【手続補正書】
【提出日】令和2年4月13日(2020.4.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＩＶ感染に耐性の細胞を産生するための方法であって、
（ａ）ＨＩＶ陰性の対象から単離された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、治療有効量の刺激性作用剤と接触させる、または接触させたステップであって、前記接触がｅｘ  ｖｉｖｏで実施される、ステップ；
（ｂ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、少なくとも１つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記ＰＢＭＣに形質導入する、または形質導入したステップであって、前記少なくとも１つのコードされる遺伝的エレメントが、
配列番号３１と少なくとも８０％の配列同一性を有する配列；または
（ｉ）配列番号１と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｉｉ）配列番号２と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｉｉｉ）配列番号３と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の少なくとも２つ；または
（ｉｖ）配列番号９７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｖ）配列番号６と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｖｉ）配列番号７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の各々
を含む、ステップ；および
（ｃ）形質導入された前記ＰＢＭＣを、少なくとも１日間培養する、または培養したステップ
を含む、方法。
【請求項２】
形質導入された前記ＰＢＭＣが、約１日から約３５日まで培養される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
形質導入された前記ＰＢＭＣは、対象への注入に使用することができる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記対象がヒトである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記刺激性作用剤がペプチドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ペプチドが、ｇａｇペプチドを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記刺激性作用剤がワクチンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ワクチンが、ＨＩＶワクチンを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはその改変体を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、発現した場合にＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、配列番号３１、配列番号１または配列番号９７のいずれか１つを含む場合、前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、発現した場合にケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することもできる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、請求項１、１１および１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
配列番号３１；または
配列番号１、配列番号２および配列番号３のうちの少なくとも２つ；または
配列番号９７、配列番号６および配列番号７の各々
を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＨＩＶ陰性対象のＨＩＶ感染を予防するための方法において使用するための、形質導入された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む組成物であって、前記方法は、
（ａ）前記対象から白血球を取り出す、または取り出したステップであって、前記対象が、治療有効量の第１の刺激性作用剤で免疫化されている、ステップ；
（ｂ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、前記白血球からＰＢＭＣを精製する、または精製したステップ；
（ｃ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、前記ＰＢＭＣを治療有効量の第２の刺激性作用剤と接触させる、または接触させたステップ；
（ｄ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、少なくとも１つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記ＰＢＭＣに形質導入する、または形質導入したステップであって、前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、
配列番号３１と少なくとも８０％の配列同一性を有する配列；または
（ｉ）配列番号１と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｉｉ）配列番号２と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｉｉｉ）配列番号３と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の少なくとも２つ；または
（ｉｖ）配列番号９７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、（ｖ）配列番号６と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列、および（ｖｉ）配列番号７と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列の各々
を含む、ステップ；
（ｅ）形質導入された前記ＰＢＭＣを、少なくとも１日間培養する、または培養したステップ；および
（ｆ）形質導入された前記ＰＢＭＣを前記対象に注入する、または注入したステップ
を含む、組成物。
【請求項１７】
形質導入された前記ＰＢＭＣが、約１日から約３５日培養される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記対象がヒトである、請求項１６〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記第１の刺激性作用剤および前記第２の刺激性作用剤の少なくとも１つがペプチドを含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ペプチドが、ｇａｇペプチドを含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記第１の刺激性作用剤および前記第２の刺激性作用剤の少なくとも１つがワクチンを含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ワクチンが、ＨＩＶワクチンを含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはその改変体を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記第１の刺激性作用剤および前記第２の刺激性作用剤が同じである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２６】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる少なくとも１つのスモールＲＮＡを含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２７】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、配列番号３１、配列番号１または配列番号９７のいずれか１つを含み、前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができるスモールＲＮＡも含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、請求項２６または２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
配列番号３１；または
配列番号１、配列番号２および配列番号３の少なくとも２つ；または
配列番号９７、配列番号６および配列番号７の各々
を含む、請求項２９に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１３】
上に本発明の好ましい実施形態についていくつか説明し、具体的に例示してきたが、本発明はそのような実施形態に限定されることを意図していない。本発明の範囲および精神から逸脱することなく、様々な改変をそこに施してもよい。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ＨＩＶ感染に耐性の細胞を産生するための方法であって、
（ａ）ＨＩＶ陰性の対象から単離された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、治療有効量の刺激性作用剤と接触させるステップであって、前記接触がｅｘ  ｖｉｖｏで実施される、ステップ；
（ｂ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、少なくとも１つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記ＰＢＭＣに形質導入するステップであって、前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができるスモールＲＮＡ、またはＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる少なくとも１つのスモールＲＮＡを含む、ステップ；および
（ｃ）形質導入された前記ＰＢＭＣを、少なくとも１日間培養するステップ
を含む、方法。
（項目２）
形質導入された前記ＰＢＭＣを対象に注入するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記対象がヒトである、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記刺激性作用剤がペプチドを含む、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記ペプチドが、ｇａｇペプチドを含む、項目４に記載の方法。
（項目６）
前記刺激性作用剤がワクチンを含む、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記ワクチンが、ＨＩＶワクチンを含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはその改変体を含む、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができるスモールＲＮＡ、およびＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる少なくとも１つのスモールＲＮＡを含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記ＨＩＶ  ＲＮＡ配列が、ＨＩＶ  Ｖｉｆ配列、ＨＩＶ  Ｔａｔ配列、またはそれらの改変体を含む、項目１または１０に記載の方法。
（項目１２）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを含む、項目１または１０に記載の方法。
（項目１３）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、マイクロＲＮＡクラスターを含む、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、
【化５５】
2019509029.tif 000001
と少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性パーセントを有するマイクロＲＮＡを含む、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、
【化５６】
2019509029.tif 000002
を含む、項目１２に記載の方法。
（項目１６）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、
【化５７】
2019509029.tif 000003
と少なくとも８０％、もしくは少なくとも８５％、もしくは少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％の同一性パーセントを有するか、または
【化５８】
2019509029.tif 000004
と少なくとも８０％、もしくは少なくとも８５％、もしくは少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％の同一性パーセントを有するマイクロＲＮＡを含む、項目１２に記載の方法。
（項目１７）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、
【化５９】
2019509029.tif 000005
を含む、項目１２に記載の方法。
（項目１８）
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
【化６０】
2019509029.tif 000006
と少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性パーセントを有する配列を含む、項目１３に記載の方法。
（項目１９）
前記マイクロＲＮＡクラスターが、
【化６１】
2019509029.tif 000007
を含む、項目１３に記載の方法。
（項目２０）
ＨＩＶ陰性対象のＨＩＶ感染を予防するための方法であって、
（ａ）有効量の第１の刺激性作用剤で前記対象を免疫化するステップ；
（ｂ）前記対象から白血球を取り出し、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を精製するステップ；
（ｃ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、前記ＰＢＭＣを治療有効量の第２の刺激性作用剤と接触させるステップ；
（ｄ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、少なくとも１つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記ＰＢＭＣに形質導入するステップ；
（ｅ）形質導入された前記ＰＢＭＣを、少なくとも１日間培養するステップ；および
（ｆ）形質導入された前記ＰＢＭＣを前記対象に注入するステップ
を含む、方法。
（項目２１）
前記第１の刺激性作用剤および前記第２の刺激性作用剤のうちの少なくとも１つが、ｇａｇペプチドを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記第１の刺激性作用剤および前記第２の刺激性作用剤のうちの少なくとも１つが、ＨＩＶワクチンを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２３）
前記ＨＩＶワクチンが、ＭＶＡ／ＨＩＶ６２Ｂワクチンまたはその改変体を含む、項目２３に記載の方法。
（項目２４）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができるスモールＲＮＡ、またはＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる少なくとも１つのスモールＲＮＡを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２５）
前記少なくとも１つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体ＣＣＲ５の産生を阻害することができるスモールＲＮＡ、およびＨＩＶ  ＲＮＡ配列を標的とすることができる少なくとも１つのスモールＲＮＡを含む、項目２０に記載の方法。