【手続補正書】
【提出日】平成30年7月13日(2018.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象において免疫応答を誘導するための組み合わせ物であって、（ａ）少なくとも１つの免疫原またはその免疫原性断片をコードするヌクレオチド配列を含むレンチウイルスベクターを含む、第１の免疫原性組成物の少なくとも２用量であって、前記少なくとも１つの免疫原が、第１の指定抗原に特異的な免疫応答を誘導することができ、前記レンチウイルスベクターが、ベクター粒子中に組み込まれ、かつ前記レンチウイルスベクター粒子が、樹状細胞に優先的に結合する外被糖タンパク質で偽型化されている、第１の免疫原性組成物の少なくとも２用量と、（ｂ）前記少なくとも１つの免疫原及びＴＬＲ４アゴニストを含む、第２の免疫原性組成物の少なくとも２用量を含み、前記第２の免疫原性組成物が前記第１の免疫原性組成物の後に投与され、前記第２の免疫原性組成物が順次かつ前記第１の免疫原性組成物の更なる２用量と交互に投与され、それにより、前記第１の指定抗原に特異的な免疫応答を誘導することを特徴とする、組み合わせ物。
【請求項２】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量がそれぞれ、単回注射として投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項３】
前記少なくとも２用量が、皮内または皮下投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項４】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量がそれぞれ、各三角筋に２回の注射と各四頭筋に２回の注射とに分割された、８回の皮内注射として投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項５】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量が、２〜３週間離して投与され、前記第２の免疫原性組成物の少なくとも１つの用量が、前記第１の免疫原性組成物の第２の用量の２〜３週間後に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項６】
前記対象が癌を有し、前記第１の指定抗原が腫瘍抗原である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
前記腫瘍抗原が、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ｇｐ１００、ｇｐ７５、ｍｄａ−７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質２、腎細胞癌抗原、５Ｔ４、ＳＭ２２−アルファ、炭酸脱水酵素Ｉ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＨＩＦ−１アルファ、ＨＩＦ−２アルファ、ＶＥＧＦ、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺酸性リン酸、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＷＮＴ、ウィルムス腫瘍抗原（ＷＴ１）、前立腺の６回膜貫通エポイセリアル（ｅｐｏｉｔｈｅｌｉａｌ）抗原（ＳＴＥＡＰ）、ＮＫＸ３．１、テロメラーゼ酵素、サバイビン、メソテリン、変異ｒａｓ、ｂｃｒ／ａｂｌ再構成、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、変異ｐ５３、野生型ｐ５３、チトクロムＰ４５０  １Ｂ１、Ｎ−アセチルグルコサミン転移酵素−Ｖ、ヒトパピローマウイルスタンパク質Ｅ６、ヒトパピローマウイルスタンパク質Ｅ７、癌胎児抗原、メルケル細胞ウイルスＴ−抗原腫瘍性タンパク質、及びアルファ−胎児タンパク質からなる群から選択される、請求項６に記載の組み合わせ物。
【請求項８】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約５×１０８〜約５×１０１０個のベクターゲノムを含む、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約５×１０９〜約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１１】
前記レンチウイルスベクターが、組み込み能欠損である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１２】
前記レンチウイルスベクターが、組み込み能がある、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１３】
前記レンチウイルスベクターが、以下の特徴、（ａ）配列番号１と比較して、少なくとも１つのアミノ酸変化を有するアミノ酸配列を含む、シンドビスウイルスＥ２糖タンパク質を含む外被で偽型化されており、配列番号１の残基１６０が欠けているか、またはグルタミン酸以外のアミノ酸であるかのいずれかであり、かつ前記Ｅ２糖タンパク質が、シンドビスウイルスＥ３タンパク質を含む融合タンパク質の部分ではないこと、（ｂ）任意で、パッケージング細胞をマンノシダーゼ阻害剤中で培養することによって取得可能である、高度にマンノシル化された外被タンパク質を有すること、（ｃ）Ｖｐｘタンパク質、任意でＳＩＶｍａｃ  Ｖｐｘを含むこと、（ｄ）ｇａｇ／ｐｏｌ遺伝子中にＤ６４Ｖインテグラーゼ変異を含むこと、（ｅ）ベクターゲノム中にｃＰＰＴ欠失を有すること、及び（ｆ）任意で、ｒｅｖ非依存性ｇａｇ／ｐｏｌ系を含むパッケージング細胞を使用して調製されること、のうちの任意の１つ以上または全てを更に特徴とする、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１４】
前記癌が、腎細胞癌、前立腺癌、黒色腫、及び乳癌からなる群から選択される、請求項６に記載の組み合わせ物。
【請求項１５】
前記ＴＬＲ４アゴニストが、以下の構造の化合物であり、
【化３】
2017522312.tif 000001
式中、Ａ１及びＡ２が独立して、水素、ホスフェート、及びリン酸塩の群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６が独立して、Ｃ３−Ｃ２３によって表される、３〜２３個の炭素を有するヒドロカルビルの群から選択される、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１６】
Ａ１がホスフェートまたはリン酸塩であり、Ａ２が水素であり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、及びＲ６がウンデシルであり、Ｒ２及びＲ４がトリデシルである、請求項１５に記載の組み合わせ物。
【請求項１７】
前記化合物が、安定な水中油型乳濁剤中に配合される、請求項１６に記載の組み合わせ物。
【請求項１８】
前記第２の免疫原性組成物が、約５ｕｇのＧＬＡ〜約１０ｕｇのＧＬＡを含む、請求項１７に記載の組み合わせ物。
【請求項１９】
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、請求項１８に記載の組み合わせ物。
【請求項２０】
哺乳動物において癌を治療するための組成物であって、樹状細胞に優先的に結合する外被糖タンパク質で偽型化されたレンチウイルスベクターを含み、前記レンチウイルスベクターが、腫瘍抗原をコードする外因性ポリヌクレオチドを含み、少なくとも第１の用量の前記組成物が、単回注射として投与されることを特徴とし、前記第１の用量の前記組成物を単回注射として投与した後に誘発される前記腫瘍抗原に特異的な免疫応答が、複数回の注射に分割された前記第１の用量を投与した後に誘発される前記腫瘍抗原に特異的な免疫応答よりも大きい、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本方法の特定の実施形態において、第１の用量のレンチウイルスベクターを単回注射として投与した後に誘発される腫瘍抗原に特異的な免疫応答は、複数回の注射に分割された第１の用量を投与した後に誘発される腫瘍抗原に特異的な免疫応答よりも大きい。一実施形態において、別個の部位に分割された第１の用量の投与は、２〜４つの部位に分離される。特定の実施形態において、少なくとも第１の用量は、皮内または皮下投与される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
対象において免疫応答を誘導するための方法であって、（ａ）前記対象に、（ｉ）少なくとも１つの免疫原またはその免疫原性断片をコードするヌクレオチド配列を含むレンチウイルスベクターを含む、第１の免疫原性組成物の少なくとも２用量を投与することであって、前記少なくとも１つの免疫原が、第１の指定抗原に特異的な免疫応答を誘導することができ、前記レンチウイルスベクターが、ベクター粒子中に組み込まれ、かつ前記レンチウイルスベクター粒子が、樹状細胞に優先的に結合する外被糖タンパク質で偽型化されている、投与することと、（ｂ）後続して、前記対象に、前記少なくとも１つの免疫原及びＴＬＲ４アゴニストを含む、第２の免疫原性組成物の少なくとも２用量を、順次かつ前記第１の免疫原性組成物の更なる２用量と交互に投与し、それにより、前記第１の指定抗原に特異的な免疫応答を誘導することと、を含む、方法。
（項目２）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量がそれぞれ、単回注射として投与される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記少なくとも２用量が、皮内または皮下投与される、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量がそれぞれ、各三角筋に２回の注射と各四頭筋に２回の注射とに分割された、８回の皮内注射として投与される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量が、２〜３週間離して投与され、前記第２の免疫原性組成物の少なくとも１つの用量が、前記第１の免疫原性組成物の第２の用量の２〜３週間後に投与される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記対象が癌を有し、前記第１の指定抗原が腫瘍抗原である、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記腫瘍抗原が、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ｇｐ１００、ｇｐ７５、ｍｄａ−７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質２、腎細胞癌抗原、５Ｔ４、ＳＭ２２−アルファ、炭酸脱水酵素Ｉ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＨＩＦ−１アルファ、ＨＩＦ−２アルファ、ＶＥＧＦ、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺酸性リン酸、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＷＮＴ、ウィルムス腫瘍抗原（ＷＴ１）、前立腺の６回膜貫通エポイセリアル（ｅｐｏｉｔｈｅｌｉａｌ）抗原（ＳＴＥＡＰ）、ＮＫＸ３．１、テロメラーゼ酵素、サバイビン、メソテリン、変異ｒａｓ、ｂｃｒ／ａｂｌ再構成、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、変異ｐ５３、野生型ｐ５３、チトクロムＰ４５０  １Ｂ１、Ｎ−アセチルグルコサミン転移酵素−Ｖ、ヒトパピローマウイルスタンパク質Ｅ６、ヒトパピローマウイルスタンパク質Ｅ７、癌胎児抗原、メルケル細胞ウイルスＴ−抗原腫瘍性タンパク質、及びアルファ−胎児タンパク質からなる群から選択される、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約５×１０８〜約５×１０１０個のベクターゲノムを含む、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約５×１０９〜約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記レンチウイルスベクターが、組み込み能欠損である、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記レンチウイルスベクターが、組み込み能がある、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記レンチウイルスベクターが、以下の特徴、（ａ）配列番号１と比較して、少なくとも１つのアミノ酸変化を有するアミノ酸配列を含む、シンドビスウイルスＥ２糖タンパク質を含む外被で偽型化されており、配列番号１の残基１６０が欠けているか、またはグルタミン酸以外のアミノ酸であるかのいずれかであり、かつ前記Ｅ２糖タンパク質が、シンドビスウイルスＥ３タンパク質を含む融合タンパク質の部分ではないこと、（ｂ）任意で、パッケージング細胞をマンノシダーゼ阻害剤中で培養することによって取得可能である、高度にマンノシル化された外被タンパク質を有すること、（ｃ）Ｖｐｘタンパク質、任意でＳＩＶｍａｃ  Ｖｐｘを含むこと、（ｄ）ｇａｇ／ｐｏｌ遺伝子中にＤ６４Ｖインテグラーゼ変異を含むこと、（ｅ）ベクターゲノム中にｃＰＰＴ欠失を有すること、及び（ｆ）任意で、ｒｅｖ非依存性ｇａｇ／ｐｏｌ系を含むパッケージング細胞を使用して調製されること、のうちの任意の１つ以上または全てを更に特徴とする、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記癌が、腎細胞癌、前立腺癌、黒色腫、及び乳癌からなる群から選択される、項目６に記載の方法。
（項目１５）
前記ＴＬＲ４アゴニストが、以下の構造の化合物であり、
【化３】
2017522312.tif 000002
式中、Ａ１及びＡ２が独立して、水素、ホスフェート、及びリン酸塩の群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６が独立して、Ｃ３−Ｃ２３によって表される、３〜２３個の炭素を有するヒドロカルビルの群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目１６）
Ａ１がホスフェートまたはリン酸塩であり、Ａ２が水素であり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５、及びＲ６がウンデシルであり、Ｒ２及びＲ４がトリデシルである、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記化合物が、安定な水中油型乳濁剤中に配合される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記第２の免疫原性組成物が、約５ｕｇのＧＬＡ〜約１０ｕｇのＧＬＡを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記第１の免疫原性組成物の前記少なくとも２用量のそれぞれが、約１×１０１０個のベクターゲノムを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
哺乳動物において癌を治療する方法であって、樹状細胞に優先的に結合する外被糖タンパク質で偽型化されたレンチウイルスベクターを含む組成物の少なくとも第１の用量を投与することを含み、前記レンチウイルスベクターが、腫瘍抗原をコードする外因性ポリヌクレオチドを含み、前記少なくとも第１の用量が、単回注射として投与され、前記第１の用量の前記レンチウイルスベクターを単回注射として投与した後に誘発される前記腫瘍抗原に特異的な免疫応答が、複数回の注射に分割された前記第１の用量を投与した後に誘発される前記腫瘍抗原に特異的な免疫応答よりも大きい、方法。