(57)【要約】【課題】  安全性が高く、同時に、ＶＬＤＬ分泌活性の高い高脂血症の予防または改善剤を提供すること。【解決手段】  セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有することを特徴とする高脂血症の予防または改善剤、ならびにセツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキまたはコショウの有機溶媒または有機溶媒水溶液による抽出物、およびクローブの抽出物を有効成分とするＶＬＤＬ分泌抑制剤、さらにこれらを含有する飲食品、化粧品または医薬品である。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有することを特徴とする高脂血症の予防または改善剤。
【請求項２】
セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＶＬＤＬ分泌抑制剤。
【請求項３】
クローブの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＶＬＤＬ分泌抑制剤。
【請求項４】
請求項１〜３いずれか１項記載の剤を含有する医薬用または動物薬用組成物。
【請求項５】
請求項１〜３いずれか１項記載の剤を含有する飲食用組成物。
【請求項６】
請求項１〜３いずれか１項記載の剤を含有する医薬部外品用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選ばれる少なくとも１種の植物素材に由来する成分を有効成分とする、高脂血症の予防または改善剤、ならびにＶＬＤＬ分泌抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、総カロリー摂取量および脂肪摂取量の急激な増加や、医療技術の進歩による長寿化により、高脂血症などの循環器障害が増加している。また、これらの現象は、脂肪摂取量の増加が特に著しい若年層においても、顕著である。上記循環器障害の増加とこの若年化が、社会問題の一つとなっている。
【０００３】
一般に、血中の中性脂肪値が１５０ｍｇ／ｄＬ以上、または、総コレステロール値が２２０ｍｇ／ｄＬ以上になった状態を高脂血症と呼ぶ。さらに、高脂血症は、血中コレステロール値の高い高コレステロール血症、血中中性脂肪値の高い高中性脂肪血症、それらどちらの値も高い複合型高脂血症の３つのタイプに分けることができる。なお、日本人における高脂血症患者は、約３２００万人とも推定されている。高脂血症は、動物性食品の過剰な摂取と運動不足やストレスなどが要因となっている疾患であるといわれている。そして、高脂血症が進行により中性脂肪やコレステロールが血管壁に沈着して動脈硬化、高血圧、心筋梗塞、脳血管障害などの疾病につながることが知られている。
【０００４】
血中の脂質は、ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、カイロミクロンに含まれる形で血中に存在する。肝臓から分泌されるＶＬＤＬは、肝臓で脂質を組み込み末梢組織への脂質の運搬を行うことから、肝臓における過剰なＶＬＤＬ産生・分泌は、動脈硬化性疾患の危険因子である高脂血症の原因となる。従って、ＶＬＤＬ分泌抑制剤は、血中のコレステロールや中性脂肪を低減し、高脂血症の予防および／または改善に有効である。
【０００５】
ＣＰ−３４６０８６といったＭＴＰ阻害剤の投与によってＶＬＤＬの分泌は抑制されるが、肝細胞内に脂質を蓄積させるといった副作用も報告されている（非特許文献１）。このため、明確なＶＬＤＬ分泌抑制活性を有しており、なおかつ安全性の高いＶＬＤＬ分泌抑制剤の開発が望まれていた。
【０００６】
例えば、共役トリエン酸系脂肪酸やその誘導体が、α−リノレン酸以上にアポＢ分泌を抑制することから、高コレステロール血症や高トリグリセリド血症に有効であるとの報告がある（特許文献１）。また、数種の植物抽出物が、ＶＬＤＬ分泌抑制作用を有するとの報告もある（特許文献２）。
【０００７】
セツレンカ（学名：Saussurea involucrata Kar. et Kir. ex Maxim.）は、キク科に属する植物であり、別名テンザンセツレンとも呼ばれる。セツレンカ抽出物が、高いメイラード反応阻害活性を有していることは開示されている（特許文献３）。
【０００８】
ネトル（学名：Urtica dioica）は、イラクサ科に属する植物であり、別名セイヨウイラクサとも呼ばれる。ネトル抽出物が、脂肪細胞中の脂肪分解を促進する効果を有していることは開示されている（特許文献４）。
【０００９】
スペアミント（学名：Mentha Spicata L.）は、シソ科に属する植物である。スペアミントに含有されているロスマリン酸、またはその塩が、リパーゼ阻害活性を有していることは開示されている（特許文献５）。
【００１０】
バジル（学名：Ocimum basilicum L.）は、シソ科に属する植物であり、別名メボウキとも呼ばれる。バジル抽出物が、前駆脂肪細胞の分化を抑制する効果をゆうしていることは開示されている（特許文献６）。
【００１１】
クローブ（学名：Syzygium aromaticum L.）は、フトモモ科に属する植物であり、別名チョウジとも呼ばれる。クローブのエタノール抽出物が、リパーゼ阻害活性を有していることは開示されている（特許文献７）。
【００１２】
センシンレン（学名：Andrographis paniculata ）は、キツネノマゴ科に属する植物であり、育毛用の皮膚外用剤としての利用が開示されている（特許文献８）。
【００１３】
レモンバーベナ（学名：Lippia citriodora）は、クマツヅラ科に属する植物であり、別名コウスイボク、ボウシュウボクとも呼ばれる。レモンバーベナ抽出物が、前駆脂肪細胞の分化を抑制する効果を有していることは開示されている（特許文献６）。
【００１４】
カルダモン（学名：Amomum cardamomum L.）は、ショウガ科に属する植物であり、その種子の乾燥させたものは、生薬であるビャクズクとして利用されている。カルダモンが、ヒト結腸ガン由来Ｃａｃｏ−２細胞の吸収を促進する作用を有していることは開示されている（特許文献９）。
【００１５】
コウキ（学名：Engelhardtia chrysolepis Hance.）は、クルミ科に属する植物である。コウキを利用した黄杞茶の抽出エキスが、リパーゼ阻害活性を有していることは開示されている（特許文献１０）。
【００１６】
コショウ（学名：Piper nigrum. L.）は、コショウ科に属する植物である。コショウの未成熟な緑色の果実が、脂肪分解促進作用を有していることは開示されている（特許文献１１）。
【特許文献１】特開２００２−２６５９８５号公報
【特許文献２】特開２００６−２２５２９７号公報
【特許文献３】特開２００７−２５４３４４号公報
【特許文献４】特開２００６−３４７９６８号公報
【特許文献５】特開２００５−  ５３８９１号公報
【特許文献６】特開２００４−  ７５６４０号公報
【特許文献７】特開２００１−１２０２３７号公報
【特許文献８】特開２００３−２２１３１３号公報
【特許文献９】特開２００７−０１６０３４号公報
【特許文献１０】特開２００２−２７５０７７号公報
【特許文献１１】特開平０８−２４５４１０号公報
【非特許文献１】Journal of Lipid Reseach, 44, 2003, 1887-1901
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明は上記を鑑み、安全性が高く、同時に、ＶＬＤＬ分泌活性の高い高脂血症の予防または改善剤、ならびに、ＶＬＤＬ分泌抑制剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明者らは、上記実情を鑑み鋭意研究を行った結果、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウの抽出物がＶＬＤＬの分泌を抑制し、高脂血症の予防または改善剤として極めて有用であることを見いだし、本発明を完成させた。
【００１９】
すなわち本発明は以下のとおりである。
［１］  セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有することを特徴とする高脂血症の予防または改善剤。
［２］  セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＶＬＤＬ分泌抑制剤。
［３］  クローブの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＶＬＤＬ分泌抑制剤。
［４］  ［１］〜［３］いずれか記載の剤を含有する医薬用または動物薬用組成物。
［５］  ［１］〜［３］いずれか記載の剤を含有する飲食用組成物。
［６］  ［１］〜［３］いずれか記載の剤を含有する医薬部外品用組成物。
【発明の効果】
【００２０】
本発明の高脂血症用の予防または改善剤、ならびに、ＶＬＤＬ分泌抑制剤は、食経験のある植物素材を由来とするために安全性が高く、優れたＶＬＤＬ分泌抑制作用を示すことから、高脂血症の予防または改善に有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下に、本発明の実施の形態を詳しく説明する。
【００２２】
本発明の高脂血症の予防または改善剤は、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物を有効成分として含有する組成物であり、高脂血症の予防または改善に用いることができ、また、血中の脂質量を適性値へコントロールすることに用いることができる。本発明において、高脂血症の予防とは、日本動脈硬化学会が動脈硬化性疾患診療ガイドライン（２００２年９月発行）にて定義している高脂血症の状態（例えば、血中総コレステロール値が２２０ｍｇ／ｄＬ以上、または血中中性脂肪値が１５０ｍｇ／ｄＬ以上の状態）、または境界域の状態（例えば、血中総コレステロール値が２００ｍｇ／ｄＬ以上２２０ｍｇ／ｄＬ未満、または血中中性脂肪値が１３０ｍｇ／ｄＬ以上１５０ｍｇ／ｄＬ未満の状態）になるのを防ぐ、または遅らせる（そのリスクを軽減する）ことや境界域の状態を維持することを指す。また、本発明でいう高脂血症の改善とは、上記に示す高脂血症の状態または境界域の状態から、血中総コレステロール値や血中中性脂肪値を低減して、正常な状態（例えば、血中総コレステロール値が２００ｍｇ／ｄＬ未満、かつ、血中中性脂肪値が１３０ｍｇ／ｄＬ未満の状態）とする、あるいはその状態に近づけることを指す。
【００２３】
本発明におけるＶＬＤＬ分泌抑制効果とは、肝臓から分泌されるＶＬＤＬの分泌を抑制する効果である。本発明のＶＬＤＬ分泌抑制剤は、肝臓から分泌されるＶＬＤＬの分泌を抑制することで、同時に高脂血症や動脈硬化性疾患の一因であるＬＤＬの生成を抑制することもできる。
【００２４】
また、本発明では、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液抽出物、および／またはクローブの抽出物を含有する組成物を、ＶＬＤＬ分泌抑制剤として使用することもできる。本発明において、ＶＬＤＬ分泌抑制効果は、例えば、被験物質を哺乳動物に投与或いは摂取させる方法、または培養肝細胞に被験物質を作用させる方法により評価可能である。このうち、培養肝細胞を用いた方法が、感度、再現性、簡便性において優れており、通常この方法が用いられる。具体的には、培養肝細胞を用いる方法の場合、例えば、予めヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２）を２４穴プレート中に植え込み２４時間培養し、更に被験物質を含む１％牛血清アルブミン含有ＤＭＥＭ培地に交換し２４時間培養を行った後、培養液を採取し、培養液中に含有されるＶＬＤＬをサンドイッチ法ＥＬＩＳＡ（エンザイムリンクドイムノソーベントアッセイ）により定量することができる（T.Yanagita et.al., Current Therapeutic Research., 60(8), 423,1999）。また抗体を用いてウエスタンブロッティング法で定量することも可能である。これらの評価系において、溶媒対照と比較してＶＬＤＬの分泌量が２０％以上減少したサンプルを「ＶＬＤＬ分泌抑制活性あり」と判定する。
【００２５】
本発明の高脂血症の予防または改善剤、またはＶＬＤＬ分泌抑制剤（以下、「本発明の剤」と総称する）の有効成分あるいはその由来となる植物素材は、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウである。上記素材は単独で、あるいは２種以上を組み合わせて用いることもできる。また、これらの植物素材は、通常食用として提供されているものでも構わない。
【００２６】
本発明の剤においてカルダモンを用いる場合は、カルダモンを基原植物とする生薬であるビャクズクを用いることも可能である。
【００２７】
セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウ等の植物素材は、葉、茎、芽、花、木質部、樹皮などの地上部および根、塊茎などの地下部、種子、果実、樹脂など全ての部位が使用可能である。そのなかでも、セツレンカについては全草、ネトルについては葉、スペアミントについては葉、バジルについては葉、クローブについては蕾およびがく、センシンレンについては全草、レモンバーベナについては葉、カルダモンについては種子、コウキについては葉、コショウについては未成熟な果実を乾燥させた黒コショウを用いることが好ましい。
【００２８】
本発明においては、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウの有機溶媒または有機溶媒水溶液による抽出物を、本発明の剤の有効成分として使用することができる。本発明において、これら植物素材の抽出物を得る方法は特に限定されないが、上記の植物素材を有機溶媒または有機溶媒水溶液に浸し、常圧下で攪拌又は放置し、静置分離、濾過又は遠心分離などを行うことにより、得ることができる。本発明において、用いられる抽出溶媒は有機溶媒もしくは有機溶媒水溶液（有機溶媒と水の混合溶媒）であり、該有機溶媒としては特に限定されないが、例えばエタノール、酢酸エチル、アセトン、ヘキサン、メタノールなどが挙げられる。また、水と混合して用いる場合は水溶性の有機溶媒が好ましい。このなかでも、得られる抽出物を食品や医薬品用途に安全に適用する観点からは、抽出に使用する有機溶媒として、エタノールもしくはエタノール水溶液を選択するのが好ましい。本発明において抽出溶媒としてエタノール水溶液を使用する場合のエタノール濃度は特に限定されないが、例えば３０重量％以上、好ましくは９０重量％以上、より好ましくは９５重量％以上である。
【００２９】
また、本発明においては、クローブの抽出物を本発明のＶＬＤＬ分泌抑制剤の有効成分として使用することもできる。このとき、クローブの抽出物を得るための抽出溶媒は特に限定されず、上述した有機溶媒や有機溶媒水溶液の他、水を用いてもよい。このなかでも得られる抽出物を食品や医薬品用途に安全に適用する観点からは、抽出に使用する有機溶媒として、エタノール又は水、もしくはその混合溶媒（エタノール水溶液）を選択するのが好ましい。本発明において、クローブ抽出物を得る方法は特に限定されず、クローブを抽出溶媒に浸し、常圧下で攪拌又は放置し、静置分離、濾過又は遠心分離などを行うことにより、得ることができる。
【００３０】
本発明において、上記植物素材の抽出物を得るための抽出条件は特に限定されないが、例えば、抽出温度は、一般に−２０〜１００℃、普通１〜９０℃、好ましくは１０〜７０℃で好適に実施できる。抽出時間は、普通０．１時間〜１ヶ月、好ましくは０．５時間〜７日間で好適に実施できる。また、抽出溶媒の使用量はセツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウ１重量部に対して１倍量以上５０倍量以下が好ましく、３倍量以上２０倍量以下がより好ましい。１倍量未満ではこれら植物素材が充分に抽出溶媒に浸らず抽出物の回収率が低くなる。また、５０倍量以上では抽出に用いる抽出タンク等の容器が大きくなり、溶媒除去に必要となるエネルギーが極めて大きく製造コストが高くなる傾向がある。
【００３１】
本発明において、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキまたはコショウの抽出物は、抽出液の形態のまま使用してもよいし、溶媒を除去したものを使用してもよい。さらに、他の適切な溶媒に溶解、懸濁した形態であってもよい。さらに、当該セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキまたはコショウの抽出物は、飲食品や医薬品として不適当な不純物を含有しない限り、抽出液のまま、又は粗抽出物あるいは半精製抽出物として本発明に使用できる。
【００３２】
本発明の剤の有効成分である、上記セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキまたはコショウの有機溶媒または有機溶媒水溶液による抽出物、およびクローブの抽出物は、ＶＬＤＬ分泌抑制活性を失わない範囲内で脱臭、精製などの操作を加えることもできる。
【００３３】
本発明の剤における有効成分は、上述したとおり、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキおよびコショウからなる群より選択される少なくとも１種の植物素材の有機溶媒または有機溶媒水溶液による抽出物、またはクローブの抽出物である（以下、総称して単に「有効成分」ともいう）。本発明の剤においては、これら有効成分を、単独で含有するものであってもよいし、また、公知の担体や助剤などの添加剤と混合して、カプセル剤、錠剤、顆粒剤など服用しやすい形態に成型したものであってもよい。また、栄養強化を目的として、ビタミンＡ，Ｃ，Ｄ，Ｅなどの各種ビタミン類を添加、併用することもできる。本発明の剤における上記有効成分の含有量は、特に限定されないが、好ましくは０．１〜１００重量％、より好ましくは１０〜９０重量％である。
【００３４】
本発明の剤は、これらを含有する飲食品、化粧品または医薬品として用いることもできる。
【００３５】
本発明の剤を含有する飲食品としては特に限定されず、例えば、飲食物材料に混合して、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカーなどの菓子類；アイスクリーム、氷菓などの冷菓類；茶、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンクなどの飲料；うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺などの麺類；蒲鉾、竹輪、はんぺんなどの練り製品；ドレッシング、マヨネーズ、ソースなどの調味料；マーガリン、バター、サラダ油などの油脂類；パン、ハム、スープ、レトルト食品、冷凍食品など、すべての一般的な飲食物に使用することができる他、製剤化して、特定保健用食品、栄養機能食品などの保健機能食品や健康食品、サプリメントとすることもできる。これら飲食品を摂取する場合、その摂取量は上記有効成分の量に換算して成人一人一日当たり、好ましくは０．０１〜１０００ｍｇ／Ｋｇ体重、より好ましくは０．１〜３００ｍｇ／Ｋｇ体重となるように摂取するのが好ましい。
【００３６】
さらに、本発明の剤を、化粧品または医薬品として用いる場合は、その剤形は特に限定されず、例えば、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、注射剤、座薬、貼付剤などが挙げられる。製剤化においては、薬剤学的に許容される他の製剤素材、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤などを適宜添加して調製することができる。これら製剤の投与量としては、上記有効成分の量に換算して、成人一人一日当たり、好ましくは０．０１〜１０００ｍｇ／Ｋｇ体重、より好ましくは０．１〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重を、１回ないし数回に分けて投与する。
【実施例】
【００３７】
以下実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３８】
（実施例１）
セツレンカ（全草）、ネトル（葉）、スペアミント（葉）、バジル（葉）、クローブ（蕾およびがく）、センシンレン（全草）、レモンバーベナ（葉）、カルダモン（種子）、コウキ（葉）およびコショウ（果実）（以上、新和物産株式会社より購入）、１０００ｇを各々、９９．５容量％エタノール水溶液５Ｌに浸し４５℃で６時間、撹拌抽出を行った後、ろ過により抽出液を得た。更に、その抽出液を減圧濃縮して溶媒を除去し、それぞれの抽出物を得た。
【００３９】
（実施例２）
クローブ（蕾およびがく）（新和物産株式会社より購入）、各々１０００ｇを、水５Ｌに浸し４５℃で６時間、撹拌抽出を行った後、ろ過により抽出液を得た。更に、その抽出液を凍結乾燥し水を除去し、クローブ水抽出物を得た。
【００４０】
（実施例３）
Ｈｅｐ−Ｇ２細胞（ヒト肝癌由来培養細胞）を２４穴培養プレートに１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように植え込み、３７℃、５％ＣＯ２条件下で２４時間培養した。培地には、１０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）、１０ｍL／Lペニシリン・ストレプトマイシン溶液（それぞれ５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００μｇ／ｍＬ、Invitrogen社製）、３７ｍｇ／Ｌアスコルビン酸（和光純薬工業株式会社製）を含むＤＭＥＭ（Dulbecco's Modified Eagle Medium、Invitrogen社製）を用いた。被検物質を含む１％ウシ血清アルブミン（Sigma社製）含有DMEMに交換し、２４時間培養した。溶媒対照（コントロール）としてはＤＭＳＯを用い、０．１％となるように添加した。コントロールおよび被検物質で処理した際に培地中の分泌されたＶＬＤＬ量は、ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（CaldioCHEK社製）にて測定した。コントロールのＶＬＤＬ分泌量を１００％として被検物質のＶＬＤＬ分泌量を算出した。
【００４１】
被検物質として、実施例１および実施例２で得られた各抽出物（それぞれ添加濃度は１００μg/mL）で処理した際のＶＬＤＬ分泌量を表１に示す。
【００４２】
【表１】
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表１から明らかなように、セツレンカ、ネトル、スペアミント、バジル、クローブ、センシンレン、レモンバーベナ、カルダモン、コウキ、コショウのエタノール抽出物及びクローブの水抽出物が、ＶＬＤＬ分泌抑制活性を有していることが示された。