【手続補正書】
【提出日】令和2年5月1日(2020.5.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つの異なる主要抗体種を含み、かつ３つ以下の異なる主要抗体種を含む抗体の混合物であって、
（ａ）それぞれ同じ第１のアミノ酸配列を有する第１の重鎖（ＨＣ１）の２つの鎖、およびそれぞれ同じ第２のアミノ配列を有する第１の軽鎖（ＬＣ１）の２つの鎖を含む第１の抗体、ならびに
（ｂ）それぞれ同じ第３のアミノ酸配列を有する第２の重鎖（ＨＣ２）の２つの鎖、およびそれぞれ同じ第４のアミノ配列を有する第２の軽鎖（ＬＣ２）の２つの鎖を含む第２の抗体を含み、
（１）前記第１の抗体および前記第２の抗体は、全長ヒトおよび／またはヒト化ＩｇＧ抗体であり；
（２）前記ＨＣ１および前記ＨＣ２が、異なるアミノ酸配列を有し、前記ＬＣ１および前記ＬＣ２が、異なるアミノ酸配列を有し；
（３）前記第１の抗体および／または前記第２の抗体の、第１の重鎖定常（ＣＨ１）ドメインおよび軽鎖定常（ＣＬ）ドメインが、１対もしくは複数対の接触システイン残基を生成する１つもしくは複数のパートナー指向性変更を含み、前記対の一方のシステイン残基が、前記接触システイン残基の対を含む抗体のＣＨ１ドメインにあり、かつ、他方は、前記接触システイン残基の対を含む抗体のＣＬドメインにあり、ここで、（Ａ）前記接触システイン残基を含む第１および／または第２の抗体が、ＩｇＧ１抗体である場合、前記ＩｇＧ１抗体における接触システイン残基の前記対の、重鎖および軽鎖の位置の対は、それぞれ、１２６および１２４位；１２８および１１８位；１３３および１１７位；１３３および２０９位；１３４および１１６位；１６８および１７４位；１７０および１６２位；１７０および１７６位；１７３および１６０位；ならびに１８３および１７６位からなる群から選択され、（Ｂ）前記接触システイン残基を含む第１および／または第２の抗体が、ＩｇＧ２抗体である場合、前記ＩｇＧ２抗体における接触システイン残基の前記対の、重鎖および軽鎖の位置の対は、それぞれ、１７０および１６２位；ならびに１７３および１６０位からなる群から選択され、（Ｃ）前記接触システイン残基を含む第１および／または第２の抗体が、ＩｇＧ４抗体である場合、前記ＩｇＧ４抗体における接触システイン残基の前記対の、前記重鎖および軽鎖の位置の対は、それぞれ、１２６および１２１位；１２６および１２４位；１２７および１２１位；１２８および１１８位；１６８および１７４位；１７０および１６２位；ならびに１７３および１６２位からなる群より選択され；
（４）前記第１および第２の抗体の両方が上記（３）に記載される接触システイン残基の対を含む場合、前記第１および第２の抗体は、同一の位置の対において接触システイン残基を含まない、混合物。
【請求項２】
前記第１の抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗体であり、前記第２の抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗体である、請求項１に記載の混合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の混合物であって、
前記第１の抗体および／または前記第２の抗体が、電荷対を含み、
前記電荷対の一方のアミノ酸が、前記電荷対を含む抗体の前記ＣＨ１にあり、前記電荷対の他方のアミノ酸が、前記電荷対を含む抗体の前記ＣＬにあり、
（１）前記電荷対を含む前記抗体が、ＩｇＧ１抗体である場合、前記電荷対は、それぞれそれらの重鎖および軽鎖位置と、それらの位置を占めるアミノ酸によって特定される、以下の残基の対：１４７Ｄ／Ｅおよび１２４Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１２４Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１２９Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１２９Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１３１Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１３１Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１８０Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１８０Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１６４Ｋ／Ｒ；１６８Ｋ／Ｒおよび１６４Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１６７Ｋ／Ｒ；１６８Ｋ／Ｒおよび１６７Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１７４Ｋ／Ｒ；ならびに１６８Ｋ／Ｒおよび１７４Ｄ／Ｅからなる群から選択され、
（２）前記電荷対を含む前記抗体が、ＩｇＧ２抗体である場合、前記電荷対は、それぞれそれらの重鎖および軽鎖位置と、それらの位置を占めるアミノ酸によって特定される、以下の残基の対：１４７Ｄ／Ｅおよび１３１Ｋ／Ｒ；ならびに１４７Ｋ／Ｒおよび１３１Ｄ／Ｅからなる群から選択され、
（３）前記電荷対を含む前記抗体が、ＩｇＧ４抗体である場合、前記電荷対は、それぞれそれらの重鎖および軽鎖位置と、それらの位置を占めるアミノ酸によって特定される、以下の残基の対：１３３Ｄ／Ｅおよび１１７Ｋ／Ｒ；１３３Ｋ／Ｒおよび１１７Ｄ／Ｅ；１３７Ｋ／Ｒおよび１１４Ｄ／Ｅ；１３７Ｄ／Ｅおよび１１４Ｋ／Ｒ；１３７Ｋ／Ｒおよび１１６Ｄ／Ｅ；１３７Ｄ／Ｅおよび１１６Ｋ／Ｒ；１４７Ｄ／Ｅおよび１２４Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１２４Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１２９Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１２９Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１３１Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１３１Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１７８Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１７８Ｄ／Ｅ；１４７Ｄ／Ｅおよび１８０Ｋ／Ｒ；１４７Ｋ／Ｒおよび１８０Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１６４Ｋ／Ｒ；１６８Ｋ／Ｒおよび１６４Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１６７Ｋ／Ｒ；１６８Ｋ／Ｒおよび１６７Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１７３Ｋ／Ｒ；１６８Ｋ／Ｒおよび１７３Ｄ／Ｅ；１６８Ｄ／Ｅおよび１７４Ｋ／Ｒ；ならびに１６８Ｋ／Ｒおよび１７４Ｄ／Ｅからなる群から選択される、混合物。
【請求項４】
前記第１または第２の抗体における接触システイン残基の前記対が、第１または第２の抗体の前記重鎖の１７０位および同族軽鎖の１６２位、または第１または第２の抗体の前記重鎖の１７０位および同族軽鎖の１６２位にあり、前記第１または第２の抗体における前記電荷対または前記電荷対のうちの一方を構成するアミノ酸は、前記第１または第２の抗体の重鎖における１４７Ｄ／Ｅおよび、同族軽鎖における１３１Ｒ／Ｋである、請求項３に記載の混合物。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか１項に記載の混合物であって、
前記第１の抗体が、１つもしくは複数のパートナー指向性変更を含み、第２の抗体は含まず；
前記パートナー指向性変更が、ＨＣ１の１７０位およびＬＣ１の１６２位、ならびに／またはＨＣ１の１７３位およびＬＣ１の１６０位における１つまたは複数の接触システイン残基を生成し、
前記第１の抗体は、ＨＣ１およびＬＣ１の間の天然のジスルフィド架橋を欠き；
（１）前記第１の抗体がＩｇＧ１抗体である場合、前記ＨＣ１におけるＣ２２０Ｇ／Ａ／Ｓと、前記ＬＣ１におけるＣ２１４Ｓ／Ａ／Ｇとの変更を含み、（２）前記第１の抗体が、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗体である場合、前記ＨＣ１におけるＣ１３１Ｓ／Ａ／Ｇと、前記ＬＣ１におけるＣ２１４Ｓ／Ａ／Ｇとの変更を含む、混合物。
【請求項６】
前記第１の抗体が、ＩｇＧ１抗体であり、そして、前記ＨＣ１に１４７Ｄ、１７０Ｃ、１７３Ｃおよび２２０Ｇと、前記ＬＣ１に１３１Ｋ、１６０Ｃ、１６２Ｃおよび２１４Ｓとを含むか；
前記第１の抗体が、ＩｇＧ２抗体であり、そして、前記ＨＣ１に１４７Ｄ、１７０Ｃ、１７３Ｃおよび１３１Ｓ／Ａ／Ｇと、前記ＬＣ１に１３１Ｋ、１６０Ｃ、１６２Ｃおよび２１４Ｓとを含む、請求項５に記載の混合物。
【請求項７】
前記第１および第２の抗体の両方が、１つもしくは複数のパートナー指向性変更を含み、
前記ＨＣ１およびＨＣ２は、前記ＨＣ１および前記ＨＣ２の両方における同一の位置のＨＣ残基において、荷電アミノ酸を含み、
前記ＨＣ１の前記ＨＣ残基における前記荷電アミノ酸は、前記ＨＣ２の同一の位置におけるＨＣ残基における荷電アミノ酸と電荷が逆であり、
前記ＬＣ１および前記ＬＣ２は、前記ＬＣ１および前記ＬＣ２の両方における同一の位置のＬＣ残基において荷電アミノ酸を含み、
前記ＬＣ残基は、前記ＨＣ残基と接触し、
前記ＬＣ１の前記ＬＣ残基における荷電アミノ酸は、前記ＬＣ２の同一の位置における前記ＬＣ残基における荷電アミノ酸と電荷が逆であり、
前記ＬＣ１の前記ＬＣ残基における荷電アミノ酸は、前記ＨＣ１の前記ＨＣ残基における荷電アミノ酸と電荷が逆である、請求項１から４のいずれか１項に記載の混合物。
【請求項８】
前記ＨＣ１および前記ＨＣ２の両方が、４４、１０５、１４７および１６８位において、荷電アミノ酸を含み；
前記ＬＣ１および前記ＬＣ２の両方が、４３、１００、１３１および１７４位において、荷電アミノ酸を含む、請求項７に記載の混合物。
【請求項９】
前記第１および第２の抗体のうちの一方が、３９９Ｒおよび４０９Ｄ／Ｅを含み、他方が、４０９Ｒを含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の混合物。
【請求項１０】
前記ＨＣ１および／または前記ＨＣ２がＩｇＧ４  ＨＣである場合、前記ＩｇＧ４  ＨＣは、２２８Ｐを含む、請求項１から９のいずれか１項に記載の混合物。
【請求項１１】
前記第１および第２の抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ半減期が、少なくとも１週間異なり、より短いｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を有する前記抗体が、Ｍ２５２Ａ、Ｍ２５２Ｌ、Ｍ２５２Ｓ、Ｍ２５２Ｒ、Ｒ２５５Ｋ、またはＨ４３５Ｒの変更のうちの少なくとも１つを含む、請求項１から１０のいずれか１項に記載の混合物。
【請求項１２】
（ａ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＴＬＡ４に結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｂ）前記第１の抗体および前記第２の抗体は両方ともヒトＨＥＲ２に結合するが、ＨＥＲ２との結合について競合しないか、
（ｃ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＬＡＧ３に結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｄ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＧＩＴＲに結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｄ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＶＥＧＦに結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｆ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＳＦＲ１ａに結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｇ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＯＸ４０に結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｈ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＴＩＧＩＴに結合し、他方はヒトＰＤ１に結合するか、
（ｉ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＴＬＡ４に結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｊ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＶＥＧＦに結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｋ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＯＸ４０に結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｌ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＳＦＲ１ａに結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｍ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＴＩＧＩＴに結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｎ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＴｉｍ３に結合し、他方はヒトＰＤＬ１に結合するか、
（ｏ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＴＬＡ４に結合し、他方はヒトＶＥＧＦに結合するか、
（ｐ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＴＬＡ４に結合し、他方はヒト４１ＢＢに結合するか、
（ｑ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＤ２０に結合し、他方はヒトＣＤ３７に結合するか、
（ｒ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＡＮＧ２に結合し、他方はヒトＶＥＧＦに結合するか、
（ｓ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＴＮＦに結合し、他方はヒトＩＬ１７ａに結合するか、
（ｔ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＤ３８に結合し、他方はヒトＣＤ１３８に結合するか、
（ｕ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＥＧＦＲに結合し、他方はヒトＨＥＲ２に結合するか、
（ｖ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＥＧＦＲに結合し、他方はヒトＨＥＲ３に結合するか、
（ｗ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＭＥＴに結合し、他方はヒトＶＥＧＦに結合するか、
（ｘ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＭＥＴに結合し、他方はヒトＥＧＦＲに結合するか、
（ｙ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＴＳＬＰに結合し、他方はヒトＩＬ３３に結合するか、
（ｚ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＩＬ４に結合し、他方はヒトＩＬ１３に結合するか、
（ａａ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＣＳＦ１Ｒタンパク質に結合し、他方はヒトＳＩＲＰ−アルファタンパク質に結合するか、
（ｂｂ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＰＤ１タンパク質に結合し、他方はヒトＳＩＲＰ−アルファタンパク質に結合するか、または
（ｃｃ）前記第１の抗体および前記第２の抗体の一方はヒトＰＤ１に結合し、他方はヒトＣＣＲ８に結合する、
請求項１から１１のいずれか１項に記載の混合物。
【請求項１３】
請求項１から１２のいずれか１項に記載の抗体の混合物をコードする、１つまたは複数の核酸。
【請求項１４】
請求項１３に記載の核酸を含む１つまたは複数のベクターであって、前記ベクターは、哺乳動物発現ベクターまたはウイルスベクターであり、前記ウイルスベクターは、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、レトロウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、修飾ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）ベクター、ヘルペスウイルスベクター、レンチウイルスベクター、およびポックスウイルスベクターからなる群から選択される、ベクター。
【請求項１５】
請求項１から１２のいずれか１項に記載の抗体の混合物を作製する方法であって、
（ａ）請求項１から１２のいずれか１項に記載の抗体の混合物をコードする１つまたは複数の核酸を宿主細胞に導入するステップ、
（ｂ）前記宿主細胞を培養培地中で培養するステップ、および
（ｃ）前記抗体の混合物を細胞塊または前記培養培地から回収するステップ
を含む、方法。
【請求項１６】
前記宿主細胞が哺乳動物細胞である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１３または１４に記載の核酸またはベクターを含む、宿主細胞株。
【請求項１８】
ＣＨＯ細胞株である、請求項１７に記載の宿主細胞株。
【請求項１９】
請求項１から１２のいずれか１項に記載の抗体の混合物あるいは請求項１３または１４に記載の核酸またはベクターを含む、患者において疾患を治療するための組成物であって、前記疾患が、がん、代謝疾患、感染性疾患、または自己免疫性もしくは炎症性疾患である、組成物。
【請求項２０】
前記疾患ががんであり、前記患者が腫瘍を有し、前記組成物が前記腫瘍に注射されることを特徴とする、請求項１９に記載の組成物。