【手続補正書】
【提出日】平成30年4月16日(2018.4.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラタンパク質であって、（ｉ）第１の免疫グロブリン（「Ｉｇ」）定常領域またはその一部に融合された第ＶＩＩＩ因子（「ＦＶＩＩＩ」）タンパク質を含む第１のポリペプチドと、（ｉｉ）中間のＸＴＥＮ配列によって第２のＩｇ定常領域またはその一部に融合されたフォンウィルブランド因子（「ＶＷＦ」）のＤ’ドメインとＤ３ドメインを含むＶＷＦタンパク質を含む第２のポリペプチドとを含み、その際前記第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列が２８８未満のアミノ酸残基を含有し、第１のポリペプチドが第２のポリペプチドに連結されるまたは会合される、前記キメラタンパク質。
【請求項２】
第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列が約３６、約４２、約７２、または約１４４のアミノ酸を含有する請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項３】
第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列が、ＡＥ４２、ＡＥ７２、ＡＥ１４４、ＡＧ４２、ＡＧ７２、ＡＧ１４４、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号１４、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２および配列番号６３から選択される請求項１または２に記載のキメラタンパク質。
【請求項４】
第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列が、配列番号５８である請求項１〜３のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項５】
第１のポリペプチドがさらに、ＦＶＩＩＩタンパク質内での１以上の挿入部位で挿入される第２のＸＴＥＮ配列を含む請求項１〜４のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項６】
第２のＸＴＥＮ配列が、ＡＥ４２、ＡＥ７２、ＡＥ８６４、ＡＥ５７６、ＡＥ２８８、ＡＥ１４４、ＡＧ８６４、ＡＧ５７６、ＡＧ２８８、ＡＧ１４４、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１７、配列番号５４、配列番号１９、配列番号１６、配列番号１８、配列番号１５、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号１４、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２および配列番号６３から選択される請求項５に記載のキメラタンパク質。
【請求項７】
第２のＸＴＥＮ配列が、配列番号８である請求項６に記載のキメラタンパク質。
【請求項８】
第２のポリペプチドにおけるＸＴＥＮ配列が、リンカーによって第２のＩｇ定常領域またはその一部に融合される請求項１〜７のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項９】
リンカーが切断可能なリンカーである請求項８に記載のキメラタンパク質。
【請求項１０】
リンカーが第ＩＩａ因子（トロンビン）によって切断可能である請求項８または９に記載のキメラタンパク質。
【請求項１１】
リンカーが、ＲＲＲＲ（配列番号１０２）、ＲＫＲＲＫＲ（配列番号１０３）、ＲＲＲＲＳ（配列番号１０４）、ＴＱＳＦＮＤＦＴＲ（配列番号２）、ＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲ（配列番号３）、ＤＦＬＡＥＧＧＧＶＲ（配列番号４）、ＴＴＫＩＫＰＲ（配列番号５）、ＬＶＰＲＧ（配列番号６）、ＡＬＲＰＲ（配列番号７）、ＫＬＴＲＡＥＴ（配列番号１２１）、ＤＦＴＲＶＶＧ（配列番号１２２）、ＴＭＴＲＩＶＧＧ（配列番号１２３）、ＳＰＦＲＳＴＧＧ（配列番号１２４）、ＬＱＶＲＩＶＧＧ（配列番号１２５）、ＰＬＧＲＩＶＧＧ（配列番号１２６）、ＩＥＧＲＴＶＧＧ（配列番号１２７）、ＬＴＰＲＳＬＬＶ（配列番号１２８）、ＬＧＰＶＳＧＶＰ（配列番号１２９）、ＶＡＧＤＳＬＥＥ（配列番号１３０）、ＧＰＡＧＬＧＧＡ（配列番号１３１）、ＧＰＡＧＬＲＧＡ（配列番号１３２）、ＡＰＬＧＬＲＬＲ（配列番号１３３）、ＰＡＬＰＬＶＡＱ（配列番号１３４）、ＥＮＬＹＦＱＧ（配列番号１３５）、ＤＤＤＫＩＶＧＧ（配列番号：１３６）、ＬＥＶＬＦＱＧＰ（配列番号：１３７）、及びＬＰＫＴＧＳＥＳ（配列番号１３８）から選択されるアミノ酸配列を含む１以上の切断部位を含む請求項９に記載のキメラタンパク質。
【請求項１２】
リンカーがＩＥＰＲ（配列番号２００）およびＩＥＰＲＳＦＳ（配列番号１９４）から選択されるアミノ酸配列を含む請求項９に記載のキメラタンパク質。
【請求項１３】
第１のＩｇ定常領域またはその一部が第１のＦｃ領域を含み、及び／または第２のＩｇ定常領域またはその一部が第２のＦｃ領域を含む請求項１〜１２のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１４】
第１のＩｇ定常領域またはその一部が第２のＩｇ定常領域またはその一部に会合される請求項１〜１３のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１５】
第１のＩｇ定常領域またはその一部が共有結合によって第２のＩｇ定常領域またはその一部に会合される請求項１４に記載のキメラタンパク質。
【請求項１６】
式：ＦＶＩＩＩ（Ｘ２）−Ｆ１：Ｆ２−Ｌ２−Ｘ１−Ｌ１−Ｖ；
を含み、式中、ＶはＤ’ドメイン及びＤ３ドメインを含むＶＷＦタンパク質であり、ＸまたはＸ１は２８８未満のアミノ酸を含有するＸＴＥＮ配列であり、Ｘ２は第２のＸＴＥＮ配列であり、ＦＶＩＩＩ（Ｘ２）はＦＶＩＩＩタンパク質内の１以上の挿入部位に挿入された第２のＸＴＥＮ配列を有するＦＶＩＩＩタンパク質を含み、Ｆ１は第１のＩｇ定常領域またはその一部であり、Ｆ２は第２のＩｇ定常領域またはその一部であり、Ｌ１およびＬ２は任意のリンカーであり、（−）はペプチド結合であり、（：）は共有結合または非共有結合である、請求項１に記載の前記キメラタンパク質。
【請求項１７】
ＦＶＩＩＩタンパク質における挿入部位が、成熟ＦＶＩＩＩタンパク質（配列番号６５）に対応するアミノ酸７４５のすぐ下流に位置する請求項５に記載のキメラタンパク質。
【請求項１８】
ＦＶＩＩＩタンパク質がＢドメインまたはその一部を含む請求項１〜１７のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１９】
ＦＶＩＩＩタンパク質が成熟ＦＶＩＩＩタンパク質（配列番号６５）に対応するアミノ酸７４６〜１６４８の欠失を含む請求項１８に記載のキメラタンパク質。
【請求項２０】
ＶＷＦタンパク質が、配列番号２１のアミノ酸７６４〜１２４０に対して少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む請求項１〜１９のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項２１】
ＶＷＦタンパク質が、配列番号２１のアミノ酸７６４〜１２４０を含む請求項１〜２０のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項２２】
ＶＷＦタンパク質が、配列番号２１の残基１０９９、残基１１４２、または残基１０９９と１１４２の双方に相当する残基にて置換されるシステイン以外のアミノ酸を含有する請求項１〜２１のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
【請求項２３】
キメラタンパク質であって、
（ｉ）第１の免疫グロブリン（「Ｉｇ」）定常領域またはその一部に融合された前記ＦＶＩＩＩタンパク質を含む第１のポリペプチドであって、前記ＦＶＩＩＩタンパク質が成熟ＦＶＩＩＩタンパク質（配列番号６５）に対応するアミノ酸７４５のすぐ下流に挿入されたＸＴＥＮ配列を含み、前記ＸＴＥＮ配列が配列番号８を含む、第１のポリペプチドと
（ｉｉ）中間のＸＴＥＮ配列によって第２のＩｇ定常領域またはその一部に融合されたフォンウィルブランド因子（「ＶＷＦ」）のＤ’ドメインとＤ３ドメインを含むＶＷＦタンパク質を含む第２のポリペプチドであって、前記第２のポリペプチドにおけるＸＴＥＮ配列が配列番号５８を含み、配列番号８８を含むリンカー配列によって前記第２のＩｇ定常領域に連結される、第２のポリペプチドとを含み、
第１のポリペプチドが第１及び第２の定常領域を介して第２のポリペプチドに連結されるまたは会合する、前記キメラタンパク質。
【請求項２４】
ＸＴＥＮ配列を含むＦＶＩＩＩタンパク質が配列番号２０２を含むアミノ酸配列を含み、ＶＷＦタンパク質が配列番号２０１を含むアミノ酸配列を含む請求項２３に記載のキメラタンパク質。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のキメラタンパク質をコードするポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセット。
【請求項２６】
請求項２５に記載のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットと前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリヌクレオチドのセットに操作可能に連結された１以上のプロモータとを含むベクターまたはベクターのセット。
【請求項２７】
請求項２５に記載のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセット、または請求項２６に記載のベクターもしくはベクターのセットを含む宿主細胞。
【請求項２８】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のキメラタンパク質、請求項２５に記載のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセット、請求項２６に記載のベクターもしくはベクターのセット、または請求項２７に記載の宿主細胞と、薬学上許容可能なキャリアとを含む医薬組成物。
【請求項２９】
出血性の疾患または状態の治療を必要とする対象にて出血性の疾患または状態を治療するための、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
出血性の疾患または状態が、出血性凝固障害、関節血症、筋肉出血、口腔出血、出血、筋肉への出血、口腔出血、外傷、頭部外傷、消化管出血、頭蓋内出血、腹腔内出血、胸郭内出血、骨折、中枢神経系の出血、咽頭後隙における出血、後腹膜腔における出血、及び腸腰筋鞘における出血から成る群から選択される請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
対象が血友病Ａを患っている請求項２９または３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
治療が予防的なものまたは要求に応じたものである請求項２９〜３１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
局所投与、眼内投与、非経口投与、クモ膜下投与、硬膜下投与、及び経口投与から成る群から選択される経路による投与のために製剤化される請求項２９〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
非経口投与が、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、及び皮内投与から成る群から選択される請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
キメラタンパク質の作製方法であって、請求項２５に記載のポリヌクレオチドまたは請求項２６に記載のベクターによって１以上の宿主細胞に形質移入することと、前記宿主細胞にて前記キメラタンパク質を発現させることとを含む、方法。
【請求項３６】
キメラタンパク質を単離することをさらに含む請求項３５に記載の方法。