【手続補正書】
【提出日】平成30年1月12日(2018.1.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐ９７ポリペプチドに融合したイズロン酸−２−スルファターゼ（ＩＤＳ）ポリペプチドと、それらの間の任意選択のペプチドリンカー（Ｌ）とを含む、ｐ９７融合タンパク質。
【請求項２】
前記ＩＤＳポリペプチドが、前記ｐ９７ポリペプチドのＮ末端に融合している、請求項１に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項３】
前記ＩＤＳポリペプチドが、前記ｐ９７ポリペプチドのＣ末端に融合している、請求項１に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項４】
間に前記ペプチドリンカーを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項５】
前記ペプチドリンカーが、剛性リンカー、可動性リンカー、及び酵素的に切断可能なリンカーのうちの１つ以上から選択される、請求項４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項６】
配列（ＥＡＡＡＫ）１〜３（配列番号３６〜３８）、任意選択で配列ＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫ（配列番号３８）を任意選択で含む剛性リンカーを含む、請求項５に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項７】
可動性リンカーを含む、請求項４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項８】
酵素的に切断可能なリンカーを含む、請求項４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項９】
表４から任意選択で選択される、Ｎ末端シグナルペプチド（ＳＰ）配列を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
【請求項１０】
薬学的に許容される担体と、請求項１〜９のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質とを含む薬学的組成物であって、無菌かつ非発熱性である、前記薬学的組成物。
【請求項１１】
治療を必要とする対象におけるリソソーム蓄積症を治療するための、請求項１〜９のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質または請求項１０に記載の薬学的組成物を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
治療を必要とする対象におけるリソソーム蓄積症を治療するための方法もまた含まれ、この方法は、本明細書に記載されるｐ９７融合タンパク質または薬学的組成物を、対象に投与することを含む。ある特定の実施形態において、リソソーム蓄積症は、ハンター症候群（ＭＰＳ  ＩＩ型）である。ある特定の実施形態において、リソソーム蓄積症は、中枢神経系（ＣＮＳ）合併症を有する。ある特定の実施形態において、対象は、リソソーム蓄積症のＣＮＳ合併症を進展させる危険性がある。ある特定の実施形態において、対象は、ヒトの男性である。ある特定の実施形態において、ｐ９７融合タンパク質または薬学的組成物は、静脈内（ＩＶ）注入または腹腔内（ＩＰ）注射によって投与される。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
ｐ９７ポリペプチドに融合したイズロン酸−２−スルファターゼ（ＩＤＳ）ポリペプチドと、それらの間の任意選択のペプチドリンカー（Ｌ）とを含む、ｐ９７融合タンパク質。
（項目２）
前記ＩＤＳポリペプチドが、前記ｐ９７ポリペプチドのＮ末端に融合している、項目１に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目３）
前記ＩＤＳポリペプチドが、前記ｐ９７ポリペプチドのＣ末端に融合している、項目１に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目４）
間に前記ペプチドリンカーを含む、項目１〜３のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目５）
前記ペプチドリンカーが、剛性リンカー、可動性リンカー、及び酵素的に切断可能なリンカーのうちの１つ以上から選択される、項目４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目６）
配列（ＥＡＡＡＫ）１〜３（配列番号３６〜３８）、任意選択で配列ＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫ（配列番号３８）を任意選択で含む剛性リンカーを含む、項目５に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目７）
可動性リンカーを含む、項目４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目８）
酵素的に切断可能なリンカーを含む、項目４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目９）
表４から任意選択で選択される、Ｎ末端シグナルペプチド（ＳＰ）配列を含む、項目１〜８のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１０）
構造：（ａ）ＳＰ−ＩＤＳ−Ｌ−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ−ｐ９７−Ｌ−ＩＤＳを含む、項目９に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１１）
前記ＳＰが、配列ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ（配列番号１４９）を含み、前記ｐ９７融合タンパク質が、構造：（ａ）ＳＰ−ｐ９７−ＩＤＳまたは（ｂ）ＳＰ−ｐ９７−Ｌ−ＩＤＳを含む、項目９に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１２）
前記ＳＰが、ヒトｐ９７  ＳＰ配列またはＭＲＧＰＳＧＡＬＷＬＬＬＡＬＲＴＶＬＧ（配列番号３９）を含み、前記ｐ９７融合タンパク質が、構造：（ａ）ＳＰ−ｐ９７−ＩＤＳまたは（ｂ）ＳＰ−ｐ９７−Ｌ−ＩＤＳを含む、項目９に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１３）
前記ＳＰが、ヒトＩＤＳ  ＳＰ配列ＭＰＰＰＲＴＧＲＧＬＬＷＬＧＬＶＬＳＳＶＣＶＡＬＧ（配列番号４０）を含み、前記ｐ９７融合タンパク質が、構造：（ａ）ＳＰ−ＩＤＳ−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ−ＩＤＳ−Ｌ−ｐ９７を含む、項目９に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１４）
表５から任意選択で選択される、精製タグ（ＴＡＧ）を含む、項目１〜１３のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１５）
構造：（ａ）ＳＰ−ＴＡＧ−ＩＤＳ−Ｌ−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ−ＴＡＧ−ｐ９７−Ｌ−ＩＤＳを含む、項目１４に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１６）
前記タグが、ポリヒスチジンタグ、任意選択でポリヒスチジン（１０個）タグを含む、項目１４または１５に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１７）
前記タグが、ＦＬＡＧタグＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号１２２）を含む、項目１４〜１６のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１８）
表６から任意選択で選択される、プロテアーゼ部位（ＰＳ）を含む、項目９〜１７のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目１９）
構造：（ａ）ＳＰ−ＴＡＧ−ＰＳ−ＩＤＳ−Ｌ−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ−ＴＡＧ−ＰＳ−ｐ９７−リンカー−ＩＤＳを含む、項目１６に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２０）
前記ＰＳ部位が、ＴＥＶプロテアーゼ部位ＥＮＬＹＦＱＧ（配列番号１３５）である、項目１６または１７に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２１）
構造（ａ）ＳＰ（ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ、配列番号１４９）−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ＩＤＳ−剛性Ｌ−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ（ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ、配列番号１４９）−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ｐ９７−剛性Ｌ−ＩＤＳを含む、項目１〜２０のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２２）
構造（ａ）ＳＰ（ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ、配列番号１４９）−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ＩＤＳ−（ＥＡＡＡＫ）３−ｐ９７または（ｂ）ＳＰ（ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ、配列番号１４９）−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ｐ９７−（ＥＡＡＡＫ）３−ＩＤＳを含む、項目２１に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２３）
構造（ａ）ＩＤＳ  ＳＰ−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ＩＤＳ−剛性Ｌ−ｐ９７または（ｂ）ｐ９７  ＳＰ−ＨＩＳ  ＴＡＧ−ＴＥＶ  ＰＳ−ｐ９７−剛性Ｌ−ＩＤＳを含む、項目１〜２２のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２４）
構造：（ａ）ＩＤＳ  ＳＰ−ＨＩＳ  ＴＡＧ（１０個）−ＴＥＶ  ＰＳ−ＩＤＳ−（ＥＡＡＡＫ）３−ｐ９７または（ｂ）ｐ９７  ＳＰ−ＨＩＳ  ＴＡＧ（１０個）−ＴＥＶ  ＰＳ−ｐ９７−（ＥＡＡＡＫ）３−ＩＤＳを含む、項目２３に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２５）
前記ＩＤＳポリペプチドが、（ａ）配列番号３１〜３５に示されるアミノ酸配列、（ｂ）配列番号３１〜３５に示される配列と少なくとも９０％一致するアミノ酸配列、または（ｃ）約１〜５０アミノ酸の付加、置換、挿入、もしくは欠失で配列番号３１〜３５とは異なるアミノ酸配列を含む、項目１〜２４のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２６）
前記ＩＤＳポリペプチドが、配列番号３２または３３に示されるアミノ酸配列を含む、項目２５に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２７）
前記ｐ９７ポリペプチドが、（ａ）配列番号１〜２８に示されるアミノ酸配列、（ｂ）配列番号１〜２８に示される配列と少なくとも９０％一致するアミノ酸配列、または（ｃ）約１〜５０アミノ酸の付加、置換、挿入、もしくは欠失で配列番号１〜２８とは異なるアミノ酸配列を含む、項目１〜２８のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２８）
前記ｐ９７ポリペプチドが、配列番号２（可溶性ヒトｐ９７）または配列番号１４もしくは１４８（ＭＴｆｐｅｐ）に示されるアミノ酸配列を含む、項目２７に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目２９）
（ａ）配列番号１３８〜１４２または２９〜３０に示されるアミノ酸配列、（ｂ）配列番号１３８〜１４２または２９もしくは３０に示される配列と少なくとも９０％一致するアミノ酸配列、あるいは（ｃ）約１〜５０アミノ酸の付加、置換、挿入、または欠失で配列番号１３８〜１４２または２９もしくは３０とは異なるアミノ酸配列を含む、項目１〜２８のいずれかに記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目３０）
配列番号１３８〜１４２または２９もしくは３０に示されるアミノ酸配列を含む、項目２９に記載の前記ｐ９７融合タンパク質。
（項目３１）
項目１〜３０のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質をコードする単離ポリヌクレオチドであって、配列番号１４３〜１４７から任意選択で選択される、前記単離ポリヌクレオチド。
（項目３２）
宿主細胞における発現のためにコドン最適化される、項目３１に記載の前記単離ポリヌクレオチド。
（項目３３）
前記宿主細胞が、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、または細菌細胞である、項目３２に記載の前記単離ポリヌクレオチド。
（項目３４）
項目１〜３３のいずれかに記載の単離ポリヌクレオチドを含み、前記単離ポリヌクレオチドが、１つ以上の調節エレメントと作動可能に連結される、組換え宿主細胞。
（項目３５）
１つ以上の調節エレメントと作動可能に連結される、項目１〜３４のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質をコードする単離ポリヌクレオチドを含む、ベクター。
（項目３６）
項目３５に記載のベクターを含む、組換え宿主細胞。
（項目３７）
項目１〜３６のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質を含む、組換え宿主細胞。
（項目３８）
前記宿主細胞が、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、または細菌細胞である、項目１〜３７のいずれかに記載の前記組換え宿主細胞。
（項目３９）
前記哺乳動物細胞が、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨＥＫ−２９３細胞、またはＨＴ−１０８０ヒト線維肉腫細胞である、項目３８に記載の前記組換え宿主細胞。
（項目４０）
薬学的に許容される担体と、項目１〜３９のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質とを含む薬学的組成物であって、無菌かつ非発熱性である、前記薬学的組成物。
（項目４１）
治療を必要とする対象におけるリソソーム蓄積症を治療するための方法であって、項目１〜４０のいずれかに記載のｐ９７融合タンパク質または薬学的組成物を、前記対象に投与することを含む、前記方法。
（項目４２）
前記リソソーム蓄積症が、ハンター症候群（ＭＰＳ  ＩＩ型）である、項目４１に記載の前記方法。
（項目４３）
前記リソソーム蓄積症が、中枢神経系（ＣＮＳ）合併症を有する、項目４１または４２に記載の前記方法。
（項目４４）
前記対象が、前記リソソーム蓄積症のＣＮＳ合併症を進展させる危険性がある、項目４１または４２に記載の前記方法。
（項目４５）
前記対象が、ヒトの男性である、項目１〜４４のいずれかに記載の前記方法。
（項目４６）
前記ｐ９７融合タンパク質または薬学的組成物が、静脈内（ＩＶ）注入または腹腔内（ＩＰ）注射によって投与される、項目１〜４５のいずれかに記載の前記方法。