(57)【要約】  本発明の育毛成分含有ナノ粒子は、生薬成分を生体適合性高分子内に封入してナノ単位の大きさの粒子とする。このナノ粒子が毛穴や頭皮表面から頭皮の深部にまで浸透することにより、生薬成分を頭皮深部にまで到達させるとともに、頭皮深部においてナノ粒子から徐々に生薬成分を放出させることができるため、育毛剤の材料として好適に用いることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種以上の生薬成分を生体適合性高分子に封入して成る育毛成分含有ナノ粒子。
【請求項２】
請求項１に記載の育毛成分含有ナノ粒子において、   
前記生薬成分が毛母細胞活性剤若しくは消炎剤から選ばれた１種以上である。
【請求項３】
請求項２に記載の育毛成分含有ナノ粒子において、   
前記毛母細胞活性剤がヒノキチオールである。
【請求項４】
請求項２に記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記消炎剤がβ−グリチルレチン酸である。
【請求項５】
請求項２乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記生薬成分として、さらに血行促進剤を封入する。
【請求項６】
請求項２乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子において、 
前記生薬成分として、さらに男性ホルモン拮抗剤を封入する。
【請求項７】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記生体適合性高分子に対する前記生薬成分の封入率が１重量％以上２０重量％以下である。
【請求項８】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記生体適合性高分子が乳酸・グリコール酸共重合体である。
【請求項９】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
平均粒子径が３０ｎｍ以上３００ｎｍ以下である。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子が複合化されて成る育毛成分含有ナノ粒子。
【請求項１１】
請求項１０に記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記育毛成分含有ナノ粒子と共に糖アルコールが複合化される。
【請求項１２】
請求項１０に記載の育毛成分含有ナノ粒子において、
前記育毛成分含有ナノ粒子と共にビタミンまたはビタミン誘導体が複合化される。
【請求項１３】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子を分散液中に分散させて成る育毛剤。
【請求項１４】
請求項１３に記載の育毛剤において、
前記分散液に他の育毛成分が配合されている。
【請求項１５】
請求項１４に記載の育毛剤において、
前記分散液に配合される育毛成分がビタミンまたはビタミン誘導体である。
【請求項１６】
ポリビニルアルコール水溶液に、少なくとも生薬と生体適合性高分子と有機溶媒とを加えて、育毛成分含有生体適合ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、
前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、
を有する育毛成分含有ナノ粒子の製造方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が０．５重量％未満である。
【請求項１８】
請求項１６に記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記溶媒留去工程の後に、さらに前記ナノ粒子含有溶液からポリビニルアルコールを除去する除去工程を有する。
【請求項１９】
請求項１８に記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が０．１重量％以上１０重量％以下である。
【請求項２０】
請求項１６乃至請求項１９のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記有機溶媒がアセトンとエタノールの混合液である。
【請求項２１】
請求項１６乃至請求項１９のいずれかに記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記溶媒留去工程又は前記除去工程の後に、さらに前記ナノ粒子を複合化する複合化工程を有する。
【請求項２２】
請求項２１に記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記複合化工程において、前記ナノ粒子と共に、糖アルコール、ビタミンおよびビタミン誘導体のうちの１種以上を複合化させる。
【請求項２３】
請求項２１に記載の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、
前記複合化工程が凍結乾燥により行われる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナノ粒子内に育毛成分として生薬を封入した育毛成分含有ナノ粒子に関する。
【背景技術】
【０００２】
人の毛髪は、発毛と脱毛のサイクル（毛周期）を繰り返すことにより新たな毛髪に生え替わる。この毛周期は、毛母細胞の分裂により新しい毛球が作られ、毛乳頭が皮下組織に達して盛んに栄養を吸収し、毛が毛孔から頭皮表面に出て伸びていく成長期、毛母細胞の分裂が止まって毛根が上に押し上げられ、毛乳頭が毛球から離れて抜けるための準備を行う退行期、毛乳頭と毛が離れ抜け落ちた後、毛乳頭が休止する休止期から成り、２ヶ月〜１年間の休止期を経て、再び毛母細胞が分裂し、成長期に入る。【０００３】
脱毛症には、男性ホルモンと遺伝に起因する壮年性、若年性脱毛症（男性型脱毛症）、ストレスによる円形脱毛症などがある。これらの脱毛症は、上記の毛周期において成長期に毛が十分発育しないまま退行期へ移ってしまう結果、毛が細く柔らかいまま毛周期的に短い状態で脱毛に至ってしまうため発生すると考えられる。【０００４】
この原因としては、例えば男性型脱毛症の場合、男性ホルモンの一種であるテストステロンが血液中から毛母細胞に達すると、細胞内に存在する還元酵素の５αリダクターゼの作用によりテストステロンがジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に変化する。このＤＨＴが細胞核に入り、特に細胞分裂のエネルギー源として不可欠のアデノシン３リン酸（ＡＴＰ）の産生を阻害する。これにより毛母細胞は不活性化し、成長期毛が休止期毛に変化して脱毛するに至る。なお、脱毛には、男性ホルモン以外にも、血液循環の不全、栄養障害、遺伝、皮脂分泌異常や頭皮常在微生物の増殖に起因するフケ・かゆみの発生等、様々な原因が考えられている。【０００５】
近年、新たな育毛成分の開発が盛んに行われており、脱毛の防止及び育毛を目的とする育毛剤が多数上市されている。これらの商品は、上述したような脱毛の原因を改善するため、血管拡張剤、栄養補給剤、男性ホルモン拮抗剤、消炎剤、抗アレルギー剤、殺菌剤、保湿剤等、作用機序の異なる成分を種々組み合わせて配合されている。これらの成分の中には、マウス等の動物実験により発毛効果が実証されているものもある。【０００６】
しかし、これらの育毛剤を使用したにもかかわらず、育毛・発毛効果が現れない場合があった。この原因には、多数の要因が関与していると考えられるが、その一つに有効成分の頭皮浸透性の問題がある。従来、外用薬剤を塗布するのは、指による直接塗布や、脱脂綿、刷毛などの器具を利用して塗布する方法が一般的である。そのような方法は、皮膚に塗布した後、吸収されて血中に移行する薬剤については簡易であり好ましい投与形態である。【０００７】
塗布部分に滞留して薬効を発現する薬剤については、確実な薬効発現のためには、一定面積の皮膚に対しては一定量の薬剤塗布が必要である。ところが、脱毛症に悩む人の多くは、頭皮が過剰な皮脂、フケ或いはゴミ等で汚れていることもあり、従来の方法では、たとえ毛根に作用する有効成分を塗布しても、塗布部位の頭皮の状態や薬剤の性質により、塗布部にはじかれてしまい十分に薬剤を投与することができないなど、塗布量に見合うだけの効果が得られないと考えられる。【０００８】
そこで、頭皮内部に存在する毛根や血管等に作用する有効成分を作用部位まで到達させるための方法が種々提案されており、例えば特許文献１には、黄杞抽出物を有効成分とし、リン脂質又はシクロデキストリンを経皮吸収促進剤として用いた養毛、育毛料が開示されている。また、特許文献２、３には、ミノキシジル及び生薬エキスを有効成分とし、極性溶媒を配合して皮内滞留効果を向上させた育毛剤が開示されている。特許文献４には、有効成分と水膨張性粘度鉱物とを含有する頭皮浸透性や使用感の優れた育毛剤組成物が開示されている。【０００９】
また、特許文献５には、リン脂質と水とを混合して得られる小胞体（リポソーム）内に有効成分を含有させ、有益な物質を毛細胞に直接的且つ選択的に送達する方法が、特許文献６には、クラスター処理された水を用いて製造された小径のリポソーム内に育毛、養毛剤を保持して成る育毛、養毛組成物が開示されている。さらに、特許文献７には、高分子ナノ粒子に生理活性成分として育毛剤を含有させた経皮吸収剤がそれぞれ開示されている。【００１０】
ここで、育毛、養毛剤の発毛効果をより確実に発現させるためには、作用部位までの有効成分の確実な到達に加えて、有効成分を長期間に亘って放出させる、いわゆる徐放性を有することが望ましい。しかしながら、上記特許文献１〜４においては、徐放性については何ら考慮されておらず、特許文献５、６の方法ではリポソーム内に薬剤を保持させるため、ある程度の徐放性は期待されるが、十分なものとは言えなかった。また、特許文献６では磁力線処理水を用いるため、高価な設備が必要となる上、製造工程の増加によるコストアップも避けられない。【００１１】
特許文献７には、ミノキシジル、ＴＧＦ（細胞成長因子）、ＥＧＦ（上皮細胞成長因子）、ＦＧＦ（線維芽細胞成長因子）、ＩＧＦ（インシュリン様成長因子）、及びテストステロン、アンドロジェン等の育毛、養毛成分を高分子ナノ粒子に含有させる旨の記載はされているものの、各成分の具体的な配合量や処方例、頭皮浸透効果や発毛効果についての試験結果等、育毛、養毛剤としての有効性の根拠は一切開示されていない。なお、有効成分として記載されているミノキシジルは、元来血圧降下剤として開発されたものであり、テストステロン、アンドロジェン等のホルモン剤とともに、長期間の連続使用による副作用が一部指摘されている。【００１２】
さらに、特許文献７には、高分子ナノ粒子の製造工程で用いる、高分子と活性成分とを溶解させる油層として、低沸点且つ難水溶性の有機溶媒であるハロゲン化アルカン類、エチルアセテート、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等が記載されているが、これらの有機溶媒は、いずれも人体に対する毒性や環境への影響が懸念されるものであり、頭皮に直接作用させる育毛、養毛剤の製造工程において使用するのは好ましいものではなかった。
【特許文献１】特開平１０−２０３９３３号公報
【特許文献２】特開平１０−２１８７３７号公報
【特許文献３】特開２００２−２２６３２９号公報
【特許文献４】特開２００３−２６５４６号公報
【特許文献５】特表平８−５１１５１０号公報
【特許文献６】特開２０００−２２９８１５号公報
【特許文献７】特開２００２−３０８７２８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、上記問題点に鑑み、頭皮内部への浸透効果と成分の徐放効果を兼備し、且つ安全性の高い育毛成分含有ナノ粒子及びそれを用いた育毛剤を提供することを目的とする。また、本発明の他の目的は、低コストで環境負荷も少ない育毛成分含有ナノ粒子の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記目的を達成するために本発明は、１種以上の生薬成分を生体適合性高分子に封入して育毛成分含有ナノ粒子としたものである。【００１５】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記生薬成分が毛母細胞活性剤若しくは消炎剤から選ばれた１種以上であることとした。【００１６】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記毛母細胞活性剤がヒノキチオールであることとした。【００１７】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記消炎剤がβ−グリチルレチン酸であることとした。【００１８】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記生薬成分として、さらに血行促進剤を封入することとした。【００１９】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記生薬成分として、さらに男性ホルモン拮抗剤を封入することとした。【００２０】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記生体適合性高分子に対する前記生薬成分の封入率が１重量％以上２０重量％以下であることとした。【００２１】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、前記生体適合性高分子が乳酸・グリコール酸共重合体であることとした。【００２２】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子において、平均粒子径が３０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることとした。【００２３】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子が複合化されることとした。【００２４】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子と共にビタミンまたはビタミン誘導体が複合化されることとした。【００２５】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子と共に糖アルコールが複合化されることとした。【００２６】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子を分散液中に分散させて成る育毛剤である。【００２７】
また本発明は、上記構成の育毛剤において、前記分散液に他の育毛成分を配合することとした。【００２８】
また本発明は、上記構成の育毛剤において、前記分散液に配合される育毛成分がビタミンまたはビタミン誘導体であることとした。【００２９】
また本発明は、ポリビニルアルコール水溶液に、少なくとも生薬と生体適合性高分子と有機溶媒とを加えて、育毛成分含有生体適合ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程とを有することを特徴とする育毛成分含有ナノ粒子の製造方法である。【００３０】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が０．５重量％未満であることとした。【００３１】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記溶媒留去工程の後に、さらに前記ナノ粒子含有溶液からポリビニルアルコールを除去する除去工程を有することとした。【００３２】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が０．１重量％以上１０重量％以下であることとした。【００３３】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記有機溶媒がアセトンとエタノールの混合液であることとした。【００３４】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記溶媒留去工程又は前記除去工程の後に、さらに前記ナノ粒子を複合化する複合化工程を有することとした。【００３５】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記複合化工程において、前記ナノ粒子と共に、糖アルコール、ビタミンおよびビタミン誘導体のうちの１種以上を複合化させることとした。【００３６】
また本発明は、上記構成の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法において、前記複合化工程が凍結乾燥により行われることとした。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】実施例１１において、β−グリチルレチン酸ＰＢＳ分散液（図１（Ａ））および本発明のβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子水分散液（図１（Ｂ））を塗布した４時間後の表皮の蛍光強度グラフ及び断面写真である。
【図２】ヒノキチオールＰＢＳ分散液（図２（Ａ））および本発明のヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子水分散液（図２（Ｂ））を塗布した４時間後の表皮の蛍光強度グラフ及び断面写真である。
【図３】実施例１２において、剃毛部全体に本発明の試験液Ａを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真である。
【図４】剃毛部全体に本発明の試験液Ｂを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真である。
【図５】剃毛部全体に比較対照液である育毛剤Ｒを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真である。
【図６】剃毛部全体に比較対照液である育毛剤Ｉを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真である。
【図７】剃毛部全体に比較対照液である育毛剤Ｇを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
生薬とは、人類の長い歴史の中で天然の薬として用いられてきた薬草を主にさしており、この生薬の主要成分が生薬成分である。本発明にかかる育毛成分含有ナノ粒子は、育毛効果を有する生薬成分を生体適合性高分子内に封入して、ナノ単位の大きさの粒子としたものである。このナノ粒子が毛穴や頭皮表面から頭皮の深部にまで浸透することにより、生薬成分を頭皮深部にまで到達させるとともに、頭皮深部においてナノ粒子から徐々に育毛成分を放出させることができるため、育毛剤の材料として好適に用いることができる。【００３９】
本発明に用いられる生体適合性高分子は、生体への刺激・毒性が低く、生体適合性で、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。また、内包する薬剤を持続して徐々に放出する粒子であることが好ましい。このような素材としては、特にポリ乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）を好適に用いることができる。ＰＬＧＡは薬物を内包可能であり、当該薬物の効力を保持したまま長期間保存できることが知られている。さらに、ＰＬＧＡの加水分解・長期半減期の特徴から、数日から１ヶ月単位の徐放ができると考えられる。【００４０】
ＰＬＧＡの分子量は、５，０００〜２００，０００の範囲内であることが好ましく、１５，０００〜２５，０００の範囲内であることがより好ましい。乳酸とグリコール酸との組成比は１：９９〜９９：１であればよいが、乳酸１に対しグリコール酸０．３３３であることが好ましい。また、乳酸およびグリコール酸の含有量が２５重量％〜６５重量％の範囲内であるＰＬＧＡは、非晶質であり、かつアセトン等の有機溶媒に可溶であるから、好適に使用される。【００４１】
また、水溶性の育毛成分を封入する場合、ＰＬＧＡの表面をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾しておくと、生薬成分とＰＬＧＡとの親和性が向上し、封入が容易になるため好ましい。生体適合性高分子としては、ほかに、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリアスパラギン酸等が挙げられる。また、これらのコポリマーであるアスパラギン酸・乳酸共重合体（ＰＡＬ）やアスパラギン酸・乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＡＬＧ）を用いても良く、アミノ酸のような荷電基あるいは官能基化し得る基を有していてもよい。【００４２】
上記以外の生体適合性高分子としては、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリエチレンのようなポリアルキレン、ポリプロピレン、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレンテレフタレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテルおよびポリビニルエステルのようなポリビニル化合物、アクリル酸とメタクリル酸とのポリマー、セルロースおよび他の多糖類、ならびにペプチドまたはタンパク質、あるいはそれらのコポリマーまたは混合物が挙げられる。【００４３】
本発明の育毛成分含有ナノ粒子に内包される生薬成分としては、毛母細胞活性剤、消炎剤、男性ホルモン拮抗剤、血行促進剤、殺菌・抗菌剤等の、育毛効果を有する種々の生薬成分が挙げられる。毛母細胞活性剤は、毛母細胞や毛根細胞に直接作用して、或いは細胞分裂のエネルギー源となるＡＴＰを増加させて細胞分裂を活性化するものである。このような毛母細胞活性剤としては、パンテノール、パントテン酸カルシウム、パントテン酸エチル、パントテニルエチルエーテル等のパンテノール誘導体、ヒノキチオール、アスパラギン酸カリウム、ペンタデカン酸グリセリド、感光素３０１、Ｎ−アセチル−Ｌ−メチオニン、５−モノニトログアヤコール、モノニトログアヤコールナトリウム、グルコン酸クロルヘキシジン、ビオチン、ネタカナール、チクセツニンジン、タイソウエキス、プラセンタエキス、ニンジンエキス、ローヤルゼリーエキス、ニンニク成分等が挙げられる。【００４４】
消炎剤は、頭皮の炎症を抑えてフケやかゆみを抑制するものである。このような消炎剤としては、β−グリチルレチン酸及びその誘導体、脂溶性グリチルレチン酸類、グリチルリチン酸及びグリチルリチン酸ジカリウム、グリチルリチン酸モノアンモニウム等のグリチルリチン酸誘導体、塩酸ジフェンヒドラミン、酢酸ヒドロコルチゾン、ブレドニゾロン、サリチル酸、アズレン、グアイアズレン、甘草エキス、エイジツエキス、オウゴンエキス、シコンエキス、カワラヨモギエキス、キキョウエキス、キョウニンエキス、クチナシエキス、熊笹抽出液、ゲンチアナエキス、コンフリーエキス、サンザシエキス、シラカバエキス、セイヨウノコギリソウエキス、ゼニアオイエキス、トウニンエキス、桃葉エキス、ビワ葉エキス等が挙げられる。【００４５】
男性ホルモン拮抗剤は、５αリダクターゼ阻害剤のように毛母細胞の分裂を鈍くする男性ホルモンの活動を抑制するものである。このような男性ホルモン拮抗剤としては、エストラジオール、エチニルエストラジオール、スピロノラクトン、オキセンドロン、ジエチルスチルベストロール、エピテストステロン、エストロン、サイプロテロンアセテート、１１α−ハイドロキシプロゲステロン、フルタマイド、３−デオキシアデノシン、酢酸クロルマジノン、ホップエキス、ペパーミントエキス、チョウジエキス、キナエキス、アロエエキス、サンショウエキス、オタネニンジンエキス等が挙げられる。【００４６】
血行促進剤は、毛細血管を拡張することにより血流量を増大させ、毛乳頭への栄養補給を促進するものである。このような血行促進剤としては、ニコチン酸及びニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸誘導体、セファランチン、塩化カルプロニウム、アセチルコリン、γ−オリザノール、サークレチン、クロマカリム、ニコランジル、ピナシジル、フタリド類、ジアルキルモノアミン誘導体、イチョウエキス、カミツレエキス、トウキエキス、センキュウエキス、ローズマリーエキス、センブリエキス、ベニバナエキス、トウガラシチンキ、チンピエキス、ショウキョウチンキ、ニンジンエキス、ショウブ根エキス、当薬エキス、ユズ抽出液等が挙げられる。【００４７】
殺菌剤は、発毛に悪影響のある雑菌の繁殖を防止するものである。このような殺菌剤としては、ヒノキチオール、イソプロピルメチルフェノール、メントール、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、オクトピロックス、クロロヘキシジン、ジンクピリチオン、ソルビン酸カリウム、ビオゾール、クジンエキス、ムクロジエキス、オウバクエキス等が挙げられる。【００４８】
上記生薬成分の中でも、頭皮の深部に存在する毛母細胞や毛乳頭に直接作用する毛母細胞活性剤や消炎剤を封入することが好ましい。特に、ヒノキチオール、β−グリチルレチン酸は、後述するように、頭皮深部に供給されることでその効果が向上することから、ナノ粒子に封入する生薬成分として好適である。ヒノキチオールは、青森ひばや台湾ひのき等に含まれる物質であり、細胞活性作用以外に殺菌、抗菌作用も兼備している。β−グリチルレチン酸は、生薬の一種である甘草の代表成分の一つであり、消炎作用以外にも、抗潰瘍作用、解毒作用等の幅広い生理活性が知られている。【００４９】
これらの生薬成分のナノ粒子内への封入率が高いほど、生薬成分含有量も高くなるため好ましいが、製造上の理由から封入率に比例してナノ粒子の粒子径も大きくなるため、ナノ粒子が頭皮深部まで到達し難くなる。そのため、生薬成分の封入率は、生体適合性高分子に対し１重量％以上２０重量％以下が好ましく、５重量％以上２０重量％以下が特に好ましい。また、上記生薬成分のうち何れか１種のみを封入しても十分な育毛効果が得られるが、特に効能や作用機序の異なる成分を複数種封入しておけば、各成分の相乗効果により育毛効果の促進が期待できる。さらに、生薬成分と共に、例えばミノキシジルやビタミン誘導体等の、生薬成分以外の育毛成分を封入することもできる。【００５０】
一般に、毛穴の直径は２００μｍ程度であるため、本発明の育毛成分含有ナノ粒子は、１０００ｎｍ未満の平均粒子径を有するものであれば特に制限はないが、頭皮深部への浸透効果を高めるためには平均粒子径を３００ｎｍ以下とすることが好ましい。また、皮膚細胞の大きさは１５，０００ｎｍ、皮膚細胞間隔は皮膚の浅い所と深い所でバラツキがあるが、７０ｎｍ程度であると考えられているため、ナノ粒子の平均粒子径を２００ｎｍ以下とすることで、毛穴以外の部分からも頭皮深部へ浸透するナノ粒子となる。一方、前述したようにナノ粒子の粒子径が小さくなるほど封入率も低くなるため、平均粒子径は３０ｎｍ以上とすることが好ましい。【００５１】
以上のようにして得られたナノ粒子は、凍結乾燥等により粉末化させる際に再分散可能な凝集粒子にできる（複合化できる）。また、流動層乾燥造粒法または乾式機械的粒子複合化法（例えば、メカノフュージョンシステムＡＭＳ（ホソカワミクロン（株）製））により、圧縮力および剪断力を加えることで複合化しても、再度分離可能な状態で一体化できる。これにより、使用前まではナノ粒子が集まった取り扱いやすい凝集粒子となっており、使用時に水分に触れることでナノ粒子に戻って高反応性等の特性を復元する複合粒子となる。【００５２】
なお、封入される育毛成分が水溶性の場合、一旦封入された育毛成分がナノ粒子表面へ漏出すると、周囲に存在する水に再溶解する。この水を凍結乾燥等により除去すると、その分だけ育毛成分が減少して封入率にばらつきが発生してしまう。そこで、有機または無機の物質を再分散可能に複合化させ、育毛成分の溶解した水を除去せずにそのままナノ粒子と共に乾燥させることが好ましい。例えば、糖アルコールやショ糖を適用することにより、封入率のばらつきを効果的に防止するとともに、糖アルコール等が賦形剤となりナノ粒子の取り扱い性を高めることができる。糖アルコールとしては、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、マルチトース、キシリトースなどが挙げられ、この中でも特にトレハロースが好ましい。なお、トレハロースは、保湿作用により育毛効果を向上させる点でも好ましい。【００５３】
また、複合化の際に、複合化粒子（ナノコンポジット）の表面にさらにビタミンやプロビタミン等の薬剤を付着させることにより、ナノ粒子から徐放的に放出される育毛成分とは別に、頭皮浸透直後に複合化粒子表面から溶け出す速効性の薬剤を作用させることができる。このような構成とすることで、ＰＬＧＡ複合化粒子にさらにすばやい浸透性（速効性の浸透作用）を与えられる。なお、複合化される薬剤が水溶性であれば、すばやく溶けて速効性の効果を示すのでより好ましい。【００５４】
このような薬剤としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ビタミンＵ、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、α−リボ酸、オロット酸及びこれらの成分又は誘導体である酢酸レチノール、酢酸リボフラビン、ピリドキシンジオクタノエート、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステル、ＤＬ−トコフェロール−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウム、パントテニルエチルエーテル、Ｄ−パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸−α−トコフェロール、コハク酸−α−トコフェロール等のビタミンまたはビタミン誘導体、或いは水溶性のプロビタミン類、例えば、ＶＣ−ＰＭＧ（水溶性リン酸アスコルビルＭｇ）、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸グルコシド）、パンテノール（水溶性ビタミンＢ５）、Ｌ−システイン等が挙げられる。【００５５】
また、ナノ粒子の表面に粘膜付着性を高めるキトサンを複合化したり、リン脂質（レシチン／フォスファチジルコリン）を複合化させて頭皮親和性を高めてもよい。また、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を複合化することで、水に溶けやすくなり、頭皮への浸透性を高められる。さらに、タルクを複合化することで、粒子のすべり性が向上し、肌への使用感を高めることができる。【００５６】
このようにして製造した育毛成分含有ナノ粒子は、分散液に分散させた育毛剤として使用することで有効な育毛効果を生じる。しかしながら、ＰＬＧＡは水分と混合させると加水分解されてしまい、短期間にナノ粒子の運搬性能が失われてしまう。そこで、このような育毛剤として使用をする場合は、分散液と粉末とを別々の容器に充填して保存しておき、使用直前に分散液と粉末とを所定量混合して使用することが好ましい。【００５７】
分散液としては、育毛成分含有ナノ粒子が短時間で均一に分散するとともに、人体に対し安全性の高いものを用いる必要があり、水、エタノールの混合液が好適に用いられる。なお、水に対するエタノールの容量比が１／２以上になるとナノ粒子の凝集が起こるため、１／１０から３／１０の範囲とすることが好ましい。【００５８】
また、発毛、育毛効果を促進するためには、様々な作用機序を有する育毛成分の複合的使用が必要である。そこで、上述した生薬成分の１種以上を分散液中にも配合することにより、ナノ粒子の頭皮深部への浸透に伴い、ナノ粒子表面に吸着された分散液中の育毛成分も同時に頭皮深部まで送達されるため、より多くの育毛成分を毛母細胞や毛乳頭へ供給することができる。また、育毛成分の中でも、頭皮表面にも作用する消炎剤、殺菌・抗菌剤や、頭皮に作用して育毛効果を更に増強させる保湿剤、局所刺激剤、抗脂漏剤、或いは前述したようなビタミン類やビタミン誘導体等を配合すれば、これらの薬剤の頭皮表面への即効性を確保しつつ、頭皮深部においては育毛成分含有ナノ粒子からの生薬成分の徐放により長期間に亘る育毛効果が期待できる。【００５９】
保湿剤は、頭皮の乾燥を防止して柔軟にすることで、発毛環境を整えるものである。このような保湿剤としては、トレハロース、メイグイファ、ソルビトール、可溶性コラーゲン、グリセリン、コンドロイチン硫酸、チューベローズポリサッカライド、冬虫夏草、トリサッカライド、尿素、バイオヒアルロン酸、ヒアルロン酸、ビタミンＣリン酸エステルカルシウム塩、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、プロピレングリコール、ボタンピエキス、アロエエキス、プラセンタエキス、エンメイソウエキス、オトギリソウエキス、オーツ麦エキス、オオムギ抽出液、オレンジ抽出液、海草エキス、キューカンバーエキス、ゴボウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、デュークエキス、ビワ抽出液、ブドウ葉エキス、プルーンエキス、ヘチマエキス、マイカイエキス、ミニササニシキ、ユリエキス、リンゴエキスなどが挙げられる。【００６０】
局所刺激剤は、頭皮の新陳代謝の活性化、頭皮の強化、かゆみ防止等の効果を有するものである。このような局所刺激剤としては、カンファー、トウガラシチンキ、ノニル酸ワニリルアミド、メントール、ショウキョウチンキ、オランダカラシエキス、カンタリスチンキ、サンショウエキス、ハッカ油、ワサビ大根エキス等が挙げられる。【００６１】
抗脂漏剤は、脱毛を促進する過剰に分泌された皮脂を除外したり、皮脂腺の活動を抑制したりするものである。このような抗脂漏剤としては、カシュウエキス、オドリコソウエキス、イオウ、チオキソロン、バンサイド、ポリソルベート類、レシチン等が挙げられる。【００６２】
なお、上記分散液中に、育毛成分以外の任意の成分、例えばエタノールや多価アルコール等のアルコール類、セルロース類、界面活性剤、油脂、水溶性高分子、着色料、香料、紫外線吸収剤、防腐剤等を本発明の効果を妨げない範囲で配合することができる。【００６３】
このようにして得られた育毛剤を頭皮に塗布すると、ナノ粒子は毛母細胞や毛乳頭が存在する毛穴内部の毛根に効率よく浸透する。即ち、頭皮に塗布されたナノ粒子を含有する液滴は、ナノ粒子により表面張力が低下しているため界面エネルギーが下がる方向（頭皮内部へ浸透する方向）に移動し易くなる。さらに、液滴内のナノ粒子又は水に対し頭皮内部からの吸着も起こるため、ナノ粒子は毛根へと効率よく送達されることとなる。そして、ナノ粒子中に封入された生薬成分は毛根部において長期間に亘って徐放する。【００６４】
本発明の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法としては、目的の物質を１０００ｎｍ未満の粒子径を有する粒子に加工することができる方法であれば特に限定されるものではないが、球形晶析法を用いることが非常に好ましい。球形晶析法は、化合物合成の最終プロセスにおける結晶の生成・成長プロセスを制御することで、球状の結晶粒子を設計し、その物性を直接制御して加工することができる方法である。球形晶析法には、晶析する結晶の生成・凝集機構の違いによって球形造粒法（ＳＡ法）と、エマルジョン溶媒拡散法（ＥＳＤ法）とに分けることができる。【００６５】
ＳＡ法は、二種類の溶媒を用いて薬物結晶を析出させて、球形造粒結晶を形成する方法である。具体的には、まず、目的の薬物を溶解し難い貧溶媒と、該薬物を良好に溶解でき、かつ貧溶媒にも混和拡散できる良溶媒とを準備する。そして、良溶媒に溶解させた薬物溶液を、撹拌下、貧溶媒中に滴下する。このとき、良溶媒の貧溶媒への移行や温度効果等による溶解度の低下を利用することで、薬物の結晶が系内に析出する。【００６６】
さらに、系内に、薬物と親和性を有し貧溶媒には混和しない少量の液体（液体架橋剤）を添加すると、液体架橋剤が遊離する。そして、結晶の間に架橋が形成され、界面張力および毛細管力により、非ランダムに結晶が凝集し始める。なお、この状態をファニキュラー状態という。【００６７】
ファニキュラー状態の系に対してさらに機械的剪断力を加えると、凝集した結晶は圧密化され、略球状の造粒物となる。なお、この状態をキャピラリー状態という。キャピラリー状態の造粒物がランダムに合一することで、最終的な球形造粒結晶が形成される（ナノ粒子形成工程）。【００６８】
ＥＳＤ法も、二種類の溶媒を用いる方法であるが、ＳＡ法とは異なり、エマルジョンを形成してから、良溶媒と貧溶媒との相互拡散を利用して薬物を球状に結晶化させる方法である。具体的には、まず、良溶媒中に溶解した薬物溶液を撹拌下、貧溶媒中に滴下する。このとき、薬物と良溶媒とが親和性を持つため、良溶媒の貧溶媒への移行が遅れ、エマルジョン滴が形成される。そして、エマルジョン滴の冷却、並びに、良溶媒および貧溶媒の相互拡散により、エマルジョン滴内で薬物の溶解度が低下していき、薬物の球形結晶粒子が、エマルジョン滴の形状を保持したまま析出、成長する。【００６９】
上記球形晶析法では、物理化学的な手法でナノ粒子を形成でき、しかも得られるナノ粒子が略球形であるため、均質なナノ粒子を、触媒や原料化合物の残留といった問題を考慮する必要なく、容易に形成することができる。その後、良溶媒である有機溶媒を減圧留去し（溶媒留去工程）、育毛成分含有ナノ粒子粉末を得る。そして、得られた粉末をそのまま、或いは必要に応じて凍結乾燥等により複合化し（複合化工程）、複合粒子とした後、容器内に充填して育毛成分含有ナノ粒子とする。【００７０】
上記良溶媒および貧溶媒の種類、並びに液体架橋剤の種類は、目的となる薬物の種類等に応じて決定されるものであり特に限定されるものではないが、育毛成分含有ナノ粒子は、頭皮へ直接塗布する育毛剤の原料として用いられるため、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ないものを用いる必要がある。このような貧溶媒としては、例えばポリビニルアルコール水溶液が好適に用いられ、良溶媒としては、例えばアセトンとエタノールの混合液が好適に用いられる。なお、余剰のポリビニルアルコールが残存している場合は、溶媒留去工程の後に、遠心分離等によりポリビニルアルコールを除去する工程（除去工程）が設けられる。【００７１】
ポリビニルアルコール水溶液の濃度、或いはアセトンとエタノールの混合比や、結晶析出時の条件や機械的剪断力の加え方も特に限定されるものではなく、目的となる薬物の種類や、球形造粒結晶の粒径（本発明の場合ナノオーダー）等に応じて適宜決定すればよいが、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が高いほどナノ粒子表面へのポリビニルアルコールの付着が良好となり、乾燥後の水への再分散性が向上する反面、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が所定以上になると、貧溶媒の粘度が上昇して良溶媒の拡散性に悪影響を与える。そのため、ポリビニルアルコールの重合度やけん化度によっても異なるが、ナノ粒子形成工程後に除去工程を設ける場合は０．１重量％以上１０重量％以下が好ましく、２％程度がより好ましい。なお、除去工程を設けない場合は０．５重量％以下とすることが好ましい。【００７２】
なお、本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
【実施例１】
【００７３】
本発明の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法について検討した。２重量％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、エタノール１０ｍＬで溶解したβ−グリチルレチン酸（アルプス薬品工業製）１００ｍｇを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００７４】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続け、１時間有機溶媒を留去した後、遠心分離操作（２００００ｒｐｍ、−２０℃、２０分）により過剰のポリビニルアルコールを除去した。上澄みを除去後、沈殿を精製水に再懸濁し凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。分光光度計を用いてＰＬＧＡナノ粒子中のβ−グリチルレチン酸の封入率を定量したところ８．５％であった。
【実施例２】
【００７５】
５重量％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、エタノール１０ｍＬで溶解したヒノキチオール（高砂香料製）３００ｍｇを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００７６】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続け、４０分間有機溶媒を留去した後、遠心分離操作（２００００ｒｐｍ、−２０℃、２０分）により過剰のポリビニルアルコールを除去した。上澄みを除去後、沈殿を精製水に再懸濁し遠心分離した後、再び上澄みを除去し、得られた沈殿を精製水約５０ｍＬで再懸濁した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。分光光度計を用いてＰＬＧＡナノ粒子中のヒノキチオールの封入率を定量したところ６．６％であった。
【実施例３】
【００７７】
７重量％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、トウガラシチンキ（丸善製薬製）９．５ｍＬを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってトウガラシチンキ封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００７８】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続け、４０分間有機溶媒を留去した後、遠心分離操作（２００００ｒｐｍ、−２０℃、２０分）により過剰のポリビニルアルコールを除去した。上澄みを除去後、沈殿を精製水に再懸濁し遠心分離した後、再び上澄みを除去し、得られた沈殿を精製水約５０ｍＬで再懸濁した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。分光光度計を用いてＰＬＧＡナノ粒子中のトウガラシチンキの封入率を定量したところ１．８％であった。
【実施例４】
【００７９】
１０重量％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、ニコチン酸ベンジル（壽ケミカル製）０．１３ｍＬ、エタノール１０ｍＬを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってニコチン酸ベンジル封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００８０】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続け、４０分間有機溶媒を留去した後、遠心分離操作（２００００ｒｐｍ、−２０℃、２０分）により過剰のポリビニルアルコールを除去した。上澄みを除去後、沈殿を精製水に再懸濁し遠心分離した後、再び上澄みを除去し、得られた沈殿を精製水約５０ｍＬで再懸濁した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。分光光度計を用いてＰＬＧＡナノ粒子中のニコチン酸ベンジルの封入率を定量したところ８．９％であった。
【実施例５】
【００８１】
０．５重量％未満のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、エタノール１０ｍＬで溶解したβ−グリチルレチン酸（アルプス薬品工業製）１００ｍｇを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００８２】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続けながら、有機溶媒を留去した。なお、溶媒留去開始と同時に、この懸濁液に４０ｍＬの精製水を４ｍＬ／分で滴下した。約１時間溶媒留去を行った後、懸濁液をフィルターろ過した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。
【実施例６】
【００８３】
０．５重量％未満のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、エタノール１０ｍＬで溶解したヒノキチオール（高砂香料製）３００ｍｇを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００８４】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続けながら、有機溶媒を留去した。なお、溶媒留去開始と同時に、この懸濁液に４０ｍＬの精製水を４ｍＬ／分で滴下した。約１時間溶媒留去を行った後、懸濁液をフィルターろ過した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。
【実施例７】
【００８５】
０．５重量％未満のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、トウガラシチンキ（丸善製薬製）９．５ｍＬを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってトウガラシチンキ封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００８６】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続けながら、有機溶媒を留去した。なお、溶媒留去開始と同時に、この懸濁液に４０ｍＬの精製水を４ｍＬ／分で滴下した。約１時間溶媒留去を行った後、懸濁液をフィルターろ過した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。
【実施例８】
【００８７】
０．５重量％未満のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、ニコチン酸ベンジル（壽ケミカル製）０．１３ｍＬ、エタノール１０ｍＬを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってニコチン酸ベンジル封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００８８】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続けながら、有機溶媒を留去した。なお、溶媒留去開始と同時に、この懸濁液に４０ｍＬの精製水を４ｍＬ／分で滴下した。約１時間溶媒留去を行った後、懸濁液をフィルターろ過した。その後、予め調製したトレハロース水溶液（トレハロース（林原製）２ｇを精製水８ｍＬに溶解して調製）を添加し、均一に混合した後、凍結乾燥した。１日後、平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なＰＬＧＡ複合ナノ粒子乾燥粉末を得た。
【実施例９】
【００８９】
０．５重量％未満のポリビニルアルコール（ＰＶＡ：クラレ社製）水溶液を調製し貧溶媒とした。生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン２０ｍＬに溶解した後、エタノール１０ｍＬで溶解したβ−グリチルレチン酸（アルプス薬品工業製）１００ｍｇを添加、混合し良溶媒とした。この良溶媒を、先の貧溶媒中に４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で滴下し、良溶媒の貧溶媒中への拡散によってβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノスフェアの懸濁液を得た。【００９０】
続いて、減圧下４０℃、１００ｒｐｍで攪拌を続けながら、有機溶媒を留去した。なお、溶媒留去開始と同時に、この懸濁液に４０ｍＬの精製水を４ｍＬ／分で滴下した。約１時間溶媒留去を行った後、懸濁液をフィルターろ過した。その後、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール１ｇ、及び賦形剤としてのトレハロース（林原製）２ｇを精製水１０ｍｌに溶解した溶液を加え、ビーカを超音波下でプレ凍結し（すなわち、−４０℃で１５分冷却し）、その後、−８０℃、１０ｔｏｒｒで凍結乾燥した。これにより、表面に酢酸ｄｌ−α−トコフェロールが複合化されたβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡ複合ナノ粒子を得た。
【実施例１０】
【００９１】
上記実施例１〜９と同様の操作により、上記ＰＬＧＡ以外の生体適合性高分子ポリマー（ポリエチレングリコール修飾ＰＬＧＡ、ポリ乳酸（ＰＬＡ））を用いて、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオール、トウガラシチンキ、及びニコチン酸ベンジル封入ナノ粒子を調製したところ、いずれも平均粒子径が２００ｎｍ〜３００ｎｍの、水への再分散性の良好なナノ粒子乾燥粉末を調製することができた。
【実施例１１】
【００９２】
上記実施例１及び２の方法に沿って調製した育毛成分含有ＰＬＧＡナノ粒子を用い、改変ブロノフ拡散チェンバー法で頭皮浸透試験を実施した。なお、試験液は、β−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液（ナノ粒子濃度＝０．４％、β−グリチルレチン酸濃度＝０．０３６％）、ヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液（ナノ粒子濃度＝０．６％、ヒノキチオール濃度＝０．０３６％）を用い、比較対照液としては、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオールのバッファー分散液（濃度０．０３６％）を利用した。【００９３】
改変ブロノフ拡散チェンバー法の工程を以下に説明する。
１）被験者（４０歳女性の前額部）から頭皮片を摘出し、皮下組織を１ｍｍ程残して除去する。
２）頭皮片を垂直方向に８個の小片に分割する。
３）頭皮小片の切断側面をバイオコンパチブルＴＧポリマーで包む。
４）滅菌された改変ブロノフ拡散チェンバーのハウジングに設置する。
５）チェンバーを２４穴マイクロプレートに設置し、無血清ＤＭＥＭ培地を入れる。
６）５％炭酸ガスを通気して、ｐＨを７．２〜７．３に維持する。
７）試験液及び比較対照液を２０μＬ／ｃｍ２頭皮表面側に添加する。
８）塗布４時間後に、頭皮小片を取り出す。
９）頭皮小片の毛穴断面を４μｍの薄さ（垂直方向）に切断する。
１０）育毛成分の頭皮浸透性を蛍光顕微鏡（励起波長４８０ｎｍ）にて撮影し、その蛍光強度をスキャニングする。【００９４】
結果を図１及び図２に示す。【００９５】
図１は、β−グリチルレチン酸ＰＢＳ分散液（図１（Ａ））或いはβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子水分散液（図１（Ｂ））を塗布した４時間後の頭皮の蛍光強度グラフ及び断面写真である。図１から明らかなように、本発明のβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液を塗布すると、頭皮表面は薄いものの頭皮の深部に向かうにつれて濃い蛍光が観察され、またその蛍光強度も頭皮深部にかけて強く観察された。一方、単にβ−グリチルレチン酸を分散させた比較対照液を塗布した場合は、頭皮表面のみ蛍光が観察され、蛍光強度も弱かった。以上から、β−グリチルレチン酸をＰＬＧＡナノ粒子に封入することにより、ヒト頭皮の毛穴の深さ０．４７〜０．８８ｍｍまで確実に高濃度に浸透することが確認された。【００９６】
図２は、ヒノキチオールＰＢＳ分散液（図２（Ａ））或いはヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子水分散液（図２（Ｂ））を塗布した４時間後の頭皮の断面写真である。図２においても図１と同様に、本発明のヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液を塗布すると、頭皮表面は薄いものの頭皮の深部に向かうにつれて濃い蛍光が観察され、またその蛍光強度も頭皮深部にかけて強く観察された。一方、単にヒノキチオールを分散させた比較対照液を塗布した場合は、頭皮表面のみ蛍光が観察され、蛍光強度も弱かった。以上から、ヒノキチオールをＰＬＧＡナノ粒子に封入することにより、ヒト頭皮の毛穴の深さ０．６６〜１．３９ｍｍまで高濃度に浸透することが確認された。
【実施例１２】
【００９７】
実施例１１において頭皮浸透性が良好であったβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子、及びヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子の発毛効果を、Ｃ３Ｈマウスを用いて評価した。このＣ３Ｈマウスは、毛刈りをすると毛周期が休止期に入る特徴があり、毛刈り後１５日間は発毛しないことがわかっている。【００９８】
Ｃ３Ｈマウスによる発毛効果の評価手順を以下に示す。なお、試験液は、β−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液（試験液Ａ；ナノ粒子濃度＝０．５％、β−グリチルレチン酸濃度＝０．０４５％）、ヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子の水分散液（試験液Ｂ；ナノ粒子濃度＝０．５％、ヒノキチオール濃度＝０．０３％）を用い、比較対照液としては、０．０４５％β−グリチルレチン酸水溶液、０．０３％ヒノキチオール水溶液、市販の育毛剤Ｒ（大正製薬（株）製）、育毛剤Ｉ（ライオン（株）製）、育毛剤Ｇ（第一製薬（株）製）を使用した。
１）Ｃ３Ｈマウスの背部下半部をバリカンで刈り取る。
２）シェーバーで剃毛する。
３）剃毛部全体に、試験液或いは比較対照液を２０μＬ／ｃｍ２塗布する。
４）毎日一定時刻に１回、連日塗布する。
５）数日毎に発毛状況を観察する。
観察結果を図３〜図７及び表１に示す。【００９９】
【表１】
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図３〜図７は、剃毛部全体に試験液Ａ、Ｂ、及び育毛剤Ｒ、Ｉ、Ｇを塗布したＣ３Ｈマウスの発毛状況を示す写真であり、表１は発毛状況の観察結果をまとめたものである。表１において、×は発毛していない状態、△はごく少量〜うっすらと発毛した状態、○は発毛が明確に確認できる状態を表している。図３、図４及び表１から明らかなように、本発明の育毛成分含有ナノ粒子を含む試験液Ａ、Ｂを塗布したマウスは、塗布１１日後は発毛していなかったが、塗布１３日後にはごく少量ではあるが発毛し始め、塗布１５日後には発毛が明確に確認できた。一方、単にβ−グリチルレチン酸或いはヒノキチオールを分散させた比較対照液を塗布した場合は、塗布１５日後においても全く発毛は認められなかった。【０１００】
また、図５〜図７及び表１から明らかなように、育毛剤Ｒは、塗布１３日後において発毛は認められず、塗布１５日後でもうっすらと発毛しているだけであった。また、育毛剤Ｉは、塗布１３日後にはうっすらと発毛し始め、塗布１５日後には発毛が明確に確認できた。また、育毛剤Ｇは、塗布１５日後においても全く発毛は認められなかった。以上より、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオールは、ＰＬＧＡナノ粒子内に封入することにより発毛効果が著しく増強されるとともに、その効果は市販の育毛剤Ｒ、育毛剤Ｇを凌駕し、育毛剤Ｉとほぼ同等であることが確認された。【０１０１】
なお、育毛剤Ｉは数種類の育毛成分を組み合わせたものであるのに対し、試験液Ａ、Ｂはそれぞれβ−グリチルレチン酸或いはヒノキチオール単独である。それにも係わらず上記のような即効的な発毛効果が得られたのは、ナノ粒子化することにより毛穴への浸透が促進された結果であると考えられる。【０１０２】
また、ナノ粒子に封入した場合と封入しなかった場合とで、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオールの育毛効果に大きな差が見られたのは、ナノ粒子に封入しない場合は、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオールが頭皮表面付近にとどまり、頭皮深部まで到達しない上、塗布後まもなく代謝、分解されてしまうのに対し、ナノ粒子に封入した場合は、β−グリチルレチン酸、ヒノキチオールの安定性が向上するとともに、頭皮深部まで到達したナノ粒子から徐々にβ−グリチルレチン酸、ヒノキチオールが放出されるため、長期間育毛効果が得られるためであると考えられる。さらに、ＰＬＧＡが加水分解されて生成する乳酸の皮脂分解効果もプラスに作用しているものと考えられる。【０１０３】
上記育毛成分封入ナノ粒子の発毛、育毛効果を十分に活用できる他の育毛成分（ビタミン類、炎症抑制、殺菌、血行促進用成分など）を配合した分散液の処方の確立を行った。処方例を表２、３に示す。
【実施例１３】
【０１０４】
【表２】
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【実施例１４】
【０１０５】
【表３】
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【０１０６】
分散液の製法としては、常温でエタノール可溶成分を攪拌しながら徐々に加えて溶解し、これに精製水を加え均一にしたのち、ろ過する。この分散液には、前述のβ−グリチルレチン酸封入ＰＬＧＡナノ粒子、ヒノキチオール封入ＰＬＧＡナノ粒子を良好に分散させることができるため、ナノ粒子と分散液とを別々の容器に充填しておくことにより、用時溶解型の育毛剤としての応用が可能となった。なお、分散液中に配合される育毛成分の種類や配合量については一例であり、ナノ粒子内に封入される生薬成分や対象とする脱毛症の種類等に応じて適宜設定すれば良い。
【産業上の利用可能性】
【０１０７】
本発明の育毛成分含有ナノ粒子は、生体適合性高分子内に育毛成分として副作用が少なくて安全性の高い生薬成分が封入されており、また、生薬成分が封入された育毛成分含有ナノ粒子が毛穴内部や頭皮表面から毛根部の存在する頭皮の深部にまで浸透することにより、生薬成分を頭皮の深部（毛根部）にまで確実に到達させ、且つ頭皮深部（毛根部）において生薬成分を徐放させることにより、長期間に亘って優れた育毛効果を持続させることができる安全性の高い育毛成分含有ナノ粒子となる。特に、生薬成分として、頭皮の深部に存在する毛母細胞や毛乳頭に直接作用するヒノキチオール等の毛母細胞活性剤や、β−グリチルレチン酸等の消炎剤を用いた場合に好適である。さらに、血行促進剤や男性ホルモン拮抗剤等の他の生薬成分を合わせて封入すれば、作用機序の異なる成分の相乗効果により育毛効果の向上が期待できる。【０１０８】
また、製造上の理由から生薬成分の封入率に比例してナノ粒子の粒子径も大きくなるが、ナノ粒子の平均粒子径を３０ｎｍ以上３００ｎｍ以下とし、生体適合性高分子に対する育毛成分の封入率を１重量％以上２０重量％以下としたので、ナノ粒子の平均粒子径を毛穴や毛穴以外の頭皮細胞の隙間部分から頭皮深部へ浸透できる程度に抑えつつ、育毛成分含有量を高めた育毛成分含有ナノ粒子となる。【０１０９】
また、ナノ粒子を形成する材料として、生体への刺激・毒性が低く、育毛成分を内包可能であり、投与後分解して代謝される生体適合性高分子を用いるので、人体への安全性を確保することができるとともに、育毛成分の徐放が可能となる。特にＰＬＧＡを用いると、ＰＬＧＡの加水分解・長期半減期の特徴から、数日から１ヶ月単位の徐放が可能となる。【０１１０】
また、育毛成分含有ナノ粒子を凍結乾燥等により複合化しておけば、容器への充填時において取り扱いやすい凝集粒子となる。さらに、ナノ粒子と共に糖アルコールやビタミン類を複合化しておけば、複合化されたナノ粒子の分散性、耐熱性が向上するとともに、封入される育毛成分が水溶性の場合でも、一旦封入された育毛成分の粒子表面への漏出を防止でき、糖アルコールのうち、特にトレハロースを複合化した場合、保湿作用による育毛効果の向上が実現される。又、ビタミンやビタミン誘導体を複合化した場合、生薬成分の育毛効果とビタミンによる育毛効果が相乗的に作用して、一層顕著な育毛効果が期待できる。【０１１１】
そして、育毛成分含有ナノ粒子を使用直前に分散液と所定量混合して分散させ、育毛剤として使用することで有効な育毛効果を生じる。また、分散液中にも育毛成分を配合しておけば、ナノ粒子表面に吸着されてナノ粒子と共に頭皮深部まで送達されるので、作用機序の異なるより多くの育毛成分を毛母細胞や毛乳頭へ供給できる。一方、頭皮表面に作用するような成分を配合しておけば、これらの薬剤の頭皮表面への即効性を確保しつつ、頭皮深部においてはナノ粒子からの生薬成分の徐放により長期間に亘る育毛効果が期待できる。【０１１２】
また、球形晶析法を用いてナノ粒子を形成する本発明の育毛成分含有ナノ粒子の製造方法により、育毛成分の封入率や平均粒径のばらつきの少ない育毛成分含有ナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。ここで、薬物と生体適合性高分子と有機溶媒を加えるポリビニルアルコール水溶液の濃度を０．５重量％以下とすることで、高濃度のポリビニルアルコール水溶液を用いた場合のように、ナノ粒子を遠心分離などでの洗浄により余剰のポリビニルアルコールを除去する除去工程が不要となるため手間と時間が削減でき、製造面で有利となる。【０１１３】
一方、高濃度のポリビニルアルコール水溶液を用いてナノ粒子を形成した後、ナノ粒子を遠心分離などで洗浄して余剰のポリビニルアルコールを除去する工程を設けた場合、ナノ粒子中に封入される育毛成分の封入率を安定化することができる。このとき、ポリビニルアルコール水溶液の濃度を０．１重量％以上１０重量％以下とすることで、貧溶媒の粘度を良溶媒の拡散に影響を与えない適切な範囲に抑えることができる。【０１１４】
また、人体や環境への影響の少ないアセトン、エタノールの混合液を良溶媒として用いたので、頭皮へ直接塗布する育毛剤の原料として安全性の高いものとなる。また、複合化工程において、ナノ粒子と共に、糖アルコールやビタミン或いはビタミン誘導体を複合化させることにより、複合化されたナノ粒子の分散性、耐熱性や育毛効果を一層向上させることができる。また、複合化工程を凍結乾燥により行うこととすれば、ナノ粒子の複合化を良好に且つ効率よく行うことができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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