(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所投与可能な眼用組成物において両親媒性抗ヒスタミン薬物濃度を選択するための方法であって、該方法が、該薬物の界面活性度を決定する工程、および該薬物が約２〜１１ｍＮ／ｍの界面活性度を有するように抗アレルギー薬物濃度を選択する工程、を包含し、ここで該薬物界面活性度は２４℃で水性緩衝液亜相上に２８〜３２ｍＮ／ｍの初期の界面圧にて広げられた１−ステアロイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンの単分子薄層の界面圧の変化を測定する事によって決定され、ここで、該両親媒性抗ヒスタミン薬物濃度を、緩衝液亜相において、０から、５ｍＭまで漸進的に増加させる、方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の背景）
（発明の分野）
本発明は、アレルギー性結膜炎、春季結膜炎、春季カタル、および巨大乳頭結膜炎のような、アレルギー性眼疾患を処置するために使用される局所的な眼用処方物に関する。より詳細には、本発明は、アレルギー性眼疾患を処置および／または予防するためのマスト細胞安定剤の治療的および予防的な局所的使用に関する。
【０００２】
（関連分野の説明）
従来の抗ヒスタミン薬物は、マスト細胞に対して二相性の効果を示すことが知られる。より低い濃度では、抗ヒスタミン剤はマスト細胞からのヒスタミン放出の阻害を促進する。抗ヒスタミン剤の濃度が増加するにつれて、マスト細胞からのヒスタミンの自発的な放出があり、これは、マスト細胞膜安定性の見掛けの喪失と関連する。例えば、Ｍｏｔａら、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１５：３９６−４０４を参照のこと。この二相性の挙動は、ヒト結膜マスト細胞の精製された調製物において、抗アレルギー薬物のケトチフェン（４，９−ジヒドロ−４−（１−メチル−４−ピペリジニル−イデン）−１０Ｈ−ベンゾ［４，５］−シクロヘプタ−［１，２−ｂ］チオフェン−１０−オン）について実証されている。Ｙａｎｎｉら、Ｊ．Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２：３８９−４００（１９９６）。
【０００３】
クロモリンナトリウムのような抗ヒスタミン活性を有しない最初に作製されたマスト細胞安定剤薬物はまた、二相性の挙動を示す。Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｍｏｎｏｇｒ．Ａｌｌｅｒｇｙ、１４：２９９−３０６（１９７９）。
【０００４】
米国特許第４，８７１，８８５号および同第４，９２３，８９２号（共にＢｕｒｒｏｕｇｈｓ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ  Ｃｏ．に譲渡された（「Ｂｕｒｒｏｕｇｈｓ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ特許」））は、抗ヒスタミン作用を有するマスト細胞安定剤として、１１−（３−ジメチルアミノプロピリデン）−６，１１−ジヒドロジベンズ［ｂ，ｅ］オキセピン−２カルボン酸および１１−（３−ジメチルアミノプロピリデン）−６，１１−ジヒドロジベンズ［ｂ，ｅ］オキセピン−２（Ｅ）−アクリル酸を含む、特定のドキセピンのカルボン酸誘導体を記載する。これらの化合物は、マスト細胞からのオータコイド（すなわち、ヒスタミン、セロトニンなど）の放出を阻害し、そして標的組織に対するヒスタミンの効果を直接的に阻害する。Ｂｕｒｒｏｕｇｈｓ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ特許は、ドキセピンのカルボン酸誘導体を含む種々の薬学的処方物を教示する；両方の特許における実施例８（１）は眼用溶液処方物を開示する。
【０００５】
米国特許第５，６４１，８０５号は、アレルギー性眼疾患を処置するための局所的な眼用処方物を開示する。局所的な処方物は、ドキセピンの酢酸誘導体、および、特に、Ｚ−１１−（３−ジメチルアミノプロピリデン）−６，１１−ジヒドロジベンズ［ｂ，ｅ］オキセピン−２−酢酸（すなわち、オロパタジン）を含み、これは、以下の式を有する化合物のシス形態である：
【０００６】
【化１】
0004851035.tif 000002
他の抗ヒスタミンまたはマスト細胞安定剤の抗アレルギー薬物とは異なり、オロパタジンは、抗ヒスタミン活性が観察される濃度よりも高い濃度にて、マスト細胞からヒスタミンの放出を引き起こさない。マスト細胞の膜安定性を維持し、そして０．０１〜０．５％（ｗ／ｖ）の薬物濃度の範囲にわたってマスト細胞からのヒスタミンの放出を防止する他の局所的な眼用抗アレルギー薬物が所望される。
（発明の要旨）
本発明は、アレルギー性眼疾患の局所的な処置における使用について適切である抗アレルギー薬物濃度を選択するための方法を提供する。本発明の方法によれば、両親媒性の抗アレルギー化合物の界面活性度が以下に記載されるように決定される。局所的に投与可能な眼用抗アレルギー産物について、抗アレルギー薬物濃度が、薬物が約２〜１１の界面活性度（ｍＮ／ｍの単位において）を有するように選択される。
【０００７】
本発明はまた、薬物が約２〜１１の界面活性度を有するような濃度にて両親媒性抗アレルギー薬物を含む、局所的に投与可能な眼用抗アレルギーの薬学的な薬物産物に関する。
【０００８】
特に、本発明は、１１を超える界面活性度を有する濃度にて処方された両親媒性の抗アレルギー化合物が、マスト細胞の膜不安定化、およびヒト結膜マスト細胞からのオータコイド（ヒスタミンを含む）の漏出を引き起こすようであるという知見に基づく。
【０００９】
（発明の詳細な説明）
本発明によれば、局所的に投与可能な眼用抗アレルギーの薬学的な薬物産物は、薬物が約２〜１１、そして好ましくは約４〜１１の界面活性度を有するような濃度で、両親媒性の抗アレルギー薬物を含む。本発明の薬物産物は、両親媒性の抗アレルギー薬物を、約２０ｍＭ以下の濃度にて含む。
【００１０】
界面活性度は、緩衝液単独中の両親媒性の抗アレルギー薬物（「試験化合物」）と、リン脂質単層との相互作用を決定することによって得られる。試験化合物／マスト細胞膜相互作用は、改変されたラングミュア槽中の水性緩衝液上に広げられたリン脂質単層において模倣される。この系において、試験化合物−膜相互作用は、水性緩衝液亜相上に２８〜３２ｍＮ／ｍの初期の界面圧にて広げられた１−ステアロイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＳＯＰＣ）の単分子薄層の界面圧（ｍＮ／ｍでΔπ）における変化を決定することによって定量される。２８〜３２ｍＮ／ｍの初期の界面圧は、この圧力がほとんどの哺乳動物細胞膜の圧力を模倣するため選択される。
【００１１】
緩衝液亜相における試験化合物の濃度を、０から、少なくとも５ｍＭまで（または５ｍＭ未満の場合、化合物の溶解度の限界まで）、および好ましくは少なくとも２０ｍＭまで（または２０ｍＭ未満の場合、化合物の溶解度の限界まで）漸進的に増加しながら、界面圧の変化は２４℃にて測定される。試験化合物は、ＳＯＰＣ単層を妨害することを回避するのに十分に遅い速度（例えば、０．４ｍｌ／分）での、連続的な亜相交換（亜相の全容量は一定に維持される）によって亜相に添加される。
【００１２】
界面圧は、２４ｇａ．ニクロムワイアＷｉｌｈｅｌｍｙ探針を備える、Ｃａｈｎ２７電気てんびんの周囲に構築された自動化界面モニター−コントローラーを使用して、測定される。［Ｔｓｕｊｉｔａら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒ  ｌｉｐａｓｅ  ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｔｏ  ｓｕｒｆａｃｅｓ．１、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２６：８４２３−８４２９（１９８７）、およびＭｏｍｓｅｎら、Ｔｈｅ  ｓｕｉｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｎｉｃｈｒｏｍｅ  ｆｏｒ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｇａｓ−ｌｉｑｕｉｄ  ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  ｔｅｎｓｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｗｉｌｈｅｌｍｙ  ｍｅｔｈｏｄ．Ｊ．Ｃｏｌｌｏｉｄ  Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  Ｓｃｉ．１３５：５４７−５５２（１９９０）を参照のこと］。鍵穴形状のテフロン（登録商標）溝の２つの水性区分（環状および長方形）は分離され；環状区分（面積＝２５．５ｃｍ2、容量＝２４．４ｍｌ）のみが単層形成のために使用される。精密な水浴によって制御されるサーモスタットベースプレートを使用して、両方の区分における温度が２４℃で維持される。水相におけるＷｉｌｈｅｌｍｙ探針の正確な位置決め、浸漬に起因する探針浮力についての補正、亜相撹拌、およびデータ収集は、マイクロプロセッサによって制御される（Ｔｓｕｊｉｔａら、同書）。
【００１３】
界面圧に対する試験化合物の効果は、緩衝液における試験化合物の濃縮された溶液での水相の連続的な交換によって決定される。緩衝液の同一性は水性亜相が生理学的ｐＨにて維持される限り重要ではないが、好ましい緩衝液は、ｐＨが７．５に調節された、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／１００ｍＭ  ＮａＣｌである。水相中の試験化合物の濃度は、交換される亜相容量の画分および濃縮された溶液中の溶質の濃度から決定される。連続的な交換は、ＳＯＰＣ単層を妨害することを回避するために必要であり、そして側面または底面の注入／排出ポートによって達成される。
【００１４】
本発明の両親媒性の抗アレルギー薬物は好ましくは、抗ヒスタミン活性を保有し、例えば、三環系のＨ1−受容体アンタゴニストは、Ｈ1−受容体に対して０．１〜１００ｎＭの範囲においてインビトロ結合親和性（ｋi）を示す。本発明の両親媒性の抗アレルギー薬物は、オロパタジン、ケトチフェン、エメダスチン、フェニラミン、ピリラミン、クロモリン、ネドクロミル（ｎｅｄｏｃｒｏｍｉｌ）、およびレボカバスチンを排除する。
【００１５】
局所的な眼投与のための抗アレルギー化合物の処方物は、公知技術を使用して作製され得る。張性調節化剤、ｐＨ調節化剤、緩衝化剤、保存剤、快適さを増強する薬剤、粘性調節剤、安定化剤などのような眼に受容可能な賦形剤が含まれ得る。例えば、塩化ナトリウム、グリセリン、マンニトールなどが等張剤として使用され得；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、塩化ベンザルコニウムなどが保存剤として使用され得；リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、ホウ酸などが緩衝化剤として使用され得；エデト酸ナトリウムなどが安定剤として使用され得；ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸などが粘性ビヒクルとして使用され得；そして水酸化ナトリウム、塩酸などがｐＨ制御剤として使用され得る。所望される場合、本発明に従う抗アレルギー剤を含有する処方物はまた、他の活性剤を含み得る。
【００１６】
本発明に従って産生される点眼処方物は典型的に、１回あたり１滴から数滴の量において１日に１回から数回、眼に適用されることのみを必要とするが、より重篤な場合において、滴下は、１日に数回適用され得る。典型的な一滴の分量は約３０μｌである。
【００１７】
本発明の特定の実施形態は、以下の実施例において例示される。
【００１８】
（実施例１：局所的な点眼剤処方物）
【００１９】
【表１】
0004851035.tif 000003
（実施例２：局所的な眼用ゲル処方物）
【００２０】
【表２】
0004851035.tif 000004
（実施例３：オロパタジンおよびケトチフェンの界面活性度の測定）
水を逆浸透および炭素濾過、Ｅｌｉｘ３脱イオン化系（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の通過、およびＭｉｌｌｉ  Ｑ  ＵＶ  Ｐｌｕｓ研磨系（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の通過によって精製した。緩衝液（０．１Ｍ  ＮａＣｌ  ｐＨ７．５を含有する１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳから構成される）は、オロパタジンおよびケトチフェンの溶液を調製するために（ならびにコントロール実験のために）使用された。薬物と緩衝液との混合後、５Ｍ  ＮａＯＨでｐＨを７．５の値に再調節することが必要であった。全ての化学薬品は試薬等級であった。
【００２１】
（水相内容物の交換）−上記の自動化界面モニター−コントローラーの環状区分を、サンプル区分の外壁を介して差し込まれる入口管（１／３２’’ＩＤ  テフロン（登録商標））および出口管（１８ｇａ．テフロン（登録商標））ではめ合せた。これらは、充填およびフラッシングのために使用された三方向に通じるテフロン（登録商標）バルブ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｒｅｎｏ、ＮＶ）を介して、マイクロプロセッサで制御されたプッシュ−プル式の２重シリンジポンプ（ｓｐ２６０ｐ型、Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｓａｒａｓｏｔａ、ＦＬ）中に設置された２５ｍＬの耐ガス構造（ｇａｓ−ｔｉｇｈｔ）シリンジ（１０２５型、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｒｅｎｏ、ＮＶ）に接続された。環状区分の温度に、入ってくる溶液を平衡化するために、約４２ｃｍの入口管を、溝の水が充填された長方形区分に巻き付けた。カスタムメイドのテフロン（登録商標）でコートされた磁性撹拌子（長さ＝３．６ｃｍ、直径２ｍｍ）を、水性内容物を混合するために使用した。撹拌子は、環状区分の下に設置されそしてマイクロプロセッサによって制御される段階式モーターで駆動された磁石によって、約５０ｒｐｍであった。比較的遅い撹拌速度および小さな撹拌子直径が、脂質単層の妨害を最小にするために使用された。環状区分の内容物と、入口シリンジ中の溶液とを、一定の容量を維持しながら交換するために、シリンジは同時であるが、反対の方向に、シリンジポンプによって操作された。コントロール実験は、２５ｍｌの水相の交換の間に、試験容器から取り出された液体の容量が、０．０２３ｍｌ（ｎ＝２）、すなわち約０．１％の平均偏差内に一定なままであったことを示した。このことは、Ｗｉｌｈｅｌｍｙ探針の浸漬の深さが、約１０μｍ内に一定であったこと、従って、水相と探針との接触角が、交換実験の間、本質的に一定のままであったことを保証した。
【００２２】
（界面圧に対するオロパタジンおよびケトチフェンの効果の測定）
オロパタジンおよびケトチフェンの飽和溶液をそれぞれ、緩衝液中で過剰の薬物を穏やかに加温し、ｐＨを７．５に調節し、そして２４℃にサンプルを平衡化することによって各交換実験について調製した。未溶解の薬物を除去するための濾過後、溶液中の薬物の濃度を分光光度的に決定した。溶液の希釈されたアリコート中の薬物の濃度を、薬物の標準溶液で得られた標準曲線にそれらの吸光度を比較することによって決定した。この溶液または緩衝液（コントロール）を、装置の注入シリンジにロードし、そして３０ｍＮ／ｍのわずかに下回る所望の界面圧に、ＳＯＰＣの単層を交換区分中の水相の界面上に広げた。安定であると考えられた、０．０１％／分未満の界面圧ドリフト速度を達成するために、脂質薄層を、９０〜２２０分間平衡化した。一旦単層が安定になると、交換は０．４ｍｌ／分の一定速度で行われ、この間界面圧は時間の関数として記録された。
【００２３】
少なくとも２連の交換実験およびコントロール（薬物なし）実験を行った。コントロールの各セットを名目上の圧力に正規化し、そしてトレースを平均した。結果は図１において示され、ここでは薬物濃度対ＳＯＰＣ単層の界面圧が、各薬物についてプロットされる。オロパタジンは、水性亜相におけるその濃度が０〜５ｍＭに増加するので、界面圧の比較的小さな増加（７．１ｍＮ／ｍ）を引き起こした。対照的に、ケトチフェンは、０〜３．５ｍＭの濃度範囲にわたって試験した場合、オロパタジンよりも２倍大きい界面圧の増加（１５ｍＮ／ｍ）を生じた。従って、オロパタジンの界面活性度は７．１であり、そしてケトチフェンの界面活性度は１５である。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、３０ｍＮ／ｍの初期の界面圧にて広げられた１−ステアロイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＳＯＰＣ）単層の界面圧に対するオロパタジンおよびケトチフェン薬物濃度の効果を示す。
【図１】
0004851035.tif 000005