(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
芳香族ポリエステルのヤーンまたは布帛を改質するための方法であって、
前記ヤーンまたは布帛をシュードモナスメンドシナ由来のクチナーゼで処理して、脱ピリング特性またはピリング防止特性を改質することを含む、方法。
【請求項２】
芳香族ポリエステル物品のテキスタイル特性を改善するための方法であって、
ヤーンまたは布帛をテキスタイルに組み込み；
当該テキスタイルとシュードモナスメンドシナ由来のクチナーゼを接触させて脱ピリング特性またはピリング防止特性を改質する；工程を含む方法。
【請求項３】
前記処理をポリエチレングリコールまたはグリセロールの存在で行なう、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
Ａ．  発明の分野
本発明は、繊維、ヤーン、布帛、フィルム、樹脂の製造に使用される合成ポリエステル；および、プラスチック、布帛、テキスタイル、ラグおよびその他の消費材の製造に使用されるその他の対象の改質分野に関する。さらに詳しくは、本発明は、ポリエステル樹脂および繊維ならびにそれらで製造される物品の表面を改質する能力を有する新規類の酵素に関する。
【０００２】
Ｂ．  技術の状態
ポリエステル類は、置換されたテレフタレート単位およびパラ置換されたヒドロキシベンゾエート単位を含むがこれらに限定されるわけではない置換された芳香族カルボン酸のエステル少なくとも８５重量％によって構成されるいずれかの長鎖合成ポリマーを含む製造合成組成物である。ポリエステルは、繊維、ヤーン、布帛、フィルム、樹脂または粉末の形態を取ることができる。多くの化学誘導体、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリトリメチレンテレフタレート（ＰＴＴ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）およびポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）が開発されている。しかし、ＰＥＴは、製造される最も一般的な直鎖ポリマーであり、今日工業的に使用される大半のポリエステルを占める。
【０００３】
熱可塑性ポリエステルは、重合と繊維形成との基本的な加工工程のいずれかで選択的に処理することができる。この柔軟性および特性の範囲は、アパレル、家具、室内装飾用品、フィルム、硬質および軟質容器、不織布、タイヤおよびカーペット工業のような市場に対するポリエステルから製造される広範な範囲の製品について許容可能である。その結果、ポリエステルは、米国において、主要な強化繊維となっている。
【０００４】
過去３０年にわたって、綿が消費量が緩やかで、安定な成長を続け、ウールは、事実上、伸びのない平坦な成長である。しかし、ポリエステルは、高い顕著性を占め始めていた。さらに、ポリエステルは、その強さ；および、質の高さ；ならびに、このような繊維を使用して製造することのできる布帛の多様性ゆえに、高レベルの消費支持を達成している。その他のポリエステル市場、例えば、繊維入り物品および不織布物品も成長し続けている。
【０００５】
テキスタイル工業において、ポリエステルは、高強度、柔軟な手触り、耐延伸性、非汚染性、機械洗浄性、防しわ性および耐磨耗性等のある種の鍵となる利点を有する。しかし、ポリエステルは、その疎水性、ピリング、静電気、可染性、不活性な表面に関して、接着のための媒体、すなわち、柔軟性または湿潤性強化化合物ほど最適ではなく、通気性に欠け、望ましくない高度にテカテカしているかまたは艶のある外観性に欠ける。さらに、１９６０年代および１９７０年代においては、ポリエステルテキスタイルは、消費認識の乏しさにあえぎ、語句“安価に製造される”と同義語であり、ポリエステルが伴う着色の悪さゆえに見向きもされなかった。この後者の問題は、大部分、ポリエステルに適合する染料の広い選択性が存在しなかったことによる。こうした認識を払拭するために、工業界は、ポリエステルの特性を改善するために強く努力してきた。
【０００６】
工業界がポリエステルの処理で達成することを模索してきた１つの帰結は、ポリエステル衣料に脱ピリング（ｄｅｐｉｌｌｉｎｇ）およびピリング防止性を生じさせることである。工業界は、また、例えば、ポリエステル布帛の重量を減少させることによって、ポリエステルの手触りおよび感触を改善することを模索し続けている。もう１つの問題領域は、ポリエステルが極性または帯電組成物、すなわち、布帛柔軟剤、仕上剤および染料を非常に吸収しがたいという特性を含むことである。ポリエステルでのもう１つの問題は、油性および／または疎水性の汚れを除去することが難しいことに係る。これら汚れは、布帛または繊維に強く付着することが多く、落ちない汚れを生ずる。
【０００７】
ＧＢ  ２２９６０１１  Ａは、等電点７．２と分子量２２ｋＤａとを有するクチナーゼを含め、種フサリウム  ソラニイ  バー・マイナスＴ．９２．６３７／１（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉｉ  ｖａｒ．ｍｉｎｕｓ  Ｔ．９２．６３７／１）の真菌により天然に生産される酵素類を開示しており、これらは、脂肪酸基体の汚れおよび汚染を除去するための洗剤組成物において有用である。
【０００８】
ＵＳ  ５５１２２０３は、クチナーゼ酵素と、クチナーゼ適合性界面活性剤とを含む洗剤組成物を開示している。微生物酵素クチナーゼは、シュードモナスメンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｍｅｎｄｏｃｉｎａ）からであり、クチンまたはクチン様の汚れを有する材料を酵素を使用して洗浄するための改良法に使用する。
【０００９】
ＰＣＴ公開パンフレットＮｏ．ＷＯ  ９７／４３０１４（Ｂａｙｅｒ  ＡＧ）は、エステラーゼ、リパーゼまたはプロテアーゼを含む水溶液で処理することによるポリエステルアミドの酵素を使用する分解を記載している。
【００１０】
ＪＰ  ５３４４８９７Ａ（Ａｍａｎｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ＫＫ）は、脂肪族ポリエステルとともに溶液に溶解させ、強度を弱めることなく、繊維テキスチャーを改善する結果を有する市販のリパーゼ組成物を記載している。シュードモナスエス・ピー・ピー（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．）からリパーゼにより分解することのできる脂肪族ポリエチレンのポリマーもまた開示されている。
【００１１】
ＰＣＴ公開パンフレットＮｏ．９７／３３００１（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）は、リパーゼで処理することによるポリエステル布帛の湿潤性および吸収性を改善するための方法を開示している。
【００１２】
ＰＣＴ公開パンフレットＮｏ．ＷＯ  ９９／０１６０４（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）は、ポリエステル繊維または布帛を脱ピリングし、エチレングリコールジベンジルエステル（ＢＥＢ）および／またはテレフタル酸ジエチルエステル（ＥＴＥ）亜単位成分のいずれかについて加水分解活性を有する酵素と反応させることによってそのような布帛の洗剤における色識別をするための方法を記載している。
【００１３】
上記から理解されうるように、ポリエステルの特性を改善するためのポリエステルの処理において、多くの進歩がなされてきた。また、このような結果を達成するために、酵素を使用する領域において、幾つかの研究が存在する。しかし、本研究は、モノ−およびジ−エステル亜単位を分解するための酵素の能力に焦点を合わせた。本出願人らは、驚くべきことに、モノ−および／またはジ−エステル加水分解活性を有する大多数の酵素がポリエステル改質特性を有しないことを見出した。対照的に、本出願人らは、ポリエステルを改質する能力を有する真のポリエステラーゼ酵素がモノ−および／またはジ−エステルを加水分解するそれらの能力についてのみで選択することができず、種々の判定基準を使用して選択する必要があることを見出した。
【００１４】
かくして、この分野でなされたかなりの研究にもかかわらず、工業界は、改善された特性を有する改質ポリエステルを製造するさらなる方法を必要としたままである。例えば、テキスタイルに関して、このような改善は、ピリング防止性に関し、製造の間の脱ピリングは、望ましい手触りおよび感触ならびに外観において改善され、静電抵抗性が改善され、親水性物質を吸収する能力が改善され、さらに自然な艶が改善され、油性汚れに対する抵抗性が改善される。
【００１５】
発明の概要
本発明の目的は、ポリエステル繊維および樹脂特性を改質する優れた能力を有する酵素組成物を提供することである。
【００１６】
本発明のさらなる目的は、ポリエステル繊維または樹脂を含む物品の特性を酵素を使用して改質する方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、ピリング防止性および脱ピリング特性に関して物品が改質された特性を有するように、ポリエステル繊維物品の表面を処理する方法を提供することである。
【００１７】
本発明のさらなる目的は、独特の機能性、例えば、静電気によるまつわりつきが低く、例えば、テカテカせず、より自然な“艶”を有する、より自然な見掛け上の外観を有するポリエステルを製造する方法を提供することである。
【００１８】
本発明のなおさらなる目的は、テキスタイル物品に織り込む際に、重量、手触りおよび／または感触が改質されるポリエステル繊維または樹脂組成物を提供することである。
【００１９】
本発明のなおさらなる目的は、汚れていない布帛でおよび／または製造の間にこのような効果を達成する方法を提供することである。
本発明に従えば、清浄で汚れていないポリエステルを処置する方法であって、ポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下で、ポリエステラーゼ活性を有する酵素溶液とポリエステルテキスタイルとを接触させる工程を含む方法が提供される。好ましくは、ポリエステルは、このような繊維、ヤーンまたは布帛を含む繊維、ヤーン、布帛または仕上テキスタイル製品である。さらに好ましくは、改質される特性が、このような繊維、ヤーンまたは物品より製造されるテキスタイルの手触り、感触および／または重量の改善を含む。好ましくは、繊維、ヤーンまたは布帛のテキスタイル特性が改質される。
【００２０】
本発明のもう１つの実施態様において、ポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛をテキスタイル製品に組み込むかまたはポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下でポリエステラーゼ活性を有する酵素によるテキスタイル仕上を施す前に、ポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛を処理する方法が提供される。したがって、テキスタイル構成部分が別個に処理される実施態様においては、その処理される構成部分（すなわち、繊維、ヤーン、布帛）は、ポリエステルテキスタイルを製造するための標準的な方法を通してテキスタイル製品に組込むことができ、かくして、仕上テキスタイル製品に対する改質が付与される。好ましくは、繊維、ヤーンまたは布帛のテキスタイル特性が改質される。
【００２１】
本発明のなおもう１つの方法の実施態様においては、ポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下でポリエステラーゼ活性を有する酵素でポリエステル樹脂またはフィルムを処理する方法が提供される。処理されるポリエステルは、仕上樹脂またはフィルム製品であってもよく、例えば、機械的な構築を通して製品に組込むことができ、かくして、仕上テキスタイル製品に改質を付与することができる。
【００２２】
本発明のなおもう１つの方法の実施態様において、ポリエステル廃棄製品は、ポリエステル廃棄製品を容易に廃棄されるかまたはリサイクルされる化合物に分解するために、本発明のポリエステラーゼ酵素で処理される。この実施態様は、廃棄物廃棄および投棄で問題が増大しつつあるポリエステル基体のプラスチックの分解において特に有用である。この実施態様の変形例においては、本発明は、このような廃棄物の完全な分解または堆肥化を促進するように、廃棄物製品中の微生物の使用により消化可能な材料の量を増加させるために使用することができる。
【００２３】
本発明のなおもう１つの方法の実施態様においては、ポリエステラーゼを使用する反応の平衡を逆転させることによってモノマー単位からポリエステルが製造される。
【００２４】
本発明の組成物実施態様においては、本発明の方法に従い、ポリエステル物品が提供される。好ましくは、ポリエステル物品は、重量、手触り、感触、脱ピリングまたはピリング防止特性が改善される。
【００２５】
本発明のさらなる実施態様において、酵素を使用する触媒を使用して、ポリエステル繊維を重合させる方法が提供される。
本発明のなおさらなる実施態様において、サイズ剤がポリエステル組成物を占めるテキスタイルからサイズ剤を除去する方法が提供される。
【００２６】
本発明の方法の実施態様において、ポリエステラーゼ酵素を単離および／または測定する検定法が提供される。本発明の組成物実施態様において、その検定法を実施するキットが提供される。
【００２７】
発明の詳細な説明
本発明に従えば、清浄で汚れていないポリエステルを処理する方法であって、ポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下で、ポリエステラーゼ活性を有する酵素溶液とポリエステルテキスタイルとを接触させる工程を含む方法が提供される。好ましくは、ポリエステルは、このような繊維、ヤーンまたは布帛を含む繊維、ヤーン、布帛または仕上テキスタイル製品である。さらに好ましくは、改質される特性が、このような繊維、ヤーンまたは物品より製造されるテキスタイルの、例えば、手触り、感触および／または重量の改善を含む。本発明のこの実施態様の目的は、ポリエステル布帛から汚れを洗濯する方法を提供することではなく、代わりに、テキスタイルを占めるポリエステルのテキスタイル特性を改質するための機構を提供することである。かくして、本発明のこの実施態様において、汚れていない、すなわち、典型的には、市販の洗濯用洗剤に賦される汚れを含まないテキスタイル製品に、ポリエステラーゼを施すことが有益なことが多い。
【００２８】
本発明のもう１つの実施態様において、ポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛をテキスタイル製品に組み込むかまたはポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下でポリエステラーゼ活性を有する酵素をテキスタイル仕上に施す前に、ポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛を処理する方法が提供される。したがって、テキスタイル構成部分が別個に処理される実施態様においては、その処理される構成部分（すなわち、繊維、ヤーン、布帛）は、ポリエステルテキスタイルを製造するための標準的な方法、例えば、織る、ミシン掛けし切断する、ならびに、縫合するプロセスを通してテキスタイル製品に組込むことができ、かくして、仕上テキスタイル製品に対して改質が付与される。
【００２９】
本発明のなおもう１つの方法の実施態様においては、ポリエステルの特性が改質されるようなある時間および条件下でポリエステラーゼ活性を有する酵素でポリエステル樹脂またはフィルムを処理する方法が提供される。処理されるポリエステルは、仕上樹脂またはフィルム製品であってもよく、例えば、機械的な構築を通して製品に組込むことができ、かくして、仕上テキスタイル製品に対して改質が付与される。
【００３０】
本発明のなおもう１つの方法の実施態様において、ポリエステル廃棄製品は、ポリエステル廃棄製品を容易に廃棄されるかまたはリサイクルされる化合物に分解するために、本発明のポリエステラーゼ酵素で処理される。この実施態様は、廃棄物廃棄および投棄で問題が増大しつつあるポリエステル基体のプラスチックの分解において特に有用である。この実施態様の変形例においては、本発明は、このような廃棄物の完全な分解または堆肥化を促進するように、廃棄物製品中の微生物の使用により消化可能な材料の量を増大させるために使用することができる。
【００３１】
本発明に従う方法において、本明細書で提供されるポリエステラーゼ溶液は、ポリエステル改質を示すために酵素に適した条件下で、繊維、ヤーンまたは布帛を含むポリエステル繊維、ヤーン、布帛またはテキスタイルと接触させられる。本発明は、好ましくは、テキスタイル製品の製造におけるポリエステラーゼの使用に係るが、必ずしも、織る間に生ずる汚れを除去する目的のための洗剤との組合せには係らない。かくして、この実施態様においては、ポリエステラーゼのポリエステル物品への適用は、繊維をヤーンに紡糸する前、ヤーンを布帛に組込む前、および／または、ポリエステルを含むテキスタイル製品の構築前に生ずる。しかし、完全なテキスタイル製品を本明細書で特定するポリエステラーゼで処理することは、同様に、本発明の範囲内であり、また、本発明についての好ましい実施態様の範囲内である。
【００３２】
本発明のもう１つの実施態様において、ポリエステラーゼ反応は、触媒反応の平衡がモノマー亜単位からポリエステルの生成方向にシフトするように行われる。このような平衡シフトは、当業者であれば、有機溶剤および超臨界流体(ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｆｌｕｉｄｓ）の最適化を含めルーチン的な酵素を使用する方法および化学的な方法を使用することによって達成しうる。
【００３３】
本明細書中で使用する“ポリエステル”とは、鎖中にエステル基を含有し、かつ、二酸とジオールとの縮合から、または、ヒドロキシ酸類の重合から誘導される直鎖高分子を意味する。本発明は、脂肪族および芳香族ポリエステルの両方に適用することができる。しかし、繊維および樹脂を製造するために使用され、置換された芳香族カルボン酸のエステル、例えば、置換されたテレフタル酸またはパラ置換されたヒドロキシベンゾエート少なくとも８５重量％、好ましくは、少なくとも９０重量％、最も好ましくは、少なくとも９５重量％を含む合成的に製造される長鎖ポリマーを含む芳香族ポリエステル物品が特に好ましい。その他の有用なポリエステル物品としては、塊状ポリマー製の物品、例えば、ヤーン、布帛、フィルム、樹脂および粉末が挙げられる。工業的用途における主要なポリエステル類としては、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、テトラメチレンテレフタレート（ＰＴＭＴ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、ポリトリメチレンテレフタレート（ＰＴＴ）およびポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、ポリシクロヘキサンジメチレンテレフタレート（ＣＨＤＭＴ）、ポリ（エチレン−４−オキシベンゾエート）Ａ−Ｔｅｌｌ、ポリグリコライド、ＰＨＢＡおよび２ＧＮが挙げられる。本明細書で使用するポリエステルは、繊維、ヤーン、布帛、テキスタイル物品またはその他のいずれかの組成物の形態を取ることができ、ポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛が使用される。
【００３４】
“ポリエステラーゼ”とは、ＰＥＴの加水分解および／または表面改質を触媒する有意な能力を有する酵素を意味する。特に、本出願人らは、実施例１（ａ）および１（ｂ）に示したＵＶおよびＭＢ検定（本明細書で、それぞれ、“ＵＶ検定”および“ＭＢ検定”と称される。）で示した条件下でＰＥＴに対して加水分解活性を有する酵素がポリエステル樹脂、フィルム、繊維、ヤーンおよび布帛の処理において有用であり、それらの特性を改質することを見出した。したがって、実施例１（ａ）および１（ｂ）で示した検定は、ポリエステラーゼ酵素を単離し、および／または、酵素のポリエステラーゼ活性を測定するために使用することができる。
【００３５】
本出願人らは、驚くべきことに、本発明に従う酵素がポリエステルに対する有意な活性を有し、改善された表面改質効果を生ずることのできる酵素の亜類を表すことを見出した。対照的に、従来技術の検定によって定義される酵素は、さらに一般的であり、かつ、偽陽性の結果のより多数の例を有するようである。例えば、ＷＯ  ９９／０１６０４に記載されているようにＥＴＥおよびＢＥＢを測定する検定のようにモノ−およびジ−エステル単位の加水分解を測定するように計画された検定が大多数の酵素を同定するのに有用であり、そのうちの幾つかは、偶然なことに、有用なポリエステラーゼ活性を有することができる。しかし、これらの検定は、モノ−およびジ−エステル分子の加水分解に基く。したがって、これらの結果は、特定の酵素が首尾よく長鎖ポリエステルの表面を改質するであろう傾向を予言するのに使用できないことが多い。実施例１（ｄ）は、小分子加水分解に計画された検定が広くはモノ−およびジ−エステル分子に対して有用である酵素を含むであろうが、このような酵素が大きな繰返しポリマー繊維、例えば、長鎖ポリエステル類に対して活性を有するか否かを正確に予言しえないであろうことを示す。
【００３６】
かくして、本発明のポリエステラーゼ酵素は、本明細書に記載するポリエステラーゼ検定の１つまたは両方に従い、陽性の結果を生ずるであろう。本発明の酵素の溶液における活性は、対照ブランクよりも少なくとも１０％高い、好ましくは、対照ブランクよりも５０％高い、最も好ましくは、１００％高い吸収を生ずるであろう。最も好ましい態様において、本発明のポリエステラーゼ酵素は、ブランク試料の吸収読みにおいて少なくとも倍の増加である両方の検定において陽性の結果を生ずるであろう。
【００３７】
適したポリエステラーゼは、動物、植物、真菌および細菌源から単離することができる。植物から誘導されるポリエステラーゼの使用に関しては、ポリエステラーゼは、多くの植物の花粉に存在する。ポリエステラーゼは、また、アブシディアエス・ピー・ピー（Ａｂｓｉｄｉａ ｓｐｐ．）；アクレモニウムエス・ピー・ピー（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ ｓｐｐ．）；アガリクス エス・ピー・ピー（Ａｇａｒｉｃｕｓｓｐｐ．）；アナエロマイセス エス・ピー・ピー（Ａｎａｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．）；アスペルギルス エス・ピー・ピー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｐｐ．）、例えば、エイ オウキュレアツス（Ａ．ａｕｃｕｌｅａｔｕｓ）、エイアワモリ（Ａ．ａｗａｍｏｒｉ）、エイ フラバス（Ａ．ｆｕｒａｖｕｓ）、エイ フォエティダス（Ａ．ｆｏｅｔｉｄｕｓ）、エイフマリクス（Ａ．ｆｕｍａｒｉｃｕｓ）、エイ フミガツス（Ａ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、エイ ニジュランス（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ）、エイニガー（Ａ．ｎｉｇｅｒ）；エイ オリザエ（Ａ．ｏｒｙｚａｅ）、エイテレウス（Ａ．ｔｅｒｒｅｕｓ）およびエイ ベルシカラー（Ａ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）；オイロバシディウム エス・ピー・ピー（Ａｅｕｒｏｂａｓｉｄｉｕｍｓｐｐ．）；セファロスポラム エス・ピー・ピー（Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｕｍｓｐｐ．）；カエトミウム エス・ピー・ピー（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｓｐｐ．）；クラドスポリウム エス・ピー・ピー（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍｓｐｐ．）；コプリヌス エス・ピー・ピー（Ｃｏｐｒｉｎｕｓｓｐｐ．）；ダクチリウム エス・ピー・ピー（Ｄａｃｔｙｌｉｕｍｓｐｐ．）；フサリウム エス・ピー・ピー（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐｐ．）、例えば、エフ コングロメランス（Ｆ．ｃｏｎｇｌｏｍｅｒａｎｓ）、エフデセムセルラーレ（Ｆ．ｄｅｃｅｍｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、エフ ジャバニクム（Ｆ．ｊａｖａｎｉｃｕｍ）、エフ リニ（Ｆ．ｌｉｎｉ）、エフオキシスポラム（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、エフ ロゾイム（Ｆ．ｒｏｓｅｕｍ）およびエフ ソラニ（Ｆ．ｓｏｌａｎｉ）；グリオクラジウムエス・ピー・ピー（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｐｐ．）；ヘルミントスポルム エス・ピー・ピー（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｕｍｓｐｐ．）、例えば、サティバム；ヒューミコラ エス・ピー・ピー（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｓｐｐ．）、例えば、エイチ・インソレンス（Ｈ．Ｉｎｓｏｌｅｎｓ）およびエイチ・ラヌギノサ（Ｈ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）；ムコールエス・ピー・ピー（Ｍｕｃｏｒ ｓｐｐ．）；ニューロスポラエス・ピー・ピー（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｓｐｐ．）、例えば、エヌ クラッサ（Ｎ．ｃｒａｓｓａ）およびエヌシトフィラ（Ｎ．ｓｉｔｏｐｈｉｌａ）；ネオカリマスチクス エス・ピー・ピー（Ｎｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘ ｓｐｐ．）；オルピノマイセスエス・ピー・ピー（Ｏｒｐｉｎｏｍｙｃｅｓ ｓｐｐ．）；ペニシリウム エス・ピー・ピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐｐ．）；ファネロカエート エス・ピー・ピー（Ｐｈａｎｅｒｏｃａｅｔｅｓｐｐ．）；フェレビア エス・ピー・ピー（Ｐｈｌｅｂｉａｓｐｐ．）；ピロマイセス エス・ピー・ピー（Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．）；シュードモナス エス・ピー・ピー（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ��．）；リゾプス エス・ピー・ピー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｓｐｐ．）；シゾフィラムエス・ピー・ピー（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｐｐ．）；トラメテス エス・ピー・ピー（Ｔｒａｍｅｔｅｓｓｐｐ．）；トリコダーマ エス・ピー・ピー（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｓｐｐ．）、例えば、ティ レエセイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）、ティレエセイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）（ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）およびティ ビリデ（Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ）；および、ウロクラジウム エス・ピー・ピー（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍｓｐｐ．）、例えば、ユー コンソルチアレ（Ｕ．ｃｏｎｓｏｒｔｉａｌｅ）；ジゴリンキュスエス・ピー・ピー（Ｚｙｇｏｒｈｙｎｃｈｕｓ ｓｐｐ．）のような真菌から誘導することもできる。同様に、ポリエステラーゼは、バシラス エス・ピー・ピー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）；セルロモーナスエス・ピー・ピー（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）；クロストリジウム エス・ピー・ピー（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｓｐｐ．）；マイセリオフトラ エス・ピー・ピー（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｓｐｐ．）；シュードモナス エス・ピー・ピー（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）、例えば、ピーメンドシナ（Ｐ．ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）およびピー プチダ（Ｐ．ｐｕｔｉｄａ）；テルモモノスポラ エス・ピー・ピー（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａｓｐｐ．）；テルモマイセス エス・ピー・ピー（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．）、例えば、ティ ラヌギノサ（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）；ストレプトマイセスエス・ピー・ピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｐ．）、例えば、エス オリボクロモゲネス（Ｓ．ｏｌｉｖｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）およびエススカビエズ（Ｓ．ｓｃａｂｉｅｓ）のような細菌において；および、フィブロバクター スキノゲネス（Ｆｉｂｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｕｃｃｉｎｏｇｅｎｅｓ）のような繊維分解反すう（ｒｕｍｉｎａｌ）細菌において；ならびに、例えば、カンディーダエス・ピー・ピー（Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．）、例として、シーアンタルクチカ（Ｃ．Ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）、シー ルゴサ（Ｃ．ｒｕｇｏｓａ）；トレシー（Ｔｏｒｒｅｓｉｉ）；シー パラプシロシス（Ｃ．ｐａｒａｐｓｌｉｏｓｉｓ）、シーサケ（Ｃ．ｓａｋｅ）；シー ゾイラノイデス（Ｃ．ｚｅｙｌａｎｏｉｄｅｓ）；ピチアマイヌータ（Ｐｉｃｈｉａ ｍｉｎｕｔａ）；ロドトルーラグルチニス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｇｌｕｔｉｎｉｓ）；アール・ムシラギノーサ（Ｒ．ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）；および、スポロボロマイセスホルサチクス（Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ ｈｏｌｓｔｉｃｕｓ）のような酵母において見出すことができることが予想される。
【００３８】
“テキスタイル”とは、布帛；もしくは、ヤーン；または、布帛もしくはヤーンを組込んだ製品を意味する。本発明で処理することのできるテキスタイルの例としては、被服、履物、椅子張り、ドラペリー、カーペット、屋外衣服、ロープおよびロープ基体の製品が挙げられる。本発明で使用する場合、テキスタイルとは、例えば、医療用に使用される不織布が挙げられる。
【００３９】
“生物学的材料”とは、生物学的由来から誘導されるいずれかの組成物を意味し、細胞、ベクター、ＤＮＡ、蛋白質、細胞膜、細胞構成成分、ＲＮＡまたはこのような材料を含むいずれかの混合物が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４０】
“テキスタイル特性”とは、物品の外観、感触または快適性に欠くことのできないポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛を含むテキスタイルの特性を意味する。本明細書で使用するテキスタイル特性としては、脱ピリング；抗ピリング；手触りの改善；感触の改善；外観、例えば、艶およびドレープ性の改善；湿潤性または吸収性を改善すること；静電的なまつわりを減少させること；油性の汚れ吸引力を低下させること；および、汚れの放出特性を改善させること；または、テキスタイルに独特の特徴を生ずるようにテキスタイルを改善するためにポリエステルの物理的改質による独特の外観を生じさせることが挙げられる。
【００４１】
“処理”とは、ポリエステラーゼによる処理に関して、物品の特性が有意に改善される程に、酵素がポリエステル物品の表面と反応することができるように、ポリエステラーゼをポリエステル物品に適用する方法を含むことを意味する。概して、これは、ポリエステラーゼの酵素作用を促進する環境において、ポリエステラーゼがポリエステル物品と混合されることを意味する。このような状態は、当酵素学者であれば、ルーチン的な試験を通して容易に測定することができる。テキスタイルの製造で使用される繊維、ヤーンまたは布帛のコンテキストにおいては、好ましい実施態様において、テキスタイル特性が改質される。樹脂またはフィルムのコンテキストにおいて、ポリエステルフィルムまたは樹脂の表面特性は、帯電性塗料またはその他の物質をその表面に付着するように、例えば、表面の親水性を改質するように改質される。
【００４２】
“テキスタイル仕上剤”とは、消費材または工業製品の製造の間にポリエステル繊維、ヤーンまたは布帛に添加されるサイズ剤、滑剤、脱泡剤、帯電防止剤およびその他の組成物を意味する。
【００４３】
本発明に従う処理は、有効量のポリエステラーゼまたはポリエステラーゼの組合せを、例えば、緩衝液または界面活性剤を含めその他の任意の成分と一緒に含有する水溶液（または有機溶剤あるいは有機化合物の混合物）を調製する工程を含むのがよい。有効量のポリエステラーゼ酵素組成物は、その意図する目的に対して十分な濃度のポリエステラーゼ酵素である。かくして、例えば、本発明に従い一連の洗浄にわたって脱ピリングを生ずることを意図する組成物中の“有効量”のポリエステラーゼは、ポリエステラーゼを使用しない同様の方法との比較において、例えば、テキスタイル物品を含有するポリエステルのテキスタイル特性を改善するか、または、フィルムまたは樹脂の表面特性を改善するために所望される効果を生ずるであろう量である。使用されるポリエステラーゼの量は、また、使用される装置；使用されるプロセスパラメータ、例えば、ポリエステラーゼ処理溶液の温度、ポリエステラーゼ溶液への暴露時間およびポリエステラーゼ活性にも依存する（例えば、個々の溶液は、より低い活性のポリエステラーゼ組成物と比較して、さらに活性なポリエステラーゼ組成物が使用されるより低濃度のポリエステラーゼを必要とするであろう。）。処理溶液中のポリエステラーゼの正確な濃度は、当業者であれば、上記因子および所望される結果に基き容易に測定することができるであろう。しかし、本明細書で開示される利点は、比較的厳格なポリエステラーゼ処理を必要とすることが本発明者らによりここで認められている。かくして、本明細書に記載する利点は、現在的に酵素を特徴とするポリエステラーゼの程よい濃度および比較的短い（１時間未満）処理時間で示されにくい。にもかかわらず、処理されるポリエステラーゼ；または、所望される利点レベルに到達し、かくして本発明の範囲に入るのに１時間未満の処理を必要とする示される条件下でポリエステルについて異常に高い活性を有するポリエステラーゼを得ることが可能であり、かつ、好ましい。同様に、大量のポリエステラーゼを比較的短時間使用すると、また、本明細書に記載する利点の達成を生ずることもできる。
【００４４】
１つの処理実施態様において、使用されるポリエステラーゼが所望される活性を示す範囲内に溶液のｐＨを維持するのに緩衝液の濃度が十分となるように、処理組成物において緩衝液が使用される。ポリエステラーゼが活性を示すｐＨは、使用されるポリエステラーゼの性質に依存する。使用される緩衝液の正確な濃度は、当業者であれば、容易に理解することのできる数種の因子に依存するであろう。例えば、好ましい実施態様において、緩衝液および緩衝液濃度は、最適なポリエステラーゼ活性に要求されるｐＨの範囲内に最終ポリエステラーゼ溶液のｐＨを維持するように選択される。本発明のポリエステラーゼの最適ｐＨ範囲の測定は、周知の技術に従い確定することができる。ポリエステラーゼの活性範囲内のｐＨに適した緩衝液は、また、本分野の当業者に周知である。
【００４５】
ポリエステラーゼおよび緩衝液以外に、処理組成物は、界面活性剤、すなわち、カチオン性、非−イオン性またはアニオン性界面活性剤を含有してもよい。適した界面活性剤としては、使用されるポリエステラーゼおよび布帛と相溶性の界面活性剤が挙げられ、例えば、アニオン性、非−イオン性および両性界面活性剤が挙げられる。適したアニオン性界面活性剤としては、直鎖または分岐アルキルベンゼンスルホネート類；直鎖または分岐アルキル基またはアルケニル基を有するアルキルまたはアルケニルエーテルサルフェート類；アルキルまたはアルケニルサルフェート類；オレフィンスルホネート類；アルカンスルホネート類等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。アニオン性界面活性剤についての適した対イオンとしては、アルカリ金属イオン類、例えば、ナトリウムおよびカリウム；アルカリ土類金属イオン類、例えば、カルシウムおよびマグネシウム；アンモニウムイオン；および、炭素数２または３を有する１−３個のアルカノール基を有するアルカノールアミン類が挙げられるが、これらに限定されるものではない。両性界面活性剤としては、例えば、第４級アンモニウム塩スルホネート類およびベタイン型の両性界面活性剤が挙げられる。このような両性界面活性剤は、同一分子内に正および負に帯電した基の両方を有する。非イオン性界面活性剤は、概して、ポリオキシアルキレンエーテル類；および、高級脂肪酸アルカノールアミド類またはそのアルキレンオキシド付加体；ならびに、脂肪酸グリセリンモノエステル類を含む。界面活性剤の混合物も、また、当業者公知の方法で使用することができる。
【００４６】
本発明の特に好ましい実施態様において、処理組成物に、グリセロール、エチレングリコールまたはポリプロピレングリコールを加えることが望ましい。本出願人らは、グリセロール、エチレングリコールまたはポリプロピレングリコールの添加がポリエステラーゼのポリエステルに及ぼす活性の強化に寄与することを見出した。本出願人らは、脱泡剤および／または滑剤、例えば、登録商標Ｍａｚｕがポリエステラーゼの活性に及ぼす望ましい効果を有することを決定した。
【００４７】
幾つかの実施態様において、酵素を使用する分解を調節する目的に対し、上記考察したパラメータを調節することが望ましいかもしれない。例えば、ｐＨは、ポリエステラーゼの活性を識別するために、ある一定の時点で調整され、望ましくない過剰の分解を防止する。あるいは、酵素活性を識別する他の分野で認識されている方法は、例えば、プロテアーゼ処理および／または加熱処理を果たすことができる。
【００４８】
上記示したように、本発明は、洗濯用洗剤の製造にて有用である。例えば、カチオン性洗濯アジュバント、すなわち、布帛柔軟剤；または、洗濯した布帛の感触、外観または快適性を改善するその他のこのような化合物の吸収を補助するのに望ましいかもしれない。この場合に、本発明は、有益なアジュバントを吸収するのを補助するように、洗浄サイクルの間にポリエステルを改質する方法を提供するであろう。
【００４９】
実施例
実施例  １
本実施例は、潜在的な酵素候補においてポリエステラーゼ活性を同定する２つの検定を提供する。好ましくは、酵素は、両検定において、ポリエステル加水分解活性を示すであろう。
【００５０】
（Ａ）  酵素を使用して、紫外光吸収に基き長鎖ポリエステルポリマー繊維を加水分解するための検定（ＵＶ検定）
本検定は、ポリエステルの酵素を使用する加水分解により生ずるテレフタレートおよびそのエステル類の放出をモニターし、試料をＵＶスペクトルに賦し、吸収を測定することにより、加水分解生成物を測定する。
【００５１】
材料：
酵素反応緩衝液：１００ｍＭのＴｒｉｓ，ｐＨ８，所望により、０．１％ＢｅｒｉｊR−３５を含有。
【００５２】
処理法：
１．  ポリエステルを高温水で洗浄し、空気乾燥する。本出願人らは、ＤａｃｒｏｎｎR５４織りポリエステル（Ｔｅｓｔｆａｂｒｉｃｓから）（以下の説明において使用する）のような容易に得られる標準化されたポリエステルの使用を本明細書で推奨し、例として挙げる。しかし、改質が所望される個々のポリエステル基質、例えば、布帛、粉末、樹脂またはフィルムを使用し、それにより、選択される酵素がその個々の基質に最適な活性を確実に有するようにすることが好ましいことが多い。このような場合、以下に記載するＤａｃｒｏｎの代わりに所望されるポリエステル基質で代替する必要があるのみである。
【００５３】
２．  ＤａｃｒｏｎR５４から５／８インチの円形見本を切り取る。
３．  見本をシールした１２−穴の微量滴定板内の反応緩衝液中、２５０ｒｐｍでオービタル（ｏｒｂｉｔａｌ）振盪しつつ、インキュベートする。典型的な反応物は、体積１ｍｌ中に、１０μｇの酵素を含む。３つの試料を試験する必要がある：（１）  基質＋緩衝液；（２）  酵素＋緩衝液；（３）  酵素＋基質＋緩衝液。
【００５４】
４．  反応を４０℃で１８時間進行させる。
５．  テレフタレートおよびそのエステルは、２４０−２４４ｎｍ（εM〜１０，０００）付近に強い特性吸収ピークを有する。したがって、酵素を使用する加水分解により、これらの種が反応の液層に放出される場合、反応物の液層の吸収は、これら波長で増大するであろう。
【００５５】
６．  加水分解が生じたか否かを決定するために、酵素＋基質＋緩衝反応物の液層の２４０−２５０ｎｍ付近の吸収を測定する。適当なブランク（基質＋緩衝液、および、酵素＋緩衝液）を差し引く必要がある。これら測定は、分光光度計の石英キュベット内または要求される波長を読み取ることのできる微小板読み取り器内のＵＶ−透過性微小滴定板において実施可能である。
【００５６】
７．  ブランクより高い吸収読みが事実上テレフタレート化合物によることを確認するために、反応混合物の吸収スペクトルは、２２０〜３００ｎｍに走査される必要がある。２４０〜２４４ｎｍの付近のピークのみを事実上の反応生成物と考える必要がある。
【００５７】
８．  テレフタル酸およびジエチルテレフタレートは、市販入手可能である。これらの吸収スペクトルは、標準として使用する必要がある。
（Ｂ）  酵素を使用するメチレンブルーの結合に基く長鎖ポリエステルポリマー繊維の加水分解についての検定（ＭＢ検定）
この検定は、メチレンブルー（カチオン性染料）のポリエステルの加水分解によって生ずる遊離のカルボキシレート基に対する結合を使用する。
【００５８】
材料：
酵素反応緩衝液：１００ｍＭのＴｒｉｓ，ｐＨ８，０．１％ＴｒｉｔｏｎRＸ−１００を含有。
【００５９】
洗浄緩衝液：１００ｍＭのＭＥＳ，ｐＨ６．０。
染料溶液：１ｍＭのＭＥＳ，ｐＨ６．０中０．１ｍｇ／ｍｌのメチレンブルー。
【００６０】
染料溶離緩衝液：１０ｍＭのＭＥＳ中０．５ＭのＮａＣｌ，ｐＨ６．０。
試験布帛よりのＤａｃｒｏｎ５４織りポリエステル。
処理法：
１．  ポリエステルを高温水で洗浄し、空気乾燥する。本出願人らは、ＤａｃｒｏｎｎR５４織りポリエステル（Ｔｅｓｔｆａｂｒｉｃｓから）（以下の説明において使用する）のような容易に得られる標準化されたポリエステルの使用を推奨する。しかし、改質が所望される個々のポリエステル基質、例えば、布帛、粉末、樹脂またはフィルムを使用し、それにより、選択される酵素がその個々の基質に最適な活性を確実に有するようにすることが好ましいことが多いであろう。
【００６１】
２．  ＤａｃｒｏｎRから５／８インチの円形見本を切り取る。
３．  見本をシールした１２−穴の微量滴定板内の反応緩衝液中、２５０ｒｐｍでオービタル（ｏｒｂｉｔａｌ）振盪しつつ、インキュベートする。典型的な反応物は、体積１ｍｌ中に、１０μｇの酵素を含む。ブランク（酵素を含まない試料）を同様に試験する必要がある。
【００６２】
４．  反応は、４０℃で１８時間進行させられる。
５．  反応溶液は吸引により取り出し、見本は、続いて、（１）残留酵素を枯渇させるための１ｍｌインキュベーション緩衝液；（２）インキュベーション緩衝液を枯渇させるための１ｍｌ水；（３）見本をｐＨ６で平衡とさせるための１００ｍＭのＭＥＳ緩衝液１ｍｌ；および、（４）ＭＥＳ緩衝液を枯渇させるための再度水１ｍｌ；で洗浄する。
【００６３】
６．  各穴に染料溶液１ｍｌを加え、そのプレートを４０℃で２０分間２５０ｒｐｍで振盪する。この場合に、メチレンブルーを使用する。しかし、その他のカチオン性染料または“レポーター（ｒｅｐｏｒｔｅｒ）”試薬も同様に使用することができる。１００ｍＭのＮａＯＨによる加水分解は正の対照として使用することができる。
【００６４】
７．  吸引により、過剰の染料（メチレンブルー）を取り除き、穴を水１ｍｌで３回洗浄する。
８．  １ｍｌの染料溶離緩衝液を各穴に加え、プレートを４０℃で３０分間２５０ｒｐｍで振盪する。
【００６５】
９．  ３００μｌの染料溶出液を各穴から９６穴板に移し、６５０ｎｍにおける吸収ピークを測定する。
実施例１（ａ）および１（ｂ）に記載した上記検定のいずれにおいても、吸収の読みは、実験誤差または非可水分解効果に起因しない有意な加水分解生成物を示す必要がある。当業者であれば、これらの効果；および、結果の解釈においてそれらに対して保護する方法を十分に承知であろう。
【００６６】
（Ｃ）  ジエチルテレフタレート（ＤＥＴ）の酵素を使用する加水分解検定
この分光学的検定は、その加水分解を伴うＤＥＴのＵＶスペクトルにおける変化をモニターする。
【００６７】
ＤＥＴは、２４４ｎｍ（εM〜１０，０００）付近に特性吸収ピークを有する。エステル加水分解生成物は、それより低い吸収を有し、そのピークは、２４０ｎｍにシフトする。したがって、ＤＥＴの加水分解は、２５０ｎｍの吸収における減少を測定することによりモニターすることができる。
【００６８】
試薬：
酵素反応緩衝液：１０ｍＭのＴｒｉｓ，ｐＨ８。
ＤＥＴ貯蔵溶液：ＤＭＳＯ中１００ｍＭ。
【００６９】
処理法：
１．  反応緩衝液にＤＥＴを１０００倍希釈して１００μＭ溶液を生成させる。キュベットまたはＵＶ透過性微量滴定板に入れる。
【００７０】
２．  分光光度計の波長を２５０ｎｍに設定する。
３．  酵素を加え、吸収の変化をモニターする。酵素を含まない緩衝液の同体積の別個試料において、バックグラウンド加水分解により生ずる吸収変化を測定する。
【００７１】
４．  反応進行曲線の直線部分より、反応速度を計算し、−ｍＡＵ／分として報告し、緩衝液ブランクの反応速度を差し引く。
（Ｄ）  ＰＥＴおよびＤＥＴ検定の結果の比較
多数の源より、エステラーゼおよび／またはリパーゼ活性を有する酵素を得、実施例１（ａ）、１（ｂ）および１（ｃ）に記載した検定に従い試験した。使用した条件下、ピー  メンドシナ（Ｐ．ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）クチナーゼの加水分解生成物の吸収を１．０として、比較結果を表Ｉに表記する。
【００７２】
【表１】
0004996027.tif 000002
【００７３】
【表２】
0004996027.tif 000003
【００７４】
上記から理解されうるように、試験したほとんど全ての酵素は、ＤＥＴ検定における活性（ジ−エステラーゼ活性）を有する。しかし、試験した酵素の１つのみがＰＥＴ検定の両方において有意な活性を有する。この証拠より、ＤＥＴ検定において活性を有し、また、ＰＥＴ加水分解活性を有する酵素に関して交差型（ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ）が存在するものの、ＤＥＴ加水分解活性を有するが、ポリエステラーゼ活性を有しない非常に多数の酵素が存在することが明らかである。実施例２および３において見られるように、ＰＥＴ活性を有する酵素は、ポリエステル繊維の酵素を使用する有意な変換を生ずる。このデータから、本出願人らは、ポリエステラーゼ活性を有する酵素の同定は、酵素がモノ−またはジ−エステラーゼ活性を有するか否かということからは予想できないと決定した。
【００７５】
実施例  ２
ポリエステルの機能性表面特性を改質するためのポリエステラーゼによる酵素を使用するポリエステル繊維の表面改質
・装置：ラウンダー−オメーター（Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏｍｅｔｅｒ）
・処理ｐＨ：ｐＨ８．６（５０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液）
・処理温度：４０℃
・処理時間：２４時間
・酵素：シュードモナスメンドシナからの４０ｐｐｍのクチナーゼ
・対照：不活性化した４０ｐｐｍのクチナーゼ（シュードモナスメンドシナ）
・基質：１００％ポリエステル−
−ＤａｃｒｏｎＲ５４（試験布帛からの形式番号７７７）
−ＤａｃｒｏｎＲ６４（試験布帛からの形式番号７６３）
観測される全ての効果がポリエステル表面の改質のみにより、付着蛋白質効果から生じないことを確認するために、見本をプロテアーゼで処理した。ポリエステラーゼ処理後、５／８インチの円板を処理した見本から切り取った。ついで、円板を５ｐｐｍのサブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）および０．１％の非−イオン性界面活性剤（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）とインキュベートして、ポリエステル上に結合された蛋白質を除去した。結合した蛋白質のレベルは、最小の蛋白質が布帛に結合したままであることを確認するために、コオマシーブルー染色（ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  ｂｌｕｅ  ｓｔａｉｎｉｎｇ）を使用して検討した。
【００７６】
酵素処理、続く、プロテアーゼ／界面活性剤処理後、円板を１２穴の微量滴定板内で以下の条件下染色した：
・液比：４０対１
・染料濃度：０．４％ｏｗｆ
・温度：４０℃
・ｐＨ：６（ｐＨ６．０での１ｍＭのＭＥＳ緩衝液）
・時間：２０分
・シェーカーの攪拌：２００ｒｐｍ
染色後、円板を脱イオン水で３回濯ぎ、空気乾燥し、ついで、反射器を使用してＣＩＥ
【数１】
0004996027.tif 000004
を使用して計算した。
【００７７】
（これらの条件は、例えば、Ｄｕｆｆ  ＆  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，Ｇｉｌｅｓ’ｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｃｏｕｒｓｅ  ｉｎ  Ｄｙｅｉｎｇ，  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｄｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｏｕｒｉｓｔｓにおいて定義されている。）
【００７８】
【表３】
0004996027.tif 000005
【００７９】
結果は、図１および図２にまとめてグラフに示す。理解されるように、ポリエステラーゼは、ある範囲のカチオン性染料を吸収および付着するポリエステル布帛の能力に有意に影響を及ぼす。
【００８０】
実施例  ３
酵素触媒ポリエステル処理
（Ａ）  酵素を使用するポリエステルの脱ピリング
ポリエステラーゼによるポリエステルの脱ピリングを立証するために、２４時間予めピリングしたＤａｃｒｏｎＲ５４★見本を４０℃で使用し、以下の実験を行った。各ラウンダー−オメーターサイクルを２４時間かけ、実験当たり３つの（５”×７”）見本を加えた。
★ＤａｃｒｏｎR５４は、Ｄｕｐｏｎｔによる１００％分散可染性ポリエステル製品である。
【００８１】
実験１）５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  緩衝液（ｐＨ８．６）＋０．０１％ナトリウムアジド
実験２）５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  緩衝液（ｐＨ８．６）＋０．０１％ナトリウムアジド＋ポリエステラーゼ（ピー  メンドシナからのクチナーゼ）
実験３）２０ｍＭ  ＮａＯＨ
各サイクル後、見本を脱イオン水で濯ぎ、ついで、新しい溶液を入れたオートクレーブラウンダー−オメーターカニスターに移した。
【００８２】
ＮａＯＨ処理した見本（実験１）は、５サイクル後、明らかな脱ピリング効果を示し、実験を停止した。各サイクル後、処理した液体の２５０ｎＭにおける吸収を測定して、ＰＥＴ加水分解を定量した。
【００８３】
脱ピリングにおける明らかな差は、緩衝液対照（実験１）対ポリエステラーゼ処理した（実験２）見本の間で観測された。実験は、１４サイクル後停止した。
これら結果は、ポリエステラーゼ処理が対照による処理と比較して、脱ピリングにおいて著しい改善を生じたことを示す。また、図３に示すように、脱ピリングにおける改善は、液体におけるＰＥＴ加水分解生成物の蓄積に対応し、ピリング特性における改善が酵素のポリエステルに及ぼす加水分解作用の結果であったことを立証する。
【００８４】
（Ｂ）  酵素媒介ポリエステル布帛重量損失
上記したラウンダー−オメーター実験後、（実験当たり３回）処理した見本を個々に秤量し、平均重量損失を計算した。結果は、図４に示す。
【００８５】
ポリエステラーゼ処理した見本およびＮａＯＨ処理した見本とも、緩衝液対照および予めピリングした見本と比較して有意な重量損失を示した（ｐ＜０．０５）。
【００８６】
（Ｃ）  ポリエステラーゼで生ずる表面改質を示す電子顕微鏡法
走査電子顕微鏡法を使用して、１）緩衝液；および、２）緩衝液＋ピー  メンドシナ  クチナーゼで１ヶ月間４０℃でインキュベートしたＰＥＴ繊維の写真撮影を行った。その結果は、図５−図８に示す。
【００８７】
（Ｄ）  ＰＴＴのクチナーゼによる加水分解
装置：ラウンダー−オメーター
処理ｐＨ：ｐＨ８．６（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  緩衝液）
処理温度：４０℃
処理時間：２４時間
酵素：クチナーゼ（シュードモナスメンドシナ）４０ｐｐｍ
対照：不活性化したクチナーゼ（シュードモナスメンドシナ）４０ｐｐｍ
基質：洗浄した１００％ＣｏｒｔｅｒｒａＲブランドＰＴＴポリエステル
クチナーゼ処理後、処理した見本から５／８インチ円板を切り取った。５ｐｐｍのサブチリジンおよび０．１％の非イオン性界面活性剤（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）で円板をインキュベートして、ポリエステルに結合した蛋白質を取出した。可染性における増加を図９に示す。このデータより、ポリエステラーゼがＰＴＴ基体布帛の表面特性を改質したことが明らかである。
【００８８】
本明細書で列挙した全ての特許および文献は、それらの全体を参考とすることによって本明細書に組込む。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、Ｄａｃｒｏｎ５４の可染性に及ぼすポリエステラーゼ処理の効果を示す。
【図２】  図２は、Ｄａｃｒｏｎ６４の可染性に及ぼすポリエステラーゼ処理の効果を示す。
【図３】  図３は、Ｄａｃｒｏｎ５４のポリエステラーゼ酵素処理からの比較定量的加水分解生成物を示す。
【図４】  図４は、ポリエステラーゼ酵素による処理後のポリエステルの重量損失を示す。
【図５】  図５は、ｗ／１００ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液（ｐＨ８．６／４０℃）でインキュベートしたポリエステル繊維の走査電子顕微鏡写真を示す。１０００Ｘ．
【図６】  図６は、Ｔｒｉｓ緩衝液クチナーゼ（ｐＨ８．６／４０℃）でインキュベートしたポリエステル繊維の走査電子顕微鏡写真を示す。１０００Ｘ．
【図７】  図７は、緩衝液およびグリセロール（５０／５０ｗ／ｗ）でインキュベートしたポリエステル繊維の走査電子顕微鏡写真を示す。５００Ｘ．
【図８】  図８は、ｗ／緩衝液およびグリセロールならびにクチナーゼで処理したポリエステル繊維の走査電子顕微鏡写真を示す。５００Ｘ．
【図９】  図９は、ＣｏｒｔｅｒｒａTM布帛の可染性に及ぼすポリエステラーゼ処理の効果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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