(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
脱脂処理した月見草種子由来の圧搾粕の溶剤抽出物を有効成分とし、該有効成分中に存在するポリフェノールとして、エラグ酸、没食子酸、ペンタガロイルグルコース、カテキンを必須成分として含有することを特徴とする糖質吸収阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載の糖質吸収阻害剤であって、前記月見草種子由来の圧搾粕の抽出溶媒がエタノールであることを特徴とする糖質吸収阻害剤。
【請求項３】
請求項１に記載の糖質吸収阻害剤であって、前記月見草種子由来の圧搾粕の抽出溶媒が７０〜８５％（ｖ／ｖ）の含水エタノールであることを特徴とする糖質吸収阻害剤。
【請求項４】
請求項１に記載の糖質吸収阻害剤であって、脱脂処理が脂溶性有機溶媒で行なわれていることを特徴とする糖質吸収阻害剤。
【請求項５】
請求項１，２，３，４のいずれかに記載の糖質吸収阻害剤を含有してなる糖質吸収阻害用薬品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野］
本発明は、例えば、糖尿病の予防やダイエット等に有効な糖質吸収阻害剤およびその製造方法に関するものである。
【０００２】
［背景技術］
食物中に含まれる多糖類（デンプン、グリコーゲン等）は、唾液および膵液中のα−アミラーゼによって加水分解され、マルトースやイソマルトースなどのオリゴ糖に分解される。次いで、小腸にてα−グルコシダーゼなどの二糖類分解酵素によってグルコースに分解され、吸収される。
【０００３】
このようにα−アミラーゼおよびα−グルコシダーゼは、体内で糖質の消化酵素として重要な役割を果たしており、これらの酵素活性が血糖値に影響を与える。よって、糖尿病や肥満の予防および治療において、これらの酵素活性を制御することは重要である。
【０００４】
糖尿病には、インスリン依存型糖尿病（Ｉ型糖尿病）とインスリン非依存型糖尿病（ＩＩ型糖尿病）の２タイプがあるが、全体の９０％は後者のタイプである。
後者（ＩＩ型糖尿病）は、過栄養によるインスリンの作用不足（例えば組織におけるインスリン感受性低下、膵臓のインスリン分泌不足等）による糖・脂質代謝の異常が原因といわれている。
【０００５】
インスリン非依存型糖尿病（ＩＩ型糖尿病）は、薬物による治療より、まずは食事療法、運動療法でコントロールすることが基本とされるが、そのように自己管理がなされていても必ずしも代謝異常が是正されるとは限らず、薬に依存しがちである。
ところが、薬剤には、投与による副作用や使用量、使用制限に制限の問題がある。また、これらは単一化された物質の混合によるものがほとんどであるため、単一物質の副作用、さらには長期に亘る服用により起こる安全性の面からも問題になっている。
【０００６】
従来、このような糖質の代謝異常を是正する植物由来の物質としては、ギムネマ、グアバ、バナバ、桑などの葉から得られる抽出物が知られる。これらの植物由来の抽出物は、安全性の面から食品、医薬品等に応用しやすいため、有効成分等について研究が行われている。
【０００７】
このような背景の下、本発明者らは、種々の植物由来の抽出物について、ポリフェノール含量、ＳＯＤ様活性等を調査し、月見草種子のエタノール抽出物に着目するに至った。
そして、各種の実験を行った結果、この抽出物に、糖質吸収阻害に有効な種々のポリフェノールが含まれることを見出した。
【０００８】
本発明の目的は、糖尿病の予防・緩和および肥満の防止にきわめて有効な月見草種子由来の糖質吸収阻害剤およびその製造方法を提供することにある。
【０００９】
［発明の開示］
本発明の糖質吸収阻害剤は、脱脂処理した月見草種子由来の圧搾粕の溶剤抽出物を有効成分とし、該有効成分中に存在するポリフェノールとして、エラグ酸、没食子酸、ペンタガロイルグルコース、カテキンを必須成分として含有することを特徴とする。
本発明の糖質吸収阻害剤は、前記月見草種子由来の脱脂圧搾粕の抽出溶媒がエタノールであることを特徴とする。
本発明の糖質吸収阻害剤は、前記月見草種子由来の圧搾粕の抽出溶媒が７０〜８５％（ｖ／ｖ）の含水エタノールであることを特徴とする。
本発明の糖質吸収阻害剤は、脱脂処理が脂溶性有機溶媒で行なわれていることを特徴とする。
本発明の薬品は、前記糖質吸収阻害剤を含有してなることを特徴とする。
本発明の飲食品は、前記糖質吸収阻害剤を含有してなることを特徴とする。
【００１０】
発明者らの実験によると、従来の植物抽出物（グアバ、バナバ、桑）は、グルコシダーゼに対しては強い阻害作用を示すが、アミラーゼに対する酵素阻害活性は十分なものではない。
これに対し、本発明による月見草種子由来の抽出物（ポリフェノール）は、アミラーゼおよびグルコシダーゼに対して共に強い酵素阻害作用を示す。特に、脱脂月見草種子のエタノール抽出物は、阻害活性が強く、かつ安全性も高いことから、糖尿病予防またはダイエット用の薬品や飲食品に配合するのに適する。
【００１１】
月見草は、マツヨイグサ属の１〜２年草または多年草である。まれに茎は木質化し低木状をなすこともある。代表種は次の４種である。
（１）コマツヨイグサ（Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ ｌａｃｉｎｉａｔａ）
（２）マツヨイグサ（Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ ｓｔｒｉａｔａ）
（３）メマツヨイグサ（Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ ｂｉｅｎｎｉｓ）
（４）オオマツヨイグサ（Ｏｅｎｏｔｈｅｒａ ｅｒｙｔｈｒｏｓｅｐａｌａ）
本発明では、月見草の種類は限定されず、いずれを用いてもよい。
【００１２】
従来、月見草は、その種子から採取される月見草油が広く知られている。月見草油にはγ−リノレン酸が多く含まれており、その効能としては、肥満、糖尿病、高コレステロール血症、多量アルコール飲用者、加齢、ビタミンＢ６
不足に有効とされている。また、ウイルス感染の場合に生ずるリノール酸からγ−リノレン酸への転換阻害、喘息、アトピー性湿疹患者の治療に対して月見草油が有効なことも知られている。
月見草種子の脂溶性成分については生理活性が研究されているが、脂溶性成分以外の物質の生理活性については報告がない。
また、月見草油の製造過程で生じる圧搾粕は、一部が飼料として利用される他、産業廃棄物として処理されるのが現状である。
【００１３】
本発明によれば、月見草種子の脂溶性成分以外の成分について、新たな用途を与えるとともに、月見草油の分離後の圧搾粕から有効成分を抽出することができる。圧搾粕から付加価値の高い有効成分を抽出し、資源の有効利用を図ることは、きわめて有意義なことである。
【００１４】
前記月見草種子の抽出溶媒としてアルコールを用いるのは、糖質吸収阻害の有効成分（ポリフェノール）を効率よく抽出するためである。特に、エタノールを用いるのが望ましい。エタノールを用いると、有効成分（ポリフェノール）が効率よく抽出されると同時に外用、食用のいずれの用途であっても抽出物を安全に使用することができるためである。その他、用途によっては、メタノール、ブタノール等を用いることも可能である。
【００１５】
抽出溶媒としてのエタノールの濃度は、７０〜８５％（ｖ／ｖ）の含水エタノールであるのが望ましい。エタノール濃度が７０％（ｖ／ｖ）未満であると、ポリフェノール成分の抽出量が不十分になり、また、８５％（ｖ／ｖ）を超えると、種子の油分が溶媒中に溶け出しやすくなるからである。
なお、アルコール抽出は、ポリフェノールの含有率を向上させるため、種々の濃度で繰り返すとよい。
【００１６】
また、月見草種子には、脱脂月見草種子を使用するのが望ましい。これは、種子中の油分を除くことにより、ポリフェノールが脱脂物中に濃縮されるためである。脱脂方法は、例えば、月見草種子を圧搾して油分を分離し、次いで、圧搾物の残留油分を脂溶性有機溶媒により抽出分離するとよい。
【００１７】
脱脂用の脂溶性有機溶媒としては、ヘキサンを用いるとよい。抽出油分を食用油として使用し得るとともに、脱脂月見草種子の抽出物を食品素材等に利用しやすいからである。なお、抽出物を食品以外の用途に用いる場合は、ヘキサンに限ることなく、その他の非極性溶媒を用いることも可能である。
【００１８】
前記月見草種子由来のポリフェノールは、好ましくは、エタノール、含水エタノール、水等の溶媒により抽出することができる。発明者らの調査によれば、抽出物には、没食子酸、エラグ酸、カテキン、ペンタガロイルグルコースが含まれる。
【００１９】
本発明の薬品は、糖尿病予防、すなわち、インスリン非依存型糖尿病（ＩＩ型糖尿病）の予防または改善に適する。また、ダイエット用薬品の有効成分としてもよい。例えば、軟・硬カプセル剤または錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤の形態で経口投与することができる。また、非経口投与する場合は、局所組織内投与、皮内、皮下、筋肉内および静脈内注射などによることができる。
投与量は、投与方法、病状、患者の年齢等によって変化し得るが、大人では、通常、１日当たり有効成分として０．５〜５０００ｍｇ、子供では通常０．５〜３０００ｍｇ程度投与することができる。
【００２０】
ポリフェノール成分の濃度については、剤型によって適宜変更することが可能であるが、通常、経口または粘膜吸収により投与される場合は約０．３〜１５．０ｗｔ％、非経口投与による場合は、０．０１〜１０ｗｔ％程度にするとよい。なお、上記投与量については、一例であり、種々の状況に応じて適宜変更可能である。
【００２１】
本発明の飲食品としては、例えば、菓子類（ガム、キャンディー、キャラメル、チョコレート、クッキー、スナック、ゼリー、グミ、錠菓等）、麺類（そば、うどん、ラーメン等）、乳製品（ミルク、アイスクリーム、ヨーグルト等）、調味料（味噌、醤油等）、スープ類、飲料（ジュース、コーヒー、紅茶、茶、炭酸飲料、スポーツ飲料等）をはじめとする一般食品や、健康食品（錠剤、カプセル等）、栄養補助食品（栄養ドリンク等）が挙げられる。これらの飲食品に月見草種子由来の抽出物（ポリフェノール）を適宜配合する。
また、インスタント食品に添加してもよい。例えば、月見草種子のエタノール抽出物を粉末セルロースとともにスプレードライまたは凍結乾燥したものを、粉末、顆粒、打錠、溶液等にすることで容易に飲食品に含有させることができる。
【００２２】
［発明を実施するための最良の形態］
以下、本発明の実施例を説明する。
【００２３】
［糖質吸収阻害剤の製造］
原料には、月見草油の製造過程で得られる圧搾粕を使用した。
まず、圧搾粕を破砕し、ヘキサンで還流し、圧搾粕に残存する油分を除いて脱脂物とした。次いで、この脱脂物を７０％（ｖ／ｖ）含水エタノールで還流し、エタノール抽出液を乾固させて糖質吸収阻害剤（実施例１）とした。
【００２４】
［α−アミラーゼの阻害作用］
実施例１（月見草種子抽出物）について、市販のアミラーゼ活性測定キット（和光純薬工業（株）社製「アミラーゼ−テストワコー」）を用いて、α−アミラーゼの阻害活性（％）を求めた。α−アミラーゼは、ヒト唾液由来のものを使用した。測定方法を以下に示す。
【００２５】
酵素液０．０２ｍｌに試料溶液を０．０１ｍｌ加え、３７℃にて５分間インキュベートした後、基質緩衝液１ｍｌを添加し、３７℃にて６０分間インキュベートした。その後、沸騰水中で１０分間インキュベートして反応を止め、発色試薬を１ｍｌ加えて所定の色素の吸光度（６６０ｎｍ）を測定した。
この測定値に基づいて酵素活性（％）を算出し、下記計算式により、阻害活性（％）を求めた。なお、酵素活性は、サンプル非共存下で測定した吸光度を基準（１００％）として算出した。
阻害活性（％）＝１００−酵素活性（％）
【００２６】
比較例として、植物由来のグアバ葉抽出物（比較例１）、バナバ葉抽出物（比較例２）、桑葉抽出物（比較例３）についても、同様な方法により、阻害活性（％）を求めた。結果を表１に示す。
【００２７】
【表１】
0004873824.tif 000002
【００２８】
表１に示すように、実施例１は、グアバ葉抽出物（比較例１）、バナバ葉抽出物（比較例２）、桑葉抽出物（比較例３）に比べ、α−アミラーゼの阻害活性が高い結果となった。
【００２９】
なお、実施例１（月見草種子抽出物）について、同様な方法で濃度変化に対する酵素活性を測定し、α−アミラーゼ（ヒト唾液由来）に対するＩＣ５０（５０％阻害濃度）を求めたところ、０．５ｍｇ／ｍｌであった。
【００３０】
また、実施例１（月見草種子抽出物）、没食子酸、エラグ酸、カテキン、およびペンタガロイルグルコースについて、同様な方法により、ブタ膵臓由来のα−アミラーゼ（ＳＩＧＭＡ社製）に対するＩＣ５０（５０％阻害濃度）を求めたところ、下記のように優れた阻害活性を示した。
化合物                              ＩＣ５０（ｍｇ／ｍｌ）
実施例１（月見草種子抽出物）        ０．０１
没食子酸                            ０．４
エラグ酸                            ＞１．０
カテキン                            ０．８
ペンタガロイルグルコース            ０．０２
【００３１】
［α−グルコシダーゼ阻害作用］
次に、実施例１（月見草種子抽出物）について、下記の測定方法により、α−グルコシダーゼの阻害活性（％）を求めた。α−グルコシダーゼ酵素液は、市販ラット腸管アセトン粉末（ＳＩＧＭＡ社製）に９倍量の０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を加え、氷中にてガラスホモゲナイザーで均質化した後、遠心分離した上清を２０倍希釈したものを使用した。測定方法を以下に示す。
【００３２】
酵素液０．０５ｍｌに試料溶液を０．０１ｍｌ加え、０．１Ｍマレイン酸緩衝液を０．６４ｍｌ、さらに０．３３ｍＭの４−メチルウンベリフェリル−α−Ｄ−グルコシドを０．３ｍｌ加え、３７℃で３０分間インキュベートした。
その後、３ｍｌのグリシン緩衝液（ｐＨ１０．３）で反応を止め、遊離した４−メチルウンベリフェリルを蛍光光度計（励起波長３６６ｎｍ、蛍光波長４５０ｍｍ）を用いて定量した。この定量値に基づいて酵素活性を算出し、下記計算式により、阻害活性（％）を求めた。なお、酵素活性は、サンプル非共存下で測定した４−メチルウンベリフェリルの定量値を基準（１００％）として算出した。
阻害活性（％）＝１００−酵素活性（％）
【００３３】
比較例として、植物由来のグアバ葉抽出物（比較例１）、バナバ葉抽出物（比較例２）、桑葉抽出物（比較例３）についても、同様な方法により、阻害活性（％）を求めた。結果を表２に示す。
【００３４】
【表２】
0004873824.tif 000003
【００３５】
表２に示すように、実施例１（月見草種子抽出物）は、グアバ葉抽出物（比較例１）、バナバ葉抽出物（比較例２）、桑葉抽出物（比較例３）よりもα−グルコシダーゼの阻害活性が劣るものの、α−グルコシダーゼに対して優れた阻害活性を有することが判る。
【００３６】
なお、実施例１（月見草種子抽出物）、没食子酸、エラグ酸、カテキン、およびペンタガロイルグルコースについて、同様な方法で濃度変化に対する酵素活性を測定し、α−グルコシダーゼに対するＩＣ５０（５０％阻害濃度）を求めたところ、下記のように優れた阻害活性を示した。
化合物                              ＩＣ５０（ｍｇ／ｍｌ）
実施例１（月見草種子抽出物）        ０．１
没食子酸                            ０．８
エラグ酸                            ０．０８
カテキン                            ０．８
ペンタガロイルグルコース            ０．０４
【００３７】
これらの実験結果より、実施例１（月見草種子抽出物）は、α−アミラーゼおよびα−グルコシダーゼの双方に阻害活性を示し、糖質の分解を効果的に抑制することが判る。
【００３８】
［正常ラットへの糖負荷試験］
次に、実施例１（月見草種子抽出物）について、動物体内における糖質吸収阻害作用を以下の条件により試験した。
【００３９】
５週令のｗｉｓｔｅｒ系雄ラット（日本クレア）を１週間予備飼育した後、６週令〜８週令のものを実験に用いた。２４時間絶食させ、試料０．５ｇ／ｋｇ（体重）を蒸留水で溶解し、さらに糖質（デンプン、スクロース）を２ｇ／ｋｇ（体重）を蒸留水で溶解し、同時に胃内ゾンデにて投与した。
【００４０】
試料投与後の血糖値の変化を調べるため、試料投与前、投与３０分後、投与６０分後、投与１２０分後、投与１８０分後に尾静脈より採血を行った。なお、コントロールとして、試料と同量の蒸留水と糖質（デンプン、スクロース）２ｇ／ｋｇ（体重）を投与したラットについても、同様な条件で採血を行った。
採取した血液を遠心分離し、この上清の血糖値を測定した。血糖値の測定には、市販のグルコース測定キット（和光純薬工業（株）社製「グルコースＢ−テストワコー」）を使用した。結果を図１および図２に示す。
【００４１】
図１および図２に示すように、コントロールでは、６０分経過までに血糖値が急激に上昇するのに対し、実施例１（月見草種子抽出物）を投与したものは、血糖値の上昇が緩やかになった。
【００４２】
［応用例：飲食品への適用］
糖尿病予防およびダイエットに有効な飲食品の配合例を下記に示す。下記表中、「月見草種子抽出物」は、前記実施例１と同様の抽出条件で得られた月見草種子のエタノール抽出物を乾燥し、粉末にしたものである。
【００４３】
配合例１：チューインガム
砂糖                                ５３．０ｗｔ％
ガムベース                          ２０．０
グルコース                          １０．０
水飴                                １６．０
香料                                  ０．５
月見草種子抽出物                      ０．５      
１００．０ｗｔ％
【００４４】
配合例２：グミ
還元水飴                            ４０．０ｗｔ％
グラニュー糖                        ２０．０
ブドウ糖                            ２０．０
ゼラチン                              ４．７
水                                    ９．６８
ウメ果汁                              ４．０
ウメフレーバー                        ０．６
色素                                  ０．０２
月見草種子抽出物                      １．０      
１００．０ｗｔ％
【００４５】
配合例３：キャンディー
砂糖                                ５０．０ｗｔ％
水飴                                ３３．０
水                                  １４．４
有機酸                                ２．０
香料                                  ０．２
月見草種子抽出物                      ０．４      
１００．０ｗｔ％
【００４６】
配合例４：ソフトカプセル
玄米胚芽油                          ８７．０ｗｔ％
乳化剤                              １２．０
月見草種子抽出物                      １．０      
１００．０ｗｔ％
【００４７】
配合例５：清涼飲料
果糖ブドウ糖液糖                    ３０．０ｗｔ％
乳化剤                                ０．５
月見草種子抽出物                      ０．０５
香料                                  微量
精製水                                残余      
１００．０ｗｔ％
【００４８】
配合例６：錠剤
乳糖                                ５４．０ｗｔ％
結晶セルロース                      ３０．０
澱粉分解物                          １０．０
グリセリン脂肪酸エステル              ５．０
月見草種子抽出物                      １．０      
１００．０ｗｔ％
【００４９】
配合例７：錠菓
砂糖                                ７６．４ｗｔ％
グルコース                          １９．０
ショ糖脂肪酸エステル                  ０．２
月見草種子抽出物                      ０．５
精製水                                ３．９      
１００．０ｗｔ％
ここで、実施例１およびこれに準ずる方法による抽出物の組成は、エラグ酸、没食子酸、カテキン、ペンタガロイルグルコースを含有していた。
【００５０】
［産業上の利用可能性］
以上説明したように、本発明によれば、糖質の吸収を効果的に抑制することができる。
また、本発明によれば、糖質の吸収による血糖値の上昇を緩やかにするため、糖尿病や肥満の予防・治療にきわめて有効である。
さらに、本発明は、食用油の原料である月見草種子から有効成分を抽出するため、安全性が高く、副作用等の心配がない。
【図面の簡単な説明】
図１は、正常ラットに月見草種子抽出物およびデンプンを投与した後の血糖値の変化を示すグラフ、図２は、正常ラットに月見草種子抽出物およびスクロースを投与した後の血糖値の変化を示すグラフである。
【図１】
0004873824.tif 000004
【図２】
0004873824.tif 000005