【手続補正書】
【提出日】平成30年2月6日(2018.2.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液サンプルを交差適合させる方法であって、
第１の血液サンプル由来の血漿および／または血清を用意する工程と；
前記血漿および／または血清と、第２の血液サンプル由来の赤血球とを接触させて、血漿および／または血清／赤血球の混合物を得る工程と；
前記血漿および／または血清／赤血球の混合物を、赤血球の感作を可能にする条件下でインキュベートする工程と；
前記赤血球を液相から分離する工程と；
前記赤血球と、抗体に結合することができる因子とを接触させる工程と
を含み、
液相からの赤血球の分離が、遠心分離なしに生じ、抗体に結合することができる因子に結合した感作された赤血球の検出は、ドナーの血液が、意図したレシピエントの血液と不適合であることを示す、方法。
【請求項２】
前記血漿および／または血清が、輸血を受ける患者から得られるか、その患者によって提供されるか、またはその患者由来である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記赤血球が、ドナー血液から得られるか、ドナー血液によって提供されるか、またはドナー血液由来である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記血漿および／または血清／赤血球の混合物が、（i）約３０〜４０℃で、約１０秒〜数時間の間インキュベートされる、および／または（ii）約３７℃で、約５分間、約１０分間、約１５分間、約２０分間、約２５分間または約３０分間インキュベートされる、および／または（iii）細胞混合物の液相からの細胞混合物の赤血球成分の分離を可能にする条件下でインキュベートされる、および／または（iv）赤血球の沈降を容易にしてペレットを形成する条件下でインキュベートされる、請求項１から３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
液相からの赤血球の分離の工程が、遠心分離の使用を必要としない、請求項１から４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
液相からの赤血球の分離の工程が、上清を除去して、赤血球のみを残す工程、および／またはペレットにした赤血球のサンプルを取り出す工程をさらに含む、請求項１から５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
上清が、ピペッティング、デカント、および／またはアスピレーションによって除去される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
抗体に結合することができる因子が、
（ｉ）１つまたは複数の抗体アイソタイプに特異性を有する、抗体またはその抗原結合フラグメント；
（ｉｉ）低分子抗体模倣物；
（ｉｉｉ）アプタマー；
（ｉｖ）核酸リガンド；
（ｖ）他の細胞由来の受容体；および
（ｖｉ）使用されてもよいレクチン
からなる群から選択される、請求項１から７までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
抗体に結合することができる因子が、基板に対してまたは基板上に結合しているか、または固定されており、
基板が、官能化および／またはコーティングされた基板であってもよい、請求項１から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
基板が、
（ｉ）官能化ポリマー；
（ｉｉ）グリシドキシプロピルトリエトキシシラン；
（ｉｉｉ）ポリ−ｌ−リジン；
（ｉｖ）アミノプロピルシラン；
（ｖ）カルボキシシラン；
（ｖｉ）ヒドロゲル；
（ｖｉｉ）ポリマー−ブラシ、官能化アルキルチオールの自己組織化単分子層；
（ｖｉｉｉ）シランベースのコーティング；および
（ｉｘ）疎水性連結および目的の生物学的分子に結合する能力を有する官能基を有する、シラン化合物
からなる群から選択される１つまたは複数の化合物で官能化および／またはコーティングされている、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
抗体に結合することができる因子が、アレイとして基板に結合または固定されている、請求項１から１０までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
抗体に結合することができる因子が、スポッティングまたはプリンティングによって基板に適用される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
マイクロアレイフォーマットで行われ、および／または、１つまたは複数の他の試験および／またはマイクロアレイ試験と組み合わされ、
前記１つまたは複数の他の試験および／またはマイクロアレイ試験が、血液型の表現型判定試験および／または血液感染性の疾患の試験からなる群から選択されてもよい、請求項１から１２までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
感作された赤血球と、抗体に結合する因子との間の結合を可能にする条件下でのインキュベーション後、未結合の赤血球が洗浄によって除去される、請求項１から１３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
抗体に結合することができる因子に結合した感作された赤血球の検出が、二次的な標識検出技術、ならびに／または蛍光、化学発光複合体化抗体および／もしくは赤血球自己蛍光、ならびに／または蛍光シグナルおよび／または画像生成の使用を含む、請求項１から１４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
１つまたは複数の対照の使用をさらに含み、
対照が、赤血球の添加を確認するための陽性対照を含んでもよい、請求項１から１５までのいずれか１項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
引用文献
Robb. J.S., Roy, D.J., Ghazal, P., Allan, J. and Petrik, J. (2006). “Development of non-agglutination microarray blood grouping” Transfusion Medicine. 16, 119-129.
Campbell, C.J., O'Looney, N., Chong Kwan, M., Robb, J.S., Ross, A.J., Beattie, J.S., Petrik, J. and Ghazal, P. (2006). “Cell Interaction Microarray for Blood Phenotyping” Analytical Chemistry. 78, 1930-1938.
British Committee for Standards in Haematology; Milkins, C., et al. (2013). Guidelines for pre-transfusion compatibility procedures in blood transfusion laboratories. Transfusion Medicine 23, 3-35.
Issit, P.D. and Anstee, D.J. (1998) Applied Blood Group Serology. Fourth Edition. Montgomery Scientific Publications.
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕血液サンプルを交差適合させる方法であって、
第１の血液サンプル由来の血漿および／または血清を用意する工程と；
血漿および／または血清と、第２の血液サンプル由来の赤血球とを接触させて、血漿および／または血清／赤血球の混合物を得る工程と；
血漿および／または血清／赤血球の混合物を、赤血球の感作を可能にする条件下でインキュベートする工程と；
赤血球を液相から分離する工程と；
赤血球と、抗体に結合することができる因子とを接触させる工程と
を含み、
液相からの赤血球の分離が、遠心分離なしに生じ、抗体に結合することができる因子に結合した感作された赤血球の検出は、ドナーの血液が、意図したレシピエントの血液と不適合であることを示す、方法。
〔２〕血漿および／または血清が、全血から調製される、前記〔１〕に記載の方法。
〔３〕血漿および／または血清が、輸血を受ける患者から得られるか、その患者によって提供されるか、またはその患者由来である、前記〔１〕または〔２〕に記載の方法。
〔４〕赤血球が、ドナー血液から得られるか、ドナー血液によって提供されるか、またはドナー血液由来である、前記〔１〕から〔３〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔５〕赤血球の感作が、血漿および／または血清に存在する抗体と赤血球の抗原との間の結合を通じて生じる、前記〔１〕から〔４〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔６〕抗原が、血液型抗原である、前記〔５〕に記載の方法。
〔７〕血漿および／または血清／赤血球の混合物が、約３０〜４０℃で、約１０秒〜数時間の間インキュベートされる、前記〔１〕から〔６〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔８〕血漿および／または血清／赤血球の混合物が、約３７℃で、約５分間、約１０分間、約１５分間、約２０分間、約２５分間または約３０分間インキュベートされる、前記〔１〕から〔７〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔９〕血漿および／または血清／赤血球の混合物が、細胞混合物の液相からの細胞混合物の赤血球成分の分離を可能にする条件下でインキュベートされる、前記〔１〕から〔８〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１０〕血漿および／または血清／赤血球の混合物が、赤血球の沈降を容易にしてペレットを形成する条件下でインキュベートされる、前記〔１〕から〔９〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１１〕液相からの赤血球の分離の工程が、遠心分離の使用を必要としない、前記〔１〕から〔１０〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１２〕液相からの赤血球の分離の工程が、上清を除去して、赤血球のみを残す工程、および／またはペレットにした赤血球のサンプルを取り出す工程をさらに含む、前記〔１〕から〔１１〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１３〕上清が、ピペッティング、デカント、および／またはアスピレーションによって除去される、前記〔１２〕に記載の方法。
〔１４〕抗体に結合することができる因子と接触させる前に、赤血球を適切な緩衝液中で再懸濁する、前記〔１〕から〔１３〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１５〕抗体に結合することができる因子が、
（ｉ）１つまたは複数の抗体アイソタイプに特異性を有する、抗体またはその抗原結合フラグメント；
（ｉｉ）低分子抗体模倣物；
（ｉｉｉ）アプタマー；
（ｉｖ）核酸リガンド；
（ｖ）他の細胞由来の受容体；および
（ｖｉ）使用されてもよいレクチン
からなる群から選択される、前記〔１〕から〔１４〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１６〕抗体に結合することができる因子が、基板に対してまたは基板上に結合しているか、または固定されている、前記〔１〕から〔１５〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔１７〕基板が、官能化および／またはコーティングされた基板である、前記〔１６〕に記載の方法。
〔１８〕基板が、
（ｉ）官能化ポリマー；
（ｉｉ）グリシドキシプロピルトリエトキシシラン；
（ｉｉｉ）ポリ−ｌ−リジン；
（ｉｖ）アミノプロピルシラン；
（ｖ）カルボキシシラン；
（ｖｉ）ヒドロゲル；
（ｖｉｉ）ポリマー−ブラシ、官能化アルキルチオールの自己組織化単分子層；
（ｖｉｉｉ）シランベースのコーティング；および
（ｉｘ）疎水性連結および目的の生物学的分子に結合する能力を有する官能基を有する、シラン化合物
からなる群から選択される１つまたは複数の化合物で官能化および／またはコーティングされている、前記〔１６〕または〔１７〕に記載の方法。
〔１９〕抗体に結合することができる因子が、アレイとして基板に結合または固定されている、前記〔１〕から〔１８〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２０〕抗体に結合することができる因子が、スポッティングまたはプリンティングによって基板に適用される、前記〔１９〕に記載の方法。
〔２１〕基板を、抗体に結合することができる因子を備えていない基板の領域が非特異的結合部位として作用することを防ぐためのブロッキングプロトコールに供する、前記〔１６〕から〔２０〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２２〕官能化および／またはコーティングされた基板が、乾燥された基板としての使用のために保管される、前記〔１７〕または〔１８〕に記載の方法。
〔２３〕マイクロアレイフォーマットで行われる、前記〔１〕から〔２２〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２４〕１つまたは複数の他の試験および／またはマイクロアレイ試験と組み合わされる、前記〔１〕から〔２３〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２５〕１つまたは複数の他の試験および／またはマイクロアレイ試験が、血液型の表現型判定試験および／または血液感染性の疾患の試験からなる群から選択される、前記〔２４〕に記載の方法。
〔２６〕感作された赤血球と、抗体に結合する因子との間の結合を可能にする条件下でのインキュベーション後、未結合の赤血球が洗浄によって除去される、前記〔１〕から〔２５〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２７〕抗体に結合することができる因子に結合した感作された赤血球の検出が、二次的な標識検出技術、ならびに／または蛍光、化学発光複合体化抗体および／もしくは赤血球自己蛍光の使用を含む、前記〔１〕から〔２６〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２８〕抗体に結合することができる因子に結合した感作された赤血球の検出が、蛍光シグナルおよび／または画像生成の使用を含む、前記〔１〕から〔２７〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔２９〕１つまたは複数の対照の使用をさらに含む、前記〔１〕から〔２８〕までのいずれか１項に記載の方法。
〔３０〕対照が、赤血球の添加を確認するための陽性対照を含む、前記〔２９〕に記載の方法。