(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ  Ｎｏ．Ｌ３９／２（１５．２．１９９２）に従い定義される、以下のバージンオリーブ油のうちの少なくとも１つ：エクストラバージンオリーブ油、バージンオリーブ油、通常のバージンオリーブ油、ランパンテバージンオリーブ油、又は、ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓに定義されている、バージンオリーブ油と低級オリーブ油の任意な配合物であって、少なくとも２５％のバージンオリーブ油を含む配合物、並びに（２）植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステル配合物、を含んで成るオリーブ油を基にした生成物であって、前記配合物の脂肪酸部分が５重量％未満の飽和脂肪酸及び６０重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む生成物。
【請求項２】
前記配合物が少なくとも５０％のバージンオリーブ油を含む、請求項１に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項３】
前記配合物が少なくとも７５％のバージンオリーブ油を含む、請求項１に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項４】
配合物の脂肪酸部分が６５重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１から３のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項５】
配合物の脂肪酸部分が３重量％未満の飽和脂肪酸を含む、請求項１から４のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項６】
配合物の脂肪酸部分が２重量％未満のステアリン酸を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項７】
配合物の脂肪酸部分が１．５重量％未満のステアリン酸を含む、請求項１から５のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項８】
３０℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項９】
２５℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１０】
２０℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１１】
１８℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１２】
８℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１３】
４℃で透明な、請求項１から７に記載のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１４】
冷蔵庫から取り出し、そして室温に至らせた後に透明となる、請求項１から７のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１５】
少なくとも１つのバージンオリーブ油がエクストラバージンオリーブ油を含んで成る、請求項１から１４のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１６】
植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステルが、スタノールの脂肪酸エステルを含んで成る、請求項１から１５のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１７】
スタノールの脂肪酸エステルのスタノール部分が、シトスタノール及び任意にカンペスタノールを含んで成る、請求項１から１６のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１８】
配合物（２）が遊離ステロール及び／又はスタノールとして計算された、０．３〜１０重量％の量で存在する、請求項１から１７のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項１９】
配合物が食品用の工程を用いて製造される、請求項１から１８のいずれか１項に記載のオリーブ油を基にした生成物。
【請求項２０】
（１）ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ  Ｎｏ．Ｌ３９／２（１５．２．１９９２）に従い定義される、以下のバージンオリーブ油のうちの少なくとも１つ：エクストラバージンオリーブ油、バージンオリーブ油、通常のバージンオリーブ油、ランパンテバージンオリーブ油、又は、ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓに定義されている、バージンオリーブ油と低級オリーブ油の任意な配合物であって、少なくとも２５％のバージンオリーブ油を含む配合物、並びに（２）植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステル配合物を含んで成るオリーブ油を基にした生成物であって、前記配合物の脂肪酸部分が５重量％未満の飽和脂肪酸及び６０重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む生成物を製造する方法であって、
（ａ）植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステル配合物を製造するために、５重量％未満の飽和脂肪酸及び６０重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む脂肪酸源で植物ステロール及び／又はスタノールをエステル化し、そして
（ｂ）オリーブ油を基にした生成物を得るために、少なくとも１つのバージンオリーブ油に配合物を溶解すること、
を含んで成る方法。
【請求項２１】
脂肪酸源が６５重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
脂肪酸源が２重量％未満のステアリン酸を含む、請求項２０又は２１に記載の方法。
【請求項２３】
エステル化段階が、過剰なアルコールの脂肪酸エステルを用いて植物ステロール及び／又はスタノールをエステル交換し、そしてエステル交換触媒の存在下でエステル化段階を実施することを含んで成る、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステルが、スタノールの脂肪酸エステルを含んで成る、請求項２０から２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
エステル化段階が食品用の工程を用いて行われる、請求項２０から２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
（１）ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ  Ｎｏ．Ｌ３９／２（１５．２．１９９２）に従い定義される、以下のバージンオリーブ油のうちの少なくとも１つ：エクストラバージンオリーブ油、バージンオリーブ油、通常のバージンオリーブ油、ランパンテバージンオリーブ油、又は、ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓに定義されている、バージンオリーブ油と低級オリーブ油の任意な配合物であって、少なくとも２５％のバージンオリーブ油を含む配合物、並びに（２）植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステル配合物を含んで成るオリーブ油を基にした生成物であって、前記配合物の脂肪酸部分が５重量％未満の飽和脂肪酸及び６０重量％超の多価不飽和脂肪酸を含む生成物を製造する方法であって、
（ａ）高ＰＵＦＡの植物油に由来する脂肪酸を有する植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステルを、少なくとも１つのバージンオリーブ油に溶解し、そして
（ｂ）オリーブ油を基にした生成物を得るために、０〜３０℃の間の温度で、溶解段階から得られた油から高融点脂質を結晶化すること、
を含んで成る方法。
【請求項２７】
６５重量％超の脂肪酸部分が多価不飽和脂肪酸を含んで成る、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
２重量％未満の脂肪酸部分がステアリン酸を含んで成る、請求項２６又は２７に記載の方法。
【請求項２９】
結晶化段階が５〜２５℃の間の温度で実施される、請求項２６から２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
植物ステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステルが、スタノールの脂肪酸エステルを含んで成る、請求項２６から２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
配合物が食品用の工程を用いて製造される、請求項２６から３０のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明の背景
本発明は、植物スタノールエステル及び／又は植物ステロールエステルを含む、特に高級オリーブ油、例えばバージンオリーブ油に基づいた、オリーブ油を基にした生成物及びその様なオリーブ油を基にした生成物の製造方法、並びにオリーブ油を基にした生成物の製造に使用可能な、ある植物スタノール及び／又はステロールエステルに関する。
【０００２】
植物ステロールは、コレステロールと構造的に非常に類似している化合物群である。天然で最も頻繁に生じる植物ステロールは、シトステロール、カンペステロール及びスチグマステロールである。植物油及び脂肪は、我々の食事における植物ステロールの主な源である。植物油において、ステロールの大部分が脂肪酸エステルとして存在する。飽和植物ステロール、例えばシトスタノール及びカンペスタノールは、我々の食事中に、少量存在している。フィンランド人の食事における合計スタノールの１日摂取量は、３０〜８０mg／kgと推定されている。しかしながら、トール油のステロールは、１０〜２０％の植物スタノール（主にシトスタノール及びカンペスタノール）を含む。植物スタノールはまた、対応する植物ステロールの二重結合を除去する水素化によっても産生され得る。
【０００３】
近年、既に多くの植物スタノール又はステロールを強化した製品、例えば市販のマーガリン、サラダドレッシング、棒チョコ及びヨーグルトと共に、植物スタノール及びステロールのコレステロール低下特性に対して多くの注目が集められてきた。近年の研究に基づき、２〜３８ｇの植物スタノール又はステロールの一日摂取量は、健康を推奨する食事の一部として使用される場合であっても、血清ＬＤＬコレステロールレベルを有意に低下せしめる。植物スタノール及びステロールを強化した食品は、上昇した血清の合計及びＬＤＬコレステロールレベルを低下せしめるために、増強された食事によるアプローチを提供する。脂肪酸エステル形態の植物スタノール及び／又はステロールによる主要食品の強化は、味及び口あたりを落としめることなく可能である。コレステロール低下効果及び植物スタノールが実質的に吸収可能でないという事実に基づき、植物スタノールは更に好ましいが、植物スタノールとステロールの配合物又は植物ステロール単独も使用され得る。
【０００４】
上昇した血清の合計及びＬＤＬコレステロールレベルを低下せしめるための、植物スタノール及び／又はステロールの使用による最良の利益は、主要食品を強化する場合に得られる。例えば、北欧において、マーガリン及びスプレッドは、その様な強化に非常に適した食品であるが、南欧においては、他の主食候補を見つけることが必要である。この地域において、オリーブ油は特に重要な主要食品である。更に、オリーブ油の消費は、高級オリーブ油の健康上の評判及び風味により、世界の他の地域においても増大している。オリーブ油は、天然において非常に低レベルの植物ステロールを含む（典型的に０．２ｇ／１００ｇ油未満）。更に、高級オリーブ油、例えばバージンオリーブ油は、コレステロールの前駆体であるスクアレンを極めて大量に含む。スクアレンの含有量は変化するが、エクストラバージン油は、典型的に約３００mg／１００ｇ油含む。食事性スクアレンは、ヒトにおける血清コレステロールレベルを増大せしめることが示されている。血清の合計及びＬＤＬコレステロールレベルに対するその様な効果は、植物スタノール及び／又はステロールによって影響を弱められ得る。従って、市販の高級オリーブ油を植物スタノール及び／又はステロールで強化し、そしてその様なオリーブ油が通常使用されるオリーブ油と同様の特性を有することを保証することは明らかに必要である。
【０００５】
バージンオリーブ油は、２０℃で２４時間保存された場合に、透明さを維持するはずである。典型的に高級オリーブ油、例えばバージンオリーブ油は、冷蔵庫の温度で長時間保存された場合に、均一な透明の結晶化が起こると同時に濁る。植物スタノール及び／又はステロールを強化したオリーブ油は、濁りを回避するはずである。
【０００６】
植物スタノール及び／又はステロールエステルの大規模生産の場合、修飾された脂肪酸組成を有する、広く一般的な植物油又は市販の食用油が使用される。その様な市販の植物油又はそれらの配合物に由来する脂肪酸を有する植物スタノール及び／又はステロールエステルによる、高級オリーブ油、例えばバージンオリーブ油の強化は、室温以下の温度でより高度に融解する脂質の沈殿を更に増強する。形成した結晶は、室温での長期間の保存の後でさえも通常溶解しない。この問題は、高レベルの多価不飽和脂肪酸及び低レベルの飽和脂肪酸を有する、現在市販されている植物油、例えば低飽和ダイズ油（ＰＵＦＡ：６７重量％、ＳＡＦＡ：７．９重量％）、ヒマワリ油（ＰＵＦＡ：６４重量％、ＳＡＦＡ：１２重量％）又はリノラ（ｌｉｎｏｌａ）油（ＰＵＦＡ：７０重量％、ＳＡＦＡ：１１重量％）に由来するスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステル化を用いても解決されることはない。
【０００７】
米国特許第５，０８９，１３９号はバージンオリーブ油を精製する方法を記載しており、この中で、バージンオリーブ油は、０℃で２４時間の低温試験にかけられた場合に、透明のままのバージンオリーブ油を得るために、１５〜３５℃の温度でマイクロフィルターで濾過される。
【０００８】
米国特許第３，７５１，５６９号は、低コレステロール特性を有する料理油及びサラダ油を記載している。液体グリセリドの基油に、０．５〜１０重量％（遊離ステロールとして算出）のステロールの脂肪酸エステルを混入する。脂肪酸部分は、Ｃ1-12飽和モノカルボン酸部分又は最大２４個の炭素原子を有する不飽和脂肪酸として表される。１つの態様において、ステロールの脂肪酸エステルは、市販の遊離ステロールとモノカルボン酸無水物との、過塩素酸触媒型のエステル化によって調製される。ステロールの脂肪酸エステルは、冷蔵庫の温度での沈殿を防ぐのに十分なほど少ない量で加えられる。例示した態様において、料理油及びサラダ油は、相互溶媒（例えばヘキサン又はジエチルエーテル）中で液体グリセリド基油及び植物ステロールモノカルボン酸エステルを溶解し、そしてその溶媒を蒸発させることによって調製した。トリオレインにおける植物ステロールの異なる脂肪酸エステルの溶解性も提示されており、これはＣ12（０．６％）及びＣ16（０．１％）飽和脂肪酸植物ステロールエステルについて非常に低い溶解性を示している。第’５６９号特許に開示されている方法及び生成物は、少なくとも２つの欠点に苦しめられている。第１に、個々の市販の遊離ステロールから調製される脂肪酸の使用は、これらの出発生成物が極めて高価なので、実用的でも経済的でもない。第２に、第’５６９号特許で使用される過塩素酸触媒型のエステル化工程は、残留塩化物が当該生成物中に残るので、食品用の工程ではない。従って、第’５６９号特許は商業的な利用に適していない。
【０００９】
英国特許第１４０５３４６号は、食用油及び食用脂に天然に含まれる遊離ステロールが、分子間エステル化工程を経て脂肪酸エステルに変換される工程を教示している。更に、例２において、上昇したステロールエステル含量を有する植物油を製造する方法を記載している。しかしながら、教示されている方法は、高級な市販のオリーブ油、例えばバージンオリーブ油の場合に実施され得ない物理的特性に基づいた、油の配合物全体の分子間エステル化に基づいている。
【００１０】
本発明の要約
植物ステロール配合物の、対応する植物スタノール配合物への飽和は、同一の脂肪酸組成を有する対応するステロール／スタノールエステルの融解特性において著しい差異をもたらす。例えば、低エルカ酸の菜種油脂肪酸とのステロールエステル及び対応するスタノールの脂肪酸エステルを基にした植物油は、ＮＭＲ技術によって測定した場合に、異なる温度で以下の量の固体脂肪含量（合計の脂肪の重量％）を示した。
【表１】
0004907816.tif 000002
【００１１】
スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルの物理的特性は、脂肪酸エステルの脂肪酸組成を変化させ、又はエステル内の植物スタノールとステロールの異なる比率を用いることによって仕立てられ得る。
【００１２】
本発明において、高級オリーブ油における高融点脂質の沈殿／結晶化による問題は、高級オリーブ油、例えばバージンオリーブ油における、いわゆる高ＰＵＦＡ植物油由来の脂肪酸を有する植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを溶解し、そしてオリーブ油に含まれる、非常に低含量の飽和脂肪酸エステルを有する植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを得るために、冷蔵庫の温度から室温の範囲の温度で、オリーブ油から任意の高融点脂質を結晶化することによって解決される。必要とされる結晶化の温度及び時間は、使用するスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルの量及び型に依存する。結晶化の温度及び時間を適切に選択することによって、バージンオリーブ油は冷蔵庫の温度で透明のままであるか、又は当該油が冷蔵庫から取り出され、そして短時間室温で維持される場合に透明となる。例えば、液体グリセリド基油中の植物ステロールパルミテートに関して、非常に限定された溶解性（０．１％）を示す米国特許第３，７５１，５６９号と比較した場合、高レベルの不飽和脂肪酸を有する植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステル配合物は、スタノール及び／又はステロールエステルの溶解性をはっきりと増大させる。
【００１３】
更に、本発明はバージンオリーブ油の直接的な強化に使用され得る植物スタノール及び／又はステロールエステルの組成を教示する。従って、本発明に従う油は、６０％超、好ましくは６５％超の多価不飽和脂肪酸、及び５％未満の飽和脂肪酸を含む脂肪酸組成を有する、適切な量の植物スタノール及び／又はステロールエステルを添加することによって得ることもできる。冷蔵庫の温度で透明なオリーブ油が所望の場合、６０％超、好ましくは６５％超の多価不飽和脂肪酸、及び５％未満の飽和脂肪酸、好ましくは３％未満、２％未満、又は最も好ましくは１．５％未満の飽和脂肪酸、例えばステアリン酸を含む脂肪酸組成を有する植物スタノール及び／又はステロールエステルが使用される。その様なスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルは、当業界で知られている任意のエステル化法によって、例えば適切にあらかじめ決定された脂肪酸組成を有する脂肪酸配合物又は脂肪酸アルコールエステル配合物のエステル化によって得ることができる。上文及び本明細書の全体に渡って、特に断らない限り、全てのパーセンテージの値が重量％である。
【００１４】
好ましい態様の説明
用語「バージンオリーブ油」は、全てｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ  Ｎｏ．Ｌ３９／２（１５．２．１９９２）に従い決定される、エクストラバージンオリーブ油、バージンオリーブ油、通常のオリーブ油及びランパンテオリーブ油を含むことを意味する。更に、ｔｈｅ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓに定義されている、バージンオリーブ油と低級オリーブ油の任意な配合物は、この定義に含まれる。好ましくは、その様な配合物は少なくとも２５％、更に好ましくは少なくとも５０％、そして最も好ましくは少なくとも７５％のバージンオリーブ油を含む。
【００１５】
用語「オリーブ油を基にした生成物」は、植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルで強化された、上文の定義に従うバージンオリーブ油を含むことが意味される。約０．３〜２５重量％、好ましくは約０．３〜１０重量％、更に好ましくは約１．５〜１０重量％、そして最も好ましくは約３〜１０重量％の植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステル（遊離スタノールとして計算）もオリーブ油を基にした生成物に含まれ得る。
【００１６】
用語「高ＰＵＦＡ植物油」は、脂肪酸組成中に５０％超の多価不飽和脂肪酸及び少なくとも７％の飽和脂肪酸を含む植物油又は植物油配合物を含むことを意味する。典型的な高ＰＵＦＡ植物油は、ヒマワリ油、コーン油、ダイズ油、低飽和ダイズ油、ベニバナ油、綿実油、リノラ油又はそれらの配合物を含む。脂肪酸組成における飽和脂肪酸の量は、典型的に約７．５〜４９％、更に好ましくは約８〜２５％、そして最も好ましくは約１０〜２０％である。
【００１７】
用語「フィトステロール」は、４−デスメチルステロール、４−モノメチルステロール、及び４，４−ジメチルステロール（トリテルペンアルコール）又はそれらの配合物を含むことを意味する。用語「フィトスタノール」は４−デスメチルスタノール、４−モノメチルスタノール及び４，４−ジメチルスタノールを含むことを意味し、そして好ましくは対応するフィトステロールの水素化によって得られる。典型的な４−デスメチルステロールは、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、２２−デヒドロブラシカステロール、Δ５−アベナステロールを含むことを意味する。典型的な４，４−ジメチルステロールは、シクロアルテノール、２４−メチレンシクロアルタノール及びシクロブラノールを含む。典型的なフィトスタノールは、シトスタノール、カンペスタノール及びそれらの２４−エピマー、シクロアルタノール及びトリテルペンアルコール（シクロアルテノール、２４−メチレンシクロアルタノール及びシクロプラノール）の飽和によって得られる飽和型を含む。用語フィトステロール及びフィトスタノールはまた、４−デスメチルステロール及びスタノール、４−モノメチルステロール及びスタノール、４，４−ジメチルステロール及びスタノールの全ての可能な天然配合物並びに天然配合物の混合物を含む。用語フィトステロール及びフィトスタノールは更に、任意な独立した４−デスメチルステロール、４−モノメチルステロール又は４，４−ジメチルステロールあるいはそれらの対応する飽和（スタノール）型を含む。
【００１８】
用語「植物ステロール」及び「植物スタノール」は、それぞれ用語「フィトステロール」及び「フィトスタノール」と同義語であると意図されている。「ステロール」及び「スタノール」も、「フィトステロール」及び「フィトスタノール」をそれぞれ意味するであろう。
【００１９】
「多価不飽和脂肪酸」は、２又はそれ以上の二重結合を含む脂肪酸として定義される。好ましくは、当該二重結合は、シス配置を有するが、１又は複数の二重結合がトランス配置であってもよい。多くの市販の植物油が、脱臭工程における熱異性化に起因して、トランス配置を有する１又は複数の二重結合を含む、パーセンテージレベルの多価不飽和脂肪酸を含む。更に、二重結合は、いわゆるメチレン介在型又は共役型のいずれでもよい。典型的な植物油に由来する多価不飽和脂肪酸は、リノレイン酸、リノレン酸及びγ−リノレン酸であるが、魚油由来の多価不飽和脂肪酸、例えばエイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸も利用され得る。
【００２０】
用語「飽和脂肪酸」とは、二重結合を全く有さず、それによって直鎖及び分枝鎖の両方の脂肪酸を含む、４〜２４個の炭素原子を有する脂肪酸を意味する。
【００２１】
用語「高ＰＵＦＡスタノール及び／又はステロールエステル」は、優先的に高ＰＵＦＡ植物油由来の脂肪酸より産生されるスタノール及び／又はステロールエステルを意味するが、魚油に由来する多価不飽和脂肪酸又は植物油及び魚油に由来する多価不飽和脂肪酸の配合物も使用され得る。
【００２２】
本発明において使用するスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルは、好ましくは食品用の工程を用いて製造される。「食品用の工程」とは、スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステル産物が、（１）スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルの１又は複数の質に影響を及ぼすので、最終産物において望ましくなく、又は（２）食品の安全性の観点から消費者にとって有害な、残留化学物質（例えば、溶媒又は触媒は塩化物を含む）を含まない任意な工程を含むと本明細書で定義される。多くの食品用の工程が当業界で知られており、これらのいずれかが本明細書で使用されるスタノール及び／又はステロール脂肪酸エステルを製造するのに適していると思われる。好ましくは、当該食品用の工程は、溶媒を含まない食品用の工程である。スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルは、米国特許第５，５０２，０４５号に記載の方法によって、例えば高ＰＵＦＡ植物油又はそれらの配合物から得られた脂肪酸アルコールエステルのエステル転移によって製造され得る。
【００２３】
スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを製造するのに適した別の方法は、エステル転移又はエステル交換触媒の存在下での、高ＰＵＦＡ植物油との遊離スタノール及び／又はステロールのエステル化によるものである。あるいは、直接的な、好ましくは触媒的なエステル化方法、例えば米国特許第５，８９２，０６８号に開示されているもの、又は酵素的なエステル化方法、例えばＥＰ  １９５  ３１１に開示されているものも使用され得る。
【００２４】
スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを製造するための別の可能性は、米国特許第５，５０２，０４５号に記載の方法に従う、高ＰＵＦＡステロール及び／又はスタノールエステルのエステル化後に得られる油相に存在する、過剰な高ＰＵＦＡアルコールエステルを利用することである。この高ＰＵＦＡアルコールエステルとステロール及び／又はスタノールエステルの混合物は、それ自体、高融点ステロール及び／又はスタノールエステルを除去する分画段階にかけられ、そして次にスタノール及び／又はステロールのエステル化のために使用されることがある。
【００２５】
スタノールエステル、ステロールエステル又はそれらの配合物は、好ましくは本発明に従いあらかじめ決定された脂肪酸組成を有する脂肪酸アルコールエステルを用いて、米国特許第５，５０２，０４５号において概要が説明された方法によって製造され得る。脂肪酸アルコールエステルは、当業界で知られている任意の方法、例えば高ＰＵＦＡ液体植物油又は高ＰＵＦＡ油の配合物から得られるアルコール脂肪酸エステルの溶媒又は界面活性剤分画によって製造され得る。脂肪酸アルコールエステルの対応する配合物も、減圧下での蒸留方法によって得ることができる。その様な蒸留方法は、優先的に１６以下の炭素原子を有する飽和脂肪酸を除去するために使用され得る。限定された脂肪酸組成を有する脂肪酸アルコールエステルも、例えば米国特許第５，６７０，３４８号に従い得られる、飽和脂肪酸の含量が低下した植物油又は油の配合物のアルコール分解によって得ることもできる。
【００２６】
所望の脂肪酸組成を有するスタノール及び／又はステロールエステルはまた、遊離脂肪酸又は当該組成の脂肪酸配合物と、スタノール及び／又はステロールとの間の直接的な、好ましくは触媒的なエステル化法、例えば米国特許第５，８９２，０６８号によっても製造され得る。エステル転移又はエステル交換触媒を用いる、所望の脂肪酸組成を有するトリグリセリドによるスタノール及び／又はステロールのエステル化も、スタノール及び／又はステロールエステルを製造するのに適した方法である。更に、スタノール及び／又はステロールエステルはまた、例えばＥＰ１９５３１１に概要が説明されている、酵素的なエステル化によって製造され得る。
【００２７】
更に、多価不飽和脂肪酸の配合物は、所望の組成を有するスタノール及び／又はステロールエステルを得るために使用され得る。
【００２８】
所望の脂肪酸組成を有するスタノールエステル及び／又はステロールエステルは更に、例えば米国特許第５，５０２，０４５号において概説されているエステル転移工程などの、任意な直接的、好ましくは酵素的エステル化工程に基づく方法によって、又は例えばＥＰ１９５３１１に概説されている様な、酵素的なエステル化工程の使用によって得られるスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルの、商業的に応用されている分画工程、例えば乾式の、洗浄剤及び湿式分画によって得ることができる。特に溶媒からの分画は、所望のステロール及び／又はスタノールエステル組成を調製するために使用され得る。ＥＰ  １９５  ３１１において概説されている様な酵素的エステル化工程を用いた場合、分画は、好ましくは酵素及びできる限りの水層を除いた後に、エステル化工程において使用される反応溶媒中で直接使用され得る。
【００２９】
上文で論じた工程は、本発明に従うスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを製造するために使用され得る、ごく一部の食品用工程である。
【００３０】
好ましい態様において、あらかじめ決定された配合のスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを含むバージンオリーブ油、好ましくはエクストラバージンオリーブ油は、例えば脂肪酸源として高ＰＵＦＡ植物油又は高ＰＵＦＡ植物油の混合物を用いることによって、米国特許第５，５０２，０４５号に開示されている様なエステル工程によって得られる、５〜５０重量％（好ましくは５〜２５％）のスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルを溶解することによって得ることができる。これは、好ましくはバージンオリーブ油の通常の精製工程の一部として行われ得る。この様にして得られるスタノール及び／又はステロールエステルのオリーブ油配合物は、当業界で知られている様な常用の「不凍化（Ｗｉｎｔｅｒｉｚｉｎｇ）」段階又は任意な分画工程が行われた後に、スタノール及び／又はステロールエステルをオリーブ油中に完全に溶解するために加熱され、そして混合される。例えば、不凍化又はバッチ乾式分画型の工程は、０〜３０℃、好ましくは５〜２５℃で行われることがあり、その結果４〜２５℃の温度範囲のある点で、更に好ましくは４〜８℃の温度範囲のある点で透明な、オリーブ油を基にした生成物を生成せしめる。本発明に従い製造されるオリーブ油を基にした生成物の全てが、冷蔵庫の温度で濁りを示す場合、冷蔵庫から取り出し、そして室温、すなわち１８〜３０℃の温度範囲のある点、更に好ましくは１８〜２５℃の温度範囲のある点で保存されたときに透明となることもある。このことは、本発明のオリーブ油を基にした生成物が、３０℃又はそれ以上、好ましくは２５℃又はそれ以上、更に好ましくは２０℃又はそれ以上、より更に好ましくは１８℃又はそれ以上で透明であることを意味している。生成物が冷蔵庫の温度（すなわち約２〜１２℃、好ましくは約２〜８℃）で保存される場合、それは好ましくは８℃、更に好ましくは４℃である。欧州の消費者は主に室温で油を保存して使用するので、オリーブ油を基にした生成物は、好ましくは２５℃又はそれ以上、更に好ましくは２０℃又はそれ以上、そして最も好ましくは１８℃又はそれ以上で透明であるだろう。
【００３１】
結晶化の温度及び時間は、使用するスタノールエステル及び／又はステロールエステル並びに最終生成物の量及び型に依存して変化し得る。主にスタノール及び／又はスタノールエステルの飽和脂肪酸が構成される固体部分を、例えば真空フィルターを通すことによって除去した後に、得られたオリーブ油を基にした生成物はそのまま使用されるか、又は未処理のバージンオリーブ油で希釈され、その結果オリーブ油を基にした生成物中で所望の含量の植物スタノール及び／又はステロールを得ることができる。バージンオリーブ油の質に依存して、オリーブ油中に天然に含まれる高融点脂質成分のいくつかは、フィルタリング工程によって同時に除去され、そしてその結果、当該工程は冷蔵庫の温度（すなわち約２〜１２℃、好ましくは約２〜８℃）でオリーブ油の透明性を向上せしめる。当業者にとって、不凍化又はバッチ乾式分画型の工程に加えて、任意な型の分画工程が、高融点を有するスタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステル、例えば飽和脂肪酸に基づいたステロール及び／又はスタノールの脂肪酸エステルを結晶化し、そして除去するために使用され得ることは明らかである。また、当業者にとって、当業界で知られている任意の濾過方法が使用され得ることも明白である。
【００３２】
所望の脂肪酸組成を有するスタノール及び／又はステロールエステルを製造する別の方法は、米国特許第５，５０２，０４５号に開示されているエステル転移後に得られる高ＰＵＦＡステロール及び／又はスタノールエステル配合物の過剰な脂肪酸メチルエステルを利用することである。乾燥段階後、スタノール及び／又はステロールエステルの脂肪酸アルコールエステル混合物は、製造されるスタノール及び／又はステロールエステルの組成に依存して５〜２５℃に冷却され、そして高融点成分は結晶化するために４〜２４時間放置される。任意に追加の脂肪酸アルコールエステルは、分画工程を容易にするために加えられる。任意な脂肪酸アルコールエステルが使用され得るが、高ＰＵＦＡアルコールエステルの使用が好ましい。濾過後、透明な油層は、好ましくは過剰な脂肪酸アルコールエステルを除去し、そして味のないスタノール及び／又はステロールエステルを得るために脱臭される。得られたスタノール及び／又はステロールエステルは、好ましくはそのままバージンオリーブ油中で混合され得る。
【００３３】
所望の脂肪酸組成を有する植物スタノール及び／又はステロールの脂肪酸エステルは更に、適当な組成を有する脂肪酸又は脂肪酸アルコールエステルから製造され得る。その様にして得られた植物スタノール及び／又はステロール脂肪酸エステルは、本発明によって教示される、オリーブ油を基にした生成物を得るために、直接オリーブ油に加えられ得る。
【００３４】
更に、本発明に従うスタノール及び／又はステロールエステル組成物は、「脂肪酸出発材料」、例えば脂肪酸、脂肪酸アルコールエステル又は、例えば微生物、酵素又は油を産生する植物の新品種の利用を含む工程によって得られる油を利用して産生され得る。ステロール及び／又はスタノール部分は、任意なステロール及び／又はスタノール源、例えば製紙産業又は植物油の処理から得られることもある。増大した量又は更に魅力的な組成の、常用の方法又は遺伝的修飾によって製造される適当なステロール及び／又はスタノールを産生する新品種も、スタノール及び／又はステロールの製造にとって可能な原材料として含まれる。好ましくは、その後スタノール及び／又はステロールは、本発明のオリーブ油を基にした生成物を製造するために食品用の工程で利用される。
【００３５】
本発明の好ましい態様において、バージンオリーブ油は、あらかじめ決定された脂肪酸組成を有する植物スタノールの脂肪酸エステルで強化される。植物スタノール及びステロールの脂肪酸エステル配合物又は植物ステロールの脂肪酸エステルも使用され得る。
【００３６】
以下の例は、本発明を更に詳細に開示するために提示される。全てのパーセンテージを重量％で示す。
【００３７】
例
例１：低飽和ダイズ油脂肪酸（ＬｏｗＳａｔＳｏｙ）に基づいたスタノールの脂肪酸エステルの調製
植物スタノールの脂肪酸エステルは試験的な規模で製造された。市販の植物ステロールの水素化によって得られる６kgの植物スタノール（組成：６８．２％のシトスタノール、２８．３％のカンペスタノール、１．１％のシトステロール及び微量の他の不飽和ステロール）は、８．６kgのＬｏｗＳａｔＳｏｙメチルエステル混合物を配合され、そして１１０〜１２０℃で乾燥された。乾燥混合物の温度は９０〜９５℃まで低下され、そしてナトリウムメチラート触媒（７３ｇ）が加えられた。温度を１２０℃まで上昇させ、そして反応を減圧下（４０mmHg）で４時間行った。変換はＧＣ解析によってモニタリングされた。一度９８％超の変換が達成されると、温度は１００℃まで低下され、そして３０重量％の熱い、９０℃超の水が触媒を破壊するために加えられた。水層を除去し、そして油層を再洗浄して１０００ppm 未満の石けん含量を提供する。油層は９５℃で乾燥させ、そして乾燥材料は１重量％の漂白補助剤（Ｔｒｙｓｉｌ，Ｇｒａｃｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を減圧下で、９５℃で２０分間用いて漂白した。濾過による漂白補助剤の除去後、標準的な試験規格の脱臭（バッチの脱臭剤、性能９kg）が、過剰なダイズ油のメチルエステルを除去し、そして味のないスタノールエステル生成物を得るために行われた。得られた植物スタノールエステルの脂肪酸組成は以下の通りである：ＳＡＦＡ：８．７％、ＭＵＦＡ：２７．５％及びＰＵＦＡ：６３．８％。Ｃ１６：Ｏ及びＣ１８：Ｏの含量は共に３．６％であった。スタノール含量は、高いエステル化変換によって５７．６重量％であった（遊離スタノール量  １．５重量％）。
【００３８】
例２：リノラ油由来の脂肪酸を有する、植物油を基にしたスタノールの脂肪酸エステルの調製
リノラ油由来の脂肪酸を有するスタノールの脂肪酸エステル配合物は、例１で概説したものと同一の植物スタノール配合物及び方法で調製された。得られた植物スタノールエステルの脂肪酸組成は以下の通りである：ＳＡＦＡ：１０．６％、ＭＵＦＡ：１７．７％及びＰＵＦＡ：７１．８％。Ｃ１６：Ｏ及びＣ１８：Ｏの含量は、それぞれ６．２％及び３．９％であった。スタノール含量は、高いエステル化変換によって５７．９重量％であった（遊離スタノールの量  ０．１３重量％）。
【００３９】
例３：ヒマワリ油由来の蒸留された高ＰＵＦＡ脂肪酸を基にした植物スタノールの脂肪酸エステルの調製
高ＰＵＦＡ植物スタノールエステルは、ヒマワリ油を基にしたメチル脂肪酸エステルの蒸留後に得られた脂肪酸メチルエステルによって、例１に概説したものと同様の手順を用いて製造された。一緒にした蒸留のカット（ｃｕｔ）は、５．６％のＳＡＦＡ（０．３％のＣ１６：Ｏ、５．０％のＣ１８：Ｏ）、２６．５％のＭＵＦＡ及び６７．９％のＰＵＦＡを含んでいた。植物スタノールエステルの合計ステロール（植物ステロール＋植物スタノール）含量は５９．５％であり、一方、植物スタノールの含量は５８．４重量％であった。遊離スタノールの量は０．８６重量％であった。
【００４０】
例４：＋７℃での結晶化による、植物スタノールを強化したバージンオリーブ油の調製
例１に従い製造された低飽和ダイズ油に由来する脂肪酸を有する、７重量％の植物スタノールエステル（４．０重量％の植物スタノール及び０．０５重量％の植物ステロールと等しい）は、油を６０℃まで加熱し、そして常圧で撹拌することによってエクストラバージンオリーブ油（Ｃａｒｌｓｈａｍｎ  Ｍｅｊｅｒｉ，Ｓｗｅｄｅｎ）中で溶解した。全ての植物スタノールエステルを溶解した場合、配合物は＋７℃で２１時間ゆっくりと撹拌することによって結晶化した。油は真空（４０mmHg）及び不凍化工程で常用される厚い（カーボン）濾紙を用いることによって濾過された。濾液の重量は、最初のエクストラバージンオリーブ油の植物スタノールエステル配合物の１．１重量％であった。得られたオリーブ油を基にした生成物は、遊離型の０．１２重量％植物スタノールと一緒に３．７重量％の植物スタノールを含んでいた。植物スタノールエステルの脂肪酸は、追加した植物スタノールエステル中の８．７％の飽和脂肪酸と比較して、４．９％の飽和脂肪酸（２．４％  Ｃ１６：Ｏ及び１．５％  Ｃ１８：Ｏ）を含んでおり、このことは、それが主に結晶化した飽和植物スタノールエステルであったことをはっきりと示している。濾液の植物スタノール含量は１９．３重量％であり、わずかに０．１８重量％の、遊離型の植物スタノールを有していた。得られた植物スタノールエステル強化型バージンオリーブ油は少なくとも５日間５℃で透明のままであり、一方、びんのガラス壁の透明な結晶化が、３日後にコントロールのエクストラバージンオリーブ油において見られた。
【００４１】
例５：１６℃での結晶化による、植物スタノール強化型バージンオリーブ油の調製
植物スタノールエステル強化型エクストラバージンオリーブ油が例４と同様に調製され、但し、結晶化は１６℃で２１時間行った。得られた、オリーブ油を基にした生成物は、遊離型の０．１１重量％の植物スタノールと一緒に、３．７重量％の植物スタノールを含んでいた。植物スタノールエステルの脂肪酸組成は、４．５％ＳＡＦＡ（２．３％  Ｃ１６：Ｏ及び１．４％  Ｃ１８：Ｏ）、２９．０％  ＭＵＦＡ及び６６．６％  ＰＵＦＡであった。濾液の重量は、最初のバージンオリーブ油のスタノールエステル配合物の１．５重量％であった。濾液の植物スタノール含量は１０．７重量％であり、わずかに０．１重量％が遊離植物スタノールであった。濾液の植物スタノールエステルの脂肪酸組成は、３６．９％ＳＡＦＡ（１８．９％  Ｃ１６：Ｏ及び１５．４％  Ｃ１８：Ｏ）、１９．７％  ＭＵＦＡ及び４３．４％  ＰＵＦＡであった。このデータは、主に飽和脂肪酸植物スタノールエステルが結晶化されることをはっきりと示している。得られた植物スタノール強化型バージンオリーブ油は５℃で少なくとも５日間透明のままであり、一方、びんのガラス壁の透明な結晶化が、３日後にコントロールのエクストラバージンオリーブ油において見られた。
【００４２】
例６：植物スタノールエステル強化型バージンオリーブ油の調製
例２に従い製造された７重量％の植物スタノールエステルは、例４に従いエクストラバージンオリーブ油（Ｃａｒｌｓｈａｍｎ  Ｍｅｊｅｒｉ，Ｓｗｅｄｅｎ）中で溶解され、そして１６℃で２０時間結晶化された。濾過後に得られた油の試料を７℃の冷蔵庫で保存し、そしてこれが濁っていくことを確認した。試料は室温で透明になったが、室温で１日後に濁り始め、室温で２日後に透明な結晶が形成した。得られた、オリーブ油を基にした生成物は、３．３重量％の植物スタノールを含んでいた。植物スタノールエステルの脂肪酸組成は、元のリノラスタノールエステルの、１０．６％  ＳＡＦＡ、１７．７％  ＭＵＦＡ及び７１．８％  ＰＵＦＡと比較して、６．０％  ＳＡＦＡ、１９．４％  ＭＵＦＡ及び７４．６％  ＰＵＦＡであった。このデータに基づき、植物スタノールエステルの脂肪酸の６％のＳＡＦＡ含量が、オリーブ油を基にした生成物の所望の特性を得るには高過ぎることは明らかである。
【００４３】
例７：植物スタノールエステル強化型バージンオリーブ油の調製
例３で得られた１１及び１６重量％の植物スタノールエステルは、エクストラバージンオリーブ油（Ｃａｒｌｓｈａｍｎ  Ｍｅｊｅｒｉ，Ｓｗｅｄｅｎ）中で溶解し、そして例４に従い処理した。結晶化温度は、１６重量％の試料の場合＋７℃（２０時間）及び＋２３℃（７日間）であり、そして１１重量％の試料の場合は＋２３℃（７日間）であった。７℃で結晶化した１６重量％の試料は、７℃で少なくとも１週間透明のままであった。このオリーブ油を基にした生成物の全スタノール含量は８．９重量％であり、そしてオリーブ油を基にした生成物に含まれる植物スタノールエステルの脂肪酸組成は、１．７％  ＳＡＦＡ（０．６５％  Ｃ１６：Ｏ及び０．３４％  Ｃ１８：Ｏ）、２６．８％  ＭＵＦＡ及び７１．５％  ＰＵＦＡであった。このオリーブ油を基にした生成物は、所望の植物スタノール含量のオリーブ油を基にした生成物を得て商品化するために、未処理のバージンオリーブ油と一緒に希釈され得る。
【００４４】
２３℃で７日間かけて結晶化した試料は７℃で濁ったが、両方の試料が室温で透明となった。オリーブ油を基にした生成物のスタノール含量は、１１％及び１６％の場合、それぞれ６．３及び８．９重量％であった。
【００４５】
例８：植物スタノールエステル強化型バージンオリーブ油の調製
例１，２及び３で得られた４．５重量％の植物スタノールエステルは、エクストラバージンオリーブ油（Ｃａｒｌｓｈａｍｎ  Ｍｅｊｅｒｉ，Ｓｗｅｄｅｎ）中で溶解され、そして７℃で１１時間保存された。ヒマワリ油のメチルエステルカットを基にした植物スタノールエステルで強化された、オリーブ油を基にした生成物（ＳＡＦＡ：５．６％；Ｃ１６：Ｏ  ０．３％、Ｃ１８：Ｏ  ５．０％）は＋７℃で透明な結晶化を示し、そしてこれらの試料が室温で透明とならなかったことは、Ｃ１８：Ｏスタノールエステルの量が、このオリーブ油を基にした生成物中で多過ぎることをはっきり示唆している。３つ全ての配合物も結晶化したのは、ＳＡＦＡ含量が多過ぎるためである（８．７％、１０．６％及び５．６％）。
【００４６】
例９：溶媒分画による、所望の脂肪酸組成を有する植物スタノール脂肪酸エステルの調製
例１で概説した手順によって得られた１０ｇの植物スタノールエステルは、２００mlの遠心管内の９０mlのｎ−ヘキサン中で溶解した。混合物を＋７℃で２４時間保存し、この後混合物を温度をプログラムで制御できる遠心機で遠心した。ヘキサン層を除き、そしてヘキサンを蒸発させた。得られた植物スタノールエステルは、４．６％ＳＡＦＡ（２．４％  Ｃ１６：Ｏ及び１．８％  Ｃ１８：Ｏ）、２７．２％  ＭＵＦＡ及び６８．２％  ＰＵＦＡを含んでいた。
【００４７】
例１０：所望の脂肪酸組成を有する植物スタノールエステルを用いる、オリーブ油を基にした生成物の調製
例９から得た７重量％の植物スタノールは、例４で概説したものと同様の手順に従いエクストラバージンオリーブ油中に溶解され、そして＋７℃で保存された。油は少なくとも７日間透明なままであった。
【００４８】
例１１：スタノールの脂肪酸エステルで強化された、オリーブ油を基にした生成物の調製
脂肪酸メチルエステルの２つのバッチは、例３に記載のものと同様の方法で蒸留によって調製したが、次の脂肪酸組成が得られた：４．９％  ＳＡＦＡ、３４．１％  ＭＵＦＡ及び６１％  ＰＵＦＡ並びに他方のものは２．５％  ＳＡＦＡ、３６．５％  ＭＵＦＡ及び６１％  ＰＵＦＡ。得られた脂肪酸メチルエステルは、例１に記載の方法を用いる植物スタノールのエステル化に使用された。０．３ｇのスタノールの脂肪酸エステルを１０ｇのエクストラバージンオリーブ油に溶解した。両方のオイルが少なくとも１週間室温で透明なままであった。
【００４９】
例１２：ステロールの脂肪酸エステルで強化した、オリーブ油を基にした生成物の調製
例１１で調製し、そして使用したものと同一の、４．９％  ＳＡＦＡ、４４．１％  ＭＵＦＡ及び６１％  ＰＵＦＡを含んで成る脂肪酸メチルエステルを、植物ステロールのエステル化に使用した。０．６ｇのステロールの脂肪酸エステルを１０ｇのエクストラバージンオリーブ油に溶解した。油は少なくとも１週間室温で透明なままであった。