(57)【要約】食経験豊かな安全な食品素材由来の物質を有効成分とし、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの機能性食品に利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善剤を提供することを課題とする。  本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、又は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分として含むことを特徴としており、糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム、肥満症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする、生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項２】
ａｒ−ターメロン、α−ターメロン及びβ−ターメロンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする、請求項１記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項３】
前記化合物がウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものである、請求項１又は２記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項４】
Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項５】
生活習慣病が糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム及び肥満症からなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜４のいずれか１項記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項６】
生活習慣病が糖尿病である、請求項１〜４のいずれか１項記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項７】
生活習慣病が内臓脂肪型肥満である、請求項１〜４のいずれか１項記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項８】
生活習慣病がメタボリックシンドロームまたは肥満症である、請求項１〜４のいずれか１項記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項記載の生活習慣病予防及び／又は改善剤を含有する機能性食品。
【請求項１０】
ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤。
【請求項１１】
ａｒ−ターメロン、α−ターメロン及びβ−ターメロンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする、請求項１０記載のペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤。
【請求項１２】
前記化合物がウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものである、請求項１０又は１１記載のペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤。
【請求項１３】
Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とするペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤。
【請求項１４】
ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体がペルオキシソーム増殖剤応答性受容体γである請求項１０〜１３のいずれか１項記載のペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明は、ウコン属植物材料由来の精油成分を有効成分として含むことを特徴とする生活習慣病予防及び／又は改善剤、並びにそれを含有する機能性食品に関する。
【背景技術】
【０００２】栄養過多や運動不足などの生活習慣の悪化による生活習慣病は大きな社会問題となっている。ここでの生活習慣病としては、肥満、糖尿病、高脂血症、高血圧症などが挙げられる。これらの病態のうち複数が合併することもあり、メタボリックシンドローム、肥満症、シンドロームＸ、死の四重奏、インスリン抵抗性症候群、内臓脂肪症候群などとも呼ばれる。メタボリックシンドロームの発症基盤はインスリン抵抗性であると言われており、さらにその上流の原因として内臓脂肪の蓄積があると言われている。従って、内臓脂肪の蓄積あるいはインスリン抵抗性を予防及び／又は改善することにより、上記の生活習慣病を予防及び／又は改善することができると考えられる。【０００３】ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＰＰＡＲ）は、糖及び脂質代謝を維持する遺伝子群の発現制御を担う転写制御因子であり、核内受容体ファミリーに属するリガンド依存性転写制御因子である。ＰＰＡＲは３種のサブタイプ、すなわちＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ、ＰＰＡＲδが存在する。中でもＰＰＡＲγは脂肪組織に発現しており、脂肪細胞の分化・成熟を制御するマスターレギュレーターである。糖尿病治療薬・インスリン抵抗性改善薬として開発されたトログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾンなどのチアゾリジン誘導体は、ＰＰＡＲγを活性化し、血糖降下作用及びインスリン抵抗性改善作用を示すＰＰＡＲγリガンドである。また、これらの薬剤は、臨床において内臓脂肪を低減させることが確認されており、糖尿病だけでなくメタボリックシンドロームに代表される生活習慣病に対しても有効であることが知られている。【０００４】ウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．）はショウガ科ウコン属の多年生草であり、一般的にはカレーのスパイスの一つであるターメリックとして知られているが、食用として利用されるだけでなく、食品や衣料などの着色料としても利用されている。また、中国の漢方、インドのアーユルヴェーダ、インドネシアのジャムーなどの伝統療法では止血作用、健胃作用、抗菌作用、抗炎症作用があることから薬用としても利用されている。【０００５】ウコンの主要成分は、黄色色素であるクルクミノイド、すなわちクルクミン及びその誘導体のデメトキシクルクミンとビスデメトキシクルクミンであることが知られている。上述のようにウコンまたはウコン抽出物の効能として種々の生理作用が知られているが、そのほとんどはクルクミノイド、特にクルクミンの生理作用と一致していることから、クルクミノイドが主要な有効成分と考えられている。【０００６】また、ウコンには精油成分も含まれており、その多くはビサボラン型セスキテルペノイド、例えばａｒ−ターメロン（ａｒ−ｔｕｒｍｅｒｏｎｅ）、α−ターメロン（α−ｔｕｒｍｅｒｏｎｅ）、β−ターメロン（β−ｔｕｒｍｅｒｏｎｅ）など、であることが知られている。ウコン精油成分の生理作用として、殺蚊作用（非特許文献１を参照）、アポトーシス誘導作用（非特許文献２を参照）、プロスタグランジン及び窒素酸化物の産生阻害作用（非特許文献３及び４を参照）、肝機能改善作用が知られている。【��００７】一方、ショウガ科ウコン属（Ｃｕｒｃｕｍａ  Ｓｐ．）の植物には、ウコン（秋ウコン：Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．）の他に、キョウオウ（春ウコン：Ｃｕｒｃｕｍａ  ａｒｏｍａｔｉｃａ  Ｓａｌｉｓｂ．）、ガジュツ（紫ウコン：Ｃｕｒｃｕｍａ  ｚｅｄｏａｒｉａ  Ｒｏｓｃ．）、クスリウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｘａｎｔｈｏｒｒｈｉｚａ  Ｒｏｘｂ．）などの品種がある。これらは同属の植物であるが、それぞれ含まれる成分が異なる。すなわち、クルクミンに代表されるクルクミノイドはウコン及びクスリウコンに豊富に含まれており、精油成分はいずれの品種にも含まれているが、その化合物は品種によって特徴がある。【０００８】キョウオウ（春ウコン：Ｃｕｒｃｕｍａ  ａｒｏｍａｔｉｃａ  Ｓａｌｉｓｂ．）に含まれるクルクメノン（特許文献１を参照）や（４Ｓ，５Ｓ）−（＋）−ゲルマクロン４，５−エポキシド（特許文献２を参照）が耐糖能改善作用を有し、糖尿病治療剤として有用であることが開示されている。また、クスリウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｘａｎｔｈｏｒｒｈｉｚａ  Ｒｏｘｂ．）に含まれるビサボラン型セスキテルペノイドであるα−クルクメンが血清トリグリセリド低下作用を有し、脂質代謝改善剤として有用であることが開示されている（特許文献３を参照）。しかし、ウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．）由来の精油成分、ことにビサボラン型セスキテルペノイドであるａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロンが血糖値低下作用または血糖値上昇抑制作用、内臓脂肪低減作用を有することは知られていない。
【特許文献１】特開平１−２３３２１７号公報
【特許文献２】特開平６−１９２０８６号公報
【特許文献３】特開平７−１４９６２８号公報
【非特許文献１】Ｒｏｔｈ，Ｇ．Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，６１，５４２−５４５，１９９８．
【非特許文献２】Ａｒａｔａｎｅｃｈｅｍｕｇｅ，Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，９，４８１−４８４，２００２．
【非特許文献３】Ｈｏｎｇ，Ｃ．Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ．Ｍｅｄ．，６８，５４５−５４７，２００２．
【非特許文献４】Ｌｅｅ，Ｓ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｐａｔｈｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．，２１，１４１−１４８，２００２．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】本発明は、食経験豊かな安全な食品素材由来の物質を有効成分とし、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの機能性食品に利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン（ｃｕｒｌｏｎｅ）、ビサクモール（ｂｉｓａｃｕｍｏｌ）及びβ−セスキフェランドレン（β−ｓｅｓｑｕｉｐｈｅｌｌａｎｄｒｅｎｅ）、並びに、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる化合物が、肥満を伴う２型糖尿病モデルにおいて血糖値上昇抑制作用及び腹腔内脂肪低減作用を有すること、並びに、ＰＰＡＲγリガンド活性を有することを見出した。【００１１】本発明は上記知見に基づくものである。すなわち、第一の本発明は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とすることを特徴とする生活習慣病予防及び／又は改善剤に関する。前記化合物は、ウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものであることが好ましい。また第二の本発明は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする生活習慣病予防及び／又は改善剤に関する。第一の本発明及び第二の本発明での生活習慣病として、糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム、肥満症などが挙げられる。
また第三の本発明は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とする、ＰＰＡＲリガンド剤に関する。前記化合物は、ウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものであることが好ましい。また第四の本発明は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とするペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤に関する。ここでのＰＰＡＲとしてＰＰＡＲγ等が挙げられる。【００１２】以下に、本発明の実施の形態を詳しく説明する。
第一の本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とすることを特徴としている。また、第二の本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とすることを特徴としている。ここでの生活習慣病として、糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム、肥満症などが挙げられる。ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレン、並びに、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる化合物は、血糖値低下作用または血糖値上昇抑制作用、及び腹腔内脂肪低減作用を有することから、糖尿病の予防及び／又は改善、内臓脂肪型肥満の予防及び／又は改善に有効である。ひいては、糖尿病（特に２型糖尿病）、肥満（特に内臓脂肪型肥満）、高脂血症、高血圧症などが複数合併したメタボリックシンドロームまたは肥満症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効である。【００１３】第三の本発明のＰＰＡＲリガンド剤、ことにＰＰＡＲγリガンド剤は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とすることを特徴としている。また、第四の本発明のＰＰＡＲリガンド剤、ことにＰＰＡＲγリガンド剤は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分とすることを特徴としている。ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレン、並びに、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる化合物は、ＰＰＡＲの中でも特にＰＰＡＲγリガンド結合領域に結合してＰＰＡＲγを活性化することから、インスリン抵抗性を改善し、糖尿病（特に２型糖尿病）、肥満（特に内臓脂肪型肥満）、高脂血症、高血圧症などが複数合併したメタボリックシンドロームまたは肥満症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効である。【００１４】ウコンは十分な食経験があって、安全な食品素材である。ウコン属植物材料由来の精油成分として２０種類以上の化合物が知られている。本発明に用いるａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンは、ウコン（秋ウコン：Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．）由来の精油成分であるビサボラン型セスキテルペノイドの１種として知られている。本発明に使用するａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンは、ウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものであってもよいし、食品または食品添加物などの製造基準に適していれば、化学合成によって得たものも使用することができるが、ウコン属植物材料由来の精油成分から得られるものが好ましい。こ��ら６化合物はそれぞれ単一化合物として本発明に使用することができ、また２種以上の混合物として本発明に使用することもできる。上記化合物としては、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロンが好ましく、ａｒ−ターメロンがより好ましい。【００１５】Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物としては、上述のａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロンの他、クルロン、ビサクモール、β−セスキフェランドレン等が挙げられる。Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物としては、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロンが好ましく、ａｒ−ターメロンがより好ましい。【００１６】本発明に使用する上述の化合物を製造する方法は、特に限定されず、公知の方法を用いることができる。例えば、ヘキサンなどの疎水性溶媒による溶媒抽出法、二酸化炭素による超臨界抽出法、水蒸気蒸留法などの方法によって、直接ウコン属植物材料から精油成分を得ることができる。また、エタノールなどの溶媒抽出により得たウコン抽出物（エキス、オレオレジン）からシリカゲルなどの精製用樹脂によるカラムクロマトグラフィーによって、セスキテルペノイド画分として精油成分を得ることができる。こうして得たウコン属植物材料由来の精油成分は、ビサボラン型セスキテルペノイドであるａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンをその総和で概ね約５０〜６０重量％含有している。さらに、ウコン属植物材料由来の精油成分からビサボラン型セスキテルペノイドであるａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン等の化合物を得る方法は、特に限定されず、シリカゲルなどの精製用樹脂によるカラムクロマトグラフィーが挙げられ、混合物として分離、あるいは単一化合物として精製することができる。【００１７】本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤における上記化合物の含量は、使用用途により適宜選択できるが、好ましくは約１〜１００重量％、より好ましくは約１０〜９０重量％である。本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、栄養、味、香り、風味、性状などを向上する目的で他の素材を混合することができる。【００１８】本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤を摂取する場合、有効成分である上記化合物の効能を発揮するためには、成人一人一日当たり上記化合物の総量として、好ましくは約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは約１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重を連続的に摂取することが望ましい。【００１９】本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの機能性食品に利用することができ、その形態は限定されず、カプセル剤や錠剤などのサプリメント形態；清涼飲料水やドリンクなどの飲料形態；加工食品や栄養調整食品などの食品形態として利用することができる。上記生活習慣病予防及び／又は改善剤を含有する機能性食品も、本発明の一つである。
【発明の効果】
【００２０】本発明によれば、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの機能性食品に利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善剤を提供することができる。本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、又は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分として含むことを特徴としており、血糖値の上昇を抑制する作用及び内臓脂肪を低減させる作用を有することから、糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム、肥満症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２２】ウコン粉末（株式会社カネカサンスパイス）７００ｇをｎ−ヘキサン３．５Ｌに浸し、室温暗所にて３日間放置した後、濾過し１次抽出液を得た。濾過後の残渣をｎ−ヘキサン３．５Ｌに浸し、室温暗所にて１日間放置した後、濾過し２次抽出液を得た。１次抽出液及び２次抽出液を混合し、減圧濃縮し、ウコンのヘキサン抽出物５０．４ｇを得た。【００２３】シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）の結果、ウコンのヘキサン抽出物には精油成分は含まれているが、クルクミノイドは含まれていないことを確認した。なお、ＴＬＣは、プレートにシリカゲル６０Ｆ２５４（Ｍｅｒｃｋ社）を、展開溶媒にクロロホルム：メタノール＝９：１（ｖ／ｖ）を用いて行った。
【実施例２】
【００２４】実施例１にて調製したウコンのヘキサン抽出物の血糖上昇抑制作用を、２型糖尿病モデル動物であるＫＫ−Ａｙマウスを用いて評価した。
ＫＫ−Ａｙマウス（雌、６週齢）を２群（各群５匹）に分け、対照群とヘキサン抽出物投与群とした。対照群には粉末精製飼料（オリエンタル酵母工業株式会社）を与え、ヘキサン抽出物投与群には実施例１にて調製したウコンのヘキサン抽出物を０．５重量％含む粉末精製飼料を与えた。なお、粉末精製飼料の組成は、カゼイン  ２０重量％、コーンスターチ  ４９．９４８重量％、シュークロース  １０重量％、大豆油  １０重量％、セルロースパウダー  ５重量％、ＡＩＮ−９３ミネラル混合  ３．５重量％、ＡＩＮ−９３ビタミン混合  １重量％、重酒石酸コリン  ０．２５重量％、第三ブチルヒドロキノン  ０．００２重量％、及びＬ−シスチン  ０．３重量％である。【００２５】給餌の開始時、２週間後及び４週間後に、マウス尾静脈より少量採血し、簡易式血糖測定器グルテストエース（株式会社三和化学研究所）を用いて、血糖値を測定した。その結果を表１に示す。【００２６】
2005115366.tif 000002
【００２７】対照群の血糖値は、給餌開始時に比べ、２週間後及び４週間後に高値を示し、高血糖になっていることが確認された。一方、ヘキサン抽出物投与群の血糖値は、２週間後及び４週間後において対照群よりも明らかに低値を示し、血糖上昇の抑制作用が認められた。
【実施例３】
【００２８】ウコンのオレオレジン（丸善製薬株式会社）３０ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、１０容量％酢酸エチル／ｎ−ヘキサンにて溶出し、溶出液を濃縮乾固して、ウコンのセスキテルペノイド画分１３．５ｇを得た。
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）の結果、ウコンのセスキテルペノイド画分にはａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロンなどのビサボラン型セスキテルペノイドは含まれているが、クルクミノイドは含まれていないことを確認した。なお、ＨＰＬＣは、ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×７５ｍｍカラム（東ソー株式会社）を３０℃で用い、移動相はアセトニトリル（Ａ）と蒸留水（Ｂ）を用いて、０〜１５分で４５〜７０％Ａに一定比率で上昇させた後、１５〜３０分は７０％Ａで一定とするグラジェント条件とし、流速を０．７ｍｌ／分として行った。注入量は２０μｌとし、検出波長は２５４ｎｍとした。
【実施例４】
【００２９】実施例３にて調製したウコンのセスキテルペノイド画分の血糖上昇抑制作用及び腹腔内脂肪低減作用を２型糖尿病モデル動物であるＫＫ−Ａｙマウスを用いて評価した。
ＫＫ−Ａｙマウス（雌、６週齢）を２群（各群６匹）に分け、対照群とセスキテルペノイド画分投与群とした。対照群には粉末高脂肪飼料（オリエンタル酵母工業株式会社）を与え、セスキテルペノイド画分投与群には実施例３にて調製したセスキテルペノイド画分を０．２４重量％含む粉末高脂肪飼料を与えた。なお、粉末高脂肪飼料の組成は、カゼイン  ２５重量％、コーンスターチ  １４．８６９重量％、シュークロース  ２０重量％、大豆油  ２重量％、ラード  １４重量％、牛脂  １４重量％、セルロースパウダー  ５重量％、ＡＩＮ−９３ミネラル混合  ３．５重量％、ＡＩＮ−９３ビタミン混合  １重量％、重酒石酸コリン  ０．２５重量％、第三ブチルヒドロキノン  ０．００６重量％、及びＬ−シスチン  ０．３７５重量％である。【００３０】給餌の開始時、２週間後及び４週間後に、マウス尾静脈より少量採血し、簡易式血糖測定器グルテストエース（株式会社三和化学研究所）を用いて、血糖値を測定した。その結果を表２に示す。また、給餌の５週間後に、解剖により腹腔内の腎臓周辺脂肪及び腸間膜脂肪を摘出して、その重量を測定した。その結果を表３に示す。【００３１】
2005115366.tif 000003
【００３２】
2005115366.tif 000004
2005115366.tif 000005
【００３３】対照群の血糖値は、給餌開始時に比べ、２週間後及び４週間後に高値を示し、高血糖になっていることが確認された。一方、セスキテルペノイド画分投与群の血糖値は、２週間後及び４週間後において対照群よりも明らかに低値を示し、血糖上昇の抑制作用が認められた。
対照群に比べ、セスキテルペノイド画分投与群の腎臓周辺脂肪及び腸間膜脂肪の重量は明らかに低値を示し、腹腔内脂肪の低減作用が認められた。
【実施例５】
【００３４】実施例３にて調製したウコンのセスキテルペノイド画分３ｇをＯＤＳカラムクロマトグラフィーに供し、６５容量％アセトニトリルで溶出して、ａｒ−ターメロン０．７ｇを分離精製した。なお、分離精製した化合物がａｒ−ターメロンであることは、１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲでの構造解析により確認した。
【実施例６】
【００３５】実施例１にて調製したウコンのヘキサン抽出物、実施例３にて調製したウコンのセスキテルペノイド画分、実施例５にて調製したａｒ−ターメロンのＰＰＡＲγリガンド活性を測定した。
ＣＶ−１細胞（雄性アフリカミドリザル腎臓由来の培養細胞）を９６穴培養プレートに６×１０３  ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように植え込み、３７℃、５％  ＣＯ２条件下で２４時間培養した。培地には、１０％  ＦＢＳ（ウシ胎仔血清）、１０ｍｌ／Ｌ  ペニシリン・ストレプトマイシン溶液（それぞれ５０００ＩＵ／ｍｌ、５０００μｇ／ｍｌ；ＧＩＢＣＯ社）、３７ｍｇ／Ｌ  アスコルビン酸（和光純薬工業株式会社）を含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ；ＧＩＢＣＯ社）を用いた。細胞をトランスフェクション用の無血清培地であるＯＰＴＩ−ＭＥＭ（ＧＩＢＣＯ社）で洗浄した後、遺伝子導入試薬であるリポフェクトアミン・プラス（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を用いて２つのプラスミド、すなわちｐＭ−ＰＰＡＲγと４×ＵＡＳｇ−ｌｕｃをトランスフェクションした。なお、ｐＭ−ＰＰＡＲγは酵母由来転写因子ＧＡＬ４遺伝子（アミノ酸配列１〜１４７）とＰＰＡＲγリガンド結合部位遺伝子（アミノ酸配列２０４〜５０５）を結合したキメラ蛋白発現用プラスミドであり、４×ＵＡＳｇ−ｌｕｃはルシフェラーゼ遺伝子の上流にＧＡＬ４の応答配列（ＵＡＳｇ）を４回組み込んだレポーター・プラスミドである。トランスフェクションの約２４時間後、サンプル（実施例１のヘキサン抽出物、実施例３のセスキテルペノイド画分、実施例５のａｒ−ターメロン）を含む培地に交換し（４ウェル）、２４時間培養した。サンプルはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解したものを、無処置対照にはＤＭＳＯを用い、表４に示す濃度になるよう培地に添加した。細胞をＣａ、Ｍｇ含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ＋）で洗浄した後、ルシフェラーゼ発光測定試薬であるルックライト（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を添加し、トップカウント・マイクロプレートシンチレーション／ルミネッセンスカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）にてルシフェラーゼの発光強度を測定した。【００３６】各サンプルの発光強度の平均値（４ウェル）を求め、無処置対照に対する比を算出し、その比活性をサンプルのＰＰＡＲγリガンド活性とした。実験を３回行った結果を表４に示す。【００３７】
2005115366.tif 000006
【００３８】陽性対照としてＰＰＡＲγリガンドであるトログリタゾンを用いたところ、濃度に依存したＰＰＡＲγリガンド活性が確認された。同様に、ウコンのヘキサン抽出物、セスキテルペノイド画分、ａｒ−ターメロンにＰＰＡＲγリガンド活性が認められた。
【実施例７】
【００３９】実施例３と同様にして調製したウコンのセスキテルペノイド画分を用いて、下記の配合で常法によりソフトカプセル剤を製造した。
セスキテルペノイド画分  ４０重量部
オリーブ油              ６０重量部
ビタミンＥ                １重量部
【産業上の利用可能性】
【００４０】本発明によれば、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの機能性食品に利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善剤を提供することができる。本発明の生活習慣病予防及び／又は改善剤は、ａｒ−ターメロン、α−ターメロン、β−ターメロン、クルロン、ビサクモール及びβ−セスキフェランドレンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、又は、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．由来のビサボラン型セスキテルペノイドから選ばれる少なくとも１種の化合物を有効成分として含むことを特徴としており、血糖値の上昇を抑制する作用及び内臓脂肪を低減させる作用を有することから、糖尿病、内臓脂肪型肥満、メタボリックシンドローム、肥満症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有用である。
【国際調査報告】
2005115366.tif 000007
2005115366.tif 000008
2005115366.tif 000009
2005115366.tif 000010