(57)【要約】    【課題】美白効果と高い安全性を有する美白剤、並びにその美白剤を含有する美白用皮膚外用剤、化粧料を提供することを課題とする。    【解決手段】すなわち、本発明は、下記式（１）で示される３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤を提供するものである。式（１）中、Ｒは水素原子、又は直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基である。【化４】2009234959.tif 000010【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）［式（１）中、Ｒは水素原子、又は直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基である。］で表される３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤。
【化１】
2009234959.tif 000009
【請求項２】
請求項１記載の美白剤を含有することを特徴とする美白用皮膚外用剤。
【請求項３】
美白剤が０．００１％〜２０．０重量％含有されている請求項２記載の美白用皮膚外用剤。
【請求項４】
請求項１記載の美白剤を含有することを特徴とする化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤、並びにその美白剤を含有する美白用皮膚外用剤、化粧料であって、メラニンの生成を抑制し、日焼け後の色素沈着、しみ・そばかす、あるいは肝斑などの予防および改善に有効な美白剤、美白用皮膚外用剤、化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚における色素異常には、日焼け後の色素沈着、しみ・そばかす、あるいは肝斑などがあげられる。このような色素沈着症の発生機序については、いまだ不明な点が多いが、一般的にはホルモンの異常や太陽光に含まれる紫外線の刺激が原因となってメラニン色素が生合成され、これらが皮膚内に異常沈着するものと考えられている。
【０００３】
このメラニン色素は、皮膚内では表皮基底層に存在するメラニン細胞（メラノサイト）内のメラニン生成顆粒（メラノソーム）において生合成され、生合成されたメラニンは隣接する表皮細胞へ拡散する。メラノサイト内におけるメラニン生成反応は、次のようなものが考えられている。すなわち、アミノ酸であるチロシンが酵素チロシナーゼの作用によりドーパキノンとなり、これが酵素的または非酵素的に反応が進行し、最終的に黒色のメラニンが生成される過程がメラニン色素の生成過程である。したがって、こうしたメラニン色素の生成反応の第一段階であるチロシナーゼの作用を抑制することがメラニン生成の抑制に重要である。
【０００４】
こうしたことから、以前より、日焼け後の色素沈着、しみ・そばかす、あるいは肝斑などの予防および改善を目的に、乳液、化粧水、クリーム、ジェル、パック、洗浄料、ファンデーション、軟膏などの皮膚外用剤には、アスコルビン酸およびその誘導体、グルタチオンなどの美白成分が配合されている。たとえばアスコルビン酸誘導体を配合するものとして、下記特許文献１や特許文献２のような出願がなされ、グルタチオンを配合するものとして、下記特許文献３のような出願がなされている。
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−１０４８６４公報
【特許文献２】特開２００３−７３２５２公報
【特許文献３】特開平５−３０１８１１公報
【０００６】
しかし、これらの美白成分を配合した化粧料では、美白成分の効果が十分でなく、或いは製剤中で変質するなどして十分な効果が得られていないのが実情である。一方、近年、ハイドロキノンを配合した皮膚外用剤が、皮膚科や美容クリニックなどで用いられている。一応、ハイドロキノンにはメラニン生成抑制効果が確認されているが、使用中のかぶれ、刺激が高頻度で発生することから、安全性に問題がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は上記のような問題点を解決するためになされたものであり、美白効果と高い安全性を有する美白剤、並びにその美白剤を含有する美白用皮膚外用剤、化粧料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等はこのような課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体が優れたメラニン生成抑制効果を有すること、さらにこの３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体を美白剤として用いることにより、製剤中において安定で、使用中のかぶれや刺激などの問題のない、皮膚への安全性の高い皮膚外用剤や化粧料が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、下記式（１）で示される３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤を提供するものである。式（１）中、Ｒは水素原子、又は直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基である。
【００１０】
【化２】
2009234959.tif 000002
【００１１】
また本発明は、このような３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤を含有する美白用皮膚外用剤及び化粧料を提供するものである。美白用皮膚外用剤中において、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンおよびその誘導体は０．００１％〜２０．０重量％含有されていることが好ましい。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の美白剤は、優れたメラニン生成抑制効果を有し、かつ安全性の高いものである。また本発明の美白剤、美白用皮膚外用剤、化粧料は、美白効果に優れ、製剤中において安定であり、皮膚への安全性も高いものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の実施形態について説明する。本発明の美白剤は、上述のように下記式（１）で示される３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなるものである。
【００１４】
【化３】
2009234959.tif 000003
【００１５】
式（１）においてＲは水素原子、又は直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜１２、好ましくは炭素数１〜８のアルキル基である。尚、Ｒの好ましい具体例としては水素原子、メチル基、エチル基、ブチル基、オクチル基などが挙げられるが、これに限定されるものではない。式（１）で示されるこれらの化合物は、たとえばマルトールとアニリン又はアルキルアニリンを反応させることにより合成することができる。
【００１６】
また本発明の美白用皮膚外用剤、及び化粧料は、上記のような３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体からなる美白剤を含有するものである。
【００１７】
本発明の美白用皮膚外用剤において有効な美白効果を得るために、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン又はその誘導体の配合量は、通常乾燥固形分として０．０００１〜５０重量％とすることが好ましい。０．０００１重量％未満では本発明の効果が充分に得られない可能性があり、一方、５０重量％を超えても、その増量に見合った効果の向上は認められないからである。この観点から、０．００１〜２０重量％がより好ましい。
【００１８】
本発明の美白用皮膚外用剤中には本発明の効果を損なわない範囲において、一般に化粧料で用いられ、あるいは医薬部外品、医薬品等の皮膚外用剤に用いられる各種任意成分を必要に応じて適宜配合することができる。このような任意成分として、例えば、精製水、エタノール、油性成分、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、薬効成分、粉体、紫外線吸収剤、色素、香料、乳化安定剤等を挙げることができる。
【００１９】
本発明の美白用皮膚外用剤の形態は、液状、乳液、軟膏、クリーム、ゲル、エアゾール、石けん等皮膚に適用可能な性状のものであれば問われるものではなく、必要に応じて適宜基剤成分等を配合して所望の形態の美白用皮膚外用剤を調製することができる。また、本発明の美白用皮膚外用剤は、医薬品、医薬部外品又は化粧料等の多様な分野において適用可能である。
【００２０】
本発明の美白用皮膚外用剤は、日焼け後の色素沈着、しみ・そばかす、あるいは肝斑などの予防および改善に用いることが可能である。なお、ここに示した色素沈着症状は例示であり、これらの色素沈着症状に本発明の美白用皮膚外用剤の適用が限定されるものではない。
【実施例】
【００２１】
以下、本発明の実施例について説明する。
（実施例１）
本実施例は、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンの調製例についての実施例である。その調製例について説明すると、先ずマルトール（１５０ｇ）及びアニリン（２３６．３５ｇ）を濃硫酸（１１０ｍｌ）と水（３６７６ｍｌ）の混合溶媒中に懸濁させて、９５℃で７２時間撹拌した。
【００２２】
２０℃まで冷却した後、析出した結晶を濾取し、次に水で洗浄し、５０℃で減圧乾燥した。さらに得られた粗結晶を熱メタノール（９００ｍｌ）に溶解し、活性炭（７．８ｇ）を加えて、７０℃で１時間撹拌した。熱時ろ過し、濾液を２０℃まで冷却、続いて氷冷し、析出した結晶を濾取した。濾取した結晶を冷メタノールで数回洗浄し、５０℃で減圧乾燥を行い、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン（１１３ｇ）を得た。
【００２３】
（実施例２）
本実施例は、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノンの調製例についての実施例である。その調製例について説明すると、先ずマルトール（１５ｇ）及び４−ブチルアニリン（３７．９ｇ）を濃硫酸（１１ｍｌ）と水（３６７mｌ）の混合溶媒中に懸濁させて、９５℃で７２時間撹拌した。
【００２４】
２０℃まで冷却した後、析出した結晶を濾取し、次に水で洗浄し、５０℃で減圧乾燥した。さらに得られた粗結晶を熱メタノール（１００ｍｌ）に溶解し、活性炭（１．５ｇ）を加えて、７０℃で１時間撹拌した。熱時ろ過し、濾液を２０℃まで冷却、続いて氷冷し、析出した結晶を濾取した。濾取した結晶を冷メタノールで数回洗浄し、５０℃で減圧乾燥を行い、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノン（１０．３ｇ）を得た。
【００２５】
（実施例３）
本実施例では、マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞を用いたチロシナーゼ活性阻害試験を行った。
【００２６】
被験化合物としては、式（１）におけるＲがＨの場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンの他、ＲがＣＨ3の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−メチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ2Ｈ5の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−エチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ4Ｈ9の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ8Ｈ17の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ12Ｈ25の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ドデシルフェニル−４−ピリジノンを用いた。
【００２７】
その試験方法について説明すると、先ず１０重量％ウシ胎児血清（ＩＣＮ社製）を含むダルベッコ改変イーグル培地（シグマ社製）にＢ１６メラノーマ細胞を懸濁し、９６ウェルマイクロプレート（ＩＷＡＫＩ社製）に播種し、ＣＯ2インキュベーター（９５容量％空気、５容量％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で２４時間培養した。
【００２８】
２４時間後、マイクロプレート中の培地を除去し、ＰＢＳ０．２ｍｌで１回洗浄した後、０．０５ｍｌの１重量％トリトンＸ−１００を含む５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）を加えて、細胞を溶解し、チロシナーゼ溶液とした。次に被験化合物をエタノールに溶解した溶液、基質である０．２質量％Ｌ−ドーパ溶液を添加し、３７℃で３時間インキュベートした。
【００２９】
３時間後、４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。チロシナーゼ阻害活性は、上記被験化合物の添加濃度が１２．５ｍＭ、２５ｍＭ、及び５０ｍＭとなる３種類のものを準備し、それぞれ３種類のものについて行った。チロシナーゼ阻害活性の算出は、被験化合物の溶液に代えて溶媒として用いたエタノールを添加したものをコントロールとして４０５ｎｍにおける吸光度を測定し、その吸光度に対する比率を求めることによって行った。すなわち、コントロールの吸光度を１００％として各被験化合物溶液のチロシナーゼ阻害率を算出した。その結果を表１に示す。
【００３０】
【表１】
2009234959.tif 000004
【００３１】
尚、表１においては、被験化合物の上記式（１）におけるＲがＨの場合はＲ＝Ｈ、ＲがＣＨ3の場合はＲ＝ＣＨ3等の表示を行っている。表１からも明らかなように、被験化合物溶液の阻害率は、いずれも５０％以上であった。特に、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−メチルフェニル−４−ピリジノン、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−エチルフェニル−４−ピリジノンの阻害率は７８％以上と高く、また濃度が高いほど、阻害率も高くなることがわかった。このことから、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンおよびその誘導体は、マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞のチロシナーゼ活性を阻害することがわかった。
【００３２】
（実施例４）
本実施例では、マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞を用いたメラニン生成抑制試験を行った。
【００３３】
被験化合物としては、式（１）におけるＲがＨの場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンの他、ＲがＣＨ3の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−メチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ2Ｈ5の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−エチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ4Ｈ9の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ8Ｈ17の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ12Ｈ25の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ドデシルフェニル−４−ピリジノンを用いた。
【００３４】
その試験方法について説明すると、先ず１０重量％ウシ胎児血清（ＩＣＮ社製）を含むダルベッコ改変イーグル培地（シグマ社製）にＢ１６メラノーマ細胞を懸濁し、６ウェルマイクロプレート（ＩＷＡＫＩ社製）に播種し、ＣＯ2インキュベーター（９５容量％空気、５容量％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で２４時間培養した。
【００３５】
２４時間後、マイクロプレート中の培地を除去し、あらかじめ被験化合物が、それぞれ最終濃度５mＭ、５０mＭ、及び５００mＭとなるように添加された１０重量％ウシ胎児血清（ＩＣＮ社製）を含むダルベッコ改変イーグル培地（シグマ社製）を加えて、ＣＯ2インキュベーター（９５容量％空気、５容量％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で６日間培養した。培地を除去し、ＰＢＳ１ｍｌで１回洗浄したのち、０．２ｍｌの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液を加えて、細胞を完全に溶解した。
【００３６】
この細胞溶解液の４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。細胞溶解液中のメラニン量は、合成メラニン（シグマ社製）を標準メラニンとして作成した検量線から求めた。また、細胞溶解液中のタンパク質量はＤＣプロテインアッセイ（バイオラッド社製）を用いて求めた。メラニン生成量は、タンパク質量中のメラニン量で比較した。被験化合物のメラニン生成抑制効果は、被験化合物の溶液に代えて溶媒として用いたエタノールを添加した１０重量％ウシ胎児血清（ＩＣＮ社製）を含むダルベッコ改変イーグル培地で培養した時のメラニン産生量を１００とした場合の値（比率）で示した。その結果を表２に示す。表２においても、被験化合物の上記式（１）におけるＲがＨの場合はＲ＝Ｈ、ＲがＣＨ3の場合はＲ＝ＣＨ3等の表示を行っている。
【００３７】
表２からも明らかなように、３種類の濃度の３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン溶液のメラニン産生量は、それぞれ９９％、７８％、５２％であり、
この他、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−メチルフェニル−４−ピリジノンについては、それぞれ９６％、６６％、４８％、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−エチルフェニル−４−ピリジノンについては、それぞれ９８％、５６％、５８％、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノンについては、それぞれ８８％、６２％、４８％、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノンについては、それぞれ１０１％、７４％、５５％、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ドデシルフェニル−４−ピリジノンについては、それぞれ１０３％、９０％、６３％となった。
【００３８】
いずれの被験化合物においても、濃度が５mＭの場合はさほどメラニン産生量を抑制させることができなかったが、被験化合物の濃度が５０mＭ及び５００mＭの場合は、優れたメラニン産生量を抑制効果が認められた。特に被験化合物の添加濃度が高いほど、メラニン産生量を抑制効果が向上した。このことから、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン及びその誘導体は、マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞のメラニン産生量を抑制させることがわかった。
【００３９】
【表２】
2009234959.tif 000005
【００４０】
（実施例５）
本実施例では、ヒト皮膚モデルを用いて色素沈着抑制試験を行った。その試験方法について説明すると、先ずヒト皮膚モデルＭＥＬ−３００Ａ（クラボウ）の上部に被験化合物を含む乳液製剤を５０ml添加し、８日間培養した。培地はメラニン合成促進因子を含むＬＬＭＭ培地を用い、２日毎に交換した。
【００４１】
被験化合物としては、式（１）におけるＲがＨの場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンの他、ＲがＣＨ3の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−メチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ2Ｈ5の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−エチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ4Ｈ9の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−ブチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ8Ｈ17の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノン、ＲがＣ12Ｈ25の場合の３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ドデシルフェニル−４−ピリジノンを用いた。
【００４２】
各被験化合物および陽性対照としてのアルブチンを含む乳液製剤の調製は、次のように行った。処方例１に示す乳液を調製し、あらかじめ溶解した被験化合物のうち３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノンについては濃度が０．０５重量％、それ以外の被験化合物については濃度が０．１重量％、アルブチンの濃度が２重量％となるように添加し、ボルテックスミキサーで撹拌した。このように調製した被験化合物を含む乳液製剤についてL*値を測定することによる色素沈着抑制試験を行った。
【００４３】
（処方例１）
組成                                              配合量（重量％）
（１）流動パラフィン                                      ４．０％
（２）ワセリン                                            ３．０％
（３）グリセリン                                          ５．０％
（４）１，３−ブチレングリコール                          ５．０％
（５）ＰＯＥグリセロールトリイソステアリン酸エステル     １．８％
（６）メチルセルロース                                    ０．３％
（７）水                                                  残量
【００４４】
L*値の測定は次のように行った。すなわち、培養終了後のヒト皮膚モデルをＰＢＳにより洗浄し、１０％ホルマリンを含む中性緩衝液で固定した。培養カップから皮膚組織を剥がしとり、水分を軽く拭った後、組織の反射光を分光光度計により求めた。分光光度計としては、「分光光度計ＵＶ−２４５０（株式会社島津製作所製）」を用いた。得られた反射光のスペクトルからL*a*b*表色系へ変換し、L*値を求めた。L*値の測定による色素沈着抑制試験の結果を表３に示す。
【００４５】
【表３】
2009234959.tif 000006
【００４６】
表３からも明らかなように、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−n−ブチルフェニル−４−ピリジノン、３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノン及び３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ドデシルフェニル−４−ピリジノンのL*値はアルブチンに比較して著しく高く、色素沈着抑制効果が優れていることがわかった。
【００４７】
（実施例６）
本実施例では、美白効果の試験を行った。上記のとおり、優れた美白剤である３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンを配合した化粧水を調製し、その美白効果、すなわち色素沈着症状の改善効果について調べた。
【００４８】
その試験方法について説明すると、先ず女性パネル（２６〜５２歳）２０名をランダムに２グループに分け、一方のグループには処方例２を、もう一方のグループには比較例１を、毎日朝と夜の２回、３ケ月間にわたって洗顔後に顔面に塗布した。試験開始前および終了後の色素沈着の状態を比較して評価した。色素沈着の改善状態は、表４に示す判定基準に従って評価し、各グループ１０名の平均スコアを算出した。結果は表５に示した。
【００４９】
（処方例２）
組成                                                        配合量（重量％）
（１）ＰＯＥ（２０）オレイルアルコールエーテル                     ０．５％
（２）メチルセルロース                                             ０．２％
（３）クインスシード                                          ０．１％
（４）エタノール                                                 １０．０％
（５）３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン      ０．２％
（６）水                                                            残量
【００５０】
（比較例１）
組成                                                        配合量（重量％）
（１）ＰＯＥ（２０）オレイルアルコールエーテル                     ０．５％
（２）メチルセルロース                                             ０．２％
（３）クインスシード                                          ０．１％
（４）エタノール                                                 １０．０％
（５）水                                                            残量
【００５１】
【表４】
2009234959.tif 000007
【００５２】
表５に美白効果試験の結果を示す。
【００５３】
【表５】
2009234959.tif 000008
【００５４】
表５からも明らかなように処方例２を用いたパネルに色素沈着症状に対する改善効果が認められ、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンを含有する化粧水が、日焼け後の色素沈着、しみ・そばかす、あるいは肝斑などを予防および改善し、美しい肌とすることが明らかとなった。
【００５５】
尚、処方例２については、上記試験期間中に含有成分の析出、分離、凝集、変臭、変色といった製剤の状態変化は全く見られなかった。また、処方例２を使用したグループにおいて、皮膚の刺激反応や皮膚感作性反応を示したパネルは存在しなかった。
【００５６】
（その他の実施例）
尚、上記実施例１及び実施例２では、マルトールとアニリン及びマルトールとオクチルアニリンとを用い、濃硫酸と水の混合溶媒中に懸濁させて撹拌し、２０℃まで冷却した後、析出した結晶を濾取し、水での洗浄、減圧乾燥して得られた粗結晶を熱メタノールに溶解し、活性炭を加えて撹拌し、熱時ろ過し、濾液を２０℃まで冷却、氷冷し、析出した結晶を濾取し、濾取した結晶を冷メタノールで洗浄、減圧乾燥することによって３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノン及び３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノンを調製したが、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル−４−ピリジノンの調製法は上記実施例１に限定されるものではない。また３−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−ｎ−オクチルフェニル−４−ピリジノンの調製法は実施例２に限定されるものではなく、他の調製法によって調製してもよい。