【手続補正書】
【提出日】平成30年6月6日(2018.6.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
周囲温度での血液サンプル中の１つ以上の代謝的に活性な細胞の実質的に安定した保存のための製剤であって、該製剤が、
（ｉ）ｐＨ緩衝液；
（ｉｉ）ＥＤＴＡおよびグルコン酸ナトリウムから成る群から選択されるキレート化剤；
（ｉｉｉ）
ａ）Ａｌａ−Ｇｌｎ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、
ｂ）２−（ベンジル（２−ヒドロキシ−エチル）（メチル）アンモニオ）アセテート、四級の分子内塩、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−３−アンモニウム−プロピオナート、Ｎ−エチル−ピペリジニウム−４−ブチルスルホナート、２−（（３−ヒドロキシプロピル）ジメチルアンモニオ）アセテート、２−（（２−ヒドロキシプロピル）ジメチルアンモニオ）アセテート、２−（２−（ヒドロキシメチル）−１−メチルピペリジニウム−１−イル）アセテート、２−（（２−ヒドロキシエチル）ジメチルアンモニオ）アセテート、２−（（２，３−ジヒドロキシプロピル）ジメチルアンモニオ）アセテート、２−（４−ヒドロキシ−１−メチルピペリジニウム−１−イル）アセテート、２−（（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ジメチルアンモニオ）アセテート、２−（ビス（２−ヒドロキシエチル）−（メチル）アンモニオ）アセテート、２−（４−（２−ヒドロキシエチル）モルフォリノ−４−イウム）アセテート、２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジニウム−１−イル）アセテート、および３−（（２−ヒドロキシ−エチル）ジメチル−アンモニオ）プロパノアートから選択される、陽イオン化合物、および
ｃ）４−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−４−エチルモルホリン−４−イウムブロミド、Ｎ−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）プロパン−１−アミニウムブロミド、２−エトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチル−２−オキソエタンアミニウムブロミド、１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−４−ヒドロキシ−１−メチルピペリジニウムブロミド、２−エトキシ−Ｎ−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソエタンアミニウムブロミド、４−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチル−２−オキソモルホリン−４−イウムブロミド、４−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルモルホリン−４−イウムブロミド、１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−１−メチルピロリジニウムブロミド、３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムクロリド、１，３−ジメチル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムメチル硫酸塩、３−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムブロミド、Ｎ−ベンジル−２−エトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−オキソエタンアミニウムブロミド、２−エトキシ−Ｎ，Ｎ−ジエチル−Ｎ−メチル−２−オキソエタンアミニウムブロミド、Ｎ−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルブタン−１−アミニウムブロミド、１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−１−メチルピペリジニウムブロミド、Ｎ−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンゼンアミニウムブロミド、１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−ヒドロキシ−１−メチルピペリジニウムブロミド、３−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）−１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムクロリド、３−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エチル）−１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムクロリド、１−メチル−３−テトラデシル−１Ｈ−イミダゾル−３−イウムブロミド、およびＮ−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルシクロヘキサンアミニウムブロミドから選択される、双性イオン化合物、
から成る群から選択される、少なくとも１つの化合物；および
（ｉｖ）随意にスクラロース；
（ｖ）随意に２−グリセロールリン酸；および
（ｖｉ）随意にアデニン、またはそれらの組み合わせ、
を含む、製剤。
【請求項２】
ｐＨ緩衝液は、２−（Ｎ−モルフォリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、３−（Ｎ−モルフォリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、３−モルフォリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、クエン酸、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
１つ以上の代謝的に活性な細胞は、白血球、赤血球、循環腫瘍細胞、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される、請求項１または２に記載の製剤。
【請求項４】
双性イオン化合物は式（Ｉ）の化合物であり：
【化１】
2017518321.tif 000001
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、非置換または置換のアルキル、非置換または置換のアリール、非置換または置換のアリールアルキルから独立して選択され、またはＲ１およびＲ２は随意に環を形成し、Ｙは、ＣＨ２、ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）であり、ここでＡは、非置換または置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、または２０の自然発生のアミノ酸の１つにおいて典型的に発見される側鎖であり；およびＺは、ＣＯ２−、ＳＯ３−、またはＯＰＯ３−であるか、あるいは
陽イオン化合物は、
（ａ）式（ＩＩ）の化合物であって：
【化２】
2017518321.tif 000002
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、非置換または置換のアルキル、非置換または置換のアリール、非置換または置換のアリールアルキルから独立して選択され、またはＲ１およびＲ２は随意に環を形成し、Ｙは、ＣＨ２、ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）であり、ここでＡは、非置換または置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、または２０の自然発生のアミノ酸の１つにおいて典型的に発見される側鎖であり；ＺはＣＯ２Ａであり；およびＸは薬学的に許容可能な陰イオンである、式（ＩＩ）の化合物；
（ｂ）式（ＩＩＩ）の化合物であって：
【化３】
2017518321.tif 000003
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、非置換または置換のアルキル、非置換または置換のアリール、非置換または置換のアリールアルキルから独立して選択され、またはＲ１およびＲ２は随意に環を形成し、Ｙは、ＣＨ２、ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）、ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）−ＣＨ（Ａ）であり、ここでＡは、非置換または置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、または２０の自然発生のアミノ酸の１つにおいて典型的に発見される側鎖であり；およびＸは薬学的に許容可能な陰イオンである、式（ＩＩＩ）の化合物；および
（ｃ）式（ＩＶ）の化合物であって：
【化４】
2017518321.tif 000004
式中、Ｒ１とＲ２は、非置換または置換のアルキル、非置換または置換のアリール、非置換または置換のアリールアルキルから独立して選択され；およびＸは薬学的に許容可能な陰イオンである、式（ＩＶ）の化合物；
からなる群から選択される、請求項１乃至３のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項５】
式（Ｉ）、式（ＩＩ）、または式（ＩＩＩ）の化合物のＲ１およびＲ２は、モルフォリノ環、ピロリジニウム環、ピペリジニウム環、またはオキサジニウム環を形成する、請求項４に記載の製剤。
【請求項６】
酢酸緩衝液、グルコース、塩化カリウム、ミオイノシトール、Ｎ−メチルグルカミン、塩化マグネシウム、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項７】
製剤が、製剤：
５０ｍＭのＭＥＳ、２００ｍＭのＡｌａ−Ｇｌｎ、５０ｍＭのスクラロース、４．４ｍＭのＫ２−ＥＤＴＡ、ｐＨ６．９；
５０ｍＭのＭＯＰＳ、２００ｍＭのＡｌａ−Ｇｌｎ、２５ｍＭのスクラロース、４．４ｍＭのＫ２−ＥＤＴＡ、ｐＨ７．２；
５０ｍＭのＭＥＳ、５０ｍＭの２−グリセロールリン酸二ナトリウム塩、１００ｍＭの２−（ベンジル（２−ヒドロキシ−エチル）（メチル）アンモニオ）アセテート、４．４ｍＭのＫ２−ＥＤＴＡ、２ｍＭのアデニン、ｐＨ６．６；
２５ｍＭのＭＥＳ、２５ｍＭの２−グリセロールリン酸二ナトリウム塩、１００ｍＭの２−（ベンジル（２−ヒドロキシ−エチル）（メチル）アンモニオ）アセテート、４．４ｍＭのＫ２−ＥＤＴＡ、５ｍＭのアデニン、２５ｍＭのスクラロース、２５ｍＭのグルコース、２５ｍＭのＡｌａ−Ｇｌｎ、ｐＨ６．９；および
２５ｍＭのＭＥＳ、２５ｍＭの２−グリセロールリン酸二ナトリウム塩、５０ｍＭの２−（ベンジル（２−ヒドロキシ−エチル）（メチル）アンモニオ）アセテート、４．４ｍＭのＫ２−ＥＤＴＡ、５ｍＭのアデニン、５０ｍＭのスクラロース、２５ｍＭのグルコース、５０ｍＭのＡｌａ−Ｇｌｎ、５ｍＭのＫＣｌ、ｐＨ６．９、
から選択される、請求項１乃至６のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項８】
請求項１乃至７のいずれか１項の製剤と混合された、実質的に安定して保存された１つ以上の精製された代謝的に活性な白血球を含む、組成物。
【請求項９】
請求項１乃至７のいずれか１項の製剤と混合された、実質的に安定して保存された１つ以上の精製された代謝的に活性な赤血球を含む、組成物。
【請求項１０】
請求項１乃至７のいずれか１項の製剤と混合された、実質的に安定して保存された１つ以上の精製された代謝的に活性な循環腫瘍細胞を含む、組成物。
【請求項１１】
採血管または真空の採血管内に含有された請求項１乃至７のいずれか１項の製剤を含む、製品。
【請求項１２】
周囲温度での、血液サンプル中の１つ以上の代謝的に活性な細胞の実質的に安定した保存のための方法であって、該方法は、被験体から採取した血液のサンプルを、請求項１乃至７のいずれか１項に記載の製剤と混合する工程を含む、方法。