【誤訳訂正書】
【提出日】令和2年10月7日(2020.10.7)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
センサー基質上にヒドロゲルポリアクリルアミドビーズを装填する方法であって、
センサー基質上に画定されたフローセルに、ヒドロゲルポリアクリルアミドビーズを含む懸濁液を適用することであって、前記センサー基質が複数のウェルを含み、前記ヒドロゲルポリアクリルアミドビーズが少なくとも部分的に前記複数のウェルの中に堆積する、ことと、
前記懸濁液を適用した後、前記フローセルから液体を取り除くことと、
前記フローセルから液体を取り除いた後、前記複数のウェルから液体を蒸発させることにより、前記ヒドロゲルポリアクリルアミドビーズを前記複数のウェル内にさらに引き込むことと、
蒸発後、前記フローセルへ水和溶液を適用することと、を含む、前記方法。
【請求項２】
前記懸濁液を適用することが、前記ヒドロゲルポリアクリルアミドビーズの存在下で前記センサー基質を遠心分離することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記フローセルから前記液体を取り除く前に、前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質上に気泡形の１つ以上の泡を流動させることを更に含む、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記フローセルから液体を蒸発させることが、少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間、前記フローセルを通して気体を引くことを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記フローセルから液体を蒸発させることが、１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で、前記フローセルを通して気体を引くことを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記センサー基質上に凝縮溶液を適用することを更に含み、前記凝縮溶液は、２０ｍＭ〜１Ｍのマグネシウム、２０００〜２００００の範囲内の分子量を有する０．１重量％〜２０．０重量％のポリエチレングリコールポリマー、またはそれらの組み合わせを含み、前記ヒドロゲルポリアクリルアミドビーズは、複数の核酸鎖をさらに含み、前記凝縮溶液は、核酸鎖を凝縮する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記凝縮溶液を適用することが、前記フローセルを通して気体を引いた後に前記凝縮溶液を適用することを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記凝縮溶液を適用することが、前記フローセルから液体を蒸発させる前に前記凝縮溶液を適用することを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質上に酵素溶液を適用することを更に含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記酵素溶液を適用後に、前記フローセルから液体を取り除くことと、前記フローセルから液体を蒸発させることとを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記センサー基質が半導体配列決定デバイスを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記半導体配列決定デバイスがｐＨセンサーのアレイを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記半導体配列決定デバイスを使用して、配列決定することを更に含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
センサー基質上にビーズを装填する方法であって、
センサー基質上に画定されたフローセルに、ヒドロゲルポリアクリルアミドから形成された核酸ビーズを含む懸濁液を適用することであって、前記センサー基質が複数のウェルを含み、前記ビーズが少なくとも部分的に前記複数のウェルの中に堆積する、適用することと、
気／液界面を前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質の上を流動させることと、
少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間、１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で、前記フローセルを通して気体を引くことによって、前記複数のウェルから液体を蒸発させることにより、前記ビーズを前記複数のウェル内にさらに引き込むことと、
前記フローセルを通して凝縮溶液を適用することであって、前記凝縮溶液は、マグネシウム塩及びポリエチレングリコールポリマーを含む、ことと、を含む、前記方法。
【請求項１５】
前記気／液界面を流動させることが、前記フローセルを通して気泡を流動させることを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記凝縮溶液を適用後に、前記フローセルを通して酵素溶液を適用することを更に含む、請求項１４または請求項１５に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００２】
ポリヌクレオチドまたはタンパク質等の生体分子を分析するための様々な技術は、それぞれがそのような生体分子に付着する粒子のアレイの堆積に依存する。例示的配列決定技術は、ポリヌクレオチド、またはその複製物を含む粒子のアレイの、ウェルアレイ内の堆積に依存する。特定の例では、粒子またはビーズを特定のセンサーに結合させるため、またこれらの生体分子を分析するための局所環境を提供するために、ウェル内に粒子またはビーズを堆積させることができる。他の例では、粒子の整列したアレイが表面上に堆積され、ウェルの恩恵なしに分析される。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００３】
例示的実施形態において、センサー基質上にビーズを装填する方法は、センサー基質上に画定されるフローセルにビーズを含む懸濁液を適用することを含む。センサー基質は複数のウェルを含む。ビーズは少なくとも部分的に複数のウェル内へ堆積される。また、本方法はフローセルから液体を取り除くことと、フローセルから液体を蒸発させることと、水和溶液をフローセルに適用することとを含む。
本発明は、例えば、以下を提供する。
（項目１）
センサー基質上にビーズを装填する方法であって、
センサー基質上に画定されたフローセルにビーズを含む懸濁液を適用することであって、前記センサー基質が複数のウェルを含み、前記ビーズが少なくとも部分的に前記複数のウェルの中に堆積し、
前記フローセルから液体を取り除くことと、
前記フローセルから液体を蒸発させることと、
前記フローセルへ水和溶液を適用することと、を含む、前記方法。
（項目２）
前記懸濁液を適用することが、前記ビーズの存在下で前記センサー基質を遠心分離することを含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記フローセルから前記液体を取り除く前に、前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質上に１つ以上の泡を流動させることを更に含む、項目１または項目２に記載の方法。
（項目４）
前記フローセルから液体を蒸発させることが、少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間、前記フローセルを通して気体を引くことを含む、項目１〜３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
前記フローセルから液体を蒸発させることが、１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で、前記フローセルを通して気体を引くことを含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記センサー基質上に凝縮溶液を適用することを更に含む、項目１〜５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記凝縮溶液を適用することが、前記フローセルを通して気体を引いた後に前記凝縮溶液を適用することを含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記凝縮溶液を適用することが、前記フローセルから液体を蒸発させる前に前記凝縮溶液を適用することを含む、項目６に記載の方法。
（項目９）
前記凝縮溶液が凝縮剤を含む、項目６に記載の方法。
（項目１０）
前記凝縮剤がマグネシウム、ポリエチレングリコールポリマー、またはそれらの組み合わせを含む、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質上に酵素溶液を適用することを更に含む、項目１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記酵素溶液を適用後に、前記フローセルから液体を取り除くことと、前記フローセルから液体を蒸発させることとを更に含む、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記センサー基質が半導体配列決定デバイスを含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記半導体配列決定デバイスがｐＨセンサーのアレイを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記半導体配列決定デバイスを使用して、配列決定することを更に含む、項目１３に記載の方法。
（項目１６）
前記ビーズがヒドロゲルビーズを含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
センサー基質上にビーズを装填する方法であって、
センサー基質上に画定されたフローセルに核酸ビーズを含む懸濁液を適用することであって、前記センサー基質が複数のウェルを含み、前記ビーズが少なくとも部分的に前記複数のウェルの中に堆積する、適用することと、
気／液界面が前記フローセルを通して、かつ前記センサー基質の上を流動させることと、
少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間、１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で、前記フローセルから液体を蒸発させることと、
前記フローセルを通して凝縮溶液を適用することと、を含む、前記方法。
（項目１８）
前記凝縮溶液がマグネシウム塩及びポリエチレングリコールポリマーを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記気／液界面を流動させることが、前記フローセルを通して気泡を流動させることを含む、項目１７または項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記凝縮溶液を適用後に、前記フローセルを通して酵素溶液を適用することを更に含む、項目１７〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
特定の実施例では、ウェルを含むセンサー基質上にビーズを堆積させる前に、ビーズを核酸と複合させる。図１に例証される通り、１０２に例証されるように、方法１００はビーズまたは粒子、増幅試薬、及び標的ポリヌクレオチドを増幅溶液に組み合わせることを含む。特に、ビーズ基質を親水性ポリマーで形成することができる。実施例では、ビーズは電荷を帯びることができる。代替として、ビーズは中性であることができる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１６】
他の複合技術は、アミンを含むモノマーの使用を含む。アミンは、アミン反応性二官能性ビス−求電子試薬で更に変性することができる求核基であり、この試薬はモノ−官能性求電子基をもたらし、続いて、このモノ−官能性求電子基はビーズに付着する。そのような求電子基を、求核基、例えば、アミンまたはチオール等を有するオリゴヌクレオチドと反応させ、これによって、空位求電子剤との反応によりオリゴヌクレオチドを付着させることができる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
ビーズを、アミノ−ヒドロキシル−アクリルアミドとヒドロキシル−アクリルアミドとの組み合わせから調製する場合、ビーズは、求核アミノ基と中性ヒドロキシル基との組み合わせを含むことができる。アミノ基を、ジイソシアネートまたはビス−ＮＨＳエステル等の二官能性ビス−求電子部分で変性することができ、その結果、親水性粒子が求核試薬と反応する。例示的なビス−ＮＨＳエステルは、ビス−スクシンイミジルスベリン酸塩またはビス−スクシンイミジルグルタル酸等の、ビス−スクシンイミジルＣ２−Ｃ１２アルキルエステルを含む。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１８】
他の活性化化学は、特定の官能基を変換して特定の所望の連鎖を適応させるための複数のステップを組み込むことを含む。例えば、いくつかの方法によって、スルホン酸塩で変性されたヒドロキシル基を求核基に変換することができる。実施例では、スルホン酸塩がアジドアニオンと反応して、アジド置換された親水性ポリマーをもたらす。アジドを直接使用して、「クリック」化学を介してアセチレン置換された生体分子に複合させることができるが、この「クリック」化学は、銅触媒を使用して、または使用せずに、実行可能である。任意に、例えば、水素を用いた触媒還元、または有機ホスフィンを用いた還元によって、アジドをアミンに変換することができる。次いで、その結果生じたアミンを、ジイソシアネート、ビス−ＮＨＳエステル、塩化シアヌル、またはそれらの組み合わせ等の様々な試薬を用いて、求電子基に変換することができる。実施例では、ジイソシアネートを使用することによってポリマーとリンカーとの間に尿素連鎖がもたらされ、それによって残留イソシアネート基がもたらされ、この残留イソシアネート基は、アミノ置換された生体分子と反応して、リンカーと生体分子との間に、尿素連鎖をもたらすることができる。別の実施例では、ビス−ＮＨＳエステルを使用することによってポリマーとリンカーと残留ＮＨＳエステル基との間にアミド連鎖がもたらされ、この残留ＮＨＳエステル基は、アミノ置換された生体分子と反応して、リンカーと生体分子との間に、アミド連鎖をもたらすることができる。更なる実施例では、塩化シアヌルを使用することによってポリマーとリンカーと２つの残留クロロ−トリアジン基との間にアミノ−トリアジン連鎖がもたらされ、これら２つの残留クロロ−トリアジン基のうちの１つは、アミノ置換された生体分子と反応して、リンカーと生体分子との間にアミノ−トリアジン連鎖をもたらすることができる。スルホン酸塩を活性化させることによって、他の求核基を粒子内に組み込むことができる。例えば、スルホン酸化した粒子がチオ安息香酸アニオンと反応し、その結果生じたチオ安息香酸を加水分解することによって、チオールを粒子に組み込み、続いて、そのチオールが、マレイミド置換された生体分子と反応してチオ−スクシンイミド連鎖を生体分子にもたらすことができる。また、チオールは、ブロモ−アセチル基と反応することもできる。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３５】
図２を参照すると、乳濁液破壊後、残存する水溶液２２６は核酸ビーズ２１０を含む。核酸ビーズ２１０は、標的ポリヌクレオチド２１４の複数の複製物に複合するビーズ２１２を含むことができる。また、溶液は標的ポリヌクレオチドの複製物を含まないビーズ２１２を含むことができ、そのビーズは本明細書において非増幅ビーズと称される。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
図１を参照すると、１１０に例証されるように、核酸ビーズを洗浄しかつ濃縮する。実施例では、遠心分離を使用してビーズをペレット化することができ、かつ過剰な溶液を傾瀉することができ、またはペレット化したビーズ上から引くことができる。別の実施例では、核酸ビーズを固定するために使用する分離基質に核酸ビーズを付着することができ、一方で核酸ビーズの周囲の水溶液を置換する。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
例えば、図２に例証されるように、核酸ビーズ２１０は分離基質２２０によって捕捉することができる。それに対して、ポリヌクレオチドの複製物を含まない非増幅ビーズ２１２は、分離基質２２０に容易に付着しない。したがって、分離基質２２０を固定し、付着した核酸ビーズ２１０を適所に保持するとき、固定しない非増幅ビーズを溶液から実質的に洗浄する。特定の例において、分離基質２１４は磁場を使用して容器壁に固定することができる磁性体基質である。それから、分離基質２２０から分離することができ、核酸ビーズ２１０は主に核酸ビーズと実質的にわずかな非増幅ビーズとを有する溶液を提供する。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３９】
図１を参照すると、１１２に例証されるように、バイオセンサー上に濃縮された核酸ビーズを装填することができる。バイオセンサーの性質次第では、バイオセンサーは核酸ビーズが上に付着することができる表面を提供することができる。その表面は平坦であることができ、かつ任意で核酸ビーズに対してより誘引性がある部分、または核酸ビーズを固定するために改変された部分を含むことができる。別の実施例では、バイオセンサーは分離部分または模様面、例えば小さなくぼみ、くぼみ、細孔、ウェル、リッジ、または核酸ビーズが整列するチャネルを含む表面を含むことができる。更なる実施例では、図２に例証されるように、バイオセンサーは核酸ビーズ２１０が堆積するウェル２１８を画定する表層構造２１６を含むことができる。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４４】
ヌクレオチド取り込みのイオン性副生成物の検出を通して配列決定に関与する一例示的システムは、ヌクレオチド取り込みの副生物として生成された水素イオンを検出することによって、鋳型核酸を配列するイオンを基にした配列決定システム等の半導体配列プラットホームを含む。典型的には、水素イオンを、ポリメラーゼによる鋳型依存性核酸の合成中に発生するヌクレオチド組み込みの副生成物として放出する。そのようなシーケンサーは、ヌクレオチド組み込みの水素イオン副生成物を検出することによって、ヌクレオチド組み込みを検出する。そのようなシーケンサーは、複数の鋳型ポリヌクレオチドを含むことができ、それらの鋳型ポリヌクレオチドを配列決定し、それぞれの鋳型をアレイ内のそれぞれの配列決定反応ウェル内に配置する。アレイのウェルをそれぞれ、少なくとも１つのイオンセンサーに連結することができ、そのイオンセンサーは、Ｈ＋イオンの放出、またはヌクレオチド組み込みの副生成物として生成された溶液のｐＨの変化を検出することができる。イオンセンサーは、電界効果トランジスタ（ＦＥＴ）を含み、このトランジスタはイオン感応検出層に連結し、この層は、Ｈ＋イオンの存在、または溶液のｐＨの変化を感知することができる。イオンセンサーは、電圧の変化として示すことができるヌクレオチド組み込みを示す出力信号を提供することができ、その変化の大きさは、それぞれのウェルまたは反応チャンバ内のＨ＋イオン濃度と相関する。複数の種類のヌクレオチドを、反応チャンバ内に順次流入させることができ、ポリメラーゼを用いて延長するプライマー（または重合サイト）に、鋳型の配列によって決定された順序で組み込むことができる。反応ウェル内のＨ＋イオンを放出させると同時に、局所ｐＨを変化させることによって、それぞれのヌクレオチド組み込みを達成することができる。センサーのＦＥＴでＨ＋イオンの放出を記録することができ、そのセンサーはヌクレオチド組み込みの発生を示す信号を生成する。特定のヌクレオチド流中に組み込まれなかったヌクレオチドは、信号を生成し得ない。また、ＦＥＴからの信号の振幅も、延長する核酸分子内に組み込まれる特定の種類のヌクレオチドの数と相関し得、それによってホモポリマー領域の解明を可能にする。したがって、シーケンサーの動作中、反応チャンバ内への複数のヌクレオチド流、ならびに多数のウェルまたは反応チャンバにわたる組み込みの観察によって、機器が多数の核酸鋳型の配列を同時に解明することが可能になる。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
図３の３０６に例証されるように、フローセルを通して気体を適用することができ、液体がフローセルから蒸発する。フローセルを通して気体を押すことができる。代替として、フローセルを通して気体を引き、液体を蒸発することができる。フローセルを通して気体を押すとき、圧力はフローセル内で気圧に対して増加することができる。フローセルを通して気体を引くとき、フローセル内の圧力は気圧に対して減少することができる。フローセルを通して気体が流動すること、特にフローセルを通して気体を引くことは、ウェルへビーズを更に押し流し、部分的にウェルを乾燥させ、ウェルから液体を蒸発させると考えられている。代替として、遠心分離を使用してフローセルの外へ液体を回転することができる。気体は窒素、ヘリウムまたはアルゴン等の貴気体、または空気であることができる。４０６の図４に例証されるように、フローセルを通る気体の流動、特にフローセルを通して引く気体はウェル内へビーズを更に引き込む。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
実施例において、フローセルを通して引かれるように、フローセルを通して気体は流動することができ、少なくとも１５秒の期間、例えば少なくとも３０秒、少なくとも４５秒、少なくとも１分、少なくとも１．５分、少なくとも２分、または更に少なくとも５分の期間流動することができる。一般に、フローセルを通して２０分未満等、３０分より長く気体は流動しない。気体を１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内、例えば５００μＬ／分〜６０ｍＬ／分の範囲、５００μＬ／分〜４０ｍＬ／分の範囲、または更に１ｍＬ／分〜２０ｍＬ／分の範囲で適用することができる。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
任意で、図３の３０８に例証されるように、気体の流動後にセンサー基質上に凝縮剤を適用することができる。凝縮試薬はウェル内のビーズを更に押すビーズの直径を減少させることができる。４０８において図４に例証されるように、凝縮試薬の適用はビーズが更に収縮してウェル内に引かれることを生じさせる。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５５】
凝縮試薬の残部は緩衝溶液、例えば緩衝生理食塩溶液を含むことができる。例えば、凝縮試薬の残部はリン酸塩緩衝液を含むことができる。特に、この溶液はナトリウムまたはハロゲン化カリウム塩、ナトリウムもしくはリン酸化カリウム塩、またはポリソルベートを含むことができる。そのような塩を１ｍＭ〜５００ｍＭの範囲内の量、例えば５０ｍＭ〜３５０ｍＭの範囲、または１５０ｍＭ〜２５０ｍＭの範囲で含むことができる。実施例では、塩化カリウムは０．５Ｍ〜２Ｍの範囲内の濃度、例えば０．８Ｍ〜１．５Ｍの範囲、または更に０．８Ｍ〜１．２Ｍの範囲で含むことができる。その上または代替として、他の緩衝剤、例えばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンであるアミン系緩衝剤を使用することができる。そのようなアミン緩衝剤を１０ｍＭ〜１Ｍの範囲内の濃度、例えば１００ｍＭ〜１Ｍの範囲、１００ｍＭ〜８００ｍＭの範囲、または更に１５０ｍＭ〜５００ｍＭの範囲で使用することができる。任意で、凝縮試薬は塩から得られた他のイオン性成分、例えばカルシウムまたはマグネシウムを含むことができる。さらに、溶液は６〜９、例えば６．５〜８．５、または７〜８．５のｐＨを有することができる。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５９】
凝縮試薬への曝露に応じて、核酸鎖を含む核酸ビーズは直径において減少することができる。例えば、ビーズまたは粒子直径は溶液への曝露に応じて、少なくとも１％まで減少することができる。実施例では、直径は少なくとも５％まで、例えば少なくとも１０％、少なくとも１５％、または更に少なくとも１９％減少する。特定の実施例では、直径は７５％以下まで減少する。その上、ビーズまたは粒子の密度は凝縮剤への曝露に応じて増加することができる。例えば、密度は少なくとも２％まで、例えば少なくとも８％、少なくとも１４％、少なくとも２１％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６５％、または更に少なくとも８０％増加することができる。特に、密度は７５００％以下まで増加する。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６２】
任意で、酵素を装填後、フローセルを通して気体を流動させるプロセスを、３１２に例証されるように、上記に記述されるように流量と期間を使用し再度繰り返すことができ、例えばフローセルから液体を蒸発させる。酵素が装填されるとき、ビーズは大きさを増加する。例えば、４１０において図４で例証されるように、酵素を装填することは、結果としてビーズの初期膨潤を生じさせることができ、かつ４１２に例証されるように酵素の存在下での更なる温置は、更なるビーズの膨潤を引き起こすことができる。フローセルを通して気体を更に引くことは、図４の４１４に例証されるように、酵素の存在下における温置に応じてビーズが膨潤した後、部分的にビーズをウェルの中へ引き込むことができる。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６４】
図５において例証される更なる例示的方法では、５０２に例証されるように、ビーズ５２０は初期にセンサー基質上のウェル５１８内へ回転することができる。ビーズ５２０を洗浄することができ、５０４に例証されるように、任意でセンサー基質に気／液界面（例えば、気泡形で）を適用することができ、初期にビーズ５２０の大きさを増加する。５０６に例証されるように凝縮剤を適用することができ、かつ液体を取り除くことができ、それから液体を蒸発することができ、５０８に例証されるように、収縮してウェル５１８へビーズ５２０をより深く押し流す。液体を取り除くことは、気泡を適用しフローセルから液体を押し流すこと、またはフローセルを回転させ液体を吹き、空気を吸い込むことを含むことができる。フローセルから液体を蒸発させることを、センサー基質のフローセルを通して空気または乾燥窒素を引くこと、またはフローセルを通して空気または窒素を押すことによって達成することができる。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６７】
ウェルを含むセンサー基質上にビーズを装填するための上記の方法の実施形態は、ビーズ、特に核酸またはタンパク質へ複合したものをセンサー基質ウェル内へ引き込む技術的利点を提供する。そのようなビーズのウェルへのより良い固定及び堆積は、キー信号における増加、または信号雑音比における減少を提供する。そのようなプロセスは更にヒドロゲルビーズ及び表面上のＯＨ基を示すウェルの壁、またはセンサー表面を利用するシステムを組み込むシステムに特に適する。そのようなＯＨ基が部分的に表面塗料によって遮断される場合においてさえも、上記の方法の実施形態は改善された装填、より高いキー信号またはより高い信号雑音比を備える。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７１】
図７の画像１に例証されるように、基質表面上にビーズを含む懸濁液を適用し、ウェル内にビーズを少なくとも部分的に堆積させる。その画像はウェルを有さないより明るい中央帯を含み、組織内の表面上に堆積したビーズを表す。より低い輝度を有する中央帯のいずれかの側面上に堆積するビーズは、少なくとも部分的にウェル内に堆積する。組織内の中央帯上のビーズの平均輝度に対する、ウェル内のビーズの平均輝度の比率はビーズが堆積したウェル内の深度を示す。図８の棒１に例証されるように、平均的ビーズは０．３〜０．３５の輝度比（組織内の表面上のビーズの平均輝度に対する、堆積したビーズの平均輝度の比率）を有する。図７の画像２及び図８の棒２に例証されるように、フローセルを通して気体を引き、ウェルから液体を蒸発後、ウェル内に堆積する平均的ビーズはより低い輝度比を示す。輝度比におけるそのような減少は、ウェル内へビーズを更に引き込むことを表す。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７４】
酵素の存在下でビーズを温置することができる。図７の画像５及び図８の棒５に例証される通り、酵素の存在下でのそのような温置はビーズの膨潤を生じさせ、したがって輝度比に増加を引き起こす。図７の画像６及び図８の棒６に例証される通り、酵素を装填し、液体をウェルから蒸発後、フローセルを通して気体を更に引き、結果としてわずかに少ない輝度比を有するビーズを生じさせる。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７８】
第１の態様の更なる実施例及び上記の実施例では、フローセルから液体を蒸発させることは、フローセルを通して気体を少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間引くことを含む。
【誤訳訂正２４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７９】
第１の態様の付加的実施例及び上記の実施例では、フローセルから液体を蒸発させることは１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で、フローセルを通して気体を引くことを含む。
【誤訳訂正２５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８０】
第１の態様の別の実施例及び上記の実施例では、その方法はセンサー基質上に凝縮溶液を適用することを更に含む。例えば、凝縮溶液を適用することは、フローセルから液体を蒸発させた後に凝縮溶液を適用することを含む。実施例では、凝縮溶液を適用することは、フローセから液体を蒸発させる前に凝縮溶液を適用することを含む。別の実施例では、凝縮溶液は凝縮剤を含む。例えば、凝縮剤はマグネシウム、ポリエチレングリコールポリマー、またはそれらの組み合わせを含む。
【誤訳訂正２６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８１】
第１の態様の更なる実施例及び上記の実施例では、その方法はフローセルを通してセンサー基質上に酵素溶液を適用することを更に含む。例えば、その方法はフローセルから液体を取り除くこと、及び酵素溶液を適用した後にフローセルから液体を蒸発することを更に含む。
【誤訳訂正２７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８４】
第２の態様では、センサー基質上でビーズを装填する方法は、センサー基質上に画定されたフローセルへ核酸ビーズを含む懸濁液を適用することを含み、センサー基質は複数のウェルを含み、ビーズは少なくとも部分的に複数のウェル内に堆積する、適用することと、気／液界面をフローセルを通して、かつセンサー基質上に流動することと、フローセルから少なくとも１５秒間かつ３０分以下の期間、１００μＬ／分〜１００ｍＬ／分の範囲内の速度で液体を蒸発させることと、フローセルを通して凝縮溶液を適用することとを含む。