【手続補正書】
【提出日】令和2年6月8日(2020.6.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＤ−１を標的とする第１タンパク質機能領域と、
ＣＴＬＡ４を標的とする第２タンパク質機能領域と、を含む二重特異性抗体。
【請求項２】
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、直接に接続または接続断片によって接続され、好ましくは、前記接続断片が（ＧＧＧＧＳ）ｎであり、ｎは、正の整数、例えば１、２、３、４、５または６である、請求項１に記載の二重特異性抗体。
【請求項３】
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、独立して免疫グロブリンまたはその抗原結合断片、例えば、半抗体、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、または、一本鎖抗体であり、
好ましくは、前記第１タンパク質機能領域が免疫グロブリンであり、前記第２タンパク質機能領域が一本鎖抗体であり、あるいは、
好ましくは、前記第１タンパク質機能領域は一本鎖抗体であり、前記第２タンパク質機能領域は免疫グロブリンである、請求項１または２に記載の二重特異性抗体。
【請求項４】
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、独立して１個、２個または２個以上である、請求項１〜３の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項５】
前記免疫グロブリンは、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、または、ＩｇＭであり、好ましくはＩｇＧである、請求項３または４に記載の二重特異性抗体。
【請求項６】
前記一本鎖抗体は、免疫グロブリンの重鎖のＣ末端に接続されている、請求項３〜５の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項７】
本発明の一つの実施形態において、
前記の免疫グロブリンの重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲを含み、および／または、
前記の一本鎖抗体の重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：
４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲを含み、
あるいは、
本発明の別の実施形態において、
前記の免疫グロブリンの重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲを含み、および／または、
前記の一本鎖抗体の重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲを含む、
請求項３〜６の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項８】
本発明の一つの実施形態において、前記免疫グロブリンの重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２０からなる群から選択され、前記免疫グロブリンの軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １８とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２２からなる群から選択され、および／または、
前記一本鎖抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２５からなる群から選択され、前記一本鎖抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７からなる群から選択され、
あるいは、
本発明の別の実施形態において、
前記免疫グロブリンの重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２、ＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２５からなる群から選択され、前記一本鎖抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７からなる群から選択され、および／または、
前記一本鎖抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２０からなる群から選択され、前記免疫グロブリンの軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １８およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２２からなる群から選択される、請求項３〜７の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項９】
前記の免疫グロブリンは非−ＣＤＲ領域を含み、かつ、前記非−ＣＤＲ領域は、鼠類以外の種由来、例えばヒト抗体由来である、請求項１〜８の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項１０】
前記の二重特異性抗体は、ＣＴＬＡ４タンパク質および／またはＰＤ−１タンパク質に結合するＫＤが約１０−５Ｍ未満、例えば、約１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍまたは１０−１０Ｍ未満またはそれ以下である、請求項１〜９の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項１１】
抗体の重鎖可変領域をコードすることが可能な核酸配列を含む単離核酸分子であって、
前記抗体の重鎖可変領域は、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲ、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲ、および、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ
ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲ、
を含む、単離核酸分子。
【請求項１２】
抗体の軽鎖可変領域をコードすることが可能な核酸配列を含む単離核酸分子であって、
前記抗体の軽鎖可変領域は、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲ、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲ、
を含む、単離核酸分子。
【請求項１３】
請求項１１及び／または請求項１２に記載の単離核酸分子を含むベクター。
【請求項１４】
請求項１１及び／または請求項１２に記載の単離核酸分子、あるいは、請求項１３に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１５】
請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体を調製する方法であって、請求項１４に記載の宿主細胞を適切な条件で培養する工程、および、細胞培養物から前記二重特異性抗体を回収する工程を含む、方法。
【請求項１６】
二重特異性抗体および複合部分を含む複合体であって、前記二重特異性抗体は請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体であり、前記複合部分は検出可能な標識であり、好ましくは、前記複合部分が放射性同位体、蛍光物質、発光性物質、色素または酵素である、複合体。
【請求項１７】
請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体、あるいは、請求項１６に記載の複合体を含む、キットであって、
好ましくは、前記キットが前記二重特異性抗体を特異的に認識する第２抗体をさらに含み、任意的に、前記第２抗体は、検出可能な標識、例えば放射性同位体、蛍光物質、発光性物質、色素または酵素をさらに含む、キット。
【請求項１８】
試料中のＣＴＬＡ４および／ＰＤ−１の存在またはそのレベルを検出するために用いられるキットの製造における、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体の使用。
【請求項１９】
請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体を含み、
さらに、薬学的に許容されるベクター及び／または賦形剤を任意的に含む、医薬組成物。
【請求項２０】
腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断する薬剤の調製における、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体もしくは請求項１６に記載の複合体の使用であって、好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、使用。
【請求項２１】
請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体の、
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出する薬剤、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断する薬剤、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）する薬剤、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除く薬剤、
Ｔリンパ球を活性化する薬剤、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させる薬剤
の調製における使用、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断する薬剤、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）する薬剤、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除く薬剤、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させる薬剤
の調製における使用。
【請求項２２】
細胞またはニーズがある被験者にインビボまたはインビトロで投与する工程を含む、
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出する方法、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断する方法、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）する方法、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除く方法、
Ｔリンパ球を活性化する方法、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させる方法、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断する方法、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）する方法、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除く方法、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させる方法、
からなる群から選択される、方法において使用するための、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体を含む組成物。
【請求項２３】
腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断するための、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体を含む組成物であって、に用いられ、好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、組成物。
【請求項２４】
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出すること、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断すること、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）すること、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除くこと、
Ｔリンパ球を活性化する薬剤こと、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させること、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断すること、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）すること、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除くこと、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させること、
に用いられる、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体を含む組成物。
【請求項２５】
腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断するための、請求項１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは請求項１６に記載の複合体を含む組成物であって、好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
本発明の具体的な実施形態を詳細に記載してきたが、当業者は、本明細書で開示される教示に照らして、本発明の構成に対して様々な改変および変更がなされ得、これらが全て本発明の保護範囲に包含されることを理解できる。本発明の全範囲は、添付の特許請求の範囲およびその何らかの同等物において定められる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
ＰＤ−１を標的とする第１タンパク質機能領域と、
ＣＴＬＡ４を標的とする第２タンパク質機能領域と、を含む二重特異性抗体。
(項目２)
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、直接に接続または接続断片によって接続され、好ましくは、前記接続断片が（ＧＧＧＧＳ）ｎであり、ｎは、正の整数、例えば１、２、３、４、５または６である、項目１に記載の二重特異性抗体。
(項目３)
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、独立して免疫グロブリンまたはその抗原結合断片、例えば、半抗体、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、または、一本鎖抗体であり、
好ましくは、前記第１タンパク質機能領域が免疫グロブリンであり、前記第２タンパク質機能領域が一本鎖抗体であり、あるいは、
好ましくは、前記第１タンパク質機能領域は一本鎖抗体であり、前記第２タンパク質機能領域は免疫グロブリンである、項目１または２に記載の二重特異性抗体。
(項目４)
前記第１タンパク質機能領域と第２タンパク質機能領域は、独立して１個、２個または２個以上である、項目１〜３の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目５)
前記免疫グロブリンは、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、または、ＩｇＭであり、好ましくはＩｇＧである、項目３または４に記載の二重特異性抗体。
(項目６)
前記一本鎖抗体は、免疫グロブリンの重鎖のＣ末端に接続されている、項目３〜５の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目７)
本発明の一つの実施形態において、
前記の免疫グロブリンの重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲを含み、および／または、
前記の一本鎖抗体の重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：
４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲを含み、
あるいは、
本発明の別の実施形態において、
前記の免疫グロブリンの重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲを含み、および／または、
前記の一本鎖抗体の重鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲを含み、その軽鎖可変領域はアミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲを含む、
項目３〜６の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目８)
本発明の一つの実施形態において、前記免疫グロブリンの重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２０からなる群から選択され、前記免疫グロブリンの軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １８とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２２からなる群から選択され、および／または、
前記一本鎖抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２５からなる群から選択され、前記一本鎖抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７からなる群から選択され、
あるいは、
本発明の別の実施形態において、
前記免疫グロブリンの重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２、ＳＥＱ
ＩＤ  ＮＯ：  ６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２５からなる群から選択され、前記一本鎖抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７からなる群から選択され、および／または、
前記一本鎖抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２０からなる群から選択され、前記免疫グロブリンの軽鎖可変領域のアミノ酸配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １８およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２２からなる群から選択される、項目３〜７の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目９)
前記の免疫グロブリンは非−ＣＤＲ領域を含み、かつ、前記非−ＣＤＲ領域は、鼠類以外の種由来、例えばヒト抗体由来である、項目１〜８の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目１０)
前記の二重特異性抗体は、ＣＴＬＡ４タンパク質および／またはＰＤ−１タンパク質に結合するＫＤが約１０−５Ｍ未満、例えば、約１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍまたは１０−１０Ｍ未満またはそれ以下である、項目１〜９の何れか一項に記載の二重特異性抗体。
(項目１１)
抗体の重鎖可変領域をコードすることが可能な核酸配列を含む単離核酸分子であって、
前記抗体の重鎖可変領域は、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２９−３１であるＣＤＲ、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５−３７であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４１とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３７であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４２−４４であるＣＤＲ、および、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲ、又は、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ
ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲ、
を含む、単離核酸分子。
(項目１２)
抗体の軽鎖可変領域をコードすることが可能な核酸配列を含む単離核酸分子であって、
前記抗体の軽鎖可変領域は、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３２−３４であるＣＤＲ、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ３８−４０であるＣＤＲ、または、
アミノ酸配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４５−４７であるＣＤＲ、
を含む、単離核酸分子。
(項目１３)
項目１１及び／または項目１２に記載の単離核酸分子を含むベクター。
(項目１４)
項目１１及び／または項目１２に記載の単離核酸分子、あるいは、項目１３に記載のベクターを含む、宿主細胞。
(項目１５)
項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体を調製する方法であって、項目１４に記載の宿主細胞を適切な条件で培養する工程、および、細胞培養物から前記二重特異性抗体を回収する工程を含む、方法。
(項目１６)
二重特異性抗体および複合部分を含む複合体であって、前記二重特異性抗体は項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体であり、前記複合部分は検出可能な標識であり、好ましくは、前記複合部分が放射性同位体、蛍光物質、発光性物質、色素または酵素である、複合体。
(項目１７)
項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体、あるいは、項目１６に記載の複合体を含む、キットであって、
好ましくは、前記キットが前記二重特異性抗体を特異的に認識する第２抗体をさらに含み、任意的に、前記第２抗体は、検出可能な標識、例えば放射性同位体、蛍光物質、発光性物質、色素または酵素をさらに含む、キット。
(項目１８)
試料中のＣＴＬＡ４および／ＰＤ−１の存在またはそのレベルを検出するために用いられるキットの製造における、項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体の使用。
(項目１９)
項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体を含み、
さらに、薬学的に許容されるベクター及び／または賦形剤を任意的に含む、医薬組成物。
(項目２０)
腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断する薬剤の調製における、項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体もしくは項目１６に記載の複合体の使用であって、好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、使用。
(項目２１)
項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体の、
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出する薬剤、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断する薬剤、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）する薬剤、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除く薬剤、
Ｔリンパ球を活性化する薬剤、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させる薬剤
の調製における使用、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断する薬剤、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）する薬剤、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除く薬剤、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させる薬剤
の調製における使用。
(項目２２)
有効量の項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体を、細胞またはニーズがある被験者にインビボまたはインビトロで投与する工程を含む、
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出する方法、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断する方法、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）する方法、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除く方法、
Ｔリンパ球を活性化する方法、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させる方法、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断する方法、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）する方法、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除く方法、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させる方法、
からなる群から選択される、方法。
(項目２３)
腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断するために用いられ、好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体。
(項目２４)
試料中のＣＴＬＡ４のレベルを検出すること、
ＣＴＬＡ４のＢ７への結合を遮断すること、
ＣＴＬＡ４の活性またはＣＴＬＡ４のレベルを制御（例えば下方制御）すること、
ＣＴＬＡ４の生体に対する免疫抑制を取り除くこと、
Ｔリンパ球を活性化する薬剤こと、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＬ−２の発現を増加させること、
および／または、
ＰＤ−１のＰＤＬ１への結合を遮断すること、
ＰＤ−１の活性またはレベルを制御（例えば下方制御）すること、
ＰＤ−１の生体に対する免疫抑制を取り除くこと、あるいは、
Ｔリンパ球におけるＩＦＮ−γの発現を増加させること、
に用いられる、項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体。
(項目２５)
有効量の項目１〜１０の何れか一項に記載の二重特異性抗体あるいは項目１６に記載の複合体を、ニーズがある被験者に投与する工程を含む、腫瘍または貧血を、予防および／または治療、あるいは、診断するための方法であって、
好ましくは、前記腫瘍が、メラノーマ、腎臓腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌、消化器癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、卵巣癌および白血病からなる群から選択されるものである、方法。