(57)【要約】本発明は、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を有効成分として含有することを特徴とする、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療又は予防用の医薬、食品、飲料又は飼料を提供する。当該医薬、食品、飲料又は飼料は、例えば高脂血症、動脈硬化症や、これらが要因となる各種疾患の治療又は予防に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を有効成分として含有することを特徴とする、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤。
【請求項２】
カルコン類化合物が、下記一般式（１）で表される化合物である請求項１記載の治療剤又は予防剤。
【化１】
2005074906.tif 000030
（式中、Ｒ１は水酸基を示し、Ｒ２は水素原子又は炭素数が１〜１５の脂肪族基を示し、Ｒ３は水酸基又はメトキシ基を示し、Ｒ４は水素原子又はプレニル基を示し、Ｒ５は水素原子又はメトキシ基を示す。さらに、Ｒ１とＲ２、またはＲ２とＲ３は共に下記式（２）で表される環構造を形成しても良い。
【化２】
2005074906.tif 000031
（式中、ＷおよびＺは炭素原子または酸素原子を示し、Ｘは炭素原子を示し、Ｙは０または１つの炭素原子を示す。点線は単結合または二重結合を示す。上記Ａ環は５員環または６員環を示す。
Ａ環が５員環を示す場合、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成するか、もしくはＲ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する。ここで、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成する場合、Ｗは酸素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、ＸおよびＺは炭素原子を示し、Ｙは存在しない。さらにこの場合、Ｘには１−ハイドロキシ−１−メチルエチル基が結合する。また、Ｒ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する場合、Ｗは炭素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、Ｘは炭素原子を示し、Ｙは存在せず、Ｚは酸素原子を示す。さらにこの場合、Ｘには１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル基が結合する。
Ａが６員環を示す場合、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成するか、もしくはＲ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する。ここで、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成する場合、Ｗは酸素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、Ｘ、Ｙ及びＺは共に炭素原子を示す。さらにこの場合、ＸおよびＹには水素原子、水酸基、メチル基およびイソヘキセニル基のいずれか１つ以上が結合するか、もしくはＸとＹが共にハイドロキシジメチルシクロヘキサン環を形成し、かつＸにはメチル基が結合する。また、Ｒ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する場合、Ｗ、Ｘ及びＹは炭素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は二重結合を示し、Ｚは酸素原子を示す。さらにこの場合、Ｙにはメチル基及びイソヘキセニル基が結合する。）
【請求項３】
上記一般式（１）で表される化合物が、キサントアンゲロール、１−（３，４−ジハイドロ−３，５−ジハイドロキシ−２−（３−イソヘキセニル）−２−メチル−２Ｈ−ベンゾピラン−８−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントフモール、イソババカルコン、１−［２，４−ジハイドロキシ−３−（６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）フェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）−２，４−ジハイドロキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＧ、１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ヘキサハイドロ−１，７−ジハイドロキシ−８，８，１０ａ−トリメチル−９Ｈ−キサンテン−４−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、ババカルコン、レスペオール、キサントアンゲロールＨ、４−ハイドロキシデリシン、１−［２，３−ジハイドロ−４−ハイドロキシ−２−（１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル）−ベンゾフラン−５−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２，３−ジハイドロ−２−（１−ハイドロキシ−１−メチルエチル）−４−メトキシ−ベンゾフラン−７−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル）−２−ハイドロキシ−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＦ、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ及びババクロマノールからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項２記載の治療剤又は予防剤。
【請求項４】
フラバノン類化合物が、下記一般式（３）で表される化合物である請求項１記載の治療剤又は予防剤。
【化３】
2005074906.tif 000032
（式中、Ｒ’１は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ’２は水酸基又はメトキシ基を示し、Ｒ’３は水素原子、プレニル基又はゲラニル基を示し、Ｒ’４は水酸基又はゲラニルオキシ基を示す。）
【請求項５】
上記一般式（３）で表される化合物が、ムンドゥレアフラバノンＡ、プロストラトールＦ、８−ゲラニル−４’−ハイドロキシ−７−メトキシフラバノン、イソババチン及び４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項４記載の治療剤又は予防剤。
【請求項６】
３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物が、下記一般式（４）で表される化合物である請求項１記載の治療剤又は予防剤。
【化４】
2005074906.tif 000033
（式中、Ｒ’’１およびＲ’’２は水素原子、水酸基、アセトキシ基又はアンゲロイルオキシ基を示す。）
【請求項７】
上記一般式（４）で表される化合物が、４’−アンゲロイルオキシ−３’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−４’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン及び３’−アセトキシ−４’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項６記載の治療剤又は予防剤。
【請求項８】
カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を有効成分として含有することを特徴とする、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項９】
カルコン類化合物が、上記一般式（１）で表される化合物である請求項８記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１０】
上記一般式（１）で表される化合物が、キサントアンゲロール、１−（３，４−ジハイドロ−３，５−ジハイドロキシ−２−（３−イソヘキセニル）−２−メチル−２Ｈ−ベンゾピラン−８−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントフモール、イソババカルコン、１−［２，４−ジハイドロキシ−３−（６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）フェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）−２，４−ジハイドロキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＧ、１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ヘキサハイドロ−１，７−ジハイドロキシ−８，８，１０ａ−トリメチル−９Ｈ−キサンテン−４−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、ババカルコン、レスペオール、キサントアンゲロールＨ、４−ハイドロキシデリシン、１−［２，３−ジハイドロ−４−ハイドロキシ−２−（１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル）−ベンゾフラン−５−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２，３−ジハイドロ−２−（１−ハイドロキシ−１−メチルエチル）−４−メトキシ−ベンゾフラン−７−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル）−２−ハイドロキシ−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＦ、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ及びババクロマノールからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項９記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１１】
フラバノン類化合物が、上記一般式（３）で表される化合物である請求項８記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１２】
上記一般式（３）で表される化合物が、ムンドゥレアフラバノンＡ、プロストラトールＦ、８−ゲラニル−４’−ハイドロキシ−７−メトキシフラバノン、イソババチン及び４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項１１記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１３】
３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物が、上記一般式（４）で表される化合物である請求項８記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１４】
上記一般式（４）で表される化合物が、４’−アンゲロイルオキシ−３’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−４’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン及び３’−アセトキシ−４’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項１３記載の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項１５】
カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を有効成分として含有することを特徴とする、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害用又は細胞の抗泡沫化用の食品、飲料又は飼料。
【請求項１６】
カルコン類化合物が、上記一般式（１）で表される化合物である請求項１５記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項１７】
上記一般式（１）で表される化合物が、キサントアンゲロール、１−（３，４−ジハイドロ−３，５−ジハイドロキシ−２−（３−イソヘキセニル）−２−メチル−２Ｈ−ベンゾピラン−８−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントフモール、イソババカルコン、１−［２，４−ジハイドロキシ−３−（６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）フェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）−２，４−ジハイドロキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＧ、１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ヘキサハイドロ−１，７−ジハイドロキシ−８，８，１０ａ−トリメチル−９Ｈ−キサンテン−４−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、ババカルコン、レスペオール、キサントアンゲロールＨ、４−ハイドロキシデリシン、１−［２，３−ジハイドロ−４−ハイドロキシ−２−（１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル）−ベンゾフラン−５−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２，３−ジハイドロ−２−（１−ハイドロキシ−１−メチルエチル）−４−メトキシ−ベンゾフラン−７−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル）−２−ハイドロキシ−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＦ、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ及びババクロマノールからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項１６記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項１８】
フラバノン類化合物が、上記一般式（３）で表される化合物である請求項１５記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項１９】
上記一般式（３）で表される化合物が、ムンドゥレアフラバノンＡ、プロストラトールＦ、８−ゲラニル−４’−ハイドロキシ−７−メトキシフラバノン、イソババチン及び４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項１８記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項２０】
３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物が、上記一般式（４）で表される化合物である請求項１５記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項２１】
上記一般式（４）で表される化合物が、４’−アンゲロイルオキシ−３’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−４’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン及び３’−アセトキシ−４’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物である請求項２０記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項２２】
アシタバから抽出して得られる、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含有する画分を含有する、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤。
【請求項２３】
アシタバから抽出して得られる、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含有する画分を含有する、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤。
【請求項２４】
アシタバから抽出して得られる、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含有する画分を含有する、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害用又は細胞の抗泡沫化用の食品、飲料又は飼料。
【請求項２５】
治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療又は予防を必要とする被験体に、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の有効量を投与することを含む、該疾患の治療又は予防方法。
【請求項２６】
治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤製造のための、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患、例えば高脂血症や動脈硬化症等の治療または予防に有用な医薬、食品、飲料又は飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】  近年、生活習慣病の１種である動脈硬化や高コレステロール血症の増加が問題になってきている。血中コレステロールの量を減らす方法としてはコレステロールや脂肪の摂取を減らす食事療法がある。また、その他には医薬品を用いる方法があり、コレステロール生合成の律速酵素である３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルＣｏＡ（以下、ＨＭＧ−ＣｏＡと称することがある）レダクターゼを阻害する薬剤を投与することで血中コレステロールの低下を促すことが出来る。【０００３】  ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤としては、いわゆる“スタチン系”と呼ばれるプラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン等の化合物が知られている。プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチンは半合成又は全合成化合物である。しかしながらこれらの薬剤は価格が非常に高いこと、横紋筋融解症や長期間投与した際の肝臓のクレアチンキナーゼを増加させる等の副作用があることが知られている。【０００４】  動脈硬化症の初期病変には脂肪線条と呼ばれる斑点状もしくは線状の脂肪沈着が見られる。この変化は主に泡沫化されたマクロファージが血管内皮に集積することによるものである。マクロファージの泡沫化は、マクロファージが変性ＬＤＬを取り込んで遊離コレステロールを生成し、アシルＣｏＡ：コレステロールＯ−アシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）によってエステル化され、これが蓄積することにより起こる。このような初期の泡沫細胞病変は血管平滑筋細胞の泡沫化を含む複雑な病変に進行する。脂肪線条はやがて繊維性硬斑となって血管壁に突出し、さらに病変が進むと石灰化、血栓の付着を伴って、血管腔を狭めたり、硬斑が破錠して血栓性閉塞をきたす。また、破錠しやすい硬斑はコレステロールエステル等の脂質成分を多く含むことも知られている。従って、マクロファージや血管平滑筋細胞等の泡沫化を抑制することは、動脈硬化病変の安定化と退縮をもたらし、動脈硬化に基づく急性冠症候群の発症や再発の低減につながることが期待される。【０００５】  カルコン類化合物は下記式（化１）で表されるカルコン骨格を有する化合物の総称であり、天然物からの抽出や合成によって得られたさまざまな化合物が知られている。【０００６】
【化１】
2005074906.tif 000002
【０００７】  カルコン類化合物の生理活性については、化合物によってそれぞれ多種多様であり、例えば細胞毒性、抗がん活性、化学防御、抗変異原性、抗菌作用、抗ウィルス活性、抗原虫性、殺虫作用等が知られている（例えば、非特許文献１）。またカルコン類化合物には神経成長因子（ＮＧＦ）産生増強作用があることが知られている（例えば、特許文献１）。また、カルコン類化合物にはインスリン様作用があることも知られている（例えば、特許文献２）。しかしながら、カルコン類化合物のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用や細胞の抗泡沫化作用についてはこれまでに知られていない。【０００８】  フラバノン類化合物は下記式（化２）で表されるフラバノン骨格を有する化合物の総称であり、天然物からの抽出や合成によって得られたさまざまな化合物が知られている。【０００９】
【化２】
2005074906.tif 000003
【００１０】  フラバノン類化合物の生理活性については、化合物によってそれぞれ多種多様であり、例えば血圧低下作用、アポトーシス誘発作用、抗酸化作用等のさまざまな生理活性が知られている。またフラバノン類化合物にはインスリン様作用があることも知られている（例えば、特許文献２）。しかしながら、フラバノン類化合物のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用や細胞の抗泡沫化作用についてはこれまでに知られていない。【００１１】  ３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物は下記式（化３）で表される３’，４’−ジハイドロセセリン骨格を有する化合物の総称であり、天然物からの抽出や合成によって得られたさまざまな化合物が知られている。【００１２】
【化３】
2005074906.tif 000004
【００１３】  ３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物の生理活性については、化合物によってそれぞれ多種多様であり、例えば抗アレルギー作用や抗炎症作用等が知られている（例えば、特許文献３）。しかしながら、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用や細胞の抗泡沫化作用についてはこれまでに知られていない。【００１４】
【特許文献１】国際公開第０１／５４６８２号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００４／０９６１９８号パンフレット
【特許文献３】特開昭６３−１５０２８７号公報
【非特許文献１】Ｊ．Ｒ．Ｄｉｍｍｏｃｋ他３名，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（オランダ），１９９９年，Ｖｏｌ．６，ｐ１１２５〜１１４９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】  本発明の目的は、安全で、簡便に摂取可能な、食品素材、医薬品素材として適したＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する物質を開発し、当該組成物もしくは物質を用いた医薬、食品、飲料または飼料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】  本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を有効成分として含有することを特徴とする、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤に関する。【００１７】  本発明の第１の発明において、カルコン類化合物としては、下記一般式（１）で表される化合物が例示される。【００１８】
【化４】
2005074906.tif 000005
（式中、Ｒ１は水酸基を示し、Ｒ２は水素原子又は炭素数が１〜１５の脂肪族基を示し、Ｒ３は水酸基又はメトキシ基を示し、Ｒ４は水素原子又はプレニル基を示し、Ｒ５は水素原子又はメトキシ基を示す。さらに、Ｒ１とＲ２、またはＲ２とＲ３は共に下記式（２）で表される環構造を形成しても良い。【００１９】
【化５】
2005074906.tif 000006
（式中、ＷおよびＺは炭素原子または酸素原子を示し、Ｘは炭素原子を示し、Ｙは０または１つの炭素原子を示す。点線は単結合または二重結合を示す。上記Ａ環は５員環または６員環を示す。
Ａ環が５員環を示す場合、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成するか、もしくはＲ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する。ここで、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成する場合、Ｗは酸素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、ＸおよびＺは炭素原子を示し、Ｙは存在しない。さらにこの場合、Ｘには１−ハイドロキシ−１−メチルエチル基が結合する。また、Ｒ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する場合、Ｗは炭素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、Ｘは炭素原子を示し、Ｙは存在せず、Ｚは酸素原子を示す。さらにこの場合、Ｘには１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル基が結合する。
Ａが６員環を示す場合、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成するか、もしくはＲ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する。ここで、Ｒ１がＷを構成し、Ｒ２がＺを構成する場合、Ｗは酸素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は単結合を示し、Ｘ、Ｙ及びＺは共に炭素原子を示す。さらにこの場合、ＸおよびＹには水素原子、水酸基、メチル基およびイソヘキセニル基のいずれか１つ以上が結合するか、もしくはＸとＹが共にハイドロキシジメチルシクロヘキサン環を形成し、かつＸにはメチル基が結合する。また、Ｒ２がＷを構成し、Ｒ３がＺを構成する場合、Ｗ、Ｘ及びＹは炭素原子を示し、Ｗ−Ｘ結合は二重結合を示し、Ｚは酸素原子を示す。さらにこの場合、Ｙにはメチル基及びイソヘキセニル基が結合する。）【００２０】  ここで、上記一般式（１）で表される化合物としては、キサントアンゲロール、１−（３，４−ジハイドロ−３，５−ジハイドロキシ−２−（３−イソヘキセニル）−２−メチル−２Ｈ−ベンゾピラン−８−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントフモール、イソババカルコン、１−［２，４−ジハイドロキシ−３−（６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）フェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）−２，４−ジハイドロキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２−ハイドロキシ−３−（６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＧ、１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ヘキサハイドロ−１，７−ジハイドロキシ−８，８，１０ａ−トリメチル−９Ｈ−キサンテン−４−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、ババカルコン、レスペオール、キサントアンゲロールＨ、４−ハイドロキシデリシン、１−［２，３−ジハイドロ−４−ハイドロキシ−２−（１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル）−ベンゾフラン−５−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［２，３−ジハイドロ−２−（１−ハイドロキシ−１−メチルエチル）−４−メトキシ−ベンゾフラン−７−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、１−［３−（２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル）−２−ハイドロキシ−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン、キサントアンゲロールＦ、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ及びババクロマノールからなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。【００２１】  本発明の第１の発明において、フラバノン類化合物としては、下��一般式（３）で表される化合物が例示される。【００２２】
【化６】
2005074906.tif 000007
（式中、Ｒ’１は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ’２は水酸基又はメトキシ基を示し、Ｒ’３は水素原子、プレニル基又はゲラニル基を示し、Ｒ’４は水酸基又はゲラニルオキシ基を示す。）【００２３】  ここで、上記一般式（３）で表される化合物としては、ムンドゥレアフラバノンＡ、プロストラトールＦ、８−ゲラニル−４’−ハイドロキシ−７−メトキシフラバノン、イソババチン及び４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。【００２４】  本発明の第１の発明において、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物としては、下記一般式（４）で表される化合物が例示される。
【化７】
2005074906.tif 000008
（式中、Ｒ’’１およびＲ’’２は水素原子、水酸基、アセトキシ基又はアンゲロイルオキシ基を示す。）【００２５】  ここで、上記一般式（４）で表される化合物としては、４’−アンゲロイルオキシ−３’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−４’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン、３’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン及び３’−アセトキシ−４’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。【００２６】  本発明の第２の発明は、本発明の第１の発明における有効成分を含有することを特徴とする、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤に関する。【００２７】  本発明の第３の発明は、本発明の第１の発明における有効成分を含有することを特徴とする、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害用又は細胞の抗泡沫化用の食品、飲料又は飼料に関する。【００２８】  本発明の第４の発明は、アシタバから抽出して得られる、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含有する画分を含有する、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤に関する。【００２９】  本発明の第５の発明は、本発明の第４の発明における画分を含有する、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤に関する。【００３０】  本発明の第６の発明は、本発明の第４の発明における画分を含有する、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害用又は細胞の抗泡沫化用の食品、飲料又は飼料に関する。【００３１】  本発明の第７の発明は、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療又は予防を必要とする被験体に、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の有効量を投与することを含む、該疾患の治療又は予防方法に関する。【００３２】  本発明の第８の発明は、治療又は予防において３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤製造のための、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の使用に関する。
【発明の効果】
【００３３】  本発明により、治療又は予防においてＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療用又は予防用の医薬、食品、飲料又は飼料が提供される。該医薬は高脂血症や動脈硬化などの、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患に対して有用である。また、該食品又は飲料は、日常の飲食品として摂取することにより、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の症状改善等が可能となる。従って、本発明の食品又は飲料はそのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用、細胞の抗泡沫化作用により生体の恒常性の維持に有用な機能性飲食品である。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】ＴＢ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２】ＴＢ１の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図３】ＴＢ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図４】ＴＢ２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図５】ＴＢ３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図６】ＴＢ３の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図７】ＴＢ４の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図８】ＴＢ４の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図９】ＴＢ５の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１０】ＴＢ５の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１１】ＴＢ６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１２】ＴＢ６の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１３】ＴＢ７の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１４】ＴＢ７の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１５】ＴＢ８の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１６】ＴＢ８の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１７】ＴＢ９の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１８】ＴＢ９の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図１９】化合物Ｃ０８２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２０】化合物Ｃ０８２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２１】クマリン化合物Ａの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２２】クマリン化合物Ａの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２３】クマリン化合物Ｂの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２４】クマリン化合物Ｂの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２５】クマリン化合物Ｃの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【図２６】クマリン化合物Ｄの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３５】  ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼは、コレステロール生合成系の律速酵素であり、ＨＭＧ−ＣｏＡからメバロン酸を生成する反応を触媒する作用を有する。近年、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害物質の探索が行われており、特にスタチン系の化合物がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用を有しており、これらは高脂血症に対する医薬として広く汎用されている。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害物質の探索には、後述の実施例２８に記載のような酵素の阻害活性を指標としたアッセイ系を用いて簡便に測定することができる。すなわち、被験物質の存在下にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼをＨＭＧ−ＣｏＡと反応させ、その阻害活性を評価することで、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害物質を簡便にスクリーニングすることができる。【００３６】  細胞の泡沫化は細胞内にコレステロールエステルが蓄積することによって起こる。細胞の抗泡沫化作用は、後述の実施例３０に記載のような細胞中のコレステロールエステル量を指標としたアッセイ系を用いて簡便に測定することができる。すなわち、被験物質とアセチルＬＤＬの存在下にマクロファージを培養し、細胞中のコレステロールエステル量を評価することで、細胞の抗泡沫化作用を簡便に測定することができる。なお、本発明において抗泡沫化の対象となる細胞としては、特に限定はないが、例えばマクロファージや平滑筋細胞等の血管系細胞や血液細胞が例示される。【００３７】  本発明においてカルコン類化合物としては、上記式（化１）で表されるカルコン骨格を構造中に有する化合物であれば特に限定はないが、例えば上記一般式（１）で表される化合物が例示される。【００３８】  本願明細書において炭素数が１〜１５の脂肪族基としては、たとえば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基などの炭素数１〜１５の直鎖状アルキル基、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基などの分枝状アルキル基、エテニル基、アリル基、トランス−１−プロペニル基、シス−１−プロペニル基などの直鎖状アルケニル基、プレニル基、イソヘキセニル基、ゲラニル基、ファルネシル基、イソプロペニル基、シス−１−メチル−１−プロペニル基、トランス−１−メチル−１−プロペニル基、トランス−１−エチル−１−プロペニル基、４−メチル−１，３−ペンタジエニル基などの分枝状アルケニル基が挙げられる。また、これらの脂肪族基に水酸基、アシル基、ハイドロペルオキシ基、エチルオキシ基等が付加した官能基やエポキシ構造を含む脂肪族基も本願明細書において脂肪族基に包含される。例えば、ハイドロキシメチル基、ハイドロキシエチル基、６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル基、７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル基、２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル基、７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル基、６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル基、７−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル基、６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル基、���−メチル−６−オキソ−２−ヘキセニル基、２−ハイドロキシ−３−メチル−３−ブテニル基及び２−ハイドロペルオキシ−３−メチル−３−ブテニル基、１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル基、１−ハイドロキシ−１−メチル−エチル基も脂肪族基に包含される。【００３９】  アシル基としては、特に限定されるものではないが、例えばアルデヒド基、カルボキシメチル基、カルボキシル基、アセチル基、アロイル基等が挙げられる。【００４０】  また、本発明において使用される上記式（１）で表される化合物としては、キサントアンゲロール、１−（３，４−ジハイドロ−３，５−ジハイドロキシ−２−（３−イソヘキセニル）−２−メチル−２Ｈ−ベンゾピラン−８−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−２）、キサントフモール、イソババカルコン、１−［２，４−ジハイドロキシ−３−（６，７−ジハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）フェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−５）、１−［３−（７−エトキシ−６−ハイドロキシ−３，７−ジメチル−２−オクテニル）−２，４−ジハイドロキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−６）、１−［２−ハイドロキシ−３−（７−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，５−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−８）、１−［２−ハイドロキシ−３−（６−ハイドロペルオキシ−３，７−ジメチル−２，７−オクタジエニル）−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−９）、キサントアンゲロールＧ、１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ヘキサハイドロ−１，７−ジハイドロキシ−８，８，１０ａ−トリメチル−９Ｈ−キサンテン−４−イル）−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−１）、ババカルコン、レスペオール、キサントアンゲロールＨ、４−ハイドロキシデリシン、１−［２，３−ジハイドロ−４−ハイドロキシ−２−（１−ハイドロキシ−１，５−ジメチル−４−ヘキセニル）−ベンゾフラン−５−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−３）、１−［２，３−ジハイドロ−２−（１−ハイドロキシ−１−メチルエチル）−４−メトキシ−ベンゾフラン−７−イル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−４）、１−［３−（２，５−エポキシ−２，６，６−トリメチル−シクロヘキシルメチル）−２−ハイドロキシ−４−メトキシフェニル］−３−（４−ハイドロキシフェニル）−２−プロペン−１−オン（ＴＢ−７）、キサントアンゲロールＦ、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ及びババクロマノールからなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。これらの化合物の構造式を表１〜３に示す。表１〜３において、最右列の実施例は、それぞれの化合物の下記実施例で使用されている名称を示す。【００４１】
【表１】
2005074906.tif 000009
【００４２】
【表２】
2005074906.tif 000010
【００４３】
【表３】
2005074906.tif 000011
【００４４】  本発明に使用されるカルコン類化合物は、市販の化合物を利用できるほか、公知の方法により合成もしくは半合成したり、植物から常法にしたがって抽出し、精製することにより得ることができる。例えば、セリ科植物、例えばアシタバから各種クロマトグラフィー等により分画し、精製することにより得ることができる。【００４５】  すなわち、例えばキサントアンゲロール、４−ハイドロキシデリシン、キサントアンゲロールＨ、ＴＢ１、ＴＢ２、ＴＢ３、ＴＢ４、ＴＢ５、ＴＢ６、ＴＢ７、ＴＢ８、ＴＢ９、キサントアンゲロールＦ、レスペオール、イソババカルコン、ババクロマノールを精製する場合は、アシタバから酢酸エチルを溶媒として抽出を行い、シリカクロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーにより適宜分画し、これらの化合物を精製することができる。また、キサントアンゲロールＢ、キサントアンゲロールＣ、キサントアンゲロールＤ、キサントアンゲロールＥ、キサントアンゲロールＧについてもアシタバに含有される化合物であり、公知の方法によりアシタバから調製し、本発明に使用することができる。また、ホップからキサントフモールを精製する場合は、例えば、ホップから酢酸エチルを溶媒として抽出を行い、シリカクロマトグラフィーにより適宜分画し、キサントフモールを精製することができる。【００４６】  フラバノン類化合物としては、上記式（化２）で表されるフラバノン骨格を構造中に有する化合物であれば特に限定はないが、例えば上記一般式（３）で表される化合物が例示される。【００４７】  本発明において使用される上記式（３）で表される化合物としては、特に限定はないが、例えばムンドゥレアフラバノンＡ、プロストラトールＦ、８−ゲラニル−４’−ハイドロキシ−７−メトキシフラバノン（Ｃ０８２）、イソババチン及び４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンからなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。これらの化合物の構造式を表４に示す。表４において、最右列の実施例は、それぞれの化合物の下記実施例で使用されている名称を示す。【００４８】
【表４】
2005074906.tif 000012
【００４９】  本発明に使用されるフラバノン類化合物は、市販の化合物を利用できるほか、公知の方法により合成もしくは半合成したり、植物から常法にしたがって抽出し、精製することにより得ることができる。例えば、セリ科植物、例えばアシタバから各種クロマトグラフィー等により分画し、精製することにより得ることができる。【００５０】  すなわち、例えば４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニン、イソババチンを精製する場合は、アシタバから酢酸エチルを溶媒として抽出を行い、シリカクロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーにより適宜分画し、これらの化合物を精製することができる。【００５１】  また、本発明に使用されるフラバノン類化合物を合成もしくは半合成する場合は、公知の方法により合成すれば良いが、例えば上記の表４に記載のフラバノン類化合物を合成もしくは半合成する場合は、公知の方法により合成することができる。【００５２】  なお、フラバノン類化合物は、２’位に水酸基を有するカルコン類化合物をアルカリ水溶液中で加熱することにより容易に合成することができる。【００５３】  ３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物としては、上記式（化３）で表される３’，４’−ジハイドロセセリン骨格を構造中に有する化合物であれば特に限定はないが、例えば上記一般式（４）で表される化合物が例示される。【００５４】  本発明において使用される上記式（４）で表される化合物としては、特に限定はないが、例えば４’−アンゲロイルオキシ−３’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン（クマリン化合物Ｄ）、３’−アンゲロイルオキシ−４’−ハイドロキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン（クマリン化合物Ｃ）、３’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン（クマリン化合物Ｂ）及び３’−アセトキシ−４’−アンゲロイルオキシ−３’，４’−ジハイドロセセリン（クマリン化合物Ａ）からなる群より選択される少なくとも１つの化合物が例示される。これらの化合物の構造式を表５に示す。表５において、最右列の実施例は、それぞれの化合物の下記実施例で使用されている名称を示す。【００５５】
【表５】
2005074906.tif 000013
【００５６】  本発明に使用される３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物は、市販の化合物を利用できるほか、公知の方法により合成もしくは半合成したり、植物から常法にしたがって抽出し、精製することにより得ることができる。例えば、セリ科植物、例えばアシタバから各種クロマトグラフィー等により分画し、精製することにより得ることができる。【００５７】  すなわち、例えばアシタバからクマリン化合物Ａ〜Ｄを精製する場合は、後述の実施例２４〜２７の記載を参考に、これらの化合物を精製することができる。【００５８】  また、本発明に使用される３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物を合成もしくは半合成する場合は、公知の方法により合成すれば良いが、例えば上記の表５に記載の３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物を合成もしくは半合成する場合は、公知の方法により合成することができる。【００５９】  上記のカルコン類化合物、フラバノン類化合物、又は３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物の誘導体としては、例えばエステルなど、体内で容易に加水分解されて上記のカルコン類化合物、フラバノン類化合物、又は３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物を生成し、所望の効果を発揮し得る誘導体（プロドラッグ）を調製可能である。かかるプロドラッグの調製は公知の方法に従えばよい。また、テトラハイドロピラニル基等の保護基を付加したものについても本発明で使用される化合物の誘導体に包含される。例えば、保護基は水酸基、アルデヒド基、ハイドロペルオキシ基等に付加することができる。また、例えば本発明の化合物をほ乳動物に投与して代謝されてできた誘導体も本発明の誘導体に包含される。なお、かかる誘導体は、上記のカルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物又はそれらの誘導体の塩であってもよい。【００６０】  また、本発明に使用されるカルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物またはそれらの誘導体の塩としては薬理学的に許容される塩が好ましい。また、前述するようにプロドラッグとして機能し得る当該化合物の誘導体であってもよい。従って、本発明に係るカルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物とは、本発明の所望の効果が得られ得る限り、その誘導体ならびにそれらの塩も包含するものである。また、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物の光学異性体、ケト−エノール互変異性体、幾何異性体などの各種異性体、各異性体の単離されたものであっても、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用又は細胞の抗泡沫化作用を有する限り、全て本発明において使用することができる。【００６１】  本発明で使用される塩としては、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、有機塩基との塩などが例示される。なお、本発明において使用される薬理学的に許容される塩とは生物に対して実質的に無毒であって、かつＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用又は細胞の抗泡沫化作用を有する化合物の塩を意味する。当該塩としては、たとえば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウムまたはプロトン化されたベンザチン（Ｎ，Ｎ′−ジ−ベンジルエチレンジアミン）、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグラミン（Ｎ−メチルグルカミン）、ベネタミン（Ｎ−ベンジルフェネチルアミン）、ピペラジンもしくはトロメタミン（２−アミノ−２−ハイドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）等の塩が挙げられる。【００６２】  本発明において有効成分として使用されるカルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物としては、アシタバから公知の方法で分画することによって得られる当該カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物を高濃度に含む画分を使用することもできる。ここで、高濃度とは、天然のアシタバ中の当該カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物の濃度よりも高いことを意味し、天然のアシタバ中の濃度の１．５倍以上であることが好ましく、２倍以上であることがより好ましい。上記の分画手段としては、抽出、分別沈殿、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等が挙げられる。また、得られた画分の精製を、下記実施例２８又は３０に例示されるとおり、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用又は細胞の抗泡沫化作用を指標としてさらに進めることにより、当該カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物を単離することもできる。【００６３】  また、本発明の有効成分として使用されるカルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物の大部分は、前述の通りアシタバに含まれる成分である。後述の実施例３０に記載のとおり、アシタバはマクロファージの抗泡沫化作用を有することから、本発明の有効成分を含むアシタバ自体を本発明の医薬、食品、飲料又は飼料の全部又は一部に使用することで、本発明の所望の効果をより効率的に発現することができる。また、アシタバから本発明の有効成分が多量に含まれるように加工、処理（抽出等）を行なったアシタバ加工処理物の全部又は一部を本発明の医薬、食品、飲料又は飼料に使用することで、さらに効率的に本発明の効果を発現することができる。また、アシタバの加工品に合成、精製などにより得られた本発明の有効成分を加えることで、高脂血症、動脈硬化症やこれらが原因因子となって起こる疾患の治療用又は予防用の食品、飲料又は飼料としてより好適に使用することができる。【００６４】  なお、本発明において、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体及びそれらの塩からなる少なくとも１つの化合物を本発明の有効成分と称し、本発明の有効成分を含有する治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療剤又は予防剤を本発明の治療剤又は予防剤と称することがある。【００６５】  本発明に係る有効成分には、後述するように特に毒性は認められない。また、副作用の発生の心配もない。それゆえ、安全かつ適切に疾患の治療又は予防を行うことができる。従って、当該有効成分を含んでなる本発明の治療剤、予防剤、食品、飲料または飼料は、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクタ���ゼ阻害作用又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療または予防に有効である。【００６６】  また、本発明において、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用を要する疾患としては、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの活性を阻害することにより治療又は予防効果がみられる疾患であれば特に限定はないが、例えば、高脂血症、動脈硬化症やこれらが原因因子となって起こる疾患、例えば心筋梗塞、狭心症、脳梗塞、くも膜下出血、肥満症等が例示される。【００６７】  また、本発明において、治療又は予防に細胞の抗泡沫化作用を要する疾患としては、細胞の泡沫化を抑制することにより治療又は予防効果がみられる疾患であれば特に限定はないが、例えば、動脈硬化症やこれらが原因因子となって起こる疾患、例えば急性心筋梗塞、不安定狭心症、虚血性突然死、脳血管障害、慢性閉塞性動脈硬化症等が例示される。【００６８】  さらに本発明の有効成分のうち、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用と細胞の抗泡沫化作用の両方の作用を併せ持つものについては、上記記載した疾患に対して特に高い効果が期待できることから、本発明に特に好適に使用することができる。さらに、これらの両方の作用が強い成分を選択的に使用することもでき、これによって、より高い効果が期待できる。【００６９】  本発明の治療剤または予防剤としては、本発明に係る前記有効成分を公知の医薬用担体と組み合わせて製剤化したものが挙げられる。本発明の態様においては、有効成分としての塩は薬理学的に許容され得る塩を用いることができる。また、本発明の治療剤または予防剤としては、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分、例えば公知の高脂血症や動脈硬化症の治療又は予防作用を有する成分、例えば、プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン等のスタチン系の化合物等のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、フコイダン等の細胞の抗泡沫化剤、メリナミド等のＡＣＡＴ阻害剤、コレステロールエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）抑制剤、コレステロール吸収阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、ＬＤＬ酸化抑制剤、ミクロソーマルトリグリセリドトランスファータンパク（ＭＴＰ）阻害剤、アポリポタンパク質Ａ１産生促進剤、ＡＴＰ−バインディングカセットサブファミリーＡ１（ＡＢＣＡ１）誘導剤などと配合することもできる。【００７０】  本発明の治療剤または予防剤の製造は、通常、前記有効成分を薬理学的に許容できる液状または固体状の担体と配合することにより行われ、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤とすることができる。また、使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品や、その他、外用剤とすることもできる。【００７１】  医薬用担体は、治療剤または予防剤の投与形態および製剤形態に応じて選択することができる。固体組成物からなる経口剤とする場合は、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤等とすることができ、たとえば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無���塩などの医薬用担体が利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料などを配合することもできる。たとえば、錠剤または丸剤とする場合は、所望によりショ糖、ゼラチン、ハイドロキシプロピルセルロースなどの糖衣または胃溶性もしくは腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。液体組成物からなる経口剤とする場合は、薬理学的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤などとすることができ、たとえば、精製水、エタノールなどが担体として利用される。また、さらに所望により湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、防腐剤などを添加してもよい。【００７２】  一方、非経口剤とする場合は、常法に従い本発明の前記有効成分を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどに溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤などを加えることにより調製することができる。また、固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。【００７３】  外用剤としては、経皮投与用または経粘膜（口腔内、鼻腔内）投与用の、固体、半固体状または液状の製剤が含まれる。また、座剤なども含まれる。たとえば、乳剤、ローション剤などの乳濁剤、外用チンキ剤、経粘膜投与用液剤などの液状製剤、油性軟膏、親水性軟膏などの軟膏剤、フィルム剤、テープ剤、パップ剤などの経皮投与用または経粘膜投与用の貼付剤などとすることができる。【００７４】  上記のような各種製剤形態での治療剤又は予防剤は、それぞれ公知の医薬用担体などを利用して、適宜、常法により製造することができる。また、かかる治療剤または予防剤における有効成分の含有量は、その投与形態、投与方法などを考慮し、好ましくは後述の投与量範囲で当該有効成分を投与できるような量であれば特に限定されるものではない。【００７５】  本発明の治療剤又は予防剤は、製剤形態に応じた適当な投与方法で投与される。投与方法も特に限定はなく、例えば、内用、外用および注射により投与されればよい。本発明の治療剤又は予防剤を注射により投与する場合は、たとえば静脈内、筋肉内、皮下、皮内などに投与し得、外用により投与する場合は、たとえば、座剤等の外用剤として、その適する投与方法により投与すればよい。【００７６】  本発明の治療剤または予防剤の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的および当該治療剤または予防剤の投与対象である患者の年齢、体重、症状等によって適宜設定され一定ではない。一般には、製剤中に含有される前記有効成分の量で、好ましくは成人１日当り０．１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重である。もちろん投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。投与は、所望の投与量範囲内において、１日内において単回で、または数回に分けて行ってもよい。また、本発明の治療剤または予防剤はそのまま経口投与するほか、任意の飲食品に添加して日常的に摂取させることもできる。【００７７】  ��た、本明細書において、医薬とは、便宜的に、上記の本発明の治療剤又は予防剤を指すのみでなく、以下に記載される本発明のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤をも指す場合がある。【００７８】  また、本発明は前記有効成分を含むＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤を提供することもできる。当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤としては、前記有効成分そのものであってもよく、また、前記有効成分を含む組成物であってもよい。本発明の態様においては、有効成分としての塩は薬理学的に許容される塩が好適である。当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤は、たとえば、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分、例えば公知の高脂血症や動脈硬化症の治療又は予防作用を有する成分、例えば、プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン等のスタチン系の化合物等のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、フコイダン等の細胞の抗泡沫化剤、メリナミド等のＡＣＡＴ阻害剤、コレステロールエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）抑制剤、コレステロール吸収阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、ＬＤＬ酸化抑制剤、ミクロソーマルトリグリセリドトランスファータンパク（ＭＴＰ）阻害剤、アポリポタンパク質Ａ１産生促進剤、ＡＴＰ−バインディングカセットサブファミリーＡ１（ＡＢＣＡ１）誘導剤などと配合することもできる。上記治療剤または予防剤の製造方法に準じて通常使用される試薬の形態に製造することもできる。当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤における前記有効成分の含有量は、当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤の投与方法、使用目的などを考慮し、本発明の所望の効果の発現が得られ得るような量であればよく、特に限定されるものではない。また、当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤の使用量も、本発明の所望の効果の発現が得られ得るようであれば特に限定されるものではない。特に、生体に投与して使用する場合には、好ましくは前記治療剤または予防剤における有効成分の投与量範囲内で有効成分を投与できるような量で使用すればよい。投与方法についても特に限定されるものではなく、前記治療剤又は予防剤と同様に適宜設定すればよい。当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤は、前述の治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療又は予防に対して有用である。また、当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤は、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患に対する薬物のスクリーニングや、高脂血症や動脈硬化症のメカニズムの研究にも有用である。また、当該ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤又は細胞の抗泡沫化剤を食品又は飲料に添加することもできる。【００７９】  本発明に係る有効成分には、後述するように特に毒性は認められない。また、副作用の発生の心配もない。それゆえ、安全かつ適切にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用���発現することができる。従って、当該有効成分を含んでなる本発明の医薬、食品、飲料または飼料は、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療または予防に有効である。【００８０】  また、本発明は、前記有効成分を含有してなるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害用及び／又は細胞の抗泡沫化用の食品、飲料又は飼料（本明細書中において、本発明の食品、飲料又は飼料と称することがある）を提供する。本発明の態様においては、有効成分の塩としては、薬理学的に許容される塩、またはそれと同等の安全性を有する塩が好適である。本発明の食品、飲料または飼料は、そのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用により、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患、すなわち前述したような、高脂血症、動脈硬化症、心筋梗塞、狭心症、脳梗塞、くも膜下出血、肥満症、急性心筋梗塞、不安定狭心症、虚血性突然死、脳血管障害、慢性閉塞性動脈硬化症等の症状改善、予防に極めて有用である。すなわち、本発明の食品又は飲料は上記の疾患の予防又は治療を目的とすることを付した機能性食品（特定保健用食品）として極めて有用であり、血中コレステロールが気になる方、ヘビースモーカーの方、肥満体型の方、運動不足の方、飲酒量の多い方、糖尿病患者の方にとって極めて有用である。【００８１】  また、本発明の食品、飲料又は飼料は、たとえば、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分、例えば公知の高脂血症や動脈硬化症の治療又は予防作用を有する成分、例えば、プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン等のスタチン系の化合物等のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、フコイダン等の細胞の抗泡沫化剤、メリナミド等のＡＣＡＴ阻害剤、コレステロールエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）抑制剤、コレステロール吸収阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、ＬＤＬ酸化抑制剤、ミクロソーマルトリグリセリドトランスファータンパク（ＭＴＰ）阻害剤、アポリポタンパク質Ａ１産生促進剤、ＡＴＰ−バインディングカセットサブファミリーＡ１（ＡＢＣＡ１）誘導剤などと配合することで、より効果の高い食品、飲料又は飼料を製造することもできる。また、既知の健康食品素材、例えば大豆タンパク質およびペプチド、グルコマンナン、キトサン、植物ステロールエステル等と配合することもできる。【００８２】  なお、本発明の食品、飲料または飼料において「含有」とは、含有、添加および／または希釈を意味する。ここで、「含有」とは食品、飲料または飼料中に本発明で使用される有効成分が含まれるという態様を、「添加」とは食品、飲料または飼料の原料に、本発明で使用される有効成分を添加するという態様を、「希釈」とは本発明で使用される有効成分に、食品、飲料または飼料の原料を添加するという態様をいうものである。【００８３】  本発明の食品、飲料または飼料の製造法に特に限定はない。たとえば、配合、調理、加工などは一般の食品、飲料または飼料のものに従えばよく、それらの製造法により製造することができ、得られた食品、飲料または飼��にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する本発明に係る前記有効成分が含有されていれば良い。【００８４】  本発明の食品または飲料としては特に限定はないが、たとえば、本発明に係る前記有効成分が含有されてなる、穀物加工品（小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類、マカロニ類、パン類、あん類、そば類、麩、ビーフン、はるさめ、包装餅など）、油脂加工品（可塑性油脂、てんぷら油、サラダ油、マヨネーズ類、ドレッシングなど）、大豆加工品（豆腐類、味噌、納豆など）、食肉加工品（ハム、ベーコン、プレスハム、ソーセージなど）、水産製品（冷凍すりみ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、さつま揚げ、つみれ、すじ、魚肉ハム、ソーセージ、かつお節、魚卵加工品、水産缶詰、つくだ煮など）、乳製品（原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ、練乳、粉乳、アイスクリームなど）、野菜・果実加工品（ペースト類、ジャム類、漬け物類、果実飲料、野菜飲料、ミックス飲料など）、菓子類（チョコレート、ビスケット類、菓子パン類、ケーキ、餅菓子、米菓類など）、アルコール飲料（日本酒、中国酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、清涼アルコール飲料、果実酒、リキュールなど）、嗜好飲料（緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、青汁、清涼飲料、乳酸飲料など）、調味料（しょうゆ、ソース、酢、みりんなど）、缶詰・瓶詰め・袋詰め食品（牛飯、釜飯、赤飯、カレー、その他の各種調理済み食品）、半乾燥または濃縮食品（レバーペースト、その他のスプレッド、そば・うどんの汁、濃縮スープ類）、乾燥食品（即席麺類、即席カレー、インスタントコーヒー、粉末ジュース、粉末スープ、即席味噌汁、調理済み食品、調理済み飲料、調理済みスープなど）、冷凍食品（すき焼き、茶碗蒸し、うなぎかば焼き、ハンバーグステーキ、シュウマイ、餃子、各種スティック、フルーツカクテルなど）、固形食品、液体食品（スープなど）、香辛料類などの農産・林産加工品、畜産加工品、水産加工品などが挙げられる。【００８５】  本発明の食品または飲料は、前記有効成分が単独もしくは複数含有、添加および／または希釈されており、その含有量がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を発現するための必要量に相当するものであれば特にその形状に限定はなく、タブレット状、顆粒状、カプセル状等の形状の経口的に摂取可能な形状物も包含する。【００８６】  本発明の食品又は飲料中の前記有効成分の含有量は特に限定されず、その官能と活性発現の観点から適宜選択できるが、例えば食品１００重量％当たり好ましくは０．００００１重量％以上、より好ましくは０．０００１〜１０重量％、更に好適には０．０００６〜６重量％であり、例えば、飲料１００重量％当たり好ましくは０．００００１重量％以上、より好ましくは０．０００１〜１０重量％、更に好適には０．０００６〜６重量％である。また本発明の食品又は飲料は、好ましくは、それらに含有される有効成分が、例えば成人１口当たり０．００１ｍｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．１ｍｇ〜１ｇ／ｋｇ体重となるように摂取すればよい。【００８７】  また、本発明は、前記有効成分を含有、添加および／または希釈してなる、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する生物用の飼料（本明細書中において、本発明の飼料と称することがある）を提供するものであり、さらに、別の一態様として、前記有効成分を生物に投与することを特徴とする生物の飼育方法をも提供する。また、本発明の別の一態様として、前記有効成分を含有することを特徴とする生物飼育用剤が提供される。【００８８】  本明細書において、生物としては、限定はないが、たとえば養殖動物、ペット動物などが挙げられる。養殖動物としてはウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラクダ、ラマなどの家畜、マウス、ラット、モルモット、ウサギなどの実験動物、ニワトリ、アヒル、七面鳥、駝鳥などの家禽、魚類、甲殻類または貝類が例示される。ペット動物としてはイヌ、ネコなどが例示される。飼料としては体調の維持および／または改善用飼料が例示される。生物飼育用剤としては浸漬用剤、飼料添加剤、飲料用添加剤が例示される。【００８９】  これらの発明によれば、それらを適用する前記例示するような生物において、本発明に使用される前記有効成分のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用に基づき、本発明の前記治療剤または予防剤によるのと同様の効果の発現が期待できる。すなわち、当該生物における治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療または予防効果を有する。【００９０】  本発明に使用される前記有効成分は通常、対象生物に１日当たり好ましくは０．０１〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重、投与される。投与は、たとえば、当該有効成分を、対象生物に供する人工配合飼料の原料中に添加混合しておくか、人工配合飼料の粉末原料と混合した後、その他の原料にさらに添加混合することで行うことができる。また、前記有効成分の飼料中の含有量は特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定すれば良いが、０．００１〜１５重量％の割合が好適である。【００９１】  本発明の飼料の製造法に特に限定はなく、また配合も一般の飼料に準ずるものであればよく、製造された飼料中にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する本発明に係る前記有効成分が含まれていればよい。【００９２】  ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する本発明に使用される前記有効成分を含んでなる飼料を摂取させること、またはＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を有する本発明に使用される前記有効成分の含有液に対象生物を浸漬することにより、家畜、実験動物、家禽、ペット動物などの体調を良好に維持し、または、改善させたりすることができる。【００９３】  本発明はまた、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療又は予防を必要とする被験体に、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の有効量を投与することを含む、該疾患の治療又は予防方法を提供する。【００９４】  被験体とは、好ましくは上記疾患の治療または予防を必要とするヒトであるが、上記疾患の治療または予防を必要とする生物、例えば、上記のような養殖動物、ペット動物等であってもよい。【００９５】  また、有効量とは、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物（有効成分）を上記被験体に投与した場合に、該有効成分を投与していない被験体と比較して、上記疾患の症状等に関して改善された臨床結果を生じる該化合物等の量である。具体的な有効量としては、投与形態、投与方法、使用目的および被験体の年齢、体重、症状等によって適宜設定され一定ではないが、好ましくは、被験体の前記有効成分の量で、成人１日当り０．１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重である。【００９６】本発明の治療方法においては、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体、及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物の有効量をそのまま上記被験体に投与してもよく、また、上記のような医薬、食品、飲料、又は飼料として投与してもよい。また、投与方法にも限定はなく、例えば、上記の治療又は予防剤と同様に、経口投与や注射等により投与すればよい。【００９７】  本発明の治療方法によれば、安全に、治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用及び／又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患を治療又は予防することが可能である。【００９８】  本発明で使用される前記有効成分は、その作用発現にとっての有効量の投与を行っても毒性は認められない。たとえば経口投与の場合、前述の表１〜５に記載の化合物、もしくはこれらの光学活性体又はそれらの塩のいずれかを、それぞれ１ｇ／ｋｇ体重でマウスに単回投与しても死亡例は認められない。また、前記有効成分は、ラットに経口投与において１ｇ／ｋｇ体重を経口単回投与しても死亡例は認められない。
【実施例】
【００９９】  以下、実施例を挙げて、本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの記載に何ら限定されるものではない。なお、実施例における％は特に記載がなければすべて容量％を意味する。【０１００】実施例１  キサントアンゲロールの調製
（１）アシタバ根部の乾燥粉末５ｋｇに１５Ｌのエタノールを加え、室温で３０分間抽出を行い、吸引ろ過後、エタノール抽出液と残渣に分けた。残渣に対して同様の抽出を２回行った後、エタノール抽出液を合わせ減圧濃縮し、エタノール抽出濃縮液を得た。【０１０１】  （２）実施例１−（１）で得られたエタノール抽出濃縮液を２Ｌの２５％エタノール水溶液に溶解し、ついで逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。樹脂はコスモシール１４０  Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク社製：４００ｍＬ）を用い、１Ｌの３０％エタノール水溶液、５Ｌの４０％エタノール水溶液、４Ｌの７５％エタノール水溶液、３Ｌの１００％エタノール水溶液の順に溶出を行った。【０１０２】  （３）実施例１−（２）で得られた７５％エタノール水溶液溶出画分を減圧濃縮し、シリカゲル（ＢＷ−３００ＳＰ：富士シリシア化学社製、３５０ｍＬ）に吸着させた。溶出はクロロホルム：ヘキサンの溶媒比を２：１（８００ｍＬ）、１０：４（１８００ｍＬ）、および酢酸エチル（１４００ｍＬ）の順に段階的に行った。溶出液はフラクション１から５まで２００ｍＬごと、フラクション６は１５０ｍＬ、フラクション７から１０は１００ｍＬごと、フラクション１１から１６は２００ｍＬごと、フラクション１７は１０００ｍＬの順に分画した。【０１０３】  （４）実施例１−（３）で得られたフラクションの番号１７を減圧濃縮し、シリカゲル（３５０ｍＬ）に吸着させた。溶出はクロロホルム：ヘキサンの溶媒比を１０：３（１０００ｍＬ）、１０：１（２１００ｍＬ）、２０：１（１０００ｍＬ）、酢酸エチル（５００ｍＬ）の順に段階的に行い、最初の２３００ｍＬを溶出の後、１００ｍＬごとに分画した。【０１０４】  （５）実施例１−（４）で得られたフラクションの番号４から２２を減圧濃縮後、クロロホルムに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿と上清とを分けた。得られた沈殿を乾燥し、キサントアンゲロールを得た。【０１０５】実施例２  ４−ハイドロキシデリシンの調製
実施例１−（３）で得られたシリカフラクションの番号１０から１５を集めて減圧濃縮後、クロロホルムに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿と上清とを分けた。得られた沈殿を乾燥し、４−ハイドロキシデリシンを得た。【０１０６】実施例３  キサントアンゲロールＨの調製
（１）実施例１−（２）で得られた４０％エタノール水溶液溶出画分を減圧濃縮し、シリカゲル（３５０ｍＬ）に吸着させた。溶出はクロロホルム：メタノールの溶媒比を５０：１（９６０ｍＬ）、４０：１（５２０ｍＬ）、２０：１（１０００ｍＬ）、１０：１（８４０ｍＬ）、５：１（５２０ｍＬ）の順に段階的に行い、溶出液を８ｍＬごとに分画した。【０１０７】  （２）実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号１４２から１６４を集めて濃縮乾固後、酢酸エチルに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿と上清とを分けた。得られた沈殿を乾燥し、キサントアンゲロールＨを得た。【０１０８】実施例４  ＴＢ１の調製
（１）実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号３０３から３２５を集めて濃縮乾固後、酢酸エチルに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿を乾燥し黄色物質を得た。【０１０９】  （２）実施例４−（１）で得られた黄色物質を核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル装置（ＡＶＡＮＣＥ６００型：ブルカ・バイオスピン社製）を用い、各種ＮＭＲスペクトルを測定し構造解析した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの番号は下記式（化８）のとおりである。【０１１０】
【化８】
2005074906.tif 000014
【０１１１】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ０．８１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．０３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．２４（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．５４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−２”），１．７１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．７５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），１．８７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），２．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−１”），２．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−１”），３．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６”），４．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，ＯＨ−６”），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６’），７．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−β），７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−α），７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），９．９７（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，ＯＨ−４），１０．２２（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，ＯＨ−４’）
図１に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１１２】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１５．３（ＣＨ３−７”），１８．８（Ｃ−１”），２０．７（ＣＨ３−３”），２８．１（ＣＨ３−７”），２８．９（Ｃ−５”），３８．３（Ｃ−４”），３８．９（Ｃ−７”），４６．４（Ｃ−２”），７６．８（Ｃ−６”），７７．９（Ｃ−３”），１０７．７（Ｃ−５’），１１０．４（Ｃ−３’），１１６．８（Ｃ−３およびＣ−５），１２０．８（Ｃ−１’），１２５．２（Ｃ−α）１２７．１（Ｃ−１），１３０．２（Ｃ−６’），１３０．８（Ｃ−２およびＣ−６），１４１．２（Ｃ−β），１５４．９（Ｃ−２’），１６０．３（Ｃ−４），１６０．６（Ｃ−４’），１８９．８（Ｃ＝Ｏ）
図２に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１１３】  次いで、実施例４−（１）で得られた黄色物質の質量スペクトル（ＭＳ）を質量分析計（ＤＸ３０２：日本電子社製）によりＦＡＢ−ＭＳの手法で測定した。【０１１４】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０７（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１１５】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例４−（１）で得られた黄色物質が１−（５，６，７，８，８ａ，１０ａ−ｈｅｘａｈｙｄｒｏ−１，７−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−８，８，１０ａ−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−９Ｈ−ｘａｎｔｈｅｎ−４−ｙｌ）−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４０８、以下ＴＢ１と称する）であることを確定した。【０１１６】  実施例５  ＴＢ２の調製
（１）実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号２８３から３０２を集めて濃縮乾固後、酢酸エチルに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿を乾燥し黄色物質を得た。【０１１７】  （２）実施例５−（１）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの番号は下記式（化９）のとおりである。【０１１８】
【化９】
2005074906.tif 000015
【０１１９】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．２０（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．３６（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．５７（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．６８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），２．１０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），２．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−１”），２．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−１”），３．７６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−２”），５．０１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６”），５．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，ＯＨ−２”），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６’），７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−β），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−α），７．５０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），９．９６（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１０．１９（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４’）
図３に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１２０】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１８．１（ＣＨ３−３”），１８．２（ＣＨ３−７”），２２．１（Ｃ−５”），２６．３（ＣＨ３−７”），２７．２（Ｃ−１”），３８．７（Ｃ−４”），６６．７（Ｃ−２”），８０．２（Ｃ−３”），１０７．８（Ｃ−５’），１０９．１（Ｃ−３’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１２１．０（Ｃ−１’），１２５．１（Ｃ−６”），１２５．１（Ｃ−α）１２７．０（Ｃ−１），１３０．３（Ｃ−６’），１３０．８（Ｃ−２およびＣ−６），１３１．６（Ｃ−７”），１４１．５（Ｃ−β），１５４．６（Ｃ−２’），１６０．４（Ｃ−４），１６０．４（Ｃ−４’），１８９．９（Ｃ＝Ｏ）
図４に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１２１】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０７（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１２２】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例５−（１）で得られた黄色物質が１−（３，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−３，５−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−２−（３−ｉｓｏｈｅｘｅｎｙｌ）−２−ｍｅｔｈｙｌ−２Ｈ−ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ−８−ｙｌ）−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４０８、以下ＴＢ２と称する）であることを確定した。【０１２３】実施例６  ＴＢ３の調製
（１）実施例１−（４）で得られたフラクションの番号２３，２４を減圧濃縮後、クロロホルムに溶解し、ヘキサンによる再結晶を行い黄色物質を得た。【０１２４】  （２）実施例６−（１）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの番号は下記式（化１０）のとおりである。【０１２５】
【化１０】
2005074906.tif 000016
【０１２６】 １Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム）：δ１．３４（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．５７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），１．６５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．７１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．７９（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−３”），２．１１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），２．１９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），３．１９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−１”），４．８２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−２”），５．１５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，Ｈ−６”），５．２１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），６．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−α），７．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６’），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−β），１３．５１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図５に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１２７】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重クロロホルム）：δ１８．１（ＣＨ３−７”），２２．４（Ｃ−５”），２３．２（ＣＨ３−３”），２６．１（ＣＨ３−７”），２７．３（Ｃ−１”），３７．１（Ｃ−４”），７４．２（Ｃ−３”），９１．６（Ｃ−２”），１０２．１（Ｃ−５’），１１４．２（Ｃ−３’），１１５．４（Ｃ−１’），１１６．４（Ｃ−３およびＣ−５），１１８．６（Ｃ−α），１２４．４（Ｃ−６”），１２８．２（Ｃ−１），１３０．９（Ｃ−２およびＣ−６），１３２．１（Ｃ−６’），１３２．７（Ｃ−７”），１４４．３（Ｃ−β），１５８．３（Ｃ−４），１６１．９（Ｃ−２’），１６７．０（Ｃ−４’），１９２．５（Ｃ＝Ｏ）
図６に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１２８】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０７（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１２９】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例６−（１）で得られた黄色物質が１−［２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−４−ｈｙｄｒｏｘｙ−２−（１−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−４−ｈｅｘｅｎｙｌ）−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ−５−ｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４０８，以下ＴＢ３と称する）であることを確定した。【０１３０】実施例７  ＴＢ４の調製
（１）実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号１１８から１３２を集めて濃縮乾固して黄色物質を得た。【０１３１】  （２）実施例７−（１）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１１）のとおりである。【０１３２】
【化１１】
2005074906.tif 000017
【０１３３】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．１８（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．２８（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），３．０７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．８７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３−４’），４．７２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−３”），４．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−２”），６．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−β），７．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−α），１０．０２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４）
図７に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１３４】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ２６．２（ＣＨ３−３”），２６．８（ＣＨ３−３”），２７．６（Ｃ−１”），５６．５（ＯＣＨ３−４’），７０．９（Ｃ−３”），９１．５（Ｃ−２”），１０５．２（Ｃ−５’），１１５．７（Ｃ−３’），１１６．０（Ｃ−１’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１２３．８（Ｃ−α），１２７．０（Ｃ−１），１３１．０（Ｃ−２およびＣ−６），１３１．３（Ｃ−６’），１４２．７（Ｃ−β），１６０．５（Ｃ−４’），１６０．６（Ｃ−４），１６１．８（Ｃ−２’），１８６．５（Ｃ＝Ｏ）
図８に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１３５】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５３（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１３６】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例７−（１）で得られた黄色物質が１−［２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−２−（１−ｈｙｄｒｏｘｙ−１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌ）−４−ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ−７−ｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量３５４、以下ＴＢ４と称する）であることを確定した。【０１３７】実施例８  ＴＢ５の調製
（１）実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号３３５から３４９を集めて減圧濃縮後、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。樹脂はコスモシール１４０  Ｃ１８−ＯＰＮ（３０ｍＬ）を用いた。それぞれ２００ｍＬの１０％エタノール水溶液、１５％エタノール水溶液、２０％エタノール水溶液、２５％エタノール水溶液、３０％エタノール水溶液、５００ｍＬの３５％エタノール水溶液、２００ｍＬの７５％エタノール水溶液の順に溶出を行い、１００ｍＬごとに溶出液を分画した。【０１３８】  （２）実施例８−（１）で得られたフラクションの番号６、７を集めて濃縮乾固後、黄色物質を得た。【０１３９】  （３）実施例８−（２）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１２）のとおりである。【０１４０】
【化１２】
2005074906.tif 000018
【０１４１】１Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ０．９６（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．０２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．１６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．６１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．７３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），２．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），３．０１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６”），３．２４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．３１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），４．００（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−７”），４．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＯＨ−６”），５．１９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−２”），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，Ｈ−α），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，Ｈ−β），７．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），８．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６’），１０．１１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１０．５５（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４’），１４．００（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図９に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１４２】１３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１７．０（ＣＨ３−３”），２２．１（Ｃ−１”），２５．４（ＣＨ３−７”），２７．２（ＣＨ３−７”），３０．３（Ｃ−５”），３７．５（Ｃ−４”），７２．４（Ｃ−７”），７８．０（Ｃ−６”），１０８．２（Ｃ−５’），１１３．６（Ｃ−１’），１１５．４（Ｃ−３’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１１８．３（Ｃ−α），１２２．４（Ｃ−２”），１２６．７（Ｃ−１），１３０．７（Ｃ−６’），１３２．０（Ｃ−２およびＣ−６），１３５．７（Ｃ−３”），１４５．０（Ｃ−β），１６１．１（Ｃ−４），１６３．２（Ｃ−４’），１６４．４（Ｃ−２’），１９２．６（Ｃ＝Ｏ）
図１０に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１４３】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４２５（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１４４】  以上、ＮＭＲスペクトル，質量スペクトル解析の結果、実施例８−（２）で得られた黄色物質が１−［２，４−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−３−（６，７−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−３，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２−ｏｃｔｅｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４２６，以下ＴＢ５と称する）であることを確定した。【０１４５】実施例９  ＴＢ６の調製
（１）実施例３−（２）で得られた上清の濃縮物をシリカゲル（１００ｍＬ）に吸着させた。溶出はヘキサン：酢酸エチル＝７：５の溶媒を用い、溶出液を８ｍＬごとに分画した。【０１４６】  （２）実施例９−（１）で得られたシリカフラクションの番号４１から５１を集めて濃縮乾固して黄色物質を得た。【０１４７】  （３）実施例９−（２）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１３）のとおりである。【０１４８】
【化１３】
2005074906.tif 000019
【０１４９】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ０．９６（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３），１．０４（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．６０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．７２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．８９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），２．１３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），３．１８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６”），３．２４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．２９（２Ｈ，ｍ，−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３），４．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＯＨ−６”），５．２０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｈ−２”），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ−α），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ−β），７．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），８．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），１０．１１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１０．５５（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４’），１４．００（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図１１に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１５０】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１７．０（ＣＨ３−３”），１７．０（−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３），２１．１（ＣＨ３−７”），２２．１（Ｃ−１”），２３．３（ＣＨ３−７”），２９．９（Ｃ−５”），３７．２（Ｃ−４”），５６．６（−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３），７５．１（Ｃ−６”），７７．５（Ｃ−７”），１０８．２（Ｃ−５’），１１３．６（Ｃ−１’），１１５．４（Ｃ−３’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１１８．３（Ｃ−α），１２２．７（Ｃ−２”），１２６．７（Ｃ−１），１３０．６（Ｃ−６’），１３２．０（Ｃ−２およびＣ−６），１３５．５（Ｃ−３”），１４５．０（Ｃ−β），１６１．１（Ｃ−４），１６３．１（Ｃ−４’），１６４．４（Ｃ−２’），１９２．６（Ｃ＝Ｏ）
図１２に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１５１】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４５３（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１５２】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例９−（２）で得られた黄色物質が１−［３−（７−ｅｔｈｏｘｙ−６−ｈｙｄｒｏｘｙ−３，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２−ｏｃｔｅｎｙｌ）−２，４−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４５４、以下ＴＢ６と称する）であることを確定した。【０１５３】実施例１０  ＴＢ７の調製
（１）実施例１−（５）で得られた上清の濃縮物をシリカゲル（３５０ｍＬ）に吸着させた。溶出はクロロホルム：ヘキサンの溶媒比を１００：１（１５００ｍＬ）、５０：１（２６００ｍＬ）、２０：１（２６００ｍＬ）、酢酸エチル（３００ｍＬ）の順に段階的に行い、溶出液を８ｍＬごとに分画した。【０１５４】  （２）実施例１０−（１）で得られたフラクションの番号２１から３０を集めて濃縮乾固して黄色物質を得た。【０１５５】  （３）実施例１０−（２）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１４）のとおりである。【０１５６】
【化１４】
2005074906.tif 000020
【０１５７】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ０．９１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），０．９６（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．２１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），１．４３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），１．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），２．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−２”），２．５２（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），２．５６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，Ｈ−６”），３．９１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３−４’），６．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−β），７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−α），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），１０．１５（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１３．９９（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図１３に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１５８】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１９．０（ＣＨ３−３”），２１．３（Ｃ−１”），２４．５（ＣＨ３−７”），２６．０（ＣＨ３−７”），２６．４（Ｃ−５”），３９．９（Ｃ−４”），４６．３（Ｃ−７”），５３．５（Ｃ−２”），５６．８（ＯＣＨ３−４’），８５．８（Ｃ−６”），８６．９（Ｃ−３”），１０３．７（Ｃ−５’），１１４．８（Ｃ−１’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１１７．４（Ｃ−３’），１１８．２（Ｃ−α），１２６．６（Ｃ−１），１３１．３（Ｃ−６’），１３２．２（Ｃ−２およびＣ−６），１４５．７（Ｃ−β），１６１．３（Ｃ−４），１６３．５（Ｃ−２’），１６４．１（Ｃ−４’），１９３．４（Ｃ＝Ｏ）
図１４に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１５９】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４２１（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１６０】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例１０−（２）で得られた黄色物質が１−［３−（２，５−ｅｐｏｘｙ−２，６，６−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｍｅｔｈｙｌ）−２−ｈｙｄｒｏｘｙ−４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４２２、以下ＴＢ７と称する）であることを確定した。【０１６１】実施例１１  ＴＢ８の調製
（１）実施例２で得られた上清を減圧濃縮後、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ：東ソー社製）を用いた。溶媒は蒸留水：アセトニトリル＝１５：８５、溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行った。溶出液の紫外線吸収を指標に溶出液を分画した。【０１６２】  （２）実施例１１−（１）で得られた逆相クロマトフラクション２（保持時間５７．６分の検出ピークを含むフラクション）を濃縮乾固して黄色物質を得た。【０１６３】  （３）実施例１１−（２）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１５）のとおりである。【０１６４】
【化１５】
2005074906.tif 000021
【０１６５】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．１９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．１９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．７０（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），２．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−４”），３．２９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．３１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．９１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３−４’），５．１９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｈ−２”），５．４７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），５．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−６”），６．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−β），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−α），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），１０．１４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１０．８１（１Ｈ，ｓ，ＯＯＨ−７”），１３．８１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図１５に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１６６】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１６．８（ＣＨ３−３”），２２．１（Ｃ−１”），２５．５（ＣＨ３−７”），２５．５（ＣＨ３−７”），４３．０（Ｃ−４”），５６．９（ＯＣＨ３−４’），８１．１（Ｃ−７”），１０３．７（Ｃ−５’），１１４．９（Ｃ−１’），１１６．６（Ｃ−３’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１１８．１（Ｃ−α），１２３．５（Ｃ−２”），１２６．５（Ｃ−１），１２７．９（Ｃ−５”），１３１．４（Ｃ−６’），１３２．３（Ｃ−２およびＣ−６），１３４．３（Ｃ−３”），１３７．０（Ｃ−６”），１４５．７（Ｃ−β），１６１．３（Ｃ−４），１６３．０（Ｃ−２’），１６３．９（Ｃ−４’），１９３．３（Ｃ＝Ｏ）
図１６に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１６７】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４３７（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１６８】  以上、ＮＭＲスペクトル，質量スペクトル解析の結果、実施例１１−（２）で得られた黄色物質が１−［２−ｈｙｄｒｏｘｙ−３−（７−ｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｙ−３，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２，５−ｏｃｔａｄｉｅｎｙｌ）−４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４３８，以下ＴＢ８と称する）であることを確定した。【０１６９】実施例１２  ＴＢ９の調製
（１）実施例１１−（１）で得られた逆相クロマトフラクション３（保持時間６１．２分の検出ピークを含むフラクション）を濃縮乾固して黄色物質を得た。【０１７０】  （２）実施例１２−（１）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１６）のとおりである。【０１７１】
【化１６】
2005074906.tif 000022
【０１７２】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．４０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．５６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），１．６２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．７２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．８９（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），３．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．３１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１”），３．９１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３−４’），４．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｈ−６”），４．７９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８”），４．８４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８”），５．１４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−２”），６．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３およびＨ−５），７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−２およびＨ−６），７．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−β），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−α），８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），１０．１５（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４），１１．２５（１Ｈ，ｓ，ＯＯＨ−６”），１３．８１（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−２’）
図１７に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１７３】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１６．７（ＣＨ３−３”），１７．７（ＣＨ３−７”），２２．０（Ｃ−１”），２９．５（Ｃ−５”），３６．０（Ｃ−４”），５６．９（ＯＣＨ３−４’），８８．２（Ｃ−６”），１０３．６（Ｃ−５’），１１４．０（Ｃ−８”），１１４．９（Ｃ−１’），１１６．７（Ｃ−３’），１１６．７（Ｃ−３およびＣ−５），１１８．１（Ｃ−α），１２２．９（Ｃ−２”），１２６．５（Ｃ−１），１３１．３（Ｃ−６’），１３２．３（Ｃ−２およびＣ−６），１３４．９（Ｃ−３”），１４５．３（Ｃ−７”），１４５．７（Ｃ−β），１６１．３（Ｃ−４），１６３．０（Ｃ−２’），１６３．８（Ｃ−４’），１９３．３（Ｃ＝Ｏ）
図１８に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１７４】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４３７（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１７５】  以上、ＮＭＲスペクトル，質量スペクトル解析の結果、実施例１２−（１）で得られた黄色物質が１−［２−ｈｙｄｒｏｘｙ−３−（６−ｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｙ−３，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２，７−ｏｃｔａｄｉｅｎｙｌ）−４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ］−３−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｏｎｅ（分子量４３８，以下ＴＢ９と称する）であることを確定した。【０１７６】実施例１３  キサントアンゲロールＧの調製
（１）実施例１２−（１）で得られたＴＢ９  １００ｍｇをメタノール５０ｍＬに溶解し、トリフェニルホスフィン６０ｍｇを加え室温で１時間反応した。反応液を減圧濃縮し、クロロホルム：メタノール＝１０：１を展開溶媒とした薄層クロマトグラフィーに供した。次に、紫外線吸収部分をかきとり、展開溶媒で抽出後、濃縮乾固することにより、キサントアンゲロールＧ５７．２ｍｇを得た。【０１７７】実施例１４  キサントアンゲロールＦの調製
実施例１−（３）で得られたシリカフラクションの番号６から９を集めて減圧濃縮後、クロロホルムに溶解した。続いてヘキサンによる再結晶を行い、生じた沈殿と上清とを分けた。得られた沈殿物を乾燥しキサントアンゲロールＦを得た。【０１７８】実施例１５  ４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンの調製
（１）実施例１４で得られた上清を減圧濃縮後、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍＸ３０ｃｍ）を用いた。溶出は４５分間、蒸留水：アセトニトリル＝１５：８５で行った後、続く５０分間はアセトニトリル容量比を１００％に直線的に変化させた。溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行った。溶出液の紫外線吸収を指標に溶出液を分画した。【０１７９】  （２）実施例１５−（１）で得られた逆相クロマトフラクション２（保持時間３３分の検出ピークを含むフラクション）を濃縮乾固して４’−Ｏ−ゲラニルナリンゲニンを得た。【０１８０】実施例１６  レスペオールの調製
実施例１５−（１）で得られた逆相クロマトフラクション５（保持時間４９分の検出ピークを含むフラクション）を濃縮乾固してレスペオールを得た。【０１８１】実施例１７  イソババカルコンの調製
（１）実施例１−（２）で得られた７５％エタノール水溶液溶出画分を減圧濃縮し、シリカゲル（ＢＷ−３００ＳＰ：３５０ｍＬ）に吸着させた。溶出はクロロホルム：ヘキサンの溶媒比を２：１（２６００ｍＬ）、１０：３、１５：１、２０：１（各６００ｍＬ）、１００：１（１０００ｍＬ）および酢酸エチル（５００ｍＬ）の順に段階的に行った。溶出液は２００ｍＬごとに分画した。【０１８２】  （２）実施例１７−（１）で得られたフラクションの番号２３〜３０を減圧濃縮し、イソババカルコンを得た。【０１８３】実施例１８  イソババチンの調製
実施例３−（１）で得られたシリカフラクションの番号１０８から１１４を集めて濃縮乾固してイソババチンを得た。【０１８４】実施例１９  ババクロマノールの調製
実施例８−（１）で得られたフラクションの番号１３から２０を集めて濃縮乾固してババクロマノールを得た。【０１８５】実施例２０  プロストラトールＦの調製
実施例１−（５）で得られたキサントアンゲロール１００ｍｇを２％水酸化ナトリウム水溶液  １００ｍＬに溶解し５０℃で２時間反応した。反応液を中和後、逆層クロマトグラフィーを用いて分画した。樹脂はコスモシール１４０  Ｃ１８−ＯＰＮ（１００ｍＬ）を用いた。それぞれ２００ｍＬの４０％エタノール水溶液、５０％エタノール水溶液、６０％エタノール水溶液の順に溶出を行った。次に、５０％エタノール水溶液溶出画分を濃縮乾固して、プロストラトールＦ６３ｍｇを得た。【０１８６】実施例２１  化合物（Ｃ０８２）の調製
（１）実施例１４で得られたキサントアンゲロールＦ  １００ｍｇを２％水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌに溶解し５０℃で２時間反応した。反応液を中和後、逆層クロマトグラフィーを用いて分画した。樹脂はコスモシール１４０  Ｃ１８−ＯＰＮ（１００ｍｌ）を用いた。それぞれ２００ｍｌの４０％エタノール水溶液、５０％エタノール水溶液、６０％エタノール水溶液、７０％エタノール水溶液の順に溶出を行った。次に、６０％エタノール水溶液溶出画分を濃縮乾固して、黄色物質２２ｍｇを得た。【０１８７】  （２）実施例２１−（１）で得られた黄色物質のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、ピークの帰属の番号は以下の式（化１７）のとおりである。【０１８８】
【化１７】
2005074906.tif 000023
【０１８９】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．５１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．５７（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−３”），１．５８（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−７”），１．８８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４”），１．９８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５”），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，Ｈ−３），３．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−３），３．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１”），３．８６（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３−７），５．０１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，Ｈ−６”），５．０９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−２”），５．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，Ｈ−２），６．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６），６．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−３’およびＨ−５’），７．３１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−２’およびＨ−６’），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５），９．５４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−４’）
図１９に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１９０】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１６．７（ＣＨ３−３”），１８．４（ＣＨ３−７”），２２．５（Ｃ−１”），２６．３（ＣＨ３−７”），２７．０（Ｃ−５”），４０．２（Ｃ−４”），４４．０（Ｃ−３），５７．０（ＯＣＨ３−７），７９．７（Ｃ−２），１０６．０（Ｃ−６），１１５．８（Ｃ−１０），１１５．９（Ｃ−３’およびＣ−５’），１１７．５（Ｃ−８），１２２．５（Ｃ−２”），１２４．８（Ｃ−６”），１２６．５（Ｃ−５），１２８．８（Ｃ−２’およびＣ−６’），１３０．８（Ｃ−１’），１３１．５（Ｃ−７”），１３５．４（Ｃ−３”），１５８．４（Ｃ−４’），１６０．５（Ｃ−９），１６３．５（Ｃ−７），１９１．８（Ｃ−４）
図２０に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０１９１】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０５（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０１９２】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、実施例２１−（１）で得られた黄色物質が８−Ｇｅｒａｎｙｌ−４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−７−ｍｅｔｈｏｘｙ−ｆｌａｖａｎｏｎｅ（分子量４０６：以下化合物（Ｃ０８２）と称する）であることを確定した。【０１９３】実施例２２  キサントフモールの調製
（１）ホップの乾燥粉末１ｋｇに１０Ｌのエタノールを加え、室温で２時間抽出を行った。次いで抽出残渣に５Ｌのエタノールを加え、室温で３０分抽出を行った。得られた抽出液を合わせロータリーエバポレーターで減圧濃縮し、ホップエタノール抽出液８００ｍＬを得た。【０１９４】  （２）実施例２２−（１）で得たホップエタノール抽出液に蒸留水とヘキサンを加えて混合後、ヘキサン層と水層に分画した。次に水層にクロロホルムを加えて混合後、水層とクロロホルム層に分画した。クロロホルム層は減圧濃縮後、クロロホルム６０ｍＬに溶解した。【０１９５】  （３）実施例２２−（２）で得たクロロホルム層をシリカゲル（ＢＷ−３００ＳＰ、１００ｍＬ）に吸着させた。ついでクロロホルム（１００ｍＬ）、クロロホルム：酢酸エチル＝１：１（１００ｍＬ）の順に溶出した。【０１９６】  （４）実施例２２−（３）で得たクロロホルム：酢酸エチル＝１：１溶出画分から酢酸エチルとヘキサンにより再結晶を行うことでキサントフモールを得た。【０１９７】実施例２３  ムンドゥレアフラバノンＡの合成
４，２’−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−３’−ｐｒｅｎｙｌ−４’−ｍｅｔｈｏｘｙｃｈａｌｃｏｎｅを触媒量のＰｙｒｉｄｉｎｉｕｍ−ｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ（東京化成）を含むジクロロメタンに溶解し室温で３０分撹拌した後、３，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−２Ｈ−ｐｙｒａｎｅ（東京化成）を添加し、室温で更に３時間撹拌することにより４−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎｙｌｏｘｙ−２’−ｈｙｄｒｏｘｙ−３’−ｐｒｅｎｙｌ−４’−ｍｅｔｈｏｘｙｃｈａｌｃｏｎｅを得た。４−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎｙｌｏｘｙ−２’−ｈｙｄｒｏｘｙ−３’−ｐｒｅｎｙｌ−４’−ｍｅｔｈｏｘｙｃｈａｌｃｏｎｅを０．５ｇ／ｍＬの水酸化ナトリウムを含むメタノール中、４０度で反応することによりムンドゥレアフラバノンＡのテトラハイドロキシピラン（ＴＨＰ）化体を得た。ムンドゥレアフラバノンＡのＴＨＰ化体をメタノール中、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸で処理することによりムンドゥレアフラバノンＡを得た。得られたムンドゥレアフラバノンＡのＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。【０１９８】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．５７，１．５９（６Ｈ，２ｓ，（ＣＨ３）２Ｃ＝），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．８，３Ｈｚ，ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ），３．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ），３．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ａｒ−ＣＨ２−ＣＨ＝），３．８６（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ３），５．０９（１Ｈ，ｍ，−ＣＨ２−ＣＨ＝），５．４７（１Ｈ，ｄｄ，ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ），６．７９（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３，５，５’），７．３２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｈ−２，６），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｈ−６’），９．５３（１Ｈ，ｓ，−ＯＨ−４）【０１９９】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３３９（Ｍ＋Ｈ）＋メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０２００】実施例２４  クマリン化合物Ａの調製
（１）実施例１−（２）で得られた４０％エタノール水溶液溶出画分を減圧濃縮し、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について述べる。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ）を用いた。溶媒は蒸留水：アセトニトリル＝１：３を用い、溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行なった。溶出液の紫外線吸収を指標に溶出液を分画した。【０２０１】  （２）実施例２４−（１）で得た逆相クロマトフラクション５（保持時間３０．５分の検出のピークを含むフラクション）のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、帰属の番号は以下の式（化１８）のとおりである。【０２０２】
【化１８】
2005074906.tif 000024
【０２０３】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．４０（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．４１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．７９（３Ｈ，ｂｒ−ｔ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，Ｈ−５”），１．８９（３Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−４”），２．０４（３Ｈ，ｓ，Ｈ−２’’’），５．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−３’），６．０８（１Ｈ，ｂｒ−ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３”），６．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−３），６．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−４’），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５），８．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−４）
図２１に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０２０４】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１６．０（Ｃ−４”），２０．８（Ｃ−５”），２１．３（ＣＨ３−２’），２３．０（Ｃ−２’’’），２５．３（ＣＨ３−２’），６１．１（Ｃ−４’），７０．４（Ｃ−３’），７８．１（Ｃ−２’），１０７．４（Ｃ−８），１１３．４（Ｃ−４ａ），１１３．４（Ｃ−３），１１５．０（Ｃ−６），１２８．０（Ｃ−２”），１３０．９（Ｃ−５），１３８．０（Ｃ−３”），１４５．３（Ｃ−４），１５４．４（Ｃ−８ａ），１５６．９（Ｃ−７），１６０．２（Ｃ−２），１６７．１（Ｃ−１”），１７０．３（Ｃ−１’’’）
図２２に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０２０５】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３８７（Ｍ＋Ｈ）＋メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０２０６】  以上、ＮＭＲスペクトル，質量スペクトル解析の結果、逆相クロマトフラクション５が３’−Ａｃｅｔｏｘｙ−４’−Ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ−３’，４’−ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（分子量３８６：以下クマリン化合物Ａと称する）であることを確定した。【０２０７】実施例２５  クマリン化合物Ｂの調製
実施例２４−（１）で得た逆相クロマトフラクション７（保持時間３２．４分の検出のピークを含むフラクション）のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、帰属の番号は以下の式（化１９）のとおりである。【０２０８】
【化１９】
2005074906.tif 000025
【０２０９】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．３３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．３７（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．７８（３Ｈ，ｂｒ−ｔ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，Ｈ−５”），１．８０（３Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−４”），２．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，Ｊ＝１８．０Ｈｚ，Ｈ−４’），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｊ＝１８．０Ｈｚ，Ｈ−４’），５．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ−３’），６．１２（１Ｈ，ｂｒ  ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３”），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−３），６．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５），７．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−４）
図２３に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０２１０】 １３Ｃ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１６．０（Ｃ−４”），２１．０（Ｃ−５”），２３．３（Ｃ−４’），２４．２（ＣＨ３−２’），２４．９（ＣＨ３−２’），６９．８（Ｃ−３’），７７．４（Ｃ−２’），１０７．１（Ｃ−８），１１２．８（Ｃ−４ａ），１１２．９（Ｃ−３），１１４．５（Ｃ−６），１２７．９（Ｃ−２”），１２８．１（Ｃ−５），１３９．２（Ｃ−３”），１４５．５（Ｃ−４），１５３．８（Ｃ−７），１５６．６（Ｃ−８ａ），１６１．０（Ｃ−２），１６７．２（Ｃ−１”）
図２４に１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２９（Ｍ＋Ｈ）＋メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０２１１】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、逆相クロマトフラクション７が３’−Ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ−３’，４’−ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（分子量３２８：以下クマリン化合物Ｂと称する）であることを確定した。【０２１２】実施例２６  クマリン化合物Ｃの調製
実施例２４−（１）で得た逆相クロマトフラクション３（保持時間２３．９分の検出のピークを含むフラクション）のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、帰属の番号は以下の式（化２０）のとおりである。【０２１３】
【化２０】
2005074906.tif 000026
【０２１４】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．３９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．４３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．９１（３Ｈ，ｂｒ−ｓ，Ｈ−５”），１．９８（３Ｈ，ｂｒ−ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−４”），４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−４’），５．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−３’），５．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，ＯＨ−４’），６．２０（１Ｈ，ｂｒ−ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３”），６．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−３），６．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５），７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−４）
図２５に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０２１５】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３４５（Ｍ＋Ｈ）＋メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０２１６】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、逆相クロマトフラクション３が３’−Ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ−４’−ｈｙｄｒｏｘｙ−３’，４’−ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（分子量３４４：以下クマリン化合物Ｃと称する）であることを確定した。【０２１７】実施例２７  クマリン化合物Ｄの調製
実施例２４−（１）で得た逆相クロマトフラクション２（保持時間２２．４分の検出のピークを含むフラクション）のＮＭＲスペクトルと質量スペクトルを実施例４−（２）と同様の方法で測定した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。なお、帰属の番号は以下の式（化２１）のとおりである。【０２１８】
【化２１】
2005074906.tif 000027
【０２１９】 １Ｈ−ＮＭＲ（重ジメチルスルホキシド）：δ１．３３（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．４１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３−２’），１．８１（３Ｈ，ｓ，Ｈ−５”），１．８９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−４”），３．９５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｈ−３’），５．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，ＯＨ−３’），５．９８（１Ｈ，ｂｒ−ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３”），６．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−３），６．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｈ−４’），６．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−５），７．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ−４）
図２６に１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。【０２２０】  ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ３４３（Ｍ−Ｈ）−メタニトロベンジルアルコールをマトリックスに用いた。【０２２１】  以上、ＮＭＲスペクトル、質量スペクトル解析の結果、逆相クロマトフラクション２が４’−Ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ−３’−ｈｙｄｒｏｘｙ−３’，４’−ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（分子量３４４：以下クマリン化合物Ｄと称する）であることを確定した。【０２２２】実施例２８  ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害試験
（１）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液の調製
阻害試験に使用したＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液はＦｏｇｅｌｍａｎらの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５５（８），３７１５−３７２５，１９８０）に従って、一部改良して調製した。【０２２３】（ｉ）ラット肝ミクロソームの調製
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（雄、２００〜２５０ｇ）４匹を午後４時から午前４時まで照明を点灯するサイクルで１週間飼育した。この際、餌および水は自由摂取できるようにしたが、屠殺３日前より餌中に５％（Ｗ／Ｗ）となるようにコレスチラミン（シグマ社製）を添加した。ラットは午前１０時に屠殺し、直ちに肝臓を摘出し冷生理食塩水で軽く洗浄後バッファーＡ水溶液（０．１Ｍ  スクロース、０．０５Ｍ  塩化カリウム、０．０４Ｍ  リン酸二水素カリウム、０．０３Ｍ  ＥＤＴＡ−カリウム、ｐＨ７．２）に浸漬（２５ｍＬ／１匹）した。得られた肝臓をポッター型ホモジナイザーによりホモジナイズし、１０，０００×ｇ、１５分間（４℃）遠心を行い沈殿を除去する操作を２回繰り返し、続いて１００，０００×ｇ、１時間（４℃）遠心を行い沈殿を回収し適当量のバッファーＡに懸濁した。これを、さらに１００，０００×ｇ、１時間（４℃）遠心を行い沈殿を回収し、タンパク濃度が８２ｍｇ／ｍＬとなるように再度バッファーＡに懸濁し、終濃度１０ｍＭとなるようにジチオスレイトールを添加し、ポッター型ホモジナイザーによりホモジナイズを行い、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの調製を行うまで−８０℃で凍結保存した。以上の操作により肝ミクロソームを調製した。【０２２４】（ｉｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの調製
（ｉ）により得られた肝ミクロソームを融解後、等量のバッファーＢ５０％グリセロール水溶液（０．１Ｍ  塩化カリウム、０．０８Ｍ  リン酸二水素カリウム、０．００２Ｍ  ＥＤＴＡ−カリウム、０．０１Ｍ  ジチオスレイトール、ｐＨ７．２）を添加し、ポッター型ホモジナイザーによりホモジナイズを行い、３７℃で６０分保温した。次に２倍量のバッファーＣ水溶液（０．１Ｍ  塩化カリウム、０．０８Ｍ  リン酸二水素カリウム、０．００２Ｍ  ＥＤＴＡ−カリウム、０．０１Ｍ  ジチオスレイトール、ｐＨ７．２）を添加し、再度ポッター型ホモジナイザーによりホモジナイズを行った後、１００，０００×ｇ、１時間（２５℃）遠心を行い上清を回収した。得られた上清から３５％−５０％硫酸アンモニウムによる沈殿画分を回収し、タンパク濃度が１２ｍｇ／ｍＬとなるようにバッファーＤ３０％グリセロール水溶液（１Ｍ  塩化カリウム、０．０８Ｍ  リン酸二水素カリウム、０．００２Ｍ  ＥＤＴＡ−カリウム、０．０１Ｍ  ジチオスレイトール、ｐＨ６．８）に溶解した。この溶液を６０℃で１０分間加熱した後、等量のバッファーＣ水溶液（ｐＨ６．８）を添加し、１００，０００×ｇ，３０分間（２５℃）で遠心を行い上清を回収した。この上清から６０％硫酸アンモニウム沈殿画分を回収し、７ｍＬのバッファーＣ水溶液（ｐＨ６．８）に溶解し、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液とした。【０２２５】（２）各化合物によるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害活性の測定
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの酵素活性はＦｏｇｅｌｍａｎらの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５５（８），３７１５−３７２５，１９８０）に従って、一部改良して測定した。【０２２６】  （１）で調製したＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液２μＬを含む反応水溶液（０．２Ｍ  塩化カリウム、０．１６Ｍ  リン酸二水素カリウム、０．００４Ｍ  ＥＤＴＡ−カリウム、０．０１Ｍ  ジチオスレイトール、０．５ｍＭ  β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸四ナトリウム（還元型）；ＮＡＤＰＨ、ｐＨ６．８）９４μＬに表６記載の終濃度となるように各化合物のジメチルスルホキシド溶液１μＬを添加し３７℃で３０分保温した。なお、対照区分として化合物を添加せずジメチルスルホキシド溶液のみを添加した区分を設定した。また、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液を添加しない区分を設定した。この後、２ｍＭのＨＭＧ−ＣｏＡ（シグマ社製）水溶液５μＬを添加し混合後、３７℃に保温し経時的に３４０ｎｍの吸光度の変化を検出することで、ＨＭＧ−ＣｏＡがメバロン酸に変換されるときに酸化されるＮＡＤＰＨの消費量を算出した。なお、各反応は３連で行った。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ活性は以下の式により測定した。【０２２７】ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ活性＝［ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液が含まれる区分の吸光度の変化］−［ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ粗酵素溶液を含まない区分の吸光度の変化］【０２２８】  なお、反応のコントロールとしてＨＭＧ−ＣｏＡ水溶液を添加しない区分を適宜設定し、酵素反応の特異性および阻害活性の特異性を確認した。
各被験化合物のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼに対する阻害活性は以下の式により算出した。【０２２９】阻害活性（％）＝（１−（［被験化合物を添加したときのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ活性］÷［対照区分のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ活性］））×１００【０２３０】  この結果を表６に示す。すなわち、表６は各被験化合物の各終濃度におけるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼに対する阻害活性を示すものであり、表に記載の各化合物に顕著なＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害活性が認められた。【０２３１】
【表６】
2005074906.tif 000028
【０２３２】実施例２９  アシタバ抽出画分の調製
（１）アシタバ根エタノール抽出画分の調製
アシタバ根の乾燥粉末２ｇに４０ｍＬのエタノールを加え、３０分間抽出を行い、遠心分離にて抽出液と残渣に分けた。次いで残渣に対して各溶媒３０ｍＬによる抽出操作を２回繰り返した。なお、エタノール抽出は室温で行った。得られた抽出液を集めてロータリーエバポレーターで濃縮した。最終的に、１ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解し、アシタバ根エタノール抽出画分を得た。【０２３３】  （２）アシタバ茎葉エタノール抽出画分の調製
アシタバ茎葉の乾燥粉末２ｇに４０ｍＬのエタノールを加え、３０分間抽出を行い、遠心分離にて抽出液と残渣に分けた。次いで残渣に対して各溶媒３０ｍＬによる抽出操作を２回繰り返した。なお、エタノール抽出は室温で行った。得られた抽出液を集めてロータリーエバポレーターで濃縮した。最終的に、１ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解し、アシタバ茎葉エタノール抽出画分を得た。【０２３４】実施例３０  マクロファージでの抗泡沫化の測定
マクロファージは変性ＬＤＬ（アセチルＬＤＬ（Ａｃ−ＬＤＬ）など）を細胞内に取り込みコレステロールエステルを合成し泡沫化する。各被験サンプルによるマクロファージの抗泡沫化活性を測定した。【０２３５】（１）マクロファージの泡沫化
１０％ウシ胎児血清（バイオウィタカー社製）含有、ダルベッコ改良イーグル培地（シグマ社製、Ｄ５７９６）にＲＡＷ２６４．７細胞（ＡＴＣＣ  ＴＩＢ  ７１）を４×１０５個／ｍｌになるように懸濁し、２４穴マイクロタイタープレートのウェルに１ｍＬずつ加えて５％炭酸ガス存在下、３７℃で一晩培養した。次に、ＵｌｔｒａＣＨＯ培地（バイオウィタカー社製、Ｂ２７２４）に交換し、各ウェルに前述の実施例で調製した各被験サンプルのジメチルスルホキシド溶液２μＬをそれぞれ以下の表７に示す濃度となるように添加した。さらに各ウェルにそれぞれ終濃度２０μｇ／ｍＬのＡｃ−ＬＤＬ（バイオテクノロジー社製、ＢＴ−９０６）を添加し、２４時間培養した。なお、対照としてＡｃ−ＬＤＬを添加しない区分およびジメチルスルホキシド添加の区分を設定した。【０２３６】（２）コレステロールエステル生合成量の測定
マクロファージの泡沫化の指標として、細胞内の全コレステロール量及び遊離コレステロール量の測定を行い、コレステロールエステル量を算出した。
培養終了後、培地を除き、０．３％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ（シグマ社製、Ａ−８０２２）含有リン酸緩衝塩溶液で細胞を洗浄し、さらにリン酸緩衝塩溶液で洗浄した。細胞に０．５ｍＬのヘキサン：イソプロパノール＝３：２の溶媒を添加し、３０分間室温に置いた後上清を回収した。この操作を再度繰り返し、あわせて１ｍＬの上清を濃縮乾固した。沈殿を３０μＬのイソプロパノールに溶解後、溶液１０μＬ中に含まれる全コレステロール量をコレステロールＥ−テスト（和光純薬社製、４３９−１７５０１）を用いて測定し、遊離コレステロール量を遊離コレステロールＥ−テスト（和光純薬社製、４３５−３５８０１）を用いて測定した。また、測定は全て２連で行った。コレステロールエステル生合成量は全コレステロール量から遊離コレステロール量を差し引いて求めた。また、抗泡沫化活性は以下の式により算出した。【０２３７】抗泡沫化活性（％）＝１００−（（被験サンプルを添加したときのコレステロールエステル生合成量）−（Ａｃ−ＬＤＬを添加しない区分のコレステロールエステル生合成量））÷（（ジメチルスルホキシドのみを添加したときのコレステロールエステル生合成量）−（Ａｃ−ＬＤＬを添加しない区分のコレステロールエステル生合成量））×１００【０２３８】  この結果を表７に示す。すなわち、表７は各被験サンプルの各終濃度におけるマクロファージ中に蓄積されるコレステロールエステル生合成に対する阻害活性を示すものであり、表に記載の各サンプルに顕著な抗泡沫化活性が認められた。【０２３９】
【表７】
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【産業上の利用可能性】
【０２４０】  本発明により、カルコン類化合物、フラバノン類化合物、３’，４’−ジハイドロセセリン類化合物、それらの誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含有する治療又は予防にＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用を要する疾患又は細胞の抗泡沫化作用を要する疾患の治療用又は予防用の医薬、食品、飲料又は飼料が提供される。該医薬は動脈硬化症や高脂血症やこれらが原因因子となって起こる疾患の治療剤又は予防剤として有用である。また、該食品又は飲料は、日常の飲食品として摂取することにより、上記疾患の症状改善等が可能となる。従って、本発明の有効成分を含有する飲食品はそのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害作用、細胞の抗泡沫化作用により、生体の恒常性の維持に有用な機能性飲食品である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【国際調査報告】
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