【手続補正書】
【提出日】令和2年9月11日(2020.9.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がん患者を処置するための組み合わせ物であって、
少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスを含有する第１の組成物であって、前記患者に第１の期間中投与されることを特徴とする、第１の組成物と、
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスとは異なる少なくとも１種の第２の腫瘍溶解性ウイルスを含有する第２の組成物であって、前記患者に第２の期間中投与されることを特徴とする、第２の組成物と
を含む、組み合わせ物。
【請求項２】
前記第２の組成物が、前記第１の組成物が投与された後２４時間〜２４週間の間に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項３】
前記第２の組成物が、前記第１の組成物が投与された後１週間〜６週間の間に投与されることを特徴とする、請求項２に記載の組み合わせ物。
【請求項４】
前記第１の組成物が、前記第１の期間中、複数回投与されることを特徴とし、前記第２の組成物が、前記第２の期間中、複数回投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項５】
前記第１および第２の組成物が、経口で、経鼻で、静脈内に、動脈内に、皮内に、皮下に、筋内に、腹腔内に、胸膜内に、膣内に、尿道内に、腫瘍内に、頭蓋内に、脊髄内に、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで、前記第１もしくは第２の腫瘍溶解性ウイルスを感染させた細胞担体の手段により投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項６】
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、約１×１０４ＴＣＩＤ５０〜約１×１０１１ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項８】
細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸である、請求項７に記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記第１および第２の組成物各々が、複数の腫瘍溶解性ウイルスを含有する、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスおよびハイブリッドウイルスから選択される、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１１】
がん患者を処置するための組成物であって、前記組成物が、少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスを含み、前記組成物が、第１の期間中投与されることを特徴とし、前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、前記第１の期間中、複数回投与されることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、経口で、経鼻で、静脈内に、動脈内に、皮内に、皮下に、筋内に、腹腔内に、胸膜内に、膣内に、尿道内に、腫瘍内に、頭蓋内に、脊髄内に、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで、前記第１もしくは第２の腫瘍溶解性ウイルスを感染させた細胞担体の手段により投与されることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルス各々が、約１×１０４ＴＣＩＤ５０〜約１×１０１１ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスの細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が独立して、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸から選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスおよびハイブリッドウイルスから選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１７】
最適化腫瘍溶解性ウイルスを生成する方法であって、
（ｉ）突然変異誘発を受けたウイルスを創出するために、合成リボヌクレオシドまたはリボヌクレオチドアナログの存在下、第１の細胞培養物で第１の腫瘍溶解性ウイルスを培養することと、
（ｉｉ）前記最適化腫瘍溶解性ウイルスを特定するために、連続希釈を使用して第２の細胞培養物で前記突然変異誘発を受けたウイルスを培養することと
を含む、方法。
【請求項１８】
前記合成リボヌクレオシドアナログが、リバビリン；５−アザシチジン；５−フルオロウラシル；５−アザ−５，６−ジヒドロ−２−デオキシシチジン；Ｎ４−アミノシチジン；Ｎ１−メチル−Ｎ４−アミノシチジン；３，Ｎ４−エテノシチジン；３−メチルシチジン；５−ヒドロキシシチジン；Ｎ４−ジメチルシチジン；５−（２−ヒドロキシエチル）−シチジン；５−クロロシチジン；５−ブロモシチジン；Ｎ４−メチル−Ｎ４−アミノシチジン；５−アミノシチジン；５−ニトロソシチジン；５−（ヒドロキシアルキル）−シチジン；５−（チオアルキル）−シチジンおよびシチジングリコール；５−ヒドロキシウリジン；３−ヒドロキシエチルウリジン；３−メチルウリジン；Ｏ２−メチルウリジン；Ｏ２−エチルウリジン；５−アミノウリジン；Ｏ４−メチルウリジン；Ｏ４−エチルウリジン；Ｏ４−イソブチルウリジン；Ｏ４−アルキルウリジン；５−ニトロソウリジン；５−（ヒドロキシアルキル）−ウリジン；５−（チオアルキル）−ウリジン；１，Ｎ６−エテノアデノシン；３−メチルアデノシン；Ｎ６−メチルアデノシン；８−ヒドロキシグアノシン；Ｏ６−メチルグアノシン；Ｏ６−エチルグアノシン；Ｏ６−イソプロピルグアノシン；３，Ｎ２−エテノグアノシン；０６−アルキルグアノシン；８−オキソ−グアノシン；２，Ｎ３−エテノグアノシン；または８−アミノグアノシンである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記合成リボヌクレオシドまたはリボヌクレオチドアナログが、約０．０２ｍＭ〜約０．５ｍＭの量で前記第１の細胞培養物と共に存在する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記第２の細胞培養物が、前記第１の細胞培養物とは異なり、前記最適化腫瘍溶解性ウイルスの所望の標的である細胞を含有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記突然変異誘発を受けたウイルスが、約１２時間〜約３６時間の第１の期間後に前記第１の細胞培養物から収集される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスが、約０．０５ＰＦＵ／細胞〜約０．５０ＰＦＵ／細胞の量で前記第１の細胞培養物に添加される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
前記最適化腫瘍溶解性ウイルスが抗体への抵抗性を有するように、前記第１の腫瘍溶解性ウイルスもまた、前記抗体の存在下、前記第１の細胞培養物で培養される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
ステップ（ｉ）および（ｉｉ）が、連続的に繰り返され、ステップ（ｉｉ）の前記最適化腫瘍溶解性ウイルスが、各後続の繰返しにつきステップ（ｉ）の前記第１の腫瘍溶解性ウイルスとして使用される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２５】
参照細胞に関する参照ウイルスから、標的細胞に関する合成標的化ウイルスを生成する方法であって、
所与のアミノ酸をコードする前記参照ウイルスにおける所与の位置の各コドンにつき、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸をコードする各コドンのコドン頻度を特定することと、
前記標的細胞における前記所与のアミノ酸につき、前記参照ウイルスにおける前記コドンに最もよく対応するコドンを選択することと、
前記参照ウイルスにおける前記所与の位置に適合する前記合成標的化ウイルスにおける位置に、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸につき選択されたコドンを使用することと
を含む、方法。
【請求項２６】
前記参照ウイルスが、腫瘍溶解性ウイルスである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記合成標的化ウイルスが、前記参照ウイルスと８０％未満の同一性を有する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記参照ウイルスにおける前記コドンに最もよく対応する、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸についての前記コドンが、（ａ）前記合成標的化ウイルスにおけるコドン対と前記参照ウイルスにおけるコドン対との間のコドン頻度の差を最小限にすることと；（ｂ）前記選択されたコドンにおけるゆらぎを最小限にすることとにより選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２５から２８のいずれかに記載の方法に従って産生される、合成標的化ウイルス。
【請求項３０】
第１の腫瘍溶解性ウイルスの濃度を患者の腫瘍溶解性ウイルスへの感受性の指標とする方法であって、前記方法が、
前記患者から得た腫瘍細胞を第１の腫瘍溶解性ウイルスに感染させることと、
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスの濃度を決定するために、感染した前記腫瘍細胞を培養することと
を含み、
前記濃度が閾値より大きい場合、前記患者が前記第１の腫瘍溶解性ウイルスに感受性であることを示す、方法。
【請求項３１】
前記閾値が、１０６ＴＣＩＤ５０／ｍＬである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記腫瘍細胞が、手術または生検のいずれかにより収集される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記腫瘍細胞が、感染される前に、細胞培養培地中に懸濁される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記感染した腫瘍細胞が、約５％ＣＯ２を含有する雰囲気における約３５℃〜約４５℃の温度でのインキュベーションにより約２４時間〜約７２時間の期間培養される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスまたはハイブリッドウイルスである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３６】
有効量の少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスを含有する組成物であって、前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、組成物。
【請求項３７】
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルス各々が、約５×１０７ＴＣＩＤ５０〜約２×１０８ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスの細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が独立して、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸から選択される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３９】
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスまたはハイブリッドウイルスから選択される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４０】
少なくとも前記第１の腫瘍溶解性ウイルスが、請求項２５から２８のいずれかに記載の方法に従って産生される合成標的化ウイルスである、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４１】
少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスを含む、がん患者を処置するための組成物であって、前記組成物が、前記患者に第１の期間中投与されることを特徴とし、前記組成物が、前記第１の腫瘍溶解性ウイルスとは異なる少なくとも１種の第２の腫瘍溶解性ウイルスと組み合わせて投与されることを特徴とし、前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが、前記患者に第２の期間中投与されることを特徴とする、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
本明細書で説明する腫瘍溶解性ウイルス組成物は、化学療法、免疫療法、放射線療法、薬物療法または細胞移植との組合せで投与することができる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
がん患者を処置する方法であって、
前記患者に、有効量の少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスを含有する第１の組成物を第１の期間中投与することと、
前記患者に、有効量の、前記第１の腫瘍溶解性ウイルスとは異なる少なくとも１種の第２の腫瘍溶解性ウイルスを含有する第２の組成物を第２の期間中投与することと
を含む、方法。
（項目２）
前記第２の組成物が、前記第１の組成物が投与された後２４時間〜２４週間の間に投与される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記第２の組成物が、前記第１の組成物が投与された後１週間〜６週間の間に投与される、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記第１の組成物が、前記第１の期間中、複数回投与され、前記第２の組成物が、前記第２の期間中、複数回投与される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記第１および第２の組成物が、経口で、経鼻で、静脈内に、動脈内に、皮内に、皮下に、筋内に、腹腔内に、胸膜内に、膣内に、尿道内に、腫瘍内に、頭蓋内に、脊髄内に、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで、前記第１もしくは第２の腫瘍溶解性ウイルスを感染させた細胞担体の手段により投与される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、約１×１０４ＴＣＩＤ５０〜約１×１０１１ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、項目１に記載の方法。
（項目８）
細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸である、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記第１および第２の組成物各々が、複数の腫瘍溶解性ウイルスを含有する、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスおよびハイブリッドウイルスから選択される、項目１に記載の方法。
（項目１１）
がん患者を処置する方法であって、
前記患者に、有効量の少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスを含有する第１の組成物を第１の期間中投与するステップであって、前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、ステップ
を含む、方法。
（項目１２）
前記第１の組成物が、前記第１の期間中、複数回投与される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記第１の組成物が、経口で、経鼻で、静脈内に、動脈内に、皮内に、皮下に、筋内に、腹腔内に、胸膜内に、膣内に、尿道内に、腫瘍内に、頭蓋内に、脊髄内に、またはｉｎ
ｖｉｔｒｏで、前記第１もしくは第２の腫瘍溶解性ウイルスを感染させた細胞担体の手段により投与される、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルス各々が、約１×１０４ＴＣＩＤ５０〜約１×１０１１ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、項目１１に記載の方法。
（項目１５）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスの細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が独立して、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸から選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１６）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスおよびハイブリッドウイルスから選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１７）
最適化腫瘍溶解性ウイルスを生成する方法であって、
（ｉ）突然変異誘発を受けたウイルスを創出するために、合成リボヌクレオシドまたはリボヌクレオチドアナログの存在下、第１の細胞培養物で第１の腫瘍溶解性ウイルスを培養することと、
（ｉｉ）前記最適化腫瘍溶解性ウイルスを特定するために、連続希釈を使用して第２の細胞培養物で前記突然変異誘発を受けたウイルスを培養することと
を含む、方法。
（項目１８）
前記合成リボヌクレオシドアナログが、リバビリン；５−アザシチジン；５−フルオロウラシル；５−アザ−５，６−ジヒドロ−２−デオキシシチジン；Ｎ４−アミノシチジン；Ｎ１−メチル−Ｎ４−アミノシチジン；３，Ｎ４−エテノシチジン；３−メチルシチジン；５−ヒドロキシシチジン；Ｎ４−ジメチルシチジン；５−（２−ヒドロキシエチル）−シチジン；５−クロロシチジン；５−ブロモシチジン；Ｎ４−メチル−Ｎ４−アミノシチジン；５−アミノシチジン；５−ニトロソシチジン；５−（ヒドロキシアルキル）−シチジン；５−（チオアルキル）−シチジンおよびシチジングリコール；５−ヒドロキシウリジン；３−ヒドロキシエチルウリジン；３−メチルウリジン；Ｏ２−メチルウリジン；Ｏ２−エチルウリジン；５−アミノウリジン；Ｏ４−メチルウリジン；Ｏ４−エチルウリジン；Ｏ４−イソブチルウリジン；Ｏ４−アルキルウリジン；５−ニトロソウリジン；５−（ヒドロキシアルキル）−ウリジン；５−（チオアルキル）−ウリジン；１，Ｎ６−エテノアデノシン；３−メチルアデノシン；Ｎ６−メチルアデノシン；８−ヒドロキシグアノシン；Ｏ６−メチルグアノシン；Ｏ６−エチルグアノシン；Ｏ６−イソプロピルグアノシン；３，Ｎ２−エテノグアノシン；０６−アルキルグアノシン；８−オキソ−グアノシン；２，Ｎ３−エテノグアノシン；または８−アミノグアノシンである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記合成リボヌクレオシドまたはリボヌクレオチドアナログが、約０．０２ｍＭ〜約０．５ｍＭの量で前記第１の細胞培養物と共に存在する、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記第２の細胞培養物が、前記第１の細胞培養物とは異なり、前記最適化腫瘍溶解性ウイルスの所望の標的である細胞を含有する、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
前記突然変異誘発を受けたウイルスが、約１２時間〜約３６時間の第１の期間後に前記第１の細胞培養物から収集される、項目１７に記載の方法。
（項目２２）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスが、約０．０５ＰＦＵ／細胞〜約０．５０ＰＦＵ／細胞の量で前記第１の細胞培養物に添加される、項目１７に記載の方法。
（項目２３）
前記最適化腫瘍溶解性ウイルスが抗体への抵抗性を有するように、前記第１の腫瘍溶解性ウイルスもまた、前記抗体の存在下、前記第１の細胞培養物で培養される、項目１７に記載の方法。
（項目２４）
ステップ（ｉ）および（ｉｉ）が、連続的に繰り返され、ステップ（ｉｉ）の前記最適化腫瘍溶解性ウイルスが、各後続の繰返しにつきステップ（ｉ）の前記第１の腫瘍溶解性ウイルスとして使用される、項目１７に記載の方法。
（項目２５）
参照細胞に関する参照ウイルスから、標的細胞に関する合成標的化ウイルスを生成する方法であって、
所与のアミノ酸をコードする前記参照ウイルスにおける所与の位置の各コドンにつき、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸をコードする各コドンのコドン頻度を特定することと、
前記標的細胞における前記所与のアミノ酸につき、前記参照ウイルスにおける前記コドンに最もよく対応するコドンを選択することと、
前記参照ウイルスにおける前記所与の位置に適合する前記合成標的化ウイルスにおける位置に、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸につき選択されたコドンを使用することと
を含む、方法。
（項目２６）
前記参照ウイルスが、腫瘍溶解性ウイルスである、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記合成標的化ウイルスが、前記参照ウイルスと８０％未満の同一性を有する、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記参照ウイルスにおける前記コドンに最もよく対応する、前記標的細胞における前記所与のアミノ酸についての前記コドンが、（ａ）前記合成標的化ウイルスにおけるコドン対と前記参照ウイルスにおけるコドン対との間のコドン頻度の差を最小限にすることと；（ｂ）前記選択されたコドンにおけるゆらぎを最小限にすることとにより選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
項目２５から２８のいずれかに記載の方法に従って産生される、合成標的化ウイルス。
（項目３０）
患者の腫瘍溶解性ウイルスへの感受性を特定するための方法であって、
前記患者から得た腫瘍細胞を第１の腫瘍溶解性ウイルスに感染させることと、
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスの濃度を決定するために、感染した前記腫瘍細胞を培養することと、
前記濃度が閾値より大きい場合、前記患者が前記第１の腫瘍溶解性ウイルスに感受性であると特定することと
を含む、方法。
（項目３１）
前記閾値が、１０６ＴＣＩＤ５０／ｍＬである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記腫瘍細胞が、手術または生検のいずれかにより収集される、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
前記腫瘍細胞が、感染される前に、細胞培養培地中に懸濁される、項目３０に記載の方法。
（項目３４）
前記感染した腫瘍細胞が、約５％ＣＯ２を含有する雰囲気における約３５℃〜約４５℃の温度でのインキュベーションにより約２４時間〜約７２時間の期間培養される、項目３０に記載の方法。
（項目３５）
前記腫瘍溶解性ウイルスが、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスまたはハイブリッドウイルスである、項目３０に記載の方法。
（項目３６）
有効量の少なくとも１種の第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスを含有する組成物であって、前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルスが、細胞移入に必要なそれらの宿主細胞表面受容体において異なっている、組成物。
（項目３７）
前記第１および第２の腫瘍溶解性ウイルス各々が、約５×１０７ＴＣＩＤ５０〜約２×１０８ＴＣＩＤ５０の投与量で存在する、項目３６に記載の組成物。
（項目３８）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび第２の腫瘍溶解性ウイルスの細胞移入に必要な前記宿主細胞表面受容体が独立して、ＣＤ１５５、インテグリンα２β１、インテグリンαＶβ３、インテグリンαＶβ６、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ５５、ＣＸＡＤＲ、ＣＤ４６、ＪＡＭ−１、ＰＶＲＬ１、ＰＶＲＬ４、ＣＤ１５０、Ｌ−ＳＩＧＮ、ＶＬＤＶＲ、ＮＲＡＭＰ２、シアル酸、ＰＧＳＬ−１（別名ＣＤ１６２）、ＳＣＡＲＢ２（スカベンジャー受容体クラスＢ、メンバー２）、アネキシンＩＩ、ＤＣ−ＳＩＧＮ（樹状細胞特異的ＩＣＡＭ３結合ノンインテグリン）、ｈＰＶＲ（ヒトポリオウイルス受容体）、ＣＤ３４＋、ＬＤＬＲ（低密度リポタンパク質受容体）、ＪＡＭ（接合部接着分子）またはヘパリン硫酸から選択される、項目３６に記載の組成物。
（項目３９）
前記第１の腫瘍溶解性ウイルスおよび前記第２の腫瘍溶解性ウイルスが独立して、ヒトエンテロウイルス、レオウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、トガウイルス、ヘルペスウイルス、パルボウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスまたはハイブリッドウイルスから選択される、項目３６に記載の組成物。
（項目４０）
少なくとも前記第１の腫瘍溶解性ウイルスが、項目２５から２８のいずれかに記載の方法に従って産生される合成標的化ウイルスである、項目３６に記載の組成物。