(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
0004954378.tif 000019
（式中、
Ｒ1は、場合によっては置換されているアルキル基であり、
Ｒ2は、アルキル基であり、
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、Ｈ又はアルカノイルであるが、ただし、Ｒ3とＲ4とが両方ともＨであることはない）
の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体及び薬学的に許容しうるその付加塩を調製する方法であって、
工程ａ）で、フランを式（II）
【化２】
0004954378.tif 000020
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のアクリル酸誘導体と反応させて式（III）
【化３】
0004954378.tif 000021
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のビシクロ化合物を形成し、
工程ｂ）で、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体を分離し、
工程ｃ）で、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体を、アジ化ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリルと反応させて式（IV）
【化４】
0004954378.tif 000022
（式中、Ｒ2は、前記のとおりであり、Ｒ5は、ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリルである）
のアジリジンを形成したのち、
工程ｄ）で、脱離的開環を実施して式（Ｖ）
【化５】
0004954378.tif 000023
（式中、Ｒ2及びＲ5は、前記のとおりである）
のシクロヘキセンアジリジン誘導体を得、
工程ｅ）で、アリールスルホニル又はアルキルスルホニルのハロゲン化物又は無水物により置換基Ｒ6を遊離ＯＨ位置に導入し、ルイス酸及びアルコールＲ1ＯＨの存在下、アジリジン環を開裂させて式（VI）
【化６】
0004954378.tif 000024
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記のとおりであり、Ｒ6は、アリールスルホニル又はアルキルスルホニルである）
のシクロヘキセン誘導体を得、
工程ｆ）で、Ｒ5を脱離させて式（VII）
【化７】
0004954378.tif 000025
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記のとおりである）
の４−アミノシクロヘキセン誘導体を得、
工程ｇ）で、式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体を、
ｇ11）式（VIII）
【化８】
0004954378.tif 000026
（式中、Ｒ1及びＲ2は、前記のとおりである）
のアジリジンに転換し、
ｇ12）アジ化物との反応により式（VIII）のアジリジンを開環してアジドアミンを得、それをアルカノイル化剤によりアルカノイル化して、式（IX）
【化９】
0004954378.tif 000027
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、前記のとおりである）
のアジ化物を形成し、
ｇ13）還元し、必要ならば、薬学的に許容しうる付加塩を形成するか、
あるいは、
ｇ21）式Ｒ７ＮＨＲ８のアミンにより式（Ｘ）
【化１０】
0004954378.tif 000028
（式中、Ｒ1及びＲ2は、前記のとおりであり、Ｒ7及びＲ8は、互いに独立して、Ｈ又はアミノ基の置換基であるが、ただし、Ｒ7とＲ8とが両方ともＨであることはない）
の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体に転換し、
ｇ22）４位置のアミノ基をアシル化し、
ｇ23）５位置のアミノ基を脱離させ、必要ならば、薬学的に許容しうる付加塩を形成するか、
のいずれかにより、最終的に処理して式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体にすることを特徴とする方法。
【請求項２】
工程ａ）をルイス酸の存在で実施する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ルイス酸が、式（III）のビシクロ化合物に対して化学量論的量で使用される塩化亜鉛である、請求項２記載の方法。
【請求項４】
式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体の分離を、式（III）のビシクロ化合物の２Ｓエキソ異性体のみを特異的に加水分解することができるＥＣ３．１．１．３のリパーゼ又はＥＣ３．１．１．３４のリポタンパク質リパーゼによって実施し、その後、蒸留によってエンド異性体から２Ｒエキソ異性体を分離することによって実施する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
Candida antarctica属のリパーゼを使用する、請求項４記載の方法。
【請求項６】
工程ｃ）で式（IV）のアジリジンを形成するために使用されるアジ化物がアジ化ジフェニルオキシホスホリルである、請求項１〜５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
工程ｄ）における脱離的開環を有機強塩基の存在で実施する、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
アルカリ−ビス−（トリメチルシリル）アミドを使用する、請求項７記載の方法。
【請求項９】
工程ｅ）が、ＯＨ基のスルホン酸エステルへの転換を含む、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
メタンスルホン酸エステルを形成する、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
工程ｆ）におけるＲ5の脱離を、強酸性条件によって実施する、請求項１〜１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体への転換を、工程ｇ21）〜ｇ23）にしたがって実施する、請求項１〜１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
式（IV）
【化１２】
0004954378.tif 000029
（式中、Ｒ2は、請求項１のとおりであり、Ｒ5は、ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリルである）
のアジリジンの調製方法であって、式（IIIa）
【化１３】
0004954378.tif 000030
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体をアジ化ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリルと反応させることを特徴とする方法。
【請求項１４】
アジ化物としてアジ化ジフェニルオキシ−ホスホリルが使用される、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
式（IV）
【化１４】
0004954378.tif 000031
（式中、Ｒ2は、アルキル基であり、Ｒ5は、ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリルである）
の化合物。
【請求項１６】
（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジエトキシ−ホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０  ２，４〕 オクタン−エキソ−６−カルボン酸エチルエステル（請求項１５記載の式（IV）において、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルである）。
【請求項１７】
（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジフェニルオキシ−ホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０  ２，４〕 オクタン−エキソ−６−カルボン酸エチルエステル（請求項１５記載の式（IV）において、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジフェニルオキシ−ホスホリルである）。
【請求項１８】
式（Ｖ）
【化１５】
0004954378.tif 000032
（式中、Ｒ2及びＲ5は、請求項１５のとおりである）
の化合物。
【請求項１９】
（１Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−７−（ジエトキシホスホリル）−５−ヒドロキシ−７−アザ−ビシクロ〔４．１．０〕ヘプタ−２−エン−３−カルボン酸エチルエステル（請求項１８記載の式（Ｖ）において、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルである）。
【請求項２０】
式（VI）
【化１６】
0004954378.tif 000033
（式中、Ｒ1は、Ｃ１−２０アルキル、Ｃ２−２０アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−２０アルコキシ、Ｃ１−２０アルコキシカルボニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される１個以上の置換基で場合により置換されているＣ１−２０アルキルであり、Ｒ2及びＲ5は、請求項１５のとおりであり、Ｒ6は、アリールスルホニル又はアルキルスルホニルである）
の化合物。
【請求項２１】
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（ジエトキシホスホリルアミノ）−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（請求項２０記載の式（VI）において、Ｒ1＝１−エチルプロピルであり、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルであり、Ｒ6＝メタンスルホニルである）。
【請求項２２】
式（VII）
【化１７】
0004954378.tif 000034
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、請求項２０のとおりである）
の化合物。
【請求項２３】
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルヒドロクロリド。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、４，５−ジアミノシキミ酸誘導体を調製するための、特にフランから出発して（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル及び薬学的に許容しうるその付加塩を調製するための多工程法ならびに新規な特定の中間体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
４，５−ジアミノシキミ酸誘導体、特に（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル及び薬学的に許容しうるその付加塩は、ウイルスノイラミニダーゼの強力な阻害薬である（J. C. Rohloff et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 4545-4550；ＷＯ９８／０７６８５）。
【０００３】
（−）−キニン酸又は（−）−シキミ酸からの（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステルの多工程合成は記載されている（J. C. Rohloff et al, loc. cit.）。
【０００４】
（−）−キニン酸及び（−）−シキミ酸は、比較的高額であり、技術的な量では入手しにくい出発化合物である。したがって、技術的規模で実施することができる多工程合成は、価格において魅力的であり、技術的な量で入手可能である出発化合物に基づくことが好ましい。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、本発明の目的は、前記４，５−ジアミノシキミ酸誘導体を良好な収率及び優れた品質で得るための新規な方法を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、式（Ｉ）
【０００８】
【化１８】
0004954378.tif 000002
【０００９】
（式中、
Ｒ1は、場合によっては置換されているアルキル基であり、
Ｒ2は、アルキル基であり、
Ｒ3及びＲ4は、互いに独立して、Ｈ又はアミノ基の置換基であり、ただし、Ｒ3とＲ4とが両方ともＨであることはない）
の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体及び薬学的に許容しうるその付加塩を調製する方法であって、
工程ａ）で、フランを式（II）
【００１０】
【化１９】
0004954378.tif 000003
【００１１】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のアクリル酸誘導体と反応させて式（III）
【００１２】
【化２０】
0004954378.tif 000004
【００１３】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のビシクロ化合物を形成し、
工程ｂ）で、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体を分離し、
工程ｃ）で、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体をアジ化物と反応させて式（IV）
【００１４】
【化２１】
0004954378.tif 000005
【００１５】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりであり、Ｒ5は、アジ化物残基である）
のアジリジンを形成したのち、
工程ｄ）で、脱離的開環を実施して式（Ｖ）
【００１６】
【化２２】
0004954378.tif 000006
【００１７】
（式中、Ｒ2及びＲ5は、前記のとおりである）
のシクロヘキセンアジリジン誘導体を得、
工程ｅ）で、置換基Ｒ6を遊離ＯＨ位置に導入し、アジリジン環を開裂させて式（VI）
【００１８】
【化２３】
0004954378.tif 000007
【００１９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ5は、前記のとおりであり、Ｒ6は、ＯＨ基の置換基である）
のシクロヘキセン誘導体を得、
工程ｆ）で、Ｒ5を脱離させて式（VII）
【００２０】
【化２４】
0004954378.tif 000008
【００２１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ6は、前記のとおりである）
の４−アミノシクロヘキセン誘導体を得、
工程ｇ）で、式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体を、
ｇ11）式（VIII）
【００２２】
【化２５】
0004954378.tif 000009
【００２３】
（式中、Ｒ1及びＲ2は、前記のとおりである）
のアジリジンに転換し、
ｇ12）式（IX）
【００２４】
【化２６】
0004954378.tif 000010
【００２５】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、前記のとおりである）
のアジ化物を形成し、
ｇ13）還元し、必要ならば、薬学的に許容しうる付加塩を形成するか、
あるいは、
ｇ21）式（Ｘ）
【００２６】
【化２７】
0004954378.tif 000011
【００２７】
（式中、Ｒ1及びＲ2は、前記のとおりであり、Ｒ7及びＲ8は、互いに独立して、Ｈ又はアミノ基の置換基であり、ただし、Ｒ7とＲ8とが両方ともＨであることはない）
の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体に転換し、
ｇ22）４位置のアミノ基をアシル化し、
ｇ23）５位置のアミノ基を脱離させ、必要ならば、薬学的に許容しうる付加塩を形成するか、
のいずれかにより、最終的に処理して式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体にすることを特徴とする方法に関する。
【００２８】
Ｒ1における「アルキル」とは、Ｃ原子１〜２０個、好都合にはＣ原子１〜１２個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基をいう。そのようなアルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ペンチル及びその異性体、ヘキシル及びその異性体、ヘプチル及びその異性体、オクチル及びその異性体、ノニル及びその異性体、デシル及びその異性体、ウンデシル及びその異性体ならびにドデシル及びその異性体である。
【００２９】
このアルキル基は、ＷＯ９８／０７６８５で定義されているような１個以上の置換基で置換されていることができる。適当な置換基は、Ｃ原子１〜２０個のアルキル（前記で定義したとおり）、Ｃ原子２〜２０個のアルケニル、Ｃ原子３〜６個のシクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ原子１〜２０個のアルコキシ、Ｃ原子１〜２０個のアルコキシカルボニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩである。Ｒ1の好ましい意味は１−エチルプロピルである。
【００３０】
Ｒ2は、前記で例示したような、Ｃ原子１〜１２個、好都合にはＣ原子１〜６個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基である。
【００３１】
Ｒ2の好ましい意味はエチルである。
【００３２】
置換基Ｒ6は、当該技術で従来から使用され、公知である、ＯＨの置換基をいう。そのような置換基は、たとえば「Compendium of Organic Methods」又は「Advanced Organic Chemistry」（ed. March J., John Wiley & Sons, New York, 1992, 353-357）に記載されている。
【００３３】
Ｒ6は、好ましくはスルホニル基であり、より好ましくは、場合によっては置換されているアリールスルホニル又はアルキルスルホニル、たとえばｐ−トルエンスルホニル、ｐ−ニトロベンゼンスルホニル、ｐ−ブロモベンゼンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル又はメタンスルホニルであり、もっとも好ましくはメタンスルホニルである。
【００３４】
Ｒ3及びＲ4又はＲ7及びＲ8における「アミノ基の置換基」とは、当該技術で従来から使用され、公知である置換基をいう。そのような置換基は、たとえば「Protective Groups in Organic Chemistry」（Theodora W. Greene et al., John Wiley & Sons Inc., New York, 1991, 315-385）に記載されている。適当な置換は、たとえばＷＯ９８／０７６８５にも記載されている。
【００３５】
Ｒ3及びＲ4の好ましい置換基は、アルカノイル基、より好ましくは、Ｃ原子１〜６個の低級アルカノイル、たとえばヘキサノイル、ペンタノイル、ブタノイル（ブチリル）、プロパノイル（プロピオニル）、エタノイル（アセチル）及びメタノイル（ホルミル）である。好ましいアルカノイル基、ひいてはＲ3の好ましい意味はアセチルであり、Ｒ4の好ましい意味はＨである。
【００３６】
Ｒ7及びＲ8の好ましい置換基は、Ｃ原子２〜６個の直鎖状又は分岐鎖状のアルケニル、好ましくはアリル又はその類似体である。アリルの適当な類似体は、α、β又はγ炭素を１個の低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル又はアリール基によって置換されているアリル基である。適当な例は、たとえば、２−メチルアリル、３，３−ジメチルアリル、２−フェニルアリル又は３−メチルアリルである。Ｒ7のもっとも好ましい意味はアリルであり、Ｒ8のもっとも好ましい意味はＨである。
【００３７】
式（Ｉ）の好ましい４，５−ジアミノシキミ酸誘導体は、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボン酸エチルエステル及びエチル（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−５−アミノ−３−（１−エチルプロポキシ）−１−シクロヘキセン−１−カルボキシレートホスフェート（１：１）である。
【００３８】
工程ａ）
工程ａ）は、フランとアクリル酸誘導体とのディールス・アルダー反応を含む。ディールス・アルダー反応そのものは当業者に公知である（たとえばTetrahedron Letters, 23, 1982, 5299-5302を参照）。したがって、この転換は、当該技術で記載されている方法及び条件にしたがって実施することができる。
【００３９】
アクリル酸の適当な誘導体は、アクリル酸のエステル類及びアミド類、好ましくはエステル類、より好ましくは低級アルキルエステル類である。
【００４０】
普通、このタイプの反応はルイス酸の存在を要する。適当なルイス酸は、マグネシウムハロゲン化物、たとえば塩化マグネシウム、臭化マグネシウムもしくはヨウ化マグネシウム又は亜鉛ハロゲン化物、たとえば塩化亜鉛、臭化亜鉛もしくはヨウ化亜鉛である。好ましいルイス酸は塩化亜鉛であることがわかった。
【００４１】
原則として、触媒量のルイス酸が適用されるが、驚くべきことに、化学量論的量又は過剰量のルイス酸、好ましくは塩化亜鉛が、妥当な時間内に、式（III）のビシクロ化合物の、９：１までの優れたエキソ／エンド比に至らせることがわかった。
【００４２】
好ましくは、化学量論的量の塩化亜鉛を使用する。
【００４３】
工程ａ）に好都合な溶媒は、５０％までの過剰で使用される、反応体であるアクリル酸誘導体そのものである。しかし、不活性溶媒を加えることは常に可能である。
【００４４】
反応温度は、２０℃〜７０℃の範囲で選択することができる。
【００４５】
反応の終了後、当業者に周知の方法を使用して処理することができる。
【００４６】
工程ｂ）
工程ｂ）は、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体、好ましくは式（III）のビシクロ化合物の光学的に純粋な２Ｒエキソ異性体の分離を含む。
【００４７】
工程ａ）は、ビシクロ化合物のエキソ／エンド混合物のラセミ化合物であって、混合物中のエキソ形が９：１の比まで富化されているラセミ化合物を提供する。
【００４８】
原則として、化合物のエンド形とエキソ形との分離は、そのような形態の異なる物理的性質、たとえば沸点の違いを利用することによって実施することができる。しかし、２種の光学異性体のそれぞれの分離は、従来的なラセミ化合物分割技術又はステレオ選択法、たとえば酵素的手法によって実施しなければならない。
【００４９】
したがって、ビシクロ化合物の目的の２Ｒエキソ形は、たとえば蒸留し、エキソエステルをそれぞれの酸に転換したのち、最後に、従来の分割剤、たとえば（−）−エフェドリン塩酸塩又はＳ−（−）−１−フェニルエチルアミンを使用するラセミ化合物分割によるエキソ及びエンド形の物理的分離によって得ることができる。
【００５０】
しかし、好ましくは、工程ａ）のエキソ／エンド混合物は、２Ｓエキソ異性体のみを特異的に加水分解することができ、２Ｒエキソ異性体をそのままに残す酵素によって処理する。ＥＣ３．１．１．３のリパーゼ又はＥＣ３．１．１．３４のリポタンパク質リパーゼを使用することが理想的であることがわかった。これらの種類の適当な代表例は、Candida属、より好ましくはCandida antarcticaのリパーゼである。このようなリパーゼは市販されている。もっとも好ましい酵素は、Roche Diagnosticsから商品名Chirazyme（登録商標）L2の下で、又はNovo NordiskからリパーゼSP-525として提供されているＢ形のリパーゼCandida antarcticaである。
【００５１】
一般的な代替として、固定化酵素を使用してもよい。
【００５２】
反応は普通、単相又は二相の水性系、好ましくは二相系中、非プロトン性溶媒を助溶媒として使用して実施する。適当な助溶媒は、アルカン類、シクロアルカン類又はシクロアルケン類である。シクロヘキサン、シクロヘキセン及びオクタンがもっとも好ましい助溶媒であることがわかった。
【００５３】
生化学的転換に使用されることが知られる一般的な水性緩衝溶液が、ｐＨを６．５〜８．０の範囲に維持するために使用される。好適には、リン酸ナトリウムもしくはカリウム緩衝液又はホウ酸緩衝液を適用することができる。そのような緩衝液は、ＮａＣｌ又はＫＣｌを５０〜３００mMの濃度でさらに含有することができる。好ましい緩衝系は、たとえば、０．１Ｍ  ＫＣｌ及び５mMホウ酸カリウムｐＨ７．５を含有することができる。
【００５４】
有機溶媒／水性相の比は、１：１０〜３：２の範囲である。全基質濃度は、好都合には、５〜２０重量％の範囲、好ましくは５〜１０重量％の範囲で選択される。
【００５５】
適当な反応温度は、０℃〜２５℃、好ましくは反応混合物の凍結温度に近い温度である。
【００５６】
好ましくは、得られた２Ｓエキソ酸を、塩基、たとえばＮａＯＨ又はＫＯＨの制御された付加によって中和し、それにより、未開裂の２Ｒエキソエステルをエンド異性体とともに有機相に残し、一般的な有機溶媒を使用する抽出によって分離する。
【００５７】
エンド異性体からの２Ｒエキソエステルの分離は、真空中の蒸留によって、好ましくは７０℃〜１００℃及び０．１mbar〜１０mbarで実施することができる。
【００５８】
工程ｃ）
工程ｃ）は、式（III）のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体とアジ化物との反応を含む。
【００５９】
適当なアジ化物は、二環系の橋頭に対してエンドの位置でアジリジン環を形成することができるものであることがわかった。予想外にも、式（XI）
Ｒ5′Ｎ3                    XI
（式中、Ｒ5′は、ジアルコキシホスホリル又はジアリールオキシホスホリル、好ましくはジアリールオキシホスホリル、もっとも好ましくはジフェニルオキシホスホリルである）
のアジ化ホスホリルがこの役目を満たした。
【００６０】
もっとも好ましいアジ化ホスホリルは、アジ化ジフェニルオキシ−ホスホリル（ＤＰＰＡ）である。
【００６１】
ＤＰＰＡの好ましさは、主に、技術量でのその入手性及びアジ化ジアルコキシホスホリルと比較して低いその毒性に基づく。
【００６２】
アジ化ホスホリルは、好都合には、工程ｂ）で得られた２Ｒエキソビシクロ化合物に対して０．８当量〜１．０当量で加える。好ましくは、化学量論的量のアジ化ホスホリルを加える。
【００６３】
溶媒の選択は、それが反応体に対して不活性である限り、重要ではない。トルエン又はジオキサンが適当な溶媒であることがわかった。
【００６４】
反応温度は、好都合には４０℃〜８０℃の間で選択される。
【００６５】
Ｒ5′がジアリールオキシホスホリルの好ましい意味を有する場合、エステル交換反応を実施してジアリールオキシホスホリル基をジアルコキシホスホリル基に転換することができる。
【００６６】
したがって、アジ化物残基Ｒ5は、ジアルコキシ−ホスホリル、好ましくはジ−（Ｃ1-6）アルコキシ−ホスホリル、もっとも好ましくはジエトキシ−ホスホリルである。エステル交換反応は、当業者には公知の方法であるが、原則として、対応するアルコール中、アルコラートの存在で実施される。もっとも好ましい方法の範囲では、エステル交換反応は、エタノール中、ナトリウムエタノラートの存在で実施される。
【００６７】
工程ｄ）
工程ｄ）は、式（IV）のアジリジンの式（Ｖ）のシクロヘキセンアジリジン誘導体への脱離的開環を含む。
【００６８】
この反応は、強い有機塩基の存在で実施する。好都合には、アルカリ−ビス−（トリアルキルシリル）アミド、好ましくはアルカリ−ビス−（トリメチルシリル）アミド、たとえばリチウムビス−（トリメチルシリル）アミド、ナトリウム−ビス−（トリメチルシリル）アミド又はカリウム−ビス−（トリメチルシリル）アミドを使用する。
【００６９】
普通、強い有機塩基を、式（Ｖ）のアジリジン１当量に対して１．０当量〜２．５当量で使用する。
【００７０】
この工程の溶媒の選択もまた、それが反応体に対して不活性である限り、重要ではない。ジオキサン又はテトラヒドロフランが適当な溶媒であることがわかった。
【００７１】
反応温度は、好都合には−８０℃〜０℃の範囲、好ましくは−８０℃〜−２０℃の範囲に維持する。
【００７２】
式（Ｖ）のシクロヘキセンアジリジンは、当業者に公知の方法を適用する酸性処理ののち、単離することができる。
【００７３】
工程ｅ）
工程ｅ）は、置換基Ｒ6を遊離ＯＨ位置に導入し、アジリジン環を開裂させて式（VI）のシクロヘキセン誘導体を得ることを含む。
【００７４】
しかし、開環が先に来て、遊離ＯＨ位置への置換基Ｒ6の導入が次に来るように順序を変更することもできる。しかし、好ましくは、まず置換基Ｒ6を遊離ＯＨ位置に導入し、第二の工程として開環を実施する。
【００７５】
そのような置換を実施するための化合物及び方法は当該技術で周知であり、たとえば「Compendium of Organic Methods」又は「Advanced Organic Chemistry」（ed. March J., John Wiley & Sons, New York, 1992, 353-357）に記載されている。
【００７６】
ヒドロキシ基が好ましくはスルホン酸エステルに転換され、したがって、Ｒ6は、好ましくはスルホニル基であり、より好ましくは場合によっては置換されているアリールスルホニル又はアルキルスルホニル、たとえばｐ−トルエンスルホニル、ｐ−ニトロベンゼンスルホニル、ｐ−ブロモベンゼンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル又はメタンスルホニルであり、もっとも好ましくはメタンスルホニルであることがわかった。
【００７７】
スルホン酸エステルを生成するために一般に使用される薬剤は、たとえば、以下のスルホン酸、すなわちメタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−ニトロベンゼンスルホン酸、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸又はトリフルオロメタンスルホン酸のハロゲン化物又は無水物である。
【００７８】
好ましい薬剤は、メタンスルホン酸のハロゲン化物又は無水物、たとえばメタンスルホニルクロリドである。
【００７９】
スルホニル化剤は、好都合には、式（Ｖ）のシクロヘキセンアジリジン１当量に対して１．０〜１．２当量で加える。
【００８０】
普通、反応は、不活性溶媒、たとえば酢酸エチル中、有機塩基の存在下で、０℃〜２０℃の反応温度で実施する。
【００８１】
アジリジン環の開環を実施するには、さらに式（Ｖ）のＯ置換シクロヘキサン誘導体を、ルイス酸の存在下で、アルコールＲ1ＯＨ（式中、Ｒ1は、前記のとおりである）で転換する。前記Ｒ1の好ましい定義に準じて、もっとも適当なアルコールはペンタン−３−オールである。
【００８２】
適当なルイス酸は、たとえば、通常は式（Ｖ）のシクロヘキセンアジリジン１当量に対して１．０当量〜１．５当量で加えられるボルトリフルオリドエチルエーテレートである。
【００８３】
反応は、好都合には、不活性溶媒、たとえばハロゲン化炭化水素、たとえば塩化メチレン中、０℃〜４０℃で実施する。
【００８４】
あるいはまた、反応は、それぞれのアルコールを十分な過剰量で使用して、余計な溶媒なしで実施することもできる。
【００８５】
工程ｆ）
工程ｆ）は、Ｒ5を脱離させて式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体を得ることを含む。
【００８６】
好ましくはジアルキルホスホリルである前記Ｒ5は、好都合には、強酸性条件を使用して脱離させる。好適には、強い鉱酸、たとえば硫酸を使用することができる。より良好な結晶化を達成するためには、形成した硫酸塩を塩酸で塩酸塩に転換することができる。
【００８７】
反応は、好都合には、極性有機溶媒、たとえばアルコール、好ましくはエステル残基Ｒ2に対応するアルコール中で実施する。
【００８８】
工程ｇ）
先に示したように、工程ｇ）は、式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体に至るための二つの異なる方法を提供する。
【００８９】
工程ｇ11）〜ｇ13）を含む一方の方法はアジ化物中間体を経由するが、工程ｇ21）〜ｇ23）を含む他方の方法はアジ化物抜きの経路をたどる。好ましい経路はアジ化物抜きの経路ｇ21）〜ｇ23）である。
【００９０】
工程ｇ11）〜ｇ13）
工程ｇ11）
式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体の式（VIII）のアジリジンへの転換は、不活性溶媒の存在下における第三級アミンとの反応によって起こすことができる。
【００９１】
好ましくは、トリエチルアミンを第三級アミンとして選択する。
【００９２】
第三級アミンは、原則として、式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体１当量に対して２．０当量〜２．５当量で適用する。
【００９３】
溶媒の選択は重要ではない。酢酸エチル又はテトラヒドロフランを用いて良好な結果が達成されている。
【００９４】
反応は通常、４０℃〜８０℃で実施する。
【００９５】
工程ｇ12）、ｇ13）
これらの工程は、式（VIII）のアジリジンのアジ化物への転換及びその後の最終生成物への還元を含む。これらの工程は当該技術で公知であり、引用例として本明細書に含めるJ. C. Rohloff et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 4545-4500のスキーム５の開示及びその対応する実験部分にしたがって処理することができる。
【００９６】
工程ｇ21）〜ｇ23）
工程ｇ21）
工程ｇ21）は、式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体の式（Ｘ）の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体への転換を含む。
【００９７】
この転換は、好都合には、式Ｒ7ＮＨＲ8（式中、Ｒ7及びＲ8は、前記意味を有する）のアミンを用いて実施する。好ましいアミンは、アリルアミン、ジアリルアミン又は２−メチルアリルアミンであり、アリルアミンがもっとも好ましい。
【００９８】
アミンを遊離させるためには、好都合には、工程ｆ）で得た式（VII）の４−アミノシクロヘキセン誘導体の塩を、まず、一般的な無機塩基、たとえば炭酸水素ナトリウムの添加又は式Ｒ7ＮＨＲ8のアミンの過剰の使用によって中和する。
【００９９】
アミンそのものとの反応は、不活性溶媒中、常圧又は高圧のいずれかを加えながら２０℃〜１５０℃で実施することができる。適当な溶媒として、tert−ブチルメチルエーテルを選択することができる。
【０１００】
工程ｇ22）
工程ｇ22）は、式（Ｘ）の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体の遊離アミノ官能基のアシル化を含む。
【０１０１】
アシル化は、強酸性条件の下、当業者に公知のアシル化剤を使用することによって実施することができる。アシル化剤は、脂肪族又は芳香族のカルボン酸もしくはその活性化誘導体、たとえばアシルハロゲン化物、カルボン酸エステル又はカルボン酸無水物であることができる。適当なアシル化剤は、好ましくは、アセチル化剤、たとえば塩化アセチル、塩化トリフルオロアセチル又は無水酢酸である。適当な芳香族アシル化剤は塩化ベンゾイルである。好適に使用される強酸は、たとえば、メタンスルホン酸と酢酸との混合物又は硫酸と酢酸との混合物である。
【０１０２】
しかし、アシル化はまた、非酸性条件下で、たとえばＮ−アセチル−イミダゾール又はＮ−アセチル−Ｎ−メトキシ−アセトアミドを使用して実施することができる。
【０１０３】
しかし、好ましくは、アシル化は、酸性条件下、酢酸エチル中、無水酢酸０．５〜２．０当量、酢酸０〜１５．０当量及びメタンスルホン酸０〜２．０当量を使用して実施する。
【０１０４】
不活性溶媒、たとえばtert−ブチルメチルエーテルを加えてもよいが、溶媒を添加せずに反応を実施することも可能である。
【０１０５】
温度は、原則として、−２０℃〜１００℃の範囲で選択する。
【０１０６】
工程ｇ23）
工程ｇ23）は、５位置のアミノ基を遊離させ、必要ならば、得られた式（Ｉ）の４，５−ジアミノシキミ酸誘導体を薬学的に許容しうる付加塩にさらに転換することを含む。
【０１０７】
アミノ基の遊離は、好都合には、適当な金属触媒の存在における異性化／加水分解によって実施する。好都合には、不活性担体、たとえば木炭又はアルミナに被着されているか、錯化形態にある貴金属触媒、たとえばＰｔ、Ｐｄ又はＲｈを使用することができる。好ましい触媒は、５〜１０％パラジウム担持炭（Ｐｄ／Ｃ）である。
【０１０８】
触媒は、好適には、式（Ｘ）の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体に対して２〜３０重量％、好ましくは５〜２０重量％の量で使用する。
【０１０９】
異性化／加水分解は、有利には、水性溶媒中で実施する。溶媒そのものはプロトン性であっても非プロトン性であってもよい。適当なプロトン性溶媒は、たとえばアルコール、たとえばメタノール、エタノール又はイソプロパノールである。適当な非プロトン性溶媒は、たとえばアセトニトリル又はジオキサンである。
【０１１０】
反応温度は、好ましくは、２０℃〜１５０℃の範囲で選択する。
【０１１１】
異性化／加水分解は、第一級アミンの存在で実施することが好ましいことがわかった。
【０１１２】
適切に使用される第一級アミンは、エチレンジアミン又はエタノールアミンもしくはそれらの適当な誘導体である。特に対象となる第一級アミンはエタノールアミンである。
【０１１３】
第一級アミンは、好適には、式（Ｘ）の５−Ｎ置換４，５−ジアミノシキミ酸誘導体に対して１．０〜１．２５当量、好ましくは１．０５〜１．１５当量で使用する。
【０１１４】
この工程で形成したかもしれないイミン類を完全に加水分解するために、通常、反応混合物を鉱酸、たとえば硫酸又は塩酸で処理する。
【０１１５】
４，５−ジアミノシキミ酸誘導体はたとえば蒸発及び結晶化によって単離することができるが、たとえばエタノール溶液中に維持したのち、J. C. Rohloff et al., J. Org. Chem., 1998, 63; 4545-4500；ＷＯ９８／０７６８５）に記載された方法にしたがって薬学的に許容しうる付加塩にさらに転換することが好ましい。
【０１１６】
「薬学的に許容しうる酸付加塩」とは、無機酸及び有機酸、たとえば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩を包含する。
【０１１７】
塩形成は、そのもの公知であり、当業者には周知である方法にしたがって実施する。無機酸との塩だけでなく、有機酸との塩もまた考慮される。塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩などがそのような塩の例である。
【０１１８】
好ましい薬学的に許容しうる酸付加塩は、好ましくはエタノール溶液中、５０℃〜−２０℃で形成することができる、リン酸との１：１塩である。
【０１１９】
本発明はさらに、式（IIIa）
【０１２０】
【化２８】
0004954378.tif 000012
【０１２１】
のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体の調製方法を含む。
【０１２２】
この方法は、工程ａ）から得た式（III）のビシクロ化合物のエキソ／エンド混合物を、ＥＣ３．１．１．３のリパーゼ又はＥＣ３．１．１．３４のリポタンパク質リパーゼで処理し、それにより、これらのリパーゼが、２Ｓエキソ異性体を特異的に加水分解し、２Ｒエキソ異性体をそのままに残すことを特徴とする。
【０１２３】
この特定の処理実施態様は工程ｂ）と同一である。
【０１２４】
それぞれの記載を引用としてここに含める。
【０１２５】
したがって、工程ｂ）の下で述べたように、好ましいリパーゼは、Candida antarctica属のリパーゼである。
【０１２６】
本発明はさらに、式（IV）
【０１２７】
【化２９】
0004954378.tif 000013
【０１２８】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりであり、Ｒ5は、アジ化物の残基である）
のアジリジンの調製方法を含む。
【０１２９】
この方法は、式（IIIa）
【０１３０】
【化３０】
0004954378.tif 000014
【０１３１】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりである）
のビシクロ化合物の２Ｒエキソ異性体をアジ化物で転換することを特徴とする。
【０１３２】
この転換は、本明細書中の前記多工程合成の工程ｅ）と同一である。工程ｃ）のそれぞれの記載を引用としてここに含める。
【０１３３】
前記の好ましいアジ化物は、アジ化ジフェニルオキシ−ホスホリル（ＤＰＰＡ）である。
【０１３４】
以下の主要な中間体は新規であり、現在の技術水準では知られていない。したがって、これらは本発明の不可欠な要素である。
【０１３５】
【化３１】
0004954378.tif 000015
【０１３６】
（式中、Ｒ2は、前記のとおりであり、Ｒ5は、アジ化物残基である）
【０１３７】
好ましくは、（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジエトキシ−ホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０２，４〕 オクタン−エキソ−６−カルボン酸エチルエステル（Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルである）及び（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジフェニルオキシ−ホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０２，４〕 オクタン−エキソ−６−カルボン酸エチルエステル（Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルである）。
【０１３８】
【化３２】
0004954378.tif 000016
【０１３９】
（式中、Ｒ2及びＲ5は、前記のとおりである）
【０１４０】
好ましくは、（１Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−７−（ジエトキシホスホリル）−５−ヒドロキシ−７−アザ−ビシクロ〔４．１．０〕ヘプタ−２−エン−３−カルボン酸エチルエステル（Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルである）。
【０１４１】
【化３３】
0004954378.tif 000017
【０１４２】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5及びＲ6は、前記のとおりである）
及び薬学的に許容しうるその塩、好ましくは、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（ジエトキシホスホリルアミノ）−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル（Ｒ1＝１−エチルプロピルであり、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ5＝ジエトキシ−ホスホリルであり、Ｒ6＝メタンスルホニルである）。
【０１４３】
【化３４】
0004954378.tif 000018
【０１４４】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ6は、前記のとおりである）
及び薬学的に許容しうるその塩、好ましくは、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルヒドロクロリド（Ｒ1＝１−エチルプロピルであり、Ｒ2＝エチルであり、Ｒ6＝メタンスルホニルである）。
【０１４５】
【実施例】
例１
７−オキサ−ビシクロ〔２．２．１〕ヘプタ−５−エン−２−カルボン酸エチルエステル（エンド／エキソ混合物）の調製
フラン３００g（４．３２mol）及びエチルアクリレート６１１g（６．０５mol）の混合物を、不活性雰囲気下、氷槽中で３℃に冷却した。温度を１０℃〜２０℃に維持しながら、塩化亜鉛７０６g（５．２mol）を３０分かけて少しずつ溶液に加えた。添加が完了すると、冷却槽を除き、発熱によって混合物を３０分かけて徐々に５０℃まで加熱させた。その後、油浴によって５０℃で２７時間維持したのち、４０℃に冷却し、ジクロロメタン２００mlで希釈してその粘性を下げた。続いて、溶液を室温まで冷まし、砕氷１．０kgと水１．５リットルとの混合物に注加し、抽出した。水性相を酢酸エチル２．５リットルで抽出したのち、合わせた有機相を水２．５リットル、水２．５リットル中炭酸水素ナトリウム１０９gの溶液及びブライン２５０mlで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、４５℃／１mbarで蒸発させ、４０℃／０．０６mbarで４５分間乾燥させて、生成物の８７：１３エキソ／エンド混合物５８０g（８０％）を得た。純度９８％（ＨＰＬＣ、ＩＳＴＤ）
【０１４６】
エキソ異性体のデータ: ＩＲ（フィルム）: 2984, 1734, 1448, 1370, 1343, 1315, 1277, 1217, 1098, 1047, 1019, 907, 874, 808, 722, 704 cm-1; MS (EI, 70 eV): 139, 123, 94, 81, 68, 55, 41, 39, 29 m/z.
【０１４７】
エンド異性体のデータ: ＩＲ（フィルム）: 2984, 1736, 1451, 1370, 1337, 1320, 1304, 1194, 1131, 1095, 1055, 1025, 905, 855, 795, 712, 702 cm-1; MS (EI, 70 eV): 139, 123, 99, 95, 81, 68, 55, 43, 41, 39, 29 m/z.
【０１４８】
例２
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−７−オキサ−ビシクロ〔２．２．１〕ヘプタ−５−エン−エキソ−２−カルボン酸エチルエステルの調製
ラセミ体７−オキサ−ビシクロ〔２．２．１〕ヘプタ−５−エン−２−カルボン酸エチルエステルの９２：８エキソ／エンド混合物５０７．５g（２．７７mol）を、１００mM塩化カリウム５．７リットル、３mMリン酸カリウム緩衝剤ｐＨ７及びオクタン（「オクタン画分」Fluka 74830）３．７リットル中、激しく攪拌することによって乳化させた。エマルションを１℃に冷却し、１Ｎ  ＮａＯＨ溶液でｐＨを７．５に調節した。Chirazyme L-2（Roche Diagnostics）０．７５MUを加えたのち、１℃で激しく攪拌しながら２．０Ｎ  ＮａＯＨ溶液の制御された添加によってｐＨを７．５に維持した（ｐＨスタット）。１０．６時間後、２．０Ｎ  ＮａＯＨ溶液９３０mlの完全な消費（エキソ異性体に関して約６７％の転換率に相当）ののち、反応混合物を３×８リットルのジクロロメタンで抽出した（はじめ、エマルションをdicaliteろ過助剤５００gの床に通して相分離を高め、第二の抽出工程の溶媒を使用前にろ過床に通した）。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、蒸発させ、高真空で乾燥させて、茶色がかった油状物１６０．５gを得た。ＧＣによると、見出し化合物（９３％ee）はエンド異性体２０．５％を含有しており、８２℃〜８６℃／３mbarでの蒸留により、その大部分を混合物から取り出した。
【０１４９】
エキソ異性体のデータ: ＩＲ（フィルム）: 2984, 1734, 1448, 1370, 1343, 1315, 1277, 1217, 1098, 1047, 1019, 907, 874, 808, 722, 704 cm-1; MS (EI, 70 eV): 139, 123, 94, 81, 68, 55, 41, 39, 29 m/z.
【０１５０】
例３
（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジエトキシホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０２，４〕 オクタン−６−カルボン酸エチルエステルの調製
トルエン３２ml中（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−７−オキサ−ビシクロ〔２．２．１〕ヘプタ−５−エン−エキソ−２−カルボン酸エチルエステル３２．３g（１９２mmol）及びアジ化ジフェニルホスホリル４８．４g（１６７mmol）の溶液を７０℃で１８時間攪拌した。次に、エタノール２６０mlを加え、混合物を３℃に冷却し、２１％ナトリウムエチラート溶液１５０ml（４０３mmol）を１５分かけて加えて、混合物を室温に至らせた。混合物を室温で３０分間攪拌したのち、ブライン６５０ml中砕氷６５０gの溶液に注加した。水相を酢酸エチル６５０mlで二回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗生成物６４．８gを得たのち、シリカゲル上で酢酸エチルとジオキサンとの９：１混合物を溶離剤として使用するクロマトグラフィーに付して、生成物３２．５g（５３％）を油状物として得た。純度９９％（ＩＳＴＤ）。〔α〕 D20＝＋１．８８（ｃ＝１、ＥｔＯＨ）
【０１５１】
ＩＲ（フィルム）: 3741, 2983, 2908, 1735, 1479, 1445, 1393, 1369, 1356, 1299, 1265, 1184, 1097, 1042, 983, 925, 897, 864, 833, 800, 740, 673 cm-1; MS (EI, eV): 320 (MH+), 290, 274, 262, 246, 234, 219, 191, 163, 109, 91, 81, 65, 55, 39 m/z.
【０１５２】
例４
（１Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−７−（ジエトキシホスホリル）−５−ヒドロキシ−７−アザ−ビシクロ〔４．１．０〕ヘプタ−２−エン−３−カルボン酸エチルエステルの調製
ＴＨＦ３２０ml中（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ジエトキシホスホリル）−８−オキサ−３−アザ−トリシクロ〔３．２．１．０２，４〕オクタン−６−カルボン酸エチルエステル６４．１g（１９７mmol）の溶液を−６５℃に冷却した。次に、温度を−６０℃未満に維持しながら、ＴＨＦ中２Ｍナトリウム−ビス−（トリメチルシリル）−アミド１４８ml（２９６mmol）を２０分かけて滴下した。混合物を−６０℃で５時間攪拌したのち、塩化アンモニウム溶液１．２０リットルを冷たい混合物に加え、添加の完了後、０℃に到達させた。水１１０mlを懸濁液に加えて明澄な溶液を得、それを３０分間攪拌すると、その間に室温に達した。溶液を酢酸エチル１．６０リットルで抽出し、有機層を炭酸水素ナトリウム飽和溶液６０mlで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、生成物５７．１g（９１％）を油状物として得た。純度９４％（ＩＳＴＤ）。さらに精製した物質の旋光：〔α〕 D20＝−３７．７°（ｃ＝１、ＥｔＯＨ）
【０１５３】
ＩＲ（フィルム）: 3381, 2983, 2910, 1712, 1647, 1446, 1393, 1258, 1213, 1165, 1136, 1096, 1028, 960, 932, 882, 848, 821, 801, 771, 748, 707, 655 cm-1; MS (EI, 70 eV): 319 (M+), 301, 290, 273, 262, 246, 234, 216, 202, 188, 174, 165, 137, 119, 109, 99, 91, 81, 65, 53, 45 m/e.
【０１５４】
例５
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（ジエトキシホスホリルアミノ）−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
酢酸エチル２５０ml中（１Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−７−（ジエトキシホスホリル）−５−ヒドロキシ−７−アザ−ビシクロ〔４．１．０〕ヘプタ−２−エン−３−カルボン酸エチルエステル２５．１３g（７８．７mmol）及びトリエチルアミン９．６１g（９４．４mmol）の溶液を０℃に冷却した。温度を１０℃未満に維持しながらメタンスルホン酸クロリド１０．０g（９４．４mmol）を１０分かけて滴下した。添加が完了すると、２０分間で混合物を室温に到達させ、塩酸トリエチルアミン沈殿物をろ別し、全部で７５mlの酢酸エチルで数回に分けて洗浄した。合わせたろ液を蒸発させて茶色がかった油状物３５．１gを得たのち、それをジクロロメタン７５mlに溶解した。３−ペンタノール２２０ml（２．０３mol）を加え、混合物を０℃に冷却し、温度を４℃未満に維持しながら１０分かけてＢＦ3*ＯＥｔ2１４．８ml（１１８mmol）を加えた。添加が完了したのち、混合物を室温で１．５時間攪拌した。粗反応生成物を３０℃で蒸発させ（過剰な３−ペンタノールを除去）、得られた油状物を酢酸エチル５００mlと炭酸水素ナトリウム飽和溶液２５０mlとに分割した。有機層をブライン２０mlで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、茶色がかった固体３６．４gを得た。
【０１５５】
精製
前記粗生成物３６．３gを酢酸エチル２４０mlにとり、６０℃に加熱して明澄な溶液を得た。この溶液を２時間かけて室温まで徐冷して、５０℃で種晶を添加した。得られた懸濁液を室温で１時間攪拌し、ろ過し、全部で３５mlの酢酸エチルで少しずつ洗浄し、４５℃／５mbarで３０分間乾燥させて、生成物の第一の部分１５．６７gを白色結晶として得た。合わせた母液と洗液とを蒸発させ、酢酸エチル５０mlとｎ−ヘプタン２５mlとの混合物にとり、７０℃に加熱した。混合物を１．５時間かけて室温まで冷まして、５０℃で種晶を添加した。懸濁液を室温で１５分間攪拌し、ろ過した。残渣を酢酸エチル７．５mlとｎ−ヘプタン２．５mlとの混合物で洗浄し、４５℃／５mbarで４５分間乾燥させて、生成物の第二の部分８．２８gを白色結晶として得た。両方の部分を合わせて生成物２３．９５g（６３％）を得た。融点１４０．５〜１４１．０℃。純度９５％（ＩＳＴＤ）。さらに精製した物質の旋光：〔α〕 D20＝−２６．５°（ｃ＝１、ＥｔＯＨ）
【０１５６】
ＩＲ（フィルム）: 3210, 2925, 2854, 1720, 1663, 1466, 1351, 1286, 1252, 1221, 1175, 1156, 1142, 1107, 1070, 1040, 966, 915, 895, 838, 811, 782, 748, 732 cm-1; MS (EI, 70 eV): 486 (M+), 416, 398, 320, 302, 286, 274, 246 m/e.
【０１５７】
例６
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルヒドロクロリドの調製
エタノール９０ml中（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（ジエトキシホスホリルアミノ）−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル２２．０７g（４１．４mmol）の溶液を０℃に冷却した。温度を２０℃未満に維持しながら９６％硫酸２２ml（３９５mmol）を２５分かけて滴下した。添加が完了したのち、混合物を７０℃で２２時間攪拌し、０℃に冷却し、酢酸エチル１．０リットルと１０％（ｗ／ｖ）水酸化ナトリウム溶液１．０リットルとの氷冷混合物に注加した。抽出したのち、相を分離させ、有機相を水２８０mlで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗生成物１４．９gを得た。この物質をtert−ブチルメチルエステル９０mlにとり、懸濁液を５０℃に加熱して明澄な茶色がかった溶液を得て、それを１０℃に冷却し、温度を２０℃未満に維持しながらエタノール中４Ｍ  ＨＣｌ  ３０mlを加えた。約１分後、生成物が沈澱し始めた。粘ちょうな懸濁液をｎ−ヘキサン５０mlで希釈し、室温で１５分間攪拌した。沈殿物をろ別し、４０℃／３mbarで３０分間乾燥させて、生成物１１．０９g（６３％）を白色結晶として得た。
【０１５８】
ＩＲ（フィルム）: 3233, 2923, 2853, 2687, 2579, 1989, 1717, 1654, 1586, 1487, 1464, 1357, 1340, 1266, 1225, 1177, 1067, 1021, 973, 940, 906, 885, 830, 747, 729 cm-1.
【０１５９】
例７
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−アリルアミノ−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
tert−ブチルメチルエステル８２ml中（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−５−メタンスルホニルオキシ−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルヒドロクロリド６．９５g（１９．９mmol）及びアリルアミン６．１ml（７９．６mmol）の溶液を、アルゴン下の圧力容器に封入し、１１０℃に加熱して４バールの内圧を生じさせた。２０時間後、混合物を室温に冷まし、tert−ブチルメチルエステル３０mlと炭酸水素ナトリウム飽和溶液１２０mlとに分割した。水相をtert−ブチルメチルエステル５０mlで抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、生成物５．９０g（９６％）をわずかに茶色がかった油状物として得た。純度７７％（ＩＳＴＤ）
【０１６０】
ＩＲ（フィルム）: 3274, 3084, 2925, 2853, 1721, 1645, 1556, 1457, 1373, 1318, 1249, 1185, 1130, 1087, 1057, 1037, 995, 938, 770, 736; MS (70 eV): 353 (M+), 296, 283, 265, 226 m/e.
【０１６１】
例８
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アリルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
温度計、攪拌機、クライゼン凝縮器及び不活性ガス供給を備えた４リットルの四つ口丸底フラスコ中、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−アリルアミノ−４−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル２７８．０gを、アルゴン下、室温で攪拌しながらtert−ブチルメチルエーテル２８００mlに溶解した。この赤色溶液から、tert−ブチルメチルエーテル１４００mlを蒸留した。再び、tert−ブチルメチルエーテル１４００mlを加え、留去した。赤色溶液を０〜５℃に冷却し、酢酸５１２ml（９．０mol）で処理すると、温度が約２３℃に上昇した。０℃〜５℃に冷却したのち、２７分かけてメタンスルホン酸５８．１ml（ｄ＝１．４８２、０．９０mol）を滴下し、続いて温度を０℃〜５℃の範囲に維持しながら４０分かけて無水酢酸８４．７ml（ｄ＝１．０８、０．９０mol）を滴下した。茶色の反応混合物を冷却することなく１４時間攪拌し、激しく攪拌しながら３０分間、脱イオン水１４００mlで処理し、茶色の有機相を１Ｍ水性メタンスルホン酸４５０mlで抽出した。温度を１０〜２５℃の範囲に維持しながら、合わせた水相（ｐＨ＝１．６）を攪拌しながらｐＨ１０．０に達するまで５０％水酸化カリウム水溶液約６９４mlで処理した。茶色の濁った混合物を、tert−ブチルメチルエーテルまず１０００ml、次に４００ml（全部で１４００ml）で抽出し、合わせた有機抽出物を木炭３２g上で攪拌し、ろ過した。ろ過ケークをtert−ブチルメチルエーテル約２００mlで洗浄し、合わせたろ液を回転エバポレータ中４７℃／３８０〜１０mbarで蒸発させて、赤茶色の非晶質結晶２８５．４gを得て、これを攪拌しながらtert−ブチルメチルエーテル５７０mlとｎ−ヘキサン２８５mlとの混合物に５０℃で溶解した。茶色の溶液を攪拌しながら−２０℃〜−２５℃まで４５分間冷却し、５時間攪拌すると、茶色の結晶が沈澱した。懸濁液を、事前に冷却した（−２０℃）ガラスフィルター漏斗に通してろ過し、ろ過ケークを、tert−ブチルメチルエーテル２８５mlとｎ−ヘキサン１４３mlとの事前に冷却した（−２０℃）混合物で洗浄し、回転エバポレータ中、４８℃＜１０mbarで乾燥させて、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アリルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル２００．３３g（８３％）を得た。融点１００．２℃〜１０４．２℃
【０１６２】
例９
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの調製
温度計、攪拌機、環流凝縮器及び不活性ガス供給を備えた１リットルの四つ口丸底フラスコ中、例８にしたがって得た（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アリルアミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル１７６．２g及びエタノールアミン３０．０ml（ｄ＝１．０１５、０．５４mol）を、室温で、エタノール８８０mlに溶解し、１０％パラジウム担持炭１７．６gで処理した。黒色の懸濁液を３時間環流状態で加熱し、室温に冷まし、ろ過した。ろ過ケークをエタノール１００mlで洗浄し、合わせたろ液を回転エバポレータ中５０℃／＜２０mbarで蒸発させた。茶色の油状残渣２０７．３gを２Ｎ塩酸６００mlで処理し、茶色の溶液を回転エバポレータ中、５０℃／７５mbarで５分間蒸留した。溶液を室温まで冷まし、tert−ブチルメチルエーテル６００mlで洗浄し、温度を室温未満に維持しながら攪拌し、冷却しながらｐＨ９〜１０に到達するまで２５％水性アンモニア約１１０mlで処理し、茶色のエマルションを形成した。エマルションを酢酸エチル６００mlで３回（全部で１８００ml）抽出した。合わせた抽出物を硫酸ナトリウム約２００g上で乾燥させ、ろ過した。ろ過ケークを酢酸エチル約２００mlで洗浄し、合わせたろ液を回転エバポレータ中、５０℃／＜２０mbarで蒸発させて茶色の油状物１５８．６gを得て、それをエタノール６５０mlに溶解した。茶色の溶液を攪拌しながら１分かけて、エタノール２５００ml中８５％オルトリン酸５７．６０g（ｄ＝１．７１、０．５０mol）の高温（５０℃）溶液に加えた。得られた溶液を１時間かけて２２℃に冷却した。４０℃で、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステルの種晶（約１０mg）を加えると、結晶化が始まった。ベージュ色の懸濁液を２時間かけて−２０℃〜−２５℃に冷却し、この温度で５時間攪拌した。懸濁液を、事前に冷却した（−２０℃）ガラスフィルター漏斗に通して２時間ろ過した。ろ過ケークを、まず事前に−２５℃に冷却したエタノール２００mlで洗浄し、次いでアセトン８５０mlで２回（全部で１７００ml）洗浄し、さらにｎ−ヘキサン１０００mlで２回（全部で２０００ml）洗浄し、５０℃／２０mbarで３時間乾燥させて、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセチルアミノ−５−アミノ−３−（１−エチル−プロポキシ）−シクロヘキサ−１−エンカルボン酸エチルエステル１２４．９g（７０％）を白色結晶として得た。融点２０５℃〜２０７℃（分解）