(57)【要約】【課題】  指示物質を含む希釈用水溶液を生物学的試料と混合し、混合前と混合後の前記指示物質の吸光度を比較することにより、生物学的試料の希釈度を導出する方法において、指示物質が生物学的試料の影響により光吸収特性が変化することから、高精度に希釈度を導出することができなかった。【解決手段】  あらかじめ希釈用水溶液中に、生物学的試料による指示物質の変化に近い、または一致する光吸収特性変化を及ぼす物質を含有させることにより、生物学的試料による希釈用水溶液中の指示物質の変化を低減、または無くすることで、高精度に生物学的試料に希釈度を導出することができる。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的試料を希釈し、その希釈度を導出するための指示物質を含む水溶液であって、該水溶液中の指示物質の光学的性質を変化させる物質を含む、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項２】
請求項１に記載の希釈用水溶液において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項３】
請求項２に記載の希釈用水溶液において、
前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項４】
請求項２に記載の希釈用水溶液において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項５】
請求項２に記載の希釈用水溶液において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項６】
請求項２のいずれかに記載の希釈用水溶液において、
前記前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項７】
請求項６に記載の希釈用水溶液において、
前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項８】
請求項１に記載の希釈用水溶液において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項９】
請求項１に記載の希釈用水溶液において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項１０】
請求項９に記載の希釈用水溶液において、
前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項１１】
請求項１ないし請求項１０のいずれかに記載の希釈用水溶液において、
前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択されるものである、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項１２】
請求項１１に記載の希釈用水溶液において、
前記指示物質が、黒色４０１号である、
ことを特徴とする希釈用水溶液。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の水溶液が、測定キット用の専用容器に収容されている、
ことを特徴とする測定キット。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれかに記載の水溶液が、固形状態に加工される、
ことを特徴とする試薬。
【請求項１５】
指示物質を含有する希釈用水溶液と生物学的試料を混合し、混合前と混合後の前記指示物質の光学的性質を比較することにより、前記生物学的試料の希釈度を導出する方法において、
前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液中に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、
ことを特徴とする生物学的試料の希釈度導出方法。
【請求項１６】
指示物質を含有する希釈用水溶液と、定量すべき成分を含有する生物学的試料とを含んだ定量用試料を調整する工程と、
同一波長の光源を用いて測定された、前記希釈用水溶液に含有される指示物質の濃度（Ｃ１）と前記定量用試料中の指示物質の濃度（Ｃ２）とから前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）を求める工程、とを含んだ希釈度導出方法において、
前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項１７】
請求項１５または請求項１６に記載の希釈度導出方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に近づける、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の希釈度導出方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長をシフトさせる、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載の希釈度導出方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長を長波長シフトさせる、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２０】
請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の希釈度算出方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の希釈度算出方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２３】
請求項２０に記載の希釈度算出方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２４】
請求項２０に記載の希釈度算出方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の希釈度算出方法において、
前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２６】
請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２７】
請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２８】
請求項２７に記載の希釈度算出方法において、
前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項２９】
請求項１５乃至請求項２８のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、
前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、
ことを特徴とする記載の希釈度導出方法。
【請求項３０】
請求項２９に記載の希釈度算出方法において、
前記指示物質が、黒色４０１号である、
ことを特徴とする希釈度導出方法。
【請求項３１】
指示物質を含有した希釈用水溶液と、定量すべき成分を含有する生物学的試料とを含んだ定量用試料とを混合する工程と、
同一波長の光源を用いて測定された、前記希釈用水溶液中の指示物質の濃度（Ｃ１）と前記定量用試料中の指示物質の濃度（Ｃ２）とから前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）を求める工程と、
前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）を求める工程と、
前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）と前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）とから生物学的試料中の定量すべき成分（Ｘ）を決定する工程とを含んだ定量方法において、
前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３２】
請求項３１に記載の定量方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に近づける、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の定量方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長をシフトさせる、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の定量方法において、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長を長波長シフトさせる、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３５】
請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３６】
請求項３５に記載の定量方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３７】
請求項３５に記載の定量方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３８】
請求項３５に記載の定量方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項３９】
請求項３５に記載の定量方法において、
前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の定量方法において、
前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４１】
請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４２】
請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４３】
請求項４２に記載の定量方法において、
前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４４】
請求項３１乃至請求項４３のいずれか１項に記載の定量方法において、
前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４５】
請求項４４に記載の定量方法において、
前記指示物質が、黒色４０１号である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４６】
請求項３１乃至請求項４５に記載の定量方法において、
前記生物学的試料は血液由来の成分であり、
前記定量すべき成分（Ｘ）は、少なくとも脂質成分である、
ことを特徴とする定量方法。
【請求項４７】
分析対象である特定成分を含有する液体試料、及び、指示物質を含有する希釈用水溶液が流路に沿って移送可能な分析用デバイスであって、
前記液体試料が収容される液体試料収容室と、
前記希釈用水溶液が収容される希釈用水溶液収容室と、
前記希釈用水溶液収容室の下流側に連結され、該希釈用水溶液収容室から移送された前記希釈用水溶液が一定量保持される希釈用水溶液計量室と、
前記液体試料収容室および前記希釈用水溶液計量室の下流側に連結され、該希釈用水溶液計量室で計量された一定量の前記希釈用水溶液と、該液体試料収容室から移送された前記液体試料とが混合される混合室と、を備え、
前記希釈用水溶液は、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有する、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項４８】
請求項４７に記載の分析用デバイスにおいて、
前記液体試料及び前記希釈用水溶液の流路に沿った移送は、遠心力を用いて行われる、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項４９】
請求項４７または請求項４８に記載の分析用デバイスにおいて、
前記液体試料収容室の下流側であって前記混合室の上流側に、該液体試料収容室から移送された前記液体試料が、遠心力を用いて低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５０】
請求項４９に記載の分析用デバイスにおいて、
前記分離室の下流側であって前記混合室の上流側に、該分離室で分離された低比重成分または高比重成分の液体試料が一定量保持される液体試料計量流路を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５１】
請求項４７または請求項４８に記載の分析用デバイスにおいて、
前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料が、遠心力を用いて低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５２】
請求項４７ないし請求項５０のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料中の特定成分が分析される分析室を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５３】
請求項５１に記載の分析用デバイスにおいて、
前記分離室の下流側に、該分離室で分離された前記低比重成分または高比重成分の液体試料の中の特定成分が分析される分析室を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５４】
請求項５２または請求項５３に記載の分析用デバイスにおいて、
前記分析室の上流側に、該分析室内に移送される前記液体試料が一定量保持される計量流路を備えた、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５５】
請求項５２に記載の分析用デバイスにおいて、
前記混合室と前記分析室とが一体に形成されてなる、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５６】
請求項５２乃至請求項５５のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記分析室は、前記液体試料中の特定成分と反応する反応試薬を保持する、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５７】
請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５８】
請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、
前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項５９】
請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６０】
請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、
前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６１】
請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６２】
請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６３】
請求項４７乃至請求項６２のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、
前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６４】
請求項６３に記載の分析用デバイスにおいて、
前記指示物質が、黒色４０１号である、
ことを特徴とする分析用デバイス。
【請求項６５】
液体試料と、指示物質を含有する希釈用水溶液とを混合し、該液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための測定キットにおいて、
前記希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を保持する、
ことを特徴とする測定キット。
【請求項６６】
請求項６５に記載の測定キットにおいて、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質は、前記液体試料を混合前の前記希釈用水溶液に予め含有されている、
ことを特徴とする測定キット。
【請求項６７】
請求項６５または請求項６６に記載の測定キットにおいて、
前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質は、前記希釈用水溶液中の指示物質の、前記生物学的試料を混合前の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の光吸収特性に近づける、
ことを特徴とする測定キット。
【請求項６８】
請求項６５ないし請求項６７のいずれか１項に記載の測定キットにおいて、
少なくとも、液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための試薬と、前記液体試料及び前記希釈用水溶液を移送可能な流路と、該流路内で発生する毛細管力と、本測定キットを軸心周りに回転させることにより発生する遠心力とを用いて前記流路内を移送させることにより、前記液体試料と前記希釈用水溶液とが混合される混合室と、を有するチャンバーを備えた、
ことを特徴とする測定キット。
【請求項６９】
請求項４７乃至請求項４９のいずれか１項に記載の分析用デバイスが装着される分析装置であって、
前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる回転駆動手段と、
前記回転駆動手段を制御し、前記分析用デバイス内の液体試料収容室および希釈用水溶液収容室に収容されている、液体試料及び希釈用水溶液を流路に沿って移送させる移送手段と、
前記分析用デバイスに光を照射し、その反射光あるいは透過光を検知する光学的検知手段と、
前記光学的検知手段により、前記希釈用水溶液収容室に収容されているときの前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質と、前記分析用デバイス内の混合室で前記液体試料と混合された希釈用水溶液中に含まれる指示物質の光学的性質とを検知し、該両光学的性質を比較することにより、前記液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する希釈度導出手段と、を備え、
前記移送手段は、
前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第１の回転動作により、前記希釈用水溶液収容室に収容されている前記希釈用水溶液を、前記分析用デバイス内の希釈用水溶液計量室に移送し、
前記第１の回転動作の停止時に、前記液体試料収容室に収容されている前記液体試料、および前記希釈用水溶液計量室に収容されている前記希釈用水溶液のそれぞれを、前記混合室の手前の流路まで移送し、
再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第２の回転動作により、前記混合室手前の流路まで移送した前記液体試料と前記希釈用水溶液とを前記混合室内に移送する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７０】
請求項６９に記載の分析装置において、
該分析装置は、
前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、
前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、
前記分析用デバイスは、
前記混合室の下流側に、該混合室から移送された前記希釈された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室を備え、
前記移送手段は、
前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室内で希釈された前記液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、
再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を、前記分析室内に移送する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７１】
請求項６９に記載の分析装置において、
前記分析用デバイスは、
前記液体試料収容室の下流側であって前記混合室の上流側に、該液体試料収容室から移送された前記液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備え、
前記移送手段は、
前記第１の回転動作の前に、前記分析用デバイスを軸心周りに回転させることにより、前記液体試料収容室に収容されている液体試料を前記分離室に移送し、
前記第１の回転動作により、前記分離室内で液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離し、
前記第１の回転動作の停止時に、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室手前の流路まで移送し、
前記第２の回転動作により、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室内に移送する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７２】
請求項７１に記載の分析装置において、
該分析装置は、
前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、
前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、
前記分析用デバイスは、
前記混合室の下流側に、該混合室から移送された前記希釈された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室を備え、
前記移送手段は、
前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室内で希釈された前記液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、
再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を、前記分析室内に移送する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７３】
請求項６９に記載の分析装置において、
前記分析用デバイスは、
前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備え、
前記移送手段は、
前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室で希釈された前記液体試料を、前記分離室の手前の流路まで移送し、
再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を前記分離室内に移送して前記希釈された液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７４】
請求項７３に記載の分析装置において、
該分析装置は、
前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、
前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、
前記分析用デバイスは、
前記分離室の下流側に、前記低比重成分または高比重成分の液体試料中に含まれる特定成分の分析が行われる分析室を備え、
前記移動手段は、
前記第３の回転動作の停止時に、前記低比重成分または高比重成分の液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、
再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第４の回転動作により、前記低比重成分または高比重成分の液体試料を、前記分析室内に移送する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７５】
請求項６５乃至請求項６８のいずれかに記載の測定キットが装着される分析装置であって、
前記測定キット内に保持されている、指示物質を含有する希釈用水溶液と液体試料とを混合するための攪拌手段と、
光を照射し、その反射光あるいは透過光を光学的に検知する光学的検知手段と、
前記光学的検知手段を用いて、前記液体試料を混合前後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を検知し、液体試料の希釈度を導出する希釈度導出手段と、
前記希釈後の液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈後の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）を測定する測定手段と、
前記希釈度導出手段により求められた希釈度と前記測定手段により求めた前記希釈度の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）とから、希釈前の液体試料中の分析すべき成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を有し、
前記液体試料を混合する前の前記希釈用水溶液中に、該希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる、
ことを特徴とする分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物学的試料の希釈度を精度よく導出するための希釈用水溶液、試薬、および希釈度算出方法、並びに、その希釈用水溶液を使用した、生物学的試料中の任意成分を定量するための定量方法、分析用デバイス、測定キット、及び分析装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、医療分野において、１台の装置により血液等の生物学的試料と分析試薬と反応させ、生物学的試料中の様々な成分を定量可能な大型の自動分析装置が実用化されており、この自動分析装置は医療分野においては無くてはならない存在となっている。しかしながら、すべての病院においてそのような装置が導入されているわけではない。特に、診療所等の小規模な医療機関においては、運用コスト等の様々な理由により、試料の分析を外部委託するという形態をとる病院も少なくない。分析を外部委託する形態をとる場合、分析結果を得るまでに時間を要し、その結果、患者は検査結果に基づく適切な治療を受けるために、必然的に再来院を余儀なくされるという不便さや、急患等の緊急を要する場合の迅速対応が難しい等の問題がある。そのような背景の中、近年市場からは、低コスト、試料液の少量化、装置の小型化、短時間測定など、より高精度で、運用の自由度が高い分析装置の登場が望まれている。
【０００３】
運用の自由度の高い分析装置を実現するためには、例えば、指先採血等で採取される少量の検体から複数種の成分濃度を短時間で高精度に測定できるという条件を満たすことが一つの理想形であろう。しかしながら、指先採血等でストレス無く得られる検体量は、せいぜい十数マイクロリットル程度であり、この少量の検体をそのまま分析するのでは前述の条件を満たすことは難しく、特に複数種の成分分析を高精度に行うことは技術的に難しい。このような課題に対する解決策の一つとして、分析システムを高感度化し、少量の検体を希釈することでその容量を増加させ、複数種の成分を分析するという方法がある。
【０００４】
一般に生物学的試料中の任意の物質を定量する場合、その任意の物質濃度が高い、生物学的試料の容量が少ない、または分析装置の都合等の理由により、生物学的試料を適当な水溶液により希釈してから分析が行われる。
【０００５】
検体を希釈して分析を行う場合、まず、生物学的試料を任意の希釈度になるよう希釈した後、該希釈後の生物学的試料中の任意の物質を定量し、前記生物学的試料の希釈度を基に希釈前の濃度に換算し、希釈前の生物学的試料中に含まれる任意の物質の濃度を決定する。このようにして生物学的試料中の任意の物質を定量する場合、生物学的試料の希釈度を正確に知ることが、高精度に分析を行うという点で非常に重要な要素となる。
【０００６】
一般的な希釈度を知る方法として、試料と希釈用水溶液を定量装置等により定量し、任意の希釈度に合わせこむ方法があり、主に大型の自動分析装置等に採用されている。この方法の場合、試料の希釈度をあらかじめ任意に決定できる利点があるが、定量のための機構が必要になる。また別の方法として、あらかじめ希釈用水溶液中に色素等に代表される指示物質を添加し、希釈前と希釈後の前記指示物質の光学的性質、例えば吸光度、を測定し比較することで試料の希釈度を検知する方法がある。これは、定量のための機構が必要なく比較的単純な構成にできる利点があり、装置の小型化に有利な方式であるが、試料の希釈度が一定でないため、それに対応できる仕組みが必要になる。
【０００７】
以下、このような検体希釈度検知方法を利用する従来の分析システムについて、図面を参照しながら説明する。
【０００８】
図１０は、特開２００３−１６１７２９号公報（特許文献１）に記載された血液分離器具を示す図であり、これは、指示物質が含有された希釈用水溶液と生物学的試料とを混合するための専用器具である。
【０００９】
まず、検査対象者の血液を血液採取容器部１０１内に採取し、該血液採取容器部１０１の上部に押し込み蓋１０２の押し込み部１０３を嵌挿する。すると、血液採取容器部１０１内の血液は、押し込み部１０３により押圧され、導入管１０４を通って限定ろ過体１０５の各細管１０６内に流入する。血液中の血漿は、細管１０６には貫通孔が設けられており、この貫通孔から、細管１０６に流入した血液中の血漿が流出し、流出した血漿は、血漿採取容器１０７内の血漿希釈溶液１０８に溶解する。一方、血液中の血球は、貫通孔から流出せずに細管１０６内を流通し、導入管１０９通ってピストン１１０を持ち上げながら血球採取容器１１１に流入し、血球採取容器１１１内の血球保護溶剤１１２に混入される。このようにして血液を血漿と血球に分離させ、血漿と血漿希釈溶液とを混合した状態の血液分離器具１００を検査場所まで搬送し、医師や看護師、臨床検査技師等の一定の有資格者または専門の技術者により、希釈度を検知し、希釈前の血漿中に含まれる任意の物質の濃度を算出する。
【特許文献１】特開２００３−１６１７２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、上記指示物質を使用し生物学的試料の希釈度を検知する方法では、希釈用水溶液中に添加する指示物質が生物学的試料の作用を受け、その光学的性質が変化する場合がある。つまり、生物学的試料と希釈用水溶液とを混合する前後において、該希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質が異なるという現象が発生するため、生物学的試料を混合前の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質と、生物学的試料を混合後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を比較しても、生物学的試料の希釈度を正確に導出することが難しいという問題があった。
【００１１】
また、特許文献１では、生物学的試料を、指示物質を含む希釈用水溶液で希釈し、希釈前と希釈後における指示物質の濃度を比較することで、希釈度を導出しているが、該指示物質の希釈前後における濃度を求める際に、同一波長における指示物質の吸光度を利用している。ところで、多くの指示物質の吸光波長が生物学的試料の影響により短波長側または長波長側へシフトすることが判明している。しかし、同一波長における希釈前と希釈後の指示物質の吸光度の比を算出する時に指示物質の希釈度を正確に反映していない場合があり、指示物質の選択次第では、生物学的試料の希釈度を正確に導出できないという問題が存在していた。
【００１２】
また、理論上、生物学的試料の作用を全く受けない指示物質を使用すれば、正確な希釈度が導出できるわけであるが、特に、特許文献１に開示されているように、指示物質として可視光を吸収する色素を用いる場合、可視光を吸収するという性質上、色素分子内に多くの共役電子が存在し、それは少なからず疎水的な相互作用や、電荷的な影響によりそのエネルギー状態が変化しやすいという性質を有している。そして、そのエネルギー状態の変化は一般的に生物学的試料に普遍的に含有される蛋白質等の成分によりもたらされることが知られており、その変化量は前述の蛋白質等の成分濃度に依存する。その結果、生物学的試料と前述の指示物質を混合した場合、指示物質の吸光波長がシフトするという現象が生じ、かつそのシフト量は、生物学的試料における個々の成分の違いによる影響を受け、それはつまり試料により波長シフト量が異なるという問題が生じる。そのため、大多数の可視光を吸収する指示物質が生物学的試料の影響を受けることが予想され、またそれらの指示物質を使用する場合、単純な指示物質の吸光度の比較では、高精度な生物学的試料の希釈度の導出が難しいといえる。
【００１３】
指示物質の光吸収波長のシフトは、少なからず希釈度の導出誤差の原因となり、その誤差はそのままの寄与率で測定結果の決定に影響を与えるため、従来の希釈度検知方法では高精度に希釈度を導出できる希釈度の範囲が実質的に限定的であり、より高い精度、またはより高い生物学的試料の希釈度が求められる分野での使用は難しい状況にあるという課題を有していた。
【００１４】
そこで、本発明は、上記問題点を解消するためになされたもので、希釈用水溶液中に含まれる指示物質への生物学的試料による性質の変化を低減可能で、より正確な生物学的試料の希釈度の検知を可能にする、希釈用水溶液および希釈度算出方法、並びに、その希釈用水溶液を使用した生物学的試料中の任意成分を正確に定量可能な成分定量方法、定量分析デバイス及び分析装置を提供することを目的としたものである。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
上記課題を解決するために、本発明の請求項１にかかる希釈用水溶液は、生物学的試料を希釈し、その希釈度を導出するための指示物質を含む水溶液であって、該水溶液中の指示物質の光学的性質を変化させる物質を含む、ことを特徴とする。
【００１６】
これにより、生物学的試料を混合前後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができる。
【００１７】
また、本発明の請求項２にかかる希釈用水溶液は、請求項１に記載の希釈用水溶液において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、ことを特徴とする。
【００１８】
また、本発明の請求項３にかかる希釈用水溶液は、請求項２に記載の希釈用水溶液において、前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、ことを特徴とする。
【００１９】
また、本発明の請求項４にかかる希釈用水溶液は、請求項２に記載の希釈用水溶液において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、ことを特徴とする。
【００２０】
また、本発明の請求項５にかかる希釈用水溶液は、請求項２に記載の希釈用水溶液において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、ことを特徴とする。
【００２１】
また、本発明の請求項６にかかる希釈用水溶液は、請求項２のいずれかに記載の希釈用水溶液において、前記前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、ことを特徴とする。
【００２２】
また、本発明の請求項７にかかる希釈用水溶液は、請求項６に記載の希釈用水溶液において、前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、ことを特徴とする。
【００２３】
また、本発明の請求項８にかかる希釈用水溶液は、請求項１に記載の希釈用水溶液において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、ことを特徴とする。
【００２４】
また、本発明の請求項９にかかる希釈用水溶液は、請求項１に記載の希釈用水溶液において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、ことを特徴とする。
【００２５】
また、本発明の請求項１０にかかる希釈用水溶液は、請求項９に記載の希釈用水溶液において、前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、ことを特徴とする。
【００２６】
また、本発明の請求項１１にかかる希釈用水溶液は、請求項１ないし請求項１０のいずれかに記載の希釈用水溶液において、前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択されるものである、ことを特徴とする。
【００２７】
また、本発明の請求項１２にかかる希釈用水溶液は、請求項１１に記載の希釈用水溶液において、前記指示物質が、黒色４０１号である、ことを特徴とする。
【００２８】
また、本発明の請求項１３にかかる測定キットは、請求項１〜１２のいずれかに記載の水溶液が、測定キット用の専用容器に収容されている、ことを特徴とする。
【００２９】
これにより、生物学的試料を混合前後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができる。
【００３０】
また、本発明の請求項１４にかかる試薬は、請求項１〜１２のいずれかに記載の水溶液が、固形状態に加工される、ことを特徴とする。
【００３１】
これにより、生物学的試料を混合前後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができる。
【００３２】
また、本発明の請求項１５にかかる希釈度導出方法は、指示物質を含有する希釈用水溶液と生物学的試料を混合し、混合前と混合後の前記指示物質の光学的性質を比較することにより、前記生物学的試料の希釈度を導出する方法において、前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液中に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、ことを特徴とする。
【００３３】
これにより、生物学的試料と混合前と混合後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができ、より正確な生物学的試料の希釈度を導出可能となる。
【００３４】
また、本発明の請求項１６にかかる希釈度導出方法は、指示物質を含有する希釈用水溶液と、定量すべき成分を含有する生物学的試料とを含んだ定量用試料を調整する工程と、同一波長の光源を用いて測定された、前記希釈用水溶液に含有される指示物質の濃度（Ｃ１）と前記定量用試料中の指示物質の濃度（Ｃ２）とから前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）を求める工程、とを含んだ希釈度導出方法において、前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、ことを特徴とする。
【００３５】
これにより、生物学的試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができ、生物学的試料の希釈度を高精度に導出可能となる。
【００３６】
また、本発明の請求項１７にかかる希釈度導出方法は、請求項１５または請求項１６に記載の希釈度導出方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に近づける、ことを特徴とする。
【００３７】
これにより、希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を生物学的試料と混合したときに近い、または一致させることができ、生物学的試料の希釈度をより高精度に導出可能となる。
【００３８】
また、本発明の請求項１８にかかる希釈度導出方法は、請求項１７に記載の希釈度導出方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長をシフトさせる、ことを特徴とする。
【００３９】
また、本発明の請求項１９にかかる希釈度導出方法は、請求項１８に記載の希釈度導出方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長を長波長シフトさせる、ことを特徴とする。
【００４０】
また、本発明の請求項２０にかかる希釈度導出方法は、請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、ことを特徴とする。
【００４１】
また、本発明緒請求項２１にかかる希釈度導出方法は、請求項２０に記載の希釈度算出方法において、前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、ことを特徴とする。
【００４２】
また、本発明の請求項２２にかかる希釈度導出方法は、請求項２０に記載の希釈度算出方法において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、ことを特徴とする。
【００４３】
また、本発明の請求項２３にかかる希釈度導出方法は、請求項２０に記載の希釈度算出方法において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、ことを特徴とする。
【００４４】
また、本発明の請求項２４にかかる希釈度導出方法は、請求項２０に記載の希釈度算出方法において、前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、ことを特徴とする。
【００４５】
また、本発明の請求項２５にかかる希釈度導出方法は、請求項２４に記載の希釈度算出方法において、前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、ことを特徴とする。
【００４６】
また、本発明の請求項２６にかかる希釈度導出方法は、請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、ことを特徴とする。
【００４７】
また、本発明の請求項２７にかかる希釈度導出方法は、請求項１５乃至請求項１９のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、ことを特徴とする。
【００４８】
また、本発明の請求項２８にかかる希釈度導出方法は、請求項２７に記載の希釈度算出方法において、前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、ことを特徴とする。
【００４９】
また、本発明の請求項２９にかかる希釈度導出方法は、請求項１５乃至請求項２８のいずれか１項に記載の希釈度算出方法において、前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、ことを特徴とする。
【００５０】
また、本発明の請求項３０にかかる希釈度導出方法は、請求項２９に記載の希釈度算出方法において、前記指示物質が、黒色４０１号である、ことを特徴とする。
【００５１】
また、本発明の請求項３１にかかる定量方法は、指示物質を含有した希釈用水溶液と、定量すべき成分を含有する生物学的試料とを含んだ定量用試料とを混合する工程と、同一波長の光源を用いて測定された、前記希釈用水溶液中の指示物質の濃度（Ｃ１）と前記定量用試料中の指示物質の濃度（Ｃ２）とから前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）を求める工程と、前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）を求める工程と、前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）と前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）とから生物学的試料中の定量すべき成分（Ｘ）を決定する工程とを含んだ定量方法において、前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含む、ことを特徴とする。
【００５２】
これにより、生物学的試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、生物学的試料の希釈度を高精度に求めることができ、その結果、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【００５３】
また、本発明の請求項３２にかかる定量方法は、請求項３１に記載の定量方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に近づける、ことを特徴とする。
【００５４】
これにより、希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を生物学的試料と混合したときに近い、または一致させることができ、生物学的試料の希釈度をより精度良く求めることができる。
【００５５】
また、本発明の請求項３３にかかる定量方法は、請求項３２に記載の定量方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長をシフトさせる、ことを特徴とする。
【００５６】
また、本発明の請求項３４にかかる定量方法は、請求項３３に記載の定量方法において、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質により、前記生物学的試料を混合前の前記希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長を長波長シフトさせる、ことを特徴とする。
【００５７】
また、本発明の請求項３５にかかる定量方法は、請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、ことを特徴とする。
【００５８】
また、本発明の請求項３６にかかる定量方法は、請求項３５に記載の定量方法において、前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、ことを特徴とする。
【００５９】
また、本発明の請求項３７にかかる定量方法は、請求項３５に記載の定量方法において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、ことを特徴とする。
【００６０】
また、本発明の請求項３８にかかる定量方法は、請求項３５に記載の定量方法において、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、ことを特徴とする。
【００６１】
また、本発明の請求項３９にかかる定量方法は、請求項３５に記載の定量方法において、前記包接化合物を形成する物質が、γ−シクロデキストリンである、ことを特徴とする。
【００６２】
また、本発明の請求項４０にかかる定量方法は、請求項３９に記載の定量方法において、前記γ−シクロデキストリンは、前記指示物質に対するモル比が、３０〜５００である、ことを特徴とする。
【００６３】
また、本発明の請求項４１にかかる定量方法は、請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、ことを特徴とする。
【００６４】
また、本発明の請求項４２にかかる定量方法は、請求項３１乃至請求項３４のいずれか１項に記載の定量方法において、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、ことを特徴とする。
【００６５】
また、本発明の請求項４３にかかる定量方法は、請求項４２に記載の定量方法において、前記アルブミンは、前記指示物質に対する重量比が、４００〜８００である、ことを特徴とする。
【００６６】
また、本発明の請求項４４にかかる定量方法は、請求項３１乃至請求項４３のいずれか１項に記載の定量方法において、前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、ことを特徴とする。
【００６７】
また、本発明の請求項４５にかかる定量方法は、請求項４４に記載の定量方法において、前記指示物質が、黒色４０１号である、ことを特徴とする定量方法。
【００６８】
また、本発明の請求項４６にかかる定量方法は、請求項３１乃至請求項４５に記載の定量方法において、前記生物学的試料は血液由来の成分であり、前記定量すべき成分（Ｘ）は、少なくとも脂質成分である、ことを特徴とする。
【００６９】
また、本発明の請求項４７にかかる分析用デバイスは、分析対象である特定成分を含有する液体試料、及び、指示物質を含有する希釈用水溶液が流路に沿って移送可能な分析用デバイスであって、前記液体試料が収容される液体試料収容室と、前記希釈用水溶液が収容される希釈用水溶液収容室と、前記希釈用水溶液収容室の下流側に連結され、該希釈用水溶液収容室から移送された前記希釈用水溶液が一定量保持される希釈用水溶液計量室と、前記液体試料収容室、および前記希釈用水溶液計量室の下流側に連結され、該希釈用水溶液計量室で計量された一定量の前記希釈用水溶液と、該液体試料収容室から移送された前記液体試料とが混合される混合室と、を備え、前記希釈用水溶液は、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有する、ことを特徴とする。
【００７０】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができ、
【００７１】
また、本発明の請求項４８にかかる分析用デバイスは、請求項４７に記載の分析用デバイスにおいて、前記液体試料及び前記希釈用水溶液の流路に沿った移送は、遠心力を用いて行われる、ことを特徴とする。
【００７２】
これにより、流体の移送制御を簡単に行うことができる。
【００７３】
また、本発明の請求項４９にかかる分析用デバイスは、請求項４７または請求項４８に記載の分析用デバイスにおいて、前記液体試料収容室の下流側であって前記混合室の上流側に、該液体試料収容室から移送された前記液体試料が、遠心力を用いて低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えた、ことを特徴とする。
【００７４】
また、本発明の請求項５０にかかる分析用デバイスは、請求項４９に記載の分析用デバイスにおいて、前記分離室の下流側であって前記混合室の上流側に、該分離室で分離された低比重成分または高比重成分の液体試料が一定量保持される液体試料計量流路を備えた、ことを特徴とする。
【００７５】
これにより、希釈度の導出精度をより高めることができる。
【００７６】
また、本発明の請求項５１にかかる分析用デバイスは、請求項４７または請求項４８に記載の分析用デバイスにおいて、前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料が、遠心力を用いて低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えた、ことを特徴とする。
【００７７】
また、本発明の請求項５２にかかる分析用デバイスは、請求項４７ないし請求項５０のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料中の特定成分が分析される分析室を備えた、ことを特徴とする。
【００７８】
また、本発明の請求項５３にかかる分析用デバイスは、請求項５１に記載の分析用デバイスにおいて、前記分離室の下流側に、該分離室で分離された前記低比重成分または高比重成分の液体試料の中の特定成分が分析される分析室を備えた、ことを特徴とする。
【００７９】
また、本発明の請求項５４にかかる分析用デバイスは、請求項５２または請求項５３に記載の分析用デバイスにおいて、前記分析室の上流側に、該分析室内に移送される前記液体試料が一定量保持される計量流路を備えた、ことを特徴とする。
【００８０】
これにより、液体試料の定量精度を高めることができる。
【００８１】
また、本発明の請求項５５にかかる分析用デバイスは、請求項５２に記載の分析用デバイスにおいて、前記混合室と前記分析室とが一体に形成されてなる、ことを特徴とする。
【００８２】
また、本発明の請求項５６にかかる分析用デバイスは、請求項５２乃至請求項５５のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記分析室は、前記液体試料中の特定成分と反応する反応試薬を保持する、ことを特徴とする。
【００８３】
また、本発明の請求項５７にかかる分析用デバイスは、請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、包接化合物を形成する物質である、ことを特徴とする。
【００８４】
また、本発明の請求項５８にかかる分析用デバイスは、請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、前記包接化合物を形成する物質が、シクロデキストリン類である、ことを特徴とする。
【００８５】
また、本発明の請求項５９にかかる分析用デバイスは、請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性カリクスアレン類である、ことを特徴とする。
【００８６】
また、本発明の請求項６０にかかる分析用デバイスは、請求項５７に記載の分析用デバイスにおいて、前記包接化合物を形成する物質が、水溶性クラウンエーテル類である、ことを特徴とする。
【００８７】
また、本発明の請求項６１にかかる分析用デバイスは、請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、界面活性剤である、ことを特徴とする。
【００８８】
また、本発明の請求項６２にかかる分析用デバイスは、請求項４７乃至請求項５６のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記指示物質の光学的性質を変化させる物質が、アルブミンである、ことを特徴とする。
【００８９】
また、本発明の請求項６３にかかる分析用デバイスは、請求項４７乃至請求項６２のいずれか１項に記載の分析用デバイスにおいて、前記指示物質が、色素、色原体、蛍光物質、及び発光物質からなる群の少なくとも１つから選択される、ことを特徴とする。
【００９０】
また、本発明の請求項６４にかかる分析用デバイスは、請求項６３に記載の分析用デバイスにおいて、前記指示物質が、黒色４０１号である、ことを特徴とする。
【００９１】
また、本発明の請求項６５にかかる測定キットは、液体試料と、指示物質を含有する希釈用水溶液とを混合し、該液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための測定キットにおいて、前記希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を保持する、ことを特徴とする。
【００９２】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができ、
【００９３】
また、本発明の請求項６６にかかる測定キットは、請求項６５に記載の測定キットにおいて、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質は、前記液体試料を混合前の前記希釈用水溶液に予め含有されている、ことを特徴とする。
【００９４】
また、本発明の請求項６７にかかる測定キットは、請求項６５または請求項６６に記載の測定キットにおいて、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質は、前記希釈用水溶液中の指示物質の、前記生物学的試料を混合前の光吸収特性を、前記生物学的試料を混合後の光吸収特性に近づける、ことを特徴とする。
【００９５】
これにより、希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を生物学的試料と混合したときに近い、または一致させることができ、より正確な生物学的試料の希釈度を導出可能となる。
【００９６】
また、本発明の請求項６８にかかる測定キットは、請求項６５ないし請求項６７のいずれか１項に記載の測定キットにおいて、少なくとも、液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための試薬と、前記液体試料及び前記希釈用水溶液を移送可能な流路と、該流路内で発生する毛細管力と、本測定キットを軸心周りに回転させることにより発生する遠心力とを用いて前記流路内を移送させることにより、前記液体試料と前記希釈用水溶液とが混合される混合室と、を有するチャンバーを備えた、ことを特徴とする。
【００９７】
また、本発明の請求項６９にかかる分析装置は、請求項４７乃至請求項４９のいずれか１項に記載の分析用デバイスが装着される分析装置であって、前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる回転駆動手段と、前記回転駆動手段を制御し、前記分析用デバイス内の液体試料収容室および希釈用水溶液収容室に収容されている、液体試料及び希釈用水溶液を流路に沿って移送させる移送手段と、前記分析用デバイスに光を照射し、その反射光あるいは透過光を検知する光学的検知手段と、前記光学的検知手段により、前記希釈用水溶液収容室に収容されているときの前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質と、前記分析用デバイス内の混合室で前記液体試料と混合された希釈用水溶液中に含まれる指示物質の光学的性質とを検知し、該両光学的性質を比較することにより、前記液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する希釈度導出手段と、を備え、前記移送手段は、前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第１の回転動作により、前記希釈用水溶液収容室に収容されている前記希釈用水溶液を、前記分析用デバイス内の希釈用水溶液計量室に移送し、前記第１の回転動作の停止時に、前記液体試料収容室に収容されている前記液体試料、および前記希釈用水溶液計量室に収容されている前記希釈用水溶液のそれぞれを、前記混合室の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第２の回転動作により、前記混合室手前の流路まで移送した前記液体試料と前記希釈用水溶液とを前記混合室内に移送する、ことを特徴とする。
【００９８】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができる。
【００９９】
また、本発明の請求項７０にかかる分析装置は、請求項６９に記載の分析装置において、該分析装置は、前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、前記分析用デバイスは、前記混合室の下流側に、該混合室から移送された前記希釈された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室を備え、前記移送手段は、前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室内で希釈された前記液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を、前記分析室内に移送する、ことを特徴とする。
【０１００】
これにより、高精度に求めた希釈度を用いて、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【０１０１】
また、本発明の請求項７１にかかる分析装置は、請求項６９に記載の分析装置において、前記分析用デバイスは、前記液体試料収容室の下流側であって前記混合室の上流側に、該液体試料収容室から移送された前記液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備え、前記移送手段は、前記第１の回転動作の前に、前記分析用デバイスを軸心周りに回転させることにより、前記液体試料収容室に収容されている液体試料を前記分離室に移送し、前記第１の回転動作により、前記分離室内で液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離し、前記第１の回転動作の停止時に、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室手前の流路まで移送し、前記第２の回転動作により、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室内に移送する、ことを特徴とする。
【０１０２】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができる。
【０１０３】
また、本発明の請求項７２にかかる分析装置は、請求項７１に記載の分析装置において、該分析装置は、前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、前記分析用デバイスは、前記混合室の下流側に、該混合室から移送された前記希釈された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室を備え、前記移送手段は、前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室内で希釈された前記液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を、前記分析室内に移送する、ことを特徴とする。
【０１０４】
これにより、高精度に求めた希釈度を用いて、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【０１０５】
また、本発明の請求項７３にかかる分析装置は、請求項６９に記載の分析装置において、前記分析用デバイスは、前記混合室の下流側に、該混合室で希釈された前記液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備え、前記移送手段は、前記第２の回転動作の停止時に、前記混合室で希釈された前記液体試料を、前記分離室の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を前記分離室内に移送して前記希釈された液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離する、ことを特徴とする。
【０１０６】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができる。
【０１０７】
また、本発明の請求項７４にかかる分析装置は、請求項７３に記載の分析装置において、該分析装置は、前記希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段と、前記希釈度導出手段により導出された希釈度（Ｄ）と、前記測定手段により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を備え、前記分析用デバイスは、記分離室の下流側に、前記低比重成分または高比重成分の液体試料中に含まれる特定成分の分析が行われる分析室を備え、前記移動手段は、前記第３の回転動作の停止時に、前記低比重成分または高比重成分の液体試料を、前記分析室の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第４の回転動作により、前記低比重成分または高比重成分の液体試料を、前記分析室内に移送する、ことを特徴とする。
【０１０８】
これにより、高精度に求めた希釈度を用いて、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【０１０９】
また、本発明の請求項７５にかかる分析装置は、請求項６５乃至請求項６８のいずれかに記載の測定キットが装着される分析装置であって、前記測定キット内に保持されている、指示物質を含有する希釈用水溶液と液体試料とを混合するための攪拌手段と、光を照射し、その反射光あるいは透過光を光学的に検知する光学的検知手段と、前記光学的検知手段を用いて、前記液体試料を混合前後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を検知し、液体試料の希釈度を導出する希釈度導出手段と、前記希釈後の液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈後の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）を測定する測定手段と、前記希釈度導出手段により求められた希釈度と前記測定手段により求めた前記希釈度の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）とから、希釈前の液体試料中の分析すべき成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を有し、前記液体試料を混合する前の前記希釈用水溶液中に、該希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる、ことを特徴とする。
【０１１０】
これにより、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、液体試料の希釈度を高精度に求めることができ、その結果、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【発明の効果】
【０１１１】
本発明によれば、指示物質を含む希釈用水溶液を生物学的試料と混合し、混合前と混合後の前記指示物質の光学的性質を比較することにより、生物学的試料の希釈度を導出する方法において、生物学的試料による希釈用水溶液中の指示物質の吸光波長シフトと同様な吸光波長シフトをあらかじめ混合前の希釈用水溶液中の指示物質に与えておくことで、前記希釈用水溶液を生物学的試料と混合した時に、前記試料が前記指示物質に及ぼす光吸収波長シフトを低減、または除去することができる。その結果、希釈用水溶液中の指示物質の吸光波長特性が、生物学的試料と混合する前と後で同等になり、その両者の状態を比較することで、従来方法よりも高い精度で生物学的試料の希釈度の導出を行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１１２】
以下に、図面を用いて本発明の実施の形態を説明する。
（実施の形態１）
以下、本発明の実施の形態１では、生物学的試料を希釈するための希釈用水溶液、生物学的試料を希釈用水溶液を用いて希釈したときの希釈度を算出する希釈度算出方法、及び、生物学的試料中の成分を定量する成分定量方法について説明する。
【０１１３】
まず、本発明で用いる希釈用水溶液の特性を、従来のものと比較して説明する。
図１に、従来技術における生物学的試料の希釈についての、希釈用水溶液に含有された指示物質の光吸収特性の変化を例示したグラフを示す。図１において、光吸収特性１は、生物学的試料を混合前の希釈液水溶液中の指示物質の光吸収特性を示し、光吸収特性２及び光吸収特性３は、生物学的試料を混合後の希釈液水溶液中の指示物質の光吸収特性を示す。特に、破線で表した光吸収特性２は、生物学的試料による影響を全く受けない場合の光吸収特性であり、光吸収特性３は生物学的試料による影響を受け、光吸収波長がシフトした場合の光吸収特性である。
【０１１４】
図１より、混合前の指示物質の光吸収特性１のピーク波長４が、混合により指示物質が生物学的試料による影響を受けて、ピーク波長５に波長シフトしていることが認められた。この波長シフトは一般的に生物学的試料中の蛋白質等により引き起こされることが知られており、波長シフト量が試料中の蛋白質濃度に依存することから、試料により、この波長シフト量が異なる。
【０１１５】
生物学的試料の希釈度を正確に導出するには、同一波長４における、生物学的試料を混合前の指示物質の光吸収特性１の吸光度６と、生物学的試料による影響を全く受けていない指示物質の光吸収特性２の吸光度７とを比較しなければならない。しかしながら、図１の場合、希釈後の指示物質の光吸収特性のピーク波長が、波長４から波長５へと長波長シフトしているため、実際には、同一波長４における、光吸収特性１の吸光度６と光吸収特性３の吸光度８とを比較することで、希釈度を算出することになる。この場合、吸光度８は、光吸収特性３のピーク波長ではなく、また、同一希釈度においても検体により変動することから、生物学的試料の影響による光吸収特性のシフト量を算出することが難しく、そのため、正確な生物学的試料の希釈度を導出することができない。
【０１１６】
これに対し、本発明では、希釈用水溶液中の指示物質の光吸収波長に対し、生物学的試料の影響により生じる波長シフトと同じ波長シフトを予め与えておくことで、生物学的試料による影響を低減している。以下、本発明の希釈用水溶液について図２を用いて説明する。
【０１１７】
図２は、本発明における生物学的試料の希釈についての、希釈用水溶液に含有された指示物質の光吸収特性の変化を例示したグラフである。
【０１１８】
図２において、光吸収特性９は、生物学的試料を混合前の指示物質の光吸収特性４に対し、生物学的試料の影響による指示物質の吸光波長シフトと同じ吸光波長シフトを予め与えたものである。つまり、生物学的試料を混合前の光吸収特性のピーク波長が、波長４から波長５に長波長シフトしている。そのため、その後、生物学的試料を混合してもそれ以上の波長シフトは起こらない。
【０１１９】
したがって、本発明の希釈用水溶液と用いて生物学的試料を希釈した場合、生物学的試料の希釈前後で、指示物質の、同一ピーク波長５における、光吸収特性９の吸光度６と光吸収特性３の吸光度７とを比較することができるため、生物学的試料の希釈度を正確に導出可能である。
【０１２０】
以下に、本発明の希釈用水溶液の含有成分について以下に詳細に説明する。
【０１２１】
１）指示物質
まず、本発明の希釈用水溶液に含有させる指示物質について説明する。
生物学的試料、特に血漿の希釈度をより正確に導出しようとする場合、個人差の大きい血漿自体の光吸収の影響がなるべく受けない波長領域に光吸収帯域を有する指示物質を選択することが望ましい。血漿の光吸収の主な原因物質として、ビリルビン、ヘモグロビン、及び乳びと呼ばれる濁り成分があげられるが、これらの成分の光吸収特性をまとめると、ビリルビンとヘモグロビンの光吸収波長は６００ｎｍ以下に存在し、乳びについては可視光領域のすべてに吸収を有するが、長波長になるほど吸収強度は減少するという性質を持つといえる。このことから、正確に血漿の希釈度を導出するためには、指示物質の吸光度を６００ｎｍ以上の波長領域で測定し、かつ、乳びの吸光度を、指示物質の光吸収が無い長波長領域で測定し、乳びによる指示物質へのの影響を除去しなければならない。
【０１２２】
したがって、指示物質としては、６００ｎｍ以上の波長領域に吸収を有するものが望ましく、かつ、測定波長のばらつきの影響を受けにくいようになるべく広い波長領域で吸収強度の変化が少ない光吸収特性を有し、また光や熱の影響により退色し難いものが望ましい。このような条件を満たす指示物質を選択することで、精度よく血漿の希釈度を導出することができる。また、血漿中の任意成分を定量することが最終目的であることから、任意成分を定量するための反応系に対し影響を与えないことも重要な選択条件になる。
【０１２３】
検討の結果、このような条件を最も満たす指示物質として黒色４０１号（分子量６１６．４９、別名：アシッドブラック１、ナフトールブルーブラック等）を見出した。
【０１２４】
２）指示物質の吸収特性を変化させる物質
次に、本発明の希釈用水溶液中の指示物質の吸収特性を変化させる物質について説明する。
【０１２５】
本発明の指示物質の光吸収波長特性を変化させる物質として、包接化合物を形成する化合物が有効であることが判明し、それはシクロデキストリン類、水溶性カリクスアレン類、水溶性クラウンエーテル類からなる群から選択される。さらにそれらはα−シクロデキストリンとその誘導体、β−シクロデキストリンとその誘導体、γ−シクロデキストリンとその誘導体、硫酸カリクス（４）アレンとその誘導体、硫酸カリクス（６）アレンとその誘導体、硫酸カリクス（８）アレンとその誘導体、水溶性クラウンエーテルとその誘導体が望ましい。ここで、前記包接化合物を形成する化合物を使用する場合、指示物質との組み合わせに注意する必要がある。すなわち、前記化合物と指示物質のすべての組み合わせにおいて、それらが包接化合物を形成するわけではなく、それぞれの分子の物理的大きさや、分子間の相互作用等により包接化合物が形成されるか否かが決定されるため、最適な組み合わせを選択することが望ましい。
【０１２６】
また、上記包接化合物を形成する化合物以外の指示物質の光吸収波長特性を変化させる物質として、アルブミン、及び界面活性剤が有効であり、界面活性剤としては特にｎ−ドデシル−β−Ｄ−マルトシド、スクロースモノラウレート、Ｔｗｅｅｎ−２０、Ｔｗｅｅｎ−８０、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００の効果が高いことがわかった。
【０１２７】
図３は、緩衝液（ＰＢＳ）に溶解させた黒色４０１号と血漿との混合前後の吸光波長特性の変化を表したグラフである。
【０１２８】
図３から、緩衝液（ＰＢＳ）に溶解させた黒色４０１号は、血漿と混合すると約１６〜１７ｎｍ光吸収ピーク波長が長波長シフトすることが認められた。そのため、この長波長シフトをあらかじめ血漿を希釈液と混合する前に実現することで、血漿混合時に生じる波長シフトを抑制することができる。
【０１２９】
検討の結果、指示物質として見出した黒色４０１号の波長を長波長シフトさせる物質として効果があるものは、シクロデキストリン類、アルブミン（牛由来）であることが判明した。特に、γ−シクロデキストリンを添加した場合に最も低濃度で高い効果が得られた。表１は、各種化合物を添加させることによる、指示物質である黒色４０１号の光吸収ピーク波長のシフト量をまとめたものである。
【０１３０】
図４は、緩衝液（ＰＢＳ）に溶解させた０．２ｍＭの黒色４０１号にγ−シクロデキストリンを添加した場合の黒色４０１号の光吸収ピーク波長の長波長シフト量を表したグラフを示す。
【０１３１】
γ−シクロデキストリンの濃度が１ｍＭの段階で既に黒色４０１号の光吸収ピーク波長のシフトが認められた。血漿による黒色４０１号の光吸収ピーク波長のシフト量が約１６〜１７ｎｍであることから、γ−シクロデキストリン濃度が６ｍＭ以上のときに、血漿による光吸収波長シフトとほぼ同等の光吸収波長シフトを実現できることが判明した。さらに好ましくは、γ−シクロデキストリン濃度を９ｍＭ以上にすればよいことが判明した。
【０１３２】
なお、γ−シクロデキストリンの濃度と光吸収ピーク波長シフト量の関係は比例関係ではなく、２０ｍＭ以上の濃度になったところでシフト量の変動が無くなっており、γ−シクロデキストリンの有効濃度の上限は飽和濃度であるといえる。
【０１３３】
【表１】
2009109428.tif 000003
【０１３４】
なお、希釈用水溶液に含有させる指示物質として黒色４０１号を選択し、その光吸収波長をシフトさせる物質としてγ−シクロデキストリンを使用した場合、以下に示す組成で希釈用水溶液を調製する。
【０１３５】
希釈用水溶液の組成は、
緩衝液（ＰＢＳ）          ｐＨ７．４
黒色４０１号              ０．２ｍＭ
γ−シクロデキストリン    １０ｍＭ
である。
【０１３６】
次に、上記希釈用水溶液を用い、ヒトの血漿の希釈度を導出する方法、及び、血漿中の特定成分、例えば総コレステロール、の定量方法を、図５を用いて以下に説明する。
【０１３７】
まず、γ−シクロデキストリンにより指示物質である黒色４０１号の光吸収波長をシフトさせた希釈用水溶液（液体試料を混合前）の６２５ｎｍの吸光度（Ａ１）を測定する。
【０１３８】
その後、血漿をある希釈度（Ｄ）で希釈用水溶液と混合し、その６２５ｎｍの吸光度（Ａ２）、及び７６０ｎｍの吸光度（Ａ３）を測定する。
【０１３９】
吸光度Ａ３を使用し、吸光度Ａ２のブランク成分を差し引いた後（Ａ２ａ）、吸光度Ａ１及びＡ２ａからヒト血漿の希釈度（Ｄ）をＤ＝（Ａ１−Ａ２ａ）／Ａ１の関係式から導出する。なお、ヒト血漿の希釈倍率（Ｄｍ）を導出する場合はＤｍ＝Ａ１／（Ａ１−Ａ２ａ）の関係式から導出される。また必要に応じ、導出された希釈度Ｄと理論希釈度との間に別途換算式を設けてもよい。
【０１４０】
その後、希釈後の血漿中に含有される総コレステロールの濃度（Ｙ）を公知の方法により求め、希釈前の総コレステロール濃度（Ｘ）をＸ＝Ｙ／Ｄの関係式より求める。
【０１４１】
このように、希釈用水溶液により希釈された生物学的試料の希釈度（Ｄ）を市販の分光光度計を使用して導出する希釈度導出方法を用いて、血漿の２倍希釈から７倍希釈までの範囲における希釈度をそれぞれの希釈度において導出し、その理論希釈度からの乖離の標準偏差（σ）を算出したところ、理論希釈倍率からの３σの区間が±２．７％であることが判明した。つまり、本実施の形態１の希釈度導出方法により導出された希釈度は、２倍希釈から７倍希釈の範囲において、統計的に９９．７％の確立で理論希釈度からの乖離が±２．７％以内に収まるということを示しており、これは、特許文献１の実施例に、理論希釈度と算出希釈度の乖離が３倍希釈時において６．７％であることが示されていることや、測定条件等の相違を鑑みても、本実施の形態１の希釈度導出方法による希釈度の導出精度は改良されていると考えられる。
【０１４２】
図６に、特許文献１の実施例における算出希釈倍率、及び本実施の形態１の希釈度導出方法により求められた算出希釈倍率のそれぞれの、理論希釈倍率からの乖離を示した。この図から、従来方法と比較して、本実施の形態１の希釈度導出方法を用いたほうが、よりばらつきなく希釈倍率を導出できることがわかる。
【０１４３】
指示物質である黒色４０１号の濃度は、光路長等の測定条件により最適な範囲が変動するため、測定時の吸光度条件からさかのぼって決定される。つまり、指示物質が測定される条件において、想定される試料の希釈倍率の範囲において、指示物質の吸光度を測定可能な範囲に収めることが望ましい。さらに言えば、指示物質の吸光度を測定時にその吸光度が０．０１から２に収まるような濃度設定が望ましく、より好ましくは、高精度に吸光度が測定可能な吸光度０．０４から２の範囲に収まる濃度設定が望ましい。
【０１４４】
また、γ−シクロデキストリンに代表される、指示物質の光吸波長を生物学的試料混合時と同等にシフトさせる物質の濃度は、前述の通りそのシフト量はその物質濃度に依存することから、指示物質と生物学的試料を混合した時のシフト量と同等になるような濃度範囲にする必要がある。そのため、本実施の形態１における、０．２ｍＭの黒色４０１号とγ−シクロデキストリンとの組み合わせの場合、γ−シクロデキストリンの濃度は６ｍＭからγ−シクロデキストリンの飽和濃度までの範囲が望ましく、コスト等の要因を鑑みると６ｍＭから２０ｍＭの範囲がより望ましい。ただし、このような指示物質の光吸波長をシフトさせる物質の最適濃度は、指示物質の構造や化学的性質及び濃度により、シフト効果を有する物質の種類、及び最適な濃度が異なるため、指示物質の種類及び濃度からさかのぼって決定される。上記試験結果から、前記指示物質の光吸収波長をシフトさせる物質が指示物質と包接化合物を形成する物質である場合は指示物質との混合比率が重要であることがわかり、前記指示物質と包接化合物を形成する物質の最適濃度を指示物質に対するモル比で表すと、３０〜５００程度が好ましく（より好ましくは、３０〜１００であり）、前記指示物質の光吸収波長をシフトさせる物質がアルブミン（牛血清由来）の場合には、指示物質に対する重量比が、１００〜８００程度（より好ましくは、４００〜８００である）が望ましい。
【０１４５】
また、希釈度を導出するための指示物質と前記指示物質の光吸収波長をシフトさせる物質とが含有された希釈用水溶液の保持形態は、希釈度導出用装置や分析装置等で使用される分析用デバイス内に直接収容されていてもよく、または装置外部の容器から検体希釈用の装置によって分析用デバイス内に注入されてもよい。さらには測定キット等に付属する専用容器に収容されている形態でもよい。
【０１４６】
また、前記希釈用水溶液は、必ずしも液体状態で保持される必要はなく、測定環境条件に応じて適宜、固形状態などに加工し、例えば分析用デバイス内等に保持してもよい。
【０１４７】
なお、本実験は日本分光製顕微紫外可視分光光度計（ＭＳＶ−３５０）により行った。
【０１４８】
このように本実施の形態１の希釈用水溶液によれば、生物学的試料を希釈するための希釈用水溶液に、該希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を変化させる物質を含有させるようにしたので、生物学的試料を混合前後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができる。
【０１４９】
また、本実施の形態１の希釈度導出方法によれば、指示物質を含有する希釈用水溶液に、該指示物質の光学的性質を変化させる物質を含有させ、生物学的試料を混合する前後の前記指示物質の光学的性質を比較することにより、前記生物学的試料の希釈度を導出するようにしたので、生物学的試料と混合前と混合後の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができ、より正確な生物学的試料の希釈度を導出可能となる。
【０１５０】
また、本実施の形態１の定量方法によれば、指示物質を含有した希釈用水溶液と、定量すべき成分を含有する生物学的試料とを含んだ定量用試料とを混合する工程と、同一波長の光源を用いて測定された、前記希釈用水溶液中の指示物質の濃度（Ｃ１）と前記定量用試料中の指示物質の濃度（Ｃ２）とから前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）を求める工程と、前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）を求める工程と、前記生物学的試料の希釈度（Ｄ）と前記定量用試料中の定量すべき成分の濃度（Ｙ）とから生物学的試料中の定量すべき成分（Ｘ）を決定する工程とを含んだ定量方法において、前記生物学的試料を混合する前の前記希釈用水溶液に、該希釈用水溶液に含まれる前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させる工程を含むようにしたので、生物学的試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質の変化を低減、または無くすことができるため、生物学的試料の希釈度を高精度に求めることができ、その結果、液体試料中の特性成分をより正確に定量することができる。
【０１５１】
（実施の形態２）
本発明の実施の形態２では、分析対象である特定成分を含有する液体試料、及び希釈用水溶液を、流路に沿って移送可能な分析用デバイスと、該分析用デバイスを装着して、液体試料中の特性成分を分析する分析装置について以下に説明する。
【０１５２】
図９は、本実施の形態２の分析用デバイス１３の上面図である。
本実施の形態２の分析用デバイス１３は、液体試料が収容される液体試料収容室１５と、前記液体試料を希釈するための希釈用水溶液が収容される希釈用水溶液収容室１４と、希釈用水溶液収容室１４の下流側に連結され、希釈用水溶液収容室１４から移送された希釈用水溶液が一定量計量されて保持される希釈用水溶液計量室１６と、液体試料収容室１５および希釈用水溶液計量室１６の下流側に連結され、希釈用水溶液計量室１６から移送された希釈用水溶液と、液体試料収容室１５から移送された液体試料とが混合される混合室１７と、混合室１７の下流側に連結され、混合室１７で混合（希釈）された液体試料が一定量計量され保持される計量流路１９と、混合室１７の下流側に連結され、混合室１７から移送された混合（希釈）された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室１８と、希釈用水溶液貯留室２０とを備える。
【０１５３】
液体試料収容室１５に収容される希釈用水溶液は、希釈度を正確に導出するための指示物質と、該指示物質の光学的性質を変化させる物質を含有しており、それは上記実施の形態１に示すとおりである。
【０１５４】
また、連結流路に働く毛細管力と、分析用デバイスを回転させることによる遠心力による流体の制御（後述する）を可能にするために、希釈用水溶液計量室１６は希釈用水溶液収容室１４に対して軸心より遠い位置に配置されており、混合室１７は希釈用水溶液計量室１６に対して軸心より遠い位置に配置され、分析室１８は混合室１７に対して軸心より遠い位置に配置されている。
【０１５５】
計量流路１９は、分析室１８に常に一定量の液体試料を移送するために設けられている。
【０１５６】
分析室１８は、液体試料中に含有される分析すべき特定成分と反応する反応試薬を保持している。これにより、液体試料中の特定成分と反応試薬を反応させた後、分析室１８に収容されている、希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定することで、該希釈された液体試料中の特定成分の濃度を算出可能である。
【０１５７】
なお、本実施の形態２では、希釈用水溶液に含有される指示物質の吸光度は、希釈用水溶液計量室１６及び混合室１７で測定して希釈度を導出する場合について説明するが、また希釈用水溶液計量室１６と混合室１７は一体に形成して、同一の測定領域で、液体試料を混合前後の希釈用水溶液中の指示物質の吸光度を測定してもよい。
【０１５８】
また、本実施の形態２では、分析室１８に、液体試料中に含有される分析すべき特定成分と反応する反応試薬が保持されている場合について説明するが、混合室１７に保持されていても良い。また、保持する反応試薬は一種類に限らず、必要に応じ分析項目別に複数種類の反応試薬を配置してもよい。
【０１５９】
図７は、本実施の形態２の分析用装置の側面図であり、図８はその斜視図である。
【０１６０】
本実施の形態２の分析装置は、その上面に分析用デバイスを載置する、円盤形状の基板１０ａと、前記基板１０ａと一体的に形成され、該基板１０ａを所定の回転速度で一定時間、軸心周りに回転させる回転駆動手段１０ｂと、回転駆動手段１０ｂの駆動を制御する移送手段３０と、光発生手段２１から分析用デバイス１３に光を照射して、その反射光または透過光を検知する光学的検知手段１１と、光学的検知手段１１により、液体試料を混合する前後の希釈用水溶液中に含まれる指示物質の光学的性質を検知して比較し、該比較結果に基づいて液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する希釈度導出手段３１と、希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段３２と、希釈度導出手段３１で導出した希釈度（Ｄ）と測定手段３２で求めた特定成分の濃度（Ｙ）とから、希釈前の液体試料中に含まれる特定成分（Ｘ）を定量する定量手段３３とを備える。
【０１６１】
移送手段３０は、回転駆動手段１０ｂを駆動させて基板１０ａを回転させることにより、該基板１０ａの所定位置にセットされた分析用デバイス１３に遠心力をかけ、この遠心力と分析用デバイス１３内に配置された連絡流路に働く毛細管力とを利用して、分析用デバイス１３内に収容される流体の移動を制御する。
【０１６２】
なお、分析デバイス１３内の流体の流れの状態、または化学的な状態は、光発生手段２１により照射される透過光１２の流体による吸収を光学的検知手段１１で測定することにより検知可能である。
【０１６３】
次に、本実施の形態２の分析装置の動作について説明する。
まず、分析用デバイス１３を基板１０ａの所定位置にセットする。この分析用デバイス１３の液体試料収容室１５及び希釈用水溶液収容室１４にはそれぞれ、分析すべき成分を含有する液体試料、及び、希釈用水溶液が収容されている。
【０１６４】
回転駆動手段１０ｂを駆動させて、分析デバイス１３がセットされた基板１０ａを回転させると（第１の回転動作）、希釈用水溶液が希釈用水溶液計量室１６に移送される。そして、この回転の停止時に、液体試料収容室１５に収容されている液体試料と、希釈用水溶液計量室１６に収容されている希釈用水溶液がそれぞれ、混合室１７の手前の連結通路まで移送される。
【０１６５】
再度、前記基板１０ａを回転させると（第２の回転動作）、液体試料収容室１５から流出してきた液体試料と、希釈用水溶液計量室１６から流出してきた希釈用水溶液とが、混合室１７内に移送されて混合される。これにより、液体試料は、希釈用水溶液により所定の希釈度（Ｄ）で希釈される。そして、この回転の停止時に、混合室１７で混合（希釈）された液体試料が、計量流路１９まで移送される。
【０１６６】
さらに、再度、前記基板１０ａを回転させると（第３の回転動作）、計量流路１９に保持されている一定量の希釈された液体試料が、分析室１８内に移送される。
【０１６７】
上記移送手段３０による一連の流体制御において、光学的検知手段１１により、希釈用水溶液収容室１４に収容されているときの希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性、および、混合室１４で液体試料と混合された後の希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を測定し、希釈度算出手段３１により、該両光吸収特定を比較して上記実施の形態１で示した希釈度算出方法を用いて液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する。
【０１６８】
そして、測定手段３２により、分析室１８内の混合（希釈）された液体試料の吸光度または濁度を測定し、希釈された液体試料中の分析すべき特定成分の濃度（Ｙ）を測定する。
【０１６９】
そして、定量手段３３により、希釈度導出手段３１で導出した希釈度（Ｄ）と、測定手段３２で測定した特定成分の濃度（Ｙ）とから、混合（希釈）前の液体試料中の定量すべき成分濃度（Ｘ）を決定する。
【０１７０】
このような本実施の形態２の分析用デバイスによれば、分析対象である特定成分を含有する液体試料が収容される液体試料収容室１５と、指示物質を含有する希釈用水溶液が収容される希釈用水溶液収容室１４と、希釈用水溶液収容室１４の下流側に連結され、希釈用水溶液収容室１４から移送された希釈用水溶液が一定量保持される希釈用水溶液計量室１６と、前記液体試料収容室１５および前記希釈用水溶液計量室１６の下流側に連結され、希釈用水溶液計量室１６で計量された一定量の希釈用水溶液と、液体試料収容室１４から移送された液体試料とが混合される混合室１７と、混合室１７の下流側に連結され、混合室１７で希釈された液体試料中の特定成分の分析が行われる分析室１８を備え、前記希釈用水溶液に、前記指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させたことにより、希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に対し、生物学的試料による指示物質の吸光波長シフトを予め与えることが可能となるため、高い精度で液体試料の希釈度を導出することができる。
【０１７１】
さらに、本実施の形態２の分析用デバイスによれば、分析室１８の上流側に、分析室１８内に移送される液体試料が一定量保持される計量流路１９を備えたことにより、分析１８内に移送する液体試料の量を常に一定にすることができるため、より精度良く液体試料中の特性成分を定量することができる。
【０１７２】
また、本実施の形態２の分析用デバイス１３が装着された分析装置によれば、分析用デバイス１３を軸心周りに回転させる回転駆動手段１０ｂと、回転駆動手段１０ｂを制御し、液体試料及び希釈用水溶液を流路に沿って移送させる移送手段３０と、光学的検知手段１１により、液体試料が混合される前後の希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を検知し比較することにより、液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する希釈度導出手段３１と、を備え、分析用デバイス１３を軸心周りに回転させる第１の回転動作により、希釈用水溶液収容室１４に収容されている希釈用水溶液を希釈用水溶液計量室１６に移送し、前記第１の回転動作の停止時に、液体試料収容室１５に収容されている液体試料および希釈用水溶液計量室１６に収容されている希釈用水溶液のそれぞれを、混合室１７の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第２の回転動作により、混合室１７手前の流路まで移送した液体試料と希釈用水溶液とを混合室１７内に移送するようにしたので、簡単な操作で分析用デバイス内における液体試料及び希釈用水溶液の流路内移送を制御することができ、また、液体試料の希釈度を高精度に導出することができる。
【０１７３】
また、本実施の形態２の分析装置によれば、希釈された液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈された液体試料中に含まれる前記特定成分の濃度（Ｙ）を求める測定手段３２と、希釈度導出手段３１により導出された希釈度（Ｄ）と、測定手段３２により測定された前記希釈された液体試料中に含まれる特定成分の濃度（Ｙ）とから、前記希釈される前の液体試料中の特定成分（Ｘ）を定量する定量手段と、をさらに備え、前記第２の回転動作の停止時に、混合室１７で希釈された前記液体試料を、分析室１８の手前の流路まで移送し、再度前記分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、前記希釈された液体試料を、分析室１８内に移送するようにしたので、高精度の導出した液体試料の希釈度を用いて、液体試料中の特定成分をより正確に定量することができる。
【０１７４】
（実施の形態３）
以下、本発明の実施の形態３による分析用デバイス、及び分析装置について説明する。
本実施の形態３の分析用デバイスは、図９に示す上記実施の形態２の分析用デバイス１３の構成に加えて、液体試料収容室１５の下流側に連結され、液体試料収容室１５から移送された液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備える。
【０１７５】
このような構成の分析用デバイスを装着した、本実施の形態３の分析装置の動作について以下に説明する。なお、本実施の形態３の分析装置の構成は、図７及び図８に示す上記実施の形態２の分析装置と同じ構成である。
【０１７６】
まず、分析用デバイス１３を基板１０ａの所定位置にセットする。この分析用デバイス１３の液体試料収容室１５及び希釈用水溶液収容室１４にはそれぞれ、分析すべき成分を含有する液体試料、及び、希釈用水溶液が収容されている。希釈用水溶液としては、上記実施の形態１で示したものを用いる。
【０１７７】
そして、回転駆動手段１０ｂを駆動させて、分析用デバイス１３がセットされた基板１０ａを回転させると（プレ回転動作）、液体試料収容室１５に収容されている液体試料を分離室に移送する。
【０１７８】
再度、基板１０ａを回転させると（第１の回転動作）、分離室内の液体試料は、低比重成分と高比重成分とに分離され、希釈用水溶液収容室１４内の希釈用水溶液は、希釈用水溶液計量室１６に移送される。そして、この回転の停止時に、分離室で分離された低比重成分または高比重成分の液体試料、および、希釈用水溶液計量室１６に収容されている希釈用水溶液がそれぞれ、混合室１７の手前の連結通路まで移送される。
【０１７９】
再度、前記基板１０ａを回転させると（第２の回転動作）、分離室から流出してきた低比重成分または高比重成分の液体試料と、希釈用水溶液計量室１６から流出してきた希釈用水溶液とが、混合室１７内に移送されて混合される。これにより、低比重成分または高比重成分の液体試料は、希釈用水溶液により所定の希釈度（Ｄ）で希釈される。そして、この回転の停止時に、混合室１７で混合（希釈）された液体試料が、計量流路１９まで移送される。
【０１８０】
さらに、再度、前記基板１０ａを回転させると（第３の回転動作）、計量流路１９に保持されている一定量の希釈された液体試料が、分析室１８内に移送される。
【０１８１】
上記移送手段３０による一連の流体制御において、光学的検知手段１１により、希釈用水溶液収容室１４に収容されているときの希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性、および、混合室１４で液体試料と混合された後の希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を測定し、希釈度算出手段３１により、該両光吸収特定を比較して上記実施の形態１で示した希釈度算出方法を用いて液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する。
【０１８２】
そして、測定手段３２により、分析室１８内の混合（希釈）された液体試料の吸光度または濁度を測定し、希釈された液体試料中の分析すべき特定成分の濃度（Ｙ）を測定する。
【０１８３】
そして、定量手段３３により、希釈度導出手段３１で導出した希釈度（Ｄ）と、測定手段３２で測定した特定成分の濃度（Ｙ）とから、混合（希釈）前の液体試料中の定量すべき成分濃度（Ｘ）を決定する。
【０１８４】
なお、本実施の形態３において、前記分離室と混合室１７との間に、該分離室から移送された低比重成分または高比重成分の液体試料が一定量保持される液体試料計量流路をさらに設け、一定量の液体試料を混合室１７へ移送できるようにしてもよい。
【０１８５】
このような本実施の形態３の分析用デバイスによれば、上記実施の形態２の分析用デバイスの構成に加え、さらに、液体試料収容室１５の下流側であって混合室１７の上流側に、液体試料収容室１５から移送された液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えたことにより、希釈用水溶液で希釈する前に、液体試料を低比重成分と高比重成分に分離することができる。
【０１８６】
また、本実施の形態３の分析用デバイスが装着された分析装置によれば、前記第１の回転動作の前に、分析用デバイスを軸心周りに回転させることにより、液体試料収容室１５に収容されている液体試料を前記分離室に移送し、前記第１の回転動作により、前記分離室内で液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離し、前記第１の回転動作の停止時に、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室１７手前の流路まで移送し、前記第２の回転動作により、前記低比重成分もしくは高比重成分の液体試料を、前記混合室１７内に移送するようにしたので、簡単な操作で分析用デバイス内における液体試料及び希釈用水溶液の流路内移送を制御することができ、また、低比重成分または高比重成分に分離された液体試料の希釈度を高精度に導出し、該液体試料中に含まれる特定成分をより正確に定量することが可能となる。
【０１８７】
（実施の形態４）
以下、本発明の実施の形態４による分析用デバイス、および分析装置について説明する。
本実施の形態４の分析用デバイスは、図９に示す上記実施の形態２の分析用デバイス１３の構成に加えて、混合室１７と計量流路１９との間に、混合室１７から移動された希釈された液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備える。
【０１８８】
このような構成の分析用デバイスを装着した、本実施の形態４の分析装置の動作について以下に説明する。なお、本実施の形態３の分析装置の構成は、図７及び図８に示す上記実施の形態２の分析装置と同じ構成である。
【０１８９】
まず、分析用デバイス１３を基板１０ａの所定位置にセットする。この分析用デバイス１３の液体試料収容室１５及び希釈用水溶液収容室１４にはそれぞれ、分析すべき成分を含有する液体試料、及び、希釈用水溶液が収容されている。
【０１９０】
回転駆動手段１０ｂを駆動させて、分析デバイス１３がセットされた基板１０ａを回転させると（第１の回転動作）、希釈用水溶液が希釈用水溶液計量室１６に移送される。そして、この回転の停止時に、液体試料収容室１５に収容されている液体試料と、希釈用水溶液計量室１６に収容されている希釈用水溶液がそれぞれ、混合室１７の手前の連結通路まで移送される。
【０１９１】
再度、前記基板１０ａを回転させると（第２の回転動作）、液体試料収容室１５から流出してきた液体試料と、希釈用水溶液計量室１６から流出してきた希釈用水溶液とが、混合室１７内に移送されて混合される。これにより、液体試料は、希釈用水溶液により所定の希釈度（Ｄ）で希釈される。そして、この回転の停止時に、混合室１７で混合（希釈）された液体試料が、分離室の手前の連結通路まで移送される。
【０１９２】
さらに、再度、前記基板１０ａを回転させると（第３の回転動作）、希釈された液体試料が分離室内に移動され、低比重成分と高比重成分に分離される。この回転の停止時に、低比重成分または高比重成分の液体試料は計量流路１９まで移送される。
【０１９３】
再度、基板１０ａを回転させると（第４の回転動作）、計量流路１９に保持されている一定量の低比重成分または高比重成分の液体試料が、分析室１８内に移送される。
【０１９４】
上記移送手段３０による一連の流体制御において、光学的検知手段１１により、希釈用水溶液収容室１４に収容されているときの希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性、および、混合室１４で液体試料と混合された後の希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を測定し、希釈度算出手段３１により、該両光吸収特定を比較して上記実施の形態１で示した希釈度算出方法を用いて液体試料の希釈度（Ｄ）を導出する。
【０１９５】
そして、測定手段３２により、分析室１８内の混合（希釈）された液体試料の吸光度または濁度を測定し、希釈された液体試料中の分析すべき特定成分の濃度（Ｙ）を測定する。
【０１９６】
そして、定量手段３３により、希釈度導出手段３１で導出した希釈度（Ｄ）と、測定手段３２で測定した特定成分の濃度（Ｙ）とから、混合（希釈）前の液体試料中の定量すべき成分濃度（Ｘ）を決定する。
【０１９７】
このような本実施の形態４の分析用デバイスによれば、上記実施の形態２の分析用デバイスの構成に加え、さらに、混合室１７の下流側に、混合室１７で希釈された前記液体試料が低比重成分と高比重成分とに分離される分離室を備えたことにより、希釈用水溶液により希釈された液体試料を低比重成分と高比重成分に分離することができる。
【０１９８】
また、本実施の形態４の分析装置によれば、前記第２の回転動作の停止時に、混合室１７で希釈された液体試料を、分離室の手前の流路まで移送し、再度分析用デバイスを軸心周りに回転させる第３の回転動作により、希釈された液体試料を分離室内に移送して前記希釈された液体試料を低比重成分と高比重成分とに分離するようにしたので、簡単な操作で分析用デバイス内における液体試料及び希釈用水溶液の流路内移送を制御することができ、また、混合室で希釈された液体試料の希釈度を高精度に求め、低比重成分または高比重成分に分離された液体試料中に含まれる特定成分を正確に定量することが可能となる。
【０１９９】
（実施の形態５）
本発明の実施の形態５では、液体試料と、指示物質を含有する希釈用水溶液とを混合し、該液体試料中に含まれる分析すべき成分を定量するための測定キット、及び分析装置について説明する。
【０２００】
本実施の形態５の測定キットは、分析すべき成分を含有する液体試料と、指示物質を含有する希釈用水溶液と、希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質と、を保持している。なお、指示物質、および、該指示物質の光吸収特定を変化させる物質は、上記実施の形態１に示したものと用いる。また、指示物質の光吸収特性を変化させる物質は、液体試料を混合前の前記希釈用水溶液に予め含有させておいても良い。
【０２０１】
さらに、本実施の形態５の測定キットは、液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための試薬と、前記液体試料及び前記希釈用水溶液を移送可能な流路と、該流路内で発生する毛細管力と、本測定キットを軸心周りに回転させることにより発生する遠心力とを用いて前記流路内を移送させることにより、前記液体試料と前記希釈用水溶液とが混合される混合室と、を有するチャンバーを備える。
【０２０２】
このような構成の測定キットが装着される、本実施の形態５の分析装置について説明する。
【０２０３】
本実施の形態５の分析装置は、前記測定キット内に保持されている、指示物質を含有する希釈用水溶液と液体試料とを混合するための攪拌手段と、光を照射し、その反射光あるいは透過光を光学的に検知する光学的検知手段と、前記光学的検知手段を用いて、前記液体試料を混合前後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を検知し、液体試料の希釈度を導出する希釈度導出手段と、前記希釈後の液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈後の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）を測定する測定手段と、前記希釈度導出手段により求められた希釈度と前記測定手段により求めた前記希釈度の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）とから、希釈前の液体試料中の分析すべき成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を有する。
【０２０４】
次に、動作について説明する。
まず、測定キット内に保持されている希釈用水溶液中に、指示物質の光吸収特性を変化させる物質を添加し、光学的検知手段を用いて、該希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性を検知する。
【０２０５】
その後、該希釈用水溶液と液体試料とを、攪拌手段を用いて混合し、光学的検知手段を用いて、混合後の希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特定を検知する。
【０２０６】
そして、希釈度導出手段により、上記実施の形態１の希釈度導出方法を用いて、液体試料の希釈度を導出する。
【０２０７】
また、混合された液体試料中に試薬を添加して、該液体試料中の特定成分と反応させた後、その吸光度又は濁度を測定し、希釈後の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）を測定する。
【０２０８】
このような本実施の形態５の測定キットによれば、液体試料と、指示物質を含有する希釈用水溶液とを混合し、該液体試料に含まれる分析すべき成分を定量するための測定キットにおいて、前記希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を保持することにより、希釈用水溶液中の指示物質の光吸収特性に対し、生物学的試料による指示物質の吸光波長シフトを予め与えることが可能となるため、高い精度で液体試料の希釈度を導出することができる。
【０２０９】
また、本実施に形態５の測定キットが装着される分析装置によれば、前記測定キット内に保持されている、指示物質を含有する希釈用水溶液と液体試料とを混合するための攪拌手段と、光を照射し、その反射光あるいは透過光を光学的に検知する光学的検知手段と、前記光学的検知手段を用いて、前記液体試料を混合前後の前記希釈用水溶液中の指示物質の光学的性質を検知し、液体試料の希釈度を導出する希釈度導出手段と、前記希釈後の液体試料の吸光度または濁度を測定し、該希釈後の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）を測定する測定手段と、前記希釈度導出手段により求められた希釈度と前記測定手段により求めた前記希釈度の液体試料中の分析すべき成分の濃度（Ｙ）とから、希釈前の液体試料中の分析すべき成分（Ｘ）を定量する定量手段と、を有し、前記液体試料を混合する前の前記希釈用水溶液中に、該希釈用水性溶液中の指示物質の光吸収特性を変化させる物質を含有させるようにしたので、液体試料の希釈度を高精度に求めることができ、その結果、液体試料中の特定成分をより正確に定量することができる。
【産業上の利用可能性】
【０２１０】
本発明にかかる希釈用水溶液、それを使用した希釈度導出方法、及び成分定量方法は、指示物質を含む希釈用水溶液を生物学的試料と混合し、混合前と混合後の前記指示物質の光学的性質を比較することにより、生物学的試料の希釈度を導出する方法において、生物学的試料による希釈用水溶液中の指示物質への影響を低減、または無くすることが可能で、従来方法よりも高精度に生物学的試料の希釈度を導出することに有用である。
【図面の簡単な説明】
【０２１１】
【図１】従来技術における生物学的試料と希釈用水溶液を混合した場合の指示物質の吸収波長の変化を表したグラフである。
【図２】本発明における生物学的試料と希釈用水溶液を混合した場合の指示物質の吸収波長の変化を表したグラフである。
【図３】黒色４０１号と血漿を混合した場合の黒色４０１号の光吸収波長のシフトを表したグラフである。
【図４】黒色４０１号とγ−シクロデキストリンを混合した場合の光吸収ピーク波長のシフト量を表したグラフである。
【図５】本発明における生物学的試料中の任意の成分を定量するためのステップ図である。
【図６】従来の希釈度算出方法及び本発明の希釈度算出方法により求めた各希釈倍率の、理論希釈倍率からの乖離を示す図である。
【図７】本発明の実施の形態２における分析装置の側面図である。
【図８】本発明の実施の形態２における分析装置の斜視図である。
【図９】本発明の実施の形態２における分析用デバイスの上面図である。
【図１０】従来の希釈度導出方法を用いられていた血液分離器具である。
【符号の説明】
【０２１２】
１０  回転駆動手段
１１  光学的検知手段
１２  光
１３  分析用デバイス
１４  希釈用水溶液収容室
１５  液体試料収容室
１６  希釈用水溶液計量室
１７  混合室
１８  分析室
１９  計量流路
２０  希釈用水溶液貯留室
２１  光発生手段
３０  移送手段
３１  希釈度導出手段
３２  測定手段
３３  定量手段
【図１】
2009109428.tif 000004
【図２】
2009109428.tif 000005
【図３】
2009109428.tif 000006
【図４】
2009109428.tif 000007
【図５】
2009109428.tif 000008
【図６】
2009109428.tif 000009
【図７】
2009109428.tif 000010
【図８】
2009109428.tif 000011
【図９】
2009109428.tif 000012
【図１０】
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