【手続補正書】
【提出日】平成30年2月20日(2018.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルにおける赤血球の存在、または、プロセス、デバイス、或いは装置への赤血球の添加、を確認するための対照試験であって、サンプルを、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子と接触させる工程を含む、対照試験。
【請求項２】
サンプル中で赤血球をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出する方法であって、サンプルを、
（ｉ）ＧＰＡ；
（ｉｉ）ＧＰＢ；
（ｉｉｉ）Ｈ；および
（ｖｉ）Ｒｈ２９
の抗原を発現する赤血球についてプローブする工程を含む方法。
【請求項３】
サンプル中で赤血球をｉｎ  ｖｉｔｒｏで検出する方法であって、
サンプルを、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；および
（ｖｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の抗原を発現する赤血球についてプローブする工程をさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
サンプルが、赤血球を含むか、潜在的に含むか、または含むと疑われる、任意の体積または量の液体または物質であり、かつ、全血のサンプル、またはそれから調製された成体、胎児、新生児および／または出生前の血漿、血清もしくは赤血球のサンプルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項５】
プロセス、デバイス、装置、アッセイおよび／またはアッセイ系への赤血球の添加を確認するための陽性対照試験として使用される、請求項１に記載の対照試験。
【請求項６】
抗Ｈ結合因子、抗グリコフォリンＡ、Ｂ結合因子および／または抗Ｒｈ２９結合因子を使用する、請求項２〜５のいずれか１項に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項７】
さらに、抗−Ｅｎa結合因子、Ｇｅ：２結合因子、Ｇｅ：３結合因子、およびＷｒb結合因子を使用する、請求項５に記載の対照試験。
【請求項８】
結合因子が、
（ｉ）抗体またはその抗原結合フラグメント、
（ｉｉ）ポリクローナルもしくはモノクローナル抗体、またはいずれかの抗原結合フラグメント
（ｉｉｉ）アプタマー、
（ｉｖ）低分子抗体模倣物、
（ｖ）核酸リガンド、および
（ｖｉ）赤血球抗原に結合することができる細胞由来の受容体
からなる群から選択される、請求項６または７に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項９】
結合因子が、任意の適切な基板上に固定、結合または吸着しており、結合因子が、基板上の１つまたは複数の別個の所定の位置に固定、結合または吸着してもよい請求項６〜８のいずれか１項に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項１０】
結合因子が、複数／一連の別のおよび／または別個のスポットとして、または、アレイまたはマイクロアレイとして、固定されている、請求項９に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項１１】
結合因子が、既存のアッセイ系、交差適合、または血液型判定アッセイ系の基板に固定されている、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項１２】
基板が、
（ｉ）グリシドキシプロピルトリエトキシシラン；
（ｉｉ）ポリ−ｌ−リジン；
（ｉｉｉ）アミノプロピルシラン；
（ｉｖ）カルボキシシラン；
（ｖ）ヒドロゲルおよびポリマー−ブラシ；
（ｖｉ）自己組織化単分子層；および
（ｖｉｉ）シランベースのコーティング
からなる群から選択される１つまたは複数の官能性ポリマーで官能化されている、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の試験、または、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項１３】
赤血球が、自己蛍光によって検出される、請求項２に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法。
【請求項１４】
赤血球の検出のためのアッセイまたはデバイスであって、赤血球抗原ＧＰＡ、ＧＰＢ、ＨおよびＲｈ２９に結合することができる因子が固定されており、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；および
（ｖｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の別の因子が固定されていてもよい、基板を含む、アッセイまたはデバイス。
【請求項１５】
血液交差適合性アッセイにおける使用のための基板であって、抗体に結合することができる因子と赤血球抗原ＧＰＡ、ＧＰＢ、ＨおよびＲｈ２９に結合することができる因子が固定されており、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；および
（ｖｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の別の因子が固定されていてもよい、基板。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０４】
エラーバーが含まれる場合、各々のサンプルについての値と関連する変異係数％は以下のとおり算出した。各々のサンプルの複製のＣＶ％を算出した（これは、Ｓ／Ｎ比または実際の値で行った）。平均値は、標準偏差であり、次いで１００を掛けて、ＣＶ％を得た。
引用文献
Robb. J.S., Roy, D.J., Ghazal, P., Allan, J. and Petrik, J. (2006). “Development of non-agglutination microarray blood grouping” Transfusion Medicine. 16, 119-129.
Campbell, C.J., O'Looney, N., Chong Kwan, M., Robb, J.S., Ross, A.J., Beattie, J.S., Petrik, J. and Ghazal, P. (2006). “Cell Interaction Microarray for Blood Phenotyping” Analytical Chemistry. 78, 1930-1938.
British Committee for Standards in Haematology; Milkins, C., et al. (2013). Guidelines for pre-transfusion compatibility procedures in blood transfusion laboratories. Transfusion Medicine 23, 3-35.
Issit, P.D. and Anstee, D.J. (1998) Applied Blood Group Serology. Fourth Edition. Montgomery Scientific Publications.
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕サンプル中で赤血球を検出する方法であって、サンプルを、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の抗原を発現する赤血球についてプローブする工程を含む方法。
〔２〕サンプル中の赤血球を検出する方法であって、サンプルを、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子と接触させる工程を含み、
結合因子に結合している赤血球の検出は、サンプルが赤血球を含んでいることを示す、方法。
〔３〕赤血球を検出する方法における使用のための、および／またはアッセイもしくはアッセイ系における使用のための、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子。
〔４〕赤血球を検出する方法における、および／またはアッセイもしくはアッセイ系における使用のための、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子の使用。
〔５〕方法、アッセイまたはアッセイ系が、サンプルまたはプロセスにおける赤血球の存在を確認するための対照試験である、前記〔３〕に記載の１つまたは複数の結合因子、または前記〔４〕に記載の使用。
〔６〕サンプルが、全血のサンプル、またはそれから調製された成体、胎児、新生児および／または出生前の血漿、血清もしくは赤血球のサンプルである、前記〔１〕または〔２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７〕サンプルが、（ｉ）赤血球を含むか、潜在的に含むか、または含むと疑われる、任意の体積または量の液体または物質である、前記〔１〕または〔２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８〕アッセイの対照試験である、前記〔１〕または〔２〕に記載の方法。
〔９〕（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子を含む、アッセイのための対照試験。
〔１０〕プロセス、デバイス、装置、アッセイおよび／またはアッセイ系への赤血球の添加を確認するための陽性対照試験として使用される、前記〔９〕に記載の対照試験。
〔１１〕赤血球抗原のうちの１つまたは複数に結合することができる結合因子が、
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＧＰＡ；および
（ｉｉｉ）Ｒｈ２９、
からなる群から選択される抗原のうちの１つまたは複数に結合することができる、前記〔２〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１２〕赤血球抗原のうちの１つまたは複数に結合することができる結合因子が、抗Ｈ結合因子、抗グリコフォリンＡ、Ｂ結合因子および／または抗Ｒｈ２９結合因子である、前記〔２〕〜〔１１〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１３〕結合因子が、
（ｉ）抗体またはその抗原結合フラグメント、
（ｉｉ）アプタマー、
（ｉｉｉ）低分子抗体模倣物、
（ｉｖ）核酸リガンド、および
（ｖ）赤血球抗原に結合することができる細胞由来の受容体
からなる群から選択される、前記〔２〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１４〕結合因子が、抗体またはその抗原結合フラグメントである、前記〔２〕〜〔１３〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１５〕結合因子が、ポリクローナル抗体もしくはモノクローナル抗体、またはいずれかの抗原結合フラグメントである、前記〔１４〕に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１６〕結合因子が、任意の適切な基板上に固定、結合または吸着している、前記〔２〕〜〔１５〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１７〕結合因子が、基板の全てまたは一部に固定、結合または吸着している、前記〔２〕〜〔１６〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１８〕結合因子が、基板上の１つまたは複数の別個の所定の位置に固定、結合または吸着している、前記〔２〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔１９〕結合因子が、複数／一連の別のおよび／または別個のスポットとして固定されている、前記〔１８〕に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２０〕基板上の各々の別個のまたは所定の位置またはスポットが独立して、１つまたは複数の固定されている結合因子を含む、前記〔１８〕または〔１９〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２１〕結合因子が、アレイまたはマイクロアレイとして、基板に固定、結合および／または吸着している、前記〔２０〕に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２２〕結合因子が、既存のアッセイ系の基板に固定されている、前記〔２〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２３〕既存のアッセイ系が、交差適合、または血液型判定アッセイ系である、前記〔２〕〜〔２２〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２４〕基板が、
（ｉ）グリシドキシプロピルトリエトキシシラン；
（ｉｉ）ポリ−ｌ−リジン；
（ｉｉｉ）アミノプロピルシラン；
（ｉｖ）カルボキシシラン；
（ｖ）ヒドロゲルおよびポリマー−ブラシ；
（ｖｉ）自己組織化単分子層；および
（ｖｉｉ）シランベースのコーティング
からなる群から選択される１つまたは複数の官能性ポリマーで官能化されている、前記〔１６〕〜〔２２〕のいずれか１項に記載の方法、結合因子、使用または対照試験。
〔２５〕赤血球が、自己蛍光によって検出される、前記〔２〕に記載の方法。
〔２６〕赤血球の検出のためのアッセイまたはデバイスであって、
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子が固定されている基板を含む、アッセイまたはデバイス。
〔２７〕血液交差適合性アッセイにおける使用のための基板であって、抗体に結合することができる１つまたは複数の結合因子、ならびに
（ｉ）Ｅｎa；
（ｉｉ）Ｇｅ：２；
（ｉｉｉ）Ｇｅ：３；
（ｉｖ）ＧＰＡ；
（ｖ）ＧＰＢ；
（ｖｉ）Ｈ；
（ｖｉｉ）Ｒｈ２９；および
（ｖｉｉｉ）Ｗｒb
からなる群から選択される１つまたは複数の赤血球抗原に結合することができる１つまたは複数の結合因子が固定されている基板。