【手続補正書】
【提出日】平成30年8月9日(2018.8.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的抗原に結合するキメラ抗原受容体であって、
ｉ．親タンパク質又はそのドメインから発達させた、且つ異常条件下での分析における標的抗原への結合における活性と比較して、正常生理条件での分析における標的抗原への結合における同活性の低下を有する少なくとも１つの抗原特異的標的領域と、
ｉｉ．膜貫通ドメインと、
ｉｉｉ．細胞内シグナル伝達ドメインと
を含む、キメラ抗原受容体。
【請求項２】
前記抗原特異的標的領域が、正常生理条件における標的抗原への結合活性に対する異常条件下における結合親和性の比率、少なくとも１．６、又は少なくとも１．８、又は少なくとも２、又は少なくとも２．５、又は少なくとも３、又は少なくとも５、又は少なくとも７、又は少なくとも８、又は少なくとも９、又は少なくとも１０、又は少なくとも１５、又は少なくとも２０を有する、請求項１に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項３】
前記抗原特異的標的領域が、異常条件下での前記分析において前記親タンパク質又はそのドメインの抗原特異的標的領域と比較して活性の増加を有する、請求項１又は２に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項４】
前記抗原特異的標的領域が、異常条件下での前記分析において前記親タンパク質又はそのドメインの抗原特異的標的領域と比較して選択性の増加を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項５】
前記キメラ抗原受容体を含有するタンパク質が前記親タンパク質又はそのドメインと比較して発現レベルの増加を有するように構成される、請求項１〜４のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項６】
細胞外スペーサードメイン又は少なくとも１つの共刺激ドメインをさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項７】
前記少なくとも１つの抗原特異的標的領域が２つの抗原特異的標的領域を含み、各抗原特異的標的領域が異なる標的抗原又は同じ標的抗原の異なるエピトープと結合する、請求項１〜６のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項８】
前記少なくとも１つの抗原特異的標的領域が、抗体、リガンド、リガンドの受容体結合ドメイン、受容体、受容体のリガンド結合ドメイン、及びａｆｆｉｂｏｄｙから選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項９】
前記抗体が、完全長抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、（Ｆａｂ’）２フラグメント、Ｆｖフラグメント、及び二価一本鎖抗体又はダイアボディから選択される、請求項８に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１０】
前記細胞外スペーサードメインが、抗体のＦｃフラグメント、抗体のヒンジ領域、抗体のＣＨ２領域、抗体のＣＨ３領域、人工スペーサー配列及びこれらの組み合わせから選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１１】
前記膜貫通ドメインが、人工疎水性配列、並びにＩ型膜貫通タンパク質、Ｔ細胞受容体のα鎖、β鎖又はζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ１５４の膜貫通ドメインから選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１２】
前記共刺激ドメインが、ＴＮＦＲスーパーファミリーのタンパク質、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＤａｐｌＯ、ＣＤ２７、ＣＤ２、ＣＤ５、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１、Ｌｃｋ、ＴＮＦＲ−Ｉ、ＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｆａｓ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ  ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３の共刺激ドメインから選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１３】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ヒトＣＤ３ζ鎖、ＦｃｙＲＩＩＩ、ＦｃｓＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質テール、細胞質受容体を担持する免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄの細胞質シグナル伝達ドメインから選択される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１４】
前記標的抗原が癌細胞の表面上に位置する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１５】
前記標的抗原が、４−１ＢＢ、５Ｔ４、腺癌抗原、α−フェトプロテイン、ＢＡＦＦ、Ｂリンパ腫細胞、Ｃ２４２抗原、ＣＡ−１２５、炭酸脱水酵素９（ＣＡ−ＩＸ）、Ｃ−ＭＥＴ、ＣＣＲ４、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２２、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３３、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４  ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７４、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＮＴ０８８８、ＣＴＬＡ−４、ＤＲ５、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ３、ＦＡＰ、フィブロネクチンエクストラドメイン−Ｂ、葉酸受容体１、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、糖タンパク質７５、ＧＰＮＭＢ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＧＦ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ−１受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩｇＧｌ、Ｌｌ−ＣＡＭ、ＩＬ−１３、ＩＬ−６、インスリン様成長因子Ｉ受容体、インテグリンα５β１、インテグリンανβ３、ＭＯＲＡｂ−００９、ＭＳ４Ａ１、ＭＵＣ１、ムチンＣａｎＡｇ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＰＣ−１Ｃ、ＰＤＧＦ−Ｒ  ａ、ＰＤＬ１９２、ホスファチジルセリン、前立腺癌細胞、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＲＯＲ１、ＳＣＨ  ９００１０５、ＳＤＣ１、ＳＬＡＭＦ７、ＴＡＧ−７２、テネイシンＣ、ＴＧＦβ２、ＴＧＦ−β、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、腫瘍抗原ＣＴＡＡ１６．８８、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ２、及びビメンチンから選択される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１６】
前記正常生理条件が、正常生理的温度、ｐＨ、浸透圧、重量オスモル濃度、酸化的ストレス及び電解質濃度のうちの１つ以上から選択される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１７】
前記正常生理条件が温度であり；及び前記条件的活性型生物学的タンパク質が正常生理的温度では実質的に不活性であり、且つ前記正常生理的温度未満の異常温度では活性である、請求項１６に記載のキメラ抗原受容体。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列を含む、発現ベクター。
【請求項１９】
前記発現ベクターが、レンチウイルスベクター、γレトロウイルスベクター、フォーミーウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、操作されたハイブリッドウイルス、及びトランスポゾン媒介性ベクターから選択される、請求項１８に記載の発現ベクター。
【請求項２０】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列を含む、遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２１】
前記細胞傷害性細胞がＴ細胞である、請求項２０に記載の遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２２】
前記Ｔ細胞が、ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、及びエフェクターメモリーＴ細胞から選択される、請求項２１に記載の遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２３】
前記細胞傷害性細胞が、ナチュラルキラー細胞、活性化ＮＫ細胞、好中球、好酸球、好塩基球、Ｂ細胞、マクロファージ及びリンホカイン活性化キラー細胞から選択される、請求項２０に記載の遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２４】
前記ポリヌクレオチド配列が前記細胞傷害性細胞のゲノムに組み込まれる、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２５】
前記細胞傷害性細胞が、治療用途に十分な量の前記キメラ抗原受容体を産生する、請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細胞傷害性細胞。
【請求項２６】
ａ．請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体の１つ以上と、
ｂ．薬学的に受容可能な賦形剤と
を含む、医薬組成物。
【請求項２７】
少なくとも１つの抗原特異的標的領域と膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ抗原受容体の作製方法であって、
標的抗原に特異的に結合する親タンパク質又はそのドメインから、
ｉ．前記親タンパク質又はそのドメインをコードするＤＮＡを１つ以上の発達的技術を用いて発達させる工程であって、それにより変異ＤＮＡを作成することと、
ｉｉ．前記変異ＤＮＡを発現させる工程であって、それにより変異ポリペプチドを得ることと、
ｉｉｉ．前記変異ポリペプチドを正常生理条件下での分析及び異常条件下での分析に供することと、
ｉｖ．工程（ｉｉｉ）において発現した前記変異ポリペプチドから、異常条件下での分析における標的抗原への結合における活性と比較して、正常生理条件での分析における標的抗原への結合における同活性の低下を呈する条件的活性型抗原特異的標的領域を選択することと
によって前記少なくとも１つの抗原特異的標的領域を生成する工程
を含む方法。
【請求項２８】
前記抗原特異的標的領域が、正常生理条件での前記分析において前記親タンパク質又はそのドメインの抗原特異的標的領域と比較して前記標的抗原に対する結合親和性の低下もまた有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗原特異的標的領域が、異常条件下での前記分析において前記親タンパク質又はそのドメインの抗原特異的標的領域と比較して活性の増加を有する、請求項２７又は２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗原特異的標的領域が、異常条件下での前記分析において前記親タンパク質又はそのドメインの抗原特異的標的領域と比較して選択性の増加を有する、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記抗原受容体を含有するタンパク質が前記親タンパク質又はそのドメインと比較して発現レベルの増加を有するように構成される、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記正常生理条件が、正常生理的温度、ｐＨ、浸透圧、重量オスモル濃度、酸化的ストレス及び電解質濃度のうちの１つ以上から選択される、請求項２７〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記正常生理条件が温度であり；及び前記条件的活性型生物学的タンパク質が、前記正常生理的温度では実質的に不活性であり、且つ前記正常生理的温度未満の異常温度では活性である、請求項２７〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記発達させる工程が、ＰＣＲ、エラープローンＰＣＲ、シャッフリング、オリゴヌクレオチド特異的突然変異誘発、アセンブリＰＣＲ、セクシャルＰＣＲ突然変異誘発、インビボ突然変異誘発、カセット突然変異誘発、再帰的アンサンブル突然変異誘発、指数関数的アンサンブル突然変異誘発、部位特異的突然変異誘発、遺伝子リアセンブリ、遺伝子部位飽和突然変異誘発、インビトロ突然変異誘発、リガーゼ連鎖反応、オリゴヌクレオチド合成及びこれらの組み合わせから選択される技術を含む、請求項２７〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
遺伝子工学的に改変された細胞傷害性細胞の、対象の癌の治癒的及び／又は予防的治療用医薬の製造のための使用であって、遺伝子工学的に改変された細胞傷害性細胞は、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターを前記対象から得られた細胞傷害性細胞に導入することにより作製される、使用。
【請求項３６】
遺伝子工学的に改変された細胞傷害性細胞を含む、対象の癌の治癒的及び／又は予防的治療に使用するための医薬であって、遺伝子工学的に改変された細胞傷害性細胞は、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターを前記対象から得られた細胞傷害性細胞に導入することにより作製される、医薬。
【請求項３７】
前記発現ベクターが、レンチウイルスベクター、γレトロウイルスベクター、フォーミーウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、操作されたハイブリッドウイルス、及びトランスポゾン媒介性ベクターから選択される、請求項３６に記載の医薬。
【請求項３８】
前記細胞傷害性細胞がＴ細胞である、請求項３６に記載の医薬。
【請求項３９】
前記Ｔ細胞が、ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、及びエフェクターメモリーＴ細胞から選択される、請求項３８に記載の医薬。
【請求項４０】
前記細胞傷害性細胞が、ナチュラルキラー細胞、活性化ＮＫ細胞、好中球、好酸球、好塩基球、Ｂ細胞、マクロファージ及びリンホカイン活性化キラー細胞から選択される、請求項３６に記載の医薬。
【請求項４１】
前記ポリヌクレオチド配列が前記細胞傷害性細胞のゲノムに組み込まれる、請求項３６〜４０のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項４２】
前記細胞傷害性細胞が、治療用途に十分な量の前記キメラ抗原受容体を産生する、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項４３】
前記癌が、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、及び他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ性悪性病変、膵癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、褐色細胞腫、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、セミノーマ、膀胱癌、メラノーマ、神経膠腫、膠芽腫、星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワン腫、頭蓋咽頭腫（ｃｒａｎｉｏｐｈａｒｙｏｇｉｏｍａ）、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫及び脳転移から選択される固形腫瘍である、請求項３６〜４２のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項４４】
前記癌が、白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、ヘアリー細胞白血病及び骨髄形成異常から選択される血液腫瘍である、請求項４３に記載の医薬。