(57)【要約】【課題】毒性が低く、高度のバイオアベイラビリティを保持し、他の薬剤と共に投与する必要のないシクロスポリン製剤を提供することを、本発明の課題とする。【解決手段】シクロスポリンＡに構造的に類似しているシクロスポリン類似体、特にシクロスポリンＡに構造的に類似しているシクロスポリン類似体の異性体混合物を含む製剤を提供することによって、上記課題が解決された。これらの製剤は、安定なマイクロエマルションプレコンセントレートを形成し、すぐれた薬剤バイオアベイラビリティを提供し、及び／又はシクロスポリンＡの投与に関連する１種類以上の副作用を軽減することができる。これらの製剤の使用方法及び調製方法も開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７を含んでなるマイクロエマルションプレコンセントレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）項のもとで、２００２年４月５日に提出された
米国仮出願第６０／３７０，５９７号（代理人事件番号０３１９９３−０４１）及び２０
０１年１０月１９日に提出された米国仮出願第６０／３４６，２０１号（代理人事件番号
０３１９９３−１２５）に対する優先権を請求する。前記２件の出願の開示は、本明細書
にそのまま組み込まれる。
【０００２】
本発明は、構造的にシクロスポリンＡに類似しているシクロスポリン類似体を含有する
製剤に関する。特に、これらの製剤は、シクロスポリン類似体ＩＳＡＴＸ２４７の異性体
混合物を含有する。これらの製剤は、高い薬剤溶解性、すぐれた薬剤バイオアベイラビリ
ティをもたらし、シクロスポリン投与に関係する１種類以上の副作用を軽減する安定なマ
イクロエマルションを形成する。これらの製剤の使用方法及び調製方法も開示される。
【背景技術】
【０００３】
下記の参考文献は、本明細書の該当部分において括弧書きの数字によって参照される。
【非特許文献１】１．グプタ（Gupta）及びロビンソン（Robinson）著、経口コントロールド−ドラッグデリバリーに関する論文、テキスト版、１９９２、イージス・カデンス（Aegis Cadence）編、マンデル・デッカー社
【非特許文献２】２．トレイバー（Traber）ら著：Helv. Chim.Acta、６０巻、ｐ．１２４７−１２５５（１９７７）
【非特許文献３】３．コベル（Kobel）ら著：Europ. J. AppliedMicrobiology and Biotechnology、１４巻、ｐ．２３７−２４０（１９８２）
【非特許文献４】４．フォン ワルトバーグ（von Wartburg）ら著：Progressin Allergy、３８巻、ｐ．２８−４５（１９８６）
【非特許文献５】５．リッチ（Rich）ら著：J. Med. Chem.、２９巻、ｐ．９７８（１９８６）
【０００４】
【特許文献１】６．米国特許第４，３８４，９９６号、１９８３年５月２４日発行
【特許文献２】７．米国特許第４，７７１，１２２号、１９８８年９月１３日発行
【特許文献３】８．米国特許第５，２８４，８２６号、１９９４年２月８日発行
【特許文献４】９．米国特許第５，５２５，５９０号、１９９６年６月１１日発行
【０００５】
【非特許文献６】１０．スケトリス（Sketris）ら著、Clin.Biochem.、２８巻：ｐ.１９５−２１１（１９９５）
【非特許文献７】１１．ベネット（Bennett）著、Renal Failure、２０巻：ｐ．６８７−９０（１９９８）
【非特許文献８】１２．ワング（Wang）ら著、Transplantation、５８巻：ｐ．９４０−９４６（１９９４）
【非特許文献９】１３．「イーストマンのビタミンＥ ＴＰＧＳ（EastmanVitamin Ｅ ＴＰＧＳ）」Eastman Brochure、Eastman ChemicalCo.、Kingsport、Tenn（１９９６年１０月）
【非特許文献１０】１４．ホーレイズ・コンデンスド・ケミカル・ディクショナリー（Hawley's Condensed Chemical Dictionary）（１９８７）
【非特許文献１１】１５．エリス（Ellis）著、Progress inMedical Chemistry 25（１９８８）エルセヴィール、アムステルダム
【非特許文献１２】１６．ソコル（Sokol, R.J.）、Lancet、３３８（８７６１）：２１２（１９９１）
【非特許文献１３】１７．ソコル、Lancet、３３８（８７６８）：６９７（１９９１）
【０００６】
上記の各出版物又は特許の開示は、個々の各出版物及び特許の専門用語が特異的にかつ
個々に参考として組み込まれるのと同様に、そのまま参考として本明細書に組み込まれる
。
【０００７】
シクロスポリンの治療薬としての使用
大部分の移植処置において、ホスト−ドナー組織型適合によるグラフト拒絶を回避する
努力が行われているにもかかわらず、免疫抑制治療は、ホスト中のドナー臓器の生存能力
のために重要である。種々の免疫抑制剤、例えばアザチオプリン、メトトレキセート、シ
クロホスファミド、ＦＫ−５０６、ラパマイシン及びコルチコステロイド類などが移植手
術に使用されている。シクロスポリン類は、Ｔ−細胞介在性反応に対するそれらの好まし
い効果のために、免疫抑制治療にますます多く使用されるようになっている（１）。
【０００８】
シクロスポリンは、体液性免疫及び細胞介在性免疫反応、例えば同種移植片拒絶、遅延
型過敏症、実験的アレルギー性脳脊髄炎、フロイント アジュバント関節炎及びグラフト
対ホスト病（ＧＶＨＤ）などを抑制することが証明された。それは、臓器移植に続く臓器
拒絶の予防に、リウマチ性関節炎の治療に、乾癬の治療に、そしてその他のＩ型糖尿病、
クローン病及び狼瘡などの免疫病の治療に使用される。多くの天然シクロスポリン類が、
当該技術では公知である。非天然シクロスポリン類は、全−又は半合成手段によって、又
は改良培養法の適用によってつくられる。このように、入手できるシクロスポリン群は重
要であり、例えば、天然シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）からシクロスポリンＺ（ＣｓＺ）ま
で、並びにその他の非天然シクロスポリン誘導体、ジヒドロ−及びイソ−シクロスポリン
などがある（２、３、４）。修飾された１−位置のアミノ酸を含むＣｓＡ類似体が、リッ
チらによって報告された（９）。免疫抑制性、抗炎症性及び抗寄生虫性ＣｓＡ類似体が、
サンド社に譲渡された米国特許第４，３８４，９９６号（６）、第４，７７１，１２２号
（７）、第５，２８４，８２６号（８）及び第５，５２５，５９０号（特許文献４）に記
載されている。
【０００９】
シクロスポリンは、分子量１２０２ダルトンを有する親油性分子である。シクロスポリ
ンＡは、水に難溶で、高い親油性を有するため、従来の固体又は液体の薬剤用担体を有す
るシクロスポリンＡ医薬組成物は不都合であることが多い。例えば、シクロスポリン類は
このような組成物からは満足に吸収されず、又はこのような組成物は耐容性がよくなく、
又はそれらの保存時における安定性は十分ではない。その溶解濃度は、１日投与量に対し
て低いことが多い。
【００１０】
シクロスポリン治療の副作用
シクロスポリン治療に関しては、多数の副作用がある。これらには腎毒性、肝毒性、白
内障発生、多毛症、パラセシス（parathesis）及び歯肉過形成などがある（１０）。最も
深刻な副作用は、腎毒性である。
【００１１】
急性シクロスポリン腎毒性は形態学的に、封入体、アイソメトリック空胞形成、及び微
小カルシウム沈着を特徴とする細管損傷を伴う。それは、糸球体濾過率の低下に導く。こ
れは、シクロスポリンで治療した患者の血清クレアチニンの速やかな増加によって確認で
きる（１１）。
シクロスポリンが腎臓障害を起こす正確なメカニズムは知られていない。ラット研究に
おいて、慢性的ＣｓＡ−誘起性腎臓機能及び腎臓構造の悪化は、腎脂質の過酸化を伴った
。抗酸化剤をＣｓＡと同時投与すると、これらのラットにおける腎臓障害は軽減すること
をワングらが証明した（１２）。
シクロスポリン治療と関連する腎毒性リスクを軽減する、これまでの当該技術での取り
組みは、この薬剤をシクロスポリンの代謝を遅らせる作用物質と同時に投与し、治療的血
中濃度を維持するために必要な用量を効果的に減らすことである。しかし、この方法は、
シクロスポリンのバイオアベイラビリティが著しく変動するという問題を解決しないこと
が多い（１２）。このように、すぐれたバイオアベイラビリティーを有しながらも、副作
用を起こさないシクロスポリン製剤を調製するという問題は、当該技術では公知である。
【００１２】
投与型
薬剤がその治療効果を実現するためには、その薬剤の治療量はバイオアベイラブルでな
ければならない、すなわち、それは患者の作用部位に到達できなければならない。経口ド
ラッグデリバリーは当該技術では知られており、投与が容易であるため一般的に利用され
ている。しかし経口投与型は、その薬剤が、まず腸内である与えられた時間内にその投与
型から遊離しなければならず、また、消化管内で溶解し、吸収されなければならないため
、複雑である。例えば、その投与型からの正しい薬剤放出、及び消化（ＧＩ）管内におけ
る薬剤の可溶化が重要である。
【００１３】
ＧＩ管の領域内でよくはたらく公知の経口投与型は、錠剤、カプセル、ゲルカプセル、
シロップ、懸濁液、エマルション、マイクロエマルション類及びプレエマルションコンセ
ントレート類などである。経口投与製剤の開発において、溶解度が重要な役割を果たす。
なぜならば、活性薬剤を運搬するために使用される製剤は、ある与えられた時間の間、活
性部位に到着する薬剤の量及び／又は濃度に影響を与えるからである。その製剤の組成も
、消化管内における薬剤化合物の可溶化に直接影響を与え、その結果、活性薬剤化合物の
血流への吸収程度及び吸収速度に影響を与える。その上、薬剤の治療効果は、その薬剤が
デリバリーシステムそのものから放出される速度によって影響を受ける。デリバリーシス
テムそれ自体は、吸収前の消化管における活性化合物の溶解速度及び溶解程度に影響を与
える（１）。
【００１４】
当該技術で知られている従来システムにおいて、薬剤の内容物は、短時間内に消化管に
放出され、ある与えられた時間、通常は投与後数時間内に、血中薬剤濃度はピークに達す
る。シクロスポリン製剤を含む公知の経口ドラッグデリバリーシステムの設計は、不都合
な用量関連性副作用をもたらすリスクを冒して、可能な限り速かな薬剤溶解を得ることに
基準をおいている。
【００１５】
したがって、毒性が低く、高度のバイオアベイラビリティーを保持し、他の薬剤と共に
投与する必要のないシクロスポリン製剤が是が非でも必要である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、以下を提供する：
（項目１）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０及びツイーン８０からなる群から選択される乳化剤；及び
ｅ）エタノール
を含んでなるマイクロエマルションプレコンセントレート。
（項目２）
医薬製剤が、約５ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、０％より多く約５０重量％までのビタミンＥＴＰＧＳ、０％より多く約５０重量％までのＭＣＴ油、０％より多く約５０重量％までの乳化剤、及び約５ないし約１５重量％のエタノールとを含み、前記製剤は、室温では液体マイクロエマルションプレコンセントレートである、項目１に記載のマイクロエマルションプレコンセントレート。
（項目３）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：４：２：２：１である、項目２に記載のマイクロエマルションプレコンセントレート。
（項目４）
ＭＣＴ油、乳化剤、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含み、前記製剤は室温で液体である、項目１に記載のマイクロエマルションプレコンセントレートを調製する方法。
（項目５）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
を含んでなる医薬製剤。
（項目６）
約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ないし約５０重量％のツイーン４０、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含んでなる、項目５に記載の医薬製剤。
（項目７）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：４：２：２：１である、項目６に記載の医薬製剤。
（項目８）
ＭＣＴ油、ツイーン４０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、項目５に記載の医薬製剤を調製する方法。
（項目９）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン８０；及び
ｅ）エタノール
を含んでなる医薬製剤。
（項目１０）
約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ないし約５０重量％のツイーン８０、約５％ないし約１５重量％のエタノールを含んでなる、項目９に記載の医薬製剤。
（項目１１）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：２：４：２：１である、項目１０に記載の医薬製剤。
（項目１２）
ＭＣＴ油、ツイーン８０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、項目９に記載の医薬製剤を調製する方法。
（項目１３）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ＭＣＴ油；
ｃ）ツイーン８０；
ｄ）トリアセチン；及び
ｅ）エタノール
を含んでなる医薬製剤。
（項目１４）
約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のトリアセチン、約５％ないし約５０重量％のＭＣＴ油、約５％ないし約５０重量％のツイーン８０、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールとを含んでなる、項目１３に記載の医薬製剤。
（項目１５）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：５：３：１：１である、項目１４に記載の医薬製剤。
（項目１６）
ＭＣＴ油、ツイーン８０、エタノール、トリアセチン、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、項目１３に記載の医薬製剤を調製する方法。
（項目１７）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ツイーン８０；
ｃ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｄ）エタノール；及び
ｅ）ミリスチン酸イソプロピル
を含んでなる医薬製剤。
（項目１８）
約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約５５重量％のミリスチン酸イソプロピル、約５％ないし約５０重量％のツイーン８０、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含んでなる、項目１７に記載の医薬製剤。
（項目１９）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：２：１：１：６である、項目１８に記載の医薬製剤。
（項目２０）
ミリスチン酸イソプロピル、ツイーン８０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、項目１７に記載の医薬製剤を調整する方法。
（項目２１）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
を含んでなる医薬製剤プレコンセントレートであって、
水性メジウムと混合すると透明な安定マイクロエマルション溶液を形成する、前記医薬製剤プレコンセントレート。
（項目２２）
約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ないし約５０重量％のツイーン４０、約５％ないし約１５重量％のエタノールを含んでなる、項目２１に記載の医薬製剤プレコンセントレート。
（項目２３）
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：４：２：２：１である、項目２２に記載の医薬製剤プレコンセントレート。
（項目２４）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
を含んでなるマイクロエマルションプレコンセントレートであって、
プレコンセントレート約１部対水性メジウム約１０ないし約１００部の割合で水性メジウムと混合すると、透明な安定マイクロエマルション溶液を形成する、前記マイクロエマルションプレコンセントレート。
（項目２５）
前記水性メジウムが、水、果汁（グレープフルーツジュースを除く）、茶、ミルク及びココアからなる群から選択される、項目２１に記載の医薬製剤。
（項目２６）
前記果汁がリンゴジュースである、項目２５に記載の医薬製剤。
（項目２７）
ＭＣＴ油、ツイーン４０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ ｎ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合し、その後この製剤を水性メジウムに加えて、マイクロエマルションプレコンセントレートを形成するまで混合することを含む、項目２１に記載の医薬製剤を調製する方法。
（項目２８）
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
を含んでなる医薬製剤であって、
皮下又は筋肉内投与に適する、前記医薬製剤。
（項目２９）
エマルション又はマイクロエマルションである、項目１、５、９、１３、又は１７のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目３０）
エマルション又はマイクロエマルションプレコンセントレートである、項目５、９、１３、又は１７のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目３１）
ＩＳＡＴＸ２４７のバイオアベイラビリティが約３０％より大きい、項目１、５、９、１３、１７、２１、又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目３２）
経口投与のためのものである、項目１、５、９、１３、１７又は２１のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目３３）
さらに、保護コロイドとしての生体適合性ポリマー類、懸濁液安定剤又は増量剤、賦形剤、結合剤及び担体を含む、項目１、５、９、１３、１７、２１、又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目３４）
生体適合性ポリマーが、ポリオキシエチレングリコール化天然又は水素化植物油、クレモフォル（商標）、ニッコル（商標）、ツイーン類、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー類、レシチン類、プロピレングリコールモノ−及びジ−脂肪酸エステル類及びプロピレングリコール カプリル−カプリン酸ジエステルからなる群から選択される、項目３３に記載の医薬製剤。
（項目３５）
ツイーンが、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタントリオレエート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタントリステアレート、ポリオキシエチレン（４）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（４）ソルビタンモノステアレート、及びポリオキシエチレン（５）ソルビタンモノオレエートからなる群から選択される、項目３４に記載の医薬製剤。
（項目３６）
免疫抑制を必要とする対象に、項目１、５、９、１３、１７、２１又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤の有効量を投与することを含む、免疫抑制を生成する方法。
（項目３７）
投与する医薬製剤の量が、前記対象の体重１ｋｇあたり約０．５ないし３ｍｇ／日である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記医薬製剤が１日１回投与される、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
前記医薬製剤が１日２回投与される、項目３６に記載の方法。
（項目４０）
前記医薬製剤を使用して、前記対象の炎症性又は自己免疫疾患又は障害を治療する、項目３６に記載の方法。
（項目４１）
項目１、５、９、１３、１７、２１又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤をつくることによって、ＩＳＡＴＸ２４７の免疫抑制効果を増強する方法。
（項目４２）
前記プレコンセントレートを、プレコンセントレート約１部対水性メジウム約１０ないし約１００部の割合で水性メジウムと混合する、項目１、５、９、１３、１７、又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤。
（項目４３）
前記水性メジウムが、水、果汁（グレープフルーツジュースを除く）、茶、ミルク及びココアからなる群から選択される、項目４２に記載の医薬製剤。
（項目４４）
前記果汁がリンゴジュースである、項目４３に記載の医薬製剤。
（項目４５）
経口製剤がソフトゼラチンカプセルに封入されている、項目３２に記載の医薬製剤。
（項目４６）
対象に投与した際に免疫抑制を生成するための薬剤の製造における、項目１、５、９、１３、１７、２１、又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤の使用。
（項目４７）
前記薬剤が、前記対象の体重１ｋｇあたり前記医薬製剤約０．５ないし３ｍｇ／日の投与に適する、項目３６に記載の使用。
（項目４８）
前記薬剤が１日１回投与される、項目３６に記載の使用。
（項目４９）
前記薬剤が１日２回投与される、項目３６に記載の使用。
（項目５０）
前記薬剤を使用して、前記対象の炎症性又は自己免疫疾患又は障害を治療する、項目３６に記載の使用。
（項目５１）
ＩＳＡＴＸ２４７の免疫抑制効果を増強するための薬剤の製造における、項目１、５、９、１３、１７、２１、又は２８のいずれかの項に記載の医薬製剤の使用。
【００１７】
本発明は、ある種の製剤、好ましくはマイクロエマルションプレコンセントレート及び
マイクロエマルション製剤が、シクロスポリン類似体、ＩＳＡＴＸ２４７のデリバリーを
行うことができるという発見に基づくものである。シクロスポリン類似体ＩＳＡＴＸ２４
７は、シクロスポリンに関連する副作用の一つ以上を軽減する一方、その薬剤の高いバイ
オアベイラビリティーは保持するものである。さらに、本発明の製剤は、十分なバイオア
ベイラビリティーを提供することによって、ＩＳＡＴＸ２４７の免疫抑制効果も高める。
【００１８】
本発明の製剤は全て、活性成分としてのＩＳＡＴＸ２４７、及びポリオキシル化部分を
有する非イオン性界面活性剤などの合成補助乳化剤で乳化された、合成又は植物性油を含
有する。したがって、本発明の製剤は、ＩＳＡＴＸ２４７、界面活性剤、エタノール、親
油性及び／又は両親媒性溶媒を含む。本発明の製剤は、必要に応じてｐＨ及び等張性を調
節でき、保護コロイドなどの生体適合性ポリマー類、懸濁液安定剤及び形成剤、賦形剤、
結合剤及び担体なども必要に応じて含むことができる。
【００１９】
好ましい一態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ビ
タミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン４０及びツイーン８０からなる群から
選択される乳化剤、及びｅ）エタノールを含んでなるマイクロエマルションプレコンセン
トレートに関するものである。より好ましくは、このマイクロエマルションプレコンセン
トレートは、約５ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、０％より多く約５０重量％ま
でのビタミンＥ ＴＰＧＳ、０％より多く約５０重量％までのＭＣＴ油、０％より多く約
５０重量％までの乳化剤、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含み、前記製剤
は、室温では液体マイクロエマルションプレコンセントレートである。より好ましくは、
ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比は、約０．５−１：４：２：２：１である。
【００２０】
本発明は、ＭＣＴ油、乳化剤、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ及び正しい量のＩＳ
ＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、マイクロ
エマルションプレコンセントレートの調製方法も意図しており、製剤は、室温では液体で
ある。
【００２１】
また別の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ビタ
ミンＥ−−トコフェリルポリエチレングリコール１０００琥珀酸（ビタミンＥ ＴＰＧＳ
）、ｃ）中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）油、ｄ）ツイーン４０、及びｅ）エタノールを含
んでなる医薬製剤に関するものである。好ましくは、この医薬製剤はマイクロエマルショ
ンである；より好ましくは、この製剤はマイクロエマルションプレコンセントレートであ
る。この製剤は、好ましくは約５ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０ないし
約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ない
し約５０％のツイーン４０及び約５ないし約１５重量％のエタノールを含む。より好まし
くは、ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が０．５−１：４：２：２：１である。
【００２２】
さらにまた別の態様において、本発明は免疫抑制を必要とする対象に、ａ）薬物学的有
効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン４０
、及びｅ）エタノールを含んでなる医薬製剤の有効量を投与することを含む、免疫抑制を
生成する方法に関するものである。
【００２３】
本発明は、ＭＣＴ油、ツイーン４０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量の
ＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、本発
明のこの態様の医薬製剤を調製する方法も意図している。
【００２４】
その他の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ビタ
ミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン８０、及びｅ）エタノールを含んでなる
医薬製剤に関するものである。好ましくは、この医薬製剤はマイクロエマルションであり
；より好ましくは、この製剤はマイクロエマルションプレコンセントレートである。この
医薬製剤は、好ましくは約５％ないし１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約
５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ない
し約５０重量％のツイーン８０、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含む。よ
り好ましくは、ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：２：４：２：１である。
【００２５】
その他の態様において、本発明は、免疫抑制を必要とする対象に、ａ）薬物学的有効量
のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン８０、及
びｅ）エタノールを含んでなる医薬製剤の有効量を投与することを含む、免疫抑制を生成
する方法に関するものである。
【００２６】
本発明は、ＭＣＴ油、ツイーン８０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、及び適量の
ＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、本発
明のこの態様の医薬製剤を調製する方法も意図している。
【００２７】
また別の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ＭＣ
Ｔ油、ｃ）ツイーン８０、ｄ）トリアセチン、及びｅ）エタノールを含んでなる、医薬製
剤に関するものである。好ましくは、この医薬製剤はマイクロエマルションであり；より
好ましくは、この製剤はマイクロエマルションプレコンセントレートである。この医薬製
剤は、好ましくは約５％ないし１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重
量％のトリアセチン、約５％ないし約５０重量％のＭＣＴ油、約５％ないし約５０重量％
のツイーン８０及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含む。より好ましくは、ａ
：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５−１：５：３：１：１である。
【００２８】
さらにまた別の態様において、本発明は、免疫抑制を必要とする対象に、ａ）薬物学的
有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ）ＭＣＴ油、ｃ）ツイーン８０、ｄ）トリアセチン、及び
ｅ）エタノールを含んでなる医薬組成物の有効量を投与することを含む、免疫抑制を生成
する方法に関するものである。
【００２９】
本発明は、ＭＣＴ油、ツイーン８０、エタノール、トリアセチン、及び適量のＩＳＡＴ
Ｘ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、本発明のこの
態様の医薬製剤を調製する方法も意図している。
【００３０】
さらにまた別の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のａ）ＩＳＡＴＸ２４７
、ｂ）ツイーン８０、ｃ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｄ）エタノール、及びｅ）ミリスチン
酸イソプロピルを含んでなる医薬製剤に関するものである。好ましくは、この医薬製剤は
マイクロエマルションであり；より好ましくは、この製剤はマイクロエマルションプレコ
ンセントレートである。この医薬製剤は、好ましくは約５％ないし約１０重量％のＩＳＡ
ＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約５５
重量％のミリスチン酸イソプロピル、約５％ないし約５０重量％のツイーン８０及び約５
％ないし約１５重量％のエタノールを含む。より好ましくは、ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量
比が約０．５−１：２：１：１：６である。
【００３１】
また別の態様において、本発明は、免疫抑制を必要とする対象に、ａ）ＩＳＡＴＸ２４
７、ｂ）ツイーン８０、ｃ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｄ）エタノール、及びｅ）ミリスチ
ン酸イソプロピルを含んでなる医薬製剤の有効量を投与することを含む、免疫抑制を生成
する方法に関するものである。
【００３２】
本発明は、ミリスチン酸イソプロピル、ツイーン８０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰ
ＧＳｎ、及び適量のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合す
ることを含む、本発明のこの態様の医薬製剤を調製する方法も意図している。
【００３３】
さらにまた別の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ
）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン４０、及びｅ）エタノールを含ん
でなる医薬製剤プレコンセントレートに関するものである。この医薬製剤プレコンセント
レートは、好ましくは約５％ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約
５０重量％のビタミンＥ ＴＰＧＳ、約５％ないし約２０重量％のＭＣＴ油、約５％ない
し約５０重量％のツイーン４０、及び約５％ないし約１５重量％のエタノールを含む。よ
り好ましくは、ａ：ｂ：ｃ：ｄ：ｅの重量比が約０．５：４：２：２：１である。さらに
より好ましいのは、製剤がマイクロエマルションプレコンセントレートであって、このプ
レコンセントレートは、水性メジウムと混合すると透明な安定マイクロエマルション溶液
を形成することである。好ましくは、この水性メジウムは、水又は果汁（グレープフルー
ツジュースを除く）である。加えて、このプレコンセントレートは、プレコンセントレー
ト約１部対水性メジウム約１０ないし約１００部という比で、水性メジウムと混合するの
がより好ましい。
【００３４】
また別の態様において、本発明は、水性メジウムに混入したａ）薬物学的有効量のＩＳ
ＡＴＸ２４７、ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン４０、及びｅ）
エタノールを含んでなる医薬製剤の有効量を、免疫抑制を必要とする対象に投与すること
を含む、免疫抑制を生成する方法に関するものである。
【００３５】
本発明は、ＭＣＴ油、ツイーン４０、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧＳｎ、及び適量
のＩＳＡＴＸ２４７を、ＩＳＡＴＸ２４７が完全に溶解するまで混合することを含む、本
発明のこの態様の医薬製剤を調製する方法も意図している。生成したプレコンセントレー
トは、その後水性メジウムと、１部のプレコンセントレート対約１０ないし約１００部の
メジウムという比で混合するのが好ましい。
【００３６】
さらにまた別の態様において、本発明は、ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７、ｂ
）ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ｃ）ＭＣＴ油、ｄ）ツイーン４０、及びｅ）エタノールを含ん
でなる医薬製剤に関するものである。この医薬製剤は、皮下（ＳＣ）又は筋肉内（ＩＭ）
投与など、非経口的に投与することができ、任意に滅菌される。
【００３７】
本発明のもう一つの態様において、前記マイクロエマルションプレコンセントレート製
剤のいずれかが、水性メジウムと混合して透明で熱力学的安定なマイクロエマルション溶
液を形成することができる。水性メジウムは、水、又はグレープフルーツジュースを除く
果汁である。グレープフルーツジュースは、ＩＳＡＴＸ２４７と不都合な反応をおこすこ
とがある。加えて、プレコンセントレートは、プレコンセントレート約１部対水性メジウ
ム約１０ないし約１００部の比で水性メジウムと混合する。
【００３８】
本発明のさらにもう一つの態様において、前記マイクロエマルションプレコンセントレ
ート製剤のいずれかは、好ましくはソフトゼラチンカプセルに封入された、経口製剤であ
る。
【００３９】
発明を実施するための形態
概して、本出願における用語は、当該技術において理解される意味で一貫して使用され
る。
【００４０】
用語「cyclosporin」及び「cyclosporine」は単にスペルの違いであり、ここでは交換
可能に用いられ、同じ化合物をあらわす。例えば、シクロスポリンＡ（cyclosporinＡ及
びcyclosporine Ａ）は、場合によって同じ化合物又は同じ化合物群をあらわす。
【００４１】
本明細書に使用する用語「マイクロエマルションプレコンセントレート」は、マイクロ
エマルションをつくる水性メジウムと接触可能である系を意味する。用語マイクロエマル
ションは、本明細書では、水及び有機化合物（疎水性（親油性）有機化合物を含める）を
含む、不透明でない（透明な）又は実質的に不透明でない熱力学的に安定なコロイド分散
系として一般的に受け入れられている意味で使用される。
【００４２】
用語「エマルション」は、小滴の形で他の液に細かく分散している少なくとも１種類の
不混和性液からなる不均質系であり、上記小滴の直径は通常０．１ｍｍを超える。このよ
うな系は、最小の安定性を有し、それは界面活性剤、微粉固体などの添加物によってさら
に不安定になる。従来の「エマルション」は、本発明のマイクロエマルションとは異なり
、熱力学的に不安定な分散系と考えられる。
【００４３】
Ａ．製剤の製法
本発明の製剤は全て、活性成分としてのＩＳＡＴＸ２４７と、補助乳化剤、好ましくは
ポリオキシル化部分を有する非イオン性界面活性剤などの補助乳化剤で乳化した合成又は
植物油を含む。本発明の製剤は、ｐＨ及び等張性を必要に応じて調節できる。本発明の製
剤は、保護コロイドなどの生体適合性ポリマー類、懸濁液安定剤及び形成剤、賦形剤、結
合剤及び担体も、必要に応じて含むことができる。幾つかの好ましい実施形態は、比較的
高い薬剤溶解度及び水性メジウムへの比較的速やかな溶解（撹拌して約５分未満）を有し
、透明マイクロエマルションを形成する、透明な安定製剤を形成する。
【００４４】
このように、本発明の製剤は、ＩＳＡＴＸ２４７、界面活性剤、油、エタノール及び、
親油性及び／又は両親媒性溶媒である乳化剤を含む、マイクロエマルション又はマイクロ
エマルションプレコンセントレートである。ある実施形態において、この製剤は、約５％
ないし約１０重量％のＩＳＡＴＸ２４７、約２０％ないし約５０重量％の界面活性剤、例
えばトコフェリルポリエチレングリコールカルボン酸エステルなど（又は任意にトリアセ
チンなどのエマルション安定剤）、約５％ないし約２０重量％の油成分、例えばＭＣＴ油
又はミリスチン酸イソプロピルなど、約５&ないし約１５重量％のエタノール、及び約２
０％ないし約４０重量％の親油性溶媒及び／又は約１０％ないし約５５重量％の両親媒性
溶媒を含む。その他に、この製剤は、任意にその他の界面活性剤を約１０％ないし約２０
重量％含むことができる。
【００４５】
本発明の実施形態は、十分な薬剤バイオアベイラビリティ（表３及び５、及び図２を参
照）及び／又は軽減された毒性（表５及び７を参照）を有する。この高められるバイオア
ベイラビリティ及び／又は軽減される毒性のメカニズムは不明である。しかし、理論によ
って制限されるものではないが、ビタミンＥ ＴＰＧＳが製剤のこれらの特徴に寄与して
いる可能性がある。例えば、ビタミンＥ ＴＰＧＳの同時投与は、小児における肝臓移植
後のシクロスポリンのバイオアベイラビリティを高めることが証明された（ソコルら）。
ビタミンＥ ＴＰＧＳは、腸内におけるチトクロームＰ４５０の薬剤代謝を阻害すること
によって、バイオアベイラビリティを高める。ビタミンＥ ＴＰＧＳは、シクロスポリン
誘起性腎臓チトクロームＰ−４５０の生成を抑制し、二次的に酸素化代謝産物の形成を減
らす。又は、ビタミンＥ ＴＰＧＳは、Ｐ−ｇｐ−コントロールド逆輸送を阻害し、腸の
腸細胞層を通過する薬剤類の正味の輸送を高め、同時投与される薬剤のバイオアベイラビ
リティの増加を引きおこしうる。加えて、ビタミンＥ ＴＰＧＳはよく知られた抗酸化剤
である。また、ビタミンＥ ＴＰＧＳは、アラキドン酸放出及びリポキシゲナーゼ酵素活
性を阻害することによって、プロスタグランジン形成に影響を与えるというやり方で、ア
ラキドン酸代謝にある役割を果たす。このプロセスにより、ビタミンＥ ＴＰＧＳは血小
板凝集を阻止し、それによってＩＳＡＴＸ２４７の腎毒性作用を減らす（１５）。又は、
ＩＳＡＴＸ２４７そのものが、シクロスポリンＡやその他の関連化合物に比べてよりバイ
オアベイラブルであり、より低毒性である可能性もある。これらのメカニズムのいずれか
、これらのメカニズムの組合わせのいずれか、又は未知のメカニズムが、ここに開示され
る組成物の高いバイオアベイラビリティ及び低い毒性に貢献しているのであろう。
【００４６】
本発明の製剤の好ましい活性成分は、シクロスポリンの類似体、ＩＳＡＴＸ２４７であ
る。ＩＳＡＴＸ２４７は、Ｅ−及びＺ−異性体の混合物として、又は単独のＥ−又はＺ−
異性体として製剤中に存在する。ＩＳＡＴＸ２４７異性体の構造式は次のとおりである：
【化１】
2009073850.tif 000002
【００４７】
本発明の製剤は、薬剤ＩＳＡＴＸ２４７、合成又は植物油、好ましくはポリオキシエチ
ル化部分を有する非イオン性界面活性剤、好ましくはポリオキシエチル化ビタミンＥなど
の合成補助乳化剤で乳化されたＭＣＴ（中鎖トリグリセリド）油を含む。処方された内容
物は、ｐＨ及び等張性を必要に応じて調節することができる。これらの製剤は、ポリ（ビ
ニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）又はポリエチレングリコ
ール（ＰＥＧ）などの生体適合性ポリマー類及びその他のポリマー類を保護コロイドとし
て、及び懸濁剤又は増量剤、賦形剤、結合剤及び／又は担体も場合により含むことができ
る。
【００４８】
ウィッティヒ反応によるＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体混合物の合成
ここに例示されるウィッティヒ反応経路は、図３の参照番号３１によって確認される。
方法１は、臭素中間体アセチル−η−ブロモシクロスポリン４１を経て進むが、方法２は
、出発点としてアセチルシクロスポリンＡアルデヒド５１を使用する。以下に記載する典
型的方法はウィッティヒ反応を用い、混合立体化学的配置を有するアルケン官能基を導入
する。
【００４９】
本明細書に開示される典型的実施形態において、ＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）
−異性体混合物を合成するために用いられるウィッティヒ反応は、任意にリチウムハリド
の存在下で行ってもよい。ウィッティヒ反応におけるリチウムハリドの存在は、生成する
幾何異性体類の比に影響をもつことはよく知られており、したがってこのような化合物の
添加は、ＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体の所望混合物の生成に役立つ。
【００５０】
方法１
本発明の一実施形態において、ＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体混合物は
、図４に示すようにつくられる。図４における波線（特に、化合物４３と４４を参照）の
表示の使用は、例示的反応系列が（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体の混合物を生成することを示
すものとする。一実施形態において、生成した（Ｅ）対（Ｚ）−異性体のパーセント比は
、（Ｅ）−異性体の約１０ないし９０パーセントから（Ｚ）−異性体の約９０ないし１０
パーセントまでの範囲であるが、これらの範囲は単なる例示であり、多くの他の範囲が可
能である。例えば、混合物は約１５ないし８５重量パーセントの（Ｅ）−異性体及び約８
５ないし１５パーセントの（Ｚ）−異性体を含むことができる。その他の実施形態におい
て、混合物は約２５ないし７５重量パーセントの（Ｅ）−異性体及び約７５ないし２５重
量パーセントの（Ｚ）−異性体；約３５ないし６５重量パーセントの（Ｅ）−異性体及び
約６５ないし３５重量パーセントの（Ｚ）−異性体；及び、約４５ないし５５重量パーセ
ントの（Ｅ）−異性体及び約５５ないし４５パーセントの（Ｚ）−異性体を含む。また別
の実施形態において、異性体混合物は、約４５ないし５０重量パーセントの（Ｅ）−異性
体及び約５０ないし５５重量パーセントの（Ｚ）−異性体を含むＩＳＡＴＸ２４７混合物
である。これらの重量パーセントは組成物の総重量を基準としており、（Ｅ）異性体及び
（Ｚ）異性体の重量の合計が１００重量パーセントであることは当然である。言い換えれ
ば、混合物は６５重量パーセントの（Ｅ）−異性体及び３５重量パーセントの（Ｚ）−異
性体を含むことができ、又はその逆でもよい。
【００５１】
図４を参照すると、アセチルシクロスポリンＡの１−アミノ酸残基の側鎖の末端η炭素
を次の反応工程において臭素化する；すなわち、四塩化炭素などの溶媒中でアセチルシク
ロスポリンＡ３５をＮ−ブロモスクシンイミド及びアゾ−ビス−イソブチロニトリルと共
に還流し、中間体アセチル−η−ブロモシクロスポリンＡ４１を生成する。Ｎ−ブロモス
クシンイミドは、アリル水素を臭素で置換するためによく用いられる試薬であり、これは
遊離基メカニズムによって行われると考えられている。この中間体４１の製法は、エバー
ル及びナニンガーによって「シクロスポリンＡの主代謝産物（ＯＬ−１７）の合成」（J.
Org. Chem.、５７巻、ｐ．２６８６−２６９１（１９９２））で詳細に記載されている
。
【００５２】
新規の中間体、アセチルシクロスポリンＡトリフェニルホスホニウムブロミド４２は、
アセチル−η−ブロモシクロスポリンＡ４１から、この化合物をトルエンなどの溶媒中で
トリフェニルホスフィンと共に加熱することによってつくることができる。
【００５３】
新規の中間体４２及びこれに類似するその他のものは、１−アミノ酸残基中に共役ジエ
ン系を含む複数のシクロスポリンＡ類似体の合成における重要な中間体であると考えられ
る。例えば、トリフェニルホスフィンに加えて、トリアリールホスフィン類、トリアルキ
ルホスフィン類、アリールアルキルホスフィン類、及びトリアリールアルシン類などの化
合物をアセチル−η−ブロモシクロスポリンＡ４１と反応させて４２に類似するその他の
活性化合物をつくることができる。
【００５４】
再び図４を参照すると、アセチルシクロスポリンＡのトリフェニルホスホニウムブロミ
ド４２と過剰のホルムアルデヒドをトルエン中で室温で撹拌することによって、アセチル
−１，３−ジエン４３の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体混合物をつくることができる。ホルム
アルデヒドの添加後、水酸化ナトリウムなどの塩基を滴下し、ジエン類の異性体混合物を
酢酸エチルで抽出する。
【００５５】
多数の有機化学の教科書が、ウィッティヒ反応を説明している。説明の一つは、特にマ
クマリーが「有機化学（Organic Chemistry）」、５版（ブルックス／コール、パシフィ
ック グローブ、２０００）、ｐ．７８０−７８３で記載しているものである。ウィッテ
ィヒ反応は、ケトン又はアルデヒドをアルケンに変換するために利用される。このような
プロセスにおいて、リンイリド（ホスホランとも呼ばれる）をアルデヒド又はケトンと反
応させると、ベタインと呼ばれる二極性中間体が得られる。一般的には、ベタイン中間体
は分離されない；むしろ、それは四員環を経て自然に分解して、アルケンとトリフェニル
ホスフィンオキシドを与える。正味の結果は、元々はリンに結合していたＲ２Ｃ＝基によ
ってカルボニル酸素原子が置換されることである。
【００５６】
非常に種々様々の試薬が上述の典型的ウィッティヒ反応試薬の代わりになり得ることは
、当業者には明らかである。例えば、多数のアルキル、アリール、アルデヒド及びケトン
化合物をホルムアルデヒドの代わりに使用すると、膨大な数のシクロスポリン誘導体がつ
くられる。出願人は、上記の合成をホルムアルデヒドで行い、また、ホルムアルデヒドの
代わりにアセトアルデヒド、ジューテロ化ホルムアルデヒド、ジューテロ化アセトアルデ
ヒド、２−クロロベンズアルデヒド、ベンズアルデヒド、及びブチルアルデヒドなどの化
合物で行った。このようなウィッティヒ反応を、トリフェニルホスホニウム誘導体以外の
化合物、例えばトリアリールホスフィン類、トリアルキルホスフィン類、アリールアルキ
ルホスフィン類及びトリアリールアルシン類などで行ってもよい。水酸化ナトリウムを使
用する代わりに、種々のその他の塩類、例えば炭酸ナトリウム、ブチルリチウム、ヘキシ
ルリチウム、ナトリウムアミド、リチウム ジイソプロピルアミドのようなリチウム障害
性塩基、及びアルカリ金属アルコキシド類などを使用してもよい。これら種々の試薬が使
用できる上に、反応は種々の有機溶媒中又は有機溶媒と水との混液中で、種々の塩、特に
リチウムハリドの存在下で、種々の温度で行うことができる。上に列挙した因子の全ては
、当業者によって合理的に選択され、形成される二重結合の立体化学、すなわちシス対ト
ランス異性体の比に所望の効果を与える。
【００５７】
この合成の最終工程において、β−炭素上の保護基を下記の手順によって除去する。ア
セチル−（Ｅ）−１，３−ジエン及びアセチル−（Ｚ）−１，３ジエンの混合物４３をメ
タノールに溶解し、それから水を加える。炭酸カリウムのような塩基を加え、反応混合物
を室温で撹拌する。使用できる炭酸カリウム以外の塩基として水酸化ナトリウム、炭酸ナ
トリウム、ナトリウムアルコキシド及びカリウムアルコキシドなどがある。その後、酢酸
エチルを使用して最終生成物であるＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体混合物
４４を抽出する。
【００５８】
方法２
ＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体混合物を、ウィッティヒ反応戦略によっ
て合成するまた別の反応経路においては、以下のように４工程の合成経路を使用する：１
）方法１のようなβ−アルコールの保護、２）第一工程から生成したアセチル−シクロス
ポリンＡを酸化してアルデヒドをつくる；３）ウィッティヒ反応；４）ウィッティヒ反応
生成物を脱アシル化し、又は同等に、酢酸エステルを加水分解して、アルコールを回復さ
せる。この反応系列は、図５で明らかにされる。
【００５９】
この合成経路は、第一工程が酢酸エステル基でβ−アルコールを保護するという点で、
図４のウィッティヒ反応経路と同様にして開始される。しかし、これら２経路は次の点
で互いに異なる；方法２の次の工程は、アセチル−シクロスポリンＡ３５をアルデヒド、
すなわちアセチルシクロスポリンＡアルデヒド５１に変換する。この反応は、十分強い酸
化剤を使用し、Ｃ＝Ｃ結合を切断して２つの断片を生成する。アルケン切断は、当該技術
では公知である。オゾンはおそらく最も一般的に使用される二重結合切断試薬であるが、
その他の酸化剤、例えば過マンガン酸カリ（ＫＭｎＯ４）又は四酸化オスミウムも、二重
結合切断を起こすことができる。
【００６０】
ルテニウム−ベースの酸化剤の使用が、カールセンらの「四酸化ルテニウム触媒による
有機化合物の酸化法の顕著な改良」J. Org. Chem.、４６巻、１９号、ｐ．３７３６−３
７３８（１９８１）で述べられている。カールセンらは、歴史的に、ルテニウム金属の費
用が触媒法の発達の動機となったことを教示しており、最も人気のある触媒法は、化学量
論的酸化剤として過ヨウ素酸塩か次亜塩素酸塩を使用している。これらの研究者はルテニ
ウムの一般的使用では反応経過中に触媒活性が喪失することを見いだし、それはカルボン
酸の存在によると仮定した。反応混合物にニトリル、特にアセトニトリルを加えると、Ｃ
Ｃｌ４／Ｈ２Ｏ／ＩＯ４−系においてアルケン類の酸化分解の速度及び程度が顕著に高ま
ることが判明した。
【００６１】
本発明の一実施形態によると、アセチルシクロスポリンＡアルデヒド５１は、次の手順
でアセチルシクロスポリンＡ３５から生成する；すなわち、アセチルシクロスポリンＡ３
５をアセトニトリルと水との混液に溶解し、それから最初に過ヨウ素酸ナトリウムを加え
、次に塩化ルテニウム水加物を加える。アルデヒド５１は酢酸エチルで抽出される。この
酸化分解戦略によるアルデヒド５１の合成は、多くの立体選択的経路にとって重要である
ことに留意すべきである。
【００６２】
方法２の第三工程は、方法１のそれと同様に、アルデヒド５１をウィッティヒ反応によ
って（Ｅ）及び（Ｚ）ジエンの混合物に変換することを含む。方法１と同様に、リンイリ
ドをアルデヒドに加えるとベタインを生じ（これは分離しない）、その結果、アルデヒド
のカルボニル酸素原子が、元々はリンに結合していたＲ２Ｃ＝基によって置換される。こ
こでも、このようなウィッティヒ反応は、トリフェニルホスホニウム誘導体以外のリン含
有化合物、例えばトリアリールホスフィン、トリアルキルホスフィン、アリールアルキル
ホスフィン及びトリアリールアルシンなどで、種々の温度で行うことができる。また種々
の塩基性溶液及び溶媒の使用又は種々の無機塩の添加によって、新たに形成される二重結
合の立体化学に影響を与えることもできる。
【００６３】
一実施形態において、アセチルシクロスポリンＡアルデヒド５３をトルエンに溶解し、
それに水酸化ナトリウム水溶液のような塩基を加える。それからアリルトリフェニルホス
ホニウムブロミド５２を加え、反応物をしばらく撹拌する。生成したアセチル（Ｅ）及び
（Ｚ）−１，３−ジエン混合物５３の処理は、ヘキサン及び／又は酢酸エチルによる抽出
を含む；ここで、用語「処理（workup）」は、反応体、生成物、溶媒などの混合物から反
応生成物を抽出及び／又は分離するプロセスを意味する。
【００６４】
方法２の最終工程において、方法１の最終工程と同様に、β−炭素位置のアルコールを
保護する酢酸エステル基を炭酸カリウムで除去すると、ＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（
Ｚ）−異性体混合物５４が得られる。保護基の除去に使用できる炭酸カリウム以外の塩基
としては、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、ナトリウムアルコキシド、及びカリウム
アルコキシドなどがある。
【００６５】
ビタミンＥ ＴＰＧＳ
トコフェリル類が、製剤中で抗酸化剤として使用される。Ｄ−トコフェリルポリエチレ
ングリコール１０００琥珀酸（ビタミンＥ ＴＰＧＳ）（イーストマンコダック、ロチェ
スター、ＮＹ）は、ビタミンＥの水溶性誘導体であり、親水性と親油性の二重の性質を有
し、当該技術で公知の製剤で、抗酸化剤又は保存料として使用されている。抗酸化剤とし
て使用する際には、トコフェリル又はビタミンＥ ＴＰＧＳは、約０．５％ないし約１％
、かつ５重量％以下の範囲で存在する。
【００６６】
ビタミンＥ ＴＰＧＳは水と混和可能で、約２０重量％までの濃度で水溶液を形成する
。この濃度を超えると、液体結晶相が形成されることがある。ビタミンＥ ＴＰＧＳは、
高い分解温度及び良い耐熱性を有する。０．０２重量パーセントでミセルを形成する。ビ
タミンＥ ＴＰＧＳ濃度が２０重量パーセントを超えると、粘度のより高い液体結晶相が
形成される。水中ビタミンＥ ＴＰＧＳ濃度が増すにつれ、より複雑な液体結晶相が生成
し、それは等方性球状ミセルから等方性シリンダ状ミセル及び、六方晶形、六方晶形、混
合六方晶形及び逆六方晶形、逆球状ミセルに、そしてラメラ相に至る（１３）。これらの
製剤において、ビタミンＥ ＴＰＧＳは、界面活性剤又は乳化剤として役立つ。それは、
溶媒、結合剤及びフィラーとしてはたらくその他の多数の賦形剤を含む複雑な製剤にも使
用される。
さらに、本発明のビタミンＥ ＴＰＧＳは、乳化剤及びアジュバントとして存在するだ
けでなく、油の変性を阻止し、それらが悪臭を発生するのを防ぐ。
【００６７】
油成分
本発明の製剤の油成分は、植物油、合成油、トリアセチンなどの油代替品、鉱油又は中
鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）油、すなわち、炭水化物鎖が８−１０個の炭素原子を有する
トリグリセリド油でよい。好ましくは、油成分はＭＣＴ油である。
【００６８】
ＭＣＴ油は、植物油に比べて多くの利点を有する：すなわち、１）酸化しにくい；２）
約０．９４−０．９５の特異的密度；これは植物油の密度より高く、水の密度に近く、そ
れによって安定なマイクロエマルションが容易に得られる；３）植物油より疎水性が小さ
く、溶解する薬剤の濃度をより高くすることができる；４）比較的低い粘度を有し、組成
物の粘度を実質的に高めることなしに、組成物中の油相の濃度をより高くすることができ
る（１５）。
【００６９】
ＭＣＴ油は市販されている。本発明によって意図されるＭＣＴ油の例には、ＴＣＲ（商
標）（脂肪酸鎖の約９５％が８又は１０個の炭素を有するトリグリセリド混合物につけら
れたSociete Industrielle des Oleagineaux社（フランス）の商品名）及びＭＩＧＬＹＯ
Ｌ８１２（商標）（グリセリン及びカプリル及びカプリン酸の混合トリエステルにつけら
れたダイナミット・ノーベル（Dynamit Nobel）社（スウェーデン）の商品名）などがあ
るが、これに限定するものではない。ミリスチン酸イソプロピルは、本発明の製剤に使用
されるもう一つの市販油である。
【００７０】
本発明によって意図される植物油の例は、大豆油、綿実油、オリーブ油、ゴマ油及びヒ
マシ油などであるが、これに限定するものではない。鉱油は、限定するものではないが、
天然炭化水素又はそれらの合成類似体を含む。オレイン酸及びリノレン酸などの油性脂肪
酸類、オレイルアルコールなどの脂肪アルコール類、ソルビタンモノオレエートなどの脂
肪エステル類及び疎水性スクロースエステル類は、油成分として使用できるが、本明細書
に記載されるその他の油のようには好ましくない。本発明の製剤に使用できるその他の脂
質には、合成及び半合成モノ−、ジ−及び／又はトリグリセリド、天然、合成又は半合成
トリグリセリドの溶媒分別又は熱分別によりつくられたトリグリセリド類、及びエステル
交換及び／又は指向性又はランダム再配列によってつくられたトリグリセリド類があるが
、これに限定するものではない。
【００７１】
乳化剤
本発明の製剤は、少なくとも１種類の乳化剤を含む。好ましくは、乳化剤又は界面活性
剤は、非イオン性親油性溶媒又は非イオン性両親媒性溶媒である；乳化剤は、ツイーン４
０、ツイーン８０などのツイーンでよい。しかし、マイクロエマルションプレコンセント
レートを形成できるいかなる界面活性剤でも使用できる。幾つかの例を以下に記載する。
【００７２】
界面活性剤成分は、両親媒性、親水性又は親油性界面活性剤又はこれらの混合物を含む
。特に好ましいのは、非イオン性親水性界面活性剤及び非イオン性親油性界面活性剤であ
る。界面活性剤成分として使用するために適した親水性界面活性剤の例は、天然又は水素
化植物油とエチレングリコールとの反応生成物である。このような生成物は、公知の方法
によって、例えば、天然又は水素化ヒマシ油又はそれらの断片とエチレンオキシドとを反
応させ、任意にその生成物から遊離ポリエチレングリコール成分を除去することによって
得られる。商品名クレモフォル（Cremophor）（商標）として市販されている種々のテン
シド類、又は界面活性剤類も適する。特に適しているのは、クレモフォル（商標）ＲＨ４
０及びクレモフォル（商標）ＥＬである。ニッコル（Nikkol）（商標）の商品名で市販さ
れる種々のテンシド類も、この範疇で使用するのに適する。
【００７３】
その他の例には、ポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステル、例えばモノ−及
びトリラウリル、パルミチル、ステアリル及びオレイルエステル、例えば、ポリオキシエ
チレン（２０）ソルビタンモノラウレート［ツイーン（商標）２０］、ポリオキシエチレ
ン（２０）ソルビタンモノパルミテート［ツイーン（商標）４０］、ポリオキシエチレン
（２０）ソルビタンモノステアレート［ツイーン（商標）６０］、ポリオキシエチレン（
２０）ソルビタンモノオレエート［ツイーン（商標）８０］、ポリオキシエチレン（２０
）ソルビタントリステアレート［ツイーン（商標）６５］、ポリオキシエチレン（２０）
ソルビタントリオレエート［ツイーン８５］、ポリオキシエチレン（４）ソルビタンモノ
ラウレート［ツイーン（商標）２１］、ポリオキシエチレン（４）ソルビタンモノステア
レート［ツイーン（商標）６１］、及びポリオキシエチレン（５）ソルビタンモノオレエ
ート［ツイーン（商標）８１］などのツイーン類がある。本発明の組成物に使用するため
にこの群のなかで特に好ましい製品は、ツイーン４０及びツイーン８０、ポリオキシエチ
レンステアリン酸エステルなどのポリオキシエチレン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチ
レン−ポリオキシプロピレン コポリマー類、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレ
ン ブロックコポリマー類、例えば商品名ポロキサマー（Poloxamer）（商標）として市販
される公知の種類のもの、琥珀酸ジオクチル、スルホ琥珀酸ジオクチルナトリウム、琥珀
酸ジ−２−エチルヘキシル又はラウリル硫酸ナトリウム及びリン脂質、特にレシチン類で
ある。本発明の組成物での使用に適したレシチンには、大豆レシチン類が含まれるが、こ
れに限定するものではない。その他の適切な製品には、クレモフォルＴＭ、ニッコルＴＭ
、グリコール化天然又は水素化植物油、及びカプリル−カプリン酸ジエステルがある。プ
ロピレングリコールモノ−及びジ脂肪酸エステル、例えばプロピレングリコールジカプリ
レート、プロピレングリコールジラウレート、プロピレングリコールヒドロキシステアレ
ート、プロピレングリコールイソステアレート、プロピレングリコールラウレート、プロ
ピレングリコールリシノレート、プロピレングリコールステアレートなども適する。
【００７４】
本発明の製剤はさらに、薬物学的に容認される界面活性剤、コロイド、懸濁液、増量剤
、賦形剤、担体、テンシド又はコテンシドを含むことができる。
【００７５】
Ｂ．本発明の好ましい製剤
本発明の実施形態は、好ましくは、十分な薬剤のバイオアベイラビリティ及び／又は低
い毒性をもたらす安定なマイクロエマルションプレコンセントレートである。これらの製
剤は、薬剤のバイオアベイラビリティを高め、シクロスポリン及びその類似体の投与に関
連する副作用を軽減するすぐれた能力を有する。マイクロエマルション製剤は、より小さ
い粒子の薬剤のデリバリーを可能にする。より小さい粒子の薬剤の単位投与量のデリバリ
ーは、表面積の増加を可能にし、おそらくより高い吸収率、及びより良いバイオアベイラ
ビリティを可能にする。マイクロエマルションは、当該技術では公知である。しかし、本
発明の製剤の成分類を用いたマイクロエマルションは、エタノール、ビタミンＥ ＴＰＧ
Ｓ、油成分、及び乳化剤の比を適切に選択することによって形成される。これは、これま
でに知られている製剤の、ＩＳＡＴＸ２４７に類似する活性薬剤に対する比の範囲外であ
る。５％未満のエタノール、又は５０％より多いビタミンＥ ＴＰＧＳを含む組成物は、
室温では固体のマイクロエマルションプレコンセントレートを形成する。これは、本発明
の製剤の比較的好ましくない実施形態である。
【００７６】
本発明の組成物中の諸成分の相対的比率は、関係する組成物の特殊なタイプによって、
例えば、それが「マイクロエマルションプレコンセントレート」、マイクロエマルション
、通常のエマルション、又は溶液などであるかどうかによって、かなり変動することはも
ちろんである。相対的比率は、組成物中の成分類の特定の機能によっても変化する；例え
ば「マイクロエマルションプレコンセントレート」の界面活性成分の場合に、それが単に
界面活性剤として使われるか又は界面活性剤及び補助溶剤の両方として使われるかによっ
ても変化する。相対的比率は、使用する特定の成分類及び製品組成物の所望の物理的特性
によっても変化する。いかなる特殊な場合でも、適用可能な比率の決定は、当業者の能力
の範囲内であるのが普通である。よって、全ての指示された比率及び以下に記載する相対
的重量範囲は、好ましい或いは個々の発明的教示を示唆するものに過ぎず、本発明をその
一般的観点で制限するものではないことを理解すべきである。本発明のマイクロエマルシ
ョンは、マイクロエマルションプレコンセントレートである。本発明の好ましい製剤は、
下記のとおりである：
【００７７】
製剤１
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
成分類の比  ０．５−１：４：２：２：１
【００７８】
製剤２
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン８０；及び
ｅ）エタノール
成分類の比  ０．５−１：２：４：２：１
【００７９】
製剤３
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ＭＣＴ油；
ｃ）ツイーン８０；
ｄ）トリアセチン；及び
ｅ）エタノール
成分類の比  ０．５−１：５：３：１：１
【００８０】
製剤４
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７
ｂ）ツイーン８０；
ｃ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ
ｄ）エタノール；及び
ｅ）ミリスチン酸イソプロピル
成分類の比  ０．５−１：２：１：１：６
【００８１】
製剤５
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール
【００８２】
成分類の比  ０.５−１：４：２：２：１；組成物はさらに水性メジウムと混合され、
透明な安定マイクロエマルション溶液を形成する。水性メジウムは、限定するものではな
いが、水、リンゴジュースなどの果汁、茶、ミルク及びココアなどである。有用な果汁と
しては、グレープフルーツジュースを除き、リンゴジュースなどが好ましい。製剤は、水
性メジウム中に、製剤約１部対水性メジウム約１０ないし約１００部の割合で溶解するの
が好ましい。
【００８３】
本発明の医薬製剤は、十分なバイオアベイラビリティを有することが好ましい。好まし
くは、ＩＳＡＴＸ２４７のバイオアベイラビリティは３０％以上であり、バイオアベイラ
ビリティが約４０％より大きいことがより好ましい。医薬製剤は、マイクロエマルション
又はマイクロエマルションプレコンセントレートなどの、経口投与型であるのが好ましい
。水性メジウムは、経口製剤として容易に摂取できるように、患者の口に合うものである
のが好ましい。
【００８４】
本発明の製剤は、必要とする患者に有効量を投与すると、免疫抑制をもたらす。好まし
くは、投与する医薬製剤の量は、約０．１ないし１０ｍｇ／ｋｇ患者体重／日であり、よ
り好ましくは約０．５ないし３ｍｇ／ｋｇ患者体重／日である。製剤は、１日１回又は２
回投与するのが好ましい。
【００８５】
正しく投与すると、本発明の製剤は、例えば臓器拒絶又はグラフト対ホスト病の予防、
及び、病気及び障害、特に自己免疫疾患及び障害及び炎症性疾患及び障害の治療を含む免
疫抑制のために使用できる。ここで意図される自己免疫病及び炎症性疾患の例は、非制限
的に、橋本甲状腺炎、悪性貧血、アジソン病、乾癬、糖尿病、リウマチ性関節炎、全身性
エリテマトーデス、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、皮膚筋炎、エリテマトーデス、多発
性硬化症、重症筋無力症、ライター症候群、関節炎（リウマチ性関節炎、慢性進行性関節
炎及び変性関節炎）、及びリウマチ疾患、自己免疫性血液病（溶血性貧血、再生不良性貧
血、赤芽球ろう及び特発性血小板減少症）、全身性エリテマトーデス、多発性軟骨炎、強
皮症、ウェーゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スチーブ
ン−ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫性炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎及びク
ローン病）、内分泌性眼障害、グレーブス眼症、サルコイドーシス、原発性胆汁性肝硬変
、若年性糖尿病（Ｉ型糖尿病）、ブドウ膜炎（前部及び後部）、乾性角結膜炎及び春季角
結膜炎、腸肺線維症、乾癬性関節炎及び糸球体腎炎などである。
【００８６】
本発明の製剤は、マラリヤ、コクシジオイデス真菌症及び住血吸虫症などの抗寄生虫疾
患又は抗原虫疾患の治療にも使用できる。それらは、腫瘍における抗ガン剤耐性を後退又
は排除するための薬剤としても使用できる。
【００８７】
本発明は、非経口投与（皮下又は筋肉内投与）製剤も意図している。この製剤は、下記
を含んでなる：
ａ）薬物学的有効量のＩＳＡＴＸ２４７；
ｂ）ビタミンＥ ＴＰＧＳ；
ｃ）ＭＣＴ油；
ｄ）ツイーン４０；及び
ｅ）エタノール。
このような製剤は、投与前に滅菌されるのが好ましい。
【００８８】
Ｃ．方法論
我々は、シクロスポリン類似体ＩＳＡＴＸ２４７の安定製剤を調製し得ることを見いだ
した。本発明の製剤は、下記の方法でつくることができる。しかし、当業者はこれらの工
程のいかなる手順も可能であることを知っている。さらに、以下で使用する成分類の量は
上述したものと同じであり、以下に記載する方法は、一つ以上の工程を変えたり又はプロ
セスを完全に逆にすることが容易である。
【００８９】
製剤５だけが、マイクロエマルションプレコンセントレートを水溶液に加えてマイクロ
エマルションを形成する方法を詳述しているが、どのマイクロエマルションプレコンセン
トレート製剤も、水性メジウムと混合することによってマイクロエマルションに変えるこ
とができる。プレコンセントレートを、プレコンセントレート１部対メジウム１０−１０
０部の割合で水性メジウムと混合するのが好ましい。水性メジウムが、リンゴジュースで
あるのがより好ましい。
【００９０】
製剤１
まず、ＭＣＴ油をツイーン４０に加えて、室温（２０−２５℃）で混合物を形成する。
次に、エタノールをＭＣＴ油とツイーン４０との混合物に加える。次に、ビタミンＥ Ｔ
ＰＧＳをその混合物に加える。混合物を３０−３５℃で、透明になるまで撹拌しながらイ
ンキュベートする。その後、適量のＩＳＡＴＸ２４７を加える。最後に、成分類を３０−
３５℃で混合し、ＩＳＡＴＸ２４７を完全に溶解させる。
【００９１】
製剤２
まず、ＭＣＴ油をツイーン８０に加えて、室温（２０−２５℃）で混合物を形成する。
次に、エタノールをＭＣＴ油とツイーン８０との混合物に加える。次に、ビタミンＥ Ｔ
ＰＧＳをその混合物に加える。混合物を３０−３５℃で、透明になるまで撹拌しながらイ
ンキュベートする。その後、適量のＩＳＡＴＸ２４７を加える。最後に、成分類を３０−
３５℃で混合し、ＩＳＡＴＸ２４７を完全に溶解させる。
【００９２】
製剤３
まず、ＭＣＴ油をツイーン８０に加えて、室温（２０−２５℃）で混合物を形成する。
次に、エタノールをＭＣＴ油とツイーン８０との混合物に加える。次に、トリアセチンを
その混合物に加える。混合物を３０−３５℃で、透明になるまで撹拌しながらインキュベ
ートする。その後、適量のＩＳＡＴＸ２４７を加える。最後に、成分類を３０−３５℃で
混合し、ＩＳＡＴＸ２４７を完全に溶解させる。
【００９３】
製剤４
まず、ＭＣＴ油をツイーン８０に加えて、室温（２０−２５℃）で混合する。次に、ミ
リスチン酸イソプロピル及びエタノールを、室温（２０−２５℃）でその混合物に加える
。その後、適量のＩＳＡＴＸ２４７を加える。最後に、成分類を室温（２０−２５℃）で
混合し、ＩＳＡＴＸ２４７を完全に溶解させる。
【００９４】
製剤５
まず、ＭＣＴ油をツイーン４０に加えて、室温（２０−２５℃）で混合物を形成する。
次に、エタノールをＭＣＴ油とツイーン４０との混合物に加える。次に、ビタミンＥ Ｔ
ＰＧＳをその混合物に加える。混合物を３０−３５℃で、透明になるまで撹拌しながらイ
ンキュベートする。その後、適量のＩＳＡＴＸ２４７を加える。最後に、成分類を３０−
３５℃で混合し、ＩＳＡＴＸ２４７を完全に溶解させる。生成したプレコンセントレート
を、その後水性メジウムと混合する。好ましくは、プレコンセントレートは水性メジウム
と、プレコンセントレート１部対メジウム１０−１００部の割合で混合する。
好ましい方法では、上記各製剤は、まずＩＳＡＴＸ２４７をエタノールに溶解すること
によってつくられる。残りの成分類は、どんな順序で加えてもよい。
【００９５】
発明の実施例の開示
下の実施例において、下記の略号は下記の意味を有する。略号が定義されていない場合
、それは一般的に容認される意味を有するものとする。
ｗ／ｗ      ＝  重量対重量
ＮＦ        ＝  （National Formulary）承認された処方
ＮＦ／ＮＰ  ＝  承認された処方／国際薬局方
ＵＳＰ      ＝  米国薬局方
ｍｇ        ＝  ミリグラム
ｍＬ        ＝  ミリリットル
ｋｇ        ＝  キログラム
ｎｇ        ＝  ナノグラム
ｎｍ        ＝  ナノメーター
Ｔｍａｘ      ＝  最高濃度に達するまでの時間
Ｃｍａｘ      ＝  最高濃度
ＡＵＣ      ＝  曲線下面積
ＬＣＭＳ    ＝  液体クロマトグラフィー−質量分析
ＭＣＴ      ＝  中鎖トリグリセリド
ＰＫ        ＝  薬物動態
ＰＳ        ＝  ブタの皮膚
【００９６】
２種類の薬剤製品、経口溶液及びソフトゼラチンカプセルが、イソテクニカ社によって
開発された。両薬剤製品共、界面活性剤、エタノール、親油性及び／又は両親媒性溶媒を
成分として含む。各薬剤製品の製法を以下に記す。
【００９７】
実施例１：ＩＳＡＴＸ２４７経口溶液の製法
次の成分類がＩＳＡＴＸ２４７薬剤製品−経口溶液を構成する：ＩＳＡＴＸ２４７、ｄ
−アルファ トコフェリル ポリエチレングリコール１０００琥珀酸（ビタミンＥ ＴＰＧ
Ｓ）ＮＦ、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）油ＵＳＰ、ツイーン４０ ＮＦ、及び９５％エ
タノールＵＳＰ。
【００９８】
【表１】
2009073850.tif 000003
【００９９】
ビタミンＥ ＴＰＧＳをホットボックス中で融解し、液体ディスペンサーに移した。各
ＴＰＧＳ容器の温かい内容物を最低１分間混合し、均質な液体であることを肉眼で確認し
た。各バレルの内容物の温度が３５℃になったとき、必要温度である３７．５±２．５℃
のグレン（Groen）容器を準備した。
【０１００】
必要量の成分ビタミンＥ ＴＰＧＳ、ＭＣＴ油、ツイーン４０及び９５％エタノールを
、確認のために正しくラベルをつけた別々の容器に秤量した。ビタミンＥ ＴＰＧＳは、
直ちにグレン容器に移した。ＭＣＴ油、ツイーン４０及びエタノールを、あらかじめ秤量
したビタミンＥ ＴＰＧＳを収容している容器に、逐次定量的に移した。エタノール蒸発
を減らすために、その容器にしっかりと蓋をし、エタノール添加後１５−２０分間、３７
．５±２．５℃で混合した。
【０１０１】
最上部と底部のサンプルを、無菌ガラス製使い捨てピペットを用いて観察した。ピペッ
トの内容物は、肉眼的に均質、透明であることが期待された。
【０１０２】
軽くボルテックスできるようなミキサーをセットした。容器に蓋をし、混合中のエタノ
ールの蒸発を減らした。連続的に混合しているブレンドに、ＩＳＡＴＸ２４７を加えた。
その後、容器を密封した。混合物を、粉末が完全に溶解するまで３０分ごとにチェックし
た。
【０１０３】
実施例２：ＩＳＡＴＸ２４７ゼラチンカプセルの製法
本発明は、ソフトゼラチンカプセルも意図している。このカプセルは、ＩＳＡＴＸ２４
７及び経口溶液のような非薬剤成分を、ゼラチン、グリセリン、水、及びソルビトールを
含有するゼラチン２Ｄ ＰＳ型（ＮＦ／ＮＰ）カプセルに封入して含む。
【０１０４】
ＩＳＡＴＸ２４７ゼラチンカプセルは、ＩＳＡＴＸ２４７、ビタミンＥ ＴＰＧＳＮＦ
、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）油ＵＳＰ、ツイーン４０ ＮＦ、及び９５％エタノール
ＵＳＰを含んでなるＩＳＡＴＸ２４７経口溶液（５０ｍｇ／ｍＬ）を、ゼラチン２Ｄ Ｐ
Ｓ型（ＮＦ／ＮＰ）カプセルに封入するというやり方でつくられた。ゼラチン２Ｄ ＰＳ
型（ＮＦ／ＮＰ）カプセルは、ゼラチンＮＦ（ブタ皮膚）、グリセリンＵＳＰ、精製水Ｕ
ＳＰ、及び７６％ソルビトールスペシャルを用いてつくられた。
【０１０５】
実施例３：安定性／保存寿命の測定
下表はびん（３０℃で保存）に入れた製剤１、及びソフトゲルカプセル形（室温で保存
）の製剤１両方について、公知のＬＣＭＳ法によって測定した安定性データを示す。製剤
は、通常の保存条件では安定である。
【表２】
2009073850.tif 000004
【０１０６】
実施例４：薬物動態（ＰＫ）曲線の比較
下に示す製剤を、ＳＤラットに経口胃管栄養法によって与え、ＩＳＡＴＸ２４７の血中
濃度を規則的時間間隔でモニターし、濃度対時間曲線（すなわち薬物動態曲線）を作成し
た。下表は、ここに開示された製剤を含む、種々のＩＳＡＴＸ２４７製剤のＰＫ曲線の比
較である。群２は、表３に示されるように、ラットモデルにおいて良いバイオアベイラビ
リティを示すが、これらの結果は、イヌ又はヒトモデルではかなり変動する（表４を参照
されたい）。
【表３】
2009073850.tif 000005
【０１０７】
群１：
ＶｉｔＥ ＴＰＧＳ／ＭＣＴ油／ツイーン４０／エタノール：４／２／２／１（ｗ／ｗ
／ｗ／ｗ）。（ここでは製剤１として開示されている）
群２：
ＶｉｔＥ ＴＰＧＳ／ＭＣＴ油／ツイーン８０／エタノール：２／４／２／１（ｗ／ｗ
／ｗ／ｗ）。（ここでは製剤２として開示されている）
群３：
ＭＣＴ油／ツイーン８０／トリアセチン／エタノール：５／３／１／１（ｗ／ｗ／ｗ／
ｗ）。（ここでは製剤３として開示されている）
群４：ツイーン８０／ＶｉｔＥ ＴＰＧＳ／エタノール／ミリスチン酸イソプロピル：
２／１／１／６（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）。（ここでは製剤４として開示されている）
群５（比較実施例）：
ＶｉｔＥ／プロピレングリコール／マイシン／クレモフォルＲＨ４０／エタノール：３
／１．２／５／６．２／２（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）。
群６：
これはリンゴジュースで１：６５に希釈され、マイクロエマルションを形成した製剤で
ある。（ここでは製剤５として開示されている）。
【０１０８】
実施例５：マイクロエマルションの製法
製剤の成分の比を１００以上入れ替えて、マイクロエマルション形成を試験した（４８
５及び９００ｎｍにおける吸収率を、それぞれ０．１及び０．０１未満と定義した）。試
験した製剤は、下記の成分比を含んでいた：
５−１０％ＩＳＡＴＸ２４７
０−５０％ビタミンＥ ＴＰＧＳ
０−５０％ツイーン４０及び／又はツイーン８０
０−５０％ＭＣＴ油
５−１５％エタノール。
【０１０９】
試験した製剤の２０％未満が、マイクロエマルションを生成した。マイクロエマルショ
ン形成は、ビタミンＥ ＴＰＧＳ又はエタノールのどちらの比にも比較的依存しない。し
かし、５０％より大きい比のビタミンＥ ＴＰＧＳ及び５％未満の比のエタノールを有す
る製剤は、室温で凍結するプレコンセントレートを生成し、それはあまり好ましくない。
図１は、ツイーン４０及びＭＣＴ油の賦形剤比の関数としてのマイクロエマルションプレ
コンセントレート形成をあらわす表である。
【０１１０】
実施例６：イヌにおける薬物動態（ＰＫ）曲線の比較
図２は、ビーグル犬における本発明のＩＳＡＴＸ２４７マイクロエマルションの薬物動
態（ＰＫ）曲線を、ネオラル（商標）のそれと比較したグラフを示す。データは、下表に
も示される。製剤をビーグル犬（６匹）に経口胃管栄養法で与え、ＩＳＡＴＸ２４７の血
中濃度を規則的時間間隔でモニターし、濃度対時間曲線（すなわち薬物動態曲線）を作成
した。より詳細に述べれば、イヌにいずれかの製剤２ｍＬ（１００ｍｇ／ｍＬ）を経口胃
管栄養法によって与えた。投与後０、０．５、１、２．５、５、７．５、１２及び２４時
間に採血し、液体クロマトグラフィー・質量分析（ＬＣＭＳ）によって分析した。
【０１１１】
【表４】
2009073850.tif 000006
【０１１２】
群１：
製剤１：ＶｉｔＥ ＴＰＧＳ／ＭＣＴ油／ツイーン４０／エタノール：４／２／２／１
（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）。
群２：
ネオラル（商標）
【０１１３】
これらのデータによると、ＩＳＡＴＸ２４７製剤のバイオアベイラビリティは、ネオラ
ル（商標）に比べてわずかに低いが、サンディミューン（Sandimmune）（商標）によるバ
イオアベイラビリティよりは実質的に大きい（データは示されず）。ネオラル（商標）は
通常、約４０％のバイオアベイラビリティであることが報告されている。表４が示すよう
に、群１のバイオアベイラビリティはネオラル（商標）に匹敵する。
これらのデータは、本発明の製剤が、シクロスポリンの他の製剤に匹敵するバイオアベ
イラビリティを有し、シクロスポリン投与に関連する副作用を軽減することを示している
。
【０１１４】
実施例７：ＩＳＡＴＸ２４７及びシクロスポリンＡの薬物動態及び毒物動態特性
ＩＳＡＴＸ２４７（４５−５０％のＥ−異性体及び５０−５５％のＺ−異性体）及びシ
クロスポリンＡの薬物動態及び毒物動態パラメーターを、ウサギモデルで試験した。その
ウサギは、シクロスポリンＡ腎臓毒性を研究するためのモデルとしても使われているが、
ラットほどよく使われてはいない。研究では、ウサギに投与したシクロスポリンＡは他の
動物モデルでこれまでに報告されたものより低い用量、しかもヒトにおける治療範囲の少
なくとも高い方の濃度以下でもある用量で、構造的及び機能的変化を引き起こすことが見
いだされた（スリヴァリスら、１９９１、１９９４）。また、細管の細胞学的変化に加え
て、間質性線維症及び動脈症の所見があることは、ウサギが腎臓毒性の研究により適した
モデルであることを示唆する。なぜならば、これらの構造的変化は、ヒトで認められる腎
臓毒性の顕著な特徴だからである。下記のスケジュールによって、ＩＳＡＴＸ２４７を最
初の７日間静脈注射（ｉ．ｖ．）し、さらに２３日間皮下注射した（ｓ．ｃ．）。
【０１１５】
【表５】
2009073850.tif 000007
【０１１６】
認められたいかなる腎臓変化もＩＳＡＴＸ２４７効果によるもので、病原体によるもの
ではないことを確実にするために、無病原体ウサギ（ＳＰＦ）を使用した。１及び７日目
に、薬剤を投与する前と、投与後０．５、１、２、４、８、１２、１８及び２４時間後に
血液サンプルを集め、薬物動態曲線を作成した。その他の評価パラメーターは、臨床的観
察、体重、食餌消費量、血液検査値、臨床化学検査、肉眼的病理試験、及び選択された組
織／臓器の組織病理学的検査などである。
【０１１７】
血液サンプルを、質量分析と高性能液体クロマトグラフィーとの組合わせ（ＬＣＭＳ）
によって分析した。下の表５は、シクロスポリンＡ又はＩＳＡＴＸ２４７の１０ｍｇ／ｋ
ｇを投与したウサギにおける平均薬物動態パラメーターをまとめたものである。
【０１１８】
【表６】
2009073850.tif 000008
【０１１９】
１０ｍｇ／ｋｇ／日を投与した雄ウサギでは、シクロスポリンＡとＩＳＡＴＸ２４７と
の薬物動態パラメーターの間に統計的有意差はなかった。同量を投与した雌ウサギのＩＳ
ＡＴＸ２４７の薬物動態パラメーターは、７日目の最大濃度を除けば雄ウサギで認められ
たパラメーターと有意に異ならなかった。
【０１２０】
ビヒクル対照、シクロスポリンＡ、又はＩＳＡＴＸ２４７を投与されたウサギの血液学
的パラメーターにおいて有意な変化は認められなかった。下の表６に示すように、研究コ
ース中、種々の群においてクレアチニン濃度に差が認められた。これらの差は、シクロス
ポリンＡが、ビヒクル対照又はＩＳＡＴＸ２４７のいずれよりも有意に大きい負の効果を
腎臓に与えることを示した。５０％多い量、すなわち１５ｍｇ／ｋｇ／日でさえ、１０ｍ
ｇ／ｋｇ／日シクロスポリンＡに比べて、ＩＳＡＴＸ２４７は血清クレアチニン濃度の有
意な増加を誘起しなかった。
【０１２１】
【表７】
2009073850.tif 000009
【０１２２】
ビヒクル対照、１０ｍｇ／ｋｇシクロスポリンＡ、５ｍｇ／ｋｇ ＩＳＡＴＸ２４７、
又は１０ｍｇ／ｋｇ ＩＳＡＴＸ２４７を投与した全てのウサギの試験では、有意な異常
はあらわれなかった。これは特に腎臓では事実であった；腎臓ではシクロスポリンＡ投与
動物で通常見られる、間質性線維症（スリヴァリスら、１９９１、１９９４）の徴候は認
められなかった。１５ｍｇ／ｋｇ ＩＳＡＴＸ２４７を投与した雄ウサギでは、精子形成
の減少が認められた。この１５ｍｇ／ｋｇ用量のＩＳＡＴＸ２４７投与で試験を完了した
３匹の雌ウサギには、変化は認められなかった。
【０１２３】
本発明を詳細に示し、その好ましい実施形態を参照して記述したが、添付の請求によっ
て規定される本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、形態及び詳細に種々の変更が
行われ得ることは当業者には理解できるであろう。
【０１２４】
上に述べた全ての参考文献は、参考としてそのまま本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１２５】
【図１】図１は、ツイーン４０及びＭＣＴ油に関する賦形剤比の関数としてのマイクロエマルションプレコンセントレートの形成を示す表であり；
【図２】図２は、ビーグル犬においてネオラル（Neoral）（商標）と比較した本件のＩＳＡＴＸ２４７マイクロエマルションの薬物動態（ＰＫ）曲線を示すグラフであり；
【図３】図３は、本発明のシクロスポリン類似体をつくるために使用できる典型的合成経路の概観を示し、ここで立体選択的経路は反応条件によってグループ化される；
【図４】図４は、臭素化前駆体からＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体の混合物を生成する合成経路を示す図である；
【図５】図５は、アルデヒド前駆体からＩＳＡＴＸ２４７の（Ｅ）及び（Ｚ）−異性体の混合物を生成する別の合成経路を示す図である。
【図１】
2009073850.tif 000010
【図２】
2009073850.tif 000011
【図３】
2009073850.tif 000012
【図４】
2009073850.tif 000013
【図５】
2009073850.tif 000014