【手続補正書】
【提出日】平成30年8月7日(2018.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上のアルキル化システイン残基を有するヘマグルチニンを含むインフルエンザワクチン。
【請求項２】
（a）前記ヘマグルチニンが、１〜５、１〜４、１〜３もしくは１〜２個のアルキル化システイン残基、もしくは１、２、３、４、もしくは５個のアルキル化システイン残基を含む、
（b）前記１つ以上のアルキル化システイン残基が、前記ヘマグルチニン中に存在する全システイン残基の約１〜５０％、１〜４０％、１〜３０％、１〜２０％もしくは１〜１０％を構成する、
（c）前記１つ以上のアルキル化システイン残基が、前記ヘマグルチニン中に存在する全システイン残基の約１０％、２０％、３０％、４０％もしくは５０％を構成する、または
（d）実質的に全ての遊離システイン残基がアルキル化されている、
請求項１に記載のインフルエンザワクチン。
【請求項３】
前記アルキル化システイン残基がメチル化システイン残基を含む、かつ／または前記ヘマグルチニンが非特異的なアルキル化および／もしくは遍在性のメチル化を有さない、請求項１または２に記載のインフルエンザワクチン。
【請求項４】
アルキル化システイン残基の数が質量分析によって決定される、請求項１〜３のいずれか１項に記載のインフルエンザワクチン。
【請求項５】
（a）アルキル化剤、または
（b）２‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）、ヨード酢酸、２‐ブロモアセトアミド、グルタチオンブロモアセトアミド、ブロモ酢酸、１，３‐プロパンスルトン、メチルメタンチオスルホン酸、メトキシカルボニルメチルジスルフィド、マレアミド、マレイミド‐ＰＥＧ、ビニルピリジン、Ｎ‐エチルマレイミド、トシルアセトアミド、およびそれらの組合せからなる群から選択されるアルキル化剤
で処理したヘマグルチニンを含むインフルエンザワクチン。
【請求項６】
（a）前記ヘマグルチニンが、カリフォルニアもしくはソロモン株に存在するＨ１タンパク質、ブリスベン、フロリダ、オハイオ、江蘇もしくは香港株に存在するＢタンパク質、および／もしくは、あるいはビクトリア、パース、ブリスタンもしくはウィスコンシン株に存在するＨ３タンパク質である、かつ／または
（b）前記ワクチンが、スプリットインフルエンザウイルスワクチンもしくは組換えインフルエンザワクチンである、かつ／または
（c）前記インフルエンザワクチンが、卵ベースのインフルエンザワクチンである、もしくは昆虫細胞、哺乳類細胞、酵母細胞、ウイルス細胞、真菌もしくは藻類において産生される、かつ／または
（d）前記インフルエンザワクチンが、１価、２価、３価もしくは４価のインフルエンザワクチンである、
請求項１〜５のいずれか１項に記載のインフルエンザワクチン。
【請求項７】
１〜３０℃の範囲の温度で約６ヶ月間貯蔵した場合に、一元放射免疫拡散（ＳＲＩＤ）アッセイによる測定において少なくとも約９０％の力価を保持する、かつ／または前記アルキル化剤を実質的に含まない、請求項１〜６のいずれか１項に記載のインフルエンザワクチン。
【請求項８】
精製ヘマグルチニン抗原またはヘマグルチニン含有ウイルス粒子をアルキル化剤で処理する工程を含む、ヘマグルチニンのアルキル化方法。
【請求項９】
（a）前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子がスプリットウイルスである、または
（b）前記精製ヘマグルチニン抗原が、精製した表面抗原もしくは精製した組換えヘマグルチニンタンパク質である、かつ／または
（c）前記ヘマグルチニンが、カリフォルニアもしくはソロモン株に存在するＨ１タンパク質、ブリスベン、フロリダ、オハイオ、江蘇もしくは香港株に存在するＢタンパク質、もしくはビクトリア、パース、ブリスタンもしくはウィスコンシン株に存在するＨ３タンパク質から選択される、
請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
卵ベースまたは細胞培養ベースの産生系から産生したインフルエンザウイルスから得られたウイルス粒子をアルキル化剤で処理する工程を含む、インフルエンザワクチンの製造方法。
【請求項１１】
前記ウイルス粒子を、前記インフルエンザウイルスを分解することによって取得する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
インフルエンザワクチンの製造方法であって、
卵ベースまたは細胞培養ベースの産生系からインフルエンザウイルスを回収し、
前記インフルエンザウイルスを分解し、
前記スプリットインフルエンザウイルスを、２‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）、ヨード酢酸、２‐ブロモアセトアミド、グルタチオンブロモアセトアミド、ブロモ酢酸、１，３‐プロパンスルトン、メチルメタンチオスルホン酸、メトキシカルボニルメチルジスルフィド、マレアミド、マレイミド‐ＰＥＧ、ビニルピリジン、Ｎ‐エチルマレイミド、トシルアセトアミド、およびそれらの組合せからなる群から選択されるアルキル化剤、最も好ましくは２‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）であるアルキル化剤で処理し、ならびに、
前記処理したスプリットインフルエンザウイルスを不活化する
ことを含む、前記インフルエンザワクチンの製造方法。
【請求項１３】
（a）前記分解工程が、前記インフルエンザウイルスを界面活性剤、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）、タウロデオキシコール酸ナトリウム、ノニルフェノールエトキシレート、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、および／もしくはデオキシコール酸ナトリウムで処理することを含む、かつ／または
（b）前記インフルエンザウイルスを、卵ベースの産生系、もしくは動物細胞、昆虫細胞、哺乳類細胞、および／もしくは鳥類細胞、もしくは植物細胞、酵母細胞、ウイルス細胞、真菌もしくは藻類、もしくは合成細胞において産生する、
請求項８〜１２に記載の方法。
【請求項１４】
（a）前記処理工程が、前記精製ヘマグルチニン抗原、前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子、前記ウイルス粒子、もしくは前記スプリットインフルエンザウイルスを、前記アルキル化剤とともに、１〜３０℃の範囲の温度、室温、もしくは１〜５℃、２〜８℃、５〜１０℃、１０〜１５℃、１５〜２０℃、２０〜２５℃、もしくは２５〜３０℃の範囲の温度でインキュベートすることを含む、かつ／または
（b）前記処理工程が、前記精製ヘマグルチニン抗原、前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子、前記ウイルス粒子、もしくは前記スプリットインフルエンザウイルスを、前記アルキル化剤とともに、最大約２４、２０、１８、１６、１４、１２、１０、８、６、４、２、１．５時間、１時間、５０分間、４０分間、３０分間、２０分間、もしくは１０分間インキュベートすることを含む、かつ／または
（c）前記アルキル化剤が、ヘマグルチニン（ＨＡ）‐システイン濃度に対して１倍モル過剰を超える濃度、１倍〜１００倍、５倍〜８５倍、１倍〜５０倍、もしくは５倍〜５０倍モル過剰の範囲の濃度、１ｍＭ〜１Ｍ、１ｍＭ〜５００ｍＭ、１ｍＭ〜４００ｍＭ、１ｍＭ〜３００ｍＭ、１ｍＭ〜２００ｍＭ、もしくは１ｍＭ〜１００ｍＭの範囲の濃度、約１ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、３００ｍＭ、４００ｍＭ、もしくは５００ｍＭの濃度、１μｇ／ｍｌ〜１，０００μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ〜４００μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ〜３００μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ〜２００μｇ／ｍｌ、もしくは１μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの範囲の濃度、もしくは約１μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、６０μｇ／ｍｌ、７０μｇ／ｍｌ、８０μｇ／ｍｌ、９０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、２００μｇ／ｍｌ、３００μｇ／ｍｌ、４００μｇ／ｍｌ、もしくは５００μｇ／ｍｌの濃度で存在する、
請求項８〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記アルキル化剤で処理する工程が、ヘマグルチニンの１つ以上のシステイン残基、１〜５、１〜４、１〜３もしくは１〜２個のシステイン残基、１、２、３、４、もしくは５個のシステイン残基、存在する全システイン残基の約１〜５０％、１〜４０％、１〜３０％、もしくは１〜２０％、存在する全システイン残基の約１０％、２０％、３０％、４０％もしくは５０％、もしくは実質的に全ての遊離システイン残基のアルキル化をもたらす、かつ／または
前記アルキル化剤による処理が非特異的なアルキル化をもたらさない、かつ／または
前記アルキル化剤による処理が遍在性のメチル化をもたらさない、
請求項８〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
（a）前記アルキル化剤で処理する工程が、
アルキル化剤の処理をしないことを除いて他の点で同一のインフルエンザワクチンと比較して、一元放射免疫拡散（ＳＲＩＤ）によって測定するインフルエンザワクチンの力価の喪失を減少させる、
前記インフルエンザワクチンを１〜３０℃で３０日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤによって測定する力価の喪失を５０％以下に減少させる、
前記インフルエンザワクチンを１〜３０℃で３０日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤによって測定する力価の喪失を３０％以下に減少させる、もしくは
前記インフルエンザワクチンを１〜３０℃で３０日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤに  よって測定する力価の喪失を１０％以下に減少させる、かつ／または
（b）前記アルキル化剤で処理する工程を、前記インフルエンザウイルスを不活化する工程の前、もしくは前記インフルエンザウイルスを不活化する工程と同時に実施する、かつ／または
（c）前記不活化工程が、前記インフルエンザウイルスを、紫外線もしくは化学的不活化剤、β‐プロピオラクトン、デオキシコール酸ナトリウムおよび／もしくはホルマリンで処理することを含む、
請求項８〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
（a）前記アルキル化剤を除去する工程、
（b）前記アルキル化剤をダイアフィルトレーションによって除去する工程、または
（c）前記アルキル化剤を前記化学的不活化剤とともにダイアフィルトレーションによって除去する工程
をさらに含む、請求項８〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記インフルエンザワクチンが、１価、２価、３価または４価のインフルエンザワクチンである、請求項８〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
請求項８〜１８のいずれか１項に記載の方法に従って製造されるインフルエンザワクチン。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
[本発明1001]
1つ以上のアルキル化システイン残基を有するヘマグルチニンを含むインフルエンザワクチン。
[本発明1002]
前記ヘマグルチニンが、1〜5、1〜4、1〜3または1〜2個のアルキル化システイン残基を有する、本発明1001のインフルエンザワクチン。
[本発明1003]
前記ヘマグルチニンが、1、2、3、4、または5個のアルキル化システイン残基を有する、本発明1001または1002のインフルエンザワクチン。
[本発明1004]
前記1つ以上のアルキル化システイン残基が、前記ヘマグルチニン中に存在する全システイン残基の約1〜50％、1〜40％、1〜30％、1〜20％または1〜10％を構成する、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1005]
前記1つ以上のアルキル化システイン残基が、前記ヘマグルチニン中に存在する全システイン残基の約10％、20％、30％、40％または50％を構成する、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1006]
実質的に全ての遊離システイン残基がアルキル化されている、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1007]
前記アルキル化システイン残基がメチル化システイン残基を含む、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1008]
前記ヘマグルチニンが非特異的なアルキル化および／または遍在性のメチル化を有さない、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1009]
アルキル化システイン残基の数が質量分析によって決定される、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1010]
アルキル化剤で処理したヘマグルチニンを含むインフルエンザワクチン。
[本発明1011]
前記アルキル化剤が、2‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）、ヨード酢酸、2‐ブロモアセトアミド、グルタチオンブロモアセトアミド、ブロモ酢酸、1，3‐プロパンスルトン、メチルメタンチオスルホン酸、メトキシカルボニルメチルジスルフィド、マレアミド、マレイミド‐ＰＥＧ、ビニルピリジン、Ｎ‐エチルマレイミド、トシルアセトアミド、およびそれらの組合せからなる群から選択される、本発明1010のインフルエンザワクチン。
[本発明1012]
前記アルキル化剤が2‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）である、本発明1010または1011のインフルエンザワクチン。
[本発明1013]
前記ヘマグルチニンが、カリフォルニアもしくはソロモン株に存在するＨ1タンパク質、ブリスベン、フロリダ、オハイオ、江蘇もしくは香港株に存在するＢタンパク質、および／または、あるいはビクトリア、パース、ブリスタンもしくはウィスコンシン株に存在するＨ3タンパク質である、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1014]
前記ワクチンが、スプリットインフルエンザウイルスワクチンである、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1015]
組換えインフルエンザワクチンである、本発明1001〜1013のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1016]
卵ベースのインフルエンザワクチンである、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1017]
昆虫細胞、哺乳類細胞、酵母細胞、ウイルス細胞、真菌または藻類において産生される、本発明1001〜1015のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1018]
1価、2価、3価または4価のインフルエンザワクチンである、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1019]
1〜30℃の範囲の温度で約6ヶ月間貯蔵した場合に、一元放射免疫拡散（ＳＲＩＤ）アッセイによる測定において少なくとも約90％の力価を保持する、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1020]
前記アルキル化剤を実質的に含まない、先行本発明のいずれかのインフルエンザワクチン。
[本発明1021]
精製ヘマグルチニン抗原またはヘマグルチニン含有ウイルス粒子をアルキル化剤で処理する工程を含む、ヘマグルチニンのアルキル化方法。
[本発明1022]
前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子がスプリットウイルスである、本発明1021の方法。
[本発明1023]
前記精製ヘマグルチニン抗原が、精製した表面抗原である、本発明1021の方法。
[本発明1024]
前記精製ヘマグルチニン抗原が、精製した組換えヘマグルチニンタンパク質である、本発明1021の方法。
[本発明1025]
前記ヘマグルチニンが、カリフォルニアもしくはソロモン株に存在するＨ1タンパク質、ブリスベン、フロリダ、オハイオ、江蘇もしくは香港株に存在するＢタンパク質、またはビクトリア、パース、ブリスタンもしくはウィスコンシン株に存在するＨ3タンパク質から選択される、本発明1021〜1024のいずれかの方法。
[本発明1026]
卵ベースまたは細胞培養ベースの産生系から産生したインフルエンザウイルスから得られたウイルス粒子をアルキル化剤で処理する工程を含む、インフルエンザワクチンの製造方法。
[本発明1027]
前記ウイルス粒子を、前記インフルエンザウイルスを分解することによって取得する、本発明1026の方法。
[本発明1028]
インフルエンザワクチンの製造方法であって、
卵ベースまたは細胞培養ベースの産生系からインフルエンザウイルスを回収し、
前記インフルエンザウイルスを分解し、
前記スプリットインフルエンザウイルスをアルキル化剤で処理し、および、
前記処理したスプリットインフルエンザウイルスを不活化する
ことを含む、前記インフルエンザワクチンの製造方法。
[本発明1029]
前記分解工程が、前記インフルエンザウイルスを界面活性剤で処理することを含む、本発明1027または1028の方法。
[本発明1030]
前記界面活性剤が、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）、タウロデオキシコール酸ナトリウム、ノニルフェノールエトキシレート、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、および／またはデオキシコール酸ナトリウムから選択される、本発明1029の方法。
[本発明1031]
前記アルキル化剤が、2‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）、ヨード酢酸、2‐ブロモアセトアミド、グルタチオンブロモアセトアミド、ブロモ酢酸、1，3‐プロパンスルトン、メチルメタンチオスルホン酸、メトキシカルボニルメチルジスルフィド、マレアミド、マレイミド‐ＰＥＧ、ビニルピリジン、Ｎ‐エチルマレイミド、トシルアセトアミド、およびそれらの組合せからなる群から選択される、本発明1021〜1030のいずれかの方法。
[本発明1032]
前記アルキル化剤が2‐ヨードアセトアミド（ＩＯＡＭ）である、本発明1031の方法。
[本発明1033]
前記インフルエンザウイルスを、卵ベースの産生系において産生する、本発明1021〜1032のいずれかの方法。
[本発明1034]
前記インフルエンザウイルスを、動物細胞、植物細胞、酵母細胞、ウイルス細胞、真菌もしくは藻類、または合成細胞で産生する、本発明1021〜1032のいずれかの方法。
[本発明1035]
前記動物細胞が、昆虫細胞、哺乳類細胞および／または鳥類細胞から選択される、本発明1034の方法。
[本発明1036]
前記処理工程が、前記精製ヘマグルチニン抗原、前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子、前記ウイルス粒子、または前記スプリットインフルエンザウイルスを、前記アルキル化剤とともに、1〜30℃の範囲の温度でインキュベートすることを含む、本発明1021〜1035のいずれかの方法。
[本発明1037]
前記温度が室温である、本発明1036の方法。
[本発明1038]
前記温度が、1〜5℃、2〜8℃、5〜10℃、10〜15℃、15〜20℃、20〜25℃、または25〜30℃の範囲である、本発明1036の方法。
[本発明1039]
前記処理工程が、前記精製ヘマグルチニン抗原、前記ヘマグルチニン含有ウイルス粒子、前記ウイルス粒子、または前記スプリットインフルエンザウイルスを、前記アルキル化剤とともに、最大約24、20、18、16、14、12、10、8、6、4、2、1．5時間、1時間、50分間、40分間、30分間、20分間、または10分間インキュベートすることを含む、本発明1021〜1038のいずれかの方法。
[本発明1040]
前記アルキル化剤が、ヘマグルチニン（ＨＡ）‐システイン濃度に対して1倍モル過剰を超える濃度で存在する、本発明1021〜1039のいずれかの方法。
[本発明1041]
前記アルキル化剤が、ヘマグルチニン（ＨＡ）‐システイン濃度に対して、1倍〜100倍、5倍〜85倍、1倍〜50倍、または5倍〜50倍モル過剰の範囲の濃度で存在する、本発明1021〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
前記アルキル化剤が、1ｍＭ〜1Ｍ、1ｍＭ〜500ｍＭ、1ｍＭ〜400ｍＭ、1ｍＭ〜300ｍＭ、1ｍＭ〜200ｍＭ、または1ｍＭ〜100ｍＭの範囲の濃度で存在する、本発明1021〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
前記アルキル化剤が、約1ｍＭ、10ｍＭ、20ｍＭ、30ｍＭ、40ｍＭ、50ｍＭ、100ｍＭ、200ｍＭ、300ｍＭ、400ｍＭ、または500ｍＭの濃度で存在する、本発明1021〜1042のいずれかの方法。
[本発明1044]
前記アルキル化剤が、1μｇ／ｍｌ〜1，000μｇ／ｍｌ、1μｇ／ｍｌ〜500μｇ／ｍｌ、1μｇ／ｍｌ〜400μｇ／ｍｌ、1μｇ／ｍｌ〜300μｇ／ｍｌ、1μｇ／ｍｌ〜200μｇ／ｍｌ、または1μｇ／ｍｌ〜100μｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する、本発明1021〜1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
前記アルキル化剤が、約1μｇ／ｍｌ、10μｇ／ｍｌ、20μｇ／ｍｌ、30μｇ／ｍｌ、40μｇ／ｍｌ、50μｇ／ｍｌ、60μｇ／ｍｌ、70μｇ／ｍｌ、80μｇ／ｍｌ、90μｇ／ｍｌ、100μｇ／ｍｌ、200μｇ／ｍｌ、300μｇ／ｍｌ、400μｇ／ｍｌ、または500μｇ／ｍｌの濃度で存在する、本発明1044の方法。
[本発明1046]
前記アルキル化剤で処理する工程が、ヘマグルチニンの1つ以上のシステイン残基のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1045のいずれかの方法。
[本発明1047]
前記アルキル化剤で処理する工程が、1〜5、1〜4、1〜3または1〜2個のシステイン残基のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1046のいずれかの方法。
[本発明1048]
前記アルキル化剤で処理する工程が、1、2、3、4、または5個のシステイン残基のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
前記アルキル化剤で処理する工程が、存在する全システイン残基の約1〜50％、1〜40％、1〜30％、または1〜20％のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1048のいずれかの方法。
[本発明1050]
前記アルキル化剤で処理する工程が、存在する全システイン残基の約10％、20％、30％、40％または50％のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
前記アルキル化剤で処理する工程が、実質的に全ての遊離システイン残基のアルキル化をもたらす、本発明1021〜1050のいずれかの方法。
[本発明1052]
前記アルキル化剤による処理が非特異的なアルキル化をもたらさない、本発明1021〜1051のいずれかの方法。
[本発明1053]
前記アルキル化剤による処理が遍在性のメチル化をもたらさない、本発明1021〜1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
前記アルキル化剤による処理が、アルキル化剤の処理をしないことを除いて他の点で同一のインフルエンザワクチンと比較して、一元放射免疫拡散（ＳＲＩＤ）によって測定するインフルエンザワクチンの力価の喪失を減少させる、本発明1021〜1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
前記アルキル化剤による処理が、前記インフルエンザワクチンを1〜30℃で30日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤによって測定する力価の喪失を50％以下に減少させる、本発明1021〜1054のいずれかの方法。
[本発明1056]
前記アルキル化剤で処理する工程が、前記インフルエンザワクチンを1〜30℃で30日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤによって測定する力価の喪失を30％以下に減少させる、本発明1021〜1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
前記アルキル化剤で処理する工程が、前記インフルエンザワクチンを1〜30℃で30日間貯蔵した場合に、ＳＲＩＤによって測定する力価の喪失を10％以下に減少させる、本発明1021〜1056のいずれかの方法。
[本発明1058]
前記アルキル化剤で処理する工程を、前記インフルエンザウイルスを不活化する工程の前に実施する、本発明1021〜1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
前記アルキル化剤で処理する工程を、前記インフルエンザウイルスを不活化する工程と同時に実施する、本発明1021〜1057のいずれかの方法。
[本発明1060]
前記不活化工程が、前記インフルエンザウイルスを、紫外線または化学的不活化剤で処理することを含む、本発明1058または1059の方法。
[本発明1061]
前記不活化工程が、前記インフルエンザウイルスを、β‐プロピオラクトン、デオキシコール酸ナトリウムおよび／またはホルマリンから選択される化学的不活化剤で処理することを含む、本発明1060の方法。
[本発明1062]
前記不活化工程が、前記インフルエンザウイルスをホルマリンで処理することを含む、本発明1061の方法。
[本発明1063]
前記アルキル化剤を除去する工程をさらに含む、本発明1021〜1062のいずれかの方法。
[本発明1064]
前記アルキル化剤をダイアフィルトレーションによって除去する、本発明1063の方法。
[本発明1065]
前記アルキル化剤を前記化学的不活化剤とともに除去する、本発明1064の方法。
[本発明1066]
前記インフルエンザワクチンが、1価、2価、3価または4価のインフルエンザワクチンである、本発明1021〜1065のいずれかの方法。
[本発明1067]
本発明1021〜1066のいずれかの方法に従って製造されるインフルエンザワクチン。
本発明の他の特徴、目的、および利点は、以下の詳細な説明、図面および特許請求の範囲において明らかである。しかしながら、これらの詳細な説明、図面、および特許請求の範囲は、本発明の実施形態を示すものの、それらは例示としてのみ与えられ、制限するものではないことは理解すべきである。本発明の範囲内における様々な変更および修正は、当業者に明らかなものとなる。