(57)【要約】  本発明は、関節リウマチ治療用組成物健康食品用組成物及び医薬品組成物に関する。  本発明の健康食品および医薬品組成物は、グルコサミン、コラーゲン、イソフラボンアグリコンが相乗的に作用して軟骨代謝異常疾患、特に関節リウマチの症状緩和、治療に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコサミン、コラーゲンおよびイソフラボンアグリコンを含有する組成物。
【請求項２】
グルコサミンが節足動物類及び／または軟体動物類が持つ構造多糖キチンの酸加水分解物として得られるものである請求項１記載の組成物。
【請求項３】
グルコサミンが、グルコサミン塩酸塩である請求項２記載の組成物。
【請求項４】
イソフラボンアグリコンがゲニステインである請求項１記載の組成物。
【請求項５】
グルコサミン塩酸塩を３０〜９０質量％、II型コラーゲンをペプチドとして１〜１０質量％、イソフラボンアグリコンを３〜３０質量％（但し、これら３成分の総量を１００％とする）含有する組成物。
【請求項６】
軟骨代謝異常疾患治療予防及び／または改善用健康食品組成物である請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
軟骨代謝異常疾患が、関節リウマチ、変形性膝関節症または変形性脊椎症である請求項６記載の健康食品組成物。
【請求項８】
軟骨代謝異常疾患治療予防及び／治療用医薬組成物である請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
軟骨代謝異常疾患が、関節リウマチ、変形性膝関節症または変形性脊椎症である請求項８記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗炎症作用を有するグルコサミン、経口免疫寛容作用を有するコラーゲン、及び血管新生抑制作用を有するイソフラボンアグリコンの各物質が相乗的に作用して軟骨代謝異常疾患、特に関節リウマチの症状緩和、治療に有用な組成物を含有する食品および医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
社会の高齢化に伴い加齢に伴ういわゆる生活習慣病と称される慢性疾患に罹患する人が急激に増加している。高齢者における身体機能、運動感覚機能の低下においては、変形性膝関節症、変形性脊椎症、骨粗鬆症など、骨などの硬組織およびその周辺組織が関わる骨・軟骨代謝異常疾患が深く関わっている。特にこれらの疾患は痛みを伴う場合が多く生活の質（ＱＯＬ）の低下を招く。現在、これらの疾患の患者数は変形性膝関節症で約７００万人、変形性脊椎症で約1500万人、骨粗鬆症で約７００万人とされる。【０００３】
これらの疾患に対する治療としては非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）、ステロイド抗炎症剤、免疫調節剤などによる薬物治療やリハビリテーションなどの理学療法、人工関節手術のような外科的治療が行われる。【０００４】
このような従来の治療方法は、いずれも治療効果が十分得られない割には、概して臓器障害や過敏症、あるいは投薬治療により別の疾病（ステロイド骨粗鬆症や間質性肺炎など）を誘発するなど、いずれの場合も強い副作用が認められ、患者に苦痛を与える。また、発症原因が明確でないため根本的な治療が困難であり、症状の程度によっては家庭内で湿布などによる簡易的な処置をしたり、適当な処置方法がないため我慢している場合も多い。【０００５】
このような状況において、これら疾患の発生や進行の予防、治療のために、家庭でも医療の現場においても簡便に利用可能であり、副作用がなく長期連用が可能な治療方法が望まれている。【０００６】
グルコサミンは一般的にはカニやエビ由来の殻に多く含まれるキチンの分解物で単糖のＮ−アセチルグルコサミンからアセチル基を除去して製造されるヘキソサミンの一種で、代表的な天然のアミノ糖であり、結合組織や軟骨を形成しているプロテオグリカンを構成し、各組織においてコラーゲン繊維、水分などと組み合って各機関の強度、柔軟性、弾力性に寄与している。グルコサミンは軟骨や結合組織の成分になるばかりでなく好中球を介した抗炎症作用が報告されており関節炎に有効なことが報告されている（特表２００４−５２９８６０号公報；特許文献１（関連出願；国際公開第０２／０４３６５３号パンフレット））。【０００７】
コラーゲンは、もともと生体にあって細胞と細胞を結びつける役目をしている繊維状のタンパク質で、とくに皮膚・軟骨・腱などの硬組織、軟骨組織、結合組織に多く分布し、ヒトでは全タンパク質中約３０％を占め、水分を除くと皮膚の７０％、歯根の６０％、軟骨の５０％を構成する体の構成上重要なタンパク質の一つである。関節軟骨ではII型コラーゲンが主成分であり、関節リウマチの免疫源であると考えられている。関節リウマチ患者ではII型コラーゲンを経口摂取することによる免疫寛容機構を利用した経口トレランス療法が開発されている。【０００８】
イソフラボンはマメ科植物中に豊富に含まれるポリフェノールの一種で、構造が女性ホルモンに似ていることから植物エストロゲンと呼ばれる。大豆にも多く含まれ、その大部分は配糖体として存在するが、大豆発酵食品では微生物による発酵を受けてアグリコンとして存在する。
本発明者らはマメ科植物由来のイソフラボンをキノコの一種である担子菌により発酵させることで、イソフラボンをアグリコン化するとともに抗腫瘍・免疫賦活作用を有する担子菌多糖体を含有させることで相乗的に抗腫瘍効果と血管新生抑制効果を高めた組成物（Genistein Combined Polysaccharide：ＧＣＰ）を開発している（国際公開第０１／４４４８８号パンフレット：特許文献２（関連出願；米国特許出願公開第２００３／０６８３２９号明細書））。【０００９】
近年、関節リウマチを含む関節炎において血管新生は炎症細胞への栄養や酸素の供給を通じて病態の進行・持続に寄与するなどが重要な役割を果たしていることが明らかになってきている。血管新生抑制作用は関節リウマチを含む関節炎の治療法としての有用性が示唆されている（J. Cell. Mol. Med. vol.6, No.3, 357-376, 2002：非特許文献１，Arthritis Res. 4(Suppl. 3) S81-S90, 2002：非特許文献２）。関節リウマチに対しては、サメ軟骨エキスが血管新生抑制作用を有するとして臨床での応用が試みられたが、サメ軟骨には独特のアンモニア臭があり、有効量を摂取しようとすると一度に数十グラムもの大量を摂取しなければならず長期連用しがたいという難点があり実用には至っていない。【００１０】
【特許文献１】特表２００４−５２９８６０号公報
【特許文献２】国際公開第０１／４４４８８号パンフレット
【非特許文献１】J. Cell. Mol. Med. vol.6, No.3, 357-376, 2002
【非特許文献２】Arthritis Res. 4(Suppl. 3) S81-S90, 2002
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の課題は、抗炎症作用、経口免疫寛容、血管新生抑制作用を有する物質が相乗的に作用して関節リウマチの症状緩和、治療に有用な組成物を含有する健康食品用および医薬品用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題に鑑み鋭意研究した結果、抗炎症作用を有するグルコサミンと経口免疫寛容機構を促すコラーゲンと血管新生抑制作用を有するイソフラボンアグリコンを同時に摂取することで関節リウマチにおける痛みや炎症などの症状の緩和、治療後の痛みの再発予防において相乗的に作用することを見出し、本発明の完成に至った。【００１３】
すなわち、本発明は下記のグルコサミン、コラーゲン、イソフラボンアグリコンを有する物質が相乗的に作用して関節リウマチの症状緩和、治療に有用な組成物を含有する食品および医薬品に関する。
１．グルコサミン、コラーゲンおよびイソフラボンアグリコンを含有する組成物。
２．グルコサミンが節足動物類及び／または軟体動物類が持つ構造多糖キチンの酸加水分解物として得られるものである前記１記載の組成物。
３．グルコサミンが、グルコサミン塩酸塩である前記２記載の組成物。
４．イソフラボンアグリコンがゲニステインである前記１記載の組成物。
５．グルコサミン塩酸塩を３０〜９０質量％、II型コラーゲンをペプチドとして１〜１０質量％、イソフラボンアグリコンを３〜３０質量％（但し、これら３成分の総量を１００％とする）含有する組成物。
６．軟骨代謝異常疾患治療予防及び／または改善用健康食品組成物である前記１〜５のいずれかに記載の組成物。
７．軟骨代謝異常疾患が、関節リウマチ、変形性膝関節症または変形性脊椎症である前記６記載の健康食品組成物。
８．軟骨代謝異常疾患治療予防及び／治療用医薬組成物である前記１〜５のいずれかに記載の組成物。
９．軟骨代謝異常疾患が、関節リウマチ、変形性膝関節症または変形性脊椎症である前記８記載の医薬組成物。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
抗炎症作用を有するグルコサミンと経口免疫寛容機構を促すコラーゲンと血管新生抑制作用を有するイソフラボンアグリコンを含有する組成物は、これらの成分を同時に摂取することで相乗的に作用し関節リウマチにおける痛みや炎症などの症状の緩和、治療後の痛みの再発予防に利用することができる。【００１５】
本発明で用いるグルコサミンは、甲殻類、昆虫類などの節足動物類や、頭足類、腹足類に代表される軟体動物類が持つ構造多糖キチンの酸加水分解物として得られ、分解の過程で得られるグルコサミン類を含む粗精製物や、そこから単離精製した成分としても用いることができる。【００１６】
上記のグルコサミンとしては特に形態を限定しないが、グルコサミン、その塩酸塩、硫酸塩またはＮ−アセチルグルコサミンなどが挙げられ、中でもグルコサミン塩酸塩が好適に用いられる。【００１７】
本発明で用いられるコラーゲンはその由来を特に限定しないがウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギなどのほ乳類、ニワトリ、シチメンチョウ、ダチョウ、エミューなどの鳥類、マグロ、カツオ、ウナギ、サケ、サメ、エイなどの魚類、カメ、ヘビなどの爬虫類、イカ、タコなどの軟体動物類、節足動物類の硬組織、軟骨組織、皮膚組織、臓器などから抽出されるコラーゲンを含む抽出物が用いられる。また、それらを慣用の方法に準じて変成、加水分解、酵素分解して得られるペプチドや、上記各種動物のコラーゲンのアミノ酸配列または遺伝子配列に基づいて化学合成されたコラーゲンも用いることができる。【００１８】
コラーゲンとして関節リウマチにおいて経口免疫寛容原となるのはII型コラーゲンであるから、コラーゲンを含む上記の抽出物からII型コラーゲンだけを単離・精製したものが好適に用いられる。【００１９】
本発明で用いられるイソフラボンアグリコンはダイズ、レッドクローバー、ホワイトクローバー、クズ、アルファルファ、エゾノレンリソウ、オランダヒユ、エニシダ等のマメ科植物類、あるいはこれらの植物組織を水、アルコールなどの有機溶媒、またはそれらの混合液により抽出した抽出物も使用することができる。また、これらを植物または微生物の産生したβグルコシダーゼにより発酵させ含有されているイソフラボン配糖体をアグリコンに変換したものも好適に使用できるし、大豆の発酵食品である味噌、醤油、納豆などの加工食品などもイソフラボンが含まれる限りイソフラボン含有素材として用いることができる。【００２０】
なかでも、マメ科植物中のイソフラボン配糖体をキノコの一種である担子菌との混合培養により発酵させイソフラボンをアグリコン化するとともに抗腫瘍・免疫賦活作用を有する担子菌多糖体を含有させることで相乗的に抗腫瘍効果と血管新生抑制効果を高めた組成物（ＧＣＰ；（株）アミノアップの登録商標）が本発明においてもっとも好適に用いられる。【００２１】
本発明の組成物は抗炎症作用を有するグルコサミンと経口免疫寛容機構を促すコラーゲンと血管新生抑制作用を有するイソフラボンアグリコンを含有するものであり、これらの成分を同時に摂取することで相乗的に作用し、関節リウマチにおける痛みや炎症などの症状の緩和、治療後の痛みの再発予防に利用するために、経口摂取できるような形態にして利用することができる。
本発明の組成物におけるグルコサミン、コラーゲンおよびイソフラボンアグリコンの割合は、本発明の効果が得られる範囲内で選択すればよいが、１例を挙げればこれら３成分の総量を１００％として、グルコサミン塩酸塩３０〜９０質量％、II型コラーゲンをペプチドとして１〜１０質量％、イソフラボンアグリコンを３〜３０質量％であり、好ましくはグルコサミン塩酸塩３０〜４５質量％、II型コラーゲンをペプチドとして1.5〜５質量％、イソフラボンアグリコンを３〜１５質量％である。
各成分の下限値未満及び上限値を超える場合には、グルコサミン、コラーゲンおよびイソフラボンアグリコンが相乗的を示さない。
本発明の組成物を経口摂取する場合には、一般に錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤として用いることができるし、これらの形態に加工する際には、発明の効果を損なわない範囲で、必要に応じて適宜の補助資材（賦形剤、栄養素、増量剤、甘味剤類、香料類、着色料、防腐剤、乳化剤等）を使用することもできる。【００２２】
本発明の組成物を経口摂取する際には、その摂取量は性別、年齢、体重、症状、目的とする治療効果等により異なるが、通常成人一人当たり、一日につきグルコサミンを１００〜2000ｍｇ程度、コラーゲンを１０〜1000ｍｇ程度、イソフラボンアグリコンを５〜５００ｍｇ程度（すべて乾燥物換算）になるように摂取すれば良い。好ましくは通常成人一人当たり、一日につきグルコサミンを５００〜1000ｍｇ、コラーゲンを２０〜４０ｍｇ、イソフラボンアグリコンを５０〜１００ｍｇ（全て乾燥物換算）になるように摂取する。
【実施例】
【００２３】
以下、実施例及び試験例を挙げて本発明を具体的に説明する。ただし、本発明はこれら実施例によりなんら限定されるものではない。
実施例１：カプセル剤の製造例
下記の処方に基づいて、常法により各素材を粉体でよく撹拌・混合した（試料１）。
【表１】
2006120974.tif 000002
【００２４】
試験例１：関節リウマチモデル動物による効果試験
自己免疫異常として全身性エリテマトーデス様病変を自然発症し、多発性関節炎とリンパ節の腫脹を来すことから関節リウマチの動物モデルとして用いられるＭＲＬ／ｌｐｒマウスに下記の試験区に各試料を投与した。各群８匹を用い、７２日間飼育した。飼育期間中の試料および水は自由摂取させた。
試験区１：通常試料（日本クレア社製マウス等用飼料ＣＥ−２）、
試験区２：通常試料にＧＣＰを１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日になるように混餌、
試験区３：通常試料に試料１を６３０ｍｇ／ｋｇ体重／日になるように混餌。【００２５】
結果
試験期間中の関節リウマチの病状を、関節の腫脹の度合いを４段階で評価し、スコア化した（スコアが大きいほど関節リウマチが進行した状態を示す。）。その変化を図１に示す。試験区１では試験期間が進むにつれて、関節リウマチの病状が進行しスコアが増大した。一方、試験区２および３では試験区１に比べてスコアの増大が抑えられていた。【００２６】
試験終了時の体重当りのリンパ節質量を図２に示す。試験区１ではリンパ節の腫脹が認められ、質量が増加していたが、試験区２および試験区３では腫脹が抑えられており、試験区３ではその効果が強かった。【００２７】
血中の尿酸濃度は関節リウマチの進行に伴って増加する。試験終了時の血中の尿酸濃度を市販の血清生化学分析キット（和光純薬（株）製，尿酸Ｃテストワコー）を使用して測定した。その結果を図３に示す。試験区１で最も高い値を示したのに対し、試験区２および試験区３では、試験区１に対して低い値を示し、試験区３が最も低い値を示した。【００２８】
関節リウマチで増加するバイオマーカーである血中の抗二本鎖ＤＮＡ（ｄｓ−ＤＮＡ）抗体量を市販のＥＬＩＳＡキット（（株）シバヤギ製，レビス抗ｄｓ−ＤＮＡマウス）を使用して測定した。その結果を図４に示す。試験区１では投与開始前に比較して抗ｄｓ−ＤＮＡ抗体量が増加しており試験区２においても同様であったが、試験区３ではその増加が抑えられており、関節リウマチの病態の進行が抑えられていることが示唆された。【００２９】
以上のことから関節リウマチの動物モデルとして用いられるＭＲＬ／ｌｐｒマウスにおいて本発明の組成物はリンパ節の腫脹を抑え、関節リウマチの病態の進行を抑えることが明らかとなった。【００３０】
試験例２：関節リウマチ患者に対する臨床検討
８７名の関節リウマチ患者を対象とした二重盲検による臨床試験を実施し、本発明の組成物の有効性を検証した。試料１をプルラン製ハードカプセルに充填し、一粒当り0.32ｇの試料１を含有するハードカプセル剤を調製した（実薬群）。偽薬（プラセボ）には麦芽エキスにデキストリンを加え、外観上区別がつかないようにした粉末を同様にハードカプセル充填して用いた（偽薬群）。【００３１】
インフォームドコンセントの後、実薬と偽薬を順次、一日１２カプセルを３回に分けて、無作為に表のような内訳で１２週間投与した。
【表２】
2006120974.tif 000003
評価項目は疼痛関節数、腫脹関節数、血中のＣＲＰ値のほか、患者の自覚症状として関節の痛みおよび生活活動状況を患者自身により、１１段階評価（０：全く痛みなしまたは全く支障なし〜１０：非常に痛いまたは全く生活できない）で、患者の主観で最も当てはまる状態の数値を選択する方式のアンケートで服用前、服用３ヵ月後に調査し、比較検討した。【００３２】
結果
疼痛関節数、腫脹関節数、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）値の各項目の服用前後の改善量を実薬群と偽薬群で比較した結果を図５に示す。いずれの項目においても実薬群は偽薬群に比べ改善量が大きく、本発明の物質の服用により関節リウマチによる関節疼痛・関節腫脹の緩和と炎症状態の改善が示唆された。【００３３】
患者による自覚症状の評価として関節の痛みおよび生活活動状況の１１段階評価のうち服用前後で１段階以上の改善があったものを有効と判断した時の有効率で表した。その結果を図６に示す。どちらの項目においても実薬群は４０％近い改善率であったのに対し、偽薬群では２０または２５％と、いずれの場合も実薬群の方が有効と評価された。【００３４】
試験例３：関節リウマチ患者に対する臨床検討
肝障害があり、強い薬を服用できない被験者（５５歳・女性）に対し、試料１をプルラン製ハードカプセルに充填し、一粒当り0.32ｇの試料１を含有するハードカプセル剤を調製し、一日９カプセルを３回に分けて、４週間投与した。
評価項目及び評価方法は試験例２と同様で、服用前、服用１ヵ月後に調査し、比較検討した。その値を表３に示す。
【表３】
2006120974.tif 000004
【００３５】
結果
被験者は、投与期間中に左膝人口関節置換手術を行ったが、疼痛関節数は投与前に比べ１ヵ月の投与後には、それぞれの値に改善が見られ、本発明の物質の服用により関節リウマチによる関節疼痛・関節腫脹の緩和と炎症状態の改善が示唆された。【００３６】
試験例４：関節リウマチ患者に対する臨床検討
通常の関節リウマチ治療を行っていたが、あまり改善の見られなかった被験者（５１歳・女性）に、試験例３と同様の方法で試料１を含有するハードカプセル剤を併用し、服用前、服用２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月後を調査し、比較検討した。その値を表４に示す。
【表４】
2006120974.tif 000005
【００３７】
結果
ＣＲＰ値に改善が見られ、本発明の物質の服用により炎症状態の改善が示唆された。【００３８】
試験例５：関節リウマチ患者に対する臨床検討
通常の関節リウマチ治療を行っていたが、あまり改善の見られなかった被験者（６０歳・女性）に、試験例３と同様の方法で試料１を含有するハードカプセル剤を併用し、服用前、服用２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月後を調査し、比較検討した。その値を表５に示す。
【表５】
2006120974.tif 000006
【００３９】
結果
ＣＲＰ値に改善が見られ、本発明の物質の服用により炎症状態の改善が示唆された。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】関節リウマチモデル動物（ＭＲＬ／ｌｐｒマウス）の試験期間中のスコア変化を示す。
【図２】関節リウマチモデル動物の試験終了時における体重当りのリンパ節重量を示す。
【図３】関節リウマチモデル動物の試験終了時における血中尿酸濃度を示す。
【図４】関節リウマチモデル動物の試験終了時における抗二本鎖ＤＮＡ抗体量を示す。
【図５】疼痛関節数、腫脹関節数、ＣＲＰ値の改善量の比較を示す。
【図６】患者による関節の痛みおよび生活活動状況の自覚症状改善における有効率を示す。
【図１】
2006120974.tif 000007
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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