(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の葉部を、水及びエタノールを７：３〜２：８（重量比）で混合した混合液により抽出して得られた抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸化剤（皮膚老化予防の用途を除く）。
【請求項２】
前記抽出物が、スーパーオキサイド消去作用、過酸化水素消去作用及びＤＰＰＨラジカル消去作用からなる群より選択される１種又は２種以上の作用を有することを特徴とする請求項１記載の抗酸化剤（皮膚老化予防の用途を除く）。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、植物抽出物を有効成分とする抗酸化剤、特に活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用に基づく抗酸化作用を有する植物抽出物を有効成分とする抗酸化剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、特に生体成分を酸化させる要因として、活性酸素や生体内ラジカルが注目されており、その生体への悪影響が問題となっている。
活性酸素は、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサイド（即ち酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン（・O2-）、過酸化水素（H2O2）、ヒドロキシラジカル（・OH）等がある。これら活性酸素は食細胞の殺菌機構にとって必須でありウイルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしているが、活性酸素の過剰な生成は生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。例えば、活性酸素は、コラーゲン等の生体組織を分解、変性あるいは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりすると考えられており、活性酸素によって引き起こされるこれらの障害が、皮膚のしわ形成や皮膚の弾力性低下等の老化の原因になるものと考えられている。
【０００３】
一方、甘草の根部（甘草根）は、古くから抗炎症剤等に用いられており、近年では癌治療にも有効であるという報告もあり、甘草根は年間約数万トン生産されている。しかしながら、甘草の地上部（例えば甘草の葉部（甘草葉））には薬効が確認されておらず、使用用途がないため廃棄物として処理されているのが現状である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明は、第一に、天然物の中から活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用を有するものを見いだし、それを有効成分とした抗酸化剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第二に、廃棄物として処理されている甘草の地上部に有用性を見出し、甘草の有効利用を図ることを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明の抗酸化剤は、甘草の地上部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。本発明の抗酸化剤において、前記抽出物が活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用を有することが好ましい。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明の抗酸化剤の有効成分である「甘草の地上部からの抽出物」は、甘草の地上部から得られる抽出物を意味し、甘草の地上部から得られる抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれもが含まれる。
【０００７】
抽出原料としては、甘草の地上部を使用する。甘草の地上部には、葉部、枝部、茎部、花部、種子部などが含まれる。甘草の地上部のうち、特に甘草の葉部（甘草葉）を抽出原料として使用することが好ましい。甘草は、マメ科に属し、古代より薬用又は甘味料の原料として利用されている有用植物である。特に根部にはグリチルリチンその他有用成分が含有されていることが確認されているが、これらの有用成分は甘草の地上部には含有されていない。これに対して、本発明者によって初めて確認された活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用を有する成分は、甘草の地上部（特に甘草葉）に含有されている。
【０００８】
甘草には、Glychyrrhiza glabra、Glychyrrhiza inflata、Glychyrrhiza uralensis、Glychyrrhiza aspera、Glychyrrhiza eurycarpa、Glychyrrhiza pallidiflora、Glychyrrhiza yunnanensis、Glychyrrhiza lepidota、Glychyrrhiza echinata、Glychyrrhiza acanthocarpa等、様々な種類のものがあり、これらのうち、いずれの種類の甘草の地上部を抽出原料として使用してもよいが、特にGlychyrrhiza glabraの甘草の地上部を抽出原料として使用することが好ましい。
【０００９】
抽出原料として使用する甘草の地上部は、採取後ただちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。甘草の地上部は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、甘草の地上部の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１０】
抽出処理の際には、抽出溶媒として極性溶媒を使用するのが好ましい。甘草の地上部に含まれる活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用を有する成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって容易に抽出することができる。
【００１１】
好適な抽出溶媒の具体例としては、水、低級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等が挙げられ、これらを単独で、又はこれら２種以上の混合物として使用することができる。好適な低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、1,3−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール等が挙げられる。
【００１２】
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００１３】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比を自由に変更することができるが、特に７：３〜２：８（重量比）が好適である。
【００１４】
抽出処理は、甘草に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【００１５】
例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調整し得るが、抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（重量比）あり、抽出時間は通常１〜４時間であり、抽出温度は通常、常温〜９５℃である。
【００１６】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００１７】
得られた抽出液はそのままでも抗酸化剤として使用することができるが、濃縮液またはその乾燥物としたものの方が利用しやすい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。
【００１８】
また、甘草の地上部からの抽出物は、好ましくない臭いも無く、植物抽出物特有の色調も有していないので、そのまま皮膚化粧料、飲食品等の原料として利用可能であるが、必要ならば、その生理活性の低下を招かない範囲で、活性向上、脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能である。精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。
【００１９】
甘草の地上部からの抽出物は、常法に従って製剤化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。甘草の地上部からの抽出物は、製剤化により粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができる。
【００２０】
甘草の地上部からの抽出物の抗酸化作用は、活性酸素消去作用および／またはラジカル消去作用に基づいて発揮される。ここで、「活性酸素」には、スーパーオキサイド（・O2-）、過酸化水素（H2O2）、ヒドロキシラジカル（・OH）等が含まれる。また、「ラジカル」とは、不対電子を１つまたはそれ以上有する分子または原子を意味し、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカル、ＤＰＰＨ等が含まれる。甘草の地上部からの抽出物は、活性酸素消去作用またはラジカル消去作用を有しているので、活性酸素消去剤またはラジカル消去剤の有効成分として利用することもでき、本発明の抗酸化剤は、これら活性酸素消去剤および／またはラジカル消去剤を有効成分として含有していてもよい。
【００２１】
本発明の抗酸化剤は、活性酸素消去作用および／または生体内ラジカル消去作用による生体成分の酸化の防止を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低下等の老化現象を効果的に予防・治療することができるとともに、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。
【００２２】
本発明の抗酸化剤を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、リップ、入浴剤、ヘアートニック、ヘアーローション、石鹸、ボディーシャンプー等が挙げられる。
【００２３】
皮膚化粧料における抗酸化剤の配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調製することができるが、好適な配合率は標準的な甘草地上部抽出物に換算して約０．０００１〜１０重量％である。
【００２４】
皮膚化粧料には、抗酸化作用の妨げにならない限り、皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤および助剤、その他任意の助剤を配合することができ、皮膚の抗酸化作用に関し、本発明の抗酸化剤のみが主剤となるものに限られるわけではない。
【００２５】
皮膚化粧料において、本発明の抗酸化剤と共に構成成分として利用可能なものとしては、具体的に挙げると次のとおりである。なお、甘草地上部抽出物とともに以下の構成成分を併用した場合、甘草地上部抽出物と併用された構成成分との間の相乗作用が、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【００２６】
収斂剤：クエン酸又はその塩類、酒石酸又はその塩類、乳酸又はその塩類、塩化アルミニウム、硫酸アルミニウムカリウム、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、パラフェノールスルホン酸亜鉛、硫酸亜鉛、ジユエキス、エイジツエキス、ハマメリスエキス、ゲンノショウコエキス、茶カテキン類、プロアントシアニジン類、ガイヨウエキス、オドリコソウエキス、オトギリソウエキス、ダイオウエキス、ヤグルマソウエキス、スギナエキス、キズタエキス、キューカンバーエキス、マロニエエキス、サルビアエキス、メリッサエキス、タマリンドハスクエキス等。
【００２７】
殺菌・抗菌剤：安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ジステアリルメチルアンモニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化アルキルジアミノエチルグリシン液、塩酸クロルヘキシジン、オルトフェニルフェノール、感光素１０１号、感光素２０１号、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン酸、ハロカルバン、レゾルシン、パラクロロフェノール、フェノキシエタノール、ビサボロール、ヒノキチオール、メントール、キトサン、キトサン分解物、ジユエキス、クジンエキス、エンメイソウエキス、ビワエキス、ウワウルシエキス、ホップエキス、ユッカエキス、アロエエキス、ケイヒエキス、ガジュツエキス、油溶性甘草エキス（甘草疎水性フラボノイド、グラブリジン、グラブレン、リコカルコンＡ）等。
【００２８】
紫外線吸収剤：β−イソプロピルフラノン誘導体、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、オキシベンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシベンゾフェノン、シノキサート、ジイソプロピルケイヒ酸メチル、メトキシケイヒ酸オクチル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラジメチルアミノ安息香酸アミル、パラジメチル安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、酸化チタン、β−カロチン、γ−オリザノール、コメヌカエキス、アロエエキス、カバノキエキス、シラカンバエキス、カミツレエキス、コゴメグサエキス、セイヨウサンザシエキス、ヘンナエキス、テウチグルミエキス、マロニエエキス、イチョウ葉エキス、カミツレエキス、油溶性甘草エキス等。
【００２９】
美白剤：アスコルビン酸およびその誘導体、イオウ、胎盤加水分解物、エラグ酸およびその誘導体、コウジ酸およびその誘導体、グルコサミンおよびその誘導体、アゼライおよびその誘導体、アルブチンおよびその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸およびその誘導体、グルタチオン、アルニカエキス、オウゴンエキス、センキュウエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、ハマボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物およびその抽出物、ギムネマエキス、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、油溶性甘草エキス（甘草疎水性フラボン、グラブリジン、グラブレン、リコカルコンＡ）等。
【００３０】
保湿剤：セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ビトロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン酸脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸又はそのエステル類、エイコサペンタエン酸又はそのエステル類、ペクチン、アルゲコロイド、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物又はその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ-オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マロニエエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマ、コメヌカエキス等。
【００３１】
細胞賦活剤：胎盤抽出物、リボフラビン又はその誘導体、ピリドキシン又はその誘導体、ニコチン酸又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体、α−トコフェロール又はその誘導体、アルニカエキス、ニンジンエキス、オタネニンジンエキス、エゾウコギエキス、ヘチマエキス（サポニン）、シコンエキス、シラカンバエキス、オウバクエキス、ボタンピエキス、シャクヤクエキス、ムクロジエキス、ベニバナエキス、アシタバエキス、ビワ葉エキス、ヒキオコシエキス、ユキノシタエキス、黄杞エキス、サルビアエキス、ニンニクエキス、マンネンロウエキス等。
【００３２】
消炎・抗アレルギー剤：アズレン、アラントイン、アミノカプロン酸、インドメタシン、塩化リゾチーム、イプシロンアミノカプロン酸、オキシベンゾン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、感光素301号、感光素401号、塩酸ジフェンヒドラミン、トラネキサム酸又はその誘導体、アデノシンリン酸、エストラジオール、エスロン、エチニルエストラジオール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、プロゲステロン、コルチコステロン、アルニカエキス、インチンコウエキス、サンシシエキス、ジュウヤクエキス、甘草エキス、トウキエキス、ヨモギエキス、ワレモコウエキス、リンドウエキス、サイコエキス、センキュウエキス、ボウフウエキス、セイヨウノコギリソウエキス、オウレンエキス、シソエキス、マロニエエキス、オウゴンエキス等。
【００３３】
抗酸化・活性酸素消去剤：ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没子食酸プロピル、バイカリン、バイカレイン、スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、ローズマリーエキス、メリッサエキス、オウゴンエキス、エイジツエキス、ビワ葉エキス、ホップエキス、ハマメリスエキス、シャクヤクエキス、セージエキス、キナエキス、カミツレエキス、ユーカリエキス、シソエキス、イチョウ葉エキス、タイムエキス、カルダモンエキス、キャラウェイエキス、ナツメグエキス、メースエキス、ローレルエキス、クローブエキス、ターメリックエキス、ヤナギタデエキス等。
【００３４】
油脂類：大豆油、アマニ油、キリ油、ゴマ油、ヌカ油、綿実油、ナタネ油、サフラワー油、トウモロコシ油、オリーブ油、ツバキ油、アーモンド油、ヒマシ油、落花生油、カカオ油、モクロウ、ヤシ油、パーム核油、牛脂、ミンク油、卵黄油、ホホバ油、月見草油、馬油等。
【００３５】
ロウ類：カルナウバロウ、キャンデリラロウ、蜜ロウ、サラシ蜜ロウ、鯨ロウ、セラックス、ラノリン類等。
【００３６】
炭化水素類：流動パラフィン、ワセリン、マイクロスリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ポリエチレン末等。
【００３７】
脂肪酸類：ステアリン酸、リノール酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ヘベニン酸、ラノリン酸、オレイン酸、ウンデシレン酸、イソステアリン酸等。
【００３８】
アルコール類：ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ラノリンアルコール、水添ラノリンアルコール、オレイルアルコール、ヘキサデシルアルコール、2−オクチルドデカノール、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、エチレングリコール又はその重合体、ブドウ糖、白糖、コレステロール、フィトステロール、セトステアリルアルコール等。
【００３９】
エステル類：オレイン酸デシル、ステアリン酸ブチル、ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキシル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、ジオレイン酸プロピレングリコール、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、トリミリスチン酸グリセリン、酢酸ラノリン、乳酸セチル等。
【００４０】
界面活性剤：陰イオン性界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤等。
【００４１】
香料：メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミント油、ユーカリ油、アニス油その他各種動植物からのオイル状香料等。
【００４２】
本発明の抗酸化剤は、任意の飲食品や栄養補助食品に配合することもできる。その場合の配合量は、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して成人１日当たりの甘草地上部抽出物の摂取量が約１〜１０００ｍｇになるように調整するのが適当である。
【００４３】
甘草の地上部からの抽出物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液および調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂および油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物などが挙げられる。
【００４４】
以上に説明した本発明の抗酸化剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００４５】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明を更に詳細に説明する。なお、本発明の範囲はこれらの実施例等に限定されるものではない。
【００４６】
〔製造例１〕
甘草（Glychyrrhiza glabra）の地上部（主として葉部。一部に枝部を含む。）の粗砕物３００ｇを抽出溶媒（水、５０重量％エタノール、エタノールまたは５０重量％プロパノールの４種類）２０００ｍＬに投入し、ゆるく攪拌しながら３時間、７０℃に保った。その後、ろ過し、ろ液を４０℃で減圧下にて濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥させ、甘草地上部抽出物を得た。４種類の抽出溶媒を用いて上記抽出を行ったところ、抽出物の収率は表１のとおりであった。
【００４７】
0005024978.tif 000002
【００４８】
〔試験例１〕スーパーオキサイド消去試験（ＮＢＴ法）
製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法によりスーパーオキサイド消去作用を試験した。
【００４９】
３ｍＭキサンチン、０．０５Ｍ Ｎａ2ＣＯ3緩衝液（ｐＨ１０．２）、３ｍＭ ＥＤＴＡ、ＢＳＡ溶液および０．７５ｍＭ ＮＢＴ各０．１ｍＬを試験管にとり、これに試料溶液０．１ｍＬを添加し、２５℃で１０分間放置した。次いで、キサンチンオキシダーゼ溶液を加えて素早く攪拌し、２５℃で２０分間静置した。その後６ｍＭ塩化銅０．１ｍＬを加えて反応を停止させ、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。このとき測定した吸光度を「酵素溶液添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。
【００５０】
また、同様の操作と吸光度の測定を、酵素溶液を添加せずに行った。このとき測定した吸光度を「酵素溶液無添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。
【００５１】
また、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「酵素溶液添加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。
【００５２】
また、酵素溶液を添加せず、さらに試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「酵素溶液無添加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。
そして、次式によりスーパーオキサイド消去率（％）を求めた。
【００５３】
消去率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）｝×１００
【００５４】
上記式中、「Ａ」は「酵素溶液添加, 試料溶液添加時の吸光度」、「Ｂ」は「酵素溶液無添加, 試料溶液添加時の吸光度」、「Ｃ」は「酵素溶液添加, 試料溶液無添加時の吸光度」、「Ｄ」は「酵素溶液無添加, 試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
【００５５】
試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、スーパーオキサイド消去率が５０％になる試料濃度（ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。その結果を表２に示す。
【００５６】
0005024978.tif 000003
【００５７】
表２に示す結果から、甘草の地上部からの抽出物がスーパーオキサイド消去作用を有することが確認された。また、このスーパーオキサイド消去作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００５８】
〔試験例２〕過酸化水素消去試験
製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法により過酸化水素消去作用を試験した。
【００５９】
過酸化水素の標準溶液（濃度１．５ｍＭ）１０μＬに試料溶液１０μＬを加え、３７℃で２０分間インキュベートとした後、発色試薬［ＤＡ−６４（和光純薬社製）を１０ｍＭ、トライトンＸ−１００を０．５％含む０．１Ｍ ＰＩＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）にペルオキシダーゼ溶液（１００ｕｎｉｔ／ｍＬ，和光純薬社製）１ｍＬを加え、全量を１００ｍＬに調整したもの］２．９８ｍＬを添加し、３７℃で５分間インキュベートした。その後、波長７２７ｎｍにおける吸光度を測定した。このとき測定した吸光度を「過酸化水素標準溶液添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。
【００６０】
また、同様の操作と吸光度の測定を、過酸化水素標準溶液を添加せずに行った。このとき測定した吸光度を「過酸化水素標準溶液無添加, 試料溶液添加時の吸光度」という。
【００６１】
また、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「過酸化水素標準溶液添加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。
【００６２】
また、過酸化水素標準溶液を添加せず、さらに試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「過酸化水素標準溶液無添加, 試料溶液無添加時の吸光度」という。
そして、次式により過酸化水素消去率（％）を求めた。
【００６３】
消去率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）｝×１００
【００６４】
上記式中、「Ａ」は「過酸化水素標準溶液添加, 試料溶液添加時の吸光度」、「Ｂ」は「過酸化水素標準溶液無添加, 試料溶液添加時の吸光度」、「Ｃ」は「過酸化水素標準溶液添加, 試料溶液無添加時の吸光度」、「Ｄ」は「過酸化水素標準溶液無添加, 試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
【００６５】
試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、過酸化水素消去率が５０％になる試料濃度（ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。その結果を表３に示す。
【００６６】
0005024978.tif 000004
【００６７】
表３に示す結果から、甘草の地上部からの抽出物が過酸化水素消去作用を有することが確認された。また、この過酸化水素消去作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００６８】
〔試験例３〕ラジカル消去試験
製造例１で得られた抽出物について、下記の試験法により非常に安定なラジカルであるＤＰＰＨを使用してラジカル消去作用を試験した。
【００６９】
１．５×１０−４Ｍ ＤＰＰＨエタノール溶液３ｍＬに試料溶液３ｍＬを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、３０分間静置した。その後、波長５２０ｎｍにおける吸光度を測定した。コントロールとして、試料溶液の代わりに試料溶液を溶解した溶媒を用いて同様に操作し、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。また、ブランクとして、エタノールに試料溶液３ｍＬを加えたのち直ちに波長５２０ｎｍにおける吸光度を測定した。測定された各吸光度より、次式によりラジカル消去率（％）を算出した。
【００７０】
ラジカル消去率（％）＝{１−（Ｂ−Ｃ）／Ａ}×１００
【００７１】
上記式中、「Ａ」は「コントロールの吸光度」、「Ｂ」は「試料溶液を添加した場合の吸光度」、「Ｃ」は「ブランクの吸光度」を表す。
【００７２】
試料濃度を段階的に減少させて上記消去率の測定を行い、ＤＰＰＨラジカルの消去率が５０％になる試料濃度（ｐｐｍ；μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
その結果を表４に示す。
【００７３】
0005024978.tif 000005
【００７４】
表４に示す結果から、甘草の地上部からの抽出物がＤＰＰＨラジカル消去作用を有することが確認された。また、このＤＰＰＨラジカル消去作用の程度は、抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００７５】
〔配合例１〕
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル                                                  ４．０ｇ
プラセンタエキス                                              ０．１ｇ
アスコルビン酸リン酸マグネシウム                              ０．１ｇ
プルーン抽出物                                                １．０ｇ
トウニン抽出物                                                １．０ｇ
キョウニン抽出物                                              １．０ｇ
タイオウ抽出物                                                ０．５ｇ
クジン抽出物                                                  ０．５ｇ
オリーブオイル                                                ２．０ｇ
スクワラン                                                    ２．０ｇ
セタノール                                                    ２．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                    ２．０ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０）                ２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.０)             ２．０ｇ
１，３−ブチレングリコール                                    ３．０ｇ
ヒノキチオール                                                ０．１５ｇ
香料                                                          ０．１５ｇ
甘草地上部水抽出物                                          １０．０ｇ
精製水                                      残部（全量を１００ｇとする）
【００７６】
〔配合例２〕
下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン                                                ５．０ｇ
サラシミツロウ                                                ４．０ｇ
セタノール                                                    ３．０ｇ
スクワラン                                                  １０．０ｇ
ラノリン                                                      ２．０ｇ
アルブチン                                                    ０．１ｇ
ルシノール                                                    ０．１ｇ
コウジ酸                                                      ０．１ｇ
黄杞エキス                                                    ０．１ｇ
イチョウ葉エキス                                              ０．１ｇ
コンキオリン                                                  ０．１ｇ
オウバクエキス                                                ０．１ｇ
ステアリン酸                                                  １．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.０)             １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                    ３．０ｇ
１，３−ブチレングリコール                                    ６．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．０５ｇ
香料                                                          ０．１ｇ
甘草地上部５０％エタノール抽出物                              ５．０ｇ
精製水                                      残部（全量を１００ｇとする）
【００７７】
〔配合例３〕
下記の組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール                                        １５．０ｇ
ポリエチレングリコール                                        ３．０ｇ
プロピレングリコール                                          ７．０ｇ
エタノール                                                  １０．０ｇ
カミツレ抽出物                                                ０．１ｇ
エラグ酸                                                      ０．１ｇ
油溶性甘草エキス                                              ０．１ｇ
海藻エキス                                                    ０．１ｇ
酵母抽出液                                                    ０．１ｇ
シソ抽出液                                                    ０．１ｇ
ジュ抽出液                                                    ０．１ｇ
シナノキ抽出液                                                ０．１ｇ
パラオキシ安息香酸エチル                                      ０．０５ｇ
香料                                                          ０．０５ｇ
甘草地上部エタノール抽出物                                    ３．０ｇ
精製水                                      残部（全量を１００ｇとする）
【００７８】
〔配合例４〕
下記の組成のカプセル剤を常法により製造した。なお、カプセルには１号ハードゼラチンカプセルを使用した。
甘草地上部水抽出物                                          ２０．０ｍｇ
コーンスターチ                                              ６０．０ｍｇ
乳糖                                                      １００．０ｍｇ
乳酸カルシウム                                              １０．０ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−Ｌ）                  １０．０ｍｇ
【００７９】
〔配合例５〕
下記の組成の顆粒状製剤を常法により製造した。
甘草地上部５０％エタノール抽出物                            ５０．０ｍｇ
牛骨粉（カルシウム２０％含有）                            ２５０．０ｍｇ
卵殻カルシウム（カルシウム３４％含有）                    １４７．０ｍｇ
大豆抽出物（イソフラボン１０％含有）                        ２５．０ｍｇ
ビタミンＢ群混合粉末（全ビタミンＢ群を含む）              １００．０ｍｇ
脂溶性ビタミン混合粉末（ビタミンＤ，Ｋ，Ｅ，Ａを含む）    １００．０ｍｇ
ミルク蛋白加水分解物（アミノ酸、低分子ペプチドを含む）      ５０．０ｍｇ
トウモロコシ・大豆蛋白加水分解物（アミノ酸、ペプチドを含む）２０．０ｍｇ
小麦胚芽抽出物（ビタミン、クロム、セレン、モリブデンを含む）３０．０ｍｇ
酵母エキス（ビタミン、核酸、亜鉛を含む）                    ５０．０ｍｇ
エリスリトール                                            ３００．０ｍｇ
ラクチュロース                                            １００．０ｍｇ
マルチトール                                              １６８．７ｍｇ
ビートオリゴ糖                                            １００．０ｍｇ
乳果オリゴ糖                                              １００．０ｍｇ
グアーガム                                                  ６０．０ｍｇ
グリセリン脂肪酸エステル                                    １５．０ｍｇ
【００８０】
〔配合例６〕
下記の組成の経口液状製剤を常法により製造した。
甘草地上部エタノール抽出物                                    ０．５ｇ
ソルビット                                                  １２．０ｇ
安息香酸ナトリウム                                            ０．１ｇ
香料                                                          １．０ｇ
硫酸カルシウム                                                ０．５ｇ
精製水                                      残部（全量を１００ｇとする）
【００８１】
【発明の効果】
本発明により、新規な抗酸化剤が提供される。本発明の抗酸化剤によれば、活性酸素消去作用および／または生体内ラジカル消去作用による生体成分の酸化の防止を通じて、皮膚のしわの形成や弾力性低下等の老化現象を効果的に予防・治療することができる。本発明の抗酸化剤は、上記効果に加え、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているので皮膚化粧料や飲食品に配合するのに好適なものである。