(57)【要約】      （修正有）【課題】微生物を用いた水素の量産化とともにルテインなどの抗酸化物質の工業的生産の提供。【解決手段】光合成能力を備えた緑藻１を含む緑藻培養液を用いて、明好気条件下、緑藻１の光合成により二酸化炭素を固定して有機物３ａを生産する緑藻光合成工程１０と、当該有機物３ａを取り出して光合成細菌を含む光合成細菌培養液８に投入し、明嫌気条件下、光合成細菌により有機物３ａから水素９を生成する細菌光合成工程２０と、緑藻光合成工程１０を経た緑藻培養液２から藻体を分離し、藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する藻体内物質抽出工程３０と、当該抽出物質から抗酸化物質を精製する抗酸化物質精製工程４０とを含み、水素生産サイクルに抗酸化物質精製工程を組み込んだ。さらに、藻体内物質抽出工程３０において抽出された有機物３ｂを乳酸発酵させて乳酸６を生産する乳酸発酵工程４０を備え、当該乳酸６も利用して水素９を生成する。【選択図】図１
2009060876.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光合成能力を備えた緑藻を含む緑藻培養液を用いて、明好気条件下、前記緑藻の光合成により二酸化炭素を固定して有機物を生産する緑藻光合成工程と、
前記緑藻光合成工程により生産された前記有機物のうち前記緑藻体外に放出された有機物を取り出して光合成能力を備えた細菌を含む細菌培養液に投入し、明嫌気条件下、前記細菌の光合成により当該有機物から水素を生成する細菌光合成工程と、
前記緑藻光合成工程を経た前記緑藻培養液から前記緑藻の藻体を分離し、前記緑藻の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する藻体内物質抽出工程と、
前記藻体内物質抽出工程において抽出された物質から抗酸化物質を精製・生産する抗酸化物質精製工程とを含み、水素生産サイクルに抗酸化物質精製工程を組み込んだことを特徴とする水素生産方法。
【請求項２】
前記藻体内物質抽出工程において抽出された物質に含まれる有機物を乳酸発酵させて乳酸を生産する乳酸発酵工程と、
前記乳酸発酵工程により生産した乳酸を含む発酵液を取り出して前記細菌培養液に投入し、前記乳酸も前記細菌光合成工程における資源として利用して水素を生成する請求項１に記載の水素生産方法。
【請求項３】
前記緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株である請求項１または２に記載の水素生産方法。
【請求項４】
前記緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対して前記抗酸化物質の生産能力を高めた緑藻変異株である請求項３に記載の水素生産方法。
【請求項５】
海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対する変異株の作成方法が、突然変異誘起剤（ＥＭＳ：ethyl methanesulfonate）で処理後、致死濃度のパラコートでセレクションする方法である請求項４に記載の水素生産方法。
【請求項６】
光合成能力を備えた緑藻を含む緑藻培養液が充填され、明好気条件下、前記緑藻の光合成により二酸化炭素を固定して有機物の生産を促進する緑藻光合成促進装置と、
光合成能力を備えた細菌を含む細菌培養液が充填され、前記緑藻光合成促進装置により生産された前記有機物を受け入れ、明嫌気条件下、前記細菌の光合成により当該有機物から水素の生成を促進する細菌光合成促進装置と、
前記緑藻光合成促進装置内の前記緑藻培養液から前記緑藻の藻体を分離し、前記緑藻の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する藻体内物質抽出装置と、
前記藻体内物質抽出装置において抽出された物質から抗酸化物質を精製・生産する抗酸化物質精製装置とを含み、水素生産とともに抗酸化物質生産を行うことを特徴とする水素生産装置。
【請求項７】
前記藻体内物質抽出装置において抽出された物質に含まれる有機物を乳酸発酵させて乳酸の生産を促進する乳酸生産促進装置と、
前記乳酸生産促進装置により生産した乳酸を含む発酵液を取り出して細菌光合成促進装置内の細菌培養液に投入し、前記乳酸も前記細菌の光合成における資源として利用して水素の生成を促進する請求項６に記載の水素生産装置。
【請求項８】
前記緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株である請求項６または７に記載の水素生産装置。
【請求項９】
前記緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対して前記抗酸化物質の生産能力を高めた緑藻変異株である請求項８に記載の水素生産装置。
【請求項１０】
海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対する変異株の作成方法が、突然変異誘起剤（ＥＭＳ：ethyl methanesulfonate）で処理後、致死濃度のパラコートでセレクションする方法である請求項９に記載の水素生産装置。
【請求項１１】
前記緑藻光合成促進装置及び前記細菌光合成促進装置が、ヘリカルフロープロモーター付きの透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターを備えたことを特徴とする請求項６から１０のいずれか１項に記載の水素生産装置。
【請求項１２】
前記透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターが内筒槽および外筒槽の２重円筒槽構造を備え、
前記内筒槽および外筒槽内の培養液の流れが、前記内筒槽底部からのガス通気により発生する上昇流と、前記上昇流が前記内筒槽上部より前記外筒槽上部に入り前記外筒槽上部から底部へ下降することにより発生する下降流を備えた前記内筒槽と前記外筒槽を巡る循環路を持ち、
前記外筒槽に生じる下降流が前記内筒外壁に設置したヘリカルフロープロモーターを介して螺旋下降流となる仕組みとした請求項１１に記載の水素生産装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微生物による水素生産工程においてルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を伴う水素生産方法および水素生産装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
化石燃料に依存しないクリーンな水素製造の工業化・量産化が確立することは、地球温暖化対策に貢献し、京都議定書における温室効果ガス６％削減の公約達成に大きく寄与することは無論のこと、四方を海に囲まれた日本にとって、無尽蔵にかつ安価に調達できる海水と二酸化炭素による新エネルギー源の確保として、独自のエネルギー安全保障の上でも有効である。水素エネルギーは燃料電池として高い効率で電気エネルギーへ変換できること、発熱量が石油の３〜４倍で、燃焼後は水を生じて環境汚染の恐れが少ない等の利点を有している。
【０００３】
このような水素の生成方法としては、従来、化石燃料から水素を得る方法、水の電気分解等の非生物による水素生産方法、微生物等の生物による水素生産方法等が行われている。例えば、生物による水素生産方法としては、藻類等の微生物を用いることが研究されており、種々の提案がなされている。
【０００４】
例えば、本出願人は、特開昭５８−６０９９２号において、水素発生能を有する緑藻を、明好気条件下で培養するサイクルと、暗嫌気条件下で培養するサイクルを交互に繰り返し、明好気条件下の培養中に光合成を行わせ、暗微好気条件下で、光合成により蓄積した物質を分解して水素を発生させる水素生産方法を開示している。
【０００５】
また、本出願人は、特開２０００−１０２３９７号において、光合成能力を有する緑藻を明好気条件下培養して光合成産物を得る工程、該緑藻を暗嫌気条件下培養し、該光合成産物の暗嫌気条件下の発酵液を得る工程、および該発酵液に、明嫌気条件下、光合成能力を有する細菌を作用させる工程を含む水素の生産方法において、該明好気条件下の緑藻の培養及び／ 又は明嫌気条件下で該発酵液に細菌を作用させる工程が透明塔型エアーリフト培養槽で行われる水素の生産方法を開示している。
【０００６】
さらに、本出願人は、特開２００４−０９７１１６号公報において、明好気条件下、液相の浸透圧が５．０ａｔｍ以上の条件で、光合成能力を有する緑藻により水素生成の資源を得る工程と、明嫌気条件下、上記資源を用いて光合成能力を有する細菌により水素を生成する工程とを含むことを特徴とする微生物による水素生産方法を開示している。
【０００７】
【特許文献１】特開昭５８−６０９９２号公報
【特許文献２】特開２０００−１０２３９７号公報
【特許文献３】特開２００４−０９７１１６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
特開昭５８−６０９９２号は、実際に水素を生成することが可能である。
しかしながら、特開昭５８−６０９９２号は、水素を生成することが可能であることを開示しているものの、工業的生産過程での最適な水素生産の条件が未だ確立されておらず、量産化、工業化への対応の点で未だ改善の余地がある。
【０００９】
また、特開２０００−１０２３９７号は、明好気的条件下における緑藻の培養及び／又は明嫌気条件下における光合成細菌による水素生産を、透明塔型エアーリフト培養槽を用いることにより、水素生産を効率よく行うことができる。つまり、光合成反応を伴う水素生産サイクルでは光を必要とするが、光が培養槽の深部まで到達できにくいところ、本発明は、培養槽内の細菌等への光の供給を効率的に行うという利点がある。
本発明は水素生産効率を高めることに対して有効であるが、いまだ商業ベースにのせるまでのコストダウンの達成には十分とは言えず、商業ベースにのせるためにさらなる努力が求められている。
【００１０】
また、特開２００４−０９７１１６号は、太陽光等の光が照射され酸素が存在する明好気条件下において、液相の浸透圧を高めているため、光合成能力を有する緑藻が、光エネルギーを利用して光合成によりグリセロール等の低分子有機物を主成分とする水素生成の資源を生成し、その資源を細胞外に分泌するものであり、暗嫌気条件下での光合成能力を有する緑藻による発酵・分解工程を経ることなく、光合成能力を有する緑藻を用いて、より簡易にグリセロール等の水素生成の資源を得ることができる。従って、水素の生産システムを簡略化し、水素の生産効率を向上し、水素の量産化・工業化を図ることができる。
上記のように、本出願人の研究により水素の量産化・工業化に対して進展してきているが、水素生産を商業ベースにのせるためには水素生産をより低コストで行う必要がある。
【００１１】
ここで、水素生産を商業ベースにのせるための方策として、生産工程の簡略化、製造設備の削減を図るべく努力がなされているが、他の有力な方策は、水素生産サイクルにおいて水素以外に商業的に価値のある副産物を併せて生産することである。しかし、従来技術において、水素生産サイクルにおいて商業的に価値のある副産物を生産するサイクルは知られていない。
【００１２】
本発明は、上記した問題に鑑みてなされたものであり、微生物を用いた水素生産において、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を可能とし、水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を図ることができる方法および装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本出願人は、鋭意研究の結果、以下のとおり、微生物を用いた水素生産において、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を可能とし、水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を図ることができる水素生産方法および水素生産装置を発明するに至った。
【００１４】
本発明の水素生産方法は、
光合成能力を備えた緑藻を含む緑藻培養液を用いて、明好気条件下、前記緑藻の光合成により二酸化炭素を固定して有機物を生産する緑藻光合成工程と、
前記緑藻光合成工程により生産された前記有機物のうち前記緑藻体外に放出された有機物を取り出して光合成能力を備えた細菌を含む細菌培養液に投入し、明嫌気条件下、前記細菌の光合成により前記有機物から水素を生成する細菌光合成工程と、
前記緑藻光合成工程を経た前記緑藻培養液から前記緑藻の藻体を分離し、前記緑藻の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する藻体内物質抽出工程と、
前記藻体内物質抽出工程において抽出された物質から抗酸化物質を精製・生産する抗酸化物質精製工程とを含み、水素生産サイクルに抗酸化物質精製工程を組み込んだことを特徴とする水素生産方法である。
【００１５】
上記構成により、微生物を用いた水素生産において、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を可能とし、水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を図ることが可能となる。
【００１６】
次に、上記水素生産方法において、前記藻体内物質抽出工程で抽出された物質に含まれる有機物を乳酸発酵させて乳酸を生産する乳酸発酵工程と、前記乳酸発酵工程により生産した乳酸を取り出して前記細菌培養液に投入し、前記乳酸も前記細菌光合成工程における資源として利用して水素を生成することが好ましい。
藻体内物質抽出工程で抽出された有機物には抗酸化物質のほかにでんぷんなどが含まれているが、でんぷんなどは直接細菌光合成工程における水素生産の資源として利用できないところ、でんぷんなどの有機物を乳酸発酵を経て乳酸に変換しておくことにより、細菌光合成工程における水素生産の資源として有効に活用することができ、水素生産速度をさらに高めることが可能となる。
【００１７】
ここで、本発明の水素生産方法において利用する緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株であることが好ましい。
本発明者は鋭意研究の結果、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株が水素生産サイクルで利用する有機物を生産するとともに、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質を効率良く生産する能力があることを発見した。
【００１８】
さらに、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質の生産効率を高めるため、本発明者は天然の野生株の海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株を変異させてルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質を効率良く生産する変異株の作成を鋭意研究し、変異株の作成に成功した。
ここでは、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対する変異株の作成方法が、突然変異誘起剤（ＥＭＳ：ethyl methanesulfonate）で処理後、致死濃度のパラコートでセレクションする方法とした。なお、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株に対する変異株の作成方法として紫外線照射による方法を採用することも可能である。紫外線照射による変異株の作成においても有用な変異株を作成することができた。
【００１９】
次に、本発明の水素生産装置は、
光合成能力を備えた緑藻を含む緑藻培養液が充填され、明好気条件下、前記緑藻の光合成により二酸化炭素を固定して有機物の生産を促進する緑藻光合成促進装置と、
光合成能力を備えた細菌を含む細菌培養液が充填され、前記緑藻光合成促進装置により生産された前記有機物のうち前記緑藻体外に放出された有機物を受け入れ、明嫌気条件下、前記細菌の光合成により当該有機物から水素の生成を促進する細菌光合成促進装置と、
前記緑藻光合成促進装置内の前記緑藻培養液から前記緑藻の藻体を分離し、前記緑藻の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する藻体内物質抽出装置と、
前記藻体内物質抽出装置において抽出された物質から抗酸化物質を精製・生産する抗酸化物質精製装置とを含み、水素生産とともに抗酸化物質生産を行うことを特徴とする水素生産装置である。
【００２０】
上記構成により、微生物を用いた水素生産に加え、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を可能とし、水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を図ることが可能な装置を提供することができる。
次に、上記水素生産装置において、前記藻体内物質抽出装置において抽出された物質に含まれる有機物を乳酸発酵させて乳酸の生産を促進する乳酸生産促進装置と、前記乳酸生産促進装置により生産した乳酸を含む発酵液を取り出して細菌光合成促進装置内の細菌培養液に投入し、前記乳酸も前記細菌の光合成における資源として利用して水素の生成を促進することが好ましい。
上記構成により、水素生産装置において、緑藻の藻体内で生産される抗酸化物質のみならず、有機物を乳酸発酵を経て有効に活用することができ、水素生産速度をさらに高めることが可能となる。
【００２１】
ここで、本発明の水素生産装置において利用する緑藻が、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株であるであることが好ましく、上記にも触れたように、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質の生産効率を高めるため変異させた海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株の変異株を用いることが好ましい。
【００２２】
次に、本発明の光合成反応を伴う緑藻光合成促進装置及び細菌光合成促進装置において、培養槽を工夫してヘリカルフロープロモーター付きの透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターを用いることが好ましい。
ヘリカルフロープロモーター付きの透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターは、内筒と外筒の２重円筒構造を備え、内筒槽底部よりガスを通気し、内筒中に培養液の上昇流が生じ、当該内筒の上昇流により内筒外壁に設置されたヘリカルフロープロモーターを介して外筒に螺旋下降流が発生する仕組みとなっており、外筒槽底に至った螺旋下降流はクリアランス（隙間）を抜けて再び内筒に戻る仕組みとなっている。縦に深い筒状の培養槽として断面積を小さくして装置設置面積を小さくしつつも、緑藻および細菌を上下に効率よく循環させて光照射を行い、光合成反応を効率よく実行させることができる。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によれば、微生物を用いた水素生産において、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を可能とし、水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を図ることが可能となる。また、緑藻の藻体内で生産されるグリセロールは直接細菌光合成の資源となりえるが、でんぷんなどは直接細菌光合成の資源とならないところ、当該でんぷんなども乳酸発酵を経て乳酸に変換しておくことにより直接細菌光合成の資源として有効に活用することができ、水素生産速度をさらに高めることが可能となる。
【００２４】
また、本発明によれば、海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株を用いることにより、ルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を効率的に行うことができ、さらに、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質の生産効率を高めるため変異させた海産性緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas）Ｗ−８０株の変異株を用いることにより、より効率的にルテインなどの抗酸化物質の副産物の生産を行うことができる。
【００２５】
また、本発明によれば、光合成反応を伴う緑藻光合成促進装置及び細菌光合成促進装置として、ヘリカルフロープロモーター付きの透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターを用いることにより、装置設置面積を小さくしつつも、緑藻および細菌を上下に効率よく循環させて光照射を行い、光合成反応を効率よく実行させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
以下、図面を参照しつつ、本発明の水素生産方法および水素生産装置の実施形態を説明する。ただし、本発明の技術的範囲は以下の実施形態に示した具体的な用途や形状・寸法などには限定されない。
【実施例１】
【００２７】
本発明の水素生産サイクルの基本工程を説明する。
図１は本発明の水素生産サイクルの基本工程を示すブロック図である。
本発明の水素生産サイクルの基本工程は、緑藻光合成工程１０、細菌光合成工程２０、藻体内物質抽出工程３０、抗酸化物質精製工程５０の４つの工程を備えている。さらに、本実施例１では、藻体内物質抽出工程３０から細菌光合成工程２０へとつながる乳酸発酵工程４０も兼ね備えた工程となっている。
【００２８】
水素生産装置の構成例は後述するが、以下に説明する各工程は、パイプあるいは／及びフィルター等を介して連続的に配置されるのが好ましい。各工程を連続的に行うことにより、生産速度を速めることができ、水素およびルテインなどの抗酸化物質をより効率的に量産化することができる。
【００２９】
まず、緑藻光合成工程１０を説明する。
緑藻光合成工程１０は、光合成能力を備えた緑藻を含む緑藻培養液を用いて、明好気条件下、緑藻の光合成により二酸化炭素を固定して有機物を生産する工程である。
緑藻光合成工程１０は培養槽を備え、培養槽の中に光合成能力を備えた緑藻１を含む海水ベースの緑藻培養液２を保持している。ここで、明好気条件下、つまり、光の照射を受けるとともに、通気ガス中の二酸化炭素を培養液中に取り込みつつ、緑藻１の光合成反応を促進し、有機物を生産する。ここで有機物には、でんぷん、グリセロールなど種々のものが含まれている。
【００３０】
緑藻１は、クラミドモナス（Chlamydomonas）属に属する海産性緑藻クラミドモナスＷ−８０株を用いることが好ましい。本発明は、水素生産サイクルにおいて、効率的な水素生産とルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４の副産物の生産を可能とすることをポイントとする。野生種のクラミドモナスＷ−８０株は海水から常法により単離された株であり、明好気条件下の光合成能力が高い上に、抗酸化物質４の生産能力が高いので好ましい。また、担体に固定化しやすいという性質もある。クラミドモナスＷ−８０株あるいはこれに相当する株は、海水サンプルから光合成能力の比較により当業者が容易に単離することができる緑藻株である。
【００３１】
なお、本発明では、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４の生産能力を高めることを目的としている。そこで、野生種の海産性緑藻クラミドモナスＷ−８０株を改良し、海産性緑藻クラミドモナスＷ−８０株に対して抗酸化物質４の生産能力を高めた緑藻変異株１ａを用いることが好ましい。本発明者は鋭意研究の結果、変異株１ａの作成に成功した。
【００３２】
なお、海産性緑藻クラミドモナスＷ−８０株に対する変異株１ａの作成方法は、突然変異誘起剤（ＥＭＳ：ethyl methanesulfonate）で処理後、致死濃度のパラコートでセレクションする方法で変異処理して作成した。
変異株１ａによる抗酸化物質４の生産能力の検証については後述する。
【００３３】
次に、緑藻光合成工程における緑藻培養液２は、その塩分濃度が１．０％〜１０．０％である海水あるいは／及び少なくとも窒素供給源・無機成分・ビタミンを含む溶液や人工海水とすることが好ましい。上記した範囲の塩分濃度とすることにより、緑藻の働きにより光合成で生成された有機物３ａを効率良く細胞外に分泌することができる。さらに好ましくは３．０％〜５．０％が良い。
ここで、塩分濃度とは、海水１ｋｇ中に溶解している無機塩類の全量の濃度を指す。
また、緑藻培養液２は適切な窒素供給源と無機成分・ビタミンを含む溶液であることが好ましい。無機成分を含む培地としては海水が好適に用いられるが、以下の組成の改変岡本培地（以下、ＭＯＭ培地という）も好ましい。ＭＯＭ培地とは、以下の［表１］の組成を持っている。
【００３４】
【表１】
2009060876.tif 000003
培養液のｐＨは８．０である。
【００３５】
ここで、微量金属混合物Ａの組成は、以下の［表２］の組成となっている。
【表２】
2009060876.tif 000004
【００３６】
次に、緑藻１により生産された有機物を細胞外に取り出す工夫について述べる。
光合成能力を有する緑藻１は、通常は、光合成により得られた澱粉等の有機物を細胞内に蓄積するが、本発明では後述する細菌光合成工程２０において水素９を生産する資源として、この緑藻光合成工程１０で生産された有機物を工業的生産過程にて利用するため、緑藻１の細胞内に得られた有機物を緑藻１の細胞外に取り出す必要がある。ここで、緑藻１で生産された有機物は緑藻光合成工程の中で直接細胞外に分泌させて取り出せるグリセロールなどの有機物３ａと後述するように細胞壁を破砕して取り出すでんぷんなどの有機物３ｂがある。
本発明者は、鋭意研究の結果、緑藻光合成工程１０において緑藻培養液２の液相の浸透圧を高める手法や、緑藻１を担体に固定化する手法や、気相中の二酸化炭素の濃度を高めたりして緑藻１に対してストレスを与える手法などにより、当該緑藻１が光合成により生産したグリセロール等の低分子有機物３ａを細胞外へ分泌することを見出している。本発明においても緑藻培養液２の液相の浸透圧を高める、緑藻１を担体に固定化する、気相中の二酸化炭素の濃度を高めるなどそれぞれの手法のいずれかまたはそれらを組み合わせて用いることにより、緑藻１が生成したグリセロール等の有機物３ａを細胞外に分泌するよう促進することが好ましい。
【００３７】
まず、緑藻培養液２の液相の浸透圧を高める手法としては、例えば、緑藻培養液２の液相の浸透圧を５．０ａｔｍ以上とする。上記のように液相の浸透圧を５．０ａｔｍ以上としているのは、浸透圧がこれより小さいと、光合成能力を有する緑藻１により生成された光合成産物が緑藻内に蓄積されてしまい、光合成産物が水素生成の素材として緑藻１外へ分泌されない。よって、水素生成の素材が不足し、水素の生成効率が低下するためである。液相の浸透圧は、さらに好ましくは１０．０ａｔｍ以上、より好ましくは２０．０ａｔｍ以上が良い。液相の浸透圧が高い方が有機物３ａを効率良く得ることができるが、緑藻１の存在環境等を考慮すると３０．０ａｔｍ以下が良い。なお、光合成能力を有する細菌により水素９を生成する工程中、液相の浸透圧は１０．０ａｔｍ〜３０．０ａｔｍであるのが好ましい。
【００３８】
また、緑藻１を担体に固定化する手法としては、例えば、緑藻１を、緑藻培養液２に不溶な担体に３０ｍｇ乾燥重量／ｃｍ３（担体）〜７０ｍｇ乾燥重量／ｃｍ３（担体）固定化された状態で用いる。さらに好ましくは４０ｍｇ乾燥重量／ｃｍ３（担体）〜５０ｍｇ乾燥重量／ｃｍ３（担体）で固定化することが好ましい。つまり、緑藻１を浮遊細胞として用いるのではなく、緑藻１を担体に固定化することで、細胞にストレスを与えるだけでなく、単位体積当たりの細胞密度を高めることができると共に、細胞活性を安定化することができ、緑藻１の作用を長期に渡って持続させることができる。また、固定化された緑藻１が死滅すると自ら容易に担体から外れ、その後、緑藻１が新たに増殖等して担体に固着するため、連続的に緑藻１の作用を得ることができる。さらに、上記担体は、緑藻１を存在させる液体に不溶であるため、緑藻１を固定化した担体と、液体とをフィルター等を用いて固液分離により容易に分離することができる。よって、緑藻１を固定化した担体のみを回収して再循環させたり、必要な溶液のみを流通させたり、緑藻１が混合しないように分離したりすることもできる。
【００３９】
なお、本発明に用いる担体の材質としては、例えば、多孔質ガラスビーズ、ポリビニルアルコール、ポリウレタンフォーム、ポリスチレンフォーム、ポリアクリルアミド、ポリビニルホルマール樹脂多孔質体、シリコンフォーム、セルロース多孔質体等の発泡体あるいは樹脂が好ましい。なお、多孔質体の開口部の大きさは、約１０μｍ〜５００μｍが好適である。また、担体の形状は問わないが、担体の強度、培養効率等を考慮すると、球状あるいは立方体状で、大きさは、球状の場合、直径が１ｍｍ〜５０ｍｍ、立方体状の場合、１ｍｍ〜５０ｍｍ角が好ましい。
【００４０】
また、緑藻１の固定化には、例えば、担体結合法、架橋法および包括法等の公知の方法が適用でき、中でも担体結合法が最適である。担体結合法には、イオン交換性の樹脂に吸着させる化学的吸着法あるいは物理的吸着法が含まれる。微細藻、特に緑藻１は、一般的に粘着性があり、容易に粘着固定化されるものが多い。なお後述する光合成細菌７は細胞表面がマイナスに帯電しているものが多く、従って、固定化担体を予めプラスに帯電しているポリエチレンイミンによりコーティングし、これに光合成細菌７を電気的引力によって結合させると容易に固定化される。
【００４１】
また、気相中の二酸化炭素の濃度を高める手法としては、例えば、二酸化炭素の体積濃度が１．０％〜２０．０％であるガスを培養槽に通気する手法がある。さらに好ましくは２．０％〜１５．０％であるガスを培養槽に通気する手法がある。
【００４２】
次に、図１における細菌光合成工程２０を説明する。
細菌光合成工程２０は、緑藻光合成工程１０により生産された有機物を取り出して光合成能力を備えた光合成細菌７を含む光合成細菌培養液８に投入し、明嫌気条件下、光合成細菌７の光合成により有機物から水素９を生成する工程である。
【００４３】
水素生産を支配する酵素として二トロゲナーゼが知られている。本発明では細菌光合成工程２０で用いる光合成細菌７において水素生産を支配する酵素である二トロゲナーゼが高誘導された状態で用いられることにより、光合成細菌７が細胞の増殖に基質やエネルギーを使うことなく主に水素生産に基質やエネルギーを使うので高速度で水素９の生産を行うことができる。なお、光合成細菌７にニトロゲナーゼを高いレベルで誘導してから光合成細菌７を担体に固定化しても良いし、光合成細菌７を担体に固定化してから光合成細菌７にニトロゲナーゼを高いレベルで誘導しても良い。
【００４４】
光合成能力を有する細菌７としては、光合成無機栄養細菌および光合成有機栄養細菌（紅色非硫黄細菌、緑色滑走細菌等）が用いられ、１種または複数種を用いることができる。本発明においては、光合成有機物を基質（電子供与体）とするので、光合成有機栄養細菌が好適に用いられる。光合成有機栄養細菌としては、ロドスピリルム科（Rhodospirillaceae）に属する紅色非硫黄細菌、クロロフレクスス科（Chloroflexaceae）に属する緑色滑走細菌等が挙げられる。
上記光合成有機栄養細菌は、例えば、海水サンプルから乳酸（例えば、０．３ｍＭ）を基質として水素を発生する微生物を選択することにより得ることができる。光合成細菌７としては、例えば、ロドシュードモナス（Rhodopseudomonas）属に属するロドシュードモナスパラストリス（Rhodopseudomonas palustris）およびロドシュードモナスアシドフィラ（Rhodopseudomonas acidophila）、ロドスピリラム（Rhodospirillum）属に属するロドスピリラムルブラム（Rhodospirillum rubrum）ＡＴＣＣ１１１７０、同ＩＦＯ３９８６ 等、ロドバクター（Rhodobacter）属に属するロドバクタースフェロイデス（Rhodobacter sphaeroides）、ロドバクターカプスレイタス（Rhodobacter capsulatus）ＡＴＣＣ２３７８２、ＡＴＣＣ１７０１３等、ロドブラム（Rhodovulum）属に属するロドブラムストリクタム（Rhodovulum strictum）、ロドブラムアドリアティカム（Rhodovulum adriaticum）、ロドブラム・サルフィドフィラム（Rhodovulum sulfidophilum）等が挙げられる。
本発明においては、海水サンプルから単離したロドブラム・サルフィドフィラムＷ−１Ｓ（Rhodovulum sulfidophilum W−1S）と名付けた株およびこれと同等の活性を有する光合成細菌が好ましい。
【００４５】
次に、藻体内物質抽出工程３０を説明する。
藻体内物質抽出工程３０は、緑藻光合成工程１０を経た緑藻培養液２から緑藻１の藻体を分離し、緑藻１の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する工程である。
本発明では、緑藻１の緑藻培養液２からの取り出し方法には、培養槽中の緑藻培養液２の一部のみを取り出し、取り出した分量に相当する新たな培養液を培養槽に継ぎ足して緑藻光合成工程１０を繰り返して行くいわゆる「持続的取り出し型」の取り出し方法と、培養槽中の緑藻培養液２の全量を一旦取り出してしまい、空になった培養槽に新たな培養液を注ぎ込んで緑藻光合成工程１０を繰り返して行くいわゆる「全量取り出し型」の取り出し方法がある。
【００４６】
まず、緑藻光合成工程１０を経た緑藻培養液２から緑藻１の藻体を分離する。緑藻培養液２をポンプなどで汲み上げ、フィルターにより濾しとるなどして藻体を分離し、適宜乾燥する。
【００４７】
次に、分離した緑藻１の藻体の細胞壁を破壊して内部の物質を抽出する。
本発明では緑藻１の藻体の細胞壁破壊の手段は特に限定されず、多様な手段がある。
例えば、超音波破砕法がある。緑藻１の藻体の細胞壁に対して所定範囲の周波数の超音波を当てて振動を起こし、細胞壁を破砕してゆく方法である。
また、例えば、有機溶媒による溶解法がある。有機溶媒により細胞内に含まれる抗酸化物質や有機物３ｂを溶解・抽出する方法である。
その他の方法であっても、細胞内に含まれる抗酸化物質や有機物を変質させることなく細胞外へ抽出させる方法であれば適用することができる。
【００４８】
上記のいずれの方法においても、細胞内に生成・蓄積されていた物質が細胞外へ抽出される。細胞内に生成・蓄積されていた物質には、デンプンなどの有機物３ｂと、ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４が含まれている。
【００４９】
ここで抽出されるデンプンなどの有機物３ｂは、緑藻光合成工程１０で緑藻１の細胞外に放出されることなく緑藻１の細胞内に蓄積されていた有機物である。本発明ではこの緑藻１の細胞内に蓄積されていた有機物３ｂも後述する乳酸発酵工程４０に引き渡すことにより有効利用する。
ルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４は後述する抗酸化物質精製工程５０に引き渡され、ルテインやゼアキサンチンなどの精製抗酸化物質４として精製される。
【００５０】
なお、緑藻１の緑藻培養液２から取り出し方法として「持続的取り出し型」の取り出し方法を採用している場合、本発明の水素生産サイクルは持続可能な形で繰り返されるので緑藻培養液２から取り出される緑藻１の分だけ緑藻光合成工程１０の緑藻培養液２中に補充されねばならない。緑藻１の補充は、別の培養槽の中で変異株として別途増殖された緑藻１や、緑藻光合成工程１０の緑藻培養液２において自己増殖した緑藻１などによりまかなわれる。
また、緑藻１の緑藻培養液２から取り出し方法として「全量取り出し型」の取り出し方法を採用している場合、培養槽中の緑藻培養液２の全量を入れ替える形で培養槽に新たな培養液を注ぎ込んで補充されねばならない。
【００５１】
緑藻１は、緑藻光合成工程１０の緑藻培養液２における光合成反応を経て細胞内に有機物を合成するとともに活性酸素ストレスに対する高い耐性を持ちルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４を合成する。そのため、緑藻１のエネルギーが効率良くそれら有機物の合成と抗酸化物質４の合成に使われることが好ましく、緑藻１の増殖はある程度抑えられる方が好ましい。
【００５２】
次に、抗酸化物質精製工程５０を説明する。
抗酸化物質精製工程５０は、藻体内物質抽出工程３０において抽出された物質から抗酸化物質４を精製・生産する工程である。藻体内物質抽出工程３０において抽出された抗酸化物質４は超音波破砕された液体中に存在している。この液体からルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４を精製する。精製したルテインやゼアキサンチンなどの抗酸化物質４は商業的に利用され得る。
このように本発明では、水素生産サイクルにおいてルテインやゼアキサンチンなどの商業的に価値のある抗酸化物質４を生産する過程を組み込むことができる。
なお、ここでは、藻体内物質抽出工程３０において超音波を用いた細胞壁破砕を前提とした上で抗酸化物質生成工程５０を説明したが、藻体内物質抽出工程３０において他の物理的手法や化学的手法などにより細胞壁破砕手法を採った場合、適宜、当該手法に合った精製手法を適用することとなる。
【００５３】
次に、乳酸発酵工程４０を説明する。
乳酸発酵工程４０は、藻体内物質抽出工程３０において抽出された物質に含まれていた有機物３ｂを乳酸発酵培養液槽に投入し、乳酸発酵培養液５中で乳酸発酵させて乳酸を生産する工程である。
乳酸発酵培養液５は、乳酸の製造に使用可能な乳酸生産微生物などが含まれており、藻体内物質抽出工程３０から渡されたデンプンなどの有機物３ｂを乳酸発酵過程により分解し、乳酸を生成する。
【００５４】
乳酸発酵を行って乳酸を生産する微生物としては、細菌、酵母、カビが挙げられる。
細菌としては、ラクトバチルス（Lactobacillus）属、ラクトコッカス（Lactococcus）属、ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）属、エンテロコッカス（Enterococcus）属、ストレプトコッカス（Streptococcus）属、バチルス（Bacillus）属、ロイコノストック（Leuconostoc）属、ペディオコッカス（Pediococcus）属のものを例示できる。
酵母としては、クルベルマイセス（Kluyveromyces）属のものを例示できる。
カビとしては、リゾプス（Rhyzopus）属、アスペルギルス（Aspergillus）属のものを例示できる。
【００５５】
また、乳酸を生産する微生物には天然の状態で乳酸を生産するものに加え、乳酸を生成するように変異させられたり遺伝子操作により乳酸生産能力を付与されたりした微生物も含まれる。例えば、サッカロマイセス・セレビシエに対して、乳酸生成に関連する遺伝子を導入した変異酵母を挙げることができる。また、変異酵母以外にも、乳酸生成能を持たない細菌、酵母、カビに乳酸生成に関連する遺伝子を導入することで、使用可能である。具体的にはサッカロマイセス（Saccharomyces）、シゾサッカロマイセス（Schizosaccharomyces）、クルベルマイセス(Kluyveromyces)、ピキア(Pichia)、ハンゼヌラ(Hansenula)、カンジダ(Candida)、トリクスポロン(Trichosporon)属のものを例示できる。また細菌では大腸菌（Escherichia coli）、ザイモモナス（Zymomonas）属を例示できる。カビではリゾプス（Rhyzopus）属、アスペルギルス（Aspergillus）属などを例示できる。
【００５６】
この乳酸発酵培養液５中に、藻体内物質抽出工程３０からデンプンなどの有機物３ｂが投入されれば、乳酸発酵培養液５中で乳酸発酵が行われて乳酸が生成される。
乳酸発酵工程４０により生産された乳酸を含む発酵液は取り出され、細菌光合成工程２０の光合成細菌培養液８中に投入され、細菌光合成工程２０による水素生産サイクルに組み込まれる。
つまり、乳酸６も細菌光合成工程２０における資源として利用して水素が生成され、緑藻光合成工程１０において緑藻１内に生産された有機物と抗酸化物質はすべて無駄なく水素生産サイクル内で有効に活用され、生産効率が改善されている。
【００５７】
（装置構成例）
次に、本発明の水素生産サイクルを適用した水素生産装置１００の構成例を説明する。
図２は、本発明にかかる水素生産装置１００の構成例を模式的に示した図である。
緑藻光合成促進装置１１０は、緑藻光合成工程１０に用いる培養槽であり、光合成能力を備えた緑藻１を含む緑藻培養液２が充填され、明好気条件下、緑藻１の光合成により二酸化炭素を固定して有機物の生産を促進する装置である。
【００５８】
細菌光合成促進装置１２０は、細菌光合成工程２０に用いる培養槽であり、光合成細菌７を含む光合成細菌培養液８が充填され、緑藻光合成促進装置１１０により生産され細胞外に分泌した有機物３ａおよび後述する乳酸発酵装置１４０で生産された乳酸６を受け入れ、明嫌気条件下、光合成細菌７の光合成により有機物３ａおよび乳酸６から水素の生成を促進する装置である。
【００５９】
この構成例では、緑藻光合成促進装置１１０および細菌光合成促進装置１２０はそれぞれ、透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターとなっている。緑藻光合成促進装置１１０および細菌光合成促進装置１２０はそれぞれ、光エネルギー及び熱エネルギーを、光合成能力を有する緑藻１や光合成細菌６に均等に伝達可能な構成とすることが好ましい。
【００６０】
本発明で用いる透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターは、光エネルギー及び熱エネルギーを全ての緑藻または細菌に均等に循環的に伝えられるような流路を備え、流路内に光合成能力を有する緑藻を含む液体あるいは光合成能力を有する光合成細菌を含む液体を流通する構成となっている。これにより、均等に循環的に光エネルギーを伝達し、光阻害を低め、光合成能力を高めることができ、エネルギー効率が高まり、より生産性を向上することができる。なお、攪拌型槽とすることもできる。
【００６１】
透明塔型エアーリフトフォトバイオリアクターの構成例を説明する。緑藻光合成促進装置１１０のものを例に説明する。緑藻光合成促進装置１１０は円筒形であり、下部に、液体が流れる程度の空間をあけて、内筒槽１１２を配置し、二重円筒構造としている。緑藻光合成促進装置１１０内に設けられた内筒槽１１２の内側の下部において、通気装置１１５からエアーを通気することにより、内筒槽１１２の内側の下部から上部へ向かって緑藻培養液２の流れを発生させ、内筒槽１１２の内側の上面では、その流れにより内筒槽１１２の外側へ緑藻培養液２が流れるようにしている。その後、緑藻培養液２が外筒槽１１６と内筒槽１１２との間の空間に沿って下部へ向かって流れることにより、緑藻培養液２の循環状態を得ている。つまり、内筒槽１１２の内側に上昇流１１３を発生させ、当該上昇流が内筒槽１１２上部より外筒槽１１６の上部に入り、内筒槽１１２と外筒槽１１６の間に下降流１１４が発生し、外筒槽１１６の底部にあるクリアランス（隙間）１１８から内筒槽１１２底部に戻り、緑藻培養液２が循環するように構成されている。内筒槽１１２の上部外壁には、螺旋状や放射状の流れを生み出すヘリカルフロープロモーター１１７が配置されている。緑藻培養液２は、外筒槽１１６と内筒槽１１２との間を流れる際に最も強く、光が照射される構成としている。
【００６２】
次に、藻体内物質抽出装置１３０は、緑藻光合成促進装置１１０内の緑藻培養液２から緑藻１の藻体を分離し、緑藻１の藻体中に生産・蓄積された物質を抽出する装置であり、緑藻１の藻体の細胞壁を破砕して細胞内のルテインなどの抗酸化物質およびデンプンなどの有機物３ｂを細胞外に出す細胞壁破壊装置１３２、ルテインなどの抗酸化物質と緑藻１の細胞内から抽出したデンプンなどの有機物３ｂとを分ける分離装置１３３を備えている。ルテインなどの抗酸化物質およびデンプンなどの有機物の分離・抽出方法は特に限定されないが、例えば、溶媒に溶解して分離・抽出して取り出す方法などがある。
【００６３】
分離されたルテインなどの抗酸化物質は抗酸化物質精製装置１５０に送られ、分離されたデンプンなどの有機物３ｂは乳酸発酵装置１４０に送られる。
【００６４】
抗酸化物質精製装置１５０は、藻体内物質抽出装置１３０において抽出された抗酸化物質を精製する。最終的に、ルテインやゼアキサンチンなどの商業的に価値の高い抗酸化物質を工業的生産過程により量産することができる。
【００６５】
乳酸発酵装置１４０は、藻体内物質抽出装置１３０において抽出されたデンプンなど有機物３ｂを乳酸発酵させて乳酸の生産を促進する装置であり、乳酸生産菌を培養液とする乳酸発酵槽１４２と、発酵液から乳酸生産菌を濾し取って乳酸を分離・抽出する濾過装置１４１を備えている。濾過後の乳酸は、細菌光合成促進装置１２０内の細菌培養液に投入され、乳酸も細菌光合成における資源として利用され、水素の生成が促進される。
【００６６】
これら各装置間は、パイプあるいは／及びフィルター等を介して連続的に配置されるのが好ましい。また、各装置の出口には、フィルターが配置され、緑藻１や光合成細菌７が槽外へ流出しない構成とすることが好ましい。これにより、水素の生産効率をより高めることができる。上記フィルターとしては、最も多く用いられるのは、ポリスルフォンであるが、これ以外にも、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリビニリデンフロライト等が用いられる。また、各槽は、不要な気体を排出する排出口を備えていても良い。
【００６７】
（実験）
緑藻光合成促進装置１１０および細菌光合成促進装置１２０として、実容積５Ｌのヘリカルフロープロモーター付きエアーリフト型バイオリアクターを用いた。ガラス製の透明塔型エアーリフト槽の高さは４３ｃｍ、外径は１３ｃｍ、ガラス製の内部円筒の直径は７．５ｃｍとした。通気装置であるガス吹き込み口を槽の底から３．４ｃｍの位置に設置した。具体的には、直径２ｃｍの円板に多数個（例えば５０個）の内径８０μｍの孔をあけ、そこからガスを吹き込んだ。
明好気条件としては、人工光を用いて行った。緑藻培養液２の主成分は、ＭＯＭ培地とした。
【００６８】
まず、実験１として、本発明の緑藻光合成工程１０から乳酸発酵工程４０による乳酸発酵サイクルの組み込みによる水素生産量の増加効果を確認する。
【００６９】
比較例１では、緑藻１として、野生種の緑藻クラミドモナスＷ−８０を用いた。光合成能力を有する細菌は、ロドブラム・サルフィドフィラムＷ−１Ｓを用いた。担体としては、ポリビニルアルコールからなる多孔性高分子材料を用いた。
また、比較例１では、実験１と同様、緑藻光合成促進装置１１０から直接供給される有機物３ａ（緑藻体外に放出されたグリセロールなど）の投入と、乳酸発酵装置１４０の乳酸発酵サイクルを用いて生成した乳酸６（藻体内物質抽出装置１３０から供給されるでんぷんなどの有機物３ｂから乳酸発酵により変換した乳酸）の投入とを行うサイクルを採用して水素生産を行った。
【００７０】
比較例２では、緑藻１として、野生種の緑藻クラミドモナスＷ−８０を用いた。光合成能力を有する細菌は、ロドブラム・サルフィドフィラムＷ−１Ｓを用いた。担体としては、ポリビニルアルコールからなる多孔性高分子材料を用いた。
また、比較例２では、乳酸発酵装置１４０の乳酸発酵サイクルを用いずに、緑藻光合成促進装置１１０から直接供給される有機物３ａ（緑藻体外に放出されたグリセロールなど）の投入と、藻体内物質抽出装置１３０から供給されるでんぷんなどの有機物３ｂの投入とを行うサイクルを採用して水素生産を行った。
【００７１】
以上の比較例１、比較例２の相違点を整理すると以下の［表３］のようになる。
【表３】
2009060876.tif 000005
【００７２】
上記条件にて実験１を実施し、比較例１と比較例２の実験結果を比較することにより、本発明の緑藻光合成工程１０から乳酸発酵工程４０の乳酸発酵サイクルによる水素生産能力の改善を確認することができる。
【００７３】
実験の結果、比較例１の水素生産量の方が、比較例２の水素生産量よりも多いという結果を得た。
以上、比較例１と比較例２を比較することにより、比較例１の水素生産量は比較例２の水素生産量よりも増加しており、乳酸発酵サイクルによる水素生産能力の改善を確認することができた。
【００７４】
次に、実験２として、本発明者が開発した緑藻クラミドモナスＷ−８０の変異株の抗酸化物質生産能力の改善効果を確認する。
【００７５】
比較例１では、緑藻１として、野生種の緑藻クラミドモナスＷ−８０を用いた。光合成能力を有する細菌は、ロドブラム・サルフィドフィラムＷ−１Ｓを用いた。担体としては、ポリビニルアルコールからなる多孔性高分子材料を用いた。
また、比較例１では、実験１と同様、乳酸発酵装置１４０を用いて緑藻１の細胞内から回収されたデンプンから乳酸発酵により生成した乳酸を投入するサイクルを採用した。
【００７６】
比較例３では、緑藻１として、緑藻クラミドモナスＷ−８０の変異株を用いた。光合成能力を有する細菌は、ロドブラム・サルフィドフィラムＷ−１Ｓを用いた。担体としては、ポリビニルアルコールからなる多孔性高分子材料を用いた。
また、比較例３では、乳酸発酵装置１４０を用いて緑藻１から回収されたデンプンから乳酸発酵により生成した乳酸を投入するサイクルを採用した。
【００７７】
以上の比較例１、比較例３の相違点を整理すると以下の［表４］のようになる。
【表４】
2009060876.tif 000006
【００７８】
つまり、比較例１と比較例３とを比較することにより、本発明者が開発した緑藻クラミドモナスＷ−８０の変異株の抗酸化物質生産能力の改善を確認することができる。
【００７９】
実験の結果、比較例３のルテイン生産量の方が、比較例１のルテイン生産量よりも多いという結果を得た。
以上、比較例１と比較例３を比較することにより、比較例３のルテイン生産量は比較例１のルテイン生産量よりも増加しており、本発明者が開発した緑藻クラミドモナスＷ−８０の変異株の抗酸化物質生産能力の改善効果を確認することができた。
【００８０】
以上、本発明のおける好ましい実施形態を図示して説明してきたが、本発明の技術的範囲を逸脱することなく種々の変更が可能であることは理解されるであろう。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
本発明は、微生物を用いた水素の量産化・工業化とともにこれら抗酸化物質の工業的生産を可能とする水素生産方法および水素生産装置に適用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】本発明の水素生産サイクルの基本工程を示すブロック図
【図２】本発明にかかる水素生産装置１００の構成例を模式的に示した図
【符号の説明】
【００８３】
１  緑藻
２  緑藻培養液
３ａ，３ｂ  有機物
４  抗酸化物質
５  乳酸発酵培養液
６  乳酸
７  光合成細菌
８  光合成細菌培養液
９  水素
１０  緑藻光合成工程
２０  細菌光合成工程
３０  藻体内物質抽出工程
４０  乳酸発酵工程
５０  抗酸化物質精製工程
１００  水素生産装置
１１０  緑藻光合成促進装置
１１２  内筒槽
１１３  上昇流
１１４  下降流
１１５  通気装置
１１６  外筒槽
１１７  ヘリカルフロープロモーター
１１８  クリアランス（隙間）
１２０  細菌光合成促進装置
１３０  藻体内物質抽出装置
１３２  細胞壁破壊装置
１３３  分離装置
１４０  乳酸発酵装置
１４１  濾過装置
１４２  乳酸発酵槽
１５０  抗酸化物質精製装置
【図１】
2009060876.tif 000007
【図２】
2009060876.tif 000008