【手続補正書】
【提出日】平成30年10月30日(2018.10.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガラクトース部分とフルクトース部分とを含むサッカリドを生成する方法であって、
（ａ）前記ガラクトース部分が前記フルクトース部分に連結されており、または
（ｂ）前記ガラクトース部分と前記フルクトース部分とがガラクトースまたはフルクトース以外の少なくとも１個の単糖部分により離れており、
前記方法が、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記方法を５．５〜９．５のｐＨで実行し、
但し、
（ｉ）前記ガラクトース部分が前記フルクトース部分に連結されている場合、前記第１のサッカリドの濃度が０．４３ｍｏｌ／Ｌ未満であり、前記第２のサッカリドの濃度が０．５ｍｏｌ／Ｌ未満であり、
（ｉｉ）前記ガラクトース部分と前記フルクトース部分とがガラクトースまたはフルクトース以外の少なくとも１個の単糖部分により離れている場合、前記第１のサッカリドの濃度および／または前記第２のサッカリドの濃度が０．５ｍｏｌ／Ｌ未満である、方法。
【請求項２】
ガラクトース部分とフルクトース部分とを含むサッカリドを生成する方法であって、
（ａ）前記ガラクトース部分が前記フルクトース部分に連結されており、または
（ｂ）前記ガラクトース部分と前記フルクトース部分とがガラクトースまたはフルクトース以外の少なくとも１個の単糖部分により離れており、
前記方法が、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記酵素が、
ａ）配列番号１との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、最大で９８０個のアミノ酸残基からなるポリペプチド、
ｂ）少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、
ｉ）前記配列番号１のポリペプチドをコードする配列番号９に含まれる核酸配列、または
ｉｉ）ｉ）の相補鎖
とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択される、方法。
【請求項３】
ガラクトース部分がフルクトース部分に連結されているサッカリドを生成する方法であって、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記方法を５．５〜９．５のｐＨで実行し、
前記第１のサッカリドの濃度が０．４３ｍｏｌ／Ｌ未満であり、
前記第２のサッカリドの濃度が０．８ｍｏｌ／Ｌ未満である、方法。
【請求項４】
前記第１のサッカリドがラクトースまたはガラクトオリゴ糖である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記第１のサッカリドがラクトースである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記第２のサッカリドがフルクトースである、請求項３または４に記載の方法。
【請求項７】
前記第１のサッカリドがラクトースであり、前記第２のサッカリドがフルクトースであり、その結果、前記生成されるサッカリドがラクツロースである、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記第１のサッカリドがラクトースであり、前記第２のサッカリドがラクツロースである、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
前記第１のサッカリドの濃度が０．０８８〜０．３８０ｍｏｌ／Ｌである、請求項３〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ラクトースの濃度が４０〜１００ｇ／Ｌである、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記第２のサッカリドの濃度が０．２７８〜０．４４４ｍｏｌ／Ｌである、請求項３〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記フルクトースの濃度が５０〜８０ｇ／Ｌである、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記酵素が、
ａ）トランスガラクトシル化活性を有するおよび配列番号１との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、最大で９８０個のアミノ酸残基からなるポリペプチド、
ｂ）少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、
ｉ）前記配列番号１のポリペプチドをコードする配列番号９に含まれる核酸配列、または
ｉｉ）ｉ）の相補鎖
とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ガラクトース部分がフルクトース部分に連結されているサッカリドを生成する方法であって、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記酵素が、
ａ）配列番号１との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、最大で９８０個のアミノ酸残基からなるポリペプチド、
ｂ）少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、
ｉ）前記配列番号１のポリペプチドをコードする配列番号９に含まれる核酸配列、または
ｉｉ）ｉ）の相補鎖
とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択される、方法。
【請求項１５】
０〜１０℃の温度で実行する請求項３〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
４５〜６０℃の温度で実行する請求項３〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ラクツロースの収率が少なくとも１０％であり、例えば少なくとも１２％であり、例えば少なくとも１５％であり、例えば少なくとも１８％であり、例えば少なくとも２０％であり、例えば少なくとも２２％であり、例えば少なくとも２５％であり、出発物質として使用するラクトースおよびフルクトースの総重量に基づいて重量で算出される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法により得られるラクツロース含有組成物。
【請求項１９】
ガラクトース部分とフルクトース部分とを含むサッカリドを生成する方法であって、前記ガラクトース部分と前記フルクトース部分とがガラクトースまたはフルクトース以外の少なくとも１個の単糖部分により離れており、
前記方法が、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記方法を５．５〜９．５のｐＨで実行し、
前記第１のサッカリドの濃度および／または前記第２のサッカリドの濃度が０．５ｍｏｌ／Ｌ未満である、方法。
【請求項２０】
前記第１のサッカリドがラクトースまたはガラクトオリゴ糖である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記第１のサッカリドがラクトースである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記第２のサッカリドがスクロースである、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記第１のサッカリドがラクトースであり、前記第２のサッカリドがスクロースであり、その結果、前記生成されるサッカリドがラクトスクロースである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記第１のサッカリドの濃度が０．０１〜０．２５ｍｏｌ／Ｌである、請求項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ラクトースの濃度が０．１〜０．２ｍｏｌ／Ｌである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記第２のサッカリドの濃度が０．０１〜０．３５ｍｏｌ／Ｌである、請求項１９〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記スクロースの濃度が０．１〜０．３５ｍｏｌ／Ｌである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記酵素がβ−ガラクトシダーゼである、請求項１〜１２、１９〜２７のいずれか一項の方法。
【請求項２９】
前記酵素がＥｎｚｙｍｅ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ（Ｅ．Ｃ．）３．２．１．２３に分類される、請求項１〜１２、１９〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記酵素が細菌起源または真菌起源である、請求項１〜１２、１９〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記酵素がビフィドバクテリア（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）起源である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記酵素が、
ａ）トランスガラクトシル化活性を有するおよび配列番号１との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、最大で９８０個のアミノ酸残基からなるポリペプチド、
ｂ）少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、
ｉ）前記配列番号１のポリペプチドをコードする配列番号９に含まれる核酸配列、または
ｉｉ）ｉ）の相補鎖
とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択される、請求項１９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ガラクトース部分とフルクトース部分とを含むサッカリドを生成する方法であって、前記ガラクトース部分と前記フルクトース部分とがガラクトースまたはフルクトース以外の少なくとも１個の単糖部分により離れており、
前記方法が、
ガラクトース部分を含む第１のサッカリドとフルクトース部分を含む第２のサッカリドとを接触させることであり、前記第１のサッカリドと前記第２のサッカリドとが異なり、前記フルクトース部分を含む前記第２のサッカリドへのガラクトース部分の転移を触媒することができる酵素の存在下で接触させること
を含み、
前記酵素が、ａ）配列番号１との少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであり、最大で９８０個のアミノ酸残基からなるポリペプチド、
ｂ）少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、
ｉ）前記配列番号１のポリペプチドをコードする配列番号９に含まれる核酸配列、または
ｉｉ）ｉ）の相補鎖
とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択される、方法。
【請求項３４】
３０〜７０℃の温度で実行する請求項１９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
食品組成物中においてｉｎ  ｓｉｔｕで実行する請求項１〜１６、１９〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記食品組成物が乳製品組成物である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記乳製品組成物の初期成分としてラクトースが存在する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記乳製品組成物にラクトースを添加する、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項３９】
請求項１〜３８のいずれか一項に記載の方法により得られるラクトスクロース含有組成物。