【手続補正書】
【提出日】平成29年11月30日(2017.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
白斑の少なくとも１つの症状を治療または改善するための、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩をを含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記症状が、光過敏性の増大、ジニトロクロロベンゼンに対する接触感受性応答の低下、皮膚、粘膜（口及び鼻の内側を覆う組織）、網膜、または生殖器の色素脱失、及び頭毛、睫毛、眉、または髭の早期白色化または灰色化からなる群より選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
白斑が、自己免疫性甲状腺疾患（橋本甲状腺炎及びグレーブス病）、悪性貧血、リウマチ性関節炎、乾癬、Ｉ型糖尿病、アジソン病、セリアック病、炎症性腸疾患、及び全身性エリテマトーデスのうちの１つ以上を伴う、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
白斑が、少なくとも１つの遺伝子突然変異を伴う、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ペプチドが、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内投与用に製剤化されている、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
さらに、局所ステロイドクリーム、モノベンゾン、ソラレン光化学療法剤、、抗生物質、ホルモン、抗新生物剤、免疫調節剤、皮膚病薬、抗血栓剤、及び抗貧血剤かなる群より選択される１以上の治療剤を含み、前記１以上の治療剤が、ペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩と併用して、逐次的に、別個に、または同時に投与するために製剤化されている、請求項１記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４８】
別の実施形態において、白斑療法の有効性を決定するためのスクリーニングアッセイは、当該技術分野で既知の任意の白斑マウスモデルからのマウスを少なくとも２つの群に分けること、少なくとも１つのマウス群を白斑療法で処置すること（即ち、有効性が決定される白斑療法）、少なくとも１つのマウス群を少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチド、例えば、Ｄ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2で処置すること、少なくとも１つのマウス群をビヒクル対照で処置すること（即ち、未処置のマウス）、及びマウスに対する白斑療法及び芳香族カチオン性処置の治療効果を比較することの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、比較される治療効果は、マウスの毛皮の白色斑点の減少、マウスのメラニン細胞内のミトコンドリアのミトコンドリア膜電位の増加、マウスのメラニン細胞内のＡＴＰ産生の増加、マウスのメラニン細胞内の細胞生存または増殖の増加、及びマウスのメラニン細胞によるメラニン産生の増加を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、白斑療法は、白斑療法でのマウスの処置がＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2でのマウスの処置より大きいもしくはそれに等しい治療効果を有する場合、効果的と見なされる。
本発明の具体的実施態様をいくつか以下に例示する。
〔１〕メラニン細胞変性を引き起こす生化学的または代謝経路を崩壊することにより哺乳類細胞を処置するための方法であって、前記細胞を治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩と接触させ、それによりメラニン細胞変性を処置または改善することを含む、前記方法。
〔２〕前記哺乳類細胞が、インサイチュまたはエクスビボのいずれかである、前記〔１〕に記載の前記方法。
〔３〕前記メラニン細胞変性が、ビオプテリン、フェノール、またはカテコールの代謝異常に起因する、前記〔１〕に記載の前記方法。
〔４〕前記メラニン細胞変性が、４−ＴＢＰなどのフェノール／カテコール誘導体への曝露によって引き起こされるストレスに起因する、前記〔１〕に記載の前記方法。
〔５〕前記メラニン細胞変性が、自己免疫反応に起因する、前記〔１〕に記載の前記方法。
〔６〕前記メラニン細胞変性が、少なくとも１つの遺伝子突然変異を伴う、前記〔１〕に記載の前記方法。
〔７〕前記遺伝子突然変異が、ＮＬＲＰ１、ＴＹＲ、ＨＬＡクラスＩ、ＨＬＡクラスＩＩ、ＨＬＡクラスＩＩＩ、ＰＴＰＮ２２、ＸＢＰ１、ＩＬ２ＲＡ、ＬＰＰ、ＲＥＲＥ、ＦＯＸＰ１、ＴＳＬＰ、ＣＣＲ６、ＧＺＭＢ、ＵＢＡＳＨ３Ａ、Ｃ１ＱＴＮＦ６、及びＦＯＸＰ３からなる群にある、前記〔６〕に記載の前記方法。
〔８〕白斑の治療を、それを必要とする対象において行うための方法であって、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を投与し、それにより白斑の少なくとも１つの症状を治療または改善することを含む、前記方法。
〔９〕前記症状が、光過敏性の増大、ジニトロクロロベンゼンに対する接触感受性応答の低下、皮膚、粘膜（口及び鼻の内側を覆う組織）、網膜、または生殖器の色素脱失、及び頭毛、睫毛、眉、または髭の早期白色化または灰色化からなる群より選択される、前記〔８〕に記載の前記方法。
〔１０〕白斑が、自己免疫性甲状腺疾患（橋本甲状腺炎及びグレーブス病）、悪性貧血、リウマチ性関節炎、乾癬、Ｉ型糖尿病、アジソン病、セリアック病、炎症性腸疾患、及び全身性エリテマトーデスのうちの１つ以上を伴う、前記〔８〕に記載の前記方法。
〔１１〕白斑が、少なくとも１つの遺伝子突然変異を伴う、前記〔８〕に記載の前記方法。
〔１２〕前記遺伝子突然変異が、ＮＬＲＰ１、ＴＹＲ、ＨＬＡクラスＩ、ＨＬＡクラスＩＩ、ＨＬＡクラスＩＩＩ、ＰＴＰＮ２２、ＸＢＰ１、ＩＬ２ＲＡ、ＬＰＰ、ＲＥＲＥ、ＦＯＸＰ１、ＴＳＬＰ、ＣＣＲ６、ＧＺＭＢ、ＵＢＡＳＨ３Ａ、Ｃ１ＱＴＮＦ６、及びＦＯＸＰ３からなる群にある、前記〔１１〕に記載の前記方法。
〔１３〕前記ペプチドが、経口、局所、系統、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内投与される、前記〔８〕に記載の前記方法。
〔１４〕Ｔ細胞蓄積及び哺乳類細胞の細胞毒性死滅を低減させるための方法であって、前記細胞を治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩と接触させ、それによりＴ細胞蓄積及び前記細胞周辺の細胞毒性死滅を低減させることを含む、前記方法。
〔１５〕対象における進行性表皮色素脱失の速度を低下させるための方法であって、それを必要とする前記対象に、治療有効量のペプチドＤ−Ａｒｇ−２’，６’−Ｄｍｔ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＮＨ2またはその薬学的に許容される塩を投与し、それにより表皮色素脱失を治療または改善することを含む、前記方法。
〔１６〕１つ以上の芳香族カチオン性ペプチドでの処置のために対象を特定するための診断アッセイであって、前記対象が白斑と診断され、
前記対象から組織を切除することであって、前記組織が、白斑の発現型または症状を呈する、切除することと、
前記組織からメラニン細胞を単離することと、
前記単離されたメラニン細胞を培養することと、
前記メラニン細胞を少なくとも２つの群に分けることと、
第１のメラニン細胞群を少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドで処置することと、
第２のメラニン細胞群をビヒクル対照で処置することと、
前記第１及び第２のメラニン細胞群を少なくとも１つの治療効果についてアッセイすることと、
前記第１のメラニン細胞群の前記少なくとも１つの治療効果を、前記第２のメラニン細胞群の前記少なくとも１つの治療効果と比較することと、を含む、前記診断アッセイ。
〔１７〕前記少なくとも１つの治療効果が、ミトコンドリア膜電位の増加、ＡＴＰ産生の増加、細胞生存または増殖の増加、及びメラニン産生の増加からなる群より選択される１つ以上の治療効果である、前記〔１６〕に記載の前記診断アッセイ。
〔１８〕前記第１及び第２のメラニン細胞群の前記少なくとも１つの治療効果を、白斑と診断されていない少なくとも１名の対象由来のメラニン細胞からアッセイされた少なくとも１つの治療影響と比較することをさらに含む、前記〔１６〕に記載の前記診断アッセイ。
〔１９〕前記対象が、前記対象が全体表の１５％〜５０％を侵す非区域性白斑（ＮＳＶ）の確定診断を有し、ＮＳＶが頭及び首を侵し、３ヶ月の期間にわたる安定したまたは緩徐進行性の白斑であること、前記対象が少なくとも１３歳であること、及び前記対象が少なくとも２×２ｃｍの大きさの少なくとも１つの白斑病変を有することからなる群より選択される１つ以上の基準に基づいて処置の候補者として選択される、前記〔１６〕に記載の前記診断アッセイ。
〔２０〕前記対象由来の未処置のメラニン細胞と比較して、前記対象由来の芳香族カチオン性ペプチド処置されたメラニン細胞において、ミトコンドリア膜電位、ＡＴＰ産生、細胞生存、細胞増殖、またはメラニン産生が約１％〜５０％、５％〜４０％、１０％〜３０％、または１５％〜２５％増加した場合、前記対象が少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドでの処置のために選択される、前記〔１６〕に記載の前記診断アッセイ。
〔２１〕前記対象由来の芳香族カチオン性ペプチド処置されたメラニン細胞の前記ミトコンドリア膜電位、ＡＴＰ産生、細胞生存、細胞増殖、またはメラニン産生が、約１％〜５０％、５％〜４０％、１０％〜３０％、または１５％〜２５％だけ正常レベルに戻った場合、前記対象が少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドでの処置のために選択され、ミトコンドリア膜電位、ＡＴＰ産生、細胞生存、細胞増殖、またはメラニン産生の正常レベルが、白斑と診断されていない少なくとも１名の対象由来のメラニン細胞をアッセイすることによって確立される、前記〔１６〕に記載の前記診断アッセイ。
〔２２〕白斑と診断された対象の芳香族カチオン性ペプチド治療を監視するためのアッセイであって、芳香族カチオン性治療を受けている白斑対象の１つ以上の罹患皮膚領域から組織を切除することと、前記組織からメラニン細胞を単離することと、前記単離されたメラニン細胞を培養することと、前記単離されたメラニン細胞を少なくとも１つの治療効果についてアッセイすることと、前記治療効果を、メラニン細胞の細胞エネルギー、メラニン産生、及び／または細胞増殖の正常化されたレベルと比較することと、を含む、前記アッセイ。
〔２３〕前記少なくとも１つの治療効果が、ミトコンドリア膜電位の増加、ＡＴＰ産生の増加、細胞生存または増殖の増加、及びメラニン産生の増加からなる群より選択される１つ以上の治療効果である、前記〔２２〕に記載の前記アッセイ。
〔２４〕芳香族カチオン性ペプチドでの処置の前記治療効果を、前記芳香族カチオン性ペプチドでの処置前の前記白斑対象由来のメラニン細胞の細胞エネルギー、メラニン産生、及び／または細胞増殖の最初のレベルと比較することをさらに含む、前記〔２２〕に記載の前記アッセイ。
〔２５〕白斑療法の有効性を決定するためのスクリーニングアッセイであって、
白斑と診断された対象の罹患皮膚領域から組織を切除することと、前記組織からメラニン細胞を単離することと、前記単離されたメラニン細胞を培養することと、前記メラニン細胞を２つ以上の群に分けることと、メラニン細胞群のうちの少なくとも１つを少なくとも１つの芳香族カチオン性ペプチドで処置することと、メラニン細胞群のうちの少なくとも１つをビヒクル対照で処置することと、メラニン細胞群のうちの少なくとも１つを白斑療法で処置することと、前記メラニン細胞を芳香族カチオン性ペプチド及び前記白斑療法での処置による治療効果についてアッセイすることと、芳香族カチオン性ペプチドでの処置の前記治療効果を前記白斑療法での処置の前記治療効果と比較することと、を含む、前記スクリーニングアッセイ。