【手続補正書】
【提出日】平成30年3月19日(2018.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生殖系列に以下を含む、遺伝子改変された非ヒト動物：
（ａ）内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座における少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子のＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における欠失または不活性化変異であって、前記少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらの組み合わせである前記欠失または不活性化変異、及び
（ｂ）以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれか、または両方：
（ｉ）少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列であって、前記再構成されていないＶＬ及びＪL遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列において前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、前記核酸配列、及び／または
（ｉｉ）生殖系列ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座であって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、前記免疫グロブリン軽鎖遺伝子座。
【請求項２】
前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント、前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメント、及び／または前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が各々、ヒトカッパ遺伝子セグメント配列を含むか、またはヒトλ遺伝子セグメント配列である、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項３】
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域及び／または前記免疫グロブリン重鎖定常領域が、非ヒト型である、請求項２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項４】
前記内在性免疫グロブリン重鎖における１つ以上の内在性ＶＨ、ＤＨ、ＪＨ遺伝子セグメントは、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現が、ヒトイディオタイプを含みかつ機能的ＣＨ１ドメインを欠く重鎖定常領域に連結されている重鎖可変ドメインを含むＶＨ単一ドメイン結合タンパク質を生じさせるようにヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントで置き換えられているか、または
前記内在性免疫グロブリン重鎖における１つ以上の内在性ＶＨ、ＤＨ、ＪＨ遺伝子セグメントは、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現が、ヒトイディオタイプを含みかつ機能的ＣＨ１ドメインを欠く免疫グロブリン重鎖定常ドメインに連結されている免疫グロブリン軽鎖可変ドメインを含むＶL単一ドメイン結合タンパク質を生じさせるように前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント及び前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントで置き換えられている、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項５】
全てのまたは実質的に全ての内在性重鎖可変領域遺伝子セグメント及び／または全てのまたは実質的に全ての内在性軽鎖可変領域遺伝子セグメントが、欠失されているか、または機能的に不活性化されている、請求項４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項６】
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列、またはヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列である、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項７】
前記ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ５遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントを含む、請求項６に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項８】
ヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ１遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントを含む、請求項６に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項９】
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列が、ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列である、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１０】
前記単一の再構成された軽鎖ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、前記非ヒト動物の全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１１】
前記単一の再構成されたヒト免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒト生殖系列ＶＬ及びヒト生殖系列ＪＬ遺伝子セグメント配列を含む、請求項１０に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１２】
前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、不活性化されたヒンジ領域を更に含む、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１３】
ＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ１配列におけるものであり、前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、ＩｇＤ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される免疫グロブリン遺伝子の欠失または不活性化変異を更に含む、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１４】
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、請求項１３に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１５】
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ２ｃ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、請求項１３に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１６】
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ３、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＥ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、請求項１３に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１７】
前記非ヒト動物が、雄非ヒト動物において機能的なＡｄａｍ６遺伝子またはその一部を更に含み、前記Ａｄａｍ６遺伝子が、Ａｄａｍ６ａ遺伝子、Ａｄａｍ６ｂ遺伝子、またはその両方である、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１８】
前記動物が、その血清中に、機能的ＣＨ１ドメインを欠いている抗原特異的単一ドメイン抗原結合タンパク質を更に含む、請求項１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項１９】
前記動物が、機能的ＣＨ１ドメインを含んでいるＩｇＭ重鎖を更に含む、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２０】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される前記再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列によってコードされるＶＬ単一ドメイン結合タンパク質である、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２１】
免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含む前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされる遺伝子操作されたユニバーサル軽鎖を更に含む、請求項１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２２】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される前記再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列によってコードされるＶＬ単一ドメイン抗原結合タンパク質であり、且つ、前記非ヒト動物が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされる遺伝子操作されたユニバーサル軽鎖を更に含む、請求項１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２３】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の少なくとも１つの重鎖が、機能的ヒンジ領域を更に欠いている、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２４】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、及びＩｇＧ３からなる群より選択されるＩｇＧアイソタイプを有する、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２５】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ヒト可変ドメイン及び非ヒト定常ドメインを含む、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２６】
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、単量体である、請求項１８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２７】
ＩｇＭ重鎖が同族軽鎖と会合する、請求項１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２８】
前記同族軽鎖は、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされるユニバーサル軽鎖である、請求項２７に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項２９】
前記動物が、げっ歯類である、請求項１に記載の遺伝子改変された動物。
【請求項３０】
前記げっ歯類が、ラットである、請求項２９に記載の遺伝子改変された動物。
【請求項３１】
前記動物が、マウスである、請求項２９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
【請求項３２】
遺伝子改変されたマウスであって、
（ａ）マウス重鎖遺伝子座における、全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン重鎖Ｖ、Ｄ、及びＪ遺伝子セグメントの、
（ｉ）１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＶＨ遺伝子セグメント、１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＤＨ遺伝子セグメント、及び１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＪＨ遺伝子セグメントであって、前記１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＶＨ、ＤＨ、及びＪＨ遺伝子セグメントがマウス重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、前記遺伝子セグメント、または、
（ｉｉ）１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＶL遺伝子セグメント及び１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＪL遺伝子セグメントであって、前記１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＶＬ、及びＪＬ遺伝子セグメントがマウス重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結され、
前記マウス重鎖定常領域遺伝子配列が、完全長ＩｇＭ遺伝子、及びＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＧ３、及びそれらの組み合わせからなる群より選択されるＩｇＧ遺伝子においてＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における欠失または不活性化変異を含む、前記遺伝子セグメント、
のいずれかによる置き換え、
（ｂ）全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖Ｖ及びＪ遺伝子セグメントの、単一の再構成されたヒト可変Ｖκ／Ｊκ遺伝子配列による置き換えを含み、前記マウスが、同族軽鎖と会合するＩｇＭ重鎖を含むＢ細胞受容体を発現する、前記遺伝子改変されたマウス。
【請求項３３】
以下を含む遺伝子改変された非ヒト動物の作製方法：
（ａ）前記非ヒト動物の内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座において少なくとも１つの非ヒト重鎖定常領域を改変して、前記重鎖定常領域がＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらの組み合わせのＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の欠失または不活性化変異を含むようにすること、及び、
（ｂ）前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座を改変して、少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列を含むようにすることであって、前記再構成されていないＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、こと、及び／または
ゲノムを改変して、生殖系列ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座を含むようにすることであって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、こと。
【請求項３４】
ステップ（ａ）が、前記改変されたＣＨ１ドメインを含んでいる、前記ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはその組み合わせのヒンジ領域を欠失または不活性化させることを更に含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の１つ以上の内在性免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントは、
前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現がヒトイディオタイプを含み且つ機能的ＣＨ１ドメインを欠いている重鎖定常領域に連結されている重鎖可変ドメインを含んでいるＶＨ単一ドメイン結合タンパク質を生じさせるように、ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントにより置き換えられているか、または
前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現がヒトイディオタイプを含み且つ機能的ＣＨ１ドメインを欠いている免疫グロブリン重鎖定常ドメインに連結されている免疫グロブリン軽鎖可変ドメインを含んでいるＶＬ単一ドメイン結合タンパク質を生じるように、再構成されていないヒト軽鎖ＶL及びＪL遺伝子セグメントにより置き換えられている、請求項３３または請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記免疫グロブリン重鎖及び／または軽鎖の定常領域遺伝子配列が、非ヒトである、請求項３３〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記再構成されていない軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子座において、全てのまたは実質的に全ての機能的内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、請求項３３〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
ＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の前記欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ遺伝子においてである、請求項３３〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記ヒトＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列、またはヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列である、請求項３３〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ５遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントを含み、
前記ヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ１遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、及び／または
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域が、前記非ヒト動物の全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントを置き換える、請求項３３に記載の方法。
【請求項４２】
前記核酸配列及び／または単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域配列が、前記非ヒト動物の生殖系列にある、請求項３３〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記ＣＨ１の欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ１におけるものであり、前記方法が、（ｃ）ＩｇＤ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される免疫グロブリン遺伝子を欠失または不活性化させることを更に含む、請求項３３〜４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記非ヒト動物が、げっ歯類である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記げっ歯類が、ラットである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記げっ歯類が、マウスである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
ＣＨ１ドメインを欠いている抗原特異的ＩｇＧ単一ドメイン結合タンパク質の生成方法であって、全部または一部において、前記方法が、以下のステップを含む方法：
（ａ）請求項１〜３２のいずれか一項に記載の遺伝子改変された非ヒト動物に前記抗原で免疫することと、
（ｂ）前記非ヒト動物が：
（ｉ）２つの同族軽鎖と会合された２つのＩｇＭ重鎖を含んでいるＩｇＭ抗体；及び
（ｉｉ）機能的ＣＨ１ドメインを欠いている少なくとも１つの重鎖を含んでいる単一ドメイン抗原結合タンパク質
を発現するように、前記非ヒト動物を維持すること。
【請求項４８】
（ｃ）前記非ヒト動物から前記抗原と特異的に結合する細胞またはタンパク質を単離することであって、前記細胞またはタンパク質が、前記単一ドメイン抗原結合タンパク質を含むこと、
（ｃ）前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記可変ドメインをコードする核酸を単離すること、
（ｃ）ベクターを発現させるのに十分な条件で、前記ベクターをトランスフェクトした宿主細胞を培養することであって、前記ベクターが、ヒト重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される核酸を含み、前記核酸が、前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記可変ドメインをコードすること、または
（ｃ）ハイブリドーマ培養物から上清を採取することであって、前記ハイブリドーマが、前記単一ドメイン抗原結合タンパク質を含んでいる細胞から生成されること
を更に含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、及びＩｇＧ３からなる群より選択されるヒトＩｇＧ定常領域遺伝子である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
請求項４８に記載の方法に従って単離された前記細胞から生成されるハイブリドーマ。
【請求項５１】
請求項４８に記載の方法に従って単離された核酸。
【請求項５２】
請求項５１に記載の核酸と同一または実質的に類似する核酸を含む細胞。
【請求項５３】
そのゲノム内に
（ａ）内在性免疫グロブリン重鎖における、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤまたはそれらの組合せのＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の欠失または不活化変異、及び
（ｂ）（ｉ）内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座における、少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列であって、前記再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント及びＪＬ遺伝子セグメントは、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列において前記欠失または不活化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、核酸配列、及び／または
（ｉｉ）生殖系列ＶＬ遺伝子セグメント配列及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座であって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列は、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されている、免疫グロブリン軽鎖遺伝子座
を含む細胞。
【請求項５４】
前記細胞が、胚性幹（ＥＳ）細胞またはＢ細胞である、請求項５２または請求項５３に記載の細胞。
【請求項５５】
機能的ＣＨ１ドメインを欠いている重鎖定常領域に作動可能に連結される軽鎖可変ドメインを含む、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
【請求項５６】
請求項１に記載の非ヒト動物または請求項３２に記載のマウスから単離される、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
【請求項５７】
請求項４７に記載の方法に従って生成される、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
他の実施形態は、記載され、以下の詳細な説明を検討することによって当業者には明らかになろう。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
生殖系列に以下を含む、遺伝子改変された非ヒト動物：
（ａ）内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座における少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子のＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における欠失または不活性化変異であって、前記少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらの組み合わせである前記欠失または不活性化変異、及び
（ｂ）以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれか、または両方：
（ｉ）少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列であって、前記再構成されていないＶＬ及びＪL遺伝
子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列において前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、前記核酸配列、
（ｉｉ）ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座であって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、前記免疫グロブリン軽鎖遺伝子座。
（項目２）
前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント、前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメント、及び／または前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒト型である、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３）
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域及び／または前記免疫グロブリン重鎖定常領域が、非ヒト型である、項目２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目４）
前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント及び前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントが、ヒトカッパセグメントである、項目２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目５）
前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント及び前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントが、前記内在性免疫グロブリン重鎖における１つ以上の内在性ＶＨ、ＤＨ、ＪＨ遺伝子セグメントを置き換える、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目６）
前記少なくとも１つの再構成されていないＶＬ遺伝子セグメント及び前記少なくとも１つの再構成されていないＪＬ遺伝子セグメントが、前記内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子座における全てのまたは実質的に全ての内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、項目５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目７）
全てのまたは実質的に全ての内在性重鎖可変領域遺伝子セグメント及び／または全てのまたは実質的に全ての内在性軽鎖可変領域遺伝子セグメントが、欠失されているか、または機能的に不活性化されている、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目８）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列、またはヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列である、項目２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目９）
前記ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ５遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントを含む、項目８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１０）
ヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ１遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントを含む、項目８に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１１）
前記動物が、（ｉ）少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列を含まず、前記再構成されていないＶＬ及びＪL遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列にお
ける前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能であり、前記重鎖遺伝子座が、非ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントを含む、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１２）
前記動物が、（ｉ）少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含む核酸配列を含まず、前記再構成されていないＶＬ及びＪL遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列にお
ける前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能であり、前記重鎖遺伝子座が、ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントを含む、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１３）
前記ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントが、全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、項目１２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１４）
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列が、非ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列である、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１５）
前記免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列が、ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列である、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１６）
前記単一の再構成された軽鎖ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、前記非ヒト動物の全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１７）
前記単一の再構成されたヒト免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒト生殖系列ＶＬ及びヒト生殖系列ＪＬ遺伝子セグメント配列を含む、項目２に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１８）
前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、不活性化されたヒンジ領域を更に含む、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目１９）
ＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ１配列におけるものであり、前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、ＩｇＤ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される免疫グロブリン遺伝子の欠失または不活性化変異を更に含む、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２０）
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、項目１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２１）
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ２ｃ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、項目１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２２）
前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座が、前記ＩｇＧ３、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＥ免疫グロブリン遺伝子において欠失または不活性化変異を更に含む、項目１９に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２３）
前記非ヒト動物が、雄非ヒト動物において機能的なＡｄａｍ６遺伝子またはその一部を更に含み、前記Ａｄａｍ６遺伝子が、Ａｄａｍ６ａ遺伝子、Ａｄａｍ６ｂ遺伝子、またはその両方である、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２４）
前記動物が、その血清中に、機能的ＣＨ１ドメインを欠いている抗原特異的単一ドメイン抗原結合タンパク質を更に含む、項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２５）
前記動物が、機能的ＣＨ１ドメインを含んでいるＩｇＭ重鎖を更に含む、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２６）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含む前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される前記再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列によってコードされるＶＬ単一ドメイン結合タンパク質である、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２７）
免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含む前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされる遺伝子操作されたユニバーサル軽鎖を更に含む、項目２５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２８）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される前記再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列によってコードされるＶＬ単一ドメイン抗原結合タンパク質であり、且つ、前記非ヒト動物が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされる遺伝子操作されたユニバーサル軽鎖を更に含む、項目２５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目２９）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の少なくとも１つの重鎖が、機能的ヒンジ領域を更に欠いている、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３０）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、及びＩｇＧ３からなる群より選択されるＩｇＧアイソタイプを有する、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３１）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ヒト可変ドメイン及び非ヒト定常ドメインを含む、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３２）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、単量体である、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３３）
ＩｇＭ重鎖が同族軽鎖と会合する、項目２５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３４）
前記同族軽鎖は、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及び／またはＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされるユニバーサル軽鎖である、項目３３に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３５）
高力価の前記単一ドメイン抗原結合タンパク質を更に含む、項目２４に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３６）
前記抗原特異的単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記力価が、少なくとも１×１０２μｇ／ｍＬ、少なくとも１×１０３μｇ／ｍＬ、少なくとも１×１０４μｇ／ｍＬ、または少なくとも１×１０５μｇ／ｍＬである、項目３５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３７）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記力価が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結されるＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列によってコードされる遺伝子操作されたユニバーサル軽鎖を発現しない対応する対照動物の、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１００倍である、項目３５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３８）
前記力価が、酵素結合免疫測定法によって決定される、項目３５に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目３９）
前記動物が、げっ歯類である、項目１に記載の遺伝子改変された動物。
（項目４０）
前記げっ歯類が、ラットまたはマウスである、項目３９に記載の遺伝子改変された動物。
（項目４１）
前記動物が、マウスである、項目４０に記載の遺伝子改変された非ヒト動物。
（項目４２）
遺伝子改変されたマウスであって、
（ａ）マウス重鎖遺伝子座における、全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン重鎖Ｖ、Ｄ、及びＪ遺伝子セグメントの、
（ｉ）１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＶＨ遺伝子セグメント、１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＤＨ遺伝子セグメント、及び１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＪＨ遺伝子セグメントであって、前記１つ以上の再構成されていないヒト免疫グロブリン重鎖ＶＨ、ＤＨ、及びＪＨ遺伝子セグメントがマウス重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、前記遺伝子セグメント、または、
（ｉｉ）１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＶL遺伝子セグメント及び１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＪL遺伝子セグメントであって、前記１つ以上の再構成されていないヒト軽鎖ＶＬ、及びＪＬ遺伝子セグメントがマウス重鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結され、
前記マウス重鎖定常領域遺伝子配列が、完全長ＩｇＭ遺伝子、及びＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＧ３、及びそれらの組み合わせからなる群より選択されるＩｇＧ遺伝子においてＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における欠失または不活性化変異を含む、前記遺伝子セグメント、
のいずれかによる置き換え、
（ｂ）全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖Ｖ及びＪ遺伝子セグメントの、単一の再構成されたヒト可変Ｖκ／Ｊκ遺伝子配列による置き換えを含み、前記マウスが、同族軽鎖と会合するＩｇＭ重鎖を含むＢ細胞受容体を発現する、前記遺伝子改変されたマウス。
（項目４３）
以下を含む項目１に記載の遺伝子改変された非ヒト動物の作製方法：
（ａ）前記非ヒト動物の内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座において少なくとも１つの非ヒト重鎖定常領域を改変して、前記重鎖定常領域がＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらの組み合わせのＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の欠失または不活性化変異を含むようにすること、及び、
（ｂ）以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれか、または両方：
（ｉ）前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に核酸配列を挿入することであって、前記核酸配列が、少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含み、前記再構成されていないＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、挿入すること、及び／または
（ｉｉ）ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座を導入することであって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、導入すること。
（項目４４）
ステップ（ａ）が、前記改変されたＣＨ１ドメインを含んでいる、前記ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはその組み合わせのヒンジ領域を欠失または不活性化させることを更に含む、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
ステップ（ａ）が、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の１つ以上の内在性免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントをヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントによって置き換え、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現がヒトイディオタイプを含む重鎖可変ドメインを生じさせるようにすることを更に含み、前記方法が、（ｂ）（ｉ）前記内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に核酸配列を挿入することを含まず、前記核酸配列が、少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含み、ここで、前記再構成されていないＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、項目４３に記載の方法。
（項目４６）
前記挿入ステップが、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の１つ以上の内在性免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントを前記再構成されていない軽鎖ＶL及びＪL遺伝子セグメントにより置き換えて、前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座の発現が、免疫グロブリン軽鎖可変ドメインと、ＣＨ１ドメインを欠いている免疫グロブリン重鎖定常ドメインとを含んでいるＶＬ単一ドメイン結合タンパク質を生じるようにすることを含む、項目４３に記載の方法。
（項目４７）
前記免疫グロブリン定常領域遺伝子が、非ヒトである、項目４６に記載の方法。
（項目４８）
前記再構成されていない軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、ヒトセグメントである、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記再構成されていない軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、ヒトカッパセグメントである、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記再構成されていない軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、ヒトラムダセグメントである、項目４８に記載の方法。
（項目５１）
前記再構成されていない軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子座において、全てのまたは実質的に全ての内在性非ヒト免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントを置き換える、項目４６に記載の方法。
（項目５２）
ＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の前記欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ遺伝子においてである、項目４３に記載の方法。
（項目５３）
ＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列の前記欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ１遺伝子においてである、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記重鎖免疫グロブリン遺伝子座が、ヒト可変ドメインをコードする可変領域遺伝子セグメント及び非ヒト定常ドメインをコードする定常領域遺伝子を含む、項目４３に記載の方法。
（項目５５）
免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、ユニバーサル軽鎖をコードする、項目４３に記載の方法。
（項目５６）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒトＶＬ／ＪＬ遺伝子配列である、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記ヒトＶＬ／ＪＬ遺伝子配列が、ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列、またはヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列である、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ５遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントを含む、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
前記ヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ１遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントを含む、項目５７に記載の方法。
（項目６０）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、非ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、項目４３に記載の方法。
（項目６１）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が、ヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、項目４３に記載の方法。
（項目６２）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域が、前記非ヒト動物の全てのまたは実質的に全ての内在性免疫グロブリン軽鎖ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントを置き換える、項目４３に記載の方法。
（項目６３）
前記核酸配列及び／または単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域配列が、前記非ヒト動物の生殖系列にある、項目４３に記載の方法。
（項目６４）
前記ＣＨ１の欠失または不活性化変異が、ＩｇＧ１におけるものであり、前記方法が、（ｃ）ＩｇＤ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される免疫グロブリン遺伝子を欠失または不活性化させることを更に含む、項目４３に記載の方法。
（項目６５）
前記ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ免疫グロブリン遺伝子が、欠失または不活性化される、項目６４に記載の方法。
（項目６６）
前記ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ２ｃ免疫グロブリン遺伝子が、欠失または不活性化される、項目６４に記載の方法。
（項目６７）
ＩｇＧ３、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＥ免疫グロブリン遺伝子が、欠失または不活性化される、項目６４に記載の方法。
（項目６８）
前記非ヒト動物が、げっ歯類である、項目４３に記載の方法。
（項目６９）
前記げっ歯類が、ラットまたはマウスである、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記げっ歯類が、マウスである、項目６９に記載の方法。
（項目７１）
ＣＨ１ドメインを欠いている抗原特異的ＩｇＧ単一ドメイン結合タンパク質の生成方法であって、全部または一部において、前記方法が、以下のステップを含む方法：
（ａ）遺伝子改変された非ヒト動物に前記抗原で免疫することであって、前記遺伝子改変された非ヒト動物が、
（ｉ）内在性免疫グロブリン重鎖遺伝子座における少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子のＣＨ１ドメインをコードするヌクレオチド配列における欠失または不活性化変異であって、前記少なくとも１つの内在性免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらの組み合わせである前記欠失または不活性化変異、及び
（ｉｉ）以下の１または２のいずれか、または両方：
１．少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）遺伝子セグメント及び少なくとも１つの再構成されていない免疫グロブリン軽鎖連結（ＪＬ）遺伝子セグメントを含んでいる核酸配列であって、前記再構成されていないＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメントが、前記ＣＨ１ドメインをコードする前記ヌクレオチド配列における前記欠失または不活性化変異を含んでいる前記免疫グロブリン重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ／ＪＬ）ヌクレオチド配列を形成するように組換え可能である、前記核酸配列、及び／または
２．ＶＬ及びＪＬ遺伝子セグメント配列を含んでいる単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域ＶＬ／ＪＬ遺伝子配列を含む免疫グロブリン軽鎖遺伝子座であって、前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域遺伝子配列が免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される、前記免疫グロブリン軽鎖遺伝子座、
を含む、前記免疫することと、
（ｂ）前記マウスが：
（ｉ）２つの同族軽鎖と会合された２つのＩｇＭ重鎖を含んでいるＩｇＭ抗体；及び
（ｉｉ）機能的ＣＨ１ドメインを欠いている少なくとも１つの重鎖を含んでいる単一ドメイン抗原結合タンパク質を発現するように、前記マウスを維持すること。
（項目７２）
前記少なくとも１つの重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ａ、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
前記重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ１定常領域遺伝子である、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、前記ＣＨ１ドメインを全て欠いている、項目７１に記載の方法。
（項目７５）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ヒト重鎖可変領域を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７６）
前記単一ドメイン抗原結合タンパク質が、ヒト軽鎖可変領域を含む、項目７１に記載の方法。
（項目７７）
前記同族軽鎖が、免疫グロブリン軽鎖定常領域遺伝子配列に作動可能に連結される前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域配列によってコードされたユニバーサル軽鎖である、項目７１に記載の方法。
（項目７８）
前記非ヒト動物が、内在性軽鎖を発現しない、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記単一の再構成された免疫グロブリン軽鎖可変領域配列が、ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列またはヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子である、項目７７に記載の方法。
（項目８０）
前記ヒトＶκ１−３９／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ５遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントを含む、項目７９に記載の方法。
（項目８１）
前記ヒトＶκ３−２０／Ｊ遺伝子配列が、ヒトＪκ１遺伝子セグメントとともに再構成されたヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントを含む、項目７９に記載の方法。
（項目８２）
（ｃ）前記ヒト動物から前記抗原と特異的に結合する細胞またはタンパク質を単離することを更に含み、前記細胞またはタンパク質が、体細胞変異された単一ドメイン抗原結合タンパク質を含む、項目７１に記載の方法。
（項目８３）
（ｄ）（ｃ）で単離された前記細胞から、前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記可変ドメインをコードする第１の核酸を単離することを更に含む、項目８２に記載の方法。
（項目８４）
最終ステップとして、（ｅ）ベクターを発現させるのに十分な条件で、前記ベクターをトランスフェクトした細胞を培養することを更に含み、前記ベクターが、ヒト重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される第２の核酸を含み、前記第２の核酸が、ステップ（ｄ）で単離した前記第１の核酸と同一または実質的に同一である、項目８３に記載の方法。
（項目８５）
前記重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、及びＩｇＧ３からなる群より選択されるヒトＩｇＧ定常領域遺伝子である、項目８４に記載の方法。
（項目８６）
（ｄ）ハイブリドーマ培養物から上清を採取するステップを更に含み、前記ハイブリドーマが、（ｃ）で単離された前記細胞から生成される、項目８２に記載の方法。
（項目８７）
（ｅ）（ｄ）で生成された前記ハイブリドーマから、前記単一ドメイン抗原結合タンパク質の前記可変ドメインをコードする第１の核酸を単離することを更に含む、項目８６に記載の方法。
（項目８８）
（ｆ）ベクターでトランスフェクトした細胞を、前記ベクターを発現させるのに十分な条件で培養することを更に含み、前記ベクターが、ヒト重鎖定常領域遺伝子に作動可能に連結される第２の核酸を含み、前記第２の核酸が、ステップ（ｅ）で単離した前記第１の核酸と同一または実質的に同一である、項目８７に記載の方法。
（項目８９）
前記重鎖定常領域遺伝子が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、及びＩｇＧ３からなる群より選択されるヒトＩｇＧ定常領域遺伝子である、項目８８に記載の方法。
（項目９０）
項目８２に記載の方法に従って単離された前記細胞から生成されるハイブリドーマ。
（項目９１）
項目８３に記載の方法に従って単離された核酸。
（項目９２）
項目８７に記載の方法に従って単離された核酸。
（項目９３）
項目８３に記載の核酸と同一または実質的に類似する核酸を含む細胞。
（項目９４）
項目８７に記載の核酸と同一または実質的に類似する核酸を含む細胞。
（項目９５）
項目１に記載の非ヒト動物の単離された細胞。
（項目９６）
前記細胞が、胚性幹（ＥＳ）細胞またはＢ細胞である、項目９５に記載の単離された細胞。
（項目９７）
機能的ＣＨ１ドメインを欠いている重鎖定常領域に作動可能に連結される軽鎖可変ドメインを含む、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
（項目９８）
項目１に記載の非ヒト動物から単離される、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
（項目９９）
項目４２に記載のマウスから単離される、単一ドメイン抗原結合タンパク質。
（項目１００）
項目７１に記載の方法に従って生成される、単一ドメイン抗原結合タンパク質。