(57)【要約】      （修正有）【課題】シャクヤク成分で、アンドロゲン受容体結合阻害活性を示す化合物の提供。【解決手段】式（Ｉ）で表される化合物。2009298766.tif 000024［式中、Ａは以下の構造である。］2009298766.tif 000025【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009298766.tif 000017
［式中、
Ａは、
【化２】
2009298766.tif 000018
であり；
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４は、水素原子または置換されていてもよいベンゾイル基を示し、
Ｒ１〜Ｒ４のうち少なくとも１つは置換されていてもよいベンゾイル基を示し；
Ｒ５は水素原子または水酸基を示す。］で表される化合物、その塩またはそのプロドラッグを含有してなるアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項２】
置換されていてもよいベンゾイル基がベンゾイル基またはガロイル基である請求項１記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項３】
式（Ｉ）中、
Ａが、
【化３】
2009298766.tif 000019
であり；
Ｒ５は前記と同一意味を表し；
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３,Ｒ４のいずれか１つがベンゾイル基またはガロイル基である請求項１または２記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項４】
式（Ｉ）中、
Ａが、
【化４】
2009298766.tif 000020
であり；
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４のうち２つ以上がガロイル基である請求項１記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項５】
アンドロゲン受容体アンタゴニストである請求項１〜４いずれか１項に記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項６】
前立腺肥大、前立腺癌、多毛症、男性型脱毛症、にきび（尋常性ざ瘡）の治療・予防剤である請求項１記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項７】
式（ＩＩ）：
【化５】
2009298766.tif 000021
で表される化合物またはその塩。
【請求項８】
式（ＩＩＩ）：
【化６】
2009298766.tif 000022
で表される化合物またはその塩。
【請求項９】
式（ＩＶ）：
【化７】
2009298766.tif 000023
で表される化合物またはその塩。
【請求項１０】
請求項７〜９いずれか１項記載の化合物のプロドラッグ。
【請求項１１】
請求項７〜９いずれか１項記載の化合物または請求項１０記載のプロドラッグからなる医薬。
【請求項１２】
請求項７〜９いずれか１項記載の化合物または請求項１０記載のプロドラッグを含有するアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シャクヤク（Ｐａｅｏｎｉａ  ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ  Ｐａｌｌａｓ）に含まれるアンドロゲン受容体結合阻害剤、ならびにアンドロゲン受容体結合阻害活性を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
生薬芍薬は、シャクヤク（Ｐａｅｏｎｉａ  ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ  Ｐａｌｌａｓ）の根であり、主として漢方処方用薬として用いられ、例えば当帰芍薬散、四物湯、桂枝茯苓丸などに用いられている。特に、更年期障害や月経不順などの婦人用漢方処方用薬に使用されている（非特許文献１、２）。一方、シャクヤク抽出物がテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有することが報告されている（特許文献１）が、シャクヤク成分の具体的化合物の男性ホルモン様作用化合物に関する報告は少ない。シャクヤク成分であるペンタガロイルグルコースの５α―リダクターゼ阻害作用およびアンドロゲン受容体発現抑制作用について報告があるのみで、アンドロゲン受容体結合阻害活性については触れられていない（非特許文献３）。
【０００３】
アンドロゲン受容体結合阻害剤としては、ステロイド系のクロルマジノンや非ステロイド系のビカルタミド、フルタミドが前立腺癌治療薬として臨床的に使用されており、強い活性を示すが、副作用も多く報告されている。従って、副作用の少ない植物由来のアンドロゲン受容体結合阻害剤も望まれており、種々の植物の抽出物のアンドロゲン受容体結合阻害剤が数多く提案されている（特許文献２、３等およびその引用文献）。しかし、効果の強さなどから、いまだ満足する効果を発揮するものは得られていないし、また、結合阻害活性を有する具体的化合物は、未だ特定されていないものが多く、植物由来のアンドロゲン受容体結合阻害作用を示す化合物として、ノビレチン（特許文献４）、５−ヒドロキシフラボン（特許文献５）などの報告が散見されるだけである。
【０００４】
【特許文献１】特開平８−２６９３７号公報
【特許文献２】特開２００７−２３０９１６号公報
【特許文献３】特開２００６−２５７０５９号公報
【特許文献４】特開２００５−２０６５４６号公報
【特許文献５】特開２００２−３２６９３１号公報
【非特許文献１】Ｙ．Ｋｕｍａｇａｉら、Ｊ．Ｔｒａｄ．Ｍｅｄ．２２巻、２２８−２３６頁、２００５年
【非特許文献２】Ｋ．Ｗａｔａｎａｂｅら、Ｊ．Ｔｒａｄ．Ｍｅｄ．２３巻、２０３−２０７頁、２００６年
【非特許文献３】Ｈ−Ｈ．Ｌｅｅら、Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ、２７巻、１１０９−１１１８頁、２００４年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
シャクヤクの中で、「大和シャクヤク」と称されるものは、古くから奈良県下で栽培、育成され、薬用に用いられる優良品種であり、その生薬は、高品質として高値で取引されているが、生薬芍薬と同様にペオニフロリンやアルビフロリン以外の薬効成分に関する報告は少ない。従って、本発明は、大和シャクヤクを含めたシャクヤク成分の中で、ホルモン様作用、特にアンドロゲン受容体結合阻害活性を示す化合物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは上記目的を達成すべく鋭意検討した結果、シャクヤク成分の中に、アンドロゲン受容体阻害活性を示す化合物、ならびにアンドロゲン受容体結合阻害活性を有する新規化合物を見出し、本発明を完成させた。
【０００７】
即ち、本発明は以下の発明を包含する。
[１]式（Ｉ）
【０００８】
【化１】
2009298766.tif 000002
［式中、
Ａは、
【０００９】
【化２】
2009298766.tif 000003
であり、
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４は、水素原子または置換されていてもよいベンゾイル基を示し、  Ｒ１〜Ｒ４のうち少なくとも１つは置換されていてもよいベンゾイル基を示し、
Ｒ５は水素原子または水酸基を示す。］で表される化合物、その塩またはそのプロドラッグを含有してなるアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[２]置換されていてもよいベンゾイル基がベンゾイル基またはガロイル基である[１]記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[３]式（Ｉ）中、Ａが、
【００１０】
【化３】
2009298766.tif 000004
であり、
Ｒ５は前記と同一意味を表し、
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３,Ｒ４のいずれか１つがベンゾイル基またはガロイル基である[１]または[２]記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[４]式（Ｉ）中、Ａが、
【００１１】
【化４】
2009298766.tif 000005
であり、
Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４のうち２つ以上がガロイル基である[１]記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[５]アンドロゲン受容体アンタゴニストである[１]〜[４]いずれかに記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[６]前立腺肥大、前立腺癌、多毛症、男性型脱毛症、にきび（尋常性ざ瘡）の治療・予防剤である[１]記載のアンドロゲン受容体結合阻害剤；
[７]式（ＩＩ）
【００１２】
【化５】
2009298766.tif 000006
で表される化合物またはその塩；
[８]式（ＩＩＩ）
【００１３】
【化６】
2009298766.tif 000007
で表される化合物またはその塩；
[９]式（ＩＶ）
【００１４】
【化７】
2009298766.tif 000008
で表される化合物またはその塩；
[１０][７]〜[９]いずれかに記載の化合物のプロドラッグ；
[１１][７]〜[９]いずれかに記載の化合物または[１０]記載のプロドラッグからなる医薬；
[１２] [７]〜[９]いずれかに記載の化合物または[１０]記載のプロドラッグを含有するアンドロゲン受容体結合阻害剤；
などを提供する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明により、シャクヤク成分で、アンドロゲン受容体結合阻害活性を示す置換されていてもよいベンゾイル基で置換されたアルビフロリンまたはペオニフロリン誘導体、ぺンタガロイルグルコース、およびアンドロゲン受容体結合阻害活性を有する新規化合物、ならびにこれらアンドロゲン受容体結合阻害剤を含有する前立腺肥大、前立腺癌、多毛症、男性型脱毛症、にきび（尋常性ざ瘡）の治療・予防剤を提供できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下において、本発明を詳細に説明する。式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４で示される「置換されていてもよいベンゾイル基」における「ベンゾイル基」が有していてもよい置換基としては、例えば、低級アルキル基（例、メチル、エチル、プロピルなど炭素数１−６の直鎖状または分枝状のアルキル基）、低級アルケニル基（例、ビニル、アリル、イソプロペニルなどの炭素数２−６の直鎖状または分枝状のアルケニル基）、シクロアルキル基（例、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなど炭素数３−６のシクロアルキル基）、置換されていてもよい水酸基（例、水酸基、メトキシ、エトキシ、プロポキシなど炭素数１−４のアルコキシ基など）、置換されていてもよいチオール基（例、メルカプト、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオなど炭素数１−４のアルキルチオなど）、置換されていてもよいアミノ基（例、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノなどの炭素数１−４のアルキルアミノ、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルプロピルアミノ、ジプロピルアミノなどの炭素数２−８のジアルキルアミノなど）、ハロゲン（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）等が挙げられ、これらの置換基を１ないし５個有していてもよく、２個以上を有する場合、置換基は同一でも異なっていてもよい。これらの置換基のなかで、水酸基が特に好ましい。
【００１７】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）で表される化合物またはその塩[以下、化合物（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）と略記することがある]の具体的化合物としては、例えば、６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、６’−Ｏ−ベンゾイルアルビフロリン、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリン、６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、ベンゾイル−オキシペオニフロリン、ガロイル−オキシペオニフロリン、３’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、４’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、４−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、トリガロイルグルコース、ペンタガロイルグルコースおよびテトラガロイルグルコース等が挙げられる。
【００１８】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）で表される化合物の塩としては、無機塩基塩あるいは有機塩基塩が挙げられ、該無機塩基塩を生成させうる無機塩基としてはアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウム等）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム）等が、該有機塩基塩を生成させうる有機塩基としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン等が挙げられる。
【００１９】
化合物（Ｉ）、（II）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）[以下、化合物（Ｉ）〜（ＩＶ）と略記することがある]が、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体を含有する場合には、これらも化合物（Ｉ）〜（IＶ）として含有されるとともに、自体公知の合成手法、分離手法によりそれぞれを単品として得ることができる。例えば、化合物（Ｉ）〜（IＶ）に光学異性体が存在する場合には、該化合物から分割された光学異性体も化合物（Ｉ）〜（IＶ）に包含される。該光学異性体は、自体公知の方法により製造することができる。
【００２０】
化合物（Ｉ）〜（IＶ）のプロドラッグとは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により、それぞれ化合物（Ｉ）〜（IＶ）に変換する化合物、すなわち酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして化合物（Ｉ）〜（IＶ）に変化する化合物、胃酸等により加水分解等を起こして化合物（Ｉ）〜（IＶ）に変化する化合物をいう。化合物（Ｉ）〜（IＶ）のプロドラッグとしては、例えば、化合物（Ｉ）〜（IＶ）の水酸基がアシル化、アルキル化、リン酸化またはホウ酸化された化合物［例、化合物（Ｉ）〜（IＶ）の水酸基がアセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、サクシニル化、フマリル化、アラニル化またはジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物］等が挙げられる。これらの化合物は、自体公知の方法によって化合物（Ｉ）〜（IＶ）から製造することができる。
【００２１】
化合物（I）〜（IＶ）は、シャクヤクの根を粉砕あるいは細断後、水、有機溶媒、またはその混合溶媒で抽出後、抽出液をカラムクロマトグラフィー等で分離精製して得られる。他方、化合物（I）〜（IＶ）は、市販のペオニフロリン、アルビフロリンまたはグルコースを、置換されていてもよいベンゾイル反応性誘導体で、それ自体公知の方法でアシル化しても得られる。置換されていてもよいベンゾイル反応性誘導体としては、例えば、酸ハライド（例、酸クロリド、酸ブロミド）、混合酸無水物（炭素数１−６アルキルカルボン酸または炭素数１−６アルキル炭酸との酸無水物）、活性エステル（例、ｐ−ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミドとのエステル）等が挙げられる。
【００２２】
シャクヤクの根からの抽出に用いられる溶媒としては、水、ならびにアルコール類、ケトン類、酢酸エステル類、エーテル類、ハロゲン系炭化水素および炭化水素類等の有機溶媒が用いられる。アルコール類としては、炭素数１−４のアルコール類が好ましく、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールおよびイソブタノール等が好ましい。ケトン類としては、アセトン、メチルエチルケトンが好ましく、酢酸エステル類としては、酢酸メチル、酢酸エチルが好ましく、エーテル類としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルが好ましく、ハロゲン系炭化水素としては、クロロホルム、ジクロロメタンが好ましく、炭化水素類としては、ヘキサン、トルエンが好ましい。これら溶媒は、単独でも２種類以上を混合して用いても良い。
【００２３】
本発明において、アンドロゲン受容体結合阻害剤とは、内在性、非内在性リガンドとアンドロゲン受容体との結合を妨害するものを意味し、その妨害の方法はいかなるものであってもよい。妨害方法としては、例えば、内在性リガンドの５α−ジヒドロテストステロン（５α−ＤＨＴ）がアンドロゲン受容体に結合するよりも先に阻害剤が結合することでアンドロゲン受容体に５α−ＤＨＴが結合できなくするなどが考えられ、具体的には、競合的拮抗薬、非競合的拮抗薬といったアンタゴニストが考えられる。結果として、アンドロゲンの過剰な分泌が軽減されるようであればよい。アンドロゲンの過剰な分泌を抑制することで、アンドロゲン依存性疾患の予防および／または治療ができるので、アンドロゲン受容体結合阻害剤は、アンドロゲン依存性疾患の予防および／または治療剤になり得る。
【００２４】
本発明のアンドロゲン受容体結合阻害剤は医薬組成物として、経口または非経口的に投与することができる。例えば、前立腺癌、前立腺肥大等の予防・治療剤として使用する場合には、経口的に投与する製剤が好ましく、経口製剤としては錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、内服液剤等の剤形が好ましい。また、例えば、多毛症、ニキビ（尋常性ざ瘡）、男性型脱毛症等の予防・治療として使用する場合には、非経口的に投与、特に外用剤が好ましく、具体的な外用剤の製剤例としては、エキス剤、硬膏剤、酒精剤、座剤、懸濁剤、チンキ剤、軟膏剤、パップ剤、ローション剤、エアゾール剤等を挙げることができる。これらの製剤は、患者の年齢、症状等に応じて適当量を患部などに塗布または噴霧などすればよい。また、シャンプー、リンス、コンディショナー、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド等の化粧料組成物に本発明のアンドロゲン受容体結合阻害剤を配合してもよい。
【００２５】
製剤化は、公知の製剤技術により行うことができ、製剤中には適当な製剤添加物を加えることができる。製剤添加物としては、賦形剤、懸濁化剤、乳化剤、保存剤および香料等を挙げることができる。
【００２６】
本発明のアンドロゲン受容体結合阻害剤の含有量は、投与対象、投与ルート、疾患などにより適宜選択することができる。例えば、製剤の形態によって相違するが、通常製剤全体に対して約０．０１〜１００重量％、好ましくは約０．１〜５０重量％程度である。本発明の医薬組成物における担体などの添加剤の含有量は、製剤の形態によって相違するが、通常製剤全体に対して約１〜９９重量％、好ましくは約１０〜９０重量％程度である。また、本発明のアンドロゲン受容体結合阻害剤の投与量は、投与対象、症状の軽重、年齢、性別、剤形、投与方法、投与期間等により異なるが、例えば、式（Ｉ）で表される化合物の成人に対する投与量としては、経口投与または非経口投与いずれの場合も、一日あたり約０．１〜約２０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．５ｍｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇである。
【実施例】
【００２７】
以下に、本発明を実施例に基づいて説明する。本発明は以下の実施例によってなんら限定されるものではなく、本発明の属する技術分野における通常の変更を加えて実施することが出来ることは言うまでもない。
【００２８】
実施例１（６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリンおよび６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンの単離）
乾燥したシャクヤク根（２００ｇ）を粉末化した後、熱水にて抽出した。抽出液を濃縮後ダイヤイオンＨＰ−２０（φ６５Ｘ４５ｍｍ）カラムクロマトグラフィーに付し、水、ＭｅＯＨ（２０〜１００％）にて分離・溶出した［Ｆｒ１（水）、Ｆｒ２（２０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ３（３０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ４（４０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ５（６０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ６（８０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ７（ＭｅＯＨ）］。Ｆｒ２〜５の画分を濃縮後、逆相ＯＤＳ（カラム：ｃｏｓｍｏｓｉｌ  １４０−Ｃ１８，φ３０Ｘ６５ｍｍ、溶出溶媒：ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝１０〜１００％）カラムクロマトグラフィーで精製し、続いて逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：３５％ａｑ．ＭｅＯＨ／０．１％ＨＣＯＯＨ）で７フラクションに分離・溶出した。第３フラクションを濃縮後、逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：３０％ａｑ．ＭｅＯＨ）で分離・精製すると、６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリンが淡黄褐色粉末として４．１ｍｇおよびペンタガロイルグルコースが淡黄褐色粉末として１２．７ｍｇ得られた。同様に上記第６フラクションを逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：１５％ａｑ．ＣＨ３ＣＮ）で分離・精製すると６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンが淡黄褐色粉末として２６．６ｍｇ得られた。上記Ｆｒ６，７を濃縮後、ダイヤイオンＨＰ−２０（φ１０Ｘ１３０ｍｍ）カラムクロマトグラフィーに付し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（６０−１００％）で溶出後、逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：５０％ａｑ．ＭｅＯＨ／０．１％ＨＣＯＯＨ）で分離・精製すると６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリンが白色粉末として３５．１ｍｇ得られた。
【００２９】
６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３３．１８０８６［（Ｍ＋Ｈ）＋，６３３．１８１４０  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３３Ｏ１５］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：１．８４（１Ｈ，ｄ，１５．６，Ｈ３ａ），１．９８（１Ｈ，ｄｄ，６．４，５．６，Ｈ３ｂ），４．０２（１Ｈ，ｄｄ，５．６，  ５．６，Ｈ４），２．８３（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），１．７５（１Ｈ，ｄ，１０．８，Ｈ７ａ），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，７．６，１０．８，Ｈ７ｂ），４．６２（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ａ），４．７２（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ｂ），１．３９（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），４．５１（１Ｈ，ｍ，Ｈ１’），３．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ２’），３．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ３’），３．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ４’），３．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ５’），４．４９  （２Ｈ，ｍ，Ｈ６’ａ  ａｎｄ  Ｈ６’ｂ），８．０６（２Ｈ，ｄ，７．６，Ｈ２’’  ａｎｄ  Ｈ６’’），７．４９（２Ｈ，ｄｄ，７．６，７．６，Ｈ３’’  ａｎｄ  Ｈ５’’），７．６１（１Ｈ，ｔ，７．６，Ｈ４’’），７．０９（２Ｈ，ｓ，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’）
【００３０】
【化８】
2009298766.tif 000009
【００３１】
ペンタガロイルグルコースの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ９３９．１１０５４［（Ｍ−Ｈ）−，９３９．１１０９０  ｆｏｒ  Ｃ４１Ｈ３１Ｏ２６］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：６．２４（１Ｈ，ｄ，８．４，Ｈ１），５．５９（１Ｈ，ｍ，Ｈ２），５．９１（１Ｈ，ｄｄ，９．６，９．６，Ｈ３），５．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ４），４．４１（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），４．４０（１Ｈ，ｍ，Ｈ６ａ），４．５１（１Ｈ，ｄ，１０．８，Ｈ６ｂ），７．１２，７．０８，７．０５，６．９８，６．９５  ａｎｄ  ６．９０（２ＨＸ５，ｓ，Ｈ２’  ａｎｄ  Ｈ６’  ｉｎ  ｇａｌｌｏｙｌ）．
【００３２】
【化９】
2009298766.tif 000010
【００３３】
６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５８３．１８２２１［（Ｍ−Ｈ）−，５８３．１８２１０  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３１Ｏ１２］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：１．７０（１Ｈ，ｍ，Ｈ３ａ），１．８４（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ３ｂ），２．５０（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），１．７０（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ａ），２．５０（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ｂ），４．７１（２Ｈ，ｓ，Ｈ８），５．３８（１Ｈ，ｓ，Ｈ９），１．２４（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），４．５７（１Ｈ，ｄ，８．０，Ｈ１’），３．２５（１Ｈ，ｄｄ，８．０，８．４，Ｈ２’），３．３５（２Ｈ，ｍ，Ｈ３’  ａｎｄ  Ｈ４’），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，７．２，７．２，Ｈ５’），４．５０（１Ｈ，ｄｄ，７．２，１１．６，Ｈ６’ａ），４．６５（１Ｈ，ｄｄ，２．４，１１．６，Ｈ６’ｂ），８．０３（４Ｈ，ｍ，Ｈ２’’，Ｈ６’’，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’），７．４８（４Ｈ，ｄｄ，６．８，７．２，Ｈ３’’，Ｈ５’’，Ｈ３’’’  ａｎｄ  Ｈ５’’’），７．６１（２Ｈ，ｔ，７．２，Ｈ４’’  ａｎｄ  Ｈ４’’’）.
【００３４】
【化１０】
2009298766.tif 000011
【００３５】
６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３１．１６６６８［（Ｍ−Ｈ）−，６３１．１６６８４  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３１Ｏ１５］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：１．７０（１Ｈ，ｍ，Ｈ３ａ），１．８４（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ３ｂ），２．５０（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），１．７０（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ａ），２．５０（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ｂ），４．７１（２Ｈ，ｓ，Ｈ８），５．３８（１Ｈ，ｓ，Ｈ９），１．２６（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），４．５７（１Ｈ，ｄ，８．０，Ｈ１’），３．２５（１Ｈ，ｄｄ，８．０，８．４，Ｈ２’），３．３５（２Ｈ，ｍ，Ｈ３’  ａｎｄ  Ｈ４’），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，７．２，７．２，Ｈ５’），４．５０（１Ｈ，ｄｄ  ７．２，１１．６，Ｈ６’ａ）  ４．６５（１Ｈ，ｄｄ，２．４，１１．６，Ｈ６’ｂ），８．０３（２Ｈ，ｄ，８．０，Ｈ２’’  ａｎｄ  Ｈ６’’），７．４８（２Ｈ，ｄｄ，７．２，８．０，Ｈ３’’’  ａｎｄ  Ｈ５’’），７．６１（１Ｈ，ｔ，７．２，Ｈ４’’），７．０８（２Ｈ，ｓ，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’）．
【００３６】
【化１１】
2009298766.tif 000012
【００３７】
実施例２（３’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンの単離）
乾燥したシャクヤク根（２００ｇ）を粉末化した後、熱水にて抽出した。抽出液を濃縮後ダイヤイオンＨＰ−２０（φ６５Ｘ４５ｍｍ）カラムクロマトグラフィーに付し、水、ＭｅＯＨ（２０〜１００％）にて分離・溶出した［Ｆｒ１（水）、Ｆｒ２（２０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ３（３０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ４（４０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ５（６０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ６（８０％ａｑ．ＭｅＯＨ）、Ｆｒ７（ＭｅＯＨ）］。Ｆｒ２〜５の画分を濃縮後、逆相ＯＤＳ（カラム：ｃｏｓｍｏｓｉｌ  １４０−Ｃ１８，φ３０Ｘ６５ｍｍ、溶出溶媒：ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝１０〜１００％）カラムクロマトグラフィーで精製し、続いて逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：３５％ａｑ．ＭｅＯＨ／０．１％ＨＣＯＯＨ）で７フラクションに分離・溶出した。第５フラクションを濃縮後、逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：２０％ａｑ．ＭｅＣＮ）で分離・精製すると、３’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンが淡黄褐色粉末として０．６ｍｇ得られた。
【００３８】
３’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３１．１６６１２［（Ｍ−Ｈ）−，６３１．１６６８４  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３１Ｏ１５］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：１．８１（１Ｈ，ｄ，１１．３，Ｈ３ａ），２．２０（１Ｈ，ｄ，１１．３，Ｈ３ｂ），２．５９（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），１．９８（１Ｈ，ｄ，９．０，Ｈ７ａ），２．５２（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ｂ），４．７５（２Ｈ，ｓ，Ｈ８），５．４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ９），１．４０（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），４．６７（１Ｈ，ｄ，７．６，Ｈ１’），３．４８（１Ｈ，ｄｄ，７．６，９．４，Ｈ２’）， ５．１１（１Ｈ，ｄｄ，９．４，９．４，Ｈ３’），３．５４（１Ｈ，ｄｄ，９．４，９．６，Ｈ４’），３．３８（１Ｈ，ｍ，Ｈ５’），３．６６（１Ｈ，ｄｄ  ５．９，１２．０，Ｈ６’ａ），３．８７  （１Ｈ，ｄｄ，１．７，１２．０，Ｈ６’ｂ），８．０６（２Ｈ，ｄ，７．４，Ｈ２’’  ａｎｄ  Ｈ６’’），７．４９（２Ｈ，ｄｄ，７．４，７．４，Ｈ３’’’  ａｎｄ  Ｈ５’’），７．６１（１Ｈ，ｔ，７．４，Ｈ４’’），７．１２（２Ｈ，ｓ，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’）
【００３９】
【化１３】
2009298766.tif 000013
【００４０】
実施例３（４’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンと４−ガロイルアルビフロリンの単離）
乾燥したシャクヤク根（２０００ｇ）をチップ化した後、５０％アセトンにて抽出した。抽出液を濃縮後、水と酢酸エチルで分配した。酢酸エチル相を濃縮後、セファデックスＬＨ−２０（φ２０Ｘ４２０ｍｍ）カラムクロマトグラフィーに付し、ＭｅＯＨにて分離・溶出した［Ｆｒ１〜Ｆｒ７］。Ｆｒ２の画分を濃縮後、逆相ＯＤＳ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  １４０−Ｃ１８，φ３０Ｘ７０ｍｍ、溶出溶媒：ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝１０〜１００％）カラムクロマトグラフィーで精製し、続いて逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：２０％ａｑ．ＭｅＣＮ）で２０フラクションに分離・溶出した。第１３フラクションを濃縮後、逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：１５％ａｑ．ＭｅＣＮ）で二回分離・精製すると、４’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンが淡黄褐色粉末として６．８ｍｇ得られた。同様に、上記第１５フラクションを濃縮後、逆相分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ、φ２０Ｘ２５０ｍｍ；溶出溶媒：１５％ａｑ．ＭｅＣＮ）で分離・精製すると、４−Ｏ−ガロイルアルビフロリンが淡黄褐色粉末として５．４ｍｇ得られた。
【００４１】
４’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３１．１６６４１［（Ｍ−Ｈ）−，６３１．１６６８４  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３１Ｏ１５］；１Ｈ−ＮＭＲ（Ｃ５Ｄ５Ｎ）：２．３０（１Ｈ，ｄ，１２．５，Ｈ３ａ），２．４８（１Ｈ，ｄ，１２．５，Ｈ３ｂ），３．０９（１Ｈ，ｄ，５．４，Ｈ５），２．３６（１Ｈ，ｄ，１０．７，Ｈ７ａ），２．９７（１Ｈ，ｍ，Ｈ７ｂ），５．１１（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ａ），５．２８（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ｂ），５．９５（１Ｈ，ｓ，Ｈ９），１．６５（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），５．１７（１Ｈ，ｄ，７．６，Ｈ１’），４．０８（１Ｈ，ｍ，Ｈ２’），４．３３（１Ｈ，ｄｄ，９．０，９．２，Ｈ３’），５．７９（１Ｈ，ｄｄ，９．２，９．６，Ｈ４’），３．９９（１Ｈ，ｍ，Ｈ５’），４．１０（１Ｈ，ｍ，Ｈ６’ａ），４．２１（１Ｈ，ｄ，１２．１，Ｈ６’ｂ），８．１３（２Ｈ，ｄ，７．６，Ｈ２’’  ａｎｄ  Ｈ６’’），７．３１（２Ｈ，ｄｄ，７．２，７．６，Ｈ３’’  ａｎｄ  Ｈ５’’），７．４９（１Ｈ，ｔ，７．２，Ｈ４’’），７．２０（２Ｈ，ｓ，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’）
【００４２】
【化１４】
2009298766.tif 000014
【００４３】
４−Ｏ−ガロイルアルビフロリンの物理化学的分析データ：ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３１．１６６８１［（Ｍ−Ｈ）−，６３１．１６６８４  ｆｏｒ  Ｃ３０Ｈ３１Ｏ１５］；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：２．２１（１Ｈ，ｄ，１６．０，Ｈ３ａ），２．６８（１Ｈ，ｄｄ，７．０，１６．０，Ｈ３ｂ），５．４４（１Ｈ，ｍ，Ｈ４），３．１９（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），２．２２（１Ｈ，ｄ，１１．１，Ｈ７ａ），２．９２（１Ｈ，ｄｄ，８．０，１１．１，Ｈ７ｂ），４．６８（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ａ），４．７９（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ８ｂ），１．５８（３Ｈ，ｓ，Ｈ１０），４．５５（１Ｈ，ｄ，７．７，Ｈ１’），３．２３（１Ｈ，ｍ，Ｈ２’），３．３３（１Ｈ，ｍ，Ｈ３’），３．２５（１Ｈ，ｍ，Ｈ４’），３．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ５’），３．６２（１Ｈ，ｄｄ，５．９，１２．０，Ｈ６’ａ），３．８７（１Ｈ，ｄ，１２．０，Ｈ６’ｂ），７．９０（２Ｈ，ｄ，７．３，Ｈ２’’  ａｎｄ  Ｈ６’’），７．３３（２Ｈ，ｄｄ，７．３，７．４，Ｈ３’’  ａｎｄ  Ｈ５’’），７．５３（１Ｈ，ｔ，７．４，Ｈ４’’），７．０５（２Ｈ，ｓ，Ｈ２’’’  ａｎｄ  Ｈ６’’’）
【００４４】
【化１５】
2009298766.tif 000015
【００４５】
実施例４（アンドロゲン受容体結合活性試験）
（１）試験方法
６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリン、６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、ペオニフロリンおよびアルビフロリンのアンドロゲン受容体（ＡＲ）結合活性を以下のようにして測定した。本アッセイは、３Ｈ−ミボレロン（Ｍｉｂｏｌｅｒｏｎｅ；標準リガンド）のＡＲへの結合を測定した。Ｐａｎｖｅｒａ社（カタログ番号Ｐ２７９）から購入したラットＡＲ組成物は、通常の方法を用いてｐＨ７．４リン酸緩衝液中で調製した。ラットＡＲ（７８ｎｇ）を１．５ｎＭ３Ｈ−ミボレロンと試験サンプル（各試験サンプル１２０，６０，３０，１５，７．５および３．８μｇ／ｍＬ）といっしょに４℃４時間インキュベーションした。非特異的結合量は１０μＭミボレロン存在下で測定した。各反応混合物はハイドロキシアパタイトスラリーと１５分間インキュベートした後ろ過した。フィルターを３回洗浄した後、ＡＲに特異的に結合した３Ｈ−ミボレロンのラベルカウントをＭｉｃｒｏｂｅｔａ  Ｔｒｉｌｕｘ  １４５０  シンチレーションカウンター  （Ｗａｌｌａｃ社）を用いて測定し、各試験サンプルのＡＲ結合活性を下式より算出した。結果を図１に示す。
【００４６】
【数１】
2009298766.tif 000016
【００４７】
（２）試験結果
図１に示すごとく、６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコースは強いＡＲ結合活性を示し、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリンおよび６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンもペオニフロリンやアルビフロリンよりも強い活性を示した。
【００４８】
実施例５（前立腺癌細胞の増殖抑制試験）
（１）試験方法
６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリン、６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、ペオニフロリンおよびアルビフロリンのアンドロゲン感受性ヒト前立腺癌細胞のＬＮＣａＰ−ＦＧＣ細胞（ＡＴＣＣより購入）にて増殖抑制活性を調べた。ＬＮＣａＰ−ＦＧＣ細胞（２．５Ｘ１０３／ウェル；１０％ＦＢＳを添加した９０％ＲＰＭＩ−１６４０培地中）を９６ウエルプレート上で、５％ＣＯ２雰囲気中、３７℃２４時間プレインキュベーションした。各ウェルに試験サンプルおよび／またはベヒクル（コントロール）を最終濃度が０．４％ＤＭＳＯ／ＤＷになるようにＦＢＳ添加ＲＰＭＩ−１６４０培地中に加えて、さらに７２時間反応した。試験サンプルは各々、２００，１６０，１２０，１００，８０，６０，４０および２０μｇ／ｍＬを用いた。インキュベーション終了後アラマールブルー（Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ）を各ウェルに添加し、さらに６時間インキュベーションした後、蛍光強度（励起波長５３０ｎｍ、蛍光波長５９０ｎｍ）をスペクトルフロー  プラス  プレイトリーダーで測定することにより、各ウェル中の細胞数を測定し、ベヒクル（コントロール）の蛍光強度と比較して細胞増殖抑制活性を算出した。なお、結果は図２に示す
【００４９】
（２）試験結果
図２より、６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリンおよび６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンは、ペオニフロリンおよびアルビフロリンより強い前立腺癌細胞増殖抑制作用を示した。また、この結果から、これら化合物のアンドロゲン受容体結合活性は、受容体アンタゴニスト活性であることが判明した。
【００５０】
実施例６
実施例３と同様にして、３’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンのＡＲ結合活性を調べた結果、１２０μｇ／ｍＬで２０％のＡＲ結合活性を示した。
【００５１】
実施例７
実施例３と同様にして、４’−Ｏ−ガロイルペオニフロリンおよび４−Ｏ−ガロイルアルビフロリンのＡＲ結合活性を調べた結果、それぞれ１００μｇ／ｍＬで２２％、５０μｇ／ｍＬで１８％の結合活性を示した。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明により、シャクヤク成分で、アンドロゲン受容体結合阻害活性を示すガロイル基またはベンゾイル基で置換されたアルビフロリンまたはペオニフロリン誘導体、ペンタガロイルグルコース、およびアンドロゲン受容体結合阻害活性を有する新規化合物、ならびにこれらアンドロゲン受容体結合阻害剤を含有する前立腺肥大、前立腺癌、多毛症、男性型脱毛症、にきび（尋常性ざ瘡）の治療・予防剤が提供された。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリン、６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、ペオニフロリンおよびアルビフロリンのアンドロゲン受容体（ＡＲ）結合活性を示す。
【図２】６’−Ｏ−ガロイルアルビフロリン、ペンタガロイルグルコース、６’−Ｏ−ベンゾイルペオニフロリン、６’−Ｏ−ガロイルペオニフロリン、ペオニフロリンおよびアルビフロリンのヒト前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ−ＦＧＣ）の増殖抑制活性を示す。
【図１】
2009298766.tif 000026
【図２】
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