(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
セサミンとエピセサミンを４０：６０〜５：９５（重量比）で含有し、前記セサミンとエピセサミンの総量が組成物の５１重量％以上であることを特徴とするセサミン／エピセサミン組成物。
【請求項２】
セサミンとエピセサミンを３０：７０〜５：９５（重量比）で含有することを特徴とするセサミン／エピセサミン組成物。
【請求項３】
セサミン及びエピセサミンの総量が、組成物の５１重量％以上であることを特徴とする請求項２に記載のセサミン／エピセサミン組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する飲食物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する医薬組成物。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する動物飼料又はペットフード。
【請求項７】
セサミンとエピセサミンを３０：７０〜５：９５（重量比）で含有する飲食品。
【請求項８】
セサミンとエピセサミンを３０：７０〜５：９５（重量比）で含有する医薬組成物。
【請求項９】
セサミンとエピセサミンを３０：７０〜５：９５（重量比）で含有する動物飼料又はペットフード。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セサミンとそのエピマー（異性体）であるエピセサミンとを所定の割合で含有させることにより、セサミン類の持つ生理活性を高めたセサミン及びエピセサミン含有組成物（セサミン／エピセサミン組成物）に関する。【０００２】
本発明はさらに、当該セサミン／エピセサミン組成物を添加しまたは含有する、飲食物、液体飲料、医薬組成物及び動物飼料又はペットフードに関する。
【背景技術】
【０００３】
本発明において、セサミン類とはセサミンとエピセサミンの総称をいう。また、本発明において、セサミンとエピセサミンの混合物をセサミン／エピセサミン組成物と表記する。
エピセサミンおよびセサミンは立体異性体の関係にある。すなわち、セサミン(sesamin)は、式I：【０００４】
【化１】
0004995567.tif 000002
【０００５】
で示される構造を有する光学活性化合物であり、そして、その異性体であるエピセサミン（episesamin）は、式II：【０００６】
【化２】
0004995567.tif 000003
【０００７】
で示される構造を有する光学活性化合物である。上記式に示されるように、セサミンが平面上で対称構造を有するのに対して、エピセサミンは非対称構造を有する。【０００８】
セサミンはゴマの主要なリグナン化合物の一つであり、ゴマ種子中に０.１〜０.５％含まれている。これに対して、エピセサミンは本来ゴマ種子には存在しておらず、ゴマ油からサラダ油などの精製処理（脱色、脱臭）工程において、セサミンがエピマー化を受け副次的に生成してくるものであり（非特許文献１）、このゴマ油から精製されるセサミン類は、セサミンとエピセサミンとをほぼ１：１（重量比）の割合で含有することが知られている（非特許文献２ ）。
先行技術文献には、セサミン類について以下の生理活性が開示されている。例えば、精製されたセサミンを用いた実験から、腸内でのコレステロール又は胆汁酸の代謝阻害作用（特許文献１）、アルコール中毒や禁断症状の緩和作用（特許文献２）、肝機能改善作用（特許文献３）、高度不飽和脂肪酸の生体内安定化作用（特許文献４）、Δ５−不飽和化酵素阻害作用（非特許文献３〜４、特許文献５）、片頭痛の抑制作用（特許文献６）、ヒト白血病細胞に対するアポトーシス誘導作用（特許文献７）、メラトニンの酸化分解抑制作用（特許文献８）等が明らかとなっている。そして、上記特許文献５のΔ５−不飽和化酵素阻害作用、上記特許文献７のヒト白血病細胞に対するアポトーシス誘導作用は、精製されたセサミンだけでなく、エピセサミンについても確認されている。
また、セサミンを含有するゴマ油を用いた実験からは、炎症性疾患（筋萎縮性側索硬化症）の改善作用（特許文献９）、抗炎症及び感染防護作用（特許文献１０）、α−リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸のうち少なくとも１種類を含有する油脂との併用によるアレルギー予防又は改善作用（特許文献１１）等が明らかとなっている。
さらに、セサミン／エピセサミン組成物については、以下の報告がある。例えば、リグナン類化合物を主成分とするゴマ油抽出物（セサミン１９．６％、エピセサミン３０．６％、セサミノール及びエピセサミノール１０．２％；リグナン類化合物含量６０．４％）を用いた実験からは、血中コレステロール低下作用および血中中性脂質低下作用（特許文献１２）、肝機能改善作用（特許文献３）等が明らかになっている。また、精製されたセサミン／エピセサミン組成物を用いた実験、例えばセサミン：エピセサミン＝約６：４を用いた実験からは、肝機能改善作用（セサミン：６１．５％、エピセサミン：３８．０％）（特許文献３）、活性酸素消去作用（セサミン：エピセサミン＝約６：４）（特許文献１３）、悪酔防止作用（セサミン：５５．２％、エピセサミン：４４．４％、純度９９．６％）（特許文献１４）、アレルギー症状の予防又は改善作用（セサミン：５５．２％、エピセサミン：４４．４％、純度９９．６％）（特許文献１５）等が、セサミン：エピセサミン＝約１：１を用いた実験からは、オメガ６系・オメガ３系不飽和脂肪酸のバランス調節作用（セサミン：５１．３％、エピセサミン：４７．８％）（特許文献１６）、過酸化脂質生成抑制（セサミン：５１．３％、エピセサミン：４７．８％）（特許文献１７）、乳癌抑制作用（セサミン：５１．３％、エピセサミン：４７．８％）（特許文献１８）、抗高血圧作用（セサミン：５１．５％、エピセサミン：４７．８％、その他のジオキサビシクロ〔３，３，０〕オクタン誘導体１．１％）（特許文献１９）、体脂肪低減作用（セサミン：エピセサミン＝約１：１、純度９９．５％）（特許文献２０）、ノコギリヤシ油との併用による前立腺肥大抑制効果（セサミン：エピセサミン＝約１：１）（特許文献２１）等が明らかとなっている。【０００９】
さらにまた、近年、セサミンとエピセサミンの生理活性の違いが明らかになっている。例えば、セサミンとエピセサミンの混合物（およそ１：１）をラットに経口投与した後の体内分布から、エピセサミンの臓器への移行量がセサミンの２倍以上高いことが報告されている（非特許文献５）。また、セサミンとエピセサミンを各々ラットに経口投与した実験から、エピセサミンがセサミンに比べて肝臓のβ酸化系酵素の遺伝子発現ならびに酵素活性を顕著に上昇させること、脂肪酸合成酵素の阻害活性についてはセサミンとエピセサミンで差がないことが報告されている（非特許文献６）。
【特許文献１】特許第３１８３６６４号
【特許文献２】米国特許第４４２７６９４号
【特許文献３】特許第３０７５３５８号
【特許文献４】特開平１１−２６９４５６号公報
【特許文献５】特許第３０７０６１１号
【特許文献６】特開２００３−１８３１７２号公報
【特許文献７】特開２００１−１５１６７６号公報
【特許文献８】特開２０００−１４３５４６号公報
【特許文献９】特表２００５−５３３０４２号公報
【特許文献１０】特表平１０−５００９３７号公報
【特許文献１１】特開平５−５８９０２号公報
【特許文献１２】特許第３００１５８９号
【特許文献１３】特開平６−２２７９７７号公報
【特許文献１４】特許第３１２４０６２号
【特許文献１５】特許第３５１２１９６号
【特許文献１６】特許第３５１２１９６号
【特許文献１７】特開平５−０５１３８８号公報
【特許文献１８】特開平５−４３４５８号公報
【特許文献１９】特開平８−２６８８８７号公報
【特許文献２０】特許第３２０５３１５号
【特許文献２１】特開２０００−２５６２０４号公報
【非特許文献１】並木ら、「ゴマその科学と機能性」、丸善プラネット株式会社（1998）
【非特許文献２】Fukuda, Y., et al., J. Am. Oil. Chem. Soc., 63, 1027-1031 (1986)
【非特許文献３】S. Shimizu, et al, J. Am. Oil Chem. Soc., 66, 237-241 (1989)
【非特許文献４】S. Shimizu, et al., Lipid, 26, 512 (1991)
【非特許文献５】Sawada R., et al., Lipids, 34, 633 (1999)
【非特許文献６】Kushiro M., et al. J. Nutr. Biochem., 13, 289-295 (2002)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
上記のとおり、セサミン類は様々な生理活性を有するものの、天然のゴマ種子中に０．１〜０．５％程度しか含まれていない貴重な化合物である。そこで、本出願人は、セサミン類の持つ生理活性を効率良く発揮させるために、セサミン類の作用を増強させる方法を検討し、α−トコフェロールがセサミン類等のジオキサビシクロ〔３,３,０〕オクタン誘導体の作用を増強しうることを見出している（特許第３２８３２７４号）。しかし、セサミン類自体の生理活性を増強させる方法は全く知られていなかった。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
セサミン類自体の生理活性を増強させることができれば、セサミン類の持つ有用な生理活性をより効率的かつ有効に発揮することができるとの考えに基づき、本発明者らは、セサミン類自体の生理活性を増強させる方法について鋭意検討を行った。
まず、エピセサミンがセサミンに比べて肝臓のβ酸化系酵素の遺伝子発現ならびに酵素活性を顕著に上昇させること（非特許文献６）から、少なくとも肝機能改善作用についてはエピセサミンがセサミンと同等以上の活性を有していると考え、エピセサミンを効率よく体内に吸収させることによって、セサミン類の持つ生理活性を増強させる方法を検討した。具体的には、セサミンとエピセサミンを様々な重量比で含有するように調製したセサミン／エピセサミン組成物（油溶試料）において、経口投与によるエピセサミンの経口吸収・血中移行性を検討した。上記の非特許文献５および６の教えによれば、エピセサミン単独投与の条件がもっとも血中移行性が高いことが予想されたが、驚くべきことに、この予想に反して、セサミンを一定量共存させたセサミン／エピセサミン組成物を用いると、エピセサミン単独投与による場合よりもエピセサミンの経口吸収性および／または血中移行性が高いことを見出した。そして、セサミン類の持つ生理活性である抗高血圧作用、肝臓のβ酸化系酵素の遺伝子発現を検討したところ、驚くべきことに、セサミンとエピセサミンを所定の割合（５０：５０〜１：９９）で配合したセサミン／エピセサミン組成物において、セサミン単独投与およびエピセサミン単独投与よりも高い活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図1は、種々のセサミン：エピセサミン組成比（４：６、５：５、３：７、２：８、１：９、０：１０）の混合物を経口投与したときのエピセサミンの経口吸収率を示す棒グラフである。
【図２】図２は、種々のセサミン：エピセサミン組成比（１：９、０．５：９．５、０：１０）の混合物を経口投与したときのエピセサミンの経口吸収率を示す棒グラフである。
【図３】図３は種々のセサミン：エピセサミン組成比（１０：０、５：５、０：１０）の混合物を単回投与したときのDOCA-salt高血圧ラットの24時間の血圧変化を示す図である。
【図４】図４は種々のセサミン：エピセサミン組成比（１０：０、５：５、０：１０）の混合物投与後、8時間目のDOCA-salt高血圧ラットの血圧変化を示す図である。
【図５】図５は種々のセサミン：エピセサミン組成比（５：５、３：７、１：９）の混合物投与後、8時間目のDOCA-salt高血圧ラットの血圧変化を示す図である。
【図６】図６は種々のセサミン：エピセサミン組成比（１０：０、５：５、３：７、１：９、０：１０）の混合物を投与したときのβ酸化系遺伝子発現に及ぼす影響を示す図である。
【発明を実施するための態様】
【００１３】
本発明は、セサミン類の生理活性を効率的にかつ有効に発揮させることができるセサミン／エピセサミン組成物、及びこの組成物を使用することによるセサミン類の生理活性を増強する方法に関する。具体的には、
１．  セサミンとエピセサミンを５０：５０〜１：９９（重量比）で含有することを特徴とするセサミン／エピセサミン組成物。
２．  セサミンとエピセサミンを３９：６１〜１：９９（重量比）で含有することを特徴とする上記１に記載のセサミン／エピセサミン組成物。
３．  セサミンとエピセサミンを３０：７０〜５：９５（重量比）で含有することを特徴とする上記１に記載のセサミン／エピセサミン組成物。
４．  セサミン及びエピセサミンの総量が、組成物の５１重量％以上であることを特徴とする上記１〜３のいずれかに記載のセサミン／エピセサミン組成物。
５．  上記１〜４に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する飲食物。
６．  上記１〜４に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する医薬組成物。
７．  上記１〜４に記載のセサミン／エピセサミン組成物を含有する動物飼料又はペットフード。
８．  上記１〜４に記載のセサミン／エピセサミン組成物により、セサミン類の生理活性を増強させる方法。
９．  前記セサミン類の生理活性が、血中コレステロール低下作用、中性脂質低下作用、抗高血圧作用、不飽和脂肪酸抗酸化作用、肝機能改善作用、活性酸素消去作用、Δ５不飽和化酵素阻害作用、又は高度不飽和脂肪酸の生体内安定化作用である、上記８に記載の方法。
【００１４】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、セサミンとエピセサミンとを所定の割合で含有することを特徴とするものである。セサミンとエピセサミンとの好ましい割合は、５０：５０〜１：９９（重量比）、より好ましくは３９：６１〜１：９９、さらに好ましくは３０：７０〜５：９５である。上記所定の割合でセサミンとエピセサミンとを含有した本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、エピセサミン単独投与と比較して、エピセサミンの経口吸収性および／または血中移行性が高いという性質を有する。また、上記所定の割合でセサミンとエピセサミンとを含有した本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、セサミン単独投与およびエピセサミンの単独投与と比較して、セサミン類の持つ生理活性、具体的には、抗高血圧作用や肝機能改善作用、脂質代謝改善作用が増強されるという特徴を有するので、セサミン類の有する生理活性を効率良くかつ有効に発揮することができる。
【００１５】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物の製造方法は特に限定されるものではなく、例えば、本発明の組成物は、セサミンおよびエピセサミンの精製品を所望の比率で配合して製造することが可能である。その際、セサミンおよびエピセサミンの精製品は、例えば非特許文献２に記載の方法で得ることが可能であり、その詳細は後記実施例１にも記載されている。しかしながら、精製品は他の適当な方法で得てもよい。
【００１６】
本発明の別の態様は、セサミンおよびエピセサミンを含む原料混合物の両成分の重量比を求め、該混合物に、本発明の所定のセサミン−エピセサミン組成比になるまでセサミンまたはエピセサミンの精製品、（もしくはセサミンまたはエピセサミンの一方を他方より多く含む混合物）を添加することからなる。
【００１７】
本発明のさらに別の態様は、セサミンとエピセサミンの混合物（例えば、組成比１：１）からセサミンを除去することからなる。セサミンの除去は、再結晶、クロマトグラフィー、蒸留等の方法を単独または適宜組み合わせて行うことができる。
【００１８】
さらに、別の態様では、本発明はセサミン、セサミン−エピセサミン混合物、又はエピセサミンにエピ化反応を施すことによってセサミン−エピセサミン組成比を調節することにより行ってもよい。
【００１９】
更に、本発明者等がセサミン−エピセサミン混合物中のエピセサミン濃度を高めるために近年開発した、次の方法を使用することもできる。すなわち、
アルコール又はアルコール水溶液にセサミン−エピセサミン混合物を溶解し、次いで、 再結晶法を用いてエピセサミンを選択的に晶析させて、エピセサミン濃度を高めたセサミン／エピセサミン混合物を得る方法がある。
【００２０】
また、別法としては、セサミン−エピセサミン混合物を特定の油脂に加熱溶解し、次いで、再結晶法を用いてエピセサミンを選択的に晶析させることにより、エピセサミン濃度を高めたセサミン／エピセサミン混合物を得ることができる。
【００２１】
さらに、セサミン−エピセサミン混合物を水、水溶性溶媒又はこれらの混合物に溶解し、必要に応じて、アルカリを添加した後、セサミン類を析出させて、エピセサミン濃度を高めたセサミン／エピセサミン混合物を得る方法も利用できる。
【００２２】
なお、本発明の実施に際して、原料混合物および本発明の組成物中のセサミン−エピセサミン組成は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等の公知の分析方法で求めることができる。
【００２３】
上記のセサミンおよびエピセサミンを含む原料混合物として、例えば、ゴマ種子、ゴマ粕およびゴマ油中から精製したゴマリグナン組成物を挙げることができる。ゴマリグナン組成物は、市販品（例えば、竹本油脂製）を購入することができるが、ゴマ油から取得することもでき、その方法は、上記の非特許文献２や、ゴマ油を水蒸気蒸留して留出物を得て、アルカリ存在下で留出物からセサミン類を析出させて分離する方法（特開平１０−７６７６号参照）等、数多く知られている。なお、セサミンおよびエピセサミンを含む原料混合物としては、上記のゴマ種子、ゴマ粕およびゴマ油中から精製したゴマリグナン組成物に限定されるものではなく、これらの成分を実質的に含有するもの、例えば、五加皮、桐木、白果樹皮等を使用することもできる。
【００２４】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、エピセサミンの経口吸収性および／または血中移行性が高いという性質を有する。エピセサミンの経口吸収性および血中移行性は、例えば、後記実施例２に記載されている方法（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる定量）により確認することが可能であるが、他の適当な方法で行ってもよい。
【００２５】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、エピセサミンの経口吸収性および／または血中移行性が高いという性質を有するため、エピセサミンの持つ様々な作用を効率的かつ有効に発揮させることができる。エピセサミンの作用としては、セサミン類の臓器移行の向上や肝機能改善作用等が挙げられる。
【００２６】
また、本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、セサミン単独投与およびエピセサミンの単独投与と比較して、そのメカニズムの詳細は不明であるが、セサミン類の持つ生理活性が高いという性質を有するため、セサミン類の持つ様々な生理活性を効率的かつ有効に発揮させることができる。セサミン類の生理活性としては、血中コレステロールおよび／または中性脂質低下作用、抗高血圧作用、不飽和脂肪酸抗酸化作用、肝機能改善作用、活性酸素消去作用、Δ５不飽和化酵素阻害作用、高度不飽和脂肪酸の生体内安定化作用等が挙げられる。
【００２７】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、飲食物または医薬品組成物の形態で好適に使用できる。飲食物または医薬品組成物に添加する本発明のセサミン／エピセサミン組成物の割合は、その機能を有する限り特に制限されないが、通常０．０１〜１００重量％の範囲から適宜選択することができる。なお、該飲食物または医薬品組成物に含有するエピセサミンの含有量としては、一回の経口摂取当たり、０．５〜１００ｍｇ、好ましくは１〜６０ｍｇ、より好ましくは３〜６０ｍｇである。
【００２８】
かかる本発明のセサミン／エピセサミン組成物含有飲食物または医薬品組成物の製造は、本発明のセサミン／エピセサミン組成物を飲食物に添加することによって行ってもよいし、セサミンとエピセサミンを本発明の重量比で含有するように、セサミン、エピセサミン、および／またはセサミン−エピセサミン混合物を同時に、または別々に添加することにより、行ってもよい。両化合物の重量比の調節は、セサミン／エピセサミン組成物の製造に関連して記載された方法を適宜用いればよい。
【００２９】
本発明のセサミン／エピセサミン組成物含有飲食物または医薬品組成物は、その形態を特に制限するものではなく、例えば粉末状、顆粒状、錠剤状などの固体状、液状、乳液状等の溶液状またはこれら溶液状の組成物を充填したカプセル剤、またはペースト状等の半固体状などの、任意の形態に調製することができる。
【００３０】
この場合、本発明のセサミン／エピセサミン組成物に、さらに希釈剤、担体または添加剤等の成分を配合して任意の製剤化処理を行い、製剤として調製することができる。ここで希釈剤または担体としては、セサミン類の生理活性を妨げないものであれば特に制限されず、例えばシュクロース、グルコース、果糖、マルトース、トレハロース、乳糖、オリゴ糖、デキストリン、デキストラン、サイクロデキストリン、澱粉、水飴、異性化液糖などの糖類、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン等のアルコール類、ソルビトール、マンニトール、エリスリトール、ラクチトール、キシリトール、マルチトール、還元パラチノース、還元澱粉分解物等の糖アルコール類、トリアセチン等の溶剤、アラビアガム、カラギナン、キサンタンガム、グァーガム、ジェランガム、ペクチン等の多糖類、または水を挙げることができる。また添加剤としては、キレート剤等の助剤、香料、香辛料抽出物、防腐剤などを挙げることができる。
【００３１】
使用上の利便等から、これらの希釈剤、担体または添加剤を用いて上記製剤を調製する場合は、セサミン／エピセサミン組成物が、製剤１００重量％中に、０．０１〜１００重量％、好ましくは０．１〜５０重量％の割合で含まれるように調製することが望ましい。この場合、原料となるセサミン／エピセサミン組成物として、例えばセサミンとエピセサミンの総量が組成物中５１％未満である組成物を用いた場合、セサミン類含有量が低いため、好ましい量のセサミン類を配合しようとすると、得られるセサミン／エピセサミン組成物含有製剤の体積が大きくなり過ぎるため、摂取に不都合を生じることがある。特に、本発明のセサミン／エピセサミン組成物を油脂に溶解してソフトカプセル等の経口投与用に製剤化した場合は、製剤を大きくするか、または一回に大量に粒数の製剤を摂取する必要があり、摂取に支障が生じるばかりか、溶剤となる油脂を必要以上に大量摂取してしまうという問題も生じる。したがって、摂取量が少なくてよいという観点からもセサミンとエピセサミンの総量が組成物中５１％以上となるように調製したセサミン／エピセサミン組成物を用いることが好ましく、さらに純度が９０％以上であるセサミン／エピセサミン組成物を用いることが好ましい。
【００３２】
セサミン／エピセサミン組成物含有飲食物としては、例えばサプリメントのように上記本発明のセサミン／エピセサミン組成物そのものを有効成分とする飲食物、ならびに一般の飲食物に上記本発明のセサミン／エピセサミン組成物を１成分として配合して、その飲食物にセサミン類の生理活性を付与してなる機能性食品（特定保健用食品や条件付き特定保健用食品が含まれる）を挙げることができる。なお、これらの飲食物には、血中コレステロールおよび／または中性脂質低下作用を始めとする生理作用を有することを容器や説明書に表示した、本発明の所定の重量比でセサミンおよびエピセサミンを含有または添加したことを特徴とする飲食物も含まれる。表示され得る飲食物の他の生理作用には、抗高血圧作用、不飽和脂肪酸抗酸化作用、肝機能改善作用、活性酸素消去作用、Δ５不飽和化酵素阻害作用、高度不飽和脂肪酸の生体内安定化作用等が含まれる。
【００３３】
対象とする飲食物としては、制限はされないが、果汁飲料、清涼飲料、スポーツ飲料、アルコール飲料、茶等の飲料、パン、めん類、ごはん、菓子類（ビスケット、ケーキ、キャンデー、チョコレート、和菓子）、豆腐およびその加工品などの農産食品、清酒、薬用酒、みりん、食酢、醤油、味噌などの発酵食品、ドレッシング、マヨネーズ、バター、マーガリン、ショートニング、食用油脂などの油脂食品、ヨーグルト、ハム、ベーコン、ソーセージなどの蓄農食品、かまぼこ、揚げ天、はんぺんなどの水産食品等を挙げることができる他、動物試料又はペットフードとしても利用可能である。
【実施例】
【００３４】
以下実施例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１．セサミンおよびエピセサミンの精製
セサミンおよびエピセサミン混合物（セサミンおよびエピセサミンを含む原料混合物）として、竹本油脂製の混合物（セサミン類としての純度：９９．５％、セサミン：エピセサミン配合比が５１．８：４８．０（重量％））を購入して用いた。【００３５】
セサミンおよびエピセサミンの高純度精製品は、以下の条件の逆相系ＨＰＬＣを用いた方法により調製した。すなわち、ＤＭＳＯに溶解させた１００ｍｇの上記混合物をDevelosil ODS-UG-5 （20Φ×250mm、野村化学社製）カラムにインジェクトし、２０％→８０％アセトニトリルの直線勾配（溶出時間：１００分、流速：５ｍｌ／分）により溶出させ、２８０ｎｍの吸光度をモニターし分画することにより、セサミン（保持時間：８９分）を３８．９ｍｇ、エピセサミン（保持時間：９４分）を３５．０ｍｇ分取した。この操作を１０回繰り返して得られたそれぞれの精製標品（いずれも純度は９９％以上）を実施例２の試験に供した。
実施例２．セサミン−エピセサミンの組成比と経口吸収・血中移行性-1
ＳＤ（ＩＧＳ）系雄性ラット（６週齢）を日本チャールスリバー社より購入し、１週間試験環境で馴化させた後、順調な発育を示した動物を試験に供した。一晩絶食させたラットを各群５匹からなる６群に分け、実施例１で得られた高純度セサミンとエピセサミンを様々な組成比で配合したセサミン／エピセサミン混合物（セサミン：エピセサミン（重量比）＝６：４、５：５、４：６、３：７、１：９、０：１０）を１０ｍｇ／ｋｇの用量でオリブ油に溶解し、ゾンデを用いて経口投与した。投与前、投与後１、２、４、６、８、２４時間後に尾静脈よりヘパリン採血管に血液を採取し、遠心分離操作（8,000rpm、10min）により血漿サンプルを得た。内部標準を添加してＯａｓｉｓ  ＨＬＢで固相抽出し、抽出液を減圧濃縮後、メタノールで懸濁し、フィルターろ過してＬＣ−ＭＳ／ＭＳに付してセサミンおよびエピセサミンの定量を行った。セサミンまたはエピセサミンの量は、セサミンおよびエピセサミンそれぞれのピーク面積と、内部標準として用いたユーデスミン（フナコシ株式会社）のピーク面積との比により決定した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析条件を以下に示す。【００３６】
(ＨＰＬＣ)
カラム：Develosil C30-UG-5（5μm、2.0 Φ × 50 mm、野村化学社製）
移動相：A；蒸留水、B；メタノール、D；100 mM 酢酸アンモニウム水溶液
流速  ：0.25 mL/min
グラジエント：B液が55%、D液が10％で2分間、その後、3分間でB液が55%から60%、D液が10％、2分間で：B液が60%から85%、D液が10％となるリニアグラジエント
（ＭＳ/ＭＳ）
測定モード：選択反応モニタリング
検出  ：エピセサミン（保持時間：約5.6分）；前駆イオンm/z=372（[M+NH4]+）、生成イオンm/z=233
：ユーデスミン（保持時間：約2.8分）；前駆イオンm/z=404([M+NH4]+)、生成イオンm/z=249
イオン化法：ＥＳＩ法
エピセサミンの血中濃度は投与後約６時間まで上昇した後にそこをピークとして徐々に減少し、２４時間後には血中にほとんど検出されなかった。吸収量の指標として、0-24時間の血中濃度曲線から曲線下面積（Area under the curve ;AUC）を求めた。各投与群のエピセサミンの投与量が異なるため、各AUCをエピセサミン投与量比で割ることにより補正して算出した吸収率をもって比較するのが適当である。その結果を図１に示す。エピセサミン単独で投与した場合の吸収率が72.5であるのに対し、セサミン：エピセサミンを50：50の配合比で投与した場合は76.7とより高い吸収率を与えることが分かった。さらに、エピセサミンの配合重量比を増加させることにともない吸収率は上がり、30：70の配合比で最も高い値となり、10：90の配合比においても高い値を示した。つまり、セサミンとエピセサミンを50：50〜10：90の組成比で配合した場合、エピセサミン単独（0：100重量比）で投与するよりもエピセサミンの吸収率が高いことが明らかとなった。【００３７】
従って、本実施例の結果は、一定の重量比でセサミンとエピセサミンを配合させることによりエピセサミンの吸収率が向上することを示すものである。
実施例３．セサミン−エピセサミンの組成比と経口吸収・血中移行性-2
有効なセサミンの配合比を規定する目的で、セサミンの配合比をさらに下げた条件下での作用について実施例２の方法に準じ評価を行った。つまり、実施例１で得られた高純度セサミンとエピセサミンを様々な組成比で配合したセサミン／エピセサミン混合物（セサミン：エピセサミン（重量比）＝１：９、０．５：９．５、０：１０）を１０ｍｇ／ｋｇの用量でオリブ油に溶解し、ゾンデを用いて経口投与し、吸収率を算出した。その結果を図２に示す。エピセサミン単独で投与した場合の吸収率が59.7であるのに対し、セサミン：エピセサミンを5：95の配合比で投与した場合は64.7、10：90の配合比で投与した場合は72.4とより高い吸収率を与えることが分かった。つまり、セサミンとエピセサミンを5：95の組成比で配合した場合においても、エピセサミン単独（0：100重量比）で投与するよりもエピセサミンの吸収率が高いことが明らかとなった。
実施例４．Deoxycorticosterone acetate-salt (DOCA-salt)高血圧モデルラットに対する血圧低下作用
SD系雄性ラット（６週齢）(日本エスエルシー（株）)に、ネンブタール麻酔下で右腎の摘出手術を施した。1週間回復させた後、DOCA-saltを週に２回、１５mg/kgの用量で皮下投与し、さらに１％の食塩水を飲料水として与えた。Systolic blood pressure（SBP）は非観血式自動血圧測定装置（BP-98A、Softron、東京）を用いテールカフ法により測定した。DOCA-salt処置開始後５週間目に血圧測定を行い、十分な血圧上昇が確認された動物を実験に使用した。８時間絶食させたラットに、対照群としてオリブ油を、また試験群としては実施例１で得られた高純度セサミンとエピセサミンを様々な組成比で配合したセサミン／エピセサミン混合物（セサミン：エピセサミン（重量比）＝１０：０、５：５、０：１０）を１００mg/kgの用量でオリブ油に懸濁し、ゾンデを用いて単回経口投与した。投与前、投与後２、４、６、８、１０、１２、２４時間後にSBPを測定した。餌は１２時間目の血圧測定後より与えた。試験は1週間の間隔を設けて実施し、同一個体での測定は最大３回までとした。【００３８】
単回投与後２４時間の血圧変化（n=５〜７）を図３に示す。セサミン単独、エピセサミン単独、オリブ油投与群では、血圧の大きな変化は見られなかったのに対し、セサミン／エピセサミン混合物（５：５）投与群では投与８時間後をピークとした顕著な血圧低下作用が認められた。投与８時間後の血圧変化を各群で比べてみると、セサミン／エピセサミン混合物（５：５）投与群の８時間後の血圧値は-３２mmHgであり、セサミン単独群（-１３ｍｍＨｇ）、エピセサミン単独（-６ｍｍＨｇ）と比べ明らかに低下していた（図４）。
実施例５．DOCA-salt高血圧モデルラットに対する血圧低下作用―混合比の影響
次に最も効果の強かったセサミン／エピセサミン混合物（５：５）を基準とし、配合比の違いによる効果の差について、実施例４の方法に準じて比較試験を行った。なお、投与量は１００mg/kgで非常に強い効果が見られたため、差を見やすくする目的で、１／２に下げて行った。【００３９】
セサミン・エピセサミンを様々な組成比で配合したセサミン／エピセサミン混合物（セサミン：エピセサミン（重量比）＝５：５、３：７、１：９）を５０mg/kgの用量でオリブ油に溶解し、ゾンデを用いて単回経口投与し、血圧値を測定した。【００４０】
投与８時間後の血圧変化（n=３）を図５に示す。セサミン／エピセサミン混合物（５:５）は５０mg/kgの用量では、血圧低下作用は認められなかった。これに対し、セサミン／エピセサミン混合物（３:７）および（１：９）混合物では血圧低下作用が認められ、特に３：７で効果が高いことが明らかとなった。【００４１】
以上の結果は、セサミンとエピセサミンを一定の配合比で混合することにより、相乗的に血圧を低下させる効果があることを示すものである。そして、その効果は配合比３:７がもっとも強いことが明らかとなった。
実施例６．β酸化系遺伝子発現に及ぼす影響
Wistar系雄性ラット（6週齢）を日本クレアより購入し、1週間試験環境で馴化させた後、順調な発育を示した動物を試験に供した。動物を１群５匹で６群に分け、対照群には溶媒であるオリブ油を、また、試験群には実施例１で得られた高純度セサミンとエピセサミンを様々な組成比で配合したセサミン／エピセサミン混合物（セサミン：エピセサミン（重量比）＝１０：０、５：５、３：７、１：９、０：１０）を２００mg/kgの用量でオリブ油に懸濁し、２４時間間隔で３回経口投与した。最終投与４時間後にネンブタール麻酔下で肝臓を摘出し、RNAを抽出後、TaqManケミストリを使用した定量ＲＴ−ＰＣＲ法（Heid CA, Stevens J, Livak KJ, Williams PM. Real time quantitative PCR. Genome Res. 1996 6(10):986-94.）によりβ酸化系遺伝子（１０種類）発現に及ぼす影響を検討した。【００４２】
評価した遺伝子を下記の表1に示し、遺伝子発現量を図６（図６Ａ、Ｂ）に示す。本条件下においてセサミン単独投与群ではβ酸化系遺伝子発現の上昇はほとんど認められなかったが、エピセサミン単独投与群では多くの遺伝子で上昇が認められた。これに対し、セサミン／エピセサミン混合物投与群ではいずれの群においてもエピセサミン単独群よりも顕著な遺伝子発現の上昇が認められた。配合比による違いについては、遺伝子により若干違いが見られたが、各群で大きな差は見られなかった。【００４３】
【表１】
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【００４４】
以上の結果は、エピセサミンとセサミンを混合することにより相乗的にβ酸化系遺伝子の発現を増強させる効果があることを示すものである。
［製剤例］
以下に製剤例を示す。「混合物」と記載したものは、セサミン：エピセサミン組成比が本発明の範囲に該当する（セサミン：エピセサミン＝３０：７０、純度９９．５％）セサミン／エピセサミン組成物を示している。【００４５】
（製剤例１）バター
「混合物」            １．２g
バター脂肪            １００g
酢酸トコフェロール    １．２g
バター製造工程の攪拌操作（チャーニング）でバターミルクが除かれたバター脂肪100ｇに「混合物」を１．２ｇ、さらに１．２ｇの酢酸トコフェロールを加えて練圧操作（ワーキング）を行い均等な組織の本発明組成物含有バターを得た。【００４６】
（製剤例２）顆粒剤
「混合物」              ０．２５ｇ
酢酸トコフェロール      ０．２５ｇ
無水ケイ酸              ２０．５ｇ
トウモロコシデンプン    ７９ｇ
以上の粉体を均一に混合した後に１０％ハイドロキシプロピルセルロース・エタノール溶液１００ｍｌを加え、常法通り練和し、押し出し、乾燥して顆粒剤を得た。【００４７】
（製剤例３）錠剤
「混合物」                  ３．５ｇ
酢酸トコフェロール          ０．５ｇ
無水ケイ酸                  ２０ｇ
微結晶セルロース            １０ｇ
ステアリン酸マグネシウム    ３ｇ
乳糖                        ６０ｇ
これらを混合し、単発式打錠機にて打錠して経7mm、重量100mgの錠剤を製造した。【００４８】
（製剤例４）カプセル剤
ゼラチン                      ７０．０％
グリセリン                    ２２．９％
パラオキシ安息香酸メチル      ０．１５％
パラオキシ安息香酸プロピル    ０．５１％
水                            適量
計                            １００％
上記成分からなるソフトカプセル剤皮の中に、以下に示す組成物を常法により充填し、１粒200ｍｇのソフトカプセルを得た。【００４９】
「混合物」            １０．８ｍｇ
小麦ビーズワックス    ３０ｍｇ
α−トコフェロール    ２０ｍｇ
パーム油              １０ｍｇ
小麦胚芽油            適宜
計                    １００％
（製剤例５）ドリンク剤
呈味：ＤＬ−酒石酸ナトリウム  ０．１ｇ
コハク酸                ０．００９ｇ
甘味：液糖                    ８００ｇ
酸味：クエン酸                １２ｇ
ビタミン：ビタミンＣ          １０ｇ
「混合物」                    １ｇ
ビタミンＥ                    ３０ｇ
シクロデキストリン            ５ｇ
香料                          １５ｍｌ
塩化カリウム                  １ｇ
硫酸マグネシウム              ０．５ｇ
上記成分を配合し、水を加えて１０リットルとした。このドリンク剤は、１回あたり約１００ｍｌを飲用する。
［発明の効果］
本発明のセサミン／エピセサミン組成物を摂取することにより、セサミン類の持つ様々な生理活性を効率よく発揮させることが可能である。特に、本発明のセサミン／エピセサミン組成物は、エピセサミンの経口吸収性および血中移行性に優れるので、エピセサミンが持つ様々な生理活性を効率よく発揮させることが可能である。また、エピセサミンにセサミンを一定の配合比で配合することにより、セサミン類の持つ血圧低下作用やβ酸化系遺伝子の発現を相乗的に増強することができる。加えて、セサミンおよびエピセサミンは、植物由来であるため穏やかな作用を有し、極めて安全性が高い。従って、本発明組成物は非常に有用であり、その応用範囲は健康食品のみならず、医薬品にも適用可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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