(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物からなる糖尿病の予防及び治療剤。
【請求項２】
ツクバネソウ属植物が、蚤休、重楼又は王孫である請求項１に記載の糖尿病の予防及び治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、糖尿病の予防及び治療剤に関し、より詳細には、ユリ科（Liliaceae）ツクバネソウ属(Paris)植物を利用した糖尿病の予防及び治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
飲食における６０〜７０％を占める炭水化物は、種々の酵素によって加水分解され、ブドウ糖となって消化管から吸収され血糖値として現れる。例えば、デンプンはアミラーゼにより分解され、麦芽糖などのオリゴ糖となり、グルコシターゼによりブドウ糖となって吸収されて血糖値を上昇させる。通常、高血糖状態になるとインシュリンが分泌され、ブドウ糖が消費されて血糖値が低下する。
【０００３】
しかし、長期間にわたる毎飲食後の急激な血糖値の上昇によるインシュリンの過剰分泌が繰り返されると糖尿病が発病し、高血糖状態の持続によって種々の合併症が生じる。また、近年の生活習慣の欧米化に伴う高カロリーの西洋食への移行や過食、モータリゼーションの発達による運動不足などが要因となって、糖尿病の可能性が否定できない人、いわゆる糖尿病予備軍と呼ばれる人の増加が大きな問題となっている。
【０００４】
糖尿病の治療に用いられる医薬品としては、膵インシュリン分泌の促進作用のあるスルホニル尿素剤；肝の糖新生の抑制と末梢の筋肉、脂肪組織でのインシュリン感受性の亢進作用のあるビグアナイド系薬剤；チアゾリジン系血糖上昇抑制剤；消化管粘膜に存在するα−グルコシターゼ（二糖類加水分解酵素）の活性を阻害してデンプンやショ糖からブドウ糖の生成を抑制して血糖値上昇を抑制するα−グルコシダーゼ阻害薬〔例えばアカルボース（バイエル社製、商品名グルコバイ）およびボグリボース（武田薬品社製、商品名ベイスン）等〕等があり、経口投与用の糖尿病治療剤として使用されている。
しかし、α−グルコシダーゼ阻害剤をはじめとする糖尿病治療剤は、一般に合成品である。また、最近になって重篤な肝障害の発生が報告されるなど、その使用にあたっては医師の厳格な管理・指導が必要とされ、容易に入手、使用できないのが現状である。
さらに、健康食品として、抗糖尿病効果を標榜したものが多数認められるが、有効性に疑問のあるものが多く、具体的に生体での効能、効果が証明されたものはほとんど認められない。
【０００５】
このような状況下において、消化管からの急激なブドウ糖吸収を抑制する効果を有し、安全で安価な天然素材の糖尿病の予防及び治療剤の開発が要望されている。
一方、ユリ科ツクバネソウ属植物を基源とする蚤休、重楼、王孫は、中国伝総医学では天然薬物として位置付けられており、例えば、蚤休の薬効としては、解毒、鎮咳、強壮、強精などが伝承されており、また、癰腫、疔瘡、瘰癧、慢性気管炎、小児のひきつけの治療、疲労回復を目的に内服されたり、神経性皮膚炎、痔、ヘビの咬傷の治療に外用されたりしている。重楼は、膏薬にして腫瘍中毒に外用される。王孫は、鎮痛、強壮、消腫などの薬効が伝承されており、衰弱疲労に内服されている。
しかし、これらの伝承薬効を科学的に証明するような医薬学的評価はほとんど行われていない天然素材であり、これらの植物に、糖尿病の予防や治療に関する作用が認められたとの報告はない。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、飲食後などにおける高血糖状態におけるインシュリン過剰分泌の繰り返しによる障害の発生を避けるために、資源的に豊富に存在する植物を基源とする天然薬物や、栽培によって品質が安定した食物について、消化管におけるブドウ糖吸収を抑制する作用及びα−グルコシダーゼ阻害活性を指標にした高血糖状態の改善作用等に関する研究を重ねたところ、ユリ科ツクバネソウ属の植物エキスに、長期連用に耐え得るほど安全で、かつ強力なブドウ糖吸収の抑制作用、α−グルコシダーゼ阻害作用及び血糖値上昇抑制作用があることを見出し、本発明の完成に至った。
すなわち、本発明によれば、ユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物からなる糖尿病の予防及び治療剤が提供される。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明の糖尿病の予防及び治療剤に利用することができる植物は、ユリ科（Liliaceae）ツクバネソウ属(Paris)に属するものであれば特に限定されるものではなく、例えば、蚤休（Paris polyphylla）、重楼(Palis petiolata)及び王孫(Paris tetraphylla）等が挙げられる。具体的には、
蚤休：七葉一枝花 (学名：Paris polyphylla  SMITH var. chinensis FRANCH.、産地（中国における省）：江蘇、浙江、福建江西、安徴、湖北、四川、貴州、雲南、広東、広西など）、闊弁蚤休(Paris polyphylla SMITH var. platypetala FRANCH.、四川、雲南)、毛脈蚤休(Paris polyphylla SMITH var. pubessens HANDMAZZ.、四川、雲南)、狭葉蚤休(Paris polyphylla SMITH var. stenophylla FRANCH.、四川、雲南)、金線重楼（Paris polyphylla SMITH、  貴州、雲南、四川、チベットなど）、雲南重楼(Paris polyphylla SMITH var. yunnanensis FRANCH., HAND-MAZZ.、雲南)、クルマバツクバネソウ（Paris quadrifolia L.=Paris verticillata、山西など、日本、朝鮮、サハリン、シベリア）、
重楼：具柄王孫(Paris petiolata  BAK ex FORB.、四川、広西など)、
王孫：ツクバネソウ(Paris tetraphylla A.GRAY、江蘇、浙江、江西、安徴、四川など、日本、朝鮮)等（以上、「中薬大辞典」小学館編による）である。
【０００８】
これらの植物は、種類や産地等によって、その中に含有される成分の量や種類に若干の差異があると考えられるが、中国、朝鮮、日本、サハリン、シベリアなどの産地のほか、いずれの地域に生育しているものでも使用することができる。
このような植物は、根茎など地下部のみならず、葉等、ツクバネソウ属植物の全ての部位を利用することができる。粉末として用いる場合には、採取した植物を、そのまま又は乾燥して粉砕機等で粉砕することにより、１００〜１０００メッシュ、好ましくは２００〜５００メッシュの粉末として調製することができる。
【０００９】
また、抽出物として用いる場合には、このような植物をそのまま、乾燥した後又は粉砕して、水、低級アルコール（メタノール、エタノール、ブタノール等）又はこれらの混合物などの溶媒により加熱又は冷浸して得ることができる。溶媒は、植物に対して２〜１０重量倍程度、好ましくは２〜５重量倍程度で使用することが適当である。また、４０〜８０℃程度に、１〜１０時間程度加熱するか、１０〜３５℃程度の冷浸温度にて、振盪下又は非振盪下に、植物を１〜１０日間程度浸漬することによって抽出物を調製することができる。
【００１０】
得られた抽出物は、濃縮して用いてもよい。濃縮は、低温低圧下で行うことが好ましい。また、この濃縮は乾固するまで行ってもよい。なお、濃縮する前にろ過し、ろ液を濃縮してもよい。
また、得られた抽出物は、精製処理に付してもよい。精製処理方法としては、クロマトグラフ法、イオン交換樹脂を使用する溶離法等を単独又は組み合わせて使用する方法が挙げられる。
【００１１】
例えば、クロマトグラフ法としては、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、遠心液体クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等のいずれか又はそれらを組み合わせて使用する方法が挙げられる。この際の担体、溶出溶媒等の精製条件は、各種クロマトグラフィーに対応して適宜選択することができる。例えば、順相クロマトグラフィーの場合にはクロロホルムーメタノール系の溶媒、逆相クロマトグラフィーの場合には、水ーメタノール系の溶媒を使用することができる。
【００１２】
また、イオン交換樹脂を使用する溶離法としては、得られた抽出液を、水又は低級アルコールに希釈／溶解させ、この溶液をイオン交換樹脂に接触させて吸着させた後、低級アルコール又は水で溶離する方法が挙げられる。この際に使用される低級アルコールは、上述した通りであり、なかでもメタノールが好ましい。イオン交換樹脂としては、通常、当該分野の精製処理に使用されるものであれば特に限定されるものではなく、例えば、巨大網状構造で多孔性の架橋されたポリスチレン系樹脂、アーバンライト、セルローズ等が挙げられる。
ユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物は、医薬的に受容な塩、賦形剤、保存剤、着色剤、矯味剤等とともに、医薬品又は食品の製造分野において公知の方法によって、顆粒、錠剤、カプセル剤等の種々の形態で使用することができる。
【００１３】
また、ユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物は、健康食品に利用することができる。健康食品とは、通常の食品よりも積極的な意味で、保健、健康維持・増進等の目的とした食品を意味し、例えば、液体又は半固形、固形の製品、具体的には、クッキー、せんべい、ゼリー、ようかん、ヨーグルト、まんじゅう等の菓子類、清涼飲料、栄養飲料、スープ等が挙げられる。また、そのまま煎じて茶剤としてもよい。これらの食品の製造工程において、あるいは最終製品に、上記粉末、抽出物等を混合又は塗布、噴霧などして添加して、健康食品とすることができる。
【００１４】
ユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物の使用量は、年齢、症状等によって異なるが、例えば、予防のために用いるには、成人１回につき粉末では５０〜１０００ｍｇ程度、好ましくは５０〜３００ｍｇ程度、抽出物では精製の度合いや水分含量等に応じて、１０〜２００ｍｇ程度、好ましくは１０〜５０ｍｇ程度が挙げられ、食前３０分位に１日３回服用するのが望ましい。また、健康食品としての使用時には、食品の味や外観に悪影響を及ぼさない量、例えば、対象となる食品１ｋｇに対し、粉末及び抽出物の形態で、１０〜１０００ｍｇ程度の範囲で用いることが適当である。
以下に、本発明の糖尿病の予防及び治療剤の実施例を以下に詳しく説明する。
【００１５】
ユリ科ツクバネソウ属植物の抽出
蚤休、重楼及び王孫の粗切品１ｋｇに２〜３リットルの溶媒（水、メタノール（含水量１％）、エタノール（含水量５％）、ブタノール）をそれぞれ加えて、８０〜９０℃で３時間加熱又は３日間冷浸し、冷却後ろ過し、そのろ液を減圧下、約４５℃以下の温度のもとで溶媒を留去して乾燥エキスとした。
加熱では、水エキスの収率は約１４〜１８％、メタノールエキスでは約１０〜１５％、エタノールエキスでは約９〜１２％、ブタノールエキスでは約５〜８％であった。また、冷浸では、収率は加熱の場合の約２０％減であった。
得られた蚤休及び重楼の水抽出物は、いずれも、淡黄色粉末で強い吸湿性を示した。
また、以下の条件下での薄層クロマトグラフィでは、いずれもＲｆ値０．８付近に黄緑色スポット、０．７付近に数個の褐色スポット、０．３付近に黒色スポットが得られた。
【００１６】
担体：Silica Gel 60F254 pre-coated TLC plate(Merck社製）
展開溶媒：クロロホルム：メタノール：水（６：４：１）
発色：１％硫酸セリウムを含む１０％硫酸水溶液を噴霧後の加熱時の呈色による。
さらに、紫外線吸収スペクトル（島津ＵＶ−１６００、溶媒：メタノール）では、いずれも、２８０ｎｍ付近に極大吸収、２４５ｎｍ付近にｓｈ吸収を示した。
【００１７】
ＩＲスペクトル（島津FTIR-8100(KBr)）では、いずれも、３４３０ｃｍ-1付近に水酸基、２９４０ｃｍ-1付近にメチレン、１６３０〜１６６０ｃｍ-1付近にカルボニル基、オレフィン又はアミド基、１０５０ｃｍ-1付近にエーテル結合に由来すると思われる吸収が認められた。
【００１８】
α−グルコシダーゼの活性阻害試験
酵素の調製：Wistar系雄性ラット（体重１５０〜３５０ｇ）の空腸から得た刷子縁膜を粗酵素として用いた。この刷子縁膜を、０．０１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ＝６．０）に懸濁し、約２５〜５０n mol／ml／分の基質が加水分解される濃度に希釈した。刷子縁膜を用いたのは、マルターゼ、シュクラーゼなどのｄ−グルコシターゼを豊富に含有しているためである。
試験法：基質としてマルトースおよびシュクロースの各々を７４ｍＭで、５０μＬ、被験エキス（水エキス又はエタノールエキス）の各濃度のもの１００μＬを加え、３７℃で２〜３分間予備加温した。なお、基質および被験エキスは、ともにマレイン酸緩衝液(ＰＨ＝６．０)に溶解して用いた。
【００１９】
次に、これに、酵素液５０μＬを加えて３０分間反応させた。
反応の停止は、水８００μＬを加え、９２〜９７℃の水浴中に２分間入れることによって行った。
生成したグルコース量を、グルコースオキシダーゼ法（グルコースＣ１１テストワコー）により測定した。
なお、比較例として、甘味を選択的に抑制し、腸からの糖の吸収を遅らせる作用があると知られているギムネマ葉のエキスを上記と同様に得、同様に試験し、生成したグルコース量を測定した。
得られた結果から、α−グルコシダーゼ活性を５０％阻害するのに必要なエキス量を求めたところ、以下の結果が得られた。その結果を表１に示す。
【００２０】
【表１】
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表１から、蚤休、重楼、王孫エキスはいずれも、α−グルコシダーゼの活性阻害作用が強いことが分かった。また、メタノールエキスよりも水エキスの方が高い活性阻害能を示した。
【００２１】
ショ糖負荷における血糖値上昇抑制作用
絶食させたWister系雄性ラット(体重１３０〜１７０ｇ)を用い、一群６匹ととして蚤休、重楼及び王孫の水エキスおよび粉末をそれぞれ経口投与した。その３０分後にショ糖を負荷（０．５ｇ/ｋｇを経口投与）した。
糖負荷後、３０分後及び１時間後に無麻酔拘束下(採血時のみ)、頚動脈から採血し、血糖値を測定した。なお、血糖値は、グルコースオキシダーゼ法により測定した。
なお、粉末は、蚤休、重楼及び王孫の乾燥粗切品を粉砕機で粉砕し、５００メッシュ程度とした。また、比較例としてギムネマ葉のエキスを用いて、同様の測定を行った。その結果を表２に示す。
【００２２】
【表２】
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表２から、蚤休、重楼、王孫エキスはいずれも、インビボにおいて、ショ糖負荷における血糖値上昇抑制作用が強いことが分かった。
ユリ科ツクバネソウ属植物の抽出物が含有された健康食品
実施例１
小麦粉５０重量部、砂糖３５重量部、全卵１０重量部、上記で得られた水エキス５重量部を秤量した。
全卵に砂糖を混合した後、予め篩に通し小麦粉を加えて軽く混ぜ合わせて生地を作り、これを適当な形に成形し、オーブンで焼き上げてせんべいを作った。
【００２３】
実施例２
当該分野で公知の方法にしたがって、上記で得られた水エキスを、カプセルに充填し、１カプセル中に５０ｍｇ含有されるゼラチンカプセルを得た。
【００２４】
【発明の効果】
本発明によれば、本発明のユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物は、α−グルコシダーゼ阻害作用と糖負荷時の血糖上昇抑制作用があることから、過食や偏食などに起因した飲食後の過血糖状態を抑制するのみならず、生活習慣病の代表とも言える糖尿病の治療剤としても有効に利用することができる。
また、長い間の使用経験に基づく植物を基源とする天然薬物であることから、副作用等の心配がなく、安価に利用できるためダイエットや糖尿病予防にも有効である。
しかも、本発明のユリ科ツクバネソウ属植物の粉末及び／又は抽出物は、健康食品として摂取しやすい形態、例えば、菓子や飲料等の形態とすることができるため、容易に服用することができ、長期間に渡って、連続的に服用し続けることができる。