(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、ジエチルジチオカルバミン酸亜鉛を含む抗白内障医薬組成物であって、
該ジエチルジチオカルバミン酸亜鉛の少なくとも一部がシクロデキストリン化合物と包接複合物を形成しており、包接化合物形成時に加熱処理を行う、抗白内障医薬組成物であって、
さらに、０．１〜１．０％のヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を安定化剤として含む抗白内障医薬組成物。
【請求項２】
水性点眼剤の形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ジエチルジチオカルバミン酸と亜鉛とによるキレートを形成した抗白内障作用を有する化合物を含む医薬組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
日本における平均寿命は世界において最も高く、高齢化社会を迎えている。厚生省の調べによると日本での白内障患者は１５０万人を超えるとされている。しかしながら、現在のところ、外科的治療法以外、白内障に有効な治療法は開発されていない。更に、この外科的療法も良い面ばかりでなく、症状の進んだ糖尿病や高血圧症を併発している患者に対する手術の不適応、術後に眼内に挿入されたレンズが混濁する術後白内障の発症、手術に対する費用の増加に伴う医療費の高騰などが大きくクローズアップされるようになってきた。本発明者らは白内障の薬物療法を試み、既にジエチルジチオカルバミン酸(ＤＤＣ)およびその誘導体が抗白内障作用を有することを開示し、製剤化によってバイオアベイラビリティを高めることを追求してきた(特開平７−２３３０５７号)。
【０００３】
ＤＤＣは水溶性であるため角膜の通過が困難であり、従って眼房水中および水晶体中への取りこみがほとんど行われず、したがってバイオアベイラビリティが低く、また酸化されやすく不安定で、薬効を十分に発揮し得ないという欠点があるため、薬物としてそのまま用いることが困難であった。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明の課題はバイオアベイラビリティが高く、より安定でかつ抗白内障作用に影響を与えないＤＤＣを提供することである。この課題は亜鉛とキレート形成したジエチルジチオカルバミン酸亜鉛((ＤＤＣ)2Ｚn)を用いることによって解決される。
【０００５】
従って、本発明の第１は、有効成分としてジエチルジチオカルバミン酸亜鉛((ＤＤＣ)2Ｚn)を含む高安定性抗白内障医薬組成物を提供する。
【０００６】
本発明の第２は、(ＤＤＣ)2Ｚnのキレート化合物を、さらにシクロデキストリンまたはその誘導体と包接複合物を形成させることにより、当該化合物の完全な可溶化を実現させた抗白内障医薬組成物を提供する。
【０００７】
(ＤＤＣ)2Ｚnはバイオアベイラビリティが高く、より安定でかつ抗白内障作用に影響を与えないＤＤＣを提供するという目的を解決し得たが、水に不溶であるため水性点眼剤への適用は困難である。従来から、水不溶性薬物については固体又は液体粒子を水に分散させる不均一系製剤が専ら利用されてきた。これらの製剤として、懸濁製剤、乳剤、リポソーム製剤などが挙げられる。しかしながら、点眼剤のような眼粘膜での貯留性が低いものは、角膜又は眼粘膜に薬物が十分移行するまでに涙液により洗い流されてしまう欠点がある。眼粘膜での貯留性を高めた眼軟膏及び油性製剤が、これを解決する目的で製剤化されているが、視力を回復させるために用いられる眼科薬がしばらくとはいえ視力の低下をともなってしまう結果をもたらす。また溶液性の点眼製剤は薬物の利用率(バイオアベイラビリティ)が良いとされているので、先に述べた水不溶性の薬物は界面活性剤を用いて可溶化されてきた。界面活性剤は水と油の両方に親和性を有する化合物で、ステロイド性抗炎症剤等に従来用いられてきた。しかしながら、抗白内障薬のように長期にわたって使用される薬物の可溶化剤としては不適当と考えられる。
また、水溶液中での化合物の安定性は非常に悪い。
【０００８】
包接複合物を形成させることによって、水に不溶である(ＤＤＣ)2Ｚnの水に対する溶解を可能にし(図１)、かつ角膜の透過性を上昇させることができ、バイオアベイラビリティを増大させることができる(図２)。また、抗白内障薬製剤の安全性及び安定性を高め、長期にわたった使用を可能とし(表２)、有効成分の薬物の完全な溶解により患者の使用時の心理的不安を除くものである。
【０００９】
本発明の第３は、(ＤＤＣ)2Ｚnとシクロデキストリン化合物の包接複合物形成時に加熱処理を行う高安定性抗白内障医薬組成物を提供する。加熱処理することによって、(ＤＤＣ)2Ｚnがシクロデキストリン中に包接される量が増加するか、またはその２分子がシクロデキストリンに包接されるなどによって溶解度が増加するものと考えられる。これによって、長時間角膜透過性を上昇させ、バイオアベイラビリティを増大させることができる(図２)。
【００１０】
本発明の第４は、繊維状の高分子である可溶性セルロース誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース(ＨＰＭＣ)を添加することによって、(ＤＤＣ)2Ｚnのさらなる安定化を確立させた(表２)抗白内障医薬組成物を提供する。
【００１１】
下記の式：
【化１】
[(Ｃ２Ｈ５)２ＮＳ２]２Ｚn
で示される(ＤＤＣ)2Ｚnは、融点１７７℃の白色粉末であり、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶剤に可溶だが、水、エタノールなどに不溶であり、天然ゴム、スチレン−ブタジエン、アクリロニトリル−ブタジエン、イソブチレン−イソプレン等の合成ゴムおよびラテックス用加硫促進剤として用いられている。毒性は低い(ＬＤ５０(ラット、経口)３３４０mg／kg体重)。この化合物がかって、眼科用の抗白内障医薬組成物に用いられたことはなかった。
【００１２】
本発明で用いられる包接複合物を形成させるシクロデキストリン化合物には、シクロデキストリンおよびその誘導体が用いられ、α−、β−、γ−シクロデキストリン、２,６−ジ−O−メチル−β−シクロデキストリン、２,３,６−トリ−O−メチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２,３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、グリコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリンなどを挙げることができ、好ましくは、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２,３−ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、グリコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリンであり、最も好ましくは、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである。
【００１３】
(ＤＤＣ)2Ｚnに対するシクロデキストリンおよびその誘導体の添加量は、０.１〜５０％、好ましくは、０.５〜３０％、より好ましくは、０.５〜２０％である。
【００１４】
本発明で用いられる(ＤＤＣ)2Ｚnに対する安定化剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム(ＣＭＣ・Ｎa)、メチルセルロース(ＭＣ)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(ＨＰＭＣ)、ポリビニルアルコール(ＰＶＡ)、アルギン酸ナトリウムなどを挙げることができ、好ましくは、ＰＶＡ、ＨＰＭＣであり、より好ましくはＨＰＭＣである。
【００１５】
(ＤＤＣ)2Ｚnに対するＨＰＭＣなどの安定化剤の添加量は、０.０５〜１０％、好ましくは、０.１〜５％、より好ましくは、０.１〜１.０％である。
【００１６】
本発明の(ＤＤＣ)2Ｚnは通常の製剤技術によって他の薬剤および、緩衝液、等張化剤、保存剤、粘稠剤、懸濁化剤などの添加剤とともに眼科用製剤、例えば、水性点眼剤、水性懸濁点眼剤、非水性(油性)点眼剤、非水性(油性)懸濁点眼剤、洗眼剤、眼軟膏剤などにも処方することができるが、特に、シクロデキストリンまたはその誘導体の添加によって、水性点眼剤(水性懸濁点眼剤を含む)に好適に処方することができる。
【００１７】
(ＤＤＣ)2Ｚnの眼科用製剤中の含有量は、毒性が低いために特に制限はなく、当業者および医師が適宜決め得るが、１回当たりの投与量は１μg〜５mgであり、１日当たりの投与量は５μg〜５０mgである。
【００１８】
薬剤学的試験
下記の実験材料および実験方法を用いて、(A)〜(Ｃ)の薬剤学的試験を行った。
(A)(ＤＤＣ)2Ｚnの溶解度測定試験
(B)(ＤＤＣ)2Ｚn溶液製剤の熱安定性試験
(C)(ＤＤＣ)2Ｚn‐ＨＰＣＤ溶液製剤のin vitroウサギ角膜透過性試験
【００１９】
実験材料及び試験
１.実験材料
Ａ.試薬
(ＤＤＣ)2Ｚn、２−ヒドロキシルプロピル−β−シクロデキストリン(ＨＰＣＤ)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(ＨＰＭＣ)、インドメタシン、トリフルオロ酢酸(ＴＦＡ、高速液体クロマトグラフィー用)、メタノール(高速液体クロマトグラフィー用)、アセトニトリル(高速液体クロマトグラフィー用)、塩化ベンザルコニウム(BC)、塩化ナトリウム(特級)(ＮaＣl)、Ｎ-２-ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ'−２−エタンスルホン酸(ＨＥＰＥＳ)、塩化カリウム(特級)、リン酸水素ニカリウム(特級)、塩化カルシウム二水和物(特級)、グルコース(特級)
【００２０】
Ｂ.使用製剤
０.５％(ＤＤＣ)2Ｚn、１０％ＨＰＣＤ、０.９%ＮaＣl、０.００５%BCに０％、０.１％または０.２５％ＨＰＭＣを加えた後４８時間以上撹拌する。
その後、メンブランフィルターMinisart CE(Sartorius、０.２ μｍ)を用いてろ過したろ液を試料とする。加熱処理の条件は、サンプルを共栓試験管に加え沸騰水浴中で３０分間煮沸した。
各処方の成分を以下の表１に示す。
【００２１】
【表１】
0004859283.tif 000002
【００２２】
Ｃ.使用実験動物
雌性白色家兎(ウサギ、２〜３ｋｇ)を使用し、ウサギは２５±２℃の飼育室でケージに入れ、十分な給水と餌(クレアＣＲ−３)を与えたものを使用した。
【００２３】
２.試験
(Ａ)各処方における(ＤＤＣ)2Ｚnの溶解度測定法
実験方法
ＨＰＬＣを用いて(ＤＤＣ)2Ｚnの定量を行った。ＨＰＬＣは島津製作所製LC−10AD、カラムMightysil RP-1８ GP ５０−２.０(３μｍ)(関東化学)を用いた。移動相として０.１％ＴＦＡ を含む４５％アセトニトリルを流速０.２５ ｍL/min、３５℃でＨＰＬＣをおこなった。ＤＤＣの検出には波長２１５nmを使用した。ＨＰＬＣ用サンプルとして検体５０μLに対し、内部標準物質として２.５μｇ/ｍLインドメタシン−メタノール溶液１００μLを添加し、調製した。(ＤＤＣ)2Ｚnの検量線は(ＤＤＣ)2Ｚn(４〜４０μｇ/ｍL)５０μLに内部標準物質インドメタシン−メタノール溶液(２.５μｇ/ｍL)１００μLを用いて同上の操作により作成した。
【００２４】
(ＤＤＣ)2Ｚnのピーク面積を内部標準物質インドメタシンのピーク面積で割った比を縦軸、(ＤＤＣ)2Ｚnの濃度を横軸にとり、検量線の傾きをもとに、(ＤＤＣ)2Ｚnの濃度は次のようにして求めた。
0004859283.tif 000003
【００２５】
実験結果
水に不溶の(ＤＤＣ)2ＺnがＨＰＣＤを添加することによって、水に溶解され得ることがわかる。さらに加熱処理することによって溶解性が増大した。処方３、５、７の非加熱処理製剤は、ＨＰＭＣ含量の増加に伴い溶解度が上昇したが、加熱処理した処方２、６および８では、ＨＰＭＣ含量の増加に伴い溶解度は劇的に増加した。図１は(ＤＤＣ)2Ｚnの可溶化に対するＨＰＭＣの添加と加熱処理の影響を示す(Ｘ軸の数字は表１の製剤の処方番号を示す)。
【００２６】
(B)各処方における(ＤＤＣ)2Ｚnの安定性試験法
実験方法
各処方を８０℃(０、４、８、１６、３２、６４h)、９０℃(０、２、４.５、９、１３.５、１８h)、１００℃(０、０.５、１.５、３、４.５、６ｈ)で加熱した後(A)の溶解度測定法と同様の方法を用いて、(ＤＤＣ)2Ｚn濃度をＨＰＬＣにより測定した。測定された(ＤＤＣ)2Ｚn濃度を次の一次速度式を用いて消失速度定数を求めた。
【数１】
0004859283.tif 000004
ここで、(ＤＤＣ)2Ｚn初濃度C0、加熱時間ｔでの(ＤＤＣ)2Ｚn濃度C、消失速度定数をｋとした。
【００２７】
各処方について、８０℃、９０℃、１００℃における速度定数ｋを求めArrhenius Plotsを作成した。Arrhenius Plotsは直線を示した。また、算出された消失速度定数ｋを次のArrhenius式：
【数２】
0004859283.tif 000005
(ここで、Ｅaは活性化エネルギー、Ａは頻度係数、Ｒは気体定数、Ｔは絶対温度を表す)に代入し各処方の活性化エネルギー(Ｅa)及び頻度因子(A)をそれぞれ算出した。プロットの傾きは活性化エネルギー(Ｅa)を、Y軸の切片は頻度因子(A)を表す。
【００２８】
実験結果
いずれの処方の製剤もArrhenius Plotsにより直線性が認められたことにより、(ＤＤＣ)2Ｚnの分解は温度依存性であることが判明した。活性化エネルギーと頻度因子から任意の温度での製剤中の(ＤＤＣ)2Ｚnの分解速度を算出することができる。
【００２９】
標準温度２５℃での製剤中の(ＤＤＣ)2Ｚnの分解速度を算出した結果、処方６が最も小さく、ここから更に算出した２５℃での(ＤＤＣ)2Ｚnの９０％残存に至る時間は約３０年と非常に安定であることが証明された。また、HPMCを含む製剤は非含有の製剤に比較し安定性が高いことが判明した。各処方の熱力学的及び安定性に関するパラメーターを表２に示す。
【００３０】
【表２】
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Ｅaは活性化エネルギー、Ａは頻度係数、ｋ２５℃は２５℃における分解速度、ｔ０.９,２５℃は２５℃で９０％残存に至る時間である。
【００３１】
(Ｃ)In ｖitroウサギ角膜透過性試験
実験方法
Ｃ−１緩衝液の調製：ＨＥＰＥＳ(+Ｇlc)緩衝液
１０mM ＨＥＰＥＳ、１３６.２mM ＮaＣl、５.３mM ＫＣl、１.０mM Ｋ２ＨＰＯ４、１.７mM ＣaＣl２・２Ｈ２Ｏ、５.５mＭ glucoseの順に加えて溶解し、３７℃、１Ｎ ＮaОＨでpＨ７.４に調製し、メンブランフィルターMinisart CE(Sartorius,０.２０ μm)でろ過し、以下の実験で使用した。
【００３２】
Ｃ−２角膜透過実験
雌性白色家兎(体重２.５〜３.０ｋｇ)に空気を耳静脈より注入することにより安楽死させた後、眼球を丁寧に摘出し、強膜部分を約１〜２mmを残して角膜部分を傷付けないように摘出した。この角膜をアクリル樹脂製角膜透過セルに装着し、リザーバー側には等張ＨＥＰＥＳ緩衝液(pＨ７.４)、ドナー側には(ＤＤＣ)2Ｚn製剤(表１の処方５及び６)を注加し、角膜表面温度である３５℃で加熱した。経時的に５０μＬずつリザーバー側から試料を採取し、透過ＤＤＣ量をＨＰＬＣにより測定した
【００３３】
得られたデータは、次式に基づき非線形最小二乗法コンピュータプログラムMULTIを用いて当てはめ計算を行い、速度論的パラメータの算出を行った。
【数３】
0004859283.tif 000007
ここで、JcはDDCの透過速度、Kmは角膜／製剤の分配係数、Dは角膜内での拡散係数、τはラグタイム、δは角膜の厚さ（平均0.0625 cm）、Aは用いた角膜の有効面積（0.64 cm2）、Qはt時間にリザーバー側に透過した積算薬物量、CHPCDは(ＤＤＣ)2Ｚn‐ＨＰＣＤ溶液製剤中の(ＤＤＣ)2Ｚn濃度である。Jc及びτは、上記の式に当てはめ算出した。
【００３４】
実験結果
実験開始から３時間までは、処方５の非加熱処理製剤と、処方６の加熱処理製剤は、ともに非常にゆっくりした透過を示した。しかし、３時間以降では加熱処理を行った処方６の方が透過速度の増加は大きくなった。図２は(ＤＤＣ)2Ｚn‐ＨＰＣＤ溶液製剤のin vitroウサギ角膜透過性を示す。また、得られたデータを解析し、透過パラメータを算出した結果を表３に示す。
【００３５】
【表３】
0004859283.tif 000008
【００３６】
実質的な透過速度を表すJcは、加熱処理を行った処方６製剤が処方５製剤より１.８倍大きく、製剤中の(ＤＤＣ)2Ｚn濃度が高いものほど透過速度が大きくなることが示された。適用製剤中の単位(ＤＤＣ)2Ｚn量当たりの薬物透過速度であるKpは、ほぼ同じであることから、薬物濃度が高いほど実質的な透過速度Jcを上昇させることが判明した。
【００３７】
【実施例】
実施例１
０.５％(ＤＤＣ)2Ｚn、１０％ＨＰＣＤ、０.９%ＮaＣl、０.００５%BCに０.１％ＨＰＭＣを加えた後４８時間以上撹拌し、その後、メンブランフィルターMinisart CE(Sartorius、０.２μｍ)を用いてろ過して水性点眼剤を調製した。
【００３８】
実施例２
０.５％(ＤＤＣ)2Ｚn、１０％ＨＰＣＤ、０.９%ＮaＣl、０.００５%BCに０.１％ＨＰＭＣを加えた後４８時間以上撹拌し、その後、メンブランフィルターMinisart CE(Sartorius、０.２μｍ)を用いてろ過し、沸騰水浴中で３０分間煮沸して水性点眼剤を調製した。
【００３９】
実施例３
０.５％(ＤＤＣ)2Ｚn、１０％ＨＰＣＤ、０.９%ＮaＣl、０.００５%BCに０％、０.２５％ＨＰＭＣを用いて、実施例１と同様に調製した。
【００４０】
実施例４
０.５％(ＤＤＣ)2Ｚn、１０％ＨＰＣＤ、０.９%ＮaＣl、０.００５%BCに０％、０.２５％ＨＰＭＣを用いて、実施例２と同様に調製した。
【図面の簡単な説明】
【図１】  (ＤＤＣ)2Ｚnの可溶化に対するＨＰＭＣの添加と加熱処理の影響を示す棒グラフである(Ｘ軸の数字は表１の製剤の処方番号を示す)。
【図２】  処方５(非加熱処理)および処方６(加熱処理)の(ＤＤＣ)2Ｚn‐ＨＰＣＤ溶液製剤のin vitroのウサギ角膜透過性を示す折線グラフである。
【図１】
0004859283.tif 000009
【図２】
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