(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量のサリドマイドと治療有効量の非ステロイド系抗炎症剤とを含む血管形成抑制用組合せ医薬であって、前記非ステロイド系抗炎症剤がスリンダックである、血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項２】
血管形成依存性疾病の治療のための、請求項１記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項３】
前記血管形成依存性疾病が癌である、請求項２に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項４】
前記血管形成依存性疾病が血液腫瘍である、請求項２に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項５】
前記血管形成依存性疾病が白血病である、請求項２に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項６】
前記サリドマイドが経口投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項７】
前記サリドマイドの投与量が０．１〜３００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項８】
前記サリドマイドの投与量が０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである、請求項７に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項９】
前記サリドマイドの投与量が１〜１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである、請求項８に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。
【請求項１０】
前記サリドマイドが１日１回投与される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の血管形成抑制用組合せ医薬。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
血管形成の抑制のための方法と組成物関係出願 本願は、1996年11月5日に出願された米国プロヴィジョナル・アプリケーション・シリアル番号60/028,708号に基づく優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、人間又は動物における望ましくない血管形成を妨げるための方法及び組成物に関する。より詳しくは、本発明は、サリドマイドや関係する化合物のような化合物の投与によって、血管形成に依存する又は関連する病気において特に望ましくない血管形成を妨げるための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ここにおいて用いるように、「血管形成」とは、組織又は器官への新しい血管の生成を意味する。通常の生理的な状態では、人間又は動物は、大変特定の限定された状態においてのみ血管形成を経験する。例えば、血管形成は、通常、怪我の治癒、胎児及び胚子の発達、及び黄体、子宮内膜そして胎盤の形成において見られる。血管形成のコントロールは、血管形成刺激剤及び抑制剤の大変規制された系である。血管形成のコントロールは、ある状態において変えられているのが見られ、多くの場合は、病気に関係した病理学上の障害がコントロールされない血管形成に関係している。
【０００４】
コントロールされた及びされない血管形成は共に同様に進行すると考えられる。内皮細胞と血管周囲細胞は、基底膜に囲まれ、毛細血管を形成する。血管形成は、内皮細胞と白血球によって開放された酵素による基底膜の侵食で始まる。
【０００５】
内皮細胞は、血管の内腔を内張りするが、次いで基底膜を通って突き出る。血管形成刺激物は、内皮細胞がその侵食された基底膜を通って移動するよう誘導する。移動細胞は、親血管から「新芽」を出し、そこにおいて内皮細胞は有糸分裂を経て増殖する。内皮新芽は毛細血管ループを形成するために互いに結合し、新たな血管を形成する。病気の状態では、血管形成の防止により、新たな微細血管システムの侵入により引起こされる損傷を避けることができる。
【０００６】
永続する規制されない血管形成は、病気状態、腫瘍転移及び内皮細胞による異常成長の多様において起こり、これらの状態において見られる病理上の損傷をもたらす。規制されない血管形成による多様な病理上の状態は、血管形成依存性又は血管形成関係疾病として共にグループ化されてきた。血管形成プロセスのコントロール働きかける治療法は、これらの疾病の停止又は緩和に通じることができる。
【０００７】
血管形成によって仲介される疾病の一つの例は、眼新生血管形成病である。この病気は、網膜や角膜のような眼の構造への新しい血管の侵入によって特徴づけられる。それは、盲目になる最も一般的な原因であり、およそ２０の眼の病気が関与している。年齢に関係する筋肉変性において、関係する視覚上の問題は、網膜色素上皮の下の線維状組織の増殖と共にブルッフ膜における欠陥を通した脈絡毛細血管の内殖によって引起こされる。血管形成損傷は、また、糖尿病網膜症、未熟児網膜症、角膜移植拒絶反応、新生血管性緑内障及び水晶体後方線維増殖症と関連している。角膜新生血管形成に関係する他の疾病は、限られることなく、流行性角結膜炎、ビタミンA欠乏症、コンタクトレンズ過度使用症、アトピー性角膜炎、上周辺角膜炎、翼状爪膜角膜炎乾燥症、スジョグレン（sjogren's）症候群、酒さ性座瘡、フィレクテニュロシス(phylectenulosis)、梅毒、ミコバクテリア感染、リピド変性症、薬品熱傷、細菌性潰瘍、菌性潰瘍、単純疱疹感染、帯状疱疹感染、原
虫感染、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン周辺変性症、周辺角質溶解、リユウマチ様関節炎、全身狼瘡、多発性動脈炎、外傷、ウェーグナー類肉腫症、強膜炎、スティーブン−ジョンソン症候群、放射状角膜切開、類天疱瘡そして角膜移植拒絶を含む。網膜／脈絡膜新生血管形成に関連する疾病は、限られることなく、糖尿病網膜症、筋肉変性、鎌状赤血球貧血、類肉腫、梅毒、弾性線維偽性黄血腫、パジェット病、静脈閉鎖、動脈閉鎖、頸動脈障害病、慢性ブドウ膜炎／ヴィトリティス(vitritis)、ミコバクテリア感染、ライム病、全身狼瘡紅斑症、未熟児網膜症、イールズ病、ベーチェット症候群、網膜炎又は脈絡膜炎を引起こす感染、想定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、オプティカル・ピット、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラズマ病、外傷そしてポストーレーザー合併症を含む。他の病気は、限られることなく、ルベオーシス（アングルの新生血管形成）に関連する病気及び増殖性硝子体網膜症の全ての型を含む線維血管又は線維組織の異常増殖によって引起こされる病気を含む。
【０００８】
血管形成が関係すると信じられているもう一つの病気は、リュウマチ様関節炎である。関節の滑液膜ライニングにおける血管は、血管形成を経験する。新たな血管ネットワークの形成に加えて、内皮細胞は、パンヌス成長と軟骨破壊に導く因子と反応性の酸素種を開放する。血管形成に関わるその因子は、リュウマチ様関節炎の慢性的炎症状態へと活発に寄与し、さらに、その状態維持に貢献する。
【０００９】
血管形成に関連する因子は、また、変形性関節症においても役割を果たす。血管形成に関係する因子による軟骨細胞の活性化は、関節の破壊に寄与する。後の段階において、血管形成因子は、新しい骨の形成を促進するであろう。骨の破壊を妨げる治療介入は、病気の進行を止め、関節炎で苦しむ人に苦痛軽減を与えることができるであろう。
【００１０】
慢性的な炎症には、また、病理学上の血管形成がかかわっているかもしれない。潰瘍性大腸炎やクローン病のような病気の状態は、新たな血管の炎症組織への内部成長と共に組織上の変化を表す。バルトネラ症−南アフリカで発見された細菌性感染−は、血管内皮細胞の増殖によって特徴付けられる慢性段階に結果としてなりうる。血管形成に関連したもう一つの病理学上の役割は、アステローム性動脈硬化症において見られる。血管の内腔に形成される斑は血管形成刺激性活動を有していることを示してきた。
【００１１】
幼児期に最も頻繁に起きる血管形成病の一つは、血管腫である。大抵の場合、腫瘤は良性であり、介入なしに退行する。よりひどい場合は、腫瘤は大きなスカスカで液体が浸透できる形態になり、臨床合併症を引起こす。血管腫の全身形態−血管腫症−は、高い死亡率を有する。現在の治療法では治療できない治療耐性血管腫が存在する。
【００１２】
血管形成は、また、オスラー−ウェーバー−ランジュ症候群のような遺伝病又は遺伝性出血性毛細管拡張において見られる損傷の起因となることがある。これは、多数の小さな血管腫、血液の腫瘍又はリンパ管によって特徴付けられる遺伝病である。血管腫は、皮膚や粘膜に見られ、しばしば鼻出血（鼻血）又は胃腸の出血に伴われ、時に肺又は肝臓の動静脈瘻と共にある。
【００１３】
血管形成は、ソリッド腫瘍形成と転移において顕著である。血管形成因子は、横紋筋肉腫、網膜芽腫、エウィング肉腫、神経芽腫そして骨肉腫のようないくつかのソリッド腫瘍と関連して見られてきた。腫瘍は、養分を供給し細胞老廃物を取除くための血液供給無しに大きくなることはできない。血管形成が重要な腫瘍は、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマそして化膿性肉芽腫のような良性腫瘍とソリッド腫瘍を含む。血管形成の防止は、これらの腫瘍の成長や腫瘍の存在による動物に対する結果として生じる損傷を止めることができるであろう。
【００１４】
血管形成は、白血病のような血液から生まれた腫瘍、即ち、通常、貧血、悪化血液凝固、リンパ節並びに肝臓及び脾臓の拡大に伴われる白血球細胞の無制限な増殖が生じる骨髄における如何なる種々の急性又は慢性の新生細胞病と関連してきたことに注意すべきである。血管形成は、白血病のような腫瘍を生じる骨髄中の異常性において役割を果たすと信じられている。
【００１５】
血管形成は、腫瘍転移の2つの段階において重要である。血管形成刺激が重要な最初の段階は、腫瘍細胞が血液流に入り体中を循環することを許可するような腫瘍の血管形成にある。腫瘍細胞が第一のサイトを離れ、第二の転移サイトに落ち着いた後、血管形成が、新たな腫瘍が成長し広がる前に、生じなければならない。
【００１６】
腫瘍の維持と転移における血管形成の役割に関する知識は、乳癌に対する予後徴候インディケーターを導いてきた。第一の腫瘍において見られる新生血管形成の量は、侵入性乳癌における最も集中的な新生血管形成の領域において微細血管密度を計数することにより決定される。高いレベルの微細血管密度は、腫瘍再発と相互に関係することが発見された。治療法による血管形成の制御は、腫瘍の再発停止をおそらく導くことができるであろう。
【００１７】
血管形成は、また、再生産と傷害治癒のような通常の生理的なプロセスにも関わっている。血管形成は、排卵においてそして受精後の胞胚の着床においても重要な段階である。血管形成防止は、無月経を誘発し、排卵を妨げ又は胞胚による着床を妨げるために用いることができるであろう。
【００１８】
傷害と治癒においては、過度の修理又は線維増殖が外科手術過程の有害な副作用となり得、血管形成によって引起こされ又は悪化させられるかもしれない。癒着はしばしば手術の合併症になり、小腸閉塞のような問題につながる。
【００１９】
種々の化合物が血管形成を妨げるために用いられてきた。テイラーら（Taylor et al.）は、血管形成抑制のためにプロタミンを用いてきた。テイラーら、ネイチャー（Taylor
et al.，Nature）297:307(1982)参照。プロタミンの毒性は、治療法としての実際の使用を限られたものにする。フォークマンら（Folkman et al.）は、血管形成のコントロールのためにヘパリンとステロイドの使用を開示してきた。フォークマンら、サイエンス（Folkman et al.，Science）221:719(1983)及び米国特許番号5,001,116と4,994,443参照。テトラヒドロコルチソルのような糖質及び鉱質コルチコイドを欠いているステロイドは、血管形成抑制剤として見出されてきた。
【００２０】
ボビン硝子体液からの4kDa糖タンパク質や軟骨由来因子のような動物内に内生的に見つけられたたの因子は、血管形成を抑制するために用いられてきた。インターフェロンのような細胞因子は、血管形成を抑制する。たとえば、インターフェロンａ又はヒト・インターフェロンβは、ヒト新生細胞によって刺激されるマウス真皮における腫瘍−誘因血管形成を抑制することが示されてきた。インターフェロンβは、また、アロジェニック脾臓細胞により誘発される血管形成の有効な抑制剤でもある。シッドキーら、キャンサー・リサーチ（Sidky et al.，Cancer Research）47:5155−5161(1987)参照。ヒト組換え型インターフェロンαは、血管形成誘発疾病であるが、肺の血管腫症の治療において成功裡に用いられたと報告された。ホワイトら、ニュー・イングランド J．Med.（White et al.，New England J.Med.）3201197-1200(1989)参照。
【００２１】
血管形成抑制に用いられてきた他の薬剤は、アスコルビン酸エーテルや関係化合物が含まれる。日本特許公開公報、昭和58年−第131978号参照。硫酸塩化された多糖類DS 4152も血管形成抑制性を示す。日本特許公開公報、昭和63年−第119500号参照。菌性の製品で
あるフマギリンは生体外で有効な血管形成剤である。
【００２２】
この化合物は生体外で有毒であるが、合成誘導体であるAGM 12470は、コラーゲンII関節炎の治療のために生体外で用いられてきた。フマギリン及びO−置換フマギリン誘導体は欧州特許庁公開番号0325199A2と0357061A1に開示されている。
【００２３】
カップランらのPCT出願番号WO 92/14455は、毒性のある濃度のTNF-aと共に患者にサリドマイド又はサリドマイド誘導体を投与することにより異常濃度のTNF-aをコントロールするための方法に言及している。
【００２４】
上記化合物は、局所又は注射による治療法である。従って、一般的な血管形成抑制剤としての使用についての欠陥があり、十分な効果の欠除している。例えば、過度の傷害治癒防止において、体内器官は、体腔内に含まれる種々の構造における切開に関わっている。これらの傷害は、血管形成抑制剤の局所適用を受けることはできない。局所デリバリ・システムは、また、内部損傷に適用できない高頻度ドレッシングに関わっており、表面傷に対してデリケートな肉芽形成組織への感染やダメージの危険性を増加させる。
【００２５】
従って、血管形成を抑制できかつ簡単に投与できる方法及び組成物が必要である。単純で効果的な治療法は、経口によるものである。もし経口により血管形成抑制剤が与えられるならば、上述の多くの種類の病気、及び他の血管形成依存性病変が容易に治療されるであろう。最適の投与量は、患者が自己管理できる形で配給されうるであろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２６】
本願の発明によれば、望ましくない血管形成を抑制するに効果的な組成物と方法が提供される。これらの組成物は、経口を含む異なるルートで容易に投与され、安全でありかつ内部の部位に血管形成抑制剤を供給する服用量にして与えることができる。本願の発明は、血管形成を抑制するのに十分な服用量で反血管形成化合物を含む組成物を投与することにより望ましくなく制御されない血管形成により仲介される哺乳動物の病気の治療法を提供するものである。
本願の発明は、また、エホキシド・グループを含む血管形成抑制化合物をも含む。これらの血管形成抑制化合物は、単独で又はエポキシド・ヒドロラーゼ抑制化合物と共に、ヒト又は動物に投与されることができる。
本願の発明は、また、反血管形成化合物と消炎化合物とを含む組成物をも含む。消炎化合物はステロイド又は非ステロイド消炎化合物であることができる。NSAIDsと呼ばれる非ステロイド消炎化合物が好ましい。
本願の発明は、黄斑変性のようなある眼の新生血管病の治療において特に有効である。本発明の一部と考えられる化合物は望ましくは経口で患者に投与され、それによって病気の進行が停止されうる。本発明を用いることで治療できる他の病気は、糖尿病網膜症、新生血管緑内障及び水晶体後方線維増殖症である。
従って、本発明の目的はヒト又は動物における望ましくない血管形成を抑制する化合物及び方法を提供することである。
【００２７】
本発明の更なる目的は、その化合物の経口投与による血管形成抑制のための組成物を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成によって仲介される病気の治療法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、黄斑変性のための治療法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、糖尿病と関連しない形態を含む増殖性硝子体網膜症の全ての形態に対する治療法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、ソリッド腫瘍の治療法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、白血病のような血液から生じる腫瘍の治療のための組成物及び方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管腫の治療のための組成物と方法を提供することである。本発明のもう一つの目的は、水晶体後方線維増殖症の治療のための組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、乾癬の治療のための組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、カポジ肉腫の治療のための組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、クローン病の治療のための組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、糖尿病網膜症の治療のための組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための消炎剤とサリドマイドを含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のためのステロイド消炎剤とサリドマイドを含む組成物と方法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための非ステロイド消炎剤とサリドマイドを含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための消炎剤と血管形成抑制化合物を含む組成物と方法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のためのステロイド消炎剤と血管形成抑制化合物を含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための非ステロイド消炎剤と血管形成抑制化合物とを含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のためのステロイド消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、血管形成依存病の治療のための非ステロイド消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、癌の治療のための消炎剤とサリドマイドを含む組成物と方法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、癌の治療のためのステロイド消炎剤とサリドマイドを含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、癌の治療のための非ステロイド消炎剤とサリドマイトとを含む組成物と方法を提供することてある。
本発明のもう一つの目的は、癌の治療のための消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、癌の治療のためのステロイド消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明の更なるもう一つの目的は、癌の治療のための非ステロイド消炎剤を含む組成物と方法を提供することである。
本発明のこれら及び他の目的、特徴、有利な点は、以下に続く開示された具体例の詳細な表現及び添付されたクレームを精査した後に明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００２８】
本発明は、血管形成に仲介される病気の治療のための組成物と方法を含む。本発明の一つの具体例は、望ましくない血管形成を抑制するためにここにおいて開示されたようなサリドマイド又はサリドマイド代謝物の使用である。本発明は、また、発達中の胎児の肢異
常を引き起こし、反血管形成機能を持つ化合物をも含む。本発明は、反血管形成性であるテラトジェン化合物の効果的な量を含む組成物を、望ましくない血管形成についてヒト又は動物に投与するステップを含むヒト又は動物における望ましくない血管形成の治療方法を含むものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
本発明に従って用いられうる化合物は、以下の一般的な式に含まれる化合物を含む。反血管形成特性を持つ化合物の例は、以下の(A),(B),又は(C)の３つの式の一つを持つ。
【化１】
0005066505.tif 000002
上式(A),(B),及び(C)において、R1，R2，R3及びR4は、-H；＝O；直鎖及び分岐鎖のアルカン、アルケン、アルキン；環状のアルカン、アルケン及びアルキン；環状と非環状の組合せであるアルカン、アルケン及びアルキン；非環状、環状、非環状／環状組合せ部分と結合するアルコール、アルデヒド、ケトン、カルボン酸、エステル又はエーテル部分；アザ(aza)；アミノ(amino)；−XOn又は−O−XOn、ここでX=Nでｎ＝２：X=Sでｎ＝２又は３；又はX=Pでｎ＝１〜３；そしてハロゲン；R5，R6及びR7はそれぞれ独立に以下から選ばれる：
【化２】
0005066505.tif 000003
又は−O−ここでYは選択的でありR1に対して上記のように定義されたのと同様である；そしてR10はR1に対して上記のように定義されたのと同様であり、又はYが存在しないときはR10＝０である；そしてＲ8は
【化３】
0005066505.tif 000004
である；そしてR9は、式D),E),F),G),そしてH)を持つ部分である；
【化４】
0005066505.tif 000005
ここで、R12−R17は独立してR5に対して上記に定義されたと同様である；ここでＲ11は
【化５】
0005066505.tif 000006
である；
【化６】
0005066505.tif 000007
ここで、R18，R19そしてR20はそれぞれ独立して以下から選ばれ、
【化７】
0005066505.tif 000008
ｎ＝１−４である。
【００３０】
従って、本発明のもう一つの面は、血管形成を抑制するのに十分な投与量において上記化合物の一つを含む治療組成物の投与による哺乳動物の血管形成を抑制することを特徴とする。
【００３１】
望ましい実施態様では、化合物は式B)を持ち、ここでR5とR5は次からなるグループより選択され、
【化８】
0005066505.tif 000009
R9はF)又はH)の式を持ち、R14とR16は次からなるグループより選択され、
【化９】
0005066505.tif 000010
ここで、R21は−H、−CH3又は−OHである。本発明のこの特徴によると特定の好ましい化合物は、サリドマイド、その前駆体、代謝物そして類似体を含む。特有の類似体は、EM-１２、N−フタロイル−DL−グルタミン酸（PGA）又はN−フタロイル−DL−グルタミン酸無水物を含む。この種類のメンバーである化合物の例は、図１から３にリストしてある。本発明の部分として含まれる化合物は、図１から３に示されるそれら化合物に限られず、ここに一般式で表される種類のメンバーである全ての他の化合物も含むことは理解されるべきである。
【００３２】
反血管形成特性を有する次の式の化合物：
【化１０】
0005066505.tif 000011
ここで、R22とR23は(独立して)、−H、−F、−Cl、−Br、−I、−CH3又は−CH2−CH3；そしてR24は、−H、−CH3又は−CH2−CH3である。
【００３３】
本発明は、また、血管形成を抑制するに十分な投与量において上記式に従った化合物を投与することにより哺乳動物における血管形成を抑制することを特徴とする。この種類のメンバーである特定の化合物の例は、図４にリストされている。
【００３４】
次の一般的な式を有するサリドマイドの血管形成抑制剤の加水分解生成物は、本発明を実施するにおいて用いることができる：
【化１１】
0005066505.tif 000012
ここで、Xは、上記に定義されたようなR6又は
【化１２】
0005066505.tif 000013
そしてR25及びR26は、独立して、−OH、−H又はNH2で、ｎ＝１から４である。そのような化合物の例は図５に示してある。
【００３５】
次のような一般式を持つ血管形成抑制化合物は、本発明を実施するにおいて用いることができる：
【化１３】
0005066505.tif 000014
ここで、Rは水素、炭素数１から６のアルキル・ラジカル、フェニル・ラジカルそしてベンジル・ラジカルからなるグループから選ばれ、R'はフタルイミド・ラジカル及びコハク酸イミド・ラジカルからなるグループから選ばれ、ここで、XはCH2又はC=Oであり、ここで、R''はH、−CH2CH3、−C6H5、−CH2C6H5、−CH2CH=CH2又は
【化１４】
0005066505.tif 000015
である。そして、この化合物の加水分解生成物であって、R''はHであり、ピペリディノ環又はピペリディノ環とイミド環の両者は加水分解される生成物である。
【００３６】
本発明の部分と考えられるもう一つのセットの化合物は、サリドマイド、EM-１２及びEM-１３８のエポキシドである。代表的なエポキシド化合物を以下に示す：
【化１５】
0005066505.tif 000016
【００３７】
エポキシドはベンゼン環の６，１のサイト、１，２のサイト、２，３のサイト、３，４のサイト、又は４，５のサイトに付くことができることは理解されるべきである。
【００３８】
サリドマイド、EM-１２及びEM-１３８のエポキシドは、加水分解されて次の化合物になりうる：
【化１６】
0005066505.tif 000017
【００３９】
水酸基は、ベンゼン環の１，２，３，４，５および６位の炭素に付くことができることは理解されるべきである。また、上記化合物の１，２，３，４，５および６位の炭素の内の２ヶ所に２つの水酸基が位置するところの２水酸基化合物が本発明の一部と理解される。エポキシド、エポキシドの加水分解生成物そしてサリドマイドの加水分解生成物は、全て本発明の一部と理解される。
【００４０】
エポキシドは、エポキシド・ヒドロラーゼとして知られる一群の酵素によって加水分解されることは知られている。エポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤である化合物類がある。これら化合物の例は、バルプロミド（２−プロピルペンタアミド）及びバルプロ酸（２−プロピルペンタン酸）である。エポキシドは重要な血管形成抑制剤であるため、本発明の一部として、エポキシド・ヒドロラーゼとの組合せでここに述べられた血管形成抑制化合物の何れかを含む組成物は理解される。エポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤は、共に若しくは逐次ヒト若しくは動物に投与されることができる。エポキシド基は、いくつかの血管形成抑制剤に対し共通する重要な置換基であるようである。エポキシドを含む如何なる血管形成抑制剤の活性を高めるためにエポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤を使用することは、本発明の一部と理解される。例えば、エポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤は、以下のエポキシド含有反血管形成化合物と共に投与され得る：AGM １４７０、エポニミシン、f/２０１５，fr/１１１１４２及びfr/１８４８７と名づけられるスコレコバシディウム・アレナリウムの微生物の代謝物。オイカワ、Biochem Biophys．Res．Comm，Vo1．８１：１０７０(１９７１)、オツカ、J．Microbial．Biotech.，Vol．１：１６３(１９９１)参照。
【００４１】
TNF-aの高濃度又は有毒レベルによって仲介される病気の治療としてエポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤と共に又は伴なわず、血管形成抑制剤を含むエポキシドの使用は、本発明の態様として理解される。TNF-aは、投与量依存性の毒性を示すとみなされてきた。もし、長期間低いレベルで存在すると、TNF-aは、悪液質になりうるであろう。悪液質は、癌、エイズの日和見感染、炎症、寄生虫症、結核そして高投与量IL-２療法のような慢性病の過程において起きる一般的な重量減と体力消耗である。血管形成抑制剤を含むエポキシドは、エポキシド・ヒドロラーゼ抑制剤を伴うかどうかに関わらず、敗血症性ショック、
ハンセン病そして移植組織対宿主疾のような病気を治療するにおいてもまた効果的である。
他の態様は、本発明の範囲内である。例えば、他の肢異常誘因化合物は、本発明に従って、用いられうる。例えば、４−メチルフタル酸、ピロドキシン、バソプレシン、アセタゾールアミド又は次の式を持つ化合物である(ここで、R=H、−OH又は−CH3)：
【化１７】
0005066505.tif 000018
【００４２】
テトラジェン、バルプロ酸(２−プロピルペンタン酸)ようなもの、リチノイド、シス−リチノ酸のようなもの、リファムピンである他の化合物もまた、本発明に従って用いられる。
【００４３】
要約すると、望ましい化合物は、テラトジェンのような、より詳しくは、肢異常を引起こすサリドマイドの類似体、加水分解生成物、代謝物及び前駆体と同様に、サリドマイドである。しかしながら、本発明の一部とみなされるにはテラトジェン作用と血管形成抑制活動の両方が必要とは限らないことは理解されるべきである。肢異常誘因化合物は、ヘルム（Helm，Arzneimittle-forschung，31(i/6):941-949(1981)）の一般的な手順によって確認されうる。この手順には、生体外でその化合物にさらされた後、ウサギが試験されている。それら化合物は、一般に購入でき、例えば、Andrulis Pharmaceuticals，Beltsville，MDから又は既知の手順に従って合成できる。本発明の化合物は、エナチオマーとして存在することができ、エナチオマーのラセミ混合物又は分離エナチオマーは全て本発明の範囲内にあると見なされることは理解されるべきである。
【００４４】
本発明の一部と理解される化合物の多くは、上記に特定したような化合物の光学的に活性なエナチオマーとして豊富であることができる。特に、Blaschkeは、Sエナナチオマーがこれらの化合物の肢異常生成効果に対して不相応に要因となると報告している。一般に、Blaschke、Arzneimittelforschung 29:1640−1642(1979)参照。上記記述項目は、一般に、関心のある化合物の光学的に活性な化合物の調整できる手順を記述する。Shealy et al.，Chem．Indus．1030(1965)及びCasini et al.，Farmaco Ed．Sci．19:563(1964)参照。
別の具体例では、本発明は、また、上述のように他の血管形成抑制化合物と組合わせて又は単独で消炎化合物を投与することにより血管形成依存性疾病の治療及び血管形成の抑制を含むのもである。これらの消炎化合物は、ステロイド若しくは非ステロイド消炎剤（NSAIDs）であってよい。本発明において用いられるステロイドの例は、限られることなく、コルチソン、コルチソル、コルチコステロン、ヒドロコルチソン、ヒドロコルチソル、プレドニソン、プレドニソルン、デキサメタソン、ベクロメタソン、ベタメタソン、モメタソン、モメタソン・フロアテ、ブデソニド、トリアムシノロン・アセトニド、そしてフルチカソンを含む。望ましいステロイドは、プレドニソン、ヒドロコルチソン、コルチソル、デキサメタソンそしてベクロメタソンである。特に望ましいステロイドは、ヒドロコルチソン、デキサメタソンそしてベクロメタソンである。
【００４５】
本発明で使用してよいNSAIDsの例は、限られることなく、アスピリン、アセトミノフェン、イブプロフェン、エスクレチン、フェニドン、ケルセチン、ケトプロフェン、ノルジヒドログイアレト酸(NDGA)、スリンダック、スリンダック・スルフォン、スリンダック硫
化物、インドメタシン、NS-398(シクロオキシゲナーゼ−2抑制剤)、シクロオキシゲナーゼ−1抑制剤、メチルヘプチル・イミダゾール、ナトリウム・フレグレレート、SKF525AHCL、トロンボキサン抑制剤、トラドール、エカサ、サルサレート、ジフルニサル、メフェナム酸、ナプロキセン、ナトリウム・ナプロキセン、フロクタフェニン、メクロフェナメート、フェニルブタゾン、オキシフェンブタソン、ジクロフェナック、エトドラック、フェノプロフェン、フルフェナム酸、フルルビプロフェン、ピルプロフェン、トルメチン、アパゾン、フェンブフェン、ナブメトン、オキサプロジン、ピロキシカム、サリシレート及びテノキシカムを含む。望ましい、NSAIDsは、スリンダック、スリンダック・スルフォン、スリンダック硫化物、インドメタシン、NS-398、メチルヘプチル・イミダゾール、ナトリウム・フレグレレートそしてSKF525AHCLである。特に望ましいNSAIDsは、インドメタシンとスリンダックである。
【００４６】
スリンダックは、(Z)−５−フルオロ−２−メチル−１−[[４−(メチル−スルフィニル)フェニル]メチレン]−1H−インデン−３−アセチック・アッシド又はシス−５−フルオロ−２−メチル−１−[ｐ−（メチルスルフィニル）ベンジリデン]インデン−３−アセチック・アッシドを含むが、以下の構造を持つ：
【化１８】
0005066505.tif 000019
【００４７】
そのような化合物は、血管形成依存性疾病を治療するために用いられる。そのような化合物は、癌のような血管形成依存性疾病を治療するために他の血管形成抑制化合物と組合わせ若しくは単独で使用されうる。
【００４８】
上述の化合物は、本技術分野の通常の技術を持つ者に知られた調整方法を用いた薬学的に許容できる調整物として供給されうる。これらの調整物は、標準の方法で投与されうる。一般に、その組合わせは、局所的な、皮膚浸透的な、経口の、直腸からのそして非経口的な(例えば、静脈注射の、皮下注射の又は筋肉注射の)ルートにより、投与されうる。加えて、その組合せは、化合物の維持された放出を許す生分解性がある高分子に包含されても良い。その生分解性がある高分子は、例えば腫瘍のサイトのような薬剤のデリバリが望ましい所の近傍に埋め込まれる。生分解性がある高分子とその使用は例えばBrem et al.，J．neurosurg．74:441-446(1991)に詳しく記述されている。
【００４９】
化合物の投与量は、治療される状態、特定の化合物、そして、化合物の投与ルートとヒト又は動物の状態や体重のような他の臨床上の因子に依存するであろう。本発明は、ヒト及び動物の両方の適用があることは理解されるべきである。ヒトへの経口投与に対して、およそ0.1から300mg/kg/日の投与量が、好ましくは、およそ0.5から50mg/kg/日の投与量が、最も好ましくはおよそ1から10mg/kg/日投与量が一般に十分である。
【００５０】
製剤形態は、経口の、直腸の、目の(硝子体内又は眼球内を含む)、鼻の、局所の(口腔内及び舌の下を含む)、膣の、非経口的な（皮下の、筋肉内の、静脈内の、皮膚内の、気管内の及びエピデュアルを含む）投与に適したものを含む。製剤形態は、単位投与量毎に
従来法で調整さてれも良く、また、従来の薬学的な手法によって調整されても良い。そのような技術は、有効成分と薬学的担体又は賦形剤を混ぜ合わせるステップを含む。一般に、製剤は、均一にかつ入念に有効成分を液体担体、細かく砕かれた担体、又はその両方と混ぜ合わされ、そして、必要ならば、製品に整形することにより準備される。
【００５１】
経口投与に対して適当な本発明の製剤は、あらかじめ決められた量の有効成分を含むカプセル、カシェ剤、錠剤のような分離した単位として、粉又は顆粒状のように、水溶性又は非水溶性の溶液又は懸濁液のように、水中油の液体エマルジョン又は油中水のエマルジョンのように、そして、食塊等のようにして存在してもよい。
【００５２】
錠剤は、1又はそれ以上の修飾成分とオプション的に圧縮又はモールディングにより作られてもよい。圧縮された錠剤は、バインダー、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、表面活性剤、又は、分散剤と共にオプション的に混ぜられ、粉又は顆粒のような自在に流動する形態において有効成分を適当な機械で圧縮することにより調整されてもよい。モールドされた錠剤は、不活性液体希釈剤と共に湿らされた粉の化合物混合体を適当な機械でモールドすることにより作られてもよい。
【００５３】
錠剤は、オプション的に、コーティング又は刻印され、そこから有効成分をゆっくりとコントロールして開放するために製剤されてもよい。
【００５４】
口に局所投与するのに適当な製剤形態は、成分として香りベースで通常、スクロースとアカシア又はトラガカントを含むロゼンジと、ゼラチンやグリセリン又はスクロースやアカシアのような不活性ベースとして有効成分を含む香錠と、適当な液体担体において投与される有効成分を含むマウスウォッシュとを含む。
【００５５】
皮膚への局所投与として適当な製剤形態は、薬学的な許容できる担体において投与されうる有効成分を含む軟膏、クリーム、ゲル、そして、ペーストとして存在してよい。望ましい局所デリバリ・システムは、投与されるべき有効成分を含む皮膚浸透性パッチである。
【００５６】
直腸投与のための製剤形態は、例えば、ココアバター又はサリチル酸塩を含む適当なベースとの座薬として存在してよい。
【００５７】
鼻からの投与として適した製剤形態は、ここでは担体が固体であるが、近くに持ってこられる粉末の容器から鼻まで鼻の通路を通して、鼻で吸うことで、即ち、急速吸入によって投与される、例えば20から50ミクロンの範囲の粒子径を持つ粗い粉を含む。例えば鼻噴霧又は点鼻液としての投与として適した製剤形態は、ここでは担体が液体であるが、有効成分の水又は油溶液を含む。
【００５８】
膣投与として適当な製剤形態は、本技術分野において適当と知られているような担体に有効成分を加えたものを含むベッサリー、タンポート、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、又はスプレイ形態として存在してもよい。
【００５９】
非経口投与として適当な製剤形態は、投与対象者の血液と等浸透圧の製剤となる、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬及び溶液を含んでもよい水性及び非水性殺菌した注射溶液と、懸濁剤と粘稠剤を含んでもよい水性及び非水性殺菌した懸濁液とを含む。製剤形態は、１単位投与量又は多単位投与量の容器、例えば、シールしたアンプルやバイアルのような容器に入れて、存在してもよく、使用直前に注射により滅菌液体担体、例えば水を加えるだけでよいフリーズド・ドライ（lyophilized）状態で保存されてもよい。即席の注射溶液や懸濁液は、以前に述べられた種類の滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調整してもよい。
【００６０】
望ましい単位投与量製剤形態は、投与成分の日々の投与量又は単位、日々の投与量未満、ここにおいて上述されたように、又はその適当な部分を含むものである。
【００６１】
成分に加えて、特に上述のように、本発明の製剤形態は、例えば、経口投与に適当な製剤形態が香料剤を含んでもよいように、問題となる製剤のタイプについて関連のある技術分野における他の従来のエージェントを含んでもよい。
【００６２】
本発明に従って治療されうる角膜新生血管形成に関連した病気は、限られることなく、糖尿病網膜症、未熟児網膜症、角膜移植拒絶反応、新生血管緑内障及び水晶体後方線維増殖症、流行性角結膜炎、ビタミンA欠乏症、コンタクトレンズ過度使用、アトピー性角膜炎、上周辺角膜炎、翼状爪膜角膜炎乾燥症、スジョグレン（sjogren's）症候群、酒さ性座瘡、フィレクテニュロシス(phylectenulosis)、梅毒、ミコバクテリア感染、リピド変性症、薬品熱傷、細菌性潰瘍、菌性潰瘍、単純疱疹感染、帯状疱疹感染、原虫感染、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン周辺変性症、周辺角質溶解、リュウマチ様関節炎、全身狼瘡、多発性動脈炎、外傷、ウェーグナー類肉腫症、強膜炎、スティーブン−ジョンソン症候群、放射状角膜切開、類天疱瘡そして角膜移植拒絶を含む。本発明に従って治療できる網膜／脈絡膜新生血管形成に関連する疾病は、限られることなく、糖尿病網膜症、筋肉変性、鎌状赤血球貧血、類肉腫、梅毒、弾性線維偽性黄血腫、パジェット病、静脈閉鎖、動脈閉鎖、頸動脈障害病、慢性ブドウ膜炎／ヴィトリティス(vitritis)、ミコバクテリア感染、ライム病、全身狼瘡紅斑症、未熟児網膜症、イールズ病、ベーチェット症候群、網膜炎又は脈絡膜炎を引起こす感染、想定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、オプティカル・ピット、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラズマ病、外傷そしてポストーレーザー合併症を含む。他の病気は、限られることなく、ルベオーシス（アングルの新生血管形成）に関連する病気及び増殖性硝子体網膜症の全ての型を含む線維血管又は線維組織の異常増殖−それが糖尿病に関連するかどうかを問わずに−によって引起こされる病気を含む。
【００６３】
慢性的炎症に関連した病気は、本発明の組成物と方法で治療できる。慢性的炎症の症状を持つ病気は、クローン病や潰瘍性大腸炎、乾癬、仙腸関節炎、及び、リュウマチ性関節炎のような小腸の病気を含む。慢性的炎症は、炎症細胞の内向きフラックスの維持のために毛細管芽の連続的な形成に依存する。炎症細胞の内向きフラックッスと存在は、肉芽腫を生成し、従って、慢性的な炎症状態を維持する。本発明の組成物と方法による血管形成抑制は、肉芽腫の形成を防ぎ、病気を緩和する。
【００６４】
本発明の組成物と方法は、クローン病や潰瘍性大腸炎のような炎症腸疾病を持つ患者の治療に使用することができる。クローン病や潰瘍性大腸炎は共に、胃腸管にある種々のサイトでの慢性的な炎症や血管形成によって特徴付けられる。クローン病は、炎症細胞の円柱によって囲まれた新しい毛細血管芽からなる胃腸管を通して慢性的な肉芽腫の炎症によって特徴付けられる。本発明の組成物と方法による血管形成の防止は、新芽の形成を抑制し、肉芽腫の形成を妨げる。
【００６５】
クローン病は、抹消回腸や結腸に大抵共通して影響する慢性的変性炎症病として起きるが、また、口から肛門及びその周辺へと通じる胃腸管のいかなる部分においても起きる。クローン病を持つ患者は、一般に腹痛、発熱、食欲不振、重量減、腹部膨張に関連して慢性的な下痢をする。潰瘍性大腸炎は、また、慢性的な、特異性の無い炎症や潰瘍性の病気で、結腸粘膜にて生じ、血の混じる下痢の存在によって特徴付けられる。
【００６６】
仙腸関節炎は、もう一つの慢性炎症病で、多重システム肉芽腫ディスオーダーとして特徴付けられる。この病気の肉芽腫は、体のどこにでも形成されうる。従って、その症状は
肉芽腫のサイトと病気が活性か否かによる。肉芽腫は炎症細胞の連続的な供給があれば、血管形成毛細管発芽によって形成される。
【００６７】
本発明の組成物と方法は、乾癬に関連した慢性的炎症状態を治療することもできる。乾癬は、皮膚病てあるか、種々の大きさの丘疹及び斑によって特徴付けられる慢性的な再発性のもう一つの病気である。特徴的な病変を維持するために必要な新しい血管の形成の防止が症状の緩和に導かれる。
【００６８】
本発明に従って治療できるもう一つの病気は、リュウマチ様関節炎である。リュウマチ様関節炎は、関節周辺での不特定的炎症によって特徴付けられる。関節の滑液膜において血管が血管形成すると信じられている。新たな血管ネットワークの形成に加えて、内皮細胞が軟骨破壊とパンヌス成長に導かれる因子と反応性酸素種を放出する。血管形成に関わる因子は、リュウマチ様関節炎の慢性的な炎症状態に活発に寄与し、その維持を助ける。
【００６９】
本発明に従って治療できる他の病気は、血管腫、オスラー−ウェーバー−ランジュ症候群、遺伝性出血性毛細管拡張、ソリッド又は血液で生じる腫瘍と後天性免疫不全症である。
【００７０】
本発明の組成物と方法は、ステロイド又は非ステロイド消炎化合物（NSAIDs）のような消炎化合物と血管形成抑制化合物の使用を含む。本発明の組成物と方法は、サリドマイド又はサリドマイド類似物又はAMG-1470、EM-12、又はEM-138のような血管形成抑制化合物と、ステロイド又は非ステロイド消炎化合物(NSAIDs)のような消炎化合物との組合せを含む。本発明の組成物と方法は、また、消炎化合物単独の使用も含む。これらの組成物は、血管形成依存性疾病の治療に用いることができる。
【００７１】
例えば、インドメタシン（5mg/kg）は、bFGF誘因血管形成を59%抑制し、VEGF誘因血管形成を61%抑制することが見つけられてきた。同様に、スリンダック（25mg/kg）は、bFGF誘因血管形成を55%抑制することが見出されてきた。スリンダックは、生体内で代謝され2つの代謝物になる：スリンダック硫化物とスリンダック・スルフォンである。スリンダック硫化物は、プロスタグランジン合成を活発に抑制するが、スリンダック・スルフォンはしない。しかしながら、両者は血管形成の抑制剤として見出された。スリンダック硫化物は、bFGF誘因新生血管形成を34%抑制し、スリンダック・スルフォンは31%抑制性を示した。
【００７２】
他のNSAIDsは、また、新生血管形成に関連する血管形成を抑制することが見出されてきた。例えば、カルボメチルヘプチル・イミダゾール、及び、フレグレレート・ナトリウムは共にbFGF誘因新生血管形成をそれぞれ32%及び22%抑制する。
【００７３】
もう一つのトロンボキサン抑制剤、SKF525AHCL、は、プロスタグランジン生成を促進するが、bFGF誘因新生血管形成を25%抑制することが見つけられた。特定のシクロオキシジェン−2抑制剤NS-398もまた、bFGF誘因新生血管形成を25%抑制した。
【００７４】
スリンダックがサリドマイドと組み合わされたとき、血管形成の抑制に付加的な効果がある。スリンダックが、AMG 1470、EM-12又はEM-138のような他の血管形成抑制剤と組み合わされたとき、血管形成の抑制に付加的な効果がある。実施例２に表された分析において、目の中の血管形成は、bFGF（基礎フィブロブラスチック成長ファクター）とVEGF（血管内皮細胞成長ファクター）の存在により生成される。そのような血管形成の抑制は、NSAIDs、ステロイド、サリドマイド、又は、NSAIDs、ステロイド及びサリドマイドの組合わせにおいて示された。
【００７５】
【表１】
0005066505.tif 000020
【００７６】
サリドマイドとスリンダックが組合わされたとき、74%のVEGFの抑制は、付加的な効果を示す。ヒドロコルチソン、スリンダック、サリドマイド及びサリドマイド＋スリンダックのデータは、対照標準（ｐ＜0.0001）から非常に異なっている。サリドマイドとスリンダックを含む組成物に関して、ウサギのV2癌腫に対する実験は、200mg/kgのサリドマイドと25mg/kgのスリンダックを組合わせた経口治療の18日後では、T/C（治療対対照標準比）が0.32を示している。
【００７７】
付加的な効果が、スリンダックとAMG-1470の組合せのような他の血管形成抑制化合物と非ステロイド消炎剤の組合せにおいても見られる。AMG-1470は、Brem et al.において示されたような既知の血管形成抑制化合物である。ごくわずかな薬剤耐性が、AMG-1470を用いた長期の消炎治療の後見られた。ここに合体された文献、Surgical Forum 45(0)，1994，pp.674-677参照。上記のチャートに示されるように、スリンダックとAMG-1470の組合せは、どちらの単独投与に比べても血管形成に及ぼす抑制効果が大きい。
【実施例】
【００７８】
本発明は、更に以下の実施例によって説明されるが、範囲を限定するものと解釈されるものではない。それに反して、手段は、詳細な説明を読んだ後、種々の他の実施態様、修飾、等価なものに及び、本発明の精神及び／又は付加されるクレームの範囲から離れること無く、通常の技術を持ったものがそれらを示唆するかもしれない。
【００７９】
実施例１
Crum et al.，Science 230:1375 et seq.（1985）によってされたヒヨコ胚子脈絡膜の分析評価は、更なる新陳代謝変換を必要としない化合物の同定に用いられる。また、ここにリファレンスとして組入れられるた米国特許5,001,116−それにはCAM分析表が欄7に表されているが−を参照されたい。簡単に、受精したヒヨコの胚子は、3又は4日目に殻から取除かれ、化合物を含むメチルセルロース円板が脈絡膜の上に移植された。胚子は、48時
間後に試験され、もし透明な脈管帯がメチルセルロース円板の周りに現れたら、その脈管帯の直径が測定された。
【００８０】
実施例２
ウサギ角膜血管形成試験 ウサギ角膜への移植のためのペレットは、12μgの組換型bFGF(武田製薬(株))を含む110μlの生理食塩水を40mgのスクラルフェート（Bukh Meditec-Dnmark）と混ぜることによって作られた。このサスペンジョンは、80μlの12%ハイドロン（Interferon Sciences）エタノール溶液に加えられた。10μlアリコートのこの混合物は、次にピペットでテフロン・ペッグに垂らされ、自然乾燥され、約17ペレットを生成した。ペレットは、麻酔をかけられた雌ニュージーランドホワイト系ウサギのそれぞれの目の角膜マイクロポケットに、角膜表面上にエリスロマイシン軟膏の局所適用を後に行った縁から2mmのところに移植された。これらの動物は、0.5%カルボキシメチル・セルロース又は0.5%カルボキシメチル・セルロース単独での胃洗浄によるポスト移植から2日目から日々えさを与えられた。サリドマイドはAndrulus Pharmaceutical(Mary land)から購入され、EM-12とスピジミドは親切にもGrunenthal GMBH(Germany)から供給された。動物は、同じ角膜専門家によってマスク法により一日おきにスリット・ランプで検査された。角膜新生血管形成領域は、関わる縁の時間数（C）と縁からの血管長さ（L）を標線での測定で決定した。円環状の面積を決定するために、C／12＊3.1416[r2−(r−L)2]の式が用いられた。ここでr＝6mm、ウサギの角膜の測定半径である。種々の数学的モデルが血管形成角膜の量を決定するために用いられた。そして、この式がペレットに向かって成長する新生血管形成バンドの面積の概算をを最も正確に与えるものであることがわかった。
【００８１】
ウサギ角膜アッセイは、それが一般にみずからは不活性であるが代謝により活性化合物を生成する化合物を認識できるため、好ましい。サリドマイド関連化合物は、以下の実施例３に示すように、テラトジェンとして知られ、本発明において使用の候補である。
【００８２】
実施例３
サリドマイド及び関連する類似体のbFGF誘因角膜新生血管形成の抑制は、8日目のメジアン標準体のパーセントで表す。bFGFとスクラルフェートを含むペレットは、実施例IIに従って、ウサギの両角膜のマイクロポケットに移植された。縁から透明角膜へと血管内成長は、最初2日目に認められ、その日に治療（200mg/kg経口）が始まった。角膜新生血管形成の面積は、4日目から12日目まで測定された。8日目の測定は、グループ間の比較のために用いられた。この時点で、血管の退行は見られず、ほとんど最高の新生血管形成が見られた。統計的解析は、非パラメータ法を活用し、正規分布でないデータ（即ち、異常値）に対する保護のために、実験間の変異を説明するために、ランクされたデータでANOVAを用いて行われた。試験された化合物は以下の通りである。
【化１９】
0005066505.tif 000021
【００８３】
（200mg/kg）の投与量のサリドマイドでの治療は、血管形成角膜の面積の抑制になり、、36%のメジアン抑制を持つ３つの実験において抑制が30から51%の範囲にあった（図６）(ｎ＝30目、ｐ＝0.0001、ランクしたデータでの２ウェイANOVA)。サリドマイドによる血管形成抑制は、たった２投与の後に認められた(図７)。ウサギは、明確な鎮静を表さず、
毒性や重量減の兆候は全く無かった。テラトジェン類似体のEM-12は、サリドマイドの他の特性を持つが、抑制性があり、42%のメジアン抑制を持っていた(ｎ＝10目、ｐ＝0.002、ランクしたデータでの２ウェイANOVA)。スピジミドは、サリドマイドの非テラトジェン類似体であり、サリドマイドの鎮静作用を持つが、活性を全く示さ無かった(対照標準の107%の面積、ｎ＝10目、統計的に対照標準と異ならない)。他の類似体、PGAやPG酸は、サリドマイドより弱い抑制効果を示した(データは示していない)。サリドマイドで治療された動物の血管内成長の密度もまた著しく低下した。
【００８４】
実施例４
ウサギ角膜アッセイ中のEM-12 EM-12は、ウサギ角膜アッセイにおいて実施例２に記したように、100mg/kg/日で試験され、21%の抑制性を示し、200mg/kg/日で試験されると43%の抑制性を示した。
【００８５】
実施例５
CAM中のフタロイル・グルタミン酸 フタロイル・グルタミン酸は、上述のCAMアッセイにおいて試験され、かすかなはん痕を持つ血管ゾーンを示す。
【００８６】
実施例６
ウサギ角膜アッセイ中のフタロイル・グルタミン酸 フタロイル・グルタミン酸は上述のように、200mg/kg投与され、29%の血管形成抑制性を示した。
【００８７】
実施例７
CAM中のフタロイル・グルタミン酸無水物 フタロイル・グルタミン酸無水物は上述のように試験され、血管形成ゾーンを示した。
【００８８】
実施例８
クローン病の治療 32歳の女性クローン病患者本発明の方法を用いて治療された。患者はクローン病の特徴的な症状を示した。即ち、激しい胃腸関係症状（下痢と腹痛を含む）と下肢に大きな病斑である。サリドマイドが経口で100mgずつ1日2回投与された。治療が1週間続いた後、下痢と腹痛を含む胃腸傷害は少なくなり、病斑も消えた。
【００８９】
実施例９
角膜マイクロポケット・アッセイ 6から8週間のC57B16オスのねずみが、Jackson Labovatories，MAから得られた。ねずみは、麻酔され、0.4X0.4mmポケットが縁に隣合うねずみ角膜のストロマに作られた。80mgのbFGF又はVEGFを含むペレットが縁血管から1.0-1.2mmのところに移植された。エリスロマイシンがそれから局所的に適用された。ねずみは、それから下の表に示すように種々の投与量の消炎剤で治療された。ペレットに対する血管の反応が、bFGFペレット移植から5日間、VEGFペレット移植から6日間、新生血管形成のクロック・アワーの数と最大血管長さによって測定された。角膜新生血管形成の面積は、最良の概算面積を与える次の式を用いて計算された：面積（mm2）＝[π×クロック・アワー×長さ（mm）×0.2（mm）]。
結果は、以下の表に記す。
【００９０】
【表２】
0005066505.tif 000022
【００９１】
抑制効果は、特定の薬剤が試験される実験の対照標準（n=8/実験）に対するbFGF又はVEGFによって角膜新生血管形成の面積のパーセント表示で表わされる。N＝は、試験された目の数を示す。薬剤は、記述されているように、sc、ip又は経口で一日一回投与された。
【００９２】
実施例１０
6から8週間のC57B16オスのねずみが、Jackson Laboratories，MAから得られた。ねずみは、麻酔され、0.4X0.4mmポケットが縁に隣合うねずみ角膜のストロマに作られた。80mgのbFGF又はVEGFを含むペレットが縁血管から1.0-1.2mmのところに移植され、VEGFを含むペレットは、縁血管から0.5−0.7mmのところに移植された。エリスロマイシンがそれから局所的に適用された。ねずみは、それから、サリドマイド、インドメタシン、スリンダック又はサリドマイドとインドメタシン又はスリンダックの組合わせで治療された。ペレットに対する血管の反応か、bFGFペレット移植から5日間、VEGFペレット移植から6日間、新生血管形成のクロック・アワーの数と最大血管長さによって測定された。角膜新生血菅形成の面積は、最良の概算面積を与える次の式を用いて計算された：面積（mm2）＝[π×クロック・アワー×長さ（mm）×0.2（mm）]。結果は、以下の表に記す。
【００９３】
【表３】
0005066505.tif 000023
【００９４】
抑制効果は、特定の薬剤が試験される実験の対照標準（n:8/実験）に対するbFGF又はVEGFによって角膜新生血管形成の面積のパーセント表示で表わされる。N＝は、試験された目の数を示す。薬剤は、記述されているように、sc、ip又は経口で一日一回投与された。
【００９５】
実施例１１
6から8週間のC57B16オスのねずみが、Jackson Laboratories，MAから得られた。ねずみは、麻酔され、0.4X0.4mmポケットが縁に隣合うねずみ角膜のストロマに作られた。80ngのbFGF又はVEGFを含むペレットが縁血管から1.0-1.2mmのところに移植された。エリスロマイシンがそれから局所的に適用された。ねずみは、それから、サリドマイド、又は、スリンダック誘導体の一つ、スリンダック・スルフォン又はスリンダック硫化物で治療された。ペレットに対する血管の反応が、bFGFペレット移植から5日間、新生血管形成のクロック・アワーの数と最大血管長さによって測定された。角膜新生血管形成の面積は、最良の概算面積を与える次の式を用いて計算された：面積（mm2）＝[π×クロック・アワー×長さ（mm）×0.2（mm）]。結果は、以下の表に記す。
【００９６】
【表４】
0005066505.tif 000024
【００９７】
抑制効果は、特定の薬剤が試験される実験の対照標準（n=8/実験）に対するbFGFによって角膜新生血管形成の面積のパーセント表示で表わされる。N＝は、試験された目の数を示す。薬剤は、記述されているように、sc、ip又は経口で一日一回投与された。
【００９８】
実施例１２
腫瘍アッセイ ニュージーランドホワイト系メスウサギ、体重およそ1.5kgがCharles River，MAから得られ、V2−癌腫を増殖させるために用いられた。この腫瘍は、Shopeビールス誘因乳頭腫を起源とする。小さな0.5 X 0.5cm片が右太股の筋肉内に移植された。200mg/kg/日のサリドマイド投与(n=14)、60mg/kg/日のスリンダック投与（n=10）又はサリドマイドとスリンダックの組合わせ投与（n=10）が腫瘍を移植してから10日目に開始され、この時、腫瘍の平均体積は6cm3であった。対照標準動物（n=13）はメチルセルロースで治療された。治療開始から17日間実験され、その時対照標準の腫瘍は100cm3であった。この実験の結果(図８)、サリドマイドとスリンダックの組合わせは、サリドマイド又はスリンダック単独よりもV2−癌腫の大きさの減少において、より効果的であった。サリドマイドとスリンダックの組合わせは、腫瘍の成長を75％抑制し、著しく、単独又は対照標準から異なっていた(ｐ＜0.05)。サリドマイドとスリンダックの経口投与による腫瘍抑制は、それぞれ、35%(ｎ＝５、ｐ＜0.01）と55%(ｎ＝１４、ｐ＜0.01)であった。データは、３つの別々の実験において集められ、それぞれの棒は、平均の標準誤差を表す。
【００９９】
もちろん、前述は本発明の望ましい実施態様にのみ関連し、添付のクレームに説明する本発明の範囲と精神を離れること無く、多くの修飾や変更が可能であることは理解されるべきてある。
【図面の簡単な説明】
【０１００】
【図１】以下の一般式によって表されて分類される代表化合物のリストである。
【図２】以下の一般式によって表されて分類される代表化合物のリストである。
【図３】以下の一般式によって表されて分類される代表化合物のリストである。
【化２０】
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【図４】以下の一般式によって表されて分類される代表化合物のリストである。
【化２１】
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【図５】以下の一般式によって表されて分類される代表化合物のリストである。
【化２２】
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【図６】血管形成のウサギ角膜モデルにおける血管形成に及ぼすサリドマイドとEM12の効果を示す。
【図７】血管形成のウサギ角膜モデルにおける角膜血管形成の領域に及ぼすサリドマイドの効果を示す。
【図８】ニュージーランドホワイト雌ウサギにおけるV2−癌腫の腫瘍成長の抑制に及ぼすサリドマイド、スリンダック又は両者の配合の影響を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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