(57)【要約】筋弛緩促進薬、左室拡張障害の治療薬、狭心症の治療薬、急性肺水腫の治療薬、微小循環系の血流改善薬及び高血圧の治療薬及び予防薬並びに心室性頻柏及びトルサドポアンの治療薬及び予防薬として役立てることができる薬剤を提供する。  上記薬剤は、一般式［Ｉ］2005105793.tif 000066［式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、2005105793.tif 000067（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。］で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000024
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000025
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする筋弛緩促進剤。
【請求項２】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000026
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000027
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする筋弛緩促進剤。
【請求項３】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１又は２に記載の筋弛緩促進剤。
【請求項４】
筋が骨格筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の筋弛緩促進剤。
【請求項５】
筋が平滑筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の筋弛緩促進剤。
【請求項６】
筋が心筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の筋弛緩促進剤。
【請求項７】
筋が左室心筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の筋弛緩促進剤。
【請求項８】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000028
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000029
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬。
【請求項９】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000030
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000031
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬。
【請求項１０】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項８又は９に記載の左室拡張障害の治療薬。
【請求項１１】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000032
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000033
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心不全の治療薬。
【請求項１２】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000034
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000035
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心不全の治療薬。
【請求項１３】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１１又は１２に記載の心不全の治療薬。
【請求項１４】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000036
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000037
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする急性肺水腫の治療薬。
【請求項１５】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000038
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000039
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする急性肺水腫の治療薬。
【請求項１６】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の急性肺水腫の治療薬。
【請求項１７】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000040
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000041
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする微小循環系の血流改善薬。
【請求項１８】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000042
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000043
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする微小循環系の血流改善薬。
【請求項１９】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１７又は１８に記載の微小循環系の血流改善薬。
【請求項２０】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000044
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000045
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする狭心症の治療薬。
【請求項２１】
一般式〔１］
2005105793.tif 000046
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000047
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする狭心症の治療薬。
【請求項２２】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２１又は２２に記載の狭心症の治療薬。
【請求項２３】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000048
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000049
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心筋障害の改善薬。
【請求項２４】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000050
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000051
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心筋障害の改善薬。
【請求項２５】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２４又は２５に記載の心筋障害の改善薬。
【請求項２６】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000052
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000053
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする高血圧の治療薬。
【請求項２７】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000054
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000055
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする高血圧の治療薬。
【請求項２８】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２７又は２８に記載の高血圧の治療薬。
【請求項２９】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000056
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000057
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心室性頻拍の治療薬。
【請求項３０】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000058
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000059
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心室性頻拍の治療薬。
【請求項３１】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２９又は３０に記載の心室性頻拍の治療薬。
【請求項３２】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000060
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000061
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする上室性頻拍の治療薬。
【請求項３３】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000062
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000063
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする上室性頻拍の治療薬。
【請求項３４】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項３２又は３３に記載の上室性頻拍の治療薬。
【請求項３５】
一般式〔１〕
2005105793.tif 000064
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000065
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするトルサドポアンの治療薬及び予防薬。
【請求項３６】
一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項３５に記載のトルサドポアンの治療薬及び予防薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、筋組織、即ち、心筋、平滑筋及び骨格筋の弛緩を促進させる機能を有する化合物、特に、心筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物に関し、特に、心筋弛緩が不十分な、即ち心筋弛緩不全の患者に与えて、心筋組織の弛緩を促進させて、心筋組織の弛緩不全を解消する作用を有する化合物に関する。
また、本発明は、心筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、心筋拡張障害関連疾患、即ち心筋弛緩障害関連疾患の治療薬又は予防薬に関する。さらに、本発明は、心筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、微小循環系の血流改善薬に関し、さらにまた、心肥大、大動脈弁狭窄症、特に重症の大動脈弁狭窄症、大動脈閉鎖不全症、狭心症の治療薬又は予防薬に関し、さらに加えて、例えば心室性頻拍やトルサドポアン（Ｔｏｒｓａｄｅｓ  ｄｅ  ｐｏｉｎｔｅｓ）といわれる多形性心室性頻拍等の頻拍性不整脈の治療薬又は予防薬に関する。そしてまた、本発明は、心筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、両心拡張不全、左室拡張不全、急性及び慢性肺うっ血、急性肺水腫、左室心筋障害、等の心筋障害関連の疾患の治療薬又は予防薬に関する。そしてさらに、本発明は、心筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、心不全の治療薬又は予防薬に関する。またさらに加えて、本発明は、筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む急性肺水腫の治療薬又は予防薬に関する。そしてこれらの他に、本発明は、筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、狭心症、特に、心筋内小血管性狭心症の治療薬又は予防薬に関する。そしてさらに本発明は、筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む高血圧の治療薬に関し、また、カテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬に関する。そしてまた、本発明は、筋組織の弛緩を促進させる機能を有する化合物を含む、心筋細胞内のカルシウム過負荷時において発生する不整脈の治療薬又は予防薬に関し、また同じくカルシウム過負荷時においてカテコールアミン誘発性の不整脈の治療薬又は予防薬に関する。
【背景技術】  例えば、心不全は、これまで、心筋の収縮機能不全に基づいて発症するものと考えられており、そのために、心不全の治療薬としては、心筋の収縮を強める薬剤が使用されている。即ち、このような心不全の治療薬としては、（１）  ジギタリス（ジゴキシン、ジギトキシン、ジギラノーゲンＣなど）、（２）  カテコールアミン（ドパミン、ドブタミン、デノパンなど）、（３）  フォスフォジエステラーゼ阻害薬（ＰＤＥＩＩＩ阻害薬、アムリノン、ミルリノン、ベスナリノンなど）、（４）  カルシウムセンシタイザー（ピモベンダン）などがあるが、これらの中で、前記（１）〜（３）に示す薬剤は、いずれもが細胞内カルシウムイオンを増やすことにより、心筋収縮を促進させるものであり、また、前記（４）の薬剤のカルシウムセンシタイザーは心筋収縮調節蛋白質トロポニンＣのカルシウムイオン感受性を高めて、心筋収縮を促進させるものである。
またこれらの他に、リアノジン受容体機能を改善及び／又は安定化により、筋小胞体からのＣａイオンのリークを抑制する作用を発揮する化合物を有効成分とする、筋肉収縮・弛緩機能障害が発症の原因となる疾患の治療又は予防剤が提案されている（日本国特開２００３−９５９７７号公報参照）。
しかしながら、最近、心不全の症例において、左室の収縮機能が保持されているにもかかわらず、心不全をきたす患者が多く、その数は心不全の患者の４０パーセントにも及ぶことが発見されて、しかも、この場合、必ずしも予後が良好といえないことが分かってきた。このような心不全の患者では左室の拡大が認められないために、このような患者では、左室拡張機能が心不全の原因となっており、これは拡張不全とよばれている。
ところで、筋肉には、心筋、骨格筋及び平滑筋があり、これら筋肉の収縮及び弛緩は、筋肉を備える臓器又は組織若しくは器官の機能を発揮する上で不可欠である。これら筋肉の収縮及び弛緩に係る治療は、血液の拍出の際の筋肉の収縮に大きなエネルギーを要するところから、従来より筋肉の収縮を高める物質が研究されており、筋肉の収縮を高める薬剤は、例えば、心臓の疾病を例にとれば、前記のように心不全の治療薬となり、また、血管の場合では、血管の収縮を強めて血圧の上昇をもたらす薬剤となる。これらとは逆に、例えば、β−遮断薬のように、心収縮力を弱めることにより、筋組織の酸素消費量を少なくする薬剤があるが、この薬剤は、労作狭心症の治療薬に使用されている。
また、トルサドポアンは、多形性心室性頻拍の特殊型で、ＱＴ延長症候群の患者で発生することが多く、ＱＲＳ軸が連続して変化し、ＱＲＳ波形が基線を軸にねじれ回転するごとく周期的に変化する不整脈であり、多くは自然に停止するが、反復性を示し、ときには、失神発作を起したり、又は心室細動に移行して、生命の危険を齎し問題とされている。トルサドポアンは、抗不整脈薬のある種のもの、抗ヒスタミン剤、クロールプロマジンなどの抗精神病薬で発現する。また、低マグネシウム血症や低カリウム血症といった電解質異常でも起こる。不整脈の治療の際に投与される抗不整脈薬では、ボーガン  ウイリアムスの抗不整脈薬の分類のクラスＩＡ群のキニジン、ジソピラミド、プロカインアミド、プロパフェノン、シベンゾリン、及び前記分類のクラスＩＩＩ群のアミオダロン、シンビットなどによって、トルサドポアンが惹起されることが知られている。また、これらの抗不整脈薬は、心電図でＱＴを延長させる作用があり、実験的にも、前記分類のクラスＩＩＩ群のクロフィリウムでトルサドポアンを発現させることができる。
例えば、拡張不全による心不全は、これまでの収縮不全による心不全とは心不全の発生のメカニズムが異なっており、収縮不全による心不全と拡張不全による心不全は峻別されている。したがって、収縮不全による心不全と拡張不全による心不全の治療法は、自ずと異なり、左室拡張不全の治療には、急性憎悪期における治療薬や慢性期における治療薬の使用が提案されてはいるが、何れも完全ではなく、例えば、最近心不全薬として使用されているβ−遮断薬は、筋収縮に影響を与える点に問題が残り、完全とはいえず、特効薬的に心筋弛緩を改善する薬剤、即ち、拡張不全による心不全の治療薬剤の出現が望まれている。
本発明は、従来の心不全の４０％とも言われている心筋弛緩不全、即ち拡張不全による心不全の特効薬的に治療薬を提供することを目的としている。
ところで、筋弛緩が促進されないことに由来する病気は多く、これらの病気は、筋弛緩を促進させることで改善できるが、筋収縮に影響を与えることなく如何に筋弛緩させるかが問題である。例えば、心臓は収縮及び弛緩を繰返してポンプとして働いており、冠灌流は、主として弛緩期に行われ、筋弛緩が容易になると、冠循環を容易にさせることになる。そのために、心肥大、特に重症の大動脈弁狭窄症や、大動脈閉鎖不全症の患者の場合には、拡張期の冠循環が障害されると狭心症を起こしてくるが、筋収縮に影響を与えることなく如何に筋弛緩を促進させて拡張期の冠循環の障害を取り除くかが問題である。また、高血圧心疾患、特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症及び老人などでの心臓肥大や加齢により心筋の弛緩障害を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害を起すが、これらの疾患の場合も、筋収縮に影響を与えることなく如何に心筋弛緩を促進させてそれらの疾患を治療し及び予防するかが問題である。末梢血管は平滑筋を弛緩させることにより血管を広げて、血圧の急な上昇を緩和し、また、その調整力により圧力の急な下降を防ぐので、筋組織の弛緩を促進する薬剤は、カテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬になりうるが、筋収縮に影響を与えることなく如何に血管の平滑筋を弛緩促進させるかが問題である。さらに、心室性頻拍では、心室の拡張期が短く冠灌流が障害されるが、筋収縮に影響を与えることなく如何に心筋弛緩を促進させて、拡張期が短い頻拍性不整脈、特に、心室性頻拍の治療を行うかが問題である。また、抗不整脈剤の投与によりトルサドポアンが発現したときは、抗不整脈剤の血中濃度が低下するまで待つしか術がなく、その間に起こる突然死などを予防できないのが現状であり問題とされている。
また、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３１，７３９−７４３（２００２）には、心筋組織においては、アクチン及びミオシンが収縮蛋白質であり、この収縮蛋白質のアクチン及びミオシンは、蛋白質のトロポニン及びトロポミオシンが存在しない場合は、常に活性化された状態にあって、筋組織は収縮した状態となる。この状態において、トロポミオシンを加えても、この筋組織の収縮した状態は変わらない。しかし、Ｃａ受容蛋白質のトロポニンを加えた場合は、筋組織の収縮反応は、筋組織内のＣａ濃度で制御されるようになる。ところで、蛋白質のトロポニンはトロポニンＩ、トロポニンＣ及びトロポニンＴの３成分を有する蛋白質複合体であって、この中、トロポニンＩは筋組織の収縮抑制蛋白質であり、トロポニンＣはカルシウムイオン結合蛋白質であり、トロポニンＴはトロポミオシンと結合する蛋白質である。トロポニンＣにカルシウムイオンが結合すると、筋組織に対するトロポニンＩの抑制作用が外れて、即ち、脱抑制されてミオシン及びアクチンが互いに滑り合って筋組織の収縮が起こる。そこで、筋組織の弛緩を促進させるためには、筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−ミオシン複合体に対する結合機能を如何に増強させるかが問題である。
ミオシンは筋肉の主な構造蛋白質で、骨格筋では筋原繊維の全蛋白質の６０％を占め、２本のミオシン重鎖と４本のミオシン軽鎖から成る。ミオシンの機能はミオシン軽鎖によって制御されており、ミオシン軽鎖は、筋収縮蛋白質のアクチンと結合する作用を有し、筋収縮の重要な働きを担っている。そこで、ミオシン軽鎖のアクチンとの結合作用を如何に変化させるかが問題である。
【発明の開示】
本発明は、筋弛緩を促進させて、筋弛緩障害等を改善して、冠循環を容易にさせることにより、心肥大、特に重症の大動脈弁狭窄症、大動脈閉鎖不全症における拡張期の冠循環が障害されて起こる狭心症、高血圧心疾患、特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症及び老人などでの心臓肥大や加齢により心筋の弛緩障害を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害又は心室性頻拍を治療又は予防する筋弛緩促進薬を提供することを目的としている。また、本発明は、トルサドポアンを治療又は予防することができるトルサドポアンの治療薬又は予防薬を提供することを目的としている。
本発明者は、実験的に、一般式〔１〕
2005105793.tif 000002
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000003
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩（以下、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩という）が、筋組織のアクチン−トロポミオシン複合体に対する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩの結合機能を増強させるものであり、このアクチン−トロポミオシン蛋白質複合体における筋収縮抑制蛋白質トロポニンＩの結合機能の増強により、トロポニンＩの筋収縮を抑制する機能を増強させて、筋の弛緩を促進することを発見した。さらに、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩がミオシン軽鎖とアクチン−トロポミオシン複合体との共沈殿をより増強することを発見した。
本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、筋収縮に影響が殆どない、筋肉即ち筋組織の弛緩を促進する機能を有することの知見に基づくものであり、従来の筋収縮に係る、例えば心不全の治療薬とは全く異なる心筋弛緩の促進に係る治療薬であって、カルシウム過負荷の状態においても、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、有効な筋弛緩を促進させることができる治療薬を提供するものである。また、本発明は、例えば、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、左室拡張障害を短時間の内に解消して左室拡張障害の治療をすることができ、特に、心筋内のカルシウム過負荷の状態においても有効である左室拡張障害の改善薬を提供するものである。そして、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋の弛緩を促進して、微小循環系の血流の流れを改善することから、微小循環系の血流改善薬の発明に至った。また、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含む薬剤が、心筋の収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋弛緩を促進して心筋の弛緩の障害を解消することを見出して、狭心症の治療薬、特に、心筋内小血管性狭心症の治療薬の発明に至った。さらにまた、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋弛緩を促進して心筋障害を解消することから、心筋弛緩が障害されている心不全、高血圧心、弁膜症及び肥大型心筋症といった疾病に対する治療薬の発明に至った。
さらに加えて、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋弛緩を促進して心筋弛緩の障害を急速に解消可能であることから急性心不全治療薬の発明に至った。さらに、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、筋弛緩を促進して、末梢血管の弛緩を容易にすることから高血圧の治療薬の発明に至った。また、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、Ｑ波からＴ波までの長さを延長させる作用を有するにも拘わらず、トルサドポアンを予防し、且つ治療し得る作用を有することを発見した。
本発明は、短時間に又は所望する時間に、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、筋弛緩を促進して、筋弛緩の障害を解消して、心筋、骨格筋及び平滑筋の筋組織の弛緩障害に由来する疾病に対する治療薬及び予防薬を提供すると共に、心室性不整脈のトルサドポアンに対する治療薬及び予防薬を提供することを目的としている。
即ち、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩、即ち、一般式〔１〕
2005105793.tif 000004
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000005
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−（カルボニル基）又は−ＣＨ２−（メチレン基）を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする筋弛緩促進剤にあり、また、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする筋弛緩促進剤であり、さらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬であり、そして、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心不全の治療薬にあり、そしてまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心不全の治療薬にあり、そしてさらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする急性肺水腫の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする急性肺水腫の治療薬にあり、これらの他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする微小循環系の血流改善薬にあり、これらの他にまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする微小循環系の血流改善薬にあり、これらに加えて、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする狭心症の治療薬にあり、これらに加えてまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする狭心症の治療薬にあり、以上の他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心筋障害の改善薬にあり、以上の他にまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心筋障害の改善薬にあり、さらにこれらの他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする高血圧の治療薬にあり、さらにこれらの他にまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする高血圧の治療薬にあり、そしてさらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心室性頻拍の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心室性頻拍の治療薬にあり、さらに加えて、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするトルサドポアンの治療薬及び予防薬にある。
本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩は、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩とすることができる。また、本発明において、筋弛緩薬の治療又は予防の対象とする筋は、心筋、特に左室心筋、骨格筋又は平滑筋である。
本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩、即ち、一般式〔１〕
2005105793.tif 000006
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000007
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−（カルボニル基）又は−ＣＨ２−（メチレン基）を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響が殆どない、心筋、骨格筋及び平滑筋等の筋の弛緩促進作用を有しているので、投与後、短時間又は所望する時間内に、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋を弛緩させて、例えば、心臓の左室を容易に拡張でき、また、心筋の冠循環、特に、心筋微小循環系における血液の流れを改善することができ、したがって、左室拡張不全等の左室拡張障害の治療薬及び心筋の冠循環改善薬、特に、心筋微小循環の改善薬を提供することができる。しかも、冠灌流は主として心臓の弛緩期に行われるので、心筋収縮に影響を殆ど与えずに、心筋の弛緩を容易にさせると、冠循環における血液の流れを改善することになるので、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、狭心症の治療薬及び予防薬とすることができる。
また、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響が殆どない、心筋、骨格筋及び平滑筋等の筋の弛緩促進作用を有しているので、投与後、短時間又は所望する時間内に、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋、骨格筋及び平滑筋を弛緩させて、例えば、高血圧による心臓肥大を伴う心筋内小血管の血液の流れを改善し、また、特発性肥大型心筋症及び大動脈弁下狭窄症における心筋障害並びに老人などの心筋弛緩障害における心筋内の小血管の血液の流れを改善することができるので、これらの心筋弛緩障害に基づく疾患の治療薬及び予防薬とすることができ、さらに、心筋弛緩障害を主とする心不全、例えば、急性又は慢性肺うっ血性心不全の治療薬及び予防薬とすることができる。さらにまた、本発明によると、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に殆ど影響が殆どない筋弛緩促進作用を有しており、投与後、短時間又は所望する時間内に、筋の収縮に影響を殆ど与えることなく、平滑筋を速やかに弛緩させて、末梢血管の弛緩を容易にすることができ、高血圧の治療薬とすることができる。そしてまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響が殆どない筋弛緩促進作用を有しており、投与後、短時間又は所望する時間内に、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、例えば、心筋の弛緩を促進して心室を容易に拡張でき、拡張期が短い頻発性の不整脈、特に心室性頻拍症の治療薬として役立てることができる。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響が殆どない、筋弛緩促進作用を有するものであり、例えば、心筋の虚血の際に、心筋細胞内のカルシウム過負荷により発生する不整脈を、投与後、短時間又は所望する時間内に治療又は予防でき、また、心筋細胞内のカルシウム過負荷時における、カテコールアミン誘発性の不整脈の治療薬又は予防薬として役立てることができる。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、不整脈などの疾患の治療時に誘発的に発現されるトルサドポアンを抑制するものであって、従来、困難とされていた、薬剤により誘発されるトルサドポアンの予防及び治療を可能にするものである。
以上のように、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、筋弛緩障害を伴う多くの疾患などの治療や予防に役立てることできるものであり、治療上極めて有用であり、社会にもたらす効果が大きい。
【図面の簡単な説明】  第１図は、実施例Ａのウサギに、メトキサミン投与下で、クロフィリウムを５０μｇ／ｋｇ／分で、また本件化合物を０．２ｍｇ／ｋｇ／分で持続静注した場合の、該持続静注開始後２３分後の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第１図の心電図において、心室性不整脈を認めない波形を符号１で示している。
第２図は、比較例Ａのウサギに、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）で持続静注した場合の、持続静注開始後概略２５分１８〜２４秒の間の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第２図の心電図においてクロフィリウム投与後２５分１９秒の時点を符号２の矢印で示し、心電図において現れたトルサドポアンの波形を符号３で示す。
第３図は、比較例Ａのウサギに、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）で持続静注した場合の、持続静注開始後概略２５分４１秒〜４８秒の間の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第３図の心電図において現れたトルサドポアンの波形を符号３で示し、心電図においてトルサドポアンの波形の発現後２５秒経過した時点を符号４の矢印で示す。
第４図は、比較例Ａのウサギに、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）を持続静注した場合の、持続静注開始後概略２２分２６秒〜２２分３３秒の間の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第４図の心電図において、クロフィリウム投与後２２分３０秒の時点を符合５の矢印で示し、その後に起こったトルサデポアンの波形を符号３で示す。
第５図は、比較例Ａのウサギに、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）を持続静注した場合の、持続静注開始後概略２３分１６秒〜２３分２３秒の間の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第５図の心電図においてトルサドポアンの波形３の発現後４９秒経過した時点を符号６の矢印で示す。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩は、日本国特許第７０３４０８号公報に物性及び製法が記載されており、既に公知の物質である。前記日本国特許第７０３４０８号公報には、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体として、（１）  ４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン［即ち、４−〔３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル〕プロピオニル〕−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン］、（２）  ４−［３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル〕プロピオニル］−２−（４−メトキシフェニル）−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン、（３）  ４−［１−（４−ベンジル）ピペリジニル）アセチル−７−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン、（４）  ４−［３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル）プロピル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン、（５）  ４−［３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル）プロピル］−２−（４−メトキシフェニル）−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン及び（６）  ４−［３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル）プロピオニル］−２−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピンが記載されている。これらの化合物は、少なくとも、筋弛緩促進作用を有するものであり、本明細書においては、これら化合物の中の４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン（以下、本件化合物という）を例に説明する。
本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩はこれら１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を包含するものであって、筋収縮に影響が殆どない、筋弛緩促進作用を有するものである。本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を含有する薬剤は、投与後、短時間又は所望する時間内において、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋、骨格筋及び平滑筋の弛緩を容易にさせる筋弛緩促進剤である。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を含有する薬剤は、投与後、短時間又は所望する時間内において、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、筋弛緩を促進させる、左室拡張障害、心不全、急性肺水腫、狭心症又は高血圧の治療薬及び／又は予防薬であり、さらに、微小循環系の血流改善薬及び／又は心筋障害の改善薬である。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を含有する薬剤は、投与後、短時間又は所望する時間内において、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋弛緩を促進させる、心筋虚血の際に心筋細胞内のカルシウム過負荷により発生する不整脈の治療薬であり、また、心筋虚血の際に心筋細胞内のカルシウム過負荷の状態で、カテコールアミン、例えばエピネフリンにより誘発される不整脈の治療薬である。
筋組織において、ミオシンとアクチンは、夫々が筋収縮蛋白質であり、トロポニン及びトロポミオシンが存在しない場合は、ミオシンとアクチンは、常に活性化された状態にあって、筋組織は収縮した状態となる。この状態の筋組織にトロポミオシンを加えてもこの筋組織の収縮した状態は変わらないが、Ｃａ受容蛋白質のトロポニンを加えると、筋組織の収縮は、筋組織内のＣａ＋＋イオン濃度で制御されることになる。ここでトロポニンは、トロポニンＩ、トロポニンＣ及びトロポニンＴの３つのサブユニットの複合体である。このサブユニットの中でトロポニンＩは、筋組織の収縮抑制成分であり、トロポニンＣはＣａ＋＋イオン結合成分であり、トロポニンＴは、筋組織の収縮抑制成分のトロポミオシンに結合する成分であり、トロポニン複合体をアクチンとトロポミオシンに繋げる。トロポニンＣがＣａ＋＋イオンと結合すると、トロポニンＩの筋収縮抑制作用が外れて、アクチンとミオシンによる筋組織の収縮が起こる。
従来から、アクチン−トロポミオシン複合体と、トロポニンＣ−Ｉ複合体を含む混合物を、２５℃で、１２０分間、１００，０００×ｇの超遠心力で処理して生成する沈殿物を分析して、前記沈殿物からアクチン−トロポミオシン複合体及びトロポニンＣ−Ｉ複合体を検出することにより、筋組織内でのアクチン−トロポミオシン複合体に対しトロポニンＣ−Ｉ複合体が結合していることを確認することができる。例えば、アクチン−トロポミオシン複合体と、トロポニンＣ−Ｉ複合体を含む混合物をカルシウムキレート剤のＥＧＴＡの存在下で、即ち、カルシウムイオンが存在しない状態で、超遠心力で処理すると、アクチン−トロポミオシン複合体とトロポニンＣ−Ｉ複合体とが結合して一緒に沈殿するが、この沈殿物が、アクチン−トロポミオシン複合体とトロポニンＣ−Ｉ複合体とにより形成された複合体であることは、前記沈殿物からトロポニンＩをＳＤＳ−ゲル電気泳動法により検出することにより確認することができる。このように、アクチン−トロポミオシン複合体とトロポニンＣ−Ｉ複合体が複合体を形成して沈殿する場合は、アクチン−トロポミオシン複合体にトロポニンＣ−Ｉが結合して、アクチン−トロポミオシン複合体にトロポニンＩの筋抑制作用が働いていることを示している。
しかし、カルシウムキレート剤のＥＧＴＡが存在しない場合は、即ち、カルシウムイオンが存在する状態では、超遠心力による共沈殿法で処理しても、トロポニンＩ又はトロポニンＣ−Ｉ複合体は、アクチン−トロポミオシン複合体と沈殿物を形成しない。このようにトロポニンＩ又はトロポニンＣ−Ｉ複合体が、アクチン−トロポミオシン複合体と沈殿物を形成しない場合は、アクチン−トロポミオシン複合体に、トロポニンＩ又はトロポニンＣ−Ｉの結合が存在しない場合に相当し、アクチン−トロポミオシン複合体にトロポニンＩの筋抑制作用が働かないことを示している。
ところで、本発明者らは、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩が添加されたアクチン−トロポミオシン複合体とトロポニンを含む混合物を、２５℃で、１２０分間、１００，０００×ｇの超遠心力により処理したときに、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の添加濃度に依存して、アクチン−トロポミオシン複合体にトロポニンＩが結合した沈殿物が得られることを発見した。このように、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩の存在は、アクチン−トロポミオシン複合体へのトロポニンＩの結合力を増強させて、トロポニンＩをアクチン−トロポミオシン複合体に結合させて沈殿を形成することが分かった。このことは、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩は、筋収縮を抑制するトロポニンＩに作用して、この作用を高めて、筋組織の弛緩を促進する作用を有するものであることを示している。
今日、一般に心不全の治療薬として使用されているβ−遮断薬のプロプラノロール、アクチン−トロポミオシン複合体及びトロポニンを含む混合物を、２５℃で、１２０分間、１００，０００×ｇの超遠心力により処理しても、アクチン−トロポミオシン複合体とトロポニンＩが結合した沈殿物を形成しない。このことは、前記β−遮断薬のプロプラノロールと前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩は、アクチン−トロポミオシン複合体及びトロポニンを含む混合物に対して、異なる作用を有することを示しており、前記β−遮断薬のプロプラノロールは、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩のように、アクチン−トロポミオシン複合体に対しトロポニンの結合力を増強させるものではないことを示している。
前記日本国特許第２７０３４０８号には、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、動力学的細胞死（ＫＤ）抑制作用を有しており、抗心筋梗塞療薬、特に急性心筋梗塞の治療及び予防治療薬剤、又は心筋壊死抑制剤として使用できることが示されている。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の製造方法及び各種測定データが示されている。前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体は、塩基性の窒素原子を有しているので、この位置において、酸付加塩が形成されるが、酸付加塩を形成する酸は、薬学的に許容されるべきものであり、このような薬学的に許容される塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩又はその他の無機酸塩、及びクエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、酒石酸塩又はその他の有機酸塩をあげることができる。
本発明において使用される前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩は、例えば、心筋弛緩促進剤として使用する場合の投与量は、化合物の種類、疾患の程度、患者の体重又は投与経路などにより異なっており、特に制限はないが、通常は、成人（平均体重６０ｋｇ）で、１日に０．１ｍｇ乃至１０００ｍｇ、好ましくは、５０ｍｇ〜２００ｍｇを、１日１〜３回程度で経口的又は非経口的（例えば、静脈注射）に投与することができる。投与する場合の剤形としては、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤及び注射剤などがある。このような剤形に形成する場合には、通常使用される製剤担体、賦形剤又は希釈剤を使用して、常法により形成することができる。
本発明において使用される前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体として、例えば、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン（以下、本件化合物という）について説明する。
本件化合物を含有する薬剤が注射用のアンプル剤である場合は、有効成分として本件化合物の１塩酸塩を使用し、等張化剤及びｐＨ調節剤を使用して調製される。この場合、等張化剤としてＤ−ソルビトールを使用することができ、ｐＨ調節剤としてクエン酸及び水酸化ナトリウムを使用することができる。この場合の一例を挙げれば、１０００ミリグラムのＤ−ソルビトール及び１０ミリグラムのクエン酸及び４０ミリグラムの本件化合物の１塩酸塩を、注射用の水に溶解し、溶解して得られた本件化合物の１塩酸塩の溶液に、水酸化ナトリウム溶液及びクエン酸を加えて、液のｐＨを３．２〜３．３に調節して、攪拌しながら残りの注射用の水を加えて全量を溶解し、この溶解して得られた溶液を濾過し、２０ミリリットルのアンプルに詰めて封入して、オートクレーブに入れて滅菌して調製される。その処方量の一例を示せば、本件化合物０．２％、Ｄ−ソルビトール５パーセント、クエン酸０．５％及び水酸化ナトリウム０．５％である。
また、本件化合物は、例えば、抗不整脈薬等の薬剤投与により誘発されるトルサドポアンの発現を抑制することができ、トルサドポアンの予防薬及び治療薬として有効である。本件化合物を投与することにより、ＱＴ延長を起す薬剤の投与や電解質異常により発生したトルサドポアンを停止させることができる。トルサドポアンは、一般に、その発生原因を除くことにより、消失するので、本件化合物の投与によりトルサドポアンを停止させるときは、本件化合物を投与すると共に、発生原因を除くことが好ましい。本件化合物は、例えば、ＱＴ延長を起す抗不整脈薬を使用して不整脈の治療を行う際に、抗不整脈薬と併用して、トルサドポアンを引起すことなく不整脈の治療を行うことができる。このように本件化合物を抗不整脈薬と併用する場合には、本件化合物は、例えば、抗不整脈薬の投与前に投与してもよく、又は抗不整脈薬と同時に投与してもよく、又は抗不整脈薬の投与後に投与してもよい。何れの場合にも、トルサドポアンを引起すことなく不整脈の治療を行うことができる。抗不整脈薬の投与後に本件化合物を投与する場合には、抗不整脈薬の投与後に、所定時間後に、又はトルサドポアンが確認されたところで、本件化合物を投与してトルサドポアンを抑制させることもできる。このように本件化合物は、不整脈を予防又は治療する作用を有するので、本件化合物を投与して、トルサドポアンの発生を抑制しながら、他方で、トルサドポアンの発生原因を除いて、トルサドポアンを停止させながら不整脈の治療を行うことができる。本発明において、トルサドポアンの予防及び治療にあたっては、本件化合物の総投与量は１ｍｇ〜４ｍｇ／ｋｇが望ましいが、症状により適宜増減することができる。また投与方法は経口、筋肉内、静注法などがあるが、より早い効果がみられるので静注法が望ましい。
【実施例】  以下に、本発明の実施例として、実験例を説明するが、本発明は、以下の例示及び説明により何ら限定されるものではない。
実験例１
本例においては、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体の薬学的に許容される塩として、本件化合物の１塩酸塩４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピンの１塩酸塩（以下、本件化合物という）を使用した。８週令の体重３００〜３３０ｇのウイスター（ｗｉｓｔａｒ）雄性ラットを用いた。麻酔はウレタン１０００ｍｇ／ｋｇとα−クロラロース８０ｍｇ／ｋｇを腹膜下に注射して行い、呼吸は自然呼吸とした。本例において、本件化合物の１００ｍｇを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。ノルエピネフリンの注入量を４０μｇ／ｋｇ／分として、ノルエピネフリンの１ｍｇを蒸留水４１μｌに溶かして、ノルエピネフリン溶液を調製した。
まず、前記ラットの右外頚静脈に、塩化カルシウム水溶液又は塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の持続注入用カテーテルを挿入し、また、同じく右総頚動脈より左心室にマイクロチップカテーテル（ミラー（Ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した。さらに、同じく右大腿静脈より被験薬溶液注入用カテーテルを挿入した。
心電図を第１誘導でとり、また、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図、左室圧を同時にパーソナルコンピュータに記録した。１分毎に、心電図のＲ波に一致する圧を左室拡張末期圧として２０拍を測定し、その平均値を求め、その測定時の左室末期圧とした。前記ラットの血圧，脈拍、心電図を１５分間モニターし、これらが安定したところで、前準備として右外頚静脈より、ラットの体重に応じて塩化カルシウム濃度を調整した塩化カルシウムの５％ブドウ糖溶液を、毎分１６．６μｌ（塩化カルシウムとして９．０ｍｇ／ｋｇ／分）で２０分間注入した。
次いで直ちに、右外頚静脈より、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液を、塩化カルシウムは、前記塩化カルシウム水溶液の用法及び容量を変更せずに、またノルエピネフリンは、ノルエピネフリンとして４０μｇ／ｋｇ／分で注入を開始し、この開始後も、この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続した。この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウム及びノルエピネフリンの右外頚静脈よりの注入（静注）を開始してから５分後に、右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、対照となる体重が３００ｇの第一のラットには、右大腿静脈より、対照となる被験薬の生理食塩水０．２ｍｌのみを３０秒掛けて注入して、対照１とした。また、同じく対照となる体重が３１０ｇの第二のラットには、前記対照１と同様に、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウム及びノルエピネフリンの右外頚静脈よりの注入（静注）を開始してから５分後に、右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、右大腿静脈より対照となる被験薬の溶剤の１％ＤＭＳＯ水溶液の０．２ｍｌのみを同様に３０秒掛けて注入して、対照２とした。さらに、実施例１に係る体重が３１０ｇの第三のラットには、前記対照１及び２と同様に、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウム及びノルエピネフリンの右外頚静脈よりの注入（静注）を開始してから５分後に、右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、右大腿静脈より被験薬の本件化合物０．３ｍｇ／ｋｇを含む１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを同様に３０秒掛けて注入した。さらに、実施例２に係る体重が３３０ｇの第四のラットには、前記対照１乃至３と同様に、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウム及びノルエピネフリンの右外頚静脈よりの注入（静注）を開始してから５分後に、右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、右大腿静脈より被験薬の本件化合物０．３ｍｇ／ｋｇを含む本件化合物の１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを同様に３０秒掛けて注入した。本例においては、前記被験薬の注入を３０秒掛けて行った後においても右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入は継続した。また、本例においては、対照１及び対照２については、前記被験薬を３０秒掛けて注入した後に、注入した被験薬に対し１／１０の濃度の希釈被験薬を１０μｌ／分で被験薬注入開始後１５分までの間に追加注入した。本例において、実施例１については、前記被験薬を０．３ｍｇ／ｋｇを含む本件化合物の１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを３０秒掛けて注入した後に、さらに前記本件化合物の１％ＤＭＳＯ水溶液を本件化合物０．０２ｍｇ／ｋｇ／分で被��薬注入開始後１５分までの間に追加注入した。しかし、実施例２については、前記被験薬を３０秒掛けて注入したのみで、被験薬の追加注入は行わなかった。夫々のラットについて、左室拡張末期圧は、夫々、１分毎に、心電図のＲ波に一致する圧を左室拡張末期圧として２０拍を測定し、その平均値から求めた。被験薬の注入開始から１５分後に、実験を終了した。この実験における５分毎の結果を次の表１に示す。
【表１】
2005105793.tif 000008
2005105793.tif 000009
（注１）  「前３０分」・・「前５分」の「前」は、被験薬の投与（注入）開始前を意味する。
（注２）  「０分」〜「１５分」は、被験薬静注開始後の時間０分乃至１５分を示す。
（注３）  対照１、対照２、実施例１及び実施例２の欄の丸カッコ内に被験薬を示す。被験薬を示す丸カッコ内において、本件化合物は、本件化合物と表示されている。
本例は２０乃至２５℃の室温において行った。本例において、塩化カルシウムの注入後からノルエピネフリンの静注開始直前において、左室拡張末期圧は、対照１において７．７〜８．６ｍｍＨｇであり、対照２において７．６〜８．６ｍｍＨｇであり、実施例１においても７．５〜８．６ｍｍＨｇであり、また実施例２においても、８．４〜９．３ｍｍＨｇであり、塩化カルシウムの注入後からノルエピネフリン静注開始直前までは、左室拡張末期圧は、実施例１及び２においても対照１及び２と殆ど変わらなかった。しかし、ノルエピネフリン静注開始１５分後（被験薬静注開始１０分後）から２０分後（被験薬静注開始１５分後）の左室拡張末期圧は、対照１においては、３０．４〜４７．３ｍｍＨｇと上昇し、また、対照２においても、３７．５〜４９．４ｍｍＨｇと上昇して、左室拡張不全の発症がみられた。これに対して、実施例１においては、ノルエピネフリン静注開始１５分後（被験薬静注開始１０分後）において、左室拡張末期圧は、１２．５ｍｍＨｇに上昇したが、被験薬の本件化合物の静注開始（投与開始）１５分後（ノルエピネフリン静注開始２０分後）において、左室拡張末期圧が１１．８ｍｍＨｇに下がった。この実施例１の左室拡張末期圧は、同時点における対照１及び２の左室拡張末期圧に対し、１／２以下の低い値であり、被験薬の本件化合物の静注により左室拡張不全を起こすに至らないことを示すものである。また、実施例２においても、ノルエピネフリン静注開始１５分後（被験薬静注開始１０分後）において、左室拡張末期圧は、１６．４ｍｍＨｇに上昇したが、被験薬の本件化合物の静注開始（投与開始）１５分後（ノルエピネフリン静注開始２０分後）において、左室拡張末期圧が１５．３ｍｍＨｇに下がった。この実施例２の左室拡張末期圧は、同時点における対照１及び２の左室拡張末期圧に対し、１／２以下の低い値であり、本件化合物の静注により左室拡張不全を起こすに至らないことを示すものである。
以上の実施例１及び２の結果からみて、被験薬の追加静注を行うことにより、被験薬の検査が容易となり、左室拡張末期圧の低下をはかることができる。また、本実験例の結果からみて、被験薬の本件化合物は左室拡張不全の治療薬及び予防薬として有効であるといえる。
実験例２
本件化合物による血圧への影響
本件においては、８週令の体重３１０及び３３０ｇのウイスター（ｗｉｓｔａｒ）雄性ラットを用いた。麻酔はウレタン１０００ｍｇ／ｋｇとαクロラロース８０ｍｇ／ｋｇを腹膜下に注射して行い、呼吸は自然呼吸とした。本例において、本件化合物の１００ｍｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。また、ノルエピネフリン１ｍｇを蒸留水４１μｌに溶かしてノルエピネフリン溶液を調製した。
本例は前記実験例１と同様に、２０乃至２５℃の室温において行われた。また、本例は、前記実験例１と同様に、前記ラットの右外頚静脈に塩化カルシウム水溶液又は塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の持続注入用カテーテルを挿入し、また、同じく右総頚動脈より大動脈にマイクロチップカテーテル（ミラー（ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した。
心電図を第１誘導でとり、また、Ａ／Ｄコンバーターを介して収縮期血圧、拡張期血圧をパーソナルコンピュータに記録した。前記ラットの血圧、脈拍及び心電図を１５分間モニターし、これらが安定したところで、前準備として右外頚静脈より、ラットの体重に応じて塩化カルシウム濃度を調整した塩化カルシウムの５％ブドウ糖溶液を、毎分１６．６μｌ（塩化カルシウムとして９．０ｍｇ／ｋｇ／分）で２５分間注入した。
次いで直ちに、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液を、塩化カルシウムは、前記塩化カルシウム水溶液の用法及び容量を変更せずに、また、ノルエピネフリンは、ノルエピネフリンとして４０μｇ／ｋｇ／分で注入を開始した。また、ノルエピネフリン静注５分後、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリの注入を持続しながら、対照となる体重が３１０ｇの第一のラットに、右大腿静脈より、被験薬の溶剤ＤＭＳＯの濃度１％水溶液の０．２ｍｌのみを３０秒掛けて注入して対照３とした。この対照３には、前記被験薬の注入後、被験薬の溶剤ＤＭＳＯの濃度１％水溶液を１０μｌ／分で被験薬静注開始後１５分まで追加注入した。また、対照３と同様に、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液によるノルエピネフリン静注５分後、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による前記塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、実施例３に係る体重が３３０ｇの第二のラットに、右大腿静脈より本件化合物０．３ｍｇ／ｋｇを含む１％ＤＭＳＯ溶液０．２ｍｌを、３０秒掛けて注入し、さらにその後、本件化合物０．０２ｍｇ／ｋｇを含む本件化合物の１％ＤＭＳＯ溶液を０．０２ｍｇ／ｋｇ／分で１４分間追加注入した。夫々のラットについて、２分毎に、収縮期血圧（ｍｍＨｇ）及び拡張期血圧（ｍｍＨｇ）を２０拍測定し、この２分毎の収縮期血圧及び拡張期血圧の測定は、被験薬の静注開始後１４分間に亘って行った。測定した収縮期血圧（ｍｍＨｇ）及び拡張期血圧（ｍｍＨｇ）から、次の式により平均血圧を求めた。
平均血圧＝〔（収縮期血圧＋拡張期血圧）×１／２〕・・・・（式）
その結果を次の表２に示す。
【表２】
2005105793.tif 000010
（注１）  「前３０分」・・「前５分」の「前」は、被験薬静注開始前を意味する。
（注２）  「０分」〜「１４分」は、被験薬静注開始後の時間０分乃至１４分を示す。
（注３）  対照３及び実施例３の欄の丸カッコ内に被験薬を示す。被験薬を示す丸カッコ内において、本件化合物は、本件化合物と表示されている。
本例において、ノルエピネフリンの静注（注入）開始後４分以降で、対照３については、平均血圧は略１６０ｍｍＨｇに上昇して推移するが、本件化合物を投与（注入）した本実施例３の場合には、ノルエピネフリンの静注開始後４分で、平均血圧は１６２ｍｍＨｇに達するが、それ以降は低下し、ノルエピネフリンの静注開始後１０乃至１４分では１３６〜１３４ｍｍＨｇの間の値となり、平均血圧の低下は明らかであった。この結果は、本件化合物が高血圧の治療薬として有用であることを示している。
実験例３
本件化合物による左室心室壁拡張能への影響についての組織ドプラー（Ｄｏｐｐｌｅｒ）法による検討
本件においては、９週令の体重３１０及び３２０ｇのウイスター（ｗｉｓｔａｒ）雄性ラットを用いた。麻酔はウレタン１０００ｍｇ／ｋｇとα−クロラロース８０ｍｇ／ｋｇを腹膜下に注射して行い、呼吸は自然呼吸とした。本例において、本件化合物の１００ｍｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。ノルエピネフリンを１ｍｇを蒸留水４１μｌに溶かしてノルエピネフリン溶液を調製した。
本例は前記実験例１と同様に、２０乃至２５℃の室温において行われた。本例においても、前記実験例１と同様に、前記ラットの右外頚静脈に塩化カルシウム水溶液又は塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の持続注入用カテーテルを挿入し、また、同じく右総頚動脈より大動脈にマイクロチップカテーテル（ミラー（ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した
心電図を第１誘導でとり、前記ラットの血圧、脈拍及び心電図を１５分間モニターし、これらが安定したところで、前準備として右外頚静脈より、５％ブドウ糖溶液中に溶解して調製した塩化カルシウム水溶液を、毎分１６．６μｌ（カルシウム：９．０ｍｇ／ｋｇ／分）で２５分間注入した。
次いで直ちに、右外頚静脈より、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液を、塩化カルシウムについて、その用法及び容量を変更せずに、またノルエピネフリンは、ノルエピネフリンとして４０μｇ／ｋｇ／分で注入（静注）を開始した。この開始後も、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続した。また、この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液によるノルエピネフリン静注５分後、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、対照となる体重が３１０ｇの第一のラットには、右大腿静脈より溶剤のＤＭＳＯの１％水溶液０．２ｍｌのみを３０秒掛けて注入して対照４とした。さらに、対照４と同様に、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液によるノルエピネフリン静注５分後、前記塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続しながら、本実施例３に係る体重が３２０ｇの第二のラットに、右大腿静脈より本件化合物０．３ｍｇ／ｋｇを含む１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを、対照４と同様に３０秒掛けて注入し、さらにその後、０．０２ｍｇ／ｋｇ／分で２０分間追加注入した。夫々のラットについて、超音波組織ドプラー法を用いて、左室心室壁拡張能を調べた。超音波診断装置としては、東芝株式会社製の超音波診断装置（Ｔｏｓｈｉｂａ  Ｐｏｗｅｒｖｉｓｉｏｎ  ＳＳＡ−３８０ＡＰＳＫ−７０ＬＴ）を使用し、１０ＭＨｚの超音波で検査した。夫々のラットについて、先ず、前胸部を剃毛して、心尖部からエコープローブを当てて、心尖部左室長軸層を描出し、僧帽弁後尖の基部にパルスドップラーのサンプルボリュームを置き、左室心室壁拡張能を左室心室壁の拡張期の壁速度〔Ｅａ波（ｍ／秒）〕を測定した。本例においては、左室心室壁拡張能は、組織ドプラー法により求めたノルエピネフリン静注前（投与前）の左室心室壁（即ち正常な左室心室壁）の拡張期の壁速度に対する、同じく組織ドプラー法により求めたノルエピネフリン静注後（投与後）の左室心室壁の拡張期の壁速度の比で示されている。その結果を次の表３に示す。
【表３】
2005105793.tif 000011
（注１）  「前５分」の「前」は、被験薬注入開始前を意味する。
（注２）  「０分」〜「３０分」は、被験薬静注開始後の時間０分乃至３０分を示す。
（注３）  対照４及び実施例４の欄の丸カッコ内に被験薬を示す。被験薬を示す丸カッコ内において、本件化合物は本件化合物と表示されている。
本例において、ノルエピネフリンの静注開始後５分で、対照４における左室心室壁の壁速度の正常の左室心室壁の壁速度（Ｅａ波）に対する速度比が０．８５に低下し、ノルエピネフリンの静注開始後３０分で、対照４における左室心室壁の壁速度（Ｅａ波）の正常の左室心室壁の壁速度（Ｅａ波）に対する速度比は０．５１に低下した。これに対して、本実施例３の場合には、ノルエピネフリンの静注開始後３０分で、左室心室壁の壁速度（Ｅａ波）の正常の左室心室壁の壁速度（Ｅａ波）に対する速度比が０．９５であり、殆ど変化がみられなかった。左室心室壁の壁速度は、単位時間当たりの心室壁の動く速度を示すから、この比が小さいことは心室壁の動きが鈍いことを示す。この結果は、本件化合物は、左室拡張障害による心不全の治療薬として、また予防薬として有用であることを示している。
実験例４
トロポニンＩとアクチン−トロポミオシン複合体の結合性の測定試薬
アクチン（ブタ筋肉由来）、トロポミオシン（鶏砂嚢由来）及びトロポニン（ブタ心筋由来）は、シグマアルドリッチ社から購入したものを使用し、その他の特に記していない試薬は、和光純薬株式会社より購入したものを使用した。
５００μｌ中で、６０ｍＭのＫＣｌ、同じく２０ｍＭのモプス（ＭＯＰＳ：３モルホリノプロパンスルホン酸（３ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ））、同じく２ｍＭｌのＭｇＣｌ２、０．０５μｇのペプスタチンＡ（ｐｅｐｓｔａｔｉｎ  Ａ）、同じく１５ｍＭの２−メルカプトエタノール（２−ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ）を含む反応液に、アクチン４．２μｇ、トロポミオシン２．１μｇ及びトロポニン１４μｇを加えて、検体５００μｌを調製した。この検体を２５℃の温度下で、２，０００×ｇの遠心力で１０分間遠心分離して沈殿物を除き、その上清を１０ｍＭのＥＧＴＡを含む新たな複数の試験管に夫々分注して、夫々を被験検体とした。
本例においては、第一の試験管の被験検体は、本件化合物を含まない、即ち、本件化合物の濃度が０モルの反応液であり、第二の試験管の被験検体は、本件化合物の濃度が１０−４モルの反応液であり、第三の試験管の被験検体は、本件化合物の濃度が１０−５モルの反応液であり、第四の試験管の被験検体は、本件化合物の濃度が１０−６モルの反応液であり、第五の試験管の被験検体は、本件化合物の濃度が１０−７モルの反応液である。各被験検体について、２５℃の温度で１２０分間反応させ、夫々について、２５℃の温度で１００，０００×ｇの遠心力を掛けて１２０分間遠心分離し、上清を除去した。分離された沈殿物について、沈殿物を浮遊させないように、反応液を静かに加え、再度吸引除去して、沈殿物を洗浄し、被験沈殿物とした。
夫々の洗浄した被験沈殿物にポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサンプルバッファーを加え、よく混合して被験沈殿物を懸濁させ、この懸濁液をゲル（ＰＡＧミニ「第一」１０／２０）上で、４０ｍＡで約１時間泳動した。泳動後、銀染色試薬〔２Ｄ−銀染色試薬「第一」（第一化学薬品株式会社製）〕で銀染色し、蒸留水で洗浄後乾燥した。このゲル電気泳動により得られ銀染色された夫々の蛋白質バンドについての沈殿量をデンシトメーターにより数値化した。蛋白質バンドにおける数値化された沈殿物の蛋白質は、ペプテドのアミノ酸配列からトロポニンＩであることが分かった。ゲル電気泳動の蛋白質バンドのペプチドについてのアミノ酸配列は、質量分析用試薬（和光純薬株式会社製質量分析用銀染色試薬）を用い、染色後、ゲル電気泳動の蛋白質バンドを切り取り、断片ペプチドを高速液体クロマトグラフィ装置〔（ＭＡＧＩＣ２００２）ミクロムバイオリソース  インク、（Ｍｉｃｈｒｏｍ  ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅｓ）社（米国）製〕を用いて分析した。この分析の結果、蛋白質バンドのペプチドのアミノ酸配列は、ＩＤＡＡＥＥＥＫＹＤＭＥＩＫであり、トロポニンＩと同定した。
第二乃至第五の被験沈殿物のトロポニンＩの沈殿量は、第一の本件化合物を含まない被験沈殿物（濃度０モル）のトロポニンＩの沈殿量に対する比により求めた。
比較例
また、本件化合物に対する比較検討化合物として、心不全薬として使用されているβ−遮断薬のプロプラノロールを使用して、トロポニンＩ、アクチン−トロポミオシンの結合性を実験例４と同じ手法により測定した。
即ち、５００μｌ中で、６０ｍＭのＫＣｌ、同じく２０ｍＭのモプス（ＭＯＰＳ：３モルホリノプロパンスルホン酸）、同じく２ｍＭのＭｇＣｌ２、０．０５μｇのペプスタチンＡ、同じく１５ｍＭの２−メルカプトエタノールを含む反応液に、アクチンを４．２μｇ、トロポミオシンを２．１μｇ及びトロポニンＩを１４μｇを加えて、検体５００μｌを調製した。この検体を２５℃の温度下で、２，０００×ｇの遠心力で１０分間遠心分離して沈殿物を除き、その上清を１０ｍＭのＥＧＴＡを含む新たな複数の試験管に夫々分注して、夫々を比較検体とした。
比較例において、第一の比較試験管の比較検体はプロプラノロールの濃度が０モルの反応液であり、第二の比較試験管の比較検体はプロプラノロールの濃度が１０−４モルの反応液であり、第三の比較試験管の比較検体はプロプラノロールの濃度が１０−５モルの反応液であり、第四の比較試験管の比較検体はプロプラノロールの濃度が１０−６モルの反応液であり、第五の比較試験管の比較検体はプロプラノロールの濃度が１０−７モルの反応液である。各比較検体について、２５℃の温度で１２０分間反応させ、夫々について、２５℃の温度で１００，０００×ｇの遠心力を掛けて１２０分間遠心分離し、上清を除去した。分離された沈殿物について、沈殿物を浮遊させないように、反応液を静かに加え、再度吸引除去して、沈殿物を洗浄し、比較沈殿物とした。
夫々の洗浄した比較沈殿物にポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサンプルバッファーを加え、よく混合して比較沈殿物を懸濁させ、この懸濁液をゲル（ＰＡＧミニ「第一」１０／２０）上で、４０ｍＡで約１時間泳動した。泳動後、銀染色試薬〔２Ｄ−銀染色試薬「第一」（第一化学薬品株式会社製）〕で銀染色し、蒸留水で洗浄後乾燥した。このゲル電気泳動により得られ銀染色された夫々の蛋白質バンドについての沈殿量をデンシトメーターにより数値化した。
第二乃至第五の比較沈殿物のトロポニンＩの沈殿量は、プロプラノロールを含まない比較沈殿物（プロプラノロール濃度０モル）におけるトロポニンＩの沈殿量に対する比により求めた。
実験例４の本件化合物を使用した場合の被験沈殿物のトロポニンＩの沈殿量と、比較例のプロプラノロールを使用した場合の比較沈殿物のトロポニンＩの沈殿量との比較検討結果を次の表４に示す。
【表４】
2005105793.tif 000012
（注）  表４においては、本件化合物は、本件化合物と表示されている。
表４には、実施例５における本件化合１塩酸塩物の各濃度でのトロポニンＩの沈殿量及び比較例におけるプロプラノロールの各濃度でのトロポニンＩの沈殿量が示されている。表４の実施例５においては、本件化合物使用した場合においては、トロポニンＩの沈殿量は、本件化合物の濃度（モル）が、１０−７から１０−４に増加するのに伴って１．２から２．８と増加している。しかし、比較例のプロプラノロールを使用した場合においては、プロプラノロールの濃度が１０−７から１０−４に増加してもトロポニンＩの沈殿量は、０．９から１．１の間であり殆ど変化していない。表４の実施例５にみられる本件化合物によるトロポニンＩの沈殿量の増加は、トロポニンＩとアクチン−トロポミオシン複合体との結合の増加に由来するものである。このことは、本件化合物が、トロポニンＩとアクチン−トロポミオシン複合体との結合量を多くして、トロポニンＩを介して筋弛緩を行うことを意味しており、したがって、本件化合物が、トロポニンＩを介して筋弛緩を促進することを示すものである。
実験例５
本例においては、例４において使用した実験試料トロポニンに含まれるミオシン軽鎖の沈殿量に対する本件化合物の作用を調べた。
本例においては、実験例４の手法により被験沈殿物を形成した。
但し、本例においては、
（１）  例４における被験検体を、カルシウムイオン（Ｃａ＋＋）及び本件化合物を共に含まないものとし、例４に倣って被験沈殿物を調製した（実験番号１）。
（２）  実験例４における被験検体を、カルシウムイオン（Ｃａ＋＋）濃度（モル）を１０−５で、本件化合物濃度（モル）を０のものとし、例４に倣って被験沈殿物を調製した（実験番号２）。
（３）  例４における被験検体を、カルシウムイオン（Ｃａ＋＋）濃度（モル）が０で、本件化合物濃度（モル）を１０−３のものとし、例４に倣って被験沈殿物を調製した（実験番号３）。及び
（４）  例４における被験検体を、カルシウムイオン（Ｃａ＋＋）濃度（モル）が１０−５で、本件化合物濃度（モル）を０のものとし、例４に倣って被験沈殿物を調製した（実験番号４）。
このようにして得られた各被験沈殿物に、ポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサンプルバッファーを加え、よく混合して被験沈殿物を懸濁させ、この懸濁液をゲル（ＰＡＧミニ「第一」１０／２０）上で、４０ｍＡで約１時間泳動した。泳動後、銀染色試薬〔２Ｄ−銀染色試薬「第一」（第一化学薬品株式会社製）〕で銀染色し、蒸留水で洗浄後乾燥した。このゲル電気泳動により得られ銀染色された夫々の蛋白質バンドについての沈殿量をデンシトメーターにより数値化した。蛋白質バンドにおける数値化された沈殿物の蛋白質は、ペプチドのアミノ酸配列からミオシン軽鎖であることが分かった。ゲル電気泳動の蛋白質バンドのペプチドについてのアミノ酸配列は、質量分析用試薬（和光純薬株式会社製質量分析用銀染色試薬）を用い、染色後、ゲル電気泳動の蛋白質バンドを切り取り、断片ペプチドを高速液体クロマトグラフィ装置〔（ＭＡＧＩＣ２００２）ミクロム  バイオリソース  インク、（Ｍｉｃｈｒｏｍ  ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅｓ）社（米国）製〕を用いて分析した。この分析の結果、蛋白質バンドのペプチドのアミノ酸配列は、ＨＶＬＡＴＬＧＥＫ及びＩＴＬＳＱＶＧＤＶＬＲであり、ミオシン軽鎖と同定した。
実験番号１乃至４について得られた沈殿量を次の表５に示す。
【表５】
2005105793.tif 000013
（注）  ミオシン軽鎖の沈殿量は、実験番号１における沈殿量を１．０とし、それに対する比で示されている。
（注）  表５においては、本件化合物は、本件化合物と表示されている。
本例において、ミオシン軽鎖の沈殿量は、カルシウムイオン（Ｃａ＋＋）濃度が１０−５モル（Ｍ）である場合の被験沈殿物（実験番号２及び４）に比して、カルシウムイオンが存在しない場合の被験沈殿物（実験番号１及び３）（弛緩状態）の方が増加しており、また、ミオシン軽鎖の沈殿量は、本件化合物が存在しない場合の被験沈殿物（実験番号１及び２）に比して、本件化合物を１０−３モルの濃度で存在させた場合の被験沈殿物（実験番号３及び４）の方が増加している。さらに、本件化合物を１０−３モルの濃度を存在させた場合の被験沈殿物（実験番号３及び４）におけるミオシン軽鎖の沈殿量は、カルシウムイオンを存在させた場合に比べてカルシウムイオンを存在させない場合の方が、僅かに多いが、殆ど同じ量とみられる。このように、本件化合物の存在は、ミオシン軽鎖の沈殿量を増加させることを示しており、これは、カルシウムイオン濃度が０モルの場合であっても、カルシウムイオン濃度が１０−５モルの場合と同様であることを示している。したがって、これらのことは、本件化合物が、カルシウムイオンの有無に係わらず筋肉の弛緩を増強させることを示すものである。
実験例６
トロポニンＩとアクチン−トロポミオシン複合体の結合性の測定
蒸留水２３μｌにトロポニンＩ〔カルバイオケム（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ）社製〕０．４μｇ、トロポニンＣ（アブカム〔ａｂｃａｍ）社〕０．５４μｇを含む溶液を４本の試験管に作成し、１００，０００×ｇ  １時間遠心分離（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ１２０ＦＣ）後、その上清２０μｌを採取し、４℃で保存した。次に別の試験管４本に蒸留水９９．４μｌの中に反応液として６００ｍＭ濃度のＫＣｌ水溶液５０μｌ、２００ｍＭ濃度のモプス〔ＭＯＰＳ（３−モルホリノプロパンスルホン酸〔３−Ｎ（ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ〕同仁堂「ＤＯＪＩＮＤＯ」社製〕水溶液５０μｌ、２０ｍＭ濃度のＭｇＣｌ２水溶液５０μｌ、１０ｍｇ／ｍｌの濃度のペプスタチンＡ〔ｐｅｐｓｔａｔｉｎ（（シグマ（ＳＩＧＭＡ）社製〕溶液５μｌ、１５０ｍＭ濃度の２−メルカプトメタノール（ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ）（シグマ（ＳＩＧＭＡ）社製）５０μｌを加えた。さらに、その後１ｍｇ／ｍｌ濃度のアクチン〔シグマ（ＳＩＧＭＡ）社〕３．２μｌ、１ｍｇ／ｍｌ濃度のトロポミオシン（ＳＩＧＭＡ）２．４μｌを加え混和後、２５℃で２０００×ｇの遠心力で５分間遠心分離機（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ  ＣＦ７Ｄ２）により遠心分離した。その上清を各々新しいチューブ４本に移し、さらに５０ｍＭ濃度のＡＴＰ（アデノシン５′−三リン酸）溶液を５０μｌ加え、攪拌しながら２５℃で３０分インキュベートした。
次いで、先に準備したトロポニンＩとトロポニンＣの１００，０００×ｇ上清２０μｌを各試験管に加え、さらに２５℃で攪拌しながら、３０分インキュベートした。次に、蒸留水のみあるいは最終濃度が１０−７、１０−６、１０−５Ｍになるように調整した被験液の本件化合物を５０μｌ加えて、攪拌しながら２５℃で３０分インキュベートした。
その後、Ｃａ２＋溶液とＥＧＴＡ溶液を混合して最終濃度が１０−６Ｍになるように調整した溶液５０μｌ加え、最終全液量が５００μｌ／１ｔｕｂｅとなるようにした。この溶液を２５℃で断続攪拌しながら６０分インキュベートした後、２５℃  １００，０００×ｇで１２０分間遠心分離機（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ  １２０ＦＣ：商品名）により遠心分離した。
遠心分離後、上清を除去し、沈殿物を浮遊させないように上記の反応液（Ｃａ２＋と薬物をのぞく）１ｍｌを静かに加え再度吸引除去し、この操作をさらに２回繰り返して沈殿を合計３回洗浄した。
洗浄した溶液を完全に除去し、沈殿物にポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサンプルバッファーを２０μｌ加え、よく混和し沈殿物を懸濁させ、９５℃で５分加熱処理後、ＰＡＧミニ「第一」１０／２０ゲル（第一化学薬品）に注入し、４０ｍＡで約１時間泳動した。泳動後、２Ｄ−銀染色試薬・ＩＩ「第一」（第一化学薬品）で銀染色し、蒸留水で洗浄後乾燥させた。その後スキャナー〔ＥＰＳＯＮ  ＥＳ−８５００（商品名）〕で取り込み、解析ソフトＩｍａｇｅＪ（商品名）により分析した。
その結果次の表６に示す。
【表６】
2005105793.tif 000014
2005105793.tif 000015
本例において、試験管のカルシウム濃度を１０−６Ｍとし、本件化合物を含まない時のトロポニンＩ量１．０とした場合、本件化合物を１０−７，１０−６，１０−５Ｍ濃度の共沈殿量は各々１．４、３．４、５．４であり、本件化合物の濃度に依存してトロポニンＩの沈殿量が増えることが明らかとなった。本例において、アクチンは、ブタの骨格筋由来であり、分子量４３キロダルトンであり、シグマ（ＳＩＧＭＡ）社であった。また、トロポミオシンは、ニワトリの砂嚢由来であり、分子量３６キロダルトンであり、シグマ（ＳＩＧＭＡ）社であった。トロポニンＩは、ヒトの心筋由来で分子量２４キロダルトンであり、カルバイオケム（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ）社製であった。また、トロポニンＣは、ヒト心筋リコンビナント由来であり、分子量１８キロダルトンであり、アブカム（ａｓｃａｍ）社であった。これらは、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分離され、各バンドは明確に識別できた。
本例においては、夫々、超遠心分離法により凝集成分が分離された０．１乃至１．２μｇのトロポニンＩ及び０．２乃至１．６μｇのトロポニンＣを含み、さらに、０．５乃至３ｍｇ／ｍｌの濃度のアクチン溶液３．２μｌ、０．５乃至３ｍｇ／ｍｌの濃度のトロポミオシン溶液２．４μｌ及び４乃至６ｍＭのＡＴＰを含む溶液の混合溶液が使用される。この混合溶液は、例えば、反応前に、全量で５００マイクロリットルに調製され、したがって、これらの薬物は、この調製される濃度範囲内の濃度において使用することができる。
実験例７
トロポニンＩとアクチン−トロポミオシン複合体の結合性の測定
蒸留水２３μｌにトロポニンＩ〔カルバイオケム（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ）社製〕０．４μｇ、トロポニンＣ〔アブカム（ａｂｃａｍ）社〕０．５４μｇを含む溶液を４本の試験管に作成し、１００，０００×ｇの遠心力で、１時間遠心分離機（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ  １２０ＦＣ）により遠心分離した後、その上清２０μｌを採取し、４℃で保存した。次に別の試験管４本に蒸留水９９．４μｌの中に反応液として６００ｍＭのＫＣｌ溶液５０μｌ、２００ｍＭモプス〔ＭＯＰＳ（Ｎ−ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）〕〔同仁堂（ＤＯＪＩＮＤＯ社製〕５０μｌ、２０ｍＭ濃度のＭｇＣｌ２  ５０μｌ、１０μｇ／ｍｌ濃度のペプスタチンＡ（ｐｅｐｓｔａｔｉｎ  Ａ）〔シグマ（ＳＩＧＭＡ）社製〕溶液５μｌ、１５０ｍＭ濃度の２−メルカブトエタノール〔２−ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ（ＳＩＧＭＡ社製）〕溶液５０μｌを加えた。さらに、その後１ｍｇ／ｍｌ濃度のアクチン（ＳＩＧＭＡ社製）溶液３．２μｌ、１ｍｇ／ｍｌ濃度のトロポミオシン（ＳＩＧＭＡ社製）溶液２．４μｌを加え混和後、２５℃  ２０００×ｇの遠心力で５分間遠心分離機（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ  ＣＦ７Ｄ２）により遠心分離した。その上清を各々新しいチューブ４本に移し、さらに５０ｍＭ濃度のＡＴＰ溶液を５０μｌ加え、攪拌しながら２５℃で３０分インキュベートした。次いで、先に準備したトロポニンＩとトロポニンＣの１００，０００×ｇの遠心力で遠心分離した分離物の上清２０μｌを各試験管に加え、さらに２５℃で攪拌しながら、３０分間インキュベートした。次に、最終濃度が１０−５Ｍになるように調整した本件化合物を被験液として各々の試験管に５０μｌ加えて、攪拌しながら２５℃で３０分インキュベートした。
その後、Ｃａ２＋溶液とＥＧＴＡ溶液を混合して最終カルシウム濃度が１０−８、１０−７．１０−６及び１０−５Ｍになるように調整した溶液の５０μｌを加え、最終全液量が、１管（ｔｕｂｅ）あたり、５００μｌ／１となるようにした。この溶液を２５℃で断続攪拌しながら６０分インキュベートした後、２５℃  １００，０００×ｇで１２０分間遠心分離機（ＨＩＴＡＣＨＩ  ｈｉｍａｃ  １２０ＦＣ）により遠心分離した。遠心分離後、上清を除去し、沈殿物を浮遊させないように上記の反応液（Ｃａ２＋と薬物を除く）１ｍｌを静かに加え再度吸引除去し、この操作をさらに２回繰り返して沈殿を合計３回洗浄した。
洗浄した溶液を完全に除去し、沈殿物にポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）用のサンプルバッファーを２０μｌ加え、よく混和し沈殿物を懸濁させ、９５℃で５分加熱処理後、ＰＡＧミニ「第一」１０／２０ゲル（第一化学薬品）にアプライし、４０ｍＡで約１時間電気泳動した。泳動後、２Ｄ−銀染色試薬・ＩＩ「第一」（第一化学薬品）で銀染色し、蒸留水で洗浄後乾燥させた。その後スキャナー（ＥＰＳＯＮ  ＥＳ−８５００）で取り込み、解析ソフトＩｍａｇｅＪにより分析しトロポニンＩの沈殿量を求めた。その結果を表７に示す。
【表７】
2005105793.tif 000016
本例において、試験管の本件化合物濃度を１０−５Ｍとし、カルシウム濃度を１０−８Ｍで沈殿するトロポニンＩ量を１．０とした場合、カルシウム濃度を１０−７、１０−６、１０−５と高くすると、おのおの０．９４、０．８１、０．７８と沈殿量が減少することが明らかとなった。このことは、カルシウム濃度が低い方がトロポニンＩ沈殿量が多くなることを示しており、すなわち、本例においては、本件化合物によるトロポニンＩの沈殿量は、カルシウム濃度に影響されることを示している。
実験例８
本件化合物によるクロフィリウムにより誘発されるトルサドポアンの抑制
本例においては、体重が２．８ｋｇから３．２ｋｇの４匹の白色ウサギを用いた。夫々のウサギについて、麻酔はメトヘキタールソジウム（Ｍｅｔｈｏｈｅｘｉｔａｌ  ｓｏｄｉｕｍ）５ｍｇ／ｋｇの静脈麻酔で行なった。また、夫々のウサギについて、気管内挿管による人工呼吸下で、右外頸静脈に本件化合物ならびに実験用薬剤の注入用カテーテルを挿入し、右総頚動脈より血圧測定用のマイクロチップカテーテル（ミラー（Ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した。
本件化合物の１００ｍｇを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶解して、本件化合物溶液を調製し、この溶液を４℃の温度で保存した。
夫々のウサギについて、心電図を第２誘導でとり、また、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図及び血圧を同時にパーソナルコンピュータに記録した。本例においては、心電図において、多形成心室性頻拍の波形が６以上連続して続くことでトルサドポアンとした。本例において、トルサドポアンについては、クロフィリウムの投与から３０分間に亙って、心電図により、トルサドポアンの発現回数を測定した。本例において、α刺激薬のメトキサミンは、トルサドポアンを惹起させ易くするために使用された。また、本例において、本件化合物、メトキサミン及びクロフィリウムは生理食塩水に混ぜて投与した。
本例においては、実施例Ａとして、体重が３．０ｋｇの第１のウサギを使用し、また、実施例Ｂとして、体重が３．１ｋｇの第２のウサギを使用した。一方、比較例Ａとして、体重が２．８ｋｇの第３のウサギを使用し、比較例Ｂとして、体重が３．１ｋｇの第４のウサギを使用した。
本例において、実施例Ａ及びＢのウサギには、まず、メトキサミン（Ｍｅｔｈｏｘａｍｉｎｅ）を１５μｇ／ｋｇ／分で投与し、その１０分後に、クロフィリウム（Ｃｌｏｆｉｌｉｕｍ）を５０μｇ／ｋｇ／分で投与を開始した。クロフィリウムの投与は投与開始後２０分間に亙って投与した。例Ａ及びＢのウサギに対しては、このクロフィリウム投与開始と同時に、本件化合物を０．２ｍｇ／ｋｇ／分で静脈内に投与を開始した。実施例Ａ及びＢのウサギに対して、本件化合物の投与は、クロフィリウムの投与終了後、さらに１０分間に亙って続けられた。実施例Ａ及びＢのウサギについての、トルサドポアンの発現に係る心電図による観察は、クロフィリウ厶の投与終了後さらに１０分を経過するまで、即ち、クロフィリウム投与後３０分まで続けられた。この間本件化合物の投与は継続されているので、前記心電図による観察は、本件化合物の投与されている間継続して行われている。
本例において、比較例Ａ及びＢのウサギには、本件化合物を投与しないで、それ以外は、実施例Ａ及びＢのウサギと同様に行った。即ち、比較例Ａ及び比較例Ｂのウサギには、メトキサミンを１５μｇ／ｋｇ／分で投与し、その１０分後に、クロフィリウムを５０μｇ／ｋｇ／分で投与を開始した。クロフィリウムの投与は開始後２０分間に亙って投与した。本例において、比較例Ａ及びＢのウサギについての、トルサドポアンの発現についての心電図による観察は、クロフィリウムの投与終了後さらに１０分を経過するまで、即ち、クロフィリウム投与後３０分まで続けられた。
図１乃至５を参照して、心電図による観察結果について説明する。
実施例Ａ及びＢのウサギについて、メトキサミン投与下で、クロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）及び本件化合物を０．２ｍｇ／ｋｇ／分で持続静注開始後３０分に亙って心電図により観察した。しかし、この実施例Ａ及びＢのウサギについての心電図による観察では、図１に示すように、心電図は、心室性不整脈を認めない波形１であり、持続静注開始後２３分後においてトルサドポアンの発現は確認できなかった。また、持続静注開始後３０分経っても、トルもサドポアンの発現は確認できなかった。これは、本件化合物によりトルサドポアンの発生が完全に抑制されたことを示している。
比較例Ａのウサギについて、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）で持続静注開始後３０分に亙って心電図により観察した。比較例Ａのウサギについての心電図による観察では、図２に示すように、クロフィリウム投与後２５分１９秒（矢印２で示す時点）でトルサドポアンの波形３が発現したことが確認された。この発現したトルサドポアンの波形３は、図３に示すように、発現後２５秒経って（矢印４で示す時点）止まったが、その後反復して発生した（図３の範囲外であり、図示されていない）。
比較例Ｂのウサギについて、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）を持続静注開始後３０分に亙って心電図により観察した。比較例Ｂのウサギについての心電図による観察では、図４に示すように、クロフィリウム投与後２２分３０秒（矢印５で示す時点）でトルサドポアンの波形３が発現したことが確認された。この発現したトルサドポアンの波形３は、図５に示すように、発現後４９秒（矢印６で示す時点）経って止まったが、その後反復して発生した（図５の範囲外であり、図示されていない）。これらの心電図による観察結果を表８に示す。
【表８】
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比較例Ａ及びＢにおいて、クロフィリウムの投与により、何れもトルサドポアンが引起されたが、クロフィリウムの投与と共に本件化合物を投与した実施例Ａ及びＢにおいては、何れもトルサドポアンは引起されなかつた。これは、本件化合物がクロフィリウムの投与後も継続するトルサドポアンの発生を完全に抑制したことを示している。また、本例は、トルサドポアンが、薬剤誘発性又は電解質異常の場合は、トルサドポアンの発生原因を除くことにより、トルサドポアンは消失するので、この場合は、本件化合物を投与すると共に、トルサドポアンの発生原因を除くことになる。本件化合物の投与は、トルサドポアンを引起すことなく不整脈を停止させる作用をも有するので、トルサドポアンの発生を抑制しながら、トルサドポアンの発生原因を除いて、トルサドポアンを伴う不整脈の治療を行うことができる。
本例においては、過去、実験的にトルサドポアンを確認するために一般的にクロフィリウムが使用しされているところから、本例においても、トルサドポアンを誘発させる薬剤として、クロフィリウムを使用したが、クロフィリウムに換えて、ボーガン  ウイリアムズ（Ｖａｕｇｈａｎ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ）によって提唱された不整脈治療薬の分類でクラス第ＩＡ群のナトリウムチャンネルの中程度の抑制作用を有する薬剤のジソピラミド、キニジン、ブロカインアミド又はプロパフェノン、また、同分類の第ＩＩＩ群のシンビット又はアミオダロンなどの、再分極遅延を招く不整脈の治療薬を使用することができる。
実験例９
本件化合物による血圧への影響
実験例２と同様の手法で本件化合物による血圧への影響を調べた。本例においては、対照例及び実施例６乃至９は、夫々、チオペンタールナトリウム２０ｍｇ／ｋｇ単回静脈内投与で麻酔し、気管内挿管し、呼吸には人工呼吸器（ＴｙｐｅＡＲ１ナリシゲ社製）を用いた。本例においても、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体の薬学的に許容される塩として、本件化合物を使用した。
本件においては、体重が２．７ｋｇから２．９ｋｇの５匹の白色ウサギを用いた。対照液を投与した対照例１のウサギは体重が２．８ｋｇであり、本件化合物を０．０４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例６のウサギは体重が２．７ｋｇであり、同じく本件化合物を０．０４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例７のウサギは体重が２．７ｋｇであった。また、本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例８のウサギは体重が２．９ｋｇであり、本件化合物を０．４ｍ／ｋｇ／分を投与した実施例９のウサギは体重が２．８ｋｇであった。
夫々のウサギについて、麻酔はチオペンタールナトリウム２０ｍｇ／ｋｇ単回静脈内投与麻酔し、気管内挿管し、呼吸は人工呼吸器（ＴｙｐｅＡＲ１，ナリシゲ社製）を用いた。その後、耳静脈よりαクロラロース９０ｍｇ／ｋｇ／２０分を注入した。本件化合物の１００ｍｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。
本例について、右外頸静脈に本件化合物ならびに実験用薬剤の注入用カテーテルを挿入し、右総頚動脈より血圧測定用のマイクロチップカテーテル（ミラー（Ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した。心電図を第２誘導でとりウサギの血圧、心拍数、心電図を１０分間モニターし、これらが安定したところで、夫々のウサギについて、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図及び収縮期血圧、拡張期血圧をパーソナルコンピュータに記録した。対照液を投与した対照例には、対照液として０．１％ＤＭＳＯを含む５％ブドウ糖溶液を０．１ｍｌ／分の速度で１０分間投与した。本件化合物を投与した実施例６及び７では、本化合物を含む５％ブドウ糖水溶液を０．１ｍｌ／分の速度で注入し、このときの本化合物の注入量は０．０４ｍｇ／ｋｇ／分であった。また実施例８及び９では、本化合物を含む５％ブドウ糖水溶液を０．１ｍｌ／分の速度で注入し、このときの本化合物の注入量は０．４ｍｇ／ｋｇ／分であった。
対照例及び実施例の各々のウサギについて、被験液投与前、投与５分及び１０分後に、収縮期血圧（ｍｍＨｇ）及び拡張期血圧（ｍｍＨｇ）を５拍測定し、測定した収縮期血圧（ｍｍＨｇ）及び拡張期血圧（ｍｍＨｇ）から、次の式により平均血圧（ｍｍＨｇ）を求めた。
平均血圧（ｍｍＨｇ）＝〔（収縮期血圧＋拡張期血圧）×１／２〕・・・（式）
実験結果は以下の表９の通りである。
【表９】
2005105793.tif 000018
夫々、対照被験薬を投与前の平均血圧を１００％とすると、対照例の１０分後の平均血圧は１００．５％で、対照被験薬投与前後で殆ど変化がなかった。
本件化合物を投与前の平均血圧を１００％とすると、０．０４ｍｇ／ｋｇ／分で投与した実施例６は１０分後１００．４％で、実施例７は１０６．５％で正常対照例と同様であり、平均血圧には殆ど変化がなかった。本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例では投与前を１００％とすると、実施例８では、投与前の平均血圧に対し、５分後には４８．２％となり、１０分後には５６．４％となり、投与前に比べ、４０％以上低下している。また、本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例９については、投与前の平均血圧に対し、５分後には６６．０％となり、１０分後には４７．４％となり、投与前に比べ、５０％以上低下している。このことは本件化合物が血圧を濃度依存的に低下させる作用があり、高血圧の治療薬として使用可能であることを示している。
実験例１０
本件化合物による心拍数および心電図のＰＱ間隔（心房から心室までの刺激伝導系を伝わる速度）への影響
本例においても、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体の薬学的に許容される塩として、本件化合物の１塩酸塩４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピンの１塩酸塩（以下、本件化合物という）を使用した。
本例においては、体重が２．７ｋｇから２．９ｋｇの５匹の白色ウサギを用いた。対照液を投与した対照例１のウサギは体重が２．８ｋｇであり、本件化合物を０．０４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１０のウサギは体重が２．７ｋｇであり、同じく本件化合物を０．０４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１１のウサギは体重が２．７ｋｇであった。また、本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１２のウサギは体重が２．９ｋｇ、本件化合物を０．４ｍ／ｋｇ／分を投与した実施例１３のウサギは体重が２．８ｋｇであった。
夫々のウサギについて、麻酔はチオペンタールナトリウム２０ｍｇ／ｋｇ単回静脈内投与麻酔し、気管内挿管し、呼吸は人工呼吸器（ＴｙｐｅＡＲ１ナリシゲ社製）を用いた。その後、耳静脈よりαクロラロース９０ｍｇ／ｋｇ／２０分を注入した。本件化合物の１００ｍｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。
本例について、右外頸静脈に本件化合物ならびに実験用薬剤の注入用カテーテルを挿入し、右総頚動脈より血圧測定用のマイクロチップカテーテル（ミラー（Ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入した。心電図を第２誘導でとりウサギの血圧、心拍数、心電図を１０分間モニターし、これらが安定したところで、夫々のウサギについて、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図及び収縮期血圧、拡張期血圧をパーソナルコンピュータに記録した。対照液を投与した対照例には、対照液として０．１％ＤＭＳＯを含む５％ブドウ糖を０．１ｍｌ／分の速度で１０分間投与した。本件化合物を投与した実施例１０及び１１では、本件化合物を含む５％ブドウ糖水溶液を０．１ｍｌ／分の速度で注入した。このときの本件化合物の注入量は０．０４ｍｇ／ｋｇ／分であった。また、本件化合物を投与した実施例１２及び１３では、本件化合物を含む５％ブドウ糖水溶液を０．１ｍｌ／分の速度で注入した。このときの本件化合物の注入量は０．４ｍｇ／ｋｇ／分で注入した。
対照例、実施例の各々のウサギで心拍数およびＰＱ間隔を被験液投与前、投与５分、１０分後に、測定した。ＰＱ間隔はＰ波の始まりからＱ波の始まりまでの時間で、心房から心室まで電気的刺激が伝わる速度を表している。被験液投与前を１００％として、其の比を併記した。
心拍数についての測定結果は次の表１０に示す通りである。
【表１０】
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夫々、対照被験薬を投与前の心拍数を１００％として、その後の心拍数を比較すると、投与しない対照例の測定開始１０分後の心拍数は９８．２％で、対照被験薬投与前後で殆ど変化がなかった。
本件化合物を投与した場合は、投与前の心拍数を１００％とすると、０．０４ｍｇ／ｋｇ／分で本件化合物を投与した実施例１０では、１０分後９６．３％であり、同じく実施例１１では９８．３％で正常対照例と同様に心拍数には殆ど変化がなかった。本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１２及び１３では本件化合物の投与前を１００％とすると、実施例１２では、５分後に９４．１％となり、１０分後は４２．２％であり、投与前に比べ、５５％以上も低下しており、本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１３では、５分後は９５．１％となり、１０分後は３０．０％であり、これは投与前に比べ、７０％も低下したことになる。
【表１１】
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また、夫々、対照被験薬を投与前のＰＱ間隔を１００％として、その後のＰＱ間隔を比較すると、投与しない対照例の１０分後のＰＱ間隔は１００％で、対照被験薬投与前後で変化がなかった。本件化合物を投与前のＰＱ間隔を１００％とすると、本件化合物を０．０４ｍｇ／ｋｇ／分で投与した実施例１０のＰＱ間隔は、１０分後１０４．２％であり、また、実施例１１のＰＱ間隔は、１０６．３％であり、何れも、対照例と同様にＰＱ間隔には殆ど変化がなかった。本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１２及び１３では、投与前を１００％とすると、実施例１２では、５分後に１３３．３％となり、１０分後は１５５．１％であり、投与前に比べ、５０％余り大きくなっている。また、本件化合物を０．４ｍｇ／ｋｇ／分を投与した実施例１３は５分後は１２０．６％となり、１０分後は１５１．５％であり、投与前に比べ、５０％余り大きくなっている。この結果は、本件化合物がＰＱ間隔を濃度依存的に大きくさせる作用があり、洞性頻脈や上室性頻脈に使用できることを示している。
実験例１１
本件化合物の心筋拡張障害に対する予防的効果についての実験例
本例は、実験例１における、カルシウムを２０分間投与し、その後カルシウム溶液とノルエピネフリン溶液を投与する実験で、本件化合物をノルエピネフリン溶液投与５分前に投与し、左室拡張障害の予防的効果を求めた。
本例においても、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体の薬学的に許容される塩として、本件化合物を使用した。
８週令の体重３１０〜３２０ｇのウイスター（ｗｉｓｔａｒ）雄性ラットを用いた。麻酔はウレタン１０００ｍｇ／ｋｇとα−クロラロース８０ｍｇ／ｋｇを腹膜下に注射して行い、呼吸は気管切開し、気管内挿管し人工呼吸器（ＳＮ−４８０−７，株式会社シナノ製作所）を用いた。本例において、本件化合物の１００ｍｇを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。ノルエピネフリンの注入量を４０μｇ／ｋｇ／分として、ノルエピネフリンの１ｍｇを蒸留水４１μｌに溶かして、ノルエピネフリン溶液を調製した。
まず、前記ラットの右外頚静脈に、塩化カルシウム水溶液又は塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の持続注入用カテーテルを挿入し、また、同じく右総頚動脈より左心室にマイクロチップカテーテル（ミラー（Ｍｉｌｌａｒ）社ＳＰＣ−３２０）を挿入し左室拡張末期圧を測定した。さらに、同じく右大腿静脈より被験薬溶液注入用カテーテルを挿入した。
心電図を第１誘導でとり、また、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図、左室圧を同時にパーソナルコンピュータに記録した。５分毎に、心電図のＲ波に一致する圧を左室拡張末期圧として２０拍を測定し、その平均値を求め、その測定時の左室末期圧とした。前記ラットの血圧，脈拍、心電図を１５分間モニターし、これらが安定したところで、前準備として右外頚静脈より、ラットの体重に応じて塩化カルシウム濃度を調整した塩化カルシウムの５％ブドウ糖溶液を、毎分１６．６μｌ（塩化カルシウムとして１２．０ｍｇ／ｋｇ／分）で２０分間注入した。
次いで直ちに、右外頚静脈より、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液を、塩化カルシウムは、前記塩化カルシウム水溶液の用法及び容量を変更せずに、またノルエピネフリンは、ノルエピネフリンとして３０μｇ／ｋｇ／分で注入を開始し、この開始後も、この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続した。この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の右外頚静脈よりの注入（静注）の開始５分前に、右外頚静脈より塩化カルシウムを持続しながら、本件化合物を投与しない対照例となる体重が３１０ｇのラットには、右大腿静脈より被験薬の溶剤の１％ＤＭＳＯ水溶液の０．２ｍｌのみを同様に３０秒掛けて注入した。
さらに、実施例１４に係る体重が３２０ｇのラットには、前記対照例と同様に、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の注入５分前に、右外頚静脈よりの塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の注入を持続しながら、右大腿静脈より被験薬の本件化合物０．３ｍｇ／ｋｇを含む１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを同様に３０秒掛けて注入した。
また、本例においては、対照例については、前記被験薬を３０秒掛けて注入した後に、注入した被験薬に対し１／１０の濃度の希釈被験薬を１０μｌ／分で被験薬注入開始後１５分までの間に追加注入した。本例において、本件化合物を投与した実施例１４については、前記被験薬を０．３ｍｇ／ｋｇを含む本件化合物の１％ＤＭＳＯ水溶液０．２ｍｌを３０秒掛けて注入した後に、さらに前記本件化合物の１％ＤＭＳＯ水溶液を本件化合物０．０２ｍｇ／ｋｇ／分で被験薬注入開始後１５分までの間に追加注入した。本例において、被験薬は総て５％ブドウ糖溶液に溶解させた。夫々のラットについて、左室拡張末期圧は、夫々、５分毎に、心電図のＲ波に一致する圧を左室拡張末期圧として２０拍を測定し、その平均値から求めた。被験薬の注入開始から１５分後に、実験を終了した。
また、夫々のラットについて、超音波組織ドプラー法を用いて、左室心室壁拡張能を調べた。超音波診断装置としては、東芝株式会社製の超音波診断装置（Ｔｏｓｈｉｂａ  Ｐｏｗｅｒｖｉｓｉｏｎ  ＳＳＡ−３８０ＡＰＳＫ−７０ＬＴ）を使用し、１０ＭＨｚの超音波で検査した。夫々のラットについて、先ず、前胸部を剃毛して、心尖部からエコープローブを当てて、心尖部左室長軸層を描出し、僧帽弁後尖の基部にパルスドップラーのサンプルボリュームを置き、左室心室壁拡張能を左室心室壁の拡張期の壁速度〔Ｅａ波（ｍ／秒）〕を測定した。５分前に被験薬を投与した対照例と実施例１４の左室拡張末期圧および左室心室筋の壁速度〔Ｅａ波（ｍ／秒）〕の結果を表に示す。なお、本例においては、左室心室壁拡張能は、組織ドプラー法により求めたノルエピネフリン静注前（投与前）の左室心室壁（即ち正常な左室心室壁）の拡張期の壁速度に対する、同じく組織ドプラー法により求めたノルエピネフリン静注後（投与後）の左室心室壁の拡張期の壁速度の比で示されている。結果を表１２に示す。
【表１２】
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対照例の塩化カルシウム投与前の左室拡張末期圧は７．４ｍｍＨｇであり、被験薬の投与直前の左室拡張末期圧は８．０ｍｍＨｇであった。この対照例においてノルエピネフリン静注開始５分後は２８．８ｍｍＨｇとなり、ノルエピネフリン静注開始１０分後は４６．４ｍｍＨｇに上昇した。
実施例１４についてみると、塩化カルシウム投与前の左室拡張末期圧は７．２ｍｍＨｇであり、被験薬注入始直前は８．１ｍｍＨｇであった。また、ノルエピネフリンを投与５分後は１４．５ｍｍＨｇ、ノルエピネフリン投与１０分後には、１８．３ｍｍＨｇであり、対照例に比較して、明らかに本件化合物を投与した場合には、左室拡張末期圧の上昇を抑制することがわかった。このことは本件化合物を塩化カルシウムを含むノルエピネフリン溶液注入の前に投与しても、左室拡張末期圧の上昇を抑え、拡張障害を改善できることがわかった。
実験例１２
本件化合物の心筋内微小循環系に及ぼす影響について
本件化合物の心筋内微小循環系に及ぼす影響を調べた。
本例においては、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体の薬学的に許容される塩として、本件化合物の１塩酸塩４−［３−（４−ベンジルピペリジンー１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピンの１塩酸塩（以下、本件化合物という）を使用した。
８週令の体重３００〜３１０ｇのウイスター（ｗｉｓｔａｒ）雄性ラット４匹を用いた。麻酔はウレタン１０００ｍｇ／ｋｇとα−クロラロース８０ｍｇ／ｋｇを腹膜下に注射して行い、呼吸は気管切開し、気管内挿管し人工呼吸器（ハーバード製）を用いた。本例において、本件化合物の１００ｍｇを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の１ｍｌに溶かして本件化合物のＤＭＳＯ溶液を調製し、この溶液を４℃の温度にて保存した。ノルエピネフリンの注入量を３０μｇ／ｋｇ／分として、ノルエピネフリンの１ｍｇを蒸留水４１μｌに溶かして、ノルエピネフリン溶液を調製した。
まず、前記ラットの右外頚静脈に、塩化カルシウム水溶液又は塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の持続注入用カテーテルを挿入し、また、同じく右総頚動脈より左心室に２Ｆポリエチレンカテーテルを挿入し、マイクロスフェア注入用とした。同じく右大腿静脈より被験薬溶液注入用カテーテルを挿入した。
心電図を第１誘導でとり、また、Ａ／Ｄコンバーターを介して心電図、左室圧を同時にパーソナルコンピュータに記録した。前記ラットの血圧，脈拍、心電図を１５分間モニターし、これらが安定したところで、前準備として右外頚静脈より、ラットの体重に応じて塩化カルシウム濃度を調整した塩化カルシウムの５％ブドウ糖溶液を、毎分１６．６μｌ（塩化カルシウムとして１２ｍｇ／ｋｇ／分）で２０分間注入した。ついで、同じく右外頚静脈より、塩化カルシウムは、前記塩化カルシウム水溶液の用法及び容量を変更せずに、またノルエピネフリンは、ノルエピネフリンとして３０μｇ／ｋｇ／分で注入を開始し、この開始後も、この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による塩化カルシウムの注入及びノルエピネフリンの注入を持続した。この塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液による注入開始の５分前に、右外頚静脈より塩化カルシウムを持続しながら、本件化合物を投与しない対照例Ａのラット（体重：３１０ｇ）と本件化合物を投与しない対照例Ｂのラット（体重：３００ｇ）には、右大腿静脈より０．１％ＤＭＳＯ水溶液を含む５％ブドウ糖溶液を投与した。また、本件化合物を投与した実施例１５のラット（体重：３００ｇ）及び実施例１６のラット（体重３００ｇ）のラットでは、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の右外頚静脈よりの注入（静注）の開始５分前に、右外頚静脈より塩化カルシウムを持続しながら、５％ブドウ糖に溶解した本件化合物０．３３ｍｇ／ｋｇ／分を３分間投与し、その後、０．０１ｍｇ／ｋｇ／分を２５分間、持続静脈内投与した。注入速度は、初めの３分は、０．５ｍｌ／３分の速度で投与し、その後は、０．０５ｍｌ／３分の速度とした。
心筋組織血流量は塩化カルシウム投与開始５分前、及び、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン水溶液の投与開始２０分後の計２回、マイクロスフェア法により測定した。左心室内に留置したポリエチレンカテーテルを介してマイクロスフェア〔１回目：イエロー  ダイトラック（Ｙｅｌｌｏｗ  ＤＹＥ―ＴＲＡＫ）ＶＩＩ＋、２回目：パーシモン  ダイトラック（Ｐｅｒｓｉｍｍｏｎ  ＤＹＥ−ＴＲＡＫ）ＶＩＩ＋（何れも、トリトンテクノロジー社製）〕をインフュージョンポンプ（モデル  ＫＤＳ２３０）を用いて０．６ｍｌ／分の速度で５０秒間かけて約２０万個／１ラットを注入した。一方、大腿動脈に留置したカテーテルを介してリファレンス血液を得た。すなわち、マイクロスフェア注入の１０秒前から７５秒間かけ、インフュージョンポンプ（モデルＫＤＳ２３０）を用いて０．８４ｍｌ／分の速度で吸引・採血した。測定終了後、左心室を摘出し、左心室重量を測定した。左心室及びリファレンス血液を溶解し、含有色素を抽出し、ダブルビーム分光光度計（１５０−２０、株式会社日立製作所）を用いて色素の吸光度を測定した。計測された組織中及びリファレンス血液中のマイクロスフェア量より組織血流量を算出した。
局所血流量の算出は次の式によった。
Ｑｍ＝（Ａｍ×Ｑｒ）／Ａｒ・・・式
式中、Ｑｍはサンプルの血流量（ｍｌ／分／心筋ｇ）を意味し、Ｑｒはリファレンス血液回収率（ｍｌ／分）を意味し、Ａｍは組織１ｇ中のマイクロスフェア分の吸光度を意味し、Ａｒはリファレンス血液中の全マイクロスフェア分の吸光度を意味する。
得られた心筋組織血流量については次の表１３に示す。
【表１３】
2005105793.tif 000023
対照例で、塩化カルシウム投与開始５分前の心筋組織血流量を１００％とすると、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン投与開始２０分後の心筋組織血流量は、対照例Ａでは４１％、対照例Ｂでは５７％であった。本件化合物を投与した実施例では、塩化カルシウム投与開始５分前の心筋組織血流量を１００％とすると、塩化カルシウムを含むノルエピネフリン投与開始２０分後の心筋組織血流量は、実施例１５では７０％、実施例１６では９８％であった。このことは本件化合物を投与した場合、本件化合物を投与しない溶剤による対照例では約４１％、５７％に心筋組織血流量が低下するのに対して、本件化合物を投与すると、心筋組織血流量の低下を抑制できることが分かった。
一般に、拡張障害を起こした場合には、心筋組織血流量が約５０％も低下するのに対し、本件化合物を投与することにより、この血流量低下は３０％以下に抑えることができる。このことは、心筋組織への血流は、主に、心臓の拡張期に流入するので、本件化合物は、心筋の拡張障害を改善して、心筋組織の血流量を増加し、心筋の微小循環系の障害を改善することが分かった。
【産業上の利用可能性】  前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、心筋、骨格筋及び平滑筋等の筋の弛緩作用を有しており、例えば、この薬剤の投与後、短時間又は所望する時間内に、心筋の収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋を弛緩させることができ、これにより、例えば、心筋の冠循環、特に、心筋微小循環系における血液の流れを改善することができ、そのために、心肥大、特に重症の大動脈弁狭窄症や、大動脈閉鎖不全症において起こる狭心症の治療ができる。また、例えば、この薬剤の投与により心筋弛緩を促進して、高血圧心疾患、特発性肥大型心筋症及び心電図のＳＴ低下で示される心筋障害等を治療し且つ予防することができる。また、例えば、この薬剤の投与により心筋弛緩を促進して、左室拡張不全等の心筋弛緩不全を治療し且つ予防することができる。また、この薬剤は、例えば、治癒が難しかった左室拡張障害に由来する急性肺水腫の治療を可能とし、また、末梢血管を弛緩させて、高血圧、特にカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬として役立てることができ、さらに、この薬剤は拡張期が短い頻発性の不整脈、特に心室性頻拍症の治療薬として役立てることができる。また、この薬剤は、従来、皆無であった、薬剤により誘発されるトルサドポアンの予防薬及び治療薬を提供するものであり、これらの患者にとって朗報である。
以上のように、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、新しく多くの疾患の治療や予防に役立てることできるものであって、治療上極めて有用であり、社会にもたらす効果が大きいものであり、産業上の利用性が大きい。
【図１】
2005105793.tif 000068
【図２】
2005105793.tif 000069
【図３】
2005105793.tif 000070
【図４】
2005105793.tif 000071
【図５】
2005105793.tif 000072
【手続補正書】
【提出日】平成18年2月28日(2006.2.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】一般式〔１〕
2005105793.tif 000073
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000074
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】一般式〔１〕
2005105793.tif 000075
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000076
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１又は２に記載の心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４】筋が骨格筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正５】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５】筋が平滑筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正６】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項６】筋が心筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項７】筋が左室心筋であることを特徴とする請求項１又は２に記載の心筋拡張障害の治療薬。
【手続補正８】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項８】一般式〔１〕
2005105793.tif 000077
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000078
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬。
【手続補正９】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項９】一般式〔１〕
2005105793.tif 000079
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基〔ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000080
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１１】一般式〔１〕
2005105793.tif 000081
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000082
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害による心不全の治療薬。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１２】一般式〔１〕
2005105793.tif 000083
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000084
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害による心不全の治療薬。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１３】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１１又は１２に記載の左室拡張障害による心不全の治療薬。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１４】一般式〔１〕
2005105793.tif 000085
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000086
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害による急性肺水腫の治療薬。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１５】一般式〔１〕
2005105793.tif 000087
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000088
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害による急性肺水腫の治療薬。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１６】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１４又は１５に記載の左室拡張障害による急性肺水腫の治療薬。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１７】一般式〔１〕
2005105793.tif 000089
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000090
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害の治療薬。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１８】一般式〔１〕
2005105793.tif 000091
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000092
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害の治療薬。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１９】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１７又は１８に記載の拡張期の冠循環障害の治療薬。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２０】一般式〔１〕
2005105793.tif 000093
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000094
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害による狭心症の治療薬。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２１】一般式〔１〕
2005105793.tif 000095
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000096
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害による狭心症の治療薬。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２２】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２１又は２２に記載の拡張期の冠循環障害による狭心症の治療薬。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２３】一般式〔１〕
2005105793.tif 000097
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000098
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害時における特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症又は心臓肥大を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害の治療薬。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２４】一般式〔１〕
2005105793.tif 000099
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000100
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害時における特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症又は老人の心臓肥大を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害の治療薬。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２５】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２４又は２５に記載の拡張期の冠循環障害時における特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症又は老人の心臓肥大を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害の治療薬。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２６】一般式〔１〕
2005105793.tif 000101
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000102
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２７】一般式〔１〕
2005105793.tif 000103
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000104
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とするカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２８】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２７に記載のカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２９】一般式〔１〕
2005105793.tif 000105
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000106
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期が短い心室性頻拍の治療薬。
【手続補正２９】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３０】一般式〔１〕
2005105793.tif 000107
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000108
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期が短い心室性頻拍の治療薬。
【手続補正３０】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３１】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項２９又は３０に記載の拡張期が短い心室性頻拍の治療薬。
【手続補正３１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３２】一般式〔１〕
2005105793.tif 000109
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000110
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期が短い上室性頻拍の治療薬。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３３】一般式〔１〕
2005105793.tif 000111
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000112
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする上室性頻拍の治療薬。
【手続補正３３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３５】一般式〔１〕
2005105793.tif 000113
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000114
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾヂアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするＱＴ延長を起こす抗不整脈薬の使用により発生するトルサドポアンの治療薬及び予防薬。
【手続補正３４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３６】一般式〔１〕で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項３５に記載のＱＴ延長を起こす抗不整脈薬の使用により発生するトルサドポアンの治療薬及び予防薬。
【手続補正３５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000115
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−又は−ＣＨ２−を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩（以下、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩という）が、筋組織のアクチン−トロポミオシン複合体に対する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩの結合機能を増強させるものであり、このアクチン−トロポミオシン蛋白質複合体における筋収縮抑制蛋白質トロポニンＩの結合機能の増強により、トロポニンＩの筋収縮を抑制する機能を増強させて、筋の弛緩を促進することを発見した。さらに、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩がミオシン軽鎖とアクチン−トロポミオシン複合体との共沈殿をより増強することを発見した。
本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、筋収縮に影響が殆どない、筋肉即ち筋組織の弛緩を促進する機能を有することの知見に基づくものであり、従来の筋収縮に係る、例えば心不全の治療薬とは全く異なる心筋弛緩の促進に係る治療薬であって、
８
【手続補正３６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
ゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、筋弛緩を促進して、末梢血管の弛緩を容易にすることから高血圧の治療薬の発明に至った。また、本発明者は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、Ｑ波からＴ波までの長さを延長させる作用を有するにも拘わらず、トルサドポアンを予防し、且つ治療し得る作用を有することを発見した。
本発明は、短時間に又は所望する時間に、筋収縮に影響を殆ど与えることなく、筋弛緩を促進して、筋弛緩の障害を解消して、心筋、骨格筋及び平滑筋の筋組織の弛緩障害に由来する疾病に対する治療薬及び予防薬を提供すると共に、心室性不整脈のトルサドポアンに対する治療薬及び予防薬を提供することを目的としている。
即ち、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩、即ち、一般式〔１〕
2005105793.tif 000116
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000117
１０
【手続補正３７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−（カルボニル基）又は−ＣＨ２−（メチレン基）を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする心筋拡張障害の治療薬にあり、また、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする心筋拡張障害の治療薬であり、さらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害の治療薬であり、そして、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害による心不全の治療薬にあり、そしてまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害による心不全の治療薬にあり、そしてさらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその
１１／１
【手続補正３８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする左室拡張障害による急性肺水腫の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする左室拡張障害による急性肺水腫の治療薬にあり、これらの他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害の治療薬にあり、これらの他にまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害の治療薬にあり、これらに加えて、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害による狭心症の治療薬にあり、これらに加えてまた、本発明は、１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害による狭心症の治療薬にあり、以上の他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期の冠循環障害時における特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症又は老人の心臓肥大を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害の治療薬にあり、以上の他にまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在す
１２／１
【手続補正３９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
る筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期の冠循環障害時における特発性肥大型心筋症、心臓弁膜症又は老人の心臓肥大を伴って心電図でＳＴ低下を示す心筋障害の治療薬にあり、さらにこれらの他に、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬にあり、さらにこれらの他にまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とするカテコールアミン誘発性の高血圧の治療薬にあり、そしてさらに、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする拡張期が短い心室性頻拍の治療薬にあり、さらにまた、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、筋肉中に存在する筋収縮抑制蛋白質のトロポニンＩのアクチン−トロポミオシン複合体に対する結合性を増強させる作用を有することを特徴とする拡張期が短い心室性頻拍の治療薬にあり、さらに加えて、本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするＱＴ延長を起こす抗不整脈薬の使用により発生するトルサドポアンの治療薬及び予防薬にある。
本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩は、４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン又はその薬学的に許容しうる塩とすることができる。ま
１３／１
【手続補正４０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
た、本発明において、筋弛緩薬の治療又は予防の対象とする筋は、心筋、特に左室心筋、骨格筋又は平滑筋である。
本発明は、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩、即ち、一般式〔１〕
2005105793.tif 000118
〔式中、Ｒ１は水素又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基を表し、Ｒ２は水素、炭素数１乃至３の低級アルコキシ基、フェニル基（ここでフェニル基は水酸基又は炭素数１乃至３の低級アルコキシ基からなる群より選ばれる１乃至３個の置換基で置換されてもよい。）、
2005105793.tif 000119
（ここでＲ３は、炭素数１乃至３のアシル基である。）を表し、Ｘは、−ＣＯ−（カルボニル基）又は−ＣＨ２−（メチレン基）を表し、ｎは１又は２を表す。〕
で示される１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有する薬剤は、筋収縮に影響が殆どない、心筋、骨格筋及び平滑筋等の筋の弛緩促進作用を有しているので、投与後、短時間又は所望する時間内に、心筋収縮に影響を殆ど与えることなく、心筋を弛緩させて、例えば、心臓の左室を容易に拡張でき、また、心筋の冠循環、特に、心筋微小循環系における血液の流れを改善することができ、したがっ
１４
【手続補正４１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
している。この第４図の心電図において、クロフィリウム投与後２２分３０秒の時点を符合５の矢印で示し、その後に起こったトルサデポアンの波形を符号３で示す。
第５図は、比較例Ａのウサギに、メトキサミン投与下でクロフィリウム（５０μｇ／ｋｇ／分）を持続静注した場合の、持続静注開始後概略２３分１６秒〜２３分２３秒の間の心電図であり、横方向に時間の経過を示している。この第５図の心電図においてトルサドポアンの波形３の発現後４９秒経過した時点を符号６の矢印で示す。
【発明を実施するための最良の形態】
本発明において、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩は、日本国特許第２７０３４０８号公報（特開平４−２３０６８１号公報）に物性及び製法が記載されており、既に公知の物質である。前記日本国特許第２７０３４０８号公報には、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体として、（１）  ４−［３−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）プロピオニル］−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン［即ち、４−〔３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル〕プロピオニル〕−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン］、（２）  ４−［３−〔１−（４−ベンジル）ピペリジニル〕プロピオニル］−２−（４−メトキシフェニル）−７−メトキシ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１，４−ベンゾチアゼピン、（３）  ４−［１−（４−ベンジル）ピペリジニル）アセチル−７−メトキシ−２−（４−メトキシフェ
１８／１
【手続補正４２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
チン−トロポミオシン複合体及びトロポニンを含む混合物に対して、異なる作用を有することを示しており、前記β−遮断薬のプロプラノロールは、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩のように、アクチン−トロポミオシン複合体に対しトロポニンの結合力を増強させるものではないことを示している。
前記日本国特許第２７０３４０８号公報（特開平４−２３０６８１号公報）には、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩が、動力学的細胞死（ＫＤ）抑制作用を有しており、抗心筋梗塞療薬、特に急性心筋梗塞の治療及び予防治療薬剤、又は心筋壊死抑制剤として使用できることが示されている。また、前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の製造方法及び各種測定データが示されている。前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体は、塩基性の窒素原子を有しているので、この位置において、酸付加塩が形成されるが、酸付加塩を形成する酸は、薬学的に許容されるべきものであり、このような薬学的に許容される塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩又はその他の無機酸塩、及びクエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、酒石酸塩又はその他の有機酸塩をあげることができる。
本発明において使用される前記１，４ベンゾチアゼピン誘導体又はその薬学的に許容される塩は、例えば、心筋弛緩促進剤として使用する場合の投与量は、化合物の種類、疾患の程度、患者の体重又は投与経路などにより異なっており、特に制限はないが、通常は、成人（平均体重６０ｋｇ）で、１日に０．１ｍｇ乃至１０００ｍｇ、好ましくは、５０ｍｇ〜２
２３
【国際調査報告】
2005105793.tif 000120
2005105793.tif 000121
2005105793.tif 000122
2005105793.tif 000123
2005105793.tif 000124
2005105793.tif 000125