【手続補正書】
【提出日】平成30年8月13日(2018.8.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
子宮頸部腫瘍の処置において、該処置を必要とする対象に使用するための融合たんぱく質をコードするポリヌクレオチドを含む医薬組成物であって、該対象は、第１の用量の該組成物、および、第２の用量の該組成物の投与を受け、該対象は、該第１の用量後の測定において、亢進した細胞性免疫応答を示し、該融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、３つ以上のアミノ酸配列を含み、
該融合たんぱく質は、ｐ５３に結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質と二量体を形成せず、該融合たんぱく質は、ｐＲｂに結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質と二量体を形成しない、組成物。
【請求項２】
前記対象における前記細胞性免疫応答は、前記第２の用量の投与後に測定された、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記対象は、第３の用量の前記組成物の投与を受ける、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記第１の用量は、少なくとも約０．５ｍｇ、少なくとも約１ｍｇ、少なくとも約１．５ｍｇ、少なくとも約２ｍｇ、少なくとも約２．５ｍｇ、少なくとも約３ｍｇ、少なくとも約３．５ｍｇ、少なくとも約４ｍｇ、少なくとも約４．５ｍｇ、又は少なくとも約５ｍｇである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記第２の用量は、少なくとも約０．５ｍｇ、少なくとも約１ｍｇ、少なくとも約１．５ｍｇ、少なくとも約２ｍｇ、少なくとも約２．５ｍｇ、少なくとも約３ｍｇ、少なくとも約３．５ｍｇ、少なくとも約４ｍｇ、少なくとも約４．５ｍｇ、又は少なくとも約５ｍｇである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記第１の用量は、約０．５ｍｇ〜約５ｍｇであり、前記第２の用量は、約０．５ｍｇ〜約５ｍｇである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記亢進した細胞性免疫応答は、多機能性Ｔ細胞数の増加、亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答、又はそれらの任意の組み合わせを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記多機能性Ｔ細胞は、フローサイトメトリーにより測定した場合、ＩＦＮ−γ、ＩＬ
−２、ＴＮＦ−α、ＭＩＰ−β、ＣＤ１０７ａ／ｂ、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、少なくとも３種類、少なくとも４種類、又は少なくとも５種類のマーカーを示す、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記多機能性Ｔ細胞数は、前記ポリヌクレオチドの前記投与前の多機能性Ｔ細胞数より、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、又は少なくとも約３０％増加する、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答は、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＴＮＦ−α、ＭＩＰ−β、ＣＤ１０７ａ／ｂ、又はそれらの任意の組み合わせの亢進した発現、或いはＣＤ３８＋Ｋｉ６７＋ＣＤ８  Ｔ細胞の増殖を含む、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答は、ＣＤ３８＋Ｋｉ６７＋ＣＤ８  Ｔ細胞数における、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１１倍、少なくとも約１２倍、少なくとも約１３倍、少なくとも約１４倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約１６倍、少なくとも約１７倍、少なくとも約１８倍、少なくとも約１９倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２１倍、少なくとも約２２倍、少なくとも約２３倍、少なくとも約２４倍、又は少なくとも約２５倍の増加である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ＩＬ−４又はＩＬ−１７ａの発現が、前記投与後に亢進されない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記子宮頸部腫瘍は、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、腺癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、神経内分泌腫瘍（ＮＥＴ）、すりガラス細胞癌、絨毛腺癌（ＶＧＡ）、非癌性悪性腫瘍、メラノーマ、リンパ腫、又は子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、又は８つのアミノ酸配列を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記融合たんぱく質は、配列番号１０に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ポリヌクレオチドは、配列番号９に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ポリヌクレオチドは、異種ポリペプチドをコードする核酸配列を更に含み、該異種ポリペプチドは、Ｆｍｓ関連チロシンキナーゼ３リガンド（「ＦＬＴ３Ｌ」）又はその一部を含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ポリヌクレオチドは、ｔＰＡのシグナルペプチドをコードする核酸配列を更に含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
子宮頸部腫瘍を除去するための外科手術を必要としない対象を特定する際に使用するための、融合たんぱく質をコードするポリヌクレオチドを含む医薬組成物であって、該対象は、第１の用量の該組成物の投与を受け、該対象は、該第１の用量後の測定において、亢進した細胞性免疫応答を示し、該融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、３つ以上のアミノ酸配列を含み、
該融合たんぱく質は、ｐ５３に結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質と二量体を形成せず、該融合たんぱく質は、ｐＲｂに結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質と二量体を形成しない、組成物。
【請求項２０】
前記対象は、第２の用量の前記組成物の投与を受ける、請求項１９に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
更に、融合たんぱく質をコードするポリヌクレオチドを含む医薬組成物と、対象への、この医薬組成物の１回の投与又は２回の投与が亢進した細胞性免疫応答を示さない場合、この医薬組成物の更なる投与を中止することに関する指示と、を含む、医薬キットであって、融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、３つ以上のアミノ酸配列を含み、
融合たんぱく質は、ｐ５３に結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質と二量体を形成せず、融合たんぱく質は、ｐＲｂに結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質と二量体を形成しない、医薬キットが開示される。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
子宮頸部腫瘍の処置において、該処置を必要とする対象に使用するための融合たんぱく質をコードするポリヌクレオチドを含む医薬組成物であって、該対象は、該組成物を必要とする対象に対する第１の用量の該組成物の投与を受け、かつ、第２の用量の該組成物の投与を受け、該対象は、該第１の用量の投与後の測定において、亢進した細胞性免疫応答を示し、該融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、３つ以上のアミノ酸配列を含み、
該融合たんぱく質は、ｐ５３に結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質と二量体を形成せず、該融合たんぱく質は、ｐＲｂに結合しないか、又は、ＨＰＶ１６若しくはＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質と二量体を形成しない、組成物。
（項目２）
前記対象における前記細胞性免疫応答は、前記第２の用量の投与後に測定された、項目１に記載の使用のための組成物。
（項目３）
前記対象は、第３の用量の前記組成物の投与を受ける、項目１又は２に記載の使用のための組成物。
（項目４）
前記第１の用量は、少なくとも約０．５ｍｇ、少なくとも約１ｍｇ、少なくとも約１．５ｍｇ、少なくとも約２ｍｇ、少なくとも約２．５ｍｇ、少なくとも約３ｍｇ、少なくとも約３．５ｍｇ、少なくとも約４ｍｇ、少なくとも約４．５ｍｇ、又は少なくとも約５ｍｇである、項目１〜３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目５）
前記第２の用量は、少なくとも約０．５ｍｇ、少なくとも約１ｍｇ、少なくとも約１．５ｍｇ、少なくとも約２ｍｇ、少なくとも約２．５ｍｇ、少なくとも約３ｍｇ、少なくとも約３．５ｍｇ、少なくとも約４ｍｇ、少なくとも約４．５ｍｇ、又は少なくとも約５ｍｇである、項目１〜４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目６）
前記第１の用量及び前記第２の用量は、同一か又は異なる、項目１〜５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目７）
前記第１の用量は、約１ｍｇ〜約４ｍｇであり、前記第２の用量は、約１ｍｇ〜約４ｍｇである、項目１〜６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目８）
前記亢進した細胞性免疫応答は、亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答、亢進したＣＤ４  Ｔ細胞応答、亢進したサイトカイン分泌、又はそれらの任意の組み合わせを含む、項目１〜７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目９）
前記亢進した細胞性免疫応答は、多機能性Ｔ細胞数の増加を含む、項目１〜８のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目１０）
前記多機能性Ｔ細胞は、フローサイトメトリーにより測定した場合、ＩＦＮ−γ、ＩＬ
−２、ＴＮＦ−α、ＭＩＰ−β、ＣＤ１０７ａ／ｂ、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、少なくとも３種類、少なくとも４種類、又は少なくとも５種類のマーカーを示す、項目９に記載の使用のための組成物。
（項目１１）
前記多機能性Ｔ細胞数は、前記ポリヌクレオチドの前記投与前の多機能性Ｔ細胞数より、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、又は少なくとも約３０％増加する、項目９又は１０に記載の使用のための組成物。
（項目１２）
前記亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答は、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＴＮＦ−α、ＭＩＰ−β、ＣＤ１０７ａ／ｂ、又はそれらの任意の組み合わせの亢進した発現を含む、項目８に記載の使用のための組成物。
（項目１３）
前記亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答は、ＣＤ３８＋Ｋｉ６７＋ＣＤ８  Ｔ細胞の増殖を含む、項目８に記載の使用のための組成物。
（項目１４）
前記亢進したＣＤ８  Ｔ細胞応答は、ＣＤ３８＋Ｋｉ６７＋ＣＤ８  Ｔ細胞数における、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１１倍、少なくとも約１２倍、少なくとも約１３倍、少なくとも約１４倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約１６倍、少なくとも約１７倍、少なくとも約１８倍、少なくとも約１９倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２１倍、少なくとも約２２倍、少なくとも約２３倍、少なくとも約２４倍、又は少なくとも約２５倍の増加である、項目１３に記載の使用のための組成物。
（項目１５）
前記亢進したＣＤ４  Ｔ細胞応答は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ４細胞の増殖を含む、項目８に記載の使用のための組成物。
（項目１６）
前記亢進したＣＤ４  Ｔ細胞応答は、ＩＦＮ−γ＋ＣＤ４細胞数における、少なくとも約１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、又は４．０倍の増加である、項目８〜１５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目１７）
前記亢進した細胞性免疫応答は、亢進したＨＰＶ１６及びＨＰＶ１８のＥ６及びＥ７特異的ＩＦＮ−γ応答を含む、項目８〜１６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目１８）
前記亢進したサイトカイン発現は、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＴＨＦ−α、又はそれらの任意の組み合わせの亢進した発現を含む、項目８〜１７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目１９）
前記ＩＦＮ−γの発現は、前記投与前のレベルに対して、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも４５倍、少なくとも５０倍亢進される、項目１８に記載の使用のための組成物。
（項目２０）
前記ＩＬ−２の発現は、前記投与前のレベルに対して、少なくとも２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１１倍、少なくとも約１２倍、少なくとも約１３倍、少なくとも約１４倍、又は少なくとも約１５倍亢進される、項目１８に記載の使用のための組成物。
（項目２１）
前記ＴＮＦ−αの発現は、前記投与前のレベルに対して、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約１６倍、少なくとも約１７倍、少なくとも約１８倍、少なくとも約１９倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２１倍、少なくとも約２２倍、少なくとも約２３倍、少なくとも約２４倍、又は少なくとも約２５倍亢進される、項目１８に記載の使用のための組成物。
（項目２２）
ＩＬ−４又はＩＬ−１７ａの発現が、前記投与後に亢進されない、項目１〜２１のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２３）
前記子宮頸部腫瘍は、良性腫瘍又は悪性腫瘍である、項目１〜２２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２４）
前記子宮頸部腫瘍は、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、腺癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、神経内分泌腫瘍（ＮＥＴ）、すりガラス細胞癌、絨毛腺癌（ＶＧＡ）、非癌性悪性腫瘍、メラノーマ、リンパ腫、又は子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）である、項目１〜２３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２５）
前記融合たんぱく質は、
（１）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（２）ＨＰＶ１６のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（３）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＮ末端部、
（４）ＨＰＶ１６のＥ７たんぱく質のＣ末端部、
（５）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＮ末端部、
（６）ＨＰＶ１８のＥ６たんぱく質のＣ末端部、
（７）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＮ末端部、及び
（８）ＨＰＶ１８のＥ７たんぱく質のＣ末端部から選択される、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、又は８つのアミノ酸配列を含む、項目１〜２４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２６）
前記融合たんぱく質は、配列番号１０に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目１〜２５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２７）
前記ポリヌクレオチドは、配列番号９に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、項目１〜２６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２８）
前記ポリヌクレオチドは、異種ポリペプチドをコードする核酸配列を更に含む、項目１〜２７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目２９）
前記異種ポリペプチドは、Ｆｍｓ関連チロシンキナーゼ３リガンド（「ＦＬＴ３Ｌ」）又はその一部を含む、項目２８に記載の使用のための組成物。
（項目３０）
前記ポリヌクレオチドは、シグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を更に含む、項目１〜２９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目３１）
前記シグナルペプチドは、組織プラスミノーゲンアクチベータ（ｔＰＡ）のシグナルペ
プチド、ヘルペス単純ウイルス糖たんぱく質Ｄ（ＨＳＶ  ｇＤ）のシグナルペプチド、成長ホルモンのシグナルペプチド、及びそれらの任意の組み合わせから選択される、項目３０に記載の使用のための組成物。
（項目３２）
前記シグナルペプチドは、ｔＰＡのシグナルペプチドである、項目３１に記載の使用のための組成物。
（項目３３）
前記ポリヌクレオチドは、ベクターである、項目１〜３２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
（項目３４）
前記ポリヌクレオチドは、ＤＮＡワクチンである、項目１〜３３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。