(57)【要約】      （修正有）【課題】一酸化窒素の産生により誘発される顔色の悪化を予防乃至は改善する一酸化窒素産生抑制剤及びこれらを含有する顔色改善用に好適な皮膚外用剤を提供する。【解決手段】下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、一酸化窒素産生抑制剤。2009221153.tif 000010（１）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長のアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基又はフェニル基、水素原子を表す。］【選択図】図１
2009221153.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、一酸化窒素産生抑制剤。    
【化１】
2009221153.tif 000008
（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長のアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基又はフェニル基、水素原子を表す。］
【請求項２】
前記一般式（１）で表される化合物は、ピロロキノリンキノンであることを特徴とする、請求項１に記載の一酸化窒素産生抑制剤。
【化２】
2009221153.tif 000009
ピロロキノリンキノン（化合物２）
【請求項３】
顔色改善に使用するためのものであって、前記顔色改善の対象となる人は、ヒト用一酸化窒素測定キットを用いて一酸化窒素量を測定したときに一酸化窒素産生量が１５０ｐｐｂの値を示す人であることを特徴とする請求項１又は２の何れか一項に記載の一酸化窒素産生抑制剤。
【請求項４】
皮膚外用剤全量に対して、請求項１〜３の何れか一項に記載の一酸化窒素産生抑制剤を０．０００１質量％〜１０質量％含有することを特徴とする、請求項３に記載の皮膚外用剤。
【請求項５】
顔色改善を目的とすることを特徴とする、請求項３又は４に記載の皮膚外用剤。
【請求項６】
化粧料又は医薬部外であることを特徴とする、請求項３〜５のいずれか一項に記載の顔色改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一酸化窒素産生抑制剤及びこれを含有する皮膚外用剤に関し、詳しくは、ピロロキノリンキノン誘導体及びそれらの薬理学的に許容な塩からなる一酸化窒素産生抑制剤及びこれらを含有する顔色改善用に好適な皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年の生活習慣の変化により、不規則な生活、偏食、ストレス等が原因であると考えられる肌荒れ、顔色が悪い、肌つやがない等の肌トラブルを抱える人は増加する傾向にあり、今後、これらの肌トラブルに対するさらに有効な解消方法が必要になっていくと予想される。
【０００３】
従来の主な肌トラブル解消方法としては、美肌作用を有する様々な成分を含有する化粧料等を使用することが上げられる。これらの有効成分は、皮膚細胞に直接働き掛け代謝を促進したり、保湿作用等により老化を防ぐことにより効果を発揮している。
【０００４】
特に、顔色が悪いことに対する解消方法としては、肌細胞への血行を促進することにより、くすみのない健康的な顔色を実現させるという試みがある。すなわち、血行を促進して皮膚細胞層へ栄養成分や水分を十分に補給し、それによって新陳代謝が活性化され、皮膚末梢での血液循環がよく保たれた結果、皮膚細胞は理想的な状態に維持され、顔面においてくすみのない美しく健康的な皮膚色が創り出せるという考えによる。しかし単なる血行の促進は、血流再還流による一酸化窒素の生成を誘発し、発生した一酸化窒素により組織がダメ−ジを受け、その形態を可逆的或いは不可逆的に変化させる場合が存する。一酸化窒素によるダメ−ジが小さければ前記形態変化は可逆的なものになり、ダメ−ジが大きすぎると不可逆的になると言われている。この様な変化は、可逆的なものであれ、不可逆的なものであれ、顔色の悪化として認識される。この様なメカニズムの顔色の悪化の改善に有用な手段は今のところ知られていない。
【０００５】
一方、ピロロキノリンキノン誘導体、特にピロロキノリンキノン（PQQ）は、メタノ−ル資化性菌の代謝産物より単離同定された物質であり、真核生物のカビ、酵母、さらには、哺乳動物にも存在することが確認されている。その生物活性としては、細胞の増殖促進作用（特許文献１）、抗白内障作用（特許文献２）、肝臓疾患予防治療作用（特許文献３）、創傷治癒作用（特許文献４）、抗アレルギ−作用（特許文献５）、逆転写酵素阻害作用（特許文献６）及びグリオキサラ−ゼＩ阻害作用−制癌作用（特許文献７）、メラニン産生抑制作用（特許文献８）等の様々な作用が明らかとなっている。
【０００６】
しかしながら、上記ピロロキノリンキノン誘導体及び／又はその薬理学的に許容される塩が一酸化窒素産生抑制作用を有することは知られておらず、これを皮膚に含有させて顔色改善効果を持たせるという報告も未だなされていない。
【０００７】
【特許文献１】特開昭６１−５８５８４号公報
【特許文献２】特開昭６３−４１４２１号公報
【特許文献３】特開昭６３−１９２７１７号公報
【特許文献４】特開昭６３−１５２３０９号公報
【特許文献５】特開昭６３−１７４９３号公報
【特許文献６】特開昭６３−１５６７２４号公報
【特許文献７】特開昭６３−２１５６２８号公報
【特許文献８】特開平８−２０５１２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、一酸化窒素の産生により誘発される顔色の悪化を予防乃至は改善することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
この様な実情に鑑みて、本発明者等は、一酸化窒素の産生によって誘発される顔色の悪化を予防乃至は改善するべく一酸化窒素産生抑制作用を有する化合物探索に鋭意努力を重ねた結果、顕著な一酸化窒素産生抑制作用を有するピロロキノリンキノン誘導体を見出し、発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明によれば、以下に示す一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする一酸化窒素産生抑制剤によって前記課題を解決できる。即ち、本発明は次に示すとおりである。
＜１＞下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、一酸化窒素産生抑制剤。
【００１０】
【化１】
2009221153.tif 000003
（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長のアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基又はフェニル基、水素原子を表す。］
【００１１】
＜２＞前記一般式（１）で表される化合物は、ピロロキノリンキノンであることを特徴とする、請求項１に記載の一酸化窒素産生抑制剤。
【００１２】
【化２】
2009221153.tif 000004
ピロロキノリンキノン（化合物２）
【００１３】
＜３＞顔色改善に使用するためのものであって、前記顔色改善の対象となる人は、ヒト用一酸化窒素測定キットを用いて一酸化窒素量を測定したときに一酸化窒素産生量が×××の値を示す人であることを特徴とする＜１＞又は＜２＞の何れか一項に記載の一酸化窒素産生抑制剤。
【００１４】
＜４＞皮膚外用剤全量に対して＜１＞〜＜３＞何れか一項に記載の一酸化窒素産生抑制剤を０．０００１質量％〜１０質量％含有すうｒことを特徴とする、＜３＞に記載の皮膚外用剤。
【００１５】
＜５＞顔色改善を目的とすることを特徴とする、＜３＞又は＜４＞に記載の皮膚外用剤。
【００１６】
＜６＞化粧料又は医薬部外であることを特徴とする、＜３＞〜＜５＞のいずれか一項に記載の顔色改善剤。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、一酸化窒素の産生によって誘発される顔色の悪化を予防乃至は改善することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明の一酸化窒素産生抑制剤は、前記一般式（１）に表される化合物及び／又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とすることを特徴とする。一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長の、より具体的には炭素数１〜４の直鎖、分岐乃至は環状構造を有することのあるアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基、１環乃至は２環が独立に結合した乃至は縮合した芳香族基又は水素原子が好ましく、R１、R2、R3が共に水素原子であるピロロキノリンキノンが特に好適に例示できる。
【００１９】
一般式（１）に表される化合物のうち、好ましいものを具体的に例示すれば、ピロロキノリンキノン（化合物２）が好適に例示できる。一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体はそのままで本発明の一酸化窒素産生抑制剤としても利用することもできるが、アルカリ金属を用いて使用することも可能である。たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、トリエチルアミン塩、ピペリジン塩等の有機アミン塩が好ましく例示できる。
【００２０】
一般式（１）に表される化合物は、メタノ−ル資化性菌を培養して精製し得ることも出来るし、特許文献８（特開平８−２０５１２号公報）に記載の方法で合成し得ることも出来る。又、ピロロキノリンキノンについては、三菱ガス化学株式会社や同仁化学株式会社より市販されているものも存し、この様な市販品を購入し利用することも出来る。斯くして得られた一般式（１）に表される化合物及び／又は整理的に許容されるそれらの塩は、一酸化窒素が生体内に過剰に発生し、不可逆的皮膚組織変化を誘導することを防ぐ作用を有する。この様な作用を得るためには、前記一般式（１）に表される化合物及び／又はその薬理学的に許容される塩を成人１人１日あたり、０．１ｍｇ〜１０ｇ一回乃至は数回に分けて、経口的に、或いは、経皮的に投与することが好ましい。
【００２１】
本発明の皮膚外用剤においては、前記一酸化窒素産生抑制剤以外に通常の皮膚外用剤で使用される、任意の成分を含有することが出来る。この様な任意の成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボガド油、トウモロコシ油、オリ−ブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワ−油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコ−ル、ステアリルアルコ−ル、イソステアリルアルコ−ル、ベヘニルアルコ−ル、オクチルドデカノ−ル、ミリスチルアルコ−ル、セトステアリルアルコ−ル等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコ−ル、ジカプリン酸ネオペンチルグリコ−ル、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロ−ルプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロ−ルプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類；ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノ−ルアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエ−ト、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレ−ト等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレ−ト等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコ−ルモノオレ−ト、ＰＯＥジステアレ−ト等）、ＰＯＥアルキルエ−テル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエ−テル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエ−テル類（ＰＯＥノニルフェニルエ−テル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエ−テル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレングリコ−ル、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリト−ル、ソルビト−ル、キシリト−ル、マルチト−ル、プロピレングリコ−ル、ジプロピレングリコ−ル、ジグリセリン、イソプレングリコ−ル、１，２−ペンタンジオ−ル、２，４−ヘキサンジオ−ル、１，２−ヘキサンジオ−ル、１，２−オクタンジオ−ル等の多価アルコ−ル類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、；表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパ−ル剤類；レ−キ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマ−等の有機粉体類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤、；桂皮酸系紫外線吸収剤、；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾ−ル、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノ−ル等の低級アルコ−ル類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ6塩酸塩、ビタミンＢ6トリパルミテ−ト、ビタミンＢ6ジオクタノエ−ト、ビタミンＢ2又はその誘導体、ビタミンＢ12、ビタミンＢ15又はその誘導体等のビタミンＢ類；α−トコフェロ−ル、β−トコフェロ−ル、γ−トコフェロ−ル、ビタミンＥアセテ−ト等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミン類等；フェノキシエタノール等の抗菌剤などが好ましく例示できる。
【００２２】
これらの必須成分、任意成分を常法に従って処理し、ロ−ション、乳液、エッセンス、クリ−ム、パック化粧料、洗浄料などに加工することにより、本発明の皮膚外用剤は製造できる。本発明の皮膚外用剤としては、皮膚に外用で適用されるものであれば特段の限定はなく応用でき、例えば、医薬部外品を含む化粧料、皮膚外用医薬、皮膚外用雑貨等が好ましく例示できる。
【００２３】
以下に、本発明について、実施例を挙げて更に詳細に説明を加えるが、本発明がかかる実施例にのみ、限定されないことは言うまでもない。
【実施例１】
【００２４】
＜本発明の一酸化窒素産生抑制剤である、ピロロキノリンキノン＞
本発明における一酸化窒素産生抑制作用を評価するために用いたピロロキノリンキノンは、同仁化学株式会社より購入し、使用した。
【００２５】
＜本発明の一酸化窒素産生抑制作用＞
マウス由来のマクロファージ様細胞であるRAW264.7（１０６／ｍｌ）を９６ウェルプレートに播種し、一夜培養後、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）（１０ng／ｍｌ）（R&D Systems，Inc.）とリポポリサッカライド（ＬＰＳ）（１０μｇ／ｍｌ）（List Biological Laboratories，Inc）およびＰＱＱを添加し、インキュベーターで３７℃、２４時間培養した。培養液（１００μｌ）にGriess試薬（１００μｌ）(Jounal of Leukocyte Biology Volume 54，August 1993，199-124)を加えて、５５０ｎｍでの吸光度の変化により、生成されたＮＯ2 の量を測定し、ＮＯ合成酵素の阻害活性とした。
【００２６】
この様に評価された、本発明の一酸化窒素産生抑制剤の一酸化窒素産生抑制作用を後記の図１に示す。この図より、本発明の一酸化窒素産生抑制剤は優れた一酸化窒素産生抑制作用を有することがわかる。
【実施例２】
【００２７】
以下に示す処方に従って、本発明の皮膚外用剤である化粧料（ロ−ション）を作製した。即ち、処方成分を８０℃に加熱し、撹拌し、溶解させ、撹拌冷却し、ロ−ション１を得た。
【００２８】
【表１】
2009221153.tif 000005
【００２９】
＜評価＞
実施例２のローションについて、顔色改善効果を調べた。比較の為、ピロロキノリンキノンを水に置換した比較例１も同様に製造した。無作為に集めた顔色の優れない自覚のあるパネラー２０名を２群に分け、１群にはローション１を、残りの１群には比較例１を渡し、朝晩２回３０日連日使用してもらった。使用終了後４８時間にアンケートで顔色の改善度合いを、スコア０：改善無し、スコア１：殆ど改善を感じない、スコア２：少し改善を感じる、スコア３：明確に改善を感じるの４段階評価を行い、使用前と、使用後４８時間にコニカミノルタ色彩色差計ＣＲ−４００で測色を行い、ΔＬを求めた。結果を表２、表３に示す。これより、本発明の皮膚外用剤であるローション１により、顔色が改善していることがわかる。
【００３０】
【表２】
2009221153.tif 000006
【００３１】
【表３】
2009221153.tif 000007
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明は化粧料などの皮膚外用剤に応用できる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の一酸化窒素酸性抑制剤の一酸化窒素産生抑制作用を示す図である。
【図１】
2009221153.tif 000011