(57)【要約】【課題】腹腔内投与された抗がん剤の効果を十分発揮させる目的で、抗がん剤が腹腔内に長時間留まることを可能にする方法を提供すること。【解決手段】架橋ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤；架橋ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の効果増強剤；架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせてなるがん治療薬；架橋ヒアルロン酸を腹腔内投与することを特徴とする抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法；架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせて腹腔内経路により投与することを特徴とするがん治療方法；並びに抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造、腹腔内経路により投与されるがん治療薬の製造、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法、および抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法における架橋ヒアルロン酸の使用。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
架橋ヒアルロン酸を含んでなり、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤。
【請求項２】
架橋ヒアルロン酸を含んでなり、抗がん剤と組み合わせて腹腔内経路により投与されたときに該抗がん剤の腹膜播種結節低減効果を増強する作用を示すことを特徴とする、抗がん剤の効果増強剤。
【請求項３】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とを組み合わせてなり、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、がん治療薬。
【請求項４】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とからなる配合剤であることを特徴とする、請求項３に記載のがん治療薬。
【請求項５】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とからなるキットであることを特徴とする、請求項３に記載のがん治療薬。
【請求項６】
腹膜播種の予防および／または治療に使用される、請求項３から５のいずれか１項に記載のがん治療薬。
【請求項７】
架橋ヒアルロン酸を腹腔内経路により投与することを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法。
【請求項８】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤を、抗がん剤と組み合わせて腹腔内経路により投与することを特徴とする、がん治療方法。
【請求項９】
腹膜播種の予防および／または治療に使用される、請求項８に記載のがん治療方法。
【請求項１０】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造における、架橋ヒアルロン酸の使用。
【請求項１１】
腹腔内経路により投与されるがん治療薬の製造における、架橋ヒアルロン酸の使用。
【請求項１２】
抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法における、架橋ヒアルロン酸の使用。
【請求項１３】
抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法における、架橋ヒアルロン酸の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒアルロン酸を含んでなる抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤、およびヒアルロン酸を腹腔内投与することを特徴とする抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法に関する。また本発明は、ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の効果増強剤に関する。さらに本発明は、ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせてなるがん治療薬、およびヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせて腹腔内経路により投与することを特徴とするがん治療方法に関する。また本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造、腹腔内経路により投与されるがん治療薬の製造、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法、および抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法におけるヒアルロン酸の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
日本人のがんによる死亡数は年々増加している。その中でも胃癌による死亡数は上位を占め、男性では死亡原因の第２位となっている。その原因の１つとして、根治不可能と考えられる進行・再発胃癌の多くは腹膜播種を合併していることが挙げられる。
【０００３】
腹膜播種の予防および／または治療法の確立はがん治療戦略上極めて重要である。しかしながら、腹膜播種は治療が困難であり、化学療法、腹腔内温熱化学療法、腹腔内免疫療法などが試みられてきたが、現在のところ確立した治療方法はない。がんによる腹膜播種に対する化学療法において、経静脈的な全身投与により抗がん剤を投与した場合、血液腹膜関門が存在するため腹腔内への薬物の移行が悪く、十分な薬効作用を発揮できない。そのため、腹腔内に抗がん剤を直接投与すること（腹腔内化学療法）で薬効を促すことは既に臨床的にも行われている。しかし腹腔内に投与された薬剤は腹膜より速やかに吸収され腹腔内より消失するため、その効果が不十分な例が存在する。薬効を十分に発揮させるためには腹腔内に長く貯留させるような方法が不可欠である。今までに、高分子量物質である６％ヒドロキシエチルスターチを抗がん剤パクリタキセルの担体溶液として使用することにより、インビボモデルにおいて腹腔内に留まる薬剤容量およびパクリタキセルの濃度の増加を達成したことが報告されている（非特許文献１）。また、高分子量物質であるイコデキストリン（ｉｃｏｄｅｘｔｒｉｎ）を担体溶液として使用することにより、インビボモデルにおいて腹腔内に留まる薬剤容量が飛躍的に増加したことが報告されている（非特許文献２）。
【０００４】
ヒアルロン酸は、ムコ多糖類であるグリコサミノグリカンの一種であり、Ｎ−アセチルグルコサミンとグルクロン酸の２糖単位が連結した構造からなる高分子物質である。ヒアルロン酸は、人体を構成する物質の一つであり、保水性に優れ、既に医療分野において、例えば関節症やドライアイに対する治療に、あるいは美容形成分野に応用されている。このようにヒアルロン酸は、生体に対して安全に使用できる医用材料である。また、最近、ヒアルロン酸を抗がん剤と共に、子宮頸癌細胞株を腹腔内投与したマウスの腹腔内に投与することにより、該マウスにおいて延命および腹水減少の効果が認められたことが報告されている（非特許文献３）。
【０００５】
【非特許文献１】モハメッド（Ｆ．Ｍｏｈａｍｅｄ）ら、「キャンサー  ケモセラピー  アンド  ファーマコロジー（Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）」、２００３年、第５２巻、第５号、ｐ．４０５−４１０。
【非特許文献２】ホウジー（Ｋ．Ｈｏｓｉｅ）ら、「ドラッグ  デリバリー（Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ）」、２００１年、第８巻、第１号、ｐ．９−１２。
【非特許文献３】ジン（Ｄｉａｎ−ｓｈｕ  Ｙｉｎ）ら、「キャンサー  レターズ（Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ）」、２００６年、第２４３巻、第１号、ｐ．７１−７９。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の課題は、腹腔内投与した抗がん剤の効果を十分発揮させる目的で、抗がん剤が腹腔内に長時間留まることを可能にする方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を達成するために鋭意研究を進めたところ、架橋ヒアルロン酸を抗がん剤と組み合わせて腹腔内に投与することにより、投与された抗がん剤を腹腔内に長期貯留させることができ、その結果、マウス腹腔播種モデルにおいて、抗がん剤のみを投与したときと比較して腹腔播種結節数をより減少させることができることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、架橋ヒアルロン酸を含んでなり、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤に関する。
【０００９】
また本発明は、架橋ヒアルロン酸を含んでなり、抗がん剤と組み合わせて腹腔内経路により投与されたときに該抗がん剤の腹膜播種結節低減効果を増強する作用を示すことを特徴とする、抗がん剤の効果増強剤に関する。
【００１０】
さらに本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とを組み合わせてなり、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、がん治療薬に関する。
【００１１】
さらにまた本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とからなる配合剤であって、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、がん治療薬に関する。
【００１２】
また本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とからなるキットであって、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、がん治療薬に関する。
【００１３】
さらに本発明は、腹膜播種の予防および／または治療に使用される、前記いずれかのがん治療薬に関する。
【００１４】
さらにまた本発明は、架橋ヒアルロン酸を腹腔内経路により投与することを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法に関する。
【００１５】
また本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤を、抗がん剤と組み合わせて腹腔内経路により投与することを特徴とする、がん治療方法に関する。
【００１６】
さらに本発明は、腹膜播種の予防および／または治療に使用される、前記がん治療方法に関する。
【００１７】
さらにまた本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造における、架橋ヒアルロン酸の使用に関する。
【００１８】
また本発明は、腹腔内経路により投与されるがん治療薬の製造における、架橋ヒアルロン酸の使用に関する。
【００１９】
さらに本発明は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法における、架橋ヒアルロン酸の使用に関する。
【００２０】
さらにまた本発明は、抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法における、架橋ヒアルロン酸の使用に関する。
【発明の効果】
【００２１】
本発明により、架橋ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤、架橋ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の効果増強剤、および架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせてなるがん治療薬を提供できる。また本発明により、架橋ヒアルロン酸を腹腔内投与することを特徴とする抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法、架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせて腹腔内投与することを特徴とするがん治療方法を提供できる。さらに本発明により、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造、腹腔内投与されるがん治療薬の製造、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法、および抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法への架橋ヒアルロン酸の使用を実施できる。
【００２２】
本発明に係る薬剤、方法および使用により、腹腔内に投与された抗がん剤の腹腔内貯留時間を延長することができ、その結果、腹腔内において抗がん剤の効果を十分発揮させることができる。このように本発明により、腹腔内に存在する臓器に発生するがん、例えば胃癌、大腸癌、膵臓癌、肝臓癌、胆のう癌、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、尿管癌、および腹膜癌、並びにこれらのがんに合併する腹腔播種の予防および／または治療を有効に実施できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明の１つの側面によれば、架橋ヒアルロン酸を含んでなり、腹腔内経路により投与されることを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤を提供できる。また、架橋ヒアルロン酸を腹腔内経路により投与することを特徴とする、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法を提供できる。
【００２４】
本発明に係る抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤および腹腔内貯留時間延長方法は、抗がん剤と組み合わせて腹腔内に投与されたときに該抗がん剤の腹腔内貯留時間を延長することができるため、腹腔内における該抗がん剤の殺細胞効果発現濃度を長く維持することができる。その結果、本発明に係る抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤および腹腔内貯留時間延長方法を使用しないときと比較して、抗がん剤の効果を増強することができる。
【００２５】
本発明の別の１つの側面によれば、したがって、架橋ヒアルロン酸を含んでなる、抗がん剤の効果増強剤を提供できる。
【００２６】
本発明に係る抗がん剤の効果増強剤は、抗がん剤と組み合わせて腹腔内経路により投与されたときに、該抗がん剤の効果、例えば腹膜播種結節低減効果を増強する作用を示すことを特徴とする。
【００２７】
「腹膜播種」とは、腹腔内に存在する臓器に発生したがんの表面から癌細胞が剥がれ落ちて腹膜に付着し細胞分裂を繰り返して増殖した結果、視認できる大きさの粒子状結節若しくは塊が腹膜上に形成された状態を意味する。「腹膜播種結節」とは、腹膜播種で認められる、腹膜上の癌細胞からなる粒子状結節若しくは塊を意味する。
【００２８】
腹膜播種は、進行・再発胃癌の多くに合併することが知られており、がん治療を困難にする原因の１つと考えられている。腹膜播種は、胃癌のほか、腹腔内に存在する臓器に発生するがん、例えば大腸癌、卵巣癌、子宮体癌、胆のう癌、尿管癌などに合併することが知られている。
【００２９】
本発明のまた別の１つの側面によれば、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とを組み合わせてなるがん治療薬を提供できる。また、本発明において、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とを組み合わせて腹腔内経路により投与することを特徴とするがん治療方法を提供できる。
【００３０】
本発明に係るがん治療剤は、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とからなる配合剤またはキットとして提供できる。
【００３１】
「配合剤」とは、複数の成分が混合された単一の組成物を意味する。すなわち、本発明に係るがん治療剤が配合剤として提供される場合、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とが混合された単一の組成物が提供される。
【００３２】
「キット」とは複数の別個の組成物を一式にして用いるものを意味する。本発明に係るがん治療剤がキットとして提供される場合、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とは別個に包装されて提供されるが、これらを同時に投与することができる。同時に投与するとは、全く同時に投与することのほか薬理学上許される程度に相前後した時間に投与することも含む。一般に、同時に投与するのが好ましい。より好ましくは、用事混合して単一の組成物として使用することが適当である。
【００３３】
本発明に係るがん治療方法において、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長に有効な量の架橋ヒアルロン酸を含有してなる薬剤と、有効量の抗がん剤とを組み合わせて投与するとは、これらを同時に投与することを意味する。同時に投与するとは、全く同時に投与することのほか薬理学上許される程度に相前後した時間に投与することも含む。一般に、同時に投与するのが好ましい。より好ましくは、用事混合して単一の組成物として投与することが適当である。
【００３４】
投与は腹腔内経路により行われる。「腹腔内経路により投与」とは、薬剤を腹腔内に直接投与することを意味する。腹腔内への薬剤の投与は、例えば注射により、あるいはカテーテルを用いて実施できる。
【００３５】
「架橋ヒアルロン酸」とは、ヒアルロン酸分子中のいくつかの特定の原子間に化学結合が形成され、その結果三次元網状構造が形成されたヒアルロン酸を意味する。ヒアルロン酸の架橋は、架橋剤、例えばビスエポキシド類、ジビニルスルホン、ジヒドラジン、ジヒドラジド、またはポリイソシアネートを用いる公知の化学的架橋方法（欧州特許公開第０１６１８８７号、欧州特許公開第０２６５１１６号、米国特許公開第４７１６１５４号など）により実施できる。
【００３６】
本発明において使用するヒアルロン酸は、架橋ヒアルロン酸である限りにおいていずれのヒアルロン酸であってもよい。架橋ヒアルロン酸として、Ｑ−Ｍｅｄ社（スウェーデン）製の架橋ヒアルロン酸であるレスチレン登録商標を好ましく挙げることができる。レスチレン登録商標は、一般に膝関節などに注射されるヒアルロン酸と異なり、動物由来のヒアルロン酸ではなく、化学的に架橋されており、形状の安定化が高いため固形状を維持できるヒアルロン酸であり、ＮＡＳＨＡ（Ｎｏｎ−Ａｎｉｍａｌ  Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ  Ａｃｉｄ）と呼ばれる。レスチレン登録商標は、高い安全性によりアメリカ合衆国の食品医薬品局によりシワ治療に対する使用が認可されている。Ｑ−Ｍｅｄ社の多糖ゲル組成物については特許出願がなされており（国際公開第９７／０４０１２号パンフレット）、日本国において特許されている（日本特許第３０９４０７４号）
【００３７】
架橋ヒアルロン酸は、架橋されていないヒアルロン酸（以下、非架橋ヒアルロン酸と称する）と比較して、その三次元網状構造ゆえに保水性や安定性により優れている。実際、後述する実施例に示すように、架橋ヒアルロン酸であるＮＡＳＨＡと抗がん剤であるタキソールとを組み合わせてマウス腹腔播種モデルに投与したところ、タキソール単独投与に比べ腹膜播種結節数の低減が認められ、架橋ヒアルロン酸がタキソールの抗腫瘍効果増強作用を示すことが判明したが、これに対し、非架橋ヒアルロン酸であり分子量１９０万〜２５０万のスベニール登録商標（中外製薬社製）とタキソールとの組み合わせではこのような増強作用は見られなかった。したがって、本発明においては、架橋ヒアルロン酸の使用が好ましい。
【００３８】
ヒアルロン酸は生体を形成する物質でわれわれの体内にも生理的に存在するものであり、それゆえ副作用がほとんど認められず生体に対して安全に使用できる医用材料である。架橋ヒアルロン酸もヒアルロン酸と同様、生体に対して安全に使用できる。
【００３９】
架橋ヒアルロン酸の用量は、約１％容量〜約５０％容量であり、好ましくは約１％容量〜約１０％容量であり、より好ましくは約１％容量〜約５％容量である。架橋ヒアルロン酸による抗がん剤の腹腔内貯留時間延長効果および抗がん剤の効果増強効果は、その量に非依存的であるため、約１％より少ない容量であってもこのような効果が得られることは十分に考え得る。使用する架橋ヒアルロン酸の量は、後述する実施例に示したようなマウス腹腔播種モデルを使用して実施例と同様な方法により決定することができる。
【００４０】
「抗がん剤」とは、癌細胞の破壊や死滅などの殺細胞効果を持つ薬剤を意味する。
【００４１】
本発明において抗がん剤は、一般的にがん治療に使用されている抗がん剤であればいずれであってもよい。具体的には、タキサン系薬剤、白金製剤、ニトロソウレア系薬剤、窒素マスタード系薬剤、トリアジン系薬剤、アンスラサイクリン系薬剤、ビンカアルカロイド系薬剤、エピポドフィロトキシン系薬剤、カンプトテシン系薬剤、およびフッ化ピリミジン系薬剤を例示できる。タキサン系薬剤として、タキソール、タキソテール、パクリタキセル、およびドセタキセルを例示できる。白金製剤として、シスプラチンおよびカルボプラチンを例示できる。ニトロソウレア系薬剤として、カルムスチンおよびロムスチンを例示できる。窒素マスタード系薬剤として、シクロホスファミドを例示できる。トリアジン系薬剤として、ダカルバジンを例示できる。アンスラサイクリン系薬剤として、ドキソルビシンおよびブレオマイシンを例示できる。ビンカアルカロイド系薬剤として、ビンクリスチンおよびビンブラスチンを例示できる。エピポドフィロトキシン系薬剤として、エトポシドを例示できる。カンプトテシン系薬剤として、イリノテカンを例示できる。フッ化ピリミジン系薬剤として、Ｓ−１を例示できる。本発明において抗がん剤として、好ましくは、タキソールやパクリタキセルを例示できる。抗がん剤は１種類を使用してもよく、２種類以上を組み合わせて使用してもよい。
【００４２】
抗がん剤の用量は、抗がん剤の種類によって異なり、一般的に治療に使用されている用量を適宜選択して決定することができる。
【００４３】
架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤と抗がん剤とを組み合わせてなるがん治療薬には、該薬剤および抗がん剤のほかに医薬上許容される担体される担体を含有させることができる。また、架橋ヒアルロン酸を含んでなる薬剤に架橋ヒアルロン酸のほかに医薬上許容される担体される担体を含有させることができる。
【００４４】
医薬用担体として、製剤の使用形態に応じて通常使用される、充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などの希釈剤や賦形剤などを例示できる。これらは得られる製剤の投与形態に応じて適宜選択使用される。
【００４５】
例えば水、医薬的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトースなどが挙げられる。これらは、剤形に応じて適宜１種類または２種類以上を組み合わせて使用される。
【００４６】
所望により、通常の蛋白質製剤に使用され得る各種の成分、例えば安定化剤、殺菌剤、緩衝剤、等張化剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤などを適宜使用して調製することもできる。
【００４７】
安定化剤としては、例えばヒト血清アルブミンや通常のＬ−アミノ酸、糖類、セルロース誘導体などを例示でき、これらは単独でまたは界面活性剤などと組み合わせて使用できる。特にこの組み合わせによれば、有効成分の安定性をより向上させ得る場合がある。上記Ｌ−アミノ酸は、特に限定はなく、例えばグリシン、システイン、グルタミン酸などのいずれでもよい。糖類も特に限定はなく、例えばグルコース、マンノース、ガラクトース、果糖などの単糖類、マンニトール、イノシトール、キシリトールなどの糖アルコール、ショ糖、マルトース、乳糖などの二糖類、デキストラン、ヒドロキシプロピルスターチ、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸などの多糖類などおよびそれらの誘導体などのいずれでもよい。セルロース誘導体も特に限定はなく、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどのいずれでもよい。界面活性剤も特に限定はなく、イオン性および非イオン性界面活性剤のいずれも使用できる。これには、例えばポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル系、ポリオキシエチレンアルキルエ−テル系、ソルビタンモノアシルエステル系、脂肪酸グリセリド系などが包含される。
【００４８】
緩衝剤として、ホウ酸、リン酸、酢酸、クエン酸、ε−アミノカプロン酸、グルタミン酸および／またはそれらに対応する塩（例えばそれらのナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ金属塩やアルカリ土類金属塩）などを例示できる。
【００４９】
等張化剤として、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、糖類、グリセリンなどを例示できる。
【００５０】
キレート剤として、例えばエデト酸ナトリウム、クエン酸などを例示できる。
【００５１】
本発明を適用できるがん疾患として、腹腔内に存在する臓器に発生するがん、例えば胃癌、大腸癌、膵臓癌、肝臓癌、胆のう癌、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、尿管癌、腹膜癌などを挙げることができる。本発明は、これらがん疾患の治療や再発の防止に有効に使用できる。また、本発明は、がん疾患に合併する腹腔播種の予防および／または治療に有効に使用できる。
【００５２】
さらに本発明の別の１つの側面によれば、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長剤の製造、腹腔内経路により投与されるがん治療薬の製造、抗がん剤の腹腔内貯留時間延長方法、および抗がん剤の腹腔内投与によるがん治療方法における架橋ヒアルロン酸の使用を提供できる。
【００５３】
本発明は下記実施例により説明されるが、当該実施例は本発明を限定的に解釈することを意図するものではない。
【実施例１】
【００５４】
腹膜播種に対する抗がん剤の効果への架橋ヒアルロン酸の影響を、マウス腹膜播種モデルを使用して検討した。
【００５５】
抗がん剤としてタキソールを使用した。タキソールは腹腔播種の治療に臨床的に使用されている。タキソールの腹腔内投与の利点として、静脈内投与に比し腹腔内での濃度を高く到達させ得ること、さらに腹腔から血中に移行するタキソールの濃度は静脈内投与に比べ低く、それによる有害事象の出現率が低下することが挙げられる。そのため腹膜播種結節に対する直接的な効果が期待されるが、しかし腹腔からの消失は速やかで殺細胞効果発現濃度を維持している時間はそれほど長くない。そこで高分子物質であるヒアルロン酸を添加することでこの殺細胞効果発現濃度の維持、並びにそれによる播種結節に対する効果の優位性を検討した。
【００５６】
架橋ヒアルロン酸として、ＮＡＳＨＡ（Ｑ−Ｍｅｄ社製）を使用した。
【００５７】
マウス腹膜播種モデルは、ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに、胃癌細胞株ＭＫＮ４５Ｐを３．０×１０６個腹腔内に注射することにより作成した。
【００５８】
（方法）
４群のマウス腹膜播種モデルを用い、３回のタキソール投与による化学療法の抗腫瘍効果に対する架橋ヒアルロン酸の効果を検討した。４群のマウスには、１ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）を含む１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と５％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、およびクレモフォールと５％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳをそれぞれ投与した。クレモフォールはタキソールの溶媒であり、上記タキソールに含まれるのと同量をタキソールのコントロールとして使用した。投与は、マウス腹膜播種モデル作成の１週後より、腹腔内経路により週１回の頻度で３回行った。効果の判定は、最終投与より１週後に行った。
【００５９】
マウス腹膜播種モデルにおける抗がん剤の効果への架橋ヒアルロン酸の影響は、マウスを開腹し形成された腹膜播種結節数を計測することにより判定した。
【００６０】
つぎに、５群のマウス腹膜播種モデルを用い、３回のタキソール投与による化学療法の抗腫瘍効果に対する架橋ヒアルロン酸の濃度依存性効果を検討した。５群のマウスには、１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）を含む１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と５％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、およびタキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１０％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳをそれぞれ投与した。投与は、マウス腹膜播種モデル作成の１週後より、腹腔内経路により週１回の頻度で３回行った。効果の判定は、最終投与より１週後に上記同様に行った。
【００６１】
さらに、５群のマウス腹膜播種モデルを用い、単回のタキソールによる化学療法の抗腫瘍効果に対する架橋ヒアルロン酸の濃度依存性効果を検討した。５群のマウスには、１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）を含む１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１０％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、およびタキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と５０％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳをそれぞれ投与した。投与は、マウス腹膜播種モデル作成の１週後に、腹腔内経路により１回行った。効果の判定は、薬剤投与より３週後に上記同様に行った。
【００６２】
（結果）
腹腔播種結節数は、タキソールの３回腹腔内投与群でコントロール群と比較して減少が認められ、さらに、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて３回腹腔内投与した群で、タキソール単独投与群と比較して有意に減少が認められた（図１）。具体的には、腹腔播種結節数はＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて投与した群で１４±３．６個であり、これに対し、タキソール単独腹腔内投与群では４．８±０．８４個であった（Ｐ＝０．０００５）。また、腹腔播種結節数は、１％ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群においても、タキソール単独腹腔内投与群のものと比較して有意に減少しており、５％または１０％のＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群と同程度であった（図２）。
【００６３】
腹腔播種結節数は、タキソールの単回投与群でもコントロール群と比較して減少が認められ、さらに、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて単回腹腔内投与した群で、タキソール単独腹腔内投与群と比較して有意に減少が認められた（図３）。ＮＡＳＨＡの濃度は腹腔播種結節数の減少に影響しなかった。
【００６４】
（考察）
タキソールと架橋ヒアルロン酸であるＮＡＳＨＡを組み合わせて腹腔内投与することにより、腹膜播種に対するタキソールの抗腫瘍効果の増強が認められた。これら結果から、架橋ヒアルロン酸は腹腔内におけるタキソールの抗腫瘍効果増強作用を有すると考えることができる。タキソールと組み合わせる架橋ヒアルロン酸の濃度は、１％でも５０％でも変わりはなく、架橋ヒアルロン酸の作用に１％以上では明らかな濃度依存性はない。
【実施例２】
【００６５】
腹膜播種結節内の抗がん剤濃度に対する架橋ヒアルロン酸の影響について、マウス腹膜播種モデルを使用して検討した。また、腹腔内投与薬液の腹腔内残量に対する架橋ヒアルロン酸の影響について、ＢＡＬＢ／ｃマウスを使用して検討した。
【００６６】
抗がん剤としてタキソールを、架橋ヒアルロン酸として、ＮＡＳＨＡ（Ｑ−Ｍｅｄ社製）を使用した。
【００６７】
マウス腹膜播種モデルは、実施例１に記載の方法と同様の方法で作成した。
【００６８】
（方法）
タキソール単回腹腔内投与後の腹膜播種結節内タキソール濃度に対する架橋ヒアルロン酸の効果を、４群のマウス腹膜播種モデルを用いて検討した。２群にはタキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）を含む１ｍｌのＰＢＳを、別の２群にはタキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と５％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳを投与した。投与は、マウス腹膜播種モデル作成の３週後に腹腔内経路により１回行った。
【００６９】
マウス腹膜播種モデルにおける腹膜播種結節内の抗がん剤濃度への架橋ヒアルロン酸の影響は、投与から３時間または１２時間後にマウスを開腹し結節内のタキソール濃度を測定することにより判定した。
【００７０】
さらに、腹腔内投与薬液の腹腔内貯留時間への架橋ヒアルロン酸の影響をＢＡＬＢ／ｃマウスを用いて経時的に検討した。一方のマウスには５ｍＬのＰＢＳを、他方のマウスには５％ＮＡＳＨＡを含む５ｍＬのＰＢＳを腹腔内投与し、投与開始後から９０分、１８０分、および３６０分後に開腹して、腹腔内に残留した液体成分を測定した。
【００７１】
（結果）
播種結節内タキソール濃度は、薬剤投与後３時間または１２時間のいずれにおいても、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて投与した群で、タキソール単独投与群と比較して高値であることが判明した（図４）。さらに、２４時間後の播種結節内タキソール濃度も、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて投与した群で、タキソール単独投与群と比較して高値であった（１６１０ｎｇ／ｇ  ｖｓ．  ３３６ｎｇ／ｇ）。
【００７２】
投与薬液の腹腔内残量の検討では、ＮＡＳＨＡの添加による投与残量の増加を認めた（図５）。
【００７３】
（考察）
架橋ヒアルロン酸であるＮＡＳＨＡを薬剤と組み合わせて腹腔内投与することにより、腹膜播種結節内に薬剤を高濃度に取り込ませることができる。また、架橋ヒアルロン酸を薬剤と組み合わせて投与することにより、腹腔内投与薬液の腹腔内貯留時間を延長することができる。
【００７４】
実施例１の結果と併せて考察すると、架橋ヒアルロン酸をタキソールと組み合わせて腹腔内投与することにより得られる腹膜播種に対する抗腫瘍効果の増強は、架橋ヒアルロン酸の投与薬剤保持作用によるものと考えられる。ヒアルロン酸は生体を形成する物質でわれわれの体内にも生理的に存在し、これまで様々な薬品としても既に使用されているため、坑がん剤の基質としての臨床応用が期待される。
【実施例３】
【００７５】
マウス腹膜播種モデルにおける抗がん剤の効果への架橋ヒアルロン酸の影響を、非架橋ヒアルロン酸と比較検討した。
【００７６】
抗がん剤としてタキソールを使用した。
【００７７】
架橋ヒアルロン酸として、ＮＡＳＨＡ（Ｑ−Ｍｅｄ社製）を使用した。また、非架橋ヒアルロン酸として、スベニール登録商標（中外製薬社製）を使用した。スベニールは分子量１９０万〜２５０万のヒアルロン酸ナトリウムを含む製剤である。
【００７８】
マウス腹膜播種モデルは、実施例１に記載の方法と同様の方法で作成した。
【００７９】
（方法）
３群のマウス腹膜播種モデルを用い、３回のタキソール投与による化学療法の抗腫瘍効果に対する各ヒアルロン酸の効果を検討した。３群のマウスには、１ｍｌのＰＢＳ、タキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１０％ＮＡＳＨＡとを含む１ｍｌのＰＢＳ、およびタキソール（２０ｍｇ／ｋｇ）と１０％スベニール登録商標とを含む１ｍｌのＰＢＳをそれぞれ投与した。投与は、マウス腹膜播種モデル作成の１週後より、腹腔内経路により週１回の頻度で３回行った。効果の判定は、最終投与より１週後に行った。
【００８０】
マウス腹膜播種モデルにおける抗がん剤の効果への架橋ヒアルロン酸の影響は、マウスを開腹し形成された腹膜播種結節数を計測することにより判定した。
【００８１】
（結果）
腹腔播種結節数は、１０％ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群で、コントロール群より有意に減少が認められた（図６）。このことから、ＮＡＳＨＡがタキソールの抗腫瘍効果増強作用を示すことが判明した。これに対し、１０％スベニール登録商標とタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群では、このような増強作用は見られなかった。
【００８２】
（考察）
腹膜播種に対する抗がん剤の効果の増強には、非架橋ヒアルロン酸より架橋ヒアルロン酸が有効であると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【００８３】
本発明に係る薬剤、方法および使用は、腹腔内に投与された抗がん剤の腹腔内貯留時間の延長効果を有し、そのため、抗がん剤の十分な効果をもたらすものである。本発明により、腹腔内に存在する臓器に発生するがんやそれに合併する治療困難な腹膜播種の有効な治療が可能になる。このように、本発明は、医薬分野における利用可能性が極めて高く有用である。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】マウス腹腔播種モデルで形成された腹腔播種結節数が、５％ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて３回腹腔内投与した群で、タキソール単独３回腹腔内投与群より有意に減少したことを示す図である。図中、Ｃｏｎｔ．はＰＢＳ投与群、Ｔｘはタキソール投与群、ＨＡ＋Ｔｘは５％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、ＨＡ＋Ｃｒは５％ＮＡＳＨＡとクレモフォール投与群を表す。（実施例１）
【図２】マウス腹腔播種モデルで形成された腹腔播種結節数が、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて３回腹腔内投与した群で、タキソール単独３回腹腔内投与群より有意に減少したこと、およびＮＡＳＨＡの効果が濃度非依存的であることを示す図である。図中、ＰＢＳはＰＢＳ投与群、Ｔｘはタキソール投与群、１％ＨＡ＋Ｔｘは１％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、５％ＨＡ＋Ｔｘは５％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、１０％ＨＡ＋Ｔｘは１０％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群を表す。（実施例１）
【図３】マウス腹腔播種モデルで形成された腹腔播種結節数が、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて単回腹腔内投与した群で、タキソール単独単回腹腔内投与群より有意に減少したこと、およびＮＡＳＨＡの効果が濃度非依存的であることを示す図である。図中、ＰＢＳはＰＢＳ投与群、Ｔｘはタキソール投与群、１％ＨＡ＋Ｔｘは１％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、１０％ＨＡ＋Ｔｘは１０％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、５０％ＨＡ＋Ｔｘは５０％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群を表す。（実施例１）
【図４】マウス腹腔播種モデルで形成された腹腔播種結節内のタキソール濃度が、薬剤投与後３時間（３Ｈ）または１２時間（１２Ｈ）のいずれにおいても、ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて投与した群（黒カラムで示す）で、タキソール単独投与群（白カラムで示す）と比較して高値であったことを示す図である。（実施例２）
【図５】ＢＡＬＢ／ｃマウスに腹腔内投与したＰＢＳの腹腔内残量が、ＰＢＳに５％ＮＡＳＡＨを混じること（黒四角で示す）によって、薬液のみ投与した（白四角で示す）ときと比較して増加したことを経時的に示す図である。（実施例２）
【図６】マウス腹腔播種モデルで形成された腹腔播種結節数が、１０％ＮＡＳＨＡとタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群で、コントロール群より有意に減少が認められたが、これに対し、１０％スベニール登録商標とタキソールとを組み合わせて腹腔内投与した群では、このような増強作用が見られなかったことを示す図である。図中、ＮＣはＰＢＳ投与群、１０％ＮＡＳＨＡ＋Ｔｘは１０％ＮＡＳＨＡとタキソール投与群、１０％スベニール＋Ｔｘは１０％スベニール登録商標とタキソール投与群を表す。（実施例３）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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