【手続補正書】
【提出日】平成30年4月3日(2018.4.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試験試料中の1以上の分析種の存在を決定するための方法であって、
a)試験試料から1以上の分析種を固相抽出すること、
b)塩基性pH、酸性pHまたは中性pHを有する溶出液で固相抽出からの1以上の分析種を溶出すること、
c)誘導体化剤で1以上の分析種をインサイチュ誘導体化することおよび
d)液体クロマトグラフィーおよび／または質量分析を用いて1以上の誘導体化分析種を検出すること
を含む方法。
【請求項２】
試料中の1以上の分析種の量を決定するための方法であって、1以上の分析種の少なくとも1つの誘導体化を可能にする条件下で誘導体化剤を含む溶出緩衝液で固相抽出からの1以上の分析種の少なくとも1つを溶出することを含む方法。
【請求項３】
1以上の分析種が、1級アミン、2級アミンまたはフェノール性ヒドロキシル基を有する化合物である、請求項1または請求項2に記載の方法。
【請求項４】
1以上の分析種が、カテコールアミンまたはその誘導体もしくは代謝物の1つ、性ホルモンまたはその誘導体もしくは代謝物の1つ、カンナビノイドまたはその誘導体もしくは代謝物の1つ、甲状腺ホルモンまたはその誘導体もしくは代謝物の1つ、オピエート、オピオイドまたはその誘導体もしくは代謝物の1つまたはアリールシクロヘキシルアミンまたはその誘導体もしくは代謝物の1つ、アンフェタミンまたはその誘導体もしくは代謝物の1つを含むモノアミン神経伝達物質である、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
試料が、生体試料、土壌試料または食料の試料である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
誘導体化剤が、ハロゲン化アシルである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ハロゲン化アシルが、塩化アシルである、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
塩化アシルが、式II:
【化１】
2017519228.tif 000001
［式中、R1、R2、R3およびR4が、各々独立してH、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシである］
で示される化合物である、請求項7に記載の方法。
【請求項９】
塩化アシルが、
【化２】
2017519228.tif 000002
［式中、縮合環系が、5〜7員の置換もしくは非置換縮合環を有する総炭素環式もしくはヘテロ環式芳香族系、適宜ナフタレン、キノロン、イソキノリン、キナゾリン、ベンゾフラン、インドールもしくはベンゾイミダゾール、または4〜8員の縮合環を有する非芳香族性炭素環式もしくはヘテロ環式縮合環系、例えば3,4-ジヒドロ-1H-インデンもしくは3,4,ジヒドロ-2H-クロメンであり、ここで縮合環が、必要に応じてハロゲン原子、適宜フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシの1以上で置換され得る］
で示される化合物の1つである、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
塩化アシルが、
【化３】
2017519228.tif 000003
［式中、R1およびR2が、各々独立してH、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシである］
で示される化合物の1つである、請求項7に記載の方法。
【請求項１１】
塩化アシルが、
【化４】
2017519228.tif 000004
で示される化合物の1つである、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
塩化アシルが、式VII:
【化５】
2017519228.tif 000005
［式中、R1、R2、R3、R4およびR5が、各々独立してH、ハロゲン原子、例えばフッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシである］
で示される化合物である、請求項7に記載の方法。
【請求項１３】
塩化アシルが、
【化６】
2017519228.tif 000006
［式中、縮合環系が、5〜7員の縮合環を有する総炭素環式もしくはヘテロ環式芳香族系、または4〜8員の縮合環を有する非芳香族性炭素環式もしくはヘテロ環式縮合環系、例えば3,4-ジヒドロ-1H-インデンもしくは3,4,ジヒドロ-2H-クロメンであり得て、ここで縮合環が、必要に応じてハロゲン原子、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシの1以上で置換され得る］
で示される化合物の1つである、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
塩化アシルが、
【化７】
2017519228.tif 000007
で示される化合物である、請求項12に記載の方法。
【請求項１５】
塩化アシルが、式VIII:
【化８】
2017519228.tif 000008
［式中、R1、R2、R3、R4およびR5が、各々独立してH、ハロゲン原子、適宜フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシである］
で示される化合物である、請求項7に記載の方法。
【請求項１６】
塩化アシルが、
【化９】
2017519228.tif 000009
［式中、縮合環系が、5〜7員の縮合環を有する総炭素環式もしくはヘテロ環式芳香族系、または4〜8員の縮合環を有する非芳香族性炭素環式もしくはヘテロ環式縮合環系、例えば3,4-ジヒドロ-1H-インデンもしくは3,4,ジヒドロ-2H-クロメンであり得て、ここで縮合環が、必要に応じてハロゲン原子、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシの1以上で置換され得る］
で示される化合物の1つである、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
塩化アシルが、
【化１０】
2017519228.tif 000010
で示される化合物である、請求項15に記載の方法。
【請求項１８】
誘導体化剤が、式IX:
【化１１】
2017519228.tif 000011
［式中、R1、R2、R3、R4およびR5が、各々独立して水素、ハロゲン原子、適宜フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシである］
で示される化合物である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
誘導体化剤が、
【化１２】
2017519228.tif 000012
［式中、縮合環系が、5〜7員の縮合環を有する総炭素環式もしくはヘテロ環式芳香族系、適宜ナフタレン、キノロン、イソキノリン、キナゾリン、ベンゾフラン、インドールもしくはベンゾイミダゾール、または4〜8員の縮合環を有する非芳香族性炭素環式もしくはヘテロ環式縮合環系、適宜3,4-ジヒドロ-1H-インデン、3,4,ジヒドロ-2H-クロメンであり得て、ここで縮合環が、必要に応じてハロゲン原子、適宜フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、シアノ基、アセチレン基、プロピレン基、ビニル基、直鎖C1-8アルキル、分岐鎖C1-8アルキル、環式C1-8アルキル、置換ビニル基、直鎖C1-8アルコキシ、分岐鎖C1-8アルコキシまたは環式C1-8アルコキシの1以上で置換され得る］
で示される化合物の1つである、請求項18に記載の方法。
【請求項２０】
質量分析が、タンデム質量分析技術またはLC-MS/MS技術を含む、請求項1〜19のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
1以上の分析種の検出が、定性的または定量的である、請求項1〜20のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
1以上の分析種の量を検出するための固相抽出キットであって、
a)固相抽出カラム、および
b)同一または別々の容器中に請求項6〜19のいずれか一項に記載の誘導体化剤と一緒に高pHを有する溶出液
を含むキット。
【請求項２３】
SPEカラムが、弱カチオン交換カラム、強カチオン交換カラム、アニオン交換カラムおよび／または逆相カラムである、請求項22に記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
誘導体化反応は、緩衝剤の1以上を含む、緩衝液の添加によりクエンチされ得る。一の実施態様において、緩衝液は、アンモニウム緩衝液、例えばギ酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、ホウ酸アンモニウム、水酸化アンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、炭酸水素アンモニウム、硫酸水素アンモニウム、ビスアンモニウムホスフェートなどである。別の一の実施態様において、クエンチング試薬はまた、水、または水と有機溶媒、例えばアルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、グリコール、グリセロールなど、アセトニトリル、アセトン、エーテル、THF、1,4-ジオキサン、DMF、NMP、DMSOもしくはHMPAとの混合溶媒中、例えば1mM〜500mMの濃度範囲の緩衝化α-アミノ酸溶液、例えばグリシン、アラニン、緩衝化α-アラニンまたは緩衝化1級アミン溶液であり得る。クエンチング工程は、溶離液中に保持され得る任意の過剰な誘導体化試薬の多くを中和し、また反応混合物のpHを低下させることにより生成物を安定化させる。この実施態様の態様において、誘導体化分析種を含む溶離液のpHは、約4〜約9.5の範囲に低下され得る。