(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコサミンおよび超免疫卵製品を含むことを特徴とする、関節炎を治療するための組成物。
【請求項２】
グルコサミンが、グルコサミンＨＣｌおよびグルコサミン硫酸を含む群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
卵製品が、全卵、卵黄、卵白およびそれらの任意の画分を含む群から選択されることを特徴とする請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
卵製品が、免疫原性または遺伝子ワクチンで超免疫処理された産卵動物から得られることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
免疫原性ワクチンが、細菌性、ウィルス性、原虫性、菌類性および細胞性免疫原、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１種の抗原を含むことを特徴とする請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
遺伝子ワクチンが、ネイキッドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、ウィルスＤＮＡ、細菌ＤＮＡ、ＤＮＡ発現ライブラリー、ＤＮＡ−ＲＮＡ免疫原、ＤＮＡ−蛋白複合体およびＤＮＡリポソーム複合体の各断片、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１種の免疫原コード化ＤＮＡ構造体を含むことを特徴とする請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
卵製品の量が、前記組成物が投与される対象重量１キログラム当たり全卵１００ミリグラムから１０グラムの間、またはそれと等価な量の全卵の画分を含むことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
グルコサミンの量が、１０ミリグラムから５グラムを含むことを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、１９９９年９月１４日出願の米国仮特許出願第６０／１５３，８８７号および２０００年３月２７日出願の米国仮特許出願第６０／１９２，３８６号の特典を請求している。
【０００２】
（発明の背景）
発明の分野
本発明は動物における炎症を低減させる方法に関する。より詳細には、本発明は、動物における炎症、特に関節炎を低減させる際に相乗効果を生むための、卵製品とグルコサミンの組合せに関する。
【０００３】
炎症
ドーランド医学辞典で定義される炎症は、「組織の傷害や破壊によって引き起こされる局所的保護反応であって、傷害の原因および傷害を受けた組織の双方を破壊し、希薄化し、または隔離する反応である」。炎症は、微小血管系の開窓、血液成分の間質空間中への漏出および炎症組織中への白血球の遊走を特徴とする。巨視的には、炎症は、通常紅斑、浮腫、痛覚過敏（圧痛）および疼痛のよく経験する臨床的兆候を伴う。
【０００４】
この複雑な反応中に、ヒスタミン、５−ヒドロキシトリプタミン、様々な走化性組成物、ブラジキニン、ロイコトリエン、プロスタグランジン等の化学伝達物質が局所的に放出される。食細胞がその区域内に遊走し、細胞リソソーム膜が壊れて溶解性酵素を放出する。以上の事象は全て、炎症反応に寄与し得る。
【０００５】
慢性関節リウマチという特定の症例では、生起する炎症が、白血球を誘引する走化性および化学活性化組成物の局所放出を起こす、抗原と抗体補体との結合を伴うと思われる。白血球は、抗原−抗体および補体の複合体に食作用を示し、そのリソソーム中に含まれる多くの酵素も放出する。次いで、これらのリソソーム酵素が軟骨および他の組織に傷害を起こし、これが炎症度を促進する。細胞性免疫反応も関与し得る。細胞機能の重要な細胞内調節物質であるプロスタグランジンも、この過程中に放出される。
【０００６】
炎症反応は、前に定義した炎症を特徴とする任意の反応である。炎症反応が、様々な疾患や傷害を伴ってしまう多くの身体的不快状態（即ち、疼痛および機能喪失）を引起すことは、医学分野の当業者にはよく知られている。
【０００７】
関節炎
関節炎は様々な形態で表れる。一部のより一般的な形態は、慢性関節リウマチ、骨関節炎および全身性リウマチを含む。
【０００８】
慢性関節リウマチは、関節の疼痛、腫張およびこわばりを特徴とする自己免疫疾患である。慢性関節リウマチは、アメリカ人の約３％、特に婦人を冒す疾患である。慢性関節リウマチは、障害性の極めて高い疾患であり、臨床疾患の発生は４０〜６０歳の人たちで最大であるが、通常３０から４０歳の年代の成人を冒す。薬物療法はある程度有効であるが、７％もの慢性関節リウマチ患者が発病後５年の短期間にある程度障害者となり、１０年以内には５０％もの患者が障害のために働けなくなる。
【０００９】
骨関節炎は、慢性関節リウマチと類似の症状を示す。特に、慢性関節リウマチが滑液における炎症として発症する一方、骨関節炎は特定の軟骨の変性として発症するが、疾患が進行するにつれ、各々の過程は相互に類似してくる。骨関節炎では、軟骨が悪化し、関節の適合が変化するにつれ、反応性の滑液がしばしば現れる。反対に、慢性関節リウマチが軟骨を侵食するにつれ、骨や軟骨の二次的骨関節炎性変化が現れる。骨関節炎、慢性関節リウマチ双方の末期段階では、冒されている関節の外観は同じである。
【００１０】
他の一部の形態の関節炎は、強直性セロネガティブ脊椎関節症（強直性脊椎炎）および反応性関節炎を含む。これらの病状は、しばしば「Ｂ−２７関連疾患」と云われ、慢性関節リウマチと識別するのが困難である。一部の症例では、強直性脊椎炎、ライター症候群または関節炎性乾癬が、同じ患者において慢性関節リウマチと同時に存在している。多くの症例では、これらの患者は、進行性慢性関節リウマチ患者と同じ疾患改善薬で治療される。
【００１１】
関節炎の発症は、このような疾患に弱い人たちに３０歳を過ぎてから起こるのが一般的である。しかし、一部の種類の関節炎は、遅延ウィルス感染等の様々な原因によって発症し得る。重複が大きいために、多くの医師がこれらの種類を「一般化リウマチ」とみなし、疾患の管理に同じように当たる。この範疇に入る一部の疾患は、慢性疲労症候群、繊維筋肉痛（結合組織炎）および痛風を含む。事実、一部の患者にとって、慢性関節リウマチと繊維筋肉痛が重なり合う証拠が蓄積してきている。
【００１２】
自己免疫疾患
上述のとおり慢性関節リウマチは自己免疫疾患であって、その病因自体が他の任意の自己免疫疾患の病因とほぼ同じである。普通身体は、自己の副生物と外来の侵入物（即ち、名前を幾つか挙げれば、細菌、ウィルス、糸状菌、原虫等）の違いを識別する。免疫細胞（ＴまたはＢリンパ球）が発生中の「自己蛋白」と反応するとき、その細胞は不良とみなされ、通常殺滅されるか、不活性化される。しかし、時には「自己反応性」免疫細胞が殺滅を逃れると思われる。後のある時に、その細胞が活性化され、免疫反応を引起すことがある。活性化は、不良自己蛋白上の一続きに合致する一続きのアミノ酸を有するポリペプチドを含んだ、普通の細菌またはウィルスに感染した後に起こると考えられている。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、ｂｏｒｒｅｌｉａ等の数種の細菌、ならびに一定のウィルス、即ちレトロウィルスが、その疾患の発症に関わってきた。慢性関節リウマチに加え、若年性糖尿病、多発性硬化症、グレーブズ病、メネリ病、重症筋無力症、エリテマトーデス、乾癬等の疾患に、自己免疫がしばしば起こる。（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ、１９９４年９月）。
【００１３】
自己免疫は特定の器官に影響を及ぼす。例えば、肝胆管および腎臓の一部の自己免疫疾患は、原発性胆汁性肝硬変、壊死性糸球体腎炎、「特発性」半月体形成性糸球体腎炎、ウィルス性肝臓および腎臓疾患、慢性肝炎、自己免疫および薬物性肝炎である（Ｇｅｒｓｈｗｉｎ，Ｍａｎｎｓ，ａｎｄ  Ｍａｃｋａｙ  １９９２）。ランゲルハンス小島の免疫破壊により、糖尿病が起こり（Ｈａｇｏｐｉａｎ  ａｎｄ  Ｌｅｒｎｍａｒｋ  １９９２）、インスリン自己抗体の記載があった（Ｐａｌｍｅｒ  １９８７）。
【００１４】
病因として自己免疫機構が示唆された全身性血管炎疾患の大きな範疇がある。それらの疾患の一部には、白血球破壊性血管炎、結節性多発性動脈炎、グッドパスチャー症候群、川崎病、ウェーゲナー肉芽腫症、チャーグ−ストラウス症候群、巨細胞性動脈炎、高安動脈炎、免疫複合体媒介、狼創、リウマチ様およびクリオグロブリン血症性血管炎、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病がある（Ｋａｌｌｅｎｂｅｒｇ，１９９６；Ｊｅｎｎｅｔｔｅ，Ｊｏｎｅｓ，Ｆａｌｋ，１９９２）。
【００１５】
自己免疫が、心膜切開後および心筋梗塞後症候群、心筋炎、特発性拡張型心筋症を含む多種の心臓疾患で役割を演じている一団の証拠もある。自己免疫は、急性心筋疾患が変性疾患に進行する原因と思われる（Ｒｏｓｅ，Ｎｅｕｍａｎｎ，Ｂｕｒｅｋ，Ｈｅｒｓｋｏｗｉｔｚ  １９９２）。
【００１６】
骨格筋症状の関与は、（慢性関節リウマチ、リウマチ性多発性筋痛、重症筋無力症、筋無力性ミオパシー、神経原性萎縮症、運動ニューロン疾患、繊維筋肉痛、結合組織炎、筋ジストロフィー、内分泌性、代謝性および癌性ミオパシーを含み得る）多発性筋炎または炎症性ミオパシー等の多くの自己免疫疾患で一般的である。（Ｈｏｌｌｉｎｇｓｗｏｒｔｈ，Ｄａｗｋｉｎｓ，Ｔｈｏｍａｓ  １９９２）。
【００１７】
他の自己免疫性疾患は、ブドウ膜炎、フォークト−小柳−原田症候群、（Ｄｅｔｒｉｃｋ  ａｎｄ  Ｈｏｏｋｓ  １９９２）、およびシェーグレン症候群、強皮症、強直性脊椎炎、皮膚筋炎、乾癬、関節炎性乾癬、ライター症候群（ＮＩＨ  １９９４）であると思われる。
【００１８】
アルツハイマー症（Ｓｉｎｇｈ等、１９９２）、痴呆複合症（Ｍａｓｔｒｏｉａｎｎｉ等、１９９１）および自閉症児童（Ｓｉｎｇｈ等、１９９３）においても、自己抗体の証拠が見出された。
【００１９】
シドナム舞踏病、慢性強迫性障害（ＯＣＤ）、注意欠陥過活動性障害（ＡＤＨＤ）、ツレット症候群（ＴＳ）および精神分裂病の一部の症例等の数種の神経疾患は、自己免疫成分を有し、抗ニューロン抗体と関係していると思われる（Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，Ｓｅｐｔ．１９９４）。
【００２０】
この要約は全てを包括するものではなく、当業者は、例えばギヤン−バレー症候群（特発性多発性神経炎）等の他の自己免疫疾患を良く知っている。
【００２１】
治療
炎症関連障害を治療するために、炎症反応の身体的不快状態を低減させる薬剤を投与することが、一般的な医療行為である。これらの性質を有する薬剤は、抗炎症剤と分類される。抗炎症薬は広範な障害の治療に使用され、様々な疾患を治療するために、同じ薬物がしばしば使用される。抗炎症薬による治療はその病気を対象とするのではなく、症状（即ち、炎症）を対象とすることが最も多い。
【００２２】
抗炎症、鎮痛および解熱薬は、しばしば化学的には無関係であるが、にも関わらず一定の治療作用および副作用を共有する雑多な一群の化合物である。コルチコステロイドは、炎症の治療に最も汎用される一群の化合物である。蛋白分解酵素は、抗炎症作用を有すると考えられる他の一群の化合物である。副腎皮質に直接的または間接的に作用してステロイドを生成させ、分泌させるホルモンは、他の一群の抗炎症性化合物である。不幸にして、天然および合成コルチコステロイド製剤は、血圧上昇、塩分および水分保持、腎障害およびカリウム、カルシウムの排泄増加を含む幾つかの重度の副作用を起こす。その上、コルチコステロイドは、感染の兆候を隠蔽し、感染微生物の散布を促進する恐れがある。これらのホルモンは、妊婦の使用には安全でないと考えられ、しかもコルチコステロイドによる長期治療は、胃の機能亢進および／または消化性潰瘍を合併してきた。コルチコステロイドによる治療は、糖尿病を悪化させ、より多い投与量のインスリンを必要とする恐れもあり、精神障害を起こす恐れもある。内因コルチコステロイドの生成を間接的に増加させるホルモン抗炎症剤も、不都合な副作用を起こす同じ可能性を有している。
【００２３】
炎症、特に慢性関節リウマチ、他の関節炎および他の自己免疫疾患に対する他の一般的治療は、薬物療法である。一般に、患者は初めに「第一使用」剤、通常は主に症状を緩和する非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）で治療される。後に、患者は、メソトレキセート、金化合物、ペニシラミン、スルファサラジン、抗マラリア薬等の「第二使用」剤または疾患改善剤（ＤＭＡＲＤ）で治療される。しかし、前記薬物は全て、殊に高用量を投与したときに、重大な副作用を示す。例えば、ＮＳＡＩＤの１種であるアスピリンは、消化不良および胃痛を起こす恐れがある。フェニルブタゾンは胃潰瘍を起こし、フェナセチンは腎疾患を起こす恐れがある。メソトレキセートは、口内潰瘍形成および胃腸（ＧＩ）副作用を起こす恐れがある。
【００２４】
もし抗炎症作用を有する天然食品を得ることができれば、関節炎、自己免疫疾患および炎症一般の治療のために、容易に投与でき、簡単に入手でき、安全な治療組成物を提供することになろう。
【００２５】
受動免疫
ニワトリ（Ｇａｌｌｕｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）、シチメンチョウおよびアヒル等の鳥類の様々な属は、鳥類疾患を起こす抗原ならびに他の抗原に対する抗体を血液および卵の中に生成する。例えば、ＬｅＢａｃｑ−Ｖｅｒｈｅｙｄｅｎ等（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２７：６８３（１９７４））およびＬｅｓｌｉｅ，Ｇ．Ａ．等（Ｊ．Ｍｅｄ．１３０：１３３７（１９６９））は、ニワトリの免疫グロブリンを定量的に分析した。Ｐｏｌｓｏｎ，Ａ等（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ９：４９５−５１４（１９８０））は、数種の蛋白および天然蛋白混合物に対してメンドリを免疫し、卵黄中にＩｇＹ抗体を検出した。Ｆｅｒｔｅｌ，Ｒ．等（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  １０２：１０２８−１０３３（１９８１））は、プロスタグランジンに対してメンドリを免疫し、卵黄中に抗体を検出した。Ｊｅｎｓｅｎｉｕｓ等（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ４６：６３−６８（１９８１））は、免疫診断に使用する卵黄ＩｇＧを単離する方法を提供している。Ｐｏｌｓｏｎ等（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ９：４７５−４９３（１９８０））は、様々な植物ウィルスで免疫したメンドリの卵黄から単離した抗体について記載している。
【００２６】
米国特許第４，３５７，２７２号は、超免疫したメンドリ由来の卵黄からの抗体単離を開示している。超免疫は、植物ウィルス、ヒトＩｇＧ、破傷風抗毒素、ヘビ抗ベニンおよびＳｅｒａｍｅｂａ由来の各抗原の反復注入により誘導された。米国特許第４，５５０，０１９号は、少なくとも３００００の分子または粒子重量を有する抗原で超免疫することにより、メンドリ中に生じた抗体の卵黄からの単離を開示している。ニワトリを超免疫するために使用する抗原は、植物ウィルス、ヒト免疫グロブリン、破傷風毒素およびヘビ毒から選択された。
【００２７】
米国特許第４，７４８，０１８号は、対応する抗原に対して免疫された鳥類の卵から得た精製抗体を、非経口的に投与することを含む哺乳類の受動免疫方法であって、その哺乳類が卵に対する免疫を獲得してしまう方法を開示している。
【００２８】
ＤＣＶ−Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓに譲渡された米国特許第５７７２９９９号は、被験者に超免疫卵および／またはミルクまたはそれらの一部を投与することによって、その被験者において慢性胃腸障害または非ステロイド抗炎症薬誘発性（ＮＳＡＩＤ誘発性）胃腸傷害を防止、抑止または低減させる方法を開示している。
【００２９】
米国特許出願第０９／２３３，３７９号は、超免疫鳥類の卵中に見出される抗炎症因子の存在を開示している。
【００３０】
免疫卵は、例えば特定の抗原または抗原混合物で免疫された鳥類から得られる卵である。超免疫卵は、例えば抗原の周期的ブースター投与によって、特定の免疫状態にされた鳥類から得られる卵である。免疫作製鳥類に投与された抗原の型に依らず、超免疫卵は、前述のように慢性胃腸障害、ＮＳＡＩＤ誘発性胃腸傷害（米国特許出願第０８／６８８，５７６号を参照されたい）の治療を含む様々な有益因子、および抗炎症組成物（米国特許出願第０９／２３３，３７９号を参照されたい）の存在による抗炎症作用を有することが判明した。
【００３１】
グルコサミン
グルコサミンは、骨関節炎に有益な効果を有する可能性に対して研究されてきた軟骨保護剤である。軟骨保護剤は、症状を緩和する上に、軟骨組織の合成と分解の均衡を助けると思われる作用剤である。グルコサミンは、グルコースから合成される内因アミノ単糖類として、数十年間生物学者に知られている。関節機能不全におけるその重要性は、軟骨成分のプロテオグリカンおよびグリコサミノグリカンの合成における生理的役割と関係している。過去４０年にわたる研究から、グルコサミンは、関節機能不全の症状を低減させるのに有効であって、十分に寛容されることが示唆される。グルコサミンは疼痛や圧痛を顕著に減少させ、運動性を改善する。研究者等は、関節の保健において推測されるグルコサミンの利点を説明する幾つかの機構を提案してきた。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの研究によって、グルコサミンが軟骨代謝に影響することが示唆された。ＳＡＭｅを用いて明らかなように、このような１つの効果はプロテオグリカン合成の刺激であると思われる。他の可能性は、グルコサミンが軟骨細胞の遺伝子発現を促進することである。その上、グルコサミンは抗炎症剤として作用し得るが、その作用はＮＳＡＩＤより５０倍から３００倍低い。しかし、ＮＳＡＩＤが、シクロオキシゲナーゼ酵素系の阻害とそれによるプロスタグランジンの妨害を介して、抗炎症作用を示すのに対し、グルコサミンはそのような作用を示さない。その抗炎症作用は、プロテオグリカン合成を刺激する結果、細胞膜を安定化させるためと思われる。最近のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの研究によって、グルコサミンが軟骨細胞のフィブロネクチンへの接着を増加させ、関節変性時に起こる接着の異常減少を効果的に逆転させることが示された。
【００３２】
（発明の概要）
本発明は、卵および卵製品、とりわけ超免疫卵または卵製品をグルコサミンと組合せ、対象動物に投与すると、このような投与がその対象動物において炎症および炎症関連障害の低減、時には防止さえも起こすために、抗炎症活性が表れるという本発明者等の発見に基づいている。
【００３３】
とりわけ、本発明は、グルコサミンおよび卵製品を含む組成物を対象としている。
【００３４】
本発明は、対象において炎症を低減させる方法であって、対象にグルコサミンおよび卵製品の有効量を投与することを含む方法も対象としている。
【００３５】
更に、本発明は、血清フィブリノーゲン量を減少させる方法であって、対象にグルコサミンおよび卵製品の有効量を投与することを含む方法も対象としている。
【００３６】
更に、本発明は、慢性関節リウマチの開始を減少または防止する方法であって、対象にグルコサミンおよび卵製品の有効量を投与することを含む方法も包含している。
【００３７】
最後に、本発明は、骨関節炎の開始を減少または防止する方法であって、対象にグルコサミンおよび卵製品の有効量を投与することを含む方法も包含している。
【００３８】
（発明の説明）
本発明は、卵製品のグルコサミンとの併用が、炎症および炎症関連障害に対して相乗的に作用するという発見に関している。
【００３９】
全体を通して以下の定義が適用される。
【００４０】
定義
「炎症」という用語は、技術を認識している意味において、組織の傷害や破壊によって誘導される局所的保護反応であって、傷害の原因および傷害を受けた組織も破壊し、希薄化し、または隔離する反応であって、疼痛、発熱、発赤、膨張および機能喪失という一連の古典的事象、ならびに、透過性と血流の増加、血漿蛋白を含んだ液の浸出、および炎症病巣中への白血球の遊走を伴った細動脈、毛細血管および細静脈の膨張を含む複雑な一連の事象の組織学的関与を、不適当で無制御な形式で特徴とする反応として、使用される。
【００４１】
「関節炎」という用語は、結合組織構造、殊に関節および関連構造の炎症と変性を特徴とする様々な障害のいずれかを意味する。関節炎は、これらの部位の疼痛、強直、または運動制限を伴う恐れがある。一部の形態の関節炎は、慢性関節リウマチ、骨関節炎、強直性セロネガティブ脊椎関節症、反応性関節炎、慢性疲労症候群、繊維筋肉痛（結合組織炎）および痛風を含む。
【００４２】
「自己免疫疾患」という用語は、ドーランドやテーバーのような標準的医学辞典に見出される標準的医学的定義に適用される。様々な自己免疫疾患の説明を、本文書の背景項に見出すことができる。
【００４３】
「超免疫」という用語は、免疫反応が未暴露の自然状態より高められ、維持されるように、１種または複数の抗原に暴露することを意味する。
【００４４】
「卵」または「卵製品」という用語は、各々、任意の全卵（食卓用、超免疫またはその他）またはその全卵由来の任意の製品や部分を意味する。
【００４５】
「食卓卵」または「食卓卵製品」という用語は、超免疫状態に維持されていない産卵動物から得られる、全卵またはその全卵由来の任意の製品や部分を各々意味する。
【００４６】
「超免疫卵」または「超免疫卵製品」という用語は、超免疫状態に維持されている産卵動物から得られ、米国特許出願第０９／２３３，３７９号に記載の抗炎症性組成物を含む、全卵またはその全卵由来の任意の製品や部分を各々意味する。
【００４７】
「超普通量」という用語は、超免疫状態に維持されていない産卵動物の卵に見出される量を超えた量を意味する。
【００４８】
「抗炎症性組成物」という用語は、米国特許出願第０９／２３３，３７９号に開示された組成物であって、本明細書では、炎症過程を妨害または抑制する組成物を意味する。
【００４９】
「部分的純粋卵抗炎症性組成物」という用語は、米国特許出願第０９／２３３，３７９号にそのまま記載の抗炎症性組成物を意味する。
【００５０】
「コンビナトリアル誘導免疫原」という用語は、コンビナトリアル合成によって免疫原の中で分子多様性を生出す過程を指す。
【００５１】
「生物工学免疫原」という用語は、抗原性を有する蛋白の挿入および翻訳を可能にする遺伝子クローニング技術や遺伝子操作の過程を介して得られる免疫原を指す。
【００５２】
「遺伝子ワクチン」という用語は、一般に組換え技術によって生産され、かつ免疫反応を誘導し得る核酸ワクチンを指す。
【００５３】
「治療」という用語は、障害の（疼痛を含む）症状の開始および／または障害の病原を遅延させるか、または完全に防止し、あるいはあるにしても、症状を改善するか、または完全に除去することを意味する。例えば、超免疫卵プラスグルコサミン製品は、ヒトや他の哺乳類における障害の症状を抑制するだけでなく、受療者中において障害の存在を妨害するための予防剤として作用することによっても、関節炎および／または自己免疫疾患を治療する。
【００５４】
「防止」という用語は、疾患の進行を減少および／または除去し、あるいは、疾患の開始を除去することを意味する。
【００５５】
「投与する」という用語は、経口、経鼻、非経口（静脈内、筋肉内、または皮下）、経直腸、局所または眼内を含む経路によって、対象に物質を供給する任意の方法を意味する。
【００５６】
「動物」という用語は、動物界の定義を意味する。
【００５７】
「標的動物」という用語は、卵または卵製品生産動物として機能する動物を指す。
【００５８】
「対象動物」という用語は、標的動物によって生産された卵または卵製品を投与される動物を指す。
【００５９】
「免疫原」という用語は、免疫学的許容ではなく、むしろ体液性抗体および／または細胞性免疫反応を誘発することのできる物質を意味する。この用語は、その生成物、即ち抗体と反応するだけでなく、免疫反応を刺激する能力も意味する。
【００６０】
発明
本発明は、超免疫卵製品とグルコサミンとの組合せを含む。本発明の原理によれば、外来の量の超免疫卵製品とグルコサミンとの組合せが、炎症を低減するために、炎症反応を示す対象に提供される。
【００６１】
好ましい実施形態では、本発明は、対象動物に投与したとき、その対象動物において炎症を低減し、かつ関節炎および／または自己免疫疾患を治療し、防止するのに有効な、グルコサミンと組合せた超免疫卵または卵製品を含む。超免疫卵は、好ましくは産卵動物から、より好ましくは、少なくとも１種の免疫原で超免疫した鳥類から得られる。超免疫卵プラスグルコサミン製品は、対象動物に経口投与するのが好ましい製品である。更に、超免疫卵または卵製品および／またはグルコサミンを、様々な形態で対象動物に続けて投与することのできる、効力のもっと高い画分に分離することができる。更に、同時に投与するのが好ましいが、グルコサミンおよび卵製品を別々に投与することができると予想される。対象に併用して投与したとき、グルコサミンおよび食卓または超免疫卵製品は、共同的に作用することによって炎症を低減する。
【００６２】
グルコサミン
グルコサミンは、コラーゲンおよびプロテオグリカンのいずれの合成のためにも、主要な基質を提供する。対象にグルコサミンを投与すると、追加量のコラーゲンおよびプロテオグリカンの生成が、結合組織を修復するための対象の自然な治癒過程に利用できるので、コラーゲンおよびプロテオグリカンの対象による自然な生成におけるグルコースからグルコサミンへの律速段階が迂回される。
【００６３】
グルコサミンは、送達および対象による取込みを促進するように、塩形であるのが好ましい。好ましい塩形は、とりわけグルコサミン塩酸およびグルコサミン硫酸である。非塩形グルコサミンの使用は、この化合物が胃腸管で吸収されないために、生物学的に利用し得るグルコサミンを提供することができないと、多くの人により考えられている。グルコサミン硫酸の場合、グルコサミンのグリコサミノグリカンへの変換を後で触媒する際に、この硫酸塩を利用し得ることが認められている。非硫酸塩形はヒアルロン酸の生成に望ましい。
【００６４】
グルコサミンの投与に関して言えば、経口投与により、それはヒトや他の動物に急速かつほぼ完全に吸収され、経口投与自体が最も好ましい。摂取されたグルコサミンのかなりの部分が軟骨および関節組織に局在し、その場で長期間滞留する。このことは、経口投与されたグルコサミンは結合組織に達し、その場でグルコサミンは新たに合成される結合組織中に組込まれることを示している。
【００６５】
卵製品
卵製品は、産卵動物から得られる任意の卵または卵画分である。好ましい実施形態では、本発明の卵製品は、卵中にとりわけ超普通量の抗炎症組成物（米国特許出願第０９／２３３，３７９号を参照されたい）を生成するために、超免疫等で操作された鳥類から得られる卵である。
【００６６】
産卵動物の超免疫
超免疫卵または卵製品は、任意の産卵動物によって生産され得る。その動物は鳥綱の一員、即ち鳥類であるのが好ましい。鳥綱の中では家禽が好ましいが、シチメンチョウ、アヒルおよびガチョウ等のこの綱の他の一員も、適当な超免疫卵製品源である。
【００６７】
このような産卵動物を、例えば免疫原の周期的ブースター投与によって特定の免疫状態にすると、その動物は、対象によって消費されたとき、超普通量の抗炎症組成物を含め、グルコサミンと併用して投与したときに、その対象において炎症関連疾患ならびに自己免疫疾患の治療および防止に有効である有益な性質を示す卵を生成すると思われる。
【００６８】
鳥類疾患に対する普通の免疫処理中、および環境因子に対する普通の暴露中に、鳥類を様々な免疫原に対して感作させても、その食卓卵は超普通量の卵抗炎症組成物を含んでいないという事実に示されるように、免疫感受性の誘導だけでは卵中にそのような超普通量を出現させるのに十分ではない。卵が望ましい超普通量の抗炎症組成物を有するのは、特定の超免疫状態にあるときだけである。
【００６９】
より多量の抗炎症組成物を含むことが一因で卵が有効になると思われるこの特別な超免疫状態は、最初の免疫化投与の後、特定の免疫原または免疫原混合物の十分に高い用量を有する周期的ブースターを投与することによって、実行されるのが好ましい。ブースターの好ましい用量は、その鳥類の一次免疫を生じるのに必要な用量の５０％以上とすべきである。したがって、その鳥類が普通ならいわゆる免疫状態にあるとしても、それ以下ではその性質が鳥類の卵中に生成しない閾値のブースター用量が存在する。超免疫状態を発現させ、維持するための要件を知れば、その動物を超免疫状態に維持するために、使用する産卵動物の属および系統に応じて免疫原の投与量を変えることは、当分野の技術の範囲に入ることである。
【００７０】
超免疫状態は、任意の免疫原または免疫原の組合せにより生成されるのが好ましい。超免疫状態を、多数の免疫原への多数回の暴露、単一免疫原への多数回の暴露、または免疫原ライブラリーへの単回暴露によって実行するのが好ましい。超免疫状態を誘導するために、細菌、ウィルス、原虫、アレルゲン、糸状菌または細胞の各物質を含む殆ど任意の免疫原を使用することができるが、それらのものに制限されるものではない。
【００７１】
超免疫状態を発現させ、維持するための要件を知れば、その動物を超免疫状態に維持するために、使用する産卵動物の属および系統に応じて免疫原の投与量を変えることは、当分野の技術の範囲に入ることである。
【００７２】
天然の免疫原で免疫化する以外に、コンビナトリアルケミストリーにより合成によって誘導した免疫原を用いて免疫化を実行してもよい。基本的戦略は、多様な分子の集団を生成するために、化学的なビルディングブロックの多数の組合せを組立てることである。オリゴマー（Ｆｏｄｏｒ，Ｓ．等、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５１：７６７（１９９１）；Ｈｏｕｇｈｔｏｎ，Ｒ．等、Ｎａｔｕｒｅ  ３５４：８２（１９９１））ならびに有機小分子（Ｂｕｎｉｎ，Ｂ．＆Ｅｌｌｍａｎ，Ｊ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１４：１０９９７（１９９２））のライブラリーの固相および溶液相コンビナトリアル合成のために、幾つかの方法が最近開発された。迅速な多数のペプチドおよびオリゴマー合成は、コンビナトリアル由来免疫原の供給源として役立つことができる。その上、代替戦略が、免疫原性を改善するために、有機ビルディングブロックをコンビナトリアル方式で骨格分子に付加することを可能にすると思われる。
【００７３】
免疫原ワクチンの代わりに、産卵動物を超免疫化する代替方式を使用することができ、それらは遺伝子ワクチンの使用を含む。とりわけ、（一般にプロモーター領域および抗原コード化配列から成る）任意のＤＮＡ構造体が、免疫反応を誘発すると思われる。遺伝子ワクチンは、免疫反応を起こすために送達される抗原コード化ベクター、ネイキッドＤＮＡの断片、プラスミドＤＮＡ、ＤＮＡ−ＲＮＡ抗原、ＤＮＡ−蛋白複合体、ＤＮＡ−リポソーム複合体、ＤＮＡ発現ライブラリー、およびウィルスや細菌ＤＮＡから成る。ＤＮＡ送達の方法は、とりわけ粒子衝撃、直接注入、ウィルスベクター、リポソームおよびジェット注入を含む。これらの送達方法を用いるとき、必要量ははるかに少なく、一般に免疫原生成の持続性が高い。このような遺伝子過程を使用するとき、ＤＮＡを鳥類に導入する好ましい方法は、胸部筋肉中へのＤＮＡの筋肉内注射によるものである。
【００７４】
ＤＮＡ送達の方法は、粒子衝撃、直接注入、リポソームおよびジェット注入を含むが、これらの方法に制限されるものではない（Ｆｙｎａｎ，Ｅ．Ｆ．等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：１１４７８−１１４８２（１９９３））。既知または未知免疫原、プロモーター領域（特にＣＭＶカリフラワーモザイクウィルス）およびＳＶ４０細菌源をコードする核酸を細菌中で複製することによって、ＤＮＡ注入に使用するプラスミドＤＮＡを生成することができる。そのＤＮＡの幾つかの非経口的投与経路がニワトリにおいて有効であるが、好ましい方法は胸部筋肉への筋肉内注射である。ワクチン試験は産卵鳥類、好ましくはニワトリで実施される。１〜２週の間隔で６か月までの間、免疫処理を反復する。
【００７５】
直接注入に使用するＤＮＡ量は、一般に塩水中ＤＮＡが５０〜３００μｇの量であるのが好ましい。粒子衝撃に対しては、２．５Ｍ  ＣａＣｌ2の添加により金ビーズ上に共沈させた４〜１００μｇのＤＮＡが好ましい。ＤＮＡ被覆粒子を生きた動物中に加速するこの方法によって、免疫処理を皮内で反復することができる。
【００７６】
以下は、産卵動物を、生成する超免疫卵または卵製品を対象に投与し得る高い免疫状態にするために、用いられる好ましい手順の詳細な説明である。
１．１種または複数の免疫原を選択する。
２．一次免疫処理により産卵動物中に免疫反応を誘導する。
３．超免疫状態を起こし、維持するために、適当な用量の免疫原のブースターワクチンを投与する。
４．超免疫卵の抗炎症活性レベルを試験する。
５．その卵を収集し、加工する。
【００７７】
この手順のより詳細な説明は以下のとおりである。
【００７８】
段階１：任意の免疫原または免疫原混合物をワクチンとして使用してよい。免疫原は、産卵動物の免疫系が反応すると思われる細菌性、ウィルス性、原虫性、糸状菌性、細胞性または他の任意の物質であってよい。この段階における肝要な点は、免疫原が産卵動物に免疫および超免疫状態を誘導することができなければならないことである。本発明方法のワクチンとして単一の免疫原だけでも機能し得るが、１つの好ましいワクチンは、以下の抗原群から選択した細菌性およびウィルス性多価抗原の混合物である。細菌性抗原は、腸内バチルスおよびバクテロイデス、肺炎球菌、シュードモナス、サルモネラ、連鎖球菌、バチルス、ブドウ球菌、ナイセリア、クロストリジウム、マイコバクテリア、放線菌類、クラミジアおよびマイコプラズマである。ウィルス性抗原は、以下の抗原群、アデノウィルス、ピコルナウィルスおよびヘルペスウィルスから選択されるのが好ましいが、他のウィルス性抗原群も有効であると思われる。
【００７９】
好ましい実施形態では、ＰＬ１００と称する多価ワクチンが使用される。ＰＬ−１００ワクチンに含まれる細菌は、実施例１の表１に列挙されている。このワクチンは、共にＤＣＶ，Ｉｎｃ．に譲渡された米国特許第５，７７２，９９９号および米国特許出願第０９／２３３，３７９号に既に記載されている。
【００８０】
段階２：ワクチンは死菌ワクチン、弱毒生ワクチンのいずれでもよく、免疫反応を誘導する任意の方法によって、それを投与することができる。筋肉内注射により免疫原を投与することによって、免疫化を実行するのが好ましい。鳥類に注射する好ましい筋肉は胸部筋肉である。好ましい用量は、免疫原ワクチン０．０５〜５ミリグラムである。使用し得る他の投与方法は、静脈内注射、腹腔内注射、皮内、直腸坐薬、エアゾール、経口、局所または眼内投与を含む。超免疫処理のためにＤＮＡ技術を使用するときは、はるかに少ない量、一般に３００マイクログラムで済む。
【００８１】
ワクチンが産卵動物中に免疫反応を誘導したかどうかを、免疫学分野の技術者に知られた幾つかの方法によって決定することができる。これらの方法例は、酵素結合イムノソルベント検定（ＥＬＩＳＡ）、刺激抗原に対する抗体存在試験、および宿主免疫細胞の抗原に対する反応能力を評価するように設計した試験を含む。免疫反応の誘導に必要な抗原の最小用量は、アジュバントの型および用いる抗原の剤形、ならびに宿主として使用される産卵動物の型を含め、用いるワクチン処理手順に依存する。
【００８２】
段階３：所定の時間間隔で適当な用量のブースターを反復投与することによって、超免疫状態を標的動物中に誘導し、維持するのが好ましい。好ましい時間間隔は、６〜１２か月の期間にわたって２〜８週間隔である。しかし、ブースター投与が免疫許容を生じないことが必須である。このような過程は当分野で良く知られている。
【００８３】
例えば一次免疫化用筋肉内注射およびブースター注入用静脈内注射等の、他の超免疫維持手順または併用手順を用いることが可能である。更に他の手順は、マイクロカプセル入りおよび液体の抗原の同時投与、または一次免疫化用筋肉内注射、およびマイクロカプセル化による経口投与や非経口投与によるブースター用量を含む。一次免疫化および超免疫化の幾つかの組合せが、当業者に知られている。
【００８４】
段階４：卵の抗炎症活性レベルを試験することが適切である。超免疫卵、それ由来の卵製品のいずれかの炎症に対する効果を試験する任意の臨床および予備臨床評価によって、これをなし得る。
【００８５】
段階５：この段階は超免疫卵の収集および加工を伴う。従来の方法によって卵を収集することができる。卵の加工を本文書の後で記載する様々な方法で実行することができる。米国特許出願第０９／２３３，３７９号に記載の抗炎症組成物を精製するために、更に卵を加工することもできる。
【００８６】
加工および投与
超免疫動物から収集した卵、または部分精製抗炎症組成物を含むその画分を加工することによって、炎症障害を治療するために、後にグルコサミンと併用して対象動物に投与し得る超免疫卵製品を生産することが好ましい。
【００８７】
卵自体、または本発明の部分精製抗炎症組成物を含むその画分は、対象動物における関節炎および／または自己免疫疾患を含む炎症を治療または防止する任意の手段によって、グルコサミンと組合せて対象動物に投与される。卵または任意の卵誘導品をグルコサミンと組合せて対象動物に直接給餌することによって、投与を行うのが好ましい。全卵、卵黄および卵白が無毒で安全な天然食品成分であることに気づくことは、重要である。
【００８８】
他の実施形態では、グルコサミンおよび卵または部分精製抗炎症組成物を含む任意のその画分は、栄養補助食品として一体化される。特に卵に関して言えば、栄養補助食品中に導入する卵または任意のその画分を調製する好ましい一方法は、卵を卵粉末に乾燥することを伴う。卵を乾燥する様々な方法が知られているが、噴霧乾燥が好ましい方法である。卵を噴霧乾燥する方法は当分野でよく知られている。
【００８９】
このような乾燥卵粉末を、例えば蛋白粉末、体力増強飲料、蛋白補助食品および他の任意の栄養スポーツ関連製品の形態で飲料中に導入することができる。その上、卵粉末をベークミックス、パワーバー、キャンディー、クッキー等に使用することができる。他の卵加工例は、オムレツ作製、卵の半熟や堅ゆで、卵焼きを含み、あるいは所望であれば、卵を生のまま食べるか、液卵として加工することもできる。
【００９０】
本発明者等は、グルコサミンおよび卵を併用して投与するのが好ましいが、同じ形態や一製品としてそれらを投与する必要はないと提案している。例えば、グルコサミンを丸剤の形で摂取する一方、卵製品を飲料として投与する。
【００９１】
部分精製抗炎症組成物をグルコサミンと組合せることを欲するのであれば、前述のように、卵を更に分離さえすることによって、部分精製抗炎症組成物を精製することができ、それによって非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔、経鼻、経口または局所を介して卵製品を別々に投与する等の他の投与方式を可能にすると思われる。その上、このような追加の分離によって、前記卵またはその画分を有するカプセル入り製品および薬剤組成物を作ることができると思われる。
【００９２】
非経口投与用抗炎症組成物の調剤は、無菌の水性または非水性溶液、懸濁液または乳濁液を含む。非水性溶媒または媒体の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油およびオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルである。
【００９３】
特に部分精製抗炎症組成物について言えば、とりわけカプセル、錠剤、丸剤、散剤および顆粒を含む固体投与剤形によって、経口投与を実行するのが好ましい。固体投与剤形では、抗炎症組成物は蔗糖、乳糖、澱粉等の少なくとも１種の不活性希釈剤と混合される。このような投与剤形は、普通どおり、不活性希釈剤以外の追加の物質を含むこともできる。カプセル、錠剤および丸剤の場合では、投与剤形は、緩衝剤、ｐＨ感受性ポリマー、または食品および製薬産業でカプセル化組成物として普通使用される他の任意の遅延放出用カプセル形成剤を含んでもよい。更に、錠剤および丸剤を、腸溶コーティングを用いて調製することができる。
【００９４】
抗炎症組成物の経口投与用液体投与剤形は、製剤分野で汎用される不活性希釈剤を含み、薬剤として許容し得る乳濁液、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシールを含む。不活性希釈剤以外に、組成物は湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、および甘味剤を含むこともできる。
【００９５】
グルコサミンおよび免疫卵製品の組合せ
グルコサミンおよび卵製品は、対象における炎症を低減するために、その対象に同時に投与すると、前述のとおり共同的に作用する。
【００９６】
グルコサミン、免疫卵製品双方の投与について言えば、一実施形態では、免疫卵製品の有効量とは関係なく、グルコサミンの有効量が対象に投与される。他の実施形態では、グルコサミンおよび免疫卵製品の有効量を含む組成物が対象に投与される。いずれの投与方法も共同的作用を引起すと思われる。
【００９７】
対象への投与を、炎症を治療または防止するのに有効な量で実行すべきである。より低い用量の免疫卵製品と混合したより高い用量のグルコサミンを、対象に投与するのが好ましい。特定の障害に応じてその反対がより好ましいかもしれず、その場合はこのような不等な用量が治療および防止に適切であり、それらの量で投与すべきである。これら２種の組成物の共同的作用のために、それに応じて投与を調節する必要があり得る。当業者であれば、対象とする炎症を最も良く治療し、防止すると思われる投与量の決定を熟知している。
【００９８】
本発明のグルコサミンおよび卵を、抗炎症活性をもたらす任意の手段によって投与してもよい。例えば、投与が非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔、経鼻または経口であってもよい。
【００９９】
とりわけカプセル、錠剤、丸剤、散剤および顆粒を含む固体投与剤形によって、経口投与を実行するのが好ましい。固体投与剤形では、グルコサミンおよび卵製品は蔗糖、乳糖、澱粉等の少なくとも１種の不活性希釈剤と混合される。このような投与剤形は、普通どおり、不活性希釈剤以外の追加の物質を含むこともできる。カプセル、錠剤および丸剤の場合では、投与剤形は、緩衝剤、ｐＨ感受性ポリマー、または食品および製薬産業でカプセル化組成物として普通使用される他の任意の遅延放出用カプセル形成剤を含んでもよい。更に、錠剤および丸剤を、腸溶コーティングを用いて調製することができる。
【０１００】
グルコサミンと卵製品との組合せの経口投与用液体投与剤形は、製剤分野で汎用される不活性希釈剤を含み、薬剤として許容し得る乳濁液、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシールを含む。不活性希釈剤以外に、組成物は湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、および甘味剤を含むこともできる。
【０１０１】
非経口投与用のグルコサミンと卵製品との組合せの調剤は、無菌の水性または非水性溶液、懸濁液または乳濁液を含む。非水性溶媒または媒体の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油およびオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルである。
【０１０２】
活性成分の用量は変化し得る。しかし、活性成分の量は、適当な投与剤形が得られるような量にすることが必要である。選択する投与剤形は、所望の治療効果、投与経路および治療期間に依存することが認識されよう。
【０１０３】
投与の用量および頻度は、副作用の可能性を考慮すると、患者の年齢および全般的健康状態に依存すると思われる。投与は、他の薬物による同時治療および投与薬物に対する患者の許容性にも依存すると思われる。
【０１０４】
超免疫卵または卵製品の対象への投与について言えば、対象に投与すべき超免疫卵または卵製品の好ましい用量範囲は、対象重量１キログラム当たり１００ミリグラムから１０グラムであることが決定されており、以下の実施例で詳述される。
【０１０５】
部分精製抗炎症組成物自体について言えば、超免疫卵の全卵、卵黄および卵白から精製し、分離した部分精製組成物の好ましい用量範囲は、対象重量１キログラム当たり１マイクログラムから４００ミリグラムであることが決定された。
【０１０６】
グルコサミンの対象への投与について言えば、対象に投与すべきグルコサミンの好ましい用量範囲は、対象重量１キログラム当たり１０ミリグラムから５グラムであることが決定されており、以下の実施例で詳述される。更により好ましくは、対象重量に対して１００ミリグラムから２．５グラムである。
【０１０７】
好ましい実施形態では、炎症に罹った５０ｌｂ（２２．７ｋｇ）の対象に、グルコサミンＨＣｌ２５０ｍｇ、超免疫卵製品７５０ｍｇおよび被覆エステルＣ３２０ｍｇを含む単一錠剤を、１日２回投与すべきである。炎症を低減または防止するために必要な限り、投与を継続する。治療の期間および程度は、特定の条件および対象状態の改善に依存すると思われる。
【０１０８】
本発明のグルコサミンおよび卵製品の投与により治療し得る炎症状態の例は、慢性関節リウマチ、骨関節炎、強直性セロネガティブ脊椎関節症、反応性関節炎、慢性疲労症候群、繊維筋肉痛（結合組織炎）および痛風を含むが、これらの疾患に制限されないあらゆる形態の関節炎を含む。本発明の卵製品は、とりわけ慢性関節リウマチ、若年性糖尿病、多発性硬化症、グレーブズ病、メネリ病、重症筋無力症、エリテマトーデス、乾癬、全身性強皮症、リウマチ熱、ショーグレン症候群；急性および亜急性滑液包炎、急性非特異的腱炎、全身性エリテマトーデス、全身性皮膚筋炎、急性リウマチ性心臓炎、天疱瘡、水疱性皮膚炎、ヘルペス、重症紅斑、多形剥脱性皮膚炎、肝硬変、季節性長期鼻炎、気管支喘息、異所性皮膚炎、血清病、角膜炎、虹彩炎、びまん性ブドウ膜炎（ｕｒｅｉｔｉｓ）、声帯炎、視神経炎、交感性眼炎、症候性サルコイドーシス、レフラー症候群、ベリリウム症、溶血性貧血、乳腺炎、乳様突起炎、接触皮膚炎、アレルギー性結膜炎、関節炎性乾癬、強直性脊椎炎、急性痛風関節炎、帯状疱疹慢性関節リウマチ、骨関節炎、他の任意の変性関節疾患、他の任意の関連自己免疫疾患等の自己免疫疾患の治療に等しく有効である。更に、アレルゲン等の炎症剤の恐れがあるものに曝された人を治療するために、グルコサミンと卵製品との組合せを使用してもよい。
【０１０９】
炎症一般、１種の関節炎、自己免疫疾患のいずれであれ、特定の障害の治療および防止という状況になると、超免疫卵製品または部分精製抗炎症組成物を含むその任意の活性画分と組合せたグルコサミンを、その特定障害を治療し、防止するのに免疫学的に有効な量で対象に投与するのが好ましい。治療の期間および程度は、特定の条件および対象状態の改善に依存すると思われる。治療の期間および程度は、もし存在するのであれば、その特定の状態、その状態の有無、その状態がある場合には、対象における状態の進行に依存すると思われる。超免疫卵製品または部分精製抗炎症組成物を含むその任意の活性画分と組合せたグルコサミンは、病状および病状の兆候を治療および／または防止する任意の量でも提供される。例えば、一部の例では、１個未満から数個の超免疫全卵（または、１個未満から数個の超免疫全卵と等価なものを含む超免疫卵製品）にわたる１日量を、病状の特定の状況に応じて、対象に有効量のグルコサミンと組合せて投与することができる。もっと効力の高い画分を、本明細書に記載の方法ならびに当分野における他の既知の方法によって、分離し、濃縮することができる。
【０１１０】
活性成分の用量は変化し得る。しかし、活性成分の量は、適当な投与剤形が得られるような量にすることが必要である。選択する投与剤形は、所望の治療効果、投与経路および治療期間に依存することが認識されよう。
【０１１１】
本発明を例示する以下の実施例を参照することによって、本発明の有利な性質を認めることができる。
【０１１２】
実施例
実施例１
ＰＬ−１００ワクチンの調製
Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得られ、下記の表１に示す細菌群を含んだ細菌培養物を、１５ｍＬの培地で復元し、３７℃で終夜インキュベートした。十分な増殖が得られた後、３７℃でインキュベートした接種用細菌を１リットルのブイヨンに接種するために、細菌懸濁液の約半量を使用した。
【０１１３】
培養液中に十分な増殖を観察した後、培地を除くために懸濁液を２０分間遠心分離することによって、細菌細胞を収穫した。得られた細菌ペレットを滅菌塩水溶液中に再懸濁し、細菌試料を３回遠心分離することによって、細胞から培地を洗い落とした。滅菌塩水洗浄を３回行った後、細菌ペレットを少量の再蒸留水中に再懸濁した。
【０１１４】
８０℃の水浴中で終夜、懸濁液をガラスフラスコに入れることによって、無培地細菌懸濁液を殺菌した。ブイヨン培養物の生存性を、少量の死菌で試験し、３７℃で５日間インキュベートし、細菌が既に死んでいることを保証するために、毎日増殖を調べた。
【０１１５】
乾燥するまで死菌の凍結乾燥を行った。次いで、乾燥細菌を滅菌塩水溶液と混合し、２．２×１０8細菌細胞／ｍＬ塩水（６６０ｎｍでの吸光度指示値１．０）の濃度にした。ＰＬ−１００ワクチン中に含まれる細菌は、下記の表１に列挙されている。
【０１１６】
【表１】
0005047431.tif 000002
【０１１７】
超免疫卵製品を得るための免疫処理手順
病原体死菌調製品を前記のように調製した。最初のワクチン処理のために、細菌を完全フロイントアジュバントと混合し、細菌材料５．６ｍｇをニワトリの胸部筋肉中に注射した。その後のワクチン処理のために、細菌調製品を不完全フロイントアジュバントと混合し、２週間隔で６か月間ニワトリに注射した。
【０１１８】
実施例２
目的
炎症の慢性動物モデルである確立されたラットアジュバント関節炎において、グルコサミン塩酸およびＤＣＶ超免疫卵の共同的抗関節炎作用を評価すること。
【０１１９】
結果
表２は、試験の１４日、２２日および３０日の足の浮腫に関する全データを示す。その結果から、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群が、疾患の１４日および３０日に最高のパーセント炎症阻止率を示したことがわかる。ＰＬ−１００卵およびグルコサミンＨＣｌは、試験の１４日および２２日に単独で阻止作用を示したが、疾患が急速に進行して重症多発性関節炎となった３０日ではいずれも無効であった。
【０１２０】
表３は、試験の１６日、２３日および３０日の全ての血清フィブリノーゲン量を示す。その結果から、フィブリノーゲン量は始め１６日に増加した後、２３日および３０日に減少することがわかる。しかし、１６日の増加量は、ＰＬ−１００およびグルコサミンＨＣｌ単独と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最小であり、血清フィブリノーゲン量の阻止も、ＰＬ−１００およびグルコサミンＨＣｌ単独と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最高である。また、３０日では、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群におけるフィブリノーゲン量のパーセント阻止率は、インドメタシン治療群の４６％に対し、３２％である。
【０１２１】
表４は、試験の２２日および３０日の全ての組織形態観察を示す。その結果から、（関節周囲の滑膜を含め、軟組織中への単核および／または多形核炎症細胞の浸潤を示す）関節周囲／軟組織の炎症は、２２日、３０日のいずれでも、他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最も影響が小さいことがわかる。
【０１２２】
（特に骨膜下区域において、新骨成長量の増加、過剰を示す）過骨症は、他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で２２日に最小で、３０日では小さい。
【０１２３】
２２日および３０日の軟骨侵食は、他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最小である。
【０１２４】
（関節表面での炎症細胞、浸出液、フィブリンまたは繊維組織の蓄積を示す）パンヌス軟骨は、他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で２２日および３０日に最も影響が小さい。
【０１２５】
（関節表面の間に繊維組織および炎症組織が形成され、普通軟骨が完全に消失し、この区域が繊維組織で置換される結果、接着および関節腔が生じるためにできる肥大し、運動性を失った関節を示す）強直症は、任意の他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最小である。
【０１２６】
最後に、（骨の壊死および溶解を示す）骨溶解は、ある程度の溶解が起こる他の群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ治療群では２２日に存在しない。
【０１２７】
【表２】
0005047431.tif 000003
【０１２８】
【表３】
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【０１２９】
【表４】
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【０１３０】
まとめ
炎症の慢性動物モデルであるラットアジュバント関節炎モデルにおいて、ＰＬ−１００卵およびグルコサミンＨＣｌは、以下の点で付加的作用を示した。
ａ）動物の後部左足の腫脹を減少させ、それにより１４日、２２日および３０日での抗炎症作用を示した。
ｂ）注射した２２日の後、（炎症の認められた血清マーカーである）血清フィブリノーゲン量を減少させ、試験終了日の３０日までその状態を継続した。
ｃ）慢性関節リウマチの程度が頂点に達していた２２日に、単核および多形核細胞の浸潤による関節周囲／軟組織に対する作用を最小限に抑えた。
ｄ）試験の２２日に過骨症から完全に防御した。
ｅ）２２日に関節炎関節周囲の軟骨の侵食を完全に防御し、３０日に傷害を最小限に抑えた。
ｆ）２２日にパンヌス区域の軟骨を完全に防御し、３０日に傷害を最小限に抑えた。
ｇ）２２日に強直症から影響を受けた関節を完全に防御し、２２日に関節炎関節区域の骨を骨溶解から完全に防御した。
ｈ）図１は試験の１４日と２２日における足部浮腫の全データを示す。その結果は、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群が疾患の１４日に最高のパーセント炎症阻止率を示したことを明らかにする。
ｉ）図２は試験の１６日、２３日および３０日における全ての血清フィブリノーゲン量を示す。その結果から、フィブリノーゲン量は始め１６日に増加した後、２３日および３０日に減少することがわかる。しかし、１６日の増加量は、ＰＬ−１００およびグルコサミンＨＣｌ単独と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最小であり、血清フィブリノーゲン量の阻止も、ＰＬ−１００およびグルコサミンＨＣｌ各単独群と比較して、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群で最高である。また、３０日では、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群におけるフィブリノーゲン量のパーセント阻止率は、インドメタシン治療群の４６％に対し、３２％である。したがって、ＰＬ−１００＋グルコサミンＨＣｌ群は、発症時に炎症の重度を抑制するだけでなく、（血清炎症マーカー量によって示されるように）試験の終了に向けて炎症を阻止する。
【図面の簡単な説明】
【図１】  ラットアジュバント関節炎モデルにおいて、超免疫卵およびグルコサミンの効果を示す棒グラフである。
【図２】  ラットアジュバント関節炎モデルにおいて、血漿フィブリノーゲン量を示す棒グラフである。
【図１】
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【図２】
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