【手続補正書】
【提出日】平成29年12月25日(2017.12.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（i）VNARポリペプチドを含む1つの細胞外抗原認識ドメイン；および
（ii）少なくとも1つのシグナル伝達ドメインを含む1つの膜貫通ポリペプチド
を含むことを特徴とするキメラ抗原受容体（CAR）。
【請求項２】
抗原認識ドメインがCDR1およびCDR3と呼ばれる2つの相補性決定領域（CDR）のみを含む、または抗原認識ドメインが1つの相補性決定領域（CDR3）のみを有する、請求項1記載のキメラ抗原受容体。
【請求項３】
抗原に対するCARの認識の特異性がCDR3によって決定される、請求項1または2記載のキメラ抗原受容体。
【請求項４】
CDR3が、VNARポリペプチドに由来する残基とのジスルフィド結合を生成する少なくとも2つのシステイン残基を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項５】
膜貫通領域と細胞外抗原認識ドメインとの間にヒンジ領域をさらに含む、請求項1〜4のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項６】
細胞外ドメイン全体が150アミノ酸より短い、請求項1〜5のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項７】
VNARポリペプチドがSEQ ID NO：1〜100のいずれかとの少なくとも50％の配列同一性を有する、請求項1〜6のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項８】
VNARポリペプチド配列がヒト化されている、請求項7記載のキメラ抗原受容体。
【請求項９】
CARの膜貫通領域が、TCRζ鎖、Fc受容体鎖、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ITAM）からなる群より選択されるシグナル伝達ドメインを含む、請求項1〜8のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１０】
CD28、OX40、ICOS、CD137、およびCD8からなる群より選択される共刺激分子をさらに含む、請求項1〜9のいずれか一項記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１１】
請求項1〜10のいずれか一項記載のCARをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
【請求項１２】
（a）免疫細胞を準備する工程；
（b）請求項1〜10のいずれか一項記載の少なくとも1種のキメラ抗原受容体を該細胞の表面に発現させる工程
を含む、免疫細胞を操作する方法。
【請求項１３】
（a）免疫細胞を準備する工程；
（b）請求項11記載の少なくとも1種のポリヌクレオチドを該細胞へ導入する工程；
（c）ポリヌクレオチドを該細胞において発現させる工程
を含む、請求項12記載の免疫細胞を操作する方法。
【請求項１４】
請求項1〜10のいずれか一項記載の少なくとも1種のキメラ抗原受容体を含む単離された免疫細胞。
【請求項１５】
炎症性Tリンパ球、細胞傷害性Tリンパ球、制御性Tリンパ球、またはヘルパーTリンパ球に由来する、請求項14記載の単離された細胞。
【請求項１６】
医薬として使用するための、請求項14または15記載の単離された免疫細胞。
【請求項１７】
癌または自己免疫疾患を処置するための医薬として使用するための、請求項14〜15のいずれか一項記載の単離された免疫細胞。
【請求項１８】
液性腫瘍を処置するための医薬として使用するための、請求項14〜15のいずれか一項記載の単離された免疫細胞。
【請求項１９】
B細胞悪性疾患を処置するための医薬として使用するための、請求項14〜15のいずれか一項記載の単離された免疫細胞。
【請求項２０】
単独でまたは化学療法と組み合わせて、表面上に排出ポンプのイオンチャネルを発現している薬剤耐性細胞を標的とするための医薬として使用するための、請求項14〜15のいずれか一項記載の単離された免疫細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
より具体的な態様において、抗原認識の際の免疫細胞の相互作用および／または活性化のモジュレーションを可能にする、単鎖構造であるか多鎖構造であるかに依る、異なる編成が、本発明のVNAR-CARのために提唱される。VNARは、CARを発現するT細胞が受容生物（例えば、ヒト）からの免疫応答を引き起こさないよう、免疫原性がより低い配列を含有するようヒト化されていてもよい。VNAR CARを発現するT細胞を、例えば、T細胞受容体をコードする遺伝子の破壊（ΔTCR）によって、同種治療において使用するため、遺伝子操作することもできる。
[本発明1001]
（i）VNARポリペプチドを含む1つの細胞外抗原認識ドメイン；および
（ii）少なくとも1つのシグナル伝達ドメインを含む1つの膜貫通ポリペプチド
を含むことを特徴とするキメラ抗原受容体（CAR）。
[本発明1002]
抗原認識ドメインが、CDR1およびCDR3と呼ばれる2つの相補性決定領域（CDR）のみを含む、本発明1001のキメラ抗原受容体。
[本発明1003]
抗原認識ドメインが1つの相補性決定領域（CDR3）のみを有する、本発明1001のキメラ抗原受容体。
[本発明1004]
抗原に対するCARの認識の特異性がCDR3によって決定される、本発明1001〜1003のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1005]
CDR3が、VNARポリペプチドに由来する残基とのジスルフィド結合を生成する少なくとも2つのシステイン残基を含む、本発明1001〜1004のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1006]
膜貫通領域と細胞外抗原認識ドメインとの間にヒンジ領域をさらに含む、本発明1001〜1005のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1007]
細胞外ドメイン全体が150アミノ酸より短い、本発明1001〜1006のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1008]
VNARポリペプチドがSEQ ID NO：1〜100のいずれかとの少なくとも50％の配列同一性を有する、本発明1001〜1007のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1009]
VNARポリペプチド配列がヒト化されている、本発明1008のキメラ抗原受容体。
[本発明1010]
CARの膜貫通領域が、TCRζ鎖、Fc受容体鎖、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ITAM）からなる群より選択されるシグナル伝達ドメインを含む、本発明1001〜1009のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1011]
CD28、OX40、ICOS、CD137、およびCD8からなる群より選択される共刺激分子をさらに含む、本発明1001〜1011のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1012]
単鎖（single-chain）CARの形態にある、本発明1001〜1011のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1013]
多鎖（multi-chain）CARの形態にある、本発明1001〜1012のいずれかのキメラ抗原受容体。
[本発明1014]
CARのシグナル伝達ドメインおよび細胞外抗原認識ドメインが、同一の鎖に存在せず、二量体または多量体のキメラ抗原受容体を形成するために相互作用する少なくとも2本の異なる鎖に存在する、本発明1013の多鎖キメラ抗原受容体。
[本発明1015]
FcεRI鎖が、合わせて多量体CARを形成するために二量体化するか、三量体化するか、または四量体化するよう、異なる鎖が、FcεRIα鎖、FcεRIβ鎖、および／もしくはFcεRIγ鎖の一部分、またはそれらのバリアントを含む、本発明1014の多鎖キメラ抗原受容体。
[本発明1016]
共刺激ドメインまたはシグナル化ドメインが膜近傍の位置にあるよう、異なる多量体が集合する、本発明1014または1015の多鎖キメラ抗原受容体。
[本発明1017]
本発明1001〜1013のいずれかのCARをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1018]
本発明1014〜1016のいずれかの多鎖CARを構成する2種以上の膜貫通ポリペプチドをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1019]
本発明1017または1018のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
[本発明1020]
（a）免疫細胞を準備する工程；
（b）本発明1001〜1016のいずれかの少なくとも1種のキメラ抗原受容体を該細胞の表面に発現させる工程
を含む、免疫細胞を操作する方法。
[本発明1021]
（a）免疫細胞を準備する工程；
（b）本発明1017または1018の少なくとも1種のポリヌクレオチドを該細胞へ導入する工程；
（c）ポリヌクレオチドを該細胞において発現させる工程
を含む、本発明1020の免疫細胞を操作する方法。
[本発明1022]
本発明1020または1021のいずれかの方法から入手可能な単離された免疫細胞。
[本発明1023]
本発明1001〜1016のいずれかの少なくとも1種のキメラ抗原受容体を含む単離された免疫細胞。
[本発明1024]
炎症性Tリンパ球、細胞傷害性Tリンパ球、制御性Tリンパ球、またはヘルパーTリンパ球に由来する、本発明1022または1023のいずれかの単離された細胞。
[本発明1025]
医薬として使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1026]
癌または自己免疫疾患を処置するための医薬として使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1027]
液性腫瘍を処置するための医薬として使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1028]
B細胞悪性疾患を処置するための医薬として使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1029]
単独でまたは化学療法と組み合わせて、表面上に排出ポンプのイオンチャネルを発現している薬剤耐性細胞を標的とするための医薬として使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1030]
養子免疫治療において使用するための、本発明1022〜1024のいずれかの単離された免疫細胞。
[本発明1031]
（a）本発明1001〜1016のいずれかのキメラ抗原受容体を含む免疫細胞を準備する工程；
（b）該免疫細胞を患者へ投与する工程
を含む、その必要のある患者を処置するための方法。
[本発明1032]
（a）の免疫細胞がドナーから得られる（同種モード）、本発明1031の患者を処置するための方法。
[本発明1033]
（a）の免疫細胞がその必要のある患者から得られる（自己モード）、本発明1031の患者を処置するための方法。