(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、及び酒石酸からなる群より選ばれる１種以上の有機カルボン酸を０．４〜１．６質量％、（Ｂ）塩酸、硫酸、及び硝酸からなる群より選ばれる１種以上の無機酸を０．０５〜０．２５質量％、並びに（Ｃ）塩化ベンザルコニウム及び塩化アルキル（炭素数１０〜２２）トリメチルアンモニウムからなる群より選ばれる１種以上の４級アンモニウム塩０．１〜０．２７質量％を含有し、（Ａ）有機カルボン酸と（Ｂ）無機酸の質量比が（Ａ）／（Ｂ）＝５〜２０である、殺菌剤組成物。
【請求項２】
（Ｂ）無機酸と（Ｃ）４級アンモニウム塩の質量比が（Ｃ）／（Ｂ）＝１〜１０である、請求項１記載の殺菌剤組成物。
【請求項３】
（Ａ）クエン酸、リンゴ酸、及び酒石酸からなる群より選ばれる１種以上の有機カルボン酸を３０〜５０質量％、（Ｂ）塩酸、硫酸、及び硝酸からなる群より選ばれる１種以上の無機酸を２〜８質量％、並びに（Ｃ）塩化ベンザルコニウム及び塩化アルキル（炭素数１０〜２２）トリメチルアンモニウムからなる群より選ばれる１種以上の４級アンモニウム塩を２〜２０質量％含有し、（Ａ）有機カルボン酸と（Ｂ）無機酸の質量比が（Ａ）／（Ｂ）＝５〜２０であり、水で３０〜５０倍に希釈して使用する、殺菌剤組成物。
【請求項４】
（Ｂ）無機酸と（Ｃ）４級アンモニウム塩の質量比が（Ｃ）／（Ｂ）＝１〜１０である、請求項３記載の殺菌剤組成物。
【請求項５】
人工血液透析装置の殺菌洗浄に用いられる請求項１〜４の何れかに記載の殺菌剤組成物。
【請求項６】
請求項１又は２記載の殺菌剤組成物を、１０℃以上６０℃以下の温度にして対象物に接触させる殺菌方法。
【請求項７】
請求項３又は４記載の殺菌剤組成物を水で３０〜５０倍に希釈した組成物を、１０℃以上６０℃以下の温度にして対象物に接触させる殺菌方法。
【請求項８】
前記希釈した組成物が、（Ａ）を０．４〜１．６質量％、（Ｂ）を０．０５〜０．２５質量％、（Ｃ）を０．１〜０．２７質量％含有する、請求項７記載の殺菌方法。
【請求項９】
対象物が人工血液透析装置である請求項６〜８の何れかに記載の殺菌方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品加工機、厨房機器、医療機器及びその周辺設備を殺菌洗浄するための殺菌剤組成物及びこれを用いた殺菌方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、殺菌や消毒目的で使用される薬剤にはさまざまなものが知られているが、特に塩素系殺菌剤として次亜塩素酸ナトリウムや酸素系殺菌剤である過酸化水素や水中で過酸化水素を発生する過炭酸塩、過ホウ酸塩等が主として用いられている。しかしながらこれらの殺菌剤は種々の課題を有している。例えば次亜塩素酸ナトリウムは炭酸カルシウム等のスケール汚れを除去できないし、金属に対し腐食性であり、酸性物質との混合によって塩素ガスを発生するという取り扱い上の問題がある。過酸化水素は高度の殺菌効果を得るためには高濃度で長時間作用させる必要がある。４級アンモニウム塩は低ｐＨ領域で殺菌力が低下し、細菌芽胞やカビ類に無効である。またたんぱく質によって失活するので事前の洗浄が必要である。例えば人工血液透析装置の透析液流路を殺菌洗浄するには、細菌芽胞を含む微生物を死滅でき、スケール汚れとたんぱく質汚れを除去できる薬剤が要求される。現在、透析液流路の殺菌洗浄は次亜塩素酸ナトリウムと酢酸のような２種類以上の薬剤を組み合わせた複雑な方法で行われている。
【０００３】
特許文献１には、可食性の酸を添加した、ダイマー型ビス第四級アンモニウム塩の溶液を加温して被殺菌物に接触させることを特徴とする細菌芽胞の殺菌方法が開示されている。
【０００４】
また、特許文献２には、疎水性過酸及びカチオン界面活性剤を含有する水性組成物が開示されており、当該組成物はバチルス芽胞に対して有効であるとされている。
【特許文献１】特開平１０−２９５７８５公報
【特許文献２】特開２００６−２２０４８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、特許文献１では短時間での殺菌を目的としているが故に、高濃度の可食性の酸を必要とし（実施例では１０重量％）、溶液を高温、例えば７０〜８０℃程度で使用する必要がある。また、塩化ベンザルコニウムとの組み合わせでは目的を達成できず、使用できる４級アンモニウム塩はダイマー型のものに限定される。特許文献２で用いられている過酸はカチオン界面活性剤が共存すると貯蔵安定性が悪く、使用時に２つの濃縮原液を混合する作業が必要となる。
【０００６】
本発明の目的は、細菌芽胞に対して優れた殺菌効果を示し、例えば１０6ｃｆｕ／ｍＬの濃度の細菌芽胞を死滅させることができ、同時にたんぱく質汚れやスケール汚れを除去できる殺菌剤組成物を提供することにある。またそのような殺菌剤組成物を用いた殺菌方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、（Ａ）有機カルボン酸、〔以下、（Ａ）成分という〕（Ｂ）無機酸〔以下、（Ｂ）成分という〕及び（Ｃ）４級アンモニウム塩〔以下、（Ｃ）成分という〕を含有する殺菌剤組成物に関する。また、本発明は、かかる本発明の殺菌剤組成物を、１０℃以上６０℃以下の温度にして対象物に接触させる殺菌方法に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、細菌芽胞に対する殺菌効果が高く、例えば１０6ｃｆｕ／ｍＬ以上の濃度の細菌芽胞を死滅させることができる殺菌剤組成物が得られる。また、本発明の殺菌剤組成物は、たんぱく質汚れやスケール汚れに対する洗浄効果にも優れる。
【０００９】
本発明の殺菌剤組成物を用いた殺菌方法によれば、種々の食品加工機、厨房機器、医療機器及びその周辺設備の微生物を殺菌することができる。例えば細菌類では、大腸菌、サルモネラ菌、黄色ブドウ球菌、緑膿菌、真菌類では黒コウジカビ、カンジダ菌等が挙げられる。更には殺菌剤に強い抵抗性を示し、耐熱性を有する枯草菌等の細菌芽胞や黒コウジカビ、カンジダ菌等の真菌胞子を死滅させることが重要である。このうち細菌芽胞とは、増殖に適さない環境において作られる休眠細胞であり、菌体の外側には多重の層状外殻を有しており、薬剤や熱に対する抵抗性が高い。しかし、本発明の殺菌剤組成物では、これらの細菌芽胞に対しても高い殺菌効果が得られる。その際、たんぱく質汚れとスケール汚れに対しても優れた除去効果が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
＜（Ａ）成分＞
有機カルボン酸としては、蟻酸、酢酸、プロピオン酸及び酪酸等の炭素数１から４の脂肪族一価カルボン酸、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸、グルコン酸等の炭素数２から６の脂肪族ヒドロキシカルボン酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸等の炭素数２から４の脂肪族二価カルボン酸が例示できる。なかでも、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、及び酒石酸からなる群より選ばれる１種以上が、殺菌性とたんぱく質汚れ除去性の観点から好ましい。本発明において、（Ａ）成分は、殺菌とたんぱく質汚れの除去に寄与する成分である。
【００１１】
＜（Ｂ）成分＞
無機酸としては、塩酸、硫酸、硝酸及びリン酸からなる群より選ばれる１種以上が挙げられる。（Ｂ）成分は殺菌及びスケール除去に効果がある。
【００１２】
＜（Ｃ）成分＞
４級アンモニウム塩としては、ベンゼトニウム塩、アルキルピリジニウム塩、または下記一般式（１）で示される化合物から選ばれる１種以上が好ましい。
Ｒ1Ｒ2Ｒ3Ｒ4Ｎ+Ｘ-              式（１）
〔式（１）中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のうち少なくとも１つは、アルコキシル基、アルカノイルアミノ基又はアルカノイルオキシ基で置換されていてもよい総炭素数８〜２８のアルキル基又はアルケニル基を示し、残余はフェニル基、ベンジル基、炭素数１〜５のアルキル基、及び−（Ｒ5Ｏ）mＨ（ここでＲ5は炭素数２〜３のアルキレン基を示し、ｍは２〜４０の数を示す）から選ばれる基を示す。Ｘ-はハロゲン原子又は有機性のアニオン基である。〕
【００１３】
中でも、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、及び塩化アルキル（炭素数１０〜２２）トリメチルアンモニウムからなる群より選ばれる１種以上が殺菌性の観点から好ましい。更には塩化ベンザルコニウムがより好ましい。
【００１４】
（Ｃ）成分は殺菌作用に効果がある。特に、（Ａ）成分と（Ｂ）成分に、更に（Ｃ）成分を共存させることにより、殺菌作用において相乗効果が得られ、（Ａ）成分、（Ｂ）成分及び（Ｃ）成分の合計の使用量を低減することができる。
【００１５】
＜殺菌剤組成物＞
有機カルボン酸は水中において解離型酸と非解離型酸として存在するが、本発明では、非解離型酸が発明の効果を発現する上で重要な役割を果たしている。本発明では、無機酸を併用することで、有機カルボン酸は水中で非解離型酸として存在するため殺菌効果が顕著に向上すると考えられる。
【００１６】
有機カルボン酸と無機酸が共存することはＮａＯＨ等による中和滴定曲線によって判断できる。即ち強酸である無機酸部分の中和変曲点と弱酸である有機カルボン酸部分の中和変曲点が二段階で観測されることから両者の存在が判る。また有機カルボン酸と無機酸の陰イオンは、それぞれ高速液体クロマトグラフィとイオンクロマトグラフィによって、その種類と濃度を知ることができる。
【００１７】
本発明の殺菌剤組成物は、（Ａ）成分と（Ｂ）成分の質量比が（Ａ）／（Ｂ）＝０．１〜２００、更に１〜５０、特に５〜２０であることが好ましい。また、（Ｂ）成分と（Ｃ）成分の質量比が（Ｃ）／（Ｂ）＝０．１〜５０、更に０．５〜２０、特に１〜１０であることが好ましい。
【００１８】
使用時において、本発明の殺菌剤組成物は、（Ａ）成分を０．１〜２．０質量％、更に０．４〜１．６質量％、特に０．８〜１．４質量％含有することが好ましい。また、（Ｂ）成分を０．０１〜１．０質量％、更に０．０５〜０．５質量％、特に０．０８〜０．２５質量％含有することが好ましい。また、（Ｃ）成分を０．０２〜０．５質量％、更に０．０５〜０．３５質量％、特に０．１〜０．２５質量％含有することが好ましい。これらの範囲において、より良好な殺菌効果が得られ、排水処理の負荷が低減でき、経済性も良好となる。また、（Ａ）成分、（Ｂ）成分がこれらの範囲であると装置部材への影響も少ない。（Ａ）〜（Ｃ）成分をこの濃度で含有する組成物は、そのまま殺菌、洗浄に供することができる。このような濃度を満たした上で、当該殺菌剤組成物は、洗浄温度でのｐＨが０．１〜３であることが好ましい。更には、使用時の本発明のｐＨは、好ましくは有機カルボン酸のｐＫａ値以下、もし有機多価カルボン酸或いは複数種類の有機カルボン酸を用いる場合は、それらの有機カルボン酸のうち最も小さいｐＫａ値以下、より好ましくは、最も小さい該ｐＫａ値から更に０．５を引いた値以下であることが好ましい。
【００１９】
本発明の殺菌剤組成物は、高濃度の殺菌剤原液として提供されてもよく、該原液を使用時に水で希釈して殺菌剤組成物、好ましくは上記使用時の濃度で（Ａ）〜（Ｃ）成分を含有する殺菌剤組成物を調製することができる。殺菌剤原液として使用できる高濃度の殺菌剤組成物は、（Ａ）成分を１０〜６０質量％、（Ｂ）成分を０．１〜１０質量％、及び（Ｃ）成分を０．１〜３０質量％含有することが好ましく、更には（Ａ）成分を３０〜５０質量％、（Ｂ）成分を２〜８質量％及び（Ｃ）成分を２〜２０質量％含有することが好ましく、特には（Ａ）成分を３５〜４５質量％（Ｂ）成分を３〜６質量％及び（Ｃ）成分を５〜１５質量％含有することが好ましい。これらの範囲において、取り扱い易く、安定性にも優れる。このような高濃度の殺菌剤組成物は、希釈して使用するための組成物であり、通常、１０〜１５０倍に希釈して使用される。
【００２０】
本発明の殺菌剤組成物は、食品加工機、厨房機器、医療機器及びその周辺設備を殺菌洗浄するために使用できる。医療機器としては、人工血液透析装置（その周辺機器等を含む）、内視鏡及び生検鉗子等の内視鏡用器具等の他、剪刀類、ピンセット類、鉗子類、持針器、膣鏡、レトラクター、蛇管、チューブ、カテーテル、カート等が挙げられる。特に、本発明の殺菌剤組成物は、人工血液透析装置用として好適である。
【００２１】
人工血液透析装置を対象とする場合、殺菌に加えて透析液組成由来の炭酸カルシウム分を除去し、さらに透析によって血液から取り除かれたたんぱく質汚れを洗浄することが要求される。内視鏡の場合も殺菌とたんぱく質汚れの除去が要求され、本発明の殺菌剤組成物の適応対象となる。
【００２２】
本発明の殺菌剤組成物は、上記（Ａ）〜（Ｃ）成分、更に本発明の効果を妨げない範囲でその他の成分を含有し、水を含有する液状の組成物とすることができる。その他の成分として、防錆剤、消泡剤、色素及び香料が挙げられる。
【００２３】
本発明の殺菌剤組成物を医療機器、例えば人工血液透析装置に用いる場合、各種のフィルター材料との相互作用を考慮すると、（Ｃ）成分以外の界面活性剤を含有しないことが好ましい。
【００２４】
本発明の殺菌剤組成物は、該組成物を１０℃以上６０℃以下の温度にして対象物に接触させる殺菌方法に供せられる。その際、本発明の殺菌剤組成物は、そのまま、或いは、上記のような高濃度の殺菌剤原液を水で希釈して得た組成物として、好ましくは（Ａ）〜（Ｃ）成分を前記使用時の濃度範囲で含有する組成物として、用いられる。したがって、本発明により、（Ａ）成分０．１〜２．０質量％、（Ｂ）成分０．０１〜１．０質量％、（Ｃ）成分０．０２〜０．５質量％、及び水を含有する殺菌剤組成物を、１０℃以上６０℃以下の温度にして対象物に接触させる殺菌方法が提供される。本発明の殺菌剤組成物の対象物への接触は、適当な希釈液を接触させることにより行われるが、希釈液と対象物は充分に接触させることが重要で、浸漬する方法の他、ライン洗浄等の場合、通液時の流速を例えば０．１〜５０リットル／分で調整する方法や通液後の滞留時間を例えば１０分〜５０時間で調整する方法が利用できる。浸漬する方法ではエアーバブリングや超音波を併用することもできる。またウォッシャーディスインフェクターのような医療機器洗浄機用の洗浄剤として用いることができる。
【実施例】
【００２５】
＜実施例１〜６及び比較例１〜５＞
（１）細菌芽胞の殺菌効果
枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＡＴＣＣ６０５１）をＳＣＤ寒天培地（日本製薬株式会社製）に３０℃で４週間前培養した後、寒天培地上に形成されたコロニーを適量かきとって１ｍＬの滅菌水に懸濁し、検鏡して細菌芽胞（以下、芽胞という）の形成を確認した。この懸濁液を２回遠心洗浄した後、適量の滅菌水で１０8〜１０9ｃｆｕ／ｍＬの菌濃度に調整した。
【００２６】
この芽胞懸濁液の０．１ｍＬを、表１の殺菌剤組成物１．９ｍＬに接種し、表１の殺菌条件で作用させた。所定の温度で、所定の時間作用させた後に、この混合液の０．１ｍＬを、リン酸緩衝液（ｐＨ６．４）１．９ｍＬに混合、不活化した。この不活化液０．４ｍＬを直径９ｃｍの標準寒天培地２枚に（１枚に０．２ｍＬ）塗抹して、３５℃で２４時間培養して、２枚の培地上に形成される全コロニー数をカウントすることで残存生菌数を測定した。コロニーが観察されない時は、検出限界の５０未満とした。結果を表１に示す。なお、表１の殺菌剤組成物の残部は水である。
【００２７】
（２）カビ胞子の殺菌効果
黒コウジカビ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ  ＩＦＯ６３４１）をポテトデキストロース寒天培地（日本製薬株式会社製）に２５℃で４週間前培養した。培地上に発生した菌体をかき取って、ガラスホモジナイザーを使って約５ｍＬの滅菌水に均一に懸濁させた。この懸濁液を２回遠心洗浄した後、適量の滅菌水で１０7〜１０8ｃｆｕ／ｍＬの菌濃度に調整した。
【００２８】
この胞子懸濁液の０．１ｍＬを、表１に示す殺菌剤組成物１．９ｍＬに接種し、表１の殺菌条件で作用させた。所定の温度で、所定の時間作用させた後に、この混合液の０．１ｍＬを、リン酸緩衝液（ｐＨ６．４）１．９ｍＬに混合、不活化した。この不活化液０．４ｍＬを直径９ｃｍの標準寒天培地２枚に（１枚に０．２ｍＬ）塗抹して、２５℃で７２時間培養して、２枚の培地上に形成される全コロニー数をカウントすることで残存生菌数を測定した。コロニーが観察されない時は、検出限界の５０未満とした。結果を表１に示す。
【００２９】
（３）たんぱく質汚れ及び炭酸カルシウムの除去性
ラインの一部を下記の条件で汚染させたシリコンチューブに置き換え、ポンプを介して液を循環できるようにループ状にラインを組み立て、表１の殺菌剤組成物を所定の条件で循環させた。循環条件は、循環時間４０分、循環温度２５℃、循環流量５００ｍＬ／分とした。循環後、汚染させたシリコンチューブを取り外し、内部の汚染度を評価した。結果を表１に示す。
【００３０】
＊シリコンチューブの汚染条件
内径６ｍｍのシリコンチューブ約４０ｃｍに標準的な透析液〔扶桑薬品工業（株）、キンダリー液ＡＦ−１号〕を充満させて、横置きにして３日間静置した。炭酸カルシウムの白い結晶が析出したのを確認して透析液を廃棄した。更に馬血液の約２ｍＬを同じシリコンチューブの内面に添加して、６０℃で２時間横置きにして馬血液を熱劣化させ固着させた。
【００３１】
＊たんぱく質汚れの評価法
洗浄終了後シリコンチューブを取り外し、血液汚れの部分を含む約５ｃｍを縦に割断し、アミドブラック染色法でたんぱく質付着状態を、目視で下記の４段階で評価した。
目視評価基準：評価対象面の染色程度
１．「なし」＝染色されない
２．「少し」＝薄い青色
３．「中程度」＝青色
４．「多い」＝濃い青色
【００３２】
＊炭酸カルシウム付着量の評価法
たんぱく質汚れの評価に用いた残りのシリコンチューブ約３０ｃｍの内部に０．１Ｎ塩酸溶液を満たし、付着している炭酸カルシウム分を溶出し、その溶出液のＣａ濃度を測定して、付着炭酸カルシウム量を求めた。シリコンチューブ約３０ｃｍの内部の容積に対して溶出したＣａＣＯ3の量をｍｇ／Ｌの単位で示した。
【００３３】
【表１】
0005095308.tif 000002
【００３４】
表中の（Ｃ）成分は以下のものである。
・サニゾールＣ：塩化ベンザルコニウム（花王（株）製）〔式（１）のＲ1がベンジル基、Ｒ2、Ｒ3がメチル基、Ｒ4が炭素数１２〜１６の混合アルキル基である化合物〕
・コータミン６０Ｗ：塩化セチルトリメチルアンモニウム（花王（株）製）〔式（１）のＲ1、Ｒ2、Ｒ3がメチル基、Ｒ4が炭素数１６のアルキル基である化合物〕
【００３５】
＜実施例７〜９＞
ＤＬ−リンゴ酸４０．０ｇを３６．０ｇのイオン交換水に溶解させる。そこへ９７％濃硫酸とサニゾールＣ（有効分５０．２質量％）を各々４．１２ｇと１５．９ｇを添加溶解させた。イオン交換水を足して全体を１００．０ｇとして高濃度の殺菌剤原液を得た。この殺菌剤原液は、−５℃と６０℃で２ヶ月間保存しても沈殿などを生じることなく安定であった。この高濃度の殺菌剤原液を３０倍、４０倍及び５０倍希釈して得られる殺菌剤組成物を用いて、実施例１等と同様の試験を行った。結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
0005095308.tif 000003
【００３７】
表１と表２の結果より、本発明の殺菌剤組成物は、殺菌性に優れ、同時に炭酸カルシウムとたんぱく質汚れを効果的に除去できる殺菌剤組成物であることが示された。