(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つのマトリクスメタロプロテイナーゼ阻害剤（ＭＭＰＩ）とショウマ（ｂｌａｃｋ  ｃｏｈｏｓｈ）の抽出物とを含み、当該ＭＭＰＩはイロマスタットであり、このイロマスタットはヒドロキサマート系合成ＭＭＰＩである、皮膚の老化およびしわを予防または減少させる組成物。
【請求項２】
化粧品または薬学的に許容される局所担体をさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ＵＶＡおよびＵＶＢ放射の遮断に活性である化合物をさらに含む、請求項１及び２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
皮膚に及ぼす老化、しわ、喫煙または受動喫煙の有害な作用を最小限にするために、皮膚に接触させる薬剤を製造するために使用される、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2000年6月29日に提出された米国特許仮出願第60/215,087号の非暫定一部継続出願である。
【０００２】
発明の分野
本発明は、局所適用した場合に皮膚のしわおよび損傷を減少または予防するための組成物および方法を提供する。
【０００３】
発明の背景
女性が閉経を経験し、男性は年をとるにつれて、いずれも皮膚のしわが増加して、皮膚の厚みが減少する。最近まで、これらの皮膚の変化の原因である分子メカニズムは十分に理解されていなかった。閉経後の女性では、血漿のエストロゲンレベルが減少していることは、明らかにこのプロセスにおいて何らかの役割を果たしているが、皮膚のしわおよび皮膚の薄化に至る分子経路に及ぼすエストロゲンの影響は、最近まで認識されなかった。アスクロフトら（Ascroft）は、経口エストロゲン補充療法が、閉経前女性と健康な閉経後女性とに認められる皮膚生検創傷の治癒の遅れを逆転させることを報告した。（G.S.アスクロフトら（Ascroft）、「エストロゲンはTGF-β1の増加に関連した皮膚創傷治癒を促進する（Estrogen Accelerates Cutaneous Wound Healing Associated with an Increase in TGF-β1）」、Nature Medicine 3：1209〜1215、1997；アスクロフトら（Ascroft）、「ヒトの老化は、マトリクスメタロプロテイナーゼ組織阻害剤（TIMP-1および-2蛋白質ならびにmRNA）の損傷によるインビボ発現を障害する（Human Ageing Impairs Injury-Induced in Vivo Expression of Tissue Inhibitors of Matrix Metalloproteinases(TIMP-1 and -2 Proteins and mRNA)）」、J. Pathol. 183：169〜176、1997；アスクロフトら（Ascroft）、「健康なヒトの正常な皮膚および急性皮膚損傷におけるマトリクスメタロプロテイナーゼ（MMP）蛋白質およびmRNAプロフィールの時間的および空間的調節における老化関連変化（Age-Related Changes in the Temporal and Spatial Regulation of Matrix Metalloptoteinases（MMP）Ptotein and mRNA Profiles in Normal Skin and Acute Cutaneous Wounds of Healthy Humans）」、Cell Tissue Res. 290：581〜591、1997を参照のこと）。さらに、彼らは、全身のエストロゲン補充療法がトランスフォーミング増殖因子蛋白質のレベルを増加させ、創傷部位におけるマトリクスメタロプロテイナーゼのレベルを減少させると報告した。アスクロフト（Ascroft）らによるこの知見によって、全身性エストロゲン補充療法が、コラーゲンを含む細胞外マトリクス蛋白質の合成を刺激し、同時にマトリクスメタロプロテイナーゼの産生を減少させることが知られているTGF-β1の産生を刺激するという仮説が立てられた。これらのエストロゲンの複合作用の結果は、閉経後女性の皮膚における厚さ全体に及ぶ穿孔創傷の治癒を促進することであった。
【０００４】
その後の論文において、アスクロフトら（Ascroft、「局所エストロゲンは、炎症反応の変化に関連したヒト高齢者における皮膚創傷治癒を加速する（Topical Estrogen Accelerates Cutaneous Wound Healing in Aged Humans Associated with an Altered Inflammatory Response）」、Am. J. Pathol. 155：1137〜1146、1999）。皮膚穿孔生検モデルは先のように利用したが、患者に経口エストロゲン補充療法を行うか否かのかわりに、高齢の男性（平均年齢70歳）および女性（平均年齢74歳）を無作為化して、創傷の上に載せた皮膚小片によって局所輸送されるエストロゲン（25μgエストラジオール／24時間）またはプラセボのいずれかを投与した。プラセボと比較して、局所エストロゲン処置は、男性および女性の双方において創傷治癒の程度を増加させ、7日目で創傷の大きさを減少させ、7日目と80日目の双方でコラーゲンレベルを増加させ、7日目でフィブロネクチンレベルを増加させた。
【０００５】
併せて考慮すると、これらの研究は、全身または局所エストロゲンが、TGF-β1レベルを増加させ、次にこれがコラーゲンの合成を増加させて同時にマトリクスメタロプロテイナーゼレベルを減少させることによって、高齢の男性および女性において厚さ全体に及ぶ皮膚創傷の治癒を改善する可能性があることを示している。
【０００６】
米国特許第6,130,254号において、皮膚の光による老化を阻害する方法が開示されている。開示された方法は、UVAとUVB遮断剤をレチノイドのようなMMP阻害剤と併用して使用することが含まれる。一つの組成物において、レチノイドをフラボンまたはイソフラボン化合物と併用して含む組成物が開示され、太陽光に曝露する前少なくとも8時間皮膚に適用することを請求している。
【０００７】
本発明者らによって確認された当技術分野の如何なるものにも、皮膚に及ぼす老化の影響（皮膚のしわ、小じわ、張りの喪失等）を減少させるために、MMPIとエストロゲンまたはフィトエストロゲンとの併用物を長期間毎日適用することは含まれていない。本発明は、この要求に応える溶液を提供する。さらに、本発明に係る特定の組成物において、非レチノイドMMP阻害剤と非フラボンまたはイソフラボンフィトエストロゲンとの組合わせを既知のUVAおよびUVB遮断剤と共に用いて、皮膚の小じわおよびしわを含む光による皮膚の老化を逆転、減少、防止、または回避することを含む、治療を施す。
【０００８】
発明の概要
本発明の化粧品局所製剤は、皮膚のしわを減少させる、皮膚の張りを改善させる、またはその双方を目的とする。好ましくは、局所製剤は、マトリクスメタロプロテイナーゼ阻害剤、MMPIを含み、合成エストロゲンに対して天然のエストロゲン、例えば17-βエストラジオールのような真のエストロゲン化合物、またはエストロゲン様ステロイド（ハーブ調製物に認められる様々なフィトエストロゲンのような）を含むことが都合がよい。本発明のその他の型の化粧品局所製剤には、合成エストロゲンとMMP阻害剤との組合わせが含まれる。例としての合成エストロゲンには、エチニルエストラジオールおよびクエン酸クロミフィンが含まれるがこれらに限定されない。化粧品局所製剤は、しわを減少させ、皮膚の張りを改善するために安全かつ有効である。特定の製剤において、本発明の組成物はさらに、生存しているヒトの皮膚に起こる光老化またはタバコ喫煙によるしわもしくは小じわを減少または逆転させるために用いてもよい。
【０００９】
本発明の好ましい態様の詳細な説明
本発明の一つの例としての態様において、天然または合成エストロゲンと、イロマスタットのようなＭＭＰ阻害剤との組合わせを、化粧品しわ取りクリームとして用いるための局所製剤として提供する。エストロゲンとＭＭＰ阻害剤とを併用すると、新しい細胞外マトリクスの沈着を相乗的に促進して、その代謝回転を減少させ、その結果、正常な皮膚の老化に関連したしわおよび薄化が減少する。さらに、本発明に係る方法および組成物は、紙巻きタバコの喫煙、葉巻タバコの喫煙、受動喫煙等、火傷の被害者、消防士、および煙に暴露される他の人に関連した皮膚のしわ、小じわ、および老化の程度を制限するのに有用である。
【００１０】
本発明に従って用いられるマトリクスメタロプロテイナーゼ阻害剤（ＭＭＰＩ）には、その全てが参照として本明細書に組み入れられる、米国特許第５，８９２，１１２号、第５，７７３，４３８号、第５，６９６，１４７号に開示および請求されるＭＭＰＩ化合物が含まれるがこれらに限定されない。イロマスタットは一つの好ましいＭＭＰＩである。
【００１１】
コラーゲン分子は皮膚の主要な張力を提供する。人が年をとるにつれ、コラーゲン分子のような皮膚の細胞外マトリクスにおける蛋白質成分が分解されるようになる。その結果、皮膚はたるみ、しわとなり、薄くなり始める。本発明の局所製剤の第二の成分であるＭＭＰ阻害剤はこの問題に対処する。好ましいＭＭＰ阻害剤はイロマスタットであり、これは低分子の改変されたジペプチドであって、コラゲナーゼ、ゼラチナーゼ、およびストロメリシンを含む、人の皮膚に存在する主要なクラスのＭＭＰの極めて強力な阻害剤である。イロマスタットはまた、両親媒性である望ましい特性も有しており、このことは、これが疎水性と親水性特性の双方を有することを意味する。したがって、イロマスタットは、皮膚の表皮の疎水性の角化層の中に浸透して、同様に皮膚の水分に富む細胞外マトリクスに存在するプロテアーゼとも相互作用する。局所製剤にはイロマスタットが含まれるが、メタロプロテイナーゼ組織阻害剤（ＴＩＭＰ）、ガラーディン、バチマスタット、マリマスタット、またはヒドロキサメートに基づく任意の合成阻害剤のような他のＭＭＰ阻害剤（天然または合成またはその双方）を局所製剤のほかの態様において用いてもよい。
【００１２】
上記のように、局所製剤は、処方薬ではなくて化粧品組成物である。本発明の化粧品局所製剤は、皮膚のしわを減少させ、皮膚のしわおよび皮膚の張りの双方を減少させることに向けられる。好ましくは、局所製剤にはＭＭＰＩが含まれ、同様に、合成エストロゲンに対して天然のエストロゲン、例えば１７−βエストラジオールのような真のエストロゲン化合物、またはエストロゲン様ステロイド（ハーブ調製物に認められる様々なフィトエストロゲンのような）が含まれる。本発明の化粧品局所製剤の他の形には、合成エストロゲンとＭＭＰ阻害剤との組合わせが含まれる。例としての合成エストロゲンには、エチニルエストラジオールとクエン酸クロミフィンが含まれがこれらに限定されない。本発明に従う好ましい組成物において、エストロゲンまたはエストロゲン様活性を有する植物化合物に富む植物の抽出物をＭＭＰＩと併用する。このように、本発明の一つの特定の態様において、植物抽出物は、多様なトリテルペングリコシドを含むことが示されているショウマ（Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａｒａｃｅｍｏｓａ）の抽出物である（例えば、シャオ（Ｓｈａｏ）ら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２０００、６３：９０５〜９１０参照、この目的のために参照として本明細書に組み入れられる）。本発明の開示において、本発明者らは、既知のクラスのフィトエストロゲンであるトリテルペングリコシドを既知のＭＭＰＩと共に含む組成物によって、皮膚のしわが劇的に減少することを証明する。
【００１３】
化粧品局所製剤は、しわを減少させ、皮膚の張りを改善するために安全かつ有効である。皮膚用の既知の担体は様々なクリーム、ゲル、および溶液であり、その多くは、適用する組成物に含まれる生物学的に有効な物質の経皮浸透を促進するように適合されている。
【００１４】
太陽への曝露に拘らずに毎日使用することを意図している本発明に係る組成物は、上記の組成物の他に、皮膚の光老化を減少、回避、または予防するための組成物を含んでもよい。米国特許第6,130,254号に示されるように、フラボンまたはイソフラボン化合物と併用して、太陽光に対する曝露に反応してMMP発現の程度を減少させるためにレチノイドを含む特定の組成物およびその使用方法が開示された。さらに、組成物はUVAおよびUVB遮断薬を含んでいた。米国特許第6,130,254号の開示は、UVAおよびUVB遮断薬を含む既知の組成物を提供する目的で参照として本明細書に組み入れられる。しかし、太陽に曝露される前に皮膚に適用するように適合された本発明の組成物には、マトリクスメタロプロテイナーゼ発現の間接的な抑制物質より、上記のようにマトリクスメタロプロテイナーゼの直接阻害剤が含まれる。その結果、本発明の組成物は、米国特許第6,130,254号に従って最適であると開示された8時間より、予想される太陽への曝露に対してこれよりかなり近い時間枠で皮膚に適用してもよい。さらに、皮膚の光老化を減少するように適合させた本発明の組成物は、エストロゲン、合成エストロゲン、ショウマ（black cohosh）のような植物抽出物に存在するトリテルペングリコシドのようなフラボンまたはイソフラボン以外のフィトエストロゲンを含む。
【００１５】
本発明に開示されるように、本発明の化粧品局所製剤の試験は、ボランティアについて行い、しわに及ぼす組成物の効果を採点した。本発明の態様により、肉眼による検分または光学顕微鏡解析のいずれかによって、皮膚の張りを劇的に増加させ、しわを減少させることが判明している。
【００１６】
本発明のさらなる例としての態様において、上記の化粧品製剤より高い用量であることを除き、上記と類似の原則に基づく処方局所製剤を調製する。化粧品製剤と同様に、処方製剤には、少なくとも一つの天然もしくは合成エストロゲンまたはその双方と組み合わせたMMP阻害剤が含まれる。
【００１７】
当業者は、多様な化粧品媒体を本発明に従って用いてもよいことを認識すると思われる。例えば、媒体は、プロピレングリコールの緩衝溶液、アクリレートゲル化剤、または多様な既知もしくは市販のクリームもしくはゲル製剤の如何なるものの単純な組み合わせであってもよい。本発明に係るさらなる組成物において、それ自身しわの減少のために有用な作用を有することが示されている担体が含まれる。このように、例えば、担体は、参照として本明細書に組み入れられる、米国特許第5,885,596号に開示される担体であってもよい。その特許に従って、組成物は、水分を重量で約40％、アジピン酸ジブチル、ミリスチン酸イソプロピル、およびその組み合わせからなる群より選択される浸透増強化合物を重量で約35％まで；脂肪アルコールを重量で約15％まで；ならびに一つまたは複数の皮膚軟化剤または保湿湿潤剤を含む。第'596号特許に開示されるように、活性物質を含まないそのような担体は、有意な抗しわ作用を有する。本発明に従って、一つの態様において、第'596号の特許に従って開示された担体またはその同等物は、本明細書に開示される活性物質、すなわちMMPIおよびエストロゲンまたはフィトエストロゲンと併用する。さらに、光老化を予防、最小限にする、または回避するために有効な組成物を提供するために、第6,130,254号特許に開示される阻害剤のようなUVAおよびUVB遮断剤を含めてもよい。
【００１８】
それぞれの成分に関して、有効量は、所定の期間に必要なしわの減少と一致するマトリクスメタロプロテイナーゼとエストロゲン、フィトエストロゲンまたはその双方の量に相関した量である。組成物におけるＭＭＰＩ対エストロゲン／フィトエストロゲンの比は、ＭＭＰＩ単独またはエストロゲン化合物単独で用いた場合と比較して、少なくとも相加効果が認められる限り、モルベースで約１０００：１〜約１：１０００の範囲であると考えられる。その他の望ましい比には、１００：１〜約１：１００、１０：１〜約１：１０、および約１：１の比が含まれるがこれらに限定されず、それらは全て本発明の開示に基づいて日常的な実験によって確認できる。ＭＭＰＩの濃度は約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌが好ましい。好ましくは、エストロゲンまたはフィトエストロゲンは、溶解度および皮膚のしわを予防または減少するための用量反応必要条件のような日常的に規定されるパラメータに応じて約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌの濃度で組成物に存在する。
【００１９】
上記の本明細書に提供される一般的な開示に照らして、本発明の実践方法、および本発明に係る組成物の製造方法に関して、当業者は添付の特許請求の範囲に定義されるように本発明を実施することができることを認識していると思われる。しかし、以下の実験の詳細は、その最善の形態を含む本発明の完全な書面での説明を確実にするように提供される。しかし、本発明の範囲は、提供される特定の実施例に関して解釈してはならないことを認識されると思われる。むしろ、本発明の範囲は、この完全な本発明の開示によって構成される本発明の完全な説明に照らして、添付の特許請求の範囲を参照して理解すべきである。
【００２０】
実施例1
イロマスタットとショウマとを含む化粧品組成物
ショウマ抽出物をゲル100 gあたり15 ml、イロマスタット10 mg、ならびに35％プロピレングリコール、平衡水、およびアクリレートゲル化剤を含む一般的クリーム担体100 mlを含む組成物を、十分に混合して形成した。クリームをボランティアの前腕、続いて顔および頚部に適用した。
【００２１】
実施例2
本発明に係る組成物のインビボ効果
実施例1に従う組成物を、組成物約0.5 ccと共に1日2回1週間にわたり、ボランティアの前腕の内側に適用した。組成物が十分に認容されることが決定したら、ボランティアの顔の眼の周囲にも同様の処置を行った。
【００２２】
実施例３
本発明の組成物を用いたインビボ処置
３５％プロピレングリコール、平衡水、およびアクリレートゲル化剤を含む担体中に、１００ｍｌあたりイロマスタット１０ｍｇおよび濃縮ショウマ抽出物２０ｍｌを含む組成物を、十分に混合することによって形成した。女性ボランティアの顔にゲルを３週間適用した。試験期間の前、最中、および後に写真を撮影した。
【００２３】
実施例4
インビボ処置の結果
本発明者らは、イロマスタットおよびショウマのしわ減少作用に関して、4週間の独立した光学顕微鏡および肉眼的評価試験を行った。本発明者らは、被験者6人と代理者2人を選んだ。被験者2人は、プロトコールに従わない、または関心がないために参加しなかった。パネリスト1人は、機械的なデータ紛失のために除外した。試験を終了した被験者の性別および年齢は、女性4人（48〜56歳）および男性1人（49歳）であった。
【００２４】
評価方法
本発明者らは被験者を三つの異なる様式で評価した：
1．左側（処置）において認められたしわの外観と右側（無処置）でのしわの外観との肉眼的比較を行う評価者4人による肉眼的評価。評価者は、「変化なし」を「0」、「ある程度の距離を隔てても明確な差」を「4」とする0〜4のスコアを用いた。
2．顔（眼窩領域）の処置側の「前」および「後」のデジタル写真の解析に基づくしわの数。
3．顔（眼窩領域）の処置側の「前」および「後」のデジタル写真の解析に基づくしわの長さ。
【００２５】
結果
1．肉眼的評価：評価者は全員、パネリスト5人中3人において明らかに目に見える改善を記録した。被験者1人は、差を示さず、被験者1人は混合評価（50/50）を示した。
2．しわの数：これは完全に消失したしわの計数である。パネリスト6人中3人が、計数したしわ全体の総数の減少を示した。試験の4週間の間でのしわの
喪失の総数は、15/46またはしわ全体の外観の32％の全体的減少であった。
3．しわの長さ：これは、減少したが消失していないしわの測定である。被験者2人は、肉眼的評価で陽性であったがしわの数は減少しなかった。1例では、これはしわが深かったためであった。この被験者は、処置領域においてしわの26％短縮を示した。第二の例では、しわの長さは短くなかったが、被験者を肉眼で再評価すると、目に見える改善が確認された。
【００２６】
結果：  目に見える改善は被験者の60％に認められた（肉眼的評価）。試験被験者の33％に関して、処置領域のしわのいくつかは完全に消失した（しわの数）。しわの深い最も高齢の被験者は、処置領域におけるしわの長さの26％短縮を示した。改善は、閉経後被験者の66％において認められ、眼の領域のしわの肉眼的な差は、処置開始後2週間で始まった。閉経前女性（被験者1人）では、認められた改善は、しわの数の67％減少であり、試験被験者1人ではしわの長さの25％減少であった。クリーム処方において活性成分を用いた唯一の男性被験者において認められた改善は、しわの数の65％減少であった。上記のように認められた皮膚のしわの減少が急速であったことおよびその程度は予想外であった。
【００２７】
実施例5
光老化の減少
実施例4に説明したように、特に光による老化を減少、回避、または予防するための組成物を本発明に従って調製し、好ましくは、太陽に曝露される前に太陽に曝露されると予想される皮膚の領域に適用する。組成物は、UVAおよびUVBの遮断剤として作用する米国特許第6,130,254号に開示される物質を含む必要はないが、付加的に含んでもよい。