(57)【要約】  力センサーを用いて、アミロイド蛋白質の凝集の過程を張力及び／又は弾性の変化としてリアルタイムに検出測定するための手段を提供するために検討を行ったところ、本発明により、メカノケミカル式センサーを用いて蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法が提供された。更に本発明により、当該方法を用いてアミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法、ならびにアミロイド関連疾患の治療薬または診断薬をスクリーニングする方法が提供された。本発明の方法は、新規なアミロイド病の治療薬・診断薬を得る目的に資するものであると考えられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法。
【請求項２】
前記力センサーが、メカノケミカル式センサーである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質が、アミロイドβ蛋白質、免疫グロブリン軽鎖蛋白質、アミロイドA蛋白質、トランスサイレチン蛋白質、リソザイム、BriL蛋白質、シスタチンC蛋白質、スクレイピー蛋白質、β2ミクログロブリン、アポリポプロテインA1、ゲルゾリン、ランゲルハンス島アミロイド蛋白質、フィブリノーゲン、プロラクチン、インシュリン、カルシトニン、心房性ナトリウムペプチド、α−シヌクリン、プリオン蛋白質、ハンチンチン蛋白質、スーパーオキサイドジスムターゼ、α1−アンチキモトリプシン及びタウ蛋白質からなる群から選択された蛋白質である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質がアミロイドβ蛋白質である、請求項３記載の方法。
【請求項５】
アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、アミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法。
【請求項６】
前記力センサーが、メカノケミカル式センサーである、請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質が、アミロイドβ蛋白質、免疫グロブリン軽鎖蛋白質、アミロイドA蛋白質、トランスサイレチン蛋白質、リソザイム、BriL蛋白質、シスタチンC蛋白質、スクレイピー蛋白質、β2ミクログロブリン、アポリポプロテインA1、ゲルゾリン、ランゲルハンス島アミロイド蛋白質、フィブリノーゲン、プロラクチン、インシュリン、カルシトニン、心房性ナトリウムペプチド、α−シヌクリン、プリオン蛋白質、ハンチンチン蛋白質、スーパーオキサイドジスムターゼ、α1−アンチキモトリプシン及びタウ蛋白質からなる群から選択された蛋白質である、請求項５記載の方法。
【請求項８】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質がアミロイドβ蛋白質である、請求項７記載の方法。
【請求項９】
アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、アミロイド関連疾患の治療薬又は診断薬を探索する方法。
【請求項１０】
前記力センサーが、メカノケミカル式センサーである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質が、アミロイドβ蛋白質、免疫グロブリン軽鎖蛋白質、アミロイドA蛋白質、トランスサイレチン蛋白質、リソザイム、BriL蛋白質、シスタチンC蛋白質、スクレイピー蛋白質、β2ミクログロブリン、アポリポプロテインA1、ゲルゾリン、ランゲルハンス島アミロイド蛋白質、フィブリノーゲン、プロラクチン、インシュリン、カルシトニン、心房性ナトリウムペプチド、α−シヌクリン、プリオン蛋白質、ハンチンチン蛋白質、スーパーオキサイドジスムターゼ、α1−アンチキモトリプシン及びタウ蛋白質からなる群から選択された蛋白質である、請求項９記載の方法。
【請求項１２】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質がアミロイドβ蛋白質である、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質からなる試料膜。
【請求項１４】
前記アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質がアミロイドβ蛋白質である、請求項１３記載の試料膜。
【請求項１５】
静電噴霧法によりアミロイドβ蛋白質を堆積させることにより形成された、請求項１４記載の試料膜。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メカノケミカル式センサーを用いて蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法に関する。更に本発明は、メカノケミカル式センサーを用いて蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出することにより、アミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法、ならびにアミロイド関連疾患の治療薬または診断薬を探索する方法に関する。
背景技術【０００２】
アルツハイマー病や免疫細胞性アミロイドーシス、反応性アミロイドーシス、家族性アミロイドーシスなどを含むアミロイド関連疾患は、蛋白質の誤った折りたたみ構造に起因する疾患である。アルツハイマー病の進行を一時的に遅らせる薬剤はあるが、これらのアミロイド関連の疾患は難治性であることが多い。現在ヒトにおいて、約20の蛋白質が誤った折りたたみ構造からアミロイド線維を形成することが知られているが、それらの約20の蛋白質は互いに相同性を有しない蛋白質である。【０００３】
上記の構造を有するアミロイドは繊維状蛋白質であり、アミロイド繊維はある病的な条件下で血管や他の組織に枕積することにより機能障害を引き起こす。アミロイド繊維は、数千の非共有結合で結合した蛋白質あるいはペプチドから構成される、層状のβシート構造を有している。このアミロイド性の構造変化を阻害することで、アミロイド蛋白質の不安定性を増加することにより、疾患を抑制することができる可能性が示唆されている（P. Hammarstromら、Science, 2001, 293, 2459）。以上のように、アミロイド蛋白質の構造変化を検出することは重要であり、アミロイド性の構造変化を抑制する化合物を探索することによりアミロイド関連疾患の治療薬が見つかる可能性がある。【０００４】
アミロイド蛋白質の凝集の活性評価およびスクリーニングは、従来から濁度の測定（J. Jarrettら、Biochemistry, 1993, 32, 4693）、チオフラビンT結合部位の測定（H. Naikiら、Lab. Invest., 1991, 65, 104、H. LeVine, Protein Sci., 1993, 2, 404）、コンゴレッド染色（E. M. Castanoら、Biochem. Biophys. Res. Commun., 1986, 141, 782）、蛍光法（T.H.J. Huang ら、J. Mol. Biol., 1997, 269, 214）、ラマンスペクトルによる散乱光の測定（T. Miuraら、Biochemistry, 2000, 39, 7024）、NMRあるいは電子顕微鏡での観察法（X. Wuら、第224回ACS National meeting and Exposition, 2002、C. Sotoら、J. Biol.Chem., 1995, 270, 3063）などの手段により行われてきた。【０００５】
これらの方法においては、通常数時間から一週間ほどかけて蛋白質の凝集を作製して検出しているので、評価に時間がかかるという問題がある。従って、短時間でアミロイド蛋白質の凝集を検出できるセンサーを用いれば、活性を効率的に評価することができる。【０００６】
またこれらの方法は、凝集した結果を観察および測定するという手法であるために、凝集の過程を、張力及び／又は弾性の変化を指標として力センサーなどを用いてリアルタイムに測定可能な手段はない。
【発明の開示】
【０００７】
そこで本発明の課題は、力センサーを用いて、アミロイド蛋白質の凝集の過程を張力及び／又は弾性の変化としてリアルタイムに検出測定するための手段を提供することである。それによってアミロイド蛋白質の凝集に伴う構造変化を、簡便かつ短時間で検出することが可能となる。
【０００８】
本発明者らは、アミロイド蛋白質からなる試料膜に披検物質を添加したときに生じるアミロイド性の構造変化を、試料膜の張力及び／又は弾性変化により検出できることを見出すことにより本発明を完成するに至った。本発明の方法は、多数の物質の中から、効率よくアミロイド蛋白質の構造変化に影響を与える活性をもつ物質を探索するのに有効であると考えられる。
【０００９】
よって本発明は、アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法を提供するものである。
【００１０】
更に本発明は、アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、アミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法を提供するものである。
【００１１】
更に本発明は、アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質、前記蛋白質の断片、前記蛋白質の変異体、タグ化した前記蛋白質、又は前記蛋白質に対する抗体蛋白質よりなる試料膜を基板上に形成し、当該試料膜を有する当該基板を力センサーに配置し、披検サンプルを当該試料膜に作用させた際の当該試料膜の張力及び／又は弾性の変化を当該力センサーにより検出することからなる、アミロイド関連疾患の治療薬又は診断薬を探索する方法を提供するものである。
【００１２】
本発明により、メカノケミカル式センサーを用いて蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法、当該方法を用いてアミロイド関連疾患の治療薬または診断薬をスクリーニングする方法、ならびにアミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法が提供された。本発明の方法は、新規なアミロイド病の治療薬・診断薬を得る目的に資するものであると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、アミロイドβ（1−42）の張力及び弾性変化に対するZnCl2およびEDTAの効果を示した図である。
【図２】図２は、アミロイドβ（1−42）の張力及び弾性変化に対するZnCl2の濃度依存性を示した図である。
【図３】図３は、アミロイドβ（1−42）の張力及び弾性変化に対するCuCl2およびEDTAの効果を示した図である。
【図４】図４は、α-シヌクレインの張力および弾性変化に対するZnCl2の濃度依存性を示した図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
従来はアミロイド蛋白質の凝集を作成することによりアミロイド蛋白質の凝集活性を検出していたが、従来の方法は手間と時間を多く必要とするものであった。本発明は力センサーを使用することにより、簡便かつリアルタイムにアミロイド蛋白質の構造変化を検出することを可能としたものである。【００１５】
本願明細書において、「アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質」とは、特異な層状のβシート構造からなるアミロイド繊維を形成するような構造変化起こす蛋白質を意味するものであり、かかる蛋白質はアミロイド関連疾患の原因となる。アミロイド性の構造変化を起こすことが知られている蛋白質の例として、これらに限定するものではないが、アミロイドβ蛋白質、免疫グロブリン軽鎖蛋白質、アミロイドA蛋白質、トランスサイレチン蛋白質、リソザイム、BriL蛋白質、シスタチンC蛋白質、スクレイピー蛋白質、β2ミクログロブリン、アポリポプロテインA1、ゲルゾリン、ランゲルハンス島アミロイド蛋白質、フィブリノーゲン、プロラクチン、インシュリン、カルシトニン、心房性ナトリウムペプチド、α−シヌクリン、プリオン蛋白質、ハンチンチン蛋白質、スーパーオキサイドジスムターゼ、α1−アンチキモトリプシ及びタウ蛋白質などを挙げることができる。この中でもアミロイドβ蛋白質は、アミロイド性の構造変化を起こす代表的な蛋白質として良く知られている。【００１６】
そしてかかる蛋白質のアミロイド性の構造変化を、該蛋白質からなる試料膜の機械的特性の変化により検出する点に本発明の最も顕著な特徴がある。本発明において試料膜の機械的特性の変化を、張力のみ、弾力のみあるいは張力と弾力の両者を指標として測定する態様が可能であるが、本発明は上記の特定の態様に限定されるものではない。【００１７】
本発明においてはまず、アミロイド性の構造変化を起こす蛋白質からなる試料膜を基板上に形成する。形成される試料膜の大きさは、好ましくは、縦は50μmから1000μm、横は200μmから2000μm、厚さは0.3μmから10μmの範囲内であるが、その範囲内に特に限定されるものではない。また本発明における基板とは、その上に試料膜が作製されることによって試料膜を測定装置に移動することを可能とする適切な膜の支持体であり、該基板の材料や大きさは特に限定されるものではない。【００１８】
なおアミロイド性の構造変化を起こす蛋白質のみならず、該蛋白質の断片や変異体蛋白質も、アミロイド性の構造変化を起こす活性を維持している限り使用することができる。また検出の便宜のために該蛋白質はタグを付した物でも良い。更に該蛋白質に対する抗体蛋白質から膜を形成しても良く、形成した抗体蛋白質からなる膜に該蛋白質を結合させたものを用いても、同様の効果を得ることができる。【００１９】
かかる蛋白質の試料膜を作製する方法としては、エレクトロスプレー（静電噴霧）により試料を堆積させて薄膜を形成させるESD法や、溶液を乾燥させることにより膜を形成させる乾燥法などを挙げることができる。かかる技術は当業者にとって周知のものであり、適宜改変して本発明の目的に使用することができる。そのような技術を開示した文献の一例として、特表２００２−５１１７９２号公報に記載されている、巨大生体分子を含む不揮発性物質の堆積物を、静電噴霧によって製造する方法を挙げることができる。【００２０】
また特開２００３−１３６００５号公報には、生体高分子などの活性を保持したまま固定して薄膜やスポットを作製するための装置が記載されている。更に特表２００２−５０３３３２号公報には、プロテインやＤＮＡと結合するリガンドを測定するための方法及び装置が記載されている。特表２００２−５０３３３２号公報に記載されている装置によると、生体高分子などから構成された試料膜に対する化学物質の作用を機械化学的（メカノケミカル的）に測定することが可能である。よって、特表２００２−５０３３３２号公報に記載されている装置により、試料膜の張力及び／又は弾性の変化を検出することは、本発明において好ましい態様である。【００２１】
なお、蛋白質とリガンドの相互作用を測定するために、蛋白質膜の弾力特性を測定するメカノケミカル的な方法は、V.N,Morozov and T Ya Morozova (1992) Anal.Biochem., 201:68-79及びV.N,Morozov and T Ya Morozova (1984) FEBS Letters, 175:299-302に記載されており、当業者はこれらの文献の記載を参考にして適宜改変を行い、本発明を実施することができる。【００２２】
また上記基板と試料膜との間に水溶性ポリマーからなる中間層を設けることは本発明において好ましい態様である。下記の実施例においては1.2%ポリビニルピロリドン（PVP）をこのような中間層として用いている。かかる中間層を設けることにより、基板から試料膜を取り外すことが容易となる。中間層としてPVPを用いる場合には、PVPの濃度は0.1％から5%、好ましくは0.3％から2%の範囲内であるが、PVPの濃度は特に限定されるものではない。また、他の水溶性ポリマーを使用することも可能である。【００２３】
なおこの中間層として使用することができる材料の例として、特表２００２−５０３３３２号公報に記載されているように、（１）ポリアクリルアミド又はポリエチレングリコールのような水溶性のポリマーの層、（２）メルカプトエタノールにより還元される二硫化物のボンドを有するポリマーから成る層、（３）堆積される生物学的分子に対する接着性が低く、炭素を相当に分散させた層、および（４）低融点のカーボンポリマーの導電性の組成の層、を挙げることができる。【００２４】
その後上記試料膜を構成する蛋白質を架橋することにより該蛋白質を固定化することができ、かかる架橋を行うことは試料膜の膜としての形態や強度を保つ目的においても有効である。生物学的分子を重合するために利用できる架橋試薬は当業者に良く知られており、例えば、Hermanson et al., Immobilized Affinity Ligand Techniques Academic Press, New York, 1991を参照することができる。【００２５】
蛋白質を架橋するために使用する試薬としては、下記の実施例で使用しているグルタルアルデヒドは最も好適である。その他に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ）ピロピルカルボジイミド（EDC）などのゼロ長架橋試薬、ジメチルアジピンイミデート（DMA）などのホモ二価性架橋試薬、スクシンイミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（SPDP）などのヘテロ二価性架橋試薬、４-アジド−２−ニトロフェニルビオシチン-4-ニトロフェニルエステルなどの三価性架橋試薬を挙げることができるが、それらに限定されるものではない。また架橋反応を行う時間も特に限定されるものではなく、下記の実施例のグルタルアルデヒドの架橋時間は５分間であるが、０から３時間程度の範囲内で最適の条件を適宜選択することができる。【００２６】
その様にして作製した試料膜を、例えば特表２００２−５０３３３２号公報記載の検出装置に配置し、適切な緩衝液中に浸すことにより、試料膜に披験サンプルを作用させる準備を行う。ここで使用する緩衝液としては、本技術分野で一般的に使用されているHepes緩衝液やTris緩衝液などを使用することができるが、それらに限定されるものではない。緩衝液のpHも特に限定されるものではなく、pH3からpH9程度の範囲内で適切なpHを適宜選択することができる。【００２７】
また上記緩衝液は適切な塩強度を有することも可能であり、下記の実施例のように0.15M程度の塩化ナトリウムを緩衝液に添加することは本発明において好ましい態様である。しかし塩強度を与えるための電解質を添加しないで測定を行うことも可能であると考えられ、かかる態様も本発明の範囲内である。また添加する電解質も塩化ナトリウムに限定されるものではない。【００２８】
上記の緩衝液を一定流速で流して試料膜の張力を安定化させた後に、試験を行う対象である披験サンプルを含む緩衝液に置換して試料膜に作用させる。披験サンプル添加前と後における試料膜の張力及び／又は弾性変化を力センサーにより測定し、アミロイド蛋白質の構造変化への影響を評価する。張力及び／又は弾性の変化は力センサーにより、好ましくはメカノケミカル式センサーにより測定することが可能である。なおメカノケミカル式センサーによる測定を、特表２００２−５０３３３２号公報に記載されている装置を用いて行うことは、本発明において特に好ましい態様である。【００２９】
なお蛋白質のアミロイド性の構造変化に対する影響を検討するための披験サンプルとして、種々の物質を採用することができる。その様な披験サンプルとなる物質の例として、蛋白質、ペプチド、アミノ酸、糖、脂質、核酸、金属及び有機化合物などを挙げることができるが、それらに特に限定されるものではない。【００３０】
本発明の方法により、アミロイド蛋白質の張力及び／又は弾性変化を、速やかに且つリアルタイムで検出することができる。よって、多くのサンプルにおけるアミロイド性の構造変化を効率的に評価できるために、アミロイド性の構造変化を阻害する物質の探索に費やす時間を大幅に短縮することができ、容易に多数の物質の中からかかる活性を有する物質を選別することができる。またアミロイド性の構造変化を阻害する物質は、アミロイド病に対する治療薬又は診断薬の良い候補と成り得る。具体的には、アミロイド性の構造変化を阻害する物質が得られたならば、更に安全性の検討などを行い、新規なアミロイド病に対する治療薬を開発することが可能であると考えられる。
実施例【００３１】
下記の実施例や図面を用いて本発明を更に詳しく説明するが、その記載は本発明の範囲を何ら限定するものではない。【００３２】
実施例１: アミロイドβの張力及び弾性変化に対するZnCl2の効果
アミロイドβ（1−42）（Bachem AG, Bubendorf, Switzerland）を0.1%アンモニア水に1 mg/mLの濃度で溶解し、その溶液を特表2002-511792号公報に記載された静電噴霧を行う装置、あるいは特開2003-136005号公報に記載された固定化装置を用いて乾燥空気中で噴霧し、縦400μm横800μmの孔をもつマスクを透過させ、静電噴霧法（ESD法）により厚さ1μmの膜を1.2％ポリビニルピロリドン上に作成し、グルタルアルデヒドで蛋白質の架橋を行った。【００３３】
この膜を、メカノケミカル式センサーを有する特表2002-503332号公報あるいは米国特許US6033913号公報に記載されている装置上に配置し、0.15 M NaClを含む10 mM Hepes pH7.4緩衝液（以下、緩衝液と略す）中に浸した。緩衝液を、検出装置上に存在する膜上に0.1から0.2 mL/minの流速で流し、張力を安定させた。その後、同じ流速で、上記緩衝液中に溶解したZnCl2溶液を流し、張力および弾性の変化を検出した（図１）。図１のグラフにおける変動は、ZnCl2によりアミロイドβ（1−42）の膜の等方性張力とコンプライアンス（剛性の逆数）が著しく増加することを示している。【００３４】
一方、キレーターであるEDTAによりZnCl2溶液添加前の状態に戻ることから、ZnCl2の作用は可逆的であると考えられる。図１において一様な状態、即ち水平線が立ち上がるところは、試料膜に張力が加わった時点を示し、振動している箇所においてコンプライアンスの検出を行なっている。図１の結果は、本発明により、アミロイドβ（1−42）とZnCl2との特別な相互作用を数分で検出できることを示したものである。ここにおける特別な相互作用とは、X. Huangら（J. Biol. Chem., 1997, 272, 26464）、C.S. Atwoodら（J. Biol. Chem., 1998, 273, 12817）あるいはR.A. Chernyら（Neuron, 2001, 30, 665）など多数の報告と考え合わせると、Zn2+が引き起こすアミロイドβ（1−42）の凝集と考えられる。【００３５】
更にZnCl2の濃度を0.01mMから3mMまで変えて測定することにより、ZnCl2の濃度の影響を検討した（図２）。その結果図２に示されるように、ZnCl2溶液に応じた弾性の変化の大きさは、濃度依存的である。【００３６】
実施例２: アミロイドβの張力及び弾性変化に対するCuCl2の効果
アミロイドβ（1−42）の膜を、実施例１に記載したように調製し、同様に検出装置上に配置し、緩衝液に溶解したCuCl2の張力および弾性の変化を検討した（図３）。実施例１と同様に、CuCl2においても、濃度依存的な張力および弾性の変化が認められ、EDTAにより張力は添加前の状態にほぼ回復した。Zn2+と同様に、Cu2+においても、アミロイドβの凝集を容易にすることが報告されている。その様な知見は、本法において検出されている現象がアミロイドβの凝集であることを補強するものである。【００３７】
実施例３：α-シヌクレインの張力および弾性変化に対するZnCl2の効果
α-シヌクレイン（BIOMOL International LP, PA, USA）の膜を実施例１に記載したように作製し、検出装置上に配置した。緩衝液に溶解したZnCl2の張力および弾性の変化を検討した（図４）。その結果、実施例１と同様に、α-シヌクレインにおいても、ZnCl2による濃度依存的な張力および弾性の変化が認められた。なおEDTAにより張力は添加前の状態にほぼ回復した。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明により、メカノケミカル式センサーを用いて蛋白質のアミロイド性の構造変化を検出する方法が提供された。更に上記検出方法を用いてアミロイド性の構造変化に影響を与える活性を有する物質を探索する方法、ならびにアミロイド関連疾患の治療薬または診断薬を探索する方法が提供された。本発明の方法は、新規なアミロイド病の治療薬・診断薬を得る目的に資するものであると考えられる。
【図１】
2005093430.tif 000002
【図２】
2005093430.tif 000003
【図３】
2005093430.tif 000004
【図４】
2005093430.tif 000005
【国際調査報告】
2005093430.tif 000006
2005093430.tif 000007