(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（３）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物であって：
【化５】
0004979157.tif 000091
ここで、水素Ｈａは、Ｗで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルから選択される基で置き換えられ得；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇは独立してＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシ、アセトキシ、フェニル、ベンジル、ジオキサボロラン、１−ピロリジン、アルキルスルフィドおよびＰＯ（Ｅｔ）２から選択される基で置き換えられ得；
Ｗは、−Ｈ、−ＣＦ３、−ＮＨ２、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ２および−ＯＲ８から選択され；
Ｒ８はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択され；
ただし、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇのうちの少なくとも２つは水素ではない、化合物。
【請求項２】
式（３）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物であって：
【化６】
0004979157.tif 000092
ここで、水素Ｈａは、Ｗで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルから選択される基で置き換えられ得；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、ＨｅおよびＨｆは独立してＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシ、アセトキシ、フェニル、ベンジル、ベンジルオキシ、ジオキサボロラン、１−ピロリジン、アルキルスルフィドおよびＰＯ（Ｅｔ）２から選択される基で置き換えられ得；
水素ＨｇはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシ、アセトキシ、フェニル、ベンジル、ベンジルオキシ、ジオキサボロラン、１−ピロリジン、アルキルスルフィドおよびＰＯ（Ｅｔ）２から選択される基で置き換えられ；
Ｗは、−Ｈ、−ＣＦ３、−ＮＨ２、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ２および−ＯＲ８から選択され；
Ｒ８はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルであり；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択され；
ただし、該化合物は、以下：
【化６Ａ】
0004979157.tif 000093
ではない、化合物。
【請求項３】
式（３）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物であって：
【化７】
0004979157.tif 000094
ここで、水素Ｈａは、Ｗで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルから選択される基で置き換えられ得；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇは独立してＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシ、アセトキシ、フェニル、ベンジル、ジオキサボロラン、１−ピロリジン、アルキルスルフィドおよびＰＯ（Ｅｔ）２から選択される基で置き換えられ得；
Ｗは、−Ｈ、−ＣＦ３、−ＮＨ２、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ２および−ＯＲ８から選択され；
Ｒ８はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択され；
ただし、Ｈｇは水素ではない、化合物。
【請求項４】
式（４）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物であって：
【化８】
0004979157.tif 000095
ここで、ＱはＯ、ＮＨ、ＮＢｎおよびＮＢＯＣから選択され；
式（４）の９〜１３位の炭素は、独立して、各々の存在においてＷで置換され；
式（４）の１５〜１９位の炭素は、独立して、各々の存在において、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシ、アセトキシ、フェニル、ベンジル、ジオキサボロラン、１−ピロリジン、アルキルスルフィドおよびＰＯ（Ｅｔ）２で置換され；
３位の炭素は置換されておらず；
Ｗは、−ＮＨ２、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ２および−ＯＲ８から選択され；
Ｒ８はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択され、
ただし、ＱはＮＨまたはＯである場合、１７位および１８位の両方が水素で置換されることはない、化合物。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物であって、
水素Ｈａは、Ｗで置換されたフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルで置き換えられ；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇは、独立して、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシから選択される基で置き換えられ得る、化合物。
【請求項６】
請求項２に記載の化合物であって、
水素Ｈａは、Ｗで置換されたフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルで置き換えられ；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇは、独立して、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシから選択される基で置き換えられ得る、化合物。
【請求項７】
請求項３に記載の化合物であって、
水素Ｈａは、Ｗで置換されたフェニル−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルで置き換えられ；
水素Ｈｃ、Ｈｄ、Ｈｅ、ＨｆおよびＨｇは、独立して、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシから選択される基で置き換えられ得る、化合物。
【請求項８】
請求項４に記載の化合物であって、
１５〜１９位の炭素は、独立して、各々の存在において、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルメトキシで置換される、化合物。
【請求項９】
請求項５に記載の化合物ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
【請求項１０】
請求項６に記載の化合物ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
【請求項１１】
請求項７に記載の化合物ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
【請求項１２】
請求項８に記載の化合物ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
【請求項１３】
患者における炎症性状態または疾患を処置または防止するための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、所定量の請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１〜８に記載の化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は該患者の炎症性状態または疾患の処置または防止に有効な量である、薬学的組成物。
【請求項１４】
前記炎症性状態または疾患が自己免疫状態または疾患である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記炎症性状態または疾患が関節の骨および／または軟骨のコンパートメントの急性または慢性炎症を伴う、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記炎症性状態または疾患がリウマチ性関節炎、通風性関節炎または若年性リウマチ性関節炎から選択される関節炎である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記炎症性状態または疾患が喘息である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記状態または疾患がＴ細胞の調節不全に関連する、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記状態または疾患が炎症性サイトカインのレベルの上昇に関連する、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記炎症性サイトカインがＩＬ−２である、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記炎症性サイトカインがＩＦＮ−γである、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記炎症性サイトカインがＴＮＦ−αである、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記炎症性状態または疾患が多発性硬化症である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
前記炎症性状態または疾患が肺サルコイドーシス（ｓａｒｃａｄｏｓｉｓ）である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
前記炎症性状態または疾患が眼の炎症またはアレルギーである、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記炎症性状態または疾患が炎症性腸疾患である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記炎症性腸疾患がクローン病または潰瘍性大腸炎である、請求項２６に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
前記炎症性状態または疾患が炎症性皮膚疾患である、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
前記炎症性皮膚疾患が乾癬または皮膚炎である、請求項２８に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
患者内の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルを調節するための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、所定量の請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１〜８に記載の化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は該患者の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルの調節に有効な量である、薬学的組成物。
【請求項３１】
前記患者が炎症性状態または疾患を有する、請求項３０に記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
患者の疾患または状態を処置または防止するための薬学的組成物であって、ここで該疾患または状態は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連し、該薬学的組成物は、所定量の請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１〜８に記載の化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連する該疾患または状態の処置または防止に有効な量であり、該酵素が、環状ＡＭＰホスホジエステラーゼまたはホスホジエステラーゼ４である、薬学的組成物。
【請求項３３】
前記酵素が環状ＡＭＰホスホジエステラーゼである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
前記酵素がホスホジエステラーゼ４である、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
患者の疾患または状態を処置または防止するための薬学的組成物であって、ここで該疾患または状態は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連し、該薬学的組成物は、所定量の以下：
【化９】
0004979157.tif 000096
【化１０】
0004979157.tif 000097
【化１１】
0004979157.tif 000098
【化１２】
0004979157.tif 000099
【化１３】
0004979157.tif 000100
【化１４】
0004979157.tif 000101
【化１５】
0004979157.tif 000102
【化１６】
0004979157.tif 000103
【化１７】
0004979157.tif 000104
【化１８】
0004979157.tif 000105
【化１９】
0004979157.tif 000106
【化２０】
0004979157.tif 000107
【化２１】
0004979157.tif 000108
【化２２】
0004979157.tif 000109
【化２３】
0004979157.tif 000110
【化２４】
0004979157.tif 000111
【化２５】
0004979157.tif 000112
【化２６】
0004979157.tif 000113
【化２７】
0004979157.tif 000114
からなる群より選択される化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連する該疾患または状態の処置または防止に有効な量であり、該酵素がホスホジエステラーゼ３である、薬学的組成物。
【請求項３６】
患者の疾患または状態を処置または防止するための薬学的組成物であって、ここで該疾患または状態は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連し、該薬学的組成物は、所定量の以下：
【化９】
0004979157.tif 000115
【化１０】
0004979157.tif 000116
【化１１】
0004979157.tif 000117
【化１２】
0004979157.tif 000118
【化１３】
0004979157.tif 000119
【化１４】
0004979157.tif 000120
【化１５】
0004979157.tif 000121
【化１６】
0004979157.tif 000122
【化１７】
0004979157.tif 000123
【化１８】
0004979157.tif 000124
【化１９】
0004979157.tif 000125
【化２０】
0004979157.tif 000126
【化２１】
0004979157.tif 000127
【化２２】
0004979157.tif 000128
【化２３】
0004979157.tif 000129
【化２４】
0004979157.tif 000130
【化２５】
0004979157.tif 000131
【化２６】
0004979157.tif 000132
【化２７】
0004979157.tif 000133
からなる群より選択される化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連する該疾患または状態の処置または防止に有効な量であり、該酵素がホスホジエステラーゼ４およびホスホジエステラーゼ３である、薬学的組成物。
【請求項３７】
前記酵素が環状ＧＭＰホスホジエステラーゼである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
患者における移植拒絶を処置または防止するための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、所定量の請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１〜８に記載の化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方され、ここで該所定量は該患者における移植拒絶の処置または防止に有効な量である、薬学的組成物。
【請求項３９】
前記拒絶が移植片対宿主疾患によるものである、請求項３８に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
患者における制御されない細胞増殖を処置または防止するための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、所定量の以下の化合物
【化２８】
0004979157.tif 000134
およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は該患者における制御されない細胞増殖の処置または防止に有効な量である、薬学的組成物。
【請求項４１】
前記制御されない細胞増殖が白血病および固形腫瘍から選択される癌によって引き起こされる、請求項４０に記載の薬学的組成物。
【請求項４２】
患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止のための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、所定量の請求項９〜１２のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１〜８に記載の化合物を含み、それを必要とする患者への投与のために処方されており、ここで該所定量は該患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止に有効な量である、薬学的組成物。
【請求項４３】
前記中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態が抑鬱である、請求項４２に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明はΔ−ラクトン化合物およびラクタムなどのそのアナログ、そして特に、γ−フェニル−置換Δ−ラクトンおよびそのアナログ、ならびにそれに関連した治療的使用に関する。
【０００２】
（発明の背景）
（炎症性応答（炎症））
炎症は侵入した微生物または組織の損傷に対する重要な局所的宿主応答であり、これは免疫系の細胞を伴う。炎症の古典的サインは、損傷部位の赤み（紅斑）、腫脹（浮腫）、疼痛および熱の上昇（発熱（ｐｙｒｅｍａ））を含む。炎症性応答により、身体は侵入した生物を特異的に認識し、排除すること、および／または組織損傷の修復が可能となる。炎症部位の急性の変化の多くは、直接的または間接的に、白血球（例えば、好中球、好酸球、リンパ球、単球）の大量の流入に起因し、これはこの応答に固有である。組織への白血球の浸潤および蓄積はそれらの活性化をもたらし、次に、例えばＬＴＢ4、プロスタグランジン、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ヒスタミン、プロテアーゼおよび活性酸素種のような炎症メディエイタの放出をもたらす。
【０００３】
通常の炎症は高度に制御されたプロセスであり、応答に関与する細胞型の各々についていくつかのレベルで厳密に制御されている。例えば、プロ炎症性サイトカインであるＴＮＦ−αの発現は、遺伝子発現、翻訳、翻訳後修飾、および細胞膜からの成熟体の放出のレベルで制御される。炎症の際にアップレギュレーションされるタンパク質の多くは転写因子ＮＦ−κＢによって制御される。プロ炎症性応答は通常、ＩＬ−１０またはＩＬ−４の生成などの内因性抗炎症性機構と拮抗する。正常な炎症性応答の特徴は、それが一時的な性質のものであり、その後は組織の状態を以前の状態に戻す消散段階となることである。消散段階はＩＬ−１のような抗炎症性機構のアップレギュレーション、ならびにプロ−炎症性プロセスのダウンレギュレーションを伴うと考えられる。
【０００４】
（炎症性疾患）
炎症性疾患は、不適切および／または正常な様式で消散せず、むしろ持続する炎症性応答が開始し、その結果、慢性の炎症状態となる場合に生じる。炎症性疾患は全身的（例えば狼蒼）あるいは特定の組織または器官に対して局所的であり得、そして莫大な個人的および経済的な負担を社会に与える。最も一般的かつ問題のある炎症性疾患の例のいくつかはリウマチ様関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、喘息、気腫、大腸炎、虚血再灌流障害である。
【０００５】
炎症性疾患に共通する根元的なテーマは細胞免疫応答の摂動（ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）であり、その結果宿主タンパク質（抗原）を外来性と認識することになる。従って、炎症性応答は誤って宿主組織に向けられ、効果細胞が特定の器官または組織を標的化し、その結果、しばしば不可逆的損傷がもたらされる。自己免疫性疾患の自己認識の局面はしばしば、疾患状態における特定のＴ細胞レセプター（ＴＣＲ）サブタイプによって特徴づけられるＴ細胞サブセットのクローン増殖に反映される。炎症性疾患はまた、Ｔヘルパー（Ｔｈ）サブセットのレベルにおける不均衡（すなわちＴｈ１細胞対Ｔｈ２細胞）によってしばしば特徴づけられる。
【０００６】
炎症性疾患の治療を目的とした治療方針は通常、以下の２つのカテゴリーのうちの１つに属する：（ａ）疾患状態においてアップレギュレーションされるプロセスのダウンモジュレーション（ｄｏｗｎ−ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ)または（ｂ）影響を受ける細胞または組織における抗炎症経路のアップレギュレーション。臨床で現在使用されている多くの養生法は第１のカテゴリーに属する。そのうちのいくつかの例はコルチコステロイドおよび非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）である。
【０００７】
炎症性疾患において摂動される組織、細胞および生化学的プロセスの多くが解明されており、これにより疾患状態を模倣する実験モデルまたはアッセイの開発が可能となっている。これらのインビトロアッセイは、関連の炎症性疾患において治療効果を有する確率が高い化合物の選択およびスクリーニングを可能とする。従って、急性炎症の発生および慢性炎症状態の維持における活性化白血球の重要性をモデル化するために現在使用されているアッセイは、インビトロでの、白血球の走化性および細胞の脱顆粒をモニタリングするアッセイ、ならびにサイトカイン合成および活性酸素種（ＲＯＳ）産生アッセイである。急性または慢性の好中球の活性化の結果、ＲＯＳが放出され、その結果、組織が損傷するので、ＲＯＳのスカベンジャーについてのアッセイは潜在的な治療効果を有する化合物の検出を可能とする。刺激されたマクロファージまたは単球細胞からのＴＮＦ−αの放出のインヒビターを検出する細胞アッセイは炎症についてのインビトロモデルの重要な成分である。なぜならこのサイトカインはアップレギュレーションされ、多くの炎症性疾患における病理に寄与することが示されているからである。冒された細胞においてｃＡＭＰの上昇が炎症性応答を調節または低下させることが示されているので、細胞の環状ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）レベル、およびｃＡＭＰレベルを制御する経路の活性のモニタリングは潜在的な抗炎症化合物の検出を可能とする。アッセイは、ｃＡＭＰ自体のレベル、ホスホジエステラーゼ活性、またはｃＡＭＰ応答要素（ＣＲＥ）−ルシフェラーゼ活性の変化のモニタリングを含み得る。
【０００８】
（リウマチ様関節炎）
リウマチ様関節炎（ＲＡ）は炎症性関節炎の最も一般的な形態であり、これは病因が未知の自己免疫障害である。成人人口の１％がこれに冒されており、対称性、慢性、糜爛性の滑膜炎（関節の滑膜の炎症）によって特徴づけられ、そしてしばしば複数の系（ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍ）が関与する。興味深いことに、女性の方が男性よりも３〜６倍流行っている。多くの患者は長期にわたって変動する疾患の過程を示し、処置せずに放置すると、進行性の関節の破壊、変形、障害をもたらし、そして死期が早まる。ＲＡを示す徴候は、関節の疼痛および腫脹（通常対称性）、朝の関節および筋肉の硬直、全般的な虚弱／疲労ならびに発熱および体重減少を包含する。ＲＡによって、合衆国において毎年、９００万人／年より多くが医者に通院し、そして２５０，０００人／年より多くが入院している。働き盛りの患者がＲＡに冒されることが多く、そのため障害により重大な経済的損失がもたらされる。
【０００９】
近年、遺伝的背景、特にクラスＩＩ主要組織適合（ＭＨＣ）遺伝子の構造がこの疾患に対する個人の感受性および重篤度において重要な役割を果たすという病識が確立している。サイトカインネットワーク、ケモカイン、成長因子および接着分子の現在の理解は、Ｔ細胞依存性およびＴ細胞非依存性の経路がリウマチ様関節炎の開始および永続化に寄与するという認識に至っている。さらに、この障害を特徴づける骨および軟骨の破壊の原因となる特異的な細胞性および生化学的事象に関して多くのことが知られている。組織レベルでは、ＲＡは、滑膜の過形成、肥大、新脈管形成および滑膜線維芽細胞の隣接の軟骨および骨への付着と侵入によって特徴づけられる。活性ＲＡでは、冒された関節においてプロ炎症性サイトカインＴＮＦ−α、ＩＬ−１およびＩＬ−６のレベルが抗炎症性サイトカインに対して相対的に上昇している。
【００１０】
（リウマチ様関節炎および他の炎症性疾患に対する現在の処置）
現在のところ、リウマチ様関節炎に利用可能な治療または防止法（予防）はなく、疼痛および硬直のような徴候に対する養生法しかない。この疾患に対する５つの主要な処置様式は、投薬（薬理学）、物理療法（運動）、関節の保護およびライフスタイルの変更ならびに手術を包含する。
【００１１】
リウマチ様関節炎の治療薬は３つのグループに分けられ得る：非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、疾患緩和（ｄｉｓｅａｓｅ  ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ  ）抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）（セカンドライン薬（ｓｅｃｏｎｄ  ｌｉｎｅ  ａｇｅｎｔ）としても知られる）、およびコルチコステロイドである。
【００１２】
ＮＳＡＩＤはプロスタグランジン合成の阻害によって、低用量で疼痛を低下させ、そして高用量で炎症徴候のうちのいくつか（腫脹および硬直）を軽減する。処方箋なしのＮＳＡＩＤの例は、アセチルサリチル酸（ＡＳＡ（登録商標）、アスピリン（登録商標）、アナシン（登録商標）等）およびイブプロフェン（モトリン（Ｍｏｔｒｉｎ）（登録商標）、アドヴィル（Ａｄｖｉｌ）（登録商標）等）を包含する。処方箋を必要とするＮＳＡＩＤの例は、ナプロシン（Ｎａｐｒｏｓｙｎ）（登録商標）、レラフェン（Ｒｅｌａｆｅｎ）（登録商標）、インドシド（Ｉｎｄｏｃｉｄ）（登録商標）、ボルタレン（Ｖｏｌｔａｒｅｎ）（登録商標）、フェルデン（登録商標）およびクリノリル（登録商標）を包含する。これらの医薬はリウマチ様関節炎の急性炎症性成分に対して有効に向けられるが、これらは徴候を処置するのみであり、根元的な疾患の進行は変化させない。ＮＳＡＩＤの有害な副作用は長期投与では深刻であり得、それは主として胃腸に関係がある（胸やけ、出血または潰瘍）。
【００１３】
炎症が６週間より長く持続する場合、または関節炎が同時に多くの関節を冒す場、ＤＭＡＲＤがしばしば処方される。これらは通常ＮＳＡＩＤまたはステロイドに加えて投与される。多くのＤＭＡＲＤは炎症性応答に関与する免疫細胞を抑制することによって作用し、これにより疾患の進行を遅延させる。しかし、ＤＭＡＲＤにより永続的な関節の損傷を逆転させることは不可能である。このクラスの最も一般的な薬物は、金塩、メトトレキセート、アザチオプリン、スルファサラジン（ｓｕｌｐｈａｓａｌａｚｉｎｅ）、ヒドロキシクロロキン（ｈｙｄｒｏｘｙｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ）、ペニシルアミンおよびクロロキンである。ＤＭＡＲＤはしばしば有益な効果を示すまでに数週間かかり、そして多くの場合、リウマチ様関節炎における効力の正確な様式は未知である。副作用も数多く、これには口のただれ、発疹、下痢、および悪心が包含される。より深刻な副作用であり、通常の血液検査及び尿検査を通じて慎重にモニタリングする必要があるものは、肝臓および腎臓の損傷、白血球数の低下（免疫抑制）および血小板数の過度の低下（血液凝固）を包含する。
【００１４】
コルチコステロイドはしばしば、重篤な疼痛、腫脹および関節の硬直を伴う激しい炎症のＲＡ患者に処方される。これらは肺および血管の内層を冒し得る全身性のリウマチ様関節炎の処置にも用いられる。投与経路は通常経口（すなわちプレドニゾン）であるが、この薬物はまた、罹患した関節、静脈、筋肉または他の炎症部位に直接注射され得る。リウマチ様関節炎におけるステロイドの長期使用由来の副作用は深刻であり、白内障、高血圧、筋肉のるいそう、挫傷、皮膚および骨の痩せ、体重増加、糖尿病および感染の感受性が包含される。
【００１５】
リウマチ様関節炎と診断された患者のうち、より重篤な疾患（衰弱および不可逆的な関節の損傷を伴う）を続けて発症するのは５％に過ぎないが、これらはこの疾患を満足に処理および／または治療するために利用可能な治療薬の理想的なセットを明らかに有さない。現在利用できるＮＳＡＩＤ（選択的ＣＯＸ−２阻害薬でさえ）はリウマチ様関節炎の急性症状、例えば腫脹、疼痛および関節の硬直を首尾良く回復し得る。しかし、これらは関節の破壊の進行に影響も与えず、関節または骨の侵食の逆転を達成もしない。ＤＭＡＲＤまたはコルチコステロイドのようなセカンドライン薬は疾患の進行を一時的に遅延し得、症状を低減し得るが、通常は許容できない副作用プロフィールまたは変わりやすい患者の応答に悩まされ、そして存在する関節の損傷を逆転し得る。リウマチ様関節炎の疾患の進行を効果的に阻止または逆転する治療薬に対する大きな必要性がある。
【００１６】
（発明の要旨）
１つの局面において、本発明は式（１）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物、ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物を提供し、
【００１７】
【化９】
0004979157.tif 000002
【００１８】
ここで、水素、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＭ1は−Ｗまたは−Ｒ7（Ｗ）nを表し、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1−Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００１９】
式（１）の化合物を含む組成物の他の局面では：ＨaおよびＨbは水素であり；Ｈaは水素であり、そしてＨbは−Ｗであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、そしてＨbは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、Ｈbは−ＣＨ2−フェニルであり、そしてフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨcはＷであり；ＨdおよびＨeは両方とも水素であり；ＨfはＷであり；Ｈfは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈfは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈfは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｍ1は−Ｗであり；Ｍ1は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｍ1は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｍ1は−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；そして／またはＭ1は−Ｒ7（Ｗ）nである。１つの実施態様において、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環ではない。
【００２０】
式（１）の化合物は式（１ａ）の立体化学を有し得る：
【００２１】
【化１０】
0004979157.tif 000003
【００２２】
式（１）の化合物は式（１ｂ）の立体化学を有し得る：
【００２３】
【化１１】
0004979157.tif 000004
【００２４】
本明細書において式（１）の言及は、式（１ａ）および（１ｂ）の化合物を含む。
【００２５】
他の局面において、本発明は式（２）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物、ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物を提供し、
【００２６】
【化１２】
0004979157.tif 000005
【００２７】
ここで、水素、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＭ2は−Ｗ表し、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００２８】
式（２）の化合物を含む組成物の他の局面では：ＨaおよびＨbは水素；Ｈaは水素であり、そしてＨbは−Ｗであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、そしてＨbは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、そしてＨbは−ＣＨ2−フェニルであり、ここでフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨcはＷであり；ＨdおよびＨeは両方とも水素であり；Ｈfは水素であり、そしてＨgはＷであり；Ｈgは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈgは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈgは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈfは水素であり、そしてＨgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｍ2は、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、および−ＯＲ8から選択され；そして／またはＭ2は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＯＨ、および−ＯＲ8から選択される。好適な実施態様では、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環系で置換され得ない。
【００２９】
式（２）の化合物は式（２ａ）の立体化学を有し得る：
【００３０】
【化１３】
0004979157.tif 000006
【００３１】
式（２）の化合物は式（２ｂ）の立体化学を有し得る：
【００３２】
【化１４】
0004979157.tif 000007
【００３３】
本明細書において式（２）の言及は、式（２ａ）および（２ｂ）の化合物の言及を含む。
【００３４】
他の局面において、本発明は式（３）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、およびその混合物を提供する：
【００３５】
【化１５】
0004979157.tif 000008
【００３６】
ここで、水素、Ｈa、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＨbは−Ｗで置換され得、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００３７】
好適な実施態様において、Ｈe、ＨfおよびＨgのうちの少なくとも２つは水素ではない。他の好適な実施態様では、Ｈgは−Ｒ7（Ｗ）nではない。他の好適な実施態様では、Ｈgは水素でも−Ｒ7（Ｗ）nでもない。他の好適な実施態様では、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環ではない。
【００３８】
他の局面において、式（３）の化合物において：Ｈaは水素であり；Ｈaは水素ではなく、そしてＨaが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素ではなく、そしてＨaが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは−Ｗであり；Ｈaは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは−ＣＨ2−フェニルであり、そしてフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨbはＷであり；Ｈbは−ＣＮであり；ＨcおよびＨdは両方とも水素であり；Ｈeは水素であり；Ｈeは水素であり、そしてＨfはＷであり；Ｈeは水素であり、そしてＨfは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈeは水素であり、そしてＨfはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈeは水素であり、そしてＨfは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは水素であり；Ｈgは−Ｗであり；Ｈgは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈgは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；ここでＨgは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；そして／またはＨgはＣ1〜Ｃ30アルキルであり、そしてｎ＝０である。
【００３９】
式（３）の化合物は式（３ａ）の立体化学を有し得る：
【００４０】
【化１６】
0004979157.tif 000009
【００４１】
式（３）の化合物は式（３ｂ）の立体化学を有し得る：
【００４２】
【化１７】
0004979157.tif 000010
【００４３】
本明細書において式（３）の言及は、式（３ａ）および（３ｂ）の化合物の言及を含む。
【００４４】
他の局面において、本発明は式（４）の化合物を提供する：
【００４５】
【化１８】
0004979157.tif 000011
【００４６】
ここで、Ｑは炭素以外の多価原子を表し；そして
式（４）の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、および１９位の炭素の各々、ならびに置換され得る限りにおいてＱは、独立して、各々の場合においてＨ、−Ｗまたは−Ｒ7（Ｗ）nで置換され、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００４７】
１つの局面において、式（４）の化合物は炭素３においてＳ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素３においてＲ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素５においてＳ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素５においてＲ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、および１９位の炭素はいずれも複素環式部分で置換されていない。
【００４８】
他の局面において、式（４）の化合物、ならびに式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において：ＱはＯであり；ＱはＳであり；ＱはＮＨであり；そして／またはＱはＮ（Ｒ7（Ｗ）n）である。他の局面において、４位または６位、好ましくは４位および６位の両方の炭素（単数または複数）は水素のみで置換され；１９位の炭素は−Ｗで置換され；１９位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換され；１９位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換され；１７位および１８位の１つの炭素は水素で置換され；１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−Ｗで置換される；１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換される；１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換される；そして／または１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換される。他の局面において、１７位、１８位および１９位の１つの炭素のみが水素で置換される。他の局面において、１７位、１８位および１９位のちょうど２つの炭素が水素で置換される。他の局面において、１７位、１８位および１９位の炭素はいずれも水素で置換されない。他の局面において、１７位、１８位および１９位の１つの炭素のみが水素で置換される。
【００４９】
他の局面において、式（４）の化合物、ならびに式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において：７位の炭素は水素のみで置換される；３位の炭素は水素で置換される；３位の炭素は−Ｗで置換される；３位の炭素はハロゲンで置換される；３位の炭素は−Ｒ7（Ｗ）nで置換される；３位の炭素はＣ1〜Ｃ6ヒドロカルビルで置換される；９位および１０位の炭素は水素で置換される；１１位、１２位、および１３位の炭素は独立して水素および−Ｗで置換される；１１位および１２位の炭素のうちの１つだけが水素で置換される；１１位および／または１２位の炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換される；１１位および／または１２位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換される；１１位および／または１２位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換される；１３位の炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換される；１３位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換される；１３位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換される；１１位、１２位、および１３位の炭素の少なくとも１つは−Ｒ7（Ｗ）nで置換される；そして／または１１位、１２位、および１３位の炭素の少なくとも１つはＣ1〜Ｃ6ヒドロカルビルまたはＣ1〜Ｃ6ハロカルビルまたはＣ1〜Ｃ6ヒドロハロカルビルで置換される。
【００５０】
他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素の１つだけが水素で置換される。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素のうちのちょうど２つの炭素が水素で置換される。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素はいずれも水素で置換されない。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の１つを越えない炭素が水素で置換される。
【００５１】
式（４）の化合物、ならびに１つ以上の式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において、６位の炭素は好ましくは＝Ｏまたは＝Ｓのいずれによっても置換されない；４位の炭素は好ましくは＝Ｏで置換されない；５位の炭素に結合するフェニル環は好ましくは４個を越えない水素原子で置換される；５位の炭素に結合するフェニル環は好ましくは４個を越えないＲ7（Ｗ）n基で置換され、そして／または式（４）の化合物は好ましくはマソニアナラクトン（ｍａｓｓｏｎｉａｎａｌａｃｔｏｎｅ）を除外する。
【００５２】
従って、好適な式（４）の化合物において、ＱはＯまたはＮＨであり、６位の炭素は置換され、＝Ｏまたは＝Ｓのいずれでも置換されない；４位の炭素は＝Ｏで置換されない；炭素５に直接結合したフェニル環は少なくとも１つの位置で炭素または水素以外の原子で直接置換される；そしてマソニアナラクトンが除外される。マソニアナラクトンは、ＣＡＳ登録番号１５０２７０−０５−６であり、また２Ｈ−ピラン−２−オン、テトラヒドロ−３−ヒドロキシ−５−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−［（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）メチル］−、（３Ｒ−ｔｒａｎｓ）としても知られる。
【００５３】
好適な実施態様では、式（４）の化合物および式（４）の化合物を含む組成物において、ＱはＮＨであり、そして１７位および１８位の両方が水素で置換されることはない。
【００５４】
本明細書で開示される、式１、２、３または４の化合物（すなわち式（１〜４）の化合物、または本発明の化合物）、あるいはこれらの化合物の１つ以上と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物は、患者における炎症性状態または疾患を処置または防止するための方法で使用され得、ここでこの方法は、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者の炎症性状態または疾患の処置または防止に有効な量である。
【００５５】
炎症性状態または疾患は自己免疫状態または疾患であり得る；炎症性状態または疾患は骨および／または関節の軟骨コンパートメントの急性または慢性炎症を伴い得る；炎症性状態または疾患はリウマチ性関節炎、通風性関節炎または若年性リウマチ性関節炎から選択される関節炎であり得る；炎症性状態または疾患は喘息であり得る；状態または疾患はＴ細胞の調節不全に関連し得る；状態または疾患は炎症性サイトカインのレベルの上昇に関連し得る（例えば、炎症性サイトカインがＩＬ−２の場合、または炎症性サイトカインがＩＦＮ−γの場合、または炎症性サイトカインがＴＮＦ−αの場合）；炎症性状態または疾患は多発性硬化症であり得る；炎症性状態または疾患は肺サルコイドーシス（ｓａｒｃａｄｏｓｉｓ）であり得る；炎症性状態または疾患は眼の炎症またはアレルギーであり得る；炎症性状態または疾患は炎症性腸疾患（例えばクローン病または潰瘍性大腸炎）であり得る；そして炎症性状態または疾患は炎症性皮膚疾患（例えば、乾癬または皮膚炎）であり得る。
【００５６】
さらに、本発明は患者内の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルを調節する方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルの調節に有効な量である。患者は炎症性状態または疾患を有し得る。
【００５７】
さらに、本発明は患者の疾患または状態を処置または防止する方法を提供し、ここで上記疾患または状態は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連し、この方法はそれを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連する疾患または状態の処置または防止に有効な量である。酵素はＡＭＰホスホジエステラーゼであり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ４であり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ３であり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ４およびホスホジエステラーゼ３の両方であり得る；または酵素は環状ＧＭＰホスホジエステラーゼであり得る。
【００５８】
さらに、本発明は患者における移植拒絶を処置または防止する方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における移植拒絶の処置または防止に有効な量である。拒絶は移植片対宿主疾患によるものであり得る。
【００５９】
さらに、本発明は患者における制御されない細胞増殖を処置または防止する方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における制御されない細胞増殖の処置または防止に有効な量である。制御されない細胞増殖は白血病および固形腫瘍から選択される癌によって引き起こされ得る。
【００６０】
さらに、本発明は患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止の方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止に有効な量である。中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態は抑鬱であり得る。
【００６１】
本発明の方法において、式（１〜４）の化合物、あるいは１つ以上の式（１〜４）の化合物と薬学的受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物は、必ずしも必要でないが、上記定義のような式（１〜４）、あるいはこれらの化合物の１つと薬学的受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物の化合物を投与された被験体において以下の所望の結果の１つ以上を達成する：
１．一次好中球由来の活性酸素種世代の阻害；
２．好中球の走化性の阻害：
３．ＴＮＦ−α産生の阻害；
４．浮腫の阻害；
５．酸素ラジカル除去；
６．環状ＡＭＰホスホジエステラーゼ１、３および／または４、ならびに関連のＰＤＥ（例えばＰＤＥ７）の阻害；
７．ヒト単球細胞におけるＣＲＥ仲介転写活性の誘導の強化；
８．ＰＤＥ、好ましくはＰＤＥ４，ＰＤＥ３，またはＰＤＥ３およびＰＤＥ４の阻害；
９．活性化Ｔ細胞サブセットによるサイトカイン産生の阻害；
１０．好中球ミエロペルオキシダーゼ放出の阻害；
１１．ＩＣ50ＰＤＥ４（ｃａｔ）：ＩＣ50ＰＤＥ４（ＨＡＲＢＳ）の比率の低さ；
１２．移植片拒絶の阻害；
１３．炎症性腸疾患における疾患の臨床的および組織病理学的パラメーターの阻害；および
１４．ネズミコラーゲン誘導関節炎モデルにおける関節炎の臨床的および組織病理学的的パラメーターの阻害。
【００６２】
本発明のこれらおよび他の局面および実施態様は以下の詳細な説明を参照すると明らかである。この目的のために、種々の参照文献が本明細書中に記載され、これは特定の手順、化合物および／または組成物をより詳細に記載し、そして本明細書中にその全体が参考として援用される。
【００６３】
（発明の詳細な説明）
本発明は、種々の疾患状態の処置および／または防止に有用な化合物、組成物および方法を提供する。例えば、１つの実施態様において、本発明は炎症性疾患の処置および／または防止の方法を提供する。この方法は、それを必要とする患者に治療有効量の、本明細書で定義されるような式（１〜４）の任意の化合物である化合物またはその薬学的に受容可能な塩、あるいは治療有効量の、式の化合物のまたはその薬学的に受容可能な塩を含む組成物を投与する工程を包含する。
【００６４】
１つの局面において、本発明は、式（１）に従う化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、および混合物、ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物を提供する。
【００６５】
【化１９】
0004979157.tif 000012
【００６６】
ここで、水素であるＨa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＭ1は−Ｗまたは−Ｒ7（Ｗ）nを表し、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００６７】
式（１）の化合物を含む組成物の他の局面において：ＨaおよびＨbは水素であり；Ｈaは水素であり、かつＨbは−Ｗであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、かつＨbは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、Ｈbは−ＣＨ2−フェニルであり、そしてフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨcはＷであり；ＨdおよびＨeは両方とも水素であり；ＨfはＷであり；Ｈfは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈfは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈfは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｍ1は−Ｗであり；Ｍ1は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｍ1は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｍ1は−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；そして／またはＭ1は−Ｒ7（Ｗ）nである。１つの実施態様において、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環ではない。
【００６８】
式（１）の化合物は式（１ａ）の立体化学を有し得る：
【００６９】
【化２０】
0004979157.tif 000013
【００７０】
式（１）の化合物は式（１ｂ）の立体化学を有し得る：
【００７１】
【化２１】
0004979157.tif 000014
【００７２】
本明細書において式（１）の化合物について言及する場合、式（１ａ）および（１ｂ）の化合物を含む。
【００７３】
他の局面において、本発明は式（２）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、および混合物、ならびに薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤を含む組成物を提供し、
【００７４】
【化２２】
0004979157.tif 000015
【００７５】
ここで、水素、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＭ2は−Ｗを表し、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００７６】
式（２）の化合物を含む組成物の他の局面では：ＨaおよびＨbは水素であり；Ｈaは水素であり、かつＨbは−Ｗであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｗであり、そしてＨbが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、かつＨbは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、Ｈbは−Ｒ7（Ｗ）nであり、そしてＨbが結合している炭素はｒ立体配置を有し；Ｈaは水素であり、かつＨbは−ＣＨ2−フェニルであり、ここでフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨcはＷであり；ＨdおよびＨeは両方とも水素であり；Ｈfは水素であり、かつＨgはＷであり；Ｈgは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈgは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈgは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈfは水素であり、かつＨgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｍ2は、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、および−ＯＲ8から選択され；そして／またはＭ2は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＯＨ、および−ＯＲ8から選択される。好適な実施態様では、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環系で置換されることはない。
【００７７】
式（２）の化合物は式（２ａ）の立体化学を有し得る：
【００７８】
【化２３】
0004979157.tif 000016
【００７９】
式（２）の化合物は式（２ｂ）の立体化学を有し得る：
【００８０】
【化２４】
0004979157.tif 000017
【００８１】
本明細書において式（２）の化合物について言及する場合、式（２ａ）および（２ｂ）の化合物に対する言及を含む。
【００８２】
他の局面において、本発明は式（３）の化合物およびその塩、溶媒和物、単離された立体異性体、および混合物を提供する：
【００８３】
【化２５】
0004979157.tif 000018
【００８４】
ここで、水素であるＨa、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfおよびＨgの各々は独立して−Ｗおよび−Ｒ7（Ｗ）nから選択される基で置換され得、そしてＨbは−Ｗで置換され得、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００８５】
好適な実施態様において、Ｈe、ＨfおよびＨgのうちの少なくとも２つは水素ではない。他の好適な実施態様では、ＨgはＲ7（Ｗ）nではない。他の好適な実施態様では、Ｈgは水素でもＲ7（Ｗ）nでもない。他の好適な実施態様では、Ｈa、Ｈb、Ｈc、Ｈd、Ｈe、ＨfまたはＨgはいずれも複素環式環ではない。
【００８６】
他の局面において、式（３）の化合物において：Ｈaは水素であり；Ｈaは水素ではなく、そしてＨaが結合している炭素はＳ立体配置を有し；Ｈaは水素ではなく、そしてＨaが結合している炭素はＲ立体配置を有し；Ｈaは−Ｗであり；Ｈaは−Ｒ7（Ｗ）nであり；Ｈaは−ＣＨ2−フェニルであり、そしてフェニルは０、１または２個のＷ置換基を有し；ＨbはＷであり；Ｈbは−ＣＮであり；ＨcおよびＨdは両方とも水素であり；Ｈeは水素であり；Ｈeは水素であり、かつＨfはＷであり；Ｈeは水素であり、かつＨfは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈeは水素であり、かつＨfはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；Ｈeは水素であり、かつＨfは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは水素であり；Ｈgは−Ｗであり；Ｈgは−ＯＨおよび−ＯＲ8から選択され；Ｈgは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、およびベンジルオキシから選択され；ここでＨgは−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択され；Ｈgは−Ｒ7（Ｗ）nであり；そして／またはＨgはＣ1〜Ｃ30アルキルであり、そしてｎ＝０である。
【００８７】
式（３）の化合物は式（３ａ）の立体化学を有し得る：
【００８８】
【化２６】
0004979157.tif 000019
【００８９】
式（３）の化合物は式（３ｂ）の立体化学を有し得る：
【００９０】
【化２７】
0004979157.tif 000020
【００９１】
本明細書において式（３）の化合物について言及する場合、式（３ａ）および（３ｂ）の化合物に対する言及を含む。
【００９２】
他の局面において、本発明は式（４）の化合物を提供する：
【００９３】
【化２８】
0004979157.tif 000021
【００９４】
ここで、Ｑは炭素以外の多価原子を表し；そして
式（４）の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、および１９位の炭素の各々、ならびに置換され得る限りにおいてＱは、独立して、各々の存在においてＨ、−Ｗまたは−Ｒ7（Ｗ）nで置換され、ここで
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は、各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【００９５】
１つの局面において、式（４）の化合物は炭素３においてＳ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素３においてＲ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素５においてＳ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の化合物は炭素５においてＲ立体配置を有する。他の局面において、式（４）の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、および１９位の炭素はいずれも複素環式部分で置換されていない。
【００９６】
他の局面において、式（４）の化合物、ならびに式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において：ＱはＯであり；ＱはＳであり；ＱはＮＨであり；そして／またはＱはＮ（Ｒ7（Ｗ）n）である。他の局面において、４位または６位、好ましくは４位および６位の両方の炭素は水素のみで置換され；１９位の炭素は−Ｗで置換され；１９位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換され；１９位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換され；１７位および１８位の１つの炭素は水素で置換され；１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−Ｗで置換され；１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換され；１７位、１８位および１９位の少なくとも１つの炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換され；そして／または１７位および１８位の少なくとも１つの炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換される。他の局面において、１７位および１８位の１つの炭素のみが水素で置換される。他の局面において、１７位、１８位および１９位のちょうど２つの炭素が水素で置換される。他の局面において、１７位、１８位および１９位の炭素はいずれも水素で置換されない。他の局面において、１７位、１８位および１９位の１つを越えない炭素が水素で置換される。
【００９７】
他の局面において、式（４）の化合物、ならびに式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において：７位の炭素は水素のみで置換され；３位の炭素は水素で置換され；３位の炭素は−Ｗで置換され；３位の炭素はハロゲンで置換され；３位の炭素は−Ｒ7（Ｗ）nで置換され；３位の炭素はＣ1〜Ｃ6ヒドロカルビルで置換され；９位および１０位の炭素は水素で置換され；１１位、１２位、および１３位の炭素は独立して水素および−Ｗで置換され；１１位および１２位の炭素のうちの１つだけが水素で置換され；１１位および／または１２位の炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換され；１１位および／または１２位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換され；１１位および／または１２位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換され；１３位の炭素は−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8または−ＯＲ8で置換され；１３位の炭素は−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、または−ＮＲ8Ｒ8で置換され；１３位の炭素は−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、または−ＯＲ8で置換され；１１位、１２位、および１３位の炭素の少なくとも１つは−Ｒ7（Ｗ）nで置換される；
他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素の１つだけが水素で置換される。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素のうちのちょうど２つの炭素が水素で置換される。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の炭素はいずれも水素で置換されない。他の局面において、１１位、１２位、および１３位の１つを越えない炭素が水素で置換される。
【００９８】
式（４）の化合物、ならびに１つ以上の式（４）の化合物と薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物において、６位の炭素は好ましくは＝Ｏまたは＝Ｓのいずれによっても置換されず；４位の炭素は好ましくは＝Ｏで置換されず；５位の炭素に結合するフェニル環は好ましくは４個を越えない水素原子で置換され；５位の炭素に結合するフェニル環は好ましくは４個を越えないＲ7（Ｗ）n基で置換され、そして／または式（４）の化合物は好ましくはマソニアナラクトン（ｍａｓｓｏｎｉａｎａｌａｃｔｏｎｅ）を除外する。
【００９９】
従って、好適な式（４）の化合物において、ＱはＯまたはＮＨであり、６位の炭素は、＝Ｏまたは＝Ｓのいずれでも置換されず；４位の炭素は＝Ｏで置換されず；炭素５に直接結合したフェニル環は少なくとも１つの位置で炭素または水素以外の原子で直接置換され；そしてマソニアナラクトンが除外される。マソニアナラクトンは、ＣＡＳ登録番号１５０２７０−０５−６を有し、また２Ｈ−ピラン−２−オン、テトラヒドロ−３−ヒドロキシ−５−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）−３−［（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）メチル］−、（３Ｒ−ｔｒａｎｓ）としても知られる。
【０１００】
式（１〜４）の化合物において：
Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＯＣＨＯ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＣＯＸ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8、−ＯＣＯＲ8、−ＯＲ8、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択され；
Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のｎは各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換され；
Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル、ハロカルビルまたはヒドロハロカルビル基であり；
ｎは０、１、２、３、４、および５から選択され；そして
Ｘは−Ｂｒ、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｉから選択される。
【０１０１】
好適な実施態様では：Ｗは、−ＮＨ2、−ＮＨＲ8、および−ＮＲ8Ｒ8から選択される；Ｗは、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＣＨＯ、−ＣＯＸ、−ＣＯＮＨＲ8、−ＣＯＮＲ8Ｒ8、−ＣＯＯＲ8、−ＣＯＲ8から選択される；Ｗは、−ＯＣＨＯ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ8、および−ＯＲ8から選択される；Ｗは、−ＢＨ2、−ＢＨＲ8、−ＢＲ8Ｒ8、−ＢＯ2Ｈ2、−ＢＯ2Ｒ8Ｒ8、−ＰＨ2、−ＰＨＲ8、−ＰＲ8Ｒ8、−ＰＯＲ8、−ＰＯ2Ｒ8、−ＰＯ3Ｒ8、−ＳＲ8、−ＳＯＲ8、−ＳＯ2Ｒ8、−ＳＯＮＨ2、−ＳＯＮＨＲ8、−ＳＯＮＲ8Ｒ8、−ＳＯ2ＮＨ2、−ＳＯ2ＮＨＲ8および−ＳＯ2ＮＲ8Ｒ8から選択される；Ｗは、−ＮＨ2、−ＣＮ、−Ｘ、−ＯＨ、−ＮＯ2、−ＳＨ、−ＮＨＲ8、−ＮＲ8Ｒ8、−ＯＲ8、および−ＳＲ8から選択される；およびＷは−ＯＲ8である。
【０１０２】
好適な実施態様では：Ｒ7はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換される；Ｒ7はＣ1〜Ｃ10ヒドロカルビル基であり、ここでＲ7の水素またはハロゲン原子のうちｎ個は各位置で独立して選択される等しい数のＷ基で置換される；および／またはＲ7は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルアリール、アルケニル置換アリール、アリール置換アルケニル、アルキニル置換アリール、アリール置換アルキニル、ビアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ビシクロアルキル、ビシクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アルケニルシクロアルキル、アルキニルシクロアルキル、アリール置換シクロアルキル、シクロアルキル置換アリール、アリール置換シクロアルケニル、シクロアルケニル置換アリール、アリール縮合シクロアルキルおよびポリシクロアルキルから選択される。
【０１０３】
好適な実施態様では：Ｒ8はＣ1〜Ｃ30ヒドロカルビル基である；Ｒ8はＣ1〜Ｃ10ヒドロカルビル基である；および／またはＲ8は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルアリール、アルケニル置換アリール、アリール置換アルケニル、アルキニル置換アリール、アリール置換アルキニル、ビアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ビシクロアルキル、ビシクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アルケニルシクロアルキル、アルキニルシクロアルキル、アリール置換シクロアルキル、シクロアルキル置換アリール、アリール置換シクロアルケニル、シクロアルケニル置換アリール、アリール縮合シクロアルキルおよびポリシクロアルキルから選択される。
【０１０４】
好適な実施態様では：ｎは０である；ｎは１である；ｎは２である；ｎは３である；ｎは４である；ｎは５である；ｎは０より大きい；ｎは１または２である；およびｎは１または２または３である。
【０１０５】
好適な実施態様では、Ｈa〜Ｈgは複素環式環でない。
【０１０６】
上記化合物において、薬学的に受容可能な塩は酸付加塩および塩基付加塩を包含する。
【０１０７】
酸付加塩は、式（１〜４）の化合物と、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸、および／または酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などのような有機酸とから形成されるような塩をいう。
【０１０８】
塩基付加塩は、式（１〜４）の化合物と、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム塩などの無機塩基とから誘導されるような塩を含む。適切な塩は、薬学的に受容可能な有機無毒性塩基由来のアンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウムおよびマグネシウム塩を包含し、これは第一級、第二級、および第三級アミン、置換アミン（天然に存在する置換アミン、環式アミンおよび塩基性イオン交換樹脂を包含する）、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジンなどの塩を包含する。
【０１０９】
上記化合物および組成物において、ヒドロカルビル基は炭素および水素のみから形成され、例えば、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アルキルアリール、アルケニル置換アリール、アリール置換アルケニル、アルキニル置換アリール、アリール置換アルキニル、ビアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ビシクロアルキル、ビシクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アルケニルシクロアルキル、アルキニルシクロアルキル、アリール置換シクロアルキル、シクロアルキル置換アリール、アリール置換シクロアルケニル、シクロアルケニル置換アリール、アリール縮合シクロアルキルおよびポリシクロアルキルを包含する。ハロカルビル基は炭素およびハロゲンのみから形成され、上記のヒドロカルビル基において各水素をフッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素および塩素から選択されるハロゲンで置換したものを包含する。ヒドロハロカルビル基はハロヒドロカルビル基とも称され得、これは炭素、水素およびハロゲンのすべてのみから形成され、そして上記の特定のヒドロカルビル基においていくつかの（全部ではなく）水素原子がフッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素および／または塩素から選択されるハロゲン原子で置換されたものを包含する。これらのヒドロカルビル基（これはハロゲン原子で置換されて、そのハロカルビルおよびヒドロハロカルビル誘導体を提供し得る）の代表的な定義を以下に提供する。
【０１１０】
「アルキル」は炭素原子の非環式鎖を表し、これは分枝または非分枝（線状）であり得る。メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピルおよびイソプロピルを包含する）、ブチル（ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、およびｔ−ブチルを包含する）、ペンチル（多数の異性体を包含する）およびヘキシル（多数の異性体を包含する）が、１個から６個の炭素原子を有するアルキル基（一般に低級アルキル基と呼ばれる）であり、本発明のアルキル基の例である。
【０１１１】
「アルケニル」は少なくとも１つの二重結合を有する不飽和脂肪族基をいう。
【０１１２】
「アルキニル」は不飽和炭化水素であって、直鎖または分枝鎖のいずれかであり得、そして１つ以上の三重結合を有するものをいう。好適な基は、約１２個を越えない炭素原子を有し、そしてエチル、プロピニル、４−メチルペンチニルなど、ならびにそれらの構造異性体であり得る。
【０１１３】
「アラルキル」はアリールラジカルによって置換されたアルキル基をいう。例えばベンジルである。
【０１１４】
「アラルキニル」はアリール環によって置換されたアルキニル基をいう。例えば、ＡｒＣ≡Ｃ−、ＡｒＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2Ｃ≡Ｃ−などである。
【０１１５】
「シクロアルキル」は環式配置の炭素原子を表し、ここでシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、が３〜６個の炭素原子を有する本発明のシクロアルキル基である。本明細書で定義される「シクロアルキル」の範囲内の追加の基は、以下で定義されるポリシクロアルキル基である。
【０１１６】
「シクロアルケニル」は環式アルケニル基を表す。適切なシクロアルケニル基は、例えば、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニルを包含する。
【０１１７】
ポリシクロアルキル基は、少なくとも１つの炭素原子が少なくとも２つの別々に同定可能な環の一部である炭素原子の配置である。ポリシクロアルキル基は２つの炭素原子の間に架橋を含み得、ここでビシクロ［１．１．０］ブチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［５．２．０］ノニル、トリシクロ［２．２．１．０1］ヘプチル、ノルボニルおよびピナニルが代表例である。ポリシクロアルキル基は、１つまたはそれ以上の縮合環系を含み得、ここでデカリニル（デカリンのラジカル）およびペルヒドロアントラセニルが代表例である。ポリシクロアルキル基はスピロ結合（ｕｎｉｏｎ）を含み得、ここで単一の原子が２つの環の唯一の共通メンバーである。スピロ［３．４］オクチル、スピロ［３．３］ヘプチルおよびスピロ［４．５］デシルが代表例である。
【０１１８】
「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表す。
【０１１９】
本明細書において、以下の略号は以下に示す意味を有する：
【０１２０】
【表１】
0004979157.tif 000022
0004979157.tif 000023
0004979157.tif 000024
0004979157.tif 000025
0004979157.tif 000026
【０１２１】
任意の構成要素または式（１〜４）の化合物において、任意の変数が１回より多く出現する場合、各出現ごとの定義は他のあらゆる出現の定義に対して独立である。置換基および／または変数の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。本発明の方法および組成物において有用な化合物、ならびに本発明の化合物は、不斉中心を有し得、そしてラセミ体、ラセミ混合物および個別のジアステレオマー、またはエナンチオマーとして生じ得、全ての異性体形態は本発明に包含される。ラセミ体またはラセミ混合物は立体異性体の５０：５０混合物を意味するのではない。
【０１２２】
別の実施態様において、本発明は上記のような式（１〜４）の化合物を薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤と組み合わせて含む薬学的組成物を提供する。これらの組成物は炎症または本明細書に開示されるような他の症状の処置のために用いられ得る。これらの組成物はまた医薬として処方され得、これは例えば炎症の処置に用いられ得る。
【０１２３】
これらの組成物は、例えば、アッセイ標準、バルク出荷（ｂｕｌｋ  ｓｈｉｐｍｅｎｔ）の便利な作製手段、または薬学的組成物として有用である。本発明の化合物のアッセイ可能な量は、当業者に周知および理解されるように、標準的なアッセイ手順および技術で容易に測定可能な量である。本発明の化合物のアッセイ可能な量は一般に全組成物重量の約０．００１ｗｔ％から約８０ｗｔ％まで変化する。不活性キャリアは、式（１〜４）の化合物を劣化させないか、またはそうでなければ式（１〜４）の化合物と共有結合反応しない任意の物質を包含する。適切な不活性キャリアの例は、水；水性バッファ（高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析で通常有用なものなど）；有機溶媒（アセトニトリル、酢酸エチル、ヘキサンなど）；および薬学的に受容可能なキャリアである。
【０１２４】
治療用途のための「薬学的に受容可能なキャリア」は薬学分野で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５）に記載されている。例えば、滅菌生理食塩水およびリン酸緩衝化生理食塩水（生理学的ｐＨ）が用いられ得る。防腐剤、安定剤、色素および香味剤さえ、薬学的組成物中に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが防腐剤として添加され得る。Ｉｄ．１４４９。さらに、抗酸化剤および懸濁剤が用いられ得る。Ｉｄ．
従って、本発明は、上記のような式（１〜４）の化合物を薬学的に受容可能なキャリアとの混合物として含む、薬学的または獣医学的組成物を提供する（以下、単に薬学的組成物と称する）。本発明はさらに、有効量の上記のような（１〜４）化合物を薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて含む、組成物、好ましくは薬学的組成物を提供する。
【０１２５】
本発明の薬学的組成物は、患者にその組成物を投与することを可能とする任意の形態であり得る。例えば、組成物は固体、液体または気体（エーロゾル）の形態であり得る。典型的な投与経路は、限定されないが、経口、局所、非経口、舌下、直腸、膣、および鼻腔内を包含する。本明細書で用いられる非経口という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または灌流技法を包含する。本発明の薬学的組成物は、中に含まれる活性成分が組成物を患者に投与したときにバイオアベイラブルであるように処方される。患者に投与される組成物は１種以上の投薬単位の形態をとり得、ここて例えば、錠剤は単一投薬単位であり得、そしてエーロゾル形態の式（１〜４）の化合物の容器は複数の投薬単位を保持し得る。
【０１２６】
薬学的組成物を調製するのに用いられる物質は薬学的に純粋であり、かつ使用される量で無毒性でなければならない。薬学的組成物中の活性成分（単数または複数）の最適な投薬量は種々の因子に依存することは、当業者には明らかである。関連する因子は、限定されないが、被験体の種類（例えばヒト）、活性成分の特定の形態、投与の様式および使用される組成物を包含する。
【０１２７】
一般に、薬学的組成物は、本明細書に記載の式（１〜４）の［ａｎ］活性化合物（ここで［ａ］および［ａｎ］は、本明細書全体を通じて、１つまたはそれ以上を示す）を、１つ以上のキャリアとの混合物中に含む。キャリア（単数または複数）は粒子であり得、その結果、組成物は例えば錠剤または散剤の形態である。キャリア（単数または複数）は液体であり得、組成物は例えば経口用シロップ剤または注射用液剤である。さらに、キャリア（単数または複数）は気体であり得、その結果、例えば吸入投与に有用なエーロゾル組成物が提供される。
【０１２８】
経口投与が意図される場合、組成物は好ましくは固体または液体形態のいずれかであり、ここで半固体、半液体、懸濁液およびゲル形態は本明細書で固体または液体と見なされる形態に含まれる。
【０１２９】
経口投与のための固体組成物として、組成物は、散剤、顆粒剤、圧縮錠剤、丸薬、カプセル、チューイングガム、カシェ剤などの形態に処方され得る。このような固体組成物は典型的には１種以上の不活性希釈剤または可食キャリアを含む。さらに、１種以上の以下のアジュバントが存在し得る：バインダー（カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微晶セルロース、またはゼラチンなど）；賦形剤（デンプン、乳糖またはデキストリンなど）；崩壊剤（アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチなど）；滑剤（ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｘなど）；グリダント（ｇｌｉｄａｎｔ）（コロイド状二酸化ケイ素など）；甘味剤（ショ糖またはサッカリンなど）、香味剤（ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバーなど）、および着色剤。
【０１３０】
組成物がカプセル剤（例えばゼラチンカプセル）の場合、これは上記タイプの物質に加えて、ポリエチレングリコール、シクロデキストリンまたは脂肪油のような液体キャリアを含み得る。
【０１３１】
組成物は液体形態、例えば、エリキシル剤、シロップ剤、溶液、乳剤、または懸濁液であり得る。液剤は、２つの例として、経口投与用、あるいは注射による送達用であり得る。経口投与が意図される場合、好ましい組成物は、本発明の化合物に加えて、１種以上の甘味剤、保存剤、色素／着色剤および香味増強剤を含む。注射による投与が意図される組成物には、１種以上の界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝剤、安定剤および等張剤が含まれ得る。
【０１３２】
本発明の液体薬学的組成物は、溶液、懸濁液、または他の形態のいずれであっても、以下のアジュバントの１つ以上を含み得る：滅菌希釈剤、例えば、注射用水、生理食塩水溶液、このましくは生理食塩水、リンゲル液、等張性塩化ナトリウム、不揮発油、例えば、合成のモノまたはジグリセリド（これは溶媒または懸濁媒体として作用し得る）、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン；抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム；錯形成剤、例えば、エチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩、および張性調節のための薬剤、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経口製剤は、アンプル、ディスポーザブルシリンジあるいはガラスまたはプラスチック製の複数の投薬バイアルに入れられ得る。生理食塩水が好適なアジュバントである。注射用薬学的組成物は好ましくは無菌である。
【０１３３】
非経口または経口投与のいずれかが意図される液体組成物は、適切な投薬量が得られるような量の式（１〜４）の化合物を含むべきである。典型的には、この量は、組成物中に本発明の化合物が少なくとも０．０１％である。経口投与が意図される場合、この量は組成物の重量の０．１％から約７０％までの間で変化し得る。好適な経口組成物は約４％から約５０％の間の式（１〜４）の活性化合物を含む。本発明による好ましい組成物および製剤は、非経口投薬単位が０．０１重量％から１重量％の間の活性化合物を含むように調製される。
【０１３４】
薬学的組成物は局所投与用に意図され得、この場合、キャリアは適切には、溶液、乳剤、軟膏またはゲル基剤を含み得る。基剤は、例えば、以下のものの１種以上を含み得る：ペトロラタム、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜ろう、鉱物油、水およびアルコールのような希釈剤、ならびに乳化剤および安定剤。濃化剤（ｔｈｉｃｋｎｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）が局所投与用の薬学的組成物中に存在し得る。経皮投与が意図される場合、組成物は経皮パッチまたはイオン導入デバイスを含み得る。局所処方物は、式（１〜４）の化合物を約０．１％から約１０％ｗ／ｖ（単位容量当たりの重量）の濃度で含み得る。
【０１３５】
組成物は直腸投与用に意図され得、例えば、坐剤の形態であり得、これは直腸内で溶解して、薬物を放出する。直腸投与用組成物は油性基剤を適切な非刺激性賦形剤として含み得る。このような基剤は、限定されないが、ラノリン、ココアバターおよびポリエチレングリコールを包含する。
【０１３６】
組成物は、固体または液体投薬単位の物理的形態を修飾する種々の物質を含み得る。例えば、組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する物質を含み得る。コーティングシェルを形成する物質は典型的には不活性であり、そして例えば、砂糖、シェラック、および他の腸溶性コーティング剤から選択され得る。あるいは、活性成分はゼラチンカプセル中に被包され得る。
【０１３７】
固体または液体形態の組成物は活性成分（単数または複数）に結合して、それにより活性成分の送達を補助する薬剤を含み得る。この能力で作用し得る適切な薬剤はモノクローナルまたはポリクローナル抗体、タンパク質またはリポソームを含む。
【０１３８】
本発明の薬学的組成物は気体状の投薬単位を構成し得る。例えば、これはエーロゾル形態であり得る。用語エーロゾルは、コロイド性質の系から加圧パッケージからなる系まで多岐にわたる系を表すために用いられ得る。送達は、液化または圧縮ガスによって、あるいは活性成分を施与する適切なポンプ系によって行われ得る。本発明の化合物のエーロゾルは、活性成分（単数または複数）を送達するために、単相、二相、または三相系で送達され得る。エーロゾルの送達は、必要な容器、アクチベーター、バルブ、サブ容器、スペーサーなどを含み、これらは一緒にキットを形成し得る。好適なエーロゾルは当業者が過度の実験を行うことなく決定され得る。
【０１３９】
固体、液体または気体形態のいずれであっても、本発明の薬学的組成物は炎症（関節炎を含む）の処置に用いられる公知の薬理学的薬剤を１種以上含み得る。
【０１４０】
薬学的組成物は薬学分野で周知の方法論によって調製され得る。
【０１４１】
注射によって投与されることが意図される組成物は、式（１〜４）の化合物を水と組み合わせて溶液を形成することによって調製され得る。均一な溶液または懸濁液の形成を促進するために、界面活性剤が添加され得る。界面活性剤は式（１〜４）の化合物と非共有結合的に相互作用して活性化合物が水性送達系中に溶解または均一に懸濁することを促進する化合物である。
【０１４２】
本明細書に開示の式１、２、３または４の化合物（すなわち式（１〜４）の化合物、または本発明の化合物）、あるいはこれらの化合物の１種以上および薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤を含む組成物は、患者における炎症性状態または疾患を処置または防止するための方法において用いられ得、ここでこの方法は、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここでこの所定量は患者の炎症性状態または疾患の処置または防止に有効な量である。
【０１４３】
炎症性状態または疾患は自己免疫状態または疾患であり得る；炎症性状態または疾患は骨および／または関節の軟骨コンパートメントの急性または慢性炎症を伴い得る；炎症性状態または疾患はリウマチ様関節炎、通風性関節炎または若年性リウマチ様関節炎から選択される関節炎であり得る；炎症性状態または疾患は喘息であり得る；この状態または疾患はＴ細胞の調節不全に関連し得る；この状態または疾患は炎症性サイトカインのレベルの上昇に関連し得る（例えば、炎症性サイトカインがＩＬ−２の場合、または炎症性サイトカインがＩＦＮ−γの場合、または炎症性サイトカインがＴＮＦ−αの場合）；炎症性状態または疾患は多発性硬化症であり得る；炎症性状態または疾患は肺サルコイドーシス（ｓａｒｃａｄｏｓｉｓ）であり得る；炎症性状態または疾患は眼の炎症またはアレルギーであり得る；炎症性状態または疾患は炎症性腸疾患（例えばクローン病または潰瘍性大腸炎）であり得る；そして炎症性状態または疾患は炎症性皮膚疾患（例えば、乾癬または皮膚炎）であり得る。
【０１４４】
さらに、本発明は患者内の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルを調節するための方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者の細胞内環状アデノシン５’一リン酸レベルの調節に有効な量である。患者は炎症性状態または疾患を有し得る。
【０１４５】
さらに、本発明は患者の疾患または状態を処置または防止するための方法を提供し、ここで上記疾患または状態は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連し、この方法はそれを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は、二次細胞メッセンジャーに関連する酵素を阻害することによって調節される病理的状態に関連する疾患または状態の処置または防止に有効な量である。酵素は環状ＡＭＰホスホジエステラーゼであり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ４であり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ３であり得る；または酵素はホスホジエステラーゼ４およびホスホジエステラーゼ３の両方であり得る；または酵素は環状ＧＭＰホスホジエステラーゼであり得る。
【０１４６】
さらに、本発明は患者における移植拒絶を処置または防止する方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における移植拒絶の処置または防止に有効な量である。拒絶は移植片対宿主疾患によるものであり得る、
さらに、本発明は患者における制御されない細胞増殖を処置または防止する方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における制御されない細胞増殖の処置または防止に有効な量である。制御されない細胞増殖は白血病および固形腫瘍から選択される癌によって引き起こされ得る。
【０１４７】
さらに、本発明は患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止の方法を提供し、これは、それを必要とする患者に所定量の本発明の化合物または組成物を投与する工程を包含し、ここで所定量は患者における中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態の処置または防止に有効な量である。中枢神経系（ＣＮＳ）に関連する状態は抑鬱であり得る。
【０１４８】
本発明の方法において、式（１〜４）の化合物、あるいは１つ以上の式（１〜４）の化合物と薬学的受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物は、必ずしも必要ではないが、上記定義のような式（１〜４）の化合物、あるいはこれらの化合物の１つと薬学的受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤とを含む組成物を投与された被験体において以下の所望の結果の１つ以上を達成し得る：
１．一次好中球由来の反応性酸素種の阻害；
２．好中球の走化性の阻害：
３．ＴＮＦ−α産生の阻害；
４．浮腫の阻害；
５．酸素ラジカル除去；
６．環状ＡＭＰホスホジエステラーゼ１、３および／または４、ならびに関連のＰＤＥ（例えばＰＤＥ７）の阻害；
７．ヒト単球細胞におけるＣＲＥ媒介転写活性の誘導の強化；
８．ＰＤＥ、好ましくはＰＤＥ４、ＰＤＥ３、またはＰＤＥ３およびＰＤＥ４の阻害；
９．活性化Ｔ細胞サブセットによるサイトカイン産生の阻害；
１０．好中球ミエロペルオキシダーゼ放出の阻害；
１１．ＩＣ50ＰＤＥ４（ｃａｔ）：ＩＣ50ＰＤＥ４（ＨＡＲＢＳ）の比率の低さ；
１２．グラフト拒絶の阻害；
１３．炎症性腸疾患における疾患の臨床的および組織病理学的パラメーターの阻害；および
１４．ネズミコラーゲン誘導関節炎モデルにおける関節炎の臨床的および組織病理学的的パラメーターの阻害。
【０１４９】
従って、本発明の方法は、炎症（急性および慢性両方の炎症を含む）ならびに特定の増殖性障害（癌）の処置に用いられ得る。本明細書において、炎症は、限定されないが、強直性脊椎炎、関節炎（この用語は１００種を越えるリウマチ性疾患を包含する）、喘息、クローン病、線維筋痛症候群、痛風、脳の炎症（多発性硬化症、ＡＩＤＳ痴呆、ライム脳症、ヘルペス脳炎、クロイツフェルト−ヤコブ病、および大脳トキソプラズマ症を含む）、気腫、炎症性腸疾患、過敏性大腸症候群、虚血再灌流障害、若年性エリテマトーデス、肺サルコイドーシス、川崎病、変形性関節炎、骨盤炎症性疾患、乾癬性関節炎（乾癬）、リウマチ様関節炎、乾癬、組織／器官移植、強皮症、脊椎関節症、全身性紅斑性狼蒼、肺サルコイドーシス、および潰瘍性大腸炎を包含する。本明細書において、増殖性障害は、限定されないが、全ての白血病および固形腫瘍を包含し、これらはその細胞周期が妨害されると分化またはアポトーシスを受けやすい。
【０１５０】
本発明の方法は、治療有効量の式（１〜４）の化合物（その塩、組成物などを含む）の投与を提供する。本明細書において、用語「治療有効量」に包含される実際の量は投与経路、処置される温血動物の種類、および考慮される特定の温血動物の身体的性質に依存する。この量を決定するためのこれらの因子およびそれらの関係は医療分野の当業者に周知である。この量および投与方法は最適な効力を達成するために調整され得るが、体重、食餌、同時に投薬される薬物のような因子、ならびに医療分野の当業者が認識する他の因子に依存する。
【０１５１】
本発明の化合物または組成物の有効量は温血動物、例えばヒトの炎症を処置するに十分である。有効量の抗炎症薬を投与する方法は当該分野で周知であり、吸入、経口または非経口形態の投与を包含する。このような投薬形態は、限定されないが、非経口溶液、錠剤、カプセル剤、徐放性インプラント、および経皮送達系；または乾燥粉末吸入器または加圧された多回投与吸入デバイスを使用する吸入投薬系を包含する。
【０１５２】
投薬量および頻度は、有害な影響なしで薬剤の有効なレベルを創出するように選択される。経口または静脈内投与される場合、これは、一般的に、約０．０１から１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、そして典型的には約０．１から１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の投薬である。また、経鼻または吸入で投与される場合、投薬範囲は典型的には約０．０１から１ｍｇ／ｋｇ／日である。
【０１５３】
式（１〜４）の化合物（上記の方法および組成物で用いられる化合物を包含する）は以下の実施例で示すスキームに従って調製され得る。以下の実施例は例示のために提供され、限定のためではない。
【０１５４】
他に指示のない限り、フラッシュクロマトグラフィーおよびカラムクロマトグラフィーはＭｅｒｃｋシリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ）を用いて達成され得る。フラッシュクロマトグラフィーは「Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ」第３版、Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ−Ｈｅｉｎｅｍａｎｎ  Ｌｔｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ（１９８８）、Ｄ．Ｄ．ＰｅｒｒｉｎおよびＷ．Ｌ．Ｆ．Ａｒｍａｒｅｇｏ編、第２３頁に記載の手順に従って行われ得る。カラムクロマトグラフィーは充填材を通る溶離液の流速が重力によって決定されるプロセスをいう。全ての場合において、フラッシュクロマトグラフィーおよび円形クロマトグラフィーは交換可能に用いられ得る。円形クロマトグラフィーはシリカゲルを用いてＣｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎ  ＃７９２４Ｔ型（Ｈａｒｒｉｓｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）上で行われる。他に指示のない限り、引用されるＲf値はシリカゲル６０Ｆ254（Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ、６４２７１、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いた薄層クロマトグラフィーによって得られる。
【０１５５】
また、他に指示のない限り、化学反応物および試薬は標準的な化成品供給会社、例えばＡｌｄｒｉｃｈ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ；ｗｗｗ．ａｌｄｒｉｃｈ．ｓｉａｌ．ｃｏｍ）；ＥＭ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｈａｗｔｈｏｒｎｅ，ＮＹ；ｗｗｗ．ｅｍｓｃｉｅｎｃｅ．ｃｏｍ）；Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏ．（Ｈａｍｐｔｏｎ，ＮＨ；ｗｗｗ．ｆｉｓｃｈｅｒｌ．ｃｏｍ）；およびＬａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．（Ｗｉｎｄｈａｍ，ＮＨ；ｗｗｗ．ｌａｎｃａｓｔｅｒ．ｃｏ．ｕｋ）から入手した。気体はＰｒａｘａｉｒ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｂ．Ｃ．）から入手した。細胞系は他に指示のない限り公的供給源または市販の供給源から入手した（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ）。
【０１５６】
（実施例）
化合物１２は本発明の代表的な化合物であり、これはスキーム１および２に従って調製される。化合物１２に関連する任意の数の化合物が同様の方法論を用いて生成され得るが、異なるケイ皮酸から出発する。化合物１２は炭素３（Ｃ３）でＳ立体配置を有し、これは化合物４のキラル補助剤（Ｓ立体配置を有する）の立体配置によって支配される。あるいは、化合物１２のＣ３のＲ立体配置が反対の立体配置（Ｒ）のキラル補助剤を用いて生成される。スキーム１および２の方法論を用いて生成される化合物において、生成物はＣ５における異性体の混合物を有する。あるいは、その中心（Ｃ５）における固定した立体配置を有する化合物はスキーム３および４に従って生成される。従って、全てのジアステレオ異性体が以下の４つのスキームに記載の適当な方法論を用いて調製され得る。
【０１５７】
化合物１２に焦点をあてると、市販の出発物質パラ−ヒドロキシ−メタ−メトキシケイ皮酸（１）の二重結合の水素化がＨ2を用いて触媒の１０％Ｐｄ／Ｃをの存在下達成される。化合物２のパラ−ヒドロキシ官能性の保護の次に（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン部分を添加して、化合物４を形成する。このキラル補助剤の使用によりカルボニルに対してα位での立体化学を支配することはすでに詳しく報告されている。化合物４をスキーム２に従って調製される置換アリールブロミドで立体選択的にアルキル化して、化合物５を得る。化合物５を水素化アルミニウムリチウムで還元して第一級アルコールを含む化合物６を得る。第一級アルコールをシリルエーテルとして保護した後、二重結合をヒドロホウ素化して、化合物８を得る。ベンジル化、次に脱シリル化して化合物１０を得、これをＪｏｎｅｓ条件を用いて酸化して、カルボン酸１１を得る。酢酸中での水素化により所望の環化生成物１２を得る。
【０１５８】
（スキーム１）
【０１５９】
【化２９】
0004979157.tif 000027
【０１６０】
（スキーム２）
【０１６１】
【化３０】
0004979157.tif 000028
【０１６２】
（化合物２の合成）
ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ、２：１）中の化合物１（３．０ｇ、０．０１５５ｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下、１４時間撹拌した。セライトプラグを通して濾過した後、溶媒を減圧下でエバポレートして、化合物２（２．９８ｇ、９８％）を白色固体として得、これをさらに精製することなく用いた。
【０１６３】
（化合物３の合成）
化合物２（２．７１ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解し、そしてこの溶液を０℃に冷却した。ＮａＨ（２．２１ｇ、鉱物油中６０％、５５．２ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、ベンジルブロミド（ＢｎＢｒ）（８．２１ｍＬ、６９．０ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２×７５ｍＬ）、次にＨ2Ｏ（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を乾固するまでエバポレートし、粗ベンジルエーテル化合物を得た。この粗混合物はある量の対応するベンジルエーテルを含んでおり、これをＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ（５０ｍＬ、２：１：１）に溶解した。ＬｉＯＨ・Ｈ2Ｏ（１．７４ｇ、４１．４ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を室温で２０時間攪拌した。溶媒を少量になるまでエバポレートした後、混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＨ2Ｏ（２×７５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物３（３．２ｇ、８１％）を白色固体として得た。
【０１６４】
（化合物４の合成）
溶液１：トリエチルアミン（２．９ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）、次にトリメチルアセチルクロリド（２．４ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を化合物３（５．０ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。混合物を０℃で１時間攪拌した。
【０１６５】
溶液２：第２のフラスコ中で、ｎ−ブチルリチウム（７．７ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−オキサゾリジノン（３．４ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液中に−７８℃で加えた。この混合物を１時間攪拌し、そして次に上記の無水物（溶液１）にカニューレを通じて加えた。この混合物を０℃から室温まで加温し、次に２４時間攪拌した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１５０ｍＬ）で希釈し、そしてＣＨ2Ｃｌ2（４×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＨ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して化合物４（７．０５ｇ、９１％）を白色結晶性固体として得た。
【０１６６】
（化合物５の合成）
化合物４（３．０ｇ、６．７３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中に溶解し、−７８℃に冷却し、そして２．０ＭのＬＤＡ（ＴＨＦ中、３．５ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。１時間後、化合物１５（３．２ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を一回でこの反応溶液に加え、そして得られた混合物を０℃に加温し、そしてさらに２時間攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ3（２×１００ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製して化合物５（２．６３ｇ、６３％）を無色油状物として得た。
【０１６７】
（化合物６の合成）
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の化合物５（２．４ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）を、ＬｉＡｌＨ4（１５４．２ｍｇ、３．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）懸濁液に０℃で加えた。混合物を２時間０℃で攪拌し、そして飽和ＮａＨＣＯ3（１ｍＬ）および１０％ＮａＯＨ（１ｍＬ）でクエンチした。得られた混合物を濾過し、濾液をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＣｌ（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。粗生成物を、２：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物６（１．４７ｇ、８５％）を無色油状物として得た。
【０１６８】
（化合物７の合成）
化合物６（１．５０ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）を乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）中で攪拌し、次にＥｔ3Ｎ（０．５６ｍＬ、４．０１ｍｍｏｌ）を加え、次いでＴＢＤＭＳＣｌ（５５４．５ｍｇ、３．６８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で６時間攪拌し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２×７５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ溶液（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５：１）で精製して化合物７（１．７４ｇ、９３％）を無色油状物として得た。
【０１６９】
（化合物８の合成）
化合物７（５６０．０ｍｇ、０．９９５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、そして０℃に冷却した。ＢＨ3−ＴＨＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、１．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を０℃で５時間混合した後、１０ＮのＮａＯＨ（１ｍＬ）を加え、次に３０％のＨ2Ｏ2（１ｍＬ）を加え、そして混合物をさらに１６時間、室温で攪拌した。ＴＨＦをエバポレートし、混合物をＥｔＯＡｃ（１２０ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＣｌ溶液（２×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物８（４３５．５ｍｇ、７５％）を無色油状物として得た。
【０１７０】
（化合物９の合成）
化合物８（９００．４ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解して０℃に冷却し、そしてＮａＨ（１３７．７ｍｇ、鉱物油中６０％、３．４４ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、ベンジルブロミド（ＢｎＢｒ）（０．４１ｍＬ、３．４４ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。次に有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１０：１）で精製して、化合物９（９１５．１ｍｇ、８８％）を無色油状物として得た。
【０１７１】
（化合物１０の合成）
化合物９（８９９．８ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、１．０Ｍのテトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＨＦ中、２．７ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた混合物を室温で８時間攪拌した。溶媒をエバポレートし、次に混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解し、そしてＨ2Ｏ（２×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１０（７３１．６ｍｇ、９８％）を無色油状物として得た。
【０１７２】
（化合物１１の合成）
化合物１０（５７０．７ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）をアセトン（１２ｍＬ）に溶解し、そして０℃に冷却した。Ｊｏｎｅｓ試薬（２５％Ｈ2ＳＯ4中の水性１Ｎ  ＣｒＯ3、２．０６ｍＬ、２．０６ｍｍｏｌ）を５分間かけてゆっくりと加えた。得られた暗緑色の混合物を４０分間室温で攪拌し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、そして５％ＨＣｌ（２×４０ｍＬ）およびＨ2Ｏ（２×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相を次にＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートして粗化合物１１（５４７．０ｍｇ）を得、これをさらに精製することなく用いた。
【０１７３】
（化合物１２の合成）
ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物１１（５４７．０ｍｇ、０．９４６ｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（７８．０ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下、４８時間攪拌した。セライトプラグに通して濾過し、そして乾固するまでエバポレートした後、混合物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｎｏｖａ  Ｐａｋ  ＨＫ  Ｃ18、Ｍ４０６３１０２（Ｗａｔｅｒｓ）、６μ、１９×３００ｍｍ）で水中５５％ＭｅＯＨを用いて精製して化合物１２（１８３．７ｍｇ、２ステップで４８％）を無色油状物として得た。
【０１７４】
（化合物１４の合成）
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（９．８０ｇ、０．０８３３ｍｏｌ）をＭｅＰＰｈ3Ｂｒ（２９．８ｇ、０．０８３３ｍｏｌ）の乾燥トルエン（１８０ｍＬ）懸濁液にアルゴン下、加えた。混合物を室温で２時間攪拌した。３’，４’−ジメトキシアセトフェノン１３（１０．０ｇ、０．０５５５ｍｏｌ）を固体として加え、そして反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。水（１０ｍＬ）をゆっくりと加え、そして混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3（２×２００ｍＬ）で洗浄し、次にＨ2Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥した後、溶液を濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１９：１）で精製して、化合物１４（９．３１ｇ、９３％）を無色油状物として得た。
【０１７５】
（化合物１５の合成）
Ｎ−ブロモスクシンイミド（４．９３ｇ、２７．３８ｍｍｏｌ）および過酸化ベンゾイル（８０．０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）を化合物１４（４．８８ｇ、２７．３８ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ3（６０ｍＬ）溶液中に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。次に混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、飽和塩化ナトリウム（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９７：３）を用いて精製して、化合物１５（２．４４ｇ、３７％）を淡黄色油状物として得た。
【０１７６】
Ｃ５において定義された立体配置を有する化合物はスキーム３に従って合成され得る。従って、市販の（３，４−ジメトキシフェニル）酢酸１６（Ａｌｄｒｉｃｈ）およびトリメチルアセチルクロリドから得られる混合無水物を（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノンのリチウムアニオンと反応させて、化合物１７を得る。キラルなオキサゾリジノン１７のチタンエノラートのｔｅｒｔ−ブチルアクリレートに対するエナンチオ選択的マイケル付加によって、適切な保護基を有するカルボキシレート官能基を有する化合物１８が得られる。このキラル補助剤の水酸化リチウムおよび過酸化水素による加水分解によってカルボン酸１９を得る。化合物１９のＢＨ3−ＴＨＦによる選択的還元によって、第一級アルコールを含む化合物２０が得られる。ｔ−ブチルエステル結合をトルエン中のｐＴｓＯＨ．Ｈ2Ｏで除去すると、対応のヒドロキシル酸が得られ、これが自発的にラクトン化して化合物２１が生じる。化合物２１のリチウムアニオンの４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドによるアルキル化によって化合物２２がジアステレオマーの混合物（約１：１）として得られる。化合物２２の水素化により所望の生成物２３を得る。従って、任意の数の置換ベンジルブロミドを用いて、ベンジル環に関する置換パターンが異なる化合物２３に関連する化合物を調製し得る。
【０１７７】
（化合物１７の合成）
溶液１：トリエチルアミン（１２．８ｍＬ、９１．７ｍｍｏｌ）、次にトリメチルアセチルクロリド（１０．４ｍＬ、８４．２ｍｍｏｌ）を（３，４−ジメトキシフェニル）酢酸１６（１５．０ｇ、７６．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２０ｍＬ）溶液に０℃で加え、そして混合物を１時間攪拌した。
【０１７８】
溶液２：第２のフラスコ中で、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、３３．７ｍＬ、８４．２ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（１４．９ｇ、８４．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（７５ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。この溶液を１時間攪拌し、そして次に溶液１に０℃でカニューレを通じて加えた。得られた混合物を０℃から室温に加温し、２４時間攪拌し、次に飽和ＮａＨＣＯ3溶液（３００ｍＬ）で希釈し、そしてＣＨ2Ｃｌ2（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、化合物１７（１９．０４ｇ、７０％）を白色固体として得た。
【０１７９】
（スキーム３）
【０１８０】
【化３１】
0004979157.tif 000029
【０１８１】
（化合物１９の合成）
チタンイソプロポキシド（０．４２ｍＬ、１．４１ｍｍｏｌ）をゆっくりと四塩化チタン（０．５０ｍＬ、４．５０ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。得られた混合物を０℃で５分間攪拌し、次にジイソプロピルエチルアミン（１．０４ｍＬ、５．９１ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、化合物１７（２．０ｇ、５．６３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を加えた。混合物を９０分間、０℃で攪拌し、次にｔｅｒｔ−ブチルアクリレート（１．２４ｍＬ、８．４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温に加温し、そして３６時間攪拌し、そして次に飽和塩化アンモニウム（５０ｍＬ）で希釈した。水層をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出し、そして合わせた有機層を１ＮのＨＣｌ（２×７５）、水（２×７５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×７５ｍＬ）で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧下でエバポレートして、粗化合物１８（２．６９ｇ）を得、これをさらに精製することなく用いた。
【０１８２】
粗化合物１８（２．６９ｇ）を３：１のＴＨＦ／水の混合物（８５ｍＬ）に溶解し、そして０℃に冷却した。水酸化リチウム一水和物（４６６．６ｍｇ、１１．１２ｍｍｏｌ）および３０％過酸化水素（２．５ｍＬ、２２．２５ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を０℃で３時間攪拌した。亜硫酸ナトリウム（３．０６ｇ、２４．４６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、次に０．５Ｎ重炭酸ナトリウム（４１ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、次に減圧下で濃縮した。水相を５％ＨＣｌで希釈してｐＨ＝２とし、次にＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、２０％酢酸エチル／ヘキサン中０．２％酢酸を用いるシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１９（１．０９ｇ、２ステップで６０％）を淡黄色油状物として得た。
【０１８３】
（化合物２０の合成）
ＢＨ3−ＴＨＦ（１．０ＭのＴＨＦ溶液、３７．６ｍＬ、０．０３７６ｍｏｌ）を２０分間かけて化合物１９（１２．１８ｇ、０．０３７６ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液中に−１８℃で滴下した。冷却浴を次に取り去り、そして反応混合物を室温で１６時間攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）を加え、そして水相をＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下でエバポレートした。残渣を、ヘキサン中の５０％ＥｔＯＡｃで溶離するカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物２０（１０．５２ｇ、９１％）を無色油状物として得た。
【０１８４】
（化合物２１の合成）
化合物２０（４８２．１ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４４．９ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）のトルエン（２０ｍＬ）溶液を３０分間８０℃で加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２×４０ｍＬ）で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥した後、混合物を濾過し、そして濾液を濃縮して化合物２１（３４２．１ｍｇ、９２％）を白色固体として得た。
【０１８５】
（化合物２２の合成）
４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドの調製：４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルアルコール（９．０ｇ、３６．８４ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）溶液にゆっくりとＰＢｒ3（４．９９ｇ、１８．４２ｍｍｏｌ）をシリンジで加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×７５ｍＬ）およびブライン（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（１０．９ｇ、９６％）を白色固体として得た。
【０１８６】
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍのヘキサン溶液、０．４２ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１５ｍＬ）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次に化合物２１（２２６．８ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（２４８．５ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６１，９１４６〜９１５５に記載の文献の手順に従って作製）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を一回でこの反応系に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和水性ＮａＣｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物２２（１５２．１ｍｇ、４１％）を無色油状物として得た。
【０１８７】
（化合物２３の合成）
ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（４：１、５ｍＬ）中の化合物２２（１５０．０ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２２．５ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下、２時間攪拌した。混合物を次にセライトプラグを通して濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物２３（１０６．３ｍｇ、８８％）を無色のシロップとして得た。
【０１８８】
本発明の特定の化合物は２つの不斉炭素原子を含み、それゆえ、それらの化合物に関して４つの可能なジアステレオマーが存在する。特定の立体異性体を調製する例示の合成手順を以下のスキーム４にまとめる。このように、化合物２０（スキーム３）の第一級アルコールの保護はベンジルブロミド（ＢｎＢｒ）およびＤＭＦ中の水素化ナトリウムを用いて達成され、ベンジルオキシ誘導体２４が得られる。化合物２４を次に、化合物２４をＴＦＡと反応させることによって、その対応の酸２５に転化する。化合物２５からのＮ−アシルオキサゾリジノン誘導体２６の合成は、先のセクションで記載の反応と同じタイプの反応を用いて達成される。化合物２６の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドによる立体選択的アルキル化により化合物２７を得る。このキラル補助剤を水酸化リチウムおよび過酸化水素で加水分解して、カルボン酸２８を得る。酢酸中での化合物２８の水素化およびトルエン中のｐＴｓＯＨ．Ｈ2Ｏでのラクトン化により所望の環化生成物２９が得られ、これは３Ｒ，５Ｓ立体配置を有する。従って、他の３つのジアステレオ異性体が同様に合成され得るが、異なるキラルオキサゾリジノンを用いて出発する。例えば、３Ｓ，５Ｓ立体配置を有する化合物３０は反対の（Ｒ）立体配置を含むオキサゾリジノンで、化合物２６と同様の中間体を用いて合成され得る。
【０１８９】
（スキーム４）
【０１９０】
【化３２】
0004979157.tif 000030
【０１９１】
（化合物２４の合成）
化合物２０（９．４５ｇ、３０．４５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、ＮａＨ（２．４３ｇ、鉱物油中６０％、６０．９０ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、ＢｎＢｒ（７．２ｍＬ、６０．９０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、そして得られた混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（６００ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物２４（１０．７３ｇ、８８％）を無色油状物として得た。
【０１９２】
（化合物２５の合成）
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（２５ｍＬ）を化合物２４（１０．０ｇ、２９．００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に室温で加えた。この混合物を１６時間攪拌し、次に減圧下で濃縮した。得られた油状物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ（７５：２３：２）で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、化合物２５（８．４９ｇ、８５％）を無色油状物として得た。
【０１９３】
（化合物２６の合成）
溶液１：トリエチルアミン（０．９８ｍＬ、６．８２ｍｍｏｌ）、次にトリメチルアセチルクロリド（０．７８ｍＬ、６．３８ｍｍｏｌ）を化合物２５（２．００ｇ、５．８０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に０℃で加え、そして混合物を１時間攪拌した。
【０１９４】
溶液２：第２のフラスコ中で、ｎ−ブチルリチウム（２．６ｍＬ、６．３８ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（１．１３ｇ、６．３８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。この溶液を１時間攪拌し、そして次に上記混合無水物（溶液１）にカニューレを通じて加えた。得られた０℃の混合物を室温まで加温した。室温で２４時間攪拌した後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１５０ｍＬ）で希釈し、そしてＣＨ2Ｃｌ2（４×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＨ2Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、化合物２６（２．３８ｇ、８１％）を淡黄色油状物として得た。
【０１９５】
（化合物２７の合成）
ｎ−ＢｕＬｉ（２．８４ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液、７．１０ｍｍｏｌ）をゆっくりとジイソプロピルアミン（１．０８ｍＬ、７．７０ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５５ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。反応混合物を−７８℃でアルゴン下１時間、攪拌した。−７８℃のＴＨＦ（３５ｍＬ）中の化合物２６を加え、そして反応混合物を１時間攪拌した。４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（２．７３ｇ、８．８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、次に、一回でこの反応系に加えた。得られた混合物を０℃に加温し、そしてさらに２時間攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和ＮＨ4Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製して、化合物２７（３．３０ｇ、７６％）白色泡状物として得た。
【０１９６】
（化合物２８の合成）
ＬｉＯＨ・Ｈ2Ｏ（０．４０４ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）およびＨ2Ｏ2（Ｈ2Ｏ中３０％、２．２ｍＬ、１９．２０ｍｍｏｌ）を化合物２７（３．５０ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（３：１、６７ｍＬ）溶液中に０℃で加えた。反応混合物を０℃で３時間攪拌した。Ｎａ2ＳＯ3（２．６６ｇ、２１．１ｍｍｏｌ、水（３０ｍＬ）中））の溶液を次に加え、次いで０．５ＮのＮａＨＣＯ3溶液（４０ｍＬ）を加えた。混合物を２時間攪拌し、次にＴＨＦを減圧下でエバポレートした。この水溶液を２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２まで希釈し、そして次にＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。得られた油状物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ（７５：２３：２）で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、化合物２８（２．２３ｇ、８４％）を無色油状物として得た。
【０１９７】
（化合物２９の合成）
ＡｃＯＨ（１５０ｍＬ）中の化合物２８（１．８６ｇ、３．３７ｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１８０ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下、１６時間攪拌した。触媒を反応混合物をセライトプラグを通して濾過することによって除去した。濾液を乾固するまでエバポレートし、そして残渣をトルエン（１００ｍＬ）中のｐＴｓＯＨ．Ｈ2Ｏ（２００ｍｇ）と共に８０℃で３０分間攪拌した。トルエンを減圧下で除去し、そして残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製して化合物２９（１．０６ｇ、８５％）を白色泡状物として得た。
【０１９８】
フェニル環上に異なるアルコキシ基を有する化合物がスキーム５に従って合成され得る。例えば、化合物４３は以下のようにして合成される。市販の３−ヒドロキシ−４−メトキシベンジルアルコール３１を、３１をベンジルブロミドおよび炭酸カリウムで還流トルエン中で処理することによって、ベンジルオキシ誘導体３２として選択的に保護し、８９％の所望の生成物を結晶化後に得る。化合物３２を次にメタンスルホニルクロリドと、トリエチルアミンおよびＣＨ2Ｃｌ2の存在下で反応させて化合物３３を得、これをさらに精製することなく用いる。粗生成物３３を次にＤＭＦ中に入れ、そしてシアン化カリウムで１８−クラウン−６の存在下、処理する。ワークアップおよび精製の後、ニトリル３４を、２ステップで収率９１％で単離する。ニトリル３４の水酸化カリウムによる加水分解を次に行い、所望のカルボン酸３５を収率９５％で得る。化合物３５をトリメチルアセチルクロリドで処理して混合無水物を得、これを（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノンのリチウムアニオンと反応させて化合物３６を収率７５％で得る。キラルなオキサゾリジノン３６のチタンエノラートのｔｅｒｔ−ブチルアクリレートに対するエナンチオ選択的マイケル付加によって、適切な保護基を有するカルボキシレート官能基を有する化合物３７が得られる。化合物３７の水素化によりアルコールが定量的収率で得られ、これを、ＤＭＦ中のシクロペンチルブロミド、炭酸カリウム、およびヨウ化カリウムで処理して、シクロペンチルオキシ誘導体３８に収率６４％で転化する。従って、フェニル環上の任意の数のアルコキシ誘導体が対応の臭化アルキルまたは官能化臭化アルキルを用いて作製され得る。キラル補助剤の水酸化リチウムおよび過酸化水素による加水分解によってカルボン酸３９を収率９１％で得る。化合物３９のＢＨ3−ＴＨＦによる選択的還元によって、第一級アルコールを含む化合物４０（収率８９％）が得られる。ラクトン４１がトルエン中のｐＴｓＯＨ．Ｈ2Ｏで化合物４０を処理することによって収率９４％で得られる。化合物４１の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドによるアルキル化により、化合物４２を収率７０％で得る。化合物４２の酢酸中での水素化により所望の生成物４３を収率８３％で得る。
【０１９９】
（スキーム５）
【０２００】
【化３３】
0004979157.tif 000031
【０２０１】
（化合物３２の合成）
トルエン（３５０ｍＬ）中の急速に攪拌した３−ヒドロキシ−４−メトキシベンジルアルコール３１（３０．０ｇ、１９５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（６２．２ｇ、４５０ｍｍｏｌ）、および１８−クラウン−６（０．４０ｇ、１ｍｏｌ％）のスラリーに、ベンジルブロミド（２５．６ｇ、１５０ｍｍｏｌ）のトルエン（１５０ｍＬ）溶液を２０分間かけて加えた。反応混合物を１６時間還流し、その後、混合物をジエチルエーテル（４００ｍＬ）で希釈し、そしてＮａＯＨ（１Ｎ、２×２５０ｍＬ）、飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×２５０ｍＬ）、およびブライン（２×３００ｍＬ）で順次洗浄した。ジエチルエーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を除去して淡黄色固体（４２．１ｇ）を得、これをＥｔＯＡｃおよびヘキサンで結晶化して、化合物３２（３２．７ｇ、８９％）を白色結晶性固体として得た。
【０２０２】
（化合物３３の合成）
化合物３２（３０．０ｇ、１２２．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３００ｍＬ）中に溶解して０℃に冷却し、そして次にＥｔ3Ｎ（２０．４ｍＬ、１４７．３６ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１１．４０ｍＬ、１４７．３６ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り去り、そして溶液を室温で２時間攪拌した。次に混合物をジクロロメタン（７００ｍＬ）で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×３００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（２×３００ｍＬ）で順次洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を濃縮して化合物３３（３３．０８ｇ）を淡黄色固体として得、これを次の工程にさらに精製することなく用いた。
【０２０３】
（化合物３４の合成）
粗３３（３３．０８ｇ）の乾燥ＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液にＫＣＮ（１５．９９ｇ、２４５．６ｍｍｏｌ）および１８−クラウン−６（５．１９ｇ、１９．６５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間攪拌し、次に水（１．５Ｌ）中に注いだ。沈殿物を採取し、そしてＥｔＯＡｃ（６００ｍＬ）中に溶解し、Ｈ2Ｏ（２×２００ｍＬ）およびブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を濃縮して化合物３４（２８．５ｇ、２ステップで収率９１％）をオフホワイトの固体として得た。
【０２０４】
（化合物３５の合成）
Ｈ2Ｏ（１７０ｍＬ）中の化合物３４（２８．０ｇ、１１０．５ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（９４．０ｇ、１６７．５ｍｍｏｌ）の混合物を１２時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却した後、これをＨ2Ｏ（１．６Ｌ）で希釈し、そして１２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。得られた沈殿物を採取し、そしてＰ2Ｏ5で乾燥して、化合物３５（２８．８ｇ、９５％）を白色固体として得た。
【０２０５】
（化合物３６の合成）
溶液１：トリエチルアミン（１７．７ｍＬ、１２６．９２ｍｍｏｌ）、次にトリメチルアセチルクロリド（１４．３ｍＬ、１１６．３５ｍｍｏｌ）を化合物３５（２８．８ｇ、１０５．７７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に０℃で加え、そして混合物を１時間攪拌した。
【０２０６】
溶液２：第２のフラスコ中で、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、４６．５ｍＬ、１１６．３５ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（２０．６ｇ、１１６．３５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１４５ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。この溶液を１時間攪拌し、そして次に溶液１に０℃で加えた。得られた混合物を０℃から室温まで加温し、２４時間攪拌し、次に飽和ＮａＨＣＯ3溶液（４００ｍＬ）で希釈し、そしてＣＨ2Ｃｌ2（４×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して出発物質（１５．９３ｇ）および化合物３６（１５．３０ｇ、出発物質の回収を基準にして７５％）を白色固体として得た。
【０２０７】
（化合物３７の合成）
チタンイソプロポキシド（２．６ｍＬ、８．６９ｍｍｏｌ）をゆっくりと四塩化チタン（３．１ｍＬ、２７．８ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液中に０℃で加えた。得られた混合物を０℃で５分間攪拌し、次にジイソプロピルエチルアミン（６．７ｍＬ、３８．２４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、化合物３６（１５ｇ、３４．７６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液を加えた。混合物を９０分間０℃で攪拌し、次にｔｅｒｔ−ブチルアクリレート（１５．３ｍＬ、１０４．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３日間０℃で攪拌し、そして次に飽和塩化アンモニウム（３００ｍＬ）で希釈した。水層をジクロロメタン（３×３００ｍＬ）で抽出し、そして合わせた有機層を５％ＨＣｌ（２×４００ｍＬ）、水（２×３００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４００ｍＬ）で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過および濾液の減圧下でのエバポレーションにより、粗化合物３７（２１．０ｇ）を得た。粗３７（２．１ｇ）の一部を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：２）で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、純粋な化合物３７（１．５５ｇ）をシロップとして得た。
【０２０８】
（化合物３８の合成）
ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（５：１、６０ｍＬ）中の化合物３７（１．５５ｇ、２．７７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下、１８時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートして、中間体のフェノール化合物（１．３０ｇ、１００％）を得た。
【０２０９】
フェノール化合物（０．３０ｇ、０．６３９ｍｍｏｌ）、無水Ｋ2ＣＯ3（０．１３２ｇ、０．９５８ｍｍｏｌ）、およびＫＩ（５ｍｇ）の乾燥ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の懸濁液を攪拌し、６５℃に加熱し、そして次にシクロペンチルブロミド（０．１０ｍＬ、０．９５８ｍｍｏｌ）を滴下した。攪拌した混合物をさらに２１時間、６５℃で加熱した。室温まで冷却した後、反応混合物をＥｔ2Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒をエバポレートした。残渣を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）を溶離液として用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物３８（０．２２ｇ、６４％）を無色シロップとして得た。
【０２１０】
（化合物３９の合成）
化合物３８（３．５ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（３：１、６０ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に冷却した。水酸化リチウム一水和物（０．５４６ｇ、１３．０２ｍｍｏｌ）および３０％過酸化水素（２．９８ｍＬ、２６．０４ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を０℃で３時間攪拌した。亜硫酸ナトリウム（３．６１ｇ、２８．６４ｍｍｏｌ）の水（１９ｍＬ）溶液を加え、次に０．５Ｎ重炭酸ナトリウム（３５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、そして次に減圧下で濃縮した。水相を５％のＨＣｌでｐＨ＝２まで希釈し、そして次にＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ4  で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、酢酸エチル／ヘキサン（１：４）中０．２％酢酸を溶離液として用いるシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物３９（２．２４ｇ、９１％）を白色固体として得た。
【０２１１】
（化合物４０の合成）
ＢＨ3−ＴＨＦ（１．０ＭのＴＨＦ溶液、２．７０ｍＬ、２．７０ｍｍｏｌ）を４０分間かけて化合物３９（２．２３ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に−１８℃で滴下した。次に冷却浴を取り去り、そして反応混合物を室温で１８時間攪拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ3溶液（１５ｍＬ）を加え、そして水相をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧下でエバポレートした。残渣を、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物４０（１．９１ｇ、８９％）を無色油状物として得た。
【０２１２】
（化合物４１の合成）
化合物４０（０．３９ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２９ｍｇ）のトルエン（２５ｍＬ）溶液を８５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下で除去し、そして残渣をジクロロメタン（６０ｍＬ）中に溶解し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を濃縮して化合物４１（０．２９３ｇ、９４％）を白色固体として得た。
【０２１３】
（化合物４２の合成）
化合物４１（０．２９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液にアルゴン下、ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中のＬＤＡ［１．２０ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉ（０．４８ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液、１．２０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアミン（０．１７ｍＬ、１．２０ｍｍｏｌ）から調製］を−７８℃でゆっくりと加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２６ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を上記混合物にシリンジで加えた。１５分後、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．６１４ｇ、２．００ｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をゆっくりと０℃まで加温し、そしてさらに２時間攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＣＨ2Ｃｌ2（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製して、化合物４２（０．３６２ｇ、７０％）を白色泡状物として得た。
【０２１４】
（化合物４３の合成）
ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（４：１、１０ｍＬ）中の化合物４２（０．３０ｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）の混合物をＨ2（バルーン）下で１８時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶離するシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物４３（０．２０５ｇ、８３％）を白色泡状物として得た。
【０２１５】
（ラクタム化合物５１および関連のアナログの合成）
δ−ラクトンに対してアナログのδ−ラクタムはスキーム６に従って合成され得る。例えば、化合物２０の重要な中間体４６への転化は、以下の５工程の手順で達成された。化合物２０をアジ化亜鉛／ビス−ピリジン錯体、トリフェニルホスフィン、およびジイソプロピルアゾジカルボキシレートでトルエン中で処理して、対応のアジド４４が９１％の収率でスムーズに得られる。化合物４４は次に１０％Ｐｄ−Ｃの存在下で水素化され、そして得られたアミン４５はＤＭＦ中のＮａＯＨで処理されて化合物４６（２ステップで６３％）に転化される。
【０２１６】
（スキーム６）
【０２１７】
【化３４】
0004979157.tif 000032
【０２１８】
化合物５１の合成に向けて、最初のアプローチをスキーム７に示す。このアプローチにおいて、化合物４６をＮａＨおよび臭化ベンジルでＤＭＦ中、処理して、化合物４７を収率８０％で得る。化合物４７を次にＴＨＦ中に入れ、そして４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドでアルキル化して、所望のカップリング生成物４８および４９を７：２：１の比で収率８６％で得る。これらの２つの異性体はシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離され得る。１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いて化合物４９の脱Ｏ−ベンジル化は容易に進行し、そしてフェノール５０が収率９８％で単離される。次に高圧下でさらに水素化分解して、化合物５１を得る。
【０２１９】
（スキーム７）
【０２２０】
【化３５】
0004979157.tif 000033
【０２２１】
ラクタム窒素の保護のための別の方法もまた、スキーム８に示されるように用いられ得る。例えば、４６のＮ−ｔ−ブトキシカルボニルアミドとしてのＮ−保護はジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートおよびトリエチルアミンを用いてジクロロメタン中で達成され得、誘導体５２を収率９５％で与える。化合物５２の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドによるアルキル化により化合物５３が収率６７％で得られる。化合物５３はジアステレオマー混合物である。化合物５３中のＮ−ＢＯＣ保護基をジクロロメタン中、トリフルオロ酢酸で除去して、生成物５４を収率７４％で得る。化合物５４を１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いて水素化分解して、ジアステレオマー混合物５５を収率８１％で得る。
【０２２２】
（スキーム８）
【０２２３】
【化３６】
0004979157.tif 000034
【０２２４】
（ラクタム化合物６１および６２の合成）
ラクタムの調製の他の例において、化合物６１および６２の合成はスキーム９に示す手順によって達成される。化合物４０をアジ化亜鉛／ビス−ピリジン錯体、トリフェニルホスフィンおよびジイソプロピルアゾジカルボキシレートでトルエン中、処理して、対応のアジド５６を得る。次に粗化合物５６を１０％Ｐｄ−Ｃ存在下で水素化して化合物５７を２ステップで収率７６％で得る。ラクタム環化工程は１ポットの３ステップ反応シーケンスを伴い、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物によるｔｅｒｔ−ブチルエステルの加溶媒分解、メタノール中でのエステル化、およびトリエチルアミンの添加によるラクタム環化を利用して、化合物５８が３ステップで収率９６％で得られる。得られる化合物５８をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートおよびトリエチルアミンでジクロロメタン中、Ｎ−保護して、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアミド誘導体５９が収率８４％で得られる。化合物５９のＬＤＡおよび４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドによるアルキル化により、化合物６０が収率７４％で得られる。化合物６０はＲ／Ｓ比が１：１のジアステレオマー混合物である。化合物６０中のＮ−ＢＯＣ保護基をトリフルオロ酢酸でジクロロメタン中で除去して、目的生成物６１を収率７４％で得る。化合物６１を１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いて水素化分解して、最終生成物６２が収率８１％で得られる。
【０２２５】
（スキーム９）
【０２２６】
【化３７】
0004979157.tif 000035
【０２２７】
（化合物４４の合成）
ＺｎＮ6．２Ｐｙ錯体の調製：Ｚｎ（ＮＯ3）2．６Ｈ2０（３．５７ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）のＨ2Ｏ（６ｍＬ）溶液を攪拌しながら、ＮａＮ3（１．５６ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）のＨ2Ｏ（１２ｍＬ）溶液を滴下した。白色懸濁液を油浴中で５０℃まで加熱し、次にピリジン（２．０ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ）を滴下して、濃密な白色沈殿を形成した。混合物がゆっくり室温に冷却する間、攪拌を続けた。塩を濾過し、冷氷水で洗浄し、そして減圧乾燥して、ＺｎＮ6．２Ｐｙ（２．９９ｇ、８１％）を白色固体として得た。
【０２２８】
ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．３０ｍＬ、６．５９ｍｍｏｌ）を化合物２０（１．０ｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、ＺｎＮ6．２Ｐｙ（０．７６ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）およびＰｈ3Ｐ（１．７３ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）の無水トルエン（２０ｍＬ）懸濁液に加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を濃縮し、そして残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物４４（１．０１ｇ、９１％）を無色油状物として得た。
【０２２９】
（化合物４５の合成）
化合物４４（１．００ｇ、２，９８ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、１８時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を蒸発乾固して化合物４５（０．９２３ｇ、１００％）を無色シロップとして得た。
【０２３０】
（化合物４６の合成）
水酸化ナトリウム（５Ｎ、０．１４ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）を化合物４５（０．２１ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を濃縮し、そして残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物４６（０．０９１ｇ、６３％）を白色固体として得た。
【０２３１】
（化合物４７の合成）
化合物４６（０．１８４ｇ、０．７８２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そして０℃に冷却し、ＮａＨ（０．０３４４ｇ、鉱物油中６０％、０．８６０ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、臭化ベンジル（０．１４ｍＬ、１．１７３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、そして得られた混合物を室温でさらに１８時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、そして得られた残渣をＥｔＯＡｃで溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物４７（０．２０３ｇ、８０％）を白色固体として得た。
【０２３２】
（化合物４８、４９の合成）
化合物４７（０．２３ｇ、０．７０７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液にアルゴン下、ゆっくりとＴＨＦ（２ｍＬ）中のＬＤＡ［０．８５ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉ（０．３４ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液、０．８５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアミン（０．１２ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）から調製］を−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１８ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を上記混合物にシリンジで加えた。１５分後、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．４３４ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を入れたＴＨＦ（１ｍＬ）を加えた。得られた混合物をさらに２時間−７８℃で攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍｌ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×４０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（３：２）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物４９（０．２９５ｇ、７５．６％）および４８（０．０４１ｍｇ、１０．５％）を白色泡状物として得た。
【０２３３】
（化合物５０の合成）
化合物４９（０．２５ｇ、０．４５３ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下４８時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を蒸発乾固して化合物５０（０．２０４ｇ、９８％）を白色泡状物として得た。
【０２３４】
（化合物５２の合成）
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（０．７２４ｇ、３．３２ｍｍｏｌ）を化合物４６（０．３９ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（０．４６ｍＬ、３．２２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０４０ｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（１２ｍＬ）溶液に加えた。混合物を室温で４時間攪拌した。混合物の濃縮し、そして残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５２（０．５４３ｇ、９８％）を白色固体として得た。
【０２３５】
（化合物５３の合成）
化合物５２（０．５４ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（７ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ＬＤＡ［１．９３ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７７ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液、１．９３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアミン（０．２７ｍＬ、１．９３ｍｍｏｌ）から調製］を入れたＴＨＦ（４ｍＬ）を−７８℃でゆっくりと加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．４２ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を上記混合物にシリンジで加えた。１５分後、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．９８９ｇ、３．２２モル）を入れたＴＨＦ（２ｍＬ）を加えた。得られた混合物をさらに４時間、−７８℃で攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和水性Ｎａ4Ｃｌ（２０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（４：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５３（０．６０４ｇ、６７％）を白色泡状物として得た。
【０２３６】
（化合物５４の合成）
トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を化合物５３（０．５５７ｇ、０．９９０ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）溶液に加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、そして次に減圧濃縮した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）に溶解し、そして飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで酢酸エチル中の５％ＭｅＯＨを溶離液として用いて精製し、化合物５４（０．３４９ｇ、７６％）を白色泡状物として得た。
【０２３７】
（化合物５５の合成）
化合物５４（０．３０ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（１：１、１０ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、５時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（９：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５５（０．１９５ｇ、８１％）を白色固体として得た。
【０２３８】
（化合物５６の合成）
ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．６２ｍＬ、８．２４ｍｍｏｌ）を化合物４０（１．５ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）、ＺｎＮ6．２Ｐｙ（０．９５ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）およびＰｈ3Ｐ（２．１６ｇ、８．２４ｍｍｏｌ）を無水トルエン（２０ｍＬ）に入れた懸濁液に加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。次に混合物を濃縮し、そして残渣を１５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５６（１．５９ｇ）を無色油状物として得た。
【０２３９】
（化合物５７の合成）
粗化合物５６（１．５９ｇ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（８０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、２０分間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／Ｅｔ3Ｎ（８５：１４：１）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５７（１．１４ｇ、２ステップで７６％）を無色油状物として得た。
【０２４０】
（化合物５８の合成）
化合物５７（０．３０１ｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）をトルエン（１８ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、そしてｐＴｓＯＨ．Ｈ2Ｏ（０．４７２ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）で処理した。溶液をディーン−スターク装置を用いて１．５時間加熱還流した。次にディーン−スターク装置を取り去り、そしてＥｔ3Ｎ（０．３５ｍＬ、２．４８ｍｍｏｌ）を溶液に加え、これをさらに４時間加熱還流した。溶媒を蒸発させ、そして残渣をＥｔＯＡｃ中の２％ＡｃＯＨで溶離して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５８（０．２２８ｇ、９６％）を白色固体として得た。
【０２４１】
（化合物５９の合成）
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（０．９３５ｇ、４．２８ｇ）を化合物５８（０．６２ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（０．６０ｍＬ、４．２８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０６０ｇ）のＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）溶液に加えた。混合物を室温で５時間攪拌した。混合物を濃縮し、そして残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（３：１）で溶出して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５９（０．６９６ｇ、８４％）を白色固体として得た。
【０２４２】
（化合物６０の合成）
化合物５９（０．６０ｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ＬＤＡ［１．８５ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７４ｍＬ、２．５Ｍヘキサン溶液、１．８５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアミン（０．２６ｍＬ、１．８５ｍｍｏｌ）から調製］を入れたＴＨＦ（２ｍＬ）を−７８℃でゆっくりと加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．４０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）を上記混合物にシリンジで加えた。１５分後、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．７１ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）を入れたＴＨＦ（２ｍＬ）を加えた。得られた混合物をさらに４時間、−７８℃で攪拌した。過剰の塩基を０℃で飽和水性Ｎａ4Ｃｌ（２０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（７：３）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物６０（０．６９３ｇ、７４％）を白色泡状物として得た。
【０２４３】
（化合物６１の合成）
トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を化合物６０（０．６３ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）溶液に加えた。混合物を室温で４時間攪拌し、トルエン（２０ｍＬ）で希釈し、そして次に減圧濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで酢酸エチル中の５％ＭｅＯＨを溶離液として用いて精製し、化合物６１（０．３９ｇ、７４％）を白色固体として得た。
【０２４４】
（化合物６２の合成）
化合物６１（０．２８ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２７ｍｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（１：１、６ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、５時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（９７：３）で溶離して、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物６２（０．２０ｇ、８４％）を白色泡状物として得た。
【０２４５】
（置換臭化ベンジルの調製：置換フェニルδ−ラクトン中間体；および最終生成物）
スキーム１０はδ−ラクトンＣの合成に用いられ得る一般的な合成方法論を示す。化合物Ａ、Ｂ、およびＣを提供する合成の方法論の例を以下に示す。
【０２４６】
（スキーム１０）
【０２４７】
【化３８】
0004979157.tif 000036
【０２４８】
任意の数の置換ベンジルハライドを用いて、ベンジル環上の置換パターンの異なる構造Ｃの最終生成物を生成し得る。置換臭化ベンジルは市販されているか、あるいは対応の置換ベンジルアルコール、ベンズアルデヒド、安息香酸または安息香酸エステルから生成され得る。
【０２４９】
例えば、置換された臭化ベンジルはスキーム１１に概略を示すようにして調製され得る。化合物６３に関連する任意の数の化合物が同様の方法論を用いて、異なる置換ベンジルアルコールで出発して生成され得る。それゆえ、市販の出発物質化合物３１を臭化ベンジルおよび炭酸カリウムでトルエン中、処理して、対応のベンジルオキシ誘導体３２が得られ、これを精製することなくＰＢｒ3でジエチルエーテル中、処理して、所望の臭化化合物６３が定量的収率で得られる。
【０２５０】
（スキーム１１）
【０２５１】
【化３９】
0004979157.tif 000037
【０２５２】
（化合物６３の合成）
アルコール３２（３．２０ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（１５ｍＬ）の溶液にＰＢｒ3（１．７７ｇ、６．５５ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（４０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×３０ｍＬ）、およびブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、化合物６３（４．０２ｇ、１００％）を淡黄色固体として得た。
【０２５３】
置換臭化ベンジル化合物はまた市販の置換ベンズアルデヒド、安息香酸および安息香酸エステルから、最初にこれらの化合物を対応のアルコールに転化することによっても調製され得る。ベンジルアルデヒドから置換臭化ベンジルを提供する合成方法論の例を以下に記載する。例えば、スキーム１２に示すように、４−ヒドロキシ−３−ニトロベンズアルデヒド７３を臭化ベンジルで、Ｋ2ＣＯ3の存在下、ＤＭＦ中で６５℃で処理すると、４−ベンジルオキシ−３−ニトロ−ベンズアルデヒド７４が得られる。化合物７４をメタノール中、ＮａＢＨ4で還元して、アルコール７５を得、そして次にＰＢｒ3を用いてジエチルエーテル中でブロム化して、所望のブロミド化合物７６が得られる。
【０２５４】
スキーム１２はまた、他の代表的な臭化ベンジル化合物がどのように作製され得るかを示す。
【０２５５】
（スキーム１２）
【０２５６】
【化４０】
0004979157.tif 000038
【０２５７】
（化合物７４の合成）
４−ヒドロキシ−３−ニトロベンズアルデヒド７３（３．００ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．７３ｇ、２６．９３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３００ｍＬ）懸濁液に、ゆっくりと臭化ベンジル（２．８５ｍＬ、２３．９６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６５℃で１８時間攪拌した。室温で冷却した後、混合物を水（１４０ｍＬ）で希釈し、そしてジエチルエーテル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧蒸発して、粗化合物７４（４．３９３ｇ、９５％）を得、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０２５８】
（化合物７５の合成）
化合物７４（４．３０ｇ、１６．７２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（１：１、５０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ4（０．６３ｇ、１６．７２ｍｍｏｌ）を滴下した。添加が完了した後、氷水浴を取り去り、そして反応混合物を室温で２時間攪拌した。水（４０ｍＬ）を加え、そして混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、そして無水ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を除去して淡黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製して、化合物７５（４．３１ｇ、９９％）を淡黄色固体として得た。
【０２５９】
（化合物７６の合成）
化合物７５（４．３０ｇ、１６．５９ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（４０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．７９ｍＬ、８．３０ｍｍｏｌ）をシリンジで加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）およびブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、化合物７６（５．０７ｇ、９５％）を淡黄色固体として得た。
【０２６０】
種々のハライド化合物を用いて、所望の生成物７７、８０、８９、９２、９４、９５および９６を得るアルキル化が、スキーム１３、１４、１５、１６、１７、１８および１９に各々示される。スキーム１３において、化合物２１は市販の３，４−ジフルオロベンジルブロミドでアルキル化して、所望の化合物７７が収率５９％で得られる。
【０２６１】
（スキーム１３）
【０２６２】
【化４１】
0004979157.tif 000039
【０２６３】
（化合物７７の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．５６ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．２０ｍＬ）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．３３ｍＬ、１．９１ｍｍｏｌ）を加え、次に化合物２１（０．３０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３，４−ジフルオロベンジルブロミド（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｉｎｃ．，０．３２ｍＬ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物７７（０．２７ｇ、５９％）を白色固体として得た。
【０２６４】
スキーム１４において、化合物２１を３，４−ジベンジルオキシベンジルブロミド（対応のアルコールをＰＢｒ3で処理して調製）でアルキル化し、次に１０％Ｐｄ／Ｃを触媒として用いて水素化して所望の化合物８０を良好な収率で得る。
【０２６５】
（スキーム１４）
【０２６６】
【化４２】
0004979157.tif 000040
【０２６７】
（化合物７８の合成）
３，４−ジベンジルオキシベンジルアルコール（１．３５ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（２５ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．２０ｍＬ、２．１１ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×３０ｍＬ）、およびブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、化合物７８（１．４７ｇ、９１％）を淡黄色油状物として得た。
【０２６８】
（化合物７９の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次に化合物２１（２００．０ｍｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３，４−ジベンジルオキシベンジルブロミド（化合物７８、２４８．５ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を一回で反応混合物に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物７９（０．３１ｇ、６７％）を無色油状物として得た。
【０２６９】
（化合物８０の合成）
化合物７９（０．２０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２５ｍｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（４：１、５ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下で２時間攪拌した。混合物を次にセライトプラグを通して濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物８０（０．０９３ｍｇ、７０％）を無色シロップとして得た。
【０２７０】
スキーム１５および１６は、置換フェニルδ−ラクトン中間体の２つの代表的な化合物である化合物８９および９２を、先の実施例に記載のものと同様の合成方法論を用いるが、化合物８９および９２を生成するのに適したベンジルアルコールを用いて、調製することを示す（例えば、スキーム５の化合物４１の合成）。
【０２７１】
（スキーム１５）
【０２７２】
【化４３】
0004979157.tif 000041
【０２７３】
（スキーム１６）
【０２７４】
【化４４】
0004979157.tif 000042
【０２７５】
（化合物（９０）の合成）
水酸化リチウム一水和物（３．２１ｇ、７６．５ｍｍｏｌ）およびＨ2Ｏ2（Ｈ2Ｏ中３０％、１７．５ｍＬ、１５２．８ｍｍｏｌ）を化合物３７（２１．４ｇ、３８．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（３：１、３５０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。反応混合物を０℃で３時間攪拌した。亜硫酸ナトリウム（２１．２ｇ、１６８．１ｍｍｏｌ）の水（１００ｍＬ）溶液を次に加え、次いで０．５Ｎ重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、そして次に減圧下濃縮した。水相を１０％ＨＣｌでｐＨ＝２に希釈し、そして次にＥｔＯＡｃ（３×７００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧濃縮した。得られた油状物を０．２％酢酸を含む酢酸エチル／ヘキサン（１：３）で溶離して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、化合物９０（１２．６ｇ、８２％）を白色固体として得た。
【０２７６】
（化合物（９１）の合成）
ＢＨ3−ＴＨＦ（１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、１３．８ｍＬ、１３．８ｍｍｏｌ）を２０分間かけて、化合物９０（５．５３ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に−１５℃で滴下した。冷却浴を取り去り、そして反応混合物を室温で４時間攪拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）を加え、そして水相をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ（２×４０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を減圧濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：２）で溶離して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物９１（５．２２ｇ、９８％）を無色ワックスとして得た。
【０２７７】
（化合物（９２）の合成）
化合物９１（１．５ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８６．０ｍｇ）のトルエン（３０ｍｌ）溶液を８０℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）で溶離して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物９２（１．１１ｇ、９１％）を無色油状物として得た。
【０２７８】
スキーム１７において、化合物４１を化合物７６でアルキル化し、そして次に得られる化合物９３の接触水素化によって、所望の化合物９４を良好な収率で得る。
【０２７９】
（スキーム１７）
【０２８０】
【化４５】
0004979157.tif 000043
【０２８１】
（化合物９３の合成）
化合物４１（０．２０ｇ、０．６８８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（１．１６ｍＬ、０．８２６ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、新たに調製、−７８℃）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２０ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、化合物７６（０．３３２ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。次に反応を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物９３（０．２６４ｇ、７２％）を白色泡状物として得た。
【０２８２】
（化合物９４の合成）
化合物９３（０．２０ｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（７ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過によって除去し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物９４（０．１１１ｇ、７２％）を淡黄色固体として得た（シリカゲルは１％トリエチルアミンで予備処理した）。
【０２８３】
同様に、スキーム１８および１９において、化合物４１を市販のヨウ化メチルおよびヨウ化アリルで各々アルキル化して、所望の化合物９５および化合物９６が得られる。
【０２８４】
（スキーム１８）
【０２８５】
【化４６】
0004979157.tif 000044
【０２８６】
（化合物９５）
化合物４１（０．２０ｇ、０．６８８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（１．１６ｍＬ、０．８２６ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、新たに調製、−７８℃）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を上記混合物にシリンジで加えた。１５分後、ヨウ化メチル（０．０６４ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。次に反応を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物９５（０．１６８ｇ、８０％）を白色固体として得た。
【０２８７】
（スキーム１９）
【０２８８】
【化４７】
0004979157.tif 000045
【０２８９】
（化合物９６の合成）
化合物４１（０．４０ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（２．３２ｍＬ、１．６６ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、新たに調製、−７８℃）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．４ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、ヨウ化アリル（０．１９ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。次に反応を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物９６（０．３３ｇ、７２％）を白色固体として得た。
【０２９０】
式（１〜４）の化合物であって、フェニル環に、特にラクトンまたはアナログの環の５位でフェニル環に結合した高炭素数のアルキルオキシ鎖を有するものが、調製された。例えば、化合物１０１は、スキーム２０に示すように、化合物９１から５ステップで生成され得る。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の化合物またはこれらの化合物に関連する任意の化合物についてフェニル環上のヒドロカルビルオキシ置換が提供され得ることが理解されるべきである。
【０２９１】
従って、化合物９１をＨ2および１０％炭素担持パラジウムを用いて脱保護して、対応のフェノール誘導体９７が得られる。化合物９７を１−ブロモブタン、炭酸カリウムおよびヨウ化カリウムでＤＭＦ中、処理して、ブチルオキシ誘導体９８が得られる。化合物９８のｔ−ブチルエステル結合をｐ−トルエンスルホン酸一水和物でトルエン中、除去して、対応のヒドロキシル酸が得られ、これは自発的にラクトン化して、化合物９９を与える。化合物９９のリチウムアニオンを化合物７６でアルキル化して、化合物１００が得られる。化合物１００の水素化により、所望の化合物１０１が得られる。
【０２９２】
（スキーム２０）
【０２９３】
【化４８】
0004979157.tif 000046
【０２９４】
（化合物９７の合成）
化合物９１（３．０ｇ、７．７６ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（０．３０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（１：１、４０ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物９７（１．８２ｇ、７９％）を白色固体として得た。
【０２９５】
（化合物９８の合成）
化合物９７（０．８０ｇ、２．７０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（０．７４６ｇｍ、５．４０ｍｍｏｌ）およびＫＩ（３０ｍｇ）を無水ＤＭＦ（７ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ブロモブタン（０．５８ｍＬ、５．４０ｍｍｏｌ）をシリンジで入れた。次に、反応混合物を６５℃で終夜攪拌し、冷却後、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、そしてジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濃縮乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物９８（０．８３４ｇ、８８％）を白色固体として得た。
【０２９６】
（化合物９９の合成）
化合物９８（０．８３４ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８０．０ｍｇ）をトルエン（２０．０ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧除去し、そして残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物９９（０．４２２ｇ、６４％）を無色シロップとして得た。
【０２９７】
（化合物１００の合成）
ラクトン９９（０．３０ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５８ｍＬ、０．４１２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、新たに調製、−７８℃）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１８ｍＬ、１．３０ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、化合物７６（０．５２ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。次に反応を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１００（０．４４３ｇ、７９％）を淡黄色固体として得た。
【０２９８】
（化合物１０１の合成）
化合物１００（０．４０ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（４０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）中に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過によって除去し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１０１（０．２１５ｇ、７０％）を淡黄色泡状物として得た
式（１〜４）の化合物であって、フェニル環に、特にラクトンまたはアナログの環の５位でフェニル環にヒドロカルビルオキシカルボニル置換基を有するものが、スキーム２１に従って調製される。例えば、化合物１０３は以下のように合成され得る。化合物９７をｐ−トルエンスルホン酸一水和物を用いて、トルエン中、ラクトン化して、化合物１０２を得る。化合物１０２と塩化アセチルおよびトリエチルアミンとを、ジクロロメタン中、反応させて、フェニル環上にエステル結合を有する化合物１０３を得る。
【０２９９】
（スキーム２１）
【０３００】
【化４９】
0004979157.tif 000047
【０３０１】
（化合物１０２の合成）
化合物９７（１．０１ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１００ｍｇ）をトルエン（３０ｍＬ）中に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧除去し、そして残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＥｔＯＡｃ、７０：３０）で精製して、化合物１０２（０．７１ｇ、９４％）を白色固体として得た。
【０３０２】
（化合物１０３の合成）
化合物１０２（０．１００ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）溶液に０℃でトリエチルアミン（０．１２５ｍＬ、０．９ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（０．０４８ｍＬ、０．６７５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで加温し、そして４時間攪拌し、そして次に水（５ｍＬ）でクエンチした。混合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、そして合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を除去し、そして得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９０：１０）で精製して、化合物１０３（０．１０３ｇ、８７％）を無色シロップとして得た。
【０３０３】
式（１〜４）の化合物であって、フェニル環に、特にラクトンまたはアナログの環の５位でフェニル環上にヒドロカルビル基の置換を有するものが、スキーム２２に示す反応シーケンスに従って合成され得る。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の任意の化合物、または式（１〜４）に関連する化合物について、フェニル環上の炭化水素置換が提供され得る。
【０３０４】
スキーム２２に示すように、化合物９１上のヒドロキシ基の保護は、塩化ｔ−ブチルジメチルシリルおよびイミダゾールをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で用いて達成され、化合物１０４を与える。ベンジル保護基を水素および炭素担持パラジウムを酢酸エチル中で用いて除去して、化合物１０５が得られる。化合物１０５は次に、化合物１０５とトリフルオロメタンスルホン酸無水物とをピリジン中で反応させることによって、その対応のアリールトリフレート１０６に転化される。パラジウムで触媒される化合物１０６とフェニルボロン酸（ｂｏｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）とのクロスカップリングは化合物１０７を与える。ラクトン化と、それに続くアルキル化により化合物１０９が得られる。最後に、接触水素化によって、化合物１１０が得られる。
【０３０５】
（スキーム２２）
【０３０６】
【化５０】
0004979157.tif 000048
【０３０７】
（化合物１０４の合成）
化合物９１（２．５０ｇ、６．５０ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、次にイミダゾール（０．６６４ｇ、９．７５ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＴＢＤＭＳＣｌ（１．４７ｇ、９．７５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ3水溶液（２×５０ｍＬ）および水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固して、化合物１０４（３．４３ｇ）を無色油状物として得、これをさらに精製することなく用いた。
【０３０８】
（化合物１０５の合成）
化合物１０４（３．４３ｇ）の酢酸エチル（２０ｍＬ）溶液に、１０％活性炭担持Ｐｄ（０．１７２ｇ）を加えた。フラスコを水素でフラッシュし、そして混合物を水素雰囲気下で１６時間激しく攪拌した。混合物を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、３：１）で精製して、化合物１０５（２．７２ｇ、２つの工程で８５％）を無色油状物として得た。
【０３０９】
（化合物１０６の合成）
化合物１０５（０．５０ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（５ｍＬ）溶液に０℃で無水トリフルオロメタンスルホン酸（０．２３ｍＬ、１．３４ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくりと加え、そして得られた混合物を０℃で１時間攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、飽和水性ブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を減圧除去して、化合物１０６（０．６２３ｇ、９４％）を淡黄色油状物として得た。
【０３１０】
（化合物１０７の合成）
フェニルボロン酸（０．０２４７ｇ、０．２０２ｍｍｏｌ）の溶液、化合物１０６（０．１０ｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（０．０５８６ｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）、および乾燥１，４−ジオキサン（２ｍＬ）の乾燥したＡｒフラッシュされたフラスコ中の混合物にＰｄ（ＰＰｈ3）4（５．３ｍｇ、０．００４６１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を攪拌し、そして８０℃の油浴中で１６時間加熱した。冷却した混合物を酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈し、ブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄した。次に有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３０：１）で精製して、化合物１０７（０．０６６６ｇ、８７％）を無色油状物として得た。
【０３１１】
（化合物１０８の合成）
化合物１０７（０．０６０ｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１２．２ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）の乾燥トルエン（１ｍｌ）溶液を乾燥アルゴン雰囲気下で攪拌し、８０℃で２時間加熱した。冷却した溶液をフラッシュシリカゲルのカラムを通して濾過し、そしてカラムをヘキサン／酢酸エチル（２：１、１５０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させて、化合物１０８（３２．７ｍｇ、９１％）を無色シロップとして得た。
【０３１２】
（化合物１０９の合成）
化合物１０８の乾燥ＴＨＦ溶液にアルゴン下、ゆっくりとＬＤＡを加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡを混合物にシリンジで加えた。１５分後、化合物７６を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。反応を飽和水性ＮＨ4Ｃｌでクエンチし、そして得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１０９を得た。
【０３１３】
（化合物１１０の合成）
化合物１０９および１０％Ｐｄ／ＣをＥｔＯＡｃ中に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜混合した。触媒を濾過によって除去し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１１０を得た。
【０３１４】
化合物１１４の合成をスキーム２３に示す手順で達成する。合成方法論は化合物１１０の合成と同様である。パラジウムで触媒される化合物１０６と市販のＢ−ベンジル−９−ＢＢＮ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）との交差カップリングにより、化合物１１１が得られる。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物を用いる化合物１１１の、トルエン中でのラクトン化により、化合物１１２が得られる。アルキル化とそれに続く接触水素化により、所望の化合物１１４が得られる。
【０３１５】
（スキーム２３）
【０３１６】
【化５１】
0004979157.tif 000049
【０３１７】
（化合物１１１の合成）
Ｂ−ベンジル−９−ＢＢＮ（０．５Ｍ、１．３２ｍｍｏｌ）の溶液、化合物１０６（０．６５０ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（０．３８２ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、および乾燥１，４−ジオキサン（４ｍＬ）の、乾燥した、Ａｒフラッシュされたフラスコ中の混合物に（ジフェニルホスフィノフェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリドを加えた。混合物を攪拌し、８０℃の油浴中で１８時間加熱した。冷却された混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、１０％ＫＯＨ（ａｑ）および３０％Ｈ2Ｏ2（ａｑ、各々１．０ｍＬ）で処理し、２時間攪拌させた。層を分離し、そして有機相をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、その後乾燥（ＭｇＳＯ4）した。溶液を濾過し、そして蒸発させて粗生成物を得た。この物質をカラムクロマトグラフィー（３０：１ヘキサン／酢酸エチル、３５ｇフラッシュシリカゲル、２．５ｃｍカラム）で分離した。Ｒf＝０．３５（１９：１ヘキサン／酢酸エチル、ｕｖ２５４ｎｍ、リンモリブデン酸、加熱）でのスポットを含む画分を単離した。溶媒を蒸発させて化合物１１１（０．２９５ｇ、５２％）を無色油状物として得た。
【０３１８】
（化合物１１２の合成）
化合物１１１（０．２８５ｇ、０．６０３ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４０．０ｍｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）の乾燥トルエン（５ｍＬ）溶液を乾燥Ａｒ雰囲気下で攪拌し、そして８０℃で３時間加熱した。冷却した溶液をフラッシュシリカゲルのカラム（２ｃｍカラム中に１０ｇ）を通し、そしてカラムをヘキサン／酢酸エチル（１：１、１５０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させて、化合物１１２（０．１０５ｇ、５９％）を無色油状物として得、これを放置してゆっくりと固化した。
【０３１９】
（化合物１１３の合成）
ジイソプロピルアミン（５６μＬ、０．４０ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（６ｍＬ）溶液に、乾燥した、Ａｒフラッシュしたフラスコ中、−７８℃でｔｅｒｔ−ブチルリチウム（１．７Ｍ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を１５分間攪拌し、次に化合物１１２（０．１００ｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）および乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）をカニューレで加えた。反応混合物を１時間攪拌し、そして次に氷水浴中で短時間温めた。乾燥ＨＭＰＡ（８８μＬ、０．５１ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を−７８℃まで冷却した。化合物７６（０．１６３ｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を−７８℃で３時間攪拌した。混合物を室温まで加温し、次に空気に開放した。溶媒を蒸発させ、粗生成物をすぐにカラムクロマトグラフィー（２：１ヘキサン／酢酸エチル、２０ｇのフラッシュシリカゲル、２ｃｍカラム）で精製した。Ｒf＝０．６５（１：１ヘキサン／酢酸エチル、ｕｖ２５４ｎｍ、リンモリブデン酸、加熱）でのスポットを含む画分を単離した。溶媒を蒸発させて化合物１１３（０．１０３ｇ、５７％）を無色油状物として得た。
【０３２０】
（化合物１１４の合成）
化合物１１３（０．１００ｇ、０．１８６ｍｍｏｌ）の４：１メタノール／酢酸エチル（５ｍＬ）溶液に、１０％活性炭担持Ｐｄ（２５ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を加えた。フラスコを水素でフラッシュし、そして混合物を水素雰囲気下で４８時間、激しく攪拌した。混合物を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（１：１ヘキサン／酢酸エチル、１５ｇのフラッシュシリカゲル、２ｃｍカラム）で精製した。Ｒf＝０．３５（１：１ヘキサン／酢酸エチル、ｕｖ２５４ｎｍ、リンモリブデン酸、加熱）でのスポットを含む画分を単離した。溶媒を蒸発させて化合物１１４（２４．９ｍｇ、３２％）をオフホワイトの固体泡状物として得た。
【０３２１】
式（１〜４）の化合物はフェニル環上、特にラクトンまたはアナログの環の５位に結合するフェニル環上にホウ素置換基（単数または複数）を有し得る。ホウ素置換を提供する合成方法論の例を以下に示す。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の任意の化合物、または式（１〜４）に関連する化合物について、フェニル環上の同じ、または類似の置換が提供され得ることを認識すべきである。
【０３２２】
例えば、式（１〜４）の化合物のフェニル環上、特に式（１〜４）のラクトンまたはアナログの５位のフェニル環上へのホウ素官能基の導入は、スキーム２４に示すように達成され得る。従って、化合物１１５は、化合物１０６とビス（ピナコラト）ジホウ素との、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィオ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）［ＰｄＣｌ2（ｄｐｐｆ）］を触媒として、かつ１，１’−ビス（ジフェニルホスフィオ）フェロセン（ｄｐｐｆ）をリガンドとして用いたパラジウム触媒交差カップリングによって生成され得る。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物を用いたトルエン中での化合物１１５のラクトン化により、化合物１１６が得られ得る。化合物１１６を化合物７６でアルキル化して、化合物１１７が得られ得る。水素および炭素担持パラジウムを用いた化合物１１７の接触水素化によって、所望の化合物１１８が得られ得る。
【０３２３】
（スキーム２４）
【０３２４】
【化５２】
0004979157.tif 000050
【０３２５】
式（１〜４）の化合物は、フェニル環上、特にラクトンまたはアナログの環の５位のフェニル環の上に窒素置換（単数または複数）を有し得る。窒素置換を提供する合成方法論の例を以下に示す。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の任意の化合物、または式（１〜４）に関連する化合物について、フェニル環上の同じ、または類似の置換が提供され得ることを認識すべきである。
【０３２６】
例えば、化合物１１２は多工程合成で化合物１０６からスキーム２５に示すようにして調製され得る。従って、化合物１０６の、ピロリジン、酢酸パラジウムまたはパラジウムジベンジリデンアセトン、ビス（ジフェニルホスホノ）ビナフチルおよびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをトルエン中で用いたパラジウム触媒アミノ化により、化合物１１９が得られ得る。化合物１１９を、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物をトルエン中で用いてラクトン化して、化合物１２０が得られ得る。化合物１２０を化合物７６でアルキル化して、化合物１２１が得られ得る。化合物１２１の、水素および炭素担持パラジウムを用いた接触水素化により、所望の化合物１２２が得られ得る。
【０３２７】
（スキーム２５）
【０３２８】
【化５３】
0004979157.tif 000051
【０３２９】
式（１〜４）の化合物は、フェニル環上、特にラクトンまたはアナログの環の５位のフェニル環の上に硫黄置換（単数または複数）を有し得る。フェニル環上に硫黄置換を提供する合成方法論の例を以下に示す。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の他の化合物のフェニル環に同じ、または類似の置換が提供され得ることを認識すべきである。
【０３３０】
硫黄含有基のフェニル環上への配置はスキーム２６に示すようにして達成され得る。
【０３３１】
従って、化合物１０６のようなアリールトリフレートは、１−ブタンチオール、酢酸パラジウムまたはパラジウムジベンジリデンアセトン、ビル（ジフェニルホスホノ）ビナフチルおよびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドとトルエン中で反応して、化合物１２３のような炭素−硫黄結合を有する化合物を提供し得る。ラクトン化はｐ−トルエンスルホン酸一水和物をトルエン中で用いて達成され得、対応の化合物１２４を与える。次に化合物１２４のアルキル化は、ＴＨＦ中、化合物１２４をＬＤＡおよび化合物７６で処理することによって達成され得る。次に、得られる化合物１２５を水素および炭素担持パラジウムを用いて接触水素化することによって、所望の化合物１２６が得られ得る。
【０３３２】
（スキーム２６）
【０３３３】
【化５４】
0004979157.tif 000052
【０３３４】
式（１〜４）の化合物は、フェニル環上、特にラクトンまたはアナログの環の５位のフェニル環の上にリン置換（単数または複数）を有し得る。リン置換を提供する合成方法論の例を以下に示す。同じ、または類似の合成方法論を適用して、式（１〜４）の化合物、または式（１〜４）に関連する化合物について、フェニル環に同じまたは類似の置換が提供され得ることが認識されるべきである。
【０３３５】
フェニル環のリン置換は以下のスキーム２７に示す経路に従って導入され得る。従って、化合物１０６の化合物１２７への転化は、ＤＭＦ中、化合物１０６をＰｄＣｌ2（ＰＰｈ3）2、ジエチルホスフィン、１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（ｄｐｐｐ）およびジイソプロピルエチルアミンで処理することによって達成され得る。次いで、化合物１２７をｐ−トルエンスルホン酸一水和物を用いてトルエン中でラクトン化して、所望の化合物１２８が提供され得る。
【０３３６】
（スキーム２７）
【０３３７】
【化５５】
0004979157.tif 000053
【０３３８】
先のセクションに記載のように、本発明の化合物は２つの不斉炭素原子を含み、それゆえこれらの化合物について４つの可能なジアステレオマーが存在する。先の実施例に記載の方法論を用いて特定の立体異性体を調製するための合成シーケンスの２つの例をスキーム２８および２９に各々、示す。
【０３３９】
（スキーム２８）
【０３４０】
【化５６】
0004979157.tif 000054
【０３４１】
スキーム２８において、化合物４０中の第一級アルコールの保護は臭化ベンジル（ＢｎＢｒ）および炭酸セシウムを用いてＤＭＦ中で達成され得、ベンジルオキシ誘導体１８８が得られる。化合物１８８は次に、化合物１８８をトリフルオロ酢酸と反応させることによって、対応の酸１８９に転化され得る。Ｎ−アシルオキサゾリジノン誘導体１９０の化合物１８９からの合成は、先のセクション（例えば、スキーム４）に記載される、同じタイプの反応を用いて達成され得る。化合物１９０の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドを用いる立体選択的アルキル化により、化合物１９１が得られ得る。キラル補助剤を水酸化リチウムおよび過酸化水素で加水分解して、カルボン酸１９２が得られ得る。化合物１９２を酢酸中で水素化し、そしてｐ−トルエンスルホン酸一水和物でトルエン中でラクトン化して、所望の環化生成物１９３が得られ得、これは３Ｒ、５Ｓ立体配置を有する。
【０３４２】
同様に、スキーム２９において、化合物２６の４−（シクロペンチルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（化合物１９９の調製はスキーム３０に記載）により立体選択的アルキル化により、化合物１９４が得られ得る。キラル補助剤の水酸化リチウムおよび過酸化水素による加水分解により、カルボン酸１９５が得られ得る。化合物１９５の酢酸中での水素化およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物でのトルエン中でのラクトン化により、所望の環化生成物１９６が得られ得、これは３Ｒ、５Ｓ立体配置を有する。従って、化合物１９３または化合物１９６に関する３つの他のジアステレオ異性体は同様にして、異なるキラルオキサゾリジノンから出発して、合成され得る。例えば、３Ｓ，５Ｓ立体配置を含む化合物は、化合物２６または化合物１９０に類似で、反対の（Ｒ）立体配置を含むオキサゾリジノンを有する中間体を用いて合成され得る。
【０３４３】
（スキーム２９）
【０３４４】
【化５７】
0004979157.tif 000055
【０３４５】
スキーム３０および３１は化合物１９９および２０３の調製を示し、これは化合物１３４、１３６および１９４の生成に用いられる２つの中間体である。
【０３４６】
従って、スキーム３０において、化合物１９７を、ＤＭＦ中、シクロペンチルブロミド、ヨウ化カリウム、および炭酸カリウムで処理すると、対応のシクロペンチルオキシ誘導体１９８が得られ、これをＰＢｒ3でジエチルエーテル中、処理して、所望の臭化化合物１９９が得られる。
【０３４７】
（スキーム３０）
【０３４８】
【化５８】
0004979157.tif 000056
【０３４９】
（化合物１９８の合成）
４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジルアルコール１９７（１．００ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．７９ｇ、１２．９８ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（２９．１ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に入れた懸濁液に、シクロペンチルブロミド（０．９１ｍＬ、８．４４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応混合物を６５℃で２４時間攪拌した。室温まで冷却した後、混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧下で蒸発させて、粗黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製して、化合物１９８（０．５０２ｇ、３５％）を淡黄色固体として得た。
【０３５０】
（化合物１９９の合成）
化合物１９８（０．４８ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（８ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．１０ｍＬ、１．０９ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくりと加え、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×２５ｍＬ）およびブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、化合物１９９（０．５７７ｇ、９３％）を白色固体として得た。
【０３５１】
スキーム３１において、化合物２００を、ＤＭＦ中、シクロペンチルブロミド、ヨウ化カリウムおよび炭酸カリウムで処理すると、対応のシクロペンチルオキシ誘導体２０１が得られる。化合物２０１をＮａＢＨ4で還元するとアルコール２０２が得られ、そして次にＰＢｒ3を用いてジエチルエーテル中で臭素化して、所望の臭化化合物２０３が得られる。
【０３５２】
（スキーム３１）
【０３５３】
【化５９】
0004979157.tif 000057
【０３５４】
（化合物２０１の合成）
３−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒド２００（２．００ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．７４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（６０．０ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１３ｍＬ）中に入れた懸濁液に、ゆっくりとシクロペンチルブロミド（１．８４ｍＬ、１７．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６５℃で２１時間攪拌した。室温まで冷却した後、混合物をトルエン（１００ｍＬ）で希釈し、そして有機相を１Ｎ  ＮａＯＨ（２×３０ｍＬ）および水（２×３０ｍＬ）で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧下で蒸発させて、粗化合物２０１（２．７０ｇ）を得、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０３５５】
（化合物２０２の合成）
化合物２０１（２．７ｇ）をＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（２：１、１５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ4（０．４６４ｇ、１２．２６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。反応混合物を０℃で３０分間攪拌した。水（１００ｍＬ）を加え、そして混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、そして無水ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を除去して、淡黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製して、化合物２０２（２．６５ｇ、２つの工程で９１％）を無色油状物として得た。
【０３５６】
（化合物２０３の合成）
化合物２０２（０．５０ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（９ｍＬ）の溶液に、ＰＢｒ3（０．１１ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくりと加え、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×２５ｍＬ）およびブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を減圧下で除去して、化合物２０３（０．６０４ｇ、９４％）を淡黄色油状物として得た。
【０３５７】
（フェニル環上のｐ−置換）
フェニル環上のパラ位で置換された異なるアルコキシ基を有する化合物は、先のセクションに記載の方法論と同様の方法論を用いて、スキーム３２に従って合成され得る。例えば、化合物２１６は以下のように合成され得る。市販の４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジルアルコール２０４（Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）はベンジルオキシ誘導体２０５として、２０４を臭化ベンジル及び炭酸カリウムで還流トルエン中で処理することによって、選択的に保護され得る。次に、トリエチルアミンおよびＣＨ2Ｃｌ2の存在下、化合物２０５をメタンスルホニルクロリドと反応させて、化合物２０６を得る。次いで、化合物２０６をＤＭＦ中に入れ、そしてシアン化カリウムで、１８−クラウン−６の存在下で処理して、ニトリル２０７を得る。次いで、ニトリル２０７の１Ｎ水性水酸化カリウムでの加水分解により、所望のカルボン酸２０８を得る。化合物２０８を塩化トリメチルアセチルで処理すると、混合無水物が得られ得、これを（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノンのリチウムアニオンと反応させて、化合物２０９が得られ得る。ｔｅｒｔ−ブチルアクリレートに対するキラルオキサゾリジノン２０９のチタニウムエノラートのエナンチオ選択的マイケル付加により、適切な保護基を有するカルボキシレート官能基を有する化合物２１０が得られ得る。化合物２１０の水素化によりフェノール基が得られ、これを、ＤＭＦ中、シクロペンチルブロミド、炭酸カリウムおよびヨウ化カリウムで処理することによって、シクロペンチルオキシ誘導体２１１として保護し得る。キラル補助剤を水酸化リチウムおよび過酸化水素で加水分解して、カルボン酸２１２が得られ得る。化合物２１２をＢＨ3−ＴＨＦで選択的に還元して、第一級アルコールを含む化合物２１３が得られ得る。ラクトン２１４は化合物２１３をｐＴｓＯＨでトルエン中で処理することによって得られ得る。化合物２１４の４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドでのアルキル化を用いて、化合物２１５が得られ得る。化合物２１５の酢酸中での水素化を用いて、所望の生成物２１６が得られ得る。
【０３５８】
（スキーム３２）
【０３５９】
【化６０】
0004979157.tif 000058
【０３６０】
スキーム３３は、スキーム１６に記載のものと同様の合成方法論を用いた化合物２１８の調製を示す。
【０３６１】
（スキーム３３）
【０３６２】
【化６１】
0004979157.tif 000059
【０３６３】
化合物２１８は重要な中間体であり、これは高炭素数のアルキルオキシ置換、ヒドロカルビルオキシカルボニル置換、ヒドロカルビル置換、ホウ素置換、窒素置換、硫黄置換およびリン置換をフェニル環のパラ位に含む化合物を、スキーム２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、および２７に同じフェニル環のメタ位の官能化について記載されているのと同様の合成方法論を用いて生成し得る。
【０３６４】
（化合物１４２の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液中に−７８℃で加えた。この混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．２０ｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３−ベンジルオキシベンジルブロミド（０．４６９ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１４２（０．２８４ｇ、７８％）を無色油状物として得た。
【０３６５】
（化合物１３１の合成）
化合物１４２（０．１９０ｍｇ、０．４３９ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（０．０２５ｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（４：１、５ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下で２時間攪拌した。混合物を次にセライトプラグを通して濾過し、濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１３１（０．１３３ｇ、８９％）を無色シロップとして得た。
【０３６６】
（化合物１３２の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．２０ｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−メトキシベンジルブロミド（０．３４ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１mＬ）溶液を一回で反応に加え、得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１３２（０．２２１ｇ、７３％）を無色油状物として得た。
【０３６７】
（化合物１３８の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次に化合物２１（０．２０ｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−ベンジルオキシベンジルブロミド（０．４６９ｇ、１．６９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１３８（０．２９ｇ、７９％）を無色油状物として得た。
【０３６８】
（化合物１３３の合成）
化合物１３８（１９０．０ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２５．０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ（４：１、５ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下で２時間攪拌した。次に混合物をセライトプラグを通して濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１３３（１３９．１ｍｇ、９２％）を無色シロップとして得た。
【０３６９】
（化合物１３４の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．４２ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１５ｍＬ、１．０７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（２２６．８ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシベンジルブロミド（０．４８ｇ、１．６８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を１回で反応に加え、得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１３４（０．２２４ｇ、６０％）を無色油状物として得た。
【０３７０】
（化合物１３５の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、４．４７ｍＬ、１１．１８ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（１．５７ｍＬ、１１．１８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２８ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（１．３２ｍＬ、７．６２ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（１．２０ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２７ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３−（ベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルブロミド（６３）（３．１２ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して化合物１３５（１．１６ｇ、７３％）を白色泡状物として得た。
【０３７１】
（化合物１３６の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．２０ｍｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−（シクロペンチルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（１９９）（０．５０７ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して化合物１３６（０．２０６ｇ、５５％）を白色油状物として得た。
【０３７２】
（化合物１３７の合成）
４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミドの調製：バニリン（２．００ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．７４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（６０．０ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍＬ）に入れた懸濁液に、ゆっくりと１−ブロモプロパン（１．５６ｍＬ、１７．２ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。反応混合物を６５℃で５時間攪拌した。室温まで冷却した後、混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧蒸発させて、粗４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンズアルデヒド（２．５５ｇ）を得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０３７３】
粗４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンズアルデヒド（２．５５ｇ）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ4（０．４９９ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。添加が終了した後、氷水浴を取り去り、反応混合物を室温で２時間攪拌した。水（５０ｍＬ）を加え、そして得られた混合物をジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒の除去により淡黄色油状物が得られ、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンジルアルコール（２．３８ｇ、２つの工程で９２％）を無色油状物として得た。
【０３７４】
４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンジルアルコール（２．２８ｇ、１１．６２ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（３０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．５５ｍＬ、５．８１ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくりと加え、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×７５ｍＬ）およびブライン（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を減圧下で除去して、４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（２．９４ｇ、９８％）を白色固体として得た。
【０３７５】
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．５６ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．２０ｍＬ、１．４２ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．３３ｍＬ、１．９１ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．３０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−（プロピルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．６５８ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１５ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１３７（０．３０２ｇ、５７％）を白色泡状物として得た。
【０３７６】
（化合物１３９の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．３８ｍＬ、０．９３１ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．１４ｍＬ、０．９９９ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．２２ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．２００ｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、臭化ベンジル（０．１０ｍＬ、０．８４６ｍｍｏｌ）の溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１０ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して化合物１３９（５３ｍｇ、３８％）を無色油状物として得た。
【０３７７】
（化合物１４０の合成）
３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンジルブロミドの調製：３−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒド（２．００ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．７４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（６０．０ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍＬ）に入れた懸濁液に、ゆっくりと１−ブロモプロパン（１．５６ｍＬ、１７．２ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。反応混合物を６５℃で５時間攪拌した。室温まで冷却した後、混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥した後、濾過し、そして濾液を減圧蒸発させて、粗３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンズアルデヒド（２．６０ｇ）を得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０３７８】
粗３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンズアルデヒド（２．６０ｇ）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ4（０．４９９ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。添加が終了した後、氷水浴を取り去り、反応混合物を室温で２時間攪拌した。水（５０ｍＬ）を加え、そして得られた混合物をジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒の除去により淡黄色油状物が得られ、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンジルアルコール（２．２９ｇ、２つの工程で８９％）を無色油状物として得た。
【０３７９】
３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンジルアルコール（２．２８ｇ、１１．６２ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（３０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．５５ｍＬ、５．８１ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくりと加え、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、そして飽和水性ＮａＨＣＯ3（２×７５ｍＬ）およびブライン（２×７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を減圧下で除去して、３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンジルブロミド（２．９２ｇ、９７％）を白色固体として得た。
【０３８０】
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．５６ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．２０ｍＬ、１．４２ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．３３ｍＬ、１．９１ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．３０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、３−（プロピルオキシ）−４−メトキシベンジルブロミド（０．６５８ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を一回で反応に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１５ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１４０（０．３１０ｇ、５９％）を白色泡状物として得た。
【０３８１】
（化合物１４１の合成）
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．５６ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（０．２０ｍＬ、１．４２ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次にＨＭＰＡ（０．３３ｍＬ、１．９１ｍｍｏｌ）を加え、次いで化合物２１（０．３０ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、４−フルオロベンジルブロミド（０．３２ｍＬ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液を一回で反応系に加え、そして得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（１５ｍＬ）でクエンチし、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製して、化合物１４１（０．２６７ｇ、６７％）を無色シロップとして得た。
【０３８２】
（化合物１４３の合成）
化合物９７（０．１２０ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．０８５ｇ、０．６１５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ヨードエタン（０．０４９ｍＬ、０．６１５ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４３（０．０９６ｇ、７２％）を無色シロップとして得た。
【０３８３】
（化合物１４４の合成）
化合物９７（０．２１ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（０．１４７ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）およびＫＩ（０．０２ｇ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ブロモプロパン（０．０７７ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４４（０．１８５ｇ、７７％）を無色シロップとして得た。
【０３８４】
（化合物１４５の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に２−ヨードプロパン（０．１８ｍＬ、１．０２ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４５（０．１８ｇ、８６％）を無色シロップとして得た。
【０３８５】
（化合物１４６の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に３−ブロモ−２−メチルプロパン（０．０７７ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４６（０．１１８ｇ、６６％）を無色シロップとして得た。
【０３８６】
（化合物１４７の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）およびＫＩ（５．０ｍｇ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に（ブロモメチル）シクロブタン（０．０８５ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４４（０．１３２ｇ、７１％）を無色固体として得た。
【０３８７】
（化合物１４８の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）およびＫＩ（５．０ｍｇ、触媒）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に（ブロモメチル）シクロブタン（０．０７５ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４８（０．１２４ｇ、６２％）を無色シロップとして得た。
【０３８８】
（化合物１４９の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ヨードペンタン（０．０９９ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１４９（０．１４３ｇ、７７％）を無色固体として得た。
【０３８９】
（化合物１５０の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ヨードヘキサン（０．１１ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１５０（０．１４８ｇ、７７％）を無色固体として得た。
【０３９０】
（化合物１５１の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ヨードヘプタン（０．１３ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１５１（０．１６０ｇ、８０％）を無色シロップとして得た。
【０３９１】
（化合物１５２の合成）
化合物９７（０．１５ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．１０５ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた懸濁液に１−ヨードオクタン（０．１８ｍＬ、１．０２ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。次に反応混合物を６５℃で終夜攪拌した。冷却後、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮して乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１５２（０．１８ｇ、８６％）を無色シロップとして得た。
【０３９２】
（化合物１５３の合成）
化合物１４３（０．０９６ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５３（０．０６０ｇ、６３％）を白色固体として得た。
【０３９３】
（化合物１５４の合成）
化合物１４４（０．１７９ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５４（０．０８６ｇ、６１％）を無色シロップとして得た。
【０３９４】
（化合物１５５の合成）
化合物１４５（０．０９４ｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５５（０．０６９ｇ、９４％）を無色シロップとして得た。
【０３９５】
（化合物１５６の合成）
化合物１４６（１１８ｍｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５６（０．０９２ｇ、１００％）を無色シロップとして得た。
【０３９６】
（化合物１５７の合成）
化合物１４７（０．１３２ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１５ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５７（０．１０１ｇ、９６％）を無色シロップとして得た。
【０３９７】
（化合物１５８の合成）
化合物１４８（０．１２４ｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１５ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５８（０．０９ｇ、７３％）を白色固体として得た。
【０３９８】
（化合物１５９の合成）
化合物１４９（０．１４３ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１５９（０．１１２ｇ、９８％）を無色シロップとして得た。
【０３９９】
（化合物１６０の合成）
化合物１５０（０．１４８ｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１６０（０．１１２ｇ、９４％）を無色シロップとして得た。
【０４００】
（化合物１６１の合成）
化合物１５１（０．１４８ｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１６１（０．１２ｇ、１００％）を無色シロップとして得た。
【０４０１】
（化合物１６２の合成）
化合物１５２（０．１８０ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３０ｍｇ、触媒）をトルエン（５ｍＬ）に入れた混合物を７５℃で３０分間加熱した。トルエンを減圧下除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６５：３５）で精製して、化合物１６２（０．１３ｇ、８８％）を無色シロップとして得た。
【０４０２】
（化合物１６３の合成）
化合物９９（０．１１ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．６７ｍＬ、０，０４８ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、４−（ベンジルオキシ）−３−メトキシベンジルブロミド（０．１８４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１６３（０．１３６ｇ、６７％）を無色シロップとして得た。
【０４０３】
（化合物１６４の合成）
化合物１６３（０．１３６ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、１９：１）で精製して、化合物１６４（０．０８２ｇ、７３％）を無色シロップとして得た。
【０４０４】
（化合物１６５の合成）
化合物９９（０．３０ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（１．８ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２８ｍＬ、１．６２ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、化合物７６（０．５２ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１６５（０．４４３ｇ、７９％）を明るい黄色の固体として得た。
【０４０５】
（化合物１６６の合成）
化合物１６５（０．１３６ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１６６（０．２１５ｇ、７０％、Ｒf＝０．２９、ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９：４）を淡黄色泡状物として得た。
【０４０６】
（化合物１６７の合成）
（３，４−ジベンジルオキシ）ベンジルブロミドの調製：（３，４−ジベンジルオキシ）ベンジルアルコール（１．３５ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（２５ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．２０ｍＬ、２．１１ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×３０ｍＬ）、およびブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、（３，４−ジベンジルオキシ）ベンジルブロミド（１．４７ｇ、９１％）を白色固体として得た。
【０４０７】
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５３ｍＬ、０．３７９ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．０９ｍＬ、０．５１７ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、（３，４−ジベンジルオキシ）ベンジルブロミド（０．１９８ｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに２時間攪拌し、そして２時間かけて室温まで温度を上げた。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１６７（０．０６１ｇ、３０％）を無色シロップとして得た。
【０４０８】
（化合物１６８の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５３ｍＬ、０．３７９ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．０９ｍＬ、０．５１７ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、ベンジルブロミド（０．０６２ｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに２時間攪拌し、そして２時間かけて室温まで温度を上げた。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１６８（０．０５１ｇ、３９％）を無色シロップとして得た。
【０４０９】
（化合物１６９の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５３ｍＬ、０．３７９ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．０９ｍＬ、０．５１７ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、市販の（３−トリフルオロメチル）ベンジルブロミド（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ、０．０７９ｍｍＬ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１６９（０．１２６ｇ、８２％）を無色シロップとして得た。
【０４１０】
（化合物１７０の合成）
化合物４１（０．２８３ｇ、０．９７５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（１．６４ｍＬ、１．１７ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２５４ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）を混合物にシリンジで加えた。１５分後、化合物６３（０．４５ｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して少量の二置換生成物を含む化合物１７０（０．２１１ｇ）を無色シロップとして得た。
【０４１１】
（化合物１７１の合成）
ピペロニルブロミドの調製：ピペロニルアルコール（５．０ｇ、３２．８６ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（８０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（１．５６ｍＬ、１６．４３ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）、およびブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、ピペロニルブロミド（６．４３ｇ、９１％）を黄色−灰色固体として得た。
【０４１２】
化合物４１（０．１５４ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．８９ｍＬ、０．６３６ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１４ｍＬ、０．７９５ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、ピペロニルブロミド（０．２２ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに５時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、化合物１７１（０．１０１ｇ、４５％）を無色シロップとして得た。
【０４１３】
（化合物１７２の合成）
（３−ベンジルオキシ）ベンジルブロミドの調製：（３−ベンジルオキシ）ベンジルアルコール（３．０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（５０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．６６ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（６０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×４０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×４０ｍＬ）、およびブライン（２×４０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、（３−ベンジルオキシ）ベンジルブロミド（３．７６ｇ、９７％）を淡黄色固体として得た。
【０４１４】
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５３ｍＬ、０．３７９ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．０９ｍＬ、０．５１７ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、（３−ベンジルオキシ）ベンジルブロミド（０．１４３ｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに２時間攪拌し、そして２時間かけて室温まで温度を上げた。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７２（０．０５４ｇ、３２％）を無色シロップとして得た。
【０４１５】
（化合物１７３の合成）
（４−ベンジルオキシ）ベンジルブロミドの調製：（４−ベンジルオキシ）ベンジルアルコール（１．００ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（２０ｍＬ）溶液にＰＢｒ3（０．２２ｍＬ、２．３４ｍｍｏｌ）を一回で加え、そして得られた混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をジエチルエーテル（３０ｍＬ）で希釈し、そしてＨ2Ｏ（２×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×２０ｍＬ）、およびブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄した。エーテル層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして溶媒を減圧下除去して、（４−ベンジルオキシ）ベンジルブロミド（１．１０ｇ、８５％）を白色固体として得た。
【０４１６】
化合物４１（０．２７６ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（１．６ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．２５ｍＬ、１．４２５ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、（４−ベンジルオキシ）ベンジルブロミド（０．３０６ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製して、化合物１７３（０．１２１ｇ、２６％）を無色シロップとして得た。
【０４１７】
（化合物１７４の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５８ｍＬ、０．４１２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１ｍＬ、０．５１６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、２−ニトロベンジルブロミド（０．１１２ｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン：ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７４（０．１２６ｇ、８６％）を無色シロップとして得た。
【０４１８】
（化合物１７５の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５８ｍＬ、０．４１２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１ｍＬ、０．５１６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、３−ニトロベンジルブロミド（０．１１２ｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７５（０．１１８ｇ、８１％）を無色シロップとして得た。
【０４１９】
（化合物１７６の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５８ｍＬ、０．４１２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１ｍＬ、０．５１６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、４−メチル−３−ニトロベンジルクロリド（９６ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７６（０．０４９ｇ、３２％）を無色シロップとして得た。
【０４２０】
（化合物１７７の合成）
化合物４１（０．１０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．５８ｍＬ、０．４１２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１ｍＬ、０．５１６ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、４−ニトロベンジルブロミド（０．１１２ｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７７（０．１０７ｇ、７３％）を無色シロップとして得た。
【０４２１】
（化合物１７８の合成）
化合物４１（０．１５ｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に、アルゴン下、ゆっくりとＬＤＡ（０．７２ｍＬ、０．６２ｍｍｏｌ、ｎ−ＢｕＬｉおよびジイソプロピルアミンからＴＨＦ中、−７８℃で新たに調製した）を加えた。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、そして次にＨＭＰＡ（０．１５ｍＬ、０．７７ｍｍｏｌ）をシリンジで加えた。１５分後、２−メトキシ−５−ベンジルブロミド（０．１９ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を−７８℃でさらに４時間攪拌した。過剰の塩基を飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、そして得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、そして濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ、９５：５）で精製して、化合物１７８（０．１９１ｇ、８１％）を白色泡状物として得た。
【０４２２】
（化合物１７９の合成）
化合物１６７（０．０５５ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（５５ｍｇ）をＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１：１、４ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１７９（０．０３３ｇ、９５％）を淡黄色シロップとして得た。
【０４２３】
（化合物１８０および１８１の合成）
先の反応由来の少量の二置換生成物を含む化合物１７０（０．１６ｇ、約０．３１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）をＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１：１、６ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：３）で精製して、化合物１８０（０．０８４ｇ）および１８１（０．０２０ｇ）を無色シロップとして得た。
【０４２４】
（化合物１８２の合成）
化合物１７２（０．０４ｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（５ｍｇ）をＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１：１、４ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製して、化合物１８２（０．０２１ｇ、６５％）を無色シロップとして得た。
【０４２５】
（化合物１８３の合成）
化合物１７３（０．０９５ｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５ｍｇ）をＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１：１、４ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：２）で精製して、化合物１８３（０．０６９ｇ、８９％）を無色シロップとして得た。
【０４２６】
（化合物１８４の合成）
化合物１７５（０．０９８ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：７）で精製して、化合物１８４（０．０７４ｇ、８１％）を白色固体として得た。
【０４２７】
（化合物１８５の合成）
化合物１７７（０．０８７ｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：７）で精製して、化合物１８５（０．０７３ｇ、８４％）を淡黄色シロップとして得た。
【０４２８】
（化合物１８６の合成）
化合物１７８（０．１６１ｇ、０．３５３ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（４ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：７）で精製して、化合物１８６（０．０８４ｇ、５６％）を白色泡状物として得た。
【０４２９】
（化合物１８７の合成）
化合物１７６（０．０４３ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）に入れた混合物をＨ2（バルーン）下、終夜攪拌した。触媒を濾過により除去し、濾液を乾固するまでエバポレートした。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：７）で精製して、化合物１８７（０．０１７ｇ、４２％）を明るい赤色シロップとして得た。
【０４３０】
以下の表を、有用な実施例で列挙された化合物の構造を定義するために提供する。これらの表中の全ての化合物は本明細書に記載の方法論または本明細書で提供される同様の化合物について記載された方法論を用いて調製された。
【０４３１】
【化６２】
0004979157.tif 000060
【０４３２】
【化６３】
0004979157.tif 000061
【０４３３】
【化６４】
0004979157.tif 000062
【０４３４】
【化６５】
0004979157.tif 000063
【０４３５】
【化６６】
0004979157.tif 000064
【０４３６】
【化６７】
0004979157.tif 000065
【０４３７】
【化６８】
0004979157.tif 000066
【０４３８】
（有用性の例）
インビトロおよびインビボでの生物学的試験は、本発明のラクトンおよびラクタム成分が、リウマチ性関節炎、以下に記載するような他の炎症性疾患ならびに炎症に関連しない疾患に関する標的に対しておびただしい数の強力な生物学的活性を示すことを示した。
【０４３９】
本明細書中で使用される「炎症を処置する」とは、炎症に関する治療、および炎症応答の進展を防止するための治療の両方を言う。本発明の有効量の化合物または組成物は、温血動物（例えば、ヒト）における炎症を処置するために使用される。有効量の抗炎症剤を投与する方法は当該分野で周知であり、この方法としては吸入、経口または非経口形態の投与が挙げられる。このような投薬形態としては以下が挙げられるが、これらに限定されない：非経口の溶液、錠剤、カプセル、持続放出性インプラントおよび経皮送達システム；あるいは、フライパウダー吸入器または加圧式の複数用量吸入デバイスを使用する吸入投薬システム。一般的に、炎症の処置には経口投与または局所投与が好ましい。有害な作用を伴わない、有効レベルの薬剤を製造するように投薬量および投薬頻度が選択される。経口的に、または静脈内に投与される場合、投薬量は一般に約０．０１〜１０ｍｇ／Ｋｇ／日の投薬量の範囲である。また、鼻腔内に、または吸入によって投与される場合、投薬量範囲は、典型的には約０．０１〜１ｍｇ／Ｋｇ／日である。
【０４４０】
本発明の化合物または組成物の投与は、他の薬剤の投与と組み合せて実施され得る。例えば、関節炎に対するその効果のためにグルココルチコイドを共に投与することが所望され得る。
【０４４１】
（活性化された好中球による反応性酸素種の生成）
好中球は、リウマチ性関節炎（ＲＡ）患者の滑液における９０％を超える白血球浸潤を構成し、そして、リウマチ性関節炎および他の多くの炎症性疾患（炎症促進メディエイタ、マトリックス分解酵素および組織損傷を生じる毒性酸素ラジカルの放出による）の急性および慢性の両方の段階に寄与すると考えられる。ある提案された病原の機構は、細胞が大きな炎症促進物質（例えば、不溶性免疫複合体または関節中に存在する損傷した内皮）を貪食できないということである。結果として、好中球顆粒は、貪食細胞小胞と内部で融合するのではなく活性化の部位で原形質膜と融合し、これによって炎症促進性の反応性酸素種（ＲＯＳ）および他の毒性物質の細胞外放出が可能となる。
【０４４２】
好中球の活性化は、インビトロで生成されるＲＯＳの定量によって測定され得る。ＲＯＳの測定によって炎症促進種の特異的な定量が可能となり、これは好中球の活性化の一般的な尺度でもある。好中球によるＲＯＳ生成を測定するための最も感度の良い方法は、ルミノールで増強された化学発光である。本発明の化合物および組成物は、ＲＯＳ生成を阻害する。化合物が好中球においてＲＯＳ生成を阻害する能力を評価するために使用されるアッセイシステムは、疾患状態（リウマチ性関節炎および炎症性腸疾患が挙げられるが、これらに限定されない）に有効であり得る、抗炎症活性を示す。
【０４４３】
新たに単離した初代ヒト好中球（５×１０6細胞／ｍＬ）を、必要な濃度の化合物またはビヒクルと共に、Ｃａ2+を含むＨＢＳＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中、３０分間、３７℃でインキュベートした。１００ｎＭのウォルトマンニンを陽性コントロールとして使用した。各サンプルのアリコートを、ルミノール（１μＭ）（Ｓｉｇｍａから入手；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ａ８５１１）が添加されたマイクロタイタープレートに移した。好中球の活性化を、（１μＭ）ｆＭＬＰ（Ｓｉｇｍａから入手；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｆ３５０６）の添加によって、すぐに開始した。各ウェルからの光の発生量をマイクロプレートルミノメータで３０分間記録した。合計の光の発生量（時間経過の積分）を各ウェルについて決定した。好中球のＲＯＳ生成に対する試験薬物の阻害活性を、０．２５％のＤＭＳＯを含有し、薬物を含まないコントロール（ＲＯＳの１００％の活性化または生成）に対する％活性として表す。ＲＯＳ生成を、コントロール値の５０％まで阻害するに必要な試験化合物の濃度（ＩＣ50）を、非線形回帰分析によって濃度−応答曲線から決定した。結果を表１に示す。
【０４４４】
表１
ＲＯＳ生成により測定された、試験化合物による好中球脱顆粒の阻害
【０４４５】
【表２】
0004979157.tif 000067
0004979157.tif 000068
【０４４６】
表１に示されるように、本発明の化合物の多くが、０．１〜１μＭの範囲のＩＣ50を示す。この結果は、これらの化合物が、インビトロにおいて、好中球による炎症促進の反応性酸素種の生成を強力にブロックすることを示す。この結果は、ホスホジエステラーゼの阻害および／または化学的捕獲が原因であり得る。この特性は、例えば、リウマチ性関節炎、炎症性腸障害、および乾癬におけるＲＯＳ媒介性組織損傷の確立した役割に起因する、インビボにおける抗炎症活性の前兆である。
【０４４７】
（好中球脱顆粒（ミエロペルオキシダーゼ放出））
好中球顆粒球は、顆粒として公知であるいくつかのタイプの小器官を含む。これらの非細胞体（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｏｄｙ）は多様なおびただしい数の殺菌剤を含み、これらの殺菌剤としては、正常な炎症応答に必須であるが、好中球が、疾患において慢性的および／または不適切に活性化される場合には急性の組織の損傷に寄与する、プロテアーゼおよび他の加水分解酵素が挙げられる。特徴的な顆粒酵素の１つは、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）であり、これは、過酸化水素の亜ハロゲン酸塩（ｈｙｐｏｈａｌｉｄｅ）への変換を触媒する。ＭＰＯは、脱顆粒の刺激時に細胞外環境へと放出され、そして好中球の活性化の信頼性のある指標である。本発明の化合物は、１００μＭのｆＭＬＰで刺激された初代ヒト好中球からの好中球ミエロペルオキシダーゼの放出を阻害した。化合物が、好中球からのＭＰＯ放出を阻害する能力を評価するために使用されるアッセイシステムは、抗リウマチ活性ならびに不適切な好中球の活性化が推定される他の疾患を示す。
【０４４８】
２つの管のヒト血液（１２ｍＬ）をＡＣＤ抗血液凝固管（Ｆｉｓｈｅｒ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．０２−６８４−２９）中に集めた。血液を、生理食塩水中６％デキストラン（４ｍＬ）と混合した。血液混合物を６０ｃｃシリンジに採取した。このシリンジを３０分間、ベンチトップ上で上向きにして叩いた。上部の血清層を、１５ｍＬの遠心分離管中の４ｍＬのＨｉｓｔｏｐａｑｕｅ（Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．１０７７−１）に重層した。この管を２０００ｒｐｍで３０分間、遠心分離した。その上清を廃棄した。ペレットを３ｍＬの冷却した蒸留水と混合し、続いて、３０秒後、１ｍＬ、６ＮのＮａＣｌと混合した。この管を１１００ｒｐｍで５分間遠心分離した。各管内のペレットを合わせ、そして１０ｍＬのＨＢＳＳ（Ｈａｎｋ’ｓ  Ｂａｌａｎｃｅ  ｏｆ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｌｔｄ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．ＬＭＣ７５））で２回洗浄した。これらの細胞を計数し、そして２×１０6細胞／ｍＬに希釈した。
【０４４９】
細胞（０．３ｍＬ）を予めラベルした微量遠心分離管にピペットで入れた。これらの細胞を５μｇ／ｍｌのサイトカラシンＢ、１０ｎＭのＰＧＥ2および所望の濃度の試験化合物またはビヒクル（０．５％ＤＭＳＯ）と共に３７℃で５分間インキュベートした。ウォルトマンニンまたはロリプラムを陽性コントロールとして使用した。１００ｎＭのｆＭＬＰを、コントロールを除く各管に添加した。３０分のインキュベート後、細胞を氷上に配置し、そして３分間１３，０００ｒｐｍで遠心分離した。５０μＬの上清を、９６ウェルプレート（３連）の適切なウェルにピペットで入れた。１００μＬの基質を各ウェル（０．５３ｍＭのｏ−ジアニシジン；Ｓｉｇｍａ、Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｄ３２５２、リン酸緩衝液（ｐＨ６．０）中０．１４７ｍＭのＨ2Ｏ2）に添加した。このプレートを３７℃で３０分間インキュベートした。反応を、５０μＬの４Ｎ  Ｈ2ＳＯ4を各ウェルに添加することによって停止させた。標準曲線を作成するために、１、０．１、０．０１、および０．００１ｍｇ／ｍＬの西洋ワサビペルオキシダーゼ（２００μＬ）をこのウェル（３連）にピペットで入れた。プレートをＥＬＩＳＡ読み取り機において４０５ｎｍで読みとった。本発明の化合物（ｃＡＭＰ  ＰＤＥインヒビター）と同様の作用機構を有する標準化合物について、慣用的に観測したミエロペルオキシダーゼの最大阻害は、約３０〜３５％であった。従って、濃度−応答研究から得た阻害効力は、３連の測定を使用する、少なくとも３回の別々の実験から決定したＩＣ15値として引用される。
【０４５０】
表２に示されるように、本発明の化合物は、刺激されたヒト好中球からのＭＰＯ放出を強力に阻害し、ＩＣ15値は０．１〜１μＭの範囲である。これらの化合物は、約４０％の、好中球ＭＰＯ放出の最大阻害を示し、これは公知のＰＤＥ４インヒビター（例えば、ロリプラム）の効果と一致する（データは示さない）。この結果は、これらの化合物が、ｆＭＬＰで刺激されたヒト好中球の脱顆粒応答を濃度に依存して阻害し得ることを示す。好中球脱顆粒は、多数の炎症性疾患（例えば、乾癬、リウマチ性関節炎）においてこの細胞型によって媒介される組織損傷の主要なエフェクターと考えられるので、これらの化合物によるこの応答の阻害は、これらおよび他の関連疾患状態における本化合物の臨床的な有用性を示す。
【０４５１】
表２
ミエロペルオキシダーゼ放出により測定された、好中球脱顆粒の阻害
【０４５２】
【表３】
0004979157.tif 000069
【０４５３】
（好中球の走化性）
走化性のプロセス（ケモカインの勾配の高い方の指向性の白血球遊走）は、炎症の病理学的な症状発現（例えば、リウマチ様の関節における悪化）関連する多数の好中球の蓄積に必須である。走化性は、好中球が血管腔から炎症部位へと遊走する主要な機構であり、従って、これは多くの炎症性疾患における好中球媒介性組織損傷に関連した共通のプロセスである。本発明において、試験化合物は、濃度に依存して、ｆＭＬＰに応答した初代ヒト好中球の走化性を阻害することが発見された。これらの化合物はまた、インターロイキン８（ＩＬ−８）が媒介する走化性を阻害する（データは示さない）。炎症した関節への好中球の遊走の特異的阻害は、リウマチ性関節炎および多くの炎症性疾患において有効な治療標的である。化合物の走化性阻能力を評価するために使用されるこのインビボアッセイシステムは、インビボでの抗リウマチ活性および炎症性疾患（ここで、好中球が、関連の組織損傷に関与する）に対する活性を示す。
【０４５４】
化学誘引物質ｆＭＬＰ（１０μＭ）を含有する走化性緩衝液を走化性プレートの各ウェルに添加し、そしてフィルターを挿入し、フィルターとウェル中の走化性緩衝液との間の接触を保証した。上記の実験で決定した最大未満の濃度の化学誘引物質を使用した。自発性細胞遊走の決定に関して、特定のウェルは化学誘引物質を含まなかったが、その代わりに緩衝液のみを収容していた。新たに単離した好中球（１×１０6）を、ビヒクル（０．１２５％  ＤＭＳＯ）±試験化合物と共に３７℃で１時間インキュベートした。処置細胞およびコントロール細胞の懸濁液を次いで、緩やかに再懸濁し、そして２０μＬの細胞を各ウェルのフィルターの上面に添加した。このプレートを５％ＣＯ2下、３７℃で１．５時間インキュベートした。次いで、細胞を吸引によってフィルターの上面から除去し、そして全てのプレートを遠心分離した。このフィルターを除去し、既知濃度の細胞を未使用のウェルに添加して標準曲線を作成した。緩衝液中に調製した、ＸＴＴ（Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｘ  ４２５１）／ＰＭＳ（Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｐ７６２６）の溶液を各ウェルに添加し、そして細胞をさらに１〜２時間インキュベートし、そして４５０ｎｍで吸光度について測定した。吸光度の値を標準曲線を使用して細胞数に変換した。ＩＣ50値は、３連で測定した、少なくとも３つの別々の実験の平均である。
【０４５５】
表３は、１０ｎＭ  ｆＭＬＰによってインキュベートされた走化性に対する本発明の化合物の阻害効力を示す。この化合物のいくつかは、このアッセイシステムにおいて、１０μＭ未満のＩＣ50を示す。ホスホジエステラーゼＩＶインヒビターであるロリプラムを陽性コントロールとして使用し、これは、好中球の走化性を、これらのアッセイ条件下、１２．５μＭにおいて８５％阻害した（データは示さない）。コントロール実験において、これらの化合物（化学誘引物質の非存在下では）が一般的な好中球の運動性に十分に影響を及ぼさないことが明らかとなった。従って、これらの化合物は、細菌由来ペプチド（ｆＭＬＰ）に応じた、ヒト好中球の指向された遊走を阻害する際に有効である。
【０４５６】
表３
ｆＭＬＰ誘発性ヒト好中球の走化性の阻害
【０４５７】
【表４】
0004979157.tif 000070
【０４５８】
（コンカナバリン−Ａによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋Ｔリンパ球におけるＴＮＦ−α産生の阻害）
活性化Ｔリンパ球は、ＴＮＦ−αを産生することが公知であり、そして炎症の局在化した領域（例えば、リウマチの滑膜、または乾癬性病巣）における、この重要な炎症メディエイタの有意な源を構成し得る。ｃｏｎＡによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞（これは、試験化合物の存在下または非存在下でインキュベートした）からの上清を、ＥＬＩＳＡシステムを使用して、ＴＮＦ−αについて分析した。（Ｐｈａｒｉｎｇｅｎ；推奨される、抗ＴＮＦ抗体セット１８６３１−Ｄおよび１８６４２−Ｄ）。かなりの量のＴＮＦ−αが、ＣｏｎＡで刺激された、ビヒクル処理Ｔ細胞において誘発された。表４に示されるように、本発明の化合物は、Ｔ細胞によって誘発されたＴＮＦ−α産生を強力に阻害することができた。この結果は、ヒト全血における、ＬＰＳによって誘発されたＴＮＦ−α放出の阻害におけるこれらの化合物の低い効力とは対照的である。これは、ＴＮＦ−α産生に影響を与える調節経路に関する細胞内ｃＡＭＰの増加に対する、単球／マクロファージの感受性がＴリンパ球と比較して異なることに起因し得る。この結果は、本発明の化合物がＴＮＦ−αの産生に関与する疾患の処置に使用され得ることを示唆する。
【０４５９】
表４
ｃｏｎＡによって刺激されたヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＴＮＦ−α産生における試験化合物の効果
【０４６０】
【表５】
0004979157.tif 000071
【０４６１】
（ヒトＴリンパ球のヘルパー機能の阻害）
（序文および理論）
リウマチ性関節炎および乾癬を含む自己免疫病因論に関する多くの免疫疾患は、炎症促進状態の開始および維持を生じる自己反応性Ｔリンパ球サブセットのＴヘルパー細胞機能における不均衡によって特徴付けられる。この不均衡は、しばしば、Ｔｈ１表現型の過剰発現および／またはＴｈ２表現型の抑制として現れる。ＩＬ−２およびＩＮＦ−γを分泌するＴ細胞は、Ｔｈ１または１型細胞として称される。これらの細胞は、マクロファージの活性化および細胞傷害性細胞経路によって、直接細胞が媒介する免疫を介して関与する。ＩＬ−４、ＩＬ−５およびＩＬ−１０を産生する細胞は、Ｔｈ２または２型細胞と呼ばれ、体液性免疫応答を調節する。本発明の化合物のいくつかは、コンカナバリンＡによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞において、インビトロで、Ｔｈ２機能よりも強力にＴｈ１機能を阻害した。従って、これらの化合物は、Ｔｈ２細胞にいずれの重大な程度まで影響を与えることなく、Ｔｈ１細胞を選択的に抑制し得、それ故、上昇したＴｈ１応答によって特徴付けられる自己免疫炎症性疾患における不均衡の補正を生じる点において、治療的価値を有し得る。
【０４６２】
初代ヒトＴ細胞についてのアッセイは、コンカナバリンＡ（ｃｏｎＡ）；（Ｓｉｇｍａ、Ｃａｔａｌｏｇ  Ｎｏ．Ｃ５２７５）によるそれらの活性化、続いて、いずれかのプロフィールについてサイトカインに関するＥＬＩＳＥ検出を含む。Ｔｈ１プロフィールの場合、ＩＬ−２およびＩＮＦ−γが基準値として使用される一方で、ＩＬ−１０はＴｈ２プロフィールについてのインジケーターである。生物学的に、これらのインジケーターは、ＩＬ−２が主要なＴ細胞マイトジェンであり、他方で、ＩＬ−１０が強力であるが選択的な免疫抑制剤を表すという点で有用である。
【０４６３】
（方法）
約６０ｃｃのヒト全血をＡＣＤ抗凝固性バキュテナー（ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ）管中に集めた。１５ｍＬのＦｉｃｏｌｌ  Ｐａｑｕｅ  １０７７を、６つの滅菌コニカル管（５０ｍＬ）にアリコートした。１０ｍＬの血液を、チューブを上向きに保持し、そしてピペットの先端部を管の内側縁部に当て、そして血液を管の側面に沿って下向きにゆっくり流すことによって、Ｆｉｃｏｌｌ  Ｐａｑｕｅの上部にゆっくりと積層させた。管を室温で３０分間、１７００ｒｐｍで回転させた。白血球バンド上の血漿層を吸引除去し、そしてパスツールピペットを使用して、白血球バンドを取り上げ、そしてこれを滅菌コニカル管（５０ｍＬ）に移した。各白血球勾配管からの細胞を別個の５０ｍＬコニカル管に移した。滅菌ＰＢＳ  ｐＨ７．４を、白血球バンドからの細胞を含む各コニカル管（５０ｍＬ）に添加し、容量を５０ｍＬとした。管を１０分間１１００ｒｐｍで回転させた。上清を吸引除去し、そして細胞を５０ｍＬのＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に再び懸濁させた。管を１０分間１１００ｒｐｍで再び遠心分離した。上清を吸引除去し、そして細胞を適切な培地中に５×１０7細胞／ｍＬまたは２×１０6細胞／ｍＬで再び懸濁した。
【０４６４】
（粗リンパ球調製：）
白血球調製物からの細胞を、１０％  ＦＢＳ＋２ｍＭグルタミンを含むＢＡＳＡＬ培地（ＡｃｉｔＣｙｔｅTM）またはＲＰＭＩ  １６４０中に１×１０6細胞／ｍＬの密度で再懸濁した。
【０４６５】
（ＣＤ  ４＋  Ｔ細胞調製：）
白血球調製物からの細胞を、２〜６％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を補充した滅菌ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に、５×１０7細胞／ｍＬの密度で再懸濁した。細胞を次いで、単離のために準備した。
【０４６６】
（ＣＤ４＋  Ｔ細胞の単離（ＳｔｅｍＳｅｐTM）：）
Ｉ）免疫磁気標識：
１００μＬの抗体カクテル（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．１４０６２）をそれぞれのｍＬの細胞に添加し、そして十分に混合した。細胞＋Ａｂカクテルを３０分間氷上でインキュベートした。３０分のインキュベーション後、６０μＬの磁気コロイド（ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｃｏｌｌｏｉｄ）をそれぞれのｍＬの細胞に添加し、そして十分に混合した。細胞＋Ａｂカクテル＋磁気コロイドを３０分間氷上でインキュベートした。３０分の最終インキュベーション後、細胞を磁気細胞分離のために準備した。
【０４６７】
ＩＩ）分離手順（重力フィード（Ｇｒａｖｉｔｙ  ｆｅｅｄ））：
サンプルをカラムの上部に充填した。ストップコックを回して、培地のフローをカラムを通して降下させ、そして培地を回収管に回収した。２〜６％のＦＢＳを補充したＰＢＳを、３カラム容量（出発サンプルの容量を含まない）が回収されるまで、カラムに添加した。細胞を洗浄し、計数し、そして１０％  ＦＢＳ＋２０ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ１６４０中に１×１０6細胞／ｍＬの密度で再懸濁した。
【０４６８】
（ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、ＩＮＦαおよびＩＬ−１０アッセイ手順）
ＣＤ４＋  Ｔ細胞を上記のように単離した。細胞を、１０％  ＦＢＳ＋２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．３６７５０）中に１×１０6細胞／ｍＬの密度で懸濁した。細胞を、試験化合物を調製している間、氷上で維持した。試験化合物を滅菌９６ウェルアッセイプレート中に、５０×最終の所望試験濃度で調製し、全てのウェルは、等量のジメチルスルホキシドビヒクルを含んでいた。５００μＬのＣＤ４＋  Ｔ細胞を、２４ウェルアッセイプレートの各ウェルに添加した。１０μＬの各試験化合物の作業溶液を適切なウェルに添加し；２つのウェルを刺激したコントロールおよび刺激しなかったコントロールとして残した。１０μＬのコンカナバリンＡ（５０×最終濃度）を１０μｇ／ｍＬで、刺激していないコントロールのウェルを除く各ウェルに添加した。細胞を３７℃で４８時間インキュベートした。次いで、馴化培地を、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１０が存在する量についてＥＬＩＳＡによって評価した。
【０４６９】
（結果および考察）
表５Ａ、５Ｂおよび５Ｃは、本発明の化合物の、Ｔｈ１応答またはＴｈ２応答を恐らく促進または抑制するサイトカインを阻害する能力における、本発明の化合物の効力に関する全個体のデータの一覧を示す。表５Ａ、５Ｂおよび５Ｃにおいて、１０μｇ／ｍＬのコンカナバリンＡで４８時間時刺激した末梢ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞における、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、およびＩＬ−１０の産生に対する本発明の成分の影響を示している。ＩＣ50は、３連で実施した少なくとも３つの別個の実験の平均である。ＣＤ４＋  Ｔ細胞の単離、インキュベーション条件およびリンホカインのＥＬＩＳＡ検出は上記の方法の節で議論される。
【０４７０】
この一連の化合物の多くのメンバー（特にＰＤＥ４およびＰＤＥ３の両方を阻害する化合物）は、リウマチ性関節炎および他の炎症性疾患（例えば、乾癬）などに見受けられるＴｈ１細胞とＴｈ２細胞との不均衡を潜在的に直し得る、活性化されたＴ細胞のサイトカインプロフィールを誘発する。表５Ａは、ｃｏｎＡによって刺激されたＣＤ４＋選択細胞Ｔｈ１プロフィールの選択的阻害を示した、この一連のメンバーのいくつかの例を示し、特にこれらの化合物は、１３６、５４および３０とナンバリングされる。
【０４７１】
これらの化合物の絶対効力がその使用されるアナログに依存して変化する場合、その効果は、ロリプラム（Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｒ６５２０）によって示される効果とは明らかに異なる。ロリプラムは、４８時間までに、ＩＬ−２およびＩＬ−１０の両方の合成を阻害することが見出された。対して、ＩＬ−１０のｃｏｎ−Ａによる刺激は本発明のいくつかの化合物によって阻害されない。ところが、同一の上清は、減少したレベルのＩＬ−２を示す。Ｔｈ１サイトカインプロフィールの抑制は、炎症部位におけるＴｈ２細胞の増強を伴う。ＩＬ−２産生を阻害するさらなる利点は、正常な環境下で反応性Ｔ細胞をアネルギー性にし得る（すなわち、ＭＨＣ  ＩＩの情況において、ＴＣＲを介する通常のマイトジェン刺激に応答できないＴ細胞）。あるいは、これはまた、自己反応性Ｔ細胞のアポトーシスを引き起こし得る。従って、本発明の化合物が有する、このＴｈ１阻害、Ｔｈ２持続特性は、他の疾患でも特にＴｈ１媒介性疾患（例えば、リウマチ性関節炎、乾癬および炎症性腸疾患）において治療的改善を達成する可能性を提供する。
【０４７２】
表５Ａ
コンカナバリンＡによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＴｈ１プロフィールに対する試験化合物の効果
【０４７３】
【表６】
0004979157.tif 000072
【０４７４】
表５Ｂ
コンカナバリンＡによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞における、Ｔｈ−１プロフィールに対する試験化合物の効果
【０４７５】
【表７】
0004979157.tif 000073
【０４７６】
表５Ｃ
コンカナバリンＡによって刺激された初代ヒトＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＴｈ２プロフィールに対する試験化合物の効果
【０４７７】
【表８】
0004979157.tif 000074
【０４７８】
（酸素ラジカル捕獲）
好中球および他の細胞によって産生される、酸化剤およびフリーラジカルは、リウマチ性関節炎および他の炎症性疾患の病因に寄与すると考えられる。この関与と一致して、フリーラジカルを不活化し得る化合物（抗酸化物質）は、リウマチ性関節炎および他の炎症性疾患において抗炎症活性を有する。
【０４７９】
本発明の化合物は、生物学的物質の抗酸化活性を測定するために使用される標準的なインビトロアッセイにおいて、フリーラジカルの形成を阻害した。アッセイ（ＲＡＮＤＯＸからのアッセイキット：全ての抗酸化物質の状態）の基準は、サンプル中の抗酸化物質が安定なラジカルカチオンであるＡＢＴＳ*+に起因する色形成を抑制する能力である。色原体ＡＢＴＳ（２，２’−アジノ−ジ−［３−エチルベンズチアゾリンスルホネート］（Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ａ１８８８））（６１０μＭ）を、ＤＭＳＯ中に溶解した本発明の化合物と一緒に基質溶液（ペルオキシダーゼ（メトミオグロビン）（６．１μＭ）およびＨ2Ｏ2（２５０μＭ））と共に正確に３分間、３７℃でインキュベートする。比較的安定な青緑色を有するラジカルカチオンＡＢＴＳ*+の生成を６００ｎｍで測定した。１００μＭの試験化合物の抗酸化活性を上記のように決定した。使用した陽性コントロールは、強力な生物学的抗酸化物質、Ｔｒｏｌｏｘ（登録商標）（６−ヒドロキシ−２．５．７．８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸）であった。試験化合物による色形成の阻害（抗酸化活性）は、陽性コントロールＴｒｏｌｏｘ（登録商標）（１００％阻害）に対して示される。これらの結果を表６に示す。このアッセイにおける色抑制は、ＡＢＳＴ*+ラジカルの生成阻害またはクエンチの阻害に起因し得る。
【０４８０】
表６
化合物の抗酸化活性
【０４８１】
【表９】
0004979157.tif 000075
【０４８２】
これらの化合物の抗酸化特性はインビボにおける抗炎症活性に起因し得、そして酸素ラジカルが関与する炎症性疾患における治療有効性を有し得る。従って、本発明の化合物の抗酸化活性は、ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害に加えて、抗炎症作用のさらなる機構を構成し得る。
【０４８３】
（レジニフェリトキシン（ｒｅｓｉｎｉｆｅｒｉｔｏｘｉｎ）誘導マウス耳浮腫急性炎）
炎症の主な特徴の一つは、流体の管外遊出および収集、間隙を導く血管拡大および浸透の増加により、赤色化および膨張することである。特に、リウマチ性関節炎は、病気に冒された関節の明白な浮腫により特徴付けられ、かなりの痛みおよび硬化を生じる。マウス耳炎モデルは、炎症についての標準的なインビボアッセイであり、このアッセイは、炎症媒介物によって誘導される浮腫に起因する耳の重量の増加に基づく。ＲＴＸ（レジニフェリトキシン；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｒ  ８７５６）は、植物Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ  ｐｏｉｓｏｎｉｉから単離されるジテルペンであり、そしてカプサイシンの超強力な（ｕｌｔｒａｐｏｔｅｎｔ）アナログである。ＲＴＸは、選択的に組織中の侵害受容でかつ熱過敏な神経末端を刺激し、神経原性の浮腫を誘発することによって作用する。本発明の化合物は、局所、腹腔内、または経口による投与のいずれであろうと、ＲＴＸの局所適用によって誘導される浮腫の発達を阻害した。このモデルで誘導される浮腫は、ＰＤＥ４インヒビターによって阻害され、従って、インビトロで匹敵する効果を有する試験化合物の効力を差次的にするためのインビボシステムにおいて有用である。
【０４８４】
マウス（ＣＤ１、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、群（ｎ＝５−８）に分けそしてタグ化した。コントロールマウスは、局所的に左耳の内側および外側に施したＲＴＸ（０．１μｇ／耳）、ならびにコントロールとして右耳に施したビヒクルを有した。局所投与のために、実験的／処置したマウスに、左耳にはＲＴＸ＋試験化合物溶液（５０μｇ／耳）を、そして右耳にはアセトンを受容させた。空腹内（ｉ．ｐ．）投与のために、１００μＬのＰＥＧ２００：生理食塩水（１：１）中に溶解した１００ｍｇ／ｋｇの試験化合物を注射し、３０分の待機時間の後に、標準で３０分のＲＴＸ浮腫誘導した。経口（ｐ．ｏ．）投与のために、１００μＬのＰＥＧ−２００中の１０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を動物に与え、次いで浮腫を、１．５時間の待機時間後０．１μｇ／耳のＲＴＸを使用して誘導した。浮腫誘導後、マウスを屠殺し、そして耳組織の標準ディスクを取り出した。組織の各ディスクを、即座に１ｇの１／１０近くまで計量した。データを各左耳と右耳との違いを解釈し、そして平均＋／−ＳＥＭを計算することで分析した。統計学的な重要性を、コントロール群対実験群の左耳／右耳の重量の差における２個のサンプルのｔ−検定により試験した。
【０４８５】
表７、８および９は、局所、腹腔内、または経口の投与経路を介して投与した場合、ＲＴＸ誘導マウスの耳浮腫モデルでの本発明の化合物の効果を示す。これらのデータから、この化合物が、任意の試験経路を通じて送達される場合、マウスでのＲＴＸ媒介炎症（浮腫）を効果的に阻害することは、明らかである。局所投与を介する効力が最も大きく、腹腔内、次いで経口胃管栄養法に続く。異なる投与経路間の効力の違いは、驚くべきことではない。なぜならｇ．ｉ．吸収および代謝プロセスは、化合物のｉ．ｐ．送達および経口送達にとって重要であるからである。
【０４８６】
表７
試験化合物の局所投与によるレジニフェリトキシン誘導マウス耳浮腫の阻害
【０４８７】
【表１０】
0004979157.tif 000076
【０４８８】
表８
試験化合物の腹腔内投与によるレジニフェリトキシン誘導マウス耳浮腫の阻害
【０４８９】
【表１１】
0004979157.tif 000077
【０４９０】
表９
試験化合物の経口投与によるレジニフェリトキシン誘導マウス耳浮腫の阻害
【０４９１】
【表１２】
0004979157.tif 000078
【０４９２】
（環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼの阻害）
（ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ４の阻害）
好中球、内皮細胞、マクロファージ、好酸球、好塩基球、Ｔ−リンパ球などのような炎症に含まれる細胞中のｃＡＭＰの上昇は、一般的に、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）の発現を阻害するような炎症サイトカインプロフィールのダウンレギュレーションを導く。抗炎症性サイトカインインターロイキン−１０（ＩＬ−１０）発現は、炎症部位の多くの細胞において、ｃＡＭＰによってポジティブに制御される。細胞中のｃＡＭＰの低下は、ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）により影響を受けるので、これらの酵素に対する特定のインヒビターが重要である。このような化合物は、特異的に阻害するＰＤＥイソエンザイムを発現する細胞において、細胞内ｃＡＭＰを上昇させる効力を有する。少なくとも９個の異なる環状ヌクレオチドＰＤＥのファミリーが存在するが、ＰＤＥ４ファミリーが特に重要である。このことは、炎症応答に影響を及ぼす重要な細胞のタイプの多くが、他のＰＤＥに対して優位にＰＤＥ４を発現するからである。ロリプラムのようなＰＤＥ４インヒビターは、好中球および好酸球のような炎症細胞においてｃＡＭＰを特異的に上昇させ、そしてこれらの炎症表現型をクエンチすることが示されている。望ましくは、治療的に有効なＰＤＥ４インヒビターは、胃酸分泌、嘔吐およびＣＮＳ作用の誘発を含む最小の副作用を有する。有害な副作用がないＰＤＥ４インヒビターは、喘息、炎症性腸管疾患、リウマチ性関節炎、乾癬および同種移植、その他を含む疾患のための抗炎症治療薬の新しい世代として大きな期待を保持する。
【０４９３】
化合物１２を、哺乳動物の環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼ（ＰＤＩ  １〜５と呼ばれる）の主なクラスの５に対する活性についてスクリーニングした。ＰＤＥ５は、基質としてｃＧＭＰを使用するが、ＰＤＥ１〜４は、ｃＡＭＰを使用する。幅広く特異的なＰＤＥインヒビター３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１７０１８）を、全てのアッセイにおいてポジティブコントロールとして使用した。様々なアッセイに対してＰＤＥを、部分的に、以下の細胞／組織から精製した：ＰＤＥ１（ウシの心臓）、ＰＤＥ２（ヒトの血小板）、ＰＤＥ３（ヒトの血小板）、ＰＤＥ４（ヒトの前単球Ｕ９３７細胞）およびＰＤＥ５（ヒトの血小板）。
【０４９４】
化合物１２は、それぞれ、８９μＭ、４５μＭおよび５．９μＭのＩＣ50を有するＰＤＥ１、３および４を阻害することが見出された。ＰＤＥ２および５に対する有意な炎症効果は存在しなかった。従って、化合物１２は、ＰＤＥ４に対して、有意な活性および選択性を示し、ｃＡＭＰホスホジエステラーゼは、炎症性細胞において優位性を示した。本発明の化合物は、自己免疫疾患、炎症性疾患、または任意の疾患において治療的有用性を提供し得、この障害に関与する炎症性細胞を発現するＰＤＥ４中の細胞内ｃＡＭＰの上昇により、炎症性表現型のダウンレギュレーションを導く。
【０４９５】
Ｕ９３７細胞質抽出物を、溶解緩衝液（２０ｍＭのＴｒｉｓ  Ｃｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、５ｍＭのβ−メルカプトエタノール、１μＭのペプスタチン、１μｇ／ｍＬのロイペプチン、１ｍＭのベンズアミンおよび０．１ｍＭのＰＭＳＦ）中のＵ９３７細胞（ＡＴＣＣ：カタログ番号ＣＲＬ−１５９）を超音波処理することにより調製した。次いで、超音波処理した細胞抽出物を、７０，０００ｇで３０分間遠心分離し、上清を取り除いた。スクロースを０．２５Ｍの最終濃度で添加し、アリコートし、そして−８０℃で保存した。
【０４９６】
ＰＤＥ反応を、１μＭ［3Ｈ］ｃＡＭＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  ｗｅｂｓｉｓｔｅ  ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｐｂｉｏｔｅｃｈ．ｃｏｍ）、０．５Ｕ／ｍＬの５’ヌクレオチダーゼ（Ｓｉｇｍａ）、５０ｍＭのＴｒｉｓ  Ｃｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ  ｐＨ７．５（２０μＬ体積）中で３７℃で３０分間実施した。Ｕ９３７抽出物を、基質の１０％未満が消費されるように添加した。試験化合物またはビヒクルを、所望の濃度まで添加した。典型的に、化合物を１００μＭから１ｎＭの範囲の６個の１０倍希釈溶液で試験した。反応を、二連で実施した。反応を、１樹脂：２メタノール：１Ｈ2Ｏの比である２００μＬのＤｏｗｅｘ  １−８  ４００Ｃｌ-アニオン交換樹脂を添加することにより終了させた。サンプルをインバージョン（ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ）により混合し、次いで、２〜３時間静置した。６５μＬのアリコートを取り出し、Ｌｕｍａｐｌａｔｅ（Ｐａｃｋａｒｄ；カタログ番号６００５１６５）上で乾燥させ、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎカウンター（ＴｏｐＣｏｕｎｔTM）で１．５分かけて計数した。そのデータを表１０に提供する。
【０４９７】
表１０
ヒトＵ９３７細胞由来のｃＡＭＰホスホジエステラーゼ４の阻害
【０４９８】
【表１３】
0004979157.tif 000079
【０４９９】
表１０は、ヒト前単球細胞株Ｕ９３７から単離したＰＤＥ４に対する、本発明の化合物の阻害活性を示す。本明細書中で記載されるＰＤＥ４アッセイ条件を利用すると、典型的なＰＤＥ４インヒビター（例えば、ＲｏｌｉｐｒａｍおよびＲｏ−２０−１７２４（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ：カタログ番号５５７５０２）により、文献（Ｓｃｈｕｄｔら（１９９６）によって総説される）に見出される値と同じＩＣ50値が得られた。さらに、ＰＤＥ１、３および４を阻害するＩＢＭＸ（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１７０１８）を使用しても、Ｕ９３７細胞中で優位なＰＤＥは、ＰＤＥ４であるという発見と一致したが、任意のさらなる阻害（データは示さず）を示さなかった。
【０５００】
細胞内ｃＡＭＰおよびタンパク質キナーゼＡの活性化を引き続て上昇させるＰＤＥ４（またはより正確には、ＰＤＥ４の特異的イソ型）の阻害が、炎症性疾患または自己免疫性疾患での治療的標的である（ここで、関連する原因細胞または組織が、このＰＤＥイソ型を優位に発現する）。リウマチ性関節炎に関して、このＰＤＥ４インヒビターロリプラムは、ラットにおけるコラーゲン誘発関節炎のような疾患の動物モデルにおいて、活性であることをが示された（Ｎｙｍａｎら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０８（３）、４１５−４１９、１９９７）。
【０５０１】
（ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ３の阻害）
本発明の化合物を、ＰＤＥ４阻害およびＰＤＥ３阻害が分離可能であるか、そしてまたファルマコフォアがそれぞれ必要とされるかどうかを確認するために、ヒト血小板ＰＤＥ３に対する阻害活性を評価した。合わせたＰＤＥ４／３インヒビターは、原因細胞／寄与細胞タイプ（例えば、関節炎、炎症性腸管疾患、乾癬および同種移植のような炎症性疾患におけるＴ細胞）がＰＤＥ４およびＰＤＥ３の両方を発現する疾患における治療剤として特に有効であり得る。このような疾患において、合わせたＰＤＥ３／４インヒビターは、ロリプラムのような選択的ＰＤＥ４インヒビターに勝る利点を有し得る。
【０５０２】
血小板細胞抽出物を、Ｕ９３７細胞について上記のように調製した。ＰＤＥ３アッセイを、ＰＤＥ４アッセイについて上記のような血小板抽出物を使用して実施した。血小板は、ＰＤＥ２、３および５を含む。しかしＰＤＥ２および５は、優先的に、ｃＧＭＰを利用するので、基質としてｃＡＭＰを用いるアッセイにおいて、ｃＧＭＰは検出されない。さらに、このアッセイにおいて使用される条件下で、ロリプラムは効果がなく、公知のＰＤＥ３インヒビタートレキンシン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ；カタログ番号３８２４２５）は、強力なインヒビターである（アッセイによりＰＤＥ３に対して特異的であることを確認）。
【０５０３】
表１１は、ＰＤＥ３の阻害に対する本発明の化合物のＩＣ50を示す。ＰＤＥ３およびＰＤＥ４の活性は分離可能であるようであり、そしてこの化合物は、ＰＤＥ４対ＰＤＥ３に対して幅広い範囲の選択性を示す。いくつかの化合物は、ＰＥＤ４に対して特異的であり、いくつかの化合物は、ＰＤＥ４およびＰＤＥ３に対してより効力があり、そしていくつかの化合物は、ＰＤＥ４およびＰＤＥ３に対してほぼ等しい効力である。従って、本発明の化合物は、異なる細胞タイプに対して最大の効力が可能となるようにＰＤＥ４／３の選択性について選択され得る。
【０５０４】
表１１
ヒトの血小板由来のｃＡＭＰホスホジエステラーゼ３の阻害
【０５０５】
【表１４】
0004979157.tif 000080
【０５０６】
（ＰＤＥイソザイムの特異性）
次いで、本発明者らは、ＰＤＥイソザイムの特異性は、化合物のクラスに特徴的であることを実証することに取りかかった。
【０５０７】
試験化合物（１００μＭ）を、ＭＤＳ  Ｐａｎｌａｂｓ（Ｂｏｔｈｅｌｌ、ＷＡ、ＵＳＡ）で実施される標準生化学方法を使用して、ＰＤＥ１、２および５に対する活性をスクリーニングした。幅広く特異的なＰＤＥインヒビター３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）を、全てのアッセイにおいてポジティブコントロールとして使用した。様々なアッセイについて、ＰＤＥを、以下の細胞／組織から部分的に精製した：ＰＤＥ１（ウシの心臓）、ＰＤＥ２（ヒトの血小板）、ＰＤＥ５（ヒトの血小板）。この結果を、表１２に示す。比較の目的のために、上記のようなＰＤＥ３（ヒトの血小板）およびＰＤＥ４（ヒトの前単球Ｕ９３７細胞株）の効果を表１２にさらに示した。
【０５０８】
表１２
ＰＤＥイソザイムの特異性
【０５０９】
【表１５】
0004979157.tif 000081
【０５１０】
（ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ４においてロリプラムの高親和性結合部位（ＨＡＲＢＳ）との置換）
吐気および嘔吐を含む所望されない副作用を有さないホスホジエステラーゼ４インヒビターが必要とされている。動物モデルによると、この活性は、［3Ｈ］−ロリプラムを高親和性結合部位（脳および中枢神経系（ＣＮＳ）内の細胞由来）と置換する化合物の能力に高度に関連してることが示された［Ｄｕｐｌａｎｔｉｅｒ  １９９６、Ｂａｒｎｅｔｔｅ  １９９６］。本発明者らは、本発明の化合物の催吐効力を予想するために高親和性ロリプラム結合部位（ＨＡＲＢＳ）置換アッセイを使用した。本発明の化合物は、ＰＤＥ４のＨＡＲＢＳ型に対して低い親和性を示し、このことにより、これらの化合物が、ロリプラムのような第１世代のＰＤＥ４インヒビターに関連する、機構に関連した副作用によって悩まされないことが示唆された。
【０５１１】
メスのＣＤ１マウスを、１００μＬのエタノールの腹腔内注射を介して屠殺し、そしてこの脳組織を、１．２ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのベンズアミン（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｂ６５０６）および０．１ｍＭのＰＭＳＦ（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｐ７６２６）を補充した５ｍＬの氷冷Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．００）中で均質化した。懸濁液を、３０，０００×Ｇ、４℃で２回遠心分離にかけ、そして上清を廃棄した。このペレットを、緩衝液中で再懸濁させ、タンパク質の濃度を０．５ｍｇ／ｍＬに調整した。試験される薬物をＤＭＳＯに溶解し、そして１〜３０，０００ｎＭの濃度範囲で９６ウェルマイクロプレートに３連でピペットで移した。１０ｍＬの膜調製物に、ＤＭＳＯ（１００μＬ）中の０．２３５μＭ［3Ｈ］−ロリプラムを補充し、１００μＬをマイクロプレートの各ウェルに分配した。このプレートを、４℃で１時間インキュベートした。このプレートの内容物を、Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｃ  フィルタープレートを介して吸引し、そして４×２００μＬの氷冷緩衝液でリンスした。このプレートを、一晩乾燥し、３０μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ２０（Ｐａｃｋａｒｄ；カタログ番号６０１３６２１）を各ウェルに添加し、そしてプレートを、シンチレーションカウンターで、２分／ウェルのサンプリング時間で読んだ。非特異性結合を示す値（２０μＭのロリプラムを使用して得られる数によって規定される）を、全データポイントから減算した。３連での測定を、各濃度で実施した。結果を表１３に示す。ＰＤＥ４：ＨＡＲＢＳは、阻害した触媒活性に必要とされるＩＣ50濃度と、５０％のロリプラムを高親和性結合部位の５０％と置換するのに必要とされる濃度の比を示す。
【０５１２】
これらのアッセイ条件の下で、約１０ｎＭのＩＣ５０を有するマウスの脳において、ロリプラムは、3Ｈ−ロリプラムを、高親和性結合部位で置換することが可能である（データは示さず）。従って、ロリプラムは、ＰＤＥ４触媒活性の半分の最大阻害に必要とされる濃度より、高親和性部位に対して２０〜４０倍の高い親和性で結合する。この触媒型に勝るＨＰＲＢＳに対する優先的親和性が、第１世代ＰＤＥ４インヒビターのネガティブ副作用；すなわち嘔吐およびＣＮＳ効果に関連した。
【０５１３】
表１３に示したデータは、試験化合物が、ロリプラムよりもこの部位への結合においてより低い効力があることを示す。例えば、ロリプラムおよび化合物４３は、ＰＤＥ４（それぞれ、２８０および２６０ｎＭ）の触媒活性に対して非常に類似したＩＣ50を有するが、しかし、それらのＨＡＲＢＡ活性は、それぞれ、１０ｎＭおよび２５０ｎＭである。従って、化合物４３は、ＰＤＥ４のＨＡＲＢＳ型との相互作用について、ロリプラムよりも約２８倍低い効力がある。ロリプラムおよび化合物４３について、ＰＤＥ４（触媒）対ＰＨＥ４HARBSのＩＣ５０比は、それぞれ２８および１．０４である。化合物４３についてのこの比は、ＨＡＲＢＳ活性をＳＡＲ効果を介して減少させる第２世代のＰＤＥ４インヒビターについて報告される値と非常によく匹敵する。例えば、この比は、ＳＢ２０７４９９（Ａｒｉｆｌｏ）およびＲＰ７３４０１（ｐｉｃｌａｍｉｌａｓｔ）に報告されており、喘息についてフェイズＩＩトライアルで試験した２種の特異的ＰＤＥ４インヒビターは、それぞれ１および３である。従って、本発明の化合物は、ロリプラム、Ｒｏ２０−１７２４または他の第１世代ＰＤＥ４インヒビターよりもかなり低いインビボ催嘔吐性効果を示し得る。
【０５１４】
表１３
マウスの脳におけるＰＤＥ４の高親和性ロリプラム結合部位についての試験化合物の親和性
【０５１５】
【表１６】
0004979157.tif 000082
0004979157.tif 000083
【０５１６】
（ヒトＵ９３７単球細胞中のフォルスコリン誘導ｃＡＭＰ応答因子ルシフェラーゼ活性の増強）
インタクトな細胞においてｃＡＭＰを上昇させる本発明の化合物の能力を実証するために、ルシフェラーゼレポーター遺伝子（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ；Ｐａｔｈ  ＤｅｔｅｃｔTM：カタログ番号２１９０７６）の発現を駆動するプロモーターにおいて、ｃＡＭＰ応答因子（ＣＲＥ）を含むプラスミド構築物としての細胞のトランスフェクションを使用して、ルミノメーターでの光の出力の検出を介して細胞内ｃＡＭＰレベルの感受性のモニタリングを可能にした。ＰＤＥインヒビターおよびアデニリルシクラーゼアゴニスト（レセプターまたは細胞内活性化因子）の組み合わせを提供する化合物を用いる、トランスフェクトした細胞の薬理学的処理により、上昇した光の出力から検出可能な上昇した細胞内ｃＡＭＰレベルを得た。ｃＡＭＰ  ＰＤＥ４は、Ｕ９３７細胞において優れた環状ヌクレオチドヌクレオチドホスホジエステラーゼ活性であることが示され、それ故、ＣＲＥルシフェラーゼ構築物を用いてトランストランスフェクトされるこの細胞タイプは、ＰＤＥ４抑制活性を有する化合物について、従来の細胞スクリーニングアッセイとして有用であり得る。このことより、本発明の化合物は、アデニルイルシクラーゼ活性因子フォルスコリンで処理されるＵ９３７細胞において、増強ルシフェラーゼ発現を提供することが示された。
【０５１７】
ヒト−プロ単球Ｕ９３７細胞を、１０％のＦＣＳおよび２ｍＭグルタメートを含むＲＰＭＩ培地中に維持した。Ｕ９３７細胞を、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ第１７巻（６）：１０５８、１９９４に記載されるように、過渡的にトランスフェクトした。簡単には、細胞を、血清を含む培地中で、５×１０6細胞／ｍＬの密度まで増殖させ、次いで約１×１０7細胞／ｍＬの密度で血清を含む培地中に再懸濁した。４００μＬの細胞を、４０μＬの容量のＨ2Ｏ中に１０μＬのレポーターベクター（ｐＣＲＥ−ｌｕｃ）を含むエレクトロポレーションキュベットに移した。レポーターベクターＤＮＡを、製造者の指示により、ＤＮＡエンドヌクレアーゼを含まないキットを使用してＤＨ５  α  Ｅ．ｃｏｌｉより調製した。Ｕ９３７細胞を、室温でＢＩＯＲＡＤエレクトロポレーターを使用してエレクトロポレートした。キャパシタンスを１０５０μＦに設定し、そして電圧を２８０Ｖに設定した。この時定数を、各エレクトロポレーション後に記載した。次いで、細胞を４ｍＬの培地および血清中に溶解し、そして２００μＬの細胞をウエルごとにプレートした。細胞を、１６〜１８時間で回収した。次いで、３７℃で４時間、１０μＭのフォルスコリンの存在下または非存在下で、細胞を試験化合物またはビヒクルで処理した。
【０５１８】
ルシフェラーゼアッセイを、製造者の指示により実施した（Ｔｒｏｐｉｘ）。簡単に、細胞を４分間１２００ｒｐｍで遠心分離し、そして培地の上清を取り除いた。細胞ペレットを、１５μＬのＬｙｓｉｓ緩衝液（Ｔｒｏｐｉｘ）中に溶解した。ルシフェラーゼアッセイを、１０μＬの緩衝液Ａおよび２５μＬの緩衝液Ｂとともに１０μＬの細胞溶解物を使用して実施した。ルシフェラーゼ活性をルミノメーターを使用して、五秒の遅延、続いて１０秒の読み込時間で得た。
【０５１９】
表１４に示すように、本発明の化合物は、１０μＭのフォルスコリンで処理したＵ９３７細胞中のルシフェラーゼ活性の誘導を増強する。シリーズ内の１１化合物は、０．１〜１μＭの間の濃度でＣＲＥルシフェラーゼを誘導する。試験化合物自体は、これらの細胞において低い基底アデニルイルシクラーゼ活性を示す有意なルシフェラーゼ活性を誘導しなかった。この結果は、これらの化合物が、酵素アッセイにおける観察と一致して、ＰＤＥ４を優先的に発現する細胞株において、ｃＡＭＰレベルを上昇させることが可能であることを実証する。
【０５２０】
インビトロＰＤＥ４阻害活性とＣＲＥルシフェラーゼ誘導効力との間に幅広い相関が存在する。
【０５２１】
ＣＲＥルシフェラーゼアッセイまたはその改変物（異なる細胞タイプまたは構築物特性）は、本発明の化合物の効力最適化のためのインビトロＰＤＥ４酵素アッセイに対して、従来の細胞ＳＡＲバックアップ／バリデーションアッセイとして有用である。
【０５２２】
表１４
アデニルイルシクラーゼ活性因子フォルスコリンと共に同時インキュベートするＵ９３７細胞中における、試験化合物によるＣＲＥ−ルシフェラーゼ活性の増強
【０５２３】
【表１７】
0004979157.tif 000084
【０５２４】
（本発明の化合物の、形質転換した細胞増強抗癌活性の増殖に対する効果）
（導入）
ＢＣＲ−ＡＢＬ形質転換骨髄性白血病由来細胞株Ｋ−５６２（ＡＴＣＣ；カタログ番号２４３）を使用して、本発明の化合物が、形質転換した細胞の増殖にどのように影響を与えるかを決定した。細胞内のｃＡＭＰを上昇させることは、特に、特定のクラスの白血病（例えば、ＣＬＬ）において、多数の悪性腫瘍の細胞周期の阻止またはアポトーシスを導く１方法である。このような細胞内機構（すなわち、ｃＡＭＰ）により、非分化の白血病クローンの分化を引き起こすことが報告されている。特に、ｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬ形質転換骨髄性白血病細胞中の細胞内ｃＡＭＰの上昇（環状ＡＭＰアナログを使用する）は、サイクリン依存性キナーゼ４の阻害、引き続くｃ−ｍｙｃのダウンレギュレーションを介して抗増殖性であることが示されている。従って、培養したＫ−５６２細胞中の本発明の化合物の抗増殖性の能力を、３−Ｈチミジン取り込みアッセイを使用して、いくつかの標準ホスホジエステラーゼと比較された。
【０５２５】
（方法）
９０μＬのＫ５６２細胞（ヒト慢性骨髄性白血病細胞）を、１０％  ＦＢＳ／２ｍＭのＬ−グルタミンを補充したＲＰＭＩ１６４０中で、１×１０5細胞／ｍＬの密度で滅菌９６ウエルアッセイプレートに播種した。試験されるべきサンプルを、所望される最終濃度の１０倍で滅菌９６ウエルアッセイプレートに調製した。全サンプル希釈液は、使用される最も高いサンプル濃度における％ＤＭＳＯを補正するために等しい量のＤＭＳＯを含んだ。試験化合物の９種の濃度を、１００μＭの最大濃度まで増殖の効果について試験した。１０μＬのサンプルおよびコントロール（ＤＭＳＯ／正常な増殖コントロール）をアリコートの細胞に添加した。この細胞を、３７℃／５％のＣＯ2で４８時間インキュベートした。４８時間のインキュベーションに続いて、２０μＬの3Ｈ−チミジンを、１μＣｉ／ｍＬの最終濃度のために各ウエルに添加した。次いで、この細胞を３７℃／５％のＣＯ2で４〜６時間インキュベートした。チミジンを加えた４〜６時間後、プレートをプラスチックでラップし、一晩−２０℃のフロストフリーフリーザで凍結した。細胞を回収し、そして3Ｈ−チミジンの数を測定した。細胞毒性と細胞分裂停止活性とを区別するために、増殖曲線を準備し、細胞の播種密度の平均ＣＰＭ値を、４８時間後に得られる最大増殖に対する平均ＣＰＭと同じ曲線上にプロットした（ＤＭＳＯ増殖コントロール細胞）。この細胞を、７．８×１０3細胞／ｍＬ〜２×１０6細胞／ｍＬの範囲の濃度について１：２で希釈した。各細胞希釈液の９０μＬをプレートした滅菌９６ウエルアッセイに播種し、そして3Ｈ−チミジンを添加する前に約４時間、３７℃／５％のＣＯ2で平衡化した。表１５のデータを上記のように得、さらに具体的には、Ｋ５６２細胞を、１０％  ＦＢＳ／２ｍＭのＬ−グルタミンで充填したＲＰＭＩ１６４０中１×１０5細胞／ｍＬで９６ウエルプレートに播種した。種々の濃度の試験化合物またはビヒクル（ＤＭＳＯ）を添加し、そしてこの細胞を３７℃／５％ＣＯ２で４８時間インキュベートした。次いで、この細胞に３７℃／５％のＣＯ2で４〜６時間かけて１μＣｉ／ｍＬの3Ｈ−チミジンを加えた。ＤＮＡに取り込まれた放射能を、ガラスファイバーフィルター上に回収してシンチレーション計数した後に測定した。
【０５２６】
（結果および議論）
表１５のデータは、本発明の化合物が、細胞周期の停止を引き起こし得（例えば、化合物１７９）、従って、細胞分化およびアポトーシスを促進する可能性があることを実証する。一方、公知のＰＤＥインヒビター（Ｒｏｌｉｐｒａｍ、ＰＤＥ−４インヒビターおよびＺａｄａｖａｒｉｎｅ、ＰＤＥ４／３インヒビター）は、Ｋ−５６２細胞の増殖能力にに対する効果を全く有さない。本発明の試験化合物および公知のＰＤＥインヒビターの両方は、この場合、全ての標的ＰＤＥ−４を阻害するが、本発明の化合物のみが、Ｋ−５６２細胞の増殖特性における劇的効果を示す。このことは、ロリプラムまたはザルダバリン（ｚａｒｄａｖａｒｉｎｅ）のいずれにも影響を与えないこれらの化合物によって標的化された新規なクラスのＰＤＥ−４酵素を十分に示し得る。Ｋ−５６２細胞株において細胞周期の停止を誘導するような化合物１７９の能力は、標準のＰＤＥ４およびＰＤＥ４／３インヒビターロリプラムおよびザルダバリンは、誘導しないので、本発明の化合物が骨髄増殖性およびリンパ球増殖障害（例えばＣＭＬおよびＣＬＬ）、ならびに潜在的に他の悪性腫瘍の処置に使用され得ることを示唆する。
【０５２７】
（表１５）
Ｋ５６２慢性骨髄性白血病細胞における試験化合物の抗増殖活性
【０５２８】
【表１８】
0004979157.tif 000085
【０５２９】
（特定の動物モデルにおける、炎症性疾患および自己免疫の効力）
特定の疾患モデルにおける概念試験の証拠を、本発明のラクトンおよびラクタム化合物の酵素的活性、細胞活性、および一般的な抗炎症活性をさらに実証するために、動物において証明した。文献の試験により、ホスホジエステラーゼインヒビター、アデニリルシクラーゼアクチベーター、またはその両方の投与による細胞内ｃＡＭＰの増加が、炎症性疾患の様々な動物モデルにおいて、確立した疾患を減少させ得、および／または疾患の発生を予防し得ることが示された。本発明の化合物の効力を、クローン病、リウマチ性関節炎、および移植拒絶の動物モデルにおいて、実証した。クローン病に関しては、確立された前臨床モデルを使用した；ラットにおけるトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）誘導大腸炎。リウマチ性関節炎については、マウスにおけるコラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）を利用した。ヒトの移植拒絶を模倣するために、マウスの尾の皮膚の同種移植片移植モデルを使用した。
【０５３０】
（炎症性腸疾患（クローン病））
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）とは、現在は不治の、胃腸管の慢性的な変動する炎症性疾患についての包括的な用語であり、クローン病および潰瘍性大腸炎を含む。これらの障害の症状には、状態が進行するに従って、直腸出血を伴う腹痛（通常、腹の右下部における）および下痢、ならびに体重減少および熱が挙げられる。ＩＢＤの病因は未知であるが、疫学的試験は、疾患と、子宮内または生後間もなくのウイルス感染（特に、麻疹）との間の関連を示唆する。Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ（ＣＣＦＡ）は、合衆国の百万〜２百万人の人が、クローン病および関連するＩＢＤに罹患しており、欧州の血統の人の方がより危険な状態であると推定する。罹患率は、それ（クローン病）が最初に記載されて以来６０年間で、顕著に増加した。合衆国のみにおいて、これらの疾患の経済的費用は、年間１．８〜２．６億米ドルであると推定されている。
【０５３１】
ＩＢＤの通常の処置は、５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）（これは、開裂してＡＳＡ（活性薬物）となるＮＳＡＩＤ誘導体である）を、下部胃腸管に、経口的にまたは結腸内に投与する工程から構成される。ＩＢＤの他の主要な処置には、コルチコステロイドおよび免疫抑制剤（例えば、６−メルカプトプリンもしくはアザチオプリン）、またはこれらの組合せが挙げられる。最近、抗ＴＮＦ−α治療が、従来の治療に対して抵抗性のいくつかのクローン病の処置のために、認可された。この治療アプローチは、ＩＢＤにおける腫瘍壊死因子の重要性を確認する。抗ＴＮＦαアプローチを用いてさえ、現在の処置の使用法（ｍｏｄａｌｉｔｙ）には、副作用と効力との両方の観点から、改善する余地が大いにある。
【０５３２】
本発明の化合物を、ラットにおけるトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）誘導大腸炎モデル（Ｍｏｒｒｉｓら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９６：７９５〜８０３、１９８９；Ｋｉｍ，Ｈ．−Ｓ．およびＢｅｒｓｔａｄ，Ａ．、Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２７：５２９〜５３７、１９９２；Ｗａｒｄ，Ｌａｎｃｅｔ  ｉｉ：９０３〜９０５、１９９７；ならびにＳｈｏｒｔｅｒら、Ａｍ．Ｊ．Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．１７：１０２４〜１０３２、１９７２）で試験した。この特定のＩＢＤモデルの利点には、以下が挙げられる：（ａ）そのラットにおける疾患の発生が、ヒトの疾患の場合に考えられるような重要な役割を果たすＴｈ１  Ｔ細胞によって、免疫的に媒介されること、（ｂ）ＴＮＢＳの単一の点滴注入が、一貫した重篤度および存続の疾患を誘導すること、（ｃ）このモデルが安価であること、（ｄ）炎症の長い持続期間（８週間まで）、（ｅ）大腸炎が再活性化された、モデルの改変が、ヒトの疾患の再発性／軽減性特徴を模倣すること、（ｆ）病変が、組織病理学的に、ヒトのものと類似すること、（ｇ）臨床的病理学が、ヒトの疾患（壊死、潰瘍の形成、顆粒球浸潤、腸の水腫、下痢および癒着を含む）を模倣すること、ならびに（ｈ）ヒトＩＢＤの処置に使用される多くの薬物が、ＴＮＢＳモデルにおいて活性であること。
【０５３３】
化合物４３を、ＴＮＢＳモデルを使用して、結腸の損傷および炎症の重篤度を減衰させるその能力について評価した。比較のために、大腸炎を患う別個のラット群を、５−アミノサリチル酸（ヒトの炎症性腸疾患の処置に通常使用される薬物）、およびＮＣＸ−４５６（５−アミノサリチル酸の新規な誘導体であって、有意に増大した抗炎症活性を有することが最近示された（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１７：印刷中、１９９９））によって処置した。
【０５３４】
（方法）
大腸炎を、０．５ｍＬの５０％エタノール中のハプテンＴＮＢＳ（６０ｍｇ／ｍＬ）の結腸内点滴注入によって誘導した。体重１７５〜２２５ｇの８匹の雄性Ｗｉｓｔａｒラット群に、化合物４３（１０ｍｇ／ｋｇ）、５−アミノサリチル酸（１００ｍｇ／ｋｇ）、ＮＣＸ−４５６（１００ｍｇ／ｋｇ）、またはビヒクル（１％カルボキシメチルセルロース）を、大腸炎誘導の１時間前、大腸炎誘導の１時間後、およびその後の１週間にわたって１２時間の間隔で、結腸内に投与した。ラットのさらなる群には、ＴＮＢＳ／エタノールの代わりに生理食塩水を結腸内に投与し、そして上に概説したものと同時にビヒクルで処置した。体重を、この試験の開始時、２日目、および７日目に記録した。
【０５３５】
これらのラットを、大腸炎誘導の７日後に屠殺し、そして損傷および炎症の範囲を評価した。ラットを屠殺した後に、遠位結腸を取り出し、そしてワックスプラットフォームにピンで固定した。下痢の存在または非存在、ならびに結腸と他の器官との間の癒着の存在および重篤度、ならびに結腸傷害の重篤度および程度を記録した。ラットを屠殺した順序はランダムであり、そして障害をスコア付けする人物は、そのラットが受けた処置に気付かなかった。スコア付けの後に、ミエロペルオキシダーゼ活性を顆粒球浸潤の指標として測定するために、結腸組織のサンプルを切除した（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１７：印刷中、１９９９；およびＭｏｒｒｉｓら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９６：７９５〜８０３、１９８９を参照のこと）。この組織サンプルは、１ｃｍ長（結腸の軸に沿って）および５ｍｍ幅であり、そして巨視的に可視の損傷の領域（または損傷のない任意のラットについては、対応する領域）から取った。残りの組織を中性に緩衝化したホルマリンに固定し、そして引き続く光学顕微鏡検査のための慣用的な方法によって処理した。ブラインドの（ｂｌｉｎｄｅｄ）様式で、各ラット由来の結腸組織のサンプルを、粘膜の潰瘍化および炎症の証拠について試験した。管腔表面の、潰瘍化が存在する部分の割合を、算出した。
【０５３６】
（結果）
ビヒクル処置した群のラットの１匹を、分析から排除した。なぜなら、ＴＮＢＳの結腸への導入後速やかに、ＴＮＢＳが排泄された（すなわち、大腸炎が発生しなかった）ためである。ビヒクル処置したラットの１匹が第７日に死亡し、そしてＮＣＸ−４５６処置したラットの１匹が第６日に死亡した。各場合において、遠位結腸の穿孔が、検死の間に観察された。この試験の様々な終点を、表１６にまとめる。ビヒクル処置したラットにおいては、ＴＮＢＳの投与の結果、遠位結腸の潰瘍化、下痢、および結腸と他の内蔵組織との間の癒着が広範囲となった。腸壁の厚みは、健康なコントロールラットのものの２倍より大きかった。ビヒクル処置した群の全体の結腸炎スコアは、１２±１であった。結腸ミエロペルオキシダーゼ活性は、健康なコントロールラットのレベルの約１０倍に増加した。組織学的に、大きな好中球炎症は、粘膜潰瘍化の部位の周囲に明白であった。ビヒクル処置したラットにおいては、組織の１ｃｍのセグメントのほぼ全体が、筋層プロプリア（ｐｒｏｐｒｉａ）の深さまで広がる粘膜潰瘍を示した。ビヒクル処置したラットは、ＴＮＢＳ投与に続く１週間の期間にわたって、有意な体重の減少（約１２％）を示した（表１６）。
【０５３７】
【表１９】
0004979157.tif 000086
【０５３８】
１週間の過程にわたる５−ＡＳＡでの処置は、癒着の罹患率／重篤度、結腸損傷スコア、腸壁厚、ミエロペルオキシダーゼ活性または組織学的スコアに、有意には影響を与えなかった（表１６）。しかし、５−ＡＳＡは、ビヒクル処置群に対して、下痢の罹患率を有意に減少させた。５−ＡＳＡで処置されたラットは、１週間の試験の過程にわたって、ビヒクル処置群と同様の体重減少（約２０％）を示した（表１６）。
【０５３９】
５−ＡＳＡの酸化窒素放出誘導体である、ＮＣＸ−４５６での１週間の処置の結果、結腸損傷スコアが有意に（約５０％）減少し、そして組織学的スコアも同様に減少した（表１６）。後者の場合においては、このことは、光学顕微鏡試験による検査のために固定され、処理された、１ｃｍサンプルの潰瘍の範囲の減少を反映した。ＮＣＸ−４５６もまた、癒着の罹患率を、ビヒクル処置群に対して有意に減少させた。ＮＣＸ−４５６で処置したラットの平均体重は、ビヒクル処置群のものと有意には異ならなかった（表１６）。
【０５４０】
化合物４３は、癒着の罹患率（ビヒクルの３６％）、結腸損傷スコア（ビヒクルの４９％）、腸壁の厚み（ビヒクルの３０％）、および組織学的スコア（コントロールの５２％）を有意に減少させ、その結果、全体の結腸炎スコアを、ビヒクル処置動物と比較して全体で５１％減少させた（表１６）。化合物４３はまた、ビヒクル処置動物と比較して、下痢の罹患率を減少させたが、この効果は統計学的には有意ではなかった。化合物４３は、様々な試験化合物のうちで、ＴＮＢＳの投与により引き起こされる体重の減少を防止した唯一の化合物であった（表１６）。組織ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）活性の増加は、結腸における組織好中球炎症のマーカーであるが、化合物４３を含め、試験化合物のいずれによっても防止されなかった。
【０５４１】
（考察）
これらの試験は、ラットの結腸のＴＮＢＳモデルにおける、化合物４３の効果を実証する。化合物４３は、巨視的および組織学的の両方で評価して、結腸損傷を有意に減少させ、腸壁厚を減少させ、ＴＮＢＳ投与の後に通常は観察される体重の減少を防止し、そして結腸と他の内蔵器官との間の癒着の罹患率を減少させた。５−ＡＳＡは、ヒトの炎症性腸疾患の処置のために通常使用される薬物であるが、結腸傷害、癒着、体重変化および腸壁厚の減少には有効でないことがわかった。５−ＡＳＡは、このモデルを含む試行の約５０％においてのみ、有効である。他方で、ＮＣＸ−４５６は、５−ＡＳＡの酸化窒素放出誘導体であるが（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１７：印刷中、１９９９）、ＴＮＢＳモデルにおいて作用を示し、これは化合物４３の作用に匹敵した。しかし、ＮＣＸ−４５６は、結腸損傷および癒着の罹患率を有意に減少させたが、化合物４３と対照的に、ＴＮＢＳ投与に続く体重の変化には有意には影響を与えず、そして腸壁厚も有意に減少させなかった。本明細書中で報告される、化合物４３の効果は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルに匹敵することに注目することが、重要である。５−ＡＳＡおよびＮＣＸ−４５６を、１００ｍｇ／ｋｇで投与した。ＮＣＸ−４５６の治療効果は、その用量が５０ｍｇ／ｋｇに減少すると、失われることもまた示された。
【０５４２】
試験化合物のいずれも、結腸組織ミエロペルオキシダーゼ活性に有意には影響を与えなかった。ＭＰＯは、好中球のアズール好性顆粒において主として見られる酵素であり、これによって、好中球炎症の生物学的指標として役立つ。任意の試験化合物の、ＭＰＯ活性に対する効果の欠乏は、結腸損傷の重篤度／程度の有意な減少にかかわらず、組織のサンプリングの方法の結果であったかもしれない。ＭＰＯのための組織サンプルを、巨視的に可視の損傷の領域から取った。この組織学的評価は常に、これらの損傷領域が大きな好中球炎症に関連付けられることを明らかにした。従って、損傷部位の周囲の好中球の高い濃度は、試験薬物での処置によって損傷が減少した組織に存在した全好中球の流入のいかなる減少をも「マスク」したかもしれない。
【０５４３】
胃腸の炎症のＴＮＢＳラットモデルは、受け入れられたヒトＩＢＤ用の前臨床モデルである。疾患の臨床的および組織学的発現は、ヒトの疾患との良好な類似性を示し、そしてヒトにおけるＩＢＤの処置のために現在使用されている多くの薬物は、このモデルにおいて効力を有する。このモデルにおける化合物４３の効力は、本発明のこの化合物および他の化合物が、ヒトの炎症性疾患（とりわけクローン病および潰瘍性大腸炎が挙げられる）の治療において使用され得ることを示唆する。
【０５４４】
（リウマチ性関節炎）
（導入および原理）
マウスにおけるコラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）モデルは、ヒトのリウマチ性関節炎において活性の、可能な薬物の活性を推定するために適切なモデルである（Ｔｒｅｎｔｈａｍ，Ｄ．Ｅ．、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．２５：９１１〜９１６、１９８２；Ｂｒａｈｎ，Ｅ．、Ｃｌｉｎ．Ｏｒｔｈｏｐ．２６５：４２〜５３、１９９１；Ｈｏｌｍｄａｈｌ，Ｒ．ら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．２９：１０６、１９８６）。これは、ヒトの疾患の特質（ｈａｌｌｍａｒｋ）と確認された、多くの分子変化、細胞変化および組織学的変化を共有する；これらには、以下が挙げられる：（ａ）関節の滑膜を構成する細胞の、明白な増殖、（ｂ）侵襲性のパンヌス様組織の形成、（ｃ）マクロファージ浸潤、顆粒球浸潤、およびリンパ球浸潤、ならびに（ｄ）骨および軟骨の崩壊。リウマチ性関節炎と同様に、ＣＩＡを患う動物は、免疫グロブリン複合体（例えば、リウマチ因子（ＲＦ）および抗コラーゲン抗体）ならびに活膜における炎症性サイトカイン（例えば、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α））の、上昇した血清レベルを示す。さらに、滑膜におけるＭＨＣクラスＩＩ拘束Ｔヘルパー細胞活性化／クローナル拡大の包含が、実証されている。影響を受けた関節のＸ線写真は、ヒトＲＡにおいて見られる変化に類似のびらん性変化をしばしば示し、そして進行中の関節炎は、ＲＡ様の関節変形および機能不全をしばしばもたらす。さらに、ヒトの疾患の症状を減少させる多くの化合物（例えば、抗ＴＮＦ生物製剤、コルチコステロイドおよびＤＭＡＲＤＳ）は、この動物モデルで効力がある。ＣＩＡモデルにおける疾患の発生／進行は、免疫（初期）相および炎症性相の両方で起こり、従って、様々な薬理学的形態および作用を有する、広範な薬物を評価することが可能となる。
【０５４５】
化合物４３を、疾患の発生中の予防レジメンにおいて腹腔内投与（１０ｍｇ／ｋｇ、１日２回）した場合の、マウスＣＩＡモデルにおける関節炎の発生または重篤度に影響を与える能力について、評価した。この処置の、疾患重篤度に対する効果を、定性的な疾患スコア、足の水腫の定量的な決定、および影響を受けた関節の詳細な組織学的試験によって、評価した。デキサメタゾンは、強力なコルチコステロイドであるが、これをこの試験におけるポジティブコントロールとして使用した。
【０５４６】
（方法）
雄ＤＢＡ／１Ｊマウス（７〜８週齢）を、０．１ｍＬのコラーゲン−アジュバントエマルジョン（完全Ｆｒｅｕｎｄアジュバント中０．１ｍｇ雛鳥ＩＩ型コラーゲン）の尾の付根での皮下注射によって、免疫化した。次いで、マウスを以下の様式で、ランダムに処置群またはコントロール群に割り当てた：化合物４３（ｎ＝１０）；０．９％生理食塩水ビヒクル中４５％２−ヒドロキシプロピルβシクロデキストリンのコントロール（ｎ＝１０）；処置なし（ｎ＝５）およびデキサメタゾンポジティブコントロール（ｎ＝５）。三週間後、これらの動物に、不完全Ｆｒｅｕｎｄアジュバント中１．０ｍｇ／ｍＬで乳化させた雛鳥ＩＩ型コラーゲンの第二の注射を追加した。この第二の注射は、疾患の再現性ある誘導のために必要である。コントロール動物においては、関節炎の臨床的徴候が、足および足根間関節／中足関節の紅斑および水腫として発現し、これらは通常、第二の免疫化の後の１〜２週間以内で現れる。化合物を、関節炎の開始を遅延させる能力、または関節炎の発生を減少させる（予防的レジメン）能力について、評価した。ビヒクル、デキサメタゾンポジティブコントロール（０．０７５ｍｇ／ｋｇ）および化合物４３（１０ｍｇ／ｋｇ）を、第二のコラーゲン注射の前日から開始して、１日２回（１回の注射あたり５０μｌ）の腹腔内注射によって投与した。ビヒクルコントロール群の最後の動物が、疾患が確立してから７日目に達するまで、これらのマウスに用量を与え続けた。この特別の場合において、追加の注射の日を含めて２５日間の処置が必要とされた。
【０５４７】
臨床的な関節炎の発生（疾患の進行）を、第二のコラーゲン注射の後に毎日モニタした。全四肢が、処置群の区別に詳しくない（ブラインドの）、訓練された観察者によって臨床的に評価され、そして以下の基準に従って、疾患の重篤度（赤味および腫張）についての０〜４のスケールでスコア付けされた。
【０５４８】
【表２０】
0004979157.tif 000087
【０５４９】
炎症を、任意の足の任意の部分の任意の赤味または腫張（膨大）として、定義した。確立された疾患を、少なくとも２４時間持続する、２より大きな足の炎症の定性的スコアとして、定義した。さらに、全四肢の足の幅が、ブラインドの観察者によって、毎日、精密な一定張力のカリパスを使用して、測定された。
【０５５０】
この試験の終了時に、各動物を、過剰用量のハロタン麻酔によって安楽死させた。膝から遠位の関節および膝を含む関節の両方を解剖し、そして組織学により分析した。肢関節を１０％ホルマリン緩衝液中に固定し、そして１０％ギ酸中で４８時間脱灰し、次いでパラフィン包埋のために処理した。連続切片（５〜７μｍ厚）を、ヘマトキシリン（ｈａｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）およびエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。足根間関節および中足関節の組織病理学的変化は、公認の病理学者、およびランキングシステムに基づいて割り当てられたスコアによって、「ブラインド」と等級付けられた。
【０５５１】
（結果および考察）
不完全Ｆｒｅｕｎｄアジュバント（ＩＦＡ）中のコラーゲン追加注射の投与の約１４〜１６日後に、処置なし群とビヒクル処置群との両方のマウスが、臨床的関節炎の明白な徴候を示し始めた。関節炎の臨床的徴候には、足の腫張、赤味および外観的変形（ｄｉｓｆｉｇｕｒｅｍｅｎｔ）が挙げられる。一旦、徴候が明らかとなったら、臨床的疾患を、毎日を基礎として、定量的（精密なカリパスを使用して足の水腫を測定）および定性的（足の炎症の重篤度に基づいて割り当てた疾患スコア）に記録した。臨床的疾患が、処置なしのマウス群およびビヒクル処置したマウス群において進行したので（試験の最後の１０日間）、１０ｍｇ／ｋｇの化合物４３（腹腔内、１日２回）で処置されたマウスにおいては、足のスコアにより評価した疾患の進行速度が、有意に減少したことが明らかとなった（データは示さず）。
【０５５２】
マウスを、第二のコラーゲン注射の２５日後（これは、疾患の確立の約１０日目に対応する）に屠殺した。試験中の各動物由来の全四肢を除去し、固定し、そしてＡＣＶＰボード公認の獣医組織学者によるブラインドの組織病理学的試験のために、処理した。各脚についての関節組織学を、０〜４のスケールで分類した。ここで、０は正常であり、そして４は最も重篤に影響を受けたものである。外傷等級を、以下のスケールに従って、足に存在する最も重篤な外傷に基づいて割り当てた：
【０５５３】
【表２１】
0004979157.tif 000088
【０５５４】
次いで、個々の足のスコアを合計して、各動物についての総計を得た（ここで、１匹の動物について可能な最大スコアは１６である）。群の値を、個々の動物のスコアを平均することにより得た。
【０５５５】
表１７は、コラーゲン追加の２５日後における、ビヒクル処置、ｄｅｘ処置および処置なしのマウスと比較した、化合物４３処置動物についての、足水腫、臨床的関節炎スコアおよび関節の組織病理学的スコアに関する、群の平均値を示す。
【０５５６】
（表１７）
マウスのコラーゲン誘導関節炎モデルにおける疾患の、臨床的および組織病理学的パラメータに対する、化合物４３の効果
【０５５７】
【表２２】
0004979157.tif 000089
【０５５８】
表１７のデータは、この試験で利用したビヒクル（２−ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）が、臨床的または組織病理学的のいずれで評価しても、疾患の発生の過程に影響を与えないことを示す。これらのデータはまた、この試験の最終日（第２５日）に、疾患の重篤度（臨床的または組織病理学的のいずれで評価しても）が、ビヒクルの群と比較して、化合物４３で処置したマウスにおいて減少したことを示す。この表に見られるように、足の水腫、関節スコアおよび組織病理学的スコアが、ビヒクルの群と比較して、化合物４３で処置した群において、それぞれ４２％、３５％および２９％だけ減少したことを示す。この試験の最後の１０日間に得たデータの、２方向ＡＮＯＶＡ分析により、化合物４３で処置した動物の関節炎スコアが、ビヒクル処置動物の関節炎スコアより有意に低いことが明らかとなった（データは示さず）。
【０５５９】
水腫スコアおよび関節炎スコアの時間経過の試験から、化合物４３の効果は、疾患が進行するにつれて、より十分に明らかとなることが、明白である。このことは、この試験をさらに１週間続けた場合に、この投薬レベルでの化合物の効果が、全ての疾患カテゴリーにおいて統計学的に有意であることを、強く示唆する。さらに、これらの結果は、化合物４３および本発明の他の化合物が、予防的によりはむしろ存在する疾患の処置において、より有効であり得る（治療レジメン）ことを立証する。本明細書で報告する、ＣＩＡの回復における化合物４３の適度な効果は、利用した投薬量が効力の一端であること、およびより高い用量によって、より大きな阻害が得られることを示し得る。バイオアベイラビリティおよび代謝パラメータが、見られる結果において重要な役割を果たしていることもまた、あり得ることである。
【０５６０】
本明細書中で報告する、マウスにおけるコラーゲン誘導関節炎の進行の、化合物４３による減少は、化合物４３が、リウマチ性関節炎および他の関連する炎症性疾患の処置において使用され得ることを、実証する。これらの結果（特に、組織病理学的スコア）はまた、これらの化合物が、関節の骨および軟骨の区画における乱れを含む疾患（変形性関節症および骨減少を含む）の処置において、使用され得ることを示す。このモデルにおける化合物４３の活性は、本明細書において報告するインビトロデータ（この化合物および本発明の他の化合物の、好中球活性化、単球／マクロファージ活性化およびＴ細胞Ｔｈ１応答に対する阻害的効果を示す）を支持する。
【０５６１】
（移植拒絶）
インビトロ試験：  ＣＤ４  Ｔ細胞の活性化、分化、および機能：
（方法）
ＡＮＤ−ＴＣＲトランスジェニックマウス（Ｋａｙｅ  Ｊ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：７４６〜７４９、１９８９）を使用して、刺激されていない（ｎａｉｖｅ）抗原特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞の供給源を提供した。ＡＮＤ−Ｔ細胞抗原レセプターは、Ｉ−ＥkクラスＩＩ  ＭＨＣ分子に関連して、ハトシトクロムＣ（ｐｃｃ）から誘導されるペプチドを認識する。
【０５６２】
刺激されていないＣＤ４  Ｔ細胞の活性化および増殖における、試験化合物の役割を試験するために、１×１０5のＡＮＤ−リンパ節Ｔ細胞を、１×１０6の照射Ｂ１０．ＢＲ脾臓細胞と共に、様々な濃度のｐｃｃペプチド（０〜１０μＭ）の存在下で、９６ウェルプレートで培養した。増殖を、3Ｈチミジン取り込みによって、評価した。全てのアッセイ条件で、３回行った。Ｔ細胞の細胞表面活性化の表現型を、フローサイトメトリ分析によって評価した。
【０５６３】
刺激されていないＣＤ４  Ｔ細胞の、Ｔｈ１およびＴｈ２細胞系列への分化を、以下のように実施した：１×１０5のＡＮＤ−リンパ節Ｔ細胞を、１０7のＢ１０．ＢＲ照射脾臓細胞と共に、以下で補充された２ｍｌの培養培地中で培養した：Ｔｈ１細胞分化については、１００Ｕ／ｍＬのＩＦＮγ、２５Ｕ／ｍＬのＩＬ２および１０μｇ／ｍＬの抗ＩＬ４；Ｔｈ２細胞分化については、１５０Ｕ／ｍＬのＩＬ４、２５Ｕ／ｍＬのＩＬ２および１０μｇ／ｍＬの抗ＩＦＮγ。３〜４日後に、これらのウェルを、同一の増分で１：４に分割した。７日後に、細胞を収穫し、そして３回洗浄して、補充物中のサイトカインを除去した。１×１０5の培養細胞を、サイトカインを全く添加されていない２５０μｌの培養培地中の５×１０5の照射Ｂ１０ＢＲ脾臓細胞＋５μＭのｐｃｃペプチドで、再刺激した。４０時間後に上澄みを収穫し、そしてＩＬ２、ＩＬ４およびＩＮＦγについて、ＥＬＩＳＡによって評価した。試験化合物を、この培養の分化の間中、添加した。
【０５６４】
試験化合物の非存在下で生成した、培養Ｔｈ１細胞およびＴｈ２細胞を、化合物の存在化での抗原刺激の間に、上述のように、増殖およびサイトカイン活性について、試験した。
【０５６５】
インビトロ試験：  ＣＤ８  Ｔ細胞の活性化、分化および機能
（方法）
２Ｃ−ＴＣＲトランスジェニックマウス（Ｓｈａ  Ｗ．Ｃ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３５：２７１〜２７４、１９８８）を使用して、刺激されていない抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の供給源を提供した。２Ｃ−Ｔ細胞抗原レセプターは、ＤｂクラスＩ  ＭＨＣ分子に関連して、ミトコンドリアαケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ酵素から誘導される２Ｃペプチドを、認識する。
【０５６６】
刺激されていないＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化および分化における、試験化合物の効力を試験するために、２Ｃリンパ節（ＬＮ）Ｔ細胞の単一細胞懸濁物を、２Ｃ−ＴＣＲトランスジェニックマウスから単離した。２Ｃ−Ｔ細胞を、様々な濃度（０〜１０ｕＭ）の２Ｃペプチドの存在下で、照射ＴＡＰ−／−Ｈ−２d脾臓細胞またはＬdトランスフェクトＴＡＰ−／−Ｔ２細胞株で刺激した。分化を、
3Ｈチミジン取り込みによって評価した。Ｔ細胞の細胞表面活性の表現型を、フローサイトメトリ分析によって実施した。
【０５６７】
細胞傷害性Ｔ細胞を、２Ｃ−Ｔ細胞の照射Ｈ−２d脾臓細胞による活性化によって、生成した。細胞を、２５Ｕ／ｍＬのＩＬ２の存在下で、７〜１０日間培養した。培養細胞の細胞傷害性キラー活性を、Ｃｒ51放出アッセイによって、Ｔ２−Ｌd標的細胞を使用して、様々な濃度の２Ｃペプチドの存在下で、試験した。刺激されていないＣＤ８  Ｔ細胞の、細胞傷害性キラー細胞への分化に対する、試験化合物の効果を、一次活性化および培養期間の間に試験化合物を添加することによって、評価した。これらの試験化合物の、細胞傷害性ＣＤ８  Ｔ細胞活性化およびエフェクター機能における効果を、Ｃｒ51放出アッセイおよび3Ｈチミジン取り込みアッセイを使用して、記載した濃度の化合物の存在下で、測定した。
【０５６８】
（結果および考察）
１方向および２方向の混合リンパ球反応（ＭＬＲ）の両方における、化合物４３および１３６の試験は、両方の化合物について効力を実証した（約５０％以上の、２０μＭにおける増殖の阻害）。最良の効果の全体は、化合物１３６において、いずれの実験レジメンを使用しても、約７０％阻害で示された。
【０５６９】
ＣＤ８＋Ｔ細胞の分化の阻害もまた、これらの化合物によって実証され、再度、１３６から生ずる効果がより強かった（５μＭにおいて約４０％阻害）。両方の化合物が、同じＣＤ８＋Ｔ細胞の細胞傷害性キラー細胞機能における阻害と、同効力（ｅｑｕｉｐｏｔｅｎｔ）（すなわち、５μＭにおいて約５０％阻害）であった。
【０５７０】
刺激されていないＤＣ４＋Ｔ細胞の分化が、化合物４３および１３６の両方によって強く阻害された（５μＭにおいて７０％を超える阻害）ことに対して、Ｔｈ１またはあＴｈ２表現型に既に分化したＣＤ４＋Ｔ細胞は、これらの化合物の存在下で、より弱い阻害を実証した。しかし、両方の化合物が、Ｔｈ２細胞（０〜８％）より強力なＴｈ１細胞（約３０％）の阻害を実証した。このことはまた、Ｔｈ１サイトカイン（ＩＦＮγ）対Ｔｈ２サイトカイン（ＩＬ−４）の阻害の範囲に、いくらか反映された。このことは、Ｔｈ２サイトカインによるこれらの調節に起因して、長期間にわたって、インビボにおけるＴｈ１サイトカイン／表現型の下方変異／抑制をもたらす傾向がある。従って、この結果は、本発明の化合物（例えば、１３６および化合物４３）を一次ヒトＣＤ４＋細胞の活性化の測定に使用する場合の、Ｔｈ１サイトカイン表現型の、Ｔｈ２サイトカイン表現型に対する優先的な抑制に関する本発明者らの発見を、さらに実証する。
【０５７１】
上述のエキソビボ試験の結果は、以下のことを示す：（ａ）化合物１３６および化合物４３は、ＣＤ８＋Ｔ細胞より優先的にＣＤ４＋Ｔ細胞を阻害する；（ｂ）ＣＤ４＋細胞において、刺激されていないＴ細胞は強力に阻害された（８０％以上）が、方向付けられた（ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ）Ｔ細胞（Ｔｈ１／Ｔｈ２）は、強力には影響を受けなかった；（ｃ）しかし、化合物のいくつか（特に、化合物１３６）は、Ｔ細胞のＴｈ２に方向付けられた母集団より、Ｔｈ１に方向付けられた母集団の優先的な阻害を示した；（ｄ）また、ＣＤ８＋Ｔ細胞の阻害が強力である一方で、それらの機能的な「キラー」活性の阻害が、二重ＰＤＥ４／３活性を有する化合物について観察された；ならびに（ｅ）コントロールのホスホジエステラーゼＩＶインヒビターである、ロリプラムは、区別される活性がほとんどから全くなしに、全てのＴ細胞母集団に対して均一に阻害性であった。
【０５７２】
インビボ試験：  マウスの尾の皮膚の同種移植片移植モデル
３つの化合物、すなわち、化合物５４、４１および１３６を、インビボの移植モデルにおいて評価した。
【０５７３】
（方法）
ドナーＨ−２b  Ｃ５７ＢＬ／６マウスの尾の皮膚を、受容者の雌Ｈ−２d  ＢＡＬＢ／ｃマウスに移植した（Ｌａｇｏｄｚｉｎｓｋｉ，Ｚ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７１：１４８〜１５０（１９９０））。５匹のマウスが、１群に含まれた。試験化合物で処置される、４つの試験群、ならびに３つのコントロール群（これには、処置なしの群、ビヒクルのみで処置される群、およびシクロスポリンＡ（ＣｓＡ；Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｃ３６６２）で処置される群が含まれる）から構成される、７つのマウスの群が、試験に含まれた。試験化合物およびＣｓＡを、１日２回、腹腔内に、１０ｍｇ／ｋｇの用量で、移植の前日から始めて、移植の日を含めて移植の１５日後まで、投与した。移植後１５日間にわたって毎日、マウスをモニタし、そして移植拒絶についてスコア付けした。
【０５７４】
（結果および考察）
皮膚の同種移植片拒絶は、主としてＴリンパ球によって媒介され、これは大部分の状況において、抗体の主要な役割についてはほとんど証拠がない。皮膚の同種移植片拒絶は、ヘルパーおよび細胞傷害性エフェクターＴ細胞集団の活性化を必要とする。移植片拒絶を、同種移植片壊死のモニタによって評価した。尾の皮膚はマウスの周囲の体幹皮膚から目視により区別されるので、拒絶の過程は容易にモニタされ得る。完全にインタクトな移植片を、１００％とスコア付けした。完全な移植片拒絶を、９０％を超える移植片壊死として定義した。急激な移植片拒絶は一般に、その移植片の腫張および紅斑に始まる、目視により観察可能な一連の事象を経て進行する。これらの事象に続いて、大部分または全ての移植片にわたる、移植片の乾燥およびかさぶたの形成が起こり、このことは、生存可能な移植片組織の損失を示す。かさぶたの形成に続いて、収縮および瘢痕形成が起こる。
【０５７５】
試験した本発明の化合物は全て、コントロール（キャリアのみ；βシクロデキストリン；Ｓｉｇｍａ；Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  Ｎｏ．Ｃ４７６７）群と比較して、移植片生存の有意な増大を実証した（表１８）。
【０５７６】
（表１８）
マウスの尾の皮膚の同種移植片移植モデルにおける、移植片拒絶に対する化合物の効果
【０５７７】
【表２３】
0004979157.tif 000090
【０５７８】
コントロール群は、平均して８．５日間の皮膚同種移植片の生存を示し、一方で化合物５４および４１で処置した群は、平均して１１〜１２日の生存を示した。化合物１３６は、移植片の生存を、平均して１５．４日延長させ、そしてその間に、ポジティブコントロールであるシクロスポリンＡの容量（１３．５日）を越えた。さらに、生存移植片の全体的な品質（個々の移植片の％拒絶）は、シクロスポリンＡを使用して得たものより良好でなければ、それと類似していた。
【０５７９】
シクロスポリンＡとの比較によって、本発明の化合物はまた、シクロスポリンＡが使用される全ての適応症における使用のために、耐え得る。これらの化合物の区別的な活性ならびに阻害されるサイトカインにおけるそれらの選択性は、免疫抑制性ではなく、免疫調節性である結果となる機構を立証する。これらの化合物がこのモデルにおいて同種移植片拒絶を抑制する能力は、これらの化合物が以下のような疾患において治療的に有用であり得ることを示唆する：多発性硬化症、炎症性腸疾患、リウマチ性関節炎、乾癬、器官移植および全ての自己免疫障害。例えば、乾癬の処置のための多くの薬物は、器官移植に使用されるか、またはこの設定における効力が実証されている。従って、器官移植における免疫調節性または免疫抑制性の薬物の効力は、乾癬における効力が予測可能であり、この一連の化合物の、乾癬の治療剤としての良い前兆である。
【０５８０】
本明細書中に記載した全ての刊行物、特許および特許出願を、各個々の刊行物、特許、または特許出願が具体的かつ個々に参考として援用されたと同程度まで、本明細書中に参考として援用する。
【０５８１】
上述のことから、本発明の特定の実施態様が本明細書中に例示の目的で記載されたが、様々な改変が、本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされ得ることが、明らかである。従って、本発明は、本明細書中に提供した特定の実施例によっては、限定されない。