【手続補正書】
【提出日】平成30年9月25日(2018.9.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インクレチンペプチド、および
インスリンアゴニストペプチド
を含む、インスリン受容体と対応するインクレチン受容体の両方でアゴニスト活性を有するインクレチン−インスリンコンジュゲートであって、
インクレチンペプチドが５〜１０個の原子の直鎖スペーサーによりインスリンペプチドに連結され、スペーサーが、式ＩＩの一般構造を含み、
【化１】
2017534676.tif 000001
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、ＨおよびＣＨ3からなる群から独立に選択され、ｎは０または１であり、ならびにｍは１、２または３である）、
インクレチンペプチドのカルボキシ末端が、インスリンペプチドのＢ鎖のアミノ末端に共有結合により前記スペーサーを介して連結している、コンジュゲート。
【請求項２】
インクレチンペプチドが、
Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＸ10ＳＩＹＬＤＫＱＡＡＸ20ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号２０３７）および
Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＩＹＬＤＫＱＡＡＸ20ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＸ40（配列番号２０３８）
（式中、
Ｘ1は、ＨｉｓまたはＴｙｒであり、
Ｘ2は、アミノイソ酪酸であり、
Ｘ10は、ガンマＧｌｕリンカーを介してもよいＣ16−Ｃ20アルキル基でアシル化されたＬｙｓであり、
Ｘ20は、アミノイソ酪酸であり、
Ｘ40は、ガンマＧｌｕリンカーを介してもよいＣ16−Ｃ20アルキル基でアシル化されたＬｙｓである）
からなる群から選択され、
前記インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＸ8ＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＸ21（配列番号３）のＡ鎖配列、および  Ｒ22−ＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＸ45（配列番号１５）のＢ鎖配列
を含み、
Ｂ鎖が、ジスルフィド結合によりＡ鎖に連結され、
Ｒ22が、結合であるか、またはＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、ＶＮＱ、ＮＱおよびＱからなる群から選択される１〜４個のアミノ酸配列であり、
Ｘ8が、トレオニンおよびヒスチジンからなる群から選択され、
Ｘ21が、アスパラギン、リシン、グリシン、アラニンからなる群から選択され、
Ｘ45が、ヒスチジン、チロシンまたはフェニルアラニンである、
請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
インクレチンをインスリンペプチドに結合させる前記直鎖スペーサーが、以下の一般構造を含む、請求項２に記載のコンジュゲート。
【化２】
2017534676.tif 000002
（式中、直鎖スペーサーのシステインアミノ酸は、アミド結合によりインクレチンのカルボキシ末端に連結され、Ｑ1はインスリンＢ鎖のＮ末端である）
【請求項４】
インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列、ならびに
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）およびＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）
からなる群から選択されるＢ鎖配列
を含む、請求項３に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
インクレチンペプチドのＣ末端アミノ酸が、Ｂ鎖のＮ末端アルファアミンで前記直鎖スペーサーによりインスリンペプチドに共有結合により連結し、
前記インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＸ8ＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＸ21（配列番号３）のＡ鎖配列、および
Ｒ22−ＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＸ45（配列番号１５）のＢ鎖配列（式中、
Ｒ22は、結合であるか、またはＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、ＶＮＱ、ＮＱおよびＱからなる群から選択される１〜４個のアミノ酸配列であり、
Ｘ8は、トレオニンおよびヒスチジンからなる群から選択され、
Ｘ21は、アスパラギン、リシン、グリシン、アラニンからなる群から選択され、
Ｘ45は、ヒスチジン、チロシンまたはフェニルアラニンである）
を含み、Ｂ鎖は、ジスルフィド結合によりＡ鎖に連結されており、ならびに
前記インクレチンペプチドが、
配列Ｘ80Ｘ81Ｘ82ＧＴＦＴＳＤＹＳＸ83ＹＬＸ84Ｘ85Ｘ86Ｘ87ＡＸ88Ｘ89ＦＸ90Ｘ91ＷＬＸ92Ｘ93Ｘ94−Ｚ1（配列番号１９２８）
（式中、Ｘ80は、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジンまたはアルファ、アルファ−ジメチルイミジアゾール酢酸（ＤＭＩＡ）Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、またはイミダゾール酢酸であり、
Ｘ81は、Ｓｅｒ、Ｄ−セリン、Ａｌａ、Ｖａｌ、グリシン、Ｎ−メチルセリンまたはアミノイソ酪酸（ＡＩＢ）、Ｎ−メチルアラニンおよびＤ−アラニンであり、
Ｘ82は、ＧｌｎまたはＧｌｕであり、
Ｘ83は、ＬｙｓまたはＩｌｅであり、
Ｘ84は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ85は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＳｅｒまたはＧｌｕであり、
Ｘ86は、ＡｒｇまたはＧｌｎであり、
Ｘ87は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘ88は、アミノイソ酪酸、ＧｌｎまたはＬｙｓであり、
Ｘ89は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ90は、ＶａｌまたはＩｌｅであり、
Ｘ91は、Ａｓｎ、ＧｌｎまたはＡｌａであり、
Ｘ92は、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＭｅｔであり、
Ｘ93は、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ  ＡｓｎまたはＡｌａであり、
Ｘ94は、ＧｌｙまたはＴｈｒであり、ならびにＺ1は、−ＣＯＯＨ、ＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）、ＫＲＮＲＮＮＩＡ（配列番号８２１）およびＫＲＮＲ（配列番号８２２）からなる群から選択される）
を含む、
請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
Ｘ80がＨｉｓまたはＴｙｒであり、
Ｘ86がアミノイソ酪酸であり、
Ｚ1がＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）である、
請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
前記インクレチンペプチドが、
Ｙ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ（ａｉｂ）ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３０）、
Ｈ（ａｉｂ）ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＬＤＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３１）、
Ｈ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３２）、
ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３３）、および
ＹａｉｂＥＧＴＦＩＳＤＹＳＩＹＬＤＲＱＡＡａｉｂＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３４）
からなる群から選択されるペプチドであり、
前記インスリンペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列と、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）
ＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）からなる群から選択されるＢ鎖配列とを含む、
請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
インクレチンをインスリンペプチドに結合させる前記直鎖スペーサーが、式ＩＩの一般構造を含む、請求項５から７までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
【化３】
2017534676.tif 000003
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、Ｈ、およびＣＨ3からなる群から独立に選択され、ｎは０であり、ｍは２である）
【請求項９】
前記インクレチンペプチドが、配列：
Ｙ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ（ａｉｂ）ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３０）、または
Ｈ（ａｉｂ）ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＬＤＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３１）を含み、
前記インスリンペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列と、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）、およびＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）からなる群から選択されるＢ鎖配列とを含む、
請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
請求項１から９までのいずれか１項に記載のコンジュゲートのプロドラッグ誘導体であって、構造：
【化４】
2017534676.tif 000004
の一般構造を有するプロドラッグペプチドエレメントが、インスリンＡ鎖のＮ末端に連結される、プロドラッグ誘導体。
（式中、
Ｒ1は、（Ｃ1−Ｃ6アルキル）ＮＨ−Ｒ9または（Ｃ1−Ｃ6アルキル）ＮＨ−Ｓ1−Ｒ9であり、
Ｒ2は、ＨまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ3−Ｃ8アルケニル、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ4−Ｃ6シクロアルキル）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ5複素環）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ6−Ｃ10アリール）からなる群から選択されるか、またはＲ4およびＲ3はこれらが結合している原子と一緒になって、４、５または６員の複素環を形成し、
Ｒ4およびＲ8は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＯＨ、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＳＨ、（Ｃ2−Ｃ3アルキル）ＳＣＨ3、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨＣ（ＮＨ2+）ＮＨ2、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ2−Ｃ5複素環）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ6−Ｃ10アリール）Ｒ7、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ9ヘテロアリール）、およびＣ1−Ｃ12アルキル（Ｗ1）Ｃ1−Ｃ12アルキルからなる群から独立に選択され、Ｗ1は、Ｎ、ＳおよびＯからなる群から選択されるヘテロ原子であるか、またはＲ4およびＲ8は、これらが結合している原子と一緒になって、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキルを形成し、
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12およびＲ13は、Ｈ、ＣＨ3、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨＣ（ＮＨ2+）ＮＨ2およびＣＨ2（Ｃ3−Ｎ2複素環）からなる群から独立に選択され、
Ｒ5は、ＮＨＲ6またはＯＨであり、
Ｒ6は、Ｈ、またはＣ1−Ｃ8アルキルであり、
Ｒ7は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、および（Ｃ0−Ｃ4アルキル）ＯＨからなる群から選択され、
Ｒ9は、Ｃ20−Ｃ30アシルからなる群から選択され、
Ｓ1は、結合であるか、または１〜６個のアミノ酸からなるスペーサーであり、前記スペーサーは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニンおよびリシンからなる群から選択される１つまたは複数の荷電アミノ酸を含む）
【請求項１１】
インクレチンペプチドが、配列Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＸ6ＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ−Ｒ4（配列番号１９３６）、またはＸ1Ｘ2ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＸ5ＡＫＤＦＶＸ3ＷＬＭＮ−Ｒ4（配列番号１９３７）
を含み、
Ｘ1＝Ｈｉｓ、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジンまたはアルファ、アルファ−ジメチルイミジアゾール酢酸（ＤＭＩＡ）Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、またはイミダゾール酢酸であり、
Ｘ2＝Ｓｅｒ、Ｄ−セリン、Ａｌａ、Ｖａｌ、グリシン、Ｎ−メチルセリンまたはアミノイソ酪酸（ＡＩＢ）、Ｎ−メチルアラニンまたはＤ−アラニンであり、
Ｘ3＝Ａｌａ、ＧｌｎまたはＣｙｓ−ＰＥＧであり、
Ｒ4＝Ｔｈｒ−ＣＯＮＨ2またはＣｙｓ−ＰＥＧまたはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号５１５）、ＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＰＥＧ（配列番号５１６）またはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣＫ（ｒＥＣ１６）Ｃ（配列番号１９３５）であり、
Ｘ5＝ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘ6＝バリン、チロシンまたはＫ（ｒＥＣ１６）Ｃであり、
Ｘ3がＣｙｓ−ＰＥＧである場合、Ｘ4はＣｙｓ−ＰＥＧまたはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＰＥＧ（配列番号５１６）ではなく、Ｘ2＝Ｓｅｒである場合、Ｘ1はＨｉｓではない、
請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
インクレチンペプチドが、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧ（配列番号７００）、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（配列番号７０３）、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＣＷＬＶＫＧＲ（配列番号７１７）ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ（配列番号７０１）またはＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ（配列番号６９９）の配列を含み、配列番号７０３、配列番号７１７、配列番号７０１または配列番号６９９のいずれかが、ＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）またはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１０９６）のアミノ酸配列の末端伸長をさらに含んでもよい、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
２つのインクレチン−インスリンコンジュゲート間で形成される二量体であって、第１および第２のインクレチン−インスリンコンジュゲートが、請求項１から１２までのいずれか１項に記載のコンジュゲートから独立に選択される、二量体。
【請求項１４】
請求項１から９，１１および１２のいずれか１項に記載のコンジュゲート、若しくは、請求項１０に記載の誘導体、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物。
【請求項１５】
糖尿病の処置のための、請求項１４に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８２】
ブタ試験のための手順
動物を、試験の前に１２時間にわたって絶食させた。ポートにアクセスした後、手持ち式血糖値測定器を用いて血糖を測定した。全ての動物について同じ血糖値測定器を使用して、２つの読取り値を取って、値が一貫していることを確保した。動物を、グルコースレベルによって無作為化して、群間での均衡のとれた分布を達成した。それぞれの特定の時点で、約３ｍＬの全血を、抗凝固剤としてのＫ３ＥＤＴＡおよび１００μｇ／ｍＬのアプロチニンを含有する採血管に採取し、採取の直後に氷浴上に置いた。全血試料を、採取の３０分以内に遠心分離し、少なくとも０．５ｍＬの血漿を取得し、インスリンＰＫ（ＥＬＩＳＡに基づくアッセイ）などの将来の分析のために保存した。３ｍＬ全血試料の小部分（採血管に入れる前）を使用して、採取の直後に手持ち式の血糖値測定器を使用して血糖をチェックした。実験の結果を、図３６および図３７に提供する。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕インクレチンペプチド、および
インスリンアゴニストペプチド
を含むインクレチン−インスリンコンジュゲートであって、インクレチンペプチドが５〜１０個の原子の直鎖スペーサーによりインスリンペプチドに連結され、スペーサーが、スペーサー直鎖の主鎖内にジスルフィド、チオエーテル、チオエーテルスルホキシド、オキシム、ヒドラゾン、セレン、ジセレン、アルキル、アルケン結合を含み、前記直鎖スペーサーが、インクレチンペプチドのカルボキシ末端を、Ｂ鎖のＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ２２、Ｂ２８もしくはＢ２９位のアミノ酸の側鎖、Ｂ鎖のＮ末端アルファアミン、または一本鎖インスリン類似体のＡ鎖とＢ鎖とを連結する連結部分の任意の位置のアミノ酸の側鎖に結合させる、インクレチン−インスリンコンジュゲート。
〔２〕インクレチンペプチドのカルボキシ末端が、インスリンペプチドのＢ鎖のアミノ末端に共有結合により連結している、前記〔１〕に記載のコンジュゲート。
〔３〕直鎖スペーサーが、式Ｉの一般構造を含む、前記〔１〕または〔２〕に記載のコンジュゲート。
【化１】
2017534676.tif 000005
（式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、Ｈ、およびＣ1−Ｃ3アルキルからなる群から独立に選択され、
Ｙは、Ｃ、Ｓ、Ｓｅ、またはＳ＝Ｏであり、
Ｚは、Ｃ、Ｓｅ、Ｓ、Ｓ（Ｃ1−Ｃ3）（Ｃ5−Ｃ6アリール）であり、またはＹと組み合わせたＺは、−Ｏ−Ｎ＝、もしくは１，２，３トリアゾールであり、
ｎは、０または１であり、
ｍは、１、２または３であるが、但し、ＹがＳ＝Ｏである場合、ＺはＣである）
〔４〕Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4が、ＨおよびＣＨからなる群から独立に選択され、
ＹがＣ、Ｓ、またはＳｅであり、
ＺがＳｅまたはＳであり、
ｎが０または１であり、
ｍが１、２または３である、
前記〔３〕に記載のコンジュゲート。
〔５〕直鎖スペーサーが、式ＩＩの一般構造を含む、前記〔４〕に記載のコンジュゲート。
【化２】
2017534676.tif 000006
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、ＨおよびＣＨ3からなる群から独立に選択され、ｎは０または１であり、ならびにｍは１、２または３である）
〔６〕Ｒ2およびＲ3がＨであり、
Ｒ1およびＲ4が独立にＨまたはＣＨ3であり、
ｎが０または１であり、
ｍが１または２である、前記〔５〕に記載のコンジュゲート。
〔７〕直鎖スペーサーが、式ＩＶの一般構造を含む、前記〔１〕または〔２〕に記載のコンジュゲート。
【化３】
2017534676.tif 000007
（式中、Ｒ3はＨまたはＣＨ3である）
〔８〕Ｒ3がＨである、前記〔７〕に記載のコンジュゲート。
〔９〕インスリンペプチドがＢ鎖とＡ鎖とを含む二本鎖インスリン類似体であり、前記Ｂ鎖がジスルフィド結合により前記Ａ鎖に連結される、前記〔１〕から〔８〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔１０〕インスリンペプチドが一本鎖インスリン類似体である、前記〔１〕から〔８〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔１１〕インクレチンペプチドが、
Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＸ10ＳＩＹＬＤＫＱＡＡＸ20ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号２０３７）および
Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＩＹＬＤＫＱＡＡＸ20ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＸ40（配列番号２０３８）
（式中、
Ｘ1は、ＨｉｓまたはＴｙｒであり、
Ｘ2は、アミノイソ酪酸であり、
Ｘ10は、ガンマＧｌｕリンカーを介してもよいＣ16−Ｃ20アルキル基でアシル化されたＬｙｓであり、
Ｘ20は、アミノイソ酪酸であり、
Ｘ40は、ガンマＧｌｕリンカーを介してもよいＣ16−Ｃ20アルキル基でアシル化されたＬｙｓである）
からなる群から選択される、前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔１２〕インクレチンペプチドが、
（ｉ）１〜３個のアミノ酸改変を有するアミノ酸配列：
Ｘ１−Ｘ２−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｚ1（配列番号８３９）
であって、
Ｘ１および／またはＸ２が、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断に対するインクレチンペプチドの感受性を低減する非天然（配列番号７０１と比較して）アミノ酸であり、
Ｚ1が、Ａｓｎ−Ｔｈｒ−ＣＯＯＨ、およびＹ−ＣＯＯＨからなる群から選択され、Ｙが、１〜２個のアミノ酸であり、さらに、
（１）ラクタム架橋が、ｉ位のアミノ酸とｉ＋４位のアミノ酸の側鎖を接続し、ｉが１２、１６、２０もしくは２４であり、または
（２）インクレチンペプチドの１６、２０、２１、および２４位のアミノ酸のうちの１、２、３個、もしくは全部が、α，α−二置換アミノ酸で置換されており、
前記インクレチンペプチドがグルカゴンアゴニスト活性を有する、アミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号７０１のアミノ酸配列であって、
２８位のＡｓｎの、荷電アミノ酸での置換、
２８位のＡｓｎの、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、システイン酸、およびホモシステイン酸からなる群から選択される荷電アミノ酸での置換、
２８位の、Ａｓｎ、Ａｓｐ、またはＧｌｕでの置換、
２８位の、Ｇｌｕでの置換、
２９位のＴｈｒの、荷電アミノ酸での置換、
２９位のＴｈｒの、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、システイン酸、およびホモシステイン酸からなる群から選択される荷電アミノ酸での置換、
２９位の、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、またはＬｙｓでの置換、
２９位の、Ｇｌｕでの置換、
２９位の後への、１〜３個の荷電アミノ酸の挿入、
２９位の後への、ＧｌｕまたはＬｙｓの挿入、
２９位の後への、Ｇｌｙ−ＬｙｓもしくはＬｙｓ−Ｌｙｓの挿入；またはこれらの組合せ
からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸改変、
ならびにグループＡもしくはグループＢ、またはこれらの組合せから選択される少なくとも１つのアミノ酸改変を含むように改変され、
グループＡは、１６位のＳｅｒの、ＴｈｒまたはＡＩＢでの置換からなる群から選択されるアミノ酸改変であり、
グループＢは、
１位のＨｉｓの、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断に対するインクレチンペプチドの感受性を低減する非天然アミノ酸での置換、
２位のＳｅｒの、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）による切断に対するインクレチンペプチドの感受性を低減する非天然アミノ酸での置換、
１０位のＴｙｒの、ＰｈｅもしくはＶａｌでの置換、
１２位のＬｙｓの、Ａｒｇでの置換、
２０位のＧｌｎの、ＡｌａもしくはＡＩＢでの置換、
２１位のＡｓｐの、Ｇｌｕでの置換、
２４位のＧｌｎの、ＡｌａもしくはＡＩＢでの置換、
２７位のＭｅｔの、ＬｅｕもしくはＮｌｅでの置換、
またはこれらの組合せ
からなる群から選択されるアミノ酸改変であり、
前記インクレチンペプチドが、グルカゴンアゴニスト活性を有する、アミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号７０１のインクレチンペプチドであって、
（ａ）ＧＩＰアゴニスト活性を付与する１位のアミノ酸改変、
（ｂ）（１）ｉ位とｉ＋４位とのアミノ酸側鎖間の、もしくはｊ位とｊ＋３位とのアミノ酸側鎖間のラクタム架橋（ここで、ｉは１２、１３、１６、１７、２０もしくは２４であり、ｊは１７である）、または
（２）類似体の１６、２０、２１、および２４位のアミノ酸のうちの１、２、３個、もしくは全部の、α，α−二置換アミノ酸での置換、
（ｃ）２７、２８および２９位のうちの１、２個または全部のアミノ酸改変、ならびに
（ｄ）１〜６個のさらなるアミノ酸改変
を含むように改変され、ＧＩＰ受容体活性化に関する類似体のＥＣ５０が約１０ｎＭ以下である、インクレチンペプチド、
（ｉｖ）配列番号１の配列であって、
（ｉ）Ｃ4−Ｃ30脂肪酸でアシル化またはアルキル化された１０位のアミノ酸、および
（ｉｉ）１６位のＡＩＢ
を含む、配列、
（ｖ）１６、２０、２１、および／または２４位の、ＡＩＢでの１つまたは複数のアミノ酸置換を含む１０個以下のアミノ酸改変、ならびにジペプチジルペプチダーゼＩＶによる切断に対する感受性の低減をもたらす１位および／または２位のアミノ酸改変が配列番号７０１と異なるアミノ酸であって、前記インクレチンペプチドが、ＧＬＰ−１受容体の天然ＧＬＰ−１の活性の少なくとも２０％を表す、アミノ酸、
（ｖｉ）２９位のアミノ酸のＣ末端にＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号９５）またはＸＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号９６）のアミノ酸配列（式中、Ｘが任意のアミノ酸であり、グリシンであってもよい）をさらに含む、（ｉ）〜（ｖ）のいずれかに記載の類似体、ならびに
（ｖｉｉ）以下のアミノ酸改変：１位のＴｙｒ、２位のＡＩＢ、１０位のＬｙｓ（ここで、Ｌｙｓはγ−Ｇｌｕ−γ−ＧｌｕジペプチドスペーサーによりＣ１６脂肪アシル基に共有結合する）、１２位のＩｌｅ、１６位のＬｙｓ、１７位のＧｌｎ、１８位のＡｌａ、２０位のＡＩＢ、２１位のＧｌｕ、２４位のＡｓｎ、２７位のＬｅｕ、２８位のＡｌａ、２９位のＧｌｙを有する配列番号１のアミノ酸、次いで、２９位のアミノ酸への配列番号９５のアミノ酸のＣ末端、およびＣ末端のアルファカルボキシレートの代わりにＣ末端アミド
を含む、前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔１３〕前記インスリンペプチドが、Ａ鎖とＢ鎖とを含み、前記Ａ鎖が、配列ＧＩＶＸ4Ｘ5ＣＣＸ8Ｘ9Ｘ10ＣＸ12ＬＸ14Ｘ15ＬＸ17Ｘ18ＹＣＸ21−Ｒ13（配列番号１９）を含み、前記Ｂ鎖が、配列：Ｒ22−Ｘ25ＬＣＧＸ29Ｘ30ＬＶＸ33Ｘ34ＬＹＬＶＣＧＸ41Ｘ42ＧＦＸ45（配列番号２０）を含み、
式中、
Ｘ4が、グルタミン酸またはアスパラギン酸であり、
Ｘ5が、グルタミンまたはグルタミン酸であり、
Ｘ8が、ヒスチジン、トレオニンまたはフェニルアラニンであり、
Ｘ9が、セリン、アルギニン、リシン、オルニチンまたはアラニンであり、
Ｘ10が、イソロイシンまたはセリンであり、
Ｘ12が、セリンまたはアスパラギン酸であり、
Ｘ14が、チロシン、アルギニン、リシン、オルニチンまたはアラニンであり、
Ｘ15が、グルタミン、グルタミン酸、アルギニン、アラニン、リシン、オルニチンまたはロイシンであり、
Ｘ17が、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、リシン、オルニチンまたはグルタミンであり、
Ｘ18が、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはトレオニンであり、
Ｘ21が、アラニン、グリシン、セリン、バリン、トレオニン、イソロイシン、ロイシン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、およびメチオニンからなる群から選択され、
Ｘ25が、ヒスチジンまたはトレオニンであり、
Ｘ29が、アラニン、グリシンおよびセリンからなる群から選択され、
Ｘ30が、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸およびシステイン酸からなる群から選択され、
Ｘ33が、アスパラギン酸およびグルタミン酸からなる群から選択され、
Ｘ34が、アラニンおよびトレオニンからなる群から選択され、
Ｘ41が、グルタミン酸、アスパラギン酸またはアスパラギンからなる群から選択され、  Ｘ42が、アラニン、オルニチン、リシンおよびアルギニンからなる群から選択され、
Ｘ45が、チロシンまたはフェニルアラニンであり、
Ｒ22が、ＡＹＲＰＳＥ（配列番号１４）、ＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、ＰＧＰＥ（配列番号１１）、グリシン−プロリン−グルタミン酸トリペプチド、バリン−アスパラギン−グルタミントリペプチド、プロリン−グルタミン酸ジペプチド、アスパラギン−グルタミンジペプチド、グルタミン、グルタミン酸およびＮ末端アミンからなる群から選択され、
Ｒ13が、ＣＯＯＨまたはＣＯＮＨ2である、
前記〔１２〕に記載のコンジュゲート。
〔１４〕前記Ａ鎖が、配列ＧＩＶＥＱＣＣＸ8Ｘ9ＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＸ21−Ｒ13（配列番号７３）を含み、前記Ｂ鎖が、配列Ｒ22−Ｘ25ＬＣＧＸ29Ｘ30ＬＶＸ33Ｘ34ＬＹＬＶＣＧＸ41Ｘ42ＧＦＸ45（配列番号２０）を含み、
Ｘ8が、ヒスチジンまたはトレオニンであり、
Ｘ9が、セリン、リシン、またはアラニンであり、
Ｘ21が、アラニン、グリシンまたはアスパラギンであり、
Ｘ25が、ヒスチジンまたはトレオニンであり、
Ｘ29が、アラニン、グリシンおよびセリンからなる群から選択され、
Ｘ30が、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸およびシステイン酸からなる群から選択され、
Ｘ33が、アスパラギン酸およびグルタミン酸からなる群から選択され、
Ｘ34が、アラニンおよびトレオニンからなる群から選択され、
Ｘ41が、グルタミン酸、アスパラギン酸またはアスパラギンからなる群から選択され、  Ｘ42が、アラニン、オルニチン、リシンおよびアルギニンからなる群から選択され、
Ｘ45が、チロシンまたはフェニルアラニンであり、
Ｒ22が、ＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、バリン−アスパラギン−グルタミントリペプチド、アスパラギン−グルタミンジペプチド、グルタミンおよびＮ末端アミンからなる群から選択され、
Ｒ13が、ＣＯＯＨまたはＣＯＮＨ2である、
前記〔１３〕に記載のコンジュゲート。
〔１５〕前記Ｂ鎖が、配列Ｒ22−Ｘ25ＬＣＧＸ29Ｘ30ＬＶＸ33Ｘ34ＬＹＬＶＣＧＸ41Ｘ42ＧＦＸ45ＹＴ−Ｚ1−Ｂ1（配列番号１４２）を含み、
Ｚ1が、アスパラギン酸−リシン、リシン−プロリン、およびプロリン−リシンからなる群から選択されるジペプチドであり、
Ｂ1が、トレオニン、アラニンまたはトレオニン−アルギニン−アルギニントリペプチドからなる群から選択される、
前記〔１３〕に記載のコンジュゲート。
〔１６〕前記インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＸ8ＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＸ21（配列番号３）のＡ鎖配列、および  Ｒ22−ＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＸ45（配列番号１５）のＢ鎖配列
を含み、
Ｂ鎖が、ジスルフィド結合によりＡ鎖に連結され、
Ｒ22が、結合であるか、またはＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、ＶＮＱ、ＮＱおよびＱからなる群から選択される１〜４個のアミノ酸配列であり、
Ｘ8が、トレオニンおよびヒスチジンからなる群から選択され、
Ｘ21が、アスパラギン、リシン、グリシン、アラニンからなる群から選択され、
Ｘ45が、ヒスチジン、チロシンまたはフェニルアラニンである、
前記〔１１〕に記載のコンジュゲート。
〔１７〕インクレチンをインスリンペプチドに結合させる前記直鎖スペーサーが、以下の一般構造を含む、前記〔１６〕に記載のコンジュゲート。
【化４】
2017534676.tif 000008
（式中、直鎖スペーサーのシステインアミノ酸は、アミド結合によりインクレチンのカルボキシ末端に連結され、Ｑ1はインスリンＢ鎖のＮ末端である）
〔１８〕インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列、ならびに
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）およびＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）
からなる群から選択されるＢ鎖配列
を含む、前記〔１７〕に記載のコンジュゲート。
〔１９〕インクレチンペプチドのＣ末端アミノ酸が、Ｂ鎖のＮ末端アルファアミンで前記直鎖スペーサーによりインスリンペプチドに共有結合により連結し、
前記インスリンペプチドが、
ＧＩＶＥＱＣＣＸ8ＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＸ21（配列番号３）のＡ鎖配列、および
Ｒ22−ＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＸ45（配列番号１５）のＢ鎖配列（式中、
Ｒ22は、結合であるか、またはＦＶＮＱ（配列番号１２）、ＦＶＫＱ（配列番号８）、ＶＮＱ、ＮＱおよびＱからなる群から選択される１〜４個のアミノ酸配列であり、
Ｘ8は、トレオニンおよびヒスチジンからなる群から選択され、
Ｘ21は、アスパラギン、リシン、グリシン、アラニンからなる群から選択され、
Ｘ45は、ヒスチジン、チロシンまたはフェニルアラニンである）
を含み、Ｂ鎖は、ジスルフィド結合によりＡ鎖に連結されており、ならびに
前記インクレチンペプチドが、
配列Ｘ80Ｘ81Ｘ82ＧＴＦＴＳＤＹＳＸ83ＹＬＸ84Ｘ85Ｘ86Ｘ87ＡＸ88Ｘ89ＦＸ90Ｘ91ＷＬＸ92Ｘ93Ｘ94−Ｚ1（配列番号１９２８）
（式中、Ｘ80は、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジンまたはアルファ、アルファ−ジメチルイミジアゾール酢酸（ＤＭＩＡ）Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、またはイミダゾール酢酸であり、
Ｘ81は、Ｓｅｒ、Ｄ−セリン、Ａｌａ、Ｖａｌ、グリシン、Ｎ−メチルセリンまたはアミノイソ酪酸（ＡＩＢ）、Ｎ−メチルアラニンおよびＤ−アラニンであり、
Ｘ82は、ＧｌｎまたはＧｌｕであり、
Ｘ83は、ＬｙｓまたはＩｌｅであり、
Ｘ84は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ85は、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＳｅｒまたはＧｌｕであり、
Ｘ86は、ＡｒｇまたはＧｌｎであり、
Ｘ87は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘ88は、アミノイソ酪酸、ＧｌｎまたはＬｙｓであり、
Ｘ89は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘ90は、ＶａｌまたはＩｌｅであり、
Ｘ91は、Ａｓｎ、ＧｌｎまたはＡｌａであり、
Ｘ92は、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＭｅｔであり、
Ｘ93は、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ  ＡｓｎまたはＡｌａであり、
Ｘ94は、ＧｌｙまたはＴｈｒであり、ならびにＺ1は、−ＣＯＯＨ、ＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）、ＫＲＮＲＮＮＩＡ（配列番号８２１）およびＫＲＮＲ（配列番号８２２）からなる群から選択される）
を含む、
前記〔１〕から〔８〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔２０〕Ｘ80がＨｉｓまたはＴｙｒであり、
Ｘ86がアミノイソ酪酸であり、
Ｚ1がＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）である、
前記〔１９〕に記載のコンジュゲート。
〔２１〕前記インクレチンペプチドが、
Ｙ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ（ａｉｂ）ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号７５６）、
Ｈ（ａｉｂ）ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＬＤＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３１）、
Ｈ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３２）、
ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３３）、および
ＹａｉｂＥＧＴＦＩＳＤＹＳＩＹＬＤＲＱＡＡａｉｂＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３４）
からなる群から選択されるペプチドであり、
インクレチンをインスリンペプチドに結合させる前記直鎖スペーサーが、式ＩＩ
【化５】
2017534676.tif 000009
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、Ｈ、およびＣＨ3からなる群から独立に選択され、ｎは０または１であり、ｍは１、２または３である）
の一般構造を含み、
前記インスリンペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列と、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）
ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）
ＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）からなる群から選択されるＢ鎖配列とを含む、
前記〔１９〕に記載のコンジュゲート。
〔２２〕インクレチンをインスリンペプチドに結合させる前記直鎖スペーサーが、式ＩＩの一般構造を含む、前記〔１９〕から〔２１〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
【化６】
2017534676.tif 000010
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、Ｈ、およびＣＨ3からなる群から独立に選択され、ｎは０であり、ｍは２である）
〔２３〕前記インクレチンペプチドが、配列：
Ｙ（ａｉｂ）ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ（ａｉｂ）ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号７５６）、または
Ｈ（ａｉｂ）ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＡＡＱＤＦＶＱＷＬＬＤＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１９３１）を含み、
前記インスリンペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ−Ｒ13（配列番号１）のＡ鎖配列と、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴ（配列番号９）、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＤＫＴ（配列番号５）、およびＦＶＫＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＥＫＴ（配列番号６）からなる群から選択されるＢ鎖配列とを含む、
前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔２４〕ｉ）インクレチンペプチドの１０、１６、２０、３０および４０位から選択される位置、またはインスリンペプチドのＢ２４、Ｂ２８もしくはＢ２９位の１個または２個のアミノ酸の側鎖が、非天然アルキルまたはアシル基をさらに含む、あるいは
ｉｉ）インクレチンペプチドの２４、３０もしくは４０位から選択される位置、またはインスリンペプチドのＢ２４、Ｂ２８もしくはＢ２９位の１個または２個のアミノ酸の側鎖が、親水性部分に連結され、前記親水性部分がポリエチレングリコールであってもよい、あるいは
ｉｉｉ）ｉ）とｉｉ）との組合せ
である、前記〔１〕から〔１０〕まで、１２から１５まで、および１９から２３までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔２５〕ｉ）１０または４０位のアミノ酸の側鎖が、非天然アルキルまたはアシル基をさらに含むか、あるいは
ｉｉ）インクレチンペプチドの２４もしくは４０位、またはインスリンペプチドのＢ２８もしくはＢ２９位のアミノ酸の側鎖が、親水性部分に連結され、前記親水性部分がポリエチレングリコールであってもよいか、あるいは
ｉｉｉ）ｉ）とｉｉ）との組合せ
である、前記〔２４〕に記載のコンジュゲート。
〔２６〕アシル基またはアルキル基が、インクレチンペプチドの１０位のアミノ酸の側鎖に連結される、前記〔２５〕に記載のコンジュゲート。
〔２７〕インクレチンペプチドが、式Ｉ
【化７】
2017534676.tif 000011
（式中、ｎ＝１〜４である）
のアミノ酸による１０位でのアミノ酸置換を含み、式Ｉのアミノ酸の側鎖がアシル基またはアルキル基に共有結合により連結している、前記〔２６〕に記載のコンジュゲート。
〔２８〕前記〔１〕から〔２７〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲートのプロドラッグ誘導体であって、構造：
【化８】
2017534676.tif 000012
の一般構造を有するプロドラッグペプチドエレメントが、インスリンＡ鎖のＮ末端に連結される、プロドラッグ誘導体。
（式中、
Ｒ1は、（Ｃ1−Ｃ6アルキル）ＮＨ−Ｒ9または（Ｃ1−Ｃ6アルキル）ＮＨ−Ｓ1−Ｒ9であり、
Ｒ2は、ＨまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ3−Ｃ8アルケニル、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ4−Ｃ6シクロアルキル）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ5複素環）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ6−Ｃ10アリール）からなる群から選択されるか、またはＲ4およびＲ3はこれらが結合している原子と一緒になって、４、５または６員の複素環を形成し、
Ｒ4およびＲ8は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＯＨ、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＳＨ、（Ｃ2−Ｃ3アルキル）ＳＣＨ3、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨＣ（ＮＨ2+）ＮＨ2、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ2−Ｃ5複素環）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ6−Ｃ10アリール）Ｒ7、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ9ヘテロアリール）、およびＣ1−Ｃ12アルキル（Ｗ1）Ｃ1−Ｃ12アルキルからなる群から独立に選択され、Ｗ1は、Ｎ、ＳおよびＯからなる群から選択されるヘテロ原子であるか、またはＲ4およびＲ8は、これらが結合している原子と一緒になって、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキルを形成し、
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12およびＲ13は、Ｈ、ＣＨ3、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＣＯＯＨ、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨＣ（ＮＨ2+）ＮＨ2およびＣＨ2（Ｃ3−Ｎ2複素環）からなる群から独立に選択され、
Ｒ5は、ＮＨＲ6またはＯＨであり、
Ｒ6は、Ｈ、またはＣ1−Ｃ8アルキルであり、
Ｒ7は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ2−Ｃ18アルケニル、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、および（Ｃ0−Ｃ4アルキル）ＯＨからなる群から選択され、
Ｒ9は、Ｃ20−Ｃ30アシルからなる群から選択され、
Ｓ1は、結合であるか、または１〜６個のアミノ酸からなるスペーサーであり、前記スペーサーは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニンおよびリシンからなる群から選択される１つまたは複数の荷電アミノ酸を含む）
〔２９〕インスリンペプチドが一本鎖インスリンであり、Ｂ鎖とＡ鎖とを結合させるペプチドリンカーが、ＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＲ（配列番号１９２２）、ＳＳＳＳＲＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＫ（配列番号１９２３）、ＧＡＧＳＳＳＸ57Ｘ58（配列番号７６）、ＧＹＧＳＳＳＲＲ（配列番号６１）およびＧＹＧＳＳＳＸ57Ｘ58ＡＰＱＴ（配列番号７７）からなる群から選択され、
Ｘ57およびＸ58が独立にアルギニン、リシンまたはオルニチンである、
前記〔１〕から〔２７〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３０〕ペプチドリンカーが、ＧＹＧＳＳＳＲＲ（配列番号６１）およびＧＡＧＳＳＳＲＲ（配列番号１９２５）からなる群から選択される、前記〔２９〕に記載のコンジュゲート。
〔３１〕インクレチンペプチドが、配列Ｘ1Ｘ2ＥＧＴＦＴＳＤＸ6ＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ−Ｒ4（配列番号１９３６）、またはＸ1Ｘ2ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＸ5ＡＫＤＦＶＸ3ＷＬＭＮ−Ｒ4（配列番号１９３７）
を含み、
Ｘ1＝Ｈｉｓ、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジンまたはアルファ、アルファ−ジメチルイミジアゾール酢酸（ＤＭＩＡ）Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、またはイミダゾール酢酸であり、
Ｘ2＝Ｓｅｒ、Ｄ−セリン、Ａｌａ、Ｖａｌ、グリシン、Ｎ−メチルセリンまたはアミノイソ酪酸（ＡＩＢ）、Ｎ−メチルアラニンまたはＤ−アラニンであり、
Ｘ3＝Ａｌａ、ＧｌｎまたはＣｙｓ−ＰＥＧであり、
Ｒ4＝Ｔｈｒ−ＣＯＮＨ2またはＣｙｓ−ＰＥＧまたはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号５１５）、ＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＰＥＧ（配列番号５１６）またはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣＫ（ｒＥＣ１６）Ｃ（配列番号１９３５）であり、
Ｘ5＝ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘ6＝バリン、チロシンまたはＫ（ｒＥＣ１６）Ｃであり、
Ｘ3がＣｙｓ−ＰＥＧである場合、Ｘ4はＣｙｓ−ＰＥＧまたはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＰＥＧ（配列番号５１６）ではなく、Ｘ2＝Ｓｅｒである場合、Ｘ1はＨｉｓではない、
前記〔１〕から〔１１〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３２〕前記インクレチンペプチドのカルボキシ末端に連結された、配列番号７８、７９および８０からなる群から選択されるペプチドをさらに含む、前記〔１〕から〔３１〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３３〕インクレチンペプチドが、ＧＩＰアゴニスト活性を有するグルカゴンの類似体（配列番号７０１）を含み、前記類似体が、以下の改変：
（ａ）ＧＩＰアゴニスト活性を付与する１位でのアミノ酸改変であって、１位のアミノ酸がイミダゾール側鎖を欠くアミノ酸であってもよい、アミノ酸改変、
（ｂ）１６位のＳｅｒの、式ＩＶのアミノ酸でのアミノ酸置換
【化９】
2017534676.tif 000013
［式ＩＶ］
（式中、ｎは１〜７であり、Ｒ1およびＲ2はそれぞれ、Ｈ、Ｃ1−Ｃ18アルキル、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＯＨ、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＮＨ2、（Ｃ1−Ｃ18アルキル）ＳＨ、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ6）シクロアルキル、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ2−Ｃ5複素環）、（Ｃ0−Ｃ4アルキル）（Ｃ6−Ｃ10アリール）Ｒ7、および（Ｃ1−Ｃ4アルキル）（Ｃ3−Ｃ9ヘテロアリール）からなる群から独立に選択され、Ｒ7はＨまたはＯＨであり、式ＩＶのアミノ酸の側鎖は遊離アミノ基を含み、式ＩＶのアミノ酸は、ホモＬｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、または２，４−ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）であってもよい）
（ｃ）類似体の１６、２０、２１および２４位のアミノ酸のうちの１、２、３個、または全部の、α，α−二置換アミノ酸での置換、
（ｄ）２７、２８および２９位のうちの１、２個または全部におけるアミノ酸改変、ならびに
（ｅ）グルカゴン配列（配列番号７０１）と比較して１〜９個のさらなるアミノ酸改変のうちの１つまたは複数を含み、
ＧＩＰ受容体活性化に関する類似体のＥＣ５０が約１０ｎＭ以下である、
前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３４〕インクレチンペプチドが、以下の改変：（ａ）１位のアミノ酸が、大きい芳香族アミノ酸であり、Ｔｙｒであってもよいこと、および（ｂ）（ｉ）２７位のＭｅｔが、大きい脂肪族アミノ酸で置換されており、Ｌｅｕで置換されていてもよいこと、（ｉｉ）２８位のＡｓｎが、小さい脂肪族アミノ酸で置換されており、Ａｌａで置換されていてもよいこと、もしくは（ｉｉｉ）２９位のＴｈｒが、小さい脂肪族アミノ酸で置換されており、Ｇｌｙで置換されていてもよいこと、を含むか、または類似体が（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の組合せを含む、前記〔３３〕に記載のコンジュゲート。
〔３５〕インクレチンペプチドが、２９位のアミノ酸に対してＣ末端に位置する位置で前記ペプチドに連結された、ＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）またはＸＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号９６）のアミノ酸配列（式中、Ｘが任意のアミノ酸であり、Ｇｌｙであってもよい）をさらに含む、前記〔３３〕または〔３４〕に記載のコンジュゲート。
〔３６〕インクレチンペプチドが、以下の改変：
（ａ）Ｄ−Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｎ−メチル−Ｓｅｒ、ＡＩＢ、Ｖａｌ、またはα−アミノ−Ｎ−酪酸で置換された２位のＳｅｒ、
（ｂ）Ｇｌｕで置換された３位のＧｌｎ、
（ｃ）１０位のアミノ酸Ｔｙｒの、アシル基またはアルキル基に共有結合により連結している側鎖を含む、式Ｉ
【化１０】
2017534676.tif 000014
（式中、ｎ＝１〜４である）
のアミノ酸であってもよい、アミノ酸での置換、
（ｄ）類似体のＣ末端アミノ酸でアシル基またはアルキル基に共有結合により連結している側鎖を含む、式Ｉのアミノ酸であってもよい、アミノ酸の付加、
（ｅ）Ｉｌｅで置換された１２位のＬｙｓ、
（ｆ）Ｇｌｎで置換された１７位のＡｒｇ、
（ｇ）Ａｌａで置換された１８位のＡｒｇ、
（ｈ）Ｇｌｕで置換された２１位のＡｓｐ、
（ｉ）Ａｓｎで置換された２４位のＧｌｎ、および
（ｊ）Ｃ末端アミノ酸のカルボン酸の、アミドであってもよい電荷中性基による置き換え
のうちの１つまたは複数をさらに含む、前記〔３３〕から〔３５〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３７〕インクレチンペプチドが、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧ（配列番号７００）、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（配列番号７０３）、ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＣＷＬＶＫＧＲ（配列番号７１７）ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ（配列番号７０１）またはＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ（配列番号６９９）の配列を含み、配列番号７０３、配列番号７１７、配列番号７０１または配列番号６９９のいずれかが、ＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号８２０）またはＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号１０９６）のアミノ酸配列の末端伸長をさらに含んでもよい、前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート。
〔３８〕構造Ｕ−Ｊをさらに含み、
Ｕがアミノ酸またはヒドロキシ酸であり、
Ｊが、Ｊのカルボキシル部分とコンジュゲートのアミンとの間のアミド結合を介して前記コンジュゲートに連結されたＮ−アルキル化アミノ酸であり、コンジュゲートからのＵ−Ｊの化学切断半減期（ｔ1/2）が、生理的条件下、ＰＢＳ中で少なくとも約１時間〜約１週間である、
前記〔１〕から〔２７〕まで、または２９から３４までのいずれか１項に記載のコンジュゲートの誘導体。
〔３９〕Ｕ−Ｊのアミノ酸側鎖に共有結合により連結しているアシル基またはアルキル基をさらに含む、前記〔３８〕に記載のコンジュゲート。
〔４０〕前記アシル基またはアルキル基が、天然グルカゴン（配列番号７０１）の１０位に対応するインクレチンペプチドの位置、またはインスリンペプチドのＢ１、Ｂ３、Ｂ２８、もしくはＢ２９から選択される１つもしくは複数の位置、または構造Ｕ−Ｊのアミノ酸の側鎖に共有結合により連結している、前記〔３９〕に記載のコンジュゲート。
〔４１〕２つのインクレチン−インスリンコンジュゲート間で形成される二量体であって、第１および第２のインクレチン−インスリンコンジュゲートが、前記〔１〕から〔４０〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲートから独立に選択される、二量体。
〔４２〕前記〔１〕から〔４１〕までのいずれか１項に記載のコンジュゲート、または薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
〔４３〕前記〔４２〕に記載の医薬組成物、および前記組成物を患者に投与するためのデバイスを含む、インスリンアゴニスト／インクレチンコンジュゲートを、それを必要とする患者に投与するためのキット。
〔４４〕糖尿病の処置のための、前記〔４２〕に記載の組成物、または薬学的に許容されるその塩のコンジュゲートの使用。