(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
平均繊維直径の異なる複数の繊維状濾材を有する白血球除去フィルター装置を用いて白血球を含む血液を濾過し、血液から白血球を除去する白血球除去方法であって、
該複数の繊維状濾材は少なくとも、平均繊維直径が２．０μｍ以上４．０μｍ未満である白血球除去用濾材Ａ及び０．７μｍ以上１．２μｍ以下である白血球除去用濾材Ｂを含み、該濾材Ｂが該濾材Ａの下流側に配置され、かつ白血球除去用濾材Ｂの平均繊維直径が濾材Ａの１７．５％より大きく５０％未満である白血球除去フィルター装置を用いることを特徴とする白血球除去方法。
【請求項２】
室温濾過時の濾過時間（ｔa）と冷蔵濾過時の濾過時間（ｔc）の比率（ｔa／ｔc）をＸ、室温濾過時の白血球除去性能（ｒa）と冷蔵濾過時の白血球除去性能（ｒc）の比率（ｒa／ｒc）をＹとするとき、ＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）0.5が０．５以上１以下となる請求項１に記載の白血球除去方法。
【請求項３】
該濾材Ａと該濾材Ｂの間に、平均繊維直径が１．２μｍより大きくかつ２．０μｍ未満である白血球除去用濾材Ｃが配置されている白血球除去フィルター装置を用いる請求項１または２に記載の白血球除去方法。
【請求項４】
該濾材Ａの有効濾過部充填重量比が該濾材Ｂの２％以上４０％以下である白血球除去フィルター装置を用いる請求項１〜３のいずれかに記載の白血球除去方法。
【請求項５】
さらに、濾材Ｂの下流側に濾材Ａと同じ濾材Ａ´が配置され、血液入口側から血液出口側に向かって濾材Ａ、濾材Ｂ、濾材Ａ´の順に配置されている白血球除去フィルター装置を用いる請求項１〜４のいずれかに記載の白血球除去方法。
【請求項６】
さらに、濾材Ｂの下流側に濾材Ｃと同じ濾材Ｃ´が配置され、血液入口側から血液出口側に向かって濾材Ａ、濾材Ｃ、濾材Ｂ、濾材Ｃ´、濾材Ａ´の順に配置されている白血球除去フィルター装置を用いる請求項５に記載の白血球除去方法。
【請求項７】
室温範囲が２０〜２４℃であり、冷蔵温度範囲が１〜６℃である請求項２〜６のいずれかに記載の白血球除去方法。
【請求項８】
血液が予め１〜６℃で保存されたものであり、濾過は該血液を１〜６℃の条件下で行うものである請求項１〜６のいずれかに記載の白血球除去方法。
【請求項９】
血液が２０〜２４℃で保存されたものであり、濾過は該血液を２０〜２４℃の条件下で行うものである請求項１〜６のいずれかに記載の白血球除去方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液中の微小凝集物、および白血球または白血球と血小板を除去する為の白血球除去フィルター装置および白血球除去方法に関する。詳しくは、輸血用の全血製剤、赤血球製剤、血小板製剤、血漿製剤などから輸血副作用の原因となる微小凝集物や白血球を除去する為の白血球除去フィルター装置および白血球除去方法に関するものであり、特に、室温濾過と冷蔵濾過の両使用条件において優れた濾過性能を発揮する白血球除去フィルター装置および白血球除去方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、輸血分野においては、血液製剤中に含まれる混入した白血球を除去して輸血する、いわゆる白血球除去輸血が普及してきている。これは輸血に伴う頭痛、吐き気、悪寒、非溶血性発熱反応などの比較的軽微な副作用や、受血者により深刻な影響を及ぼすアロ抗原感作、ウィルス感染、輸血後GVHDなどの重篤な副作用が、主として輸血に用いられた血液製剤中に混入している白血球が原因で引き起こされることが明らかになったためである。【０００３】
頭痛、吐き気、悪寒、発熱などの比較的軽微な副作用を防止するためには、血液製剤中の白血球を、残存率が１０−１〜１０−２以下になるまで除去すればよいと言われている。また、重篤な副作用であるアロ抗原感作やウィルス感染を防止するためには、白血球を残存率が１０−４〜１０−６以下になるまで除去する必要があると言われている。【０００４】
現在、血液製剤から白血球を除去する方法は、大別して遠心分離機を用いて血球成分の比重差を利用して白血球を分離除去する遠心分離法と、不織布等の繊維集合体や連続気孔を有する多孔構造体などからなる濾材（フィルター材）を用いて白血球を粘着又は吸着により除去するフィルター法の２種類がある。このうち、白血球を粘着又は吸着により除去するフィルター法は、操作が簡便であること、及びコストが安いことなどの利点を有するため、現在最も普及している。【０００５】
上記の不織布等の繊維集合体や連続気孔を有する多孔構造体などの濾材による白血球除去の機構は、主として濾材表面と接触した白血球が、濾材表面に粘着又は接着されることによるとされている。従って、従来の濾材における白血球除去性能の向上手段として、濾材と白血球との接触頻度を高めること、即ち繊維径や濾材の細孔径を小さくしたり、嵩密度を高めることなどにより濾材単位体積あたりの表面積を増やすなどの検討が行われている。【０００６】
特許文献１には、繊維直径が３μｍ未満、嵩密度が０．１５ｇ／ｃｍ３を超え０．５０ｇ／ｃｍ３以下の不織布を用いた白血球除去フィルター装置が開示されている。しかし、上記手段では、一定の白血球除去性能は得られるものの、使用時間の経過に伴い、通液抵抗が高まると共に濾材の目詰まりが発生しやすくなり、濾過時間の延長や濾過の停止、それに伴う血液製剤回収不良等の問題が残った。【０００７】
このような問題に対し、先ず、血液製剤中の凝集塊による濾材の目詰まりを抑制する為の検討がなされてきた。特許文献２には、繊維状濾材の平均繊維直径Ｘと平均繊維間間隔Ｙの積ＸＹが規定された３種類一組の濾材を有する白血球除去フィルター装置が開示されている。この濾材においては、上流にＸＹ＞５０の濾材を配置して大きめの微小凝集塊を捕捉し、その下流に５０≧ＸＹ＞７の濾材を配置して比較的小さめの微小凝集塊を捕捉し、更にその下流に７≧ＸＹの濾材を配するという３層構造を必須とすることにより、凝集塊と白血球とを効率よく除去している。【０００８】
また、特許文献３では、フィルター装置の上流にゲル状の凝集塊を除去する濾材、その下流に微小凝集塊を除去する濾材、更にその下流に白血球を除去する濾材を配置している。【０００９】
また、特許文献４では、フィルター装置の上流側に下流より嵩密度の小さい濾材を配置して、微小凝集塊による目詰まりを抑制している。【００１０】
これらの技術により血液製剤中の微小凝集塊による濾材（フィルター材）の目詰まりは抑制可能になったが、近年、白血球除去性能に対する要求がさらに高まった。具体的には、白血球除去率９９．９９％の水準が要求されるようになった結果、白血球除去用濾材層の繊維径や濾材の細孔径を小さくしたり、嵩密度を高めることで対応することになり、血球成分（特に白血球、血小板）や血漿タンパク（特にフィブリン）による白血球除去用濾材層における目詰まりという新たな問題が発生するようになった。しかし前述の開示技術は、凝集塊によるプレフィルター層における目詰まりを抑制することには有効だが、血球成分による白血球除去用濾材層における目詰まり抑制には不十分であった。【００１１】
この問題を解決する為に、物性の異なる不織布を組み合わせた白血球除去用濾材に関する技術が開示されている。特許文献５は、平均繊維直径０．３〜１．６μｍの第１のフィルター材の上流に第１のフィルター材より平均繊維直径の大きな第２のフィルター材を配置させたフィルター装置を開示している。しかし本発明者らの検討によれば、これに開示された技術により、第１のフィルター材における目詰まりは軽減されるが、第２のフィルター材における目詰まりの懸念は依然として存在している。【００１２】
また、市場環境の変化に伴う新たな課題に対する懸念も生じている。従来は採血後冷蔵保存（最長６週間保存）された血液を病院のベッドサイドにおいて白血球除去する用法が主であったが、最近は欧米の多くの血液センターにおいて、血液製剤の品質向上および白血球除去工程管理のために保存前に白血球除去を行うこと（保存前白血球除去）が一般的になりつつある。この保存前白血球除去の血液濾過としては、採血後１日以内に室温状態で濾過する室温濾過と冷蔵庫で１〜３日程度保存した後濾過する冷蔵濾過が並存している場合が多く、室温濾過においては、濾過時間が短い反面、冷蔵保存血液より白血球が漏出しやすく、冷蔵濾過においては、反対に濾過時間が長く、白血球の漏出は比較的防止されるという傾向が認められている。従って、両条件下でフィルター装置を使用するためには、フィルター装置には冷蔵濾過時における濾過時間の短縮と室温濾過時における白血球除去性能の向上が要求される。【００１３】
このような室温濾過と冷蔵濾過の両方の使用条件に耐えうるような白血球除去フィルター装置は未だ得られていない。すなわち、特許文献５においては、このような要求に対する認識が無く、室温濾過時に白血球除去性能不足になる懸念がある。【００１４】
また、特許文献６は、血液出口側の第二の本フィルター材の繊維径が血液入口側の第一の本フィルター材の繊維径の５０％から９０％の間に規定されたフィルター装置を開示している。しかし本発明者らの検討により、該記載の第一と第二の本フィルター材の繊維径が近いために、濾材機能の違いが乏しく、機能分担ができていない結果、濾過時間短縮か高白血球除去性能かの何れかに偏った性能にならざるを得ないことが判明した。これでは冷蔵濾過または室温濾過の何れかに適したフィルター装置しか提供できないことになる。つまり特許文献６においても、室温濾過時の高白血球除去性能と冷蔵濾過時の濾過時間短縮を両立させるためのフィルター装置についての認識が無い。【００１５】
以上のように、保存前白血球除去という新たな市場環境において、室温濾過時の高白血球除去性能と冷蔵濾過時の濾過時間短縮の両立という新たな課題が発生しつつあるが、従来の技術ではこの課題に対する認識は無かった。従って、室温濾過時と冷蔵濾過時の両使用条件において優れたフィルター装置は未だ提供するに至っておらず、そのような白血球除去フィルター装置を用いた白血球除去方法も知られていない。
【特許文献１】特開昭６０−１９３４６８号公報
【特許文献２】特開平１−２３６０６４号公報
【特許文献３】米国特許第４９２５５７２号明細書
【特許文献４】特開平３−１７３８２４号公報
【特許文献５】特開平５−１７３６１号公報
【特許文献６】特開２００２-２０４９１０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明の課題は、血液中の白血球を除去する際に問題となる血球成分や血漿タンパクによる白血球除去用濾材の目詰まりを低減することで、冷蔵濾過時の濾過時間を短縮し、かつ室温濾過時の高い白血球除去性能を発揮する白血球除去方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、白血球や血漿タンパクを適度に除去でき、かつ目詰まりが発生しにくい繊維状濾材Ａの繊維径及びこの適度に白血球や血漿タンパクが除去された血液中に残存する白血球を効率的に除去できる濾材Ｂの繊維径を見出した。更に、特定の繊維径を有する繊維状濾材Ｂを特定の繊維径を有する濾材Ａの下流に組み合わせた白血球除去フィルター装置が、冷蔵濾過時の短い濾過時間と室温濾過時の高い白血球除去性能を同時に達成することを見出した。更にまた、この時、濾材Ｂの平均繊維直径を濾材Ａのそれと適度に乖離させることにより、その機能を効果的、効率的に分担させ得ることを見出し、本発明の白血球除去方法を完成するに至った。
すなわち、本発明は、以下に示す特定の白血球除去フィルター装置を用いる白血球除去方法である。
（１）平均繊維直径の異なる複数の繊維状濾材を有する白血球除去フィルター装置を用いて白血球を含む血液を濾過し、血液から白血球を除去する白血球除去方法であって、
該複数の繊維状濾材は少なくとも、平均繊維直径が２．０μｍ以上４．０μｍ未満である白血球除去用濾材Ａ及び０．７μｍ以上１．２μｍ以下である白血球除去用濾材Ｂを含み、該濾材Ｂが該濾材Ａの下流側に配置され、かつ白血球除去用濾材Ｂの平均繊維直径が濾材Ａの１７．５％より大きく５０％未満である白血球除去フィルター装置を用いることを特徴とする白血球除去方法。
（２）該濾材Ａと該濾材Ｂの間に、平均繊維直径が１．２μｍより大きくかつ２．０μｍ未満である白血球除去用濾材Ｃが配置されている白血球除去フィルター装置を用いる請求項１に記載の白血球除去方法。
（３）該濾材Ａの有効濾過部充填重量比が該濾材Ｂの２％以上４０％以下である白血球除去フィルター装置を用いる上記（１）又は（２）に記載の白血球除去方法。
（４）さらに、濾材Ｂの下流側に濾材Ａと同じ濾材Ａ’が配置され、各濾材が血液入口側と血液出口側に対して対称的に配置されている白血球除去フィルター装置を用いる上記（１）〜（３）のいずれかに記載の白血球除去方法。
（５）室温濾過時の濾過時間（ｔａ）と冷蔵濾過時の濾過時間（ｔｃ）の比率（ｔａ／ｔｃ）をＸ、室温濾過時の白血球除去性能（ｒａ）と冷蔵濾過時の白血球除去性能（ｒｃ）の比率（ｒａ／ｒｃ）をＹとするとき、ＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５が０．５以上１以下となる上記（１）〜（４）のいずれかに記載の白血球除去方法。
（６）室温範囲が２０〜２４℃であり、冷蔵温度範囲が１〜６℃である上記（５）に記載の白血球除去方法。
（７）血液が予め１〜６℃で保存されたものであり、濾過は該血液を１〜６℃の条件下で行うものである上記（１）〜（４）のいずれかに記載の白血球除去方法。
（８）血液が２０〜２４℃で保存されたものであり、濾過は該血液を２０〜２４℃の条件下で行うものである上記（１）〜（４）のいずれかに記載の白血球除去方法。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の特定の白血球除去フィルター装置を用いる白血球除去方法によれば、従来技術による白血球除去フィルター装置を用いる白血球除去方法に比べて冷蔵濾過時においては濾過停止による血液回収不良を低減し、濾過時間が短く、かつ室温濾過時においては高い白血球除去性能を得ることができる。従って、室温濾過および冷蔵濾過の両使用条件下で血液から短時間のうちに白血球を高い除去率で除去する白血球除去方法として極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例１〜７、比較例１〜６における室温濾過白血球除去性能と冷蔵濾過時間の関係を示すグラフ
【図２】実施例８、比較例７における白血球除去フィルター装置の断面模式図
【図３】実施例１〜８、比較例１〜７におけるＸ（＝室温濾過時間ｔａ／冷蔵濾過時間ｔｃ）とＹ（＝室温濾過時白血球除去性能ｒａ／冷蔵濾過時白血球除去性能ｒｃ）の関係を示すグラフ
【図４】実施例１〜８、比較例１〜７におけるＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５を示すグラフ
【図５】実施例１〜８、比較例２〜５および比較例７における白血球除去濾材平均繊維直径比とＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５の関係を示すグラフ
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
以下、本発明について具体的に説明する。
本発明において、白血球除去フィルター装置の平均繊維直径とは、以下の手順によって求められる値をいう。先ず、濾材の一部をサンプリングし、走査電子顕微鏡を用いて写真に撮る。サンプリングに際しては、濾材の有効濾過断面積部分を、１辺が０．５ｃｍの正方形によって区分し、その中から６ヶ所をランダムサンプリングする。６区分のうち３区分は上流側の面、残り３区分は下流側の面からサンプリングされ、これらの各区分を拡大倍率２５００倍で観察する。各区分について、サンプル中央部分およびその近傍箇所の写真を撮っていき、その写真に撮られた繊維の合計本数が各区分１００本以上となるまで撮る。このようにして得た写真について、写っている全ての繊維の直径を測定する。ここで直径とは、繊維軸に対して直角方向の繊維の幅をいう。測定した全ての繊維の直径の和を、繊維の数で割った値を平均繊維直径とする。但し、複数の繊維が重なり合って、他の繊維の陰になってその直径が測定できない場合、また複数の繊維が溶融するなどして、太い繊維になっている場合、更に、著しく直径の異なる繊維が混在している場合、等々の場合には、これらのデータは削除する。また、上流側と下流側とで明らかに平均繊維直径が異なる場合には、もはやこれを単一な濾材とは認めない。ここで「明らかに平均繊維直径が異なる」とは、統計的に有意差が認められる場合をいう。この場合は上流側と下流側とを異なる濾材としてとらえ、両者の境界面を見つけた後、両者の平均繊維直径を別々に測定し直す。【００２１】
本発明において、白血球除去フィルター装置の濾材Ａは平均繊維直径が２．０μｍ以上４．０μｍ未満である必要があり、２．０μｍ以上３．５μｍ未満が好ましく、２．０μｍ以上３．０μｍ未満が最も好ましい。濾材Ａには血球成分や血漿タンパクを適度に除去し、かつ目詰まりしにくいことが要求される。４．０μｍ以上では従来の微小凝集塊除去用のプレフィルターに近く、血球成分を除去することが困難であり、逆に２．０μｍ未満では血球成分や血漿タンパクを除去しすぎて、目詰まりを誘発するため不適である。なお、濾材Ａが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合もあるが、この場合、複数の濾材全てについて平均繊維直径が前記範囲に含まれる。【００２２】
また、本発明において、白血球除去フィルター装置の濾材Ｂは平均繊維直径が０．７μｍ以上１．２μｍ以下である必要があり、０．９μｍ以上１．２μｍ以下が好ましく、１．０μｍ以上１．２μｍ以下が最も好ましい。濾材Ｂは濾材Ａで適度に血球成分や血漿タンパクが除かれた後の血液を濾過するので、白血球または白血球及び血小板を高効率で除去することが要求されている。平均繊維直径が１．２μｍを超えると、白血球または白血球及び血小板の除去効率が低下するため不適である。平均繊維直径が１．２μｍを越えても、濾材充填量を増やせば除去効率を上げることができるが、濾材での血液の残留ロスが増えるため不適である。また０．７μｍ未満のものは、もはや安定して繊維布を製造することは難しく、血液の流れ抵抗が高くなり過ぎたり、赤血球濾過時においては溶血が発生しやすくなるなどの問題が生じるので不適である。なお、濾材Ｂが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合もあるが、この場合、複数の濾材全てについて平均繊維直径が前記範囲に含まれる。【００２３】
更に、本発明では濾材Ｂの平均繊維直径を濾材Ａのそれと適度に乖離させることでその機能を効果的、効率的に分担させ、冷蔵濾過時の短い濾過時間と室温濾過時の高白血球除去能の両方をより高度に達成することができる。そのためには、濾材Ｂの平均繊維直径は濾材Ａの１７．５％より大きく５０％未満とする必要があり、好ましくは、３０％以上４８％以下であり、最も好ましくは４０％以上４８％以下である。前述の濾材Ａと濾材Ｂに要求される平均繊維直径の範囲から、濾材Ｂの濾材Ａに対する平均繊維直径比率は１７．５％より大きくなる。逆に当該比率の上限に関しては、５０％以上では濾材Ａ、Ｂの繊維径が近すぎて、機能分担が効果的、効率的にできないため、冷蔵濾過時の短い濾過時間と室温濾過時の高白血球除去性能の両機能を同時に持たせることができず、不適である。濾材Ａと濾材Ｂの平均繊維直径の比率（百分率、％）を求める際、濾材Ａが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合は、平均繊維直径が最小のものを選択し、同様に、濾材Ｂが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合は、平均繊維直径が最大のものを選択し、濾材Ａ、Ｂの比率を求める。また、本発明で規定する濾材Ａは濾材Ｂの上流側に配置されているため、濾材Ｂの下流側にある濾材は濾材Ａに該当しない。【００２４】
濾材Ａ、Ｂの間に濾材Ａ、Ｂの中間的な平均繊維直径を有する濾材Ｃを挿入することも有効である。これは特に濾材Ｂに繊維径が細い繊維状濾材を用いる場合に有効であるが、あくまでも濾材Ａ、Ｂが存在した上で、その補助的な役割を担うべきものである。濾材Ｃの平均繊維直径は濾材Ａ、Ｂの中間であり、よって１．２μｍより大きくかつ２．０μｍ未満であることが好ましい。また、有効濾過部における濾材Ｃの充填重量比は、濾材Ｂの１００％以下が好ましく、５０％以下が更に好ましく、３０％以下が最も好ましい。【００２５】
本発明において、白血球除去フィルター装置の濾材Ａ、ＢおよびＣは、各々単独の剥離可能な繊維層であっても良いし、異なる平均繊維直径を有する他の繊維層と剥離困難な状態に一体化した構造をとることもできる。また、各濾材は前述で規定した平均繊維直径の範囲内であれば、異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成されてもよい。例えば濾材Ａが、平均繊維直径３．９μｍの繊維状濾材Ａ１と２．５μｍの濾材Ａ２から構成されていても良い。この場合、白血球除去フィルター装置の上流から下流に向けて平均繊維直径が細くなるように各濾材を組み合わせることが好ましい。【００２６】
また濾材Ａ、Ｂを組み合わせる際、有効濾過部における濾材Ａの充填重量比が濾材Ｂの２％以上４０％以下であることが好ましく、３％以上３０％以下が更に好ましく、４％以上２０％以下が最も好ましい。２％未満では濾材Ａが少なすぎるか、濾材Ｂが多すぎることになり、結果として濾材Ｂの目詰まり防止が不十分となるか、血液ロスの増加に繋がる傾向にあり、好ましくない。逆に４０％を超えると、濾材Ａが多すぎるか、濾材Ｂが少なすぎることを意味し、夫々血液ロスの増加または白血球除去性能不足の傾向にあり、好ましくない。濾材Ａが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合は、それら複数濾材の充填重量の合計を濾材Ａの充填重量とし、同様に、濾材Ｂが異なる平均繊維直径を有する複数の濾材から構成される場合は、それら複数濾材の充填重量の合計を濾材Ｂの充填重量として濾材Ａの、濾材Ｂに対する重量比（百分率、％）を求める。【００２７】
本発明において、白血球除去フィルター装置は濾材Ａ、ＢおよびＣ以外の濾材を有しても良い。例えば濾材Ａの更に上流に微小凝集塊を補足するための公知のプレフィルターがあっても良いし、濾材Ｂの下流側に血液流路を確保するためのポストフィルターがあっても良い。特に、可撓性容器からなる白血球除去フィルターにおいては、ポストフィルターを配置することは、濾材が血液出口側容器に密着することを防止する上で好ましい。また、濾材Ｂの下流に濾材Ａと同濾材のＡ’や濾材Ｃと同濾材のＣ’があっても良い。更には、濾材が血液入口側と出口側から見て対称的な構造、例えばＡ−Ｂ−Ａ’やＡ−Ｃ−Ｂ−Ｃ’−Ａ’という構造をとることも可能である。このような対称構造の場合、入口側と出口側の識別が不要であり、濾過方向間違いによる性能不良の懸念が無く、生産性に優れたフィルター装置が実現可能である。【００２８】
本発明において、白血球除去フィルター装置を用いて室温（ambient temperature）濾過した場合の濾過時間（ｔａ）と冷蔵（cold）濾過した場合の濾過時間（ｔｃ）の比率（ｔａ／ｔｃ）をＸ、室温濾過時の白血球除去性能（ｒａ）と低温濾過時の白血球除去性能（ｒｃ）の比率（ｒａ／ｒｃ）をＹとするとき、ＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５が０．５以上１以下であることが好ましく、０．５５以上１以下であることが更に好ましく、０．６以上１以下であることが最も好ましい。一般に、冷蔵濾過時は血液粘度が高くて流速が遅くなる一方、フィルター装置による血球の除去性能は高くなる傾向にある。よって冷蔵濾過時間（ｔｃ）は室温濾過時間（ｔａ）より長くなり、冷蔵濾過時白血球除去性能（ｒｃ）は室温濾過時白血球除去性能（ｒａ）より高くなり、Ｘ（＝ｔａ／ｔｃ）とＹ（＝ｒａ／ｒｃ）は共に１以下となる傾向にある。しかし１つのフィルター装置が室温濾過と冷蔵濾過の両使用条件に対して適用可能であるためには、両使用条件下におけるフィルター装置の性能の差が小さいことが必要とされる。つまりＸとＹが共に１に近いフィルター装置でなければ両使用条件に適用できず、ＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５が０．５未満では冷蔵濾過時間の延長およびまたは室温濾過時の白血球除去性能低下の懸念がある。また更にＸ、Ｙ夫々に関して好適な範囲としては、Ｘは０．３以上１以下であることが好ましく、０．４以上１以下であることが更に好ましく、０．５以上１以下が最も好ましい。Ｘが０．３未満では冷蔵濾過時間が室温濾過時間と比べて長過ぎて、血液センター等における濾過業務に支障をきたす可能性が有る。Ｙは０．５５以上１以下が好ましく、０．６以上１以下が更に好ましく、０．６５以上１以下が最も好ましい。Ｙが０．５５未満では室温白血球除去性能不良の可能性がある。【００２９】
なお、本発明でいう冷蔵濾過とは、白血球を含む血液を予め１〜６℃で保存した後、１〜６℃の温度環境下で濾過することをいう。また、室温濾過とは、白血球を含む血液を２０〜２４℃で保存した後、２０〜２４℃の温度環境下で濾過することをいう。【００３０】
本発明において、白血球除去フィルター装置内の濾材Ａ、ＢおよびＣの充填密度は０．１ｇ／ｃｍ３以上０．４ｇ／ｃｍ３以下が好ましく、０．１３ｇ／ｃｍ３以上０．３ｇ／ｃｍ３以下が更に好ましく、０．１５ｇ／ｃｍ３以上０．２５ｇ／ｃｍ３以下が最も好ましい。０．１ｇ／ｃｍ３未満では白血球が接着しやすい部位である繊維と繊維の交絡部が少なく、またフィルター装置製造時の濾材の取り扱い性や性能安定性の面でも問題があり好ましくない。一方、０．４ｇ／ｃｍ３以上では濾材充填密度が高すぎ、血液の流路となる空間が少なくなるため、濾材単位体積あたりの濾過流速が著しく低下する。また、血液を濾材に均等に浸透させ、流れ斑を少なくする為に、国際公開第２００４／０５０１４６号パンフレットにおいて濾材の均一性を示す指標として用いられている厚さ０．３ｍｍ相当の地合指数が、１５以上９０以下であることが好ましく、更に好ましくは１５以上７０以下であり、最も好ましくは１５以上５０以下である。地合指数が９０以上では均一性が悪く、繊維が偏在しているため血液の流れ斑が生じ、単位体積あたりの白血球除去性能が低下し、更には目詰まりが生じやすくなるため著しい濾過時間の延長の恐れがある。一方、地合指数が１５より小さいと、不織布を製造することが難しく、生産効率の点で満足できなくなるので、１５以上が好ましい。【００３１】
なお、充填密度を求める際、硬質容器を使用する場合は、濾材全体を硬質容器の内側の厚み相当の幅に圧縮し、その状態で各濾材の厚みを側面から測定する。また、図２のような可撓性容器を使用する場合は、圧縮されないため、各不織布の厚みに枚数を乗じて濾材の厚みを算出する。硬質容器及び可撓性容器共に、これらの厚みに有効濾過部の面積を乗じて各濾材の体積を求め、濾材の充填重量を該求めた体積で割ることによって充填密度を求める。【００３２】
各々の濾材は白血球除去フィルター装置の容器内に収納される以前に、あらかじめ決められた範囲の厚み、密度になるように予備形成されていても良く、更に各濾材の集合体として一体化された形で予備形成されていても良い。本発明における濾材繊維層の具体例としては、メルトブロー不織布やフラッシュ不織布あるいはスパンボンド不織布、スパンレース不織布、湿式不織布、乾式不織布、等の不織布の他、紙、織布、メッシュなどを挙げることができる。また繊維素材の例を挙げるならば、ポリアミド、ポリエステル、ポリアクリロニトリル、ポリウレタン、ポリビニルホルマール、ポリビニルアセタール、ポリトリフルオロクロルエチレン、ポリ（メタ）アクリレート、ポリスルホン、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリプロピレン、セルロース、セルロールアセテート、麻、綿、絹、ガラス、炭素等何れも適する。【００３３】
また本発明においては、濾材の白血球除去性能や必要に応じて血小板除去能力を高めるために表面改質を行っても良い。また、濾材に白血球を効率良く吸着させ、血小板をほとんど通過させるために表面改質を行っても良い。濾材を有効利用するには血液が浸透し易い方が好ましく、濾材表面を親水性にすることが好ましい。親水性表面の好ましい例としては、非イオン性親水基と塩基性含窒素官能基を含有する表面が挙げられ、該表面部の塩基性窒素原子の含量が０．２重量％以上４．０重量％以下であることが更に好ましい。親水性表面を得る為の親水化手法の例としては、親水性ポリマーコーティング、プラズマ放電処理、電子線照射、放射線グラフト重合等が挙げられる。【００３４】
本発明において、白血球除去フィルター装置に濾材を収容する容器の材質は、硬質性樹脂や可撓性樹脂の何れでも良く、硬質性樹脂の場合、素材はフェノール樹脂、アクリル樹脂、エポキシ樹脂、ホルムアルデヒド樹脂、尿素樹脂、ケイ素樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、ポリウレタン、ポリカーボネート、塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、スチレン−ブタジエン共重合体等が挙げられる。可撓性樹脂の場合、可撓性の合成樹脂製のシート状または円筒状成型物から形成されるのが好ましく、素材は軟質ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリエチレンやポリプロピレンのようなポリオレフィン、スチレン−ブタジエン−スチレン共重合体の水添物、スチレン−イソプレン−スチレン共重合体またはその水添物等の熱可塑性エラストマー、および熱可塑性エラストマーとポリオレフィン、エチレン−エチルアクリレート等の軟化剤との混合物等が好適な材料として挙げられる。好ましくは軟質塩化ビニル、ポリウレタン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリオレフィン、およびこれらを主成分とする熱可塑性エラストマーであり、更に好ましくは軟質塩化ビニル、ポリオレフィンである。【００３５】
また容器の形状は、濾過前の血液の入口と濾過後の血液の出口を有する形状であれば特に限定は無いが、濾材との密着を防止して血液流路を確保するために、容器内面を凹凸状に形成しても良い。特に可撓性容器の場合、血液入口側からの濾過圧力および濾過後血液が落差で回収される場合の陰圧により濾材が血液出口側容器に押し付けられて密着し、血流が阻害される可能性が高いので、血液出口側の内面を凹凸状にすることは効果的である。【００３６】
本発明において、白血球除去フィルター装置は、濾材Ａと濾材Ｂを重ねて充填し、濾材Ａが濾材Ｂの上流になるように配置する。これらの濾材を血液入口または出口となるポートを有する可撓性樹脂シートで挟み、高周波溶着機等を用いて濾材と可撓性シートの周縁部分を一体化溶着させることにより得ることができる。前述したように、濾材Ａ及びＢには複数種類の濾材を積層して用いることもあり、また、濾材ＡとＢの間や、濾材Ａの上流あるいは、濾材Ｂの下流にさらに別の濾材を積層することもある。【００３７】
更に本発明は、以上述べた白血球除去フィルター装置を用いて、白血球を含む血液を濾過し、白血球が除去された血液を得ることを特徴とする白血球除去方法である。また、本方法は室温濾過及び低温濾過のいずれにも用いることができる。本発明で濾過の対象となる血液とは、白血球を含む全血や全血から調製して得られる単一もしくは複数種類の血液成分からなる液体、またはそれらの液体に抗凝固剤や保存液などが添加された液体を総称するものである。具体例としては、全血製剤、赤血球製剤、血小板製剤、血漿製剤、洗浄赤血球浮遊液、解凍赤血球濃厚液、合成血、多血小板血漿、バフィーコートなどが挙げられるが、これらに限定されるものでは無い。具体例の中で特に、白血球を多く含む全血製剤や高粘度で濾過時間の比較的長い赤血球製剤の濾過において、本発明の白血球除去フィルター装置の使用は有用である。
以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はそれらの例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３８】
濾材Ａとして、ポリエチレンテレフタレート（以下ＰＥＴと略す）からなり、平均繊維直径３．９μｍ、目付（単位濾過面積の濾材重量）６０ｇ／ｍ２、比表面積０．７ｍ２／ｇの不織布Ａ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ１を使用した。なお、各濾材の比表面積は０．３ｇの濾材を比表面積計（SHIMADZU  micromeritics  Tri  Star）で測定して求めた。有効濾過面積１．３３ｃｍ２のカラムに有効濾過部充填重量８．０ｍｇ（以下、濾材重量は全て有効濾過部の充填重量）の濾材Ａ１と５８．５ｍｇの濾材Ｂ１を重ねて充填し、Ａ１がＢ１の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ１の平均繊維直径は濾材Ａ１の３０．８％になり、有効濾過部における濾材Ａ１の充填重量比は該濾材Ｂ１の１３．６％になった。
濾過性能評価は、以下の方法により行ったところ、室温濾過時の濾過時間は２４．０分、白血球除去性能は２．８となり、冷蔵濾過時の濾過時間は３７．２分、白血球除去性能は４．１となった。尚、実施例１〜７、比較例１〜６の各フィルター装置の濾材の仕様及び濾過性能評価の結果については表１および図１にまとめて記載した。【００３９】
（濾過性能評価）
濾過性能評価には、以下の様に調製した赤血球製剤を用いた。全血４５０ｍＬを抗凝固剤ＣＰＤ６３ｍＬが入った血液バッグに採血、混和し、遠心分離後上清の血漿を除去し、残った濃厚赤血球に赤血球保存液ＡＳ−１を１００ｍＬ添加し、採血当日に赤血球製剤を調製した。こうして得た赤血球製剤を室温濾過と冷蔵濾過の２条件で上記カラムに濾過した。室温濾過の場合は、上記赤血球製剤を採血翌日まで室温保存後濾過し、冷蔵濾過の場合は赤血球製剤調製後、４℃の冷蔵庫内で保存し、採血から３日後に４℃環境温度下で濾過した。室温、冷蔵濾過共に赤血球製剤を落差５０ｃｍで濾過し、４ｍＬを回収した時点で濾過を終了し、濾過開始から終了までの濾過時間を測定した。白血球除去性能に関しては、下記の式（１）に従って算出した。
白血球除去性能
＝Ｌｏｇ（濾過前白血球濃度（個／μＬ）／濾過後白血球濃度（個／μＬ））  （１）
濾過前の白血球濃度は自動血球計数装置ＳＦ３０００（シスメックス社）を用いて測定し、濾過後の白血球濃度はＬｅｕｃｏＣＯＵＮＴキットおよびＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（共にベクトン・ディッキンソン社）を用いて、フローサイトメトリー法にて測定した。
【実施例２】
【００４０】
濾材Ａとして、平均繊維直径２．５μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．８ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ２を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ１を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ２と５８．５ｍｇの濾材Ｂ１を重ねて充填し、Ａ２がＢ１の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ１の平均繊維直径は濾材Ａ２の４８．０％になり、有効濾過部における濾材Ａ２の充填重量比は該濾材Ｂ１の１３．６％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は２７．６分、白血球除去性能は３．０となり、冷蔵濾過時の濾過時間は４６．８分、白血球除去性能は４．０となった。
【実施例３】
【００４１】
濾材Ａとして、平均繊維直径２．１μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．９ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ３を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．０μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．８ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ２を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ３と５８．５ｍｇの濾材Ｂ２を重ねて充填し、Ａ３がＢ２の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ２の平均繊維直径は濾材Ａ３の４７．６％になり、有効濾過部における濾材Ａ３の充填重量比は該濾材Ｂ２の１３．６％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は３０．８分、白血球除去性能は３．２となり、冷蔵濾過時の濾過時間は６０．０分、白血球除去性能は４．４となった。
【実施例４】
【００４２】
濾材Ａとして、平均繊維直径２．５μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．８ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ２を使用し、濾材Ｃとして、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積１．１ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ１を使用した。前述のカラムに１６．０ｍｇの濾材Ａ２と８．０ｍｇの濾材Ｃ１と４２．６ｍｇの濾材Ｂ１を重ねて充填し、上流からＡ２、Ｃ１、Ｂ１の順番になるように配置した。この時、濾材Ｂ１の平均繊維直径は濾材Ａ２の４８．０％になり、有効濾過部における濾材Ａ２の充填重量比は該濾材Ｂ１の３７．５％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は１８．２分、白血球除去性能は２．６となり、冷蔵濾過時の濾過時間は２９．６分、白血球除去性能は３．５となった。
【実施例５】
【００４３】
濾材Ａとして、平均繊維直径３．０μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．７５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ４を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径０．９μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積２．０ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ３を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ４と５８．５ｍｇの濾材Ｂ３を重ねて充填し、Ａ４がＢ３の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ３の平均繊維直径は濾材Ａ４の３０．０％になり、有効濾過部における濾材Ａ４の充填重量比は該濾材Ｂ３の１３．６％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は３３．５分、白血球除去性能は３．６となり、冷蔵濾過時の濾過時間は６７．３分、白血球除去性能は４．７となった。
【実施例６】
【００４４】
濾材Ａとして、平均繊維直径３．０μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．７５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ４を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径０．７μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積２．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ４を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ４と５８．５ｍｇの濾材Ｂ４を重ねて充填し、Ａ４がＢ４の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ４の平均繊維直径は濾材Ａ４の２３．３％になり、有効濾過部における濾材Ａ４の充填重量比は該濾材Ｂ４の１３．６％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は４０．９分、白血球除去性能は３．８となり、冷蔵濾過時の濾過時間は９３．０分、白血球除去性能は４．８となった。
【実施例７】
【００４５】
濾材Ａとして、平均繊維直径３．９μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．７ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径０．７μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積２．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ４を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ１と５８．５ｍｇの濾材Ｂ４を重ねて充填し、Ａ１がＢ４の上流になるように配置した。この時、濾材Ｂ４の平均繊維直径は濾材Ａ１の１７．９％になり、有効濾過部における濾材Ａ１の充填重量比は該濾材Ｂ４の１３．６％になった。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は３８．８分、白血球除去性能は３．８となり、冷蔵濾過時の濾過時間は８１．３分、白血球除去性能は４．７となった。
【比較例１】
【００４６】
プレフィルターとして、平均繊維直径１２μｍ、目付３０ｇ／ｍ２、比表面積０．２４ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｐ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ１を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇのプレフィルターＰ１と５８．５ｍｇの濾材Ｂ１を重ねて充填し、Ｐ１がＢ１の上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は３２．４分、白血球除去性能は３．３となり、冷蔵濾過時の濾過時間は１４１．５分、白血球除去性能は４．５となった。
【比較例２】
【００４７】
濾材Ｃとして、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積１．１ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ１を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ｃ１と５８．５ｍｇの濾材Ｂ１を重ねて充填し、Ｃ１がＢ１の上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は３３．６分、白血球除去性能は３．４となり、冷蔵濾過時の濾過時間は１６２．８分、白血球除去性能は４．５となった。
【比較例３】
【００４８】
濾材Ｃとして、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積１．１ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ１を使用し、別の濾材Ｃとして、平均繊維直径１．４μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．３ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ２を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ｃ１と５８．５ｍｇの濾材Ｃ２を重ねて充填し、Ｃ１がＣ２の上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は２９．３分、白血球除去性能は２．４となり、冷蔵濾過時の濾過時間は１１６．３分、白血球除去性能は３．４となった。
【比較例４】
【００４９】
濾材Ａとして、平均繊維直径２．５μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．８ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ２を使用し、濾材Ｃとして、平均繊維直径１．４μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．３ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ２を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ２と５８．５ｍｇの濾材Ｃ２を重ねて充填し、Ａ２がＣ２の上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は１３．７分、白血球除去性能は１．７となり、冷蔵濾過時の濾過時間は３３．９分、白血球除去性能は３．３となった。
【比較例５】
【００５０】
濾材Ａとして、平均繊維直径３．０μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．７５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ４を使用し、濾材Ｄとして、平均繊維直径０．５μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積３．４ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇの濾材Ａ４と５８．５ｍｇの濾材Ｄを重ねて充填し、Ａ４がＤの上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は５６．４分、白血球除去性能は４．２となり、冷蔵濾過時の濾過時間は２５０．５分、白血球除去性能は５．０となった。
【比較例６】
【００５１】
プレフィルターとして、平均繊維直径４．１μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．６５ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｐ２を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径０．９μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積２．０ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ３を使用した。前述のカラムに８．０ｍｇのプレフィルターＰ２と５８．５ｍｇの濾材Ｂ３を重ねて充填し、Ｐ２がＢ３の上流になるように配置した。実施例１と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は４７．３分、白血球除去性能は３．５となり、冷蔵濾過時の濾過時間は１８４．７分、白血球除去性能は４．５となった。
【実施例８】
【００５２】
プレフィルターとして、平均繊維直径１２μｍ、目付３０ｇ／ｍ２、比表面積０．２４ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｐ１を使用し、濾材Ａとして、平均繊維直径２．５μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積０．８ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ａ２を使用し、濾材Ｃとして、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積１．１ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．１μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．６ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ３を使用した。上流から順番にＰ１−Ａ２−Ｃ１−Ｂ３の順に重ね、更にこの下流側にＣ１と同濾材のＣ１’、Ａ２と同濾材のＡ２’、Ｐ１と同濾材のＰ１’を重ね、全体としてＰ１−Ａ２−Ｃ１−Ｂ３−Ｃ１’−Ａ２’−Ｐ１’という対称構造の濾材を作製した。この濾材を血液入口または出口となるポートを有する可撓性塩化ビニル樹脂シートで挟み、高周波溶着機を用いて濾材と可撓性シートの周縁部分を一体化溶着させ、図２に示す断面構造を有する有効濾過面積５６ｃｍ２の白血球除去フィルター装置を作成した。この時、濾材Ｂ３の平均繊維直径は濾材Ａ２の４４．０％になり、有効濾過部における濾材Ａ２の充填重量比は該濾材Ｂ３の６．８％になった。濾過性能評価を以下の方法により行ったところ、室温濾過時の濾過時間は１３分、白血球除去性能は４．０となり、冷蔵濾過時の濾過時間は２５分、白血球除去性能は４．５となった。なお、実施例８、比較例７の各フィルター装置の仕様及び濾過性能評価の結果については表２にまとめて記載した。【００５３】
（濾過性能評価）
濾過性能評価には、以下の様に調製した赤血球製剤を用いた。全血４５０ｍＬを抗凝固剤ＣＰＤ６３ｍＬが入った血液バッグに採血、混和し、遠心分離後上清の血漿を除去し、残った濃厚赤血球に赤血球保存液ＡＳ−１を１００ｍＬ添加し、採血当日に赤血球製剤を調製した。こうして得た赤血球製剤を室温濾過と冷蔵濾過の２条件で上記フィルター装置に濾過した。室温濾過の場合は、上記赤血球製剤調製当日に室温下で濾過し、冷蔵濾過の場合は赤血球製剤調製後、４℃の冷蔵庫内で保存し、採血から３日後に４℃環境温度下で濾過した。室温、冷蔵濾過共に落差１１０ｃｍの自然落差で濾過し、濾液を３００ｍＬ回収した時点で濾過を終了し、濾過開始から終了までの濾過時間を測定した。白血球除去性能に関しては、実施例１と同様に算出した。
【比較例７】
【００５４】
プレフィルターとして、平均繊維直径１２μｍ、目付３０ｇ／ｍ２、比表面積０．２４ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｐ１を使用し、濾材Ｃとして、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ２、比表面積１．１ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｃ１を使用し、濾材Ｂとして、平均繊維直径１．１μｍ、目付４０ｇ／ｍ２、比表面積１．６ｍ２／ｇのＰＥＴ不織布Ｂ３を使用した。上流から順番にＰ１−Ｃ１−Ｂ３の順に重ね、更にこの下流側にＣ１と同濾材のＣ１’、Ｐ１と同濾材のＰ１’を重ね、全体としてＰ１−Ｃ１−Ｂ３−Ｃ１’−Ｐ１’という対称構造の濾材を作製した。この濾材を用いて、実施例５と同様の白血球除去フィルター装置を作成した。実施例７と同様の方法にてフィルター装置の濾過性能評価を行った結果、室温濾過時の濾過時間は１６分、白血球除去性能は４．２であったが、冷蔵濾過時は濾過時間の大幅な延長が見られて７８分を要し、白血球除去性能は４．５であった。
【００５５】
実施例１〜８および比較例１〜７の結果に関して、Ｘ（＝室温濾過時間ｔａ／冷蔵濾過時間ｔｃ）とＹ（＝室温濾過時白血球除去性能ｒａ／冷蔵濾過時白血球除去性能ｒｃ）の関係を図３にまとめた。比較例はＸまたはＹが低値であるのに比べて、実施例はＸ、Ｙが平均的に高値であった。これをＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５で示すと、図４のようになり、実施例は比較例に比べて顕著に高値を示した。
また、実施例１〜８、比較例２〜５および比較例７の結果に関して、白血球除去濾材の平均繊維直径比（百分率、％）とＸとＹの相乗平均（Ｘ×Ｙ）０．５の関係を図５に示した。図５における白血球除去濾材の平均繊維直径比は、実施例においては濾材Ａに対する濾材Ｂの平均繊維直径の比率であり、比較例においては２種類の白血球除去濾材のうち太径濾材に対する細径濾材の平均繊維直径の比率である。（比較例１および比較例６は白血球除去濾材が１種類のため比率は算出していない。）この結果、白血球除去濾材の平均繊維直径比が５０％未満の実施例において、ＸとＹの相乗平均が顕著に高値を示した。比較例５は平均繊維直径比が１６．７％であったが、細径濾材の繊維径が細すぎるために、ＸとＹの相乗平均は実施例より低値を示した。
【００５６】
以上のように、実施例においては本発明で示した特定の繊維径を有する濾材Ａと濾材Ｂを組み合わせ、その機能を分担することで、冷蔵濾過時の濾過時間の短縮と室温濾過時の白血球除去性能の向上を同時に達成することができたが、比較例においては、実施例に比べて冷蔵濾過時の濾過時間が長い、若しくは室温濾過時の白血球除去性能が低い結果となった。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
本発明の白血球除去方法は、室温濾過においても、冷蔵濾過においても輸血用の血液から微小凝集塊、および白血球または白血球と血小板を効率的に除去し、かつ従来技術より短時間で濾過を終了させることが可能であるため、特に血液センター等における血液製剤の保存前白血球除去において極めて有用である。
【００５８】
【表１】
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【００５９】
【表２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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