(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療に有効な量の抗痙攣剤、１−５個の炭素を含む脂肪族アルコール３０−６０容量％とプロピレングリコール、ポリエチレングリコール２００、ポリエチレングリコール３００及びポリエチレングリコール４００、及びポリエチレングリコール６００からなる群からより選択されるグリコール３０−６０容量％と水１０容量％とを含有する水性媒体、ならびに前記水性媒体に対しグリココレートナトリウム塩、タウロコレートナトリウム塩、およびリソホスファチジルコリンから選択される生物学的活性剤１％ｗ／ｖを含む吸収速度制御方式の鼻粘膜投与用薬学的組成物であって、
前記抗痙攣剤が、ジアゼパム、クロナゼパム、および以下の式で表される（Ｓ）−２−カルバモイロキシル−１−ｏ−クロロフェニルエタノールから選択される吸収速度制御方式の鼻粘膜投与用薬学的組成物。
【化１】
0004951723.tif 000013
【請求項２】
前記抗痙攣剤が（Ｓ）−２−カルバモイロキシル−１−ｏ−クロロフェニルエタノールであり、前記水性媒体が前記脂肪族アルコール３０容量％と前記グリコール６０容量％と水１０容量％とを含有する、請求項１の組成物。
【請求項３】
前記抗痙攣剤がジアゼパムであり、前記水性媒体が前記脂肪族アルコール６０容量％と前記グリコール３０容量％と水１０容量％とを含有する、請求項１の組成物。
【請求項４】
前記抗痙攣剤がクロナゼパムであり、前記水性媒体が前記脂肪族アルコール３０容量％と前記グリコール６０容量％と水１０容量％とを含有する、請求項１の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、生物学的に活性な薬剤の粘膜を介した(transmucosal)輸送のための薬学的組成物を目的とする。より詳しくは、本発明は、脂肪族アルコール、グリコール、水、及びそれらの胆汁塩又はレシチンのような生物学的活性剤との組み合わせを含む薬学的に許容され得る共溶媒(co-solvent)系を含む薬剤を共投与(coadministration)することによって、抗痙攣剤の粘膜を介した浸透及び吸収の速度及び量(extent)を調節及び促進するための新規な方法に関する。さらにより詳しくは、本発明は、迅速かつ便利な投与方法において、発作重積状態(status epilepticus)及び発熱性発作の緊急な処置に有用であり得る、患者に許容され得る経鼻的抗痙攣剤輸送系を提供するための、薬学的組成物に関する。
【０００２】
発明の背景
発作重積状態は、死亡率が３−３５％である、神経学的に危険な状態である。治療の主な目的は、病気を伴う発作(pathological seizure activity)の迅速な処置であり、発作重積状態の症状の出現(episode)を治療していない期間が長くなればなるほど、制御することが困難になり、永久的な脳損傷の危険性が増す。従って、適切な薬学処方を含む適当な投与量での、効果的な薬剤による迅速な治療、並びに低換気症候群及び低血圧への注意を含む、明確な計画が、患者の治療に不可欠である。
【０００３】
現在のいくつかの薬剤投与計画は、発作重積状態の治療に適用され得ることが明らかになっている。ジアゼパム(Diazepam)及びロラゼパム(lorazepam)は、この目的のために最も広く使用されているベンゾジアゼピン(benzodiazepines)である。抗痙攣剤の静脈内投与は、癲癇性痙攣を抑制するための最も迅速な方法である。しかし、例えば、殺菌器具や熟練者(skilled personnel)を必要とすること等の技術的な困難性により、及び血栓静脈炎の進行の可能性により、静脈内投与が、不便で、かつ時間がかかる(delaying)場合には、他の投与経路が非常に好ましいこともある。また、静脈内投薬は、低血圧、心臓の律動不整(cardiac dysrhythmia)、又は中枢神経系の機能低下と関連することもある。このことに関連して、モーレナール(Moolenaar)[モーレナール(Moolenaar)ら、Int. J. Pharm.、5：127-137(1986)]は、筋肉内注射、経口錠剤、及び直腸溶液のようないくつかの他の経路によって、ジアゼパムをヒトに投与しようと試みた。直腸投与のみが、かなり(fairly)迅速な吸収をもたらすことが明らかになったので、IV注射の代替経路と考えられ得る。しかし、直腸経路は、特に、救急治療(emergency treatment)では、非常に不便な薬剤投与方法である。バーグハード(Burghardt)の米国特許第4,863,720号には、舌下噴霧し得る製剤(pharmaceutical preparation)が開示されており、その製剤において、活性薬剤は、最適には、ポリエチレングリコール(PEG)を含み、かつエタノール、脂肪酸のジ−及び／又はトリグリセリド、並びに薬学的に適用可能な圧縮不活性ガスを必要とするベンゾジアゼピンであり得る。
【０００４】
より最近には、鼻の粘膜は、多くの医薬物質の治療効果を、実際の投与経路にもたらすと考えられている。経鼻(Intranasal)投与は、必要に応じて、全身的又は局部的効果を得るために、薬剤を迅速かつ簡単に投与し得るという利点を有する。しかし、経鼻薬剤投与に関する主な問題は、殆どの薬剤分子が、鼻粘膜を通ると、ゆっくりと、しかもわずかしか拡散しないため、簡単な経鼻投与では、所望量の治療薬を得ることができないことである。経鼻投与に関する更なる制約は、投与量を少なくする必要があることである；鼻孔当たり約１５０μｌより多くの投与は、一般に不可能である；それ以上であると、製剤が咽頭へ排出され、飲み込まれてしまう。従って、薬剤の溶解性が高く、他方では、鼻の粘膜を刺激しない溶媒系が強く望まれている。化学的アジュバント(adjuvant)又は浸透性向上剤(permeation enhancer)の共投与によって、薬剤の経鼻吸収が増加され得る。例えば、ラウ(Lau)及びスラットリー(Slattery) [ラウ(Lau)ら、Int. J. Pharm.、54:171-174(1989)]は、ジアゼパムやロラゼパムのようなベンゾジアゼピンを、それら薬剤を様々な溶媒；トリアセチン、ジメチルスルホキシド、ＰＥＧ４００、クレモフォア(Cremophor)ＥＬ、リパル(Lipal)−９−ＬＡ、イソプロピルアジペート(isopropyl adipate)、及びアゾン(Azone)、に溶解することによって投与しようと試みた。それら溶媒の多くは、ジアゼパム及びロラゼパムを、所望の濃度で溶解したが、それらは、鼻へ投与する場合に使用するには刺激が強すぎた。クレモフォア(Cremophor)ＥＬは、鼻の粘膜組織への刺激が最も少ないことがわかったが、ヒトにおけるこの媒体(vehicle)の使用において、鼻の吸収はかなり遅く(Tmax≒1.4時間)、最高濃度は、IV投与後に観察されるものと比べて低かった。米国特許第4,950,664号において、ラグビー（Rugby）は、薬学的に適用可能な鼻用担体(nasal carrier)におけるベンゾジアゼピン睡眠薬の経鼻投与を記載した。担体は、食塩水溶液、アルコール、グリコール、グリコールエーテル又はそれらの混合物であり得る。イヌにおける薬学動力学(pharmacokinetic)の研究の結果から、経鼻投与後では、トリアゾラム(triazolam)の場合に最大血漿濃度に達する時間が１８分であったが、一方では５分以内の効果的な治療が、興味深いゴールであると考えられる。ベックガード(Bechgaard)及びホジョクツガー(Hjortkjer)[ベックガード(Bechgaard)ら、J. Pharm. Pharmacol.、49：747-750(1997)]は、グリコフロール(glycofurol)やテトラエチレングリコールのような純粋な有機溶媒の使用、及びジアゼパムの鼻での輸送(nasal delivery)のための担体としての、それらの組み合わせを記載した。実験した最も有望な(promising)担体系の場合、経鼻投与後の最初の３０分間に測定した絶対的な(absolute)生物学的利用能は、４９−６２％であった。PCT WO 95/31217において、ドゥメックス(Dumex)は、ベンゾジアゼピンを含む生物学的に活性な化合物の経鼻投与のための、トコフェロール及びその誘導体に基づく薬学的エマルジョン調製物の使用を記載した。
【０００５】
発明の概要
本発明は、媒体によって調節して(vehicle modulated)、ヒト及び動物の粘膜に抗痙攣剤を投与する新規な方法である。媒体系は、脂肪族アルコール、又はグリコール、及びそれらの胆汁塩又はレシチンのような生物学的活性剤との組み合わせを含む、水性の薬学的担体である。
【０００６】
本発明の目的は、抗痙攣剤の経鼻浸透及び吸収を向上させ得る薬学的に適用可能な担体系を提供することである。薬学的組成物において使用される成分は、好ましくは（一般に安全であると認められている）ＧＲＡＳ材料のものであるので、関連する重大な毒性の問題はない。本発明のもう１つの目的は、好ましくない(adverse)副作用を回避又は低減しながら、最適な治療効果を得るように適切に調整された速度で、抗痙攣剤の経鼻輸送を調節する方法を提供することである。そのような組成物は、発作重積状態及び発熱性発作の緊急(acute)治療における、薬剤の経鼻投与に特に適している。
【０００７】
図面の簡単な説明
図１は、本発明のジアゼパム調製物のインビトロの経鼻浸透への、媒体の効果を示すグラフである。
図２は、本発明の媒体からのジアゼパムのインビトロの経鼻浸透への、薬剤濃度値の効果を示すグラフである。
図３は、本発明の媒体からのジアゼパムのインビトロの経鼻浸透への、グリココレートナトリウム塩(SGC)の影響を示すグラフである。
図４は、本発明による調製物の静脈内投与(IV)及び経鼻投与後のジアゼパムの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（１回の投与）。
図５は、本発明による調製物の静脈内及び経鼻投与後のジアゼパムの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（複数回の投与）。
図６は、本発明の調製物における、プロピレングリコール／エタノール容量比の関数としての、調製物の経鼻投与後のジアゼパムの平均結晶濃度−時間プロファイルを示すグラフである。
図７は、本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後のクロナゼパムの平均血漿濃度プロファイルを示すグラフである。
図８は、投与強度の関数としての、本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後の（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである。
図９は、本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後の（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（１回及び複数回の投与）
【０００８】
発明の詳細な説明
本発明によれば、１つの脂肪族アルコール、１つのグリコール及び生物学的活性剤を含む、特定の水性共溶媒系が、抗痙攣剤の経鼻輸送の速度の調節及び向上をもたらす。本発明のアルコールは、Ｃ1からＣ5の脂肪族アルコールから選択される；グリコールは、プロピレングリコール(PG)、ポリエチレングリコール(PEG)２００、ＰＥＧ３００及びＰＥＧ４００、及びＰＥＧ６００から選択される；生物学的活性剤は、コレートナトリウム塩（sodium cholate）、デオキシコレートナトリウム塩（sodium deoxycholate）、タウロコレートナトリウム塩（sodium taurocholate）、グリココレートナトリウム塩（sodium glycocholate）及びウルソデオキシコレートナトリウム塩（sodium ursodeoxycholate）のような胆汁塩、又はリソホスファチジルコリン（lysophosphatidylcholines）、ホスファチジルコリン（phosphotidylcholines）、ホスファチジルセリン（phosphatidylserines）、ホスファチジルイノシトール（phosphatidylinositols）、ホスファチジルエタノールアミン（phosphatidylethanolamines）及びホスファチジルグリセロール（phosphatidylglycerols）のようなレシチンから選択される。上記の組成物は、ヒト及び動物の粘膜に適用され得る抗痙攣剤を含む医薬品(medical preparations)のために使用され得る。より具体的には、これら組成物は、ジアゼパム(diazepam)、クロナゼパム(clonazepam)、及びロラゼパム(lorazepam)のようなベンゾジアゼピン、並びに、以下の式で表される、モノカルバメート系の新たな抗痙攣化合物、（Ｓ）−２−カルバモイロキシル−１−ｏ−クロロフェニルエタノールを含み、かつ溶液、懸濁液、ゲル、又は他の有用な経鼻的処方での経鼻投与に用いられるものである。
【化２】
0004951723.tif 000002
これらの経鼻組成物は、何らかの既知の治療目的のために使用することができるが、そのためのものとしては、フェニトイン類(phenytoins)（フェニトイン、メフェニトイン(mephenytoin)及びエトトイン(ethotoin)）、バルビツレート類(barbiturates)（フェノバルビタル((Phenobarbital)、メフォバルビタル(mephobarbital)、及びプリミドン(primidone))、イミノスチルベン類（iminostilbenes）(カルバマゼピン(carbamazepine))、スクシニミド類（succinimides）（エトスクシミド(ethosuximide)）、バルプロ酸（valproic acid）、オキサゾリジネジオン類（oxazolidinediones）（トリメタジオン (trimethadione)）、及び他の抗発作剤（ガバペンチン(gabapentin)、ラモトリジン(lamotrigine)、アセタゾルアミド(acetazolamide)、フェルバメート(felbamate)、及びγ−ビニルＧＡＢＡを含む、このような抗痙攣剤が知られている。抗痙攣性の経鼻製剤の利用は、投与を非常に容易にする。腸管外(parenteral)投与と比べて、例えば、簡単な噴霧器、スポイト(dropper)、又はネブライザー(nebulizer)は、特に癲癇の急性痙攣性発作の症状の救急治療のために、迅速かつ便利に薬剤を輸送するには十分であろう。臨床的観点から、経鼻投与は、抗痙攣効果の持続時間を長くすることもある。本発明により、媒体中の脂肪族アルコール及びグリコールの割合を変化させ、かつ本発明の調製物を１回の投薬 (single-dose)及び／又は数回の投薬(multiple-dose)で投与することにより、治療効果を、開始、強度、及び持続時間の点で、より効率的かつ正確に調節することができる。本発明は、モデル化合物としての抗痙攣剤に関して説明されているが、ヒト及び動物の粘膜へ適用され得るその他の生物学的に活性な薬剤にも、本発明が適用され得ることが理解される。
本発明は、本発明を実施する具体的な態様を説明する以下の実施例によって更に説明されるが、添付の請求項の範囲を限定するものではない。
【０００９】
【実施例】
実施例１
インビトロの鼻膜浸透の研究
このインビトロの実験で使用した鼻の粘膜は、ニュージーランドホワイトラビット(New Zealand White rabbits)(2.5-3.0kg)から得た。ウサギは、フェノバルビタルのＩＶ注射によって殺された。手術用はさみ及び骨切断用鋸を用いて、鼻の隔膜を、骨ブロックから注意深く除去した。その後、鼻の粘膜の２片を、膜表面の中央に触れないで、鼻の隔膜から注意深く剥ぎ、通常の食塩溶液ですすぎ洗いした。ガラス拡散セル装置の２つのハーフセル(half cells)の間に粘膜を置いた。鼻の膜の露出面積は、約０．６４ｃｍ2であった。試験溶液又は懸濁液(3.5ml)を、ドナー(donor)区画中の膜の粘膜側へ導入し、一方、３．５ｍｌの１０％エタノール、４０％プロピレングリコール、及び５０％のｐＨ７．４の等張リン塩緩衝溶液を、レセプター(receptor)区画へ添加した。拡散系全体を、実験を通して３７℃に維持した。所定の時間間隔で、１００μｌのレセプター溶液を、分析のために取り出し、かつ容量を一定に保つために、同量の新たなレセプター媒体を補充した。時間の関数としての、浸透した薬剤の累積量(cumulative amount)のプロットから得られた直線の傾きから、定常状態の流速(flux value)を決定した。各実験は、少なくとも２回行われた。この方法は、実施例２−６において使用された。
【００１０】
複数の溶媒輸送システム（モデル ６００Ｅ、ウォーターズアソシエーツ(Waters Associates)、ミルフォード(Milford)、マス(Mass.)）、オートインジェクター(auto-injector)（モデル ７１７プラス、ウォーターズアソシエーツ(Waters Ass.)、フォトダイオードアレイ検出器（モデル ９９６、ウォーターズアソシエーツ(Waters Ass.)）、逆相シンメトリック(Symmetric)Ｃ18カラム（150mm×3.9mm ID、5μm）、及びミレニウム(Millenium)２０１０ソフトウェアコンピューターシステムを備えた高圧液体クロマトグラフィーシステムを、この研究において使用した。ジアゼパム、クロナゼパム、及び（Ｓ）−２−カルバモイロキシル−１−ｏ−クロロフェニルエタノールの分析のために使用した移動相及びＵＶ波長は、それぞれ、２５４ｎｍにおいて７０％メタノール、３０％水；２５２ｎｍにおいて６０％メタノール、４０％水；及び２６２ｎｍにおいて２５％アセトニトリル及び７５％水であった。
【００１１】
実施例２
この実施例は、新たに使用された(excised)鼻の膜を通したモデル薬剤であるジアゼパムのインビトロでの浸透における、１％ｗ／ｖで水性媒体に溶解した胆汁塩及びレシチンの効果を示すものである。これらの研究では、コレートナトリウム塩、デオキシコレートナトリウム塩、タウロコレートナトリウム塩及びグリココレートナトリウム塩のような一連の胆汁塩、並びにリソホスファチジルコリンのようなレシチンが試験された。インビトロの膜浸透試験法において記載された方法を用いて、浸透速度を測定した。この方法で得られた定常状態の流速データの平均を、表１に示す。
【００１２】
【表１】
0004951723.tif 000003
【００１３】
表１に見られるように、グリココレートナトリウム塩のような胆汁塩及びリソホスホジチルコリンのようなレシチンは、鼻の膜を通したジアゼパムの浸透を大幅に向上させる効果をもたらす。
【００１４】
実施例３
この実施例は、３７℃での、ウサギの鼻粘膜を通したジアゼパムのインビトロ膜浸透への、媒体の影響を示すものである。この実験では、水並びに３０％エタノール(ETOH)、６０％プロピレングリコール（PG）、及び１０％水（WT）からなる共溶媒媒体を使用し、１％のジアゼパム懸濁液及び溶液を、それぞれ調製した。実施例１に記載した方法を用いて、浸透速度を決定した。この方法で得られたジアゼパムの経鼻浸透プロファイルを、図１に示す。
図１に見られるように、エタノール、プロピレングリコール、及び水を含む共溶媒媒体は、水性懸濁液によって得られたものと比べて、ジアゼパムの経鼻浸透速度を、約８倍向上させた。
【００１５】
実施例４
この実施例は、インビトロの鼻粘膜を通したジアゼパムの浸透への、ドナー区画における薬剤濃度の影響を示すものである。この研究では、３０％エタノール、６０％プロピレングリコール、及び１０％水を含む共溶媒混合物を用いて、０．５−２％のジアゼパム製剤を調製した。実施例１に記載した試験方法を用いて、インビトロの膜浸透速度を測定した。０．５−２％のジアゼパム製剤によって得られたインビトロでの経鼻流速データを、図２に示す。
図２に見られるように、０．５−２％の濃度レベルにおいて、ジアゼパムの定常状態の経鼻流速は、ドナー区画における薬剤濃度の増加と共に、直線的に増加した。
【００１６】
実施例５
この実施例は、ジアゼパムのインビトロの経鼻的な膜浸透における、本発明による経鼻製剤への、胆汁塩の混合(incorporation)の効果を示すものである。この実験では、３０％エタノール、６０％プロピレングリコール、及び１０％水からなる媒体への、１％レベルのグリココレートナトリウム塩の含有(inclusion)が試験された。胆汁塩を含む媒体、及び胆汁塩を含まない媒体を用いて、試料薬剤溶液(10mg/ml)を調製した。実施例１に記載した試験方法を用いて、膜浸透速度を測定した。この方法で得られたインビトロ浸透プロファイルを、図３に示す。
図３に見られるように、１％レベルのグリココレートナトリウム塩を含有することにより、ジアゼパムの経鼻的な浸透速度は大幅に向上する。胆汁塩が媒体に含有される場合の、定常状態の流速の約５０％の増加が注目される。
【００１７】
実施例６
この実施例は、ジアゼパム、クロナゼパム、及び（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールのような３つのモデル薬剤の相対的な経鼻浸透性(transnasal permeabilities)を示すものである。この実験では、３０％エタノール、６０％プロピレングリコール、及び１０％水からなる共溶媒媒体が使用された。実施例１に記載された試験方法を用いて、インビトロの浸透実験が行われた。開始時の薬剤濃度を５ｍｇ／ｍｌとして、薬剤を用いて得られた相対的な経鼻浸透性係数及び定常状態の流速データを、表２に示す。
【００１８】
【表２】
0004951723.tif 000004
【００１９】
表２に見られるように、カルバメート系抗痙攣剤（Ｓ）−２−カルバモイロキシル−１−ｏ−クロロフェニルエタノールの経鼻浸透性は、ジアゼパムの場合と比べると約２倍であることがわかる。
【００２０】
実施例７
ジアゼパム製剤の生物学的利用能及び薬学動力学
ジアゼパムを含む本発明の調製物の生物学的利用能及び薬学動力学的な特徴を、ニュージーランドホワイトラビットへ経鼻的に適用した後に試験した(n=3-4)。比較のため、同量を静脈内投与した後に、ジアゼパム注射（表３の処方１）をインビボで試験した。エルキンス−シン社(Elkins-Sinn,Inc.)から、ＩＶ処方１(10mg/2ml)を得た。これは、プロピレングリコール(0.4ml)、アルコール(0.1ml)、ベンジルアルコール(0.015ml)、ベンゾエートナトリウム塩／安息香酸(50mg)、及び１ｍｌ注射するために十分な量の水から調製された。経鼻的に適用するために、１％グリココレートナトリウム塩を含む（表３の処方３）、及び含まない（表３の処方２）、３０％エタノール、６０％プロピレングリコール、及び１０％水からなる本発明の媒体系を用いて、２つの製剤をそれぞれ調製した。比較のために、ポリオキシエチレン化ヒマシ油（クレモフォア(Cremophor)ＥＬ）の無毒性活性剤媒体を用いて調製した別の経鼻製剤（表３の処方４）も、経鼻適用した後に試験した。なぜなら、この製剤は、ラウ(Lau)及びスラットリー(Slattery)によって(1989年)、ヒトで試験されたからである。上記の媒体１ｍｌに、２０ｍｇのジアゼパム（シグマケミカル(Sigma Chemical)）を溶解することによって、全ての経鼻製剤を、実験の直前に調製した。
【００２１】
実験の直前に、ウサギ(n=3-4)を計量し、仰向けにしながらウサギ拘束器(restrainers)にウサギを拘束した。各ウサギは、５秒以内で、ファイファー(Pfeiffer)噴霧装置によって、それぞれの鼻孔内に１００μｌの処方２又は３を与えられた。ＩＶ投与を受けるウサギ(n=3)は、２０秒間、耳の静脈に注入することにより、１ｍｇ／ｋｇの処方１を与えられた。繰り返し投薬の研究のために、同量の処方３(100μl)を、最初の投薬の５分後に、それぞれの鼻孔内に噴霧した。ＩＶ及びＩＮ投与の０、２、５、１０、２０、３０、４５、６０及び１２０分後に、血液試料(1ml)を回収した。遠心分離によって、血液試料から血漿を分離し、分析するまでー２０℃で保存した。分析のために、1.5mlのポリプロピレン遠心分離管に、血漿試料(0.5ml)を正確に移した。内部標準（クロナゼパム １μｇ／ｍｌ）を含む０．０１％ ｖ／ｖ過塩素酸含有アセトニトリル０．５ｍｌを、血漿試料に添加した。混合物を、３０秒間ボルテックスミキサーで攪拌し(vortexed)、４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＨＰＬＣによってジアゼパムの血漿濃度を分析した。実施例１に記載したようなウォーターズ(Waters)ＨＰＬＣを用いて、分析を行った。この研究で使用したカラムは、３．９ｍｍ×１５０ｍｍ×５μｍのシンメトリックＣ18カラムであった。移動相は、５０容量％メタノール：１０容量％アセトニトリル：４０容量％のｐＨ３．５のリン酸塩緩衝液であった。移動相の流速は、１ｍｌ／分であり、２２８．５ｎｍでＵＶ検出を行った。ジアゼパムの検出限界は、７０ｎｍｏｌ／ｌであった。０〜１２０分の、薬剤血漿濃度と時間との曲線の下の面積(AUC)を、線形台形法(linear trapezoidal method)によって算出した。この方法で得られた生物学的利用能及び薬学動力学データを、表３に記載する。本発明の調製物の１回のＩＶ投与（処方１）並びに１回及び２回のＩＮ適用（処方３及び４）後に得られた相対的な薬学動力学プロファイルを、図４及び５にそれぞれ図示する。
【００２２】
【表３】
0004951723.tif 000005
【００２３】
図４及び表３に見られるように、１％ＳＧＣ、３０％エタノール、６０％ＰＧ及び１０％水によって調製されたＩＮ処方３は、クレモフォア(Cremophor)ＥＬ処方４と比較して、経鼻吸収が顕著に増加している。ＩＮ処方３の場合のＣmax及びＡＵＣ0-120分は、それぞれ、ＩＶ投与に対して約６９％及び７６％である。一方、クレモフォア(Cremophor)ＥＬ処方４の場合のＣmax及びＡＵＣ0-120分は、ＩＶ注射の約１９％及び４２．６％である。これらの相対的な結果は、ラウ(Lau)及びスラットリー(Slattery)(1989年)により報告されたヒトの薬学動力学データと一致することがわかる。報告されたデータによれば、クレモフォア(Cremophor)ＥＬ製剤は、ヒトでの経鼻投与の１．４時間後にＴmaxが得られ、Ｃmaxは、ＩＶ注射と比べて約２７％でしかなかった。非常に驚くべきことに、図５及び表３に見られるように、最初の投薬の５分後に経鼻適用を繰り返すことにより、ジアゼパムの経鼻吸収は顕著に増加する。２回目の適用後に、Ｃmax及びＡＵＣ値は、最初の投与で得られたものと比べて、ちょうど２倍になった。また、２回目の投薬後に得られる血漿ジアゼパム値は、７分以内の１回のＩＶ投与のものより大きい。これらの発見は、１回の経鼻投薬で所望の治療効果が得られない場合、繰り返し投与計画（短時間）が、癲癇発作の緊急の処置のために、効果的に利用することができることを明確に示している。
【００２４】
実施例８
最大血漿値の薬学動力学の調節
２ｍｇのジアゼパムを含む１００μｌの媒体を調製し、実施例７に記載したものと類似の方法で、ウサギ(n=3)に適用した。以下の媒体を試験した：１％ＳＧＣを含む６０％ＥＴＯＨ、３０％ＰＧ、及び１０％水（ＷＴ）、１％ＳＧＣを含む３０％ＥＴＯＨ、６０％ＰＧ、及び１０％水（ＷＴ）、並びに１％のＳＧＣを含む２０％ＥＴＯＨ、７０％ＰＧ及び１０％水（ＷＴ）。以下の時間間隔で、耳の静脈から血液試料を採取した：０、２、５、１０、２０、３０、４５、６０、及び１２０分。血漿中のジアゼパム濃度を、ＨＰＬＣによって決定した。調製物のＩＶ及びＩＮ投与後に得られた薬学動力学プロファイルを、表４及び図６に示す。
【００２５】
【表４】
0004951723.tif 000006
【００２６】
表４及び図６に見られるように、ＩＮ投与後２分以内に観察される、薬剤の最大血漿濃度は、試験した媒体中のＥＴＯＨ／ＰＧの容量比に応じて調節することができる。Ｃmaxは、ＥＴＯＨ／ＰＧの容量比の増加と共に、０．３から２へと、徐々に増加する。また、１％のＳＧＣを含む６０％ＥＴＯＨ、３０％ＰＧ及び１０％水(WT)からなるＩＮ媒体の場合の、２分での最大血漿濃度は、同じ投薬量のＩＶ注射の約７９％である。
また、媒体中のＥＴＯＨ／ＰＧの容量比を調節することにより、排出相(elimination phase)中の血漿値−時間プロファイルを調節することもできる。
【００２７】
実施例９
ジアゼパム調製物の薬理学的応答
本発明の調製物を１ｍｇ／ｋｇの投与量でＩＶ投与及びＩＮ投与した後のジアゼパムの筋弛緩効果の向上によって、ニュージーランドホワイトラビットにおいて、薬理学的応答を試験した。経鼻製剤の媒体は、１％ＳＧＣを含む３０％エタノール、６０％プロピレングリコール、及び１０％水からなるものであった。媒体１ｍＬにジアゼパム２０ｍｇを超音波処理によって溶解することにより、試料製剤を調製した。ＩＶ製剤は、実施例７で用いたものと同じであった。お尻の先を指で強く覆った(tipped)後、ウサギを横たえながら、ウサギにおける薬理学的応答を、各鼻孔に１００μＬの経鼻製剤を適用した後に測定した。ＩＶ及びＩＮ投与後に、ウサギが後ろ足を一方に伸ばして横たわったままでいる平均応答時間を、表５に記載する。
【００２８】
【表５】
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【００２９】
表５に見られるように、本発明の経鼻製剤は、非常に素早い応答をもたらす。薬理学的応答時間は、１．５分であった。
【００３０】
実施例１０
クロナゼパム調製物の生物学的利用能及び薬学動力学
１％ＳＧＣを含む、３０％ＥＴＯＨ、６０％ＰＧ及び１０％水からなる本発明の媒体２ｍｌにクロナゼパム８．３６ｍｇを溶解することにより、経鼻製剤を調製した。２ｍＬの４０％ＰＧ、３０％ＥＴＯＨ、及び３０％水溶液に、３ｍｇのクロナゼパムを溶解し、無菌条件下で、滅菌フィルターによって溶液をろ過することによって、ＩＶ注射用製剤を調製した。実施例７に記載したものと類似の方法で、０．２ｍｇ／ｋｇの投与量で、ウサギ(n=3)に製剤を投与した。５分間隔での繰り返し投与計画（２回および３回適用）も試験した。以下の時間間隔で、耳の静脈から血液試料を得た：０、２、５、１０、２０、３０、４５、６０、及び１２０分。遠心分離によって、血液試料から血漿を分離し、分析するまでー２０℃で保存した。分析のために、血漿試料(0.5ml)を、１５ｍｌの試験管に正確に移した。１０μｌの内部標準溶液（ジアゼパム−５μｇ／ｍｌ）及び５０μｌのＮａＯＨ(0.5M)を、血漿試料に添加した。上記の混合物に、５ｍｌのジエチルエーテルを添加し、この混合物を、ボルテックスミキサーで６０秒間攪拌し、４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上部の(upper)希薄溶液を、５ｍｌの試験管に移し、４０℃で３０分間、真空蒸発器で蒸発させた。２０％エタノール、３０％アセトニトリル、及び５０％のｐＨ３．５のＫＨ2ＰＯ4／Ｈ3ＰＯ4緩衝液からなる、ＨＰＬＣ分析用移動相１００μｌで、残渣を溶かした。流速１ｍｌ／分で、２５４ｎｍでＵＶ検出を行うＨＰＬＣによって血漿中のクロナゼパム濃度を決定した。クロナゼパムの検出限界は、１６ｎｍｏｌ／ｌであった。１回又は複数回の投薬スケジュールで、ＩＶ及びＩＮ投与後に得られた生物学的利用能及び薬学動力学データを表６に記載し、平均血漿濃度−時間プロファイルを、図７に示す。
【００３１】
【表６】
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【００３２】
表６及び図７で見られるように、初期の最大血漿濃度は、調製物の最初の経鼻投与後２分以内に得られている。最大血漿値は、ＩＶ注射の約３２％であった。しかし、５分間隔での３回目の適用後、１５分で観察される最大血漿濃度は、１回のクロナゼパムのＩＶ注射とほぼ同じであった。
【００３３】
実施例１１
クロナゼパム調製物の薬理学的応答
実施例９に記載したものと類似の方法で、１ｍＬ当たり４．１８ｍｇのクロナゼパムを含む媒体１００μＬを、それぞれの鼻孔内に適用した後、ニュージーランドホワイトラビットにおいて、クロナゼパム調製物の薬理学的応答を試験した。媒体は、１％のＳＧＣを含む、３０％ＥＴＯＨ、６０％ＰＧ、及び１０％水からなるものであった。この研究で使用されたＩＶ製剤は、実施例１０で記載したものと同じであった。ＩＶ及びＩＮ投与後に測定した平均応答時間を、表７に示す。
【００３４】
【表７】
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【００３５】
表７で見られるように、本発明のクロナゼパム製剤の経鼻適用は、ＩＶ注射（１．７分）の場合と比べて、より素早い応答時間（１．４分）をもたらす。
【００３６】
実施例１２
（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの生物学的利用能及び薬学動力学
モノカルバメート系の新たな抗痙攣剤、（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノール５０ｍｇ又は１００ｍｇを、１％ＳＧＣを含む、３０％ＥＴＯＨ、６０％ＰＧ、及び１０％水からなる本発明の媒体１ｍＬに溶解することにより、経鼻製剤を調製した。（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノール１５ｍｇを、４０％ＰＥＧ４００及び６０％水１ｍＬに溶解し、無菌条件下で滅菌膜によってろ過することにより、ＩＶ注射用製剤を調製した。実施例７に記載したものと類似の方法で、２ｍｇ／ｋｇと５ｍｇ／ｋｇの２通りの投与量で、これら製剤を、ウサギ(n=2-4)に投与した。本発明の調製物の経鼻適用において、５分間隔での繰り返し投与計画の研究も行った。以下の時間間隔で、耳の静脈から血液試料を得た：０、２、５、１０、２０、３０、４５、６０、１２０、１８０、及び２４０分。血液試料から、遠心分離によって血漿を分離し、分析するまで−２０℃で保存した。分析のために、１５ｍｌの試験管に、血漿試料(0.5ml)を正確に移した。５０μｌの内部標準溶液（２−（２，６−ジクロロフェニル）−２−カルバモイルオキシエチル）オキソカルボキサミド−１０μｇ／ｍｌ）及び５ｍｌのメチル−ブチルエーテルを、血漿試料に添加した。混合物を、ボルテックスミキサーで６０秒間攪拌し、３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上部の希薄溶液を、５ｍｌの試験管に移し、４０℃で３０分間真空蒸発器で蒸発させた。２００μｌの脱イオン水に、残渣を溶かした。２０％アセトニトリル及び８０％水からなる移動相を使用するＨＰＬＣによって、流速１ｍｌ／分及び２１０ｎｍでのＵＶ検出で、血漿中の（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノール濃度を決定した。（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの検出限界は、２３ｎｍｏｌ／ｌであった。２つの投与強度(dose strengths)で（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールをＩＶ及びＩＮ投与した後に決定された薬学動力学パラメーターを、表８に示す。１回及び２回の投与計画における、本発明の調製物のＩＶ投与及びＩＮ投与後に得られた生物学的利用能および薬学動力学パラメーターを、表９に記載する。１回及び２回の投与スケジュールでの、（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノール調製物のＩＶ及びＩＮ投与後に得られた平均血漿濃度−時間プロファイルを、図８及び９に示す。
【００３７】
【表８】
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【００３８】
【表９】
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【００３９】
図８で見られるように、経鼻適用後、５−３０分以内に観察された初期の最大濃度は、投与強度の増加に比例して増加した。経鼻調製物の生物学的利用能は、ＩＶ注射の７３−７９％であることがわかる。表９及び図９に示した薬学動力学の結果は、最初の投与の５分後に、経鼻製剤の２回目の適用を行うことにより、最初の投与後に得られたものとほぼ同じ生物学的利用能が得られることを明確に示している。２回目の経鼻適用後、Ｃmax及びＡＵＣ0-240分は２倍になる。また、２回目の投与緒に得られた（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの血漿濃度は、３０分で、１回のＩＶ注射で得られた血漿値より大きかった。
【００４０】
実施例１３
安定性研究
本発明による薬学的組成物において、薬剤の安定性を最適化するために、１０−１４週間に亘り、３７℃の保存温度で、安定性向上研究を行った。３０％ＥＴＯＨ、６０％ＰＧ，及び１０％水からなる本発明の媒体を用いて、試料薬剤溶液(0.1mg/ml)を調製した。オーブンセット中に、３７℃で薬剤溶液を保存した。適当な時間間隔で、１００μｌの試料を取り出し、ＨＰＬＣによって分析した。薬剤回収率の点で決定された化学的安定性データを、表１０に示す。
【００４１】
【表１０】
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【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のジアゼパム調製物のインビトロの経鼻浸透への、媒体の効果を示すグラフである。
【図２】本発明の媒体からのジアゼパムのインビトロの経鼻浸透への、薬剤濃度値の効果を示すグラフである。
【図３】本発明の媒体からのジアゼパムのインビトロの経鼻浸透への、グリココレートナトリウム塩(SGC)の影響を示すグラフである。
【図４】本発明による調製物の静脈内投与(IV)及び経鼻投与後のジアゼパムの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（１回の投与）。
【図５】本発明による調製物の静脈内及び経鼻投与後のジアゼパムの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（複数回の投与）。
【図６】本発明の調製物における、プロピレングリコール／エタノール容量比の関数としての、調製物の経鼻投与後のジアゼパムの平均結晶濃度−時間プロファイルを示すグラフである。
【図７】本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後のクロナゼパムの平均血漿濃度プロファイルを示すグラフである。
【図８】投与強度の関数としての、本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後の（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである。
【図９】本発明による調製物の静脈内投与及び経鼻投与後の（Ｓ）−２−カルバモイロキシルー１−ｏ−クロロフェニルエタノールの平均血漿濃度−時間プロファイルを示すグラフである（１回及び複数回の投与）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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