(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）および式（II）で表される化合物を共重合して得られる、式（III）および式（IV）で表される繰り返し単位からなるポリエーテルであって、かつ式(Ａ)で表される繰り返し単位を有さないポリエーテル。
【化１】
0005105166.tif 000035
【化２】
0005105166.tif 000036
【化３】
0005105166.tif 000037
【化４】
0005105166.tif 000038
【化５】
0005105166.tif 000039
（式中、Ｒ1は−ＯＲ2または−ＮＨＲ3で示される基を表し、Ｒ2およびＲ3は水素、無機塩基あるいは有機塩基またはＣ1〜Ｃ15の炭化水素を含む基、またはアミノ酸もしくはペプチドであるリンカーが結合した薬理作用を有する化合物を表す。ここで同一の共重合体内でＲ1、Ｒ2またはＲ3は同一であっても異なっていてもよいが、同一の共重合体内では少なくとも１以上の、アミノ酸もしくはペプチドであるリンカーが結合した薬理作用を有する化合物が含まれるものとする。各構造単位のモル比は、（III）／（（III）＋（ＩＶ））＝０．００１〜０．５であり、構造単位（ＩＩＩ）および（ＩＶ）のモル％はそれぞれ（ＩＩＩ）＝０．１〜９９．９および（ＩＶ）＝０．１〜９９．９である。ここで、式（ＩＩＩ）および式（ＩＶ）を構造単位として含むポリエーテルは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００である。）
【請求項２】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）換算重量平均分子量／ＰＥＧ換算数平均分子量（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．１〜２．７である請求項１に記載のポリエーテル。
【請求項３】
リンカーがＧｌｙ，Ａｌａ，Ｌｅｕ，Ｉｌｅ，Ｐｈｅで示されるアミノ酸から選択または組み合わせて用いられる請求項１または２に記載のポリエーテル。
【請求項４】
リンカーがＧｌｙ−Ｇｌｙ，Ａｌａ−ＧＬｙ，Ｇｌｙ−Ａｌａ，Ｌｅｕ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｌｅｕ，Ｉｌｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｉｌｅ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙから選択される請求項１〜３のいずれかに記載のポリエーテル。
【請求項５】
薬理作用を有する化合物が抗悪性腫瘍薬、抗炎症薬、抗リウマチ薬、酵素阻害薬または核酸である請求項１〜４のいずれかに記載のポリエーテル。
【請求項６】
抗悪性腫瘍薬がアルキル化薬、代謝拮抗薬、抗腫瘍性抗生物質、微小管阻害薬、ホルモン類似薬、トポイソメラーゼ阻害薬、生物製剤（サイトカイン）、分子標的治療薬、非特異的免疫賦活薬から選択される請求項５に記載のポリエーテル。
【請求項７】
アルキル化薬がマスタード薬またはニトロソウレア類から選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項８】
代謝拮抗薬が葉酸代謝拮抗薬であるメトトレキセート、ピリミジン代謝拮抗薬である５−フルオロウラシル、プリン代謝拮抗薬の６−ＭＰから選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項９】
抗腫瘍性抗生物質がアンスラサイクリン系のドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシンＣから選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項１０】
微小管阻害薬がタキサン系のパクリタキセル、ドセタキセルから選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項１１】
トポイソメラーゼ阻害薬がトポイソメラーゼＩ阻害薬のイリノテカン、ノギテカンから選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項１２】
分子標的治療薬がイマチニブ、ゲフィチニブから選択される請求項６に記載のポリエーテル。
【請求項１３】
抗炎症薬が副腎皮質ステロイド薬、非ステロイド性抗炎症薬から選択される請求項５に記載のポリエーテル。
【請求項１４】
副腎皮質ステロイド薬がヒドロコルチゾン、コルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾンから選択される請求項１３に記載のポリエーテル。
【請求項１５】
非ステロイド性抗炎症薬がサリチル酸系のアスピリン、アントラニル系のメフェナム酸、プロピオン酸系のイブプロフェン、ロキソプロフェン、アリール酢酸系のジクロフェナク、インドメタシンから選択される請求項１３に記載のポリエーテル。
【請求項１６】
抗リウマチ薬が免疫調節薬、免疫抑制薬から選択される請求項５に記載のポリエーテル。
【請求項１７】
免疫調節薬が金チオリンゴ酸ナトリウム、ペニシラミン、ロベンザリットから選択される請求項１６に記載のポリエーテル。
【請求項１８】
免疫抑制薬がミゾリビン、メトトレキサート、タクロリムスから選択される請求項１６に記載のポリエーテル。
【請求項１９】
酵素阻害薬がファスジルまたは塩酸ファスジルから選択される請求項５に記載のポリエーテル。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれかに記載のポリエーテルを含む製剤。
【請求項２１】
Ｒ2が水素又は無機塩基、または有機塩基である請求項１に記載のポリエーテルを用いた生体内組織への薬物送達用担体。
【請求項２２】
式（III）および式（IV）で表される繰り返し単位からなり、かつ、式(Ａ)で表される繰り返し単位を有さない請求項１〜１９のいずれかに記載のポリエーテルの製造方法であって、式（I）および式（II）で表される化合物をランダム共重合する工程を含む前記製造方法。【化９】
0005105166.tif 000040
【化１０】
0005105166.tif 000041
【化１１】
0005105166.tif 000042
【化１２】
0005105166.tif 000043
【化１３】
0005105166.tif 000044（式中、Ｒ1は−ＯＲ2または−ＮＨＲ3で示される基を表し、Ｒ2およびＲ3は水素、無機塩基あるいは有機塩基またはＣ1〜Ｃ15の炭化水素を含む基、またはアミノ酸もしくはペプチドであるリンカーが結合した薬理作用を有する化合物を表す。ここで同一の共重合体内でＲ1、Ｒ2またはＲ3は同一であっても異なっていてもよいが、同一の共重合体内では少なくとも１以上の、アミノ酸もしくはペプチドであるリンカーが結合した薬理作用を有する化合物が含まれるものとする。各構造単位のモル比は、（III）／（（III）＋（IV））＝０．００１〜０．５であり、構造単位（III）および（IV）のモル％はそれぞれ（III）=０．１〜９９．９および（IV）=０．１〜９９．９である。ここで、式（III）および式（IV）を構造単位として含むポリエーテルは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００である。）
【請求項２３】
重合に用いる触媒が塩基およびルイス酸から選択される請求項２２に記載のポリエーテルを製造する方法。
【請求項２４】
重合に用いる触媒が水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化セシウムやナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリムプロポキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムプロポキシド、カリウムｔ−ブトキシド、カリウム−ｔ−２−メチル−２−ブトシキドおよび三フッ化ホウ素エーテル錯体、トリアルキルアルミニウム、トリエチルアルミニウム、トリフェニルアルミニウム、トリブチルアルミニウムから選択され、単独もしくは混合して使用される請求項２２に記載のポリエーテルを製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、側鎖にペンダント状カルボキシメチル基を導入したポリエーテル、これを用いた薬物送達用担体及び薬物複合体に関する。また、医薬化合物を標的部位に到達させるためのポリエーテルの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
例えば抗腫瘍薬等の薬物（医薬化合物）は、静脈内投与や経口投与などの投与経路により全身的に投与されると、特定の腫瘍部位に移行して癌細胞の増殖を阻害ないし抑制することにより治療効果を発揮する。しかしながら、全身投与された抗腫瘍薬は、血中から肝臓、脾臓、骨髄といった網内系臓器に取り込まれる、あるいは腎臓を介し尿中に排泄されるために血中濃度が低下し、腫瘍部位への移行が十分に行われない、また場合によっては毒性発現する場合がある。
また、通常の抗腫瘍薬を単独で全身投与した場合には、腫瘍部位への移行選択性（腫瘍選択性）が低いために、抗腫瘍薬が全身の様々な細胞・組織・臓器に満遍なく分布してしまい、正常な細胞や組織に対しても細胞毒として作用し、嘔吐、発熱、あるいは脱毛などの副作用を極めて高率に発生させるという問題が指摘されている。そこで、抗腫瘍薬を効率的かつ選択的に腫瘍部位に移行させる技術の開発、更には到達した腫瘍部位からの制御された薬物放出を行う技術が求められてきた。
このような技術の一つとして、例えば、多糖の様な水溶性高分子に抗腫瘍薬を結合させて、抗腫瘍薬の血中からの消失を遅延させ、かつ、癌組織への指向性を高める方法が提案されている。例えば、種々の多糖に対してアドリアマイシンを結合させた複合体が開示されている例がある（特許文献１）。また、カルボキシメチルデキストランを含む種々の多糖誘導体にアンスラサイクリン系抗腫瘍薬を結合させた錯体が開示されている例もある（非特許文献１）。さらに、カルボキシアルキルデキストランポリアルコールに対してペプチドを介して薬物を結合させた複合体が開示されている例がある（特許文献２）。これらの天然由来の多糖は水酸基等の官能基を有し薬物担持能力に優れるものの、天然物であることから均一な品質のものを容易に得られないといった問題点がある。
一方、合成高分子を薬物送達用担体として用いた例としては、ヒドロキシプロピルメタクリレート（ＨＰＭＡ）にリンカーを介し血管新生阻害薬（ＴＮＰ−４７０）を結合させた例が報告されている（非特許文献２）。また、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）にパクリタキセルを結合させた複合体が開示されている例がある（非特許文献３）。これらの合成高分子は生体内で分解されないという特徴があるものの、血漿増量剤などとして生体に投与されるなど、安全性の面ではハードルが低い。
【特許文献１】米国特許第5,688,931号公報
【特許文献２】特開2002-30002号公報
【非特許文献１】Biol. Pharm. Bull., 24, 535-543(2001)
【非特許文献２】Nature Medicine, 10, 255-261(2004)
【非特許文献３】J. Med. Chem., 39, 424-431(1996)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
従来のポリエチレングリコールは、薬物の担持能力及び薬物送達などの面で十分満足できるものではなかった。従って、薬物の担持能力に優れ、しかも薬物を標的部位に移行させることのできるポリエーテルによる薬物送達用担体、及びこの担体を用いた薬物複合体を提供すること及びこのようなポリエーテルの簡易な製造方法を提供することが望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は上記課題に鑑み鋭意研究した結果、ペンダント状にカルボキシメチル基を導入した特定の構造単位からなるポリエーテルを薬物送達用の担体として用いることで本課題を解決することに成功した。すなわち、本発明は以下の構成からなる。
（１）式（I）および式（II）で表される化合物を共重合して得られる、式（III）および式（IV）で表される繰り返し単位を有するポリエーテル。
【化１２】
0005105166.tif 000002
【化１３】
0005105166.tif 000003
【化１４】
0005105166.tif 000004
【化１５】
0005105166.tif 000005
（式中、Ｒ１は−ＯＲ２または−ＮＨＲ３で示される基を表し、Ｒ２およびＲ３は水素、無機塩基あるいは有機塩基またはC１〜C１５の炭化水素を含む基、または薬理作用を有する基を表す。ここで同一の共重合体内でR1、Ｒ２またはＲ３は同一であっても異なっていてもよい。各構造単位のモル比は、（III）／（（III）＋（IV））＝０．００１〜０．５であり、構造単位（III）および（IV）のモル％はそれぞれ（III）=０．１〜９９．９および（IV）=０．１〜９９．９である。ここで、式（III）および式（IV）を構造単位として含むポリエーテルは、ポリエチレングリコール（PEG）換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００である。）
（２）下式（V）および式（VI）を構造単位として含むポリエーテルに対し、薬理作用を有する基を、薬理作用を有する基自身が有するアミノ基を介して、あるいは、アミノ基を有するリンカーを介して結合させることにより得られる式（VII）を含みかつ（V）、（VI）を構造単位として含む前記（１）に記載のポリエーテル。
【化１６】
0005105166.tif 000006
【化１７】
0005105166.tif 000007
【化１８】
0005105166.tif 000008
（式中、Ｒ４は水素、無機塩基あるいは有機塩基を示し、ＮＨ−Ｒ５は自身が有するアミノ基を介し、あるいは自身が結合したリンカーが有するアミノ基を介し結合した薬理作用を有する基を示す。各構造単位のモル比は、（VII）／（（V）＋（VI）＋（VII））＝０．００１〜０．５である。各構造単位（V）、（VI）および（VII）のモル％はそれぞれ（V）＝０〜９９．９、（VI）=０．１〜９９．８および（VII）=０．１〜９９．８である。ここで、式（V）、（VI）および式（VII）を構造単位として含むポリエーテルは、PEG換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００である。）
（３）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）換算重量平均分子量／ＰＥＧ換算数平均分子量（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．１〜２．７である前記（１）または（2）に記載のポリエーテル。
（４）薬理作用を有する基がリンカーと結合した基である前記（1）〜（３）のいずれかに記載のポリエーテル。
（５）リンカーがアミノ酸もしくはペプチドである前記（１）〜（４）のいずれかに記載のポリエーテル。
（６）リンカーがＧｌｙ，Ａｌａ，Ｌｅｕ，Ｉｌｅ，Ｐｈｅで示されるアミノ酸から選択または組み合わせて用いられる前記（１）〜（５）のいずれかに記載のポリエーテル。
（７）リンカーがＧｌｙ−Ｇｌｙ，Ａｌａ−ＧＬｙ，Ｇｌｙ−Ａｌａ，Ｌｅｕ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｌｅｕ，Ｉｌｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｉｌｅ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙから選択される前記（１）〜（６）のいずれかに記載のポリエーテル。
（８）薬理作用を有する基が分子中に官能基としてアミノ基、またはカルボキシル基、または水酸基を有する前記（１）〜（７）のいずれかに記載のポリエーテル。
（９）薬理作用を有する基が抗悪性腫瘍薬、抗炎症薬、抗リウマチ薬、酵素阻害薬または核酸である前記（１）〜（８）のいずれかに記載のポリエーテル。
（１０）抗悪性腫瘍薬がアルキル化薬、代謝拮抗薬、抗腫瘍性抗生物質、微小管阻害薬、ホルモン類似薬、白金製剤、トポイソメラーゼ阻害薬、生物製剤（サイトカイン）、分子標的治療薬、非特異的免疫賦活薬およびその誘導体から選択される前記（９）に記載のポリエーテル。
（１１）アルキル化薬がシクロフォスファミドなどのマスタード薬、ニムスチンなどのニトロソウレア類およびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１２）代謝拮抗薬が葉酸代謝拮抗薬であるメトトレキセート、ピリミジン代謝拮抗薬である５−フルオロウラシル、プリン代謝拮抗薬の６−ＭＰおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１３）抗腫瘍性抗生物質がアンスラサイクリン系のドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシンＣおよびそれらの誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１４）微小管阻害薬がタキサン系のパクリタキセル、ドセタキセルおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１５）ホルモン類似薬がタモキシフェンおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１６）白金製剤がシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１７）トポイソメラーゼ阻害薬がトポイソメラーゼＩ阻害薬のイリノテカン、ノギテカンおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１８）生物製剤がインターフェロンおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（１９）分子標的治療薬がイマチニブ、ゲフィチニブ、リツキシマブおよびその誘導体から選択される前記（１０）に記載のポリエーテル。
（２０）抗炎症薬が副腎皮質ステロイド薬、非ステロイド性抗炎症薬およびその誘導体から選択される前記（９）に記載のポリエーテル。
（２１）副腎皮質ステロイド薬がヒドロコルチゾン、コルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾンおよびその誘導体から選択される前記（２０）に記載のポリエーテル。
（２２）非ステロイド性抗炎症薬がサリチル酸系のアスピリン、アントラニル系のメフェナム酸、プロピオン酸系のイブプロフェン、ロキソプロフェン、アリール酢酸系のジクロフェナク、インドメタシンおよびその誘導体から選択される前記（２０）に記載のポリエーテル。
（２３）抗リウマチ薬が免疫調節薬、免疫抑制薬、生物学的製剤およびその誘導体から選択される前記（９）に記載のポリエーテル。
（２４）免疫調節薬が金チオリンゴ酸ナトリウム、ペニシラミン、ロベンザリットおよびその誘導体から選択される前記（２３）に記載のポリエーテル。
（２５）免疫抑制薬がミゾリビン、メトトレキサート、レフルノミド、タクロリムスおよびその誘導体から選択される前記（２３）に記載のポリエーテル。
（２６）生物学的製剤がインフリキシマブ、エタネルセプトおよびその誘導体から選択される前記（２３）に記載のポリエーテル。
（２７）酵素阻害薬がファスジルおよびその誘導体から選択される前記（９）に記載のポリエーテル。
（２８）前記（１）〜（２７）のいずれかに記載のポリエーテルを含む製剤。
（２９）前記（１）におけるＲ２が水素又は無機塩基、または有機塩基であるポリエーテルを用いた生体内組織への薬物、遺伝子、あるいは生体内イメージング用造影剤に対する送達用担体。
（３０）前記（１）におけるＲ２が水素又は無機塩基、または有機塩基であるポリエーテルを用いた薬剤、ペプチド、核酸または蛋白を担持あるいは固定化するための担体。
（３１）前記（１）〜（２７）のいずれかに記載のポリエーテルを架橋してなる構造体を疾患部位に投与することによる治療方法。
（３２）薬物送達製剤の製造における前記（１）〜（２７）のいずれかに記載のポリエーテルの使用。
（３３）式（I）および式（II）で表される化合物をランダム共重合して、式（III）および式（IV）で表される繰り返し単位を有するポリエーテルを製造する方法。
【化１９】
0005105166.tif 000009
【化２０】
0005105166.tif 000010
【化２１】
0005105166.tif 000011
【化２２】
0005105166.tif 000012
（式中、Ｒ１は−ＯＲ２または−ＮＨＲ３で示される基を表し、Ｒ２およびＲ３は水素、無機塩基あるいは有機塩基またはC１〜C１５の炭化水素を含む基、または−ＮＨＲ３は薬理作用を有する基を表す。ここで同一の共重合体内でR1、Ｒ２またはＲ３は同一であっても異なっていてもよい。各構造単位のモル比は、（III）／（（III）＋（IV））＝０．００１〜０．５であり、構造単位（III）および（IV）のモル％はそれぞれ（III）=０．１〜９９．９および（IV）=０．１〜９９．９である。ここで、式（III）および式（IV）を構造単位として含むポリエーテルは、ポリエチレングリコール（PEG）換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００である。）
（３４）重合に用いる触媒が塩基およびルイス酸から選択される前記（３３）に記載のポリエーテルを製造する方法。
（３５）重合に用いる触媒が水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化セシウムやナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリムプロポキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムプロポキシド、カリウムｔ−ブトキシド、カリウム−ｔ−２−メチル−２−ブトシキドおよび三フッ化ホウ素エーテル錯体、トリアルキルアルミニウム、トリエチルアルミニウム、トリフェニルアルミニウム、トリブチルアルミニウムから選択され、単独もしくは混合して使用される前記（３３）に記載のポリエーテルを製造する方法。
（３６）前記（１）〜（２７）のいずれかに記載のポリエーテルを静脈内より生体内に投与することによる治療方法。
（３７）前記（１）〜（２７）のいずれかに記載のポリエーテルを疾患部位に投与することによる治療方法。
【発明の効果】
【０００５】
（１）本発明のポリエーテルは、側鎖に任意の数のカルボキシル基がペンダント状に導入されたポリエーテルであって、従来のポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧということがある）の場合のようにポリマーの主鎖両端にのみ薬物が担持されるのでなく、ポリマーの側鎖にも化合物や薬物が容易に結合され得る。その結果、化合物や薬物の導入量を制御することが可能となり、結果として高導入量あるいは高薬物含量の複合体あるいは製剤が調製可能となる。製剤として生体に投与する場合には、総投与量を減じることが可能となり投与時間の減少、投与液量の減少等、患者に対する負荷が減少する。
（２）本発明のポリエーテルは、ペンダント状側鎖カルボキシル基を有するためにアミド結合を利用する事により高収率で容易に薬物担持が可能となる。
（３）本発明のポリエーテルは、ペンダント状側鎖カルボキシル基を無機塩あるいは有機塩に変換することで、水に対する溶解性がより高くなり、例えば難水溶性化合物の可溶化に優れる。特に注射剤用の薬物送達用担体として有用である。
（４）本発明のポリエーテルは特に、薬物送達用担体として用いる場合は、生体に対する安全性が高い。これは、側鎖に導入された適度な量のカルボキシル基による負電荷のために、肝臓、脾臓、骨髄といった代謝臓器、副作用発現臓器への分布が軽減され、臓器障害や細胞毒性を引き起こす可能性が低減されると考えられるからである。従って、本発明のポリエーテルを医療用として用いた場合、生体との相互作用が極めて少なく安全な材料といえる。 
（５）本発明のポリエーテルは特に、薬物送達用担体として用いられた場合は、担持した薬物を標的とする腫瘍臓器あるいは炎症臓器に選択的に集積させることが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明のポリエーテルは、ランダム共重合ポリエーテルからなり、下記式（III）及び（IV）で表される構造単位を含む。本発明のポリエーテルの分子量は、ＰＥＧ換算重量平均分子量で１，０００〜２００，０００である。前記の重量平均分子量が１，０００未満になるとポリエーテルは極めて水に溶けやすいが体内からの排泄速度も極めて大きい、２００，０００を越えるとポリエーテルは水に溶けるものの粘度が上昇するからである。薬物送達用担体としての生体への安全性を考慮するとポリエーテルの重量平均分子量は１，０００〜１５０，０００が好ましく、１，０００〜１００，０００がより好ましい。さらに、血中滞留性向上と腎排泄の容易さから判断すれば１，０００〜７０，０００が好ましい。生体中の血漿アルブミンの分子量（約６７，０００）よりも低い場合、ポリエーテルの体外への排泄が迅速に進行するためである。従って、特に、体外への排泄が制御されながら生体への安全性も高い１０，０００〜７０，０００程度の分子量であることがより好ましい。また、生体内に投与した場合の血中滞留性をより向上させるためには、３０，０００〜７０，０００が更に好ましい。
【０００７】
ここでＰＥＧ換算重量平均分子量とは、ＧＰＣにより分子量の測定を実施した場合において、ＰＥＧを標準試料（ＴＳＫｓｔａｎｄａｒｄ  ＰＯＬＹ（ＥＴＨＹＬＥＮＥ  ＯＸＩＤＥ）、ＴＯＳＯＨ（株）製）とし、その重量平均分子量に換算して得られた分子量をいう。ＰＥＧは水溶性溶媒及び有機溶媒にも可溶なため、親水性重合体及び疎水性重合体の分子量測定の際に分子量標準物質として用いる。
【０００８】
本発明のポリエーテルは、同一分子中における親水性部分と疎水性部分をランダムに分散させるためにランダム共重合により製造されることを特徴としている。本発明のポリエーテルを、ブロック共重合により製造すると、界面活性剤として作用するポリエーテルが生成される可能性があり、そのようなポリエーテルを生体内に投与した場合溶血作用を発現する可能性があり、生体にとって悪影響を及ぼす危険性があるからである。
【０００９】
【化２３】
0005105166.tif 000013
【化２４】
0005105166.tif 000014
【００１０】
本発明のポリエーテルの各構造単位のモル比は、（III）／（（III）＋（IV））＝０．００１〜０．５であり、構造単位（III）及び（IV）のモル％はそれぞれ（III）=０．１〜９９．９及び（IV）=０．１〜９９．９である。
【００１１】
本発明の薬物複合体ならびに薬物送達用担体における重量平均分子量／数平均分子量（Ｍｗ／Ｍｎ）で表示する分子量分布としては、目的とする薬理効果を十分に発揮するために薬物複合体ならびに薬物送達用担体の品質の均一性が重要であることから、上記の分子量分布が１．２〜２．７であることが望ましい。該薬物複合体ならびに該薬物送達用担体に関し品質確保のためには１．２〜２．２であることが好ましく、１．１〜１．８であることがより好ましく、さらに１．０〜１．５であることがなお一層好ましい。
【００１２】
一般式（III）、（IV）式中、Ｒ１は−ＯＲ２または−ＮＨＲ３で示される基を表し、Ｒ２及びＲ３は水素、ナトリウムなどの無機塩基あるいは有機塩基またはC１〜C１５の炭化水素を含む基、または薬理作用を有する基を表す。ここで、同一の共重合体内でR1、Ｒ２またはＲ３は同一であっても異なっていてもよい。
【００１３】
一般式（III）の例として、一般式（V）及び（VII）が挙げられ、これら一般式（III）、（V）、（VII）で表されるポリエーテルを製造するためのモノマー原料の例としては、エチレンオキサイド及びグリシドールの水酸基を有機置換基で置換したグリシジルエーテル誘導体（一般式（VIII））、アミノ酸またはペプチドを導入したグリシジルエーテル誘導体（一般式（IX））等を挙げることができる。
【００１４】
【化２５】
0005105166.tif 000015
（式中、Ｒ４は水素、ナトリウム等の無機塩基あるいは有機塩基を示す。）
【化２６】
0005105166.tif 000016
（式中、Ｒ５は自身が有するアミノ基を介し、あるいは自身が結合したリンカーが有するアミノ基を介し結合した薬理作用を有する基を示す。
【化２７】
0005105166.tif 000017
（式中、Ｒ６はC１〜C１５の炭化水素を含む基を表し、同一の共重合体においてＲ６は同一であっても異なっていてもよい。）
【化２８】
0005105166.tif 000018
（式中、Ｒ７はC１〜C２０の脂肪族炭化水素を有する基、又はC６〜C２０の芳香族炭化水素誘導体を有する基を示し、同一の共重合体内でＲ７は同一であっても異なっていても良い。）
【００１５】
ここで一般式（VIII）で表されるグリシジルエーテル誘導体は例えば下記に示すようなスキームに従い製造することができるが、以下の方法に限定されるわけではない。例えば一般式（VIII）におけるＲ６がC３の場合については、ヒドロキシ酢酸とエピクロロヒドリンを出発原料として2,3-epoxypropyl epoxypropoxyacetateを得る合成例について１９６０年に開示されている（特許文献３）。また一般式（VIII）におけるＲ６がエチル基の場合については、グリシドールを原料とする合成例が報告されている（非特許文献４）。本発明においては、下記に示すようなスキームに従い製造した。すなわちアリルアルコール（Ａ）を原料とし水素化ナトリウム等の塩基の存在下、クロロ酢酸を反応させその後酸性条件下にて有機溶媒にて抽出することでカルボキシメチル基導入体（Ｂ）を得、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤存在下でアルコールを反応させることでエステル体（Ｃ）を得る。その後、３−クロロ過安息香酸、過酢酸等の酸化剤によりオレフィン部分の酸化反応を行い目的とする上述一般式（VIII）で示されるグリシジルエーテル誘導体（Ｄ）を得る。
【特許文献３】米国 2925426号公報
【非特許文献４】油化学，36，874-881 (1987)
【００１６】
【化２９】
0005105166.tif 000019
【００１７】
例えば、グリシジルエーテル誘導体としては、Ｒ６としてメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル等の脂肪族炭化水素、あるいはフェニル、ｐ−ニトロフェニル、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル等の芳香族炭化水素及び誘導体、グリシジル、さらには窒素原子で結合した無水コハク酸を挙げることができる。これらのＲ６に関してはエポキシの開環重合が終了した後、酸処理、塩基処理、水素添加などの通常の有機合成で用いる脱保護の条件により除去することでカルボン酸を形成することが可能である。あるいはＲ６として、例えばｐ−ニトロフェニル、無水コハク酸等のペプチド合成で用いられる活性エステルと呼ばれる基を導入した場合には、カルボン酸を経由することなくＲ６に対してアミノ基を有する化合物を直接反応させることでアミド結合（ペプチド結合）を形成させることも可能である。
【００１８】
また、下式（ＩＸ）で示される様にグリシジルエーテル誘導体としてアミノ酸またはペプチドを導入したモノマー原料もまた本発明のモノマー原料である。
【００１９】
【化３０】
0005105166.tif 000020
（式中、Ｒ７はC１〜C２０の脂肪族炭化水素を有する基、C６〜C２０の芳香族炭化水素誘導体を有する基を示し、同一の共重合体内でＲ７は同一であっても異なっていても良い。）
【００２０】
ここで一般式（IX）で表されるグリシジルエーテル誘導体は下記に示すようなスキームに従い製造することができる。例えば上述のカルボキシメチル基導入体（Ｂ）を原料として用い、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤存在下でアミン類を反応させることでアミド体（Ｅ）を得る。その後３−クロロ過安息香酸等の酸化剤によりオレフィン部分の酸化反応を行い目的とする上述一般式（IX）で示されるグリシジルエーテル誘導体（Ｆ）を得る。
【００２１】
【化３１】
0005105166.tif 000021
【００２２】
例えば上述のアミン類としては必要に応じて側鎖及びカルボキシル基が保護されたアミノ酸、ペプチド、あるいはベータアラニン等のアミノカルボン酸などが挙げられる。ここで式（ＩＸ）の具体例としては下式（Ｘ）で示される様なグリシンベンジルエステルが導入されてなるグリシジルエーテル誘導体を挙げることが出来る。
【００２３】
【化３２】
0005105166.tif 000022
【００２４】
本発明のポリエーテルの製造における最大の特徴は、モノマーとしてカルボキシメチル基が導入されているものを用いるため、一段階の重合工程でポリマーに直接カルボキシル基が導入されることである。更に、カルボキシメチル基導入量をエチレンオキサイドに対するモノマー使用量の調節によって制御可能であることも特徴である。
このように、カルボキシル基を有するモノマーを用いてランダム重合して得られた本発明のポリエーテルは、従来技術であるＰＥＧに比べ様々な点において優れている。すなわち、本発明のポリエーテルは、側鎖に反応性の高いカルボキシメチル基が導入されていることから、水溶解性、水和能力、保水能力及び官能基導入能力に優れる。また、導入量が制御された側鎖カルボキシル基を有効に用いることにより、薬物等を結合させて所望の薬物含有量からなる薬物複合体を得ることが可能となる。より具体的には、アルゴン雰囲気下、ＴＨＦ、トルエン等の溶媒中、あるいは場合によってはDMFやDMSO等を用い水−有機溶媒の混合系、あるいは水溶液中においてペプチド合成で使用される縮合剤等の存在下で本発明のポリエーテルのカルボキシメチル基に対して薬物、ペプチド、生体イメージング用造影剤、核酸及び蛋白を結合させることが可能である。
【００２５】
このようにして得られる機能基導入ポリエーテルは、薬物送達医薬や蛋白精製用担体など医療行為のために用いられる医療用材料として非常に優れている。また、カルボキメチル基が特に活性エステルに変換された場合は縮合剤の存在無しにアルゴン雰囲気下、ＴＨＦ、エーテル、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、トルエン等の有機溶媒中、あるいは含水有機溶媒中、あるいは場合によってはＰＢＳ等の緩衝液中あるいは水溶液中において薬剤、ペプチド、核酸及び蛋白を結合させることが可能である。このような機能基導入ポリエーテルは、薬物送達医薬や蛋白精製用担体など医療行為のために用いられる医療用材料として優れている。
【００２６】
従来技術として、ＰＥＧは、医薬用途として広く用いられているが、両末端だけにしか官能基導入に使える水酸基が存在しないために薬物担持能力が極めて低く、薬物送達のための担体としては適切でない。また、薬物の血中滞留性を向上させて標的臓器への薬物送達を試みた場合、ＰＥＧの分子量を増加させて腎排泄を妨げなければならない問題が生じる。例えば、ＰＥＧ分子量が６万であるとき薬剤が５００とすればＰＥＧの一分子には両端の水酸基に２分子の薬物しか導入されないため薬剤の導入量は重量％では１．６％となる。更に例えばPEG分子量４万にカンプトテシンを導入したプロドラッグ製剤PROTHECANにおいて薬物含量は１．７％（ｗ／ｗ）となることが報告されている（非特許文献５）。
【非特許文献５】TRENDS in Biotechnology, 24(1), 39-47 (2006)
【００２７】
これらの場合、例えば患者にＰＥＧを担体として用い製剤化した薬物を投与しようとすると、必要薬剤量の６０倍のＰＥＧ製剤を投与する必要があり、患者にとって薬剤投与時の負荷が極めて大きい。これに対し、本発明のポリエーテルは、側鎖にカルボキシル基を多数導入することが可能であるために薬物の導入量を自由に増加させることができ、例えば複合体に対する薬剤導入量を１０％以上とすることも可能である。従って、本発明の薬物複合体の総投与量を従来のＰＥＧ複合体投与量に比べて大幅に減らすことができ、患者に対する投与時の負荷を大幅に軽減することが可能となる。
【００２８】
本発明のポリエーテルの組成については、反応に用いる原料の種類、原料の重量、重合開始剤の種類、重合開始剤の添加量、反応溶媒の有無、反応溶媒の選択、反応温度、反応時間、原料濃度、重合開始剤濃度、反応雰囲気、反応圧力、撹拌状態、撹拌速度等の調整により、種々の組成比を有するポリエーテルが製造される。例えばトルエン、ヘキサン、ヘプタン、２−メトキシエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル等の反応溶媒中または無溶媒で、エチレンオキサイドと共に種々のグリシジルエーテル類を、例えば三フッ化ホウ素エーテル錯体、トリアルキルアルミニウム、トリエチルアルミニウム、トリフェニルアルミニウムやトリブチルアルミニウムなどのルイス酸等の金属重合開始剤あるいは水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化セシウムやナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリムプロポキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムプロポキシド、カリウムｔ−ブトキシド、カリウム−ｔ−２−メチル−２−ブトシキド等などの重合開始剤を単独あるいは混合して使用し、氷冷、室温下または必要に応じて加熱下にて常圧もしくは加圧下で開環重合させることにより得られる。
【００２９】
重合後に塩酸、硫酸等の酸、あるいは水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等の塩基、あるいはパラジウムカーボン等の触媒存在下における水素添加等の操作により、目的とするカルボン酸を生成させることができる。あるいは活性エステル型の場合は重合後の酸、塩基、水素添加処理の必要が無く、そのまま薬剤、ペプチド、核酸及び蛋白を結合させることが可能である。
【００３０】
本発明におけるポリエーテルの重量平均分子量は、前述のとおり、安全性の面から生体内からの体外への排泄が容易な分子量の大きさであることが重要であるが、例えば、ＧＰＣ分析におけるＰＥＧ換算重量平均分子量が１，０００〜１００，０００を達成するには、必要に応じて例えば、出発原料の精製、反応後に高分子量分画または低分子量分画の分別除去を行ってもよい。例えば、分子量分画の具体的方法は、サイズエクスクルージョンクロマトグラフィー（ＳＥＣ）、ＧＰＣ等のクロマトグラフィー、ＵＦモジュール等を含む限外ろ過、超遠心分離法、エーテル、エタノールなどの有機溶媒等を用いた沈殿分画等の種々の手法により行うことができる。
【００３１】
以上のとおり、本発明のポリエーテルを、例えば薬物複合体及び薬物送達用担体として用いる場合には、最適な分子量を選択し、かつ側鎖カルボキシメチル基を使用目的に応じて最適な量だけ導入することが可能である。
【００３２】
本発明に含まれる薬物複合体は、薬物送達用担体に直接又はリンカーを介して薬物（医薬化合物）が結合している。すなわち、本発明のポリエーテルの構造単位を表す一般式（Ｉ）においてＲ２、Ｒ３、Ｒ５が薬理作用を有する基（リンカーに結合した薬理作用を有する基も含む）である場合がこれに相当する。薬物としては、カルボキシル基又は当該リンカーに反応し得る官能基を有する医薬化合物であれば特に制限されないが、例えば金属原子、アミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシ基、メルカプト基、カルボキサミド基、ウレタン基等を有する医薬化合物が好ましい。このうちでもアミノ基を有する医薬化合物は、リンカーの有無にかかわらず容易に本発明のポリエーテルに結合させることができる。また、このようなアミノ基を有さない医薬化合物については、リンカーによって官能基を導入することにより担体と結合可能となる。例えば、パクリタキセル、デキサメタゾン、カンプトテシン等は薬物中に存在する水酸基をリンカーによってアミノ基に変換することにより、本発明のポリエーテルに容易に結合することが可能となる。
【００３３】
該医薬化合物としては、抗悪性腫瘍薬、抗炎症薬、抗リウマチ薬、酵素阻害剤または核酸等が挙げられる。
【００３４】
抗悪性腫瘍薬としては、アルキル化薬、代謝拮抗薬、抗腫瘍性抗生物質、微小管阻害薬、ホルモン類似薬、白金製剤、トポイソメラーゼ阻害薬、生物製剤（サイトカイン）、分子標的治療薬、非特異的免疫賦活薬及びその誘導体が挙げられる。ここでアルキル化薬としてはシクロフォスファミドなどのマスタード薬、ニムスチン等のニトロソウレア類などが挙げられる。代謝拮抗薬としては葉酸代謝拮抗薬のメトトレキサート、ピリミジン代謝拮抗薬の５−ＦＵ、プリン代謝拮抗薬の６−ＭＰなどが挙げられる。抗腫瘍性抗生物質としてはアントラサイクリン系のドキソルビシン、ダウノルビシンに加えその他として、マイトマイシンＣなどが挙げられる。微小管阻害薬としてパクリタキセル、ドセタキセルなどが挙げられる。ホルモン類似薬としてタモキシフェンなどが挙げられる。白金製剤としてシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンなどが挙げられる。トポイソメラーゼ阻害薬として、トポイソメラーゼＩ阻害薬のイリノテカン、ノギテカン、エトポシドなどが挙げられる。生物製剤としてはインターフェロンなどが挙げられる。分子標的治療薬としてはイマチニブ、ゲフィチニブ、リツキシマブなどが挙げられる。
【００３５】
抗炎症薬としては、副腎皮質ステロイド、非ステロイド性抗炎症薬が挙げられる。副腎皮質ステロイドとしてヒドロコルチゾン、コルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾンなどが挙げられる。非ステロイド性抗炎症薬としてサリチル酸系のアスピリン、アントラニル系のメフェナム酸、プロピオン酸系のイブプロフェン、ロキソプロフェン、アリール酢酸系のジクロフェナク、インドメタシンなどが挙げられる。またこれら非ステロイド性抗炎症薬の分類にはＣＯＸ選択性による分類もある。
【００３６】
抗リウマチ薬としては、免疫調節薬、免疫抑制薬、生物学的製剤などが挙げられる。免疫調節薬として金チオリンゴ酸ナトリウム、ペニシラミン、ロベンザリットなどが挙げられる。免疫抑制薬としてミゾリビン、メトトレキサート、レフルノミド、タクロリムスなどが挙げられる。生物学的製剤としてインフリキシマブ、エタネルセプトなどが挙げられる。
【００３７】
該薬物送達用担体と薬物とを結合させて本発明の薬物複合体を製造するには、例えばこれらを錯体形成配位結合、エステル結合、チオエステル結合、酸アミド結合、酸無水物形成などの手段で結合させることにより製造される。例えば、錯体形成反応の場合には、通常、水溶液中で反応させればよい。エステル結合形成反応の場合には、種々のカルボジイミド類などの脱水縮合剤存在下に行い、その際必要に応じてジメチルアミノピリジンなどの活性剤を加えるとよい。また、酸アミド結合形成反応の場合には、種々カルボジイミド類等、脱水縮合剤の存在下に行えばよい。
【００３８】
本発明では、該薬物送達用担体と薬物とを結合させるためにリンカーを介して結合させる場合がある。本発明のリンカーとしては、担体との距離を調整する、いわゆるスペーサも含まれる。リンカーとしては、例えば、１個のアミノ酸、ペプチド結合した２〜４個のアミノ酸等が挙げられる。より具体的には、１個のアミノ酸の残基（アミノ酸のアミノ基及びカルボキシル基からそれぞれ１個の水素原子及び１個の水酸基を除いた残基を意味する）、又はペプチド結合した２ないし４個のアミノ酸からなるオリゴペプチドの残基（Ｎ末端のアミノ基及びＣ末端のカルボキシル基からそれぞれ１個の水素原子及び１個の水酸基を除いた残基を意味する）の形態を有している。好ましいリンカーは１アミノ酸残基または、２〜４個のアミノ酸からなるオリゴペプチドの残基である。このようなアミノ酸の立体障害の違いにより担体に結合した薬物の遊離速度を調整することが可能となる。
【００３９】
リンカーを構成するアミノ酸の種類は特に限定されないが、例えば、Ｌ−又はＤ−アミノ酸、好ましくはＬ−アミノ酸を用いることができ、α−アミノ酸のほか、β−アラニン、ε−アミノカプロン酸、γ−アミノ酪酸などを用いてもよい。このようなα−アミノ酸以外のアミノ酸は、薬物送達用担体に近接した位置に配置されることが好ましい。介在基の結合方向は特に限定されないが、一般的には、カルボキシアルキルポリエーテルのカルボキシル基に介在基のＮ末端を酸アミド結合によって結合し、医薬化合物のアミノ基もしくは水酸基に介在基のＣ末端を結合することができる。また、例えば、ペプチドリンカーの構成単位としてリジン残基を含めておき、リジン残基のα−アミノ基及びε−アミノ基をそれぞれ他のアミノ酸のカルボキシル基と酸アミド結合させると、ペプチドリンカーの両末端がＮ末端になるので、医薬化合物のカルボキシル基を結合することが可能になる。さらに、リンカー中に１個又は２個以上のジアミン化合物又はジカルボン酸化合物の残基（例えばエチレンジアミンなどのジアミンの残基やコハク酸などのジカルボン酸の残基）を構成単位として含めておき、それぞれ両末端がＮ末端の介在基及び両末端がＣ末端のリンカーを利用してもよい。
【００４０】
リンカーのアミノ酸配列は特に限定されないが、ジペプチド構造を含むリンカーを用いると、ペプチダーゼが豊富であると考えられる腫瘍部位や炎症部位で加水分解が促進され、当該部位において医薬化合物が高濃度に遊離する。上記ジペプチドを含むリンカーと医薬化合物とが結合して形成される部分構造は本発明の薬物複合体の部分構造である。医薬化合物の残基として、例えば、濃度依存型の抗腫瘍薬（例えば、ドキソルビシン）などを用いる場合には、ジペプチド残基を部分ペプチド配列として含むリンカーを用いることが特に好ましい。また、医薬化合物の残基として、一定の濃度以上で作用時間の持続を必要とする時間依存型の抗腫瘍薬（例えば、パクリタキセル）を用いる場合にも、上記のリンカーを用いることによって高い抗腫瘍効果を達成できる場合がある。一般的には、上記のリンカーに限定されることなく、抗腫瘍薬の作用機作、体内動態や毒性発現の特徴、体内での抗腫瘍薬の遊離性などの観点から好ましいリンカーを選択する必要がある。
【００４１】
リンカーのアミノ酸配列としては、具体的には、Ｇｌｙ，Ａｌａ，Ｌｅｕ，Ｉｌｅ，Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ａｌａ−ＧＬｙ，Ｇｌｙ−Ａｌａ，Ｌｅｕ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｌｅｕ，Ｉｌｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｉｌｅ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ，Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ，Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙから選択される配列が望ましい。
【００４２】
リンカーを介して結合する薬物複合体に関しては、本発明のポリエーテルのカルボキシル基に対して、医薬化合物の残基と結合させたリンカーを結合することにより本発明の薬物複合体を製造することができる。リンカーと本発明のポリエーテルのカルボキシル基との結合は、一般的には、リンカーのＮ末端アミノ基と本発明のポリエーテルのカルボキシル基とを酸アミド結合により結合させることにより形成できる。もっとも、リンカーと本発明のポリエーテルのカルボキシル基との結合は上記のものに限定されることはなく、他の化学結合や１又は２以上のリンカーを利用した結合であってもよい。例えば、リンカーのＣ末端カルボキシル基と本発明のポリエーテルのカルボキシル基とにより酸無水物を形成させてもよく、また、エチレンジアミン等のジアミン化合物をリンカーとして用いてそれぞれのカルボキシル基をジアミンの各アミノ基に酸アミド結合させてもよい。リンカーのＮ末端アミノ基と本発明のポリエーテルのカルボキシル基とを酸アミド結合により結合させる場合には、ペプチド類の合成に用いる通常の脱水縮合剤、例えば、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のようなＮ，Ｎ′−ジシクロアルキルカルボジイミド類、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＰＣ）等のカルボジイミド誘導体のほか、１−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキシキノリン（ＥＥＤＱ）などを用いることができる。また、活性エステル法や酸ハライド法などにより反応を行ってもよい。また本発明のポリエーテルで活性エステル型の場合は脱水縮合剤を用いる必要はない。
【００４３】
薬理作用を有する基の具体例について以下に示す。
下記式（X）で表される薬剤化合物に対して、リンカーとしてグリシン（H2N−CH2−COOH）を用いてこれらを結合すると下記式（Y）で示されるアミノ基を有する化合物となる。これを薬理活性を有する基としてポリエーテルに結合して用いることができる。
【００４４】
【化３３】
0005105166.tif 000023
（X）
【化３４】
0005105166.tif 000024
（Y）
【００４５】
また、下記式で示される化合物は、薬理活性を有する基自身がイミノ基を有しており、該イミノ基を介してポリエーテルに結合される。
【００４６】
【化３５】
0005105166.tif 000025
【００４７】
さらに、上記薬剤にグリシンをリンカーとして結合させた下記式で示される化合物を薬理作用を示す基として用いることもできる。
【００４８】
【化３６】
0005105166.tif 000026
【００４９】
本発明のポリエーテルに導入する医薬化合物残基の量は、特に限定されないが、医薬化合物残基の物理化学的性質、並びに本発明の薬物複合体の体内動態、薬効、及び毒性などの観点から適宜選択すべきである。一般的には、０．１〜４０重量％、好ましくは１〜２０重量％、さらに好ましくは２〜２０重量％、特に好ましくは３〜１５重量％程度の範囲を選択することができる。ポリエーテルに導入された医薬化合物残基の割合は、例えば、紫外吸光分析、蛍光光度分析、吸光度分析などにより容易に決定することが可能である。
【００５０】
本発明の薬物複合体は、医薬化合物が有する官能基（例えば、抗腫瘍剤又は抗炎症剤などの医薬化合物の有する官能基）を利用して高分子修飾することが可能であり、高分子修飾により所望の標的臓器に医薬化合物を送達することができる。従って、医薬化合物の有する所望の医薬活性を腫瘍部位や炎症部位などの局所において特異的に発現させることができる。さらに側鎖に導入された適当量のカルボキシル基による負電荷のために、代謝・副作用（毒性）発現臓器である肝臓・脾臓・骨髄への分布が減少し医薬化合物の副作用（毒性）発現が軽減されるので、医薬化合物自体の有する毒性を低減することできるという特徴を有する。
本発明のポリエーテルは極めて優れた血中滞留性及び腫瘍・炎症部位への集積性を有するので薬物送達用の担体として有用であり、本ポリエーテルからなる担体と薬物を結合させた薬物複合体は非常に有効に標的臓器に送達され、薬物の作用を発揮させることができる。また、薬物担体は、従来のＰＥＧとは構造的に異なり側鎖に多数のカルボキシル基を有するため、医薬化合物の担持能力に優れている。さらに、本発明の薬物複合体は、水に対する溶解性が特に向上していることから、難水溶性薬物等における注射剤として用いる場合に特に有用である。特に本発明の薬物複合体は、ＰＥＧを薬物送達用担体として用いた場合に比べて、１モル当たりの医薬化合物の担持能力が特に優れているため、投与される患者にとっての負担が少なくてすむ。
【００５１】
本発明の薬物複合体を含む医薬は、通常、凍結乾燥品などの形態でバイアル等に充填することができ、用時溶解型の注射用又は点滴用製剤等の非経口投与用製剤として臨床に提供されるが、本発明の医薬の製剤形態は上記態様に限定されることはない。上記製剤の製造には、例えば、溶解補助剤、ｐＨ調整剤、安定化剤など当業界で利用可能な製剤用添加物を用いることができる。
【００５２】
本発明の医薬の投与量は特に限定されないが、通常は、医薬化合物残基を構成する医薬化合物の投与量、本発明の薬物複合体中に導入された医薬化合物の残基の量、患者の状態や疾患の種類などを勘案して決定すべきである。例えば、カンプトテシンが約５重量％程度の割合で導入された本発明の薬物複合体を非経口投与する場合には、一般に一日あたり体表面積１ｍ２につき約０．１〜１００ｍｇ程度、好ましくは約１〜３０ｍｇの範囲で一回投与し、３〜４週毎に繰り返すことが好ましい。
【００５３】
本発明は、前記薬物複合体を静脈内より生体内に、また疾患部位に投与することにより
治療する方法に関する。さらに、該薬物複合体であるポリエーテルを架橋してなる構造体
を疾患部位に投与することにより治療する方法にも関する。
【実施例】
【００５４】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例
に限定されることはない。
また本実施例におけるＧＰＣの条件は、以下のとおりである。
カラム：Ｇ４０００ＰＷＸＬ（東ソー社製）
移動相：２０％アセトニトリルｉｎ ５０ｍＭ塩化リチウム
流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
ポンプ：Ｌ−６２００（日立製作所製）
検出器：Ｌ−３３００（ＲＩ：示差屈折計、日立製作所製）
化合物の分子量及び分子量分布を算出するための検量線は、スタンダードポリエチレンオキサイド（ＴＯＳＯＨ製、重量平均分子量が２．４×１０４，５．００×１０４，１
・  ７×１０４，１４．０×１０４）を用いて作成した。
以下の実施例中、共重合体（番号）は単に化合物（同番号）と記載することがある。
【００５５】
[実施例１] 
水素化ナトリウム（１３．２ｇ）のテトラヒドロフラン（３００ｍｌ）懸濁液に氷冷下、アリルアルコール（２０．４ｍｌ）のＴＨＦ溶液（ＴＨＦ２００ｍｌ）を添加し３０分間攪拌した。その後ブロモ酢酸（３４．７ｇ）のテトラヒドロフラン（１５０ｍｌ）溶液を９０分間に渡り滴下した。反応液を室温下５日間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、水を加え酢酸エチルで洗浄した。その後５Ｎ塩酸でｐＨを２に調製し水相を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物（１）２６．７ｇを得た。
この粗精製物（１）（１５ｇ）を塩化メチレン２００ｍｌに溶解し、エタノール（１１．４ｍｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ；１４．２ｍｌ）及びジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ；１．５ｇ）を添加し、氷冷後水溶性カルボジイミド（ＥＤＣ；２４．２ｇ）の塩化メチレン溶液を３０分間に渡り滴下した。この反応液を室温下２日間攪拌した。反応液を飽和重曹水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物２６．３ｇを得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，２４０ｇ，ヘキサン／エーテル５：１）により精製し表記化合物（２）（１１．２ｇ）を得た。
化合物（２）（１１．０ｇ）を塩化メチレン１５０ｍｌに溶解し、氷冷下、３−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ；１５．９ｇ）の塩化メチレン溶液を９０分間に渡り滴下した。室温で２日間攪拌し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去し粗精製物（１９．３ｇ）を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１４０ｇ，ヘキサン／エーテル２：１）により精製し表記化合物（３）（１１．１ｇ）を得た。
【００５６】
【化３７】
0005105166.tif 000027
【００５７】
表記化合物（３）に関する化合物分析データを下記に示す。ＮＭＲの基準は３−トリメチルシリルプロピオン酸−２，２，３，３−ｄ４ナトリウム塩を使用した。
測定条件：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、日本電子製ＪＮＭ−ＬＡ４００）、１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＢｒｕｋｅｒＢｉｏｓｐｉｎ製Ａｄｖａｎｃｅ６００）、ＧＣ／ＭＳ  （ＨＰ製  ＨＰ５９７３）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，２．７Ｈｚ），２．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，４．２Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｍ），３．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．０Ｈｚ），３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，２．８Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ），４．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ），４．２３（２Ｈ，ｑ，J=７．２Hz）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１４．２，４４．１，５０．６，６１．０，６８．５，７２．１，１７０．２
ＭＳ：ｍ／ｚ  １６１[Ｍ＋Ｈ]＋
【００５８】
[実施例２]
実施例１の粗成生物（１）（１１．６ｇ）を塩化メチレン２００ｍｌに溶解し、イソプロパノール（１５．３ｍｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（１１．０ｍｌ）及びジメチルアミノピリジン（１．２ｇ）を添加し、氷冷後水溶性カルボジイミド（１８．６ｇ）の塩化メチレン溶液を３０分間に渡り滴下した。この反応液を室温下２日間攪拌した。反応液を飽和重曹水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物２２．５ｇを得た。このものをシリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，２４０ｇ，ヘキサン／エーテル５：１）により表記化合物（４）（９．７ｇ）を得た。
化合物（４）（７．９ｇ）を塩化メチレン１５０ｍｌに溶解し、氷冷下、３−クロロ過安息香酸（１６．１ｇ）の塩化メチレン溶液を９０分間に渡り滴下した。室温で２日間攪拌し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去し粗精製物（１４．５ｇ）を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１５０ｇ，ヘキサン／エーテル２：１）により精製し表記化合物（５）（９．２ｇ）を得た。
【化３８】
0005105166.tif 000028
【００５９】
表記化合物（５）に関する化合物分析データを下記に示す。
測定条件：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、日本電子製ＪＮＭ−ＬＡ４００）、１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＢｒｕｋｅｒＢｉｏｓｐｉｎ製Ａｄｖａｎｃｅ６００）、ＧＣ／ＭＳ  （ＨＰ製  ＨＰ５９７３）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．２７（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，２．７Ｈｚ），２．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，４．３Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｍ），３．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．０Ｈｚ），３．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，２．９Ｈｚ），４．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ），４．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ），５．１０（１Ｈ，ｍ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２１．８，４４．１，５０．６，６８．６，７２．１，１６９．７
ＭＳ：ｍ／ｚ  １７５[Ｍ＋Ｈ]＋
【００６０】
[実施例３]
水素化ナトリウム（１０．５ｇ）のテトラヒドロフラン懸濁液（２００ｍｌ）に氷冷下、アリルアルコール（１６．３ｍｌ）のＴＨＦ溶液（ＴＨＦ２００ｍｌ）を添加し３０分間攪拌した。その後ブロモ酢酸（２７．８ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（１５０ｍｌ）を６０分間に渡り滴下した。反応液を室温下３日間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、水を加え酢酸エチルで洗浄した。その後５Ｎ塩酸でｐＨを２に調製し水相を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し粗成生物（６）２２．１ｇを得た。
この粗成生物（６）（２２ｇ）を塩化メチレン１５０ｍｌに溶解し、ベンジルアルコール（２１．６ｍｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（２０．９ｍｌ）及びジメチルアミノピリジン（１．１ｇ）を添加し、氷冷後水溶性カルボジイミド（３５．３ｇ）の塩化メチレン溶液を６０分間に渡り滴下した。この反応液を室温下２日間攪拌した。反応液を飽和重曹水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物６６．０ｇを得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，２４０ｇ，ヘキサン／エーテル５：１）により精製し表記化合物（７）（３１．５ｇ）を得た。
化合物（７）（３１．５ｇ）を塩化メチレン２００ｍｌに溶解し、氷冷下、３−クロロ過安息香酸（２８．９ｇ）の塩化メチレン溶液を９０分間に渡り滴下した。室温で２日間攪拌し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去し粗精製物（３８．４ｇ）を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１５０ｇ，ヘキサン／エーテル２：１）により精製し表記化合物（８）（３０．０ｇ）を得た。
【００６１】
【化３９】
0005105166.tif 000029
【００６２】
表記化合物（８）に関する化合物分析データを下記に示す。
測定条件：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、日本電子製ＪＮＭ−ＬＡ４００）、１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＢｒｕｋｅｒＢｉｏｓｐｉｎ製Ａｄｖａｎｃｅ６００）、ＧＣ／ＭＳ  （ＨＰ製  ＨＰ５９７３）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，２．７Ｈｚ），２．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．９，４．４Ｈｚ），３．２０（１Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．０Ｈｚ），３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，２．８Ｈｚ），４．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ），４．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ），５．２０（２Ｈ，ｓ），７．３１−７．３９（５Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４４．０，５０．６，６６．６，６８．４，７２．１，１２８．４−１２８．６，１３５．３，１７０．０
ＭＳ：ｍ／ｚ  ２２３[Ｍ＋Ｈ]＋
【００６３】
[実施例４]
実施例３と同様な条件下で、純度６０％の水素化ナトリウム（２２．０ｇ）のテトラヒドロフラン懸濁液に氷冷下、アリルアルコール（２０．４ｍｌ）を添加し３０分間攪拌した。その後ブロモ酢酸（３４．７ｇ）のテトラヒドロフラン溶液を６０分間に渡り滴下した。反応液を室温下３日間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、水を加え酢酸エチルで洗浄した。その後５Ｎ塩酸でｐＨを２に調製し水相を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物（９）２６．４ｇを得た。
この粗精製物（９）（３．０ｇ）を塩化メチレン５０ｍｌに溶解し、グリシン・ベンジルエステル・ｐ−トルエンスルホン酸塩（１１．４ｇ）及びジメチルアミノピリジン（３１７ｍｇ）及びＮ−メチルモルホリン（３．７ｍｌ）を添加し、氷冷後水溶性カルボジイミド（４．０ｇ）の塩化メチレン溶液を６０分間に渡り滴下した。この反応液を室温下２日間攪拌した。反応液を飽和重曹水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し粗精製物６．８ｇを得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１４０ｇ，塩化メチレン／アセトニトリル＝９０：１０）により精製し表記化合物（１０）（６．２ｇ）を得た。
化合物（１０）（６．１ｇ）を塩化メチレン１００ｍｌに溶解し、氷冷下、３−クロロ過安息香酸（４．６ｇ）の塩化メチレン溶液を９０分間に渡り滴下した。室温で２日間攪拌し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去し粗精製物（８．６ｇ）を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１４０ｇ，塩化メチレン／アセトニトリル＝９０：１０）により精製し、再度化合物をシリカゲルクロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０，１２０ｇ，塩化メチレン／アセトニトリル＝８０：２０）により精製し表記化合物（１１）（５．５ｇ）を得た。
【００６４】
【化４０】
0005105166.tif 000030
【００６５】
表記化合物（１１）に関する化合物分析データを下記に示す。
測定条件：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、日本電子製ＪＮＭ−ＬＡ４００；；６００ＭＨｚ  Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｄｖａｎｃｅ６００  ）、１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、日本電子社製ＪＮＭ−ＬＡ４００）、ＧＣ／ＭＳ（サーモエレクトロン製  Ｖｏｙａｇｅｒ）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．７，４．９Ｈｚ），２．８２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．３，４．９），３．１８（１Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．９，１１．６Ｈｚ）、３．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．６，１１．６Ｈｚ），４．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ），４．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ），４．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６，１８．２Ｈｚ），４．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６，１８．２Ｈｚ），５．１９（２Ｈ，ｓ），７．３２−７．４０（５Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４０．７，４４．１，５０．４，６７．２，７０．４，７１．８，１２８．４−１２８．６，１３５．２，１６９．５，１６９．８
ＭＳ：ｍ／ｚ  ２８０[Ｍ＋Ｈ]＋
【００６６】
[実施例５]  重合反応１  
アルゴン雰囲気下、耐圧反応容器に実施例１で得られた化合物（３）１０．６ｇ、エチレンオキサイド７０ｍｌ、カリウムｔ−ブトキシド１Ｍテトラヒドロフラン溶液１ｍｌ及びトリイソブチルアルミニウム１Ｍヘキサン溶液１０ｍｌ、及び溶媒としてヘキサン３００ｍｌを加え、３０℃で４．５時間反応を行った。反応終了後、反応生成物を回収し、減圧下で溶媒を除去することによって目的とするランダム共重合体（１２）４１ｇを白色固体として得た。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、８０，０００であった。更に 1Ｈ−ＮＭＲ分析によると、ＴＳＰ（３−トリメチルシリルプロピオン酸−２，２，３，３−ｄ４重水素化ナトリウム塩）を標準とする重水中での測定によるカルボン酸エチルエステルの導入率は、２．９ｍｏｌ％であった。
上記共重合体（１２）１０．２ｇを３０ｍｌジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液３０ｍｌを加えて５０℃で２４時間撹拌した。反応終了後、米国スペクトラポア社製透析膜（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ２、分子量分画１２，０００−１４，０００）を用い、精製水を外液とした２日間の透析を行った。次いで、ミリポア社製メンブランフィルター（ＤＵＲＡＰＯＲＥ、０．４５μｍ）を用いたろ過後、凍結乾燥の工程を経て、白色非晶質の目的とするエチル基が脱保護されたランダム共重合体（１３）９．４ｇを得た。下記式においてa,bは整数を表す。
【００６７】
【化４１】
0005105166.tif 000031
【００６８】
1Ｈ−ＮＭＲ分析より、エチル基が除去されたことを確認し、更にカルボキシメチル基の導入率は、モル比で２．７ｍｏｌ％であった。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、８９，０００であり、Ｍｗ／Ｍｎ＝２．７であった。ＧＰＣ分析の結果を図１に示す。
【００６９】
[実施例６]   重合反応２  
アルゴン雰囲気下、耐圧反応容器に実施例３で得られた化合物（８）９．３ｇ、エチレンオキサイド７０ｍｌ、カリウム２−メチル−２−ブトキシド１Ｍテトラヒドロフラン溶液１．１ｍｌ及びトリイソブチルアルミニウム１Ｍヘキサン溶液１１．１ｍｌ、及び溶媒としてヘキサン３００ｍｌを加え、２５℃で５時間反応を行った。反応終了後、反応生成物を回収し、減圧下で溶媒を除去することにより、目的とするランダム共重合体（１４）５０ｇを白色固体として得た。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、３９，０００であった。更に1Ｈ−ＮＭＲ分析によるカルボン酸ベンジルエステルの導入率は、モル比で２．０ｍｏｌ％であった。
上記共重合体（１４）２０．１ｇを６０ｍｌＤＭＳＯに溶解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液６０ｍｌを加えて５０℃で２０時間撹拌した。反応終了後、米国スペクトラポア社製透析膜（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ２、分子量分画１２，０００−１４，０００）を用い、精製水を外液とした２日間の透析を行った。次いで、ミリポア社製メンブランフィルター（ＤＵＲＡＰＯＲＥ、０．４５μｍ）を用いたろ過後、凍結乾燥の工程を経て、白色非晶質の目的とするベンジル基が脱保護されたランダム共重合体（１５）１６．０ｇを得た。下記式においてc,dは整数を表す。
【００７０】
【化４２】
0005105166.tif 000032
【００７１】
1Ｈ−ＮＭＲ分析より、ベンジル基が除去されたことを確認し、更にカルボキシメチル基の導入率は、モル比で２．１ｍｏｌ％であった。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、５８，０００であり、Ｍｗ／Ｍｎ＝１．６であった。ＧＰＣ分析の結果を図２に示す。
【００７２】
[実施例７]   重合反応３  
アルゴン雰囲気下、耐圧反応容器に実施例３で得られた化合物（８）９．３ｇ、エチレンオキサイド７０ｍｌ、カリウムｔ−ブトキシド１Ｍテトラヒドロフラン溶液１ｍｌ及びトリイソブチルアルミニウム１Ｍヘキサン溶液１０ｍｌ、及び溶媒としてヘキサン３００ｍｌを加え、３０℃で４．５時間反応を行った。反応終了後、反応生成物を回収し、減圧下で溶媒を除去することにより、目的とするランダム共重合体（１６）５０ｇを白色固体として得た。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、３５，０００であった。更に1Ｈ−ＮＭＲ分析によるカルボン酸ベンジルエステルの導入率は、モル比で２．１ｍｏｌ％であった。
上記共重合体（１６）２０．１ｇを６０ｍｌＤＭＳＯに溶解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液６０ｍｌを加えて５０℃で２０時間撹拌した。反応終了後、米国スペクトラポア社製透析膜（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ２、分子量分画１２，０００−１４，０００）を用い、精製水を外液とした２日間の透析を行った。次いで、ミリポア社製メンブランフィルター（ＤＵＲＡＰＯＲＥ、０．４５μｍ）を用いたろ過後、凍結乾燥の工程を経て、白色非晶質の目的とするベンジル基が脱保護されたランダム共重合体（１７）１６．９ｇを得た。下記式においてe,fは整数を表す。
【００７３】
【化４３】
0005105166.tif 000033
【００７４】
1Ｈ−ＮＭＲ分析によりベンジル基が除去されたことを確認し、更にカルボキシメチル基の導入率は、モル比で２．１ｍｏｌ％であった。得られた共重合体のＰＥＧ換算分子量をＧＰＣにより測定した結果は、５４，０００であり、Ｍｗ／Ｍｎ＝１．７であった。ＧＰＣ分析の結果を図３に示す。
【００７５】
[実施例８]  毒性評価
上記実施例６中の化合物（１５）に関し生理食塩水を投与溶媒として、更に生理食塩水を比較対照として、化合物（１５）投与量１０００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇについて、投与液量２５ｍｌ／ｋｇの条件で６週齢BALB/c雌性マウス（各群n=５、日本エスエルシー（株）から購入）の尾静脈より０日目、３日目、６日目の３回にわたり間歇投与を行った。その結果を図４に示す。
体重減少を指標として評価を実施した。実験開始日におけるマウスの体重を100％とした場合の体重変化を評価し、１０％の体重減少が起きた場合に毒性有りと判断した。その結果、投与開始日以後の１０％以上の体重減少は見られず、しかも体重に関し投与後２５日目における有意な差は見られず、毒性無しと判断された。図中の各ポイントは各投与群における平均体重±標準偏差（ＳＤ）を示す。図中の上向き矢印は投与日（０日目、３日目、６日目）を示す。
【００７６】
以下の実施例では次の略号を使用する。
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｔｒｔ：トリフェニルメチル基（トリチル基）、Ｚ：ベンジルオキシカルボニル基、Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、ＤＭＡＰ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、HBTU：２−（１−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウム  ヘキサフルオロフォスフェート、ＤＩＰＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、ｔＢｕＯＫ： Potassium t-butoxide，ＤＭＳＯ−ｄ６：重水素化ジメチルスルホキシド
【００７７】
〔実施例９〕
（工程１）２’−Ｇｌｙ−ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ塩酸塩（１８）の製造
米国、ハウザー社製のパクリタキセルを原料として、パクリタキセルの２’位水酸基にアミノ酸リンカーを導入し２’−Ｇｌｙ−ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ塩酸塩（１８）を調製した。
生成物については１Ｈ−ＮＭＲ及びＨＲＭＳ（high-resolution mass spectrometry）により構造確認した。すなわち、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ（１７８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（７３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及びパクリタキセル（米国、HＡＵＳＥＲ社製、４２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（７６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：独国Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、２’−Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（４８９ｍｇ）を得た。
この化合物（４２０ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ｍｌ)に溶解し、室温下ピペリジン（２ｍｌ）を加え、５分間撹拌し、溶媒を留去して、脱Ｆｍｏｃ化し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／塩化メチレン＝８０／２０）で精製し、標記化合物（１８）（１４５ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．０１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０５（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．６，９．２Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．５１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１９）１．６５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，Ｈ−６ｂ）１．８１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．５，９．６Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）１．８６（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）２．１１（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）２．２３（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．３２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ａ）３．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−３）３．９６−４．０７（ｍ，３Ｈ，ＧｌｙＣＨ２，Ｈ−２０）４．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．７，１０．７，Ｈ−７）４．６３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．９０（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ−７）４．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，Ｈ−５）５．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，Ｈ−２）５．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｈ−２’）５．５８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−３’）５．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ−１３）６．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）７．１９−８．００（ａｒｏｍａｔｉｃ，１５Ｈ）８．４０（ｂｒｓ，２Ｈ，ＧｌｙＮＨ２）９．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  ９１１．３６０４
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ49Ｈ55Ｏ15Ｎ2としての計算値  ９１１．３６０２
【００７８】
（工程２）ポリエーテル−２’−Ｇｌｙ−パクリタキセル（１９）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）をＤＭＦ５ｍｌに溶解し、氷冷下、この溶液に本実施例（工程１）で得た、２’−Ｇｌｙ−パクリタキセル（１８）（１０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（５２ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（１９）（１０２ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、６．１％（重量％）であった。
【００７９】
〔実施例１０〕
（工程１）２’−Ａｌａ−パクリタキセル（２０）の製造
Ｚ−Ａｌａ（１４５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）及び、ＤＭＡＰ（７９ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）及びパクリタキセル（４２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（８２ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、２’−Ｚ−Ａｌａ−パクリタキセル（４３５ｍｇ）を得た。この化合物（４００ｍｇ）をジオキサン（２０ｍｌ）に溶解しパラジウム−炭素触媒（２００ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、４時間撹拌し、触媒を濾去した後、減圧下で溶媒を留去し、残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、標記化合物（２０）（２２０ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．０１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０３（ｓ
，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．１４（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−Ａｌａ）１．５１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−
１９）１．６１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．６，９．２Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．６４（ｔ，
１Ｈ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，Ｈ−６ｂ）１．８１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）１．８８（ｄｄ
，１Ｈ，Ｊ＝１５．３，  ９．５Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）２．１１（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）
２．２７（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ａ）３．５２（ｑ，１Ｈ，
Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−Ａｌａ）３．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−３）４．０２
（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−２０）４．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ
−２０）４．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，６．６，１７．４Ｈｚ，Ｈ−７）４．６
６（ｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，ＯＨ−７）４．９２（ｄｄ
，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，Ｈ−５）５．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６，Ｈ−２’）５．４
３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−２）５．６４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ−３
’）５．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ−１３）６．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）
７．２０−８．００（ａｒｏｍａｔｉｃ，１５Ｈ）９．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ
，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  ９２５．３７９７
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ50Ｈ57Ｏ15Ｎ2としての計算値  ９２５．３７５９
【００８０】
（工程２）ポリエーテル−２’−Ａｌａ−パクリタキセル（２１）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）に対し、本実施例１０（工程１）で得た、２’−Ａｌａ−パクリタキセル（２０）（２５ｍｇ）を用いた以外は実施例９（工程２）と同様に行い、標記化合物（２１）（１０３ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．７％（重量％）であった。
【００８１】
〔実施例１１〕
（工程１）２’−Ｌｅｕ−パクリタキセル（２２）の製造
Ｚ−Ｌｅｕ（１７２ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１０（工程１）と同
様に行い２’−Ｚ−Ｌｅｕ−パクリタキセル（４５０ｍｇ）を得た。この化合物（４００ｍｇ）をジオキサン(２０ｍｌ)に溶解しパラジウム−炭素触媒（２００ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、４時間撹拌し、触媒を濾去した後、減圧下溶媒を留去し、残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、標記化合物（２２）（２８０ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．６６（ｄ，３Ｈ，Ｍｅ−Ｌｅｕ）０．７０（ｄ，３Ｈ，Ｍｅ−Ｌｅｕ）１．０１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０３（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．２６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４，８．５，１３．４Ｈｚ，Ｈ−Ｌｅｕ）１．３６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８，７．６，１３．４Ｈｚ，Ｈ−Ｌｅｕ）１．５１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１９）１．５６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３，９．０Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．６４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ｂ）１．６７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−Ｌｅｕ）１．７９（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）１．８４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３，９．５Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）２．１０（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）２．２５（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．３３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．７，９．５，６．４Ｈｚ，Ｈ−６ａ）３．３８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６，５．８Ｈｚ，Ｈ−Ｌｅｕ）３．５９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−３）４．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−２０）４．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，Ｈ−２０）４．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．９，６．９，１１．０Ｈｚ，Ｈ−７）４．６４（ｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，ＯＨ−７）４．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，Ｈ−５）５．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２，Ｈ−２’）５．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−２）５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−３’）５．８６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ−１３）６．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）７．２０−８．００（ａｒｏｍａｔｉｃ，１５Ｈ）９．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  ９６７．４３２１
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ53Ｈ63Ｏ15Ｎ2としての計算値  ９６７．４２２８
【００８２】
（工程２）
ポリエーテル−２’−Ｌｅｕ−パクリタキセル（２３）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）に対し、本実施例１１（工程１）で得た、２’−Ｌｅｕ−パクリタキセル（２２）（２５ｍｇ）を用いた以外は実施例９（工程２）と同様に行い、標記化合物（２３）（９７ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、４．０％（重量％）であった。
【００８３】
〔実施例１２〕
（工程１）２’−Ｉｌｅ−パクリタキセル（２４）の製造
Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ（２１２ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）及び、ＤＭＡＰ（７３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及びパクリタキセル（４２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（７６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマト・グラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、２’−Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−パクリタキセル（５５３ｍｇ）を得た。この化合物（４７０ｍｇ）をＤＭＦ(１０ｍｌ)に溶解し、室温下ピペリジン（２ｍｌ）を加え、５分間撹拌した後、減圧下溶媒を留去し、残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、標記化合物（２４）（３５０ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．６２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｍｅ−Ｉｌｅ）０．８１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，Ｍｅ−Ｉｌｅ）１．０１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０３（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．０７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．４，７．３，４．９Ｈｚ，Ｈ−Ｉｌｅ）１．３２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．４，７．６，４．６Ｈｚ，Ｈ−Ｉｌｅ）１．５１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１９）１．５６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３，９．２Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．５６−１．６１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−Ｉｌｅ）１．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．７，３．１Ｈｚ，Ｈ−６ｂ）１．７９（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）１．８７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．３，９．８Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）２．１０（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）２．２９（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．３３（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．４，９．６，６．４Ｈｚ，Ｈ−６ａ）３．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−３）３．６０−３．６７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−Ｉｌｅ）４．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ，Ｈ−２０）４．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ，Ｈ−２０）４．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．８，６．７，６．７Ｈｚ，Ｈ−７）４．６４（ｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，ＯＨ−７）４．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，Ｈ−５）５．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，Ｈ−２’）５．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−２）５．６４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−３’）５．８５（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝０．９，９．２Ｈｚ，Ｈ−１３）６．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）７．２０−８．００（ａｒｏｍａｔｉｃ，１５Ｈ）９．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  ９６７．４２３４
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ53Ｈ63Ｏ15Ｎ2としての計算値  ９６７．４２２８
【００８４】
（工程２）ポリエーテル−２’−Ｉｌｅ−パクリタキセル（２５）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）に対し、本実施例１２（工程１）で得た、２’−Ｉｌｅ−パクリタキセル（２４）（３０ｍｇ）を用いた以外は実施例９（工程２）と同様に行い、標記化合物（２５）（９２ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、２．５％（重量％）であった。
【００８５】
〔実施例１３〕
（工程１）２’−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル塩酸塩（２６）の製造
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（ペプチド研究所製、１．１ｇ、５ｍｍｏｌ）を水（２ｍｌ）、２−プロパノール（２ｍｌ）及びジエチルアミン（１．５ｍｌ）の混合溶液に溶かし、この反応液にトリチルクロライド（１．８ｇ、６．５ｍｍｏｌ）を徐々に加え、１時間撹拌した。反応液に水を加え、生じた沈殿を水で洗浄した。次に、沈殿に酢酸５ｍｌを加えて酸性にした後、溶媒を減圧下留去することによりＴｒｔ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ１．４ｇを得た。得られたＴｒｔ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（６０４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及び、ＤＭＡＰ（１５８ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及びパクリタキセル（８５３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（１６４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加え室温下終夜撹拌した。反応溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝８０／２０）で精製し、２’−Ｔｒｔ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（９９０ｍｇ）を得た。この化合物（８００ｍｇ）を９０％酢酸（１０ｍｌ）で処理して脱Ｎ−トリチル化し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：独国Ｍｅｒｃｋ社製Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、次に酢酸塩をイオン交換樹脂により塩酸塩へ変換して標記化合物（２６）（４５０ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）；δ１．０１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０３（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．５，９．１Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．５０（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１９）１．６３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，Ｈ−６ｂ）１．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３，９．５Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）１．８１（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）２．１２（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）２．２３（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．２９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．４，９．２，７．０Ｈｚ，Ｈ−６ａ）２．９０（ｄｄ，１Ｈ，１４．２，７．８Ｈｚ，ＰｈｅＣＨ２）３．０８（ｄｄ，１Ｈ，１４．４，５．２Ｈｚ，ＰｈｅＣＨ２）３．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−３）４．０５−４．１０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−７，ＰｈｅＣＨ）４．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１８．０，５．８Ｈｚ，Ｇｌｙ）４．６１（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．９０（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ−７）４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，Ｈ−５）５．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，Ｈ−２’）  ５．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ−２）５．５３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ−３’）５．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，Ｈ−１３）６．２９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）７．１６〜８．００（ｍ，２０Ｈ，ａｒｏｍａｔｉｃ）８．１５（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ２）９．０２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，Ｇｌｙ−ＮＨ）９．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  １０５８．４２４１
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ58Ｈ64Ｏ16Ｎ3としての計算値  １０５８．４２８７
【００８６】
（工程２）
ポリエーテル−２’−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（２７）の製造  
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）に対し、本実施例１３（工程１）で得た、２’−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（２６）（３０ｍｇ）を用いた以外は実施例９（工程２）と同様に行い、標記化合物（２７）（９５ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．５％（重量％）であった。
【００８７】
〔実施例１４〕
Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（２８）の製造
（１）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２９）の合成
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ・Ｈ2Ｏ（国産化学製、２５ｇ、１０４ｍｍｏｌ）をパラトルニンスルホン酸１水和物（１９．８ｇ、１０４ｍｍｏｌ）、ベンジルアルコール（２５ｍｌ）及びトルエン（２００ｍｌ）混合液に溶かし、Dean-Stark装置により５時間加熱環流する。反応後、溶媒を留去し、ジエチルエーテルを加えることで標記化合物であるＰｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２９）のパラトルエンスルホン酸塩（３４ｇ）を得た。
（２）Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（３０）の合成
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（ペプチド研究所製、６．６ｇ、５０ｍｍｏｌ）を精製水（２０ｍｌ）、２−プロパノール（４０ｍｌ）及びジエチルアミン（１５ｍｌ）の混合溶液に溶かし、この反応液にトリチルクロライド（１８．１ｇ、６５ｍｍｏｌ）を徐々に加え、１時間撹拌する。反応液に精製水を加え、生じた沈殿を水で洗浄した。次に、沈澱に酢酸5mlを加えて酸性にした後、溶媒を減圧下で留去することにより標記化合物（３０）１３．３ｇを得た。
（３）Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（３１）の合成
乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）に、Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（３０）（１．５４ｇ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（０．５２ｇ）及びＤＣＣ（０．９３ｇ）を加え、４℃で３時間反応した。反応溶液にＰｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（２９）のパラトルエンスルホン酸塩（２．０ｇ）及びＮ−メチルモルホリン（０．４１ｇ）を溶かしたＤＭＦ溶液（ＤＭＦ１０ｍｌ）を加え、４℃で１５時間反応する。沈殿物を除き、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：独国Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9365，Silica gel 60，200-400mesh，溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製することにより、標記生成物（３１）（１．６ｇ）を得た。
（４）Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（２８）の合成
化合物（３１）Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＢｎ（１．３ｇ）をＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶かし、１０％パラジウム−炭素（０．５ｇ）及び１，４−シクロヘキサジエン（０．４ｇ）を加え、室温下３０分反応する。反応液をろ過し、触媒を除き、溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9365，Silica gel60，200-400 mesh，溶離液：クロロホルム／メタノール＝７／１）で精製することにより、標記化合物（２８）（１．１ｇ）を得た。
Anal．Calcd for: Ｃ34Ｈ34Ｎ4Ｏ5：Ｃ，７０．５７；Ｈ，５．９２；Ｎ，９．６８  
Found: Ｃ，７０．０３；Ｈ，６．０７；Ｎ，９．６７
アミノ酸分析：Ｐｈｅ（１）１．００，Ｇｌｙ（３）２．９１
加水分解条件：６ＮＨＣｌ、１１０℃、２２ｈｒｓ
【００８８】
〔実施例１５〕
２’−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル塩酸塩（３２）の製造
実施例１４で得た（２８）Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（７３９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及び、ＤＭＡＰ（１５８ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及びパクリタキセル（８５３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（１６４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加え室温下４時間撹拌した。反応溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：独国Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／３０）で精製し、２’−Ｎα−Ｔｒｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（３３）（１２５０ｍｇ）を得た。
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  １４１４．５７６３
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ81Ｈ84Ｏ18Ｎ5としての計算値  １４１４．５８１１
この化合物（３３）（１１００ｍｇ）を７５％酢酸（１０ｍｌ）で処理して脱Ｎ−トリチル化し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝８５／１５／５）で精製し、次に陰イオン交換樹脂により塩酸塩へ変換して表記化合物（３２）（５３３ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．００（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１７）１．０３（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１６）１．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．４，９．２Ｈｚ，Ｈ−１４ｂ）１．４９（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１９）１．６３（ｂｒｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，Ｈ−６ｂ）１．７４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．４，  ９．２Ｈｚ，Ｈ−１４ａ）１．８０（ｓ，３Ｈ，Ｍｅ−１８）２．１１（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−１０）２．２３（ｓ，３Ｈ，Ａｃ−４）２．３０（ｍ，１Ｈ，Ｈ６ａ）２．７２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．９，１０．２Ｈｚ，ＰｈｅＣＨ２Ｈｂ）３．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．９，３．８Ｈｚ，ＰｈｅＣＨ２ＣＨａ）３．５２（ｂｒｓ，２Ｈ，ＧｌｙＣＨ２）３．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−３）３．６６（ｄｄ，１Ｈ，１６．９，５．４Ｈｚ，ＧｌｙＣＨ２ｂ）３．８４（ｄｄ，１Ｈ，１６．９，５．４Ｈｚ，ＧｌｙＣＨ２ａ）４．０１（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１４．５，８．４Ｈｚ，Ｈ−２０ａ，Ｈ−２０ｂ）４．０１（２Ｈ，ＧｌｙＣＨ２）４．０９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−７）４．５５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２，８．５，３．８Ｈｚ，ＰｈｅＣＨ２ＣＨ）４．６１（ｓ，１Ｈ，ＯＨ−１）４．８９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９，１．３Ｈｚ，Ｈ−５）４．９２（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ−７）５．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２，Ｈ−２）５．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，Ｈ−２’）５．５１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−３’）５．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ−１３）６．２９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１０）７．１０−８．００（ａｒｏｍａｔｉｃ，２０Ｈ）８．３３（ｄ，１Ｈ，ＰｈｅＣＯＮＨ）８．５１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，ＧｌｙＣＯＮＨ）８．６９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＧｌｙＣＯＮＨ）９．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ＣＯＮＨ−３’）
ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ  １１７２．４７１１
(Ｍ＋Ｈ)+：Ｃ62Ｈ70Ｏ18Ｎ5としての計算値  １１７２．４７１６
Anal．Calcd for: Ｃ62Ｈ69Ｏ18Ｎ5・ＨＣｌ・２．５Ｈ2Ｏ：Ｃ，５９．４０；Ｈ，６．
０３；Ｎ，５．５９．
Found: Ｃ，５９．５５；Ｈ，６．０４；Ｎ，５．６０
【００８９】
〔実施例１６〕
ポリエーテル−２’−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（３４）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０３ｍｇ）をDMF５ｍｌに溶解し、この溶液に実施例１５で得た、２’−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−パクリタキセル（３２）（１０．３ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（５３ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（３４）（１１３ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、６．４％（重量％）であった。
【００９０】
〔実施例１７〕
２０−Ｇｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３５）の製造
（工程１）２０−ＢＯＣ−Ｇｌｙ−カンプトテシン（３６）の製造
BOC−Ｇｌｙ（２６３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（１２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及び（Ｓ）−（＋）−Ｃａｍｐｔoｔｈｅｓｉｎ（東京化成製、１７４ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（１８９ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え室温で３．５時間撹拌した。反応溶液を０．１Ｎ塩酸及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下で留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、２０−ＢＯＣ−Ｇｌｙ−カンプトテシン（３６）（３１５ｍｇ）を得た。
【００９１】
（工程２）２０−Ｇｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３５）の製造
化合物（３６）（３００ｍｇ）を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶解し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；２ｍｌ）を加え、５分間撹拌し、ついで溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝１０／１０／９０）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（３５）（２１４ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．９７（ｓ，３Ｈ）２．２０（ｍ，２Ｈ）４．０８，４．３４（ｄｄ，２Ｈ）５．３２（ｓ，２Ｈ）５．５６（ｓ，２Ｈ）７．３２（ｓ，１Ｈ）７．７３（ｔ，１Ｈ）７．８８（ｔ，１Ｈ）８．１５（ｄ，１Ｈ）８．１７（ｄ，１Ｈ）８．５６（ｂｒｓ，２Ｈ）８．７２（ｓ，１Ｈ）
１３C−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．５３，３０．１８，３８．６−４０．２，５０．１０，６６．２９，７７．４２，９５．５１，１１８．７８，１２７．６３，１２７．８２，１２８．４５，１２８．６６，１２９．４９，１３０．４３，１３１．５８，１４４．７２，１４５．９７，１４７．７７，１５２．１３，１５６．３９，１６６．７７
【００９２】
〔実施例１８〕
ポリエーテル−２０−Ｇｌｙ−カンプトテシン（３７）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０３ｍｇ）DMF５ｍｌに溶解し、この溶液に実施例１７で得た、２０−Ｇｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３５）（２０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（１０８ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．２２μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（３７）（１０５ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．５％（重量％）であった。
【００９３】
〔実施例１９〕
２０−ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３８）の製造
（工程１）２０−ＴｒｔＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン（３９）の製造
実施例１４で得られた（２８）Ｔｒｔ−ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ（１７３６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（２４４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）及び（Ｓ）−（＋）−Ｃａｍｐｔoｔｈｅｓｉｎ（３４８ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１００ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（３７８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶液を０．１Ｎ塩酸及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下で留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、２０−ＴｒｔＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン（３９）（７５４ｍｇ）を得た。
【００９４】
（工程２）２０−ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３８）の製造
化合物（３９）（７００ｍｇ）を７５％酢酸（８ｍｌ）に溶解し、２０分間撹拌後、溶媒を留去した。脱Ｔｒｔ化した化合物を陰イオン交換樹脂（バイオラッド社ＡＧ１−Ｘ８）により酢酸塩を塩酸塩に変換し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：メタノール／塩化メチレン＝１５／８５）で精製し、標記化合物（３８）（５３５ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．９３（ｔ，３Ｈ）２．３２（ｍ，２Ｈ）２．７７，３．０６（ｄｄ，ｄｄ，２Ｈ）３．２７（ｓ，２Ｈ）３．６１，３．７６（ｄ，ｄ，２Ｈ）４．１１，４．２１（ｄｄ，ｄｄ，２Ｈ）４．５５（ｍ，１Ｈ）５．２７（ｓ，２Ｈ）５．５１（ｓ，２Ｈ）７．１５（ｍ，１Ｈ）７．１９（ｓ，１Ｈ）７．２２（ｍ，４Ｈ）７．７１（ｔ，１Ｈ）７．８７（ｔ，１Ｈ）８．１２（ｄ，１Ｈ）８．１７（ｄ，１Ｈ）８．２３（ｂｒｓ，１Ｈ）８．３１（ｄ，１Ｈ）８．６８（ｓ，１Ｈ）８．６８（ｂｒｓ，２Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．５２，３０．４２，３７．４３，４０．４１，４１．６４，４２．２１，５０．０８，５３．９６，６６．２８，７６．２７，９５．２０，１１８．８７，１２６．２０，１２７．５９，１２７．８０，１２８．０１，１２８．３９，１２８．７９，１２９．０６，１２９．５０，１３０．３７，１３１．４９，１３７．８２，１４５．１１，１４５．８７，１４７．７２，１５２．１２，１５６．４１，１６７．００，１６８．３５，１６８．８４，１７１．６８
【００９５】
〔実施例２０〕
ポリエーテル−２０−ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン（４０）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）をDMF(５ｍｌ)に溶解し、この溶液に実施例１９で得た、２０−ＧｌｙＧｌｙＰｈｅＧｌｙ−カンプトテシン塩酸塩（３８）（２０ｍｇ）をＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（１００ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．２２μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（４０）（１０１ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２５４ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、４．５％（重量％）であった。
【００９６】
〔実施例２１〕
２１−Ａｌａ−デキサメタゾン塩酸塩（４１）の製造
（工程１）２１−ＢＯＣ−Ａｌａ−デキサメタゾン（４２）の製造
BOC−Ａｌａ（５６８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（２４４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）及びデキサメタゾン（３９２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を乾燥塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（２５２ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加え室温で０．５時間撹拌した。反応溶液を０．１Ｎ塩酸及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝８０／２０）で精製し、２１−ＢＯＣ−Ａｌａ−デキサメタゾン（４２）（５５３ｍｇ）を得た。
【００９７】
（工程２）２１−Ａｌａ−デキサメタゾン塩酸塩（４１）の製造
化合物（４２）（５００ｍｇ）を塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；１ｍｌ）を加え２時間撹拌後に溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝５／１５／８５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（４１）（４１２ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．８０（ｄ，３Ｈ）０．９０（ｓ，３Ｈ）１．０９（ｓ，１Ｈ）１．３３−１．７９（ｍ，４Ｈ）１．４９（ｓ，３Ｈ）１．５０（ｄ，３Ｈ）２．０８−２．９１（ｍ，６Ｈ）３．３５（ｂｒｓ，１Ｈ）４．１７（ｍ，１Ｈ）４．２４（ｑ，１Ｈ）４．９５（ｄ，１Ｈ）５．２０（ｄ，１Ｈ）５．２７（ｓ，１Ｈ）５．５３（ｄ，１Ｈ）６．０１（ｓ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，１Ｈ）７．３３（ｄ，１Ｈ）８．４６（ｂｒｓ，１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５．２０，１６．０９，１６．２９，２３．０８，２７．４１，３０．４１，３２．０５，３３．７０，３５．６１，３５．８３，４３．４２，４７．８０，４８．０５，４８．２５，６９．３８，７０．４１，９０．６１，１０１．４２，１２４．１９，１２９．０３，１５２．９４，１６７．１７，１６９．９８，１８５．４１，２０４．３０
【００９８】
〔実施例２２〕
ポリエーテル−２１−Ａｌａ−デキサメタゾン（４３）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）をDMF（５ｍｌ）に溶解した。この溶液に実施例２１で得た、２１−Ａｌａ−デキサメタゾン塩酸塩（４１）（２０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU(（１００ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．２２μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（４３）（９２ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２４０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．５％（重量％）であった。
【００９９】
〔実施例２３〕２１−Ｌｅｕ−デキサメタゾン塩酸塩（４４）の製造
（工程１）  ２０−ＢＯＣ−Ｌｅｕ−デキサメタゾン（４５）の製造  BOC−Ｌｅｕ・Ｈ２Ｏ（７４７ｍｇ、３ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（２４４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）及びデキサメタゾン（３９２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（２５２ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加え室温で１３時間撹拌した。反応溶液を０．１Ｎ塩酸及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝８０／２０）で精製し、２０−ＢＯＣ−Ｌｅｕ−デキサメタゾン（４５）（６０５ｍｇ）を得た。
【０１００】
（工程２）２１−Ｌｅｕ−デキサメタゾン塩酸塩（４４）の製造
化合物（４５）（５００ｍｇ）を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶解し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；１ｍｌ）を加え、２時間撹拌後、溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝５／１５／８５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（４４）（５１０ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．７９（ｄ，３Ｈ）０．８８（ｄ，３Ｈ）０．８９（ｓ、３Ｈ）０．９２（ｄ，３Ｈ）１．０８（ｍ，１Ｈ）１．３４−１．８１（ｍ，６Ｈ）１．４９（ｓ，３Ｈ）１．８６（ｍ，１Ｈ）２．１２−２．８８（ｍ，６Ｈ）３．３５（ｓ，２Ｈ）３．４４（ｑ，１Ｈ）４．１６（ｍ，１Ｈ）４．８５（ｄ，１Ｈ）５．０２（ｄ，１Ｈ）５．１７（ｓ，１Ｈ）５．４７（ｄ，１Ｈ）６．０１（ｓ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，１Ｈ）７．３１（ｄ，１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５．２７，１６．３０，２１．８７，２３．１１，２３．１５，２４．１５，２７．４６，３０．５０，３２．１３，３３．７９，３５．５２，３５．７９，４３．４６，４３．５６，４８．１５，４８．１６，５２．１６，６８．２１，７０．６２，９０．６７，１０１．４７，１２４．２４，１２９．０６，１５３．０４，１６７．２７，１７５．４７，１８５．４８，２０４．９０
【０１０１】
〔実施例２４〕
ポリエーテル−２１−Ｌｅｕ−デキサメタゾン（４６）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１００ｍｇ）を水２０ｍｌに溶解し、氷冷下、この溶液にＤＭＦ５ｍｌを加えた。この溶液に実施例２３で得た、２１−Ｌｅｕ−デキサメタゾン塩酸塩（４４）（２０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（１００ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．２２μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（４６）（９７ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２４０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、４．１％（重量％）であった。
【０１０２】
〔実施例２５〕
２１−Ｉｌｅ−デキサメタゾン塩酸塩（４７）の製造
（工程１）２０−ＢＯＣ−Ｉｌｅ−デキサメタゾン（４８）の製造
BOC−Ｉｌｅ（１０４０ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（３６６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）及びデキサメタゾン（５８８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、ＤＩＰＣ（３７８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加え室温で１４時間撹拌した。反応溶液を０．１Ｎ塩酸及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：独国Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝８０／２０）で精製し、２０−ＢＯＣ−Ｉｌｅ−デキサメタゾン（４８）（６２０ｍｇ）を得た。
【０１０３】
（工程２）２１−Ｉｌｅ−デキサメタゾン塩酸塩（４７）の製造
化合物（４８）（６００ｍｇ）を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶解し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ；１ｍｌ）を加え、２時間撹拌後、溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：４．０×５０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝５／１５／８５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（４７）（５８４ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．８０（ｄ，３Ｈ）０．９０（ｓ，３Ｈ）０．９３（ｔ，３Ｈ）１．０３（ｄ，３Ｈ）１．０８（ｍ，１Ｈ）１．３３−１．８６（ｍ，６Ｈ）１．４９（ｓ，３Ｈ）１．５０（ｄ，１Ｈ）２．１３−２．９１（ｍ，６Ｈ）４．１１（ｄ，１Ｈ）４．１６（ｍ，１Ｈ）４．９９（ｄ，１Ｈ）５．１７（ｄ，１Ｈ）５．２６（ｓ，１Ｈ）５．５５（ｄ，１Ｈ）６．０１（ｓ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，１Ｈ）７．３４（ｄ，１Ｈ）８．４４（ｓ，１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６９，１３．６９，１５．２１，１６．２１，２３．０９，２５．０２，２７．４４，３０．４５，３２．０８，３３．７２，３５．８１，３５．６１，３６．３４，４３．４４，４８．０８，４８．２２，５６．１５，６９．５４，７０．４１，９０．７２，１０１．４６，１２４．１９，１２９．００，１５２．９６，１６７．１８，１６８．６６，１８５．４１，２０４．４０
【０１０４】
〔実施例２６〕
ポリエーテル−２１−Ｉｌｅ−デキサメタゾン（４９）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０２ｍｇ）をDMF５ｍｌに溶解した。この溶液に実施例２５で得た、２１−Ｉｌｅ−デキサメタゾン塩酸塩（４７）（２０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（１００ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．２２μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（４９）（０．９７ｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２４０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．０％（重量％）であった。
【０１０５】
〔実施例２７〕
Ａｌａ−ファスジル（５０）の製造
（工程１）ＢＯＣ−Ａｌａ−ファスジル（５１）の製造
BOC−Ａｌａ（７５６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（１２２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び塩酸ファスジル水和物（６７３ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を乾燥塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、WSCD・HCｌ（水溶性カルボジイミド、ペプチド研製、７６６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶液を飽和重曹水及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、ＢＯＣ−Ａｌａ−ファスジル（５１）（７１３ｍｇ）を得た。
【０１０６】
（工程２）Ａｌａ−ファスジル（５０）の製造
化合物（５１）（６５０ｍｇ）に対し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５ｍｌ）を加え１０分後に溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝８５／１５／５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（５０）（５０４ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．３０（ｄｄ，２Ｈ）１．７−２．０（２Ｈ）３．２−３．８（８Ｈ）４．３（１Ｈ）７．９（１H）８．１（２Ｈ）８．３−８．４（２Ｈ）８．５（１Ｈ）８．７（１Ｈ）９．５（１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６．４，１６．７，２７．６，２９．５，４４．４−４８．９，１１７．０，１２６．６，１２８．８，１３０．６，１３２．３，１３２．６，１３３．５，１３３．９，１４４．８，１５３．５，１６９．４
【０１０７】
〔実施例２８〕
ポリエーテル−Ａｌａ−ファスジル（５２）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０４ｍｇ）をDMF５ｍｌに溶解した。この溶液に実施例２７で得た、Ａｌａ−ファスジル（５０）（１０ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（５２ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（５２）（１１０ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２７０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．４％（重量％）であった。
【０１０８】
〔実施例２９〕
Ｌｅｕ−ファスジル（５３）の製造
（工程１）ＢＯＣ−Ｌｅｕ−ファスジル（５４）の製造
BOC−Ｌｅｕ・Ｈ２Ｏ（９９７ｍｇ、４ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（１２２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び塩酸ファスジル水和物（６７３ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を乾燥塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、WSCD・HCｌ（水溶性カルボジイミド、ペプチド研製、７６６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶液を飽和重曹水及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／メタノール／アセトニトリル＝９５／５／５）で精製し、ＢＯＣ−Ｌｅｕ−ファスジル（５４）（７１８ｍｇ）を得た。
【０１０９】
（工程２）Ｌｅｕ−ファスジル（５３）の製造
化合物（５４）（６５０ｍｇ）に対し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５ｍｌ）を加え１０分後に溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝８５／１５／５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（５３）（５２５ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．９（６Ｈ）１．４−２．０（５Ｈ）３．２−３．８（８Ｈ）４．３（１Ｈ）７．９（１H）８．２（２Ｈ）８．３−８．４（２Ｈ）８．５（１Ｈ）８．７（１Ｈ）９．５（１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：２１．０，２１．２，２３．１，２３．４，２７．８，２９．４，４０．０，４５．９−４８．６，１１７．１，１２６．７，１２８．８，１３０．６，１３２．５，１３２．７，１３３．５，１３３．９，１４４．６，１５３．４，１６９．１
【０１１０】
〔実施例３０〕
ポリエーテル−Ｌｅｕ−ファスジル（５５）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０１ｍｇ）をDMF５ｍｌに溶解した。この溶液に実施例２９で得たＬｅｕ−ファスジル（５３）（１０．６ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（５２ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（５５）（１０６ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２７０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．４％（重量％）であった。
【０１１１】
〔実施例３１〕
Ｉｌｅ−ファスジル（５６）の製造
（工程１）ＢＯＣ−Ｌｅｕ−ファスジル（５７）の製造
BOC−Ｉｌｅ（７６６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）及び、ジメチルアミノピリジン（１２２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び塩酸ファスジル水和物（６７３ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を乾燥塩化メチレン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、WSCD・HCｌ（水溶性カルボジイミド、ペプチド研製、７６６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を加え室温で終夜撹拌した。反応溶液を飽和重曹水及び飽和食塩水で洗浄しその後、溶媒を減圧下留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：塩化メチレン／アセトニトリル＝７０／３０）で精製し、ＢＯＣ−Ｌｅｕ−ファスジル（５７）（８２６ｍｇ）を得た。
【０１１２】
（工程２）Ｉｌｅ−ファスジル（５６）の製造
化合物（５７）（８００ｍｇ）に対し、室温下トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５ｍｌ）を加え１０分後に溶媒を留去した。脱ＢＯＣ化した化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル：Ｍｅｒｃｋ社製 Art No．9385，Silica gel 60，200-400 mesh，カラム：２．０×３０ｃｍ、溶離液：アセトニトリル／メタノール／塩化メチレン＝８５／１５／５）で精製し、その後陰イオン交換樹脂で処理することで、標記化合物（５６）（７６３ｍｇ）を得た。テトラメチルシランを標準とするDMSO-d6溶媒におけるNMRデータ及び質量分析データを下記に示す。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．８５（ｔｔ、３Ｈ）０．９６（ｄｄ、３Ｈ）１．１４（１Ｈ）１．４６（１Ｈ）１．７−２．０（３Ｈ）３．２−３．８（８Ｈ）４．２（１Ｈ）７．９（１H）８．１（２Ｈ）８．３−８．４（２Ｈ）８．５（ｄｄ、１Ｈ）８．７（ｄｄ、１Ｈ）９．５（１Ｈ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．２，１４．８，２２．９，２７．５，２９．７，３５．７，３５．９，４４．４，４５．９，４６．２、４６．７，４７．１，４７．３，４９．２，５３．８，１１７．１，１２６．６，１２８．８，１３０．６，１３２．４，１３２．６，１３３．５，１３３．９，１４４．６，１５３．４，１６８．２
ＭＳ：ｍ／ｚ  ４０５[Ｍ＋Ｈ]＋
【０１１３】
〔実施例３２〕
ポリエーテル−Ｉｌｅ−ファスジル（５８）の製造
実施例６で得た、共重合体（１５）（１０１ｍｇ）をDMF５ｍｌに溶解した。この溶液に実施例２９で得たＩｌｅ−ファスジル（５６）（１０．６ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）及びHBTU（５２ｍｇ）を溶解したＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。この反応液を透析膜（分子量カットオフ１２，０００−１４，０００、米国、スペクトラム社製）を用い、精製水に対して４℃で２日間透析した。この内液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）にて濾過した後、凍結乾燥し、表記化合物（５８）（１０９ｍｇ）を得た。本複合体の薬物の導入量は、２７０ｎｍにおける紫外吸光度及び複合体の総重量から算出したところ、３．７％（重量％）であった。
【０１１４】
〔実施例３３〕
化合物（１９）、（２１）、（２３）、（２５）、（２７）及び（３４）の生理食塩水に対する溶解度
化合物（１９）、（２１）、（２３）、（２５）、（２７）及び（３４）をそれぞれ１０ｍｇ量り取り、０．１ｍｌの生理食塩水に加えたところ、加えた化合物はそれぞれ完全に溶解した。パクリタキセル換算では、化合物（１９）は６．１ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度であった。同様に（２１）は３．７ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、（２３）は４．０ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、（２５）は２．５ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、（２７）は３．５ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、（３４）は６．４ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度であった。
更に、パクリタキセル（米国、ＨＡＵＳＥＲ社製）１ｍｇは、１０ｍｌの生理食塩水に溶解しなかった。
【０１１５】
〔実施例３４〕
マウス及びヒト血漿中における化合物（１９）、（２１）、（２３）及び（２５）からのパクリタキセル遊離評価実験
実施例９で得た化合物（１９）、実施例１０で得た化合物（２１）、実施例１１で得た化合物（２３）及び実施例１２で得た化合物（２５）をそれぞれ生理食塩水に溶解し、パクリタキセルに換算した濃度が１２５μｇ／ｍｌとなるよう調製した。これらの溶液２０μｌをマウス及びヒト血漿２００μｌにそれぞれ添加し、３７℃における薬物複合体からのパクリタキセル遊離量を測定した。薬学雑誌，１１４，３５１−３５５（１９９４）記載の方法に従い、血漿中からのパクリタキセル回収を行い、ＨＰＬＣにより、化合物（１９）、（２１）、（２３）及び（２５）から血漿中に遊離したパクリタキセル量を評価した。
図５及び図６には、パクリタキセル遊離の経時変化を示した。その結果、薬物複合体からのパクリタキセルの遊離速度はマウス及びヒト血漿で同じ傾向が見られた。その順序は、遊離速度の大きい順に化合物（１９）＞（２１）＞（２３）＞（２５）であり、これはリンカーであるアミノ酸の立体障害の大きさと相関が見られた。
【０１１６】
〔実施例３５〕
抗腫瘍効果の評価実験（１）
Ｃｏｌｏｎ２６腫瘍細胞４％懸濁液を、Ｂａｌｂ／Ｃ系の雌性マウス（６週齢）の側腹部皮下に移植し、被検化合物として実施例９で得た化合物（１９）、実施例１０で得た化合物（２１）、実施例１１で得た化合物（２３）、実施例１２で得た化合物（２５）を生理食塩水に溶解した被検液、及びパクリタキセルをエタノール−クレモホールＥＬ（米国、シグマ社製）−生理食塩水に溶解した被検液を、一群５匹として尾静脈内に投与した。投与量はパクリタキセル換算で５０ｍｇ／ｋｇとした。無処置群は、一群９匹とした。細胞移植後２日目に、第１回被検液を投与し、その後７日毎に、被検液を尾静脈内に合計４回投与した。マウスの腫瘍体積を測定することにより、抗腫瘍効果を判定した。無処置群及び被検液投与群の平均腫瘍体積の経時変化を示した。腫瘍体積Ｖは、腫瘍を外部から計測し、長径ａ（ｍｍ）及び短径ｂ（ｍｍ）とするとき、下式（ＸＩ）により求めた。
【０１１７】
【数１】
0005105166.tif 000034
【０１１８】
被検液投与後の、腫瘍体積の経時変化は、図７に示される通りであった。本発明による薬物複合体（１９）及び（２１）の５０ｍｇ／ｋｇ投与群の抗腫瘍効果は、パクリタキセルの５０ｍｇ／ｋｇ投与群の抗腫瘍効果と比較して、有意に優れていた。抗腫瘍効果の強さは［化合物（１９）及び（２１）＞（２３）＞（２５）及びパクリタキセル］の順序であった。
【０１１９】
〔実施例３６〕
抗腫瘍効果の評価実験（２）
Ｃｏｌｏｎ２６腫瘍細胞４％懸濁液を、Ｂａｌｂ／Ｃ系の雌性マウス（６週齢）の側腹部皮下に移植し、被検化合物として実施例１６で得た化合物（３４）を生理食塩水に溶解した被検液、及び対照としてパクリタキセルをエタノール−クレモホールＥＬ（米国、シグマ社製）−生理食塩水に溶解した被検液を一群３匹として尾静脈内に投与した。投与量はパクリタキセル換算で５０ｍｇ／ｋｇとした。無処置群は、一群５匹とした。腫瘍細胞移植後２日目に、第１回被検液を投与し、その後４日毎に計７回、被検液を尾静脈内に投与した。マウスの腫瘍体積を測定し比較することにより、抗腫瘍効果を判定した。腫瘍体積Ｖは、腫瘍を外部から計測し、長径ａ（ｍｍ）及び短径ｂ（ｍｍ）とするとき、実施例３５における式（XI）により求めた。無処置群及び被検液投与群の平均腫瘍体積の経時変化を示した。
被検液投与後の、腫瘍体積の経時変化は、図８に示される通りであった。本発明による薬物複合体（３４）の５０ｍｇ／ｋｇ投与群の抗腫瘍効果は、パクリタキセルの５０ｍｇ／ｋｇ投与群の抗腫瘍効果と比較して、有意に優れていた。
【０１２０】
〔実施例３７〕
化合物（３７）、（４０）、（４３）、（４６）、（４９）、（５２）、（５５）及び（５８）の生理食塩水に対する溶解度評価
化合物（３７）、（４０）、（４３）、（４６）、（４９）、（５２）、（５５）及び（５８）をそれぞれ１０ｍｇ量り取り、０．１ｍｌの生理食塩水に加えた、加えた化合物はそれぞれ完全に溶解した。カンプトテシン換算で化合物（３７）は３．５ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度であった。同様に化合物（４０）はカンプトテシン換算で４．５ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、化合物（４３）はデキサメタゾン換算で３．５ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、化合物（４６）は同様にデキサメタゾン換算で４．１ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、化合物（４９）は同様にデキサメタゾン換算で３．０ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度であった。更に化合物（５２）はファスジル換算で３．４ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、化合物（５５）はファスジル換算で３．４ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度、また化合物（５８）はファスジル換算で３．７ｍｇ／ｍｌ（生理食塩水）の溶解度であった。
【０１２１】
〔実施例３８〕
マウス血漿中における、化合物（４３）、（４６）及び（４９）からのデキサメタゾン遊離評価実験
実施例２２で得た化合物（４３）、実施例２４で得た化合物（４６）及び実施例２６で得た化合物（４９）をそれぞれ生理食塩水に溶解し、デキサメタゾン換算で８０μｇ／ｍｌとなるよう調製した。これらの溶液５０μｌをマウス血漿２５０μｌにそれぞれ添加し、３７℃におけるそれぞれの薬物複合体からのデキサメタゾン遊離量を測定した。血漿中のデキサメタゾン回収並びに定量は次のようにして行った。すなわち、血漿サンプル２５０μｌに対し、２５０μlリン酸緩衝液(pH7.4)を加え、さらに内部標準として酢酸ヒドロコルチゾンを含むアセトニトリル−メタノール溶液（ＣＨ3ＣＮ／ＭｅＯＨ＝４／１、酢酸ヒドロコルチゾン濃度＝１０ｎｇ／ｍl）を３ｍｌ加えた後遠心し、（３０００ｒｐｍ、１０分、４℃）得られた上清７００μlに、蒸留水７００μlを加え、メンブランフィルター（０．４μｍ）にてろ過した後、ＨＰＬＣにて定量した。
図９にマウス血漿中からのデキサメタゾン遊離の経時変化を示した。薬物複合体からのデキサメタゾンの遊離速度の順序は、遊離速度の大きい順に化合物（４３）＞（４６）＞（４９）であり、これはリンカーであるアミノ酸の立体障害の大きさと相関が見られた。
＜ＨＰＬＣの条件＞
カラム：Asahipak HIKARISIL C18(4.6×150mm)  流速：1.0ml/min
カラム温度：２５℃
検出波長：２４０nm
移動相：Linear gradient
0min：20%アセトニトリル水溶液（20%CH3CN/H2O）
20min：50%アセトニトリル水溶液（50%CH3CN/H2O）
【産業上の利用可能性】
【０１２２】
本発明のポリエーテルは、生体組織適合性及び体液適合性に優れるため、これを医療用材料として用いた場合には、材料全体の高い安全性が実現される。特に、本発明のポリエーテルは、生体との相互作用が極めて少なく、生体組織に認識されにくいために肝臓、脾臓、骨髄といった代謝臓器、副作用発現臓器に分布することが少なく、臓器障害や細胞毒性を引き起こす可能性が低減され、標的とする臓器に集積することが可能となる。
また、該ポリエーテルにアミノ酸やペプチドなどのリンカーを介して薬理活性を有する化合物を結合させて薬物複合体として用いた場合、これを生体内に投与した際に、生体組織に認識されずに薬物を標的組織に送達することが可能になる。薬物複合体は、薬物遊離速度の制御が可能であり、しかも結合前の薬物に比べ生理食塩水に対する溶解性が極めて向上し、溶解補助剤無しでの静脈内投与を可能とする。
【図面の簡単な説明】
【０１２３】
【図１】実施例５の本発明の化合物（１３）のＧＰＣによる溶出曲線を示す図である。
【図２】実施例６の本発明の化合物（１５）のＧＰＣによる溶出曲線を示す図である。
【図３】実施例７の本発明の化合物（１７）のＧＰＣによる溶出曲線を示す図である。
【図４】実施例８の本発明の化合物（１５）における毒性評価のグラフである。
【図５】実施例３４の本発明の化合物（１９）、（２１）、（２３）及び（２５）のマウス血漿中薬物遊離のグラフである。
【図６】実施例３４の本発明の化合物（１９）、（２１）、（２３）及び（２５）のヒト血漿中薬物遊離のグラフである。
【図７】実施例９の本発明の化合物（１９）、実施例１０の本発明の化合物（２１）、実施例１１の本発明の化合物（２３）、実施例１２の本発明の化合物（２５）のColon26に対する抗腫瘍効果を表すグラフである。
【図８】実施例１６の本発明の化合物（３４）のColon26に対する抗腫瘍効果を表すグラフである。
【図９】実施例２２の本発明の化合物（４３）、実施例２４の本発明の化合物（４６）、実施例２６の本発明の化合物（４９）のマウス血漿中薬物遊離のグラフである。
【図１】
0005105166.tif 000045
【図２】
0005105166.tif 000046
【図３】
0005105166.tif 000047
【図４】
0005105166.tif 000048
【図５】
0005105166.tif 000049
【図６】
0005105166.tif 000050
【図７】
0005105166.tif 000051
【図８】
0005105166.tif 000052
【図９】
0005105166.tif 000053