【手続補正書】
【提出日】平成30年6月25日(2018.6.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カチオン性脂質およびＰＥＧ化脂質を含む複数の脂質ナノ粒子を含む組成物であって、
前記脂質ナノ粒子は、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを封入し、
前記ポリヌクレオチドは、
（ｉ）少なくとも１つの５’キャップ構造；
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）；
（ｉｉｉ）ＣＲＩＳＰＲポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム；および
（ｉｖ）３’非翻訳領域（ＵＴＲ）
を含む、組成物。
【請求項２】
前記脂質ナノ粒子が、ステロールをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性脂質をさらに含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記カチオン性脂質が、生分解性カチオン性脂質である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質、ＰＥＧ化脂質、非カチオン性脂質、およびステロールを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記カチオン性脂質が、少なくとも１つのエステル結合を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記ポリヌクレオチドが、ポリＡテールをさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記オープンリーディングフレームが、少なくとも１つの１−メチル−シュードウリジンを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記オープンリーディングフレームが、１−メチル−シュードウリジン、シチジン、アデノシン、およびグアノシンから選択されるヌクレオチドからなる、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＣＲＩＳＰＲポリペプチドが、配列番号７，８，９，６１，６２，６３，６４，または６５の配列に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＣＲＩＳＰＲポリペプチドが、配列番号７，８，９，６１，６２，６３，６４，または６５の配列を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
（ａ）ｍＲＮＡと（ｂ）ｓｇＲＮＡとを含む組成物であって、
前記ｍＲＮＡは、
（ｉ）少なくとも１つの５’キャップ構造；
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）；
（ｉｉｉ）ＣＲＩＳＰＲポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム；および
（ｉｖ）３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含み、
前記ｓｇＲＮＡは、
（ｉ）目的遺伝子の５’−ＵＴＲのいずれかの鎖に相補的な２０〜２５長結合ヌクレオチドの第１領域；および
（ｉｉ）ガイドＲＮＡ足場配列を含む、第１領域の３’末端に位置する第２領域、を含む、組成物。
【請求項１３】
前記ＣＲＩＳＰＲポリペプチドが、配列番号７，８，９，６１，６２，６３，６４，または６５の配列に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記ｍＲＮＡが、ポリＡテールをさらに含む、請求項１２または１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記オープンリーディングフレームが、少なくとも１つの１−メチル−シュードウリジンを含む、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記オープンリーディングフレームが、１−メチル−シュードウリジン、シチジン、アデノシン、およびグアノシンから選択されるヌクレオチドからなる、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドを含む、請求項１２〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項１２〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドおよび少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、カチオン性脂質およびＰＥＧ化脂質を含む複数の脂質ナノ粒子をさらに含み、前記脂質ナノ粒子が、前記ｍＲＮＡおよび前記ｓｇＲＮＡの少なくとも一方を、少なくとも１つ封入している、請求項１２〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記脂質ナノ粒子が、ステロールをさらに含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性脂質をさらに含む、請求項２０または２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記カチオン性脂質が、生分解性カチオン性脂質である、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質、ＰＥＧ化脂質、非カチオン性脂質、およびステロールを含む、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記カチオン性脂質が、少なくとも１つのエステル結合を含む、請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
（ｉ）少なくとも１つの５’キャップ構造；
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）；
（ｉｉｉ）ＣＲＩＳＰＲポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームであって、１−メチル−シュードウリジン、シチジン、アデノシン、およびグアノシンから選択されるヌクレオチドからなる、オープンリーディングフレーム；および
（ｉｖ）３’非翻訳領域（ＵＴＲ）、を含む、ｍＲＮＡ。
【請求項２７】
前記ＣＲＩＳＰＲポリペプチドが、配列番号７，８，９，６１，６２，６３，６４，または６５の配列に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項２６に記載のｍＲＮＡ。
【請求項２８】
前記ｍＲＮＡが、ポリＡテールをさらに含む、請求項２６または２７に記載のｍＲＮＡ。
【請求項２９】
前記３’−ＵＴＲが、少なくとも１つのｍｉＲ結合部位または１つのｍｉＲ結合部位シードを含む、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項３０】
前記３’−ＵＴＲが、ｍｉＲ−１２２またはｍｉＲ−１４２またはｍｉＲ−１４６結合部位を含む、請求項２６〜２９のいずれか一項に記載のｍＲＮＡ。
【請求項３１】
カチオン性脂質およびＰＥＧ化脂質を含む複数の脂質ナノ粒子を含む組成物であって、前記脂質ナノ粒子が、請求項２６〜３０のいずれか一項に記載のｍＲＮＡを封入している、組成物。
【請求項３２】
前記脂質ナノ粒子が、ステロールをさらに含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性脂質をさらに含む、請求項３１または３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記カチオン性脂質が、生分解性カチオン性脂質である、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質、ＰＥＧ化脂質、非カチオン性脂質、およびステロールを含む、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３６】
前記カチオン性脂質が、少なくとも１つのエステル結合を含む、請求項３１〜３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記組成物が、
（ｉ）目的遺伝子の５’−ＵＴＲのいずれかの鎖に相補的な２０〜２５長結合ヌクレオチドの第１領域；および
（ｉｉ）ガイドＲＮＡ足場配列を含む、第１領域の３’末端に位置する第２領域、を含むｓｇＲＮＡをさらに含む、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドを含む、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項３７または３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドおよび少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
（ｉ）目的遺伝子の５’−ＵＴＲのいずれかの鎖に相補的な２０〜２５長結合ヌクレオチドの第１領域；および
（ｉｉ）ガイドＲＮＡ足場配列を含む、第１領域の３’末端に位置する第２領域、を含む、ｓｇＲＮＡであって、
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つのホスホロチオエート結合および少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドのいずれか一方を含む、ｓｇＲＮＡ。
【請求項４２】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つのホスホロチオエート結合を含む、請求項４１に記載のｓｇＲＮＡ。
【請求項４３】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドを含む、請求項４１または４２に記載のｓｇＲＮＡ。
【請求項４４】
前記ｓｇＲＮＡが、少なくとも１つのホスホロチオエート結合および少なくとも１つの２’−メトキシ−ヌクレオチドを含む、請求項４１〜４３のいずれか一項に記載のｓｇＲＮＡ。
【請求項４５】
カチオン性脂質およびＰＥＧ化脂質を含む複数の脂質ナノ粒子を含む組成物であって、
前記脂質ナノ粒子が、請求項４１〜４４のいずれか一項に記載のｓｇＲＮＡを封入している、組成物。
【請求項４６】
前記脂質ナノ粒子が、ステロールをさらに含む、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性脂質をさらに含む、請求項４５または４６に記載の組成物。
【請求項４８】
前記カチオン性脂質が、生分解性カチオン性脂質である、請求項４５〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質、ＰＥＧ化脂質、非カチオン性脂質、およびステロールを含む、請求項４５〜４８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記カチオン性脂質が、少なくとも１つのエステル結合を含む、請求項４５〜４９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５１】
前記組成物が、
（ｉ）少なくとも１つの５’キャップ構造；
（ｉｉ）５’非翻訳領域（ＵＴＲ）；
（ｉｉｉ）ＣＲＩＳＰＲポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム；および
（ｉｖ）３’非翻訳領域（ＵＴＲ）、を含むｍＲＮＡをさらに含む、請求項４５〜５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記オープンリーディングフレームが、１−メチル−シュードウリジン、シチジン、アデノシン、およびグアノシンから選択されるヌクレオチドからなる、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
前記ｍＲＮＡが、ポリＡテールをさらに含む、請求項５１または５２に記載の組成物。
【請求項５４】
前記ＣＲＩＳＰＲポリペプチドが、配列番号７，８，９，６１，６２，６３，６４，または６５の配列に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含む、請求項５１〜５３のいずれか一項に記載の組成物。