(57)【要約】      （修正有）【課題】プランジャに負荷される力が、洗浄機構の状態に依存せず、一定の範囲内に制御されるキャピラリ電気泳動装置を提供する。【解決手段】プランジャポンプのポンプ駆動系とプランジャの間に、プランジャに負荷される力を一定にする力荷重部を挟む。洗浄機構の洗浄用溶液循環には、ポンプ駆動系の変位移動を用い、プランジャに負荷する力が洗浄用溶液の循環に要する力とは独立にする。【選択図】図２
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【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
以下の構成を含む電気泳動装置：
泳動媒体が充填されるキャピラリ：
キャピラリの両端に電圧を印加する高圧電源：
キャピラリ内の、電気泳動分離された試料に励起光を照射し、キャピラリの検出部内の、試料からの蛍光を検出する光学系：
プランジャを洗浄する洗浄機構と、プランジャ軸方向に移動する部分を有するポンプ駆動系と、プランジャに一定の範囲内で力を加える力荷重部を備え、駆動系で発生する移動により洗浄機構内のプランジャ洗浄用溶液の循環を行い、且つキャピラリに泳動媒体を充填するプランジャポンプ。
【請求項２】
請求項１記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
力荷重部の一部で、プランジャに結合し、プランジャと一体になって移動するスライダ：
力荷重部の一部でスライダの移動範囲を制限し、ポンプ駆動系に固定されたカバー：
ポンプ駆動系で発生する変位により、体積が変わる部分を有する洗浄機構。
【請求項３】
請求項２記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
力荷重部の一部で、カバーとスライドの間に置かれ、カバーとスライドの相対距離を力に変換する、バネ：
力荷重部の一部で、スライダに結合した検知棒を検出するセンサ。
【請求項４】
請求項２記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
力荷重部の一部で、スライダに結合した磁石：
力荷重部の一部で、カバーに結合した磁石：
力荷重部の一部で、スライダとカバーの接触を感知する、接触センサ：
力荷重部の一部で、スライダに結合した検知棒を検出するセンサ。
【請求項５】
請求項１記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
少なくとも２箇所の位置に移動し、その内のある位置では、ポンプ駆動系で発生する変位により、体積が変わる部分を有する洗浄機構。
【請求項６】
請求項１記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
少なくとも２箇所の位置に変位し、その内のある位置では、ポンプ駆動系で発生する変位により、洗浄機構の体積が変わる、循環ＯＮ／ＯＦＦ切り替え部分。
【請求項７】
以下の構成を含む電気泳動装置：
泳動媒体が充填されるキャピラリ：
キャピラリの両端に電圧を印加する高圧電源：
キャピラリ内の、電気泳動分離された試料に励起光を照射し、キャピラリの検出部内の、試料からの蛍光を検出する光学系：
キャピラリに泳動媒体を充填するプランジャポンプ：
プランジャを洗浄する洗浄機構：
プランジャを洗浄する洗浄機構と、プランジャ軸方向に移動する部分を有するポンプ駆動系を有し、ポンプ駆動系で発生する移動により洗浄機構内のプランジャ洗浄用溶液の循環を行い、且つプランジャには一定の範囲内で力を負荷しつつ、キャピラリに泳動媒体を充填するプランジャポンプ。
【請求項８】
請求項７記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
少なくとも２箇所の位置に移動し、その内のある位置では、ポンプ駆動系の変位により、体積が変わる部分を有する洗浄機構。
【請求項９】
請求項７記載の電気泳動装置であって、以下の構成を含むプランジャポンプ：
少なくとも２箇所の位置に変位し、その内のある位置では、ポンプ駆動系の変位により、洗浄機構の体積が変わる、循環ＯＮ／ＯＦＦ切り替え部分。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本考案は、核酸やタンパク質等を分離分析する電気泳動装置に関し、例えば、キャピラリに泳動媒体を充填する泳動媒体充填ユニットの流路の構造に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、キャピラリに高分子ゲルやポリマ溶液などの電気泳動媒体（分離媒体）を充填したキャピラリ電気泳動装置が開発されている。キャピラリ電気泳動装置の基本構成は、キャピラリ，キャピラリの両端に高電圧を印加する電源，レーザー光光源等からなる照射系，蛍光を検出する受光光学系，キャピラリの温度を制御する温調部，キャピラリに泳動媒体を充填する泳動媒体充填ユニット等である。試料を分析する際には、蛍光標識されたＤＮＡ等の試料をキャピラリの分離媒体の中にて電気泳動を行い、分子サイズ順に分離をし、蛍光標識に照射光を照射し、生じる蛍光を検出する。電気泳動の際、分子サイズ順に泳動速度が異なるので、分子サイズ順に分離が起こる。
【０００３】
キャピラリの内径が数十μｍであるため流路抵抗が大きいことと、泳動媒体が水と比べて数〜数十倍の高粘性のため、泳動媒体の充填には高い圧力を要する。しかし、必要以上に高い圧力を発生させるとポンプ，キャピラリが破損する可能性があるので、一定の範囲で圧力を制御する必要がある。従来、泳動媒体を充填するために、プランジャポンプが用いられてきた。ポンプ駆動系の一部が一定の力で移動することで、プランジャに一定の力が負荷され、結果圧力が一定に制御されてきた。
【０００４】
また、泳動媒体充填時にはプランジャシールから泳動媒体がリークする。泳動媒体は乾燥すると結晶化するので、プランジャ周辺で結晶化すると、シール部でプランジャの固着による動作不可能や結晶によりプランジャやシールが傷つきシール性能の劣化が起きる。そのため、プランジャシールからリークした泳動媒体を洗浄し、プランジャやプランジャシール部で泳動媒体が結晶化しないための洗浄機構が必要となる。電気泳動用のプランジャポンプ以外に、液体クロマトグラフィで用いられるプランジャポンプも同様にプランジャの洗浄機構を備えている。洗浄機構内の洗浄用溶液を循環させるには、モータやカム等の駆動系が必要になるが、その分装置の部品点数が多くなる。このため、液体クロマトグラフィの洗浄機構では、プランジャにダイヤフラムを固定し、ダイヤフラム内に洗浄用溶液を充填する。プランジャの動作により、ダイヤフラムの体積が変化することで洗浄用溶液が循環させる。その方式では、洗浄用溶液の循環はポンプの駆動系で行われ、他の駆動系を必要としない。
【０００５】
【特許文献１】特開平３−１１１４６７５号公報
【考案の開示】
【考案が解決しようとする課題】
【０００６】
本考案は、キャピラリ電気泳動装置において、キャピラリに泳動媒体を充填するプランジャポンプに備わった、プランジャ洗浄機構に関する。
【０００７】
ポンプ駆動系が一定の力で、洗浄機構の洗浄用溶液の循環と泳動媒体の充填を行う際には、洗浄機構の状態により、プランジャが発生する圧力が変化する。例えば洗浄機構内の流路が詰まった場合、洗浄用溶液を流すために力が必要になる。従来の、プランジャの移動で洗浄用溶液を循環させる方式では、洗浄用溶液の循環に要する力により、プランジャに負荷される力の大きさが変化する。プランジャに負荷される力が小さくなると、プランジャにより発生する圧力が小さくなり、キャピラリへの泳動媒体を充填できなくなる。
【０００８】
プランジャポンプの駆動系で、プランジャ洗浄機構の洗浄用溶液の循環と泳動媒体の充填を兼ねる場合には、プランジャに負荷される力が、洗浄機構の状態に依存せず、一定の範囲内に制御されることが求められる。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
プランジャポンプのポンプ駆動系とプランジャの間に、プランジャに負荷される力を一定にする力荷重部を挟む。洗浄機構の洗浄用溶液循環には、ポンプ駆動系の変位移動を用い、プランジャに負荷する力が洗浄用溶液の循環に要する力とは独立にする。
【考案の効果】
【００１０】
本考案によると、ポンプ以外の駆動系を必要とせずにプランジャの洗浄が自動で行われ、且つ泳動媒体時の圧力は洗浄機構の状態によらず一定に制御できる。これにより別の駆動系が必要になることによる部品点数の増加を抑えることができ、また、絶えずプランジャシール部での結晶化が抑制されポンプの故障の発生を抑えることができ、また、泳動媒体充填時には絶えず安定した圧力でキャピラリに泳動媒体を充填できる。
【考案を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、上記及びその他の本考案の新規な特徴と利益を、図面を参酌して説明する。ただし、図面はもっぱら解説のためのものであって、本考案の範囲を限定するものではない。また、各実施例は、適宜組み合わせることができる。
【実施例１】
【００１２】
図１に、本考案の電気泳動装置の全体構造を示す。本例の電気泳動装置は、単数もしくは複数本のキャピラリを含むキャピラリアレイ１０１，キャピラリアレイ１０１に泳動媒体を注入するプランジャポンプ１０２，キャピラリアレイ１０１内のサンプルに光を照射し、サンプルの蛍光を検出する光学系１０３，キャピラリアレイ１０１に高電圧を加える電源ユニット１０４，キャピラリを恒温に保つ恒温槽１０５，キャピラリ陰極側端にバッファ又は純水が入った容器１０６や試料が入った容器１０７を搬送する搬送機１０８を有する。
【００１３】
本実施例の電気泳動装置に用いるプランジャポンプ１０２を図２に、プランジャポンプ１０２の泳動媒体の充填プロセスを図３に示す。プランジャポンプ１０２は、キャピラリ接続部１１１から陽極２１０まで泳動媒体が充填された流路を形成している。本実施例では、アクリルブロック２０３やチューブ２１８の組み合わせで流路を形成している。この流路の途中にプランジャ２０２がある。プランジャポンプユニットは、アクリルブロック２０３，プランジャ２０２，シール２０４，位置センサ２０５，プランジャ軸受け２０６，力荷重部２０７，駆動系２０８からなる。力荷重部２０７は、カバー２０７１，スライダ２０７２，バネ２０７３，ストッパ２０７４，検知棒２０７５から構成される。駆動系２０８にはリニアアクチュエータ２０８１を用いる。リニアアクチュエータ２０８１の移動棒２０８２の移動量はリニアアクチュエータ２０８１に備わったモータに送るパルス数から換算できる。プランジャ２０２は力荷重部２０７のスライダ２０７２に固定され、スライダ２０７２はカバー２０７１に沿って動くことができる。スライダ２０７２とカバー２０７１の間にバネ２０７３があり、カバー２０７１にはストッパ２０７４がついている。バネ２７０３は装置内に縮んだ状態で挿入され、プランジャ２０２に一定以上の圧力が負荷された時、スライダ２０７２がストッパ２０７４から外れる。カバー２０７１はリニアアクチュエータ２０８１と接続している。
【００１４】
以下、便宜上プランジャ２０２を押し出す方向をＸ方向として説明する。
【００１５】
泳動媒体をアクリルブロック２０３のチャンバー２０３１に充填する際には、リニアアクチュエータ２０８１の移動棒２０８２を−Ｘ方向に引っ込めることでプランジャ２０２が引っ込み、大気圧により泳動媒体用ボトル２２１０からチャンバー２０３１内へ泳動媒体が吸い込まれる。
【００１６】
泳動媒体をキャピラリアレイ１０１に充填する際には、Lower Block１１５ のピンバルブ１１６を閉じる。次にリニアアクチュエータ２０８１の移動棒２０８２を、Ｘ方向に押し出す。移動棒２０８２の移動に伴い、移動棒２０８２に固定されたカバー２０７１もＸ方向に移動する。移動開始時は、プランジャ２０２もカバー２０７１と共にＸ方向に移動し、泳動媒体を圧縮する。この圧縮によりアクリルブロック２０３内の圧力が急上昇し、力荷重部２０７に組み込まれたバネ２０７３が発生する力以上の力がプランジャ２０２に負荷され、スライダ２０７２がストッパ２０７４から外れる。この時点から移動棒２０８２がさらにＸ方向に押し込まれると、バネ２０７３が縮みだす。移動棒２０８２がキャピラリアレイ１０１の充填に必要な体積分Ｘ方向に移動した後、ストッパ２０７４から外れたスライダ２０７２およびプランジャ２０２がキャピラリアレイ１０１から吐出される流量に応じてＸ方向に動く。そのうちスライダ２０７２がストッパ２０７４に当り、プランジャ２０２の移動が終了する。その後ピンバルブ１１６を開き、泳動媒体の充填を完了する。
【００１７】
一定量キャピラリアレイ１０１に泳動媒体を充填するためには、はじめ、検知棒２０７５が位置センサ２０５にあり、且つスライダ２０７２がストッパ２０７４に当っている状態から、ピンバルブ１１６を閉じる。次に、泳動媒体をキャピラリアレイ１０１に充填するために必要な容量分、移動棒を−Ｘ方向に移動させてチャンバー２０３１に泳動媒体を充填させる。この後、移動棒２０８２をＸ方向に、泳動媒体をキャピラリアレイ１０１に充填するために必要な容量分移動させる。ストッパ２０７４から外れたスライダ２０７２がストッパ２０７４に当った後、つまり位置センサ２０５の場所に検知棒２０７５が来た後に、ピンバルブ１１６を開き、泳動媒体充填作業を完了とする。位置センサ２０５を用いることで、スライダ２０７２がストッパ２０７４に当っているかどうか判断することができる。
【００１８】
プランジャ２０２が泳動媒体を充填する圧力は、スライダ２０７２がストッパ２０７４から外れる時の圧力が下限となり、移動棒２０８２がキャピラリアレイ１０１の充填に必要な体積分、Ｘ方向に移動した直後の圧力が上限となる。この上限の値は、最大で、スライダ２０７２がストッパ２０７４と接触している時のバネ２０７３縮み量とプランジャ２０２のストローク量の和にバネ定数を掛け、プランジャ２０２面積で割った値になる。アクリルブロック２０３やキャピラリアレイ１０１内で泳動媒体が詰まった場合等の状態によらず、本実施例の圧力の最大は、上記計算値を超えることはない。
【００１９】
洗浄機構３０１として、本実施例１のプランジャポンプ１０２にはプランジャ２０２を洗浄するためのWater pool３０１１が備わっている。Water pool３０１１から洗浄用溶液吸引用チューブ３０１２と、洗浄用溶液吐出用チューブ３０１３がでている。吐出用チューブ３０１３はゴム乳首３０１４と吸引用チェックバルブ３０１５を有し、一端が洗浄用溶液入れ３０１６に入っている。吐出用チェックバルブ３０１７は洗浄用溶液入れ３０１６からWater pool３０１１へ移動する流体だけを通す。吐出用チューブ３０１３は吐出用チェックバルブ３０１７を有し、一端が廃液入れ３０１８に入っている。吐出用チェックバルブ３０１７はWater pool３０１１から廃液入れ３０１８へ移動する流体だけを通す。乳首３０１４はカバー２０７１とアクリルブロック２０３の間に置かれている。
【００２０】
カバー２０７１がＸ方向に移動すると、カバー２０７１により乳首３０１４がつぶされ、乳首３０１４内の溶液もしくは気体が吐出用チューブ３０１３へと押しやられる。その状態から、カバー２０７１が−Ｘ方向に戻ると、ゴムの弾性力により乳首３０１４に復元力が働く。乳首３０１４の形状が元に戻る際に、吸引用チューブ３０１２から洗浄用溶液が吸い上げられる。
【００２１】
本実施例の、プランジャ２０２を−Ｘ方向に戻し、泳動媒体をチャンバー２０３１内に充填し、プランジャ２０２をＸ方向に押し出し、泳動媒体をキャピラリアレイ１０１に充填するという一連に動作に応じて、乳首３０１４が元の形状にもどり、洗浄用溶液を洗浄用溶液入れ３０１６から吸引し、乳首３０１４がカバー２０７１につぶされ乳首３０１４内の洗浄溶液がWater pool３０１１を通り、廃液入れ３０１８側に吐出される。
【００２２】
プランジャポンプ１０２の一連の動作により、Water pool３０１１の洗浄用溶液も循環される。洗浄用溶液の循環のために、プランジャポンプ１０２に備わったリニアアクチュエータ２０８１以外の駆動系２０８は必要としていない。リニアアクチュエータ２０８１は、泳動媒体充填時には、バネ２０７３の縮み分と乳首３０１４をつぶす分、−Ｘ方向に斥力を受ける。リニアアクチュエータ２０８１の発生する力が、乳首３０１４をつぶす力より十分大きく、乳首３０１４の発生する斥力でリニアアクチュエータ２０８１の位置が変化しないのであれば、プランジャ２０２をＸ方向に押す力は、移動棒２０８２とプランジャ２０２の位置だけで決まり、洗浄機構３０１の状態は関係ない。したがって、発生する圧力の最大値，最小値はバネ定数と、スライダ２０７２がストッパ２０７４に当っている時のバネ２０７３の縮み量、リニアアクエータ２０８１の移動棒２０８２の移動量で定まり、一定の範囲内に圧力が納まる。リニアアクチュエータ２０８１の発生する力を大きくするには、リニアアクチュエータ２０８１のモータの出力を大きいものにすればよい。
【００２３】
また、装置操縦者が乳首３０１４をポンプボディ２１５の外に出し、装置操縦者が乳首３０１４を潰し、洗浄用溶液を循環してもよい。長期間放置や洗浄用溶液入れ３０１６への洗浄用溶液を入れることを忘れたことにより、プランジャシール２０４部近傍での、泳動媒体の結晶化が考えられる。その場合、プランジャ２０２の動作前に、結晶を溶解し取り除くことが望まれるので、プランジャ２０２動作前に洗浄用溶液の循環する方がよい。そのため、長期間放置や洗浄用溶液入れへの洗浄用溶液を入れることを忘れた場合等には、乳首３０１４をポンプボディ２１５から出し、装置操縦者が洗浄用溶液を循環させ、その後乳首３０１４をポンプボディ２１５内に戻せばよい。上記目的のために始めから、ポンプボディ２１５の中にある乳首３０１４とは別に、ポンプボディ２１５の外に乳首３０１４が一個以上あってもよい。
【実施例２】
【００２４】
プランジャポンプ１０２の力荷重部２０７に実施例１のバネ式ではなく、磁力を用いたものでもよい。実施例１のバネ２０７３の代わりに磁石４０１が入っている。磁石４０１はカバー２０７１とスライダ２０７２に反発するように、カバー２０７１，スライダ２０７２両方に固定されている。カバー２０７１には、スライダ２０７２もしくはスライダ２０７２に固定した磁石４０１との接触をはかる接触センサ４０２が固定されている。スライダ２０７２には検知棒２０７５が固定され、位置センサ２０５でスライダ２０７２の位置が位置センサ２０５の位置にあるかないか判断する。
【００２５】
泳動媒体をチャンバー２０３１に充填する際には、リニアアクチュエータ２０８１の移動棒２０８２を−Ｘ方向に引っ込めることでプランジャ２０２が引っ込み、大気圧により泳動媒体用ボトル２２１０からチャンバー２０３１内へ泳動媒体が吸い込まれる。
【００２６】
泳動媒体をキャピラリアレイ１０１に充填する際には、Lower Block１１５ のピンバルブ１１６を閉じる。次にリニアアクチュエータ２０８１の移動棒２０８２を、Ｘ方向に押し出す。移動棒２０８２の移動に伴い、移動棒２０８２に固定されたカバー２０７１もＸ方向に移動する。移動開始時は、プランジャ２０２もカバー２０７１と共にＸ方向に移動し、泳動媒体を圧縮する。この圧縮によりアクリルブロック２０３内の圧力が急上昇し、スライダ２０７２がストッパ２０７４と接触する位置にある時の磁石４０１間の斥力より大きな力が、プランジャ２０２に−Ｘ方向に負荷され、スライダ２０７２がストッパ２０７４から外れる。この時点より移動棒２０８２がさらにＸ方向に移動すると、スライダ２０７２がカバー２０７１に対し相対的に−Ｘ方向に動き、スライダ２０７２が接触センサ７０２と接触する。接触を感知すると、移動棒２０８２のＸ方向の移動を停止する。移動棒２０８２を停止すると、泳動媒体がゆっくりとキャピラリアレイ１０１に充填され圧力が低下する。圧力が低下すると磁石４０１間の斥力により、スライダ２０７２がカバー２０７１に対し相対的にＸ方向に動き、接触センサ４０２から外れる。スライダ２０７２が接触センサ４０２から外れたら、移動棒２０８２のＸ方向の移動を再開する。上記動作を繰り返し、キャピラリアレイ１０１の充填に必要な体積分Ｘ方向に移動したら、移動棒２０８２の移動を終了し、スライダ２０７２がストッパ２０７４の位置に戻り、泳動媒体の充填を終了する。
【実施例３】
【００２７】
実施例１，２では乳首３０１４の体積変化を用いて、洗浄用溶液の循環を行っているが、乳首３０１４の代わりに、カバー２０７１に洗浄用プランジャ５０１が備わっていてもかまわない。カバー２０７１のＸ方向の移動により、洗浄用プランジャ５０１のＸ方向の位置が変化し、Water pool３０１１内の洗浄用溶液が循環される。
【実施例４】
【００２８】
実施例１，２では乳首３０１４の体積変化を用いて、洗浄用溶液の循環を行っているが、乳首３０１４の代わりに、洗浄用シリンジ６０１を用いてもかまわない。
【００２９】
この洗浄用シリンジ６０１は、取り外しが可能でもよく、洗浄する必要がない場合や保管するときには洗浄用シリンジ６０１を外して、栓をすることができてもよい。
【００３０】
また、装置操縦者が洗浄用シリンジ６０１のピストン６０２を動かし、洗浄用溶液を循環してもよい。長期間放置や洗浄用溶液入れ３０１６への洗浄用溶液を入れることを忘れたことにより、プランジャシール２０４部近傍で、プランジャ２０２が泳動媒体の結晶化が考えられる。その場合、プランジャ２０２の動作前に、結晶を溶解し取り除くことが望まれるので、プランジャ２０２動作前に洗浄用溶液の循環する方がよい。そのため、長期間放置や洗浄用溶液入れ３０１６への洗浄用溶液を入れることを忘れた場合等には、洗浄用シリンジ６０１を装置操縦者が動かして、洗浄用溶液を循環させてよい。
【実施例５】
【００３１】
実施例４において、循環ＯＮ／ＯＦＦ切り替え部分として固定ピン６０３により、ピストン６０２を固定してもよい。固定ピン６０３がピストン６０２を固定している場合は、カバー２０７１の移動による自動洗浄がＯＮになり、固定ピン６０３をピストン６０２から外れた場合にはカバー２０７１の移動による自動洗浄がＯＦＦになる。この固定ピン６０３のＯＮ／ＯＦＦの切り替えは、自動でも手動でもかまわない。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】実施例１のキャピラリ電気泳動装置。
【図２】実施例１のプランジャポンプユニット。
【図３】実施例１のポンプの動作プロセス。
【図４】実施例２のプランジャポンプユニット。
【図５】実施例３のプランジャポンプユニット。
【図６】実施例４，５のプランジャポンプユニット。
【符号の説明】
【００３３】
１０１  キャピラリアレイ
１０２  プランジャポンプ
１０３  光学系
１０４  電源ユニット
１０６  バッファ又は水が入った容器
１０７  試料が入った容器
１０８  搬送機
２１０  陽極
１１５  Lower Block
１１６  ピンバルブ
２０２  プランジャ
２０３  アクリルブロック
２０４  プランジャシール
２０５  位置センサ
２０６  プランジャ軸受け
２０７  力荷重部
２０７１  カバー
２０７２  スライダ
２０７３  バネ
２０７４  ストッパ
２０７５  検知棒
１１１  キャピラリ接続部
２１８  チューブ
２２１０  泳動媒体用ボトル
２１５  ポンプボディ
２０８  駆動系
２０３１  チャンバー
２０８１  リニアアクチュエータ
２０８２  移動棒
３０１  プランジャ洗浄機構
３０１１  Water pool
３０１２  吸引用チューブ
３０１３  吐出用チューブ
３０１４  乳首
３０１５  吸引用チェックバルブ
３０１６  洗浄用溶液入れ
３０１７  吐出用チェックチューブ
３０１８  廃液入れ
４０１  磁石
４０２  接触センサ
５０１  洗浄用プランジャ
５０２  洗浄用プランジャシール
６０１  洗浄用シリンジ
６０２  ピストン
６０３  固定ピン
【図１】
0003136063.tif 000003
【図２】
0003136063.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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