(57)【要約】タバコ材は、着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより喫煙時の刺激・辛みを低減させたものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより喫煙時の刺激・辛みを低減させたタバコ材。
【請求項２】
前記着色酸性水溶性高分子物質が、１万〜６万ダルトンの分子量を有する請求項１に記載のタバコ材。
【請求項３】
前記タバコ材が、バーレー種タバコを含む請求項１に記載のタバコ材。
【請求項４】
着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより刺激・辛味原因成分を低減させたタバコ抽出液を含むタバコ香喫味剤。
【請求項５】
前記着色酸性水溶性高分子物質が、１万〜６万ダルトンの分子量を有する請求項４に記載のタバコ香喫味剤。
【請求項６】
前記タバコ抽出液が、バーレー種タバコ由来のものである請求項４に記載のタバコ香喫味剤。
【請求項７】
天然タバコ材からの水系抽出液を含む香喫味剤を天然タバコ材の抽出残渣である繊維を含む再生タバコウエブに添加してなる再生タバコ材であって、前記香喫味剤が請求項４に記載のタバコ抽出液であることを特徴とする再生タバコ材。
【請求項８】
着色酸性水溶性高分子物質を低減させることを含むタバコ材の製造方法。
【請求項９】
天然タバコ材からの水系抽出液から着色酸性水溶性高分子物質を低減させることを含む香喫味剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、タバコの香喫味改善の分野に係り、詳しくは、喫煙時の刺激・辛みを低減させたタバコ材、香喫味剤、再生タバコ材、タバコ材の製造方法、および香喫味剤の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】  天然タバコ材は、刺激・辛み等の不要な喫味を示し、特にバーレー種タバコは、刺激・辛み等の不要な喫味特徴が強いため、従来様々な香料添加や加熱処理等により喫味を改善することが行われてきた。しかし、このような不要喫味の原因については未だその詳細は解明されておらず、従来の喫味改善のための香料技術や処理方法は経験に基づくものであり、効率やコストの点で問題があった（Ｔｏｂａｃｃｏ  Ｒｅｐｏｒｔｅｒ，Ｊｕｌｙ２００３，ｐｐ．６４−７０参照）。【０００３】  従って、天然タバコ材、特にバーレー種タバコ中の刺激・辛みの原因成分を化学的に解明することができれば、その的確な低減処理により、天然タバコ材の香喫味を効率的に改善することが可能になると考えられる。
【発明の開示】
【０００４】  そこで、本発明では、天然タバコ材、特にバーレー種タバコ中の刺激・辛みの原因成分を化学的に解明することにより、その物理的・化学的性質に即した形で刺激・辛みの原因成分を低減し、もって天然タバコ材の香喫味を改善する手段を提供することを目的とする。
【０００５】  本発明者らは、バーレー種タバコの水抽出液を各種クロマトグラフィー手法により分画し、各画分を用いてシガレットを作製し、官能評価により刺激・辛みが発現することを指標として刺激・辛みの原因成分の精製を行った。その結果、刺激・辛みの原因成分（以下、「本原因成分」という）が水抽出液中に含まれる着色酸性水溶性高分子物質であることを明らかにした。この分画精製の過程で、本原因成分の低減法の開発につながる物理的・化学的性質が明らかになった。なお、本原因成分は、不揮発性であるため、直接の刺激・辛み成分ではなく、喫煙時に刺激・辛み成分を発生する前駆体成分と考えられる。本発明はこれらの知見に基づく。
【０００６】  すなわち、本発明の第１の側面によれば、着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより喫煙時の刺激・辛みを低減させたことを特徴とするタバコ材が提供される。
【０００７】  本発明の第２の側面によれば、着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより刺激・辛味原因成分を低減させたタバコ抽出液を含むことを特徴とするタバコ香喫味剤が提供される。
【０００８】  本発明の第３の側面によれば、天然タバコ材からの水系抽出液を含む香喫味剤を天然タバコ材の抽出残渣である繊維を含む再生タバコウエブに添加してなる再生タバコ材であって、前記香喫味剤が本発明の香喫味剤であることを特徴とする再生タバコ材が提供される。
【０００９】  本発明の第４の側面によれば、着色酸性水溶性高分子物質を低減させることを特徴とするタバコ材の製造方法が提供される。
【００１０】  また、本発明の第５の側面によれば、天然タバコ材からの水系抽出液から着色酸性水溶性高分子物質を低減させることを特徴とする香喫味剤の製造方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、着色酸性水溶性高分子物質（刺激・辛み原因成分）のゲルろ過高速液体クロマトグラムである。
【図２】図２は、着色酸性水溶性高分子物質（刺激・辛み原因成分）の紫外可視吸収スペクトルである。
【図３】図３は、着色酸性水溶性高分子物質（刺激・辛み原因成分）の赤外吸収スペクトルである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】  以下、本発明をより詳しく説明する。【００１３】  本発明では、天然タバコ材、特にバーレー種タバコ材の刺激・辛みの原因成分を化学的に解明するために、バーレー種タバコ材を水系溶媒で抽出し、抽出液を獲得した。抽出残渣は、実質的に繊維からなる。この抽出残渣を常法によりスラリー化し、抄紙して再生ウエブシートを作製し、これを裁刻して再生タバコ刻みを得た。【００１４】  他方、上記抽出液を分画分子量１万ダルトンの限外ろ過膜で処理し、分子量１万ダルトン未満の画分と分子量１万ダルトン以上の画分を得た。分子量１万ダルトン未満の画分を濃縮し、上記再生タバコ刻みに添加し、これを用いてシガレットを作製した。このシガレットを官能検査に供したところ、抽出液をそのまま添加した再生タバコ刻みを用いて作製したシガレットに対して刺激・辛みがほとんどない点で喫味が大幅に改善されたという評価を得た。この結果から、分子量１万ダルトン以上の水溶性高分子画分に本原因成分が存在すると推定した。【００１５】  しかし、分子量１万ダルトン以上の画分は、大部分の香喫味成分（糖、アミノ酸、配糖体等）が除かれているため、これを上記再生タバコ刻みに添加して作製したシガレットでは評価できない。そこで、別途作製した評価用シガレットに分子量１万ダルトン以上の高分子画分を添加し、官能試験を行った。その結果、バーレー種様の刺激・辛みが発現し、上記推定が裏付けられた。【００１６】  以上の検討から、以下の各精製段階では、各画分について分画分子量１万ダルトンの限外ろ過処理を行い、分子量１万ダルトン以上の成分について評価した。【００１７】  また、各画分を用いて以下記述する評価用シガレットを作製し、官能検査を行い、刺激・辛みの発現を指標として分画を進めた。【００１８】  ＜画分の官能評価方法＞
１０人の専門パネルの官能評価により、各画分を添加した評価用シガレットを、精製水のみ添加した対照シガレットと比較して刺激・辛みが発現するかどうかを評価した。評価用シガレットとしては、市販の超低ニコチン・タール製品（タール１ｍｇ、ニコチン０．１ｍｇ）の香料無添加品を用いた。このシガレットは加香量に対して喫味効果が小さい傾向があるが、シガレットそのものの喫味への影響がほとんどなく、各画分の喫味効果の判定には満足できる結果を得ている。各画分の添加は、バーレー種タバコ原料２０ｇ由来の画分を１ｍＬの精製水に溶かし、その１０μＬ（原料０．２ｇ由来の画分に相当）をシリンジで評価用シガレットに注入することによって行った。シガレット１本当りの刻み量は約０．６ｇであり、各画分の添加量は、刻みの約３分の１量の原料に相当する。【００１９】  ＜分画精製の予備的検討＞
本原因成分の分画精製を目的として、様々な水溶性高分子の分画精製方法を検討した。しかし、分画操作によるｐＨやイオン強度の変動により不溶化や樹脂等への不可逆的な吸着が起こるため、当初からの系統的な分画は困難であった。そこで、各種の単位分画操作での知見を整理した後、単位分画法の組み合わせを検討した。【００２０】  ＜単位分画操作における知見＞
（１）本原因成分は、精製水よりも塩水溶液に溶解しやすく、また酸性条件下よりも塩基性条件下の方が溶けやすい。ただし、水溶液の塩基性が高いと、反応・分解のおそれがあるため、天然タバコ原料からの抽出には、弱酸性の塩（酢酸ナトリウム）の水溶液を用いることにした。抽出温度は、室温（約２５℃）、６０℃、９０℃を検討したが、室温での抽出処理により得られた抽出液が最も刺激・辛みが強かった。【００２１】  （２）上記のように、分画分子量１万ダルトンの限外ろ過膜による分画処理により、分子量１万ダルトン以上の画分に刺激・辛みを認めた。【００２２】  （３）本原因成分は、多糖類等と異なり、逆相系樹脂に吸着され、水／メタノール等で溶出される。【００２３】  （４）本原因成分は、ジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥセルロース）のような陰イオン交換樹脂に吸着され、酸の性質を示す。【００２４】  （５）たんぱく質や多糖類と異なり、メタノール／水（体積比９／１）混合溶媒によって沈殿せず、この混合溶媒の可溶部に本原因成分が存在した。【００２５】  （６）タバコ中の代表的なフラボノイド類は、刺激・辛みを示さないが、高分子と会合する性質があり、着色しているため、妨害成分として除去した（ポリビニルピロリドン樹脂への吸着）。【００２６】  上記の予備的検討に基づき、最良の結果が得られた分画精製スキームを以下に詳述する。【００２７】  ＜バーレー種タバコ原料中の刺激・辛み原因成分の分画精製スキーム＞
バーレー種中骨（葉柄、葉の太い支脈部）は香味が薄く、刺激・辛みが顕著であるため検討対象とした。【００２８】  バーレー種中骨原料を粉砕し、１０倍容の０．１Ｍ酢酸ナトリウム水溶液中で室温下３０分間攪拌することによって抽出を行った。抽出液をろ過後、遠心分離して細粉を除いた。この抽出液を逆相系の吸着材カラムに供し、カラムを水で洗浄した。水／メタノールもしくは水／アセトニトリル、具体的には水／メタノール（６／４）で溶出する暗褐色の溶液を減圧濃縮により有機溶媒を除き、少量のポリビニルピロリドンを加えて攪拌後ろ過してポリフェノールを除去した。続いて、処理液をＤＥＡＥ−セルロースによるイオン交換クロマトグラフィーに供した。カラムを水洗して中塩基性成分を除いた後、水酸化ナトリウム水溶液で溶出した。溶出液を限外ろ過（分画分子量１万ダルトン）して低分子成分を除き、水洗後、凍結乾燥した。さらに、メタノール／水（９／１）で分別沈殿を行い遠心分離して沈殿する多糖類やたんぱく質を除き、上清部を減圧濃縮後、凍結乾燥して最終精製品を得た。本原因成分の最終精製品は原料から収率約０．２％で獲得され、香料無添加評価用シガレットに対して約４００ｐｐｍ濃度の添加で、１０名の専門パネル全員によりバーレー種特有の刺激・辛みが発現することが確認された。【００２９】  本原因成分のゲルろ過高速液体クロマトグラムは、図１に示されている（下記実施例１参照）。図１に明らかなように、本原因成分は、１万〜６万ダルトンの分子量を有し、ピーク分子量は、１万６千ダルトンである。本原因成分は、上に述べたように酸性物質であり、その水溶液は濃度により茶褐色〜黒褐色を呈する（図２に示す紫外可視吸収スペクトル参照）。また、タバコ中に含まれる他の水溶性高分子であるペクチンやタンパク質等とは異なり、含水アルコールに可溶である。【００３０】  図３に本原因成分の赤外吸収スペクトルを示す。本原因成分は、図３に示すように、３４２３、２９３５、１６１８、１４１１、１２６１、１０７０および５３４ｃｍ−１に吸収ピークを示す。【００３１】  本原因成分の元素分析結果は、以下のとおりである。【００３２】  Ｃ：３６．２％；Ｈ：４．７０％；Ｎ：４．０９％；灰分：１２．６％。【００３３】  本原因成分の紫外可視吸収スペクトルの特徴は、一般の食品等におけるメラノイジンといわれる褐色高分子に類似している。食品中のメラノイジンについては多くの研究がなされており、その生成には糖質−アミノ酸等のメイラード（非酵素的褐変）反応、およびポリフェノール類の酵素による酸化的重合（酵素的褐変）反応が関与しているとされている。しかし、食品毎に関与する成分が異なるために化学組成や性質が異なり、一般的な化学構造は未確定である（高宮和彦編「色から見た食品のサイエンス」、ｐ．１８３−１９１（２００４）；「澱粉科学」第３８巻第１号ｐ．７３〜７９（１９９１）参照）。【００３４】  一方、バーレー種タバコ原料中の着色成分は褐色色素（ｂｒｏｗｎ  ｐｉｇｍｅｎｔ）と呼ばれ、化学的性質は本原因成分と類似している。褐色色素については化学的検討が行われており、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，８６，９４−１０１（１９６０）やＡｒｃｈ��Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，９３，５８０−５９０（１９６１）では、ポリフェノール（クロロゲン酸およびルチン）の酸化重合物（酵素的褐変反応）とタンパク質や鉄イオン等の複合した高分子成分と考えられている。その後の研究により、タバコ中の褐色色素は化学組成の異なる数種類に分けられることが明らかになっている（Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，２６（１９７８），３８０−３８５）参照）。【００３５】  また、葉タバコについて褐色色素分析方法およびそれを利用した正常葉と品質低下葉の判別方法が提案されている（特開平１１−８３８２７号公報）。この分析法は葉タバコの粗抽出液を水／アセトニトリル溶媒系の逆相液体クロマトグラフで順次アセトニトリルの比率を増加させ、極性の異なる褐色色素成分を分離して、その比率から正常葉と品質低下葉の判別を行うものである。原料葉タバコの品質等級には色調が判定の要素になっており、その意味で色調の主体を成す褐色色素成分は重要である。しかし、この成分の直接的な喫味効果については報告が無い。【００３６】  以上のような経緯で、天然タバコ材、特にバーレー種タバコ原料中の着色酸性高分子成分（本原因成分）がバーレー種独特の刺激・辛みを発現することを初めて見出した。また本原因成分がいわゆるメラノイジンやタバコの褐色色素成分と呼ばれている成分と化学的性質が類似していることを明らかにした。【００３７】  従って、本原因成分を天然タバコ材、特にバーレー種タバコ原料から削減することにより、刺激・辛みを低減して効率的に香喫味を改善することができる。すなわち、本発明により、着色酸性水溶性高分子物質の含有率を減少させることにより喫煙時の刺激・辛みを低減させたことを特徴とするタバコ材を提供することができる。【００３８】  また、天然タバコ材を水系抽出溶媒により抽出して得た抽出液から本原因成分を低減させて得られる抽出液は、そのまま、または濃縮し、あるいは凍結乾燥して、刺激・辛みの原因成分が低減したタバコ香喫味剤として使用することができる。そして、抽出残渣である繊維材料を用いて常法により作製された再生ウエブシートにこのタバコ香喫味剤を添加することにより、再生タバコ材を得ることができる。【００３９】  ここで、抽出処理に供する天然タバコ材としては、タバコの葉、刻み、中骨、茎、根およびそれらの混合物を用いることができる。抽出溶媒としては、水系溶媒を用いることができる。水等の水系抽出溶媒は、アルカリ性であっても、酸性であってもよい。水系抽出溶媒として、水と水混和性有機溶媒との混合物も使用し得る。そのような有機溶媒の例を挙げると、エタノールのようなアルコール類である。これら抽出溶媒には、塩化ナトリウムのような無機塩を溶解して用いることもできる。抽出処理は、通常、室温（約２５℃）〜１００℃の温度で、５分〜６時間程度行うことができる。【００４０】  抽出処理の終了後、得られた抽出混合物を例えば圧搾ろ過等による分離操作に供し、抽出液と抽出残渣（繊維）に分ける。得られた抽出液から本原因成分を低減させることにより、本発明のタバコ香喫味剤が得られる。このタバコ香喫味剤は、そのまま、または濃縮して、あるいは凍結乾燥して用いることができる。【００４１】  他方、抽出残渣を用いてスラリーを作製し、抄紙して再生タバコウエブを製造する。この再生タバコウエブは、その全部が上記抽出残渣により構成されるものでもよいし、その一部が上記抽出残渣により構成されるものでもよい。さらに、抽出残渣は、本発明の香喫味剤を調製するために直接抽出処理した結果の抽出残渣であってもよいし、他の目的で天然タバコ材を抽出して得た抽出残渣であってもよい。【００４２】  次に、抽出液から本原因成分を低減させるためのより具体的な方法を説明する。この低減方法は、本原因成分の物理的・化学的性質に即したものである。すなわち、本原因成分は、分子量が１万〜６万の高分子物質であること、ペクチン等のタバコ成分と比較して低極性であること、酸性の水溶性高分子物質であること等の物理的・化学的性質を利用して、本原因成分を効率的に低減して香喫味を改善することができる。以下に、本原因成分の低減方法について詳述する。なお、天然タバコ材からの抽出液の獲得方法は、上に述べたとおりである。【００４３】  ＜本原因成分の限外ろ過法等による低減方法＞
天然タバコ原料からの抽出液を半透膜もしくはホローファイバー等を用いた限外ろ過法で分子量１千ダルトン以上、好ましくは１万ダルトン以上の高分子成分を除去する。この除去操作は透析法やゲルろ過法でも可能である。分子量１千ダルトン未満、好ましくは分子量１万ダルトン未満の画分を香喫味剤として利用することができる。【００４４】  ＜本原因成分のイオン交換による低減方法＞
天然タバコ原料からの抽出液を陰イオン交換樹脂（代表例：ＤＥＡＥセルロース（ＤＥＡＥセルロファイン（商品名）等）により吸着処理に供し、ろ過等で樹脂を除去する。得られたろ液は、本原因成分が低減したものとなる。このろ液を香喫味剤として利用することができる。本操作にはイオン交換膜も適用可能である。【００４５】  ＜本原因成分の吸着樹脂等による低減方法＞
天然タバコ原料からの抽出液を活性炭、吸着性樹脂（ポリスチレン／ジビニルベンゼン共重合体等）、もしくは逆相系吸着剤（代表例：オクタデシルシリカゲル（ＯＤＳ）等）による吸着処理に供し、吸着剤を分離し、処理液を得る。吸着剤は水および水／アルコール等で洗浄して洗液を処理液に加える。この処理液をタバコ香喫味剤として利用することができる。【００４６】  ＜本原因成分の酸沈殿による低減方法＞
本原因成分は酸性の性質を示す高分子物質であるので、その溶液のｐＨ（水素イオン濃度）を下げることにより不溶化させ、分離することができる（前記文献Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，２６（１９７８），３８０−３８５の手法を参照）。具体的には、天然タバコ原料からの抽出液に無機酸（硫酸、リン酸等）または有機酸（シュウ酸等）を加えてｐＨを好ましくは２以下に低下させる。ろ過または遠心分離等で沈殿を除去した後、アルカリ（水酸化カルシウム等）を加えてｐＨを元に戻す。シュウ酸を用いた場合は、水酸化カルシウムで処理することにより、水不溶性のシュウ酸カルシウムになり遠心分離等により除去することができる。この処理液を香喫味剤として利用することができる。【００４７】  ＜本原因成分の溶媒沈殿による低減方法＞
本原因成分は他の多糖類や蛋白質等と異なり、水／メタノール（体積比１／９）混合溶媒に可溶であるが、より極性の低い溶媒には不溶である。この性質を利用して本原因成分を他の成分から分離することができる。極性の低い溶媒としては、アルコール類、具体的にはメタノール（１００％）、エタノール、イソプロパノール等の脂肪族アルコール、ベンジルアルコール等の芳香族アルコール、もしくは他の水可溶性溶媒アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル等を単独もしくは混合溶媒として用いることができる。この場合、例えばヘキサンのように水とは非混和性の溶媒もアルコール等を含む溶媒には可溶であるため用いることができる。さらに、溶媒の種類を段階的に変更して分別沈殿を行い、本原因成分の分析値を元に画分の取捨選択を行うこともできる。【００４８】  ＜上記処理の組み合わせによる本原因成分の低減方法＞
タバコ原料からの本原因成分の低減には、上記低減方法のいずれかを単独、もしくは組み合わせて行うことができる。また条件の選択による成分の低減量の調節や、分離した成分を適当量再生タバコウエブに添加することもできる。【００４９】  また、上記の低減方法で得た香喫味剤を２種以上混合することもできる。【００５０】  以上述べたように、本発明に従い着色酸性水溶性高分子物質を天然タバコ材（またはその抽出液）から除去することにより、最終タバコ製品の喫煙時の刺激・辛みを低減させることができる。その場合、着色酸性水溶性高分子物質は、刺激・辛み低減の鑑定から、初期量（天然タバコ材に存在する量、または天然タバコ材から水系抽出溶媒で抽出したままの抽出液中の重量）の１０％以上（１００％まで）、好ましくは５０％以上、さらに好ましくは８０％以上低減させることが好ましい。【００５１】  以下、実施例および参考例により本発明を更に具体的に説明する。
【実施例】
【００５２】  実施例１：本原因成分の分析法
本原因成分低減の指標として、高速液体クロマトグラフィーを用いた本原因成分の簡易分析法を構築した。バーレー種タバコ原料（抽出液の場合はタバコ原料１．０ｇ相当分を凍結乾燥したもの）１．０ｇを粉砕し、これに０．１Ｍ酢酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えて、室温で３０分間攪拌し、ろ過、遠心分離して上清部を逆相系固相抽出カートリッジ（オアシスＨＬＢ（６ｃｃ、５００ｍｇ、ウォーターズ社））に通し、水洗後、アセトニトリル／水（６／４）１０ｍＬで溶出させた。溶出液を減圧濃縮してアセトニトリルを除去し、ポリビニルピロリドン樹脂（ポリクラーＶＴ（和光純薬））のミニカラムに通し、さらに陰イオン交換固相抽出カートリッジ（ボンドエルートＤＥＡ（５００ｍｇ、バリアン社））に供した。水洗後、０．４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液４ｍＬで溶出させ、溶出液をそのまま限外ろ過デバイス（アミコンウルトラ４（分画分子量１万ダルトン、ミリポア社））により遠心限外ろ過と緩衝液（０．１Ｍ食塩を含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８））交換とを行い、最終的に同緩衝液で５ｍＬにメスアップして高速液体クロマトグラフィー分析に供した。【００５３】  ＜分析条件＞
高速液体クロマトグラフ機種：アジレント社１１００型
カラム：プロテインパック１２５（ウォーターズ社）
溶媒：０．１Ｍ食塩を含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）
溶媒流速：１．０ｍＬ／分
検出器：ダイオードアレー；測定波長４１０ｎｍ。【００５４】  代表的なクロマトグラムを図１に示す。このクロマトグラムにおける波長４１０ｎｍピークの積分値を本原因成分低減の指標とする。【００５５】  また、ここで得られた本原因成分の紫外可視吸収スペクトルは図２に示すとおりであり、赤外吸収スペクトルは、図３に示すとおりであった。元素分析結果は、上に示したとおりである。【００５６】  参考例：再生タバコシートの製造
バーレー種タバコ原料（中骨：ラミナ重量比＝１：１）７５ｇを６０℃の温水０．７５Ｌに攪拌しながら３０分浸漬後、圧搾ろ過して、ろ液（抽出液）と抽出残渣（繊維）に分離した。常法により、繊維をスラリー化した後、抄紙して再生タバコウエブシートを得た。調和処理後の再生タバコウエブシートの重量は、２０．６ｇであった。この再生ウエブシートを裁刻して原料タバコ刻みを得た。【００５７】  他方、ろ液（約０．５Ｌ）を５０ｍＬ以下に減圧濃縮して、上記原料タバコ刻みに噴霧し、乾燥後、調和処理（温度湿度一定条件で、水分平衡に達するまで蔵置）して再生タバコ刻を得た。これを用いて手巻き操作によりシガレット（１本当りの刻量約０．６ｇ）を作製した。【００５８】  実施例２
参考例で得たろ液（０．５Ｌ、原料７５ｇ相当）を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分）して不溶部を除去した後、分画分子量１万ダルトンの再生セルロース製半透膜を用いた限外ろ過ディスク（ミリポア社ウルトラセルＰＬＧＣ限外ろ過ディスク、公称分画分子量１０，０００）を用いた限外ろ過処理を行った。透過液と濃縮液の凍結乾燥後の収量はそれぞれ１２．８ｇと２．１ｇであった。透過液の凍結乾燥物を５０ｍＬの水に溶解し、参考例で得た原料刻みに全量噴霧添加し、再生タバコ刻みを得た。この再生タバコ刻みを用いて、参考例と同様にしてシガレットを製造した。【００５９】  実施例３
参考例のろ液（０．５Ｌ、原料７５ｇ相当）を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分）して不溶部を除き、陰イオン交換樹脂（生化学工業製ＤＥＡＥセルロファイン）５０ｍＬ（湿った樹脂の体積）を加えて攪拌吸着を行った後、ろ過処理を行った。処理液を減圧濃縮し、参考例で得た原料刻みに全量噴霧添加し、再生タバコ刻みを得た。この再生タバコ刻みを用いて、参考例と同様にしてシガレットを製造した。【００６０】  実施例４
参考例のろ液（０．５Ｌ、原料７５ｇ相当）を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分）して不溶部を除き、逆相系吸着樹脂（オアシスＨＬＢ；樹脂量６ｇ×２本、ウォーターズ社）のカラムを通過させて着色成分を吸着させた。処理液を減圧濃縮し、参考例で得た原料刻みに全量噴霧添加し、再生タバコ刻みを得た。この再生タバコ刻みを用いて、参考例と同様にしてシガレットを製造した。【００６１】  ＜参考例および実施例２〜４の分析値および喫味評価＞
原料１ｇに対応する抽出液中の本原因成分の分析値（実施例１で言及したように液体クロマトグラムにおける波長４１０ｎｍのピーク面積；相対値）を求めた。また、刺激・辛みの減少評価を１０人の専門パネル中、参考例のシガレットに対し刺激・辛みが明らかに減少したと評価した人数で表した。結果を表１に示す。
【表１】
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【００６２】  以上本発明を種々の態様、実施例等に沿って説明したが、本発明は、これら態様、実施例により制限されるものではない。本発明者らが初めて見いだした刺激・辛み原因成分は、バーレー種に限らず、他のタバコ種（例えば、黄色種、オリエント種、在来種）にも含まれ得るものであり、本発明はそれらタバコ種またはそれらタバコ種を含む天然タバコ材に適用できることはいうまでもなく、広く天然タバコ材一般に適用されるものである。【００６３】  以上述べたように、本発明に従いタバコ材中の水可溶性成分中の着色酸性水溶性高分子物質を低減させることにより、従来タバコ原料の喫味改善に用いられていた各種香料の添加や処理工程を用いることなく、タバコ材の刺激・辛みを低減させることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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