(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）
【化１】
0005109200.tif 000006
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物、および下記一般式（２）
【化２】
0005109200.tif 000007
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物より選ばれる１種または２種以上のＰｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ誘導体を有効成分とする抗アレルギー剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然物由来の抗アレルギー剤に関する。また、特定のPhloroglucinol誘導体を有効成分とする抗アレルギー剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、花粉症、喘息、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患は非常に増えていて、全人口の３０〜４０％にも達すると推定され、大きな社会問題となっている。まず、考えられるのは遺伝的な要因であるが、主として栄養状態、環境の変化などが密接に関与していると考えられている。アレルギーは本来、身を守る免疫反応が自分自身を攻撃して、炎症反応を引き起こしてしまった状態を意味する。このアレルギー反応はＩ型からＩＶ型に分類され、Ｉ型が最もよく知られている。すなわち、花粉症、喘息、アトピー性皮膚炎など主要なアレルギーを発症させる型である。
【０００３】
Ｉ型アレルギー反応は、アレルゲンが体内に侵入すると、発症に強く関与するＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）がＢ細胞から産生される。このＩｇＥがマスト細胞や好塩基球上に発現している高親和性ＩｇＥレセプター（ＦｃεＲＩ）に結合する。レセプター上のＩｇＥは、再度侵入したアレルゲンによって架橋されると、レセプターが凝集して、ヒスタミン、ロイコトリエン、プロスタグランジンなどのケミカルメディエーターが放出され、アレルギーの発症を誘導する。
【０００４】
現在のところ、上記のアレルギー疾患の治療には、抗ヒスタミン剤やステロイド剤などの医薬品が開発され使用されているが、眠気、口渇、胃腸障害などの副作用があって、長期にわたる服用が問題となっている。そこで、最近、安全性が高く、副作用のない天然物を起源とする植物成分や食品成分が、抗アレルギー作用を有することが明らかにされ、そうした成分を有効成分とした抗アレルギー剤がいくつか報告されている。
例えば、茶に含有するヒスタミン遊離に対する抑制効果をもつ３−Ｏ−メチルガロイルエピガロカテキンや４−Ｏ−メチルガロイルエピガロカテキン（特許文献１）、ペパーミントに含有するアレルギー鼻炎症状の予防や改善効果をもつルテオリン−７−Ｏ−ルチノシド（特許文献２）、マスト細胞表面上のＩｇＥレセプターの発現を抑制する作用を有するイソフラボン類（特許文献３）などが挙げられている。
【０００５】
ところで、ヘリクリサム属植物抽出物には強い抗菌活性、抗炎症性作用や抗酸化活性などを有することが知られている。また、ヘリクリサム属植物抽出物に含まれる上記活性を有する成分の探索もなされていて、抗酸化活性を有する成分として、フラボノール類や、該抽出物を加水分解して得られるフェノール成分などが報告されている（例えば、非特許文献１〜３）。また、本出願人らは、Phloroglucinol誘導体である一般式（１）で表される化合物を有効成分とする抗酸化剤、該抗酸化剤が配合された香料組成物について出願している（特許文献４）。
【０００６】
また、Phloroglucinol誘導体は、抗菌活性を有することが知られている（特許文献５および非特許文献４〜６、ヘリクリスム属（別名、ヘリクリサム属）植物の抽出物からなる抗菌剤（特許文献６、本願出願人らが出願））が、抗アレルギー効果を有することはこれまで知られていなかった。
【特許文献１】特許第３６３７３５５号
【特許文献２】特開２００３−１２８５５８号公報
【特許文献３】特開２００６−３４８００３号公報
【特許文献４】特願２００７−０７３９５８号
【特許文献５】ドイツ特開１９８９−３９０７５４３号公報
【特許文献６】特開２００１−３０２５３２号公報
【非特許文献１】Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，７６（２），２６９（２００５）
【非特許文献２】Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，９０（４），６８５（２００５）
【非特許文献３】Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，４６０（２−３），２１９（２００３）
【非特許文献４】Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，６２（６），５２１（１９９１）
【非特許文献５】Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２９（４），１０９３（１９９０）
【非特許文献６】Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２８（６）, １６１３（１９８９）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上記事情において、安全性が高く、副作用のない天然物を起源とする植物成分や食品成分を有効成分とした抗アレルギー剤の開発がさらに強く求められていた。すなわち、本発明は、安全性が高く、副作用のない、天然物由来の優れた、抗アレルギー剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記の課題を解決するため種々検討した結果、インターロイキン４シグナリングの阻害活性（ＩｇＥクラススイッチの阻害活性）、ＦｃεＲＩ発現の低下活性、およびヒスタミン放出の阻害活性を指標にして、ヘリクリサム属植物の抽出物、その中性画分、さらに、Phloroglucinol誘導体である下記一般式（１）と（２）で表される化合物が、優れた抗アレルギー作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、
下記一般式（１）
【化１】
0005109200.tif 000002
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物、および下記一般式（２）
【００１０】
【化２】
0005109200.tif 000003
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物より選ばれる１種または２種以上のPhloroglucinol誘導体を有効成分とする抗アレルギー剤やヘリクリサム植物の抽出物の中性画分を有効成分とする抗アレルギー剤に関する。
【００１１】
また、一般式（１）
【化３】
0005109200.tif 000004
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物を有効成分とするＩＬ−４シグナリング阻害剤、ＦｃεＲＩ発現低下剤、またはヒスタミン放出阻害剤、
および、一般式（２）
【００１２】
【化４】
0005109200.tif 000005
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される化合物を有効成分とするＩＬ−４シグナリング阻害剤、ＦｃεＲＩ発現低下剤、またはヒスタミン放出阻害剤にも関する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の抗アレルギー剤は、植物からの抽出物であり安全性が高く、非常に優れた抗アレルギー効果を発揮して、アレルギー症状の予防、軽減に有効である。また、抗アレルギー成分として、ヘリクリサム属植物の中性画分、或は上記一般式（１）と上記一般式（２）で表されるPhloroglucinol誘導体は、安全性が高く、非常に優れた抗アレルギー効果を発揮する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明に用いるヘリクリサム（Ｈｅｌｉｃｈｒｙｓｕｍ）属植物は、キク科で南ヨーロッパ、南アフリカ、熱帯アジアからオーストラリアにかけて約５００種が分布して、一年草または多年草で低木状になる種もある。
【００１５】
ヘリクリサム属植物としては、Ｈｅｌｉｃｈｒｙｓｕｍ（以下、Ｈ．と略記する）ａｍｂｉｇｎｕｍ、Ｈ．ａｍｏｒｇｉｎｕｍ、Ｈ．ａｒｅｎａｒｉｕｍ、Ｈ．ａｒｇｅｎｔｅｕｍ、Ｈ．ａｒｍｅｎｉｕｍ、Ｈ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｍ、Ｈ．ａｕｒｅｏｎｉｔｅｎｓ、Ｈ．ｂｅｌｌｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ｈ．ｂｒａｃｔｅａｔｕｍ、Ｈ．ｃａｅｓｐｉｔｉｔｉｕｍ、Ｈ．ｃｒｉｓｐｕｍ、Ｈ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ、Ｈ．ｆｒｉｇｉｄｕｍ、Ｈ．ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ、Ｈ．ｉｔａｌｉｃｕｍ（異名Ｈ．ｒｕｐｅｓｔｒｅ）、Ｈ．ｌｅｕｃｏｐｓｉｄｅｕｍ、Ｈ．ｍａｒｉｔｉｍｕｍ、Ｈ．ｍｉｌｆｏｒｄｉａｅ、Ｈ．ｎｉｔｅｎｓ、Ｈ．ｐｅｔｉｏｌａｒｅ、Ｈ．ｏｄｏｒａｔｉｓｓｉｍｕｍ、Ｈ．ｐｅｔｉｏｌａｔｕｍ、Ｈ．ｐｉｃａｒｄｉｉ、Ｈ．ｐｌｉｃａｔｕｍ、Ｈ．ｐｌｉｎｔｈｏｃａｌｙｘ、Ｈ．ｐｏｌｙｐｈｙｌｌｕｍ、Ｈ．ｐｕｍｉｌｕｍ、Ｈ．ｒｕｂｉｃｕｎｄｕｍ、Ｈ．ｓｅｌａｇｏ、Ｈ．ｓｅｒｏｔｉｎｕｍ（異名Ｈ．ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｍ）、Ｈ．ｓｅｘａｔｉｌｅ、Ｈ．ｓｉｂｔｈｏｒｐｉｉ（異名Ｈ．ｖｉｒｇｉｎｅｕｍ）、Ｈ．ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｍ、Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓ、Ｈ．ｔａｅｎａｒｉ、Ｈ．ｔｈｉａｎｓｃｈａｎｉｃｕｍ等が挙げられる。これらのなかで、セロチヌム（Ｈ．ｓｅｒｏｔｉｎｕｍ）、イタリクム（Ｈ．ｉｔａｌｉｃｕｍ）またはストエカス（Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓ）が好ましく、とりわけヘリクリサム  ストエカス（Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓ）が特に好ましい。
【００１６】
ヘリクリサム属植物の抽出物としては、ヘリクリサム属植物の全草、葉、枝、花、根、茎などいずれの部位の抽出物でもよいが、特に花からの抽出部に含有しているものが好ましい。
【００１７】
ヘリクリサム属植物の抽出物としては、種々の形態のものを利用することができるが、有機溶剤に一定期間浸漬させた後、植物を取り除き溶媒を留去してコンクリートを得て、さらにアルコールに溶解（加温が望ましい）して再抽出していたアブソリュートを用いることが好ましい。
【００１８】
ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分は、ヘリクリサム属植物を溶媒、例えば液化ガス（液体炭酸、液化プロパン、液化ブタン等）、水、炭素数１〜５の低級アルコール類（メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、イソブチルアルコール等）、含水低級アルコール類、炭素数１〜５の低級アルコールと炭素数１〜５の脂肪酸とのエステル類（酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ブチル等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、前記エステル類およびケトン類の含水物、ハロゲン化炭化水素類（クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、トリクロロエタン等）、エーテル類（メチルエーテル、エチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等）、炭化水素類（石油エーテル、ヘキサン等）あるいは前記溶媒の混合物で抽出して得た抽出液をそのまま、或いは濃縮することにより得ることが出来る。前記抽出溶媒の中でも炭化水素類が好ましく、更に炭化水素類で抽出後炭素数１〜５の低級アルコール類、特にエチルアルコールで抽出することが好ましい。抽出方法としては特に限定されず、例えば溶媒中に原料植物を室温で１〜１００時間程度浸漬する方法、或いは溶媒の沸点以下の温度で加温、攪拌しながら抽出する方法などがあるが、抽出温度は、抽出時の変性がより少ない点から室温が好ましい。溶媒の使用量も特に限定されず、例えば原料植物に対して質量比で１〜１００倍量、より好ましくは５〜５０倍量が挙げられる。
【００１９】
次に、前記の植物抽出物をそのまま、あるいは有機溶媒、例えば、酢酸エチルまたは前記炭化水素類を追加後、酸水溶液およびアルカリ水溶液にて洗浄処理する。特に限定されないが、酸水溶液とは、塩酸、硫酸などの酸性化合物の水溶液であり、特に限定されないが、酸の濃度は１〜１０（ｗ／ｗ）％が好ましい。同様に特には限定されないが、アルカリ水溶液とは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムなどのアルカリ性化合物の水溶液であり、アルカリ性化合物の濃度は１〜２０（ｗ／ｗ）％が好ましい。
【００２０】
この洗浄の工程としては、アルカリ水溶液ついで酸水溶液にて洗浄処理する方法でも、酸水溶液ついでアルカリ水溶液にて洗浄処理する方法でもよい。また、洗浄処理後の画分に溶媒が残存していれば、その除去を行い中性画分を得る。
【００２１】
本発明で用いる前記一般式（１）および前記一般式（２）は、上記で得られた中性画分をカラムクロマトグラフィーによる処理により得ることができる。カラムクロマトグラフィーには、例えば、順相および逆相系の支持体を利用したカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、さらには超臨界流体を用いたクロマトグラフィーなどを用いることができ、使用する溶媒には特に制限はない。
【００２２】
また、当該化合物を得るには中性画分を処理するものでなくとも、精油、コンクリート、アブソリュートなどから一般的によく知られている分離および精製方法を用いることにより得ることもでき、また、上記ヘリクリサム属植物でなくとも当該化合物を含有する他の植物を原料として抽出することもでき、さらに、当該化合物を化学合成によって製造したものを用いることもできる。
【００２３】
本発明の抗アレルギー剤に、特に限定されない香料を添加することもできる。香料として使用可能な香料素材については、特に限定されないが、例えば、以下のものが挙げられる。
【００２４】
リモネン、ピネンに代表される各種炭化水素類；オクタナール、デカナール、シトラールなどの各種アルデヒド類；マルトール、ダマセノン、メチルヘプテノンなどの各種ケトン類；Ｌ−メントール、オクタノール、リナロール、フェニルエチルアルコールなどの各種アルコール類；メチルフェニルエチルエーテル、リナロールオキサイド、１，４−シネオールなどの各種エーテルおよびオキサイド類；エチルブチレート、ゲラニルアセテート、ヘキシルアセテートなどの各種エステル類；γ−デカラクトン、クマリン、ジャスミンラクトンなどの各種ラクトン類；インドール、フェニルアセトニトリル、リモネンチオールなどの各種ヘテロ化合物類；レモンオイル、グレープフルーツオイルといったシトラス系オイルや、シトラス系オイルを使用して作られたエッセンス類やオイル類；ペパーミントオイル、ジャスミンアブソリュート、シダーウッドオイル、オリスコンクリートなどの各種天然香料素材類、あるいはそれらを処理して得られる香料素材類；などが挙げられるがこれらに限定されるものではない。
【００２５】
実施例
以下、本発明を製造例および実施例に基づいて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２６】
（製造例１）
Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓの乾燥した花１ｋｇを、ヘキサン１０Ｌに浸漬させ、室温で１週間静置後、花を除いた。次に、溶媒を留去してコンクリート２５０ｇを得た。次にコンクリート２５０ｇをエチルアルコール２．５Ｌに加温溶解して再抽出し、溶液を−１５℃〜−２５℃に冷却してワックスなどの不溶解物を除いた後、減圧下でエチルアルコールを留去し赤褐色、粘稠なアブソリュート１９０ｇを得た。
【００２７】
上記アブソリュート９０ｇを、酢酸エチル０．５Ｌに溶解させた。有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加え良く攪拌した後、水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え、同様の操作を行い有機層を残した。
次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い有機層を残した。
ｐＨ試験紙でｐＨが７になっていることを確認した後、無水硫酸マグネシウムを加え、放置した。その後、濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分（以下、ＳＫ−１ともいう）を７２ｇ得た。
【００２８】
ＳＫ−１のプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルを重メタノールにて測定した。主に観測されたスペクトルデータは、一般式（１）（Ｒがメチル基およびエチル基）で表される化合物に基づくプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータであった。従って、ＳＫ−１に含まれる主なPhloroglucinol誘導体は、一般式（１）（Ｒはメチル基またはエチル基）で表される構造と確認した。
【００２９】
（製造例２）
製造例１で製造したアブソリュート１００ｇを、酢酸エチル０．５Ｌに溶解させた。次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を１５０ｍｌ加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い、有機層を残した。
次に、有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら、水層部分を除き、この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い、有機層を残した。
ｐＨ試験紙でｐＨが７になっていることを確認した後、無水硫酸マグネシウムを加えた。濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分を８０ｇ得た。
【００３０】
上記中性画分８０ｇを、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）、酢酸エチル、酢酸エチル／メタノール＝１：１（ｖ／ｖ）の移動相を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行った。
【００３１】
酢酸エチル留出画分２２ｇを、６０％メタノール水溶液、７０％メタノール水溶液、およびメタノールによる逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行った。６０％メタノール水溶液留出画分より、一般式（２）で表される化合物（以下、ＳＫ−２ともいう）を１２ｇ得た。
【００３２】
ＳＫ−２のプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータを以下に示した。下記データを解析した結果、ＳＫ−２には、一般式（２）（Ｒはエチル基）で表される化合物が５１％、一般式（２）（Ｒはメチル基）で表される化合物が４５％含有した混合物であることを確認した。
【００３３】
１H-NMR(400MHz, CD３OD; ppm)  δ: 1.17(3H,t), 1.63(6H,s), 1.67(3H,s), 1.87(3H,s), 1.88(3H,s), 2.09(2H), 2.17(3H,s), 2.20(2H), 2.52(2H), 2.67(3H,s), 3.22(2H,d), 3.51(2H,br), 5.17(1H,dd), 5.22(1H,dd)
【００３４】
１３C-NMR(100MHz, CD３OD; ppm)  δ: 10.1, 10.5, 12.1, 17.2, 17.7, 20.0, 22.4, 23.7, 25.3, 25.9, 27.8, 32.9, 33.2, 101.3, 106.5, 108.8, 109.3, 113.5, 114.3, 125.6, 125.9, 131.8, 134.7, 156.0, 159.7, 160.6, 162.6, 163.0, 170.9, 180.2, 180.4, 205.1
【００３５】
（製造例３）：（ヘリクリサム属植物からの抽出）
Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓの乾燥した花１ｋｇをヘキサン１０Ｌに室温で浸漬して、花香成分および抗アレルギー成分を移行させた後、花を除いた。次に、溶媒を留去してコンクリート２５０ｇを得た。次にコンクリート２５０ｇをエチルアルコール２．５Ｌに加温溶解して再抽出し、溶液を−１５℃〜−２５℃に冷却してワックスなどの不溶解物を除いた後、減圧下でエチルアルコールを留去し赤褐色、粘着状のアブソリュート１９０ｇを得た。強いカレー臭を有していた。
これをヘキサンに一定量を溶解させた。次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離させた後水層部分を除き、この操作を５回以上行った。この操作の最後に、水を加え、同じ操作を行い、有機層を残した。
次に、有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムを加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離させた後、水層部分を除き、この操作を５回以上行った。この操作の最後に、水を加え、同じ操作を行い、有機層を残した。
ｐＨ試験紙でｐＨ７になっていることを確認した後、乾燥硫酸マグネシウム又は乾燥塩化カルシウムを加え、数時間攪拌、放置した。その後、濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分を得た。
【００３６】
次に上記中性画分８０グラムを、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）〜酢酸エチル／メタノール＝１：１（ｖ／ｖ）の移動相を用いて常法に従いシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、当該Phloroglucinol誘導体群のうち、Ｒがメチル基およびエチル基である化合物を主成分とする２つの画分を、それぞれ４．９ｇ、３．２ｇ（Ｒがエチル基である化合物の純度７０％、以下Ｒがエチル基である粗精製品ともいう）得た。粗精製品の臭いは無かった。
【００３７】
さらに、この粗精製品について、前記した溶剤でシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返し、一般式（１）で表される化合物のＲがエチル基である化合物を、０．５ｇ得た（これを「ＳＫ−３」ともいう。）
【００３８】
ＳＫ−３のＩＲ、ＵＶ、ＥＩ−ＭＳならびにプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータは、特願２００７−０７３９５８の実施例１Ａで得られた精製品−２のデータと同一であった。
【００３９】
ＳＫ−３のＨＭＢＣスペクトルなどの２次元ＮＭＲスペクトルデータを解析した結果、特願２００７−０７３９５８に記載の通り、本発明の化合物における鎖状側鎖がネリル基（二重結合がシス体（Ｚ））であることが判明した。
【００４０】
上記Phloroglucinol誘導体の純度は、高速液体クロマトグラフィーのピーク面積比から算出した結果である。
カラム：ＯＤＳ−５−Ａ（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）（ＹＭＣ社製）
検出器：２０５ｎｍ（ＵＶ）
移動相：アセトニトリル：３０ｍ  ｍｏｌ／Ｌギ酸アンモニウム水溶液＝６２．５：３７．５
【実施例１】
【００４１】
（インターロイキン４シグナリングの阻害活性）
ヒト成熟Ｂ細胞株ＤＮＤ３９を、２×１０６細胞数／ｍＬに調製して、インターロイキン４（１００Ｕ／ｍＬ）とともに、ＳＫ−１、ＳＫ−２、ＳＫ−３とを、各々０．１％ＤＭＳＯ水溶液で終濃度が０．１μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、および１０μｇ／ｍＬになるように溶解させ、共存下で３０分間インキュベートした。その後、細胞を溶解し、免疫沈降に供して、リン酸化Ｓｔａｔ６（ｐＳｔａｔ６）とＳｔａｔ６を検出した。その結果を図１に示した。有意差検定はｔ検定法にて行い、危険率ｐが0.01未満（p<0.01）で有意な場合、「＊」を、0.001未満（p<0.001）で有意な場合、「＊＊」を付して有意であることを示した。
【００４２】
その結果、いずれも１μｇ／ｍＬの濃度でインターロイキン４誘導性Ｓｔａｔ６リン酸化を有意に抑制した。
【実施例２】
【００４３】
（ＦｃεＲＩ発現の低下活性）
ＳＫ−１、ＳＫ−２、ＳＫ−３を、各々０．１％ＤＭＳＯ水溶液で終濃度が０．１、１および１０μｇ／ｍＬになるように溶解させ、これらの存在下で、ヒト好塩基球様細胞株ＫＵ８１２細胞（５×１０５細胞数／ｍＬ）を２４時間培養した。その後、ＦｃεＲＩに特異的な抗体を用いたフローサイトメトリー解析により、細胞表面上のＦｃεＲＩ発現レベルを測定し、結果を表１および図２に記載した。
【００４４】
表１
濃度（μｇ／ｍｌ）  ＦｃεＲＩ陽性細胞率（％）
ＳＫ−１        ０．１            ５０．９
ＳＫ−１        １．０            ４３．４
ＳＫ−１      １０                ４７．０
ＳＫ−２        ０．１            ４９．３
ＳＫ−２        １．０            ４４．５
ＳＫ−２      １０                ３２．４
ＳＫ−３        ０．１            ４８．０
ＳＫ−３        １．０            ４８．４
ＳＫ−３      １０                ２６．２
対照                              ４８．７
【００４５】
この結果、いずれも１μｇ／ｍＬの濃度でＦｃεＲＩ発現を有意に抑制した。
【実施例３】
【００４６】
（ヒスタミン放出の阻害活性）
ＫＵ８１２細胞（１×１０６細胞数／ｍＬ）に、ＳＫ−１、ＳＫ−２、ＳＫ−３を、０．１％ＤＭＳＯ水溶液で終濃度が０．１μｇ／ｍＬ、および１μｇ／ｍＬになるように溶解させたものと、対照としてエピガロカテキン−３−０−ガレート（Epigallocatechin-3-O-gallate、ＥＧＣＧ；終濃度２５μＭ）とを、添加して、２０分間前処理を行った。
その後、カルシウム導入剤Ａ２３１８７（終濃度５５μＭ）により、２０分間刺激後、上清を回収して蛍光法により細胞外に放出されたヒスタミン量を測定した。その結果を図２に示した。なお、図３に記載した、Relative histamine release(%)とは、相対ヒスタミン放出率（％）を意味する。また、有意差検定はｔ検定法にて行い、危険率ｐが0.01未満（p<0.01）で有意な場合「＊」を、0.001未満（p<0.001）で有意な場合「＊＊」を付して有意であることを示した。
【００４７】
その結果、いずれも１μｇ／ｍＬの濃度でヒスタミン放出の阻害活性を有意に抑制した。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明の一般式（１）および一般式（２）で表される化合物または天然物抽出物（ヘリクリサム属の植物抽出物の中性画分）は抗アレルギー作用を有し、これらを配合するあるいは添加することにより、抗アレルギー性を付与することができる。本発明の抗アレルギー剤は、植物抽出物であり安全性が高く、非常に優れた抗アレルギー性を有する。従って、本発明の化合物または天然物抽出物を、香粧品、飲食品、健康食品などに添加することにより、これらに抗アレルギー性が付与できる。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】インターロイキン４誘導性Ｓｔａｔ６のリン酸化阻害活性試験結果
【図２】ＦｃεＲＩ発現の低下活性試験結果
【図３】ヒスタミン放出阻害活性試験結果
【図１】
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【図２】
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【図３】
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