(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉａ：
【化１】
0004851020.tif 000028
〔式中、
Ｒ1は、場合によりＣ１−６−アルキル、Ｃ２−６−アルケニル、Ｃ３−６−シクロアルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ１−６−アルコキシカルボニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉで置換されているＣ１−２０−アルキル基であり、
Ｒ2は、Ｃ１−１２−アルキル基であり、かつ
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、Ｈ又はＣ１−６−アルカノイル基であり、ただし、Ｒ3及びＲ4の両方は、Ｈではない〕
の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体及び医薬的に許容し得るそれらの付加塩の製造方法であって、
工程ａ）において、
式II：
【化２】
0004851020.tif 000029
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様であり、かつ
Ｒ5は、Ｈ又はＣ１−３−アルキルである〕
のイソフタル酸誘導体を水素化して式III：
【化３】
0004851020.tif 000030
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを形成させ、
工程ｂ）において、
式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを、Ｒ5がＨである場合には、選択的に酵素的加水分解して式IVａもしくはIVｂの（Ｓ）−もしくは（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を形成させるか、又はＲ5がＣ１−３−アルキルである場合には、まず脱アルキル化し、次いで選択的に加水分解するか、もしくはまず選択的に加水分解し、次いで脱アルキル化するかのいずれかで、式IVａもしくは式IVｂ：
【化４】
0004851020.tif 000031
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕
の（Ｓ）−又は（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を形成させ、
工程ｃ）において、
式（IVａ）のシクロヘキサン一酸を、式Ｖａ：
【化５】
0004851020.tif 000032
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕
のオキサゾリジノンへとさらに変換し、
工程ｄ）において、
式（Ｖａ）のオキサゾリジノンを、式VIａ：
【化６】
0004851020.tif 000033
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様であり、Ｒ6は、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、tert−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、アリルオキシカルボニル（ＡｌｌＯＣ）及び９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）から選択されるアミノ保護基である〕
のシクロヘキセノールへと転換し、
工程ｅ）において、
式（VIａ）のシクロヘキセノールを、式VIIａ：
【化７】
0004851020.tif 000034
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記と同様である〕
のアジドへとさらに変換し、
工程ｆ）において、
式（VIIａ）のアジドを還元し、アシル化して、式VIIIａ：
【化８】
0004851020.tif 000035
〔式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4及びＲ6は、前記と同様である〕
の各アシル化アミンを形成させ、
工程ｇ）において、
アミノ保護基Ｒ6を除去することによって、式（VIIIａ）のアシル化アミンを式（Ｉａ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体へと最終的に移行させ、かつ必要であればそれぞれの医薬的に許容し得る塩を形成させることを特徴とする方法。
【請求項２】
工程ａ）における水素化が、水素化触媒の存在下で、２０℃〜１５０℃の温度で、１バール〜２００バールの水素圧で行われる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
水素化触媒が、不活性支持体上に１〜１０％の量で適用されたロジウム又はルテニウムである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
式（IVａ）の（Ｓ）−シクロヘキサン一酸を得るために、工程ｂ）における選択的加水分解を、ＥＣクラス３．１．１．１のエステラーゼによって、Ｒ5がＨである式IIIの全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを用いて行う、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
エステラーゼが、ブタ肝臓エステラーゼである、請求項４記載の方法。
【請求項６】
式（IVｂ）の（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を得るために、工程（ｂ）における選択的加水分解を、ＥＣクラス３．１．１．３のリパーゼによって、Ｒ5がＨ又は低級アルキルである式IIIの全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを用いて行う、請求項１〜３いずれか１項記載の方法。
【請求項７】
アスペルギルスオリゼ、サーモミセスラヌギノサ又はムコールミエヘイから選択されるリパーゼを使用する、請求項６記載の方法。
【請求項８】
工程ｃ）において、クルチウス分解、ヤマダクルチウス分解又はホフマン分解の原理に従い、シクロヘキサン一酸をオキサゾリジノンへと転換する、請求項１〜７いずれか１項記載の方法。
【請求項９】
工程ｄ）が、アミノ保護基Ｒ6のオキサゾリジノンへの導入及びその後の塩基によって誘導されるシクロヘキセノール（VI）への転換を含む、請求項１〜８いずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
シクロヘキセノール（VI）への転換のための塩基が、アルカリ水素化物、アルカリアルコラート、ジアザビシクロウンデセン又はテトラアルキルグアニジンから選択される、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
工程ｅ）におけるアジドの形成が、最初に水酸基の離脱基への転換、そして次にアジドの形成を含む、請求項１〜１０いずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
最初に水酸基がスルホン酸エステルに転換され、次にスルホン酸エステルがアルカリアジドで処理される、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
工程ｆ）におけるアジドの還元が、金属により触媒される水素化によってか、又は水の存在下でホスフィンを用いて行われることを特徴とする、請求項１〜１２いずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
工程ｆ）におけるアシル化が、アセチル化であることを特徴とする、請求項１〜１３いずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
式III：
【化１３】
0004851020.tif 000036
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、請求項１と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラート誘導体の製造方法であって、
式II：
【化１４】
0004851020.tif 000037
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、請求項１と同様である〕
のイソフタル酸誘導体を水素化することを特徴とする、製造方法。
【請求項１６】
式IVａ又はIVｂ：
【化１５】
0004851020.tif 000038
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、請求項１と同様である〕
の（Ｓ）−又は（Ｒ）−シクロヘキサン一酸の製造方法であって、式III：
【化１６】
0004851020.tif 000039
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、請求項１と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを、Ｒ5がＨである場合には、選択的に加水分解し、又はＲ5が低級アルキルである場合には、まず脱アルキル化し、次いで選択的に加水分解するか、もしくはまず選択的に加水分解し、次いで脱アルキル化するのいずれかであることを特徴とする、製造方法。
【請求項１７】
式II：
【化１７】
0004851020.tif 000040
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、請求項１と同様である、ただし、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は同時にメチルではない〕
の化合物。
【請求項１８】
式III：
【化１８】
0004851020.tif 000041
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、請求項１と同様である〕
の化合物。
【請求項１９】
式IVａ又はIVｂ：
【化１９】
0004851020.tif 000042
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、請求項１と同様である〕
の化合物。
【請求項２０】
式Ｖａ又はＶｂ：
【化２０】
0004851020.tif 000043
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、請求項１と同様である〕
の化合物。
【請求項２１】
式VIａ又はVIｂ：
【化２１】
0004851020.tif 000044
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、請求項１と同様である〕
の化合物。
【請求項２２】
式VIIａ又はVIIｂ：
【化２２】
0004851020.tif 000045
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、請求項１と同様である〕
の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、イソフタル酸誘導体を出発原料とした４，５−ジアミノシキミ酸誘導体の調製、特に（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル、及びその医薬的に許容し得る付加塩の多工程製造方法、それらの個々の工程、並びに新規な特定の中間体に関する。
【０００２】
４，５−ジアミノシキミ酸誘導体、特に（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル、及びその医薬的に許容し得る付加塩は、ウイルスノイラミニダーゼの強力な阻害剤である（J.C.Rohloff et al.,J.Org.Chem.,1998,63,4545-4550；国際特許公開第９８／０７６８５号）。
【０００３】
（−）−キニン酸又は（−）−シキミ酸からの（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステルの多工程合成は、（J.C.Rofloff et al.（前記））に記載されている。
【０００４】
（−）−キニン酸及び（−）−シキミ酸は、いずれも、かなり高価で技術的な量の入手困難な出発化合物である。従って、技術的な規模で実行可能な多工程合成は、好ましくは、それよりも価格的に魅力的で、技術的な量で入手可能な出発化合物に基づいているべきである。
【０００５】
従って、本発明の目的は、良好な収率及び優れた品質の、前記の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体のそのような新規な入手法を提供することである。
【０００６】
驚くべきことに、請求項１記載の合成法によって、この目的が達成され得ることが見出された。
【０００７】
従って、本発明は、下記式
【０００８】
【化２３】
0004851020.tif 000002
【０００９】
〔式中、
Ｒ1は、場合により置換されているアルキル基であり、
Ｒ2は、アルキル基であり、かつ
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立のＨ又はアミノ基の置換基であり、ただし、Ｒ3及びＲ4の両方は、Ｈではない〕
の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体及び医薬的に許容し得るそれらの付加塩の製造方法であって、
工程ａ）において、
式II：
【００１０】
【化２４】
0004851020.tif 000003
【００１１】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様であり、かつＲ5は、Ｈ又は低級アルキルである〕
のイソフタル酸誘導体を水素化して、式III：
【００１２】
【化２５】
0004851020.tif 000004
【００１３】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを形成させ、
工程ｂ）において、
式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを、Ｒ5がＨである場合には、選択的に加水分解して式IVａもしくはIVｂの（Ｓ）−もしくは（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を形成させるか、又はＲ5が低級アルキルである場合には、まず脱アルキル化し、次いで選択的に加水分解するか、もしくはまず選択的に加水分解し、次いで脱アルキル化するかのいずれかで、式IVａもしくは式IVｂ：
【００１４】
【化２６】
0004851020.tif 000005
【００１５】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕
の（Ｓ）−又は（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を形成させ、
工程ｃ）において、
式（IVａ）のシクロヘキサン一酸を、式Ｖａ：
【００１６】
【化２７】
0004851020.tif 000006
【００１７】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕
のオキサゾリジノンへとさらに変換し、
工程ｄ）において、
式（Ｖａ）のオキサゾリジノンを、式VIａ：
【００１８】
【化２８】
0004851020.tif 000007
【００１９】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様であり、Ｒ6は、アミノ保護基である〕
のシクロヘキセノールへと転換し、
工程ｅ）において、
式（VIａ）のシクロヘキセノールを、式VIIａ：
【００２０】
【化２９】
0004851020.tif 000008
【００２１】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記と同様である〕
のアジドへとさらに変換し、
工程ｆ）において、
式（VIIａ）のアジドを還元し、アシル化して、式VIIIａ：
【００２２】
【化３０】
0004851020.tif 000009
【００２３】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4及びＲ6は、前記と同様である〕
のアシル化アミンを形成させ、
工程ｇ）において、
アミノ保護基Ｒ6を除去することによって、式（VIIIａ）のアシル化アミンを式（Ｉａ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体へと最終的に移行させ、かつ必要であればそれぞれの医薬的に許容し得る塩を形成させることを特徴とする方法に関する。
【００２４】
Ｒ1におけるアルキルという用語は、１〜２０個のＣ原子、好都合には１〜１２個のＣ原子を有する直鎖状又は分岐状のアルキル基の意味を有する。そのようなアルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、tert−ブチル、ペンチル及びその異性体、ヘキシル及びその異性体、ヘプチル及びその異性体、オクチル及びその異性体、ノニル及びその異性体、デシル及びその異性体、ウンデシル及びその異性体、並びにドデシル及びその異性体である。
【００２５】
このアルキル基は、例えば国際特許公開第９８／０７６８５号において定義されたような一つ又は複数の置換基で置換され得る。適当な置換基は、（上記において定義されたような）１〜６個のＣ原子を有するアルキル、２〜６個のＣ原子を有するアルケニル、３〜６個のＣ原子を有するシクロアルキル、ヒドロキシ、１〜６個のＣ原子を有するアルコキシ、１〜６個のＣ原子を有するアルコキシカルボニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＪである。Ｒ1の好ましい意味は、１−エチルプロピルである。
【００２６】
Ｒ2は、上記において例示されたような１〜１２個のＣ原子、好都合には１〜６個のＣ原子を有する直鎖状又は分岐状のアルキル基である。
【００２７】
Ｒ2の好ましい意味は、エチルである。
【００２８】
Ｒ5は、１〜３個のＣ原子を有するｎ−アルキル基、好ましくはメチルである。
【００２９】
Ｒ3及びＲ4は、便利に使用され、当分野において既知であり、例えば国際特許公開第９８／０７６８５号に記載されたようなアミノ基の置換基である。
【００３０】
Ｒ3及びＲ4は、好ましくはアルカノイル基を表し、より好ましくはヘキサノイル、ペンタノイル、ブタノイル（ブチリル）、プロパノイル（プロピオニル）、エタノイル（アセチル）及びメタノイル（ホルミル）のような１〜６個のＣ原子を有する低級アルカノイル基を表す。好ましいアルカノイル基、従ってＲ3の好ましい意味は、アセチルであり、Ｒ4の好ましい意味は、Ｈである。
【００３１】
Ｒ6は、通常使用されており、当分野において既知であり、例えば"Protective Groups in Organic Chemistry",Theodora W.Greene et al.,John Wiley & Sons Inc.,New York,1991,315-385に記載されているような一般的なアミノ保護基である。
【００３２】
Ｒ6は、好適には、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、tert−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、アリルオキシカルボニル（ＡｌｌＯＣ）又は９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）であり、好ましくはtert−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）である。
【００３３】
好ましい式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体は、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル及び（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステルホスファート（１：１）である。
【００３４】
工程ｃ）以降の過程を、式（IVｂ）のシクロヘキサン一酸を用いて実行する場合、本発明の方法は、式Ｉｂ：
【００３５】
【化３１】
0004851020.tif 000010
【００３６】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、前記と同様である〕
を有する４，５−ジアミノシキミ酸誘導体、及び対応する中間体の全ての（＋）−鏡像異性体の生成を可能にする。
【００３７】
工程ａ）
工程ａ）は、式（II）のイソフタル酸誘導体の式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートへの水素化を含む。
【００３８】
水素化は、不活性支持体上に適用され得る一般的な水素化触媒の存在下で水素を用いて行われる。好適な水素化触媒は、酸化アルミニウム又は木炭のような不活性支持体上に１〜１０％の量で適用されたロジウム又はルテニウムである。
【００３９】
水素化は、２０℃〜１５０℃の温度で、１バール（１０5Ｐａ）〜２００バールの水素圧で、酢酸エチル、エタノール、テトラヒドロフラン又はtert−ブチルメチルエーテルのような不活性溶媒中で実施され得る。
【００４０】
得られた式（III）のシクロヘキサンジカルボキシラートは、全シス−のメソ形を示し、従って、光学的に不活性である。
【００４１】
工程ｂ）
工程ｂ）は、式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートの式（IVａ）又は（IVｂ）の（Ｓ）−又は（Ｒ）−シクロヘキサン一酸への選択的酵素的加水分解及び必要であれば脱アルキル化を含む。
【００４２】
Ｒ5がＨである式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを出発原料とする場合には、選択的な酵素的加水分解を直接行うことができるが、Ｒ5が低級アルキルである式（III）の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを出発原料とする場合には、脱アルキル化を選択的加水分解の前又は後のいずれかに行うことができる。
【００４３】
脱アルキル化は、トリアルキルハロゲンシランの存在下でアルカリヨウ化物を用いて行われうる。脱アルキル化は、好ましくは脱メチル化であり、好ましくはトリメチルクロロシランと共にヨウ化ナトリウムが使用される。この脱アルキル化は、概して、２０℃〜８０℃の温度で、アセトニトリルのような不活性溶媒中で行われる。
【００４４】
選択的加水分解は、（III）のシクロヘキサンジカルボキシラートの酵素的加水分解を含み、それによって、酵素の選択が、式IVａ：
【００４５】
【化３２】
0004851020.tif 000011
【００４６】
の（Ｓ）−一酸、又は式IVｂ：
【００４７】
【化３３】
0004851020.tif 000012
【００４８】
の（Ｒ）−一酸異性体のいずれが得られうるかを決定する。
【００４９】
所望の立体構造を有する式（Ｉａ）の４，５−ジアミノシキミ酸を得るためには、その後の反応工程を式（IVａ）の（Ｓ）−一酸を用いて行う必要がある。
【００５０】
Ｒ5がＨである式IIIの全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを出発原料とし、式（IVａ）の（Ｓ）−異性体を得るための好適な酵素は、ＥＣクラス３．１．１．１．のエステラーゼであり、好ましくは哺乳動物エステラーゼ（例えば、ブタ、ウシ又はウマ由来）である。最も好ましいエステラーゼは、ブタ肝臓エステラーゼ（以後、ＰＬＥと呼ぶ）である。ＰＬＥの市販調製物は、ロシュダイアグノスティクス（Roche Diagnostics）、フルカ（Fluka）、シグマ（Sigma）、アマノ（Amano）又はアルタス（Altus）より購入することができる。比較的精製度の低いＰＬＥ調製物（例えば、ロシュダイアグノスティクスの「ＰＬＥテクニカルグレード」）又は（例えば、フルカの「ブタ肝臓アセトン粉末」のような）わずかにしか精製されていない調製物が、（例えば、ロシュダイアグノスティクスのキラザイム（Chyrazyme）Ｅ−１又はキラザイムＥ−２のような）濃縮又は分離されたアイソザイム画分を有するＰＬＥ調製物と同様に使用され得る。
【００５１】
一般的な代替物として、酵素を固定化された形態で使用してもよい。
【００５２】
基質は５〜１５％濃度（ｗ／ｗ）、好ましくは約１０％の水性溶液中の懸濁液として適用される。適当な反応温度は、室温〜３５℃までであり、好適な反応ｐＨは、６．５〜８．５である。
【００５３】
水性層に関して、例えば５〜５０mMの濃度のリン酸緩衝液又はトリス緩衝液のような、生化学的変換のために使用されることが既知の一般的な緩衝溶液が使用される。そのような緩衝溶液は、例えば５０〜３００mMの濃度のＮａＣｌ又はＫＣｌのような塩をさらに含有していてもよい。好ましい緩衝系は、例えば、０．１ＭのＫＣｌ及び１０mMのトリス塩酸（ｐＨ８．０）を含有していてもよい。
【００５４】
酵素の添加の後、ＮａＯＨ又はＫＯＨのような塩基の調節された添加によって、攪拌下に、反応混合物のｐＨを選択された値に維持し、それによって形成された一酸が溶液に取り込まれ、反応混合物が幾分透明になる。
【００５５】
反応の終了後、通常の反応混合物の酸性化及び一般的な有機溶媒による抽出によって、生成物が得られる。
【００５６】
Ｒ5がＨであるか又は低級アルキル、好ましくはメチルである式IIIの全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを出発原料とする場合に、式（IVｂ）の（Ｒ）−異性体を得るための好適な酵素は、ＥＣクラス３．１．１．３．のリパーゼである。このクラスの好適な代表は、アスペルギルスオリゼ（Aspergillus oryzae）（フルカより商業的に入手可能）、サーモミセスラヌギノサ（Thermomyces lanuginosa）（以前は、フミコララヌギノサ（Humicola lanuginosa）と呼ばれた；例えばノボノルディスク（Novo Nordisk））又はムコール・ミエヘイ（Mucor miehei）（例えばノボノルディスク）由来のリパーゼである。この場合にも、比較的精製度の低い粗酵素調製物を使用してもよい。
【００５７】
この場合にも、一般的な代替法として、酵素を固定化された形態で使用してもよい。
【００５８】
反応は、水性系又は水性−有機二相系において行われる。好ましいのは、共溶媒として非水溶性の非極性溶媒を有する二相系である。好適な共溶媒は、アルカン又はシクロアルカンであり、好ましいのはシクロヘキサンである。
【００５９】
基質は、５〜１０％（ｗ／ｗ）の全体濃度で単相系又は二相系に（懸濁液として）適用される。好適な反応温度は室温〜３５℃までであり、好適な反応ｐＨは６．５〜８．５である。
【００６０】
水性層に関して、例えば５〜５０mMの濃度のリン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液又はトリス緩衝液のような、生化学的変換のため使用されることが既知の一般的な緩衝溶液が使用される。そのような緩衝溶液は、例えば５０〜３００mMの濃度のＮａＣｌ、ＫＣｌのような塩、又は糖（例えば、グルコース）のような多価アルコールをさらに含有していてもよい。好ましい緩衝系は、例えば、０．１Ｍのグルコース及び５mMのリン酸ナトリウム（ｐＨ７．０）を含有していてもよい。
【００６１】
有機溶媒／水性層の比率は、１：１０〜１：１までの範囲内である。
【００６２】
酵素の添加の後、ＮａＯＨ又はＫＯＨのような塩基の調節された添加によって、攪拌下で、反応混合物のｐＨを選択された値に維持する。
【００６３】
反応の終了後、伝統的な反応混合物の酸性化及び一般的な有機溶媒による抽出によって、生成物が得られる。
【００６４】
工程ｃ）
工程ｃ）は、式（IVａ）のシクロヘキサン一酸の、式（Ｖ）のオキサゾリジノンへの変換を含む。
【００６５】
この変換は、クルチウス又はホフマン分解の公知の原理を適用して行われうる。ホフマン分解の場合、シクロヘキサン一酸の、各シクロヘキサンモノアミドへの転換、及びその後の、例えば、次亜塩素酸塩による環形成によりオキサゾリジノンが形成され、クルチウス分解はシクロヘキサンアジド中間体の形成を含む。
【００６６】
クルチウス分解の好適な変法として、ジアルキルホスホリルアジド又はジアリルホスホリルアジド、好ましくはジアリルホスホリルアジド、最も好ましくはジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）を使用したヤマダ−クルチウス分解を適用することができる。
【００６７】
ヤマダ−クルチウス分解は、通常、第三級アミン、好ましくはトリエチルアミンの存在下で、例えば塩化メチレン又は酢酸エチルのような不活性溶媒中で行われる。
【００６８】
工程ｄ）
工程ｄ）は、式（Ｖ）のオキサゾリジノンの、式（VI）のシクロヘキセノールへの転換を包含する。
【００６９】
この転換は、アミノ保護基であるＲ6の導入及びその後の塩基により誘導される式（VI）のシクロヘキセノールへの転換を含む。
【００７０】
アミノ保護基Ｒ6の好適な置換基は、前述と同様であるが、ＢＯＣ基が好ましい基である。
【００７１】
アミノ保護基の導入は、当業者に公知である。
【００７２】
その後の塩基により誘導される転換のための好適な塩基は、アルカリ水素化物、アルカリアルコラート、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）又はテトラアルキルグアニジンである。好ましい塩基は、０．５〜２５モル％の量で適用される水素化ナトリウムである。
【００７３】
通常、反応は、各溶媒の還流温度で、塩化メチレン、トルエン、テトラヒドロフラン、酢酸エチルのような不活性溶媒中で行われる。
【００７４】
式（VI）のシクロヘキセノールは、当業者に公知の方法により反応混合物から単離され得る。
【００７５】
工程ｅ）
工程ｅ）は、式（VII）のアジドの形成を含む。
【００７６】
この工程は、反応中心における構造の反転を引き起こすための、最初に、水酸基の好適な離脱基への転換、そして次にアジド形成を含む。
【００７７】
ＯＨ基の離脱基への転換は、スルホニル化、即ちＯＨ基のスルホン酸エステルへの変換により実施され得る。
【００７８】
そのようなスルホン酸エステルを生成させるために一般的に使用される試薬は、例えば、以下のスルホン酸：メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−ニトロベンゼンスルホン酸、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸又はトリフルオロメタンスルホン酸のハロゲン化物又は無水物である。
【００７９】
好ましい試薬は、トリフルオロメタンスルホン酸無水物のようなトリフルオロメタンスルホン酸のハロゲン化物又は無水物である。
【００８０】
スルホニル化剤は、好都合には、約２当量の好適な塩基の存在下で、式VIのシクロヘキセノール１当量に対し１．０〜１．５当量の量で添加される。
【００８１】
反応は、通常、塩化メチレンのような不活性溶媒中で、−２０℃〜室温の反応温度で行われる。
【００８２】
形成されたスルホン酸エステルは、例えば、結晶化により単離され精製され得るし、又は以下の反応へと直接導入され得る。
【００８３】
アジド形成は、先に得られたスルホン酸エステル中間体を、好適なアジドで処理することにより行われ、これによって立体配置の反転が生じる。一般的に使用されるアジドは、１〜２当量の量のアジ化ナトリウムのようなアルカリアジドである。反応は、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、エタノール又はアセトンのような溶媒中で、−１０℃〜５０℃の温度で行われる。
【００８４】
工程ｆ）
工程ｆ）は、アジドの還元、及びその後の、式（VIII）の各アシル化アミンを形成させるための得られたアミンのアシル化を包含する。
【００８５】
還元は、ａ）水素を用いる通常の金属で触媒される水素化、又はｂ）ホスフィンを用いるアジドの還元のいずれかによって行われる。
【００８６】
方法ａ）によると、例えば、不活性支持体上に適用され得るＰｄ触媒、Ｐｔ触媒、ラネーＮｉ触媒又はラネーＣｏ触媒のような一般的な水素化触媒が使用され得る。
【００８７】
水素化は、適当な有機溶媒、例えば、酢酸エチル中で、２０℃〜６０℃の温度で、１バール〜５０バールの水素圧で行われうる。
【００８８】
方法ｂ）により好適に使用され得るホスフィンは、トリオクチルホスフィン、トリイソブチルホスフィン及びトリ−ｎ−ブチルホスフィンである。最も好ましいホスフィンは、トリ−ｎ−ブチルホスフィンである。
【００８９】
通常は、還元は、１〜２０当量の水の存在下で、酢酸エチル又はテトラヒドロフランのような極性溶媒中で行われる。
【００９０】
反応温度は、使用されるホスフィンにより異なるが、概して、−２０℃〜５０℃の範囲内で選択される。
【００９１】
形成されたアミンは、単離され得るが、好ましくは、以下の反応において直接アシル化される。
【００９２】
アシル化は、塩基の存在下で、当業者に既知の条件で、アシル化剤を使用して実施され得る。好適なアシル化は、概して、脂肪族又は芳香族のカルボン酸のハロゲン化物又は無水物である。好ましいアシル化剤は、塩化アセチル又は無水酢酸のような一般的なアシル化剤である。
【００９３】
工程ｇ）
工程ｇ）は、アミノ保護基であるＲ6の除去、そして必要であれば式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体のそれぞれの医薬的に許容し得る塩の形成を含む。
【００９４】
アミノ保護基Ｒ6は、当業者に周知の方法に従い除去され得る。好ましいＢＯＣ基は、室温で酢酸中のＨＢｒによって、又は酢酸エチル中のＨＣｌにより容易に分離され得る。
【００９５】
次に、例えば、水性塩基により遊離アミンを遊離させ、次いでJ.C.Rohloff et al.,J.Org.Chem.,1998,63,4545-4550；国際特許公開第９８／０７６８５号に記載の方法に従い、医薬的に許容し得る付加塩へと転換することができる。
【００９６】
「医薬的に許容し得る酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のような無機酸又は有機酸を有する塩を包含する。
【００９７】
塩の形成は、それ自体既知であり、そしてあらゆる当業者に周知である方法に従い、室温で行われる。
【００９８】
好ましい医薬的に許容し得る酸付加塩は、好ましくは−２０℃〜５０℃の温度でエタノール溶液中で形成され得るリン酸との１：１塩である。
【００９９】
本発明は、式II：
【０１００】
【化３４】
0004851020.tif 000013
【０１０１】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
のイソフタル酸誘導体の製造方法であって、式Ｘ：
【０１０２】
【化３５】
0004851020.tif 000014
【０１０３】
〔式中、Ｒ5は、前記と同様である〕
のジアルコキシフェノールを、
工程ａａ）において、
式XI：
【０１０４】
【化３６】
0004851020.tif 000015
【０１０５】
〔式中、Ｒ1及びＲ5は、前記と同様である〕
のトリアルコキシベンゼンへと変換し、
工程ａｂ）において、
式XII：
【０１０６】
【化３７】
0004851020.tif 000016
【０１０７】
〔式中、Ｒ1及びＲ5は、前記と同様であり、Ｘは、ハロゲン原子を表す〕
のジハロトリアルコキシベンゼンへとさらにハロゲン化し、最終的に、工程ａｃ）において、式IIの生成物が形成されるようカルボニル化することを特徴とする方法をさらに含む。
【０１０８】
工程ａａ）
式Ｘのジアルキルオキシフェノールのエーテル化は、各アルコールＲ1ＯＨのメタンスルホン酸エステルを用いて実施され得る。反応は、原則として、不活性溶媒中で、アルカリアルコラートのような強力な塩基の存在下で行われる。
【０１０９】
別のエーテル化は、ミツノブ条件下で（O.Mitsunobu,Synthesis,1981,1）、即ち、テトラヒドロフランのような好適な不活性溶媒中での、ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（ＤＩＡＤ）及びトリフェニルホスフィンの存在下での、式Ｘのジアルコキシフェノールの各アルコールＲ1ＯＨによる処理によって、起こりうる。
【０１１０】
工程ａｂ）
この工程におけるハロゲン化は、好ましくはジブロモ化である。
【０１１１】
式XIのトリアルコキシベンゼンのための好適なブロモ化剤は、例えば、Ｎ−ブロモスクシニミド（ＮＢＳ）である。
【０１１２】
ジブロモ化は、通常、２当量のＮＢＳを用いて、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような極性溶媒中で、−１０℃〜５０℃の温度で行われる。
【０１１３】
工程ａｃ）
式XIIのジハロトリアルコキシベンゼンのカルボニル化は、一酸化炭素を用いて、好適な触媒の存在下で、エタノールのようなアルコール溶媒中で実施され得る。
【０１１４】
適当な触媒は、周期表の第VIII族元素の金属化合物とホスフィン化合物とによって、例えば、酢酸パラジウムと１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（ｄｐｐｐ）又はトリフェニルホスフィンとにより形成された金属複合体である。
【０１１５】
通常、反応は、８０℃〜１５０℃の温度で、２０バールまでのＣＯ圧で行われる。
【０１１６】
本発明は、式III：
【０１１７】
【化３８】
0004851020.tif 000017
【０１１８】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラート誘導体の製造方法であって、
式II：
【０１１９】
【化３９】
0004851020.tif 000018
【０１２０】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
のイソフタル酸誘導体を水素化することを特徴とする方法をさらに含む。
【０１２１】
この工程は、本明細書の前記の多工程合成の工程ａ）と同一である。工程ａ）の各説明が参照としてここに組み込まれる。
【０１２２】
本発明は、式III：
【０１２３】
【化４０】
0004851020.tif 000019
【０１２４】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕
の全シス−シクロヘキサンジカルボキシラートを選択的に加水分解し、そして必要であれば脱アルキル化して、式IVａ又はIVｂ：
【０１２５】
【化４１】
0004851020.tif 000020
【０１２６】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕
の（Ｓ）−又は（Ｒ）−シクロヘキサン一酸を形成させることをさらに含む。
【０１２７】
この工程は、本明細書の前記の多工程合成の工程ｂ）に相当する。工程ｂ）の各説明が参照としてここに組み込まれる。
【０１２８】
以下の重要な中間体は、新規であり、当分野において公知ではなく、従って、それらは本発明の必須の要素である。
【０１２９】
【化４２】
0004851020.tif 000021
【０１３０】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチル−プロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ5がメチルである５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシイソフタル酸エチルエステル。
【０１３１】
【化４３】
0004851020.tif 000022
【０１３２】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ5がメチルである全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル、及びＲ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ5がＨである全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシシクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル。
【０１３３】
【化４４】
0004851020.tif 000023
【０１３４】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルである全シス−（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシシクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステル。
【０１３５】
【化４５】
0004851020.tif 000024
【０１３６】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルである全シス−（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシシクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステル。
【０１３７】
【化４６】
0004851020.tif 000025
【０１３８】
〔式中、Ｒ1及びＲ2は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、そしてＲ2がエチルである（３ａＳ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＳ）−７−（１−エチルプロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル、及びＲ1が１−エチルプロピルであり、そしてＲ2がエチルである（３ａＲ，５Ｓ，６Ｓ，７Ｓ，７ａＲ）−７−（１−エチルプロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル。
【０１３９】
【化４７】
0004851020.tif 000026
【０１４０】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ6がtert−ブトキシカルボニルである（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert.−ブトキシカルボニル−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−ヒドロキシシクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（VIａ）、及びＲ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ6がtert−ブトキシカルボニルである（３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−tert−ブトキシカルボニル−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−ヒドロキシシクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（VIｂ）。
【０１４１】
【化４８】
0004851020.tif 000027
【０１４２】
〔式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記と同様である〕、好ましくは、Ｒ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ6がtert−ブトキシカルボニルである（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチルプロポキシ）シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（VIIａ）、及びＲ1が１−エチルプロピルであり、Ｒ2がエチルであり、そしてＲ6がtert−ブトキシカルボニルである（３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−４−アジド−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチルプロポキシ）シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（VIIｂ）。
【０１４３】
以下の実施例は、本発明を制限することなく、本発明をより詳細に例示するものである。
【０１４４】
実施例１
メタンスルホン酸１−エチル−プロピルエステルの調製
３−ペンタノール（１．０mol）８８．１５ｇを含む無色ピリジン溶液１５０mlに、攪拌しながら、０℃で、メタンスルホニルクロリド（１．１mol）１２６．０ｇを１時間かけて添加した。加温（１５分）及び室温で１時間の攪拌後、脱イオン水５０mlを一度に全部添加し、室温での攪拌を１時間継続した。反応混合物を、酢酸エチル５００mlで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ８００ml及び１０％塩水２５０mlで洗浄した。両方の水性層を酢酸エチル２５０mlで連続的に抽出した。合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4約２０ｇで乾燥させた後、回転式エバポレーター（５０℃／≧１mbar）で溶媒を除去し、黄色の油状の表題生成物１５４．４ｇ（９２．９％）を得、それを精製することなく次の工程において使用することができた。
【０１４５】
実施例２
（１−エチル−プロポキシ）−１，３−ジメトキシ−ベンゼンの調製
２，６−ジメトキシフェノール３８．５ｇ（０．２５mol）及びメタンスルホン酸１−エチル−プロピルエステル８３．１ｇ（０．５０mol）を含む黄色のジメチルスルホキシド溶液５００mlに、攪拌しながら、５０℃で、tert−ブチル化カリウム５６．１ｇ（０．５０mol）を含むジメチルスルホキシド溶液５００mlを４時間かけて添加した。さらに、tert−ブチル化カリウム２．８ｇ（０．０２５mol）を添加した後、５０℃での攪拌を１時間継続した。反応混合物を、酢酸エチル５００ml及び１Ｎ  ＨＣｌ６００mlで分配した。有機層を脱イオン水２５０mlで２回、合計で脱イオン水５００mlで洗浄し、水性層を酢酸エチル２５０mlで連続的に抽出した。合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4約２５ｇで乾燥し、濾過し、回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）によって溶媒を蒸発させ、橙色の油状物質として表題生成物５６．２ｇ（１００．２％）を得、それを精製することなく次の工程において使用した（ｂｐ．９０℃／０．０３mbar）。
【０１４６】
実施例３
１，５−ジブロモ−３−（１−エチル−プロポキシ）−２，４−ジメトキシ−ベンゼン）の調製
粗（１−エチル−プロポキシ）−１，３−ジメトキシ−ベンゼン（０．２０mol）４４．９ｇを含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液６０mlに、０℃で、Ｎ−ブロモスクシニミド７３．４ｇ（０．４mol）を含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液１６０mlを１時間かけて添加した。室温への加温（０．５時間）及び大気温度での１８時間攪拌後、赤茶色の反応混合物を、酢酸エチル４００ml及び５％塩水４００mlで分配した。有機層を、５％塩水２００mlで２回、合計で５％塩水４００mlで洗浄し、全ての水性層を酢酸エチル２００mlで連続的に抽出した。合わせた有機層を、木炭約４ｇと一緒に１時間攪拌し、濾過助剤約２０ｇ（Hyflo）で濾過した。回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）による溶媒の除去によって、粗表題生成物７８．７ｇ（１０３％）を得、それを８０％（ｖ／ｖ）エタノール−Ｈ2Ｏ４００mlに５０℃で溶解させ、冷却そして２０℃での１８時間の攪拌によって結晶化し、濾過し、約４０mlの−２０℃の冷８０％（ｖ／ｖ）エタノール−Ｈ2Ｏで洗浄し、乾燥し（３５℃／１mbar／１８時間）、薄黄色の表題生成物６９．０ｇ（９０．３％）が得られた（融点４７〜４８℃）。
【０１４７】
実施例４
５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−イソフタル酸ジエチルエステルの調製
オートクレーブに、１，５−ジブロモ−３−（１−エチル−プロポキシ）−２，４−ジメトキシ−ベンゼン３８．２１ｇ（０．１０mol）、酢酸カリウム３９．２６ｇ（０．４０mol）、エタノール２００ml、酢酸パラジウム（II）０．１１ｇ（０．５mmol）及び１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン０．２５ｇ（０．６mmol）を投入した。オートクレーブを密封し、加圧し、攪拌（２００rpm）しながら１０barの一酸化炭素で４回換気し、最後に反応混合物を攪拌（６００rpm）しながら１１０℃に加熱した。ＣＯ圧を１０barに調整し、反応を一定の気圧（１１０℃で１０bar）で１５時間継続した。冷却後、オートクレーブを換気し、反応混合物をヘキサン１００mlと５％水性Ｎａ2ＣＯ3２００mlとの攪拌された混合物へ注入した。水性層を分離し、ヘキサン１００mlで抽出した。両方の有機層を１Ｎ  ＨＣｌ１００mlで連続的に洗浄し、合わせ、Ｎａ2ＳＯ4約１０ｇで乾燥させた。濾過及び回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）による溶媒の除去の後、得られた黄色の油状の残さ３５．７ｇを高度の減圧下で蒸留し、薄黄色の油状物質として表題生成物３４．９ｇ（９４．６％）を得た（ｂｐ．１４０℃／０．０２mbar）。
【０１４８】
実施例５
全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製
オートクレーブに、５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−イソフタル酸ジエチルエステル３６．８４ｇ（０．１０mol）、５％Ｒｕ／Ａｌ2Ｏ3触媒３６．８４ｇ及び酢酸エチル２５０mlを投入した。オートクレーブを密封し、５barのＨ2で攪拌しながら３回加圧した。次いで、反応混合物を１００barのＨ2の気圧下で６０℃で２４時間攪拌した。室温まで冷却した後、オートクレーブを換気し、アルゴンを通気した。黒色の懸濁液を濾過助剤（Hyflo）約５０ｇで濾過し、オートクレーブ及び濾過ケークを酢酸エチル約２００mlで洗浄した。合わせた無色の濾液を回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）により蒸発させ、固形物３５．１ｇ（９３．７％）が得られ、それをヘキサン５３０mlに５０℃で溶解させた。冷却しそして−２０℃での６時間の攪拌による結晶化によって、濾過、約５０mlの−２０℃の冷ヘキサンでの洗浄、そして乾燥（５０℃／１mbar／１６時間）の後、白色の結晶状の表題生成物３０．８ｇ（８２．２％）を得た（融点１０８〜１０９℃）。
【０１４９】
実施例６
全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製
ヨウ化ナトリウム６０．０ｇ（０．４０mol）を含むアセトニトリル懸濁液２００mlに、脱イオン水０．３６０ｇ（０．０２mol）を添加した。４０℃で３０分間攪拌後、トリメチルクロロシラン５０．６ml（０．４０Mol＝４３．５ｇ）を全て一度に添加し、４０℃での攪拌を１時間継続した。全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル３７．４ｇ（０．０１mol）を、白色の懸濁液に全て一度に添加し、４０℃での攪拌を１４時間継続した。室温に冷却後、橙色の懸濁液を、酢酸エチル５００ml及び脱イオン水２５０mlで分配し、２つの層をチオ硫酸ナトリウム約２．５ｇの添加により無色化した。有機層を１０％塩水１００mlで２回、合計１０％塩水２００mlで洗浄し、３つの水性層を全て、酢酸エチル１００mlで連続的に抽出した。合わせた有機層を、Ｎａ2ＳＯ4約２５ｇで乾燥させ、濾過し、溶媒を回転式エバポレーション（５０℃／≧１０mbar）により蒸発させた。白色の結晶状の残さ（３４．９ｇ）を還流メチルシクロヘキサン２００mlに溶解させ、冷却及び−２０℃での１６時間の攪拌により結晶化した。濾過及び−２０℃の冷メチルシクロヘキサン約２０mlで洗浄し、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）の後に、白色の表題生成物３３．６ｇ（９７．０％）を得た（融点１１５〜１１６．５℃）。
【０１５０】
実施例７
全シス−（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステルの調製
全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル３４．４０ｇ（０．１０mol）を含む１０mMトリス緩衝液３９０ml（ｐＨ８．０）の懸濁液を、激しく攪拌しながら３５℃に加熱した。ブタ肝臓エステラーゼ３．４４ml（ロシュダイアグノスティクスの「テクニカルグレード」）を添加し、懸濁液を、激しく攪拌しながら１．０Ｎ水酸化ナトリウム溶液の調節された添加（ｐＨスタット）によって、ｐＨ８．０及び３５℃に維持した。１．０Ｎ  ＮａＯＨ  １０３．３ml（１．０４当量）の４６時間にわたる完全な消費の後、溶液のｐＨを２５％ＨＣｌ約１３mlで２．０に調整した。反応混合物をジクロロメタン３３０mlで３回抽出し、合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4約１００ｇで乾燥させた。濾過及び回転式エバポレーション（４０℃／≧５mbar）による溶媒の除去の後、残さを減圧下（０．０３mbar）で一夜乾燥させ、無色のゴム状物質として表題生成物２９．５２ｇ（９３．４％）を得、それを精製することなく次の工程において使用した。
〔α〕D＝＋７．２°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５１】
実施例８
（３ａＳ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＳ）−７−（１−エチル−プロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロ−ベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステルの調製
全シス−（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル３１．２ｇ（０．１０mol）を含むジクロロメタン溶液２００mlに、トリエチルアミン１０．１ｇ（０．１０mol）及びジフェニルホスホリルアジド２９．０ｇ（０．１０mol）を添加した。次いで、透明な反応混合物を還流下に１６時間攪拌した。冷却後、それをジクロロメタン２００ml及び１Ｍ  ＨＣｌ３００mlに分配した。有機層を５％ＮａＨＣＯ3３００mlで洗浄し、５％塩水３００mlで３回洗浄した。水性層をジクロロメタン２００mlで２回連続的に抽出した。合わせた有機層を、Ｎａ2ＳＯ4約５０ｇで乾燥させ、濾過し、溶媒を回転式エバポレーション（３５℃／≧１０mbar）により蒸発させた。白色の結晶状の残さ（３４．６ｇ）を還流酢酸ブチル３００mlに溶解させ、冷却及び−２０℃での１６時間の攪拌により結晶化した。濾過及び−２０℃の冷酢酸ブチル約４０mlでの洗浄によって、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）の後に、白色の結晶状の表題生成物２５．４ｇ（２工程で８０．５％）のを得た（融点１８０〜１８１℃）。
〔α〕D＝＋３１．２°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５２】
実施例９
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−ヒドロキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
ジ−tert−ブチルジカルボネート２．４０ｇ（１１mmol）、４−ジメチルアミノピリジン２５mg（０．２mmol）及び（３ａＳ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＳ）−７−（１−エチル−プロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロ−ベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル３．１５ｇ（１０mmol）に、トルエン５０mlを添加し、懸濁液を室温で４時間攪拌した。回転式エバポレーション（５０℃／１０mbar）により溶媒を除去し、ゴム状の残さをトルエン５０mlに再溶解させた。テトラメチルグアニジン１．１５ｇ（１０mmol）の添加の後、反応混合物を２０時間還流し、室温まで冷却し、２Ｎ  ＨＣｌ２０mlで洗浄し、１０％塩水２０mlで２回、合計で１０％塩水４０mlで洗浄した。水性層をトルエン２５mlで連続的に抽出し、有機層を合わせ、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過及び回転式エバポレーション（５０℃／１０mbar）によって、結晶状残さ３．８０ｇを得、それを、熱ヘキサン７０ml（６０℃）に溶解させ、冷却及び−２０℃での一夜の攪拌により結晶化した。濾過及び２０℃冷ヘキサン約１０mlのでの洗浄によって、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）後に、白色の結晶状の表題生成物２．８８ｇ（７７．６％）を得た（融点１０２〜１０２．５℃）。
〔α〕D＝−５２．５°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５３】
実施例１０ａ
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−ヒドロキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル）３．７１ｇ（１０mmol）及びピリジン１．６１ml（２０mmol）を含むＣＨ2Ｃｌ2溶液２０mlを０℃に冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸無水物１．７３ml（１０．５mmol）を１０分かけて添加し、０℃での攪拌を１時間継続した。反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌ  １０mlで洗浄し、１０％塩水１０mlで２回、１０％塩水合計２０mlで洗浄した。水性層を、塩化メチレン１０mlで連続的に抽出し、合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過及び回転式エバポレーション（３０℃／１０mbar）によって、ベージュ色の結晶状の表題生成物４．９６ｇ（９８．４％）を得、それを、さらに精製することなく次の工程において使用した。
【０１５４】
実施例１０ｂ
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
ジ−tert−ブチルジカルボネート４．８０ｇ（２２mmol）、４−ジメチルアミノピリジン４９mg（０．４mmol）及び（３ａＳ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＳ）−７−（１−エチル−プロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロ−ベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステル６．３１ｇ（２０mmol）に、トルエン１００mlを添加し、懸濁液を室温で４時間攪拌した。６０％水素化ナトリウム油中分散液２０mg（約０．５mmol）の添加後、反応混合物を１時間還流し、室温へ冷却し、溶媒を回転式エバポレーションにより除去した。黄色がかった半結晶状の粗（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−ヒドロキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（７．８３ｇ）を、ＣＨ2Ｃｌ2１００mlに再溶解させ、ピリジン３．２２ml（４０mmol）を攪拌しながら添加した。−１０℃に冷却後、トリフルオロメタンスルホン酸無水物３．４７ml（２１mmol）をシリンジで１０分かけて添加し、−１０℃での攪拌を１時間継続した。１Ｎ  ＨＣｌ２０mlを、攪拌しながら−１０℃の冷反応混合物へ添加し、有機層を１０％塩水２０mlで２回、１０％塩水合計４０mlで洗浄した。全ての水性層をＣＨ2Ｃｌ2２０mlで連続的に抽出し、合わせた有機層を、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、回転式エバポレーション（３０℃／≧１０mbar）により溶媒を除去した。黄色の結晶状の残さ（１０．０ｇ）を、熱ジイソプロピルエーテル１５０ml（６８℃）に溶解させ、新たなフラスコへ移した。室温への冷却後、懸濁液を−２０℃で一夜攪拌した。濾過及び−２０℃の冷ジイソプロピルエーテル約４０mlでの洗浄によって、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）の後に、白色の結晶状の表題生成物８．３５ｇ（８２．９％）を得た（融点１２２〜１２３℃）。
〔α〕D＝−７９．１°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５５】
実施例１１
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル１０．０７ｇ（２０mmol）及び９０％水性アセトンの攪拌された懸濁液５０mlに、アジ化ナトリウム１．４３ｇ（２２mmol）を添加し、反応混合物を室温で１５時間攪拌した。アセトンを回転式エバポレーション（４０℃／≧１０mbar）により除去し、油状の残さを、酢酸エチル５０ml及び５％塩水２５mlに分配した。水性層を酢酸エチル２５mlで抽出し、両方の有機層を５％塩水２５mlで連続的に洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶媒を回転式エバポレーション（４０℃／≧１０mbar）により除去し、薄黄色の油状の残さ８．００ｇを得、それを熱ヘキサン（５０〜６０℃）８０mlに溶解させ、濾過し、冷却及び−２０℃での一夜の攪拌により結晶化した。濾過及び−２０℃の冷ヘキサン約２０mlによる洗浄によって、乾燥（５０゜／１０mbar／１６時間）後に、白色の結晶状の表題生成物６．１５ｇ（７７．６％）を得た（融点９２〜９３℃）。
〔α〕D＝−６３．３°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５６】
実施例１２
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル１．５９ｇ（４mmol）及び水０．３６ml（２０mmol）を含むテトラヒドロフラン溶液５mlを０℃に冷却した。トリエチルアミン１．１２ml（８mmol）及び酢酸無水物０．３８mlを添加し、０℃での攪拌を１５分間継続した。トリ−ｎ−ブチルホスフィン１．１４ml（４．４mmol）を５分かけて添加し、黄色がかった溶液を、０℃で３０分間、次いで室温で１時間攪拌した。トリエチルアミン５．５８ml（４０mmol）の添加後、酢酸無水物１．８９ml（２０mmol）を氷冷しながら徐々に添加し、室温での攪拌を１時間継続した。反応混合物を酢酸エチル３０mlで希釈し、２Ｎ  ＨＣｌ２５ml、１０％Ｎａ2ＣＯ3１０ml及び１０％塩水２０mlで連続的に洗浄した。水性層を酢酸エチル２０mlで連続的に洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶媒を回転式エバポレーション（３０℃／≧１０mbar）により除去したところ、粗生成物２．８９ｇを得、それを、ヘキサン：酢酸エチル１．４：１を用いたＳｉＯ2（１００ｇ）上でのクロマトグラフィにより精製した（１００ml分画）。回転式エバポレーション（３０℃／≧１０mbar）によって、無色の結晶状の残さとして表題生成物１．３９ｇ（８４％）を得た（融点１５３．５〜１５４．５℃）。
〔α〕D＝−８９．７°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１５７】
実施例１３ａ
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルリン酸エンの調製
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル１０．３１ｇ（２５mmol）を含む酢酸エチル溶液１００mlに、室温で、５Ｎ  ＨＣｌを含む酢酸エチル２５mlを添加した。２０分後、白色の沈殿物が形成され、濃厚な懸濁液を室温で２４時間攪拌した。懸濁液を酢酸エチル１２５mlで希釈し、３Ｎ  ＮａＯＨ約４０ml（ｐＨ約９．５）及び１０％塩水５０mlで洗浄した。水性層を酢酸エチル１２５mlで２回、酢酸エチル合計２５０mlで連続的に洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶媒を回転式エバポレーション（３０℃／≧１０mbar）により除去し、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル８．０６ｇを得、それを、エタノール５０mlに溶解し、約２時間かけて９９％リン酸２．４５ｇ（２５mmol）を含むエタノール温溶液５０ml（５５℃）に添加した。（約２／３の（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの添加後、透明な溶液に純粋な表題生成物を種晶として添加した。）冷却そして０〜５℃で３時間攪拌後、懸濁液を濾過し、アセトン４０mlで２回、アセトン合計８０mlで洗浄し、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）させ、白色の結晶状の表題生成物９．０７ｇ（８８．４％）を得た（融点２０１〜２０２℃）。
〔α〕D＝−３２．１°（Ｈ2Ｏ；ｃ＝１）
【０１５８】
実施例１３ｂ
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルリン酸塩の調製
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−５−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−（１−エチルプロポキシ）シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル３．９６ｇ（１０mmol）を含む酢酸エチル溶液５０mlに、湿ったラネーコバルト触媒２．０ｇを添加し、懸濁液を攪拌し、室温で２０時間水素化した（およそ１．１bar  Ｈ2；５００rpm）。濾過により触媒を除去した後、トリエチルアミン１．５３ml（１１mmol＝１．１１ｇ）及び酢酸無水物０．９９ml（１０．５mmol＝１．０７ｇ）を全て一度に添加し、無色の溶液を室温で１時間攪拌した。次いで、５．７Ｍ  ＨＢｒ／酢酸（３０mmol  ＨＢｒ）５．２６mlを無色の溶液に添加し、反応混合物を室温で２０時間攪拌した。次いで、攪拌しながら２Ｎ  ＮａＯＨ約５５ml（ｐＨ約９．５）を添加し、有機層を分離し、２０％塩水３０mlで２回、２０％塩水合計６０mlで洗浄した。３つの水性層を全て、酢酸エチル３０mlで２回、酢酸エチル合計６０mlで連続的に抽出し、合わせた有機層を乾燥させた（Ｎａ2ＳＯ4）。濾過及び回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）による溶媒の除去の後、黄色がかった粘性の残さ（３．４７ｇ）をエタノール２０mlに溶解し、３０分かけて０．９８ｇのオルトリン酸（１０mmol）を含む５０℃のエタノール温溶液４０mlに添加した（３分の２の添加後、５０℃の温溶液へ純粋な表題生成物を種晶として添加した。）白色の懸濁液を冷却し（２ｈ）、０℃で３ｈ攪拌した。結晶を濾過し、アセトン約２０mlで洗浄し、乾燥（５０゜／１０mbar／１６時間）させ、白色の結晶状のリン酸塩３．４１ｇ（８３．２％）を得た（融点１９８〜１９９℃）（dec.）。
〔α〕D＝−３２．１°（Ｈ2Ｏ；ｃ＝１）
【０１５９】
実施例１４
全シス−（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステル）の調製
全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−メトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル７４．９ｇ（０．２０mol）を含むシクロヘキサン懸濁液２４０mlに、０．１Ｍグルコースを含む水１．１ｌ及び０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液６０ml（ｐＨ７．０）を添加し、混合物を激しく攪拌しながら３５℃に加熱した。アスペルギルスオリゼ由来リパーゼ５６０mg（フルカ６２２８５）を添加し、乳濁液／懸濁液を、激しく攪拌しながら１．０Ｎ水酸化ナトリウム溶液の調節された添加（ｐＨスタット）によりｐＨ７．０及び３５℃に維持した。１．０Ｎ水酸化ナトリウム１８７．５ml（０．９４当量）の２０時間後の完全な消費の後、ｐＨを１Ｎ塩酸約２００mlで２．０にセットし、反応混合物をジクロロメタン１．５ｌで抽出した。全乳濁液を、ジカライト１５０ｇ（dicalite）濾過助剤のベッドで濾過し、使用前にジカライトベッドに通したジクロロメタン１．５ｌで、再び２回水性層を抽出した。合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4１７５ｇで乾燥させ、濾過し、濃縮（１３mbar／５０℃／１時間）し、残さを高度の減圧下で一夜乾燥させ、白色の結晶状の表題生成物６９．４２ｇ（１００％）を得た（融点１４７〜１４８℃）。
〔α〕D＝＋7．４°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１６０】
実施例１５
全シス−（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル）の調製
ヨウ化ナトリウム３０．０ｇ（０．２０mol）を含むアセトニトリルの攪拌された懸濁液１００mlに、トリメチルクロロシラン２１．７ｇ（０．２０mol；２５．３ml）を全て一度に添加した。室温で０．５時間の攪拌の後、全シス−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジメトキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステル１７．３ｇ（０．０５０mol）を添加し、室温での攪拌を１２ｈ継続した。反応混合物をジクロロメタン２５０ml及び脱イオン水２５０mlに分配した。２つの赤色がかった層を、Ｎａ2Ｓ2Ｏ3約０．２５ｇの添加により無色化し、有機層を１０％塩水１００mlで２回、１０％塩水合計２００mlで洗浄した。次いで、全ての水性層をジクロロメタン約１００mlで連続的に抽出した。合わせた有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、溶媒を回転式エバポレーション（５０℃／≧１mbar）により蒸発させたところ、無色のゴム状物質として表題生成物１５．８ｇ（９９．４％）を得、それを精製することなく次の工程において使用した。
〔α〕D＝−７．２°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）
【０１６１】
実施例１６
全シス−（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−７−（１−エチル−プロポキシ）−６−ヒドロキシ−２−オキソ−オクタヒドロ−ベンゾオキサゾール−５−カルボン酸エチルエステルの調製
全シス−（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−（１−エチル−プロポキシ）−４，６−ジヒドロキシ−シクロヘキサン−１，３−ジカルボン酸１−エチルエステル１５．７７ｇ（５０mmol）を含むジクロロメタン溶液１００mlに、トリエチルアミン５．０６ｇ（５０mmol）及びジフェニルホスホリルアジド１４．４８ｇ（５０mmol）を添加した。次いで、透明な反応混合物を還流下１６時間攪拌した。冷却後、それをジクロロメタン１００ml及び１Ｍ  ＨＣｌ１５０mlに分配した。有機層を５％ＮａＨＣＯ3１５０mlで洗浄し、５％塩水１５０mlで３回、５％塩水合計４５０mlで洗浄した。５つの水性層全てをジクロロメタン１００mlで２回、ジクロロメタン合計２００ｍで連続的に抽出した。合わせた有機層を、Ｎａ2ＳＯ4約２５ｇで乾燥させ、濾過し、回転式エバポレーション（３５℃／≧１０mbar）により溶媒を蒸発させた。白色の結晶状の残さ（１７．４ｇ）を還流酢酸ブチル１５０mlに溶解し、冷却及び−２０℃での１６時間の攪拌により結晶化した。濾過及び−２０℃の冷酢酸ブチル約２０mlでの洗浄によって、乾燥（５０℃／１０mbar／１６時間）後に、白色の結晶状の表題生成物１２．６ｇ（３工程で７９．９％）を得た（融点１８０．５〜１８１℃）。
〔α〕D＝−３１．１°（ＣＨＣｌ3；ｃ＝１）