(57)【要約】【課題】サンプル注入部にサンプルを注入する際にサンプル定量部に予め充填された緩衝剤の粘度に拘わらず、サンプル定量のばらつきを抑えることの出来る生体試料判別用プレートを提供する。【解決手段】生体サンプルをプレート上に設けられたサンプル定量部に注入するためのサンプル注入流路と緩衝剤を前記サンプル定量部に充填するために前記サンプル定量部に設けられた第１と第２の緩衝剤充填流路とを備えた生体試料判別用プレートにおいて、前記サンプル定量部の底面と前記第１と第２の緩衝剤充填流路の底面に溝を設け、前記溝の方向を前記第１あるいは第２の緩衝剤充填流路の何れか一つの流路方向と略一致させる。【選択図】  図１
2009025069.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体サンプルをプレート上に設けられたサンプル定量部に注入するためのサンプル注入流路と緩衝剤を前記サンプル定量部に充填するために前記サンプル定量部に設けられた第１と第２の緩衝剤充填流路とを備えた生体試料判別用プレートにおいて、
前記サンプル定量部の底面と前記第１と第２の緩衝剤充填流路の底面に溝を設け、前記溝の方向は前記第１あるいは第２の緩衝剤充填流路の何れか一つの流路方向と略一致している生体試料判別用プレート。
【請求項２】
前記緩衝剤の粘度が１００から３００ｃＰである請求項１に記載の生体試料判別用プレート。
【請求項３】
前記溝の高さは、略６０ｎｍとし、前記溝ピッチは２５μｍから２００μｍである請求項２に記載の生体試料判別用プレート。
【請求項４】
前記第１の緩衝剤充填流路に設けられた溝と前記第２の緩衝剤充填流路に設けられた溝とのなす角度は略９０度である請求項１に記載の生体試料判別用プレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＤＮＡやタンパクその他の生体サンプルを緩衝剤中で移動させて得られる輸送反応を検出して生体サンプルを判別する生体サンプル判別装置用プレートに関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、分子生物学の急速な進展によって、様々な疾患と遺伝子の関係を正確に理解することが可能になり、遺伝子をターゲットにした医療に注目が集まるようになってきている。
【０００３】
特にＤＮＡのＳＮＰ（ｓｉｎｇｌｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍの略で「一塩基多型」と一般に称される。）が注目されている。それは、ＳＮＰが持つ特異性にある。ＳＮＰは、ヒトや動物に普遍に見られるが、同じ種でも個体によりＳＮＰが異なる。すなわちＳＮＰの違いを調べることにより、各個人の疾患に対する罹患率や薬剤に対する効果や感受性を予測し、個人に合わせた医療を行うことが出来る。さらには、ヒトや動物の親子関係の特定ができると考えられている。
【０００４】
このＳＮＰや一部の塩基配列が異なるＤＮＡを調べる方法として、アフィニティキャピラリー電気泳動法を利用した遺伝子診断装置と遺伝子診断方法がある。（例えば特許文献１を参照。）。
【０００５】
この方法は、まず目的配列に相補的なプローブＤＮＡに高分子化合物を結合させたコンジュゲートＤＮＡを作製する。このコンジュゲートＤＮＡは、高分子化合物のため、キャピラリー内で移動し難くなる性質を持つ。このコンジュゲートＤＮＡを電気浸透流が起きないようにコーティングされたキャピラリー管に充填し、陰極側から一本鎖のサンプルＤＮＡを注入して電圧を印加する。その際に、コンジュゲートＤＮＡと完全に相補的な配列を持ったサンプルＤＮＡは、充填したコンジュゲートＤＮＡとの相互作用により泳動が妨げられる。このときＳＮＰをもったサンプルＤＮＡと完全に相補的な配列を持ったサンプルＤＮＡとでコンジュゲートＤＮＡとのハイブリダイゼーションにおける親和性の差を電気泳動の移動度で比較することにより、ＳＮＰを持つＤＮＡを明瞭に識別出来る。
【０００６】
高分子化合物を結合させたコンジュゲートＤＮＡを用いて、サンプルＤＮＡのＳＮＰを判別するときは、サンプルＤＮＡとコンジュゲートＤＮＡを結合（以下、ハイブリという）させるためにサンプルＤＮＡを一本鎖の状態にする。サンプルＤＮＡは生体試料からゲノムＤＮＡを抽出し、蛍光色素を標識したプライマーＤＮＡを用いてＰＣＲで増幅した後、一本鎖に変性（サンプルＤＮＡ調整と呼ぶ。）する。調整したサンプルＤＮＡをサンプル定量部に注入した後、サンプル定量部で定量したサンプルＤＮＡをコンジュゲートＤＮＡと緩衝剤とが充填されたキャピラリー管内に注入し、電気泳動により増幅されたＰＣＲ産物を検出部で光学的に検出する。
【特許文献１】特開２００２−３４０８５８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら従来の構成では、サンプル定量部に緩衝剤を注入した後にサンプルＤＮＡをサンプル定量部に送り込みサンプル定量するが、サンプル定量部の両側に接続された２つの緩衝剤充填流路に充填された緩衝剤の粘度により定量できるサンプル量のばらつきが大きくなるという課題を有していた。
【０００８】
本発明は、前記従来の課題を解決するもので、サンプル注入部にサンプルを注入する際にサンプル定量部に予め充填された緩衝剤の粘度に拘わらず、サンプル定量のばらつきを抑えることの出来る生体試料判別用プレートを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記従来の課題を解決するために本発明の生体試料判別プレートは、生体サンプルをプレート上に設けられたサンプル定量部に注入するためのサンプル注入流路と緩衝剤を前記サンプル定量部に充填するために前記サンプル定量部に設けられた第１と第２の緩衝剤充填流路とを備えた生体試料判別用プレートにおいて、前記サンプル定量部の底面と前記第１と第２の緩衝剤充填流路の底面に溝を設け、前記溝の方向は前記第１あるいは第２の緩衝剤充填流路の何れか一つの流路方向と略一致していることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の生体試料判別用プレートによれば、定量部の底面にサンプルを進ませたい方向へ誘導するような溝を設けることにより、サンプル定量部に充填されている緩衝剤の粘度によらず、安定したサンプルの定量が出来る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下に、本発明の生体試料判別用プレートの実施の形態を図面とともに詳細に説明する。
【００１２】
（実施の形態１）
図１は本実施の形態１における生体試料判別用プレートの定量部１０３付近の図である。まず、本実施の形態１における生態試料判別用プレートの定量部１０３付近の構成について説明する。１０２は、サンプルをサンプル定量部１０３に導くためのサンプル注入流路であり、その幅は１００μｍ、深さは５０μｍである。また、１１１と１１２とは、それぞれ緩衝剤をサンプル定量部１０３に充填するための第１の緩衝剤充填流路と第２の緩衝剤充填流路であり、それぞれ幅１００μｍ、深さ５０μｍである。１０４と１０５は、それぞれ緩衝剤がサンプル定量部１０３に流入するための。緩衝剤流入口である。また、１０６は、サンプルをサンプル注入流路１０２に充填する際にサンプルが流入する入り口となるサンプル流入口であり、１０７はサンプルをサンプル注入流路１０２とサンプル定量部１０３とに充填した際に不要なサンプルを流出させるサンプル流出口である。サンプル定量部１０３の大きさは、縦３００μｍ、横８００μｍ、深さ５０μｍの直方体形状を持つ。図１の斜線で示すように、サンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２には微細な溝１０８が形成されており、この溝１０８の方向は、本実施例では第２の緩衝剤充填流路１１２の方向に一致するように設けられている。
【００１３】
次に、図２を用いて、本実施例の構造を持つサンプル定量部３に緩衝剤とサンプルを充填するときの様子を説明する。最初に、緩衝剤を定量部１０３に充填するが、この緩衝剤は２つの流入口１０４、１０５からサンプル定量部１０３へ向けて流入し、サンプル定量部１０３内部で合流し充填が完了する。図２は第１の流路に緩衝剤が充填された様子を示す図であり、緩衝剤はサンプル定量部１０３の下部１０１に充填されている。
【００１４】
次に、図３を用いてサンプルのサンプル定量部１０３への充填の様子を説明する。サンプルは、図３の矢印の方向に従ってサンプル注入流路１０２のサンプル流入口１０６からサンプル流出口１０７の方向へ移動する。この時に、サンプルはサンプル注入流路１０２に充填されるとともに、サンプル定量部１０３へも充填される。図３はサンプルがサンプル注入流路１０２と定量部１０３とに充填された様子を示す。
【００１５】
この時に、予めサンプル定量部１０３に充填された緩衝剤の粘度が異なると、サンプル定量部１０３により定量できるサンプル量にばらつきが生じる。これは、サンプルをサンプル定量部１０３に充填する際にサンプル定量部の下部１０１に生じる圧力に対して第１の緩衝剤充填流路１１１と第２の緩衝剤充填流路１１２とが持つ抵抗力の差が、緩衝剤の粘度によりばらつくために生じる。このばらつき効果の差異について、従来例である溝のない場合と本発明の溝を設けた場合とで、以下詳細に説明する。
【００１６】
本発明の効果を確かめるために、図１に示した構造を持つプレートに４種類の溝ピッチを設けた実施例１から４と比較例として溝を設けなかったものとを用意し、後述する共通条件下で１０回サンプル定量を行い、その効果を確認した。サンプル量のばらつきの判定は、顕微鏡を用いた目視検査を行い、第１の緩衝剤充填流路１１１と第２の緩衝剤充填流路とに流れるサンプル充填パターンが１０回とも同じパターンであれば○と判定した。
（共通条件）
サンプル定量部の下部１０１に充填した緩衝剤の粘度は５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０ｃＰとし、サンプル注入流路に流れるサンプル流量を１００ｍｌ／ｈ、３００ｍｌ／ｈとした。
（実施例１）
サンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２に、高さ６０ｎｍでピッチ２５μｍの溝を形成した。
（実施例２）
サンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２に、高さ６０ｎｍでピッチを５０μｍの溝を形成した。
（実施例３）
サンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２に、高さ６０ｎｍでピッチ７５μｍの溝を形成した。
（実施例４）
サンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２に高さ６０ｎｍでピッチ１００μｍの溝を形成した。
【００１７】
サンプル流量を１００ｍｌ／ｈに設定した場合での各実施例と比較例でのサンプル量のばらつきの判定結果を表１に示す。
【００１８】
【表１】
2009025069.tif 000003
【００１９】
また、サンプル流量を３００ｍｌ／ｈに設定した場合での各実施例と比較例でのサンプル量のばらつきの判定結果を表２に示す。
【００２０】
【表２】
2009025069.tif 000004
【００２１】
表１及び表２の結果より、比較例に示したサンプル注入流路１０２、サンプル定量部１０３及び第１の緩衝剤充填流路１１１、及び第２の緩衝剤充填流路１１２に溝１０８を形成していない場合は、流路量１００ｍｌ／ｈ、３００ｍｌ／ｈの何れの条件でも、緩衝剤の粘度５０から３００ｃＰでは、何れの流量でもサンプルのばらつきを抑制することはできなかった。緩衝剤の粘度３５０ｃＰになると何れの流量でもサンプル量のばらつきはなかった。一方、実施例１から４では、緩衝剤の粘度が５０ｃＰでは、何れの流量でもサンプル量のばらつきを抑制することが出来なかった。従って、本発明は、緩衝剤の粘度が１００から３００ｃＰの範囲においては、サンプル量のばらつきを抑制することが出来る。なお、緩衝剤の粘度３５０ｃＰになると、緩衝剤の粘度が高いためサンプル定量部１０３により定量できるサンプル量のばらつきは、顕微鏡を用いた目視検査により判定できないレベルであるため本発明を適用する必要はない。
【００２２】
次に、図１から図３で説明した流路底面に溝を設けた生体試料判別用プレートの具体的な例を示す。以下、図４から図１０を用いて、本実施の形態１における生体サンプル判別プレート及びそれを用いた生体サンプル判別方法について説明する。本発明は、生体サンプルを緩衝剤中で移動させて、生物学的、酵素的、免疫学的、及び化学的反応を行い、生体サンプルを容易かつ安価に精度よく短時間で判別することを実現するものである。
【００２３】
なお、本実施の形態１では、説明を具体的にするために、前記生体サンプルがＤＮＡサンプルで、前記緩衝剤が分離用ＤＮＡコンジュゲート及びＤＮＡ結合制御剤を含むものであるとし、本生体サンプル判別プレートが、流路中に充填させた分離用ＤＮＡコンジュゲート中に、定量された前記ＤＮＡサンプルを添加して電気泳動を行い、該流路中の蛍光度あるいは吸光度を検出して、該ＤＮＡサンプルのＳＮＰｓ（一塩基多型）の有無を判別するものとする。また、各流路やサンプル定量部のサイズは、図１で説明したプレート構成とほぼ同じサイズである。
【００２４】
まず、本生体サンプル判別プレートの構成について説明する。図４は、本生体サンプル判別プレートのパターン形成面を示す図である。本プレート２０１には、図４に示すパターン２０２が８個放射状に形成されており、同時に８検体のＤＮＡ判別が可能である。図４に示すように本プレート２０１の外形は８センチ四方の正方形で４角のうち３角はＲが設けられ、残りの１角は面取りされている。
【００２５】
更に穴２０４を設けているが、これは外形を非対称にしてパターンの場所を特定できるようにしている。材料はアクリル系の樹脂を使用し厚みは２ｍｍである。パターン形成面には、流路やチャンバーなどとなる溝が、深さ５０μｍで形成され、さらにその上面を厚さ５０μｍのアクリル製フィルムを接着することで密閉流路が形成されている。また、軸心２０５は本プレートの軸心であり、軸心２０５を中心に本プレートを回転部に固定するための回転部固定用穴２０３を設けている。
【００２６】
図５は図４に示すプレート２０１に形成されたパターン２０２の詳細形状を示す図である。パターン２０２は、緩衝剤である分離用ＤＮＡコンジュゲートが注入される緩衝剤注入口２０６と、注入された緩衝剤を一旦保持するための緩衝剤注入部２０７と、ＤＮＡサンプルが注入されるサンプル注入口２０８と、注入されたＤＮＡサンプルを一旦保持すためのサンプル注入部２０９と、サンプル注入部２０９に注入されたＤＮＡサンプルの移動先であるサンプルプール２１０と、一定の体積を持つ定量部２１１と、正電圧の印加部である正電極部２１２と、負電圧の印加部である負電極部２１３と、これらを接続する流路とからなる。
【００２７】
ここで、緩衝剤注入部２０７、サンプル注入部２０９、サンプルプール２１０、定量部２１１、正電極部２１２、負電極部２１３の各部周辺の形状について詳細に説明する。サンプルプール２１０は流路２１５によりサンプル注入部２０９と接続されている。サンプルプール２１０には空気孔２１６が設けられており、空気抜けが可能となる。正電極部２１２は正電圧の印加部であり、負電極部２１３は負電圧の印加部である。これらは流路２１４を介して接続されており、さらには流路２１７、２１８により緩衝剤注入部２０７ともそれぞれ接続されている。また、正電極部２１２、負電極部２１３は流路２１９、２２０により緩衝剤注入部２０７と接続されており、この２つの流路を通じて緩衝剤注入口２０６より空気抜けが可能となる。
【００２８】
定量部２１１付近の形状について図６を用いて詳細に説明する。定量部は流路２１４と流路２１５の合流部に設けられており、一定の体積を有している。また、緩衝剤流入口２２１、２２２はＤＮＡコンジュゲートを流路２１４に充填する際に緩衝剤が流入する入り口となり、サンプル流入口２２３はＤＮＡサンプルを流路２１５に充填する際にＤＮＡサンプルが流入する入り口で、サンプル流出口２２４はＤＮＡサンプルを流路２１５充填する際にＤＮＡサンプルが流出する出口であり、定量部２１１の底面にはサンプル流出口２２３から緩衝剤流入口２２２の方向へ延びる高さ略６０ｎｍの溝２２４が５０μｍピッチで設けられている。これは、図１で説明したサンプル定量部１０３とほぼ同じ構成である。
【００２９】
それでは、図５を利用して前述した該ＤＮＡサンプルのＳＮＰｓ（一塩基多型）の有無を判別するまでの具体的操作および動作の一例を説明する。
【００３０】
まず、検体となるＤＮＡサンプルを準備する。本来ＤＮＡは２本鎖の螺旋構造をしたものであるが、本実施の形態１においては、判別したいＳＮＰｓ部位を含む約６０塩基長の１本鎖ＤＮＡを準備する。抽出方法や１本鎖化については本発明とは直接関係がないので詳細説明は省略する。
【００３１】
次に、緩衝剤としてＤＮＡコンジュゲートを準備する。ＤＮＡコンジュゲートとは、６〜１２塩基長１本鎖ＤＮＡの５’末端に高分子のリニアポリマーが共有結合したものである。さらにＤＮＡは、正常型に対しては相補であるが変異型に対しては相補ではない配列であり、正常型ＤＮＡに対しての結合力が強く、変異型ＤＮＡに対しての結合力が弱い特性がある。また、電気泳動した場合、５’末端に結合したリニアポリマーがおもりとなり泳動速度がかなり遅いという特性もある。以降に記述する「ＤＮＡコンジュゲート」とは、電解質の役目もするｐＨ緩衝剤およびＭｇＣｌ2などのＤＮＡ結合力制御剤を含んだ物性とする。
【００３２】
試料の準備が終わったところで、ＤＮＡコンジュゲートおよびＤＮＡサンプルをプレート内へ注入する。ＤＮＡコンジュゲートはピペッター等により定量を緩衝剤注入口２０６から緩衝剤注入部２０７へ分注する。ＤＮＡサンプルも同様に定量をサンプル注入口２０８よりサンプル注入部２０９へ分注する。分注量としては、パターンのスケールにより異なるが本実施の形態１においては、ＤＮＡコンジュゲートは１８マイクロリットル、ＤＮＡサンプルは２マイクロリットルとする。
【００３３】
次にモータ等にプレートを固定し、重心２０５を軸に回転させる。この時分注されたＤＮＡコンジュゲートは、遠心力により外周方向へと移動する。
【００３４】
緩衝剤注入部２０６内のＤＮＡコンジュゲートは流路を通り正電極部２１２と負電極部２１３へ等分され正電極部２１２へ移動したＤＮＡコンジュゲートはさらに流路を通り定量部２１１まで移動する。負電極部２１３へ移動したＤＮＡコンジュゲートも同様に流路を通り定量部２１１まで移動する。回転開始から２分後、ＤＮＡコンジュゲートの移動が停止した状態が図７（ａ）である。また、定量部２１１周辺を拡大した図が図７（ｂ）である。
【００３５】
ＤＮＡコンジュゲートは、正電極部２１２および負電極部２１３の６割程度まで充填されており、流路２１４を満たし、図７（ｂ）に示すように定量部２１１まで達している。
正電極部２１２と負電極部２１３内に存在するＤＮＡコンジュゲートの液面高さとサンプル定量部の液面高さは、重心２０５を中心とする同一円周上となる。
【００３６】
次に注入されたＤＮＡサンプルの移動について図５および図８〜１０を用いて説明する。サンプル注入部２０９に注入されたＤＮＡサンプルは流路２１５を円周方向に移動して、流路２１５中に遠心分布される。このとき、サンプル注入部２０９に注入されるＤＮＡサンプルの量が多ければ、プレート２０１を高速回転させることで生じる遠心力によって、流路２１４に分離用ＤＮＡコンジュゲートが充填される前に、ＤＮＡサンプルが流路２１５に充填されて、流路２１４にＤＮＡサンプルが流れてしまうこととなる。従って、サンプル注入部２０９に注入するＤＮＡサンプルの量は、遠心力によって流路２１４にまで達しない量、つまり、図８に示すように流路２１５の途中で移動が止まる量を注入するようにする。
【００３７】
次に、サンプル注入部２０９に加圧処理を行うことによりＤＮＡサンプルを流路２１５に充填させる。この加圧処理は、ポンプ等の加圧手段を、サンプル注入部２０９のサンプル注入口２０８に接触させ、サンプル注入口２０８からサンプル注入部２０９に保持されたＤＮＡサンプルに圧力をかけることにより行う。
【００３８】
この加圧により、サンプル注入部２０９のＤＮＡサンプルは流路２１５を通り、定量部２１１およびサンプルプール２１０まで達する。特に、定量部２１１ではＤＮＡサンプルは流路２１４に充填されたＤＮＡコンジュゲートと接することになる。
【００３９】
この際、定量部２１１の底面には６０ｎｍの高さの溝２２０を５０μｍピッチで設けてあるため、定量部２１１にてＤＮＡコンジュゲートと接触したＤＮＡサンプルは流路２１４の緩衝剤流入口２１９の方向へ拡散していく。このとき拡散の大きさは加圧の圧力とＤＮＡコンジュゲートの粘度に依存するため、加圧の圧力とＤＮＡコンジュゲートの粘度を一定にすることにより、ＤＮＡサンプルの拡散方向と拡散量を常に一定にすることが出来る。
【００４０】
そして加圧処理の後、プレート１を中速にて数秒間もう一度回転させる。ここでは約３０００ｒｐｍでおよそ２秒回転させることで、図９に示すようにサンプル注入部２０８とサンプルプール２１０間の流路２１５に充填されていたＤＮＡサンプルを、回転により生じる遠心力によって、図９に示すように流路２１４に充填された分離用ＤＮＡコンジュゲートと接する部分である定量部２１１にのみ残すようにする。
【００４１】
このとき、流路２１５に充填されたＤＮＡサンプルは定量部２１１において、サンプル注入流路底部の高さで定量化される。残存したＤＮＡサンプルは他ＤＮＡサンプルに対して電気的にも絶縁された状態である。
【００４２】
次に、電気泳動を行う。電気泳動は正電極部２１２に正電極、負電極部２１３に負電極を、プレート２０１の外部からアクリル製のフィルムを突き破って挿入して、分離用ＤＮＡコンジュゲートと接触させる。そして数百Ｖの電圧を印加する。すると、流路２１４および定量部２１１において電界が発生し、定量部２１１に一定量残存したＤＮＡサンプルは流路２１４中を正電極側（図１０中Ａ方向）へ移動する。
【００４３】
流路２１４中には分離用ＤＮＡコンジュゲートが充填されており、ＤＮＡサンプルは分離用ＤＮＡコンジュゲートとの結合を繰り返しながら電気泳動する。この時、上述したようにＤＮＡサンプル中の正常型ＤＮＡは分離用ＤＮＡコンジュゲートとの結合力が強いため泳動速度が遅くなり、変異型ＤＮＡは結合力が弱いため正常型に比べ泳動速度は速くなる。つまりＤＮＡサンプル中に正常型、変異型両方が存在した場合は、正常型のＤＮＡと変異型のＤＮＡが分離していくこととなり、ＳＮＰｓの判別が行える。
【００４４】
ＤＮＡの検出は、蛍光標識（ＦＩＴＣ）を修飾したＤＮＡを４７０ｎｍの光で励起し、５２０ｎｍ付近の光検出によって行った。ＤＮＡの検出は、２６０ｎｍの吸光度によって行ってもよい。また、流路２１４を電気泳動するＤＮＡを、プレート２０１を回転させながら走査して光検出することもできる。
【００４５】
以上のように、本実施の形態１によれば、定量部２１１の底面に６０ｎｍ程度の高さの溝２２１を５０μｍピッチで設けることで、定量部２１１でＤＮＡコンジュゲートとＤＮＡサンプルが接触した際の拡散の方向を制御することが出来る。また、ＤＮＡコンジュゲートの粘度とＤＮＡサンプルを移動させる際の流量を一定にすることによりサンプルの拡散の大きさを一定とすることができるため、ＤＮＡサンプルをＤＮＡコンジュゲートに添加した状態を常に同じにすることができる。これにより、毎回、ＤＮＡの検出を安定して行うことが出来る。
【００４６】
なお、この溝のピッチは５０μｍに限ることはなく、図１から図３に示したように２５μｍから１００μｍの範囲で適宜、選択すればよい。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明の生体試料判別用プレートは、ＤＮＡサンプル等の生体サンプルの判別を、短時間で正確に、且つ簡便に行えるようにするものとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートの定量部周辺を示す図
【図２】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートの第１の流路に緩衝剤を充填した様子を示す図
【図３】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートの第２の流路及び定量部にサンプルを充填した様子を示す図
【図４】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートの流路形成面を示す図
【図５】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートに形成される流路パターンを示す図
【図６】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別用プレートの定量部付近の形状を示す図
【図７】本発明の実施の形態１にかかる試料充填処理を施した時のＤＮＡコンジュゲートの状態を示す図
【図８】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別装置用プレートにＤＮＡコンジュゲートとＤＮＡサンプルを充填し、４０００ｒｐｍにて回転中の各試料の状態を示した図
【図９】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別装置用プレートにＤＮＡコンジュゲートとＤＮＡサンプルを充填し、４０００ｒｐｍにて回転停止後、加圧処理をした時の各試料の状態を示した図
【図１０】本発明の実施の形態１にかかる生体試料判別装置用プレートにＤＮＡコンジュゲートとＤＮＡサンプルを充填し、４０００ｒｐｍにて回転停止後、再回転した直後の各試料の状態を示した図
【符号の説明】
【００４９】
１０１  サンプル定量部の下部
１０２  サンプル注入流路
１０３  定量部
１０４、１０５  緩衝剤流入口
１０６  サンプル流入口
１０７  サンプル流出口
１０８  溝
１１１  第１の緩衝剤充填流路
１１２  第２の緩衝剤充填流路
２０１  プレート
２０２  流路パターン
２０３  回転部固定用穴
２０４  位置決め穴
２０５  プレート重心
２０６  緩衝剤注入口
２０７  緩衝剤注入部
２０８  サンプル注入口
２０９  サンプル注入部
２１０  サンプルプール
２１１  定量部
２１２  正電極部
２１３  負電極部
２１４、２１５  流路
２１６  空気孔
２１７、２１８  緩衝剤流入口
２１９  サンプル流入口
２２０  サンプル流出口
２２１  溝
【図１】
2009025069.tif 000005
【図２】
2009025069.tif 000006
【図３】
2009025069.tif 000007
【図４】
2009025069.tif 000008
【図５】
2009025069.tif 000009
【図６】
2009025069.tif 000010
【図７】
2009025069.tif 000011
【図８】
2009025069.tif 000012
【図９】
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【図１０】
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