(57)【要約】本発明は、ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする血中コレステロール低下剤を提供する。本発明の血中コレステロール低下剤は天然物由来で副作用がなく、且つ優れた高脂血症改善効果を有する。よって、当該血中コレステロール低下剤は、高脂血症や動脈硬化症、肥満症に対する治療用又は予防用の医薬として、また上記疾患の治療用又は予防用の食品、飲料または飼料として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする血中コレステロール低下剤。
【請求項２】
ブナシメジ又はホンシメジがそれらの子実体である請求項１記載の血中コレステロール低下剤。
【請求項３】
処理物が乾燥粉末、熱水抽出物、熱水抽出残渣、加熱処理物、酢酸エチル抽出物または酢酸エチル抽出残渣である請求項１又は２記載の血中コレステロール低下剤。
【請求項４】
請求項１〜３いずれかに記載の血中コレステロール低下剤を含有することを特徴とする高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の医薬。
【請求項５】
請求項１〜３いずれかに記載の血中コレステロール低下剤を含有することを特徴とする高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の食品、飲料又は飼料。
【請求項６】
被験体に、有効量のブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを投与することを含む、血中コレステロールの低下方法。
【請求項７】
血中コレステロール低下剤の製造のための、ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は担子菌を利用した血中コレステロール低下剤、これを含有する高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の医薬、食品、飲料又は飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】  近年、生活習慣が大きく影響する疾患が増加している。さらに生活疾患の中でも心筋梗塞や狭心症などの心臓病、脳梗塞や脳出血などの脳血管障害が増加する傾向にある。【０００３】  心疾患と脳血管疾患は、発病の背景に動脈硬化という血管疾患がひそんでいる。動脈硬化は、動脈の内側の壁が厚くなり、血液の通り道が狭くなってしまう疾患である。動脈の壁が厚くなるのは傷ついた血管壁に血液由来のコレステロールに富んだ脂質が沈着して組織を破壊し、さらに脂肪をたくさん取り込んでドロドロの硬化巣を形成してしまうからである。血中のコレステロールが異常に高い状態は、動脈硬化を促す要因のひとつと考えられており、高コレステロール血症が病状の悪化を招いている。【０００４】  従来の高脂血症疾患に対する治療法としては、コレステロール合成阻害薬、イオン交換樹脂、コレステロール酸化抑制薬を用いる方法が効果的であり、広範に用いられている。しかし、これらの薬物による長期治療での副作用の発現は、患者にとって治療を拒否する原因となっている。また、運動療法、食事療法が推奨されるが、いずれも継続が困難である。このため、副作用を生じる可能性が低い自然食品や健康食品（機能性食品を含む）に対する関心が高まっている。これまでにハタケシメジが、高脂血症を抑制することが知られており（例えば、非特許文献１）、特許も出願されている（例えば、特許文献１）。しかし、その作用は弱いものであった。また、シイタケにも強い抗高脂血症作用があることが報告されており（例えば、非特許文献２および３）、その主成分がエリタデニン（レンチナシン）であることも明らかになっている（例えば、非特許文献４）。その他にもマイタケ（例えば、非特許文献５）やエノキタケ（例えば、非特許文献６および７）、海外ではヒラタケに関する報告（例えば、非特許文献８、９、１０および１１）もあるが、ブナシメジやホンシメジに関しては報告されていない。【０００５】
【特許文献１】特開２００３−７３２９９
【非特許文献１】Ｊ  Ｎｕｔｒ  Ｓｃｉ  Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ，４８，Ｐ７３−７６，２００２
【非特許文献２】Ｍｕｓｈｒｏｏｍ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＩＸ（Ｐａｒｔ  Ｉ），Ｐ４６３−４６７
【非特許文献３】栄養学雑誌３６，Ｐ１１９−１２５，１９７８
【非特許文献４】Ｓｐｅｃｉａｌｉａ，Ｐ１２３７−１２３８，１９６９
【非特許文献５】Ｊ  Ｎｕｔｒ  Ｓｃｉ  Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ，３５，Ｐ９１−９４，１９８９
【非特許文献６】Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ，２２６（８），Ｐ７５８−７６５，２００１
【非特許文献７】栄養と食糧，３０（１），Ｐ３５−３８，１９７７
【非特許文献８】Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｓ，４４，２８７−２９１，１９９５
【非特許文献９】Ａｎｎ  Ｎｕｔｒ  Ｍｅｔａｂ，３５，１９１−１９５，１９９１
【非特許文献１０】Ｎａｈｒｕｎｇ，４０（４），２２２−２２４，１９９６
【非特許文献１１】Ｚ  Ｅｒｎａｈｒｕｎｇｓｗｉｓｓ，３５，２４９−２５２，１９９６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】  従来の機能性食品においては、高脂血症改善効果が必ずしも十分ではなく、より効果的な機能性食品が望まれていた。本発明は、上記従来技術の課題に鑑みなされたものであり、その目的は、副作用を生じる可能性が低く、且つ優れた高脂血症改善効果を持つ血中コレステロール低下剤、これを含有する医薬、食品、飲料又は飼料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】  本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は、ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする血中コレステロール低下剤に関する。本発明の第１の発明において、ブナシメジ又はホンシメジはそれらの子実体であることが好ましく、また、処理物は乾燥粉末、熱水抽出物、熱水抽出残渣、加熱処理物、酢酸エチル抽出物または酢酸エチル抽出残渣であることが好ましい。【０００８】  本発明の第２の発明は、第１の発明の血中コレステロール低下剤を含有することを特徴とする高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の医薬に関する。【０００９】  本発明の第３の発明は、第１の発明の血中コレステロール低下剤を含有することを特徴とする高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の食品、飲料又は飼料に関する。【００１０】  本発明の第４の発明は、被験体に、有効量のブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを投与することを含む、血中コレステロールの低下方法に関する。【００１１】  本発明の第５の発明は、血中コレステロール低下剤の製造のための、ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つの使用に関する。
【発明の効果】
【００１２】  ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする血中コレステロール低下剤が提供される。本発明の血中コレステロール低下剤は天然物由来で副作用がなく、且つ優れた高脂血症改善効果を有する。よって、当該血中コレステロール低下剤は、高脂血症や動脈硬化症、肥満症に対する治療用又は予防用の医薬として、また上記疾患の治療用又は予防用の食品、飲料または飼料として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】  以下、本発明の好適な実施形態を詳細に説明する。ブナシメジはシロタモギタケ属、ホンシメジはシメジ属に属する担子菌類の一種である。これらは春から秋にかけて林内、草地等、ある程度の高温多湿の条件を満たす場所に発生する食用菌である。ブナシメジについてはすでに人工栽培技術が確立されており、人工栽培品が量産され非常に安価で販売されている。一方、ホンシメジについては、これまでは人工栽培が困難であったが、近年人工栽培がより容易に実施可能となり（例えば、特開２０００−１０６７５２、特開２００１−１２００５９）、人工栽培による大量生産が始まったきのこで、非常に美味なきのことして知られている。【００１４】  なお、本明細書において、ホンシメジとは分類学上、「Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ」に分類されるものをいい、ブナシメジとは「Ｈｙｐｓｉｚｉｇｕｓ  ｍａｒｍｏｒｅｕｓ」（以前はＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｕｌｍａｒｉｕｍと分類されていた）に分類されるものをいう。従来、ブナシメジを「やまびこほんしめじ」、「ホンシメジ」と称して流通されていたことがあるが、これらは分類学上ホンシメジとは異なるキノコである（きのこ栽培指標  平成元年１月、長野県、長野県農業協同組合中央会、長野県経済事業農業共同組合連合会、長野県森林組合連合会編集発行；山渓カラー名鑑  日本のきのこ  昭和６３年１１月１０日、株式会社  山と渓谷社発行）。ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）は１９９３年、滋賀県の森林センターで初めて菌床人工栽培に成功したことが報告されており（２００４年度版  きのこ年鑑  ２００４年４月１日、株式会社特産情報  きのこ年鑑編集部発行）、これ以前に「ホンシメジ」として流通されていたものは、天然物を除いては「ブナシメジ」であると類推される。なお、ホンシメジは菌根菌（生きた樹木の根に発生（活物寄生）して栄養を摂取する）であるのに対し、ブナシメジは木材腐朽菌（枯れた樹木に発生（死物寄生）する）であることからも、これらは明らかに異なるきのこである。【００１５】  本発明において、ブナシメジとして使用される菌株としては特に限定はないが、例えばリオフィラム  ウルマリウム  Ｋ−０２５９（ＦＥＲＭ  Ｐ−１２９８１、寄託日：１９９２年６月２日）、リオフィラム  ウルマリウム  Ｍ−８１７１（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１４１５、寄託日：１９８６年８月２３日）、リオフィラム  ウルマリウム  Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３５４、寄託日：２００２年４月２５日）、リオフィラム  ウルマリウム  Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３５５、寄託日：２００２年４月２５日）、リオフィラム  ウルマリウム  Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３５６、寄託日：２００２年４月２５日）、リオフィラム  ウルマリウム  Ｌｕ１−１８１（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３５７、寄託日：２００２年４月２５日）等の人工栽培可能な菌株が例示され、特に好適にはリオフィラム  ウルマリウム  Ｍ−８１７１（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１４１５、寄託日：１９８６年８月２３日）が例示される。また、ホンシメジとしては特に限定はないが、リオフィラム  シメジＬａ０１−２７（ＦＥＲＭ  Ｐ−１７４５５、寄託日：１９９９年７月１３日）、リオフィラム  ��メジ  Ｌａ０１−２０（ＦＥＲＭ  Ｐ−１６８４１、寄託日：１９９８年６月１６日）等の人工栽培可能な菌株が例示される。なお、上記の菌株はいずれも、独立行政法人  産業技術総合研究所  特許生物寄託センター（〒３０５−８５６６  日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に寄託されている。【００１６】  本発明においては、ブナシメジおよびホンシメジとしてはそれらの子実体または菌糸体を用いることができるが、その生理作用の観点から子実体が好適である。菌糸体は、炭素源および窒素源を含む培地で種菌を培養して得られる生あるいは乾燥菌糸体を利用でき、さらに乾燥したものが使用においては簡便である。【００１７】  本発明において処理物としては、ブナシメジ又はホンシメジに人為的な処理を施したものであれば特に限定はないが、例えば乾燥粉末、抽出物、抽出物の残渣、加熱処理物、粉砕物、搾汁液、破砕物、乾燥物、酵素処理物、化学処理物、もしくはこれらの処理工程を組み合わせた処理物等が例示される。特に好適には、乾燥粉末、抽出物、抽出物の残渣、加熱処理物が例示される。本発明の有効成分として使用され得るものであれば、処理物の形態に特に限定はない。なお、これらの処理物の原料としては、ブナシメジ又はホンシメジの子実体または菌糸体のいずれも使用することができる。【００１８】  本発明の処理物として乾燥粉末を使用する場合、その製法としては特に限定はないが、例えば上記のような処理物の原料に対して天日干し、凍結乾燥、乾熱乾燥、温風乾燥等の公知の乾燥処理を行うことにより得られた乾燥物を、ビーズミル、ワーリングブレンダー、ホモジナイザー等の各種粉砕混合機による粉砕処理を行うことにより得ることができる。【００１９】  本発明において、抽出物とは抽出溶媒を用いて抽出操作を行う工程を経て得られる組成物のことをいう。具体的には、水抽出物、熱水抽出物、エタノール抽出物、酢酸エチル抽出物等が例示され、本発明においては、熱水抽出物、酢酸エチル抽出物が好適に使用される。抽出は、公知の抽出方法により以下のように行うことができる。例えば原料の粉砕物、細断物もしくは乾燥粉末を使用し、溶媒を用いてバッチ式もしくは連続式で抽出を行うことができる。また、ここで原料としては、後述のブナシメジ又はホンシメジの化学処理物や酵素処理物を用いることも出来る。抽出物を得る際の抽出溶媒としては、特に限定はないが、水、ヘキサン、クロロホルム、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等の親水性もしくは親油性の溶媒を挙げることができ、特に好適には、水、酢酸エチルを使用することができ、所望により単独で、もしくは適宜混合液として用いることができる。抽出溶媒の量は適宜決定すればよいが、通常、抽出操作に供する際の原料の重量に対し、好ましくは０．１〜１００倍量の抽出溶媒を使用すれば良い。抽出温度も適宜、目的に応じて決定すれば良いが、水抽出の場合は通常、好ましくは４〜１３０℃、より好ましくは１０〜１００℃である。なお、本明細書中において、７０℃以上の抽出温度での水抽出を熱水抽出といい、熱水抽出により得られた抽出物を熱水抽出物��いう。また、溶媒中にエタノールや酢酸エチル等の揮発性物質が含まれる場合は４〜６０℃の範囲が好適である。抽出時間も、抽出効率を考慮し決定すればよいが、通常、好ましくは数秒間〜数日間、より好ましくは５分間〜２４時間の範囲となるように、原料、抽出溶媒、抽出温度を設定するのが好適である。抽出時の圧力は、特に限定はなく、所望により適宜決定することができる。抽出操作は、例えば常圧下でも加圧下でも吸引濾過等による減圧下でも所望により条件を選択して行うことができる。抽出操作は、たとえば、攪拌しながら又は静置して行えばよく、また、必要に応じて数回繰り返してもよい。以上の操作により、本発明で使用されるブナシメジ又はホンシメジの抽出物（以下、本発明の抽出物と称することがある。）が得られる。抽出物は必要に応じ、ろ過、遠心分離、濃縮、限外ろ過、分子ふるい等の処理を行い、目的の血中コレステロール低下作用を有する成分が濃縮された抽出物を調製することができる。抽出物や濃縮抽出物の血中コレステロール低下作用は、後述の実施例２記載の方法に準じて簡便に測定することができる。なお、本発明においては異なった抽出法で得られた抽出物を２種以上併用することもできる。このようにして得られる本発明の抽出物は減圧濃縮、殺菌、フリーズドライ、スプレードライ等の処理に供して抽出溶媒を除去し、乾燥したブナシメジ又はホンシメジ抽出物を得ることが出来る。【００２０】  また、本発明においては、本発明の抽出物を公知の方法で分画することによって得られる画分や、分画操作を複数回繰り返すことにより得られる画分も本発明の抽出物に包含される。上記の分画手段としては、抽出、分別沈殿、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等が挙げられる。得られた画分の精製を、血中コレステロール低下作用を指標としてさらに進めることにより、血中コレステロール低下作用の活性成分を単離することもできる。それらの成分も本発明の有効成分に包含される。【００２１】  本発明において、抽出物の残渣とは、上記のように抽出を行った後に得られる残渣のことをいい、これらも本発明の有効成分として使用することができる。例えば、実施例１に記載のような工程で得られたホンシメジ由来の熱水抽出残渣が例示される。なお、後述の実施例４および６に記載のとおり、本発明の所望の効果の発現の観点から、本発明の有効成分として好適には熱水抽出残渣または酢酸エチル抽出残渣を使用することができる。【００２２】  また、本発明の処理物としてブナシメジ又はホンシメジの加熱処理物を使用する場合は、その製法としては特に限定はないが、例えば、ブナシメジ又はホンシメジの乾燥粉末を水に懸濁し、５０〜１２０℃、好適には６０〜１１０℃、さらに好適には７０〜１００℃で加熱処理することにより得ることができる。加熱時間は特に限定はないが、例えば数秒間〜数日間、より好ましくは５分〜２４時間の範囲が例示される。なお、後述の実施例４に記載のとおり、本発明の所望の効果の発現の観点から、本発明の有効成分として好適には当該加熱処理物を使用することができる。【００２３】  本発明において粉砕物とは、有効成分の原料として用いられるブナシメジ又はホンシメジを粉末状に砕いたものであり、例えば、ワーリングブレンダー、例えばＷｏｎｄｅｒ  Ｂｌｅｎｄｅｒ  ＷＢ−１（大阪ケミカル（株）製）を使用することにより製造することができる。また、本発明の処理物としてブナシメジ又はホンシメジの搾汁液を使用する場合は、その製法としては、公知の植物の搾汁方法と同様に行うことができ、特に限定はないが、例えばスクリュー式、ギア式、カッター式等の搾り機やジューサーを用いる方法が挙げられる。また、前処理として原料を細断あるいはすりつぶした後、上述のジューサー又は布等で絞って搾汁液を得ることもできる。【００２４】  本発明において破砕物とは、有効成分の原料として用いられるブナシメジ又はホンシメジを砕き壊したものであり、一般には粉砕物よりも組織片が大きく、例えば、破砕機を使用することにより製造することができる。また、乾燥物とは有効成分の原料として用いられるブナシメジ又はホンシメジを天日干し、凍結乾燥、乾熱乾燥、温風乾燥の公知の乾燥処理を行うことにより得られる。また、化学処理物とは、特に限定はないが、ブナシメジ又はホンシメジを酸処理、アルカリ処理、酸化処理、還元処理、浸透圧処理等に供して得られたものをいい、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、クエン酸、酢酸等の無機酸や有機酸、又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア等の無機塩基や有機塩基を含む水溶液にブナシメジ又はホンシメジを浸漬することにより製造することができる。化学処理物には、前記のような化学処理を受けたブナシメジ又はホンシメジに由来するすべてのものを含む。酵素処理物とは、例えば、ペクチナーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、マンナナーゼ、グルコシダーゼ、ヘミセルラーゼ、キチナーゼ、α−およびβ−グルクロニダーゼ、α−およびβ−グルカナーゼ等による酵素処理物、微生物による酵素反応物（例えば、発酵物）をいい、例えば、ブナシメジ又はホンシメジに対して上記酵素を適当な緩衝液中で作用させることにより製造することができる。酵素処理物には、前記のような酵素処理を受けたブナシメジ又はホンシメジに由来するすべてのものを含む。【００２５】  本発明の血中コレステロール低下剤は、上記したようなホンシメジ、ブナシメジ及びその処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする。なお、本明細書中において、上記したようなホンシメジ、ブナシメジ及びその処理物からなる群より選択される少なくとも１つを、本発明の有効成分と称する場合がある。本発明の血中コレステロール低下剤は、前記有効成分そのものであってもよく、また、前記有効成分を含む組成物であってもよい。本発明の血中コレステロール低下剤においては、たとえば、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分などと配合することができる。【００２６】  本発明の血中コレステロール低下剤の製造は、通常、前記有効成分を薬学的に許容できる液状または固体状の担体と配合することにより行われ、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤とすることができる。また、使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品や、その他、外用剤とすることもできる。【００２７】  担体は、本発明の血中コレステロール低下剤の投与形態および剤型に応じて選択することができる。固体組成物からなる経口剤とする場合は、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤等とすることができ、たとえば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩などが担体として利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料などを配合することもできる。たとえば、錠剤または丸剤とする場合は、所望によりショ糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロースなどの糖衣または胃溶性もしくは腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。液体組成物からなる経口剤とする場合は、薬理学的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤などとすることができ、例えば、精製水、エタノールなどが担体として利用される。また、さらに所望により湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、防腐剤などを添加してもよい。【００２８】  一方、非経口剤とする場合は、常法に従い本発明の前記有効成分を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどに溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤などを加えることにより調製することができる。また、固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。【００２９】  外用剤としては、経皮投与用または経粘膜（口腔内、鼻腔内）投与用の、固体、半固体状または液状の製剤が含まれる。また、座剤なども含まれる。例えば、乳剤、ローション剤などの乳濁剤、外用チンキ剤、経粘膜投与用液剤などの液状製剤、油性軟膏、親水性軟膏などの軟膏剤、フィルム剤、テープ剤、パップ剤などの経皮投与用または経粘膜投与用の貼付剤などとすることができる。【００３０】  以上の各種製剤は、それぞれ公知の担体などを利用して、適宜、常法により製造することができる。また、かかる製剤における有効成分の含有量は、その投与形態、投与方法などを考慮し、好ましくは後述の本発明の医薬の投与量範囲で当該有効成分を投与できるような量であれば特に限定されるものではない。例えば、有効成分としてブナシメジ又はホンシメジ子実体の乾燥粉末を使用する場合、それらの含有率は本発明の血中コレステロール低下剤中、通常、０．００１〜１００重量％、好ましくは０．０１〜９０重量％、より好ましくは０．１〜８０重量％である。【００３１】  コレステロールは、生体細胞膜の構成成分として細胞の形態・機能の維持に必須であり、またステロイドホルモンや胆汁酸の前駆物質としても重要な成分である。血液中の総コレステロール値を測定すると、脂質代謝異常をきたす疾患が推測できるので、臨床的な意義は大きい。またコレステロールはリポ蛋白質に結合して血中で可溶化しているが、結合するリポ蛋白質の種類により善玉コレステロール（ＨＤＬ）と、悪玉コレステロール（ＬＤＬ、ＶＬＤＬ）とに分けられる。��ＤＬは血管壁に付着した余分のコレステロールを取り除き、肝臓に輸送して異化する機能を有している。末梢の組織ではコレステロールを分解することができないので、この役割は重要である。疫学的にもＨＤＬが動脈硬化症の危険予防因子であることがわかっている。そのため、ＨＤＬは善玉コレステロールとも呼ばれるのである。一方、ＬＤＬやＶＬＤＬは肝臓から末梢組織にコレステロールを運ぶ役割を担っている。ところが、何らかの理由でＬＤＬやＶＬＤＬが変性すると、血管壁にコレステロールを沈着させて組織を破壊する。そのため、悪玉コレステロールとも呼ばれる。総コレステロールに対するＨＤＬ、ＬＤＬ、ＶＬＤＬの比率は、脂質代謝異常の診断および疾患の程度を推測するために重要である。本発明の有効成分であるブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物を投与することにより、実施例４に記載のとおりＨＤＬを減少させることなく、ＬＤＬ、ＶＬＤＬを減少させることができることから、本発明の有効成分は効果的にコレステロールを低下させることのできる医薬品や機能性食品素材として非常に有用である。【００３２】  本発明の血中コレステロール低下剤を投与することにより、血中のコレステロール値が低下することから、高脂血症や動脈硬化症、肥満症等のコレステロールの上昇に起因する疾患の症状改善または予防に極めて有用である。さらに本発明の有効成分であるブナシメジとホンシメジは嗜好性の高いきのこであることから、特に経口投与においては苦痛なく継続的に投与することができる。すなわち、本発明により、本発明の血中コレステロール低下剤を含有する高脂血症、動脈硬化症または肥満症の治療用又は予防用の医薬（以下、本発明の医薬と称することがある）が提供される。【００３３】  本発明の医薬の製造方法やその形状、担体については、上記の血中コレステロール低下剤と同様に行うことが出来る。【００３４】  本発明の医薬は、製剤形態に応じた適当な投与経路で投与される。投与方法も特に限定はなく、内用、外用および注射によることができる。注射剤は、例えば静脈内、筋肉内、皮下、皮内などに投与し得、外用剤は、たとえば、坐剤をその適する投与方法により投与すればよい。【００３５】  本発明の医薬としての投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的および当該医薬の投与対象である患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され一定ではない。一般には、製剤中に含有される前記有効成分の投与量で、例えば本発明の有効成分としてブナシメジ又はホンシメジ子実体の乾燥粉末を使用した場合、ヒト（例えば成人）１日当り０．０００１ｍｇ〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．００１ｍｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。もちろん投与量は、種々の条件、例えば乾燥物の水分含有率等によっても変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。投与は、所望の投与量範囲内において、１日内において単回で、または数回に分けて行ってもよく、所定期間に渡って行ってもよい。また、本発明の治療剤または予防剤はそのまま経口投与するほか、任意の飲食品に添加して日常的に摂取させることもできる。【００３６】  本発明に係る有効成分には、後述するように特に毒性は認められない。また、副作用の発生の心配もない。それゆえ、該有効成分によれば、安全かつ適切に血中コレステロール低下作用を発現させることができる。従って、当該有効成分を含んでなる本発明の医薬、食品、飲料または飼料は、血中コレステロールの上昇に起因する疾患の治療または予防に有効であり、高脂血症や動脈硬化、肥満症の予防又は症状改善や血中コレステロール値の低下や上昇抑制のために用いられることを付した食品又は飲料としてきわめて有用である。従って、本発明の食品又は飲料は血中コレステロール値が気になる方が食すのに非常に適した食品又は飲料となる。【００３７】  また、本発明は、本発明の血中コレステロール低下剤を含有する高脂血症、動脈硬化症又は肥満症の治療用又は予防用の食品、飲料又は飼料を提供する。ここで、「含有」とは、含有、添加および／または希釈を意味する。本発明の食品、飲料または飼料は、その血中コレステロール低下作用により、上記の疾患の症状改善、予防に極めて有用である。なお、本願明細書中の血中コレステロール低下剤とは血中コレステロール上昇抑制剤も包含するものである。【００３８】  なお、本明細書において、前記「含有」とは食品、飲料または飼料中に本発明で使用される有効成分が含まれるという態様を、前記「添加」とは食品、飲料または飼料の原料に、本発明で使用される有効成分を添加するという態様を、前記「希釈」とは本発明で使用される有効成分に、食品、飲料または飼料の原料を添加するという態様をいうものである。【００３９】  本発明の食品、飲料または飼料の製造法に特に限定はない。たとえば、配合、調理、加工などは一般の食品、飲料または飼料のものに従えばよく、それらの製造法により製造することができ、得られた食品、飲料または飼料に前述の血中コレステロール低下剤が含有されていれば良い。【００４０】  本発明の食品または飲料としては特に限定はないが、たとえば、本発明の血中コレステロール低下剤が含有されてなる、穀物加工品（小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類、マカロニ類、パン類、あん類、そば類、麩、ビーフン、はるさめ、包装餅など）、油脂加工品（可塑性油脂、てんぷら油、サラダ油、マヨネーズ類、ドレッシングなど）、大豆加工品（豆腐類、味噌、納豆など）、食肉加工品（ハム、ベーコン、プレスハム、ソーセージなど）、水産製品（冷凍すりみ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、さつま揚げ、つみれ、すじ、魚肉ハム、ソーセージ、かつお節、魚卵加工品、水産缶詰、つくだ煮など）、乳製品（原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ、練乳、粉乳、アイスクリームなど）、野菜・果実加工品（ペースト類、ジャム類、漬け物類、果実飲料、野菜飲料、ミックス飲料など）、菓子類（ガム、飴、チョコレート、ビスケット類、菓子パン類、ケーキ、餅菓子、米菓類など）、アルコール飲料（日本酒、中国酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、清涼アルコール飲料、果実酒、リキュールなど）、嗜好飲料（緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、清涼飲料、乳酸飲料など）、調味料（しょうゆ、ソース、酢、み��んなど）、缶詰・瓶詰め・袋詰め食品（牛飯、釜飯、赤飯、カレー、その他の各種調理済み食品）、半乾燥または濃縮食品（レバーペースト、その他のスプレッド、そば・うどんの汁、濃縮スープ類）、乾燥食品（即席麺類、即席カレー、インスタントコーヒー、粉末ジュース、粉末スープ、即席味噌汁、調理済み食品、調理済み飲料、調理済みスープなど）、冷凍食品（すき焼き、茶碗蒸し、うなぎかば焼き、ハンバーグステーキ、シュウマイ、餃子、各種スティック、フルーツカクテルなど）、固形食品、液体食品（スープなど）、香辛料類などの農産・林産加工品、畜産加工品、水産加工品などが挙げられる。【００４１】  本発明の食品または飲料には前記有効成分が単独もしくは複数含有、添加および／または希釈されており、その血中コレステロール低下作用を発現するための必要量が含まれていれば特にその形状に限定はなく、タブレット状、顆粒状、カプセル状等の形状の経口的に摂取可能な形状物も包含する。ここで食品としては、大豆多糖類や還元糖を含有させたものであってもよい（例えば、特開２０００−１５７１９６号公報参照）。また、本発明の処理物が液体状である場合、グリセリンを添加し、希釈して飲用とする、濃縮された液体状の健康食品とすることもできる。【００４２】  また、本発明の飲料の一態様であるアルコール飲料としては、本発明で使用されるブナシメジ又はホンシメジの子実体を飲用のアルコール類に浸漬したものを、そのままもしくは公知のアルコール飲料の製造方法に準じて得られるアルコール飲料として飲用に供することもできる。【００４３】  さらに、本発明で有効成分として使用されるブナシメジ又はホンシメジの子実体又は菌糸体の処理物、例えば、粉砕物や破砕物を公知の方法に従って錠剤や顆粒等の形態に成形したものも本発明の食品に包含される。【００４４】  本発明の食品又は飲料中の前記有効成分の含有量は特に限定されず、それらの食品としての官能性と活性発現の観点から適宜選択できるが、例えばブナシメジ又はホンシメジの子実体の乾燥粉末を有効成分とした場合、それらの含有率は食品中、好ましくは０．１重量％以上、より好ましくは１〜１００重量％、更に好ましくは６〜１００重量％であり、飲料中、好ましくは０．１重量％以上、より好ましくは１〜１００重量％、更に好ましくは６〜１００重量％である。また本発明の食品又は飲料は、それらに含有される有効成分が、ブナシメジ又はホンシメジを有効成分とした場合、ヒト（例えば成人）１日当り０．０００１ｍｇ〜２０ｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．００１ｍｇ〜１５ｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０１ｍｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重となるように摂取すればよい。もちろん摂取量は、種々の条件、例えばキノコの鮮度や乾燥の程度等によっても変動するので、上記摂取量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。【００４５】  また、本発明は、前記有効成分を含有してなる、血中コレステロール低下作用を有する生物用の飼料を提供するものであり、さらに、別の一態様として、前記有効成分を生物に投与することを特徴とする生物の飼育方法をも提供する。また、本発明の別の一態様として、前記有効成分を含有することを特徴と���る生物飼育用剤が提供される。ここで、「含有」とは、前記の含有、添加および／または希釈を意味する。【００４６】  本明細書において、生物としては、限定はないが、たとえば養殖動物、ペット動物などが挙げられる。養殖動物としてはウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラクダ、ラマなどの家畜、マウス、ラット、モルモット、ウサギなどの実験動物、ニワトリ、アヒル、七面鳥、駝鳥などの家禽が例示される。ペット動物としてはイヌ、ネコなどが例示される。飼料としては体調の維持および／または改善用飼料が例示される。生物飼育用剤としては浸漬用剤、飼料添加剤、飲料用添加剤が例示される。【００４７】  これらの発明によれば、それらを適用する前記例示するような生物において、本発明に使用される前記有効成分の血中のコレステロール低下作用に基づき、前述の本発明の医薬によるのと同様の効果の発現が期待できる。【００４８】  本発明に使用される前記有効成分は通常、例えばブナシメジ又はホンシメジ子実体の乾燥粉末を有効成分とした場合、対象生物１日当たり好ましくは０．０００１ｍｇ〜２０ｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．００１ｍｇ〜１５ｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは０．０１ｍｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重投与される。もちろん投与量は、種々の条件、例えば水分含有率等によっても変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。投与は、たとえば、当該有効成分を、対象生物に供する人工配合飼料の原料中に添加、混合しておくか、人工配合飼料の粉末原料と混合した後、その他の原料にさらに添加、混合することで行うことができる。また、前記有効成分の飼料中の含有量は特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定すれば良いが、例えばブナシメジ又はホンシメジ子実体の乾燥粉末を有効成分とした場合、それらの含有率は飼料中、好ましくは０．１重量％以上、より好ましくは１〜１００重量％、更に好ましくは６〜１００重量％である。【００４９】  本発明の飼料の製造法に特に限定はなく、また配合も一般の飼料に準ずるものであればよく、製造された飼料中に前述の本発明の血中コレステロール低下剤が含まれていればよい。生物飼育用剤は、前記飼料の場合に準じて、製造、使用等すればよい。【００５０】  本発明の血中コレステロール低下剤を含んでなる飼料を摂取させること、または血中コレステロール低下剤の含有液に対象生物を浸漬することにより、家畜、実験動物、家禽、ペット動物などの体調を良好に維持し、または、改善させたりすることができる。なお、これらの態様は、本発明により提供される生物の飼育方法の一態様をなす。【００５１】  本発明はまた、被験体に、有効量のブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを投与することを含む血中コレステロールの低下方法を提供する。【００５２】  本明細書中において被験体とは、好ましくは血中コレステロールの低下を必要とするヒトであるが、血中コレステロールの低下を必要とする生物、例えば、上記のような養殖動物、ペット動物等であってもよい。【００５３】  また、本明細書中において有効量とは、ブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つ（有効成分）を上記被験体に投与した場合に、該有効成分を投与していない被験体と比較して、血中コレステロール量が低下する結果を生じる該成分の量である。具体的な有効量としては、投与形態、投与方法、使用目的および被験体の年齢、体重、症状等によって適宜設定され一定ではないが、好ましくは、上記の医薬と同様に、前記有効成分の量で、ヒト（例えば成人）１日当り０．０００１ｍｇ〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重である。【００５４】  本発明の血中コレステロール低下方法においては、有効量のブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つをそのまま上記被験体に投与してもよく、また、上記のような医薬、食品、飲料、又は飼料として投与してもよい。また、投与方法にも限定はなく、例えば、上記の医薬と同様に、経口投与や注射等により投与すればよい。【００５５】  本発明の血中コレステロール低下方法によれば、安全に被験体の血中コレステロールを低下することが可能である。なお、本明細書中において血中コレステロールの低下とは、血中コレステロールの上昇抑制も包含するものである。【００５６】  本発明で使用される前記有効成分は、その作用が発現する有効量を生物に投与しても毒性は認められない。たとえば経口投与の場合、ブナシメジ又はホンシメジの乾燥粉末を１ｇ／ｋｇ体重でマウスに単回投与しても死亡例は認められない。また、前記有効成分は、ラットに対し１ｇ／ｋｇ体重を経口単回投与しても死亡例は認められない。【００５７】  以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、以下の実施例に記される「％」とは、特に明記されない限り「重量％」を意味するものとする。
【実施例】
【００５８】実施例１
生鮮ホンシメジ子実体（リオフィラム  シメジ  Ｌａ０１−２７：タカラバイオにて栽培）１６．７ｋｇを、６０℃・２日間、乾熱乾燥し、１，３７７ｇの乾燥ホンシメジを得た。該乾燥ホンシメジをワーリングブレンダーにより粉砕し、ホンシメジ乾燥粉末１，３６５ｇを調製した。生鮮ブナシメジ子実体（リオフィラム  ウルマリウム  Ｍ−８１７１：タカラバイオにて栽培）からも同様に、ブナシメジ乾燥粉末を調製した。つぎに、ホンシメジについては、乾燥粉末５００ｇを１０Ｌの水に懸濁し、９５℃・３時間加熱抽出、１晩放置後、遠心分離により、抽出上清液８．９Ｌおよび抽出残渣を得た。抽出上清液はエバポレーターで濃縮後、凍結乾燥し、ホンシメジ由来熱水抽出上清２４３ｇを調製した。抽出残渣はそのまま凍結乾燥し、ホンシメジ由来熱水抽出残渣２４５ｇを調製した。【００５９】実施例２
雄性Ｗｉｓｔａｒラットを日本ＳＬＣ社から購入し、予備飼育の後４週齢より実験に用いた。標準飼料ＣＥ−２（日本クレア社製）にコレステロールおよびコール酸をそれぞれ０．２５％ずつ混ぜ合わせ、高コレステロール食（ＨＣＤ食）を調製した。ＨＣＤ食をラットに自由摂取させた群を対照群とし、実施例１で調製したサンプルのうち、ブナシメジ乾燥粉末、ホンシメジ乾燥粉末をそれぞれ、ＨＣＤ食に種々の割合で混ぜ合わせた餌を自由摂取させた群をサンプル投与群とした。試験開始前および開始後３日目に採血を行い、遠心分離して血漿を得た。血中の総コレステロール値を市販のキット（和光純薬製）で測定した。各群６匹から得た血中総コレステロール値の平均値±標準誤差を表１に示した。【００６０】  標準試料投与群（健常群）と比較して、対照群では顕著に血中コレステロール値が上昇し、高コレステロール血症が惹起された。対照群に比し、各サンプル投与群では血中コレステロール値の上昇の抑制が見られた。コレステロール上昇抑制作用は用量が高い群ほど強かった。一方、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、各サンプルは安全に服用できることがわかった。【００６１】
【表１】
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【００６２】実施例３
雄性Ｗｉｓｔａｒラットを日本ＳＬＣ社から購入し、予備飼育の後４週齢より実験に用いた。標準飼料ＣＥ−２にコレステロールおよびコール酸をそれぞれ０．２５％ずつ混ぜ合わせ、ＨＣＤ食を調製した。ＨＣＤ食をラットに自由摂取させた群を対照群とし、実施例１で調製したサンプルのうちホンシメジ乾燥粉末、ホンシメジ由来熱水抽出上清、ホンシメジ由来熱水抽出残渣を、それぞれＨＣＤ食に乾燥粉末相当量として５％が含有されるように混ぜ合わせた餌を自由摂取させた群をサンプル投与群とした。試験開始前および試験開始後３日目に採血を行い、遠心分離して血漿を得た。血中の総コレステロール値を市販のキットで測定した。その結果、いずれのサンプル投与群においても対照群に比べて有意に血中コレステロールの上昇抑制作用が認められた。一方、サンプル投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、各サンプルは安全に服用できることがわかった。【００６３】実施例４
（１）雄性Ｗｉｓｔａｒラットを日本ＳＬＣ社から購入し、予備飼育の後４週齢より実験に用いた。標準飼料ＣＥ−２にコレステロールおよびコール酸をそれぞれ０．２５％ずつ混ぜ合わせ、ＨＣＤ食を調製した。ＨＣＤ食をラットに自由摂取させた群を対照群とし、実施例１で調製したサンプルのうち、ホンシメジ乾燥粉末、ホンシメジ由来熱水抽出上清、ホンシメジ由来熱水抽出残渣を、それぞれＨＣＤ食に乾燥粉末相当量として１０％が含有されるように混ぜ合わせた餌を自由摂取させた群をサンプル投与群とした。また、ホンシメジ乾燥粉末５００ｇを１０Ｌの水に懸濁し、９５℃・３時間加熱したものをそのまま凍結乾燥し、ホンシメジ乾燥粉末加熱処理物を得た後、上記と同様に混餌投与した。試験開始前および試験開始後３日目に採血を行い、遠心分離して血漿を得た。血中の総コレステロール値を市販のキットで測定した。各群６匹から得た血中総コレステロール値の平均値±標準誤差を表２に示した。【００６４】  標準飼料投与群（健常群）と比較して、ＨＣＤ食対照群では顕著に血中コレステロール値が上昇し、高コレステロール血症が惹起された。ホンシメジ乾燥粉末１０％を投与した群では、対照群に比し、血中コレステロール値の上昇抑制が見られた。また、ホンシメジ乾燥粉末加熱処理物（乾燥粉末１０％相当量）を投与した群では、元の乾燥粉末投与群に比べ、血中コレステロール上昇抑制作用が強かった。そこでホンシメジ乾燥粉末加熱処理物の凍結乾燥前の処理液を遠心分離し、ホンシメジ由来熱水抽出上清と残渣を得た。それぞれをサンプルとしてＨＣＤ食に乾燥粉末１０％相当量となるように混合後ラットに投与した場合、血中コレステロール上昇抑制作用は残渣の方が強かった（表２）。一方、上記全サンプル投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、各サンプルは安全に服用できることがわかった。【００６５】
【表２】
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【００６６】  （２）血中コレステロール上昇抑制作用の確認された実施例４−（１）記載のホンシメジ乾燥粉末およびホンシメジ乾燥粉末加熱処理物を投与したラットにおいて、試験開始３日目の血中のＨＤＬ−コレステロール値（ＨＤＬ）を市販のキット（和光純薬社製）で測定し、総コレステロール値との差をＶＬＤＬおよびＬＤＬ−コレステロール値（ＶＬＤＬ＋ＬＤＬ）とした。さらに、総コレステロール値（総Ｃｈｏ）に対するＨＤＬ−コレステロール値の比率を算出した。各群６匹の被験ラット血中のそれらの値の平均値±標準誤差を表３に示した。【００６７】  その結果、ホンシメジ乾燥粉末およびホンシメジ乾燥粉末加熱処理物を投与してもＨＤＬ−コレステロール値は上昇抑制せず、ＶＬＤＬおよびＬＤＬ−コレステロール値を特異的に上昇抑制させることがわかった。そのため、総コレステロール値に対するＨＤＬ−コレステロール値の比率が増加した。血中の総コレステロール値に対するＨＤＬ−コレステロール値の比率は、ホンシメジ乾燥粉末加熱処理物投与群の方が高かった。【００６８】
【表３】
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【００６９】実施例５
ホンシメジの子実体乾燥粉末１００ｇに全量が２Ｌになるまで酢酸エチルを加え、室温で３時間攪拌した。これを吸引ろ過により、ろ液と残渣に分けた。このろ液をエバポレーターで減圧乾固することによりホンシメジ由来酢酸エチル抽出上清２．２６ｇを得た。また、残渣を吸引乾燥することによりホンシメジ由来酢酸エチル抽出残渣９８．６９ｇを得た。一方、ブナシメジの子実体乾燥粉末についても同様に、粉末１００ｇに全量が２Ｌになるまで酢酸エチルを加え室温で３時間攪拌した。その後、吸引ろ過によりろ液と残渣に分け、残渣を吸引乾燥してブナシメジ由来酢酸エチル抽出残渣９６．５２ｇを得た。【００７０】実施例６
雄性Ｗｉｓｔａｒラットを日本ＳＬＣ社から購入し、予備飼育の後４週齢より実験に用いた。標準飼料ＣＥ−２にコレステロールおよびコール酸をそれぞれ０．２５％ずつ混ぜ合わせ、ＨＣＤ食を調製した。ＨＣＤ食をラットに自由摂取させた群を対照群とし、実施例５で調製したサンプルをそれぞれ、ＨＣＤ食に乾燥粉末相当量として１０％の含有量となるように混ぜ合わせた餌を自由摂取させた群をサンプル投与群とした。投与開始後３日目に腹大静脈から採血を行い、遠心分離して血清を得た。血中の総コレステロール値を市販のキットで測定した。各群６匹の被験ラット血清中の総コレステロール値の平均値±標準誤差を表４に示した。
その結果、標準飼料投与群（健常群）と比較して、ＨＣＤ食対照群では顕著に血中コレステロール値が上昇し、高コレステロール血症が惹起された。対照群に比し、ブナシメジ由来酢酸エチル抽出残渣又はホンシメジ由来酢酸エチル抽出上清および残渣を乾燥粉末１０％相当量で投与した場合には、コレステロール値の上昇抑制が見られた。また、投与期間中の体重変化および摂餌量の変化に異常は認められず、各サンプルは安全に服用できることがわかった。【００７１】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００７２】  本発明によりブナシメジ、ホンシメジ及びそれらの処理物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分として含有することを特徴とする血中コレステロール低下剤が提供される。当該血中コレステロール低下剤は、高脂血症や動脈硬化症、肥満症に対する治療用又は予防用の医薬として、また上記疾患の治療用又は予防用の食品、飲料または飼料として有用である。
【国際調査報告】
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