【手続補正書】
【提出日】平成30年11月2日(2018.11.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを有する対象の予後を判定するための方法であって、
（ａ）前記対象から得られたがん細胞及びリンパ球を含む試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を測定することと、
（ｂ）参照と比較して、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数に基づいて前記対象の前記予後を判定することと、を含み、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数の増加は、前記対象が予後の改善を有し得ることを示す、前記方法。
【請求項２】
前記予後の改善が、全生存期間の増加を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記予後の改善が、無憎悪生存期間の増加を含む、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
有効量のＯＸ４０アゴニストを含む、対象のがんを治療する、またはその進行を遅延させるための医薬であって、参照と比較して、前記対象から得られたがん細胞及びリンパ球を含む試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数が多い、前記医薬。
【請求項５】
がんを有する対象のＯＸ４０アゴニスト治療薬に対する応答性を予測するための方法であって、
（ａ）前記対象から得られたがん細胞及びリンパ球を含む試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を測定することと、
（ｂ）参照と比較して、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数に基づいて、前記対象を応答性である対象または非応答性である対象に分類することと、を含み、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数の増加は、前記対象が前記ＯＸ４０アゴニスト治療薬に対して応答性であり得ることを示す、前記方法。
【請求項６】
ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数が、前記対象からの前記試料の目的の異なる領域内のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の中央値、平均値、または平均数である、請求項１〜３、および５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数が、前記試料の目的の前記領域内の全細胞に対して正規化される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記参照が、前記対象の前記がんと同じ種類及び／または病期を有するがんから得られたがん細胞及びリンパ球を含む試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数に基づく、請求項１〜３、および５〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記参照が、前記対象の前記がんと同じ種類及び／または病期を有するがんから得られた試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の中央値、平均値、または平均数である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＯＸ４０アゴニストが、アゴニスト抗ヒトＯＸ４０抗体である、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗体が、
モノクローナル抗体、またはヒト化抗体もしくはヒト抗体である；
ＩｇＧ１  Ｆｃ領域、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域、もしくはＦｃ受容体との結合を減少させる変異を含むＦｃ領域を含む；
（ａ）配列番号２、８、または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３、または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３と、を含む；または
ＭＥＤＩ６４６９またはＭＥＤＩ０５６２である、
請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＯＸ４０アゴニストが、ＯＸ４０Ｌの１つ以上の細胞外ドメインを含む、またはＭＥＤＩ６３８３である、請求項５または６に記載の方法。
【請求項１３】
前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数の測定が、
（ａ）前記試料中のＣＤ４の発現を示すリンパ球を標識することと、
（ｂ）ステップ（ａ）の後に、前記試料中のＯＸ４０の発現を示すリンパ球を標識することと、
（ｃ）ステップ（ｂ）の後に、前記試料中のＦｏｘｐ３の発現を示すリンパ球を標識することと、
（ｄ）ステップ（ｃ）の後に、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を測定することと、を含む、請求項１〜３、および５〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
対象から得られたがん細胞及びリンパ球を含む試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を測定するための方法であって、
（ａ）前記試料中のＣＤ４の発現を示すリンパ球を標識するステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）の後に、前記試料中のＯＸ４０の発現を示すリンパ球を標識するステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）の後に、前記試料中のＦｏｘｐ３の発現を示すリンパ球を標識するステップと、
（ｄ）ステップ（ｃ）の後に、前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を測定するステップと、を含む、前記方法。
【請求項１５】
ステップ（ａ）とステップ（ｂ）との間、及び／またはステップ（ｂ）とステップ（ｃ）との間に、ＥＤＴＡ緩衝液またはクエン酸緩衝液を含む溶液で前記試料を処理することをさらに含む、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＣＤ４の発現、ＯＸ４０の発現、及びＦｏｘｐ３の発現を示すリンパ球が、免疫蛍光染色によって標識される、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ＯＸ４０の発現を示すリンパ球が、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号７、２６、または２７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３と、を含む抗体を使用して標識される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の数を定量化することが、前記免疫蛍光染色を撮像することを含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記がんが、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、腎細胞がん腫、膀胱がん、卵巣がん、膠芽腫、神経芽腫、黒色腫、乳がん、胃がん、及び肝細胞がんからなる群から選択される、請求項１〜３、および５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記乳がんが、トリプルネガティブ乳がんである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記試料が、がん細胞及びリンパ球を含み、前記がん細胞が、原発性腫瘍から、または転移した癌腫からのものである、請求項１〜３、５〜および２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球が、腫瘍浸潤性リンパ球である、請求項１〜３、および５〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
がんを有する対象の予後を判定するための方法であって、
（ａ）前記対象から得られた転移性がん細胞及びリンパ球を含む試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数を測定することと、
（ｂ）参照と比較して、前記試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数に基づいて前記対象の前記予後を判定することと、を含み、前記試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数の増加は、前記対象が予後の改善を有し得ることを示す、前記方法。
【請求項２４】
前記予後の改善が、全生存期間、および／又は無憎悪生存期間の増加を含む請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
有効量のＯＸ４０アゴニストを含む、対象のがんを治療する、またはその進行を遅延させるための医薬であって、前記対象から得られた転移性がん細胞及びリンパ球を含む試料が、参照と比較して、前記試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の増加した数を有する、前記医薬。
【請求項２６】
がんを有する対象のＯＸ４０アゴニスト治療薬に対する応答性を予測するための方法であって、
（ａ）前記対象から得られた転移性がん細胞及びリンパ球を含む試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数を測定することと、
（ｂ）参照と比較して、前記試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数に基づいて、前記対象を応答性である対象または非応答性である対象に分類することと、を含み、前記試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数の増加は、前記対象が前記ＯＸ４０アゴニスト治療薬に対して応答性であり得ることを示す、前記方法。
【請求項２７】
ＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数が、前記対象からの前記試料の目的の異なる領域内のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の中央値、平均値、または平均数である、請求項２３、２４、および２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
ＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数が、前記試料中の前記領域内の全細胞に対して正規化される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記参照が、前記対象の前記がんと同じ種類及び／または病期を有するがんから得られた転移性がん細胞及びリンパ球を含む試料中のＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球の数に基づく、請求項２３、２４、および２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記参照が、前記対象の前記がんと同じ種類及び／または病期を有するがんから得られた試料中のＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球の中央値、平均値、または平均数である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＯＸ４０アゴニストが、アゴニスト抗ヒトＯＸ４０抗体である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗体が、
モノクローナル抗体、またはヒト化抗体もしくはヒト抗体である；
ＩｇＧ１  Ｆｃ領域、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域、またはＦｃ受容体との結合を減少させる変異を含むＦｃ領域を含む；
（ａ）配列番号２、８、または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１と、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３、または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２と、（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３と、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１と、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２と、（ｆ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３と、を含む；または
ＭＥＤＩ６４６９またはＭＥＤＩ０５６２である、
請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＯＸ４０アゴニストが、ＯＸ４０Ｌの１つ以上の細胞外ドメインを含む、またはＭＥＤＩ６３８３である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３４】
前記がんが、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、腎細胞がん腫、膀胱がん、卵巣がん、膠芽腫、神経芽腫、黒色腫、乳がん、胃がん、及び肝細胞がんからなる群から選択される、請求項２３、２４、および２６〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記乳がんが、トリプルネガティブ乳がんである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＯＸ４０＋リンパ球、ＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３＋リンパ球、またはＣＤ４＋  ＯＸ４０＋  Ｆｏｘｐ３−リンパ球が、腫瘍浸潤性リンパ球である、請求項２３、２４、および２６〜３５のいずれか一項に記載の方法。