(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分が、エラグ酸、その塩、その金属錯体、そのモノ−若しくはポリエーテル誘導体、又は、モノ−若しくはポリアシル化誘導体である、コラーゲンＶＩＩの割合を増加させることによる、しわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項２】
エラグ酸塩は、アルカリ金属又はアルカリ土類金属の金属塩、アミン塩、アミノ酸塩、亜鉛及び銅とのエラグ酸の金属錯体から選択され、モノ−又はポリアシル化誘導体は、２〜２２個の炭素原子を持つ飽和又は不飽和アシル基を含み、そして、前記モノ−又はポリエーテル誘導体は、１〜４個の炭素原子を持つアルコキシの誘導体、又は、エラグ酸の１以上の水酸基と糖若しくは糖鎖との縮合誘導体であることを特徴とする請求項１に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項３】
前記アルカリ金属又はアルカリ土類金属の金属塩の金属が、ナトリウムまたはカルシウムであることを特徴とする請求項２に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項４】
前記アミン塩のアミンが、メチルグルタミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、コリンまたはビス−トリエチルアミンであることを特徴とする請求項２に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項５】
前記アミノ酸塩のアミノ酸が、アルギニン、リジンまたはオルニチンであることを特徴とする請求項２に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項６】
前記アシル基が、酢酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ステアリン酸、ブラシジン酸、エルカ酸、ベヘン酸及び（全Ｚ）−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエノン酸から選択された酸から得られることを特徴とする請求項２に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項７】
前記エラグ酸の１以上の水酸基と糖若しくは糖鎖との縮合誘導体における糖が、グルコース、アラビノース、ラムノースまたはガラクトースであることを特徴とする請求項２に記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤。
【請求項８】
請求項１〜７の１つに記載のしわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤を、組成物の全重量に対して０．０００１〜５重量％含有することを特徴とする、コラーゲンＶＩＩの割合を増加させることにより、しわの出現を遅らせ若しくはその深さを低減させ、又は、脱毛症を改善する化粧用組成物（日焼け防止用組成物を除く）。
【請求項９】
前記しわ出現遅延剤、しわの深さ低減剤、又は脱毛症改善剤を、組成物の全重量に対して０．０１〜１重量％含有することを特徴とする請求項８記載の化粧用組成物（日焼け防止用組成物を除く）。
【請求項１０】
さらに、ビタミンＡ類とＣ類のビタミン、それらのエステル、トコフェロール、キサンチン、レチノイド、センテラ・アジアチカ（Ｃｅｎｔｅｌｌａ ａｓｉａｔｉｃａ）の抽出物、アジアチン（ａｓｉａｔｉｃ）やマデカシン（ｍａｄｅｃａｓｓｉｃ）酸、アジアチコシド又はマデカソシドのグリコシル化誘導体、シーゲスベッキア・オリエンタリス（Ｓｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）の抽出物、コンミフォーラ・ムカル（Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ ｍｕｋｕｌ）の抽出物、エリオボトリャ・ジャポニカ（Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａ ｊａｐｏｎｉｃａ）の抽出物、マグネシウム、マンガン、ケイ素、亜鉛、塩化マグネシウム、塩化マンガン、シラノール及びアスパラギン酸マグネシウムからなる群より選択される１種以上の物質を含有することを特徴とする請求項８または９記載の化粧用組成物（日焼け防止用組成物を除く）。
【請求項１１】
前記キサンチンが、カフェインまたはテオフィリンであることを特徴とする請求項１０記載の化粧用組成物（日焼け防止用組成物を除く）。
【請求項１２】
前記レチノイドが、ビタミンＡ酸であることを特徴とする請求項１０記載の化粧用組成物（日焼け防止用組成物を除く）。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、本質的に、化粧品又は薬学、特に皮膚科学の分野におけるエラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体の新規使用に関する。
【０００２】
エラグ酸は、２，３，７，８−テトラヒドロキシ（１）−ベンゾ−ピラノ（５，４，３−ｃｄｅ）（１）ベンゾピラン−５，１０−ジオンとも呼ばれるもので、ポリフェノール類に属するよく知られた化合物である。植物界で見受けられる。文献Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ  ２０版（１９９６）、３５８８号を参照できる。
【０００３】
ＦＲ−Ａ−１４７８５２３号公報は、エラグ酸の精製方法と、このような方法により得た純粋なエラグ酸を開示している。
エラグ酸は以下の化学式を持つ。
【０００４】
【化１】
0005010775.tif 000002
【０００５】
これは４つの縮合環を持つ。
エラグ酸は、特にフランスのＥｘｔｒａ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅから市販されており入手できる。
ＥＰ−Ａ−０４９６１７３号公報は、エラグ酸に加えて、没食子酸と加水分解型タンニンを含むアレッポ没食子（Ａｌｅｐｐｏ  ｇａｌｌｓ）の抽出物、並びに、紫外線Ｂ保護フィルターとして、及び、皮膚の老化を引き起こすフリーラジカルの有害な作用に対する防止的な役割における、化粧品での利用を記載する。
【０００６】
また、ＶＩＩ型コラーゲン（以下ではコラーゲンＶＩＩという）が、基底膜と結合して表皮を真皮につなげるアンカリングフィラメントの主要構成物質であることも知られている。「ＶＩＩ型コラーゲン、アンカリングフィラメント及び表皮水疱症」Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．（１９９３）１０１、２５２〜２５５という標題の文献でＲ．Ｂｕｒｇｅｓｏｎが記載するように、表皮の基底層のケラチン生成細胞と、より少量ではあるが真皮の繊維芽細胞とによって合成される。Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．（１９９２）９９  ８０８〜８１２のＡ．Ｋｏｅｎｉｇらの文献も参照できる。これに関して、最近の研究によると、レチノイン酸の局所適用が、光化学線作用性の老化を受けた皮膚でアンカリングフィラメントの数を増加させることが分かっている（Ｗｏｏｄｌｅｙ  Ｄ．Ｔ．ら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．（１９９０）２６３、３０５７〜９）。現在、レチノイン酸又はトレチノインは、最も有効なしわ防止剤の１つと認識されている（Ｌ．Ｈ．Ｋｌｉｇｍａｎ、Ｃｕｔｉｓ（１９８８）４１（６）４１９〜２０；Ｊ．Ｊ．Ｌｅｙｄｅｎら、Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．（１９８９）２１（３Ｐｔ  ２）６３８〜４４；Ｊ．Ｈ．Ｓａｕｒａｔ、Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．（１９９５）４３（１〜３）８９〜９２）。
【０００７】
Ｙ．Ｑ．Ｃｈｅｎ、Ａ．Ｍａｕｖｉｅｌ、Ｊ．Ｒｙｙｎａｎｅｎ、Ｓ．Ｓｏｌｌｂｅｒｇ、Ｊ．Ｕｉｔｔｏの論文（「培養ヒト皮膚繊維芽細胞及びケラチン生成細胞によるＶＩＩ型コラーゲン遺伝子の発現：ドナーの年齢及びサイトカイン応答の影響」Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ、（１９９４）１０２、２０５〜２０９）では、皮膚のもろさの増大や表皮の修復能力の減少など特定の皮膚老化の徴候は、年老いた対象でのコラーゲンＶＩＩ合成の減少に起因するものとされている。「皮膚のもろさ」なる表現は、特に皮下（ｓｕｂ−ｂａｓａｌ）での水疱の出現に関係することに留意されたい。
【０００８】
Ｍ．ＡｋｉｙａｍａらがＪ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．（１９９５）１０５  ８４４〜８５０で、コラーゲン、特にコラーゲンＶＩＩが、ヒトの毛嚢、特にマトリックス（毛乳頭近傍部）の基底膜のレベル及び隆起部（毛球の上部）の基底膜のレベルで、重要な役割を果たすことを記載している。これら２つの部位には、高い分裂能力を有する細胞、特に毛幹を生み出すケラチン生成細胞がある。
【０００９】
最後に、真皮−表皮結合は、基底部の表皮ケラチン生成細胞が最適な代謝を行うのに最も重要であることも知られている。すなわち良好な結合によって、上記細胞が、良質でしなやかな、形のよい角質層の形成とともに、細胞層の機能性を損なわない最適な内部水分量を確保することが可能になる。つまり、良好な真皮−表皮結合は、代謝平衡点での皮膚の形成及び維持に関与して、皮膚に特に美しい外観を与える。
【００１０】
本発明の範囲内では、驚くべきことに、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体が、標準ヒトケラチン生成細胞が存在する媒体中で、コラーゲンＶＩＩの割合を有意に増加させることが見いだされた。
【００１１】
この発見が、真皮と表皮との固着を促進したり、頭皮の毛嚢のレベルで、細胞、特にケラチン生成細胞の機能性の回復又は維持に寄与したりするのを特に目的とした、コラーゲンＶＩＩの割合を増加させることが望まれるすべての用途で特に有用な新規の化粧用、薬用又は特に皮膚科学用組成物の開発につながった。この性質は局所用、化粧用又は皮膚科学用組成物の製造に特に有用なことが判明した。
【００１２】
このような組成物は、特に、皮膚が弛緩した又はたるんだ人間の真皮と表皮との固着を促進することを可能にする。また、毛髪の状態を改善し、良質の毛髪の成長を促し、又は、脱毛をゆるやかにし若しくは遅らせるための毛髪ケアでも有用でありうる。更に、表皮水疱症等の、真皮−表皮結合の欠陥に伴う病状を治療できる。
【００１３】
すなわち第一の特徴によれば、本発明は、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体の、化粧学的に許容される担体からなる化粧用組成物に好ましくは配合される、真皮と表皮との固着を改善する化粧成分としての使用に関する。
表皮と真皮との固着の改善は、表皮−真皮結合の強化によって好適に実現する。
【００１４】
第二の特徴によれば、本発明は、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体の、化粧学的に許容される担体からなる化粧用組成物に好ましくは配合される、コラーゲンＶＩＩの割合を増加させる化粧成分としての使用にも関する。
【００１５】
本発明の範囲内では、驚くべきことに、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体の作用が、コラーゲンＶＩＩの割合を増加させることであると明らかに実証された。
従って、本発明の組成物は、真皮と表皮との固着を改善することが望まれる全ての用途で特に有用であることが判明した。
【００１６】
本発明の範囲内では、エラグ酸塩は、特に金属塩、なかでもナトリウムやカルシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩、メチルグルタミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、コリンやビス−トリエチルアミンの塩等のアミン塩、及び、アミノ酸塩、特にアルギニン、リジンやオルニチン等の塩基性アミノ酸の塩を含み、金属錯体は、特に亜鉛及び銅との錯体を含み、モノ−又はポリアシル化誘導体は、特に、２〜２２個の炭素原子を持つ飽和又は不飽和アシル基からなる。これらアシル基は、好ましくは、酢酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ステアリン酸、ブラシジン酸、エルカ酸、ベヘン酸及び（全Ｚ）−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエノン酸に対応する。前記モノ−又はポリエーテル誘導体は、特に、１〜４個の炭素原子を持つアルコキシの誘導体、又は、エラグ酸の１以上の水酸基と糖若しくは糖鎖との縮合誘導体である。特に、上記誘導体は、３−メトキシエラグ酸、又は、グルコース、アラビノース、ラムノースやガラクトースなどの糖とのモノ−若しくはポリエーテル誘導体である。
【００１７】
上記エーテル又はアシル化誘導体は、当業者によく知られたポリフェノールのエーテル化又はアシル化プロセスによって入手できる。そのうちいくつかは植物から抽出することでも入手できる。
【００１８】
更に、エラグ酸、その金属錯体塩、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体は、特に、皮膚を引き締め、皮膚の老化の徴候の出現を防止し又は遅らせ、しわの出現を遅らせ又はその深さを低減し、及び、毛髪の状態を改善することを目的とする。
【００１９】
すなわち本発明は、特に、しわ防止製品、皮膚の老化、特に自然な皮膚の老化、及び皮膚のたるみに対処する製品、又は、脱毛に対処するローション等の毛髪ケアローションに関する。
【００２０】
従って、本発明は、皮膚の老化、特に皮膚の光化学線作用性の老化、すなわち照射、特に太陽光線の照射及びなかでも紫外線太陽光の照射で誘発された老化に対処する特に有益な化粧用組成物の調製を可能にする。
一般的に、本発明の化粧用組成物は、特にたるんだ又は張りのない皮膚に対処するための、皮膚の引き締め製品として特に有用であることが分かる。
【００２１】
第三の特徴によれば、本発明は、真皮と表皮との固着における欠陥と関連した病状、特に真皮−表皮結合の弱化に関連した病状、例えば表皮水疱症を治療するためか、あるいは、コラーゲンＶＩＩの欠乏に関連した症状又は病状を治療するための薬用組成物、特に皮膚科学用組成物を製造するための、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体の使用にも関する。
【００２２】
本発明の化粧用又は薬用組成物、特に皮膚科学用組成物は、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体を、好適に、組成物の全重量に対して０．０００１％〜５重量％、好ましくは０．０１％〜１重量％含有する。
【００２３】
更なる利点として、本発明の組成物は、皮膚の細胞外マトリックスの構成物質の合成を促進し及び／又は良質の角質層の形成を調整する少なくとも１つの物質を更に含有してもよい。
【００２４】
挙げられるこのような物質の例は、ビタミン、特にビタミンＡ類とＣ類、及び、エステル等のそれらの誘導体、トコフェロール、キサンチン、特にカフェイン又はテオフィリン、レチノイド、特にビタミンＡ酸、センテラ・アジアチカ（Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ）の抽出物、アジアチン（ａｓｉａｔｉｃ）やマデカシン（ｍａｄｅｃａｓｓｉｃ）酸、及び、アジアチコシド又はマデカソシド等のそのグリコシル化誘導体、シーゲスベッキア・オリエンタリス（Ｓｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）の抽出物、コンミフォーラ・ムカル（Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ  ｍｕｋｕｌ）の抽出物、及び、エリオボトリャ・ジャポニカ（Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の抽出物、並びに、無機成分、好ましくはマグネシウム、マンガン、ケイ素及び亜鉛である。これら無機成分は、マグネシウム及びマンガンの場合は塩化物として、ケイ素の場合はシラノールとして、マグネシウムの場合はアスパラギン酸塩として、好適に使用される。
【００２５】
また本発明の組成物は、脂肪族Ｃ3 〜Ｃ12アルファ−ヒドロキシ酸、特にクエン酸、リンゴ酸及び乳酸、アミノ酸、特にアルギニン、シトルリン及びトレオニン、セラミド、グリコセラミド、リン脂質、スリミング（ｓｌｉｍｍｉｎｇ）成分、フォルスコリン、コリウス（Ｃｏｌｅｕｓ）の抽出物、テフロシア（Ｔｅｐｈｒｏｓｉａ）の抽出物、線条防止成分、特にマロニエの実の抽出物及びエスキン、微小循環を保護又は改善する成分、特にギンクゴ・ビローバ（Ｇｉｎｋｇｏ  Ｂｉｌｏｂａ）のビオフラボノイド、並びに、遮光成分、特に酸化チタン、アシル・メトキシけい皮酸（Ｐａｒｓｏｌ  ＭＣＸ（登録商標））及び植物由来の遮光成分からなる群より選択される少なくとも１つの物質も含有できる。
【００２６】
特に毛髪の処置及びケアを目的とする本発明の組成物において、エラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体は、アークティウム・ラッパ（Ａｒｃｔｉｕｍ  ｌａｐｐａ）の抽出物、クロロキシレノール、レゾルシノール又は亜鉛ピリチオン等のふけ止め成分、５α−リダクターゼ阻害剤等の脂漏止め成分、特にピゲウム・アフリカヌム（Ｐｙｇｅｕｍ  ａｆｒｉｃａｎｕｍ）の抽出物、並びに、セファランチン及びニコチン酸メチル等の、血液の微小循環を促進する成分からなる群より選択される少なくとも１つの他の有効成分と好適に組み合わせられる。
【００２７】
処方は各種形態を採ることができる。最も広く用いられる形態の１つは、皮膚組織への適用にふさわしい局所用形態である。限定する意図ではないが、この適当な局所用処方には、エマルション、クリーム、乳液、香油、ゲル、ローション及び治療用メーキャップ組成物が含まれる。
【００２８】
他の特徴によれば、本発明は、コラーゲンＶＩＩの割合の増加を目的とした化粧的又は医薬的処置、特に皮膚科学用処置方法にも関する。
【００２９】
本発明は、なかでも、特に真皮−表皮結合の強化によって、真皮と表皮との固着を改善するため、皮膚を引き締めるため、皮膚の老化の徴候の出現を防止し又は遅らせるため、しわの出現を遅らせ又はその深さを低減するため、及び、毛髪の状態を改善するための化粧的処置方法であって、化粧学的に許容される賦形剤中に場合により含まれたエラグ酸、その塩、その金属錯体、又は、そのモノ−若しくはポリエーテル、若しくはモノ−若しくはポリアシル化誘導体を化粧学的な有効量輸送することからなることを特徴とする化粧的処置方法にも関する。
この方法の態様は、特に、組成物に関連した以上の記載から当然に導かれる。
【００３０】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、いくつかの実施例に関する以下の説明的な記載から、当業者には明らかになろう。これらは単に例示のため記載したものであり、決して本発明の範囲を限定するものではない。この実施例は、本発明の必須部分を形成する。また、以下の実施例では特に明記しない限り、百分率は重量基準で示し、温度はセ氏であり、気圧は大気圧である。
【００３１】
本発明の実施例
実施例１
培養標準ヒトケラチン生成細胞でコラーゲンＶＩＩの割合を増加させることにおけるエラグ酸の活性の証明
以下の試験は、フランスのＥｘｔｒａ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅから入手できる、融点が３６０℃以上という粉末状のエラグ酸で行った。
この試験は標準ヒトケラチン生成細胞で遮光下行った。
【００３２】
１−試験の手順
ａ）ケラチン生成細胞の由来：
標準ヒトケラチン生成細胞（ＮＨＫ）の培養株は、健康な皮膚の外科的サンプルから作製する。この研究では、４９歳白人女性（ＮＨＫ１１２４とする）と５０歳白人女性（ＮＨＫ１１０６とする）に行った美容整形に由来する２つの細胞株で試験を行った。
【００３３】
ｂ）培養条件：
ケラチン生成細胞を完全無血清培地（ＳＦＭｃとする、ＧＩＢＣＯ）で維持する。この細胞を試験に使用する前に、一次培養株から一度又は二度、継代培養を行った（すなわち一回の継代をＰ１とし、二回の継代をＰ２とする）。
【００３４】
ｃ）処理条件：
この細胞を、９６穴培養プレートに、ＳＦＭｃ中、１ウェルあたりＮＨＫ２５０００個の割合で接種する。細胞が良好に付着するのに必要な２４時間のインキュベーションの後、試験中のケラチン生成細胞の増殖を抑制するため、培地を、２％に希釈したＳＦＭｃに置き換えた。エラグ酸の試験濃度は試験媒体１ｍＬ当たり０．５マイクログラムであるが、これは、あらかじめ、ＤＭＳＯ１ｍＬ当たりエラグ酸０．５ｍｇを含むストック溶液からすぐに得られる。したがって試験媒体中のＤＭＳＯの最終濃度は０．１％ｖ／最終ｖである。この濃度は細胞に毒性を持たない。コントロールは、０．１ｖ／ｖのＤＭＳＯを加えた２％希釈のＳＦＭｃ試験媒体からなる。試験製品用に６つの培養株を、コントロール実験用に６つの培養株を用意する。
【００３５】
細胞を処理培地と７２時間接触させた。
コラーゲンＶＩＩ定量のため、培養株の上澄み液を取り除く。コラーゲンＶＩＩの量と細胞タンパク質の量とを関係づけることを目的として、ウェルに残った細胞シートでタンパク質の定量を行う（ＢＣＡ法、ＳＩＧＭＡ）。
【００３６】
並行して、処理したプレートを、ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒからのＸＴＴキット、番号１４６５０１５を用いたＸＴＴ生存度試験に用いて、生存可能な細胞のミトコンドリアデヒドロゲナーゼ活性を測定する。この試験によっても、また、試験濃度が０．５μｇ（マイクログラム）／ｍＬである細胞の微視的観察によっても、生存度の有意の低下は検出されなかった。
【００３７】
ｄ）コラーゲンＶＩＩのＥＬＩＳＡ：
ＥＬＩＳＡ法によるコラーゲンＶＩＩの定量手順としては、コラーゲンＩの定量で用いたもの（Ｍ．ＤＵＭＡＳ、Ｃ．ＣＨＡＵＤＡＧＮＥ、Ｆ．ＢＯＮＴＥ、Ａ．ＭＥＹＢＥＣＫ：「老齢のドナー由来のヒト真皮繊維芽細胞によるＩ型及びＩＩＩ型コラーゲンのＩｎ  ｖｉｔｒｏ生合成」、Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｇｅｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、７３（１９９４）１７９〜１８７）を応用した。
【００３８】
以下の変更を加えた：
−第一抗体：抗ヒトＶＩＩ型コラーゲンマウスモノクロナール抗体、イソタイプＩｇＧ１（ライフ・テクノロジーズ、参照１２０７３−０１１、バッチＦＢ２ｂ０１）
−第二抗体：アルカリ性ホスファターゼと結合した抗マウス全ＩｇＧヤギ抗体（エテルシム（Ｉｎｔｅｒｃｈｉｍ）、参照１１５−０５６−０６２、バッチ２６７９３）
アルカリ性ホスファターゼの活性は、基質パラニトロフェニルホスフェート（ＰＮＰＰ）が開裂し、吸光度が４０５ナノメートルで測定されるパラニトロフェノールが生じることで確認する。
【００３９】
ｅ）結果の表示と統計的解釈：
ケラチン生成細胞培養株でのコラーゲンＶＩＩの割合が増加するという結果を、エラグ酸の活性（Ａとする）として表す。ここで、Ａは百分率で表され、以下の式で表される：
【００４０】
【数１】
0005010775.tif 000003
【００４１】
式中：
−下付きの“ｅａ”は、エラグ酸存在下で作製したケラチン生成細胞培養株に関する値である。
−下付きの“ｋｓ”は、エラグ酸の不在下で作製したケラチン生成細胞培養株、すなわちコントロール培養株に関する値である。
−ＲＯＤは、光学密度の減少分である：
ＲＯＤ＝（ＯＤ−ＯＤblank ）
【００４２】
−ＯＤは、上澄み液を処置して測定した光学密度である。
−ＯＤblank は、培養媒体で測定した光学密度である。
−ＲＯＤＣは、対象ウェルで定量した細胞たんぱく質１００μｇあたりの光学密度に対応するよう修正を施したＲＯＤである。
【００４３】
処置培養株（ｎ＝６）とコントロール培養株（ｎ＝６）で得た結果を、有意のレベルをｐ＜０．０５とした不対ステューデント試験で比較する。
こうして、培養媒体中のコラーゲンＶＩＩの割合に対する本発明の化合物、すなわちエラグ酸の活性を、上述したＮＨＫ１１２４（Ｐ２）及びＮＨＫ１１０６（Ｐ１）という２つの別種のケラチン生成細胞株で試験した。
【００４４】
結果−結論
各培養株の測定値の平均に基づいて、結果を以下の表１に示す。
【００４５】
【表１】
0005010775.tif 000004
【００４６】
表１で示した結果は、本発明のエラグ酸が０．５μｇ／ｍＬ濃度で存在することに起因して、培養媒体中のコラーゲンＶＩＩの存在比が大きく有意に増加することを示す。
コラーゲンＶＩＩは、特にアンカリングフィラメントの主要構成要素であるため、この試験から明らかに、本発明のエラグ酸とその誘導体は、真皮−表皮結合を強化することで真皮と表皮との固着を改善する成分として好適に使用できることが分かる。従って、本発明のエラグ酸とその誘導体は、化粧用「しわ防止」、「老化防止」及び「引き締め」組成物や、表皮水疱症に対処する皮膚科学用組成物で好適に使用できる。
【００４７】
また、コラーゲンＶＩＩがヒト毛嚢のレベルで重要な役割を果たすことが知られていることから、上記実験結果を考慮すれば、本発明のエラグ酸とその誘導体は毛髪ケア用に、そして一般的に、毛髪の状態を改善するのに大きな利点がある。
【００４８】
本発明の実施例２
化粧用引き締め組成物：
−フランスのＥｘｔｒａ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅから市販されているエラグ酸
０．０１ｇ
−センテラ・アジアチカの抽出物                                ０．１ｇ
−Ｏ／Ｗ型エマルション状の芳香性乳化賦形剤と、防腐剤
合計で１００ｇとなる量
このエマルションは、皮膚のたるみに対処し、その張りを回復させる。皮膚のたるみがあり処置すべき体の部位に適用することによる３週間の処置によって好適に使用できる。
【００４９】
本発明の実施例３
「老化防止」エマルション
−エラグ酸の酢酸エステル                                    ０．０２ｇ
−ビタミンＡパルミテート                                    ０．０１ｇ
−芳香性流動乳化賦形剤                          合計で１００ｇとなる量
このエマルションは、好ましくは毎晩、処置すべき体の部位、特に顔に使用できる。しわや皮膚のたるみなど、皮膚の老化の徴候の出現を遅らせることに寄与する。約６カ月間にわたり毎日処置すると、皮膚はなめらか、柔軟になり、より引き締まる。輝きを取り戻す。
【００５０】
本発明の実施例４
化粧用引き締め及び「老化防止」エマルション
このエマルションは以下の３相Ａ、Ｂ及びＣから調製する。
相Ａ
−Ｅｍｕｌｇａｄｅ  ＳＥ（登録商標）（１）                        ６ｇ
−セチルアルコール                                                ２ｇ
−ＢＨＴ                                                    ０．０２ｇ
−イソノニル・イソノナノエート                                    ６ｇ
−プロピルパラベン                                          ０．０２ｇ
−ココヤシグリセリド                                              ６ｇ
−センテラ・アジアチカ                                        ０．１ｇ
【００５１】
相Ｂ
−メチルパラベン                                              ０．２ｇ
−蒸留水                                                  ６７．６４ｇ
相Ｃ
−エラグ酸                                                  ０．０１ｇ
−ブチレングリコール                                            １２ｇ
−ビタミンＡパルミテート                                    ０．０１ｇ
【００５２】
（１）Ｅｍｕｌｇａｄｅ  ＳＥ（登録商標）はＨＥＮＫＥＬからの組成物であり、ステアリン酸グリセリル（及び）セテアレス（ｃｅｔｅａｒｅｔｈ）−２０（及び）セテアレス−１０（及び）セテアリル（ｃｅｔｅａｒｙｌ）アルコール（及び）パルミチン酸セチルの混合物である。
【００５３】
相Ｃを調製するには、まず、エラグ酸とブチレングリコールの混合物を１５分間超音波処理にかける。次にビタミンＡパルミテートを加える。
脂肪相Ａと水相Ｂをともに８５℃まで加熱する。８５℃で、機械的攪拌で相Ｂを相Ａと乳化する。得られたエマルションが４５℃に冷やされるまで攪拌を維持し、その温度で４５分間攪拌を続ける。
【００５４】
相Ｃを相Ａ／相Ｂエマルションに加え、これを攪拌下４５℃で維持する。この攪拌は、相Ｃを加えた後５分間続ける。
このエマルションは、好ましくは毎晩、処置すべき体の部位、特に顔に使用できる。しわなど、皮膚の老化の徴候の出現を遅らせたり、後者の深さを低減したり、ひふのたるみに対処するのに寄与する。約６か月間毎日処置すると、皮膚はなめらか、柔軟になり、より引き締まる。
【００５５】
本発明の実施例５
化粧用引き締め及び「老化防止」エマルション
このエマルションは以下の化合物で調製する。
【００５６】
−蒸留水                                                  ６７．５３ｇ
−ブチレングリコール                                      １２．００ｇ
−Ｅｍｕｌｇａｄｅ  ＳＥ（登録商標）                        ６．００ｇ
−イソノニル・イソノナノエート                              ６．００ｇ
−ココヤシグリセリド                                        ６．００ｇ
−セチルアルコール                                          ２．００ｇ
−メチルパラベン                                            ０．２０ｇ
−センテラ・アジアチカ                                      ０．１０ｇ
−ビタミンＡパルミテート                                    ０．１０ｇ
−エラグ酸のナトリウム塩                                    ０．０３ｇ
−ＢＨＴ                                                    ０．０２ｇ
−プロピルパラベン                                          ０．０２ｇ
組成物Ｅｍｕｌｇａｄｅ  ＳＥ（登録商標）は先の実施例で記載した。
【００５７】
このエマルションは、好ましくは毎晩、処置すべき体の部位、特に顔に使用できる。しわなど、皮膚の老化の徴候の出現を遅らせたり、後者の深さを低減したり、ひふのたるみに対処するのに寄与する。約６か月間毎日処置すると、皮膚はなめらか、柔軟になり、より引き締まる。
【００５８】
本発明の実施例６
表皮水疱症を治療するためのゲル状皮膚科学用調剤
−エラグ酸の亜鉛錯体                                        ０．０１ｇ
−ブチレングリコール                                            １０ｇ
−無水エタノール                                                ２０ｇ
−蒸留水                                                  ５４．９９ｇ
−２％濃度のカルボマー（ＧＯＯＤＲＩＣＨからのＵｌｔｒｅｚ（登録商標）−
１０ゲル）                                                      １５ｇ
このゲルは、表皮水疱症の場合の処置すべき部位に、少なくとも１５日間、日に三度、局所適用できる。
【００５９】
本発明の実施例７
脱毛に対処するための「ふけ止め」ローション
エラグ酸の亜鉛錯体０．０１ｇ、クロロキシレノール０．００５ｇ及びセファランチン０．０１ｇと、合計で１００ｇとなる量の芳香性アルコール賦形剤を使用して、ヘアローションを調製した。
【００６０】
このローションを朝晩、頭皮に適用して用いた後、軽くマッサージをする。８〜１５日間の処置のあと、脱毛が目立ってゆるやかになって、かゆみが消えた。処置すべき毛髪の問題の程度に応じて、２〜４か月間の間隔を空けて３０日間という治療期間を推奨する。
【００６１】
本発明の実施例８
化粧用引き締め及び「老化防止」エマルション
−エラグ酸                                                  ０．５０ｇ
−ビタミンＡパルミテート                                    ０．０１ｇ
−センテラ・アジアチカ                                      ６．００ｇ
−防腐剤入りの賦形剤                            合計で１００ｇとなる量
【００６２】
このエマルションは、好ましくは毎晩、処置すべき体の部位、特に顔に使用できる。しわなど、皮膚の老化の徴候の出現を遅らせたり、後者の深さを低減したり、ひふのたるみに対処するのに寄与する。約６か月間毎日処置すると、皮膚はなめらか、柔軟になり、より引き締まる。