【手続補正書】
【提出日】平成30年3月19日(2018.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組み換えポリペプチド又はその活性フラグメントであって、 配列番号３又は配列番号４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、タンパク質分解活性を有する、組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。
【請求項２】
（ａ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、ＤＴＧＩＤＸＸＨＸＸＬＸＮＬＶＸＴＳＬＧＸＳＸＶＧＧＸＸＸＤＶＸＧＨモチーフを含み、このとき最初のＤが活性部位であるアスパラギン酸であり、最後のＨが活性部位であるヒスチジンであり、Ｘは任意のアミノ酸であるか、又は、
（ｂ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、ＤＴＧＩＤＸＸＨＸＸＬＸａＮＬＶＸＴＳＬＧＸＳＸＶＧＧＸｂＸＸｃＤＶＸＧＨモチーフを含み、このとき最初のＤが活性部位であるアスパラギン酸であり、最後のＨが活性部位であるヒスチジンであり、Ｘ、Ｘａ、Ｘｂ、及びＸｃが任意のアミノ酸であり、ただし、Ｘａがアルギニンであるとき、Ｘｂ及びＸｃはグリシンではない、請求項１に記載の組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。
【請求項３】
（ａ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、８０〜８２番目の残基位置にあるＶＳＧ配列を含み、ここで、前記ポリペプチド又はその活性フラグメントのアミノ酸位置が、配列番号７に定めるアミノ酸配列に対応して番号付けされ；
（ｂ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、配列番号１８と比較して少なくとも１つのアミノ酸残基の挿入を含み、ここで、前記挿入が３９〜４７番目の残基位置にあり、前記残基位置が、配列番号１８に定めるアミノ酸配列に対応して番号付けされ、ここで、前記３９〜４７番目の残基位置がＨＱＳＬＡＮＬＶＮＴＳＬＧで置換されていてもよく；
（ｃ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、配列番号１８と比較して少なくとも１つのアミノ酸残基の欠失を含み、ここで、前記欠失が５１〜６４番目の残基位置にあり、前記残基位置が、配列番号１８に定めるアミノ酸配列に対応して番号付けされ、ここで、前記５１〜６４番目の残基位置が、ＶＧＧＳＴＭＤＶＱＧＨ、ＶＧＧＳＡ／ＰＥＤＶＱＧＨ、ＶＧＧＮＰＥＤＲＱＧＨ、又はＶＧＧＴＰＡＤＶＨＧＨで置換されていてもよく；及び／又は
（ｄ）前記ポリペプチド又はその活性フラグメントが、配列番号１８と比較して少なくとも１つのアミノ酸残基の欠失を含み、ここで、前記欠失が６８〜９５番目の残基位置にあり、前記残基位置が、配列番号１８に定めるアミノ酸配列に対応して番号付けされ、ここで、前記６８〜９５番目の残基位置が、ＶＡＧＴＩＡＳＹＧＳＶＳＧＶＭＨＮＡＴＬＶＰＶＫＶで置換されていてもよい、請求項１又は２に記載の組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。
【請求項４】
前記ポリペプチドが、５〜１２の範囲のｐＨにおいて、その最大プロテアーゼ活性の少なくとも５０％を保持し；及び／又は前記ポリペプチドが、５５℃〜８０℃の範囲の温度において、その最大プロテアーゼ活性の少なくとも５０％を保持する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。 
【請求項５】
前記ポリペプチドが、ストレス条件下、５０℃において２０分後に少なくとも８０％の活性を保持し、ここで、前記ストレス条件が、ＬＡＳ／ＥＤＴＡアッセイ、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡアッセイ、又はＨＤＬアッセイから選択される、請求項１〜４に記載の組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。 
【請求項６】
前記組み換えポリペプチド又はその活性フラグメントが、Ｘ００３Ｎ、Ｘ００６Ｒ、Ｘ０１０Ｅ、Ｘ０２０Ｉ、Ｘ０２６Ｎ、Ｘ０２８Ｒ、Ｘ０２９Ｉ、Ｘ０３８Ａ、Ｘ０４１Ｐ、Ｘ０４２Ｎ、Ｘ０４４Ｒ、Ｘ０４８Ｄ、Ｘ０５３Ｒ、Ｘ０５９Ｇ、Ｘ０６１Ｇ、Ｘ０８５Ｑ、Ｘ０８８Ｒ、Ｘ０９０Ｉ、Ｘ０９６Ｇ、Ｘ０９８Ｎ、Ｘ１０３Ｍ、Ｘ１０４Ｙ、Ｘ１０７Ｑ、Ｘ１１３Ａ、Ｘ１１５Ｓ、Ｘ１１７Ｎ、Ｘ１３１Ｄ、Ｘ１３２Ｓ、Ｘ１３３Ｄ、Ｘ１３６Ｎ、Ｘ１３７Ｎ、Ｘ１３８Ｉ、Ｘ１３９Ｎ、Ｘ１４３Ｓ、Ｘ１４４Ｓ、Ｘ１４６Ｔ、Ｘ１４７Ｌ、Ｘ１５７Ｒ、Ｘ１６８Ｎ、Ｘ１６９Ａ、Ｘ１７８Ｎ、Ｘ１７９Ｒ、Ｘ１８０Ｔ、Ｘ２０４Ｙ、Ｘ２０７Ｇ、Ｘ２０８Ｑ、Ｘ２０９Ｆ、Ｘ２１０Ｒ、Ｘ２１２Ｌ、Ｘ２１９Ｔ、Ｘ２２２Ｖ、Ｘ２２９Ｉ、Ｘ２３０Ｋ、Ｘ２３１Ｓ、Ｘ２３１Ａ、Ｘ２３９Ｔ、Ｘ２４０Ｑ、Ｘ２４１Ｖ、Ｘ２４３Ｎ、Ｘ２４５Ｌ、Ｘ２４６Ｒ、Ｘ２４７Ｄ、Ｘ２５５Ｌ、Ｘ２５６Ｎ、Ｘ２５７Ｑ、Ｘ２６４Ｎ、Ｘ２６６Ｙ、Ｘ２７１Ａ、及びＸ２７３Ｇから選択される少なくとも１つの置換を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組み換えポリペプチド又はその活性フラグメント。
【請求項７】
界面活性剤と、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み換えポリペプチドと、を含む組成物であって、前記組成物が、洗濯用洗剤、布地柔軟化洗剤、自動食器洗浄洗剤、手洗い用食器洗浄洗剤、及び硬質表面クリーニング用洗剤から選択される洗剤組成物であり得る、組成物。
【請求項８】
前記組成物が、少なくとも１種のカルシウムイオン及び／又は亜鉛イオン；少なくとも１種の安定剤；少なくとも１種の漂白剤；少なくとも１つの補助成分；及び／又は、アシルトランスフェラーゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、α−ガラクトシダーゼ、アラビノシダーゼ、アリールエステラーゼ、β−ガラクトシダーゼ、カラギナーゼ、カタラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、セルラーゼ、コンドロイチナーゼ、クチナーゼ、エンド−β−１，４−グルカナーゼ、エンド−β−マンナナーゼ、エステラーゼ、エキソ−マンナナーゼ、ガラクタナーゼ、グルコアミラーゼ、ヘミセルラーゼ、ヒアルロニダーゼ、ケラチナーゼ、ラッカーゼ、ラクターゼ、リグニナーゼ、リパーゼ、リポキシゲナーゼ、マンナナーゼ、オキシダーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ペクチナーゼ、ペントサナーゼ、ペルオキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、ホスファターゼ、ホスホリパーゼ、フィターゼ、ポリガラクツロナーゼ、プロテアーゼ、プルラナーゼ、レダクターゼ、ラムノガラクツロナーゼ、β−グルカナーゼ、タンナーゼ、トランスグルタミナーゼ、キシランアセチル−エステラーゼ、キシラナーゼ、キシログルカナーゼ、キシロシダーゼ、メタロプロテアーゼ、追加のセリンプロテアーゼ、及びこれらの組み合わせから選択される１種又は２種以上の追加の酵素又は酵素誘導体を更に含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
（ａ）前記組成物が、約０．００１重量％〜約１．０重量％の、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み換えポリペプチドを含み；
（ｂ）前記組成物がリン酸塩を含まなく；
（ｃ）前記組成物がリン酸塩を含み；
（ｄ）前記組成物がホウ素を含まなく；
（ｅ）前記組成物がホウ素を含み；又は
（ｆ）前記組成物がｐＨ約７〜約１２で処方される、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１０】
クリーニング方法であって、表面又は物品を、（ｉ）緩衝液と、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み換えポリペプチド、又は、（ｉｉ）請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物、と接触させることを含む、方法。
【請求項１１】
組み換えポリペプチドの作製方法であって、 
（ａ）請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターにより、宿主細胞を安定的に形質転換することと、 
（ｂ）前記形質転換した宿主細胞が前記ポリペプチドを産生するのに好適な条件下で、前記形質転換した宿主細胞を培養することと、
（ｃ）前記ポリペプチドを回収することと、を含む、方法。
【請求項１２】
配列番号３及び配列番号４から選択されるアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
【請求項１３】
請求項１２に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項１４】
請求項１３に記載の発現ベクターによって形質転換された宿主細胞。
【請求項１５】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、織物若しくは皮革加工組成物、羽毛加工用組成物、動物飼料用組成物、コンタクトレンズ洗浄用組成物、又は創傷清拭用組成物。