【手続補正書】
【提出日】令和2年4月6日(2020.4.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
弱毒生デング−２ウイルス、デング−２／１キメラ、デング−２／３キメラ、及びデング−２／４キメラを含む、デングウイルスの４つ全ての血清型を含む四価ワクチン調合物を含む医薬組成物であって、
弱毒生デング−２ウイルスは、ＤＥＮＶ−２  １６６８１から誘導されたＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３変異体の形態にあり、ＮＳ１−５３、５’ＮＣ−５７、及びＮＳ３−２５０における三重突然変異を有し、ＮＳ３タンパク質のアミノ酸２５０位にバリン残基を含み、各キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３のゲノムと、前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのカプシド、プレ膜／膜又はエンベロープをコードする１つ以上の構造タンパク質遺伝子か、あるいはＤＥＮ−１、ＤＥＮ−３又はＤＥＮ−４に由来する１つ又は複数の対応する構造タンパク質遺伝子で置換されているそれらの組合せとを有し、
医薬組成物中の弱毒生デング−２ウイルスの濃度は、他のデングウイルス血清型のうちの２つ以上のｌｏｇプラーク形成単位（ＰＦＵ）よりも少なくとも２分の１ｌｏｇＰＦＵ低いか、
デング−２／３キメラの濃度は、四価ワクチン調合物中の弱毒生デング−２ウイルスよりもＰＦＵで少なくとも２分の１高い、医薬組成物。
【請求項２】
デング−２／１キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸１１６位がロイシン残基を有し、ＮＳ２Ｂタンパク質のアミノ酸９２位がアスパラギン酸残基を有するようにさらに２つの突然変異を有し、
弱毒生デング−２ウイルスは、ｐｒＭタンパク質のアミノ酸５２位がグルタミン酸残基を有し、ＮＳ５タンパク質のアミノ酸４１２位がバリン残基を有するようにさらに２つの突然変異を有し、
デング−２／３キメラは、ウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ、野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７３）を有し、前記デング−２／３キメラは、前記野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子に、Ｅタンパク質のアミノ酸２２３位がセリン残基を含むようにさらに１つの突然変異を有し、
デング−２／４キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸６６位がグリシン残基を含み、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸２１位がバリン残基を含むようにさらに２つの突然変異を有し、デング−２／４キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸９９位に関して、アルギニン又はリジン残基を含む混合遺伝子型である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
デング−２／１キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−１  １６００７に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７９）を有し、
デング−２／３キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７３）を有し、
デング−２／４キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−４  １０３６に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７９）を有する、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記デング−２／１キメラ：前記弱毒生デング−２ウイルス：前記デング−２／３キメラ：前記デング−２／４キメラの比が、約４：４：５：５ｌｏｇプラーク形成単位（ＰＦＵ）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記デング−２／１キメラ：前記弱毒生デング−２ウイルス：前記デング−２／３キメラ：前記デング−２／４キメラの比が、約５：４：５：５ｌｏｇＰＦＵである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
１．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／１キメラ、
１．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有する弱毒生デング−２ウイルス、
５．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／３キメラ、及び
１．０×１０４から５×１０６ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／４キメラの少なくとも１つを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
２．５×１０４ＰＦＵのデング−２／１キメラ、
６．３×１０３ＰＦＵの弱毒生デング−２ウイルス、
３．２×１０４ＰＦＵのデング−２／３キメラ、及び
４．０×１０５ＰＦＵのデング−２／４キメラを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
デングウイルスの分解を低減する安定化緩衝液を更に含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記安定化緩衝液が、トレハロース及びアルブミン及び任意選択でポロキサマー４０７を含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
２〜１７歳の小児又は若年成人、あるいは１〜１１歳の小児をデングウイルス感染症に対して治療するための、弱毒生デング−２ウイルス、デング−２／１キメラ、デング−２／３キメラ、及びデング−２／４キメラを含む、デングウイルスの４つ全ての血清型を含む四価ワクチン調合物を含む医薬組成物であって、前記方法は、
前記医薬組成物を、前記小児又は若年成人に対して皮下投与することを含み、前記医薬組成物の投与が、前記医薬組成物の第１の用量を０日目に投与すること、及びデングウイルスに対する同じ医薬組成物の第２の用量を、第１の投与から９０日以内に投与することからなり、前記医薬組成物が、前記２〜１７歳の小児又は若年成人、あるいは前記１〜１１歳の小児においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導し、
前記医薬組成物中の弱毒生デング−２ウイルスの濃度は、他のデングウイルス血清型のうちの２つ以上のｌｏｇプラーク形成単位（ＰＦＵ）よりも少なくとも２分の１ｌｏｇＰＦＵ低いか、
四価ワクチン調合物中のデング−２／３キメラの濃度は、弱毒生デング−２ウイルスよりもＰＦＵで少なくとも２分の１高い、医薬組成物。
【請求項１１】
弱毒生デング−２ウイルスは、ＤＥＮＶ−２  １６６８１から誘導されたＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３変異体の形態にあり、ＮＳ１−５３、５’ＮＣ−５７、及びＮＳ３−２５０における三重突然変異を有し、ＮＳ３タンパク質のアミノ酸２５０位にバリン残基を含み、各キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムと、前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのカプシド、プレ膜／膜又はエンベロープをコードする１つ以上の構造タンパク質遺伝子か、あるいはＤＥＮ−１、ＤＥＮ−３又はＤＥＮ−４に由来する１つ又は複数の対応する構造タンパク質遺伝子で置換されているそれらの組合せとを有する、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
デング−２／１キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸１１６位がロイシン残基を有し、ＮＳ２Ｂタンパク質のアミノ酸９２位がアスパラギン酸残基を有するようにさらに２つの突然変異を有し、
弱毒生デング−２ウイルスは、ｐｒＭタンパク質のアミノ酸５２位がグルタミン酸残基を有し、ＮＳ５タンパク質のアミノ酸４１２位がバリン残基を有するようにさらに２つの突然変異を有し、
デング−２／３キメラは、ウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ、野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７３）を有し、前記デング−２／３キメラは、前記野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子に、Ｅタンパク質のアミノ酸２２３位がセリン残基を含むようにさらに１つの突然変異を有し、
デング−２／４キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸６６位がグリシン残基を含み、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸２１位がバリン残基を含むようにさらに２つの突然変異を有し、デング−２／４キメラは、ＮＳ２Ａタンパク質のアミノ酸９９位に関して、アルギニン又はリジン残基を含む混合遺伝子型である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
デング−２／１キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−１  １６００７に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７９）を有し、
デング−２／３キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−３  １６５６２に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７３）を有し、
デング−２／４キメラはウイルス骨格として前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムを有し、かつ野生型ＤＥＮ−４  １０３６に由来する対応するｐｒＭ−Ｅ遺伝子で置換された前記ＤＥＮ−２  ＰＤＫ−５３ゲノムのｐｒＭ−Ｅ遺伝子（ｎｔ−４５７〜−２３７９）を有する、請求項１１又は１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記デング−２／１キメラ：前記弱毒生デング−２ウイルス：前記デング−２／３キメラ：前記デング−２／４キメラの比が、約４：４：５：５ｌｏｇプラーク形成単位（ＰＦＵ）である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記デング−２／１キメラ：前記弱毒生デング−２ウイルス：前記デング−２／３キメラ：前記デング−２／４キメラの比が、約５：４：５：５ｌｏｇＰＦＵである、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
１．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／１キメラ、
１．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有する弱毒生デング−２ウイルス、
５．０×１０３から５×１０５ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／３キメラ、及び
１．０×１０４から５×１０６ＰＦＵまでの濃度を有するデング−２／４キメラの少なくとも１つを含む、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
２．５×１０４ＰＦＵのデング−２／１キメラ、
６．３×１０３ＰＦＵの弱毒生デング−２ウイルス、
３．２×１０４ＰＦＵのデング−２／３キメラ、及び
４．０×１０５ＰＦＵのデング−２／４キメラを含む、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
デングウイルスの分解を低減する安定化緩衝液を更に含む、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記安定化緩衝液が、トレハロース及びアルブミン及び任意選択でポロキサマー４０７を含む、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ポロキサマー４０７が、０．１から３．０％（ｗ／ｖ）までの濃度を有し、トレハロースが、５．０から５０％（ｗ／ｖ）までの濃度を有し、アルブミンが、０．０１から３．０％（ｗ／ｖ）までの濃度を有する、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記小児又は若年成人が、前記医薬組成物の投与前に、デングウイルスに対して血清陰性又は未感作である、請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記小児又は若年成人が、前記医薬組成物の投与前に、デングウイルスに対して血清陽性である、請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。