【手続補正書】
【提出日】平成30年5月22日(2018.5.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸配列：
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０ＧＸ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４（配列番号７１７）を含み、配列中、
Ｘ１は、Ｒ、Ｅ、［ｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ２は、［ｒ］、Ｒ、Ｅ、［ｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ３は、Ｑ、［ｑ］または［ＢＬｅｕ］であり、
Ｘ４は、［ｈＡｒｇ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、Ｒ、Ｅまたは［ｒ］であり、
Ｘ５は、Ｐまたは［ａＭｅＰｒｏ］であり、
Ｘ６は、Ｒ、Ｅ、［ｒ］、［ｈＡｒｇ］または［ＮＭｅＡｒｇ］であり、
Ｘ７は、Ｌ、［ａＭｅＬｅｕ］、［ＢＬｅｕ］、［ＮＭｅＬｅｕ］または［Ｃｈａ］であり、
Ｘ８は、Ｓ、［ＢｈＳｅｒ］または［ＮｈＳｅｒＧ］であり、
Ｘ９は、ＨまたはＹであり、
Ｘ１０は、Ｋまたは［ＮＬｙｓＧ］であり、
Ｘ１１は、Ｐ、［Ｏｉｃ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１２は、［Ｎｌｅ］、［ｒＮｌｅ］または［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、
Ｘ１３は、Ｐ、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ａｉｂ］であり、
Ｘ１４は、Ｆ、［Ｄ−ＢｈＰｈｅ］、［４−Ｃｌ−Ｆ］、［Ｄ−４ＣｌＦ］または［Ｄ−Ｂｉｐ］である、単離ポリペプチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドのアミノ末端がアセチル化されている、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３】
所望により結合リンカーを介して、Ｃ１〜Ｃ２５飽和または不飽和脂肪族アシル基に結合した、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４】
前記脂肪族アシル基が、トリデカノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、ヘキサデカノイル、ブタンジオイル、オクタンジオイルまたはデカンジオイルである、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項５】
前記脂肪族アシル基が、オクタノイル、デカノイル、ドデカノイル、トリデカノイル、テトラデカノイル、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル、ヘプタデカノイル、オクタデカノイルまたはオクタデカンジオイルである、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項６】
前記結合リンカーが、Ａｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ−ＡｅｅａまたはγＧｌｕを含む、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項７】
所望により結合リンカーを介して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマーに結合した、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項８】
前記ＰＥＧポリマーが、５ｋＤａ、１０ｋＤａまたは２０ｋＤａのＰＥＧポリマーである、請求項７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項９】
前記結合リンカーが３−メルカプトプロパン酸を含む、請求項７に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１０】
所望により結合リンカーを介して、免疫グロブリンまたは免疫グロブリンＦｃドメインに結合した、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１１】
前記結合リンカーがペプチジルリンカーである、請求項１０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１２】
前記結合リンカーが非ペプチジルリンカーである、請求項１０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１３】
前記非ペプチジルリンカーがＰＥＧポリマーを含む、請求項１２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１４】
Ｘ７が［ＮＭｅＬｅｕ］であり、Ｘ１２が［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、Ｘ１４が［Ｄ−Ｂｉｐ］である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１５】
Ｘ１が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ２が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ３がＱであり、Ｘ４が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ５がＰである、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１６】
Ｘ６及びＸ７が［ＮＭｅＡｒｇ］と［ａＭｅＬｅｕ］、［ｈＡｒｇ］と［ＢＬｅｕ］または［ｈＡｒｇ］と［ａＭｅＬｅｕ］である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１７】
Ｘ１３が［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ａｉｂ］であり、Ｘ１４が［Ｄ−ＢｈＰｈｅ］または［４−Ｃｌ−Ｆ］である、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１８】
配列番号８〜１１、１６、１７、３１、３２、４５、５３、６０、６８、６９〜７１、９２、１１２、１１４、１１９、１２０、２２１、２２８、２３７、２６３、２８６、２８７、３６２、３７３、３７６、３７９、３８２、３８８、４１２、４１６、４６０、４６８、４８２、４８３、４８５、４９１、４９８、４９９、５００、５０２、５０５、５１４、５１９、５２６、５３１、５３４、５４４、５５２、５５４、５６０及び５７１から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１９】
次式：
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４
（式中、Ｘ１は、脂肪族アシル基であり、
Ｘ２は、γＧｌｕであるか、または不在であり、
Ｘ３は、スペーサー部分基であるか、または不在であり、
Ｘ４は、アペリンポリペプチドであり、前記アペリンポリペプチドは、少なくとも１つのＤ−アミノ酸、β−アミノ酸、Ｎ−メチルアミノ酸、α−メチルアミノ酸、非標準アミノ酸または非標準アミノ酸のＤ−若しくはβ−型を含む。）
に従う構造を含む、単離ポリペプチド。
【請求項２０】
Ｘ２がγＧｌｕである、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２１】
前記脂肪族アシル基がＣ１〜Ｃ２５脂肪族アシル基である、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２２】
前記脂肪族アシル基が、ブタノイル、ヘキサノイル、オクタノイル、デカノイル、ドデカノイル、トリデカノイル、テトラデカノイル、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル、ヘプタデカノイル、オクタデカノイル、オクタデカンジオイル、オクタンジオイル、デカンジオイル、ドデカンジオイル、ヘキサンジオイル、ブタンジオイル、テトラデカンジオイルまたはヘキサデカンジオイルである、請求項２１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２３】
Ｘ３が、Ａｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ−ＡｅｅａまたはγＧｌｕから選択されるスペーサー部分基である、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２４】
Ｘ１がオクタデカンジオイル、ヘプタデカノイル、トリデカノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、ヘキサデカノイル、ブタンジオイル、オクタンジオイルまたはデカンジオイルであり、Ｘ２がγ−Ｇｌｕであるか、または不在であり、Ｘ３がＡｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａであるか、または不在である、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２５】
前記アペリンポリペプチドが少なくとも１２アミノ酸長である、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２６】
前記アペリンポリペプチドが少なくとも１つの非標準アミノ酸置換を有する、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２７】
前記アペリンポリペプチドが２、３、４、５、６、７、８または９個の非標準アミノ酸を有する、請求項２６に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２８】
前記Ｄ−アミノ酸、前記β−アミノ酸、前記Ｎ−メチルアミノ酸、前記α−アミノ酸、前記非標準アミノ酸または前記非標準アミノ酸の前記Ｄ−若しくはβ−型が、完全長アペリン（配列番号２）、アペリン６５〜７７（配列番号３）、アペリン６５〜７７（アペリン−１３）（配列番号４）、アペリン（配列番号５）または完全長アペリンの断片中の標準アミノ酸に代わって用いられる、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２９】
配列番号７〜７１４の任意の配列群から選択されるアミノ酸配列を有する単離ポリペプチド。
【請求項３０】
アミノ酸配列：
Ｚ１Ｚ２Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７（配列番号７６９）を含み、
配列中、
Ｚ１は、アシル基であり、
Ｚ２は、結合リンカーを含むか、または不在であり、
Ｘ１は、Ｏ、Ｋ、［Ｄ−Ｏｒｎ］、［ｋ］、［ＢＬｙｓ］、［Ｄ−ＢＬｙｓ］、［ＢｈＬｙｓ］若しくは［Ｄ−ＢｈＬｙｓ］であるか、または不在であり、
Ｘ２は、Ｆ、［ＢｈＰｈｅ］、［ＢＰｈｅ］であるか、または不在であり、
Ｘ３は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］、［ＢｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ４は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］、［ＢｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ５は、Ｑ、Ｌ、Ｎ、［ｑ］、［ｌ］、［ＰＥ］、［ＢｈＧｌｎ］、［ＢｈＡｓｎ］、［ａＭｅＬｅｕ］、［ａＭｅＧｌｎ］、［ＢＬｅｕ］または［ＢｈＬｅｕ］であり、
Ｘ６は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］または［ＢｈＡｒｇ］であり、
Ｘ７は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ８は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］または［ＢｈＡｒｇ］であり、
Ｘ９は、Ｌ、［Ｃｈａ］、［ＮＭｅＣｈａ］、［ｒＣｈａ］、［ｒＬｅｕ］、［ＮＭｅＬｅｕ］、［ａＭｅＬｅｕ］、［ＢＬｅｕ］または［ＢｈＬｅｕ］であり、
Ｘ１０は、Ｓ、［ａＭｅＳｅｒ］、［ＢｈＳｅｒ］、［ｒＳｅｒ］、［Ｓａｒ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１１は、Ｈ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｙ、［Ｄｅｇ］、［Ｔｌｅ］、［ＮＭｅＶａｌ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１２は、Ｋ、［ＮＭｅＬｙｓ］、［ＢｈＬｙｓ］、［ＢＬｙｓ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１３は、Ｇ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１４は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［Ｉｄｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１５は、Ｍ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、［Ｍｅｔ（Ｏ）］、［Ｎｌｅ］、［Ｎｖａ］または［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、
Ｘ１６は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［Ｉｄｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１７は、Ｆ、［Ｔｉｃ］、［Ｄ−Ｔｉｃ］、［Ｔｉｑ］、［Ｄ−Ｔｉｑ］、［４−Ｃｌ−Ｆ］、［ｐＩ−Ｐｈｅ］、［Ｄ−４ＦＦ］、［Ｄ−４ＣｌＦ］、［Ｄ−４ＩＦ］、［Ｉｄｃ］、［Ａｉｃ］、［Ｏｉｃ］、［Ｄ−Ｉｇｌ］、［ｆ］、［Ｄ−１Ｎａｌ］、［Ｄ−２Ｎａｌ］、［１−Ｎａｌ］、［２−Ｎａｌ］若しくは［Ｄ−Ｂｉｐ］であるか、または不在である、単離ポリペプチド。
【請求項３１】
Ｚ１が、Ｃ１〜Ｃ２５飽和または不飽和脂肪族アシル基である、請求項３０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３２】
Ｚ１が、アセチル、オクタノイル（Ｏｃｔ）、デカノイル（Ｄｅｃ）、ドデカノイル（ＤＤＡ）、トリデカノイル（ＴＤＡ）、テトラデカノイル（ミリストイル）、ペンタデカノイル（ＰＤＡ）、ヘキサデカノイル（パルミトイル）、ヘプタデカノイル（ＨＤＡ）、オクタデカノイル（ステアロイル）、オクタデカンジオイル（ＯＤＤＡ）または前記ポリペプチドの半減期を延長するために組み込まれる任意の脂肪族アシル基若しくは親油基である、請求項３０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３３】
Ｚ１が、５ｋＤａ、１０ｋＤａ、２０ｋＤａのＰＥＧポリマー、または前記ポリペプチドの半減期を延長するために組み込まれる任意の他のＰＥＧポリマーである、請求項３０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３４】
Ｚ２がＡｅｅａ、γ−グルタミン酸またはこれらの組み合わせを含む結合リンカーである、請求項３０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３５】
前記Ｚ２の結合リンカーが不在である、請求項３０に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３６】
野生型アペリン１３（配列番号４）またはピログルタミン酸化野生型アペリン−１３（配列番号６）と比較して安定性が向上した、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３７】
請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドと、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項３８】
治療を必要とする対象の心血管病態を治療するための組成物であって、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドを含む、前記組成物。
【請求項３９】
心血管病態を有する対象の心収縮性を改善するための組成物であって、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドを含み、前記対象の心収縮性が前記組成物の投与後に改善する、前記組成物。
【請求項４０】
ｄＰ／ｄｔｍａｘ及び／または駆出率が前記組成物の投与後に前記対象にて増加する、請求項３８または３９に記載の組成物。
【請求項４１】
収縮期または拡張期機能が前記組成物の投与後に前記対象にて改善する、請求項３８または３９に記載の組成物。
【請求項４２】
心血管病態を有する対象の駆出率を増加させるための組成物であって、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドを含み、前記駆出率が前記組成物の投与後に増加する、前記組成物。
【請求項４３】
前記心血管病態が心不全である、請求項３８〜４２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
前記心不全が駆出率の低下した心不全である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記心不全が駆出率の保持された心不全である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４６】
前記心不全が慢性収縮期心不全または慢性拡張期心不全である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４７】
前記心不全が急性心不全である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４８】
前記心血管病態が高血圧である、請求項３８〜４２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
治療を必要とする対象の心血管病態を治療する薬剤の調製のための請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用。
【請求項５０】
心血管病態を有する対象の心収縮性を改善する薬剤の調製のための請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用であって、前記薬剤により前記対象の心収縮性が投与後に改善する、前記使用。
【請求項５１】
前記薬剤により前記対象のｄＰ／ｄｔｍａｘ及び／または駆出率が投与後に増加する、請求項４９または５０に記載の使用。
【請求項５２】
前記薬剤により前記対象の収縮期または拡張期機能が投与後に改善する、請求項４９または５０に記載の使用。
【請求項５３】
心血管病態を有する対象の駆出率を増加させる薬剤の調製のための請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用であって、前記薬剤により前記対象の駆出率が投与後に増加する、前記使用。
【請求項５４】
前記心血管病態が心不全である、請求項４９〜５３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５５】
前記心不全が駆出率の低下した心不全である、請求項５４に記載の使用。
【請求項５６】
前記心不全が駆出率の保持された心不全である、請求項５４に記載の使用。
【請求項５７】
前記心不全が慢性収縮期心不全または慢性拡張期心不全である、請求項５４に記載の使用。
【請求項５８】
前記心不全が急性心不全である、請求項５４に記載の使用。
【請求項５９】
前記心血管病態が高血圧である、請求項４９〜５３のいずれか一項に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
したがって、別の実施形態において、本発明は、必要とする対象において、心血管障害を治療し、心収縮性を改善し、または駆出率を増加させる方法を提供し、この方法は、本明細書に記載の修飾アペリンポリペプチドまたはその複合体のいずれかを治療上有効な量で含む医薬組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、心血管障害は、心不全である。心不全は、急性心不全であっても、慢性心不全（例えば、慢性収縮期または慢性拡張期）であってもよい。一実施形態において、心不全は、駆出率の低下した心不全である。別の実施形態において、心不全は、駆出率の保持された心不全である。他の実施形態において、心血管病態は、高血圧である。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
アミノ酸配列：
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０ＧＸ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４（配列番号７１７）を含み、配列中、
Ｘ１は、Ｒ、Ｅ、［ｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ２は、［ｒ］、Ｒ、Ｅ、［ｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ３は、Ｑ、［ｑ］または［ＢＬｅｕ］であり、
Ｘ４は、［ｈＡｒｇ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、Ｒ、Ｅまたは［ｒ］であり、
Ｘ５は、Ｐまたは［ａＭｅＰｒｏ］であり、
Ｘ６は、Ｒ、Ｅ、［ｒ］、［ｈＡｒｇ］または［ＮＭｅＡｒｇ］であり、
Ｘ７は、Ｌ、［ａＭｅＬｅｕ］、［ＢＬｅｕ］、［ＮＭｅＬｅｕ］または［Ｃｈａ］であり、
Ｘ８は、Ｓ、［ＢｈＳｅｒ］または［ＮｈＳｅｒＧ］であり、
Ｘ９は、ＨまたはＹであり、
Ｘ１０は、Ｋまたは［ＮＬｙｓＧ］であり、
Ｘ１１は、Ｐ、［Ｏｉｃ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１２は、［Ｎｌｅ］、［ｒＮｌｅ］または［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、
Ｘ１３は、Ｐ、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ａｉｂ］であり、
Ｘ１４は、Ｆ、［Ｄ−ＢｈＰｈｅ］、［４−Ｃｌ−Ｆ］、［Ｄ−４ＣｌＦ］または［Ｄ−Ｂｉｐ］である、単離ポリペプチド。
（項目２）
前記ポリペプチドのアミノ末端がアセチル化されている、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目３）
所望により結合リンカーを介して、Ｃ１〜Ｃ２５飽和または不飽和脂肪族アシル基に結合した、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目４）
前記脂肪族アシル基が、トリデカノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、ヘキサデカノイル、ブタンジオイル、オクタンジオイルまたはデカンジオイルである、項目３に記載の単離ポリペプチド。
（項目５）
前記脂肪族アシル基が、オクタノイル、デカノイル、ドデカノイル、トリデカノイル、テトラデカノイル、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル、ヘプタデカノイル、オクタデカノイルまたはオクタデカンジオイルである、項目３に記載の単離ポリペプチド。
（項目６）
前記結合リンカーが、Ａｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ−ＡｅｅａまたはγＧｌｕを含む、項目３に記載の単離ポリペプチド。
（項目７）
所望により結合リンカーを介して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマーに結合した、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目８）
前記ＰＥＧポリマーが、５ｋＤａ、１０ｋＤａまたは２０ｋＤａのＰＥＧポリマーである、項目７に記載の単離ポリペプチド。
（項目９）
前記結合リンカーが３−メルカプトプロパン酸を含む、項目７に記載の単離ポリペプチド。
（項目１０）
所望により結合リンカーを介して、免疫グロブリンまたは免疫グロブリンＦｃドメインに結合した、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１１）
前記結合リンカーがペプチジルリンカーである、項目１０に記載の単離ポリペプチド。
（項目１２）
前記結合リンカーが非ペプチジルリンカーである、項目１０に記載の単離ポリペプチド。
（項目１３）
前記非ペプチジルリンカーがＰＥＧポリマーを含む、項目１２に記載の単離ポリペプチド。
（項目１４）
Ｘ７が［ＮＭｅＬｅｕ］であり、Ｘ１２が［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、Ｘ１４が［Ｄ−Ｂｉｐ］である、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１５）
Ｘ１が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ２が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ３がＱであり、Ｘ４が［ｈＡｒｇ］であり、Ｘ５がＰである、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１６）
Ｘ６及びＸ７が［ＮＭｅＡｒｇ］と［ａＭｅＬｅｕ］、［ｈＡｒｇ］と［ＢＬｅｕ］または［ｈＡｒｇ］と［ａＭｅＬｅｕ］である、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１７）
Ｘ１３が［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］または［Ａｉｂ］であり、Ｘ１４が［Ｄ−ＢｈＰｈｅ］または［４−Ｃｌ−Ｆ］である、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１８）
配列番号８〜１１、１６、１７、３１、３２、４５、５３、６０、６８、６９〜７１、９２、１１２、１１４、１１９、１２０、２２１、２２８、２３７、２６３、２８６、２８７、３６２、３７３、３７６、３７９、３８２、３８８、４１２、４１６、４６０、４６８、４８２、４８３、４８５、４９１、４９８、４９９、５００、５０２、５０５、５１４、５１９、５２６、５３１、５３４、５４４、５５２、５５４、５６０及び５７１から選択されるアミノ酸配列を含む、項目１に記載の単離ポリペプチド。
（項目１９）
次式：
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４
（式中、Ｘ１は、脂肪族アシル基であり、
Ｘ２は、γＧｌｕであるか、または不在であり、
Ｘ３は、スペーサー部分基であるか、または不在であり、
Ｘ４は、アペリンポリペプチドであり、前記アペリンポリペプチドは、少なくとも１つのＤ−アミノ酸、β−アミノ酸、Ｎ−メチルアミノ酸、α−メチルアミノ酸、非標準アミノ酸または非標準アミノ酸のＤ−若しくはβ−型を含む。）
に従う構造を含む、単離ポリペプチド。
（項目２０）
Ｘ２がγＧｌｕである、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２１）
前記脂肪族アシル基がＣ１〜Ｃ２５脂肪族アシル基である、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２２）
前記脂肪族アシル基が、ブタノイル、ヘキサノイル、オクタノイル、デカノイル、ドデカノイル、トリデカノイル、テトラデカノイル、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル、ヘプタデカノイル、オクタデカノイル、オクタデカンジオイル、オクタンジオイル、デカンジオイル、ドデカンジオイル、ヘキサンジオイル、ブタンジオイル、テトラデカンジオイルまたはヘキサデカンジオイルである、項目２１に記載の単離ポリペプチド。
（項目２３）
Ｘ３が、Ａｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ、γＧｌｕ−Ａｅｅａ−ＡｅｅａまたはγＧｌｕから選択されるスペーサー部分基である、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２４）
Ｘ１がオクタデカンジオイル、ヘプタデカノイル、トリデカノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、ヘキサデカノイル、ブタンジオイル、オクタンジオイルまたはデカンジオイルであり、Ｘ２がγ−Ｇｌｕであるか、または不在であり、Ｘ３がＡｅｅａ、Ａｅｅａ−Ａｅｅａであるか、または不在である、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２５）
前記アペリンポリペプチドが少なくとも１２アミノ酸長である、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２６）
前記アペリンポリペプチドが少なくとも１つの非標準アミノ酸置換を有する、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２７）
前記アペリンポリペプチドが２、３、４、５、６、７、８または９個の非標準アミノ酸を有する、項目２６に記載の単離ポリペプチド。
（項目２８）
前記Ｄ−アミノ酸、前記β−アミノ酸、前記Ｎ−メチルアミノ酸、前記α−アミノ酸、前記非標準アミノ酸または前記非標準アミノ酸の前記Ｄ−若しくはβ−型が、完全長アペリン（配列番号２）、アペリン６５〜７７（配列番号３）、アペリン６５〜７７（アペリン−１３）（配列番号４）、アペリン（配列番号５）または完全長アペリンの断片中の標準アミノ酸に代わって用いられる、項目１９に記載の単離ポリペプチド。
（項目２９）
配列番号７〜７１４の任意の配列群から選択されるアミノ酸配列を有する単離ポリペプチド。
（項目３０）
アミノ酸配列：
Ｚ１Ｚ２Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７（配列番号７６９）を含み、
配列中、
Ｚ１は、アシル基であり、
Ｚ２は、結合リンカーを含むか、または不在であり、
Ｘ１は、Ｏ、Ｋ、［Ｄ−Ｏｒｎ］、［ｋ］、［ＢＬｙｓ］、［Ｄ−ＢＬｙｓ］、［ＢｈＬｙｓ］若しくは［Ｄ−ＢｈＬｙｓ］であるか、または不在であり、
Ｘ２は、Ｆ、［ＢｈＰｈｅ］、［ＢＰｈｅ］であるか、または不在であり、
Ｘ３は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］、［ＢｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ４は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］、［ＢｈＡｒｇ］であるか、または不在であり、
Ｘ５は、Ｑ、Ｌ、Ｎ、［ｑ］、［ｌ］、［ＰＥ］、［ＢｈＧｌｎ］、［ＢｈＡｓｎ］、［ａＭｅＬｅｕ］、［ａＭｅＧｌｎ］、［ＢＬｅｕ］または［ＢｈＬｅｕ］であり、
Ｘ６は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］または［ＢｈＡｒｇ］であり、
Ｘ７は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ８は、Ｒ、［ｈＡｒｇ］、［ｒ］、［ＮＭｅＡｒｇ］、［ＮＭｅｈＡｒｇ］、［ｒｈＡｒｇ］、［ｒＡｒｇ］または［ＢｈＡｒｇ］であり、
Ｘ９は、Ｌ、［Ｃｈａ］、［ＮＭｅＣｈａ］、［ｒＣｈａ］、［ｒＬｅｕ］、［ＮＭｅＬｅｕ］、［ａＭｅＬｅｕ］、［ＢＬｅｕ］または［ＢｈＬｅｕ］であり、
Ｘ１０は、Ｓ、［ａＭｅＳｅｒ］、［ＢｈＳｅｒ］、［ｒＳｅｒ］、［Ｓａｒ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１１は、Ｈ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｙ、［Ｄｅｇ］、［Ｔｌｅ］、［ＮＭｅＶａｌ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１２は、Ｋ、［ＮＭｅＬｙｓ］、［ＢｈＬｙｓ］、［ＢＬｙｓ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１３は、Ｇ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］または［ｂＡｌａ］であり、
Ｘ１４は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［Ｉｄｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１５は、Ｍ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、［Ｍｅｔ（Ｏ）］、［Ｎｌｅ］、［Ｎｖａ］または［ｐＩ−Ｐｈｅ］であり、
Ｘ１６は、Ｐ、［Ｓａｒ］、［Ａｉｂ］、［ＢｈＰｒｏ］、［ａＭｅＰｒｏ］、［Ｏｉｃ］、［Ｉｄｃ］、［ｒＰｒｏ］または［Ｐｉｐ］であり、
Ｘ１７は、Ｆ、［Ｔｉｃ］、［Ｄ−Ｔｉｃ］、［Ｔｉｑ］、［Ｄ−Ｔｉｑ］、［４−Ｃｌ−Ｆ］、［ｐＩ−Ｐｈｅ］、［Ｄ−４ＦＦ］、［Ｄ−４ＣｌＦ］、［Ｄ−４ＩＦ］、［Ｉｄｃ］、［Ａｉｃ］、［Ｏｉｃ］、［Ｄ−Ｉｇｌ］、［ｆ］、［Ｄ−１Ｎａｌ］、［Ｄ−２Ｎａｌ］、［１−Ｎａｌ］、［２−Ｎａｌ］若しくは［Ｄ−Ｂｉｐ］であるか、または不在である、単離ポリペプチド。
（項目３１）
Ｚ１が、Ｃ１〜Ｃ２５飽和または不飽和脂肪族アシル基である、項目３０に記載の単離ポリペプチド。
（項目３２）
Ｚ１が、アセチル、オクタノイル（Ｏｃｔ）、デカノイル（Ｄｅｃ）、ドデカノイル（ＤＤＡ）、トリデカノイル（ＴＤＡ）、テトラデカノイル（ミリストイル）、ペンタデカノイル（ＰＤＡ）、ヘキサデカノイル（パルミトイル）、ヘプタデカノイル（ＨＤＡ）、オクタデカノイル（ステアロイル）、オクタデカンジオイル（ＯＤＤＡ）または前記ポリペプチドの半減期を延長するために組み込まれる任意の脂肪族アシル基若しくは親油基である、項目３０に記載の単離ポリペプチド。
（項目３３）
Ｚ１が、５ｋＤａ、１０ｋＤａ、２０ｋＤａのＰＥＧポリマー、または前記ポリペプチドの半減期を延長するために組み込まれる任意の他のＰＥＧポリマーである、項目３０に記載の単離ポリペプチド。
（項目３４）
Ｚ２がＡｅｅａ、γ−グルタミン酸またはこれらの組み合わせを含む結合リンカーである、項目３０に記載の単離ポリペプチド。
（項目３５）
前記Ｚ２の結合リンカーが不在である、項目３０に記載の単離ポリペプチド。
（項目３６）
野生型アペリン１３（配列番号４）またはピログルタミン酸化野生型アペリン−１３（配列番号６）と比較して安定性が向上した、項目１〜３５のいずれか一項に記載の単離ポリペプチド。
（項目３７）
項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドと、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
（項目３８）
治療を必要とする対象の心血管病態を治療するための方法であって、項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドを前記対象に投与することを含む、前記方法。
（項目３９）
心血管病態を有する対象の心収縮性を改善する方法であって、項目１〜３６のいずれか一項に記載のポリペプチドを前記対象に投与することを含み、前記対象の心収縮性が投与後に改善する、前記方法。
（項目４０）
ｄＰ／ｄｔｍａｘ及び／または駆出率が前記ポリペプチドの投与後に前記対象にて増加する、項目３８または３９に記載の方法。
（項目４１）
収縮期または拡張期機能が前記ポリペプチドの投与後に前記対象にて改善する、項目３８または３９に記載の方法。
（項目４２）
心血管病態を有する対象の駆出率を増加させる方法であって、項目１〜３６のいずれか一項に記載のポリペプチドを前記対象に投与することを含み、前記駆出率が前記ポリペプチドの投与後に増加する、前記方法。
（項目４３）
前記心血管病態が心不全である、項目３８〜４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記心不全が駆出率の低下した心不全である、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記心不全が駆出率の保持された心不全である、項目４３に記載の方法。
（項目４６）
前記心不全が慢性収縮期心不全または慢性拡張期心不全である、項目４３に記載の方法。
（項目４７）
前記心不全が急性心不全である、項目４３に記載の方法。
（項目４８）
前記心血管病態が高血圧である、項目３８〜４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
治療を必要とする対象の心血管病態を治療する薬剤の調製のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用。
（項目５０）
心血管病態を有する対象の心収縮性を改善する薬剤の調製のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用であって、前記薬剤により前記対象の心収縮性が投与後に改善する、前記使用。
（項目５１）
前記薬剤により前記対象のｄＰ／ｄｔｍａｘ及び／または駆出率が投与後に増加する、項目４９または５０に記載の使用。
（項目５２）
前記薬剤により前記対象の収縮期または拡張期機能が投与後に改善する、項目４９または５０に記載の使用。
（項目５３）
心血管病態を有する対象の駆出率を増加させる薬剤の調製のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドの使用であって、前記薬剤により前記対象の駆出率が投与後に増加する、前記使用。
（項目５４）
前記心血管病態が心不全である、項目４９〜５３のいずれか一項に記載の使用。
（項目５５）
前記心不全が駆出率の低下した心不全である、項目５４に記載の使用。
（項目５６）
前記心不全が駆出率の保持された心不全である、項目５４に記載の使用。
（項目５７）
前記心不全が慢性収縮期心不全または慢性拡張期心不全である、項目５４に記載の使用。
（項目５８）
前記心不全が急性心不全である、項目５４に記載の使用。
（項目５９）
前記心血管病態が高血圧である、項目４９〜５３のいずれか一項に記載の使用。
（項目６０）
治療を必要とする対象の心血管病態を治療するための方法における使用のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチド。
（項目６１）
心血管病態を有する対象の心収縮性を改善するための方法における使用のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドであって、前記対象の前記心収縮性が前記ポリペプチドの投与後に改善する、前記単離ポリペプチド。
（項目６２）
ｄＰ／ｄｔｍａｘ及び／または駆出率が前記ポリペプチドの投与後に前記対象にて増加する、項目６０または６１に記載の単離ポリペプチド。
（項目６３）
収縮期または拡張期機能が前記ポリペプチドの投与後に前記対象にて改善する、項目６０または６１に記載の単離ポリペプチド。
（項目６４）
心血管病態を有する対象の駆出率を増加させるための方法における使用のための項目１〜３６のいずれか一項に記載の単離ポリペプチドであって、前記対象の前記駆出率が前記ポリペプチドの投与後に増加する、前記単離ポリペプチド。
（項目６５）
前記心血管病態が心不全である、項目６０〜６４のいずれか一項に記載の単離ポリペプチド。
（項目６６）
前記心不全が駆出率の低下した心不全である、項目６５に記載の単離ポリペプチド。
（項目６７）
前記心不全が駆出率の保持された心不全である、項目６５に記載の単離ポリペプチド。
（項目６８）
前記心不全が慢性収縮期心不全または慢性拡張期心不全である、項目６５に記載の単離ポリペプチド。
（項目６９）
前記心不全が急性心不全である、項目６５に記載の単離ポリペプチド。
（項目７０）
前記心血管病態が高血圧である、項目６０〜６４のいずれか一項に記載の単離ポリペプチド。