(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経保護に使用するための医薬の調製におけるキセノンの使用であって、前記医薬が、吸入により送達されるものであり、且つ神経伝達物質過剰により生じる神経中毒を治療するための医薬の調製におけるキセノンの使用を除く、使用。
【請求項２】
前記医薬中のキセノンは、医薬的に許容される担体、希釈剤または添加剤と組合せて使用する請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記医薬は、ＮＭＤＡ受容体活性に関連した容態の処置に使用する請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記医薬は、ＮＭＤＡ受容体活性化に関連した容態の処置に使用する請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記医薬は、ＮＭＤＡ受容体の活性化レベルを低下させるために使用する請求項１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（背景）
本発明は、神経保護剤として、および／またはシナプス可塑性の阻害における、キセノンの使用に関する。特に、本発明は、ＮＭＤＡアンタゴニストとしてのキセノンの使用、および、ＮＭＤＡ受容体活性に関連した容態の処置におけるキセノンの使用に関する。
【０００２】
ＮＭＤＡ（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸）受容体は、グルタミン酸（glutamate）受容体の主なサブクラスであり、グルタミン酸は、哺乳動物の中枢神経系の最も重要な興奮性神経伝達物質であると考えられている。重要なことには、ＮＭＤＡ受容体の活性化は、多くの疾病状態における興奮毒性および神経死をもたらす中心的事象になることが示されており、並びに、頭部外傷、卒中および心臓停止後の低酸素および虚血の結果であることが示されている。
【０００３】
ＮＭＤＡ受容体は、記憶および学習などの多くの高度の認知機能の基礎をなすシナプス可塑性、並びに、特定の侵害受容経路および疼痛の認知に主要な役割を果たしていることは当分野で公知である（Ｃｏｌｌｉｎｇｒｉｄｇｅら、ＮＭＤＡ受容体、オックスフォード大学出版、１９９４）。さらに、ＮＭＤＡ受容体のある特性により、それらが、意識自体の基礎をなす脳における情報処理に関与し得ることが示唆されている。
【０００４】
ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、多くの理由から、例えば以下の３つの具体的な理由から、治療に役立つ。第一に、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、全身麻酔の非常に望ましい構成要素である深い鎮痛、および鎮静を付与する。第二に、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、多くの臨床的に関連した環境下で（虚血、脳外傷、神経障害疼痛状態、およびあるタイプの痙攣を含む）神経保護作用がある。第三に、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストは、有益な程度の健忘症を付与する。
【０００５】
しかし、現在のＮＭＤＡ受容体アンタゴニストに関連した多くの欠点があることは、従来技術から明らかである。これらは、不随意運動の発生、交感神経系の刺激、高用量での神経毒性の誘導（ＮＭＤＡ受容体は全身麻酔薬としての効力は低いため、妥当である）、心筋抑制、および、例えば「燃え上がり現象」などのいくつかの癲癇発作性パラダイムにおける前痙攣を含む（Ｗｌａｚ  Ｐら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９４；６：１７１０〜１７１９）。特に、血液脳関門を通過できる新規ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストの開発には、かなりの困難がある。この要素によって、多くの既知のＮＭＤＡアンタゴニストの治療への適用が限定される。
【０００６】
従って、本発明は、血液脳関門を通って容易に拡散できる、一般的な医薬に使用する、改良ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストを提供することを探索する。
【０００７】
（発明の記載）
本発明の態様は、添付の特許請求の範囲および以下の記載に提示する。
【０００８】
従って、本発明は、神経保護剤および／またはシナプス可塑性の阻害剤としてのキセノンの使用に関する。好ましい態様において、キセノンは、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストとして作用する。
【０００９】
本発明の第二の態様は、哺乳動物のＮＭＤＡ受容体活性を調節することを含む処置法に関し、前記方法は、哺乳動物に治療有効量のキセノンを投与することにより、ＮＭＤＡ受容体活性を調節することを含む。
【００１０】
本発明の好ましい態様において、キセノンは、医薬的に許容される担体、希釈剤または添加剤と組合せて投与する。
【００１１】
好ましくは、この処置法は、ＮＭＤＡ受容体活性に関連した容態に罹患した哺乳動物を処置するために使用し得る。より好ましい態様において、哺乳動物は、ＮＭＤＡ受容体活性化に関連した容態の処置を受けている。
【００１２】
さらにより好ましくは、本発明は、キセノンがＮＭＤＡ受容体の活性化レベルを低下させる、処置法に関する。
【００１３】
本発明の別の実施形態は、ＮＭＤＡ受容体活性を調節するのに適した医薬組成物の調製プロセスに関し、前記プロセスは、ＮＭＤＡアンタゴニストを、医薬的に許容される担体、添加剤または希釈剤に加えることを含み、ここでの改良は、キセノンをＮＭＤＡアンタゴニストとして使用することを含む。
【００１４】
本発明のさらなる実施形態は、ＮＭＤＡアンタゴニストおよび医薬的に許容される担体、添加剤または希釈剤を含む、ＮＭＤＡ活性を調節する医薬組成物を提供し、ここでの改良は、キセノンをＮＭＤＡアンタゴニストとして使用することを含む。
【００１５】
本発明のさらに別の実施形態は、哺乳動物のＮＭＤＡ受容体活性の調節に使用するための、医薬の調製における、キセノンの使用に関する。
【００１６】
好ましい態様において、医薬中のキセノンは、医薬的に許容される担体、希釈剤または添加剤と組合せて使用する。
【００１７】
好ましくは、医薬は、ＮＭＤＡ受容体活性に関連した容態の処置に使用するためのものである。より好ましい態様において、医薬は、ＮＭＤＡ受容体活性化に関連した容態の処置に使用するためのものである。さらにより好ましくは、医薬は、ＮＭＤＡ受容体の活性化レベルを低下させるのに使用するためのものである。
【００１８】
（詳細な説明）
広い態様において、本発明は、神経保護剤としての、および／またはシナプス可塑性の阻害剤としての、キセノンの使用に関する。好ましい態様において、キセノンは、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストとして作用する。
【００１９】
キセノンは、麻酔特性が５０年前から知られている化学的に不活性のガスである（Ｌａｗｒｅｎｃｅ  ＪＨら、Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９４６；１０５：１９７〜２０４）。それが最初に手術に使用されて以来（Ｃｕｌｌｅｎ  ＳＣら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９５１；１１３：５８０〜５８２）、多くの研究グループにより、代謝副産物がないこと、深い鎮痛、迅速な開始および回復、および心臓血管系に対する最小限の作用を含む、優れた薬理学的プロフィルを有することが示された（Ｌａｃｈｍａｎｎ  Ｂら、Ｌａｎｃｅｔ  １９９０；３３５：１４１３〜１４１５；Ｋｅｎｎｅｄｙ  ＲＲら、Ａｎａｅｓｔｈ．Ｉｎｔｅｎｓ．Ｃａｒｅ  １９９２；２０：６６〜７０；Ｌｕｔｔｒｏｐｐ  ＨＨら、Ａｃｔａ  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ．Ｓｃａｎｄ．１９９４；３８：１２１〜１２５；Ｇｏｔｏ  Ｔら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ  １９９７；８６：１２７３〜１２７８；Ｍａｒｘ  Ｔら、Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ．１９９７；７８：３２６〜３２７）。しかし、今まで、キセノンの臨床活性の基礎をなす分子機序は、依然として解明されていない。
【００２０】
我々は、英国特許出願番号ＧＢ９９１３６７７．２（１９９９年６月１１日出願）に医薬用途におけるキセノンの使用を記載しており、その内容を本明細書の記載の一部となすものとする。
【００２１】
「アンタゴニスト」なる語は、当分野におけるその通常の意味で使用し、すなわち、その天然アゴニスト（この場合、グルタミン酸）による受容体の機能的活性化を防げる化合物である。
【００２２】
大半の他の麻酔薬は、抑制性ＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸Ａ型）受容体の活性を増強することが広く知られている（Ｆｒａｎｋｓ  ＮＰら、Ｎａｔｕｒｅ  １９９４；３６７：６０７〜６１４；Ｍｉｈｉｃ  ＳＪら、Ｎａｔｕｒｅ  １９９７；３８９：３８５〜３８９）。しかし、これらの受容体に対するキセノンの作用は、無視できると考えられる。その代わり、キセノンは、興奮性ＮＭＤＡ受容体チャネルを強力に阻害する。この作用は、その薬理学的プロフィルの多くの重要な特徴を説明し、この不活性ガスの麻酔および鎮痛作用に役立つようである。
【００２３】
従来技術は、神経保護剤および／またはシナプス可塑性の阻害剤としてのキセノンの使用を、開示も示唆もしていないことを注記する。また従来技術は、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストとしてのキセノンの使用も開示も示唆もしていない。
【００２４】
多くの他のＮＭＤＡアンタゴニストとは異なり、キセノンは、血液脳関門を通って拡散することにより、脳と迅速に平衡化できる。ＮＭＤＡアンタゴニストとしてキセノンを使用することのさらなる利点は、分子が、呼吸により急速に消失できる、不活性な揮発性ガスであることである。
【００２５】
従って、本発明は、以下の１つ以上を達成するための、キセノンの使用に関する。
ａ）神経保護を提供する。
ｂ）シナプス可塑性を阻害する、例えば、アヘンに対する耐性の発達を阻止する。
【００２６】
「神経保護」なる語は、損傷、例えば虚血による損傷または外傷による損傷の部位での、ニューロンなどの神経性エンティティを保護することを意味する。
【００２７】
さらなる実施形態において、本発明は、哺乳動物の神経保護を提供する、および／またはシナプス可塑性を阻止する方法を提供し、前記方法は、哺乳動物に治療有効量のキセノンを投与することを含む。
【００２８】
好ましくは、キセノンは、医薬的に許容される担体、希釈剤または添加剤と組合せて投与する。例えば、本発明の医薬組成物において、キセノンは、目的の投与経路および標準的な医薬慣行に関して選択した、任意の適切な結合剤（群）、潤滑剤（群）、懸濁化剤（群）、コーティング剤（群）、可溶化剤（群）と混合し得る。
【００２９】
キセノンは、別の医薬的に活性な物質と組合せて投与してもよい。前記物質は、ＧＡＢＡ作動性活性を促進する、麻酔剤または鎮静剤を含む、任意の適切な医薬的に活性な物質であり得る。かかるＧＡＢＡ作動性物質の例は、イソフルラン、プロポフォールおよびベンゾジアゼピン類を含む。
【００３０】
別の実施形態において、本発明は、哺乳動物のＮＭＤＡ受容体活性化レベルを低下する方法を提供し、前記方法は、哺乳動物に治療有効量のキセノンを投与することにより、ＮＭＤＡ受容体活性を調節することを含み、ここでの低下により、神経保護および／またはシナプス可塑性の阻害がなされる。
【００３１】
本発明のさらなる実施形態は、神経保護および／またはシナプス可塑性の阻害に適した医薬組成物の調製プロセスを提供し、前記プロセスは、キセノンを医薬的に許容される担体、添加剤または希釈剤に加えることを含み、ここでの改良は、神経保護剤として、および／またはシナプス可塑性の阻害剤として、キセノンを使用することを含む。
【００３２】
別の実施形態において、本発明は、キセノンおよび医薬的に許容される担体、添加剤または希釈剤を含む、神経保護および／またはシナプス可塑性の阻害のための医薬組成物を提供し、ここでの改良は、キセノンを神経保護剤として、および／またはシナプス可塑性の阻害剤として使用することを含む。
【００３３】
典型的には、本発明の医薬組成物は、静脈内（ボーラス投与または点滴により）、脳脊髄幹（硬膜下またはくも膜下）、経皮、または吸入により送達され得る。
【００３４】
例えば、本発明はまた、以下のいずれか１つ以上のための医薬の調製における、キセノンの使用に関する。
ａ）神経保護を提供する。
ｂ）シナプス可塑性を阻止する、例えば、アヘンに対する耐性の発達を阻止する。
【００３５】
組成物に使用するキセノンの濃度は、所望の臨床効果の達成に必要な最小濃度であり得る。医師が個々の患者に最も適した実際の投与量を決めるのが通常であり、この投与量は、具体的な患者の年齢、体重および応答に応じて変化する。勿論、より高いまたはより低い投与量範囲に利点がある個別の場合もあり得、これも本発明の範囲内である。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、ヒト投与または動物投与用であり得る。
【００３７】
従って、本発明の組成物はまた、動物医薬としても使用し得る。これに関して、本発明はさらに、本発明の組成物および獣医学的に許容される希釈剤、添加剤または担体を含む、獣医学的組成物にも関する。
【００３８】
獣医学的使用では、本発明の組成物またはその獣医学的に許容される組成物は、典型的には、通常の獣医学的慣行に従って投与し、獣医外科医が、具体的な動物に最も適した、投与方式および投与経路を決定する。
【００３９】
本発明はさらに、添付の図面を参照して記載する。
【００４０】
より詳細には、図１Ａは、代表的な興奮性シナプス後電流（ＥＰＳＣ）および１ｍＭキヌレン酸に対するその感受性および１０μＭビククリンに対するその非感受性を示す。挿入図は、−６０ｍＶで測定した電流に正規化した、ＥＰＳＣのピークについての直線電流−電圧関係を示し、データ点は平均値を示す（平均５つの細胞）。図１Ｂは、代表的な抑制性シナプス後電流（ＩＰＳＣ）および１０μＭのビククリンに対するその感受性および１ｍＭのキヌレン酸に対する非感受性を示す。挿入図は、−６０ｍＶで測定した電流に正規化した、ＩＰＳＣのピークについての直線電流−電圧関係を示し、データ点は平均値を示す（平均６つの細胞）。挿入図中の誤差棒はＳＥＭであるが、これらは、記号のサイズよりも小さい場合には示さない。
【００４１】
より詳細には、図２Ａは、３．４ｍＭのキセノンの存在下および非存在下でのＧＡＢＡ作動性シナプス後電流を示す。キセノンは、ＩＰＳＣに対して有意な効果は全く示さない。挿入図は、３μＭのＧＡＢＡにより誘起された電流に対する、４．３ｍＭのキセノンの効果のないことを示した、それぞれの軌跡を示す。図２Ｂは、３．４ｍＭのキセノンの存在下および非存在下でのグルタミン酸作動性シナプス後電流を示す。基本的な効果は、電流の遅い成分の減少である（この例では約７０％）。点は、測定した電流への両側指数適合を示す。挿入図は、１００μＭのＮＭＤＡにより誘起された電流に対する、３．４ｍＭのキセノンの効果を示したそれぞれの軌跡を示す。
【００４２】
より詳細には、図３は、ＮＭＤＡは、２４＋２μＭのＮＭＤＡのＥＣ50および１．２±０．１のＨｉｌｌ係数で、内向電流（−６０ｍＶで固定したニューロンにおいて）を活性化することを示す。キセノンはこの電流を約６０％阻害するが、ＥＣ50またはＨｉｌｌ係数を有意に変化させない。各データ点は、少なくとも６つの細胞の平均ピーク電流を示す。
【００４３】
より詳細には、図４は、キセノンが、ＮＭＤＡ受容体により媒介されるグルタミン酸作動性興奮性シナプス後電流（ＥＰＣＳ）の成分を選択的に阻害することを示す。ニューロンを−６０ｍＶで電圧固定し、シナプス応答を、＋２０ｍＶまでの２ｍ秒の脱分極パルスにより刺激した。対照グルタミン酸作動性ＥＰＳＣは、特徴的な二相性崩壊を示した。遅い成分は、２００μＭのＡＰ５により完全に遮断され、速い成分はほとんど影響を受けなかった。挿入図は、ＮＭＤＡ受容体により媒介される成分（対照ＥＰＣＳと、ＡＰ５存在下でのＥＰＣＳの間の差異）およびキセノンの存在下でのそのサイズ（キセノンの存在下でのＥＰＳＣと、ＡＰ５の存在下でのＥＰＣＳの間の差異を考慮することにより計算）を示す。対照溶液は、８０％Ｎ2および２０％Ｏ2を用いて、試験溶液は８０％キセノンおよび２０％Ｏ2を用いて室温で平衡化した。
【００４４】
より詳細には、図５は、表版およびファンアセンブリ、ガスおよび電気フィードスルーの詳細を示す。チャンバーは、ステンレス鋼または陽極酸化アルミニウムから組立て、容易に消毒できる。ガスは、細胞が正確に定めた濃度のキセノンに確実に曝露する効率的な混合を提供する、高速ファンに接続したポートを通って侵入する。キセノンがｖｍｌ／分でチャンバーに導入され、チャンバーの容量がＶであり、チャンバーに侵入するキセノンの濃度がＣinである場合、出てくるガスの濃度Ｃoutは、以下の式により示される。
【数１】
0005088997.tif 000002
【００４５】
より詳細には、図７は、キセノンが、正に理論的速度で窒素を置換することを示す実験的試験を示す。１つの細胞培養プレートの存在下で、ガスの容量は５７０ｍｌである。よって、４０ｍｌのキセノン／分の速度および１つの細胞培養プレートでは、チャンバー中のガスは、理論的に、ガスが完全に混合されていれば、ｔ＝４３分で、最終濃度の９５％に達するはずである。
【００４６】
より詳細には、図８は、キセノンの較正チャートの例であり、キセノン流速（ｍｌ／分）に対する、流量計（ｍｍ）のボールの高さを示す。細胞を曝露するガス環境の組成は、キセノン（または別に、窒素、酸素、または二酸化炭素）について較正しておいた正確なフローロタメーターを使用して定めた。
【００４７】
より詳細には、図９は、規定のガス混合物（キセノン、酸素、窒素および二酸化炭素）を、安定で正確な制御環境を提供する、ガスを混合したチャンバーに通過させた場合のガス解析を示す。ガスの組成は、ガスクロマトグラフィーを使用して確認した。ガスは、出口で試料を採取し、ガラスバイアルに封をした。バイアルを、パーキンエルマー自動ヘッドスペースサンプラーＨＳ４０ＸＬに移し、これは、バイアル中（４０μｌの試料採取容量）のガスの試料を採取し、次いでこれらを、キャリヤーガスとしてヘリウム（２ｍｌ／分）を用いて６０℃で作動する、２メートル×１／８ｓｓ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｒｂ  １０２  ８０−１００メッシュカラムを装着したパーキンエルマーＸＬガスクロマトグラフに供給した。ガスを、１５０℃のインジェクト温度で、１１０℃の熱伝導度検出器を使用して検出した。
【００４８】
より詳細には、図１０は、１５日目の共培養液中のＮＭＤＡ誘導神経損傷の用量反応曲線を示す。対照実験により、底にあるグリア単層は、使用した最大用量のＮＭＤＡにより影響を受けないことが実証された（処理：１０分間、２４時間後にＬＤＨ遊離）。
【００４９】
より詳細には、図１１は、１５日目の共培養物中のグルタミン酸誘導神経損傷の用量反応曲線を示す。対照実験により、底にあるグリア単層は、使用した最大用量のグルタミン酸により影響を受けないことが実証された（処理：３０分間、６時間後にＬＤＨ遊離）。
【００５０】
より詳細には、図１２は、姉妹培養液（ｎ＝３）をＮＭＤＡ（７５０μｍｏｌで１０分間）に曝露し、続いて、神経傷害を、曝露２４時間後にＬＤＨの出現により定量する、ＮＭＤＡ誘導神経損傷中および後の７５％キセノンの効果を示す。
【００５１】
より詳細には、図１３は、姉妹培養液（ｎ＝３）をグルタミン酸（７５μｍｏｌで１０分間）に曝露し、続いて、神経傷害を、曝露２４時間後にＬＤＨの出現により定量する、グルタミン酸誘導神経損傷中および後の７５％キセノンの効果を示す。
【００５２】
より詳細には、図１４は、漸増用量のＰＧＥ1は、用量依存的にアデニル酸シクラーゼ（ＡＣ）を刺激することを示す。
【００５３】
より詳細には、図１５は、α−２アゴニストのノルエピネフリンを、ＡＣ活性をＰＧＥ1で刺激する条件下で共投与する場合に、ＡＣ活性は、用量依存的にノルエピネフリンにより阻害されることを示す。基礎条件下でさえ（「−ＰＧＥ1」）、阻害効果は明らかである。
【００５４】
出願人により実施される研究により、キセノンは、実質的にＧＡＢＡA受容体に対して全く効果を及ぼさないことが示された。規定のＧＡＢＡサブユニットを安定に発現する、電位固定培養ラット海馬ニューロンおよび電位固定ＰＡ３細胞（Ｈａｄｉｎｇｈａｍ  ＫＬら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９２；８９、６３７８〜６３８２）の両方において、３μＭのＧＡＢＡにより活性化される電流は、１００％のキセノンによってさえ、有意に影響を受けなかった。この観察の重要性は、ヒト麻酔薬として機能するには、５０％有効濃度ＥＣ50は７１％ｖ／ｖであるので、明白となる（Ｃｕｌｌｅｎら、Ａｎｅｓｔｈｓｉｏｌｏｇｙ  １９６９、３０５〜３０９）。キセノンは、海馬ニューロン中の機能的ＧＡＢＡ遊離シナプスに対してほとんど効果を及ぼさないことが示され、８０％キセノンが、ピーク抑制性シナプス後電流を僅か８±２％減少し、これは、キセノンのシナプス前効果が非常に僅かであることを示す。
【００５５】
これに対し、キセノンは、ＮＭＤＡ受容体に対して有意な効果を及ぼすことが示された。培養海馬ニューロンに関する機序の研究は、８０％キセノン（これは手術での麻酔を維持する）は、ＮＭＤＡ活性化電流を６０％減少させ、ＮＭＤＡのＥＣ50値またはＨｉｌｌ係数には有意な変化は無いことが示された。この非競合的阻害により、シナプス間隙には高濃度のグルタミン酸があるにも関わらず、キセノンは、強力に神経伝達を阻害することが示される。
【００５６】
さらなる研究を、それ自体でシナプスを形成する（自己シナプス）、海馬ニューロンのマイクロアイランド培養液を使用して実施した（Ｂｅｋｋｅｒｓ  ＪＭら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９１：８８、７８３４〜７８３８）。海馬ニューロンから記録した典型的なグルタミン酸作動性シナプス後電流を図４に示す。対照記録は、特徴的な二相時間経緯を示し、速い成分は、非ＮＭＤＡ受容体により媒介され、はるかに遅い成分はＮＭＤＡ受容体により媒介される。ＮＭＤＡ受容体媒介成分は、高度に選択的な競合的アンタゴニストのＤＬ−２−アミノ−５−ホスホノペンタノエートにより遮断されるので容易に同定される（Ｗａｔｋｉｎｓ  ＪＣら、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ、１９８１；２１、１６５〜２０４）。
【００５７】
２００μＭのＡＰ５の添加により、遅い成分はほぼ完全に遮断され、速い成分のみが残り、単純指数関数時間経緯は、対照の速い成分のそれと非常に類似していることが示された。グルタミン酸作動性シナプス後電流に対するキセノンの効果は、ＡＰ５の効果と類似している（図４）。遅いＮＭＤＡ受容体媒介成分は、７０％以上減少し、一方、速い成分はほとんど変化しない。よって、キセノンがシナプスＮＭＤＡ受容体を阻害するだけでなく、非ＮＭＤＡ受容体にはほとんど明らかな効果を及ぼさない。
【００５８】
シナプス電流に対する効果に関して、キセノンを用いて観察された作用の選択性は意外である。ほとんど全ての全身麻酔薬が、ＧＡＢＡA受容体でＧＡＢＡの作用を増強するという事実から（Ｔａｎｅｌｉａｎ  ＤＬら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ  １９９３；７８：７５７〜７７６；Ｆｒａｎｋｓ  ＮＰら、Ｎａｔｕｒｅ  １９９４；３６７：６０７〜６１４）、キセノンも例外ではないと予期した。しかし、キセノンはＧＡＢＡA受容体に対する効果が全くないことにより、キセノンは、ＧＡＢＡA受容体で無効であり（Ｂｒｏｃｋｍｅｙｅｒ  ＤＭら、Ｂｒ．Ｊ．Ａｎｅｓｅｓｔｈ．１９９５；７４：７９〜８４）、ＮＭＤＡ受容体で優先的に作用すると考えられる、いわゆる「解離」麻酔薬であるケタミンなどの薬剤と同じクラスに該当する。同様に、結果により、キセノンは、選択的にＮＭＤＡ受容体を遮断し、ＡＭＰＡ／ＫＡ受容体にはほとんど効果を及ぼさないことが示された。この後者の結果により、キセノンの作用は、起源が後シナプスであることが強く示唆される。しかし、キセノンには、ＮＭＤＡ受容体成分の崩壊時間に対する効果がないことにより、ＮＭＤＡ誘起電流のＥＣ50濃度はキセノンの存在下で変化しないという観察と同じように、単純なオープンチャネル遮断阻害機序は除外される。ＮＭＤＡ受容体へのキセノンの驚くべき選択性に関する正確な分子基礎がどのようなものであろうと、深い麻酔および精神異常発現効果の誘導能を含む、その異常な薬理学的プロフィルの多くの特徴をかなり簡単に説明する。
【００５９】
従って、キセノンは、作用が驚くべき程に選択的であり、興奮性および抑制性シナプス伝達に対して非常に異なる効果を有することは明らかである。キセノンの作用は、グルタミン酸作動性シナプスでの作用に関してのみ説明し得るが、他の標的も、同様に将来同定し得る。それにも関わらず、キセノンに対するＧＡＢＡ作動性シナプスの非感受性により、作用機序は、明らかに、大半の全身麻酔薬の作用機序とは異なることが示される。機序レベルでは、キセノンにとって、シナプス後受容体は、最も重要な分子標的であることは明らかである。
【００６０】
本発明はさらに、実施例により記載する。
【００６１】
（実施例）
（海馬ニューロンの培養）
海馬ニューロンは、前記の方法を使用して培養液中で増殖した（Ｓｅｇａｌ  ＭＭら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．１９９０、６４；１３９０〜１３９９；Ｂｅｋｋｅｒｓ  ＪＭら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９１、８８：７８３４〜７８３８；Ｍｅｎｎｅｒｉｃｋ  Ｓら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．１９９５、７３：３２０〜３３２）。簡潔には、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（生後１〜３日）の海馬を解剖し、粗くスライスし、パパイン含有溶液（２０単位ｍｌ-1）中で３０分間３７℃で撹拌した。酵素非含有溶液で洗浄した後、組織を、穏やかに、火で研磨加工したパスツールピペットで粉砕し、細胞を、８〜１０×１０4細胞ｍｌ-1で蒔き、３７℃で培養した（９５％空気／５％ＣＯ2）。細胞の培養に使用したガラススライドを、最初に、アガロース（０．１５％ｗ／ｖ）でコーティングし、ついで、ガラス−ミクロ噴霧器からのポリ−Ｄ−リジン（ＰＤＬ）およびコラーゲン（０．１ｍｇｍｌ-1ＰＤＬおよび０．５ｍｇｍｌ-1ラット尾コラーゲン）の微細ミストを噴霧し、ＵＶ照射により滅菌した。これにより、直径１００ないし１０００μｍの許容可能な基質のマイクロアイランドが生じた。蒔いた３〜４日後、グリア細胞層が約８０％の集密性となった場合に、抗有糸分裂剤（シトシンβ−Ｄ−アラビノフラノシド、５μＭ）を加えて、グリア細胞増殖を停止した。次いで、ニューロン培養液を、さらに４〜９日間成熟させた。我々は、軸索突起および樹状突起が複数の自己シナプス（autapse）を形成している１つの単離ニューロンを含む、マイクロアイランドを使用した。この手順により、多くの表現型の同一な単シナプス接合の集合が提供された。
【００６２】
（電気生理学）
ニューロンは、全細胞記録技術を使用して、電位固定した（Ａｘｏｐａｔｃｈ２００増幅器、カリフォルニア州フォスターシティー所在のＡｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）。電極は、ホウケイ酸ガラスから組立て、典型的には３ないし５ＭΩの抵抗を示した。直列抵抗は、７５〜９０％補われた。ニューロンを、−６０ｍＶで電位固定し、シナプス応答は、＋２０ｍＶまでの２ｍ秒の脱分極パルスにより刺激した。膜電位が−６０ｍＶまで回復した後すぐに、大量（１〜２０ｎＡ）のシナプス後電流を観察および記録した。シナプス測定のために、データを５０ｋＨｚで試料採取し、２０ｋＨｚ（−３ｄＢ、８極ベッセル）でフィルターにかけ、コンピューターに保存した。細胞外記録溶液は、ＮａＯＨでｐＨ７．３に滴定した、（ｍＭ）１３７ｍＮａＣｌ、５ＫＣｌ、３ＣａＣｌ2、５ＨＥＰＥＳ、１０グルコース、０．００１グリシン、０．０００１ストリキニーネＨＣｌであり、細胞内（ピペット）溶液は、ＫＯＨでｐＨ７．２５に滴定した、（ｍＭ）１４０ＫＣｌ、４ＮａＣｌ、０．５ＥＧＴＡ、２ＭｇＡＴＰ、１０ＨＥＰＥＳであった。
【００６３】
ＧＡＢＡ、ＮＭＤＡまたはグルタミン酸を外的に適用した実験では、ニューロンを、大量培養液中で増殖し、蒔いた３〜１１日後に使用した。データを、２００Ｈｚで試料採取し、１００Ｈｚ（−３ｄＢ、８極Ｂｅｓｓｅｌ）でフィルターにかけた。ＮＭＤＡおよびグルタミン酸誘起応答についての細胞外記録溶液は、ＮａＯＨでｐＨ７．４０に滴定した、（ｍＭ）１５０ＮａＣｌ、４ＫＣｌ、２ＣａＣｌ2、１０ＨＥＰＥＳ、１０グルコース、０．０００２クエン酸テトロドトキシン（英国ブリストル所在のＴｏｃｒｉｓ  Ｃｏｏｋｓｏｎ）、０．１ピクロトキシン、０．０００１ストリキニーネＨＣｌ、０．００１グリシンであり、ＧＡＢＡ誘起応答の細胞外記録溶液は、ＮａＯＨでｐＨ７．４０に滴定した、（ｍＭ）１５０ＮａＣｌ、４ＫＣｌ、１ＣａＣｌ2、１ＭｇＣｌ2、１０ＨＥＰＥＳ、１０グルコース、０．０００２クエン酸テトロドトキシンであり、ＧＡＢＡ−、ＮＭＤＡ−およびグルタミン酸誘起応答についての細胞内（ピペット）溶液は、ＣｓＯＨでｐＨ７．２０に滴定した、（ｍＭ）１４０ＣｓＣｌ、３ＮａＣｌ、１１ＥＧＴＡ、２ＭｇＡＴＰ、１０ＨＥＰＥＳであった。特記しない限り、全ての化学物質は、シグマケミカル社から得た（英国ドーセット州プール所在）。試験溶液を、迅速に切り替わる灌流系を使用して細胞に適用した（Ｄｏｗｎｉｅ  ＤＬら、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６、１１８：４９３〜５０２）。全ての電気生理学的測定は、室温（２０〜２３℃）で実施した。
【００６４】
（麻酔溶液の調製）
キセノン溶液は、最初に、純粋なガス（酸素、窒素またはキセノン）を、微細焼結ガラス気泡器を通して、細胞外記録食塩水で充填した２５０または５００ｍｌのＤｒｅｃｈｓｅｌ瓶に泡立てることにより調製した。溶液を１．５から２時間泡立てたが、平衡は、４５分以内に生じることが判明した。（酸化を最小限にするために、神経毒および神経伝達物質は、完全に酸化した食塩水から排除した）。泡立てる間、溶液を室温で絶えず撹拌した。次いで、これらの溶液を混合して、所望の最終濃度のガスを得た。我々の対照溶液は、通常、８０％の窒素溶液および２０％の酸素溶液を含んでいたが、我々の試験溶液は、通常、８０％のキセノン溶液および２０％酸素の溶液を含んでいた。Ｂｕｎｓｅｎの水／ガス分配係数０．０９６５を使用して（Ｓｍｉｔｈ  ＲＡら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １９８１、６４５：３２７〜３３８）、我々は、我々の標準試験溶液は３．４ｍＭのキセノンを含むと計算する。キセノン（研究等級、９９．９９３％純粋）は、英国サリー州ギルフォード所在のＢＯＣガスから供給された。全ての場合において、キセノンは、シナプス電流を開始する前に、少なくとも３０秒間ニューロンに予め適用した。
【００６５】
（シナプス応答の統合）
全電荷移行についての推定値を得るために、ＥＰＳＣまたはＩＰＳＣを数的に統合した。しかし、電流は、記録期間の終了まで基線までに崩壊しない場合もあるので、修正（これは、絶えず、全電荷移行の５％より少ない）を、応答の崩壊相への両側指数適合を使用して、観察された電流を基線に外挿することにより適用した。
【００６６】
（対照シナプス電流）
対照シナプス電流を特徴づけ、以前の研究の知見に従って、ほぼ普遍的に、２つの集合の１つに該当した（Ｂｅｋｋｅｒｓ  ＪＭら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９１、８８：７８３４〜７８３８；Ｍｅｎｎｅｒｉｃｋ  Ｓら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．１９９５、７３：３２０〜３３２）。約半分の細胞が、シナプス後電流を示し、これは、比較的速く崩壊し（約８ｍ秒の半減時間）、一方、他方の半分は、顕著に遅い（約４０ｍ秒の半減時間）電流を示した（図１および表１参照）。より速い応答が、丸い外見および複雑な樹状突起を有する細胞から記録された。キヌレン酸に対するその感受性（１ｍＭキヌレン酸で８０±３％のピーク電流の阻害；ｎ＝７細胞）およびビククリンに対する非感受性（１０μＭのビククリンで０．４±１．３％のピーク電流の阻害；ｎ＝１３細胞）により、これらの細胞を、興奮性グルタミン酸作動性ニューロンと同定した。これに対し、より遅いシナプス電流は、ビククリンによりほぼ完全に遮断され（１０μＭのビククリンで９４±１％のピーク電流の阻害；ｎ＝８細胞）、キヌレン酸により影響を受けず（１ｍＭのキヌレン酸で６±４％のピーク電流の阻害；ｎ＝５細胞）、従って、これらの応答はＧＡＢＡ作動性であると同定した。これらの抑制性ニューロンは、より簡単な樹状突起をもち、より平板になる傾向があった。ＧＡＢＡおよびグリシンは、脊髄介在ニューロンにより共遊離され得るという近年の知見から（Ｊｏｎａｓ  Ｐら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９８、２８１：４１９〜４２４）、我々は、我々が記録した抑制性応答は、一部、グリシン受容体により媒介されるという可能性を考えた。しかし、対照電流は、１００ｎＭのストリキニーネにより、ほとんど影響を受けず（４±２％阻害；ｎ＝６細胞）、これは、抑制性電流は完全にＧＡＢＡ作動性であることを確認する。
【００６７】
興奮性および抑制性電流は、実質的に同じ立ち上がり時間を示し（表１参照）、電流のピークは、試験電位と共に、線形に変化した（図１の挿入図参照）。シナプス電流Ｉ（ｔ）の崩壊相（ここでのｔは電流のピークから測定した時間である）は、以下の型式の両側指数式により適合した。
【数２】
0005088997.tif 000003
ここでのＩfastおよびＩslowは、振幅であり、τfastおよびτslowは、それぞれ速いおよび遅い成分の時間定数である。対照興奮性および抑制性応答から測定した、これらの崩壊時間定数の値を表１に示す。両方の場合において、全電荷移行の約３分の２が、遅い成分により実施された。興奮性グルタミン酸作動性応答ついて、この遅い成分は、ＮＭＤＡ受容体により媒介されるとして、容易に同定できる。なぜなら、それは、高度に選択的なＮＭＤＡ受容体アンタゴニストである、２００μＭのＡＰ５（ＤＬ−２−アミノ−５−ホスホノペンタノエート）により完全に（９９±１％；ｎ＝１０細胞）遮断されるからである（Ｄａｖｉｅｓ  Ｊら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ  １９８１、２１：７７〜８１）。この濃度のＡＰ５の存在下、シナプス電流の崩壊相は、対照の速い成分のそれとはほとんど異ならない、大きさおよび時間経緯で、単純指数関数に、よく適合できる。この速い成分は、ピーク興奮性電流の大きさを非常に大きく決定するが（Ｉfast／Ｉtotal＝９２±１％；ｎ＝１３細胞）、これは、ＡＭＰＡ／ＫＡ受容体により媒介される電流に起因できる（Ｂｅｋｋｅｒｓ  ＪＭら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９１、８８：７８３４〜７８３８；Ｍｅｎｎｅｒｉｃｋ  Ｓら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．１９９５、７３：３２０〜３３２）。
【００６８】
（シナプス電流に対するキセノンの効果）
痛みのある刺激に対する応答を防ぐ、キセノンのガス濃度は（すなわちＭＡＣ）、種により異なるようであり、ヒトでは７１％ａｔｍであり（Ｃｕｌｌｅｎ  ＳＣら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ  １９６９、３１：３０５〜３０９）、アカゲザルでは９８％ａｔｍであり（Ｗｈｉｔｅｈｕｒｓｔ  ＳＬら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌ．１９９４、６：２７５〜２７９）、ラットでは１６１％ａｔｍである（Ｋｏｂｌｉｎ  ＤＤら、Ａｎｅｓｔｈ．Ａｎａｌｇ．１９９８、８７：４１９〜４２４）。これらの値を、Ｏｓｔｗａｌｄ水／ガス分配係数０．０８８７（Ｗｅａｔｈｅｒｓｂｙ  ＰＫら、Ｕｎｄｅｒｓｅａ  Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．１９８０、７：２７７〜２９６）を使用して、３７℃の遊離水濃度に変換すると（Ｆｒａｎｋｓ  ＮＰら、Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ．１９９３、７１：６５〜７６；Ｆｒａｎｋｓ  ＮＰら、Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ、１９９６、８４：７１６〜７２０）、得られた数値は、ヒト、サルおよびラットでそれぞれ、２．５ｍＭ、３．４ｍＭおよび５．６ｍＭであり、平均値は３．８ｍＭである。室温で実施した本明細書に記載の実験では、標準的な試験溶液に存在するキセノンの濃度は、３．４ｍＭであった。この濃度で、キセノンは、抑制性シナプス電流に対して無視できる効果を示したが、興奮性電流を強く抑制した。これは、図２に代表的な軌跡を用いて示す。
【００６９】
ＧＡＢＡ作動性シナプス電流では、３．４ｍＭのキセノンは、シナプス後電流のピーク値にも、時間経緯にも影響を及ぼさなかった。様々な抑制性シナプスパラメータの変化率を表２に示し、ここでは、どれも有意に変化していないことが分かる。低（３μＭ）濃度の外的に適用したＧＡＢＡにより誘起された電流に対するキセノンの効果も調べた。ここで、４．３ｍＭのキセノンは、ＧＡＢＡ誘導電流に対して有意な効果を示さなかった（２±３％増強、ｎ＝４細胞）。代表的な軌跡の対を、図２Ａの挿入図に示す。これに対し、３．４ｍＭのキセノンは、グルタミン酸作動性シナプス電流を大きく抑制し、この効果は、ほぼ専ら、遅いＮＭＤＡ受容体の媒介する電流成分に限定された（図２Ｂ）。これは、表２に列挙した種々の興奮性シナプスパラメータの変化率において明白である。ここで、キセノンの質的効果は、ＡＰ５の効果により顕著に密接に模倣される。ある濃度のＡＰ５（２００μＭ）では、ＮＭＤＡ受容体成分は、ほぼ完全に遮断されることが予期され（Ｄａｖｉｅｓ  Ｊら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔｓ  １９８１、２１：７７〜８１）、これは、Ｉslowの９９％遮断と一致する（表２参照）。これは、全電荷移行の７５％減少を伴い、遅いＮＭＤＡ受容体媒介成分により実施されると我々が推定した、全電荷の６１％に近い（表１参照）。差異は、ＡＰ５による、速い時間定数τfastの、小さいが、有意な減少を説明し得る。キセノンは同様に、Ｉslowの大きな阻害（７０％）および全電荷移行の大きな阻害（５６％）を引き起こし、速いＡＭＰＡ／ＫＡ受容体媒介成分に対する効果はほんの僅かである。
【００７０】
（神経保護効果）
（新生児グリアおよび胎児神経細胞の共培養）
解離ネズミ皮質細胞培養液を、胎児マウス（妊娠１４〜１７日目）の全脳新皮質を使用して調製した。皮質グリア細胞培養液は、初期生後マウスから調製した。非ニューロン細胞分裂をシトシンアラビノシドで停止した後、生存している皮質ニューロン細胞を、グリア細胞バックグラウンドに蒔き、共培養した。
【００７１】
（ＮＭＤＡでのニューロン共培養液の損傷）
胎児皮質細胞を最初に収集した日から１５日後に、共培養液プレートを、室温で、１０〜１，０００μＭのＮ−メチル，Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）の対照塩溶液（ＣＣＳ）中に１０分間曝露した。注意深くＣＣＳで洗浄した後、細胞を、グルタミン酸または乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）を含まないが、グルコース２５ｍＭ、およびＮａＨＣＯ3３８ｍＭを補充した、イーグルス最少必須培地中で、３７℃で加湿ＣＯ2（５％）雰囲気中インキュベートした。損傷度は、培地へのＬＤＨ遊離を測定することにより決定した。ＮＭＤＡ誘導損傷の用量反応曲線を、前記したように、図１０に示す。
【００７２】
（グルタミン酸でのニューロン共培養液の損傷）
皮質細胞を最初に収集した日から１５日後に、共培養プレートを、室温で、１０〜１，０００μＭのグルタミン酸のＣＣＳ中に１０〜３０分間曝露した。注意深くＣＣＳで洗浄した後、細胞を、グルタミン酸または乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）を含まないが、グルコース２５ｍＭ、およびＮａＨＣＯ3３８ｍＭを補充した、イーグルス最少必須培地中で、３７℃で加湿ＣＯ2（５％）雰囲気中インキュベートした。損傷度は、培地へのＬＤＨ遊離を測定することにより決定した。グルタミン酸誘導損傷の用量反応曲線を、前記したように、図１１に示す。
【００７３】
（キセノンでのＮＭＤＡ損傷ニューロングリア共培養細胞の保護）
１気圧のキセノン７５％を、ほぼ最大の損傷を生じる濃度である、７５０μＭのＮＭＤＡに曝露する間および後に細胞に送達した。損傷度は、培地へのＬＤＨ遊離を測定することにより決定した（「基線」ＬＤＨ遊離について修正した後）。キセノンは、３０％以上、ＮＭＤＡにより生じた損傷を減少し、キセノンをＮＭＤＡ曝露後に続けた場合、損傷は、さらに、５５％以上減少した。キセノンの保護作用の結果を、前記したように、図１２に示す。
【００７４】
（キセノンでのグルタミン酸損傷ニューロングリア共培養細胞の保護）
１気圧のキセノン７５％を、ほぼ最大の損傷を生じる濃度である、７５μＭのグルタミン酸に曝露する間および後に細胞に送達した。損傷度は、培地へのＬＤＨ遊離を測定することにより決定した（「基線」ＬＤＨ遊離について修正した後）。キセノンは、３５％以上、グルタミン酸により生じた損傷を減少し、キセノンをグルタミン酸曝露後に続けた場合、損傷は、さらに、６０％以上減少した。キセノンの保護作用の結果を、前記したように、図１３に示す。
【００７５】
（シナプス可塑性の阻害）
中枢神経系の機能の摂動は、シナプス可塑性と称される、神経接合の強度の変化により生じ得る。本発明者は、神経芽細胞腫Ｘグリオーマハイブリッド細胞系を使用して、シナプス可塑性に対するキセノンの効果を調べた。このパラダイムでは、シナプス伝達に中枢的に関与しているα−２アドレナリン作動性受容体が、アデニル酸シクラーゼ（ＡＣ）を阻害する。
【００７６】
ＡＣに対するα−２アドレナリン作動性受容体の阻害効果を調べるために、最初に、内因性ＡＣを、プロスタグランジンＥ1（ＰＧＥ1）で刺激することが必要である。漸増量のＰＧＥ1は、用量依存的にＡＣを刺激する（図１４）。α−２アゴニストであるノルエピネフリンを、ＡＣ活性をＰＧＥ1で刺激する条件下で共投与する場合、この活性は、ノルエピネフリンにより用量依存的に阻害される（図１５）。
【００７７】
「シナプス可塑性」を誘導するために、細胞を、ノルエピネフリンで８時間前処理し、十分に洗浄した細胞からホモジネートを調製した後、再度適用したノルエピネフリンにより、ＰＧＥ1刺激ＡＣ活性に対するその阻害作用は低下する。これらの細胞を前処理期中にキセノンに同時に曝露すると、ノルエピネフリンの阻害作用は持続する。
【００７８】
本発明の変形は当業者には明らかである。本明細書に記載の文献は、本明細書の記載の一部となすものとする。
【００７９】
【表１】
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【００８０】
【表２】
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【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、対照興奮性および抑制性シナプス後応答を示す。
【図２】  図２は、抑制性および興奮性シナプス後応答に対する、キセノンの作用を示した、代表的な軌跡を示す。
【図３】  図３は、キセノンの存在下および非存在下でのＮＭＤＡの濃度に対する、最大対照電流の比率を示す。
【図４】  図４は、興奮性シナプス後応答に対するＡＰ５およびキセノンの作用、および挿入図、ＮＭＤＡ受容体により媒介される成分を示す。
【図５】  図５は、培養液中に細胞を曝露するために使用する装置の構成および性能を示す。
【図６】  図６は、培養液中に細胞を曝露するために使用する全チャンバーの全体像を示す。
【図７】  図７は、キセノンをチャンバーに導入する典型的な実験のチャンバー動態を示し、時間（分）と共に、キセノンが増加し、窒素が減少することを示す。
【図８】  図８は、キセノンの較正チャートを示す。
【図９】  図９は、チャンバーのガス解析の典型例を示す。
【図１０】  図１０は、ＮＭＤＡ誘導ニューロン損傷の用量反応曲線を示す。
【図１１】  図１１は、グルタミン酸誘導ニューロン損傷の用量反応曲線を示す。
【図１２】  図１２は、ＮＭＤＡ誘導ニューロン損傷中および後の７５％キセノンの作用を示す。
【図１３】  図１３は、グルタミン酸誘導ニューロン損傷中および後の７５％キセノンの作用を示す。
【図１４】  図１４は、アデニル酸シクラーゼ（ＡＣ）に対する、漸増用量のプロスタグランジンＥ1（ＰＧＥ1）の作用を示す。
【図１５】  図１５は、アデニル酸シクラーゼ（ＡＣ）活性に対する、ノルエピネフリンの共投与の作用を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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