【手続補正書】
【提出日】令和2年8月20日(2020.8.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階を含む、細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する方法：
（a）1回または複数回のインキュベーションを行い、それによってアウトプット組成物を産生する段階であって、ここで段階（a）における1回または複数回のインキュベーションが、
（i）サンプル中の1つまたは複数の細胞の溶解を誘導するのに十分な条件の下で、細胞組成物の少なくとも一部分を含むサンプルまたは細胞組成物に由来するサンプルを低張溶液とともにインキュベートし、それによって溶解細胞組成物を産生すること、および
（ii）溶解細胞組成物の少なくとも一部分または溶解細胞組成物に由来するサンプルを高張溶液とともにインキュベートすること
を含む、段階; ならびに
（b）アウトプット組成物中のビーズ粒子の存在、非存在、数および/または濃度を判定し、それによって細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する段階。
【請求項２】
以下の段階を含む、細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出するための方法：
（a）1回または複数回のインキュベーションを行い、それによってアウトプット組成物を産生する段階であって、ここで1回または複数回のインキュベーションが、サンプル中の1つまたは複数の細胞の浸透圧溶解を誘導するのに十分な条件の下で、細胞組成物の少なくとも一部分を含むサンプルまたは細胞組成物に由来するサンプルをインキュベートすることを含む、段階; ならびに
（b）アウトプット組成物中のビーズ粒子の存在、非存在、数および/または濃度を判定し、それによって細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する段階。
【請求項３】
浸透圧溶解を誘導するのに十分な条件が、サンプルを低張溶液と接触させることを含む、請求項2記載の方法。
【請求項４】
浸透圧溶解を誘導するための条件の下でインキュベートすることにより、溶解細胞組成物が産生され、
段階（a）における1回または複数回のインキュベーションが、溶解細胞組成物または溶解細胞組成物に由来する組成物を高張溶液とともにインキュベートすることをさらに含む、
請求項2または3記載の方法。
【請求項５】
以下の段階を含む、細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出するための方法：
（a）1回または複数回のインキュベーションを行い、それによってアウトプット組成物を産生する段階であって、ここで段階（a）における1回または複数回のインキュベーションが、
（i）サンプル中の1つまたは複数の細胞の溶解を誘導するのに十分な条件の下で、細胞組成物の少なくとも一部分を含むサンプルまたは細胞組成物に由来するサンプルを低張溶液または高張溶液とともにインキュベートし、それによって溶解細胞組成物を産生すること、および
（ii）溶解細胞組成物の少なくとも一部分または溶解細胞組成物に由来するサンプルを他の低張溶液または高張溶液とともにインキュベートすること
を含む、段階; ならびに
（b）アウトプット組成物中のビーズ粒子の存在、非存在、数および/または濃度を判定し、それによって細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する段階。
【請求項６】
細胞組成物が、細胞組成物中の1つもしくは複数の細胞の表面に結合したビーズ粒子の1つもしくは複数を含むかまたは含むことが疑われ、
細胞組成物が、残留ビーズ粒子を含むかまたは含むことが疑われ、
細胞組成物が、ビーズ粒子の1つもしくは複数に結合した細胞を含有する組成物に由来し、かつ/あるいは
細胞組成物が、インプット組成物からのビーズ粒子の除去に由来する、
請求項1〜5のいずれか一項記載の方法。
【請求項７】
(1) 細胞の集団をビーズ粒子の1つまたは複数と混合し、それによってインプット組成物を生成する段階; および
(2) インプット組成物中の細胞からビーズ粒子の1つまたは複数を除去し、それによって細胞組成物を産生する段階
を含む方法によって、細胞組成物が産生される、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
【請求項８】
段階（a）が、アウトプット組成物をすすぐかまたは洗浄することをさらに含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
【請求項９】
ビーズ粒子の1つまたは複数が、細胞組成物中の細胞の表面上の巨大分子に結合することができる材料または生体分子を含む、請求項1〜8のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０】
生体分子が抗体またはその抗原結合断片である、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
低張溶液が270 mOsm/L未満のオスモル濃度を有するか、
低張溶液が0 mOsm/L〜270 mOsm/Lまたは約0 mOsm/L〜270 mOsm/Lのオスモル濃度を有するか、
低張溶液が250 mOsm/Lもしくはそれ未満に満たない、または約250 mOsm/Lもしくはそれ未満に満たないオスモル濃度を有するか、
低張溶液が0 mM〜140 mMまたは約0 mM〜140 mMの溶質濃度を含むか、
低張溶液が140 mM未満または約140 mM未満の溶質濃度を含むか、
低張溶液が0％〜0.8％または約0％〜0.8％の溶質の量に対する重量パーセント(％w/v)を含むか、あるいは
低張溶液が0.8％未満または約0.8％未満の溶質の％w/vを含むか、かつ／あるいは
低張溶液が溶質を含まない、
請求項1および3〜10のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２】
低張溶液が注射用滅菌水である、請求項1および3〜11のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
高張溶液が300 mOsm/L超のオスモル濃度を有するか、
高張溶液が300 mOsm/L超または約300 mOsm/Lのオスモル濃度を有するか、
高張溶液が1000〜3000 mOsm/Lまたは約1000〜3000 mOsm/Lのオスモル濃度を有するか、
高張溶液が200 mM超または約200 mMの溶質濃度を有するか、
高張溶液が200 mM〜5000 mMまたは約200 mM〜5000 mMの溶質濃度を有するか、
高張溶液が1.5％〜15％または約1.5％〜15％の溶質の量に対する重量パーセント(％w/v)を含むか、かつ／あるいは
高張溶液が1.5％超または約1.5％超の溶質の％w/vを含む、
請求項1および4〜12のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
高張溶液が、NaClである溶質を含む、請求項1および4〜13のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５】
細胞組成物の濃度が、少なくとももしくは少なくとも約2×105細胞/mLである、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６】
細胞組成物の量が、0.2 mL〜50 mL、または約0.2 mL〜50 mLであるか、あるいは
細胞組成物の量が、少なくともまたは少なくとも約0.2 mL、またはそれ以上である、
請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７】
ビーズ粒子の1つまたは複数が、0.001 μm超の直径を有する粒子を有するまたは含む、あるいは、1.0 μm〜500 μmの直径を有する粒子を有するまたは含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８】
ビーズ粒子の1つまたは複数が、細胞組成物中の細胞の平均直径と実質的に同じであるまたは細胞組成物中の細胞の平均直径より1.5倍大きいもしくは小さい範囲内である直径を有する粒子を有するまたは含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の方法。
【請求項１９】
ビーズ粒子の1つまたは複数が磁性である、および/またはビーズ粒子の1つまたは複数が、磁性コア、常磁性コア、もしくは超常磁性コアを含む、請求項1〜18のいずれか一項記載の方法。
【請求項２０】
磁性コアが、金属酸化物、フェライト、金属、ヘマタイト、金属合金、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
ビーズ粒子の1つまたは複数が酸化鉄コアを含む、請求項1〜20のいずれか一項記載の方法。
【請求項２２】
磁性コアがコートを含み、コートが、磁性コアを酸化から保護、低減、または防止する、請求項19〜21のいずれか一項記載の方法。
【請求項２３】
コートが、重合体、多糖類、シリカ、脂肪酸、炭素、またはそれらの組み合わせを含み、重合体、多糖類、シリカ、脂肪酸、炭素、またはそれらの組み合わせが、生分解性であり、多糖類が、キトサン、アガロース、デンプン、デキストラン、デキストラン誘導体、またはそれらの組み合わせである、かつ／あるいは、重合体が、ポリエチレングリコール、ポリ(乳酸-コ-グリコール酸)、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコール、またはそれらの組み合わせである、請求項22記載の方法。
【請求項２４】
細胞が、10 μm〜30 μmまたは約10 μm〜30 μmの直径を有する、請求項1〜23のいずれか一項記載の方法。
【請求項２５】
段階（a）における1回または複数回のインキュベーションの前に、細胞組成物中の細胞の刺激および/または活性化をもたらすための刺激剤を含むビーズ粒子の1つまたは複数と、細胞組成物が混合されている、請求項1〜24のいずれか一項記載の方法。
【請求項２６】
細胞がT細胞であり、刺激剤が抗CD3抗体および/もしくは抗CD28抗体またはそれらの抗原結合断片である、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
段階（a）における1回または複数回のインキュベーションの前に、細胞組成物中の細胞の単離または濃縮をもたらすための親和性剤を含むビーズ粒子の1つまたは複数と、細胞組成物が混合されている、請求項1〜26のいずれか一項記載の方法。
【請求項２８】
親和性試薬が、細胞組成物中の1つまたは複数の細胞上の細胞表面タンパク質に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項27記載の方法。
【請求項２９】
ビーズ粒子の表面もしくはビーズ粒子の表面上のコートを破壊しないか、またはビーズ粒子の表面に付着した生体分子を除去する、請求項1〜28のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
段階（b）における判定が、手動計数法、電子粒子計数法、親和性に基づく検出、顕微鏡法、フローサイトメトリー、または磁性細胞選別を含む、かつ／あるいは
ビーズ粒子の表面に会合したまたは付着した、存在する1つまたは複数の材料または生体分子を検出することを含む、あるいは
生体分子が、ビーズ粒子の表面に付着した細胞表面タンパク質に対する抗体または抗原結合断片であり、これは任意で抗CD3抗体または抗CD28抗体である、
請求項1〜29のいずれか一項記載の方法。
【請求項３１】
以下の段階を含む、細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する方法：
（a）1回または複数回のインキュベーションを行い、それによってアウトプット組成物を産生する段階であって、ここで1回または複数回のインキュベーションが、サンプル中の1つまたは複数の細胞の溶解を誘導するのに十分な条件の下で、細胞組成物の少なくとも一部分を含むサンプルまたは細胞組成物に由来するサンプルをインキュベートすることを含む、段階; ならびに
（b）ビーズ粒子上に存在している、ビーズ粒子に会合している、またはビーズ粒子に付着している材料、部分、または生体分子に特異的に結合する結合剤を用いて、アウトプット組成物中のビーズ粒子の存在、非存在、数、および/または濃度を判定し、それによって細胞組成物中のビーズ粒子を計数するまたはビーズ粒子の存在もしくは非存在を検出する段階。
【請求項３２】
材料がデキストランであり、かつ/または結合剤が抗デキストラン抗体である、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
生体分子が、ビーズ粒子の表面に付着した細胞表面タンパク質に対する抗体または抗原結合断片であり、これは任意で抗CD3抗体または抗CD28抗体である、請求項31または32記載の方法。
【請求項３４】
1回または複数回のインキュベーションが、サンプルを低張溶液とともにインキュベートすることを含む、請求項31〜33のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
1回または複数回のインキュベーションが、サンプルを高張溶液とともにインキュベートすることをさらに含む、請求項34記載の方法。
【請求項３６】
前記判定が、コートを含むビーズ粒子の1つまたは複数の検出のための蛍光活性化細胞選別(FACS)を含む、請求項31〜35のいずれか一項記載の方法。
【請求項３７】
段階（a）における1回または複数回のインキュベーションが、約15℃〜30℃である温度で実施される、請求項1〜36のいずれか一項記載の方法。
【請求項３８】
浸透圧細胞溶解をもたらすための溶液を含む容器、
包装材料、ならびに
細胞組成物中の粒子を計数するまたは粒子の存在もしくは非存在を検出するための使用説明書を含むラベルまたは添付文書
を含む、製造品。
【請求項３９】
浸透圧細胞溶解をもたらすための溶液が低張溶液である、請求項38記載の製造品。