(57)【要約】  本発明の目的は、薬理活性ペプチド及びタンパク質が、肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、膣粘膜、眼粘膜、胃粘膜、消化管粘膜等の粘膜を介して効率的に吸収されるように設計された経粘膜用組成物を提供することである。  以下の成分(i)及び(ii)を配合して経粘膜用組成物を調製する：(i)生理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種、及び(ii) 重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記(i)及び(ii)成分を含有することを特徴とする経粘膜用組成物：
(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種、及び
(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種。
【請求項２】
(i)成分が、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、抗欝剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレストロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤及びワクチンよりなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項３】
(i)成分が、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、細胞接着因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、腎および泌尿器系に作用する因子、結合組織および皮膚に作用する因子、感覚器官に作用する因子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系に作用する因子及び酵素よりなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項４】
(i)成分が、インターフェロン、インターロイキン、インスリン、成長ホルモン、カルシトニン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、副腎皮質ホルモン、黄体形成ホルモン、副甲状腺ホルモン、及び副甲状腺ホルモンの活性フラグメントよりなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項５】
(ii)成分が、重合度が２〜１５のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン、及びこれらの塩から選択される少なくとも１種である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項６】
(i)成分１００重量部に対して、上記(ii)成分を０．００１〜１×１０6重量部の割合で含有する、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項７】
(i)成分を１×１０−６〜３０w／v％の割合で含有する液状組成物である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項８】
(ii)成分を０．０１〜３０w／v％の割合で含有する液状組成物である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項９】
(i)成分を１×１０−５〜９９重量％の割合で含有する固形状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項１０】
(ii)成分を０．１〜５０重量％の割合で含有する固形状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項１１】
経鼻、経消化器、経肺、口腔粘膜、眼粘膜又は経腟粘膜用の組成物である、請求項１記載の経粘膜用組成物。
【請求項１２】
ほ乳動物において、薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種の経粘膜吸収を向上させる方法であって、
(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種と共に、(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種を、ほ乳動物の粘膜に投与することを特徴とする、方法。
【請求項１３】
請求項１乃至１１の何れかに記載の経粘膜用組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種、及び(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の、経粘膜用組成物の製造のための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、経粘膜用組成物に関する。より具体的には、薬理活性ペプチドやタンパク質の経粘膜吸収性が改善されている経粘膜用組成物に関する。更に、本発明は、薬理活性ペプチドやタンパク質の経粘膜吸収を向上させる方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、薬理活性ペプチドやタンパク質等の薬物の投与は、主として、静脈内又は皮下に対して注射による投与が行われている。しかし、注射による薬物の投与は、患者にとって精神的負担や肉体的苦痛が多く、また患者自身による投与が困難であるといった便宜上の問題点もある。そこで、近年、注射以外の薬物の投与方法として、肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、膣粘膜、胃粘膜、消化管粘膜等の粘膜を介して薬物を投与する方法が注目されている。【０００３】
しかしながら、一般に、ペプチドやタンパク質は、粘膜での吸収性が低いため、所期の薬効を発現させるための十分量を経粘膜吸収させることは、必ずしも容易ではない。そこで、ペプチドやタンパク質を効率よく経粘膜吸収させるための吸収促進剤が、これまでに種々開発されている。例えば、吸収促進剤として、シチジンヌクレオチド誘導体（特許文献１）や分子量５千以上のキトサン（特許文献２）を使用する方法が報告されている。【０００４】
以上のような種々の方法が提案されているが、今なお、ペプチドやタンパク質の難粘膜吸収性を改善する手段として、より実用的で効果的な方法で粘膜吸収を実現する技術の開発が望まれている。
【特許文献１】特開平６−９４２４号公報
【特許文献２】特開平１１−１１６４９９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、薬理活性ペプチド及びタンパク質が、肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、膣粘膜、胃粘膜、消化管粘膜等の粘膜を介して効率的に吸収されるように設計された経粘膜用組成物を提供することを目的とする。更に、本発明は、薬理活性ペプチド及びタンパク質の粘膜吸収を効率的に向上させる方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、粘膜に適用する組成物中に、薬理活性ペプチド又はタンパク質と共に、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、又はグルコサミンを共存させることにより、薬理活性ペプチド又はタンパク質の経粘膜吸収性が高められて、粘膜適用により優れた薬効を発現できる組成物が得られることを見出した。本発明は、かかる知見に基づいて、更に改良を重ねることにより完成したものである。【０００７】
即ち、本発明は、下記に掲げる経粘膜用組成物を提供する：
項１．  下記(i)及び(ii)成分を含有することを特徴とする経粘膜用組成物：
(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種、及び
(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種。
項２．  (i)成分が、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、抗欝剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレストロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤及びワクチンよりなる群から選択される少なくとも１種である、項１記載の経粘膜用組成物。
項３．  (i)成分が、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、細胞接着因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、腎および泌尿器系に作用する因子、結合組織および皮膚に作用する因子、感覚器官に作用する因子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系に作用する因子及び酵素よりなる群から選択される少なくとも１種である、項１記載の経粘膜用組成物。
項４．  (i)成分が、インターフェロン、インターロイキン、インスリン、成長ホルモン、カルシトニン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、副腎皮質ホルモン、黄体形成ホルモン、副甲状腺ホルモン、及び副甲状腺ホルモンの活性フラグメントよりなる群から選択される少なくとも１種である、項１記載の経粘膜用組成物。
項５．  (ii)成分が、重合度が２〜１５のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン、及びこれらの塩から選択される少なくとも１種である、項１記載の経粘膜用組成物。
項６．  (i)成分１００重量部に対して、上記(ii)成分を０．００１〜１×１０6重量部の割合で含有する、項１記載の経粘膜用組成物。
項７．  (i)成分を１×１０−６〜３０w／v％の割合で含有する液状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
項８．  (ii)成分を０．０１〜３０w／v％の割合で含有する液状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
項９．  (i)成分を１×１０−５〜９９重量％の割合で含有する固形状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
項１０．  (ii)成分を０．１〜５０重量％の割合で含有する固形状組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。
項１１．  鼻腔粘膜、消化器粘膜、肺粘膜、口腔粘膜、眼又は腟粘膜に適用される組成物である、項１記載の経粘膜用組成物。【０００８】
また、本発明は、下記に掲げる粘膜吸収を向上させる方法を提供する：
項１２．  ほ乳動物において、薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種の経粘膜吸収を向上させる方法であって、
(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種と共に、(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種を、ほ乳動物の粘膜に投与することを特徴とする、方法。
項１３．  (i)成分が、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、抗欝剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレストロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤及びワクチンよりなる群から選択される少なくとも１種である、項１２記載の方法。
項１４．  (i)成分が、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、細胞接着因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、腎および泌尿器系に作用する因子、結合組織および皮膚に作用する因子、感覚器官に作用する因子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系に作用する因子及び酵素よりなる群から選択される少なくとも１種である、項１２記載の方法。
項１５．  (i)成分が、インターフェロン、インターロイキン、インスリン、成長ホルモン、カルシトニン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、副腎皮質ホルモン、黄体形成ホルモン、副甲状腺ホルモン、及び副甲状腺ホルモンの活性フラグメントよりなる群から選択される少なくとも１種である、項１２記載の方法。
項１６．  (ii)成分が、重合度が２〜１５のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン、及びこれらの塩から選択される少なくとも１種である、項１２記載の方法。
項１７．  (i)成分と共に、(ii)成分を(i)成分１００重量部に対して０．００１〜１×１０6重量部の割合で投与する、項１２記載の方法。
項１８．  (i)成分及び(ii)成分を含有し、(i)成分が１×１０−６〜３０w／v％の割合で含有されている液状組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、項１２に記載の方法。
項１９．  (i)成分及び(ii)成分を含有し、(ii)成分を０．０１〜３０w／v％の割合で含有されている液状組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、項１２に記載の方法。
項２０．  (i)成分及び(ii)成分を含有し、(i)成分を１×１０−５〜９９重量％の割合で含有する固形状組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、項１２に記載の方法。
項２１．  (i)成分及び(ii)成分を含有し、(ii)成分を０．１〜５０重量％の割合で含有する固形状組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、項１２に記載の方法。
項２２．  投与される粘膜が、鼻腔粘膜、消化器粘膜、肺粘膜、口腔粘膜、眼又は腟粘膜である、項１２に記載の方法。
項２３．  請求項１乃至１１の何れかに記載の経粘膜用組成物をほ乳動物の粘膜に投与する、項１２に記載の方法。【０００９】
更に、本発明は、下記に掲げる使用を提供する。
項２４．  (i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種、及び(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の、経粘膜用組成物の製造のための使用。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】試験例１において、各組成物（実施例１−４及び比較例１−２）をラットの気管内に投与した際の血清中IFNαの平均濃度の経時変化を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明をより詳細に説明する。
Ｉ．経粘膜用組成物
(i)成分
本発明の経粘膜用組成物は、(i)成分として、生理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種を含有する。【００１２】
本発明において、生理活性を有するペプチド及び蛋白質としては、２個以上のアミノ酸から構成されるペプチド及びその誘導体が使用される。具体的には、当該ペプチド及び蛋白質として、アミノ酸のみから構成されるものの他、例えば、ガラクトース、マンノース等の糖、又は糖鎖で修飾されているもの；ポリエチレングリコール等の合成ポリマー、又はコンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸等の天然ポリマーで修飾されているもの；その他非ペプチド性化合物で修飾されているもの等が使用される。また、生理活性を発現するために必要なアミノ酸配列に、他の機能を備えたペプチドを付加したハイブリッドペプチドであってもよい。また、薬理活性を保持していることを限度として、既に薬理活性が知られているペプチド及び蛋白質のフラグメントであってもよい。【００１３】
当該ペプチド及び蛋白質の分子量については、特に制限されないが、例えば２００〜２０００００、好ましくは２００〜１０００００、更に好ましくは２００〜５００００程度が挙げられる。【００１４】
本発明に使用されるペプチド及び蛋白質は、その粘膜吸収特性については特に制限されず、粘膜易吸収性のものであってもよく、また粘膜難吸収性のものであってもよい。ここで、「粘膜易吸収性」とは、他の粘膜吸収促進剤がなくても、一般的な投与量で、薬効作用が発揮できる程度の量のペプチド及び蛋白質が粘膜を介して吸収されることを意味し、「粘膜難吸収性」とは、他の粘膜吸収促進剤と共存しなければ、一般的な投与量では、薬効作用が発揮できる程度の量のペプチド及び蛋白質が粘膜を介して吸収されないことを意味する。ペプチド及び蛋白質の粘膜吸収性を向上させるという本発明の効果に鑑みれば、好ましいペプチド及び蛋白質として粘膜難吸収性のものが挙げられる。【００１５】
当該ペプチド及び蛋白質は、天然由来のもの、遺伝子組み換え技術により製造したもの、化学合成により製造したもののいずれであってもよい。【００１６】
生理活性を有するペプチド及び蛋白質としては、例えば、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、抗欝剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレストロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤及びワクチン等として使用される成分が挙げられる。【００１７】
当該ペプチド及び蛋白質の具体例としては、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、細胞接着因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、腎および泌尿器系に作用する因子、結合組織および皮膚に作用する因子、感覚器官に作用する因子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系に作用する因子及び酵素が例示される。これらの中で好ましくは、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系に作用する因子及び酵素が挙げられる。【００１８】
以下に、当該ペプチド及び蛋白質の具体例を列挙する。本発明はこれらのペプチド及び蛋白質に限定されるものではない。
サイトカイン：例えば、インターフェロン（インターフェロン−α、β、γ）、インターロイキン（インターロイキン−１〜１１）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α、β）、悪性白血球阻止因子（ＬＩＦ）、エリスロポエチン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、スロンボポイエチン、血小板増殖刺激因子、巨核球増殖刺激因子等。
ペプチドホルモン：例えば、インスリン、成長ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、アミリン、オキシトシン、黄体形成ホルモン等。
成長因子：例えば、神経成長因子（ＮＧＦ、ＮＧＦ−２／ＮＴ−３）、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、血小板由来細胞成長因子（ＰＤＧＦ）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）等。
心臓血管系に作用する因子：例えば、エンドセリン、エンドセリンインヒビター、エンドセリンアンタゴニスト、エンドセリン生成酵素阻害剤、バソプレシン、レニン、アンギオテンシンI、アンギオテンシンII、アンギオテンシンIII、アンギオテンシンIインヒビター、アンギオテンシンII受容体アンタゴニスト、心房ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、抗不整脈ペプチド等。
細胞接着因子：例えば、ラミニン、細胞間接着因子１（ＩＣＡＭ１）等。
中枢および末梢神経系に作用する因子：例えば、エンケファリン、エンドルフィン、キョートルフィン、ニューロトロピックファクター（ＮＴＦ）、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）、アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド（ＰＡＣＡＰ）、甲状腺ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）、ニューロテンシン等。
体液電解質および血液有機物質に作用する因子：例えば、カルシトニン、アポプロテインＥ、ヒルディン等。
骨および骨格に作用する因子：例えば、甲状腺ホルモン、甲状腺ホルモンの活性フラグメント、ヒストンＨ４−関連骨形成増殖ペプチド等。
消化器系に作用する因子：例えば、セクレチン、ガストリン等が例示される。
腎および泌尿器系に作用する因子：例えば、脳由来ナトリウム利尿ペプチド、ウロテンシン等。
感覚器官に作用する因子：例えば、サブスタンスＰ等。
免疫系に作用する因子：例えば、走化性ペプチド、ブラディキニン等が例示される。
呼吸器系に作用する因子：例えば、喘息反応を制御する因子等。【００１９】
これらの(i)成分の中で、好適に使用されるものとして、インターフェロン、インターロイキン、インスリン、成長ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、カルシトニン、甲状腺ホルモン及び甲状腺ホルモンの活性フラグメントが挙げられる。特に好ましい(i)成分としては、インターフェロンが例示される。【００２０】
上記(i)成分の一日当たりの投与量は、該(i)成分の種類、患者の年齢や性別等によって異なるが、成人１日当たり、通常０．００１〜１００ｍｇ、好ましくは０．０１〜１０ｍｇを目安として設定すればよい。【００２１】
(ii)成分
本発明の経粘膜用組成物は、(ii)成分として、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種を含有する。【００２２】
本発明において、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖とは、２〜２０個のグルコサミン残基がβ1-4結合により結合しているオリゴ糖を意味する。【００２３】
本発明において、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖の誘導体としては、薬学的に許容されることを限度として、特に制限されない。このような誘導体としては、具体的には、上記キトサンオリゴ糖のカルボキシメチル化物、カルボキシエチル化物、ヒドロキシエチル化物、ジヒドロキシプロピル化物、メチル化物、エチル化物、グリコール化物、アシル化物、トシル化物、硫酸化物等が例示される。【００２４】
また、(ii)成分として使用される、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体及びグルコサミンの塩については、薬学的に許容されるものであれば特に制限されない。このような塩として、具体的には、無機酸（例えば塩酸、硫酸、燐酸等）により形成された塩；及び有機酸（例えば酢酸、酒石酸、乳酸、グルタミン酸、マレイン酸、アルギン酸、クエン酸等）により形成された塩が例示される。【００２５】
当該(ii)成分として、好ましくは、重合度が２〜１５のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩が挙げられ、更に好ましくは、重合度が２〜１０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩が挙げられる。【００２６】
(ii)成分として使用される上記キトサンオリゴ糖は、酵素（キトナーゼ等）や酸等を用いて、キトサンを加水分解することによって製造することができる。また、上記キトサンオリゴ糖は、キチンを酵素（キチナーゼ等）や酸等を用いて加水分解した後に、これを強アルカリ溶液中で脱アセチル化する方法により製造することもできる。【００２７】
経粘膜用組成物
本発明の経粘膜用組成物において、上記(i)及び(ii)成分の配合比率としては、特に制限されるものではないが、通常、上記(i)成分１００重量部に対して、上記(ii)成分が０．００１〜１×１０6重量部、好ましくは０．０１〜１×１０5重量部、更に好ましくは０．１〜１×１０4重量部となる比率を挙げることができる。上記比率を満たすことによって、(i)成分の経粘膜吸収を格段向上させることが可能になる。【００２８】
本発明の経粘膜用組成物における上記(i)成分の配合量については、粘膜に適用されて薬理効果を奏するのに有効な量であればよく、患者の性別や年齢、投与形態、製剤の形状や剤型、使用する(i)成分の種類や一日投与量、（ii）成分の種類、期待する薬効効果等に応じて適宜設定される。経粘膜用組成物における上記(i)成分の配合割合の一例として、(i)成分が該組成物の総重量に対して１×１０-７〜９９重量％となる割合が挙げられる。具体的には、液状の組成物として調製する場合であれば、(i)成分が通常１×１０-6〜３０ｗ／ｖ％、好ましくは１×１０-5〜１０ｗ／ｖ％、更に好ましくは１×１０-4〜１ｗ／ｖ％となる割合が例示される。ここで、単位「ｗ／ｖ％」は、「g/100ml」と同義である。また、例えば、固形状の組成物として調製する場合であれば、(i)成分が該組成物の総重量に対して通常１×１０-5〜９９重量％、好ましくは１×１０-4〜５０重量％、更に好ましくは１×１０-3〜１０重量％となる割合が例示される。【００２９】
本発明の経粘膜用組成物における上記(ii)成分の配合量については、上記(i)成分の粘膜吸収を向上させるのに有効な量であればよく、上記(i)及び(ii)成分の配合比率と、上記(i)成分の配合量に基づいて適宜設定される。経粘膜用組成物における上記(ii)成分の配合割合の一例として、(ii)成分が該組成物の総重量に対して０．００１〜５０重量％となる割合が挙げられる。具体的には、液状の組成物として調製する場合であれば、(ii)成分が通常０．０１〜３０ｗ／ｖ％、好ましくは０．１〜１０ｗ／ｖ％、更に好ましくは０．５〜５ｗ／ｖ％となる割合が例示される。また、例えば、固形状の組成物として調製する場合であれば、(ii)成分が該組成物の総重量に対して通常０．１〜５０重量％、好ましくは０．５〜３０重量％、更に好ましくは１〜１０重量％となる割合が例示される。【００３０】
本発明の経粘膜用組成物は、上記(i)及び(ii)成分に加えて、経粘膜用組成物に通常使用されているの各種薬効成分を含有することができる。【００３１】
また、本発明の経粘膜用組成物には、上記成分の他に、該組成物の用途或いは形状等に応じて、経粘膜用組成物に通常使用される担体又は添加剤を適宜配合してもよい。該担体又は添加剤の配合割合については、当業界において通常採用されている範囲に基づいて、適宜設定すればよい。配合できる担体又は添加剤としては、特に制限されないが、例えば、水、生理食塩水、その他水性溶媒、水性又は油性基剤等の各種担体；賦形剤、結合剤、ｐＨ調整剤、崩壊剤、吸収促進剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、香料等の各種添加剤が挙げられる。【００３２】
このような添加剤として、具体的には、乳糖、白糖、マンニトール、塩化ナトリウム、ブドウ糖、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸塩等の賦形剤；水、エタノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースNa、セラック、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、デキストリン、プルラン等の結合剤；クエン酸、無水クエン酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、無水リン酸一水素ナトリウム、無水リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等のｐＨ調整剤；カルメロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピセルロース、カルメロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスポビドン、ポリソルベート８０等の崩壊剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の他の吸収促進剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ポリエチレングリコール、コロイド状ケイ酸、ショ糖脂肪酸類等の滑沢剤；黄酸化鉄、黄色三二酸化鉄、三二酸化鉄、βカロテン、酸化チタン、食用色素（例えば、食用青色１号等）、銅クロロフィル、リボフラビン等の着色剤；並びにアスコルビン酸、アスパルテーム、アマチャ、塩化ナトリウム、果糖、サッカリン、粉糖等の矯味剤等が例示できる。【００３３】
更に、上記成分の他、本発明の経粘膜用組成物には、基剤として生分解性合成高分子を用いてもよい。このような生分解性合成高分子としては、例えばポリ乳酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）共重合体、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸−グリコール酸）共重合体、及びこれらの混合物等が代表的なものとして挙げられるが、これらに限定されるものではない。【００３４】
本発明の経粘膜用組成物は、粘膜に適用できることを限度として、その形状については特に制限されず、固形状、液体状、半固形状、懸濁状、粉末状、微粒子状のいずれの形状であってもよい。また、本発明の経粘膜用製剤は、公知の方法に従い、マイクロカプセル（マイクロスフィアー）などの粒子に成型されていてもよい。【００３５】
また、本発明の経粘膜用組成物は、適用対象となる粘膜については、特に制限されない。本発明の経粘膜用製剤の適用対象粘膜として、具体的には、鼻粘膜、消化器粘膜（胃腸粘膜）、肺粘膜、膣粘膜、口腔粘膜、眼粘膜，気管粘膜等が例示される。これらの中で、患者のコンプライアンス等の理由から、好ましくは、鼻粘膜、消化器粘膜、肺粘膜及び膣粘膜が挙げられる。【００３６】
本発明の経粘膜用組成物は、その形状や適用対象粘膜に応じて、各種の剤型に調製することができる。また、本発明の経粘膜用組成物は、医薬組成物として用いられ、その適用対象粘膜や剤型に応じた投与形態で、患者の粘膜に投与される。【００３７】
II．経粘膜吸収の向上方法
前述するように、上記成分(ii)には、薬理活性を有するペプチド及び蛋白質の経粘膜吸収を向上させることができる。従って、更に、本発明は、ほ乳動物において、薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種の経粘膜吸収を向上させる方法を提供する。当該方法は、(i)薬理活性を有するペプチド及び蛋白質よりなる群から選択される少なくとも１種と共に、(ii)重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種を、ヒト等のほ乳動物の粘膜に投与することを特徴とするにより実施される。【００３８】
当該方法において、(i)成分の種類や投与量、(ii)成分の種類や投与量、(i)成分と(ii)成分との比率、投与対象粘膜等については、前記「I．経粘膜用組成物」の場合と同様である。【００３９】
当該方法は、好適には、前記の経粘膜用組成物をほ乳動物の粘膜に投与することによって実施される。
【実施例】
【００４０】
以下、本発明について、実施例及び試験例をもって詳細に説明するが、本発明はこれらによって制限されるものではない。なお、実施例４及び比較例１で使用したキトサンオリゴ糖又はキトサンの平均分子量は、「キチン、キトサンハンドブック」（キチン、キトサン研究会編、技報堂出版）第８章キチン，キトサンの分析法に記載されている高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いたGPC (Gel Permeation Chromatography) モードでの方法により求めた。【００４１】
実施例１
キトサンヘキサマー（６個グルコサミン残基がβ1-4結合により結合しているオリゴ糖；製品名：キトサンヘキサマー、分子量：１２０４、Code No.400436、購入元：生化学工業株式会社）を注射用水（製造番号：2D71N、発売元：大塚製薬株式会社）で溶解し、5mg/mLのキトサンヘキサマー溶液を調製した。この溶液0.5 mLを1000万IUのインターフェロンα（IFNα）を含むバイアル（天然型インターフェロンα製剤、商品名：オーアイエフ、製造番号：3G86F10、製造発売元：大塚製薬株式会社）に添加し、軽く振り混ぜてバイアル内の凍結乾燥物を溶解させて、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４２】
実施例２
キトサンヘキサマーの代わりに、同量のキトサンダイマー（６個グルコサミン残基がβ1-4結合により結合しているオリゴ糖；製品名：キトサンダイマー、分子量：４１３、Code No.400432、購入元：生化学工業株式会社）を使用する以外は、上記実施例１と同様の方法で、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４３】
実施例３
キトサンヘキサマーの代わりに、同量のD-(+)-グルコサミン（分子量：２１６、Code No.101782、購入元：和光純薬工業株式会社）を使用する以外は、上記実施例１と同様の方法で、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４４】
実施例４
キトサンヘキサマーの代わりに、同量のキトサン（製品名：水溶性キトサン、平均分子量１８００、製品No. 037-14303、購入元：和光純薬工業株式会社）を使用する以外は、上記実施例１と同様の方法で、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４５】
実施例５
キトサンヘキサマー（６個グルコサミン残基がβ1-4結合により結合しているオリゴ糖；製品名：キトサンヘキサマー、分子量：１２０４、Code No.400436、購入元：生化学工業株式会社）を等張リン酸緩衝液で溶解し、10mg/mLのキトサンヘキサマー溶液を調製した。また、サケカルシトニン（Code No.T3660、購入元：シグマアルドリッチジャパン株式会社）を等張リン酸緩衝液で溶解し、２μg/mL のサケカルシトニン溶液を調製した。このサケカルシトニン溶液0.5 mLとキトサンヘキサマー溶液0.5 mLを混合し、サケカルシトニン濃度が1 μg/mLの組成物を調製した。【００４６】
比較例１
キトサンヘキサマーの代わりに、同量のキトサン（製品名：CHITOSAN EF、平均分子量４８０００、LOT 0302190、購入元：日本油脂株式会社）を使用する以外は、上記実施例１と同様の方法で、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４７】
比較例２
キトサンヘキサマーを使用しないこと以外は、上記実施例１と同様の方法で、IFNα濃度が2000万IU/mL（約0.01w/v%）の組成物を調製した。【００４８】
比較例３
キトサンヘキサマーを使用しないこと以外は、上記実施例５と同様の方法で、サケカルシトニン濃度が1μg/mLの組成物を調製した。【００４９】
試験例１
上記実施例１−４及び比較例１−２の組成物の粘膜吸収特性、特に肺粘膜での吸収特性について検討するために、以下の試験を行った。【００５０】
実験動物として約18時間絶食したWistar系雄性ラット（体重約200g）を用いた。イソフルラン麻酔下、ラットを固定し、テフロンチューブ（内径0.8mm、外径1.6mm）を口腔から気管内に約5cm挿入した。このテフロンチューブを通して上記実施例１−４及び比較例１−２の組成物を0.5mL/kgの容量で気管内に投与した。気管内投与後、30分、1、2、3、4、5、6、8、10時間に鎖骨下静脈より0.2mL採血し、1800ｇで10分間遠心分離することにより、血清を得た。得られた血清中のIFNα濃度を酵素抗体法（ELISA）によるヒトIFNα測定キット（製造発売元：株式会社日本抗体研究所）を用いて測定した。【００５１】
得られた結果を図１及び表１に示す。図１には、血清中IFNαの平均濃度の経時変化を示す（n=4）。表１には、薬物動態学パラメータの平均値を示す（n=4）。なお、表１中の各パラメータは次の意味を示す。
AUC10hr：投与後10時間までの血清中濃度−時間曲線下面積（IU・hr／mL）
AUCinf：投与後無限大時間までの血清中濃度−時間曲線下面積（IU・hr／mL）
Cmax：最高血中濃度（IU／mL）
Tmax：最高血中濃度到達時間（hr）
この結果、キトサンヘキサマー、キトサンダイマー、分子量１８００のキトサンオリゴ糖、又はグルコサミンをIFNαと共に配合した組成物（実施例１−４）では、キトサン（分子量４８０００）を配合した組成物（比較例１）やIFNαを単独で含有する組成物（比較例２）に比して、最高血中濃度(Cmax)及び投与後10時間までの血清中濃度−時間曲線下面積(AUC10hr)が共に増大することが確認された。【００５２】
【表１】
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【００５３】
以上の結果から、生理活性ペプチドや蛋白質と共に、重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖又はグルコサミンを配合することにより、組成物中の生理活性ペプチドや蛋白質の経粘膜吸収性が向上して、バイオアベイラビリティ（生物学的利用能）が顕著に改善されることが明らかとなった。【００５４】
試験例２
上記実施例５及び比較例３の組成物の粘膜吸収特性、特に肺粘膜での吸収特性について検討するために、以下の試験を行った。【００５５】
実験動物として約18時間絶食したWistar系雄性ラット（体重約200g）を用いた。イソフルラン麻酔下、ラットを固定し、上記実施例５及び比較例３の組成物の0.1mLをそれぞれ気管内に投与した。投与後10分、30分、1、2、3、4、5、6時間に鎖骨下静脈より0.2 mL採血し、1800ｇで10分間遠心分離することにより、血清を得た。得られた血清中のカルシウム濃度をメチルキシレノールブルー（MXB）法によるカルシウム測定キット（製造発売元：和光純薬株式会社）を用いて測定した。【００５６】
この結果、キトサンヘキサマーをサケカルシトニンと共に配合した組成物（実施例５）では、サケカルシトニンを単独で含有する組成物（比較例３）に比して、血清中カルシウム低下作用が3.8倍高く、実施例５の組成物の投与による該作用は投与後少なくとも６時間持続することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
本発明の経粘膜用組成物では、生理活性を有するペプチドや蛋白質と共に、分子量３０００以下である重合度が２〜２０のキトサンオリゴ糖、その誘導体、グルコサミン又はこれらの塩が共存しており、これによって、生理活性を有するペプチドや蛋白質の粘膜を介する吸収特性が改善されている。従って、本発明の経粘膜用組成物によれば、生理活性を有するペプチドや蛋白質に基づく薬効作用を効率的に発揮されることが可能になる。【００５８】
また、本発明の経粘膜用組成物は、患者への苦痛を伴う注射とは異なり、鼻粘膜、肺粘膜、腟粘膜、消化管粘膜等の粘膜へ自己投与可能であるので、長期間連投が必要な生理活性ペプチド又は蛋白質の経粘膜用製剤として極めて有用である。
【図１】
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【国際調査報告】
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