(57)【要約】  副生成物としての１−ケストースやフラクトシルラクトスクロース含量が低く、且つ、糖組成としてラクトスクロースを７０％以上含有するラクトスクロース高含有糖質を提供し、また、工業的製造に適したラクトスクロース高含有糖質及び糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する高純度ラクトスクロースの製造方法を提供し、更には、吸湿性の低いラクトスクロース固状物とこれを含有せしめた固状組成物を提供することを課題とし、糖組成として、ラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有するラクトスクロース高含有糖質を提供し、さらに、スクロースとラクトースとを含有する水溶液に、バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを作用させ、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有する反応物とし、これを採取することを特徴とするラクトスクロース高含有糖質の製造方法、及びこのラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけて糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を採取することを特徴とする高純度ラクトスクロースの製造方法を提供し、更には、結晶ラクトスクロースの製造方法並びにこれを含有せしめた各種固状組成物を提供することにより上記課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖組成として、ラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有するラクトスクロース高含有糖質。
【請求項２】
さらに、他の糖質としてグリセリン、グルコース、フラクトース、スクロース、ラクトース、及びラクチュロースから選ばれる１種又は２種以上を含有する請求の範囲第１項記載のラクトスクロース高含有糖質。
【請求項３】
スクロースとラクトースとを含有する水溶液に、バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを作用させ、糖組成としてラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有する反応物とし、必要に応じて、更に、混在するラクトースを異性化させてラクトースとラクチュロースとの混合物にした後、これを採取することを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項４】
バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼが、組換え型酵素である請求の範囲第３項記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項５】
バチルス属に属する微生物が、バチルス・スピーシーズ  Ｖ２３０（ＦＥＲＭ  ＢＰ−５０５４）である請求の範囲第３項又は第４項記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項６】
スクロース非資化性酵母が、サッカロミセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４１又はサッカロミセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４２である請求の範囲第３項乃至第５項のいずれかに記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項７】
ラクトスクロース生成反応における反応原料としてのスクロースとラクトースとの比率が、１：０．６５乃至１．３である請求の範囲第３項乃至第６項のいずれかに記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項８】
ラクトスクロース生成反応における反応液ｐＨを、４．０乃至５．５に制御することを特徴とする請求の範囲第３項乃至第７項のいずれかに記載のラクトスクロース高含有糖質の製造方法。
【請求項９】
請求の範囲第１項又は第２項記載のラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけ、糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を採取することを特徴とする高純度ラクトスクロースの製造方法。
【請求項１０】
請求の範囲第１項又は第２項記載のラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけ、糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を採取し、これを濃縮し、噴霧乾燥することを特徴とする高純度ラクトスクロース粉末の製造方法。
【請求項１１】
さらに、造粒する工程を含む請求の範囲第９項又は第１０項記載の高純度ラクトスクロース粉末の製造方法。
【請求項１２】
請求の範囲第１項又は第２項記載のラクトスクロース高含有糖質又は請求の範囲第９項記載の高純度ラクトスクロースの製造方法によって得られる高純度ラクトスクロースを用い、ラクトスクロースの過飽和溶液から結晶ラクトスクロースを晶出させ、これを採取することを特徴とする結晶ラクトスクロースの製造方法。
【請求項１３】
結晶ラクトスクロースが、ラクトスクロース５含水結晶である請求の範囲第１２項記載の結晶ラクトスクロースの製造方法。
【請求項１４】
請求の範囲第１２項又は第１３項記載の結晶ラクトスクロースの製造方法によって得られる結晶ラクトスクロースを含有せしめてなる固状組成物。
【請求項１５】
結晶ラクトスクロースとともに、他の結晶糖質を結晶ラクトスクロースの質量に対して０．０１乃至１００倍量の範囲で含有せしめることを特徴とする請求の範囲第１４項記載の固状組成物。
【請求項１６】
飲食物、化粧品又は医薬品のいずれかの形態にある請求の範囲第１４項又は第１５項記載の固状組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラクトスクロース高含有糖質とその製造方法並びに用途、より詳細には、糖組成として、ラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有するラクトスクロース高含有糖質とその製造方法、さらには、このラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけ、糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を採取することを特徴とする高純度ラクトスクロースの製造方法、更には結晶ラクトスクロースの製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、オリゴ糖をはじめとする諸種の糖質が有する機能が続々と明らかになりつつある。機能性オリゴ糖の内、ラクトスクロース［β−Ｄ−ガラクトシル−（１，４）−α−Ｄ−グルコシル−（１，２）−β−Ｄ−フラクトシド］は、難消化性、ビフィズス菌増殖促進性、難う蝕性、保湿性など優れた機能を有しており、食品、化粧品、医薬品など広範な用途に有用なオリゴ糖である。ラクトスクロースは、スクロースとラクトースとを含有する水溶液に、アルスロバクター属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼを作用させ、このβ−フラクトフラノシダーゼが触媒する糖転移反応によって工業的に製造されている（特開平３−２７２８５号公報を参照）。しかしながら、β−フラクトフラノシダーゼの転移反応のみでは、得られる反応物のラクトスクロース含量は、糖組成として約３０％程度と低く、また、その反応物は、未反応のラクトース、スクロース、反応残渣のグルコース、フラクトース、副生成物の１−ケストース、フラクトシルラクトスクロースなどを比較的多量に含むため、ラクトスクロース本来の機能を十分に発揮できる糖組成物とはいい難い。そこで、ラクトスクロースの純度を上げるため、酵素反応後、未反応のラクトースを部分的に結晶化させて濾過・除去したり、酵素反応の際、インベルターゼ欠損酵母を添加してグルコースなど単糖を資化させたりする方法が実施され、ラクトスクロース含有糖質（登録商標「乳果オリゴ」）が製造されている（藤田孝輝、「バイオセパレーションプロセス便覧」、１９６−２０１頁、共立出版発行、１９９６年を参照）。とりわけ、β−フラクトフラノシダーゼの転移反応にインベルターゼ欠損酵母を併用する方法には、単に反応液からグルコースなど単糖を除去するだけでなく、単糖が除去されることにより転移反応がラクトスクロースの生成に傾くため、ラクトスクロースの生成量も向上するという利点があり、生成するラクトスクロースは反応物の糖組成として約６５％に達する（特開平４−２９３４９４号公報を参照）。さらに、このラクトスクロース含量が高まった反応物を原料に、イオン交換樹脂を用いたクロマトグラフィーを行い、ラクトスクロース純度を約８０％に高め、続いて、オクタデシルシリカ樹脂（ＯＤＳ）を用いたクロマトグラフィーで純度約９９％の精製ラクトスクロースを得ることができる（藤田孝輝、「バイオセパレーションプロセス便覧」、１９６−２０１頁、共立出版発行、１９９６年を参照）。【０００３】
しかしながら、アルスロバクター属微生物由来β−フラクトフラノシダーゼは、スクロースのフラクトシル基をラクトースに転移してラクトスクロースを生成する反応以外にも、副反応として、フラクトシル基をスクロース自体に転移して１−ケストースを生成する反応や、生成したラクトスクロースにさらにフラクトシル基を転移してフラクトシルラクトスクロースを生成する反応をも触媒する。副生成物として１−ケストースやフラクトシルラクトスクロースなどが生成することは、ラクトスクロースの製造という観点からは好ましくなく、ラクトスクロース生成量を低下させている一因となっている。また、上記の副生成物は、インベルターゼ欠損酵母では資化されないため、β−フラクトフラノシダーゼとインベルターゼ欠損酵母を同時に作用させ得られる反応物中に蓄積し、それらの含量は５乃至１０％にも及ぶ。さらに、副生成物として１−ケストースやフラクトシルラクトスクロースを比較的多量含有する反応物を原料として高純度ラクトスクロースを製造する場合、上記のイオン交換樹脂及びオクタデシルシリカ樹脂（ＯＤＳ）を用いるクロマトグラフィーなどの複数の精製手段を必要とする上、精製して得られる高純度ラクトスクロースの収率が低いという問題があり、高純度ラクトスクロースの工業的製造には適していないと考えられる。【０００４】
一方、ラクトスクロース含有粉末は、その純度を高めることによって吸湿性を低減し、比較的安定性の高い粉末が得られることが知られている（特開平４−２８１７９５号公報）。しかしながら、その後の研究において、この粉末も夏場の高温高湿度の環境下、例えば、温度２７℃、相対湿度７５％では、きわめて吸湿し易く、不安定で取り扱い困難であることが判明し、より安定なラクトスクロース固状物の提供が望まれる。【０００５】
一方、ラクトスクロースの結晶としては、９０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液から得られたラクトスクロース５含水結晶がガド・アビガド（Ｇａｄ  Ａｖｉｇａｄ）、『ジャーナル・バイオロジカル・ケミストリイ（Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）』、１９５７年、第２２９巻、１２１乃至１２９頁に開示されている。しかしながら、この結晶は吸湿性が強く、また、結晶化が困難であることもあり、結晶ラクトスクロースは工業規模での生産に至っていなかった。
【発明の開示】
【０００６】
斯かる状況に鑑み、本発明の課題は、副生成物としての１−ケストースやフラクトシルラクトスクロース含量が低く、且つ、糖組成としてラクトスクロースを７０％以上含有するラクトスクロース高含有糖質を提供し、また、工業的製造に適したラクトスクロース高含有糖質及び糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する高純度ラクトスクロースの製造方法を提供し、更には、結晶ラクトスクロースの製造方法と吸湿性の低い結晶ラクトスクロースを含有せしめた固状組成物を提供することにある。
【０００７】
上記の課題を解決するために、本発明者等は、β−フラクトフラノシダーゼを用いたラクトスクロース製造において、スクロース非資化性酵母を併用するのみならず、β−フラクトフラノシダーゼの由来及び反応条件にも着目し、ラクトスクロースの製造方法を検討した。その結果、従来、β−フラクトフラノシダーゼとインベルターゼ欠損酵母を併用しても該反応による反応物中のラクトスクロース含量は、糖組成として最大約６５％までにしか達さないと考えられてきたにもかかわらず、全く意外なことに、スクロースとラクトースとを含有する水溶液に、同じ特許出願人による特開平９−２２４６６５号公報に記載のバチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母を併用して反応させ、反応液のｐＨを４．０乃至５．５に制御することによって、得られる反応物中のラクトスクロース含量が、糖組成として７０％以上に達することが判明した。さらに、得られた反応物を調べたところ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースが、糖組成として合計３％未満と極めて低いことも判明した。そして、該反応物を原料としてクロマトグラフィー法で精製すると、さらに高純度のラクトスクロースを容易に高収率で調製できることが判明した。また、上記の、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が低いラクトスクロースの過飽和水溶液からは、意外にも、容易に結晶ラクトスクロース（５含水結晶）が晶出することを見出し、採取した結晶ラクトスクロースは、夏場の高温高湿度の環境下、例えば、温度２７℃、相対湿度７５％においても吸湿性が低く、取り扱い容易なラクトスクロースの固状製品であることが判明し、加えて、結晶ラクトスクロースを含有せしめた各種固状物の製造に有利に利用しうることが判明した。
【０００８】
すなわち、本発明は、糖組成として、ラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有するラクトスクロース高含有糖質を提供し、さらに、スクロースとラクトースとを含有する水溶液に、バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを作用させ、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有する反応物とし、これを採取することを特徴とするラクトスクロース高含有糖質の製造方法、及びこのラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけて糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を採取することを特徴とする高純度ラクトスクロースの製造方法を提供し、更には、上記方法で得られるラクトスクロース高含有糖質又は高純度ラクトスクロースを用いた結晶ラクトスクロースの製造方法並びにこれを含有せしめた各種固状組成物を提供することにより上記課題を解決するものである。
【０００９】
本発明によれば、カラムクロマトグラフィーなどの精製手段を使用せずとも、スクロースとラクトースとから、β−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母を併用した生成反応のみで、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上含有し、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満と低いラクトスクロース高含有糖質を製造することができる。さらに、このラクトスクロース高含有糖質を、樹脂を用いたクロマトグラフィーにかけることにより糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する高純度ラクトスクロースを容易に製造することができる。また、本発明によれば、従来、結晶化が難しかったラクトスクロースをラクトスクロースの過飽和水溶液から容易に晶出させることが可能となり、また、得られる結晶ラクトスクロースは夏場の高温高湿度の環境下においても吸湿性が低く取り扱いが容易であって、この結晶ラクトスクロースを含有せしめることにより、吸湿性の低い安定な各種固状組成物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明のラクトスクロース高含有糖質は、糖組成として、ラクトスクロースを７０％以上、１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計３％未満含有するラクトスクロース高含有糖質であって、β−フラクトフラノシダーゼの副反応により生成する１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースの含量が、従来のラクトスクロース含有糖質に比べ、極めて低いことを特徴とする。【００１１】
本発明のラクトスクロース高含有糖質が含有するラクトスクロース、１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロース以外の糖質としては、未反応のスクロース及びラクトース、ラクトースのアルカリ異性化物であるラクチュロース、β−フラクトフラノシダーゼの作用によるスクロースの分解物であるグルコース及びフラクトース、及び、スクロース非資化性酵母によるグルコース及びフラクトースの発酵産物であるグリセロールなどが挙げられる。後述する実施例にも示すように、これらの糖質の大部分は、β−フラクトフラノシダーゼによって分解されず、スクロース非資化性酵母によって資化・分解されないラクトースが占めている。【００１２】
本発明のラクトスクロース高含有糖質の製造方法（以下、単に「本発明の製造方法」又は「当該製造方法」という場合がある。）は、バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母を利用することを特徴とする。本発明でいうβ−フラクトフラノシダーゼとは、少なくともスクロース、ラフィノース及びエルロースのβ−フラクトフラノシド結合を加水分解して、フラクトースを遊離する反応並びにこれらβ−フラクトフラノシド結合を有する糖質を糖供与体として、糖供与体以外の他の糖質、糖アルコール及びアルコール類から選ばれる受容体にβ−フラクトフラノシル基を転移する反応を触媒する酵素を意味する。本発明で利用できるβ−フラクトフラノシダーゼは、このように定義され、起源がバチルス属に属する微生物であり、且つ、下記に詳述する本発明で用いるスクロース非資化性酵母と併用して作用させた場合、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上含有し、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満と低いラクトスクロース高含有糖質を製造できるものである限り調製方法などは特に限定されない。例えば、本出願と同じ特許出願人による特開平９−２２４６６５号公報に開示された、バチルス・スピーシーズ  Ｖ２３０（ＦＥＲＭ  ＢＰ−５０５４）起源の天然型β−フラクトフラノシダーゼ、及び本出願と同じ特許出願人による特開平１０−６６５８６号公報に開示された、上記β−フラクトフラノシダーゼをコードするＤＮＡを用いて遺伝子組換え技術で調製された組換え型のβ−フラクトフラノシダーゼはいずれも本発明に有利に利用できる。組換え型酵素の場合、バチルス属に属する微生物以外の宿主細胞より得られたβ−フラクトフラノシダーゼも本発明において利用できることは言うまでもない。さらに、同公報に開示されたβ−フラクトフラノシダーゼをコードするＤＮＡに蛋白質工学的手法を適用して得られる変異酵素も、所期の転移作用を実質的に消失していないものである限り本発明に利用できる。【００１３】
本発明でいうスクロース非資化性酵母とは、単糖類を資化するものの、二糖以上のオリゴ糖類を資化及び／又は分解できない酵母を意味する。本発明で利用するスクロース非資化性酵母は、グルコース及びフラクトースを資化し、スクロース、ラクトース及びラクトスクロースのいずれも資化及び／又は分解できない酵母である限りその種類は特に限定されない。例えば、天然より分離した酵母を各種変異剤で突然変異させてインベルターゼを欠損させるか、又はスクロース資化能を喪失させ、目的に合わせて育種したものを用いることもできる。また、インベルターゼ欠損酵母として知られている公知菌であるサッカロミセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４１やサッカロミセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４２なども本発明に有利に利用できる。【００１４】
本発明の製造方法における原料となるスクロース及びラクトースは、それらの調製方法や形態は特に限定されず、例えば、市販品を含む、天然より単離された調製品、酵素的又は化学的に調製ないしは合成された調製品、さらには、本発明の製造方法における酵素反応やスクロース非資化性酵母による単糖の資化の進行や、当該製造方法による生成物の利用に支障をきたさない範囲で、斯かる糖質以外の夾雑物質を含んでいる調製品や、以上のような調製品を組み合わせてなる組成物であってもよい。【００１５】
バチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを併用して、スクロース及びラクトース（以下、スクロース及びラクトースのいずれか又は両者を指して「基質」という場合がある。）を含む水溶液に、反応液のｐＨを４．０乃至５．５に制御する以外は、用いるβ−フラクトフラノシダーゼの酵素学的性質及びスクロース非資化性酵母の生理学的性質に応じて適宜選ばれる条件下で作用させれば、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上含有し、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロース含量が糖組成として合計３％未満と低い反応物を得ることができる。このラクトスクロース生成反応のみで得られる反応物のラクトスクロース含量は、通常、糖組成として７０％以上８０％未満であって、８０％以上となることはない。ラクトスクロース生成反応の条件としては、例えば、同じ特許出願人による特開平９−２２４６６５号公報に開示されたバチルス属に属する微生物由来のβ−フラクトフラノシダーゼ及びスクロース非資化性サッカロミセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４１を利用する場合、該酵素が完全には失活せず、且つ、該酵母がグルコース及びフラクトースを資化できる条件、すなわち、温度は、通常、約０乃至４０℃の範囲、望ましくは、約１５乃至３５℃の範囲が好適であり、ｐＨは、通常、４．０乃至５．５の範囲に制御するのが好ましい。反応混合物中の基質の濃度は所期の反応が進行し、得られる反応物がラクトスクロースを糖組成として７０％以上、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満である限り特に限定されないものの、例えば、スクロースとラクトースとを、それぞれ、通常、０．１乃至４０質量％の範囲、望ましくは、１乃至３０質量％の範囲が好ましく、両者の量比は１：０．６５乃至１．３とするのが好ましい。【００１６】
β−フラクトフラノシダーゼの使用量に関しては、反応原料（基質）中のスクロースの乾燥質量１ｇ当たり、通常、０．１乃至５０単位の範囲、望ましくは、０．５乃至１０単位の範囲とするのが好適である。なお、本明細書でいうβ−フラクトフラノシダーゼ活性の１単位とは、同じ特許出願人による特開平９−２２４６６５号公報に記載の方法に従って、ｐＨ６．０、４０℃でスクロースを基質として反応させたとき、１分間当たり２μｍｏｌのＤ−グルコースに相当する還元力を増加させる酵素量を意味する。【００１７】
スクロース非資化性酵母の使用量に関しては、反応原料（基質）中のスクロースの乾燥質量１ｇ当たり、通常、湿質量として０．０１乃至１ｇの範囲、望ましくは、０．０５乃至０．２ｇの範囲とするのが好適である。【００１８】
β−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを併用する方法は、得られる反応物がラクトスクロースを糖組成として７０％以上含有し、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満である限り特に限定されず、例えば、スクロースとラクトースとを含有する水溶液にβ−フラクトフラノシダーゼと酵母とを同時に或いは異なる時点で添加し作用させてもよいし、β−フラクトフラノシダーゼと酵母のいずれか又は両者を反応中、適宜追加して作用させてもよい。さらに、β−フラクトフラノシダーゼ反応とスクロース非資化性酵母による処理とを別々の反応容器で行い、それぞれの反応液を互いに循環させることで連続的に反応させてもよく、このような場合、固定化β−フラクトフラノシダーゼや固定化スクロース非資化性酵母を用いたバイオリアクターは有利に利用することができる。【００１９】
β−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを併用して反応させる時間は、それらを併用する方法や反応の進行の度合いに応じて適宜選択することができ、通常、２乃至２００時間の範囲、望ましくは、１０乃至８０時間の範囲が好適である。【００２０】
反応に用いたβ−フラクトフラノシダーゼ及び／又はスクロース非資化性酵母は、必要に応じて、遠心分離、膜濾過などの手法により反応物と分離・回収して、再度、該反応に用いることも有利に実施できる。【００２１】
以上のような本発明のラクトスクロース高含有糖質の製造方法によると、ラクトスクロースを糖組成として７０％以上含有し、且つ、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満と低い反応物をラクトスクロース高含有糖質として得ることができる。斯かるラクトスクロース高含有糖質は、そのままの状態で用いてもよく、また、アルカリ処理により残存するラクトースを部分的にラクチュロースに異性化してラクトース含量を低減させ、含まれるラクトースの結晶が析出するのを抑えたラクトスクロース高含有糖質とした後、用いることも随意である。さらには、本発明のラクトスクロース高含有糖質を、慣用の方法、例えば、活性炭処理などによる脱色、イオン交換樹脂処理などによる脱塩、炭酸飽充による不純物の不溶化、結晶化によるラクトースの除去、珪藻土などの助剤を用いる濾過、エバポレーターなどを用いる濃縮、必要に応じて、さらに噴霧乾燥などから選ばれる適宜の工程により所望のレベルにまで精製した製品として、諸種の用途に利用することができる。【００２２】
また、本発明のラクトスクロース高含有糖質を原料として、イオン交換樹脂などを用いるクロマトグラフィーによりさらに精製し、糖組成としてラクトスクロースを９０％以上含有する画分を回収し、濃縮してシラップ状高純度ラクトスクロースとすることも、また、これを噴霧乾燥、真空乾燥、凍結乾燥などから選ばれる適宜の乾燥工程により粉末化した粉末又は顆粒製品として、諸種の用途に利用することもできる。【００２３】
また、以上述べてきたラクトスクロース高含有糖質又は高純度ラクトスクロースを用いて、ラクトスクロースの過飽和水溶液とし、次いで、結晶ラクトスクロースを晶出させ、これを採取することも有利に実施できる。晶出条件としては、ラクトスクロースの過飽和溶液であって、結晶ラクトスクロースが析出すればよく、通常、ラクトスクロース濃度７５質量％以上の水溶液が適している。具体的に述べれば、例えば、純度約７５％以上、望ましくは、約８０乃至９５％のラクトスクロースを、濃度約７５乃至９５質量％又はこれ以上の濃度とし、その溶液の温度は、溶液が凍結せず、また結晶の融点以下でラクトスクロースの褐変、分解の懸念の少ない温度、例えば、水分約５乃至２５質量％の溶液を２０乃至６０℃で晶出させればよい。また、晶出させるに際して、溶液の過飽和度、粘度などを調整するために、例えば、メタノール、エタノール、アセトンなどを共存させることも随意である。【００２４】
晶出方法は、通常、比較的高温の過飽和ラクトスクロース含有溶液を助晶缶にとり、これに種晶を、望ましくは、０．１乃至２０質量％共存せしめて、ゆっくり攪拌しつつ、徐冷し、晶出を促してマスキットにすればよい。【００２５】
晶出したマスキットから結晶ラクトスクロースを製造する方法は、結晶ラクトスクロースが採取できればよく、例えば、分蜜方法、ブロック粉砕方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法などの公知の方法を利用すればよい。【００２６】
例えば、分蜜方法は、通常、バスケット型遠心分離機にかけ、結晶ラクトスクロースと蜜とを分離する方法で、必要により、該結晶に少量の冷水をスプレーして洗浄することも容易であり、より高純度の結晶ラクトスクロースを製造するのに好適である。他の三つの方法は、蜜を分離しないので、得られる結晶製品に純度の上昇は見られないものの製品収量の多い特徴を有している。従って、本製品の場合には、通常、結晶製品に、ラクトスクロース以外に原料又は製造工程由来の糖質、例えば、スクロース、ラクトースなどが含まれる。【００２７】
噴霧乾燥方法の場合には、通常、晶出率約２０乃至５０％のマスキットを高圧ポンプでノズルから噴霧し、結晶粉末が溶融しない温度、例えば、約４０乃至６５℃の温風で乾燥し、次いで、温風で乾燥熟成すれば、非吸湿性又は難吸湿性の結晶含有粉末が容易に製造できる。【００２８】
また、ブロック粉砕法は、通常、晶出率約１０乃至６０％のマスキットを約０．５乃至５日間静置して全体をブロック状に晶出固化させ、これを粉砕又は切削などの方法によって破砕し、乾燥すれば、非吸湿性、難吸湿性の結晶含有粉末が容易に製造できる。【００２９】
また、ラクトスクロース含有水溶液を、常法に従い、水分５質量％未満に加熱濃縮して、溶融状態としたラクトスクロースの過飽和水溶液とし、この溶液に種晶を結晶の融点以下の温度で混捏し、これを各種形状、例えば、粉体、顆粒、棒状、板状、立方体などに直接成形して、非吸湿性又は難吸湿性の結晶含有固体を製造することも随意である。【００３０】
本発明の製造方法により得られるラクトスクロース高含有糖質及び高純度ラクトスクロース、さらには、結晶ラクトスクロースは、従来公知のラクトスクロース及びラクトスクロース含有糖質と同様の用途に、例えば、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤、ミネラル吸収促進剤などとして健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用することができる。とりわけ、結晶ラクトスクロースは、前記の各種機能に加えて、実質的に非吸湿性であり、流動性であり、粘着、固着の懸念も少なく取り扱い容易であり、その包装、輸送、貯蔵などの管理に要する物的、人的経費が大幅に削減できる特徴を有する。【００３１】
また、本発明の結晶ラクトスクロースは、実質的に非吸湿性乃至難吸湿性の粉末で、耐熱性が高く、安定性もよいので、従来、極めて困難とされていた各種固状組成物、例えば、粉末状混合甘味料、チョコレート、チューインガム、即席ジュース、即席スープ、顆粒、錠剤などの固着抑制剤、賦形剤、増量剤、粉末基剤などとして結晶ラクトスクロースを、望ましくは１質量％以上含有せしめて、例えば、飲食物、化粧品、医薬品、成形物などの各種固状組成物を製造することも、更には、試薬、化学工業原料などとして利用することも有利に利用できる。【００３２】
また、本発明のラクトスクロースは、他の結晶糖質、例えば、マルトース、ラクトース、マルチトール、トレハロース、パラチノース、スクロースなどと、望ましくは、結晶ラクトスクロースの質量に対して０．０１乃至１００倍量の配合割合で併用して、吸湿性が低く取り扱いの容易な各種固状組成物を製造することも有利に実施できる。【００３３】
さらには、前述のようにして得た高純度ラクトスクロース粉末品又は結晶品を、適宜の水溶性高分子、例えば、プルラン、水溶性プルランエーテル、水溶性プルランエステル、ゼラチン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、海藻多糖類などを結合剤として常法により造粒し、流動性に優れ、取り扱いが容易な造粒品として各種用途に利用することも有利に実施できる。【００３４】
以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明する。
【実施例１】
【００３５】
＜ラクトスクロース高含有糖質の製造＞【００３６】
＜実施例１−１：β−フラクトフラノシダーゼの調製＞
同じ特許出願人による特開平９−２２４６６５号公報に記載された方法に従ってバチルス・スピーシーズ  Ｖ２３０（ＦＥＲＭ  ＢＰ−５０５４）を、スクロースを炭素源として含む培地中で４０Ｌの培養規模で培養した。引き続き上記公報に記載の方法に従って、培養物を遠心分離して、その上清を約３８Ｌ採取し、β−フラクトフラノシダーゼの活性測定を行い、この培養上清がβ−フラクトフラノシダーゼ活性を示すことを確認した。【００３７】
上記の培養上清をＵＦ膜濃縮し、１ｍｌ当り約３６０単位のβ−フラクトフラノシダーゼ活性を有する粗酵素液３６０ｍｌを得た。これを、引き続き上記公報に記載の方法に従って、『ＤＥＡＥ−トヨパール』ゲル（東ソー株式会社製）を用いたイオン交換クロマトグラフィー、『ブチル−トヨパール６５０』ゲル（東ソー株式会社製）を用いた疎水クロマトグラフィー、及び、再度、『ＤＥＡＥ−トヨパール』ゲルを用いたイオン交換クロマトグラフィーに供し、７．５％（ｗ／ｖ）ポリアクリルアミドゲル電気泳動において単一のバンドを示すβ−フラクトフラノシダーゼの精製標品を得た。得られた精製標品の比活性は蛋白質１ｍｇ当り約２０５単位であった。【００３８】
＜実施例１−２：スクロース非資化性酵母の調製＞
グルコース２．０％（ｗ／ｖ）、酵母エキス２．０％（ｗ／ｖ）及び水からなる液体培地を５００ｍｌ容三角フラスコに２００ｍｌ入れ、オートクレーブで１２１℃、２０分間滅菌し、冷却して、サッカロマイセス・セレビシアエ  ＡＴＣＣ５６７４１を接種し、２７℃、２３０ｒｐｍで２４時間回転振盪培養したものを種培養とした。容量３０Ｌのファーメンターに種培養と同じ組成の培地を入れて、加熱滅菌、冷却して温度２７℃とした後、種培養液１％（ｖ／ｖ）を接種し、温度２７℃、ｐＨ４．０乃至７．０に保ちつつ、４８時間通気攪拌培養した。培養後、培養液を遠心分離（８，０００ｒｐｍ、２０分間）して該酵母の菌体を湿質量として約６８０ｇ回収した。【００３９】
＜実施例１−３：ラクトスクロース生成反応＞
スクロース及びラクトースをそれぞれ２０質量％含有する水溶液をｐＨ６．０に調整し、これに実施例１−１で調製したβ−フラクトフラノシダーゼ精製標品をスクロース１グラム当り１単位、及び実施例１−２で調製した酵母を固形物質量当り湿質量で６．９％になるように加えて、１Ｎの水酸化ナトリウム溶液を用いて該反応液をｐＨ４．０乃至５．５に制御しながら、３０℃で２４時間及び４２時間反応させた。反応後、反応液の糖組成を高速液体クロマトグラフィー法（ＨＰＬＣ）で測定した。ＨＰＬＣは、『ＴＳＫ−ＧＥＬ  ＡＭＩＤＥ−８０』カラム（東ソー株式会社製）を用い、カラム温度３５℃、溶離液としてアセトニトリル：水（７１：２９）を用いて、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎの条件で行い、検出は示差屈折計『ＲＩ−８０１２』（東ソー株式会社製）を用いて行った。糖組成分析の結果を表１示す。なお、対照実験として、アルスロバクター・スピーシーズ  Ｋ−１由来のβ−フラクトフラノシダーゼを、藤田孝輝ら、『アグリカルチュラル・バイオロジカル・ケミストリー（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）』、５４巻、９１３−９１９頁（１９９０）に記載の方法で精製し、それをスクロース１グラム当り１０単位加え、反応液をｐＨ５．５乃至６．５に制御した以外は、全く同じ操作を行った。得られた結果を表１示す。【００４０】
【表１】
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【００４１】
表１に示すとおり、本発明で用いるバチルス・スピーシーズ  Ｖ２３０のβ−フラクトフラノシダーゼは、糖組成としてラクトスクロースを７１．０％（反応時間２４時間）乃至７３．６％（反応時間４２時間）と７０％以上生成し、且つ、副生成物である１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計０．１％（反応時間２４時間）乃至０．３％（反応時間４２時間）と１％未満しか生成しないことが判明した。一方、対照であるアルスロバクター・スピーシーズ  Ｋ−１のβ−フラクトフラノシダーゼは、糖組成としてラクトスクロースを６３．３％（反応時間２４時間）乃至６３．０％（反応時間４２時間）と６５％未満しか生成せず、また、副生成物である１−ケストースとフラクトシルラクトスクロースを合計５．９％（反応時間２４時間）乃至１２．４％（反応時間４２時間）と著量生成することも判明した。
【実施例２】
【００４２】
＜ラクトスクロース高含有糖質粉末の製造＞
スクロースを２４質量％及びラクトースを１６質量％含有する水溶液をｐＨ６．０に調整し、これに実施例１−１で調製したβ−フラクトフラノシダーゼ粗酵素液をスクロース１グラム当り１単位、及び実施例１−２で調製したスクロース非資化性酵母を原料固形物当り湿質量で７．５％になるように加えて、１Ｎの水酸化ナトリウム溶液を用いて該反応液をｐＨ４．０乃至５．５に制御しながら、３０℃で４５時間反応させた。反応後、反応液の糖組成をＨＰＬＣで測定したところ、グリセリンを２．０％、グルコース及びフラクトースを合計２．１％、スクロースを５．４％、ラクトースを１４．７％、１−ケストースを１．４％、ラクトスクロースを７３．０％、フラクトシルラクトスクロースを０．１％及び他の未知糖質を１．３％含有していた。得られた反応液を９０℃で３０分間加熱して酵素を失活させた後、常法に従って活性炭で濾過した。得られた濾過液を６０℃に調整した後、消石灰を固形物質量当り１．５％加えてｐＨを１１に調整して１５分間保持した後に、二酸化炭素を吹き込み、ｐＨを８にして炭酸飽充を行った。これを常法に従って濾過し、イオン交換樹脂を用いて脱塩し、濃縮した後、噴霧乾燥して、糖組成としてグリセリンを１．９％、グルコース及びフラクトースを合計２．２％、スクロースを５．５％、ラクトースを１０．８％、ラクチュロースを３．３％、１−ケストースを１．３％、ラクトスクロースを７３．５％、フラクトシルラクトスクロースを０．１％及び他の未知糖質を１．４％含有するラクトスクロース高含有糖質粉末を製造した。【００４３】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【実施例３】
【００４４】
＜ラクトスクロース高含有糖質シラップの製造＞
スクロースを１８質量％及びラクトースを２２質量％含有する水溶液をｐＨ６．０に調整し、これに実施例１−１で調製したβ−フラクトフラノシダーゼ粗酵素液をスクロース１グラム当り１単位、及び実施例１−２で調製したスクロース非資化性酵母を固形物質量当り湿質量で５．０％になるように加えて、１Ｎの水酸化ナトリウム溶液を用いて該反応液をｐＨ４．０乃至５．５に制御しながら、３２℃で４２時間反応させた。反応後、反応液の糖組成をＨＰＬＣで測定したところ、グリセロールを１．９％、グルコース及びフラクトースを合計０．１％、スクロースを１．２％、ラクトースを２２．６％、１−ケストースを０．３％、ラクトスクロースを７２．４％、フラクトシルラクトスクロースを０．１％、及び他の未知糖質を１．４％含有していた。得られた反応液を、常法に従ってＳＦ膜で濾過して酵母を除き、更に常法に従ってＵＦ膜で濾過してβ−フラクトフラノシダーゼなど高分子成分を除き、続いて活性炭で濾過した後、減圧乾燥して固形物約８０質量％の濃縮液を得た。この濃縮液を温度約２５℃に調整した後、仕込みラクトースの約３質量％の結晶ラクトース粉末を加えラクトースを部分的に結晶化した。晶出したラクトースを常法に従って濾過により除去した後、イオン交換樹脂を用いて脱塩し、濃縮して、糖組成としてグリセロールを２．２％、グルコース及びフラクトースを合計０．１％、スクロースを１．４％、ラクトースを１０．１％、１−ケストースを０．４％、ラクトスクロースを８４．１％、フラクトシルラクトスクロースを０．１％、及び他の未知糖質を１．６％含有するラクトスクロース高含有糖質シラップを製造した。【００４５】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【実施例４】
【００４６】
＜高純度ラクトスクロース粉末の製造＞
スクロースを２０質量％及びラクトースを２０質量％含有する水溶液をｐＨ６．０に調整し、これに実施例１−１で調製したβ−フラクトフラノシダーゼ粗酵素液をスクロース１グラム当り１単位、及び実施例１−２で調製したスクロース非資化性酵母を固形物質量当り湿質量で５．０％になるように加えて、１Ｎの水酸化ナトリウム溶液を用いて該反応液をｐＨ４．０乃至５．５に制御しながら、３０℃で３０時間反応させた。反応後、反応液の糖組成をＨＰＬＣで測定したところ、グリセロールを２．０％、グルコース及びフラクトースを合計０．２％、スクロースを１．６％、ラクトースを１９．２％、１−ケストースを０．６％、ラクトスクロースを７４．７％、フラクトシルラクトスクロースを０．１％、及び他の未知糖質を１．７％含有していた。得られた反応液を常法に従ってＳＦ膜で濾過して酵母を除き、更に常法に従ってＵＦ膜で濾過してβ−フラクトフラノシダーゼなど高分子成分を除き、続いて活性炭で濾過した後、減圧乾燥して固形物約６０質量％の濃縮液を得た。このラクトスクロース高含有糖質シラップを原糖液とし、ラクトスクロースの純度を高めるため、強酸性カチオン交換樹脂（商品名『アンバーライトＣＲ−１３１０』（Ｎａ＋型）、オルガノ株式会社）を用いてカラムクロマトグラフィーを行った。即ち、前記樹脂を内径１２．５ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム１０本に充填し、これらカラムを直列に接続して樹脂層全長を１６ｍとした。カラム内温度を４０℃に維持しつつ、前記シラップを樹脂量に対して１．５％（ｖ／ｖ）加え、これに４０℃の温水をＳＶ０．２で流して分画し、溶出液の糖組成をＨＰＬＣ法でモニターしながら、ラクトスクロース高含有画分を採取し、これを常法に従って、濾過し、イオン交換樹脂、活性炭を用いて脱塩、脱色精製し、濃縮した後、噴霧乾燥して、糖組成としてスクロースを０．１％、ラクトースを２．３％、１−ケストースを１．１％、ラクトスクロースを９６．０％、フラクトシルラクトスクロースを０．２％、及び他の未知糖質を０．３％含有する高純度ラクトスクロース粉末を製造した。【００４７】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【実施例５】
【００４８】
＜高純度ラクトスクロース造粒品の製造＞
実施例４で得た高純度ラクトスクロース粉末１００質量部に対し、予めプルラン（商品名『プルランＰＦ−２０』、株式会社林原商事販売）を脱イオン水に終濃度約３％（ｗ／ｖ）になるよう溶解して得たプルラン水溶液約６質量部を常法に従い噴霧することにより造粒を行った。得られた造粒品を篩目開き１．７ｍｍの篩で分級し、高純度ラクトスクロース造粒品を得た。この造粒品の粒度分布を測定し、原料である高純度ラクトスクロース粉末の粒度分布と比較したところ、原料の高純度ラクトスクロース粉末では粒子径１０６μｍ以下の粒子が８５％以上を占めていたのに対して、高純度ラクトスクロース造粒品では粒子径１５０μｍ以上の粒子が７０％以上を占めていた。【００４９】
本品は、造粒品であることから流動性に優れ、取り扱いが容易であり、また、溶解時にまま粉を起こし難い特徴を有している。本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【実施例６】
【００５０】
＜結晶ラクトスクロース＞
実施例４の方法で得たラクトスクロース高含有画分を、常法に従って、濾過し、イオン交換樹脂、活性炭を用いて、脱塩、脱色精製し、水分約２５質量％に減圧濃縮して、助晶缶にとり、種結晶を１質量％加えてゆっくり攪拌しつつ２４時間かけて約３０℃に徐冷した。これを遠心分離機にかけてラクトスクロース５含水結晶を収率約４０％で得た。本品は、純度約９８％以上の結晶ラクトスクロースで、夏場の高温多湿環境下においても実質的に吸湿性を示さず取り扱い容易で、甘味料、難消化性甘味料、整腸剤などとして、飲食物、化粧品、医薬品などの諸種の分野、とりわけ、結晶ラクトスクロースを含有せしめた固状組成物への用途に有利に利用できる。
【実施例７】
【００５１】
＜甘味料＞
実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース１質量部に、α−グルコシルステビオシド（東洋精糖株式会社販売、商品名「αＧ−スイート」）０．０５質量部を均一に混合し、顆粒成形機にかけて、顆粒状甘味料を得た。本品は、甘味の質が優れ、砂糖の約２倍の甘味を有し、甘味度当たりのカロリーは、砂糖の約１／２に低下している。本甘味料は、低カロリー甘味料として、カロリー摂取を制限している肥満者、糖尿病者などのための低カロリー飲食物などに対する甘味付けに好適である。また、本甘味料は、虫歯誘発菌による酸の生成が少なく、不溶性グルカンの生成も少ないことより、虫歯を抑制する飲食物などに対する甘味付けに好適である。さらに、本甘味料は腸内の菌叢を整える整腸剤としても好適である。
【実施例８】
【００５２】
＜成形甘味料＞
実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース１質量部と粉砂糖２質量部とを均一に混合し、これに適量の水を噴霧し、常法に従って成形して成形甘味料を得た。本品は腸内の菌叢を整える整腸機能を有する成形甘味料として、コーヒー、紅茶などへの甘味付けに有効に利用できる。
【実施例９】
【００５３】
＜チョコレート＞
カカオペースト４０質量部、カカオバター１０質量部、砂糖２０質量部、実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース３０質量部を混合してレファイナーに通して粒度を下げた後、コンチェに入れて５０℃で２昼夜練り上げた。この間に、レシチン０．５質量部を加え充分に混和分散させた。次いで、温度調節機で３１℃に調節し、バターの固まる直前に型に流し込み、振動機でアワ抜きを行い、１０℃の冷却トンネルを２０分間くぐらせて固化させた。これを型抜きして包装し製品を得た。本品は吸湿性がなく、色、光沢共によく、内部組織も良好で、口中でなめらかに溶け、上品な甘味とまろやかな風味を有する。また、本品は整腸作用を有するチョコレートとしても好適である。
【実施例１０】
【００５４】
＜チューインガム＞
ガムベース３質量部を柔らかくなる程度に加熱溶融し、これに無水結晶マルチトール（株式会社林原商事販売、登録商標「マビット」）４質量部及び実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース３質量部を加え、さらに適量の香料と着色料とを混合し、常法に従って、ロールにより練り合わせ、成形、包装して製品を得た。本品は、テクスチャー、風味とも良好なチューインガムである。また、本品は、整腸作用を有するチューインガムとしても好適である。
【実施例１１】
【００５５】
＜飲料＞
ヨーグルト１００質量部、実施例４の方法で得た高純度ラクトスクロース粉末５０質量部、トレハロース１０質量部、ヨーグルトフレーバー０．２５質量部及びレモンエッセンス０．１質量部に水を加えて全体を１０００質量部とする配合で、常法に従って、ヨーグルト飲料を製造した。本品は、風味が豊かで、且つ、腸内の菌叢を整える整腸機能を有している。
【実施例１２】
【００５６】
＜経管栄養剤＞
実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース１０質量部、トレハロース１０質量部、グリシン１．１質量部、グルタミン酸ナトリウム１質量部、乳酸カルシウム０．４質量部、炭酸マグネシウム０．１質量部、チアミン０．０１質量部及びリボフラビン０．０１質量部からなる配合物を調製した。この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小包に充填し、ヒートシールして製品を得た。本品は、１袋分を約３３乃至５００ｍｌの水に溶解して栄養補給液とし、経管方法により、鼻腔、胃腸などへ投与して使用する。本品はヒトのみならず、家畜などへの非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。また、本品は、腸内菌叢を整える整腸作用を有している。
【実施例１３】
【００５７】
＜糖衣錠＞
質量１５０ｍｇの素錠を芯剤とし、これに実施例６の方法で得た結晶ラクトスクロース４５質量部、プルラン（平均分子量２０万）２質量部、水３０質量部、タルク２５質量部及び酸化チタン３質量部からなる下掛け液を用いて錠剤質量が約２３０ｍｇになるまで糖衣し、次いで、同じ結晶ラクトスクロース６５質量部、プルラン１質量部及び水３４質量部からなる上掛け液を用いて糖衣し、さらに、ロウ液で艶出しして光沢のある外観の優れた糖衣錠を得た。本品は、糖衣掛け時の作業性が優れているだけでなく、耐衝撃性にも優れており、高品質を長時間維持する。また、本品は、腸内の菌叢を整える整腸機能を有している。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
以上述べたように、本発明のラクトスクロース高含有糖質の製造方法によれば、カラムクロマトグラフィーなどの精製手段を使用せずとも、スクロースとラクトースとからβ−フラクトフラノシダーゼとスクロース非資化性酵母とを併用した反応のみで、糖組成として７０％以上のラクトスクロースを含有するラクトスクロース高含有糖質を製造することができる。また、本発明の製造方法で得られるラクトスクロース高含有糖質は、副生成物である１−ケストース及びフラクトシルラクトスクロースの含量が糖組成として合計３％未満と低いことから、これを原料としてクロマトグラフィー法で精製すると、さらに高純度のラクトスクロースを容易に高収率で調製することができる。【００５９】
さらに、本発明により得られるラクトスクロース高含有糖質又は高純度ラクトスクロースは、機能を発揮するに有効なラクトスクロースを糖組成として７０％以上又は９０％以上含有することから、ラクトスクロース含量が低い従来のラクトスクロース含有糖質に比べ、ラクトスクロースが本来有する難消化性、ビフィズス菌増殖促進性、難う蝕性、保湿性などの優れた機能を比較的少量で発揮することができる。そのため、本発明で得られるラクトスクロース高含有糖質又は高純度ラクトスクロースは、これを配合して飲食品、化粧品、医薬品、飼料などの各種組成物を製造する場合、他の原材料と配合する上で、より幅広い配合組成を選択することができる。【００６０】
さらには、ラクトスクロース高含有糖質又は高純度ラクトスクロースを含むラクトスクロースの過飽和水溶液から晶出し、採取して製造されるラクトスクロース５含水結晶は、実質的に非吸湿性であり、流動性良好で、粘着、固着の懸念も少なく取り扱い容易であることから、各種固状組成物に有利に利用できる。【００６１】
本発明は、斯くも顕著な作用効果を奏する発明であり、斯界に貢献すること誠に多大な意義のある発明である。
【国際調査報告】
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