(57)【要約】      （修正有）【課題】人体にやさしく安全な柑橘類又はその加工物に含まれる成分を用いて、精神的ストレス負荷に起因する免疫能の低下を回復させる作用に優れた免疫回復剤、特に胸腺の萎縮等に伴って生じる免疫能の低下を回復させる作用に優れた免疫回復剤及びそれを配合した安全性に優れた飼料組成物を提供する。【解決手段】柑橘類又はその加工物（好ましくは温州ミカンの果皮又は圧搾残渣）に多く含まれるフラボン化合物であるヘスペリジンを有効成分とする免疫回復剤を、動物又は魚介類用の飼料組成物に含有させる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘスペリジン及び／又はその塩を有効成分とする、免疫回復剤。
【請求項２】
胸腺萎縮に伴って生じる免疫低下を回復するものであることを特徴とする、請求項１記載の免疫回復剤。
【請求項３】
前記胸腺萎縮が、精神的ストレス下で生じるものであることを特徴とする、請求項１又は２記載の免疫回復剤。
【請求項４】
前記精神的ストレスが、動物の密集飼育条件によるもの又は乳離れによるものであることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の免疫回復剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の免疫回復剤を含有してなる、飼料組成物。
【請求項６】
動物の密集飼育用又は離乳食用、もしくは魚介類の密集飼育用の飼料であることを特徴とする、請求項５記載の飼料組成物。
【請求項７】
免疫回復剤の基源が柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣であることを特徴とする、請求項５又は６記載の飼料組成物。
【請求項８】
前記柑橘類が、ミカン、ポンカン、ハッサク及びネーブルオレンジからなる群から選択されるものである、請求項７記載の飼料組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヘスペリジン及び／又はその塩を有効成分とする免疫回復剤及びそれを含有する飼料組成物に関する。詳しくは、本発明は、胸腺萎縮等に伴って生じる免疫低下、特に密集飼育などによる精神的ストレスの負荷によって生じる胸腺萎縮に伴う免疫低下を有効に回復しうる、免疫回復剤及びそれを含有する飼料組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、人口の増加と共に、食糧の確保が重要な課題となっており、それを受けて、農業、畜産業においては労働集約化と生産効率化が広く行われている。例えば、レッグホーンなどの飼育においては、運動が殆どできないケージで、極めて多数の動物を飼育する（密集飼育条件）といったような効率化が行われている。
【０００３】
しかしながら、密集飼育条件では、この飼育条件によるストレスが動物に荷重に負荷を与え、これによって胸腺萎縮を引き起こし、免疫、特にＴ細胞が関与する細胞性免疫が抑制されて免疫能が低下し、感染症の集団感染を発生させる場合が少なくない。
また、例えば豚等の哺乳動物の飼育現場では、生後１ヶ月を過ぎた程度の子豚は乳離れがもたらす精神的ストレスによって下痢を起こしやすくなり、これにより腸の免疫力が低下して生存率を低下させる場合が少なくない。
そこで、このような様々な要因でもたらされる精神的ストレスに起因する免疫能の低下を速やかに回復する手段を開発し、飼育動物の生存率を上げることが望まれていた。
【０００４】
集団感染を防ぐための対策としては、例えば、抗生物質などを飼料に配合し、体力の向上をはかる方法などが考案されていた（例えば、特許文献１を参照）が、薬剤耐性病原菌の登場を誘発するなどの問題点が存在した。また、化学物質や抗生物質等の薬物を含む飼料を与えれば、それを摂取する人体への悪影響が懸念された。
【０００５】
そこで、家畜や家禽類等の動物や魚介類のストレスにより低下した免疫能及び感染抵抗力を回復させてその生産性や品質を向上させ、さらにはそれを摂取する人体への弊害を防ぐためにも、ストレス由来の免疫低下に対する優れた回復能を有し、かつ化学物質や抗生物質等の薬物に依存しない安全な飼料の開発が望まれている。
【０００６】
一方、温州ミカン等の柑橘類の皮は漢方で陳皮と称され、健胃、鎮咳、去痰、感冒などを目的とする処方に使用されてきたことから、これまでに温州ミカンに含まれる成分の生理的な作用に関する活発な研究が行われてきた。
【０００７】
本発明者は、これまで陳皮と同様の成分を含む温州ミカンの搾汁（ジュース）圧搾残渣がストレスモデルに及ぼす作用について検討してきた。その結果、これらを外用で用いることにより皮膚機能低下改善作用が発揮されること（特許文献２）、及び経口摂取することによってＩｇＡ産生恒常化作用が発揮されること（特許文献３）を見いだし、それぞれ先に特許出願した。
【０００８】
しかしながら、柑橘類に含まれる成分の精神的ストレス負荷による悪影響に対する作用に関しては、未だ十分な研究がなされているとは言えず、また温州ミカンの皮や圧搾残渣のほとんどが産業廃棄物として処理されている現状においては、ストレス改善作用の観点からこれらのさらなる有効利用が求められている。
【０００９】
これまで温州ミカンには、ヘスペリジン（hesperidin）等のフラボン系化合物が含まれることが知られている。ヘスペリジンには末梢血流の改善作用などがあり、また該ヘスペリジン及びそのアグリコンには前駆脂肪細胞の脂肪細胞への分化促進作用があることが徐々に明らかにされつつある。
また、ヘスペリジン又はその誘導体を飼料の摂取量増強の目的で飼料に含有させる技術（特許文献４）、血糖値の上昇を抑制する目的で飼料に含有させる技術（特許文献５）等が知られている。
【００１０】
しかし、ヘスペリジンの精神的ストレス負荷による胸腺萎縮等に伴って生じる免疫能低下に対する優れた回復作用についてはこれまで知られておらず、このような観点からの研究例は報告されていない。ましてや、動物又は魚介類の飼育時に様々な要因でもたらされる精神的ストレスによって発生する免疫能の低下を回復するために飼料に配合する技術は全く知られていない。
【００１１】
【特許文献１】特開２００８−００１７０７号公報
【特許文献２】特開２００１−２１３７７５号公報
【特許文献３】特開２００５−２５５５７４号公報
【特許文献４】特開平０７−２０３８６７号公報
【特許文献５】特開２００７−２２３９１４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、ストレスにより低下した免疫能を回復させる作用を有し且つ人体にやさしく副作用の少ない免疫回復剤、及びそれを含む動物又は魚介類用の飼料組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者は、上述した課題に鑑み鋭意検討した結果、温州ミカン等の柑橘類又はその加工物に含まれるフラボン系化合物の一種であるヘスペリジンが精神的ストレス負荷による生体への悪影響のうち、胸腺萎縮等に伴う免疫能低下に対する優れた回復作用を発揮すること、及びこのヘスペリジンを動物又は魚介類用の飼料に配合することにより、その動物や魚介類の免疫能及び感染抵抗力を高め、その生産性や品質を向上し、さらにはそれを摂取する人体への弊害を防ぐことを可能にする薬物に依存しない安全な飼料組成物を提供しうることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【００１４】
すなわち、本発明は、以下の（１）〜（７）に示す免疫回復剤及びそれを含有する飼料組成物に関する。
（１）ヘスペリジン及び／又はその塩を有効成分とする、免疫回復剤。
（２）胸腺萎縮に伴って生じる免疫低下を回復するものであることを特徴とする、（１）記載の免疫回復剤。
【００１５】
（３）前記胸腺萎縮が、精神的ストレス下で生じるものであることを特徴とする、（１）又は（２）記載の免疫回復剤。
（４）前記精神的ストレスが、動物の密集飼育条件によるもの又は乳離れによるものであることを特徴とする、（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫回復剤。
（５）（１）〜（４）のいずれかに記載の免疫回復剤を含有してなる、飼料組成物。
【００１６】
（６）動物の密集飼育用又は離乳食用、もしくは魚介類の密集飼育用の飼料であることを特徴とする、（５）記載の飼料組成物。
（７）免疫回復剤の基源が柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣であることを特徴とする、（５）又は（６）記載の飼料組成物。
（８）前記柑橘類が、ミカン、ポンカン、ハッサク及びネーブルオレンジからなる群から選択されるものである、（７）記載の飼料組成物。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の免疫回復剤は、さまざまな要因でもたらされる精神的ストレス負荷による胸腺萎縮に伴って生じる免疫能低下、特にそのうち胸腺萎縮に伴う免疫能低下において、優れた回復作用を示す。また、本発明の免疫回復剤の有効成分であるヘスペリジンは、柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣を基源とするものであり、その作用は緩和で人体にやさしく副作用も少ないため、安全性においても優れている。さらに、産業廃棄物として処理されることの多い温州ミカン等の柑橘類の果皮や圧搾残渣を有効に利用したものであり、環境性及び経済性にも優れている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下に、本発明の実施の形態を説明する。
（１）ヘスペリジン
本発明の免疫回復剤は、柑橘類に含まれるフラボン系化合物（フラボノイド）であるヘスペリジン（hesperidin）を有効成分とする。ヘスペリジンは柑橘類に多く含まれる特徴的な配糖体成分であり、以下の化学構造を有する。
【００１９】
【化１】
2009234924.tif 000002
【００２０】
本発明のヘスペリジンとしては、そのアグリコンから選択されるものであってもよい。また、ヘスペリジンの塩としては、ナトリウム塩が挙げられる。
ヘスペリジンは、柑橘類又はその加工物に多く含まれ、特に柑橘類の果皮及び果肉部（さのう）に多く含まれる。ヘスペリジンの単離は、従来公知の方法を用いることができる。
【００２１】
（２）柑橘類又はその加工物
本発明における柑橘類としては、温州ミカン、ポンカン、ハッサク、ネーブルオレンジ、バレンシアオレンジ、キンカン、夏ミカン、甘夏ミカン、伊予かん、グレープフルーツ、レモン、ユズ、スダチ、スルガオレンジ、デコポン、ザボン、文旦等が挙げられる。これらのうち、より好ましいものは温州ミカン、ポンカン、ハッサク及びネーブルオレンジからなる群から選択されるものであり、特に好ましいものは温州ミカンである。
【００２２】
柑橘類（ミカン）の構造は、表面の果皮、果皮の内壁にある白色部分（中果皮）、種子、通常食される「さのう」（果肉部）、及びじょうのう膜（さのうを包む内袋）によって構成されている。本発明の上記フラボン系化合物は、これら柑橘類の構成部分のうち、特に果皮及びさのうに多く含まれる。
【００２３】
柑橘類又はその加工物としては、柑橘類の果皮、搾汁液（果汁又はジュース）、該搾汁液を濃縮した濃縮液、あるいは搾汁液もしくはその濃縮液を乾燥したり、さらに必要に応じて粉末化したりしたもの（固体）、果汁圧縮残渣などが挙げられる。また、柑橘類の果皮をそのまま又は乾燥させたもの（凍結乾燥品、通風乾燥品，天日干し品など）もしくはそれらの粉砕物なども挙げられる。
【００２４】
柑橘類の圧搾残渣は、柑橘類を搾汁した後に残るもので、繊維質、ペクチン等を含む。本発明で用いられる圧搾残渣は、かかる搾汁後の残渣をそのまま用いても良く、あるいは乾燥後粉末化したものを用いても良い。
【００２５】
本発明のヘスペリジンは、柑橘類の果皮及びさのうに多く含まれることから、本発明で用いられる柑橘類又はその加工物としては、柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣（主にさのうの圧搾残渣）が好ましい。さらに、ヘスペリジンは柑橘類の果皮に特に多く含まれることから、特に柑橘類の果皮が好ましい。
【００２６】
本発明の免疫回復剤の有効成分であるヘスペリジンとしては、柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣から抽出・単離したものを用いても良く、またヘスペリジンを多く含む柑橘類の果皮又は果汁圧搾残渣それ自体を、そのまま本発明の免疫回復剤として用いても良い。
【００２７】
（３）免疫回復剤
本発明の免疫回復剤は、免疫能低下、特に胸腺の萎縮に伴って生じる免疫能低下に対する回復作用を有する。すなわち、精神的ストレスが負荷されるとストレス兆候として胸腺の萎縮が起こり、免疫、特にＴ細胞が関与する細胞性免疫が抑制されて低下するが、本発明の免疫回復剤はかかる胸腺の萎縮に伴って生じる免疫能の低下に対する顕著な回復作用を有する。さらに、本発明の免疫回復剤は、動物や魚介の密集飼育等の要因による精神的ストレス下に生じる胸腺の萎縮に伴う免疫能低下に対する回復作用に優れている。また本発明の免疫回復剤は、豚や牛等の哺乳動物の飼育現場おける、子豚や仔牛の乳離れによる精神的ストレスがもたらす下痢などの症状に伴う腸の免疫力低下に対する回復作用に優れている。
【００２８】
（４）飼料組成物
本発明の免疫回復剤は、動物又は魚介類の飼料に配合して用いられる。特に、動物の密集飼育用又は離乳食用、もしくは魚介類の密集飼育用の飼料に好適に配合される。
本発明の免疫回復剤を動物又は魚介類用の飼料に配合して用いる場合、対象となる動物又は魚介類としては、家禽などの動物や、養殖魚介類が挙げられる。より具体的には、豚、牛、馬、山羊、鹿、ウサギ、山羊、羊等の家畜；  ブロイラー、採卵鶏などのニワトリ、アヒル、ウズラ、カモ、七面鳥、キジ、ガチョウなどの家禽類；  猿、マウス、ラット、モルモット等の実験動物；  ハマチ、マダイ、フグ、マグロ、ヒラメ、シマアジ、マアジ、サケ、ギンザケ、コイ、ウナギ、ニジマス、アユ、エビ類（クルマエビ、ボタンエビ、イセエビ、ロブスター、ブラックタイガー等）、カニ類（タラバガニ、ズワイガニ、ワタリガニ、ケガニ等）、貝類（アワビ、サザエ等）などの養殖水産動物が挙げられる。
【００２９】
本発明の免疫回復剤は、上記のような動物又は魚介類用として従来一般的に用いられているものであれば、いかなる飼料に配合して用いることもできる。そのような飼料は、通常、とうもろこし、ふすま、米、麦、綿実粕、マイロ、大豆粕、魚粉、脱脂米糠、油脂、アルファルファ、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化コリン、各種ビタミン剤（ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、パントテン酸カルシウム、ニコチン酸アミド、葉酸）、無機塩（硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅、硫酸亜鉛、ヨウ化カリウム、硫酸コバルト）等の一部又は全部を混合して調製される。
【００３０】
飼料中の主要な成分としては、トウモロコシ、粉砕したトウモロコシ、トウモロコシ粉、トウモロコシ胚芽粗粉、マイロ、キビ、カラスムギ、小麦、小麦粉、小麦胚芽粉、大麦、米、ライ麦、燕麦などの穀物類又は加工穀物類副製品；米ヌカ、フスマ、麦ヌカなどの糟糠類、エンドウマメ種子、ピーナッツ粉、大豆粉などのマメ類、ジャガイモ粉などのイモ類；大豆粕、脱脂大豆、綿実粕、菜種粕、ゴマ粕、ヒマワリ粕、サフラワー粕、ココヤシ粗粉などの植物性油粕等；オオムギモルト、ビール粕、酒粕、グルタミン酸発酵粕、トウモロコシ発酵粕、コーングルテンフィード、コーンジャームミール、コンニャク飛粉などの製造粕類；魚粉、肉粉、肉骨粉、ミートミール、ミートボーンミール、血粉、フェザーミール、脱脂粉乳、乾燥ホエー、ヘビーミール、オキアミミール、カゼイン、ゼラチンなどの動物質材料；ビール酵母などの酵母類；トウモロコシデンプン、デキストリンなどの糖類；アルファルファ、乾燥アルファルファ粉、牧草粉、各種リーフミール、大豆タンパク、小麦グルテン、トウモロコシツエインなどの植物性タンパク質；結晶性セルロース、タルク、シリカ、白雲母、ゼオライト等の無機物質の微粉末；炭酸カルシウムなどの無機カルシウム化合物；並びにリン酸カルシウムなどの無機リン酸塩；などを挙げることができる。飼料には、さらに必要に応じ、畜産分野で許容されている他の添加物（例えば、他の抗生物質や殺菌剤、駆虫剤、抗酸化剤など）を飼料に配合することもできる。
【００３１】
本発明の飼料における免疫回復剤の含有量は、一般的には０．０００１重量％〜１重量％であり、好ましくは０．００１重量％〜３．０重量％の範囲である。しかしながら、本発明における飼料組成物中の免疫回復剤の含有量は、上記の量に制限されることなく、対象動物の種類、成長段階、年齢、体重、環境条件、体調、飼料の材料の種類、給餌する季節などに応じて必要量を適宜選択して添加配合することができ、それにより得られる効果を調整することができる。
【実施例】
【００３２】
以下に、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例にのみ限定されるものではない。
【００３３】
本実験では、過密負荷（密集飼育）により精神的ストレス負荷を与えられた動物を用い、精神的ストレス負荷による影響（胸腺萎縮）に対する本発明の免疫回復剤の作用効果を検証した。
【００３４】
Ｉ．実験の方法
＜使用動物＞
ＨＯＳ：Ｈｒ−１ヘアレスマウス（雌、７週）を、１ケージ（ｃａｇｅ）当たり５匹の割合で馴化した後、以下の６グループに分けて飼育し、使用した。
（１）Normal（ノーマルグループ）；１ｃａｇｅあたり５匹入れ、市販飼料を与えて１２日間飼育した（１グループ）。
（２）Stress（精神的ストレス負荷グループ）；１ｃａｇｅあたり２０匹入れ、市販飼料を与えて１２日間飼育した（５グループ）。
【００３５】
＜実験手順＞
上記飼育法にて飼育した実験動物群（６グループ）について、実験を開始した。すなわち、市販飼料（製造者；オリエンタル社（株）、商品名；普通飼料「ＭＦ」）を、上記６グループに摂餌（Food Intake）し、７日間飼育した。ただし、上記（２）（精神的ストレス負荷グループ；５グループ）のうち１グループには、検体を含まない飼料を与えた（Control）。別の１グループには、公知の抗精神薬である塩酸クロルプロマジン（Chlorpromazine hydrochloride）を混ぜた飼料を与えた（Positive Control）。残りの３グループには、下記表１に示す量の検体（ヘスペリジン）を投与した。なお、この検体（ヘスペリジン）は、温州ミカンの果皮を粉砕後、５０％メタノールで抽出し、その抽出物をＨＰ−２０及びシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより調製したものである。
【００３６】
II．実験結果
実験開始から７日後に、各グループのマウスについて、胸腺（Thymus）の重量を測定した。結果を表１に示す。
【００３７】
【表１】
2009234924.tif 000003
【００３８】
表１からわかるように、密集飼育による精神的ストレスが負荷されると、胸腺は萎縮するが、ヘスペリジンを与えることにより、公知の抗精神薬（Chlorpromazine hydrochloride）に比べて格段に優れた胸腺萎縮の回復効果が発揮されることがわかる。
このように、実施例１の結果によれば、本発明の免疫回復剤は、胸腺萎縮に伴う免疫能低下に対する優れた回復作用を有することがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明の免疫回復剤は、精神的ストレス負荷による生体の機能低下に伴う免疫能低下、特に胸腺萎縮に伴う免疫能低下に対し、これを回復させる作用に優れている。
【００４０】
このような本発明の免疫回復剤は柑橘類又はその加工物に多く含まれ、人体にやさしく安全性が高いものであるから、動物又は魚介類の飼料に配合することにより、動物や魚介類の密集飼育等のさまざまな要因でもたらされる精神的ストレス負荷によって低下した免疫能及び感染抵抗力を回復させる効果を有しかつ化学物質や抗生物質等の薬物に依存しない安全な飼料組成物を提供することができる。そして、このような飼料組成物を用いるにより、飼育動物又は魚介類の生産性や品質を向上させ、さらにはそれを摂取する人体への弊害を防ぐことができる。特に、温州ミカンの果皮又は果汁圧搾残渣を用いるのが有効であることから、我が国の優れた農産物である温州ミカンのさらなる有効利用に役立つことが期待される。