【手続補正書】
【提出日】令和2年7月9日(2020.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：４に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含み、配列番号：４の７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、ポリペプチドをコードする核酸分子。
【請求項２】
（ａ）配列番号：１であり、配列番号：１の３４４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｂ）配列番号：２であり、配列番号：２の７０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｃ）配列番号：３であり、配列番号：３の６５５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｄ）配列番号：５であり、配列番号：５の７８１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｅ）配列番号：６であり、配列番号：６の１３６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｆ）配列番号：７であり、配列番号：７の１８３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｇ）配列番号：８であり、配列番号：８の１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｈ）配列番号：９であり、配列番号：９の１０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｉ）配列番号：１０であり、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｊ）配列番号：１１であり、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｋ）配列番号：１２であり、配列番号：１２の６９位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｌ）配列番号：１３であり、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｍ）配列番号：１７であり、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｎ）配列番号：１８であり、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、及び／または、
（ｏ）配列番号：１９であり、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸分子。
【請求項３】
請求項１または２に記載の核酸分子から選択される少なくとも１つの核酸分子を含む菌株。
【請求項４】
配列番号：２０、配列番号：２１または配列番号：２２に対して少なくとも９０％同一なｔＲＮＡをコードする核酸を含み、以下の特徴、
（ｉ）７位に相当する位置にＧまたはＣ、
（ｉｉ）４９位に相当する位置にＴ、
（ｉｉｉ）５０位に相当する位置にＡまたはＣ、
（ｉｖ）６４位に相当する位置にＴ、
（ｖ）６５位に相当する位置にＧまたはＡ、及び／または、
（ｖｉ）６６位に相当する位置にＧ、ＴまたはＣ、
のうちの１つまたは複数を含む、請求項３に記載の菌株。
【請求項５】
寄託受入番号４２５９５でＮＣＩＭＢに寄託されたＥ．ｃｏｌｉ菌株。
【請求項６】
請求項３または請求項５に記載の細菌の培養物であって、１〜１００ｍｇ／Ｌの前記培養物の量で発現組換えポリペプチドを含み、前記発現組換えポリペプチドは少なくとも１つのセレノシステイン残基を含む、細菌の培養物。
【請求項７】
少なくとも１つのセレノシステイン残基を含むポリペプチドを発現させるための方法であって、
（ａ）セレン供給源の存在下、請求項５または６に記載の菌株内で前記ポリペプチドをコードする核酸を発現させることと、
（ｂ）前記細菌から前記組換えポリペプチドを精製することと、
を含む、前記方法。
【請求項８】
配列番号：４に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含み、配列番号：４の７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、組換えポリペプチドであって、
好ましくは、前記ポリペプチドは、配列番号：４の７３位に相当する位置にＡｌａ置換を含み、
さらにより好ましくは、前記ポリペプチドは、配列番号：４の４５位に相当する位置にＡｓｎ置換、２９０位に相当する位置にＬｅｕ置換、２７１位に相当する位置にＡｓｐ置換、１５３位に相当する位置にＴｙｒ置換、４５位に相当する位置にＶａｌ置換、２８４位に相当する位置にＰｒｏ置換、７３位に相当する位置にＩｌｅ置換、６８位に相当する位置にＬｅｕ置換、６９位に相当する位置にＩｌｅ置換、３０５位に相当する位置にＣｙｓ置換、１４４位に相当する位置にＳｅｒ置換、及び／または、２８１位に相当する位置にＶａｌ置換、を更に含む、組換えポリペプチド。
【請求項９】
（ａ）配列番号：１であり、配列番号：１の３４４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｂ）配列番号：２であり、配列番号：２の７０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｃ）配列番号：３であり、配列番号：３の６５５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｄ）配列番号：５であり、配列番号：５の７８１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｅ）配列番号：６であり、配列番号：６の１３６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｆ）配列番号：７であり、配列番号：７の１８３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｇ）配列番号：８であり、配列番号：８の１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｈ）配列番号：９であり、配列番号：９の１０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｉ）配列番号：１０であり、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｊ）配列番号：１１であり、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｋ）配列番号：１２であり、配列番号：１２の６９位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｌ）配列番号：１３であり、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｍ）配列番号：１７であり、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｎ）配列番号：１８であり、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、または、
（ｏ）配列番号：１９であり、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含む組換えポリペプチドであって、
好ましくは、
前記ポリペプチドは、配列番号：１の３４４位に相当する位置にＰｒｏ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：２の７０２位に相当する位置にＨｉｓ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：３の６５５位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：５の７８１位に相当する位置にＧｌｙ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：６の１３６位に相当する位置にＶａｌ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：７の１８３位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：８の１位に相当する位置にＡｒｇ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：９の１０２位に相当する位置にＣｙｓ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にＣｙｓ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にＬｅｕ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１２の６９位に相当する位置にＧｌｙ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にＳｅｒ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にＩｌｅ置換を含む、または
前記ポリペプチドは、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にＰｒｏ置換を含み、
さらにより好ましくは、
前記ポリペプチドは、配列番号：１の９９９位に相当する位置にＴｈｒ置換、４５７位に相当する位置にＴｈｒ置換、５９１位に相当する位置にＰｒｏ置換、１８３位に相当する位置にＴｈｒ置換、３５８位に相当する位置にＬｅｕ置換、２３位に相当する位置にＡｒｇ置換、９０２位に相当する位置にＩｌｅ置換、８８９位に相当する位置にＶａｌ置換、６２０位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、１７４位に相当する位置にＧｌｙ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：３の３９８位に相当する位置にＣｙｓ置換、６５２位に相当する位置にＡｌａ置換、２６４位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、２１位に相当する位置にＡｌａ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：５の９１６位に相当する位置にＧｌｙ置換、９３８位に相当する位置にＨｉｓ置換、８６０位に相当する位置にＨｉｓ置換、９２５位に相当する位置にＡｓｐ置換、及び／または、４７０位に相当する位置にＭｅｔ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：６の１１５位に相当する位置にＡｌａ置換、３８６位に相当する位置にＡｒｇ置換、１５５位に相当する位置にＡｒｇ置換、９８位に相当する位置にＳｅｒ置換、２０１位に相当する位置にＡｌａ置換、２９４位に相当する位置にＴｈｒ置換、１５９位に相当する位置にＴｙｒ置換、及び／または、１１２位に相当する位置にＩｌｅ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１８の７６位に相当する位置にＧｌｙ置換、２９３位に相当する位置にＶａｌ置換、６３７位に相当する位置にＴｈｒ置換、３位に相当する位置にＶａｌ置換、３１１位に相当する位置にＳｅｒ置換、４７１位に相当する位置にＴｈｒ置換、２２８位に相当する位置にＶａｌ置換、３１１位に相当する位置にＳｅｒ置換、及び／または、２５７位に相当する位置にＴｈｒ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：７の１７３位に相当する位置にＶａｌ置換、１９６位に相当する位置にＬｅｕ置換、１８０位に相当する位置にＰｈｅ置換、２４９位に相当する位置にＡｌａ置換、５位に相当する位置にＶａｌ置換、２７３位に相当する位置にＬｅｕ置換、及び／または、１７６位に相当する位置にＡｓｎ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：９の１５位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、３０位に相当する位置に置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１９の１９３位に相当する位置にＩｌｅ置換、２３３位に相当する位置にＴｈｒ置換、３００位に相当する位置にＡｌａ置換、及び／または、１９９位に相当する位置にＡｒｇ置換、を更に含む、
前記ポリペプチドは、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にＡｌａ置換を更に含む、または
前記ポリペプチドは、配列番号：１１の１１９位に相当する位置にＶａｌ置換、５３５位に相当する位置にＰｒｏ置換、３７３位に相当する位置にＡｒｇ置換、５３５位に相当する位置にＳｅｒ置換、１１９位に相当する位置にＴｈｒ置換、６０１位に相当する位置にＡｌａ置換、１０３位に相当する位置にＬｙｓ置換、３１位に相当する位置にＡｓｐ置換、６６２位に相当する位置にＩｌｅ置換、３５９位に相当する位置にＬｙｓ置換、及び／または、５１９位に相当する位置にＡｓｐ置換、を更に含む、組換えポリペプチド。
【請求項１０】
精製組換えポリペプチドを含む組成物であって、前記ポリペプチドは、前記ポリペプチドの野生型には存在しない選択位置に少なくとも１つのセレノシステイン残基を含み、前記組成物中における前記組換えポリペプチドの少なくとも８０％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、前記組成物。
【請求項１１】
前記組成物中における前記組換えポリペプチドの８０％〜９９．９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含み、
好ましくは、前記組成物中における前記組換えポリペプチドの９０％〜９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含み、
より好ましくは、前記組成物中における前記組換えポリペプチドの少なくとも９５％または９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組換えポリペプチドは、ヒトポリペプチドに対して少なくとも９０％同一であり、好ましくは、前記ヒトポリペプチドは疾患に関与するポリペプチドである、請求項１０から請求項１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組換えポリペプチドは抗体または酵素を含む、請求項１０から請求項１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記ポリペプチドは選択位置に少なくとも２つのセレノシステイン残基を含む、請求項１０から請求項１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記選択位置の前記２つのセレノシステイン残基はジセレニド結合を形成する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
少なくとも５０μｇの前記精製組換えポリペプチドを含み、精製組換えポリペプチドは９７％〜９９．９％の純度である、請求項１０から請求項１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１０から請求項１６のいずれか１項に記載の組成物を含む医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
本発明のその他の目的、特徴及び利点は、以下の発明を実施するための形態により明らかとなるであろう。しかしながら、発明を実施するための形態及び特定の実施例については、本発明の好ましい実施形態を示してはいるが、単に例示として示されていると理解するべきであり、そのため、本発明の趣旨内及び範囲内における様々な変更及び修正は、本明細書の発明を実施するための形態により当業者に明らかとなるであろう。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
精製組換えポリペプチドを含む組成物であって、前記ポリペプチドは、前記ポリペプチドの野生型には存在しない選択位置に少なくとも１つのセレノシステイン残基を含み、前記組成物中における前記組換えポリペプチドの少なくとも８０％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、前記組成物。
（項目２）
前記組成物中における前記組換えポリペプチドの８０％〜９９．９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記組成物中における前記組換えポリペプチドの９０％〜９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目１に記載の組成物。
（項目４）
前記組成物中における前記組換えポリペプチドの少なくとも９５％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目１に記載の組成物。
（項目５）
前記組成物中における前記組換えポリペプチドの少なくとも９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目１に記載の組成物。
（項目６）
前記組換えポリペプチドは、ヒトポリペプチドに対して少なくとも９０％同一である、項目１から項目５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目７）
前記ヒトポリペプチドは疾患に関与するポリペプチドである、項目６に記載の組成物。
（項目８）
前記組換えポリペプチドは抗体または酵素を含む、項目１から項目５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目９）
前記ポリペプチドは選択位置に少なくとも２つのセレノシステイン残基を含む、項目１から項目５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１０）
前記選択位置の前記２つのセレノシステイン残基はジセレニド結合を形成する、項目９に記載の組成物。
（項目１１）
前記ポリペプチドは酵素または抗体を含む、項目１０に記載の組成物。
（項目１２）
前記抗体はアグリコシル化抗体である、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
少なくとも５０μｇの前記精製組換えポリペプチドを含む、項目１から項目５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１４）
精製組換えポリペプチドは９７％〜９９．９％の純度である、項目１から項目５のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１５）
前記ポリペプチドは、選択位置に２、３、４、５、６、７、８、９または１０のセレノシステイン残基を含む、項目１から項目１１のいずれか１項に記載の組成物。
（項目１６）
項目１から項目１１のいずれか１項に記載の組成物を含む医薬組成物。
（項目１７）
項目１６に記載の有効量の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、対象を治療するための方法。
（項目１８）
（ａ）配列番号：１であり、配列番号：１の３４４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｂ）配列番号：２であり、配列番号：２の７０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｃ）配列番号：３であり、配列番号：３の６５５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｄ）配列番号：４であり、配列番号：４の７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｅ）配列番号：５であり、配列番号：５の７８１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｆ）配列番号：６であり、配列番号：６の１３６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｇ）配列番号：７であり、配列番号：７の１８３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｈ）配列番号：８であり、配列番号：８の１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｉ）配列番号：９であり、配列番号：９の１０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｊ）配列番号：１０であり、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｋ）配列番号：１１であり、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｌ）配列番号：１２であり、配列番号：１２の６９位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｍ）配列番号：１３であり、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｎ）配列番号：１７であり、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｏ）配列番号：１８であり、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、及び／または、
（ｐ）配列番号：１９であり、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸分子。
（項目１９）
（ａ）配列番号：１であり、配列番号：１の３４４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｂ）配列番号：２であり、配列番号：２の７０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｃ）配列番号：３であり、配列番号：３の６５５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｄ）配列番号：４であり、配列番号：４の７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｅ）配列番号：５であり、配列番号：５の７８１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｆ）配列番号：６であり、配列番号：６の１３６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｇ）配列番号：７であり、配列番号：７の１８３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｈ）配列番号：８であり、配列番号：８の１位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｉ）配列番号：９であり、配列番号：９の１０２位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｊ）配列番号：１０であり、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｋ）配列番号：１１であり、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｌ）配列番号：１２であり、配列番号：１２の６９位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｍ）配列番号：１３であり、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｎ）配列番号：１７であり、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
（ｏ）配列番号：１８であり、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、または、
（ｐ）配列番号：１９であり、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にアミノ酸置換または欠失を有する、
に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含む組換えポリペプチド。
（項目２０）
前記ポリペプチドは、配列番号：１の３４４位に相当する位置にＰｒｏ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２１）
前記ポリペプチドは、配列番号：２の７０２位に相当する位置にＨｉｓ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２２）
前記ポリペプチドは、配列番号：３の６５５位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２３）
前記ポリペプチドは、配列番号：４の７３位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２４）
前記ポリペプチドは、配列番号：５の７８１位に相当する位置にＧｌｙ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２５）
前記ポリペプチドは、配列番号：６の１３６位に相当する位置にＶａｌ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２６）
前記ポリペプチドは、配列番号：７の１８３位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２７）
前記ポリペプチドは、配列番号：８の１位に相当する位置にＡｒｇ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２８）
前記ポリペプチドは、配列番号：９の１０２位に相当する位置にＣｙｓ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目２９）
前記ポリペプチドは、配列番号：１０の１０５位に相当する位置にＣｙｓ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３０）
前記ポリペプチドは、配列番号：１１の６７３位に相当する位置にＬｅｕ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３１）
前記ポリペプチドは、配列番号：１２の６９位に相当する位置にＧｌｙ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３２）
前記ポリペプチドは、配列番号：１３の１０７位に相当する位置にＳｅｒ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３３）
前記ポリペプチドは、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にＡｌａ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３４）
前記ポリペプチドは、配列番号：１８の５４５位に相当する位置にＩｌｅ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３５）
前記ポリペプチドは、配列番号：１９の１２４位に相当する位置にＰｒｏ置換を含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３６）
前記ポリペプチドは、配列番号：１の９９９位に相当する位置にＴｈｒ置換、４５７位に相当する位置にＴｈｒ置換、５９１位に相当する位置にＰｒｏ置換、１８３位に相当する位置にＴｈｒ置換、３５８位に相当する位置にＬｅｕ置換、２３位に相当する位置にＡｒｇ置換、９０２位に相当する位置にＩｌｅ置換、８８９位に相当する位置にＶａｌ置換、６２０位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、１７４位に相当する位置にＧｌｙ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３７）
前記ポリペプチドは、配列番号：３の３９８位に相当する位置にＣｙｓ置換、６５２位に相当する位置にＡｌａ置換、２６４位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、２１位に相当する位置にＡｌａ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３８）
前記ポリペプチドは、配列番号：４の４５位に相当する位置にＡｓｎ置換、２９０位に相当する位置にＬｅｕ置換、２７１位に相当する位置にＡｓｐ置換、１５３位に相当する位置にＴｙｒ置換、４５位に相当する位置にＶａｌ置換、２８４位に相当する位置にＰｒｏ置換、７３位に相当する位置にＩｌｅ置換、６８位に相当する位置にＬｅｕ置換、６９位に相当する位置にＩｌｅ置換、３０５位に相当する位置にＣｙｓ置換、１４４位に相当する位置にＳｅｒ置換、及び／または、２８１位に相当する位置にＶａｌ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目３９）
前記ポリペプチドは、配列番号：５の９１６位に相当する位置にＧｌｙ置換、９３８位に相当する位置にＨｉｓ置換、８６０位に相当する位置にＨｉｓ置換、９２５位に相当する位置にＡｓｐ置換、及び／または、４７０位に相当する位置にＭｅｔ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４０）
前記ポリペプチドは、配列番号：６の１１５位に相当する位置にＡｌａ置換、３８６位に相当する位置にＡｒｇ置換、１５５位に相当する位置にＡｒｇ置換、９８位に相当する位置にＳｅｒ置換、２０１位に相当する位置にＡｌａ置換、２９４位に相当する位置にＴｈｒ置換、１５９位に相当する位置にＴｙｒ置換、及び／または、１１２位に相当する位置にＩｌｅ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４１）
前記ポリペプチドは、配列番号：１８の７６位に相当する位置にＧｌｙ置換、２９３位に相当する位置にＶａｌ置換、６３７位に相当する位置にＴｈｒ置換、３位に相当する位置にＶａｌ置換、３１１位に相当する位置にＳｅｒ置換、４７１位に相当する位置にＴｈｒ置換、２２８位に相当する位置にＶａｌ置換、３１１位に相当する位置にＳｅｒ置換、及び／または、２５７位に相当する位置にＴｈｒ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４２）
前記ポリペプチドは、配列番号：７の１７３位に相当する位置にＶａｌ置換、１９６位に相当する位置にＬｅｕ置換、１８０位に相当する位置にＰｈｅ置換、２４９位に相当する位置にＡｌａ置換、５位に相当する位置にＶａｌ置換、２７３位に相当する位置にＬｅｕ置換、及び／または、１７６位に相当する位置にＡｓｎ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４３）
前記ポリペプチドは、配列番号：９の１５位に相当する位置にＣｙｓ置換、及び／または、３０位に相当する位置に置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４４）
前記ポリペプチドは、配列番号：１９の１９３位に相当する位置にＩｌｅ置換、２３３位に相当する位置にＴｈｒ置換、３００位に相当する位置にＡｌａ置換、及び／または、１９９位に相当する位置にＡｒｇ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４５）
前記ポリペプチドは、配列番号：１７の２４６位に相当する位置にＡｌａ置換を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４６）
前記ポリペプチドは、配列番号：１１の１１９位に相当する位置にＶａｌ置換、５３５位に相当する位置にＰｒｏ置換、３７３位に相当する位置にＡｒｇ置換、５３５位に相当する位置にＳｅｒ置換、１１９位に相当する位置にＴｈｒ置換、６０１位に相当する位置にＡｌａ置換、１０３位に相当する位置にＬｙｓ置換、３１位に相当する位置にＡｓｐ置換、６６２位に相当する位置にＩｌｅ置換、３５９位に相当する位置にＬｙｓ置換、及び／または、５１９位に相当する位置にＡｓｐ置換、を更に含む、項目１９に記載の組換えポリペプチド。
（項目４７）
（ｉ）配列番号：１４に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）２１２位に相当する位置にＩｌｅ置換、１６２位に相当する位置にＡｓｎ置換、２９９位に相当する位置にＡｌａ置換、及び／または、２２０位に相当する位置にＡｒｇ置換、を含む、ポリペプチドをコードする核酸分子。
（項目４８）
（ｉ）配列番号：１４に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）２１２位に相当する位置にＩｌｅ置換、１６２位に相当する位置にＡｓｎ置換、２９９位に相当する位置にＡｌａ置換、及び／または、２２０位に相当する位置にＡｒｇ置換、を含む、組換えポリペプチド。
（項目４９）
（ｉ）配列番号：１５に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）１８４位に相当する位置にＡｌａ置換、１７３０位に相当する位置にＡｓｎ置換、１８８８位に相当する位置にＡｓｐ置換、３５２位に相当する位置にＴｈｒ置換、３７４位に相当する位置にＳｅｒ置換、１４２３位に相当する位置にＡｒｇ置換、１５０２位に相当する位置にＧｌｕ置換、２８５位に相当する位置にＧｌｎ置換、４７０位に相当する位置にＬｙｓ置換、９３９位に相当する位置にＴｈｒ置換、１６６９位に相当する位置にＰｈｅ置換、２０３４位に相当する位置にＩｌｅ置換、１７１３位に相当する位置にＡｓｎ置換、７０４位に相当する位置にＴｈｒ置換、及び／または、１０８４位に相当する位置にＩｌｅ置換、を含むポリペプチドをコードする核酸分子。
（項目５０）
（ｉ）配列番号：１５に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）１８４位に相当する位置にＡｌａ置換、１７３０位に相当する位置にＡｓｎ置換、１８８８位に相当する位置にＡｓｐ置換、３５２位に相当する位置にＴｈｒ置換、３７４位に相当する位置にＳｅｒ置換、１４２３位に相当する位置にＡｒｇ置換、１５０２位に相当する位置にＧｌｕ置換、２８５位に相当する位置にＧｌｎ置換、４７０位に相当する位置にＬｙｓ置換、９３９位に相当する位置にＴｈｒ置換、１６６９位に相当する位置にＰｈｅ置換、２０３４位に相当する位置にＩｌｅ置換、１７１３位に相当する位置にＡｓｎ置換、７０４位に相当する位置にＴｈｒ置換、及び／または、１０８４位に相当する位置にＩｌｅ置換、を含む、組換えポリペプチド。
（項目５１）
（ｉ）配列番号：１６に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）１１２位に相当する位置にＰｈｅ置換、１２６位に相当する位置にＡｌａ置換、９７８位に相当する位置にＬｅｕ置換、１９９位に相当する位置にＧｌｙ置換、４７６位に相当する位置にＴｈｒ置換、及び／または、７３５位に相当する位置にＶａｌ置換、を含むポリペプチドをコードする核酸分子。
（項目５２）
（ｉ）配列番号：１６に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、ならびに、（ｉｉ）１１２位に相当する位置にＰｈｅ置換、１２６位に相当する位置にＡｌａ置換、９７８位に相当する位置にＬｅｕ置換、１９９位に相当する位置にＧｌｙ置換、４７６位に相当する位置にＴｈｒ置換、及び／または、７３５位に相当する位置にＶａｌ置換、を含む、組換えポリペプチド。
（項目５３）
項目１８、項目４７、項目４９または項目５１に記載の核酸分子から選択される少なくとも１つの核酸分子を含む菌株。
（項目５４）
前記菌株は、項目１８、項目４７、項目４９または項目５１に記載の核酸分子から選択される少なくとも１つの核酸分子によりコードされる前記ポリペプチドを発現する、項目５３に記載の菌株。
（項目５５）
少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０の前記核酸分子を含む、項目５３に記載の菌株。
（項目５６）
前記菌株は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０の前記核酸分子によりコードされる前記ポリペプチドを発現する、項目５５に記載の菌株。
（項目５７）
前記菌株はＥ．ｃｏｌｉ株である、項目５５に記載の菌株。
（項目５８）
配列番号：２０、配列番号：２１または配列番号：２２に対して少なくとも９０％同一なｔＲＮＡをコードする核酸を含み、以下の特徴、
（ｉ）７位に相当する位置にＧまたはＣ、
（ｉｉ）４９位に相当する位置にＴ、
（ｉｉｉ）５０位に相当する位置にＡまたはＣ、
（ｉｖ）６４位に相当する位置にＴ、
（ｖ）６５位に相当する位置にＧまたはＡ、及び／または、
（ｖｉ）６６位に相当する位置にＧ、ＴまたはＣ、
のうちの１つまたは複数を含む、項目５３に記載の菌株。
（項目５９）
前記分子は、配列番号：２０に対して少なくとも約９０％同一な前記配列を含むｔＲＮＡをコードし、以下の特徴、
（ｉ）７位に相当する位置にＧ、
（ｉｉ）４９位に相当する位置にＴ、
（ｉｉｉ）５０位に相当する位置にＣ、
（ｉｖ）６４位に相当する位置にＴ、
（ｖ）６５位に相当する位置にＧ、及び／または、
（ｖｉ）６６位に相当する位置にＣ、
のうちの１つまたは複数を含む、項目５８に記載の菌株。
（項目６０）
前記分子は、前記特徴（ｉ）〜（ｖｉ）のうちの２、３、４、５または６つを含む、項目５９に記載の菌株。
（項目６１）
前記分子は、配列番号：２０に対して少なくとも９５％同一な配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目５８に記載の菌株。
（項目６２）
前記分子は、配列番号：２０の前記配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目６１に記載の菌株。
（項目６３）
前記分子は、配列番号：２１に対して少なくとも約９０％同一な前記配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目５８に記載の菌株。
（項目６４）
前記分子は、配列番号：２１の前記配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目６３に記載の菌株。
（項目６５）
前記分子は、配列番号：２２に対して少なくとも約９０％同一な前記配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目５８に記載の菌株。
（項目６６）
前記分子は、配列番号：２２の前記配列を含むｔＲＮＡをコードする、項目６５に記載の菌株。
（項目６７）
セレノシステイン組み込み用のＴＡＧコドンを有するコード配列中に少なくとも１つの位置を有する目的のポリペプチドをコードする発現可能な核配列を更に含む、項目５３に記載の菌株。
（項目６８）
前記発現可能な核配列はヒトポリペプチドをコードする、項目６７に記載の菌株。
（項目６９）
前記発現可能な核配列は酵素または抗体をコードする、項目６７に記載の菌株。
（項目７０）
前記発現可能な核配列はＴ７  ＲＮＡポリメラーゼプロモーターを含む、項目６７に記載の菌株。
（項目７１）
Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼをコードする核酸配列を更に含む、項目５３に記載の菌株。
（項目７２）
寄託受入番号４２５９５でＮＣＩＭＢに寄託されたＥ．ｃｏｌｉ菌株。
（項目７３）
項目５３から項目７２のいずれか１項に記載の菌株を含む細菌の培養物。
（項目７４）
１〜１００ｍｇ／Ｌの前記培養物の量で発現組換えポリペプチドを含む前記培養物を含み、前記発現組換えポリペプチドは少なくとも１つのセレノシステイン残基を含む、細菌の培養物。
（項目７５）
１０〜４０ｍｇ／Ｌの前記培養物の量で発現組換えポリペプチドを含み、前記発現組換えポリペプチドは少なくとも１つのセレノシステイン残基を含む、項目７４に記載の培養物。
（項目７６）
前記発現組換えポリペプチドは項目のいずれか１項に記載のポリペプチドである、項目７４または項目７５に記載の培養物。
（項目７７）
前記発現組換えポリペプチドは、前記ポリペプチドの野生型には存在しない選択位置に少なくとも１つのセレノシステイン残基を含む、項目７４または項目７５に記載の培養物。
（項目７８）
前記培養物中における前記発現組換えポリペプチドの少なくとも８０％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目７７に記載の培養物。
（項目７９）
前記培養物中における前記組換えポリペプチドの８０％〜９９．９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目７７に記載の培養物。
（項目８０）
前記培養物中における前記発現組換えポリペプチドの９０％〜９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目７７に記載の培養物。
（項目８１）
前記培養物中における前記発現組換えポリペプチドの少なくとも９５％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目７７に記載の培養物。
（項目８２）
前記培養物中における前記発現組換えポリペプチドの少なくとも９９％は、前記選択位置に前記セレノシステイン残基を含む、項目７７に記載の培養物。
（項目８３）
前記発現組換えポリペプチドはヒトポリペプチドに対して少なくとも９０％同一である、項目７４または項目７５に記載の培養物。
（項目８４）
前記ヒトポリペプチドは疾患に関与するポリペプチドである、項目８３に記載の培養物。
（項目８５）
前記発現組換えポリペプチドは抗体または酵素を含む、項目７４または項目７５に記載の培養物。
（項目８６）
前記ポリペプチドは選択位置に少なくとも２つのセレノシステイン残基を含む、項目７４または項目７５に記載の培養物。
（項目８７）
前記選択位置の前記２つのセレノシステイン残基はジセレニド結合を形成する、項目８６に記載の培養物。
（項目８８）
前記ポリペプチドは、選択位置に２、３、４、５、６、７、８、９または１０のセレノシステイン残基を含む、項目８６に記載の培養物。
（項目８９）
項目７４から項目８８のいずれか１項に記載の培養物から精製した少なくとも第１のセレノシステイン残基を含むポリペプチド。
（項目９０）
少なくとも１つのセレノシステイン残基を含むポリペプチドを発現させるための方法であって、
（ａ）セレン供給源の存在下、項目５３から項目７２のいずれか１項に記載の菌株内で前記ポリペプチドをコードする核酸を発現させることと、
（ｂ）前記細菌から前記組換えポリペプチドを精製することと、
を含む、前記方法。
（項目９１）
（ａ）セレン供給源の存在下、項目５３から項目７２のいずれか１項に記載の菌株内で前記ポリペプチドをコードする核酸を発現させることと、
（ｂ）前記細菌から前記組換えポリペプチドを精製することと、
を含む方法により製造した、選択位置に少なくとも１つのセレノシステイン残基を含む組換えポリペプチド。