(57)【要約】      （修正有）【課題】侵襲性脈管再生手順の後の再狭窄を減少または予防するために用いられ得る方法および組成物を提供する。【解決手段】処置を必要としている哺乳動物に、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する脈管再生手順の後に生じる再狭窄を減少または予防する方法。(a)選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかと組み合わせた選択的アデノシンA1アンタゴニスト、または(c)内在的に放出されるアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化を妨害するための選択的アデノシンA1アンタゴニスト。該方法によるアデノシンA2Aレセプターの選択的刺激に依存して、外科的手順も改善される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
本発明は、アデノシン薬理学および改善された外科手術手順に関する。より詳細には、本発明は、アデノシンA2Aレセプターの選択的活性化による、脈管生成手順の後の再狭窄を減少または予防する工程に関する。
【背景技術】
【０００２】
関連分野
血管の閉塞は、閉塞を除去するか、あるいはバイパスグラフトを通して血流を別ルートで送るかのいずれかを試みる脈管再生手順で処置され得る。種々の外科的アプローチが使用されてきており、経皮的経管的冠動脈形成術(PTCA)、方向性冠動脈粥種切除術(directional  coronary  atherectomy)(DCA)、およびエキシマレーザー血管形成術が挙げられる。心臓に改善された血流を提供するために、例えば、冠状動脈バイパスグラフトの挿入が一般的なプラクティスとなってきた。PTCAは代替的な手順であり、これもまた、冠血管内の粥状動脈硬化プラークの存在により冠血流が重篤に損なわれている患者において行われる。この手順において、バルーンカテーテルが冠血管中に挿入され、そして粥状動脈硬化プラークを粉砕する、および／または血管の疾患に冒されていない領域を膨張させて冠血流を回復させる目的で、狭窄部位で膨らませられる。この手順は、米国において１年でほぼ300,000人の患者に行われる。この手順は、狭窄を軽減し、そして冠血流を回復させる上で、非常に成功率が高いが、この手順の有用性は、患者の約５％における血管の突然の閉鎖(再流動(re-flow)現象無し)により、およびこの手順の３〜６ヶ月内で患者の30％〜40％における再狭窄により阻害されている(Barry,  W.  L.およびSarembock,  I.  J.、Anticoag.  Antiplatelet  Ther.  12：517〜535(1994))。再狭窄は、動脈損傷の後の管修復の悪化した形態として記載され得る。新規デバイスおよび種々の薬理学的ストラテジーが、この問題を消去しようとして成功しなかった。
【０００３】
非常に多くの研究が、血管形成の後の再狭窄の機構を解明する目的で行われてきた。好中球／血小板相互作用が関与することを示唆する大多数の証拠が入手可能である。血管形成手順は、短期間の心筋虚血を引き起こす。現在の証拠は、虚血の間の好中球の活性化が以下により損傷をもたらすことを示唆している：(a)  酸素フリーラジカル、タンパク質分解酵素、およびロイコトキシンの放出、(b)  好中球の内皮細胞への凝集および付着、ならびに引き続いて起こる毛細管閉塞化および冠状動脈血流の障害、ならびに(c)  活性化好中球によるロイコトリエンB4の放出から生じ得る血管収縮。血小板は、活性化好中球からの酸素フリーラジカル、ロイコトリエン、および血小板活性化因子の放出により活性化される。血小板の沈着および血栓形成は、血管形成の後の再狭窄に寄与することが示されてきた。活性化血小板は、トロンボキサン、セロトニン、およびアデニンヌクレオチドを含む血管収縮物質を放出する。さらに、血小板は、血管平滑筋細胞の増殖を引き起こす血小板由来の成長因子を放出する。
【０００４】
再狭窄のための第一の刺激は、血管形成手順の間の虚血に対する応答における好中球の活性化であるようである。非常に多くの臨床的研究が、血管形成に続いて冠状静脈洞から採られた血液中に好中球上の表面付着分子の発現が増加していることを示した(Mickelson,  J.  K.ら、JACC  28：345〜353  (1996)；Ikeda、Hら、Am.  Heart  J.  128：1091〜1098  (1994)；Neumannら、Circulation  92：748〜755  (1995)；Neumannら、J.  Am.  Coll.  Cardiol.  27：819〜824  (1996)；Siminiak,  T.ら、Br.  Heart  J.  74：625〜630  (1995)；およびBaj.  Z.ら、Atherosclerosis  106：159〜168  (1994))。さらに、血管形成に続いて冠状静脈洞から採られた好中球は、エキソビボで試験された場合、毒性酸素生成物およびエラスターゼの放出を増加することを示し(Ikeda、Hら、Am.  Heart  J.  128：1091〜1098  (1994))、そして冠状静脈洞から採られた血漿はエキソビボで通常の好中球の活性化を引き起こす(Neumann,  F.-J.ら、Br.  Heart.  J.  70：27〜34  (1993))。
【０００５】
アデノシンは、虚血の期間中、循環系中へ放出される内因性のシグナル分子である。アデノシンは、A1、A2A、A2B、およびA3と命名されるアデノシンレセプターの４個のサブタイプの活性化によりその生理学的作用を表す。アデノシンA2Aレセプターは、それらが血管拡張を媒介する血管上に位置する(Ueeda,  M.ら、J.  Med.  Chem.  34：1334〜1339  (1991)；Ueeda,  Mら、J.  Med.  Chem.  34：1340〜1344  (1991)；Niiya,  K.ら、J.  Med.  Chem.  35：4557〜4561  (1992)、Niiya,  K.  ら、J.  Med.  Chem.  35：4562〜4566  (1992)；およびGlover,  D.  K.  ら、Circulation  94：1726〜1732  (1996))か、またはそれらが凝集の阻害を媒介する血小板上  (Cristalli,  G.  ら、Arch.  Pharmacol.  349：644〜650  (1994)；およびVarani,  K.  ら、Biochem.  Pharmacol.  48：1658〜1661  (1994))およびそれらが内皮細胞への付着の阻害および毒性酸素生成物の放出を媒介する好中球上(Cronstein,  B.  N.ら、J.  Clin.  Invest.  85：1150〜1157  (1990)；Cronstein,  B.  N.ら、J.  Immunol.  148：2201〜2206  (1992)；および  Sullivan,  G.  W.  ら、Int.  J.  Immunopharmac.  17：793〜803  (1995))に位置する。A2Aアデノシンレセプターのみを選択的に活性化する化合物は、これらの３つの性質によって虚血組織における抗炎症作用を有することが期待される。好中球上のA1レセプターの活性化は走化性を促進し、それにより好中球の損傷部位への移動を増加させる。さらに、A1レセプターの活性化は好中球の内皮への付着を増加させる。それ故にA1レセプターでのアデノシンの作用は炎症前(pro-inflammatory)である(Cronstein,  B.  N.ら、J.  Clin.  Invest.  85：1150〜1157  (1990)、およびCronstein,  B.  N.ら、J.  Immunol.  148：2201〜2206  (1992))。A2A-レセプターの刺激およびA1-レセプター活性化の回避が、本発明の基本である。
【０００６】
ヒト好中球を使用するインビトロ研究は、A2A選択的アゴニストが、活性化好中球からの酸素フリーラジカルおよびタンパク質分解酵素の放出を阻害すること、および活性化好中球の内皮への付着を阻害することを示した(Cronstein,  B.  N.ら、J.  Immunol.  148：2201〜2206  (1992)、Cronstein,  B.  N.ら、J.  Clin.  Invest.  85：1150〜1157  (1990)；およびSullivan,  G.  W.  ら、Int.  J.  Immunopharmac.  17：793〜803  (1995))。A2A選択的アゴニストはまた、活性化イヌ好中球のイヌ心筋細胞への付着および酸化的損傷の減少の両方を阻害することが示されてきた(Bullough,  D.  A.ら、J.  Immunol.  155：2579〜2586  (1995))。ブタにおける研究は、血管形成の間、バルーン膨張により生じた動脈損傷部位で血小板沈着および好中球付着の増加があることを示した(Merhi,  Y.ら、Circulation  90：997〜1002  (1994)；およびProvost,  P.  およびMerhi,  Y.、J.  Pharmacol.  Exp.  Ther.  277：17〜21  (1996))。
【０００７】
Solleviは、米国特許第5,449,655号において、経皮的内径血管形成のための方法を開示しており、これは両立した、血管拡張の有益な性質を提供するためのアデノシンの連続投与、血小板凝集の阻害、およびカテコールアミンの放出を調節するシナプス前神経機構の阻害を含む。
【０００８】
Solleviは、米国特許第5,534,504号において、冠血栓のための方法を開示しており、これは、上述の性質を提供するための血栓溶解性薬剤と両立したアデノシンの投与を含む。
【０００９】
Bru-Magniezらは、米国特許第5,459,132号において、特定のN6-置換アデノシン誘導体を開示しており、これは、ガン、乾癬、粥状動脈硬化、および再狭窄現象を処置するために使用される、鎮痛薬、抗高血圧薬、および増殖抑制薬剤として請求されている。
【００１０】
哺乳動物の器官への減損した血流は、通常粥状動脈硬化の結果として血管の閉塞から生じる。不十分な血流は組織虚血を引き起こし、そして心筋梗塞、発作、または腎不全のような病的状態をもたらし得る。処置選択物は、血管形成、粥腫切除、または動脈内膜切除手順のような侵襲性外科手順、ならびに通常の血流を回復させるためのバイパスグラフトまたはステントの挿入を含む。これらの処置の有効性の主要な制限は、一掃された血管のような対象の大部分が数ヶ月内で再びふさがれた状態になり得ることである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、侵襲性脈管再生手順の後の再狭窄を減少または予防するために用いられ得る方法および組成物に対する必要が存在し続ける。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上記課題を解決するために、本発明は、例えば以下の項目を提供する。
１．脈管再生手順の後に生じる再狭窄を減少または予防する方法であって、その方法は、以下の工程を包含し：
このような処置を必要としている哺乳動物に、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程：
(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、
(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、ならびに
(c)  内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするための選択的アデノシンA1アンタゴニスト；
ここで、その活性薬剤は脈管再生手順の前の選択された時間で投与が開始され、そして再狭窄が減少または予防されるような有効量で投与される、方法。
２．上記薬学的組成物が、上記脈管再生手順の30分前に投与が開始される、項目１に記載の方法。
３．上記薬学的組成物が、上記脈管再生手順後２日間まで連続して投与される、項目２に記載の方法。
４．上記薬学的組成物が、静脈内ボーラス注射により、または点滴により、上記脈管再生手順により処置された脈管構造へ直接投与される、項目１に記載の方法。
５．上記脈管再生手順が、冠動脈、頸動脈、腎動脈、または脚動脈の１つ以上で行われる、項目１に記載の方法。
６．上記脈管再生手順が、バルーン血管形成術、バイパスグラフトの挿入、ステントの挿入、経皮的経管的冠動脈形成術、または方向性冠動脈粥種切除術のうちの１つである、項目１に記載の方法。
７．上記脈管再生手順がエキシマレーザー血管形成術を含む、項目１に記載の方法。
８．上記哺乳動物がヒトである、項目１に記載の方法。
９．上記薬剤が選択的A2Aレセプターアゴニストである、項目１に記載の方法。
１０．上記選択的A2Aレセプターアゴニストが以下からなる群より選択される、項目９に記載の方法：
2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン、
2-(3-シクロヘキセニル)メチレンヒドラジノアデノシン、
2-イソプロピルメチレンヒドラジノアデノシン、N-エチル-1’-デオキシ-1’-(6-アミノ-2-((2-チアゾリル)エチニル)-9H-プリン-9-イル)-β-D-リボフランウロンアミド、
N-エチル-1’-デオキシ-1’-(6-アミノ-2-(へキシニル)-9H-プリン-9-イル)-β-D-リボフランウロンアミド、
2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン-5’-N-メチルウロンアミド、
5’-クロロ-5’-デオキシ-2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン、
N6-(2-(3,5-ジメトキシフェニル)-2-(2-メチルフェニル)アデノシン、
2-(2-フェニル)エトキシアデノシン、
2-(2-(4-メチルフェニル)-エトキシ)アデノシン、
2-(2-(4-フルオロフェニル)エトキシ)アデノシン、
2-(2-(2-ナフチル)エトキシ)アデノシン、
2-(p-(2-カルボキシエチル)フェニル)エチルアミノ-5’-N-エチル-カルボキサミドアデノシン、
2-(2-シクロヘキシル)エトキシアデノシン、
2-オクチニルアデノシン、
2-チアゾリルエチニルアデノシン、および
2-フェネチルアミノ-5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン。
１１．上記選択的A2Aアゴニストが、2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン、2-(3-シクロヘキセニル)メチレンヒドラジノアデノシン、2-イソプロピルメチレンヒドラジノアデノシン、2-(2-フェニル)エトキシアデノシン、2-(2-(4-メチルフェニル)エトキシアデノシン、2-(2-シクロヘキシル)エトキシアデノシン、または2-(2-(p-カルボキシエチル)フェニル)エチルアミノ-5’-N-エチル-カルボキシアミドアデノシンである、項目１０に記載の方法。
１２．上記薬剤が選択的A1レセプターアンタゴニストである、項目１に記載の方法。
１３．上記薬剤が以下からなる群より選択される選択的A1レセプターアンタゴニストである、項目１２に記載の方法：
(±)-  N6-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン、
(±)-  N6-[エンド-2’-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、
(±)-  N6-[エンド-2’-(エンド-5’-ヒドロキシ)-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、
8-シクロペンチル-1,3-ジプロピルキサンチン、
キサンチンアミン同種物（congener）、
8-(ノルアダマンタン-3-イル)-1,3-ジプロピルキサンチン、
8-(シクロペンタン-3-オン)-1,3-ジプロピルキサンチン,
8-(ジシクロプロピルメチル)-1,3,ジプロピルキサンチン、
(R)-7,8-ジメチル-2-フェニル-9-(1-フェニルエチル)-7-デアザアデニン、
1-プロピル-3-(4-アミノ-3-ヨードフェニルエチル)-8-シクロペンチルキサンチン、
(+)-(R)-[(E)-3-(2-フェニルピラゾロ[1,5-a]ピリジン-3-イル)アクリロイル]-2-ピペリジンエタノール、
7-[2-[エチル(2-ヒドロキシエチル)アミノ]エチル]-3,7-ジヒドロ-1,3-ジメチル-8-(フェニルメチル)-1H-プリン2,6-ジオン、
1,3-ジプロピル-8-スルホフェニルキサンチン、
1,3-ジプロピル-8-[2-(5,6-エキソ-エポキシ)-(1S,2S)-ノルボルン-2-イル]キサンチン、および
7,8-ジヒドロ-8-エチル-2-(3-ノルアダマンチル)-4-プロピル-1H-イミダゾ[2,1-i]プリン-5(4H)-オン。
１４．上記薬剤がさらに、アデノシン、5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン、および2-クロロアデノシンからなる群より選択される非選択的アデノシンアゴニストを含む、項目１２に記載の方法。
１５．被検体における脈管再生を提供する方法であって：
(i)  被検体に、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程：
(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、
(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、および
(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト(内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA2Aレセプターの活性化を許容しながら、内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするため)；および
(ii)  その被検体に脈管再生手順を実行して閉塞を除去するか、またはバイパスグラフトを通して血流を別ルートで送る工程、
を包含する、方法。
１６．上記薬学的組成物が、上記脈管再生手順の30分前に投与開始される、項目１５に記載の方法。
１７．上記薬学的組成物が、上記脈管再生手順後２日間まで連続して投与される、項目１６に記載の方法。
１８．上記薬学的組成物が、静脈内ボーラス注射により、または点滴により、上記脈管再生手順により処置された脈管構造へ直接投与される、項目１５に記載の方法。
１９．上記脈管再生手順が、冠動脈、頸動脈、腎動脈、または脚動脈の１つ以上で行われる、項目１５に記載の方法。
２０．上記脈管再生手順が、バルーン血管形成術、バイパスグラフトの挿入、ステントの挿入、経皮的経管的冠動脈形成術、または方向性冠動脈粥種切除術のうちの１つである、項目１５に記載の方法。
２１．上記脈管再生手順がエキシマレーザー血管形成術を含む、項目１５に記載の方法。
２２．上記薬剤が選択的A2Aレセプターアゴニストである、項目１５に記載の方法。
２３．上記選択的A2Aレセプターアゴニストが以下からなる群より選択される、項目２２に記載の方法：
2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン、
2-(3-シクロヘキセニル)メチレンヒドラジノアデノシン、
2-イソプロピルメチレンヒドラジノアデノシン、N-エチル-1’-デオキシ-1’-(6-アミノ-2-((2-チアゾリル)エチニル)-9H-プリン-9-イル)-β-D-リボフランウロンアミド、
N-エチル-1’-デオキシ-1’-(6-アミノ-2-(へキシニル)-9H-プリン-9-イル)-β-D-リボフランウロンアミド、
2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン-5’-N-メチルウロンアミド、
5’-クロロ-5’-デオキシ-2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン、
N6-(2-(3,5-ジメトキシフェニル)-2-(2-メチルフェニル)アデノシン、
2-(2-フェニル)エトキシアデノシン、
2-(2-(4-メチルフェニル)-エトキシ)アデノシン、
2-(2-(4-フルオロフェニル)エトキシ)アデノシン、
2-(2-(2-ナフチル)エトキシ)アデノシン、
2-(p-(2-カルボキシエチル)フェニル)エチルアミノ-5’-N-エチル-カルボキサミドアデノシン、
2-(2-シクロヘキシル)エトキシアデノシン、
2-オクチニルアデノシン、
2-チアゾリルエチニルアデノシン、および
2-フェネチルアミノ-5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン。
２４．上記薬剤が選択的A1レセプターアンタゴニストである、項目１５に記載の方法。
２５．上記薬剤が以下からなる群より選択される選択的A1レセプターアンタゴニストである、項目２４に記載の方法：
(±)-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン、
(±)-  N6-[エンド-2’-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、
(±)-  N6-[エンド-2’-(エンド-5’-ヒドロキシ)-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、
8-シクロペンチル-1,3-ジプロピルキサンチン、
キサンチンアミン同種物、
8-(ノルアダマンタン-3-イル)-1,3-ジプロピルキサンチン、
8-(シクロペンタン-3-オン)-1,3-ジプロピルキサンチン,
8-(ジシクロプロピルメチル)-1,3,ジプロピルキサンチン、
(R)-7,8-ジメチル-2-フェニル-9-(1-フェニルエチル)-7-デアザアデニン、
1-プロピル-3-(4-アミノ-3-ヨードフェニルエチル)-8-シクロペンチルキサンチン、
(+)-(R)-[(E)-3-(2-フェニルピラゾロ[1,5-a]ピリジン-3-イル)アクリロイル]-2-ピペリジンエタノール、
7-[2-[エチル(2-ヒドロキシエチル)アミノ]エチル]-3,7-ジヒドロ-1,3-ジメチル-8-(フェニルメチル)-1H-プリン-2,6-ジオン、
1,3-ジプロピル-8-スルホフェニルキサンチン、
1,3-ジプロピル-8-[2-(5,6-エキソ-エポキシ)-(1S,2S)-ノルボルン-2-イル]キサンチン、および
7,8-ジヒドロ-8-エチル-2-(3-ノルアダマンチル)-4-プロピル-1H-イミダゾ[2,1-i]プリン-5(4H)-オン。
２６．上記薬剤がさらに、アデノシン、5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン、および2-クロロアデノシンからなる群より選択される非選択的アデノシンアゴニストを含む、項目２５に記載の方法。
【００１３】
発明の要旨
本発明の第一の局面は、哺乳動物における脈管再生手順の後の再狭窄を減少または予防する方法に関し、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程を含む：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、および(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト(内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA2Aレセプターの活性化を許容しながら、内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするため)。
【００１４】
本発明の第二の局面は、脈管再生の後の再狭窄の減少および防止において有用である組成物に関する。これらの組成物は、以下のいずれかを含み得る：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、または(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト(内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA2Aレセプターの活性化を許容しながら、内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするため)。
【００１５】
本発明の第三の局面は、哺乳動物における脈管再生の後の再狭窄を減少または予防するための薬物の製造のための、以下のうちの１つの使用を規定する：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、または(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト。
【００１６】
本発明の第四の局面は、外科的プロセスを規定し、以下を含む：
(i)  被検体に、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、および(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト(内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA2Aレセプターの活性化を許容しながら、内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするため)；および
(ii)  上述の被検体に脈管再生手順を実行して閉塞を除去するか、またはバイパスグラフトを通して血流のルートを変更する（reroute）工程。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
好適な実施態様の詳細な説明
ここで、アデノシンA2Aレセプターの選択的刺激が、脈管再生に続く再狭窄を減少または予防し得ることが見いだされた。アデノシンA2Aレセプターは、以下のいずれかを含む組成物により選択的に刺激され得：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、あるいは(c)  内在的に放出されるアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするための選択的アデノシンA1アンタゴニストは、脈管再生に続く再狭窄の予防および処置において有用である。
【００１８】
外科的手順が提供され、以下を含む：
(i)  被検体に、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤、および以下からなる群より選択される活性薬剤を含む薬学的組成物を投与する工程：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、および(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニスト(内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA2Aレセプターの活性化を許容すると同時に内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするため)；ならびに
(ii)  上述の被検体に脈管再生手順を実行して閉塞を除去するか、またはバイパスグラフトを通して血流を別ルートで送る工程。
【００１９】
本発明の手順は、再狭窄が減少する程度において、先行技術を越える改善を示す。
【００２０】
種々の脈管再生手順が使用され得、これには経皮的経管的冠動脈形成術(PTCA)、方向性冠動脈粥腫切除術(DCA)、およびエキシマレーザー血管形成術を含む。心臓に改善された血流を提供するために、冠状動脈バイパスグラフトの挿入が用いられ得る。PTCAは代替的な手順であり、これもまた、冠血管内の粥状硬化プラークの存在により冠血流が重篤に損なわれている患者において行われる。この手順において、バルーンカテーテルが冠血管中に挿入され、そして粥状硬化プラークを粉砕する、および／または血管の疾患を有さない領域を広げて冠血流を回復する目的で、狭窄部位で膨らませられる。
【００２１】
本発明において、脈管再生手順に続く再狭窄を減少または予防する方法が提供され、ここで哺乳動物、好ましくはヒトは、有効量の以下のいずれかを投与される：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかとの組合せ、あるいは(c)  内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするための選択的アデノシンA1アンタゴニスト。(a)、(b)、または(c)の１つを含む組成物は、脈管再生手順の前の選択された時間で投与が開始され、そして再狭窄が減少または予防されるような有効量で投与される。好ましくは、投与は手順に続いて２日間までの期間、続けられる。
【００２２】
好ましくは、本発明の組成物および方法は、選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストを用いる。
【００２３】
用語「アデノシンA2Aレセプターの選択的刺激」は、アデノシンA1レセプターと比較して実質的により大きなアデノシンA2Aレセプターの刺激を示す。選択的刺激は、薬剤としてアデノシン単独が用いられる場合に得られるA2A：A1刺激の比よりも、特定の薬剤または薬剤の組合せについてのA2A：A1刺激の比が大きい場合に生じる。
【００２４】
用語「有効量」は、脈管再生手順から誘導された虚血に対する応答において内在的に放出されるアデノシンによる選択的アデノシンA2Aレセプター活性化を可能にするのに十分である、以下のいずれかの濃度：(a)  アデノシンA2Aレセプターアゴニストの濃度、(b)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストまたは非選択的アデノシンアゴニストのいずれかの濃度と合わせたアデノシンA1レセプターアンタゴニストの濃度、または(c)  選択的アデノシンA1アンタゴニストの濃度、を示す（これは内在的に放出されるアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をうち消す)。
【００２５】
用語「選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト」は、アデノシンA2Aレセプターを優先的に刺激し、そしてアデノシンA1レセプターを実質的に刺激しないアゴニストを示す。化合物は、Niiya,  K.ら、J.  Med.  Chem.  35：4557〜4561  (1992)において記載されるように心血管活性について試験し、そして約100よりも大きいと本明細書中で定義されるA1/A2選択性比を実証することにより選択的A2Aアゴニストとして選択され得る。当業者により正しく理解されるように、他のアッセイがアデノシンA2Aレセプターアゴニスト作用(agonism)をスクリーニングするために用いられ得る。
【００２６】
選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニストの例は以下を含む：2-(置換アミノ)アデノシン5’-カルボキサミド、米国特許第4,968,697号に記載；2-(置換アミノ)アデノシン、米国特許第5,034,381号に記載；イミダゾ-  [4,5-b]-ピリジン誘導体、米国特許第4,977,144号に記載；および2-(置換アルキニル)アデノシン、米国特許第5,189,027号に記載。選択的A2Aレセプターアゴニストのさらなる例は、2-ヒドラゾアデノシン(米国特許第5,278,150号に記載)ならびに2-アラルコキシおよび2-アルコキシアデノシン(米国特許第5,140,015号に記載)を含む。
【００２７】
アデノシンA2Aレセプターに対して選択的なアゴニストの例は、以下を含むがこれらに限定されない：2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン、2-(3-シクロヘキセニル)メチレンヒドラジノアデノシン、2-イソプロピルメチレンヒドラジノアデノシン、N-エチル-1’-デオキシ-1’-[6-アミノ-2-[(2-チアゾリル)エチニル]-9H-プリン-9-イル]-β-D-リボフランウロンアミド(ribofuranuronamide)、N-エチル-1’-デオキシ-1’-[6-アミノ-2-[へキシニル]-9H-プリン-9-イル]-β-D-リボフランウロンアミド、2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン-5’-N-メチルウロンアミド(methyluronamide)、5’-クロロ-5’-デオキシ-2-(1-ヘキシン-1-イル)アデノシン、N6-[2-(3,5-ジメトキシフェニル)-2-(2-メチルフェニル)アデノシン、2-(2-フェニル)エトキシアデノシン、2-[2-(4-メチルフェニル)-エトキシ]アデノシン、2-[2-(4-フルオロフェニル)エトキシ]アデノシン、2-(2-(2-ナフチル)エトキシ)アデノシン、2-[p-(2-カルボキシエチル)フェネチルアミノ-5’-N-エチル-カルボキサミドアデノシン(CGS-21680)、2-(2-シクロヘキシル)エトキシアデノシン、2-オクチニルアデノシン(YT-146)、2-チアゾリルエチニルアデノシン、および2-フェネチルアミノ-5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン(CGS-21577)。
【００２８】
好適な選択的A2Aアゴニストは以下を含む：2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン、2-(3-シクロヘキセニル)メチレンヒドラジノアデノシン、2-イソプロピルメチレンヒドラジノアデノシン、2-(2-フェニル)エトキシアデノシン、2-(2-(4-メチルフェニル)エトキシアデノシン、2-(2-シクロヘキシル)エトキシアデノシン、および2-(2-(p-カルボキシエチル)フェニル)エチルアミノ-5’-N-エチル-カルボキシアミドアデノシン。
【００２９】
用語「選択的アデノシンA1レセプターアンタゴニスト」は、アデノシンA1レセプターと優先的に結合し、そしてアデノシンA2AまたはA2Bレセプターと実質的に結合しないアンタゴニストを示す。化合物は、Belardinelliら、J.  Pharm.  Exp.  Ther.  275：1167〜1176  (1995)において記載されるように心血管活性についてスクリーニングされ、そしてその化合物が、冠コンダクタンスにおけるA2レセプター媒介性増加の遮断と比較して、S-H間隔におけるA1レセプター媒介性増加の、統計的に有意に(対コントロール)より強い遮断を生成することを実証する事により、選択的A1アンタゴニストとして選択され得る。当業者により理解されるように、異なるアッセイが使用されてアデノシンA1選択的拮抗作用をスクリーニングし得る。
【００３０】
選択的アデノシンA1レセプターアンタゴニストの例は以下を含む：[[2,3,7,6,9-テトラヒドロ-1,3-ジアルキル-2,6-ジオキソ-1H-プリン-8-イル]アルキル]フェニルヘテロアルカン酸およびそのエステル、米国特許第5,208,240号に記載；1,3-ジアルキル-8-(置換フェニル)キサンチン、米国特許第4,783,530号に記載；1,3-ジアルキルキサンチンおよびアデノシンのエポキシド、米国特許第5,446,046号に記載；8-トリシクロアルキル置換1,3-ジアルキルキサンチン、米国特許第5,395,836号に記載；および1,3-ジ脂環式アルキル-8-置換キサンチン。選択的A1レセプターアンタゴニストとして作用する化合物のさらなる例は、  米国特許第5,066,655号、国際出願公開第WO  96/06845号、および米国出願第08,299,992号に記載されるような、N6-置換9-メチルアデニンを含む。
【００３１】
アデノシンA1レセプターに対して選択的なアンタゴニストの例は、以下を含むがこれらに限定されない：(±)-  N6-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン(N-0861)、(±)-  N6-[エンド-2’-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、(±)-  N6-[エンド-2’-(エンド-5’-ヒドロキシ)-ノルボルニル]-8-(イソプロピルメチルアミノ)-9-メチルアデニン、8-シクロペンチル-1,3-ジプロピルキサンチン(DPCPX)、キサンチンアミン同種物（congener）(XAC)、8-(ノルアダマンタン-3-イル)-1,3-ジプロピルキサンチン(NAX)、8-(シクロペンタン-3-オン)-1,3-ジプロピルキサンチン(KFM19),8-(ジシクロプロピルメチル)-1,3-ジプロピルキサンチン(KF-15372)、(R)-7,8-ジメチル-2-フェニル-9-(1-フェニルエチル)-7-デアザアデニン、1-プロピル-3-(4-アミノ-3-ヨードフェニルエチル)-8-シクロペンチルキサンチン(BW-A844U)、(+)-(R)-[(E)-3-(2-フェニルピラゾロ[1,5-a]ピリジン-3-イル)アクリロイル]-2-ピペリジンエタノール(FK453)、7-[2-[エチル(2-ヒドロキシエチル)アミノ]エチル]-3,7-ジヒドロ-1,3-ジメチル-8-(フェニルメチル)-1H-プリン-2,6-ジオン(バミフィリン(bamiphylline))、1,3-ジプロピル-8-スルホフェニルキサンチン(DPSPX)、1,3-ジプロピル-8-[2-(5,6-エキソ-エポキシ)-(1S,2S)-ノルボルン(norborn)-2-イル]キサンチン(CVT-124)、および7,8-ジヒドロ-8-エチル-2-(3-ノルアダマンチル(noradamantyl))-4-プロピル-1H-イミダゾ[2,1-i]プリン-5(4H)-オン。
【００３２】
用語「非選択的アデノシンアゴニスト」は、アデノシンA1、A2A、およびA2Bレセプターに結合するアゴニストを示す。化合物は、Ueeda,  M.ら、J.  Med.  Chem.  34：1334〜1339  (1991)において記載されるように心血管活性について試験し、そして約５と約100との間として本明細書中で定義されるA1/A2選択性比を実証することにより、非選択的アゴニストとして選択され得る。非選択的アゴニストの例は、アデノシン、5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン(NECA)、および2-クロロアデノシンを含むが、これらに限定されない。
【００３３】
本発明は、脈管再生手順の間アデノシンA2Aレセプターを選択的に活性化することによる、好中球の活性化に続く再狭窄の減少または予防を提供する。本発明の方法は、付着および好中球からの毒性酸素生成物の放出に起因する虚血性損傷を強く減少または予防するだけではなく、続いての血小板の活性化（これは無再潅流現象および再狭窄を導く）をも阻害する。
【００３４】
PTCAを受けた患者の約５％に生じる無再潅流現象は、血管内の血流の妨害および血小板から放出される物質による血管狭窄を引き起こす、結晶板と好中球との凝集に起因すると思われる。PTCAに続く急性合併症の割合は、血小板凝集を阻害するアスピリンにより減少され得る。従って、アスピリンは血管形成手順の間、通常的に投与される。しかし、アスピリンは、再狭窄の遅延型合併症の割合にほとんど効果がないことが示されてきた。さらに、アスピリンは、血管拡張プロスタグランジンの産生を阻害し、それによりPTCAに続いて生じ得る血管攣縮を悪化させ得る。対称的に、本発明は、血管拡張を引き起こすさらなる利益を有すると同時に、血小板凝集の直接的な阻害をもたらすことにより、血管形成手順に続く急性血管閉鎖を減少する点でアスピリンより優れている(Cristalli,  G.ら、Arch.  Pharmacol.  349：644〜650  (1994)；およびVarani,  K.ら、Biochem.  Pharmacol.  48：1658〜1661  (1994))。
【００３５】
血小板の沈着および血栓形成が血管形成に続く再狭窄に寄与することが実証されてきた一方、抗血小板または抗血栓治療が一般にバルーン血管形成術後の再狭窄においてほとんど効果を有さないことが実証されてきた(Barry,  W.  L.およびSarembock,  I.  J.、Anticoag.  Antiplatelet  Ther.  12：517〜535  (1994))。このことは、ヒトにおいて現在まで試験された薬剤の全てが、相対的に弱いおよび非特異的な血小板機能のインヒビターであるという事実に部分的に起因し得る。また、再狭窄は多くの因子の結果であり、そして血小板単独の作用をブロックすることは、再狭窄を阻害するためには十分ではあり得ない。本発明は、好中球の活性化および血小板の活性化の両方の阻害の結果として、虚血性損傷および再狭窄を防止する方法を提供する。
【００３６】
本発明において、哺乳動物、特にヒトにおいて脈管再生手順に続く再狭窄の減少または予防に有用である組成物もまた、提供される。そのような組成物は、以下のいずれかを含む：(a)  選択的アデノシンA2Aレセプターアゴニスト、(b)  選択的アデノシンA1アンタゴニストと非選択的アデノシンアゴニストとの組合せ、または(c)  脈管再生手順で誘導された虚血に対する応答において内在的に放出されたアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするための選択的アデノシンA1アンタゴニスト。
【００３７】
薬理学的に活性な化合物に加えて、薬学的組成物は、活性化合物の薬学的に使用され得る調製物への加工を容易にする賦形剤および補助剤を含む、適切な薬学的に受容可能なキャリアを含み得る。薬学的に受容可能なキャリアは、以下を含むがこれらに限定されない：生理食塩水、水またはブドウ糖水溶液、MolecusolＴＭまたは類似の糖溶液、エタノールと当該分野で通常使用される水性緩衝液溶液(例えば、リン酸緩衝液)との組合せ、および希釈水酸化ナトリウム溶液(約0.2N)。適した親油性溶媒またはビヒクルは、合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチル、またはトリグリセリド、またはポリエチレングリコール400を含む。理解されるように、種々のキャリアおよび／または賦形剤が、用いられる特定の薬剤の溶解性に依存して要求され得る。
【００３８】
投与される選択的A2Aアゴニストの投薬量は、レシピエントの年齢、健康状態、および体重、同時に行われる治療の種類、もしあれば特定のアゴニストの効力に依存する。多くの公知のA2Aアゴニストについての投薬量は、先行技術で記載されている。最適な用量は、日常的な実験操作により当業者により決定され得る。
【００３９】
アデノシンA1アンタゴニストと、選択的アデノシンA2アゴニストまたは非選択的アゴニストのいずれかとの比は、個々の薬剤の効力に依存する。しかし、Niiya,  K.ら、J.  Med.  Chem.  35：4557〜4561  (1992)において規定されるように、そのA1/A2選択性比がほぼ100より大きいように、組合せは選択されるべきである。必要とされるA2Aレセプターの選択的刺激に達するための、各薬剤の相対的効力に基づくそれらの濃度調整は、日常的な実験操作を用いる当業者により達成され得る。
【００４０】
本発明の組成物が、脈管再生手順の前に、好ましくは脈管再生手順を行う30分前に投与され、次いで脈管再生手順後２日間まで、好ましくは１日の間、好ましくは連続注入により、連続的に投与される事が好ましい。しかし、反復ボーラス注射が使用され得る。
【００４１】
これらの組成物が、静脈内ボーラス注射または注入により直接これらの脈管再生手順に含まれる脈管構造へ投与される事が好ましい。
【００４２】
以下の実施例は、本発明の方法および組成物の例示であって、制限するものではない。通常遭遇し、そして当業者に明白である種々の条件およびパラメーターの、他の適切な改変および付加は、本発明の精神および範囲内にある。
【実施例】
【００４３】
実施例１
アデノシンA2A選択的アゴニストの投与による再狭窄の減少
空気乾燥(air  desiccation)内皮損傷により焦点性大腿部(focal  femoral)粥状硬化症をウサギにおいて誘導し、続いて１ヶ月間２％コレステロール、６％ピーナツ油の食餌を与える。動脈狭窄の程度を血管造影により評価する。この時点で、2.5mmのバルーンを使用してバルーン血管形成術を行う（バルーンを狭窄範囲中に挿入し、そして60秒、10気圧、60秒の間隔の膨張で３回膨らませる）。この手順は、冠血管を開かせるためにヒトにおいて使用される手順と同様である。ウサギに、2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン(0.6μg/Kg/分)またはビヒクルの静脈注入を与える（これは血管形成手順の10分前に開始し、そして血管形成術に続いて１日間継続する）。血管造影図を、血管形成術の前および後、ならびに血管形成の28日後に撮る。これらの血管造影図を、動脈狭窄の低下について定量的に分析する。ウサギを、血管形成の２８日後に屠殺し、そして動脈を組織病理学的および形態計測的に分析する。アデノシンA2A選択的アゴニストで処置されたウサギの群における動脈狭窄の程度は、ビヒクルで処置されたウサギの群における動脈狭窄よりも有意に低い。
【００４４】
実施例２
アデノシンA1アンタゴニストおよび非選択的アデノシンアゴニストの同時投与による再狭窄の減少
１つのウサギの群を、2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシンの代わりに、有効量の(±)-N6-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン(0.25mg/kg/分)および5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン(６μg/Kg/分)との組合せで処置することを除いて、実施例１に従う。選択的アデノシンA1アンタゴニスト((±)-N6-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン)および非選択的アデノシンアゴニスト(5’-N-エチルカルボキサミドアデノシン)の組合せで処置したウサギの群における動脈狭窄の程度は、ビヒクルで処置されたウサギの群における動脈狭窄よりも有意に低い。
【００４５】
実施例３
アデノシンA1アンタゴニストおよびアデノシンA2A選択的アゴニストの同時投与による再狭窄の減少
１つのウサギの群を、2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン単独の代わりに、有効量の、(±)-N6-エンドノルボルナン-2-イル-9-メチルアデニン(0.25mg/kg/分)と2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン(0.6μg/Kg/分)との組合せで処置することを除いて、実施例１に従う。この組合せで処置したウサギの群における動脈狭窄の程度は、ビヒクルで処置されたウサギの群における動脈狭窄よりも有意に低い。
【００４６】
実施例４
選択的アデノシンA1アンタゴニストの投与による再狭窄の減少
ビヒクルではないウサギの群を2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシンで処置するのではなく、脈管再生手順から誘導される虚血の応答において内在的に放出されるアデノシンによるアデノシンA1レセプターの活性化をブロックするために、有効量の(±)-N6-エンドノルボルナン（endonorbonan）-2-イル-9-メチルアデニン(0.25μg/kg/分)で処置することを除いて、実施例１に従う。選択的アデノシンA1アンタゴニスト((±)-N6-エンドノルボルナン（endonorbonan）-2-イル-9-メチルアデニン)で処置したウサギの群における動脈狭窄の程度は、ビヒクルで処置されたウサギの群における動脈狭窄よりも有意に低い。
【００４７】
実施例５
アデノシンA2A選択的アゴニストの投与による好中球および血小板の活性化のインビボ阻害
ヒトにバルーン血管形成術を行い、そして2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン(0.6μg/kg/分)またはビヒクルの静脈注入のいずれかを与える（これは血管形成手順の10分前に開始し、そして血管形成術に続いて１日の間、継続する）。好中球および血小板のインビボ活性化を、冠状静脈洞から血液サンプルを採取し、そしてフローサイトメトリにより血小板および好中球上の表面付着分子の発現を測定することにより、測定する。2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシンを受けた群は、表面付着分子を発現する血小板および好中球が、ビヒクルを受けた群よりも有意に少ないことを実証する。
【００４８】
実施例６
アデノシンA2A選択的アゴニストの投与による再狭窄の減少
狭窄した動脈に起因する損なわれた血流で苦しんでいるヒトに、バルーン血管形成術を行い、そして2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシン(0.6μg/kg/分)またはビヒクルの静脈注入のいずれかを与える（これは血管形成手順の10分前に開始し、そして血管形成術に続いて１日間継続する）。バルーン血管形成手順の６ヶ月後、これらの被検体で血管造影図を撮り、血管形成術を行った血管を検査する。再狭窄の発生率は、2-シクロヘキシルメチレンヒドラジノアデノシンを受けた群において、ビヒクルを受けた群よりも有意に低い。
【００４９】
ここで本発明について十分に記載したが、広範なおよび等価な範囲の条件、処方物、および他のパラメーター内で、本発明またはその任意の実施態様の範囲に影響を及ぼすことなく同様のことが実施され得ることが、当業者に理解される。本明細書中に引用される全ての特許、特許出願、および刊行物が、参考としてその全体が本明細書中に十分に援用される。