【手続補正書】
【提出日】令和2年1月17日(2020.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫細胞を、表１において挙げられる化合物、ならびにその誘導体及び類似体からなる群から選択される少なくとも１つの薬剤を含む、十分量の組成物と、調節されていない免疫細胞と比較し、改善された治療可能性を有する調節された免疫細胞の集団を得るのに十分な時間、接触させることを含む、免疫細胞を調節する方法。
【請求項２】
（ａ）前記調節された免疫細胞が、前記１つ又は複数の薬剤と接触させていない免疫細胞と比較し、
（ｉ）改善された増殖、細胞毒性、サイトカイン応答、サイトカイン放出、細胞リコール、及び／又は持続性；
（ｉｉ）改善された細胞拡大、維持、分化、脱分化、及び／又は生存率；ならびに／あるいは
（ｉｉｉ）増大した数若しくは割合の、免疫細胞の１つ又は複数の所望される亜集団、
を有する細胞を含む、
（ｂ）前記免疫細胞が、少なくとも一つの薬剤と接触する前に、少なくとも一つの以下の特徴を有する：
（ｉ）（１）Ｔ細胞、ＮＫＴ細胞、又はＮＫ細胞；
（２）ＮＫ細胞；
（３）ＣＤ５７−ＮＫ細胞；又は
（４）ＣＤ５７−ＮＫＧ２Ｃ＋ＮＫ細胞；
を含む、
（ｉｉ）末梢血、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染の部位由来の組織、腹水、胸水、脾臓組織、若しくは腫瘍から単離されるか、又はそれに含まれる；
（ｉｉｉ）（１）健常対象；
（２）自己免疫疾患、造血器悪性腫瘍、ウイルス感染症若しくは固形腫瘍を有する対象；  （３）遺伝子的に修飾された免疫細胞を既に投与された対象；又は
（４）ＣＭＶ血清陽性である対象
から単離される、又は
（ｉｖ）ゲノム的に操作され、挿入、欠失、若しくは核酸置換を含む；
（ｖ）少なくとも１つの遺伝子的に修飾されたモダリティを含む；
（ｖｉ）幹細胞、造血幹細胞若しくは造血前駆細胞、又は前駆細胞から試験管内で分化する；又は
（ｖｉｉ）造血系又は非造血系の非多能性細胞から試験管内で分化転換する;
（ｃ）一つ又は複数の添加剤を更に含む前記少なくとも一つの薬剤を含む前記組成物；及び／又は
（ｄ）（ｉ）十分な量の調節のための組成物と接触させる段階の前に、前記免疫細胞を活性化させること；及び選択的に、活性化段階の前であること、
（ｉｉ）活性化及び調節のために前記免疫細胞をＣＤ３及びＣＤ１９細胞から枯渇させること、
を含む、請求項１の方法。
【請求項３】
以下の特徴の少なくとも一つを有する、請求項２の方法であって：
（ａ）前記幹細胞が、誘導された多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）又は胚性幹細胞（ＥＳＣ）を含む；
（ｂ）前記前駆細胞が、ＣＤ３４＋造血性内皮細胞、多能性前駆細胞、Ｔ細胞前駆細胞、ＮＫ前駆細胞、又はＮＫＴ前駆細胞である；
（ｃ）前記幹細胞、造血幹細胞若しくは造血前駆細胞、又は前駆細胞が、
（ｉ）ゲノム的に操作され、挿入、欠失、若しくは核酸置換を含む、又は
（ｉｉ）少なくとも１つの遺伝子的に修飾されたモダリティを含む；
（ｄ）前記遺伝子的に修飾されたモダリティが、セーフティスイッチタンパク質、ターゲティングモダリティ、受容体、シグナル伝達分子、転写因子、医薬的に有効なタンパク質及びペプチド、薬物標的候補；又は前記免疫細胞の生着、輸送、ホーミング、バイアビリティー、自己再生、持続性、免疫応答制御及び調節、ならびに／若しくは生存を促進するタンパク質の少なくとも１つを含む；
（ｅ）前記免疫細胞の遺伝子的に修飾されたモダリティが、（ｉ）欠失若しくは低減した発現のＢ２Ｍ、ＴＡＰ１、ＴＡＰ２、タパシン、ＮＬＲＣ５、ＰＤ１、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＲＦＸＡＮＫ、ＣＩＩＴＡ、ＲＦＸ５、又はＲＦＸＡＰ、及び染色体６ｐ２１領域中の任意の遺伝子；ならびに（ｉｉ）誘導された若しくは増大した発現のＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｇ、ＨＡＣＤ１６、ｈｎＣＤ１６、４１ＢＢＬ、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４７、ＣＤ１１３、ＣＤ１３１、ＣＤ１３７、ＣＤ８０、ＰＤＬ１、Ａ２ＡＲ、Ｆｃ受容体、あるいは二重若しくは多特異性又は普遍的エンゲイジャーとのカップリングのための表面トリガー受容体の１つあるいは複数を含む、
（ｆ）前記一つ又は複数の添加剤が：（ｉ）ペプチド、抗体、抗体フラグメント、サイトカイン、マイトジェン、成長因子、スモールＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、単核血液細胞、フィーダー細胞、フィーダー細胞成分若しくは置換因子、対象となる１つ若しくは複数のポリ核酸を含むベクター、化学療法剤若しくは放射性部分、及び免疫調節薬（ＩＭｉＤ）の少なくとも一つ；（ｉｉ）ＩＬ２、ＩＬ１５、ＩＬ１２、ＩＬ１８及びＩＬ２１を含む刺激性サイトカインの少なくとも1つ、又は（ｉｉｉ）ＭＥＫ阻害剤、ラパマイシン、及びＳＴＩＮＧアゴニストの１つ又は複数を含む、又は
（ｇ）前記組成物が：（ｉ）ＧＳＫ３阻害剤、ＴＧＦβ受容体阻害剤、ＲＯＣＫ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＰＤＫ１アゴニスト、及びラパマイシンの１つ又は複数；（ｉｉ）ＧＳＫ３阻害剤；（ｉｉｉ）ＣＨＩＲ９９０２１；（ｉｖ）ＧＳＫ３阻害剤及びＩＬ１５；（ｖ）ＧＳＫ３阻害剤、ＩＬ１５、及びＳＴＩＮＧアゴニスト；又は（ｖｉ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジメチルアセトアミド、エタノール及びその組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの有機溶媒を含む、
（ｈ）前記調節された免疫細胞又は、１つ又は複数の薬剤と接触させることで増大した数又は割合を有する免疫細胞の１つ若しくは複数の所望される亜集団は：（ｉ）ナイーブＴ細胞、幹細胞メモリーＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、タイプＩ  ＮＫＴ細胞、ＣＤ５７＋ＮＫ細胞、又は養子ＮＫ細胞；（ｉｉ）ＣＤ５７＋、ならびにＮＫＧ２Ｃ＋、低ＰＬＺＦ、低ＳＹＫ、低ＦｃεＲγ、低ＥＡＴ−２、低ＴＩＧＩＴ、低ＰＤ１、低ＣＤ７、低ＣＤ１６１、高ＬＩＬＲＢ１、高ＣＤ４５ＲＯ、及び低ＣＤ４５ＲＡの少なくとも１つを含む養子ＮＫ細胞；又は（ｉｉｉ）ｈｎＣＤ１６を発現するＣＤ５７＋ＮＫ細胞を含み、
前記調節された免疫細胞又は、１つ又は複数の薬剤と接触させることで増大した数又は割合を有する免疫細胞の１つ若しくは複数の所望される亜集団は、少なくとも一つの遺伝子的に修飾されたモダリティを含む；
（ｊ）前記方法は一つ又は複数の所望される調節された免疫細胞由来の亜集団を更に含む；
（ｋ）前記十分な時間が、１６時間以上である；
（ｌ）前記免疫細胞が、フィーダーフリーな環境にある；
（ｍ）前記調節された免疫細胞がＮＫ細胞を含み、前記調節されたＮＫ細胞が（ｉ）調節されていないＮＫ細胞と比較し、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ１６、ＫＩＲ、ＣＤ２、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４及びＮＫｐ４６の１つ又は複数において増大した発現を有する調節されたＮＫ細胞の集団であって、その前記発現が、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％又はそれ以上増大される；（ｉｉ）拡大を少なくとも２倍増大する；及び／又は（ｉｉｉ）改善されたサイトカイン応答が、増大した産生の、ＩＦＮγ及び／若しくはＴＮＦαを含む１つ又は複数のサイトカインを含む、方法。
【請求項４】
ＮＫ細胞の集団を調節する方法であって：
（ａ）免疫細胞の集団を（ｉ）健常対象；（ｉｉ）自己免疫疾患、造血器悪性腫瘍、ウイルス感染若しくは固形腫瘍を有する対象；（ｉｉｉ）遺伝子的に修飾された免疫細胞を既に投与された対象；又は（ｉｖ）ＣＭＶ血清陽性である対象；から得ること、
（ｂ）ＣＤ３及びＣＤ１９細胞を、免疫細胞の前記集団から枯渇させること、及び
（ｃ）工程（ｉｉ）からもたらされた免疫細胞の前記集団を、ＧＳＫ３阻害剤を含む十分量の組成物と、調節されていないＮＫ細胞と比較し、養子細胞療法の改善された治療可能性を有する調節されたＮＫ細胞の集団を得るのに十分な時間、接触させること、を含む、ＮＫ細胞の集団を調節する方法であって、
ＣＤ３及びＣＤ１９細胞を枯渇させるのに先立ち、免疫細胞の前記集団が、ＧＳＫ３阻害剤の不存在下でサイトカインと共に培養されない、及び
調節されていないＮＫ細胞と比較し、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ１６、ＫＩＲ、ＣＤ２、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４及びＮＫｐ４６の１つ又は複数において増大した発現を有する調節されたＮＫ細胞の集団であって、その前記発現が、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％又はそれ以上増大される；ＮＫ細胞の拡大を少なくとも２倍増大する、及び／又は；前記改善されたサイトカイン応答が、増大した産生の、ＩＦＮγ及び／若しくはＴＮＦαを含む１つ又は複数のサイトカインを含む、方法。
【請求項５】
免疫細胞の集団、ならびに表１において挙げられる化合物、その誘導体及び類似体からなる群から選択される１つ又は複数の薬剤を含む組成物であって、前記１つ又は複数の薬剤が、前記免疫細胞の調節を介して、調節された免疫細胞が、前記１つ又は複数の薬剤によって調節されていない免疫細胞と比較し、改善された治療可能性を有することができる、組成物。
【請求項６】
請求項５の組成物であって、
（ａ）前記１つ又は複数の薬剤が、前記免疫細胞を前記１つ又は複数の薬剤で調節する際に、
（ｉ）細胞拡大、維持、分化、脱分化、及び／若しくは生存率を改善し；
（ｉｉ）細胞増殖、細胞毒性、持続性、サイトカイン応答及び分泌、及び／若しくは細胞リコールを改善し；ならびに／又は
（ｉｉｉ）所望される免疫細胞亜集団の数若しくは割合を増大する；
（ｂ）前記免疫細胞が以下の特徴の少なくとも一つを有する：
（ｉ）（１）Ｔ細胞、ＮＫＴ細胞、及び／又はＮＫ細胞；
（２）ＣＤ５７−ＮＫ細胞；又は
（３）ＣＤ５７−ＮＫＧ２Ｃ＋ＮＫ細胞を含む、
（ｉｉ）末梢血、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染の部位由来の組織、腹水、胸水、脾臓組織、若しくは腫瘍から単離されるか、又はそれに含まれる；
（ｉｉｉ）（１）健常対象；
（２）自己免疫疾患、造血器悪性腫瘍、ウイルス感染症若しくは固形腫瘍を有する対象；
（３）遺伝子的に修飾された免疫細胞を既に投与された対象；又は
（４）ＣＭＶ血清陽性である対象
から単離される、
（ｉｖ）ゲノム的に操作され、挿入、欠失、若しくは核酸置換を含む；
（ｖ）少なくとも１つの遺伝子的に修飾されたモダリティを含む；
（ｖｉ）幹細胞、造血幹細胞、又は造血前駆細胞、若しくは前駆細胞から試験管内で分化する；又は
（ｖｉｉ）造血系又は非造血系の非多能性細胞から試験管内で分化転換する、又は
（ｃ）前記組成物が１つ又は複数の添加剤を更に含む、
組成物。
【請求項７】
（ａ）前記調節された免疫細胞、又は増大した数又は割合を有する免疫細胞の前記所望される亜集団が：
（ｉ）ナイーブＴ細胞、幹細胞メモリーＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、タイプＩ  ＮＫＴ細胞、ＣＤ５７＋ＮＫ細胞、又は養子ＮＫ細胞；
（ｉｉ）ＣＤ５７＋、ならびにＮＫＧ２Ｃ＋、低ＰＬＺＦ、低ＳＹＫ、低ＦｃεＲγ、低ＥＡＴ−２、低ＴＩＧＩＴ、低ＰＤ１、低ＣＤ７、低ＣＤ１６１、高ＬＩＬＲＢ１、高ＣＤ４５ＲＯ、及び低ＣＤ４５ＲＡの少なくとも１つを含む、養子ＮＫ細胞；
（ｉｉｉ）ｈｎＣＤ１６を発現するＣＤ５７＋ＮＫ細胞；
（ｉｖ）少なくとも１つの遺伝子的に修飾されたモダリティ；
（ｂ）前記幹細胞が、誘導された多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）又は胚性幹細胞（ＥＳＣ）を含む；
（ｃ）前記前駆細胞が、ＣＤ３４＋造血性内皮細胞、多能性前駆細胞、Ｔ細胞前駆細胞、ＮＫ前駆細胞、又はＮＫＴ前駆細胞である；
（ｄ）前記幹細胞、造血幹細胞若しくは造血前駆細胞、又は前駆細胞が、
（ｉ）ゲノム的に操作され、挿入、欠失、若しくは核酸置換を含むか、又は
（ｉｉ）少なくとも１つの遺伝子的に修飾されたモダリティを含む；
（ｅ）前記遺伝子的に修飾されたモダリティが、セーフティスイッチタンパク質、ターゲティングモダリティ、受容体、シグナル伝達分子、転写因子、医薬的に有効なタンパク質及びペプチド、薬物標的候補；又は前記免疫細胞の生着、輸送、ホーミング、バイアビリティー、自己再生、持続性、免疫応答制御及び調節、ならびに／若しくは生存を促進するタンパク質の少なくとも１つを含む；
（ｆ）前記遺伝子的に修飾されたモダリティが、（ｉ）欠失若しくは低減した発現のＢ２Ｍ、ＴＡＰ１、ＴＡＰ２、タパシン、ＮＬＲＣ５、ＰＤ１、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＲＦＸＡＮＫ、ＣＩＩＴＡ、ＲＦＸ５、又はＲＦＸＡＰ、及び染色体６ｐ２１領域中の任意の遺伝子；ならびに（ｉｉ）誘導された若しくは増大した発現のＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｇ、ＨＡＣＤ１６、ｈｎＣＤ１６、４１ＢＢＬ、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４７、ＣＤ１１３、ＣＤ１３１、ＣＤ１３７、ＣＤ８０、ＰＤＬ１、Ａ２ＡＲ、Ｆｃ受容体、あるいは二重若しくは多特異性又は普遍的エンゲイジャーとのカップリングのための表面トリガー受容体の１つあるいは複数を含む；
（ｇ）前記1つ又は複数の添加剤が：（ｉ）ペプチド、抗体、抗体フラグメント、サイトカイン、マイトジェン、成長因子、スモールＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、単核血液細胞、フィーダー細胞、フィーダー細胞成分若しくは置換因子、対象となる１つ若しくは複数のポリ核酸を含むベクター、化学療法剤若しくは放射性部分、及び免疫調節薬（ＩＭｉＤ）の少なくとも一つ；（ｉｉ）ＩＬ２、ＩＬ１５、ＩＬ１２、ＩＬ１８及びＩＬ２１を含む刺激性サイトカインの少なくとも１つ；（ｉｉｉ）ＭＥＫ阻害剤、ラパマイシン、及びＳＴＩＮＧアゴニストの一つ又は複数；又は
（ｈ）前記組成物が：（ｉ）ＧＳＫ３阻害剤、ＴＧＦβ受容体阻害剤、ＲＯＣＫ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＰＤＫ１アゴニスト、及びラパマイシンの１つ又は複数；（ｉｉ）ＧＳＫ３阻害剤；（ｉｉｉ）ＮＫ細胞の集団、及びＧＳＫ３阻害剤；（ｉｖ）ＮＫ細胞の集団、ＧＳＫ３阻害剤、及びＩＬ１５；（ｖ）ＮＫ細胞の集団、ＧＳＫ３阻害剤、ＩＬ１５、及びＳＴＩＮＧアゴニスト；又は（ｖｉ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジメチルアセトアミド、エタノール及びその組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの有機溶媒を含む、
請求項６の組成物。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の細胞療法のためのＴ、ＮＫ又はＮＫＴ細胞を含む調節された免疫細胞を含む治療組成物を製造する方法。
【請求項９】
請求項１〜４のいずれか１項により製造される調節された免疫細胞の集団。
【請求項１０】
請求項１〜４のいずれか１項により製造される調節されたＮＫ細胞の集団。
【請求項１１】
請求項１〜４のいずれか１項により製造される調節された養子ＮＫ細胞の集団。
【請求項１２】
請求項１〜４のいずれか１項により製造される選択的に拡大されたＮＫ細胞を含む、調節された免疫細胞の集団。
【請求項１３】
調節されていないＮＫ細胞と比較し、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ１６、ＫＩＲ、ＣＤ２、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４及びＮＫｐ４６の１つ又は複数において増大した発現を有する調節されたＮＫ細胞の集団であって、その前記発現が、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％又はそれ以上増大される、集団。
【請求項１４】
請求項１〜４のいずれか１項により得られる調節された免疫細胞を含む組成物。
【請求項１５】
請求項９~１３のいずれか１項に記載の調節された細胞、及び治療上許容される培地を含む、治療組成物であって；選択的にペプチド、サイトカイン、マイトジェン、成長因子、スモールＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ（２本鎖ＲＮＡ）、単核血液細胞、フィーダー細胞、フィーダー細胞成分若しくは置換因子、対象となる１つ若しくは複数のポリ核酸を含むベクター、抗体、化学療法剤若しくは放射性部分、及び免疫調節薬（ＩＭｉＤ）からなる群から選択される１つ又は複数の追加の添加剤をさらに含む、組成物。
【請求項１６】
治療上十分量の請求項１５の治療組成物を、養子細胞療法を必要とする対象に投与することにより、対象を処置する方法であって、前記細胞療法が、自家又は同種であり；前記対象が、自己免疫異常、血液系腫瘍、固形腫瘍、癌、又はＨＩＶ、ＲＳＶ、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、若しくはＢＫポリオーマウイルスと関連する感染症を有する、方法。
【請求項１７】
医学で使用するための請求項１５の組成物であって、前記使用が治療上十分量の組成物を抗体、化学療法剤、又は放射性処置と組み合わせて投与することを含む、前記抗体、化学療法剤、又は放射性処置が、前記組成物の投与に先立ち、最中、又は後である、組成物。
【請求項１８】
請求項１〜４の方法に記載の細胞療法のための治療組成物の製造のための混合物の使用であって、前記混合物が：
（ａ）免疫細胞の単離された集団、及び
（ｂ）ＧＳＫ３阻害剤を含む組成物
を含む；
前記ＧＳＫ３阻害剤が、（ａ）の前記細胞を調節する能力がある；
選択的に、免疫細胞の前記単離された集団が、ＮＫ細胞を含む；
選択的に、調節される際、免疫細胞の前記単離された集団が、調節されていないＮＫ細胞を含む免疫細胞の単離された集団と比較して、
（ａ）少なくともＣＤ５７における増大した遺伝子発現；
（ｂ）増大したＣＤ５７＋細胞亜集団；
（ｃ）ＣＤ５７＋、ならびにＮＫＧ２Ｃ＋、低ＰＬＺＦ、低ＳＹＫ、低ＦｃεＲγ、低ＥＡＴ−２、低ＴＩＧＩＴ、低ＰＤ１、低ＣＤ７、低ＣＤ１６１、高ＬＩＬＲＢ１、高ＣＤ４５ＲＯ、及び低ＣＤ４５ＲＡの少なくとも１つを含む増大した養子ＮＫ細胞亜集団；（ｄ）改善された増殖、細胞毒性、サイトカイン応答、サイトカイン放出、細胞リコール、及び／若しくは持続性；ならびに／又は（ｅ）改善された細胞拡大、維持、分化、脱分化、及び／若しくは生存率；
を含む、使用。