(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラセミ形およびエナンチオマー的に純粋な形の下記式Ｉを有する化合物：
【化２】
0004879398.tif 000017
式中、基Ａおよび二つのリン含有基は任意の配列でグリセロール骨格のＣ原子Ｃ１，Ｃ２およびＣ３へ連結されており；
Ｘ１，Ｘ２，Ｘ３およびＸ４は互いに同一または異なって、独立に酸素またはイオウであり；
Ａはアルキル、ヒドロキシ、メルカプト、またはアルキルもしくはアシル置換ヒドロキシであり、その場合アルキルもしくはアシル基は直鎖または分枝した、そして任意に二つまでの二重結合および任意に１ないし３の芳香族基によって置換された１ないし２４のＣ原子を有し、
Ｚは水素またはこの化合物の酸形に対応する塩であり；
Ｎ１およびＮ２の一方はヒドロキシカルボニルもしくはその塩形であり、他方はＤ−またはＬ−構造のヌクレオシド誘導体であるか、または二つのＮ１およびＮ２は互いに異なって、各自Ｄ−もしくはＬ−構造のヌクレオシド誘導体であり、ここでヌクレオシド誘導体基は一般式ＩＩ，ＩＩＩおよびＩＶの基もしくはこれらの互変異性体形から選択され、
【化３】
0004879398.tif 000018
【化４】
0004879398.tif 000019
【化５】
0004879398.tif 000020
式中、
Ｙは酸素またはイオウであり；
Ｒ1 はヒドロキシル、アミノ、アシル化、アルキル化もしくはポリオキシエチレン置換アミノ基であって、そのアシルまたはアルキル基は直鎖もしくは分枝のＣ原子１ないし２４を有しそして任意に二つまでの二重結合を持ち、そして芳香族基によって置換されていることができ；
Ｒ2 は水素、ハロゲン、アミノもしくはヒドロキシル基か、またはブロモビニルまたは直鎖もしくは分枝のＣ1 −Ｃ24アルキル基であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 ，Ｒ7 およびＲ8は同一または異なって、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、エチニルまたはアジドであるが、Ｒ3 ないしＲ8の一つはヌクレオシド誘導体基がリン原子へそれによって連結される酸素であり、そしてＣ＝Ｃ二重結合が位置ａに存在する時はＲ3 ないしＲ6の隣接する二つの基は省かれることを条件とする。
【請求項２】
Ｘ1 ，Ｘ2 ，Ｘ3 およびＸ4は酸素原子であり；
式Ｉのグリセロール骨格のＣ1 原子は基Ａへ連結され、その場合Ａはヒドロキシル、オクタデシル、オクタデシルオキシ、ドコシルオキシもしくはベヘノイルオキシ、パルミトイルまたはオレオイルであり；
式Ｉのグリセロール骨格のＣ2 原子はフォスフォジエステルブリッジによってＮ2 へ連結されており、その場合Ｎ2 は式II，III またはIVのヌクレオシド誘導体基であって、これらの式中
Ｙは酸素原子であり；
Ｒ1 はヒドロキシル、アミノ、オクタデシルアミノ、ドコシルアミノ、パルミトルアミノ、オレオイルアミノまたはベヘノイルアミノ基であり；
Ｒ2 はメチル、エチル、水素またはハロゲンであり；
Ｒ3 ないしＲ8は前記の意味を有し、その場合基Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 およびＲ8 の一つはヌクレオシド誘導体基Ｎ2 がそれによってリン原子へ連結される酸素であり、
式Ｉのグリセリル骨格のＣ3 原子は遊離もしくは塩形にあるヒドロキシカルボニルフォスフォネート基へ連結されている、請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｎ2 は、式IIまたはIVのヌクレオシド誘導体基であり；これら式中、
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはヒドロキシル基であり；
Ｒ2 は水素、メチルまたはエチルであり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7は水素であり；
Ｒ6 は水素、フッ素またはアジドであり；
Ｒ8 はＮ2 がそれによってリン原子へ連結される酸素である、請求項２の化合物。
【請求項４】
Ｘ1 ，Ｘ2 ，Ｘ3 およびＸ4は酸素原子であり；
Ａはパルミトイルオキシ、オレオイルオキシまたはオクタデシルオキシであって、式Ｉのグリセロール骨格のＣ2 原子へ連結されており；
Ｎ1 およびＮ2は異なってそして式II，III およびIVのヌクレオシド誘導体基である、請求項１の化合物。
【請求項５】
Ｎ1 は式IIのヌクレオシド誘導体基であり、式II中
Ｒ1 はアミノまたはパルミトイルアミノ基であり；
Ｒ2 ，Ｒ3 およびＲ4 は水素であり；
Ｒ6 は式Ｉのグリセロール骨格の位置Ｃ1 またはＣ3へＮ1 がそれによって連結される酸素原子であり；
Ｎ2 は式III またはIVのヌクレオシド誘導体基である、請求項４の化合物。
【請求項６】
Ｎ2 は式IVのヌクレオシド誘導体基であって；式IV中、
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはヒドロキシル基であり；
Ｒ2 は水素またはメチルであり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7は水素であり；
Ｒ6 は水素、フッ素またはアジドであり；
Ｒ8 は式Ｉのグリセリルジリン酸骨格の位置Ｃ1 またはＣ2へＮ2 がそれによって連結される酸素原子である、請求項４の化合物。
【請求項７】
Ｎ1 は式IIまたはIVのヌクレオシド誘導体基であり；
Ｎ2 は式III のヌクレオシド誘導体であり；
どの場合も式中
Ｒ1 はヒドロキシルであり；
Ｒ2 ないしＲ7は水素であり；
Ｒ8 は式Ｉのグリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ2がそれによって連結される酸素原子である、請求項７の化合物。
【請求項８】
Ｎ１およびＮ２は独立して式ＩＶのヌクレオシド誘導体基であり；Ｎ１中、
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはオクタデシルアミノであり；
Ｒ2 ，Ｒ5およびＲ７は水素であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 およびＲ６ は同一または異なって、水素、ヒドロキシまたはフッ素であり；
Ｒ1 はヒドロキシル基であり；
Ｒ2 はメチルまたはハロゲンであり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7は水素であり、その二つの隣接する基はもし二重結合が位置ａに存在すれば任意に省かれ；
Ｒ6 は水素、フッ素、アシドまたはヒドロキシルであり；
Ｎ1 およびＮ2においてＲ8 はそれぞれの場合グリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ2
がそれによって連結される酸素原子である請求項４の化合物。
【請求項９】
Ｎ1 およびＮ2において、
Ｒ1 は同一または異なってヒドロキシル基またはアミノ基であり；
Ｒ2 は同一または異なって水素またはメチルであり；
Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ6 はＮ1 においてアジドそしてＮ2 においてフッ素であり；
Ｒ8 はグリセロール−１，３−リン酸骨格へＮ1 およびＮ2
がそれによって連結される酸素原子である請求項８の化合物。
【請求項１０】
Ｎ1 において、
Ｒ1 はアミノまたはパルミトイルアミノ基であり；
Ｒ2 およびＲ7は水素であり；
Ｒ3 およびＲ4はフッ素、水素またはヒドロシキルであり；
Ｒ5 は水素またはエチニル基であり；
Ｒ6 は水素であり；
Ｎ2 において、
Ｒ1 はヒドロキシルであり；
Ｒ2 はフッ素であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7は水素であり；
Ｒ6 はヒドロキシルであり、
Ｎ1 およびＮ２においてどの場合もＲ8 はグリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ２がそれによって連結される酸素原子である、請求項８の化合物。
【請求項１１】
ａ）３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→２）−１−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−（ヒドロキシカルボニル）フォスフォネート、
ｂ）アラビノシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−５−フルオロ−２’−デオキシウリジン、
ｃ）Ｎ4 −パルミトイル−３’−チア−２’，３’−ジデオキシシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン、
ｄ）３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジン、
ｅ）Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン、
ｆ）３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−２’，３’−ジデオキシイノシン、
ｇ）３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン、
ｈ）２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−５−フルオロ−２’−デオキシウリジン、
から選ばれる化合物。
【請求項１２】
Ｎ２がＬ構造のヌクレオシド誘導体基である請求項５の化合物。
【請求項１３】
任意に薬学的に許容し得る製剤補助剤と組合わされた、またはリポソームもしくはナノ粒子中に添加された、薬学的に許容し得る担体または希釈剤中に、請求項１の化合物を含んでいるＨＩＶ感染および／または癌を処置するための医薬組成物。
【請求項１４】
癌は、白血病、肺癌、中枢神経系の癌、腸癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、または乳癌である請求項１３の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は新規なそして適切な場合両親媒性のグリセリルヌクレオチドと、それらの製造およびがんおよび感染病を処置するための組成物に関する。
【０００２】
規定された構造的特徴を示すヌクレオチドアナログはがんおよびウイルスにより引き起こされる感染病の化学療法において価値ある薬物であることが証明されている（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗ（１９９６）１９，２８７）。しかしながらヌクレオチドアナログの治療効果はそれ自体は非活性であるヌクレオチトアナログがプロトラッグとして細胞に取込まれ、そして実際に活性な化合物、例えばヌクレオチドアナログの５’−トリリン酸誘導体に同化される時のみに見られる。これらのヌクレオチドはＤＮＡ複製を停止しおよび／または逆転写をブロックする。１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（ａｒａＣ）および５−フルオロ−２’−デオキシウリジン（５ＦｄＵ）のようなＤＮＡ複製を防止するヌクレオチドアナログは造血細胞の悪性病に対してそして固形腫瘍に対して有効である。３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン（ＡＺＴ），２’，３’−ジデオキシシチジン（ｄｄＣ），２’，３’−ジデオキシイノシン（ｄｄＩ），３’−チア−２’，３’−ジデオキシチミジン（３ＴＣ）および２，３’−ジデヒドロ，２’，３’−ジデオキシチミジン（ｄ４Ｔ）のようなジデオキシヌクレオシドアナログはＨＩＶ感染の治療のために特に適している。
【０００３】
フォスフォノギ酸のトリナトリウム塩（Ｆｏｓｃａｒｎｅｔ）のような非ヌクレオシド抗ウイルス活性化合物はウイルスポリメラーゼのポリリン酸結合部位をブロックする。これは単純ヘルペスウイルス、ＨＩＶウイルスおよびヒトサイトメガロウイルスのようなウイルスを阻止する。膜をより良く透過することができるＦｏｓｃａｒｎｅｔの両親媒性グリセリル誘導体はウイルス療法の最適化に貢献する（Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｃｈｅｍ．＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（１９９８）９，３３）。
【０００４】
ＨＩＶ治療の場合特に速やかに起こる化学療法のコースの間の抵抗性の発展のため、併用療法の使用によって病気の進行を長期間遅らせることができるだけである。そのような療法においては、数種の抗ウイルス活性化合物が合わせて投与される（Ｓｃｈｗｅｉｚ，Ｍｅｄ．Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ．（１９９７）１２７，４３６）。併用療法の場合に患者に課すべき治療計画が厳格であるため、患者コンプライアンスは低い。それ故達成される治療成功度は利用し得る薬物が持っている高い可能性をもって得ることができた可能な成功度より十分に低い（ＡＩＤＳ  １９９８  Ｄｉａｇｏｎｏｓｔｉｋ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｉｅ（Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ），Ｓｔｅｉｎｈａｕｓｅｒ  ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）。
【０００５】
最善でも例えばＣｏｍｂｉｖｉｒの場合のように２種類のヌクレオシドプロドラッグ（ＡＺＴおよび３ＴＣ）が混合物として存在する形の投与のみが患者に対して併用療法を実用的にする。しかしながら細胞によるプロドラッグの摂取は増加しないし、活性化合物を与えるそれらの同化の最適化も存在しないから、そのような混合物では改善する効果を達成することは殆ど不可能である。
【０００６】
他方、２種類のヌクレオシドアナログがフォスフォジエステル結合によって連結されている（ＥＰ０６４２５２７Ｂ１）両親媒性結合物を使用して併用療法を決定的に最適化することができる。これら両親媒性ジヌクレオシドアナログのある種の欠点は、フォスフォジエステル結合の所望の酵素切断が起こる時、どの場合でも一方のモノマー単位のみが活性ヌクレオシドアナログとして放出されるが、結合物の第２のモノマー単位はそれ自体は不活性なヌクレオシドアナログとして不可避的に残ることである。もし細胞がこのヌクレオシドアナログを活性ヌクレオシドアナログを与えるように同化しなければ、投与したダイマーの５０％までが治療的に使用されず、それ故不活性である。これら両親媒性結合物の追加の欠点は、２種類の結合したヌクレオシドアナログの少なくとも一方は、生成するダイマーが両親媒性になることを確実にするように親油性基を持たなければならないことである。それ故どちらも親油化できない併用療法に適した２種類のヌクレオシドアナログは両親媒性ダイマーへ変換することができず、治療において結合物として使用することができない。
【０００７】
本発明の目的は、がんおよび感染をもっと効果的に撲滅するために使用できる新規な合剤を提供可能とすることである。この目的は、前記した２種類の活性化合物の組合せの利益が完全に実現されるように、２種類の活性化合物を各場合に同時に遊離することができる新規なグリセリルヌクレオチドによって達成される。この新規なグリセリルヌクレオチドを製造するため、二つの治療上活性なヌクレオシド誘導体を相互へ、またはあるヌクレオシド誘導体をグリセロール脂質骨格によってフォスフォノギ酸またはその塩形（Ｆｏｒｓｃａｒｎｅｔ）へ共有結合することに優先性が与えられる。
【０００８】
本発明は第１に、ラセミ形もしくはエナンチオマー的に純粋な式Ｉａの化合物、およびこれら化合物の薬学的に許容し得る塩に関する。
【０００９】
【化１２】
0004879398.tif 000002
【００１０】
式中、
ａ）基Ａ1 ，Ａ2 およびＡ3 の一つは、水素原子またはヒドロキシル、メルカプト、アルキル、アルケニル、ポリオキシアルケニル、アリール、アシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、ポリオキシアルケニルオキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アシルチオおよびアリールチオから選ばれた基であって、アルキル、アルケニルおよびアシルは任意に１〜３のアリール基で置換されており、
ｂ１）基Ａ1 ，Ａ2 およびＡ3 の残る二つは相互に異なる二つのヌクレオシド基であって、ヌクレオシド基の各自は生理学的に切断し得るリン含有橋かけ基によってグリセリル鎖の炭素原子へ連結されており、または
ｂ２）基Ａ1 ，Ａ2 およびＡ3 の残りの一つはヌクレオシド基であり、そして残りの基の他方はヒドロキシカルボニルであって、それらの各自は生理学的に切断し得るリン含有橋かけ基によってグリセリル鎖の炭素原子へ連結されており、ここでヌクレオシド基の少なくとも一つは天然に存在するヌクレオシドではなく、該ヌクレオシド基は任意にその塩基部分において一以上の環原子上におよび／またはアミノ側基のような一以上の側基上において、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、ポリオキシアルケニル、アリール、アシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、ポリオキシアルケニルオキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アシルチオおよびアリールチオから選ばれた一以上の基で置換されており、この場合アルキル、アルケニルおよびアシル基は任意に１〜３のアリール基もしくはハロゲンで置換されており；そして前記ヌクレオシド基は任意にその炭水化物部分において水素、Ｆ，Ｃｌ，ＢｒおよびＩのようなハロゲン、ヒドロキシル、エチニルおよびアジドから選ばれた置換基により１回以上置換されており、任意に炭素原子の代りにＳ，ＮおよびＯから選ばれたヘテロ原子を所有し、そして任意に一つまたは隣接しないＣ＝Ｃ２重結合を含んでいる。
【００１１】
天然に存在せずそして本発明化合物に存在するヌクレオシド基は糖基（炭水化物部分）へＮ−グリコシド的にまたはＯ−グリコシド的に連結された複素環基（塩基部分）を含むヌクレオシド（ヌクレオシド誘導体）から誘導される。それらは天然に存在するヌクレオシド、アデノシン、グアノシン、シチジン、ウリジンおよびチミジンと対応するデオキシヌクレオシドから炭水化物部分および／または塩基部分において異なっている。
【００１２】
天然に存在しないヌクレオシドまたはヌクレオシド誘導体の基はヘキソースまたはペントース、好ましくはデオキシリボースまたはリボースから誘導される。適切な場合、１個または数個のプロトンもしくはヒドロキシル基を糖残基中に置換または除去することができる。これに関し適切な置換基は前述した置換基水素、Ｆ，Ｃｌ，ＢｒおよびＩのようなハロゲン、ヒドロキシル、エチニルおよびアジドから選ばれる。適切な場合、Ｓ，ＮおよびＯから選ばれたヘテロ原子が炭素原子に代わって存在することができ、そして適切な場合、糖残基は１または二つの隣接しないＣ＝Ｃ二重結合を含むことができる。
【００１３】
天然に存在しないヌクレオシドまたはヌクレオシド誘導体の塩基部分は、一つまたは二つの４ないし７員環からなり、合わせてＮ，ＳおよびＯ，特にＮおよびＯから選ばれた１ないし６個のヘテロ原子を含む単環または双環複素環塩基の残基である。そのような塩基の例は、プリンおよびピリミジン塩基アデニン、グアニン、シトシン、ウラシルおよびチミジンである。使用し得る塩基の他の例は、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、アミノピラゾール、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、テトラゾール、ペンタゾール、ピリドン、ピペリジン、ピリジン、インドール、イソインドール、ピリタジン、インドキシル、イサチン、．ピラジン、ピペラジン、グラミン、トリプトファン、キヌレン酸、トリプタミン、３−インドール酢酸、カルバゾール、インダゾール、１，３，５−トリアジン、１，２，４−トリアジン、１，２，３−トリアジンおよびテトラジンである。好ましくは塩基はアデニン、グアニン、シトシン、ウラシルおよびチミジンと、そして１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾールおよびテトラゾールである。適切な場合、前記塩基は１回ないし４回のように１回以上、特に１回または２回、前述した基ヒドロキシル、アミノ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、ポリオキシアルケニル、アリール、アシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、ポリオキシアルケニルオキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アシルチオまたはアリールチオによって置換されることができ、その場合アルキル、アルケニルおよびアシル基は任意に１〜３のアリール基またはハロゲン原子で置換される。これに関し、置換は環原子上で、または好ましくは環炭素原子上で、または側基例えば塩基のアミノ側基上で行われることができる。
【００１４】
本発明による式（Ｉａ）の化合物中で生理学的に切断可能なリン含有橋かけ基は、好ましくはフォスフォジエステル基およびそれらのイオウ含有アナログから誘導される。好ましくは具体例においては、式（Ｉａ）の化合物はそれ故−ＯＰ（ＯＺ）（Ｏ）Ｏ−，−ＳＰ（ＯＺ）（Ｏ）Ｏ−，ＯＰ（ＯＺ）（Ｓ）Ｏ−およびＳＰ（ＯＺ）（Ｓ）Ｏ−から選ばれた橋かけ基によって各自独立にグリセリル基へ連結され、そしてヒドロキシカルボニル基は−ＯＰ（ＯＺ）（Ｏ）−，−ＳＰ（ＯＺ）（Ｏ）−および−ＳＰ（ＯＺ）（Ｓ）−から選ばれた橋かけ基によってグリセリル基へ連結され、ここでＺはプロトンかまたは薬学的に許容し得るカチオンである。
【００１５】
Ａ1 ，Ａ2 およびＡ3 が分子へ両親媒性が与えられるように選ばれた式（Ｉａ）の化合物に特に優先性が与えられる。これはグリセリル基またはヌクレオシド誘導体残基を親油性基で置換することによって達成される。この点に関しヌクレオシド誘導体残基は好ましくは塩基部分に親油性基を持っている。言及することができるそのような親油性基の例はアルキル、アルケニル、ポリオキシアルケニル、アリール、アシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、ポリオキシアルケニルオキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アシルチオおよびアリールチオであり、この場合アルキル、アルケニルおよびアシル基は任意に１〜３のアリール基またはハロゲン原子で置換される。
【００１６】
親油性基は好ましくは６より多い、例えば７ないし３０のもしくは１０ないし２４の炭素原子を含まなければならない。
【００１７】
言及することができる好適なアリール基の例は、フェニル、ナフチルおよびベンジルである。
【００１８】
言及することができる好適なアルキル基の例は、メチル、エチル、ｉ−もしくはｎ−プロピル、ｎ−，ｉ−，ｓｅｃ−もしくはｔ−ブチル、ｎ−もしくはｉ−ペンチル、そして加えてｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ｎ−トリデシル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ペンタデシルおよびｎ−ヘキサデシル、オクタデシル、ドコサニルおよびそれらの単一もしくは多分岐アナログのような、１〜２４のＣ原子を有する直鎖または分岐基である。
【００１９】
好適なアルケニル基の例は、前述した２〜２４炭素原子を有するアルキル基の単一もしくは多数、好ましくは単一もしくは２個不飽和アナログであり、その場合二重結合は炭素鎖中の任意の位置に所在することができる。
【００２０】
好適なポリオキシアルケニル基の例は、Ｃ2 −Ｃ4 アルキレンオキシドから誘導され、そして２ないし１２のアルキレンオキシド繰り返し単位を含むことができる。
【００２１】
好適なアシル基の例は、任意に１回以上不飽和でそして任意に置換された直鎖もしくは分岐鎖Ｃ1 −Ｃ24モノカルボキシル酸から誘導される。例えば使用し得るアシル基は以下のカルボキシル酸から誘導される。ギ酸、酢酸、プロピオン酸、ｎ−およびｉ−酪酸、ｎ−およびｉ−吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸、トリデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸、マーガリン酸、ステアリン酸、ノナデカン酸、アラキギン酸、ベヘニン酸、リグノセリン酸、セロチン酸およびメリシン酸のような飽和酸；アクリル酸、クロトン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸およびエルカ酸のような単不飽和酸；およびソルビン酸およびリノール酸のような２重不飽和酸である。もし脂肪酸が二重結合を含むならば、二重結合はシスもしくはトラス形で存在することができる。
【００２２】
好適なアルキルオキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アルケニルオキシおよびポリオキシアルケニルオキシ基の例は、前述したアルキル、アルケニル、アシル、アリールおよびポリオキシアルケニル基の酸素末端アナログである。
【００２３】
好適なアルキルチオ、アルケニルチオ、アシルチオおよびアリールチオの例は、上のアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アシルオキシおよびアリールオキシ基の対応するイオウ末端アナログである。
【００２４】
本発明は特に、ラセミ形およびエナンチオマー的に純粋な形の式Ｉの好ましくは両親媒性グリセリルヌクレオシド
【００２５】
【化１３】
0004879398.tif 000003
に関する。
【００２６】
式中、基Ａおよび二つのリン含有基は任意の配列でグリセロール骨格のＣ原子Ｃ１，Ｃ２およびＣ３へ連結されており；Ｘ１，Ｘ２およびＸ３は互いに同一または異なって、独立に酸素またはイオウであり；Ａはアルキル、ヒドロキシ、メルカプト、またはアルキルもしくはアシル置換ヒドロキシであり、その場合アルキルもしくはアシル基は直鎖または分枝した、そして任意に二つまでの二重結合および任意に１ないし３の芳香族基によって置換された１ないし２４のＣ原子を有し；Ｚは水素またはこの化合物の酸形に対応する塩であり；Ｎ１またはＮ２の一方はヒドロキシカルボニルもしくはその塩形であり、他方は、Ｄ−またはＬ−構造のヌクレオシド誘導体であるか、またはこのＮ１およびＮ２は互いに異なって、各自Ｄ−もしくはＬ−構造のヌクレオシド誘導体であり；ここでヌクレオシド誘導体基は一般式ＩＩ，ＩＩＩおよびＩＶの基もしくはそれらの互変異性体形から選択され、
【００２７】
【化１４】
0004879398.tif 000004
【００２８】
【化１５】
0004879398.tif 000005
【００２９】
【化１６】
0004879398.tif 000006
【００３０】
この場合、
Ｙは酸素またはイオウであり；
Ｒ1 はヒドロキシル、アミノ、アシル化、アルキル化もしくはポリオキシエチレン置換アミノ基であって、そのアシルまたはアルキル基は直鎖もしくは分枝であり、Ｃ原子１〜２４とそして二つまでの二重結合を有し、そして一つの芳香族基によって置換されていることができ；
Ｒ2 は水素、ハロゲン、アミノもしくはヒドロキシル基か、またはブロモビニルまたは直鎖もしくは分枝Ｃ1 −Ｃ24アルキル基であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 ，Ｒ7 およびＲ8 は同一または異なってそして水素、ハロゲン、ヒドロキシル、エチニルまたはアジドであり；
そして基Ｒ3 ないしＲ8 の一つはヌクレオシド誘導体がそれによってグリセリルリン酸へ連結される酸素であり、基Ｒ3 ないしＲ8 の二つはａが二重結合の結合の時は省かれる。
【００３１】
式Ｉ中の基Ａ，Ｒ1 およびＲ2 は好ましくは両親媒性を持っている化合物が得られるように選ばれる。
【００３２】
もしＡがアルコキシ基であるならば、その時優先性はヘキサデシルオキシ基、オクタデシルオキシ基またはドコサニルオキシ基のようなＣ原子１２ないし２４を有する基に与えられる。
【００３３】
もしＡがカルボキシル酸基であるならば、その時優先性はパルミチン酸基、ステアリン酸基またはベヘニン酸基のようなＣ原子１２ないし２４を有する基に与えられる。
【００３４】
もしＡがアルキル基であるならば、その時優先性はヘキサデシル基、９−オクタデセニル基、オクタデシル基またはドコサニル基のようなＣ原子１２ないし２４を有する基に与えられる。
【００３５】
もしＲ1 がアルキル化アミノ基であるならば、アルキル基はその時好ましくはヘキサデシル基またはオクタデシル基のようなＣ原子１２ないし２４を有する基であり；もしＲ1 がアシル化アミノ基であるならば、アシル基はその時好ましくはパルミトイル基、オレイル基またはベヘノイル基のようなＣ原子１２ないし２４を有する基である。
【００３６】
Ｒ2 は好ましくは水素、ハロゲン、メチルまたはエチルであり；Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 およびＲ7 はアジド、水素、フッ素、エチニルまたはヒドロキシル基であり；そしてＲ8 は好ましくはヒドロキシル基である。しかしながらＲ8 は特に好ましくはヌクレオシド基が橋かけ基のＰ原子へそれによって結合する酸素原子である。
【００３７】
もし二つの基Ｎ1 およびＮ2 の一つがヒドロキシカルボニル基であるならば、優先性は式IIまたはくIVのヌクレオシド誘導体である他方の基に与えられる。
【００３８】
化合物の他の好ましいグループは以下のとおりである。
【００３９】
ａ）式（Ｉ）の化合物であって、
Ｘ1 ，Ｘ2 ，Ｘ3 およびＸ4 は酸素原子であり；
式Ｉのグリセロール骨格のＣ1 原子は式Ａへ連結され、この場合Ａはヒドロキシル、オクタデシル、オクタデシルオキシ、ドコシルオキシまたはベヘノイルオキシ、パルミトイルまたはオレオイルであり；
式Ｉのグリセロール骨格のＣ2 原子はフォスフォジエステル架橋によってＮ2 へ連結され、この場合Ｎ2 は式II、III またはIVのヌクレオシド誘導体基であって、式中、
Ｙは酸素原子であり；
Ｒ1 はヒドロキシ、アミノ、オクタデシルアミノ、ドコシルアミノ、パルミトイルアミノ、オレオイルアミノまたはベヘノイルアミノ基であり；
Ｒ2 はメチル、エチル、水素またはハロゲンであり；
Ｒ3 ないしＲ8 は上で述べた意味を有し、その場合基Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 およびＲ8 の一つはヌクレオシド誘導体基Ｎ2 がリン原子へそれによって連結される酸素原子であり；そして
式Ｉのグリセロール骨格のＣ3 原子はその遊離もしくは塩形にあるヒドロキシカルボニルフォスフォネート基へ連結されている。
【００４０】
ｂ）グループａ）に従う式Ｉの化合物であって、式中特にＮ2 は式IIまたはIVのヌクレオシド誘導体基であって、式IIまたはIV中、
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはヒドロオキシ基であり；
Ｒ2 は水素、メチルまたはエチル基であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ6 は水素、フッ素またはアジドであり；そして
Ｒ8 はＮ2 がそれによってリン原子へ連結される酸素原子である。
ｃ）式Ｉの化合物であって、式中、
Ｘ1 ，Ｘ2 ，Ｘ3 およびＸ4 は酸素原子であり；
Ａはパルミトイルオキシ、オレオイルオキシまたはオタタデシルオキシであって、式Ｉのグリセロール骨格のＣ2 原子へ連結されており；
Ｎ1 およびＮ2 は異なって、式II，III およびIVのヌクレオシド誘導体基である。
ｄ）グループｃ）に従った式Ｉの化合物であって、式中特にＮ1 は好ましくは式IIのＬ−構造ヌクレオシド誘導体基であって、式II中
Ｒ1 はアミノまたはパルミトイルアミノ基であり；
Ｒ2 およびＲ3 は水素であり；
Ｒ8 は式Ｉのグリセリルジリン酸骨格のＣ1 またはＣ3 位にあるリン原子へそれによってＮ1 が連結される酸素原子であり、
Ｎ2 は式III またはIVのヌクレオシド誘導体基である。
ｅ）グループｃ）に従う式Ｉの化合物であって、式中特にＮ2 は好ましくは式IVのヌクレオシド誘導体基であって、式IV中
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはヒドロキシル基であり；
Ｒ2 は水素またはメチルであり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ6 は水素、フッ素またはアジドであり；
Ｒ8 は式Ｉのグリセリルジリン酸骨格のＣ1 またはＣ3 位にあるリン原子へそれによってＮ2 が連結される酸素原子である。
ｆ）グループｃ）に従う式Ｉの化合物であって、式中特にＮ1 は式IIまたはIVのヌクレオシド誘導体基であり、Ｎ2 は式III のヌクレオシド誘導体基であって、どちらの場合も式中
Ｒ1 はヒドロキシルであり；
Ｒ2 ないしＲ7 は水素であり；
Ｒ8 は式Ｉのグリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 またはＮ2 がそれによって連結される酸素原子である。
ｇ）グループｃ）に従う式Ｉの化合物であって、式中特にＮ1 およびＮ2 は式IVのヌクレオシド誘導体基であって、式中Ｎ1 において、
Ｒ1 はアミノ、パルミトイルアミノまたはオクタデシルアミノ基であり；
Ｒ2 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 およびＲ6 は同一または異なって、水素、ヒドロキシルまたはフッ素であり；
そして式中Ｎ2 において、
Ｒ1 はヒドロキシル基であり；
Ｒ2 はメチルまたはハロゲンであり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であるが、その二つの隣接する基はもし二重結合が位置ａに存在すれば任意に省かれ；
Ｒ6 は水素、フッ素、アジドまたはヒドロキシル基であり；
Ｎ1 およびＮ2 中のＲ8 はそれぞれの場合グリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ2 がそれによって連結される酸素原子である。
ｈ）グループｇ）に従う式Ｉの化合物であって、特にＮ1 およびＮ2 中、
Ｒ1 は同一または異なって、ヒドロキシル基またはアミノ基であり；
Ｒ2 は同一または異なって、水素またはメチルであり；
Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ8 はグリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ2 がそれによって連結される酸素原子である。
ｉ）グループｇ）に従う式Ｉの化合物であって、式中特にＮ1 において、
Ｒ1 はアミノまたはパルミトイルアミノ基であり；
Ｒ2 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ3 およびＲ4 はフッ素、水素またはヒドロキシルであり；
Ｒ5 は水素またはエチニル基であり；
Ｒ6 はヒドロキシルであり；そしてＮ2 において
Ｒ1 はヒドロキシルであり；
Ｒ2 はフッ素であり；
Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ7 は水素であり；
Ｒ6 はヒドロキシルであり；
Ｒ8 はいずれの場合もグリセロール−１，３−ジリン酸骨格へＮ1 およびＮ2 がそれによって連結される酸素原子である。
【００４１】
式Ｉａの新規な好ましくは両親媒性のグリセリルヌクレオシドは、式Ｉｂ：
【００４２】
【化１７】
0004879398.tif 000007
【００４３】
（式中、基Ａ18，Ａ28およびＡ38の一つはヒドロキシル、メルカプト、ヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネート基であり、そして他の二つの基はＡ1 ，Ａ2 およびＡ3 に対して上で与えた意味を有し、その場合二つの基の少なくとも一つは上の定義に従ったヌクレオシド基である。）の化合物を、
ａ）酸クロライドの存在下、上に述べた定義に従ったヌクレオシドまたはヌクレオシド誘導体であって、その場合もし基Ａ18，Ａ28およびＡ38の一つがヒドロキシル基またはメルカプト基であるならばヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネート基を付加的に有するヌクレオシド誘導体と縮合し、そして生成する生成物を酸化し、または
ｂ）（エトキシカルボニル）ジクロロフォスフォネートおよび酸クロライドと反応させ、そしてエトキシ基をその後アルカリ性条件下で加水分解することによって製造することができる。
【００４４】
式ＩにおいてＮ1 およびＮ2 がＤ−またはＬ−構造のヌクレオシド誘導体である新規なそして好ましくは両親媒性グリセリルヌクレオシドは、式Ｖ
【００４５】
【化１８】
0004879398.tif 000008
【００４６】
（式中Ａ，Ｘ2 Ｂおよびリン酸基はグリセロール骨格のＣ1 ，Ｃ2 およびＣ3 原子へ任意の配列で連結されることができ；基Ａ，Ｘ2 ，Ｘ3 ，Ｘ4 ，Ｎ2 およびＺは与えられた意味を有し；Ｘ2 Ｂはヒドロキシル、チオール、ヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネート基である。）の化合物を酸クロライドの存在下上の式II，III またはIVのヌルレオシド誘導体と縮合し、その後酸化することによって製造することができる。その場合式II，III またIV中、基Ｒ1 ないしＲ8 は与えられた意味を有し、加えてＲ8 は４−モノ−、４，４’−ジメトキシトリフェニルメトキシ、ヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネートであることができ；Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 およびＲ6 は加えてＣ原子１〜２４を有しそしてフェニル基で置換されていることができる直鎖または分枝カルボキシル基であることができ；基Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 およびＲ8 の一つはもし式Ｖの化合物においてＸ2 Ｂがヒドロキシルまたはチオールであるならば常にヒドロゲンフォスフォネートかもしくはチオヒドロゲンフォスフォネートであるが、他方もしＸ2 Ｂがヒドロゲンフォスフォネートもしくはチオヒドロゲンフォスフォネートであるならばこれら基のどれもヒドロゲンフォスフォネートもしくはチオヒドロゲンフォスフォネートではない。
【００４７】
縮合は酸無水物または特にピバロイルクロライドのような酸クロライドの存在下、−８０℃ないし＋１００℃，例えば約０〜２０℃において特に満足に進行する。酸化は、ａ）水性有機溶媒中ヨウ素でＰ−Ｈ結合をＰ＝Ｏ結合へ酸化するか、またはｂ）Ｐ−Ｈ結合をトリエチルアミン／ＣＳ2 中Ｓ8 でＰ＝Ｓ結合へ酸化することにより、−８０℃ないし＋１００℃，例えば約０〜２０℃において特に満足に進行する。
【００４８】
酸化およびクロマトグラフィー処理の後、４−モノ−もしくは４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル基はヒドロキシル基で置換される。もし必要ならば、アシル基はメルカプト、ヒドロキシルおよび／またはアミノ基へ加水分解的に変換される。
【００４９】
式Ｉ中Ｎ1 が酸もしくは塩の形で結合している新規なそして好ましくは両親媒性化合物は、Ｂが水素である式Ｖの化合物を（エトキシカルボニル）フォスフォリルクロライドとそれ自体既知の態様で反応させることによって製造することができる。この反応は特にピリジン／クロロホルム、アセトニトリル／クロロホルムもしくはピリジン／塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素と、そしてリン酸トリメチルとの混合物中で−１０℃ないし＋８０℃，例えば約０〜１０℃において特に満足に進行する。反応およびクロマトグラフィー処理後、酸クロライド基およびエトシキ基はアルカリ性条件下でのその後の加水分解によってヒドロキシル基または対応する塩の形へ変換される（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９８６）２９，１３８９）。
【００５０】
出発物質として使用される式Ｖの化合物は、式VI
【００５１】
【化１９】
0004879398.tif 000009
【００５２】
の化合物を式II，III またはIVのヌクレオシド誘導体と酸クロライドの存在下縮合し、その後既知の態様でヨウ素またはイオウで酸化することによって製造することができる（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔ．（１９８６）２７，４６９；ｉｂｉｄ．５５７５）。
【００５３】
この場合式VI中基Ａ，Ｘ2 Ｒ9 およびＸ3 Ｂはグリセロール骨格のＣ1 ，Ｃ2 およびＣ3 原子へ任意の配列で連結されることができ；ＡおよびＸ2 は与えられた意味を有し；Ｒ9 は４−モノ−もしくは４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル、またはＣ原子１〜２４を有しそして芳香族基で置換されていることができる直鎖もしくは分枝アシル基であり；基Ｘ3 Ｂはヒドロキシル、チオール、ヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネート基である。また式II，III またはIVにおいて、Ｒ1 〜Ｒ8 は前述した意味を有し、その場合基Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 およびＲ8 の一つはもし式VIの化合物において基Ｘ3 Ｂがヒドロキシルもしくはチオールであるならば常にヒドロゲンフォスフォネートもしくはチオヒドロゲンフォスフォネートであるが、しかし他方もし式VIの化合物においてＸ3 Ｂがヒドロゲンフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネートであるならばこれら基のどれもヒドロゲスフォスフォネートまたはチオヒドロゲンフォスフォネートではない。
【００５４】
クロマトグラフィー処理後、４−モノ−もしくは４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル基は酸性条件下で水素で置換され、アシル基はアルカリ性条件下で水素で置換される。
【００５５】
上の反応に必要な出発物質は既知物質であるか、それとも良く知られた方法（Ｈｅｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ（１９８２）６５，１０５６；Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．（１９９１）７６５；ｉｂｉｄ．（１９９６）３６５；Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｃｈｅｍ  ＆  Ｃｈｅｍｔｈｅｒ．（１９９８）９，３３；Ｊ．Ｃ．Ｓ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｉ（１９８２）１１７１；Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９８６）１８７，８０９；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔ．（１９８６）２７，２６６１）に類似して製造することができる。
【００５６】
本発明による化合物は両親媒性または非両親媒性特性を持つことができる。しかしながら両親媒性化合物が特に好ましい。
【００５７】
本発明に従ってＦｏｓｃａｒｎｅｔおよび治療的に活性ヌクレオシドアナログの両親媒性グリセリルヌクレオシドへの変換は、薬力学的挙動に顕著な変化をもたらす。その結果、投与すべき投与量をそれぞれのモノマーと比較して驚くほど増量することができ、同時にこれらの高度に強力な薬物のすべての毒性副作用の増幅へ導かない。加えて、両親媒性グリセリルヌクレオチドはそれぞれのモノマーヌルレオシドアナログに対する耐性の存在下においてさえもなお効果を有する。
【００５８】
本発明に従った両親媒性グリセリルヌクレオチドの両親媒性特性は種々の投与スキームの実行を可能にする。グリセリルヌクレオチドの親油性領域は活性化合物をマトリックス脂質と共にリポソーム中へ安定に組入れる結果となり、水に溶けている両親媒性グリセリルの細胞摂取を促進し、そして同時にそれらを非常に速い酵素加水分解から保護する。親水性領域は恐らくミセル形成によって活性化合物を水溶性とすることを可能にする。両親媒性グリセリルヌクレオチド投与の代替可能性の利益は、ダイマーの所望の遅放性効果が水溶液およびリポソーム分散液において達成されることである。このことはリポソーム技術に専ら依存する必要がなくて、水のみに可溶性の活性化合物の場合は容易に可能でないこの技術を必要に応じて使用できることを意味する。
【００５９】
本発明に従った両親媒性グリセリルヌクレオチドの他の一利益は、１種以上の他の活性化合物の多様な量と共にそれらをリポソーム中へ組み入れることができ、相乗効果をもたらすことである。これらの両親媒性グリセリルヌクレオチドおよび／または生物学的に耐えられる補助剤と合わせてた組成物中のそれを使用し、および／または少なくとも１または２以上の組成物中に本発明に従った化合物を含む治療剤を使用し、がんおよびウイルスに起因する感染病の治療を最適化することができる。
【００６０】
一般に、本発明の化合物は固体、好ましくは哺乳類、特にヒトを処置するための医薬品の形で使用される。このためこれら化合物は、本発明に従って少なくとも１種のヌクレオシドリン酸アナログまたは適切な場合本発明に従った数種の化合の混合物と、そして適切な場合望まれる特定の治療効果のために使用される適切な追加の活性化合物と共に薬学的に許容される補助剤を含む医薬組成物の形で通常投与される。これらの組成物は、例えば経口的に、経腸的に、経皮的に、皮下的に、静脈内的に、筋肉内的にまたは鼻内的に投与される。
【００６１】
好適な薬剤フォーミュレーションは、粉末、顆粒、錠剤、ロゼンジ、サシェー、カシェー、糖衣錠、硬および軟ゼラチンカプセルのようなカプセル、坐剤または膣用形のような固形剤；軟膏、クリーム、ヒドロゲル、ペーストまたはプラスターのようて半固形剤；および溶液、エマルジョン、特にｏ／ｗエマルジョン、懸濁液、例えばローション、注射および注入剤、および点眼および点耳ドロップのような液剤である。本発明の化合物の投与のため埋め込み遅放性デバイスを使用することもできる。さらにリポソーム、マイクロスフェアまたはポリマーマトリックスを使用するも可能である。
【００６２】
本発明による化合物は組成物を製造する時通常補助剤と混合もしくは希釈される。補助剤は活性化合物のためのビヒクル、担体または媒体として作用する固体、半固体または液体物質である。
【００６３】
好適な補助剤は、例えば乳糖、グルコース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビヤガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガントガム、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップおよびメチルセルロースを含む。加えて、フォーミューレーションは、例えばタルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油のような滑沢剤；湿潤剤；乳化および懸濁剤；メチル−およびプロピルヒドロキシベンゾエートのような保存剤；抗酸化剤；抗刺激剤；キレート剤；コーティング補助剤；乳化安定剤；フィルム形成剤；ゲル形成剤；臭気マスキング剤；矯味剤；樹脂；ヒドロコロイド；溶剤；可溶化剤；中和剤；浸透促進剤；顔料；４級アンモニウム化合物；再脂化および高脂化剤；軟膏、クリームもしくはオイルベース；シリコーン誘導体；拡散補助剤；安定剤および滅菌剤；坐剤ベース、結合剤、フィラー、滑沢剤、崩壊剤またはコーティング剤のような錠剤補助剤；噴射剤；乾燥剤；不透明化剤；濃化剤；ワックス；皮膚軟化剤；白色鉱油のような、薬学的に許容し得る担体およびまたは慣用の補助物質を含むことができる。この点に関しフォーミュレーションは、例えばＨ．Ｐ．，Ｌｅｘｉｋｏｎ  ｄｅｒ  Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ  ｆｕｒ  Ｐｈａｒｍａｚｉｅ，Ｋｏｓｍｅｔｉｋ  ｕｎｄ  ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ  Ｇｅｂｉｅｔｅ（Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  ａｕｘｉｌｉａｒｙ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ｆｏｒ  ｐｈａｒｍａｃｙ，ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ａｒｅａｓ），４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｕｌｅｎｄｏｒｆ：ＥＣＶ−Ｅｄｉｔｉｏｎ−ｋａｎｔｏｒ  ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ｃｏｍｐａｎｙ，１９９６に提供されているような専門知識に基づいている。
【００６４】
多種類の組成物が本発明による化合物をできるだけ効果的に投与されることを確実にするために製造される。すべてのこれらの組成に共通した特徴は、本発明による化合物が有機担体と組合されることである。
【００６５】
これらの組成物の好ましい具体例は最大０．４μｍの直径を有する単層ないしオリゴ層リポソームの形に本発明による化合物の組合せを提供する。超音波、ゲルクロマトグラフィー、界面活性剤透析および高圧力濾過のようなリポソーム調製のためのすべての既知の方法をリポソームの生成のために使用することができる。それぞれの場合導入された親油性基はそれぞれのグリセリルヌクレオチドから追加の脂質成分と共に形成されたリポソームのサイズおよび安定性に重要な影響を有する（Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｔｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ：Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｍｏｎｏｇｒａｐｈｓ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｖｏｌ７，Ｇ．Ｇ．Ｋｎｉｇｈｔ  ｅｄｉｔｏｒ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（１９８１）を参照）。
【００６６】
本発明による化合物を有機担体と組合せる他の好ましい可能性は、化合物を生物学的に耐え得るナノ粒子に封入することである。ナノ粒子は、これら化合物がナノ粒子に効率的に封入されるように本発明による化合物が重合時に添加される有機化学的ポリマーへ与えられた名称である（Ｂｅｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ（１９９６）４０（６），１４６７−１４７１を参照）。
【００６７】
好ましい具体例においては、組成物は細胞または処置すべき器官に特異的に濃縮される成分を用いて実現される。これに関し、リポソームの組成物は、例えば組成物が細胞および／または処置すべき器官に優先的に濃縮されるように、抗体、帯電した脂質または親水性ヘッド基で修飾された脂質のような分子が追加的に提供されるように選択されることができる。腫瘍細胞、ウイルス感染細胞および／または器官に対して特異的に指向する分子を含んでいるそのような組成物は、薬物の治療効果を増大し、同時に未感染組織に対する毒性を減らす。
【００６８】
組成物は、本発明による化合物と、そして適切な場合有機担体に加え、慣用の賦形剤および／または希釈剤および／または補助物質を含有する治療剤に加工することができる。慣用の賦形剤の例はマンニトール、グルコース、アルブミン等であり、希釈剤としては生理食塩水または５％グルコース溶液が主として使用される。さらに溶液を適当な試薬例えばリン酸塩で緩衝化するのが慣例である。これに加えて、有機担体と本発明による化合物よりなる組成物を攻撃しない限り、医薬品を調製のために慣用のすべての他の剤を加えることが可能である。調製物は注入溶液としてまたは経口的に投与することができる。
【００６９】
しかしながら両親媒性グリセリルヌクレオチドへの変換は、酵素加水分解に対する抵抗を増強しそして可能な投与形を拡げる効果を有するのみでなく、それは細胞増殖抑制およびウイルス増殖抑制効果を驚くほど最適化する。
【００７０】
両親媒性グリセリルヌクレオチドは造血細胞の悪性病および固形腫瘍に対して使用することができる。優れた細胞増殖抑制効果の結果、非常に少ない重大な副作用しか存在しない。本発明による細胞増殖抑制活性化合物の高投与量を採用することができ、そして治療は慢性期間で実施することができる。
【００７１】
驚くべきことに、本発明によるヌクレオシドリン酸アナログはウイルス増殖抑制効果をも発揮し、そのためそれらは例えばヘルペス、肝炎およびＡＩＤＳの場合においてウイルス感染の化学療法にそして薬物耐性を克服するために使用することができる。
【００７２】
それ故本発明は、白血病、肺がん、腸がん、中枢神経系のがん、黒色腫、卵巣がん、腎臓がん、前立腺がんおよび乳がんのようながんを処置するための、およびＡＩＤＳ、Ａ型、Ｂ型およびＣ型肝炎およびヘルペルのようなウイルス病を処置するための本発明による化合物の使用にも関する。
【００７３】
以下の実施例は本発明をこれら実施例へ制限することなく説明する。
【００７４】
実施例１
３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→２）−１−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−（ヒドロキシカルボニル）フォスフォネートの製造
ａ）出発物質の製造
３−Ｏ−（４−モノメトキシトリチル）−１−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−２−ヒドロゲンフォスフォネート２．５ｇ（３．８ｍｍｏｌ）を３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン１ｇ（３．８ｍｍｏｌ）と共に無水ピリジン１５ｍｌ中に溶解する。ピバロイルクロライド２．３ｍｌ（１９ｍｍｏｌ）を湿気を排除しながらこの溶液へ加え、約１０℃へ冷却し、全体を室温において７分間かきまぜる。次に水１ｍｌとＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２０ｍｌを順番に反応混合物へ加え、０℃へ冷却し、その後冷却することなく１時間かきまぜる。過剰のヨウ素は亜硫酸水素ナトリウムによって還元し、反応混合物をロータリエバポレータでシロップへ濃縮し、ジクロロメタン８０ｍｌに取り、この混合物を水／メタノール＝１／１（ｖ／ｖ）に対して３回振とうする。有機相をロータリエバポレータ中でシロップへ濃縮し、さらにトルエンと３回共蒸発する。４−モノメトキシトリチル基を水素に置換するため、シロップを酢酸／水＝４／１（ｖ／ｖ）に溶かし、この溶液を４０℃において５分間加熱し、次にロータリエバポレータ中シロップへ濃縮する。シロップは次にトルエンと２回共蒸発し、クロロホルム／メタノール＝９８／２（ｖ／ｖ）２５ｍｌに溶かし、クロロホルム／メタノール勾配を用いてシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をロータリエバポレータ中泡２ｇ（３ｍｍｏｌ）へ変換する。このものはクロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）中Ｒｆ値０．４８を示す。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）で得られた泡を、リン酸トリメチル１２ｍｌに溶解しそしてあらかじめ０℃へ冷却したエトキシカルボニルフォスフォニルジクロライド１ｇの溶液へかきまぜながら少しづつ加える。反応混合物を０℃でさらに４時間攪拌し、エーテル５０ｍｌと水５０ｍｌを冷却下に加え、全体をよく振とうする。水層を分離し、有機相を再び水と振とうして抽出する。合併した水相を氷で冷却しながら２Ｍ水酸化ナトリウム溶液で中和し、シロップへ濃縮し、エーテルへ取り、超音波を印加しながら結晶化する。生成する沈澱を遠心し、乾燥し、水１０ｍｌに溶解し、２Ｍ水酸化ナトリウム溶液１０ｍｌを加える。この反応溶液を室温で１時間攪拌し、２Ｎ塩酸で中和し、減圧濃縮し、セファデックスＧ１０カラム上で脱塩する。目的物含有分画を凍結乾燥し、無色結晶として３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→２）−１−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−（ヒドロキシカルボニル）−ヒドロゲンフォスフォネート２．１ｇを得る。これはシリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上で溶媒系クロロホルム／メタノール＝６：４（ｖ／ｖ）中においてＲｆ値０．１を示す。計算した分子質量（７６９．７７）はイオンスプレー質量スプクトル中の分子ピーク（７６８．５）によって確認される。
【００７５】
実施例２
アラビノシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリル−（３→５’）−５−フルオロ−２’−デオキシウリジンの製造
ａ）出発物質の製造
実施例１のａ）と同様に、１−Ｏ−（４−モノメトキシトリチル）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−ヒドロゲンフォスフォネート４．８ｇ（７ｍｍｏｌ）を３’−Ｏ−アセチル−５−フルオロ−２’−デオキシウリジン２ｇ（７ｍｍｏｌ）と共に無水ピリジン５０ｍｌ中添加したピバロイルクロライド４．３ｍｌの存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液３２ｍｌで酸化する。４−モノメトキシトリチル基を水素に置換するため、縮合後得られたシロップを酢酸／水＝４／１（ｖ  ２ｖ）に溶解し、この溶液を還流下３０分間加熱する。冷却した溶液をロータリエバポレータ中シロップへ濃縮し、トルエンと２回共蒸発し、ジクロロメタン／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）３５ｍｌに取り、この混合物をシリカゲルカラム上でジクロロメタン／メタノール勾配を用いて分画する。目的物含有分画を減圧下泡３．０ｇへ変換する。このものはシリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上溶媒系クロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）においてＲｆ値０．３２を示す。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）に記載したようにして得た泡と２’，３’−ジ−Ｏ−アセチル−Ｎ4 −ステアロイルアラビノシチジン−５’−ヒドロゲンフォスフォネート２．８ｇ（４．３ｍｍｏｌ）を、実施例１のａ）と同様に、無水ピリジン３５ｍｌ中添加したピバロイルクロライド３ｍｌの存在下縮合する。水２ｍｌを加えた後、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２０ｍｌを加えることによって酸化を行う。ロータリエバポレータで濃縮した後、反応混合物をジクロロメタンに取り、この溶液を飽和ＮａＣｌ／水／メタノール＝１／1 ／２（ｖ／ｖ／ｖ）よりなる液で３回抽出する。有機相をシロップへ濃縮し、トルエンと３回再蒸発する。次にシロップをジクロロメタン／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）に取り、ジクロロメタン／メタノール勾配を用いてシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をシロップへ減圧濃縮し、熱い酢酸エチルに溶かした後０℃で結晶化する。アシル保護基を水素へ置換するため、沈澱を少量のジクロロメタン／メタノール＝１／1 （ｖ／ｖ）へ溶解する。室温でアンモニアを飽和させたメタノールを溶液へ加え、室温でシールして３６時間放置し、結晶化するまでロータエバポレータで濃縮する。０℃で１２時間放置後沈澱したアラビノシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−５−フルオロ−２’−デオキシウリジンを吸引濾過し、エーテルで洗い、乾燥後白色粉末２．３ｇを得る。このものはシリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上溶媒系クロロホルム／メタノール／ＮＨ2 ＝１０／１０／３（ｖ／ｖ／ｖ）中Ｒｆ値０．１０を示す。計算した分子質量（９５７．９３）はイオンスプレー質量スペクトル中の分子ピーク（９５７．０によって確認される。
【００７６】
実施例３
Ｎ4 −パルミトイル−３’−チア−２’，３’−ジデオキシチジル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジンの製造
ａ）出発物質の製造
実施例１のａ）と同様に、１−Ｏ−アセチル２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−ヒドロゲンフォスフォネート２．４ｇ（５．３ｍｍｏｌ）と、３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン１．４ｇ（５．３ｍｍｏｌ）を無水ピリジン３０ｍｌ中添加したピロバロイルクロライド３．５ｍｌ（２８．４ｍｍｏｌ）の存在下縮合する。水２ｍｌを加えた後、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２５ｍｌを用いて酸化する。反応混合物をロータリエバポレータ中で濃縮し、クロロホルム８５ｍｌに取る。次にこの溶液を３回各場合飽和ＮａＣｌ／水／メタノール＝１／１／２（ｖ／ｖ／ｖ）４０ｍｌを用いて振とうすることによって抽出する。次に有機相をシロップへ濃縮し、アセチル基を水素に置換する目的のため室温でアンモニアを飽和させたメタノールで１２時間処理する。減圧濃縮後、シロップをジクロロメタンに取り、ジクロロメタン／メタノール勾配を用いてシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画を減圧下シロップへ濃縮し、エタノールに溶かし、−２５℃で無色結晶３．０ｇに結晶化する。これら結晶はクロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）溶媒系中Ｒｆ値０．２６を示す。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）に記載したように得られた結晶と、Ｎ4 −パルミトイル−３’−チア−２’，３’−ジデオキシシチジン−５’−ヒドロゲンフォスフォネートを実施例１のａ）と同様に、乾燥ピリジン４０ｍｌ中添加したピバロイルクロライド３．０ｍｌの存在下縮合する。次に酸化はＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２０ｍｌを用いて行う。生成するシロップをクロロホルム／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）に溶かし、クロロホルム／メタノール勾配を用いてシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をシロップへ濃縮し、それからメタノールを添加してＮ4 −パルミトイル−３’−チア−２’，３’−ジデオキシシチジル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン２．５ｇを白色粉末の形で結晶化させる。このものは溶媒系クロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）中シリカゲル薄層クロマトグラフィーにおいてＲｆ値０．２０を示す。計算した分子質量（１２０３．５）はイオンスプレー質量スペクトル中の分子ピーク（１２０２．５）によって確認される。
【００７７】
実施例４
３’−アジト−２’，３’−ジデオキシチミジル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル（３→５）−Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジンの製造
実施例３のａ）において得た結晶とＮ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジン−５’−ヒドロゲンフォスフォネート２．３ｇ（４．５ｍｍｏｌ）を、実施例１のａ）と同様に、無水ピリジン４０ｍｌ中添加したピバロイルクロライド３．０ｍｌの存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２０ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップを熱エタノール１３０ｍｌに溶かして濾過し、−２５℃で３’−アジト−２’，３’−ジデオキシチミジル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジン５．１ｇを無色結晶として結晶化する。このものは溶媒系クロロホルム／メタノール＝６／４（ｖ／ｖ）中シリカゲルプレート上でＲｆ値０．２６を示す。計算した分子質量（１１８５．４０）はイオンスプレー質量スペクトル中分子ピーク（１１８４．０）によって確認される。
【００７８】
実施例５
Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセリリル−（３−５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジンの製造
ａ）出発物質の製造
実施例１のａ）と同様に、１−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセロール−３−ヒドロゲンフォスフォネート３．２ｇ（７．２ｍｍｏｌ）と、３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン２．０ｇ（７．２ｍｍｏｌ）を無水ピリジン６０ｍｌ中添加したピバロイルクロライド４．５ｍｌ（３６．６ｍｍｏｌ）の存在下で縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素水溶液３２ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップをクロロホルム／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）７５ｍｌに取り、クロロホルム／メタノール勾配を使用してシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画を減圧濃縮し、残渣をクロロホルム１５ｍｌに取り、室温でアンモニアを飽和させたメタノールを次に加え、混合物を室温で９０分間放置する。反応混合物を次に減圧濃縮し、残渣をトルエンで再蒸発乾固する。残渣をクロロホルム／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）に取り、クロロホルム／メタノール勾配を使用してシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画を泡２．７ｇに減圧濃縮する。このものは溶媒系クロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）中Ｒｆ値０．２４を示す。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）に記載した得られた泡と、Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジン−５’−ヒドロゲンフォスフォネート２．１ｇ（４．１ｍｍｏｌ）を、実施例１のａ）と同様に、無水ピリジン３５ｍｌ中添加したピバロイルクロライド２５ｍｌ（２０．３ｍｍｏｌ）の存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２０ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップをクロロホルム／メタノール＝９５／５（ｖ／ｖ）５０ｍｌに取り、クロロホルム／メタノール勾配を使用してシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をシロップへ減圧濃縮し、それからメタノールを添加した後、Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジル−（５’→１）−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン２．３ｇを白色粉末の形で晶出させた。このものは溶媒系クロロホルム／メタノール＝６／４（ｖ／ｖ）中シリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上でＲｆ値０．２５を示す。計算した分子質量（１１７１．３２）はイオンスプレー質量スペクトル中分子ピーク（１１７０．０）によって確認される。
【００７９】
実施例６
３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−２’，３’−ジデオキシイノシンの製造
ａ）出発物質の製造
実施例３のａ）に記載したようにして得た出発物質を乾燥ピリジン１０ｍｌと乾燥ジオキサン４０ｍｌよりなる混合物に溶かし、サリチルクロロフォスファイト１．１ｇ（５．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間振とうする。次に反応混合物を０℃へ冷却し、水２ｍｌを添加し、混合物を室温でさらに１５分間振とうし、減圧下シロップへ濃縮する。シロップを水１２０ｍｌに取り、この溶液を各場所酢酸エチル４０ｍｌと３回振とうして抽出する。水相を減圧濃縮し、凍結乾燥し、白色粉末２．５ｇを得る。この白色粉末は溶媒系クロロホルム／メタノール＝７／３（ｖ／ｖ）中シリカゲルプレート上でＲｆ値０．１５を示す。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）に記載したようにして得た凍結乾燥物を実施例１のａ）と同様にして２’，３’−ジデオキシノイシン０．８ｇ（３．４ｍｍｏｌ）と無水ピリジン２５ｍｌ中添加したピバロイルクロライド２．０ｍｌ（１６．３ｍｍｏｌ）の存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液１８ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップをクロロホルム／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）５０ｍｌに取り、クロロホルム／メタノール勾配を使用してシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をシロップに減圧濃縮し、それからエーテルを添加した後、３’−アシド−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−ジデオキシイノシン１．１ｇを白色結晶の形で晶出させる。このものは溶媒系クロロホルム／メタノール＝１／１（ｖ／ｖ）中シリカプレート上でＲｆ値０．２１を示す。計算した分子質量（９７１．９９）はイオンスプレー質量スペクトル中分子ピーク（９７０．５）によって確認される。
【００８０】
実施例７
３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５' →１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アシド−２’，３’−ジデオキシチミジンの製造
ａ）出発物質の製造
実施例１のａ）と同様に、１−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセロール−３−ヒドロゲンフォスフォネート４．３ｇ（９．５ｍｍｏｌ）と、３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシチミジン２．３ｇ（９．５ｍｍｏｌ）を無水ピリジン２５ｍｌ中添加したピバロイルクロライド５．７ｍｌの存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液４５ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップを少量のクロロホルムに取り、室温でアンモニアを飽和させたメタノール２００ｍｌを加えた。混合物を激しく振り、次に室温で一夜放置する。反応混合物を晶出が始まるまで減圧濃縮する。−２５℃で１２時間放置後得られた沈澱を吸引濾過し、乾燥する。これにより溶媒系クロロホルム／メタノール＝６／４（ｖ／ｖ）中シリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上でＲｆ値０．７１を示す白色粉末３．４ｇを与える。
ｂ）最終生成物の製造
ａ）に記載したように得た粉末３．４ｇ（５．２ｍｍｏｌ）と、３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン−５’−ヒドロゲンフォスフォネート１．７ｇ（２．３ｍｍｏｌ）を、実施例１のａ）と同様に、無水ピリジン４５ｍｌ中添加したピバロイルクロライド３．５ｍｌの存在下縮合し、ＴＨＦ中０．２Ｍヨウ素溶液２５ｍｌで酸化する。縮合後得られたシロップをクロロホルム／メタノール＝９／１（ｖ／ｖ）に溶かし、クロロホルム／メタノール勾配を使用してシリカゲルカラム上で分画する。目的物含有分画をシロップへ減圧濃縮し、それからメタノールを添加後溶媒系クロロホルム／メタノール＝６／４（ｖ／ｖ）中シリカゲル薄層クロマトグラフィープレート上Ｒｆ値０．４５を示す白色結晶の形で３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシチミジリル−（５’→１）−２−Ｏ−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン２．７ｇを得る。計算した分子質量（９７９．９１）はイオンスプレー質量スペクトル中分子ピーク（９７９．０）によって確認される。
【００８１】
実施例８
有機担体と、本発明による両親媒性グリセリルヌクレオチドと、コレステロールを含む組成物の製造
１．リポソームの組成
本発明による化合物をｍｌあたり１０ｍｇ含有するリポソーム。リポソーム１ｍｌは、フォスファチジルコリン１００ｍｇ、コレステロール１０ｍｇ、および必要であれば例えばリン酸塩バッファーを使用して所望のｐＨへ調節した０．９％食塩水中に分散した本発明による化合物１０ｍｇを含有する。緩衝化した食塩水を使用する代りに、適切な場合６７ｎＭ生理的リン酸バッファーまたは５％グルコース溶液を使用することも可能である。
２．超音波によるリポソーム調製物の製造
本発明による化合物をｍｌあたり１０ｍｇ含有するリポソーム分散液２．５ｍｌの製造。
大豆フォスファチジルコリン２５０ｍｌを丸底フラスコ中でｔ−ブタノール５ｍｌに溶解し、コレステロール２５ｍｇを加えた。混合物をあたため（５０℃）る時コレステロールが溶解する。ＤＭＳＯの適量（０．２５〜１ｍｌ）に溶解した本発明の化合物２５ｍｇをこの溶液へ加え、得られた溶液をロータリエバポレータ中半量へ濃縮し、凍結乾燥する。凍結乾燥物へ水２．５ｍｌを加え、次に超音波によって懸濁液へ変換し、その後再度凍結乾燥する。凍結乾燥物を０．９％ＮａＣｌ溶液２．５ｍｌへ懸濁し、厚壁ガラス遠心チューブ中でＢｒａｎｓｏｎ２５０超音波処理装置の超音波チップ（３ｍｍ）を用いて冷却しながら１時間超音波処理する。これはＳＰＣ１００ｍｇ，コレステロール１０ｍｇおよび本発明の化合物１０ｍｇ／ｍｌの組成を有する乳白色リポソーム分散液を与える。
【００８２】
実施例９
本発明による化合物の抗ＨＩＶ効果のインビトロ研究。
新規化合物Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジル−（５’→１）−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジン（ＮＳＣ７０４５３２−Ｆ／１）のインビトロウイルス増殖抑制（抗ＨＩＶ）効果は、以下の実験法によって証明することができる。２複製サイクル以内にＨＩＶによって殺されるＴ４リンパ球（細胞ライン：ＣＥＭ−ＳＳ）を試験システムとして使用する。検出するのは細胞死滅の抑制率である。本発明化合物をＤＭＳＯに溶かし、この溶液を１：１００の比で細胞培養培地で希釈する。次に半対数的（ｌｏｇ10）希釈液を調製する。これはＤＭＳＯ中の本発明化合物のもとの溶液を基にして少なくとも１：２００の希釈液をもたらす。本発明化合物とインキュベートしただけの未感染Ｔ４リンパ球は毒性対照として役立つ。本発明化合物の不存在下感染および感染しないＴ４リンパ球は追加の標準対照として役立つ。細胞カルチャーを５％ＣＯ2 雰囲気中３７℃において６日インキュベートし、その後テトラゾリウム塩（ＸＴＴ）をすべての細胞カルチャーへ加えると、その時生存細胞にホルマザン呈色反応が現れる。すべての細胞カルチャーをホルマザン生産を定量化するために分光光度測定的に検査する。これに加え、抗ＨＩＶ活性を確認するため個々のカルチャーを顕微鏡的に検査する。本発明化合物で処理したウイルス感染細胞をサンプルプレート上で標準と比較する。Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｐｒｏｇｒａｍの環境内で決定したインビトロ抗ＨＩＶ活性データを以下の表に要約する。このデータから５０％細胞成育（ＩＣ50）は本発明化合物の＞１．００×１０-6モルで発生するが、感染からの５０％保護（ＥＣ50）は１．７９×１０-8であり、治療スパン（ＩＣ／ＥＣ）は＞５．５９×１０+1であることがわかる。
【００８３】
【表１】
0004879398.tif 000010
【００８４】
Ｎ4 −パルミトイル−２’，３’−ジデオキシシチジリル−（５’→１）−２−Ｏ−パルミトイル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシチミジンの抗ＨＩＶ活性の結果
【００８５】
実施例１０
本発明化合物のインビトロ細胞増殖抑制効果
ａ）実験法
腫瘍細胞ラインの生育の本発明化合物による５０％阻止（ＧＩ50）および１００％阻止（ＴＧＩ）を種々の濃度においてテストシステムとして使用して決定する。これら細胞に対する毒性（ＬＣ50）も決定する。マイクロタイタープレートのシリーズを日０において腫瘍細胞でインキュベートし、そして２４時間プレインキュベートする。その後本発明化合物を５段階濃度において細胞へ加えた。これら各場合最高可溶濃度から出発して１０倍希釈する。次に４８時間インキュベートし、その終りに細胞をその場に固定し、洗浄し、乾燥する。固定した細胞へ結合するピンク染料スルフォローダミンＢ（ＳＲＢ）を加え、細胞を再び洗浄する。残った細胞は接着性細胞塊を表わし、そして分光光度的に測定する。自動的に集められるデータをコンピューターによって評価し、以下の結果へ導く。
ｂ）結果
ｂ１）本発明による両親媒性化合物アラビノシチジル−（５’→１）−２−Ｏ
−オクタデシル−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−５−フルオロ
−２’−デスオキシウリジン（ＮＳＣ６９８６８８−Ａ／１）
【００８６】
【表２】
0004879398.tif 000011
0004879398.tif 000012
0004879398.tif 000013
【００８７】
上のインビトロ試験結果に基づいて、この活性化合物は好ましくは肺、腸、中枢神経系および腎臓の腫瘍の治療に適している。
ｂ２）本発明による非両親媒性化合物２’，３’−ジデスオキシシチジリル−
（５’→１）−ラセミ−グリセリリル−（３→５’）−５−フルオロ−
２’−デスオキシウリジン（ＮＳＣ７０４５３３）
【００８８】
【表３】
0004879398.tif 000014
0004879398.tif 000015
0004879398.tif 000016
【００８９】
上のインビトロ試験結果に基づいて、この活性化合物は好ましくは肺、中枢神経系、腎臓の腫瘍の治療に、そして黒色腫の治療に適している。