(57)【要約】【課題】本発明は、新規なＡＧＥ形成阻害剤を提供すること。【解決手段】次の一般式（１）【化１】2009051744.tif 000013で表わされるカルコン誘導体、その塩又はその溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
2009051744.tif 000011
〔式中、Ａはハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基若しくはＣ1-6アルコキシ基が置換していてもよいフェニル基、ハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基若しくはＣ1-6アルコキシ基が置換していてもよいナフチル基又は基
【化２】
2009051744.tif 000012
（ここで、Ｘは水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-6アルキル基又はＣ1-6アルコキシ基を示し、Ｂは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｎ（Ｒ6）−（ここでＲ6 はＣ1-6アルキル基又はＣ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基を示す）、−Ｏ−又は−Ｓ−を示す）を示し、Ｗは−ＣＨ＝ＣＨ−又は−ＣＨ2Ｏ−を示し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ5 は同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基、テトラゾリル基、基−ＣＯＮＨＲ7（ここでＲ7 は水素原子又はＣ1-6アルキル基を示す）又は基−Ｏ（ＣＨ2）nＲ8（ここでＲ8 はカルボキシル基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基又はテトラゾリル基を示し、ｎは１〜４の数を示す）を示す。ただし、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ5 で示される基のうち、少なくとも一つはＣ1-6アルキル基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基、テトラゾリル基、基−ＣＯＮＨＲ7 又は基−Ｏ（ＣＨ2）nＲ8 を示す〕
で表わされるカルコン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤。
【請求項２】
一般式（１）で表されるカルコン誘導体が、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルオキシ−５−メチルオキシカルボニルフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［４−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、及び１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オンからなる群から選ばれるカルコン誘導体である、請求項１記載のＡＧＥ形成阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は請求項２記載のＡＧＥ形成阻害剤を有効成分とする糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糸球体病変における不可逆的蛋白修飾による糖尿病性腎症の発症又は進展に対する予防及び／又は治療に有用な薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、本邦では糖尿病患者、糖尿病が疑われる患者及び糖尿病予備群が約２千万人存在するといわれている。糖尿病を起因とした合併症のうち、糖尿病性腎症の発症率は年々増加の推移をたどり、透析導入原因としてすでに慢性糸球体腎炎を上回り第一位となっている。
【０００３】
糖尿病性腎症が発症した場合における最大の問題点は、末期腎不全即ち透析への移行率が、非常に高いことにある。また、糖尿病性腎症による透析への移行は医療費高騰等の社会的に大きな問題となっている。そこで、糖尿病性腎症に関わる治療剤、又は予防を期待できる薬剤が強く望まれている。
【０００４】
糖尿病性腎症の成因には、（１）遺伝的素因をはじめとして、（２）糸球体血行動態変化、（３）グリケーションの亢進やカルボニル・酸化ストレスにより生じた糖化最終産物（Advanced Glycation End Products（以下、「ＡＧＥ」と称する））の蓄積、（４）Protein Kinase Cの活性化や、（５）ポリオール代謝の亢進など、様々な因子の関与が考えられている（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５）。
【０００５】
現在、糖尿病性腎症の治療現場では、糸球体血行動態の改善を主目的としたアンジオテンシン変換酵素阻害剤（以下、「ＡＣＥ阻害剤」と称する）やアンジオテンシンIIの１型受容体拮抗剤（以下、「ＡＲＢ」と称する）が汎用されており、基礎のみならず臨床的なｅｖｉｄｅｎｃｅが報告されている（非特許文献６、非特許文献７）。しかしながら、これらの多くは血圧降下剤として認可されており、糖尿病性腎症の治療剤としての認可はほとんどなされていない。単に、糖尿病性腎症の患者の多くは高血圧であることから、これらが汎用されているに過ぎない。なお、ＡＣＥ阻害剤の塩酸イミダプリルは１型糖尿病性腎症の治療剤として初めて認可されたものの、糖尿病性腎症に対する治療又は予防的作用を有する薬剤はほとんどなく、新規な薬剤の登場が切望されている。
【０００６】
そこで次の糖尿病性腎症の治療剤として、ＡＧＥ形成阻害剤が注目を浴びている。ＡＧＥで修飾されたタンパクは腎循環動態、腎糸球体基底膜の濾過機構等、多数の腎機能に悪影響を及ぼし、また、ＡＧＥ自身がメサンギウム細胞等の腎構成細胞に多数存在するＡＧＥ関連受容体（例えば、Receptor for AGE：ＲＡＧＥ）に作用して、サイトカインや増殖因子等の障害因子を産生させることが報告されている（非特許文献８）。従って、ＡＧＥの形成を抑制することは、糖尿病性腎症の進展抑制に繋がると考えられる。
【０００７】
アミノグアニジンは、反応性カルボニル化合物（３−デオキシグルコソン、メチルグリオキサールなど）の捕捉作用、酸素ラジカル（特に、ヒドロキシラジカル）の捕捉作用及び金属キレート形成作用により、ＡＧＥの形成を阻害すると考えられており、ＡＧＥ阻害に基づく糖尿病性腎症の治療剤として、最初に本格的な研究がなされた化合物である。しかし、これはすでに臨床治験も終了したが、いまだ実用化には至っていない。（非特許文献９、非特許文献１０、非特許文献１１）。
【０００８】
また、その他のＡＧＥ形成阻害剤としてはアミノグアニジンの誘導体であるＯＰＢ−９１９５、ＬＲ−９０、ＡＬＴ−９４６、天然化合物及びその類縁体であるチアミン（ビタミンＢ１）、チアミンピロリン酸、ベンフォチアミンなど幾つかの化合物が知られている（非特許文献１２）が、いずれも実用化には至っていない。
【０００９】
一方、本発明に関係するカルコン誘導体はアレルギー性疾患、炎症性疾患の治療剤としての用途が知られている。例えば、特許文献１にはロイコトリエン拮抗作用に基づく喘息治療剤が開示されている。また、特許文献２にはＶＣＡＭ−１発現阻害作用を有する１, ３−ビス−（置換フェニル）−２−プロペン−１−オン類が開示されている。特に、特許文献２には、カルコン骨格を有する化合物が糸球体腎炎に有効であることが記載されており、実施例として炎症性ケモカインであるＭＣＰ−１、接着因子であるＶＣＡＭ−１の制御作用、平滑筋細胞の増殖抑制作用、マウスのアレルギー炎症モデル、マウス足浮腫モデルの結果といった抗炎症作用や細胞増殖抑制作用が記載されている。
【００１０】
糸球体腎炎の発症機序は、自己免疫応答が関与するものが多く、マクロファージ、炎症性サイトカイン・ケモカイン、接着分子の関与が病態の発症に重要であると考えられている。しかし、糖尿病性腎症の発症・進展の根源は糖代謝異常に基づくものであり、持続的な高血糖によるグリケーション（ＡＧＥ）、糸球体過剰濾過、ポリオール代謝異常が糖尿病性腎症における主因子だと考えられる。糖尿病患者および糖尿病モデル動物において、ＭＣＰ−１やＶＣＡＭ−１の発現の亢進を示唆する報告はあるが、これらの因子の発現亢進は、ＡＧＥがＲＡＧＥを活性化した結果とも考えられ、糖尿病性腎症の発症・進展への関与は、未だ不明な部分が多い。特許文献２の糸球体腎炎治療作用は抗炎症作用の面から述べられているに過ぎず、具体的なデータの開示はない。さらに糖尿病性腎症に有効であるデータは何ら記載されていないことからも、カルコン骨格を有する化合物が糖尿病性腎症に有効であることは知られていなかった。本発明は、後記実施例に記載するとおり、抗ＡＧＥ作用に基づく、２型糖尿病に起因する腎症の進展の緩和を認めており、ＡＧＥ形成阻害剤が糖尿病性腎症の発症又は進展抑制に繋がると考えられる。
【００１１】
【特許文献１】特許３８９５４０４公報
【特許文献２】特表２００４−５０１１４７公報
【非特許文献１】Cooper, ME.etal.; Lancet, 352, 213-219, 1998.
【非特許文献２】槙野博史；糖尿病性腎症 発症・進展機序と治療：８０−１２１，１９９９年；診断と治療社
【非特許文献３】Bohlender, J.et al.; Am. J. Physiol. Renal Physiol., 289,F645-F659, 2005
【非特許文献４】D, Jay.et al.; Free Radical Biology & Medicine, 40, 183-192, 2006
【非特許文献５】Vinik, A.; Expert Opin. Investig. Drugs, 14(12), 1547-1559, 2005
【非特許文献６】Masakuni, N. et al.; Jpn. J. Pharmacol., 85: 416-422, 2001
【非特許文献７】Rossing, K. et al.; Diabetes Care., 28(9): 2106-2112, 2005
【非特許文献８】Locatelli, F. et al.; Nephrol. Dial. Transplant., 18(9): 1716-25, 2003
【非特許文献９】Price, DL. et al.; J. Biol. Chem., 276, 48967-48972, 2001
【非特許文献１０】Abdel-Rahman, E. et al.; Expert Opin. Investig. Drugs., 11(4): 565-574, 2002
【非特許文献１１】Mark E.et al.; Current Diabetes Reports., 4: 441-446, 2004
【非特許文献１２】今泉勉  ほか；ＡＧＥｓ研究の最前線：２０９−２１７，２００４年；メディカルレビュー社
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、新規なＡＧＥ形成阻害剤を提供することにある。ＡＧＥ形成阻害剤は糸球体病変における不可逆的蛋白修飾による糖尿病性腎症の発症及び進展に対する予防又は治療に有用である。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＡＧＥ形成阻害作用を持つ化合物を探索した結果、下記一般式（１）で表されるカルコン誘導体が、ＡＧＥの一種であるペントシジンを指標にしたｉｎ  ｖｉｔｒｏ系での阻害試験において、アミノグアニジンと比較して、強いＡＧＥ形成阻害作用を有することを見出し、また、下記一般式（１）で表される化合物がｉｎ  ｖｉｖｏ系において、尿アルブミン／クレアチニン濃度比、尿中８−ｈｙｄｒｏｘｙ−２’−ｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅ（以下、「８−ＯＨｄＧ」と称する)排泄量、及びPeriodic acid Schiff stain陽性領域（以下、「ＰＡＳ陽性領域」と称する）が減少することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１４】
即ち、本発明は、
［１］  次の一般式（１）
【００１５】
【化１】
2009051744.tif 000002
【００１６】
〔式中、Ａはハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基若しくはＣ1-6アルコキシ基が置換していてもよいフェニル基、ハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基若しくはＣ1-6アルコキシ基が置換していてもよいナフチル基又は基
【００１７】
【化２】
2009051744.tif 000003
【００１８】
（ここで、Ｘは水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-6アルキル基又はＣ1-6アルコキシ基を示し、Ｂは、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｎ（Ｒ6）−（ここでＲ6 はＣ1-6アルキル基又はＣ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基を示す）、−Ｏ−又は−Ｓ−を示す）を示し、Ｗは−ＣＨ＝ＣＨ−又は−ＣＨ2Ｏ−を示し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ5 は同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基、テトラゾリル基、基−ＣＯＮＨＲ7（ここでＲ7 は水素原子又はＣ1-6アルキル基を示す）又は基−Ｏ（ＣＨ2）nＲ8（ここでＲ8 はカルボキシル基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基又はテトラゾリル基を示し、ｎは１〜４の数を示す）を示す。ただし、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ5 で示される基のうち、少なくとも一つはＣ1-6アルキル基、カルボキシル基、シアノ基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基、テトラゾリル基、基−ＣＯＮＨＲ7 又は基−Ｏ（ＣＨ2）nＲ8 を示す〕
で表わされるカルコン誘導体、その塩又はその溶媒和物を有効成分とするＡＧＥ形成阻害剤、
【００１９】
［２］  一般式（１）で示されるカルコン誘導体が、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルオキシ−５−メチルオキシカルボニルフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［４−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、及び１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オンからなる群から選ばれるカルコン誘導体である、前記［１］記載のＡＧＥ形成阻害剤、
【００２０】
［３］  前記［１］又は［２］記載のＡＧＥ形成阻害剤を有効成分とする糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤
を提供するものである。
【発明の効果】
【００２１】
後記実施例に記載するとおり、血液透析患者の血漿を用い、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した評価において、各被検薬物は、アミノグアニジンと比べ、優れたＡＧＥ形成阻害活性を示した。即ち、血液透析患者の血漿を用い、３７℃、７日間、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した系において認められた主要なＡＧＥの一種であるペントシジンの生成に対して、各被検薬物の添加は、いずれもアミノグアニジン添加に比べ、強いペントシジン生成抑制作用を示した。
また、糖尿病モデル動物を用い、被検薬物を投与した評価において、被検薬物は疾患の緩和をもたらした。即ち、糖尿病モデル動物ＫＫＡｙマウスを用い、一日２回、１２週間投与し、尿アルブミン／クレアチニン濃度比及び尿中排泄８−ＯＨｄＧ量、腎糸球体ＰＡＳ陽性領域を測定したところ、対照群に比べその値が減少し、疾患の緩和が認められた。
従って、本発明の一般式（１）で表される化合物若しくはその溶媒和物は、優れたＡＧＥ形成阻害作用を有し、糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本発明における用語の定義は以下の通りである。
【００２３】
「Ｃ1-6アルキル基」とは、炭素数１乃至６個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、２−メチルブチル基、ネオペンチル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、４−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基又は２−エチルブチル基である。本発明の「Ｃ1-6アルキル基」は、好適には「Ｃ1-4アルキル基」であり、より好適にはメチル基、ｎ−ブチル基又はｔ−ブチル基である。
【００２４】
「Ｃ1-4アルキル基」とは、炭素数１乃至４個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基又はｔ−ブチル基である。
【００２５】
「Ｃ1-6アルコキシ基」とは、そのアルキル基部位が上記定義の直鎖状又は分岐鎖状の「Ｃ1-6アルキル基」である炭素数１乃至６個のアルコキシ基を意味し、例えばメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、イソペントキシ基、２−メチルブトキシ基、ネオペントキシ基、１−エチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、４−メチルペントキシ基、３−メチルペントキシ基、２−メチルペントキシ基、１−メチルペントキシ基、３，３−ジメチルブトキシ基、２，２−ジメチルブトキシ基、１，１−ジメチルブトキシ基、１，２−ジメチルブトキシ基、１，３−ジメチルブトキシ基、２，３−ジメチルブトキシ基、１−エチルブトキシ基又は２−エチルブトキシ基である。本発明の「Ｃ1-6アルコキシ基」は、好適には「Ｃ1-4アルコキシ基」であり、より好適にはメトキシ基又はｎ−ブトキシ基である。
【００２６】
「Ｃ1-4アルコキシ基」とは、そのアルキル基部位が上記定義の直鎖状又は分岐鎖状の「Ｃ1-4アルキル基」である炭素数１乃至４個のアルコキシ基を意味し、例えばメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓ−ブトキシ基又はｔ−ブトキシ基である。
【００２７】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子であり、好適には塩素原子である。
【００２８】
「Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基」とは、炭素数１乃至６個の上記定義の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基がカルボニル基に結合した基を意味し、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｎ−プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｎ−ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓ−ブトキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ｎ−ペントキシカルボニル基、イソペントキシカルボニル基、２−メチルブトキシカルボニル基、ネオペントキシカルボニル基、１−エチルプロポキシカルボニル基、ｎ−ヘキシルオキシカルボニル基、イソヘキシルオキシカルボニル基、４−メチルペントキシカルボニル基、３−メチルペントキシカルボニル基、２−メチルペントキシカルボニル基、１−メチルペントキシカルボニル基、３，３−ジメチルブトキシカルボニル基、２，２−ジメチルブトキシカルボニル基、１，１−ジメチルブトキシカルボニル基、１，２−ジメチルブトキシカルボニル基、１，３−ジメチルブトキシカルボニル基、２，３−ジメチルブトキシカルボニル基、１−エチルブトキシカルボニル基又は２−エチルブトキシカルボニル基である。本発明の「Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基」は、好適には、「Ｃ1-4アルキルオキシカルボニル基」であり、より好適にはメチルオキシカルボニル基である。
【００２９】
「Ｃ1-4アルキルオキシカルボニル基」とは、炭素数１乃至４個の上記定義の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基がカルボニル基に結合した基を意味し、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｎ−プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｎ−ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓ−ブトキシカルボニル基又はｔ−ブトキシカルボニル基である。
【００３０】
その他、ここに定義のない基については、通常の定義に従う。
【００３１】
本発明における好ましい様態は以下の通りである。
【００３２】
一般式（１）において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5は同一又は異なって、カルボキシル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子が好ましい。Ｃ1-6アルキル基としては、Ｃ1-4アルキル基が好ましく、メチル基、ブチル基、ｔ-ブチル基が特に好ましい。Ｃ1-6アルコキシ基としては、Ｃ1-4アルコキシ基が好ましく、メトキシ基が特に好ましい。Ｃ1-6アルキルオキシカルボニル基としては、Ｃ1-4アルキルオキシカルボニル基が好ましく、メトキシカルボニル基が特に好ましい。ハロゲン原子としては、塩素原子が好ましい。
【００３３】
一般式（１）において、Ａは式：
【００３４】
【化３】
2009051744.tif 000004
【００３５】
が好ましい。
【００３６】
一般式（１）において、Ｂとしては、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｎ（Ｒ6）−が好ましい。Ｒ6 はＣ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基が好ましく、エトキシエチル基が特に好ましい。
【００３７】
一般式（１）において、Ｘとしては水素原子が好ましい。
【００３８】
一般式（１）において、Ｗとしては−ＣＨ２Ｏ−が好ましい。
【００３９】
一般式（１）において、Ａ−Ｗ−の置換位置はフェニル環上のｏ位、ｍ位及びｐ位のいずれの位置でも良いが、ｍ位及びｐ位が好ましい。
【００４０】
一般式（１）において、二重結合部分はトランス体及びシス体のいずれでもよいが、トランス体が好ましい。
【００４１】
一般式（１）のさらに好ましい様態は以下の通りである。
【００４２】
一般式（１）において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5の少なくとも１つがカルボキシル基、Ｃ1-6アルキル基又はＣ1-6アルキルオキシカルボニル基であり、Ａが次式：
【００４３】
【化４】
2009051744.tif 000005
【００４４】
であり、Ｘが水素原子であり、Ｂが−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｎ（Ｒ6）−であり、Ｒ6がＣ1-6アルコキシＣ1-6アルキル基である組み合わせが好ましい。
【００４５】
一般式（１）の特に好ましい様態は以下の通りである。
【００４６】
一般式（１）が、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルオキシ−５−メチルオキシカルボニルフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−ｎ−ブチルオキシ−５−カルボキシフェニル）−３−［３−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−メチルフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（２−カルボキシフェニル）−３−［４−（キノリン−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（３−カルボキシ−５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［４−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オン、又は１−（４−カルボキシ−２−ヒドロキシフェニル）−３−［３−（１−エチルオキシエチルベンズイミダゾール−２−イルメチルオキシ）フェニル］プロパン−２−エン−１−オンで表されるカルコン誘導体。
【００４７】
一般式（１）で表される化合物の「塩」とは、上記一般式で示される化合物と無毒の塩を形成するものであればいかなる塩でも良い。薬学的に許容することのできる塩基塩は、アルカリ金属カチオン（例えば、カリウム及びナトリウム）及びアルカリ土類金属カチオン（例えば、カルシウム及びナトリウム）から誘導される塩基塩、アンモニウム又は水溶性アミン付加塩（例えば、Ｎ−メチルグルカミン及び低級アルカノールアンモニウム）等の有機アミンとの塩基塩を挙げることができる。  
また、本発明の一般式（１）で表されるカルコン誘導体に光学異性体や幾何異性体が存在する場合は、これらすべての異性体が本発明に包含される。
【００４８】
一般式（１）で表される化合物の「溶媒和物」とは、水和物又はアルコール（例えば、エタノール）との溶媒和物等が挙げられる。
【００４９】
本発明の一般式（１）で表される化合物は、公知の方法（前記特許文献１）により製造することができる。例えば次の反応式に示す方法によって製造される。
【００５０】
【化５】
2009051744.tif 000006
【００５１】
（式中、Ａ、Ｗ、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ5 は前記と同じものを示す。）
【００５２】
すなわち、化合物（２）のアルデヒド体と化合物（３）のアセトフェノン体をメタノール、エタノール、テトラヒドロフランあるいは水等の極性溶媒中、水酸化ナトリウムあるいは水酸化カリウム等の塩基存在下で反応させることによって本発明化合物（１）が得られる。
【００５３】
化合物（２）においてＷが−ＣＨ2Ｏ−の場合は、既知のヒドロキシベンズアルデヒドとクロロメチル化された芳香族化合物との反応で得ることができる。また、Ｗが−ＣＨ＝ＣＨ−の場合は既知のベンゼンのジアルデヒド誘導体とメチル化された芳香族化合物とを無水酢酸存在下で縮合することにより得られる。
【００５４】
化合物（３）でＲ1がヒドロキシ基で残りのＲ2 〜Ｒ5 のうち一つがカルボキシル基あるいはシアノ基のものは、次の反応式に従って化合物（４）で表わされるアセチル誘導体よりフリース転位により得ることができる。
【００５５】
【化６】
2009051744.tif 000007
【００５６】
（式中、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 又はＲ5 は前記と同じものを示す。）
【００５７】
化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがアルキルオキシカルボニル基あるいはテトラゾリル基のものは、相当するカルボン酸誘導体あるいはニトリル体から既知の方法に従って得ることができる。例えば、カルボン酸誘導体（化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがカルボキシル基）をアルコール中５％の硫酸と還流することにより相当するエステル体（化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがアルキルオキシカルボニル基）を得ることができる。またニトリル体（化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがシアノ基）を、ＤＭＦ中、塩化アンモニウム存在下でアジ化ナトリウムと反応させることにより相当するテトラゾール誘導体（化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがテトラゾリル基）を得ることができる。
【００５８】
化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つが−Ｏ（ＣＨ2）2Ｒ8（ここでＲ8はＣ1-6アルキルオキシカルボニル基を示す）のものは、適当なヒドロキシアセトフェノン体（化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがヒドロキシ基）とクロロ酢酸エチルとの反応によるアルキル化で得ることができる。
【００５９】
化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つが−Ｏ（ＣＨ2）2Ｒ8（ここでＲ8はテトラゾリル基を示す）である化合物は、まず適当なヒドロキシアセトフェノン体と２−ブロモアセトニトリルとを反応させ、次いでこのものにアジ化ナトリウムをＤＭＦ中、塩化アンモニウム存在下で反応させることにより得られる。
【００６０】
また化合物（３）でＲ1 〜Ｒ5 のうち一つがアルコキシ基のものは相当するヒドロキシアセトフェノン体をアルキル化することにより得られる。
【００６１】
本発明の一般式（１）で表されるカルコン誘導体は、上記方法によって得られるが、さらに必要に応じて再結晶法、カラムクロマトグラフィー等の通常の精製手段を用いて精製することができる。また必要に応じて、常法によって前記した所望の溶媒和物にすることもできる。
【００６２】
本発明の医薬組成物は、一般式（１）で表されるカルコン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物を含有するものであって、単独で用いてよいが、通常は薬学的に許容される担体、添加物等を配合して使用される。医薬組成物の投与形態は、特に限定されず、治療目的に応じて適宜選択できる。斯かる剤形としては、例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤等を挙げることができる。
【００６３】
これらの製剤は、その剤形に応じて製剤学上使用される賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤等の医薬品添加物と適宜混合、希釈又は溶解し、常法に従い製造することができる。
【００６４】
例えば、散剤の場合は、必須成分のほかに、必要に応じて適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和して調製すればよい。錠剤の場合は、必要に応じて適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を加え、常法に従い打錠して調製すればよい。また錠剤は必要に応じてコーティングを施し、フィルムコート錠、糖衣錠等にすることができる。
【００６５】
また、注射剤の場合は、液剤（無菌水又は非水溶液）、乳剤及び懸濁剤の形態とすることができる。これらに用いられる非水担体、希釈剤、溶媒又はビヒクルとしては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油、オレイン酸エチル等の注射可能な有機酸エステルが挙げられる。また、該組成物には防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤等の補助剤を適宜配合することができる。
【００６６】
本発明の一般式（１）で表される化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して１日１〜１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【００６７】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００６８】
血液透析患者の血漿を用いてのＡＧＥ形成阻害作用
血液透析患者の血漿中ＡＧＥ（指標：ペントシジン）の測定はＭｉｙａｔａらの報告に従って実施した（Miyata,T.et al:JAm Soc Nephrol,13,2478-2487,2002)。血液透析患者の血漿０．９ｍＬをアミノグアニジン又は各被検薬物の存在下（添加量は０．１ｍＬ）で、３７℃で７日間反応した。アミノグアニジン及び各被検薬物の最終濃度は５．０ｍＭとした。なお、アミノグアニジン又は各被検薬物はジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して使用した。ＤＭＳＯの最終濃度は反応溶液１ｍＬ中、反応時における酸化反応に影響しない１０％とした。７日間の反応後に、アミノグアニジン又は各被検薬物を添加した血漿中のペントシジンの濃度を以下に示す方法で測定した。
【００６９】
反応溶液０．０５ｍＬに等量の１０％トリクロロ酢酸（以下、「ＴＣＡ」と称する）を加え、５０００×ｇ、５分間遠心した。上清を除去し、沈殿物を５％ＴＣＡ０．３ｍＬで洗い、その後凍結乾燥し乾燥させた。次いで、窒素条件下で１１０℃、１６時間６Ｎ塩酸０．１ｍＬを添加し、乾燥物を加水分解した。引き続き、５Ｎ水酸化ナトリウム０．１ｍＬと０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）０．２ｍＬを添加し中和した。中和溶液は、口径０．５μｍのフイルターを通し、リン酸緩衝液で希釈し、ペントシジン測定用サンプルを調整した。ペントシジン濃度の測定はＭｉｙａｔａらの方法に従って実施した。
【００７０】
表１に、各被検薬物によるペントシジン形成阻害強度を、アミノグアニジンによる形成阻害強度を１．０とした場合における相対値として表した（形成阻害強度はコントロール群を対照においた。コントロール群にはＤＭＳＯのみ添加した）。
相対値＝（被検薬物の形成阻害率）÷（アミノグアニジンの形成阻害率）  
【００７１】
アミノグアニジン及び各被検薬物の反応中における最終濃度は５．０ｍＭに固定した。
【００７２】
下記表１に示すように、各被検薬物の相対値は、３．１５〜９．４０であり、いずれの被検薬物もアミノグアニジンによるペントシジン形成阻害作用よりも強力な作用を有していた。以上から、一般式（１）で表される本発明のカルコン誘導体は、アミノグアニジンよりも強力なＡＧＥ形成阻害作用を有し、さらに強力な治療剤としての可能性が本実験結果より明らかとなった。
【００７３】
【表１】
2009051744.tif 000008
2009051744.tif 000009
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【実施例２】
【００７４】
ＫＫＡｙマウスを用いた糖尿病性腎症抑制作用の検討
雄性ＫＫＡｙマウス（日本チャールズリバー株式会社）を６週齢で入荷し、７週齢時にメタボリックケージ（商品名：ＭＥＴＡＢＯＬＩＣＡ、製造元：株式会社杉山元医理器社製）を用いて、１８時間の採尿を実施した。採取した尿より、尿中アルブミン濃度をＤＣＡ２０００システム（ミクロアルブミン・クレアチニンカートリッジ（バイエルメデイカル社製））を用いて測定し、尿中アルブミン排泄量（尿中アルブミン濃度×尿量）を指標にブロック化割付により群分けを行い、対照群（ｎ＝６）に対し薬物投与群（ｎ＝６）とした。被検物質９（表１中の被検化合物番号９）は、０．５％メチルセルロース溶液を添加し、２５ｍｇ／ｋｇ溶液を調製した。なお、尿量は重量法によって算出した。すなわち、採尿開始前にあらかじめ測定しておいた採尿瓶（品名：ボトル３０ｍＬ、型：ＭＭ−０９、製造元：株式会社杉山元医理器社製）の重量と、採尿終了後の採尿瓶の重量との差から、１８時間あたりの尿量とした。薬物投与（被検物質９）は８週齢時より開始し、１２週間の反復投与（１日２回（ｂｉｄ）、強制経口投与）を行った。投与期間中、２, ４, ６, ８,および１２週間後に投与前と同様の方法で１８時間の蓄尿を実施し、主要パラメータである尿中アルブミン排泄量を測定し、尿アルブミン／クレアチニン濃度比を算出した。また、酸化ストレスマーカーとして尿中８−ＯＨｄＧ濃度を測定し、１８時間あたりの尿中８−ＯＨｄＧ排泄量（尿中８−ＯＨｄＧ濃度×尿量）を算出した。測定には投与開始前、投与後８および１２週の尿を使用した。８−ＯＨｄＧ濃度は、８−ＯＨｄＧ測定用ＥＬＩＳＡキット（Ｎｅｗ  ８−ＯＨｄＧ  Ｃｈｅｃｋ：日本老化制御研究所）を用いて、プレートリーダー（可視）ＭＳ−ＵＶ（ＬＡＢＳＹＳＴＥＭＳ，Ｈｅｌｓｉｎｋｉ）により測定を行った。１２週間の投与後、腎糸球体におけるＰＡＳ陽性領域を評価するために剖検を実施した。０．５％ペントバルビタール（東京化成工業株式会社製）を１０ｍＬ／ｋｇの割合で腹腔内投与し、麻酔後、開腹し腹部大動脈切開の後に腎臓を摘出した。摘出した腎臓を氷冷した生理食塩水で洗浄後、腎動静脈に平行に中央部約２ｍｍ程度を切り出し、１０％中性緩衝ホルマリン溶液に浸潤させ固定した。ホルマリン溶液中に固定した腎切片については、ＰＡＳ染色標本スライドを各個体について作製し（標本作製は株式会社イナリサーチに依頼）、スライド１枚に対して糸球体２０個の画像をランダムに取り込み、画像解析ソフト（Lumina Vision）を用いて、ＰＡＳ陽性領域を糸球体面積（ボーマン嚢より内側領域）に対する面積率で算出した。なお、選択した糸球体は糸球体の形態が構築されているものに限定した。
【００７５】
ＫＫＡｙマウスは若週齢より著しい高血糖を示す自然発症の糖尿病マウスであり、肥満を伴い、インスリン抵抗性が認められる。腎については、糖尿病状態の継続期間、年齢に伴い、糸球体メサンギウム基質と細胞の増加、更にはメサンギウムの肥厚と糸球体硬化が認められ、ヒトの糖尿病性糸球体硬化症に類似しているモデルである。
図１に、被検物質９によるＫＫＡｙモデルマウスに対する尿アルブミン／クレアチニン濃度比を表し、図２に、被検物質９によるＫＫＡｙモデルマウスに対する尿中排泄８−ＯＨｄＧ量を表し、図３に、被検物質９によるＫＫＡｙモデルマウスに対するＰＡＳ陽性領域を表した。尿アルブミン／クレアチニン濃度比は糖尿病性腎症を診断する指標である。尿中８−ＯＨｄＧ（８−ヒドロキシデオキシグアニジン）は酸化ストレスによるＤＮＡ障害のマーカーであり、その値が大きいほど、酸化ストレスが重度であることを示す。糖尿病性腎症の病態ではメサンギウム領域にＰＡＳ陽性物質が蓄積することが知られており、ＰＡＳ陽性領域の値が大きいほど病態が重症であることを示す。
これらの結果より、本発明のカルコン誘導体が、糖尿病性腎症の症状の進展・緩和し、糖尿病性腎症の予防及び／又は治療剤として有用であることが、糖尿病モデル動物を用いた本試験結果からも示された。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】ＫＫＡｙモデルマウスに対する尿アルブミン／クレアチニン濃度比を表す図。
【図２】ＫＫＡｙモデルマウスに対する尿中排泄８−ＯＨｄＧ量を表す図。
【図３】ＫＫＡｙモデルマウスに対するＰＡＳ陽性領域の面積率を表す図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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