(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造を有する化合物および該化合物の塩。
【化１】
0004949552.tif 000013
［式中、
ｓおよびｔはそれぞれ独立に０〜３の整数であり；
ＴはＣ（Ｏ）および（ＣＨ２）ｖからなる群から選択され、ｖは０〜３の整数であり；
ＬはＯ、ＮＲ９、Ｓおよび（ＣＨ２）ｗからなる群から選択され、ｗは０または１の整数であり；
ＭはＣ（Ｒ１０）（Ｒ１１）であり；
Ｂは水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ９は独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシアルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アルコキシアルコキシ、シクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルケニル、シクロアルキルアルキニル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、アルキルアリール、アルケニルアリール、アルキニルアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、複素環、複素環アルキル、複素環アルケニル、複素環アルキニル、アルキル複素環基、アルケニル複素環基およびアルキニル複素環基からなる群から選択され、ここでＲ１およびＲ２が一体となって、４−（２−チエニルメチル）ピペラジノ、４−（３−チエニルメチル）ピペラジノ、４−（２−メトキシフェニル）ピペラジノ、４−（２−チエニルカルボニル）ピペラジノ、４−（２−チエニルスルホニル）ピペラジノおよび４−（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジノからなる群から選択される環を形成していても良く、Ｒ５およびＲ９が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシアルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アルコキシアルコキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、ハロアルキル、ハロアルケニルおよびハロアルキニルからなる群から選択され；
Ｒ１０およびＲ１１は独立に、水素またはアルキルである。］
【請求項２】
ｓおよびｔがそれぞれ１であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ５が、アリール、アルキルアリール、アルケニルアリール、アルキニルアリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、複素環、複素環アルキル、複素環アルケニル、複素環アルキニル、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキニル複素環基、アルキル、アルケニルおよびアルキニルからなる群から独立に選択され；
Ｒ３およびＲ４が水素、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アルキル、アルケニルおよびアルキニルからなる群から独立に選択され；並びに、
Ｒ６およびＲ７が水素、低級アルキル、低級アルケニル及び低級アルキニルからなる群から独立に選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（（（（（１Ｓ）−１−（（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル）ペンチル）アミノ）カルボニル）アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［（１，３−チアゾール−２−イルメチル）（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−４−モルホリノ−４−オキソブタン酸、（３Ｒ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジアリルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジイソブチルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（３−メトキシベンジル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（（（（（１Ｓ）−１−（（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル）ペンチル）アミノ）カルボニル）（メチル）アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−チエニル）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−メトキシフェニル）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−チエニルスルホニル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸からなる群から選択される請求項１に記載の化合物および該化合物の医薬的に許容される塩。
【請求項４】
医薬的に許容される担体中に、請求項１に記載の化合物または該化合物の医薬的に許容される塩を含む医薬組成物。
【請求項５】
α4β1インテグリン受容体結合阻害剤を製造するための請求項１に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、α４β１インテグリンのそれの受容体、例えばＶＣＡＭ−１（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｃｅｌｌ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ−１）およびフィブロネクチンへの結合の阻害に関するものである。本発明はさらに、その結合を阻害する化合物、そのような化合物を含む医薬的に活性な組成物、上記のようなあるいはα４β１が関与する疾患状態の抑制または予防のための製剤でのそのような化合物の使用に関するものでもある。
【０００２】
（背景技術）
組織が微生物による侵襲を受けたり、あるいは損傷を受けると、炎症応答において白血球が主要な役割を果たす。炎症応答の最も重要な側面の一つには、細胞接着事象が関与する。白血球は血流を介して循環しているのが認められる。しかしながら、組織が感染したり損傷状態になると、白血球は侵襲または損傷を受けた組織を識別し、毛細管壁に結合し、毛細管を通って患部組織に移動する。これらの事象には、細胞接着分子と称される蛋白類が介在する。
【０００３】
白血球には主に、顆粒球、単核球およびリンパ球という３種類がある。インテグリンα４β１（ＶＬＡ−４、ｖｅｒｙ  ｌａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎ−４とも称される）は、単球、リンパ球および好酸球および好塩基球という２種類の顆粒球の表面で発現する異種二量体（heterodimeric）蛋白である。この蛋白は、毛細管の内壁を覆う内皮細胞に関連する蛋白であるＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンを識別し、それに結合する能力により、細胞接着において重要な役割を果たす。
【０００４】
毛細管を取り巻く組織の感染または損傷が起こると、内皮細胞が、感染と戦う上で必要な白血球を結合させるのに必須であるＶＣＡＭ−１などの一連の接着分子を発現する。ＶＣＡＭ−１またはフィブロネクチンへの結合に先だって、白血球が最初にある種の接着分子に結合して、その流れを緩やかにし、血球が活性化された内皮に沿って「転がる」ようにする。そうして、単球、リンパ球、好塩基球および好酸球が、α４β１インテグリンを介して血管壁上でＶＣＡＭ−１またはフィブロネクチンに強固に結合することができる。そのような相互作用が、損傷を受けた組織への白血球の移動ならびに最初の転がり事象にも関与することを示す証拠がある。
【０００５】
外傷部位への白血球移動は感染との戦いおよび異物破壊において役立つが、多くの場合、この移動が制御できなくなり、白血球がその場になだれ込み、広範囲にわたって組織損傷を引き起こす。従って、このプロセスを遮断することができる化合物は、治療薬として有用なものとなり得る。そこで、白血球のＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンへの結合を防止する阻害薬を開発することは有用であると考えられる。
【０００６】
α４β１結合の阻害によって治療可能であると考えられる疾患の一部には、アテローム性動脈硬化、慢性関節リウマチ、喘息、アレルギー、多発性硬化症、狼瘡、炎症性腸疾患、移植片拒絶反応、接触過敏症およびＩ型糖尿病などがあるが、これらに限定されるものではない。一部の白血球上で認められる以外に、α４β１は、白血病、メラノーマ、リンパ球腫および肉腫細胞などの各種癌細胞でも認められている。α４β１が関与する細胞接着がある種の癌の転移に関与し得ることが示唆されている。従って、α４β１結合の阻害薬も、一部の種類の癌治療において有用となる可能性がある。
【０００７】
α４β１の蛋白への結合を阻害するペプチドの単離および精製は、米国特許５５１０３３２号に開示されている。結合を阻害する蛋白は、ＷＯ９５／１５９７３号、ＥＰ０３４１９１５号、ＥＰ０４２２９３８Ａ１号、米国特許５１９２７４６号およびＷＯ９６／０６１０８号に開示されている。細胞接着および細胞接着が介在する病気の阻害および予防に有用な新規化合物は、ＷＯ９６／２２９６６号、ＷＯ９８／０４２４７号およびＷＯ９８／０４９１３号に開示されている。
【０００８】
従って本発明の目的は、α４β１結合の阻害薬である新規化合物、ならびにそのような新規化合物を含む医薬組成物を提供することにある。
【０００９】
（発明の開示）
本発明は、下記式Ｉの新規化合物およびそれの塩に関する。
【００１０】
【化４】
0004949552.tif 000002
式中、
ＡはＯ、ＳおよびＮＲ６からなる群から選択され；
ＥはＣＨ２、Ｏ、ＳおよびＮＲ７からなる群から選択され；
各Ｊは独立に、Ｏ、ＳおよびＮＲ８からなる群から選択され；
ｓおよびｔはそれぞれ独立に０〜３の整数であり；
ＴはＣ（Ｏ）および（ＣＨ２）ｖからなる群から選択され、ｖは０〜３の整数であり；
ＬはＯ、ＮＲ９、Ｓおよび（ＣＨ２）ｗからなる群から選択され、ｗは０または１の整数であり；
ＭはＣ（Ｒ１０）（Ｒ１１）および（ＣＨ２）ｖからなる群から選択され、ｖは０〜３の整数であり；
ＸはＣＯ２Ｂ、ＰＯ３Ｈ、ＳＯ３Ｈ、ＯＰＯ３Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＮＨＳＯ２Ｒ１３、テトラゾリルおよび水素からなる群から選択され；
Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は独立に、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、シクロアルキルアルキル、アルキルアミノ、ハロアルキル、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、複素環アルキルおよびアルキル複素環基からなる群から選択され；
Ｒ１およびＲ２が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ３およびＲ４が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ５およびＲ９が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ１０およびＲ１１が一体となって環を形成していても良い。
【００１１】
好ましくは式Ｉにおいて、ＭはＣ（Ｒ１０）（Ｒ１１）であり；
ＸはＣＯ２Ｂであり；
ＡはＮＲ６であり；
ＥはＮＲ７であり；
各ＪはＯであり；
ｓおよびｔはそれぞれ１であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ５はアリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、アルキル複素環、複素環アルキルまたはアルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環またはアルキルであり；
Ｒ６およびＲ７は水素および低級アルキルである。
【００１２】
現在好ましい化合物は、下記式ＩＩの化合物およびそれの塩である。
【００１３】
【化５】
0004949552.tif 000003
式中、ＡはＯ、ＳおよびＮＲ６からなる群から選択され；
ＥはＣＨ２、Ｏ、ＳおよびＮＲ７からなる群から選択され；
各Ｊは独立に、Ｏ、ＳおよびＮＲ８からなる群から選択され；
ＴはＣ（Ｏ）および（ＣＨ２）ｖからなる群から選択され、ｖは０または１の整数であり；
ＬはＯ、ＮＲ９、Ｓおよび（ＣＨ２）ｗからなる群から選択され、ｗは０または１の整数であり；
ｓおよびｔはそれぞれ独立に０〜３の整数であり；
Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立に、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、シクロアルキルアルキル、アルキルアミノ、ハロアルキル、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、複素環アルキルおよびアルキル複素環基からなる群から選択され；
Ｒ１およびＲ２が連結して環を形成していても良く；
Ｒ３およびＲ４が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ５およびＲ９が一体となって環を形成していても良く；
Ｒ１０およびＲ１１が一体となって環を形成していても良い。
【００１４】
好ましくは上記式ＩＩにおいて、
ＡはＮＲ６であり；
ＥはＮＲ７であり；
各ＪはＯであり；
ｓおよびｔは１であり；
Ｒ１およびＲ２はアリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、アルキル複素環、複素環アルキルまたはアルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環またはアルキルであり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１およびＢは水素または低級アルキルであり；
Ｒ５はアリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、アルキル複素環、複素環アルキルまたはアルキルである。
【００１５】
より好ましくはその化合物は、下記の構造を有する。
【００１６】
【化６】
0004949552.tif 000004
式中、置換基ならびに好ましい化合物は、式ＩＩについて前記で定義した通りである。
【００１７】
特に好ましい化合物は、以下の置換基を有する。すなわち、Ｒ１およびＲ２が独立にアリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環およびアルキルからなる群から選択され；Ｒ５がアリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環、アルキル複素環、複素環アルキルおよびアルキルからなる群から選択され；Ｒ６およびＲ７が独立に、水素および低級アルキルからなる群から選択され；Ｂ、Ｒ１０およびＲ１１が独立に、水素および低級アルキルからなる群から選択され；Ｒ３およびＲ４が水素、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、複素環およびアルキルからなる群から選択されるものである。
【００１８】
現在好ましい化合物は、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（（（（（１Ｓ）−１−（（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル）ペンチル）アミノ）カルボニル）アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［（１，３−チアゾール−２−イルメチル）（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−４−モルホリノ−４−オキソブタン酸、（３Ｒ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジアリルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジイソブチルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（３−メトキシベンジル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（（（（（１Ｓ）−１−（（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル）ペンチル）アミノ）カルボニル）（メチル）アミノ）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−チエニル）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−メトキシフェニル）プロパン酸、（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−チエニルスルホニル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸およびそれらの医薬的に許容される塩、光学異性体およびプロドラッグである。
【００１９】
本発明はさらに、生理的に許容される希釈剤および１種類以上の本発明の化合物を含む医薬組成物に関するものでもある。
【００２０】
本発明はさらに、阻害上有効量の本発明の化合物存在下に、ＶＣＡＭ−１を発現する細胞に対して、α４β１インテグリンを発現する細胞を曝露する段階を有する、α４β１インテグリンのＶＣＡＭ−１への結合を阻害する方法に関するものでもある。ＶＣＡＭ−１は血管内皮細胞、抗原提示細胞その他の種類の細胞の表面に存在し得る。α４β１は単核球などの白血球、リンパ球、顆粒球、幹細胞または自然にα４β１を発現する他の細胞上に存在し得る。
【００２１】
本発明はさらに、有効量の本発明の化合物を、単独または製剤にて罹患患者に投与する段階を有する、α４β１結合が介在する疾患状態の治療方法をも提供するものである。
【００２２】
（発明を実施するための最良の形態）
用語の定義
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、炭素数１０個以下、好ましくは６個以下、より好ましくは４個以下の直鎖もしくは分岐の飽和もしくは不飽和炭素鎖を意味する。この用語はまた、アルケニル基およびアルキニル基を含むものでもある。「低級アルキル」とは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルを指す。
【００２３】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、炭素原子数３〜１０個であり、１〜３個の環を有する脂環系を指し、例えば特にシクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニルおよびアダマンチルなどがあるが、これらに限定されるものではない。シクロアルキル基は、未置換であるかあるいは低級アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、水酸基、ハロゲン、メルカプト、ニトロ、カルボキシアルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニルおよびカルボキシアミドから独立に選択される１個、２個または３個の置換基で置換されていても良い。この用語は、シクロアルケニル基およびシクロアルキニル基を含むものでもある。
【００２４】
本明細書で使用される「シクロアルキルアルキル」という用語は、低級アルキル基に懸垂したシクロアルキル基を指し、例えばシクロヘキシルメチルなどがあるが、これに限定されるものではない。
【００２５】
本明細書で使用される「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、Ｉ、Ｂｒ、ＣｌまたはＦを指す。
【００２６】
本明細書で使用される「ハロアルキル」という用語は１以上のハロゲン置換基が懸垂した低級アルキル基を指し、例えば特にクロロメチル、フルオロエチル、トリフルオロメチルおよびペンタフルオロエチルがある。
【００２７】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語はＲａＯ−を指し、Ｒａは低級アルキル基である。アルコキシの例としては、特にエトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【００２８】
本明細書で使用される「アルコキシアルコキシ」という用語は、ＲｂＯ−ＲｃＯ−を指し、Ｒｂは上記で定義の低級アルキルであり、Ｒｃはアルキレンであり、そのアルキレンは−（ＣＨ２）ｎ′−であり、ｎ′は１〜６の整数である。アルコキシアルコキシ基の代表的な例には、特にはメトキシメトキシ、エトキシメトキシ、ｔ−ブトキシメトキシなどがある。
【００２９】
本明細書で使用される「アルキルアミノ」という用語は、ＲｄＮＨ−を指し、Ｒｄは低級アルキル基であり、例えば特にエチルアミノ、ブチルアミノなどがある。本明細書で使用される「カルボキシ」という用語はカルボン酸基−Ｃ（Ｏ）ＯＨを指す。
【００３０】
本明細書で使用される「アミノ」という用語はＨ２Ｎ−を指す。
【００３１】
本明細書で使用する場合、「アリール」という用語は、例えば特にフェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、アントラセニルなどの炭素環式芳香族基を意味する。
【００３２】
「複素環」という用語は、環中に１以上の酸素、窒素または硫黄原子を有する芳香環基または非芳香環基を指し、例えば特にはフリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、１，３，５−トリチアニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、ベンゾ［ｂ］フラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、１Ｈ−インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキザリニル、１，８−ナフチリジニル、プテリジニル（pteridinyl）、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニルおよびフェノキシジニル、テトラヒドロフラノシル、テトラヒドロピラノシル、ピペリジニル、ピペラジニルがある。
【００３３】
本明細書で使用される「複素環アルキル」という用語は、低級アルキル基が懸垂した複素環基を指し、それには２−チエニルメチル、２−ピリジニルメチルおよび２−（１−ピペリジニル）エチルなどがあるが、それらに限定されるものではない。
【００３４】
本明細書で使用される「アルキル複素環」という用語は、複素環に懸垂したアルキル基を指し、それには２−メチル−５−チアゾリル、２−メチル−１−ピロリルおよび５−エチル−２−チオフェニルなどがあるが、それらに限定されるものではない。
【００３５】
存在する場合は、アリール、アルキル、シクロアルキルまたは複素環基に好適な置換基には、アルコール類、アミン類、ヘテロ原子あるいは直接結合したまたは好適な連結基を介して結合したアリール、アルキル、シクロアルキルまたは複素環基のいずれかの組み合わせなどがある。連結基は代表的には、Ｃ、Ｃ＝Ｏ、ＣＯ２、Ｏ、Ｎ、またはＳ、Ｓ＝Ｏ、ＳＯ２のいずれかの組み合わせを含む原子数１〜３個の短鎖であり、例えばエーテル類、アミド類、アミン類、尿素類、スルファミド類、スルホンアミド類などがある。
【００３６】
例えば、上記の式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩにおけるＲ１およびＲ２は独立に、フェニル、イソブチル、ｎ−ブチル、２−チエニルメチル、１，３−チアゾール−２−イル−メチル、ベンジル、チエニル、３−ピリジニルメチル、３−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル、アリル、イソブチル、３−メトキシベンジル、プロピル、２−エトキシエチル、シクロプロピルメチル、４−（（２−トルイジノカルボニル）アミノ）ベンジル、２−ピリジニルエチル、２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル、１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル、４−ピペリジニルメチル、３−ヒドロキシ−４−メトキシベンジル、４−ヒドロキシフェネチル４−アミノベンジル、フェニルスルホニルメチル、イソプロピルまたは２−オキソ−１−ピロリジニルであることができるが、それらに限定されるものではない。
【００３７】
Ｒ１とＲ２とが連結して、４−（２−チエニルメチル）ピペラジノ、４−（３−チエニルメチル）ピペラジノ、４−（２−メトキシフェニル）ピペラジノ、４−（２−チエニルカルボニル）ピペラジノ、４−（２−チエニルスルホニル）ピペラジノまたは４−（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジノなどの環を形成していても良い。
【００３８】
Ｒ３とＲ４とが連結して、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、４−ピペリジニルおよび４−テトラヒドロピラニルなどの環を形成することができる。
【００３９】
Ｒ５とＲ９とが連結して、特にピロリジノ、１−ピペリジノ、４−メチル−１−ピペラジノ、４−アセト−１−ピペラジノおよび４−モルホリノなどの環を形成していても良い。
【００４０】
Ｒ１０とＲ１１とが連結して、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルなどの環を形成していても良い。
【００４１】
上記の式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩについてのＲ５置換基は、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、１−ナフチル、チエニル、４−イソブトキシフェニル、２，６−ジメチルフェニル、アリルオキシフェニル、３−ブロモ−４−メトキシフェニル、４−ブトキシフェニル、１−ベンゾフラン−２−イル、２−チエニルメチル、フェニル、メチルスルファニル、フェニルスルファニル、フェネチルスルファニル、４−ブロモ−２−チエニル、３−メチル−２−チエニルまたは４，５−ジヒドロ−１，３−オキサゾール−２−イルであることができるが、これらに限定されるものではない。
【００４２】
上記の式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩについてのＲ３およびＲ４置換基は、水素、ブチル、ベンジル、ベンジルオキシメチル、ベンジルチオメチル、フェニルスルファニルメチル、ベンジルスルファニルメチル、エチルチオメチル、メチルスルファニルエチル、エチルスルファニルメチル、メチルまたはカルボキシエチルであることができるが、それらに限定されるものではない。
【００４３】
略称
以下の図式および実施例で使用した略称は、ｔ−ブチルオキシカルボニルがＢＯＣ；酢酸エチルがＥｔＯＡｃ；ジメチルホルムアミドがＤＭＦ；テトラヒドロフランがＴＨＦ；ｐ−トルエンスルホニルがＴｏｓ；ジシクロヘキシルカルボジイミドがＤＣＣ；１−ヒドロキシベンゾトリアゾールがＨＯＢＴ；無水トリフルオロ酢酸がＴＦＡＡであり；Ｎ−メチルモルホリンがＮＭＭであり；ジイソプロピルエチルアミンがＤＩＰＥＡであり；塩化メチレンがＤＣＭであり；リチウムヘキサメチルジシラジドがＬＨＭＤＳであり；ナトリウムヘキサメチルジシラジドがＮａＨＭＤＳであり１，１′−カルボニルジイミダゾールがＣＤＩであり；ＴＲＩＳ−緩衝生理食塩水がＴＢＳである。アミノ酸については、Ｌ−システインをＣ、Ｌ−アスパラギン酸をＤ、Ｌ−グルタミン酸をＥ、グリシンをＧ、Ｌ−ヒスチジンをＨ、Ｌ−イソロイシンをＩ、Ｌ−ロイシンをＬ、Ｌ−アスパラギンをＮ、Ｌ−プロリンをＰ、Ｌ−グルタミンをＱ、Ｌ−セリンをＳ、Ｌ−トレオニンをＴ、Ｌ−バリンをＶ、Ｌ−トリプトファンをＷと略する。
【００４４】
上記で示した式の化合物合成に使用することができる手順の例を図式１〜６に示してある。
【００４５】
【化７】
0004949552.tif 000005
【００４６】
【化８】
0004949552.tif 000006
【００４７】
図式２を上記に示す。
【００４８】
【化９】
0004949552.tif 000007
【００４９】
【化１０】
0004949552.tif 000008
【００５０】
図式５を上記に示す。
【００５１】
【化１１】
0004949552.tif 000009
【００５２】
図式６を上記に示す。
【００５３】
本発明の代表的化合物の製造についての詳細な説明を実施例に示してある。
【００５４】
本発明の化合物は、無機酸または有機酸から誘導される医薬的に許容される塩の形で使用することができる。「医薬的に許容される塩」という表現は、不適当な毒性、刺激、アレルギー応答などの妥当な医学的判断の範囲内で、ヒトおよび下等動物の組織と接触して使用するのに適しており、妥当な利益／危険比を有する塩を意味する。医薬的に許容される塩は当業界で公知である。例えば、バージらの報告には医薬的に許容される塩について詳細に記載されている（M. Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66: 1 et seq）。これらの塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製時にin situで、あるいは遊離塩基官能基を好適な有機酸と反応させることで別個に製造することができる。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イソチオン酸塩）、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パルミトイル酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩などがあるが、これらに限定されるものではない。さらに、塩基性窒素含有基を、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピルおよびブチルなどの低級アルキルハロゲン化物；硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルなどの硫酸ジアルキル；塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルなどの長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジルおよびフェネチルなどのハロゲン化アリールアルキルなどの試薬で４級化することができる。それによって、水溶性または油溶性またはそれらに分散性の生成物が得られる。医薬的に許容される酸付加塩を形成するのに使用することができる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸などの無機酸ならびにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸およびクエン酸などの有機酸などがある。
【００５５】
塩基付加塩は、医薬的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩などの好適な塩基あるいはアンモニアまたは有機１級、２級もしくは３級アミンとカルボン酸含有部分とを反応させることで、本発明の化合物の最終的な単離および精製時にin situで製造することができる。医薬的に許容される塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびアルミニウム塩などのアルカリ金属またはアルカリ土類金属に基づいたカチオンならびに特にアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアンモニウム、ジメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、エチルアンモニウムなどの無毒性の４級アンモニアおよびアミンカチオンなどがあるが、これらに限定されるものではない。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミン類には、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、ピペラジンなどがある。
【００５６】
本発明の化合物の局所投与用製剤には、分座、噴霧剤、軟膏および吸入剤などがある。活性化合物を無菌条件下に、医薬的に許容される担体ならびに何らかの必要な保存剤、緩衝剤または必要になる場合がある推進剤と混合する。眼科製剤、眼軟膏、粉剤および液剤も、本発明の範囲内であると想到される。
【００５７】
本発明の医薬組成物中の有効成分の実際の用量レベルを変動させて特定の患者、組成物および投与形態に関して所望の治療応答を達成する上で有効な量の活性化合物を得ることができる。選択用量レベルは、特定化合物の活性、投与経路治療対象の状態の重度ならびに治療を受ける患者の状態および病歴に応じて変わる。しかしながら、所望の治療効果を達成する上で必要なレベルより低いレベルの化合物用量から開始し、所望の効果が得られるまで用量を漸増させることは、当業界の技術の範囲内である。
【００５８】
上記または他の治療で使用する場合、治療上有効量の本発明の化合物の一つを、純粋な形で、あるいは存在する場合には、医薬的に許容される塩、エステルまたはプロドラッグの形態で用いることができる。別法として、前記化合物を、１以上の医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて、対象化合物を含む医薬組成物として投与することができる。本発明の化合物の「治療上有効量」という表現は、医学的治療に適用可能な妥当な利益／リスク比で、障害を治療する上で十分な量の化合物を意味する。しかしながら、本発明の化合物および組成物の総１日使用量は、妥当な医学的判断の範囲内で担当医が決定する。特定患者についての具体的な治療上有効な用量レベルは、治療対象の障害および障害の重度；使用する具体的な化合物の活性；使用する具体的な組成物；患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事；使用する具体的化合物の投与時刻、投与経路、排泄速度；使用する具体的化合物と組み合わせてまたは同時投与で使用する薬剤；ならびに医薬業界で公知の同様の要素などの各種要素によって決まる。例えば、所望の治療効果を達成する上で必要なレベルより低いレベルの化合物用量から開始し、所望の効果が得られるまで用量を漸増させることは、当業界の技術の範囲内である。
【００５９】
ヒトまたは下等動物に投与する本発明の化合物の総１日用量としては、約０．０００１〜約１０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲が可能である。経口投与に関しては、より好ましい用量は、約０．００１〜約５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲とすることができる。所望に応じて、有効１日用量を複数用量に分解して投与することができる。結果的には、１回投与組成物は、１日用量を構成するような量またはその約数量を含有することができる。
【００６０】
本発明はさらに、１以上の無毒性の医薬的に許容される担体とともに製剤した本発明の化合物を含む医薬組成物をも提供する。医薬組成物は特に、固体もしくは液体の形で経口投与用に、あるいは直腸投与用に製剤することができる。
【００６１】
本発明の医薬組成物は、ヒトおよび他の哺乳動物に対して、経口投与、直腸投与、非経口投与、大槽内投与、経膣投与、腹腔内投与、局所投与（粉剤、軟膏または滴剤によるものなど）、バッカル剤投与するか、あるいは経口もしくは経鼻噴霧剤として投与することができる。本明細書で使用される「非経口的に」という用語は、静脈、筋肉、腹腔内、胸骨内、皮下および関節内の注射および注入を含む投与形態を指す。
【００６２】
別の態様において本発明は、本発明の成分および生理的に耐容される希釈剤を含む医薬組成物を提供するものである。本発明は、非経口注射、経鼻投与、固体もしくは液体の形での経口投与、直腸もしくは局所投与などのために、本明細書で総称して希釈剤と称する１以上の無毒性で生理的に耐容もしくは許容される希釈剤、担体、補助剤または媒体とともに組成物中に製剤する上記の１以上の化合物を含むものである。
【００６３】
前記組成物は、冠動脈内ステント（細いワイアメッシュからなる管状機器）または生体分解性ポリマーを介して、標的部位で局所投与用のカテーテルから投与することもできる。前記化合物はまた、標的指向（targeted）投与のために、抗体などのリガンドと複合体形成させることもできる。
【００６４】
非経口注射に適した組成物は、生理的に許容される無菌の水系もしくは非水系液剤、分散液、懸濁液または乳濁液ならびに再生して無菌の注射用溶液もしくは分散液とするための粉剤を含むことができる。好適な水系および非水系の担体、希釈剤、溶媒または媒体には、水、エタノール、多価アルコール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセリンなど）、植物油（オリーブ油など）、オレイン酸エチルなどの注射用有機エステル、ならびにそれらの好適な混合物などがある。
【００６５】
これらの組成物はまた、保存剤、湿展剤、乳化剤および分散剤などの補助剤を含むこともできる。微生物の作用防止は、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などの各種抗菌および抗真菌剤によって確保することができる。例えば、糖類、塩化ナトリウムなどの等張剤を含有させることが望ましい場合もある。例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなど、吸収を遅延させる薬剤を使用することで、注射用医薬製剤の長期吸収を行うことができる。
【００６６】
活性化合物以外に、懸濁液には、例えばエトキシ化イソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル類、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカントまたはそれら物質の混合物などの懸濁剤を含有することができる。
【００６７】
例えば、レシチンなどのコーティング剤を用いたり、分散液の場合には必要な粒径を維持することで、さらには界面活性剤を用いることで、適切な流動性を維持することができる。
【００６８】
場合によっては、薬剤の効果を長引かせるには、皮下注射または筋肉注射からの医薬品の吸収を遅延させることが望ましい。これは、水溶性が低い結晶または非晶質材料の懸濁液を用いることで行うことができる。薬剤の吸収速度はそれの溶解速度によって決まり、後者は次に、結晶の大きさおよび結晶型によって決まると考えられる。別形態として、非経口投与医薬製剤の遅延吸収は、オイル系媒体中に薬剤を溶解または懸濁させることで行う。
【００６９】
注射用デポー製剤は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生体分解性ポリマー中で薬剤のマイクロカプセル基質を形成することで得られる。薬剤のポリマーに対する比ならびに使用する特定のポリマーの性質に応じて、薬剤放出の速度を制御することができる。多の生体分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）類およびポリ（無水物）などがある。デポー注射製剤は、身体組織と適合性であるリポソームまたは微乳濁液に薬剤を捕捉させることによっても製剤される。
【００７０】
注射製剤は例えば、細菌保持フィルターを用いる濾過によって、あるいは使用直前に無菌水その他の無菌注射用媒体に溶解または分散させることができる無菌の固体組成物の形で滅菌剤を組み入れることで滅菌することができる。
【００７１】
経口投与用の固体製剤には、カプセル、錠剤、丸薬、粉剤および粒剤などがある。そのような固体製剤では、活性化合物を、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウムなどの１以上の不活性で医薬的に許容される賦形剤もしくは担体、および／またはａ）デンプン類、乳糖、ショ糖、グルコース、マニトールおよびケイ酸などの充填剤もしくは増量剤；ｂ）カルボキシメチルセルロース、アルギン酸化合物、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖およびアカシアゴムなどの結合剤；ｃ）グリセリンなどの湿潤剤；ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸化合物および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；ｅ）パラフィンなどの溶液遅延剤；ｆ）４級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；ｇ）セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセリンなどの湿展剤；ｈ）カオリンおよびベントナイトクレーなどの吸収剤；ｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物などの潤滑剤と混合することができる。カプセル、錠剤および丸薬の場合、製剤は緩衝剤を含有することもできる。
【００７２】
同様の種類の固体組成物も、ラクトースすなわち乳糖などの賦形剤ならびに高分子量ポリエチレングリコール類などを用いる軟および硬充填ゼラチンカプセル中に充填剤として用いることもできる。
【００７３】
錠剤、糖剤、丸薬および粒剤という固体製剤は、腸溶コーティング剤および医薬製剤業界で公知の他のコーティング剤のようなコーティング剤および外皮を用いて製剤することができる。それらは適宜に、乳濁剤を含有することができ、適宜に徐放的に腸管のある部分のみでまたはその部分で優先的に有効成分を放出するような組成物とすることもできる。使用可能な包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびロウ類などがあり得る。
【００７４】
適切な場合、活性化合物には、１以上の上記賦形剤を用いて、マイクロカプセルの形態とすることもできる。
【００７５】
経口投与用液体製剤には、医薬的に許容される乳濁液、液剤、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤などがある。活性化合物以外に、液体製剤は、例えば水その他の溶媒、可溶化剤ならびにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、オイル類（特には、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油およびゴマ油）、グリセリン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール類およびソルビタンの脂肪酸エステル類ならびにそれらの混合物などの乳化剤を含有することができる。
【００７６】
不活性希釈剤以外に、経口組成物は、湿展剤、乳化剤および懸濁剤、甘味剤、香味剤および芳香剤などの補助剤を含有することもできる。
【００７７】
直腸投与または経膣投与用の組成物は好ましくは、室温で固体であるが体温では液体であることから、直腸または膣腔で融解し、活性化合物を放出するカカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬用ロウなどの好適な非刺激性賦形剤または担体と、本発明の化合物を混合することで製造することができる。
【００７８】
本発明の化合物は、リポソームの形で投与することもできる。当業界で公知のように、リポソームはリン脂質その他の脂質物質に由来するものである。リポソームは、水系媒体中で分散する単ラメラまたは多ラメラ水和液晶によって形成される。リポソームを形成することができる無毒性で生理的に許容され代謝可能な脂質を用いることができる。リポソームの形での本発明の組成物は、本発明の化合物以外に、安定剤、保存剤、賦形剤などを含有することができる。好ましい脂質は、別個または一緒に使用される天然および人工のリン脂質およびホスファチジルコリン類（レシチン類）である。
【００７９】
リポソーム形成方法は当業界で公知である。例えば、プレスコットの編著を参照する（Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p.33 et seq）。
【００８０】
本明細書で使用される「医薬的に許容されるプロドラッグ」という用語は、妥当な医学的判断の範囲内で、不適切な毒性、刺激、アレルギー応答などを起こすことなくヒトおよび下等動物の組織と接触しての使用に好適であり、妥当な利益／リスク比を持ち、所期の用途において有効である本発明の化合物のプロドラッグ、ならびに可能な場合には、本発明の化合物の両性イオン型を表す。本発明のプロドラッグは、例えば血液中での加水分解によってin vivoで急速に変換を受けて、上記式の親化合物になることができる。詳細な考察は、ヒグチらの著作（T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, V. 14 of the A.C.S. Symposium Seriesおよびロッシュらの著作（Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press (1987)）にあり、それらは引用によって本明細書に含まれるものとする。
【００８１】
哺乳動物に投与される異なる化合物のin vivo変換によって形成される本発明の化合物は、本発明の範囲に含まれるものである。
【００８２】
本発明の化合物は、不斉中心またはキラル中心が存在する立体異性体として存在することができる。これらの異性体は、置換基およびキラル炭素原子の配置によって決まる「Ｒ」または「Ｓ」である。立体異性体には、エナンチオマーおよびジアステレオマー、ならびにエナンチオマーまたはジアステレオマーの混合物が想到される。本発明の化合物の個々の立体異性体は、不斉またはキラル中心を有する市販の原料から合成的に製造することができるか、あるいはラセミ混合物を製造し、次に当業者には公知の分割を行うことで得ることができる。その分割方法の例としては、（１）エナンチオマー混合物のキラル補助剤への結合、得られるジアステレオマー混合物の再結晶もしくはクロマトグラフィーによる分離、ならびに補助剤からの光学的に純粋な生成物の放出、あるいは（２）キラルクロマトグラフィーカラムでの光学エナンチオマー混合物の直接分離などがある。
【００８３】
本発明の化合物は、溶媒和しない状態ならびに半水化物などの水和型のような溶媒和型で存在することができる。特に水およびエタノールなどの医薬的に許容される溶媒との溶媒和物は、本発明に関しては、非溶媒和物と同等である。別の態様において本発明は、α４β１インテグリンのＶＣＡＭ−１への結合を阻害する方法を想到するものである。本発明の方法は、in vitroまたはin vivoで用いることができる。本発明の方法によれば、阻害を行う上で有効な量の本発明の化合物の存在下、α４β１インテグリンを発現する細胞をＶＣＡＭ−１を発現する細胞に曝露する。
【００８４】
α４β１インテグリンを発現する細胞は、天然白血球、肥満細胞その他の細胞表面で自然にα４β１を発現する細胞種、あるいはα４β１インテグリンをコードするポリヌクレオチド（例：ゲノムＤＮＡまたｃＤＮＡ）を含む発現ベクターでトランスフェクションした細胞であることができる。特に好ましい実施態様では、α４β１インテグリンは、単球、リンパ球または顆粒球（例：好酸球または好塩基球）などの白血球表面上に存在する。
【００８５】
ＶＣＡＭ−１を発現する細胞は、天然細胞（例：内皮細胞）またはＶＣＡＭ−１をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターでトランスフェクションした細胞であることができる。ＶＣＡＭ−１を発現するトランスフェクション細胞の製造方法は当業界で公知である。
【００８６】
ＶＣＡＭ−１が細胞表面に存在する場合、そのＶＣＡＭ−１の発現は好ましくは、腫瘍壊死因子−α、インターロイキン−４およびインターロイキン−１βなどの炎症性サイトカイン類によって誘発される。
【００８７】
α４β１インテグリンおよびＶＣＡＭ−１を発現する細胞が生存生物にある場合、その生存生物に本発明の化合物を有効な量で投与する。好ましくはその化合物は、本発明の医薬組成物に含有させる。本発明の方法は白血球の損傷組織への制御されない移動に関連する疾患の治療において特に有用である。そのような疾患には、喘息、アテローム性動脈硬化、慢性関節リウマチ、アレルギー、多発性硬化症、狼瘡、炎症性腸疾患、移植片拒絶反応、接触過敏症、Ｉ型糖尿病、白血病および脳の癌などがあるが、それらに限定されるものではない。投与は好ましくは、血管投与、皮下投与、経鼻投与、経皮投与または経口投与で行う。
【００８８】
本発明はさらに、α４β１インテグリンの蛋白への結合を選択的に阻害する方法であって、阻害上有効量の本発明の化合物存在下に、インテグリンを蛋白に曝露させる段階を有する方法をも提供するものである。好ましい実施態様では、α４β１インテグリンは、天然またはα４β１インテグリンを発現するよう形質転換した細胞の表面で発現される。
【００８９】
α４β１インテグリンが結合する蛋白は、細胞表面上または細胞外基質の一部で発現させることができる。特に好ましい蛋白はフィブロネクチンまたはインベーシン（ｉｎｖａｓｉｎ）である。
【００９０】
以下、本発明の化合物が結合を阻害する能力について、実施例に詳細に説明する。これら実施例は、本発明の好ましい実施態様および用途について説明するためのものであり、本明細書に添付の特許請求の範囲に別段の記載がない限り、本発明を限定するものではない。
【００９１】
実施例１
（９Ｓ，１３Ｓ）−１３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−９−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−３，１１−ジオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１２−トリアザペンタデカン−１５−酸（６）の合成
段階１：チオフェン２−メチルアミン（１．３６ｍＬ、１３．２６ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶かした。この溶液に、ベンズアルデヒド（１．３４ｍＬ、１３．２６ｍｍｏｌ）、水素化シアノホウ素ナトリウム（８３２ｍｇ、１３．２６ｍｍｏｌ）および酢酸２滴を加えた。反応液を室温で２４時間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、酢酸エチル（５００ｍＬ）に取った。有機層を水（２００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機溶液をＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン（１：３）によって流して、１を得た（１．３０５ｇ、４８％）。
【００９２】
段階２：化合物１（５０ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）およびＮα−ｔ−ＢＯＣ−Ｎε−Ｃｂｚ−Ｌ−リジン（９４ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶かし、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（６１ｍｇ、０．２９５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、溶液を水で洗浄し（１００ｍＬで２回）、ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をシリカゲルで酢酸エチル：ヘキサン（１：３）によって流して、２を得た（１２７ｍｇ、９１％）。
【００９３】
段階３：化合物２（１２０ｍｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）を２Ｎ ＨＣｌのジオキサン溶液（４ｍＬ）に溶かし、室温で３時間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮した。残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して３を得た（９０ｍｇ、９２％）。
【００９４】
段階４：化合物３（８５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）および４（７１ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）混合液に溶かした。トリエチルアミン（０．０３ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、溶液を０．５Ｎ ＮａＯＨ水溶液で洗浄し（２５ｍＬで５回）、ＭｇＳＯ４で脱水した。減圧下に濃縮して、５を得た（１１９ｍｇ、９２％）。
【００９５】
段階５：化合物５（１１０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）、水（２ｍＬ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）混合液に溶かした。水酸化リチウム（１３ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で終夜加熱した。冷却後、反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８、水：アセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ、３０分間かけて２０％から６０％アセトニトリルの勾配、２５４ｎｍで検出）精製によって、６を得た（１０ｍｇ、９％）。
【００９６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール−ｄ４）：δ７．２５〜７．３５（ｍ、１０Ｈ）、６．７〜７．０（ｍ、６Ｈ）、５．９（ｍ、２Ｈ）、５．０〜５．１（ｍ、４Ｈ）、４．４〜４．７（ｍ、４Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ、２Ｈ）、２．６〜２．８（ｍ、２Ｈ）、１．１〜１．６（ｍ、６Ｈ）。
【００９７】
実施例２
３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（４−ブトキシフェニル）プロパン酸（１２）の合成
段階１：（Ｒ）−ｐ−トルエンスルフィン酸（１Ｓ，２Ｒ，５Ｓ）−（＋）−メンチル（０．５９ｇ、２．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶かし、窒素下に冷却して−７８℃とした。混合物に、リチウムＮ，Ｎ−ビス（トリメチルシリル）アミド（３．０ｍＬ、１．０ＭのＴＨＦ溶液）を滴下した。滴下終了後、冷却浴を外し、混合物を室温で５時間撹拌した。溶液を冷却して０℃とし、注射器を用いてチオフェン−２−カルボキシアルデヒド（０．３７ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）を加え、その後直ちに粉末フッ化セシウム（０．６１ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を室温で１８時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応停止し、酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。有機溶液を濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して（シリカゲル、１４：１ヘキサン：酢酸エチル）、化合物７（０．３０ｇ、６７％）を得た。
【００９８】
段階２：ナトリウムＮ，Ｎ−ビス（トリメチルシリル）アミド（１．４ｍＬ、１．０ＭのＴＨＦ溶液）を冷却して−７８℃とし、酢酸エチル（０．１４ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を滴下した。１５分後、ジエチルエーテル（４．２ｍＬ）をフラスコの横側からゆっくり流し込み、次に化合物７のジエチルエーテル溶液（３．６ｍＬ）を加えた。混合物を−７８℃で５時間維持し、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応停止し、昇温させて室温とした。混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機相を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して（シリカゲル、６：１から３：１ヘキサン：酢酸エチルへの勾配溶離）によって精製して、化合物８を得た（０．２５９ｇ、変換率７８％で収率８０％）。
【００９９】
段階３：脱水メタノール（３．３ｍＬ）に溶かした化合物８（０．２５９ｇ、０．８２７ｍｍｏｌ）を冷却して０℃とし、トリフルオロ酢酸（０．１２７ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を０℃で２．５時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物をジエチルエーテルと２ＮＨＣｌとの間で分配した。水層を塩化メチレンおよび飽和重炭酸ナトリウム水溶液に投入し、塩化メチレンで抽出した（２回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。化合物９（０．１１９ｇ、７２％）を透明油状物として回収し、それ以上精製せずに使用した。
【０１００】
段階４：塩化メチレンに溶かした化合物９（０．１１９ｇ、０．５９８ｍｍｏｌ）を１，１′−カルボニルジイミダゾール（０．０９７ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）で処理した。室温で３０分間撹拌後、化合物１０（０．１９ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、２ＮＨＣｌ、水、飽和重炭酸ナトリウム溶液およびブラインの順で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して（シリカゲル、勾配溶離３：１から２：１ヘキサン：酢酸エチル）、化合物１１（０．２６ｇ、７９％）を得た。
【０１０１】
段階５：化合物１１（０．２６ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を３：１ＴＨＦ：水（１．９ｍＬ）およびメタノール（０．５ｍＬ）に溶かした。水酸化リチウム・１水和物（０．０３０ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を室温で固体として加えた。４時間後、混合物を水で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。エーテル層を廃棄し、水層を過剰の２ＮＨＣｌで抽出した。酸性水層を酢酸エチルで抽出し（２回）、合わせた。有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。有機溶液を濾過し、減圧下に濃縮して、化合物１２を得た（０．２３ｇ、９２％）。
【０１０２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．２５（ｂｒ．Ｓ、１Ｈ）、７．４７（ｄｄ、Ｊ＝１．１，５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｄｄ、Ｊ＝１．１，５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄｄ、Ｊ＝１．４，５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０７（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｍ、２Ｈ）、６．９３（ｍ、３Ｈ）、６．６５（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．４３（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．２９（ｄｄ、Ｊ＝７．１，１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．９２（ｄ、Ｊ＝１６．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｍ、３Ｈ）、４．５６（ｄ、Ｊ＝１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．７５（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．４６（ｍ、２Ｈ）、１．１８（ｍ、４Ｈ）、０．７８（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）。
【０１０３】
実施例３
（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］−カルボニル｝アミノ）−３−（２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸ナトリウム塩（１９）の合成
段階１：Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−アスパラギン酸β−メチルエステル（６．０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（５．２ｍＬ、３６．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を冷却して０℃とし、クロロギ酸イソブチル（３．６ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。氷冷溶液を濾過し、ジアゾメタン（１００ｍｍｏｌ）のエーテル溶液（７５ｍＬ）を加えた。低温で１時間撹拌後、窒素ガスを反応液に吹き込んで過剰のジアゾメタンを除去した。濃縮によって１３を得て（４．５ｇ）、それ以上精製せずに使用した。
【０１０４】
段階２：ジアゾケトン１３（４ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）をエーテル（２０ｍＬ）に溶かした。反応混合物を冷却して−３０℃とし、４８％ＨＢｒのＨ２Ｏ溶液（５ｍＬ）で処理した。黄色が消えなくなったら、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機溶液をＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。クロマトグラフィー精製（シリカゲル、３：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって１４を得た（３．５ｇ、７４％）。
【０１０５】
段階３：１４（１ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（７ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．４５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）およびチオアセトアミド（０．２３ｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー精製することで（シリカ、３５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）１５を得た（０．９２ｇ、６０％）。
【０１０６】
段階４：化合物１５（８００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）をジオキサン（３ｍＬ）に溶かし、４．０ＭＨＣｌのジオキサン溶液（３ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、減圧下に濃縮した。それによって１６を得て（５８０ｍｇ、７８％）、それ以上精製せずに使用した。
【０１０７】
段階５：化合物１６（３００ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦ（５ｍＬ）に懸濁させ、次にジイソプロピルエチルアミン（０．４０ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、カーバメート１７（７００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）で処理し、反応液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、５％ＮａＯＨ溶液で抽出し、有機層をＭｇＳＯ４で脱水した。濃縮およびクロマトグラフィー精製（シリカゲル、１：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって１８を得た（１７５ｍｇ、６５％）。
【０１０８】
段階６：化合物１８（１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶かし、ＮａＯＨ（７．０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の水溶液（水１ｍＬ）を加えた。反応混合物を４５℃で２時間撹拌した。粗反応液を凍結乾燥して、１９を黄色固体として得た。
【０１０９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ０．８５（ｍ、３Ｈ）、１．４２（ｍ、４Ｈ）、１．４８（ｍ、２Ｈ）、２．６５（ｓ、３Ｈ）、２．８０（ｍ、１Ｈ）、３．０５（ｍ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、４．９５（ｍ、１Ｈ）、５．３０（ｍ、１Ｈ）、５．６３（ｍ、１Ｈ）、５．８５（ｍ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、７．２５（ｍ、４Ｈ）、７．３０（ｍ、２Ｈ）。
【０１１０】
実施例４
５−［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］−５−オキソ−３−フェニルペンタン酸（２０）の合成
１０（０．３０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）および３−フェニルグルタミン酸（２１４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、ＤＣＣ（２２５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃと５％ＨＣｌとの間で分配した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。クロマトグラフィー精製（シリカゲル、２％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）によって２０を得た（８０ｍｇ、５２％）。
【０１１１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ４）：δ０．８９（ｍ、３Ｈ）、０．９５（ｍ、４Ｈ）、１．３０（ｍ、２Ｈ）、２．８５（ｍ、１Ｈ）、２．９５（ｍ、２Ｈ）、３．８３（ｍ、１Ｈ）、４．６〜４．８（ｍ、４Ｈ）、５．００（ｍ、１Ｈ）、６．９５（ｍ、４Ｈ）、７．２２（ｍ、５Ｈ）。
【０１１２】
実施例５
（３Ｒ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸（２５）の合成
段階１：イソブチリルクロライド（４７ｇ、０．４４ｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（７５ｍＬ）およびｔｅｒｔ−ブタノール（７５ｍＬ）溶液に０℃で、ピリジン（３９．３ｍＬ、４８６ｍｍｏｌ）を注射器によってゆっくり加えた。混合物を昇温させて室温とし、終夜撹拌し、ＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍＬ）によって希釈し、Ｈ２Ｏ、ＨＣｌ（２Ｎ、２回）、Ｈ２Ｏ（２回）および飽和ＮａＨＣＯ３によって洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濾液を加熱せずに減圧下に濃縮した。得られた油状物を簡単に蒸留し、１２８〜１２９℃で沸騰する留分を回収して、イソブチル酸ｔｅｒｔ−ブチル２１を得た（３５．９ｇ、５６％）。
【０１１３】
段階２：ピペロナール（７５１ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液を乾燥窒素雰囲気下に冷却して０℃とし、それにリチウムビストリメチルシリルアミド（１．０ＭのＴＨＦ溶液５．０ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。得られた混合物を０℃で１５分間撹拌し、昇温させて室温とした。このＴＭＳ−アルドイミン溶液を下記の方法に従って直接使用した。
【０１１４】
段階３：ジイソプロピルアミン（０．８４ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を乾燥窒素雰囲気下に冷却して−７８℃とし、それにブチルリチウム（１．６Ｍヘキサン溶液３．７５ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、２１（７２１ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、２０分間かけてフラスコの側面からカニューレで滴下し、ＴＨＦ（１ｍＬ）で洗浄した。混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、段階２で製造したＴＭＳ−アルドイミン溶液を１５分間かけてフラスコの側面からカニューレで滴下し、ＴＨＦ（１ｍＬ）で洗浄した。得られた混合物を２４時間かけて徐々に昇温させて室温とし、ＨＣｌ（２０ｍＬ、２Ｎ）で反応停止し、直ちに酢酸エチルを加えた。混合物をＨ２Ｏ（２回）、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濾液を減圧下に濃縮し、残留物について、溶離液を３：２ヘキサン：酢酸エチルから１：１ヘキサン：酢酸エチルとし、最終的に１：３ヘキサン：酢酸エチルとするシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って、β−ラクタム２２（２２６ｍｇ、２１％）を白色固体として得た。
【０１１５】
段階４：アミン１０（７７０ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）溶液を乾燥窒素雰囲気下に冷却して０℃とし、それにトリエチルアミン（０．５０ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸フェニル（０．３７ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。得られた混合物を０℃で１時間撹拌し、７：３ヘキサン：酢酸エチルで希釈し、Ｈ２Ｏ（２回）およびブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濾液を減圧下に濃縮した。残留物について、溶離液を４：１ヘキサン：酢酸エチルとするシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って、カーバメート２３（９０７ｍｇ、８６％）を無色油状物として得た。
【０１１６】
段階５：β−ラクタム２２（１１７ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．３ｍＬ）溶液を乾燥窒素雰囲気下に−４５℃で冷却し、それにブチルリチウム（１．６Ｍヘキサン溶液０．３３ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。混合物を−４５℃で１５分間撹拌し、乾燥窒素雰囲気下に−４５℃まで冷却したカーバメート２３（２９３ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．３ｍＬ）溶液をカニューレで滴下し、ＴＨＦ（１ｍＬ）で洗浄した。得られた混合物を１時間かけて昇温させて０℃とし、氷酢酸（０．５ｍＬ）のＨ２Ｏ（５ｍＬ）溶液で反応停止し、ヘキサン：酢酸エチルの１：１混合液およびＨ２Ｏで直ちに希釈した。有機相をＨ２Ｏ（２回）、飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濾液を減圧下に濃縮した。残留物について、溶離液を４：１ヘキサン：酢酸エチルから３：１ヘキサン：酢酸エチルとし、最終的に１３：７ヘキサン：酢酸エチルとするシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って、β−ラクタム２４（最も極性の高いジアステレオマー１０６ｍｇ、３５％）を無色油状物として得た。
【０１１７】
段階６：β−ラクタム２４（７３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５ｍＬ）溶液に室温で、水酸化リチウム（２７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（０．７５ｍＬ）溶液を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌し、ＨＣｌで酸性とし、酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濾液を減圧下に濃縮して２５（７８ｍｇ、１００％）を黄色粉末として得た。
【０１１８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＳＯＣＤ３）：δ０．７３（ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）、１．０１（ｓ、３Ｈ）、１．０２（ｓ、３Ｈ）、１．０５〜１．５３（ｍ、６Ｈ）、４．６３（ｍ、４Ｈ）、４．８６（ｄ、Ｊ＝１０．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４（ｄ、Ｊ＝１６．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．９６（ｓ、１Ｈ）、５．９７（ｓ、１Ｈ）、６．５２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．６６（ｄｄ、Ｊ＝８．１，１．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７１（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．７３（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．９５（ｄｄ、Ｊ＝５．１，３．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１（ｍ、２Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｍ、１Ｈ）、７．４７（ｍ、１Ｈ）。
【０１１９】
実施例６
（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−［｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ｝カルボニル｝（メチル）アミノ］プロパン酸（３０）の合成
段階１：乾燥窒素雰囲気下、室温にて２６（５１３ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．３２ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４４３ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で終夜撹拌し、７：３ヘキサン：酢酸エチル混合液で希釈し、ＨＣｌ（２Ｎ）、Ｈ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。次に、濾液を減圧下に濃縮して、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−β−アミノエステル２７（７４３ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。その取得物はジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを４〜５％含有していたが、精製せずに使用した。
【０１２０】
段階２：乾燥窒素雰囲気下で室温にて２７（３７０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（０．５０Ｍトルエン溶液４．０４ｍＬ、２．０２ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。得られた混合物を室温で１５分間撹拌し、ヨウ化メチル（０．２５ｍＬ、４．０４ｍｍｏｌ）を注射器によって一気に加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、ＨＣｌ（２Ｎ）で反応停止し、３：２ヘキサン：酢酸エチルで直ちに希釈した。有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濾液を減圧下に濃縮し、残留物について、溶離液を１７：３ヘキサン：酢酸エチルとするシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って、Ｎ−メチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−β−アミノエステル２８（２３８ｍｇ、６２％、［消費された２７に基づいて８７％］）を、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−β−アミノエステル２７（１０６ｍｇ、２９％）とともに無色油状物として得た。
【０１２１】
段階３：乾燥窒素雰囲気下に室温でゴム隔膜で密閉した、２８（４０５ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の入ったフラスコに、ＨＣｌ（４．０Ｍジオキサン溶液５．３ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。窒素導入針を外し、密閉フラスコ中の混合物を終夜撹拌した。得られた懸濁液をジエチルエーテルで希釈し、過剰のＨＣｌを窒素気流下に除去した。次に、混合物を減圧下に除去し、残留物をＨ２Ｏ（４０ｍＬ）に取り、凍結乾燥して、２９（２５１ｍｇ、９５％）を黄褐色固体として得た。
【０１２２】
段階４：乾燥窒素雰囲気下に室温で、１０（１１０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（１ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）およびホスゲン（１．９Ｍトルエン溶液０．１８ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を注射器によって加えた。混合物を３０分間撹拌し、カニューレによって、２９（８８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（１ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０６６ｍＬ、０．３８ｍｍｏｌ）溶液に加えた。得られた混合物を４０℃まで加熱して終夜経過させ、冷却して室温とし、酢酸エチルで希釈し、ＨＣｌ（２Ｎ、２回）およびブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。次に、濾液を減圧下に濃縮した。残留物について、溶離液を１９：１クロロホルム：メタノールから９：１クロロホルム：メタノールとするシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って３０を得た（１２９ｍｇ、６６％）。
【０１２３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＳＯＣＤ３）：δ０．８０（ｍ、３Ｈ）、１．２０（ｍ、４Ｈ）、１．５９（ｍ、２Ｈ）、２．６０（ｄｄ、Ｊ＝１５．４，７．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．８２（ｍ、１Ｈ）、４．５７〜４．７５（ｍ、４Ｈ）、５．６１（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．９８（ｓ、１Ｈ）、５．９９（ｓ、１Ｈ）、６．７２（ｄｄ、Ｊ＝８．１，１．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．９５（ｄｄ、Ｊ＝５．１，３．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｍ、２Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｍ、１Ｈ）、７．４８（ｍ、１Ｈ）。
【０１２４】
上記の手順は、以下の化合物の合成に利用することもできる。
【０１２５】
（９Ｓ，１３Ｓ）−１３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−９−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−３，１１−ジオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１２−トリアザペンタデカン−１５−酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛（ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（（２−［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル）アミノ｝−３−（１−ナフチル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−チエニル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（（（（（１Ｓ）−１−（（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル）ペンチル）アミノ）カルボニル）アミノ）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル）｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（４−イソブトキシフェニル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノカルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２，６−ジメチルフェニル）プロパン酸；３−［４−（アリルオキシ）フェニル］−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；３−［４−（ベンジルオキシ）フェニル］−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［｛（（ｌＳ）−１−［（ジベンジルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；３−１−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−ブロモ−４−メトキシフェニル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−ナフチル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ベンジル（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（４−ブトキシフェニル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−チエニル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−チエニル）プロパン酸；３−（１−ベンゾフラン−２−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（３−ピリジニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−３−モルホリノ−３−オキソプロピル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−ベンジル−２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｒ）−１−［（ベンジルチオ）メチル］−２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｒ）−２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−１−［（エチルチオ）メチル］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［［（３−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル）メチル］（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［（３−ピリジニルメチル）（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸エチル；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（５−メチル−２−チエニル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［（１，３−チアゾール−２−イルメチル）（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−１−メチル−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛２−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−２−メチルプロピル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（４Ｓ）−４−［（｛［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−２−カルボキシエチル］アミノ｝カルボニル）アミノ］−５−［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］−５−オキソペンタン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−チエニル）プロパン酸メチル；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−４−モルホリノ−４−オキソブタン酸；（３Ｒ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジアリルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジイソブチルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（９Ｓ，１３Ｓ）−１３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−９−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−３，１１−ジオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１２−トリアザペンタデカン−１５−酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−［｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝（イソプロピル）アミノ］プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（３−メトキシベンジル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ］プロパン酸；５−［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］−５−オキソ−３−フェニルペンタン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−［｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝（メチル）アミノ］プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ−３−（４−ブロモ−２−チエニル）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ−３−（３−メチル−２−チエニル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジメチルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−［２−（３−チエニルメチル）−１，３−チアゾール−４−イル］プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジプロピルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−｛［（｛（１Ｓ）−１−［（ジプロピルアミノ）カルボニル］ペンチル｝アミノ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（２−チエニル）プロパン酸；（８Ｓ，１２Ｓ）−１２−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−８−ブチル−６−（２−エトキシエチル）−７，１０−ジオキソ−３−オキサ−６，９，１１−トリアザテトラデカン−１４−酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（４，５−ジヒドロ−１，３−オキサゾール−２−イル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（１−｛［ビス（シクロプロピルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−５−［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］−５−オキソペンタン酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（３−メトキシフェニル）プロパン酸；（１０Ｓ，１４Ｓ）−１４−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−１０−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝−２，２−ジメチル−４，１２−ジオキソ−３−オキサ−５，１１，１３−トリアザヘキサデカン−１６−酸；（３Ｓ）−３−（｛［（（１Ｓ）−５−アミノ−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−チエニルメチル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［ビス（２−チエニルメチル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−５−ヘキセン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（３−チエニルメチル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−メトキシフェニル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−チエニルカルボニル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛［（（１Ｓ）−１−｛［４−（２−チエニルスルホニル）ピペラジノ］カルボニル｝ペンチル）アミノ］カルボニル｝アミノ）プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−［（｛［（１Ｓ）−１−（｛４−［（ベンジルオキシ）カルボニル］ピペラジノ｝カルボニル）ペンチル］アミノ｝カルボニル）アミノ］プロパン酸；（３Ｓ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−３−（｛（（（１Ｓ）−１−｛（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル｝ペンチル）アミノ）カルボニル｝アミノ）プロパン酸エチル；３−（｛（（（１Ｓ）−１−｛（ビス（２−チエニルメチル）アミノ）カルボニル｝ペンチル）アミノ）カルボニル｝アミノ）−３−（３−チエニル）プロパン酸メチルならびにこれらの医薬的に許容される塩。
【０１２６】
実施例７
本発明の化合物が結合を阻害する能力は、Ｎ−末端Ｃｙｓを有するフィブロネクチンのＣＳ１配列を含む２６アミノ酸ペプチド（ＣＤＥＬＰＱＬＶＴＬＰＨＰＮＬＨＧＰＥＩＬＤＶＰＳＴ）を、マレイミド活性化卵白アルブミンにカップリングさせる方法によって求める。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）およびＣＳ１接合卵白アルブミンを、ＴＢＳ（５０ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．５；１５０ｍＭＮａＣｌ）中０．５μｇ／ｍＬで、４℃にて１６時間にわたり、９６ウェルポリスチレンプレートでコーティングした。プレートをＴＢＳで３回洗浄し、室温で４時間にわたり、３％ＢＳＡを含むＴＢＳでブロックした。ブロックしたプレートを結合緩衝液（ＴＢＳ；１ｍＭ  ＭｇＣｌ２；１ｍＭ  ＣａＣｌ２；１ｍＭ  ＭｎＣｌ２）中で３回洗浄してからアッセイに供した。カルセインＡＭで蛍光的に標識したＲａｍｏｓ細胞を結合緩衝液に再懸濁させ（細胞１０７個／ｍＬ）、化合物を含むまたは含まない同一緩衝液で１：２に希釈した。細胞をウェルに直ちに加え（細胞２．５×１０５個／ウェル）、３７℃で３０分間インキュベートした。結合緩衝液で３回洗浄後、接着細胞を溶解させ、螢光測定器を用いて定量した。結果を第１表に示してある。ＩＣ５０は、５０％阻害を得る上で必要な用量と定義される。Ａは第１表における阻害を表し、阻害パーセントは、化合物を濃度１００μＭでアッセイに加えた場合における細胞接着阻害を示す。ＩＣ５０値が小さく、阻害パーセントが大きいほど、細胞接着防止において化合物の有効性が高い。
【０１２７】
第１表
【０１２８】
【表１】
0004949552.tif 000010
【０１２９】
【表２】
0004949552.tif 000011
【０１３０】
【表３】
0004949552.tif 000012
【０１３１】
引用文献はいずれも、引用によって本明細書に含まれるものとする。
【０１３２】
本発明は、前記の説明および実施例によって説明される。それらを考慮すると、多くの変更は当業者には明らかであることから、前記の説明は説明を目的としたものであって、本発明を制限するものではない。添付の特許請求の範囲の範囲および精神内でのそのような変更はいずれも本発明に含まれるものとする。
【０１３３】
変更は、特許請求の範囲で定義される本発明の概念および範囲から逸脱しない限りにおいて、本明細書に記載の本発明の方法における組成、操作および配置において行うことができる。