【手続補正書】
【提出日】平成30年4月2日(2018.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一意的人工プラスミド特異的配列（UAPS）と、標的増幅ポリヌクレオチド配列（TAP）とを含む、陽性増幅対照プラスミド（PAC）であって、該TAPが、細菌またはウイルスのヌクレオチド配列を含む、前記陽性増幅対照プラスミド（PAC）。
【請求項２】
前記UAPSが、天然のいかなるパルボウイルスも認識せずアニールもしない、請求項1記載のPAC。
【請求項３】
前記UAPSがSEQ ID NO:10を含む、請求項2記載のPAC。
【請求項４】
前記TAPが、NS-1ヌクレオチド配列を含む、請求項1記載のPAC。
【請求項５】
核酸抽出対照（NEC）ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項1記載のPAC。
【請求項６】
前記NECがM13バクテリオファージのヌクレオチド配列を含む、請求項5記載のPAC。
【請求項７】
M13バクテリオファージのヌクレオチド配列がM13K07のヌクレオチド配列を含む、請求項6記載のPAC。
【請求項８】
M13K07のヌクレオチド配列がSEQ ID NO:8を含む、請求項7記載のPAC。
【請求項９】
1種類または複数種類のオリゴヌクレオチドプライマーをさらに含む、請求項1記載のPAC。
【請求項１０】
前記1種類または複数種類のオリゴヌクレオチドプライマーが順方向オリゴヌクレオチドプライマー、逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項9記載のPAC。
【請求項１１】
前記1種類または複数種類のオリゴヌクレオチドプライマーが齧歯類パルボウイルスオリゴヌクレオチドプライマーである、請求項9記載のPAC。
【請求項１２】
前記齧歯類パルボウイルスオリゴヌクレオチドプライマーが順方向オリゴヌクレオチドプライマー、逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項11記載のPAC。
【請求項１３】
M13オリゴヌクレオチドプライマーをさらに含む、請求項6記載のPAC。
【請求項１４】
前記M13オリゴヌクレオチドプライマーが順方向オリゴヌクレオチドプライマー、逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項13記載のPAC。
【請求項１５】
一意的検出プローブヌクレオチド配列（UDP）を含む組成物であって、該UDPが、UAPSを検出するために使用される、前記組成物。
【請求項１６】
前記UDPが、SEQ ID NO:3を含む、請求項15記載の組成物。
【請求項１７】
前記UDPが、少なくとも1種類のフルオロフォアおよび少なくとも1種類のクエンチャーをさらに含む、請求項15記載の組成物。
【請求項１８】
前記フルオロフォアが、495nm以上680nm以下の範囲内の励起波長、および515nm以上710nm以下の範囲内の発光波長を有するフルオロフォアの群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項１９】
前記フルオロフォアが、495nmの励起波長および520nmの発光波長を有する、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
前記フルオロフォアがFAMである、請求項19記載の組成物。
【請求項２１】
前記クエンチャーが、430nm以上672nm以下の範囲内に吸収のピークを有する色素の群より選択される、請求項17記載の組成物。
【請求項２２】
前記クエンチャーがBHQ-1である、請求項21記載の組成物。
【請求項２３】
前記フルオロフォアが前記UDPの5'末端に結合しており、かつ前記クエンチャーが前記UDPの3'末端に結合している、請求項17記載の組成物。
【請求項２４】
前記NS-1配列が、マウスの微小ウイルスプロトタイプ系統（MVMp）、マウスの微小ウイルス免疫抑制系統（MVMi）、マウスの微小ウイルスCutter系統（MVMc）、マウスパルボウイルス1b（MPV-1b）、マウスパルボウイルス1a（MPV-1a）、マウスパルボウイルス1c（MPV-1c）、ハムスターパルボウイルス（HaPV）、Toolanのパルボウイルス（H-1）、Kilhamラットウイルス（KRV）、ラットパルボウイルス1a、ラット微小ウイルス、およびラットウイルスLのUmass系統（RV-Umass）からなる群より選択される、請求項4記載のPAC。
【請求項２５】
a．（i）試験サンプル、（ii）UDP、（iii）TAP順方向オリゴヌクレオチドプライマー、（iv）TAP逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、（v）TAP検出プローブ、および（vi）DNAポリメラーゼを混合する段階；
b．段階（a）の組み合わせをポリメラーゼ連鎖反応（PCR）に供する段階；ならびに
c．該PCRを、シグナルの産生についてモニターする段階
を含む、生物学的汚染物質を検出する方法。
【請求項２６】
前記UDPが、少なくとも1種類のフルオロフォアおよび少なくとも1種類のクエンチャーをさらに含む、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
前記フルオロフォアが、495nm以上680nm以下の範囲内の励起波長、および515nm以上710nm以下の範囲内の発光波長を有するフルオロフォアの群より選択される、請求項26記載の方法。
【請求項２８】
前記TAP検出プローブが、少なくとも1種類のフルオロフォアおよび少なくとも1種類のクエンチャーをさらに含む、請求項25記載の方法。
【請求項２９】
TAPの産生が約533nm〜約580nmでモニターされる、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
段階（a）が、（vii）NEC特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー、（viii）NEC特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、および（ix）NEC特異的オリゴヌクレオチド検出プローブをさらに含む、請求項25記載の方法。
【請求項３１】
前記NECがM13バクテリオファージである、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
前記NEC特異的オリゴヌクレオチド検出プローブがシアニン色素を含む、請求項30記載の方法。
【請求項３３】
前記シアニン色素が、約650nmでの吸収極大および約670nmでの発光極大を有するCy5である、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
段階（a）が、前記試験サンプルの代わりにPACを含む、請求項25記載の方法。
【請求項３５】
段階（a）が、前記試験サンプルの代わりにバッファーを含む、請求項25記載の方法。
【請求項３６】
シグナルが、偽陽性を表す、請求項26記載の方法。
【請求項３７】
同時にUDPシグナルが生じなければ、シグナルが汚染を表す、請求項28記載の方法。
【請求項３８】
シグナルが、反応容器からのオリゴヌクレオチドの抽出を表す、請求項32記載の方法。
【請求項３９】
一意的人工プラスミド特異的配列（UAPS）と、標的増幅ポリヌクレオチド配列（TAP）とを含む、陽性増幅対照プラスミド（PAC）であって、該TAPが、細菌またはウイルスのヌクレオチド配列と、核酸抽出対照（NEC）ヌクレオチド配列とを含む、前記陽性増幅対照プラスミド（PAC）。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
具体的な態様において、標的汚染物質は齧歯類パルボウイルスであり、その場合において、（1）標的汚染物質特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーは齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーであり、より具体的にはSEQ ID NO:1の配列を含み；（2）標的汚染物質特異的オリゴヌクレオチド検出プローブは齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブであり、より具体的にはSEQ ID NO:2の核酸配列を含み；（3）人工オリゴヌクレオチド検出プローブは一意的検出プローブ（UDP）であり、より具体的にはSEQ ID NO:3の核酸配列を含み；（4）標的汚染物質特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーは齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーであり、より具体的にはSEQ ID NO:4の核酸配列を含み；（5）NEC特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーはM13順方向オリゴヌクレオチドプライマーであり、より具体的にはSEQ ID NO:5の核酸配列を含み；（6）NEC特異的オリゴヌクレオチド検出プローブはM13検出プローブであり、より具体的にはSEQ ID NO:6の核酸配列を含み；かつ（7）NEC特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーはM13逆方向オリゴヌクレオチドプライマーであり、より具体的にはSEQ ID NO:8の核酸を含む。方法の一態様において、NEC Q-PCRシグナルが検出される（すなわち、シグナルが、予想される回収範囲内にある）場合には、試験サンプルの核酸抽出が成功したと推測され得る。他方で、NECシグナルが検出されない（すなわち、シグナルが、予想される回収範囲外にある）場合には、試験サンプルの核酸抽出が失敗したと推測され得、そしてあらゆる陰性Q-PCR標的汚染物質シグナルが無効（すなわち、偽陰性）であると見なされる。
[本発明1001]
人工ヌクレオチド配列、フルオロフォア、およびクエンチャーを含む組成物であって、該人工ヌクレオチド配列が、その3'末端に、SEQ ID NO:9および12〜37のいずれか1つの配列と同一である連続した5個以下の核酸を含む、組成物。
[本発明1002]
フルオロフォアが、495nm以上680nm以下の範囲内の励起波長、および515nm以上710nm以下の範囲内の発光波長を有するフルオロフォアの群より選択される、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
クエンチャーが、430nm以上672nm以下の範囲内に吸収のピークを有する色素の群より選択される、本発明1002の組成物。
[本発明1004]
フルオロフォアが、495nmの励起波長および520nmの発光波長を有する、本発明1001の組成物。
[本発明1005]
フルオロフォアがFAMである、本発明1004の組成物。
[本発明1006]
クエンチャーがBHQ-1である、本発明1005の組成物。
[本発明1007]
フルオロフォアが人工ヌクレオチド配列の5'末端に結合しており、かつクエンチャーが人工ヌクレオチド配列の3'末端に結合している、本発明1001の組成物。
[本発明1008]
人工ヌクレオチド配列が、
2018509174.tif 000001
の核酸配列を含む、本発明1001の組成物。
[本発明1009]
a．齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
b．齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；
c．人工オリゴヌクレオチド検出プローブ；
d．齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー；
e．M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
f．M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；および
g．M13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー
を含む、組成物。
[本発明1010]
a、b、およびdのオリゴヌクレオチド配列がそれぞれ、マウスの微小ウイルスプロトタイプ系統（MVMp）、マウスの微小ウイルス免疫抑制系統（MVMi）、マウスの微小ウイルスCutter系統（MVMc）、マウスパルボウイルス1b（MPV-1b）、マウスパルボウイルス1a（MPV-1a）、マウスパルボウイルス1c（MPV-1c）、ハムスターパルボウイルス（HaPV）、Toolanのパルボウイルス（H-1）、Kilhamラットウイルス（KRV）、ラットパルボウイルス1a、ラット微小ウイルス、およびラットウイルスLのUmass系統（RV-Umass）からなる群より選択される齧歯類パルボウイルスのNS-1配列を含む、本発明1009の組成物。
[本発明1011]
人工オリゴヌクレオチド検出プローブが、その3'末端に、SEQ ID NO:9および12〜37のいずれか1つの配列と同一である連続した5個以下の核酸を有するヌクレオチド配列を含む、本発明1009の組成物。
[本発明1012]
a、b、およびdのオリゴヌクレオチド配列がSEQ ID NO:37にハイブリダイズする、本発明1010の組成物。
[本発明1013]
b、c、およびfの各検出プローブが、各検出プローブに対するフルオロフォアが異なる波長で光を放つようなフルオロフォアおよびクエンチャーを含む、本発明1009の組成物。
[本発明1014]
各プローブのフルオロフォアが、495nm以上680nm以下の範囲内の励起波長、および515nm以上710nm以下の範囲内の発光波長を有するフルオロフォアの群より選択される、本発明1013の組成物。
[本発明1015]
クエンチャーが、430nm以上672nm以下の範囲内に吸収のピークを有する色素の群より選択される、本発明1014の組成物。
[本発明1016]
人工オリゴヌクレオチド検出プローブ（c）が、フルオロフォアFAMおよびクエンチャーBHQ-1を含み；齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ（b）が、フルオロフォアVICおよび副溝結合非蛍光性クエンチャー（MGBNFQ）を含み；かつM13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブが、フルオロフォアCy5およびクエンチャーBHQ2を含む、本発明1013の組成物。
[本発明1017]
齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー（a）が、SEQ ID NO:1の核酸配列を含み；齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー（d）が、SEQ ID NO:4の核酸配列を含み；かつ齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ（b）が、SEQ ID NO:2の核酸配列を含む、本発明1012の組成物。
[本発明1018]
人工オリゴヌクレオチド検出プローブ（c）が、SEQ ID NO:3の核酸配列を含む、本発明1011の組成物。
[本発明1019]
M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー（e）が、SEQ ID NO:5の核酸配列を含み；M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ（f）が、SEQ ID NO:6の核酸配列を含み；かつM13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー（g）が、SEQ ID NO:7の核酸配列を含む、本発明1009の組成物。
[本発明1020]
a．反応混合物を作製するために複数の成分を混合する段階であって、該成分が、（i）試験サンプルに由来する核酸サンプル、（ii）オリゴヌクレオチド、および（iii）DNAポリメラーゼを含む、前記段階；
b．反応混合物をポリメラーゼ連鎖反応（PCR）に供する段階；
c．PCR中、（i）標的増幅ポリヌクレオチド（TAP）、（ii）核酸抽出対照増幅ポリヌクレオチド（NACP）、および（iii）プラスミド増幅対照ポリヌクレオチド（PACP）の産生をモニターする段階；ならびに
d．TAPの産生をNACPおよびPACPの産生と比較する段階
を含み、PCR中に産生されたTAPの存在、NACPの存在、およびPACPの非存在が、試験サンプルが生物学的汚染物質を含有しかつ陽性増幅対照プラスミドを含有しないことを表す、試験サンプルにおける生物学的汚染物質を検出する方法。
[本発明1021]
オリゴヌクレオチドが、（a）齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー、（b）齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ、（c）人工オリゴヌクレオチド検出プローブ、（d）齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー、（e）M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー、（f）M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ、および（g）M13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーを含む、本発明1020の方法。
[本発明1022]
試験サンプルが、哺乳動物細胞培養物またはその精製された画分から入手される、本発明1020の方法。
[本発明1023]
試験サンプルにM13K07ファージが加えられる、本発明1020の方法。
[本発明1024]
核酸サンプルが、約1mLの試験サンプルを溶解、タンパク質分解、および熱変性に供し、それに続いてサンプルと抽出対照サンプルとを混合し、次いで該サンプルから核酸を抽出することによって調製される、本発明1020の方法。
[本発明1025]
抽出対照サンプルがM13K07ファージである、本発明1024の方法。
[本発明1026]
（a）齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:1の核酸配列を含み；（b）齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブが、VICフルオロフォア、副溝結合非蛍光性クエンチャー（MGBNFQ）、およびSEQ ID NO:2の核酸配列を含み；（c）人工オリゴヌクレオチド検出プローブが、FAMフルオロフォア、非蛍光性クエンチャーBHQ、およびSEQ ID NO:3の核酸配列を含み；（d）齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:4の核酸配列を含み；（e）M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:5の核酸配列を含み；（f）M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブが、Cy5フルオロフォア、BHQ-2クエンチャー、およびSEQ ID NO:6の核酸配列を含み；かつM13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:7の核酸配列を含む、本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記成分がウラシル-N-グリコシラーゼ（UNG）を含む、本発明1020の方法。
[本発明1028]
反応混合物を50℃で少なくとも2分間インキュベートする段階を含む、本発明1020の方法。
[本発明1029]
PCR段階（b）が、
（i）反応混合物を95℃で2分間インキュベートする段階；それに続く
（ii）（1）95℃で10秒間の変性、それに続く（2）30秒間のアニーリングの8回のサイクルであって、該8回のサイクルの最初のアニーリング温度が70℃であり、アニーリング温度が1サイクル毎に1℃低下し、かつ該8回のサイクルの最後のアニーリング温度が62℃である、前記8回のサイクル；それに続く
（iii）（1）95℃で10秒間の変性段階、それに続く（2）62℃で30秒間のアニーリング段階を含む少なくとも40回のサイクルのDNA増幅であって、変性温度からアニーリング温度への温度変化の割合は1秒間あたり約4.4℃であり、かつアニーリング温度から変性温度へは1秒間あたり約2.2℃である、前記DNA増幅
を含む、本発明1028の方法。
[本発明1030]
（a）TAPの産生を、各増幅サイクルで533〜580nmにおける蛍光を測定することによってモニターし；（b）NACPの産生を、各増幅サイクルで618〜660nmにおける蛍光を測定することによってモニターし；かつ（c）PACPの産生を、各増幅サイクルで465〜510nmにおける蛍光を測定することによってモニターする、本発明1026の方法。
[本発明1031]
試験サンプルに対して実施された方法から得られた結果を、外部陽性対照および外部陰性対照と比較する段階を含み、かつ該陰性対照または該陽性対照が失敗した場合は、試験サンプルに対して実行された方法から得られた結果は却下される、本発明1020の方法。
[本発明1032]
外部陽性対照が、
a．陽性対照混合物を作製するために複数の陽性対照成分を混合する段階であって、該陽性対照成分が、（i）陽性増幅対照（PAC）プラスミド、および（ii）陽性対照オリゴヌクレオチドカクテルを含み、かつ（iii）試験サンプルを含まない、前記段階；
b．陽性対照混合物を陽性対照のポリメラーゼ連鎖反応（PCR）に供する段階；ならびに
c．PCR中、（i）標的増幅ポリヌクレオチド（TAP）、（ii）核酸抽出対照増幅ポリヌクレオチド（NACP）、および（iii）プラスミド増幅対照ポリヌクレオチド（PACP）の産生をモニターする段階
を含み、PCR中に産生されたTAP、NACP、およびPACPの存在が、PCRが適正に機能していることを表し、かつTAP、NACP、またはPACPのうちのいずれか1つまたは複数の非存在が、陽性対照が失敗していることを表す、本発明1031の方法。
[本発明1033]
PACプラスミドが、（i）パルボウイルス核酸配列、（ii）M13K07核酸配列、および（iii）該プラスミドに一意的な人工核酸配列を含む、本発明1032の方法。
[本発明1034]
（i）パルボウイルス核酸配列がSEQ ID NO:37の配列を含み；（ii）M13K07核酸配列がSEQ ID NO:8の配列を含み；かつ（iii）前記プラスミドに一意的な人工核酸配列がSEQ ID NO:10の配列を含む、本発明1033の方法。
[本発明1035]
PACプラスミドがSEQ ID NO:11の核酸配列を含む、本発明1034の方法。
[本発明1036]
陽性対照オリゴヌクレオチドカクテルが、
SEQ ID NO:1の核酸配列を含む、齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
VICフルオロフォア、MGBNFQクエンチャー、およびSEQ ID NO:2の核酸配列を含む、齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；
FAMフルオロフォア、BHQクエンチャー、およびSEQ ID NO:3の核酸配列を含む、人工オリゴヌクレオチド検出プローブ；
SEQ ID NO:4の核酸配列を含む、齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー；
SEQ ID NO:5の核酸配列を含む、M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
Cy5フルオロフォア、BHQ-2クエンチャー、およびSEQ ID NO:6の核酸配列を含む、M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；ならびに
SEQ ID NO:7の核酸配列を含む、M13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー
を含む、本発明1033の方法。
[本発明1037]
陽性対照PCRが、
a．陽性対照混合物を95℃で2分間インキュベートする段階；それに続く
b．8回のサイクルの最初のアニーリング温度が70℃であり、アニーリング温度が1サイクル毎に1℃低下し、かつ8回のサイクルの最後のアニーリング温度が62℃であるような、（i）95℃で10秒間の変性、それに続く（ii）30秒間のアニーリング、の8回のサイクル；およびそれに続く
c．（i）95℃で10秒間の変性段階、それに続く（ii）62℃で30秒間のアニーリングの段階を含む、40回のサイクルのDNA増幅
を含む、本発明1036の方法。
[本発明1038]
陽性対照PCRにおけるTAPの産生が、各増幅サイクルで533〜580nmにおける蛍光を測定することによってモニターされ、陽性対照PCRにおけるNACPの産生が、各増幅サイクルで618〜660nmにおける蛍光を測定することによってモニターされ；かつ陽性対照PCRにおけるPACPの産生が、各増幅サイクルで465〜510nmにおける蛍光を測定することによってモニターされる、本発明1036の方法。
[本発明1039]
a．陽性増幅対照（PAC）プラスミド；
b．齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
c．齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；
d．人工オリゴヌクレオチド検出プローブ；
e．齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー；
f．M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマー；
g．M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブ；
h．M13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマー；および
i．バッファー
を含む、組成物。
[本発明1040]
PACプラスミドが、（i）パルボウイルス核酸配列、（ii）M13K07核酸配列、および（iii）該プラスミドに一意的な人工核酸配列を含む、本発明1039の組成物。
[本発明1041]
パルボウイルス核酸配列がSEQ ID NO:37の配列を含み、M13K07核酸配列がSEQ ID NO:8の配列を含み、かつ前記一意的核酸配列がSEQ ID NO:10の配列を含む、本発明1040の組成物。
[本発明1042]
PACプラスミドがSEQ ID NO:11の核酸配列を含む、本発明1041の組成物。
[本発明1043]
齧歯類パルボウイルス特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:1の核酸配列を含み；
齧歯類パルボウイルス特異的オリゴヌクレオチド検出プローブが、VICフルオロフォア、副溝結合クエンチャー（MGBNFQ）、およびSEQ ID NO:2の核酸配列を含み；
人工オリゴヌクレオチド検出プローブが、VICフルオロフォア、非蛍光性クエンチャーBHQ、およびSEQ ID NO:3の核酸配列を含み；
齧歯類パルボウイルス特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:4の核酸配列を含み；
M13特異的順方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:5の核酸配列を含み；
M13特異的オリゴヌクレオチド検出プローブが、Cy5フルオロフォア、BHQ-2クエンチャー、およびSEQ ID NO:6の核酸配列を含み；かつ
M13特異的逆方向オリゴヌクレオチドプライマーが、SEQ ID NO:7の核酸配列を含む、
本発明1042の組成物。