(57)【要約】本発明は、安価な原料から簡易な方法で、抗酸化活性、チロシナーゼ阻害活性、肝保護作用、糖や中性脂肪の吸収抑制作用などの各種生理作用を有するポリフェノール含有抽出物を得ることを目的とする。具体的には、上記課題は、サツマイモ茎葉から得られるポリフェノール含有水溶性サツマイモ茎葉抽出物、その製造方法、上記サツマイモ茎葉抽出物を含有する機能性食品、機能性素材、抗酸化剤、肝保護剤、チロシナーゼ阻害剤、糖吸収抑制剤、中性脂肪吸収抑制剤などによって達成される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール含量が１０％以上であることを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項２】
ポリフェノール含量が２０％以上であることを特徴とする、請求項１記載のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項３】
ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする、請求項１または２に記載のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項４】
ポリフェノール中のケルセチン−３−グルコシド含量が、サツマイモ茎葉抽出物中の１％以上であることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれかに記載のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項５】
ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドおよび３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とする、請求項１ないし４のいずれかに記載のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項６】
サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドおよび３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項７】
サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール成分として少なくともケルセチン−３−グルコシド、クロロゲン酸および３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項８】
サツマイモ茎葉を含水有機溶媒により抽出する工程、前記抽出工程により得られた抽出液より有機溶媒を除去し水画分を得る工程を含んでなることを特徴とするポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物の製造方法。
【請求項９】
前記工程後にポリフェノールを精製する工程をさらに含む、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
サツマイモ茎葉の乾燥、粉砕、加熱、焙煎のいずれか一つ、またはこれらを組合わせた工程を前段階として含む、請求項８または９に記載の製造方法。
【請求項１１】
含水有機溶媒がエタノールであって、含量が４０〜９０％であることを特徴とする、請求項８ないし１０のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１２】
エタノール含量が６０％であることを特徴とする、請求項８ないし１１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
請求項８ないし１２のいずれかに記載の製造方法により得ることのできるポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１４】
請求項８ないし１２のいずれかに記載の製造方法により得ることのでき、ポリフェノール含量が１０％以上であり、かつ当該ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１５】
サツマイモ茎葉を水抽出する工程を経て得ることができる水溶性のサツマイモ茎葉抽出物であって、ポリフェノール含量が１０％以上であり、当該ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１６】
サツマイモの品種が白甘藷に属するものであることを特徴とする、請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４または１５に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１７】
サツマイモの品種がシロユタカであることを特徴とする、請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５または１６に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１８】
サツマイモ茎葉抽出物の製造工程の前段階に、サツマイモ茎葉の乾燥、粉砕、加熱、焙煎のいずれか一つ、またはこれらを組合わせた工程を含む、請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６または１７に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
【請求項１９】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性飲食品。
【請求項２０】
抗酸化、肝保護、チロシナーゼ阻害、糖吸収抑制、中性脂肪吸収抑制、肥満の予防・改善、抗うつ、抗疲労、のうちのいずれか１以上の機能を有する請求項１９に記載の機能性飲食品。
【請求項２１】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性素材。
【請求項２２】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする医薬品。
【請求項２３】
抗酸化、肝保護、チロシナーゼ阻害、糖吸収抑制、中性脂肪吸収抑制、肥満の予防・改善、抗うつ、抗疲労、のうちのいずれか１以上の薬効を有する請求項２２に記載の医薬品。
【請求項２４】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項２５】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする消臭剤。
【請求項２６】
ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１８に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする油脂および油脂含有食品の劣化防止剤。
【請求項２７】
水溶性のサツマイモ茎葉抽出物を、ポリフェノール含量として０．０１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ含有する飲料水。
【請求項２８】
請求項１、２、３、４、５、６、７、１３、１４、１５、１６、１７または１８に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物を含有する飲食品。
【請求項２９】
清涼飲料水、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料、油脂、加工食品、麺パン類、調味料、菓子類（水菓子、ゼリー、ヨーグルト、グミ）、または栄養補助食品である、請求項２７または２８に記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、ポリフェノールを含有する水溶性サツマイモ茎葉抽出物及びその製造方法に関する。また、本発明は、当該サツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性飲食品、機能性素材、医薬品、抗酸化剤、肝保護剤、チロシナーゼ阻害剤、糖吸収抑制剤、中性脂肪吸収抑制剤、肥満の予防・治療剤、抗うつ剤、抗疲労剤、消臭剤、油脂および油脂含有食品の劣化防止剤などにも関する。さらに、本発明は、当該サツマイモ茎葉抽出物を含有する飲食品に関する。
【背景技術】  ポリフェノール化合物は植物の二次代謝産物として広く植物に含まれており、その種類も多様であることが知られている。これらのポリフェノール化合物は多様な生理活性を持つ点で古くから薬学の分野で研究されており、近年においては食品化学の分野で注目を集めている。
そのなかで、特に最近研究の集中している茶のポリフェノール（カテキン類）においては、抗菌、抗ウィルス、抗酸化、抗突然変異、抗癌、血小板凝集抑制、血圧上昇抑制、血中コレステロール低下、抗う蝕、抗アレルギー、腸内フローラ改善、消臭など非常に広範な生理作用を有することが認知されつつある（特開昭６３−２１４１８３号、特開平２−６４９９号、特開平４−１７８３２０号、特開２００２−３２６９３２号）。
一方、サツマイモについては、「シモン芋」といわれるブラジル原産の品種については健康食品として塊根の粉末やその茎葉をお茶にした製品が販売されている。シモン芋葉部の凍結乾燥熱水抽出液のポリフェノール含量と抗酸化活性を調べ、ＨＰＬＣ分析によりポリフェノールの成分としてクロロゲン酸およびカフェ酸を同定した報告がある（日本食品科学工学会誌（２００２），４９（１０），６８３−６８７）。
また、ブラジル原産サツマイモ葉に含有される成分について、サツマイモ葉アルコール抽出物からケルセチン−３−グルコシド（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ−３−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）、ケンフェロール−４’，７−ジメチルエーテル（ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ−４’，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ）、オムブイン（ｏｍｂｕｉｎ）、ケルセチン（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）、ケルセチン−３’，４’，７−トリメチルエーテル（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ−３’，４’，７−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ）、β−シトステロール（β−ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）および蔗糖（ｓｕｃｒｏｓｅ）の７成分を単離したとの報告がある（Ｚｈｏｎｇｃａｏｙａｏ（１９９４），２５（４），１７９−８１）。中国産のサツマイモ葉のフラボノイドとして、ケルセチン−３−ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（６→１）−ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノシド（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ−３−ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（６→１）−ｏ−α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）、ケンフェロール−４，７−ジメチルエーテル（ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ−４，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ）、ケルセチン−３−ｏ−β−Ｄ−グルコシド（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ−３−ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅおよびケルセチンをＨＰＬＣにより単離したとの報告もある（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ（１９９６），１５（１），７１−７４）。一方、６０種のサツマイモについて葉部の凍結乾燥粉末のメタノール抽出液についてＨＰＬＣ分析によりポリフェノール成分を同定したところ、その主成分はカフェ酸およびその誘導体５種であり、全ての品種で同じ成分が検出されたという報告もある（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００２），５０，３７１８−３７２２）。
機能性については、サツマイモ茎葉の粉砕物が血糖値上昇抑制効果および血圧上昇抑制効果を有するとの報告がある（九州沖縄農業研究センター、［Ｏｎｌｉｎｅ］、［平成１６年８月４日検索］、インターネット、＜ＵＲＬ：
ｈｔｔｐ：／／ｋｏｎａｒｃ．ｎａｒｏ．ａｆｆｒｃ．ｇｏ．ｊｐ／ｐｒｅｓｓ／２００４０５２４／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ＞。また、サツマイモ地上部のエタノール抽出液にαアミラーゼ阻害活性、αグルコシダーゼ阻害活性、ＡＣＥ阻害活性があるとの報告がある（特開２００４−７５６３８号）。
【発明の開示】
現在、栽培されているサツマイモのほとんどが塊根を食用や加工用に利用されている。一方、茎葉についてはごく一部で食用とされているが、ほとんどが未利用な状態である。サツマイモ葉のポリフェノール成分を同定する試みがなされているが、報告されている成分は文献により異なっており、一致した見解は得られていない。また、サツマイモ茎葉から機能性食品素材として適した水溶性抽出物を取得する試みは未だなされていない。
植物に含まれるポリフェノールが広範な生理作用を有することが知られており、茶などの植物から抽出され、機能性食品などに応用されている。機能性食品に適応するためにはその機能性を発揮するための濃度が重要である。機能性を発揮する場合の有効濃度が高くなるとコストが高くなることとは別に、ポリフェノールの味が問題になり食品に用いにくくなる場合がある。ポリフェノールは茶のカテキンのように強い苦味があるものが多いことが知られており、低濃度でも機能性を発揮するものが求められている。また、イチョウ葉エキスや大豆イソフラボンのようにポリフェノールを含むエキスは水に難溶性である場合があるが、飲料等へ添加するためには水溶性の良いものが求められている。
本発明者らはより効率よくしかも経済的にポリフェノール含有抽出物を製造するために種々の原料をスクリーニングし、またポリフェノール含有抽出物の製造方法について検討し、さらにはそのようにして得られたポリフェノール含有抽出物の生理作用等を検討した。その結果、サツマイモの茎葉を原料とし、含水有機溶媒を用いて抽出し水溶性成分を得、ポリフェノール画分を精製することでポリフェノールを高濃度に含有し、かつ水溶性に優れた抽出物を効率よく得ることができることを見出した。また当該抽出物の生理作用を調べたところ予想を大幅に上回る高活性を持っていることを見出し、本発明に到達した。
すなわち、本発明は、下記に示すような、ポリフェノールを含有する水溶性サツマイモ茎葉抽出物、その製造方法、前記サツマイモ茎葉抽出物の用途などを提供する。
（１）サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール含量が１０％以上であることを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
（２）ポリフェノール含量が２０％以上であることを特徴とする、上記（１）記載のサツマイモ茎葉抽出物。
（３）ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする、上記（１）または（２）に記載のサツマイモ茎葉抽出物。
（４）ポリフェノール中のケルセチン−３−グルコシド含量が、サツマイモ茎葉抽出物中の１％以上であることを特徴とする、上記（１）ないし（３）のいずれかに記載のサツマイモ茎葉抽出物。
（５）ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドおよび３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とする、上記（１）ないし（４）のいずれかに記載のサツマイモ茎葉抽出物。
（６）サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドおよび３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
（７）サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノール成分として少なくともケルセチン−３−グルコシド、クロロゲン酸および３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物。
（８）サツマイモ茎葉を含水有機溶媒により抽出する工程、前記抽出工程により得られた抽出液より有機溶媒を除去し水画分を得る工程を含んでなることを特徴とするポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物の製造方法。
（９）前記工程後にポリフェノールを精製する工程をさらに含む、上記（８）に記載の製造方法。
（１０）サツマイモ茎葉の乾燥、粉砕、加熱、焙煎のいずれか一つ、またはこれらを組合わせた工程を前段階として含む、上記（８）または（９）に記載の製造方法。
（１１）含水有機溶媒がエタノールであって、含量が４０〜９０％であることを特徴とする、上記（８）ないし（１０）のいずれかに記載の製造方法。
（１２）エタノール含量が６０％であることを特徴とする、上記（８）ないし（１１）のいずれかに記載の製造方法。
（１３）上記（８）ないし（１２）のいずれかに記載の製造方法により得ることのできるポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１４）上記（８）ないし（１２）のいずれかに記載の製造方法により得ることのでき、ポリフェノール含量が１０％以上であり、かつ当該ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１５）サツマイモ茎葉を水抽出する工程を経て得ることができる水溶性のサツマイモ茎葉抽出物であって、ポリフェノール含量が１０％以上であり、当該ポリフェノールの成分として少なくともケルセチン−３−グルコシドを含有することを特徴とする水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１６）サツマイモの品種が白甘藷に属するものであることを特徴とする、上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）または（１５）に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１７）サツマイモの品種がシロユタカであることを特徴とする、上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）または（１６）に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１８）サツマイモ茎葉抽出物の製造工程の前段階に、サツマイモ茎葉の乾燥、粉砕、加熱、焙煎のいずれか一つ、またはこれらを組合わせた工程を含む、上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）または（１７）に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物。
（１９）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性飲食品。
（２０）抗酸化、肝保護、チロシナーゼ阻害、糖吸収抑制、中性脂肪吸収抑制、肥満の予防・改善、抗うつ、抗疲労、のうちのいずれか１以上の機能を有する（１９）に記載の機能性飲食品。
（２１）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性素材。
（２２）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする医薬品。
（２３）抗酸化、肝保護、チロシナーゼ阻害、糖吸収抑制、中性脂肪吸収抑制、肥満の予防・改善、抗うつ、抗疲労、のうちのいずれか１以上の薬効を有する（２２）に記載の医薬品。
（２４）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
（２５）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする消臭剤。
（２６）ポリフェノールを含有する水溶性のサツマイモ茎葉抽出物、または上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）もしくは（１８）に記載のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする油脂および油脂含有食品の劣化防止剤。
（２７）水溶性のサツマイモ茎葉抽出物を、ポリフェノール含量として０．０１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ含有する飲料水。
（２８）上記（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）または（１８）に記載の水溶性のサツマイモ茎葉抽出物を含有する飲食品。
（２９）清涼飲料水、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料、油脂、加工食品、麺パン類、調味料、菓子類（水菓子、ゼリー、ヨーグルト、グミ）、または栄養補助食品である、上記（２７）または（２８）に記載の飲食品。
本発明によれば、人体に種々の有益な活性を有するポリフェノール含有水溶性サツマイモ茎葉抽出物を提供することができる。本発明の抽出物は、水溶性であるがゆえに、例えば、種々の飲料に溶かして摂取することができるという利点がある。
また、本発明のポリフェノール含有サツマイモ茎葉抽出物の製造方法によれば、特別な材料や施設を用いることなく効率良くポリフェノール含有抽出物を得ることができる。
さらに、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、抗酸化活性、チロシナーゼ阻害活性、肝保護作用、糖や中性脂肪の吸収抑制作用等の活性又は作用を有するので、そのような活性又は作用を有する機能性飲食品、機能性素材、医薬等として有用である。
【図面の簡単な説明】  図１は、サツマイモの茎及び葉から得られたサツマイモ茎葉抽出物の液体クロマトグラフィーのチャートである。
図２は、サツマイモの葉から得られたサツマイモ茎葉抽出物の液体クロマトグラフィーのチャートである。
図３は、実施例９のＡＰＰＨ投与ラット肝障害モデルにおけるサツマイモ茎葉抽出物の抗酸化作用を示すグラフである。（ａ）は尿中８−ＯＨｄＧの測定結果を、（ｂ）は肝ホモジナイズ試料中のチオバルビツール酸反応物（ＴＢＡＲＳ）の測定結果を表す。
図４は、実施例１１のラット糖負荷試験におけるサツマイモ茎葉抽出物の糖吸収抑制作用を示すグラフである。
図５は、実施例１１の血糖上昇抑制効果についてのグアバ葉抽出物との比較試験の結果を示すグラフである。
図６は、実施例１２のラット脂肪負荷試験におけるサツマイモ茎葉抽出物の中性脂肪吸収抑制作用を示すグラフである。
図７は、実施例１２の脂肪吸収抑制作用についての緑茶抽出物との比較試験の結果を示すグラフである。
図８は、実施例１６のサツマイモ茎葉抽出物の消臭効果を示すグラフである。アンモニア（ａ）、メルカプタン（ｂ）、トリメチルアミン（ｃ）の結果をそれぞれ表す。
図９は、実施例１７の脂肪細胞の状態を示す。
図１０は、実施例１８の強制遊泳試験におけるマウスのＥＤＢおよびＩＭＯの平均時間を示すグラフである。
図１１は、実施例１９のサツマイモの茎葉抽出物の濃度における油脂の変敗時間を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】  以下、本発明を詳細に説明する。
（ポリフェノール含有水溶性サツマイモ茎葉抽出物）
本発明の第１の態様は、サツマイモ茎葉由来の水溶性抽出物であって、ポリフェノールを含有していることを特徴とするサツマイモ茎葉抽出物に関する。本明細書中、「サツマイモ」とは、ヒルガオ科サツマイモ属に属する植物のことをいい、この属であれば如何なる品種のものを用いることもでき、例としてシロユタカ、コガネセンガン、ＳＵＫＵＨ、種子島紫、シモンイモ等が挙げられるが、好ましくは白甘藷に属する品種のサツマイモである。白甘藷とは、塊根部の皮がアントシアニンをほとんど含まず、白色であるサツマイモをいう。より好ましくはシロユタカである。なお、本明細書中、「サツマイモ茎葉」は、サツマイモの地上部のうち少なくとも葉を含み、好ましくは茎葉両方を含む材料という意味で用いられる。とりわけ好ましくは葉のみである。サツマイモ茎葉は、通常、用途がなく廃棄処分されているので、このような材料を利用することは資源の再利用の面でも有意義である。ここで用いられるサツマイモ茎葉は、新鮮材料であってもよく、また乾燥材料であってもよい。好ましくは乾燥材料であり、乾燥方法としては天日乾燥、温風乾燥、凍結乾燥等適当な手段を適宜選択し得るが、天日乾燥が好ましい。また、サツマイモ茎葉は、抽出効率を考慮して粉砕したものを使用することもできる。また、サツマイモ茎葉に適宜、焙煎等を施すことにより、抽出物の味や風味を増すことも可能である。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は水溶性であるから、例えば、種々の飲料に溶かして摂取することができるという利点がある。ここで、「水溶性」とは、室温で１Ｌの水に対し、少なくとも１００ｍｇ以上、好ましくは１ｇ以上、更に好ましくは１０ｇ以上、特に好ましくは５０ｇ以上溶解できることをいう。
本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、有効成分としてサツマイモ茎葉由来のポリフェノールを含有する。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、好ましくはカテキン換算で全不揮発性成分重量の１０％以上、好ましくは１５％以上、より好ましくは２０％以上、さらに好ましくは２５％以上、とりわけ好ましくは３０％以上のポリフェノールを含有する。ポリフェノール含量の上限は特に限定されないが、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、通常、６０％ぐらいまでのポリフェノールを含有する。ポリフェノールの含量は、没食子酸換算による表現を用いてもよい。サツマイモの茎葉由来のポリフェノール成分としては、例えば、ケルセチン−３−グルコシドやケルセチン−３−ガラクトシド等のケルセチン配糖体、クロロゲン酸、３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸、４，５−ジカフェオイルキナ酸、３，４，５−トリカフェオイルキナ酸等のカフェ酸誘導体等が例示される。なお、サツマイモの茎葉由来のポリフェノールにおいては、未同定のポリフェノール成分が含有されている可能性があるが、本発明はそのような未同定ポリフェノール成分を排除するものではない。上記ポリフェノール中、ケルセチン−３−グルコシドは体内への吸収が良好なことから好ましいポリフェノール成分である（Ｏｌｔｈｏｆ  ＭＲ．ら、Ｊ  Ｎｕｔｒ．２０００  Ｍａｙ；１３０（５）：１２００−１２０３、Ｍｏｒａｎｄ  Ｃ．ら、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｒｅｓ．２０００  Ｎｏｖ；３３（５）：６６７−７６．）。ゆえに、本発明の好ましい態様においては、本発明の水溶性サツマイモ抽出物は、水溶性のサツマイモ茎葉抽出物中のポリフェノール成分の構成成分として、少なくともケルセチン−３−グルコシドを有するものであり、さらに好ましくは、ケルセチン−３−グルコシド、３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有するものが好ましい。さらに好ましくは、少なくともケルセチン−３−グルコシド、クロロゲン酸および３，５−ジカフェオイルキナ酸を、とりわけ好ましくは、少なくともケルセチン−３−グルコシド、ケルセチン−３ガラクトシド、クロロゲン酸および３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有することが望ましい。前記ポリフェノール中のケルセチン−３−グルコシド含量がサツマイモ抽出物中の１％以上、好ましくは２％以上、より好ましくは３％以上、特に好ましくは５％以上であることが望ましい。ケルセチン−３−グルコシド含量の上限は限定されないが、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、通常、前記ポリフェノール中３０％ぐらいまでのケルセチン−３−グルコシドを含有する。サツマイモの葉にはケルセチン−３−グルコシド、−ガラクトシドなどのケルセチン配糖体が多く含まれているので、葉の割合が多い原料を用いて抽出するとケルセチン配糖体を多く含んだ画分を得ることができる。なお、ケルセチン−３−ガラクトシドはこれまでサツマイモ茎葉の成分としては知られていなかったものであり、本発明のサツマイモ茎葉抽出物を特徴付ける成分の１つである。前記ポリフェノール中の３，５−ジカフェオイルキナ酸含量は、１％以上が好ましく、より好ましくは２％以上、とりわけ好ましくは３％以上である。クロロゲン酸も含有していることが望ましい。また、本発���のサツマイモ茎葉抽出物は、ポリフェノール以外に例えば、フェニルアラニン、トリプトファン等のアミノ酸、有機酸、多糖類、糖脂質等の副成分が含まれていてもよい。有機酸としては、例えばキナ酸、多糖類としては、例えばオリゴ糖、糖脂質としては、例えばヤラピン等が挙げられ、これらのポリフェノール以外の成分も本発明のサツマイモ茎葉抽出物の好ましい構成成分である。これらのポリフェノール成分または副成分の定量は、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により行うことができる。
本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、製造方法は特に限定されず、抽出効率の観点からは、後述する含水有機溶媒による抽出が好ましいが、水抽出によっても得ることができる。水抽出には、熱水、温水または冷水を用いることができ、目的とする温度の水に、茎葉を入れて一定時間浸漬し、目的成分を抽出する。茎葉は、事前に乾燥および粉砕を施しておくことが好ましい。抽出温度としては例えば、熱水の場合、６０〜１００℃、好ましくは６０〜８０℃、温水の場合、３０〜６０℃、好ましくは５０〜６０℃、冷水の場合、０〜３０℃、好ましくは１０〜３０℃であるが、抽出効率の点からは熱水抽出が好ましい。抽出時間は特に限定されないが、熱水の場合には１０〜１５０分間、好ましくは２０分〜７０分間であり、抽出温度を下げるに従い、長時間かけて抽出するのが好ましく、冷水抽出の場合には１日程度かけて抽出することもできる。また、抽出の際には加圧して抽出することができ、特に抽出温度を低くする場合には加圧して抽出するのが望ましい。抽出後には抽出液を冷却して、沈殿を除去し、サツマイモ茎葉抽出物を得ることができる。ドリップ抽出であれば、布や紙のフィルターの上に茎葉を置き、上から熱湯を注いで濾（こ）す。欲する味や風味、香ばしさの違いにあわせて適宜選択できる。さらに、後述する精製過程を付加してもよいが、カラムによる精製を行う前に、抽出液を希釈する工程、もしくは沈殿を除去する際に沈殿除去の促進剤（有機酸、エタノール等）を添加する工程等のカラム精製を実施しやすくするのための工程を加えることが望ましい。得られたサツマイモ茎葉抽出物の水溶液をさらに濃縮して利用してもよいし、乾燥させて水分を除去することにより、粉末状のサツマイモ茎葉抽出物としてもよい。
（サツマイモ茎葉抽出物の製造方法及びその製法によって得ることができる抽出物）
本発明の第２の態様は、サツマイモ茎葉を含水有機溶媒により抽出する工程、前記抽出工程により得られた抽出液より有機溶媒を除去し水画分を得る工程、前記水画分からポリフェノールを精製する工程を含んでなることを特徴とするポリフェノール含有サツマイモ茎葉抽出物の製造方法に関する。本発明の第３の態様はこの製造方法によって得ることができるサツマイモ茎葉抽出物に関する。
以下、本発明の製造方法における各工程の好ましい態様について述べる。
（抽出工程）
まず、本発明の製法においては、サツマイモ茎葉を含水有機溶媒を用いた抽出に供する。ここで用いられるサツマイモ茎葉は、前述の通り、新鮮材料でも乾燥材料であってもよく、抽出効率を考慮すると粉砕したものが好適である。ここで用いられる抽出方法は、特に限定されず、静置又は攪拌条件下、冷浸、温浸または還流するなどの公知の方法を用いることができる。例えば、乾燥させたサツマイモ茎葉を破砕したものに含水有機溶媒を加え、それらを混合し、そのまま浸漬または加熱還流しながら抽出する。加える含水有機溶媒の量は特に限定されないが、乾燥材料を用いる場合は材料の容量の少なくとも３倍以上、新鮮材料を用いる場合は材料の容量の少なくとも５倍以上の容量の含水有機溶媒を加えることが望ましい。
ここで、抽出に用いられる含水有機溶媒としては、サツマイモ茎葉からポリフェノール類を抽出できるものであれば特に限定されず、例えば、水と親水性有機溶媒の混合溶液が用いられる。この混合溶液中の有機溶媒含量は、例えば、４０〜９０容量％、好ましくは４０〜８０容量％、より好ましくは５０〜８０容量％である。親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、ｔ−ブタノールなどの一価の低級アルコール；エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコールなどの多価アルコール；メチルセロソルブ、エチルセロソルブなどのセロソルブ類；ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類などが挙げられる。本発明においては、特に、含水アルコール（エタノール、メタノール等）を好適に用いることができる。本発明者らは、抽出する際の抽出液である含水アルコールについて水分量が多いと抽出されたポリフェノールが時間と共に分解消失していくことを見出している。また、アルコール濃度が高すぎると収量が低下し、匂いや味が悪くなる傾向があるため、適正なアルコール濃度があることを見出した。すなわち、本発明の抽出工程において用いられる含水アルコール（例えば、エタノール）は、好ましくは、４０〜９０容量％、より好ましくは、５０〜８０容量％のアルコール（例えば、エタノール）である。特に、６０容量％以上のエタノールが望ましい。なお、上記のような抽出は、例えば、１０〜７０℃、好ましくは４０〜６０℃で、１時間〜４８時間、好ましくは、２時間〜１０時間行なわれる。
次いで、上記のようにして得られた抽出液について、有機溶媒を除去し水画分を得る。有機溶媒を除去する方法としては、減圧濃縮による有機溶媒の留去、非親水性有機溶媒（例：ヘキサン等）による有機溶媒の分画など、使用する含水有機溶媒の種類により当業者が用い得る手法を適宜選択し得る。含水エタノールを使用する場合は、減圧濃縮によるアルコールの留去が好ましい。有機溶媒の除去は、溶液中の水の比率が少なくとも７０％以上になるまで行うことが好ましい。このようにして得られた有機溶媒を除去した抽出液を水画分と呼ぶこととする。水画分を得る工程で、水に不溶または難溶な成分が沈殿する、または分画されるので、水画分は、水に不溶なサツマイモ茎葉成分が除かれた状態となっている。よって、この工程が、本発明のサツマイモ茎葉抽出物の水溶性を高めるために寄与しているものと考えられる。水に不溶または難溶な成分の沈殿を促すために、水画分を静置したり、数倍量の水を加える操作を行っても良い。沈殿した水に不溶または難溶な成分は、デカントで除く、非親水性有機溶媒（例：ヘキサン等）により分画して除く、ろ過する等適当な手段で除去すればよい。
（精製工程）
次に、上記のようにして得られた水画分のポリフェノールを精製する。ここでポリフェノールを精製するとは、サンプル中の不揮発性成分の総含量におけるポリフェノールの割合を高めることを意味する。具体的には、水画分から、ポリフェノール以外の各種の不揮発性成分を除去することによって精製を達成することができる。最終的に得られるサツマイモ茎葉抽出物（通常、水などの揮発可能な成分を除去した粉末の形態をとる）において、全不揮発性成分中のポリフェノールの含量が１０％以上、好ましくは２０％以上になればポリフェノール画分が精製されたものとする。精製すなわちポリフェノール以外の不揮発性成分の除去は、吸着剤を用いる方法などの公知の方法が用いられる。例えば、ポリフェノール類を選択的に吸着かつ溶離できる吸着剤を充填したカラムに、上記の水画分を通すことによりポリフェノールを吸着剤に吸着させ、洗浄後、溶出液によって精製ポリフェノールを溶出させる。カラムではなくバッチ法でもよい。また、水画分に対し、エタノール等の親水性有機溶媒を添加し、有機溶媒に難溶性の不揮発性成分（多糖類等）を沈殿させ除去する方法でもよい。このような沈殿除去法と、カラム精製を組み合わせて用いてもよい。
ここで用いられる吸着剤としては、例えば架橋スチレン系の多孔質重合体の合成吸着樹脂、陰イオン交換樹脂、オクタデシル基化学結合型シリカゲル（ＯＤＳ）等を用いることができる。市販の合成樹脂吸着剤としては、例えば、三菱化成株式会社のダイヤイオンＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＨＰ２ＭＧ、ＳＰ２０７、ＳＰ８２５、ＳＰ８５０；ローム・アンド・ハース社のアンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４、ＸＡＤ−７、ＸＡＤ−２６などを用いることができる。吸着剤を用いる精製方法の実施条件等は当業者に容易に設定できる。市販の吸着剤に、マニュアルが添付されている場合は、そのマニュアルの指示にしたがって吸着操作を行なうことができる。
上記吸着後は、通常、カラムに洗浄液を通すことより不純物などを洗浄・除去する。洗浄液としては、水（好ましくは蒸留水）、１〜１０重量％のエタノール水溶液等が好適に用いられる。通常、樹脂量の１〜１０倍程度の洗浄液を通液するとよい。洗浄後、溶出液をカラムに通すことによりポリフェノール含有画分を溶出、回収することができる。溶出液としては、例えば、含水アルコール、含水アセトン、含水アセトニトリルなどの含水有機溶媒を用いることができる。特に好適な溶出液は、２０％以上のエタノール水溶液または１００％エタノールである。通常、溶出液の通液量は樹脂量の２〜６倍程度が望ましい。
このようにして得られたポリフェノール含有画分を減圧濃縮（又は濃縮乾固）することにより有機溶媒を留去させ、サツマイモ茎葉抽出物の水溶液を得ることができる。さらに、サツマイモ茎葉抽出物の水溶液を噴霧乾燥または凍結乾燥などで水分を除去し、粉末状のサツマイモ茎葉抽出物を得ることができる。粉末は、必要に応じて、粉砕器を用いて粒径を揃えたり、微粒粉末とすることもできる。また、デキストリン等の粉末助剤を添加して噴霧乾燥や凍結乾燥を行うことができ、さらに、得られた粉末に安定化剤、賦形剤等を添加することもできる。このようにして得られた組成物、すなわち、液体製剤又は粉末製剤は、後述のサツマイモ茎葉抽出物含有機能性飲食品、機能性素材、医薬製剤、抗酸化剤、肝保護剤、チロシナーゼ阻害剤、糖吸収抑制剤、中性脂肪吸収抑制剤、肥満の予防・治療剤、抗うつ剤、抗疲労剤、消臭剤、油脂および油脂含有食品の劣化防止剤などとして利用できる。
本発明の第３の態様は、上記製造方法によって得ることができるサツマイモ茎葉抽出物である。上記製造方法によって得ることができるサツマイモ茎葉抽出物と物として同一であれば、異なる製造方法によって得られたものであっても本発明のサツマイモ茎葉抽出物に含まれる。物として同一であるかどうかは、例えば、本発明の第１の態様に記載された特徴を有しているかどうかをもって確認することができる。すなわち、上記製造方法によって得ることができるサツマイモ茎葉抽出物の好ましい形態は、上記製造方法によって得ることができ、かつ本発明の第１の態様に記載された水溶性、ポリフェノール含量、ポリフェノール成分、ポリフェノール中の各種成分の含量等で特徴づけられるサツマイモ茎葉抽出物である。
（用途）
本発明の第４の態様は、上記本発明の第１の態様または第３の態様で述べたサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする医薬品、機能性飲食品、機能性素材、抗酸化剤、肝保護剤、チロシナーゼ阻害剤、糖吸収抑制剤、中性脂肪吸収抑制剤、肥満の予防・治療剤、メタボリックシンドロームの予防・治療剤、抗うつ剤、抗疲労剤、消臭剤、油脂および油脂含有食品の劣化防止剤などに関する。さらに、当該サツマイモ茎葉抽出物を含有する飲食品にも関する。ここで用いられるサツマイモ茎葉抽出物の製造方法としては、上記製造方法が好ましいが、特にこれに限定されることはなく、如何なる公知の方法をも用いることができる。ここで用いられるサツマイモ茎葉抽出物の好ましい態様は、本発明の第１の態様または第３の態様に記載された特徴を有しているサツマイモ茎葉抽出物である。
１．抗酸化剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物の抗酸化能は、後述の実施例８の各種の抗酸化能実験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、抗酸化剤の有効成分として用いることができる。
本発明の抗酸化剤は、実施例９のラットを用いた実験によって、生体内においても活性酸素を消去する作用を有することが確認されている。したがって、本発明の抗酸化剤は、活性酸素が関与する種々の疾患や症状の予防または治療に用いることができる。活性酸素が関与する疾患としては、活性酸素によって誘導され得る癌、アレルギー、動脈硬化など過酸化脂質が関与する疾患などが挙げられる。活性酸素が関与する症状としては、老化にともなう各種症状、シミ、シワ、肌荒れなどが挙げられる。
２．肝保護剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物の肝保護作用は、後述の実施例９のラットを用いた実験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、肝保護剤の有効成分として用いることができる。
本発明の肝保護剤は、肝臓機能の不全又は低下が関与する疾患や症状の予防または治療および改善に用いることができる。そのような肝臓機能の不全又は低下が関与する疾患としては、例えば、肝硬変、ウイルス肝炎、劇症肝炎、肝癌等の肝疾患、肝臓の損傷・疲弊などが挙げられる。肝臓機能の不全又は低下が関与する症状として、二日酔い、アルコール肝炎、倦怠感、疲労感、血行不良などが挙げられる。これらの疾患や症状を予防するためには、本発明の肝保護剤を事前または平時から摂取することにより肝臓機能を向上させておくことが好ましい。
３．チロシナーゼ阻害剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物がチロシナーゼ阻害活性を有することは、後述の実施例１０に記載のチロシナーゼ阻害活性試験によって確認されている。チロシナーゼはポリフェノールオキシダーゼともいわれ、ポリフェノールを不活性化し、皮膚のメラニン生成や食品の褐変反応を増悪する酵素である。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、チロシナーゼ阻害剤の有効成分として用いることができる。
本発明のチロシナーゼ阻害剤は、チロシナーゼが関与する疾患や症状の予防または治療および改善に用いることができる。そのようなチロシナーゼが関与する症状としては、例えば、皮膚のメラニンの発生、日焼け、色素沈着などが挙げられる。また、本発明のチロシナーゼ阻害剤を摂取することにより、皮膚のメラニンの発生を抑制することができ、美白効果が期待できる。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、美白作用を有する化粧品又は機能性食品の有効成分としても用いることもできる。
４．糖吸収抑制剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が糖吸収抑制作用を有することは、後述の実施例１１に記載のラットを用いた実験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、糖吸収抑制剤の有効成分として用いることができる。
本発明の糖吸収抑制剤は、糖吸収を抑制し、血糖値の上昇を抑制する作用があるので、人体中に摂取される糖が関与する疾患や症状の予防または治療および改善に用いることができる。そのような糖が関与する疾患としては、例えば、糖尿病、肥満、糖尿病性合併症などが挙げられる。また、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、食後の過血糖を防ぐ効果があるため血糖値が気になる人に対し訴求力のある機能性食品素材になり得る。
５．中性脂肪吸収抑制剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が中性脂肪吸収抑制作用及び吸収遅延作用を有することは、実施例１２に記載のラットを用いた実験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、中性脂肪吸収抑制剤の有効成分として利用できる。
本発明の中性脂肪吸収抑制剤は、中性脂肪吸収を抑制する作用を有するので、中性脂肪の過多が関与する疾患や症状の予防または治療および改善に用いることができる。そのような疾患としては、例えば、高コレステロール症、高脂血症、虚血性心疾患、脳血管障害などが挙げられる。また、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、体脂肪が気になる人に対し訴求力のある機能性食品素材となり得る。
６．肥満の予防・治療剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が脂肪細胞の分化および肥大化抑制作用を有することは、実施例１７に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるラット腸間膜由来白色脂肪細胞の分化および肥大化抑制試験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、脂肪細胞の分化および肥大化抑制剤の有効成分として利用でき、ゆえに、肥満の予防・治療剤として用いることができる。さらに、サツマイモ茎葉抽出物は、上記の糖吸収抑制作用、中性脂肪吸収抑制作用も有することから、これら作用の相乗効果によっても肥満の予防・治療効果が期待できる。
本発明の肥満の予防・治療剤は、肥満が関与する疾患や症状の予防または治療および改善に用いることができる。そのような疾患としては、例えば動脈硬化、高血圧、糖尿病などが挙げられる。また、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、肥満および体脂肪が気になる人に対し訴求力のある機能性食品素材となり得る。
７．メタボリックシンドロームの予防・治療剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、上記のとおり糖吸収抑制作用によって高血糖症状を予防・改善し、中性脂肪吸収抑制作用によって、高脂血症、とりわけ高トリグリセライド血症の予防・改善が可能となり、脂肪細胞の分化および肥大化抑制作用等により肥満の予防・治療作用等を有することも併せてメタボリックシンドロームの予防・治療剤の有効成分として利用できる。メタボリックシンドロームとは、主に内臓脂肪の蓄積に起因し、肥満、糖尿病、高脂血症、高血圧等の複数の危険因子が重積し、動脈硬化や冠動脈疾患（最終イベントとして、心筋梗塞や脳梗塞）の発症リスクが高まった病態をいう。食習慣の乱れから様々な生活習慣病が発症しがちな現代社会において、問題視されている疾患のひとつである。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、メタボリックシンドロームの予防・改善に有効な作用を複数併せ持つことから、メタボリックシンドロームが気になる人に対し訴求力のある機能性食品素材となり得る。
８．抗うつ剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が抗うつ作用を有することは、実施例１８に記載のマウス強制水泳法による抗うつ作用の検討によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、抗うつ剤の有効成分として利用できる。また、ストレスを軽減し、リラックス効果も期待できる。
本発明の抗うつ剤は、抗うつ作用を有するので、うつ病およびうつ病に関連する症状の予防または治療および改善に用いることができる。また、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、うつ病が気になる人、ストレスの多い現代人に対し訴求力のある機能性食品素材となり得る。
９．抗疲労剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が抗疲労作用を有することは、実施例１８に記載のマウス強制水泳法による抗疲労作用の検討によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、抗疲労剤の有効成分として利用できる。
例えば長時間の運動による肉体的な疲労を軽減する、また、気分をリラックスさせて精神的なストレスや疲労を感じにくくする等、身体的および精神的な疲労の予防、軽減、改善が期待である。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、例えば常に身体的な疲労を受けるスポーツ選手、長時間の労働などによって身体的および精神的疲労を感じやすい人に対し訴求力のある機能性食品素材となり得る。
１０．消臭剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物がヒトやペットの口臭、体臭、便臭等の原因物質に対する脱臭効果を有することは、実施例１６に記載の試験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、消臭剤の有効成分として利用できる。
サツマイモ茎葉抽出物は、ヒトやペットの口臭、体臭、便臭に対する消臭、飲食品の消臭等にも使用することができ、脱臭効果を有する物質の中でも、極めて幅広い応用範囲で使用可能な物質となり得る。
１１．油脂および油脂含有食品の劣化防止剤
本発明のサツマイモ茎葉抽出物が油脂および油脂含有食品の劣化防止に有効であることは、実施例１９に記載の油脂安定性試験によって確認されている。したがって、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、油脂の変敗を抑制する劣化防止剤として、とりわけ動物性の油脂の劣化防止剤として有用である。豚脂・ラードなどの動物脂質を使用する加工食品（フライドポテトやスナック、カップ麺等）をはじめ、その他様々な油脂類に添加し、油脂の劣化防止に応用できる。食品油脂の劣化防止には、粉末状のサツマイモ茎葉抽出物を油脂中にぱらぱらと添加したり、サツマイモ茎葉抽出物の水溶液を油脂に混ぜて乳化したりすることも可能である。また、粉末状のサツマイモ茎葉抽出物を天ぷら粉、パン粉、小麦粉等の揚げ衣に添加したり、油脂で加工する食品原料中に混合したりすることにより、食品を油脂で調理すると同時に油脂の劣化を防止することもできる。食品油脂への添加量は特に限定されないが、好ましくは１０ｐｐｍ以上、より好ましくは２００ｐｐｍ以上、とりわけ好ましくは５００ｐｐｍ以上であり、上限は限定されないが、サツマイモ茎葉抽出物をソフトカプセルに加工し、油脂の５０重量％程度のサツマイモ茎葉抽出物を添加することも可能である。
１２．医薬品、機能性飲食品および機能性素材
本発明のサツマイモ茎葉抽出物は抗酸化活性、肝保護作用、チロシナーゼ阻害活性、糖や中性脂肪の吸収抑制作用等の活性又は作用を有し、機能性素材として優れた機能を有している。よって本発明のサツマイモ茎葉抽出物は機能性素材の有効成分として利用できる。
機能性素材は、機能性を有する材料、原料として、あらゆる用途に利用できる。形態も特に限定されず、有効成分はサツマイモ茎葉抽出物のみであってもよいし、その他の機能性素材や原料と混合された状態であってもよく、粉末、液体、成形体等あらゆる形をとり得る。実施例２０で、サツマイモ茎葉抽出物を原料として、顆粒、錠剤およびグミを作製し、機能性素材として利用しやすいことは確認されている。
機能性素材として食品用途で効果が期待できる１日あたりの摂取量は成人１日あたり０．１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは１ｍｇ／ｋｇ以上、更に好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ以上、特に好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ以上である。１日あたりの摂取量の上限は特に限定されないが、例えば、２０００ｍｇ／ｋｇ程度までは許容範囲内である。但し、好ましい摂取量の範囲は、製品形態や個人の特性により当然変動することが考えられる。
機能性素材としては、食品として摂取する以外の用途として、抗酸化効果を有することから食品の酸化防止剤、食品色素の安定剤、消臭剤等への利用が考えられる。また、チロシナーゼ阻害活性を有することから化粧料としての利用が考えられる。化粧料は、常法に従って製造することができる。化粧料は、一般の皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、指定医薬部外品、外用医薬品等を包含するものであり、その剤型も目的に応じて任意に選択することができる。すなわち、クリーム、軟膏、乳液、溶液、ゲル等の剤型やパック、ローション、パウダー、スティック等の形態とすることができる。抽出物の配合量は、化粧料の総量を基準として、成分固形分換算で０．０００１〜１．０％が好ましく、特に好ましくは０．００１〜０．１％である。
本発明のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする機能性飲食品は、本発明のサツマイモ茎葉抽出物を適当な製剤に製剤化すること、または飲食品に添加することにより提供される。本発明のサツマイモ茎葉抽出物を有効成分とする医薬品は、本発明のサツマイモ茎葉抽出物を適当な製剤に製剤化することで提供される。
医薬品または機能性飲食品（健康食品）としての製剤の形態としては、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。この経口投与剤は、経口投与剤の形態に応じて一般に用いられる賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等を添加して製造することができる。サツマイモ茎葉抽出物は、経口投与用剤中に、用途及び形態によっても異なるが、一般に０．１〜１００重量％、特に１〜８０重量％含有するのが好ましい。
また、医薬品として本発明のサツマイモ茎葉抽出物を投与する場合、その投与量はその作用、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより変化するが、例えば、一般的に体重６０ｋｇの成人においては、ポリフェノール含量として１日につき約１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜５００ｍｇ、より好ましくは３０ｍｇ〜３００ｍｇである。
サツマイモ茎葉抽出物を飲食品に添加することにより機能性飲食品を提供する場合には、食品や飲料等にサツマイモ茎葉抽出物をその機能性を発揮できるように添加する。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、食事中の糖質や中性脂肪の過剰吸収および肝臓での過酸化脂質の産生を抑制できる特性を有しカロリーダイエットにも有望であることから、糖質を多く含む製品（果汁、ジュース、ビール、酒類、チョコレート、クッキー、はちみつ製品、飴、ガム、ゼリー、アイスクリーム、ヨーグルト、和菓子・洋菓子類）、中性脂肪を多く含む原料（魚油、マーガリン、乳製品、バター、卵黄油、マヨネーズ、サラダ油、ドレッシング）を利用した加工食品、過酸化脂質を多く発生する揚げ物製品（天ぷら、ポテトチップス等のスナック菓子、揚げせんべい、インスタント麺）等、および糖質・中性脂肪の吸収低下や体脂肪の減少を促す成分（緑茶・桑葉茶、グアバ、明日葉、大豆蛋白・豆乳、キチン・キトサン、アルギン酸、オリゴ糖・デキストリン・食物繊維）を利用した機能性強化向け製品に混合すると効果的である。さらに、うこん、異性化リノール酸、セサミン、ビタミンＥ、ＣｏＱ１０、αリポ酸、カルニチン、アミノ酸（バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、テアニン、ヒスチジン）、人参類（エゾウコギ、紅参、西洋人参）、有機酸類（ビタミンＣ、酢、クエン酸）、ビタミンＢ群、すっぽん、蟻、プラセンタ、トウガラシ、黒胡椒、カロチノイド類（リコピン、アスタキサンチン、ルテイン）、イソフラボン、キノコ、海藻由来多糖類（アガリクス、フコイダン）、各種ハーブ類（イチョウ葉、松樹皮、ブドウ抽出物）、ベリー類（ブルーベリー）、脂質類（ＥＰＡ、ＤＨＡ）から選ばれる物質を組み合わせた栄養補助食品も効果的である。食品や飲料等への添加量としては、サツマイモ茎葉抽出物の１日あたりの摂取量が成人１日あたり１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ以上となるように含有させることが好ましい。１日あたりの摂取量の上限は特に限定されないが、例えば、２０００ｍｇ／ｋｇ程度までは許容範囲内である。但し、好ましい摂取量の範囲は、製品形態や個人の特性により当然変動することが考えられる。
１３．飲食品
本発明の水溶性サツマイモ茎葉抽出物を、ポリフェノール含量として０．００１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．０１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは０．０１ｍｇ／ｍｌ〜３ｍｇ／ｍｌ含有する飲食品として用いることができる。本発明により、サツマイモ茎葉抽出物中のポリフェノール含量を高めることが可能となり、ゆえに高濃度にサツマイモ茎葉由来のポリフェノールを含有する飲料水とすることができる。嗜好性の面では、ポリフェノール含量として約３ｍｇ／ｍｌ以下であることが望ましく、また、サツマイモ茎葉抽出物の薬効・機能を発揮させるためには、約０．０１ｍｇ／ｍｌ以上含有するのが効率的である。これらの点から、より好ましくは０．０５ｍｇ／ｍｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ、さらに好ましくは０．１ｍｇ／ｍｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ、とりわけ好ましくは０．３ｍｇ／ｍｌ〜２ｍｇ／ｍｌであるが、加工する飲食品の種類に応じて適宜増減することができる。また、サツマイモ茎葉抽出物の水溶液をゼリーなどの菓子類に加工したり、サツマイモ茎葉抽出物の粉末を麺類、インスタント食品等の加工食品に混ぜ込んだり、さらに栄養補助食品の素材とすることもできる。飲食品としては、清涼飲料水、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料、油脂、加工食品、麺パン類、調味料、菓子類（水菓子、ゼリー、ヨーグルト、グミ）、栄養補助食品、等をあげることができる。１回あたりのサツマイモ茎葉由来のポリフェノール摂取量は、約１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは約５ｍｇ〜５００ｍｇ、より好ましくは約１０ｍｇ〜３００ｍｇに調製されていることが好ましい。
【実施例】  次に、本発明を実施例に基づいて更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１  サツマイモ茎葉抽出物の抽出条件の検討
サツマイモ茎葉抽出物の製造にあたり、エタノール濃度によってポリフェノールの抽出効率がどのように変化するか調べた。サツマイモの品種としてシロユタカを用い、栽培４ヶ月のものの茎葉を収穫し、天日にて乾燥させたものを破砕し抽出に用いた。抽出精製操作は下記に示した手法に従った。
（１）条件検討として１つの抽出条件に乾燥、粉砕したサツマイモ茎葉９０ｇを用いた。
（２）抽出の条件設定として、エタノール濃度（０％（水）、２０％、４０％、６０％、８０％）を変えた５条件で検討した。
（３）抽出は初回７００ｍｌの抽出液で室温１２時間放置することで抽出を行い、その後、濾過を行い、その濾液を捕集するとともに抽出残渣に５００ｍｌの抽出液を加え、抽出を１２時間行った。その後同じ操作を行い、計３回の抽出を行い、捕集した抽出液を合せた。
（４）抽出液をロータリーエバポレーターで２００ｍｌ程度まで濃縮し、その後、５０ｍｌのヘキサンで分画し、水層部分を捕集した。
（５）三菱化学から販売されているＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ２０を用いて精製を行った。５０ｇのＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ２０を水に置換したカラム作り、捕集した水層部分をカラムに通した。その後、カラム容量の約５００ｍｌの水で洗浄した後、約２５０ｍｌの９０％エタノールでポリフェノール画分を溶出させ、捕集した。
（６）捕集したポリフェノール画分はポリフェノール量を測定するとともに濃縮乾固させ、重量を測定した。
捕集したポリフェノール画分は東洋紡エンジニアリング株式会社から販売されているポリフェノール測定器（ＰＡ−２０）を用いて、カテキン換算としてポリフェノール量を測定した。
【表１】
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表１からわかるようにエタノール濃度４０％以上であればポリフェノールが３００ｍｇ以上抽出されていることがわかる。また、乾固重量あたりのポリフェノール重量の割合についてはエタノール濃度６０％が最大で２３．６％となった。
次に抽出液中のポリフェノールの安定性を調べた。安定性については抽出直後のポリフェノール濃度と１２日間室内に放置した後のポリフェノール濃度を比較し濃度の低下率を安定性の指標とした。結果を表２に示す。
【表２】
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表２からわかるようにエタノール濃度が低下すると１２日後のポリフェノール濃度が低下することが分かった。このことから抽出液については少なくとも４０％以上、好ましくは６０％以上のエタノール濃度が適当であると考えられる。また、エタノール濃度が高い場合（８０％）は葉緑素などの成分や油分なども抽出されることが観察され、かつポリフェノールの収量も若干低下することを考慮すると、８０％より高いエタノール濃度で抽出を行うことは利点がないと思われる。
実施例２  ポリフェノールの純度向上法の検討
機能性食品において機能性成分の純度を、コストをかけずに上げることは重要なことである。例えば不純物の中に渋みなど、好ましくない成分が含まれている場合があり、純度を上げることにより、相対的に好ましくない成分を少なくできるからである。そこで、サツマイモの茎と葉に分けて抽出を実施し、さらに濃縮後、時間とともに発生する沈殿を除去する方法を検討した。検討条件として、下記の項目で検討した。
（ａ）サツマイモの茎を分離し、６０％エタノールを用いた実施例１の手法でポリフェノール画分を得、その画分の乾固重量あたりのポリフェノール量つまり純度を調べた。ただし、実施例１のヘキサン分画は省略した。
（ｂ）サツマイモの葉を分離し、６０％エタノールを用いた実施例１の手法でポリフェノール画分を得、その画分の乾固重量あたりのポリフェノール量つまり純度を調べた。ただし、実施例１のヘキサン分画は（ａ）と同様省略した。
（ｃ）サツマイモの葉を分離し、６０％エタノールを用いた実施例１の方法で抽出し、２００ｍｌの濃縮液を得、その濃縮液を３日間静置した後、３日間で生成した沈殿を除去したものをＨＰ−２０カラムに通し実施例１と同じようにポリフェノール画分を捕集した。そして、その画分の乾固重量あたりのポリフェノール量つまり純度を調べた。ただし、実施例１のヘキサン分画は（ａ）と同様省略した。
（ｄ）サツマイモの葉を分離し、６０％エタノールを用いた実施例１の方法で抽出し、２００ｍｌの濃縮液を得、その濃縮液に約４倍容量のエタノールを加え３日放置した。３日間で生成した沈殿を除去した後、再びロータリーエバポレーターでエタノールを除去した後、ＨＰ−２０カラムに通し実施例１と同じようにポリフェノール画分を捕集した。そして、その画分の乾固重量あたりのポリフェノール量つまり純度を調べた。ただし、実施例１のヘキサン分画は（ａ）と同様省略した。
その結果を表３に示す。
【表３】
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表３からわかるように葉から抽出した場合、ポリフェノール量を茎と比べ１０倍程度効率よく抽出でき、カテキン換算として算出したポリフェノール純度も高いことが分かる。また、実施例１の方法で抽出、濃縮を行った後、静置することで純度が向上することが分かった。また、放置する際に、エタノールを加えた場合の方が純度として５６．４％と高い値になった。このことは（ｃ）の静置する条件ではエタノール濃度が低いため、一部分解、消失を考慮する必要があると考えられる。以上のことから濃縮後に静置処理を行い沈殿の生成を待った後にその沈殿を除去することにより、通常は２０％から３０％のポリフェノール純度（カテキン換算）であるものを６０％程度まで向上可能なことがわかった。
実施例３  液体クロマトグラフィーによる成分の検索
６０％エタノールを用いた実施例１の手法でサツマイモ茎葉もしくは葉より抽出分画したポリフェノール画分（サツマイモ茎葉抽出物）を液体クロマトグラフィーで成分を検索した。条件を下に示す。
条件：カラム：      Ｓｈｉｍａ−ｐａｃｋ  ＶＰ−ＯＤＳ（島津製）
カラム温度：  ４０℃
溶離液：  Ａ液４．５ｍＭクエン酸水：アセトニトリル：イソプロパノール
１００：１０：３
Ｂ液６ｍＭクエン酸水：アセトニトリル：イソプロパノール
１００：４７：３
溶離液勾配：  時間            Ａ／Ｂ
０ｍｉｎ        ８５／１５
４０ｍｉｎ      ０／１００（リニアグラジェント）
５０ｍｉｎ      ０／１００
６０ｍｉｎ      ８５／１５（リニアグラジェント）
図１にサツマイモ茎葉から６０％エタノールを用いて実施例１の方法で得たサツマイモ茎葉抽出物の液体クロマトグラフィーのチャートを示した。ピークの解析から、当該抽出物には、ケルセチン−３−グルコシド、ケルセチン−３−ガラクトシド、クロロゲン酸および３種のジカフェオイルキナ酸（３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸、４，５−ジカフェオイルキナ酸）が含まれていることが分かった。また、図２にはサツマイモ葉から６０％エタノールを用いて実施例１の方法で得たサツマイモ茎葉抽出物の液体クロマトグラフィーのチャートを示した。葉のみを用いた抽出物においては特にケルセチン−３−グルコシドやケルセチン−３−ガラクシドが多く含まれていることが分かった。
実施例４  ８０％エタノールを用いたサツマイモ茎葉抽出物の製造
以下の手法でサツマイモ茎葉抽出物を製造した。
（１）サツマイモの乾燥茎葉２．２２ｋｇを２０Ｌの抽出器に入れ、８０％のエタノールを１３．２Ｌ加え加温抽出（７５℃）を２時間行い、ヌッチェにより濾過し、抽出液を約１０Ｌ得た。
（２）さらに同様な操作を３度行い。抽出液４０Ｌを得た。抽出液を減圧下約１／７まで濃縮した。
（３）ヘキサン８．０Ｌ加え脂溶性成分を分離した後、ヘキサン層を除去した。
（４）水層部分は、減圧下さらに溶液が約５Ｌ程度になるまで溶媒を留去した。
（５）濃縮溶液に水を５Ｌ加えた。希釈溶液に不純物が下層にたまったため、デカンテーションにより不溶物を除去した。
（６）上澄み液を吸着樹脂（ＨＰ２０）３Ｌに通液した後、水４Ｌにて樹脂を洗浄した。
（７）樹脂から９０％エタノール１０Ｌを用いて吸着物を溶離させた。
（８）溶出液は減圧下溶媒を留去乾固させ、噴霧乾燥機により粉末サンプル５４．４３ｇ（収率２．４５％）得た。
得られた粉末サンプル（サツマイモ茎葉抽出物）のポリフェノール含量はカテキン換算で約３４％、ポリフェノール中のケルセチン−３−グルコシド含量は５．６％であった。また、液体クロマトグラフィーにて実施例３と同様にケルセチン−３−グルコシド、ケルセチン−３−ガラクトシド、クロロゲン酸およびジカフェオイルキナ酸が含まれていることを確認した。
実施例５  ６０％エタノールを用いたサツマイモ茎葉抽出物の製造
乾燥サツマイモ茎葉１．５ｋｇを粉砕し、６．１Ｌの６０％エタノールを添加し２時間以上抽出を行い、１次抽出液を搾汁し３．５Ｌを回収した。１次搾汁液と同量の６０％エタノールを添加し、１２時間以上置いた後、２次抽出液を搾汁し３．３４Ｌを回収した。１次抽出液と２次抽出液を合わせてロータリーエバポレーターで約１／３量（２．３Ｌ）に減圧濃縮した。壁面に付着した油性成分はデカントで除去し、得られた水溶液に２倍量の１００％エタノールを添加し、１２時間以上放置した。沈殿物（多糖類等と思われる）をデカントで除去し、上澄みをロータリーエバポレーターで約１／７量（９９０ｍｌ）に減圧濃縮した。得られた水溶液をＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ２０（三菱化学）カラムに通した。カラム容量の５倍量の水で洗浄した後、カラム容量の２倍量の９０％エタノールで溶出し、溶出液をスプレードライヤーで乾固し、サツマイモ茎葉抽出物を得た。乾燥茎葉からの抽出物収率は０．６６％、抽出物中のポリフェノール含量は４１．３％、ポリフェノール中のケルセチン−３−グルコシド含量は３．０％であった。また、液体クロマトグラフィーにて実施例３と同様にケルセチン−３−グルコシド、ケルセチン−３−ガラクトシド、クロロゲン酸およびジカフェオイルキナ酸が含まれていることを確認した。
実施例６  抽出方法の比較
６０％エタノール抽出、熱水抽出、水抽出についてケルセチン−３−グルコシド抽出量の比較を行った。
（１）６０％エタノール抽出
乾燥サツマイモ茎葉を６０％エタノールで抽出し、ロータリーエバポレーターで濃縮後ＨＰ２０カラムにかけ、９０％エタノールで溶出した画分を乾固し、ケルセチン−３−グルコシド抽出量を測定した。
（２）熱水抽出およびエタノール沈殿
乾燥サツマイモ茎葉を９０℃の熱水で抽出し、２倍量の１００％エタノールを添加後、生じた沈殿を除去し、ロータリーエバポレーターで濃縮後ＨＰ２０カラムにかけ、９０％エタノールで溶出した画分を乾固し、ケルセチン−３−グルコシド抽出量を測定した。
（３）熱水抽出
乾燥サツマイモ茎葉を９０℃の熱水で抽出し、ロータリーエバポレーターで濃縮後ＨＰ２０カラムにかけ、９０％エタノールで溶出した画分を乾固し、ケルセチン−３−グルコシド抽出量を測定した。
（４）水抽出
乾燥サツマイモ茎葉を水で抽出し、２倍量の１００％エタノールを添加後、生じた沈殿を除去し、ロータリーエバポレーターで濃縮後ＨＰ２０カラムにかけ、９０％エタノールで溶出した画分を乾固し、ケルセチン−３−グルコシド抽出量を測定した。結果を表４に示す。
【表４】
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ケルセチン−３−グルコシドの抽出量は、６０％エタノールが優れていることが分かった。また、熱水抽出または水抽出は、カラム精製過程で、エタノールに溶けない物質が精製を阻害するので、カラム精製する場合には、工夫を要することが分かった。
熱水抽出によって、大量にエタノールに不溶な成分が抽出される。この物質は、カラム精製過程で、９０％エタノールによって溶出する際に不溶化すると考えられ、カラムを水で洗浄したにもかかわらず、９０％エタノールでの溶出の際に、強固に樹脂に結合して、褐色の色が抜けなくなる。これはカラムの再生に影響すると予想された。ついで、熱水抽出液や水抽出液に２倍量の１００％エタノールを加え、６７％のエタノール濃度にすると、もやもやとした粘着性のある沈殿物が多量に析出した。この沈殿物をろ過した後にカラム精製を実施するとカラムへの色素沈着は観察されなかった。しかしながら、熱水抽出および水抽出にカラム精製過程を加えた製法は、ケルセチン−３−グルコシド抽出量は６０％エタノール抽出に劣り、また、結局エタノールを使用せねばならず、工程削減の効果も得られないので６０％エタノール抽出と比較して、抽出効率の点からは優位性は低いと判断される。
実施例７  各種サツマイモ品種の茎葉成分の比較
実施例１ないし６で使用したサツマイモ品種シロユタカと、コガネセンガン、ＳＵＫＵＨ、種子島紫およびシモンイモの４品種について茎葉に含まれるポリフェノール成分の比較を行った。シロユタカ、コガネセンガン、ＳＵＫＵＨ、種子島紫は乾燥サツマイモ茎葉を６０％エタノールで抽出しろ過したサンプルをＨＰＬＣ分析に供した。シモンイモについては市販のお茶（茎葉を使用したお茶）を６０％エタノールで抽出しろ過したサンプルをＨＰＬＣ分析に供した。
その結果、シロユタカと他の４品種においてクロマトグラフィーで検出される成分の種類に大きな差はなく、含有される物質の種類は同等であると考えられたが、各成分の含有割合は、品種によって若干異なっている。また、シロユタカ葉のみを用いたサツマイモ葉抽出物は、他の品種の抽出物と比較して、ケルセチン−３−グルコシドを多く含み、望ましいことが分かった。
実施例８  抗酸化能の確認
サツマイモ茎葉抽出物を用いて抗酸化能を測定した。
（１）スーパーオキシド消去活性
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物のスーパーオキシド消去活性を電子スピン反応（ＥＳＲ）法で測定した。結果は３．９×１０４単位／ｇ（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４４，６０４９（１９６９）に定義された単位）となりサツマイモポリフェノールに抗酸化能があることが確認できた。抗酸化能としては高いレベルであるものの、抗酸化能が非常に高いと言われるピクノジェノール（１．６×１０５単位／ｇ）と比べると４分の１程度であった。
（２）ＤＰＰＨラジカル消去能
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物および実施例２で得た茎のみの抽出物または葉のみの抽出物についてＤＨＨＰラジカル消去能を電子スピン反応（ＥＳＲ）法で測定した。実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物は６５３μｍｏｌ／ｇ、実施例２で得た茎のみの抽出物は３０４μｍｏｌ／ｇ、実施例２で得た葉のみの抽出物は１２７３μｍｏｌ／ｇであった（活性は、サンプル１ｇあたりのトロロックスμｍｏｌ相当量で表示）。市販のお茶粉末では５１５μｍｏｌ／ｇ程度と言われており、サツマイモ茎葉抽出物はお茶粉末と同等かそれよりも優れた活性を示した。
（３）ヒドロキシラジカル消去能
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物および実施例２で得た茎のみの抽出物または葉のみの抽出物について、過酸化水素−２価鉄イオン系にて発生させたヒドロキシラジカルの消去能をＤＭＰＯを用いたスピントラッピング法で測定した。実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物は１０．８ｍｍｏｌ／ｇ、実施例２で得た茎のみの抽出物は１６．８ｍｍｏｌ／ｇ、実施例２で得た葉のみの抽出物は１４．４ｍｍｏｌ／ｇであった（活性は、サンプル１ｇあたりのマンニトールｍｍｏｌ相当量で表示）。市販のお茶粉末では９．３ｍｍｏｌ／ｇ程度と言われており、サツマイモ茎葉抽出物はお茶粉末と同等かそれよりも優れた活性を示した。
実施例９  サツマイモ茎葉抽出物の肝保護作用
サツマイモ茎葉抽出物を食品や飲料で摂取した際に、成分が腸管から吸収され血液に移行し、実際に体内でフリーラジカルを消去できるかどうかについて確認した。サツマイモ茎葉抽出物を投与したラットと非投与のラットを用いてラジカルイニシエーターである２，２’−アゾビスアミジノプロパン二塩酸塩（ＡＡＰＨ）を腹腔に投与し、その影響を調べた。試験の材料と方法を下記に示す。
（ａ）供試動物
種：ラット、系統：ＳＤ、性別：オス、入荷時週齢：６週齢
（ｂ）試験群の設定
コントロール群：５匹、１ｍｇ／ｋｇ投与群：５匹、３０ｍｇ／ｋｇ投与群：５匹
（ｃ）試験項目および方法
・体重、摂餌量測定：サツマイモ茎葉抽出物の投与は７日間とし、一般状態についての観察体重および摂餌量は毎日午前１０から１１時の間に測定した。飼料および給水は自由摂取とした。
・実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物を蒸留水にて溶解し、サツマイモ茎葉抽出物の摂取量が１日あたり１ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇとなるよう胃ゾンデを用いて経口投与した。Ｃｏｎｔｒｏｌ群については生理食塩水を１０ｍＬ／ｋｇを投与した。７日目の投与においては、ＡＡＰＨ投与１２時間前にサツマイモ茎葉抽出物および生理食塩水を投与した。
・ＡＡＰＨの投与は生理食塩水を用いて５０ｍｇ／ｋｇ  Ｂ．Ｗに調製し、ラットに腹腔内投与した。
・尿サンプルはＡＡＰＨ投与後より解剖時まで、代謝ケージを用いて採取した。採取した尿については不純物を濾過した後、分析に供するまで−８０℃下に保存した。
・解剖については、ＡＡＰＨ投与終了後より１２時間の絶食を行い、ペントバルビタール系麻酔薬麻酔下において腹大動脈から採血した。血液は遠心分離（４℃、３０００ｒｐｍ、２０分）して血清を採取し、分析に供するまで−８０℃下にて凍結保存した。次に肉眼的観察を行った後、脱血処理を施した後に肝臓を摘出し、重量を測定した。重量測定後は、分析に供するまで−８０℃下にて凍結保存した。
・生化学検査として、血清については総蛋白、アルブミン、総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロール、リン脂質、過酸化脂質、ＡＳＴ、ＡＬＴを分析し、尿については８−ＯｈｄＧ（８−Ｈｙｄｒｏｘｙ−ｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅ）を分析した。
・肝臓中の過酸化脂質の測定は、摘出し凍結させた肝臓を解凍後、氷冷下でホモジナイズし、菊川の方法（日本生化学会編  基礎生化学実験法  第５巻  脂質・糖質・複合糖質  東京化学同人）に基づき、チオバルビツール酸（ＴＢＡ）試験より測定した。なお、結果については各試料中のタンパク質あたりのＴＢＡＲＳ（ｎｍｏｌ／ｍｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（チオバルビツール酸反応物：ｔｈｉｏｂａｒｂｉｔｕｒｉｃ  ａｃｉｄ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）として算出した。
・統計処理として、試験結果は平均値±標準誤差で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ−ｔ  ｔｅｓｔを用いた。
結果
（Ａ）一般状態および体重推移
一般状態においては、全例において異常は認められなかった。ＡＡＰＨ投与前７日間の体重推移では、Ｃｏｎｔｒｏｌ群、１ｍｇ／ｋｇ群およぴ３０ｍｇ／ｋｇ群のいずれの群においても顕著な差は認められなかった。ＡＡＰＨ投与後の状態観察では、投与後、各群において被毛が逆立つ特有の反応が観察された。サツマイモ茎葉抽出物投与群に関しては、その状態からの回復がＣｏｎｔｒｏｌ群に比較して早期であった。
（Ｂ）摂餌量
試験期間中の摂餌量においては、１ｍｇ／ｋｇ群で１日目にＣｏｎｔｒｏｌ群に対して有意に増加したが、正常範囲の摂餌量であること、翌日より各群間に顕著な差が認められなかったことから、一過性の症状と思われた。
（Ｃ）肝臓重量
肉眼的観察においては、Ｃｏｎｔｒｏｌ群で暗黄赤褐色を呈し、軽度に腫大していたのに対してサツマイモ茎抽出物群については正常に近い赤褐色の色調であった。特に、１ｍｇ／ｋｇ群では３０ｍｇ／ｋｇ群よりも、より正常に近い状態を示した。触診では、Ｃｏｎｔｒｏｌ群では柔らかく各葉の先端部位が鈍角であるのに対して、サツマイモ茎葉抽出物投与群の肝臓は弾力性に富み、各葉の先端部位は鋭角であった。肝臓重量はＣｏｎｔｒｏｌ群４．３８３±０．２０９ｇに対して、１ｍｇ／ｋｇ群では３．９１１±０．２４９ｇ、３０ｍｇ／ｋｇ群では４．０３３±０．３１６ｇとサツマイモ茎葉抽出物投与群で低い値を示した。
（Ｄ）血清およぴ尿中生化学検査
・血清総蛋白：Ｃｏｎｔｒｏｌ群４．８８±０．１０ｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群５．０４±０．０５ｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群５．００±０．０５ｇ／ｍＬと高い値を示した。
・血清アルブミン：Ｃｏｎｔｒｏｌ群２．７０±０．０５ｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群２．９０±０．０７ｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群２．７４±０．０５ｇ／ｍＬと１ｍｇ／ｋｇ群でやや高い値を示した。
・血清総コレステロール：Ｃｏｎｔｒｏｌ群４０．１８±５．５５ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群５５．７４±２．９３ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群４８．４０±６．４１ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群でやや高い値を示した。
・血清ＨＤＬ−コレステロール：Ｃｏｎｔｒｏｌ群１６．２０±１．４６ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群２２．２０±０．５８ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群１８．２０±２．２９ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群でやや高く、特に１ｍｇ／ｋｇ群で高い値を示した。
・血清ＬＤＬ−コレステロール：Ｃｏｎｔｒｏｌ群２．８８±１．２９ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群５．６０±１．２９ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群４．００±１．３０ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群でやや高く、特に１ｍｇ／ｋｇ群で高い値を示した。
・血清リン脂質：Ｃｏｎｔｒｏｌ群７１．９８±４．９０ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群８４．０４±４．１６ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群８１．４０±４．６８ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群でやや高く、特に１ｍｇ／ｋｇ群で高い値を示した。
・血清過酸化脂質：Ｃｏｎｔｒｏｌ群０．８４±０．１２ｎｍｏｌ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群０．６８±０．０７ｎｍｏｌ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群０．５８±０．０２ｎｍｏｌ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群で低く、特に３０ｍｇ／ｋｇ群で低い値を示した。
・血清ＡＳＴ：Ｃｏｎｔｒｏｌ群２０４．６４±５５．８５ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群９９．７２±２３．９３ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群１４８．４０±４１．２４ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群で低く、特に１ｍｇ／ｋｇ群で低い値を示した。
・血清ＡＬＴ：Ｃｏｎｔｒｏｌ群７０．３６±１７．５６ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群３９．５２±５．８６ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群４９．００±１０．５８ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群で低い値を示した。
・尿中８−ＯＨｄＧ：Ｃｏｎｔｒｏｌ群４１．５６±４．９０ｍｇ／ｍＬに対し、１ｍｇ／ｋｇ群２１．６０±２．７５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｋｇ群１９．８８±１．８５ｍｇ／ｍＬとサツマイモ茎葉抽出物投与群で有意（ｐ＜０．０５）に低い値を示した。結果を図３（ａ）に示す。
・肝臓ＴＢＡＲＳ：Ｃｏｎｔｒｏｌ群０．４８６±０．０３５ｎｍｏｌ／ｍｇ  ｐｒｏｔｅｉｎに対し、１ｍｇ／ｋｇ群０．２９６±０．０２５ｎｍｏｌ／ｍｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ、３０ｍｇ／ｋｇ群０．２８６±０．０２０ｎｍｏｌ／ｍｇ  ｐｒｏｔｅｉｎとサツマイモ茎葉抽出物投与群で有意（ｐ＜０．０１）に低い値を示した。結果を図３（ｂ）に示す。
抗酸化作用を検討する指標として、ＡＡＰＨ投与後より解剖時までの１２時間採取した尿申の８−ＯＨｄＧ、肝臓中ＴＢＡＲＳについて測定した結果、尿中の８−ＯＨｄＧならび肝臓中ＴＢＡＲＳは、Ｃｏｎｔｒｏｌ群に比較して、サツマイモ茎葉抽出物投与群が有意に低い値を示した。解剖時の肉眼的観察では、特に１ｍｇ／ｋｇ群でその状態が良好であり、肝臓重量についても低い値を示した。さらに、血清生化学検査値では、同様にサツマイモ茎葉抽出物投与群で良好であり、肉眼的観察同様に３０ｍｇ／ｋｇ群よりも１ｍｇ／ｋｇ群でその傾向を示した。３０ｍｇ／ｋｇ群では、血清過酸化脂質ならびに尿申８−０ＨｄＧが１ｍｇ／ｋｇ群よりも低い値であった。
以上の結果から、サヅマイモ茎葉抽出物は、ラジカル開始剤ＡＡＰＨを腹腔内に投与することによる生体内脂質過酸化を誘発させたモデル動物において、高濃度摂取では血清過酸化脂質、肝臓中ＴＢＡＲＳおよぴ尿中８−ＯＨｄＧ等の過酸化物の産生を有意に抑制する抗酸化作用を示し、また、低濃度摂取では高濃度よりも緩やかな抗酸化作用を示すとともに、肝臓の障害を軽減し肝臓を保護する作用をもつ素材であることが確認された。
（上記結果に関する考察）
上記実験結果は実に驚くべきものであった。つまりここで用いたサツマイモ茎葉抽出物中のポリフェノール類はカテキン換算の含量として約３０％であり、体重６０ｋｇの人に換算すると０．３×１ｍｇ／ｋｇ×６０ｋｇ＝１８ｍｇとなる。ポリフェノール成分として１日わずか２０ｍｇ程度の摂取量で機能性を発揮すると予想される。一方、最近脚光を浴びている茶カテキンを比較するとその機能性を発揮する量として人で５００ｍｇという値が公表されている（バイオサイエンスとインダストリー  Ｖｏｌ．６１  Ｎｏ．１１  ２００３）。茶カテキンの機能性としては体脂肪低減作用であり、本発明のサツマイモ茎葉抽出物とは機能性が異なるが、ポリフェノールの有効濃度が茶カテキンより１桁低く、高活性であることはわれわれの予想を越えるものであった。また、２００４年度の日本農芸化学会で九州沖縄農業研究センターのグループから紫サツマイモの塊根から調製したアントシアニンを含むサツマイモジュースの四塩化炭素投与による肝機能障害軽減効果に関し報告があった。発表の紫サツマイモのジュースには１２０ｍｌで１２．６ｇの紫サツマイモ成分が含まれており、投与量としてはアントシアニン換算で１日５０ｍｇ／ｋｇとなるようであったが、本発明のサツマイモ由来茎葉抽出物の機能性効果はそれと比較して十分に高いと考えられる（２００４年度日本農芸化学会  大会要旨集  ３Ａ１７ｐ１０）。
実施例１０  チロシナーゼ阻害活性の確認
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物を用いてチロシナーゼ阻害活性を測定した。その測定方法を下記に示す。
（ａ）反応試薬
・チロシン溶液（０．５ｍｇ／ｍＬ）：チロシン２５ｍｇを蒸留水にて５０ｍＬにメスアップし、測定に使用した。
・チロシナーゼ溶液（２５００Ｕ／ｍｇ）：マッシュルーム由来のチロシナーゼ（２５００Ｕ／ｍｇ）６ｍｇを蒸留水にて１００ｍＬにメスアップし、測定に使用した。
・１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）：リン酸二水素カリウム０．９０７２ｇ蒸留水にて１００ｍＬに、リン酸水素ナトリウム２．３８７６ｇを蒸留水にて１００ｍＬにメスアップした。次に、各々等量を混合した後、ｐＨが６．８であることを確認し測定に使用した。
・５０ｖ／ｖ％エタノール溶液：エタノールおよび蒸留水を等量混合し測定に使用した。
（ｂ）試料対象物の調製
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物１０ｍｇを５０ｖ／ｖ％エタノール溶液１０ｍＬに溶解し、原液とした。次にその原液を用いて、１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）にて０．００５ｍｇ、０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇの量になるよう希釈し、反応に使用した。
（ｃ）チロシナーゼ活性測定
下記の反応系を調製後、３７℃で１時間インキュベートし、４７５ｎｍの吸光度を測定した。対照（Ａｂ）はチロシン溶液（０．５ｍＬ）、リン酸緩衝液（４．０ｍＬ）、チロシナーゼ溶液（０．５ｍＬ）を加え、５．０ｍＬとする。一方、検体（Ａｔ）はチロシン溶液（０．５ｍＬ）、リン酸緩衝液（２．０ｍＬ）、チロシナーゼ溶液（０．５ｍＬ）、各試験溶液（２．０ｍＬ）を加え５ｍＬとする。
（ｄ）チロシナーゼ活性抑制率の算出は下記の計算式で求めた。
抑制率＝（Ａｂ−Ａｔ）／Ａｂ×１００
また、試験対象物のチロシナーゼ５０％抑制濃度（ＩＣ５０）を算出した。
サツマイモ茎葉抽出物のチロシナーゼ阻害活性を美白作用が知られるコウジ酸やアスコルビン酸と比較して測定した。その結果を表５に示した。
【表５】
2006014028.tif 000008
表５からサツマイモ茎葉抽出物のチロシナーゼ活性抑制作用について、ｉｎ  ｖｉｔｒｏによるチロシナーゼ活性測定を行ったところ、０．０５ｍｇでチロシナーゼ活性抑制率が６６．４０％とコウジ酸、アスコルビン酸と比較して高い活性を示した。また抑制率の結果からは、ＩＣ５０は０．０３７ｍｇと推定された。
実施例１１  糖吸収抑制効果の確認
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物を用いて動物実験で糖の吸収抑制作用について、グルコース投与による糖負荷試験を行った。試験の材料と方法を下記に示す。
（ａ）供試動物
種：ラット、系統：ＳＤ、性別：オス、入荷時週齢：４週齢
（ｂ）試験群の設定
コントロール群：５匹、３０ｍｇ／ｋｇ投与群：５匹
（ｃ）試験項目および方法
・体重については、予備飼育期間中のみ毎日午前１０から１１時の間に測定した。なお、糖負荷試験は前日の体重を考慮して、４群に群分けを行った。
・サツマイモ茎葉抽出物は蒸留水にて各濃度に調製し、胃ゾンデを用いて経口投与した。
・糖負荷試験は、試験前日より１８時間絶食後、グルコースを２ｇ／ｋｇ経口投与し、投与前（０分）、投与後３０、６０、９０、１２０分に眼窩静脈叢より採血し、血糖測定機を用いて測定した。なお、サツマイモ茎葉抽出物はグルコース負荷３０分前に投与した。また、各測定値をもとに１２０分間のΔ血糖面積値（ＡＵＣ：ｍｇ／ｄＬ・ｈｒ）を下記の計算式より算出した。
計算式
ＡＵＣ（０−Ｔ４）＝Ｃ１Ｔ１／２＋（Ｃ１＋Ｃ２）（Ｔ２−Ｔ１）／２＋（Ｃ２＋Ｃ３）（Ｔ３−Ｔ２）／２＋（Ｃ３＋Ｃ４）（Ｔ４−Ｔ３）／２
Ｃ１：０分から３０分時の血糖上昇値
Ｃ２：０分から６０分時の血糖上昇値
Ｃ３：０分から９０分時の血糖上昇値
Ｃ４：０分から１２０分時の血糖上昇値
Ｔ：経過時間（ｈｒ）  Ｔ１：０．５ｈｒ、Ｔ２：１．０ｈｒ、Ｔ３：１．５ｈｒ、Ｔ４：２．０ｈｒ
・統計処理として、試験結果は平均値±標準誤差で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ−ｔ  ｔｅｓｔを用い、」対照群に対しｐ＜０．０５で有意とした。
サツマイモ茎葉抽出物の糖負荷試験の結果について表６に示した。
【表６】
2006014028.tif 000009
2006014028.tif 000010
表６の結果を、グラフとして図４に示す。グルコース投与３０分後において、すべての群で血糖値が最も上昇したが、サツマイモ茎葉抽出物投与群は対照群と比較して有意な上昇抑制が認められた。６０分後においても、対照群に対して低値を示し、有意差も認められた。グルコース負荷１２０分間のΔ血糖面積値（ＡＵＣ：ｍｇ／ｄＬ・ｈｒ）では、対照群が最も高い値を示し、サツマイモ茎葉抽出物投与群は有意に低値を示した。以上により、サツマイモ茎葉抽出物の糖吸収抑制作用が確認された。
さらに、上記と同様の条件で、血糖上昇抑制効果について、グアバ葉抽出物との比較試験を行った。試験群は、サツマイモ茎葉抽出物３０ｍｇ／ｋｇ群、１００ｍｇ／ｋｇ群、グアバ葉抽出物１００ｍｇ／ｋｇ群および対照群とし、ラット各５匹で行った。各試験対象物は生理食塩水にて調製し、対照群は生理食塩水のみの投与とした。
上記と同様、試験対象物を投与後、グルコース２ｇ／ｋｇ経口投与して、上記と同様の採血スケジュールで採血を行い、血糖値を測定した。各測定値をもとに経時的な血糖濃度のグラフを図５に示した。
グルコース投与３０分後において、全ての群で血糖値が最も上昇したが、サツマイモ茎葉抽出物群およびグアバ葉抽出物群は、対照群と比較して血糖値上昇の直線の傾きが緩やかであり、各群とも糖吸収を抑制していることが推認された。サツマイモ茎葉抽出物３０ｍｇ／ｋｇ群は、グアバ葉抽出物１００ｍｇ／ｋｇ群と同程度の血糖値の推移を示し、サツマイモ茎葉抽出物の３０ｍｇ／ｋｇ群と１００ｍｇ／ｋｇ群とでは、用量依存的に血糖値上昇抑制を示した。以上より、サツマイモ茎葉抽出物は、グアバ葉抽出物と比較して、より強力な血糖上昇抑制作用を有していることが示唆された。
実施例１２  脂肪吸収抑制作用の確認
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物を用いて動物実験で脂肪吸収抑制作用について、大豆油投与による脂肪負荷試験を行った。試験の材料と方法を下記に示す。
（ａ）供試動物
種：ラット、系統：ＳＤ、性別：オス、入荷時週齢：４週齢
（ｂ）試験群の設定
コントロール群：５匹、３０ｍｇ／ｋｇ投与群：５匹
（ｃ）試験項目および方法
・体重については、予備飼育期間中のみ毎日午前１０から１１時の間に測定した。なお、脂肪負荷試験は前日の体重を考慮して、４群に群分けを行った。
・サツマイモ茎葉抽出物は蒸留水にて各濃度に調整し、胃ゾンデを用いて経口投与した。
・脂肪負荷試験は、試験前日より１８時間絶食後、植物（大豆）油を２ｇ／ｋｇ経口投与し、投与前（０分）、投与後３０、６０、１２０、１８０、２４０、３００分に眼窩静脈叢より採血した。その血液は遠心分離（４℃、３０００ｒｐｍ、２０分）して血漿を採取し、市販キットを用いてトリグリセライド濃度を測定した。なお、サツマイモ茎葉抽出物は植物油投与直前に投与した。また、各測定値をもとに３００分間のΔ中性脂肪面積値（ＡＵＣ：ｍｇ／ｄＬ・ｈｒ）を下記の計算式より算出した。
計算式
ＡＵＣ（０−Ｔ４）＝Ｃ１Ｔ１／２＋（Ｃ１＋Ｃ２）（Ｔ２−Ｔ１）／２＋（Ｃ２＋Ｃ３）（Ｔ３−Ｔ２）／２＋（Ｃ３＋Ｃ４）（Ｔ４−Ｔ３）／２＋（Ｃ４＋Ｃ５）（Ｔ５−Ｔ４）／２＋（Ｃ５＋Ｃ６）（Ｔ６−Ｔ５）／２
Ｃ１：０分から３０分時の中性脂肪上昇値
Ｃ２：０分から６０分時の中性脂肪上昇値
Ｃ３：０分から１２０分時の中性脂肪上昇値
Ｃ４：０分から１８０分時の中性脂肪上昇値
Ｃ５：０分から２４０分時の中性脂肪上昇値
Ｃ６：０分から３００分時の中性脂肪上昇値
Ｔ：経過時間（ｈｒ）  Ｔ１：０．５ｈｒ、Ｔ２：１．０ｈｒ、Ｔ３：２ｈｒ、Ｔ４：３ｈｒ、Ｔ５：４ｈｒ、Ｔ６：５ｈｒ
・統計処理として、試験結果は平均値±標準誤差で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ−ｔ  ｔｅｓｔを用い、」対照群に対しｐ＜０．０５で有意とした。
サツマイモ茎葉抽出物の脂肪負荷試験の結果について表７に示した。
【表７】
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表７の結果を図６に示す。植物油投与６０分において、サツマイモ茎葉抽出物投与群は血中中性脂肪濃度の上昇傾向は認められるものの、対照群に対し有意に低値を示した。１２０分後では、対照群の６０分時とほぼ同値であったが、サツマイモ茎葉抽出物投与群は低値を示しているものの、サツマイモ茎葉抽出物投与群はこの時点が最も上昇していることから、脂肪吸収の遅延作用があるものと推察される。
植物油投与１８０分、２４０分後では、サツマイモ茎葉抽出物投与群は対照群と比較して低い値を示し、１８０分時では有意差も認められた。３００分後においては、群間差は認められなかった。以上からサツマイモ茎葉抽出物の脂肪吸収抑制作用が確認された他、吸収遅延作用も有する可能性が考えられる。
さらに上記と同様の条件で、脂肪吸収抑制作用について、緑茶抽出物（ポリフェノール含量３０％）との比較試験を行った。試験群は、サツマイモ茎葉抽出物３０ｍｇ／ｋｇ群、１００ｍｇ／ｋｇ群、緑茶抽出物３０ｍｇ／ｋｇ群および対照群とし、ラット各５匹で行った。各試験対象物は生理食塩水にて調製し、対照群は生理食塩水のみの投与とした。上記と同様、試験対象物を投与後、食後に植物（大豆）油を２ｍｇ／ｋｇ経口投与し、上記と同様の採血スケジュールで採血を行い、トリグリセ
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ｍｇ／ｄＬ・ｈｒ）を上記のとおり計算し、図７に示した。
サツマイモ茎葉抽出物投与群および緑茶抽出物（ポリフェノール含量３０％）投与群はいずれも対照群と比較して、大豆油の摂取により増加する血液中の中性脂肪の量を有意に低下させた。サツマイモ茎葉抽出物と緑茶抽出物の各３０ｍｇ／ｋｇ投与群とを比較すると、サツマイモ茎葉抽出物のほうが、血液中の中性脂肪低下作用が大きいことが分かる。また、サツマイモ茎葉抽出物投与群では、用量依存的に中性脂肪の量を低下させた。以上より、サツマイモ茎葉抽出物は、緑茶抽出物と比較しても、より強力に中性脂肪吸収抑制作用を発揮していることが示唆された。
実施例１３  サツマイモ茎葉抽出物の毒性試験
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物の単回投与による経口毒性を検討するため、０ｍｇ／ｋｇ（対照群）および２０００ｍｇ／ｋｇの用量で、各用量当たりＳＤ系ラット雌雄各５匹に１回投与し、１４日間観察した。投与液は所定量のサツマイモ茎葉抽出物を秤量し、媒体である２ｖ／ｖ％Ｔｗｅｅｎ８０水溶液に懸濁させ、投与液とした。投与液は投与当日に一回調製した。観察・測定項目として、一般状態の観察（投与前、投与後３０分、１、３、５時間、その後は１日１回、１４日間観察）、体重測定（投与直前、第２，４，８，１５日に電子上皿天秤を用いて測定）、病理学的検査（第１５日に全例をチオペンタールナトリウムの腹腔内投与による麻酔下で腹大動脈を切断・放血し、安楽死させた後剖検）を行った。いずれの群でも死亡例は発現せず、観察期間中、何ら毒性症状も発現しなかった。また、剖検でもなんら異常所見は得られなかった。
実施例１４  サツマイモ葉抽出物を含有する飲料水（熱水抽出物）の作製
焙煎工程を加えることによって、サツマイモ茎葉抽出物の抗酸化性を保持した範囲でサツマイモ茎葉抽出物の味を整えることができる。焙煎する温度や時間を調節することにより、焙煎の程度を調節することが可能である。
サツマイモ葉（乾燥物）を裁断機にてカットし、鍋にて中程度（２分３０秒）に焙煎後、熱水（８０℃）に２０分浸漬し、サツマイモ葉抽出物を含有する飲料水を作成した。シロユタカは葉が大きく、さらに乾燥重量も大きいことから、焙煎等の工程においても扱いやすかった。焙煎工程を経ることによって、焙煎しない場合と比較して、飲料水（サツマイモ茎葉抽出物）に香ばしい香りと味を付与することができた。これはサツマイモ葉に含まれるクロロゲン酸の分解産物であるキナ酸が生じたことも、その一因であると考えられる。また、抽出する水の温度によっても微妙に味や香りを変化させることができる。焙煎したサツマイモ茎葉は本発明の抽出原料として使用することも可能であるが、例えばティーパックに焙煎したサツマイモ茎葉を４グラムずつ包装し、およそ２リットルのお湯に浸漬することで手軽に飲料水（サツマイモ茎葉抽出物）を得ることができ、サツマイモ茎葉抽出物の様々な優れた効果を発揮することのできる、香り、味とも良好な飲料水を製造することができる。
実施例１５  サツマイモ茎葉抽出物の変異原性試験
（１）エームス試験
医薬品遺伝毒性試験ガイドラインに準拠した「エームス試験」により試験管内での変異原性の効果判定を行った。検定菌として，Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ（ＴＡ１００，ＴＡ９８，ＴＡ１５３５，ＴＡ１５３７）およびＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（ＷＰ２ｕｖｒＡ／ｐＫＭ１０１）の５菌株を用いた。実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物（被験検体）５０００μｇ／プレートを最高用量とし、Ｓ９ｍｉｘ添加、無添加群、各６段階（１．２２〜５００）にて用量反応性試験を行ったが、菌の生育阻害は見られなかったため、本試験でも５０００μｇ／プレートを最高用量として５用量を設定して実施し、各濃度での復帰突然変異コロニー数を測定した。その結果、Ａｍｅｓ試験の判定法に準じ、いずれの検定菌においてもＳ９ｍｉｘの有無にかかわらず変異原性は陰性と判断された。
（２）小核試験
医薬品遺伝毒性試験ガイドラインに準拠した「げっ歯類を用いた小核試験」により、サツマイモ茎葉抽出物の生体内での変異原性の効果判定を行った。実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物（被験検体）５００、１０００および２０００ｍｇ／ｋｇを、雄性ラット（７週令、５匹／群）に各用量３例を用いて２回強制経口投与（２４時間間隔）した結果、いずれの群においても死亡は認められず、一般状態にも変化はなかった。したがって、本試験では被験検体については同じ濃度とし、陽性対象にシクロホスファミド１０ｍｇ／ｋｇ、陰性対象に生理食塩水を加えて実施することとした。最終投与２４時間後、被験動物の大腿骨より骨髄細胞を採取して組織標本を作製した。全赤血球中の小核を持つ赤血球の割合を定法にて測定し、統計処理を施した結果、被験検体に関して小核の出現頻度は統計学的に有為でなく変異原性は陰性と判断された。
以上より、いずれの試験においても、サツマイモ茎葉抽出物の変異原性は陰性という結果であり、サツマイモ茎葉抽出物の摂取によって突然変異を起こす可能性は低く、極めて安全性が高いことが示唆された。
実施例１６  サツマイモ茎葉抽出物の脱臭効果試験
ヒトやペットの口臭、体臭、便臭等の原因物質に対する消臭効果を検討した。
（１）３００ｍｌのコニカルビーカーに１００ｍｌ純水にアンモニア、トリメチルアミン、メルカプタンを添加し、アルミホイルで蓋をした。
（２）ヘッドスペース部を各成分の濃度を検知管にて測定し、実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物を１ｇ入れ攪拌し、ヘッドスペース部の各成分の濃度を検知管にて測定した。
測定結果を図８に示した。アンモニア、トリメチルアミンはサツマイモ茎葉抽出物を添加した直後に臭気は感じられず、濃度も検出限界以下となった。また、メチルメルカプタンについては、サツマイモ茎葉抽出物添加直後に部分的に分解され、減臭効果が認められた。以上より、サツマイモ茎葉抽出物は異なる種類の臭気に対しても脱臭効果を発揮することが示唆された。サツマイモ茎葉抽出物は本発明の安全性試験によって、生体に対して極めて安全性が高いことが確認されていることから、ヒトやペットの口臭、体臭、便臭に対する消臭、飲食品の消臭等にも使用することができ、脱臭効果を有する物質の中でも、極めて幅広い応用範囲で使用可能な物質であるといえる。
実施例１７  ラット白色脂肪細胞を用いた脂肪細胞分化および肥大化抑制試験
脂肪細胞の増加抑制効果を調べるため、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるラット腸間膜由来白色脂肪細胞の分化および肥大化抑制試験を行った。
ラット白色脂肪細胞の脂肪細胞分化および肥大化抑制の観察
ラット白色脂肪細胞キット（（株）セルガレージ）の脂肪細胞を使用し、操作は全て通常の方法に従い行った。まず、脂肪細胞を増殖用培地中で５％ＣＯ２下２４時間インキュベーションを行った。脂肪細胞が２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌになるように２４ｗｅｌｌプレートに播種し、２４時間インキュベーションした後、分化誘導培地に交換し、５％ＣＯ２下４８時間インキュベーションした。さらに脂肪細胞維持培地に交換した後、各試験対象物として、実施例４で得たサツマイモ葉抽出物１００μｇ／ｍＬ、緑茶抽出物（９０％カテキン）１００μｇ／ｍＬを培地中の脂肪細胞に添加し、何も添加しないものをコントロールとして、５％ＣＯ２下インキュベーションをし、２４ｈごとに細胞の状態を観察した。
各群の脂肪細胞の２４時間後、７２時間後、９６時間後における状態を図９に示した。その結果、サツマイモ茎葉抽出物および緑茶抽出物は両者ともコントロールと比較して、全ての時間にわたり、顕著に脂肪細胞の脂肪滴の蓄積および脂肪細胞の肥大化を抑制した。サツマイモ茎葉抽出物と緑茶抽出物とを比較すると、２４時間後には緑茶抽出物のほうが脂肪滴の蓄積はやや少ないものの、４８時間後（データは示さない）および７２時間後には両者同等となり、９６時間後は両者同等か、もしくはわずかにサツマイモ茎葉抽出物のほうが脂肪細胞の肥大化を抑制した。以上より、サツマイモ茎葉抽出物は、緑茶エキスと比較しても、ほぼ同等か、それ以上の脂肪細胞の分化および肥大化抑制効果効果を有することが分かった。従って、本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、脂肪細胞の分化および肥大化が原因となって生じる肥満の予防・治療剤として利用できる可能性が示唆された。
実施例１８  マウス強制水泳法による抗うつ作用および抗疲労作用の検討
マウス強制水泳法により、サツマイモ茎葉抽出物の抗うつ作用および抗疲労作用の検討を行った。
マウス（ＢＡＬＢ／ｃ系統・雄・７週齢）は、本試験開始前日まで７日間予備飼育を行い馴化した。予備飼育終了２日前に供試動物を５分間強制遊泳させ、試験対象物投与前の遊泳状態が均一になるようにスクリーニングを行い、予備飼育最終日の体重も考慮して、供試動物６匹ずつ群分けを行い、本試験を開始した。試験群は、実施例４で得たサツマイモ葉抽出物  ３０ｍｇ／ｋｇ群、３００ｍｇ／ｋｇ群、セントジョーンズワート３００ｍｇ／ｋｇおよび対象群とした。各試験対象物は生理食塩水にて調製し、胃ゾンデを用いて強制経口投与（１０ｍＬ／ｋｇ）した。なお、コントロール群については、生理食塩水を同様に強制経口投与（１０ｍＬ／ｋｇ）した。試験対象物を投与してから、１時間後に１０Ｌの温水（３７℃）を満たしたアクリル製水槽（３５０×４００×１８０ｍｍ）中で遊泳させ、遊泳状態を観察した。判定は、下記基準に準拠して持続時間を測定した。
判定基準
ＥＤＢ（ｅｓｃａｐｅ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｂｅｈａｖｉｏｒ）：  水槽より跳び出ようとする行動、あるいは潜水して出口を捜し求めるような行動
ＩＭＯ（ｉｍｍｏｂｉｌｉｔｙ）：  ほとんどの動きを停止し、単に浮遊しているだけの状態
各群のＥＤＢおよびＩＭＯ時間の平均値を図１０に示した。サツマイモ茎葉抽出物およびセントジョーンズワート抽出物投与群は、コントロール群に対してＥＤＢの有意な延長とＩＭＯの有意な短縮が認められた。また、サツマイモ茎葉抽出物投与群については濃度依存的な効果を示し、サツマイモ茎葉抽出物３００ｍｇ／ｋｇ群はセントジョーンズワート３００ｍｇ／ｋｇ群とほぼ同等の効果がみられた。セントジョーンズワートは、気分をリラックスさせ、ストレスに効果のあるハーブとして広く知られ、ドイツでは、軽〜中等度のうつ症状に対して、実際に抗うつ薬として使用されている。サツマイモ茎葉抽出物群はセントジョーンズワート群と同様に、強制的な運動負荷や精神的ストレスに対して有効であったことから、サツマイモ茎葉抽出物は、単回経口投与でも十分に、精神的および肉体的なストレス、疲労に対して有効であり、セントジョーンズワートとほぼ同等の、抗うつ作用、抗ストレス作用、リラックス作用を有することが示唆された。
実施例１９  油脂安定性試験
実施例４で得たサツマイモ茎葉抽出物をビタミンＥフリーの豚脂３ｇに対し、それぞれ２００ｐｐｍ、１０００ｐｐｍとなるように添加し、試料液とした。乾燥空気流量２０Ｌ／ｈｒ、温度１２０℃下、試料液を自動油脂安定性試験装置（ＣＤＭ試験装置）により、油脂の変敗開始時間を求めた。
サツマイモ茎葉抽出物の濃度における変敗時間を図１１に示した。サツマイモ茎葉抽出物は、０ｐｐｍで１．６時間であった変敗時間を、２００ｐｐｍで豚脂の変敗時間を２倍（３．３時間）に延長し、１０００ｐｐｍで３倍（５時間）に延長した。以上より、サツマイモ茎葉抽出物は、豚脂・ラードなどの動物脂質を使用する加工食品（フライドポテトやスナック、カップ麺等）をはじめ、その他様々な油脂類に添加し、油脂の劣化防止に応用できる可能性が示唆された。
実施例２０  サツマイモ茎葉抽出物を用いた製剤の作製
本発明のサツマイモ茎葉抽出物を用いて、下記の３種類の製剤を作製した。
（１）顆粒剤の作製
下記の表８のとおり、サツマイモ茎葉抽出物を終濃度５％となるように各種賦形剤と混合し、合計２ｋｇの原料を適量の水を加えて練合の上、噴霧乾燥造粒機を用いて顆粒剤を作製した。製造した顆粒剤は２グラムごとにアルミ包装した。本品は携帯に便利であり、水溶性も良好であるため、用時１００ｍＬ程度のお湯あるいは水に溶解することで美味しく飲料化することができた。本品は１包当たりサツマイモ茎葉抽出物１００ｍｇを含有する。
【表８】
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（２）錠剤の作製
下記の表９のとおり、サツマイモ茎葉抽出物１ｋｇを終濃度２０％となるように各種賦形剤と混合し、合計５ｋｇの原料をもとに適量の水を加えて練合の上、打圧式の錠剤製造機を用いて１錠２５０ｍｇの錠剤を作成した。本品は１錠当たりサツマイモ茎葉抽出物５０ｍｇを含有する。
【表９】
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（３）グミの作製
下記の表１０のとおり、サツマイモ茎葉抽出物１０ｇをグミ基剤１ｋｇと加熱下混合し、糖度が８０％程度になるまで煮詰める。クエン酸液ならびに果汁及び香料を加え、熱いうちに一粒５ｇに成型した（サツマイモ茎葉抽出物終濃度０．１％）。本品は１粒当たりサツマイモ茎葉抽出物５ｍｇを含有する。
【表１０】
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サツマイモ茎葉抽出物は、各製剤中への配合率を目的に応じて適宜増減することも可能であり、また、他の機能性素材、飲食品素材や香料と混合することも容易であることから、機能性素材としての取り扱い性に優れ、極めて応用範囲が広いことが分かった。また、飲食品の素材としても同様に幅広く使用可能であるといえる。
【産業上の利用可能性】  本発明によれば、人体に種々の有益な活性を有するポリフェノール類を含有する水溶性サツマイモ茎葉抽出物を提供することができる。本発明のサツマイモ茎葉抽出物は、抗酸化活性、チロシナーゼ阻害活性、肝保護作用、糖や中性脂肪の吸収抑制作用等の活性又は作用を有するので、そのような機能・作用を有する機能性食品、機能性素材、医薬等として有用である。
また、本発明のポリフェノール含有サツマイモ茎葉抽出物の製造方法によれば、特別な材料や施設を用いることなく効率良くポリフェノール含有抽出物を得ることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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