【手続補正書】
【提出日】平成30年9月14日(2018.9.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞にウイルスベクターを形質導入する方法であって、
下記一般式Ｉで表される化合物またはその塩もしくはプロドラッグを前記細胞と接触させる工程、および
前記細胞にウイルスベクターを形質導入する工程を含む、方法。
【化１】
2017529075.tif 000001
[式中、各Yは、独立してNおよびCHから選択され；
Zは、
1)-CN、
2)-C(O)OR1、
3)-C(O)N(R1)R3、
4)-C(O)R1、または
5)1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換されたヘテロアリール基であり、ここで、(R1)およびR3が窒素原子に結合する場合、任意で、(R1)およびR3は窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成し、当該環は、任意で、1または2以上のRAまたはR4で置換され；
Wは、
1)-CN、
2)-N(R1)R3、
3)-C(O)OR1、
4)-C(O)N(R1)R3、
5)-NR1C(O)R1、
6)-NR1C(O)OR1、
7)-OC(O)N(R1)R3、
8)-OC(O)R1、
9)-C(O)R1、
10)-NR1C(O)N(R1)R3、
11)-NR1S(O)2R1、
12)1、2または3つのRA置換基またはR1置換基で任意に置換された-ベンジル基、
13)-X-L-(X-L)n-N(R1)R3、
14)L基およびヘテロアリール基の一方または両方に結合する1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-X-L-(X-L)n-ヘテロアリール基、
15)L基およびヘテロシクリル基の一方または両方に結合する1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-X-L-(X-L)n-ヘテロシクリル基、
16)1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-X-L-(X-L)n-アリール基、
17)-X-L-(X-L)n-NR1RA、または
18)-(N(R1)-L)n-N+R1R3R5R6-であり、ここで、nは0、1、2、3、4または5に等しい整数であり、R1およびR3が窒素原子に結合する場合、任意で、R1およびR3は、窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成し、当該環は、任意で、1または2以上のRAまたはR4で置換され；
各Xは、独立して、O、SおよびNR1から選択され；
各Lは、独立して、
1)-C1-6アルキレン基、
2)-C2-6アルケニレン基、
3)-C2-6アルキニレン基、
4)N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C3-7シクロアルキレン基、または
5)N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C3-7シクロアルケニレン基であり、ここで、前記アルキレン基、前記アルケニレン基、前記アルキニレン基、前記シクロアルキレン基、および、前記シクロアルケニレン基は、それぞれ独立して、1または2つのR4置換基またはRA置換基で任意に置換され；
R1は、それぞれ独立して、  
1)-H、
2)-C1-6アルキル基、
3)-C2-6アルケニル基、 
4)-C2-6アルキニル基、
5)-C3-7シクロアルキル基、 
6)-C3-7シクロアルケニル基、
7)-C1-5ペルフルオロ基、
8)-ヘテロシクリル基、 
9)-アリール基、 
10)-ヘテロアリール基、または
11)-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R2は、
1)-H、
2)1または2以上のRA置換基で任意に置換された-C1-6アルキル基、
3)-C(O)R4、
4)1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-ヘテロアリール基、
5)1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-ヘテロシクリル基、または
6)1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-アリール基であり；
R3は、それぞれ独立して、
1)-H、
2)-C1-6アルキル基、
3)-C2-6アルケニル基、 
4)-C2-6アルキニル基、
5)-C3-7シクロアルキル基、
6)-C3-7シクロアルケニル基、
7)-C1-5ペルフルオロ基、
8)-ヘテロシクリル基、 
9)-アリール基、 
10)-ヘテロアリール基、または
11)-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R4は、それぞれ独立して、
1)-H、
2)-C1-6アルキル基、
3)-C2-6アルケニル基、
4)-C2-6アルキニル基、
5)-C3-7シクロアルキル基、
6)-C3-7シクロアルケニル基、
7)-C1-5ペルフルオロ基、
8)-ヘテロシクリル基、 
9)-アリール基、
10)-ヘテロアリール基、または
11)-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R5は、それぞれ独立して、
1)-C1-6アルキル基、
2)N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C1-6アルキレン-C2-6アルケニル基、
3)N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C1-6アルキレン-C2-6アルキニル基、
4)1または2以上のRA置換基またはR4置換基を任意で有する-L-アリール基、
5)1または2以上のRA置換基またはR4置換基を任意で有する-L-ヘテロアリール基、
6)-C1-6アルキレン-C(O)O-、
7)-C1-6アルキレン-C(O)OR1、
8)-C1-6アルキレン-CN、
9)-C1-6アルキレン-C(O)NR1R3(R1およびR3は、任意で、窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成する)、または
10)-C1-6アルキレン-OHであり；
R6は、
1)ハロゲン、
2)OC(O)CF3、または
3)OC(O)R1であり；
RAは、それぞれ独立して、
1)-ハロゲン、
2)-CF3、
3)-OR1、
4)-L-OR1、
5)-OCF3、
6)-SR1、
7)-CN、
8)-NO2、
9)-NR1R3、
10)-L-NR1R1、
11)-C(O)OR1、
12)S(O)2R4、
13)-C(O)N(R1)R3、 
14)-NR1C(O)R1、
15)-NR1C(O)OR1、
16)-OC(O)N(R1)R3、
17)-OC(O)R1、
18)-C(O)R4、
19)-NHC(O)N(R1)R3、
20)-NR1C(O)N(R1)R3、または
21)-N3であり；
Rdは、それぞれ独立して、
1)-H、
2)-C1-6アルキル基、
3)-C2-6アルケニル基、
4)-C2-6アルキニル基、
5)-C3-7シクロアルキル基、
6)-C3-7シクロアルケニル基、
7)-C1-5ペルフルオロ基、
8)-ベンジル基、または
9)-ヘテロシクリル基である]
【請求項２】
前記化合物が下記式IAで表される化合物またはその塩もしくはプロドラッグである、請求項１に記載の方法。
【化２】
2017529075.tif 000002
［式中、W、Y、ZおよびR2は請求項１と同義である］
【請求項３】
各Yが、独立してNおよびCHから選択され；
Zが、-CN、-C(O)OR1、-C(O)N(R1)R3、または、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-ヘテロアリール基であり、
Wが、-CN、-N(R1)R3、1、2または3つのRA置換基またはR1置換基で任意に置換された-ベンジル基、-X-L-(X-L)n-N(R1)R3、-X-L-(X-L)n-NR1RA、または、-(N(R1)-L)n-N+R1R3R5R6-であり、ここで、nは0、1、2または3に等しい整数であり、R1およびR3が窒素原子と結合する場合、任意で、R1およびR3が、窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成し、当該環は任意で1または2以上のRAまたはR4で置換され；
各Xが、独立して、O、SまたはNR1であり；
Lが、それぞれ独立して、-C1-6アルキレン基、-C2-6アルケニレン基、-C2-6アルキニレン基、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C3-7シクロアルキレン基、または、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する-C3-7シクロアルケニレン基であり、ここで、前記アルキレン基、前記アルケニレン基、前記アルキニレン基、前記シクロアルキレン基、および、前記シクロアルケニレン基は、それぞれ独立して、1または2つのR4置換基またはRA置換基で任意に置換され；
R1が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ヘテロシクリル基、-ヘテロアリール基、または、-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R2が、-H、1または2以上のRA置換基で任意に置換された-C1-6アルキル基、-C(O)R4、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-ヘテロアリール基、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-ヘテロシクリル基 、または、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-L-アリール基であり；
R3が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、または、-C1-5ペルフルオロ基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記ペルフルオロアルキル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R4が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ヘテロシクリル基、-アリール基、-ヘテロアリール基、または、-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R5が、それぞれ独立して、-C1-6アルキル基、1または2以上のRA置換基またはR4置換基を任意で有する-L-アリール基、1または2以上のRA置換基またはR4置換基を任意で有する-L-ヘテロアリール基、-C1-6アルキレン-C(O)O-、-C1-6アルキレン-C(O)OR1、-C1-6アルキレン-CN、-C1-6アルキレン-C(O)NR1R3、または、-C1-6アルキレン-OHであり；
R6が、-ハロゲン、-OC(O)CF3、または、-OC(O)R1であり；
RAが、それぞれ独立して、-ハロゲン、-CF3、-OR1、-L-OR1、-OCF3、-SR1、-CN、-NO2、-NR1R3、-L-NR1R1、-C(O)OR1、S(O)2R4、-C(O)N(R1)R3、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR1、-OC(O)N(R1)R3、-OC(O)R1、-C(O)R4、-NHC(O)N(R1)R3、-NR1C(O)N(R1)R3、または、-N3であり；
Rdが、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ベンジル基、または、-ヘテロシクリル基である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記化合物が下記式IIAで表される化合物またはその塩もしくはプロドラッグである、請求項１に記載の方法。
【化３】
2017529075.tif 000003
［式中、Z、WおよびR2は請求項１と同義である］
【請求項５】
Zが、-CN、-C(O)O-C1-6アルキル基、-C(O)NH-C1-6アルキル基、または、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-ヘテロアリール基であり；
Wが、-N(R1)R3、-NR1-C1-6アルキレン-N(R1)R3、-O-C1-6アルキレン-N(R1)R3、-S-C1-6アルキレン-N(R1)R3、-NR1-C1-6アルキレン-NR1RA、-NR1-C1-6アルキレン-(NR1-C1-6アルキレン)n-NR1R3、または、-NR1-C1-6アルキレン-(NR1-C1-6アルキレン)n-NR1RAであり、ここで、nは0、1、2または3に等しい整数であり、R1およびR3が窒素原子に結合する場合、任意で、R1およびR3は、窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成し、当該環は、任意で、1または2以上のRAまたはR4で置換され；
R1が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ヘテロシクリル基、-ヘテロアリール基、または、-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R2が、-H、-C1-6アルキル基、-C(O)R4、アルキレン基またはヘテロアリール基上で1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-C1-6アルキレン-ヘテロアリール基、1または2以上のRAまたはR4で任意に置換された-C1-6アルキレン-ヘテロシクリル基、または、アルキレン基またはヘテロアリール基上で1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-C1-6アルキレン-アリール基であり；
R3が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、または、-C1-5ペルフルオロ基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記ペルフルオロアルキル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R4が、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ヘテロシクリル基、-アリール基、-ヘテロアリール基、または、-ベンジル基であり、ここで、前記アルキル基、前記アルケニル基、前記アルキニル基、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、前記ペルフルオロアルキル基、前記ヘテロシクリル基、前記アリール基、前記ヘテロアリール基、および、前記ベンジル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
RAが、それぞれ独立して、-ハロゲン、-CF3、-OR1、-L-OR1、-OCF3、-SR1、-CN、-NO2、-NR1R3、-L-NR1R1、-C(O)OR1、S(O)2R4、-C(O)N(R1)R3、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR1、-OC(O)N(R1)R3、-OC(O)R1、-C(O)R4、-NHC(O)N(R1)R3、-NR1C(O)N(R1)R3、または、-N3であり；
Rdが、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C2-6アルケニル基、-C2-6アルキニル基、-C3-7シクロアルキル基、-C3-7シクロアルケニル基、-C1-5ペルフルオロ基、-ベンジル基、または、-ヘテロシクリル基である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
Zが、CO2Meまたは2-メチル-2H-テトラゾール-5-イルであり；
R2がベンジル基またはHであり；
WがNH-L-N(R1)R3であり、ここで、LはC2-4アルキレン基またはC3-7シクロアルキレン基であり、R1およびR3はC1-4アルキル基またはHであるか；R1およびR3は、R1およびR3が結合する窒素原子と一緒になって、N、OおよびSから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する3〜7員環を形成し、当該環は、任意で、1または2以上のRAまたはR4で置換される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
Ｗが
【化４】
2017529075.tif 000004
である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記化合物が下記式IIAで表される化合物またはその塩である、請求項１に記載の方法。
【化５】
2017529075.tif 000005
［式中、Zは、-C(O)O-C1-4アルキル基、または、1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された、-ヘテロアリール基であり； 
Wは、-N(R1)R3、-NR1-C1-6アルキレン-N(R1)R3、-O-C1-6アルキレン-N(R1)R3、-S-C1-6アルキレン-N(R1)R3、または、-NR1-C1-6アルキレン-(NR1-C1-6アルキレン)n-NR1R3であり、ここで、nは0、1、2または3に等しい整数であり、R1およびR3が同じ窒素原子に結合する場合、R1およびR3は、任意で、窒素原子と一緒になって、NおよびOから選択される1または2以上の他のヘテロ原子を任意で有する5〜６員環を形成し、当該環は、任意で、1または2以上のRAまたはR4で置換され；
R1は、それぞれ独立して、-H、-C1-6アルキル基、-C3-7シクロアルキル基、または、-ヘテロシクリル基であり、ここで、前記アルキル基、前記シクロアルキル基、前記ヘテロシクリル基は、それぞれ独立して、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R2は、-H、-C1-6アルキル基、アルキレン基またはヘテロアリール基上で1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-C1-6アルキレン-ヘテロアリール基；または、アルキレン基またはアリール基上で1または2以上のRA置換基またはR4置換基で任意に置換された-C1-6アルキレン-アリール基であり；
R3は、それぞれ独立して、-Hまたは-C1-6アルキル基であり、ここで、前記アルキル基は、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
R4は、それぞれ独立して、-Hまたは-C1-6アルキル基であり、ここで、前記アルキル基は、1、2または3つのRA置換基またはRd置換基で任意に置換され；
RAは、それぞれ独立して、-ハロゲン、-CF3、-OR1、-OCF3、-SR1、-CN、-NO2、-NR1R3、-C(O)OR1、S(O)2R4、-C(O)N(R1)R3、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR1、-OC(O)N(R1)R3、-OC(O)R1、-C(O)R4、-NHC(O)N(R1)R3、または、-NR1C(O)N(R1)R3であり；
Rdは、それぞれ独立して、-Hまたは-C1-6アルキル基である］
【請求項９】
前記化合物が、
【化６】
2017529075.tif 000006
あるいは、その塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記細胞が幹細胞および／または前駆細胞を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記幹細胞が原始造血細胞を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記原始造血細胞が臍帯血、骨髄または末梢血に由来する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ウイルスベクターが組み込み欠損型ウイルスベクターである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ウイルスベクターがレンチウイルスベクターである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記レンチウイルスベクターがシュードタイプレンチウイルスベクターである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記レンチウイルスベクターが、水疱性口炎ウイルスＧタンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）またはＲＡＤ１１４エンベロープタンパク質でシュードタイプされている、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記細胞を前記形質導入前に前記化合物と接触させる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記細胞を前記形質導入前および前記形質導入中に前記化合物と接触させる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記細胞を前記化合物と２時間〜２２時間接触させる、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
（ｉ）請求項１および１０〜１２のいずれか一項で定義された細胞、（ｉｉ）請求項１〜９のいずれか一項で定義された少なくとも１つの化合物、および、（ｉｉｉ）請求項１および１３〜１６のいずれか一項で定義されたウイルスベクターを含む、組成物。
【請求項２１】
（ｉｖ）細胞増殖に適した培地を更に含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記細胞が幹細胞を含む、請求項２０または２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記幹細胞が原始造血細胞を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記原始造血細胞が臍帯血、骨髄または末梢血に由来する、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法により得られた形質導入細胞集団。
【請求項２６】
請求項２５に記載の形質導入細胞集団を含む、医薬組成物。
【請求項２７】
細胞遺伝子治療を必要とする対象を治療するための医薬組成物であって、
請求項２５に記載の形質導入細胞集団を有効量含む、医薬組成物。
【請求項２８】
前記対象が血液病またはリソソーム蓄積症に罹患している、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記血液病またはリソソーム蓄積症が、ウィスコット・アルドリッチ症候群（WAS）、異染性白質ジストロフィー（MLD）、白血球接着不全症、Ｘ連鎖性慢性肉芽腫症、ファンコニ貧血、副腎白質ジストロフィー、ムコ多糖症ＩＩＩＡ型、重症複合免疫不全症（SCID）、または、アデノシンデアミナーゼ（ADA）欠損症である、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
細胞内で目的遺伝子を発現させる方法であって、
請求項１〜９のいずれか一項で定義された一般式Iで表される化合物を前記細胞と接触させるステップ、および、
前記目的遺伝子をコードする核酸を含むウイルスベクターを前記細胞に形質導入するステップを含む、方法。
【請求項３１】
前記ウイルスベクターが請求項１および１３〜１６のいずれか一項で定義されたものである、請求項３０に記載の方法。