(57)【要約】本発明によれば、下記一般式（I）【化１】2006025490.tif 000073（式中、各記号の定義は請求の範囲における定義と同義である。）で表されるキナゾリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物もしくは溶媒和物、それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を有効成分とする分子シャペロン機能調節剤を提供することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式 （Ｉ）
【化１】
2006025490.tif 000044
[式中、ｎは０〜３の整数を表し、Ｒ１は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｓ(Ｏ)ｆＲ１３（式中、fは０〜２の整数を表し、Ｒ１３はＣ１−５アルキルを表す。）、−ＮＲ１４Ｒ１５（式中、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルカノイル又はＣ１−５アルキルスルホニルを表す。）、Ｃ２−５アルケニル、Ｃ２−５アルキニル又はＣ１−５アルカノイルを表し、
Ｒ２、Ｒ３のいずれか一方は、
Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、（Ｒ２８ＳＯ２）２Ｎ−（式中、Ｒ２８はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＨ3ＣＯＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＣＨ3ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＮＣＣＨ２ＣＯＮＨ−、
【化２】
2006025490.tif 000045
（式中、Ｘは−Ｃ(Ｏ)−又はＳＯ２−を表し、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、又はハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イルもしくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）、又は
【化３】
2006025490.tif 000046
（式中、Ｒ７は水素原子、ハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イルもしくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）を表し、
Ｒ２、Ｒ３の残りの一方が
【化４】
2006025490.tif 000047
｛式中、Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して、［ａ］水素原子、［ｂ］ヒドロキシもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表すか、［ｃ］Ｒ８とＲ９が一緒になってＣ=Ｏを表すか、又は［ｄ］Ｒ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１０− (式中、Ｒ１０は水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。)を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、ｍは０〜３の整数を表し、Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は、［ａ］水素原子、又は［ｂ］シアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、ｕ及びｊは０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。
ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノ基を表す場合にはｊは０を表す。｝、
【化５】
2006025490.tif 000048
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)ｇ−（式中、ｇは０〜２の整数を表す。）、カルボニル又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は［ａ］水素原子、［ｂ］Ｃ１−５アルキルスルホニル、［ｃ］Ｃ１−５アルカノイル、［ｄ］Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又は［ｅ］シアノ、もしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。｝を表す。｝、又は、
【化６】
2006025490.tif 000049
｛式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝を表す。]で表されるキナゾリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物もしくは溶媒和物、それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を有効成分とする分子シャペロン機能調節剤。
【請求項２】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、
Ｒ２は、Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、（Ｒ２８ＳＯ２）２Ｎ−（式中、Ｒ２８はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＨ3ＣＯＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＣＨ3ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−、Ｎ≡ＣＣＨ２ＣＯＮＨ−、
【化７】
2006025490.tif 000050
｛式中、Ｘは−Ｃ(Ｏ)−又はＳＯ２−を表し、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、又はハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イルもしくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。｝を表し、
Ｒ３は、
【化８】
2006025490.tif 000051
｛式中、ｍは０〜３の整数を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、ヒドロキシもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、Ｒ８とＲ９が一緒になって−Ｃ(Ｏ)−を表すか、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１０− (式中、Ｒ１０は水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。)を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は水素原子、又はシアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、
Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
ｕ及びｊはそれぞれ独立して０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、
Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。
ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノを表す場合にはｊは０を表す。）、
【化９】
2006025490.tif 000052
（式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)ｇ−（式中、ｇは０〜２の整数を表す。）、−Ｃ(Ｏ)−、又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は、水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）、又は
【化１０】
2006025490.tif 000053
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）を表す。｝を表す。]である前記請求項１に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項３】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が
【化１１】
2006025490.tif 000054
｛式中、ｍは０〜３の整数を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子、又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は、水素原子、又はシアノもしくはＣ１〜Ｃ５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、ｕ及びｊはそれぞれ独立して０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノを表す場合にはｊは０を表す。)、
【化１２】
2006025490.tif 000055
（式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｃ(Ｏ)−、又は ―ＮＲ２０―（式中、Ｒ２０は水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）、又は
【化１３】
2006025490.tif 000056
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して水素原子、又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）を表す。｝である請求項１又は２のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項４】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が、
【化１４】
2006025490.tif 000057
[式中、ｍは０又は１を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｙは、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＨ２)２−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ ｛式中、ｕ及びｊは０又は１を表し、Ｒ１６は、水素原子、又はＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、水素原子、シアノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、Ｒ１９がシアノを表す場合、ｊは０を表す。｝、
【化１５】
2006025490.tif 000058
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、
Ｚは−Ｏ−又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝、又は
【化１６】
2006025490.tif 000059
｛式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１又は２を表し、
Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、又はカルボキシルを表す。｝を表す。]で表される請求項１から３のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項５】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が、
【化１７】
2006025490.tif 000060
[式中、ｍは０又は１を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｙは、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｎ(Ｒ１６)− (ＣＨ２)２−Ｒ１９ ｛式中、Ｒ１６は、水素原子、又はＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、水素原子、シアノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、Ｒ１９がシアノを表す場合、ｊは０を表す。｝、
【化１８】
2006025490.tif 000061
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、
Ｚは−Ｏ−又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は、水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝、又は
【化１９】
2006025490.tif 000062
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１又は２を表し、
Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシルを表す。）を表す。]である請求項１から４のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項６】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ２が、Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、又は
【化２０】
2006025490.tif 000063
（式中、各記号は前記と同義である。）である請求項１から５のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項７】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、ｎが１又は２を表し、Ｒ１が、ハロゲン原子、シアノ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルコキシ、−ＮＲ１４Ｒ１５（式中、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルカノイル、又はＣ１−５アルキルスルホニルを表す。）、Ｃ２−５アルキニル、又はＣ１−５アルカノイルである請求項１から６のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項８】
前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、ｎが２を表し、Ｒ１がハロゲン原子を表し、Ｒ２が
【化２１】
2006025490.tif 000064
であり、Ｒ３が
【化２２】
2006025490.tif 000065
[式中、Ｒ８、Ｒ９はＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、−Ｎ(Ｒ１６)− (ＣＨ２)２−Ｒ１９ ｛式中、Ｒ１６は、Ｃ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。｝、又は
【化２３】
2006025490.tif 000066
（式中、Ｒ２０はＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。]で表されるキナゾリン化合物である請求項１から７のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項９】
キナゾリン誘導体がN-{4-[(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ]-7-[3-メチル-3-(4-メチル-1-ピペラジニル)-1-ブチニル]-6-キナゾリニル}アクリルアミド   ビス(4-メチルベンゼンスルホン酸)である請求項１から８のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれか１項に記載の分子シャペロン機能調節剤を含有する、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療のための、若しくは温熱治療増強作用のための医薬用組成物。
【請求項１１】
熱ショック蛋白質が関与する疾患がホルモン依存性疾患、造血器腫瘍、又は悪性軟部腫瘍である前記請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ホルモン依存性疾患が、前立腺肥大、子宮内膜症、又はホルモン感受性癌である前記請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ホルモン感受性癌が、ホルモン感受性乳癌、ホルモン感受性前立腺癌、又はホルモン感受性子宮内膜癌である前記請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
造血器腫瘍が、白血病、悪性リンパ腫、又は骨髄腫である前記請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
悪性軟部腫瘍が、骨肉種又は軟部肉腫である前記請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
下記一般式 （Ｉ）
【化１】
2006025490.tif 000067
[式中、ｎは０〜３の整数を表し、Ｒ１は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｓ(Ｏ)ｆＲ１３（式中、fは０〜２の整数を表し、Ｒ１３はＣ１−５アルキルを表す。）、−ＮＲ１４Ｒ１５（式中、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルカノイル又はＣ１−５アルキルスルホニルを表す。）、Ｃ２−５アルケニル、Ｃ２−５アルキニル又はＣ１−５アルカノイルを表し、
Ｒ２、Ｒ３のいずれか一方は、
Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、（Ｒ２８ＳＯ２）２Ｎ−（式中、Ｒ２８はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＨ3ＣＯＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＣＨ3ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＮＣＣＨ２ＣＯＮＨ−、
【化２】
2006025490.tif 000068
（式中、Ｘは−Ｃ(Ｏ)−又はＳＯ２−を表し、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、又はハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イルもしくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）、又は
【化３】
2006025490.tif 000069
（式中、Ｒ７は水素原子、ハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イルもしくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）を表し、
Ｒ２、Ｒ３の残りの一方が
【化４】
2006025490.tif 000070
｛式中、Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して、［ａ］水素原子、［ｂ］ヒドロキシもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表すか、［ｃ］Ｒ８とＲ９が一緒になってＣ=Ｏを表すか、又は［ｄ］Ｒ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１０− (式中、Ｒ１０は水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。)を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、ｍは０〜３の整数を表し、Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は、［ａ］水素原子、又は［ｂ］シアノもしくはＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、ｕ及びｊは０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。
ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノ基を表す場合にはｊは０を表す。｝、
【化５】
2006025490.tif 000071
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)ｇ−（式中、ｇは０〜２の整数を表す。）、カルボニル又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は［ａ］水素原子、［ｂ］Ｃ１−５アルキルスルホニル、［ｃ］Ｃ１−５アルカノイル、［ｄ］Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又は［ｅ］シアノ、もしくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。｝を表す。｝、又は、
【化６】
2006025490.tif 000072
｛式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝を表す。]で表されるキナゾリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物もしくは溶媒和物、それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を含有する、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療のための、若しくは温熱治療増強作用のための医薬用組成物。
【請求項１７】
熱ショック蛋白質が関与する疾患がホルモン依存性疾患、造血器腫瘍、又は悪性軟部腫瘍である前記請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
ホルモン依存性疾患が、前立腺肥大、子宮内膜症、又はホルモン感受性癌である前記請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
ホルモン感受性癌が、ホルモン感受性乳癌、ホルモン感受性前立腺癌、又はホルモン感受性子宮内膜癌である前記請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
造血器腫瘍が、白血病、悪性リンパ腫、又は骨髄腫である前記請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
悪性軟部腫瘍が、骨肉種又は軟部肉腫である前記請求項１７に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分子シャペロン機能を調節する化合物を有効成分とした熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
熱ショック蛋白質（以下、HSPと記すこともある。）は細胞で恒常的に発現し、新規に翻訳合成された蛋白質のフォールディングやオルガネラへの輸送といった分子シャペロン機能を担っている。その上、HSPは細胞がストレスにさらされた時に発現誘導されて蛋白質が変性するのを防ぐか、変性が甚だしい場合には変性蛋白質の分解を促進するという働きを持つ。【０００３】
HSPの例としては、制限されないが、HSP70やHSP90等が挙げられる。例えば、HSP90のシャペロン機能はそれ単独ではなくHSP40やHSP70等のコシャペロンと協同で行われ、複数のコシャペロンが段階的に入れ替わりながら介在して進行する複雑なプロセスで調節されている。【０００４】
HSP90は細胞内で多種多様な蛋白質と複合体を形成し、多くの場合、HSP90との持続的な相互作用が標的蛋白質（以下、クライアント蛋白質と呼ぶこともある。）の安定な存在や正常機能の維持に必須である。HSP90のクライアント蛋白質にはプロテインキナーゼやステロイドホルモン受容体等の細胞増殖や分化に重要な役割を果たすシグナル伝達分子が多いことが特徴である。したがって、理論的にはHSP90の分子シャペロン機能を阻害する薬剤は細胞内において多くのクライアント蛋白質を同時に失活させる作用を持ち、細胞増殖性疾患、例えば悪性腫瘍に対して効果的な作用を持つものと期待される。【０００５】
悪性腫瘍の中でも特に、ホルモン依存的に増殖する乳癌、前立腺癌、子宮内膜癌は上記クライアント蛋白質に含まれるステロイドホルモン受容体群（エストロジェン、プロゲステロン、又はアンドロジェン等の受容体群）と細胞増殖関連キナーゼ群（ErbB2、Raf、Akt、Cdc2、Cdk4等）の双方がそれら癌細胞の生存維持に重要な役割を持つため、分子シャペロンの機能調節剤が最も効果的にその作用を発揮する可能性が高いと考えられる。そして、ホルモン感受性癌のみならず前立腺肥大や子宮内膜症等のホルモン依存性疾患も同様に分子シャペロン機能調節剤にふさわしい対象となると考えられる。【０００６】
代表的な造血器腫瘍である慢性骨髄性白血病の決定的な責任遺伝子はbcr-ablというチロシンキナーゼであることが知られており、このキナーゼもやはりHSP90のクライアント蛋白質である。そしてHSP90阻害剤がbcr-abl陽性の白血病細胞にアポトーシスを起こさせかつ分化を促進するとの報告がある（非特許文献１参照）。したがって、造血器腫瘍は分子シャペロン調節剤の良い標的疾患の一つと考えられる。【０００７】
一般的に、分子シャペロンの誘導は腫瘍細胞の生存維持に関与していると言われている。例えば、HSP90は様々な腫瘍細胞において正常細胞よりも発現量が恒常的に増加しているとの報告がある（非特許文献２参照）。また、腫瘍細胞に発現するHSP90は正常細胞のそれに比べて機能的により高活性なシャペロン複合体を形成するという特徴を持つことからHSP90は抗癌剤開発の良い標的となりうるとの報告もある（非特許文献３参照）。HSPに関して臨床的には、乳癌においてHSP70を高発現した患者群は無病生存率が有意に短く予後不良であるとの報告がある（非特許文献４参照）。現在でもなお、悪性腫瘍の治療においては有用性の高い治療薬、予防薬が待ち望まれている。【０００８】
癌の温熱療法は、癌細胞が正常細胞に比べて熱に弱いという性質を利用し、全身若しくは腫瘍局所を41℃以上に加温する治療法である。通常、温熱療法は単独で用いずに放射線や抗癌剤と併用して互いの治療効果が増強するように意図して用いる場合が多い。温熱療法の臨床研究が最も盛んに行われている癌種として悪性メラノーマと軟部肉腫が挙げられる。軟部肉腫は比較的若年から発症しその好発部位は四肢である。患肢の温存手術のための導入療法や転移の抑制を目的として、温熱と抗癌剤を併用する臨床試験が精力的に検討されている（非特許文献５参照）。従って、軟部肉腫は温熱増強剤を適応するのに最も相応しい癌種の一つと考えられる。【０００９】
温熱療法を繰り返すと腫瘍細胞が温熱耐性（thermo tolerance）を獲得して効果が減弱する場合がある。腫瘍細胞におけるHSP70やHSP110等の誘導は、この温熱耐性獲得やストレス抵抗性に関与しているとの報告がある（非特許文献６参照）。従って、シャペロン機能を調節する薬剤は腫瘍細胞の温熱耐性を解除することによって温熱効果を増強し、より効率的に腫瘍細胞の増殖を阻害することが期待される。しかしながら、シャペロン調節剤の温熱増強効果に関する研究はまだ報告例がほとんどなく、温熱増強を利用した有効な治療法の確立に向けて更に研究開発を発展させる余地がある。【００１０】
従来、HSP90に結合する化合物としてベンゾキノンアンサマイシン系化合物ハービマイシンＡ、ゲルダナマイシン等が知られている（非特許文献７参照）。ゲルダナマイシンの誘導体である17-アリルアミノ-17-デメトキシゲルダナマイシン（以下、17-AAGと記す。）は現在臨床試験中であり、その有効性や安全性はまだ確立されていない。【００１１】
従って、未だHSP90への作用に基づく医薬品として販売されている化合物は存在しない。特に経口剤に関しては現時点では臨床開発段階にある化合物すらほとんど存在しない。【００１２】
そして、ゲルダナマイシンや17-AAGは腫瘍細胞においてHSP90のクライアント蛋白質の発現を抑制すると同時にHSP70の発現を増加させることが知られており、これはクライアント蛋白質のプロテオソーム分解に先立ってHSP90−クライアント複合体からHSP70−クライアント複合体へシフトするためと考えられている（非特許文献１参照）。【００１３】
一方、これまで構造的にキナゾリン骨格を有する化合物が分子シャペロン機能を調節することを直接証明した報告例はなく、また、これを示唆する知見も知られていない。
【非特許文献１】Cancer Res. 61, 1799-804, 2001
【非特許文献２】Int. J. Cancer 51, 613-9, 1992
【非特許文献３】Nature 425, 407-10, 2003
【非特許文献４】J. Natl. Cancer Inst. 85, 570-4, 1993
【非特許文献５】Clin.Cancer Res. 5, 1650-7, 1999
【非特許文献６】Pathol. Oncol. Res. 4, 316-21, 1998
【非特許文献７】Cancer Cell 3, 213-7, 2003
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、上記のような現状に鑑み、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防及び／又は治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、ある種のキナゾリン誘導体が分子シャペロン機能を調節することを見出し、更に、この分子シャペロン機能調節剤が、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療のための、若しくは温熱療法増強作用のための医薬組成物として有用であること見出して本発明を完成するに至った。【００１６】
すなわち、本発明は、以下の通りである。【００１７】
本発明は、
（１）下記一般式 （Ｉ）【００１８】
【化１】
2006025490.tif 000002
【００１９】
[式中、ｎは０〜３の整数を表し、Ｒ１は水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｓ(Ｏ)ｆＲ１３（式中、fは０〜２の整数を表し、Ｒ１３はＣ１−５アルキルを表す。）、−ＮＲ１４Ｒ１５（式中、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルカノイル又はＣ１−５アルキルスルホニルを表す。）、Ｃ２−５アルケニル、Ｃ２−５アルキニル又はＣ１−５アルカノイルを表し、
Ｒ２、Ｒ３のいずれか一方は、
Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、（Ｒ２８ＳＯ２）２Ｎ−（式中、Ｒ２８はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＨ3ＣＯＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＣＨ3ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＮＣＣＨ２ＣＯＮＨ−、【００２０】
【化２】
2006025490.tif 000003
【００２１】
（式中、Ｘは−Ｃ(Ｏ)−又はＳＯ２−を表し、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、又はハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル若しくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）、又は【００２２】
【化３】
2006025490.tif 000004
【００２３】
（式中、Ｒ７は水素原子、ハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル若しくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。）を表し、
Ｒ２、Ｒ３の残りの一方が【００２４】
【化４】
2006025490.tif 000005
【００２５】
｛式中、Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して、［ａ］水素原子、［ｂ］ヒドロキシ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表すか、［ｃ］Ｒ８とＲ９が一緒になってＣ=Ｏを表すか、又は［ｄ］Ｒ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１０− (式中、Ｒ１０は水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。)を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、ｍは０〜３の整数を表し、Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は、［ａ］水素原子、又は［ｂ］シアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、ｕ及びｊは０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。【００２６】
ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノ基を表す場合にはｊは０を表す。｝、【００２７】
【化５】
2006025490.tif 000006
【００２８】
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)ｇ−（式中、ｇは０〜２の整数を表す。）、カルボニル又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は［ａ］水素原子、［ｂ］Ｃ１−５アルキルスルホニル、［ｃ］Ｃ１−５アルカノイル、［ｄ］Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又は［ｅ］シアノ、若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。｝を表す。｝、又は、【００２９】
【化６】
2006025490.tif 000007
【００３０】
｛式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して、水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝を表す。]で表されるキナゾリン誘導体若しくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物若しくは溶媒和物、それらの光学活性体若しくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を有効成分とする分子シャペロン機能調節剤、
（２）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、
Ｒ２は、Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、（Ｒ２８ＳＯ２）２Ｎ−（式中、Ｒ２８はモルホリノで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＨ3ＣＯＣＨ２ＣＯＮＨ−、ＣＨ3ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−、Ｎ≡ＣＣＨ２ＣＯＮＨ−、【００３１】
【化７】
2006025490.tif 000008
【００３２】
｛式中、Ｘは−Ｃ(Ｏ)−又はＳＯ２−を表し、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、又はハロゲン原子、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル若しくはジ（Ｃ１−５アルキル）アミノで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表す。｝を表し、
Ｒ３は、【００３３】
【化８】
2006025490.tif 000009
【００３４】
｛式中、ｍは０〜３の整数を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、ヒドロキシ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、Ｒ８とＲ９が一緒になって−Ｃ(Ｏ)−を表すか、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１０− (式中、Ｒ１０は水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。)を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は水素原子、又はシアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、
Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、
ｕ及びｊはそれぞれ独立して０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、
Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。【００３５】
ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノを表す場合にはｊは０を表す。）、【００３６】
【化９】
2006025490.tif 000010
【００３７】
（式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)ｇ−（式中、ｇは０〜２の整数を表す。）、−Ｃ(Ｏ)−、又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は、水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）、又は【００３８】
【化１０】
2006025490.tif 000011
【００３９】
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）を表す。｝を表す。]である前記（１）に記載の分子シャペロン機能調節剤、
（３）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が【００４０】
【化１１】
2006025490.tif 000012
【００４１】
｛式中、ｍは０〜３の整数を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｒ１１、Ｒ１２はそれぞれ独立して水素原子、又はＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＲ１７Ｒ１８)ｖ−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ (式中、Ｒ１６は、水素原子、又はシアノ若しくはＣ１〜Ｃ５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ独立して水素原子又はＣ１−５アルキルを表し、ｕ及びｊはそれぞれ独立して０又は１を表し、ｖは１〜５の整数を表し、Ｒ１９は、水素原子、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、1)ｕ及びｊが同時に０を表す場合にはｖは２〜５の整数を表し、2)Ｒ19がシアノを表す場合にはｊは０を表す。)、【００４２】
【化１２】
2006025490.tif 000013
【００４３】
（式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、Ｚは−Ｏ−、−Ｃ(Ｏ)−、又は ―ＮＲ２０―（式中、Ｒ２０は水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）、又は【００４４】
【化１３】
2006025490.tif 000014
【００４５】
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１〜３の整数を表し、ｋは０又は１を表し、Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシル、シアノ、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノ、モルホリノ、又はＣＯＮＲ２１Ｒ２２（式中、Ｒ２１、Ｒ２２はそれぞれ独立して水素原子、又はＣ１−５アルキルを表す。）を表す。）を表す。｝である前記（１）又は（２）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（４）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が、【００４６】
【化１４】
2006025490.tif 000015
【００４７】
[式中、ｍは０又は１を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｙは、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｎ(Ｒ１６)−(ＣＯ)ｕ−(ＣＨ２)２−(ＣＯ)ｊ−Ｒ１９ ｛式中、ｕ及びｊは０又は１を表し、Ｒ１６は、水素原子、又はＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、水素原子、シアノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、Ｒ１９がシアノを表す場合、ｊは０を表す。｝、【００４８】
【化１５】
2006025490.tif 000016
【００４９】
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、
Ｚは−Ｏ−又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝、又は【００５０】
【化１６】
2006025490.tif 000017
【００５１】
｛式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１又は２を表し、
Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、又はカルボキシルを表す。｝を表す。]で表される前記（１）から（３）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（５）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ３が、【００５２】
【化１７】
2006025490.tif 000018
【００５３】
[式中、ｍは０又は１を表し、
Ｒ８、Ｒ９はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキル、又はＲ８とＲ９が一緒になって環を形成し、−Ｏ−、−ＮＨ−を介していてもよいＣ３−８のシクロアルキレンを表し、
Ｙは、Ｃ１−５アルコキシ、−Ｎ(Ｒ１６)− (ＣＨ２)２−Ｒ１９ ｛式中、Ｒ１６は、水素原子、又はＣ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、水素原子、シアノ、Ｃ１−５アルコキシ、モルホリノ、４−Ｃ１−５アルキルピペラジン−１−イル、又はジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。ただし、Ｒ１９がシアノを表す場合、ｊは０を表す。｝、【００５４】
【化１８】
2006025490.tif 000019
【００５５】
｛式中、ｐ及びｑはそれぞれ独立して２又は３を表し、
Ｚは−Ｏ−又は−ＮＲ２０−（式中、Ｒ２０は、水素原子、Ｃ１−５アルキルスルホニル、Ｃ１−５アルカノイル、Ｃ１−５アルコキシカルボニル、又はシアノ若しくはＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。｝、又は【００５６】
【化１９】
2006025490.tif 000020
【００５７】
（式中、ｒ及びｔはそれぞれ独立して１又は２を表し、
Ｗは水素原子、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、Ｃ１−５アルカノイルオキシ、カルボキシルを表す。）を表す。]である前記（１）から（４）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（６）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、Ｒ２が、Ｒ２７ＳＯ２ＮＨ−（式中、Ｒ２７はＣ１−５アルキルを表す。）、Ｃ１−５アルコキシ、又は【００５８】
【化２０】
2006025490.tif 000021
【００５９】
（式中、各記号は前記と同義である。）である前記（１）から（５）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（７）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、ｎが１又は２を表し、Ｒ１が、ハロゲン原子、シアノ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルコキシ、−ＮＲ１４Ｒ１５（式中、Ｒ１４及びＲ１５はそれぞれ独立して水素原子、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−５アルカノイル、又はＣ１−５アルキルスルホニルを表す。）、Ｃ２−５アルキニル、又はＣ１−５アルカノイルである前記（１）から（６）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（８）前記一般式 （Ｉ）のキナゾリン誘導体において、ｎが２を表し、Ｒ１がハロゲン原子を表し、Ｒ２が【００６０】
【化２１】
2006025490.tif 000022
【００６１】
であり、Ｒ３が【００６２】
【化２２】
2006025490.tif 000023
【００６３】
[式中、Ｒ８、Ｒ９はＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表し、
Ｙは、−Ｎ(Ｒ１６)− (ＣＨ２)２−Ｒ１９ ｛式中、Ｒ１６は、Ｃ１−５アルコキシで置換されていても良いＣ１−５アルキルを表し、Ｒ１９は、ジ（Ｃ１−５アルキル）アミノを表す。｝、又は【００６４】
【化２３】
2006025490.tif 000024
【００６５】
（式中、Ｒ２０はＣ１−５アルコキシで置換されていてもよいＣ１−５アルキルを表す。）を表す。]で表されるキナゾリン化合物である前記（１）から（７）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、
（９）キナゾリン誘導体がN-{4-[(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ]-7-[3-メチル-3-(4-メチル-1-ピペラジニル)-1-ブチニル]-6-キナゾリニル}アクリルアミド   ビス(4-メチルベンゼンスルホン酸である前記（１）から（８）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤、又は
（１０）前記（１）から（９）のいずれかに記載の分子シャペロン機能調節剤を含有する、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療のための、若しくは温熱治療増強作用のための医薬用組成物、
（１１）熱ショック蛋白質が関与する疾患がホルモン依存性疾患、造血器腫瘍、又は悪性軟部腫瘍である前記（１０）に記載の医薬組成物、
（１２）ホルモン依存性疾患が、前立腺肥大、子宮内膜症、又はホルモン感受性癌である前記（１１）に記載の医薬組成物、
（１３）ホルモン感受性癌が、ホルモン感受性乳癌、ホルモン感受性前立腺癌、又はホルモン感受性子宮内膜癌である前記（１２）に記載の医薬組成物、
（１４）造血器腫瘍が、白血病、悪性リンパ腫、又は骨髄腫である前記（１１）に記載の医薬組成物、
（１５）悪性軟部腫瘍が、骨肉種又は軟部肉腫である前記（１１）に記載の医薬組成物、
（１６）下記一般式 （Ｉ）【００６６】
【化１】
2006025490.tif 000025
【００６７】
（式中、各記号は前記（１）の通りである。）で表されるキナゾリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物もしくは溶媒和物、それらの光学活性体もしくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を含有する、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防又は／及び治療のための、若しくは温熱治療増強作用のための医薬用組成物、
（１７）熱ショック蛋白質が関与する疾患がホルモン依存性疾患、造血器腫瘍、又は悪性軟部腫瘍である前記（１６）に記載の医薬組成物、
（１８）ホルモン依存性疾患が、前立腺肥大、子宮内膜症、又はホルモン感受性癌である前記（１７）に記載の医薬組成物、
（１９）ホルモン感受性癌が、ホルモン感受性乳癌、ホルモン感受性前立腺癌、又はホルモン感受性子宮内膜癌である前記（１８）に記載の医薬組成物、
（２０）造血器腫瘍が、白血病、悪性リンパ腫、又は骨髄腫である前記（１７）に記載の医薬組成物、又は、
（２１）悪性軟部腫瘍が、骨肉種又は軟部肉腫である前記（１７）に記載の医薬組成物に関する。
【発明の効果】
【００６８】
本発明によれば、前記一般式（I）で表されるキナゾリン誘導体若しくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物若しくは溶媒和物、それらの光学活性体若しくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を有効成分として含む分子シャペロン機能調節剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】ヒト上皮癌由来A-431細胞におけるHSP70誘導の時間変化のグラフである。縦軸は、対照ウェルの細胞のHSP70発現量を100とした時の化合物で処理した細胞のHSP70の発現量を示し、横軸は処理時間を表す。
【図２】ウェスタンブロット法による各種腫瘍細胞でのHSP70の発現を示す。各レーンはそれぞれC:DMSO, A:化合物A, ZD:ゲフィニチブである。
【図３】ウェスタンブロット法によりヒト乳癌由来MCF-7細胞中のクライアントタンパク質の発現を示す。各レーンはそれぞれC:DMSO，GA:ゲルダナマイシン，A:化合物A，ZD:ゲフィニチブであり、ERα及びARは核分画を、HER2，AKT及びCDK4は細胞抽出液を各抗体で処理した。
【図４】ヒト乳癌由来MCF-7細胞をエストラジオールで刺激した時の細胞増殖に及ぼす化合物の影響を示す。縦軸は抑制率を、横軸は化合物の濃度を表す。図中、Aは化合物Aを、TAMはタモキシフェンを示す。
【図５】ヒト前立腺癌細胞由来DU 145細胞の増殖に及ぼす温熱処理と化合物Aとの影響を示す。縦軸は熱処理を施さなかったプレートの対照ウェルの吸光度を100とした場合の化合物処理ウェル又は熱処理ウェルの吸光度を，横軸は化合物Aの濃度を表す。
【図６】ヌードマウス移植ヒト乳癌MCF-7の増殖に及ぼす化合物Aの影響を示す。 縦軸は，腫瘍重量を，横軸は化合物Aの投与量を表す。1群5匹，＊：p<0.05、溶媒投与群を対照としたDunnett法による。
【図７】ヒト乳癌由来T-47D細胞における蛋白質のユビキチン化に及ぼす化合物Aの影響を示す。縦軸は対照を100とした時の化合物処理によるユビキチン化蛋白質の割合を表し、横軸は処理時間を表す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００７０】
本発明における各定義は次の通りである。【００７１】
本発明の化合物は前記一般式（I）で表されるキナゾリン誘導体である。【００７２】
前記一般式（I）の各置換基において定義されるハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられ、C1〜C5アルキル基としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、iso−プロピル基、ｎ−ブチル基、iso−ブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ネオペンチル基等が挙げられ、C1〜C5アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、iso−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、iso−ブトキシ基、sec−ブトキシ基、tert−ブトキシキ基、n−ペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基等が挙げられ、C２〜C5アルケニル基としては、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−ブテニル基、２−メチルプロペン−１−イル基、２−ブテニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基等が挙げられ、C２〜C5アルキニル基としては、エチニル基、１−プロピニル基、１−ブチニル基、１−ペンチニル基等、C1〜C5アルカノイル基としては、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソバレリル基、バレリル基等
が挙げられ、C１〜C5アルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基等が挙げられ、C３〜C８シクロアルキレン基としては、シクロプロパン基、シクロブタン基、シクロペンタン基、シクロヘキサン基等が挙げられ、C１〜C5アルカノイルオキシ基としては、アセチルオキシ基、プロピオニルオキシ基等が挙げられ、C１〜C5アルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基等が挙げられ、C１〜C5アルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基等が挙げられる。【００７３】
本発明のキナゾリン誘導体は、公知の方法により相当する酸又は塩基によって塩に変換される。【００７４】
塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、炭酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、あるいはギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、安息香酸塩、フタル酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩等の有機酸との塩が挙げられる。またナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属との塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属との塩、あるいはアンモニウム塩、薬理学的に許容される有機アミン（テトラメチルアミン、トリエチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシエチルアミン）、リジン、アルギニン等）との塩が挙げられる。【００７５】
本発明のキナゾリン誘導体は、各種の立体構造をとることができる。例えば、不斉炭素原子を中心に考えた場合、その絶対配置は（Ｓ）体、（Ｒ）体のいずれでもよく、又はラセミ体であってもよい。純粋な形態の光学異性体若しくはジアステレオ異性体、それら異性体の任意の混合物、又はラセミ体等は、いずれも本発明の範囲に包含される。【００７６】
また、式（I）で表されるキナゾリン誘導体は、例えば水和物のような溶媒和ならびに非溶媒和の形で存在することが出来るものであり、本発明は、抗癌活性を有する全てのこの種の溶媒和形を包含する。【００７７】
以下、表１〜表９に本発明化合物の好ましい具体例を示す。表中、Ｍｅはメチル基を、Ｅｔはエチル基を、Ｐｒはプロピル基を表す。【００７８】
【表１】
2006025490.tif 000026
【００７９】
【表２】
2006025490.tif 000027
【００８０】
【表３】
2006025490.tif 000028
【００８１】
【表４】
2006025490.tif 000029
【００８２】
【表５】
2006025490.tif 000030
【００８３】
【表６】
2006025490.tif 000031
【００８４】
【表７】
2006025490.tif 000032
【００８５】
【表８】
2006025490.tif 000033
【００８６】
【表９】
2006025490.tif 000034
【００８７】
本発明において「熱ショック蛋白質」とは、任意の適当な熱ショック蛋白質（HSP）又はその複合体であってよく、好ましくはHSP70やHSP90である。【００８８】
本発明において「分子シャペロン機能調節」とは、HSP自身の発現量調節やクライアント蛋白質を含むHSP複合体形成に対する作用を介して分子シャペロン機能の阻害やクライアント蛋白質の分解を促進することである。【００８９】
本発明において「熱ショック蛋白質が関与する疾患」の具体例としては、ホルモン依存性疾患、造血器腫瘍又は悪性軟部腫瘍が挙げられる。【００９０】
本発明において「ホルモン依存性疾患」とは、その疾患の病態活動にホルモンを必要とする疾患であり、好ましくはステロイドホルモンが病態活動に関与する疾患である。具体的には前立腺肥大、子宮内膜症又はホルモン感受性癌等が挙げられる。【００９１】
本発明において「ホルモン感受性癌」の具体例としてはホルモン感受性乳癌、ホルモン感受性前立腺癌又はホルモン感受性子宮内膜癌が挙げられる。【００９２】
本明細書で、前記一般式(I)で表される化合物としては、国際公開第０２／６６４４５号パンフレットに記載されたキナゾリン化合物を挙げることができ、これらの化合物の製造方法は、上記明細書に記載されている。【００９３】
さらに、前記一般式（I）の医薬上許容し得る塩、水和物、若しくは溶媒和物、それらの光学活性体若しくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物は、通常の方法で合成することができる。【００９４】
上記方法にて得られる前記一般式（I）の化合物、またはその医薬上許容し得る塩、水和物、若しくは溶媒和物、それらの光学活性体若しくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物は、分子シャペロン機能調節剤として有用であり、熱ショック蛋白質が関与する疾患の予防及び／又は治療薬として有用であり、さらに、温熱治療増強作用薬としても有用である。【００９５】
本発明の予防及び／又は治療剤として有効成分である前記一般式（I）の化合物又はその塩の１種又は２種以上をそのまま患者に投与してもよいが、好ましくは、有効成分と薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物を加え、当業者に周知な形態の製剤として提供されるべきである。【００９６】
薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、pH調節剤、安定化剤、噴射剤、及び粘着剤等を用いることができる。経口投与に適する製剤の例としては、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、又はシロップ剤等を挙げることができ、非経口投与に適する製剤としては、例えば、注射剤、点滴剤、又は坐剤等を挙げることができる。【００９７】
経口投与に適する製剤には、添加物として、賦形剤、崩壊剤、崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤又は基剤等を用いることができる。【００９８】
注射あるいは点滴用に適する製剤には、溶解剤、溶解補助剤、等張化剤又はｐＨ調節剤等の製剤用添加物を用いることができる。【００９９】
また、本発明における分子シャペロン機能調節剤は、５−フルオロウラシル(5-Fluorouracil)、ゲムシタビン(Gemcitabine)、ドキソルビシン(Doxorubicin)、イリノテカン(Irinotecan)、シスプラチン(Cisplatin)、パクリタキセル(Paclitaxel)、ビンクリスチン(Vincristine)、エトポシド(Etoposide)、トラスツズマブ(Trastuzumab)又はイマチニブ(Imatinib)等の抗癌剤、リュープロレリン(Leuprorelin)、タモキシフェン(Tamoxifen)、アナストロゾール(Anastrozole)又はゴセレリン(Goserelin)等のホルモン療法剤、グラニセトロン(Granisetron)、デキサメタゾン(Dexamethasone)又はメトクロプラミド(Metoclopramide)等の制吐剤等と併用してもよい。【０１００】
本発明の医薬の投与経路は特に限定されず、経口的又は非経口的に投与することができる。例えば、HSPが関与する疾患に対しては、症状の悪化の防止ないしは症状の軽減等を目的として、静脈内、動脈内、又は心臓内に注射により投与することが好ましい。【０１０１】
本発明の医薬の投与量は、熱ショック蛋白が関与する疾患の予防及び／又は治療の目的、患者の年齢や状態等の条件に応じて適宜選択可能であるが、一般的には、成人に対して0.001〜100mg/kg程度を一日あたり1回あるいはそれ以上に分けて注射又は点滴により投与するか、0.001〜100mg/kg程度を一日あたり1回あるいはそれ以上に分けて経口的に投与することが好ましい。
【実施例】
【０１０２】
以下、本発明について実施例を挙げて詳細に説明するが、その要旨を越えない限り、本発明は以下に限定されるものではない。【０１０３】
なお、各実施例の実験に使用した試薬、化合物、腫瘍細胞は以下の通りである。
HSP70特異的抗体 ：ストレスジェン社製、#SPA-810
抗HER2抗体：ネオマーカーズ社製、Ab-15
抗EGFR抗体：アップステート社製、#06-129
抗ERα抗体：サンタクルズ社製、sc-7207
抗AR抗体：サンタクルズ社製、sc-815
抗AKT抗体：セルシグナリング社製、#9272
抗CDK4抗体：アップステート社製、#06-139
抗ユビキチン抗体：サンタクルズ社製、sc-8017
化合物A：下記化合物を国際公開第０２／６６４４５号パンフレットの記載に準じて合成し、実験に使用した。
N-{4-[(3-Chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[3-methyl-3-(4-methyl-1-piperazinyl)-1-buthynyl]-6-quinazolinyl}acrylamide bis(4-methylbenzenesulfonate)}【０１０４】
【化２４】
2006025490.tif 000035
【０１０５】
化合物 B〜F：下記化合物を国際公開第０２／６６４４５号パンフレットの記載に準じて合成し、実験に使用した。【０１０６】
化合物 B：
N-([4-(3-Chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-{3-[4-(2-methoxyethyl)-1-piperazinyl]-3-methyl-1-butynyl}-6-quinazolinyl)acrylamide【０１０７】
【化２５】
2006025490.tif 000036
【０１０８】
化合物 C:
N-{4-[(3-Chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[3-(4-methyl-1-piperazinyl)-1-propynyl]-6-quinazolinyl}acrylamide【０１０９】
【化２６】
2006025490.tif 000037
【０１１０】
化合物 D:
N-{4-[(3-Cyano-phenyl)amino]-7-[3-methyl-3-(4-methyl-1-piperazinyl)-1-butynyl]-6-quinazolinyl}acrylamide【０１１１】
【化２７】
2006025490.tif 000038
【０１１２】
化合物 E:
N-{4-[(3-Chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[4-(4-methyl-1-piperazinyl)-4-tetrahydropyranylethynyl]-6-quinazolinyl}acrylamide【０１１３】
【化２８】
2006025490.tif 000039
【０１１４】
化合物 F:
(3-Chloro-4-fluorophenyl)-(7-ethoxy-6-{3-methyl-3-[methyl-(1-methyl-4-
piperidinyl)amino]-1-butynyl}-4-quinazolinyl)amine【０１１５】
【化２９】
2006025490.tif 000040
【０１１６】
ゲフィニチブ：キナゾリン骨格を有し、抗悪性腫瘍剤として知られている下記化合物を国際公開第９６／３３９８０号パンフレットの記載に準じて合成し、対照薬として実験に使用した。
4-(3'-Chloro-4'-fluoroanilino)-7-methoxy-6-(3-morpholinopropoxy)quinazoline【０１１７】
【化３０】
2006025490.tif 000041
【０１１８】
ゲルダナマイシン ： Cat. # G 3381、シグマ社より入手
ボルテゾミブ：プロテアソーム阻害剤として知られている下記化合物を米国特許第６０８３９０３号明細書に準じて合成し、対照薬として実験に使用した。【０１１９】
【化３１】
2006025490.tif 000042
【０１２０】
XTT(2,3-Bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide) を試薬として用いた：Cat. # X 4251、シグマ社より入手
A-431細胞：ヒト上皮癌由来A-431細胞、東北大学医学部・加齢医学研究所・医用細胞資源センター(以下、細胞資源センターと記す。)より入手。
TE-8細胞：ヒト食道癌由来TE-8細胞（細胞資源センターより入手）
NCI-H520細胞：ヒト肺癌由来NCI-H520細胞（ATCCより入手）
HPAC細胞：ヒト膵癌由来HPAC細胞（ATCCより入手）
DU145細胞：ヒト前立腺癌由来DU145細胞（ATCCより入手）
KPL-4細胞：ヒト乳癌由来KPL-4細胞（川崎医科大学・紅林淳一先生より分与、文献：Kurebayashi, J., et al., British J Cancer, 79, 707-717, 1999）
MKN-45細胞：ヒト胃癌由来MKN-45細胞（ヒューマンサイエンス研究資源バンクより入手）
DLD-1細胞：ヒト結腸癌由来DLD-1細胞（ATCCより入手）
MCF-7細胞：ヒト乳癌由来MCF-7細胞 (ATCCより入手)
T-47D細胞：ヒト乳癌由来T-47D細胞 (ATCCより入手)
実施例１  ヒト上皮癌由来A-431細胞を用いた時間依存的なHSP70誘導作用
（方法）A-431細胞を12ウェルプレートで培養し、およそ70-80%程度に増殖した時点で、化合物A及び対照薬ゲフィニチブを各々10 μMとなるように添加した。【０１２１】
尚、対照にはDMSOを0.1%添加した。添加後、6、9、12及び24時間後に細胞を集めて細胞抽出液を調製した。HSP70特異的抗体を用いたウェスタンブロット法により細胞抽出液中のHSP70タンパク質の発現を調べた。 PVDF膜上のHRP標識2次抗体による化学発光量をHSP70の発現量とし、対照ウェルの細胞のHSP70発現量を100としてT/C (%)を求めた。【０１２２】
結果を図１に示す。
（結果）化合物A（‐○‐）で処理したA-431細胞では、処理後6時間後から12時間後までHSP70の発現が時間依存的に上昇し、24時間後には大きく減少した。 この減少は化合物Aの細胞障害性作用によるものと考えられた。一方、ゲフィニチブ（‐●‐）で処理したA-431細胞では、12時間後までHSP70発現の明らかな上昇が見られず、24時間後にはHSP70の発現が減少した。【０１２３】
このことから、化合物AによりHSP70が誘導されることが明らかとなった。さらに、化合物Aの処理6時間後からHSP70が誘導されることが明らかとなった。【０１２４】
実施例２ 各種ヒト腫瘍由来細胞でのHSP70誘導作用
（方法）化合物AのHSP70誘導作用について、各種ヒト腫瘍細胞での誘導を検討した。【０１２５】
TE-8細胞、NCI-H520細胞、HPAC細胞、DU145細胞、KPL-4細胞、MKN-45細胞、HL-60細胞及びDLD-1細胞をそれぞれ12ウェルプレートで培養した。【０１２６】
70-80%程度に各細胞が増殖した時点で、化合物A及び対照薬ゲフィニチブを各々10 μMとなるように添加した。対照ウェルにはDMSOを0.1%添加した。添加後、9時間後に細胞を集めて細胞抽出液を調製した。HSP70特異的抗体を用いたウェスタンブロット法により各腫瘍細胞抽出液中のHSP70タンパク質の発現を調べた。【０１２７】
結果を図２に示した。
（結果）いずれのヒト腫瘍由来細胞でも、化合物A処理9時間後のHSP70発現はDMSO処理対照に比べて上昇した。一方、ゲフィニチブ処理腫瘍細胞では、HSP70発現の明らかな上昇が見られなかった。【０１２８】
このことから、化合物Aは広範囲の腫瘍細胞でHSP70を誘導することが明らかとなった。【０１２９】
実施例３HSP90クライアントタンパク質の発現抑制作用
（方法）HSP90シャペロンのクライアントタンパク質EGFR、HER2、ERα、AR、AKT及びCDK4の発現に及ぼす化合物Aの影響を検討した。【０１３０】
MCF-7細胞を直径10cmの培養ディッシュで培養し、70-80%程度に増殖した時点で、化合物A及び対照薬ゲフィニチブを各々10μMとなるように添加した。陽性対照としてゲルダナマイシンを1μMで、また陰性対照にはDMSOを0.1%それぞれ添加した。【０１３１】
化合物添加後、24時間後に細胞を集めて二分し、半分の細胞より細胞抽出液を調製し、残り半分の細胞より細胞質画分と核画分を調製した。細胞質画分及び核画分の調製にはNER-PER（商標） Nuclear and Cytoplasmic Extraction Reagents (PIERCE社製、＃78833) を用いた。各クライアントに特異的な抗体を用いたウェスタンブロット法により各腫瘍細胞抽出液及び核画分中のクライアントの発現を調べた。【０１３２】
結果を図３に示した。
（結果）いずれのクライアントも、DMSO処理対照細胞に比べてゲルダナマイシン処理群ならびに化合物A処理細胞で発現が減少した。一方、ゲフィニチブ処理腫瘍細胞では、クライアントの明らかな減少は見られなかった。このことから、化合物Aは分子シャペロン機能を阻害することが示唆された。【０１３３】
実施例４ エストラジオール (E2) 依存的な細胞増殖に対する抑制作用
（方法）エストロジェン受容体を発現し、エストラジオール (E2、17β-Estradiol、Cat. #E 1024、シグマ社) に反応して増殖するヒト乳癌由来MCF-7細胞を用いて、E2存在下の細胞増殖に及ぼす化合物Aの影響を検討した。対照化合物として、E2刺激によるヒト乳癌由来MCF-7細胞の増殖を抑制することが知られているタモキシフェン（Cancer Res., 62, 2474-2477, 2002） (Cat. # T 9262、シグマ社) を用いた。活性炭処理した牛胎児血清を、5%含むフェノールレッド非添加のDME・F12混合培地にMCF-7細胞を懸濁し、2×104個/ウェルで24ウェルプレートに培養した。翌日 (Day 1)、培地交換時にプレートの半分のウェルにE2を最終濃度10 nMとなるように添加し、残り半分のウェルには培地のみを添加した。化合物Aは0.037、0.11、0.33、１及び3μMで、またタモキシフェンは0.062、0.19、0.56、1.7及び5μMでウェルに添加した。【０１３４】
Day 4及びDay 7に培地を捨て、同じ組成の培地を加えて培養を続けた。尚、対照ウェルには培地のみを加えた。【０１３５】
Day 10にXTTを用いた色素法により細胞増殖活性を測定した。【０１３６】
すなわち、培養終了後XTTを各ウェルに添加し、4時間発色後反応液を96ウェルプレートに移し、492 nmの吸光度を測定した。【０１３７】
以下の式により抑制率を算出した。【０１３８】
抑制率(%) = {1- [(E2存在下、化合物添加ウェルの吸光度)−(E2非添加対照ウェルの吸光度)]÷[(E2存在下、対照ウェルの吸光度)−(E2非添加対照ウェルの吸光度)]×100
結果を図４に示した。
（結果）化合物A（‐○‐）はタモキシフェン（‐△‐）と同様にE2刺激によるヒト乳癌由来MCF-7細胞の増殖を抑制することが明らかになった。【０１３９】
実施例５ 温熱処理と化合物Ａとの併用による細胞増殖抑制の増強作用
（方法）ヒト前立腺癌由来DU 145細胞を用いて、温熱処理時の細胞増殖抑制作用に対する化合物Ａの影響を検討した。DU 145細胞を1×104個/ウェルで96ウェルプレート2枚に培養した。 翌日、化合物Aを0.37、1.1、3.3及び10μMとなるようにそれぞれのプレートに添加後、1枚のプレートは43℃に設定した5%CO2インキュベーター内で4時間培養し (熱処理)、もう1枚のプレートは37℃、5%CO2インキュベーター内で同様に4時間培養した。4時間後、生理食塩水で3回ウェルを洗浄し、増殖培地を加えて37℃、5%CO2インキュベーター内で24時間培養した。【０１４０】
細胞増殖活性の測定には、実施例４と同じくXTTによる色素法に拠った。すなわち、培養後，XTTを各ウェルに添加し、4時間後、492 nmの吸光度を測定した。【０１４１】
熱処理を施さなかったプレートの対照ウェルの吸光度を100とし、以下の式よりT/C (%) を求めた。【０１４２】
T/C (%) = [熱処理した対照ウェル又は化合物処理したウェルの吸光度÷熱処理をしなかった対照ウェルの吸光度]×100
結果を図5に示した。
（結果）この結果、化合物Aの濃度を増加することで熱ショックによる細胞死が増強されることが明らかとなった。【０１４３】
実施例６ ヌードマウス移植ヒト乳癌由来MCF-7に対する化合物Aの抗腫瘍効果
（方法）日本クレア株式会社より購入した雌ヌードマウスの皮下にヒト乳癌由来MCF-7細胞を移植し、その増殖に及ぼす化合物Aの影響を検討した。Glass microfibre filter GF/B (ワットマン製、#1821 05) の小細片に17β-Estradiol溶液を滴下して500μg/filterのペレットを作製した。雌Balb/cヌードマウスの頸部皮下にこのペレットを移植後、MCF-7細胞を5×106個/マウスで右背部皮下に移植した。移植後7日目から1群5匹のヌードマウスに化合物Aを30及び100 mg/kgで1日1回、2週間経口投与した。【０１４４】
対照には溶媒として用いた0.5%トラガカント溶液を同様に投与した。最終投与の翌日にヌードマウスを麻酔下で屠殺し、皮下腫瘍を摘出して重量を測定した。各群の平均腫瘍重量と標準誤差を算出し、溶媒投与群を対照としてDunnett法で統計解析した。【０１４５】
結果を図６に示した。
（結果）図６に示すように、対照群に比べて化合物Aを100 mg/kg投与した群で腫瘍重量が有意に減少した。【０１４６】
このことから、化合物Aはエストロジェンで増殖させたMCF-7乳癌に対して抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。【０１４７】
実施例７ ヒト乳癌由来T-47D細胞を用いた化合物AからFのHSP70誘導作用
（方法）T-47D細胞を12ウェルプレートで培養し、およそ70-80%程度に増殖した時点で、化合物 A, B, C, D, E及びFを各々10 μMとなるように添加した。【０１４８】
尚、対照にはDMSOを0.1%添加した。添加後、9時間後に細胞を集めて細胞抽出液を調製した。HSP70特異的抗体を用いたウェスタンブロット法により細胞抽出液中のHSP70タンパク質の発現を調べた。 PVDF膜上のHRP標識2次抗体による化学発光量をHSP70の発現量とし、対照ウェルの細胞のHSP70発現量を100としてT/C (%)を求めた。【０１４９】
結果を表１０に示す。【０１５０】
【表１０】
2006025490.tif 000043
【０１５１】
（結果）化合物A〜Fで処理したT-47D細胞では，対照に比べて HSP70の発現が上昇した。 【０１５２】
この結果より、化合物A〜Fを用いてT-47D細胞を９時間処理することで細胞内にHSP70が誘導されることが示された。【０１５３】
実施例８ ヒト乳癌由来T-47D細胞における化合物Aのユビキチン化蛋白質誘導作用
（方法）T-47D細胞を６ウェルプレートで培養し、およそ70-80%程度に増殖した時点で、化合物Aを1、3及び10 μMで，またボルテゾミブ (PS-341) 及びゲルダナマイシン（GA）をそれぞれ3 μMとなるように添加した。尚、対照にはDMSOを0.1%添加した。添加後、1、3、6及び24時間後に細胞を集めて細胞抽出液を調製した。ユビキチン特異的抗体を用いたウェスタンブロット法により細胞抽出液中のユビキチン化された蛋白質の発現を調べた。      【０１５４】
PVDF膜上のHRP標識2次抗体による化学発光量をユビキチン化蛋白質の発現量とし、対照ウェルの細胞抽出液の発現量を100としてT/C (%)を求めた。【０１５５】
結果を図７に示す。
（結果）ボルテゾミブ（‐○‐）で処理したT-47D細胞では、3時間後から顕著なユビキチン化蛋白質の出現が見られた。一方、化合物A  1μM（‐●‐）及びゲルダナマイシン（‐□‐）で処理したT-47D細胞では、24時間後まで蛋白質のユビキチン化は見られなかった。これに対して化合物A  3（‐▲‐）μM及び10μM（‐■‐）で処理したT-47D細胞では，処理後6時間後からユビキチン化された蛋白質の量が上昇し、24時間後まで持続した。【０１５６】
このことから、化合物A  3μM及び10μで処理することにより、6時間後からユビキチン化蛋白質が出現することが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【０１５７】
本発明によれば、前記一般式（I）で表されるキナゾリン誘導体若しくはその薬学的に許容される塩、それらの水和物若しくは溶媒和物、それらの光学活性体若しくはラセミ体又はそれらのジアステレオマー混合物を有効成分として含む分子シャペロン機能調節剤を提供することができる。【０１５８】
なお、本出願は、日本特許出願  特願２００４−２５４７１６号を優先権主張して出願されたものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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