【手続補正書】
【提出日】令和2年10月7日(2020.10.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドを含む単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質であって、
前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、配列番号７７、配列番号７８、配列番号７９、配列番号８０、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、及び配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む
ことを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項２】
ハイブリッド可溶性アクチビンＩＩＢ受容体−細胞外ドメイン（ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤ）ポリペプチドを含む単離ハイブリッドアクチビンＩＩＢ受容体（ＡｃｔＲＩＩＢ）リガンドトラップタンパク質であって、
前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号１のアミノ酸配列を含み、ここで、アミノ酸残基Ｒ３、Ｉ６、Ｙ７、Ｙ８、Ｌ１４、Ｅ１５、Ｓ２０、Ｌ２２、Ｒ２４、Ｅ２６、Ｅ２８、Ｑ２９、Ｌ３３、Ｌ４８、Ｙ３６、Ｓ３８、Ｒ４０、Ｓ４２、Ｔ４５、Ｋ５１、Ｆ５８、Ｑ６４、Ｅ６５、Ａ６８、Ｔ６９、Ｅ７０、Ｅ７１、Ｎ７２、Ｑ７４、Ｆ８４、Ｒ８８、Ｔ９０、Ｈ９１、Ｌ９２、Ｅ９４、Ａ９５、Ｇ９６、Ｇ９７、Ｐ９８、Ｅ９９、Ｖ１００、Ｙ１０２、Ｅ１０３、Ｐ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８、又はＴ１１０の少なくとも２個が別のアミノ酸で置換されており、
前記ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、ミオスタチン及びアクチビンに結合することができるが、骨形成タンパク質９（ＢＭＰ９）への結合親和性が野生型ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドに対して減少している
ことを特徴とする単離ハイブリッドアクチビンＩＩＢ受容体（ＡｃｔＲＩＩＢ）リガンドトラップタンパク質。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質において、前記ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質が、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドに連結されたヒトＦｃドメインを含み、前記ヒトＦｃドメインが、ヒトＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃドメイン、ヒトＩｇＧ２免疫グロブリンのＦｃドメイン、及びヒトＩｇＧ４免疫グロブリンのＦｃドメインからなる群から選択されることを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項４】
請求項３に記載の単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質において、前記ヒトＦｃドメインが、
ａ）配列番号４４に示されるペプチドリンカー配列；
ｂ）配列番号１１８に示されるヒンジリンカー配列；及び
ｃ）配列番号４４に示されるペプチドリンカー配列及び配列番号１１８に示されるヒンジリンカー配列の両方
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むリンカーによって、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドに連結されていることを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項５】
請求項３に記載の単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質において、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号１６及び配列番号２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項６】
請求項５に記載の単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質において、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号４４に示されるアミノ酸配列を含むペプチドリンカーに融合され、前記ペプチドリンカーが、配列番号１１８に示されるアミノ酸配列を含むヒンジリンカーに融合され、前記ヒンジリンカーが、配列番号４３のアミノ酸配列を含むヒトＦｃドメインに融合されていることを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項７】
請求項５に記載の単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質において、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号２９のアミノ酸配列を含み、前記ハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチドが、配列番号４４に示されるアミノ酸配列を含むペプチドリンカーに融合され、前記ペプチドリンカーが、配列番号１１８に示されるアミノ酸配列を含むヒンジリンカーに融合され、前記ヒンジリンカーが、配列番号４３のアミノ酸配列を含むヒトＦｃドメインに融合されていることを特徴とする単離ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質。
【請求項８】
薬学的に許容可能なキャリアと混合して、治療有効量の請求項１乃至７の何れか１項に記載のハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質を含む、薬学的組成物。
【請求項９】
第２の薬剤と組み合わせて、対象における筋消耗を治療又は予防するための請求項８に記載の薬学的組成物であって、前記第２の薬剤が、成長ホルモン、グレリン、ＩＧＦ１、インスリン、プレドニゾン、コルチコステロイド療法、アンドロゲン除去療法、同化ステロイド、アンジオテンシン又はアンジオテンシン受容体に対する拮抗薬、炎症性サイトカイン、例えばＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１及びそれらの受容体に対する拮抗薬、ミオスタチン、アクチビンＡ又はＴＧＦ−βファミリーの別のメンバー及びそれらの受容体に対する他の拮抗薬、ビスホスホネート、ＲＡＮＫＬ阻害剤、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体の作動薬、β２作動薬、ＰＧＣ−１αの活性化剤、プロテアソーム阻害剤、癌治療薬、化学療法剤、細胞療法、幹細胞療法、遺伝子療法、遺伝子標的療法、並びにアンチセンスオリゴヌクレオチド療法からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１０】
請求項９に記載の薬学的組成物において、前記第２の薬剤が、アンチセンスオリゴヌクレオチド療法であることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１１】
請求項９に記載の薬学的組成物において、前記ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢリガンドトラップタンパク質及び前記第２の薬剤が、別個の剤形で提供されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１２】
対象における筋消耗を治療又は予防するための請求項８に記載の薬学的組成物であって、前記筋消耗が、筋ジストロフィー、筋炎、ミオパチー、運動ニューロン疾患、筋萎縮症、脊髄性筋萎縮症、神経筋接合部疾患、末梢神経疾患、脊髄損傷、脳卒中、神経変性疾患、食欲不振、悪液質、代謝障害、癌、臓器不全、外傷、廃用、感染、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、心血管疾患、慢性腎臓病、サルコペニア、サルコペニア肥満、変形性関節症、老化状態、線維症、及び自己免疫障害からなる群から選択される症状と関連していることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の薬学的組成物において、前記脊髄性筋萎縮症が、乳児型進行性脊髄性筋萎縮症、中間型脊髄性筋萎縮症、若年型脊髄性筋萎縮症、及び成人型脊髄性筋萎縮症からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１４】
請求項１２に記載の薬学的組成物において、前記末梢神経疾患が、シャルコー・マリー・トゥース病、デジェリン・ソッタス病、及びフリードライヒ運動失調症からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１５】
請求項１２に記載の薬学的組成物において、前記神経変性疾患が、パーキンソン病、ハンチントン病、アルツハイマー病、及びクロイツフェルト・ヤコブ病からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項１２に記載の薬学的組成物において、前記老化状態が、高齢者のフレイル、加齢性サルコペニア、及び変形性関節症からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１７】
請求項１２に記載の薬学的組成物において、前記運動ニューロン疾患が、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ又はルー・ゲーリック病）であることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１８】
対象における骨疾患を治療又は予防するための請求項８に記載の薬学的組成物であって、前記骨疾患が、骨粗鬆症、腎性骨形成異常症、骨軟化症、骨形成不全症、進行性骨化性線維異形成症、コルチコステロイド誘発性骨量減少、アンドロゲン除去療法誘発性骨量減少、骨折、癌誘発性骨量減少、骨転移、骨のパジェット病、くる病、ペルテス病、及び線維性骨異形成症からなる群から選択されることを特徴とする薬学的組成物。
【請求項１９】
ポリヌクレオチドであって、
ａ．配列番号１６及び配列番号２９からなる群から選択されるハイブリッド可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ−ＥＣＤポリペプチド配列と、
ｂ．ヒトＦｃドメイン配列と
を含むポリペプチドをコードすることを特徴とするポリヌクレオチド。
【請求項２０】
請求項１９に記載のポリヌクレオチドにおいて、前記ポリヌクレオチドによってコードされる前記ポリペプチドが：
ａ．配列番号４４に示されるペプチドリンカー配列；
ｂ．配列番号１１８に示されるヒンジリンカー配列；又は
ｃ．配列番号４４に示されるペプチドリンカー配列及び配列番号１１８に示されるヒンジリンカー配列の両方
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むリンカーをさらに含むことを特徴とするポリヌクレオチド。
【請求項２１】
請求項１９又は２０に記載のポリヌクレオチドにおいて、前記ポリヌクレオチドによってコードされる前記ポリペプチドが、シグナルペプチドリーダー配列をさらに含むことを特徴とするポリヌクレオチド。
【請求項２２】
請求項１９乃至２１の何れか１項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２３】
請求項１９乃至２１の何れか１項に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項２４】
請求項２３に記載の宿主細胞において、前記宿主細胞が、哺乳類細胞であることを特徴とする宿主細胞。
【請求項２５】
ハイブリッドＡｃｔＲＩＩＢタンパク質を産生する方法であって、前記方法が、請求項２４に記載の宿主細胞を前記タンパク質の発現を促進する条件下で培養するステップと、前記タンパク質を回収するステップとを備えることを特徴とする方法。