(57)【要約】【課題】  安全な細菌性リパーゼ阻害剤を提供することを目的とする。【解決手段】  ボイセンベリー（Ｒｕｂｕｓ  ｓｐ．  Ｈｙｄｒｉｄ “Ｂｏｙｓｅｎ”）を含む細菌性リパーゼ阻害剤。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載の細菌性リパーゼ阻害剤を含むニキビ用皮膚外用剤。
【請求項３】
請求項１に記載の細菌性リパーゼ阻害剤を含むフケ用皮膚外用剤。
【請求項４】
請求項１に記載の細菌性リパーゼ阻害剤を含む化粧料。
【請求項５】
請求項１に記載の細菌性リパーゼ阻害剤を含む食品。
【請求項６】
請求項１に記載の細菌性リパーゼ阻害剤を含む医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リパーゼ阻害剤に関する。特に、医薬品、化粧品、食品などに用いられるリパーゼ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
人体における細菌性リパーゼには毛包内に常在する、プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）、ピティロスポラム・オバール（Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏｒｕｍ ｏｖａｌｅ）、マイクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）などの産生するリパーゼが知られており、これらのリパーゼが皮脂中に含まれるトリグリセライドを分解し遊離脂肪酸を産生する。この遊離脂肪酸は、皮膚に対して刺激性の炎症反応を引き起こし、ニキビ、皮膚炎、フケなどの要因となると考えられている。
【０００３】
特にニキビの原因とされるプロピオニバクテリウム・アクネスの菌数と産生する遊離脂肪酸には相関関係があり、遊離脂肪酸が毛包壁に対して、刺激性の炎症反応とそれに伴う過角化、コメドの形成を引き起こすと考えられている。（非特許文献１参照）
【０００４】
２−Ｐｙｒｉｄｙｌｍｅｔｈｙｌ−２−（ｐ−（２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｙｌ）−ｐｈｅｎｙｌ）ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ（慣用名：イブプロフェンピコノール）を有効成分とするリパーゼ阻害剤が知られている。（非特許文献２参照）また、カドミウム、コバルト、亜鉛、鉄等の金属塩の最小抑制濃度をリパーゼ抑制剤としてオムツに適用することによる、オムツかぶれおよび皮膚炎を治療する方法が知られている。（特許文献１参照）しかし、かかる方法は開発途上であり、局所適用による安全性にも問題があった。
【特許文献１】特開昭５９−１８６９１９号公報
【非特許文献１】McGinley, K, J. et.al., J. Clin. Microbiol. 12:672-675, 1980
【非特許文献２】西日皮膚、47巻、5号、888〜898、899〜908頁（1985年）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、リパーゼ阻害作用を有する、安全な細菌性リパーゼ阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、上記課題を解決するためになされたものである。すなわち、本発明は、一実施の形態によれば、ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤である。本発明の細菌性リパーゼ阻害剤は、ボイセンベリーを含むことにより、細菌性リパーゼ阻害効果を有する。
【０００７】
本発明は、別の実施の形態によれば、上記ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤を含むニキビ用皮膚外用剤である。本発明のニキビ用皮膚外用剤は、細菌性リパーゼ阻害効果を有し、ニキビの症状を改善することができる。
【０００８】
本発明は、また別の実施の形態によれば、上記ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤を含むフケ用皮膚外用剤である。本発明のフケ用皮膚外用剤は、細菌性リパーゼ阻害効果を有し、フケの症状を改善することができる。
【０００９】
本発明は、また別の実施の形態によれば、上記ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤を含む化粧料である。本発明の化粧料は、細菌性リパーゼ阻害効果を有するものである。
【００１０】
本発明は、また別の実施の形態によれば、上記ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤を含む食品である。本発明の食品は、細菌性リパーゼ阻害効果を有するものである。
【００１１】
本発明は、また別の実施の形態によれば、上記ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤を含む医薬品である。本発明の医薬品は、細菌性リパーゼ阻害効果を有するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の効果として、安全な細菌性リパーゼ阻害剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
ボイセンベリー（ＢｏｙｓｅｎＢｅｒｒｙ）は、学名を「Ｒｕｂｕｓ  ｓｐ．  Ｈｙｄｒｉｄ “Ｂｏｙｓｅｎ”」といい、バラ科キイチゴ属に属するベリーフルーツである。ボイセンベリーは、アメリカ合衆国が原産地であるが現在はニュージーランドが世界一の生産国、輸出国となっている。ボイセンベリーの果実は、食用に用いられるほか、保湿剤、美白剤としての効果も知られている。（特開２００２−３２２０７７号公報）
【００１４】
本発明者らは、このボイセンベリーの果実が、細菌性リパーゼの阻害活性を有することを発見し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、一実施の形態によれば、ボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤である。
【００１５】
ボイセンベリーの使用する部分は、特には、果実、または果実に由来する成分である。したがって、ボイセンベリーを含む、とはボイセンベリーの果実または果実に由来する成分を含むことをいう。ボイセンベリーの果実または果実に由来する成分としては、種を除いた皮と実からの抽出物、果実を生のまま凍結乾燥した凍結乾燥物、もしくは凍結乾燥物を粉末にしたボイセンベリー凍結乾燥粉末からの抽出物、または果実を絞ることにより得られる果汁もしくは果汁の濃縮・乾固物が挙げられる。抽出操作をせずに、ボイセンベリー果実の凍結乾燥物もしくは凍結乾燥粉末を細菌性リパーゼ阻害剤に含ませることもできる。しかし、本発明の実施態様によれば、これらの形態に限定されることはなく、ボイセンベリーの果実または果実に由来する成分が含まれる細菌性リパーゼ阻害剤であればよい。
【００１６】
ボイセンベリーの果実抽出物を得るための抽出方法としては、ボイセンベリーの果実を、生のままで抽出することができ、もしくは細切・乾燥・粉砕等の処理後に抽出することができる。抽出は、生の果実もしくは処理後の果実を抽出溶媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるために、抽出溶媒の撹拌を行ったり、抽出溶媒中でホモジナイズしたりしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒沸点以下の温度とするのが好ましい。抽出時間は、溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが好ましい。
【００１７】
抽出溶媒は、水、熱水（８０℃以上に加熱した水）、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン、エチルエーテル、プロピルエーテル、酢酸エチル、酢酸ブチル、アセトン、エチルメチルケトン、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水からなる群より選択される、１種もしくは２種以上であってよい。
【００１８】
ボイセンベリーの上記溶媒による抽出物は、溶媒に溶解した状態で細菌性リパーゼ阻害剤とすることもできるが、抽出溶液を濃縮・乾固して粉末状にして細菌性リパーゼ阻害剤とすることもできる。また、濃縮・乾固物を水や極性溶媒に再度溶解したり、或いは細菌性リパーゼ阻害作用を損なわない範囲で脱色、脱臭、脱塩の精製処理を行ったり、カラムクログラフィーによる分画抽出をおこなったりした後に用いてもよい。
【００１９】
ボイセンベリーの抽出物及び抽出画分は、そのままでも細菌性リパーゼ阻害剤とすることができるが、前記抽出物及び抽出画分物より１種又は２種以上を選択し、精製水や低級アルコール水溶液、緩衝液などの水性担体、乳濁状担体、ゲル状担体、クリームなどのペースト状担体、粉末状担体に含有させて細菌性リパーゼ阻害剤とすることもできる。
【００２０】
本実施形態によるリパーゼ阻害剤により機能が阻害される細菌性リパーゼの例としては、マラセチア属（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｓｐ．）、例えばマラセチア・フルフル（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｆｕｒｆｕｒ）、マイクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）、ピティロスポラム・オバール（Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏｒｕｍ ｏｖａｌｅ）、及びムーコル・ミーヘイ（Ｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）、カンジダ・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ ｒｕｇｏｓａ）、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）、リゾープス・ニベウス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｎｉｖｅｕｓ）、リゾープス・デレマー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｄｅｌｅｍａｒ）由来のリパーゼが挙げられるが、これらには限定されない。
【００２１】
本実施形態によるボイセンベリーを含む細菌性リパーゼ阻害剤によれば、細菌性リパーゼ阻害効果を達成することができる。この効果は、細菌性リパーゼに起因する症状を改善できる程度に十分なものである。また、食用のボイセンベリーによりかかる効果を達成できることで、安全性を兼ね備えた細菌性リパーゼ阻害剤を提供することができる。
【００２２】
本発明は、別の実施の形態によれば、上記実施の形態に係る細菌性リパーゼ阻害剤を含む、ニキビ用皮膚外用剤である。ニキビ用皮膚外用剤は、上記細菌性リパーゼ阻害剤を含み、そのほかに、通常の外用剤に含まれる担体等の成分を含んでもよい。
【００２３】
本発明は、また別の実施の形態によれば、上記実施の形態に係る細菌性リパーゼ阻害剤を含む、フケ用皮膚外用剤である。フケ用皮膚外用剤は、上記細菌性リパーゼ阻害剤を含み、そのほかに、通常の外用剤に含まれる担体等の成分を含んでもよい。
【００２４】
上記ニキビ用皮膚外用剤、またはフケ用皮膚外用剤において、細菌性リパーゼ阻害剤は、上記細菌性リパーゼ阻害剤の１種又は２種以上であってもよい。また、上記リパーゼ阻害剤が、各外用剤中に、ボイセンベリーの濃度が０．０００１〜１０重量％となるように含まれていることが好ましい。ボイセンベリーの濃度が０．０００１重量％未満だと、リパーゼ阻害効果が乏しく、１０重量％より多いと、香り、着色に起因する問題が生じる場合があるためである。ここでのボイセンベリーの濃度とは、ボイセンベリー抽出物を用いる場合には、抽出に用いたボイセンベリー果実の乾燥物重量の、外用剤全体の重量に対する濃度（重量％）を表す。抽出操作をすることなく、ボイセンベリー乾燥物を用いる場合には、用いた乾燥物の外用剤全体の重量に対する濃度（重量％）を表す。抽出操作をすることなく、ボイセンベリーの生の果実や、ボイセンベリー果汁を用いてリパーゼ阻害剤を調製する場合には、凍結乾燥物１ｇが、生の果実約７ｇ分、果汁約６ｇ分に相当するので、これを基準に計算して凍結乾燥物と同じ濃度になるように調節することができる。
【００２５】
本実施形態によるニキビ用皮膚外用剤によれば、ニキビの症状を改善することができる。また、本実施形態によるフケ用皮膚外用剤によれば、フケの症状を改善することができる。
【００２６】
本発明のまた別の実施の形態によれば、上記実施の形態に係る細菌性リパーゼ阻害剤を含む、化粧料、医薬品、食品である。これらは、上記実施の形態に係る細菌性リパーゼ阻害剤を、軟膏、クリーム、ジェル、洗顔フォームなどの通常医薬品または医薬部外品、化粧水、乳液、クリーム、美容液、洗顔クリームなどの化粧品、洗浄料、食品に配合したものである。
【００２７】
細菌性リパーゼ阻害剤を含む化粧料、医薬品は、油脂、保湿剤、粉体、色素、乳化剤、可溶化系、クリーム、乳液などの乳化系、カラミンローション等の分散系、また噴射剤と共に充填したエアゾールの剤型、化粧用パックの形態をとることができる。かかる実施形態によれば、細菌性リパーゼに関連する症状を緩和し、改善することができる化粧品、医薬品を提供することができる。また、特に、細菌性リパーゼ阻害効果に安全性を兼ね備えた化粧品、医薬品を提供することができる。また、ボイセンベリーの脱色、脱臭操作を行わない場合には、ボイセンベリー果実に由来する鮮やかな色彩や、強い香りを利用して、合成色素や着色香料を使用せずに製品を製造することができるという利点もある。
【００２８】
細菌性リパーゼ阻害剤を含む食品としては、具体的には、サプリメント、クッキーなどの菓子、清涼飲料などの飲料などが挙げられる。かかる実施形態によれば、細菌性リパーゼに関連する症状を緩和し、改善することができる食品を提供することができる。本実施形態では、特にリパーゼ阻害剤を経口摂取することができる。また、細菌性リパーゼ阻害剤に含まれるボイセンベリーは、ビタミンＡ、カロテン、ナイアシン、ビタミンＣなどをバランスよく含み、葉酸を多く含むことから、上記細菌性リパーゼ阻害機能に加えて、栄養的にバランスのいい食品とすることができる。さらには、ボイセンベリーは、他のベリーや果実類と比較して際立って食物繊維の含有量が多いことから、食品に含ませるボイセンベリーの調製態様によっては、食物繊維供給源食品としての機能をも併せもったものとすることができる。
【実施例１】
【００２９】
本発明の実施の形態に係る細菌性リパーゼ阻害剤のリパーゼ阻害効果を試験した。
表１に示す試験品粉末を室温にて精製水で５日間浸漬したものを細菌性リパーゼ阻害剤として使用した。なお、抽出後に残渣が生じるものに関しては、残渣は使用しなかった。
【００３０】
【表１】
2009120490.tif 000002
【００３１】
［試験方法］
表１に示した実施例１−１、１−２及び比較例１−１〜１−３のリパーゼ阻害剤について、リパーゼ活性阻害効果を評価した。リパーゼ阻害効果の評価は、脱エステル化することにより蛍光を発する４−メチルウンベリフォリオレエート（Ｓｉｇｍａ社製）に、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ由来リパーゼ（Ｓｉｇｍａ社製  ＥＣ  ３．１．１．３）を作用させ、生成した蛍光性を有する４−メチルウンベリフェロンを蛍光強度計にて定量する事により行った。
【００３２】
詳細には、９６穴マイクロプレートにＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ由来リパーゼ溶液を最終濃度で１０ｕｎｉｔ／ｍＬになるように調整した。このリパーゼ溶液に、各実施例及び比較例のリパーゼ阻害剤を最終濃度で１ｍｇ／ｍＬ（抽出物の場合は使用した粉末の重量％濃度換算）になるように添加した。さらに４−メチルウンベリフェリルオレエートを１００μＭになるように添加した。暗所で、３７℃で１５分間反応させ、分解して得られた４−メチルウンベリフェロンを、蛍光強度計（励起波長：３２０ｎｍ、蛍光波長：４５０ｎｍ）で測定した。
【００３３】
微生物リパーゼ活性阻害効果は、４−メチルウンベリフェリルオレエートとＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ由来リパーゼのみで反応させた場合（コントロール）に生成した４−メチルウンベリフェロン量を１００とした、実施例及び比較例の各リパーゼ阻害剤を添加した場合（サンプル）に生成した４−メチルウンベリフェロン量の割合を、以下の式にしたがって、阻害率（％）にて表した。
阻害率（％）＝{1-(Es-Esblank)/(Ec-Ecblank)×100}
Es：サンプルの蛍光強度
Esblank：サンプルブランクの蛍光強度
Ec：コントロールの蛍光強度
Ecblank：コントロールブランクの蛍光強度
【００３４】
結果を表２に示す。表２からわかるように、本発明品にかかるボイセンベリーを含むリパーゼ阻害剤は高いリパーゼ活性を示しており、皮膚常在菌が産生するリパーゼによる皮脂の分解を抑制し、遊離されてきた脂肪酸に起因する皮膚疾患を抑制する事が期待できる。      
【００３５】
【表２】
2009120490.tif 000003
【実施例２】
【００３６】
［ニキビ改善の有効性評価］
次に皮膚外用剤としての実施例及び比較例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
実施例２及び比較例２の皮膚外用剤を、表３に示す処方に従い、常法によって製造した。ボイセンベリー１は、実施例１で使用したのと同じ製品を用い、抽出操作をすることなく凍結乾燥粉末を外用剤に添加した。表中の各数値は、皮膚外用剤全体の重量に対する各成分の重量％を示す。
【００３７】
２２歳から４０歳のニキビを有する男女２０名を試験のパネラーとした。化粧石鹸を用いて顔面をよく洗浄したあと、患部に、２０名中１０名は実施例２の皮膚外用剤を、他の１０名は比較例２の皮膚外用剤を、１日に２〜３回塗布した。４週間後に患部の観察を行い、以下の基準で評価した。
【００３８】
外用剤によるニキビ改善への有効性は、以下の三段階で評価した。
Ａ：１０名中、症状が改善された者が８名以上
Ｂ：１０名中、症状が改善された者が５〜７名
Ｃ：１０名中、症状が改善された者が４名以下
【００３９】
有効性の評価結果を、処方と合わせて表３に示す。表３から、ボイセンベリーを含む本発明の皮膚外用剤は、ボイセンベリーを添加しない皮膚外用剤と比較して、ニキビ改善効果が高いことがわかった。
【００４０】
【表３】
2009120490.tif 000004
【実施例３】
【００４１】
さらに、以下に本発明の実施例として、リパーゼ阻害剤の処方の実施例を示す。以下の処方例は本発明を限定するものではない。本実施例においてボイセンベリー１は、実施例１で使用したのと同じ製品を用い、抽出操作をすることなく凍結乾燥粉末をそれぞれの処方に添加した。
【００４２】
［実施例３−１］リパーゼ阻害用化粧水
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ０．１０
（２）Ｌ−アルギニン                              ２．００
（３）濃グリセリン                                ５．００
（４）１，３−ブチレングリコール                  ５．００
（５）キサンタンガム                              ０．０５
（６）ヒアルロン酸ナトリウム                      ０．０１
（７）防腐剤                                          適量
（８）精製水                                  残余／１００
【００４３】
［実施例３−２］リパーゼ阻害用乳液
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ０．１０
（２）トリオクタン酸グリセリル                    ３．００
（３）ホホバ油                                    １．００
（４）オリブ油                                    １．００
（５）メチルポリシロキサン                        ０．１０
（６）ＰＯＥ２０                                  １．５０
（７）ソルビタンモノオレエート                    １．５０
（８）Ｌ−アルギニン                              ２．００
（９）Ｌ−セリン                                  ０．５０
（１０）ピロリドンカルボン酸ナトリウム            ０．１０
（１１）ポリビニルピロリドン                      ０．０５
（１２）防腐剤                                        適量
（１３）精製水                                残余／１００
【００４４】
［実施例３−３］リパーゼ阻害用クリーム
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ０．１０
（２）ベヘニルアルコール                          ２．００
（３）トリオクタン酸グリセリル                    ３．００
（４）ホホバ油                                    １．００
（５）オリブ油                                    １．００
（６）メチルポリシキロサン                        ０．１０
（７）ＰＯＥ２０                                  ２．５０
（８）ＰＯＥ８０                                  ０．５０
（９）Ｌ−アルギニン                              ２．００
（１０）Ｌ−セリン                                ０．５０
（１１）ピロリドンカルボン酸ナトリウム            ０．１０
（１２）カルボキシビニルポリマー                  ０．０５
（１３）水酸化カリウム                            ０．０１
（１４）防腐剤                                        適量
（１５）精製水                                残余／１００
【００４５】
［実施例３−４］リパーゼ阻害用美容液
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ０．１０
（２）カルボキシビニルポリマー（２％水溶液）    １０．００
（３）カルボキシエチルセルロース                  ３．００
（４）グリセリン                                １０．００
（５）植物抽出液                                  ０．５０
（６）トリエタノールアミン                        ０．１５
（７）クインシード液（１％水溶液）              １０．００
（８）ヒアルロン酸ナトリウム液（１％水溶液）      ４．００
（９）Ｌ−アルギニン                              ２．００
（１０）防腐剤                                        適量
（１１）精製水                                残余／１００
【００４６】
［実施例３−５］リパーゼ阻害用洗顔クリーム
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー  １                          ０．１０
（２）ステアリン酸                                ４．００
（３）ヤシ油脂肪酸                                ８．００
（４）水酸化カリウム                              ０．２０
（５）１，３−ブチレングリコール                  ３．００
（６）濃グリセリン                                ５．００
（７）ジステアリン酸ジエチルグリコール            １．００
（８）Ｌ−アルギニン                              ２．００
（９）エデト酸二ナトリウム                        ０．０５
（１０）防腐剤                                        適量
（１１）精製水                                残余／１００
【００４７】
［実施例３−６］リパーゼ阻害用飲料
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ４．００
（２）砂糖                                        ７．００
（３）乳酸カルシウム                              ０．１８
（４）クエン酸三ナトリウム                        ０．１３
（５）水                                      残余／１００
【００４８】
［実施例３−７］リパーゼ阻害用ゼリー
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                            ４．００
（２）クエン酸ナトリウム・２水和物                ０．４０
（３）クエン酸・１水和物                          ０．７４
（４）ペクチン                                    ２．００
（５）砂糖                                      ４０．００
（６）水あめ                                    ３０．００
（７）水                                      残余／１００
【００４９】
［実施例３−８］リパーゼ阻害用クッキー
成分                                              重量（ｇ）
（１）ボイセンベリー１                              ２．０
（２）油脂                                      ２５０．０
（３）砂糖                                      ２００．０
（４）卵                                          ５０．０
（５）薄力粉                                    ３５０．０
【００５０】
［実施例３−９］リパーゼ阻害用軟膏
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                              １．５
（２）イソプロピルメチルフェノール                  ０．３
（３）ステアリン酸                                １２．５
（４）ソルビタン・モノステアレート                １０．０
（５）ポリソルベート６０                            ６．０
（７）防腐剤                                          適量
（８）精製水                                  残余／１００
【００５１】
［実施例３−１０］リパーゼ阻害用ヘアリキッド
成分                                                重量％
（１）ボイセンベリー１                              ０．１
（２）ＰＥＧ−２０  水添ヒマシ油                    １．６
（３）コポリマー                                    ３．０
（４）グリセリン                                    ５．０
（５）エタノール                                  ４０．０
（６）精製水                                  残余／１００
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明の活用例として、化粧品、医薬品、食品等が挙げられる。