【手続補正書】
【提出日】平成30年10月4日(2018.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異種プロモーターに作動可能に連結した少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む単離核酸分子であって、前記ポリヌクレオチドは、
配列番号４の少なくとも１５個の連続したヌクレオチド；配列番号４の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号４を含むディアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチド；配列番号４を含むディアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コードポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体からなる群から選択される第１のヌクレオチド配列を少なくとも含む、核酸分子。
【請求項２】
前記ポリヌクレオチドが、配列番号７６およびその相補体から選択される、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項３】
請求項１または２に記載の核酸分子を含む植物形質転換ベクター。
【請求項４】
前記ディアブロティカ属（Diabrotica）生物がＤ．ｖ．ヴィルギフェラ（D. v. virgifera）ルコント；Ｄ．バルベリ（D.barberi）スミスおよびローレンス；Ｄ．ｕ．ホワルディ（D. u. howardi）；Ｄ．ｖ．ゼアエ（D. v. zeae）；Ｄ．バルテアタ（D. balteata）ルコント；Ｄ．ｕ．テネラ（D. u.tenella）；Ｄ．スペシオーサ（D. speciosa）ジャーマー；およびＤ．ｕ．ウンデシムプンクタータ（D. u. undecimpunctata）マンネルヘイムからなる群から選択される、請求項１または２に記載の核酸分子。
【請求項５】
請求項１または２に記載の核酸分子のポリヌクレオチドであって、前記ポリヌクレオチドは異種プロモーターに作動可能に連結する、ポリヌクレオチド。
【請求項６】
請求項５に記載のポリヌクレオチドを含む二本鎖リボ核酸分子（ｄｓＲＮＡ）分子。
【請求項７】
ポリヌクレオチド配列を鞘翅目昆虫と接触させることが、前記ポリヌクレオチドと特異的に相補的な内因性ヌクレオチド配列の発現を阻害する、請求項６に記載の二本鎖リボ核酸分子。
【請求項８】
リボヌクレオチド分子を鞘翅目昆虫と接触させることが、前記昆虫を殺すまたはその成長および／もしくは摂食を阻害する、請求項７に記載の二本鎖リボ核酸分子。
【請求項９】
前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子をコードし、
前記ポリヌクレオチドは、前記第２のヌクレオチド配列および第３のヌクレオチド配列を含み、
前記第３のヌクレオチド配列が、前記第２のヌクレオチド配列により前記第１のヌクレオチド配列に連結されており、
前記第３のヌクレオチド配列が実質的に前記第１のヌクレオチド配列の逆相補体であり、前記第１のヌクレオチド配列および前記第３のヌクレオチド配列が、転写されたときにハイブリダイズしてｄｓＲＮＡ分子におけるステム構造を形成する、請求項１、２、または４に記載の核酸分子。
【請求項１０】
第１のリボヌクレオチド配列、第２のリボヌクレオチド配列、および第３のリボヌクレオチド配列を含む、請求項９に記載の核酸分子を構成するポリヌクレオチドによってコードされるｄｓＲＮＡ分子であって、
前記第１のリボヌクレオチド配列は、前記第１のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第２のリボヌクレオチド配列は、前記第２のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第３のリボヌクレオチド配列は、前記第３のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第３のリボヌクレオチド配列が、前記第２のリボヌクレオチド配列により前記第１のリボヌクレオチド配列に連結されており、
前記第１のリボヌクレオチド配列および前記第３のリボヌクレオチド配列が、ｄｓＲＮＡ分子にハイブリダイズする、ｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１１】
異種プロモーターが、植物細胞中で機能的である、請求項９に記載の核酸分子。
【請求項１２】
請求項１、２、４、９、または１１記載の核酸分子を含む細胞。
【請求項１３】
原核細胞、真核細胞、または植物細胞である、請求項１２に記載の細胞。
【請求項１４】
請求項１、２、４、９、または１１に記載の核酸分子を含むトランスジェニック植物細胞、トランスジェニック植物性物質、種子、またはトランスジェニック植物であって、前記異種プロモーターは植物細胞中、植物性物質中、種子中、または植物中で機能的である、トランスジェニック植物細胞、トランスジェニック植物性物質、種子、またはトランスジェニック植物。
【請求項１５】
検出可能な量の前記ポリヌクレオチドを含む、請求項１４に記載の植物または植物性物質から生産される商品生産物。
【請求項１６】
トウモロコシ、ダイズ、または綿である、請求項１４に記載の植物、植物細胞、または植物性物質。
【請求項１７】
鞘翅目昆虫集団を防除する方法であって、請求項６〜１０のいずれか１項に記載のｄｓＲＮＡ分子を含む作用物質を前記集団の昆虫に摂食させることを含む、方法。
【請求項１８】
前記作用物質は噴霧可能な製剤であるか、あるいは、
前記作用物質は前記ｄｓＲＮＡ分子を発現するトランスジェニック植物性物質である、
請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
作物の収量を向上する方法であって、
前記作物中で請求項１４に記載のトランスジェニック植物または種子を栽培することにより、前記ｄｓＲＮＡ分子が発現されるようにすること
を含む、方法。
【請求項２０】
前記植物がゼア・マイス（Zea mays）である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
トランスジェニック植物細胞を産生する方法であって、
請求項１、２、４、９、および１１のいずれか１項に記載の核酸を含むベクターで植物細胞を形質転換することと、
植物細胞培養物の発育を可能にするのに十分な条件下で前記形質転換植物細胞を培養することと、
そのゲノム中において前記ポリヌクレオチドを組み込み、前記ｄｓＲＮＡ分子を発現する、トランスジェニック植物細胞を選択することと
を含む、方法。
【請求項２２】
鞘翅目昆虫抵抗性トランスジェニック植物を産生する方法であって、
請求項１４に記載の前記トランスジェニック植物細胞からトランスジェニック植物を再生させることを含む、方法。
【請求項２３】
トランスジェニック植物細胞を産生する方法であって、
請求項１、２、４、９、および１１のいずれか１項に記載の核酸分子で植物細胞を形質転換することと、
植物細胞培養物の発育を可能にするのに十分な条件下で前記形質転換植物細胞を培養することと、
そのゲノム中において前記ポリヌクレオチドを組み込み、ｄｓＲＮＡ分子を発現する、トランスジェニック植物細胞を選択することと
を含む、方法。
【請求項２４】
鞘翅目昆虫抵抗性トランスジェニック植物を産生する方法であって、
請求項１４に記載の前記トランスジェニック植物細胞からトランスジェニック植物を再生させることを含む、方法。
【請求項２５】
請求項１、２、４、９、および１１のいずれか１項に記載の核酸分子であって、
（ａ）前記核酸分子は、バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）に由来するポリペプチドもしくはＰＩＰ−１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをさらに含み；および／または
（ｂ）（ａ）の前記ポリヌクレオチドは、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ３４、およびＣｒｙ３５を含む群から選択されるＢ．チューリンゲンシス（B. thuringiensis）由来のポリペプチドをコードする、核酸分子。
【請求項２６】
請求項１４に記載のトランスジェニック植物細胞もしくはトランスジェニック植物または請求項２３に記載の方法により生産されるトランスジェニック植物細胞であって、
（ａ）前記細胞または植物は、バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）に由来するポリペプチドもしくはＰＩＰ−１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み；および／または
（ｂ）（ａ）の前記ポリヌクレオチドは、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ３４、およびＣｒｙ３５を含む群から選択されるＢ．チューリンゲンシス（B. thuringiensis）由来のポリペプチドをコードする、トランスジェニック植物細胞もしくはトランスジェニック植物。
【請求項２７】
請求項２１または２３に記載の方法であって、
（ａ）前記形質転換された植物細胞は、バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）に由来するポリペプチドもしくはＰＩＰ−１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み；および／または
（ｂ）（ａ）の前記ポリヌクレオチドは、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ３４、およびＣｒｙ３５を含む群から選択されるＢ．チューリンゲンシス（B. thuringiensis）由来のポリペプチドをコードする、方法。