(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
解粒剤を含まない液に難溶性薬物を懸濁し、該懸濁液を高圧ホモジナイザーに導入し高圧処理した後に、解粒剤を添加し凝集粒を解粒することを特徴とする難溶性薬物の微粒子分散液の製造方法。
【請求項２】
解粒剤が合成高分子化合物または天然多糖類である請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
合成高分子化合物が、天然多糖類誘導体、ビニルポリマー誘導体またはポリアルキレングリコールの共重合体である請求項２記載の製造方法。
【請求項４】
難溶性薬物が、合成抗菌剤、抗真菌剤、抗リウマチ剤、抗炎症剤または消化器官用薬である請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項５】
難溶性薬物が、合成抗菌剤、抗リウマチ剤または抗真菌剤である請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項６】
抗真菌剤が、トリアゾール系抗真菌剤またはポリエン系抗真菌剤である請求項４または５に記載の製造方法。
【請求項７】
難溶性薬物が、合成抗菌剤である請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項８】
難溶性薬物が、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸、イトラコナゾール、アムホテリシンＢ、グリセオフルビンまたはイグラチモドである請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項９】
難溶性薬物が、イグラチモドである請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項１０】
難溶性薬物が、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸である請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項１１】
難溶性薬物が、２０℃の水に対し０．１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解性である薬物である請求項１〜７のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項１２】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法で得られる１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸またはイグラチモドの微粒子分散液。
【請求項１３】
１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸またはイグラチモドの微粒子分散液中の粒子の９０％（体積）以上が、粒子径１０００ｎｍ未満の大きさであることを特徴とする請求項１２記載の微粒子分散液。
【請求項１４】
１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸またはイグラチモドの微粒子分散液中の粒子の９０％（体積）以上が、粒子径５００ｎｍ未満の大きさであることを特徴とする請求項１２記載の微粒子分散液。
【請求項１５】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法で得られる微粒子状の１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸またはイグラチモドを含有する製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、難溶性薬物の微粒子分散液およびその製造方法に関する。さらに詳しくは、解粒剤を含まない液に難溶性薬物を懸濁し、該懸濁液を高圧ホモジナイザーに導入し、高圧処理した後に、解粒剤を添加し、凝集粒を解粒することによって得られる難溶性薬物の微粒子分散液およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
薬物が薬効を発揮するためには、薬物が吸収部位で溶解することが必要である。しかしながら、難溶性薬物は、溶解速度が遅く、溶解過程が吸収の律速となることが多い。難溶性薬物の溶解性および吸収性を改善する方法は、（１）薬物を微粒化する方法、（２）高分子基剤と共に固体分散体を形成する方法、（３）シクロデキストリン類と共に可溶性複合体とする方法および（４）易溶解性の塩を形成させる方法などが知られている。
（１）の方法において特に難溶性薬物粒子を１０００ｎｍ未満の粒子径（以下、ナノオーダーサイズという）に微粒化することにより、（１）薬物表面積の増大、（２）溶解度の向上、（３）溶解速度の向上および（４）吸収部位粘膜表面への薬物粒子の付着力増大などの効果により、吸収性が向上することが知られている（非特許文献１）。【０００３】
薬物を微粒化する方法は、気体中での乾式粉砕と液体雰囲気中での湿式粉砕に大別される。一般に乾式粉砕は、１０μｍ以下の粒子に粉砕することが困難である。一方、湿式粉砕は、１０μｍ以下の粒子に粉砕することが可能である（非特許文献２）。さらに、湿式粉砕は、媒体ミルなどを用いる機械的破砕法と高圧ホモジナイザーなどを用いる加圧粉砕法に大別される。【０００４】
機械的破砕法は、ベッセル内にボールやビーズなどの粉砕媒体と破砕物を投入し、ベッセルを回転することにより、粉砕する方法である。たとえば、溶解性の低い結晶性薬物および表面変性剤の混合液を、媒体ミルを用いて薬物粒子を粉砕する方法などが知られている（特許文献１）。上記の粉砕方法では、表面変性剤の存在下、薬物懸濁液を通常数日間磨砕処理を行うため、微生物汚染を受けやすい欠点および粉砕の進行に伴って粉砕物中に粉砕媒体（ボール、ビーズなど）および粉砕容器の磨耗粉が混入する欠点を有している（非特許文献１、非特許文献３）。たとえば、ＵＳＰ２８（The United States Pharmacopeia 28）収載の塩化ナトリウム注射液および日本薬局方１４収載の常水の鉄の限度値は、それぞれ２ｐｐｍおよび０．３ｍｇ／Ｌであるが、これらと比較し、上記粉砕方法における金属混入は多い（特許文献１）。とりわけ、注射剤などの医薬品においては、汚染物質の混入は品質上の大きな問題となる。【０００５】
一方、加圧粉砕法は、加圧された液体が高速で細いノズルまたは間隙を通過する際に生じるせん断力あるいはジェット流による粒子相互または粒子−壁面との衝撃力による破壊作用あるいはキャビテーションによって生じる衝撃波を利用して粉砕する方法である。加圧粉砕法は、粉砕媒体を使用しておらず、磨耗粉の混入が少ないことから医薬品製造に適している（非特許文献４）。
加圧粉砕法において、難溶性薬物粒子を高圧ホモジナイザーを用いて微粒化する方法が知られている。一般的な方法として分散剤と難溶性薬物の混合液を高圧ホモジナイザーで処理する方法などが知られており（特許文献２、非特許文献１）、パクリタキセルおよびクロファジミンなどではナノオーダーサイズの微粒子分散液が得られている。しかしながら、上記の手順で難溶性薬物を処理した場合、分散液中の難溶性薬物は、薬物の性質により特定のサイズ以下に微粒化することは困難である（非特許文献１）。さらに上記の手順で難溶性薬物を処理した場合、分散液中の難溶性薬物の粒子径は、分布が広く不均一になりやすい（非特許文献５）。
大小の粒子が混在した状態においては、小さな粒子は、溶解して消滅し、大きな粒子は、より成長する現象（オストワルド熟成）が起こることが知られている（非特許文献６）。粒子径が不均一な微粒子は、経時的に安定した微粒子特性（溶解度および溶解速度の向上、付着力の増大など）を示さない。
また、分散液中における微粒子は、粒子径が小さいほど、粒子のブラウン運動が激しくなるため、粒子が接近・衝突する機会が増える。その結果、粒子間の反発力よりもファンデルワールス引力の影響が大きくなるため、微粒子は凝集しやすくなる。高分子化合物の添加は、微粒子の分散安定化効果を示すことが知られている。しかし、分散安定化効果は、高分子化合物の分子量、分子構造、添加量または添加条件で複雑に変化する。特に、粒子径がナノオーダーサイズの微粒子は、特別な粒子間反発作用が働かなければ凝集が起きる（非特許文献７）。
また、ナノオーダーサイズの微粒子分散液を提供する別の方法としては、薬物を水混和性の有機溶媒に溶解し、これに水性溶媒を添加し、薬物を析出させる方法が知られている（特許文献３）。このような方法はビルトアップ法と呼ばれ、当該発明で述べられているサイズダウン法とは明確に区別されるものである。特許文献３の方法は、医薬に許容される有機溶媒に溶解しない薬物には適用できない。【０００６】
【特許文献１】日本特許第３６０２５４６号公報
【特許文献２】日本特許第２５５４７８４号公報
【特許文献３】日本公表特許第２００４−５３８２４９公報
【非特許文献１】アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Advanced Drug Delivery Reviews）、第４７巻、第３−１９頁、２００１年
【非特許文献２】すぐに役立つ粒子設計・加工技術、じほう社編、第２３−２４頁、２００３年
【非特許文献３】粉砕・分級と表面改質、ＮＧＴ社編、第７５−７６頁、２００１年
【非特許文献４】インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファーマシューティクス（International Journal of Pharmaceutics）、第１９６巻、第１６９−１７２頁、２０００年
【非特許文献５】インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファーマシューティクス（International Journal of Pharmaceutics）、第２１４巻、第３−７頁、２００１年
【非特許文献６】微粒子工学大系、第１巻、基礎技術、フジ・テクノシステム社編、第１５１−１５２頁、２００１年
【非特許文献７】微粒子工学大系、第１巻、基礎技術、フジ・テクノシステム社編、第２３８−２４２頁、２００１年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
難溶性薬物を高圧ホモジナイザーを用いてナノオーダーサイズの微粒子に微粒化する製造方法は、確立されておらず、効果的かつ簡便な難溶性薬物の微粒子分散液の製造方法および分散安定性に優れた難溶性薬物の微粒子分散液が強く望まれている。また、最終製剤において汚染物質のより少ない製剤が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
このような状況下において、本発明者らは、鋭意検討を行った結果、解粒剤を含まない液に難溶性薬物を懸濁後、高圧ホモジナイザーで高圧処理し、ついで、解粒剤を添加し、凝集粒を解粒することにより、難溶性薬物がナノオーダーサイズの粒子に微粒化された難溶性薬物の微粒子分散液を、効果的かつ簡便に製造できることを見出した。ここで、解粒剤とは、凝集粒を分散する効果のある添加剤を意味する。
本発明は、まず、第１工程として、解粒剤を含まない液に難溶性薬物を懸濁し、該懸濁液を高圧ホモジナイザーで高圧処理を行い、分散液を得る。得られた分散液は、静置すると速やかに難溶性薬物の粒子が凝集・沈降し、外観からは、微粒化されていないように見える。しかしながら、第２工程として、第１工程で得られた分散液に解粒剤を添加し、必要に応じて高圧ホモジナイザーによる高圧処理または超音波処理などの解粒処理を施すことにより、難溶性薬物の凝集粒が解粒され、驚くべきことに分散液中の粒子がナノオーダーサイズである難溶性薬物の微粒子分散液を製造できる。すなわち、従来の一般的な方法である分散剤と難溶性薬物の混合液を高圧ホモジナイザーで処理する方法で難溶性薬物を処理した場合、分散液中の難溶性薬物は、薬物の性質により特定のサイズ以下に微粒化することは困難であったが、本発明方法により、さらに微粒化された微粒子分散液を得ることができる。
さらに、この方法により製造された難溶性薬物の微粒子分散液は、含まれる難溶性薬物粒子の９０％（体積）以上が、粒子径１０００ｎｍ未満または５００ｎｍ未満の大きさの微粒子とすることができ、さらに、本発明で得られた難溶性薬物の微粒子分散液は、保存時に粒子径分布の経時的変化がほとんどなく、静置保存しても難溶性薬物の微粒子が凝集・沈降することがなく、分散安定性に優れることを見出し、本発明を完成した。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の製造方法によれば、長期にわたり分散安定性に優れるナノオーダーサイズの難溶性薬物の微粒子分散液を簡便に製造できる。さらに、本発明の製造方法により得られる難溶性薬物の微粒子分散液を製剤化することにより、汚染物質の少ない優れた医薬製剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明について詳述する。
本発明で用いられる難溶性薬物とは、日本薬局方１４通則の性状の項において溶解性を示す用語、「極めて溶けにくい」および「ほとんど溶けない」に対する薬物を意味し、具体的には、２０℃の水に対する溶解性が、１ｍｇ／ｍＬ未満の薬物を意味する。より具体的には、たとえば、セフジトレンピボキシル、セフテラムピボキシル、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、テリスロマイシンおよびアジスロマイシンなどの抗生剤；ノルフロキサシン、トスフロキサシン、スパルフロキサシン、ナジフロキサシン、エノキサシン、シノキサシン、フレロキサシン、プルリフロキサシン、ナリジクス酸、ピペミド酸、ピロミド酸および１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸などのピリドンカルボン酸系の合成抗菌剤；ミコナゾール、クロトリマゾールおよび硝酸エコナゾールなどのイミダゾール系、イトラコナゾールなどのトリアゾール系、アムホテリシンＢおよびその誘導体などのポリエン系ならびにグリセオフルビンなどの抗真菌剤；サキナビル、リトナビル、ロピナビル、ネビラピン、ビダラビン、アンプレナビルおよびエファビレンツなどの抗ウイルス剤；イブプロフェン、ケトプロフェンおよびプラノプロフェンなどのプロピオン酸系、インドメタシンなどのアリール酢酸系ならびにピロキシカム、アンピロキシカムおよびロルノキシカムなどのオシキカム系などの抗炎症剤；レフルノミド、メトトレキサート、サラゾスルファピリジン、オーラノフィンおよびイグラチモドなどの抗リウマチ剤；フマル酸クレマスチン、ロラタジン、メキタジン、ザフィルルカスト、プランルカスト、エバスチン、タザノラスト、トラニラスト、ラマトロバンおよびオキサトミドなどの抗アレルギー剤；オメプラゾール、ランソプラゾール、テプレノン、メトクロプラミドおよびソファルコンなどの消化器管用薬などが挙げられる。【００１１】
好ましい難溶性薬物としては、合成抗菌剤、抗真菌剤、抗リウマチ剤、抗炎症剤および消化器官用薬が挙げられ、より好ましくは、合成抗菌剤、抗真菌剤および抗リウマチ剤などが挙げられ、さらに好ましくは、合成抗菌剤が挙げられる。具体的に好ましい難溶性薬物としては、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸、イトラコナゾール、アムホテリシンＢ、グリセオフルビンおよびイグラチモドが挙げられ、より好ましくはイグラチモドおよび１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸が挙げられ、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸がよりさらに好ましい。
また、抗真菌剤としては、イミダゾール系、トリアゾール系、ポリエン系またはグリセオフルビンなどのいずれでもよいが、トリアゾール系またはポリエン系の抗真菌剤が好ましく、トリアゾール系抗真菌剤がより好ましい。
また、本発明で用いられる難溶性薬物としては、２０℃の水に対する溶解性が、０．１ｍｇ／ｍＬ未満の薬物が好ましく、０．０１ｍｇ／ｍＬ未満の薬物がさらに好ましい。【００１２】
本発明で用いられる難溶性薬物の分散液に対する含有率としては、高圧ホモジナイザーにて高圧処理が可能であれば特に制限されないが、たとえば、難溶性薬物が分散液に対して、０．０１〜５０％（重量％）が好ましく、０．０１〜３０％（重量％）がより好ましい。難溶性薬物の微粒子分散液を種々の剤形に製剤化する際には、所望の含有率に調整することができる。【００１３】
本発明で用いられる解粒剤としては、天然多糖類または合成高分子化合物から選ばれる１種以上の高分子化合物が好ましい。
本発明で用いられる天然多糖類としては、アラビアゴム、キサンタンガム、プルランなどが挙げられ、アラビアゴムおよびプルランが好ましい。
本発明で用いられる合成高分子化合物としては、天然多糖類誘導体、ビニルポリマー誘導体またはポリアルキレングリコールの共重合体が挙げられる。【００１４】
本発明で用いられる天然多糖類誘導体としては、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウムなどのセルロース誘導体ならびにヒドロキシプロピルスターチなどのデンプン誘導体などが挙げられ、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロース誘導体が好ましい。
本発明で用いられるビニルポリマー誘導体としては、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンおよびカルボキシビニルポリマーなどが挙げられ、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンが好ましく、ポリビニルアルコールがさらに好ましい。
本発明で用いられるポリアルキレングリコールの共重合体としては、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーが好ましい。【００１５】
本発明で用いられる解粒剤の濃度は、解粒剤の種類および添加方法によっても異なるが、得られる微粒子分散液に対し、通常、０．００１〜２０％、好ましくは、０．０１〜１０％、さらに好ましくは、０．１〜３％であればよい。解粒剤は、第１工程で得られた分散液に、あらかじめ溶媒に解粒剤を溶解した溶液として添加してもよいし、解粒剤が速やかに溶解する場合は、溶媒に溶解せずに添加してもよい。また、第１工程で得られた分散液を遠心分離して得られる難溶性薬物の粒子を含む沈殿または第１工程で得られた分散液の溶媒を減圧乾燥等により留去して得られる難溶性薬物の粒子を含む残渣に、解粒剤をあらかじめ溶媒に溶解した溶液を添加してもよい。【００１６】
本発明の第１工程の解粒剤を含まない液としては、たとえば、水、含水有機溶媒または有機溶媒などが挙げられる。より具体的には、水、メタノール、エタノール、プロパノ−ル、２−プロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、アセトン、アセトニトリル、ジクロロメタンおよびクロロホルムならびにこれらの混合液などが挙げられ、水、エタノール、プロパノ−ル、２−プロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンおよびアセトンならびにこれらの混合液などが好ましく、水、エタノール、２−プロパノールおよびアセトンならびにこれらの混合液がさらに好ましく、水が特に好ましい。
また、本発明の第１工程の解粒剤を含まない液には、解粒剤以外の微粒化を妨げない添加剤を添加してもよい。添加剤としては、たとえば、防腐剤、等張化剤、ｐＨ調整剤および緩衝剤などが挙げられ、ｐＨ調整剤および緩衝剤などが好ましい。【００１７】
本発明で用いられる防腐剤としては、たとえば、パラオキシ安息香酸メチルおよびパラオキシ安息香酸エチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウムならびに塩化ベンゼトニウムなどが挙げられる。【００１８】
本発明で用いられる等張化剤としては、たとえば、塩化ナトリウム、ブドウ糖、果糖、乳糖、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、キシリトールおよびグリセリンなどが挙げられる。【００１９】
本発明で用いられるｐＨ調整剤としては、塩酸、酢酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、乳酸、シュウ酸、ホウ酸、クエン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、モノエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、メグルミンおよびトロメタモールなどが挙げられる。【００２０】
本発明で用いられる緩衝剤としては、酸、塩基、酸と塩基の塩およびアミノ酸などが挙げられ、これらを混合して用いてもよい。より具体的には、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、ホウ酸および炭酸などの鉱酸；シュウ酸、クエン酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸、乳酸、酢酸および安息香酸などの有機カルボン酸；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸などのスルホン酸；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウムおよび水酸化カルシウムなどの無機塩基；モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、メグルミンおよびトロメタモールなどの有機塩基；塩化ナトリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸水素ニナトリウム、リン酸ニ水素ナトリウム、リン酸三カリウム、リン酸水素ニカリウム、リン酸ニ水素カリウム、ホウ砂、炭酸ナトリウムおよび炭酸水素ナトリウムなどの鉱酸と無機塩基の塩；クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウムおよび安息香酸ナトリウムなどの有機カルボン酸と無機塩基の塩；メタンスルホン酸ナトリウムおよびｐ−トルエンスルホン酸ナトリウムなどのスルホン酸と無機塩基の塩；タウリンなどのアミノスルホン酸；アスパラギン酸およびグルタミン酸などの酸性アミノ酸；グルタミンおよびグリシンなどの中性アミノ酸；ならびにアルギニンおよびリジンなどの塩基性アミノ酸などが挙げられる。【００２１】
本発明において、高圧ホモジナイザーで高圧処理する際には、難溶性薬物の溶解、溶媒和化合物の形成および結晶形変化などを抑制する目的で、第１工程の解粒剤を含まない液に前述のｐＨ調整剤および緩衝剤などを添加することにより、ｐＨ、イオンの種類および／またはイオンの濃度などを適宜調整することが好ましい。具体的には、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸など難溶性薬物が両性電解質である場合、第１工程の解粒剤を含まない液のｐＨを溶解度が最も低い等電点付近のｐＨに調整する方法；酸性薬物において、第１工程の解粒剤を含まない液のｐＨを実質的にイオン化が起こらない領域まで低くする方法；同様に塩基性薬物において、ｐＨを実質的にイオン化が起こらない領域まで高くする方法；塩基性薬物の酸付加塩に酸と同種の陰イオンを加えることにより平衡を移動させ、薬物の溶解度を低下させる（共通イオン効果）方法；溶媒和化合物を形成する難溶性薬物において、第１工程の解粒剤を含まない液に溶媒和化合物を形成しない液を用いる方法が挙げられる。より具体的にはイグラチモドなど水和物を形成する薬物においては、エタノールなど水以外の液を第１工程の解粒剤を含まない液に用いる方法が挙げられる。【００２２】
本発明で使用する高圧ホモジナイザーとしては、加圧粉砕法に用いられるものであれば、特に制限されないが、たとえば、ピストンギャップ型、液体ジェットミル型および高圧ジェット流反転型などが挙げられ、液体ジェットミル型および高圧ジェット流反転型が好ましく、液体ジェットミル型がさらに好ましい。より具体的には、ピストンギャップ型としては、マントンゴーリン（ＡＰＶ社製）などが挙げられる。液体ジェットミル型としては、マイクロフルイダイザー（みづほ工業社製）、アルティマイザー（スギノマシン社製）およびナノマイザー（吉田機械興業社製）などが挙げられる。高圧ジェット流反転型としては、ＤｅＢＥＥ（日本ビーイーイー社製）などが挙げられる。【００２３】
本発明の第１工程において、解粒剤を含まない液に難溶性薬物を懸濁した液を高圧ホモジナイザーで高圧処理を行う際の圧力は、１００ＭＰａ以上が好ましく、１５０ＭＰａ〜３００ＭＰａがさらに好ましい。【００２４】
本発明の第２工程において、解粒剤を添加した後、解粒処理する方法としては、たとえば、高圧ホモジナイザーで高圧処理する方法、超音波照射を行う方法および回転式ホモジナイザーで回転処理する方法などが挙げられる。高圧ホモジナイザーで高圧処理する方法および超音波照射を行う方法が好ましく、高圧ホモジナイザーで高圧処理する方法がさらに好ましい。
本発明の第２工程において、たとえば、高圧ホモジナイザーで高圧処理を行う際の圧力は、５０〜１５０ＭＰａが好ましい。【００２５】
本発明において、高圧ホモジナイザーで高圧処理ならびに超音波処理を行う際には、難溶性薬物の溶解および分解、溶媒和化合物の形成および結晶形変化などを抑制する目的で、難溶性薬物の懸濁液および分散液の温度を制御することが好ましい。一般的に高圧処理ならびに超音波処理は、温度上昇を伴い、薬物の溶解度が上昇するため必要に応じて、高圧処理ならびに超音波処理する際の難溶性薬物の懸濁液を冷却液により冷却する方法が好ましい。【００２６】
本発明において「難溶性薬物の微粒子分散液中の粒子の９０％（体積）以上が、粒子径１０００ｎｍ未満の大きさである」とは、微粒子分散液における難溶性薬物粒子の９０％（体積）以上が１０００ｎｍ未満の微粒子から構成されることを意味し、具体的には、レーザ回折散乱式の粒子径分布測定において、体積分布の９０％累積径（Ｄ９０）が、１０００ｎｍ未満であることを意味する。
また、「難溶性薬物の微粒子分散液中の粒子の９０％（体積）以上が、粒子径５００ｎｍ未満の大きさである」とは、上記と同様に体積分布の９０％累積径（Ｄ９０）が、５００ｎｍ未満であることを意味する。
本発明で得られる難溶性薬物のＤ９０は、１０００ｎｍ未満であることが好ましく、５００ｎｍ未満であることがより好ましい。【００２７】
本発明における難溶性薬物の微粒子分散液には、上記の防腐剤、等張化剤、ｐＨ調整剤および緩衝剤以外に、生体付着性高分子化合物および増粘剤などの添加剤を一種以上添加してもよい。添加剤の添加時期は、第２工程における処理前の難溶性薬物の分散液に解粒剤を添加する際に添加する方法および第２工程終了後に添加する方法が挙げられる。【００２８】
本発明で用いられる生体付着性高分子化合物としては、たとえば、キトサンおよびその誘導体ならびにヒアルロン酸ナトリウムなどが挙げられる。【００２９】
本発明で用いられる増粘剤としては、たとえば、デキストラン、カラギーナン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウムおよびジェランガムなどが挙げられる。【００３０】
本発明で得られた難溶性薬物の微粒子分散液は、必要に応じて製剤化することにより、たとえば、外用剤、注射剤、経口剤、吸入剤またはデポ製剤などとして投与することができる。外用剤としては、たとえば、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、口腔粘膜または皮膚に投与される液剤、軟膏剤、硬膏剤および肛門または膣に投与される坐剤などが挙げられる。注射剤としては、たとえば、静脈内、動脈内、皮内、皮下、筋肉内、関節内、臓器内などに投与される注射剤が挙げられる。経口剤としては、たとえば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤およびシロップ剤などが挙げられる。吸入剤としては、たとえば、エアゾール剤および粉末吸入剤などが挙げられる。
【実施例】
【００３１】
つぎに、本発明を実施例、比較例および試験例を挙げて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。これらの実施例および比較例において特に限定しないかぎり、高圧処理中、懸濁液を二重管式熱交換器にて約１０℃の水を用いて冷却した。
イグラチモドは、日本特許２９７３１４３号に記載の方法により製造した。
１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸は、国際公開ＷＯ０２／０６２８０５号に記載の方法により製造した。【００３２】
実施例１
１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジニル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸（以下、Ｔ−３９１２という。）３ｇを水４７ｇに懸濁した。この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った。得られた液３１ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学製、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液６ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を３３ｇ得た。【００３３】
実施例２
Ｔ−３９１２ ３ｇを水４７ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った。得られた液３ｇに２．２％ポリビニルアルコール（日本合成化学製、ゴーセノールＥＧ−２５）水溶液２７ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−１５００）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を３０ｇ得た。【００３４】
実施例３
Ｔ−３９１２ ９ｇを水１４１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った。得られた液９０ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学製、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液１８ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１５０ＭＰａの高圧処理を１０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を６８ｇ得た。【００３５】
実施例４
Ｔ−３９１２ ２１ｇを水３２９ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（日本ビーイーイー製、ＤｅＢＥＥ）を用いて、２１０ＭＰａの高圧処理を１００回行った。得られた液２０ｇに１．１％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液１８０ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（日本ビーイーイー製、ＤｅＢＥＥ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を２００ｇ得た。【００３６】
実施例５
Ｔ−３９１２ ２１ｇを水３２９ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（日本ビーイーイー製、ＤｅＢＥＥ）を用いて、２１０ＭＰａの高圧処理を３００回行った。得られた液２３０ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液４６ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（日本ビーイーイー製、ＤｅＢＥＥ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を２０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を２５０ｇ得た。【００３７】
実施例６
Ｔ−３９１２ １３ｇを水２４７ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（スギノマシン製、アルティマイザー）を用いて、３００ＭＰａの高圧処理を３００回行った。この液の２２０ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液４４ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（スギノマシン製、アルティマイザー）を用いて１５０ＭＰａの高圧処理を１０回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を２３０ｇ得た。【００３８】
実施例７
Ｔ−３９１２ ３ｇを水４７ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った。得られた液０．３ｇに２．２％アラビアゴム（三栄薬品貿易、商品名：局方アラビアゴム末）水溶液４．７ｇを添加し、超音波ホモジナイザー（日本精機製作所製、ＵＳ−１５０、先端チップ径：７ｍｍ）を用いて１０分間超音波照射を行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を５ｇ得た。【００３９】
実施例８
グリセオフルビン０．９ｇ（和光純薬工業）を水２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った（所要時間  １時間１０分）。高圧処理中は懸濁液を二重管式熱交換器にて冷却した。熱交換器には、低温恒温水循環装置（東京理化器械製、ＮＣＣ−２１００）で５℃にした冷却液（日曹丸善ケミカル、ナイブライン）を循環した。得られた液２０ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液１０ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い（所要時間  ３分）、グリセオフルビンの微粒子分散液を２８．２ｇ得た。【００４０】
実施例９
イグラチモド０．９ｇをエタノール２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１５０ＭＰａの高圧処理を３００回行った（所要時間  １時間１２分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、０℃の冷却液で冷却した。得られた液２５ｇに６％ヒドロキシプロピルセルロース（日本曹達、ＨＰＣ−Ｌ）エタノール溶液５ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い（所要時間  ３分）、イグラチモドの微粒子分散液を２７．２ｇ得た。【００４１】
実施例１０
インドメタシン（和光純薬工業）０．９ｇを水２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った（所要時間  １時間１２分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、５℃の冷却液で冷却した。得られた液２５ｇに６％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液５ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い（所要時間  ３分）、インドメタシンの微粒子分散液を１５．８ｇ得た。【００４２】
実施例１１
イトラコナゾール（ＬＫＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）０．５ｇを水２４．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った（所要時間  １時間３８分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、−５℃の冷却液で冷却した。得られた液２４．１ｇに２０％アラビアゴム（鈴粉末薬品）水溶液２．７ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い（所要時間  ４分）、イトラコナゾールの微粒子分散液を２４．８ｇ得た。【００４３】
実施例１２
アムホテリシンＢ（和光純薬工業）０．６ｇを水２９．４ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を１００回行った（所要時間  ２４分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、０℃の冷却液で冷却した。得られた液２３．５ｇに１５％ポリビニルピロリドン（ＩＳＰ  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製、ＰＬＡＳＤＯＮＥ  Ｋ−２５）水溶液３．７ｇを添加し、高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１００ＭＰａの高圧処理を１０回行い（所要時間  ３分）、アムホテリシンＢの微粒子分散液を２８．３ｇ得た。【００４４】
実施例１３
実施例１２のアムホテリシンＢ（和光純薬工業）の懸濁液に２００ＭＰａの高圧処理を１００回行い、得られた液６．５ｇに１５％ポリビニルピロリドン（ＩＳＰ  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製、ＰＬＡＳＤＯＮＥ  Ｋ−２５）水溶液１ｇを添加し、超音波ホモジナイザー（日本精機製作所製、ＵＳ−１５０、先端チップ径：１２ｍｍ）を用いて１０分間超音波照射を行い、アムホテリシンＢの微粒子分散液を７．５ｇ得た。【００４５】
実施例１４
ランソプラゾール（Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）０．５ｇを水２４．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を３００回行った（所要時間  １時間２７分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、−５℃の冷却液で冷却した。得られた液０．３ｇに２％プルラン（林原商事）水溶液２ｇを添加し、超音波ホモジナイザー（日本精機製作所製、ＵＳ−１５０、先端チップ径：７ｍｍ）を用いて５分間超音波照射を行い、ランソプラゾールの微粒子分散液を２．３ｇ得た。【００４６】
実施例１５
イトラコナゾール（ＬＫＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）０．５ｇを水２４．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を６００回行った（所要時間  ３時間３分）。高圧処理中は懸濁液を実施例８と同様の方法により、−５℃の冷却液で冷却した。得られた液０．３ｇに２％アラビアゴム（鈴粉末薬品）水溶液２ｇを添加し、超音波ホモジナイザー（日本精機製作所製、ＵＳ−１５０、先端チップ径：７ｍｍ）を用いて５分間超音波照射を行い、イトラコナゾールの微粒子分散液を２．３ｇ得た。【００４７】
比較例１
Ｔ−３９１２ ３ｇを１％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液４７ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を３６ｇ得た。【００４８】
比較例２
Ｔ−３９１２ １２．５ｇを１％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液２３７．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（日本ビーイーイー製、ＤｅＢＥＥ）を用いて、２１０ＭＰａの高圧処理を１００回行い、Ｔ−３９１２の微粒子分散液を２４５ｇ得た。【００４９】
比較例３
グリセオフルビン（和光純薬工業）０．９ｇを２％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、実施例８と同様の方法で冷却しながら、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行い（所要時間  １時間３９分）、グリセオフルビンの微粒子分散液を２７．０ｇ得た。【００５０】
比較例４
イグラチモド０．９ｇを１％ヒドロキシプロピルセルロース（日本曹達、ＨＰＣ−Ｌ）エタノール溶液２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて１５０ＭＰａの高圧処理を、実施例９と同様の方法で冷却しながら、３００回行い（所要時間  １時間３３分）、イグラチモドの微粒子分散液を２５．１ｇ得た。【００５１】
比較例５
インドメタシン（和光純薬工業）０．９ｇを１％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学、メトローズ６０ＳＨ−５０）水溶液２９．１ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を、実施例１０と同様の方法で冷却しながら、３００回行い（所要時間  １時間１８分）、インドメタシンの微粒子分散液を２８．４ｇ得た。【００５２】
比較例６
イトラコナゾール（ＬＫＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）０．５ｇを２％アラビアゴム（鈴粉末薬品）水溶液２４．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて２００ＭＰａの高圧処理を、実施例１１と同様の方法で冷却しながら、３００回行い（所要時間１時間３０分）、イトラコナゾールの微粒子分散液を２０．７ｇ得た。【００５３】
比較例７
アムホテリシンＢ（和光純薬工業）０．６ｇを２％ポリビニルピロリドン（ＩＳＰ  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製、ＰＬＡＳＤＯＮＥ  Ｋ−２５）水溶液２９．４ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、実施例１２と同様の方法で冷却しながら、２００ＭＰａの高圧処理を１００回行い（所要時間２４分）、アムホテリシンＢの微粒子分散液を３０．０ｇ得た。【００５４】
比較例８
ランソプラゾール（Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）０．５ｇを２％プルラン（林原商事）水溶液２４．５ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、実施例１４と同様の方法で冷却しながら、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行い（所要時間１時間２１分）、ランソプラゾールの微粒子分散液を１０．３ｇ得た。【００５５】
比較例９
アムホテリシンＢ（和光純薬工業）０．６ｇを水２９．４ｇに懸濁し、この懸濁液に高圧ホモジナイザー（吉田機械興業製、ナノマイザー、ＹＳＮＭ−２０００ＡＲ）を用いて、実施例１２と同様の方法で冷却しながら、２００ＭＰａの高圧処理を３００回行い（所要時間１時間９分）、アムホテリシンＢの微粒子分散液２８．３ｇ得た。【００５６】
試験例１  粒子径の測定
実施例および比較例の粒子径分布の測定は、レーザ回折散乱式粒度分布測定装置（ベックマン・コールター製、ＬＳ １３ ３２０）またはレーザ回折散乱式粒度分布測定装置（堀場製作所製、ＬＡ−９２０）を用いて測定した。
比較例１および実施例１の５０％累積径および９０％累積径を表１に示した。
表１より実施例１は比較例１よりも粒子径が小さい。さらに、比較例１の粒子径分布は広く、５０％累積径が１０００ｎｍ以上であることから１０００ｎｍ未満の微粒子がしめる割合は５０％以下であった。これに対して、実施例１の粒子径分布は狭く、９０％累積径が１０００ｎｍ未満であることから、９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子で構成されることが示されている。【００５７】
【表１】
0004875979.tif 000002
【００５８】
比較例２および実施例４の５０％累積径および９０％累積径を表２に示した。
実施例４は比較例２よりも５０％累積径、９０％累積径共に小さく、実施例４は、９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子であることが確認された。【００５９】
【表２】
0004875979.tif 000003
【００６０】
実施例２、３、５、６の５０％累積径および９０％累積径を表３に示した。
いずれも９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子であることが確認された。【００６１】
【表３】
0004875979.tif 000004
【００６２】
試験例２  Ｔ−３９１２微粒子分散液の外観による分散安定性の評価
（１）比較例１および実施例１を冷蔵にて８週間静置した後、外観を観察した。結果を図１に示す。比較例１（図左の試験管）は、上部に澄明な層が見られ、粒子の沈降が認められたのに対して、実施例１（図右の試験管）は、全体に白濁状態を保っていることが確認された。
（２）比較例１および実施例１を冷蔵にて１４カ月間静置した後、外観を観察した。結果を図２に示す。比較例１（図左の試験管）は、上部に澄明な層が見られ、粒子の沈降が認められたのに対して、実施例１（図右の試験管）は、全体に白濁状態を保っていることが確認された。【００６３】
試験例３  Ｔ−３９１２微粒子分散液の粒子径による分散安定性の評価
実施例３につき、調製時および調製から４カ月後に粒子径分布を測定した。結果を表４に示す。両者の粒子径分布には変化が認められず、４カ月経過しても安定な分散状態を保っていることが確認された。
すなわち、本発明で得られた難溶性薬物の微粒子分散液は、保存時に粒子径分布の経時的変化がほとんどなく、分散安定性に優れることが確認された。【００６４】
【表４】
0004875979.tif 000005
【００６５】
試験例４  Ｔ−３９１２微粒子分散液の粒子径による分散安定性の評価
比較例１および実施例１につき、調製時および調製から１２カ月後に粒子径分布を測定した。結果を表５に示す。比較例１は、調製時よりも１２カ月後では、５０％累積径、９０％累積径共に大きいのに対して、実施例１は、両者の粒子径分布には変化が認められず、１２カ月経過しても安定な分散状態を保っていることが確認された。
すなわち、本発明で得られた難溶性薬物の微粒子分散液は、保存時に粒子径分布の経時的変化がほとんどなく、分散安定性に優れることが確認された。【００６６】
【表５】
0004875979.tif 000006
【００６７】
試験例５    粒子径の測定
比較例３および実施例８の５０％累積径および９０％累積径および同様に各実施例とそれに対応する比較例の５０％累積径および９０％累積径を表６に示した。
実施例８は比較例３よりも５０％累積径、９０％累積径共に小さく、実施例８は、９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子であることが確認された。その他の比較試験においても実施例は、各比較例に比して５０％累積径、９０％累積径共に小さく、全ての実施例において９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子であることが確認された。【００６８】
【表６】
0004875979.tif 000007
【００６９】
実施例１５の５０％累積径および９０％累積径を表７に示した。９０％以上が１０００ｎｍ未満のナノオーダーサイズの微粒子であることが確認された。【００７０】
【表７】
0004875979.tif 000008
【００７１】
比較例９の５０％累積径および９０％累積径を表８に示した。解粒剤を加えない場合には、５０％累積径、９０％累積径、共に１０００ｎｍ以上であり、ナノオーダーサイズに至らないことが確認された。
【表８】
0004875979.tif 000009
【００７２】
試験例６    グリセオフルビン微粒子分散液の外観による分散安定性の評価
比較例３および実施例８を冷蔵にて２４時間静置した後、外観を観察した。結果を図３に示す。同様に９週間静置した後、外観を観察した結果を図４に示す。比較例３（図左の試験管）は、２４時間において上部に澄明な層が見られ、９週間では上部の澄明な層が広がり、粒子沈降の進行が認められたのに対して、実施例８（図右の試験管）は、９週間後においても全体に白濁状態を保っていることが確認された。【００７３】
試験例７    イトラコナゾール微粒子分散液の外観による分散安定性の評価
比較例６および実施例１１を冷蔵にて２４時間静置した後、外観を観察した。結果を図５に示す。同様に４週間静置した後、外観を観察した結果を図６に示す。比較例６（図左の試験管）は、２４時間において上部に澄明な層が見られ、４週間では上部の澄明な層が広がり、粒子沈降の進行が認められたのに対して、実施例１１（図右の試験管）は、４週間後においても全体に白濁状態を保っていることが確認された。【００７４】
試験例８    アムホテリシンＢ微粒子分散液の外観による分散安定性の評価
比較例７、９および実施例１２を冷蔵にて９週間静置した後、外観を観察した。結果を図７に示す。比較例９（図左のスクリュー管）および比較例７（図中央のスクリュー管）は、９週間において上部に澄明な層が見られ、粒子の沈降が認められたのに対して、実施例８（図右のスクリュー管）は、９週間後においても全体に淡黄色の懸濁状態を保っていることが確認された。【００７５】
試験例９    Ｔ−３９１２微粒子分散液中の金属濃度の定量
実施例３および実施例６で得られた微粒子分散液に、濃硫酸および濃硝酸を加え加熱し、常法に従い、Ｔ−３９１２およびヒドロキシプロピルメチルセルロースを灰化させ、ＩＣＰ発光分光分析装置（セイコーインスツルメンツ製、ＳＰＳ３０００  ＩＣＰ)にて微粒子分散液中の金属濃度を求めた。高圧ホモジナイザーの接液部の主たる材質はステンレスであり、このステンレスの主成分である鉄の濃度の測定結果を表９に示す。実施例３、実施例６のいずれも微粒子分散液中の鉄濃度は１ｐｐｍより低く、高圧処理による鉄混入は極めて低いことが確認された。
また、いずれの微粒子分散液においても、鉛、ビスマス、銅、カドミウム、アンチモン、スズ、水銀などの有害性重金属の濃度は１ｐｐｍ以下であり、また、その他のクロム、ニッケル、コバルト、亜鉛、タングステン、アルミニウム、ケイ素、マンガン、モリブデンおよびジルコニウムなどの濃度は５ｐｐｍ以下であった。
すなわち、本発明で得られた難溶性薬物の微粒子分散液は金属混入が極めて低く、医薬品製造に適していることが示された。
【表９】
0004875979.tif 000010
【００７６】
製剤例１  点眼剤
実施例５と同様の方法で製したＴ−３９１２の微粒子分散液を遠心分離し、その上層を孔径０．２ミクロンのメンブランフィルター（ポール製、ポジダイン）でろ過した。このろ液２ｇに、２％キトサン（ＰＲＯＮＯＶＡ、ＰＲＯＴＯＳＡＮ  Ｇ−２１３）水溶液２ｇを添加した。この液にグリセリン（丸石製薬）を添加し、等張化することによりＴ−３９１２の点眼剤を調製した。【００７７】
製剤例２  外用液剤
実施例９で製したイグラチモドの微粒子分散液２．５ｇにプロピレングリコール（丸石製薬）２．２５ｇおよびミリスチン酸イソプロピル（日本サーファクタント、ＩＰＭ−１００）０．２５ｇを添加することによりイグラチモドの外用液剤を調製した。【００７８】
製剤例３  注射剤
実施例１１で製したイトラコナゾールの微粒子分散液１ｇに塩化ナトリウム（和光純薬工業）０．００９ｇを添加し溶解した。この液を、オートクレイブ滅菌（トミー精工製、蒸気滅菌器、ＳＳ−３２０）することによりイトラコナゾールの注射剤を調製した。【００７９】
製剤例４  シロップ剤
実施例１２で製したアムホテリシンＢの微粒子分散液１ｇにグリセリン１ｇ（丸石製薬）および単シロップ（丸石製薬）８ｇを添加することによりアムホテリシンＢのシロップ剤を調製した。【００８０】
製剤例５  顆粒剤
実施例９で製したイグラチモドの微粒子分散液１．７５ｇを４０℃に加熱した乳糖（ＤＭＶ、Ｐｈａｒｍａｔｏｓｅ  ５０Ｍ）１ｇに加えて造粒し、乾燥することによりイグラチモドの顆粒剤を調製した。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
本発明の製造方法によれば、長期にわたり分散安定性に優れるナノオーダーサイズの難溶性薬物の微粒子分散液を簡便に製造できる。さらに、本発明の製造方法により得られる難溶性薬物の微粒子分散液を製剤化することにより、汚染物質の少ない優れた医薬製剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】比較例１および実施例１を冷蔵にて８週間静置後の外観の写真である。
【図２】比較例１および実施例１を冷蔵にて１４ヶ月間静置後の外観の写真である。
【図３】比較例３および実施例８を冷蔵にて２４時間静置後の外観の写真である。
【図４】比較例３および実施例８を冷蔵にて９週間静置後の外観の写真である。
【図５】比較例６および実施例１１を冷蔵にて２４時間静置後の外観の写真である。
【図６】比較例６および実施例１１を冷蔵にて４週間静置後の外観の写真である。
【図７】比較例７、比較例９および実施例１２を冷蔵にて９週間静置後の外観の写真である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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