(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンセリン及び／又はその塩を含有する魚肉の抽出エキスを有効成分とすることを特徴とする抗疲労剤。
【請求項２】
前記アンセリン及び／又はその塩を１０質量％以上含有する請求項１に記載の抗疲労剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、魚介類、鳥肉、畜肉等から得られるイミダゾールジペプチド類を利用した抗疲労剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
激しい運動を行なうと、筋肉にあるグリコーゲン由来のグルコースが利用され、無酸素的な解糖反応が進行して筋肉の収縮に必要なＡＴＰが合成される。そして、その代謝産物である乳酸が蓄積して筋肉内ｐＨの低下が起こり、筋収縮の効率が落ちてくる。この状態は代謝性アシドーシスと言われており、その結果、筋肉疲労に至ると考えられている。そのため、持続的な運動による筋肉疲労を抑制するためには、代謝性アシドーシスを引き起こさないことが重要である。
【０００３】
近年、スポーツ選手の間でサプリメントとしてクレアチンの摂取が盛んに行われている。クレアチンは体内でクレアチンリン酸に変換され、高エネルギーリン酸化合物としてエネルギーを運搬する働きを有し、またＡＴＰの合成に不可欠な成分であり、クレアチンの摂取により筋肉のクレアチン含量が増加し、高強度の運動のパフォーマンスが向上することが知られている（Harris, R. C. et al：Clin. Sci., 83, 367-374, 1992）。
【０００４】
また、エネルギー源としてのグリコーゲンが不足すると、体脂肪がより利用されやすくなると共に血中アミノ酸がエネルギーに変換されることから、血中アミノ酸の濃度をできるだけ高め、エネルギー源として利用して筋肉疲労や筋力低下を改善する試みもなされている。特にエネルギーとして利用されやすいアミノ酸は、分岐鎖アミノ酸（ロイシン、イソロイシン、バリン）であり、例えば特開昭５８−１６５７７号、特開平７−２５８３８号及び特開２０００−２６２９０号には、上記分岐鎖アミノ酸を食品として利用することが提案されている。
【０００５】
さらに、特開平８−１９８７４８号及び特開平９−２４９５５６号には、運動機能の向上と疲労回復効果を目的として、スズメバチ（Vespar属）の幼虫が分泌する唾液に含まれるアミノ酸類に準じて構成されたアミノ酸組成物を投与することにより、血中アミノ酸の変動を抑制することが提案されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、魚介類、鳥肉、畜肉等から得られるエキス類は様々なアミノ酸類を含んでおり、一般には調味料として広く利用されているが、その生理活性機能についてはほとんど研究されていない。
【０００７】
従って、本発明の目的は、魚介類、鳥肉、畜肉等から得られるエキス類を利用した抗疲労剤を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、カツオやマグロの肉から調製された調味料エキスの生理活性機能を研究する過程で、該エキス中に多量に含まれるイミダゾールジペプチド類に着目し、鋭意研究した結果、イミダゾールジペプチド類に運動能力の向上効果、すなわち抗疲労効果があることを発見し、この事実に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明の抗疲労剤は、アンセリン及び／又はその塩を含有する魚肉の抽出エキスを有効成分とすることを特徴とする。
【００１０】
本発明においては、前記アンセリン及び／又はその塩を１０質量％以上含有することが好ましい。
【００１１】
本発明によれば、従来、調味料として利用されてきた魚肉の抽出エキスを利用した新たな抗疲労剤を提供できる。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明の抗疲労剤は、魚肉に含有するイミダゾールジペプチド類であるアンセリン（β−アラニル−１−メチルヒスチジン）、及び／又はその塩を有効成分として含有する。
【００１３】
また、上記アンセリンの塩としては、塩酸、乳酸、酢酸、硫酸、クエン酸、アスコルビン酸、リンゴ酸、コハク酸、アジピン酸、グルコン酸、酒石酸等の塩が挙げられる。
【００１４】
上記アンセリンは、魚肉から水抽出、熱水抽出、アルコール抽出、超臨界抽出等の方法により抽出したエキスを精製することにより得ることができる。
【００１５】
例えば、アンセリンは以下のようにして得ることができる。まず、常法に従ってカツオ、マグロ、ウシ、ニワトリ等の肉からエキスを調製し、適宜水を加えて該エキスのブリックス（Ｂｘ．）を１〜１０％に調整した後、限外濾過膜（分画分子量５，０００〜５０，０００）を用いて高分子タンパク質を除去し、低分子ペプチド画分を回収する。次いで、文献（Suyama et al：Bull. Japan. Soc. Scient. Fish., 33, 141-146, 1967）の方法に従って、適宜濃縮した低分子ペプチド画分を強酸性樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィーに供し、溶出液を回収する。そして、この溶出液を脱塩した後ｐＨ調整し、凍結乾燥等により乾燥して得ることができる。
【００１６】
本発明の抗疲労剤は、上記アンセリン及び／又はその塩を１０〜１００質量％含むことが好ましく、５０〜１００質量％含むことがより好ましい。
【００１７】
また、上記基本的成分の他に、賦形剤、ミネラル類、ビタミン類、糖類、香料等を適宜含むことができる。
【００１８】
本発明の抗疲労剤の製品形態は、錠剤、粉末、顆粒、溶液、カプセル剤等が挙げられるが、特に制限されない。
【００１９】
本発明の抗疲労剤の１日当りの有効摂取量は、アンセリン換算で１〜２００ｍｇ／体重ｋｇ、より好ましくは５〜３０ｍｇ／体重ｋｇである。
【００２０】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。
実施例１（アンセリンの調製）
常法に従って調製したカツオエキス（Ｂｘ．＝５５％）１０ｋｇに、４倍量の水を加えて希釈した後、限外濾過膜（分画分子量１０，０００）を用いて高分子タンパク質を除去し、低分子ペプチド画分を回収した。この画分を濃縮して、０．３８Ｎクエン酸ナトリウム水溶液（ｐＨ４．０）で平衡化した強酸性樹脂（商品名「Amberlite IR-120」、ロームアンドハース社製）を充填したカラムクロマトグラフィーに供し、樹脂容量の４．５〜６．０倍の０．３８Ｎクエン酸ナトリウム水溶液（ｐＨ４．０）で溶出して溶出画分を回収した。そして、この溶液を脱塩し、ｐＨ調整した後、凍結乾燥して、粉末４５ｇを得た。得られた粉末を日立製アミノ酸分析計で分析したところ、アンセリン塩酸塩として９８％の純度であった。
【００２１】
参考例１（カルノシンの調製）
常法に従ってブタ肉から調製したエキス（Ｂｘ．＝３０％）１０ｋｇを用いた以外は、実施例１と同様の方法で、粉末２４ｇを得た。この粉末はカルノシン塩酸塩として９２％の純度であった。
【００２２】
参考例２（バレニンの調製）
常法に従ってヒゲクジラの肉から調製したエキス（Ｂｘ．＝５０％）１０ｋｇを用いた以外は、実施例１と同様の方法で、粉末４０ｇを得た。この粉末はバレニン塩酸塩として９２％の純度であった。
【００２３】
試験例（マウスを用いた強制運動負荷試験）
６週齢のＳＰＦマウス（雄）２０匹を２群（各群１０匹）に分け、４時間絶食させた後、対照群には注射用水を２００ｍｇ／ｋｇ体重、試験群には実施例１で調製したアンセリン塩酸塩の水溶液（４０ｍｇ／ｍｌ）をアンセリン塩酸塩換算で２００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、それぞれ強制的に経口投与した。
【００２４】
経口投与してから正確に１時間後に以下の強制運動をマウスに負荷した。水温２０℃の水を満たして空気を送り込み水面を波立たせた水槽（Ｗ２６５×Ｄ４２７×Ｈ２０４ｍｍ）に、マウスを入れて遊泳時間の測定を行なった。なお、マウスには、マウスの平均体重の１０％に相当する重りを負荷し、遊泳開始からマウスが頭部を水面下に７秒以上沈めるまでの時間を遊泳時間とした。
【００２５】
そして、上記遊泳時間の測定終了後３分間経過した時点（１回目）及び３０分間経過した時点（２回目）で、マウスを針金に懸垂させて、落下するまでの時間を測定した。
【００２６】
さらに、上記運動負荷後、１時間経過してから採血して血漿を分離し、血漿中の乳酸量を測定した。乳酸量の測定は、市販のキット（商品名：Ｆ−キット  Ｌ−乳酸、ベーリンガーマンハイム株式会社製）を用いて行なった。なお、上記の各測定結果は平均値±標準誤差で表し、有意差の検定は、Studen't  t−testにより行なった。
【００２７】
図１には、遊泳時間の結果が示されている。図１から、試験群は、対照群に比べて遊泳時間が長くなる傾向が認められた。
【００２８】
図２、３には、１回目及び２回目の懸垂時間の結果が示されている。図２、３から、いずれの場合も試験群は対照群に比べて懸垂持続時間が長くなる傾向が認められた。特に２回目の懸垂においては、試験群は対照群に対して危険率０．０１以下で有意に懸垂時間が長くなる効果が認められた。
【００２９】
図４には、運動負荷後１時間経過した時の血漿乳酸量が示されている。図４から、試験群は対照群に比べて危険率０．０５％以下で有意に血漿中の乳酸量が低いレベルに抑えられていることが分かる。
【００３０】
以上の結果から、アンセリンを経口摂取することにより、運動能力が向上することが示唆された。また、運動後の血漿中の乳酸量が低く抑えられていることから、運動による筋肉の疲労を抑制していることが示唆された。
【００３１】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によれば、アンセリン及び／又はその塩を含有する魚肉の抽出エキスを有効成分とすることにより、運動能力の向上及び抗疲労効果を有する抗疲労剤を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  マウスの遊泳時間測定の結果を示す図である。
【図２】  マウスの１回目の懸垂時間測定の結果を示す図である。
【図３】  マウスの２回目の懸垂時間測定の結果を示す図である。
【図４】  運動負荷後１時間経過した時点のマウスの血漿中の乳酸量を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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