(57)【要約】【課題】本発明は、安全であり毎日の服用も可能であって、アレルギー性気管支喘息を有意に抑制できる薬剤を提供することを目的とする。【解決手段】本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、枇杷種子の抽出物を含むことを特徴とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
枇杷種子の抽出物を含むことを特徴とするアレルギー性気管支喘息抑制剤。
【請求項２】
上記抽出物が、アルコール水抽出物である請求項１に記載のアレルギー性気管支喘息抑制剤。
【請求項３】
肺杯細胞の増加を抑制するものである請求項１または２に記載のアレルギー性気管支喘息抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アレルギー性気管支喘息を抑制するための薬剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アレルギー性気管支喘息は、ダニやホコリ、大気汚染物質などの異物をアレルゲンとするアレルギー反応により、激しく咳き込んだり、気管支が細くなることで呼吸困難を起こす疾患である。一般的には致死的な疾患ではないといわれているものの、実際には毎年数千人が気管支喘息による呼吸困難で亡くなっており、決して軽視することはできない。
【０００３】
近年、ハウスダストなどのアレルゲンの増加、寄生虫など気管支喘息の原因とならないアレルゲンの減少、ストレスの増加など、様々な要因によりアレルギー疾患が問題となっている。アレルギー疾患の治療には、従来、ステロイド剤や抗ヒスタミン薬などが用いられていた。しかしアレルギー疾患は完治し難く、継続的な投薬が必要となるため、これら化学薬剤では副作用が生じ易い。そこで、比較的副作用が少ないと考えられる天然成分から、抗アレルギー作用を有するものの探索が行われている。
【０００４】
例えば特許文献１には、果実外皮の組織中にトレハロースを浸透させた機能性食品が開示されており、果実として枇杷が例示されている。また、その実施例では、当該機能性食品の抗アレルギー作用の試験結果が記載されている。
【０００５】
ところで本発明者は、枇杷種子抽出物の様々な効能を見出している。例えば、枇杷種子抽出物は、肝臓等の細胞繊維化を抑制し（特許文献２）、また、フリーラジカルを消去する（特許文献３）。
【０００６】
さらに本発明者は枇杷種子抽出物について研究を進め、当該抽出物がアレルギー疾患を抑制することを見出して特許出願している（特許文献４）。当該公報には、枇杷種子抽出物が、花粉症、アレルギー性鼻炎およびアレルギー性結膜炎に対して効果を示す実験例が記載されている。しかし、アレルギー性気管支喘息に関する記載はない。
【特許文献１】特開２００１−３４６５３７号公報
【特許文献２】特開２００１−２４０５５３号公報
【特許文献３】特開２００３−２４６７４５号公報
【特許文献４】特開２００８−６３２５５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上述した様に、これまでにも抗アレルギー作用を示す天然成分の探索は行われている。しかし従来、アレルギー性気管支喘息に対する効果が具体的に実証されている天然成分は知られていない。
【０００８】
そこで、本発明が解決すべき課題は、安全であり毎日の服用も可能であって、アレルギー性気管支喘息を有意に抑制できる薬剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、上記課題を解決すべく種々検討を重ねた。その結果、本発明者が研究を続けている枇杷種子抽出物が、特にアレルギー性気管支喘息に対して顕著な抑制効果を有することを見出して、本発明を完成した。
【００１０】
本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、枇杷種子の抽出物を含むことを特徴とする。
【００１１】
上記抽出物としては、アルコール水抽出物が好適である。アルコール水を抽出溶媒として用いれば、疎水性成分から親水性成分まで満遍なく抽出することができ、その抽出物の抗アレルギー作用が優れているからである。
【００１２】
本発明に係る抑制剤がアレルギー性気管支喘息を抑制する作用機序は必ずしも明らかではないが、本発明抑制剤は、少なくとも肺において粘液を産生することにより咳の原因となる肺杯細胞の増生を抑制する作用効果を有する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、枇杷種子の抽出物を主要な有効成分とするものであることから安全性に優れ、毎日の服用も可能である。その上、アレルギー性気管支喘息の諸症状や、その原因となる細胞間情報伝達物質を顕著に抑制することができる。従って、本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、近年問題となっているアレルギー性気管支喘息の優れた抑制剤として、産業上極めて有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、枇杷種子の抽出物を含むことを特徴とする。なお、本発明において「抑制」とは、アレルギー性気管支喘息の症状を軽減する全ての態様を含む概念であり、例えば、予防や治療などが含まれる。
【００１５】
枇杷は中国原産のバラ科の常緑樹であり、日本へは古代に持ち込まれたと考えられており、その果実は日本でも親しまれている。また、その葉はビタミンＢ１７やクエン酸などを含み、枇杷茶や生薬として利用されてきた。しかし枇杷種子に関しては、枇杷果実に占める割合は大きいにも関わらず、その利用方法はほとんど検討されず、廃棄されていた。一方、本発明者は枇杷種子が有する優れた薬効を見出し、研究を継続してきた。本発明は、その研究の一環として完成されたものである。
【００１６】
本発明で用いる枇杷種子は、果実から皮と果肉を除いたものを用いればよい。続いて、保存や効率的な粉砕のために洗浄や乾燥を行う。乾燥の条件は特に制限されないが、例えば、ニトリル化合物であるアミグダリンを分解酵素であるエムルジンで分解するために、４０℃前後で１週間程度乾燥する。
【００１７】
抽出を効率的なものとするために、枇杷種子は、抽出前に粉砕することが好ましい。粉砕の方法は特に制限されないが、例えば、ボールミル、ハンマーミル、ローラーミル、ロッドミル、サンプルミル、スタンプミル、エヒスインテグレーター、冷却装置付きブレンダーなどを用いることができる。
【００１８】
次に、粉砕した枇杷種子を溶媒に浸漬することにより有効成分を抽出する。抽出溶媒の種類は特に制限されず、対象であるアレルギー性気管支喘息の種類と抽出された成分の有効性を考慮しつつ適宜選択できるが、生体に無害か害の少ないものが好適である。例えば、水、または、メタノールやエタノール等のアルコール；テトラヒドロフランやジオキサン等のエーテル；アセトン等のケトン；などの水混和性有機溶媒と、水との混合溶媒を用いることができる。好適には、５０〜８０容量％程度のエタノール水を用いる。なお、ここでのエタノール水は、エタノール：水の容量が５０：５０〜８０：２０のものをいう。
【００１９】
浸漬条件は、適宜調節することができる。例えば、用いる溶媒量は、少なくとも粉砕した枇杷種子が万遍なく漬かる程度とし、また、有効成分の抽出量や濃縮する際の効率などを考慮して調節すればよい。抽出温度も特に制限されず、抽出効率を高めるために３０〜５０℃程度に加温してもよいが、有効成分が分解されるおそれがあるので、好適には室温とする。また、抽出効率を高めるために、溶媒を攪拌してもよい。抽出時間も適宜調節すればよいが、通常は５〜１０日間程度とする。
【００２０】
抽出後は、濾過等により枇杷種子の残渣を除去する。得られた抽出液は、溶媒によってはそのままアレルギー性気管支喘息抑制剤として使用してもよいが、保存安定性を高めるために、いったん濃縮したり、さらに好適な溶媒に再溶解することが好ましい。濃縮処理では、濃縮温度を抑制するためや効率の観点からエバポレーターを用いて減圧することが好適である。
【００２１】
枇杷種子から抽出される成分やその量は、使用する溶媒の種類などにより異なるが、５０〜８０容量％程度のエタノール水を抽出溶媒として用いれば、極性の高い化合物から比較的極性の低い化合物まで、満遍なく抽出することができる。
【００２２】
本発明者による研究によれば、７０％エタノール水を抽出溶媒として用いて得られる枇杷種子抽出物には、リノレン酸やリノール酸等の不飽和脂肪酸、β−シトステロール等のステロール類、β−シトステロールモノグリコサイド等の糖誘導体が含まれていた。本発明において、何れの有効成分が抗アレルギー性気管支喘息作用を示すのかは必ずしも明らかではないが、複数の化合物が相加的または相乗的に効果を示していることが考えられる。
【００２３】
本発明に係る抽出物は、枇杷種子由来のものであることから安全性は高いと考えられる。実際、安全性試験でも高い安全性が確認されている。従って、本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、アレルギー性気管支喘息の治療目的のみならず、恒常的に服用することによりアレルギー性気管支喘息の予防目的で用いることも可能である。
【００２４】
本発明に係るアレルギー性気管支喘息抑制剤の投与量は、投与すべき患者の状態や年齢など、また、抽出された成分の構成などによる。ラットにおいては、少なくとも３７５ｍｇ／ｋｇ／日程度投与すべきであるが、ヒトに対しては、より少ない量であることが好ましい。何れにせよ、投与開始から患者の状態等により、投与量は適宜調節すればよい。
【００２５】
本発明に係る抽出物へは、公知の製剤成分を添加し、様々な製剤とすることができる。例えば、基材、賦形剤、着色剤、滑沢剤、矯味剤、乳化剤、増粘剤、湿潤剤、安定剤、保存剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、抗酸化剤、佐薬、緩衝剤、ｐＨ調整剤、甘味料、香料などを添加することができる。また、これら添加剤の配合量は、本発明の作用効果を妨げない様な量である限り、必要に応じて適宜設定することができる。
【００２６】
剤形としては、液剤、シロップ剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、坐剤、注射剤とすることができるが、長期投与する場合を考慮して、液剤などの経口剤とすることが好ましい。
【００２７】
液剤とする場合、いったん濃縮して粉末とした枇杷種子抽出物を、水等の溶媒に再溶解または再分散する。この際における枇杷種子抽出物の濃度は特に制限されず、患者の状態等により適宜調節すればよいが、例えば、乾燥状態の枇杷種子抽出物の濃度に換算して、２〜８０ｇ／Ｌ程度とすることができる。
【００２８】
液剤とする場合の溶媒としては、ヒトが飲用するに適した水が好ましい。例えば、蒸留水、精製水、純水、水道水などを用いればよい。また、微量のエタノールなどを添加してもよい。
【００２９】
本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は、アレルギー性気管支喘息の抑制、即ち予防や治療に適用することができる。特に本発明のアレルギー性気管支喘息抑制剤は安全性が高いので、恒常的に服用することにより、アレルギー性気管支喘息を予防する健康食品または健康飲料として利用することも可能である。
【実施例】
【００３０】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はもとより下記実施例により制限を受けるものではなく、前・後記の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に含まれる。
【００３１】
製造例１  本発明に係るアレルギー性気管支喘息抑制剤の製造
高知県室戸市あるいは須崎市で採取した枇杷種子を日干しにより十分に乾燥した。乾燥した枇杷種子１ｋｇを冷却装置付ブレンダーにより粉砕し、７０％エタノール水２Ｌに浸漬し、室温で１週間攪拌した。その後、液体部分を分取し、エバポレーターにより減圧濃縮した。得られた抽出物約１２０ｇを、２００ｍＬの蒸留水に溶解することにより、本発明に係るアレルギー性気管支喘息抑制剤を製造した。
【００３２】
試験例１  
５週齢の雄性のＢＡＬＢ／ｃマウス２４匹を、６匹ずつ以下の群に分けた。
第１群  −  ダニ抽出物投与群
第２群  −  ダニ抽出物＋ディーゼル自動車排気ガス抽出物（以下、「ＤＥＰ」という）投与群
第３群  −  枇杷種子抽出物＋ダニ抽出物投与群
第４群  −  枇杷種子抽出物＋ダニ抽出物＋ＤＥＰ投与群
【００３３】
また、アレルゲンとして市販のダニ抽出物標準品を生理食塩水に溶解して濃度４μｇ／１００μＬの溶液を調製した。また、同じくアレルゲンとして市販のＤＥＰ標準固形物を塩化メチレンで抽出したものをＤＭＳＯに溶解して２００ｍｇ／ｍＬの溶液を得、さらに生理食塩水で希釈して６２．５μｇ／１００μＬの溶液を調製した。
【００３４】
先ず、第１群と第２群にはアレルゲン投与の１４日前から水道水を自由に与え、第３群と第４群には上記製造例１で製造した枇杷種子抽出物を自由に与えた。次いで、マウスをネンブタールで麻酔し、カニューレにて上記ダニ抽出物溶液を１回当たり１００μＬずつ、５週間にわたり週２回、計１０回気管内へ投与した。さらに第２群と第４群へは、同様にＤＥＰ溶液を１回当たり１００μＬずつ気管内投与した。アレルゲン投与の直前、およびダニ抽出物溶液の偶数回目投与の前日に、眼窩より３００μＬ採血し、ダニ抗原特異的ＩｇＧ１抗体価、ＩＬ−１３量およびＴＧＦ−β１量を測定した。また、最終のダニ抽出物溶液投与から２日後に過剰量のネンブタールを注射することによりマウスを安楽死させ、肺洗浄液（ＢＡＬＦ）を採取し、好酸球数を測定した。また、肺を採取してＨＥ染色し、肺の病理組織標本を作製した。ダニ抗原特異的ＩｇＧ１抗体価の測定結果を図１に、ＩＬ−１３量の測定結果を図２に、ＴＧＦ−β１量の測定結果を図３に、ＢＡＬＦ中の好酸球数を図４に、肺の病理組織標本の２０倍拡大写真を図５に示す。
【００３５】
図１のとおり、特にアレルゲンとしてダニ抽出物に加えてＤＥＰを加えた場合にダニ抗原に特異的なＩｇＧ１抗体価が上昇しており、強いアレルギー反応が起こっていたが、本発明に係る枇杷種子抽出物の投与により当該抗体価は危険率＜０．０５で有意に抑制された。図２〜３のとおり、ＤＥＰにより誘導されたＩＬ−１３およびダニ抽出物またはＤＥＰにより誘導されたＴＧＦ−β１も、本発明に係る枇杷種子抽出物の投与により有意に抑制されている。これらは、気管支においてアレルギー反応により粘液を産生するようになる杯細胞を増生することから、図２〜３の結果は本発明の枇杷種子抽出物がアレルギー反応を抑制することの証拠となる。また、図４のとおり、有意差はなかったものの、本発明の枇杷種子抽出物は、ＤＥＰの投与により増加した肺中の好酸球の分化活性化を抑制する。
【００３６】
さらに図５のとおり、ダニ抽出物に加えてＤＥＰを加えた場合には、肺の表面に杯細胞が増加しており、さらに浮腫まで生じた。しかし本発明の枇杷種子抽出物を投与した場合には、これら杯細胞と浮腫は顕著に抑制されている。
【００３７】
以上の結果のとおり、本発明に係る枇杷種子抽出物は、アレルギー性気管支喘息の症状や、その発生に関与する細胞間情報伝達物質の産生を顕著に抑制できることが実証された。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】アレルギー性気管支喘息モデルマウスにおけるダニ抗原特異的ＩｇＧ１抗体価の測定結果を示す図である。
【図２】アレルギー性気管支喘息モデルマウスの血清中ＩＬ−１３量の測定結果を示す図である。
【図３】アレルギー性気管支喘息モデルマウスの血清中ＴＧＦ−β１量の測定結果を示す図である。
【図４】アレルギー性気管支喘息モデルマウスの肺洗浄液（ＢＡＬＦ）中における好酸球数の測定結果を示す図である。
【図５】アレルギー性気管支喘息モデルマウスの肺の病理組織標本の２０倍拡大写真である。
【符号の説明】
【００３９】
１：杯細胞、  ２：浮腫
【図１】
2009235035.tif 000002
【図２】
2009235035.tif 000003
【図３】
2009235035.tif 000004
【図４】
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【図５】
2009235035.tif 000006