【手続補正書】
【提出日】令和2年10月1日(2020.10.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象者のグリア細胞繊維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）状況の評価を補助する方法であって、
前記対象者からの生体サンプル中の少なくとも一つの生物マーカーを検出する工程を含み、生物マーカーの少なくとも一つがＧＦＡＰであり、当該方法が、（ｉ）５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下の量でのＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、（ｉｉ）５ｌｏｇのダイナミックレンジを有し、（ｉｉｉ）そのダイナミックレンジにおいて直線性である、方法。
【請求項２】
対象者のグリア細胞繊維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）状況の評価を補助する方法であって、
ａ）前記対象者からの生体サンプルを、同時若しくは順次に、任意の順序で、少なくとも一つの第１の特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第２の特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記第１の特異的結合メンバー及び前記第２の特異的結合メンバーがそれぞれ特異的にＧＦＡＰに結合し、それにより、前記第１の特異的結合メンバー−ＧＦＡＰ−第２の特異的結合メンバーを含む一又は複数の第１の複合体を産生する、
ｂ）前記サンプル中に存在する前記一又は複数の第１の複合体中のＧＦＡＰを検出する工程と
を含み、
当該方法が、
５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下のＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、前記生体サンプルの希釈を必要とせず；又は
５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下の量でＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、当該方法が５ｌｏｇのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり；又は
約５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬのダイナミックレンジでＧＦＡＰのレベルを定量することができ、１０％未満ＣＶの精度及び１０％未満の直線性からの偏差（ＤＬ）が前記ダイナミックレンジで達成される、方法。
【請求項３】
対象者のグリア細胞繊維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）状況の評価を補助する方法であって、
ａ）前記対象者からの生体サンプルを、同時若しくは順次に、任意の順序で、少なくとも一つの第１の特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第２の特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記第１の特異的結合メンバー及び前記第２の特異的結合メンバーがそれぞれ特異的にＧＦＡＰに結合することで、前記第１の特異的結合メンバー−ＧＦＡＰ−第２の特異的結合メンバーを含む一又は複数の第１の複合体を産生し、前記第１の特異的結合メンバー又は第２の特異的結合メンバーが検出可能な標識を含む、
ｂ）一又は複数の第１の複合体からのシグナルを評価する工程と、ここで、検出可能な標識からの検出可能なシグナルの量が、サンプル中に存在するＧＦＡＰの量を示す、
を含み、
当該方法が、
（ｉ）５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下のＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、前記生体サンプルの希釈を必要とせず；又は
（ｉｉ）５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下の量でＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、当該方法が５ｌｏｇのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり；又は
（ｉｉｉ）約５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬのダイナミックレンジでＧＦＡＰのレベルを定量することができ、１０％未満ＣＶの精度及び１０％未満の直線性からの偏差（ＤＬ）が前記ダイナミックレンジで達成される方法。
【請求項４】
対象者からの生体サンプル中のＧＦＡＰを測定する方法であって、
（ａ）前記対象者からの生体サンプルを得ること；
（ｂ）前記生体サンプルを、同時に又は順次に、任意の順序で、
（１）ＧＦＡＰ又はＧＦＡＰ断片上のエピトープに結合して捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原複合体を形成する少なくとも一つの捕捉抗体、及び
（２）検出可能な標識を含み、前記捕捉抗体によって結合されていないＧＦＡＰ上のエピトープに結合して少なくとも一つの捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−少なくとも一つの第１の検出抗体−複合体を形成する少なくとも一つの第１の検出抗体
と接触させること、及び
（ｃ）前記少なくとも一つの捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−少なくとも一つの第１の検出抗体複合体中の前記検出可能な標識によって発生するシグナルに基づいて、前記生体サンプル中のＧＦＡＰの量若しくは濃度を求めること
を含み、
当該方法が、
（ｉ）５０，０００ｐｇ／ｍＬ以下の量でＧＦＡＰのレベルを求めるのに用いることができ、前記方法が５ｌｏｇのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり；又は
（ｉｉ）約５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬのダイナミックレンジでＧＦＡＰのレベルを定量することができ、１０％未満ＣＶの精度及び１０％未満の直線性からの偏差（ＤＬ）が前記ダイナミックレンジで達成される、方法。
【請求項５】
前記ＧＦＡＰをイムノアッセイ又は臨床化学アッセイによって検出する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
当該方法を用いて、約１０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約２０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約２５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約３０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約４０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約５０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約６０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約７０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約７５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約８０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約９０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約１００ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約１２５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、及び約１５０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬからなる群から選択されるＧＦＡＰのレベルを求めることができる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の特異的結合メンバー及び第２の特異的結合メンバーのいずれかであって、前記検出可能な標識を含まないメンバーが固体支持体上に固定化されている、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項８】
当該方法を、ポイント・オブ・ケア機器又は単分子検出アッセイを用いて行う、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ＧＦＡＰを一又は複数の他の生物マーカーとともに評価する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
当該方法が、約１０ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約３５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約１００ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約１２５ｐｇ／ｍＬ〜約５０，０００ｐｇ／ｍＬ、約１５０ｐｇ／ｍＬ〜約１５，０００ｐｇ／ｍＬ及び約１７５ｐｇ／ｍＬ〜約１０，０００ｐｇ／ｍＬからなる群から選択されるＧＦＡＰのレベルを検出する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記接触を同時に行う、請求項２〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記接触を順次に行う、請求項２〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも一つの捕捉抗体が、固体支持体上に固定化されている、請求項４〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記方法を約５〜約２０分以内で行う、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法を約１５分以内で行う、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記生体サンプルが、全血サンプル、血清サンプル、脳脊髄液サンプル、血漿サンプル、組織及び体液からなる群から選択される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記方法を、外傷性脳損傷の発生又は外傷性脳損傷のないことを確認するために行う、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記外傷性脳損傷が、軽度外傷性脳損傷である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ＧＦＡＰの状況が、単一時間点でＧＦＡＰのレベル又は量を測定することによって評価される、請求項１、２、３、５〜１２、又は１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
ＧＦＡＰの状況が、複数時間点でＧＦＡＰのレベル又は量を測定することによって評価される、請求項１、２、３、５〜１２、又は１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記方法を、前記対象者の臨床状態、前記対象者の臨床検査値、前記対象者の軽度、中等度若しくは重度ＴＢＩを患っているという分類、前記対象者の低若しくは高レベルのＧＦＡＰの表示、及び前記対象者が頭部への損傷を受けた可能性がある事象のタイミングからなる群から選択される因子とは無関係に、対象者について行うことができる、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記方法を２０マイクロリットル未満の体積の前記生体サンプルを用いて行う、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記生体サンプルが希釈を必要としない、請求項１、４〜６、又は８〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記方法が、約１０ｐｇ／ｍＬの検出下限（ＬｏＤ）を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記方法が、約２０ｐｇ／ｍＬの検出下限（ＬｏＤ）を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記方法が、拡大された検出ウィンドウを提供する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記一つの第１のＧＦＡＰ特異的結合メンバーが、固体支持体上に固定化されている、請求項２、３、又は７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも一つの第２のＧＦＡＰ特異的結合メンバーが、固体支持体に固定化されている、請求項２、３又は７に記載の方法。
【請求項２９】
前記少なくとも一つの第１のＧＦＡＰ特異的結合メンバー及び前記少なくとも一つの第２のＧＦＡＰ特異的結合メンバーが、単一特異性抗体である、請求項２、３又は７に記載の方法。
【請求項３０】
前記生体サンプルが希釈されている又は未希釈である、請求項１６に記載の方法。