(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)
【化１】
0004913305.tif 000053
[式中、
Q1とQ2は、フェニルであり、Q1とQ2の一方またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、ヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-C4アルキル)スルファモイル、C1-4アルキルスルホニル、あるいは式(Ia)
【化２】
0004913305.tif 000054
〔式中、
Yは、-S(O)2NH-、または-S(O)2-であり;
Zは、RbRcN-、または複素環基であって、このとき前記の複素環基の環炭素が、Rhから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく;
RbおよびRcは、C1-4アルキルおよびフェニルから独立的に選択され;
nは0であり;
mは2であって、さらに、Zが複素環基である場合は、mが0であってよい］で示される置換基から選択される１つの基で置換されており；
Gは-O-、または-NR2-であり;
R2は、水素、C1-6アルキルおよびC3-6アルケニルから選択され、このとき前記のC1-6アルキルおよびC3-6アルケニルが、Rnから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく;
R1は、水素およびハロから選択され;
Q1は、その環炭素が、ハロ、シアノ、C1-4アルキルおよび複素環基から独立的に選択される1〜4個の置換基で置換されていてもよく;
Q1はさらに、上記置換基とは独立的に、あるいは上記置換基に加えて、1個のC1-4アルコキシ置換基で置換されていてもよく;
Q2は、その環炭素が、ハロ、シアノ、C1-4アルキルおよび複素環基から独立的に選択される1〜4個の置換基で置換されていてもよく;
Rnは、ハロおよびフェニルから選択され;そして
Rhは、C1-4アルキルから選択され；ここにおいて、上記複素環基はモルホリノ、１，３，４−チアジアゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリルおよびピリジニルから選択される]で示されるピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩（但し、R1がニトロおよびGが-NH-である場合、Q1はスルファイモイルによって置換されたフェニルでも、N-置換スルファモイル（ここにおいてN-置換基はピリミジン、４−メチルピリミジンまたは４，６−ジメチルピリミジンである）によって置換されたフェニルでもなく、また、R1が水素、Gが-NH-、並びにQ1およびQ2がいずれもパラ位で-SO2NH2によって置換されたフェニルである化合物を除く）。
【請求項２】
Q1とQ2の一方またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、メシル、N-(2-ジエチルアミノエチル)スルファモイル、2-(N-メチル-N-フェニルアミノ)エチルスルホニル、2-モルホリノエチルスルホニル、N-(5-メチルチアジアゾル-2-イル)スルファモイル、N,N-ジ-(2-ヒドロキシエチル)スルファモイル、N-(チアゾル-2-イル)スルファモイル、N-(3,4-ジメチルイソオキサゾル-5-イル)スルファモイル、N-(ピリド-2-イル)スルファモイル、およびN-メチルスルファモイルから選択される1つの基で置換されている請求項1記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項３】
Q1が、-NH-に対するパラ位またはメタ位がスルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)の置換基で置換されたフェニルである、請求項1または２記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項４】
Gが-O-、-NH-、-(4,4,4-トリフルオロブチル)N-、-(3-ブロモ-2-プロペニル)N-、もしくは-(3-フェニル-2-プロペニル)N-である請求項1〜3のいずれか一項に記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項５】
Q1が1つのC1-4アルコキシ置換基で置換されていてもよい請求項1〜4のいずれか一項に記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項６】
Q2の環炭素が、ハロ、シアノ、メチル、メトキシ、およびモルホリノから独立的に選択される1〜2個の置換基で置換されていてもよい請求項1〜5のいずれか一項に記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項７】
2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-(2-シアノアニリノ)ピリミジン、2-(4-N-メチルスルファモイルアニリノ)-4-アニリノ-5-ブロモピリミジン、2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-アニリノ-5-ブロモピリミジン、2,4-ジ-(4-スルファモイルアニリノ)-5-ブロモピリミジン、または2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-(4-メトキシフェノキシ)-5-クロロピリミジンから選択される請求項1〜6のいずれか一項に記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項８】
a)  Gが-NR2-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(II)
【化３】
0004913305.tif 000055
(式中、Lはハロ基、−ＯＨ基、メタンスルホニルオキシ基、トルエン−４−スルホニルオキシ基、メシル基、メチルチオ基またはメチルスルフィニル基である)のピリミジンと式(III)
【化４】
0004913305.tif 000056
(式中、Gは-NR2-である)の化合物とを反応させること;
b)  式(IV)
【化５】
0004913305.tif 000057
(式中、Lはハロ基、−ＯＨ基、メタンスルホニルオキシ基、トルエン−４−スルホニルオキシ基、メシル基、メチルチオ基またはメチルスルフィニル基である)のピリミジンと式(V)
【化６】
0004913305.tif 000058
の化合物とを反応させること;
c)  側鎖が式(Ia)であって、Yが-S(O)2NH-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(VI)
【化７】
0004913305.tif 000059
(式中、Lはハロ基、−ＯＨ基、メタンスルホニルオキシ基、トルエン−４−スルホニルオキシ基、メシル基、メチルチオ基またはメチルスルフィニル基である)化合物と式(VII)
【化８】
0004913305.tif 000060
のアミンとを反応させること;
d)  側鎖が式(Ia)であって、Yが-NHS(O)2-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(VIII)
【化９】
0004913305.tif 000061
のアミンと式(IX)
【化１０】
0004913305.tif 000062
(式中、Lはハロ基、−ＯＨ基、メタンスルホニルオキシ基、トルエン−４−スルホニルオキシ基、メシル基、メチルチオ基またはメチルスルフィニル基である)の化合物とを反応させること;
そしてその後に、必要に応じて、
i)  式(I)の化合物を式(I)の別の化合物に転化すること;
ii)  任意の保護基を取り除くこと; および
iii)  医薬用として許容しうる塩を形成させること;
を含み、上記式中、Ｑ１，Ｑ２，Ｒ１，Ｇ，ｍ，ｎ及びＺは請求項１と同じ意味を表す、請求項1〜7のいずれか一項に記載のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩の製造法。
【請求項９】
請求項1〜7のいずれか一項に記載の式(I)のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩を、医薬用として許容しうる希釈剤またはキャリヤーと組み合わせて含む医薬用組成物。
【請求項１０】
ヒト等の温血動物に対する予防処置または治療処置の方法において使用するための、請求項1〜7のいずれか一項に記載の式(I)のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項１１】
医薬として使用するための、請求項1〜7のいずれか一項に記載の式(I)のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩。
【請求項１２】
ヒト等の温血動物に対して制癌性の細胞周期阻害(抗細胞増殖)効果を生成させるのに使用するための医薬の製造における、請求項1〜7のいずれか一項に記載の式(I)のピリミジン化合物、または前記ピリミジン化合物の医薬用として許容しうる塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、細胞周期阻害活性を有していて、従って抗細胞増殖(例えば制癌)活性を発現させる上で有用な、従ってヒト等の温血動物を処置する方法において有用な、ピリミジン誘導体または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルに関する。本発明はさらに、前記ピリミジン誘導体の製造法、前記物質を含有する医薬用組成物、ならびに医薬の製造における前記物質の使用またはヒト等の温血動物に対して抗細胞増殖活性を発現させる上での使用に関する。
【０００２】
サイクリン（ｃｙｃｌｉｎ）と呼ばれる系列の細胞内蛋白質は、細胞周期において中心的役割を果たしている。サイクリンの合成と分解は、細胞周期中に発現のレベルが変動するように緊密に制御されている。サイクリンはサイクリン依存性のセリン/トレオニン・キナーゼ(CDK)に結合し、この結合が、細胞内でのCDK(例えばCDK1、CDK2、CDK4、および/またはCDK6)の活性にとって必須である。これらのファクターのそれぞれがどのように結びついてCDKの活性を調節しているのかについての正確な詳細はまだあまり解明されていないが、これらの2つのバランスによって、細胞が細胞周期に従って進行するかどうかが決定づけられている。
【０００３】
最近、腫瘍遺伝子や腫瘍抑制遺伝子の研究が急速に進み、細胞周期へのエントリーを抑制することが、腫瘍における有糸分裂生起の重要な制御ポイントであるとして確認されている。さらに、CDKは、多くの腫瘍遺伝子シグナル経路より下流に存在していると考えられる。またサイクリンのアップレグュレーション(upregulation)及び/又は内因性阻害剤の不足によるCDK活性のディスレギュレーション(disregulation)が、有糸分裂誘発性シグナル経路と腫瘍細胞増殖との間の重要な軸(an important axis)となっているようである。
【０００４】
従って、細胞周期キナーゼの阻害剤〔特に、CDK2、CDK4、及び/又はCDK6の阻害剤(それぞれ、S期、G1-S、およびG1-S期にて作用する)〕は、細胞増殖(例えば、哺乳類癌細胞の増殖)の選択的阻害剤として有用であるはずである、と認識されている。
【０００５】
本発明は、驚くべきことに特定の2,4-ピリミジン化合物が細胞周期キナーゼの作用を阻害し(CDK2、CDK4、およびCDK6に対して選択性を示す)、従って抗細胞増殖特性を有する、という発見に基づいている。このような特性は、異常な細胞周期や異常な細胞増殖〔例えば、癌(充実性腫瘍や白血病)、線維増殖性障害と分化性障害（fibroproliferative and differentiative disorders）、乾癬、リウマチ様関節炎、カポジ肉腫、血管腫、急性ネフロパシーと慢性ネフロパシー、アテローム（atheroma）、アテローム性動脈硬化症、動脈再発狭窄症、自己免疫疾患、急性炎症と慢性炎症、骨の疾患、および網膜血管増殖を伴う眼の疾患〕に関連した疾患状態の処置に対して有用であると考えられる。
【０００６】
本発明によれば、式(I)
【０００７】
【化１２】
0004913305.tif 000002
【０００８】
[式中、
Q1とQ2はアリールまたは炭素結合したヘテロアリールから独立的に選択され、Q1とQ2の一方またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、ハロまたはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロまたはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-C4アルキル)スルファモイル、ハロまたはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、あるいは式(Ia)または(Ia')
【０００９】
【化１３】
0004913305.tif 000003
【００１０】
〔式中、
Yは、-NHS(O)2-、-S(O)2NH-、または-S(O)2-であり;
Zは、RaO-、RbRcN-、RdS-、ReRfNNRg-、C3-8シクロアルキル、フェニル、または複素環基であって、このとき前記のフェニル基、C3-8シクロアルキル基、または複素環基の環炭素が、Rhから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく、前記複素環基が-NH-部分を含有している場合は、該窒素がRiから選択される基で置換されていてもよく;
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、およびRgは、水素、C1-4アルキル、C2-4アルケニル、フェニル、複素環基、およびC3-8シクロアルキルから独立的に選択され、このとき前記のC1-4アルキル、C2-4アルケニル、およびC3-8シクロアルキルが、Riから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく;
nは0または1であり;
mは1、2、または3であって、さらに、ZがC3-8シクロアルキル、フェニル、または複素環基である場合は、mが0であってよく;
Q3は窒素結合した複素環であって、このとき前記複素環の環炭素が、Rkから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく、前記複素環基が-NH-部分を含有している場合は、該窒素がRmから選択される基で置換されていてもよい〕で示される置換基から選択される1つの基で置換されており;
Gは-O-、-S-、または-NR2-であり;
R2は、水素、C1-6アルキル、C3-6アルケニル、およびC3-6アルキニルから選択され、このとき前記のC1-6アルキル、C3-6アルケニル、およびC3-6アルキニルが、Rnから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく;
R1は、水素、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、N-(C1-3アルキル)アミノ、N,N-ジ-(C1-3アルキル)アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、C1-3アルキル(ハロ、シアノ、アミノ、N-(C1-3アルキル)アミノ、N,N-ジ-(C1-3アルキル)アミノ、ヒドロキシ、およびトリフルオロメチルから独立的に選択される1個もしくは2個の置換基で置換されていてもよい)、C3-5アルケニル(最大３個までのハロ置換基で、または１個のトリフルオロメチル置換基で置換されていてもよい)、C3-5アルキニル、C1-3アルコキシ、メルカプト、C1-3アルキルスルファニル、カルボキシ、ならびにC1-3アルコキシカルボニルから選択され;
Q1は、その環炭素が、ハロ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、C1-4アルキル、C2-4アルケニル、C2-4アルキニル(前記のC1-4アルキル、C2-4アルケニル、およびC2-4アルキニルは、R0から選択される1個以上の基で置換されていてもよい)、C1-4アルカノイル、C1-4アルコキシカルボニル、複素環基、ヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルS(O)a(式中、aは0または1である)、N'-(C1-4アルキル)ウレイド、N',N'-ジ-(C1-4アルキル)ウレイド、N'-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイド、N',N'-ジ-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイド、N-C1-4アルキルアミノ、N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノ、N-C1-4アルキルカルバモイル、N,N-ジ-(C1-4アルキル)カルバモイル、およびC1-4アルカノイルアミノから独立的に選択される1〜4個の置換基で置換されていてもよく;
Q1はさらに、上記置換基とは独立的に、あるいは上記置換基に加えて、アリール、C3-8シクロアルキル、および複素環基から独立的に選択される1〜2個の置換基で置換されていてもよく、このとき前記のアリール、C3-8シクロアルキル、または複素環基の環炭素がRpから選択される1個以上の基で置換されていてもよく、前記複素環が-NH-部分を含有している場合は、該窒素がRqから選択される基で置換されていてもよく;
Q1はさらに、上記置換基とは独立的に、あるいは上記置換基に加えて、1個のC1-4アルコキシで、または１個のヒドロキシ置換基で置換されていてもよく;
Q2は、その環炭素が、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、シアノ、アミノ、ウレイド、カルバモイル、C1-4アルキル、C2-4アルケニル、C2-4アルキニル、C1-4アルコキシ(前記のC1-4アルキル、C2-4アルケニル、C2-4アルキニル、およびC1-4アルコキシは、Rrから選択される1個以上の基で置換されていてもよい)、C1-4アルカノイル、C1-4アルコキシカルボニル、複素環基、ヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルS(O)a(式中、aは0または1である)、N'-(C1-4アルキル)ウレイド、N',N'-ジ-(C1-4アルキル)ウレイド、N'-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイド、N',N'-ジ-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイド、N-C1-4アルキルアミノ、N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノ、N-C1-4アルキルカルバモイル、N,N-ジ-(C1-4アルキル)カルバモイル、C2-4アルケニルオキシ、C2-4アルキニルオキシ、およびC1-4アルカノイルアミノから独立的に選択される1〜4個の置換基で置換されていてもよく;
Q2はさらに、上記置換基とは独立的に、あるいは上記置換基に加えて、アリール、C3-8シクロアルキル、または複素環基から独立的に選択される1〜2個の置換基で置換されていてもよく、このとき前記のアリール、C3-8シクロアルキル、または複素環基の環炭素がRsから選択される1個以上の基で置換されていてもよく、前記複素環が-NH-部分を含有している場合は、該窒素がRtから選択される基で置換されていてもよく;
Rj、Rn、Ro、およびRtは、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、シアノ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、ニトロ、メルカプト、カルバモイル、スルファモイル、N-C1-4アルキルアミノ、N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノ、C1-4アルカノイル、C1-4アルカノイルオキシ、C1-4アルコキシ、C1-4アルコキシカルボニル、N-C1-4アルキルカルバモイル、N,N-ジ-(C1-4アルキル)カルバモイル、C1-4アルカノイルアミノ、C1-4アルキルS(O)a(式中、aは0〜2である)、C1-4アルキルスルホニルアミノ、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、N-(C1-4アルキル)2スルファモイル、N-(C1-4アルキル)カルバモイル、N-(C1-4アルキル)2カルバモイル、フェニル、フェニルチオ、フェノキシ、C3-8シクロアルキル、および複素環基から独立的に選択され、このとき前記のフェニル、フェニルチオ、フェノキシ、C3-8シクロアルキル、および複素環基の環炭素が、Ruから選択される1個以上の基で置換されていてもよく、前記複素環基が-NH-部分を含有している場合は、該窒素が、Rvから選択される基で置換されていてもよく;
Rh、Rk、Rp、Rs、およびRuは、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、シアノ、ホルミル、ホルムアミド、カルボキシ、ニトロ、メルカプト、カルバモイル、スルファモイル、C1-4アルキル(ハロ、シアノ、アミノ、N-C1-4アルキルアミノ、N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノ、またはヒドロキシから選択される1個以上の基で置換されていてもよい)、C2-4アルケニル(ハロから選択される1個以上の基で置換されていてもよい)、C2-4アルキニル、N-C1-4アルキルアミノ、N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノ、C1-4アルカノイル、C1-4アルカノイルオキシ、C1-4アルコキシ(ハロから選択される1個以上の基で置換されていてもよい)、C1-4アルコキシカルボニル、N-C1-4アルキルカルバモイル、N,N-ジ-(C1-4アルキル)カルバモイル、C1-4アルカノイルアミノ、C1-4アルキルS(O)a(式中、aは0〜2である)、C1-4アルキルスルホニルアミノ、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、N-(C1-4アルキル)2スルファモイル、フェニル、C3-8シクロアルキル、および複素環基から独立的に選択され; そして
Ri、Rq、Rt、およびRvは、C1-4アルキル、C1-4アルカノイル、C1-4アルキルスルホニル、C1-4アルコキシカルボニル、カルバモイル、N-(C1-4アルキル)カルバモイル、N,N-ジ-(C1-4アルキル)カルバモイル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、ベンゾイル、およびフェニルスルホニルから独立的に選択される]で示されるピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で（in vivo）加水分解可能なエステルが提供される。
【００１１】
“アリール”は、4〜12個の原子を含有する、完全不飽和もしくは部分不飽和で単環式または二環式の炭素環である。“アリール”は、5個または6個の原子を含有する単環式の環、あるいは9個または10個の原子を含有する二環式の環であるのが好ましい。“アリール”は、フェニル、ナフチル、テトラリニル、またはインダニルであるのがさらに好ましい。“アリール”は、フェニル、ナフチル、またはインダニルであるのがさらに好ましい。“アリール”は、フェニルであるのが特に好ましい。
【００１２】
“炭素結合ヘテロアリール”は、少なくとも1つの原子が窒素、イオウ、または酸素から選択されている、完全不飽和で5員もしくは6員の単環式の環または9員もしくは10員の二環式の環である。この環は、炭素原子を介して-NH-に(Q1の場合)またはGに(Q2の場合)結合している。“炭素結合ヘテロアリール”は、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、フラザニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、インドリル、キノリル、またはベンゾイミダゾリルであるのが好ましい。“炭素結合ヘテロアリール”は、ピリジル、チアゾリル、またはピラゾリルであるのがさらに好ましい。“炭素結合ヘテロアリール”は、ピリジルであるのが特に好ましい。
【００１３】
“複素環基”は、4〜12個の原子(少なくとも1つの原子が窒素、イオウ、または酸素から選択される)を含有する、飽和、部分飽和、もしくは不飽和で単環式または二環式の環であって、特に明記しない限り、炭素結合していても、あるいは窒素結合していてもよく、このとき-CH2-基が-C(O)-で置き換えられていてもよく、また環イオウ原子が酸化されてS-オキシドを形成していてもよい。“複素環基”は、ピロリジニル、モルホリノ、ピペリジル、ピリジル、ピラニル、ピロリル、イソチアゾリル、インドリル、キノリル、チエニル、フリル、1,3-ベンゾジオキソリル、チアジアゾリル、ピペラジニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、ピロリジニル、チオモルホリノ、ピラゾリル、ピロリニル、ホモピペラジニル、テトラヒドロピラニル、イミダゾリル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、イソオキサゾリル、4-ピリドン、1-イソキノロン、2-ピロリドン、4-チアゾリドン、イミダゾ[1,2-a]ピリジン、または3-アザ-8-オキサビシクロ[3,2,1]ヘキサンであるのが好ましい。“複素環基”は、ピロリジニル、モルホリノ、ピペリジル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、ピリジル、インドリル、チエニル、フリル、ピペラジニル、チオモルホリノ、ピラゾリル、イミダゾリル、2-ピロリドン、イミダゾ[1,2-a]ピリジン、または3-アザ-8-オキサビシクロ[3,2,1]ヘキサンであるのがさらに好ましい。特に好ましい“複素環基”は、モルホリノ、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、またはピリジルである。
【００１４】
“窒素結合複素環”は、4〜12個の原子〔このうち1個の原子が窒素原子（示されている通りアミドを形成するように結合）であって、他の原子が全て炭素原子であるか、あるいは1〜3個のヘテロ原子が窒素、イオウ、または酸素から選択され、他の原子が炭素原子である〕を含有する、飽和、部分飽和、もしくは完全不飽和で単環式または二環式の環であり、このとき-CH2-基が-C(O)-で置き換えられていてもよく、また環イオウ原子が酸化されてS-オキシドを形成していてもよい。言うまでもないが、この窒素結合の形成の際には、窒素原子は第四級化されない、すなわち中性化合物が形成される。“窒素結合複素環”は、ピロル−１−イル（1-ピロリル）、ピロリン−１−イル（1-ピロリニル）、ピロリジン−１−イル（1-ピロリジニル）、イミダゾル−１−イル（1-イミダゾリル）、イミダゾリン−１−イル（1-イミダゾリニル）、イミダゾリジン−１−イル（1-イミダゾリジニル）、ピラゾル−１−イル（1-ピラゾリル）、ピラゾリン−１−イル（1-ピラゾリニル）、ピラゾリジン−１−イル（1-ピラゾリジニル）、トリアゾル−１−イル（1-トリアゾリル）、ピペリジン−１−イル（1-ピペリジニル）、ピペラジン−１−イル（1-ピペラジニル）、モルホリノ、チオモルホリノ、インドル−１−イル（1-インドリル）、インドリジン−１−イル（1-インドリジニル）、またはベンゾイミダゾル−１−イル（1-ベンゾイミダゾリル）であるのが好ましい。“窒素結合複素環”は1-ピペリジニルであるのがさらに好ましい。
【００１５】
本明細書においては、“アルキル”という用語は、直鎖アルキル基と枝分かれ鎖アルキル基の両方を含むが、“プロピル”等の個々のアルキル基に言及している場合は、特に直鎖アルキルのみを表わしている。他の総称的な用語に対しても類似の慣例が適用される。“ハロ”は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードである。
【００１６】
C2-4アルケニルの例は、ビニルおよびアリルであり; C2-6アルケニルの例は、C3-5アルケニル、ビニル、およびアリルであり; C3-6アルケニルの例は、C3-5アルキニルおよびアリルであり; C3-6アルキニルの例はプロピン−２−イル（2-プロピニル）であり; C2-4アルキニルの例は、エチニルおよび2-プロピニルであり; C2-6アルキニルの例は、エチニルおよび2-プロピニルであり; C1-4アルカノイルの例は、アセチルおよびプロピオニルであり; C1-4アルコキシカルボニルの例は、C1-3アルコキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、およびtert-ブトキシカルボニルであり; C1-4アルキレンの例は、メチレン、エチレン、およびプロピレンであり; C1-4アルキルの例は、C1-3アルキル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、およびtert-ブチルであり; C1-6アルキルの例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、および3-メチルブチルであり; C1-4アルコキシの例は、C1-3アルコキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、およびブトキシであり; C2-4アルケニルオキシの例はアリルオキシであり; C2-4アルキニルオキシの例はプロピニルオキシであり; C1-4アルキルS(O)a(式中、aは0または1である)の例は、C1-3アルキルスルファニル、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、およびプロピルスルフィニルであり; C1-4アルキルS(O)a(式中、aは0〜2である)の例は、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、プロピルスルフィニル、メシル、エチルスルホニル、およびプロピルスルホニルであり; C1-4アルキルスルホニルの例は、メシルおよびエチルスルホニルであり; N-C1-4アルキルカルバモイルの例は、N-メチルカルバモイル、N-エチルカルバモイル、およびN-プロピルカルバモイルであり; N,N-ジ-(C1-4アルキル)-カルバモイルの例は、N,N-ジメチルカルバモイル、N-エチル-N-メチルカルバモイル、およびN,N-ジエチルカルバモイルであり; N-C1-4アルキルアミノの例は、N-(C1-3アルキル)アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、およびプロピルアミノであり; N,N-ジ-(C1-4アルキル)アミノの例は、N,N-ジ-(C1-3アルキル)アミノ、ジメチルアミノ、N-エチル-N-メチルアミノ、ジエチルアミノ、N-メチル-N-プロピルアミノ、およびジプロピルアミノであり; C1-4アルカノイルアミノの例は、アセトアミド、プロピオンアミド、およびブチルアミドであり; C3-8シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルであり; C1-4アルカノイルの例は、アセチルおよびプロピオニルであり; C1-4アルカノイルオキシの例は、アセチルオキシおよびプロピオニルオキシであり; N'-(C1-4アルキル)ウレイドの例は、N'-メチルウレイドおよびN'-エチルウレイドであり; N',N'-ジ-(C1-4アルキル)ウレイドの例は、N',N'-ジメチルウレイド、N',N'-ジイソプロピルウレイド、およびN'-メチル-N'-プロピルウレイドであり; N'-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイドの例は、N'-メチル-N-エチルウレイドおよびN'-メチル-N-メチルウレイドであり; N',N'-ジ-(C1-4アルキル)-N-(C1-4アルキル)ウレイドの例は、N',N'-ジメチル-N-エチルウレイドおよびN'-メチル-N'-プロピル-N-ブチルウレイドであり; N-(C1-4アルキル)スルファモイルの例は、N-メチルスルファモイルおよびN-イソプロピルスルファモイルであり; N,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイルの例は、N-メチル-N-エチルスルファモイルおよびN,N-ジプロピルスルファモイルであり; そしてC1-4アルキルスルホニルアミノの例は、メシルアミノ、エチルスルホニルアミノ、およびプロピルスルホニルアミノである。
【００１７】
本発明のピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる適切な塩は、例えば、充分に塩基性である本発明のピリミジン誘導体の酸付加塩、例えば無機酸または有機酸(例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、またはマレイン酸)による酸付加塩である。さらに、充分に酸性である本発明のピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる適切な塩は、アルカリ金属塩(例えば、ナトリウム塩やカリウム塩)、アルカリ土類金属塩(例えば、カルシウム塩やマグネシウム塩)、アンモニウム塩、あるいは生理学的に許容しうるカチオンを与える有機塩基との塩〔例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス-(2-ヒドロキシエチル)アミンとの塩〕である。
【００１８】
式(I)の化合物は、ヒトまたは動物の体内で分解して式(I)の化合物を生成するプロドラッグの形態で投与することができる。プロドラッグの例としては、式(I)の化合物の生体内で加水分解可能なエステルがある。
【００１９】
カルボキシ基またはヒドロキシ基を含有する式(I)の化合物の生体内で加水分解可能なエステルは、例えば、ヒトもしくは動物の体内で加水分解してもとの酸またはアルコールを生成する、医薬用として許容しうるエステルである。医薬用として許容しうる、カルボキシに対する適切なエステルとしては、C1-6アルコキシメチルエステル(例えばメトキシメチル)、C1-6アルカノイルオキシメチルエステル(例えばピバロイルオキシメチル)、フタリジルエステル、C3-8シクロアルコキシカルボニルオキシC1-6アルキルエステル(例えば1-シクロヘキシルカルボニルオキシエチル)、1,3-ジオキソレン-2-オニルメチルエステル(例えば5-メチル-1,3-ジオキソレン-2-オニルメチル)、およびC1-6アルコキシカルボニルオキシエチルエステル(例えば1-メトキシカルボニルオキシエチル)などがあり、本発明の化合物中のどのカルボキシ基においても形成することができる。
【００２０】
ヒドロキシ基を含有する、式(I)の化合物の生体内で加水分解可能なエステルとしては、リン酸エステル等の無機エステル、α-アシルオキシアルキルエーテル、およびこれらに関連した化合物などがあり、これらの化合物は、エステルの生体内加水分解の結果、分解してもとのヒドロキシ基を生成する。α-アシルオキシアルキルエーテルの例としては、アセトキシメトキシおよび2,2-ジメチルプロピオニルオキシ-メトキシがある。生体内で加水分解可能なエステルを形成する基としては、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、置換ベンゾイル、置換フェニルアセチル、アルコキシカルボニル(アルキルカーボネートエステルを生成する)、ジアルキルカルバモイル、N-(ジアルキルアミノエチル)-N-アルキルカルバモイル(カルバメートを生成する)、ジアルキルアミノアセチル、およびカルボキシアセチルなどがある。ベンゾイル上の置換基の例としては、環窒素原子からメチレン基を介してベンゾイル環の3-位または4-位に結合したモルホリノおよびピペリジノなどがある。
【００２１】
式(I)のある化合物には、キラル中心及び/又は幾何異性中心(E-異性体とZ-異性体)を有するものがあり、本発明は、CDK阻害活性を有するこのような光学異性体、ジアステレオ異性体、および幾何異性体を全て包含することは言うまでもない。
【００２２】
本発明は、CDK阻害活性を有する、式(I)の化合物の全ての互変異性形に関する。
さらに、式(I)の特定の化合物が、非溶媒和形だけでなく溶媒和形(例えば水和形)にても存在しうることは言うまでもない。当然のことながら、本発明は、CDK阻害活性を有するこのような全ての溶媒和形を含む。
【００２３】
本発明の特定の好ましい化合物は、式(I)のピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルを含み、このときR1、Q1、Q2、およびGは、前記にて定義した意味のいずれか、あるいは下記の意味のいずれかを有する。このような意味は、適切な場合には、前記もしくは後記にて説明されている定義、特許請求の範囲、または実施態様のいずれに対しても使用することができる。
【００２４】
Q1とQ2は、フェニルとピリジルから独立的に選択するのが好ましい。
Q1はフェニルであるのが好ましい。
Q2は、フェニルまたはピリジルであるのが好ましい。
【００２５】
Q1がフェニルであって、Q2がフェニルとピリジルから選択されるのが好ましい。
Q1とQ2がフェニルであるのがさらに好ましい。
【００２６】
Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、ヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、C1-4アルキルスルファモイル、または式(Ia)の置換基から選択される１つの基で置換されているのが好ましく、このとき
Yは-S(O)2NH-または-S(O)2-であり;
Zは、RaO-、RbRcN-、または複素環基であって、このとき複素環基の環炭素が、Rhから選択される1つ以上の基で置換されていてもよく;
Ra、Rb、およびRcは、水素、C1-4アルキル、およびフェニルから独立的に選択され;
nは0であり;
mは2であり、あるいはZが複素環であるときmは0であってもよい。
【００２７】
Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、ヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、C1-4アルキルスルファモイル、または式(Ia)の置換基から選択される１つの基で置換されているのがさらに好ましく、このとき
Yは-S(O)2NH-または-S(O)2-であり;
Zは、RaO-、RbRcN-、チアゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、またはモルホリノであって、このときチアゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、またはモルホリノの環炭素が、1つ以上のメチル基で置換されていてもよく;
Ra、Rb、およびRcは、水素、C1-4アルキル、およびフェニルから独立的に選択され;
nは0であり;
mは2であり、あるいはZがチアゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、またはピリジルあるときmは0であってもよい。
【００２８】
Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、メシル、N-(2-ジエチルアミノエチル)スルファモイル、2-(N-メチル-N-フェニルアミノ)エチルスルホニル、2-モルホリノエチルスルホニル、N-(5-メチルチアゾル-2-イル)スルファモイル、N,N-ジ-(2-ヒドロキシエチル)スルファモイル、N-(チアゾル-2-イル)スルファモイル、N-(3,4-ジメチルイソオキサゾル-5-イル)スルファモイル、N-(ピリド-2-イル)スルファモイル、およびN-メチルスルファモイルから選択される1つの基で置換されているのがさらに好ましい。
【００２９】
Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイルとN-メチルスルファモイルから選択される1つの基で置換されているのがさらに好ましい。
Q1は、スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)もしくは(Ia')の置換基から選択される1つの基で置換されているのが好ましく、Q2は、スルファモイルから選択される1つの基でさらに置換されていてもよい。
【００３０】
Q1において、-NH-に対してパラ位またはメタ位が、スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)もしくは(Ia')の置換基で置換されているのがさらに好ましく、Q2は、Gに対してパラ位のスルファモイルから選択される1つの基でさらに置換されていてもよい。
【００３１】
Q1において、-NH-に対してパラ位が、スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)もしくは(Ia')の置換基で置換されているのがさらに好ましく、Q2は、Gに対してパラ位のスルファモイルから選択される1つの基でさらに置換されていてもよい。
【００３２】
本発明の1つの態様においては、Gは-O-であるのが好ましい。
本発明の他の態様においては、Gは-S-であるのが好ましい。
本発明のさらに他の態様においては、Gは-NR2-であるのが好ましい。
【００３３】
本発明の1つの態様においては、Gは-O-または-NR2-であるのが好ましい。
本発明の1つの態様においては、Gが-NR2-であるとき、R2は水素であるのが好ましい。
【００３４】
本発明の他の態様においては、Gが-NR2-であるとき、R2は水素でないのが好ましい。
Gは-O-または-NR2-であるのが好ましく、このときR2は、水素、C1-6アルキル、およびC3-6アルケニルから選択され、前記のC1-6アルキルとC3-6アルケニルは、1つ以上のハロ、シアノ、またはフェニルで置換されていてもよい。
【００３５】
Gは-O-または-NR2-であるのがさらに好ましく、このときR2は、水素、C1-6アルキル、およびC3-6アルケニルから選択され、前記のC1-6アルキルとC3-6アルケニルが1つ以上のハロまたはフェニルで置換されていてもよい。
【００３６】
Gは、-O-、-NH-、-(4,4,4-トリフルオロブチル)N-、-(3-ブロモ-2-プロペニル)N-、または-(3-フェニル-2-プロペニル)N-であるのがさらに好ましい。
Gは、-O-または-NH-であるのがさらに好ましい。
【００３７】
R1は水素またはハロであるのが好ましい。
R1は、水素、クロロ、またはブロモであるのがさらに好ましい。
好ましくは、Q1は１個C1-4アルコキシ置換基で置換されていてもよく、スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいC1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)もしくは(Ia')の置換基から選択される1つの基で置換されているのが好ましい。
【００３８】
Q1は、スルファモイル、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、またはN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイルから選択される１個の基で置換されているのがさらに好ましい。
【００３９】
Q2は、非置換であるか、あるいはハロ、シアノ、C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、および複素環基から選択される１個又は２個の基で置換されているのが好ましい。
【００４０】
さらに好ましくは、Q2の環炭素が、ハロ、シアノ、メチル、メトキシ、およびモルホリノから独立的に選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよい。
さらに好ましくは、Q2の環炭素が、シアノとメトキシから独立的に選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよい。
【００４１】
Q2は、フェニル、2-モルホリノフェニル、2-シアノフェニル、4-ブロモフェニル、2-フルオロ-5-メチルフェニル、4-メトキシフェニル、または4-スルファモイルフェニルであるのが好ましい。
【００４２】
Q2は、フェニル、2-シアノフェニル、4-メトキシフェニル、または4-スルファモイルフェニルであるのがさらに好ましい。
従って本発明の好ましい態様においては、前記式(I)
[式中、
Q1とQ2がフェニルとピリジルから独立的に選択され、Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、N-(C1-4アルキル)スルファモイル、ヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイル、C1-4アルキルスルホニル、または式(Ia)の置換基から選択される１個の基で置換されており、このとき
Yは-S(O)2NH-または-S(O)2-であり;
Zは、RaO-、RbRcN-、または複素環基であって、前記複素環基の環炭素が、Rhから選択される１個以上の基で置換されていてもよく;
Ra、Rb、およびRcは、水素、C1-4アルキル、およびフェニルから独立的に選択され;
nは0であり;
mは2であるか、あるいはZが複素環基であるときmは0であってもよく;
Gは-O-または-NR2-であって、R2は、水素、C1-6アルキル、およびC3-6アルケニルから選択され、このとき前記のC1-6アルキルとC3-6アルケニルは、１個以上のハロまたはフェニルで置換されていてもよく;
R1は水素またはハロである]で示されるピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルが提供される。
【００４３】
従って本発明のさらに好ましい態様においては、前記式(I)
[式中、
Q1が、１個のC1-4アルコキシ置換基で置換されていてもよいフェニルであって、Q2が、１個以上のハロ、シアノ、メチル、メトキシ、およびモルホリノで置換されていてもよいフェニルであり、Q1における、-NH-に対するパラ位が、スルファモイル、メシル、N-(2-ジエチルアミノエチル)スルファモイル、2-(N-メチル-N-フェニルアミノ)エチルスルホニル、2-モルホリノエチルスルホニル、N-(5-メチルチアジアゾル-2-イル)スルファモイル、N,N-ジ-(2-ヒドロキシエチル)スルファモイル、N-(チアゾル-2-イル)スルファモイル、N-(3,4-ジメチルイソオキサゾル-5-イル)スルファモイル、N-(ピリド-2-イル)スルファモイル、およびN-メチルスルファモイルから選択される１個の基で置換されており、Q2が、スルファモイルから選択される１個の基で置換されていてもよく;
Gは、-O-、-NH-、-(4,4,4-トリフルオロブチル)N-、-(3-ブロモ-2-プロペニル)N-、または-(3-フェニル-2-プロペニル)N-であり;
R1は、水素、クロロ、またはブロモである]で示されるピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルが提供される。
【００４４】
本発明の1つの態様においては、本発明の好ましい化合物は、実施例1、20、21、29、または31に記載の化合物、あるいは前記化合物の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルである。
【００４５】
本発明の他の態様においては、本発明の好ましい化合物は、実施例のいずれかに記載の化合物、あるいは前記化合物の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルを含む。
【００４６】
本発明の好ましい態様は、前記化合物または前記化合物の医薬用として許容しうる塩に関する態様である。
式(I)のピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルは、化学的に関連した化合物の製造に対して適用できることが知られているいかなる方法によっても製造することができる。このような方法は、式(I)のピリミジン誘導体または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルを製造するのに使用される場合、本発明のさらなる特徴として提供され、後記の個々の実施例において説明されており、このとき特に明記しない限り、R1、Q1、Q2、およびGは、式(I)のピリミジン誘導体に関して前記にて定義した意味のいずれかを有し、また環Q1またはQ2上に他の置換基が描かれていない場合、環は、前述した置換基(必要に応じて保護処理されていてもよい)のいずれを有していてもよい。環Q1上に置換基が描かれている場合、特に明記しない限りこのことは、置換基が環Q1上に存在することに加えて、あるいは置換基が環Q1上に存在する代わりに、置換基が環Q2上にも存在しうることを含んでいる。必要な出発物質は、有機化学の標準的方法〔例えば、“Advanced Organic Chemistry(Wiley-Interscience), Jerry March”(反応条件や反応試剤に関する一般的指針としても有用)を参照〕によって得ることができる。このような出発物質の製造については、本明細書に記載の方法と実施例(本発明がこれらの方法と実施例によって限定されることはない)において説明されている。これとは別に、必要な出発物質は、文献に記載の方法と類似の方法(当有機化学技術者には公知である)によって得ることもできる。
【００４７】
従って本発明のさらなる特徴として、
a)  Gが-NR2-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(II)
【００４８】
【化１４】
0004913305.tif 000004
【００４９】
(式中、Lは後記にて定義の置き換え可能な基である)のピリミジンと式(III)
【００５０】
【化１５】
0004913305.tif 000005
【００５１】
(式中、Gは-NR2-である)の化合物とを反応させること;
b)  式(IV)
【００５２】
【化１６】
0004913305.tif 000006
【００５３】
(式中、Lは後記にて定義の置き換え可能な基である)のピリミジンと式(V)
【００５４】
【化１７】
0004913305.tif 000007
【００５５】
の化合物とを反応させること;
c)  側鎖が式(Ia)であって、Yが-S(O)2NH-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(VI)
【００５６】
【化１８】
0004913305.tif 000008
【００５７】
(式中、Lは後記にて定義の置き換え可能な基である)化合物と式(VII)
【００５８】
【化１９】
0004913305.tif 000009
【００５９】
のアミンとを反応させること;
d)  側鎖が式(Ia)であって、Yが-NHS(O)2-である場合の式(I)の化合物に対しては、式(VIII)
【００６０】
【化２０】
0004913305.tif 000010
【００６１】
のアミンと式(IX)
【００６２】
【化２１】
0004913305.tif 000011
【００６３】
(式中、Lは置き換え可能な基である)の化合物とを反応させること;
e)  側鎖が式(Ia')である場合の式(I)の化合物に対しては、式(VI)の化合物と式(X)
【００６４】
【化２２】
0004913305.tif 000012
【００６５】
のアミンとを反応させること;
そしてその後に、必要に応じて、
i)  式(I)の化合物を式(I)の別の化合物に転化すること;
ii)  保護基が存在する場合は保護基を取り除くこと; および
iii)  医薬用として許容しうる塩または生体内で加水分解可能なエステルを形成させること;
を含む方法が提供される。
【００６６】
当業者には周知のことであるが、プロセスc)は、Q1とQ2の一方、またはQ1とQ2の両方の環炭素が、スルファモイル、ハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN-(C1-4アルキル)スルファモイル、またはハロもしくはヒドロキシで置換されていてもよいN,N-ジ-(C1-4アルキル)スルファモイルから選択される1つの基で置換されている場合の式(I)の化合物を製造するのにも使用することができる。
【００６７】
Lは置き換え可能な基であって、Lに対する適切な意味は、例えばハロ基、スルホニルオキシ基、またはイオウ基(例えばクロロ、ブロモ、メタンスルホニルオキシ、トルエン-4-スルホニルオキシ、メシル、メチルチオ、およびメチルスルフィニル)である。
【００６８】
上記反応に対する具体的な反応条件は以下の通りである。
プロセスa)
i)  式(II)のピリミジンと式(III)の化合物は、所望により適切な酸(塩酸や硫酸等の無機酸、あるいは酢酸やギ酸等の有機酸)の存在下で反応させることができる。本反応は、適切な不活性溶媒もしくは不活性希釈剤〔例えば、ジクロロメタン(DCM)、アセトニトリル、ブタノール、テトラメチレンスルホン、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、またはN-メチルピロリジン-2-オン〕中にて、例えば0℃〜150℃の範囲で(便宜的には、還流温度または還流付近の温度で)行うのが好ましい; あるいは
ii)  式(II)のピリミジンと式(III)の化合物は、標準的なBuchwald条件下(例えば、"J. Am. Chem. Soc., 118, 7215"; "J. Am. Chem. Soc., 119, 8451", "J. Org. Chem., 62, 1568 and 6066")にて、例えば、酢酸パラジウムの存在下にて適切な溶媒(例えば、トルエン、ベンゼン、またはキシレン等の芳香族溶媒)中で、適切な塩基(例えば、炭酸セシウム等の無機塩基、またはカリウム-t-ブトキシド等の有機塩基)を使用して、適切なリガンド〔例えば、2,2'-ビス(ジフェニルホスフィノ)-1,1'-ビナフチル〕の存在下で、25〜80℃の範囲の温度で反応させることができる。
【００６９】
式(II)のピリミジンは、下記のスキームに従って製造することができる(スキーム中、Lは前記にて定義の置き換え可能な基である)。
【００７０】
【化２３】
0004913305.tif 000013
【００７１】
式(IIB)と(III)の化合物は市販されており、当業界に公知の方法によって製造される。
プロセスb)
i)  式(IV)のピリミジンと式(V)のアニリンは、適切な溶媒(例えば、アセトン等のケトン、エタノールやブタノール等のアルコール、トルエンやN-メチルピロリジン等の芳香族炭化水素)中にて、所望により適切な酸(例えば、上記の酸または適切なルイス酸)の存在下で、0℃〜還流温度の範囲(好ましくは還流温度)で反応させることができる; あるいは
ii)  式(IV)のピリミジンと式(V)のアニリンは、上記のような標準的なBuchwald条件下で反応させることができる。
【００７２】
式(IV)のピリミジンは、下記のスキームに従って製造される(スキーム中、Lは前記にて定義の置き換え可能な基である)。
【００７３】
【化２４】
0004913305.tif 000014
【００７４】
式(V)のアニリンは、市販されているか、あるいは当業界に公知の方法によって製造される。
式(IVA)のピリミジンは、市販されているか、あるいは例えば、Lが-OHである場合の式(IVA)の化合物(すなわちウラシル)とPOCl3とを反応させて、Lが-Clである場合の式(IVA)の化合物を得ることによって製造することができる。
【００７５】
プロセスc)
式(VI)の化合物と式(VII)のアミンは、塩基(たとえば、トリエチルアミン等の第三アミン)と触媒(例えばジメチルアミノピリジン)の存在下でカップリングさせることができる。反応のための適切な溶媒としては、アセトニトリル等のニトリル、およびジメチルホルムアミド等のアミドがある。反応は、0〜120℃の範囲の温度で行うのが適切である。
【００７６】
例えばLが塩素である場合の式(VI)の化合物は、下記のスキームに従って製造することができる(スキーム中、Pgは、後記のような適切なイオウ保護基である)。
【００７７】
【化２５】
0004913305.tif 000015
【００７８】
式(VII)のアミンと式(VIa)のアミンは、市販されているか、あるいは当業界に公知の方法によって製造される。
プロセスd)
式(IX)の化合物と式(VIII)のアミンは、上記プロセスc)に記載の条件下でカップリングさせることができる。
【００７９】
式(VIII)のアミンは、下記のスキームに従って製造することができる(スキーム中、Pgは、後記のような適切なアミノ保護基である)。
【００８０】
【化２６】
0004913305.tif 000016
【００８１】
式(IX)の化合物は、市販されているか、あるいは当業界に公知の方法によって製造される。
プロセスe)
式(VI)の化合物と式(X)のアミンは、上記プロセスc)に記載の条件下でカップリングさせることができる。
【００８２】
式(X)のアミンは、市販されているか、あるいは当業界に公知の方法によって製造される。
式(I)のある化合物の、式(I)の他の化合物への転化の例としては以下のようなものがある。
【００８３】
i)  Gが-NR2-である場合; 水素としてのR2から他のR2への転化は、例えば以下のように行われる(式中、Lは置き換え可能な基である):
【００８４】
【化２７】
0004913305.tif 000017
【００８５】
ii)  Gが-NR2-である場合; 置換側鎖としてのR2から他の置換側鎖としてのR2への転化は、例えば以下のように行われる〔式中、Msはメタンスルホニルであり、Nuは、式(I)において定義のR2に対する任意の置換基である置換基を導入する求核試剤である(ヒドロキシル基は、必ずしも図示のような末端炭素上に存在する必要はない)〕。
【００８６】
【化２８】
0004913305.tif 000018
【００８７】
iii)  式(Ia)のある側鎖から式(Ia)の別の側鎖への転化。
iv)  標準的な方法を使用しての、R1のある場合からR1の他の場合への転化(例えば、ヒドロキシとしてのR1からC1-4アルコキシへとしてのR1への転化)。
【００８８】
当業者には周知のことであるが、上記のプロセスc)、d)、およびe)に記載の側鎖(Ia)または(Ia')の形成、ならびに上記のi)とii)における側鎖R2の形成は、中間体に対しても行うことができる。
【００８９】
本発明の好ましいプロセスはプロセスb)である。
本発明の化合物における種々の環置換基は、標準的な芳香族置換反応によって導入することもできるし、あるいは上記プロセスの前もしくはすぐ後において従来の官能基修飾(functional group modifications)によって生成させることができ、こうしたことも本発明のプロセス態様中に含まれる。このような反応および変性法としては、例えば、芳香族置換反応による置換基の導入、置換基の還元、置換基のアルキル化、および置換基の酸化などがある。このような方法に対する試剤と反応条件は、化学業界において公知である。芳香族置換反応の特定の例としては、濃硝酸を使用するニトロ基の導入; フリーデル-クラフツ条件下にてハロゲン化アシルとルイス酸(例えば三塩化アルミニウム)を使用するアシル基の導入; フリーデル-クラフツ条件下にてハロゲン化アルキルとルイス酸(例えば三塩化アルミニウム)を使用するアルキル基の導入; およびハロ基の導入; などがある。官能基修飾の特定の例としては、例えば、ニッケル触媒を使用する接触水素化、あるいは塩酸存在下にて鉄を使用する加熱処理によるニトロ基からアミノ基への還元; およびアルキルチオからアルキルスルフィニルもしくはアルキルスルホニルへの酸化; などがある。
【００９０】
言うまでもないことであるが、本明細書に記載の反応の幾つかにおいては、化合物中に感受性の基が存在する場合はこれを保護することが必要であるか又は望ましい。保護処理が必要であるか又は望ましい場合、および保護処理のための適切な方法は、当業者には公知である。従来の保護基を標準的な仕方("T.W.Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991"を参照)に従って使用することができる。従って、反応物がアミノ基、カルボキシ基、またはヒドロキシ基等の基を含んでいる場合、本明細書に記載の幾つかの反応にて当該基を保護するのが望ましいことがある。
【００９１】
アミノ基またはアルキルアミノ基に対する適切な保護基は、例えば、アシル基(例えばアセチル等のアルカノイル基)、アルコキシカルボニル基(例えばメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、またはt-ブトキシカルボニル基)、アリールメトキシカルボニル基(例えばベンジルオキシカルボニル)、またはアロイル基(例えばベンゾイル)である。上記保護基に対する脱保護条件は、選択する保護基の種類に従って必然的に変わる。従って例えば、アルカノイル等のアシル基、アルコキシカルボニル基、またはアロイル基は、例えば適切な塩基(例えば、水酸化リチウムや水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物)による加水分解によって除去することができる。これとは別に、t-ブトキシカルボニル基等のアシル基は、例えば適切な酸(塩酸、硫酸、リン酸、またはトリフルオロ酢酸など)で処理することによって除去することができ、またベンジルオキシカルボニル基等のアリールメトキシカルボニル基は、例えば、触媒(炭素担持パラジウムなど)による水素化によって、あるいはルイス酸〔例えばボロントリス(トリフルオロアセテート)〕で処理することによって除去することができる。第一級アミノ基に対する代替の適切な保護基は、例えばフタロイル基であり、この基は、アルキルアミン(例えばジメチルアミノプロピルアミン)で、あるいはヒドラジンで処理することによって除去することができる。
【００９２】
ヒドロキシル基に対する適切な保護基の例としては、アシル基(例えば、アセチル等のアルカノイル基)、アロイル基(例えばベンゾイル)、またはアリールメチル基(例えばベンジル)などがある。上記保護基に対する脱保護条件は、選択する保護基の種類に従って必然的に変わる。従って例えば、アルカノイル等のアシル基またはアロイル基は、例えば適切な塩基(例えば、水酸化リチウムや水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物)による加水分解によって除去することができる。これとは別に、ベンジル基等のアリールメチル基は、例えば炭素担持パラジウム（palladium-on-carbon）等の触媒による水素化によって除去することができる。
【００９３】
チオ基に対する適切な保護基の例としては、アシル基(例えばアセチル等のアルカノイル基)、アロイル基(例えばベンゾイル)、またはアリールメチル基(例えばベンジル)などがある。上記保護基に対する脱保護条件は、選択する保護基の種類に従って必然的に変わる。従って例えば、アルカノイル等のアシル基またはアロイル基は、例えば適切な塩基(例えば、水酸化リチウムや水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物)による加水分解によって除去することができる。これとは別に、アセチル基やベンゾイル基は、例えばナトリウムやアンモニアによる開裂によって除去することができる。
【００９４】
カルボキシ基に対する適切な保護基の例としては、例えば水酸化ナトリウム等の塩基を使用する加水分解によって除去できるエステル形成基(an esterifying group)(メチル基やエチル基など)、例えば酸(トリフルオロ酢酸等の有機酸)を使用する処理によって除去できるt-ブチル基、または例えば炭素担持パラジウム等の触媒による水素化によって除去できるベンジル基などがある。
【００９５】
保護基は、当化学業界に公知の従来法を使用して、適切な合成段階において除去することができる。
本明細書に記載の中間体の多くは新規化合物であり(例えば、式IIとIVの化合物)、これらは本発明のさらなる特徴として提供されている。
【００９６】
アッセイ
前述したように、本発明にて定義のピリミジン誘導体は、抗細胞増殖活性(例えば、化合物のCDK阻害活性によるものと考えられる制癌活性)を有する。これらの特性は、例えば下記の方法を使用して評価することができる。
【００９７】
CDK4阻害活性
使用されている略語は以下の通りである。
HEPESはN-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-N'-(2-エタンスルホン酸)であり、DTTはジチオトレイトールであり、PMSFはフッ化フェニルメチルスルホニルである。
【００９８】
試験基質(GST-網膜芽細胞腫)への[γ-33-P]-アデノシン三リン酸の組み込みを測定するためのシンチレーション・プロキシミティ・アッセイ(Scintillation Proximity Assay)(SPA-アマシャムから入手)を使用して、96ウェルフォーマットにてインビトロキナーゼアッセイにおいて本発明の化合物を試験した。各ウェル中に試験しようとする化合物を入れ(DMSOと水で適切な濃度に希釈)、コントロールウェル中に、阻害剤コントロール（inhibitor control）としてのp16またはポジティブコントロール（positive control）としてのDMSOを入れた。
【００９９】
25μlのインキュベーション緩衝液中に希釈して得たCDK4/サイクリンD1酵素(量は酵素活性に依存する)の約0.5μlを各ウェルに加え、次いで20μlのGST-Rb/ATP/ATP33混合物(0.5μgのGST-Rbと0.2μMのATPと0.14μCiの[γ-33-P]-アデノシン三リン酸を含有)を加え、得られた混合物を穏やかに撹拌し、次いで室温で60分インキュベートした。
【０１００】
各ウェルに、0.8mg/ウェルの蛋白質A-PVTSPAビーズ(アマシャム)、20pM/ウェルの抗グルタチオントランスフェラーゼ、ウサギIgG〔モレキュラー・プローブズ(Molecular Probes)から入手〕61mMのEDTA、および50mMのHEPES(pH7.5, 0.05%のアジ化ナトリウムを含有)を含有する150μlの停止液を加えた。
【０１０１】
プレートをトップシール-Sプレートシーラー(Topseal-S plate sealer)でシールし、2時間放置し、次いで2500rpmにて1124xgで5分回転させた。ウェル1つ当たり30秒間トップカウント(Topcount)上でプレートを読み取った。
【０１０２】
酵素と基質との混合物を希釈するのに使用したインキュベーション緩衝液は、50mMのHEPES(pH7.5)、10mMのMnCl2、1mMのDTT、100μMのバナジウム酸ナトリウム（sodium vanadate）、100μMのNaF、10mMのグリセロリン酸ナトリウム、およびBSA(1mg/mlファイナル)を含有した。
【０１０３】
コントロールとして、p16の代わりに他の公知のCDK4阻害剤を使用することもできる。
試験基質
本アッセイでは、網膜芽細胞腫(Science 1987 Mar 13; 235(4794): 1394-1399; Lee W.H., Bookstein R., Hong F., Young L.J., Shew J.Y., Lee E.Y.)の一部だけを使用し、融合してGSTタグにした。網膜芽細胞腫アミノ酸379-928(網膜芽細胞腫プラスミドATCCpLRbRNLから得られる)のPCRを行い、この配列をpGEX2T融合ベクター(Smith D.B. and Johnson K.S. Gene 67, 31(1988); 誘導発現のためのtacプロモーター、任意のE.コリ(E.Coli)宿主において使用するための内部lac Iq遺伝子、およびトロンビン開裂のためのコーディング領域（coding region）を含有-ファルマシア・バイオテックから入手)にクローニングし、これを使用してアミノ酸792-928を増幅した。この配列を再びpGEX 2Tにクローニングした。
【０１０４】
このようにして得られた網膜芽細胞腫792-928を、標準的な誘導発現法を使用してE.コリ(E.Coli)(BL21(DE3)pLysS細胞)中に発現させ、次のように精製した。
E.コリ(E.Coli)ペーストを10ml/gのNETN緩衝液〔50mMのTris(pH7.5)、120mMのNaCl、1mMのEDTA、0.5容量%のNP-40、1mMのPMSF、1ug/mlのロイペプチン、1ug/mlのアプロチニン、および1ug/mlのペプスタチンを含有〕中に再懸濁し、ホモジェネート100ml当たり45秒で2回超音波処理した。遠心分離後、上澄み液を10mlのグルタチオン・セファロース・カラム(glutathione Sepharose column)(ファルマシア・バイオテック, 英国ハーツ(Herts))に装入し、NETN緩衝液で洗浄した。キナーゼ緩衝液〔50mMのHEPES(pH7.5), 10mMのMgCl2, 1mMのDTT, 1mMのPMSF, 1ug/mlのロイペプチン, 1ug/mlのアプロチニン、および1ug/mlのペプスタチンを含有〕で洗浄した後、蛋白質をキナーゼ緩衝液中にて50mMの還元グルタチオンで溶離した。GST-Rb(792-927)を含有するフラクションをプールし、キナーゼ緩衝液に対して一晩透析した。8〜16%のTris-グリシンゲル(ノベックス, 米国サンディエゴ)を使用して、最終の生成物をドデカ硫酸ナトリウム(SDS)PAGE(ポリアクリルアミドゲル)によって分析した。
【０１０５】
CDK4とサイクリンD1
CDK4とサイクリンD1を、MCF-7細胞株(ATCC番号:HTB22から入手, 胸部腺癌細胞株)由来のRNAから下記のようにクローニングした。MCF-7細胞からRNAを作製し、オリゴdTプライマーを使用して逆転写した。PCRを使用して各遺伝子の全コード配列を増幅した〔CDK4アミノ酸1-303; Ref. Cell 1992 Oct 16; 71(2): 323-334; Matsushime H., Ewen M.E., Stron D.K., Kato J.Y., Hans S.K., Roussel M.F., Sherr C.J. および サイクリン（Cyclin） D1 アミノ酸1-296; Ref. Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol., 1991; 56:93-97; Arnold A., Motokura T., Bloom T., Kronenburg, Ruderman J., Juppner H., Kim H.G.〕。
【０１０６】
配列決定の後、標準的な方法を使用してPCR生成物を昆虫発現ベクターpVL1393(インビトロゲン1995カタログ番号:V1392-20から入手)にクローニングした。次いで、標準的なウイルスバキュロゴールド共感染法（virus Baculogold co-infection technique）を使用して、PCR生成物を昆虫のSF21細胞系(Fall Army Wormの卵巣組織から得られるSpodoptera Frugiperda細胞-市販されている)中に二重に発現させた。
【０１０７】
下記の実施例には、サイクリンD1とCDK4のそれぞれのウイルスに関して二重感染MOI3を有するSF21細胞(TC100+10%FBS(TCS)+0.2%プルロニック(Pluronic)中)におけるサイクリンD1/CDK4の生成の詳細が説明されている。
【０１０８】
サイクリンD1/CDK4の生成例
ローラーボトル培養物（roller bottle culture）の中で2.33×106細胞/mlにまで増殖させたSF21細胞を使用して、10×500mlのローラーボトルに0.2×10E6細胞/mlを接種した。ローラーボトルをローラー・リグ(a roller rig)上にて28℃でインキュベートした。
【０１０９】
3日(72時間)後に細胞をカウントし、2つのボトルからの平均が1.86×10E6細胞/ml(99%生存)であることがわかった。次いで培養物を、二重ウイルスで各ウイルスに対してMOI3にて感染させた。
【０１１０】
10×500mlを、JS303サイクリンD1(ウイルス力価-9×10E7pfu/ml)とJS304CDK4((ウイルス力価-1×10E8pfu/ml)で感染させた。
サイクリンD1  (1.86×10E6×500×3)/(0.9×108) = 各500mlボトルに対して31mlのウイルス.
CDK4  (1.86×10E6×500×3)/(1×108) = 各500mlボトルに対して28mlのウイルス.
ウイスルを混合してから培養物に加え、培養物を28℃のローラー・リグに戻した。
【０１１１】
3日(72時間)のポスト感染の後、5リットルの培養物を取り入れた。取り入れた細胞の全カウント数は1.58×10E6細胞/ml(99%生存)であった。細胞を250mlロットにて、Heraeus Omnifuge2.0RS中で、4℃にて2500rpmで30分回転させた。上澄み液を廃棄した。約4×10E8細胞/ペレットの20ペレットをLN2中にてスナップ凍結し、CCRF低温室にて−80℃で貯蔵した。次いで、SF21細胞を溶解緩衝液〔50mMのHEPES(pH7.5)、10mMの塩化マグネシウム、1mMのDTT、10mMのグリセロリン酸塩、0.1mMのPMSF、0.1mMのフッ化ナトリウム、0.1mMのオルトバナジウム酸ナトリウム、5ug/mlのアプロチニン、5ug/mlのロイペプチン、および20ｗ／ｖ％のスクロースを含有〕中に再懸濁し、氷冷した脱イオン水を加えることによって、SF21細胞を低張的に溶解させた。遠心分離後、上澄み液をPorosHQ/M1.4/100アニオン交換カラム(PEバイオシステムズ、英国ハートフォード(Hertford))に装入した。CDK4とサイクリンD1を、375mMのNaClを溶解緩衝液に混合した溶液で共溶離し、適切な抗-CDK4抗体および抗-サイクリンD1抗体(サンタクルーズ・バイオテクノロジー（Santa Cruz Biotechnology）、米国カリフォルニア州)を使用して、それらの存在をウェスタンブロットによってチェックした。
【０１１２】
p16コントロール(Nature 366; 704-707; 1993; Serrano M, Hannon GJ, Beach D)
HeLa cDNA(ATCC CCL2から得られるHela細胞、頚部からのヒト上皮癌; Cancer Res. 12: 264, 1952)からp16(CDK4/サイクリンD1の天然の阻害剤)を増幅させ、5'ヒッツタグ(5' Hits tag)を有するpTB375NBSEにクローニングし、標準的な方法を使用して、BL21(DE3)pLysS細胞(プロメガ(Promega)から入手; Ref. Studier F.W. and Moffat B.A., J. Mol. Biol., 189, 113, 1986)に形質転換させた。1リットルの培養物を適切なODに増殖させ、IPTGを使用して一晩、p16の発現を誘発した。次いで、50mMのリン酸ナトリウム、0.5Mの塩化ナトリウム、PMSF、0.5μg/mlのロイペプチン、および0.5μg/mlのアプロチニンを含有する溶液中での超音波処理によって細胞を溶解した。本混合物をスピンダウンし、上澄み液をニッケルキレートビーズに加え、1.5時間混合した。リン酸ナトリウムとNaClを含んだ溶液(pH6.0)でビーズを洗浄し、200mMのイミダゾールを使用して、リン酸ナトリウムとNaClを含んだ溶液(pH7.4)でp16生成物を溶離した。
pTB NBSEは、pTB375 NBPEから下記のように構築した。
【０１１３】
pTB375
pTB375を生成させるために使用されるバックグラウンドベクターはpZEN0042(英国特許第2253852号を参照)であり、pAT153から誘導されるバックグラウンドにおいて、プラスミドRP4からのtetA/tetR誘発性のテトラサイクリン抵抗性配列と、プラスミドpKS492からのcer安定性配列(cer stability sequence)とを含有した。pTB375は、T7遺伝子10プロモーター、複数のクローニング部位、およびT7遺伝子10終止配列からなる発現カセットを加えることによって生成させた。さらに、バックグラウンドベクターからの転写リードスルーを少なくするように設計されたターミネーター配列を、発現カセットの上流に組み込んだ。
【０１１４】
pTB375NBPE
pTB375中に存在する特異なEcoRI制限酵素認識部位を取り除いた。制限酵素Ndel、BamHI、PstI、およびEcoRIに対する認識配列を含有する新たな複数クローニング部位を、pTB375中に存在する元のBamHI 部位を破壊して、Ndel部位とBamHI部位との間でpTB375中に導入した。
【０１１５】
pTB375NBSE
制限酵素に対する認識配列を含有する新たな複数クローニング部位(NdeI、BamHI、SmaI、およびEcoRI)を、NdeI部位とEcoRI部位との間にてpTB375NBPE中に導入した。これらの制限酵素認識部位を含有するオリゴヌクレオチドはさらに、NdeI部位内に存在する開始剤コドン(ATG)と同じリーディング・フレームにて、NdeI部位とBamHI部位との間に位置する6つのヒスチジンコドンを含有した。
【０１１６】
上記と類似の仕方によって、CDK2とCDK6の阻害が評価できるようなアッセイを確立することができる。CDK2(EMBL受入番号X62071)とサイクリンAもしくはサイクリンE(EMBL受入番号M73812を参照)とを一緒に使用することができ、このようなアッセイに対するさらなる詳細が、PCT国際公開番号WO99/21845およびこれに関連した“Biochemical & Biological Evaluation sections”に記載されている(これらの文献を参照により本明細書に含める)。
【０１１７】
CDK2とサイクリンEとを使用する場合、部分的な共精製(partial co-purification)は下記のように達成することができる:
Sf21細胞を溶解緩衝液〔50mMのTris(pH8.2)、10mMのMgCl2、1mMのDTT、10mMのグリセロリン酸塩、0.1mMのオルトバナジウム酸ナトリウム、0.1mMのNaF、1mMのPMSF、1ug/mlのロイペプチン、および1ug/mlのアプロチニンを含有〕中に再懸濁し、10mlのDounceホモジェナイザー中で2分間均質化する。遠心分離後、上澄み液をPorosHQ/M1.4/100アニオン交換カラム(PEバイオシステムズ、英国ハートフォード)に装入する。0〜1MのNaCl勾配の初期に、カラムの20容でCDK2とサイクリンEを共溶離させる(溶解緩衝液からプロテアーゼ阻害剤を除いて実施)。抗CDK2抗体と抗サイクリンE抗体(サンタクルーズ・バイオテクノロジー、米国カリフォルニア州)の両方を使用して、ウェスタンブロットによって共溶離をチェックした。
【０１１８】
式(I)の化合物の薬理学的性質は化学構造が変わるにつれて変化するが、一般には、上記のアッセイにおいて式(I)の化合物が示す活性は、250μM〜1nMの範囲のIC50濃度または用量で表わすことができる。
【０１１９】
上記インビトロアッセイの試験に従った、実施例23のCDK2阻害活性の測定によればIC50=0.347μMであった。
本発明の化合物のインビボ活性は、標準的な方法(例えば、細胞増殖の阻害を測定することによる方法、および細胞毒性を評価することによる方法)によって評価することができる。
【０１２０】
細胞増殖の阻害は、細胞をスルホローダミンB(Sulforhodamine B: SRB)〔蛋白質を染色し、従ってウェル中の蛋白質(すなわち細胞)の量を推定できる蛍光染料〕で染色することによって測定することができる〔“Boyd, M.R.(1989) Status of the NCI preclinical antitumour drug discovery screen. Prin. Prac Oncol 10:1-12”を参照〕。以下に、細胞増殖の阻害の測定について詳細に説明する。
【０１２１】
96ウェルプレートにおいて100μlの体積の適切な培地中にて細胞を培養した。培地は、MCF-7、SK-UT-1B、およびSK-UT-1用のダルベッコ変法イーグル培地であった。一晩、細胞を結合させ、次いで阻害剤化合物を種々の濃度(最大濃度はDMSO中1容量%)にて加えた。コントロールプレートのアッセイを行って、添加前の細胞に対する値を得た。細胞を37℃、5%CO2にて3日間インキュベートした。
【０１２２】
3日間の終了時にTCAをプレートに加えて、最終濃度を16容量%とした。プレートを4℃で1時間インキュベートし、上澄み液を取り除き、プレートを水道水で洗浄した。乾燥後、100μlのSRB染料(1%酢酸中0.4%SRB)を37℃にて30分で加えた。過剰のSRBを除去し、プレートを1%酢酸で洗浄した。蛋白質に結合したSRBを10mMのTris(pH7.5)に可溶化し、室温で30分振盪した。540nmにてODを読み取り、50%の増殖阻害を引き起こす阻害剤濃度を、阻害剤濃度対吸光度の半対数プロットから求めた。光学濃度を、実験のスタート時に細胞を培養したときの光学濃度未満に低下させた化合物の濃度から、毒性に関する値を得た。
【０１２３】
SRBアッセイで試験した場合の、本発明の化合物に対する典型的なIC50値は1mM〜1nMの範囲である。
本発明のさらなる態様によれば、式(I)のピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルを、前述のように医薬用として許容しうる希釈剤もしくはキャリヤーと関連して含んだ医薬用組成物が提供される。
【０１２４】
本発明の医薬用組成物は、経口投与に適した形態(例えば、錠剤やカプセル)であっても、静脈注射、皮下注射、筋内注射、血管注射、または点滴を含めた非経口注入に適した形態(例えば、無菌の溶液、懸濁液、またはエマルジョン)であっても、局所投与に適した形態(例えば、軟膏やクリーム)であっても、あるいは直腸投与に適した形態(例えば座剤)であってもよい。
【０１２５】
一般には、上記の組成物は、従来の賦形剤を使用して従来の方法で製造することができる。
ピリミジンは通常、温血動物に、動物の体表面積の1平方メートル当たり5〜5000mg(すなわち、約0.1〜100mg/kg)の範囲内の単位用量にて投与され、この用量が治療学的に有効な用量である。錠剤やカプセル等の単位剤形は通常、例えば1〜250mgの活性成分を含有する。1〜50mg/kgの範囲の日用量(daily dose)を使用するのが好ましい。しかしながら、日用量は、処置しようとする対象物、投与経路の種類、および処置しようとする病気の程度に応じて必然的に変わる。従って、最適の用量は、個々の患者に対して処置を施す医師によって決定される。
【０１２６】
本発明のさらなる態様によれば、ヒト等の温血動物に対して予防処置または治療処置を施す方法において使用するための、前に定義された通りの式（Ｉ）のピリミジン誘導体、またはそのピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルが提供される。
【０１２７】
本発明のピリミジン誘導体、または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルが有効な細胞周期阻害剤(抗細胞増殖剤)であること、そしてこの性質はCDK阻害特性によるものであると考えられること(理論的に関連付けられているわけではない)を、本発明者らは見出した。従って本発明の化合物は、CDK酵素のみによって、あるいは一部がCDK酵素によって媒介される疾患または病状の処置に対して有用であると考えられる。すなわち、本発明の化合物を使用して、こうした処置を必要とする温血動物に対しCDK阻害効果を生じさせることができる。従って本発明の化合物は、CDK酵素を阻害することを特徴とする、悪性細胞の増殖を処置するための方法をもたらす。すなわち、本発明の化合物を使用して、CDKの阻害のみによって、あるいは一部がCDKの阻害によって媒介される抗増殖効果を生じさせることができる。CDKは多くの一般的なヒト癌(例えば、白血病、乳癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、前立腺癌、膀胱癌、膵臓癌、および卵巣癌)に関与しているので、本発明のこのようなピリミジン誘導体は広範囲の抗癌特性を有すると考えられる。従って、本発明のピリミジン誘導体はこれらの癌に対して抗癌活性を有すると考えられる。さらに、本発明のピリミジン誘導体は、ある範囲の白血病、リンパ悪性腫瘍、および充実性腫瘍(例えば、肝臓、腎臓、前立腺、および膵臓等の組織における癌腫や肉腫)に対して活性を有すると考えられる。本発明の化合物は特に、例えば、結腸、胸部、前立腺、肺、および皮膚の原発性・再発性の充実性腫瘍の増殖を遅くすると考えられる。本発明の化合物、または前記化合物の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルはさらに、CDKと関連している原発性・再発性の充実性腫瘍(例えば、結腸、胸部、前立腺、肺、陰門、および皮膚の特定の腫瘍を含めて、特に増殖と広がりの上でCDKに大きく依存する腫瘍)の増殖を抑制すると考えられる。
【０１２８】
本発明のピリミジン誘導体はさらに、白血病、線維増殖性障害と分化性障害、乾癬、リウマチ様関節炎、カポジ肉腫、血管腫、急性ネフロパシーと慢性ネフロパシー、アテローム、アテローム性動脈硬化症、動脈再発狭窄症、自己免疫疾患、急性炎症と慢性炎症、骨の疾患、および網膜血管増殖を伴う眼の疾患を含めた広範囲の疾患状態において、他の細胞増殖疾患に対する活性を有すると考えられる。
【０１２９】
従って本発明のこの態様によれば、医薬として使用するための、式(I)のピリミジン誘導体または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステル; およびヒト等の温血動物において制癌性の細胞周期阻害(抗細胞増殖)効果を生じさせるのに使用するための医薬の製造における、前に定義された通りの式(I)のピリミジン誘導体または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルの使用; が提供される。細胞周期阻害効果は特に、CDK2、CDK4、および/またはCDK6(特にCDK2)を阻害することによって、S期またはG1-S期にて生じさせる。
【０１３０】
本発明のこの態様のさらなる特徴によれば、ヒト等の温血動物に有効量の上記ピリミジン誘導体を投与することを含む、処置を必要とする前記動物において制癌性の細胞周期阻害(抗細胞増殖)効果を生じさせる方法が提供される。阻害効果は特に、CDK2、CDK4、および/またはCDK6(特にCDK2)を阻害することによって、S期またはG1-S期にて生じさせる。
【０１３１】
前述したように、ある特定の細胞増殖疾患の治療的または予防的処置に対して必要とされる用量は、処置しようとする対象物、投与経路、および処置しようとする病気の程度に応じて必然的に変わる。単位用量は、例えば1〜100mg/kgの範囲であり、好ましくは1〜50mg/kgの範囲である。
【０１３２】
前述のCDK阻害活性は単独療法として施してもよいし、あるいは本発明の化合物のほかに、１種以上の他の物質および/または処置を含んでもよい。このような共同処置(conjoint treatment)は、処置のための個々の成分を同時的に、逐次的に、あるいは別々に投与することによって達成することができる。医療腫瘍学の分野では、癌に罹患した個々の患者を処置するのに、異なった形式の処置を組合わせて使用するのが通常のやり方である。医療腫瘍学では、前述の細胞周期阻害処置に加えての、このような共同処置の他の手段は、外科手術、放射線療法、あるいは化学療法であってよい。このような化学療法は、3つの主要な種類の治療剤を含む:
(i)  前述のメカニズムと同一の、または前述のメカニズムとは異なったメカニズムで作用する他の細胞周期阻害剤;
(ii)  抗エストロゲン(例えば、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン)、プロゲストゲン(例えば、酢酸メゲストロール)、アロマターゼ阻害剤(例えば、アナストロゾール、レトラゾール、ボラゾール、エグゼメスタン)、抗プロゲストゲン、抗アンドロゲン(例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロン)、LHRH作用薬とLHRH拮抗薬(例えば、酢酸ゴセレリンやリュープロリド(luprolide))、テストステロン5α-ジヒドロレダクターゼの阻害剤(例えばフィナステリド)、抗侵襲剤(例えば、マリマスタットのようなメタロプロテイナーゼ阻害剤、およびウロキナーゼ・プラスミノゲン・アクチベータ受容体機能の阻害剤)、および増殖因子機能の阻害剤(増殖因子としては、例えば、血小板から誘導される増殖因子や肝細胞増殖因子などがあり、このような阻害剤としては、増殖因子抗体、増殖因子受容体抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、およびセリン/トレオニンキナーゼ阻害剤などがある)等の細胞成長抑止剤; ならびに
(iii)  代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート等のアンチフォレート、5-フルオロウラシル等のフルオロピリミジン、プリン類縁体とアデノシン類縁体、シトシンアラビノシド); 抗腫瘍抗生物質(例えば、ドキソルビシンやダウノマイシンやエピルビシンやイダルビシン等のアントラサイクリン、マイトマイシン-C、ダクチノマイシン、ミトラマイシン); 白金誘導体(例えば、シスプラチンやカルボプラチン); アルキル化剤(例えば、ナイトロジェン・マスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イフォスファミド、ニトロソウレア、チオテパ); 細胞分裂抑制剤(例えば、ビンクリスチン等のビンカ・アルカロイド、タキソールやタキソテレ等のタキソイド); ならびにトポイソメラーゼ阻害剤(例えば、エトポシドやテニポシド等のエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン); 等の、医療腫瘍学において使用されるような抗増殖/抗腫瘍薬およびこれらの組合わせ物。
【０１３３】
本発明のこの態様によれば、式(I)のピリミジン誘導体または前記ピリミジン誘導体の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステルと、癌の共同的な処置のための前記の抗腫瘍物質とを含む医薬用物品が提供される。さらに、例えば上記のような共同的処置を使用する場合は、制吐剤を投与するのが有用である。
【０１３４】
式(I)の化合物およびそれらの医薬用として許容しうる塩は、治療薬として使用することのほかに、新たな治療薬の研究の一部としての、実験動物(例えば、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラット、およびマウス)に対して細胞周期活性に関する阻害剤の効果を評価するための、インビトロ・インビボ試験システムの開発と標準化における薬理学的ツールとしても有用である。
【０１３５】
上記の他の医薬用組成物、プロセス、方法、使用、および医薬製造上の特徴に対しては、本発明の化合物の他の実施態様および好ましい実施態様も当てはまる。
【０１３６】
以下に実施例(これによって本発明が限定されることはない)を挙げて本発明を説明するが、適切な場合には、当化学技術者に公知の標準的な方法、及びこれら実施例に記載の方法と類似の方法を使用することができ、また特に明記しない限り下記の通りであるとする:
(i)  蒸発除去は減圧でのロータリー・エバポレーションによって行い、最終処理手順は乾燥剤等の残留固体を除去した後に濾過により行った。
【０１３７】
(ii)  操作は、周囲温度にて(一般には18〜25℃の範囲で)、特に明記しない場合、あるいは当業者がそうするようにアルゴン等の活性雰囲気下で行った場合を除いて、空気中で行った。
【０１３８】
(iii)  E.Merk(ドイツ、ダルムシュタット)から得られるメルク・キーゼルゲル・シリカ(Merk Kieselgel silica)(Art.9385)またはメルク・リヒロプレプ(Merk Lichroprep)RP-18(Art.9303)逆相シリカを使用して、カラムクロマトグラフィー(フラッシュ法による)および中圧液体クロマトグラフィー(MPLC)を行った。
【０１３９】
(iv)  収率は単に例示のために記載してあり、必ずしも得られる最大値を表わしているわけではない。
(v)  融点は、メトラー(Mettler)SP62自動融点装置、油浴装置、またはコフラー(Koffler)ホットプレート装置を使用して測定した。
【０１４０】
(vi)  式(I)の最終生成物の構造は、一般には、核(通常はプロトン)磁気共鳴(NMR)スペクトル法および質量スペクトル法によって確認した。プロトン磁気共鳴の化学シフト値は、特に明記しない限り、300MHzの磁界強さにて作動するバリアン・ジェミニ(Varian Gemini)2000スペクトロメーターを使用して、重水素化DMSO-d6(特に明記しない限り)中にてδスケール(テトラメチルシランからのダウンフィールドppm(ppm downfield))により測定した。ピークの多重度は以下の通りである: s, 一重項; d, 二重項; t, 三重項; m, 多重項; br, ブロード。質量分析法(MS)は、VGプラットホームに対するエレクトロスプレー(electrospray)によって行った。
【０１４１】
(vii)  中間体は通常、完全には特性決定せず、薄層クロマトグラフィー(TLC)、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)、赤外線(IR)、MS、またはNMRによる分析によって純度を評価した。
【０１４２】
(viii)  本明細書のこれまでにあるいは以降に下記の略語が使用されることがある。
DMF  N,N-ジメチルホルムアミド;
NMP  N-メチルピロリジン-2-オン;
DMSO  ジメチルスルホキシド;
Rt  保持時間;
(ix)  システムA
カラム  4.6mm×10cmのHichrom RPB 5A
溶媒  A=95%水, 5%アセトニトリル+0.1%ギ酸  B=95%アセトニトリル, 5%水+0.1%ギ酸
実施時間  5〜95%Bの9.5分勾配で10分
波長  254nm、バンド幅10nm
質量検出器  プラットホームLC
【０１４３】
実施例1
2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-(2-シアノアニリノ)ピリミジン
2-クロロ-4-(2-シアノアニリノ)ピリミジン(250mg, 1.09ミリモル)をn-ブタノール(3ml)中に溶解し、スルファニルアミド(150mg, 0.87ミリモル)を加えた。得られた懸濁液を、全ての固体が溶解するまでメタノールで処理した。反応混合物を95℃で12時間加熱した後、周囲温度に冷却した。メタノール性アンモニアを使用して反応混合物を塩基性(pH9〜10)にし、シリカ上で溶媒を蒸発除去した(5ml)。残留物をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン中0〜15%の2.0Mメタノール性アンモニア溶液で溶離)により精製して固体生成物(256mg)を得た。
【０１４４】
【化２９】
0004913305.tif 000019
【０１４５】
実施例2〜11
適切な4-スルホニルアニリン中間体と2-クロロ-4-アニリノピリミジン中間体とを使用して、実施例1に記載の方法と類似の方法により下記の化合物を製造した。
【０１４６】
【化３０】
0004913305.tif 000020
【０１４７】
【化３１】
0004913305.tif 000021
【０１４８】
【化３２】
0004913305.tif 000022
【０１４９】
【化３３】
0004913305.tif 000023
【０１５０】
実施例13
2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-[2-フルオロ-5-メチル-N-(4,4,4-トリフルオロブチル)アニリノピリミジン
2-クロロ-4-(N-4,4,4-トリフルオロブチル-2-フルオロ-5-メチルアニリノ)ピリミジン(215mg, 0.62ミリモル)をn-ブタノール(2ml)中に溶解し、スルファニルアミド(85mg, 0.50ミリモル)を加えた。得られた懸濁液を、固体が全て溶解するまでメタノールで処理した。反応混合物を95℃で12時間加熱した後、周囲温度に冷却した。沈殿した固体を濾過によって捕集し、少量のメタノールで洗浄し、減圧乾燥して白色固体(132mg)を得た。
【０１５１】
【化３４】
0004913305.tif 000024
【０１５２】
実施例14〜22
適切な4-スルホニルアニリン中間体と2-クロロ-4-アミノピリミジン中間体とを使用して、実施例13に記載の方法と類似の方法により下記の化合物を製造した。
【０１５３】
【化３５】
0004913305.tif 000025
【０１５４】
【化３６】
0004913305.tif 000026
【０１５５】
【化３７】
0004913305.tif 000027
【０１５６】
実施例23
2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-(2-シアノアニリノ)-5-クロロピリミジン
2,5-ジクロロ-4-(2-シアノアニリノ)ピリミジン(265mg, 1.00ミリモル)をn-ブタノール(1ml)中に溶解し、スルファニルアミド(207mg, 1.20ミリモル)を加えた。得られた懸濁液を2時間加熱還流し、周囲温度に冷却した。メタノール性アンモニアを使用して反応混合物を塩基性にし、シリカ上で溶媒を蒸発除去した(5ml)。残留物をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン中0〜15%の2.0Mメタノール性アンモニア溶液で溶離)により精製して固体生成物(426mg)を得た。
【０１５７】
【化３８】
0004913305.tif 000028
【０１５８】
実施例24〜28
適切な4-スルホニルアニリンを使用して、実施例23に記載の方法と類似の方法により下記の化合物を製造した。
【０１５９】
【化３９】
0004913305.tif 000029
【０１６０】
【化４０】
0004913305.tif 000030
【０１６１】
【化４１】
0004913305.tif 000031
【０１６２】
実施例29
2,4-ジ-(4-スルファモイルアニリノ)-5-ブロモピリミジン
5-ブロモ-2,4-ジクロロピリミジン(228mg, 1.0ミリモル)、4-スルファニルアミド(180mg, 1.05ミリモル)、およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(174μl, 1.0ミリモル)をn-ブタノール(30ml)中に溶解して得た溶液を100℃で16時間加熱した。溶液からガム状物が生成した。ジエチルエーテル(20ml)を加えてガム状物を固化させ、沈殿を起こさせた。固体を濾過によって捕集し、高温のメタノールと共にすりつぶして生成物(55mg)を白色固体として得た。
【０１６３】
【化４２】
0004913305.tif 000032
【０１６４】
実施例30
2-(3-スルファモイルアニリノ)-4-[(2-モルホリノ)アニリノ]ピリミジン
本実施例では、溶液の付加をザイメイト・マスター・ラボラトリー・ステーション(Zymate Master Laboratory Station)によって行い、ザイメイトXPロボットを使用して操作し、ステムRS5000リアクト・ステーション(Stem RS5000 Reacto-Station)中で撹拌した。化合物の構造は、システムAを使用して、マイクロマス・オープンリンクス・システム(Micromass OpenLynx system)に従ってLCMSにより確認した。
【０１６５】
3-アミノベンゼンスルホンアミド(172mg, 1.0ミリモル)を1,4-ジオキサン(8ml)中に溶解して得た溶液に、2-クロロ-4-[(2-モルホリノ)アニリノ]ピリミジン(290mg, 1ミリモル)と塩化水素(1,4-ジオキサン中4.0M溶液, 50μl)を加えた。反応混合物を100℃で60時間加熱した。反応混合物を冷却し、得られた固体を濾過し、1,4-ジオキサンで洗浄し、48℃にて減圧乾燥して淡褐色固体(358mg)を得た。Rt 5.88; MS(M+H)+: 427
【０１６６】
実施例31
2-(4-スルファモイルアニリノ)-4-(4-メトキシフェノキシ)-5-クロロピリミジン
2,5-ジクロロ-4-(4-メトキシフェノキシ)ピリミジン(方法25; 0.65g, 2.4ミリモル)とスルファニルアミド(0.38g, 2.2ミリモル)をNMP(1.5ml)中に溶解して得た溶液を100℃で4時間加熱した。反応混合物を水と酢酸エチルとに分配した。有機溶液から溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製(ジクロロメタン中0.1%ギ酸および4%メタノールで溶離)して固体生成物(0.17g, 19%)を得た。
【０１６７】
【化４３】
0004913305.tif 000033
【０１６８】
出発物質の製造
上記実施例に対する出発物質は、市販されているか、あるいは既知の化合物から標準的な方法によって容易に製造することができる。上記の反応において使用される出発物質の幾つかに対し、それらの製造法を以下に説明する。
【０１６９】
方法1
2-クロロ-4-(2-フルオロ-5-メチル-(N-4,4,4-トリフルオロブチル)アニリノ)ピリミジン
2-クロロ-4-(2-フルオロ-5-メチルアニリノ)ピリミジン(750mg, 3.16ミリモル)、4,4,4-トリフルオロ-1-ブロモブタン(725mg, 3.80ミリモル)、および炭酸カリウム(525mg, 3.80ミリモル)をN,N-ジメチルホルムアミド(3ml)中に溶解した。反応混合物を室温で12時間撹拌し、シリカ上で溶媒を蒸発除去し(5ml)、カラムクロマトグラフィーにより精製し〔酢酸エチル(0〜40%):イソヘキサンで溶離〕、そして溶媒を蒸発除去して固体(976mg)を得た。
【０１７０】
【化４４】
0004913305.tif 000034
【０１７１】
方法2〜10
適切な2-クロロ-4-アニリノピリミジン及び関連するアルキル化剤を使用して、方法1に記載の方法と類似の方法によって下記の化合物を製造した。
【０１７２】
【化４５】
0004913305.tif 000035
【０１７３】
【化４６】
0004913305.tif 000036
【０１７４】
方法11
2-クロロ-4-(2-シアノアニリノ)ピリミジン
2,4-ジクロロピリミジン(3g, 0.02モル)、アントラニロニトリル(2.38g, 0.02モル)、および濃塩酸(触媒量)を水(5ml)に加えた。反応混合物を40℃に加温して出発物質を溶解し、得られた溶液を室温で12時間撹拌した。生成した固体沈殿物を濾過により捕集し、減圧乾燥して淡黄色固体(5.14g)を得た。
【０１７５】
【化４７】
0004913305.tif 000037
【０１７６】
方法12
2-クロロ-4-(4-ブロモアニリノ)ピリミジン
2,4-ジクロロピリミジン(3g, 20.14ミリモル)、4-ブロモアニリン(3.46g, 20.14ミリモル)、およびジイソプロピルエチルアミン(3.86ml, 22.15ミリモル)をn-ブタノール(5ml)中に溶解した。反応混合物を120℃で12時間加熱した後、冷却し、シリカ上で溶媒を蒸発除去した(5ml)。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製〔酢酸エチル(50%):イソヘキサンで溶離〕し、溶媒を蒸発除去して固体(4.77g)を得た。
【０１７７】
【化４８】
0004913305.tif 000038
【０１７８】
方法13〜17
適切な2,4-ジクロロピリミジン及び関連するアミンを使用して、方法12に記載の方法と類似の方法によって下記の化合物を製造した。
【０１７９】
【化４９】
0004913305.tif 000039
【０１８０】
【化５０】
0004913305.tif 000040
【０１８１】
方法18
4-[2-(N,N-ジエチルアミノ)エチルアミノ]ベンゼンスルホンアミド
“Therapie, 1965, 20(4), p.917-29”に記載の方法に従って上記の出発物質を製造した。
【０１８２】
方法19
2,4,5-トリクロロピリミジン
5-クロロウラシル(10.0g, 68.5ミリモル)をオキシ塩化リン(60ml)中に溶解し、五塩化リン(16.0g, 77ミリモル)を加えた。反応混合物を110℃で16時間還流した後、20℃に自然冷却した。次いで激しく撹拌しながら、反応混合物を25℃にて水(200ml)中に徐々に且つ慎重に注ぎ込んだ。90分撹拌してから、EtOAc(250ml)を加えた。有機層を分離し、水性層を再度EtOAc(250ml)中に抽出した。有機層を合わせ、重炭酸ナトリウム水溶液(200ml)およびブライン(200ml)で洗浄し、次いで溶媒を蒸発除去して黄色固体を得た。この粗製物質をカラムクロマトグラフィーにより精製(ジクロロメタンで溶離)して、生成物を黄色液体(6.37g, 51%)として得た。NMR(CDCl3): 8.62(s,1H); MS(M+): 182, 184, 186
【０１８３】
方法20
4-[2-ヒドロキシ-3-(ジメチルアミノ)プロポキシ]アニリン塩酸塩
4-[2-ヒドロキシ-3-(ジメチルアミノ)プロポキシ]ニトロベンゼン(方法21, 3.75g)をエタノール(40ml)中に溶解して得た溶液を、炭素担持10%パラジウム(0.4g)により一晩接触水素化した。触媒を、珪藻土を通して濾過することにより除去し、濾液を濃縮した。少量のイソプロパノールを含有するジエチルエーテル中に残留物を溶解し、塩化水素含有エーテル(ethereal hydrogen chloride)(1M, 16ml)を加えた。ジエチルエーテルを蒸発除去し、固体残留物をイソプロパノール中に懸濁した。本混合物をスチーム浴上で数分加熱してから、自然冷却した。不溶性の固体を濾過によって捕集し、イソプロパノールとエーテルで洗浄し、乾燥して生成物(3.04g, 72.4%)を得た。
【０１８４】
【化５１】
0004913305.tif 000041
【０１８５】
方法21
4-[2-ヒドロキシ-3-(ジメチルアミノ)プロポキシ]ニトロベンゼン
4-(2,3-エポキシプロポキシ)ニトロベンゼン(“Synthetic Communications, 1994, 24, 833”に記載された通りに得た; 4.3g)をメタノール(30ml)とDMF(10ml)中に溶解した。ジメチルアミンのメタノール溶液(2M, 17ml)を加え、本混合物を一晩撹拌した。揮発性物質を蒸発除去し、残留物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液(100ml)と酢酸エチル(100ml)とに分配した。有機層を分離し、塩化ナトリウム飽和水溶液(2×100ml)で洗浄し、MgSO4で乾燥した。濃縮により生成物が油状物として得られ、この油状物は高い減圧下にて徐々に結晶化した。(4.79g, 89.9%)。
【０１８６】
【化５２】
0004913305.tif 000042
【０１８７】
方法22
4-[2-[(N-メチル-N-フェニル)アミノ]エチルスルホニル]アニリン
4-[2-[(N-メチル-N-フェニル)アミノ]エチルスルホニル]ニトロベンゼン(方法23; 10g, 31.25ミリモル)をエタノール(100ml)中に溶解して得た溶液に、5mlの水、1mlの濃塩酸、および25gの鉄ピンダスト(iron pin dust)を加えた。反応混合物を3時間加熱還流した。反応混合物を冷却し、苛性アルカリを加えて塩基性にし、濾過した。鉄残留物をさらに100mlの沸騰エタノールで抽出し、再び濾過した。濾液を合わせて、これに水(400ml)を加え、生成物を濾過によって捕集した。この粗製物質をアセトン(80ml)中に溶解し、活性炭で処理し、濾過し、水を加えることによって沈殿させた。生成物を濾過により捕集した(6g)。融点158〜159℃。
【０１８８】
【化５３】
0004913305.tif 000043
【０１８９】
方法23
4-[2-[(N-メチル-N-フェニル)アミノ]エチルスルホニル]ニトロベンゼン
1-[(2-クロロエチル)スルホニル]-4-ニトロベンゼン(米国特許第5,716,936号; 5g, 22.8ミリモル)を水(50ml)中に溶解して得た溶液に、酢酸ナトリウム(3g, 36.6ミリモル)とN-メチルアニリン(3.3g, 30.8ミリモル)を加えた。反応混合物を1時間加熱還流した。短時間冷却した後、高温の水性上澄み液を廃棄した。残留油状物を冷水で洗浄した。得られた固体を濾過により捕集し、自然乾燥した。この粗製物資をベンゼン/石油エーテルから再結晶して赤色結晶(5.3g)を得た。融点111〜113℃。この物質を、さらなる特性決定(characterisation)を行わずに使用した。
【０１９０】
方法24
4-[(2-[N-モルホリノ]エチル)スルホニル]アニリン
N-メチルアニリンの代わりにモルホリンを使用して、上記の方法22(パートA〜C)において使用したのと類似の方法に従って標記化合物を製造することができる。
【０１９１】
【化５４】
0004913305.tif 000044
【０１９２】
方法25
2,5-ジクロロ-4-(4-メトキシフェノキシ)ピリミジン
2,4,5-トリクロロピリミジン(1.0g, 5.4ミリモル)と4-メトキシフェノール(0.64g, 5.2ミリモル)をNMP(2.5ml)中に溶解して得た溶液を無水炭酸カリウム(1.65g, 12ミリモル)で処理した。反応混合物を周囲温度で18時間撹拌した。反応混合物を水と酢酸エチルとに分配した。有機層から溶媒を蒸発除去し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製(イソヘキサン中10%酢酸エチルで溶離)して固体生成物(1.33g, 90%)を得た。
【０１９３】
【化５５】
0004913305.tif 000045
【０１９４】
実施例32
ヒトに対して治療用または予防用として使用するための、式(I)の化合物または前記化合物の医薬用として許容しうる塩もしくは生体内で加水分解可能なエステル(以後化合物Xと呼ぶ)を含有する代表的な医薬剤形を以下に記す。
【０１９５】
【化５６】
0004913305.tif 000046
【０１９６】
【化５７】
0004913305.tif 000047
【０１９７】
【化５８】
0004913305.tif 000048
【０１９８】
【化５９】
0004913305.tif 000049
【０１９９】
【化６０】
0004913305.tif 000050
【０２００】
【化６１】
0004913305.tif 000051
【０２０１】
【化６２】
0004913305.tif 000052
【０２０２】
注意
上記の製剤は、医薬業界に公知の従来法によって得ることができる。錠剤(a)〜(c)は、例えば酢酸フタル酸セルロースの被膜を得るべく、従来の手段によって腸溶コーティングすることができる。