(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）の死菌体とキトサンとを有効成分として含有することを特徴とする家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤。
【請求項２】
エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）がエンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）ＥＣ−１２（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０２８４）であることを特徴とする請求項１記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤。
【請求項３】
大腸菌が、浮腫病を引き起こす大腸菌、又は腸管毒血症性大腸菌（Enterotoxemic Escherichia coli）であることを特徴とする請求項１又は２記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤。
【請求項４】
死菌体が、加熱処理死菌体であることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤。
【請求項５】
エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）の死菌体とキトサンとを有効成分として含有する組成物を、家畜・家禽類又は魚介類に経口投与することを特徴とする家畜・家禽又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法。
【請求項６】
エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）がエンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）ＥＣ−１２（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０２８４）であることを特徴とする請求項５記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法。
【請求項７】
死菌体が、加熱処理死菌体であることを特徴とする請求項５又は６記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法。
【請求項８】
大腸菌が、浮腫病を引き起こす大腸菌、又は腸管毒血症性大腸菌（Enterotoxemic Escherichia coli）であることを特徴とする請求項５〜７のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法。
【請求項９】
授乳期の母豚及び離乳期前後の子豚に経口投与することを特徴とする請求項５〜８のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとの併用物を有効成分とする、家畜・家禽類又は魚介類の感染防除剤及びその感染防除方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、乳酸菌を含む家畜の治療薬として、家畜の成長促進あるいは下痢の予防治療薬に、生菌であるラクトバチルス・アシドフィラスおよびストレプトコッカス・フエカリスを含有してなる家畜用薬剤が知られている（例えば、特開昭５１−１０６７２５号公報参照）。また、豚、牛等の家畜の下痢や軟便症状を回復させると共に、毛づやを良くして順調な発育を得ることができるようにするために、ビフィズス菌等の生菌剤１ｇに対し、塩化ナトリウム２〜１２ｇ、塩化カリウム１〜１０ｇ、重炭酸ナトリウム２〜１８ｇ、ブドウ糖１０〜８０ｇ、グリシン５〜３０ｇの割合で含有させる家畜用混合飼料や（例えば、特開平３−６１４５２号公報参照）、ビフィズス菌、乳酸菌、又は酵母の菌体処理物を含有する犬特有の感染症の予防・治療用ドッグフードが知られている（例えば、特開２００１−３０９７５３号公報参照）。【０００３】
さらに、乳酸菌であるエンテロコッカス属に属する菌体の利用として、カンジダ菌等の感染防御剤（例えば、特開平０５−９７６８９号参照）や免疫賦活剤（例えば、特開平８−９９８８７号公報、特開平１１−９２３８９号公報参照）が知られており、Enterococcus faecalis AD101菌株の死菌体を主成分とする免疫調整剤も知られている（例えば、特開２００１−４８７９６号公報参照）。【０００４】
一方、消化管等への薬理作用を有する乳酸菌含有組成物として、該乳酸菌の消化管への付着性を向上させるため塩基性高分子物質であるキトサンを用いることが知られており（例えば、ＷＯ９９／６４０２３号パンフレット参照）、薬理作用を有する乳酸菌を含有し、摂取又は投与された乳酸菌含有組成物が、消化管及び／又は泌尿生殖器から排出されることに抗して当該薬理作用を増大させるためには、消化管及び／又は泌尿生殖器に長期間滞留せしめることが有効であること、そのためには、消化管及び／又は泌尿生殖器への乳酸菌の付着性を向上させることが有効である旨説明され、用いる乳酸菌が生菌であることが明らかにされている。しかしながら、乳酸菌の生菌を用いる方法は調製及びその保存が必ずしも容易ではなく、このため価格を含め広く一般化するには至らなかった。【０００５】
また、キチン及び／又はキトサンと乳酸菌の生菌や酵素やアミノ酸を含有する動物用栄養組成物を動物に給餌することによって、飼育動物の耐感染症を強化し、しかも人間への影響が少ない飼料をつくるための動物栄養組成物（例えば、特開平１１−０３２６９５号公報参照）や、ビタミン，カルシウム，シソ抽出物，バラ抽出物，アガリスク，プロポリス，グルコサミン，コンドロイチン，乳酸菌，イチョウ葉，ＤＨＡ，ガルシニアキチンキトサン，カモミール，米胚芽醗酵物（ＳＯＤ），ポリフェノールのうちの１種または複数種を選択した健康補助素材と嗜好素材とを粒状にし、それらを個包装にしたペット用栄養補助食（乳酸菌とオリゴ糖との相乗効果が特記されている特開２００３−０３８１０３号公報参照）の他、乳酸菌とキトサンを含む健康食品・健康補助食品が数多く報告（例えば、特開２００２−３１５５３６号公報、特開平０９−２７８６７４号公報参照）されているが、これらは例外なく乳酸菌の生菌体が用いられており、乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとを有効成分とする家畜・家禽又は魚の感染防除剤、同じく乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとを有効成分とする感染防除方法は知られていなかった。【０００６】
ところで、豚の大腸菌症は、原因菌や発病機序により大腸菌性下痢、大腸菌性腸管毒血症及び大腸菌性敗血症に大別され、下痢、敗血症は新生期に多発し、下痢は特定の血清型に属する毒素原生大腸菌の感染が主因であり、腸管毒血症は離乳期（４〜１２週齢）に発生し、原因菌は腸管毒血症大腸菌Enterotoxemic Escherichia coli（ETEEC）と総称され、毒血症はETEECの小腸内定着とその結果産生された毒素が吸収され、標的組織に障害を引き起こすことにより発病することや、浮腫病Edema disease（ED）は大腸菌性腸管毒血症の典型であり、原因菌は特定の血清型に属し、Vero毒素産生性大腸菌（VTEC）の範疇に含まれ、浮腫病（ED）は散発的に発生することが多いが、時には小規模な集団発生を起こすことや、まれに２〜３週齢の哺乳豚、あるいは成豚にも発生し、成豚は離乳豚よりも慢性の経過をとり、発生の特徴は、豚群の中の数等が突発的に発病し、短期間（４〜１５日間）で終息することであるが、同一農場で再発を繰り返すこともあり、発病率は、１０〜４０％であるが、死亡率は５０〜９０％と高く、発生は１つの血清型菌の感染によることが多いが、時には複数の菌型による感染もあることや、浮腫病（ED）原因菌の血清型（Ｏ１３９、Ｏ１４１）は各国とも共通しており、実験的にはＯ１３９の１０５個を３日間経口投与する事で発症し、通常、伝播は糞便、エロゾール、汚染飼料などを介して起こり、農場の汚染は長期に及ぶことが知られている（例えば、「臨床と微生物」 Vol.23, 843-849, 1996参照）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
家畜・家禽等の細菌性下痢や肺炎等の罹患により成長の停止・遅延・死亡等は酪農家、養鶏者にとって大きな問題である。特に分娩後・離乳後の幼畜では細菌性下痢症や肺炎が多発し死に至る例が多い。これらの罹患により発育遅延に陥る例も多く、経済的損失も大きい。従来、家畜・家禽又は魚の病原菌等の感染に抗生物質や合成抗菌剤が使用されてきたが、生産コストの増大につながり、またそれらの病気の予防としても用いられているが、作業性、コスト等の面において問題があり、更に耐性菌が生じ薬効を奏さなくなる欠点があった。そのため、感染症の予防・治療のため、効果・作業性・コスト等の問題のない、家畜・家禽類及び魚介類の感染症防除剤が切望されていた。本発明の課題は、抗生物質や合成抗菌剤に頼ることなく、したがって、耐性菌が発生することもなく、且つ安全で、コスト面でも経済的な、家畜・家禽類及び魚介類に適用する感染防除剤及び感染防除方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
家畜のうちでも特に食肉として、近年需要性が高い豚において、その飼育中、特に子豚の離乳期前後に感染症が発生しやすく、その結果、子豚は死に至ることが多い。その感染症は、大腸菌のうちある種の毒素（ベロ毒素ＶＴ２ｖｐ１(ＶＴｅ)）を産生する菌により引き起こされる疾病である。この疾病は離乳後の子豚、即ち約３５〜６０日齢の子豚でみられることが多く、発生農場では子豚の１０〜４０％が発病するといわれている。本発明者らは、このような豚の飼育期間において、離乳期前後の子豚に高い確率で罹患する浮腫病に着目し、その予防及び治療について鋭意研究の結果、意外にも乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンを併用して投与すると、その感染病に対し、それらを単独で用いた場合に比べて相乗的に感染を抑制することを見い出し、本発明を完成するに至った。【０００９】
すなわち本発明は（１）エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）の死菌体とキトサンとを有効成分として含有することを特徴とする家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤や、（２）エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）がエンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）ＥＣ−１２（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０２８４）であることを特徴とする上記（１）に記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤や、（３）大腸菌が、浮腫病を引き起こす大腸菌、又は腸管毒血症性大腸菌（Enterotoxemic Escherichia coli）であることを特徴とする上記（１）又は（２）に記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤や、（４）死菌体が、加熱処理死菌体であることを特徴とする上記（１）〜（３）のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除剤に関する。
【００１０】
また本発明は、（５）エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）の死菌体とキトサンとを有効成分として含有する組成物を、家畜・家禽類又は魚介類に経口投与することを特徴とする家畜・家禽又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法や、（６）エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）がエンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）ＥＣ−１２（ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０２８４）であることを特徴とする上記（５）記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法や、（７）死菌体が、加熱処理死菌体であることを特徴とする上記（５）又は（６）に記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法や、（８）大腸菌が、浮腫病を引き起こす大腸菌、又は腸管毒血症性大腸菌（Enterotoxemic Escherichia coli）であることを特徴とする上記（５）〜（７）のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法や、（９）授乳期の母豚及び離乳期前後の子豚に経口投与することを特徴とする上記（５）〜（８）のいずれかに記載の家畜・家禽類又は魚介類の大腸菌（Escherichia coli）感染防除方法に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとを有効成分として含有する家畜・家禽又は魚介類の感染防除剤を経口的に投与すると、抗生物質や合成抗菌剤を使用することなく、相乗的に感染防除効果を奏し、また、抗生物質耐性の病原性感染病に対しも予防および治療が可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の家畜・家禽類又は魚介類の感染防除剤としては、乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとを有効成分として含有する組成物であれば特に制限されず、また、本発明の家畜・家禽類又は魚介類の感染防除方法としては、乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとを有効成分として含有する組成物を、家畜・家禽類又は魚介類に経口投与する方法であれば特に制限されず、上記感染防除剤や組成物は、そのままあるいは製剤などあらゆる形態で使用することができる。【００１３】
本発明において用いる乳酸菌は、家畜・家禽類又は魚介類に有用な乳酸桿菌であればよく、例えば、ラクトバシラス・アシドフィルス、ラクトバシラス・サリバリウス、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・ラムノサス、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ファーメンタム、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・デルブリュッキイ、ラクトバシラス・ロイテリ、ラクトバシラス・ガッセリ、ラクトバシラス・ジョンソニイ、ラクトバシラス・ケフィア、ラクトバシラス・ブルネリ等を挙げることができる。【００１４】
また、乳酸球菌として、例えば、エンテロコッカス・フェカリス、エンテロコッカス・フェシウム、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、ロイコノストック・ラクティス、ロイコノストック・メセンテロイデス等を挙げることができる。更に、ビフィズス菌として、例えば、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・アニマリス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム、ビフィドバクテリウム・サーモフィラム、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス等を挙げることができる。【００１５】
これらの乳酸菌は、一種又は二種以上の菌種を配合して用いることができる。これらの乳酸菌は、乳酸菌培養の常法に従って任意の条件で培養することによって得ることができる。【００１６】
本発明において用いる乳酸菌として、エンテロコッカス・フェカリスＡＴＣＣ１９４３３やエンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２等のエンテロコッカス・フェカリスに属する微生物を好適に例示することができるが、中でもエンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２（２００５年２月２５日にＦＥＲＭ ＢＰ−１０２８４として、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センター（〒３０５−８５６６ 日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６）に寄託されている）を用いることが好ましく、エンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０２８４）は、強い免疫賦活効果を有する乳酸菌として知られており（特開２００４−４１０９９号公報）、その菌学的性質は、以下に示す。このエンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２の培養方法としては、従来公知の乳酸菌の培養方法も含め特に制限されるものではないが、乳酸菌生育用培地を用い、３７℃で培養ｐＨを中性付近に維持しながら５〜１２０時間、好ましくは、１６〜２８時間培養し、生菌数約１０７〜１０１０／ｍｌ、好ましくは約１０８〜１０１０／ｍｌの培養液を得る方法を例示することができる。また、エンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２の１６ＳｒＤＮＡは、国立遺伝研究所に「ＡＢ１５４８２」として登録されている。
【００１７】
【表１】
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【００１８】
本発明においては、用いる乳酸菌は、死菌体又はその処理物として用いる必要があるが、かかる死菌体としては、常法により培養、集菌した乳酸菌の菌体を洗浄し、遠心脱水し、必要に応じて洗浄・脱水を繰り返した後、蒸留水、生理食塩水等に懸濁し、この懸濁液を、例えば８０〜１１５℃で３０分〜３秒間加熱することにより得られる死菌体懸濁液やその乾燥物、又は前記死菌体懸濁液にガンマ線或いは中性子線を照射することにより得られる死菌体懸濁液やその乾燥物を挙げることができる。該死菌体懸濁液の乾燥手段としては公知の乾燥手段であれば特に制限されないが、噴霧乾燥、凍結乾燥等を例示することができる。場合によっては、加熱等による殺菌処理の前後、あるいは、乾燥処理の前後に、酵素処理、界面活性剤処理、磨砕・粉砕処理を行うこともでき、これらの処理により得られるものも、本発明の死菌体又はその処理物に含まれる。【００１９】
キトサンは、カニの甲羅、エビの殻、イナゴ、カイコ、サナギ等の昆虫の表皮、椎茸、エノキダケ等のキノコ類、クモノスカビ等の接合菌類の細胞壁の成分等の主成分であるキチン質を化学処理して得られる高分子多糖類であり、抗癌性、抗菌性、免疫機能向上作用等を有するものとして公知の物質であり、本発明には、市販のものも含めて従来公知のキトサンも含め、制限なく使用することができる。【００２０】
本発明で好ましく使用されるキトサンは、天然より得られるキチンをアルカリ処理して得られる脱アセチル化物である。このキトサンは、平均分子量のサイズにより、また脱アセチル化度の度合いにより、多くの種類があるが、本発明にはこれら各種のキトサン（キトサンオリゴ糖を含む）を使用することができる。【００２１】
前記の感染防除剤や組成物を製剤として用いる場合、デンプン、乳糖、大豆蛋白等の担体、賦形剤、結合材、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、懸濁剤等の添加剤を配合して、周知の方法で粉剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤等に製剤することができる。かかる製剤はそのまま投与することもできるが、飼料等に混じて給餌させることもできる。【００２２】
本発明において、感染防除の対象となる家畜・家禽類としては、牛、豚、馬、羊、ヤギなどの家畜、鶏、鴨、ダチョウなどの家禽を例示することができ、授乳、哺乳期も含め、いずれの段階の日齢、年齢の家畜・家禽にも適用できるが、特に、豚の飼育においては、授乳期の母豚及び離乳期前後の子豚に経口投与することが浮腫病の感染防除の点で好ましい。また、魚介類としては、ハマチ、ブリ、鯛、鯉、鰻、エビ、アサリ、蛤等通常養殖されている魚介類を好適に例示することができる。【００２３】
本発明における感染防除とは、感染症に対する予防及び／又は治療を意味する。感染症の種類としては家畜・家禽類や魚介類により様々であるが、微生物が生体宿主に侵入し定着、増殖する病気の全てをいう。感染症の中でも消化器系の感染症の予防及び治療に効果があり、特に家畜に感染しやすい病原菌として、浮腫病を引き起こす大腸菌や腸管毒血症性大腸菌等の大腸菌、サルモネラ、クロストリディウムが、また、コクシジウム原虫等を挙げることができる。【００２４】
感染症のうちでも、Vero毒素産生性大腸菌（たとえば、腸管毒血症性大腸菌）による子豚の浮腫病は離乳期前後の子豚に多く発生するが、その発生原因としては、飼育されている分娩舎や離乳舎の構造等の飼育環境要因や、大腸菌が発生しやすい梅雨の期間、夏の暑い時や冬の寒い時など子豚の免疫力が低下する季節要因や、また、離乳方法が悪く消化不良等による哺乳要因や、栄養不良等の飼育要因や、遺伝要因などが複雑に関与すると考えられる。その主なる症状は、眼瞼の浮腫（赤く腫れる）、著明な腸管膜リンパ節の腫脹、下痢が特徴であり、神経症状もある。【００２５】
本発明の乳酸菌又はその処理物及びキトサンの投与量は、家畜・家禽類又は魚介類の種類に応じて、１回あたりの投与量、投与回数を適宜決定することができ、回復状態により、それらを変更できる。【００２６】
乳酸菌の死菌体又はその処理物及びキトサンを家畜等へ直接経口投与する方法及び飼料や飲水に混合してから投与する方法があるが、何れでもよく、また、それらを混合しても、別々に投与してもよい。【００２７】
乳酸菌の死菌体又はその処理物とキトサンとの配合割合は、乳酸菌の種類により変動するが、重量比１：０．１〜１：１００、さらに望ましくは、重量比１：１０〜１：２０であることが好ましい。【００２８】
乳酸菌の死菌体又はその処理物を、子豚に投与する場合の投与方法及び投与量としては、たとえば、離乳後餌付け開始時より体重１ｋｇあたり５０〜２００ｍｇ／日を飼料に混ぜて投与する方法を具体的に例示することができ、また、投与期間は、子豚の健康状態、環境により異なるが、５日齢より約７０日齢までの間が適当であり、同時に投与するキトサンについては、５００〜４０００ｍｇ／日を投与することが望ましい。また、これら物質は飼料に直接配合してもよく、この場合乳酸菌は０．００１％〜０．２０％、望ましくは０．０１〜０．０５％、キトサンは０．１〜０．５％が望ましい。【００２９】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３０】
（エンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２死菌体の調製）
エンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０２８４）をロゴサ培地で３７℃、２４時間培養した前培養液を、酵母エキス４％、ポリペプトン３％、乳糖１０％を含む液体培地に０．１（ｖ／ｖ）％接種し、ｐＨスタットを用いてｐＨ６．８〜７．０に苛性ソーダ水溶液で調整しながら３７℃、２２〜２４時間中和培養を行なった。
【００３１】
培養終了後、連続遠心機で菌体を分離、回収した後、水を加えて元の液量まで希釈して再度連続遠心機で菌体を分離、回収した。この操作を合計４回繰り返して菌体を洗浄した。次いで、洗浄した菌体を適量の水に懸濁し、１００℃、３０分間殺菌した後、スプレードライヤーを用いて菌体を乾燥して加熱処理菌体粉末を調製した。【００３２】
（浮腫病に対する感染防除）
下痢による死亡数が他の養豚場より高い傾向にある養豚場において、浮腫病に対する感染防除試験を実施した。豚は生後２８日齢で下痢の症状が観察された豚（ＬＤＷ系三元交雑種豚）に対して行った。豚は生後３５日で離乳させた。餌は通常離乳前後に投与する餌に対して以下の配合になるように供した。この餌を２８日齢から４２日齢の離乳前後の豚に対して給餌した。また、乳酸菌としては、エンテロコッカス・フェカリスＥＣ−１２の加熱処理死菌体を用い、予め小麦粉で１０倍希釈したプレミックスを作成しておいた。キトサンとして、キトサン原末（甲陽ケミカル株式会社製）を用いた。以下の対照区、それぞれの単独投与区、両者の併用投与区毎に飼育した。また、結果を（表２）に示す。【００３３】
１）対照区：基礎飼料ＳＤＳＮｏ．１（日本配合飼料株式会社製、抗菌剤及び生菌剤を含まないもの）
２）乳酸菌単独投与区：基礎飼料に乳酸菌の死菌体を０．０５０％添加したもの
３）キトサン単独投与区：基礎飼料にキトサン原末を０．５％添加したもの
４）（乳酸菌＋キトサン）投与区：基礎飼料に乳酸菌の死菌体を０．０５％及びキトサン０．１％添加したもの
５）（乳酸菌＋キトサン）投与区：基礎飼料に乳酸菌の死菌体を０．０２５％及びキトサン０．５％添加したもの
６）（乳酸菌＋キトサン）投与区：基礎飼料に乳酸菌の死菌体を０．０５％及びキトサン０．５％添加したもの【００３４】
【表２】
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【００３５】
表２の結果から、対照区に比べて、下痢回復率及び死亡率、体重増加率において、乳酸菌の死菌体単独投与区又はキトサン単独投与区でも飼育上良好な傾向が認められるが、さらに乳酸菌の死菌体及びキトサンを併用した併用投与区は、単独投与に比べて良好であり、キトサン０．５％と乳酸菌の死菌体０．０５％併用したものは、それぞれ単独に投与したものに比べ相乗効果が認められた。
【実施例２】
【００３６】
（原因大腸菌に対する感染防除）
実施例１で使用した養豚場より常法により大腸菌を採取し培養した。この培養した大腸菌を生後２５日の子豚に感染させた。子豚はすべて下痢症状を起こした。子豚は生後３５日で離乳させた。実施例１と同様に調製した乳酸菌の死菌体やキトサンは、通常離乳前後に投与する餌に対して（表３）の配合になるように供した。この餌を２８日齢から４２日齢の離乳前後の豚に対して給餌した。結果を（表３）に示す。【００３７】
【表３】
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【００３８】
表３の結果より、乳酸菌の死菌体使用は、飼育上良好な結果をもたらすが、実施例１と同様に乳酸菌の死菌体とキトサンとの併用により、下痢回復率、死亡率及び期間体重増加率において飼育上良好な結果が得られ、乳酸菌濃度が一定以上の濃度即ち０．０５％である場合、キトサンとの組み合わせは、それぞれ単独使用に比べて相乗効果を顕著に示すことが分かる。【００３９】
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