(57)【要約】【課題】酸化還元機能を保持する生体機能物質により反応する溶媒中の基質を検出し、また、当該反応の進行に関わる活性度・反応速度等の諸因子の特定を迅速・高感度かつ高精度に行なうことができ、再現性に優れており、簡便な構成の非水系バイオセンサーを作製するために使用される原材料となる基質感応膜素材を提供する。【解決手段】基質感応膜素材は、カルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミド及び／又は該カルボキシル基の少なくとも一部とシクロデキストリンの水酸基とでエステル結合しているエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含んだ高分子化合物と、酸化還元反応をして基質を酸化還元させる生体機能物質とが、含有されている。非水系酸化還元バイオセンサー１は、その基質感応膜素材を含む非水系酸化還元反応場形成素材で電極基材上に膜状に形成された基質感応膜により、被覆されている作用電極１７と、参照電極１５とを有している。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミド及び／又は該カルボキシル基の少なくとも一部とシクロデキストリンの水酸基とでエステル結合しているエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含んだ高分子化合物と、酸化還元反応をして基質を酸化還元させる生体機能物質とが、含有されていることを特徴とする基質感応膜素材。
【請求項２】
前記シクロデキストリンが、α−、β−又はγ−シクロデキストリンであることを特徴とする請求項１に記載の基質感応膜素材。
【請求項３】
前記カルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドが、ポリ（メタ）アクリルアミドのアミド基の一部加水分解物、又は（メタ）アクリルアミドと（メタ）アクリル酸との共重合物であることを特徴とする請求項１に記載の基質感応膜素材。
【請求項４】
前記生体機能物質が、自ら酸化還元反応をして基質を酸化還元させるものであることを特徴とする請求項１に記載の基質感応膜素材。
【請求項５】
前記生体機能物質が、チトクロムｃ、及び／又はヘモグロビンであることを特徴とする請求項４に記載の基質感応膜素材。
【請求項６】
酸化還元メディエーターを含んでいることを特徴とする請求項１に記載の基質感応膜素材。
【請求項７】
前記酸化還元メディエーターが、メチルビオロゲンであることを特徴とする請求項６に記載の基質感応膜素材。
【請求項８】
前記高分子化合物と前記生体機能物質と媒質とを含む膜組成物で膜状に成形されており、それの脱媒質により、細孔が形成されていることを特徴とする請求項１に記載の基質感応膜素材。
【請求項９】
請求項１に記載の基質感応膜素材を有していることを特徴とする非水系酸化還元反応場形成素材。
【請求項１０】
請求項９に記載の非水系酸化還元反応場形成素材で電極基材上に膜状に形成され、そこに前記生体機能物質を固定しつつ前記高分子化合物と共に露出させている基質感応膜により、被覆されている作用電極と、参照電極とを有していることを特徴とする非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１１】
前記基質と有機溶媒とを含む溶液に、前記作用電極と、前記参照電極とが、浸漬されていることを特徴とする請求項１０に記載の非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１２】
前記有機溶媒が、非プロトン性溶媒であることを特徴とする請求項１１に記載の非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１３】
前記基質が、過酸化水素、スーパーオキシドアニオンラジカルであることを特徴とする請求項１１に記載の非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１４】
前記溶液が、前記基質に反応する酵素を含んでいることを特徴とする請求項１１に記載の非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１５】
前記酵素が、カタラーゼであることを特徴とする請求項１４に記載の非水系酸化還元バイオセンサー。
【請求項１６】
請求項３に記載の非水系酸化還元反応場形成素材で電極基材上に膜を形成して作用電極を被覆し、それと参照電極とを、酸化還元される基質と有機溶媒とが含有された非水系溶液に、浸漬し、酸化還元電位を測定することを特徴とする基質濃度測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、溶液中の基質を検知できる電位制御可能な非水系バイオセンサーのために用いられる基質感応膜素材に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
バイオセンサーは、医療分野で患者の血糖値等の計測、食品製造分野での品質管理、環境保全分野での環境計測などの際に、様々な測定対象物質の量を検出するためのものである。
【０００３】
バイオセンサーとして、酵素と測定対象物質である基質との特異的な高選択的反応による物理的又は化学的変化を、電気信号、光、又は熱に変換して検出するというものが知られている。
【０００４】
このようなバイオセンサーとして、例えば、特許文献１に、酵素への検体の供給部、酵素への酸素供給部、ポリアクリルアミドゲル状電解質含浸ポリカーボネートと電極との電荷伝達体及び酵素を含んでおり、検体中の電極活性物量を酵素反応生成物によって生じる電流で検出する検出部を有するバイオセンサーが、開示されている。親水性高分子のポリアクリルアミドが含有する酵素と、非水溶媒のみに溶解している基質との間で起こる酵素反応を検出するこのような非水溶液系のバイオセンサーは、センサーの稼働に伴って酵素自身を消費するという問題があった。
【０００５】
また、非特許文献１に、アセトニトリル中の基質のカテコール及び４−メチルカテコールと反応させる酵素のチロシナーゼを含み、シクロデキストリンを化学結合した非可塑性ポリアクリルアミドメンブランでコーティングした白金ディスク電極が、開示されている。このような特定の基質のみならず、広範な基質、又は少量の基質について、定量できるセンサーが望まれている。
【０００６】
【特許文献１】特開２００７−１８７４４９号公報
【非特許文献１】「ケミストリー  レターズ(Chemistry  Letters)」、日本化学会、２００７年４月、第３６巻、ｐ．５０６−５０７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は前記の課題を解決するためになされたもので、酸化還元機能を保持する生体機能物質により反応する溶媒中の基質を検出し、また、当該反応の進行に関わる活性度・反応速度等の諸因子の特定を迅速・高感度かつ高精度に行なうことができ、再現性に優れており、簡便な構成の非水系バイオセンサーを作製するために使用される原材料となる基質感応膜素材を提供することを目的とする。またその素材を用いて広範な基質の電気化学測定系となる正確かつ簡便な非水系バイオセンサーを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記の目的を達成するためになされた特許請求の範囲の請求項１に記載の基質感応膜素材は、カルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミド及び／又は該カルボキシル基の少なくとも一部とシクロデキストリンの水酸基とでエステル結合しているエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含んだ高分子化合物と、酸化還元反応をして基質を酸化還元させる生体機能物質とが、含有されていることを特徴とする。
【０００９】
請求項２に記載の基質感応膜素材は、請求項１に記載されたもので、前記シクロデキストリンが、α−、β−又はγ−シクロデキストリンであることを特徴とする。
【００１０】
請求項３に記載の基質感応膜素材は、請求項１に記載されたもので、前記カルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドが、ポリ（メタ）アクリルアミドのアミド基の一部加水分解物、又は（メタ）アクリルアミドと（メタ）アクリル酸との共重合物であることを特徴とする。
【００１１】
請求項４に記載の基質感応膜素材は、請求項１に記載されたもので、前記生体機能物質が、自ら酸化還元反応をして基質を酸化還元させるものであることを特徴とする。
【００１２】
請求項５に記載の基質感応膜素材は、請求項４に記載されたもので、前記生体機能物質が、チトクロムｃ、及び／又はヘモグロビンであることを特徴とする。
【００１３】
請求項６に記載の基質感応膜素材は、請求項１に記載されたもので、酸化還元メディエーターを含んでいることを特徴とする。
【００１４】
請求項７に記載の基質感応膜素材は、請求項６に記載されたもので、前記酸化還元メディエーターが、メチルビオロゲンであることを特徴とする。
【００１５】
請求項８に記載の基質感応膜素材は、請求項１に記載されたもので、前記高分子化合物と前記生体機能物質と媒質とを含む膜組成物で膜状に成形されており、それの脱媒質により、細孔が形成されていることを特徴とする。
【００１６】
請求項９に記載の非水系酸化還元反応場形成素材は、請求項１に記載の基質感応膜素材を有していることを特徴とする。
【００１７】
請求項１０に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項９に記載の非水系酸化還元反応場形成素材で電極基材上に膜状に形成され、そこに前記生体機能物質を固定しつつ前記高分子化合物と共に露出させている基質感応膜により、被覆されている作用電極と、参照電極とを有していることを特徴とする。
【００１８】
請求項１１に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項１０に記載されたもので、前記基質と有機溶媒とを含む溶液に、前記作用電極と、前記参照電極とが、浸漬されていることを特徴とする。
【００１９】
請求項１２に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項１１に記載されたもので、前記有機溶媒が、非プロトン性溶媒であることを特徴とする。
【００２０】
請求項１３に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項１１に記載されたもので、前記基質が、過酸化水素、スーパーオキシドアニオンラジカルであることを特徴とする。
【００２１】
請求項１４に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項１１に記載されたもので、前記溶液が、前記基質に反応する酵素を含んでいることを特徴とする。
【００２２】
請求項１５に記載の非水系酸化還元バイオセンサーは、請求項１４に記載されたもので、前記酵素が、カタラーゼを含む過酸化水素分解酵素であることを特徴とする。
【００２３】
請求項１６に記載の基質濃度測定方法は、請求項３に記載の非水系酸化還元反応場形成素材で電極基材上に膜を形成して作用電極を被覆し、それと、参照電極とを、酸化還元される基質と有機溶媒とが含有された非水系溶液に、浸漬し、酸化還元電位を測定することを特徴とする。
【発明の効果】
【００２４】
本発明の基質感応膜素材は、高分子化合物を含有しており、酸化還元機能を保持する生体機能物質がこの高分子化合物によって固定化され、その酸化還元機能を有する生体機能物質固定場で酸化還元反応を起こし易くする疎水性の反応場が構築される担体となるものである。基質感応膜素材は、酵素反応に倣って人工的に酵素様機能を発現する親水性の有機合成ポリマーであって、非水系酸化還元反応場形成素材となるものである。
【００２５】
基質感応膜を含む酸化還元反応場形成素材は、酸化還元機能を有する生体機能物質と、溶液中の基質とりわけ非水溶液にのみ溶解する基質との反応速度が迅速になるというものである。
【００２６】
この基質感応膜素材は、チトクロムｃやヘモグロビンなどの酸化還元タンパク質のような生体機能物質を、均一に分散させることが可能で、非水系の溶媒に溶解した被験対象物である基質の酸化還元に伴う電子の授受をモニターして、基質の定性・定量を可能とする。この素材は、生体機能物質の酸化又は還元による測定を行う非水系酸化還元バイオセンサーに、用いることができる。
【００２７】
この非水系酸化還元反応場形成素材で被覆された電極を有する非水系酸化還元バイオセンサーは、基質感応膜中の疎水性の酸化還元固定場で特異的な高選択的酸化還元反応を起こし易くし、その変化を電気信号により高感度で再現性よく検出することができるものである。
【００２８】
非水系酸化還元バイオセンサーは、応答速度が迅速で、かつ高感度・高精度であり、再現性に優れるので、信頼性が高い。しかも簡便な構成であるので、製造効率が高い。
【００２９】
この非水系酸化還元バイオセンサーを用いた基質濃度測定方法によれば、高濃度から極低濃度に至る広範な範囲で、酸化又は還元される基質の濃度を、正確かつ精密に定量することができる。
【実施例】
【００３０】
以下、本発明の実施例を詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３１】
基質感応膜素材は、以下のようにして調製される。
【００３２】
その原材料であるカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドは、数平均分子量２０万のポリアクリルアミド又はポリメタクリルアミドを、部分的に加水分解することにより合成される。
【００３３】
高分子化合物は、重量比で２０〜１：１０〜１のカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドとγ−シクロデキストリンとを、エステル結合させることにより、エステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドとして、合成される。
【００３４】
基質感応膜素材は、得られた高分子化合物の２０〜５０重量部と、測定すべき基質である過酸化水素に酸化還元反応する生体機能物質のヘモグロビン１〜２重量部と、必要に応じて水とを、混練することにより得られる。
【００３５】
この基質感応膜素材からなる非水系酸化還元反応場形成素材を用いた非水系酸化還元バイオセンサー１は、実施例に対応する図１を参照して説明すると、以下の通りである。
【００３６】
バイオセンサー１は、反応容器を塞ぐポリテトラフルオロエチレン製栓１６に作用電極１７と参照電極１５とが貫通したものである。容器に、基質である過酸化水素のアセトニトリル溶液１０が入っている。作用電極１７と参照電極１５との先端が、反応容器内へ到達し、この溶液１０に浸漬されている。
【００３７】
作用電極１７は、図２に示すとおり、ポリテトラフルオロエチレン製管２３の内空の下端に、白金製基板である２ｍｍ径の白金棒２５が絞り挿入されている。その基板２５の最下端に、基質感応膜素材の塗布により形成された基質感応膜２６が０．１〜０．２ｍｍの厚さで被覆されている。この膜２６から、酵素と高分子化合物中のシクロデキストリンとが、露出し、溶液１０に接触している。一方基板２５の最上端で導線であるステンレスリード線２１が銀含有ペースト２４で接合されている。ポリテトラフルオロエチレン製管２３の内空の上端に挿入されたシリコン製栓２２から、このステンレスリード線２１が引き出されている。
【００３８】
参照電極１５は、図１に示すとおり、導線に繋がるＡｇ／Ａｇ＋参照電極であり、塩橋１８を介して容器内で溶液１０に接触している。
【００３９】
作用電極１７と参照電極１５との導線は、検知機器に繋がっている。検知機器は、関数発生機１３・ポテンショスタット１２・Ｘ−Ｙレコーダー１１に接続されている。
【００４０】
基質を含有する非水溶液の少量を滴下するミクロビュレット１４がポリテトラフルオロエチレン製栓１６を貫通し、その先端の滴下孔が、溶液１０よりも上方にまで達している。また、電気化学測定セルを構成するための対極１９としての白金線がポリテトラフルオロエチレン製栓１６を貫通し、その先端が溶液１０に浸漬されている。
【００４１】
容器の底に、ポリテトラフルオロエチレンで磁石が被覆された撹拌子２０が、設置されている。
【００４２】
基質濃度測定方法の際に使用したときのバイオセンサー１の作用について、説明する。アセトニトリル溶液１０ｍｌ中で拡散している過酸化水素が、基質感応膜２６から露出している酸化還元反応する生体機能物質に接触する。すると、過酸化水素が、酸化還元反応する生体機能物質の作用で、還元体になる。過酸化水素によって酸化された膜中に固定されている生体機能物質は電極から電子を受け取って還元される。この電極反応により電流が電気回路に流れる結果、検出機器で電圧と電流が検出される。過酸化水素の濃度に応じた電流が検出されるので、その量から過酸化水素の濃度を、直接的に、算出することができる。また、当該酸化還元反応の進行に関わる諸因子、例えば固定されている生体機能物質の活性・酸化還元反応速度の特定をすることができる。
【００４３】
アセトニトリル溶液のような非水溶液中の過酸化水素が、高感度で再現性よく検出されるメカニズムは、詳細が必ずしも明らかでないが、以下の通りであると推察される。基質感応膜にエステル結合した籠状のγ−シクロデキストリン（その高分子化合物の化学構造式の模式を示す図３、γ−シクロデキストリンの化学構造式を示す図４を参照）に過酸化水素が選択的に近接する結果、センサー内部に部分的濃度の偏りが生じ、より高濃度になった部位での酸化還元反応発生確率が増大し、酸化還元酵素反応が迅速かつ確実に進行するためであると、考えられる。
【００４４】
なお、基質として過酸化水素がアセトニトリルに溶解した溶液を例に示したが、基質がその他の非プロトン性溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解した溶液であってもよい。
【００４５】
基質は、スーパーオキシドアニオンラジカル等のような過酸化物や活性酸素であっても同様に、測定することができる。
【００４６】
高分子化合物として、γ−シクロデキストリンエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドの例を示したが、シクロデキストリンは、γ型に限られず、α-型、β-型であってもよく、それらシクロデキストリンの誘導体であってもよい。
【００４７】
生体機能物質は、自らは酸化還元反応せず触媒として作用するような酵素以外のもので、自ら酸化還元反応をして基質を酸化還元させるものであり、ヘム１分子当り酸素１分子と結合するヘムタンパク質であるヘモグロビンの例を示したが、酸化還元機能を保持する生体機能物質であれば、特に限定されない。生体機能物質は、Fe2+とFe3+＋e-との間で酸化還元反応を行って電子伝達を生理的な活性としてもるヘムタンパク質であるシトクロム、例えばシトクロムｃのようなタンパク質であってもよい。
【００４８】
別な基質濃度測定方法の際に使用したときのバイオセンサー１の作用について、説明する。アセトニトリル溶液１０ｍｌ中で拡散している過酸化水素が、共存しているカタラーゼの酵素作用によって分解され、前記と同様に観測される電流値から、カタラーゼの濃度を、算出することができる。
【００４９】
基質に反応する酵素として、基質の過酸化水素を水と酸素分子とに分解するヘプトヘムタンパク質であるカタラーゼを用い、一定量の過酸化水素が分解された残存量を測定することにより、カタラーゼの濃度を間接的に測定する例を示したが、基質である過酸化物や活性酸素に反応するものであれば、特に限定されない。
【００５０】
目的とする酸化還元反応を促進するために、膜内に酸化還元反応補助剤である酸化還元メディエーターを、共存させてもよい。このようなケミカルメディエーターは、特に限定されないが、電子受容体として用いられるメチルビオロゲンが挙げられる。
【００５１】
さらに生体機能物質を組み合わせることにより、バイオセンサーをより高機能化する場合、それら個々の物質の酸化還元電位を知る必要があるが、この非水系バイオセンサーはその目的を達成するために有効に用いることが可能である。
【００５２】
またこの非水系バイオセンサーの構成部分である白金ディスク電極は、目的物質の酸化還元電位に対応した電位制御が可能である。
【００５３】
この基質感応膜素材は、１分子が単鎖であり、可塑剤を含んでおらず、他の分子の主鎖と架橋しておらず、複雑に曲りくねった三次元構造のポリ（メタ）アクリルアミドである高分子化合物を含有している。その高分子化合物は、極度に脱水されたアセトニトリルと一定時間共存させることによって残存する水が脱水される結果、三次元構造に細孔を生じ、この基質感応膜素材は、あたかも分子篩いの構造を有する薄膜として、白金ディスク上に付着している。基質感応膜素材の篩いの径サイズは、例えば約１００μｍであり、前記共存時間を制御することにより、制御可能である。
【００５４】
非水溶媒中で測定すべき対象基質は、基質感応膜素材が持つ細孔径以下ならばその間隙に侵入し、酸化還元に含まれる生体機能物質であるタンパク質に、接触することが可能であり、その結果、反応部位が増大することによりセンサーの感度が、向上する。また、その細孔径を調整することにより、対象基質の選択性を発現させることができる。
【００５５】
さらに、基質感応膜素材は、非水溶媒中に共存する物質の白金ディスク電極への物質移動をその細孔径のサイズによって、選択的に発現する。また、その細孔径のサイズによって、基質よりも嵩高い不純分子の細孔への侵入を阻害し、測定すべき基質のみを侵入させるので、正確かつ感度良く、基質濃度を測定することができる。
【００５６】
この非水系バイオセンサーが検知することを可能とする過酸化水素の定量下限は、基質感応膜素材中の高分子化合物がカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドやアクリルアミドのみの場合に約３０μＭであるが、さらにシクロデキストリンを有するエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドと共存させることによって約０．１μＭ程度まで、低くすることができる。そのため、感度の向上に資する。
【００５７】
以下に、実際に、非水系酸化還元バイオセンサーを試作し、過酸化水素とヘモグロビンとの酸化還元反応をアンペロメトリーにより測定して検討し、最大酵素反応速度とミカエリス定数とを特定した結果を、示す。
【００５８】
（実施例１）
１．高分子化合物の調製
カルボキシル基含有ポリアクリルアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ社製：製品番号１９０９３−４）２ｇと、γ−シクロデキストリン（ナカライテスク株式会社製：製品番号１００３２−５１）０．１ｇとを、リパーゼを触媒として、ｎ−ヘプタン中、５０℃で９４時間反応してエステル結合させることにより、高分子化合物２ｇを得た（図４参照）。なお、本反応は次の文献に依拠しておこなった。H.H.Pattekhan and S. Divakar,
Indian J. Chem., Vol.41B, May 2002,pp.1025-1027.
【００５９】
２．基質感応膜素材の調製
この高分子化合物０．１ｇと、ヘモグロビン（ナカライテスク株式会社製：製品番号２０８−１１５３１）０．００１ｇとを、水に溶解することにより、基質感応膜素材を得た。
【００６０】
３．作用電極の作製
基質感応膜素材を、直径２ｍｍの白金ディスク基板に塗布し、窒素ガスで水を気化した後、シリカゲルデシケータ内で２時間乾燥することにより、厚さ約０．２ｍｍの基質感応膜で被覆された白金ディスクを得た。これを用い、図２に示すような作用電極を作製した。
【００６１】
４．バイオセンサーの試作
この作用電極と、実験ごとに作成したＡｇ／Ａｇ＋（対銀・銀イオン）参照電極とを用い、図１に示すような測定セルを構成した。
【００６２】
５．アセトニトリル中での過酸化水素を基質とする場合のアンペロメトリー
アセトニトリル中の過酸化水素の濃度を順次増して行き、酸化還元反応によって生成するヘモグロビンの酸化物が、−０．８０Ｖ（対銀・銀イオン参照電極）に設定された作用電極の白金表面で還元される際に生じる電流を記録した。その結果を図５に示す。
【００６３】
６．過酸化水素のＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋの逆数プロット
得られた結果から、過酸化水素濃度の逆数と電流値の逆数との関係をグラフにする。その結果を図６に示す。得られた直線の縦軸との接点と、横軸との接点から、それぞれ酵素反応速度因子が得られる。図６から明らかな通り、酸化還元反応の速度因子を精度良く、簡便に得られることが証明された。
【００６４】
（実施例２）
シクロデキストリンを含まないカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含んだ基質感応膜素材を用いた場合のアンペロメトリーの結果を、図７に示す。図７から明らかな通り、シクロデキストリンを含有するセンサーがその効力を保持していることが証明された。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の基質感応性膜素材は、溶液、特に水不含有の溶液中の基質を検出するためのバイオセンサーの原材料に用いられる。これを用いたバイオセンサーは、生体機能物質の酸化還元、電子移動、活性度、触媒能力等の評価に用いることができる高性能センサーである。さらに、膜中に固定された酸化還元反応する生体機能物質は、電極の酸化還元により容易に元の状態に復元される結果、消費されることなく繰り返し可能なバイオセンサーとして使用することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】本発明を適用する非水系バイオセンサーの実施の一例を示す概要図である。
【図２】本発明を適用する非水系バイオセンサー中の作用電極を示す側面断面図である。
【図３】本発明を適用する非水系バイオセンサーに用いられる基質感応膜素材中に含まれるもので、カルボキシル基含有ポリアクリルアミドにシクロデキストリンをエステル結合させた高分子化合物の化学構造式の模式図である。
【図４】γ−シクロデキストリンの化学構造式を示す図である。
【図５】本発明を適用するカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミド及びそれのシクロデキストリンエステル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含む基質感応膜素材を用いた非水系バイオセンサーで、アセトニトリル中での過酸化水素についてのアンペロメトリーを測定したときのチャートを示す図である。
【図６】その際得られた電流密度と過酸化水素濃度との関係を示す図である。
【図７】本発明を適用するカルボキシル基含有ポリ（メタ）アクリルアミドを含む基質感応膜素材を用いた非水系バイオセンサーで、アセトニトリル中での過酸化水素についてのアンペロメトリーを測定したときのチャート、及びその際得られた電流密度と過酸化水素濃度との関係を示す図である。
【符号の説明】
【００６７】
１は非水系酸化還元バイオセンサー、１０は溶液、１１はＸ−Ｙレコーダー、１２はポテンショスタット、１３は関数発生機、１４はミクロビュレット、１５は参照電極、１６はポリテトラフルオロエチレン製栓、１７は作用電極、１８は塩橋、１９は対極、２０はポリテトラフルオロエチレン被覆攪拌子、２１はステンレスリード線、２２はシリコン製栓、２３はポリテトラフルオロエチレン製管、２４は銀ぺースト、２５は白金棒（２ｍｍ径）、２６は基質感応膜である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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