【手続補正書】
【提出日】令和2年2月28日(2020.2.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物８
【化１】
2019513718.tif 000001
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化２】
2019513718.tif 000002
から合成するためのプロセスであって、該プロセスは、
化合物１を溶媒中の強塩基と低温で反応させることによって、化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入した後、エッシェンモーザー塩と、それに続いてヨードメタンとを添加して、以下の化合物２Ａ
【化３】
2019513718.tif 000003
を生成し、化合物２Ａのケト基を、低温のルイス酸（好ましくはＣｅＣｌ３）の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して、化合物２
【化４】
2019513718.tif 000004
を生成するステップ、
あるいは、化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下で、パラホルムアルデヒドと反応させて化合物２Ａを生成した後に、化合物２Ａのケト基を、低温の溶媒中のルイス酸の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して化合物２を生成することによって、化合物１から化合物２を生成するステップと、
化合物２を溶媒中のＡｌＭｅ３と反応させて、化合物３
【化５】
2019513718.tif 000005
を生成するステップと、
化合物３を、弱塩基中の塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルと反応させて、化合物４
【化６】
2019513718.tif 000006
を生成するステップと、
化合物４を、フッ素化剤（好ましくは三フッ化ジエチルアミノ硫黄ＤＡＳＴ）でフッ素化して２’位を立体選択的にフッ素化することにより、化合物７
【化７】
2019513718.tif 000007
を生成し、化合物７をフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて脱保護してシリル保護基を除去することにより、化合物８
【化８】
2019513718.tif 000008
を生成するステップと
を含み、化合物８の合成は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上を生成するためのいずれか１つ以上のステップでの任意の分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項２】
化合物８
【化９】
2019513718.tif 000009
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化１０】
2019513718.tif 000010
から合成するためのプロセスであって、該プロセスは、
化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下で、パラホルムアルデヒドと反応させて、化合物２Ａ
【化１１】
2019513718.tif 000011
を生成し、それに続いて化合物２Ａのケト基を、低温の溶媒中のルイス酸の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して、化合物２
【化１２】
2019513718.tif 000012
を生成するステップと、
化合物２を溶媒中のＡｌＭｅ３と反応させて、化合物３
【化１３】
2019513718.tif 000013
を生成するステップと、
化合物３を、弱塩基中の塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルと反応させて、化合物４
【化１４】
2019513718.tif 000014
を生成するステップと、
化合物４を三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）でフッ素化して、化合物４の２’位を立体選択的にフッ素化することにより、化合物７
【化１５】
2019513718.tif 000015
を生成し、化合物７を脱保護してシリル保護基を除去することにより、化合物８
【化１６】
2019513718.tif 000016
を生成するステップと
を含み、化合物８の合成は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び／又は８を生成するためのいずれか１つ以上のステップでの任意の分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項３】
化合物２は化合物１から、精製及び／又は分離を行わずにワンポットで調製される、請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
化合物８
【化１７】
2019513718.tif 000017
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）化合物１０を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化１８】
2019513718.tif 000018
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）のアミンが保護された６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物８Ｐ
【化１９】
2019513718.tif 000019
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）を生成するステップと、
化合物８Ｐを脱保護して、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化２０】
2019513718.tif 000020
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物８Ｐ及び化合物１０のいずれかの生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項５】
化合物８Ｐは、
【化２１】
2019513718.tif 000021
である、請求項４に記載のプロセス。
【請求項６】
化合物８
【化２２】
2019513718.tif 000022
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）化合物１０を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化２３】
2019513718.tif 000023
のｄｉ−Ｂｏｃ保護６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物９
【化２４】
2019513718.tif 000024
を生成するステップと、
化合物９を脱保護して、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化２５】
2019513718.tif 000025
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物９及び／又は化合物１０の生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項７】
少なくとも化合物１０は精製及び単離される、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
化合物８
【化２６】
2019513718.tif 000026
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環グアノシン（ＦＭＣＧ）化合物１１を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化２７】
2019513718.tif 000027
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基を表す）のアミンが保護された６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物９Ｐ
【化２８】
2019513718.tif 000028
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基を表す）を生成するステップと、
化合物９Ｐを脱保護し、６−クロロ基をケトン基へ変換して、化合物１１（ＦＭＣＧ）
【化２９】
2019513718.tif 000029
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物９Ｐ及び／又は化合物１１の生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項９】
化合物９Ｐは、
【化３０】
2019513718.tif 000030
である、請求項８に記載のプロセス。
【請求項１０】
化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上が分離及び／又は精製される、請求項１に記載のプロセス。
【請求項１１】
化合物２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上が分離及び／又は精製される、請求項２に記載のプロセス。
【請求項１２】
化合物８Ｐ又は化合物１０が分離及び精製される、請求項４又は５に記載のプロセス。
【請求項１３】
化合物９及び／又は化合物１０が分離及び精製される、請求項６に記載のプロセス。
【請求項１４】
化合物８Ｐ及び化合物１０の両方が分離及び精製される、請求項４又は５に記載のプロセス。
【請求項１５】
化合物９Ｐ及び／又は化合物１１が分離及び精製される、請求項８又は９に記載のプロセス。
【請求項１６】
前記脱保護のステップは、高温の溶媒中のトリフルオロ酢酸及び水の存在下で行われる、請求項４〜１０のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１７】
ＦＭＣＡ（化合物１０）又はＦＭＣＧ（化合物１１）を、化学構造
【化３１】
2019513718.tif 000031
（ＲはＣ１−Ｃ２０アルキル基であり、フェニル基は任意で置換される）のクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物と、溶媒中の弱塩基の存在下で更に反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化３２】
2019513718.tif 000032
（ＲはＣ１−Ｃ２０アルキル基である）又はその薬学的に許容可能な塩若しくは立体異性体を生成する、請求項４〜９のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１８】
ＦＭＣＡ化合物１０又はＦＭＣＧ化合物１１のプロドラッグ形態を生成する方法であって、
化合物１０又は化合物１１を、化学構造
【化３３】
2019513718.tif 000033
（ＲはＣ１−Ｃ２０アルキル基である）のクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物と、溶媒中の弱塩基の存在下で反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化３４】
2019513718.tif 000034
（ＲはＣ１−Ｃ２０アルキル基である）又はその薬学的に許容可能な塩を生成する、方法。
【請求項１９】
Ｒはメチル又はイソプロピルである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
化合物２Ａ、２、３、４、５、６、７、８、８Ｐ、９、９Ｐ若しくは９Ｇ又はそれらの塩のいずれか１つ以上。
【請求項２１】
化合物２
【化３５】
2019513718.tif 000035
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化３６】
2019513718.tif 000036
から生成する方法であって、該方法は、第１のステップにおいて、化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下でパラホルムアルデヒドと反応させることによって、化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入し、それに続いて前記第１のステップから得られた化合物を、低温のルイス酸の存在下で還元剤を用いて還元して、化合物２
【化３７】
2019513718.tif 000037
を生成するステップを含む、方法。
【請求項２２】
前記還元剤が水素化ホウ素ナトリウムであり、前記ルイス酸がＣｅＣｌ３である、請求項２１に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
一実施形態では、本発明は、式８
【化２】
2019513718.tif 000038
の化合物を、置換済みペンタノン誘導体１
【化３】
2019513718.tif 000039
から合成するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、化合物１を溶媒中の強塩基と低温（例えば−７８℃）で反応させることによって化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入した後、エッシェンモーザー塩と、それに続いてヨードメタンとを添加して、以下の化合物２Ａをもたらすことを含み、化合物２Ａは単離されてもよいが、好ましくは水素化ホウ素ナトリウムを用いてその場で還元されて、化合物２
【化４】
2019513718.tif 000040
をもたらす。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
化合物４を、無水溶媒（例えば塩化メチレン）中のフッ素化剤（例えば三フッ化ジエチルアミノ硫黄ＤＡＳＴ）と反応させて、２’位を立体選択的にフッ素化して以下の化合物７を生成し（化合物７を生成するための反応は、副生成物として化合物５及び化合物６も生成する。図１のスキーム１Ａ、及び図２のスキーム１を参照）、
【化１０】
2019513718.tif 000041
続いてこの化合物７を、溶媒（例えばＴＨＦ）中のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）を用いてシリル保護基を除去するために反応させて、以下の化合物８
【化１１】
2019513718.tif 000042
を生成する。上記合成の１つ以上のステップ又は合成全体は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上の生成について各化合物の分離及び／又は精製（副生成物である化合物５及び６も分離／精製され得る）を伴う複数のステップで行われてもよい。なお、ｔ−ブチルエーテル保護基以外の別の保護基を用いて、糖シントン（化合物８）を生成してもよい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
ＦＭＣＡ（化合物１０）及びＦＭＣＧ（化合物１１）はそれぞれ、ＦＭＣＡ又はＦＭＣＧを、適切なクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物（例えば、ＦＭＣＡに関しては図３のスキーム２に示すように化合物１１Ａを用いて、又はフェニル基が任意で置換されている試薬を用いて）
【化１８】
2019513718.tif 000043
（ここでＲはＣ１−Ｃ２０アルキル基、好ましくはメチル又はイソプロピル基である）（フェニル基は任意で置換されている）と、溶媒（例えばＴＨＦ）中のメチルイミダゾール又は他の弱塩基の存在下で反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化１９】
2019513718.tif 000044
（ここでＲはＣ１−Ｃ２０アルキル、好ましくはメチル又はイソプロピルである）を生成することによって、ホスホロアミダイトプロドラッグ形態に変換されてもよい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
次に化合物７を、ＴＨＦ（溶媒）中でシリル保護基を除去するために反応させ（好ましくはフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて）、分離し、回収し、精製して、以下の化合物８
【化３７】
2019513718.tif 000045
を生成する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
化合物８からのＦＭＣＧの合成
ＦＭＣＧは、化合物８
【化４２】
2019513718.tif 000046
から、２つのステップで高収率で合成される。化合物８を、好ましい化学構造
【化４３】
2019513718.tif 000047
の２−アミノが保護された６−クロロプリン誘導体と反応させる。ここでは、トリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）を低温（例えば約−１０℃）の溶媒（好ましくはＴＨＦ）中で約２０〜４５分の期間に亘って混合し、２−アミノが保護された６−クロロプリン誘導体を添加して、低温（例えば０℃）で更なる期間（例えば２０〜４５分、好ましくは約３０分）に亘って混合する。その後に化合物８を添加して十分な期間（例えば約１．５時間）に亘って撹拌して、保護された６−クロロプリン化合物を糖シントン（化合物８）に結合させ、精製（カラムクロマトグラフィ）後に以下の化合物９Ｇ
【化４４】
2019513718.tif 000048
を生成する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
実施例の第１のセット（図１のスキーム１Ａと関連）
（３ａＲ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２，２−ジメチル−５−メチレンジヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４（５Ｈ）−オン（２Ａ）：−７８℃のＴＨＦ中の化合物１（１５ｇ、６１．９ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、滴下漏斗を用いてＴＨＦ中のＬＤＡ溶液（５３．６ｍｌ、８０ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を−７８℃で３時間撹拌し、エッシェンモーザー塩（４５．８ｇ、２４８ｍｍｏｌ）を一度に添加した。この混合物を同じ温度で更に３時間、そして室温で８時間撹拌した。次にヨードメタン（１３１ｍＬ）を添加し、室温で更に４時間撹拌した。この混合物を、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で急冷して１時間撹拌し、塩化メチレン（２×３００ｍＬ）を用いて抽出した。混ざり合った有機抽出物を１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）、それに続いて塩水（８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュシリカ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物２Ａを淡黄色の油として得た。収率（１１．４ｇ、７２．４％）；1H NMR [500 MHz, CDCl3]: δ 6.22 (d, J = 2 Hz, 1 H), 5.52 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 4.59 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4.48 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 3.64 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.46 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.09 (m, 1 H), 1.37 (s, 3 H), 1.35 (s, 3 H), 1.08 (s, 9 H);  
MS (ESI) m/z: 255 [M+H]+
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２，２−ジメチル−５−メチレンテトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（２）：無水メタノール（１５０ｍＬ）中の化合物２Ａ（１１．４ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃のＣｅＣｌ３．７Ｈ２Ｏ（１８．３７ｇ、４９．３ｍｍｏｌ）を添加して、１０分間撹拌した。次にＮａＢＨ４（１．８６ｇ、４９．３ｍｍｏｌ）をこの混合物に一度に添加した。３０分後、反応混合物を０℃にし、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）を添加した。これを更に１時間撹拌した後、減圧下で溶媒を除去した。残渣を塩化メチレン（２×２００ｍＬ）で抽出した。混ざり合った有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、真空下で濃縮した。これにより得られた残渣をフラッシュシリカ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物２を白色固体として得た。収率（９．１ｇ、７９％）；1H NMR [500 MHz, CDCl3]: δ 5.25 (s, 1 H), 5.11 (s, 1 H), 4.50-4.53 (m, 3 H), 3.46 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.27 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 2.63 (t, J = 3.5 Hz, 1 H), 2.25 (d, J = 11 Hz, 1 H), 1.40 (s, 3 H), 1.34 (s, 3 H), 1.12 (s, 9 H);
MS (ESI) m/z: 257 [M+H]+
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−メチレンシクロペンタン−１，２−ジオール（３）：化合物２（２．２ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのＴＨＦに溶解し、氷浴で０℃まで冷却した後、トリメチルアルミニウム溶液（１７２ｍｍｏｌ、８６ｍｌ）を添加した。この反応混合物を周囲温度で７２時間撹拌した。次に反応混合物を−３０℃まで冷却し、２ｍｌのメタノール及び飽和塩化アンモニウム溶液で急冷した。酢酸エチル及びヘキサンを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィによって、化合物３を灰色がかった白色の固体として得た。収率（１．８ｇ、７７％）。1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 5.32 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.07-4.05 (m, 1H), 3.94-3.92 (m, 1H), 3.44 (dd, J = 4.5 & 8.5 Hz, 1 H), 3.35 (dd, J = 5.0 & 8.5 Hz, 1H), 2.80 (bs, 1H), 2.64-2.62 (m, 1H), 2.51 (bs, 1H), 1.25 (s, 9H), 1.15 (s, 9H)
MS (ESI) m/z: 258 [M+H]+
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−メチレンシクロペンタノール（４）：０℃の無水塩化メチレン（２５ｍｌ）中の化合物３（１．７６．２４ｍｍｏｌｇ、ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（０．８５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ）を添加し、５分間撹拌した。この溶液に塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（２．０６ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を２時間撹拌した。反応混合物を水（２０ｍｌ）で希釈して有機層を分離し、水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、硫化ナトリウムで乾燥させた。有機層を真空下で乾燥させて粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：９）で精製して、化合物４を油として得た。収率（２．５２ｇ、７９％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 7.80-7.78 (m, 2H), 7.74-7.71 (m, 3H), 7.43-7.35 (m, 5H), 5.19 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.82-3.79 (m, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.36-3.33 (m, 2H), 2.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.57 (s, 1H), 1.13 (s, 9H), 1.10 (s, 9H), 1.05 (s, 9H);  
MS (ESI) m/z: 512 [M+H]+
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジフェニルシラン（７）：無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の化合物４（２．５ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ；３．２３ｍＬ、２４．４７ｍｍｏｌ）を−２０℃でゆっくりと添加し、この混合物を３０分間撹拌しながら室温まで温めた。この反応混合物を−２０℃の氷水を用いて急冷し、有機層を回収し、水性相をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。混ざり合った有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で溶媒を除去した。粗残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（１％ＥｔＯＡｃ／９９％ヘキサン）で精製して、化合物７を黄色がかかった油として得た。収率（９００ｍｇ、３６％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 7.75-7.73 (m, 4H), 7.45-7.37 (m, 6H), 5.11 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.74-4.71 (m, 0.5 H), 4.64-4.60 (m, 1.5 H), 4.03-3.97 (m, 1H), 3.42 (dd, J = 4.0 & 8.0 Hz, 1H), 3.32 (dd, J = 4.0 & 8.5 Hz, 1H), 2.50 (s, 1H), 1.14 (s, 9H), 1.12 (s, 9H), 1.08 (s, 9H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -188.98 (s, 1F);
MS (ESI) m/z: 514 [M+H]+
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
９−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチル）−Ｎ，Ｎ−ｄｉｂｏｃ−９Ｈ−プリン−６−アミン（９）：−１０℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１１５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、ＤＩＡＤ（８８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護アデニン（１１０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、この混合物を０℃で３０分間撹拌した。続いてＴＨＦ（１ｍＬ）中の化合物８（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン  １／２０〜１／１０）で精製して、化合物９を白色の泡状物質として得た。収率（９５ｍｇ、６０％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 8.92 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 5.98 (d, J = 28.5 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.92 (s, 0.5 H), 4.81-4.72 (m, 1.5 H), 4.34 (d, J = 14 Hz, 1H), 3.64-3.61 (m, 1H), 3.56-3.52 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 1.48 (s, 18H), 1.29 (s, 9H), 1.28 (s, 9H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -188.14 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 421 [M+H]+
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−３−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−フルオロ−５−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンシクロペンタノール（ＦＭＣＡ、１０）：化合物９（８０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸と水との混合物（５ｍＬ、３：２）に溶解し、混合物を６０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィ（メタノール／ＤＣＭ  ０．２／１０〜０．６／１０）によって精製して、化合物１０（２６ｍｇ、８０％）を白色固体として得た。mp 215-218 ℃; [α] 25D = +152.10° (c 0.5, MeOH); 1H-NMR [500 MHz, CD3OD]: δ 8.26 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 25.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.96 (dt, J = 2.5, 52.5 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.44 (dt, J = 3.0, 14.0 Hz, 1H), 3.81-3.91 (m, 2H), 2.81 (s, 1H); 19F NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ -192.93 (ddd, J = 14.0, 28.0, 及び 56.0 Hz, 1F); 13C{1 H} NMR [125 MHz, CD3OD]: δ 51.0, 57.5 (d, J = 17.4 Hz), 61.7, 72.9 (d, J = 23.6 Hz), 95.9 (d, J = 184.0 Hz), 111.7, 117.9, 141.1, (d, J = 5.3 Hz), 146.0, 149.9, 152.5, 156.0
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
９−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチル）−６−クロロ−Ｎ，Ｎ−ｄｉｂｏｃ−９Ｈ−プリン−２−アミン（９Ｇ）：−１０℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（８６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、ＤＩＡＤ（６７ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の２−Ｎ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護−６−Ｃｌ−プリン（１２１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、この混合物を０℃で３０分間撹拌した。続いてＴＨＦ（１ｍＬ）中の化合物８（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン  １／２０〜１／１０）で精製して、化合物９Ｇを白色の泡状物質として得た。収率（９５ｍｇ、６０％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 8.35 (s, 1H), 5.87 (d, J = 25 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.92 (s, 0.5 H), 4.88 (s, 1.5 H), 4.78 (s, 0.5 H) 4.34 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.64-3.62 (m, 1H), 3.57-3.54 (m, 1H), 2.84 (m, 1H), 1.48 (s, 18H), 1.28 (s, 18H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -187.12 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 627 [M+H]+
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
化合物７のＴＢＤＰＳ脱保護を、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）によって行った。化合物７を室温のＴＨＦ中のＴＢＡＦの２Ｍ溶液で処理して、化合物８を８７％の収率で得た。この合成に関して、化合物８は重要な中間体としての役割を果たした。これをＴＨＦ中のジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）及びトリフェニルホスフィン（ＴＰＰ）を用いて、光延結合条件下でＮ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護アデニンと縮合し、化合物９を７４％の収率で生成した（スキーム２）。化合物９のｔｅｒｔ−ブチル及びＢｏｃ保護基を、室温のＤＣＭ中の２モルのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いて除去し、標的化合物１０（ＦＭＣＡ）を８０％の収率で得た。ＦＭＣＡを化合物１１Ａと縮合することによって、ホスホロアミダイトプロドラッグ（ＦＭＣＡＰ）を合成した。化合物１１Ａは、反応物１１を生成するために、−７８℃のＤＣＭ中で塩化フェニルホスホリルとＬ−アラニンイソプロピルエステルとを反応させることによって供給された。このプロドラッグ形態を得るために、室温のＴＨＦ中のＮ−メチルイミダゾール（ＮＭＩ）の存在下においてＦＭＣＡを化合物１１Ａで処理し、標的化合物１２を６１％の収率で生成する。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８４】
｛［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−４−フルオロ−５−ヒドロキシ−２−メチレンシクロペンチル）メトキシ］（フェノキシホスホリルアミノ｝プロピオン酸イソプロピルエステル（１２）：ジクロロリン酸フェニル（１．０ｍｏｌ当量）及びＬ−アラニンイソプロピルエステル塩酸塩（１．０ｍｏｌ）を無水ジクロロメタン中に取り、−７８℃まで冷却した。トリエチルアミン（２．０ｍｏｌ）を−７８℃で滴下して添加し、１時間撹拌した。１時間後、反応混合物をゆっくりと室温まで温め、撹拌を２時間継続した。溶媒を減圧下で除去し、粗残渣を無水エーテル中に再懸濁し、窒素下でセライトベッドを通してろ過した。ろ液を濃縮して化合物１１Ａを得て、これを次のステップにそのまま使用した。０℃のアルゴン雰囲気下で、Ｎ−メチルイミダゾール、ＮＭＩ（０．９ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ中の化合物１０（０．５ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に添加した。クロロリン酸１１Ａ（２．２ｇ、７．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中に溶解して、滴下して添加した。反応混合物を室温まで温め、撹拌を一晩継続した。次に揮発性物質を減圧下で蒸発させ、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（２％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、化合物１２を灰色がかった白色の固体として得た。収率（０．５５ｇ、６１％）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ d 8.36 (s, 1H), 7.84 (d, J =  24.5 Hz, 1H), 7.28-7.10 (m, 5H), 5.88 (d, J = 30.0 Hz, 1H), 5.80 (bs, 2H), 5.18 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.96-4.76 (m, 3H), 4.39-4.34 (m, 2H), 4.17- 4.04 (m, 2H), 3.90-3.88 (m, 2H), 3.00 (bs, 1H), 1.31 (d, J =  6.5 Hz, 3H), 1.16 (dd, J = 6.0, & 14.0 Hz, 6H); 19F NMR (500 MHz, CDCl3) δ -192.81 (ddd, J = 17.5, 31.5 & 53.0 Hz, 1F); 31P NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 2.84, 2.37; 13C{1H} NMR [125 MHz, CDCl3]: δ 187.7, 173.3, 155.4, 153.1, 150.5, 144.5, 142.4, 140.9, 129.8, 125.2, 120.3, 118.7, 112.3, 95.9, 73.7, 50.5, 49.6, 21.6, 20.8; HRMS (EI) Calcd for (C24H31FN6O6P+H) + 549.2027, found 549.2026
【手続補正１７】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2019513718.tif 000049