【手続補正書】
【提出日】令和2年6月12日(2020.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３３５】
他の実施形態
本出願を詳細な説明と一緒に記載してきたが、以上の説明は、例示を目的とし、本出願の範囲を限定することを意図するものではなく、本出願の範囲は、添付の特許請求の範囲により定義されるものと理解されたい。他の態様、利点及び変更形態は、以下の特許請求の範囲に含まれる。
本発明は以下を提供する。
[１]
哺乳動物の臓器又は組織の細胞外マトリックスを官能基化する方法であって、
（ｉ）前記臓器又は組織の前記細胞外マトリックスを官能基化するために前記哺乳動物を選択するステップと、
（ｉｉ）前記哺乳動物に栄養素を投与するステップであって、前記栄養素は、生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化される、ステップと
を含む方法。
[２]
哺乳動物の臓器又は組織の細胞外マトリックスを官能基化する方法であって、
（ｉ）前記臓器又は組織を採取するステップと、
（ｉｉ）生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化された栄養素を含む培地を用いて前記臓器又は組織を培養するステップと
を含む方法。
[３]
移植のための臓器又は組織を調製する方法であって、
（ｉ）生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化された栄養素をドナー対象に投与するステップと、
（ｉｉ）前記ドナー対象から手術により前記臓器又は組織を取り出すステップと、
（ｉｉｉ）前記摘出された臓器又は組織を、前記官能基化された栄養素の反応性化学基に対して相補的な反応性化学基で官能基化された生物活性分子を含む保存液で処理するステップと
を含む方法。
[４]
前記臓器又は組織は、ウシ、ブタ、マウス又はヒト臓器又は組織である、上記[１]〜[３]のいずれかに記載の方法。
[５]
前記臓器又は組織は、頸動脈、肺、心臓、肝臓、腎臓及び皮膚からなる群から選択される、上記[１]〜[４]のいずれかに記載の方法。
[６]
生体直交型化学反応で反応性の前記化学基は、アジド（−Ｎ３）、アルキン、ニトロン、イソシアニド、シクロプロペン及びテトラジンからなる群から選択される、上記[１]〜[５]のいずれかに記載の方法。
[７]
生体直交型化学反応で反応性の前記化学基は、アジド（−Ｎ３）及びアルキンから選択される、上記[１]〜[６]のいずれかに記載の方法。
[８]
生体直交型化学反応で反応性の前記化学基は、アジド（−Ｎ３）である、上記[１]〜[６]のいずれかに記載の方法。
[９]
前記栄養素は、糖、アミノ酸、脂肪酸及びトリグリセリドからなる群から選択される、上記[１]〜[８]のいずれかに記載の方法。
[１０]
前記栄養素は、単糖である、上記[１]〜[９]のいずれかに記載の方法。
[１１]
生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化された前記栄養素は、アジド標識ガラクトサミン、アジド標識グルコサミン及びアジド標識マンノサミンからなる群から選択される、上記[１]〜[１０]のいずれかに記載の方法。
[１２]
生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化された前記栄養素は、Ａｃ４ＧａｌＮ
Ａｚ、Ａｃ４ＭａｎＮＡｚ及びＡｃ４ＧｌｃＮＡｚから選択される、上記[１]〜[１１]のいずれかに記載の方法。
[１３]
生体直交型化学反応で反応性の化学基で官能基化された前記栄養素は、テトラアシル化Ｎ−アジドアセチルガラクトサミン（Ａｃ４ＧａｌＮＡｚ）である、上記[１]〜[１２]のいずれかに記載の方法。
[１４]
前記栄養素は、腹腔内注射、皮下注射又は気管内経路によって投与される、上記[１]又は[３]〜[１３]のいずれかに記載の方法。
[１５]
前記栄養素は、腹腔内注射によって投与される、上記[１]又は[３]〜[１３]のいずれかに記載の方法。
[１６]
官能基化された細胞外マトリックスを含む哺乳動物臓器又は組織の脱細胞化スカフォールドであって、前記細胞外マトリックスは、上記[１]〜[１５]のいずれかに記載の方法によって官能基化される、脱細胞化スカフォールド。
[１７]
細胞外マトリックスを含む哺乳動物臓器又は組織の脱細胞化スカフォールドであって、前記脱細胞化スカフォールドの前記細胞外マトリックスは、少なくとも１つの生物活性分子で化学選択的に官能基化される、脱細胞化スカフォールド。
[１８]
上記[１７]に記載の脱細胞化スカフォールドを調製する方法であって、上記[１６]に記載の脱細胞化スカフォールドを、前記官能基化された細胞外マトリックスの反応性化学基に対して相補的な反応性化学基で官能基化された生物活性分子と反応させるステップを含む方法。
[１９]
生物学的補綴メッシュを調製する方法であって、上記[１６]に記載の脱細胞化スカフォールドを、前記官能基化された細胞外マトリックスの反応性化学基に対して相補的な反応性化学基で官能基化された生物活性分子と反応させるステップを含む方法。
[２０]
前記反応させるステップは、前記脱細胞化スカフォールドへの前記生物活性分子の注入を含む、上記[１８]又は[１９]に記載の方法。
[２１]
前記相補的な反応性化学基は、アジド（−Ｎ３）、アルキン、ニトロン、イソシアニド、シクロプロペン又はテトラジンである、上記[３]又は[１８]若しくは[１９]のいずれかに記載の方法。
[２２]
前記アルキンは、脂肪族アルキン又はシクロオクチンである、上記[２１]に記載の方法。
[２３]
前記シクロオクチンは、ジベンゾシクロオクチン（ＤＢＣＯ）、ジフルオロベンゾシクロオクチン（ＤＩＦＢＯ）、ビアリールアザシクロオクチノン（ＢＡＲＡＣ）、ジベンゾシクロオクチン（ＤＩＢＯ）、二フッ素化シクロオクチン（ＤＩＦＯ）、一フッ素化シクロオクチン（ＭＯＦＯ）、ジメトキシアザシクロオクチン（ＤＩＭＡＣ）又はアリールレスオクチン（ＡＬＯ）である、上記[２２]に記載の方法。
[２４]
前記アルキンは、脂肪族アルキンであり、及び前記反応させるステップは、銅（Ｉ）触媒の存在下で実施される、上記[２１]又は[２２]に記載の方法。
[２５]
前記アルキンは、シクロオクチンであり、及び前記反応させるステップは、銅フリー条
件下で実施される、上記[２１]〜[２３]のいずれかに記載の方法。
[２６]
前記生物活性分子は、成長因子、ペプチド、抗体、抗凝血剤又は抗生物質である、上記[３]又は[１７]〜[２５]のいずれかに記載の方法。
[２７]
前記抗凝血剤は、クマリン、ヘパリン、第Ｘａ因子の五糖類阻害剤、直接第Ｘａ因子阻害剤又は直接トロンビン阻害剤である、上記[２６]に記載の方法。
[２８]
前記抗凝血剤は、ヘパリンである、上記[２６]又は[２７]に記載の方法。
[２９]
前記抗生物質は、キノロン、β−ラクタム、セファロスポリン、ペニシリン、カルバペネム、リポペプチド、アミノグリコシド、グリコペプチド、マクロライド、アンサマイシン又はスルホンアミドである、上記[２６]に記載の方法。
[３０]
前記抗生物質は、バンコマイシンである、上記[２６]又は[２９]に記載の方法。
[３１]
前記抗体は、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）に対して特異的な抗体である、上記[２６]に記載の方法。
[３２]
前記官能基化された細胞外マトリックスの前記反応性化学基に対して相補的な反応性化学基で官能基化された前記生物活性分子は、ヘパリン−アルキン、ヘパリン−アルキン−ビオチン（ヘパリンＡＢ）、バンコマイシン−アルキン、ヘパリン−ＤＢＣＯ、バンコマイシン−ＤＢＣＯ、抗ＴＮＦ−α−アルキン及び抗ＴＮＦ−α−ＤＢＣＯから選択される、上記[３]又は[１８]〜[３１]のいずれかに記載の方法。
[３３]
前記官能基化された細胞外マトリックスの前記反応性化学基に対して相補的な反応性化学基で官能基化された前記生物活性分子は、ヘパリン−アルキン、バンコマイシン−アルキン、ヘパリン−ＤＢＣＯ、バンコマイシン−ＤＢＣＯ、抗ＴＮＦ−α−アルキン及び抗ＴＮＦ−α−ＤＢＣＯから選択される、上記[３]又は[１８]〜[３１]のいずれかに記載の方法。
[３４]
移植のための哺乳動物臓器又は組織を調製する方法であって、上記[１７]又は[２６]〜[３３]のいずれかに記載の哺乳動物臓器又は組織の脱細胞化スカフォールドにレシピエント由来の細胞を播種して、移植のための前記臓器又は組織を取得するステップを含む方法。
[３５]
前記レシピエント由来の細胞は、上皮細胞、内皮細胞、間質細胞、筋肉細胞及びニューロンから選択される、上記[３４]に記載の方法。
[３６]
上記[３４]又は[３５]に記載の方法によって調製される、移植のための哺乳動物臓器又は組織。
[３７]
上記[３]〜[１６]又は[２１]〜[３３]のいずれかに記載の方法によって調製される、移植のための哺乳動物臓器又は組織。
[３８]
少なくとも１つの生物活性分子で生体直交的に官能基化された生物学的補綴メッシュであって、上記[２０]〜[３３]のいずれかに記載の方法によって調製される生物学的補綴メッシュ。