(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式:
【化１】
0005089845.tif 000012
(式中、
R1、R2、R3、R4およびR5は独立して、H、-CN、-OH、-OCH3またはハロゲンであって、R1、R2、R3、R4およびR5の少なくとも1つが-CNであり、そして
R6は、C1〜C12の直鎖状または分枝状のアルキレン、C2〜C12の直鎖状または分枝状のアルケニレン、アリーレン、C1〜C12の直鎖状または分枝状のアルキレン(アリーレン)またはアリーレン(C2〜C12の直鎖状または分枝状のアルキレン)であり、ただし、以下の表に記載された置換基の組み合わせを有する化合物を除く
【表１】
0005089845.tif 000013
)を有する化合物およびその製薬学的に許容可能な塩
から選択される化合物。
【請求項２】
(A)生物学的活性薬剤、および
(B)請求項1に記載される少なくとも1つの化合物
を含む製薬組成物であって、
前記生物学的活性薬剤が、成長ホルモン類、ヒト成長ホルモン(hGH) 類、組換えヒト成長ホルモン(rhGH) 類、ウシ成長ホルモン類、ブタ成長ホルモン類、成長ホルモン放出ホルモン類、インターフェロン類、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ヒトカルシトニン;エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、抗原類、モノクローナル抗体類、ソマトスタチン、プロテアーゼ阻害剤類、アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン類、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、プロスタグランジン類、シクロスポリン、バソプレッシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、デスフェリオキサミン(DFO)、副甲状腺ホルモン(PTH)、PTH断片、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、ビタミン類;これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類;およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される、製薬組成物。
【請求項３】
生物学的活性薬剤が、hGH、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類、またはこれらの組合せを含む、請求項2に記載の組成物。
【請求項４】
生物学的活性薬剤がクロモリンナトリウムである、請求項2に記載の組成物。
【請求項５】
生物学的活性薬剤がヘパリンである、請求項2に記載の組成物。
【請求項６】
生物学的活性薬剤がインスリンである、請求項2に記載の組成物。
【請求項７】
生物学的活性薬剤がヒト成長ホルモンである、請求項2に記載の組成物。
【請求項８】
(A)請求項2に記載の組成物、および
(B)賦形剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、可塑剤、着色剤、及び投薬用ビヒクルのいずれか一つ、またはこれらの任意の組合せ
を含む単位剤形。
【請求項９】
生物学的活性薬剤が、hGH、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類、またはこれらの組合せを含む、請求項8に記載の単位剤形。
【請求項１０】
錠剤、カプセル、粒子剤、粉末剤、サッシェ剤または溶液の形態である、請求項8に記載の単位剤形。
【請求項１１】
投薬用ビヒクルが、水、25%プロピレングリコール水溶液、リン酸塩緩衝液、1,2-プロパンジオール、エタノール、およびこれらの任意の組合せから選択される液体である、請求項8に記載の単位剤形。
【請求項１２】
組成物を調製するための方法であって、
(A)少なくとも1つの生物学的活性薬剤、
(B)請求項1に記載の化合物、および
(C)場合により投薬用ビヒクル
を混合することを含み、
前記生物学的活性薬剤が、成長ホルモン類、ヒト成長ホルモン(hGH) 類、組換えヒト成長ホルモン(rhGH) 類、ウシ成長ホルモン類、ブタ成長ホルモン類、成長ホルモン放出ホルモン類、インターフェロン類、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ヒトカルシトニン;エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、抗原類、モノクローナル抗体類、ソマトスタチン、プロテアーゼ阻害剤類、アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン類、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、プロスタグランジン類、シクロスポリン、バソプレッシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、デスフェリオキサミン(DFO)、副甲状腺ホルモン(PTH)、PTH断片、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、ビタミン類;これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類;およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される、方法。
【請求項１３】
下記の化合物:
【化２】
0005089845.tif 000014
およびその製薬学的に許容可能な塩
から選択される化合物。
【請求項１４】
(A) 生物学的活性薬剤、ならびに
(B)請求項13に記載の化合物またはそれらの混合物
を含む製薬組成物であって、
前記生物学的活性薬剤が、成長ホルモン類、ヒト成長ホルモン(hGH) 類、組換えヒト成長ホルモン(rhGH) 類、ウシ成長ホルモン類、ブタ成長ホルモン類、成長ホルモン放出ホルモン類、インターフェロン類、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ヒトカルシトニン;エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、抗原類、モノクローナル抗体類、ソマトスタチン、プロテアーゼ阻害剤類、アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン類、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、プロスタグランジン類、シクロスポリン、バソプレッシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、デスフェリオキサミン(DFO)、副甲状腺ホルモン(PTH)、PTH断片、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、ビタミン類;これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類;およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される、製薬組成物。
【請求項１５】
製薬組成物を調製するための方法であって、
(A)少なくとも1つの生物学的活性薬剤、
(B)請求項13に記載の化合物またはそれらの混合物、および
(C)場合により投薬用ビヒクル
を混合することを含み、
前記生物学的活性薬剤が、成長ホルモン類、ヒト成長ホルモン(hGH) 類、組換えヒト成長ホルモン(rhGH) 類、ウシ成長ホルモン類、ブタ成長ホルモン類、成長ホルモン放出ホルモン類、インターフェロン類、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子(IGF)、IGF-1、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、極超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ヒトカルシトニン;エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、抗原類、モノクローナル抗体類、ソマトスタチン、プロテアーゼ阻害剤類、アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン類、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、プロスタグランジン類、シクロスポリン、バソプレッシン、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸ナトリウム、クロモグリク酸二ナトリウム、バンコマイシン、デスフェリオキサミン(DFO)、副甲状腺ホルモン(PTH)、PTH断片、抗微生物剤、抗生物質、抗真菌剤、ダプトマイシン、ビタミン類;これらの化合物のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類;およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される、方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第60/230,331号および同第60/237,235号(それぞれ、2000年9月6日出願および2000年10月2日出願、これらはともに参照として本明細書中に組み込まれる)の利益を主張する。
【０００２】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤などの活性薬剤を標的に送達するためのシアノフェノキシカルボン酸化合物に関する。これらの化合物は、動物に対する経口投与経路、結腸内投与経路、肺投与経路および他の投与経路のための、活性薬剤との非共有結合的混合物を形成させるために十分に適している。そのような組成物の調製方法および投与方法もまた開示される。
【０００３】
【従来の技術】
活性薬剤を送達する従来の手段は、多くの場合、生物学的障害、化学的障害および物理的障害によって大きく制限されている。典型的には、これらの障害は、送達が生じる環境、送達に対する標的の環境、および/または標的自体によって課せられる。生物学的活性薬剤および化学的活性薬剤は、そのような障害の攻撃を特に受けやすい。
【０００４】
生物学的活性および化学的活性な薬理学的薬剤および治療薬剤を動物に送達する際、様々な障害が身体によって課せられる。物理的障害の例には、ある種の活性薬剤に対して比較的不透過性であり、そして標的に達する前に横断しなければならない皮膚、脂質二重層および様々な器官膜、例えば、循環系などがある。化学的障害には、胃腸(GI)管におけるpH変化、および分解酵素が含まれるが、これらに限定されない。
【０００５】
これらの障害は、経口送達システムの設計では特に重要である。多くの生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤の経口送達は、生物学的障害、化学的障害および物理的障害がなければ、動物に投与するための好まれる経路である。経口投与が典型的には行われない多数の薬剤には、カルシトニンおよびインスリン;多糖、および特に、ヘパリン(これに限定されない)を含むムコ多糖;ヘパリノイド類;抗生物質;ならびに他の有機物質などの生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤が含まれる。これらの薬剤は、酸加水分解、酵素などによって胃腸管内で迅速に効果がなくなることがあり、または分解されることがある。さらに、高分子薬剤のサイズおよび構造により、吸収が妨げられることがある。
【０００６】
攻撃を受けやすい薬理学的薬剤を経口投与するためのより初期の方法は、アジュバント(例えば、レソルシノール類、ならびにポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびn-ヘキサデシルポリエチレンエーテルなどの非イオン性界面活性剤)を同時に投与して、腸壁の透過性を人為的に増大させること、そしてまた、酵素阻害剤(例えば、膵臓トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロホスファート(DFF)およびトラジロール)を同時に投与して、酵素分解を阻害することに頼っている。リポソームもまた、インスリンおよびヘパリンに対する薬物送達システムとして記載されている。しかし、そのような薬物送達システムの広範囲の使用は下記の理由から妨げられている:(1)これらのシステムは毒性量のアジュバントまたは阻害剤を必要とする;(2)好適な低分子量の積み荷(すなわち、活性薬剤)を利用することができない;(3)これらのシステムは安定性が悪く、有効期間が不十分である;(4)これらのシステムは製造が困難である;(5)これらのシステムは活性薬剤(積み荷)を保護することができない;(6)これらのシステムは活性薬剤を不利な方向に変化させる;または(7)これらのシステムは活性薬剤の吸収させることができないか、または促進することができない。
【０００７】
プロテノイドのマイクロスフェアが、医薬品を送達するために使用されている。例えば、米国特許第5,401,516号、同第5,443,841号および再発行特許第35,862号を参照のこと。さらに、ある種の修飾されたアミノ酸が、医薬品を送達するために使用されている。例えば、米国特許第5,629,020号、同第5,643,957号、同第5,766,633号、同第5,776,888号および同第5,866,536号を参照のこと。
【０００８】
より近年には、ポリマーが、ポリマー状の送達剤を得るために、修飾アミノ酸またはその誘導体に連結基を介して結合させられている。修飾されたポリマーは任意のポリマーであり得るが、好ましいポリマーには、ポリエチレングリコール(PEG)およびその誘導体が含まれ、しかし、これらに限定されない。例えば、国際特許出願公開WO00/40203を参照のこと。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、調製が容易であり、かつ広範囲の活性薬剤を様々な経路によって送達することができる単純で、安価な送達システムが依然として求められている。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、活性薬剤の送達を容易にする化合物および組成物を提供する。本発明の送達剤化合物には、下記の式を有する化合物が含まれる:
【化６】
0005089845.tif 000002
(式中、
R1、R2、R3、R4およびR5は独立して、H、-CN、-OH、-OCH3またはハロゲンであって、R1、R2、R3、R4およびR5の少なくとも1つが-CNであり、そして
R6は、C1〜C12の直鎖状または分枝状のアルキレン、アルケニレン、アリーレン、アルキル(アリーレン)またはアリール(アルキレン)であり、
ただし、R1が-CNであり、R4がHまたは-CNであり、かつR2、R3およびR5がHであるとき、R6はメチレン((CH2)1)ではない)
およびその塩。
【００１１】
好ましい実施形態において、R1はHまたは-CNである。別の好ましい実施形態において、R4は、H、-CNまたはハロゲンである。別の好ましい実施形態において、ハロゲンはClである。
【００１２】
好ましくは、R6はC1〜C9アルキレンである。より好ましくは、RはC2〜C9アルキレンである。より好ましい実施形態によれば、R6はC4〜C7アルキレンである。別の好ましい実施形態によれば、R6は、(CH2)1、(CH2)3、(CH2)4、(CH2)5、(CH2)7または(CH2)9である。
【００１３】
好ましい実施形態において、R1は-CNである。好ましくは、R2、R3、R4およびR5はHまたはハロゲンであり、好ましくはClである。好ましくは、R6は(CH2)n(式中、nは1〜12であり、好ましくは2〜9であり、より好ましくは3〜7であり、より好ましくは7である)であるか、またはR6は-(CH2)-パラ-フェニレンである。
【００１４】
別の好ましい実施形態において、R3は-CNである。好ましくは、R1、R2、R4およびR5はHまたはハロゲンであり、好ましくはClである。好ましくは、R6は(CH2)n(式中、nは1〜12であり、好ましくは2〜9であり、より好ましくは3〜7であり、より好ましくは7である)である。
【００１５】
別の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、表1の化合物またはその塩またはその混合物を含む:
【表１】
0005089845.tif 000003
【００１６】
化合物1〜9の化学構造を下記に示す:
【化７】
0005089845.tif 000004
【化８】
0005089845.tif 000005
【化９】
0005089845.tif 000006
およびその塩またはその混合物。
【００１７】
本発明はまた、上記式の送達剤化合物の少なくとも1つと、少なくとも1つの活性薬剤とを含む組成物を提供する。これらの組成物は、そのような送達剤化合物を用いない活性薬剤の投与と比較して、活性薬剤の生物利用性が増大または改善されて、活性薬剤を選択された生物学的システムに送達する。
【００１８】
本発明の組成物を含む単位剤形もまた提供される。投薬単位は液体の形態であり得るか、または錠剤、カプセルもしくは粒子剤(粉末剤もしくはサッシェ剤を含む)などの固体の形態であり得る。
【００１９】
別の実施形態は、上記式の送達剤化合物の少なくとも1つと、活性薬剤とを含む組成物を動物に投与することによって、活性薬剤を、そのような活性薬剤を必要とする動物に投与するための方法である。好ましい投与経路には、経口経路、結腸内経路および肺経路が含まれる。
【００２０】
さらに別の実施形態は、本発明の組成物の有効な量を投与することによって、疾患を処置するか、または所望する生理学的作用を、それを必要とする動物において達成するための方法である。
【００２１】
さらに別の実施形態は、上記式の少なくとも1つの送達剤化合物と、少なくとも1つの活性薬剤とを混合することによって本発明の組成物を調製する方法である。
【００２２】
【発明の実施の形態】
送達剤化合物
本明細書中で使用される用語「アルキル」および用語「アルケニル」には、それぞれ、直鎖状および分枝状のアルキル置換基およびアルケニル置換基が含まれる。
【００２３】
送達剤化合物はカルボン酸またはその塩の形態であり得る。好適な塩には、有機塩および無機塩、例えば、ナトリウム、カリウムおよびリチウムなどのアルカリ金属塩;マグネシウム、カルシウムまたはバリウムなどのアルカリ土類金属塩類;アンモニウム塩類;リシンまたはアルギニンなどの塩基性アミノ酸類;ならびにジメチルアミンまたはピリジンなどの有機アミン類が含まれるが、これらに限定されない。好ましくは、塩はナトリウム塩類である。塩は、一ナトリウム塩類および二ナトリウム塩類などの一価塩類または二価塩類であり得る。塩はまた、溶媒和物類であってもよく、これには、エタノール溶媒和物類および水和物類が含まれる。
【００２４】
本発明の送達剤化合物の塩は、この分野で知られている方法によって調製することができる。例えば、ナトリウム塩類は、送達剤化合物をエタノールに溶解し、水酸化ナトリウム水溶液を加えることによって調製することができる。
【００２５】
さらに、1種または複数の送達剤化合物を含むポリアミノ酸類およびペプチド類を使用することができる。
【００２６】
アミノ酸は、少なくとも1つのフリーのアミン基を有する任意のカルボン酸であり、これには、天然に存在するアミノ酸および合成アミノ酸が含まれる。ポリアミノ酸は、(ペプチド結合で連結された2つ以上のアミノ酸である)ペプチド、または例えば、エステル連結もしくは無水物連結により連結され得る他の基によって形成される結合で連結される2つ以上のアミノ酸のいずれかである。ペプチドは、長さが、2つのアミノ酸を有するジペプチドから、数百アミノ酸を有するポリペプチドまで変化し得る。これらのアミノ酸またはペプチド単位の1つまたは複数をアシル化またはスルホン化することができる。
【００２７】
本明細書中に記載される化合物はアミノ酸に由来し得るか、または本開示に基づいて当業者の技術に含まれる方法によって、そして国際特許出願公開WO96/30036および同WO97/36480ならびに米国特許第5,643,957号および同第5,650,386号に記載される方法によってアミノ酸から容易に調製することができる。例えば、送達剤化合物は、1つのアミノ酸を、アミノ酸に存在する非修飾アミノ基と反応して、アミドを形成する適切なアシル化剤またはアミン修飾剤と反応させることによって調製することができる。様々な保護基を、当業者に知られているように、望ましくない副反応を避けるために使用することができる。保護基に関しては、T. W. Greene、Protecting Groups in Organic Synthesis、Wiley、New York(1981)が参照される(この開示はこれにより参照として本明細書中に組み込まれる)。
【００２８】
送達剤化合物は、再結晶によって、または単独もしくはタンデムに連結された1種または複数の固体クロマトグラフィー担体における分別によって精製することができる。好適な再結晶溶媒系には、エタノール、水、ヘプタン、酢酸エチル、アセトニトリル、メタノール、テトラヒドロフランおよびこれらの混合物は含まれるが、これらに限定されない。分別は、メタノール/n-プロパノールの混合物を移動相として使用するアルミナなどの好適なクロマトグラフィー担体において;移動相としてトリフルオロ酢酸/アセトニトリルの混合物を使用する逆相クロマトグラフィー;そして移動相として水または適切な緩衝液を使用するイオン交換クロマトグラフィーで行うことができる。アニオン交換クロマトグラフィーが行われるとき、好ましくは、0〜500mMの塩化ナトリウムの勾配が用いられる。
【００２９】
送達剤化合物は、-NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH2NH-、-NHCH2-、-CH2NHC(O)O-、-OC(O)NHCH2-、-CH2NHCOCH2O-、-OCH2C(O)NHCH2-、-NHC(O)CH2O-、-OCH2C(O)NH-、-NH-、-O-および炭素-炭素結合からなる群から選択される連結基によって送達剤化合物に結合したポリマーを含有することができる。1つの好ましい実施形態によれば、高分子の送達剤はポリペプチドまたはポリアミノ酸ではない。ポリマーは任意のポリマーであってもよく、これには、哺乳動物において安全に使用される交互共重合体、ブロック共重合体およびランダム共重合体(これらに限定されない)が含まれる。好ましいポリマーには、ポリエチレン;ポリアクリラート;ポリメタクリラート;ポリ(オキシエチレン);ポリ(プロピレン);ポリプロピレングリコール;ポリエチレングリコール(PEG);ならびにそれらの誘導体およびそれらの組合せが含まれるが、これらに限定されない。ポリマーの分子量は、典型的には、約100ダルトンから約200,000ダルトンの範囲である。ポリマーの分子量は、好ましくは、約200ダルトンから約10,000ダルトンの範囲である。1つの実施形態において、ポリマーの分子量は約200ダルトンから約600ダルトンの範囲であり、より好ましくは約300ダルトンから約550ダルトンの範囲である。
【００３０】
活性薬剤
本発明において使用される好ましい活性薬剤には、生物学的活性薬剤および化学的活性薬剤が含まれ、これらには、殺虫剤、薬理学薬剤および治療薬剤が含まれるが、これらに限定されない。好適な活性薬剤には、酸加水分解、酵素などによって胃腸管内で効果が低下するか、効果がなくなるか、または破壊される薬剤が含まれる。また、好適な活性薬剤として、経口服用されたとき、その生理化学的特性、例えば、サイズ、構造または電荷などにより、吸収が妨げられるか、または妨害されるそのような高分子薬剤も含まれる。
【００３１】
例えば、本発明において使用される好適な生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤には、下記が含まれるが、それらに限定されない:タンパク質;ポリペプチド;ペプチド;ホルモン;多糖、および特にムコ多糖の混合物;炭水化物;脂質;小さい極性有機分子(すなわち、分子量が500ダルトン以下である極性の有機分子);他の有機化合物;ならびに特に、胃腸管の粘膜を単独で通過しない化合物(または、投与された量の一部のみが通過する化合物)および/もしくは胃腸管において酸および酵素による化学的切断を受けやすい化合物;またはそれらの任意の組合せ。
【００３２】
さらなる例には、その合成供給源、天然供給源または組換え供給源を含む下記が含まれるが、それらに限定されない:成長ホルモン類、これには、ヒト成長ホルモン(hGH) 類、組換えヒト成長ホルモン(rhGH) 類、ウシ成長ホルモン類およびブタ成長ホルモン類が含まれる;成長ホルモン放出ホルモン類;成長ホルモン放出因子、インターフェロン類、これには、α、βおよびγが含まれる;インターロイキン-1;インターロイキン-2;インスリン、これには、任意に対イオン(亜鉛、ナトリウム、カルシウムおよびアンモニウムを含む)を有するブタ型、ウシ型、ヒト型およびヒト組換え型が含まれる;インスリン様増殖因子、これにはIGF-1が含まれる;ヘパリン、これには、未分画ヘパリン、ヘパリノイド類、デルマタン類、コンドロイチン類、低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリンおよび極超低分子量ヘパリンが含まれる;カルシトニン、これには、サケ型、ウナギ型、ブタ型およびヒト型が含まれる;エリスロポイエチン;心房性ナトリウム利尿因子;抗原類;モノクローナル抗体類;ソマトスタチン;プロテアーゼ阻害剤類;アドレノコルチコトロピン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン;オキシトシン;黄体形成ホルモン放出ホルモン;卵胞刺激ホルモン;グルコセレブロシダーゼ;トロンボポイエチン;フィルグラスチム;プロスタグランジン類;シクロスポリン;バソプレッシン;クロモリンナトリウム(クロモグリク酸ナトリウムまたはクロモグリク酸二ナトリウム);バンコマイシン;デスフェリオキサミン(DFO);ビスホスホネート類、これには、アレンドロン酸塩、チルドロン酸塩、エチドロン酸塩、クロドロン酸塩、パミドロン酸塩、オルパドロン酸塩およびインカドロン酸塩が含まれる;副甲状腺ホルモン(PTH)、これには、その断片が含まれる;抗微生物剤類、これには、抗生物質類、抗菌剤類および抗真菌剤類が含まれる;ビタミン類;これらの化合物のアナログ類、断片類、模倣体類およびポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体類;またはこれらの任意の組合せ。抗生物質の非限定的な例には、ダプトマイシンおよびそのアナログ類などのグラム陽性菌に作用する殺菌性のリポペプチド系抗生物質類および環状ペプチド系抗生物質類が含まれる。
【００３３】
送達システム
本発明の組成物は、本発明の1種または複数の送達剤化合物(その塩類およびポリマー誘導体類を含む)と、1種または複数の活性薬剤とを含む。1つの実施形態において、1種または複数の送達剤化合物、またはこれらの化合物の塩類、またはこれらの化合物もしくは塩がそのユニットの1つまたは複数を形成するポリアミノ酸類もしくはペプチド類を、投与組成物を形成させるために、投与に先立って活性薬剤と混合することによって送達剤として使用することができる。
【００３４】
投与組成物は液体の形態であり得る。溶液媒体は、水(例えば、サケカルシトニン、副甲状腺ホルモンおよびエリスロポイエチンの場合)、25%プロピレングリコール水溶液(例えば、ヘパリンの場合)、およびリン酸塩緩衝液(例えば、rhGHの場合)であり得る。他の投薬用ビヒクルには、ポリエチレングリコールが含まれる。投薬用溶液は、投与直前に、送達剤化合物の溶液を活性薬剤の溶液と混合することによって調製することができる。あるいは、送達剤化合物(または活性薬剤)の溶液は固体形態の活性薬剤(または送達剤化合物)と混合することができる。送達剤化合物および活性薬剤はまた、乾燥粉末として混合することができる。送達剤化合物および活性薬剤はまた、製造プロセスのときに混合することができる。
【００３５】
投薬用溶液は、場合により、様々な添加剤、例えば、リン酸塩緩衝剤塩類、クエン酸、グリコール類、または他の分散剤を含有することができる。安定化用の添加剤を、溶液に、好ましくは約0.1%〜20%(w/v)の間の濃度で含むことができる。
【００３６】
あるいは、投与組成物は、錠剤、カプセルまたは粒子剤(粉末剤またはサッシェ剤など)などの固体の形態であり得る。固体の投薬形態物は、固体形態の送達剤化合物を固体形態の活性薬剤と混合することによって調製することができる。あるいは、固体物は、冷凍乾燥(凍結乾燥)、沈殿化、結晶化および固体分散などのこの分野で知られている方法によって送達剤化合物および活性薬剤の溶液から得ることができる。
【００３７】
本発明の投与組成物はまた1種または複数の酵素阻害剤を含むことができる。そのような酵素阻害剤には、アクチノニンまたはエピアクチノニンおよびそれらの誘導体類などの化合物が含まれるが、これらに限定されない。他の酵素阻害剤には、アプロチニン(トラジロール)およびボーマン-バーク阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。
【００３８】
本発明の投与組成物において使用される活性薬剤の量は、標的の適応症に対して特定の活性薬剤の目的を達成するために有効な量である。組成物における活性薬剤の量は、典型的には、薬理学的、生物学的、治療的または化学的に有効な量である。しかし、組成物が単位剤形中で使用されるときの量は、その量より少なくてもよい。これは、単位剤形が送達剤化合物/活性薬剤組成物を複数含有し得るか、または薬理学的、生物学的、治療的もしくは化学的に有効な量の一部を含有し得るからである。その場合、有効総量を、活性薬剤の有効な量を合計で含有する累積数のユニットで投与することができる。
【００３９】
使用される活性薬剤の総量は、当業者に知られている方法によって決定することができる。しかし、本発明の組成物は、活性薬剤を単独で含有する組成物よりも効率的に活性薬剤を送達することができるので、先行技術の単位剤形または送達システムにおいて使用される量よりも少ない量の生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤を対象者に投与することができ、その一方で、同じ血中レベルおよび/または治療効果を依然として達成することができる。
【００４０】
本明細書中に開示される送達剤化合物は、生物学的活性薬剤および化学的活性薬剤を、特に経口、鼻腔内、舌下、十二指腸内、皮下、口内、結腸内、直腸的、膣的、粘膜、肺、経皮、皮内、非経口的、静脈内、筋肉内および眼の各システムで送達することを容易にし、同様に血液脳関門の横断を容易にする。
【００４１】
単位剤形はまた、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、可塑剤、着色剤、着香剤、矯味剤、糖、甘味剤、塩、および投薬用ビヒクル(水、1,2-プロパンジオール、エタノール、オリーブ油またはこれらの任意の組合せを含むが、これらに限定されない)のいずれか1つまたは任意の組合せを含むことができる。
【００４２】
本発明の化合物および組成物は、ニワトリなどの鳥類;齧歯類、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、霊長類および特にヒトを含む哺乳動物;および昆虫(これらに限定されない)を含む任意の動物に生物学的活性薬剤または化学的活性薬剤を投与するために有用である。
【００４３】
本発明のシステムは、それ以外の場合には活性薬剤がその標的域(すなわち、送達組成物の活性薬剤が放出される目的領域)に達する前に、そして投与された動物の身体内で遭遇する条件によって分解されるか、または効果が低下させられる化学的活性薬剤または生物学的活性薬剤を送達するために特に好都合である。具体的には、本発明の送達剤化合物および組成物は、活性薬剤、特に、通常の場合には経口的に送達することができない活性薬剤、または改善された送達が所望される活性薬剤を経口投与することにおいて有用である。
【００４４】
送達剤化合物および活性薬剤を含む組成物は、送達剤を伴わない活性薬剤の投与と比較して、活性薬剤の生物利用性を増大または改善させて、活性薬剤を選択された生物学的システムに送達することにおいて有用である。送達は、より活性薬剤を一定の期間にわたって送達することによって、または(より速く送達するか、または送達を遅らせるような)活性薬剤を特定の期間内に送達することにおいて、または活性薬剤を特定の時期に、もしくは(持続的送達のように)一定の期間にわたって送達することにおいて改善され得る。
【００４５】
本発明の別の実施形態は、本発明の組成物を投与することによって、動物において、疾患を処置もしくは防止し、または所望する生理学的効果を達成するための方法である。そのような疾患および生理学的効果は下記の表に列挙される。活性薬剤に対する具体的な適用症は、Physicians' Desk Reference(第54版、2000、Medical Economics Company, Inc.、Montvale、NJ)に見出すことができる(これは参照として本明細書中に組み込まれる)。下記の表における活性薬剤には、それらのアナログ類、断片類、模倣体類およびポリエチレングリコール修飾誘導体類が含まれる。
【表２】
0005089845.tif 000007
【００４６】
例えば、本発明の1つの実施形態は、インスリンと、少なくとも1つの本発明の送達剤化合物とを投与することによって、糖尿病罹患患者、または糖尿病に罹りやすい患者を処置するための方法である。
【００４７】
投与後、組成物または単位剤形に存在する活性薬剤は循環に取り込まれる。薬剤の生物利用性は、血液における知られている薬理学的活性を測定することによって、例えば、ヘパリンにより引き起こされる血液凝固時間の増大、またはカルシトニンにより引き起こされる循環カルシウムレベルの低下を測定することによって容易に評価される。あるいは、活性薬剤自身の循環レベルを直接測定することができる。
【００４８】
【実施例】
下記の実施例により、本発明が、限定されることなく例示される。すべての部は、別途示されない限り、重量比で示される。
【００４９】
下記に列挙される化合物に対するプロトン核磁気共鳴(1H-NMR)分析は、別途示されない限り、溶媒としてジメチルスルホキシド(DMSO-d6)を使用して、300MHzのBruker分光光度計で行われた。
【００５０】
実施例1-化合物の調製
1a:化合物1の調製
還流冷却器、磁石撹拌子および窒素導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、5g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、150mLの無水エタノールおよび15.7mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、ブロモ酢酸エチル(4.6mL、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００５１】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(250mL)に溶解して、飽和NaHCO3(3×100mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(150mL)/水(10mL)に溶解した。LiOH(4g)を加え、得られた混合物を3時間にわたって加熱還流した(75℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。100mLのH2Oを加え、水溶液を濃塩酸で約2のpHに酸性化した。溶液を4℃の冷蔵庫で冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、6.71gの生成物3-(2-シアノフェノキシ)酢酸を得た(90%の収率)。融点:179〜181℃。分子式:C9H7NO3。燃焼分析:%C:61.02(計算値)、60.69(実測値);%H:3.98(計算値)、3.98(実測値);%N:7.91(計算値)、7.66(実測値)。
【００５２】
1b.化合物2の調製
還流冷却器、磁石撹拌子およびN2導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、5g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、150mLの無水エタノールおよび15.7mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、4-ブロモ酪酸エチル(6.0mL、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００５３】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(300mL)に溶解して、飽和NaHCO3(2×100mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(150mL)/水(10mL)に溶解した。LiOH(5グラム)を加え、得られた混合物を3時間にわたって加熱還流した(75℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。75mLのH2Oを加え、水溶液を濃HClで約2のpHに酸性化した。溶液を4℃の冷蔵庫で冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、生成物の4-(2-シアノフェノキシ)ブタン酸を得た(71%の収率)。融点:127〜128℃。分子式:C11H11NO3。燃焼分析:%C:64.38(計算値)、64.01(実測値);%H:5.4(計算値)、5.2(実測値);%N:6.83(計算値)、6.74(実測値)。
【００５４】
1c:化合物3の調製
還流冷却器、磁石撹拌子および窒素導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、4g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、150mLの無水エタノールおよび12.5mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、5-ブロモ吉草酸エチル(5.3mL、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(80℃)。反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(200mL)に溶解して、飽和NaHCO3(2×100mL)、H2O(1×50mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(150mL)/水(10mL)に溶解した。LiOH(3.5g)を加え、得られた混合物を3時間にわたって加熱還流した(80℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。75mLのH2Oを加え、水溶液を濃HClで約2のpHに酸性化した。フラスコを、4℃の冷蔵庫に4時間置くことによって冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、6.2gの物質を得た(84%の収率)。この物質を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(約95/5)から再結晶することによってさらに精製して、5.3gの5-(2-シアノフェノキシ)ペンタン酸を得た。融点:87〜89℃。燃焼分析:%C:65.74(計算値)、65.52(実測値);%H:5.98(計算値)、5.86(実測値);%N:6.39(計算値)、6.38(実測値)。1HNMR 分析:(d6-DMSO):δ12.0、s、1H(COOH);δ7.73〜7.62、m、2H(CNに対してオルト位およびパラ位の芳香族CH);δ7.25、d、1H、J=8.5Hz(ORに対してパラ位の芳香族CH);δ7.10、dt、1H、J=0.7および6.8Hz(ORに対してオルト位の芳香族CH);δ4.16、t、2H、J=7.5Hz(Oに対してα位のCH2);δ2.33、t、2H、J=7.2Hz(COOHに対してα位のCH2);δ1.80〜1.64、m、4H(残る脂肪族CH2)。
【００５５】
1d:化合物4の調製
還流冷却器、磁石撹拌子およびN2導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、5g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、150mLの無水エタノールおよび15.7mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、6-ブロモヘキサン酸エチル(7.5mL、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００５６】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(300mL)に溶解して、飽和NaHCO3(3×100mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×100mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(150mL)/水(15mL)に溶解した。LiOH(7g)を加え、得られた混合物を2時間にわたって加熱還流した(75℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。125mLのH2Oを加え、水溶液を濃HClで約2のpHに酸性化した。溶液を4℃の冷蔵庫で冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、粗製の酸を得た。この物質を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(95/5)から再結晶することによってさらに精製して、6.81gの6-(2-シアノフェノキシ)ヘキサン酸を得た(70%の収率)。融点:77〜80℃。カールフィッシャー:1.26%のH2O。H2Oを伴う分子式:C13H15NO3*0.1652。燃焼分析:%C:66.09(計算値)、66.19(実測値);%H:6.54(計算値)、6.36(実測値);%N:5.93(計算値)、5.9(実測値)。1H  NMR分析:(d6-DMSO):δ12.0、s、1H;7.72〜7.61、m、2H;7.25、d、1H;7.10、dt、1H;4.14、t、2H;2.26、t、2H;1.80〜1.41、m、6H。
【００５７】
1e.化合物5の調製
還流冷却器、磁石撹拌子およびN2導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、10g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、400mLの無水エタノールおよび31.3mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、8-ブロモオクタン酸エチル(21g、1当量)を15分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(80℃)。
【００５８】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(400mL)に溶解して、飽和NaHCO3(3×100mL)、ブリーチ(1×100mL)、H2O(1×50mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(200mL)/水(20mL)に溶解した。LiOH(8.6g)を加え、得られた混合物を3時間にわたって加熱還流した(80℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。150mLのH2Oを加え、水溶液を濃HClで約2のpHに酸性化した。フラスコを、4℃の冷蔵庫に4時間置くことによって冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、18gの物質を得た(74%の収率)。この物質を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(約95/5)から再結晶することによってさらに精製して、15gの8-(2-シアノフェノキシ)オクタン酸を得た。融点:83〜85℃。カールフィッシャー:1.1%。分子式(H2Oを伴う):C15H19NO3*0.1613H2O。燃焼分析(H2Oを含む):%C:68.19(計算値)、68.53(実測値);%H:7.37(計算値)、7.33(実測値);%N:5.30(計算値)、5.34(実測値)。1H  NMR分析:(d6-DMSO):δ12.0、s、1H(COOH);δ7.71〜7.60、m、2H(CNに対してオルト位およびパラ位の芳香族CH);δ7.23、d、1H、J=8.4Hz(ORに対してパラ位の芳香族CH);δ7.10、dt、1H、J=0.7および6.7Hz(ORに対してオルト位の芳香族CH);δ4.13、t、2H、J=6.4Hz(Oに対してα位のCH2);δ2.22、t、2H、J=7.3Hz(COOHに対してα位のCH2);δ1.73、m、2H、(Oに対してα位のCH2);δ1.52〜1.28、m、8H(残る脂肪族CH2)。
【００５９】
1f.化合物6の調製
還流冷却器、磁石撹拌子および窒素導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、4g(1当量)の2-ヒドロキシベンゾニトリル、140mLの無水エタノールおよび12.54mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、10-ブロモデカン酸エチル(9.4g、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００６０】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を酢酸エチル(300mL)に溶解して、1/2飽和NaHCO3(2×100mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。有機層を乾燥して、10gの粗エステルを得た。その後、この粗物質をエタノール(100mL)/水(20mL)に溶解した。LiOH(3.3g)を加え、得られた混合物を3時間にわたって加熱還流した(75℃)。溶液を冷却して、溶媒を除いた。20mLのH2Oを加え、水溶液を濃HClで約3のpHに酸性化した。溶液を4℃の冷蔵庫に移して冷却した。黄褐色の固体が沈殿し始めた。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、不純物を含む酸を得た。この固体を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(95/5)から再結晶することによってさらに精製して、7.1gの生成物10-(2-シアノフェノキシ)デカン酸を得た(78%の収率)。融点:82〜84℃。水を伴う分子式:C17H23NO3*0.0532。燃焼分析:%C:70.33(計算値)、69.82(実測値);%H:8.02(計算値)、7.89(実測値);%N:4.82(計算値)、4.82(実測値)。
【００６１】
1g:化合物7の調製
還流冷却器、磁石撹拌子およびN2導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、5g(1当量)の2-ヒドロキシ-5-クロロベンゾニトリル、125mLの無水エタノールおよび12.16mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、5-ブロモ吉草酸エチル(5.2mL、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００６２】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(200mL)に溶解して、飽和NaHCO3(2×75mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×50mL)で洗浄した。その後、この粗物質をエタノール(120mL)/水(10mL)に溶解した。LiOH(4g)を加え、得られた混合物を1時間にわたって加熱還流(75℃)し、その後、周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を除き、75mLのH2Oを加えた。水溶液を濃HClで約3のpHに酸性化して、フラスコを4℃に冷却した。黄褐色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、不純物を含む酸を得た。固体を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(95/5)から(3回)再結晶することによってさらに精製して、2.88gの生成物5-(4-クロロ-2-シアノフェノキシ)ペンタン酸を得た(35%の収率)。融点:87〜90℃。分子式:C12H12ClNO3。燃焼分析:%C:56.82(計算値)、57.03(実測値);%H:4.77(計算値)、4.71(実測値);%N:5.52(計算値)、5.45(実測値);Cl 13.98(計算値)、13.93(実測値)。
【００６３】
1h:化合物8の調製
還流冷却器、磁石撹拌子および窒素導入管を備えた300mLの三つ口丸底フラスコに、5g(1当量)の4-ヒドロキシベンゾニトリル、150mLの無水エタノールおよび15.7mL(1当量)のナトリウムエトキシドを仕込んだ。この混合物を25℃で15分間撹拌した。その後、8-ブロモオクタン酸エチル(10.5g、1当量)を10分かけて滴下して加えた。得られた混合物を72時間にわたって加熱還流した(75℃)。
【００６４】
反応混合物を冷却し、固体をろ過して除いた。溶媒をロータリーエバポレーターで除いた。粗残渣を塩化メチレン(200mL)に溶解して、飽和NaHCO3(2×75mL)、H2O(1×100mL)およびブライン(1×100mL)で洗浄した。その後、この粗物質をエタノール(125mL)/水(10mL)に溶解した。LiOH(5g)を加え、得られた混合物を1時間にわたって加熱還流(75℃)し、その後、周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を除き、75mLのH2Oを加えた。水溶液を濃HClで約3のpHに酸性化して、フラスコを4℃に冷却した。灰白色の固体が沈殿した。この物質を真空ろ過によって集め、高真空で一晩乾燥して、不純物を含む酸を得た。固体を、酢酸エチル/ヘキサン(hexanes)(95/5)からの再結晶およびクロロホルムを用いた再度の再結晶によってさらに精製して、4.5gの生成物8-(4-シアノフェノキシ)オクタン酸を得た(41%の収率)。融点:137〜140℃。分子式:C15H19NO3。燃焼分析:%C:68.94(計算値)、68.57(実測値);%H:7.33(計算値)、7.13(実測値);%N:5.36(計算値)、5.28(実測値)。
【００６５】
1i:化合物9の調製
水酸化カリウム(15.02g、268.4mmol)を乳鉢で粉砕して粉末にし、その後、50mLのジメチルスルホキシド(DMSO)、8g(6.71mmol)の2-ヒドロキシベンゾニトリルおよび12.59g(7.38mmol)の4-(クロロメチル)安息香酸を含む125mLの三角フラスコに加えた。反応物を室温で6日間撹拌した。蒸留水(200mL)を褐色の混合物に加え、得られた溶液を4℃に冷却した。冷えたとき、溶液を濃HClで酸性化した。得られた固体をブッフナー漏斗による真空ろ過によって集めた。この物質を、酢酸エチルからの再結晶を繰り返すことによって精製して、5.71gの生成物4-(2-シアノフェノキシメチル)安息香酸を得た。融点:199〜203℃。燃焼分析:%C:71.14(計算値)、70.89(実測値);%H:4.38(計算値)、4.35(実測値);%N:5.53(計算値)、5.25(実測値)。1H  NMR分析:(d6-DMSO):δ8.0、d、2H;δ7.8、d、1H;δ7.75、t、1H;δ7.65、d、2H;δ7.4、d、1H;δ7.2、t、1H;δ5.44、s、2H。
【００６６】
実施例2
実施例2A  ヘパリンの経口送達および結腸内送達
送達剤化合物およびヘパリンナトリウムUSPを25%プロピレングリコール水溶液に含有する経口胃管(PO)および結腸内(IC)による投薬用溶液を調製した。送達剤化合物のナトリウム塩が使用され、または遊離の酸は、1当量の水酸化ナトリウムでナトリウム塩に変換された。典型的には、送達剤化合物およびヘパリン(約166〜182IU/mg)を乾燥粉末として渦混合した。この乾燥混合物を25%(v/v)プロピレングリコール水溶液に溶解し、渦撹拌して、超音波処理器に入れた(約37℃)。pHをNaOH水溶液(2N)で約7(6.5〜8.5)に調節した。投薬用溶液を超音波処理して、透明な溶液を得た。最終的な容量を3.0mLに調節した。最終的な送達剤化合物投薬量、ヘパリン投薬量および体積投薬量は下記の表2に示される。
【００６７】
典型的な投薬プロトコルおよびサンプリング・プロトコルは下記の通りであった。体重が275g〜350gのオスSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投薬直前に筋肉内投与によりケタミン塩酸塩(88mg/kg)で麻酔した。5匹のラットからなる1つの投薬群に、投薬用溶液の1つが投与された。経口胃管(PO)投薬の場合、11cmのRuschの8フレンチ・カテーテルを、ピペット・チップを付けた1mLのシリンジに取りつけた。カテーテルを通して溶液を吸引することによってシリンジを投薬用溶液で満たし、その後、カテーテルを拭き、乾燥させた。カテーテルを食道に通し、1cmのチューブをラットの門歯から出して残した。溶液を、シリンジのプランジャーを押すことによって投与した。結腸内(IC)投薬の場合、7.5cmの8フレンチRuschカテーテルを、ピペット・チップを付けた1mLのシリンジに取りつけた。この投薬用カテーテルを、チューブがもはや見えなくなるまで肛門から結腸内に挿入した。投薬用溶液をゆっくり結腸内に送った。
【００６８】
クエン酸塩添加血液サンプルを、ケタミン(88mg/kg)投与後、典型的には0.25時間、0.5時間、1.0時間および1.5時間の時間に心臓穿刺によって集めた。ヘパリン活性を、Henry, J.B.、Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods、Philadelphia、PA、W.B. Saunders(1979)の方法に従って活性化部分トロンボプラスチン時間(APTT)を用いることによって測定した。以前の研究では、約20秒のベースライン時間が示された。各群における5匹のラットから得られた結果はそれぞれの時間について平均化された。最大値が下記の表2に報告される。
【表３】
0005089845.tif 000008
【００６９】
実施例2B  組換えヒト成長ホルモン(rhGH)の経口送達
リン酸塩緩衝液における送達剤化合物およびrhGHの経口胃管(PO)投薬用溶液を調製した。送達剤化合物の溶液を、化合物のナトリウム塩を用いて、または遊離の酸をそのナトリウム塩に変換することによって作製した。典型的には、送達剤化合物の溶液を、ナトリウム塩を作製するときには1当量の水酸化ナトリウム(1.0N)を加えことによって、リン酸塩緩衝液において調製し、撹拌した。最終的な投薬用溶液を、送達剤化合物をrhGHストック溶液(15mg rhGH/ml)と混合し、所望する容量(通常的には3.0ml)に希釈することによって調製した。送達剤化合物およびrhGh投薬量は下記の表3に示される。
【００７０】
典型的な投薬プロトコルおよびサンプリング・プロトコルは下記の通りであった。体重が200g〜250gのオスSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投薬の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与した。5匹のラットからなる1つの投薬群に、投薬用溶液の1つが投与された。経口胃管(PO)投薬の場合、11cmのRuschの8フレンチ・カテーテルが、ピペット・チップを付けた1mLのシリンジに適合した。カテーテルを通して溶液を吸引することによってシリンジを投薬用溶液で満たし、その後、カテーテルを拭き、乾燥させた。カテーテルを食道に通し、1cmのチューブをラットの門歯から出して残した。溶液を、シリンジのプランジャーを押すことによって投与した。
【００７１】
血液サンプルを、経口投薬の場合には、典型的には0分、15分、30分、45分、60分および90分の時間に尾動脈から連続して集めた。それぞれの時間から得られた5サンプルをまとめた。血清rHGH濃度を、rHGH免疫アッセイ試験キット(キット#K1F4015、これはGenzyme Corporation Inc.(Cambridge、MA)から得られる)によって定量した。以前の研究では、約0のベースライン値が示された。
【００７２】
各群に対する最大濃度が下記の表3に報告される。
【表４】
0005089845.tif 000009
【００７３】
実施例2c  クロモリンの経口送達
送達剤化合物およびクロモリン(二ナトリウム塩)(クロモリン)(Sigma Chemicals(St. Louis、MO)から得られる)を含有する投薬用溶液を脱イオン水において調製した。送達剤化合物の自由な酸は1当量の水酸化ナトリウムでナトリウム塩に変換された。この混合物を激しく撹拌し、超音波処理器に入れた(約37℃)。pHをNaOH水溶液で約7〜7.5に調節した。必要な場合には、さらなるNaOHを、均一な溶解性を達成するために添加し、そしてpHを再度調節した。混合物を激しく撹拌し、必要な場合には超音波処理および加熱もまた使用して均一な溶液を得た。送達剤化合物の溶液を、ストック溶液(脱イオン水における175mgクロモリン/ml、pHは必要な場合にはNaOHまたはHClで約7.0に調節される;ストック溶液は、ホイルで包まれて凍結保存され、その後、使用前に約30℃に解凍および加熱される)からのクロモリンと混合した。混合物を激しく撹拌し、必要な場合には超音波処理および加熱もまた使用して均一な溶液を得た。pHを、NaOH水溶液で約7〜7.5に調節した。その後、溶液を水で所望する容量(通常の場合には2.0ml)および濃度に希釈して、使用するまでホイルに包んで保存した。最終的な送達剤化合物の用量およびクロモリンの用量ならびに投薬容量は下記の表4に示される。
【００７４】
典型的な投薬プロトコルおよびサンプリング・プロトコルは下記の通りであった。体重が200g〜250gのオスSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投薬の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)で麻酔し、そして麻酔状態を維持するために必要なときには再度麻酔した。5匹の動物からなる1つの投薬群に、投薬用溶液の1つが投与された。11cmのRuschの8フレンチ・カテーテルが、ピペット・チップを付けた1mLのシリンジに適合した。カテーテルを通して溶液を吸引することによってシリンジを投薬用溶液で満たし、その後、カテーテルを拭き、乾燥させた。カテーテルを食道に通し、1cmのチューブを門歯から出して残した。溶液を、シリンジのプランジャーを押すことによって投与した。
【００７５】
血液サンプルを、典型的には投薬後の0.25時間、0.5時間、1.0時間および1.5時間に尾動脈から集めた。血清クロモリン濃度をHPLCによって測定した。サンプルは下記のように調製された:100μlの血清を、エッペンドルフ・チューブにおいて100μlの3N HClおよび300μlの酢酸エチルと一緒にした。チューブを激しく10分間撹拌し、次いで10,000rpmで10分間遠心分離した。200μlの酢酸エチル層を、67μlの0.1Mリン酸塩緩衝液を含有するエッペンドルフ・チューブに移した。チューブを激しく10分間撹拌し、次いで10,000rpmで10分間遠心分離した。その後、リン酸塩緩衝液層をHPLCバイアルに移し、HPLCに注入した(カラム=Keystone Exsil Amino 150×2mm i.d.、5μm、100Å;移動相=35%緩衝液(68mM KH2PO4(85% H3PO4でpH 3.0に調節))/65%アセトニトリル;注入量=10μl;流速=0.30ml/分;クロモリン保持時間=5.5分;吸収が240nmで検出される)。以前の研究では、約0のベースライン値が示された。
各群における動物から得られた結果はそれぞれの時間について平均化された。これらの平均値の最大値(すなわち、平均最大血清クロモリン濃度)が下記の表4に報告される。
【表５】
0005089845.tif 000010
【００７６】
インスリン-経口送達
送達剤化合物とヒト亜鉛インスリン(26IU/mg(最小値)、これはCalbiochem-Novabiochem Corp.(La Jolla、CA)から入手可能である)との経口投薬(PO)用組成物を脱イオン水において調製した。典型的には、500mgの送達剤化合物を1.5mlの水に加えた。送達剤化合物の自由な酸は、得られた溶液を撹拌し、1当量の水酸化ナトリウムを加えることによってナトリウム塩に変換された。溶液を渦撹拌し、その後、加熱(約37℃)し、超音波処理した。pHをNaOHまたはHClで約7〜8.5に調節した。必要な場合には、さらなるNaOHが、均一な溶解性を達成するために加えられ、そしてpHを約7〜8.5に再度調節した。その後、水を加えて、総容量を約2.4mlにして、渦撹拌した。インスリン・ストック溶液(0.5409gのインスリンおよび18mlの脱イオン水から作製された15mg/ml、HClおよびNaOHでpH8.15に調節し、そして透明な溶液を得るために、40mlの濃HCl、25mlの10N NaOHおよび50mlの1N NaOHを使用する)からの約1.25mgのインスリンを溶液に加えて、転倒することによって混合した。溶液は直ちに投薬プロトコルで使用することができ、あるいは溶液は、投薬前に1時間、37℃の水浴に入れることができる。最終的な送達剤化合物投薬量、インスリン投薬量および体積投薬量は下記の表5に示される。
【００７７】
典型的な投薬プロトコルおよびサンプリング・プロトコルは下記の通りであった。体重が200g〜250gのオスSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投薬の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)で麻酔し、そして麻酔状態を維持するために必要なときには再度麻酔した。5匹の動物からなる1つの投薬群に、投薬用溶液の1つが投与された。経口投薬の場合、11cmのRuschの8フレンチ・カテーテルが、ピペット・チップを付けた1mLのシリンジに適合した。カテーテルを通して溶液を吸引することによってシリンジを投薬用溶液で満たし、その後、カテーテルを拭き、乾燥させた。カテーテルを食道に通し、1cmのチューブを門歯から出して残した。溶液を、シリンジのプランジャーを押すことによって投与した。
【００７８】
血液サンプルを、典型的には、15分、30分、60分、120分および180分の時間で尾動脈から連続的に集めた。血清インスリンのレベルを、このプロトコルで使用されるサンプルの容量および濃度に対する標準曲線の感度および直線範囲を最適化するために標準的なプロトコルを改変して、インスリンELISA試験キット(キット#DSL-10-1600、これはDiagnostic Systems Laboratories, Inc.(Webster、TX)から得られる)を用いて測定した。血清中のヒトインスリン濃度(μU/ml)をそれぞれの投薬群における5匹の動物のそれぞれについて各時間について測定した。各時間に対する5つの値を平均化して、結果を血清インスリン濃度対時間としてプロットした(以前の実験では、ヒトインスリンを単独で経口投薬した後、ヒトインスリンの測定可能なレベルは明らかにされなかった)。最大値(ピーク値)および曲線下面積(AUC)が下記の表5に報告される。
【表６】
0005089845.tif 000011
【００７９】
上記に述べられた特許、特許出願、試験方法および刊行物は、その全体が参照として本明細書により組み込まれる。
【００８０】
本発明の多くの変化が、上記の詳細な説明を考慮して当業者には明らかである。そのような自明な変化はすべて、添付された請求項の十分に意図された範囲内である。