(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）の化合物、または製薬上許容されるその塩を、少なくとも一つの製薬上許容される担体または賦型剤とともに含む、製薬組成物。
【化１】
0005010088.tif 000009
（式（Ｉ）中、Ｒ1はアリール基で置換されたＣ1アルキル基を表し、該アリール基が、非置換の、あるいは、１以上の、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基で置換された、フェニル基、ジフェニル基、または、単環式５〜７員複素芳香環基であり、Ｒ2はそれぞれ独立に水素原子または非置換のアルキル基を表す。）。
【請求項２】
前記Ｃ1-6アルキル基がＣ1-2アルキル基であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記Ｃ1-6アルコキシ基がメトキシ基であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記アリール基が、非置換の、あるいは、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基で置換された、フェニル基であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記複素芳香環基がピリジニル基であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
それぞれのＲ2が水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
下記式（Ｉ）の化合物、または製薬上許容されるその塩：
【化２】
0005010088.tif 000010
（式（Ｉ）中、Ｒ1は、アリール基で置換されたＣ1アルキル基を表し、ここで該アリール基は、非置換の、あるいは、１以上の、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基で置換された、フェニル基、ジフェニル基、あるいは、単環式５〜７員複素芳香環基であり、Ｒ2は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、水素原子または非置換のアルキル基を表す。）。
【請求項８】
前記Ｃ1-6アルキル基がＣ1-2アルキル基であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
前記Ｃ1-6アルコキシ基がメトキシ基であることを特徴とする、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
前記アリール基が、非置換の、あるいは、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基で置換された、フェニル基であることを特徴とする、請求項７〜９のいずれかに記載の化合物。
【請求項１１】
それぞれのＲ2が水素原子を表すことを特徴とする、請求項７〜１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
基Ｒ1において、
前記アリール基が、非置換の、あるいは、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基で置換されたフェニル基であり、
前記Ｃ1-6アルキル基がメチル基であることを特徴とする、請求項７〜１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
ＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステル、ＡＬＡ−ｐ−ニトロベンジルエステル、ＡＬＡ−ｐ−［トリフルオロメチル］ベンジルエステル、ＡＬＡ−ｐ−フルオロベンジルエステル、ＡＬＡ−４−クロロベンジルエステル、ＡＬＡ−３−メチルベンジルエステルおよびＡＬＡ−２−メチルベンジルエステルから選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１４】
以下の工程のうち少なくとも一つを含む、請求項７〜１３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法：
（ａ）下記式（ＩＩ）の化合物
【化３】
0005010088.tif 000011
（式（ＩＩ）中、Ｘは脱離基を表すか、またはＣＯＸは酸無水基を表す。Ｒ2は請求項７の定義と同じ意味である。）
と、下記式（ＩＩＩ）の化合物
【化４】
0005010088.tif 000012
（式（ＩＩＩ）中、Ｒ1は請求項７の定義と同じ意味である。）
とを反応させる工程；および
（ｂ）上記式（Ｉ）の化合物を、製薬上許容されるその塩に変換する工程。
【請求項１５】
前記式（ＩＩ）中、Ｘがヒドロキシル基、ハロゲン原子またはアルコキシ基を表すことを特徴とする請求項１４に記載の製造方法。
【請求項１６】
請求項７〜１３のいずれかに定義された化合物または製薬上許容されるその塩を、少なくとも一つの製薬上許容される担体または賦型剤とともに含む、製薬組成物。
【請求項１７】
光化学治療に用いられる治療剤または診断に用いられる診断剤を製造するために、請求項７〜１３のいずれかに定義された化合物または製薬上許容されるその塩の使用の方法。
【請求項１８】
光化学治療または診断が、光化学治療に応答する身体の外部または内部表面の疾患または異常に対して行われることを特徴とする、請求項１７に記載の使用の方法。
【請求項１９】
光化学治療に応答する身体の外部または内部表面の疾患または異常を処置する際に同時に、別個にまたは逐次的に使用するための組み合わせ調製物として、請求項７〜１３のいずれかに定義された化合物または製薬上許容されるその塩を、少なくとも一つの表面浸透助剤および必要に応じて１以上のキレート剤とともに含む製品。
【請求項２０】
ａ）請求項７〜１３のいずれかに定義された化合物または製薬上許容されるその塩を含有する第１容器、
ｂ）少なくとも一つの表面浸透助剤を含有する第２容器；および所望により
ｃ）上記第１容器または第３容器のいずれかの中に含有される１以上のキレート化剤
を含む、身体の外部または内部表面の疾患または異常の光化学治療に用いるためのキット。
【請求項２１】
少なくとも以下の工程：
ｉ） 患者の体液または組織を、請求項７〜１３のいずれかに定義された化合物と混合すること、
ｉｉ） 該混合物を光に曝すこと、
ｉｉｉ） 蛍光レベルを確定すること、および
ｉｖ） この蛍光レベルと対照レベルとを比較すること
を含む、患者の体液または組織のサンプルをアッセイすることによる異常または疾患のインビトロ検査方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の技術分野】
本発明は、５−アミノレブリン酸（ＡＬＡ）の新規誘導体、特にＡＬＡのエステルおよび光化学治療または診断における光増感剤としてのそれらの使用に関する。
【０００２】
【発明の技術的背景】
光化学治療は、光線力学的治療（ＰＤＴ）としても知られており、皮膚または他の上皮器官もしくは粘膜の様々な異常または疾患、特にガンまたは前ガン病変、ならびに一部の非悪性障害、たとえば乾癬などの皮膚病の治療のための技術である。光化学治療は、光増感剤（光化学治療剤）を身体の患部に適用した後、光増感剤を活性化し、次いで、それらを細胞毒性形態に変換するために光活性化光線に曝すことを含み、これにより疾患細胞を死滅させるか、またはそれらの増殖能力を減少させる。
【０００３】
種々の光増感剤が知られているが、とりわけソラレン類、ポルフィリン類、クロリン類およびフタロシアニン類が挙げられる。このような薬剤は光に曝されると毒性となる。
光増感薬剤は、様々な機構によって直接的にまたは間接的にその効果を発揮する。たとえば、ある光増感剤は光により活性化されると直接毒性になるが、他のものは毒性種、たとえば一重項酸素のような酸化剤または他の酸素フリーラジカルを生成するように作用し、それらは、細胞物質および脂質、タン白質および核酸などの生体分子に対して極めて有害である。ソラレン類は直接的に作用する光増感剤の一例であり；光に曝されることにより、それらはＤＮＡ分子の二本鎖の間で付加物（adduct）および架橋を形成し、これによりＤＮＡ合成を阻害する。この治療に伴う不都合なリスクは、望ましくない突然変異原性および発ガン性の副作用が生じる可能性である。
【０００４】
こうした不都合は、もう一方の間接的な作用様式を有する光増感剤を選択することによって回避することができる。たとえば、毒性酸素種の生成により間接的に作用するポルフィリン類は、突然変異原性の副作用を有さず、光化学治療にとってより好ましい候補となる。ポルフィリン類は、ヘムの合成において自然に生じる前駆体である。特に、鉄（Fe3+）が酵素フェロケラターゼ（ferrochelatase）の作用によってプロトポルフィリンIX（Ｐｐ）に取り込まれると、ヘムが生成される。Ｐｐは極めて有力な光増感剤であるが、ヘムは光増感効果を有さない。
【０００５】
このようなポルフィリンベースの薬剤の一つであるフォトフリンTM（PhotofrinTM）が、近年、特定のガンの治療における光増感剤として承認されている。その主な不都合は、それを非経口的に、一般的には経静脈的に投与しなければならないため、静脈注射後数週間続くことのある皮膚の光過敏症（photosensitization）を引き起こすことである。フォトフリンはポルフィリンの大きなオリゴマーからなり、局所的に適用された場合、皮膚に容易には浸透しない。同様の問題が、他のポルフィリンベースの光増感剤にも存在する。たとえば、いわゆる“ヘマトポルフィリン誘導体”（Ｈｐｄ）であり、ガンの光化学治療における使用について報告されている（たとえば、S. Dougherty. J. Natl. Cancer Ins., 1974年, 52; 1333; Kelly および Snell, J. Urol, 1976年, 115 : 150を参照）。Ｈｐｄは、ヘマトポルフィリンを酢酸および硫酸で処理し、その後アセチル化物をアルカリで溶解させることにより得られる複合混合物である。
【０００６】
これらの問題を克服するために、Ｐｐ前駆体の光化学治療の可能性について研究されている。特に、Ｐｐ前駆体５−アミノレブリン酸（ＡＬＡ）は、ある特定の皮膚ガンに対する光化学治療剤として研究されている。ＡＬＡは、ヘム合成の第１段階においてスクシニルＣｏＡおよびグリシンから形成され、限定された程度で皮膚に浸透し、Ｐｐの局所的な集積（build-up）をもたらすことができる；フェロケラターゼ（金属化酵素）の作用はヘム合成において律速段階であるため、過剰のＡＬＡはＰｐ、光増感剤の蓄積をもたらす。したがって、ＡＬＡを皮膚の腫瘍に対して局所的に適用し、次いで数時間後にこの腫瘍を光に曝すことにより、有益な光化学治療効果を得ることができる（たとえば、WO91/01727参照）。基底細胞ガンおよび扁平上皮ガンを覆う皮膚は、健康な皮膚よりもＡＬＡを浸透しやすいため、また、皮膚腫瘍中ではフェロケラターゼ濃度が低いため、ＡＬＡの局所的な適用は、腫瘍中において選択的に促進されたＰｐの生成をもたらすことが見出された。
【０００７】
しかしながら、ＡＬＡを用いた光化学治療は、必ずしも完全に満足できるものとは限らない。ＡＬＡは、広範囲の腫瘍または他の病態の処置を可能にするほど充分に効果的にすべての腫瘍および他の組織に浸透することはできず、また、ＡＬＡは医薬製剤中で不安定であるという傾向を有する。これらの問題は、大部分は直鎖の非置換アルキルＡＬＡエステルの使用によって克服されてきた。直鎖の非置換アルキルＡＬＡエステルは、異常組織への改善された選択性、全身的でない投与薬剤の局在性（non-systemic localization）、向上した取り込みとＰｐＩＸ生、ならびに投与時の軽減された苦痛感覚などといった優れた特性を示すＡＬＡエステルの使用によりある程度までは克服されてきた（WO96/28412参照）。
【０００８】
データベースＸｆｉｒｅ、エントリー3060978、5347132、5499790、5620924、5633390、5991317および6517740（Beilstein）；コスモ総合研究所（株）、日本特許アブストラクト, Vol 16; No. 156 (C-0930), 16.4.1992; EP-A-316179   (徳山曹達（株）); GB-A-2058077 (Hudsonら)およびDE-A-2411382 (Boehringer Sohn Ingelheim)には５−アミノレブリン酸のアルキルエステル誘導体、およびそれらの誘導体および塩、さらにその製造方法が記載されている。
【０００９】
しかしながら、これらの化合物は、未だ、ＰＤＴにおける医薬品としての使用においてある制限を示し、たとえば比較的低い効力を示すことから、代わりとなる光化学治療剤、特に従来技術よりも向上した効力を示す光化学治療剤に対する要求がある。
【００１０】
【発明の目的】
本発明はこうした要求に取り組むものであり、特に、より良い医薬品である、すなわち従来技術に記載された効果よりも向上した光化学治療効果を有する光化学治療薬剤を提供することを目的としている。
【００１１】
【発明の具体的説明】
ある部類の誘導体化されたＡＬＡエステルが、分岐アルキルＡＬＡエステルおよび置換ベンジルＡＬＡエステルを本質的に含んでいるＡＬＡエステルが、光化学治療における使用に適していることを今回見出した。とりわけ、このような特定の化合物が、既知の化合物と比較して驚くほど有利に増強されたＰＤＴ特性を与えることを見出した。
【００１２】
したがって、一つの観点から見ると、本発明は光化学治療または診断において使用される化合物を提供するものであって、該化合物は５−アミノレブリン酸の分岐アルキルエステルまたは置換アルキルエステル、あるいはそれらの誘導体または製薬上許容されるそれらの塩である。
さらなる観点において、本発明は、光化学治療または診断に使用される化合物を提供するものであって、該化合物は一般式Iの化合物：
【００１３】
【化５】
0005010088.tif 000002
【００１４】
（式中、R1は、非置換直鎖アルキル基以外の、必要に応じて置換されていてもよいアルキル基を表し（好ましくは、R1は非置換の場合には、分岐アルキル基を表す）；およびR2は、それぞれ水素原子または必要に応じて置換されたアルキル基を表す）
または製薬上許容されるその塩である。
【００１５】
好ましくは、本発明は、光化学治療または診断において用いられる、式 I の化合物、
【００１６】
【化６】
0005010088.tif 000003
【００１７】
（式中、R1は、必要に応じて置換された分岐アルキル基（たとえば、C5-30アルキル基）または置換アルキル基を表し；
R2は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、水素原子または必要に応じて置換されたアルキル基を表し、好ましくはR1基であり；
上記の置換基は、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アシルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アミノ基、アリール基、ニトロ基、オキソ基、フルオロ基、-SR3基、-NR32基および-PR32基から選択され、各アルキル基は、必要に応じて１以上の、 -O-基、-NR3-基、-S-基または-PR3-基によって中断され；ならびに
R3は水素原子またはC1-6アルキル基を表す）
およびその塩を提供する。
【００１８】
本明細書で用いられる「アルキル」という用語は、特に他に明記しない限り、任意の長鎖または短鎖の、環状、直鎖状または分岐状の脂肪族である飽和または不飽和の炭化水素基を含む。不飽和アルキル基は、モノ不飽和でもポリ不飽和でよく、アルケニル基およびアルキニル基の両者を含む。特に明記しない限り、このような基は最大４０個の原子を含んでよい。しかしながら、最大１０、好ましくは最大８、特に好ましくは最大６、とりわけ好ましくは最大４個の炭素原子を含むアルキル基が望ましい。
【００１９】
上記の置換されたアルキルR1基は、一置換または多置換でもよい。したがって、好適なR1基として、たとえばアルコキシアルキル、ヒドロキシアルコキシアルキル、ポリヒドロキシアルキル、ヒドロキシポリアルキレンオキシアルキル、オキサアルキルおよびポリオキサアルキルなどが挙げられる。
本明細書で用いられる「アシル」という用語は、カルボキシレート基およびカルボネート基の両方を含み、したがって、アシルオキシ置換アルキル基として、たとえばアルキルカルボニルオキシアルキルが挙げられる。このような基において、任意のアルキレン部分は、好ましくはアルキル基に対して本明細書で定義した炭素原子の含有量を有する。
【００２０】
好ましい置換アルキルR1基には、１以上のオキソ基を有する基、好ましくは、１、２または３個（好ましくは２または３個）のオキソ基によって置換された直鎖のC4-12アルキル基（たとえば、C8-10アルキル基）が含まれる。このような基の例としては、3,6-ジオキサ-1-オクチル基および3,6,9-トリオキサ-1-デシル基が挙げられる。
【００２１】
式Iの化合物に存在してもよい特に好ましい置換アルキルR1基として、アリール基によって置換（好ましくは末端で置換）されたC1-6アルキル、好ましくはC1-4アルキル、特に好ましくはC1もしくはC4アルキル（たとえば、メチル）が挙げられる。好ましいアリール基としては、フェニル、ジフェニルおよび単環の５〜７員環、たとえば５または６員環の複素芳香環、特にフェニル基が挙げられ、ならびにそうした基自体が、必要に応じ、たとえば１以上（具体的には、１または２）の、C1-6アルキル基（好ましくはC1-4アルキル基、たとえばメチル基）、アルコキシ基（たとえば、メトキシ基）、ニトロ基、フルオロ基、クロロ基またはトリフルオロメチル基によって置換されていてもよい。好適な複素芳香環基としては、酸素、硫黄および窒素から選ばれる少なくとも１つのヘテロ原子を含む基が挙げられる。好ましい複素芳香環基はピリジンである。
【００２２】
代表的な置換アルキル基R1として、アシルアルキル基、アルコキシメチル基、アルコキシエチル基およびアルコキシプロピル基、またはアシロキシメチル基、アシロキシエチル基およびアシロキシプロピル基、たとえばピバロイルオキシメチル基が挙げられる。
式Iにおける上記分岐アルキル基は、C4-8、好ましくはC5-8の直鎖アルキル基であって、かつ、１以上の置換されていてもよいC1-6アルキル基（たとえばC1-2アルキル基）による置換によって分岐されていることが望ましく、したがって好ましくはC6-9アルキル基を形成している。R1が分岐アルキル基である場合、これは好ましくは非置換である。たとえば、R1は非置換の分岐C5-10アルキル基、好ましくは分岐したC5-8アルキル基、たとえば分岐したC5またはC6アルキル基を表してもよい。
【００２３】
R1が置換アルキル基を表す場合、特に好ましい置換基は、アリール（たとえばフェニル）またはアルコキシであって、それ自体も置換されていてもよい。
したがって、特に好ましい形態において、R1は以下のように表される：
必要に応じて置換された分岐C5-30アルキル基、好ましくは分岐C6-9アルキル基であって、該分岐アルキル基は、直鎖のC4-29アルキル基、好ましくはC4-8アルキル基、より好ましくはC5-8（たとえばC5またはC6）アルキル基を含み、かつ、これらのアルキル基が１以上のC1-6アルキル基、好ましくはC1またはC2アルキル基による置換でもって分岐されており、その置換の位置が好ましくはエステル側から２番目のC2もしくはそれより高い炭素原子であるアルキル基、
あるいは、
アリールもしくはアルコキシで置換された、アルキル基（好ましくはC1またはC2アルキル基）であって、好ましくは該アリール基が置換されており、とりわけ好ましいのは、１以上の、アルキル基（たとえばC1-2アルキル基）、アルコキシ基（たとえばメトキシ基）、フルオロ基、クロロ基、ニトロ基またはトリフルオロメチル基によって置換されており、
かつ、
好ましくは上記アルコキシ基が、さらに1以上のアルコキシ基によって置換されおり、後者のアルコキシ基はさらに置換されていれもよい。
【００２４】
さらなる観点において、本発明は新規な化合物を提供する。したがって、本発明は、式Iの化合物、
【００２５】
【化７】
0005010088.tif 000004
【００２６】
（式中、R1は、必要に応じて置換された分岐C5-30アルキル基、好ましくは分岐C6-9アルキル基であって、この該分岐アルキル基は、直鎖のC4-29アルキル基、好ましくは直鎖C4-8アルキル基、より好ましくは直鎖C5-8（たとえば、C5またはC6）アルキル基を含み（これら直鎖アルキル基は、１以上のC1-6アルキル基、好ましくはC1またはC2アルキル基による置換でもって分岐されており、該置換の位置はエステル側から２番目のC2またはそれ以上に高い炭素原子である。）、あるいは、
複素芳香環でないアリールによる置換アルキル基、好ましくは非複素芳香環アリールによる置換C1またはC2アルキル基であり（ここで該アリール基は置換されており、特に好ましくは１以上の、アルキル基（たとえば、C1-2アルキル基）、アルコキシ基（たとえばメトキシ基）、フルオロ基、クロロ基、ニトロ基またはトリフルオロメチル基によって置換されている。）、あるいは、
アルコキシ置換アルキル基、好ましくはアルコキシ置換C1またはC2アルキル基であり（該アルキル基は、メトキシ基、またはアルコキシ基で置換されたアルコキシ基によって置換されており、前者のアルコキシ基はさらに置換されていてもよい。）、
R2は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、水素原子または必要に応じて置換されたアルキル基（たとえば基R1）を表し；
上記の置換基は、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アシルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アミノ基、アリール基、ニトロ基、オキソ基、フルオロ基、-SR3基、-NR32基および-PR32基から選択される置換基であり、
かつ該アルキル基は、必要に応じて１以上の、-O-基、-NR3-基、-S-基または-PR3-基によって中断されていてもよいアルキル基であり；さらに
R3は、水素原子またはC1-6アルキル基を表す）
および製薬上許容され得るそれらの塩を提供する。
【００２７】
R2は、ともに水素原子であることが好ましく、したがって好ましい形態においては、本発明は、置換ベンジルＡＬＡエステルおよび必要に応じて置換された分岐C6-9アルキルＡＬＡエステルを提供し、これらが本発明の方法において使用される。
したがって、本発明の好ましい化合物または本発明の方法において用いられる好ましい化合物は、2‐メチルペンチルＡＬＡエステル、4‐メチルペンチルＡＬＡエステル、1-エチルブチルＡＬＡエステル、3,3‐ジメチル‐1‐ブチルＡＬＡエステル、ベンジルＡＬＡエステル、p‐メチルベンジルＡＬＡエステル、p‐ニトロベンジルＡＬＡエステル、p‐［トリフルオロメチル］ベンジルＡＬＡエステル、p‐フルオロベンジルＡＬＡエステル、4‐クロロベンジルＡＬＡエステル、3‐メチルベンジルＡＬＡエステルおよび2‐メチルベンジルＡＬＡエステルを含む。
【００２８】
本発明の上記化合物または本発明において使用される上記化合物は、多官能化合物の誘導体化、特にエステル化に関する技術において公知である標準的な方法および手順を用いて製造することができる。当該技術分野において知られているように、化合物のこのようなエステル化は、要求されている基のみが、エステル化条件下で活性を維持し、かつ反応に関与するように、適切な基の保護および脱保護を伴うであろう。したがって、たとえばエステルを製造するために用いられる置換アルカノールの置換基を、エステル化反応の間保護してもよい。同様に、式Ｉの化合物にNR22基を提供する化合物上にあるNR22基は、反応の間保護し、その後脱保護してもよい。このような保護／脱保護の手順は、公知のアミノ酸誘導体、特にそのエステルの製造において周知の技術である。たとえばMcomieの“Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum, 1973 およびT.W.Greeneの“Protective Groups in Organic Chemistry”, Wiley-Interscience, 1981 を参照されたい。
【００２９】
したがって、さらなる観点において、本発明は、本発明の化合物または本発明において用いられる化合物の製造方法であって、５−アミノレブリン酸のカルボキシ基のエステルを形成することを含む製造方法を提供する。
したがって、本発明は、本発明の化合物または本発明において用いられる化合物の製造方法であって、５−アミノレブリン酸またはそのエステル化可能な誘導体を、アルカノールまたはそのエステル形成誘導体と反応させることを含む製造方法を提供するものであることが理解される。
【００３０】
より詳しくは、本発明のこの観点は、式Iの化合物の製造方法を提供するものであって、該方法は以下の工程の少なくとも１つを含む：
(a)  式IIの化合物
【００３１】
【化８】
0005010088.tif 000005
【００３２】
（式中、Xは脱離基、たとえばヒドロキシル基、ハロゲン原子またはアルコキシ基を表し、またはCOXは酸無水物基を表し、R2は上記で定義したものである）を、式IIIの化合物
【００３３】
【化９】
0005010088.tif 000006
【００３４】
（式中、R1は上記で定義したものである）と反応させる工程；および
(b)  式Iの化合物を製薬上許容され得るそれらの塩に変換する工程。
工程(a)の反応は、水、アセトン、ジエチルエーテル、メチルホルムアミド、テトラヒドロフランなどの溶媒または混合溶媒において、混合物の沸点までの温度、好ましくは室温で行うことが都合がよい。
【００３５】
エステル化反応の条件は用いるアルコールに依存するであろうが、その条件はエステルの最大収量が得られるように選ぶことができる。エステル化反応は可逆平衡反応であることから、反応条件は最大収量のエステル生成物が得られるように選択することができる。このような条件は、典型的なエステル化反応において生成される水を、水との共佛混合物の形成によって除去することができる溶媒を選択することで得ることができる。このような溶媒としては、水と共佛混合物を形成することが可能な芳香族炭化水素または他のもの、たとえばクロロホルムといった塩素化炭化水素によって例示される。５−ＡＬＡの低級エステルを形成するために、平衡反応を、大過剰のアルコールを使用することにより、エステル側に向けてもよい。他のエステルについても、大過剰の酸を用いることにより、平衡をエステル生成物に向けることができる。
【００３６】
エステル化反応は当該技術分野において公知であり、たとえばSaul Pataiの“The chemistry of the carboxylic acids and esters”,  (Ch.11, p.505, Inter‐science 1969年)  およびHouban Weyl, (Methoden der Organische Chemie, Band E5,“Carbonsauren und carbonsauren-derivate”, p.504, Georg Thieme Verlag, 1985年)に記載されている。アミノ酸誘導体の形成は、同じシリーズのBand XI/2 (Houben Weyl, Methoden der Organische Chemie, Band XI/2,“Stickstoff-  verbindungen”, p.269, Georg Thieme Verlag, 1958年)に記載されている。
【００３７】
工程(a)の反応は、触媒、たとえば無機もしくは有機酸または塩基のような酸結合剤の存在下で、都合よく行われる。
出発物質として用いられる化合物は文献から公知であり、多くの場合市販されているか、あるいはそれ自体公知の方法を用いて得ることができる。ＡＬＡは、たとえばSigmaまたはPhotocure ASA, オスロ,ノルウェーから入手可能である。
【００３８】
上述したように、本発明の化合物または本発明にしたがって用いられる化合物は、製薬上許容される塩の形態をとることができる。このような塩は、好ましくは生理的に許容される有機酸または無機酸との酸付加塩（acid addition salts）である。好適な酸として、たとえば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸およびアスコルビン酸などが挙げられる。疎水性の塩もまた、たとえば沈殿によって都合よく製造することができる。適当な塩としては、たとえば酢酸塩、臭化物、塩化物、クエン酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、メシレート（mesylate）、硝酸塩、リン酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、ステアリン酸塩、トシラート（tosylate）、カルシウム塩、メグルミン塩、カリウム塩およびナトリウム塩が挙げられる。塩生成のための手順は、当該技術分野における従来の方法である。
【００３９】
上述したように、本発明の化合物および本発明にしたがって用いられる化合物ならびにそれらの塩は、価値ある薬理学的な諸性質、すなわち光化学治療剤として有用にする光増感特性を有する。
したがって、本発明のさらなる観点は、上述したような化合物、または製薬上許容されるそれらの塩を、少なくとも1つの医薬担体または賦型剤とともに含む医薬組成物を提供する。
【００４０】
さらになる観点において、上述のように、たとえば光化学治療または診断における医薬として使用される医薬組成物が提供される。
さらに別の観点において、光化学治療に用いられる治療剤、特に光化学治療に応答する、身体の外部もしくは内部の表面の障害または異常を処置するための治療剤の製造において、上述したような化合物または製薬上許容されるそれらの塩の使用の方法が提供される。
【００４１】
本発明にしたがって治療しうる異常および疾患には、光化学治療に対し、反応性を示す悪性の、悪性になる前のおよび非悪性の異常または疾患があり、その例として腫瘍または他の新生物、乾せんまたは光線性角化症および座そう、皮膚剥離などの皮膚障害、および他の疾患または感染、たとえば細菌性、ウイルス性または真菌性感染、具体的にはヘルペスウイルス感染などが挙げられる。本発明は、病巣(lesions)が離散して形成された、上記組成物を直接適用できる疾患、障害または異常の処置に特に適している（ここでいう病巣とは、腫瘍などを含めた広い意味で用いている）。
【００４２】
本発明にしたがって治療しうる内部および外部の身体表面として、皮膚および他のすべての上皮および漿膜表面が挙げられ、たとえば粘膜、器官、具体的には気道、胃腸管および尿生殖路のライニング、およびこのような表面に注ぐ管を有する腺（たとえば、肝臓、皮脂腺を有する毛包、乳腺、唾液腺および精嚢）が挙げられる。皮膚に加えて、このような表面としては、たとえば膣、子宮内膜および尿路上皮のライニングが挙げられる。また、このような表面として、疾患組織またはガン組織の切除後に身体内に形成される空洞、たとえばグリオームのような腫瘍を切除した後の脳の空洞を挙げることもできる。
【００４３】
したがって、典型的な表面としては：(i)皮膚および結膜；(ii)口、咽頭、食道、胃、腸管および腸管付属器、直腸および肛門管のライニング（lining）；(iii)鼻道、鼻洞、鼻咽頭、気管、気管支および細気管支のライニング；(iv)尿管、膀胱および尿道のライニング；(v)膣、子宮頚管および子宮のライニング；(vi)壁側胸膜および臓側胸膜；(vii)腹膜腔および骨盤腔のライニング、およびこれらの腔内に収容される器官の表面；(viii)硬膜および髄膜；(ix)たとえば外科手術時に直接に、または針を通して挿入された光ファイバーを介して、光活性化光線が近づきうる固形組織中のすべての腫瘍が挙げられる。
【００４４】
本発明の組成物は、１種類以上の生理的に許容される担体または賦型剤を用いて、当業界において公知の技術により、従来の手順にて製剤することができる。好ましい形態として適切ならば、本発明に係る化合物または組成物を、担体または賦型剤を使用する場合はその添加の前または後に、たとえばγ線照射、オートクレーブ滅菌または加熱滅菌によって殺菌して無菌製剤を提供する。
【００４５】
本組成物は局所的、経口的または全身的に投与できる。局所用組成物が好ましく、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤(ointments)、スプレー剤、ローション剤、ロウ膏剤(salves)、スティック剤、石鹸剤、散剤、膣坐剤、エアゾル剤、滴剤、液剤および当該技術分野における従来型製薬形態が挙げられる。
軟膏剤(ointments)、ゲル剤およびクリーム剤は、たとえば水性基剤または油性基剤を用いて、好適な増粘剤および／またはゲル化剤を添加して処方することができる。ローション剤は、水性または油性基剤を用いて製剤することができ、通常、１種以上の乳化剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤または着色剤を含有する。散剤は、好適な粉末基剤を用いて製剤することができる。滴剤および液剤は、１以上の分散剤、可溶化剤または懸濁化剤をも含む水性または非水性の基剤を用いて製剤することができる。エアゾルスプレー剤は、好適な噴射剤を用いて、加圧包装から放出させるのが都合がよい。
【００４６】
あるいは、本発明の組成物は、経口的または非経口的投与、たとえば皮内、皮下、腹腔内または静脈内注射に適した形態にて提供することができる。したがって、別の製薬形態として、無被覆錠剤または被覆錠剤、カプセル剤、懸濁剤および溶液剤が挙げられ、これらは、活性成分と、必要に応じて従来の１種類以上の不活性な担体および／または希釈剤、たとえば、コーンスターチ、ラクトース、スクロース、微晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、水／エタノール、水／グリセロール、水／ソルビトール、水／ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロースまたは硬化脂肪などの脂肪物質またはそれらの好適な混合物とを含有する。
【００４７】
本発明の組成物は、さらに潤滑剤、保湿剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、甘味剤、香味剤、吸収促進剤、たとえば後述するような表面浸透助剤などをさらに含んでいてもよい。本発明の組成物は、当該技術分野で公知の操作を採用することによって、患者に投与した後に、活性成分の素早い放出、徐々の放出または遅れた放出を与えるように製剤することができる。また、可溶化剤および／または安定化剤、たとえばα、β、γおよびHP-βシクロデキストリンなどのシクロデキストリン類（ＣＤ）を用いることもできる。組成物は適当な投与形態、たとえば乳濁液として、またはリポソーム、ニオソーム(niosomes)、マイクロスフェア、ナノパーティクルなどの形態であってもよい。かくして本発明の化合物は、これらの形態に吸収されるか、取り込まれるか、あるいは結合させてもよい。
【００４８】
本組成物における上述した本化合物の濃度は、化合物の性質、組成、投与様式、治療条件および患者に依存し、選択に応じて変更または調整することができる。しかし一般的には、０．０１〜５０％、具体的には０．０５〜２０％、たとえば１〜１０％(ｗ/ｗ)の濃度範囲が好適である。治療用途のためには、０．１〜５０％の濃度範囲、たとえば０．２〜３０％(ｗ/ｗ)が好適であることが分かった。高い親油性を有する誘導体を製造する場合には、より低い投与量、たとえば０．０１〜１０％、具体的には０．０２〜１％(ｗ/ｗ)の濃度範囲で用いてもよい。
【００４９】
到達し難い部位への局所的投与は、当業界で公知の技術、たとえばカテーテルまたは他の適当な薬物送達システムなどの使用によって達成できる。
適用表面への投与後、処置される領域を光に曝して、光化学治療効果が達成される。投与に引き続き、露光が行われる時間の長さは、本組成物の性質、治療条件および投与形態に依存する。これは、一般的に０．５〜４８時間、たとえば１〜１０時間のオーダーである。
【００５０】
照射は、一般に４０〜２００ジュール／cm2、たとえば１００ジュール／cm2の線量レベルで適用される。
照射に用いられる光の波長を選択して、より有効な光化学治療効果を達成することができる。従来、ポルフィリン類を光化学治療に用いる場合、ポルフィリンの吸収極大付近の光で照射される。したがって、たとえば皮膚ガンの光化学治療にＡＬＡを用いる従来技術の場合には、３５０〜６４０ｎｍ、好ましくは６１０〜６３５ｎｍの領域の波長が採用されていた。しかしながら、ポルフィリンの吸収極大を超える広範囲の波長を照射に選択することにより、光増感効果を高めることができる。理論に縛られることを望むわけではないが、これは、Ｐｐおよび他のポルフィリン類がその吸収スペクトル内の波長を有する光に曝されると、特に光プロトポルフィリン（ＰＰｐ）を始めとする様々な光生成物に分解される、という事実によるものであると考えられる。ＰＰｐは1種のクロリンであり、相当な光増感効果を有し；その吸収スペクトルは、Ｐｐが吸収する波長を超えて長波長側、すなわち、ほとんど７００ｎｍ（Ｐｐは６５０ｎｍを超える光をほとんど吸収しない）まで伸びる。したがって、従来の光化学治療において用いられる波長はＰＰｐを励起せず、このためさらなる光増感効果の利益は得られない。５００〜７００ｎｍの範囲における光の波長での照射は、特に効果的であることが判明した。波長６３０ｎｍおよび６９０ｎｍを含むことが特に重要である。
【００５１】
したがって、本発明のさらなる観点は、身体の外部または内部表面の疾患または異常に対する光化学治療の処置方法であって、疾患表面に上記で定義した組成物を投与すること、および該表面を光、好ましくは波長領域３００〜８００ｎｍ、たとえば５００〜７００ｎｍの光に曝すことを含む処置方法を提供する。
身体の様々な領域を、たとえばランプまたはレーザーによって照射する方法は、よく知られた技術である（たとえば、Van den Bergh, Chemistry in Britain, May 1986 p. 430-439を参照）。到達し難い領域については、これは光ファイバーを用いて都合よく達成できる。
【００５２】
本発明の化合物または本発明に用いられる化合物は、他の光増感剤、たとえばＡＬＡまたはフォトフリンTMとともに、または光化学治療効果を高める他の活性成分とともに、処方および／または投与することができる。たとえば、キレート化剤は、Ｐｐの蓄積を高めるために含めることは有益である；キレート化剤による鉄のキレート化によって、酵素フェロケラターゼの作用によりヘムを形成するためのＰｐへの鉄の取り込みを妨げ、その結果Ｐｐの集積(build-up)をもたらす。このようにして、光増感効果が増強される。
【００５３】
アミノポリカルボン酸キレート化剤は、こうした使用に特に好適であり、金属の解毒化または磁気共鳴造影コントラスト剤における常磁性金属イオンのキレート化に関する文献中に記載されているすべてのキレート化剤が挙げられる。特にＥＤＴＡ、ＣＤＴＡ（シクロヘキサンジアミン四酢酸）、ＤＴＰＡおよびＤＯＴＡならびにそれらの公知の誘導体／アナログを挙げることができる。ＥＤＴＡが好ましい。鉄キレート化効果を得るために、デスフェリオキサミン（desferrioxamine）および他の鉄担体も、たとえばＥＤＴＡのようなアミノポリカルボン酸キレート化剤と併用することができる。
【００５４】
上記キレート化剤は、０．０５〜２０％、たとえば０．１〜１０％(ｗ/ｗ)の濃度で用いることが都合がよい。
さらに、表面浸透助剤および特にジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のようなジアルキルスルホキシドは、光化学治療効果の増強における有益な効果を有することが判明した。これは、WO95/07077に詳しく記載されている。
【００５５】
表面浸透助剤は、医薬文献に記載されているすべての皮膚浸透助剤、たとえばキレート化剤（例：ＥＤＴＡ）、界面活性剤（例：ドデシル硫酸ナトリウム）、非界面活性剤、胆汁塩（例：デオキシコール酸ナトリウム）および脂肪酸（例：オレイン酸）のいずれでもよい。好適な表面浸透助剤の例としては、HPE-101（Hisamitsuより入手可能）、ＤＭＳＯおよび他のジアルキルスルホキシド、特にｎ−デシルメチルスルホキシド（ＮＤＭＳ）、ジメチルスルフアセトアミド、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦＡ）、ジメチルアセトアミド、グリコール、種々のピロリドン誘導体（Woodfordら, J. Toxicol. Cut. & Ocular Toxicology, 1986年, 5: 167-177）、およびAzoneTM（Stoughton ら, Drug Dpv. Ind. Pharm. 1983年, 9: 725-744）、またはそれらの混合物が挙げられる。
【００５６】
しかしながら、ＤＭＳＯは、抗ヒスタミンおよび抗炎症活性を有するために、さらに酵素ＡＬＡシンターゼおよびＡＬＡデヒドロゲナーゼ（それぞれＡＬＡを形成する酵素およびＡＬＡをポルホビリノーゲンに縮合させる酵素）に対する活性促進作用を有し、これにより活性形態、Ｐｐの生成を高めるために好ましい。
上記表面浸透助剤は、０．２〜５０％（ｗ/ｗ）の濃度範囲、たとえば約１０％（ｗ/ｗ）で好適に使用される。
【００５７】
本発明の化合物または本発明にしたがって使用される化合物は、さらに他の薬剤とともに処方しおよび／または投与して、ＰＤＴの有効性を向上させることができる。したがって、たとえば腫瘍を処置する場合、腫瘍治療に有効であることが見出された血管形成阻害剤（抗血管形成剤）（O'Reilly ら, Nature Medicine, 2, p689-692,1996年; Yamamotoら, Anticancer Research, 14, pl-4,1994; および Brooks ら, J. Clin. Invest., 96, p1815-1822,1995年）を、ＰＤＴにおいて本発明の組成物とともに用いて、さらに腫瘍の脈管系に損傷を与えることができる。使用できる血管形成阻害剤としては、TNP-470（AGM-1470, フマギリンと呼ばれる真菌分泌物の合成類似体、武田薬品工業株式会社（大阪）、アンジオスタチン（Surgical Research Lab. at Children's Hospital Medical Center of Harvard Medical School）およびインテグリンαvβ3拮抗薬（たとえば、インテグリンαvβ3に対するモノクロナール抗体、The Scripps Research Institute, LaJolla, CA）が挙げられる。
【００５８】
あるいは、または追加的に、免疫治療剤（たとえば、抗体もしくはマクロファージ活性化因子のような作動体(effectors)）または化学療法剤を用いて、本発明によるＰＤＴの効果を高めることができる。これらの補充的薬剤の投与は、経路、濃度および処方に関して、これらの薬剤を使用するための公知の方法にしたがって行われる。これらの補充薬剤は、それらの機能に応じて、ＰＤＴによる処置の前、処置後または処置中に投与することができる。たとえば、血管形成阻害剤は、腫瘍の再成長を阻止するためにＰＤＴの後、５〜１０日に添加してもよい。
【００５９】
同様に、他の抗ガン剤も本発明の組成物と併用することができ、製剤の一部として含有させるか、または別個の治療剤として該組成物と同時に、別々にまたは逐次的に投与することができる。
また、グルコースも、局所的にまたは全身的に投与されると、ＰＤＴを支援することが判明した。理論に縛られることを望むわけではないが、グルコースの投与によりｐＨの低下を招き、これはプロトポルフィリン、たとえばＡＬＡの疎水性を増加させ、これによりプロトポルフィリンがさらに容易に細胞に浸透すると思われる。局所的な投与を考える場合、薬剤、たとえばクリーム剤は、０．０１％〜１０％（ｗ/ｗ）のグルコースを含むことが好ましい。
【００６０】
処置される条件および組成物の性質に応じて、本発明に用いられる化合物は、たとえば単一の組成物において、このような他の任意の薬剤とともに同時に投与してもよく、あるいは逐次的にまたは別々に投与してもよい。実際に多くの場合、特に有益な光化学治療効果は、本発明で用いられる化合物の投与前に、別個の工程において表面浸透助剤で前処理することによって得ることができる。
【００６１】
さらに、ある状況においては、表面浸透助剤での前処理をした後、表面浸透助剤とともに光化学治療剤を投与することが有益な場合がある。表面浸透助剤を前処理に用いるときは、高濃度、たとえば１００％（ｗ/ｗ）以下で用いることができる。このような前処理工程を採用するならば、光化学治療剤は続いて、前処理後数時間までに、たとえば前処理後５〜６０分間隔で投与できる。
【００６２】
したがって、さらなる観点から見ると、本発明は上述した化合物または製薬上許容されるその塩を、少なくとも１つの表面浸透助剤、および必要に応じ１以上のキレート化剤とともに含む製品であって、光化学治療に応答する身体の外部または内部表面の疾患または異常を処置する際に、同時に、別個にまたは逐次的に使用するための組み合わせ調製物としての生産物を提供する。
【００６３】
もう一方から見ると、本発明のこの観点は、身体の外部または内部表面の疾患または異常の光化学治療で用いるためのキットであって、
a)  上述した化合物または製薬上許容されるそれらの塩を含む第１容器、
b)  少なくとも１つの表面浸透助剤を含む第２容器；および所望により
c)  上記第１容器または第３容器のいずれかの中に含有される１以上のキレート化剤を含むキットも提供する。
【００６４】
表面浸透助剤が別個の前処理工程において適用される場合、より高濃度、たとえば１００％(ｗ/ｗ)以下で適用できる。
上述した化合物を用いる処置方法は、処置される疾患または異常の蛍光を、必然的に伴うことが分かる。この蛍光の強度は、異常細胞を排除するために使用できるけれども、蛍光の局在化を用いて、異常または障害のサイズ、程度および状態を視覚化することができる。
【００６５】
このように調査部位で同定または確認された異常または疾患は、次いで別の治療技術、たとえば外科的または化学的治療により、あるいは蛍光の連続的な蓄積による本発明の治療方法により、あるいは適当な部位に本発明の化合物をさらに適用することにより、治療することができる。診断技術は、治療処置に用いられるよりも低いレベルの蛍光を視覚化用に必要とすることがわかる。したがって、一般的に０．２〜３０％、たとえば１〜５％（ｗ/ｗ）の濃度範囲が好適である。投与の部位、方法および様式を、治療上の使用に関して以前から検討して来ているが、ここで記載した診断上の使用にも適用できる。
【００６６】
また、本発明の化合物または本発明に用いられる化合物は、インビトロの検査技術、たとえば体液中に含まれる細胞の検査に用いることもできる。非正常な組織に関係した強い蛍光により、異常または障害が好適に示される。この方法は非常に感度が高く、たとえば尿または痰サンプル中の上皮細胞を検査することにより、それぞれ膀胱ガンまたは肺ガンなどの異常または疾患の早期発見のために用いることができる。尿および痰以外に好適に検査することができる体液として、血液、精液、涙、脊髄液などが挙げられる。組織サンプルまたは検体、たとえば生検組織または骨髄サンプルも検査することができる。したがって、本発明は、上記の光化学治療の方法に従って診断するための本発明の化合物またはその塩の使用、および前記検査を行うための製品およびキットにまで拡張される。
【００６７】
本発明のさらなる観点は、患者の体液または組織のサンプルをアッセイすることによる異常または疾患を検査するインビトロの検査方法に関するものであり、該方法は少なくとも以下の工程を含む：
i)  上記体液または組織を、上述した化合物と混合すること、
ii)  得られた該混合物を光に曝すこと、
iii)  蛍光レベルを確定すること、および
iv)  上記蛍光レベルと対照レベルとを比較すること。
【００６８】
【実施例】
本発明を、図面を参照して、以下の限定のためではない実施例により詳細に説明する。
【００６９】
【実施例１】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸エステル塩酸塩の調製
一般操作 Ｉ
０℃（浴温度）に冷却した攪拌下のアルコール（６．0ｍｌまたは５〜６ｇ）中へ、塩化チオニル（１．０ｍｌ）を滴下して加え、次いで５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。この混合物を７０〜９０℃で１〜４時間攪拌することにより透明な溶液を得た。反応混合物はＴＬＣ（アルミニウム箔上のシリカゲル６０、アセトン−メタノール（３：２）で溶離）でチェックした。その混合物を常温に冷却して、攪拌しながらジエチルエーテル（５０ｍｌ）中へ加えた。得られた混合物をろ過して粗エステルを得た。過剰のアルコールを濾液から回収することができた。
【００７０】
粗エステルは、１５０〜２００×２５ｍｍのシリカゲル６０カラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトニトリル（２５０ｍｌ）および５〜１０％メタノールのアセトニトリル溶液（５００〜１０００ｍｌ）により溶離して行い精製した。生成物を含む分画を蒸発濃縮し、残渣をエーテルで洗浄して、３０〜４０℃、０．２ｍｍＨｇで乾燥した。
この方法により、以下のエステルを調製した。
【００７１】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸エチルエステル塩酸塩
エタノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は２時間後に完結した。収量１．０ｇ（収率８５％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.19 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.54 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.6 Hz), 3.96 (2H, br s), 4.05 (2H, q, J = 7.0 Hz), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 14.0, 27.1, 34.2, 46.4, 60.0, 171.9, 202.4.
【００７２】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸１−メチル−ペンチルエステル塩酸塩  [化合物１]
２−ヘキサノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は約４時間後に完結した。収量１．０ｇ（収率６６％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 0.87 (3H, t, J = 6.5 Hz), 1.15 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.25 (4H, m), 1.51 (2H, m), 2.51 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.81 (2H, t, J = 6. 6 Hz), 3.95 (2H, s), 4.78 (1H, m, J = 6.5 Hz), 8.47 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 13.6, 19.4, 21.6, 26.6, 27.0, 33.8, 34.4, 44.9, 69.6, 169.5, 200.1.
【００７３】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３−ヘキシルエステル塩酸塩  [化合物１２]
３−ヘキサノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から１００℃で得た。反応は２日後に完結した。収量０．８７ｇ（収率５８％）、琥珀色の油。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 0.83 (3H, t, J = 7.4 Hz), 0.86 (3H, t, J = 7.2 Hz), 1.27 (2H, m, J = 7.7 Hz), 1.48 (4H, m, J = 7.5 Hz), 2.54 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.95 (2H, s), 4.73 (1H, m, J = 5.9 Hz), 8.55 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 9.3, 13.6, 17.8, 26.2, 26.8, 33.9, 34.8, 45.9, 73.7, 169.8, 200.1.
【００７４】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２−メチル−１−ペンチルエステル塩酸塩  [化合物１３]
２−メチル−１−ペンタノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は３．５時間後に完結した。収量１．４３ｇ（収率９５％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 0.85-0.90 (6H, m), 1.1-1.4 (4H, m), 1.74 (1H, m), 2.56 (2H, t, J = 6.7 Hz), 2.84 (2H, t, J = 6.6 Hz), 3.75-3.9 (2H, m), 3.95 (2H, br s), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6) : δ 13.9, 16.4, 19.1, 26.7, 31.3, 33.9, 34.5, 45.9, 67.9, 170.0, 200.1.
【００７５】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−メチル−１−ペンチルエステル塩酸塩  [化合物８]
４−メチル−１−ペンタノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は２時間後に完結した。収量１．３２ｇ（収率８７％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 0.87 (6H, d, J = 6.6 Hz), 1.15-1.25 (2H, m), 1.45-1.65 (3H, m), 2.55 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.96 (2H, br s), 3.99 (2H, t, J = 6.8 Hz), 8.53 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ22.0, 22.2, 25.6, 26.7, 26.8, 34.0, 45.9, 63.5, 169.9, 200.1.
【００７６】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３，３−ジメチル−１−ブチルエステル塩酸塩  [化合物１６]
３，３−ジメチル−１−ブタノール（５．０ｇ；４９ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は４時間後に完結した。収量０．９１ｇ（収率６０％）、ｍｐ １４６〜１４８℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 0.91 (9H, s), 1.51 (2H, t, J = 7.6 Hz), 2.53 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.2 Hz), 3.96 (2H, br s), 4.07 (2H, t, J = 7.0 Hz), 8.54 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.0, 29.3, 29.34, 34.3, 46.4, 61.5, 171.9, 202.4.
【００７７】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸シクロヘキシルエステル塩酸塩  [化合物７]
シクロヘキサノール（６．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から８０℃で得た。塩化チオニルは常温で添加した。反応は３時間後に完結した。収量１．４８ｇ（収率９９％）
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.1-1.5 (6H, m), 1.5-1.9 (4H, m), 2.52 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.82 (2H, t, J = 6.3 Hz), 3.95 (2H, br s), 4.64 (1H, m), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 22.8, 24.5, 27.1, 30.6, 33.9, 45.9, 71.2, 169.3, 200.1.
【００７８】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２−フェニルエチルエステル塩酸塩  [化合物５]
２−フェニルエタノール（５．０ｇ；４１ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は３時間後に完結した。収量１．４３ｇ（収率８８％）
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.50 (2H, t, J = 6.4 Hz, 2.82 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.89 (2H, t, J = 7.0 Hz), 3.95 (2H, br s), 4.23 (2H, t, J = 7.0 Hz), 7.1-7.4 (5H, m), 8.54 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 24.6, 28.0, 35.2, 47.4, 65.5, 127.2, 129.2, 129.7, 172.8, 203.3.
【００７９】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−フェニル−１−ブチルエステル塩酸塩  [化合物１４]
４−フェニル−１−ブタノール（５．０ｇ；３３ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は２９時間後に完結した。収量１．２２ｇ（収率６８％）
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6) : δ 1.60 (4H, br s), 2.5-2.6 (4H, m), 2.84 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.97 (2H, br s), 4.0 (2H, m), 7.15-7.35 (5H, m), 8.56 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.0, 27.2, 27.6, 34.3, 34.6, 46.4, 63.8, 125.6, 128.2, 141.8, 171.9, 202.4.
【００８０】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２−メトキシエチルエステル塩酸塩  [化合物２０]
２−メトキシエタノール（５．０ｇ；６６ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は１時間後に完結した。収量１．２５ｇ（収率９３％）、黄色味を帯びた油。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.57 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.2 Hz), 3.27 (3H, s), 3.54 (5H, br s), 3.95 (2H, br s), 4.12 (2H, br s), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 58.0, 63.2, 69.6, 172.0, 202.5.
【００８１】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３，６−ジオキサ−１−オクチルエステル塩酸塩  [化合物２３]
ジエチレングリコールモノエチルエーテル（５．０ｇ；３７ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は４時間後に完結した。収量０．９０ｇ（収率５３％）、淡黄褐色の固体。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.10 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.58 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.35-3.65 (8H, m), 3.96 (2, br s), 4.13 (2H, t, J = 4.2 Hz), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 15.0, 27. 1, 34.3, 46.5, 63.4, 65.5, 68.1, 69.1, 69.8, 172.0, 202.5.
【００８２】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３，６，９−トリオキサ−１−デシルエステル塩酸塩  [化合物２５]
トリエチレングリコールモノメチルエーテル（５．０ｇ；３０ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から７０℃で得た。反応は２０時間後に完結した。収量１．１９ｇ（収率６３％）、褐色を帯びた固体。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.58 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.84 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.25 (3H, s), 3.4-3.65 (10H, m), 3.96 (2H, br s), 4.13 (2H, m), 8.49 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 58.0, 63.4, 68.1, 69.5, 69.6, 69.7, 71.2, 171.9, 202.5.
【００８３】
一般操作 ＩＩ
アルコール（５．０ｇ）と、５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）との混合物を９０〜１００℃（アルコールを融解するために必要であれば１３５℃まで）に加熱して、１２Ｍ塩酸（０．１ｍｌ）を加えた。透明な溶液が得られるまで（５〜６日までの間で）加熱を続けた。次いで前記と同様の最終操作を行った。
この方法により、以下のエステルを調製した。
【００８４】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸ベンジルエステル塩酸塩  [化合物４]
ベンジルアルコール（５０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１０．０ｇ；６０ｍｍｏｌ）から得た。９０℃に加熱して２３時間後、過剰のベンジルアルコールを９０℃（浴温度）、０．３３ｍｍＨｇで留去した。収量８．１ｇ（収率５３％）、褐色を帯びた粉体。
1H NMR (200 MHz ; DMSO-d6): δ 2.63 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.87 (2H, t, J = 6.5 Hz), 3.98 (2H, br s), 5.11 (2H, s), 7.3-7.4 (5H, br s), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 26.7, 33.8, 45.9, 64.8, 126.3, 126.4, 126.8, 134.4, 169.8, 200.1.
【００８５】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−ニトロベンジルエステル塩酸塩  [化合物１１]
４−ニトロベンジルアルコール（５．０ｇ；３３ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１３５℃で１５分後に完結した。収量０．９５ｇ（収率５２％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.72 (2H, t, J = 5.8 Hz), 2.91 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.02 (2H, br s), 5.28 (2H, s), 7.67 (2H, d, J = 8.0 Hz), 8.25 (2H, d, J = 9.1 Hz), 8.58 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 64.4, 123.5, 128.3, 143.9, 146.9, 171.8, 202.5.
【００８６】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−フルオロベンジルエステル塩酸塩  [化合物１５]
４−フルオロベンジルアルコール（５．０ｇ；４０ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は９０℃で３時間後に完結した。収量１．０２ｇ（収率６２％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.63 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.88 (2H, t, J = 6.6 Hz), 3.99 (2H, br s), 5.10 (2H, s), 7.22 (2H, t, J = 8.8 Hz), 7.45 (2H, d, J = 8.0 Hz), 8.57 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 64.9, 115.0, 115.4, 130.1, 130.2, 132.2, 132.3, 159.3, 164.2, 171.8, 202.4.
【００８７】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−メチルベンジルエステル塩酸塩  [化合物３]
４−メチルベンジルアルコール（５．０ｇ；４１ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は２日後に完結した。収量０．８４ｇ（収率５２％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.30 (3H, s), 2.60 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.86 (2H, t, J = 6.2 Hz), 3.96 (2H, br s), 5.05 (2H, s), 7.1-7.3 (4H, m), 8.55 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 21.7, 28.1, 35.2, 47.4, 66.4, 128.9, 129.8, 133.9, 138.2, 172.8, 203.4.
【００８８】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−イソプロピルベンジルエステル塩酸塩  [化合物２]
４−イソプロピルベンジルアルコール（５．０ｍｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は２日後に完結した。収量１．０ｇ（収率５６％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.19 (6H, d, J = 6.6 Hz), 2.61 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.84 (1H, m), 2.88 (2H, t, J = 6.8 Hz), 3.98 (2H, br s), 5.06 (2H, s), 7.2-7.4 (4H, m), 8.56 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 23.7, 27.1, 33.1, 34.3, 46.4, 65.5, 126.2, 128.0, 133.3, 148.2, 171.8, 202.6.
【００８９】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−ｔ−ブチルベンジルエステル塩酸塩  [化合物１０]
４−ｔ−ブチルベンジルアルコール（５．０ｇ；３０ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は２日後に完結した。収量０．８４ｇ（収率５２％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.27 (9H, s), 2.61 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.87 (2H, t, J = 6.6 Hz), 3.98 (2H, br s), 5.06 (2H, s), 7.29 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.39 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.55 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 31.0, 34.16, 34.26, 46.4, 65.4, 125.0, 127.7, 133.0, 150.4, 171.8, 202.4.
【００９０】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−（トリフルオロメチル）ベンジルエステル塩酸塩  [化合物９]
４−（トリフルオロメチル）ベンジルアルコール（４．９ｇ；２８ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は２時間後に完結した。収量１．２４ｇ（収率６４％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.69 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.92 (2H, t, J = 6.4 Hz), 4.00 (2H, br s), 5.23 (2H, s), 7.62 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.75 (2H, d, J = 8.2 Hz), 8.58 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.4, 46.5, 64.7, 121.4, 125.2, 125.3, 125.4, 126.9, 128.2, 140.9, 171.8, 202.5.
【００９１】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２−フルオロベンジルエステル塩酸塩  [化合物１７]
２−フルオロベンジルアルコール（５．７ｇ；４５ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で２７時間後に完結した。収量０．６４ｇ（収率４４％）、ｍｐ ９１〜９４℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.63 (2H, t, J = 6.0 Hz), 2.88 (2H, t, J = 6. 0 Hz), 3.98 (2H, br s), 5.16 (2H, s), 7.2-7.6 (4H, m), 8.56 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.0, 34.3, 46.4, 59.7, 59.8, 115.1, 115.5, 122.7, 123.0, 124.5, 130.4, 130.6, 130.7, 130.8, 157.8, 162.7, 171.8, 202.4.
【００９２】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３−フルオロベンジルエステル塩酸塩  [化合物２４]
３−フルオロベンジルアルコール（５．１ｇ；４０ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で２０時間後に完結した。収量１．０４ｇ（収率７２％）、ｍｐ １１５〜１１９℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.67 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.90 (2H, t, J = 6. 2 Hz), 4.00 (2H, d, J = 5.0 Hz), 5.14 (2H, s), 7.1-7.3 (3H, m), 7.4-7.5 (1H, m), 8.54 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 64.7, 114.1, 114.5, 114.9, 123.1, 123.6, 130.4, 130.5, 138.8, 139.0, 159.6, 164.5, 171.8, 202.5.
【００９３】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルエステル塩酸塩  [化合物１８]
２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルアルコール（５．１ｇ；２６ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で６日後に完結した。収量０．２５ｇ（収率１３％）、ｍｐ １４６〜１４８℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.59 (2H, t, J = 6. 4 Hz), 2.85 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.95 (2H, br s), 5.22 (2H, s), 8.51 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 26.8, 34.2, 46.5, 53.2, 109.9, 123.2, 134.5, 139.5, 142.7, 147.7, 171.6, 202.4.
【００９４】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−クロロベンジルエステル塩酸塩  [化合物１９]
４−クロロベンジルアルコール（５．０ｇ；３５ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で２４時間後に完結した。収量０．５６ｇ（収率３２％）、ｍｐ １２７〜１２９℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.65 (2H, t, J = 5.8 Hz), 2.89 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.99 (2H, br s), 5.11 (2H, s), 7.44 (4H, s), 8.56 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 64.7, 128.4, 129.7, 132.6, 135.1, 171.8, 202.5.
【００９５】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３，４−ジクロロベンジルエステル塩酸塩  [化合物２２]
３，４−ジクロロベンジルアルコール（５．０ｇ；２８ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で４５時間後に完結した。収量１．１２ｇ（収率５７％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.67 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.90 (2H, t, J = 6.4 Hz), 4.00 (2H, br s), 5.12 (2H, s), 7.2-7.5 (1H, m), 7.5-7.6 (2H, m), 8.50 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.7, 64.1, 129.8, 130.7, 137.3, 173.7, 202.8.
【００９６】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３−ニトロベンジルエステル塩酸塩  [化合物２１]
３−ニトロベンジルアルコール（５．０ｇ；３３ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で２０時間後に完結した。収量１．００ｇ（収率５５％）。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.68 (2H, br s), 2.90 (2H, br  s), 3.98 (2H, br s), 5.26 (2H, s), 7.6-7.9 (2H, m), 8.1-8.3 (2H, m), 8.47 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.5, 64.4, 122.3, 122.8, 130.1, 134.3, 138.4, 147.7, 171.8, 202.5.
【００９７】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸２−メチルベンジルエステル塩酸塩  [化合物２９]
２−メチルベンジルアルコール（５．０ｇ；４１ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は１００℃で４日後に完結した。収量０．７２ｇ（収率４４％）、ｍｐ １０７〜１０９℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.29 (3H, s), 2.62 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.86 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.96 (2H, br s), 5.10 (2H, s), 7.2-7.4 (4H, m), 8.54 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 18.4, 27.0, 34.3, 46.4, 64.1, 123.1, 125.8, 128.2, 128.8, 130.0, 133.8, 136.5, 171.8, 202.5.
【００９８】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３−メチルベンジルエステル塩酸塩  [化合物３１]
２−メチルベンジルアルコール（５．０ｇ；４０ｍｍｏｌ）および５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１．０ｇ；６．０ｍｍｏｌ）から得た。反応は８０℃で２日後に完結した。収量１．１１ｇ（収率６８％）、ｍｐ ９６〜９８℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.31 (3H, s), 2.62 (2H, t, J = 6.2 Hz), 2.87 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.97 (2H, br s), 5.06 (2H, s), 7.1-7.4 (4H, m), 8.55 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 20.9, 27.1, 34.3, 46.4, 65.6, 124.9, 128.3, 128.4, 128.5, 135.9, 137.5, 171.9, 202.5.
【００９９】
一般操作 III
ベンジルアルコール（５．０ｍｍｏｌ）を、０℃（浴温度）に冷却したＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（０．６３ｇ；５．０ｍｍｏｌ）と塩化銅（Ｉ）（１ｍｇ）との混合物へ滴下して加えた。０℃条件下で１時間経過後、混合物を常温下で約２４時間攪拌した。暗緑色の混合物をペンタン（３ｍｌ）で希釈し、セライトパッド（Celite pad）を通してろ過した。残渣を少量のペンタンで洗浄し、集め合わせた濾液を蒸発濃縮した。残渣を、乾燥したテトラヒドロフランに溶解し、そこへＮ−ｔ−ＢＯＣ−５−アミノ−４−オキソペンタン酸（０．４３ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン溶液（１０ｍｌ）を加えた。常温で５日間放置した後、混合物をろ過し、残渣を少量のジエチルエーテルで洗浄した。該残渣を酢酸エチル（２０ｍｌ）に溶解し、塩化水素の酢酸エチル溶液（２ｍｌ）で処理した。４時間〜３日後に塩酸塩の沈殿物を生じた。この沈殿物を以下に示したように精製した。
【０１００】
Ｎ−ｔ−ＢＯＣ−５−アミノ−４−オキソペンタン酸
トリエチルアミン（１３．９ｍｌ；１０．１ｇ；０．１０ｍｏｌ）を、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（２５ｍｌ）に溶解した５−アミノ−４−オキソペンタン酸塩酸塩（１０．０ｇ；５９．７ｍｍｏｌ）とジ−ｔ−ブチルジカーボネート（２１．８ｇ；０．１０ｍｏｌ）との混合物に撹拌しながら滴下して加えた。反応混合物を５０℃で６時間攪拌し、次いで常温下で一晩攪拌した。溶媒を３５〜４０℃（浴温度）、７〜１ｍｍＨｇで留去した。残渣を氷冷した１０％のクエン酸（５０ｍｌ）で酸性化し、直ちに酢酸エチル（６×１５ｍｌ）で抽出した。集め合わせた抽出物を水（２×５ｍｌ）および飽和ＮａＣｌ溶液（１×５ｍｌ）で洗浄した。保冷室中で一晩Na2SO4により乾燥した後、混合物をろ過し、次いで蒸発濃縮した。得られた赤色の油は、５０×６０ｍｍのシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、酢酸エチル−ヘキサン（２：１）溶媒により溶離して精製した。５０ｍｌの分画を収集して、１２．２ｇ（８８％）の粘稠な黄色の油を得たが、これは保冷室での貯蔵により一部が固化した。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.39 (9H, s), 2.42 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.63 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.78 (2H, d, J = 5.8 Hz), 7.04 (1H, t, J = 5.6 Hz), 12.1 (1H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.4, 28.1, 38.6, 49.5, 78.1, 155.7, 173.6, 206.1.
【０１０１】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−メトキシベンジルエステル塩酸塩  [化合物２８]
４−メトキシベンジルアルコール（１．０ｇ；７．２ｍｍｏｌ）と、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（０．９１ｇ；７．２ｍｍｏｌ）と、塩化銅（９ｍｇ）と、Ｎ−ｔ−ＢＯＣ−５−アミノ−４−オキソペンタン酸（１．７ｇ；７．２ｍｍｏｌ）とから調製した。１７５×２５ｍｍのシリカゲル６０カラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトニトリル（２００ｍｌ）、５％メタノールのアセトニトリル溶液（５００ｍｌ）および１０％メタノールのアセトニトリル溶液（７５０ｍｌ）を用いて溶離し、５０ｍｌの分画を収集して、０．２４ｇ（１１％）の生成物を得た。ｍｐ １１０〜１１２℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.58 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.83 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.75 (3H, s), 3.94 (2H, br s), 5.02 (2H, s), 6.93 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.31 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.48 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.2, 46.4, 55.0, 65.4, 113.7, 127.9, 129.8, 159.1, 171.8, 202.5.
【０１０２】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸３−ピリジニルメチルエステルジ塩酸塩  [化合物２６]
３−ピリジニルメタノール（０．５５ｇ；５．０ｍｍｏｌ）と、０．４３ＭのＮ−ｔ−ＢＯＣ−５−アミノ−４−オキソペンタン酸のジクロロメタン溶液（１０ｍｌ；４．３ｍｍｏｌ）とから調製した。ろ液から溶媒を留去して１．０ｇの残渣を得、これを酢酸エチルに溶解した。得られた琥珀色の溶液へ塩化水素の酢酸エチル溶液（２ｍｌ）を加えた。常温で４時間放置した後、残渣をろ過し、シリカゲル上で３０℃、０．０１ｍｍＨｇで乾燥して、０．６３ｇ（６８％）の吸湿性固体を得た。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.69 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.91 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.9-4.0 (2H, m), 5.35 (2H, s), 8.0-8.2 (1H, m), 8.54 (3H, br s), 8.5-8.7 (1H, m), 8.9- 9.0 (2H, m).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.0, 34.3, 46.4, 61.9, 126.9, 140.8, 141.3, 144.4, 171.7, 202.5.
【０１０３】
５−アミノ−４−オキソペンタン酸４−ジフェニルメチルエステル塩酸塩  [化合物２７]
４−ジフェニルメチルアルコール（５．０ｇ；４０ｍｍｏｌ）と、Ｎ−ｔ−ＢＯＣ−５−アミノ−４−オキソペンタン酸溶液（１０ｍｌ；４．３ｍｍｏｌ）とから調製した。粗塩酸塩は、１９０×２５ｍｍのシリカゲル６０カラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトニトリル（３００ｍｌ）、１０％メタノールのアセトニトリル溶液（１０００ｍｌ）および２０％メタノールのアセトニトリル溶液（２５０ｍｌ）で溶離して精製し、５０ｍｌの分画を収集した。収量０．３９ｇ（収率１６％）、ｍｐ １６３〜１６６℃。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 2.65 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.88 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.98 (2H, br s), 5.16 (2H, s), 7.2-7.5 (5H, m), 7.6-7.8 (4H, m), 8.52 (3H, br s).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 27.1, 34.3, 46.4, 65.3, 126.6, 126.7, 127.5, 128.5, 128.9, 135.2, 139.6, 139.8, 171.9, 202.5.
【０１０４】
５−[[１−（アセチルオキシ）エトキシ]カルボニル]アミノ−４−オキソペンタン酸ベンジルエステル塩酸塩  [化合物３０]
ピリジン（０．３２ｍｌ；０．３２ｇ；４．０ｍｍｏｌ）を、５−アミノ−４−オキソペンタン酸ベンジルエステル塩酸塩（０．５２ｇ；２．０ｍｍｏｌ）およびクロロ蟻酸−１−クロロエチル（０．２９ｇ；２．０ｍｍｏｌ）を加えて攪拌混合している乾燥テトラヒドロフラン溶液（１０ｍｌ）中へ滴下して加えた。常温で２時間攪拌した後、得られた混合物を水（１×２ｍｌ）および飽和ＮａＣｌ溶液（１×２ｍｌ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ4）。次いでろ過および蒸発濃縮を行い０．６５ｇの琥珀色の油状物質を得た。この油状物質を氷酢酸（１０ｍｌ）に溶解し、酢酸水銀（ＩＩ）（０．６４ｇ；２．０ｍｍｏｌ）を加えた。常温で３日間攪拌した後、過剰の酢酸を約３０℃（浴温度）、８〜１０ｍｍＨｇで留去した。得られた残渣をジエチルエーテル（１０ｍｌ）に加えて攪拌し、ろ過した。さらにエーテル（１５ｍｌ）で残渣を洗浄した後、集め合わせた濾液をＮａＨＣＯ3で中和し、飽和ＮａＣｌ溶液（１×１０ｍｌ）で洗浄した。乾燥（ＭｇＳＯ4）、ろ過、蒸発濃縮を行った後、粗生成物は、１９０×２５ｍｍのシリカゲル６０カラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、酢酸エチル−ヘキサン（２：１）（５００ｍｌ）で溶離して精製し、２５ｍｌの分画を収集した。収量０．４３ｇ（収率６１％）、薄黄色の油。
1H NMR (200 MHz; DMSO-d6): δ 1.41 (3H, d, J = 5.6 Hz), 2.00 (3H, s), 2.57 (2H, t, J = 6.0 Hz), 2.73 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.90 (2H, d, J = 6.0 Hz), 5.08 (2H, s), 6.68 (1H, q, J = 5.4 Hz), 7.36 (5H, s), 7.71 (1H, t, J = 5.8 Hz).
13C NMR (50 MHz; DMSO-d6): δ 19.6, 20.6, 27.3, 33.7, 49.5, 65.5, 88.8, 127.8, 127.9, 128.4, 136.1, 154.2, 168.6, 172.0, 205.1.
【０１０５】
【実施例２】
細胞培地でのポルフィリン生成の インビトロ測定
方法
以下の化合物をＡＬＡと比較して試験した。
１．    ＡＬＡ−１−メチルペンチルエステル
２．    ＡＬＡ−ｐ−イソプロピルベンジルエステル
３．    ＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステル
４．    ＡＬＡ−ベンジルエステル
５．    ＡＬＡ−２−フェニルエチルエステル
６．    ＡＬＡ−ヘキシルエステル
７．    ＡＬＡ−シクロヘキシルエステル
８．    ＡＬＡ−４−メチルペンチルエステル
９．    ＡＬＡ−ｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステル
１０．  ＡＬＡ−ｐ−[ｔ−ブチル]ベンジルエステル
１１．  ＡＬＡ−ｐ−ニトロベンジルエステル
試験化合物は、ＤＭＳＯに濃度１００ｍＭとなるように溶解した（ストック溶液）。ストック溶液をリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）または培養液で希釈して適切な濃度を得た。
【０１０６】
細胞培養
原発性直腸S状結腸腺癌細胞に由来するWiDr細胞を、１０％の子牛胎児の血清と、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンと、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンと、１％のグルタミンとを含むＲＰＭＩ１６４０培養液（Ｇｉｂｃｏ社製）中で継代培養した。細胞は一週間に二度１：１００に分割され、湿気環境下で３７℃、５％ＣＯ2濃度に維持された。
【０１０７】
処理条件
前段落で記載したＲＰＭＩ培地２ｍｌ中の５×１０5個のＷｉＤｒ細胞を、６ウエルプラスチック製組織培養プレート（Ｎｕｎｃ社製）の各ウエルへ加え、湿気環境下、３７℃、５％ＣＯ2濃度で４８時間放置して、該細胞を基板へ適切に付着させた。その後、血清を含まないＲＰＭＩ１６４０培養液で細胞を２回洗浄した。次いで、２ｍｌの新鮮な培養媒体に溶解した上記試験化合物の適当な希釈溶液を、最終的な濃度が０．００１、０．０１、０．１および１ｍＭとなるように、2つずつ各ウエルへ加え、そして細胞を３７℃で４時間培養した。
【０１０８】
細胞のポルフィリン含有量の測定
細胞を“処理条件”の項で記述したように処理した後、ＰＢＳで２回洗浄してから、セルスクレーパー（Ｃｏｓｔａｒ社製）を用いて細胞を基板から掻きとって１Ｍ ＨＣｌＯ4の５０％メタノール溶液中へ導入した。細胞の残がいは遠心分離で除去した。各サンプルのポルフィリン含有量は、パーキンエルマー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）ＬＳ５０Ｂ分光蛍光光度計（励起波長４０７ｎｍ。発光は、発光側の長波長パス・カットオフフィルター（５３０ｎｍ）を用いて６０６ｎｍで測定した）を使用して蛍光分析で決定した。各サンプルの蛍光はブラッドフォード法により測定された対照細胞中のタンパク質含有量に関して計算された。
【０１０９】
結果
試験化合物１〜３、４および５、６〜８、９〜１１に対する結果をそれぞれ図１〜４に示す。
【０１１０】
図１から、ｐ−メチルベンジルエステルおよびｐ−イソプロピルエステルでは急勾配の用量−応答曲線が見られることがわかる。これらのエステルは等しい効率で細胞のポルフィリン生合成を誘起し、ＡＬＡよりも約２００倍の効力があった。１−メチルペンチルエステルについての曲線は、エステル濃度の増加とともに緩やかに増加した。ポルフィリン生成の誘導に関して、１−メチルペンチルエステルは、低濃度ではＡＬＡに比べて僅かだけ優れていた。
【０１１１】
図２から、細胞のポルフィリン生成誘導に関してベンジルおよび２−フェニルエチルエステルの双方は、ＡＬＡに比べて相当に効率がよいことがわかる。実際、０．００１ｍＭのベンジルエステルにより誘起されるポルフィリン生成は、０．６ｍＭのＡＬＡにより得られるそれと等しい。同様に、０．００１ｍＭの２−フェニルエチルエステルの添加に伴う蛍光強度は、０．４ｍＭのＡＬＡにより誘起されたそれに相当する。
【０１１２】
図３は、ヘキシルエステルおよび４−メチルペンチルエステルが、ともに等しく効率がよいことを示している。さらに図３から、これらのエステルが細胞のポルフィリン生成を誘起する能力は、ＡＬＡのそれに比べて約１００倍高いことがわかる。シクロヘキシルエステルは、低濃度では、ポルフィリン生成誘起に関してＡＬＡよりも僅かだけ効率がよい。高濃度になると、シクロヘキシルエステルはＡＬＡよりも効率が低い。
【０１１３】
図４から、ｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステル、ｐ−[ｔ−ブチル]ベンジルエステルおよびｐ−ニトロベンジルエステルは、ポルフィリン生成の誘起に関し、ＡＬＡに比べて約２００倍効率がよいことがわかる。
結果を以下に要約した。
【０１１４】
【表１】
0005010088.tif 000007
【０１１５】
【実施例３】
マウス皮膚への局所塗布後のポルフィリン生成
方法
以下の化合物をＡＬＡと比較して試験した（実施例２で試験した化合物１〜１１を含む）。
１．    ＡＬＡ−１−メチルペンチルエステル
２．    ＡＬＡ−ｐ−イソプロピルベンジルエステル
３．    ＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステル
４．    ＡＬＡ−ベンジルエステル
５．    ＡＬＡ−２−フェニルエチルエステル
６．    ＡＬＡ−ヘキシルエステル
７．    ＡＬＡ−シクロヘキシルエステル
８．    ＡＬＡ−４−メチルペンチルエステル
９．    ＡＬＡ−ｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステル
１０．  ＡＬＡ−ｐ−[ｔ−ブチル]ベンジルエステル
１１．  ＡＬＡ−ｐ−ニトロベンジルエステル
１２．  ＡＬＡ−１−エチルブチルエステル
１３．  ＡＬＡ−２−メチルペンチルエステル
１４．  ＡＬＡ−４−フェニルブチルエステル
１５．  ＡＬＡ−ｐ−フルオロベンジルエステル
１６．  ＡＬＡ−３，３’−ジメチル−１−ブチルエステル
１７．  ＡＬＡ−２−フルオロベンジルエステル
１８．  ＡＬＡ−２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルエステル
１９．  ＡＬＡ−４−クロロベンジルエステル
２０．  ＡＬＡ−２−メトキシエチルエステル
２１．  ＡＬＡ−３−ニトロベンジルエステル
２２．  ＡＬＡ−３，４−[ジ−クロロ]ベンジルエステル
２３．  ＡＬＡ−３，６−ジオキサ−１−オクチルエステル
２４．  ＡＬＡ−３−フルオロベンジルエステル
２５．  ＡＬＡ−３，６，９−トリオキサ−１−デシルエステル
２６．  ＡＬＡ−３−ピリジニル−メチルエステル
２７．  ＡＬＡ−４−ジフェニル−メチルエステル
２８．  ＡＬＡ−４−メトキシ−ベンジルエステル
２９．  ＡＬＡ−２−メチルベンジルエステル
３０．  ５−[（１−アセチルオキシエトキシ）−カルボニル]−アミノレブリン酸ベンジルエステル
３１．  ＡＬＡ−３−メチルベンジルエステル
【０１１６】
方法
試験化合物は、二酸化ケイ素、流動パラフィン、ワセリン、アルブム（album）、セトステアリルアルコール（cetostearol）、ポリソルベート．40（polysorbat. 40）、モノステアリン酸グリセリル、ミグリオール（Miglyol：登録商標）８１２（植物性脂肪酸の混合物）、ポリプロピレングリコールおよび精製水からなる、「Unguentum Merck」クリーム基材（Merckから入手可能）中に、所望の濃度となるように加えて製剤化された。濃度は塩酸塩として計算した％（ｗ／ｗ）で与えられた。製剤は実験を始めるより前の日に調製され、使用日まで冷蔵庫に貯蔵した。
【０１１７】
実験には、Norwegian Radium Hospital （Montebello, オスロ,ノルウェー）の実験動物局から入手した約２２ｇの雌性 Balb/c 無胸腺ヌードマウスを使用した。
一群あたり３匹のマウスを使用した。各マウスに０．０５〜０．１ｇの製剤を右わき腹へ局所的に塗布し、均一に分布させ、包帯（商品名Opsite Flexigrid、Smith and Nephew Medical社（Hull, 英国）製）で覆った。ファイバー点測定装置（the fiber point measuring device）は、光学ファイバーの束を、４０７ｎｍの励起光を生成する分光蛍光光度計へ結合して構成した。励起光は、組織中へ０．１〜０．５ｍｍ侵入することが可能であり、ファイバー束の半分を通してマウスの皮膚へ導入された。これにより生じた蛍光スペクトル（５５０〜７５０ｎｍ）は残りのファイバーを通して集められ、定量化のため光電子増倍管へ送られた。
【０１１８】
クリーム製剤を塗布した後、皮膚におけるポルフィリンからの蛍光スペクトルはファイバ−光学法（fiber−optical method）により、投与後、様々な時間間隔で測定した。
蛍光強度は各実験によりバラツキがあった。そこで各実験において、内部標準として１％（ｗ／ｗ）の５−アミノレブリン酸ヘキシルエステル塩酸塩を含有させた。
結果
以下、次の試験化合物についての結果を図５〜１７に示す：図５・・・化合物１、６、１２、１３；図６・・・化合物５〜８；図７・・・化合物３および６；図８・・・化合物２、６、１４；図９・・・化合物６、１１、１５；図１０・・・化合物６、９、１０；図１１・・・化合物４および６；図１２・・・化合物６および１６；図１３・・・化合物６、１７〜１９；図１４・・・化合物６、２０〜２２；図１５・・・化合物６、２３〜２５；図１６・・・化合物６、２６〜２８；図１７・・・化合物６、２９〜３１。
【０１１９】
図１２および１７でＡＬＡ−３，３−ジメチル−１−ブチルエステル、ＡＬＡ−２−メチルベンジルエステル、５−[（アセチルオキシエトキシ）−カルボニル]−ＡＬＡ−ベンジルエステルおよびＡＬＡ−３−メチルベンジルエステルを３％（ｗ／ｗ）で使用し、図１３でＡＬＡ−２−フルオロベンジルエステル、ＡＬＡ−２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルエステルおよびＡＬＡ−４−クロロベンジルエステルを１０％（ｗ／ｗ）で使用した以外は、すべての化合物を１％（ｗ／ｗ）で使用した。
【０１２０】
図５から、ヘキシルエステル、１−メチルペンチルエステル、１−エチルブチルエステルおよび２−メチルペンチルエステルは、すべてポルフィリンを与えていることがわかる。さらに、ヘキシルエステルが最も強い蛍光を与え、次いで２−メチルペンチルエステル、１−エチルブチルエステルの順で強い蛍光を与えていることがわかる。本実験では１−メチルペンチルエステルは中程度の蛍光レベルを与えた。
【０１２１】
図６から、ヘキシルエステルおよび４−メチルペンチルエステルが高い蛍光レベルを生じ、これに対しシクロヘキシルエステルおよび２−フェニルエチルエステルは低い蛍光レベルを与えることがわかる。
図７から、ＡＬＡヘキシルエステルおよびＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステルが高くしかも同等の蛍光レベルを与えることがわかる。
【０１２２】
図８から明らかなように、５−アミノレブリン酸−ｐ−イソプロピル−ベンジルエステルは中間レベルの蛍光を与え、これに対しで５−アミノレブリン酸−４−フェニル−ブチルエステルは低い蛍光レベルしか与えなかった。この点に関し、後者の化合物の類縁体（５−アミノレブリン酸−２−フェニル−エチルエステル）も相対的に低めの蛍光レベルの値を与えていることは興味深い（図６）。これは、５−アミノレブリン酸−ベンジルエステル（図１１）が、ベンジルとＡＬＡとの間が１またはそれ以上のメチレン基（―ＣＨ2―）で“延長”されると、ポルフィリン生成を誘起する能力が低下することを示している。
【０１２３】
図９から、ｐ−ニトロベンジルエステルおよびヘキシルエステルが双方ともに高い蛍光レベルを与えたことがわかる。ｐ−フルオロベンジルエステルは、それよりやや低いレベルを与えていた。
図１０から、ヘキシルエステルおよびｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステルでは高いポルフィリン生成量（高い蛍光レベルから示される）が得られたことがわかる。ｐ−（ｔｅｒｔ−ブチル）ベンジルエステルでは中程度の蛍光レベルが得られた。これは、おそらくエステル基が嵩高いためと考えられる。
【０１２４】
図１１から明らかなように、ヘキシルエステルおよびベンジルエステルのいずれも高いレベルの蛍光が得られた。
図１２から、１％のヘキシルエステルと３％製剤の３，３’−ジメチル−１−ｔ−ブチルエステルから類似の蛍光レベルの値が得られたことがわかる。このようにこの２つのエステルは、皮膚内のポルフィリン生成誘起についてほぼ等しく効果的である。
【０１２５】
図１３から、４−クロロベンジルエステルは高い蛍光レベルを与え、これに対しで２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルエステルおよび２−フルオロベンジルエステルは中〜高活性を与えたことがわかる。
図１４、１５から、ヘキシルエステル以外の試験されたすべてのＡＬＡエステルは、局所塗布後に中程度の皮膚蛍光を与えたことがわかる。
【０１２６】
図１６から明らかなように、ヘキシルエステルは高レベルの蛍光を与え、３−ピリジニル−メチルエステルおよび４−メトキシ−ベンジルエステルは中程度の蛍光を与えたことがわかる。４−ジフェニル−メチルエステルは相対的に低い蛍光を与えた。
図１７から、Ｎ−置換ＡＬＡ−ベンジルエステルは中程度から高い蛍光を与え、これに対しで試験した他の３種のエステルは高い蛍光レベルを与えることがわかった。
【０１２７】
結果を以下に要約した。
【０１２８】
【表２】
0005010088.tif 000008
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、ＡＬＡ（黒塗り円）、ＡＬＡ−１−メチルペンチルエステル（白抜き円）、ＡＬＡ−ｐ−イソプロピルベンジルエステル（黒塗り逆三角）、ＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステル（白抜き逆三角）により誘起された細胞のポルフィリン生成を示す。
【図２】  図２は、ＡＬＡ（黒塗り円）、ＡＬＡ−ベンジルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−２−フェニルエチルエステル（白抜き三角）により誘起された細胞のポルフィリン生成を示す。バーは標準偏差を表す。
【図３】  図３は、ＡＬＡ（黒塗り円）、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き円）、ＡＬＡ−シクロヘキシルエステル（黒塗り逆三角）、ＡＬＡ−４−メチルペンチルエステル（白抜き逆三角）により誘起された細胞のポルフィリン生成を示す。バーは標準誤差を表す。
【図４】  図４は、ＡＬＡ（黒塗り円）、ＡＬＡ−ｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステル（白抜き円）、ＡＬＡ−ｐ−[ｔ−ブチル]ベンジルエステル（黒塗り逆三角）、ＡＬＡ−ｐ−ニトロベンジルエステル（白抜き逆三角）により誘起された細胞のポルフィリン生成を示す。
【図５】  図５は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−１−メチルペンチルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−１−エチルブチルエステル（黒塗り逆三角）、ＡＬＡ−２−メチルペンチルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図６】  図６は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き四角）、ＡＬＡ−シクロヘキシルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−２−フェニルエチルエステル（影付き四角）、ＡＬＡ−４−メチルペンチルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図７】  図７は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き四角）、ＡＬＡ−ｐ−メチルベンジルエステル（影付き三角）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図８】  図８は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−ｐ−（イソプロピル）ベンジルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−４−フェニルブチルエステル（影付き逆三角）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図９】  図９は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−ｐ−フルオロベンジルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−ｐ−ニトロベンジルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１０】  図１０は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−ｐ−（ｔ−ブチル）ベンジルエステル（影付き三角）、ＡＬＡ−ｐ−[トリ−フルオロメチル]ベンジルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１１】  図１１は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−ベンジルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１２】  図１２は、１％ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、３％ＡＬＡ−３，３−ジメチル−１−ブチルエステル（黒塗り三角）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１３】  図１３は、１％ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き四角）、１０％ＡＬＡ−２−フルオロベンジルエステル（影付き三角）、１０％ＡＬＡ−２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルエステル（影付き菱型）、１０％ＡＬＡ−４−クロロベンジルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１４】  図１４は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き三角）、ＡＬＡ−２−メトキシエチルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−３−ニトロベンジルエステル（影付き菱型）、ＡＬＡ−３，４−[ジ−クロロ]ベンジルエステル（白抜き円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１５】  図１５は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−３，６−ジオキサ−１−オクチルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−３−フルオロベンジルエステル（白抜き菱型）、ＡＬＡ−３，６，９−トリオキサ−１−デシルエステル（影付き円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１６】  図１６は、ＡＬＡ−ヘキシルエステル（黒塗り四角）、ＡＬＡ−３−ピリジニル−メチルエステル（黒塗り三角）、ＡＬＡ−４−ジフェニル−メチルエステル（黒塗り菱型）、ＡＬＡ−４−メトキシ−ベンジルエステル（黒塗り円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１７】  図１７は、１％ＡＬＡ−ヘキシルエステル（白抜き四角）、３％ＡＬＡ−２−メチルベンジルエステル（黒塗り三角）、３％ ５−[（１−アセチルオキシエトキシ）−カルボニル]ＡＬＡ−ベンジルエステル（黒塗り菱型）、３％ＡＬＡ−３−メチルベンジルエステル（白抜き円）を局所塗布した後の皮膚蛍光を示す。バーは標準誤差を表す。
【図１】
0005010088.tif 000013
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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