(57)【要約】【課題】クマやくすみを予防でき且つ長期的に塗布又は摂取することが可能な血液レオロジー改善用外用剤及び食品を提供する。【解決手段】スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物を含有する血液レオロジー改善用外用剤及び食品とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物を含有する血液レオロジー改善用外用剤。
【請求項２】
前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物に、少なくともポリフェノールが含有されていることを特徴とする請求項１記載の血液レオロジー改善用外用剤。
【請求項３】
前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）の抽出物を含有し、該スベリヒユの抽出物の抽出溶媒が、水又は水溶性有機溶媒であることを特徴とする請求項１又は２記載の血液レオロジー改善用外用剤。
【請求項４】
前記水溶性有機溶媒が、エタノール又は１，３-ブタンジオールであることを特徴とする請求項３に記載の血液レオロジー改善用外用剤。
【請求項５】
スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物を含有する血液レオロジー改善用食品。
【請求項６】
前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物に、少なくともポリフェノールが含有されていることを特徴とする請求項５記載の血液レオロジー改善用食品。
【請求項７】
前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）の抽出物を含有し、該スベリヒユの抽出物の抽出溶媒が、水又は水溶性有機溶媒であることを特徴とする請求項５又は６記載の血液レオロジー改善用食品。
【請求項８】
前記水溶性有機溶媒が、エタノールであることを特徴とする請求項７に記載の血液レオロジー改善用食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スベリヒユ又はその抽出物を含有し、クマやくすみを予防でき且つ長期的に塗布又は摂取することが可能な血液レオロジー改善用外用剤及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
目の下の「クマ」や肌の「くすみ」などは、血行の滞留によって生じると考えられている。血行不良によって毛細血管への血流が悪くなると、目の周りでは皮膚が薄いためその血液が皮膚に透けて青黒く見えてしまったり、また肌が暗くくすんだ顔色に見えてしまったりする。
【０００３】
この血行不良の原因の一つとして、血液レオロジー（血液の流動性）の異常が挙げられる。血液レオロジーが悪くなると、血液中の赤血球が柔軟性を失って変形能（赤血球が有するしなやかに変形し、狭いところでも通過することができる能力）が低下する。これにより、血液の流動性の低下が生じ、血行不良となる。
【０００４】
上記変形能がどのようにして維持されるか、また摂取する食事や皮膚に塗布する外用剤によりどのような影響を受けるかについての研究が、現在進められている。例えば特許文献１にはアムラー果実及びその抽出物からなる血流改善剤が挙げられている。特許文献１には、その他にも血流を改善する可能性のある食品として、梅干し、梅肉エキス、黒酢、ダッタンそば等が挙げられている。
【特許文献１】特開２００６−３３５７０８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
たとえ上述した如く血液レオロジー改善効果を有する有効成分を植物から見出しても、中にはその性状のために目の周り等の弱い皮膚に長期的に塗布することができないものや、その風味のために食品として長期的に摂取することが難しいものがある。従って、このような有効成分は、性状や風味に難点が少なく、長期的に塗布又は摂取しても副作用の無いものである必要がある。
【０００６】
本発明は上記の課題に鑑みてなされたものであり、本発明の目的は、クマやくすみを予防でき且つ長期的に塗布又は摂取することが可能な血液レオロジー改善用外用剤及び食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、スベリヒユ又はその抽出物に、血液レオロジー改善作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
即ち、請求項１に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物を含有する血液レオロジー改善用外用剤に関する。
請求項２に係る発明は、前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物に、少なくともポリフェノールが含有されていることを特徴とする請求項１記載の血液レオロジー改善用外用剤に関する。
請求項３に係る発明は、前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）の抽出物を含有し、該スベリヒユの抽出物の抽出溶媒が、水又は水溶性有機溶媒であることを特徴とする請求項１又は２記載の血液レオロジー改善用外用剤に関する。
請求項４に係る発明は、前記水溶性有機溶媒が、エタノール又は１，３-ブタンジオールであることを特徴とする請求項３に記載の血液レオロジー改善用外用剤に関する。
請求項５に係る発明は、スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物を含有する血液レオロジー改善用食品に関する。
請求項６に係る発明は、前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）又はその抽出物に、少なくともポリフェノールが含有されていることを特徴とする請求項５記載の血液レオロジー改善用食品に関する。
請求項７に係る発明は、前記スベリヒユ（Portulaca oleracea L.）の抽出物を含有し、該スベリヒユの抽出物の抽出溶媒が、水又は水溶性有機溶媒であることを特徴とする請求項５又は６記載の血液レオロジー改善用食品に関する。
請求項８に係る発明は、前記水溶性有機溶媒が、エタノールであることを特徴とする請求項７に記載の血液レオロジー改善用食品に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の外用剤及び食品は、スベリヒユ又はその抽出物を含有することにより、長期的に塗布又は摂取することが可能で、血液レオロジー改善作用によりクマやくすみ等の症状を長期的に改善することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明の血液レオロジー改善用外用剤及び食品（以下、外用剤及び食品ということがある）について説明する。
本発明の外用剤及び食品は、有効成分としてスベリヒユ科スベリヒユ属植物又はその抽出物を含有する。このスベリヒユ属植物としては、スベリヒユ（Portulaca. oleracea L.）、マツバボタン（Portulaca grandiflora Hook）、ケツメクサ（Portulaca pilosa）等が挙げられるが、好ましくはスベリヒユ（Portulaca. oleracea L.）（別名イハイズル、トンボグサ、馬歯筧又は五行草）が用いられる。
スベリヒユは、多肉質で茎が赤褐色を呈する１年生の草花植物であり、畑地や路傍の日当たりの良いところに広く分布していて入手が容易である。
【００１１】
スベリヒユは、成分として、ω−３脂肪酸、α−トコフェロール、アスコルビン酸、β−カロテン、グルタチオン等を含み、これらの成分による効用としては、特に抗酸化作用が知られている。さらに、ω−３脂肪酸による抗炎症作用、アスコルビン酸やグルタチオンによる免疫システム増強作用等も知られている。
本発明者らは、これらの作用の他、スベリヒユが血液レオロジー改善作用を有すること、及びスベリヒユ抽出分画の水溶性部にポリフェノールが含有され、このポリフェノールが血液レオロジー改善作用の有効成分の１つであることを見出した。
【００１２】
本発明の外用剤及び食品は、スベリヒユ及びスベリヒユの抽出物のいずれか一方を用いてもよく、これらを併用してもよい。
本発明に係るスベリヒユは、スベリヒユの全草である。本発明の外用剤及び食品には、例えば洗浄後、乾燥後、乾燥粉砕後のいずれのスベリヒユを用いてもよい。
本発明に係るスベリヒユの抽出物は、スベリヒユの全草から抽出される抽出物である。本発明の外用剤及び食品には、例えば洗浄後、乾燥後、乾燥粉砕後のいずれのスベリヒユの抽出物を用いてもよい。
【００１３】
本発明に係るスベリヒユ抽出物は、その抽出に用いられる溶媒や温度条件、抽出時間等について特に限定されず、任意に選択可能である。
抽出溶媒は、水または水溶性有機溶媒が使用できる。水溶性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール，イソプロパノール、１,３-ブタンジオール、またエチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチルグリコール等のグリコール類が挙げられる。これら水溶性有機溶媒のうち、外用剤においてはエタノールまたは１,３-ブタンジオールが好ましく用いられ、食品においてはエタノールが好ましく用いられる。また、本発明に係る水溶性有機溶媒は、水に溶解して用いてもよい。
抽出時間は、スベリヒユから有効成分が十分に抽出される時間であればよく、抽出温度に応じて適宜決定される。例えば抽出温度が７５℃〜１００℃の場合、その抽出時間は１〜２時間程度であることが好ましく、抽出温度が低い場合には、より長い抽出時間が必要となる。
【００１４】
本発明に係るスベリヒユ抽出物の調製方法は、例えば次のようにして行うことができる。
スベリヒユの全草を乾燥後粉砕し、乾燥粉末を作成する。
抽出溶媒として熱水を使用する場合、例えばスベリヒユ粉砕物５０ｇに精製水８００ｍｌを加え、１時間煮沸した後４０℃まで冷却し、濾過剤としてセライトを用いて吸引濾過して抽出液６６０ｇを得る。さらにこの抽出液を乾固することにより不揮発成分１５ｇを得る。
一方、５０％エタノールを使用する場合、例えばスベリヒユ粉砕物２０ｇに５０％エタノール３００ｍｌを加え、１時間煮沸した後４０℃まで冷却し、濾過剤としてセライトを用いて吸引濾過して抽出液２２０ｇを得る。さらにこの抽出液を乾固することにより不揮発成分３．７ｇを得る。
【００１５】
さらに、本発明に係るスベリヒユ抽出物は、本発明の外用剤及び食品が、血液レオロジー改善をもたらす（１）血小板凝集抑制作用（２）線溶系活性化作用（３）抗トロンビン作用（４）赤血球凝集抑制作用のうち、特にどの作用効果を奏することが好ましいかによって、その溶媒の種類及び溶媒の濃度を選択できる。
例えば、４０〜６０％エタノールを溶媒として用いた場合、そのスベリヒユ抽出物は血小板凝集抑制作用及び線溶系活性化作用に優れ、８０％〜９９．５％エタノールを溶媒として用いた場合、そのスベリヒユ抽出物は抗トロンビン作用及び線溶系活性化作用に優れ、そして水（熱水）を溶媒として用いた場合、そのスベリヒユ抽出物は赤血球凝集抑制作用に優れる。
【００１６】
本発明の外用剤においては、含まれるスベリヒユは、スベリヒユ又はスベリヒユの抽出物のどちらでもよいが、スベリヒユの抽出物を使用することがより好ましい。この理由は製剤としての外用剤は乳化物や液体が主体であり、配合するには液状のものが製剤化に有利であるからである。
本発明の食品においては、含まれるスベリヒユは、スベリヒユ又はスベリヒユの抽出物どちらであっても好適に用いられる。
【００１７】
本発明の外用剤は、スベリヒユ抽出物が、不揮発成分として０．０００１〜１０重量％含むように配合することが好ましく、より好ましくは０．００１〜１重量％含むように配合する。
この理由は０．０００１重量％未満であると十分な効果を得るには大量に塗布する必要があり、また１０重量％を超えると使用感に問題を生じまた期待されるほどの効果は得られないため、いずれの場合も好ましくないからである。
本発明の食品は、１日あたりスベリヒユ抽出物の不揮発成分として、１０〜６０００ｍｇとなるように摂取することが好ましく、より好ましくは２０〜３０００ｍｇとなるように摂取する。
この理由は、スベリヒユ抽出物の不揮発成分１０ｍｇ未満の摂取では、本発明の効果を充分に発揮することができず、スベリヒユ抽出物の不揮発成分６０００ｍｇを超えて摂取しても好ましい範囲の効果に比較して期待されるほどの効果は得られず、いずれの場合も好ましくないからである。
尚、外用剤及び食品にスベリヒユが含まれる場合、含量および一日の摂取量を上記スベリヒユ抽出物の不揮発性成分に換算することになる。
【００１８】
本発明の外用剤及び食品にはさらにポリフェノールを添加してもよい。上述した如く、本発明に係るスベリヒユ又はその抽出物には既にポリフェノールが含まれているが、さらにポリフェノールを添加することにより、従来から知られる作用である抗酸化作用とともに血液レオロジー改善作用の効果をさらに奏することとなる。
【００１９】
本発明の外用剤及び食品は、スベリヒユに加え、他の生薬を含有することができる。例えば、血流改善作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用、抗酸化作用、抗老化作用、抗菌作用等を有することが知られている生薬等を含有することができる。
血流改善作用を有する生薬としては、トウガラシ、オタネ人参、オランダカラシ、アルニカ、紅花、クジン、サンショウ、タマネギ、ニンニク、ニンジンを例示することができる。
抗アレルギー作用を有する生薬としては、キキョウ、コガネバナ、コブシ、コンフリー、サンシュユ、シソ、シャクヤク、ジャノヒゲ、ドクダミ、ナツメ、ヒナタイノコズチ、ボタン、ローズマリーを例示することができる。
抗炎症作用を有する生薬としては、アオツヅラフジ、アケビ、エンジュ、オウバク、オウレン、オトギリソウ、キキョウ、クマザサ、コガネバナ、コンフリー、シャクヤク、ジャノヒゲ、セイヨウノコリギソウ、トチバニンジン、パセリ、ボタン、ミシマサイコ、ヤエムグラ、ヤマウコギ、ヨクイニンを例示することができる。
【００２０】
抗酸化作用を有する生薬としては、アーティチョーク、アカワイン、アマチャ、オウゴン、オニク、オレガノ、カッコン、カルドン、ガマズミ、クガイソウ、クズ、クワ、コーヒー、コガネバナ、コメ、ゴバイシ、ゴマ、サンザシ、サンシチニンジン、シャクヤク、スイカズラ、セージ、ダリヤ、ノアザミ、ヒマワリ、ビンロウジュ、フランキンセンス、ボタンピ、ローズマリーを例示することができる。
抗老化作用を有する生薬としては、アメリカニンジン、イチョウ、エキナケア、ビンロウジュ、ヤナギを例示することができる。
抗菌作用を有する生薬としては、アカネ、アカヤジオウ、アキノキリンソウ、アザミ、アロエ、イタドリ、ウツボグサ、ウド、ウメ、エゴマ、オウバク、オウレン、オケラ、オトギリソウ、カナムグラ、カミツレ、カワラヨモギ、ガジュツ、キク、キハダ、キランソウ、キンミズヒキ、ギシギシ、クチナシ、クマザサ、クララ、ゲンノショウコ、コガネバナ、コブシ、ゴボウ、サンザシ、サンシュユ、サンショウ、シソ、シャクヤク、ショウガ、スイカズラ、スイバ、セージ、セロリ、タマネギ、タンポポ、ダイコン、ツルドクダミ、ツルナ、ツワブキ、トウガラシ、トウキ、ドクダミ、ナツメ、ナンテン、ニンニク、ネズ、ネズミモチ、ハマスゲ、ヒキオコシ、ヒマワリ、フサザクラ、ボタン、ミカン、ミソハギ、ミチヤナギ、メギ、ヤブコウジ、ユーカリノキ、ヨモギ、リンドウ、レンギョウ、ローズマリー、ワレモコウを例示することができる。
なお、上記作用に限定されるものではなく、他の作用を有する生薬であってもよく、一般に食品用として添加される生薬を含有することができる。
これら生薬については、その生薬に応じた従来公知の方法等によって適宜調整することができる。
【００２１】
また、本発明の外用剤及び食品においては、スベリヒユに加え、ペプチド及びタンパク質を含有することができる。
ペプチドとは、決まった順でアミノ酸が繋がってできた分子の系統群、即ち、タンパク質を構成しているアミノ酸が２〜１０個位に結合している状態をいい、ポリグルタミン酸（ＰＧＡ）を例示することができる。
ポリペプチドとは、アミノ酸の一つの線形の鎖をいう。
タンパク質とは、５０以上のアミノ酸からなる一つ以上のポリペプチドをいい、例えば、コラーゲン、シルクタンパクを例示することができる。
【００２２】
また、本発明の外用剤及び食品においては、スベリヒユに加え、糖類を含有することができる。
糖類とは、単糖、オリゴ糖及び多糖だけでなく、アミノ糖及び糖アルコール等も含み、トレハロース、ヒアルロン酸、キチン、キトサン（グルコサミン）、ムチン、コンドロイチン硫酸、アルギン酸を例示することができる。
さらに、クロレラ、イースト菌、ヨーグルトエキス等、種々の有効成分を含有することも可能である。
【００２３】
本発明の外用剤及び食品においては、スベリヒユに追加して添加する他の成分、即ちスベリヒユ以外の生薬、ペプチド、タンパク質及び糖類についても、スベリヒユ抽出物と同様の理由で、それぞれ抽出物の不揮発成分が、外用剤においては０．０００１〜１０重量％、より好ましくは０．００１〜１重量％配合し、食品においては一日の摂取量が１０〜６０００ｍｇ、より好ましくは１０〜３０００ｍｇとなるよう摂取する。
【００２４】
本発明の外用剤は、スベリヒユ抽出物に、上記他の成分（生薬、ペプチド、タンパク質及び糖類等）を適宜追加し、薬学的に許容される製剤担体を用いて、外用剤として従来公知の形態とすることができる。例えば、パスタ剤、軟膏剤、クリーム剤、液剤、ゲル剤などの形態が挙げられる。
本発明の外用剤は、主に皮膚外用剤として使用することができ、化粧品、浴用剤、医薬部外品等に適用することが可能である。
【００２５】
本発明の外用剤は、その用途に合わせて、以下記載する成分を含有させることができる。
美白用であれば、紫外線防御、抗炎症、突然変異抑制、抗酸化、チロシナーゼ阻害、メラニン抑制及び細胞賦活等の効果を有する成分を含有することができる。
老化防止用であって生理的老化防止用であれば、保湿、創傷治癒、免疫賦活、細胞賦活、コラーゲン産生促進、ヒアルロン酸産生促進、皮膚弾力改善及びメイラード反応阻害等の効果を有する成分を含有することができる。また、光老化防止用であれば、紫外線防止、抗酸化、突然変異抑制、表皮肥厚抑制、皮膚弾力改善、抗炎症、エラスチン保護、コラーゲン保護、免疫賦活及び細胞賦活等の効果を有する成分を含有することができる。
シワ防止用であれば、紫外線防止、シワ改善、保湿、表皮肥厚抑制、抗炎症、皮膚弾力改善、抗酸化、細胞賦活、エラスチン保護、コラーゲン保護、コラーゲン産生促進、ヒアルロン酸保護及びヒアルロン酸産生促進等の効果を有する成分を含有することができる。
抗炎症用であれば、脱感作、ＩｇＥ抗体産生抑制、補体活性抑制、ＰＣＡ反応抑制、接触皮膚炎抑制、カラゲニン浮腫抑制、ヒスタミン遊離抑制、アラキドン酸浮腫抑制及びヒアルロニダーゼ阻害等の効果を有する成分を含有することができる。
ニキビ防止用であれば、抗男性ホルモン、収斂、皮脂腺抑制、ニキビ発生抑制、抗酸化、抗炎症、抗菌及びリパーゼ活性阻害等の効果を有する成分を含有することができる。
保湿用であれば、肌荒れ改善、経表皮水分損失抑制、皮膜形成、ＮＭＦ産生促進、角質水分量増加、細胞保護、ヒアルロン酸産生促進及びコラーゲン産生促進等の効果を有する成分を含有することができる。
【００２６】
上記紫外線防止効果を有する成分としては、オウゴン、カミツレ、シルクタンパク、ク
ララ、スイカズラ、ソウハクヒ及びヨクイニンを例示することができる。
抗炎症効果を有する成分としては、オウレン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、セ
イヨウサンザシ、セージ、ドクダミ及びホオノキ、突然変異抑制効果を有する成分として
は、アマチャ、ウイキョウ及びユキノシタを例示することができる。
抗酸化効果を有する成分としては、オウゴン、オウバク、オウレン、オトギリソウ、カ
ッコン、グレープフルーツ、サイシン、シソ、セイヨウサンザシ、セージ、ソウハクヒ、
ユーカリ、レモングラス及びローズマリーを例示することができる。
チロシナーゼ阻害効果を有する成分としては、オウゴン、クララ、シソ、ソウハクヒ及びヨクイニン、メラニン抑制効果を有する成分としては、シャクヤク、カッコン、セイヨウサンザシ及びソウハクヒ、細胞賦活効果を有する成分としてはアロエベラを例示することができる。
【００２７】
保湿効果を有する成分としては、アルギン酸、アロエベラ、イースト菌、キチン、キトサン、コラーゲン、シルクタンパク、トレハロース、ヒアルロン酸、ＰＧＡ、オトギリソウ、カワラヨモギ、グレープフルーツ、ノバラ、ヨーグルトエキス、ヨクイニンを例示することができる。
創傷治癒効果を有する成分としてはムチン、免疫賦活効果を有する成分としてはオウゴン、細胞賦活効果を有する成分としては、イースト菌、アロエベラ、クロレラ、ムチンを例示することができる。
コラーゲン産生促進効果を有する成分としてはアロエベラ、ヒアルロン酸産生促進効果を有する成分としてはヒアルロン酸、皮膚弾力改善効果を有する成分としてはキチン、ホオノキ、メイラード反応阻害効果を有する成分としてはマロニエを例示することができる。
表皮肥厚抑制効果を有する成分としてはオウゴン、ホオノキ、エラスチン保護効果を有する成分としてはオトギリソウ、ボダイジュ、コラーゲン保護効果を有する成分としてはオウゴン、ビワの葉、ホオノキ、ユーカリ、シワ改善効果を有する成分としてはアルギン酸、キチン、アロエベラ、ヨーグルトエキスを例示することができる。
【００２８】
脱感作効果を有する成分としてはボダイジュ、ＩｇＥ抗体産生抑制効果を有する成分としてはラクトフェリン、補体活性抑制効果を有する成分としてはオトギリソウ、シソ、セイヨウサンザシ、ドクダミ、ビワの葉、ローズマリー、ＰＣＡ反応抑制効果を有する成分としてはシソ、ドクダミ、ビワの葉を例示することができる。
接触皮膚炎抑制効果を有する成分としては、シソ、ボタンピ、カラゲニン浮腫抑制効果を有する成分としてはイースト菌、オウゴン、シソ、ビワの葉、ボタンピ、ヒスタミン遊離抑制効果を有する成分としてはオウレン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、セイヨウサンザシ、セージ、ドクダミ、ビワの葉、ホオノキ、ボタンピ、レモングラスを例示することができる。
アラキドン酸浮腫抑制効果を有する成分としてはボタンピ、ヒアルロニダーゼ阻害効果を有する成分としてはオウゴン、オトギリソウ、カワラヨモギ、シソ、ドクダミを例示することができる。
抗菌効果を有する成分としてはオウバク、レモングラス、ラクトフェリン、リパーゼ活性阻害効果を有する成分としてはキトサン、オトギリソウを例示することができる。
【００２９】
肌荒れ改善効果を有する成分としてはアロエベラ、ムチン、ヨーグルトエキス、経表皮水分損失抑制効果を有する成分としてはアルギン酸、アロエベラ、キチン、シルクタンパク、ＰＧＡ、ヒアルロン酸、皮膜形成効果を有する成分としてはキトサン、シルクタンパク、ＰＧＡ、ヒアルロン酸、ヨクイニンを例示することができる。
ＮＭＦ産生促進効果を有する成分としては、ＰＧＡ、コラーゲン、角質水分量増加効果を有する成分としてはアルギン酸、アロエベラ、イースト菌、キチン、コラーゲン、トレハロース、ＰＧＡ、クロレラ、オトギリソウ、カワラヨモギ、グレープフルーツ、ノバラ、細胞保護効果を有する成分としてはトレハロースを例示することができる。
これら本発明の外用剤の製造方法は、上述した如くスベリヒユ又はその抽出物を含有するものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
【００３０】
本発明の血液レオロジー改善用食品は、スベリヒユ自体又はスベリヒユ抽出物に、上記他の成分（生薬、ペプチド、タンパク質及び糖類等）を適宜追加し、薬学的に許容される製剤担体を用いて、食品として従来公知の形態とすることができる。例えば、粉末状、液状、顆粒、錠剤、丸剤、カプセル状などの形態が挙げられる。
【００３１】
本発明の食品としては、例えば、健康食品、栄養補助食品（バランス栄養食、サプリメント等）、栄養機能食品、特定保健用食品、病者用食品、口腔ケア用食品等が挙げられる。また、本発明に係るスベリヒユ又はその抽出物は、通常の手段を用いてジュース、飴、ガム、アイスクリーム等の通常の食品に含有させればよく、食品の味覚等を損なわない範囲で含有させることができる。
これら本発明の食品の製造方法は、スベリヒユ又はその抽出物を含有するものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
【実施例】
【００３２】
以下、本発明における血液レオロジー改善用外用剤及び食品に関する試験例を示す。
【００３３】
（スベリヒユ抽出物の製造）
本発明のスベリヒユの抽出物を以下の如く製造した。実験原料として、日本産のスベリヒユ（Portulaca oleracea L.）の全草を乾燥後に粉砕したものを用いた。
（実施例１）
スベリヒユの乾燥粉末５０ｇを、１０倍量の５０％エタノールにて、２時間１回熱時抽出した。ろ過後、減圧下でエタノールを留去後、減圧乾燥して得たエキス（不揮発成分６．７ｇ）を実施例１とした。
（実施例２）
スベリヒユの乾燥粉末５０ｇを、１０倍量の９０％エタノールにて、２時間１回熱時抽出した。ろ過後、減圧下でエタノールを留去後、減圧乾燥して得たエキス（不揮発成分４．８ｇ）を実施例２とした。
（実施例３）
スベリヒユの乾燥粉末５０ｇを、１０倍量の９９．５％エタノールにて、２時間１回熱時抽出した。ろ過後、減圧下でエタノールを留去後、減圧乾燥して得たエキス（不揮発成分０．９５ｇ）を実施例３とした。
（実施例４）
スベリヒユの乾燥粉末５０ｇを、１０倍量の水にて、２時間１回熱抽出した。ろ過後、減圧脱水乾燥して得たエキス（不揮発成分１５ｇ）を実施例４とした。
【００３４】
（試験例１：物性試験）
本発明に係るスベリヒユ抽出物の物性を測定した。
＜実験方法＞
測定する試料は、実施例２を用いた。
まず実施例２にアセトンを添加し、アセトン可溶部とアセトン不可溶部に分離した。得られたアセトン不溶部にエタノールを添加し、エタノール可溶部とエタノール不可溶部に分離した。得られたエタノール可溶部を、ＤｉａｉｏｎＨＰ−２０のカラムを用いて水溶出部と１０％メタノール溶出部（図１に分画１として示す）に分離した。得られた水溶出部を、ＤｉａｉｏｎＨＰ−２０カラム（２０ｍｍ（φ）×３００ｍｍ）を用いて５つの分画を得た（図１に分画２乃至６として示す）。各カラムの水溶出は２０ｍｌであった。
【００３５】
分画１、４及び５の試料について、その成分を特定するために下記（１）ＤＰＰＨラジカル補捉法（２）ＵＶスペクトルデータ（３）呈色反応（４）ＨＰＬＣ分析の試験を行った。
（１−１．ＤＰＰＨラジカル補捉法）
分画１、４、５の試料それぞれ２ｍｌに、０．５Ｍ緩衝酢酸溶液（ｐＨ５．５）０．４ｍｌ、エタノール１．６ｍｌ、０．５ｍＭ ＤＰＰＨ／エタノール溶液１ｍｌを添加した。そして室温で３０分インキュベートした後、５２０ｎｍにおける吸光度を測定した。対照群には、緩衝液と５％ＤＭＳＯ／緩衝液を用いた。また、比較例１（陽性対照薬）にはＬ−アスコルビン酸を用いた。
＜結果＞
測定値を表１に示す。表中、各値は３回実施したものを平均±Ｓ．Ｅ．で表した。＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。分画１、４、５の試料いずれにも濃度依存的に抗酸化作用が示された。
【００３６】
【表１】
2009286722.tif 000002
【００３７】
（１−２．ＵＶスペクトルデータ）
分画１を用い、UV mini 1240(SHIMADZU)の機器にて、試料は水に溶解し、まず（Ａ）中性で測定した。次いで、（Ｂ）（Ａ）の中性試料液に1N-NaOHを2mL駒込ピペットで1滴加えてアルカリ性として測定した。さらに、（Ｃ）（Ｂ）のアルカリ性試料液に1N-HClを2滴加えて酸性として測定を行った。
分画１の試料を（Ａ）中性にした場合、（Ｂ）アルカリ性にした場合、（Ｃ）酸性にした場合のＵＶスペクトルをそれぞれ測定した。
＜結果＞
結果を図２に示す。図２（Ａ）は分画１の試料を中性にした場合のＵＶスペクトルデータを示し、図２（Ｂ）は（Ａ）をアルカリ性にした場合のＵＶスペクトルデータを示す。図２（Ａ）においてはλmax２７０ｎｍであり、図２（Ｂ）においてはλmax２９５ｎｍであった。さらに、（Ｃ）の測定結果は、図２（Ａ）と全く同じ波形を示した。このように、アルカリ性にすることにより吸収波長が長波長側にシフトし、酸性にすると元に戻ることから、分画１の試料に含まれる成分がフェノール性化合物であることが推定される。
【００３８】
（１−３．呈色反応）
分画１、４、５の試料の呈色反応を試験した。
＜結果＞
分画１、４、５の試料に１Ｍ塩化第２鉄液を加えると、分画１、４、５全ての試料が暗紫色に呈色した。したがって、分画１、４、５の試料にはフェノール性化合物が含まれることが示された。
【００３９】
（１−４．ＨＰＬＣ分析）
分画１、４、５の試料についてＨＰＬＣ分析を行った。
以下に分析条件を示す。
機種： SCL-10A vp (SHIMADZU)
カラム：nacalai tesque COSMOSIL packed Column (φ４．６mm×１５０mm)
移動相： 10%アセトニトリル水溶液
カラム温度：４０℃
流速：０．８mL/min
注入量：１０μL
＜結果＞
分画１、４、５の試料のいずれにも、グルタチオン（スベリヒユに含有されるとして公知の抗酸化力の強い化合物）は検出されなかった。
＜考察＞
以上の結果より、スベリヒユ抽出物には、公知であるグルタチオンとは異なる、抗酸化力の強いフェノール性化合物が含有されていることが示された。
【００４０】
（試験例２：血液レオロジー改善作用）
以下、本発明に係るスベリヒユ抽出物が有する血液レオロジー改善作用をもたらす（１）血小板凝集抑制作用（２）線溶系活性化作用（３）抗トロンビン作用（４）赤血球凝集抑制作用について試験を行った。
【００４１】
（試験例２−１：血小板凝集抑制作用）
＜実験方法＞
実施例１及び実施例２を用い、比較例２（陽性対照薬）としてインドメタシンを用いた。
実施例１、実施例２及び比較例２をＤＭＳＯ含有５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４，ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％）で溶解した。対照群はＤＭＳＯ含有トリス塩酸緩衝液（ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％）を使用した。
無麻酔下、ＪＷ系雄性ウサギの心臓から採血し、直ちに１／１０容量の３．８％クエン酸ナトリウムを加えて混和した。２２０×ｇ、１０分間、室温にて遠心分離し、上層の多血小板血漿（platelet rich plasma；ＰＲＰ）を得た。さらに、下層を８８０×ｇ、１５分間、室温にて遠心分離し、その上層の乏血小板血漿（platelet poor plasma；ＰＰＰ）を得た。
【００４２】
血小板凝集抑制試験は，Bornらの方法［Born,G.V.R.,Nature，第194巻，第927頁(1962年)］に準じて行った。すなわち、血小板濃度が２．５−３．５×１０５個/μＬになるようにＰＲＰをＰＰＰで希釈し、ＰＰＰを透過度１００％、ＰＲＰを透過度０％の標準値に設定した。キュベットにＰＲＰを２００μLずつ分注し、３７℃、２２０×ｇで３分間攪拌した後、実施例１、実施例２、比較例２をそれぞれ１１μL添加した。さらに、３７℃、３×ｇで３分間保温撹拌した後、凝集剤としてコラーゲン（最終濃度；５μｇ／ｍＬ）を１１μＬ添加した。そして、血小板凝集によって生じるＰＲＰの透過度の変化を、アグリゴメーターを用いて経時的に記録した。血小板凝集率は凝集剤添加時の最大凝集から算出した。
【００４３】
＜結果＞
結果を表２に示す。表中、各値は２〜４回実施したものを平均±Ｓ．Ｅ．で表し、＊は、対照群との有意差ｐが０．０５未満であったことを示し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
比較例２は、０．１ｍＭの濃度で有意な血小板凝集抑制作用を示した。これに対し、実施例１は５００μｇ／ｍＬの濃度で有意な血小板凝集抑制作用を示した。実施例２は、５００μｇ／ｍＬの濃度では溶解しなかったため、５０μｇ／ｍＬと２００μｇ／ｍＬの濃度で実験を行った。しかしながら実施例２の活性に濃度依存性が得られず、これは完全に溶解していない可能性があると考えられる。
【００４４】
【表２】
2009286722.tif 000003
【００４５】
（試験例２−２：抗トロンビン作用）
＜実験方法＞
実施例１、実施例２及び実施例３を用い、比較例３（陽性対照薬）としてヘパリンを用いた。
抗トロンビン試験は、フィブリノーゲン液のトロンビンによる凝固時間を指標に行った。すなわち、０．１５Ｍ ＮａＣｌ−０．０５Ｍ トリスアセテート緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した０．５％フィブリノーゲン液１．８ｍＬに、実施例１、実施例２、実施例３及び比較例３をそれぞれ０．１ｍＬ加えた。そして１分後に０．２Ｕ／ｍＬのトロンビン溶液０．１ｍＬを添加することにより凝固反応を惹起し、フィブロノーゲン液が凝固するまでの時間を測定した。尚、実施例１、実施例２、実施例３及び比較例３は、トリスアセテート緩衝液を用いて溶解した。また、対照群には、トリスアセテート緩衝液を使用した。
【００４６】
＜結果＞
結果を表３に示す。表中、各値は５回実施したものを平均±Ｓ．Ｅ．で表し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
比較例３は、１０Ｕｎｉｔ／ｍＬの濃度でフィブリノーゲン凝固時間の延長が認められた。実施例２及び実施例３は、濃度依存的にフィブリノーゲン凝固時間を延長し、５００μｇ／ｍｌにおいては比較例３よりもフィブリノーゲン凝固時間を延長させた。
【００４７】
【表３】
2009286722.tif 000004
【００４８】
（試験例２−３：線溶系活性化作用）
＜実験方法＞
実施例１、実施例２、実施例３を用い、比較例４（陽性対照薬）として硫酸デキストランを用いた。
実施例１、実施例２、実施例３及び比較例４を、ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ（ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％）で溶解した。対照群にはＤＭＳＯ含有ＰＢＳ（ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％）を用いた。
フィブリン平板をNoren [Noren I., Ramstrom G., Wallen P., Haemostasis., 4, 110-124 (1975). ]らの方法に準じて作成した。すなわち，５０℃の１%アガロース溶液に０．４％フィブリノーゲン液を等量混和し、この混合液１０ｍＬずつを試験管に分注した。直ちに１００Ｕ／ｍＬのトロンビン溶液０．１ｍＬを添加した後、シャーレ（９０×１５ｍｍ）に注ぎ、フィブリン平板を作成し、直径６ｍｍの穴を開けた。
【００４９】
実施例１、実施例２、実施例３及び比較例４が、ウロキナーゼによるプラスミノーゲンからプラスミンへの変換に及ぼす活性化作用は、Astrupらの方法に準じて測定した。すなわち、実施例１、実施例２、実施例３及び比較例４と１．２５Ｕ／ｍＬのウロキナーゼ溶液を等量混合したものをフィブリン平板の穴に２０μＬずつ分注し、３１℃、１４時間インキュベートした後、フィブリン溶解面積を測定した。
【００５０】
＜結果＞
結果を表４に示す。表中、各値は６回実施したものを平均±Ｓ．Ｅ．で表し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
比較例４は、２００μｇ／ｍＬの濃度で有意な線溶系活性化作用を示した。これに対し、実施例１、実施例２及び実施例３は、それぞれ２００及び５００μｇ／ｍＬの濃度で有意な線溶系活性化作用が認められた。
【００５１】
【表４】
2009286722.tif 000005
【００５２】
（試験例２−４：赤血球凝集抑制作用）
＜実験方法＞
実施例１及び実施例４を用いた。
まず、赤血球浮遊液の調製法を示す。ペントバルビタール麻酔下でウィスター系雄性ラット（２８０−３００ｇ）の後大静脈から採血し、１／１５容量の２５０Ｕ／ｍＬヘパリンを加え混和し、７００×ｇで１０分間遠心分離し、赤血球を分離した。得られた赤血球をリン酸緩衝液（ＰＢＳ、１３６．９ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、８．０ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、１．５ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ７．４）で２回洗浄し、ヘマトクリット値０．２５％の赤血球浮遊液を調製した。
【００５３】
赤血球凝集抑制試験はSobio [Sabio H., Levien M., Atkibson S., Thromb. Res., 29, 537-540 (1983). ]らの方法を用いて行った。すなわち、キュベットに赤血球浮遊液２００μＬを分注し、３７℃、３×ｇで３分間撹拌した後、実施例１及び実施例４をそれぞれ１１μＬ添加した。また、対照群において、１０％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳを使用した。３分後、凝集剤として０．０１％ポリブレン（ＰＢＳに溶解）１１μＬを注入し、赤血球凝集を惹起した。赤血球凝集による赤血球浮遊液の透過度の変化をアグリコメーター（NKK Hema tracer 1, NIKO Bioscience Inc.）を用いて経時的に１０分間記録した。赤血球の凝集率は赤血球浮遊液の透過度を０％、ＰＢＳの透過度を完全集合１００％として、凝集剤添加１０分後の凝集から算出した。
【００５４】
＜結果＞
結果を表５に示す。表中、各値は３回実施したものを平均±Ｓ．Ｅ．で表し、＊＊は、対照群との有意差ｐが０．０１未満であったことを示す。
実施例４には濃度依存的に赤血球凝集抑制作用が認められた。
【００５５】
【表５】
2009286722.tif 000006
【００５６】
＜考察＞
試験例２−１乃至２−４に記載する如く、実施例１（５０％エタノール抽出）、実施例２（９０％エタノール抽出）、実施例３（９９．５％エタノール抽出）、実施例４（熱水抽出）について、血小板凝集抑制作用、抗トロンビン作用、線溶系活性化作用、赤血球凝集抑制作用の試験を行った。
この結果、血小板凝集抑制作用については、実施例１及び２のうち特に実施例１が５００μｇ／ｍＬの濃度で有意な血小板凝集抑制作用を示した。
抗トロンビン作用については、実施例１乃至３のうち特に実施例２及び実施例３が、濃度依存的にフィブリノーゲン凝固時間を延長した。
線溶系活性化作用については、実施例１、実施例２及び実施例３の全てにおいて、それぞれ２００及び５００μｇ／ｍＬの濃度で有意な線溶系活性化作用が認められた。
赤血球凝集抑制作用については、実施例１及び４のうち実施例４に赤血球凝集抑制作用が認められた。
以上の如く、抽出する溶媒の種類（エタノール又は水）又はエタノールの濃度によって、これら効果が異なる。したがって、特に必要な作用効果に応じて溶媒及びその濃度を選択可能である。例えば、実施例１においては、血小板凝集抑制作用、綿溶系活性化作用が認められたことから、これらの作用に基づく血液レオロジー改善作用が得られる。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】実施例２の抽出過程を示す図である。
【図２】実施例２の分画１のＵＶスペクトルデータであり、（Ａ）は中性にした場合のスペクトルデータ、（Ｂ）は（Ａ）をアルカリ性にした場合のスペクトルデータを示す。
【図１】
2009286722.tif 000007
【図２】
2009286722.tif 000008