【手続補正書】
【提出日】平成30年2月8日(2018.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケトヘキソキナーゼ（ＫＨＫ）の発現を阻害するための二本鎖ＲＮＡｉ剤であって、二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記センス鎖が、配列番号１、配列番号３又は配列番号５のヌクレオチド配列のいずれか１つと３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み、及び前記アンチセンス鎖が、配列番号２、配列番号４又は配列番号６のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含む、二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２】
ケトヘキソキナーゼ（ＫＨＫ）の発現を阻害するための二本鎖ＲＮＡｉ剤であって、二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖が、表３、４、５、６、及び７のいずれか１つに列挙されるアンチセンス配列のいずれか１つと３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含む相補性の領域を含む、二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３】
前記センス鎖及びアンチセンス鎖が、ＡＤ−６３８５１、ＡＤ−６３８２０、ＡＤ−６３８５３、ＡＤ−６３８３９、ＡＤ−６３８５４、ＡＤ−６３８５５、及びＡＤ−６３８８６、並びに表３、４、５、６、及び７のいずれか１つに開示される配列のいずれか１つからなる群から選択される配列を含む、請求項２に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４】
少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項５】
前記修飾ヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチド、５’−ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、デオキシ−ヌクレオチド、３’末端デオキシ−チミン（ｄＴ）ヌクレオチド、２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチド、２’−フルオロ修飾ヌクレオチド、２’−デオキシ−修飾ヌクレオチド、コレステリル誘導体又はドデカン酸ビスデシルアミド基に結合された末端ヌクレオチド、２’−デオキシ−２’−フルオロ修飾ヌクレオチド、固定ヌクレオチド、非固定ヌクレオチド、立体配座的に制限されたヌクレオチド、拘束エチルヌクレオチド、非塩基性ヌクレオチド、２’−アミノ−修飾ヌクレオチド、２’−Ｏ−アリル−修飾ヌクレオチド、２’−Ｃ−アルキル−修飾ヌクレオチド、２’−ヒドロキシル−修飾ヌクレオチド、２’−メトキシエチル修飾ヌクレオチド、２’−Ｏ−アルキル−修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホロアミデート、非天然塩基を含むヌクレオチド、テトラヒドロピラン修飾ヌクレオチド、１，５−アンヒドロヘキシトール修飾ヌクレオチド、シクロヘキセニル修飾ヌクレオチド、ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、メチルホスホネート基を含むヌクレオチド、５’−ホスフェートを含むヌクレオチド、及び５’−ホスフェート模倣体を含むヌクレオチドからなる群から選択される、請求項４に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項６】
前記修飾ヌクレオチドの少なくとも１つが、２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチド、５’−ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、及びコレステリル誘導体又はドデカン酸ビスデシルアミド基に結合された末端ヌクレオチドからなる群から選択される、請求項５に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項７】
リガンドを更に含む、請求項１又は２に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項８】
請求項１又は２に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤と脂質製剤とを含む医薬組成物。
【請求項９】
前記脂質製剤が、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
細胞内でのケトヘキソキナーゼ（ＫＨＫ）の発現を阻害することが可能な二本鎖ＲＮＡｉ剤であって、二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖が、ＫＨＫをコードするｍＲＮＡの一部に相補的な領域を含み、各鎖が、約１４〜約３０ヌクレオチド長であり、前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、式（ＩＩＩ）：
センス：５’ｎｐ−Ｎａ−（ＸＸＸ）ｉ−Ｎｂ−ＹＹＹ−Ｎｂ−（ＺＺＺ）ｊ−Ｎａ−ｎｑ３’
アンチセンス：３’ｎｐ’−Ｎａ’−（Ｘ’Ｘ’Ｘ’）ｋ−Ｎｂ’−Ｙ’Ｙ’Ｙ’−Ｎｂ’−（Ｚ’Ｚ’Ｚ’）ｌ−Ｎａ’−ｎｑ’５’（ＩＩＩ）
（式中：
ｉ、ｊ、ｋ、及びｌがそれぞれ、独立して、０又は１であり；
ｐ、ｐ’、ｑ、及びｑ’がそれぞれ、独立して、０〜６であり；
各Ｎａ及びＮａ’が、独立して、修飾又は非修飾のいずれか又はそれらの組み合わせの０〜２５のヌクレオチドを含むオリゴヌクレオチド配列を表し、各配列が、少なくとも２つの異なる修飾のヌクレオチドを含み；
各Ｎｂ及びＮｂ’が、独立して、修飾又は非修飾のいずれか又はそれらの組み合わせの０〜１０ヌクレオチドを含むオリゴヌクレオチド配列を表し；
それぞれ存在していても又は存在していなくてもよい各ｎｐ、ｎｐ’、ｎｑ、及びｎｑ’が、独立して、オーバーハングヌクレオチドを表し；
ＸＸＸ、ＹＹＹ、ＺＺＺ、Ｘ’Ｘ’Ｘ’、Ｙ’Ｙ’Ｙ’、及びＺ’Ｚ’Ｚ’がそれぞれ、独立して、３連続ヌクレオチド上の３つの同一の修飾の１つのモチーフを表し；
Ｎｂ上の修飾が、Ｙ上の修飾と異なり、且つＮｂ’上の修飾が、Ｙ’上の修飾と異なり；及び
前記センス鎖が、少なくとも１つのリガンドにコンジュゲートされる）
によって表される、二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１１】
ｉが０であり；ｊが０であり；ｉが１であり；ｊが１であり；ｉ及びｊの両方が０であり；又はｉ及びｊの両方が１である、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１２】
ｋが０であり；ｌが０であり；ｋが１であり；ｌが１であり；ｋ及びｌの両方が０であり；又はｋ及びｌの両方が１である、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１３】
ＸＸＸが、Ｘ’Ｘ’Ｘ’に相補的であり、ＹＹＹが、Ｙ’Ｙ’Ｙ’に相補的であり、及びＺＺＺが、Ｚ’Ｚ’Ｚ’に相補的である、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１４】
前記ＹＹＹモチーフが、前記センス鎖の切断部位又はその近傍に存在する、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１５】
前記Ｙ’Ｙ’Ｙ’モチーフが、前記５’末端の前記アンチセンス鎖の１１位、１２位及び１３位に存在する、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１６】
前記Ｙ’が、２’−Ｏ−メチルである、請求項１５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１７】
前記二本鎖領域が、１５〜３０ヌクレオチド対長である、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１８】
前記二本鎖領域が、１７〜２３ヌクレオチド対長である、請求項１７に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１９】
前記二本鎖領域が、１９〜２３ヌクレオチド対長である、請求項１７に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２０】
前記二本鎖領域が、２１〜２３ヌクレオチド対長である、請求項１７に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２１】
各鎖が、１５〜３０のヌクレオチドを有する、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２２】
各鎖が、１９〜３０のヌクレオチドを有する、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２３】
前記ヌクレオチド上の修飾が、ＬＮＡ、ＣＲＮ、ｃＥＴ、ＵＮＡ、ＨＮＡ、ＣｅＮＡ、２’−メトキシエチル、２’−Ｏ−アルキル、２’−Ｏ−アリル、２’−Ｃ−アリル、２’−フルオロ、２’−デオキシ、２’−ヒドロキシル、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２４】
前記ヌクレオチド上の修飾が、２’−Ｏ−メチル又は２’−フルオロ修飾である、請求項２３に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２５】
前記リガンドが、二価又は三価の分枝鎖状リンカーを介して結合された１つ又は複数のＧａｌＮＡｃ誘導体である、請求項７又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２６】
前記リガンドが、
【化１】
2017509354.tif 000001
である、請求項７又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２７】
前記リガンドが、前記センス鎖の３’末端に結合される、請求項７又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２８】
以下の概略図
【化２】
2017509354.tif 000002
に示される前記リガンドにコンジュゲートされ、式中、Ｘが、Ｏ又はＳである、請求項２７に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２９】
表３、４、５、６、及び７のいずれか１つに列挙されるＲＮＡｉ剤の群から選択される、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３０】
前記ＲＮＡｉ剤が、ＡＤ−６３８５１、ＡＤ−６３８２０、ＡＤ−６３８５３、ＡＤ−６３８３９、ＡＤ−６３８５４、ＡＤ−６３８５５、及びＡＤ−６３８８６の群から選択される、請求項１０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３１】
請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤を含む細胞。
【請求項３２】
請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤を含む医薬組成物。
【請求項３３】
二本鎖ＲＮＡｉ剤が、非緩衝液中で投与される、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記非緩衝液が、生理食塩水又は水である、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、緩衝液とともに投与される、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記緩衝液が、酢酸塩、クエン酸塩、プロラミン、炭酸塩、若しくはリン酸塩又はそれらの任意の組み合わせを含む、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記緩衝液が、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
細胞内でのケトヘキソキナーゼ（ＫＨＫ）発現を阻害する方法であって、
（ａ）前記細胞を、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤または請求項８、９又は３２〜３７のいずれか一項に記載の医薬組成物と接触させる工程と；
（ｂ）工程（ａ）で産生された前記細胞を、ＫＨＫ遺伝子のｍＲＮＡ転写物の分解を得るのに十分な時間にわたって維持し、それによって、前記細胞内での前記ＫＨＫ遺伝子の発現を阻害する工程と
を含む、方法。
【請求項３９】
ケトヘキソキナーゼ（ＫＨＫ）に関連する障害に罹患している対象を処置するための医薬組成物であって、治療有効量の、請求項１、２又は１０のいずれか一項に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤または請求項９又は３２〜３７のいずれか一項に記載の医薬組成物を含む、医薬組成物。
【請求項４０】
前記対象がヒトである、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記ケトヘキソキナーゼに関連する疾病が、肝疾患、脂質異常症、血糖コントロールの異常、心血管疾患、腎臓病、メタボリックシンドローム、脂肪細胞機能障害、内臓脂肪蓄積、肥満、高尿酸血症、痛風、摂食障害、及び過剰な糖への渇望からなる群から選択される、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記肝疾患が、脂肪肝及び／又は脂肪性肝炎である、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記脂質異常症が、高脂血症、高いＬＤＬコレステロール、低いＨＤＬコレステロール、高トリグリセリド血症、及び食後高トリグリセリド血症からなる群から選択される、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記血糖コントロールの異常が、インスリン抵抗性及び／又は糖尿病である、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記心血管疾患が、高血圧症及び／又は内皮細胞機能障害である、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記腎臓病が、急性腎障害、尿細管機能障害、及び近位尿細管の炎症性変化からなる群から選択される、請求項４１に記載の医薬組成物。