【手続補正書】
【提出日】令和2年1月28日(2020.1.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リソソーム蓄積症（lysosomal storage disease, LSD）治療のための治療学的酵素と免疫グロブリンＦｃ領域が非ペプチド性重合体連結部を介して連結された、酵素結合体であって、治療学的酵素がα−ガラクトシダーゼ（alpha-galactosidase）Ａでない、酵素結合体。
【請求項２】
前記酵素は、β−グルコシダーゼ（beta-glucosidase）、β−ガラクトシダーゼ（beta-galactosidase）、ガラクトース−６−スルファターゼ（Galactose-6-sulfatase）、酸性セラミダーゼ（acid ceramidase）、酸性スフィンゴミエリナーゼ（acid sphingomyelinase）、ガラクトセレブロシダーゼ（galactocerebrosidsase）、アリールスルファターゼＡ（arylsulfatase A）、β−ヘキソサミニダーゼ（beta-hexosaminidase）Ａ、β−ヘキソサミニダーゼ（beta-hexosaminidase）Ｂ、ヘパラン−Ｎ−スルファターゼ（heparan N-sulfatase）、α−Ｄ−マンノシダーゼ（alpha-D-mannosidase）、β−グルクロニダーゼ（beta-glucuronidase）、Ｎ−アセチルガラクトサミン−６−スルファターゼ（N-acetylgalactosamine-6 sulfatase）、リソソーム酸性リパーゼ（lysosomal acid lipase）、α−Ｎ−アセチルグル−Ｄ−コサミニダーゼ（alpha-N-acetyl-D-glucosaminidase, NAGLU）、グルコセレブロシダーゼ（glucocerebrosidase）、ブチリルコリンエステラーゼ（butyrylcholinesterase）、キチナーゼ（Chitinase）、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（glutamate decarboxylase）、リパーゼ（lipase）、ウリカーゼ（Uricase）、血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ（Platelet-Activating Factor Acetylhydrolase）、中性エンドペプチダーゼ（neutral endopeptidase）、ミエロペルオキシダーゼ（myeloperoxidase）、アセチル−ＣｏＡ−グルコサミニドＮ−アセチルトランスフェラーゼ（Acetyl-CoA-glucosaminide N-acetyltransferse）、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−スルファターゼ（N-acetylglucosamine-6-sulfatase）、ガラクトサミン６−スルファターゼ（galactosamine 6-sulfatase, GALN）、ヒアルロニダーゼ（hyaluronidase）、α−フコシダーゼ（α-fucosidase）、β−マンノシダーゼ（β-mannosidase）、α−ノイラミニダーゼ（α-neuraminidase, sialidase）、Ｎ−アセチル−グルコサミン−１−ホスホトランスフェラーゼ（N-acetyl-glucosamine-1-phosphotransferase）、ムコリピン１（mucolipin-1）、α−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ（α-N-acetyl-galactosaminidase）、Ｎ−アスパルチル−β−グルコサミニダーゼ（N-aspartyl-β-glucosaminidase）、ＬＡＭＰ−２（Lysosome-associated membrane protein 2）、シスチノシン（Cystinosin）、シアリン（Sialin）、セラミダーゼ（ceramidase）、酸性β−グルコシダーゼ（acid-β-glucosidase）、ガラクトシルセラミダーゼ（galactosylceramidase）、ＮＰＣ１（Niemann-Pick disease, type C1）、カテプシンＡ（cathepsin A）、ＳＵＭＦ１（Sulfatase-modifying factor 1）、リソソーム酸性リパーゼ（lysosomal acid lipase, LIPA）、トリペプチジルペプチダーゼ１（Tripeptidyl peptidase 1）、アリールスルファターゼＢ（arylsulfatase B, ARSB）、イズロニダーゼ（iduronidase）、α−グルコシダーゼ（alpha-glucosidase）及びイミグルセラーゼ（imiglucerase）からなる群から選択される、請求項１に記載の酵素結合体。
【請求項３】
前記酵素は、アリールスルファターゼＢ（arylsulfatase B, ARSB）、イズロニダーゼ（iduronidase）、α−グルコシダーゼ（alpha-glucosidase）及びイミグルセラーゼ（imiglucerase）からなる群から選択される、請求項１に記載の酵素結合体。
【請求項４】
前記リソソーム蓄積症は、ムコ多糖症（mucopolysaccharidosis, MPS）、グリコーゲン蓄積症（Glycogen storage disease）及びスフィンゴ脂質症（sphingolipidosis）からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項５】
前記ムコ多糖症は、ＭＰＳ Ｉ（mucopolysaccharidosis I）及びＭＰＳ ＶＩ（mucopolysaccharidosis VI）からなる群から選択される、請求項４に記載の酵素結合体。
【請求項６】
前記グリコーゲン蓄積症はポンペ病（Pompe disease）である、請求項４に記載の酵素結合体。
【請求項７】
前記スフィンゴ脂質症はゴーシェ病（Gaucher’s disease）である、請求項４に記載の酵素結合体。
【請求項８】
前記酵素結合体は、免疫グロブリンＦｃ領域が結合していない酵素よりトランスサイトーシス（transcytosis）及び生体利用率（bioavailability, BA）が増加したものである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項９】
前記トランスサイトーシスは、免疫グロブリンＦｃ領域とＦｃＲｎ（neonatal Fc receptor）との結合によるものである、請求項８に記載の酵素結合体。
【請求項１０】
前記酵素結合体は、免疫グロブリンＦｃ領域が結合していない酵素より組織分布性（tissue distribution）が増加したものである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１１】
前記酵素結合体は、免疫グロブリンＦｃ領域が結合していない酵素より骨髄標的性が増加したものである、請求項１０に記載の酵素結合体。
【請求項１２】
前記免疫グロブリンＦｃ領域は非グリコシル化されたものである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１３】
前記免疫グロブリンＦｃ領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４ドメインからなる群から選択される１つ〜４つのドメインを含む、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１４】
前記免疫グロブリンＦｃ領域は、ヒンジ領域をさらに含む、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１５】
前記免疫グロブリンＦｃ領域が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ又はＩｇＭに由来する免疫グロブリンＦｃフラグメントである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１６】
前記免疫グロブリンＦｃ領域のそれぞれのドメインが、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭからなる群から選択される免疫グロブリンに由来する異なる起源を有するドメインのハイブリッドである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１７】
前記免疫グロブリンＦｃ領域は、同一起源のドメインからなる単鎖免疫グロブリンで構成された二量体又は多量体である、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１８】
前記免疫グロブリンＦｃ領域はＩｇＧ４ Ｆｃフラグメントである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項１９】
前記免疫グロブリンＦｃ領域はヒト非グリコシル化ＩｇＧ４ Ｆｃフラグメントである、請求項１８に記載の酵素結合体。
【請求項２０】
前記酵素結合体は、酵素のＮ末端に非ペプチド性重合体連結部が結合されたものである、請求項１〜７のいずれかに記載の酵素結合体。
【請求項２１】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の酵素結合体を含むリソソーム蓄積症（lysosomal storage disease, LSD）予防又は治療用薬学的組成物。
【請求項２２】
前記酵素結合体は、アリールスルファターゼＢ（arylsulfatase B, ARSB）、イズロニダーゼ（iduronidase）、α−グルコシダーゼ（alpha-glucosidase）及びイミグルセラーゼ（imiglucerase）からなる群から選択される、請求項２１に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記薬学的組成物は、トランスサイトーシス、生体利用率、組織分布性及び骨髄標的性を増加させるものである、請求項２１又は２２に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
（ａ）リソソーム蓄積症（lysosomal storage disease, LSD）治療のための治療学的酵素と非ペプチド性重合体を連結するステップと、
（ｂ）（ａ）ステップの前記酵素と非ペプチド性重合体が連結された連結体を、前記酵素の生体内半減期を延長させることのできる生体適合性物質に連結するステップとを含む、酵素結合体を製造する方法であって、治療学的酵素がα−ガラクトシダーゼ（alpha-galactosidase）Ａでない、方法。
【請求項２５】
前記酵素は、β−グルコシダーゼ（beta-glucosidase）、β−ガラクトシダーゼ（beta-galactosidase）、ガラクトース−６−スルファターゼ（Galactose-6-sulfatase）、酸性セラミダーゼ（acid ceramidase）、酸性スフィンゴミエリナーゼ（acid sphingomyelinase）、ガラクトセレブロシダーゼ（galactocerebrosidsase）、アリールスルファターゼＡ（arylsulfatase A）、β−ヘキソサミニダーゼ（beta-hexosaminidase）Ａ、β−ヘキソサミニダーゼ（beta-hexosaminidase）Ｂ、ヘパリン−Ｎ−スルファターゼ（heparin N-sulfatase）、α−Ｄ−マンノシダーゼ（alpha-D-mannosidase）、β−グルクロニダーゼ（beta-glucuronidase）、Ｎ−アセチルガラクトサミン−６−スルファターゼ（N-acetylgalactosamine-6 sulfatase）、リソソーム酸性リパーゼ（lysosomal acid lipase）、α−Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミニダーゼ（alpha-N-acetyl-D-glucosaminidase, NAGLU）、グルコセレブロシダーゼ（glucocerebrosidase）、ブチリルコリンエステラーゼ（butyrylcholinesterase）、キチナーゼ（Chitinase）、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（glutamate decarboxylase）、リパーゼ（lipase）、ウリカーゼ（Uricase）、血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ（Platelet-Activating Factor Acetylhydrolase）、中性エンドペプチダーゼ（neutral endopeptidase）、ミエロペルオキシダーゼ（myeloperoxidase）、アセチル−ＣｏＡ−グルコサミニドＮ−アセチルトランスフェラーゼ（Acetyl-CoA-glucosaminide N-acetyltransferse）、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−スルファターゼ（N-acetylglucosamine-6-sulfatase）、ガラクトサミン６−スルファターゼ（galactosamine 6-sulfatase, GALN）、ヒアルロニダーゼ（hyaluronidase）、α−フコシダーゼ（α-fucosidase）、β−マンノシダーゼ（β-mannosidase）、α−ノイラミニダーゼ（α-neuraminidase, sialidase）、Ｎ−アセチル−グルコサミン−１−ホスホトランスフェラーゼ（N-acetyl-glucosamine-1-phosphotransferase）、ムコリピン１（mucolipin-1）、α−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ（α-N-acetyl-galactosaminidase）、Ｎ−アスパルチル−β−グルコサミニダーゼ（N-aspartyl-β-glucosaminidase）、ＬＡＭＰ−２（Lysosome-associated membrane protein 2）、シスチノシン（Cystinosin）、シアリン（Sialin）、セラミダーゼ（ceramidase）、酸性β−グルコシダーゼ（acid-β-glucosidase）、ガラクトシルセラミダーゼ（galactosylceramidase）、ＮＰＣ１（Niemann-Pick disease, type C1）、カテプシンＡ（cathepsin A）、ＳＵＭＦ１（Sulfatase-modifying factor 1）、リソソーム酸性リパーゼ（lysosomal acid lipase, LIPA）及びトリペプチジルペプチダーゼ１（Tripeptidyl peptidase 1）からなる群から選択される、請求項２４に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項２６】
前記酵素結合体が下記化学式（１）で表される、請求項２４に記載の酵素結合体を製造する方法。
Ｘ−Ｌａ−Ｆ・・・（１）
ここで、Ｘはリソソーム蓄積症（lysosomal storage disease, LSD）治療のためのアリールスルファターゼＢ（arylsulfatase B, ARSB）、イズロニダーゼ（iduronidase）、α−グルコシダーゼ（alpha-glucosidase）及びイミグルセラーゼ（imiglucerase）であり、
Ｌは非ペプチド性重合体であり、
ａは０又は自然数であるが、ａが２以上であればそれぞれのＬは互いに独立しており、
ＦはＸの生体内半減期を延長させることのできる物質である。
【請求項２７】
前記酵素は、アリールスルファターゼＢ（arylsulfatase B, ARSB）、イズロニダーゼ（iduronidase）、α−グルコシダーゼ（alpha-glucosidase）及びイミグルセラーゼ（imiglucerase）からなる群から選択される、請求項２４に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項２８】
前記Ｆは、高分子重合体、脂肪酸、コレステロール、アルブミン及びそのフラグメント、アルブミン結合物質、特定アミノ酸配列の繰り返し単位の重合体、抗体、抗体フラグメント、ＦｃＲｎ結合物質、生体内結合組織、ヌクレオチド、フィブロネクチン、トランスフェリン（Transferrin）、サッカライド（saccharide）、ヘパリン及びエラスチンからなる群から選択される、請求項２４〜２７のいずれかに記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項２９】
前記ＦｃＲｎ結合物質は免疫グロブリンＦｃ領域である、請求項２８に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３０】
前記非ペプチド性重合体は、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール、ポリビニルアルコール、ポリサッカライド、デキストラン、ポリビニルエチルエーテル、生分解性高分子、脂質重合体、キチン、ヒアルロン酸及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２４〜２７のいずれかに記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３１】
前記非ペプチド性重合体はポリエチレングリコールである、請求項３０に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３２】
前記（ａ）ステップの非ペプチド性重合体の反応基は、アルデヒド基、マレイミド基及びスクシンイミド誘導体からなる群から選択される、請求項２４〜２７のいずれかに記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３３】
前記アルデヒド基は、プロピオンアルデヒド基又はブチルアルデヒド基である、請求項３２に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３４】
前記スクシンイミド誘導体は、スクシンイミジルカルボキシメチル、スクシンイミジルバレレート、スクシンイミジルメチルブタノエート、スクシンイミジルメチルプロピオネート、スクシンイミジルブタノエート、スクシンイミジルプロピオネート、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド又はスクシンイミジルカーボネートである、請求項３２に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３５】
前記非ペプチド性重合体は、末端にアルデヒド反応基を有するものである、請求項３２に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３６】
前記非ペプチド性重合体は、両末端にそれぞれアルデヒド基及びマレイミド反応基を有するものである、請求項３２に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３７】
前記非ペプチド性重合体は、両末端にそれぞれアルデヒド基及びスクシンイミド反応基を有するものである、請求項３２に記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３８】
前記酵素のＮ末端に非ペプチド性重合体連結部が結合された結合体を分離するステップをさらに含む、請求項２４〜２７のいずれかに記載の酵素結合体を製造する方法。
【請求項３９】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の酵素結合体を含む、酵素のトランスサイトーシス（transcytosis）増加用組成物。
【請求項４０】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の酵素結合体を含む、酵素の組織分布性（tissue distribution）増加用組成物。
【請求項４１】
リソソーム蓄積症（lysosomal storage disease, LSD）治療のためのα−ガラクトシダーゼＡと免疫グロブリンＦｃ領域が非ペプチド性重合体連結部を介して連結された、酵素結合体。
【請求項４２】
前記リソソーム蓄積症はファブリー病である、請求項４１に記載の酵素結合体。
【請求項４３】
請求項４１に記載の酵素結合体を含む、リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）予防又は治療用薬学的組成物。
【請求項４４】
前記リソソーム蓄積症はファブリー病である、請求項４３に記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
（ａ）リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）治療のためのα−ガラクトシダーゼＡと非ペプチド性重合体を連結するステップと、
（ｂ）（ａ）ステップの連結された物質を結合するステップであって、前記酵素と前記非ペプチド性重合体を免疫グロブリンＦｃ領域に連結するステップとを含む、酵素結合体を製造する方法。
【請求項４６】
前記酵素結合体が下記化学式（１）で表される、請求項４５に記載の方法。
Ｘ−Ｌａ−Ｆ・・・（１）
ここで、Ｘはα−ガラクトシダーゼＡであり、
Ｌは非ペプチド性重合体であり、
ａは０又は自然数であるが、ａが２以上であればそれぞれのＬは互いに独立しており、
ＦはＸの生体内半減期を延長させることのできる物質である。
【請求項４７】
リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）を予防又は治療するための薬剤を調製するための請求項１〜３のいずれかに記載の酵素結合体の使用。
【請求項４８】
リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）を予防又は治療するための薬剤を調製するための請求項４１に記載の酵素結合体の使用。