(57)【要約】  安定した分離性能を有し、高い光学分割能力と十分な耐溶剤性を兼ね備えた光学異性体用分離剤を提供する。  シリカゲル等の担体に、セルロース、アミロース等の光学活性高分子化合物が化学結合により担持された、比表面積が10〜150ｍ2／gで、かつ平均粒径が1〜100μmである光学異性体用分離剤である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体に光学活性高分子化合物が担持された、比表面積が10〜150ｍ2／gで、かつ平均粒径が1〜100μmである光学異性体用分離剤。
【請求項２】
光学活性高分子化合物が多糖又は多糖誘導体である請求項１記載の光学異性体用分離剤。
【請求項３】
多糖がセルロース又はアミロースである請求項２記載の光学異性体用分離剤。
【請求項４】
比表面積が10〜100ｍ2／gである請求項１〜３のいずれかに記載の光学異性体用分離剤。
【請求項５】
担体と光学活性高分子化合物が、直接又は間接に化学結合されたものである請求項１〜４のいずれかに記載の光学異性体用分離剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載した分離剤を光学異性体の分離に用いる用途。
【請求項７】
請求項１記載した分離剤を光学異性体混合物に接触し、異性体を取り出すことを含む光学異性体を分離する方法。  
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は光学異性体用分離剤に関し、特に高速液体クロマトグラフィー（HPLC）に好適に用いられる光学異性体用分離剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、多糖類やその誘導体、例えばセルロースやアミロースのエステル又はカルバメート誘導体が高い光学分割能力を示すことはよく知られている。また、これらをシリカゲル上に物理的に吸着、担持させたクロマトグラフィー用分離剤が幅広い光学分割能、高い段数、耐久性を示す優れた分離剤であることもよく知られている（非特許文献１）。【０００３】
しかし、これらの分離剤は、多糖誘導体をシリカゲルに物理的な吸着によって担持させているため、多糖誘導体を溶解させる溶剤を移動相等に使用することができず、分離条件選択に制約があった。また、試料を溶解する溶剤にも制限があり、移動相として使用可能な溶剤に対して溶解性の小さい試料では、特にクロマト分取時において大きな短所があった。更に分離剤に強く吸着する汚染物質の洗浄においても、洗浄液が制限されるという欠点があった。これらの点から多糖誘導体を担持した分離剤で、耐溶剤性を兼ね備えた分離剤が求められていた。【０００４】
このような問題を解決するために、多糖誘導体を担体上で固定化させる方法がこれまでにも提案されている。【０００５】
例えば特許文献１においては、多糖類の水酸基部位にエステル結合又はウレタン結合を介してビニル基を導入した多糖誘導体を、ビニル基を導入した多孔質担体に対して直接共重合させた光学異性体用分離剤が開示されている。【０００６】
また、本発明者らにあっても、先に特許文献２において、イソシアネート誘導体を介して多糖誘導体をシリカゲルに化学的に結合させることにより両者の安定性を確保する技術を開示し、更に特許文献３において、セルロース誘導体を担持したシリカゲル上でスチレン、ジビニルベンゼンをラジカル共重合させ、網掛けをして固定化する方法を開示している。【０００７】
しかし、これらの製法においては、同じ方法で製造した分離剤であっても、得られた分離剤の性能がばらつくことが多く、この点で改善の余地がある。
【特許文献１】特開平4-202141号公報
【特許文献２】特公平7-30122号公報
【特許文献３】特開平11-171800号公報
【非特許文献１】Y.Okamoto,M.Kawashima and K.Hatada, J.Am.Chem.Soc.,106,5357,1984
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、安定した分離性能を有し、分離剤ごとのばらつきのない光学異性体用分離剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、課題の解決手段として、担体に光学活性高分子化合物が担持された、比表面積が10〜150ｍ2／gで、かつ平均粒径が1〜100μmである光学異性体用分離剤を提供するものである。
本発明は、上記分離剤を光学異性体の分離に用いる用途と上記分離剤を光学異性体混合物に接触し、異性体を取り出すことを含む光学異性体を分離する方法を提供する。  【００１０】
本発明の分離剤における比表面積はBET法により測定されるものである。本発明の分離剤では、分離剤の比表面積と担体の比表面積は一致しない。【００１１】
本発明の分離剤における平均粒径は、電気抵抗法（コールターカウンター法）により測定されるものである。分離剤の平均粒子径は、担体に光学活性高分子化合物が担持されたものであるから、分離剤の平均粒径と担体の平均粒径とは完全には一致しないが、実質的には（１μｍのオーダーでは）担体の粒子径と等しくなる。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の光学異性体用分離剤は、所定範囲の比表面積及び平均粒径に設定されているため、光学分割能力が高くかつ安定した分割能が発揮することができ、分離剤ごとのばらつきが殆どない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の光学異性体用分離剤に含まれる光学活性高分子化合物は、光学活性な置換基を有していないメタクリル酸エステル、メタクリル酸アミド、アクリル酸エステル、アクリル酸アミド、光学活性な置換基を有しているメタクリル酸エステル、メタクリル酸アミド、アクリル酸エステル、アクリル酸アミド、ポリスチレン、ポリアセチレン又はこれらの共重合体、多糖とその誘導体、ペプチド、蛋白質等を挙げることができるが、特に不斉識別能力を有することで知られているメタクリル酸エステル、アクリル酸アミド、多糖とその誘導体、蛋白質等が望ましい。【００１４】
これらの中でも、特に好適なものは多糖とその誘導体であり、合成多糖、天然多糖及び天然物変成多糖のいずれかを問わず、光学活性であればいかなるものでもよいが、好ましくは結合様式の規則性の高いものが望ましい。【００１５】
多糖とその誘導体としては、β−1,4−グルカン（セルロース）、α−1,4−グルカン（アミロース、アミロペクチン）、α−1,6−グルカン（デキストラン）、β−1,6−グルカン（ブスツラン）、β−1,3−グルカン（例えばカードラン、シゾフィラン等）、α−1,3−グルカン、β−1,2−グルカン(CrownGall 多糖)、β−1,4−ガラクタン、β−1,4−マンナン、α−1,6−マンナン、β−1,2−フラクタン（イヌリン）、β−2,6−フラクタン（レバン）、β−1,4−キシラン、β−1,3−キシラン、β−1,4−キトサン、α−1,4−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸等であり、アミロースを含有する澱粉も含まれる。これらの中でも、高純度の多糖を容易に入手できるセルロース、アミロース、β−1,4−キシラン、β−1,4−キトサン、キチン、β−1,4−マンナン、イヌリン、カードラン等が好ましく、特にセルロース、アミロースが好ましい。【００１６】
これらの多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノース又はフラノース環の平均数）は、好ましくは５以上、より好ましくは１０以上であり、特に上限はないが、500以下であることが取り扱いの容易さの点で望ましい。【００１７】
多糖誘導体としては、上記のような多糖の水酸基の一部に該水酸基と反応しうる官能基を有する化合物を、従来公知の方法でエステル結合又はウレタン結合させることにより誘導体化して得られる化合物を挙げることができる。ここでヒドロキシ基と反応しうる官能基を有する化合物としては、イソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル、酸ハライド、酸アミド、ハロゲン化物、エポキシ化合物、アルデヒド、アルコール又はその他脱離基を有する化合物であればいかなるものでもよく、これらの脂肪族、脂環族、芳香族、ヘテロ芳香族化合物を用いることができるが、それらの化合物の中でも特に、ハロゲン原子又は炭素数１〜３のアルキル基で置換されたフェニルイソシアナート化合物が好適に用いられる。【００１８】
多糖誘導体として特に好ましいものは、１単糖当たり０．１個以上のエステル結合又はウレタン結合を有する多糖のエステル又はカルバメート誘導体である。【００１９】
本発明の光学異性体用分離剤に含まれる担体としては、多孔質有機担体又は多孔質無機担体が挙げられ、好ましくは多孔質無機担体である。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアクリレート等からなる高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケイ酸塩、ヒドロキシアパタイトなどであり、特に好ましい担体はシリカゲルである。【００２０】
担体の平均粒径は、1μｍ〜100μｍ、好ましくは１μｍ〜70μｍであり、平均孔径は、好ましくは100Å〜1500Å、より好ましくは250Å〜800Åである。担体の表面は、残存シラノール基の影響を排除するために表面処理が施されていることが望ましいが、表面処理が施されていなくてもよい。担体の粒径は、光学異性体用分離剤の粒径と同一である。【００２１】
光学異性体用分離剤は、比表面積が10〜150ｍ2／g、好ましくは10〜100ｍ2／g、更に好ましくは20〜70ｍ2／gである。【００２２】
光学異性体用分離剤の比表面積と担体の比表面積は一致しておらず、光学異性体用分離剤の比表面積は、担体の比表面積が増減されたものになる。【００２３】
例えば上記の３段階の数値範囲の上限値で説明すれば、比表面積が150ｍ2／gを超える担体、100ｍ2／gを超える担体、又は70ｍ2／gを超える担体を用いた場合は、光学活性高分子化合物を担持させることで、それぞれの分離剤の比表面積を、150ｍ2／g以下、100ｍ2／g以下、又は70ｍ2／g以下に減少させることにより、分離性能を高めることができ、かつ安定させることができる。【００２４】
逆に、例えば上記の３段階の数値範囲の下限値で説明すれば、比表面積が10ｍ2／g未満の担体、又は20ｍ2／g未満の担体を用いた場合には、光学活性高分子化合物を担持させることで、それぞれの分離剤の比表面積を、10ｍ2／g以上、又は20ｍ2／g以上に増加させることにより、分離性能を高めることができ、かつ安定させることができる。【００２５】
本発明において担体に光学活性化合物を担持させる方法は物理吸着でもよいが、担体と光学活性化合物が化学結合していることが好ましい。【００２６】
光学活性高分子化合物を担体に化学結合させる方法は公知であり（例えば、特開昭６３−２７７１４９号公報、特開平４−２０２１４１号公報、特開２００２−１４８２４７号公報参照）、担体にスペーサーを介して光学活性高分子化合物を化学結合させる方法（間接結合）、担体に光学活性高分子化合物を直接化学結合させる方法、担体及び／又は光学活性化合物に重合性官能基を導入して、担体と光学活性高分子化合物を重合させる方法等を挙げることができる。【００２７】
担体又はスペーサに光学活性高分子化合物を化学結合させる結合様式としては、アミド結合、ウレタン結合、エステル結合、及びビニル結合等の重合基による重合での共有結合を挙げることができる。【００２８】
担体にスペーサーを介して光学活性高分子化合物を担持させる方法としては、  （I）アミノ基、一置換アミノ基、水酸基またはメルカプト基を有する担体、又はこのような活性水素を有さない担体の場合には、アミノ基、一置換アミノ基、水酸基若しくはメルカプト基を含有する処理剤による処理を施した後の担体に、多官能のイソシアネート誘導体や酸クロライド誘導体等の多官能の反応性誘導体を反応させ、次いで同じくアミノ基、一置換アミノ基、水酸基又はメルカプト基等の活性水素を有する光学活性高分子化合物を反応させる方法、
（II）上記方法（I）とは逆に、前記多官能の反応性誘導体を先ず光学活性高分子化合物と反応させ、次いで担体と反応させる方法を挙げることができる。【００２９】
担体に直接光学活性高分子化合物を化学結合させる方法は、スペーサーを使用せずに、光学活性高分子化合物が有する官能基を直接担体に結合させる方法であり、例えば、重合性官能基を導入した光学活性高分子化合物を担体に担持させた後、重合させる方法、光学活性高分子化合物を担体に担持させた後、ＵＶやγ線等で重合させる方法を適用できる。  例えば、JP-A 8-59702、JP-A 11-171800、 JP-A 2004-167343、JP-A 11-510193 を参照できる。  【００３０】
本発明の所定の比表面積及び平均粒子径を有する光学異性体用分離剤は、平均粒径が1μｍ〜100μｍ（好ましくは１μｍ〜70μｍ）で、比表面積が10〜150ｍ2／g（好ましくは10〜100ｍ2／g、更に好ましくは20〜70ｍ2／g）である担体（但し、比表面積は前記範囲外でもよい。望ましくは、平均孔径が、好ましくは100Å〜1500Å 、より好ましくは250Å〜800Åのもの）を用い、実施例に記載した分離剤中の担持量（即ち、分離剤中の光学活性高分子化合物率）は１５〜２３％の範囲に入るように、担体と光学活性高分子化合物を結合させる方法を適用して製造することができる。分離剤中の糖結合比率を調整する方法としては、所定量の光学活性高分子化合物（糖）を分割し、溶媒中、１回又は複数回に分けて担体と接触させる方法を適用できる。【００３１】
本発明の光学異性体用分離剤は、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー用の分離剤として有用であるが、特に液体クロマトグラフィー用の分離剤、更に好ましくは擬似移動床式クロマトグラフィー用の充填剤として用いることが好ましい。
【実施例】
【００３２】
本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【００３３】
合成例１〜７で得られた分離剤の比表面積の測定方法、
比表面積の測定法；ＢＥＴ多点法
測定装置：高速比表面積・細孔径分布測定装置NOVA-1200（ユアサアイオニクス（株）製）
前処理条件：試料を測定セルに入れ、６０℃（真空下）で１０分間脱気した。
吸着ガス：窒素ガス
セルサイズ：スモールペレットセル1.80ｃｍ3（ステム外径９ｍｍ）
測定項目：０．１、０．２、０．３の吸着側３点
解析項目：ＢＥＴ１点、ＢＥＴ多点、ラングミュアーによる比表面積
測定回数：試料を替えて３回測定した。表示した比表面積は３回測定の平均値である。【００３４】
合成例８〜１７で得られた分離剤の比表面積の測定方法、
比表面積の測定法：BET一点法
測定装置：BET比表面積測定装置  Macsorb(HM model-1201)  （株）マウンテック製
前処理条件：試料を測定セルに入れ、標準ガス条件下(N2 30％、He７０％）にて、７５℃で１５分間脱気した。
測定原理：流動法(BET一点法)
吸着ガス：窒素ガス【００３５】
合成例１（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積25m2／g）10ｇとアミロース1.5ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００３６】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 6.8ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ34.7m2／gであった。【００３７】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００３８】
合成例２（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積34m2／g）10ｇとアミロース1.4ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００３９】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 6.2ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ44.7m2／gであった。【００４０】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００４１】
合成例３（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積50m2／g）10ｇとアミロース1.0ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００４２】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 7.2ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ48.1m2／gであった。【００４３】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００４４】
合成例４（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積30m2／g）10ｇとアミロース1.0ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００４５】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 6.8ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ64.0m2／gであった。【００４６】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００４７】
合成例５（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積101m2／g）10ｇとアミロース1.0ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００４８】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 6.8ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ82.6m2／gであった。【００４９】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００５０】
合成例６（比表面積が10〜150ｍ2／gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径5μｍ、比表面積100m2／g）10ｇとアミロース0.8ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００５１】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.3ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 8.2ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ128m2／gであった。【００５２】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００５３】
合成例７（比表面積が150ｍ2／gを超える分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径５μｍ、比表面積270m2／g）10ｇとアミロース0.7ｇをDMSO 38mLに70℃下で分散させ、ボランピリジン錯体250μL、酢酸190μLを添加し、窒素雰囲気下20時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMSO、メタノールで洗浄後、真空乾燥して糖結合シリカゲルを得た。【００５４】
得られた糖結合シリカゲルに、4−ジメチルアミノピリジン0.6ｇを加え、DMAC 30mLに分散し、3,5−ジメチルフェニルイソシアナート 10.9ｇを加え、窒素雰囲気下75℃で48時間撹拌した。撹拌混合物をグラスフィルターでろ別し、残渣をDMAC、メタノールで洗浄後、真空乾燥して光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法で比表面積測定したところ200m2／gであった。【００５５】
得られた分離剤を長さ15cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００５６】
実施例１〜６
合成例１〜６で得られた分離用カラムを用い、液体クロマトグラフィーにより、ヘキソバルビタールとベンゾインエチルエーテルの光学分離を行った。【００５７】
ヘキソバルビタールの分析条件は、移動相：ヘキサン(H)／THF＝70／30、流速：1.0mL／分、温度：25℃、検出：254nmで行った。ベンゾインエチルエーテルの分析条件は、移動相：ヘキサン(H)／酢酸エチル(EA)＝80／20、流速：1.0mL／分、温度：25℃、検出：254nmで行った。尚、表中の分離係数(α)は以下の式より求めた。【００５８】
分離係数(α)＝k1'／k2'
但し、k1'及びk2'はk1'＝(t1−t0)／t0、k2'＝(t2−t0)／t0を表し、このt1およびt2は各光学異性体の溶出時間を示し、t0はトリ−tert−ブチルベンゼンの溶出時間を示す。結果を表１に示した。【００５９】
比較例１
合成例７で得られた分離用カラムを用い、実施例１と同様の方法でヘキソバルビタールとベンゾインエチルエーテルの光学分離を行った。結果を表１に示した。【００６０】
【表１】
2005085835.tif 000002
【００６１】
合成例８（比表面積が10〜150m2/gの範囲内の分離剤の合成）
既知の方法で製造したセルローストリス（３,５-ジメチルフェニルカルバメート）を、末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積18m2/g）に物理吸着にて担持させた充填剤(ポリマー担持率：20重量％)10gを、水/アセトニトリル混合溶媒500mlに懸濁して撹拌した。懸濁液を特表平11-510193号に記載されている方法で45分間UV照射した後、固体を濾取、ポリマーの良溶媒であるテトラヒドロフランで過熱還流洗浄を4回繰り返し、さらにメタノールで洗浄して、未反応ポリマーを取り除き、目的の光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「５４m2/g」であった。  得られた分離剤を長さ25cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００６２】
合成例９（比表面積が10〜150m2/gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積42m2/g）を用いた以外は、合成例８と同様の方法にて光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「８２m2/g」であった。  得られた分離剤を長さ25cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００６３】
合成例１０（比表面積が10〜150m2/gの範囲内の分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積85m2/g）を用いた以外は、合成例８と同様の方法にて光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「１２７m2/g」であった。  得られた分離剤を長さ25cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００６４】
合成例１１（比表面積が150m2/gを超える分離剤の合成）
末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積259m2/g）を用いた以外は、合成例８と同様の方法にて光学異性体用分離剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「２６６m2/g」であった。  得られた分離剤を長さ25cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００６５】
実施例７〜９
合成例８〜１０で得られた分離用カラムを用い、液体クロマトグラフィーにより、トランススチルベンオキシドとトリフルオロアンスリルエタノールとベンゾインの光学分離を行った。
移動相：ヘキサン/2-プロパノール＝9/1、流速：1.0ml/分、温度：25℃、検出：254nmの分析条件で、すべてのサンプルを分析した。【００６６】
比較例２
合成例１１で得られた分離用カラムを用い、実施例７〜９と同様の方法で、トランススチルベンオキシドとトリフルオロアンスリルエタノールとベンゾインの光学分離を行った。  結果を表２に示した。【００６７】
【表２】
2005085835.tif 000003
【００６８】
合成例１２  (比表面積が10〜150m2/gの範囲内の分離剤の合成)
既知の方法で製造したセルローストリス（3,5-ジメチルフェニルカルバメート）を、末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積20m2/g）に物理吸着にて担持させた充填剤(ポリマー担持率：20重量％)10gにスチレン、ジビニルベンゼン及びラジカル発生剤であるアゾビスイソブチロニトリル(AIBN)の混合物（合計量630mg）を均一に振り掛けた。その後、ゆっくりと攪拌しながら80℃以上の温度で3日間の加熱を行った。【００６９】
フラスコにアセトン、100mlを加え、室温下、30分の攪拌後、固体を濾取し、これを3回繰り返した。最後にMeOH、100mlを加え１回の洗浄を行うことで目的の光学異性体用分離剤を得た(担持量=22.4%)。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「56 m2/g」であった。  得られた分離剤を長さ25cmL、内径0.46cmのステンレス製カラムにスラリー充填法により充填し分離用カラムを得た。【００７０】
合成例１３  (比表面積が10〜150m2/gの範囲内の分離剤の合成)
既知の方法で製造したセルローストリス（3,5-ジメチルフェニルカルバメート）を、末端にアミノ基を有するシラン処理剤で表面処理されたシリカゲル（平均粒径20μm、比表面積20m2/g）に物理吸着にて担持させた充填剤(ポリマー担持率：20重量％)10gにスチレン、ジビニルベンゼン及びラジカル発生剤であるアゾビスイソブチロニトリル(AIBN)の混合物（合計量630mg）を均一に振り掛けた。
100mlの純水に界面活性剤(ポリオキシエチレン(20)ソルビタンラウリウレート)を10滴加えた水溶液に上記固体を分散させ、その後、ゆっくりと攪拌しながら80℃以上の温度で3日間の加熱を行った後、固体を濾取した。得られた固体をフラスコに戻し、アセトン、100mlを加え、室温下、30分の攪拌後、固体を濾取し、これを3回繰り返した。最後にMeOH、100mlを加え１回の洗浄を行うことで目的の光学異性体用分離剤を得た(担持量=18.6%)。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「56 m2/g」であった。【００７１】
実施例１０〜１１
合成例１２〜１３で得られた分離用カラムを用い、液体クロマトグラフィーにより、トランススチルベンオキシドとトリフルオロアンスリルエタノールとベンゾインの光学分離を行った。  
移動相：ヘキサン/2-プロパノール＝9/1、流速：1.0ml/分、温度：25℃、検出：254nmの分析条件で、すべてのサンプルを分析した。結果を表３に示した。【００７２】
合成例１４
窒素雰囲気下、公知の方法によって合成したグルコース単位で約０．９から１．０個のトリチル基が反応したトリチルセルロース４．０ｇを乾燥ピリジンに溶かし、４−メチルフェニルイソシアネート１０ｍｌを加えて１００℃で２５時間加熱攪拌した。これをメタノール７００ｍｌに注ぎ込み、析出した固体を濾取、エタノールで洗浄、乾燥後、濃塩酸入りメタノール（セルロース誘導体１．０ｇにつき、０．２５ｍｌ濃塩酸と４０ｍｌメタノール）中で攪拌し、トリチル基を除去した。脱トリチル化されたセルロース誘導体を濾取し、エタノール洗浄、乾燥し、セルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）を得た。【００７３】
上記セルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）をTHFに溶解し、これを不活性シリカゲル（平均粒径7μm、比表面積28 m2/g）に均一に降りかけ、塗布した。溶剤を留去した後、メタノール洗浄し、セルロース誘導体が担持されたシリカゲルを得た（ポリマー担持量、２０％）。【００７４】
上記のセルロース誘導体が担持されたシリカゲル１５ｇへ、乾燥トルエン７０ｍｌを加え、さらにトルエン−２，４−ジイシシアネート１２５ｍｇ、乾燥ピリジン１０ｍｌ懸濁液を加えて、１１０℃で５時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行いセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲルへの固定化された充填剤を得た。これに乾燥トルエン５０ｍｌ、乾燥ピリジン５０ｍｌを加え、さらに４−メチルフェニルイソシアネート１．０ｍｌを加えて、１１０℃で１８時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行い、その結果セルロース トリス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲル上に固定化された充填剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「69 m2/g」であった。【００７５】
合成例１５
合成例１４で得たセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）をTHFに溶解し、これを不活性シリカゲル（平均粒径7μm、比表面積2328 m2/g）に均一に降りかけ、塗布した。溶剤を留去した後、メタノール洗浄し、セルロース誘導体が担持されたシリカゲルを得た（ポリマー担持量、２０％）。  【００７６】
上記のセルロース誘導体が担持されたシリカゲル１５ｇへ、乾燥トルエン７０ｍｌを加え、さらにヘキサメチレンジイソアイアネート１２５ｍｇ、乾燥ピリジン１０ｍｌ懸濁液を加えて、１１０℃で５時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行いセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲルへの固定化された充填剤を得た。これに乾燥トルエン５０ｍｌ、乾燥ピリジン５０ｍｌを加え、さらに４−メチルフェニルイソシアネート１．０ｍｌを加えて、１１０℃で１８時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行い、その結果セルロース トリス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲル上に固定化された充填剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「67 m2/g」であった。【００７７】
合成例１６
合成例１４で得たセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）をTHFに溶解し、これを不活性シリカゲル（平均粒径7μm、比表面積28 m2/g）に均一に降りかけ、塗布した。溶剤を留去した後、メタノール洗浄し、セルロース誘導体が担持されたシリカゲルを得た（ポリマー担持量、２０％）。【００７８】
上記のセルロース誘導体が担持されたシリカゲル１５ｇへ、乾燥トルエン７０ｍｌを加え、さらにジフェニルメタンジイソシアネート１２５ｍｇ、乾燥ピリジン１０ｍｌ懸濁液を加えて、１１０℃で５時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行いセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲルへの固定化された充填剤を得た。これに乾燥トルエン５０ｍｌ、乾燥ピリジン５０ｍｌを加え、さらに４−メチルフェニルイソシアネート１．０ｍｌを加えて、１１０℃で１８時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行い、その結果セルロース トリス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲル上に固定化された充填剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「65 m2/g」であった。【００７９】
合成例１７
合成例１４で得たセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）をTHFに溶解し、これを合成例pppで用いた不活性シリカゲル（平均粒径7μm、比表面積23 m2/g）に均一に降りかけ、塗布した。溶剤を留去した後、メタノール洗浄し、セルロース誘導体が担持されたシリカゲルを得た（ポリマー担持量、２０％）。  【００８０】
上記のセルロース誘導体が担持されたシリカゲル１５ｇへ、乾燥トルエン７０ｍｌを加え、さらにジフェニルメタンジイソシアネート６０ｍｇ、乾燥ピリジン１０ｍｌ懸濁液を加えて、１１０℃で５時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行いセルロース −６−ヒドロキシ−２，３−ビス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲルへの固定化された充填剤を得た。これに乾燥トルエン５０ｍｌ、乾燥ピリジン５０ｍｌを加え、さらに４−メチルフェニルイソシアネート１．０ｍｌを加えて、１１０℃で１８時間加熱攪拌した。反応終了後、濾取し、THF、メタノールで順次洗浄した後、真空乾燥を行い、その結果セルロース トリス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲル上に固定化された充填剤を得た。この分離剤をBET法(1点法)で比表面積測定したところ「63 m2/g」であった。【００８１】
実施例１２〜１５
合成例１４〜１７で得られた分離用カラムを用い、液体クロマトグラフィーにより、トリフルオロアンスリルエタノール、ナフチルエチルアルコール、コバルトトリスアセチルアセトナート光学分離を行った。結果を表３に示した。
移動相：ヘキサン/2-プロパノール＝9/1、流速：1.0ml/分、温度：25℃、検出：254nmの分析条件で、すべてのサンプルを分析した。【００８２】
【表３】
2005085835.tif 000004
【国際調査報告】
2005085835.tif 000005
2005085835.tif 000006