(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)出発分子量を有する生分解性ポリマー、前記ポリマー用の溶媒、及び前記ポリマーのエステル加水分解を触媒する求核性化合物、を含む第１の相を調製すること；
(b)前記第１の相を保持期間にわたり保持温度で維持すること；
(c)混合手段の影響下で前記第１の相を第２の相と組み合わせて乳剤を生じさせること；および
(d)前記乳剤と抽出媒体とを組み合わせ、それによってマイクロ粒子を生じさせること、
を含み、前記保持期間と前記保持温度は、前記ポリマーの出発分子量が選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量まで減少するように調節される、選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法。
【請求項２】
前記保持温度を高め、それによって、ポリマーの分子量減少（decay）を増加させ保持期間の長さを短縮すること、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記保持温度を低下させ、それによって、ポリマーの分子量減少（decay）を減少させ保持期間の長さを増加させること、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記出発分子量が50kD〜250kDの範囲内である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記保持期間が0.05時間〜6時間の範囲内である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記保持温度が15℃〜35℃の範囲内である請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記混合手段が静止型混合機（static  mixer）である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記求核性化合物がリスペリドン、9−ヒドロキシリスペリドンおよびそれらの薬学的に許容できる塩からなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記溶媒がベンジルアルコールおよび酢酸エチルを含む請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ポリマーが、ポリ（グリコール酸）、ポリ−d,l−乳酸、ポリ−l−乳酸および前述したものの共重合体からなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ポリマーが、100：0〜50：50の乳酸対グリコールのモル比を有するポリ（d,l−乳酸−co−グリコ−ル酸）である請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
さらに、(e)前記保持期間の間前記第１の相を混合すること、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量が、10kD〜185.0kDの範囲内である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量が、10kD〜185.0kDの範囲内である請求項４に記載の方法。
【請求項１５】
前記選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項４に記載の方法。
【請求項１７】
前記選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
(a)出発分子量を有する生分解性ポリマーを提供すること；
(b)溶媒に前記ポリマー、および前記ポリマーのエステル加水分解を触媒する求核性化合物を溶解して第１の相を生じさせること；
(c)前記第１の相を保持期間にわたり保持温度で維持すること；
(d)混合手段の影響下で前記第１の相を第２の相と組み合わせて乳剤を生じさせること；および
(e)前記乳剤と抽出媒体を組み合わせ、それよってマイクロ粒子を生じさせること、
を含み、前記保持期間と前記保持温度は、前記出発分子量が選択されたマイクロ粒子ポリマー分子量まで減少するように選択される、マイクロ粒子の調製方法。
【請求項１９】
前記保持温度を高め、それによって、ポリマーの分子量減少（decay）を増加させ前記保持期間の長さを短縮すること、を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記保持温度を低下させ、それによって、ポリマーの分子量減少（decay）を減少させ前記保持期間の長さを延ばすこと、を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記出発分子量が50kD〜250kDの範囲内である請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記保持期間が0.05時間〜6時間の範囲内である請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
前記保持温度が15℃〜35℃の範囲内である請求項１８に記載の方法。
【請求項２４】
前記混合手段が静止型混合機（static  mixer）である請求項１８に記載の方法。
【請求項２５】
さらに、(f)前記第１の相に活性剤を添加すること、を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２６】
前記求核性化合物が、リスペリドン、9−ヒドロキシリスペリドンおよびそれらの薬学的に許容できる塩からなる群から選ばれる請求項１８に記載の方法。
【請求項２７】
前記溶媒がベンジルアルコールおよび酢酸エチルを含む請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ポリマーが、ポリ（グリコール酸）、ポリ−d,l−乳酸、ポリ−l−乳酸および前述したものの共重合体からなる群から選ばれる請求項１８に記載の方法。
【請求項２９】
前記ポリマーが、100：0〜50：50の乳酸対グリコール酸のモル比を有するポリ（d,l−乳酸−co−グリコール酸）である請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
さらに、(f)前記保持期間の間前記第１の相を混合すること、を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項３１】
前記選択マイクロ粒子ポリマー分子量が、10kD〜185.0kDの範囲内である請求項１８に記載の方法。
【請求項３２】
前記選択マイクロ粒子ポリマー分子量が、10kD〜185.0kDの範囲内である請求項２１に記載の方法。
【請求項３３】
前記選択マイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項１８に記載の方法。
【請求項３４】
前記選択マイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項２１に記載の方法。
【請求項３５】
前記選択マイクロ粒子ポリマー分子量に達するために、前記出発分子量が10%〜50%の量減少する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３６】
前記求核性化合物が活性剤である請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
前記求核性化合物が不活性剤である請求項１に記載の方法。
【請求項３８】
さらに、(e)前記第１の相に活性剤を添加すること、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
さらに、(e)前記第１の相に不活性剤を添加すること、を含む請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
前記求核性化合物が塩基性である請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
前記求核性化合物が活性剤である請求項１８に記載の方法。
【請求項４２】
前記求核性化合物が不活性剤である請求項１８に記載の方法。
【請求項４３】
さらに、(f)前記第１の相に不活性剤を添加すること、を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項４４】
前記求核性化合物が塩基性である請求項１８に記載の方法。
【請求項４５】
前記求核性化合物がナルトレキソンである請求項１に記載の方法。
【請求項４６】
前記求核性化合物がオキシブチニンである請求項１に記載の方法。
【請求項４７】
前記求核性化合物がナルトレキソンである請求項１８に記載の方法。
【請求項４８】
前記求核性化合物がオキシブチニンである請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はマイクロ粒子の調製に関する。より詳しくは、本発明は、選択ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法および装置に関する。
【０００２】
【関連技術】
化合物をマイクロ粒子の形でカプセル化できる様々な方法が知られている。薬物または他の活性剤の持続放出または遅延放出をもたらすために、生物学的活性剤または薬学的活性剤を生物適合性、生分解性の壁形成材料（例えばポリマー）内にカプセル化することが特に有利である。これらの方法において、カプセル化しようとする材料（薬物または他の活性剤）は、一般に、スターラー、攪拌機または他の動的混合技術を用いて、壁形成材料を含有する一以上の溶媒に溶解、分散または乳化される。その後、溶媒はマイクロ粒子から除去され、その後、マイクロ粒子製品が得られる。
【０００３】
マイクロ粒子製品のインビトロ（in vitro）およびインビボ（in vivo）の性能に影響を及ぼす一つの変数は、最終マイクロ粒子製品中のポリマーまたは高分子マトリックス材料の分子量である。分子量は薬物放出特性に影響を及ぼす。ポリマーの分子量はポリマーの生分解速度に影響を及ぼす。活性剤放出の拡散メカニズムに関して、ポリマーは活性剤のすべてがマイクロ粒子から放出されるまで完全な状態でいて、その後分解するべきである。活性剤は、高分子マトリックス材料が生浸食するにつれてマイクロ粒子から放出されることも可能である。高分子材料の適切な選択によって、得られたマイクロ粒子が拡散放出特性と生分解放出特性の両方を示すマイクロ粒子製剤を製造することが可能である。これは多段階（multiphasic）放出パターンを生じるのに有用である。
【０００４】
50%以下のチオリダジン遊離塩基を含有するマイクロカプセルのポリ（D,l-ラクチド）（「DL-PL」）成分の分子量が、製造中、およびマイクロカプセルの溶解速度試験中に減少したとの報告がある（Maulding,H.V. et al., Biodegradable Microcapsules:「Acceleration of Polymeric Excipient Hydrolytic Rate by Incorporation of a Basic Medicament」, Journal of Controlled Release, Volume 3, 1986, pages 103-117を参照すること。以後「Maulding記事」と呼ぶ）。Maulding記事中で報告された結果は、ケトチフェン遊離塩基マイクロカプセル内のDL-PLの分解速度がカプセル化工程を4℃で行った時の方が25℃で行った時より大きかったことを明らかにしている。対照的に、チオリダジン遊離塩基マイクロカプセル内のDL-PLの分解速度は、カプセル化工程を23℃で行った時の方が4℃で行った時より大きかった。これらの結果に基づいて、Maulding記事は、チオリダジン塩基の場合、4℃でマイクロカプセルの調製を行うことによりポリマーの分解を回避することを示唆している。Maulding記事は、最終マイクロ粒子内のポリマーの分子量を便利に制御できる方法を提供してはいない。Maulding記事はまた最終マイクロ粒子製品において選択ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法も提供していない。
【０００５】
従って、最終マイクロ粒子製品中のポリマーまたは高分子マトリックス材料の分子量を制御するマイクロ粒子調製のための改善された方法が当該技術において必要とされている。選択ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法を提供する改善された工程が当該技術において特に必要とされている。本発明は、以下に充分に記載されており、そのような改善された方法に対する当該技術における要求を解決するものである。
【０００６】
【発明の概要】
本発明はマイクロ粒子を調製する方法に関する。本発明は、様々なポリマー分子量のマイクロ粒子製品を同じ分子量の出発材料を用いて製造することを可能にする。本発明は、実質的に同じポリマー分子量を有するマイクロ粒子製品を様々な分子量の出発材料から製造することも可能にする。本発明の一つの態様において、選択マイクロ粒子ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法が提供される。該方法は、
(a)求核性化合物、出発分子量を有するポリマーおよび前記ポリマー用の溶媒を含む第１の相を調製すること；
(b)混合手段の影響下で前記第１の相を第２の相と組み合わせて乳剤を形成させること；
(c)前記乳剤と抽出媒体を組み合わせてマイクロ粒子を形成させること；および、
(d)前記工程(b)の前に、選択マイクロ粒子ポリマー分子量が得られるようにポリマーの出発分子量を減少させることを可能にするのに十分な持続時間の保持期間にわたり保持温度で前記第１の相を維持する工程とを含む。
【０００７】
本発明の別の態様において、マイクロ粒子を調製するもう一つの方法が提供される。該方法は、
(a)出発分子量を有するポリマーを提供すること；
(b)溶媒に前記ポリマーおよび求核性化合物を溶解して第１の相を形成させること；
(c)混合手段の影響下で前記第１の相を第２の相と組み合わせて乳剤を形成させること；
(d)前記乳剤と抽出媒体を組み合わせることによりマイクロ粒子を形成させること；および
(e)前記工程(c)の前に保持期間にわたり保持温度で第１の相を維持することであって、ここにおいて前記保持期間は選択マイクロ粒子ポリマー分子量が得られるように出発分子量が減少するように選択されること、を含む。
【０００８】
本発明の他の態様において、前述した方法は前記第１の相に活性剤を添加することを含む。本発明のなお別の態様において、前述した方法は前記第１の相に不活性剤を添加することを含む。
【０００９】
本発明の別の態様において、保持温度を高め、それよってポリマーの分子量減少を増大させて保持期間の持続時間を短縮する。保持温度は低下させることができ、それよってポリマーの分子量減少を減らして保持期間の持続時間を増やす。
【００１０】
本発明の他の態様は、本発明の方法により調製されたマイクロカプセル化活性剤およびマイクロ粒子を含む。
【００１１】
【特徴および利点】
本発明の特徴は、活性剤を含有するマイクロ粒子を含む、マイクロ粒子を調製するために本発明を使用できることである。
【００１２】
本発明の別の特徴は、本発明が、マイクロ粒子製品における選択ポリマー分子量を得るために、求核性化合物／ポリマー溶液の保持時間および保持温度の変更を可能にすることである。
【００１３】
本発明の利点は、求核性化合物／ポリマー溶液の保持時間を変えることにより、様々な出発分子量を有する様々なポリマーを用いることにより、マイクロ粒子製品において選択ポリマー分子量が得られることである。
【００１４】
本発明の更なる利点は、様々なポリマー分子量のマイクロ粒子製品を、同じ出発ポリマーを用いるか、または同じ出発分子量を有するポリマーを用いて製造することができることである。
【００１５】
添付した図面を用いて本発明を説明する。図面において、類似参照番号は同じ要素か、または機能的に類似の要素を示している。
【００１６】
【好ましい実施形態の詳細な説明】
概要
本発明はマイクロ粒子を調製するための改善された方法を提供する。本発明の方法は、最終マイクロ粒子製品中のポリマーの分子量を制御するためにポリマー溶液の保持時間および保持温度を制御する。このようにして、本発明の方法は、選択ポリマー分子量を様々な出発材料分子量から有利に達成することを可能にする。あるいは、同じ分子量の出発材料を用いて様々なポリマー分子量のマイクロ粒子製品を製造することが可能である。従って、同じ出発材料から一定の範囲の製品を製造することができ、よって最終製品中のポリマーの所望分子量を達成するために最終製品を再製剤化する必要性を排除する。
【００１７】
本発明において用いられるポリマー溶液は求核性化合物を含む。本明細書において用いられる「求核性化合物」とは、様々なラコチド：グリコリド比を含むポリマーなどの生分解性ポリマーの生分解において起きるポリマー分断などのエステル加水分解を、求核性触媒によって促進する化合物を意味する。求核性化合物は、ポリマーのエステル基に対し水酸化物イオンまたは水より効果的な求核性試薬である。ポリマー加水分解を触媒する求核性化合物には、アミンおよびカルボキシレートアニオンが含まれるが、それらに限定されず、そして「活性剤」（以下で定義される）または活性剤でない「不活性剤」であることも可能である。活性剤である求核性化合物の例には、リスペリドン、９−ヒドロキシリスペリドン、および前述したものの薬学的に許容できる塩、ナルトレキソンおよびオキシブチニンが挙げられるが、それらに限定されない。不活性剤である求核性化合物の例には、硫酸プロタミン、スペルミン、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミンおよびトリエタノールアミンが含まれるが、それらに限定されない。本発明がいかなる特定の求核性化合物にも限定されず、本発明が他の求核性活性剤および求核性不活性剤を包含することは、当業者において容易に明らかである。
【００１８】
後述する記載の明確性を確実にするために、以下の定義をする。「マイクロ粒子」または「マイクロスフィア」は、粒子のマトリックスまたは結合剤として作用するポリマーを含む粒子を意味する。マイクロ粒子は、ポリマーマトリックス内に分散または溶解した活性剤または他の物質を含有してもよい。ポリマーは、好ましくは生分解性で生物適合性である。「生分解性」とは、身体によって容易に処分可能な生成物に身体的過程によって分解して、身体内に蓄積しない材料を意味する。生分解の生成物も身体と生物適合性であるべきである。「生物適合性」とは、身体に対して有毒ではないことを意味し、薬学的に許容でき、発癌性でなく、そして身体組織中に重大な炎症を誘発しない。本明細書において用いられる「身体」とは、好ましくは人体を意味するが、身体が非人間の動物身体であってもよい。「重量％」または「％重量」とは、マイクロ粒子の全重量当たりの重量部を意味する。例えば、１０重量％活性剤は、１０重量部活性剤および９０重量部ポリマーを意味する。「制御放出マイクロ粒子」または「持続放出マイクロ粒子」とは、時間の関数として活性剤または他種の物質が放出されるマイクロ粒子を意味する。「質量（mass）中央直径」とは、分布の半分（体積％）が、より大きい直径を有し、半分が、より小さい直径を有する直径を意味する。
【００１９】
「活性剤」とは、薬理的な、しばしば有益な効果を奏する剤、薬物、化合物、組成物またはそれらの混合物を意味する。これは、食品、食品サプリメント、栄養素、薬物、ビタミンおよび他の有益な剤を含む。本明細書において用いられるこの用語は、患者に局所的または全身的作用をもたらす生理学的および薬理学的に活性な如何なる物質をもさらに含む。そのような活性剤には、抗生物質、抗ウイルス剤、抗てんかん薬（anepileptics）、鎮痛剤、抗喘息剤、抗炎症剤および気管支拡張薬が含まれ、末梢神経、アドレナリン受容体、コリン受容体、骨格筋、心臓血管系、平滑筋、血管系、シノプチック部位、神経接合部位、内分泌およびホルモン系、免疫系、生殖系、骨格系、オータコイド系、消化および排泄系、ヒスタミン系および中枢神経系に作用する薬物を含む無機および有機化合物であってもよく、これらに限定されない。好適な剤は、例えば、多糖、ステロイド、催眠薬、鎮痛薬、精神安定剤、抗痙攣薬、筋弛緩剤、抗パーキンソン病薬、鎮痛剤、抗炎症剤、筋収縮剤、抗菌薬、抗マラリア薬、避妊薬を含むホルモン剤、交感神経興奮薬、生理作用を誘発することが可能なポリペプチドおよび蛋白質、利尿薬、脂質調整剤、抗アンドロゲン剤、ロイコトリエン拮抗薬、抗寄生虫剤、腫瘍薬、抗腫瘍薬、血糖降下薬、栄養剤、サプリメント、成長サプリメント、脂肪、眼薬、抗腸炎薬、電解質および診断薬から選択することができる。
【００２０】
【方法および実施例】
本発明を説明し、本発明の実施に用いられる材料および方法を記載するために以下の実施例を提示する。かかる実施例は、本発明に如何なる制限をするものではない。
【００２１】
求核性化合物を用いる分子量実験
実施例１
最終マイクロ粒子製品の分子量と求核性化合物／ポリマー溶液の保持期間の持続との間の関係を実証する一連の実験を1kg規模で行った。リスペリドンを含むマイクロ粒子を1kg規模で調製した。1kgプロセス（400gの活性剤および600gのポリマー）では、40%（400g/1000g、x100%）のマイクロ粒子理論薬物装填率である。
【００２２】
600gのMEDISORB（登録商標）7252DLポリマー（Alkermes,Inc., オハイオ州ブルーアシュ）を酢酸エチルに溶解して、16.7重量%ポリマー溶液を調製した。ベンジルアルコールに400gのリスペリドン（塩基性求核性活性剤）（Janssen Pharmaceutica, ベルギーのBeerse）を溶解することにより24重量%薬物溶液を調製した。前記薬物溶液を前記ポリマー溶液に混合することにより、求核性活性剤／ポリマー溶液（有機相）を調製した。該活性剤／ポリマー溶液を25±5℃の温度に維持した。ポリマーの出発分子量に基づいて最終マイクロ粒子製品における選択された又は所望のポリマー分子量を得るために十分な持続時間の保持期間、活性剤／ポリマー溶液を保持した。分子量損失に及ぼす保持時間の影響を示す実験の結果を、表１および図１に関して、以下により詳細に論じる。
【００２３】
乳化剤として作用する1%ポリビニルアルコール（PVA）の30リットル溶液を調製することにより第２の連続相を調製した。2086gの酢酸エチルをこれに添加して6.5重量%の酢酸エチル溶液を形成させた。
【００２４】
マサツセッチュ州ノースアンドーバのChemineer,Inc.から入手できる1/2インチKenics静止型混合機（Kenics static mixer）などの静止型混合機（static mixer）を用いて前記二相を組み合わせた。3L/分の全流速では、一般に、約80〜90μの範囲内の質量中央直径（MMD）のマイクロ粒子サイズ分布となる。連続相と不連続相との比は５：１（ｖ／ｖ）であった。
【００２５】
冷却液は、5〜10℃の酢酸エチルおよび注入水（WFI）の2.5%溶液であった。冷却液の体積はバッチサイズg当たり0.25Lである。冷却工程は、冷却槽内のマイクロ粒子を攪拌しながら約4時間より長い時間にわたって行われた。
【００２６】
冷却工程の完了後、マイクロ粒子を集め、脱水し乾燥した。温度を約15℃未満で維持した。
【００２７】
その後、25%エタノール溶液を用いてマイクロ粒子を再スラリー槽内で再びスラリーにした。再スラリー槽内の温度は約0℃〜約15℃の範囲内であった。その後、好ましくは25℃±1℃で維持された別の抽出媒体（25%エタノール溶液）で少なくとも6時間にわたり洗浄するためにマイクロ粒子を冷却槽に送り戻した。
【００２８】
マイクロ粒子を集め、脱水し乾燥した。温度を約20℃より高く、しかし40℃未満に加温した。乾燥を約16時間より長い時間にわたり継続した。
【００２９】
上述したプロセスを用いて1Kg規模でリスペリドンマイクロ粒子を24バッチ調製した。以下の表１は、各バッチごとの、ポリマーの出発分子量（kD）、完成マイクロ粒子製品中のポリマーの最終分子量（kD）、ポリマーの分子量の%損失、および活性剤／ポリマー溶液の保持時間（hr）を示している。
【００３０】
【表１】
0004903344.tif 000002
【００３１】
表１で報告されたデータを図１に示すグラフに描いている。図１は、分子量の初期損失が約17%で、活性剤／ポリマー溶液の保持時間1hr当たり約5.7%の追加の損失伴うことを示している。
【００３２】
実施例２
完成マイクロ粒子製品の分子量と、求核性化合物／ポリマー溶液の保持期間の持続時間との間の関係をまた示す付加実験を20kg規模で行った。リスペリドンを含むマイクロ粒子を20kg規模で調製した。20kgプロセス（8kgの活性剤および12kgのポリマー）では、40%（8kg/20kg、x100%）のマイクロ粒子理論薬物装填率である。
【００３３】
酢酸エチルに12kgのMEDISORB（登録商標）7525DLポリマー（Alkermes,Inc., オハイオ州ブルーアシュ）を溶解することにより16.7重量%ポリマー溶液を調製した。ベンジルアルコールに8kgのリスペリドン（Janssen Pharmaceutica, ベルギーのBeerse）を溶解することにより24重量%薬物溶液を調製した。前記薬物溶液を前記ポリマー溶液に混合することにより、求核性活性剤／ポリマー溶液（有機相）を調製した。該活性剤／ポリマー溶液を25±5℃の温度に維持した。ポリマーの出発分子量に基づいて完成マイクロ粒子製品における選択されまたは所望のポリマー分子量を得るために十分な保持期間にわたり活性剤／ポリマー溶液を保持した。分子量損失に及ぼす保持時間の影響を示す実験の結果を表２および図２に関して以下でより詳細に論じる。
【００３４】
乳化剤として作用する1%PVA溶液を600リットル調製することにより第２の連続相を調製した。42gの酢酸エチルをこれに添加して6.5重量%酢酸エチル溶液を生じさせた。マサツセッチュ州ノースアンドーバのChemineer,Inc.から入手できる1インチKenics静止型混合機などの静止型混合機を用い、前記二相を組み合わせた。
【００３５】
冷却液は、5〜10℃の酢酸エチルおよび注入水（WFI）の2.5%溶液であった。冷却液の体積はバッチサイズg当たり0.25Lである。冷却槽内のマイクロ粒子を攪拌しながら、冷却工程を約4時間より長い時間にわたって行った。
【００３６】
冷却工程の完了後、マイクロ粒子を集め、脱水し乾燥した。温度を約15℃未満で維持した。
【００３７】
その後、25%エタノール溶液を用いてマイクロ粒子を再スラリ化槽内で再びスラリ化した。再スラリ化槽内の温度は約0℃〜約15℃の範囲内であった。その後、好ましくは25℃±1℃で維持された別の抽出媒体（25%エタノール溶液）で少なくとも6時間洗浄するためにマイクロ粒子を冷却槽に送り戻した。
【００３８】
マイクロ粒子を集め、脱水し乾燥した。温度を約20℃より高くしかし40℃未満に加温した。乾燥を約16時間より長い時間にわたり継続した。
【００３９】
上述したプロセスを用いて20Kg規模でリスペリドンマイクロ粒子を4バッチ調製した。以下の表２は、各バッチごとの、ポリマーの出発分子量（kD）、完成マイクロ粒子製品中のポリマーの最終分子量（kD）、ポリマーの分子量の%損失、および活性剤／ポリマー溶液の保持時間（hr）を示している。完成マイクロ粒子製品中のポリマーの分子量はGPCによって決定した。
【００４０】
【表２】
0004903344.tif 000003
【００４１】
表２で報告されたデータは、活性剤／ポリマー溶液保持時間における保持期間を変えることにより、比較的一定分子量の出発材料（143kD、145kDおよび146kD）から様々な完成マイクロ粒子製品分子量が得られたことを示している。表２で報告されたデータを図２で示すグラフで描いている。図２は、分子量の初期損失が約16%で、活性剤／ポリマー溶液の保持時間1hr当たり約7.3%の追加の損失伴うことを示している。
【００４２】
実施例３
ポリマーの出発分子量（kD）および完成マイクロ粒子製品中のポリマーの最終分子量（kD）を、求核性化合物ナルトレキソンを含有するマイクロ粒子に関して決定した。出発ポリマーのラクチド：グリコリド比は、75：25、85：15および65：35であった。用いられたポリマーは、MEDISORB（登録商標）7525DLポリマー、MEDISORB（登録商標）8515DLポリマーおよびMEDISORB（登録商標）6535DLポリマーで、すべてオハイオ州ブルーアシュのAlkermes,Inc.から入手できる。
【００４３】
共溶媒抽出プロセスを用いてナルトレキソン塩基マイクロ粒子を製造した。理論バッチサイズは15〜20gであった。ポリマーを酢酸エチルに溶解して16.7%w/wポリマー溶液を生じさせた。ナルトレキソン塩基無水物をベンジルアルコールに溶解して30.0%w/w溶液を生じさせた。種々のバッチにおいて、30%〜75%の範囲で異なる理論薬物装填率を有するマイクロ粒子を生じさせるために、用いる薬物とポリマーの量が変えられた。単一均質溶液（有機相）が生じるまで周囲ポリマーおよび薬物溶液を合わせて混合した。水相は周囲条件で、1%w/wポリビニルアルコールおよび飽和量の酢酸エチルを含有していた。これら２つの溶液を、1/4インチインラインミキサーを通して、3：1（水相：有機相）の比で容積式ポンプを介してポンプで送り、乳剤を形成させた。5〜10℃および理論マイクロ粒子1g当たり0.5Lの抽出溶液の体積で、蒸留水に溶解した酢酸エチル2.5w/w%からなる攪拌溶媒抽出溶液に、前記乳剤を移送した。ポリマーと薬物溶液とを、乳剤小滴から抽出溶液に抽出してマイクロ粒子を生じさせた。初期抽出プロセスは2〜4時間の範囲であった。マイクロ粒子を25μmシーブ上に集め、冷（＜5℃）25 % w/wエタノール溶液ですすいだ。窒素を用いて前記マイクロ粒子を一晩（約17時間）冷却乾燥した。その後、5〜10℃で激しく攪拌している25%w/wエタノール溶液からなる再スラリ化溶液に前記マイクロ粒子を移送した。短時間の混合（5〜15分）後に、再スラリ化溶液およびマイクロ粒子を、攪拌している25%w/wエタノール二次抽出溶液（約25℃、マイクロ粒子理論グラム当たり0.2Lの二次抽出溶液の体積で）に移した。マイクロ粒子を6時間にわたり攪拌し、マイクロ粒子からの追加の溶媒除去が可能でとなった。その後、前記マイクロ粒子を25μmシーブ上に集め、室温にて25%w/wエタノール溶液ですすいだ。これらのマイクロ粒子を、周囲条件下で一晩（約17時間）フード内で乾燥し、篩って凝集マイクロ粒子を除去し、その後貯蔵のため冷凍機に入れた。
【００４４】
表３で以下に示されるように、75：25ポリマーを用いて3バッチのマイクロ粒子を調製し、85：15ポリマーに関して2バッチ、63：35ポリマーに関して4バッチを調製した。表３は、ポリマーの出発分子量（kD）、完成マイクロ粒子製品中のポリマーの最終分子量（kD）、およびポリマーの分子量の損失%をバッチごとに示している。完成マイクロ粒子製品中のポリマーの分子量はGPCによって決定した。表３のデータは、様々なラクチド：グリコリド比を有するポリマーのための求核性化合物（ナルトレキソン）を含有する完成マイクロ粒子製品中のポリマーの分子量の損失の例を示している。
【００４５】
【表３】
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【００４６】
実施例４
最終マイクロ粒子製品の分子量と求核性化合物／ポリマー溶液の保持期間の持続時間との間の関係をこれも実証する別の実験を他のポリマーで行った。異なるラクチド：グリコリド比を有する別のポリマーを含むマイクロ粒子を調製した。65：35、85：15および100：0のラクチド：グリコリド比を有するポリマーを用いる、リスペリドンを含むマイクロ粒子を、実施例１で上述したのと同じ工程を用いて1Kg規模で調製した。用いられたポリマーは、MEDISORB（登録商標）6535DLポリマー、MEDISORB（登録商標）8515DLポリマーおよびMEDISORB（登録商標）100DLポリマーで、すべてオハイオ州ブルーアシュのAlkermes,Inc.から入手できる。
【００４７】
以下の表４は、ポリマーの出発分子量（kD）、最終マイクロ粒子製品中のポリマーの最終分子量（kD）、ポリマーの分子量の%損失、および活性剤／ポリマー溶液の保持時間（hr）をバッチごとに示している。最終マイクロ粒子製品中のポリマーの分子量はGPCによって決定した。
【００４８】
【表４】
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【００４９】
表４で報告されるデータは、ほぼ同じ分子量（96kDと98kD）を有するマイクロ粒子製品を、二つの異なるラクチド：グリコリド比（それぞれ85：15と100：0）を有する二つの異なる分子量のポリマー（それぞれ112kDと105kD）から調製することができることを示している。従って、本発明により、同一のポリマー分子量を有するマイクロ粒子製品を二つの異なる出発材料を用いて有利に製造することができる。
【００５０】
実施例５
時間の関数として求核性化合物（オキシブチニン）の存在下でポリマーの分子量損失を実証する付加実験を行った。試験は、100：0ラクチド：グリコリドポリマーおよび固有粘度が異なる二つの75：25ラクチド：グリコリドポリマーを用いて行われた。試験ごとに、以下のプロトコルで行われた。約6gのポリマーをエルレンマイヤーフラスコに秤量する。44gの酢酸エチルを前記ポリマーに添加し、超音波処理し振とうしてポリマーを溶解させる。1.5gのオキシブチニン塩基を秤量する。前記ポリマー溶液を攪拌し、薬物を添加する。薬物を添加する時にタイマーをスタートさせる。溶液を攪拌しながら、アリコート（aliquot）ごとに元の体積の約1/3を取ることにより、1分、5分および15分で薬物／ポリマー溶液をサンプリングする。前記アリコートを250mLの50：50 H2O：MeOHに小分けし、攪拌する。この混合物からポリマーが沈殿し、該沈殿物から薬物を除去する。沈殿ポリマーを沈殿させ、上澄み液を移す。ポリマー残渣を100mLのMeOHで洗浄し、約1分攪拌し、250mLまでH2Oを加える。ポリマーを再び沈殿させ、操作を繰り返す。その後、残渣をビーカーから除去し、シンチレーションバイアルに入れ、凍結させる。一旦すべてのサンプルを集め凝固させ、すべてのサンプルを凍結乾燥機に置き、−10℃に冷却する。凍結乾燥機を起動し、一旦安定な真空が達成されると、棚温度を15℃に上げ、一晩（18時間まで）保持して残留溶媒を除く。
【００５１】
これらの実験の結果を表５に示している。各実験ごとに、薬物／ポリマー溶液中で求核性化合物にポリマーを1分、5分および15分露出した時のポリマー分子量と一緒に、ポリマーの出発分子量を示している。表５で分かるように、薬物／ポリマー溶液の露出時間または保持時間が長ければ長いほど、ポリマーの分子量が低下する。
【００５２】
【表５】
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【００５３】
分子量温度実験
実施例６
完成マイクロ粒子製品の分子量と求核性化合物／ポリマー溶液の保持期間の持続との間の関係への、温度の影響を決定するため、付加実験を行った。275gのベンジルアルコールに50gのリスペリドン（Janssen Pharmaceutica, ベルギーのBeerse）を溶解して薬物溶液を生じさせた。酢酸エチルに75gのMEDISORB（登録商標）7525DLポリマー（Alkermes,Inc., オハイオ州ブルーアシュ）を溶解することによりポリマー溶液を生じさせた。ポリマーの出発分子量は146kDであった。前記薬物溶液と前記ポリマー溶液を混合して、組み合わせ溶液を生じさせた。前記組み合わせ溶液のフラスコを各々15℃、25℃および35℃のチャンバに入れた。周期的時間間隔で、シリンジと針を介して各々のチャンバのフラスコから、前記組み合わせ溶液10ccを抜き取った。その後、10ccのサンプルを、室温（約20℃）200mlのメタノールを含む浴内で沈殿させた。高分子沈殿物をメタノール浴から回収し、一晩真空で乾燥させた。該乾燥サンプルをGPCにより分子量の試験に付した。
【００５４】
前記実験の結果を図３のグラフに描いている。図３に示されるように、分子量減少は温度上昇につれて増大する。従って、ポリマーおよび求核性化合物を含有する溶液の保持温度を高めることにより、ポリマーの分子量減少が増大し、特定の分子量減少が得られる保持期間の持続が短縮される。同様に、ポリマーおよび求核性化合物を含有する溶液の保持温度を低下させることにより、ポリマーの分子量減少が減少し、特定の分子量減少が得られる保持期間の持続が増加する。例えば、分子量を130kDから110kDに減少させるために必要な時間は、35℃で最短（約5時間）であり、15℃で最長（約15時間）である。
【００５５】
図３はポリマー分子量の初期増加を示している。この現象は、ポリマーのある部分、特により低い分子量の部分が抽出媒体に可溶であるので非常に起きやすい。分子量の分析測定は存在するすべての分子量部分の表出であり、低分子量材料の除去（溶解）は、測定分子量を増加させうる。
【００５６】
マイクロ粒子を調製する方法
実施例７
上述した実施例によって例示されたように、本発明による選択マイクロ粒子ポリマー分子量を有するマイクロ粒子を調製する方法をここでより詳細に説明する。本発明の一実施形態において、求核性化合物、出発分子量を有するポリマーおよびポリマー用の溶媒を含む第１の相を調製する。本発明の一実施形態において、第１の溶媒に求核性活性剤を溶解して活性剤溶液を生じさせることにより前記第１の相を調製する。前記ポリマーを第２の溶媒に溶解してポリマー溶液を生じさせる。前記活性剤溶液と前記ポリマー溶液を混合して前記第１の相を生じさせる。特に好ましい実施形態において、活性剤は、リスペリドン、９−ヒドロキシリスペリドンおよびそれらの薬学的に許容できる塩からなる群から選択される。こうした実施形態において、好ましい第１の溶媒はベンジルアルコールであり、好ましい第２の溶媒は酢酸エチルである。
【００５７】
本発明のもう一つの実施形態において、溶媒に求核性化合物およびポリマーを溶解して溶液を生じさせることにより、第１の相を調製する。なお別の実施形態において、活性剤を第１の相に添加する。別の実施形態において、不活性剤を第１の相に添加する。第１の相を調製する特定の方法またはプロセスに本発明が全く限定されないことが理解されるべきであり、適する他のプロセスは当業者に対して容易に明らかであろう。
【００５８】
第２の相を調製し、混合手段の影響下で前記第１の相と組み合わせて、乳剤を生じさせる。好ましい実施形態において、前記二相を組み合わせて乳剤を生じさせるために静止型混合機を用いる。静止型混合機を用いて乳剤を生じさせるプロセスは、例えば、米国特許第5,654,008号に記載されており、その特許の全体は本明細書に引用により援用される。乳化液小滴から溶媒を抽出する抽出媒体と乳化液とを組み合わせ、それによって乳化液小滴をマイクロ粒子に入れて固化させる。
【００５９】
前記第１および第２の相を組み合わせる前に、前記第１の相を保持温度で保持期間にわたり維持する。保持期間は、保持温度でポリマーの出発分子量を選択マイクロ粒子ポリマー分子量に減少させることを可能にするのに十分な期間である。本明細書において提供された教示と実施例および当業者の知識に基づいて、適する保持温度および保持期間の決定は当業者の日常的技量内であり、過度な実験を要しない。本発明の好ましい実施形態において、ポリマーの出発分子量は、選択ポリマー分子量に達するために約10〜約50%減少する。しかし、本発明がかような%減少に限定されないことは当業者によって理解されるべきである。
【００６０】
保持期間中に、前記第１の相を混合し、攪拌し、または別様にかき回してもよい。あるいは、保持期間中に、前記第１の相は、混合、攪拌またはかき回しに供されなくてもよい。保持温度は、好ましくは約15℃〜約35℃の範囲内で、より好ましくは約25℃である。
【００６１】
本発明にかかるマイクロ粒子を調製する別の方法をここで説明する。出発分子量を有するポリマーおよび求核性化合物を溶媒に溶解して、第１の相を生じさせる。活性剤および／または不活性剤を第１の相に添加することができる。前記第１の相を混合手段の影響下で第２の相と組み合わせて、乳剤を生じさせる。溶媒を抽出する抽出媒体と前記乳剤とを組み合わせ、よって乳化液小滴をマイクロ粒子に入れて固化させる。前記第１および第２の相を組み合わせる前に、前記第１の相を保持温度で保持期間維持する。ポリマーの出発分子量が選択マイクロ粒子ポリマー分子量に保持温度で減少するように、保持期間を選択する。上述した方法で保持温度を変えることにより保持期間の持続時間を調節することが可能である。
【００６２】
本発明のマイクロ粒子
本発明の方法により調製されたマイクロ粒子は、好ましくは高分子結合剤を含む。適する高分子結合剤材料には、ポリ（グリコール酸）、ポリ−d,l−乳酸、ポリ−l−乳酸、前述したものの共重合体、ポリ（脂肪族カルボン酸）、コポリオキサレート、ポリカプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリ（オルトカーボネート）、ポリ（アセタール）、ポリ（乳酸−カプロラクトン）、ポリオルトエステル、ポリ（グリコール酸−カプロラクトン）、ポリ酸無水物（anhydride）およびポリホスファジンが含まれる。ポリ（d,l−乳酸−co−グリコール酸）は、Alkermes,Inc.（オハイオ州ブルーアシュ）から市販されている。Alkermes,Inc.から市販されている適する製品は、MEDISORB（登録商標）5050DLとして知られている50:50ポリ（d,l−乳酸−co−グリコール酸）である。この製品は、50%ラクチドおよび50%グリコリドのモル%組成を有する。他の適する市販製品は、MEDISORB（登録商標）6535DL、7525DL、8515DLおよびポリ（d,l−乳酸）（100DL）である。ポリ（ラクチド−co−グリコリド）もBoehringer Ingelheim（ドイツ）から、Resomer（登録商標）マーク、例えば、PLGA50：50（Resomer（登録商標）RG502）、PLGA75：25（Resomer（登録商標）RG752）およびd,l−PLA（Resomer（登録商標）RG206）で、ならびにBirmingham Polymers（アラバマ州バーミンガム）から、市販されている。これらの共重合体は、広範囲の分子量および乳酸対グリコール酸の比で入手できる。
【００６３】
本発明による調製のために適するマイクロ粒子の一つの種類は、生分解性である持続放出マイクロ粒子である。しかし、本発明が生分解性または他の種類の持続放出マイクロ粒子に限定されないことが当業者によって理解されるべきである。当業者に対して明らかであろうように、生分解性マイクロ粒子のための高分子結合剤材料の分子量は多少重要である。分子量は、満足のいくポリマー被膜の形成を可能にするのに十分高いのがよい。すなわち、ポリマーは良好な膜形成材料であるのがよい。しかし、膜の特性が用いられる特定の高分子結合剤材料に応じてもある程度決まるので、すべてのポリマーのために適切な分子量範囲を規定することは非常に難しい。ポリマーの分子量は、ポリマーの生分解速度に及ぼす影響の観点からも重要である。薬物放出の拡散メカニズムに関して、ポリマーは薬物のすべてがマイクロ粒子から放出されるまで無傷のままであり、その後分解するべきである。薬物は、高分子結合剤が生分解するにつれてマイクロ粒子から放出されることも可能である。高分子材料の適切な選択によって、得られたマイクロ粒子が拡散放出特性と生分解放出特性の両方を示すマイクロ粒子製剤化を行うことが可能である。これは、多重放出パターンにより有用である。ポリマーの満足な出発分子量は、5〜500kDの範囲内、好ましくは約50kD〜約250kDの範囲内である。マイクロ粒子ポリマーの分子量は、好ましくは約10kD〜約185kDの範囲内である。
【００６４】
本発明により調製されるマイクロ粒子は、活性剤、またはマイクロ粒子からホストに放出される他種の物質を含んでいてもよい。しかし、本発明が活性剤を含有するマイクロ粒子の調製に限定されないことが理解されるべきである。活性剤は求核性化合物であることが可能である。あるいは、活性剤は求核性化合物でなく、形成プロセス中にマイクロ粒子に添加される。こうした活性剤には、1,2−ベンザゾール、特に3−ピペリジニル−置換1,2−ベンズイソキサゾールおよび1,2−ベンズイソチアゾールが含まれる。この種の最も好ましい活性剤は、3−[2−[4−(6−フルオロ−1,2−ベンズイソキサゾール−3−イル）−1−ピペリジニル]エチル]−6,7,8,9−テトラヒドロ−2−メチル−4H−ピリド[1,2−a]ピリミジン−4−オン（「リスペリドン」）および3−[2−[4−(6−フルオロ−1,2−ベンズイソキサゾール−3−イル)−1−ピペリジニル]エチル]−6,7,8,9−テトラヒドロ−9−ヒドロキシ−2−メチル−4H−ピリド[1,2−a]ピリミジン−4−オン（「9−ヒドロキシリスペリドン」）ならびにそれらの薬学的に許容できる塩である。リスペリドン（本明細書において用いられるこの用語は、その薬学的に許容できる塩を含むように意図される）は最も好ましい。リスペリドンは、米国特許第4,804,663号の教示により調製することが可能であり、その特許の全体は本明細書に引用して援用される。9−ヒドロキシリスペリドンは、米国特許第5,158,952号の教示により調製することが可能であり、その特許の全体は本明細書に引用して援用される。
【００６５】
他の生物学的活性剤には、非ステロイド系避妊薬；副交感神経興奮薬；精神治療薬；精神安定剤；鬱血除去薬；催眠鎮静薬；ステロイド；スルホンアミド；交換神経興奮薬；ワクチン；ビタミン；抗マラリア薬；抗偏頭痛薬；L−ドーパなどの抗パーキンソン病薬；抗痙攣薬；抗コリン作動薬（例えばオキシブチニン）；鎮咳薬；気管支拡張薬；冠血管拡張薬およびニトログリセリンなどの心臓血管薬；アルカロイド；鎮痛薬；コデイン、ジヒドロコジエノン、メペリジン、モルヒネなどの麻酔薬；サリチル酸塩、アスピリン、アセトアミノフェン、d−プロポキシフェンなどの非麻酔薬；ナルトレキソンおよびナロキソンなどのオピオイド受容体拮抗薬；ゲンタマイシン、テトラサイクリンおよびペニシリンなどの抗生物質；抗癌剤；抗痙攣薬；抗催吐薬；抗ヒスタミン薬；ホルモン薬、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、非ホルモン薬、アロプリノール、インドメタシンおよびフェニルブタゾンなどの抗炎症薬；プロスタグラジンおよび抗癌剤（cytotoxic drug）が挙げられる。
【００６６】
なお他の適する活性剤には、エストロゲン；抗菌剤；抗真菌剤；抗ウイルス薬；凝固阻止薬；抗痙攣剤；抗鬱薬；抗ヒスタミン薬および免疫薬が挙げられる。
【００６７】
適する生物学的活性剤の他の例には、ペプチドおよび蛋白質、類縁体、突然変異体、およびそれらの活性フラグメント、例えば、免疫グロブリン、抗体、サイトカイン（例えば、リンフォカイン、モノカイン、ケモカイン）、血液凝固因子、造血因子、インターロイキン（IL−2、IL−3、IL−4、IL−6）、インターフェロン（β−IFN、α−IFNおよびγ−IFN）、赤血球造成因子（erythropoietin）、ヌクレアーゼ、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子（例えば、GCSF、GM−CSF、MCSF）、インスリン、酵素（例えば、スーパーオキシドジスムターゼ、組織プラスミノーゲン活性化因子）、腫瘍サプレッサー、血液蛋白質、ホルモンおよびホルモン類縁体（例えば、成長ホルモン、副腎皮質ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（LHRH））、ワクチン（例えば、腫瘍性、細菌性およびウイルス性抗原）；ソマトスタチン；抗原；血液凝固因子；成長因子（例えば、神経成長因子、インスリン様成長因子）；蛋白質阻害剤、蛋白質拮抗薬および蛋白質作動薬；アンチセンス分子などの核酸；オリゴヌクレオチド；およびリボザイムが挙げられる。本発明において用いるために適する小分子量薬剤には、塩酸ブレオマイシン、カルボプラチン、メトトレキセートおよびアドリアマイシンなどの抗腫瘍剤；解熱剤および鎮痛薬；塩酸エフェドリン、塩酸メチルエフェドリン、塩酸ノスカピン、リン酸コデインなどの鎮咳剤および去痰剤；塩酸クロルプロマジン、塩酸プロクロルペラジンおよび硫酸アトピンなどの鎮痛薬；塩化ツボクラリンなどの筋肉弛緩剤；フェニトインナトリウム塩およびエトスクシミドなどの抗てんかん薬；メトクロパミドなどの抗潰瘍薬；クロミプラミンなどの抗鬱剤；ジフェンヒドラミンなどの抗アレルギー薬；テオフィロールなどの強心薬；塩酸プロパノロールなどの抗不整脈薬；塩酸ジルチアゼムおよび硫酸バメタンなどの血管拡張薬；ペントリニウムおよび塩酸エカラジンなどの降圧利尿薬；メトホルミンなどの抗利尿薬；クエン酸ナトリウムおよびヘパリンなどの抗凝固剤；トロンビン、メナジオン重亜硫酸ナトリウムおよびアセトメナフトンなどの止血剤；イソニアジドおよびエタンブトールなどの抗結核薬；リン酸プレドニゾロンナトリウムおよびメチマゾールなどのホルモンが挙げられる。
【００６８】
サイズによってまたは種類によってマイクロ粒子を混合することができる。しかし、本発明が活性剤を含有する生分解性マイクロ粒子または他の種類のマイクロ粒子の使用に限定されないことが理解されるべきである。一実施形態において、多段階式にホストに活性剤を届ける方式、および／またはホストに異なる時間に異なる活性剤を、もしくは同時に活性剤の混合物を、提供する方式で、マイクロ粒子は混合される。例えば、マイクロ粒子形態または従来の非カプセル化形態のいずれかを取った第二の抗生物質、ワクチン、または所望のあらゆる活性剤を、第一の活性剤と混合することが可能であり、ホストに提供することができる。
【００６９】
装置
図４を今参照すると、本発明によるマイクロ粒子の調製に際して用いるために適する装置構成の一実施形態が示されている。本発明の好ましい実施形態において、270で一般的に示された破線境界内に含まれた装置は、「スチームイン・プレース（steam-in-place）」（SIP）工程を用いて滅菌される。
【００７０】
第１の相201が提供される。第１の相201は、好ましくは、一以上の溶媒に溶解したポリマーと、活性剤とを含む不連続相である。前記活性剤は、ポリマーを溶解している溶媒と同じかまたは異なる溶媒に溶解または分散されうる。第２の相202は、好ましくは連続処理媒体として水を含む連続相である。好ましくは、微小滴が凝集しないようにするとともに乳剤中の微小滴のサイズを制御するために、界面活性剤または親水性コロイドなどの乳化剤が連続相に添加される。界面活性剤または親水性コロイドとして使用できる化合物の例には、ポリ（ビニルアルコール）（PVA）、カルボキシメチルセルロース、ゼラチン、ポリ（ビニルピロリドン）、Tween80およびTween20などが挙げられるが、それらに限定されない。連続相中の界面活性剤または親水性コロイドの濃度は、界面活性剤、親水性コロイド、不連続相および用いられる連続処理媒体に応じて,連続処理媒体に基づき約0.1重量%〜約10重量%である。好ましい連続相は、0.1〜10重量%、より好ましくは0.5〜2重量%のPVA水溶液である。絶対に必要とは限らないけれども、不連続相を形成する溶媒の少なくとも一の溶媒で連続相を飽和させることが好ましい。
【００７１】
第１の相201および第２の相202を混合手段の影響下で組み合わせて、乳剤を生じさせる。混合手段の好ましい種類は静止型混合機（static mixer）210である。本発明で用いるために適する他の混合手段には、ホモジナイザー、プロペラ、インペラおよびスターラーなどの、前記第１および第２の相を機械的にかき混ぜる装置が含まれるが、それらに限定されない。
【００７２】
好ましくは、不連続および連続な相201および202は、静止型混合機210を通してポンプで送られて乳剤を形成し、そして大容量の冷却液に送られて、高分子マトリックス材料中にカプセル化された活性剤を含有するマイクロ粒子を得る。ポンプ203は第１の相201を静止型混合機210に送り、ポンプ204は第２の相202を静止型混合機210に送る。本発明の工程において静止型混合機を用いる特に好ましい混合方法は、米国特許第5,654,008号において開示されており、その特許の全体は本明細書に引用して援用する。
【００７３】
第１および第２の相201および202を静止型混合機210で混合して、乳剤を生じさせる。生成した前記乳剤は、ポリマーマトリックス材料中にカプセル化された活性剤を含有するマイクロ粒子を含む。その後、マイクロ粒子は、好ましくは、殆どの溶媒をマイクロ粒子から除去するために、冷却液を含む冷却槽または抽出槽220内で攪拌されて、結果、固化したマイクロ粒子を形成する。静止型混合機210からマイクロ粒子が移動し、冷却槽220に入った後、連続処理媒体は希釈され、マイクロ粒子中の溶媒の多くは抽出によって除去される。この抽出冷却工程において、親水性コロイドまたは界面活性剤を伴って、または伴わないでマイクロ粒子を乳化中に用いられた同じ連続相（第２の相202）中で、あるいはもう一つの冷却液中で懸濁させることができる。冷却液は、マイクロ粒子から溶媒のかなりの部分を除去するが、マイクロ粒子を溶解しない。抽出冷却工程中に、溶解した溶媒を含有する冷却液を任意に除去することが可能であるか、あるいは新鮮冷却液で置き換えることができる。
【００７４】
冷却槽220内での冷却工程が完了すると、マイクロ粒子は、マイクロ粒子収集装置、脱水装置および乾燥装置として機能する装置230にポンプ224によって移送される。
【００７５】
装置230は振動篩または振動スクリーンを含む。振動は、より大きな粒子を保持しつつ、より小さい粒子および液体をスクリーンを通して落下させる。スクリーンを通して落下する、前記小さい粒子および液体は、廃物235として除去される。装置230は、真空ライン237の使用を通して真空乾燥機としても機能する。マイクロ粒子は、振動エネルギーによって、および少量の乾燥気流、好ましくは乾燥窒素（N2）流236によって、流動化される。
【００７６】
乾燥させたマイクロ粒子は、洗浄工程を行うためにもう一つの抽出媒体に移送される。洗浄工程は、好ましくは、マイクロ粒子のガラス転移温度（Tg）より高い温度を有する抽出媒体222を用いて、冷却槽220内で行われる。前記洗浄工程を行うために、マイクロ粒子は、経路231により示されてるように、最初に再スラリ化槽または他の型の容器240に導入される。容器240内で用いられる抽出媒体242の温度はマイクロ粒子のTgより低い。
【００７７】
洗浄工程が冷却槽220内で完了した後、マイクロ粒子は、脱水および最終乾燥のためにポンプ224を介して装置230に再び移送される。最終乾燥の完了時に、マイクロ粒子は、経路232によって示されているように、上述した方式で装置230からシフター250に排出される。シフター250は、バイアルに充填するため、そしてバルクイン・プロセス試験（例えば、外観（aspect）、活性剤含有量、残留溶媒、in vitro放出、および粒子サイズ分布）のためにサイズによってマイクロ粒子を分別するために用いられる。
【００７８】
結論
本発明の種々の実施形態を上で説明してきた一方で、限定でなく例のみとして実施形態を提示してきたことが理解されるべきである。本発明は、制御放出マイクロ粒子または活性剤を含有するマイクロ粒子の調製に限定されず、特定の活性剤、ポリマー、溶媒に限定されず、本発明は特定の規模にもバッチサイズにも限定されない。従って、本発明の幅および範囲は、上述した例示的な実施形態のどれによっても限定されるべきでなくて、以下の請求の範囲および請求の範囲の均等物によってのみ定義されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【図１】1kg規模で溶液保持時間（hr）の関数としての分子量損失%のグラフを示す。
【図２】20kg規模で溶液保持時間（hr）の関数としての分子量損失%のグラフを示す。
【図３】15℃、25℃および35℃で溶液保持時間（hr）の関数としての分子量（kD）のグラフを示す。
【図４】本発明にかかるマイクロ粒子を調製するために適する装置構成の一実施形態を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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