(57)【要約】  【課題】  日常に於いて摂取しうるMMP-9活性を阻害する成分及びその摂取手段を提供する。  【解決手段】  日常に於いて摂取しうるMMP-9活性を阻害する成分及びその摂取手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、次に示す植物の抽出物が優れたＭＭＰ９（マトリックスメタロプロテアーゼ９）阻害作用を有し、これを経口投与組成物に含有させる。（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）  【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次に示す植物の抽出物を含有する、骨の老化および疾病の予防又は改善のための経口投与組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
【請求項２】
前記植物の抽出物は、８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（MMP-9）に４０％以上の阻害作用を有するものであることを特徴とする、請求項１に記載の経口投与組成物。
【請求項３】
食品であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の経口投与組成物。
【請求項４】
次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物の８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（MMP-9）に４０％以上の活性阻害が存したものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物と、製剤化のための成分とを用いて、製剤を製造する。
【請求項５】
前記骨の老化は、破骨細胞の亢進によるものであることを特徴とする、請求項１〜４何れか１項に記載の経口投与組成物。
【請求項６】
前記骨の老化は、骨粗鬆症であることを特徴とする、請求項１〜５何れか１項に記載の経口投与組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害作用を有する成分を含有する、食品などの経口投与組成物に関し、さらに詳しくは、細胞外マトリックスとして、骨などに存在するコラーゲンを分解して、老化による組織変化や疾病を増悪させる特定のマトリックスメタロプロテアーゼ（Matrix metalloproteinases；ＭＭＰｓ）の活性を阻害して、骨の老化および該骨老化に関与する疾病の増悪を防止するのに有用な、経口投与組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨は生体の骨格としてその構造を維持する上で必要不可欠あると同時に、生体内でのカルシウムの貯蔵庫としての機能も合わせ持つ非常に重要な組織である。骨は骨芽細胞による骨形成と、破骨細胞による骨吸収とのバランスにたった、骨代謝を維持することにより、その強度を保つためのリモデリングとカルシウム供給を行っている。加齢やホルモンバランスの変化などにより骨代謝のバランスが崩れて、破骨細胞の行う骨吸収が優位となることにより骨量減少をきたし、骨強度が低下して骨粗しょう症などの疾病が発生することが知られている。骨基質の大部分はコラーゲンからなり、骨代謝の際のコラーゲン分解は重要な要素で、骨組織にもコラーゲナーゼ群として、MMP-1及びMMP-13、ゼラチナーゼ群として、MMP-2とMMP-9、ストロメライシン群としてMMP-3、さらに膜結合型のMT1-MMPなどのマトリックスメタロプロテアーゼの存在が報告されている。中でも、骨吸収を司る破骨細胞ではMMP-9が強く発現しており（例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３を参照）、骨吸収の大きな要素としてＭＭＰ−９の活性の亢進が推定される。このMMP-9活性を阻害することにより、骨代謝のバランスを整えることにより、骨の老化（脆弱化）を防ぐことができると推定されているが、この様な機能を有する成分であって、日常摂取できるものはまだ見いだせていないのが現状である。
【０００３】
【特許文献１】特開２００１−３３５５７５号公報
【特許文献２】特表２００６−５００４２２号公報
【特許文献３】特表２００４−５２４８１２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、日常に於いて摂取しうるMMP-9活性を阻害する成分及びその摂取手段を提供すること課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、日常に於いて摂取しうるMMP-9活性を阻害する成分及びその摂取手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、次に示す植物の抽出物が優れたＭＭＰ９（マトリックスメタロプロテアーゼ９）阻害作用を有し、これを含有する経口投与組成物が、骨老化および疾病の予防又は改善に有用であることを見いだし、発明を完成させるに至った。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
即ち、本発明は、以下に示す通りである。
（１）次に示す植物の抽出物を含有する、骨の老化および疾病の予防又は改善のための経口投与組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
（２）前記植物の抽出物は、８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（MMP-9）に４０％以上の阻害作用を有するものであることを特徴とする、（１）に記載の経口投与組成物。
（３）食品であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の経口投与組成物。
（４）次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物の８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（MMP-9）に４０％以上の活性阻害が存したものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物と、製剤化のための成分とを用いて、製剤を製造する。
（５）前記骨の老化は、破骨細胞の亢進によるものであることを特徴とする、（１）〜（４）何れか１項に記載の経口投与組成物。
（６）前記骨の老化は、骨粗鬆症であることを特徴とする、（１）〜（５）何れか１項に記載の経口投与組成物。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、日常に於いて摂取しうるMMP-9活性を阻害する成分及びその摂取手段を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の経口投与様の組成物は、骨の老化およびこの老化に関与する疾病の予防又は改善のためのものであって、次に示す植物の抽出物から選択される１種乃至は２種以上を含有することを特徴とする。抽出物の作製は、常法に従って行えば良く、植物体１質量部に対して、溶媒１〜１００質量部を加え、常温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、所望により濾過などで不溶物を取り除き、所望により減圧溜去、凍結乾燥等で溶媒を除去することも出来る。更に、これらの抽出物をカラムクロマトグラフィーや液液抽出などで分画精製することも出来る。カラムクロマトグラフィーとしては、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、「ダイアイオンＨＰ−２０」のようなイオン交換樹脂、ＯＤＳ等が好適に例示できる。勿論、植物体の一部又は全部を粉砕など加工しただけのものも本発明の抽出物に含まれる。これらの植物体は何れも充分な食経験の存するものであり、食物としての摂取が可能なものである。故に日常的な摂取できるほどに安全性が確保されている。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiolarosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
【０００８】
これらの植物の内、サルノコシカケ科カバノアナタケは、菌体の部分何れもが使用可能であり、特に好ましくは子実体である。抽出物の作製に用いる溶媒としては、水性の極性溶媒が好ましく、具体的には、エタノールなどのアルコール及び／又は水が好ましい。中でも熱水抽出が特に好ましい。
【０００９】
ハマウツボ科カンカニクジュヨウについては、全草の部分何れもが使用可能であり、特に好ましくは全草である。抽出物の作製に用いる溶媒としては、水性の極性溶媒が好ましく、具体的には、エタノールなどのアルコール及び／又は水が好ましい。中でも熱水抽出が特に好ましい。
【００１０】
ベンケイソウ科コウケイテンは、全草の何れの部分も使用可能であり、特に好ましくは全草である。抽出物の作製に用いる溶媒としては、水性の極性溶媒が好ましく、具体的には、エタノールなどのアルコール及び／又は水が好ましい。中でも熱水抽出が特に好ましい。
【００１１】
ウコギ科エゾウコギは、全草の何れの部分も使用可能であり、特に好ましくは根である。抽出物の作製に用いる溶媒としては、水性の極性溶媒が好ましく、具体的には、エタノールなどのアルコール及び／又は水が好ましい。中でも熱水抽出が特に好ましい。
【００１２】
トチュウ科トチュウは、葉、花、蕾、樹皮、木幹、根何れも使用可能であるが、特に好ましくは葉である。抽出物の作製に用いる溶媒としては、水性の極性溶媒が好ましく、具体的には、エタノールなどのアルコール及び／又は水が好ましい。中でも熱水抽出が特に好ましい。
【００１３】
以下に、これらの植物体を用いた抽出物の製造例を示す。
【００１４】
＜製造例１＞
サルノコシカケ科カバノアナタケの子実体５００ｇに水２Ｌを加え、３時間沸騰させて抽出を行い、室温まで冷却した後、濾過により不溶物を除き、凍結乾燥して、９７ｇのアモルファスとして抽出物１を得た。
【００１５】
＜製造例２＞
製造例１と同様の手技で、ハマウツボ科カンカニクジュヨウの全草５００ｇを処理し、１０５ｇのアモルファスとして抽出物２を得た。
【００１６】
＜製造例３＞
製造例１と同様の手技で、ベンケイソウ科コウケイテンの全草５００ｇを処理し、１２３ｇのアモルファスとして抽出物３を得た。
【００１７】
＜製造例４＞
製造例１と同様の手技で、ウコギ科エゾウコギの根５００ｇを処理し、２２ｇのアモルファスとして抽出物４を得た。
【００１８】
＜製造例５＞
製造例１と同様の手技で、トチュウ科トチュウの葉５００ｇを処理し、８５ｇのアモルファスとして抽出物５を得た。
【００１９】
斯くして得られた抽出物は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害活性、特に、マトリックスメタロプロテアーゼ９（MMP９）阻害作用に優れ、これにより骨の老化およびかかる老化に関与した疾病が悪化するのを防ぐ作用を有する。骨の老化に関与した疾患としては、例えば、破骨細胞の活性が亢進し、骨を形成するカルシウムが血中に溶出し骨質量が減少する骨質量減少症、これが更に悪化し、骨に空洞を形成する骨粗鬆症などが例示できる。又、骨吸収が抑制されることから骨代謝は骨形成に傾くので、損失したカルシウムが再度骨に沈着するので、前記抽出物を摂取することにより、前記疾病の改善にもつながる。
この様な作用を発揮するためには、これらの抽出物は、一日あたり１０〜１００００ｍｇを１回乃至は数回に分けて、経口経路で投与されることが好ましい。この時留意すべきことは、MMP９の阻害活性が、８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）溶液において、４０％以上存することを確認することである。阻害活性は既存のMMP９阻害活性測定用のキット、例えば、フナコシ薬品株式会社から販売されている、「MMP−9 Colorimetric Assay Kit (AK-410)」等を用い、測定することが出来る。阻害活性は、（１−検体存在下のプロテアーゼの反応速度／検体非存在下でのプロテアーゼの反応速度）×１００の式で算出される。前記のMMP９の阻害活性が４０％を下回るときには、骨の老化の抑制、骨の老化に関与する疾病の予防乃至は改善の効果を発現しない場合が存する。
【００２０】
かかる成分は、製剤化のための任意成分とともに処理することにより、本発明の経口投与組成物に加工することが出来る。本発明の経口投与組成物としては、経口投与される特徴を備えていれば特段の限定無く、例えば、経口投与医薬組成物、食品、飲み物などが好適に例示できる。この中では、食品が特に好ましく、中でも特定の機能を期待される特定保健用食品などの食品が特に好ましい。前記製剤化のための任意成分としては、例えば、乳糖、デキストリン、シクロデキストリンなどの賦形剤、デンプン、セルロースなどの崩壊剤、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアガムなどの結合剤、ペクチン、レシチンなどの乳化・分散剤、白糖、蜂蜜、麦芽糖などの矯味剤、シェラック、ゼラチンなどの被覆剤などが好適に例示できる。
【００２１】
以下に、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明がかかる実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【実施例１】
【００２２】
製造例１〜５で作製した抽出物１〜５について、そのMMP９阻害活性を「MMP−9 Colorimetric Assay Kit (AK-410)」を用いて測定した。結果を表１に示す。何れの抽出物も８．９mＵ/μｇ（酵素活性/植物抽出物）で４０％以上の阻害率を示していることがわかる。
【００２３】
【表１】
2009091276.tif 000002
【実施例２】
【００２４】
下記の処方に従って、本発明の経口投与組成物である、食品（錠剤）を作製した。即ち、成分を「ニューマルメライザー」（不二パウダル株式会社製）に仕込み、送風攪拌下、水１００ｍｌを噴霧し、造粒し、４０℃の温風を３時間送風して、乾燥させ、これを打錠して、錠剤１（１００ｍｇ）を得た。
【００２５】
【表２】
2009091276.tif 000003
【実施例３】
【００２６】
実施例２と同様に、下記に示す処方に従って、食品（錠剤２〜５）を作成した。
【００２７】
【表３】
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【００２８】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００２９】
本発明は骨老化抑制のための食品に応用できる。