(57)【要約】【課題】アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物及び該化合物を配合した生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を提供する。【解決手段】下記式にて表される化合物及び該化合物を配合してなる生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。2009120591.tif 000015式中、Ｒ１は放射性ハロゲン置換基、ｍは１〜４の整数である。本化合物は、生体組織に沈着したアミロイドへの親和性を有すると共に、正常組織からの良好なクリアランスを有している。本発明により、生体内における良好なアミロイド描出能を有する、新規なアミロイド親和性化合物及び生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を得ることが可能となった。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
【化１】
2009120591.tif 000012
（式中、Ｒ１は放射性ハロゲン置換基、ｍは１〜４の整数である。）で表されることを特徴とする、化合物並びにその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンである、請求項１記載の化合物並びにその塩。
【請求項３】
下記式（２）：
【化２】
2009120591.tif 000013
（式中、Ｒ２は非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基、ｍは１〜４の整数である。）で表される、化合物並びにその塩。
【請求項４】
下記式（１）：
【化３】
2009120591.tif 000014
（式中、Ｒ１は放射性ハロゲン置換基、ｍは１〜４の整数である。）で表されること化合物並びにその塩を配合してなる、生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。
【請求項５】
Ｒ１が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンである、請求項４記載の生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は頭部変性疾患の診断に用いる化合物に関する。より詳しくは、アルツハイマー病を初めとするアミロイドが蓄積する疾患の診断において、病巣部位におけるアミロイドの検出に有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミロイドと呼ばれる繊維状蛋白質が体内の種々の器官あるいは組織に沈着することにより発症する疾患は、アミロイドーシスと総称されている。アミロイドーシスに共通しているのはアミロイドと呼ばれるβシート構造に富んだ繊維状蛋白質が全身の諸臓器あるいは局所に沈着し、その臓器や組織における機能異常を生じる点である。
【０００３】
アミロイドーシスの代表的疾患であるアルツハイマー病（以下、ＡＤという）は、認知症の原因となる疾患として知られている。この病気は、漸次進行性にアミロイドが脳に沈着して死に至る疾患であるため、他のアミロイドーシスと比較しても社会的関心の高い疾患であるといえる。近年、先進各国では社会の高齢化に伴いＡＤ患者数が急激に増加しており、社会的な問題となっている。
【０００４】
病理組織学的見地によると、ＡＤは、老人斑（senile plaques）の出現、神経原繊維変化（neurofibrillary
tangles）及び広範な神経脱落の３つの脳内病理所見によって特徴付けられる。老人斑はアミロイドを主要構成成分とする構造物であり、ＡＤ発症における最初期、すなわち臨床症状が出現する１０年以上前に出現する脳内の病理所見とされる。
【０００５】
ＡＤの診断は、ＣＴ及びＭＲＩ等の画像診断を補助的に組み合わせた上で、種々の認知機能評価（例えば、長谷川式スケール、ADAS-JCog、MMSE等）を行うことにより実施されている。しかし、このような認知機能評価に基づく方法は、発症初期における診断感度が低く、さらに、各個人が生来有する認識機能により診断結果が影響を受けやすいという欠点がある。また、確定診断には疾患部の生検が不可欠であるため、患者の存命中にＡＤの確定診断を行うことは、現状では事実上不可能である（非特許文献１）。
【０００６】
一方、老人斑を構成するアミロイドはアミロイドβ蛋白質（以下、Ａβという）の凝集体であることが報告されており、さらにＡβの凝集体がβシート構造をとることで神経細胞毒性を示すことが多くの研究より報告されている。これらの知見に基づき、Ａβの脳内への沈着が引き金となり、その下流の現象として神経原繊維変化の形成及び神経脱落が起こるとする、いわゆる「アミロイドカスケード仮説」が提唱されている（非特許文献２）。
【０００７】
このような事実に基づき、近年、アミロイドに高い親和性を有する化合物をマーカーとして用い、ＡＤをインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で検出する試みがなされている。
このような脳内アミロイド画像診断用プローブの多くは、アミロイドに対する親和性が高く、かつ脳移行性の高い疎水性の低分子化合物を、種々の放射性核種、例えば１１Ｃ、１８Ｆ及び１２３Ｉ等で標識した化合物である。具体例として、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、ＴＺＤＭという）や６−ヒドロキシ−２−［４’−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、６−ＯＨ−ＢＴＡ−１という）を始めとする種々のチオフラビン誘導体（特許文献１、非特許文献３）、（Ｅ）−４−メチルアミノ−４’―ヒドロキシスチルベン（以下、ＳＢ−１３という）や（Ｅ）−４−ジメチルアミノ−４’―ヨードスチルベン（以下、ｍ−Ｉ−ＳＢという）を初めとするスチルベン化合物（特許文献２、非特許文献４、非特許文献５）、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾオキサゾール（以下、ＩＢＯＸという）、６−［２−（フルオロ）エトキシ］−２−［２−（２−ジメチルアミノチアゾール−５−イル）エテニル］ベンゾオキサゾールを初めとするベンゾオキサゾール誘導体（非特許文献６，非特許文献７）、２−（１−｛６−［（２−フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）マロノニトリル（以下、ＦＤＤＮＰという）を初めとするＤＤＮＰ誘導体（特許文献４、非特許文献８）及び６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、ＩＭＰＹという）を初めとするイミダゾピリジン誘導体（特許文献３、非特許文献９）等を１１Ｃや放射性ハロゲンで標識した化合物が報告されている。さらに、これらの画像診断用プローブの一部については、ヒトイメージング研究が実施され、ＡＤ患者において健常例とは明らかに異なる脳への放射能集積を示すことが報告されている（非特許文献１０、非特許文献１１、非特許文献１２、非特許文献１３）。
また、国際公開２００７／００２５４０号パンフレットには、アミロイド親和性基にエチレングリコール又はポリエチレングリコールを介して放射性同位体標識部位結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献５）。
さらに、国際公開２００７／０６３９４６号パンフレットには、脳内での代謝を抑える目的で、５員の芳香族複素環式基を結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献６）。
【０００８】
【特許文献１】特表２００４−５０６７２３号公報
【特許文献２】特表２００５−５０４０５５号公報
【特許文献３】特表２００５−５１２９４５号公報
【特許文献４】特表２００２−５２３３８３号公報
【特許文献５】国際公開第２００７／００２５４０号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２００７／０６３９４６号パンフレット
【非特許文献１】J. A.Hardy & G. A. Higgins, “Alzheimer’s Disease: The AmyloidCascade Hypohesis.”, Science, 1992, 256, p.184-185
【非特許文献２】G. McKhann et al., “Clinical diagnosis of Alzheimer’s disease:Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department ofHealth and Human Services Task Force on Alzheimer’s Disease.”, Neurology, 1984,34, p.939-944
【非特許文献３】Z.-P. Zhuang et al., “Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins asProbes for Amyloid Aggregates.”, J. Med. Chem., 2001,44, p.1905-1914
【非特許文献４】MasahiroOno et al., “11C-labeled stilbene derivatives as Aβ-aggregate-specific PET imagingagents for Alzheimer’s disease.”, Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30,p.565-571
【非特許文献５】H. F.Kung et al., “Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques .”, J. American Chemical Society, 2001,123, p.12740-12741
【非特許文献６】Zhi-Ping Zhuanget al., “IBOX(2-(4’-dimethylaminophenyl)-6- iodobensoxazole):a ligand for imaging amyloidplaques in the brain.”, Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894
【非特許文献７】Furumoto Y et al., “[11C]BF-227:A New 11C-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β Plaques Imaging.”, European Journal of Nuclear Medicine andMolecular Imaging, 2005, 32, Sup.1, P759
【非特許文献８】EricD. Agdeppa et al.,“2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes(DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer’sDisease.”, Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p.404-417
【非特許文献９】Zhi-Ping Zhuanget al., “Structure-Activity Relationship of Imidazo[1,2-a]pyridinesas Ligands for Detectingβ-AmyloidPlaques in the Brain.”, J. Med. Chem, 2003, 46,p.237-243
【非特許文献１０】W. E.Klunk et al., “Imaging brain amyloidin Alzheumer’s disease with Pittsburgh Compound-B.”,Ann. Neurol., 2004, 55, p.306-319
【非特許文献１１】Nicolaas P. L. G. Verhoeffet al., “In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With [11C]SB-13 PET.”, AmericanJournal of Geriatric Psychiatry, 2004, 12, p.584-595
【非特許文献１２】HiroyukiArai et al., "[11C]-BF-227 AND PET to Visualize Amyloidin Alzheimer's Disease Patients", Alzheimer's & Dementia: The Journal ofthe Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S312
【非特許文献１３】ChristopherM. Clark et al., "Imaging Amyloid with I123 IMPY SPECT", Alzheimer's &Dementia: The Journal of the Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S342
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の様に、アミロイドを対象とした画像診断プローブとして、種々の化合物が開示され、臨床応用に向けて検討が進められている。
ＴＺＤＭ、ＩＢＯＸ及びｍ−Ｉ−ＳＢのヨードを［１２５Ｉ］で標識した化合物は、正常マウスを用いた実験の結果、投与後２分点において、いずれも脳内への移行が認められている。しかしこれらの化合物は、正常組織からのクリアランスが十分ではなく、投与後の時間経過に伴い、徐々に脳内に集積する傾向を示している（特表２００５−５１２９４５号公報、Zhi-Ping Zhuang et al.,Nuclear Medicine
and Biology, 2001, 28, p.887-894、H. F. Kung et al.,J. Am. Chem. Soc., 2001,
123, p.12740-12741）。正常組織からのクリアランスが十分でないと、アミロイド集積部位において十分なコントラストが得られないといった問題がある。ＳＢ−１３を［１１Ｃ］で標識した化合物については、ラットを用いた実験により正常組織からのクリアランスを有することが示されているが、そのクリアランス速度は十分に速いとはいえない（Masahiro Ono et al., Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30,
p.565-571）。
【００１０】
一方、ＩＭＰＹを初めとするイミダゾピリジン骨格を有する化合物は、投与後脳内へ移行してアミロイドに集積するといった性質を有すると共に、上述した化合物とは異なり正常組織からのクリアランスが早いといった優れた性質を有することが、［１２５Ｉ］標識化合物を用いた実験の結果明らかとされている。しかし、ＩＭＰＹは、復帰突然変異試験にて陽性を示す化合物であり、この化合物を画像診断プローブとして用いるには、その投与量や投与形態につき十分な注意が必要となる。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）
ＦＤＤＮＰについても、復帰突然変異試験にて陽性を示すことが、報告されている。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）
【００１１】
本発明は、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして種々の化合物が開示されているものの、臨床使用に耐え得る性能を有することが確認された化合物は未だ存在していないという上記事情に鑑みてなされたものであり、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物及び該化合物を配合した生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を得ることを目的とした。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明者等は鋭意検討を重ねた結果、イミダゾピリジン−フェニル骨格を有し、フェニル基にアルキル鎖を介して水酸基を結合させた一連の化合物により、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物を提供し得ることを見出し、本発明を完成した。
【００１３】
本発明の一側面によると、下記式（１）：
【００１４】
【化４】
2009120591.tif 000002
で表されることを特徴とする化合物並びにその塩、又は該化合物を配合してなる、生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬が提供される。
【００１５】
ここで、生体組織としては、アミロイドーシスにおいてアミロイドが沈着することが知られている種々の組織とすることができる。このような生体組織の代表例としては、脳、心臓、肺、膵臓、骨、関節等が挙げられ、最も代表的な生体組織としては、脳が挙げられる。脳を対象とした場合における、代表的なアミロイドーシスは、アルツハイマー病及びレビー小体型痴呆である。
【００１６】
式（１）中、Ｒ１は放射性ハロゲン置換基、ｍは１〜４の整数である。
放射性ハロゲンとしては、ＳＰＥＣＴやＰＥＴにおいて通常用いられている核種を用いることができる。好ましくは、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンを用いることができ、より好ましくは１８Ｆ又は１２３Ｉを用いることができる。
【００１７】
なお、Ｒ１の結合部位は、イミダゾピリジン環における６位の炭素であることが好ましく、ヒドロキシアルキル基の結合部位は、フェニル基の４’位の炭素であることが好ましい。従って、好ましい態様において、本発明の一側面に係る化合物は、下記式（３）：
【００１８】
【化５】
2009120591.tif 000003
で表される化合物並びにその塩であり、本発明に係る生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬は、前記式（３）で表される化合物並びにその塩を配合してなるものである。ここで、式（３）中のＲ１及びｍは、前記式（１）におけるものと同様である。
【００１９】
本発明の別の一側面によると、下記式（２）：
【００２０】
【化６】
2009120591.tif 000004
で表される化合物並びにその塩が提供される。
【００２１】
式（２）中、Ｒ２は非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基であり、ｍは１〜４の整数である。
【００２２】
なお、Ｒ２の結合部位は、イミダゾピリジン環における６位の炭素であることが好ましく、ヒドロキシアルキル基の結合部位は、フェニル基の４’位の炭素であることが好ましい。従って、好ましい態様において、本発明の一側面に係る化合物は、下記式（４）：
【００２３】
【化７】
2009120591.tif 000005
で表される化合物並びにその塩である。ここで、式（４）におけるＲ２及びｍは、前記式（２）におけるものと同様である。
【発明の効果】
【００２４】
本発明により、生体内における良好なアミロイド描出能を有する、新規なアミロイド親和性化合物及び生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を得ることが可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
（標識前駆体化合物の合成）
以下、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する場合を例にとり、本発明に係る化合物の合成方法について説明する。
【００２６】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成にあたっては、まず、公知の方法（例えば、図１、工程１に示す方法）にて合成された４’−（ヒドロキシメチル）アセトフェノンと臭化第二銅とを反応させ、２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノンを得る（図１、工程２）。この反応は、定法、例えば文献（King L. Carroll & Ostrum G. Kenneth,
Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461）記載の方法に従って行うことができる。
【００２７】
次に、上記で合成した２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノンを２−アミノ−５−ヨードピリジンと反応させ、２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する（図１、工程３）。この工程は、例えば、下記の要領にて行うことができる。
【００２８】
まず、２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノンと２−アミノ−５−ヨードピリジンとをアセトニトリル等の不活性溶媒に溶解し、還流温度にて２〜６時間反応させると２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの臭化水素酸塩が生成し、白色沈殿を生じる。このときの溶媒としては、アセトニトリルの他、メタノールやアセトンといった、同様の反応にて通常用いられる溶媒を用いることができる。また、反応温度は還流することができる温度であればよく、例えばアセトニトリルを溶媒とした場合は１１０℃とすることができる。なお、用いる溶媒の量は、反応に十分な量であればよいが、多過ぎると反応物の沈殿を得ることができないため、注意が必要である。例えば、１ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノンを用いて反応させる場合は、約３〜６ｍＬの溶媒を用いればよい。
【００２９】
次に、反応液をろ過して沈殿物をろ別後、この白色沈殿をメタノール／水混液（２：５）に懸濁し、これに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を沈殿物に対して大過剰となるように加えると、２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンが遊離して沈殿が生ずる。この新たに生じた沈殿をろ取することによって、本工程の目的物である２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図１、工程３）。メタノール／水混液の量は、反応させるために十分な量であれば特に限定する必要はないが、多すぎると生成物の析出の妨げとなるため注意が必要である。また、炭酸水素ナトリウムの量は、反応基質である前記沈殿物に対して大過剰であれば特に限定する必要はない。
【００３０】
次いで、２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンにアルコール溶媒中でアルカリ条件を与えるといった公知の方法によりアセチル基を除去し、２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得る（図１、工程４）。
【００３１】
得られた２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンをジオキサンに溶解し、トリエチルアミンを加えた後、ビストリブチルスズ及び触媒量のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムを添加する。この反応液を約９０℃に加熱して一昼夜程度反応させた後、溶媒を留去し、クロマトグラム精製を行って、目的物である６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図２、工程１）。このとき、ビストリブチルスズの量は、反応基質に対して過剰量となる条件を満たす量であればよく、具体的には反応基質である２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対してモル比にして１．５倍程度であれば良い。
【００３２】
なお、イミダゾピリジン環にトリブチルスタニル置換基以外のトリアルキルスタニル置換基を結合させた化合物を得る場合は、図２の工程１でビストリブチルスズを用いる代わりに、目的に応じた種々のビストリアルキルスズを用いればよい。例えば、イミダゾピリジン環にトリメチルスタニル置換基を結合させた化合物を合成する場合は、図２の工程１においてビストリメチルスズを用いて上記と同様の反応を行えばよい。
【００３３】
また、イミダゾピリジン環における置換基の結合部位が異なる化合物や、２つの置換基が結合した化合物を得る場合には、図１の工程３において、２−アミノ−５−ヨードピリジンの代わりに、目的化合物に対応した種々の化合物を用いて公知の方法によって反応を行えば良い。
【００３４】
（放射性ハロゲン標識化合物の合成方法）
次に、放射性ヨード標識体化合物を例にとり、本発明の別の一側面に係る、放射性ハロゲン標識化合物の製造方法について説明する。
【００３５】
放射性ヨード標識体化合物の合成は、上記の要領にて合成した標識前駆体化合物を不活性有機溶媒に溶解し、これに公知の方法にて得られた［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液等を加え、酸及び酸化剤を加えて反応させることによって行うことができる。標識前駆体化合物を溶解させる不活性有機溶媒としては標識前駆体及び［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム等との間で反応性を有さない種々の溶媒を用いることができ、好ましくはメタノールを用いることができる。
【００３６】
酸は種々のものを用いることができ、好ましくは塩酸を用いることができる。
酸化剤は、反応液中のヨウ素を酸化させることができるものであれば特に限定する必要はなく、好ましくは過酸化水素又は過酢酸を用いることができる。酸化剤の添加量は、反応溶液中のヨウ素を酸化させるのに十分な量であれば良い。
【００３７】
ヨウ素以外の放射性ハロゲン標識体は、合成目的に応じた標識前駆体を、目的に応じた放射性ハロゲンで標識することによって合成することができる。
【００３８】
（本発明に係る診断剤の調製方法及び使用方法）
本発明に係る診断剤は、他の一般に知られている放射性診断剤と同様、本発明に係る放射性ハロゲン標識化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水、あるいはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における本化合物の濃度は、配合された本化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。本化合物の投与量は、投与された薬剤の分布を画像化するために十分な濃度であれば特に限定する必要はない。例えば、ヨウ素−１２３（１２３Ｉ）標識化合物及びフッ素−１８（１８Ｆ）標識化合物の場合は、体重６０ｋｇの成人一人当り５０〜６００ＭＢｑ程度、静脈投与又は局所投与して使用することができる。投与された薬剤の分布は、公知の方法にて画像化することができ、例えばヨウ素−１２３（１２３Ｉ）標識化合物の場合はＳＰＥＣＴ装置、フッ素−１８（１８Ｆ）標識化合物の場合はＰＥＴ装置を用いて画像化することができる。
【００３９】
以下、実施例、比較例及び参考例を記載して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。なお、下記実施例において、実験に供する化合物の名称を、表１の様に定義した。
【００４０】
【表１】
2009120591.tif 000006
【００４１】
（実施例１）２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成
【００４２】
４’−アセチルベンズアルデヒド３００ｍｇ（２．０２ｍｍｏｌ相当）をテトラヒドロフラン２０ｍＬに溶解し、これにトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム４７１ｍＬ（２．２２ｍｍｏｌ相当）を滴下した。これを室温下で２時間攪拌した後、８０℃でさらに２時間攪拌した。反応終了後、室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）にて精製を行い、４’−（ヒドロキメチル）アセトフェノン２４２ｍｇ（１．６１ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程１）。
【００４３】
臭化第二銅４９６ｍｇ（２．２３ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５．０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−（ヒドロキメチル）アセトフェノン４６１ｍｇ（２．８１ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。２．５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で精製し、２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノン１９６ｍｇ（０．８５６ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程２）。
【００４４】
２−ブロモ−４’−（アセトキシメチル）アセトフェノン１９６ｍｇ（０．８５６ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン２４４ｍｇ（０．６５８ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル４．０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて２．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水５．０ｍＬ−メタノール２．０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で１０分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１５０ｍｇ（０．４４６ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程３）。
【００４５】
２−［４’−（アセトキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１５０ｍｇ（０．４５６ｍｍｏｌ相当）をメタノール５．０ｍLに溶解し，炭酸カリウム１８９ｍｇ（１．３７ｍｍｏｌ相当）を加えた後、室温で３時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液と水を加え、析出した沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物を水、アセトニトリルの順で洗浄し、２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１２０ｍｇ（０．３４３ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程４）。
【００４６】
得られた２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００４７】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 8.90 ( s, 1H ), 8.29 ( s,
1H ), 7.91 ( d, J = 7.8 Hz, 2H ), 7.42-7.38 ( m, 4H ), 5.22 ( brs, 1H ), 4.52 ( s, 2H )。
【００４８】
（実施例２）６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００４９】
実施例１で得られた、２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５０．０ｍｇ（０．１４３ｍｍｏｌ相当）をジオキサン２．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン１．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．１１ｍＬ（０．２１ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム１０．９ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で２４時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４８．３ｍｇ（０．０９４１ｍｍｏｌ相当）を得た（図２、工程１）。
【００５０】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００５１】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 7.98 ( s, 1H ), 7.94 ( d, J = 7.8 Hz, 2H ), 7.83 (
s, 1H ), 7.61 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 7.43 ( d, J = 7.8 Hz, 2H ),
7.16 ( d, J = 8.7, 1H ), 4.73 ( s, 2H ), 1.90 ( brs,
1H ), 1.62-1.49 ( m, 6H ), 1.39-1.32 ( m, 6H ), 1.19-1.05 ( m, 6H ), 0.91 ( t, J =
7.3 Hz, 9H )。
【００５２】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：d 145.7, 144.8, 140.6, 133.4, 131.4, 130.1, 127.4, 126.2,
122.2, 117.1, 107.2, 65.2, 29.0, 27.3, 13.7, 9.8。
【００５３】
（実施例３）２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００５４】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）１００μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸９０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、５６２ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム１５０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、下記の条件のＨＰＬＣに付して２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。
【００５５】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（商品名、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×１５０ｍｍ）
移動相：０．１％トリフルオロ酢酸を含む水／０．１％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル＝８０／２０→０／１００（１７分）
流速：１．０  ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）及び放射線検出器（ｒａｙｔｅｓｔ社 ＳＴＥＦＦＩ型）
【００５６】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標） Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において１６１．６ＭＢｑであった。また、下記の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９７％であった。
【００５７】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝１００／１／２
検出器：Ｒｉｔａ  Ｓｔａｒ（製品名、ｒａｙｔｅｓｔ社製）
【００５８】
（実施例４）２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成
【００５９】
塩化アルミニウム１．６８ｇ（１２．６ｍｍｏｌ相当）を１，２−ジクロロエタン１０ｍＬに溶解し、水浴で１０℃に冷却した。これに塩化アセチル０．９３９ｍＬ（１３．２ｍｍｏｌ相当）を滴下して１．５時間攪拌した後、室温にもどし、酢酸フェネチル９８５ｍｇ（６．００ｍｍｏｌ相当）を加えてさらに２時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に滴下し、ジクロロメタンで３回抽出を行った。合わせたジクロロメタン層を、水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、４’−（２”−アセトキシエチル）アセトフェノンの粗精製物１．７８ｇを得た（図３、工程１）。
【００６０】
得られた４’−（２”−アセトキシエチル）アセトフェノン粗精製物１．７８ｇをメタノール２０ｍＬに溶解し、炭酸カリウム１．２４（９．０ｍｍｏｌ相当）を加え１時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮した。得られた粗生成物につきシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、４’−（２”−ヒドロキエチル）アセトフェノン４６１ｍｇ（２．８１ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程２）。
【００６１】
臭化第二銅１．５１ｇ（６．４６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル２０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−（２”−ヒドロキエチル）アセトフェノン４６１ｍｇ（２．８１ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。３時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝７／１）で精製し、２−ブロモ−４’−（２”−アセトキシエチル）アセトフェノン６５６ｍｇ（２．７０ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程３）。
【００６２】
２−ブロモ−４’−（２”−アセトキシエチル）アセトフェノン６５６ｍｇ（２．７０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン６０１ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて３時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶をメタノール２０ｍＬに懸濁させた後、これに炭酸カリウム１．４９ｇ（１０．８ｍｍｏｌ相当）を加え、さらに１時間攪拌した。反応終了後，水（１０．０ｍＬ）を加え、析出した沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物を水、アセトニトリルの順で洗浄し、２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３９７ｍｇ（０．７５３ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程４）。
【００６３】
得られた２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００６４】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 8.82 ( s, 1H), 8.27 ( s,
1H ), 7.85 ( d, J = 8.2 Hz, 2H ), 7.42 ( s, 1H ), 7.29 ( d, J =
8.2 Hz, 2H ), 3.62 ( t, J = 6.9 Hz, 2H ), 2.75 ( t, J = 6.9 Hz,
2H )。
【００６５】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：d 144.7, 143.3, 139.4, 132.1, 131.2, 131.0, 129.2, 125.4,
117.7, 110.5, 108.4, 77.3, 61.8。
【００６６】
（実施例５）６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００６７】
２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン９６．１ｍｇ（０．２６４ｍｍｏｌ相当）をジオキサン４．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．２０ｍＬ（０．４０ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム１８．３ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン９６．２ｍｇ（０．１８２ｍｍｏｌ相当）を得た（図４、工程１）。
【００６８】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００６９】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 7.92 ( s, 1H ), 7.84 ( d, J
= 7.8 Hz, 2H ), 7.75 ( s, 1H ), 7.53 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 7.23 ( d, J
= 7.8 Hz, 2H ), 7.09 ( d, J = 8.7, 1H ), 3.84 ( t, J = 6.4 Hz, 2H
), 2.85 ( t, J = 6.4 Hz, 2H ), 1.90 ( brs, 1H
), 1.58-1.42 ( m, 6H ), 1.32-1.26 ( m, 6H ), 1.12-0.99 ( m, 6H ), 0.85 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。
【００７０】
（実施例６）２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００７１】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）６０μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸８０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、５３７ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム１２０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例３と同様の条件によるＨＰＬＣに付して２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。
【００７２】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標） Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において３４８ＭＢｑであった。また、実施例３と同様の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９９％であった。
【００７３】
（実施例７）２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成
【００７４】
塩化アルミニウム８．４０ｇ（６３ｍｍｏｌ相当）を１，２−ジクロロエタン５０ｍＬに溶解し、水浴で１０℃に冷却した。これに塩化アセチル４．６９ｍＬ（６６ｍｍｏｌ相当）を３０分かけて滴下し、２．５時間攪拌した。その後、反応液を室温にもどし、３−フェニルプロピルアセテート５．３５ｇ（３０ｍｍｏｌ相当）を２０分かけて加え、さらに２時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に滴下し、ジクロロメタンで３回抽出を行った。合わせたジクロロメタン層を、水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、４’−（３”−アセトキシプロピル）アセトフェノンの粗精製物８．３６ｇを得た（図５、工程１）。
【００７５】
得られた４’−（３”−アセトキシプロピル）アセトフェノン粗精製物８．３６ｇをメタノール１００ｍＬに溶解し、炭酸カリウム６．２２（４５．０ｍｍｏｌ相当）を加え２時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮した。得られた粗生成物につきシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、４’−（３”−ヒドロキシプロピル）アセトフェノン２．６８ｇ（１５．０ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程２）。
【００７６】
臭化第二銅１．５０ｇ（６．４４ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル２０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−（３”−ヒドロキシプロピル）アセトフェノン５００ｍｇ（２．８０ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。２時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、２−ブロモ−４’−（３”−アセトキシプロピル）アセトフェノン７０２ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程３）。
【００７７】
２−ブロモ−４’−（３”−アセトキシプロピル）アセトフェノン７０２ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン６０１ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて２時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水２．０ｍＬ−メタノール１．０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で１０分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−［４’−（３”−アセトキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン６０７ｍｇ（１．６０ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程４）。
【００７８】
２−［４’−（３”−アセトキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４５０ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ相当）をメタノール１０．０ｍLに溶解し、炭酸カリウム４４４ｍｇ（３．２１ｍｍｏｌ相当）を加えた後、室温で２０時間攪拌した。反応終了後、水（１０．０ｍＬ）を加え、析出した沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物を水、アセトニトリルの順で洗浄し、２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４０３ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程５）。
【００７９】
得られた２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００８０】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 8.38 ( d, J = 0.9 Hz, 1H ), 7.86 ( d, J =
7.8 Hz, 2H ), 7.43 ( s, 1H ), 7.34-7.33 ( m, 2H ), 7.32-7.26 ( m, 2H ),
3.72-3.69 ( m, 2H ), 2.76 ( t, J = 7.8 Hz, 2H ), 1.95-1.92 ( m, 2H )。
【００８１】
（実施例８）６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００８２】
２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１００ｍｇ（０．２６４ｍｍｏｌ相当）をジオキサン４．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．２０ｍＬ（０．４０ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム１８．３ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン９６．８ｍｇ（０．１８９ｍｍｏｌ相当）を得た（図６、工程１）。
【００８３】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。
【００８４】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：d 7.98 ( s, 1H ), 7.88 ( d, J = 7.9 Hz, 2H ), 7.80 (
s, 1H ), 7.59 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 7.28-7.26 ( m, 2H ), 7.15 ( d, J
= 8.7, 1H ), 3.72-3.69 ( m, 2H ), 2.75 ( t, J = 7.3 Hz, 2H ), 1.96-1.91
( m, 2H ), 1.61-1.50 ( m, 6H ), 1.39-1.32 ( m, 6H ), 1.13-1.04 ( m, 6H ),
0.92-0.89 ( m, 9H )。
【００８５】
（実施例９）２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【００８６】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）６０μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸４０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、１６６．９ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム４０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例３と同様の条件によるＨＰＬＣに付して２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。
【００８７】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標） Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において４９．８ＭＢｑであった。また、実施例３と同様の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９７％であった。
【００８８】
（参考例１）［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹの合成
【００８９】
文献（Zhi-Ping Zhuang
et al., J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243）記載の方法に従い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成し、メタノールに溶解した（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。当該溶液５３μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ７５μＬ、２２４〜２５３ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム６０〜７０μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ
ヨウ化ナトリウム溶液 １０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例３と同様の条件によるＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ画分を分取した。
【００９０】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ
Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１４５ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において４１〜５７ＭＢｑであった。また、実施例３と同様の条件にてＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９３％であった。
【００９１】
（実施例１０〜１２、比較例１）オクタノール抽出法を用いた分配係数の測定
【００９２】
化合物の血液脳関門（以下、ＢＢＢという）透過性の指標として一般に知られている、オクタノール抽出法を用いた分配係数（以下、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌという）を測定した。
【００９３】
（方法）
化合物１のジエチルエーテル溶液、化合物２のジエチルエーテル溶液、化合物３のジエチルエーテル溶液及び［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹのジエチルエーテル溶液を、それぞれ１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液にて希釈し、放射能濃度２０〜３６ＭＢｑ／ｍＬに調整した。これらの液各１０μＬを、それぞれオクタノール２ｍＬに添加し、さらに１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍＬを加えて３０秒間攪拌した。それぞれの混合液を低速遠心機（形式：ＣＴＤ４，日立工機株式会社製）で遠心分離（２０００ 回転／分×６０分間）した後、オクタノール層及び水層を各１ｍＬ分取し、それぞれの放射能カウントをオートウェル・ガンマシステム（形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ、Ａｌｏｋａ社製）にて計測した。得られた放射能カウントを用い、式（１）よりｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値を算出した。
【００９４】
【数１】
2009120591.tif 000007
【００９５】
（結果）
結果を表２に示す。この表に示すように、化合物１、化合物２及び化合物３のｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの値は、１〜３の間の値を示していた。ＢＢＢを透過可能な化合物においては、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値は１〜３の間の値の値であることが知られている（Douglas D. Dischino
et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038）。以上の結果より、化合物１、化合物２及び化合物３は、ＩＭＰＹ同様にＢＢＢ透過性を有することが示唆された。
【００９６】
【表２】
2009120591.tif 000008
【００９７】
（実施例１３〜１５、比較例２）脳内移行性及びクリアランスの測定
【００９８】
化合物１、化合物２及び化合物３を用い、雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）における脳への放射能集積の経時的変化を測定した。
【００９９】
（方法）
化合物１を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物２を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３６ＭＢｑ／ｍＬ）、及び、化合物３を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２５ＭＢｑ／ｍＬ）をそれぞれ調製し、試料溶液とした。この試料溶液を、チオペンタール麻酔下で尾静脈より雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）に投与した（投与量：０．０５ｍＬ、投与した放射能：１．０〜１．８ＭＢｑ相当）。投与後２分、５分、３０分、６０分に腹部大動脈より脱血した上で脳を採取し、脳の質量を測定し、さらに脳の放射能をシングルチャネルアナライザー（検出器型番：ＳＰ−２０、応用光研工業株式会社製）を用いて計測した（以下、本実施例にてＡとする）。また、残り全身の放射能量を同様に測定した（以下、本実施例にてＢとする）。これらの測定結果を用い、下記式（２）より、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した。
【０１００】
別に、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度１６ＭＢｑ／ｍＬ）を調製し、上記と同様の操作を行って、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した。
なお、実施例１３〜１５、比較例２のそれぞれは、各時間点において、それぞれ３匹の動物を用いて実験を行った。
【０１０１】
【数２】
2009120591.tif 000009
【０１０２】
（結果）
結果を表３に示す。表３に示すように、化合物１、化合物２及び化合物３は、投与後２分点において、１２３Ｉ−ＩＭＰＹ同様、高い放射能集積が認められ、その後６０分にかけて速やかに消失する傾向を示していた。この結果より、化合物１、化合物２及び化合物３は、１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同様、高い脳移行性及び速やかな脳からのクリアランスを有することが示唆された。
【０１０３】
【表３】
2009120591.tif 000010
【０１０４】
（実施例１６〜１８）脳内アミロイドの描出の確認
【０１０５】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。
【０１０６】
（方法）
（１）Ａβ１−４２（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。
【０１０７】
（２）チオペンタール麻酔下、雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）の片側扁桃核へ上記アミロイド懸濁液を２．５μＬ（２５μｇ相当）注入し、対照として、反対側の扁桃核にリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）を２．５μＬ注入した。アミロイド懸濁液及びリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）注入１日後のラットを、検体とした。
【０１０８】
（３）化合物１を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物２を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３６ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物３を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２５ＭＢｑ／ｍＬ）をそれぞれ調製し、試料溶液とした。この試料溶液を、チオペンタール麻酔下、上記ラットに尾静脈より投与した（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：１０〜１８ＭＢｑ相当）。
【０１０９】
（４）投与６０分後に脳を摘出して、ミクロトーム（形式：ＣＭ３０５０Ｓ、ＬＥＩＣＡ社製）を用いて厚さ１０μｍの脳切片を作製した。当該脳切片をイメージングプレート上で２０時間露光させた後、バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）を用いて画像解析を行った。
【０１１０】
（５）バイオイメージングアナライザーを用いた上記画像解析の終了後、チオフラビンＴによる病理染色を行って蛍光顕微鏡（株式会社ニコン製、形式：ＴＥ２０００−Ｕ型、励起波長：４００〜４４０ｎｍ、検出波長：４７０ｎｍ）を用いたイメージングを行い、当該切片上にアミロイドが沈着していることを確認した（図・７ｂ、図８ｂ及び図９ｂ）。
【０１１１】
（結果）
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図７〜図９に示す。この図に示すように、いずれの化合物においても、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、化合物１、化合物２及び化合物３は、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。
【０１１２】
（実施例１９）復帰突然変異試験
【０１１３】
化合物４の遺伝子突然変異誘発性を調べるため、ネズミチフス菌（Salmonella
typhimurium）のＴＡ９８、ＴＡ１００を用いる復帰突然変異試験（以下、Ａｍｅｓ試験という）を行った。
【０１１４】
試験はＳ９ｍｉｘ無添加とＳ９ｍｉｘ添加の場合について実施した。陰性対象はジメチルスルホオキサイド（以下、ＤＭＳＯという）を用いた。陽性対象はＳ９ｍｉｘ無添加とする場合は２−（２−フリル）−３−（５−ニトロ−２−フリル）アクリルアミド（以下、ＡＦ−２という）を用い、Ｓ９ｍｉｘ添加の場合は２−アミノアントラセン（以下、２−ＡＡという）を用いた。
【０１１５】
試験用プレートへ添加する被験液として、化合物４をＤＭＳＯで溶解した最高濃度液（化合物濃度：５０ｍｇ／ｍＬ）及び最高濃度液をＤＭＳＯで希釈した各濃度の被験液を調製した。Ｓ９ｍｉｘ無添加とする場合の陽性対象については、試験菌株にＴＡ９８を用いる場合はＡＦ−２をＤＭＳＯで溶解した被験液（化合物濃度：１μｇ／ｍＬ）、試験菌株にＴＡ１００を用いる場合はＡＦ−２をＤＭＳＯで溶解した被験液（化合物濃度：０．１μｇ／ｍＬ）を用いた。Ｓ９ｍｉｘを添加する場合の陽性対象については、試験菌株にＴＡ９８を用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解した被験液（化合物濃度：５μｇ／ｍＬ）、試験菌株にＴＡ１００を用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解した被験液（化合物濃度：１０μｇ／ｍＬ）を用いた。
【０１１６】
各被験液の添加液量は０．１ｍＬ／プレートとし、陰性対象についてはＤＭＳＯのみを０．１ｍＬ／プレートとなるように添加した。各被験液と各試験菌株とを混合後、軟寒天を用いて試験用プレート上の培地へ重層し、３７℃で４８時間培養した。別に、各被験液とＳ９ｍｉｘと試験菌株を混合後、軟寒天を用いて試験用プレート上の培地へ重層し、３７℃で４８時間培養した。判定は、培養後のプレートにおける復帰突然変異コロニー数をカウントすることにより行い、復帰突然変異コロニー数が陰性対照の２倍以上の値を示し、更に濃度に依存して増加した場合を陽性とした。
【０１１７】
結果を表４に示す。化合物４処理群における復帰変異コロニー数は、いずれの菌株ともＳ９ｍｉｘ添加の有無および被験物質添加量にかかわらず、陰性対照物質処理群の２倍未満であった。一方、陽性対照物質処理群は、明らかな復帰変異コロニー数の増加を示していた。以上の結果より、化合物４はＡｍｅｓ陰性と判定され、遺伝子突然変異誘発性は無いものと判断された。
【０１１８】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【０１１９】
本発明に係る化合物は、診断薬分野において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１２０】
【図１】２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図２】６−トリブチルスタニル−２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図３】２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図４】６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図５】２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図６】６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図７】（ａ）２−［４’−（３”−ヒドロキシプロピル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図８】（ａ）２−［４’−（２”−ヒドロキシエチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図９】（ａ）２−［４’−（ヒドロキシメチル）フェニル］−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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