【手続補正書】
【提出日】平成30年10月5日(2018.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要な非分析物の初期成分をさらに含む流体試料中の、分析物の濃度を決定するための改善された方法であって、前記方法が、前記試料を揮発およびイオン化するステップと、揮発およびイオン化された試料を、検出されるイオン化分析物の量に強度において比例する信号を提供するイオン分析物検出デバイスに導入するステップとを含み、
ここで、前記改善が、
前記流体試料がナノリットルサイズの液滴の形態で前記イオン分析物検出デバイスに導入されるように、揮発およびイオン化の前に前記流体試料のナノリットルサイズの液滴を音響的に生成すること、ならびに
（ａ）前記流体試料中の前記初期成分として機能し、（ｂ）（ｉ）前記必要な初期成分よりも揮発性であるか、または（ｉｉ）前記流体試料を揮発させると、前記必要な初期成分よりも揮発性である少なくとも１種の反応生成物をもたらす反応を受け、かつ（ｃ）前記初期成分を使用して得られた信号強度または信号対雑音比のいずれかよりも信号強度における増加および／またはより大きい信号対雑音比をもたらす、代替成分で、前記必要な非分析物の初期成分を代替すること
を含む、改善された方法。
【請求項２】
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約５ｎｌ未満の平均液滴サイズを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約５０ｐｌ未満の平均液滴サイズを有する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約１ｐｌ未満の平均液滴サイズを有する、請求項１、２または３に記載の方法。
【請求項５】
前記改善が、前記流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴を生成するための音響排出を使用することをさらに含む、請求項１、２、３または４に記載の方法。
【請求項６】
前記音響排出が、前記流体試料の表面から一貫したサイズの流体液滴の急速排出をもたらす方式で、前記流体試料を含むリザーバーに集中された音響エネルギーを向ける音響排出装置を使用して行われる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記イオン分析物検出デバイスが、質量分析計を含む、請求項１、２、３、４、５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記イオン化するステップが、化学イオン化、電界脱離イオン化、エレクトロスプレーイオン化、大気圧化学イオン化、マトリックス支援レーザー脱離イオン化、および誘導結合型プラズマイオン化から選択される方法を含む、請求項１、２、３、４、５、６または７に記載の方法。
【請求項９】
前記分析物が、薬物、代謝産物、阻害剤、リガンド、受容体、触媒、合成ポリマー、およびアロステリックエフェクターから選択される、請求項１、２、３、４、５、６、７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記必要な非分析物の初期成分が、初期塩を含み、前記代替成分が、代替塩を含む、請求項１、２、３、４、５、６、７、８または９に記載の方法。
【請求項１１】
前記初期塩および前記代替塩が前記流体試料のための緩衝塩として機能することで、前記流体試料の揮発が前記代替緩衝塩の気相抽出をもたらす、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記代替塩が、弱酸または弱塩基から形成された一価のイオンを含む、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記代替成分が、前記流体試料を揮発させると、前記必要な初期成分および／または前記分析物よりも揮発性である少なくとも１種の反応生成物をもたらす反応を受けるように選択される、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記反応が、分解反応である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記反応が、揮発中に生じて、前記流体試料中の少なくとも１種の非分析物成分を気相抽出を提供する、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記代替成分が、双性イオン化合物を含む、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記双性イオン化合物が、前記流体試料のための緩衝塩として機能する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記双性イオン化合物が、部分的に不飽和のプレ芳香族化合物を含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
質量分析計、流体試料の液滴を生成するための音響排出装置、および前記質量分析計に導入する前に前記液滴を揮発およびイオン化するための手段を使用して、流体試料中の分析物の濃度を決定するための改善されたシステムであって、改善が、前記流体試料中の少なくとも１種の必要な成分を、前記初期成分と同じ機能を推進するが、それぞれ前記初期成分を使用して得られた分析物信号の強度および／または信号対雑音比に対して、分析物信号の強度における増大および／または信号対雑音比における増大をもたらす代替成分で置き換えることを含む、たシステム。
【請求項２０】
前記初期成分が、初期緩衝塩であり、前記代替成分が、代替緩衝塩であり、前記代替緩衝塩が、前記初期緩衝塩よりも揮発性であり、前記流体試料の揮発が前記代替緩衝塩の気相抽出をもたらす、請求項１９に記載の改善されたシステム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明の方法およびシステムは、一般に、代替成分を用いずに得られた分析物の信号強度および信号対雑音比に対して、分析物の信号強度および／または信号対雑音比を、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２５％増大する。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
必要な非分析物の初期成分をさらに含む流体試料中の、分析物の濃度を決定するための改善された方法であって、前記方法が、前記試料を揮発およびイオン化するステップと、揮発およびイオン化された試料を、検出されるイオン化分析物の量に強度において比例する信号を提供するイオン分析物検出デバイスに導入するステップとを含み、
改善が、前記必要な非分析物の初期成分として、
（ａ）前記流体試料中の前記初期成分として機能し、
（ｂ）（ｉ）前記必要な初期成分および／もしくは前記分析物の両方よりも揮発性であり、または（ｉｉ）前記流体試料を揮発させると、前記必要な初期成分および／もしくは前記分析物よりも揮発性である少なくとも１種の反応生成物をもたらす反応を受け、
（ｃ）前記初期成分を使用して得られた信号強度または信号対雑音比のいずれかよりも信号強度における増加および／またはより大きい信号対雑音比をもたらす、
代替成分を用いることを含む、改善された方法。
（項目２）
前記改善が、揮発およびイオン化の前に、流体試料のナノリットルサイズの液滴を生成することをさらに含み、前記流体試料が、ナノリットルサイズの液滴の形態で前記イオン分析物検出デバイスに導入される、項目１に記載の方法。
（項目３）
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約５ｎｌ未満の平均液滴サイズを有する、項目２に記載の方法。
（項目４）
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約２．５ｎｌ未満の平均液滴サイズを有する、項目３に記載の方法。
（項目５）
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約５０ｐｌ未満の平均液滴サイズを有する、項目４に記載の方法。
（項目６）
流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴が、約１ｐｌ未満の平均液滴サイズを有する、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記改善が、前記流体試料の前記ナノリットルサイズの液滴を生成するための音響排出を使用することをさらに含む、項目２に記載の方法。
（項目８）
前記音響排出が、前記流体試料の表面から一貫したサイズの流体液滴の急速排出をもたらす方式で、前記流体試料を含むリザーバーに集中された音響エネルギーを向ける音響排出装置を使用して行われる、項目６に記載の方法。
（項目９）
前記イオン分析物検出デバイスが、質量分析計を含む、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記イオン化するステップが、化学イオン化、電界脱離イオン化、エレクトロスプレーイオン化、大気圧化学イオン化、マトリックス支援レーザー脱離イオン化、および誘導結合型プラズマイオン化から選択される方法を含む、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記分析物が、薬物、代謝産物、阻害剤、リガンド、受容体、触媒、合成ポリマー、およびアロステリックエフェクターから選択される、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記分析物が、生体分子である、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記生体分子が、ヌクレオチド分析物、ペプチド分析物、およびサッカライド分析物から選択される、項目１３に記載の方法。
（項目１４）
前記必要な非分析物の初期成分が、初期塩を含み、前記代替成分が、代替塩を含む、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記初期塩および前記代替塩が、前記流体試料のための緩衝塩として機能する、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記代替塩が、弱酸または弱塩基から形成された一価のイオンを含む、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記代替塩が、炭酸水素アンモニウム、ギ酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、酢酸ピリジニウム、ギ酸ピリジニウム、酢酸エチルモルホリニウム、酢酸トリメチルアミノ、およびギ酸トリメチルアミノから選択される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記代替塩が、炭酸水素アンモニウム、ギ酸アンモニウム、および酢酸アンモニウムから選択される、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記代替成分が、前記必要な初期成分および／または前記分析物の両方よりも揮発性である、項目１に記載の方法。
（項目２０）
前記代替成分が、前記流体試料を揮発させると、前記必要な初期成分および／または前記分析物よりも揮発性である少なくとも１種の反応生成物をもたらす反応を受けるように選択される、項目１に記載の方法。
（項目２１）
前記反応が、分解反応である、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記少なくとも１種の反応生成物が、芳香族化合物を含む、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記反応が、揮発中に生じて、前記流体試料中の少なくとも１種の非分析物成分を気相抽出を提供する、項目２０に記載の方法。
（項目２４）
前記代替成分が、双性イオン化合物を含む、項目２０に記載の方法。
（項目２５）
前記双性イオン化合物が、前記流体試料のための緩衝塩として機能する、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記双性イオン化合物が、部分的に不飽和のプレ芳香族化合物を含む、項目２４に記載の方法。
（項目２７）
前記反応が、前記代替成分中の連結の化学的開裂を含む、項目２０に記載の方法。
（項目２８）
前記連結を化学的に開裂するのに有効な試薬が、揮発の前に前記流体試料に添加される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記反応が、前記代替成分の連結の光分解開裂を含む、項目２０に記載の方法。
（項目３０）
前記流体試料が、揮発中に照射される、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記反応が、前記代替成分中の熱に不安定な連結の熱開裂を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３２）
必要な非分析物の初期成分をさらに含む流体試料中の、分析物の濃度を決定するための改善された方法であって、前記方法が、前記流体試料を揮発およびイオン化するステップと、揮発およびイオン化された試料を、検出されるイオン化分析物の量に強度において比例する分析物の信号を提供するイオン分析物検出デバイスに導入するステップとを含み、改善が、
前記必要な非分析物の初期成分を、前記流体試料の揮発中に、前記流体試料中の前記初期成分として機能する反応生成物をもたらす反応を受け、前記初期成分、前記分析物、またはその両方、および前記分析物よりも揮発性であり、前記初期成分を使用して得られた分析物信号の強度および信号対雑音比に対して、前記分析物の信号強度における増大および／または信号対雑音比における増大をもたらす、双性イオン化合物で置換することを含む、方法。
（項目３３）
必要な非分析物の初期成分をさらに含む流体試料中の、分析物の濃度を決定するための改善された方法であって、前記方法が、前記流体試料を揮発およびイオン化するステップと、揮発およびイオン化された試料を、検出されるイオン化分析物の量に強度において比例する分析物信号を提供するイオン分析物検出デバイスに導入するステップとを含み、
改善が、
前記必要な非分析物の初期成分を、前記流体試料の揮発中に、揮発性芳香族化合物をもたらし、二酸化炭素を発生させ、アンモニア、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミンまたは窒素ガスから選択される窒素群、および揮発性芳香族化合物を放出する分解反応を受ける、部分的に不飽和のプレ芳香族双性イオン化合物で置換することを含む、方法。
（項目３４）
質量分析計、流体試料の液滴を生成するための音響排出装置、および前記質量分析計に導入する前に前記液滴を揮発およびイオン化するための手段を使用して、流体試料中の分析物の濃度を決定するための改善されたシステムであって、改善が、前記流体試料中の少なくとも１種の必要な成分を、前記初期成分と同じ機能を推進するが、それぞれ前記初期成分を使用して得られた分析物信号の強度および／または信号対雑音比に対して、分析物信号の強度における増大および／または信号対雑音比における増大をもたらす代替成分で置き換えることを含む、たシステム。
（項目３５）
前記初期成分が、初期緩衝塩であり、前記代替成分が、代替緩衝塩であり、前記代替緩衝塩が、前記初期緩衝塩よりも揮発性であり、前記流体試料の揮発が前記代替緩衝塩の気相抽出をもたらす、項目３４に記載の改善されたシステム。
（項目３６）
前記代替成分が、化学的に、熱により、または光分解により開裂されて、より低い分子量の反応生成物をもたらすことができる連結を含む、項目３４に記載の改善されたシステム。
（項目３７）
前記代替成分が、光分解により開裂され得る連結を含み、デバイスが、前記連結を開裂するのに有効な放射線源をさらに含む、項目３６に記載の改善されたシステム。
（項目３８）
前記放射線源が、紫外線源である、項目３７に記載の改善されたシステム。
（項目３９）
分析物信号強度および／または信号対雑音比の前記増大が、少なくとも１０％である、項目３４に記載の改善されたシステム。
（項目４０）
分析物信号強度および／または信号対雑音比の前記増大が、２５％である、項目３９に記載の改善されたシステム。
（項目４１）
分析物信号強度および／または信号対雑音比の前記増大が、少なくとも１０％である、項目１に記載の方法。
（項目４２）
分析物信号強度および／または信号対雑音比の前記増大が、２５％である、項目４１に記載の改善されたデバイス。