(57)【要約】  【課題】長い食経験をもつ紅麹から、優れた食後血糖値上昇抑制作用を有するα−グルコシダーゼ阻害物を製造する方法を得る。  【解決手段】蒸米をモナスカス属に属する糸状菌により培養して得た米紅麹を、４０℃以上の温水若しくは、熱水で抽出すること、モナスカス属に属する糸状菌が、モナスカス  ピローサス（Monascus pilosus）種であること、これを含有して成る飲食物。醸造食品の原料としてだけでなく、常法により、菌および酵素の失活物、乾燥物、乾燥粉砕物、粉末、顆粒物、水溶液、ペースト状物、抽出エキス、抽出エキス濃縮物、抽出エキスなどのごとき加工物として安全で広範囲の用途に用いることができる。  【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
米紅麹の水抽出物であるα−グルコシダーゼ阻害剤。
【請求項２】
蒸米をモナスカス属に属する糸状菌により培養して得た米紅麹を、４０℃以上の温水若しくは、熱水で抽出することを特徴とするα−グルコシダーゼ阻害剤の製造方法。
【請求項３】
モナスカス属に属する糸状菌が、モナスカス  ピローサス（Monascus pilosus）種であることを特徴とする請求項２に記載のα−グルコシダーゼ阻害剤の製造法。
【請求項４】
請求項１〜３に記載のα−グルコシダーゼ阻害剤を含有して成る飲食物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品、健康食品などに使用することができる阻害活性が強いα−グルコシダーゼ阻害剤及びその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
α−グルコシダーゼ阻害剤は、食事に含まれている炭水化物(糖質)を小腸でブドウ糖に分解する消化酵素であるα−グルコシダーゼの働きを抑え、食後血糖値の急激な上昇を抑制する作用を有する。
そのため過血糖症状及び過血糖に由来する肥満症、糖尿病などの疾患の改善に有用であり、α−グルコシダーゼ阻害剤を添加した食品は代謝異常の予防食としても適している。
【０００３】
一方、紅麹は穀類にモナスカス属の菌株を繁殖させた麹で、中国、台湾などでは紅酒、老酒、紅乳腐などの醸造原料として利用されており、また古来より生薬として「消食活血」「健脾燥胃」などの効果が知られている。
近年、血圧降下作用、コレステロール改善作用等、様々な機能を有することが科学的にも実証されつつあり、味噌、醤油、食酢等の醸造食品をはじめ、パン、麺類等、色々な食品に利用されている。最近ではサプリメント原料としての利用も拡大している。
【０００４】
血糖低下作用を有する麹については、例えば、特許文献１がある。
また、大豆発酵食品由来のα−グルコシダーゼ阻害剤としては、豆類又は穀類をアスペルギルス属の糸状菌を用いて固体培養し、得られた培養物を水で抽出したものが、特許文献２、および３に開示されている他、大豆を製麹原料とし、モナスカス属の菌株を用いて得られた大豆紅麹を用いたα−グルコシダーゼ阻害剤については特許文献４に開示されている。
【０００５】
【特許文献１】特公昭６０−４４９１４号公報
【特許文献２】特開２００１−１８６８７７号公報
【特許文献３】特開２００４−１６６６２８号公報
【特許文献４】特開２００６−２９６２５１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、製麹原料として米を特定し、モナスカス属の菌株を用いて固体培養して得られた米紅麹を原料とし、その抽出物にα−グルコシダーゼ阻害作用のあることについては知られていない。
【０００７】
本発明は、安全性が高く、医薬はもとより、健康食品、一般の食品への適用が可能であり、特に、強いα−グルコシダーゼ阻害活性を有するα−グルコシダーゼ阻害剤を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
即ち、本発明は、米紅麹の水抽出物にα−グルコシダーゼ阻害活性を有することを究明して成されたもので、以下の構成を特徴とする。
項１．米紅麹の水抽出物であるα−グルコシダーゼ阻害剤。
項２．蒸米をモナスカス属に属する糸状菌により培養して得た米紅麹を、４０℃以上の温水若しくは、熱水で抽出することを特徴とするα−グルコシダーゼ阻害剤の製造方法。
項３．モナスカス属に属する糸状菌が、モナスカス  ピローサス（Monascus pilosus）種であることを特徴とする請求項２に記載のα−グルコシダーゼ阻害剤の製造法。
項４．請求項１〜３に記載のα−グルコシダーゼ阻害剤を含有して成る飲食物。
【発明の効果】
【０００９】
製麹原料として米を用いた米紅麹は、他の製麹原料を使用した場合に比して食経験も豊富なため、α−グルコシダーゼ阻害剤として、実用性が高く有用である。
即ち、長年食されている食品成分を原料として使用しており、安全性の点で優れているので、これを利用し、様々な醸造食品や主食、飲料、健康食品など幅広い食品分野に展開でき、特に、食後血糖値の上昇抑制作用を有し、その結果、過血糖症状及び過血糖に起因する肥満症、脂肪過多症、過脂肪血症、糖尿病などの予防に有効で、健康人の疾病予防の新規な食材として好適である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明の原料に用いる米は白米（搗精米）でも玄米でもよく、破砕米のような形状も含む。また原産地、品種は特に限定されない。
培養に用いる紅麹菌は、モナスカス(Monascus)属に属する糸状菌であればいずれの菌であってもよいが、食品用としてモナスカス  パープレウス(Monascus  purpureus)、モナスカス  ピローサス(Monascus  pilosus)、モナスカス  ルーバー（Monascus ruber）やそれらの変種、変異株が挙げられる。特に、食用としての実績があり、風味、外観等に優れるモナスカス  ピローサス（Monascus pilosus）が好適に用いられる。これらの紅麹菌は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。
製麹条件としては、培地の水分率を３５〜６０％、好ましくは、４５〜５５％、温度を２０〜３７℃、好ましくは、２５〜３５℃、培養日数を５〜３０日、好ましくは、７〜１４日間として培養する。
【００１１】
水抽出条件としては、以下の要件を必要とする。
１．抽出する水の温度は４０℃以上とすれば良いが、好ましくは５０℃以上、特に好ましくは８０℃以上とする。
即ち、温度が高いほどより高濃度のα−グルコシダーゼ阻害剤を得ることができる。
２．抽出する水の量は、米紅麹の１〜３０倍重量を加えれば良いが、好ましくは２〜１５倍重量とする。
３．抽出時間は、４０℃程度の抽出温度では６〜２４時間、５０℃を超えると２〜６時間程度とする。
４．抽出法としては特に制限はないが、通常撹拌抽出を用いる。得られた抽出物は濾過、遠心分離等により固形分を取り除いた後、濃縮乾固、フリーズドライ、スプレードライ等の方法で粉末化するのが好ましい。
【００１２】
以上のようにして得られたα−グルコシダーゼ阻害剤は、麹の利用法として公知の全ての用途に利用でき、醸造食品の原料としてだけでなく、常法により、菌および酵素の失活物、乾燥物、乾燥粉砕物、粉末、顆粒物、水溶液、ペースト状物、抽出エキス、抽出エキス濃縮物、抽出エキスなどのごとき加工物として用いることができる。
具体的には、ジュース、清涼飲料、健康ドリンク、菓子類、パン、シリアル、アイスクリーム、お茶、ふりかけ、麺類、各種惣菜、納豆や豆腐、食用油、味噌や日本酒など醸造食品、醤油などの各種調味料、マヨネーズやマーガリンなどの乳製品、ソーセージなどの魚肉類ねり製品、カプセル化食品、錠剤、サプリメント等、いろいろな飲食物の原料、或いは、添加物として好適に用いることができる。
また、特定保健用食品や栄養補助食品等の場合であれば、錠剤、粉末、顆粒、カプセル、トローチ、シロップ、液体等の形態のものであってもよい。これらの中で好適なものとして、錠剤、粉末、顆粒、カプセル、液体等を挙げることができる。
【００１３】
本発明のα−グルコシダーゼ阻害剤の摂取量については、食品形態や年齢、体重等により異なるが、例えば、成人１日当たりの摂取量として、本α−グルコシダーゼ阻害剤乾燥粉末として、０．１〜２０ｇに相当する量を挙げることができる。
摂取方法としては、当該量をそのまま、或いは、紅麹、若しくはその加工物として、或いは、食品、飲料等に添加して摂取することができる。
【００１４】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
なお、実施例におけるα-グルコシダーゼ阻害活性は以下の方法により求めた。
１．α-グルコシダーゼ
ラット小腸由来のα-グルコシダーゼ(SIGMA社製)を用いた。
２．測定原理
α-グルコシダーゼ活性は、p-nitrophenyl-α-D-glucopyranosideの加水分解で生成されたp-nitrophenolの量を測定した。
３．酵素反応
（１）試料溶液（５０μｌ）
被験物を０．２５Ｍリン酸緩衝液に溶解した。
（２）緩衝液  (３００μｌ)
０．２５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を用いた。
（３）基質溶液  (１００μｌ)
１．４ｍＭのp-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside溶液（０．２５Ｍりん酸緩衝液に溶解）を用いた。
（４）酵素溶液（５０μｌ）
α―グルコシダーゼ酵素液（０．１Ｍマレイン酸バッファー（ｐＨ６．５）に溶解）を用いた。
（５）反応停止液  （１０００μｌ）
０．２Ｍ炭酸ナトリウム溶液を用いた。
（６）操作法
試料溶液５０μｌに緩衝液３００μｌ、基質溶液１００μｌを加えた後、酵素溶液５０μｌを加えて３７℃で１０分間反応させた。反応停止溶液を１０００μｌ加えて反応を終了させた後、生成されたp-nitrophenolの量を４００ｎｍの吸光度から算出した。対照には、試料溶液の代わりに０．２５Ｍリン酸緩衝液を用いた。なお、それぞれのブランクとしては、反応停止溶液を加えたものを用いた。
（７）α-グルコシダーゼ阻害活性の算出方法
阻害活性率（％）＝[(  (Ａ−Ｂ)−(Ｃ−Ｄ)  ／ (Ａ−Ｂ)  )  ]×１００
Ａ：対照溶液の吸光度
Ｂ：対照溶液のブランクの吸光度
Ｃ：試料溶液の吸光度
Ｄ：試料溶液ブランクの吸光度
【実施例１】
【００１５】
白米を９０分間水に浸漬し、４５分間水切りした後、オートクレーブで      １２５℃、３０分間加圧蒸気滅菌した。これに、Monascus pilosus を植菌し、培地の水分率４５〜６０％、温度２５〜３０℃の製麹条件で１０日間培養して米紅麹を得た。
こうして得た米紅麹１００ｇに１５倍容量の水を加え、５０℃まで昇温し、時々撹拌しながら２時間抽出した。得られた抽出液を遠心分離、濾過後、凍結乾燥によって目的のα-グルコシダーゼ活性阻害物を得た。こうして得た抽出物を粉砕し、０．２ｇ/ｍｌを希釈倍率１の試料溶液とし、希釈倍率１２８倍まで５段階の希釈溶液を作製し、α-グルコシダーゼ活性阻害率を測定、近似直線からＩＣ５０（阻害率５０％の試料濃度）を算出した。
ＩＣ５０値が低いほど阻害活性は強いことを示す。
（比較例１）
【００１６】
実施例１の製麹で得た米紅麹物粉砕物０．２ｇ/ｍｌ（抽出操作を加えない米紅麹そのもの）を希釈倍率１の試料溶液とし、希釈倍率１２８倍まで５段階の希釈溶液を作製し、α-グルコシダーゼ活性阻害率を測定、近似直線からＩＣ５０（阻害率５０％の試料濃度）を算出した。
（比較例２）
【００１７】
乾燥大豆を９０分間水に浸漬し、４５分間水切りした後、オートクレーブで１２５℃、３０分間加圧蒸気滅菌した。これに、Monascus pilosus を植菌し、培地の水分率４５〜５５％、温度２５〜３０℃の製麹条件で１４日間培養して大豆紅麹を得た。こうして得た大豆紅麹１００ｇに１５倍容量の水を加え、５０℃まで昇温し、時々撹拌しながら２時間抽出した。得られた抽出液を遠心分離、濾過後、凍結乾燥によって目的のα-グルコシダーゼ活性阻害物を得た。こうして得た抽出物を粉砕し、０．２ｇ/ｍｌを希釈倍率１の試料溶液とし、希釈倍率１２８倍まで５段階の希釈溶液を作製し、α-グルコシダーゼ活性阻害率を測定、近似直線からＩＣ５０（阻害率５０％の試料濃度）を算出した。
得られた結果を表１に示す。
この結果から、本発明抽出物は、比較例１，２に比べ、極めて高いα−グルコシダーゼ阻害活性を有することが確認された。
【００１８】
【表１】
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【実施例２】
【００１９】
白米を９０分間水に浸漬し、４５分間水切りした後、オートクレーブで      １２５℃、３０分間加圧蒸気滅菌した。これに、Monascus pilosus を植菌し、培地の水分率４５〜６０％、温度２５〜３０℃の製麹条件で１０日間培養して米紅麹を得た。こうして得た米紅麹５０ｇに１５倍容量の水を加え、４０℃、５０℃、７０℃、９０℃まで昇温し、時々撹拌しながら４０℃および５０℃の場合は２時間、６時間、２４時間の抽出条件で、また７０℃および９０℃の場合は２時間、６時間、１０時間の抽出条件で抽出した。得られた抽出液を遠心分離、濾過後、凍結乾燥によって目的のα-グルコシダーゼ活性阻害物を得た。こうして得た抽出物を粉砕し、０．２ｇ/ｍｌを希釈倍率１の試料溶液とし、希釈倍率１２８倍まで５段階の希釈溶液を作製し、α-グルコシダーゼ活性阻害率を測定、近似直線からＩＣ５０（阻害率５０％の試料濃度）を算出した。
得られた結果を表２に示す。
この結果から、抽出温度が高くなるほどα−グルコシダーゼ阻害活性の高い抽出物が得られ、抽出時間も短時間であるほど好ましいとの結果が得られた。
【００２０】
【表２】
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【産業上の利用可能性】
【００２１】
本発明のα−グルコシダーゼ阻害剤は、食後血糖値上昇抑制作用を有するα−グルコシダーゼ阻害物を含み、よって、これを目的とした用途に広汎に、且つ好適に用いることができるものである。