前記細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋細胞である、項目４２〜６６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６８）
前記細胞が、免疫エフェクター細胞である、項目４２〜６７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６９）
前記細胞が、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目４２〜６８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７０）
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、項目４２〜６８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７１）
前記細胞の源が、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺問題、感染部位由来組織、腹水、胸水、脾臓組織、または腫瘍である、項目４２〜７０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７２）
前記細胞が、１つ以上の修飾されたＴＧＦβＲ２対立遺伝子を含む、項目４２〜７１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７３）
前記１つ以上の修飾されたＴＧＦβＲ２対立遺伝子が、機能不全であるか、または実質的に低減されたＴＧＦβＲ２機能および／もしくは細胞内シグナル伝達を有する、項目７２に記載の細胞。
（項目７４）
前記細胞が、前記１つ以上の修飾されたＴＧＦβＲ２対立遺伝子内に導入された免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする核酸を含み、かつ前記細胞が、前記１つ以上の修飾ＴＧＦβＲ２対立遺伝子内に導入されていない遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、項目４６〜５１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７５）
項目４２〜７４のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、複数の細胞。
（項目７６）
項目４２〜７４のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、組成物。
（項目７７）
項目４２〜７４のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞と、生理学的に許容可能な担体と、を含む、組成物。
（項目７８）
細胞内のヒトＴＧＦβＲ２遺伝子を編集する方法であって、前記細胞内に項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＴＧＦβＲ２遺伝子内の標的部位で２本鎖の破断を作成する、方法。
（項目７９）
細胞内のヒトＴＧＦβＲ２遺伝子を編集する方法であって、前記細胞内に項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＴＧＦβＲ２遺伝子内の標的部位で２本鎖の破断を作成し、前記破断が、非相同末端結合（ＮＨＥＪ）によって修復される、方法。
（項目８０）
細胞内のヒトＴＧＦβＲ２遺伝子を編集する方法であって、前記細胞内に項目１〜３７のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよびドナー修復テンプレートを導入することを含み、前記ポリペプチドの発現が、ヒトＴＧＦβＲ２遺伝子内の標的部位で２本鎖の破断を作成し、前記ドナー修復テンプレートが、前記２本鎖の破断（ＤＳＢ）の前記部位で相同組換え修復（ＨＤＲ）によって前記ヒトＴＧＦβＲ２遺伝子内に組み込まれる、方法。
（項目８１）
前記細胞が、造血細胞である、項目７８〜８０のいずれか一項に記載の方法。
（項目８２）
前記細胞が、Ｔ細胞である、項目７８〜８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
前記細胞が、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、および／またはＣＤ８＋細胞である、項目７８〜８２のいずれか一項に記載の方法。
（項目８４）
前記細胞が、免疫エフェクター細胞である、項目７８〜８３のいずれか一項に記載の方法。
（項目８５）
前記細胞が、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目７８〜８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８６）
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞またはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である、項目７８〜８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８７）
前記細胞の源が、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺問題、感染部位由来組織、腹水、胸水、脾臓組織、または腫瘍である、項目７８〜８６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８８）
前記ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドが、ｍＲＮＡである、項目７８〜８７のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
５´−３´エクソヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドが、前記細胞内に導入されている、項目７８〜８８のいずれか一項に記載の方法。
（項目９０）
Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片をコードするポリヌクレオチドが、前記細胞内に導入されている、項目７８〜８９のいずれか一項に記載の方法。
（項目９１）
前記ドナー修復テンプレートが、ＴＧＦβＲ２遺伝子、または前記野生型ＴＧＦβＲ２遺伝子と比較して、１つ以上の変異を含むその部分をコードする、項目８０〜９０のいずれか一項に記載の方法．
（項目９２）
前記ドナー修復テンプレートが、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体のうちの１つ以上をコードする、項目８０〜９１のいずれか一項に記載の方法。
（項目９３）
前記ドナー修復テンプレートが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、項目９２に記載の方法。
（項目９４）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターが、短ＥＦ１αプロモーター、長ＥＦ１αプロモーター、ヒトＲＯＳＡ２６遺伝子座、ユビキチンＣ（ＵＢＣ）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１（ＰＧＫ）プロモーター、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＡＧ）プロモーター、β−アクチンプロモーター、および骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー、負の制御領域の欠失、ｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目９３に記載の方法。
（項目９５）
前記ドナー修復テンプレートが、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体に作動可能に連結され、それらの間に散在し、および／またはそれらに隣接する１つ以上の自己切断型ウイルスペプチドをさらにコードする、項目９２〜９４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９６）
前記自己切断型ウイルスペプチドが、２Ａペプチドである、項目９５に記載の方法。
（項目９７）
前記ドナー修復テンプレートが、異種ポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目９２〜９６のいずれか一項に記載の方法。
（項目９８）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、免疫抑制因子に対抗する酵素機能を含む、項目９２〜９７のいずれか一項に記載の方法。
（項目９９）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、キヌレニナーゼ活性を含む、項目９８に記載の方法。
（項目１００）
前記免疫抑制シグナルダンパーが、
（ａ）免疫抑制因子に結合し、任意に抗体もしくはその抗原結合断片である細胞外ドメイン、
（ｂ）免疫抑制因子および膜貫通ドメインに結合する細胞外ドメイン、または
（ｃ）免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインと、膜貫通ドメインと、免疫抑制シグナルを前記細胞に伝達不可能である修飾細胞内ドメインと、を含む、項目９２〜９７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０１）
前記免疫抑制シグナルダンパーの前記細胞外ドメインおよび／または膜貫通ドメインが、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインおよび／または膜貫通ドメインである、項目１００に記載の方法。
（項目１０２）
前記免疫力エンハンサーが、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー分子（ＢｉＴＥ）、免疫賦活因子、およびフリップ受容体からなる群から選択される、項目９２〜９７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０３）
前記免疫賦活因子が、サイトカイン、ケモカイン、細胞毒素、サイトカイン受容体、およびそれらのバリアントからなる群から選択される、項目１０２に記載の方法。
（項目１０４）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、ＴＧＦβＲ２膜貫通ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２膜貫通ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目１０２に記載の方法。
（項目１０５）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、ＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７８、および／またはＣＤ３ζからの細胞内ドメインと、を含む、項目１０２に記載の方法。
（項目１０６）
前記フリップ受容体が、ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインと、前記ＴＧＦβＲ２細胞外ドメインの前記Ｃ末端終端にフレーム内で融合されたＣＤ３ポリペプチド、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、またはＣＤ１３７から単離された膜貫通ドメインと、同じく単離された細胞内ドメインと、を含む、項目１０２に記載の方法。
（項目１０７）
前記遺伝子操作された抗原受容体が、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはゼータカインからなる群から選択される、項目９２〜９７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０８）
前記ドナー修復テンプレートが、前記ＤＳＢのヒトＴＧＦβＲ２遺伝子配列５´に対して相同な５´相同アームと、前記ＤＳＢのヒトＴＧＦβＲ２遺伝子配列３´に対して相同な３´相同アームと、を含む、項目８０〜１０７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０９）
前記５´および３´相同アームの長さが、約１００ｂｐ〜約２５００ｂｐから独立して選択される、項目１０８に記載の方法。
（項目１１０）
前記５´および３´相同アームの長さが、約６００ｂｐ〜約１５００ｂｐから独立して選択される、項目１０８または項目１０９に記載の方法。
（項目１１１）
前記５´相同アームが約１５００ｂｐであり、前記３´相同アームが約１０００ｂｐである、項目１０８〜１１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１２）
前記５´相同アームが約６００ｂｐであり、前記３´相同アームが約６００ｂｐである、項目１０８〜１１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１３）
ウイルスベクターが、前記細胞内に前記ドナー修復テンプレートを導入するために使用される、項目８０〜１１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１４）
前記ウイルスベクターが、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）またはレトロウイルスである、項目１１３に記載の方法。
（項目１１５）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２由来の１つ以上のＩＴＲを有する、項目１１４に記載の方法。
（項目１１６）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、およびＡＡＶ１０からなる群から選択される血清型を有する、項目１１４または項目１１５に記載の方法。
（項目１１７）
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２またはＡＡＶ６血清型を有する、項目１１４〜１１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１８）
前記レトロウイルスが、レンチウイルスである、項目１１４に記載の方法。
（項目１１９）
前記レンチウイルスが、インテグラーゼ欠損レンチウイルス（ＩＤＬＶ）である、項目１１８に記載の方法。
（項目１２０）
有効量の項目７６または項目７７に記載の組成物を対象に投与することを含む、癌、感染性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、および免疫不全、またはそれらに関連する状態の少なくとも１つの症状を治療、予防、または緩和する、方法。
（項目１２１）
有効量の項目７６または項目７７に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、固形癌を治療する方法。
（項目１２２）
前記固形癌が、肝臓癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、膀胱癌、脳癌、肉腫、頭頸部癌、骨癌、甲状腺癌、腎臓癌、または皮膚癌を含む、項目１２１に記載の方法。
（項目１２３）
有効量の項目７６または項目７７に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、血液学的悪性腫瘍を治療する方法。
（項目１２４）
前記血液学的悪性腫瘍が、白血病、リンパ腫、または多発性骨髄腫である、項目１２３に記載の方法。