【手続補正書】
【提出日】平成30年4月2日(2018.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の工程を含み、任意選択的にはこれらの工程を文字順で含む、昆虫ペプチドの活性または毒性の増加方法；
ａ）水と形態１の昆虫ペプチドを混合して、液体の形態中にある前記ペプチドまたは半液体の形態中にある前記ペプチドの、水溶液または水性エマルションを形成する工程であって、前記水溶液または水性エマルションが少なくとも１０％の水を含む工程；
ｂ）前記水溶液または水性エマルションのｐＨを測定する工程；
ｃ）前記水溶液または水性エマルションのｐＨをｐＨ２〜６に調整する工程；
ｄ）前記水溶液または水性エマルションの温度を少なくとも約４０℃まで上げる工程であって、
ここで、共有結合している２Ｈ＋Ｏ原子の除去により、形態２の昆虫ペプチドにして、前記形態１の昆虫ペプチドを形態２の昆虫ペプチドに変換し、前記形態１の昆虫ペプチドの１つのアミノ酸はヒドロキシ基を共有結合的に失い、前記形態２の昆虫ペプチドにおいてラクトンを形成する、工程。
【請求項２】
前記水溶液または水性エマルションが、約３．０〜約４．０のｐＨに調整される、または約３．２、３．４、３．５、３．６、もしくは３．８のｐＨに調整される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記水溶液または水性エマルションが、約３．０〜約４．０のｐＨに調整され、約１０〜５００℃の温度に加熱される、または、約３．２、３．４、３．５、３．６、もしくは３．８のｐＨに調整され、約１０〜５００℃の温度に加熱される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ｐＨの調整が強酸または弱酸を使用して行われ；前記強酸が使用される場合には、前記強酸が、塩素酸（ＨＣｌＯ３）、塩酸（ＨＣｌ）、臭化水素酸、（ＨＢｒ）、ヨウ化水素酸（ＨＩ）、リン酸（Ｈ３ＰＯ４）、硫酸（Ｈ２ＳＯ４）、過塩素酸（ＨＣｌＯ４）、及び硝酸（ＨＮＯ３）のいずれか、またはこれらの酸の組み合わせから選択され、前記弱酸が使用される場合には、前記弱酸が、酢酸及びシュウ酸のいずれか、またはこれらの組み合わせから選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記ｐＨの調整の間、前記水溶液または水性エマルションは、蒸気もしくは圧力なしに加熱される、または、圧力及び／もしくは蒸気で加熱される、または、それらの組み合わせで加熱される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記水溶液または水性エマルションは、前記水溶液または水性エマルションのｐＨが調整された後、乾燥粉末または顆粒の形態まで乾燥される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記水溶液または水性エマルションは、前記水溶液または水性エマルションのｐＨが調整された後、噴霧乾燥される、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記昆虫ペプチドは、配列番号１１９または配列番号１２１のアミノ酸の配列を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
昆虫ペプチドの毒性及び／または活性を増加させるための方法であって、
ａ）昆虫ペプチドを、乾燥の形態で、または、水溶液もしくは水性エマルション中に前記昆虫ペプチドを含み、約１０％未満の水を含む組成物で加熱する工程；
ｂ）形態１の昆虫ペプチドの望ましい量が、形態２の昆虫ペプチドに変換されるまで、前記加熱したペプチドを、望ましい温度に保持する工程であって、ここで、共有結合している２Ｈ＋Ｏ原子の除去により、前記形態１の昆虫ペプチドを形態２の昆虫ペプチドに変換し、前記形態１の昆虫ペプチドの１つのアミノ酸はヒドロキシ基を共有結合的に失い、ラクトンを形成する、工程；
を含む、方法。
【請求項１０】
前記形態１の昆虫ペプチドが、
ａ）加熱されて約４０℃より高い温度で少なくとも約１時間保持される；
ｂ）加熱されて約８０℃〜約１２０℃の温度で少なくとも約２時間保持される；
ｃ）加熱されて約５０℃〜約８０℃の温度で少なくとも約３時間保持される；
ｄ）加熱されて約１８０℃より高い温度及び少なくとも約５ｐｓｉの圧力で少なくとも約５分間保持される；
ｅ）加熱されて約１００℃より高い温度及び少なくとも約１０ｐｓｉの圧力で少なくとも約１０分間保持される；
ｆ）加熱されて約８０℃〜約１２０℃の温度及び少なくとも約１０ｐｓｉの圧力で少なくとも約３０分間保持される；もしくは
ｇ）加熱されて約５０℃〜約８０℃の温度で少なくとも１時間保持される；
ｈ）加熱されて約２００℃〜約３００℃の温度及び約５〜約１０ｐｓｉの圧力で約５〜約１０分間保持される；
ｉ）加熱されて約１５０℃〜約２００℃の温度及び約１０〜約３０ｐｓｉの圧力で約５〜約３０分間保持される；
ｊ）加熱されて約８０℃〜約１５０℃の温度及び約１０〜約２０ｐｓｉの圧力で約２０〜約６０分間保持される；もしくは
ｋ）加熱されて約５０℃〜約８０℃の温度及び約１０〜約４０ｐｓｉの圧力で約３０〜約６０分間保持される；
または前記ペプチドが、
ｌ）加熱されて約１１０℃〜約１３０℃の温度及び約１０〜約２０ｐｓｉの圧力で約１０〜約２０分間保持される；もしくは
ｍ）加熱されて約１２１℃の温度及び約２１ｐｓｉの圧力で約２０分間保持される、
ことを含む多段階手順のいずれか１つ以上に従って処理される、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記形態１の昆虫ペプチドは、噴霧乾燥プロセスまたはオートクレーブプロセスを用いて、形態２の昆虫ペプチドに変換される、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法により得られる、形態２の昆虫ペプチド。
【請求項１３】
前記形態１の昆虫ペプチドは、配列番号１１９または配列番号１２１のアミノ酸の配列を有する、請求項１２に記載の昆虫ペプチド。
【請求項１４】
請求項１２または１３に記載のペプチドを含む殺虫性の組成物であって、前記組成物の製剤は、前記形態２の昆虫ペプチドで処理されるべき昆虫の生息場所への適用に適したものである、殺虫性組成物。
【請求項１５】
配列番号１１９または配列番号１２１のアミノ酸の配列を含む形態１の昆虫ペプチドから得られる形態２の昆虫ペプチドであって、前記形態２の昆虫ペプチドは、共有結合している２Ｈ＋Ｏ原子が除去され、前記形態２の昆虫ペプチドの１つのアミノ酸はヒドロキシ基を共有結合的に失ったものであり、前記形態２の昆虫ペプチドにおいてラクトンを形成したものである、形態２の昆虫ペプチド。
【請求項１６】
形態２の昆虫ペプチドラクトンをヒドラジンと混合すること、および、得られたペプチドヒドラジドを精製することを含む、形態２の昆虫ペプチドをペプチドヒドラジドの形態へと変換するプロセスによって作る、ペプチドヒドラジドの製造方法。
【請求項１７】
前記形態２の昆虫ペプチドを水中に用意し、ヒドラジン一水和物を添加し、その混合物を撹拌して前記ペプチドヒドラジドを得る、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記形態２の昆虫ペプチドは、約２０個のアミノ酸から約５０個のアミノ酸まで大きさが多様であり、２個、３個または４個のシステイン結合を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記形態２の昆虫ペプチドは、配列表にある任意のペプチド、並びに、配列表にある任意のペプチドと８０％超の相同性を有する配列表にある任意のペプチドもしくは任意のペプチド、または、８５％超、９０％超、９５％超、もしくは９９％超の相同性を有する任意のアミノ酸配列から調製され、前記形態２の昆虫ペプチドは、３個もしくは４個のシステイン結合を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
前記形態２の昆虫ペプチドは、前記配列番号１１９または配列番号１２１のアミノ酸の配列を含み、下記方法ａまたは方法ｂのいずれかを用いて合成され、
方法ａは、
ａ）前記形態２の昆虫ペプチドを水中で混合する工程、
ｂ）前記形態２の昆虫ペプチドの溶液をヒドラジン一水和物で処理し、室温で撹拌して、前記ペプチドヒドラジドを形成する工程、
ｃ）前記ペプチドヒドラジドの溶液を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸のグラジエントで溶出）で精製する工程、
ｄ）前記ペプチドヒドラジドを減圧下で濃縮して、その体積を減らす工程、
ｅ）前記ペプチドヒドラジドの濃縮物を凍結する工程、
ｆ）前記ペプチドヒドラジドの濃縮物を凍結乾燥して、前記ペプチドヒドラジドを得る工程、
を含み、
方法ｂは、
ａ）形態１の昆虫ペプチドと形態２の昆虫ペプチドとの混合物であるスーパーリキッド濃縮物の溶液を撹拌する工程、
ｂ）前記スーパーリキッド濃縮物を約５０℃〜９０℃まで加熱する工程、
ｃ）前記スーパーリキッド濃縮物の溶液をヒドラジン一水和物で処理して、ペプチドヒドラジドの溶液を形成する工程、
ｄ）前記ペプチドヒドラジドの溶液から前記ペプチドヒドラジドを精製する工程、
ｅ）前記ペプチドヒドラジドを凍結乾燥して、乾燥粉末のペプチドヒドラジドを得る工程
を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ペプチドヒドラジドをペプチドヒドラゾンに変換する方法によって、ペプチドヒドラゾン製品を得る方法であって、前記ペプチドヒドラジドは、昆虫ペプチドを含み、前記方法は、
ａ）前記ペプチドヒドラジドの水溶液をヘキサナールのエタノール溶液と混合して、ペプチドヒドラゾン前駆体溶液を形成する工程、
ｂ）ヘキサナール、酢酸およびエタノールを含む溶液を前記ペプチドヒドラゾン前駆体溶液に添加して、前記ペプチドヒドラゾンを形成する工程、
を含む、方法。
【請求項２２】
前記ペプチドヒドラゾン製品は、ペプチドヒドラゾン（ＩＩ）であり、
前記方法は、
ａ）ペプチドヒドラジド（Ｉ）の水溶液をヘキサナールのエタノール溶液と混合する工程、
ｂ）ヘキサナール、酢酸およびエタノールを含む溶液を添加して、ペプチドヒドラゾン前駆体溶液を形成する工程、
ｃ）前記ペプチドヒドラゾン前駆体を加熱して、前記ペプチドヒドラゾン（ＩＩ）を製造する工程、
を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ａ）形態２の昆虫ペプチドをペプチドヒドラジドに変換する工程、
ｂ）複合グリコールを酸で酸性化する工程、
ｃ）前記ペプチドヒドラジドを前記酸性化した複合グリコールと混合して、ペプチドグリコールヒドラゾンを得る工程、
を含む、ペプチドグリコールヒドラゾンの製造方法。
【請求項２４】
前記酸が酢酸であり、前記複合グリコールが、Ｏ−［２−（６−オキソカプロイルアミノ）エチル］−Ｏ’−メチルポリエチレングリコール（ＩＶ）である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ペプチドヒドラジドケトン製品を得るための方法であって、
ａ）形態２の昆虫ペプチドをペプチドヒドラジドに変換する工程、および、
ｂ）前記ペプチドヒドラジドをアクリルケトンに加えて、ペプチドヒドラジドケトンを得る工程、
を含む方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、前記アクリルケトンは、ＰＥＧ４ケトン（ＶＩＩＩ）である、方法。
【請求項２７】
請求項２３または２４に記載の方法により得られる、ペプチドグリコールヒドラゾン。
【請求項２８】
請求項２５または２６に記載の方法により得られる、ペプチドヒドラジドケトン。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】人工的に活性化したペプチド