(57)【要約】【課題】プレートが偏心してプレートと光学ユニットとの位置ずれが生じた場合でも、測定流路の開始点から終了点までの間の測定値の誤差を抑えることができる生体サンプル検出装置を提供する。【解決手段】電気泳動流路が形成されたプレートと、前記電気泳動流路に充填された蛍光物質と、前記電気泳動流路内の蛍光物質を走査するための光学ユニットと、前記光学ユニットにより検出された蛍光値を測定する蛍光値測定手段と、前記測定された蛍光値から補正プロファイルを算出するための補正プロファイル演算部と、前記電気泳動流路内を電気泳動する生体サンプルの蛍光値を前記補正プロファイルに従い補正するサンプル補正手段と、を備えた生体サンプル分析装置。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
電気泳動流路が形成されたプレートと、
前記電気泳動流路に充填された蛍光物質と、
前記電気泳動流路内の蛍光物質を走査するための光学ユニットと、
前記光学ユニットにより検出された蛍光値を測定する蛍光値測定手段と、
前記測定された蛍光値から補正プロファイルを算出するための補正プロファイル演算部と、
前記電気泳動流路内を電気泳動する生体サンプルの蛍光値を前記補正プロファイルに従い補正するサンプル補正手段と、を備えた生体サンプル分析装置。
【請求項２】
前記生体サンプルは、消光物質で修飾されている請求項１に記載の生体サンプル分析装置。
【請求項３】
前記生体サンプル分析装置は、前記プレートを回転させるための回転手段をさらに備え、
前記光学ユニットは前記回転手段による前記プレートの回転を利用して前記電気泳動流路の走査を行うように配置されている請求項１に記載の生体サンプル分析装置。
【請求項４】
前記電気泳動流路は、前記プレートの回転軌跡に対して同心円上に配置されるように形成されている請求項１に記載の生体サンプル分析装置。
【請求項５】
前記補正プロファイル演算部は、前記蛍光物質が前記電気泳動流路に充填されたときに、前記電気泳動流路の位置毎に前記蛍光物質の蛍光強度を測定し、その最大値を基準として前記電気泳動流路の位置毎の蛍光強度割合を算出し、前記電気泳動流路の位置とそれに対応する蛍光強度割合を記憶して補正プロファイルとする請求項１に記載の生体サンプル分析装置。
【請求項６】
前記サンプル補正手段は、前記電気泳動流路の位置毎の測定された電気泳動中の前記生体サンプルの蛍光値と前記気泳動流路の位置に対応する前記補正プロファイルの蛍光強度割合とを除算し、その商を前記生体サンプル蛍光値と補正する請求項５に記載の生体サンプル分析装置。
【請求項７】
前記生体サンプル分析装置は、前記生体サンプルを電気泳動するための電気泳動制御手段と前記電気泳動流路の電極に所定の電圧を与える電圧印加部とをさらに備え、前記電気泳動制御手段は、前記補正プロファイル演算部により前記補正プロファイルが算出された後に前記生体サンプルを電気泳動させる請求項１に記載の生体サンプル分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、核酸、タンパク質、酵素等の生体サンプルを緩衝液中で移動させて得られる輸送反応を検出して、生体サンプルを検出する生体サンプル分析装置に関し、より詳細には、生体サンプルを保持する流路を支持するプレートが着脱可能である構成において、流路の位置ずれを測定し生体サンプルの蛍光値を補正することにより、生体サンプルをより定量性高く検出する生体サンプル分析装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、核酸、タンパク質、酵素等の生体サンプルを検出する手法として、蛍光反応を利用する蛍光検出法が採用されてきた。既存の光源や受光素子等の光学部品を組み合わせて、ラジオアイソトープを使わず、安全、安価に生体サンプルの測定が可能であることから、蛍光検出法は酵素免疫測定、電気泳動、共焦点走査型蛍光顕微鏡法などさまざまな生体サンプルの検出に応用されている。
【０００３】
蛍光検出法は、励起光を照射することで蛍光物質を修飾した生体サンプルから発せられる蛍光信号を検出する方法である。蛍光物質は、例えばＦＩＴＣは波長４９５ｎｍの励起光に対して、波長５２０ｎｍの蛍光を発する物質である。蛍光を発する物質を検出するためには、励起波長を有する光と、蛍光波長を検出する受光部の組み合わせで測定される。これらを実用化するために、落射式と呼ばれている蛍光測定方法が知られている。これは励起光を生体サンプル上方から照射し、励起光によって起こる蛍光反応の変化を、励起光照射側に配置した受光素子で検出するものである。蛍光を発する物質と、それに対応した励起光と受光素子を利用することで、様々な蛍光物質や蛍光標識した生体サンプルを検出できるようになる。
【０００４】
蛍光検出を行う場合、生体サンプルを支持するための基板やセル、流路などの基板が用いられるが、近年、樹脂製のプレートに微細な流路を形成したものを用いて検出を行う装置が出てきた。この装置では、流路内に蛍光物質が修飾された生体サンプルと緩衝液を充填した後、緩衝液に所定の電位勾配をかけて生体サンプルを電気泳動させ、泳動中の生体サンプルに励起光を照射して蛍光の強度分布を検出することにより、生体サンプルの泳動状態を観察する方式が見られる（例えば、特許文献１参照。）。
【特許文献１】特表２００５−０６４３３９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら前記従来の構成では、生体サンプルがプレート内の測定流路に注入され電気泳動する時に、測定流路に励起光を照射しながらプレートを回動させ走査する必要がある。この時には、測定流路の開始点から終了点までの間、検出器は測定流路の中心をトレースしなければならない。ところが、プレートの着脱によるアソビやプレートの成型誤差のため、流路と検出器との相対位置にばらつきが生じる。そのため、測定流路の中心を検出器がトレースできず、測定流路の開始点から終了点までの間の測定値に誤差が生ずるといという課題を有していた。
【０００６】
本発明は、前記従来の課題を解決するもので、プレートが偏心してプレートと光学ユニットとの位置ずれが生じた場合でも、測定流路の開始点から終了点までの間の測定値の誤差を抑えることができる生体サンプル検出装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記従来の課題を解決するために、本発明の生体サンプル分析装置は、電気泳動流路が形成されたプレートと、前記電気泳動流路に充填された蛍光物質と、前記電気泳動流路内の蛍光物質を走査するための光学ユニットと、前記光学ユニットにより検出された蛍光値を測定する蛍光値測定手段と、前記測定された蛍光値から補正プロファイルを算出するための補正プロファイル演算部と、前記電気泳動流路内を電気泳動する生体サンプルの蛍光値を前記補正プロファイルに従い補正するサンプル補正手段と、を備えることを特徴としたものである。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の生体サンプル検出装置によれば、流路を支持するプレートに充填された蛍光物質を含有した溶液を励起することにより得られた蛍光値を元に、流路と検出部の位置ずれの補正プロファイルを算出し、流路内に電気泳動された生体サンプルの蛍光値を補正することで、測定値の定量性を確保できる生体サンプル測定装置を提供することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下に、本発明の生体サンプル分析装置の実施の形態を図面とともに詳細に説明する。
【００１０】
（実施の形態１）
図１は、本発明の実施の形態１における生体サンプル分析装置のブロック図である。
【００１１】
本実施の形態にかかる生体サンプル分析装置は、蛍光物質や生体サンプルをプレート１０１に形成された流路に遠心力により充填させるためのステッピングモータ１０２とそれを制御する回転手段１０３を持つ。プレートを基準位置で停止させるために、プレートには、基準位置マーカー１１３を備え、基準位置マーカー１１３を検出する基準位置検出器１１４を備える。ステッピングモータ１０２によってプレート１０１を回転させながら充填された蛍光物質を励起し、蛍光物質から発せられる蛍光を受光する光学ユニット１０４を備える。そして、蛍光強度を電気信号に変換するサンプル蛍光値測定手段１０５と、補正プロファイルを作成する補正プロファイル演算部１０６を備える。また、回転手段１０３によるプレートの遠心力によって生体サンプルが定量添加された後、プレート１０１内の流路に対して電圧印加を行うための正電極１０７と負電極１０８と電源１０９を持ち、これらを制御する電気泳動手段１１０を備える。ステッピングモータ１０２によってプレート１０１を回転させながらサンプル蛍光値測定手段１０５により電気泳動を行った流路中を生体サンプルが泳動する様を走査し、補正プロファイルを用いて、測定されたサンプル蛍光値を補正するサンプル補正手段１１１を備える。また、これらの動作手順を管理するシステム制御部１１２を備える。光学ユニット１０４は、例えば、光源として波長４９５ｎｍのレーザーダイオードと、受光部としてフォトダイオードを備え、蛍光を受光する機能を持っているものであればよい。
【００１２】
次に、図２を用いてプレートの詳細を説明する。図２（ａ）は、本実施の形態におけるプレートを流路形成面から見た図である。プレートの材料はアクリル系の樹脂であり、厚みは２ｍｍである。流路形成面には深さ５０μｍの流路やリザーバーとなる溝が掘られ、さらにその上面にアクリル製フィルムを接着することで密閉流路が形成されている。またプレートの重心にはプレートを固定するための穴２０１が設けられている。本図では、８つの流路パターンが形成されている。プレートを回転させると遠心力により、これら流路に予め注入されている蛍光物質や生体サンプルを充填、定量を行い、また測定流路に沿って光学ユニットにより生体サンプルの蛍光検出を行う。
【００１３】
図２（ｂ）は、図２（ａ）に示すプレート内に形成された一つの流路パターンの詳細形状を示した図である。サンプル注入部２０２、緩衝剤注入部２０３、サンプルチャンバー部２０４、サンプル保持部２０５、及びバッファ部２０６は非貫通穴であり、サンプル注入口２０８と緩衝剤注入口２０９は流路形成面の裏側である試料注入面から各試料が注入できるように一部貫通している。さらに、負電極部２１０と正電極部２１１も試料注入面から電圧が印加できるように貫通穴になっている。
【００１４】
正電極部２１１は電気泳動用正電圧の印加部であり、負電極部２１０は電気泳動用負電極の印加部である。これらは測定流路２１２を介して接続されており、さらには、流路２１３、流路２１４により緩衝剤注入部２０３ともそれぞれ接続されている。この測定流路２１２は、それぞれの流路パターン毎に１つ設けられており、図１に示すように同一円周上に配置するように形成されている。サンプルチャンバー部２０４は、流路２１５によりサンプル注入部２０２と接続されている。また、サンプル保持部２０５は、流路２１６と流路２１７によりサンプルチャンバー部２０４と接続されている。バッファ部２０６は、流路２１６、流路２１７、流路２１８によりサンプルチャンバー部２０４、サンプル保持部２０５とそれぞれ接続されており、さらに、流路２１９によってバッファ部２０６の空気抜きが可能となる。サンプル定量部２２０は測定流路２１２と流路２１８の合流部分に設けられており、生体サンプルを定量する所である。
【００１５】
次に、図３を用いて、測定流路を走査する様子を説明する。図３（ａ）は、図２（ａ）に示すプレート内に形成された一つの測定流路を流路形成面から見た図であり、図３（ｂ）は、測定流路に蛍光物質が泳動する様を走査した時の蛍光強度を示すグラフである。グラフ中の点線は測定流路の中心をトレースした時の蛍光強度データであり、実線は測定流路の中心をトレースできなかった時の蛍光強度データである。
【００１６】
走査時には、測定流路の開始点３０１から終了点３０２まで、光学ユニットは点線３０３のように測定流路の中心をトレースしなければならない。ところが、プレートの着脱による遊びやプレートのロット間で成型誤差が発生するため、測定流路と光学ユニットの相対位置がばらついてしまう。そのため、実線３０４のように測定流路の中心を光学ユニットがトレースできず、光学ユニットの測定位置が流路中心より離れるに従って生体サンプルから発せられる蛍光強度が低下し、その結果、蛍光強度データ３０６のように蛍光強度データ３０５に対して検出感度が低下してしまう。
【００１７】
次に、基準位置検出器の構成について図４を用いて説明する。基準位置マーカー１１３は、プレート１０１上の測定流路２１２が配置されている同心円上に１個設けられている。基準位置マーカー１１３は光学的反射材で出来ているので、光源から光を照射することで、基準位置マーカー１１３の通過を反射型フォトセンサ４０１で検知する。反射型フォトセンサ４０１と光学ユニットとの位置は、予め定められている。サンプル蛍光値測定手段１０５から回転手段１０３に対して基準位置検出命令が送られると、回転手段１０３はステッピングモータ１０２へパルスを出力し、プレート１０１を回転させながら、反射型フォトセンサ４０１で基準位置マーカー１１３の通過を検知する。反射型フォトセンサ４０１からの立下り信号を回転手段１０３が受け取ると、ステッピングモータ１０２へのパルス出力を停止しステッピングモータ１０２を停止する。これにより、プレート１０１は、正確に光学ユニットに対して一定の位置関係で停止する。
【００１８】
次に、サンプル蛍光値測定手段について図５を用いて説明する。サンプル蛍光値測定手段１０５にシステム制御部１１２から開始命令が送られると、まず、サンプル蛍光値測定制御部５０１は回転手段１０３に対して基準位置検出命令を送り、ステッピングモータ１０２を回転させプレートを基準位置で停止させる。次に、制御手段５０１は光学ユニット１０４に対して、光源５０２から励起光を照射する命令を送る。その後、回転手段１０３に対してステッピングモータ１０２を回転させる命令を送る。パルスカウント部５０３は、回転手段１０３からのモータ駆動パルス信号を入力しそのパルス数をカウントする。パルスカウント部５０３は、カウントしたパルス数を予め設定したサンプリング間隔で除算した剰余が０になる度にＡＤ変換器５０４に対してＡＤ変換命令を送る。ＡＤ変換器５０４は、ＡＤ変換命令を受け取ると光学ユニット１０４のフォトダイオード５０５からの蛍光強度信号をＡＤ変換し、その時のパルス数とＡＤ変換された蛍光強度とをシステム制御部１１２内の蛍光値測定データ５０６に出力する。この動作は、蛍光強度データを取得する度に行われるので、蛍光値測定データ５０６にはパルス数と蛍光強度のデータが追加して記憶される。
【００１９】
本実施例の生体サンプル測定装置では、１２８００パルスを与えたとき１回転するステッピングモータを使用した。また、本実施例でのプレートに対する光学ユニットの位置アドレスは、０から１２７９９までの値で変化し、一つの位置アドレスは約０．０２８度（測定流路円周上の距離で約０．０１７ｍｍ）に相当する。さらに、本実施例では、プレート１０１の中心から半径３５ｍｍの同心円状に測定流路２１２を８個配置し、各測定流路の流路長を２０ｍｍ、測定流路同士の間隔を７．５ｍｍ、基準位置マーカーと最初の測定流路との距離を３．５ｍｍとした。そのため、本実施例では、基準位置マーカーから最初に出会う測定流路までの位置アドレスは２０４カウント、この測定流路の最後の位置アドレスは１３６８カウントとなる。このように、プレート上にある８つの測定流路の開始位置アドレスと終了位置アドレスを予め計算してシステム制御部１１２内部のアドレステーブル５０７に記憶しておく。
【００２０】
次に、補正プロファイル演算部の構成について図６を用いて説明する。補正プロファイル演算部１０６は、補正プロファイルの演算を行う演算部６０１と演算部６０１およびデータを制御する補正プロファイル演算制御部６０２で構成される。蛍光物質を注入するための注入部に蛍光物質が注入され、プレートの回転により蛍光物質が、測定流路に充填された後、サンプル蛍光値測定手段により流路内の蛍光物質の蛍光強度を測定する。この蛍光強度データをシステム制御部１１２内へ蛍光値測定データ５０６に補正プロファイル作成用データとして保存する。システム制御部１１２より補正プロファイル演算命令が送られると、補正プロファイル演算制御部６０２は、予め補正プロファイル作成用に測定された蛍光値測定データ５０６と予め計算されたアドレステーブル５０７をシステム制御部１１２より取得し、演算部６０１に対して蛍光値測定データ５０６とアドレステーブル５０７と共に演算開始命令を送る。演算部６０１は、取得した蛍光値測定データ５０６のパルス数すなわち位置アドレスと蛍光強度のデータをアドレステーブル５０７と対比し、各測定流路毎の蛍光強度に分割しそれぞれの測定流路の蛍光強度の最大値を１００％とし各位置アドレスの蛍光強度の割合（蛍光強度割合）を計算する。計算された補正プロファイル６０３は補正プロファイル演算制御部を介してシステム制御部１１２内部の補正プロファイル６０３に記憶される。
【００２１】
補正プロファイル作成のための蛍光強度を測定するサンプリング間隔は、後に生体サンプル蛍光値を補正するために使用するため、生体サンプル走査時のサンプリング間隔と同じでなければならない。
【００２２】
本発明では、補正プロファイルを取得した後で電気泳動流路に生体サンプルを電気泳動させる必要がある。そのために必要な電気泳動制御手段の構成と動作について以下に詳細に説明する。
【００２３】
補正プロファイルが作成された後、生体サンプルを注入する注入部に消光物質が修飾された生体サンプルを注入してプレートの回転によりサンプル保持部に定量充填する。その後、プレートを基準位置まで回転させ、プレート上の正電極および負電極を電源に接続し、所定の時間電圧を印加して測定流路内の生体サンプルを電気泳動させ、電圧印加を停止した後、サンプル蛍光値測定手段により、測定流路を走査する。この電圧印加、測定流路走査を複数回繰り返すことにより、生体サンプルの泳動する様を逐次検出することができる。
【００２４】
次に、本発明のサンプル補正手段について図７と図８とを用いて説明する。サンプル補正手段１１１は、生体サンプルの蛍光値を補正するサンプル補正部７０１とサンプル補正部７０１およびデータを制御するサンプル補正制御部７０２で構成される。電気泳動後の測定流路走査により蛍光値測定データ５０６を取得した後、システム制御部よりサンプル補正手段１１１に対して生体サンプル蛍光値補正命令が送られると、サンプル補正制御部７０２は予め測定された蛍光値測定データ５０６とアドレステーブル５０７と補正プロファイル６０３をシステム制御部１１２より取得し、サンプル補正部７０１に対して蛍光値測定データ５０６とアドレステーブル５０７と補正プロファイル６０３と共にサンプル補正開始命令を送る。サンプル補正部８０１は、取得した蛍光値測定データ５０６を補正プロファイル６０３を基に補正を行う。補正された蛍光値補正データ７０３はサンプル補正制御部を介してシステム制御部１１２に記憶される。
【００２５】
ここで、生体サンプルの蛍光値を補正する方法ついて詳細に説明する。図８のグラフは、プレート内に形成されたある一つの流路パターンの測定流路での位置アドレスと蛍光強度を示している。図８（ａ）は、補正プロファイル作成のために測定した蛍光値測定データで、図８（ｂ）は、生体サンプルが電気泳動される様を走査して得られた蛍光値測定データである。
【００２６】
電気泳動により取得された蛍光値測定データ図８（ｂ）は、予め設定されたアドレス毎に蛍光強度が求められている。その後、蛍光強度データを補正プロファイル作成のために測定された蛍光値測定データ図８（ａ）から作成された補正プロファイルを参照して、蛍光値測定データ図８（ｂ）は補正され、補正後の蛍光値測定データ図８（ｃ）が算出される。例えば、補正プロファイル中のある位置アドレスでの蛍光強度が９５％であれば、補正された蛍光強度は、蛍光強度（補正）  ＝  蛍光強度（測定時）  ／  ０．９５  となる。この計算を各測定流路の蛍光強度を取得したすべての位置アドレスに対して行うと、図８（ｃ）に示した補正後の蛍光値測定データが得られる。
【００２７】
ここで得られた蛍光値測定データは、通常の蛍光スペクトルと逆転しているので、見やすくするために補正後波形から補正プロファイル作成用データの最大値から減算し、ベースライン変換波形図８（ｄ）を算出する。
【００２８】
以下、従来の技術と本発明との効果の比較を行うために、次のような実験を行った。まず、従来の構成の条件として、生体サンプルは蛍光物質としてＦＡＭを修飾したサンプルＤＮＡ５０ｎＭを、９０％ホルムアミド、水１０％の溶媒に溶かし、泳動バッファとして、サンプルＤＮＡに相補的な配列をもつアミノ化ＤＮＡに電気非泳動物質のＰＥＧ（分子量５００ｋ）を修飾し、濃度３．５％となるよう５０ｍＭのＴＢＥに溶かしたものを使用した。これらを、プレートに充填定量した後、２００Ｖの電圧を１２０秒間印加し、光学ユニットにより測定流路を走査した。サンプル蛍光値測定のサンプリング間隔は、６（測定流路円周上の距離で約０．１０２ｍｍ）とした。プレートは、回転軸穴に位置ズレのないものと、本来の回転軸に対して４００μｍの偏心が発生しているものを使用した。
【００２９】
次に、本発明の構成の条件として、生体サンプルは消光物質としてＴＡＭＲＡを修飾したサンプルＤＮＡ５０ｎＭを、９０％ホルムアミド、水１０％の溶媒に溶かし、泳動バッファとして、サンプルＤＮＡに相補的な配列を持つアミノ化ＤＮＡに電気非泳動物質のＰＥＧ（分子量５００ｋ）と蛍光物質ＦＡＭを修飾し、濃度３．５％となるよう５０ｍＭのＴＢＥに溶かしたものを使用した。泳動バッファを充填した後、補正プロファイルを作成し、その後の電気泳動及び走査は上記の実験条件と同様の手順で行った。結果を図９に示す。
【００３０】
図９（ａ）は従来の構成での測定の結果を示し、波形９０１は偏心のないプレートでの蛍光強度で、波形９０２は偏心しているプレートでの蛍光強度を示す。図９（ｂ）は本発明の構成での測定の結果を示し、波形９０３は偏心のないプレートでの蛍光強度で、波形９０４は偏心しているプレートでの蛍光強度を示す。表１にこれらの波形のピーク部分（点線枠で囲んだ部分）の面積を比較した結果を示す。
【００３１】
【表１】
2009168486.tif 000003
【００３２】
この結果、従来の構成での測定では、偏心のないプレートの出力波形９０１の面積に対して、偏心しているプレートの出力波形９０２は３５．１％の差異が見られた。そして、本発明の構成での測定では、偏心のないプレートの出力波形９０３の面積に対して、偏心しているプレートの出力波形９０４は２．５％の差異まで抑えることができた。
【産業上の利用可能性】
【００３３】
本発明にかかる生体サンプル測定装置は、流路を支持するプレートに充填された蛍光物質を含有した溶液を励起することにより得られた蛍光値を元に、流路と検出部の位置ずれの補正プロファイルを算出し、流路内に電気泳動された生体サンプルの蛍光値を補正することで、測定値の定量性を確保できる生体サンプル測定装置を提供することができるようにするものとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置のブロック図
【図２】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置のプレートの図
【図３】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置の測定流路の図
【図４】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置の基準位置検出器の構成図
【図５】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置のサンプル蛍光値測定手段の構成図
【図６】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置の補正プロファイル演算部の構成図
【図７】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置のサンプル補正手段の概略図
【図８】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置のサンプル補正手段の構成図
【図９】本発明の実施の形態における生体サンプル分析装置の実験結果を示すグラフ
【符号の説明】
【００３５】
１０１  プレート
１０２  ステッピングモータ
１０３  回転手段
１０４  光学ユニット
１０５  サンプル蛍光値測定手段
１０６  補正プロファイル演算部
１０７  正電極
１０８  負電極
１０９  電源
１１０  電気泳動手段
１１１  サンプル補正手段
１１２  システム制御部
１１３  基準位置マーカー
１１４  基準位置検出器
２０１  穴
２０２  サンプル注入部
２０３  緩衝剤注入部
２０４  サンプルチャンバー部
２０５  サンプル保持部
２０６  バッファ部
２０８  サンプル注入口
２０９  緩衝剤注入口
２１０  負電極部
２１１  正電極部
２１２  測定流路
２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９  流路
２２０  サンプル定量部
３０１  開始点
３０２  終了点
３０３  点線
３０４  実線
３０５、３０６  蛍光強度データ
４０１  反射型フォトセンサ
５０１  サンプル蛍光値測定制御部
５０２  光源
５０３  パルスカウント部
５０４  ＡＤ変換器
５０５  フォトダイオード
５０６  蛍光値測定データ
５０７  アドレステーブル
６０１  演算部
６０２  補正プロファイル演算制御部
６０３  補正プロファイル
７０１  サンプル補正部
７０２  サンプル補正制御部
７０３  蛍光値補正データ
９０１  波形（従来測定偏心なし）
９０２  波形（従来測定偏心あり）
９０３  波形（本発明測定偏心なし）
９０４  波形（本発明測定偏心あり）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2009168486.tif 000010
【図８】
2009168486.tif 000011
【図９】
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