【手続補正書】
【提出日】令和1年11月22日(2019.11.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイクロ流体デバイスであって、
エンクロージャを備え、
前記エンクロージャが、
マイクロ流体チャネルを備えるフロー領域と、
分離領域及び接続領域を含む隔離ペンであって、前記接続領域が、前記マイクロ流体チャネルへの基端開口部と、前記分離領域への先端開口部とを有する、隔離ペンと、
前記基板に配置されるインサイチュー生成バリアを含むインサイチュー生成分離構造であって、前記インサイチュー生成バリアが、固化ポリマー網目構造を含む、インサイチュー生成分離構造と、
を備え、
前記インサイチュー生成バリアが、前記マイクロ流体チャネル及び／又は前記隔離ペンを少なくとも部分的に遮断する、
マイクロ流体デバイス。
【請求項２】
前記固化ポリマー網目構造が、光開始ポリマーを含み、及び／又はシリコーンポリマーを含まない、請求項１に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３】
前記インサイチュー生成バリアが、前記隔離ペンの接続領域内に配置される、請求項１又は２に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項４】
前記インサイチュー生成バリアの部分が、前記接続領域から前記マイクロ流体チャネル内に延びる、請求項１から３のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５】
前記インサイチュー生成バリアが、前記マイクロ流体チャネルに配置される、請求項１又は２に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６】
前記インサイチュー生成バリアが、前記隔離ペンの基端開口部の一縁部に隣接して配置される、請求項５に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項７】
複数の隔離ペンを更に含み、前記複数の隔離ペンが、行を形成し、前記インサイチュー生成バリアが、前記隔離ペンの前記行の端部に配置される隔離ペンの基端開口部の先端縁部に隣接して配置される、請求項５又は６に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項８】
前記インサイチュー生成バリアが、複数の微小物体の少なくとも１つのサブセットが前記マイクロ流体チャネル内で前記バリアを超えて移動することを阻止し、前記複数の微小物体が、１ミクロンから２０ミクロンの範囲の直径を有する、請求項５から７のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項９】
前記固化ポリマー網目構造は、合成ポリマー、修飾合成ポリマー、又は生体ポリマーを含む、請求項１から８のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１０】
前記合成ポリマー修飾が、サイズ変更モチーフ、切断モチーフ、反応末端モチーフ、及び／又は細胞認識モチーフを含む、請求項１から９のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１１】
前記固化ポリマー網目構造が、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、修飾ポリ乳酸、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、修飾ポリグリコール酸、ポリアクリルアミド（ＰＡＭ）、修飾ポリアクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＰＮＩＰＡｍ）、修飾ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、修飾ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸（ＰＡＡ）、修飾ポリアクリル酸、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、修飾ポリカプロラクトン、フィブロネクチン、修飾フィブロネクチン、コラーゲン、修飾コラーゲン、ラミニン、修飾ラミニン、ポリサッカリド、修飾ポリサッカリド、又は任意の組合わせのコポリマーの少なくとも１つを含み、
任意で、前記固化ポリマー網目構造が、加水分解、タンパク質分解、浸透圧変化、温度変化、又は光学照明による分解を受けることができる、
請求項１から１０のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１２】
前記基板が、前記エンクロージャ内に誘電泳動（ＤＥＰ）力を生成するように構成されており、
任意で、前記ＤＥＰ力が、光学的に作動される、
請求項１から１１のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１３】
マイクロ流体デバイスのエンクロージャにおいて微小物体を分離する方法であって、
前記エンクロージャが、
基板と、
フロー領域と、
分離領域及び接続領域を含む少なくとの１つの隔離ペンであって、前記接続領域が、前記フロー領域への基端開口部と、前記分離領域への先端開口部とを有する、少なくとの１つの隔離ペンと、
を備え、
当該方法が、
複数の微小物体を含む第１の流体媒体を前記マイクロ流体デバイスのエンクロージャに導入するステップと、
流動性ポリマーを含む溶液を前記エンクロージャに導入するステップと、
前記フロー領域の少なくとも１つの選択されたエリアにおいて、前記流動性ポリマーの固化を活性化し、それによりインサイチュー生成分離構造を形成するステップと、
前記インサイチュー生成分離構造を用いて、前記複数の微小物体の少なくとも１つを分離するステップと、
を含む方法。
【請求項１４】
前記流動性ポリマーの固化を開始する前記ステップが、前記フロー領域の前記少なくとも１つの選択されたエリアを光学的に照明することを含み、更に、前記流動性ポリマーを固化する前記ステップが、前記流動性ポリマーのポリマーを重合化してポリマー網目構造を形成することを含み、
任意で、前記流動性ポリマーを導入する前記ステップが、光活性化可能な重合化開始剤を導入することを更に含む、
請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記エンクロージャが複数の隔離ペンを含み、
前記フロー領域がマイクロ流体チャネルを含み、前記複数の隔離ペンのそれぞれの前記基端開口部が、前記マイクロ流体チャネルの１つの側において開く、
請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
固化を活性化する前記ステップが、隔離ペンの内部で実行され、
任意で、前記流動性ポリマーの固化を活性化する前記ステップが、前記接続領域にインサイチュー生成バリアを含むインサイチュー生成分離構造を生成する、
請求項１３から１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記インサイチュー生成バリアによって分離されない前記複数の微小物体の残りを前記マイクロ流体デバイスから搬出するステップを更に含む、請求項１３から１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記フロー領域を通る流体媒体の流れを増大させるか、
加水分解剤を前記フロー領域に導入するか、
タンパク質分解剤を前記フロー領域に導入するか、
前記フロー領域内の浸透圧を増大／低減する流体媒体を前記フロー領域に導入するか、
前記インサイチュー生成バリアの温度を変更するか、又は
前記インサイチュー生成バリアを光学的に照明することにより、
前記インサイチュー生成バリアを減少又は除去し、
それにより前記少なくとも１つの微小物体を前記インサイチュー生成分離構造から解放するステップを更に含む、
請求項１３から１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記少なくとも１つの解放された微小物体を前記マイクロ流体デバイスから搬出することを更に含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記流動性ポリマーの固化を活性化する前記ステップが、前記マイクロ流体チャネルにインサイチュー生成バリアを含むインサイチュー生成分離構造を形成する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記流動性ポリマーの固化を活性化する前記ステップが、前記インサイチュー生成バリアを前記複数の隔離ペンの少なくとも１つの隔離ペンの基端開口部に配置する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記流動性ポリマーの固化を活性化する前記ステップが、少なくとも２つの連続した隔離ペンの前記基端開口部を遮断するサイズのインサイチュー生成バリアを含むインサイチュー生成分離構造を形成する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記インサイチュー生成バリアによって分離されない前記複数の微小物体の残りを前記マイクロ流体デバイスから搬出するステップを更に含む、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記流動性ポリマーが、合成ポリマー、修飾合成ポリマー、又は生体ポリマーを含み、
任意で、前記合成ポリマー修飾が、サイズ変更モチーフ、切断モチーフ、反応末端モチーフ、及び／又は細胞認識モチーフを含む、
請求項１３から２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記複数の微小物体を導入する前記ステップが、誘電泳動（ＤＥＰ）力を使用することを更に含み、任意で、前記ＤＥＰ力を光学的に作動させる、
請求項１３から２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
マイクロ流体デバイスを備えるキットであって、
前記マイクロ流体デバイスがエンクロージャを備え、
前記エンクロージャが、
基板と、
前記エンクロージャ内に配置されるフロー領域と、
前記基板に配置される少なくとも１つのインサイチュー生成分離構造であって、固化ポリマー網目構造を含むインサイチュー生成分離構造と、
流動性ポリマー溶液であって、前記ポリマーが、重合化及び／又は熱誘導ゲル化が可能である、流動性ポリマー溶液と、
を備える、キット。
【請求項２７】
光活性化可能な重合化開始剤をさらに含む、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
前記流動性ポリマーが、合成ポリマー、修飾合成ポリマー、又は生体ポリマーを含む、請求項２６に記載のキット。
【請求項２９】
前記流動性ポリマーは、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、修飾ポリ乳酸、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、修飾ポリグリコール酸、ポリアクリルアミド（ＰＡＭ）、修飾ポリアクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（ＰＮＩＰＡｍ）、修飾ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、修飾ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸（ＰＡＡ）、修飾ポリアクリル酸、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、修飾ポリカプロラクトン、フィブロネクチン、修飾フィブロネクチン、コラーゲン、修飾コラーゲン、ラミニン、修飾ラミニン、ポリサッカリド、修飾ポリサッカリド、又は任意の組合わせのコポリマーの少なくとも１つを含む、請求項２６に記載のキット。
【請求項３０】
前記マイクロ流体デバイスの少なくとも１つの内面を共有結合的に修飾するように構成される試剤を更に含み、
前記試剤が、アルキル末端部分、フルオロアルキル末端部分、ＰＥＧ末端部分、デキストラン末端部分、又は正電荷又は負電荷末端部分を、前記共有結合的に修飾された表面に付与する、
請求項２６から２９のいずれか１項に記載のキット。