(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全の群から選択された腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬であって、
腎臓関連の疾患が起こることを回避可能な時点で、所定の期間投与されることにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善するものであり、
デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを有効成分とすることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項２】
請求項１記載の薬において、腎臓関連の疾患が糸球体硬化症および／または末期腎不全であることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項３】
請求項１又は２記載の薬において、経口投与されることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項４】
請求項１又は２記載の薬において、座薬投与されることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項５】
請求項１又は２記載の薬において、非経口投与されることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項６】
請求項１又は２記載の薬において、固体として投与されることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項７】
請求項１又は２記載の薬において、液体として投与されることを特徴とする腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬。
【請求項８】
デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの使用方法であって、巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全の群から選択された腎臓関連の疾患を回避または治療するための薬剤を、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを有効成分として調製することを特徴とするデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの使用方法。
【請求項９】
請求項８記載の使用方法であって、腎臓関連の疾患が糸球体硬化症および／または末期腎不全であることを特徴とするデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの使用方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、一般的には、腎臓に関する疾患を治療および／または予防する方法に関する。一層詳細には、本発明は、糸球体硬化症、および／または末期の腎不全、および／または関連する疾患の予防方法に関する。本発明の方法は、好適には、アンジオテンシンＩの誘導体を投与することで遂行される。必ずしもそうであるとは限らないが、一般的に、アンジオテンシンＩの誘導体は、抗アンジオテンシンＩＩ特性を示す。アンジオテンシンＩの好適な例は、デス−アスパラギン酸塩−アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体である。本発明は、糸球体硬化症および／または末期の腎不全のような疾患に限定されるものではなく、腎臓に関連する疾患の治療および／または予防にも関する。
【０００２】
発明の背景
腎不全や他の腎臓関連の疾患は、重大な症状を引き起こし、結局、そのような疾患の影響によって死に至ることもある。したがって、腎疾患の治療にさらに有効な医薬を開発することが必要である。
【０００３】
デス−アスパラギン酸塩−アンジオテンシンＩ（デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ）は、アミノペプチダーゼの作用によってデカペプチドから生成するノナペプチドである。ノナペプチドは、酵素のＮＨ2末端が分解することによって、アンジオテンシンＩから生成する（１）。デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩは、血漿や酵素を変換する肺のアンジオテンシンの基質である（２）。さらに、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩは、アンジオテンシン受容体の任意のインドメタシン感受性サブタイプとして機能する（３）とともに、アンジオテンシンＩＩの昇圧作用（４）や肥大作用（５）を抑制する。アンジオテンシンＩＩは、腎臓疾患を進行させる糸球体硬化症の重要な媒介物である（６〜８）。本発明をなす過程で、本発明者らは、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの抗アンジオテンシンＩＩ特性が腎臓関連の疾患の治療および／または予防に有効であることを見いだした。
【０００４】
発明の要旨
本明細書において、文言「を有する」または「を有して」は、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、「対象物がその構成要素のみからなり、他の構成要素は含まない」という意味ではなく、「対象物はその構成要素のみからなっていてもよく、さらに他の構成要素を具備していてもよい」という意味である。
【０００５】
本発明に係る一実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、腎臓関連の疾患が起こることを充分に回避可能な時点で、アンジオテンシンＩの誘導体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【０００６】
本発明に係る別の実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、腎臓関連の疾患が起こることを充分に回避可能な時点で、アンジオテンシンＩＩ−阻害剤としてのアンジオテンシンＩの誘導体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【０００７】
本発明に係るまた別の実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【０００８】
本発明に係るさらに別の実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療および／または予防に使用される組成物であって、アンジオテンシンＩと薬学上容認可能なキャリア、および／または希釈剤を含有する組成物が提供される。
本発明に係るさらにまた別の実施形態によれば、巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全の群から選択された腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、
腎臓関連の疾患が起こることを回避可能な時点で、アンジオテンシンＩの誘導体を有効量で所定の期間投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善することを特徴とする腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法が提供され、アンジオテンシンＩの誘導体は、アンジオテンシンＩＩの１以上の機能を抑制する。
本発明に係る別の実施形態によれば、腎臓関連の疾患に対する予防または治療のための用具であって、
調合された薬剤を保護する容器と、
前記容器中に有効量で存在してアンジオテンシンＩＩの１以上の機能を抑制するアンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体と、
前記アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体を、巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全の群から選択された腎臓関連の疾患の予防または治療に使用することが記載されるとともに前記容器に添付された注意書きと、
を有する用具が提供される。
そして、本発明の別の実施形態によれば、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの使用方法であって、巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全の群から選択された腎臓関連の疾患を回避または治療するために薬剤として調合されたデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを使用することが提供される。
【０００９】
好適な実施形態の詳細な説明
本発明は、アンジオテンシンＩの誘導体が、試験的に腎症を起こさせたラットにおいて、糸球体硬化症やそれに関連する蛋白尿の影響を回避し、低減し、または改善することについて言及するものである。腎疾患の研究に動物を使用することは、従来から盛んに行われている（９）。本発明においては、ラットの蛋白尿に対するデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの効果は、腎亜全摘術にて確認された。デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩが腎臓関連の疾患を回避し、低減し、改善することに効果があることが分かった。
【００１０】
そして、本発明の一実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、アンジオテンシンＩの有効量を投与する方法が提供される。
【００１１】
さらに、本発明によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、腎臓関連の疾患が起こることを充分に回避可能な時点で、アンジオテンシンＩの誘導体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【００１２】
ここで、用語「腎臓関連の疾患」は広義の意味で使用されており、巣状または部分的な糸球体硬化症、慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生、末期腎不全を含む概念である。腎臓関連の疾患の好適な例は、糸球体硬化症および／または末期腎不全である。
【００１３】
デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの誘導体には、アンジオテンシンＩまたはデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩから、単独または複数のアミノ酸が置換、除去、または付加されてなる変種や部分が含まれる。一般的なアンジオテンシンＩの誘導体は、アンジオテンシンＩＩの活性や機能を抑制し、低減し、阻害する。
【００１４】
この実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、腎臓関連の疾患が起こることを充分に回避可能な時点で、アンジオテンシンＩＩ−阻害剤としてのアンジオテンシンＩの誘導体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【００１５】
本発明によれば、好適な誘導体は、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体である。相同体ないし類似体に関していえば、ミモトープ（mimotope）、ペプチド、類似擬似体を含む。この種の誘導体、相同体、類似体は、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩに代わって作用薬、必要に応じて拮抗薬として機能する。
【００１６】
上記したように、誘導体においては、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの単独または複数のアミノ酸が置換され、さらに付加され、および／または除去されている。
【００１７】
デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩのアミノ酸付着誘導体には、アミノおよび／またはカルボキシ末端縮合と同様に、単独または複数のアミノ酸の連続的な付着が含まれる。付着はランダムに起こり得るが、最終製品の適切なスクリーニングによって、１以上のアミノ酸残留物がデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの所定のサイトに導入された付着アミノ酸配列変異体となる。除去変異体は、配列から１以上のアミノ酸を除去することによってキャラクタリゼーションされる。置換アミノ酸変異体は、配列から少なくとも１つの残留物が除去された後、その除去箇所に他の異なる残留物が付加されたものである。
【００１８】
アミノ酸の置換によってデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの誘導体を調製する場合、アミノ酸は、一般的には、疎水性、親水性、電気陰性、巨大な側鎖等のような特性を有する他のアミノ酸に置換される。アミノ酸の置換の典型例は、１個を置換することである。アミノ酸の付着は、通常、１〜６個のアミノ酸を付加することであり、一方、アミノ酸の除去は、１〜６個のアミノ酸を離脱させることである。除去または付着は、隣接する官能基同士を１組として行うことが好ましい。すなわち、隣接する２個の官能基を除去したり、２個の官能基を隣接するように付着させることが好ましい。
【００１９】
相同体には、機能的、構造的、立体化学的に類似したポリペプチドが含まれる。ポリペプチドの例としては、家畜や実験動物、霊長類等を源とするものが挙げられる。デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの相導体も、類似ペプチドである。
【００２０】
類似体または擬似体には、人工的に生成されるアミノ酸を含有する分子と同様に、アミノ酸を含有していないにも関わらず、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩと同じ機能を示す分子が含まれる。本明細書における類似体には、側鎖が修飾されたもの、人工のアミノ酸および／またはペプチド合成間に生成した誘導体、架橋体、ペプチド分子またはその類似体における立体配座制限が緩和されたものが含まれる。
【００２１】
人工的なアミノ酸の例としては、ペプチド合成間のものが含まれ、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェニルペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、ノルバリン、フェニルグリシン、オルニチン、サルコシン、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸、２−チエニルアラニンおよび／またはアミノ酸のＤ−異性体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２２】
架橋体も使用可能である。架橋体としては、（ＣＨ2）nスペーサ基を有する二機能性イミドエステル等の均等二機能架橋剤を使用して安定な三次元立体配座としたものが例示される。ここで、ｎ＝１〜６であり、エステルとしては、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび他のスペーサ的反応基のようなアミノ反応部を一般的に含有するヘテロ−二機能性試薬が例示される。
【００２３】
以上の物質の修飾体も、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを安定させるのに重要である。もし使用されるのであれば、例えば、ワクチンや治療組成物を製造したり、検出分析を行う際に重要となるであろう。本発明における人工のアミノ酸の例は、次の表１に示される。
【００２４】
【表１】
0004911854.tif 000002
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0004911854.tif 000004
【００２５】
本発明においては、さらに、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩと化学的に等価な物質が提供される。化学的等価物は、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩから誘導されたものである必要はなく、立体配座や機能が類似であればよい。または、化学的等価物は、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの生理化学的特性に類似するように配列が設定されたものであってもよい。化学的等価物は、化学的に合成されたものであってもよいし、例えば、天然物をスクリーニングすることによって見いだされたものであってもよい。化学的等価物は、機能的に等価であるものが好ましい。
【００２６】
上記したように、本発明の観点によれば、本発明には、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ、その留分および前駆体の機能的に等価な変種が含まれる。ここでいう「機能的に等価」とは、ペプチド、関連するポリペプチド、アンジオテンシンＩから誘導された誘導体、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩのような誘導体として定義される。ここで、アミノ酸配列は、単独または複数のアミノ酸が置換されていたり、付加されていたり、除去されていたりすることによって修飾されている。また、配列においては、アミノ酸が化学的に修飾されていてもよい。この修飾には、脱グリコシルやグリコシル化が含まれる。しかしながら、アンジオテンシンＩＩの活性を維持するような修飾は含まれない。
【００２７】
本発明におけるデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩには、例えば、イソ型、単量体、二量体、多量体、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩのペプチド留分、相同体、それらの機能的等価物等、この分子の全形態が含まれる。アンジオテンシンＩの他の機能的等価物や相同体もこの文言に含まれるものとする。
【００２８】
上記のアミノ酸変種とは、固相ペプチド合成や、ＤＮＡ組み替え操作等の周知のペプチド合成技術によって調製されたものである。既知または部分的に既知であるＤＮＡの所定のサイトを置換して突然変異体を調製する手法は周知であり、例えば、Ｍ１３突然変異誘発が挙げられる。置換、付加、除去変種として現れる変種蛋白を生成するためのＤＮＡ配列の操作に関しては、例えば、サムブローク（Sambrook）らの文献（１０）に記載されている。
【００２９】
さらに、本発明に係る別の一実施形態によれば、腎臓関連の疾患の治療方法および／または予防方法であって、腎臓関連の疾患が起こることを充分に回避可能な時点で、アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体を有効量でしばらく投与することにより、腎臓関連の疾患の兆候が現れることを回避、抑制、または改善する方法が提供される。
【００３０】
さらになお、本発明に係るまた別の一実施形態によれば、アンジオテンシンＩの誘導体を腎臓関連の疾患の治療薬および／または予防薬として使用することが提供される。
【００３１】
本発明は、また、腎臓関連の疾患の治療および／または予防に使用される組成物であって、アンジオテンシンＩと薬学上容認可能なキャリア、および／または希釈剤を含有する組成物を提供するものである。
【００３２】
アンジオテンシンＩの誘導体は、アンジオテンシンＩＩの活性や、アンジオテンシンＩＩの全てまたは部分的な機能を抑制するものであることが好ましい。
【００３３】
誘導体がデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、またはその類似体であると、より好適である。
【００３４】
腎臓関連の疾患の例としては、糸球体硬化症および／または末期腎不全が挙げられる。
【００３５】
本発明に係るこの実施形態によれば、デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩ、その誘導体、その相同体、その類似体、その塩、または後述する製薬剤がこれらと混合されたもの等のような（ただし、これらに限定されるものではない）アンジオテンシンＩを、患者のような被験体に対し、従来から周知の方法を介して、有効量でしばらく投与する。上記したものを単独で投与してもよいし、上記したものと、カプトプリル、他のアンジオテンシン酵素変換抑制剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤等とを併せて投与してもよい。組成物は、経口投与、座薬、非経口投与（すなわち、筋肉注射、静脈注射、皮下注射または皮内注射）等によって投与することができる。なお、投与に際しては、後に詳述するように、錠剤、懸濁液、溶液等、投与方法に応じて、固体または液体として適量とすればよい。適量の投与を継続的に行うか、１回限りの投与とするかは、任意に決定される。
【００３６】
製薬剤を調製するための適当な薬剤キャリアとしては、固体、液体、これらの混合物が例示される。組成物は、錠剤、丸薬、カプセル、粉末、腸溶性コート剤やその他の保護剤、除放剤、除溶剤、それらの埋め込み剤、ミクロスフェア剤、溶液、懸濁液、エルキシル剤、エアロゾル等とし得る。
【００３７】
特に注射による投与の場合（等浸透圧であるとき）、好適な液体キャリアとしては、水、生理食塩水、水溶性デキストロース、グリコールが挙げられる。キャリアは、石油、動物、野菜、合成系等の様々な油分、例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ごま油から選定することができる。製薬賦形剤の好適な例としては、スターチ、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、サッカロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、胡粉、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロール一ステアリン酸、塩化ナトリウム、脂肪粉乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノール等が挙げられる。組成物は、滅菌等に際して都合のよい薬剤である必要があり、また、防腐剤、安定化剤、乳化剤、浸透圧を調整するための塩、緩衝剤等の一般的な製薬付加剤を含有していてもよい。好適な薬剤キャリアとその製薬剤に関しては、マーチンがアレミングストンファラマスティカルサイエンス第１５版、マック印刷会社、イーストン（１９７５年）において記載している。例えば、１４０５〜１４１２頁および１４６１〜１４８７頁を参照されたい。この種の組成物は、一般的には、有効量の活性成分とともに、患者に適切な量を投与するために適切な量を調製するための適当量のキャリアを含有する。
【００３８】
好ましい一実施形態によれば、本発明に係る治療方法は、兆候を緩和することが特に必要な場合や差し迫った場合に実施される。別の好適な実施形態によれば、その方法は、継続的または予防的な処置として実施される。
【００３９】
本発明に係る治療方法を実施するに際しては、被験体に投与される製薬組成物の適当量は、症状の段階や重症度、投与のスケジュール、被験体の年齢ないし肉体的特徴等に応じて変化させればよい。適当量は、薬学分野ではよく知られている臨床学的手法によって決定すればよい。
【００４０】
本明細書においては、ラットに関する説明を行うが、本発明は特にこれに限定されるものではない。本発明が、人類、ねずみ、うさぎ、家畜、霊長類等（これらに限定されない）のほ乳類に対するアンジオテンシンＩに使用し得ることにまで拡張して解釈されるべきことは、容易に諒解され得るであろう。
【００４１】
本発明を実施例によって更に詳細に説明するが、本発明は、下記実施例のみに限定されるものではない。
【００４２】
実施例１
試験薬品・被験体
バッフェム（Bachem）社（ドゥーベンドルフ、スイス国）製のデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを使用した。周知の手法によって、デス−アスパラギン酸塩−アンジオテンシンＩを調製した。成体のスピローグドーリーラット（ＳＤ、２５０〜３００ｇ）をシンガポール国立大学の動物センターから譲り受けた。
【００４３】
実施例２
糸球体硬化症と蛋白尿の誘発
モリソンの文献（１１）に記載された通り、腎臓の５／６を摘出した。要するに、７ｗ／ｖ％の抱水クロラール（０．４ｇ／ｋｇ）で各ラットに麻酔をかけた。腎臓に達するように腹部の腹壁を切開した。右の腎臓を摘出するとともに、左の腎臓の頭方および尾方を切除して１／３とした。左の腎臓の切端部を組織接合（ヒストクリル、ブラウン）で封止し、出血を防いだ。このようにして、腎柔組織の５／６を切除した。最終的に、このモデルでは、人間における慢性進行性腎不全、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ、増殖性糸球体硬化症、鎮痛薬性腎症、糖尿病、片側腎摘出、皮質壊死、片側腎の無形生等のように、巣状および部分的な糸球体硬化症や腎組織に類似した変化が生じた（９）。
【００４４】
実施例３
蛋白尿の排出量の測定とデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩによる処置
手術の後、各ラットを１週間のうちの２４時間だけ代謝ケージに入れ、これを８週間継続した。２４時間尿の排出量と、該尿中の蛋白質濃度を測定した。８週間後、ラットをランダムに２つの集団に分けた（１集団につき８匹）。一方の集団（以下、処置集団）には、８週間に亘って、鈍角なニードルを有する１ｍｌシリンジを介して、生理食塩水０．５ｍｌに溶解したデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを、１日当たり、体重１ｋｇにつき７６２ｎｍｏｌｅ経口投与した。１日当たり、体重１ｋｇにつき７６２ｎｍｏｌｅという投与量は、原出願において、心臓肥大に対して経口投与で最も効率的であった量（平均体重３２８ｇに対して２５０ｎｍｏｌｅ）に基づいて計算した。残余の１集団（以下、対照集団）には、これに準拠して生理食塩水０．５ｍｌのみを経口投与した。これらのラットにおける２４時間尿の排出量と、該尿中の蛋白質濃度を、更にその後の８週間に亘って測定した。この測定方法は、以前の腎摘出において、腎臓の５／６が摘出されたラットにおける蛋白尿の排出量が、通常、７週目から８週目で上昇し始めるという結果が得られていたことから決定した。同様の実験を、腎摘出された１２匹のラットで繰り返して行った。
【００４５】
正常なラットにおけるデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩの効果を調べるために、１２匹のラットを１集団として生理食塩水を投与する一方、他の１２匹の正常なラットに対して１日当たり体重１ｋｇにつき７６２ｎｍｏｌｅのデス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩを投与した。
【００４６】
これらのラットについても同様に、１週間に１回、２４時間尿の排出量と、該尿中の蛋白質濃度とを測定した。
【００４７】
実施例４
デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンの効果
上記の実験結果を表２、表３および表４にまとめて示す。データは、平均値±標準誤差として表した。一方向差異分析と、その後のニューマンクレフ試験により、著しい相違点があることが分かった。容認可能な有意レベルは、ｐ＜０．０５であった。デス−Ａｓｐ−アンジオテンシンＩは、腎臓が切除されたラットの蛋白尿が進行することを抑制する効果がある。１日当たり体重１ｋｇにつき７６２ｎｍｏｌｅの経口投与により、抗蛋白尿作用が現れる。この投与量では、正常ラットにおいては、ノナペプチドは蛋白尿の排出に対して効果はなかった。
【００４８】
【表２】
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【００４９】
【表３】
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【００５０】
【表４】
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