(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを、製麹に用いた前記蒸煮爆砕処理バガスの５〜１０倍量を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することを特徴とする爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項２】
蒸煮爆砕処理が、２．０〜３．０Ｍｐａの条件下で行われることを特徴とする請求項１記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項３】
バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことを特徴とする請求項１又は２記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項４】
発酵基質として、小麦フスマを用いることを特徴とする請求項１〜３のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項５】
蒸煮爆砕処理バガスと発酵基質の混合物に、等量の加水を行い、水分含量を調整することを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項６】
麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ（ＮＦＲＩ１１４７）から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項７】
麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を約５０％に調整することを特徴とする請求項１〜６のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項８】
さらに、カルシウム含有化合物を添加し、ｐＨを４．０〜６．９に調整することを特徴とする請求項７記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項９】
４８〜７２時間発酵した後、発酵停止処理を実施することを特徴とする請求項１〜８のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項１０】
爆砕発酵処理食物繊維が、乾燥微粉末の形態であることを特徴とする請求項１〜９のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
【請求項１１】
食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するバガスの爆砕発酵処理食物繊維。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バガス等のヘミセルロース含有植物資源から得られるキシロオリゴ糖、抗酸化活性物質及び食物繊維を含有する爆砕発酵処理食物繊維や、その製造方法に関する。詳しくは、蒸煮爆砕処理を施したバガス等のヘミセルロース含有植物資源から麹を製造し、この麹によりバガス等のヘミセルロース含有植物資源を発酵することによって得られるキシロオリゴ糖、抗酸化活性物質及び食物繊維を含有する爆砕発酵処理食物繊維や、その製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
食物繊維は、経口により摂取することで、有用な生理作用を有することが知られている。例えば、便通改善作用、コレステロール代謝の正常化、耐糖性の改善、インシュリン分泌の促進、有害物質の体外への排出等の効果を有することが知られている。【０００３】
一方、キシロオリゴ糖や抗酸化活性を有する物質も有用な生理作用を有することが知られている。キシロオリゴ糖は、ヒトの消化酵素では分解されず、腸に到達し、便秘症状の改善、腸内環境の改善等の効果を有しており、少量でも腸内環境改善効果が大きいという特徴を有している。また、抗酸化活性を有する物質は、血圧降下、活性酸素消去、過酸化物生成抑制、コレステロール上昇抑制、脂肪代謝促進等の好ましい効果を発現することが明らかとなっている。【０００４】
そして、これらの効果を安全に得ることができ、かつ、廉価に製造することができる食品等が求められており、その原料となる食品素材の安価な提供も求められている。この食品素材を食品に応用することで、容易にこれらの効果を有する食品等の製造をすることが可能となる。この食品素材を安価に得るために、効率的な製造が望まれている。【０００５】
従来、このような食品素材の製造方法として、穀類及び豆類外皮由来の食物繊維原料に麹菌を接種して繁殖させる発酵処理を行った後、酸により加水分解処理を行う方法が知られている（例えば、特許文献１）。また、キシロオリゴ糖を含有し、抗酸化性を有する食物繊維の製造方法としては、バガス等の植物繊維を、高圧蒸煮処理し、爆砕処理後、キシラナーゼやセルラーゼを用いる酵素処理により糖変換する工程を有する抗酸化性食物繊維の製造方法が知られている（例えば、特許文献２）。【０００６】
その他、整腸作用等を有するキシロオリゴ糖の製造方法として、化学パルプを原料とし、それを酵素処理し、加水分解することにより、キシロオリゴ糖を得る方法が知られている（例えば、特許文献３）。また、麹菌により、抗酸化性物質であるフェルラ酸が多量に含まれる穀類蒸留酒を得る方法や（例えば、特許文献４）、クエン酸を産生する麹菌を用いて製造する酒類の副生物から、抗酸化活性を有する物質であるフェルラ酸を分離取得する方法が開示されている（例えば、特許文献５）。【０００７】
【特許文献１】特開平６−７０９９号公報
【特許文献２】特開２００２−２０４６７４号公報
【特許文献３】特開２００３−４８９０１号公報
【特許文献４】特開２００４−２３６６３４号公報
【特許文献５】特開２００３−５２３５１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、従来の製造方法では、様々な問題があった。加水分解処理を必要とする場合は製造工程に時間を要し、酸による加水分解を行う場合は中和が必要となり製造工程が複雑となり、塩が生じる等の問題があった。【０００９】
また、酵素処理を必要とする場合は、経済性の理由から実用化が困難となる等の問題があった。酵素は一般的に高価であり、酵素を用いる場合は酵素液等の調整が必要であり新たな設備を必要とする場合があった。【００１０】
本発明の課題は、上述の問題を解決し、キシロオリゴ糖、抗酸化活性物質及び食物繊維を含有し、食品素材や健康サプリメントとして有用な素材を、簡便な工程で、効率よく、かつ安価に製造する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、サトウキビの絞りカスであるバガスの有効利用について鋭意研究し、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を約５０％に調整した後、麹菌により製麹した。その結果、麹菌が蒸煮爆砕処理バガスに増殖・生育するまでに２週間ほど要し、多くの場合雑菌による汚染が発生し、かつ、キシロオリゴ糖の蓄積が認められなかった。そこで、原料となる蒸煮爆砕処理バガスの一部を用いて製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に約１０倍の蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を約５０％に調整した後、発酵することにより、キシロビオースとキシロトリオ−ス等のキシロオリゴ糖、フェルラ酸等の抗酸化性物質及び食物繊維を含有する有用な食品素材が得られることを見出し、本発明をするに至った。【００１２】
すなわち本発明は、（１）バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを、製麹に用いた前記蒸煮爆砕処理バガスの５〜１０倍量を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することを特徴とする爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（２）蒸煮爆砕処理が、２．０〜３．０Ｍｐａの条件下で行われることを特徴とする前記（１）記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（３）バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことを特徴とする前記（１）又は（２）記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（４）発酵基質として、小麦フスマを用いることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（５）蒸煮爆砕処理バガスと発酵基質の混合物に、等量の加水を行い、水分含量を調整することを特徴とする前記（１）〜（４）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（６）麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ（ＮＦＲＩ１１４７）から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることを特徴とする前記（１）〜（５）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（７）麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を約５０％に調整することを特徴とする前記（１）〜（６）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（８）さらに、カルシウム含有化合物を添加し、ｐＨを４．０〜６．９に調整することを特徴とする前記（７）記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（９）４８〜７２時間発酵した後、発酵停止処理を実施することを特徴とする前記（１）〜（８）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法や、（１０）爆砕発酵処理食物繊維が、乾燥微粉末の形態であることを特徴とする前記（１）〜（９）のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法に関する。
【００１３】
また本発明は、（１１）食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するバガスの爆砕発酵処理食物繊維に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明により得られた爆砕発酵処理バガスの熱水抽出物の抗酸化活性をＤＰＰＨ法により測定した結果（ｎ＝３）を示す図である。
【図２】本発明により得られた爆砕発酵処理バガスの８０％エタノール抽出物の抗酸化活性をＤＰＰＨ法により測定した結果（ｎ＝３）を示す図である。
【図３】本発明により得られた爆砕発酵処理バガスの分画方法を示す図である。
【図４】本発明により得られた爆砕発酵処理バガスを図３の画分方法で分画した際の主な分画の抗酸化活性を示す図である。
【図５】本発明により得られた爆砕発酵処理バガス、及び対照としての爆砕酵素処理バガスにおけるパラヒドロキシ安息香酸（ｐＨＢＡ）とフェルラ酸の含量を測定した結果を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法としては、ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する方法であれば特に制限されるものではなく、上記ヘミセルロース含有植物資源としては、サトウキビから砂糖を製造する過程で複製されるサトウキビの圧搾カスであるバガスの他、イネやトウモロコシの芯、木等の不溶性キシランを含む他の植物資源を挙げることができる。以下、ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合を例にとって説明する。【００１６】
ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合、本発明の爆砕発酵処理食物繊維を爆砕発酵処理バガスといい、かかる爆砕発酵処理バガスは、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する方法により得られることになる。【００１７】
上記蒸煮爆砕処理としては、耐圧反応容器内で、高温・高圧の水蒸気によりバガスを蒸煮し、キシランをある程度加水分解させた後、耐圧反応容器に設けられたバルブを一気に開放し、瞬間的に大気圧に放出する処理であれば特に制限されず、この蒸煮爆砕処理により、加水分解による化学的反応と、水の断熱膨張による物理的反応の相乗効果によって、バガスを粉砕することができる。この蒸煮爆砕処理条件としては、１．０Ｍｐａ〜３．０Ｍｐａで３０秒〜１０分、好ましくは２．０Ｍｐａ〜２．８Ｍｐａで１〜５分、より好ましくは２．４Ｍｐａ〜２．６Ｍｐａで６０〜８０秒を例示することができる。また、バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことが好ましく、粉砕の程度としては、平均粒径２〜５ｍｍ、特に３〜４ｍｍ、中でも３．５ｍｍの長さに粗粉砕することが好ましい。【００１８】
蒸煮爆砕処理されたバガスは発酵基質と混合される。かかる発酵基質としては、バガスと混合することにより麹菌が生育しうるものであれば特に制限されないが、安価に入手し得る点で、小麦フスマ、米ヌカ、廃糖蜜等を例示することができるが、小麦フスマが好ましい。例えば、発酵基質として小麦フスマを用いる場合、蒸煮爆砕処理されたバガス１００重量部に対して、小麦フスマを１〜５０重量部、好ましくは１０〜５０重量部、より好ましくは４０〜４５重量部配合することができる。製麹にあたっては、この混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは約５０％になるように加水する。【００１９】
製麹に使用する麹菌としては特に限定されるものではなく、通常の製麹に用いられる麹菌を挙げることができ、具体的には、アスペルギルス・オリゼー（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）等を例示することができる。使用する麹菌としては、キシロオリゴ糖を多く含有する食品素材を得ることができることから、高キシラナーゼ活性を有する株が好ましい。このキシラナーゼによりヘミセルロースからキシロオリゴ糖が産生する。高キシラナーゼ活性株の調製方法として、紫外線や変異誘発剤を用いた変異株の調製方法も利用しうるが、安全性の点で単胞子分離を実施して得られる自然変異株が好ましい。キシラナーゼ活性は、キシランから４０℃で１分間に１μｍｏｌのキシロースを遊離する活性を１単位として定義し、その測定方法としては、公知方法を利用することができる。高キシラナーゼ活性を有する麹菌としては、この条件により、０．３５単位／ｇ以上であることが好ましい。また、キシロオリゴ糖の中でも、キシロビオースやキシロトリオースを主として含むものが、キシロオリゴ糖の中でも胃酸に対する抵抗性が他のオリゴ糖に比べて高いことから、分解されず腸内に到達することから好ましい。爆砕発酵処理バガスに含有されるキシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖は、整腸作用等の観点から、３．９％以上が好ましく、かかるキシロビオースやキシロトリオースを主とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含む爆砕発酵処理バガスを製造するため、麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ（ＮＦＲＩ１１４７）から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることが好ましい。製麹は、２８〜３２℃、特に３０℃で５〜７日培養することにより行うことが好ましい。【００２０】
次いで、製麹した麹を水に分散し、この麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する。麹分散液に混合する蒸煮爆砕処理物として、製麹に用いた蒸煮爆砕処理物の５〜１０倍量、好ましくは８〜９倍量を用いることができる。麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合した混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは略５０％になるように加水する。発酵は、２８〜３２℃、特に３０℃で４８〜７２時間培養することにより行うことが好ましい。発酵後、発酵停止処理を実施することが、過発酵防止の点で好ましい。かかる発酵停止処理としては、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露する方法を具体的に例示することができる。【００２１】
また、カルシウム含有化合物を添加し、ｐＨを４．０〜６．９に調整する工程を含むことが好ましく、カルシウム含有化合物を添加することによりｐＨの低下を防ぎ、カルシウム含有化合物の添加量を適宜調節し、ｐＨを４．０〜６．９に調整することで、発酵効率を向上させ、ひいては発酵時間の短縮を図ることが可能である。なお、本発明におけるカルシウム含有化合物としては、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、酸性ピロリン酸カルシウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、第一リン酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、第三リン酸カルシウム、パントテン酸カルシウム、ピロリン酸二水素カルシウム、サンゴカルシウム、ドロマイト、卵殻カルシウム、牛骨粉カルシウム、ほたて貝殻カルシウム、ミルクカルシウムを例示することができ、これらのうちでも水酸化カルシウム、卵殻カルシウム、牛骨粉カルシウム、ほたて貝殻カルシウム、ミルクカルシウムを好適な例示として挙げることができる。【００２２】
本発明の製造方法によって得られる爆砕発酵処理バガスとしては、乾燥品が好ましく、特に乾燥微粉末が好ましい。この乾燥微粉末の平均粒径としては、１ｍｍ以下、好ましくは５００μｍ以下、より好ましくは２００〜３００μｍを好適に例示することができる。また、本発明の製造方法によって得られる爆砕発酵処理バガスとしては、キシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含有するものや、フェルラ酸等の抗酸化活性物質を含有して抗酸化活性を示すものや、酵素法により測定した食物繊維を５０重量％以上含むものが好ましい。【００２３】
次ぎに、本発明の爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）としては、上記の本発明の製造方法によって得られる、食物繊維を５０重量％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものであれば特に制限されず、これら爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）は、加工食品に用いることで、キシロオリゴ糖、抗酸化活性物質及び食物繊維を含有する食品を容易に提供することができる。加工食品としては、例えば、麺類、飴、クッキー、シリアル類、菓子類（スナック類）、ふりかけ類、畜産加工品類、魚肉加工品類、缶詰類、ジュース類、清涼飲料、栄養ドリンク剤、犬猫用飼料、魚用飼料等を挙げることができる。また、常法により錠剤、顆粒、カプセル、シロップ等製剤化して、健康サプリメントとすることもできる。【００２４】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２５】
（麹菌の選択）
アスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）ＮＦＲＩ１１４７株をポテトデキストロース寒天培地（日水）にて十分に生育させ、胞子形成をさせた後、その胞子を０．１％Ｔｗｅｅｎ８０を含む０．９％食塩水にけん濁し、この胞子液を、ポテトデキストロース寒天培地（日水）に塗沫した。２５℃にて２〜３日間静置培養して独立したコロニーを形成させ、約５００個のコロニーから生育速度が速かった株１２株を分離した。分離株をバガス-小麦フスマ培地（爆砕バガス５ｇ、小麦フスマ５ｇ、蛎殻カルシウム５ｍｇ、脱イオン水５０ｍＬ）に接種して、２５℃にて３〜１０日間培養した後、０．０５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５）を加えて培養物をよく抽出し、Ｎｏ５濾紙（ADVANTEC社製）によって濾過して、抽出液を得た。抽出液のキシナラーゼ活性を測定し、キシラナーゼ活性値が高い自然変異株１１４７−９株を選択した。さらに１１４７−９株をもとにして、同様に２回目の単胞子分離操作を繰り返し、同様に成育の早い株１２株を得た。これらを同様にバガス-小麦フスマ培地にて培養し、キシラナーゼ活性を測定した。最も活性の高い株は、単胞子分離する前の０．２５４Ｕ／ｍｇ蛋白から０．４５３Ｕ／ｍｇ蛋白に上昇した。得られた最も活性値の高い株を１１４７−９−６株とした。なお、ＮＦＲＩ１１４７株は独立行政法人食品総合研究所において保管されており、一定の条件下で第三者に分譲される。【００２６】
上記キシラナーゼ活性の測定は、１％濃度の可溶性キシラン（シグマ社製）を含む１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）０．１ｍｌに、同じ緩衝液に適当に希釈した培養上清０．１ｍｌを加え、３７℃、１０分間反応させ銅試薬１．０ｍｌを添加して反応を停止した。それに０．８ｍｌの同緩衝液を加えて全量を２．０ｍｌとし、生成した還元糖をソモギー・ネルソン（Somogyi-Nelson）法で測定した。すなわち、これを１００℃、１５分間加熱した後、流水で急冷し次いでネルソン液１．０ｍｌを加え室温で２０分間静置して発色させた。そこへ、純水７．０ｍｌを加えて不溶物を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）により除去した後、５００ｎｍの吸光度を測定した。還元糖量は、キシロースを同様の系で測定して作成した検量線により求めた。なお、培養上清を加える前に銅試薬をあらかじめ加えて同様に発色させたものをブランクとした。また酵素活性単位は、１分間に１μｍｏｌの還元糖（キシロースとして）を生成する酵素量を１単位（Ｕ）とした。【００２７】
（製麹工程）
乾燥バガス粉砕機を用いて平均粒径３．５ｍｍの長さに粗粉砕し、反応釜（オートクレーブ）内に収容した後、反応釜に加熱水蒸気を送り込み、２．５Ｍｐａ（２２０℃），７０秒間の蒸煮処理を行った後、反応釜から急激に水蒸気を排出し、圧力を瞬時に大気圧にまで戻すことにより爆砕処理を行った。この蒸煮爆砕処理を行ったバガス３５ｋｇに小麦フスマ１５ｋｇを混合し、水５０Ｌを加水して水分が約５０重量％となるように調整した後、単胞子分離により選択した麹菌を接種し、３０℃、６日間培養して麹を製造した。【００２８】
（発酵工程）
この製麹した麹を水７０Ｌに分散し、麹の製造で用いた爆砕処理したバガス３００ｋｇに混合した。そして、水分が全体の５０重量％となるように加水し調整した後、３０℃、６０時間の発酵処理した後、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露して発酵停止処理を行った。この発酵処理物をディスク型乾燥機（月島機械社製）を用い、乾燥温度８０〜１００℃（品温）で乾燥した後、微粉砕処理をして、平均粒径２５０μｍの爆砕発酵処理バガスとした。この爆砕発酵処理バガスの栄養組成を表１に示す。【００２９】
【表１】
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【００３０】
表１に示されるように、爆砕発酵処理バガスは食物繊維に富み、キシロビオースとキシロトリオ−スを約４％含んでいる。なお、キシロビオースやキシロトリオ−スのキシロオリゴ糖の測定は、ＤＸ−５００を用いＨＰＬＣ法（日本ダイオネクス社製）に則り測定した。また、別法として、同じＨＰＬＣ法であるが、カラム：Biorad Aminex Carbohydrate HPX-42A 300×7.8、flow rate１．０ｍｌ／ｍｉｎで移動相を水とし、カラム温度８０℃にて測定した。【００３１】
（爆砕発酵処理バガスの抗酸化性）
爆砕発酵処理バガスの抗酸化活性を調べるために、ＤＰＰＨラジカル消去法を実施した。この試験には、爆砕発酵処理バガスの熱水抽出液と８０％エタノール抽出液を供試サンプルとした。熱水抽出は、爆砕発酵処理バガス２ｇを２５ｍｌの８０℃の熱水で２０分間静置抽出し、Ｎｏ．５濾紙（ADVANTEC社製）を用いて濾過した。この操作を２回繰り返し、５０ｍｌに調整（fill up）し、供試サンプルとした。また、８０％エタノール抽出は、爆砕発酵処理バガス１ｇを１０倍量の８０％エタノールで１２時間間静置抽出し、Ｎｏ．５濾紙を用いて濾過した。この操作を２回繰り返した後、遠心エバポレーターを用いて蒸発乾固し、これを８０％エタノールにて１ｍｇ／ｍｌに調整し、供試サンプルとした。【００３２】
ＤＰＰＨラジカル消去法は、ＤＰＰＨ試薬をエタノールに溶解し、０．１ｍＭの濃度とした。このＤＰＰＨ溶液１．０ｍｌ、０．０５Ｍトリス塩酸緩衝液０．９５ｍｌ、エタノール１．０ｍｌ、及び供試サンプル０．０５ｍｌを混合し、３０秒間反応させ、分光光度計（SHIMAZU製）を用いて波長５１７ｎｍにおける吸光度を測定した。なお、コントロールとして熱水抽出液の代わりに水を用い、また、比較のため、未処理バガスの熱水抽出液や８０％エタノール抽出液を用い、さらに、ポジティブコントロールとして１．０ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸溶液や、１．０ｍｇ／ｍｌのα−トコフェロールの８０％エタノール溶液を用いた。コントロールの吸光度を１００とした場合の吸光度の割合を求め、この吸光度の割合をＤＰＰＨ残存率とした。そして、その数値が小さいほど抗酸化活性が強いと判断した。結果を図１及び図２に示す。【００３３】
図１及び図２に示したとおり、爆砕発酵処理バガスの熱水可溶成分も８０％エタノール可溶成分も抗酸化活性を示し、未処理のバガスの抗酸化活性は低いことが明らかとなった。このことから、本発明における発酵処理により抗酸化活性が著しく増大することが明らかとなった。【００３４】
（抗酸化性を有する物質の精製）
得られた爆砕発酵処理バガスを７０％アセトン水で抽出後、分液フラスコにて、ｎ−ヘキサンと水で抽出した。この水層をさらに、酢酸エチルと水で抽出した。この得られた酢酸エチル抽出物に抗酸化性が認められた。分画の手順を図３に示す。また、主な画分の抗酸化活性を図４に示した。なお、抗酸化性の測定には、前述のＤＰＰＨラジカル消去法を用いた。【００３５】
（パラヒドロキシ安息香酸とフェルラ酸の含量）
爆砕発酵処理バガス及び対照としての特許文献２記載の爆砕酵素処理バガスにおけるパラヒドロキシ安息香酸（ｐＨＢＡ）とフェルラ酸の含量を調べた。粉砕したサンプルを１ｇ精秤し、８０％メタノールを２５ｍｌ添加し、磨砕抽出した。その後、８０００ｒｐｍ、１５分間遠心分離後、上澄みを得た。この工程を２回繰り返し５０ｍｌにFill upし、０．４５μｍのフィルターにてろ過した。その後、ＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム（野村科学社製）検出波長２８０ｎｍ）にて分析した。図５に示すように、パラヒドロキシ安息香酸（ｐＨＢＡ）含量には差が見られなかったが、フェルラ酸含量は、本発明の爆砕発酵処理バガスの方が、対照の爆砕酵素処理バガスに比べて約３倍多く、１００ｇあたり１．２５ｍｇを含んでいた。
【産業上の利用可能性】
【００３６】
本発明の爆砕発酵処理バガスの製造方法によれば、キシロオリゴ糖、抗酸化性物質及び食物繊維を含有する有用な食品素材を、簡便な工程で、効率よく、安価に得ることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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