【手続補正書】
【提出日】令和2年9月16日(2020.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の捕捉ゾーン（１５）および第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を有するキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）を備えるマイクロ流体システムにおいて、少なくとも１つの第１の液体マイクロドロップ（２０）および少なくとも１つの第２の液体マイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）を操作する方法であって、前記方法が、
（ｉ）前記第１の捕捉ゾーン（１５）に第１のマイクロドロップ（２０）を捕捉するステップと、
（ｉｉ）前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）に第２のマイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）を捕捉するステップと、からなるステップを含み、
第１および第２のマイクロドロップ（２０；２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が互いに接触するように第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が配置されており、
同一の第１または第２の液体マイクロドロップ（２０、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）に対して前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が及ぼす捕捉力が異なるように前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が構成されており、
流体の配向された流れ（Ｆ１；Ｆ２）によって、前記第１および第２のマイクロドロップ（２０、２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が前記マイクロ流体システム内を移動する、方法。
【請求項２】
前記第２の液体マイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）の少なくとも１つが前記第１のマイクロドロップ（２０）より小さいサイズまたは小さい体積を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が前記第１のマイクロドロップ（２０）に及ぼす捕捉力より大きい捕捉力で、前記第１のマイクロドロップ（２０）が前記第１の捕捉ゾーン（１５）に捕捉される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記第１および第２のマイクロドロップ（２０；２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が異なるものであるか、または異なる内容物を有する、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）が複数の第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含み、ステップ（ｉｉ）が、第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）当たり１つの第２のマイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）を捕捉することからなり、各第２のマイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が第１または第２のマイクロドロップ（２０、２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）の少なくとも１つと接触するように、前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が配置されている、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ステップ（ｉｉ）が、流体の第１の方向の流れ（Ｆ１）の影響下で、第２の捕捉ゾーンの１つまたはいくつか（１８ｍ）に第２のマイクロドロップ（２５ｍ）を捕捉することからなるサブステップ（ｉｉ’）と、流体の第２の方向の流れ（Ｆ２）の影響下で、第２の捕捉ゾーンの別の１つまたはいくつかの部分（１８ｖ）に第２のマイクロドロップ（２５ｖ）を捕捉することからなるサブステップ（ｉｉ’’）とを含み、流体の第１および第２の流れは異なる向き（Ｆ１、Ｆ２）である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）またはそれらの各々に捕捉された前記第２のマイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）またはそれらの各々を前記第１のマイクロドロップ（２０）と融合させることからなるステップ（ｉｉｉ）を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｉｉｉ）の後に、第１および第３のマイクロドロップ（２０；８５）が互いに接触するように、第２のマイクロドロップを有さない１つまたは複数の第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）に第３のマイクロドロップ（８５）を捕捉することからなるステップ（ｖ）を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第１および第２のマイクロドロップ（２０；２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ；８５）が捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）に無作為に供給される、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記第１の捕捉ゾーン（１５）の高さ（ｈ１）が、前記第１の捕捉ゾーンの体積が前記第１のマイクロドロップの体積と同等またはそれより大きくなるものである、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
‐前記キャピラリトラップの前記第１の捕捉ゾーンに前記第１のマイクロドロップを捕捉するステップであって、前記第１のマイクロドロップが第１のゾーンに捕捉され続けるように、第１のゾーンによって前記第１のマイクロドロップに及ぼされる捕捉力Ｆ４が、配向された流れによって前記第１のマイクロドロップに及ぼされる流体力学的抗力Ｆｔ４より大きく、抗力Ｆｔ４がＦ４とＦ５との間にあり、Ｆ５が前記キャピラリトラップの前記第２の捕捉ゾーンによって前記第１のマイクロドロップに及ぼされる捕捉力を表す、ステップと、
‐次いで、前記キャピラリトラップの前記第２の捕捉ゾーンに前記第２のマイクロドロップを捕捉するステップであって、第２のゾーンに前記第２のマイクロドロップを装填する間に、配向された流れによって前記第２のマイクロドロップに及ぼされる流体力学的抗力Ｆｔ５がＦ５とＦ３との間にあり、Ｆ３が前記キャピラリトラップの前記第２のゾーンによって前記第２のマイクロドロップに及ぼされる捕捉力である、ステップと、
を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記キャピラリトラップの前記第２のゾーンによって前記第２のマイクロドロップに及ぼされる前記捕捉力Ｆ３が、前記第１のゾーンによって前記第１のマイクロドロップに及ぼされる捕捉力Ｆ４未満である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記マイクロ流体システムが複数のキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）を備え、各キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）が、第１のマイクロドロップ（２０）の各々を捕捉するための第１の捕捉ゾーン（１５）と、第２のマイクロドロップの各々を捕捉するための第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）とを有し、前記第１のマイクロドロップ（１５）が、同一であるかまたは少なくともｙが異なるマイクロドロップの第１のパネルを形成し、前記第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が、少なくともｚが異なるマイクロドロップの第２のパネルを形成し、前記方法が、前記マイクロ流体システムにおいて、第１および第２のマイクロドロップの異なる可能な組み合わせのうちの１つの組み合わせにそれぞれ対応するマイクロドロップのパネルを得るために、各第１のマイクロドロップ（１５）を接触している第２のマイクロドロップと融合させるステップを含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記マイクロドロップの第２のパネルが、少なくともそれらの内容物において異なる第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記マイクロドロップの第２のパネルが、対象の第２の化合物の濃度において異なる第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
ステップ（ｉｉｉ）の前に、観察または測定の追加のステップ（ｉｖ）を含む、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ステップ（ｉｉｉ）の後に、観察または測定の追加のステップ（ｉｖ）を含む、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記第１のマイクロドロップ（１５）の各々が細胞を含み、前記第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）の各々が規定濃度でスクリーニングされる医薬品を含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記第１のマイクロドロップ（１５）の各々が癌細胞を含み、前記第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）がスクリーニングされる異なる医薬品を含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記第１のマイクロドロップ（１５）の各々がスフェロイドの形態で培養された肝細胞を含み、毒性を評価すべき医薬品を異なる濃度で含む第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が前記第２の捕捉ゾーンの各々に供給される、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記第１のマイクロドロップ（１５）がスフェロイドの形態で培養された肝細胞を含むアガロースマイクロドロップであり、前記方法が、肝細胞のスフェロイドを形成するステップと、アガロースをゲル化するステップとを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
第１および第２のマイクロドロップ（１５、１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を融合するステップから数日後の各マイクロドロップにおける細胞の生存率を決定して細胞の少なくとも半分を殺傷する前記医薬品の濃度を決定するステップを含む、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記第１のマイクロドロップ（１５）の各々が、生検から得られた腫瘍細胞を含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記第１のマイクロドロップ（１５）の各々が、スフェロイドの形態で培養された特定の患者の生検から得られた腫瘍細胞を含み、前記第２のマイクロドロップ（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が、複数の濃度でさまざまな活性物質を含み、前記方法が、特定の患者にとって、前記さまざまな活性物質のうちから最も有効な活性物質およびその濃度を決定することを含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記第１のマイクロドロップおよび第２のマイクロドロップの一方がゲル化培地を含み、他方が複数の細胞を含み、前記方法が、
（ｉｉｉ）前記第１のマイクロドロップを前記第２のマイクロドロップと融合するステップと、
（ｉｖ）ゲル中に複数の細胞を封入するために前記ゲル化培地をゲル化するステップと、からなるステップを含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
ゲル化するステップ（ｉｖ）の前に、細胞のスフェロイドの形成を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第１の捕捉ゾーン（１５）に捕捉された第１の液体マイクロドロップ（２０）および第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）に捕捉された第２の液体マイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が、キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）内で互いに接触するように配置された、第１の捕捉ゾーン（１５）および第２の捕捉ゾーン（１８，１８ａ，１８ｂ，１８ｃ，１８ｍ，１８ｖ）を有するキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）を備える、マイクロドロップを捕捉するマイクロ流体装置であって、第１および第２のキャピラリトラップ（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が、前記第１および第２のキャピラリトラップによって同一の第１または第２の液体マイクロドロップ（２０、２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）に及ぼされる捕獲力が異なるように構成されており、前記マイクロドロップ（２０、２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が、流体の配向された流れ（Ｆ１；Ｆ２）によって前記マイクロ流体装置内で移動する、装置。
【請求項２８】
請求項１に記載の方法を実施するためのものである、請求項２７に記載の装置。
【請求項２９】
前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が空洞である、請求項２７または２８に記載の装置。
【請求項３０】
前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）は、それらの寸法の少なくとも１つが異なる、請求項２７から２９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３１】
前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が異なる高さ（ｈ１；ｈ２）を有し、前記第１の捕捉ゾーン（１５）が特に前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）より高い、請求項２７から３０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３２】
前記第１および第２の捕捉ゾーン（１５；１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が、上から見たときに異なる形状を有する、請求項２７から３１のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３３】
前記第１の捕捉ゾーン（１５）が、前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）より大きな面積を有する、請求項３２に記載の装置。
【請求項３４】
前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が、前記第１の捕捉ゾーン（１５）に近づくにつれて少なくとも一方向に広くなる、請求項２７から３３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３５】
前記キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）が、捕捉された第２のマイクロドロップ（２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）の各々が前記キャピラリトラップに捕捉された第１のマイクロドロップ（２０）または第２のマイクロドロップ（２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）の少なくとも１つと接触するように配置された複数の第２の捕捉ゾーン（１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む、請求項２７から３４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３６】
各々が第１の捕捉ゾーン（１５）および第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む複数のキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）を備え、
前記キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）の前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）に捕捉された第２のマイクロドロップ（２５、２５ａ、２５ｂ、２５ｃ、２５ｍ、２５ｖ）が前記キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）の前記第１の捕捉ゾーン（１５）に捕捉された第１のマイクロドロップ（２０）と接触するように、各キャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）の前記第１の捕捉ゾーン（１５）および前記第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）が配置されている、請求項２７から３５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３７】
１平方センチメートル当たり少なくとも１０個のキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）を備える、請求項３６に記載の装置。
【請求項３８】
ｎ個の第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む第１のキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）と、ｐ個の第２の捕捉ゾーン（１８、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｍ、１８ｖ）を含む第２のキャピラリトラップとを備え、ｎがｐとは異なる、請求項３６または３７に記載の装置。
【請求項３９】
捕捉チャンバ（３０）を有するチャネル（９）を含み、１つまたは複数のキャピラリトラップ（１２、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ）が前記捕捉チャンバ（３０）内にある、請求項２７から３８のいずれか一項に記載の装置。