【手続補正書】
【提出日】平成30年10月19日(2018.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
残基
（ａ）Ｌ９４及びＰ１１３；
（ｂ）Ｌ９４及びＹ１１５；又は
（ｃ）Ｐ１１３及びＹ１１５
を含むトリマーＴＮＦα上のエピトープに結合する抗体であって、ここで、Ｌ９４はＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在し、Ｐ１１３及びＹ１１５はＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在し、残基番号付けは配列番号３６に従うものである、抗体。
【請求項２】
Ｌ９４、Ｐ１１３及びＹ１１５の３個全部を含むエピトープに結合し、ここで、Ｌ９４が、ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在し、Ｐ１１３及びＹ１１５が、ＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
以下の残基をさらに含むエピトープに結合する、請求項１又は２に記載の抗体：
（ａ）残基がＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在し、次から選択される１個以上の残基：Ｔ７７、Ｔ７９、Ｙ８７、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６及びＲ１３８；及び／又は
（ｂ）残基がＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在し、次から選択される１個以上の残基：Ｌ６３、Ｄ１４３、Ｆ１４４、Ｓ１４７及Ｑ１４９；及び／又は
（ｃ）ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在し、次から選択される１個以上の残基：Ｌ７５、Ｓ８１、Ｒ８２、Ｉ８３、Ｉ９７及びＤ１４０；及び／又は
（ｄ）ＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する次から選択される１個以上の残基：Ｐ２０、Ｆ６４、及びＫ６５、
ここで、残基番号付けは、配列番号３６に従うものである。
【請求項４】
以下の残基をさらに含むエピトープに結合する、請求項１又は２に記載の抗体：
（ａ）ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在する残基であるＴ７７、Ｔ７９、Ｙ８７、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６及びＲ１３８；
（ｂ）ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在する残基であるＴ７７、Ｔ７９、Ｙ８７、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｒ１３８、Ｌ７５、Ｓ８１、Ｒ８２、Ｉ８３、Ｉ９７及びＤ１４０；
（ｃ）ＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する残基であるＬ６３、Ｄ１４３、Ｆ１４４、Ｓ１４７及びＱ１４９；
（ｄ）ＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する残基であるＬ６３、Ｄ１４３、Ｆ１４４、Ｓ１４７、Ｑ１４９、Ｐ２０、Ｆ６４及びＫ６５；
（ｅ）ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在する残基であるＴ７７、Ｔ７９、Ｙ８７、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６及びＲ１３８、並びにＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する残基であるＬ６３、Ｄ１４３、Ｆ１４４、Ｓ１４７及びＱ１４９；
（ｆ）ＴＮＦαトリマーのＡ鎖上に存在する残基であるＴ７７、Ｔ７９、Ｙ８７、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｒ１３８、Ｌ７５、Ｓ８１、Ｒ８２、Ｉ８３、Ｉ９７及びＤ１４０、並びにＴＮＦαトリマーのＣ鎖上に存在する残基であるＬ６３、Ｄ１４３、Ｆ１４４、Ｓ１４７、Ｑ１４９、Ｐ２０、Ｆ６４及びＫ６５
ここで、残基番号付けは、配列番号３６に従うものである。
【請求項５】
（ａ）１ｎＭ以下、任意には２００ｐＭ以下の親和性（ＫＤ−ａｂ）を有し；及び／又は
（ｂ）ヒト化抗体であり；及び／又は
（ｃ）Ｆａｂ、改変型Ｆａｂ、Ｆａｂ’、改変型Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単一ドメイン抗体又はｓｃＦｖであり；及び／又は
（ｄ）トリマーＴＮＦαと、化合物（１）〜（７）：
【化１−１】
2018525333.tif 000001
【化１−２】
2018525333.tif 000002
【化１−３】
2018525333.tif 000003
のいずれか１つとの複合体に結合し、
任意には、トリマー−化合物複合体に対して１ｎＭ以下、さらに任意には２００ｐＭ以下の親和性（ＫＤ−ａｂ）を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
ＴＮＦαへの結合について請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗体と競合する抗体。
【請求項７】
請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体をコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体を含む、ヒト又は動物の体の治療剤。
【請求項９】
請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容されるアジュバント及び／又は担体とを含む医薬組成物。
【請求項１０】
対象から得られた試料中の化合物−トリマー複合体の検出のための標的遭遇バイオマーカーとしての請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体の使用であって、前記抗体が検出可能であり、前記複合体がトリマーＴＮＦαと、トリマーＴＮＦαに結合することができる化合物とを含み、それにより、化合物−トリマー複合体が、必要な受容体に結合し、受容体を介してトリマーにより誘導されるシグナル伝達を調節する、上記抗体の使用。
【請求項１１】
化合物−トリマー複合体が、必要な受容体に結合し、受容体を介してトリマーによって誘導されるシグナル伝達を調節する、トリマーＴＮＦαへの化合物の標的遭遇を検出する方法であって、
（ａ）前記化合物を投与された対象から試料を取得するステップ；
（ｂ）請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体と、前記試料及び対照試料とを接触させるステップであって、前記抗体が検出可能である、ステップ；
（ｃ）前記検出可能抗体の、前記試料及び前記対照試料への結合の量を決定するステップ
を含み、前記検出可能抗体の前記試料への結合が前記検出可能抗体の前記対照試料への結合よりも高いことが、前記化合物の前記トリマーＴＮＦαへの標的遭遇を示す、上記方法。
【請求項１２】
トリマーＴＮＦαのコンフォメーション変化を惹起する化合物のスクリーニングにおける請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体の使用であって、前記コンフォメーション変化が、トリマーＴＮＦαの結合に対する必要な受容体のシグナル伝達を調節する、上記使用。
【請求項１３】
ＴＮＦαトリマーに結合し、必要な受容体を介するトリマーのシグナル伝達を調節することができる化合物を同定する方法であって、
（ａ）ＴＮＦαトリマーと試験化合物とを含む試験化合物−トリマー複合体の、前記複合体に選択的に結合する請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体に対する結合親和性を測定するための結合アッセイを実行するステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で測定された結合親和性と、ステップ（ａ）に記載の抗体に高い親和性で結合することが公知の異なる化合物−トリマー複合体の結合親和性とを比較するステップ；及び
（ｃ）ステップ（ｂ）に記載の比較に照らして考慮した場合、その測定された結合親和性が許容される場合、ステップ（ａ）の化合物−トリマー複合体中に存在する化合物を選択するステップ
を含む、上記方法。
【請求項１４】
（ａ）抗体が、ＴＮＦαトリマーの非存在下での化合物への結合及び／又は化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーへの結合と比較して、ＴＮＦαトリマー−化合物複合体に選択的に結合し、任意には、抗体が、化合物非存在下でＴＮＦαとリマーに結合する及び／又はＴＮＦαとリマーの非存在下で化合物に結合するＫＤ−ａｂよりも、化合物の非存在下で少なくとも１００分の１、さらに任意には少なくとも２００分の１であるＫＤ−ａｂを有するＴＮＦαのトリマー−化合物複合体に結合し；及び／又は
（ｂ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの安定性と比較して、ＴＮＦαトリマーの安定性を増加させ、
（ｉ）安定性の増加が、少なくとも１℃のＴＮＦαトリマーの温度遷移中点（Ｔｍ）の増加をもたらし；
（ｉｉ）安定性の増加が、少なくとも１０℃のＴＮＦαトリマーの温度遷移中点（Ｔｍ）の増加をもたらし；又は
（ｉｉｉ）ＴＮＦαトリマーのＴｍの増加が１０℃〜２０℃であり；及び／又は
（ｃ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対する結合親和性と比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対する結合親和性を増加させ、任意には、
（ｉ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対する結合に関する結合速度（ｋｏｎ−ｒ）及び解離速度（ｋｏｆｆ−ｒ）値と比較して、ｋｏｎ−ｒを増加させること及び／又はｋｏｆｆ−ｒを減少させることによって、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対する結合親和性を増加させ；及び／又は
（ｉｉ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対する結合に関するｋｏｎ−ｒ値と比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するｋｏｎ−ｒを減少させ、
化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対するＫＤ−ｒと比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するＫＤ−ｒを少なくとも１０分の１に減少させ；
化合物が、化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が１０ｎＭ未満であり；又は
化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対するＫＤ−ｒと比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するＫＤ−ｒを少なくとも４分の１に減少させ；
化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が６００ｐＭ未満であり、任意には、化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が２００ｐＭ未満であり、
任意には、該方法は、高効率アッセイである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
（ａ）前記試験化合物が５００ｎＭ以下のＩＣ５０値を有し；
（ｂ）ステップ（ｂ）における化合物が、化合物（１）〜（７）、又はその塩若しくは溶媒和物からなる群から選択され；及び／又は
（ｃ）受容体がＴＮＦ受容体である、請求項１３又は１４に記載の方法。