(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤と、下記式（１）
【化１】
0004970692.tif 000005
（式中、ｎは１０）
で表される還元型補酵素Ｑ１０を併用することを特徴とする、動脈硬化抑制剤。
【請求項２】
ヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤と還元型補酵素Ｑ１０は、両者を含む単一の製剤として投与されることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の動脈硬化抑制剤。
【請求項３】
ヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤と還元型補酵素Ｑ１０が別々の薬剤として投与されることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の動脈硬化抑制剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、コレステロール低下作用を有する薬剤、例えばヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤（以下、スタチンと記す）と、血漿低密度リポ蛋白質（以下、ＬＤＬと記す）中に存在して、ＬＤＬの酸化抑制作用を持つ還元型補酵素Ｑ１０を併用することにより、より強い動脈硬化抑制作用を発現させる方法、および、そのための組成物に関する。
背景技術
冠動脈疾患は今日では最も注意を払わねばならない疾患の一つである。冠動脈疾患の引き金である動脈硬化には種々の要因が複合的に寄与すると考えられているが、血中のコレステロールの増加が重要な因子であり、より直接的にはコレステロール粒子である低密度リポ蛋白質（ＬＤＬ）の増加およびその酸化による変性が要因である。
動脈硬化を予防するためには、血中コレステロールを低下させることが重要である。高コレステロール症患者に対するスタチン類の強いコレステロール低減作用が報告されている。スタチン類は、コレステロール生合成の律速酵素であるヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素を阻害する事により、生体内でのコレステロールの生合成を抑制し、肝臓内のコレステロール含量の低下と、それに引き続くＬＤＬ受容体の増加によって血漿中のコレステロールを低下させている。しかし、この薬剤が開発されてから約１０年が経過したにも関わらず、冠動脈疾患の発症率には変化がないとの報告があり、動脈硬化の抑制は、コレステロールの低減のみでは不十分である。
動脈硬化の発生要因として、酸化ＬＤＬ仮説が知られている。即ち、ＬＤＬが酸化を受けて酸化ＬＤＬが生じ、この酸化ＬＤＬがマクロファージに取り込まれてマクロファージを泡沫化し、泡沫化したマクロファージが動脈壁に沈着して動脈硬化を進展させる、というものである。近年、この仮説を裏付ける研究結果が多く発表されている。高脂血薬であるプロブコールの抗動脈硬化作用は、コレステロール低減作用によるものではなく、抗酸化作用によるものであると考えられている。即ち、抗動脈硬化作用には、コレステロールの低減と共にＬＤＬの酸化抑制が有効な手段である。
ＬＤＬに含まれる天然の抗酸化物質として補酵素Ｑ１０とビタミンＥが知られている。従来、そのＬＤＬ中での存在量の多さからビタミンＥが抗酸化活性の中心物質であると考えられてきたが、補酵素Ｑ１０がより重要な因子であることが最近の研究で明らかになった。補酵素Ｑ１０は、生体で生合成される分子であるが、その生合成経路がコレステロールの生合成経路と同様にヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡを経由するため、前記のスタチンによって補酵素Ｑ１０の生合成も阻害を受けることは良く知られた事実である。実際にスタチンの投与による血漿中補酵素Ｑ１０量の減少が多く報告されている。また、スタチンの投与によりＬＤＬが酸化を受けやすくなったという報告もあり、スタチンによる補酵素Ｑ１０への、ひいてはＬＤＬの易酸化性への影響が疑われている。スタチン投与による補酵素Ｑ１０の減少に対しては、補酵素Ｑ１０を投与して減少を補うことが行われている（特開平２−２３３６１１号公報、ＵＳ５０８２６５０、ＵＳ５３１６７６５）。
補酵素Ｑ１０は、酸化型と還元型の二つの型があり、生体内においては通常４０〜９０％程度が還元型で存在することが知られている。ＬＤＬ粒子中で抗酸化活性を示すものは還元型補酵素Ｑ１０であり、酸化型補酵素Ｑ１０がどれだけ大量に存在しても、抗酸化活性は全く示さない。従って、動脈硬化抑制には血漿中の還元型補酵素Ｑ１０を増加させる必要がある。しかし、前述した補酵素Ｑ１０の投与には、いずれも酸化型補酵素Ｑ１０（ユビキノン）が用いられている。
発明の要約
本発明は、高脂血症あるいはコレステロール薬の使用による血漿ＬＤＬの抗酸化能の低下をより効率的に回復あるいは増加させ、より強い抗動脈硬化作用を得るための方法および組成物を提供することを目的とするものである。
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、還元型補酵素Ｑ１０の投与が酸化型補酵素Ｑ１０の投与に比較して血漿中の還元型補酵素Ｑ１０を顕著に増加させることを見出し、本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明は、コレステロール低下薬と、下記式（１）
0004970692.tif 000002
で表される還元型補酵素Ｑ１０を併用することからなる、動脈硬化を抑制する方法である。
また本発明は、コレステロール低下薬と上記還元型補酵素Ｑ１０を共に含有する動脈硬化抑制用組成物でもある。
スタチンの投与によって減少した血漿中の補酵素Ｑ１０を補うために、酸化型補酵素Ｑ１０を使用することは知られているが、本発明の還元型補酵素Ｑ１０の使用は、酸化型の使用に比べて血漿中の還元型補酵素Ｑ１０量を顕著に増加させることができ、ＬＤＬの酸化抑制、ひいては動脈硬化抑制に非常に有効である。
なお、本明細書中の「動脈硬化抑制」とは、動脈硬化を予め回避するための予防、および、動脈硬化を治癒させるための治療の双方の意味を有するものである。
以下に本発明を詳述する。
発明の詳細な開示
本発明の動脈硬化抑制方法は、コレステロール低下薬と、還元型補酵素Ｑ１０を併用することからなる。
コレステロール低下薬としては特に限定されず、ヒドキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤（スタチン）、クロフィブラート系抗高脂血剤、ニコチン酸誘導体、ステロール誘導体、エラスターゼ、ポリエンフォスファチジルコリン、メリナミド、パンテチン、イコサペント酸エデト等が挙げられ、ヒドキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤が好ましい。
ヒドキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤としては特に限定されず、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、アトロバスタチン、ロスバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、ピタバスタチン等を挙げることができる。
コレステロール低下薬と還元型補酵素Ｑ１０の使用比は、特に限定されるものではないが、重量比で１：１０〜１０：１が好ましく、１：５〜５：１がより好ましい。
本発明の方法においては、コレステロール低下薬と還元型補酵素Ｑ１０をともに経口投与することが好ましく、その場合の投与量としては、還元型補酵素Ｑ１０基準で１０ｍｇ〜１ｇが好ましく、５０〜５００ｍｇがより好ましい。
本発明の方法では、コレステロール低下薬と還元型補酵素Ｑ１０とを別々の時間に投与してもよく、または同時に投与してもよい。同時に投与する場合は、コレステロール低下薬と還元型補酵素Ｑ１０は、両者を含む単一の製剤として投与してもよく、または別々の薬剤として投与してもよい。さらに還元型補酵素Ｑ１０の投与開始時期は、コレステロール低下剤投与の投与開始前であってもよく、開始後であってもよく、または同時であってもよい。
上記還元型補酵素Ｑ１０を得る方法としては特に限定されず、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により補酵素Ｑ１０を得た後、クロマトグラフィーにより流出液中の還元型補酵素Ｑ１０区分を濃縮する方法などを採用することが出来る。この場合においては、必要に応じて上記補酵素Ｑ１０に対し、水素化ほう素ナトリウム、亜ジチオン酸ナトリウム（ハイドロサルファイトナトリウム）等の一般的な還元剤を添加し、常法により上記補酵素Ｑ１０中に含まれる酸化型補酵素Ｑ１０を還元して還元型補酵素Ｑ１０とした後にクロマトグラフィーによる濃縮を行っても良い。また、既存の高純度補酵素Ｑ１０に上記還元剤を作用させる方法によっても得ることが出来る。
本発明の動脈硬化抑制用組成物には、上記還元型補酵素Ｑ１０と、コレステロール低下薬を配合する。
コレステロース低下薬としては特に制限されないが、ヒドキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤（スタチン）が好ましい。
コレステロール低下薬と還元型補酵素Ｑ１０の配合比は、特に限定されるものではないが、重量比で１：１０〜１０：１が好ましく、１：５〜５：１がより好ましい。
本発明の組成物には、更に、薬学的に許容される他の製剤素材を定法により適宜添加しても良い。このような製剤素材としては、特に限定されず、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、薬効成分の溶解補助剤、安定化剤などが挙げられる。
上記賦形剤としては特に限定されず、例えば、白糖、乳糖、ブドウ糖、コーンスターチ、マンニトール、結晶セルロース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等が挙げられる。
上記崩壊剤としては特に限定されず、例えば、澱粉、寒天、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素カルシウム、デキストリン、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、トラガント等が挙げられる。
上記滑沢剤としては特に限定されず、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が挙げられる。
上記結合剤としては特に限定されず、例えば、エチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トラガント、シェラック、ゼラチン、アラビアゴム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ソルビトール等が挙げられる。
上記酸化防止剤としては特に限定されず、例えば、アスコルビン酸、トコフェロール、ビタミンＡ、−カロチン、亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、クエン酸等が挙げられる。
上記着色剤としては特に限定されず、例えば、医薬品に添加することが許可されているもの等を用いることが出来る。
上記凝集防止剤としては特に限定されず、例えば、ステアリン酸、タルク、軽質無水ケイ酸、含水二酸化ケイ酸等が挙げられる。
上記吸収促進剤としては特に限定されず、例えば、高級アルコール類、高級脂肪酸類、グリセリン脂肪酸エステル等の界面活性剤等が挙げられる。
上記薬効成分の溶解補助剤としては特に限定されず、例えば、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エチル等が挙げられる。
本発明の動脈硬化抑制用組成物を経口投与する場合の投与量は、通常、補酵素Ｑ１０基準で１０ｍｇ〜１ｇ、より望ましくは、５０〜５００ｍｇが用いられる。
本発明の組成物は種々の形態の製剤とすることができる。例えば、還元型補酵素Ｑ１０及びコレステロース低下薬を、例えば、天然油、油状の高級脂肪酸、高級脂肪酸モノグリセライド、又はこれらの混合物に加えあるいは溶解し、油状のまま充填してソフトカプセル剤とすることも出来る。この場合においては、ゼラチンを主体としたもの又はその他の水溶性高分子物質を主体としたもの等を使用することも出来る。また、このようなカプセルにはマイクロカプセルも含まれる。
発明を実施するための最良の形態
以下に実施例及び製剤例を揚げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例および製剤例のみに限定されるものではない。
（実施例１）高脂肪食ハムスターの血漿中還元型補酵素Ｑ１０量に対する還元型補酵素Ｑ１０および酸化型補酵素Ｑ１０の効果
コレステロールを１．５％含有する高脂肪食をハムスターに１週間摂餌させた後、酸化型補酵素Ｑ１０あるいは還元型補酵素Ｑ１０の１％（Ｗ／Ｖ）オリーブオイル溶液を連続４日間経口投与した。一晩絶食させた後、血漿を採取し血漿中の還元型補酵素Ｑ１０量をＨＰＬＣにて定量した。
0004970692.tif 000003
表１に示したように、酸化型補酵素Ｑ１０の投与群に比較して還元型補酵素Ｑ１０投与群では、血漿中還元型補酵素Ｑ１０量がより多く増加した。
（実施例２）高脂肪食ハムスターの血漿低密度リポ蛋白質（ＬＤＬ）の抗酸化活性評価
コレステロールを１．５％含有する高脂肪食をハムスターに１週間摂餌させた後、酸化型補酵素Ｑ１０あるいは還元型補酵素Ｑ１０の１％（Ｗ／Ｖ）オリーブオイル溶液、および、体重１ｋｇあたりプラバスタチン１０ｍｇを連続４日間経口投与した。一晩絶食させた後、血漿を採取し血漿中のＬＤＬを密度勾配遠心法により分取し、ＬＤＬの抗酸化活性の指標として１ａｇ  ｔｉｍｅを求めた。ここで、Ｌａｇ  ｔｉｍｅは、ＬＤＬ（４０μｇ蛋白質／ｍＬ）に銅イオン（１μＭ）を加え、酸化により生じる酸化脂、脂肪酸の共役ジエン構造を２３４ｎｍで経時的にモニターし、共役ジエンの急激な増加が始まるまでの時間とした。結果を表２に示す。
0004970692.tif 000004
表２に示したように、酸化型補酵素Ｑ１０投与により、ＬＤＬの抗酸化活性が増加した。更に、還元型補酵素Ｑ１０の投与により更にＬＤＬの抗酸化活性が増加した。
（製剤例１）
ヒドロキシメチルグルタリルＣｏＡ還元酵素阻害剤と還元型補酵素Ｑ１０を含有するカプセル製剤を以下の組成にて作製した。
プラバスタチン            ２０ｍｇ重量部
還元型補酵素Ｑ１０        ５０ｍｇ重量部
乳糖                    ２００ｍｇ重量部
ステアリン酸マグネシウム    ５ｍｇ重量部
産業上の利用可能性
本発明の方法および組成物を用いることにより、血漿中の還元型補酵素Ｑ１０を顕著に増加させることができ、ＬＤＬの抗酸化能の増強ひいては優れた動脈硬化抑制作用を発揮することができる。