【手続補正書】
【提出日】令和2年5月21日(2020.5.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）左側の（５’）レンチウイルスＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）レトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）セントラルポリプリントラクト／ＤＮＡフラップ（ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰ）と、
（ｅ）トリペプチジルペプチダーゼ１（ＴＰＰ１）ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）レンチウイルスＬＴＲと、を含む、ポリヌクレオチドを含む、哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項２】
（ａ）前記レンチウイルスが、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス、ＨＩＶ  １型およびＨＩＶ２型を含む）ビスナ・マエディウイルス（ＶＭＶ）ウイルス、ヤギ関節炎脳炎ウイルス（ＣＡＥＶ）、ウマ伝染性貧血ウイルス（ＥＩＡＶ）、ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）、およびサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される；
（ｂ）前記レンチウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である；または
（ｃ）前記レンチウイルスがＨＩＶ−１である、
請求項１に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項３】
前記５’ＬＴＲのプロモーターは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーター、およびシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）プロモーターからなる群から選択される異種プロモーターで置換される、請求項１または請求項２に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項４】
（ａ）前記３’ＬＴＲは、１つ以上の修飾を含む；
（ｂ）前記３’ＬＴＲは、ウイルス複製の第１ラウンドを超えるウイルス転写を防止する１つ以上の欠失を含む；
（ｃ）前記３’ＬＴＲは、前記３’ＬＴＲのＵ３領域におけるＴＡＴＡボックス、ならびにＳｐ１およびＮＦ−κＢ転写因子結合部位の欠失を含む；または
（ｄ）前記３’ＬＴＲは、自己不活性化（ＳＩＮ）ＬＴＲである、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項５】
（ａ）前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、インテグリンサブユニットアルファＭ（ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ）、ＣＤ６８、Ｃ−Ｘ３−Ｃモチーフケモカイン受容体１（ＣＸ３ＣＲ１）、イオン化カルシウム結合アダプター分子１（ＩＢＡ１）、膜貫通タンパク質１１９（ＴＭＥＭ１１９）、ｓｐａｌｔ  ｌｉｋｅ転写因子１（ＳＡＬＬ１）および接着Ｇタンパク質結合受容体Ｅ１（Ｆ４／８０）からなる群から選択される；
（ｂ）前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー、ネガティブコントロール領域欠失、ｄ１５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターまたはその転写活性断片を含む；
（ｃ）前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、伸長因子１α（ＥＦ１α）プロモーターまたはその転写活性断片を含む；
（ｄ）前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、短いＥＦ１αプロモーターである；または
（ｅ）前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、長いＥＦ１αプロモーターである、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項６】
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、ｃＤＮＡである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項７】
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、発現のために最適化されたコドンである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項８】
前記ポリヌクレオチドが、
（ａ）左側の（５’）ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）ＲＲＥレトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰと、
（ｅ）ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＭＮＤプロモーターまたはＥＦ１αプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、
を含む、請求項１に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項９】
前記ポリヌクレオチドが、
（ａ）左側の（５’）ＣＭＶプロモーター／ＨＩＶ−１キメラＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）ＲＲＥレトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰと、
（ｅ）ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＭＮＤプロモーターまたはＥＦ１αプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）ＳＩＮ  ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、
を含む、請求項１に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項１０】
ウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルまたはウサギβ−グロビンポリアデニル化シグナルをさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞。
【請求項１１】
薬学的に許容される担体および、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の哺乳動物ＣＤ３４＋造血幹細胞または前駆細胞を含む、薬学的組成物。
【請求項１２】
対象における神経セロイドリポフスチン症（ＮＣＬ）を治療するための、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
対象における神経セロイドリポフスチン症に関連する少なくとも１つの症状を減少させるための、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記対象が、後期乳幼児ＮＣＬ（ＬＩＮＣＬ）または幼年型バッテン病（ＪＮＣＬ）と診断されている、請求項１２または請求項１３に記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
ある実施形態では、対象は、幼年型バッテン病（ＪＮＣＬ）と診断されている。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ａ）左側の（５’）レンチウイルスＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）レトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）セントラルポリプリントラクト／ＤＮＡフラップ（ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰ）と、
（ｅ）トリペプチジルペプチダーゼ１（ＴＰＰ１）ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）レンチウイルスＬＴＲと、を含む、ポリヌクレオチド。
（項目２）
前記レンチウイルスが、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス、ＨＩＶ  １型およびＨＩＶ２型を含む）ビスナ・マエディウイルス（ＶＭＶ）ウイルス、ヤギ関節炎脳炎ウイルス（ＣＡＥＶ）、ウマ伝染性貧血ウイルス（ＥＩＡＶ）、ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）、およびサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される、項目１に記載のポリヌクレオチド。
（項目３）
前記レンチウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である、項目１または２に記載のポリヌクレオチド。
（項目４）
前記レンチウイルスがＨＩＶ−１である、項目１〜３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目５）
前記５’ＬＴＲのプロモーターは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーター、およびシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）プロモーターからなる群から選択される異種プロモーターで置換される、項目１〜４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目６）
前記３’ＬＴＲは、１つ以上の修飾を含む、項目１〜５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目７）
前記３’ＬＴＲは、ウイルス複製の第１ラウンドを超えるウイルス転写を防止する１つ以上の欠失を含む、項目１〜６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目８）
前記３’ＬＴＲは、前記３’ＬＴＲのＵ３領域におけるＴＡＴＡボックス、ならびにＳｐ１およびＮＦ−κＢ転写因子結合部位の欠失を含む、項目１〜６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目９）
前記３’ＬＴＲは、自己不活性化（ＳＩＮ）ＬＴＲである、項目１〜６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１０）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、インテグリンサブユニットアルファＭ（ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ）、ＣＤ６８、Ｃ−Ｘ３−Ｃモチーフケモカイン受容体１（ＣＸ３ＣＲ１）、イオン化カルシウム結合アダプター分子１（ＩＢＡ１）、膜貫通タンパク質１１９（ＴＭＥＭ１１９）、ｓｐａｌｔ  ｌｉｋｅ転写因子１（ＳＡＬＬ１）および接着Ｇタンパク質結合受容体Ｅ１（Ｆ４／８０）からなる群から選択される、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１１）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー（ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ  ｅｎｈａｎｃｅｒ）、ネガティブコントロール領域欠失、ｄ１５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターまたはその転写活性断片を含む、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１２）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、伸長因子１α（ＥＦ１α）プロモーターまたはその転写活性断片を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１３）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、短いＥＦ１αプロモーターである、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１４）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたプロモーターは、長いＥＦ１αプロモーターである、項目１〜９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１５）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、ｃＤＮＡである、項目１〜１４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１６）
前記ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、発現のために最適化されたコドンである、項目１〜１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１７）
（ａ）左側の（５’）ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）ＲＲＥレトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰと、
（ｅ）ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＭＮＤプロモーターまたはＥＦ１αプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、を含む、ポリヌクレオチド。
（項目１８）
（ａ）左側の（５’）ＣＭＶプロモーター／ＨＩＶ−１キメラＬＴＲと、
（ｂ）プシー（Ψ）パッケージングシグナルと、
（ｃ）ＲＲＥレトロウイルスの移出エレメントと、
（ｄ）ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰと、
（ｅ）ＴＰＰ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＭＮＤプロモーターまたはＥＦ１αプロモーターと、
（ｆ）右側の（３’）ＳＩＮ  ＨＩＶ−１  ＬＴＲと、
を含む、ポリヌクレオチド。
（項目１９）
ウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルまたはウサギβ−グロビンポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目１〜１８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目２０）
項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むレンチウイルスベクターで形質導入された、哺乳動物細胞。
（項目２１）
前記細胞が造血細胞である、項目２０に記載の哺乳動物細胞。
（項目２２）
前記細胞がＣＤ３４＋細胞である、項目２０または２１に記載の哺乳動物細胞。
（項目２３）
前記細胞が幹細胞または前駆細胞である、項目２０〜２２のいずれか一項に記載の哺乳動物細胞。
（項目２４）
ｇａｇをコードする第１のポリヌクレオチドと、ｐｏｌをコードする第２のポリヌクレオチドと、ｅｎｖをコードする第３のポリヌクレオチドと、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドと、を含む、産生細胞。
（項目２５）
項目２４に記載の産生細胞によって産生された、レンチウイルスベクター。
（項目２６）
項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドまたは項目２０〜２３のいずれか一項に記載の哺乳動物細胞を含むレンチウイルスベクターを含む、組成物。
（項目２７）
薬学的に許容される担体および、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドまたは項目２０〜２３のいずれか一項に記載の哺乳類細胞を含むレンチウイルスベクターを含む、薬学的組成物。
（項目２８）
神経セロイドリポフスチン症（ＮＣＬ）を治療する方法であって、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むレンチウイルスベクターを、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むレンチウイルスベクターで形質導入された細胞を、または項目２０〜２３のいずれか一項に記載の哺乳動物細胞を、対象に投与することを含む、方法。
（項目２９）
項目２７に記載の薬学的組成物を対象に投与することを含む、神経セロイドリポフスチン症を治療する、方法。
（項目３０）
対象における神経セロイドリポフスチン症に関連する少なくとも１つの症状を軽減させる方法であって、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むレンチウイルスベクターを、項目１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むレンチウイルスベクターで形質導入された細胞を、または項目２０〜２３のいずれか一項に記載の哺乳動物細胞を、対象に投与することを含む、方法。
（項目３１）
項目２７に記載の薬学的組成物を対象に投与することを含む、対象における神経セロイドリポフスチン症に関連する少なくとも１つの症状を減少させる、方法。
（項目３２）
前記少なくとも１つの症状が、発作、失明、認知機能低下、および運動機能低下からなる群から選択される、項目３０または３１に記載の方法。
（項目３３）
前記対象が、後期乳幼児ＮＣＬ（ＬＩＮＣＬ）と診断されている、項目２８〜３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
前記対象が、幼年型バッテン病（ＪＮＣＬ）と診断されている、項目２８〜３２のいずれか一項に記載の方法。