【手続補正書】
【提出日】平成30年8月22日(2018.8.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された改変型ヒトキヌレニナーゼ酵素であって、前記改変型酵素が、天然型ヒトキヌレニナーゼ（配列番号：８を参照）に比べて少なくとも１つの置換を有し、前記少なくとも１つの置換が、（ａ）Ａ９９、Ｆ３０６、及びＡ４３６；  （ｄ）Ａ４３６；  （ｅ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｆ）Ａ９９、Ｉ１３１、及びＦ２４９；  （ｇ）Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＥ２５９；  （ｈ）Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、Ｅ２５９、及びＦ３０６；  （ｉ）Ａ９９及びＦ３０６；  （ｊ）Ａ９９、Ｔ１３８、Ｆ３０６、及びＡ４３６；  （ｋ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｌ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｍ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｎ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｔ１３８、Ｖ３３９、及びＩ４０５；    （ｏ）Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｐ）Ｆ７１、Ａ９９、及びＥ２５９；  （ｑ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｅ２５９、及びＡ２８２；  （ｒ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｅ２５９、及びＶ３０３；  （ｓ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＬ３２２；  （ｔ）Ｆ７１、Ｅ２５９、及びＬ３２２；  （ｕ）Ｆ７１、Ｆ２４９、Ｅ２５９、及びＶ３０３；  （ｖ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、及びＩ４０５；  （ｗ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、及びＩ４０５；  （ｙ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、及びＳ４０８；  （ａ’）Ｉ１１０；  （ｂ’）Ｉ１１０及びＦ３０６；  （ｃ’）Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＳ２７４；  （ｄ’）Ｉ１３１及びＦ２４９；  （ｅ’）Ｔ１３８；  （ｆ’）Ｌ５９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；  （ｇ’）Ｈ４１、Ｑ１７５、及びＡ４３６；  並びに（ｈ’）Ｔ１３８及びＡ４３６からなる群より選択される位置にある、前記酵素。
【請求項２】
前記少なくとも１つの置換が、（ａ）Ａ９９Ｓ、Ｆ３０６Ｌ及びＡ４３６Ｔ；（ｂ）Ｆ３０６Ｍ；（ｃ）Ｆ３０６Ｌ；（ｄ）Ａ４３６Ｔ；（ｅ）Ａ９９Ｆ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ及びＳ４０８Ｎ；（ｆ）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ及びＦ２４９Ｗ；（ｇ）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ及びＥ２５９Ｐ；（ｈ）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ、Ｅ２５９Ｐ及びＦ３０６Ｌ；（ｉ）Ａ９９Ｓ及びＦ３０６Ｌ；（ｊ）Ａ９９Ｓ、Ｔ１３８Ｓ、Ｆ３０６Ｌ及びＡ４３６Ｔ；（ｋ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、Ｉ４０５Ｌ及びＳ４０８Ｎ；（ｌ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、Ｖ３３９Ｉ、Ｉ４０５Ｆ、及びＳ４０８Ｎ；（ｍ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ及びＳ４０８Ｎ；（ｎ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｔ１３８Ｓ、Ｖ３３９Ａ、及びＩ４０５Ｆ；（ｏ）Ｆ３０６Ｉ、Ｌ３３７Ｖ、Ｖ３３９Ｉ、Ｉ４０５Ｆ及びＳ４０８Ｔ；（ｐ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ及びＥ２５９Ｐ；（ｑ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｅ２５９Ｐ及びＡ２８２Ｐ；（ｒ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｅ２５９Ｐ及びＶ３０３Ｓ；（ｓ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ及びＬ３２２Ｐ；（ｔ）Ｆ７１Ｌ、Ｅ２５９Ｐ及びＬ３２２Ｐ；（ｕ）Ｆ７１Ｌ、Ｆ２４９Ｗ、Ｅ２５９Ｐ及びＶ３０３Ｓ；（ｖ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ及びＩ４０５Ｌ；（ｗ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｍ及びＩ４０５Ｌ；（ｘ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｓ、Ｉ４０５Ｌ；（ｙ）Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｌ、Ｖ３３９Ｔ及びＳ４０８Ｔ；（ｚ）Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｔ及びＩ４０５Ｌ；（ａ’）Ｉ１１０Ｌ；（ｂ’）Ｉ１１０Ｌ及びＦ３０６Ｌ；（ｃ’）Ｉ１３１Ｍ、Ｆ２４９Ｗ、及びＳ２７４Ｇ；（ｄ’）Ｉ１３１Ｖ及びＦ２４９Ｗ；（ｅ’）Ｔ１３８Ｓ；（ｆ’）Ｌ５９Ｍ、Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ、及びＳ４０８Ｎ；（ｇ’）Ｈ４１Ｒ、Ｑ１７５Ｌ、及びＡ４３６Ｔ；並びに（ｈ’）Ｔ１３８Ｓ及びＡ４３６Ｔからなる群より選択される、請求項１に記載の酵素。
【請求項３】
単離された改変型ヒトキヌレニナーゼ酵素であって、前記改変型酵素が、天然型ヒトキヌレニナーゼ（配列番号：８を参照）に比べて少なくとも１つの置換を有し、前記少なくとも１つの置換が、（ａ）Ａ９９、Ｆ３０６、及びＡ４３６；（ｂ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｉ４０５、Ｓ４０８；（ｃ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、及びＩ４０５；（ｄ）Ａ９９、Ｔ１３８、Ｆ３０６、及びＡ４３６；（ｅ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；（ｆ）Ａ９９及びＦ３０６；（ｇ）Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；（ｈ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、及びＩ４０５；（ｉ）Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｓ４０８；（ｋ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｇ１１２、Ｔ１３８、Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｖ３３９、Ｉ４０５、Ｓ４０８、及びＡ４３６；（ｌ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｌ３３７、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；（ｍ）Ａ４３６；（ｎ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｔ１３８、Ｖ３３９、及びＩ４０５；（ｐ）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｉ４０５、Ｓ４０８、及びＡ４３６；（ｑ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＬ３２２；（ｒ）Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、Ｅ２５９、及びＦ３０６；（ｓ）Ｆ７１、Ａ９９、及びＥ２５９；（ｔ）Ｆ７１、Ａ９９、Ｓ１６７、及びＥ２５９；（ｕ）Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＳ２７４；（ｖ）Ｌ５９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；（ｗ）Ｉ１１０及びＦ３０６；（ｘ）Ａ９９、Ｉ１３１、Ｆ２４９、及びＥ２５９；（ｙ）Ｆ７１、Ｅ２５９、及びＬ３２２；（ｚ）Ｈ４１、Ｑ１７５、及びＡ４３６；（ａ’）Ａ９９、Ｉ１３１、及びＦ２４９；（ｂ’）Ｉ１３１及びＦ２４９；（ｃ’）Ｔ１３８及びＡ４３６；（ｄ’）Ｔ１３８；（ｅ’）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｅ２５９、及びＶ３０３；（ｆ’）Ａ９９、Ｇ１１２、Ｆ３０６、Ｖ３３９、Ｉ４０５、及びＳ４０８；（ｇ’）Ｆ７１、Ａ９９、Ｉ１３１、Ｅ２５９、及びＡ２８２；（ｈ’）Ｆ７１、Ｆ２４９、Ｅ２５９、及びＶ３０３；（ｉ’）Ｉ１１０；並びに（ｊ’）Ｆ３０６からなる群より選択される位置にある、前記酵素。
【請求項４】
前記少なくとも１つの置換が、（ａ）Ａ９９Ｓ、Ｆ３０６Ｌ及びＡ４３６Ｔ；（ｂ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、Ｉ４０５Ｌ、Ｓ４０８Ｎ；（ｃ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、及びＩ４０５Ｌ；（ｄ）Ａ９９Ｓ、Ｔ１３８Ｓ、Ｆ３０６Ｌ、及びＡ４３６Ｔ；（ｅ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ、及びＳ４０８Ｎ；（ｆ）Ａ９９Ｓ及びＦ３０６Ｌ；（ｇ）Ｆ３０６Ｉ、Ｌ３３７Ｖ、Ｖ３３９Ｉ、Ｉ４０５Ｆ、及びＳ４０８Ｔ；（ｈ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｍ、及びＩ４０５Ｌ；（ｉ）Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｌ、Ｖ３３９Ｔ、Ｓ４０８Ｔ；（ｊ）Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｓ、Ｉ４０５Ｌ；（ｋ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｇ１１２Ａ、Ｔ１３８Ｓ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、Ｖ３３９Ｉ、Ｉ４０５Ｌ、Ｓ４０８Ｎ、及びＡ４３６Ｔ；（ｌ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｌ３３７Ｖ、Ｖ３３９Ｉ、Ｉ４０５Ｆ、及びＳ４０８Ｎ；（ｍ）Ａ４３６Ｔ；（ｎ）Ａ９９Ｖ、Ｇ１１２Ａ、Ｔ１３８Ｓ、Ｖ３３９Ａ、及びＩ４０５Ｆ；（ｏ）Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ｔ、及びＩ４０５Ｌ；（ｐ）Ａ９９Ｉ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｉ４０５Ｌ、Ｓ４０８Ｎ、及びＡ４３６Ｔ；（ｑ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ、及びＬ３２２Ｐ；（ｒ）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ、Ｅ２５９Ｐ、及びＦ３０６Ｌ；（ｓ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、及びＥ２５９Ｐ；（ｔ）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｓ１６７Ｔ、及びＥ２５９Ｐ；（ｕ）Ｉ１３１Ｍ、Ｆ２４９Ｗ、及びＳ２７４Ｇ；（ｖ）Ｌ５９Ｍ、Ｇ１１２Ｓ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ、及びＳ４０８Ｎ；（ｗ）Ｉ１１０Ｌ及びＦ３０６Ｌ；（ｘ）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｆ２４９Ｗ、及びＥ２５９Ｐ；（ｙ）Ｆ７１Ｌ、Ｅ２５９Ｐ、及びＬ３２２Ｐ；（ｚ）Ｈ４１Ｒ、Ｑ１７５Ｌ、及びＡ４３６Ｔ；（ａ’）Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、及びＦ２４９Ｗ；（ｂ’）Ｉ１３１Ｖ及びＦ２４９Ｗ；（ｃ’）Ｔ１３８Ｓ及びＡ４３６Ｔ；（ｄ’）Ｔ１３８Ｓ；（ｅ’）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｅ２５９Ｐ、及びＶ３０３Ｓ；（ｆ’）Ａ９９Ｆ、Ｇ１１２Ａ、Ｆ３０６Ｙ、Ｖ３３９Ａ、Ｉ４０５Ｌ、及びＳ４０８Ｎ；（ｇ’）Ｆ７１Ｌ、Ａ９９Ｉ、Ｉ１３１Ｖ、Ｅ２５９Ｐ、及びＡ２８２Ｐ；（ｈ’）Ｆ７１Ｌ、Ｆ２４９Ｗ、Ｅ２５９Ｐ、及びＶ３０３Ｓ；（ｉ’）Ｉ１１０Ｌ；並びに（ｊ’）Ｆ３０６Ｙからなる群より選択される、請求項３に記載の酵素。
【請求項５】
異種ペプチドセグメントを更に含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の酵素。
【請求項６】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と結合している、請求項１〜４のいずれか一項に記載の酵素。
【請求項７】
１つ以上のＬｙｓまたはＣｙｓ残基を介してＰＥＧと結合している、請求項１〜４のいずれか一項に記載の酵素。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の酵素をコードするヌクレオチド配列を含む、核酸。
【請求項９】
細菌、真菌、昆虫、または哺乳類における発現についてコドン最適化されている、請求項８に記載の核酸。
【請求項１０】
請求項８に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１１】
請求項８に記載の核酸を含む、宿主細胞。
【請求項１２】
細菌細胞、真菌細胞、昆虫細胞、または哺乳類細胞である、請求項１１に記載の宿主細胞。
【請求項１３】
製薬上許容できる担体の中に請求項１〜４のいずれか一項に記載のキヌレニナーゼを含む、医薬製剤。
【請求項１４】
前記キヌレニナーゼが異種ペプチドセグメントを更に含む、請求項１３に記載の製剤。
【請求項１５】
前記キヌレニナーゼがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と結合している、請求項１３に記載の製剤。
【請求項１６】
前記キヌレニナーゼが、１つ以上のＬｙｓまたはＣｙｓ残基を介してＰＥＧと結合している、請求項１５に記載の製剤。
【請求項１７】
前記キヌレニナーゼをコードする核酸が、細菌、真菌、昆虫、または哺乳類における発現についてコドン最適化されている、請求項１３に記載の製剤。
【請求項１８】
核酸が発現ベクターの中にある、請求項１３に記載の製剤。
【請求項１９】
腫瘍を有する対象の治療で使用するための、有効量の請求項１３に記載の製剤を含む組成物。
【請求項２０】
前記対象が、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、またはＴＤＯを発現する腫瘍を有すると特定されている、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記腫瘍が固形腫瘍である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記腫瘍が血液腫瘍である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
前記対象がヒト患者である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２４】
前記製剤が、腫瘍内に、静脈内に、皮内に、動脈内に、腹腔内に、病変内に、頭蓋内に、関節内に、前立腺内に、胸膜腔内に、気管内に、眼内に、鼻内に、硝子体内に、膣内に、直腸内に、筋肉内に、皮下に、結膜下に、膀胱内に、粘膜に、心膜内に、臍内に、経口で、吸入によって、注射によって、点滴によって、持続点滴によって、標的細胞を直接浸す局所潅流によって、カテーテルを介して、または潅注によって投与される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２５】
少なくとも第２の抗癌化合物を更に含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２６】
前記第２の抗癌化合物が、抗ＰＤ１、抗ＣＴＬＡ−４、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
発現したキメラ抗原Ｔ細胞受容体（ＣＡＲ）、及び発現した請求項１に記載のキヌレニナーゼ酵素を含む、トランスジェニックＴ細胞。
【請求項２８】
ヒトＴ細胞である、請求項２７に記載の細胞。
【請求項２９】
前記ＣＡＲ及び前記キヌレニナーゼをコードするＤＮＡが、細胞のゲノムに組み込まれている、請求項２７に記載の細胞。
【請求項３０】
前記ＣＡＲが癌細胞抗原を標的とする、請求項２７に記載の細胞。
【請求項３１】
前記癌細胞抗原がＨＥＲ２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、またはＧＤ２である、請求項３０に記載の細胞。
【請求項３２】
腫瘍を有する対象の治療で使用するための、有効量の請求項２７に記載のトランスジェニック細胞を含む組成物。
【請求項３３】
前記トランスジェニック細胞が自己由来である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記トランスジェニック細胞が異種由来である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３５】
腫瘍の治療のための医薬の製造における、請求項１〜４のいずれか一項に記載のキヌレニナーゼ、または請求項１〜４のいずれか一項に記載のキヌレニナーゼをコードする核酸の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
[本発明1001]
単離された改変型ヒトキヌレニナーゼ酵素であって、前記改変型酵素が、天然型ヒトキヌレニナーゼ（配列番号：8を参照）に比べて少なくとも1つの置換を有し、前記少なくとも1つの置換が、（ａ）Ａ99、Ｆ306、及びＡ436；  （ｂ）Ｆ306；  （ｄ）Ａ436；  （ｅ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；  （ｆ）Ａ99、Ｉ131、及びＦ249；  （ｇ）Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、及びＥ259；  （ｈ）Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、Ｅ259、及びＦ306；  （ｉ）Ａ99及びＦ306；  （ｊ）Ａ99、Ｔ138、Ｆ306、及びＡ436；  （ｋ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、Ｉ405、及びＳ408；  （ｌ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；  （ｍ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；  （ｎ）Ａ99、Ｇ112、Ｔ138、Ｖ339、及びＩ405；    （ｏ）Ｆ306、Ｌ337、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；  （ｐ）Ｆ71、Ａ99、及びＥ259；  （ｑ）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｅ259、及びＡ282；  （ｒ）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｅ259、及びＶ303；  （ｓ）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、及びＬ322；  （ｔ）Ｆ71、Ｅ259、及びＬ322；  （ｕ）Ｆ71、Ｆ249、Ｅ259、及びＶ303；  （ｖ）Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、及びＩ405；  （ｗ）Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、及びＩ405；  （ｙ）Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、及びＳ408；  （ａ’）Ｉ110；  （ｂ’）Ｉ110及びＦ306；  （ｃ’）Ｉ131、Ｆ249、及びＳ274；  （ｄ’）Ｉ131及びＦ249；  （ｅ’）Ｔ138；  （ｆ’）Ｌ59、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；  （ｇ’）Ｈ41、Ｑ175、及びＡ436；  並びに（ｈ’）Ｔ138及びＡ436からなる群より選択される位置にある、前記酵素。
[本発明1002]
前記少なくとも1つの置換が、（ａ）Ａ99Ｓ、Ｆ306Ｌ及びＡ436Ｔ；（ｂ）Ｆ306Ｍ；（ｃ）Ｆ306Ｌ；（ｄ）Ａ436Ｔ；（ｅ）Ａ99Ｆ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ及びＳ408Ｎ；（ｆ）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ及びＦ249Ｗ；（ｇ）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ及びＥ259Ｐ；（ｈ）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ、Ｅ259Ｐ及びＦ306Ｌ；（ｉ）Ａ99Ｓ及びＦ306Ｌ；（ｊ）Ａ99Ｓ、Ｔ138Ｓ、Ｆ306Ｌ及びＡ436Ｔ；（ｋ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、Ｉ405Ｌ及びＳ408Ｎ；（ｌ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、Ｖ339Ｉ、Ｉ405Ｆ、及びＳ408Ｎ；（ｍ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ及びＳ408Ｎ；（ｎ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｔ138Ｓ、Ｖ339Ａ、及びＩ405Ｆ；（ｏ）Ｆ306Ｉ、Ｌ337Ｖ、Ｖ339Ｉ、Ｉ405Ｆ及びＳ408Ｔ；（ｐ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ及びＥ259Ｐ；（ｑ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｅ259Ｐ及びＡ282Ｐ；（ｒ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｅ259Ｐ及びＶ303Ｓ；（ｓ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ及びＬ322Ｐ；（ｔ）Ｆ71Ｌ、Ｅ259Ｐ及びＬ322Ｐ；（ｕ）Ｆ71Ｌ、Ｆ249Ｗ、Ｅ259Ｐ及びＶ303Ｓ；（ｖ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ及びＩ405Ｌ；（ｗ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｍ及びＩ405Ｌ；（ｘ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｓ、Ｉ405Ｌ；（ｙ）Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｌ、Ｖ339Ｔ及びＳ408Ｔ；（ｚ）Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｔ及びＩ405Ｌ；（ａ’）Ｉ110Ｌ；（ｂ’）Ｉ110Ｌ及びＦ306Ｌ；（ｃ’）Ｉ131Ｍ、Ｆ249Ｗ、及びＳ274Ｇ；（ｄ’）Ｉ131Ｖ及びＦ249Ｗ；（ｅ’）Ｔ138Ｓ；（ｆ’）Ｌ59Ｍ、Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ、及びＳ408Ｎ；（ｇ’）Ｈ41Ｒ、Ｑ175Ｌ、及びＡ436Ｔ；並びに（ｈ’）Ｔ138Ｓ及びＡ436Ｔからなる群より選択される、本発明1001の酵素。
[本発明1003]
単離された改変型ヒトキヌレニナーゼ酵素であって、前記改変型酵素が、天然型ヒトキヌレニナーゼ（配列番号：8を参照）に比べて少なくとも1つの置換を有し、前記少なくとも1つの置換が、（ａ）Ａ99、Ｆ306、及びＡ436；（ｂ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、Ｉ405、Ｓ408；（ｃ）Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、及びＩ405；（ｄ）Ａ99、Ｔ138、Ｆ306、及びＡ436；（ｅ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；（ｆ）Ａ99及びＦ306；（ｇ）Ｆ306、Ｌ337、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；（ｈ）Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、及びＩ405；（ｉ）Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｓ408；（ｋ）Ｆ71、Ａ99、Ｇ112、Ｔ138、Ｆ306、Ｌ337、Ｖ339、Ｉ405、Ｓ408、及びＡ436；（ｌ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｌ337、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；（ｍ）Ａ436；（ｎ）Ａ99、Ｇ112、Ｔ138、Ｖ339、及びＩ405；（ｐ）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｉ405、Ｓ408、及びＡ436；（ｑ）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、及びＬ322；（ｒ）Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、Ｅ259、及びＦ306；（ｓ）Ｆ71、Ａ99、及びＥ259；（ｔ）Ｆ71、Ａ99、Ｓ167、及びＥ259；（ｕ）Ｉ131、Ｆ249、及びＳ274；（ｖ）Ｌ59、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；（ｗ）Ｉ110及びＦ306；（ｘ）Ａ99、Ｉ131、Ｆ249、及びＥ259；（ｙ）Ｆ71、Ｅ259、及びＬ322；（ｚ）Ｈ41、Ｑ175、及びＡ436；（ａ’）Ａ99、Ｉ131、及びＦ249；（ｂ’）Ｉ131及びＦ249；（ｃ’）Ｔ138及びＡ436；（ｄ’）Ｔ138；（ｅ’）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｅ259、及びＶ303；（ｆ’）Ａ99、Ｇ112、Ｆ306、Ｖ339、Ｉ405、及びＳ408；（ｇ’）Ｆ71、Ａ99、Ｉ131、Ｅ259、及びＡ282；（ｈ’）Ｆ71、Ｆ249、Ｅ259、及びＶ303；（ｉ’）Ｉ110；並びに（ｊ’）Ｆ306からなる群より選択される位置にある、前記酵素。
[本発明1004]
前記少なくとも1つの置換が、（ａ）Ａ99Ｓ、Ｆ306Ｌ及びＡ436Ｔ；（ｂ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、Ｉ405Ｌ、Ｓ408Ｎ；（ｃ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、及びＩ405Ｌ；（ｄ）Ａ99Ｓ、Ｔ138Ｓ、Ｆ306Ｌ、及びＡ436Ｔ；（ｅ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ、及びＳ408Ｎ；（ｆ）Ａ99Ｓ及びＦ306Ｌ；（ｇ）Ｆ306Ｉ、Ｌ337Ｖ、Ｖ339Ｉ、Ｉ405Ｆ、及びＳ408Ｔ；（ｈ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｍ、及びＩ405Ｌ；（ｉ）Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｌ、Ｖ339Ｔ、Ｓ408Ｔ；（ｊ）Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｓ、Ｉ405Ｌ；（ｋ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｇ112Ａ、Ｔ138Ｓ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、Ｖ339Ｉ、Ｉ405Ｌ、Ｓ408Ｎ、及びＡ436Ｔ；（ｌ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｌ337Ｖ、Ｖ339Ｉ、Ｉ405Ｆ、及びＳ408Ｎ；（ｍ）Ａ436Ｔ；（ｎ）Ａ99Ｖ、Ｇ112Ａ、Ｔ138Ｓ、Ｖ339Ａ、及びＩ405Ｆ；（ｏ）Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ｔ、及びＩ405Ｌ；（ｐ）Ａ99Ｉ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｉ405Ｌ、Ｓ408Ｎ、及びＡ436Ｔ；（ｑ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ、及びＬ322Ｐ；（ｒ）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ、Ｅ259Ｐ、及びＦ306Ｌ；（ｓ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、及びＥ259Ｐ；（ｔ）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｓ167Ｔ、及びＥ259Ｐ；（ｕ）Ｉ131Ｍ、Ｆ249Ｗ、及びＳ274Ｇ；（ｖ）Ｌ59Ｍ、Ｇ112Ｓ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ、及びＳ408Ｎ；（ｗ）Ｉ110Ｌ及びＦ306Ｌ；（ｘ）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｆ249Ｗ、及びＥ259Ｐ；（ｙ）Ｆ71Ｌ、Ｅ259Ｐ、及びＬ322Ｐ；（ｚ）Ｈ41Ｒ、Ｑ175Ｌ、及びＡ436Ｔ；（ａ’）Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、及びＦ249Ｗ；（ｂ’）Ｉ131Ｖ及びＦ249Ｗ；（ｃ’）Ｔ138Ｓ及びＡ436Ｔ；（ｄ’）Ｔ138Ｓ；（ｅ’）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｅ259Ｐ、及びＶ303Ｓ；（ｆ’）Ａ99Ｆ、Ｇ112Ａ、Ｆ306Ｙ、Ｖ339Ａ、Ｉ405Ｌ、及びＳ408Ｎ；（ｇ’）Ｆ71Ｌ、Ａ99Ｉ、Ｉ131Ｖ、Ｅ259Ｐ、及びＡ282Ｐ；（ｈ’）Ｆ71Ｌ、Ｆ249Ｗ、Ｅ259Ｐ、及びＶ303Ｓ；（ｉ’）Ｉ110Ｌ；並びに（ｊ’）Ｆ306Ｙからなる群より選択される、本発明1003の酵素。
[本発明1005]
異種ペプチドセグメントを更に含む、本発明1001〜1004のいずれかの酵素。
[本発明1006]
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と結合している、本発明1001〜1004のいずれかの酵素。
[本発明1007]
1つ以上のＬｙｓまたはＣｙｓ残基を介してＰＥＧと結合している、本発明1001〜1004のいずれかの酵素。
[本発明1008]
本発明1001〜1004のいずれかの酵素をコードするヌクレオチド配列を含む、核酸。
[本発明1009]
細菌、真菌、昆虫、または哺乳類における発現についてコドン最適化されている、本発明1008の核酸。
[本発明1010]
本発明1008の核酸を含む、発現ベクター。
[本発明1011]
本発明1008の核酸を含む、宿主細胞。
[本発明1012]
細菌細胞、真菌細胞、昆虫細胞、または哺乳類細胞である、本発明1011の宿主細胞。
[本発明1013]
製薬上許容できる担体の中に本発明1001〜1004のいずれかのキヌレニナーゼを含む、医薬製剤。
[本発明1014]
前記キヌレニナーゼが異種ペプチドセグメントを更に含む、本発明1013の製剤。
[本発明1015]
前記キヌレニナーゼがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と結合している、本発明1013の製剤。
[本発明1016]
前記キヌレニナーゼが、1つ以上のＬｙｓまたはＣｙｓ残基を介してＰＥＧと結合している、本発明1015の製剤。
[本発明1017]
前記キヌレニナーゼをコードする核酸が、細菌、真菌、昆虫、または哺乳類における発現についてコドン最適化されている、本発明1013の製剤。
[本発明1018]
核酸が発現ベクターの中にある、本発明1013の製剤。
[本発明1019]
腫瘍を有する対象の治療方法であって、有効量の本発明1013の製剤を前記対象に投与することを含む、前記方法。
[本発明1020]
腫瘍を有する対象の治療で使用するための、有効量の本発明1013の製剤を含む組成物。
[本発明1021]
前記対象が、ＩＤＯ1、ＩＤＯ2、またはＴＤＯを発現する腫瘍を有すると特定されている、本発明1020の組成物。
[本発明1022]
前記腫瘍が固形腫瘍である、本発明1020の組成物。
[本発明1023]
前記腫瘍が血液腫瘍である、本発明1020の組成物。
[本発明1024]
前記対象がヒト患者である、本発明1020の組成物。
[本発明1025]
前記製剤が、腫瘍内に、静脈内に、皮内に、動脈内に、腹腔内に、病変内に、頭蓋内に、関節内に、前立腺内に、胸膜腔内に、気管内に、眼内に、鼻内に、硝子体内に、膣内に、直腸内に、筋肉内に、皮下に、結膜下に、膀胱内に、粘膜に、心膜内に、臍内に、経口で、吸入によって、注射によって、点滴によって、持続点滴によって、標的細胞を直接浸す局所潅流によって、カテーテルを介して、または潅注によって投与される、本発明1020の組成物。
[本発明1026]
少なくとも第2の抗癌化合物を更に含む、本発明1020の方法。
[本発明1027]
前記第2の抗癌化合物が、抗ＰＤ1、抗ＣＴＬＡ−4、または抗ＰＤ−Ｌ1抗体を含む、本発明1026の方法。
[本発明1028]
発現したキメラ抗原Ｔ細胞受容体（ＣＡＲ）、及び発現した本発明1001のキヌレニナーゼ酵素を含む、トランスジェニックＴ細胞。
[本発明1029]
ヒトＴ細胞である、本発明1028の細胞。
[本発明1030]
前記ＣＡＲ及び前記キヌレニナーゼをコードするＤＮＡが、細胞のゲノムに組み込まれている、本発明1028の細胞。
[本発明1031]
前記ＣＡＲが癌細胞抗原を標的とする、本発明1028の細胞。
[本発明1032]
前記癌細胞抗原がＨＥＲ2、ＣＤ19、ＣＤ20、またはＧＤ2である、本発明1031の細胞。
[本発明1033]
腫瘍を有するヒト対象においてＴ細胞応答を提供する方法であって、有効量の本発明1028のトランスジェニック細胞を前記対象に投与することを含む、前記方法。
[本発明1034]
腫瘍を有する対象の治療で使用するための、有効量の本発明1028のトランスジェニック細胞を含む組成物。
[本発明1035]
前記トランスジェニック細胞が自己由来である、本発明1034の組成物。
[本発明1036]
前記トランスジェニック細胞が異種由来である、本発明1034の組成物。
[本発明1037]
腫瘍の治療のための医薬の製造における、本発明1001〜1004のいずれかのキヌレニナーゼ、または本発明1001〜1004のいずれかのキヌレニナーゼをコードする核酸の使用。
本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかとなるであろう。しかし、本発明の趣旨及び範囲内での種々の変化及び変更は、この詳細の説明より当業者には明らかとなるため、詳細の説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているものの、実例としてのみ与えられることが理解されなければならない。