(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シソ科メンタ（Ｍｅｎｔｈａ）属ミントの溶媒抽出物、キク科アルテミシア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）属ヨモギの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属オレンジの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属レモンの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属グレープフルーツの溶媒抽出物、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類、クマル酸類、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン及びプラトールからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分からなる、光によるシトラール又はシトラールを含有する製品中のシトラールの減少抑制剤。
【請求項２】
シトラール含有製品がシトラス飲料及びデザートから選ばれる食品である請求項１記載のシトラールの減少抑制剤。
【請求項３】
シトラール含有製品が香粧品である請求項１記載のシトラールの減少抑制剤。
【請求項４】
シトラール又はシトラールを含有する製品に、シソ科メンタ（Ｍｅｎｔｈａ）属ミントの溶媒抽出物、キク科アルテミシア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）属ヨモギの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属オレンジの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属レモンの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属グレープフルーツの溶媒抽出物、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類、クマル酸類、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン及びプラトールからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を１〜５００ｐｐｍ配合することを特徴とする光によるシトラール又はシトラールを含有する製品中のシトラールの減少抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、シトラール又はシトラールを含有する製品に広く適用することができるシトラールの減少抑制剤、並びにシトラールの減少抑制方法に関する。
ここで本発明における「シトラールを含有する製品」とは、食品（本発明でいう食品とは特に限定されるものではなく、例えば炭酸飲料、果汁、果汁飲料、乳性飲料、茶類飲料等の飲料、ヨーグルト、プリン、ゼリー、アイスクリーム等の冷菓、キャンディー、水飴等の菓子等が挙げられる）；食品素材；或いはフレーバー等の食品添加物；香水、化粧品、洗剤、石鹸、シャンプー、リンス、入浴剤、芳香剤等の香粧品など、シトラールを香味又は香気成分として利用する物の総称である。
【０００２】
【従来の技術】
シトラールは、レモン様の特徴的な香気・香味を有する重要なフレーバー成分であるが、光の照射により減少する。すなわち異性化、酸化、分解等によりシトラールの化学構造が変わり、その結果、劣化臭成分に変化することが知られている（R. C. Cookson et al. ; Tetrahedron, 19, 1995(1963)）。
それ故、シトラールを含有する製品中のシトラール含量は、製品の製造、流通、保存等の各段階で光に暴露されることにより徐々に減少し、本来のフレッシュなシトラス感が失われるとともに劣化臭成分が増加するため製品の品質低下の大きな要因となっている。
【０００３】
従来、光によるシトラールの減少抑制のため、シトラール含有製品には、例えばアルミニウム等の遮光性材料を用いた容器等が使用されてきた。しかし、アルミニウム等は遮光性材料として優れている反面、その使用コストが高いという問題があった。
一方、最近では店頭ディスプレイ時に製品のイメージアップを図るため、透明ガラス容器入りの食品や化粧品、透明又は半透明プラスチック容器入りの食品や化粧品および透明袋入りの食品が急増しており、さらにそうした製品をコンビニエンスストア、スーパー等では長時間、蛍光灯又は日光の下に陳列する販売形態が一般的になっている。
その結果、シトラールの減少と劣化臭の生成に起因する製品の品質低下や異臭の発生が従来に比べより一層の問題となっている。
【０００４】
そこで光によるシトラールの減少に対して大きな抑制効果をもたらすと同時に安価なシトラールの減少抑制方法が求められ、コストの高い容器の開発よりも、低コストで扱いの簡便な添加剤を用いることによるシトラールの減少抑制方法が要望されている。
こうした光起因のシトラールの減少を抑制するための添加剤として、ビタミンＣが有効であるという報告（H. Tateba et al. The proceedings of the Eighth Weuruman Flavour Reserch Symposium, held in Reading, UK on 23-26 July 1996. p82-85）がある。これはビタミンＣのラジカル消去効果によりシトラールの減少抑制を図るものである。
【０００５】
しかしながら、実際にはビタミンＣをシトラール含有製品に使用しても、シトラールの減少抑制効果は十分ではなく、過剰に使用すれば製品本来の香味が損なわれることになる。
従って、製品に添加した場合にシトラールの減少抑制効果が高く、しかも安全で経済性に優れ、かつ製品の本来の香味・香気に影響を与えることのない少量の使用で十分な効果を奏する新たなタイプのシトラールの減少抑制剤又は抑制方法が強く要望されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従来技術における問題点に鑑み、本発明はシトラールを含有する製品の製造、流通、保存等の各段階で光を起因とするシトラールの減少と、それに伴うシトラール由来の劣化臭の生成を効果的に抑制でき、また安全性が高く、経済性に優れしかも製品本来の香味又は香気に影響を与えることのないシトラールの減少抑制剤、並びに減少抑制方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、光によるシトラールの減少について詳細に検討した結果、特定の植物の溶媒抽出物、或いは特定の食品由来の成分をシトラール又はシトラールを含有する製品に配合することにより、シトラールの減少抑制効果に顕著な効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。また、本発明は、シトラール又はシトラール含有製品の光照射によって発生する異臭が、主としてシトラールの光照射によって生成する特定の光環化反応生成物、すなわちシトラールに由来する特定の化合物による劣化臭であることを解明した研究成果に基づくものである（「第44回  香料・テルペンおよび精油化学に関する討論会」平成12年９月15日〜17日；主催／日本化学会；共催／日本薬学会・日本農芸化学会）。かかる劣化臭の主要因である光環化反応生成物は、下記のとおりである。
【０００８】
▲１▼ フォトシトラール（photocitral C）
(1R*,2S*,5S*)-2,6,6-trimethylbicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxaldehyde
▲２▼ フォトシトラール（photocitral D）
(1R*,2R*,5S*)-2,6,6-trimethylbicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxaldehyde
▲３▼ フォトシトラール（photocitral B）
(1R*,4S*,5R*)-1,6,6-trimethylbicyclo[2.1.1]hexane-5-carboxaldehyde
▲４▼ フォトシトラール（photocitral A）
(1S*,2S*,5S*)-2-isopropenyl-5-methylcyclopentan-1-aldehyde、及び
▲５▼ 2-(3-methyl-2-cyclopenten-1-yl)-2-methylpropanal
【０００９】
従って、本発明のシトラールの減少抑制剤並びに減少抑制方法は、同時にそれぞれ光によるシトラール由来の劣化臭成分の生成抑制剤、その劣化臭成分の生成抑制方法として機能する。
【００１０】
本発明は、シソ科メンタ（Ｍｅｎｔｈａ）属ミントの溶媒抽出物、キク科アルテミシア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）属ヨモギの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属オレンジの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属レモンの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属グレープフルーツの溶媒抽出物、カフェー酸（caffeic acid）、フェルラ酸（ferulic acid）、シナピン酸（sinapic acid）、ロズマリン酸（rosmarinic acid）、ジカフェオイルキナ酸（dicaffeoyl quinic acid）類、クマル酸（cumaric acid）類、α−グルコシルルチン（α-glucosyl rutin：酵素処理ルチン）、クエルセチン（quercetin）、ミリシトリン（myricitrin）、クエルシトリン（quercitrin）、γ−オリザノール（γ−orizanol）、カンフェロール（kaempferol）、ヘスペレチン（hesperetin）、クリシン（chrysin）、ルテオリン−７−グリコシド（luteolin-7-glucoside）、６−ヒドロキシフラボン（6-hydroxyflavone）、７−ヒドロキシフラボン（7-hydroxyflavone）、プラトール（pratol）及び７,８−ジヒドロキシフラボン（7,8-dihydroxyflavone）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分であることを特徴とするシトラール又はシトラールを含有する製品中のシトラールの減少抑制剤である。
【００１１】
また、上記減少抑制剤において、シトラール含有製品がシトラス飲料及びデザートから選ばれる食品であることを特徴とし、シトラール含有製品が香粧品であることを特徴とする。
【００１２】
さらに、本発明はシトラール含有製品に、シソ科メンタ（Ｍｅｎｔｈａ）属ミントの溶媒抽出物、キク科アルテミシア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）属ヨモギの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属オレンジの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属レモンの溶媒抽出物、ミカン亜科シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）属グレープフルーツの溶媒抽出物、カフェー酸（caffeic acid）、フェルラ酸（ferulic acid）、シナピン酸（sinapic acid）、ロズマリン酸（rosmarinic acid）、ジカフェオイルキナ酸（dicaffeoyl quinic acid）類、クマル酸（cumaric acid）類、α−グルコシルルチン（α-glucosyl rutin：酵素処理ルチン）、クエルセチン（quercetin）、ミリシトリン（myricitrin）、クエルシトリン（quercitrin）、γ−オリザノール（γ−orizanol）、カンフェロール（kaempferol）、ヘスペレチン（hesperetin）、クリシン（chrysin）、ルテオリン−７−グリコシド（luteolin-7-glucoside）、６−ヒドロキシフラボン（6-hydroxyflavone）、７−ヒドロキシフラボン（7-hydroxyflavone）、プラトール（pratol）及び７,８−ジヒドロキシフラボン（7,8-dihydroxyflavone）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を１〜５００ｐｐｍ配合することを特徴とするシトラール又はシトラールを含有する製品中のシトラールの減少抑制方法である。
【００１３】
【発明の実施の形態】
〔１〕シトラールの減少抑制剤
シトラールの減少抑制剤としては人体への安全性の観点から、従来より食品や漢方薬に使用されている植物関連の天然物に由来するものが好ましい。こうした条件を満たすものとして、下記のミント、ヨモギ、オレンジ、レモン、グレープフルーツのそれぞれから溶媒を用いて抽出された各抽出物、若しくは食品中に存在するカフェー酸（caffeic acid）、フェルラ酸（ferulic acid）、シナピン酸（sinapic acid）、ロズマリン酸（rosmarinic acid）、ジカフェオイルキナ酸（dicaffeoyl quinic acid）類、クマル酸（cumaric acid）類、α−グルコシルルチン（α-glucosyl rutin：酵素処理ルチン）、クエルセチン（quercetin）、ミリシトリン（myricitrin）、クエルシトリン（quercitrin）、γ−オリザノール（γ−orizanol）、カンフェロール（kaempferol）、ヘスペレチン（hesperetin）、クリシン（chrysin）、ルテオリン−７−グリコシド（luteolin-7-glucoside）、６−ヒドロキシフラボン（6-hydroxyflavone）、７−ヒドロキシフラボン（7-hydroxyflavone）、プラトール（pratol）及び７,８−ジヒドロキシフラボン（7,8-dihydroxyflavone）から選ばれ、これらを２種以上併用することもできる。
【００１４】
上記の中でミント等の植物の溶媒抽出物については下記の植物種が例示されるがそれに限定されるものではない。
▲１▼ミント：
ミズハッカ(学名：Mentha aquatica L.)
セイヨウハッカ(学名：Mentha piperita L.)
ペニロイアルハッカ(学名：Mentha pulegium L.)
マルバハッカ(学名：Mentha rotundifolia (L.)Huds.)
オランダハッカ(学名：Mentha spicata L)
ベルガモットハッカ(学名：Mentha citrata （Ehrh.）Briq.)
【００１５】
▲２▼ヨモギ：
ヨモギ（学名：Artemisia princeps）
カズザキヨモギ（学名：Artemisia indica Willd. yar. maximowiczii (Nakai) Hara）
ヤマヨモギ（学名：Artemisia Montana(Nakai) Pamp.）
オトコヨモギ（学名：Artemisia japonica Thunb. ex Murray）
ホソバノオトコヨモギ（学名：Artemisia japonica Thunb. ex Murray f. resedifolica Takeda）
シロヨモギ（学名：Artemisia steleriana Bess）
ヒロハヤマヨモギ（学名：Artemisia stolonifera(Maxim.) Komarov）
ヒロハウラジロヨモギ（学名：Artemisia koidzumii Nakai）
イヌヨモギ（学名：Artemisia keiskeana Miq.）
サマニヨモギ（学名：Artemisia arctica Less）
キタダケヨモギ（学名：Artemisia kitadakensis Hara et Kitamura）
アサギリソウ（学名：Artemisia schmidtiana Maxim）
ヨモギナ（学名：Artemisia lactiflora Wall. ex DC.）
ヒメヨモギ（学名：Artemisia feddei Lev. et Vaniot）
ヒトツバヨモギ（学名：Artemisia monophylla Kitamura）
ミヤマオトヨモギ（学名：Artemisia pedunculosa Miq.）
タカネヨモギ（学名：Artemisia sinanesis Yabe）
ニガヨモギ（学名：Artemisia absinthium L.）
カワラニンジン（学名：Artemisia apiacea Hance）
カワラヨモギ（学名：Artemisia capillaries Thunb. ex Murray）
クソニンジン（学名：Artemisia annua L.）
【００１６】
▲３▼オレンジ：（学名：Citrus nobikis f.deliciosa）
（学名：Citrus nobilis Lour.）
（学名：Citrus sinensis L.）
（学名：Citrus unshiu Marc.）
▲４▼レモン：（学名：Citrus limon Burm. Fil.）
▲５▼グレープフルーツ：（学名：Citrus paradisi Macf.）
【００１７】
上記のうちミントについては、茎（枝幹）、葉を原材料として後述の抽出処理に付される。また、ヨモギについては葉を、オレンジ、レモン、グレープフルーツについては果皮を使用することが好ましい。
以下にミント、ヨモギ、オレンジ、レモン、グレープフルーツからの溶媒抽出物の製造に用いる溶媒と抽出法の一例を挙げるが、本発明に適用される抽出法は、下記の例に限定されるものではない。
【００１８】
抽出処理に使用する溶媒は、水又は極性有機溶媒であり、有機溶媒は含水物であっても良い。
極性有機溶媒としては、アルコール、アセトン、酢酸エチル等が例示される。中でも人体への安全性と取扱性の観点から水またはエタノール、プロパノール、ブタノールのような炭素数２〜４の脂肪族アルコールが望ましく、特に、水又はエタノール又はこれらの混合物が望ましい。
【００１９】
抽出に用いる溶媒の量は任意に選択できるが、一般には上記植物の原材料１重量部に対し溶媒量が２〜１００重量部、好ましくは５〜２０重量部を使用する。
なお、抽出の前処理としてヘキサン等の非極性有機溶媒であらかじめ脱脂処理をし、後の抽出処理時に余分な脂質が抽出されるのを防止してもよい。またこの脱脂処理で結果的に脱臭等の精製ができる場合がある。さらに、脱臭の目的で抽出前に水蒸気蒸留処理を施しても良い。
【００２０】
抽出処理方法としては、抽出の対象となる原材料の種類、量等により種々の方法を採用することができる。
例えば前記各種植物を粉砕したものを溶媒中に入れ、浸漬法又は加熱還流法で抽出することができる。なお浸漬法による場合は加熱条件下、室温又は冷却条件下のいずれであってもよい。
次いで、溶媒不溶物を除去して抽出液を得るが、溶媒不溶物を除去する方法としては、遠心分離、濾過、圧搾等の各種の固液分離手段を適宜用いることができる。
【００２１】
得られた抽出液はそのままでもシトラールの減少抑制剤成分として使用できるが、例えば、水、エタノール、グリセリン、トリエチルシトレート、ジプロピレングリコール、プロピレングリコール等の液体希釈剤で適宜希釈して使用してもよい。さらに希釈剤等としてデキストリン、シュークロース、ペクチン、キチン等を加えることもできる。これらをさらに濃縮してペースト状の抽出エキスとしても、また凍結乾燥又は加熱乾燥などの処理を行い粉末として使用してもよい。
また超臨界抽出による抽出、分画、または脱臭処理したものも使用可能である。  なお、上記抽出物の市販品を使用してもよい。
【００２２】
上記方法で得られた抽出物は、そのままシトラール含有食品に配合することができるが、さらに、脱色、脱臭等の精製処理をすることができる。
精製処理には活性炭や多孔性のスチレン−ジビニルベンゼン共重合体からなる合成樹脂吸着剤などを使用することができる。かかる精製用の合成樹脂吸着剤としては、例えば三菱化学株式会社製「ダイヤイオンＨＰ−２０（商品名）」やオルガノ株式会社製「アンバーライトＸＡＤ−２（商品名）」等が例示される。
【００２３】
また、上記植物抽出物以外のシトラール減少抑制剤である、カフェー酸（３，４−ジヒドロキシケイヒ酸）、フェルラ酸（４−ヒドロキシ−３−メトキシケイヒ酸）、シナピン酸（３,５−ジメトキシ−４−ヒドロキシケイヒ酸）、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類、クマル酸類、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）、クエルセチン、ミリシトリン、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン、プラトール、７，８−ジヒドロキシフラボンは、それ自体既知の化合物であり、試薬又は市販品として入手可能である。これらは精製品でも未精製品でもよく、また、これらの成分を産出する植物、動物、微生物等天然物より得られた粗生成物であってもよく、さらにこれらの成分を含有する抽出物であってもよい。
【００２４】
例えば、フェルラ酸、ロズマリン酸、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）に関しては、築野ライスファインケミカルズ(株)製の「フェルラ酸」、東洋精糖(株)製の「αＧルチンＰＳ又はαＧルチンＰ」（α−グルコシルルチン）、東京田辺製薬(株)製の「ＲＭ−２１Ａ」（ロズマリン酸）等の市販品を用いることができる。また、クエルセチンはルチン分解物としてアルプス薬品工業(株)から入手可能である。
【００２５】
また、ジカフェオイルキナ酸類、カフェー酸に関しては、以下の抽出法で得ることができる。すなわち、粉砕したコーヒー生豆に１０倍重量の含水エタノールを添加し、１〜３時間還流抽出する。冷却後不溶物を濾別し、減圧下で１０〜２０倍濃縮し、希塩酸を用いてｐＨ２〜３に調製する。
調製液を前記多孔性の合成樹脂吸着剤に通液させジカフェオイルキナ酸類、カフェー酸を吸着させる。水で洗浄後、含水エタノールで脱着し、ジカフェオイルキナ酸、カフェー酸等を含有する抽出物を得ることができる。さらに分取高速液体クロマトグラフィーを用いて高純度の、ジカフェオイルキナ酸、カフェー酸を得ることができる。
【００２６】
シトラールの減少抑制剤は、上記のとおり得られた抽出物、又はカフェー酸、フェルラ酸、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類、クマル酸類、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）、クエルセチン、ミリシトリン、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン、プラトール及び７,８−ジヒドロキシフラボンの単品化合物を原材料として例えば以下のように調製される。
【００２７】
一般的には各種成分を組み合わせて、例えば水、アルコール、グリセリン、ジプロピレングリコール、プロピレングリコール、トリエチルシトレート等の（混合）溶剤に適当な濃度で溶解させて（具体的には、水／エタノール、水／エタノール／グリセリン、水／グリセリン等の混合溶剤）液剤とする。また、各種成分の溶液に賦形剤、乳化剤等（デキストリン等）を添加し噴霧乾燥によりパウダー状にすることも可能であり、用途に応じて種々の剤形を採用することができる。
【００２８】
〔２〕シトラールの減少抑制方法
本発明のシトラールの減少抑制剤をシトラール含有製品の加工段階で適宜添加することにより、製品中のシトラールの減少を抑制することができる。
抽出物であるミント、ヨモギ、オレンジ、レモン、グレープフルーツの添加量については特に制限はなく、使用する劣化抑制剤の成分の純度、あるいは添加対象の種類により異なるが、一般的に１〜５００ｐｐｍの添加量が適当である。
食品の場合には、食品本来の香味・香気にほとんど影響を及ぼさない用量という観点から、抽出物の濃度は１〜１００ｐｐｍ、特に３〜５０ｐｐｍが好ましい。
香粧品の場合には、その香気に影響を与えない用量という観点から、抽出物の濃度は１〜５００ｐｐｍが好ましい。
【００２９】
また、カフェー酸、フェルラ酸、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類、クマル酸類、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）、クエルセチン、ミリシトリン、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン、プラトール及び７，８−ジヒドロキシフラボンの使用量についても特に制限はなく、使用する減少抑制剤の成分の純度、あるいは添加対象の製品の種類により異なるが、純度の高いものでは１〜５００ｐｐｍが適当である。１〜１００ｐｐｍの範囲が好ましい。
【００３０】
またシトラール減少抑制剤を２種類以上混合するときの割合は、特に限定されるものではない。混合した減少抑制剤の添加量については、使用する減少抑制剤の成分の純度、あるいは添加対象の製品の種類により異なるが、純度の高いものでは、１〜５００ｐｐｍが適当である。１〜１００ｐｐｍの範囲が好ましい。
【００３１】
〔３〕減少抑制剤又は減少抑制方法の適用の対象
本発明のシトラール減少抑制剤又は抑制方法を適用しうる製品としては、特に限定はしないが、例えば、食品では店頭陳列される場合が多い炭酸飲料、果汁、果汁飲料等のシトラス飲料、シトラール含有のヨーグルト、ゼリー、アイスクリーム等の冷菓、キャンディー、水飴等の菓子等、各種シトラス風味のドレッシング等が挙げられる。食品以外では、シトラールを含有する香水、化粧品、洗剤、石鹸、シャンプー、リンス、入浴剤、芳香剤等の香粧品が挙げられる。
また、食品への適用に当たっては、種々の食品原料（例えば、砂糖、醤油、塩等）及び各種食品添加物（例えば、調味料、酸味料等）に適当な濃度となるように混ぜ込んで使用してもよい。
【００３２】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
（１）抽出物
抽出物を以下のとおり調製した。
【００３３】
〔抽出例１〕（ミント抽出物）
セイヨウハッカの乾燥葉１ｋｇを８リットルのエタノールで２回還流抽出した。次いで、２回の抽出液の合液を、約０．５リットルまで減圧濃縮した。これに５０重量％エタノール１.５ リットルを加え、ヘキサン（１リットル×３回）で液−液分配し、含水エタノール層を集めて減圧濃縮し、７２g のエキスを得た。
このエキスを「ダイヤイオン」(三菱化学(株)製の多孔性樹脂「ＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−２０」)のカラムクロマトグラフィー（φ５０×３００mm ）に付し、水、２０％（v／v）エタノール、５０％（v／v）エタノール、エタノール、アセトン（各４リットル）で順次溶出し、減圧濃縮して各々の溶出物を得た。
【００３４】
以下それぞれ「ミント２０％エタノール溶出物」、「ミント５０％エタノール溶出物」と呼ぶ。物性は以下の通りであった。
a) 「ミント５０％エタノール溶出物」の紫外線吸収スペクトルは図１に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.０クエン酸緩衝液）。
なお、測定機器は島津製作所製の「分光光度計ＵＶ−２１００ＰＣ」を使用した（以下の各抽出例も同様）。
λmax：２８４,３２９ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに可溶
【００３５】
〔抽出例２〕（ヨモギ抽出物）
乾燥ヨモギ葉５００ｇに７.５ｋｇの５０重量％エタノールを添加し、１時間還流抽出した。冷却後、残渣を固液分離後、セライトろ過し不溶物を取り除いた。  濾液を減圧下で約２ｋｇに濃縮後、不溶物をセライトろ過した。ろ液を前記多孔性樹脂であるＨＰ２０(５００ml)に通した後、蒸留水２ｋｇで洗浄した。
次に１０重量％エタノール１ｋｇ、続いて３０重量％エタノール４ｋｇで脱着した。減圧下で３０重量％エタノール溶出画分を約１ｋｇまで濃縮後、フリーズドライし、淡褐色粉末２０.１ｇを得た。
【００３６】
以下「ヨモギ抽出物」と呼ぶ。物性は以下の通りであった。
a) 紫外線吸収スペクトルは図４に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
λmax：３２５ｎｍ
b） 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに可溶
【００３７】
〔抽出例３〕（オレンジ抽出物、ヘプタメトキシフラボン、タンゲリチン及びノビレチン）
オレンジ果皮を圧搾して得られた精油を減圧蒸留してリモネン等の揮発成分を除去した不揮発性のワックス様物質５０gに５０重量％エタノールを１０００ｇ添加し、５５℃に達するまで加熱攪拌した。室温まで冷却後、分液し水―エタノール層を分取した。その溶液に活性炭１ｇを添加し室温で３０分間攪拌後、不溶物をセライトろ過し除去した。エバポレーターによりアルコールを減圧除去した後、フリーズドライし１０.５ｇの淡褐色粉末を得た。以下「オレンジ抽出物」と呼ぶ。物性は以下の通りであった。さらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／０→０／１）にて分離精製し、ヘプタメトキシフラボン、タンゲリチン、ノビレチンをそれぞれ５.１ｇ、２.５ｇ、１.７ｇの白色結晶を得た。
【００３８】
▲１▼オレンジ抽出物
a) 紫外線吸収スペクトルは図５に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
λmax：２５４,３３５ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００３９】
▲２▼ヘプタメトキシフラボン
a) 紫外線吸収スペクトルは図６に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
λmax：２５４,３４３ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００４０】
▲３▼タンゲリチン
a) 紫外線吸収スペクトルは図７に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
λmax：２６８,３３０ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００４１】
▲４▼ノビレチン
a) 紫外線吸収スペクトルは図８に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
λmax：２６８,３３７ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００４２】
〔抽出例４〕（レモン抽出物）
レモン果皮を圧搾して得られた精油を減圧蒸留して揮発成分を除去した不揮発性のワックス様物質５ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１→１／１）にて分離した。各分画品のうち、シリカゲル薄層クロマトグラフィー上で、ヘキサン／酢酸エチル＝１／１で展開した時の移動率（Ｒｆ）＝０.６に相当する分画分をエバポレーターで溶媒を除去し、ヘキサン／酢酸エチルを用いて再結晶することにより、白色結晶０.１ｇを得た。以下「レモン抽出物」と呼ぶ。物性は以下の通りであった。
【００４３】
a) 紫外線吸収スペクトルは図９に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：酢酸エチル）。
λmax：２５５,３２０ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００４４】
〔抽出例５〕（グレープフルーツ抽出物）
グレープフルーツ果皮を圧搾して得られた精油を減圧蒸留して揮発成分を除去した不揮発性のワックス様物質１０ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１→１／１）にて分離した。各分画品のうち、シリカゲル薄層クロマトグラフィー上で、ヘキサン／酢酸エチル＝６／１で展開した時の移動率（Ｒｆ）＝０.３７５に相当する分画分をエバポレーターで溶媒を除去し、ヘキサン／酢酸エチルを用いて再結晶することにより白色結晶０．７ｇを得た。以下「グレープフルーツ抽出物」と呼ぶ。物性は以下の通りであった。
【００４５】
a) 紫外線吸収スペクトルは図１０に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：酢酸エチル）。
λmax：３２０ｎｍ
b) 溶解性：水に可溶、５０重量％エタノールに易溶、エタノールに易溶
【００４６】
単品試薬として以下のものを使用した。
（１）カフェー酸
ナカライテスク(株)製のカフェー酸を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１２に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
（２）フェルラ酸
ナカライテスク(株)製のフェルラ酸を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１３に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００４７】
（３）シナピン酸
ナカライテスク(株)製のシナピン酸を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１４に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００４８】
（４）ロズマリン酸
EXTRASYNTHESE社製「ロズマリン酸」を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１５に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００４９】
（５）３,５−ジカフェオイルキナ酸
コーヒー豆から単離したものを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１７に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００５０】
（６）ｐ−クマル酸
ナカライテスク(株)製のｐ−クマル酸を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図１８に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００５１】
（７）α−グルコシルルチン
東洋精糖(株)製のα−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）、商品名「αＧルチンＰＳ」（以下、αＧルチンＰＳと略す）を使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２０に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００５２】
（８）クエルセチン
ナカライテスク(株)製のクエルセチンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２１に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）。
【００５３】
（９）ミリシトリン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のミリシトリンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２２に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：９５重量％エタノール）。
【００５４】
(10)クエルシトリン
ナカライテスク(株)製のクエルシトリンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２３に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００５５】
（11）γ―オリザノール
ナカライテスク(株)製のγ―オリザノールを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２５に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：エタノール）
【００５６】
（12）カンフェロール
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のカンフェロールを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２６に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：エタノール）
【００５７】
（13）ヘスペレチン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のヘスペリチンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２７に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００５８】
（14）クリシン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のクリシンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２８に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：エタノール）
【００５９】
（15）ルテオリン−７−グリコシド
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のルテオリン−７−グリコシドを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図２９に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：エタノール）
【００６０】
（16）６−ヒドロキシフラボン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製の６−ヒドロキシフラボンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図３０に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００６１】
（17）７−ヒドロキシフラボン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製の７−ヒドロキシフラボンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図３１に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００６２】
（18）プラトール
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製のプラトールを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図３２に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：エタノール）
【００６３】
（19）７，８−ジヒドロキシフラボン
ＥＸＴＲＡＳＹＮＴＨＥＳＥ(株)製の７，８−ジヒドロキシフラボンを使用した。
紫外線吸収スペクトルは図３３に示すとおりである（測定濃度：２０ｐｐｍ、希釈溶剤：ｐＨ３.５クエン酸緩衝液）
【００６４】
次に、上記シトラール減少抑制剤を添加したモデル飲料を作成し、シトラールの減少抑制効果を評価した。
〔試験例１.１〕
１／１０Ｍクエン酸−１／５Ｍリン酸水素二ナトリウムで調整したｐＨ３.５の緩衝溶液に、蔗糖５％、シトラール１０ｐｐｍ添加し酸性シトラール溶液を調整した。この溶液に各種シトラール減少抑制剤を１０ｐｐｍ添加し、５０ｍｌ容量のガラスバイアル（テフロンキャップ付き）に各５０ｇ詰めた。
光安定性試験器（東京理化器械株式会社製「ＬＳＴ−３００型」）中、１５０００ルクス（高照度型蛍光灯昼光色：４０Ｗ×１２本）にて１４日間、１０℃にて光照射した。
各酸性シトラール溶液をジクロロメタンで抽出後、ガスクロマトグラフィーにてシトラールの回収量を測定した。表１．１にシトラールの残存率を示した（無添加遮光条件でのシトラール回収量を１００％とし相対値であらわした）。
【００６５】
【表１】
0004933700.tif 000002
【００６６】
上記の表１.１によりカフェー酸、フェルラ酸、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類（３,５-ジカフェオイルキナ酸）、クマル酸類（ｐ−クマル酸）、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）及びクエルシトリンを添加することにより、無添加および他の抗酸化物質である（−）−エピカテキンガレート、没食子酸、ビタミンＣに比較しシトラールの光による減少抑制を非常に強く抑制した。
【００６７】
〔試験例１.２〕
上記試験例１.１の光照射した各酸性シトラール溶液をジクロロメタンで抽出後、ガスクロマトグラフィーにてシトラール由来の劣化臭である(1R*,2S*,5S*)-2,6,6-trimethylbicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxaldehyde（ ＝photocitral C）、(1R*,2R*,5S*)-2,6,6-trimethylbicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxaldehyde（＝ photocitral D）、(1R*,4S*,5R*)-1,6,6-trimethylbicyclo[2.1.1]hexane-5-carboxaldehyde（ ＝photocitral B）、2-(3-methyl-2-cyclopenten-1-yl)-2-methylpropanal、(1S*,2S*,5S*)-2-isopropenyl-5-methylcyclopentan-1-aldehyde（＝photocitral A）の生成量を測定した。表１.２に劣化臭の生成抑制率〔無添加品の光照射条件での劣化臭の生成量をＡ、生成抑制剤添加品の光照射条件下での劣化臭の生成量をＢとし、生成抑制率（％）＝１００−Ｂ／Ａ×１００〕で表した。
【００６８】
【表２】
0004933700.tif 000003
【００６９】
上記の表１．２によりカフェー酸、フェルラ酸、シナピン酸、シナピン酸、ロズマリン酸、ジカフェオイルキナ酸類（３,５-ジカフェオイルキナ酸）、クマル酸類（ｐ−クマル酸）、α−グルコシルルチン（酵素処理ルチン）、クエルシトリン、オレンジ抽出物、ヘプタメトキシフラボン、タンゲリチン及びノビレチンを添加することにより、無添加および他の抗酸化物質である（−）−エピカテキンガレート、没食子酸、ビタミンＣに比較し、光によるシトラール由来の劣化臭の生成抑制を非常に強く抑制した。
【００７０】
〔試験例２〕
砂糖３５ｇ、クエン酸０.３５ｇ 及びシトラール１ｇを含有する６５重量％エタノール水溶液を準備した（全量１０００ml ）。この溶液を透明ガラス容器に入れ、表２に示す各種抽出物および化合物を２００ｐｐｍ添加し、光安定性試験器（東京理化器械株式会社製「ＬＳＴ−３００型」）にて光照射を行った。条件は温度１０℃、昼白色蛍光ランプ４０Ｗ×１２本（４０００ルクス）及び３６０nm 近紫外線ランプ４０Ｗ×３本（紫外線強度０.３mW／cm2）で７２時間光照射した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて光照射後のシトラール含量を測定した。なお、測定条件は次のとおりである。
【００７１】
（測定条件）
装  置：日立製作所製「ＨＩＴＡＣＨＩ Ｄ−７０００ ＨＰＬＣシステム」
カラム：ナカライテスク社製「コスモシール ５Ｃ１８−ＡＲ−１１ 」
（カラム温度４０℃）
溶離液：  ０分  アセトニトリル：蒸留水＝１０：９０
２５分  アセトニトリル：蒸留水＝９０：１０
流  速：１ml／分
検出波長：２５４ｎｍ
表３におけるシトラール残存量(％)は以下の式にしたがって計算した。
シトラール残存量(％)＝ Ａ／Ｂ × １００
（式中、Ａは光照射後の試料中のシトラール含量を表し、Ｂは光照射前の
試料中のシトラール含量を表す。）
【００７２】
【表３】
0004933700.tif 000004
【００７３】
以上より、ミント、ヨモギ、オレンジ、レモン、グレープフルーツから溶媒抽出された各抽出物、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７−ヒドロキシフラボン、プラトール、ｐ−クマル酸、シナピン酸、カフェー酸は無添加に比較しシトラールの減少抑制効果が非常に高かった。
【００７４】
〔実施例１〕（ミント抽出物、オレンジ抽出物、レモン抽出物、グレープフルーツ抽出物の実施例：（レモン飲料））
グラニュー糖５ｇ、クエン酸０.１ｇ、レモン香料（シトラール含有品）０.１ｇおよび蒸留水にて全量１００ｇに調整した。これに各種シトラール減少抑制剤であるミント抽出物１％溶液を０.１ｇ添加し均一に攪拌した。同様にヨモギ抽出物、オレンジ抽出物、レモン抽出物、グレープフルーツ抽出物の１％溶液を添加した。それぞれガラス容器に充填し７０℃、１０分間加熱殺菌し、レモン飲料を作成した。
【００７５】
〔実施例２〕（カフェー酸、フェルラ酸、シナピン酸、ロズマリン酸、３,５−ジカフェオイルキナ酸、ｐ−クマル酸、α−グルコシルルチン（α−ＧルチンＰＳ）の実施例：（殺菌乳酸菌飲料））
発酵乳原液２０ｇに蒸留水を８０ｇにて希釈した。レモン香料０.１ｇおよびカフェー酸の１％溶液を０.１ｇ適量添加し、ガラス容器に充填後、殺菌（７０℃、１０分間）し完成した。フェルラ酸、シナピン酸、ロズマリン酸、３,５−ジカフェオイルキナ酸、ｐ−クマル酸、α−グルコシルルチン（α−ＧルチンＰＳ）についても同様に１％溶液を０.１ｇ添加した。
【００７６】
〔実施例３〕（クエルセチン、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリシン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、７,８−ジヒドロキシフラボンの実施例（洗口剤））
下記の表３の処方により洗口剤を作成した。
【００７７】
【表４】
0004933700.tif 000005
【００７８】
上記クエルセチン入りの口腔洗浄剤と同様の処方にて、クエルシトリン、γ−オリザノール、カンフェロール、ヘスペレチン、クリスチン、ルテオリン−７−グリコシド、６−ヒドロキシフラボン、プラトール、７,８−ジヒドロキシフラボン入りの洗口剤を作成した。
【００７９】
〔実施例４〕ミント抽出物、オレンジ抽出物、レモン抽出物、グレープフルーツ抽出物の実施例（化粧水）
下記の表４の処方により化粧水を調製した。
【００８０】
【表５】
0004933700.tif 000006
【００８１】
上記ミント抽出物入りの化粧水と同様にオレンジ抽出物、レモン抽出物、グレープフルーツ抽出物入りの化粧水を作成した。
【００８２】
【発明の効果】
本発明のシトラールの減少抑制剤をシトラール含有香料、若しくはシトラール含有製品等に使用することにより、光によるシトラールの減少を効果的に抑制することができる。また、本発明のシトラールの減少抑制剤は、光によるシトラール由来の劣化臭の主要因である化合物、フォトシトラールＡ、Ｂ、Ｃ及びＤ等の生成を効果的に抑制することができるので、シトラール由来の劣化臭生成抑制剤として機能する。
よって、本発明のシトラールの減少抑制剤をの使用することによって、シトラール含有製品中のシトラールが製造、流通、保存期間中の各段階で光に暴露されることにより徐々に減少することを効率的に抑制でき、その結果、フレッシュ感が維持され且つ劣化臭の無い、長期間安定した品質のシトラール含有製品を提供することが可能となる。
また、本発明のシトラールの減少抑制剤は、植物由来の抽出物、或いは入手しやすい成分からなるので安価であり、製品への添加も容易に行うことができるので、シトラールの減少抑制方法として経済性にも優れる。
さらに、植物由来の抽出物、或いは元来、食品中に含まれている成分なので安全性が高く、しかも微量の濃度でシトラールの減少の抑制効果があるので食品を始めとする製品本来の香味や香気に影響を与えることもない。
【図面の簡単な説明】
【図１】抽出例１におけるミント５０％エタノール溶出物の紫外線吸収スペクトル図である。
【図２】抽出例２におけるヨモギ抽出物の紫外線吸収スペクトル図である。
【図３】抽出例３におけるオレンジ抽出物の紫外線吸収スペクトル図である。
【図４】抽出例３におけるのヘプタメトキシフラボン紫外線吸収スペクトル図である。
【図５】抽出例３におけるタンゲリチンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図６】抽出例３におけるノビレチンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図７】抽出例４におけるレモン抽出物の紫外線吸収スペクトル図である。
【図８】抽出例５におけるグレープフルーツ抽出物の紫外線吸収スペクトル図である。
【図９】カフェー酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１０】フェルラ酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１１】シナピン酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１２】ロズマリン酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１３】３,５−ジカフェオイルキナ酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１４】ｐ−クマル酸の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１５】α−グルコシルルチン（αＧルチンＰＳ）の紫外線吸収スペクトル図である。
【図１６】クエルセチンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図１７】ミリシトリンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図１８】クエルシトリンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図１９】γ―オリザノールの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２０】カンフェロールの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２１】ヘスペリチンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２２】クリシンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２３】ルテオリン−７−グリコシドの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２４】６−ヒドロキシフラボンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２５】７−ヒドロキシフラボンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２６】プラトールの紫外線吸収スペクトル図である。
【図２７】７,８−ジヒドロキシフラボンの紫外線吸収スペクトル図である。
【図１】
0004933700.tif 000007
【図２】
0004933700.tif 000008
【図３】
0004933700.tif 000009
【図４】
0004933700.tif 000010
【図５】
0004933700.tif 000011
【図６】
0004933700.tif 000012
【図７】
0004933700.tif 000013
【図８】
0004933700.tif 000014
【図９】
0004933700.tif 000015
【図１０】
0004933700.tif 000016
【図１１】
0004933700.tif 000017
【図１２】
0004933700.tif 000018
【図１３】
0004933700.tif 000019
【図１４】
0004933700.tif 000020
【図１５】
0004933700.tif 000021
【図１６】
0004933700.tif 000022
【図１７】
0004933700.tif 000023
【図１８】
0004933700.tif 000024
【図１９】
0004933700.tif 000025
【図２０】
0004933700.tif 000026
【図２１】
0004933700.tif 000027
【図２２】
0004933700.tif 000028
【図２３】
0004933700.tif 000029
【図２４】
0004933700.tif 000030
【図２５】
0004933700.tif 000031
【図２６】
0004933700.tif 000032
【図２７】
0004933700.tif 000033