【手続補正書】
【提出日】平成30年5月18日(2018.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物発酵による少なくとも１つの生成物の生成のための方法であって、
ＣＯ、ＣＯ２又はＣＯ２プラスＨ２のうちの少なくとも１つを含むガス状基質を、液体栄養培地中に少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物の培養物を含むバイオリアクタに提供して、エタノール、２，３−ブタンジオール、乳酸塩、コハク酸塩、メチルエチルケトン、２−ブタノール、イソプロパノール、プロパンジオール、及びアセトインからなる群から選択される少なくとも１つの生成物を生成することを含み、
ビタミンＢ５及びビタミンＢ７の濃度は、約１００〜約４０００μｇ／バイオマス１ｇに維持され、Ｂ１の濃度は、約２０〜約５００μｇ／バイオマス１ｇに維持される、方法。
【請求項２】
前記生成物は、エタノール及び２，３−ブタンジオールである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
２，３−ブタンジオールの前記生成は、少なくとも１日当たり１０ｇ／Ｌである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
２，３−ブタンジオールの前記生成は、少なくとも１日当たり２０ｇ／Ｌである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
エタノール：２，３−ブタンジオールの比が、約４：１〜約１：１と様々である、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム、及びアセトバクテリウムからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム・オートエタノゲナム、クロストリジウム・リュングダリイ、クロストリジウム・カルボキシディボランス、クロストリジウム・ドラケイ、クロストリジウム・コスカチイ、クロストリジウム・ラグスダレイ、及びアセトバクテリウム・ウッディからなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記液体栄養培地中のビタミンＢ５の前記濃度は、約２００〜約４０００μｇ／バイオマス１ｇと様々である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記液体栄養培地中のビタミンＢ５の前記濃度は、約２００〜約３０００μｇ／バイオマス１ｇと様々である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
微生物発酵によるエタノール及び２，３−ブタンジオールの生成のための方法であって、
ＣＯ、ＣＯ２又はＣＯ２プラスＨ２のうちの少なくとも１つを含むガス状基質を、液体栄養培地中にクロストリジウム・オートエタノゲナムの培養物を含むバイオリアクタに提供して、少なくとも２，３−ブタンジオール及びエタノールを生成することを含み、
ビタミンＢ５の濃度が、約１９８μｇ  Ｂ５／バイオマス１ｇの濃度を超えて約２〜約８０倍の濃度に維持されることを特徴とする、方法。
【請求項１１】
エタノール：２，３−ブタンジオールの比が、約４：１〜約１：１と様々である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
微生物発酵によるエタノール及び２，３−ブタンジオールの生成のための方法であって、
ＣＯ、ＣＯ２またはＣＯ２プラスＨ２のうちの少なくとも１つを含むガス状基質を、液体栄養培地中にクロストリジウム・オートエタノゲナムの培養物を含むバイオリアクタに提供して、少なくとも２，３−ブタンジオール及びエタノールを生成することを含み、
ビタミンＢ５の濃度が、約２００〜４０００μｇ／バイオマス１ｇの濃度に維持されることを特徴とする、方法。
【請求項１３】
エタノール：２，３−ブタンジオールの比が、約４：１〜約１：１と様々である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記液体栄養培地中のビタミンＢ５の前記濃度は、約２００〜約３０００μｇ／バイオマス１ｇと様々である、請求項１２に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２３】
本明細書及び後続する任意の請求項を通して、文脈上別段の解釈が必要でない限り、「含む」、「含んでいる」等の単語は、排他的な意味とは対照的な包括的な意味で、すなわち、「限定されないが〜を含む」という意味で解釈されるものとする。
本発明は、以下の態様を包含し得る。
［１］
微生物発酵の間に少なくとも１つのピルビン酸塩由来生成物の生成を増加させる方法であって、
ａ）ＣＯを含むガス状基質を、液体栄養培地中に少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物の培養物を含むバイオリアクタに提供して、少なくとも１つのピルビン酸塩由来生成物及び少なくともアセチル−ＣｏＡ由来生成物を生成することと、
ｂ）少なくとも１つのピルビン酸塩由来生成物の前記生成が増加するように、前記液体栄養培地中の少なくとも１つの栄養素の濃度を前記少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物の細胞要求を超える濃度まで増加させることと、を含み、前記栄養素は、
１）ビタミンＢ１、
２）ビタミンＢ５、
３）ビタミンＢ７、及びそれらの混合物からなる群から選択される、方法。
［２］
微生物発酵によって生成される２，３−ブタンジオールの生成を増加させる方法であって、
ａ）ＣＯを含むガス状基質を、液体栄養培地中に少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物の培養物を含むバイオリアクタに提供して、少なくとも２，３−ブタンジオール及びエタノールを生成することと、
ｂ）２，３−ブタンジオールの前記生成が増加するように、前記液体栄養培地中の少なくとも１つの栄養素の濃度を前記少なくとも１つの酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物の細胞要求を超える濃度まで増加させることと、を含み、前記栄養素は、
１）ビタミンＢ１、
２）ビタミンＢ５、
３）ビタミンＢ７、及びそれらの混合物からなる群から選択される、方法。
［３］
ビタミンＢ５またはビタミンＢ１の濃度を、前記少なくとも１つの微生物の前記細胞要求を超えて２〜８０倍増加させる、上記［１］に記載の方法。
［４］
ビタミンＢ５またはビタミンＢ１の前記濃度を、前記少なくとも１つの微生物の前記細胞要求を超えて２〜８０倍増加させる、上記［２］に記載の方法。
［５］
ビタミンＢ７の濃度を、前記液体栄養培地中で、前記少なくとも１つの微生物の前記細胞要求を超えて２〜３０倍増加させる、上記［１］に記載の方法。
［６］
ビタミンＢ７の前記濃度を、前記液体栄養培地中で、前記少なくとも１つの微生物の前記細胞要求を超えて２〜３０倍増加させる、上記［２］に記載の方法。
［７］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ１の前記濃度は、２０〜５００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［１］に記載の方法。
［８］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ１の前記濃度は、２０〜５００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［２］に記載の方法。
［９］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ５の前記濃度は、１００〜４０００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［１］に記載の方法。
［１０］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ５の前記濃度は、１００〜４０００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［２］に記載の方法。
［１１］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ７の前記濃度は、１００〜４０００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［１］に記載の方法。
［１２］
前記液体栄養培地中のビタミンＢ７の前記濃度は、１００〜４０００μｇ／生成バイオマス１ｇと様々である、上記［２］に記載の方法。
［１３］
前記ピルビン酸塩由来生成物は、２，３−ブタンジオール、乳酸塩、コハク酸塩、メチルエチルケトン、２−ブタノール、プロパンジオール、２−プロパノール、イソプロパノール、アセトイン、イソブタノール、シトラマル酸塩、ブタジエン、及びポリ乳酸からなる群から選択される、上記［１］に記載の方法。
［１４］
前記アセチル−ＣｏＡ由来生成物は、エタノールである、上記［１］に記載の方法。
［１５］
２，３−ブタンジオールの前記生成を、エタノール：２，３−ブタンジオールの比が４：１〜１：１と様々であるように増加させる、上記［２］に記載の方法。
［１６］
２，３−ブタンジオールの前記生成は、少なくとも１日当たり１０ｇ／Ｌである、上記［２］に記載の方法。
［１７］
２，３−ブタンジオールの前記生成は、少なくとも１日当たり２０ｇ／Ｌである、上記［２］に記載の方法。
［１８］
前記酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム、モーレラ、オキソバクター、ペプトストレプトコッカス、アセトバクテリウム、ユウバクテリウム、またはブチリバクテリウムからなる群から選択される、上記［１］に記載の方法。
［１９］
前記酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム、モーレラ、オキソバクター、ペプトストレプトコッカス、アセトバクテリウム、ユウバクテリウム、またはブチリバクテリウムからなる群から選択される、上記［２］に記載の方法。
［２０］
前記酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム・オートエタノゲナム、クロストリジウム・リュングダリイ、クロストリジウム・カルボキシディボランス、クロストリジウム・ドラケイ、クロストリジウム・スカトロゲネス、クロストリジウム・アセチカム、クロストリジウム・フォルミコアセチカム、クロストリジウム・マグナム、ブチリバクテリウム・メチロトロフィカム、アセトバクテリウム・ウッディ、アルカリバクルム・バッキ（Ａｌｋａｌｉｂａｃｕｌｕｍ  ｂａｃｃｈｉ）、ブラウティア・プロダクタ、ユーバクテリウム・リモスム、ムーレラ・サーモアセチカ、スポロミュサ・オバータ、スポロミュサ・シルバセティカ、スポロミュサ・スフェロイデス、オキソバクター・フェニジイ、及びサーモアナエロバクター・キブイからなる群から選択される上記［１８］に記載の方法。
［２１］
前記酢酸生成性のカルボキシド栄養性微生物は、クロストリジウム・オートエタノゲナム、クロストリジウム・リュングダリイ、クロストリジウム・カルボキシディボランス、クロストリジウム・ドラケイ、クロストリジウム・スカトロゲネス、クロストリジウム・アセチカム、クロストリジウム・フォルミコアセチカム、クロストリジウム・マグナム、ブチリバクテリウム・メチロトロフィカム、アセトバクテリウム・ウッディ、アルカリバクルム・バッキ（Ａｌｋａｌｉｂａｃｕｌｕｍ  ｂａｃｃｈｉ）、ブラウティア・プロダクタ、ユーバクテリウム・リモスム、ムーレラ・サーモアセチカ、スポロミュサ・オバータ、スポロミュサ・シルバセティカ、スポロミュサ・スフェロイデス、オキソバクター・フェニジイ、及びサーモアナエロバクター・キブイからなる群から選択される、上記［１９］に記載の方法。