(57)【要約】本発明の目的は、天然物由来の特定化合物、それを有効成分として含有することを特徴とするメタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物を、簡便且つ効率的に提供することである。本発明は、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなる、メタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）で表される化合物、又はその塩もしくはエステル。
【化１】
2006085562.tif 000014
【請求項２】
式（２）で表される化合物、又はその塩もしくはエステル。
【化２】
2006085562.tif 000015
【請求項３】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分とする、ＰＰＡＲγリガンド剤。
【化３】
2006085562.tif 000016
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項４】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなるメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物。
【化４】
2006085562.tif 000017
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項５】
式（４）で表される化合物が式（６）で表される化合物である、請求項４記載のメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物。
【化５】
2006085562.tif 000018
【請求項６】
式（５）で表される化合物が式（２）で表される化合物である、請求項４記載のメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物。
【化６】
2006085562.tif 000019
【請求項７】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを０．００００００１重量％以上１００重量％未満含有してなる、請求項４〜６のいずれか１項記載のメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物。
【請求項８】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなるインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物。
【化７】
2006085562.tif 000020
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項９】
式（４）で表される化合物が式（６）で表される化合物である、請求項８記載のインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物。
【化８】
2006085562.tif 000021
【請求項１０】
式（５）で表される化合物が式（２）で表される化合物である、請求項８記載のインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物。
【化９】
2006085562.tif 000022
【請求項１１】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを０．００００００１重量％以上１００重量％未満含有してなる、請求項８〜１０のいずれか１項記載のインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物。
【請求項１２】
飲食用であることを特徴とする請求項４〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１３】
医薬用であることを特徴とする請求項４〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
家畜又はペット用であることを特徴とする請求項４〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１５】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを用いることを特徴とする、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置方法。
【化１０】
2006085562.tif 000023
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項１６】
メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物を製造するための、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルの使用。
【化１１】
2006085562.tif 000024
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項１７】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを用いることを特徴とする、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置方法。
【化１２】
2006085562.tif 000025
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【請求項１８】
インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物を製造するための、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルの使用。
【化１３】
2006085562.tif 000026
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＰＰＡＲ）は、脂質代謝を維持する遺伝子群の発現制御を担う転写制御因子として同定された核内受容体ファミリーに属するリガンド依存性転写制御因子である。哺乳動物ではＰＰＡＲα、ＰＰＡＲδ（ＰＰＡＲβ、ＮＵＣ−１、ＦＡＡＲ）、ＰＰＡＲγの３種のサブタイプの存在が知られており、ＰＰＡＲαは主に肝臓で、ＰＰＡＲδは普遍的に発現している。ＰＰＡＲγにはＰＰＡＲγ１とＰＰＡＲγ２の２種のアイソフォームが存在しており、ＰＰＡＲγ１は脂肪組織の他に免疫系臓器や副腎、小腸で発現している。ＰＰＡＲγ２は脂肪組織で特異的に発現しており、脂肪細胞の分化・成熟を制御するマスターレギュレーターである（非特許文献１参照）。【０００３】
ＰＰＡＲγリガンドとしては、１５−デオキシ−Δ１２，１４−プロスタグランジンＪ２やΔ１２−プロスタグランジンＪ２等のアラキドン酸代謝物、ω−３多価不飽和脂肪酸、α−リノレン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）等の不飽和脂肪酸、９−ヒドロキシオクタデカジエン酸や１３−ヒドロキシオクタデカジエン酸等のエイコサノイド類等が知られている（非特許文献２参照）。また、共役トリエン構造又は共役テトラエン構造を有する炭素数１０〜２６の共役不飽和脂肪酸が開示されている（特許文献１参照）。合成化合物では、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン等のチアゾリジン誘導体がＰＰＡＲγリガンドであることが知られている。【０００４】
ＰＰＡＲγリガンドであるチアゾリジン誘導体は、そのアゴニスト活性と血糖降下作用が相関することから、インスリン抵抗性症候群処置作用との関連が注目され、２型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病：ＮＩＤＤＭ）に対するインスリン抵抗性症候群処置薬として開発された。すなわち、ＰＰＡＲγリガンドであるチアゾリジン誘導体は、ＰＰＡＲγを活性化することにより、前駆脂肪細胞から分化した正常機能を有する小型脂肪細胞を増加させ、インスリン抵抗性症候群を惹起するＴＮＦαや遊離脂肪酸の産生や分泌が亢進している肥大脂肪細胞をアポトーシスにより減少させることで、インスリン抵抗性症候群を処置する（非特許文献３参照）。またＰＰＡＲγリガンドは、２型糖尿病だけでなく、高インスリン血症、脂質代謝異常、肥満、高血圧、動脈硬化性疾患といったインスリン抵抗性症候群（非特許文献４参照）の予防・処置にも有効である。さらにＰＰＡＲγリガンドは、炎症性サイトカインの産生を抑制すること（非特許文献５参照）、アポトーシスを誘導して癌細胞の増殖を抑制すること（非特許文献６参照）から、炎症や癌の予防・処置にも有効である。さらに近年では、トログリタゾン等のチアゾリジン誘導体とは異なる薬理作用を期待しうる、化学合成されたＰＰＡＲγ調節剤の開発も進行中である（非特許文献７参照）。【０００５】
ＰＰＡＲγリガンドは、ＩＩ型糖尿病をはじめ、高インスリン血症、脂質代謝異常、肥満、高血圧、動脈硬化性疾患等のインスリン抵抗性症候群やメタボリックシンドロームを予防・処置する効果を有する。
【特許文献１】特開２０００−３５５５３８号公報
【非特許文献１】河田照雄、医学のあゆみ，１８４，５１９〜５２３，１９９８
【非特許文献２】Ｊ．Ａｕｗｅｒｘ，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，４２，１０３３〜１０４９，１９９９
【非特許文献３】Ａ．Ｏｋｕｎｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１０１，１３５４〜１３６１，１９９８
【非特許文献４】Ｒ．Ａ．Ｄｅｇｒｏｎｚｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ，１４，１７３〜１９４，１９９１
【非特許文献５】Ｃ．Ｊｉａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３９１，８２〜８６，１９９８
【非特許文献６】Ｙ．Ｔｓｕｂｏｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２７０，４００〜４０５，２０００
【非特許文献７】Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１７，６６２−６７６，２００３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記に鑑み、本発明は、食用可能な天然物由来の特定の化合物；特定の化合物を有効成分とするＰＰＡＲγリガンド剤；特定の化合物を有効成分として含有する、メタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群を予防及び／又は処置する組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、甘草をはじめとする植物の抽出物が、血糖降下作用及び脂質代謝処置作用を有することを見出し、この抽出物がＰＰＡＲγリガンド活性を有することを見出した。また、本発明者らは、その活性成分を鋭意探索した結果、抽出物中の特定成分がＰＰＡＲγリガンド活性を有していることを見出し、さらに甘草よりこれらの成分を抽出する際には、甘草を両親媒性有機溶媒で効率的に抽出できることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００８】
すなわち、本発明は、
式（１）で表される化合物、又はその塩もしくはエステル；【０００９】
【化１】
2006085562.tif 000002
【００１０】
式（２）で表される化合物、又はその塩もしくはエステル；【００１１】
【化２】
2006085562.tif 000003
【００１２】
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分とする、ＰＰＡＲγリガンド剤【００１３】
【化３】
2006085562.tif 000004
【００１４】
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕；
に関する。【００１５】
また、本発明は、
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなる、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物；
式（４）で表される化合物が式（６）で表される化合物である、上記メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物；【００１６】
【化４】
2006085562.tif 000005
【００１７】
式（５）で表される化合物が式（２）で表される化合物である、上記メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物；
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを０．００００００１重量％以上１００重量％未満含有してなる、上記メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物；に関する。【００１８】
さらに、本発明は、
飲食用であることを特徴とする上記組成物；
医薬用であることを特徴とする上記組成物；
家畜又はペット用であることを特徴とする上記組成物；
式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを用いることを特徴とする、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置方法、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置方法；
メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物を製造するための、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルの使用；に関する。【００１９】
以下に、本発明について詳しく説明する。
本発明のメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物は、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなるものである。【００２０】
【化５】
2006085562.tif 000006
【００２１】
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕【００２２】
また、本発明で用いる、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物、式（５）で表される化合物、それらの塩及びエステルは、ＰＰＡＲγリガンド活性を有し、ＰＰＡＲγリガンド剤となりうる。【００２３】
なお、ここにいう処置とは、治療又は改善を意味する。
ここにいうペルオキシソーム増殖剤応答性受容体（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＰＰＡＲ）は、前述のとおり、脂質代謝を維持する遺伝子群の発現制御を担う転写制御因子として同定された核内受容体ファミリーに属するリガンド依存性転写制御因子である。そのサブタイプの１つであるＰＰＡＲγは、哺乳動物ではＰＰＡＲγ１とＰＰＡＲγ２の２種のアイソフォームが存在しており、ＰＰＡＲγ１は脂肪組織の他に、免疫系臓器や副腎、小腸で発現している。【００２４】
ここにいうＰＰＡＲγリガンド剤とは、ＰＰＡＲγと親和性を示す化合物（ＰＰＡＲγリガンド活性を有する化合物）を意味する。
ある化合物がＰＰＡＲγリガンド活性を有するか否かは、後述の実施例２に記載のアッセイによって決定できる。【００２５】
ここにいうメタボリックシンドロームとは、内臓脂肪型肥満に加えて、糖尿病、高脂血症及び高血圧症からなる群より選ばれる少なくとも１種の病態を併発する症候群を意味し、また、「内臓脂肪症候群（ｖｉｓｃｅｒａｌ  ｆａｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）」及び「マルチプルリスクファクター症候群」と同義である（Ｍａｔｓｕｚａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ／Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，１３，３−１３，１９９７参照）。【００２６】
ここにいうインスリン抵抗性症候群とは、高インスリン血症、脂質代謝異常、肥満、高血圧、及び動脈硬化性疾患からなる群より選択される少なくとも２種の病態を併発する症候群を意味する（Ｒ．Ａ．Ｄｅｇｒｏｎｚｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ，１４，１７３〜１９４，１９９１参照）。【００２７】
本発明に用いる式（１）で表される化合物は、新規化合物である。【００２８】
【化６】
2006085562.tif 000007
【００２９】
本発明に用いる式（４）で表される化合物【００３０】
【化７】
2006085562.tif 000008
【００３１】
〔式中、Ｒ１〜４は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は少なくとも１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はそれぞれ独立してＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
は、フラバノン誘導体であり、これらの中でも特に式（６）で表されるシンフラバノンがより好ましい。【００３２】
【化８】
2006085562.tif 000009
【００３３】
本発明に用いる式（５）で表される化合物【００３４】
【化９】
2006085562.tif 000010
【００３５】
〔式中、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ又はＯＣＨ３を示す。Ｒ７〜８は、そのうちの少なくとも１つがプレニル基であるか、又は１対の隣接する２個の基が−ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ３）２Ｏ−で６員環を形成しており、その他はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＣＨＯを示す。〕
は、イソフラバノン誘導体であり、これらの中でも特に式（２）で表される新規化合物がより好ましい。【００３６】
【化１０】
2006085562.tif 000011
【００３７】
上記化合物の塩もまた、本発明で好適に使用しうる。当該塩は、上記化合物の溶液を、好適な飲食用、医薬用、飼料用又はペットフード用に許容される酸（例えば、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、シュウ酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、リン酸等）の溶液と混合することによって形成しうる。さらに、上記化合物が酸性部分を有する場合、好適な飲食用、医薬用、飼料用又はペットフード用に許容されるその塩は、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等）；アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩等）；好適な有機配位子（例えば、第四級アンモニウム塩等）とで形成される塩を含む。【００３８】
また、上記化合物の脂肪酸エステル等のエステルも本発明で好適に使用しうる。該エステルは、任意の有機酸又は無機酸とで形成することができる。当該酸としては、飲食用、医薬用、飼料用又はペットフード用に好適な酸を使用することができ、好ましくは脂肪酸である。該脂肪酸としては特に限定されないが、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸等の長鎖脂肪酸；酢酸、酪酸等の短鎖又は中鎖脂肪酸等が挙げられる。【００３９】
上記化合物であれば、植物等の天然物由来の化合物、あるいは化学合成した化合物のいずれも使用することができるが、食経験のある天然物由来の化合物であるのが好ましい。【００４０】
次に、上記化合物の製造方法について説明する。
上記化合物の製造方法としては、特に限定されないが、例えば、甘草の１種であるマメ科カンゾウ属（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ属）の植物から抽出することにより、上記化合物を得ることができる。また、上記化合物を含有する他の植物より抽出してもよいし、化学合成して得てもよい。【００４１】
甘草から得る場合に使用しうる甘草としては、マメ科カンゾウ属（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ属）の植物であれば良く、例えば、ウラルカンゾウ（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ）、チョウカカンゾウ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ  ＢＡＴ．）、ヨウカンゾウ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ  Ｌ．）、ナンキンカンゾウ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ  Ｌ．ｖａｒ  ｇｌａｎｄｕ  ｒｉｆｅｒａ  Ｒｅｇｅｌ  ｅｔ  Ｈｅｒｄｅｒ）、シナカンゾウ（Ｇ．ｅｃｈｉｎａｔａ  Ｌ．）、イヌカンゾウ（Ｇ．ｐａｌｌｉｄｉｆｌｏｒａ  Ｍａｘｉｍ）、その他同属植物（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）等が挙げられる。好ましくは、ウラルカンゾウ（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ）、チョウカカンゾウ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ  ＢＡＴ．）、ヨウカンゾウ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ  Ｌ．）等である。産地としては、特に制限されないが、新彊産、東北産、西北産、モンゴル産、ロシア産、アフガニスタン産等の甘草を使用することができる。【００４２】
本発明においては、上記甘草の根、根茎、ストロン、場合により周皮を除いたもの（皮去り甘草（カンゾウ））等が好ましく用いられる。これらは、細片、砕片、又は、好ましくは粉末の形状で用いられ、一般に、例えば、約１０ｍｍ以下の細片、砕片や、平均粒径１０００ミクロン以下（好ましくは５００ミクロン以下、より好ましくは２００ミクロン以下）の粉末のものが用いられる。尚、上記甘草は、その種類、産地、採取時期等により有効成分の組成・量が多少異なるので、予め実験により有効成分を多く含有することが確認されたものを使用するのが好ましい。【００４３】
抽出法としては、特に限定されないが、例えば、上記甘草から有機溶媒や水を用いて抽出する方法等が挙げられる。【００４４】
抽出に用いる有機溶媒としては、上記化合物を効率よく抽出する観点から、両親媒性有機溶媒が好ましい。両親媒性有機溶媒とは、親水性溶媒及び疎水性溶媒の両者と混和可能である有機溶媒をいう。両親媒性有機溶媒としては、例えば、ケトン（例えば、アセトン等）、アルコール（炭素数１〜４の１価、２価、３価、多価アルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、プロピレングリコール、グリセリン等）、エステル（例えば、酢酸エチル等）等が挙げられる。これら溶媒は、単独で用いても、２種以上を混合して用いても良い。
抽出溶媒としては、好ましくは、水、アルコール及びアセトンから選ばれる１種又は２種以上の溶媒である。また、医薬又は飲食に適する観点から、エタノールが特に好ましい。【００４５】
両親媒性有機溶媒は、無水の状態で使用しても構わないが、両親媒性有機溶媒と水とを混合させた含水の状態で好ましく使用しうる。この場合の両親媒性有機溶媒／（両親媒性有機溶媒＋水）の重量比は、抽出のしやすさも考慮して、通常０．３以上、好ましくは０．４以上、より好ましくは０．５以上、さらに好ましくは０．６以上である。上記比率は、抽出時の系中における比率と解することができる。上記比率の含水溶媒を抽出に使用することにより、抽出工程における両親媒性有機溶媒のコストダウンが図れる。【００４６】
尚、言うまでもなく、悪影響のない範囲で、他の溶媒及び／又は溶解可能成分を共存させることもできる。
他の溶媒としては、例えば、ヘキサン等が挙げられる。
溶解可能成分としては、例えば、Ｔｗｅｅｎ（ツイーン）等が挙げられる。【００４７】
上記の両親媒性有機溶媒による抽出は、一般的な方法に従って実施することができ、特に制限されない。上記抽出の操作は、例えば、上記甘草に対して１〜２０倍容量の上記両親媒性有機溶媒を用いて、０．１時間〜１週間程度、又はそれ以上の時間で行うことができる。上記抽出は、必要に応じて、１回もしくは複数回実施してもよく、また、上記両親媒性有機溶媒を適宜組み合わせて用いても良い。抽出温度は、特に制限されず、系の固化温度から沸点の間、通常−２０〜１００℃、好ましくは１〜８０℃である。抽出時の圧力は、特に制限されず、常圧〜加圧された状態（１〜５気圧）が用いられうるが、所望ならば減圧にすることもできる。還流下に、また、やや加圧された状態でも、好ましく実施しうる。上記抽出操作は、安定性の面から、酸性〜弱アルカリ性、好ましくは酸性〜中性で好適に実施される。【００４８】
上記の抽出後は、必要に応じて、一般的な分離操作（例えば、加圧濾過、減圧濾過、遠心分離、沈降等）により、抽出液と甘草抽出残さを分離し、所望により上記溶媒で洗浄を行い、甘草抽出液を得ることができる。尚、上記分離操作においては、必要に応じて、活性炭、活性白土等の一般に使用しうる濾過助剤等を使用してもよい。
このようにして得られた甘草抽出液から、必要に応じて、一般的な溶媒除去操作（例えば、常圧濃縮、減圧濃縮、噴霧乾燥、凍結乾燥、凍結濃縮等）により、使用した溶媒を除去することによって、溶媒が除去された甘草抽出物を取得することができる。
なお、上記製造方法においては、活性成分の安定性の面から、上記一連の操作、なかでも両親媒性有機溶媒等による抽出、又は、両親媒性有機溶媒等による抽出及びその後の操作（抽出液の分離、溶媒除去）は、窒素ガス等を用いる不活性ガス雰囲気下等の脱酸素雰囲気下に行うのが好ましい。【００４９】
さらに、上記抽出により得たものから、シリカゲルやＯＤＳ等のカラムクロマトグラフィーにより、目的化合物を分画又は単離精製することができる。具体的には、上記抽出画分を減圧下濃縮して溶媒を除去し、粗画分を得る。その粗画分から、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ＯＤＳシリカゲルカラムクロマトグラフィー、ＯＤＳカラムを装着した高速液体クロマトグラフィー、ゲル濾過カラムクロマトグラフィー等を繰り返すことにより、目的化合物を単離精製することができる。【００５０】
好ましい実施態様としては、例えば、甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の乾燥原木を用い、両親媒性有機溶媒（例えば、エタノール等）で抽出を行い、その抽出液を減圧下濃縮して溶媒を除去し、抽出物を得る。その抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、有機溶媒を用いて溶出操作を行い、目的化合物の画分を得る。なお、上記化合物の製造法の具体例は、後述の実施例１に記載している。
また、各種クロマトグラフィー等で用いられる溶出溶媒としては、特に限定されないが、上記抽出溶媒として例示されたもの（水、両親媒性有機溶媒）、クロロホルム、アセトニトリル、ヘキサン等が挙げられる。【００５１】
また、その他の化学合成を利用して、上記化合物を得ることもできる。
さらに、上述の植物からの抽出や化学合成により得られた上記化合物を用いて、その塩やエステル体を得ることができる。当該塩は、上述のように、上記化合物の溶液を、好適な飲食用、医薬用、飼料用又はペットフード用に許容される酸の溶液と混合することによって得ることができる。当該エステルは、上述のように、飲食用、医薬用、飼料用又はペットフード用に好適な酸を使用して、公知の方法により得ることができる。【００５２】
次に、本発明のメタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物の製造方法について説明する。すなわち、当該組成物の製造方法は、上記化合物又はその塩もしくはエステルを製造し、必要に応じて、当該化合物又はその塩もしくはエステルを担体と混合することを含むものである。
当該組成物中における上記化合物又はその塩もしくはエステルの含有量は、特に限定されないが、組成物中０．００００００１重量％以上１００重量％未満含有されることが好ましい。【００５３】
上記式（１）、（２）、（４）、（５）、（６）で表される化合物は、純粋な化合物を使用してもよく、また、医薬品や飲食品として不適当な不純物を含有しない限り、半精製又は粗製のものを使用することもできる。その場合、上記甘草抽出物をそのまま用いてもよく、あるいはそれをさらに精製したものであっても良い。
その形態は特に限定されず、例えば、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）、健康食品、栄養補助食品等の飲食品、医薬品、医薬部外品等として用いることができる。
本発明の化合物、その塩、エステル、及び組成物は、魚類、爬虫類、両生類、鳥類、哺乳類等、あらゆる動物に投与又は適用することができる。哺乳類としては特に限定されず、ヒト、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、マウス、ラット、モルモット等が挙げられる。【００５４】
飲食品として用いる場合は、そのまま直接摂取することができ、また、公知の担体や助剤等を使用してカプセル剤、錠剤、顆粒剤等の服用しやすい形態に成型して摂取することができる。さらに、飲食品用に使用可能な他の製剤素材を、常法により適宜添加混合しても良い。このようなものとしては特に制限されず、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤等が挙げられる。
これら成型剤における本発明の上記化合物又はその塩もしくはエステルの含有量は、好ましくは０．１重量％以上１００重量％未満、より好ましくは１０〜９０重量％である。【００５５】
さらに、飲食物材料に混合して、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカー等の菓子類；アイスクリーム、氷菓等の冷菓類；茶、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンク等の飲料；うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺等の麺類；蒲鉾、竹輪、半片等の練り製品；ドレッシング、マヨネーズ、ソース等の調味料；マーガリン、バター、サラダ油等の油脂類；パン、ハム、スープ、レトルト食品、冷凍食品等、全ての飲食物に使用することができる。
これら飲食用組成物を摂取する場合、その摂取量は特に限定されないが、本発明の上記化合物又はその塩もしくはエステルとして、成人一人一日当たり、好ましくは０．１〜３０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重である。また、家畜やペット用の飼料やペットフードとしても使用することができ、その摂取量は特に限定されないが、本発明の上記化合物又はその塩もしくはエステルとして、一日当たり０．１〜３０００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましい。【００５６】
医薬品として用いる場合は、その剤形は特に限定されず、例えば、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、注射剤、坐剤、貼付剤等が挙げられる。製剤化においては、薬剤学的に許容される他の製剤素材、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤等を適宜添加して調製することができる。
これら製剤の投与量としては、特に限定されないが、本発明の上記化合物又はその塩もしくはエステルとして換算して、成人一人一日当たり、好ましくは０．１〜３０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重を、１回ないし数回に分けて投与する。また、家畜やペット用の医薬品としても使用することができ、その投与量は特に限定されないが、本発明の上記化合物又はその塩もしくはエステルとして、一日当たり０．１〜３０００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましい。【００５７】
本発明の上記化合物、その塩、エステル、及び上記組成物は、食経験のある甘草抽出物成分及びその類縁化合物からなり、毒性が低いと考えられる。また、本発明により得られた甘草抽出物は、甘み等が障害になる食品にも添加することができる。さらに、従来報告されているＰＰＡＲγリガンドである高度不飽和脂肪酸類に比べて安定性が高く、食品や医薬組成物に適した形状にしうるという点でも優れている。【００５８】
以上のように、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを有効成分として含有してなる組成物は、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置に有用であり、また、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置に有用である。【００５９】
また、本発明のメタボリックシンドロームの予防及び／又は処置方法、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置方法は、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルを用いる（投与又は適用する）ことを特徴とするものである。
さらに、メタボリックシンドロームの予防及び／又は処置用組成物を製造するための、及び、インスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置用組成物を製造するための、式（１）で表される化合物、式（４）で表される化合物及び式（５）で表される化合物から選ばれる少なくとも１種の化合物又はその塩もしくはエステルの使用も、本発明の範囲である。
【発明の効果】
【００６０】
本発明によれば、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体γ（ＰＰＡＲγ）リガンド剤、及びそれを含有する組成物が、簡便且つ効率的に提供される。本発明のリガンド剤及び組成物は、メタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６１】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【００６２】
（実施例１）甘草からの化合物の抽出、単離
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａの根及び走出茎）４ｋｇについて、９５％エタノール２．５Ｌを用いて抽出（４５℃、２時間）を２回行い、その抽出液を減圧下濃縮して溶媒を除去し、抽出物１２０．８ｇを得た。その抽出物を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（以下、ＣＣ）に付し、クロロホルム−メタノール（１９：１、９：１、２：１）、メタノールで５００ｍＬづつ分取しながら順次溶出し、計６４のフラクションを得た。フラクション番号１から１６のフラクションを集め、順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（９９：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計５０のフラクションを得た。フラクション番号３３から３７について逆相シリカゲルＣＣに付し、メタノール−水（４：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計８８のフラクションを得た。フラクション番号１から１０について順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（１００：１、５０：１、２０：１）で１００ｍＬづつ分取しながら順次溶出し、計６２のフラクションを得た。フラクション番号３４から４２について逆相シリカゲルＣＣに付し、アセトニトリル−水（２：３）で５０ｍＬづつ分取しながら溶出し、計４０のフラクションを得た。フラクション番号２０から２２について逆相シリカゲルカラムを装着した分取ＨＰＬＣを用いて精製を行い（溶離液：メタノール−水、７：３）、計３つのフラクションを得た。フラクション番号２（保持時間４４分）について、逆相シリカゲルカラムを装着した分取ＨＰＬＣを用いて精製を行い（溶離液：アセトニトリル−水、１：１）、化合物１（８．０ｍｇ）を得た（保持時間８７分）。なお、上記各フラクション番号は、それぞれ直前で得られたフラクションにおける番号を示す（以下同様）。【００６３】
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａの根及び走出茎）４ｋｇについて、９５％エタノール２．５Ｌを用いて抽出（４５℃、２時間）を２回行い、その抽出液を減圧下濃縮して溶媒を除去し、抽出物１２０．８ｇを得た。その抽出物を順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（１９：１、９：１、２：１）、メタノールで５００ｍＬづつ分取しながら順次溶出し、計６４のフラクションを得た。フラクション番号１から１６のフラクションを集め、順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（９９：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計５０のフラクションを得た。フラクション番号２から５のフラクションを集め、順相シリカゲルＣＣに付し、ヘキサン−アセトン（３：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計８０のフラクションを得た。フラクション番号１５から１７について逆相シリカゲルＣＣに付し、アセトニトリル−水（３：１）で５０ｍＬづつ分取しながら溶出し、計４４のフラクションを得た。フラクション番号９から１３について、逆相シリカゲルカラムを装着した分取ＨＰＬＣを用いて精製を行い（溶離液：アセトニトリル−水、２：１）、化合物２（７．８ｍｇ）を得た（保持時間８７分）。【００６４】
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａの根及び走出茎）４ｋｇについて、９５％エタノール２．５Ｌを用いて抽出（４５℃、２時間）を２回行い、その抽出液を減圧下濃縮して溶媒を除去し、抽出物１２０．８ｇを得た。その抽出物を順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（１９：１、９：１、２：１）、メタノールで５００ｍＬづつ分取しながら順次溶出し、計６４のフラクションを得た。フラクション番号１から１６のフラクションを集め、順相シリカゲルＣＣに付し、クロロホルム−メタノール（９９：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計５０のフラクションを得た。フラクション番号２から５のフラクションを集め、順相シリカゲルＣＣに付し、ヘキサン−アセトン（３：１）で１００ｍＬづつ分取しながら溶出し、計８０のフラクションを得た。計８０フラクション中のフラクション番号２９から３８を集め、逆相シリカゲルＣＣに付し、アセトニトリル−水（３：１）で５０ｍＬづつ分取しながら溶出し、計４４のフラクションを得た。フラクション番号５から７について、逆相シリカゲルカラムを装着した分取ＨＰＬＣを用いて精製を行い（溶離液：アセトニトリル−水、２：１）、化合物３（７．３ｍｇ）を得た（保持時間３３分）。【００６５】
構造解析の結果、化合物２はシンフラバノン（ｓｈｉｎｆｌａｖａｎｏｎｅ）と同定した。なお、同化合物の構造同定において、Ｉ．Ｋｉｔａｇａｗａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＆  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，４２，１０５６〜１０６２（１９９４）に記載されたスペクトルデータを参考にした。【００６６】
化合物１は新規化合物であり、各種二次元ＮＭＲの詳細な構造解析の結果、その構造を３，４，３’，４’−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙ−２−ｍｅｔｈｏｘｙ−５’−γ，γ−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｌｌｙｌｃｈａｌｃｏｎｅと決定した。
化合物１の性状及びスペクトル
褐色粉末状、Ｃ２１Ｈ２２Ｏ６
ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３７１．１４８７（計算値、Ｃ２１Ｈ２３Ｏ６：３７１．１４９５）
ＵＶ  ｌ  ｍａｘ（メタノール）ｎｍ：３６８（４．４５），２５７（４．１１）．
ＩＲ（ＮａＣｌ板）ｃｍ−１：３３７５，２９７０，１６９９，１６４２，１５９５，１５６６，１５０７，１４６９，１４３４，１２９８，１２１２，１１７３，１０５３，９８７，９４１，８５４．
１Ｈ−ＮＭＲ（重アセトン）ｐｐｍ：７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，Ｈ−ｂ），７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，Ｈ−ａ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，Ｈ−６’），７．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，Ｈ−２’），７．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−６），６．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−５），３．８８（３Ｈ，ｓ，２−ＯＭｅ），３．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−１”），１．７７  ａｎｄ  １．７５（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，Ｍｅ−４”  ａｎｄ  Ｍｅ−５”）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（重アセトン）ｐｐｍ：１８８．０（Ｃ−ｂ’），１４９．０（Ｃ−４），１４８．７（Ｃ−２），１４８．３（Ｃ−４’），１４４．６（Ｃ−３’），１３８．７（Ｃ−３），１３８．４（Ｃ−ｂ），１３２．３（Ｃ−３”），１３０．７（Ｃ−１’），１２８．２（Ｃ−５’），１２２．９（Ｃ−２”），１２２．８（Ｃ−６’），１２１．０（Ｃ−１），１２０．５（Ｃ−ａ），１１９．６（Ｃ−６），１１３．１（Ｃ−２’），１１２．０（Ｃ−５），６１．０（ＯＭｅ），２５．４（Ｃ−４”），１７．４（Ｃ−５”）．【００６７】
化合物３は新規化合物であり、各種二次元ＮＭＲの詳細な構造解析の結果、その構造を３，２’−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−４’−ｍｅｔｈｏｘｙ−６”，６”−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｎｏ［２”，３”：７，８］ｉｓｏｆｌａｖａｎｏｎｅと決定した。
化合物３の性状及びスペクトル
白色粉末状、Ｃ２１Ｈ２０Ｏ６
ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３６９．１３２０（計算値、Ｃ２１Ｈ２１Ｏ６：３６９．１３３８
ＵＶ  ｌ  ｍａｘ（メタノール）ｎｍ：３１３（３．９８），２６８（４．５６）．
ＩＲ（ＮａＣｌ板）ｃｍ−１：３３６３，２９７６，２９３２，１６６９，１６２０，１５９６，１５７７，１５１０，１４６３，１４３８，１３７２，１２７４，１２１２，１１６５，１１１３，１０８０，１０２３，９６１，８８７，８３９．
１Ｈ−ＮＭＲ（重アセトン）ｐｐｍ：７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ−６’），６．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，Ｈ−４”），６．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６），６．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．４Ｈｚ，Ｈ−５’），６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，Ｈ−３’），５．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，Ｈ−５”），４．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，Ｈ−２ａ），４．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，Ｈ−２ｂ），３．７４（３Ｈ，ｓ，４’−ＯＭｅ），１．４６  ａｎｄ  １．４５（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，Ｍｅ−７”  ａｎｄ  Ｍｅ−８”）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（重アセトン）ｐｐｍ：１８９．９（Ｃ−４），１６１．６（Ｃ−４’），１５９．６（Ｃ−７），１５７．４（Ｃ−８ａ），１５６．８（Ｃ−２’），１２９．６（Ｃ−５），１２８．９（Ｃ−５”），１２８．３（Ｃ−６’），１１７．５（Ｃ−１’），１１５．６（Ｃ−４”），１１３．９（Ｃ−４ａ），１１１．５（Ｃ−６），１０９．５（Ｃ−８），１０５．３（Ｃ−５’），１０２．７（Ｃ−３’），７７．９（Ｃ−６”），７４．５（Ｃ−３），７４．４（Ｃ−２），５５．０（ＯＭｅ），２７．９×２（Ｃ−７”，Ｃ−８”）．
上記化合物１、２、３の構造を表１に示す。【００６８】
【表１】
2006085562.tif 000012
【００６９】
（実施例２）ＰＰＡＲγリガンド活性の測定
ＣＶ−１細胞（雄性アフリカミドリザル腎臓由来の培養細胞）を９６穴培養プレートに６×１０３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように植え込み、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養した。培地には、１０％ＦＢＳ（ウシ胎仔血清）、１０ｍｌ／Ｌペニシリン・ストレプトマイシン溶液（それぞれ５０００ＩＵ／ｍｌ、５０００μｇ／ｍｌ、ＧＩＢＣＯ社）、３７ｍｇ／Ｌアスコルビン酸（和光純薬工業株式会社）を含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ：ＧＩＢＣＯ社）を用いた。細胞をＯＰＴＩ−ＭＥＭ（ＧＩＢＣＯ社）で洗浄した後、ｐＭ−ｍＰＰＡＲγと４×ＵＡＳｇ−ｌｕｃを、リポフェクトアミン・プラス（ＧＩＢＣＯ社）を用いてトランスフェクションした。なお、ｐＭ−ｍＰＰＡＲγは、酵母由来転写因子ＧＡＬ４遺伝子（アミノ酸配列１〜１４７）とマウスＰＰＡＲγリガンド結合部位遺伝子（アミノ酸配列１７４〜４７５）を結合したキメラ蛋白発現用プラスミドであり、４×ＵＡＳｇ−ｌｕｃは、ルシフェラーゼ遺伝子の上流にＧＡＬ４の応答配列（ＵＡＳｇ）を４回組み込んだレポーター・プラスミドである。トランスフェクションの約２４時間後、サンプル（化合物１〜３、陽性対照トログリタゾン）を含む培地に交換し、２４時間培養した（ｎ＝４）。
測定群のサンプルはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解したものを、無処置対照にはＤＭＳＯを用い、培地に１／１０００量添加した。細胞をＣａ、Ｍｇ含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ＋）で洗浄した後、ルックライト（Ｐａｃｋａｒｄ社）を添加し、トップカウント・マイクロプレートシンチレーション／ルミネッセンスカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ社）にてルシフェラーゼの発光強度を測定した。【００７０】
上記測定群と同様に、コントロール群としてｐＭ−ｍＰＰＡＲγの代わりにｐＭ（ＰＰＡＲγリガンド結合部位遺伝子を除去したプラスミド）を用いて測定した。
各サンプルについて、測定群及びコントロール群の発光強度の平均値（ｎ＝４）の比（測定群／コントロール群）を算出し、無処置対照に対する比活性をサンプルのＰＰＡＲγリガンド活性とした。比活性が１．５以上ある場合に、ＰＰＡＲγリガンド活性ありとして評価した。
実施例１で得た化合物１〜３のＰＰＡＲγリガンド活性を測定した結果を表２に示す。また、陽性対照としてトログリタゾン（三共株式会社）を用いた場合の結果も表２に示す。各化合物のＰＰＡＲγリガンド活性を比較したところ、化合物１、２、３に、トログリタゾン０．５μＭよりも強いＰＰＡＲγリガンド活性が認められた。【００７１】
【表２】
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【産業上の利用可能性】
【００７２】
本発明によれば、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体γ（ＰＰＡＲγ）リガンド剤、及びそれを含有する組成物が、簡便且つ効率的に提供される。本発明のリガンド剤及び組成物は、メタボリックシンドローム及びインスリン抵抗性症候群の予防及び／又は処置に有用である。
【国際調査報告】
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