(57)【要約】【課題】人体や動植物に対する有害性が低く、取り扱いが容易な抗菌組成物を提供する。【解決手段】本発明の抗菌組成物は、水と、抗菌作用を有する金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子と、金属ナノ粒子とリン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とを結合する結合材とを含む。本発明の抗菌組成物は、金属ナノ粒子として、Ｐｔナノ粒子および／またはＡｇナノ粒子を含み、結合材として、アミノ基及びカルボキシル基を有する水溶性化合物および／または−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する水溶性化合物を含み、生体親和性の高いリン酸カルシウム系化合物を含んでいるから有害性が低い。本発明の抗菌組成物中では金属ナノ粒子が結合材を介してリン酸カルシウム系化合物と結合しており、リン酸カルシウム系化合物が捕獲した菌類に金属ナノ粒子が接触して、抗菌作用を発揮する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
水と、抗菌作用を有する金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子と、前記金属ナノ粒子と前記リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とを結合する結合材とを含み、
前記金属ナノ粒子が、Ｐｔナノ粒子および／またはＡｇナノ粒子であり、
前記結合材が、アミノ基及びカルボキシル基を有する水溶性化合物および／または−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する水溶性化合物であることを特徴とする抗菌組成物。
【請求項２】
前記リン酸カルシウム系化合物が、ＣａＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ（リン酸一水素カルシウム）、Ｃａ３（ＰＯ４）２（リン酸三カルシウム）、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２（ヒドロキシアパタイト）のうちの一種以上であることを特徴とする請求項１に記載の抗菌組成物。
【請求項３】
前記結合材が、ヒスチジン、システイン、アルギニン、リシン、メチオニン、およびセリンからなる群より選ばれるアミノ酸、前記アミノ酸を一種以上含むペプチド、前記アミノ酸を一種以上含むタンパク質、またはＮ−ビニルピロリドンのポリマーであることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の抗菌組成物。
【請求項４】
前記金属ナノ粒子が、前記抗菌組成物の全重量に対して３ｐｐｍ〜６００ｐｐｍ含まれることを特徴とする請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の抗菌組成物。
【請求項５】
前記金属ナノ粒子の平均粒子径が３ｎｍ〜５０ｎｍであることを特徴とする請求項１〜請求項４のいずれか一項に記載の抗菌組成物。
【請求項６】
請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の抗菌組成物の製造方法であって、
前記金属ナノ粒子の水分散液と、前記結合材の水分散液とを混合した後、前記リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子を添加して混合することを特徴とする抗菌組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌組成物およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
微生物の増殖を防ぐ抗菌剤としては、高濃度アルコール、塩素、ヨウ素、次亜塩素酸化合物、オゾン、過酸化水素、クレゾール、イミダゾール系化合物等の合成化学品（例えば、特許文献１を参照）、およびユーカリ油などの天然物抽出物質などが知られており、用途・目的に応じ使い分けられている。
【０００３】
これらの抗菌剤は、抗菌効果が高いことから多用されているが、誤飲や揮発成分の吸引により人体に入ると危険であるし、安全な濃度が人により相違し、接触により皮膚炎などのアレルギー症状をおこすなどの問題がある。
【０００４】
また、特許文献１に記載の抗菌組成物に使用されているイミダゾール系化合物などの合成化学品は、多用すると耐性菌が発現するという問題もある。
【特許文献１】特開２００４−３３９１０２公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記以外の抗菌剤としては、たとえば鳥インフルエンザ発生現場において使用される石灰、光触媒酸化チタン、銀イオン含有抗菌剤、農業用の殺菌剤、家畜などに投与される抗生物質などが知られている。これらのうち、石灰は水との接触により発熱し強アルカリ性を示すことから、接触によるやけどなどの発生が懸念され、使用の際には、細心の注意を払う必要がある。  
【０００６】
光触媒酸化チタンは、紫外線存在下では優れた抗菌効果を発揮できるが、紫外線の存在が不可欠であり、周辺の有機物を区別することなく分解するという欠点を有している。
銀イオン含有抗菌剤は、抗菌性に優れ、安全性も高いが、銀イオンは、多くの細胞よりもはるかに小さいサイズであるため、皮膚などの消毒に用いると皮膚の細胞内に入るおそれがある。
【０００７】
農業用の殺菌剤としては、ボルドー液、石灰硫黄合剤、ジチオカーバメート、ベンズイミダゾール系抗生物質などの薬品が使用されるが、散布者は使用濃度、散布回数、十二分な防護服の着用、および周囲への配慮が必要である。
家畜類や魚類などの病気を予防するために投与される抗生物質は、耐性菌の発現や、これらを食する人間への健康についても配慮する必要がある。
したがって、従来から、抗菌剤として使用されているものは、抗菌効果が高い半面、毒性などの有害性が高かったり、有用なものを分解したり、細胞内に入るおそれがあるなどの欠点を有しており、安全かつ効果的に使用するのが容易ではなかった。
本発明は上記のような事情に基づいて完成されたものであって、人体や動植物に対する有害性が低く、取り扱いが容易な抗菌組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
すなわち本発明は、水と、抗菌作用を有する金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子と、前記金属ナノ粒子と前記リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とを結合する結合材とを含み、前記金属ナノ粒子が、Ｐｔナノ粒子および／またはＡｇナノ粒子であり、前記結合材が、アミノ基及びカルボキシル基を有する水溶性化合物および／または−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する水溶性化合物であることを特徴とする抗菌組成物、およびその製造方法である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の抗菌組成物中では、抗菌作用を有する金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とが結合材を介して結合しており、この結合粒子の大きさは金属イオンよりもかなり大きいから、細胞内に入りにくい。
【００１０】
本発明の抗菌組成物に含まれている、リン酸カルシウム系化合物は生体との親和性が高い成分であり、Ｐｔナノ粒子、Ａｇナノ粒子、アミノ基及びカルボキシル基を有する水溶性化合物のナノ粒子、および−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する水溶性化合物のナノ粒子は人体や動植物に対する有害性の低い成分である。
したがって、本発明の抗菌組成物は、細胞内に入り難く、人体や動植物に対する有害性が低い。
【００１１】
また、本発明の抗菌組成物中に含まれるリン酸カルシウム系化合物のナノ粒子は、生体成分とのなじみがよい成分であるため、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子に付着した菌類は簡単には離脱できずに、そのまま捕獲される。
そしてこのリン酸カルシウム系化合物と結合材を介して結合している抗菌作用を有する金属ナノ粒子が、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子に捕獲された菌類に接触して、抗菌作用を発揮するから、確実にかつ早期に抗菌効果が発現する。
【００１２】
以上より、本発明によれば、人体や動植物に対する有害性が低く、取り扱いが容易な抗菌組成物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の抗菌組成物（以下、単に「組成物」ともいう）には、水と、抗菌作用を有する金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子と、金属ナノ粒子と無機化合物のナノ粒子とを結合する結合材として作用する水溶性化合物のナノ粒子とが含まれる。
【００１４】
抗菌作用を有する金属としては、Ｐｔ、Ａｇ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｐｂ、Ｎｉ、Ｃｒ、青銅および黄銅などが挙げられるが、安全性が高く、用途が広範であるという観点から、ＡｇおよびＰｔが好ましい。
【００１５】
Ａｇは、抗菌作用があるにもかかわらず、古くから食器にも用いられており、食品添加物として製菓材料のアラザンや清涼剤（仁丹）の表面コートに使用される程度に安全性が高いという点と、Ｐｔと比較すると低価格であることから特に好ましい。
【００１６】
本発明においては上記抗菌作用を有する金属を、電解法、ビーズミル粉砕法などの方法により、金属粒子を所望の大きさに粉砕してナノ粒子としたものや、市販されている金属ナノ粒子などを用いることができる。
【００１７】
上記金属をナノサイズ粒子に粉砕する方法のうち、平均粒子径が１０ｎｍ以下の微細な粒子を得ることができるという点で電解法が好適である。
【００１８】
抗菌作用を有する金属をナノ粒子とすることで、菌類との接触表面積を広くし、少ない量でありながら効率よく抗菌性を発揮することができるとともに、水中で均一に分散させることができる。
なお、本明細書において、「菌類」とは、ウイルス、細菌、真菌などの微生物を意味する語として用いる。
【００１９】
本発明で使用する金属ナノ粒子の平均粒子径は、３ｎｍ〜５０ｎｍであるのが好ましく、３ｎｍ〜１５ｎｍであるとさらに好ましい。金属ナノ粒子の平均粒子径が５０ｎｍを超えると、水中での安定性や分散性が十分でなくなることがあるからである。
【００２０】
金属ナノ粒子とともに、本発明の組成物に含まれるリン酸カルシウム系化合物は、生体のタンパク質やリン酸基と結合しやすい性質（生体親和性が高い）を有し、ヒトや動植物に対して親和性が高いだけではなく、菌類が付着しやすく簡単には離脱しないという性質をも有する。
【００２１】
本発明において、リン酸カルシウム系化合物としては、ＣａＨＰＯ４（モネタイト）、ＣａＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ（リン酸一水素カルシウム）、Ｃａ３（ＰＯ４）２（リン酸三カルシウム：ＴＣＰ）、Ｃａ４（ＰＯ４）２Ｏ（リン酸四カルシウム：ＴｅＣＰ）、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２（ヒドロキシアパタイト：ＨＡＰ）、Ｃａ８Ｈ２（ＰＯ４）６・５Ｈ２Ｏ（リン酸八カルシウム：ＯＣＰ）、３Ｃａ３（ＰＯ４）２・Ｃａ（ＯＨ）２［ボーンアッシュ（骨灰）］、ＣａＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ＋Ｃａ（ＯＨ）２（骨リン）及び、ボーンチャイナ（焼成不良、成型不良などの不用品）などの難溶性のリン酸カルシウム類を用いることができる。
【００２２】
上記リン酸カルシウム系化合物のうち、ＣａＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ（リン酸一水素カルシウム）、Ｃａ３（ＰＯ４）２（リン酸三カルシウム：ＴＣＰ）、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２（ヒドロキシアパタイト：ＨＡＰ）は、安全性が高いという点で、好ましく、生体との親和性が高いという点でＨＡＰが特に好ましい。
【００２３】
なお、ＨＡＰ以外のリン酸カルシウム系化合物を、ｐＨが５未満の状態で、水に溶解させると、ＨＡＰに転化し、ＣａＣＯ３（炭酸カルシウム）存在下、ｐＨ７未満の状態でリン酸一水素カルシウムやＣａＨＰＯ４を水に溶解すると、ＨＡＰへの転化が進行する。本発明においては、このようにして得られたＨＡＰを使用してもよい。
【００２４】
本発明では、上記リン酸カルシウムを以下の方法により粉砕してナノ粒子としたものを用いる。
ボーンチャイナ以外の上記リン酸カルシウム系化合物は、例えばビーズミル法（ジルコニウムボール使用）により粉砕してナノ粒子とし、ボーンチャイナは、粗粉砕してから、ボールミルで平均粒子径が１０〜１００μｍ程度になるまで粉砕し、さらにビーズミル法によりナノ粒子とする。
【００２５】
リン酸カルシウム系化合物の平均粒子径は、５０ｎｍ〜５００ｎｍであるのが好ましく、１００ｎｍ〜３５０ｎｍであるとさらに好ましい。平均粒子径が５００ｎｍを超えると水中に浮遊・分散し難くなるからである。
なお、リン酸カルシウム系化合物と同様に生体親和性材料として知られている、生体ガラスや金属チタンをそのまま使用したりその表面にアパタイトを被覆したものを使用することも考えられるが、これらをナノサイズ化しさらにその表面に金属ナノ粒子を被覆するのは、時間と費用がかかる点で好ましくない。
【００２６】
本発明の組成物に含まれる、金属ナノ粒子とリン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とを結合する結合材としては、アミノ基及びカルボキシル基を有する水溶性化合物や−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する水溶性化合物等を用いることができる。
【００２７】
アミノ基およびカルボキシル基を有する化合物としては、アラニン、アルギニン、システイン、グルタミン、グリシン、ヒドロキシプロリン、プロリン、セリン、アスパラギン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、スレオニン、バリン、リシン（リジン）などの水溶性のアミノ酸などが挙げられる。
【００２８】
−ＨＮＣ＝Ｏ基を有する化合物としては、上記アミノ酸を含む水溶性のペプチドや水溶性タンパク質、Ｎ−ポリビニルピロリドンのポリマー、Ｎ−ジメチルアクリルアミドポリマーなどが挙げられる。
【００２９】
本発明に用いる結合材には、金属ナノ粒子とリン酸カルシウム系化合物とを結合する機能とともに、金属ナノ粒子を安定化する役割と、水中での分散性や溶解性が求められる。
このような点を考慮すると、本発明において結合材としては、ヒスチジン、システイン、アルギニン、リシン、メチオニン、セリンなどの水溶性のアミノ酸や、これらのアミノ酸のうち少なくとも一種を含む水溶性のペプチドや水溶性のタンパク質、Ｎ−ポリビニルピロリドンが好ましい（詳細は、試験例１を参照）。
【００３０】
上記結合材のうち、水溶性のアミノ酸は、ラットにおける経口投与によるＬＤ５０が、体重１ｋｇ当たり１０ｇ以上のものが大半であり（システインのみ３．１ｇ）、安全性が高いので特に好ましい。
【００３１】
次に、本発明の組成物の製造方法について説明する。
まず、上述した方法により所定の大きさに粉砕した金属ナノ粒子または市販の金属ナノ粒子と、結合材とを別々に水に分散させて金属ナノ粒子の水分散液（Ａ）および結合材の水溶液（Ｃ）を調製し、リン酸カルシウム系化合物を粉砕してナノ粒子としたもの（Ｂ）を作製する。
このようにして得られた（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）を混合すると本発明の組成物が得られる。
【００３２】
上述したように、本発明において結合材は金属ナノ粒子を安定化する役割をも有しているため、金属ナノ粒子の水分散液（Ａ）と結合材の水溶液（Ｃ）を混合してから、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子（Ｂ）を添加して混合するのが好ましい。このような順で混合することで、結合材により安定化された金属ナノ粒子が、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子の表面に確実に付着される。
【００３３】
（Ａ）と（Ｂ）とを混合した後（Ｃ）を混合したとしても、金属ナノ粒子と、リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子とが結合材を介して結合するが、上記方法により製造した組成物と同様の状態になるまでに、時間がかかる。
なお、本発明において使用する水は、純水であるのが好ましい。陰イオン成分（塩素イオン、硝酸イオン、硫酸イオン）などを含む水を用いると、金属ナノ粒子との反応により沈殿や色の変化を生じるからである。
【００３４】
本発明の組成物中の各成分の量（実際に使用される状態での組成物中の量）は以下の通りである。
抗菌性を有する金属ナノ粒子の含有量は、適用する菌種、用途（即効性が求められるか否か等）、結合材の種類によって選択されるが、多すぎるとコスト高になる上に、変色しやすくなるため、組成物全体に対して１ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍであるのが好ましく、３〜３００ｐｐｍであるのがさらに好ましい。
【００３５】
リン酸カルシウム系化合物のナノ粒子の含有量は、組成物全体に対しては、５ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍが好ましく、５ｐｐｍ〜８０ｐｐｍであるとさらに好ましい。
【００３６】
結合材の含有量は、金属ナノ粒子の含有量の１／１０量〜１０倍量であるのが好ましい。結合材が金属ナノ粒子の量の１０倍量を超えて含まれていると、金属ナノ粒子の抗菌作用が有効に発揮できなくなるからである。
【００３７】
本発明の組成物には、ｐＨの変動を防ぐために、上記以外の成分としてリン酸緩衝液などを添加してもよい。本発明の組成物には、他の抗菌剤を添加することもできるが、その際には、安全性を考慮する必要がある。
本発明の組成物は、たとえば、手指の消毒や、犬や猫などのペットの身体を洗うために用いたり、病気の予防のためにペットや家畜の飲用水として用いたり、切り花の鮮度保持用の水や、植物の洗浄水、病院等の空調用の水などとして用いることができる。
【００３８】
＜試験例１＞
本発明に用いる結合材には、金属ナノ粒子とリン酸カルシウム系化合物とを結合する機能とともに、金属ナノ粒子を安定化する役割が求められるため、以下の方法により、金属ナノ粒子を安定化するのに適した結合材について検討を行った。
（１）安定性試験１
金属ナノ粒子の水分散液としては、粒子径が４ｎｍで濃度が１５０ｐｐｍのＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を用い、このＡｇナノ粒子と、純水（ｐＨ６．５〜７．５）とを使用して、１００ｐｐｍの濃度のＡｇナノ粒子の水分散液を調製した。
上記Ａｇナノ粒子の水分散液とは別に、表１に示す各種アミノ酸と純水とを使用して、各種アミノ酸を１００ｐｐｍ濃度で含有するアミノ酸の水溶液を調製した。本試験および以下に記載する試験例においては、アミノ酸として、市販されている試薬（Ｌ体のもの）を用いた。
【００３９】
ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）製の透明ビンに、アミノ酸の水溶液と、Ａｇナノ粒子の１００ｐｐｍ濃度の水分散液とを、１／１（質量比）の割合で入れてから、混合したものを２個ずつ用意した（Ａｇナノ粒子とアミノ酸の最終濃度はそれぞれ５０ｐｐｍ）。比較のために、Ａｇナノ粒子のみを１００ｐｐｍ濃度で含む水分散液を２個用意した。
２個のうち一方を４０℃で１０日間、他方を２０℃で３０日間、直射日光があたらないように放置し、変色の有無を観察し、結果を以下の判定基準により判断して表１に示した。
【００４０】
◎：変化なし
○：若干の変色が認められた
△：少し変色した
×：変色した
【００４１】
【表１】
2009046410.tif 000002
【００４２】
表１から、２０℃で３０日放置した後の安定性は、ヒスチジン、システイン、アルギニン、リシン、メチオニン、セリン、トリプトファン、アスパラギン、グルタミン、フェニルアラニンで良好であった。
これらのうち、ヒスチジン、システイン、アルギニン、リシン、メチオニン、セリンは４０℃１０日放置後の安定性も良好であった。
【００４３】
以上より、本発明に使用する結合材としては、ヒスチジン、システイン、アルギニン、リシン、メチオニン、セリンが好ましいということがわかった。
【００４４】
（２）安定性試験２
安定性試験１の結果が、２０℃で３０日放置後の結果が◎、○、△だったアミノ酸について、以下に示す安定性試験２を行った。
粒子径が４ｎｍで濃度が１５０ｐｐｍのＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］と、純水（ｐＨ６．５〜７．５）とを使用して、２０ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍの濃度のＡｇナノ粒子の水分散液をそれぞれ調製した。
【００４５】
安定性試験１の結果が、２０℃で３０日放置後の結果が◎、○、△だった各種アミノ酸を１００ｐｐｍ濃度で含有するアミノ酸の水溶液を調製した。
【００４６】
ＰＥＴ製の透明ビンに、アミノ酸の水溶液と、Ａｇナノ粒子の水分散液とを入れて［１／１（質量比）］、混合したものをＡｇナノ粒子の濃度ごとに用意した。比較のためにアミノ酸を含まず、Ａｇナノ粒子を１００ｐｐｍ濃度で含む水分散液を用意した。
これらを２０℃で３０日間、直射日光があたらないように放置し、変色の有無を観察し、結果を以下の判定基準により判断して表２に示した。
【００４７】
◎：変化なし。
○：若干の変色が認められた。
△：少し変色した。
×：変色した。
【００４８】
表２に記載のＡｇナノ粒子の濃度は、アミノ酸水溶液との混合後の最終濃度で示した。表中、Ａｇナノ粒子の最終濃度が７５ｐｐｍのものは、上記の１５０ｐｐｍの濃度のＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］をそのまま用いて調製し、Ａｇナノ粒子の最終濃度が１５０ｐｐｍのものは、粒子径が４ｎｍで濃度が３００ｐｐｍのＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を用いて調製した。
【００４９】
【表２】
2009046410.tif 000003
【００５０】
表２から、銀の濃度が高いものほど、安定性が悪くなるということがわかった。
【００５１】
（３）安定性試験３
結合材としてＮ−ビニルピロリドンポリマーを検討した。
金属ナノ粒子の水分散液としては、粒子径が４ｎｍで濃度が１５０ｐｐｍのＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を用いた。
このＡｇナノ粒子の水分散液と、純水（ｐＨ６．５〜７．５）とを使用して、１００ｐｐｍの濃度のＡｇナノ粒子の水分散液を調製した。
【００５２】
Ｎ−ビニルピロリドンポリマー［ＢＡＳＦ（株）製、商品名「Ｌｕｖｉｔｅｃ  Ｋ−３０」］３０％水溶液と純水とを使用して、Ｎ−ビニルピロリドンポリマーを１００ｐｐｍ濃度で含有する結合材の水溶液を調製した。
【００５３】
次に、ＰＥＴ製の透明ビンに、上記結合材の水溶液と、Ａｇナノ粒子の１００ｐｐｍ濃度の水分散液とを入れて［１／１（質量比）］混合し、４０℃で１０日間、直射日光があたらないように放置し、変色の有無を観察すると、やや変色が認められた（上記安定性試験１および２で示した判定基準△に相当）。
【００５４】
＜試験例２＞
次に本発明の組成物を作製し、その抗菌性について調べた。
（１）実施例１の組成物の調製
金属ナノ粒子の水分散液として、粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子を５０００ｐｐｍ含有するＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を用いた。
結合材として、ヒスチジンを用い、ヒスチジンを５０００ｐｐｍの濃度で含有する結合材の水溶液を調製した。
【００５５】
リン酸カルシウム系化合物としてヒドロキシアパタイト（宇部マテリアルズ製）を用い、粒子径が３００ｎｍになるように粉砕してから、固形分の濃度が１０質量％となるように純水に分散させてヒドロキシアパタイトの水分散液を調製した。
【００５６】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子１０００ｐｐｍ、ヒスチジン１０００ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト１００００ｐｐｍとなるように、Ａｇ水分散液と、結合材水溶液とを混合してからヒドロキシアパタイトの水分散液を添加して混合し、得られた組成物を実施例１の組成物とした。
なお、本実施例および以下の実施例および比較例において、組成物および水分散液の調製に使用する水としては、特に断りのない限り、純水を用いた。
【００５７】
（２）抗菌性試験
比較例１としてヒドロキシアパタイトを１００００ｐｐｍの濃度で含む水分散液、比較例２として精製水を使用して、以下の方法によりウイルスに対する抗菌性を調べた。
【００５８】
ウイルスとして、鳥インフルエンザウイルス［１９８３年に島根県で野生のコハクチョウから分離された、Ａ／ｗｈｉｓｔｌｉｎｇ  ｓｗａｎ／ｓｃｈｉｍａｎｅ／４９９／８３（Ｈ５Ｎ３）］を用いた。
【００５９】
まず、１０日齢発育鶏卵を用いて上記鳥インフルエンザウイルスを増殖させたウイルス漿尿液を、精製水で約１０６．０ＥＩＤ５０／０．１ｍｌに希釈したもの（以下、ウイルス希釈液という）を調製した。なお、ＥＩＤ５０とはｅｇｇ−ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  ｄｏｓｅ（５０％発育鶏卵感染量）を意味する。
【００６０】
次に、全量が６．０ｍｌとなるように、実施例１の組成物、比較例１の水分散液および比較例２の精製水（以下、試験品ともいう）に、それぞれウイルス希釈液を０．６ｍｌずつ加えて、試験品−ウイルス液を調製した。
この試験品−ウイルス液を４℃で１時間攪拌したものと６時間攪拌したものとを用意した。攪拌後の試験品−ウイルス液の一部を回収し、１０倍段階希釈した後、１０日齢の発育鶏卵の漿尿膜腔内に０．１ｍｌずつ接種した。
【００６１】
接種後の発育鶏卵を３７℃、２日間培養した後、赤血球凝集（ＨＡ）試験により漿尿膜腔でのウイルス増殖の有無を確認し、試験品−ウイルス液中のウイルス力価をＲｅｅｄ  ａｎｄ  Ｍｕｅｎｃｈの方法により算出した。結果を以下に示した。
【００６２】
なお、試験品との混合前のウイルス希釈液のウイルス力価は６．５（ウイルス不活性率０％）であった。ウイルス力価の数値は低いほどウイルスの不活性率が高いことを示す。具体的には、ウイルス力価が５．５の場合ウイルスの不活性率は約９０％であり、ウイルス力価が１低くなると、ウイルスの活性率が約１／１０減少する。
【００６３】
実施例１  （１時間攪拌）ウイルス力価０．５
（６時間攪拌）ウイルス力価−０．５
比較例１  （１時間攪拌）ウイルス力価３．３
（６時間攪拌）ウイルス力価１．８
比較例２  （１時間攪拌）ウイルス力価２．５
（６時間攪拌）ウイルス力価１．５
【００６４】
上記の結果より、実施例１の組成物を用いると、１時間攪拌するだけでウイルス力価が顕著に低くなった。このことから本発明の組成物は、充分な抗菌作用を有していることがわかった。
【００６５】
＜試験例３＞
Ａｇナノ粒子の濃度を変えた組成物を各種作製し、その抗菌性について調べた。
（１）実施例２〜９の組成物の調製
最終濃度がＡｇナノ粒子１ｐｐｍ、ヒスチジン１ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト１ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例２の組成物を調製した。
【００６６】
最終濃度がＡｇナノ粒子５ｐｐｍ、ヒスチジン５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例３の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子１０ｐｐｍ、ヒスチジン２５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト２５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例４の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子１５ｐｐｍ、ヒスチジン５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例５の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子２０ｐｐｍ、ヒスチジン２５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト２５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例６の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子２５ｐｐｍ、ヒスチジン２５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト２５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例７の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子１００ｐｐｍ、ヒスチジン１００ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト１００ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例８の組成物を調製した。
最終濃度がＡｇナノ粒子１０００ｐｐｍ、ヒスチジン１０００ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト１０００ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして実施例９の組成物を調製した。
【００６７】
最終濃度がＡｇナノ粒子０ｐｐｍ、ヒスチジン１０００ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト１０００ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１と同様にして比較例３の組成物を調製した。
【００６８】
（２）抗菌性試験（銀濃度）
全量が６．０ｍｌとなるように、実施例２〜９および比較例３の組成物（以下、試験品ともいう）に、それぞれウイルス希釈液を０．６ｍｌずつ加えて、試験品−ウイルス液を調製した。
実施例２〜８の組成物を用いた、試験品−ウイルス液を４℃で１時間攪拌し、攪拌後の試験品−ウイルス液の一部を回収し、１０倍段階希釈した後、１０日齢の発育鶏卵の漿尿膜腔内に０．１ｍｌずつ接種した。
【００６９】
接種後の発育鶏卵を３７℃、２日間培養した後、試験例２の（２）の抗菌性試験と同様にして、ウイルス力価を測定し、結果を表３に示した。
【００７０】
（３）抗菌性試験（反応時間）
ウイルス希釈液との攪拌時間を変えた場合の抗菌性について調べた。
実施例８および９の組成物を用い、試験品−ウイルス液の攪拌時間を１０分、および３０分としたこと以外は、（２）の抗菌性試験（銀濃度）と同様にしてウイルス力価を測定し、結果を、（２）の結果とともに表３に示した。
【００７１】
【表３】
2009046410.tif 000004
【００７２】
表３に示す結果より、Ａｇナノ粒子が１ｐｐｍ含まれていれば、抗菌性を発揮し、Ａｇナノ粒子の量が多くなるに従い、早期に抗菌性が発現することがわかった。
【００７３】
＜試験例４＞
次に、本発明の組成物を人体に適用した場合の抗菌性について調べた。
（１）実施例１０の組成物の調製
金属ナノ粒子の水分散液として、粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を１５０ｐｐｍ含有するＡｇナノ粒子の水分散液を調製した。
結合材として、メチオニンを用い、メチオニンを１００ｐｐｍの濃度で含有する結合材の水容液を調製した。
【００７４】
リン酸カルシウム系化合物としてリン酸三カルシウム（宇部マテリアルズ製）を、ジルコニウムビーズを用いてビーズミルにて平均粒子径が３００ｎｍまで粉砕してから、濃度が５０ｐｐｍとなるように純水に分散させてリン酸三カルシウムの水分散液を調製した。
【００７５】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子２５ｐｐｍ、メチオニン２５ｐｐｍ、リン酸三カルシウム２５ｐｐｍとなるように、Ａｇ水分散液と、結合材水溶液とを混合してからリン酸三カルシウムの水分散液を添加して混合し、得られた組成物を実施例１０の組成物とした。
【００７６】
（２）抗菌性試験
実施例１０の組成物をスプレー容器に入れ、約５ｍｌを３本の手指に吹き付けた後、２分経過後、６分経過後、および１５分経過後に、手指に存在する菌類の状況を観察した。
具体的には、実施例１０の組成物を吹き付ける前と、吹き付けてから上記所定時間経過した手指をこすりつけたバイオチェッカーＴＴＣを３５℃で３日間養生して菌類の状況を観察した。
【００７７】
スプレー吹き付け前のものに関しては１０３のコロニーが観察され、吹きつけ後２分経過後のもの、吹きつけ後６分経過後、および吹きつけ後１５分経過後のものに関してはコロニーは観察されなかった。
このことから本発明によれば、短時間に抗菌効果が発揮されることがわかった。
【００７８】
＜試験例５＞
さらに、本発明の組成物中のリン酸カルシウム系化合物の量について検討した。
（１）実施例１１〜１３および比較例４の組成物の調製
金属ナノ粒子の水分散液として、粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を１５０ｐｐｍ含有するＡｇナノ粒子の水分散液を調製した。
【００７９】
結合材として、メチオニンを用い、メチオニンを１００ｐｐｍの濃度で含有する結合材の水溶液を調製した。
リン酸カルシウム系化合物としてヒドロキシアパタイト（宇部マテリアルズ製）を用い、ジルコニウムビーズを用いてビーズミルにて平均粒子径が１００ｎｍまで粉砕してから、固形分の濃度が１０質量％となるように純水に分散させてヒドロキシアパタイトの水分散液を調製した。
【００８０】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子２．５ｐｐｍ、メチオニン２．５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト５ｐｐｍとなるように、Ａｇ水分散液と、結合材分散液とを混合してからヒドロキシアパタイトの水分散液を添加して混合し、得られた組成物を実施例１１の組成物とした。
【００８１】
最終濃度がＡｇナノ粒子２．５ｐｐｍ、メチオニン２．５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイト５０ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１１と同様にして、得られた組成物を実施例１２の組成物とした。
【００８２】
最終濃度がＡｇナノ粒子２．５ｐｐｍ、メチオニン２．５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトが１００ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１１と同様にして、得られた組成物を実施例１３の組成物とした。
【００８３】
ヒドロキシアパタイトを含まないこと以外は、実施例１１と同様にして得られた組成物を比較例４の組成物とした。
【００８４】
（２）抗菌性試験
ヒトインフルエンザウイルス  Ａ／Ａｉｃｈｉ／２／６８（Ｈ３Ｎ２）と、イヌパルボウイルス  Ｃｐ４９株を用いて以下の方法により抗菌試験を行った。
実施例８〜１０および比較例４の組成物をそれぞれ上記２種のウイルスと混合し、３７℃で３０分間振とうした後、遠心して上清を試料として残存ウイルス数を評価した。
具体的には、ヒトインフルエンザウイルスはＭＤＣＫ細胞を、イヌパルボウイルスはＣＲＦＫ細胞を用いて、財団法人畜産生物安全科学研究所の方法により残存ウイルス数を評価した。
表４には、試験結果と実施例１１〜１３および比較例４の組成物のヒドロキシアパタイトの最終濃度を示した。
【００８５】
【表４】
2009046410.tif 000005
【００８６】
ヒドロキシアパタイトを含む実施例１１〜１３の組成物では、ヒドロキシアパタイトを含まない比較例４の組成物と比較して、ウイルスの残存数が顕著に少ないという結果が得られた。
【００８７】
これは、ヒドロキシアパタイトのナノ粒子が、菌類が付着しても簡単には離脱しないという生体親和性を有していることから、ヒドロキシアパタイトのナノ粒子によって捕獲された菌類にＡｇナノ粒子が接触して、抗菌作用を発揮できたからではないかと考えられる。
【００８８】
ヒドロキシアパタイトの濃度が５０ｐｐｍもの（実施例１２）と１００ｐｐｍのもの（実施例１３）を用いた場合の、ウイルス残存数を比較すると、ヒトインフルエンザウイルスに対しては同じであり、イヌパルボウイルスに対しても効果の差に大差がなかった。
【００８９】
このことから、ヒドロキシアパタイトの濃度が５０ｐｐｍ以下の場合には、ヒドロキシアパタイトの濃度を高くすることにより、抗菌性が顕著に向上するということがわかった。
【００９０】
＜試験例６＞
さらに、本発明の組成物中の結合材の量について検討した。
（１）実施例１４〜１９の組成物の調製
金属ナノ粒子の水分散液として、平均粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子を１５０ｐｐｍ含有するＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を使用した。
結合材として、ヒスチジンを用い、ヒスチジンを１５０ｐｐｍの濃度で含有する結合材の水分散液を調製した。
リン酸カルシウム系化合物としてヒドロキシアパタイト（宇部マテリアルズ製）を用い、ジルコニウムビーズを用いてビーズミルにて平均粒子径が１００ｎｍになるまで粉砕してから、所定の濃度となるように純水に分散させてヒドロキシアパタイトの水分散液を調製した。
【００９１】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを５ｐｐｍ、ヒスチジンを１ｐｐｍとなるように、Ａｇ水分散液と、結合材水溶液とを混合してからヒドロキシアパタイトの水分散液を添加して混合し、得られた組成物を実施例１４の組成物とした。
【００９２】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を５０ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを５０ｐｐｍ、ヒスチジンを８ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１４と同様にして、得られた組成物を実施例１５の組成物とした。
【００９３】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を１５０ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを１５０ｐｐｍ、ヒスチジンを２５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１４と同様にして、得られた組成物を実施例１６の組成物とした。
【００９４】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを５ｐｐｍ、ヒスチジンを０．５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１４と同様にして、得られた組成物を実施例１７の組成物とした。
【００９５】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を５０ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを５０ｐｐｍ、ヒスチジンを４ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１４と同様にして、得られた組成物を実施例１８の組成物とした。
【００９６】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を１５０ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを１５０ｐｐｍ、ヒスチジンを１５ｐｐｍとなるようにした以外は実施例１４と同様にして、得られた組成物を実施例１９の組成物とした。
【００９７】
（２）抗菌性試験
サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｕｍ：ＧＰ４２−Ｌｙモルモット頚部リンパ節腫膿病変由来）と大腸菌Ｏ１５７型（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１５７：Ｈ７北里大学医学部由来）を用いて以下の方法により抗菌試験を行った。
【００９８】
サルモネラ菌を１０５ＣＦＵ／５０μｌ、大腸菌Ｏ１５７型を６．７×１０４ＣＦＵ／５０μｌ使用して、ＳＣＤ寒天培地にて１８時間培養し、培養されたサルモネラ菌、大腸菌を１白金耳量（３．５ｍｇ）ずつとり、それぞれを滅菌蒸留水１ｍｌに懸濁した。この菌液を１００μｌずつ実施例１４〜１９の組成物１０ｍｌに加えた。
【００９９】
菌液をそれぞれ実施例１４〜１９の組成物に滴下してから、ボルテックスにて数秒間攪拌後、直ちにマンニット食塩培地３枚に５０μｌずつ接種した（振とう・混釈０分）。
上記とは別に、菌液を実施例１４〜１９の組成物に滴下した後、シェーカーにて６０分間振とう・混釈後、マンニット食塩培地３枚に５０μｌずつ接種した（振とう・混釈６０分）。
菌液を接種した後の培地を３５℃で３日間養生して菌類の状況を観察した結果を以下に示す。
【０１００】
菌液と組成物との振とう・混釈時間が６０分のものを接種したすべての培地では、菌のコロニーは認められず、菌の発生・発育を抑制できた。
菌液と組成物との振とう・混釈時間が０分のものであって、サルモネラ菌液を滴下した組成物を接種した培地では、Ａｇナノ粒子やヒスチジンの濃度にかかわらず、０〜５コロニーが観察され、その発育を抑制できなかった。
菌液と組成物との振とう・混釈時間が０分のものであって、大腸菌液を滴下した組成物を接種した培地のうち、組成物中のＡｇナノ粒子の濃度が５０ｐｐｍのものと１５０ｐｐｍのものでは、ヒスチジンの濃度にかかわらず、菌の発生・発育を完全に抑制できたが、Ａｇナノ粒子の濃度が５ｐｐｍのものでは菌の発生・発育を完全に抑制できなかった。
【０１０１】
本試験の結果より、ヒスチジンの濃度は抗菌効果に影響を与えておらず、Ａｇナノ粒子の濃度が５０ｐｐｍ以上であれば、振とう・混釈時間が短くても、充分な抗菌効果が得られることがわかった。
【０１０２】
＜試験例７＞
金属ナノ粒子の水分散液として、平均粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子を１５０ｐｐｍ含有するＡｇナノ粒子の水分散液［（株）朝日商会製、商品名「シルバリア」］を使用し、結合材として、システインを用い、システインを１５０ｐｐｍの濃度で含有する結合材の水分散液を調製した。
リン酸カルシウム系化合物としてヒドロキシアパタイト（宇部マテリアルズ製）を用い、ジルコニウムビーズを用いてビーズミルにて平均粒子径が１００ｎｍになるまで粉砕してから、所定の濃度となるように純水に分散させてヒドロキシアパタイトの水分散液を調製した。
【０１０３】
最終濃度が、Ａｇナノ粒子を２５ｐｐｍ、ヒドロキシアパタイトを２５ｐｐｍ、システインを２５ｐｐｍとなるように、Ａｇ水分散液と、結合材水溶液とを混合してからヒドロキシアパタイトの水分散液を添加して混合し、得られた組成物を実施例２０の組成物とした。
【０１０４】
（１）抗菌性試験１
本発明の組成物を塗布した布について、以下の方法により抗菌性試験を行った。
実施例２０の組成物を１００ｇ／ｍ２塗布後、乾燥した、５０ｍｍ×５０ｍｍの大きさの綿製の布片と、本発明の組成物を未塗布の綿製の布片について、ＪＩＳ  Ｚ  ２８０１  ５．２に準拠した抗菌試験を行った。結果を表５に示す。
表５中、処理とは本発明の組成物を塗布したものを示し、無処理とは本発明の組成物の塗布を行わなかったものを示す。
【０１０５】
【表５】
2009046410.tif 000006
【０１０６】
表５より本発明の組成物を塗布したものでは、枯草菌、緑膿菌、ＭＲＳＡ（メシチリン耐性黄色ブドウ球菌）に対する抗菌性があるということがわかった。
【０１０７】
（２）かび抵抗性試験
本試験例の（１）抗菌性試験１と同様にして、実施例２０の組成物を塗布した布について、以下の方法により抗菌性試験を行った。
実施例２０の組成物を１００ｇ／ｍ２塗布後、乾燥した、５０ｍｍ×５０ｍｍの大きさの綿製の布片を用いて、ＪＩＳ  Ｚ  ２９１１−２０００に準拠してかび抵抗性試験を行った。
本試験には、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ  ＮＢＲＣ  ６３４１、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ  ＩＡＡ７０１３、Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｖａｒｉｏｔｉｉ  ＩＡＭ５００１、Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｉｒｅｎｓ  ＮＢＲＣ  ６３５５、Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ  ｇｌｏｂｏｓｕｍ  ＮＢＲＣ  ６３４７を用いた。
その結果、２週間経過後、４週間経過後ともにかびの発育はみられなかった。
このことから本発明の組成物はカビに対しても効果があることがわかった。
【０１０８】
（３）臭気指標試験
本発明の組成物を家畜の飼料に混合して適用した例について以下の試験を行った。
生後１年の雌鳥に、実施例２０の組成物を混合した飼料を１週間食べさせた後、鶏糞の臭気を測定した。
実施例２０の組成物の混合量が、組成物混合後の食餌全体に対して３質量％となるようにして、この組成物を混合した食餌を、雌鳥に一日当たり３５ｇ与えた。  鶏糞の臭気はＯＤＯＲ  ＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮ  ＭＥＴＥＲ  ＣＯＳＭＯＳ  ＸＲ３２９ＩＩＩを用いて測定した。
その結果、本発明の組成物を混合した飼料を１週間摂取した後の鶏糞の臭気指標は、本発明の組成物を混入しない飼料を食べさせた場合の臭気指標の１／１３に低下した。
このことから、本発明の組成物は、糞便の臭気を低減する作用があるということがわかった。
【０１０９】
＜まとめ＞
上記試験例１〜７によれば、組成物中にＡｇナノ粒子を１ｐｐｍ以上１０００ｐｐｍ以下の濃度で含んでいれば、抗菌性を発揮することができることがわかった。
【０１１０】
Ａｇナノ粒子の濃度が高くなるに従い抗菌性は向上するが、安定性が低下するので、保存時の問題がある。したがって、組成物中のＡｇナノ粒子の濃度は、保存時の問題、適用する菌種、用途（即効性が求められるか否か等）、結合材の種類によって適宜選択するのが好ましいと考えられる。
【０１１１】
＜他の実施形態＞
本発明は上記記述及び図面によって説明した実施形態に限定されるものではなく、例えば次のような実施形態も本発明の技術的範囲に含まれる。
（１）上記実施例においては、抗菌作用を有する金属ナノ粒子としてＡｇナノ粒子を使用するものを示したが、抗菌作用を有する金属ナノ粒子として、Ｐｔナノ粒子を用いることもできる。
【０１１２】
（２）上記実施例においては、平均粒子径が４ｎｍのＡｇナノ粒子を用いたが抗菌作用を有する金属ナノ粒子の平均粒子径は４ｎｍに限定されず、１０ｎｍ、２５ｎｍ、４０ｎｍなどであってもよい。
【０１１３】
（３）上記実施例においては、リン酸カルシウム系化合物として、ヒドロキシアパタイトと、リン酸三カルシウムを使用するものを用いたが、リン酸一水素カルシウム、リン酸四カルシウム、ボーンアッシュ、骨リン、ボーンチャイナを用いてもよい。
【０１１４】
（４）上記実施例においては、アミノ酸として、市販の試薬（Ｌ体）のヒスチジン、メチオニン、システインを用いた組成物を例示したが、他のアミノ酸（合成品、Ｄ体、ＤＬ体含む）やペプチド、タンパク質、ポリビニルピロリドン等を含むものであってもよい。
【０１１５】
（５）上記試験例においては、鳥インフルエンザウイルス、ヒトインフルエンザウイルス、イヌパルボウイルス、サルモネラ菌、大腸菌Ｏ１５７型、枯草菌、緑膿菌、ＭＲＳＡ、各種カビ類に本発明の組成物を適用した例を示したが、本発明の組成物は、ブドウ球菌、赤痢菌、肺炎桿菌、腸炎ビブリオ、セレウス菌、ボツリヌス菌、ウエルシュ菌、破傷風菌、炭疽菌、クレブシェラ、レジオネラ菌、シュードモナス、ポリオウイルス、ロタウイルス、ヘルペスウイルスなどの菌類にも適用できる。
【０１１６】
（６）上記試験例では、本発明の組成物を直接菌類に使用したり、人間の手指や布に塗布したり、雌鳥の食餌に混合した例を示したが、魚類や植物等に適用して病気を防いだり、空気中に噴射して空気中の菌類に適用することもできる。