【手続補正書】
【提出日】平成30年3月16日(2018.3.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
図2に図示するV1、V3、およびV5より選択されるポリペプチド構造のうちの一つと少なくとも80％の同一性を有するCD33特異的キメラ抗原受容体（CAR）であって、該構造が、
（a）モノクローナル抗CD33抗体由来のVHおよびVLを含む細胞外リガンド結合ドメイン、
（b）FcRIIIαヒンジ、CD8αヒンジ、およびIgG1ヒンジより選択されるヒンジ、
（c）CD8α膜貫通ドメイン、ならびに
（d）CD3ζシグナリングドメインおよび4-1BB由来の共刺激ドメインを含む細胞質ドメイン
を含む、CD33特異的キメラ抗原受容体（CAR）。
【請求項２】
構造V3がCD8αヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、請求項1記載のCD33特異的CAR。
【請求項３】
CD8αヒンジがSEQ ID NO：4と少なくとも80％の同一性を有する、請求項2記載のCD33特異的CAR。
【請求項４】
SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、およびSEQ ID NO：30と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項2または3記載の構造V3のCD33特異的CAR。
【請求項５】
構造V1がFcγRIIIαヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、請求項1記載のCD33特異的CAR。
【請求項６】
FcγRIIIαヒンジがSEQ ID NO：3と少なくとも80％の同一性を有する、請求項5記載のCD33特異的CAR。
【請求項７】
SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、およびSEQ ID NO：22と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項5または6記載の構造V1のCD33特異的CAR。
【請求項８】
構造V5がIgG1ヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、請求項1記載のCD33特異的CAR。
【請求項９】
IgG1ヒンジがSEQ ID NO：5と少なくとも80％の同一性を有する、請求項8記載のCD33特異的CAR。
【請求項１０】
SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、およびSEQ ID NO：38と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項8または9記載の構造V5のCD33特異的CAR。
【請求項１１】
VHが、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、およびSEQ ID NO：17より選択されるポリペプチド配列と少なくとも80％の同一性を有し、かつVLが、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：16、およびSEQ ID NO：18より選択されるポリペプチド配列と少なくとも80％の同一性を有する、請求項1〜10のいずれか一項記載のCD33特異的CAR。
【請求項１２】
4-1BB由来の共刺激ドメインがSEQ ID NO：8と少なくとも80％の同一性を有し、および／またはCD3ζシグナリングドメインがSEQ ID NO：9と少なくとも80％の同一性を有する、請求項1〜11のいずれか一項記載のCD33特異的CAR。
【請求項１３】
CD8α膜貫通ドメインがSEQ ID NO：6と少なくとも80％の同一性を有する、請求項1〜12のいずれか一項記載のCD33特異的CAR。
【請求項１４】
請求項1〜13のいずれか一項記載のCARをコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項１５】
請求項1〜13のいずれか一項記載のCD33特異的CARを細胞表面膜に発現する、操作された免疫細胞。
【請求項１６】
CD33の発現が抑制されている、請求項15記載の操作された免疫細胞。
【請求項１７】
CD33発現細胞を特徴とする前悪性または悪性の癌状態の治療のための医薬の製造における、請求項15または16記載の操作された免疫細胞の使用。
【請求項１８】
白血病またはリンパ腫の治療のための医薬の製造における、請求項15または16記載の操作された免疫細胞の使用。
【請求項１９】
白血病が、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、および骨髄異形成症候群からなる群より選択される、請求項18記載の使用。
【請求項２０】
リンパ腫が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ならびに濾胞性リンパ腫（小細胞型および大細胞型）からなる群より選択される、請求項18記載の使用。
【請求項２１】
（a）免疫細胞を準備する工程、
（b）請求項1〜13のいずれか一項記載の少なくとも1種のCD33特異的キメラ抗原受容体を該細胞の表面に発現させる工程
を含む、免疫細胞を操作する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
本発明の操作された免疫細胞は、B細胞リンパ腫または白血病の処置のような治療的な適用のために特に有用である。
[本発明1001]
図2に図示するV1、V3、およびV5より選択されるポリペプチド構造のうちの一つと少なくとも80％の同一性を有するCD33特異的キメラ抗原受容体（CAR）であって、該構造が、
（a）モノクローナル抗CD33抗体由来のVHおよびVLを含む細胞外リガンド結合ドメイン、
（b）FcRIIIαヒンジ、CD8αヒンジ、およびIgG1ヒンジより選択されるヒンジ、
（c）CD8α膜貫通ドメイン、ならびに
（d）CD3ζシグナリングドメインおよび4-1BB由来の共刺激ドメインを含む細胞質ドメイン
を含む、CD33特異的キメラ抗原受容体（CAR）。
[本発明1002]
構造V3がCD8αヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、本発明1001のCD33特異的CAR。
[本発明1003]
CD8αヒンジがSEQ ID NO：4と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1002のCD33特異的CAR。
[本発明1004]
SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29、およびSEQ ID NO：30と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、本発明1002または1003の構造V3のCD33特異的CAR。
[本発明1005]
構造V1がFcγRIIIαヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、本発明1001のCD33特異的CAR。
[本発明1006]
FcγRIIIαヒンジがSEQ ID NO：3と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1005のCD33特異的CAR。
[本発明1007]
SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、およびSEQ ID NO：22と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、本発明1005または1006の構造V1のCD33特異的CAR。
[本発明1008]
構造V5がIgG1ヒンジおよびCD8α膜貫通ドメインを含む、本発明1001のCD33特異的CAR。
[本発明1009]
IgG1ヒンジがSEQ ID NO：5と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1008のCD33特異的CAR。
[本発明1010]
SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、およびSEQ ID NO：38と少なくとも80％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、本発明1008または1009の構造V5のCD33特異的CAR。
[本発明1011]
VHが、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、およびSEQ ID NO：17より選択されるポリペプチド配列と少なくとも80％の同一性を有し、かつVLが、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：16、およびSEQ ID NO：18より選択されるポリペプチド配列と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1001〜1010のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1012]
4-1BB由来の共刺激ドメインがSEQ ID NO：8と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1001〜1011のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1013]
CD3ζシグナリングドメインがSEQ ID NO：9と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1001〜1012のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1014]
CD8α膜貫通ドメインがSEQ ID NO：6と少なくとも80％の同一性を有する、本発明1001〜1013のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1015]
シグナルペプチドをさらに含む、本発明1001〜1014のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1016]
シグナルペプチドがSEQ ID NO：1またはSEQ ID NO：2と少なくとも80％の配列同一性を有する、本発明1015のCD33特異的CAR。
[本発明1017]
CD33に特異的ではない別の細胞外リガンド結合ドメインをさらに含む、本発明1001〜1016のいずれかのCD33特異的CAR。
[本発明1018]
本発明1001〜1017のいずれかのCARをコードする、ポリヌクレオチド。
[本発明1019]
本発明1018のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
[本発明1020]
本発明1001〜1017のいずれかのCD33特異的CARを細胞表面膜に発現する、操作された免疫細胞。
[本発明1021]
炎症性Tリンパ球、細胞傷害性Tリンパ球、制御性Tリンパ球、またはヘルパーTリンパ球に由来する、本発明1020の操作された免疫細胞。
[本発明1022]
TCRの発現が抑制されている、本発明1021の操作された免疫細胞。
[本発明1023]
CD33の発現が抑制されている、本発明1020〜1022のいずれかの操作された免疫細胞。
[本発明1024]
少なくとも1種の免疫抑制薬または化学療法薬に対して耐性になるよう修飾されている、本発明1020〜1023のいずれかの操作された免疫細胞。
[本発明1025]
治療において使用するための、本発明1020〜1024のいずれかの操作された免疫細胞。
[本発明1026]
患者がヒトである、本発明1025の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1027]
状態がCD33発現細胞を特徴とする前悪性または悪性の癌状態である、本発明1025〜1026のいずれかの治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1028]
状態がCD33発現細胞の過剰量を特徴とする状態である、本発明1025〜1027のいずれかの治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1029]
状態が血液癌状態である、本発明1025〜1028のいずれかの治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1030]
血液癌状態が白血病である、本発明1029の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1031]
白血病が、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、および骨髄異形成症候群からなる群より選択される、本発明1030の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1032]
白血病が急性骨髄性白血病（AML）である、本発明1031の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1033]
血液癌が悪性リンパ増殖性障害である、本発明1029の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1034]
悪性リンパ増殖性障害がリンパ腫である、本発明1033の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1035]
リンパ腫が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ならびに濾胞性リンパ腫（小細胞型および大細胞型）からなる群より選択される、本発明1034の治療において使用するための操作された免疫細胞。
[本発明1036]
癌細胞の傷害を引き起こすために有効な量の本発明1020〜1024のいずれかの操作された免疫細胞と血液癌細胞を接触させる工程を含む、血液癌細胞に傷害を与える方法。
[本発明1037]
（c）免疫細胞を準備する工程、
（d）本発明1001〜1017のいずれかの少なくとも1種のCD33特異的キメラ抗原受容体を該細胞の表面に発現させる工程
を含む、免疫細胞を操作する方法。
[本発明1038]
（e）免疫細胞を準備する工程、
（f）CD33特異的キメラ抗原受容体をコードする少なくとも1種のポリヌクレオチドを該細胞へ導入する工程、
（g）該細胞においてポリヌクレオチドを発現させ、任意で、CD33特異的キメラ抗原受容体を発現させる工程
を含む、本発明1037の免疫細胞を操作する方法。
[本発明1039]
（b）免疫細胞を準備する工程、
（c）CD33特異的キメラ抗原受容体をコードする少なくとも1種のポリヌクレオチドを該細胞へ導入する工程、
（d）CD33に特異的ではない少なくとも1種の他のキメラ抗原受容体を導入する工程
を含む、本発明1037または1038の免疫細胞を操作する方法。
[本発明1040]
（c）本発明1001〜1017のいずれかのCD33特異的キメラ抗原受容体を表面に発現している免疫細胞を準備する工程、
（d）該免疫細胞を患者へ投与する工程
を含む、その必要のある対象を処置する方法。
[本発明1041]
前記免疫細胞がドナーから提供される、本発明1040の方法。
[本発明1042]
前記免疫細胞が患者自身から提供される、本発明1040の方法。