【手続補正書】
【提出日】平成30年10月5日(2018.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異種プロモーターに作動可能に連結した少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む単離核酸であって、
前記ポリヌクレオチドが、
（i）配列番号１；配列番号１の相補体；配列番号１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の相補体；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体； 
（ii）配列番号７１；配列番号７１の相補体；配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の相補体；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；または
（iii）配列番号１、配列番号３、配列番号４、配列番号１１、配列番号７１、配列番号７３および前述のもののいずれかの相補体
からなる群から選択され、または
（iv）前記（i）または（ii）の生物が、Ｄ．ｖ．ヴィルギフェラ（D. v. virgifera）ルコント；Ｄ．バルベリ（D. barberi）スミスおよびローレンス；Ｄ．ｕ．ホワルディ（D. u. howardi）；Ｄ．ｖ．ゼアエ（D. v. zeae）；Ｄ．バルテアタ（D. balteata）ルコント；Ｄ．ｕ．テネラ（D. u. tenella）；Ｄ．スペシオーサ（D. speciosa）ジャーマー；Ｄ．ｕ．ウンデシムプンクタータ（D. u. undecimpunctata）マンネルヘイム；エウスキスツス・ヘロス（Euschistus heros）（Ｆａｂｒ．）（ネオトロピカルブラウンスティンクバグ）、およびエウスキスツス・セルブス（Euschistus servus）（セイ）（ブラウンスティンクバグ）からなる群から選択され；または
（v）前記（i）、（ii）、または（iii）のポリヌクレオチドが、内因性害虫遺伝子の発現を阻害するＲＮＡ分子をコードする少なくとも１つの追加のポリヌクレオチドをさらに含み、または
（vi）前記核酸が、バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをさらに含むか；または
（vii）前記バチルス・ツリンギエンシス由来の（ｖ）のポリペプチドが、Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する前記ポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される
単離核酸。
【請求項２】
請求項１に記載のポリヌクレオチドを含む植物形質転換ベクターであって、
（i）前記異種プロモーターが、植物細胞中で機能的であり、および／または
（ii）前記追加のポリヌクレオチド（複数可）が、それぞれ植物細胞中で機能的である異種プロモーターに作動可能に連結している、
植物形質転換ベクター。
【請求項３】
前記ＲＮＡが、二本鎖リボ核酸分子からなる群から選択される、請求項１に記載のポリヌクレオチドから転写されるリボ核酸（ＲＮＡ）分子。
【請求項４】
請求項１に記載のポリヌクレオチドの発現から産生される二本鎖リボ核酸分子であって、
（i）前記ポリヌクレオチド配列を鞘翅目または半翅目害虫と接触させることが、前記ポリヌクレオチドと特異的に相補的な内因性ヌクレオチド配列の発現を阻害し、および／または
（ii）（i）の前記リボヌクレオチド分子を鞘翅目または半翅目害虫と接触させることが、前記害虫を殺すまたはその成長および／もしくは摂食を阻害し、および／または
（iii）前記二本鎖リボ核酸分子が、第１、第２および第３のＲＮＡセグメントを含み、
前記第１のＲＮＡセグメントが前記ポリヌクレオチドを含み、
前記第３のＲＮＡセグメントが、第２のポリヌクレオチド配列により前記第１のＲＮＡセグメントに連結されており、
前記第１および前記第３のＲＮＡセグメントがリボ核酸に転写されたときにハイブリダイズして二本鎖ＲＮＡを形成するように、前記第３のＲＮＡセグメントが実質的に前記第１のＲＮＡセグメントの逆相補体である、二本鎖ＲＮＡ。
【請求項５】
請求項１に記載のポリヌクレオチドで形質転換された細胞であって、
（i）原核細胞であり、および／または
（ii）真核細胞であり、および／または
（iii）植物細胞であり、
ここで、
（a）前記細胞が、トウモロコシ、ダイズまたは綿細胞であり、および／または
（b）前記細胞が、バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、および／または
（c）Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する前記（b）のポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、
細胞。
【請求項６】
請求項１に記載のポリヌクレオチドで形質転換された植物であって、
（i）前記少なくとも１つのポリヌクレオチドが前記植物において二本鎖リボ核酸分子として発現し、および／または
（ii）前記植物が、トウモロコシ、ダイズまたは綿であり、および／または
（iii）前記少なくとも１つのポリヌクレオチドが前記植物においてリボ核酸分子として発現し、鞘翅目または半翅目害虫が前記植物の一部を摂取したとき、前記リボ核酸分子が、前記少なくとも１つのポリヌクレオチドと特異的に相補的である内因性ポリヌクレオチドの発現を阻害し、および／または
（iv）前記植物が、バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、および／または
（v）Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する前記（iv）のポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、
植物。
【請求項７】
前記ポリヌクレオチドを含む、請求項６に記載の植物の種子。
【請求項８】
検出可能な量の前記ポリヌクレオチドを含む、請求項６に記載の植物から生産される商品生産物。
【請求項９】
害虫集団を防除する方法であって、
（a）前記害虫内部の生物学的機能を阻害するために前記害虫との接触の際に機能するリボ核酸（ＲＮＡ）分子を含む作用物質を用意することを含み、前記ＲＮＡが、配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチド；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの相補体；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの転写物；ならびに配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの転写物の相補体と特異的にハイブリダイズ可能であり、または
（b）前記（a）の作用物質が二本鎖ＲＮＡ分子であり、または
（c）前記（a）の害虫が鞘翅目または半翅目害虫である、
方法。
【請求項１０】
鞘翅目または半翅目害虫集団を防除する方法であって、
（a）鞘翅目または半翅目害虫の宿主植物に請求項１に記載のポリヌクレオチドを含む形質転換植物細胞を供給することを含み、前記集団に属する鞘翅目または半翅目害虫との接触により前記鞘翅目または半翅目害虫内部の標的配列の発現を阻害するように機能し、前記ポリヌクレオチドを含まない同じ宿主植物種の植物における同じ害虫種と比較して、前記鞘翅目もしくは半翅目害虫または害虫集団の成長および／または生存の低減をもたらすリボ核酸分子を生成するように前記ポリヌクレオチドを発現させ、または
（b）前記（a）のリボ核酸分子が二本鎖リボ核酸分子であり、または
（c）前記鞘翅目または半翅目害虫集団が、前記形質転換植物細胞を欠いている同じ宿主植物種の宿主植物に外寄生する同じ害虫種の集団と比較して減少し、または
（d）前記（a）のリボ核酸分子が二本鎖リボ核酸分子であり、前記鞘翅目または半翅目害虫集団が、前記形質転換植物細胞を欠いている同じ種の宿主植物に外寄生する鞘翅目または半翅目害虫集団と比較して減少する、
方法。
【請求項１１】
植物における害虫外寄生を防除する方法であって、
（a）配列番号１または配列番号７１、
（b）配列番号１または配列番号７１の相補体、
（c）配列番号１または配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片、
（d）配列番号１または配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体、
（e）配列番号１または配列番号７１の転写物、
（f）配列番号１または配列番号７１の転写物の相補体、
（g）配列番号１または配列番号７１の転写物の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片、および
（h）配列番号１または配列番号７１の転写物の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体
からなる群から選択されるポリヌクレオチドと特異的にハイブリダイズ可能であるリボ核酸（ＲＮＡ）を前記害虫の食餌に供給することを含み、
ここで、
（i）前記食餌が前記ポリヌクレオチドを発現するように形質転換された植物細胞を含み、および／または
（ii）前記特異的にハイブリダイズ可能なＲＮＡが二本鎖ＲＮＡ分子に含まれる、方法。
【請求項１２】
コーン作物の収量を向上する方法であって、
（a）請求項１に記載の核酸をコーン植物に導入して、トランスジェニックコーン植物を産生することと、
（b）前記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現を可能にするために前記コーン植物を栽培することとを含み、前記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現が、鞘翅目および／または半翅目害虫の発育または成長ならびに前記鞘翅目および／または半翅目害虫による感染に起因する収量の損失を阻害し、および／または
（c）前記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現が、前記コーン植物の一部と接触した鞘翅目および／または半翅目害虫における少なくとも第１の標的遺伝子を抑制するＲＮＡ分子を生成する、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
開示
本開示は、以下の［１］から［５２］を含む。
［１］異種プロモーターに作動可能に連結した少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む単離核酸であって、
上記ポリヌクレオチドが、
配列番号１；配列番号１の相補体；配列番号１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の相補体；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１を含むジアブロティカ属（Diabrotica）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；ならびに
配列番号７１；配列番号７１の相補体；配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の相補体；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号７１を含むエウスキスツス属（Euschistus）生物の天然コード配列の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体
からなる群から選択される、
単離核酸。
［２］配列番号１、配列番号３、配列番号４、配列番号１１、配列番号７１、配列番号７３および前述のもののいずれかの相補体からなる群から選択される、上記［１］に記載のポリヌクレオチド。
［３］上記［１］に記載のポリヌクレオチドを含む植物形質転換ベクター。
［４］上記生物がＤ．ｖ．ヴィルギフェラ（D. v. virgifera）ルコント；Ｄ．バルベリ（D. barberi）スミスおよびローレンス；Ｄ．ｕ．ホワルディ（D. u. howardi）；Ｄ．ｖ．ゼアエ（D. v. zeae）；Ｄ．バルテアタ（D. balteata）ルコント；Ｄ．ｕ．テネラ（D. u. tenella）；Ｄ．スペシオーサ（D. speciosa）ジャーマー；Ｄ．ｕ．ウンデシムプンクタータ（D. u. undecimpunctata）マンネルヘイム；エウスキスツス・ヘロス（Euschistus heros）（Ｆａｂｒ．）（ネオトロピカルブラウンスティンクバグ）、ネザラ・ビリデュラ（Nezara viridula）（Ｌ．）（ミナミアオカメムシ）、ピエゾドルス・グイルディニイ（Piezodorus guildinii）（ウェストウッド）（レッドバンディッドスティンクバグ）、ハリオモルファ・ハリス（Halyomorpha halys）（Ｓｔａｌ）（クサギカメムシ）；チナビア・ヒラレ（Chinavia hilare）（セイ）（グリーンスティンクバグ）；エウスキスツス・セルブス（Euschistus servus）（セイ）（ブラウンスティンクバグ）、ディケロプス・メラカンツス（Dichelops melacanthus）（ダラス）、ディケロプス・フルカツス（Dichelops furcatus）（Ｆ．）、エデッサ・メジタブンダ（Edessa meditabunda）（Ｆ．）、チアンタ・ペルジトル（Thyanta perditor）（Ｆ．）（ネオトロピカルレッドショルダードスティンクバグ）、チナビア・マルギナツム（Chinavia marginatum）（パリソ・ド・ボーヴォワ）、ホルシアス・ノビレルス（Horcias nobilellus）（ベルク）（コットンバグ）、テディア・スチグモサ（Taedia stigmosa）（ベルク）、ホシカメムシ（Dysdercus peruvianus）（Ｇｕｅｒｉｎ−Ｍｅｎｅｖｉｌｌｅ）、ネオメガロトムス・パルブス（Neomegalotomus parvus）（ウェストウッド）、レプトグロスス・ゾナツス（Leptoglossus zonatus）（ダラス）、ニエストレア・シダエ（Niesthrea sidae）（Ｆ．）、カスミカメムシ（Lygus hesperus）（ナイト）（ウェスタンターニッシュドプラントバグ）およびサビイロメクラガメ（Lygus lineolaris）（パリソ・ド・ボーヴォワ）からなる群から選択される、上記［１］に記載のポリヌクレオチド。
［５］上記［１］に記載のポリヌクレオチドから転写されるリボ核酸（ＲＮＡ）分子。
［６］上記［１］に記載のポリヌクレオチドの発現から産生される二本鎖リボ核酸分子。
［７］上記ポリヌクレオチド配列を鞘翅目または半翅目害虫と接触させることが、上記ポリヌクレオチドと特異的に相補的な内因性ヌクレオチド配列の発現を阻害する、上記［６］に記載の二本鎖リボ核酸分子。
［８］リボヌクレオチド分子を鞘翅目または半翅目害虫と接触させることが、上記害虫を殺すまたはその成長および／もしくは摂食を阻害する、上記［７］に記載の二本鎖リボ核酸分子。
［９］第１、第２および第３のＲＮＡセグメントを含み、
上記第１のＲＮＡセグメントが上記ポリヌクレオチドを含み、
上記第３のＲＮＡセグメントが、第２のポリヌクレオチド配列により上記第１のＲＮＡセグメントに連結されており、
上記第１および上記第３のＲＮＡセグメントがリボ核酸に転写されたときにハイブリダイズして二本鎖ＲＮＡを形成するように、上記第３のＲＮＡセグメントが実質的に上記第１のＲＮＡセグメントの逆相補体である、上記［６］に記載の二本鎖ＲＮＡ。
［１０］長さが約１５〜約３０ヌクレオチドの二本鎖リボ核酸分子および一本鎖リボ核酸分子からなる群から選択される、上記［５］に記載のＲＮＡ。
［１１］上記異種プロモーターが、植物細胞中で機能的である、上記［１］に記載のポリヌクレオチドを含む植物形質転換ベクター。
［１２］上記［１］に記載のポリヌクレオチドで形質転換された細胞。
［１３］原核細胞である、上記［１２］に記載の細胞。
［１４］真核細胞である、上記［１２］に記載の細胞。
［１５］植物細胞である、上記［１４］に記載の細胞。
［１６］上記［１］に記載のポリヌクレオチドで形質転換された植物。
［１７］上記ポリヌクレオチドを含む、上記［１６］に記載の植物の種子。
［１８］検出可能な量の上記ポリヌクレオチドを含む、上記［１６］に記載の植物から生産される商品生産物。
［１９］上記少なくとも１つのポリヌクレオチドが上記植物において二本鎖リボ核酸分子として発現する、上記［１６］に記載の植物。
［２０］トウモロコシ、ダイズまたは綿細胞である、上記［１５］に記載の細胞。
［２１］トウモロコシ、ダイズまたは綿である、上記［１６］に記載の植物。
［２２］上記少なくとも１つのポリヌクレオチドが上記植物においてリボ核酸分子として発現し、鞘翅目または半翅目害虫が上記植物の一部を摂取したとき、上記リボ核酸分子が、上記少なくとも１つのポリヌクレオチドと特異的に相補的である内因性ポリヌクレオチドの発現を阻害する、上記［１６］に記載の植物。
［２３］内因性害虫遺伝子の発現を阻害するＲＮＡ分子をコードする少なくとも１つの追加のポリヌクレオチドをさらに含む、上記［１］に記載のポリヌクレオチド。
［２４］上記追加のポリヌクレオチド（複数可）がそれぞれ植物細胞中で機能し得る異種プロモーターに作動可能に連結した、上記［２３］に記載のポリヌクレオチドを含む植物形質転換ベクター。
［２５］害虫集団を防除する方法であって、上記害虫内部の生物学的機能を阻害するために上記害虫との接触の際に機能するリボ核酸（ＲＮＡ）分子を含む作用物質を用意することを含み、上記ＲＮＡが、配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチド；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの相補体；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体；配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの転写物；ならびに配列番号１および配列番号７１からなる群から選択されるポリヌクレオチドの転写物の相補体と特異的にハイブリダイズ可能である、方法。
［２６］上記作用物質が二本鎖ＲＮＡ分子である、上記［２５］に記載の方法。
［２７］上記害虫が鞘翅目または半翅目害虫である、上記［２５］に記載の方法。
［２８］鞘翅目または半翅目害虫集団を防除する方法であって、
鞘翅目または半翅目害虫の宿主植物に上記［１］に記載のポリヌクレオチドを含む形質転換植物細胞を供給することを含み、上記集団に属する鞘翅目または半翅目害虫との接触により上記鞘翅目または半翅目害虫内部の標的配列の発現を阻害するように機能し、上記ポリヌクレオチドを含まない同じ宿主植物種の植物における同じ害虫種と比較して、上記鞘翅目もしくは半翅目害虫または害虫集団の成長および／または生存の低減をもたらすリボ核酸分子を生成するように上記ポリヌクレオチドを発現させる、方法。
［２９］上記リボ核酸分子が二本鎖リボ核酸分子である、上記［２８］に記載の方法。
［３０］上記鞘翅目または半翅目害虫集団が、上記形質転換植物細胞を欠いている同じ宿主植物種の宿主植物に外寄生する同じ害虫種の集団と比較して減少する、上記［２８］に記載の方法。
［３１］上記リボ核酸分子が二本鎖リボ核酸分子である、上記［２８］に記載の方法。
［３２］上記鞘翅目または半翅目害虫集団が、上記形質転換植物細胞を欠いている同じ種の宿主植物に外寄生する鞘翅目または半翅目害虫集団と比較して減少する、上記［２９］に記載の方法。
［３３］植物における害虫外寄生を防除する方法であって、
配列番号１または配列番号７１、
配列番号１または配列番号７１の相補体、
配列番号１または配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片、
配列番号１または配列番号７１の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体、
配列番号１または配列番号７１の転写物、
配列番号１または配列番号７１の転写物の相補体、
配列番号１または配列番号７１の転写物の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片、および
配列番号１または配列番号７１の転写物の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドの断片の相補体
からなる群から選択されるポリヌクレオチドと特異的にハイブリダイズ可能であるリボ核酸（ＲＮＡ）を上記害虫の食餌に供給することを含む、方法。
［３４］上記食餌が上記ポリヌクレオチドを発現するように形質転換された植物細胞を含む、上記［３３］に記載の方法。
［３５］上記特異的にハイブリダイズ可能なＲＮＡが二本鎖ＲＮＡ分子に含まれる、上記［３３］に記載の方法。
［３６］コーン作物の収量を向上する方法であって、
上記［１］に記載の核酸をコーン植物に導入して、トランスジェニックコーン植物を産生することと、
上記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現を可能にするために上記コーン植物を栽培することとを含み、上記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現が、鞘翅目および／または半翅目害虫の発育または成長ならびに上記鞘翅目および／または半翅目害虫による感染に起因する収量の損失を阻害する、方法。
［３７］上記少なくとも１つのポリヌクレオチドの発現が、上記コーン植物の一部と接触した鞘翅目および／または半翅目害虫における少なくとも第１の標的遺伝子を抑制するＲＮＡ分子を生成する、上記［３６］に記載の方法。
［３８］トランスジェニック植物細胞を産生する方法であって、
上記［１］に記載の核酸を含むベクターで植物細胞を形質転換することと、
複数の形質転換植物細胞を含む植物細胞培養の発育を可能にするのに十分な条件下で上記形質転換植物細胞を培養することと、
上記少なくとも１つのポリヌクレオチドをそれらのゲノムに組み込んだ形質転換植物細胞を選択することと、
上記少なくとも１つのポリヌクレオチドによりコードされるリボ核酸（ＲＮＡ）分子の発現について上記形質転換植物細胞をスクリーニングすることと、
上記ＲＮＡを発現する植物細胞を選択することと
を含む、方法。
［３９］上記ＲＮＡ分子が二本鎖ＲＮＡ分子である、上記［３８］に記載の方法。
［４０］鞘翅目および／または半翅目害虫抵抗性トランスジェニック植物を産生する方法であって、
上記［３８］に記載の方法により産生される上記トランスジェニック植物細胞を用意することと、
上記トランスジェニック植物細胞からトランスジェニック植物を再生させることとを含み、上記少なくとも１つのポリヌクレオチドによりコードされる上記リボ核酸分子の発現が、形質転換植物に接触する鞘翅目および／または半翅目害虫における標的遺伝子の発現を調節するのに十分である、方法。
［４１］トランスジェニック植物細胞を産生する方法であって、
鞘翅目害虫から植物を保護する手段を含むベクターで植物細胞を形質転換することと、
複数の形質転換植物細胞を含む植物細胞培養の発育を可能にするのに十分な条件下で上記形質転換植物細胞を培養することと、
植物に鞘翅目害虫抵抗性を与える手段をそれらのゲノムに組み込んだ形質転換植物細胞を選択することと、
鞘翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害するための手段の発現について上記形質転換植物細胞をスクリーニングすることと、
鞘翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害するための上記手段を発現する植物細胞を選択することと
を含む、方法。
［４２］鞘翅目害虫抵抗性トランスジェニック植物を産生する方法であって、
上記［４１］に記載の方法により産生された上記トランスジェニック植物細胞を用意することと、
上記トランスジェニック植物細胞からトランスジェニック植物を再生させることとを含み、鞘翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害する上記手段の発現が、形質転換植物に接触する鞘翅目害虫における標的遺伝子の発現を調節するのに十分である、方法。
［４３］トランスジェニック植物細胞を産生する方法であって、
植物に半翅目害虫抵抗性を与える手段を含むベクターで植物細胞を形質転換することと、
複数の形質転換植物細胞を含む植物細胞培養の発育を可能にするのに十分な条件下で上記形質転換植物細胞を培養することと、
植物に半翅目害虫抵抗性を与える上記手段をそれらのゲノムに組み込んだ形質転換植物細胞を選択することと、
半翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害するための手段の発現について上記形質転換植物細胞をスクリーニングすることと、
半翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害するための上記手段を発現する植物細胞を選択することと
を含む、方法。
［４４］半翅目害虫抵抗性トランスジェニック植物を産生する方法であって、
上記［４３］に記載の方法により産生された上記トランスジェニック植物細胞を用意することと、
上記トランスジェニック植物細胞からトランスジェニック植物を再生させることとを含み、半翅目害虫における必須遺伝子の発現を阻害する上記手段の発現が、形質転換植物に接触する半翅目害虫における標的遺伝子の発現を調節するのに十分である、方法。
［４５］バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをさらに含む、上記［１］に記載の核酸。
［４６］Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する上記ポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、上記［４５］に記載の核酸。
［４７］バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、上記［１５］に記載の細胞。
［４８］Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する上記ポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、上記［４７］に記載の細胞。
［４９］バチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、上記［１６］に記載の植物。
［５０］Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する上記ポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、上記［４９］に記載の植物。
［５１］上記形質転換植物細胞がバチルス・ツリンギエンシス（Bacillus thuringiensis）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属種またはシュードモナス（Pseudomonas）属種に由来するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、上記［３８］に記載の方法。
［５２］Ｂ．ツリンギエンシス（B. thuringiensis）に由来する上記ポリペプチドが、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｉ、Ｃｒｙ２Ａ、Ｃｒｙ３、Ｃｒｙ７Ａ、Ｃｒｙ８、Ｃｒｙ９Ｄ、Ｃｒｙ１４、Ｃｒｙ１８、Ｃｒｙ２２、Ｃｒｙ２３、Ｃｒｙ３４、Ｃｒｙ３５、Ｃｒｙ３６、Ｃｒｙ３７、Ｃｒｙ４３、Ｃｒｙ５５、Ｃｙｔ１ＡおよびＣｙｔ２Ｃを含む群から選択される、上記［５１］に記載の方法。
本明細書に開示するのは、核酸分子（例えば、標的遺伝子、ＤＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡおよびｈｐＲＮＡ）、ならびに例えば、Ｄ．ｖ．ヴィルギフェラ（D. v. virgifera）ルコント（ウェスタンコーンルートワーム、「ＷＣＲ」）；Ｄ．バルベリ（D. barberi）スミスおよびローレンス（ノーザンコーンルートワーム、「ＮＣＲ」）；Ｄ．ｕ．ホワルディ（D. u. howardi）バーバー（サザンコーンルートワーム、「ＳＣＲ」）；Ｄ．ｖ．ゼアエ（D. v. zeae）クリサンおよびスミス（メキシカンコーンルートワーム、「ＭＣＲ」）；Ｄ．バルテアタ（D. balteata）ルコント；Ｄ．ｕ．テネラ（D. u. tenella）；Ｄ．スペシオーサ（D. speciosa）ジャーマー；Ｄ．ｕ．ウンデシムプンクタータ（D. u. undecimpunctata）マンネルヘイム等の鞘翅目害虫、ならびにエウスキスツス・ヘロス（Euschistus heros）（Ｆａｂｒ．）（ネオトロピカルブラウンスティンクバグ、「ＢＳＢ」）、Ｅ．セルブス（E. servus）（セイ）（ブラウンスティンクバグ）；ネザラ・ビリデュラ（Nezara viridula）（Ｌ．）（ミナミアオカメムシ）、ピエゾドルス・グイルディニイ（Piezodorus guildinii）（ウェストウッド）（レッドバンディッドスティンクバグ）、ハリオモルファ・ハリス（Halyomorpha halys）（Ｓｔａｌ）（クサギカメムシ）；チナビア・ヒラレ（Chinavia hilare）（セイ）（グリーンスティンクバグ）；Ｃ．マルギナツム（C. marginatum）（パリソ・ド・ボーヴォワ）；ディケロプス・メラカンツス（Dichelops melacanthus）（ダラス）；Ｄ．フルカツス（D. furcatus）（Ｆ．）；エデッサ・メジタブンダ（Edessa meditabunda）（Ｆ．）；チアンタ・ペルジトル（Thyanta perditor）（Ｆ．）（ネオトロピカルレッドショルダードスティンクバグ）；ホルシアス・ノビレルス（Horcias nobilellus）（ベルク）（コットンバグ）；テディア・スチグモサ（Taedia stigmosa）（ベルク）；ホシカメムシ（Dysdercus peruvianus）（Ｇｕｅｒｉｎ−Ｍｅｎｅｖｉｌｌｅ）；ネオメガロトムス・パルブス（Neomegalotomus parvus）（ウェストウッド）；レプトグロスス・ゾナツス（Leptoglossus zonatus）（ダラス）；ニエストレア・シダエ（Niesthrea sidae）（Ｆ．）；カスミカメムシ（Lygus hesperus）（ナイト）（ウェスタンターニッシュドプラントバグ）およびサビイロメクラガメ（L. lineolaris）（パリソ・ド・ボーヴォワ）等の半翅目害虫を含む、害虫の防除のためのそれらの使用の方法である。特定の例において、害虫における１つまたは複数の天然核酸の少なくとも一部と相同的であり得る例示的な核酸分子を開示する。