(57)【要約】      （修正有）【課題】新規な希土類金属錯体及びそれを用いた蛍光発光材料を提供する。【解決手段】例えば下記構造式で例示される希土類金属錯体、及びそれを用いる蛍光発光材料。2009084341.tif 000097【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）：
【化１】
2009084341.tif 000070
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａは、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基とＹｂとを含む発光基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される希土類金属錯体。
【請求項２】
前記Ａが下記一般式（２）〜（１１）のいずれか１つで表される、請求項１に記載の希土類金属錯体。
【化２】
2009084341.tif 000071
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化３】
2009084341.tif 000072
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化４】
2009084341.tif 000073
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化５】
2009084341.tif 000074
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化６】
2009084341.tif 000075
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化７】
2009084341.tif 000076
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化８】
2009084341.tif 000077
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化９】
2009084341.tif 000078
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１０】
2009084341.tif 000079
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１１】
2009084341.tif 000080
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【請求項３】
下記一般式（１２）:
【化１２】
2009084341.tif 000081
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される、希土類金属錯体。
【請求項４】
一般式（１２）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、請求項３に記載の希土類金属錯体。
【請求項５】
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、請求項１〜４のいずれかに記載の希土類金属錯体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の希土類金属錯体を含む、蛍光発光材料。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれかに記載の希土類金属錯体を含む、蛍光分子プローブ材料。
【請求項８】
下記一般式（１３）：
【化１３】
2009084341.tif 000082
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａ１は、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される化合物。
【請求項９】
前記Ａ１が下記一般式（１４）〜（２３）のいずれか１つで表される、請求項８に記載の化合物。
【化１４】
2009084341.tif 000083
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１５】
2009084341.tif 000084
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１６】
2009084341.tif 000085
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１７】
2009084341.tif 000086
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１８】
2009084341.tif 000087
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化１９】
2009084341.tif 000088
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化２０】
2009084341.tif 000089
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化２１】
2009084341.tif 000090
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化２２】
2009084341.tif 000091
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【化２３】
2009084341.tif 000092
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【請求項１０】
下記一般式（２４）： 
【化２４】
2009084341.tif 000093
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される、化合物。
【請求項１１】
一般式（２４）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、請求項８〜１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
下記一般式（１）：
【化２５】
2009084341.tif 000094
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａは、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基とＹｂとを含む発光基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される希土類金属錯体の製造方法であって、
下記一般式（１３）：
【化２６】
2009084341.tif 000095
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａ１は、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される化合物に、Ｙｂを含む化合物を与えることを特徴とする希土類金属錯体の製造方法。
【請求項１４】
下記一般式（２５）：
【化２７】
2009084341.tif 000096
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示し、Ｘは、ハロゲン原子、ハロゲン化アルキル基、アミノ基、Ｒ’ＣＯＯ−基、Ｒ’ＯＣＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）又はイソチオシアネート基を示す。）
で表される化合物。
【請求項１５】
一般式（２５）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、請求項１４又は１５に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な希土類金属錯体及びそれを用いた蛍光発光材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
蛍光分析法は、空間・時間分解能が高く、安全で操作も簡便であることが多いため、生体組織内物質の測定、特にin vitroにおいて多用されている。この蛍光分析法で用いられている蛍光分子プローブとしては、種々のものが提案されている（特許文献１及び非特許文献１）。
【０００３】
しかしながら、これらの蛍光分子プローブを用いると、１）観測する蛍光波長が可視光領域であるため、生体組織中の水分、ヘモグロビン等による吸収又は散乱が生じてしまう（さらに、in vivoでの蛍光分析を行うと仮定すると、その検出限界はせいぜい１ｍｍ程度であると推測されている）、２）蛍光物質が有機分子であることが多いため、照射する励起光と観測される蛍光とのスペクトルピークが大きく重複することにより、スペクトルのバックグランドが高くなり、Ｓ／Ｎ比（Signal/Noise比）が非常に悪くなってしまう、３）励起光が紫外線領域にあり、生体組織にダメージを与えてしまう、という種々の問題が生じている。これらの問題により、in vitroの測定にさえ、精度・感度の点において、さらなる改良の余地が残されている。また、現時点ではまだ実現されていないin vivoへの応用を考えると、上記問題はより一層深刻になる。
【０００４】
したがって、高精度及び高感度の検出が可能な蛍光発光材料及び蛍光分子プローブの開発が望まれている。
【０００５】
本発明者らは、上記問題に鑑み研究を行い、上記問題を解決できる蛍光発光材料及び蛍光分子プローブの開発に成功している（特許文献２）。特許文献２の蛍光発光材料を使用すると、バックグランドを顕著に減少させることができ、高精度及び高感度の測定が可能となる。
【０００６】
この蛍光発光材料は蛍光検出測定の精度、感度等の点で十分に優れたものではあるが、バックグランドをさらに減少させて、より一層高精度な測定を行える余地が残されている。また、測定に際し、蛍光発光材料を溶液中に含有させて測定するが、この蛍光発光材料では当該溶液のｐＨを６程度以上の条件で行わなければならないため、ｐＨの調整が必要となる場合があり、簡便性にやや欠ける問題がある。
【特許文献１】特表２００５−５２９２１９号公報
【特許文献２】特開２００７−２３８６５０号公報
【非特許文献１】Ntziachristos et al., pages12294-12299, PNAS, August 17, 2004, vol.101, no.33
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、測定時のバックグランドをより一層低減でき、さらに測定の際に使用する溶液のｐＨの調整が不要な蛍光発光材料及び蛍光分子プローブを提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記のような従来技術の問題点を鑑み、鋭意研究を重ねた結果、特定の構造を有する希土類金属錯体を用いることにより、上記問題点を解決するに至った。すなわち、本発明は下記の希土類金属錯体、それを用いた蛍光発光材料及び蛍光分子プローブ等に係る。
【０００９】
項１．
下記一般式（１）：
【００１０】
【化１】
2009084341.tif 000002
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａは、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基とＹｂとを含む発光基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される希土類金属錯体。
【００１１】
項２．
前記Ａが下記一般式（２）〜（１１）のいずれか１つで表される、項１に記載の希土類金属錯体。
【００１２】
【化２】
2009084341.tif 000003
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１３】
【化３】
2009084341.tif 000004
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１４】
【化４】
2009084341.tif 000005
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１５】
【化５】
2009084341.tif 000006
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１６】
【化６】
2009084341.tif 000007
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１７】
【化７】
2009084341.tif 000008
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１８】
【化８】
2009084341.tif 000009
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００１９】
【化９】
2009084341.tif 000010
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００２０】
【化１０】
2009084341.tif 000011
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００２１】
【化１１】
2009084341.tif 000012
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００２２】
項３．
下記一般式（１２）：
【００２３】
【化１２】
2009084341.tif 000013
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される、希土類金属錯体。
【００２４】
項４．
一般式（１２）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、項３に記載の希土類金属錯体。
【００２５】
項５．
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、項１〜４のいずれかに記載の希土類金属錯体。
【００２６】
項６．
項１〜５のいずれかに記載の希土類金属錯体を含む、蛍光発光材料。
【００２７】
項７．
項１〜５のいずれかに記載の希土類金属錯体を含む、蛍光分子プローブ材料。
【００２８】
項８．
下記一般式（１３）：
【００２９】
【化１３】
2009084341.tif 000014
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａ１は、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される化合物。
【００３０】
項９．
前記Ａ１が下記一般式（１４）〜（２３）のいずれか１つで表される、項８に記載の化合物。
【００３１】
【化１４】
2009084341.tif 000015
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３２】
【化１５】
2009084341.tif 000016
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３３】
【化１６】
2009084341.tif 000017
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３４】
【化１７】
2009084341.tif 000018
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３５】
【化１８】
2009084341.tif 000019
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３６】
【化１９】
2009084341.tif 000020
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３７】
【化２０】
2009084341.tif 000021
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３８】
【化２１】
2009084341.tif 000022
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００３９】
【化２２】
2009084341.tif 000023
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００４０】
【化２３】
2009084341.tif 000024
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンを示す。）
【００４１】
項１０．
下記一般式（２４）： 
【００４２】
【化２４】
2009084341.tif 000025
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される、化合物。
【００４３】
項１１．
一般式（２４）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、項１０に記載の化合物。
【００４４】
項１２．
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、項８〜１１のいずれかに記載の化合物。
【００４５】
項１３．
下記一般式（１）：
【００４６】
【化２５】
2009084341.tif 000026
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａは、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基とＹｂとを含む発光基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される希土類金属錯体の製造方法であって、
下記一般式（１３）：
【００４７】
【化２６】
2009084341.tif 000027
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａ１は、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表される化合物に、Ｙｂを含む化合物を与えることを特徴とする希土類金属錯体の製造方法。
【００４８】
項１４．
下記一般式（２５）：
【００４９】
【化２７】
2009084341.tif 000028
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨを示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示し、Ｘは、ハロゲン原子、ハロゲン化アルキル基、アミノ基、Ｒ’ＣＯＯ−基、Ｒ’ＯＣＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）又はイソチオシアネート基を示す。）
で表される化合物。
【００５０】
項１５．
一般式（２５）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示し、Ｂはリンカー部を示す、項１４に記載の化合物。
【００５１】
項１６．
前記Ｂがアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基である、項１４又は１５に記載の化合物。
【００５２】
１．希土類金属錯体
本発明の希土類金属錯体は、下記一般式（１）：
【００５３】
【化２８】
2009084341.tif 000029
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）等を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ａは、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基とＹｂとを含む発光基を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
で表されることを特徴とする。
【００５４】
まず、本錯体は、１）エネルギー供給部、２）リンカー部Ｂ、及び３）発光部Ａからなる。
【００５５】
本発明の発光メカニズムは、励起光が照射された場合にエネルギー供給部がエネルギーを吸収し、エネルギートランスファー（エネルギー移動）の過程を経て、発光部（発光基）にエネルギーを移動させ、その結果、発光部が有する希土類金属が蛍光を放射すると考えられる。
【００５６】
エネルギー供給部
エネルギー供給部は、励起光が照射された場合にエネルギーを吸収し、エネルギートランスファー（エネルギー移動）の過程を経て、発光部（発光基）にエネルギーを移動させる役割を果たし、下記一般式（２６）で表される。
【００５７】
【化２９】
2009084341.tif 000030
Ｒ１は、Ｎ、ＣＨ等である。好ましくは、Ｎである。
【００５８】
Ｒ２は、同一又は異なって、例えば、ハロゲン原子、アルキル基、カルボン酸含有基、アミノ基、ニトロ基等である。
【００５９】
ハロゲン原子としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等である。
【００６０】
アルキル基は、炭素数１〜８程度のアルキル基であり、置換基を有していてもよく、また、直鎖状及び分岐状のいずれであってもよい。
【００６１】
カルボン酸含有基は、カルボン酸基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＨ、−Ｃ２Ｈ４−ＣＯＯＨ、−Ｃ３Ｈ６−ＣＯＯＨ等が挙げられる。
【００６２】
また、ｐは、０〜４の整数である。好ましくは、０である。ここで、ｐが２以上の整数である場合は、Ｒ２は２つ存在するが、その場合は、当該２つのＲ２は同一の置換基であってもよく、また、異なる置換基であってもよい。例えば、両者がハロゲン原子同士であったりしてもよく、一方が、ハロゲン原子で、他方がアルキル基等であってもよい。３以上の場合も同様であり、３つの置換基Ｒ２すべてが同一であってもよく、２つの置換基のみが同一であったり、３つの置換基全てが異なっていたりしてもよい。
【００６３】
Ｒ３は、同一又は異なって、例えば、ハロゲン原子、アルキル基、カルボン酸含有基、アミノ基、ニトロ基等である。
【００６４】
ハロゲン原子としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等である。
【００６５】
アルキル基は、炭素数１〜８程度のアルキル基であり、置換基を有していてもよく、また、直鎖状及び分岐状のいずれであってもよい。
【００６６】
カルボン酸含有基は、カルボン酸基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＨ、−Ｃ２Ｈ４−ＣＯＯＨ、−Ｃ３Ｈ６−ＣＯＯＨ等が挙げられる。
【００６７】
また、ｑは、０〜３の整数である。好ましくは、０である。ここで、ｑが２以上の整数である場合は、Ｒ３は２つ存在することになるが、その場合は、当該２つのＲ３は同一の置換基であってもよく、また、異なる置換基であってもよい。ｑが３の場合も同様であり、３つの置換基Ｒ３すべてが同一であってもよく、２つの置換基のみが同一であったり、３つの置換基全てが異なっていたりしてもよい。
【００６８】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ2ＰＯ３−Ｏ−基等である。ここで、Ｒはアルキル基を示し、好ましくは炭素数１〜１６（特に炭素数１〜４）のアルキル基を示す。
【００６９】
ＲＣＯＯ−基としては、例えば、メチルカルボン酸エステル（ＣＨ３ＣＯＯ−）、エチルカルボン酸エステル（Ｃ２Ｈ５ＣＯＯ−）、プロピルカルボン酸エステル（Ｃ３Ｈ５ＣＯＯ−）等が挙げられる。
【００７０】
ＲＯ−基としては、例えば、メトキシ基（ＣＨ３−Ｏ−）、エトキシ基（Ｃ２Ｈ５−Ｏ−）、プロポキシ基（Ｃ３Ｈ７−Ｏ−）等が挙げられる。
【００７１】
ＲＳＯ３−Ｏ−基としては、例えば、メチルスルホキシド基（ＣＨ３ＳＯ３−Ｏ−）、エチルスルホキシド基（Ｃ２Ｈ５ＳＯ３−Ｏ−）、プロピルスルホキシド基（Ｃ３Ｈ７ＳＯ３−Ｏ−）等が挙げられる。
【００７２】
Ｒ２ＰＯ３−Ｏ−基としては、例えば、ジメチルホスホキシド基（（ＣＨ３）2ＰＯ３−Ｏ−）、ジエチルホスホキシド基（（Ｃ２Ｈ５）2ＰＯ３−Ｏ−）、ジプロピルホスホキシド基（（Ｃ３Ｈ７）2ＰＯ３−Ｏ−）等が挙げられる。
【００７３】
本発明では、下記式（２７）で表される基が最も好ましい。
【００７４】
【化３０】
2009084341.tif 000031
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示す。）
発光部（Ａ）
発光部（Ａ）は、Ｙｂ（イッテルビウム）と、窒素原子を３つ以上有する、Ｙｂ（イッテルビウム）と配位し得る基とを含む発光基である。発光部（Ａ）は、リンカー部を通じて移動してきたエネルギーを利用して、希土類金属錯体から蛍光を放射する役割を果たす。
【００７５】
具体例として、下記一般式（２）〜（１１）で表される基である。
【００７６】
【化３１】
2009084341.tif 000032
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示す。Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示す。アルキレン基の炭素数は、例えば１〜４であり、好ましくは、１〜３である。アルキレン基は、さらにメチル基、エチル基、ハロゲン原子等の置換基を有していてもよい。アルキレン基として、最も好ましくはメチレン基である。
【００７７】
Ｒ５が−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−の場合は、通常Ｃ６Ｈ４（ベンゼン環）部分がリンカー部Ｂに結合する形をとる。
【００７８】
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。
【００７９】
カルボン酸含有基は、カルボン酸基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯＯＨ、−Ｃ２Ｈ４−ＣＯＯＨ、−Ｃ３Ｈ６−ＣＯＯＨ等が挙げられる。この中でも好ましくは、−ＣＨ２−ＣＯＯＨである。
【００８０】
カルボン酸エステル含有基は、カルボン酸エステル基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＣＯＯ（ｔ−Ｂｕ）、−ＣＨ２−ＣＯＯＣＨ３等が挙げられる。この中でも好ましくは、−ＣＨ２−ＣＯＯ（ｔ−Ｂｕ）である。
【００８１】
カルボン酸アミド含有基は、カルボン酸アミド基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＣＯＯＮＨ２，−ＣＨ２−ＣＯＯＮ（ＣＨ３）２等が挙げられる。この中でも好ましくは、−ＣＨ２−ＣＯＯＮＨ２である。
【００８２】
リン酸含有基は、リン酸基を含有している基である限り限定的でなく、例えば、−ＣＨ２−ＰＯ３Ｈ２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ２Ｈ４−ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ３Ｈ６−ＰＯ３Ｈ２等が挙げられる。この中でも好ましくは、−ＣＨ２−ＰＯ３Ｈ２である。
【００８３】
上記カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基及びリン酸含有基は、１価又は２価のアニオンであってもよい。例えば、カルボン酸含有基であれば、通常、１価のアニオンとなり、カルボン酸基部分が−ＣＯＯ−となる。また、リン酸含有基であれば、通常１価又は２価のアニオンとなり、リン酸基部分が−ＰＯ３Ｈ−又は−ＰＯ３２−となる。
【００８４】
【化３２】
2009084341.tif 000033
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００８５】
【化３３】
2009084341.tif 000034
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００８６】
【化３４】
2009084341.tif 000035
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００８７】
【化３５】
2009084341.tif 000036
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００８８】
【化３６】
2009084341.tif 000037
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００８９】
【化３７】
2009084341.tif 000038
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００９０】
【化３８】
2009084341.tif 000039
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００９１】
【化３９】
2009084341.tif 000040
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【００９２】
【化４０】
2009084341.tif 000041
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
なお、上記、Ｒ８、Ｒ１２、Ｒ１６、Ｒ２１、Ｒ２６、Ｒ３２、Ｒ３８、Ｒ４４及びＲ４９におけるアルキレン基及び−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−は、上述したＲ５と同じものが挙げられる。好ましいものも同様である。
【００９３】
Ｒ９〜Ｒ１１、Ｒ１３〜Ｒ１５、Ｒ１７〜Ｒ２０、Ｒ２２〜Ｒ２５、Ｒ２７〜Ｒ３１、Ｒ３３〜Ｒ３７、Ｒ３９〜Ｒ４３、Ｒ４５〜Ｒ４８及びＲ５０〜Ｒ５３におけるカルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基又はカルボン酸アミド含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオンにおいても、上述したＲ６及びＲ７と同じものが挙げられる。好ましいものも同様である。
【００９４】
上記発光部の中として、好ましいのは、一般式（４）及び（５）で表される基であり、より好ましくは下記式（２８）で表される基である。
【００９５】
【化４１】
2009084341.tif 000042
すなわち、希土類金属錯体として、下記式（１２）が好ましい。
【００９６】
【化４２】
2009084341.tif 000043
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）等を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
【００９７】
本発明では、特に一般式（１２）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示す希土類金属錯体が好ましい。
【００９８】
本発明において、配位されている中心金属である希土類金属はＹｂ（イッテルビウム）である。この希土類金属は通常３価のカチオンとなって配位されている。これにより、蛍光を当該希土類金属から放射することができる。具体的には、近赤外領域の波長（７００〜１０００ｎｍ程度）の波長の蛍光が放射され、生体組織をより一層的確に透過することができる。
【００９９】
本発明の発光部は、上記構造を有することより、上記発光部への希土類金属の配位は安定である。これにより、例えば、溶媒等による影響が少なく脱離しにくいため、安定した良好な蛍光発光材料、さらには蛍光分子プローブ等として用いることができる。
【０１００】
リンカー部（Ｂ）
リンカー部（Ｂ）は、上記発光部Ａとエネルギー供給部を結合する部分である。リンカー部は、発光部Ａとエネルギー供給部を結合する限り限定されないが、発光部とエネルギー供給部とのエネルギー伝搬効率の観点から、例えば、アミド基（−ＮＨＣＯ−）、エステル基（−ＣＯＯ−）、ウレア基（−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）又はチオウレア基（−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−）等が好ましい。
【０１０１】
また、下記一般式（２９）：
【０１０２】
【化４３】
2009084341.tif 000044
（式中、Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立にアミド基、エステル基、ウレア基又はチオウレア基等を示す。Ｒ５４は、炭素数１〜４のエーテル結合を有していてもよいアルキレン基等を示す。）
であってもよい。
【０１０３】
なお、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−等の結合部は、発光部Ａ又はエネルギー供給部のいずれにも結合していてもよい。すなわち、例えば、（発光部Ａ）−ＮＨＣＯ−（エネルギー供給部）というように結合していてもよいし、（発光部Ａ）−ＣＯＮＨ−（エネルギー供給部）というように結合していてもよい。また、Ｘ１及びＸ２についても同様に、Ｘ１及びＸ２のいずれの部分が発光部Ａに結合していてもよい。すなわち、例えば、（発光部Ａ）−Ｘ１−Ｒ５４−Ｘ２−（エネルギー供給部）というように結合していてもよいし、（発光部Ａ）−Ｘ２−Ｒ５４−Ｘ1−（エネルギー供給部）というように結合していてもよい。
【０１０４】
上記のうち、より具体的な好ましい組み合わせは、
（発光部Ａ）−ＣＯＮＨ−（エネルギー供給部）
（発光部Ａ）−ＮＨＣ（Ｓ）ＮＨ−（エネルギー供給部）
（発光部Ａ）−ＣＯＮＨＣ２Ｈ４ＮＨＣＯ−（エネルギー供給部）であり、より好ましくは、（発光部Ａ）−ＣＯＮＨ−（エネルギー供給部）である。
【０１０５】
２．化合物（１３）
本発明の化合物は、さらに上記希土類金属錯体の中間体であって、下記一般式（１３）：
【０１０６】
【化４４】
2009084341.tif 000045
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）等を示し、Ａ１は、窒素原子を３つ以上有するＹｂに配位し得る基を示し、Ｂは、リンカー部を示し、ｐは０〜４の整数を示し、ｑは０〜３の整数を示す。）
で表される化合物をも含むことを特徴とする。
【０１０７】
リンカー部及びエネルギー供給部は、上述したものと（好ましいものも含めて）同様のものが挙げられる。
【０１０８】
Ａ１について
Ａ１は、窒素原子を３つ以上有する、Ｙｂに配位し得る基である。
【０１０９】
具体例としては、一般式（１４）〜（２３）で表される基である。
【０１１０】
【化４５】
2009084341.tif 000046
（式中、Ｒ５は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１１】
【化４６】
2009084341.tif 000047
（式中、Ｒ８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ９〜Ｒ１１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１２】
【化４７】
2009084341.tif 000048
（式中、Ｒ１２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１３】
【化４８】
2009084341.tif 000049
（式中、Ｒ１６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ１７〜Ｒ２０は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１４】
【化４９】
2009084341.tif 000050
（式中、Ｒ２１は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ２２〜Ｒ２５は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１５】
【化５０】
2009084341.tif 000051
（式中、Ｒ２６は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ２７〜Ｒ３１は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１６】
【化５１】
2009084341.tif 000052
（式中、Ｒ３２は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ３３〜Ｒ３７は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１７】
【化５２】
2009084341.tif 000053
（式中、Ｒ３８は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ３９〜Ｒ４３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１８】
【化５３】
2009084341.tif 000054
（式中、Ｒ４４は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ４５〜Ｒ４８は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
【０１１９】
【化５４】
2009084341.tif 000055
（式中、Ｒ４９は、アルキレン基又は−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−等を示し、Ｒ５０〜Ｒ５３は、それぞれ独立に、カルボン酸含有基、カルボン酸エステル含有基、カルボン酸アミド含有基又はリン酸含有基或いはこれらの１価又は２価のアニオン等を示す。）
上記基の中でも好ましいのは、一般式（１６）及び（１７）で表される基であり、最も好ましくは下記式（３０）で表される基である。
【０１２０】
【化５５】
2009084341.tif 000056
すなわち、化合物として、一般式（２４）が好ましい。
【０１２１】
【化５６】
2009084341.tif 000057
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲ２ＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）等を示し、ｐは、０〜４の整数を示し、ｑは、０〜３の整数を示し、Ｂは、リンカー部を示す。）
【０１２２】
本発明では、特に一般式（２４）において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示す化合物が好ましい。
【０１２３】
３．化合物（２５）
本発明の化合物（２５）は、上記希土類金属錯体及び上記化合物（１３）の中間体であって、下記一般式（２５）：
【０１２４】
【化５７】
2009084341.tif 000058
（式中、Ｒ１は、Ｎ又はＣＨ等を示し、Ｒ２は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ３は、同一又は異なって、ハロゲン原子、アルキル基又はカルボン酸含有基等を示し、Ｒ４は、ヒドロキシル基、ＲＣＯＯ−基、ＲＯ−基、ＲＳＯ３−Ｏ−基又はＲＰＯ３−Ｏ−基（Ｒはアルキル基）等を示し、Ｂは、リンカー部を示し、Ｘは、ハロゲン原子、ハロゲン化アルキル基、アミノ基（Ｈ２Ｎ−基）、Ｒ’ＣＯＯ−基、Ｒ’ＯＣＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）又はイソチオシアネート基等を示し、ｐは０〜４の整数を示し、ｑは０〜３の整数を示す。）
で表されることを特徴とする。
【０１２５】
リンカー部及びエネルギー供給部は、上述したものと（好ましいものも含めて）同様のものが挙げられる。
【０１２６】
Ｘは、ハロゲン原子、ハロゲン化アルキル基、アミノ基（Ｈ２Ｎ−基）、Ｒ’ＣＯＯ−基、Ｒ’ ＯＣＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）、イソチオシアネート基（−ＮＣＳ）等である。
【０１２７】
ハロゲン原子は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等を示す。
【０１２８】
ハロゲン化アルキル基は、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子が１又は２以上置換されたアルキル基（炭素数は、好ましくは１〜８程度、より好ましくは、１〜３程度）を示す。また、直鎖状及び分岐状のいずれであってもよい。好ましい具体例は、−ＣＨ２−Ｃｌ基である。
【０１２９】
Ｒ’ＣＯＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）としては、具体的には、例えば、ＨＣＯＯ−、ＣＨ３ＣＯＯ−、ＣＨ3ＣＨ2ＣＯＯ−等が挙げられる。この場合のアルキル基の好ましい炭素数は０〜８程度、より好ましくは０〜３程度である。
【０１３０】
Ｒ’ＯＣＯ−基（Ｒ’は、水素原子又はアルキル基）としては、具体的には、例えば、ＨＯＣＯ−、ＣＨ３ＯＣＯ−、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＯ−等が挙げられる。この場合のアルキル基の好ましい炭素数は０〜８程度、より好ましくは０〜３程度である。
【０１３１】
化合物（２５）の具体例を挙げると、例えば、下記一般式（３１）〜（３３）で表される化合物である。
【０１３２】
【化５８】
2009084341.tif 000059
【０１３３】
【化５９】
2009084341.tif 000060
【０１３４】
【化６０】
2009084341.tif 000061
本発明では、特に一般式（２５）（特に一般式（３１）〜（３３））において、Ｒ１がＮ又はＣＨを示し、Ｒ４がヒドロキシル基を示し、ｐ及びｑが０の整数を示す化合物が好ましい。
【０１３５】
４．希土類金属錯体の製造方法
本発明の希土類金属錯体の典型的な製造方法としては、図１に示されるように、
Ｉ）一般式（３４）：
【０１３６】
【化６１】
2009084341.tif 000062
（式中、Ｚは、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＮＣＯ又は−ＮＣＳ等を示し、Ｒ１〜Ｒ４及びｐ、ｑは前述したものと同じである。）
で表される化合物にリンカー部の前駆体（−Ｂ−Ｘ基）を結合させて、一般式（２５）で表される化合物を得る工程、
II）一般式（２５）で表される化合物にＡ１を結合させて、式（１３）で表される化合物を得る工程、
III）式（１３）で表される化合物とＹｂを含む化合物とを反応させて、式（１）で表される化合物を得る工程、
を経て製造される。
【０１３７】
一般式（３４）に表される化合物及びリンカー部の前駆体は公知又は市販のものを使用すればよい。
【０１３８】
Ａ１としては公知又は市販のものを使用でき、例えば、式（３５）で表される種々の化合物を原料として使用できる。
【０１３９】
【化６２】
2009084341.tif 000063
【０１４０】
上記の中でも、本発明では、特に式（３５−２）、（３５−４）、（３５−１４）等で表される化合物を使用することが好ましい。
【０１４１】
なお、窒素原子に置換基が置換されていない化合物（1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン等）を原料として用いる場合においては、所望の化合物を用いて当該窒素原子に置換基を置換させればよい。窒素原子に置換基を置換させる方法は常法に従って行えばよい。
【０１４２】
Ｙｂを含む化合物としては、例えば、Ｙｂのハロゲン化物、酸化物等を用いればよい。ハロゲン化物としては、例えばＬｎＹ３等が挙げられる（ＬｎはＹｂを示し、Ｙは、Ｃｌ、Ｂｒ等を示す。）。
【０１４３】
必要に応じて、所望の部位を結合させるために、他の部位に保護基を結合させてもよい。保護基の脱着は、公知又は市販のものを用いて、公知の方法に従って行うことができる。例えば、（ｔ−ＢｕＯＣＯ）２Ｏ、ＣＨ３ＯＨ、ｔ−ＢｕＯＨ等を用いて保護することができる（この場合、後述するように、保護基が予め結合されているＡ１を結合させる工程を工程II(a)とし、工程II(a)で得られた化合物から保護基を脱離させる工程を工程II(b)とする）。
【０１４４】
本発明のより具体的な典型例として、図２に下記一般式（３６）の希土類金属錯体の合成手順の一例を示す。この具体例に従い上記工程を詳細に説明する。なお、各部を結合させる順番は図１及び２の合成手順に限定されず、適宜設定できる。
【０１４５】
【化６３】
2009084341.tif 000064
【０１４６】
I工程
工程Iは、式（３７）で表される化合物（「ＰＡＮ−ＮＨ２」ともいう。）と、リンカー部Ｂの前駆体（−Ｂ−Ｘ基）を形成できるクロロアセチルクロライド等とを反応させて、式（３８）で表される化合物（以下、「ＰＡＮ−Ｃｌ」ともいう。）を得る工程である。なお、クロロアセチルクロライドの代わりにブロモアセチルブロマイド等であってもよい。
【０１４７】
【化６４】
2009084341.tif 000065
【０１４８】
【化６５】
2009084341.tif 000066
【０１４９】
ＰＡＮ−ＮＨ２に対して、クロロアセチルクロライドを通常１．０〜１．２当量程度加えればよい。
【０１５０】
溶媒は限定的でなく、例えば、ＴＨＦ、ＣＨ２Ｃｌ２等を用いることができる。
【０１５１】
必要に応じて、塩基等を加えても良い。塩基は限定的でなく、例えば、トリエチルアミン等をＰＡＮ−ＮＨ２に対して、５〜２０当量程度加えればよい。
【０１５２】
なお、ＰＡＮ−ＮＨ２等は公知又は市販のものを使用すればよいが、例えば、２−アミノピリジンに対して、２−アミノ−５−ナフトールを１．０〜１．２当量程度加えることにより製造することもできる。この際、必要に応じて、２−アミノピリジンに対して、ＮａＮＨ２、イソアミルニトレート等を１．０〜１．５当量加えてもよい。溶媒は限定的でなく、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、エタノール等を使用すればよい。
【０１５３】
II工程
工程II(a)は、PAN-Clと、tBu3DOTA（1,4,7,10-tetraazacyclododecane- 1,4,7-triacetic acid tri-tert-butyl ester）とを反応させて、式（３９）で表される化合物（以下、「PAN-tBuDOTA」ともいう。）を得る工程である。
【０１５４】
【化６６】
2009084341.tif 000067
【０１５５】
PAN-Cl に対して、tBu3DOTAを通常１〜１．５当量程度加えればよい。
【０１５６】
溶媒は限定的でなく、例えば、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）等を用いることができる。
【０１５７】
必要に応じて、塩基等を加えてもよい。塩基は限定的でなく、例えば、炭酸カリウム、炭酸カリウム等を用いることができる。添加量は通常１．０〜１０当量程度とすればよい。
【０１５８】
また、反応進行促進剤等の添加物を加えても良い。反応促進剤としては、例えば、ヨウ化カリウム、ヨウ化ナトリウムなどが挙げられる。これにより、塩素−ヨウ素交換反応により反応を効率よく進めることができる。添加量は通常１．０〜１０当量程度とすればよい。
【０１５９】
II(b)工程
工程II(b)は、PAN-tBuDOTAをトリフルオロ酢酸（TFA）等の溶媒と混合させて、式（４０）で表される化合物（以下、「PAN-DOTA」ともいう。）を得る工程である。TFAの代わりにアニソール（anisole）等を使用してもよい。
【０１６０】
【化６７】
2009084341.tif 000068
【０１６１】
III工程
工程IIIは、PAN-DOTAとYbCl3とを反応させて、式（３６）で表される化合物（以下、「PAN-DOTA(Yb)」とする）を得る工程である。
【０１６２】
PAN-DOTAに対して、通常YbCl3を１．０〜１．２当量程度加えればよい。
【０１６３】
溶媒は限定的でなく、例えば、水、メタノール、ＤＭＦ等が挙げられる。
【０１６４】
５．希土類金属錯体の用途
本発明の希土類金属錯体は、蛍光発光材料として用いることができる。特に、蛍光分子プローブとして用いることに適している。例えば、新規生体機能解析イメージング、蛍光分析法（in vivo, in vitro）、機能的分子イメージング（in vivo, in vitro）、高感度反応指示薬等として用いることができる。
【０１６５】
特に、本発明の希土類金属錯体は、測定時におけるバックグランドが極めて少なくなっているため、従来の蛍光分子プローブよりも高精度及び高感度で分析が可能となっている。また、測定時における溶媒のｐＨによる影響が少なく、測定溶媒のｐＨに拘わらず、高精度及び高感度の測定が可能となる。なお、測定溶媒としては、例えば、各種水溶液、メタノール、エタノール、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。
【０１６６】
蛍光分子プローブとして用いる場合は、公知の蛍光分子プローブと同様にして行えばよい。
【０１６７】
対象認識部位としては、例えば、抗体のほか、ＲＧＤペプチド等のペプチド構造、エステル等の化学結合形構造などの特定の生体分子によって認識される構造が挙げられる。ＲＧＤペプチドをさらに詳述すると、ＲＧＤペプチドが特異的に認識するインテグリンは癌の悪性度と密接な関係にある（悪性度の高い癌に多く発現している）ため、ＲＧＤペプチドの導入により、癌の質的診断に有効に活用できる。
【０１６８】
対象認識部位の導入方法としては、例えば、一般式（２６）に挙げられる構造について、Ｒ２あるいはＲ３に導入された置換基を通じて、エステル結合、エーテル結合、チオウレア結合などを利用して、対象認識部位（抗体、ペプチドなど）を結合（導入）させる方法等が挙げられる。これらは、例えば、J. Biol. Chem., 2003, 78, 3170-3175、Inorg. Chem. 2004, 43, 2624〜2635等に記載の公知の方法に従って行えばよい。
【０１６９】
本発明の希土類発光金属は、蛍光分子プローブとして用いる場合、注射用蒸留水、生理食塩水、リンゲル液等の溶媒（有機溶媒及び無機溶媒）中に分散又は溶解して用いればよい。必要に応じて、担体、賦型剤、電解質、バッファー等の添加物を用いてもよい。
【０１７０】
注射、血管内（動脈、静脈）、経口、腹腔内、経皮、皮下等によって生体に投与することができる。好ましくは、水剤、乳剤又は懸濁剤の形態で、静脈注射すればよい。
【０１７１】
照射する励起光は限定的でなく、２５０〜５５０ｎｍと幅広い範囲から選択されるが、特に生体組織にダメージを与えない観点から、４００〜５５０ｎｍが好ましい。励起光の光源は特に制限されず、イオンレーザー、色素レーザー、半導体等のレーザー、ハロゲン光源、キセノン光源等を使用することができる。必要に応じて、公知の光学フィルターを用いて、所望の励起光及び蛍光を得ることができる。
【発明の効果】
【０１７２】
本発明の希土類金属錯体は、励起光を照射されることにより、エネルギー供給部が励起され、当該励起エネルギーがエネルギートランスファーの過程を経て発光部（発光基）に到達し、発光部にある希土類金属が励起されて、希土類金属が蛍光を発光する。よって、蛍光発光材料として用いることができる。
【０１７３】
本発明の希土類金属錯体は、エネルギー供給部である有機分子の励起光の吸収領域と、希土類金属が行う蛍光発光の波長領域（近赤外領域：７００〜１０００ｎｍ程度）とが、適度に離れているため、励起光のスペクトルピークと蛍光発光のスペクトルピークが重なりにくくなっている。その結果、バックグランドが低くなり、Ｓ／Ｎ比（Signal/Noise比）が良好である（ノイズが少ない）ことから、蛍光分子プローブとして用いることにより、高感度及び高精度での蛍光分析が行うことが可能である。特に、本発明の希土類金属錯体は、測定時におけるバックグランド（蛍光発光の周辺部の波長のスペクトル）が極めて少なくなっているため、非常に高精度及び高感度での蛍光分析が可能となる。さらに、蛍光発光の波長が近赤外領域（７００〜１０００ｎｍ程度）であるため、生体組織透過性に優れている。
【０１７４】
本発明の希土類金属錯体によれば、４００〜５５０ｎｍ程度の励起光（照射光）で励起することができ、これにより生体組織にダメージを与えず、安全性の高い蛍光分子プローブとなる。
【０１７５】
本発明の希土類金属錯体は発光原子がイッテルビウム（Ｙｂ）であるため、有機蛍光分子の蛍光寿命（一般的にナノ秒（１０−９秒）程度）に比べて、蛍光寿命が一般的にマイクロ秒〜ミリ秒（１０−６秒〜１０−３秒）程度と長い。従って、この時間差を利用して、時間分解蛍光分析法を用いれば、より一層バックグランドを低減でき、より一層高感度及び高精度での測定が可能となる。
【０１７６】
これらの特徴により、本発明の希土類金属錯体は、測定溶媒のｐＨによる影響を少なくでき、溶媒のｐＨに拘わらず、幅広い範囲のｐＨで測定が可能である。すなわち、測定溶液のｐＨの調整を不要とすることができる。
【０１７７】
従って、本発明の希土類金属錯体は、in vivo及びin vitroにおける蛍光プローブとして非常に優れている。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１７８】
以下に実施例及び比較例を用いて、本発明をより具体的に説明する。なお、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
【０１７９】
実施例１
I工程
（PAN-NH2の合成)
2-aminopyridine (1.9 g, 20.0 mmol) 及びNaNH2 (882.1 mg, 22.6 mmol) を嫌気条件下dry Et2O (50 mL) に加え、40℃で30 分間加熱還流した。Isoamylnitrate (2.4 g, 20.2 mmol) のdry Et2O 溶液 (50 mL) をゆっくり滴下し、引き続き1.5 時間加熱還流した。生じた沈殿を桐山漏斗を用いて濾過し、残渣をEt2O で洗浄した後、ただちにdry EtOH (50 mL) に溶解させた。その溶液をCO2 ガスをバブリングしている2-amino-5-naphthol (3.2 g, 20.0 mmol) のdry THF 溶液 (50 mL) に、ゆっくり滴下し、8 時間攪拌した。エバポレーターを用いて溶媒を留去した後、NH2修飾シリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ = 8.0 cm, l = 20 cm, eluent: CHCl3:MeOH = 10:1) を用いて不要成分を除去し、さらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ = 6.0 cm, l = 20 cm, eluent: AcOEt) で単離した。エバポレーターを用いて溶媒を留去し、PAN-NH2を褐色粉末として、728 mg (2.8 mmol, 14%) を得た。
【０１８０】
(PAN-Cl の合成)
PAN-NH2 (77.7 mg, 0.3 mmol) とEt3N (80 mL, 0.6 mmol) をdry THF (10 mL) に加え、ClCH2COCl (39.3 mg,0.3mmol) のdry THF 溶液(5 mL) を滴下し8 時間攪拌した。エバポレーターを用いて溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ= 4.5 cm, l = 15 cm, eluent: CHCl3:MeOH = 10:1) で単離した。エバポレーターを用いて溶媒留去し、PAN-Cl を赤色粉末として、79.2 mg (0.09 mmol, 77 %) を得た。
【０１８１】
II(a)工程（PAN-tBuDOTA の合成)
PAN-Cl (68.2 mg,0.2 mmol) をKI (50.0 mg, 0.3 mmol)、 K2CO3 (34.6 mg,0.3 mmol)及びtBu3DOTA (104.5 mg,0.2 mmol) とともにdry MeCN (40 mL) に懸濁させ、60 ℃で12 時間加熱攪拌した。その後、ガラスフィルターを用いて、K2CO3 を除去し、エバポレーターで溶媒を留去した。残渣をCHCl3に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ= 3.0 cm, l = 15 cm, eluent: CHCl3:MeOH = 10:1 → 1:1) で単離した。エバポレーターを用いて溶媒を留居し、PAN -tBuDOTA を赤色粉末として 112.9 mg (0.14 mmol, 69%) 得た。
【０１８２】
II(b)工程(PAN-DOTA の合成）
PAN-tBuDOTA (83.1 mg,0.1 mmol) をTFA (8 mL) に加え、室温で8 時間攪拌した。エバポレーターを用いて溶媒を留去し、Et2O を加え、PAN-DOTA を析出させた。桐山漏斗を用いて吸引濾過し、残渣をEt2O で洗浄した。残渣を乾燥後回収し、PAN-DOTA を赤色粉末として64.1 mg(0.1 mmol,98%) 得た。
MS (ESI, pos.) m/z found 651 ([M+H]+), calcd. 651
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.39-8.35 ( 2H, m), 8.05-7.96 ( 3H, m), 7.57-7.53 ( 2H, m), 7.25 ( 1H, dd, J = 8.0 and 4.4 Hz), 6.70 ( 1H, d, J = 10.0 Hz), 4..04-3.43 ( 8H, m), 3.30 ( 16H, br), 1.47 ( 27H, s)
【０１８３】
III工程（PAN-DOTA (Yb)の合成)
PAN-DOTA (7.1 mg, 11 μmol) をMeOH (1mL) に溶解させた。得られたPAN-DOTA溶液に、YbCl3・6H2O (12.0 mg, 31 mmol) をMeOH (1 mL) に溶解させた溶液をゆっくり加え、室温にて2 時間攪拌した。エバポレーターを用いて溶媒を留去した後、MeOH少量を加え、急激に混ざり合わず、2層に分離するようにEt2O を加え、一晩液-液拡散法により再結晶した。析出した橙色粉末を桐山漏斗を用いて回収し、Et2O で洗浄、次いで真空ラインで乾燥させることにより、目的のPAN-DOTA(Yb) （式４０）を橙色粉末として3.6 mg (4.4 mg, 40%)得た。
【０１８４】
試験例
実施例１で得たPAN-DOTA(Yb)に約530nmの励起光を行い、蛍光スペクトル（装置名「Fluorolog-3」, Jobin Yvon Inc.社製）（測定条件： 測定範囲 800-1200nm、励起波長530nm、スリット長 10nm(励起側)、10nm(蛍光側)、積算回数 ５回、積算方法  平均化、測定間隔 １nm、測定時間 0.1s/nm、high voltage 1450V、720nm cut-off filter 使用、測定濃度 10 μM、測定溶媒 0.01 M Tris-HCl buffer pH 8.0(通常の蛍光スペクトル)、0.01 M britton-Robinson Buffer pH 2.0, 5.0, 8.0, 11.0（各pH ごとのスペクトル測定用））を測定した。この測定結果を図３に示す。
【０１８５】
これらの図からも明らかなように、近赤外領域である975nm付近にイッテルビウム（Yb）由来の蛍光が測定された。また、励起光と蛍光とのスペクトルが十分離れており、生体組織透過性の良好な波長域（700〜1000nm）での測定が可能であるため、高感度及び高精度の蛍光分子プローブとして使用でき、さらに、in vitro及びin vivoでの蛍光分析及びイメージングに適用し得ることが分かった。
【０１８６】
また、ｐＨが２〜１１の間で、Yb由来の蛍光が明確に測定できていることから、本発明の実施例は測定可能な測定溶媒のｐＨが非常に広範囲であることが分かった。
【０１８７】
比較例１
特開２００７−２３８６５０号公報の実施例１に従って、下記式（４１）の希土類金属錯体（4AMF-DOTA(Nd)）を製造した。
【０１８８】
【化６８】
2009084341.tif 000069
【０１８９】
この4AMF-DOTA(Nd)に約500nmの励起光を行い、蛍光スペクトル（装置名「Fluorolog-3」, Jobin Yvon Inc.社製）（測定条件：測定範囲  800-1200nm、励起波長  488nm、スリット長  5nm(励起側)、5nm(蛍光側)、積算回数  5回、積算方法  平均化、測定間隔 1nm、測定時間 1s/nm、high voltage1450V、720nm cut-off filter 使用、測定濃度 10 μM、測定溶媒  0.01 M Tris-HCl buffer pH 8.0）を測定した。この結果を図４に示す。図４から、近赤外領域である870nm及び900nm付近にネオジウム（Nd）由来の蛍光が観測された。
【０１９０】
なお、測定条件において、測定溶媒のpHを４にした場合の実験も行ったところ、比較例１の希土類金属錯体の蛍光がほとんど観測されなかった。
【０１９１】
評価
図３及び図４を比較すると、図４の比較例１では希土類金属元素由来の蛍光波長近傍（800-850nm）付近におけるバックグランドが観察されたのに対し、本発明では希土類金属元素由来の蛍光波長近傍（850-900nm）におけるバックグランドはほとんど観察されなかった。従って、本発明の希土類金属錯体は、比較例１の希土類金属錯体を用いた蛍光プローブよりも高精度及び高感度で測定可能なことが分かった。
【図面の簡単な説明】
【０１９２】
【図１】図１は、本発明の希土類金属錯体の製造方法の一例を示す。
【図２】図２は、本発明の式（３６）で表される希土類金属錯体の合成手順の一例を示す。
【図３】図３は、実施例１で製造した希土類金属錯体の蛍光スペクトルを示す。
【図４】図４は、比較例１で製造した希土類金属錯体の蛍光スペクトルを示す。
【図１】
2009084341.tif 000098
【図２】
2009084341.tif 000099
【図３】
2009084341.tif 000100
【図４】
2009084341.tif 000101