【手続補正書】
【提出日】平成30年4月9日(2018.4.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遺伝子改変Ｔ細胞集団であって、
サイトカインで刺激された複数のＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞を含み、ＣＤ８−Ｔ細胞および／もしくはＣＤ４−Ｔ細胞が実質的に除去されていること、かつ／またはＣＤ８−Ｔ細胞および／もしくはＣＤ４−Ｔ細胞よりも前記ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が多く含まれるように濃縮されていること、
サイトカインで刺激された前記複数のＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、キメラ抗原受容体をコードする遺伝子をさらに含むこと、
サイトカインで刺激された前記複数のＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、少なくとも１つのサイトカインで刺激された細胞であること、
前記遺伝子改変Ｔ細胞集団がＣＤ８＋Ｔ細胞を含む場合、前記少なくとも１つのサイトカインがＩＬ−２およびＩＬ−１５を含むこと、ならびに
前記遺伝子改変Ｔ細胞集団がＣＤ４＋Ｔ細胞を含む場合、前記少なくとも１つのサイトカインがＩＬ−７およびＩＬ−１５を含むこと
を特徴とする遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項２】
前記複数のＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、移植適合性の向上、増強もしくは改善または移植適合性への寄与のための少なくとも１つの受容体をさらに含む、請求項１に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項３】
前記複数のＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、リーダー配列をコードする第１の配列、リガンド結合ドメインをコードする第２の配列、シグナル伝達ドメインをコードする第３の配列、選択マーカーをコードする第４の配列、およびスペーサーをコードする配列を有するベクターをさらに含む、請求項１または２に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項４】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項５】
前記キメラ抗原受容体またはリガンド結合ドメインが、ＣＤ１９に特異的である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項６】
前記Ｔ細胞が、Ｔ細胞前駆細胞または造血幹細胞（ＨＳＣ）である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項７】
がんの治療、抑制または緩和を必要とする対象の該がんの治療、抑制または緩和のための組成物または組み合わせ製剤において使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団であって、
前記がんが、たとえば、白血病、再発性かつ／もしくは化学療法抵抗性のＣＤ１９＋急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、再発性かつ／もしくは化学療法抵抗性のＣＤ１９＋小児急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ＨＳＣＴ後の再発、または自己免疫疾患などであること、および
前記組成物または組み合わせ製剤が医薬品添加剤をさらに含むこと
を特徴とする遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項８】
移植適合性の向上もしくは誘導または移植適合性への寄与のための前記少なくとも１つの受容体が、ＣＤ４５ ＲＡ、ＣＤ４５ ＲＯ、ＣＣＲ７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＣＤ５７、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ２８および／またはＣＤ６２Ｌである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項９】
サイトカインで刺激された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、細胞表面選択マーカーをさらに含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞集団。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の遺伝子改変Ｔ細胞を製造する方法であって、
Ｔ細胞の混合集団からＣＤ８＋発現Ｔ細胞集団またはＣＤ４＋発現Ｔ細胞集団を分離または濃縮して、該Ｔ細胞が分離または濃縮された集団を作製すること、
分離または濃縮された前記Ｔ細胞集団を刺激して、刺激されたＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を作製すること、
刺激された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を、キメラ抗原受容体をコードするベクターで形質導入して、形質導入されたＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を作製すること、
前記細胞集団がＣＤ８＋Ｔ細胞を含む場合はＩＬ−２およびＩＬ−１５を含む組換えサイトカインを少なくとも１つの組換えサイトカインとして使用して、前記細胞集団がＣＤ４＋Ｔ細胞を含む場合はＩＬ−７およびＩＬ−１５を含む組換えサイトカインを少なくとも１つの組換えサイトカインとして使用して、形質導入された前記ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を少なくとも１つの組換えサイトカインと接触させて、サイトカインで刺激された形質導入ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を作製すること、ならびに
サイトカインで刺激された前記形質導入ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を１日以上かけて増殖させて、キメラ抗原受容体をコードする遺伝子を含む遺伝子改変Ｔ細胞を得ること
を含む方法。
【請求項１１】
Ｔ細胞の混合集団からの前記ＣＤ８＋Ｔ細胞集団またはＣＤ４＋Ｔ細胞集団の分離または濃縮が、ＣＤ８上もしくはＣＤ４上に存在するエピトープを有するＴ細胞を選択する親和性選択、フローサイトメトリーまたは免疫磁気選択によって行われる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記遺伝子改変ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞が、移植適合性の向上、誘導もしくは増強または移植適合性への寄与のための少なくとも１つの受容体を含む、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記単離されたＴ細胞集団の刺激が、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞と、ビーズまたは粒子などの、抗体を結合させた支持体とを接触させることによって行われ、前記抗体を結合させた支持体が、抗ＴＣＲ抗体、抗ＣＤ２抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４抗体および／または抗ＣＤ２８抗体を含む、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ベクターが、リーダー配列をコードする第１の配列、リガンド結合ドメインをコードする第２の配列、シグナル伝達ドメインをコードする第３の配列、選択マーカーをコードする第４の配列、およびスペーサーをコードする配列をさらに含む、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記キメラ抗原受容体のリガンド結合ドメインが、ＣＤ１９に特異的である、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記Ｔ細胞が、Ｔ細胞前駆細胞または造血幹細胞（ＨＳＣ）である、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
移植適合性の向上もしくは誘導または移植適合性への寄与のための前記少なくとも１つの受容体が、ＣＤ４５ ＲＡ、ＣＤ４５ ＲＯ、ＣＣＲ７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＣＤ５７、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ２８および／またはＣＤ６２Ｌである、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ベクターがさらにマーカー配列をコードし、該マーカー配列が細胞表面選択マーカーをコードするものであってもよい、請求項１０〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
サイトカインで刺激された前記形質導入ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を前記マーカー配列による選択によって濃縮し、サイトカインで刺激されかつ濃縮された形質導入ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４＋Ｔ細胞の集団を作製する工程をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記少なくとも１つの組換えサイトカインが、細胞外から前記Ｔ細胞に提供されること、および前記少なくとも１つの組換えサイトカインが、少なくとも１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間もしくは２０日間、またはこれらの期間のいずれか２つによって定義される範囲にある期間にわたって提供されることを特徴とする、請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の方法。