【手続補正書】
【提出日】平成30年11月12日(2018.11.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルを測定する方法であって、前記方法が、
ａ）グリコサミノグリカンの消化が二糖の混合物の生成を可能にする条件下で、１つ以上の酵素で生体試料をインキュベートする工程と、
ｂ）工程ａ）で生成する前記二糖の混合物を化学的に誘導体化する工程と、
ｃ）各個別の前記誘導体化された二糖の量を測定する工程と、
ｄ）工程ｃ）で測定した前記各個別の誘導体化された二糖の量に基づいて生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルを測定する工程と、を含む、方法。
【請求項２】
前記グリコサミノグリカンがヘパラン硫酸を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記１つ以上の酵素が１つ以上のヘパリナーゼを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記１つ以上のヘパリナーゼがヘパリナーゼＩ、ＩＩ及び／またはＩＩＩを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記１つ以上の酵素が、コンドロイチナーゼＡＣ、コンドロイチナーゼＢ、コンドロイチナーゼＣ、コンドロイチナーゼＡＢＣ及びケラタナーゼからなる群から選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
前記二糖の混合物が、二糖Ｉ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、ＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、ＩＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ）、ＩＶ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ）、ＩＩ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ，６Ｓ）及び／またはＩＶ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ）を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記測定することが、誘導体化されたＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、誘導体化されたＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、誘導体化されたＩＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ）、誘導化されたＩＶ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ）、誘導体化されたＩＩ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ，６Ｓ）、及び誘導体化されたＩＶ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ）のそれぞれの量を測定することを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記二糖の混合物が疎水性部分で誘導体化されている、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記二糖の混合物が、４−ブチルアニリン、２−アミノベンズアミド（２−ＡＢ）、２アミノ安息香酸（アントラニル酸、２−ＡＡ）、または２−アミノアクリドン（ＡＭＡＣ）で誘導体化されている、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記工程ｃ）が、
（ｉ）前記個々の誘導体化された二糖をクロマトグラフィーにより分離することと、
（ｉｉ）前記各個々の誘導体化された二糖を質量分析で測定することと、を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記クロマトグラフィーが逆相液体クロマトグラフィーである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記各個々の誘導体化された二糖が内部標準物質と比較して測定される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記各個々の二糖が４−ブチルアニリンで誘導体化されており、各対応する二糖の内部標準物質が１３Ｃ６−４−ブチルアニリンで標識されている、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記生体試料中の前記グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルが、前記測定した個々の二糖の量に基づいて合計した二糖のレベル値により決定される、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記生体試料が脳脊髄液（ＣＳＦ）試料である、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＣＳＦ試料が約１０μｌ〜約１００μｌの範囲の量を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＣＳＦ試料が約４５μｌ〜約５５μｌの範囲の量を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記生体試料が血液試料である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記生体試料が血しょう試料または尿試料である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記生体試料が、グリコサミノグリカンを抽出するために最初に処理される、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記生体試料が、０．１μＭ超の濃度でグリコサミノグリカンを含む、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
リソソーム蓄積症を患う対象を治療するための組成物であって、前記組成物は、置換酵素の治療有効量を含み、
前記組成物は、投与間隔で前記組成物を投与することを含む治療過程で、前記対象に投与されることを特徴とし、
対象から得た生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルが、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法により治療過程中に測定されることと、前記リソソーム蓄積症の治療が監視されることを特徴とする、前記組成物。
【請求項２３】
前記リソソーム蓄積症が、ＭＰＳＩ、ＭＰＳＩＩ、ＭＰＳＩＩＩＡ、ＭＰＳＩＩＩＢ、ＭＰＳＩＩＩＣ、ＭＰＳＩＩＩＤ、ＭＰＳＩＶＡ、ＭＰＳＩＶＢ、ＭＰＳＶＩ、ＭＰＳＶＩＩ、ＭＰＳＩＸ、アルファマンノース症、アスパルチルグルコサミン尿症、ファブリー病、フコシド蓄積症、ガラクトシアリドーシス、ゴーシェ病、ＧＭ１ガングリオシドーシス、ＧＭ２活性化因子欠損症、シアリドーシス、クラッベ病、異染性白質ジストロフィー、ムコリピドーシスＩＶ型、多種スルファターゼ欠損症、ポンペ病、サンドホフ病、テイサックス病、ＡＢ型シンドラー病、サラ病、ベータマンノース症、及びグロボイド細胞白質ジストロフィーからなる群から選択される、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記組成物が髄腔内または静脈内に投与されることを特徴とする、請求項２２または２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記投与量が、１０ｍｇ、４５ｍｇ、９０ｍｇ及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記置換酵素が、組み換えヒトヘパランＮ−スルファターゼまたは組み換えイデュルスルファーゼである、請求項２２〜２５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２７】
前記投与間隔が、毎日、毎週、隔週、毎月、隔月、毎年またはこれらの組み合わせである、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記生体試料が、脳脊髄液（ＣＳＦ）、全血、細胞、組織、血しょう、血清、血液、尿、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び／または前記投与間隔が維持される、請求項２２〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３０】
前記ＧＡＧのレベルが少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上減少する、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び／または投与間隔が調節される、請求項２２〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記治療に有効な用量及び投与間隔を調節することが、前記投与量及び／もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び／もしくは投与間隔を減少させることを含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記ＧＡＧレベルが１％以下、２％以下、３％以下、４％以下、５％以下、６％以下、７％以下、８％以下、９％以下もしくは１０％以下減少する、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて増加する場合、前記治療的に有効な用量及び／または投与間隔が調節される、請求項２２〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記治療に有効な用量及び投与間隔を調節することが、前記投与量及び／もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び／もしくは投与間隔を減少させることを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記ＧＡＧのレベルが少なくとも１％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上増加する、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３７】
前記対照ＧＡＧのレベルが、ｉ）リソソーム蓄積症を患っている対象のＧＡＧレベル、ｉｉ）治療の初期の時点で測定されたリソソーム蓄積症を患っている対象のＧＡＧレベル、またはｉｉｉ）未治療の対照対象のＧＡＧレベルである、請求項２９〜３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
ハンター症候群を治療するための組成物であって、前記組成物は、組み換えイズロン酸−２−スルファターゼ（Ｉ２Ｓ）を含み、前記組成物は、治療を必要とする対象に定期的に髄腔内投与されて、その結果、脳脊髄液（ＣＳＦ）のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルが、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法により測定される、治療前のベースラインのＧＡＧレベルと比較して８５％超減少することを特徴とする、前記組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
少なくとも１つの態様において、本発明は、治療を必要とする対象に、組み換えイズロン酸−２−スルファターゼ（Ｉ２Ｓ）の治療に有効な用量を定期的に髄腔内投与して、その結果、脳脊髄液（ＣＳＦ）のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルは、ＧＡＧレベルを測定するいずれかの方法、例えば、本明細書に記載されるいずれかの方法により測定される、治療前のベースラインのＧＡＧレベルと比較して８５％超減少できることを含有する、ハンター症候群を治療する方法を含む。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルを測定する方法であって、前記方法が、
ａ）グリコサミノグリカンの消化が二糖の混合物の生成を可能にする条件下で、１つ以上の酵素で生体試料をインキュベートする工程と、
ｂ）工程ａ）で生成する前記二糖の混合物を化学的に誘導体化する工程と、
ｃ）各個別の前記誘導体化された二糖の量を測定する工程と、
ｄ）工程ｃ）で測定した前記各個別の誘導体化された二糖の量に基づいて生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルを測定する工程と、を含む、方法。
（項目２）
前記グリコサミノグリカンがヘパラン硫酸を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記１つ以上の酵素が１つ以上のヘパリナーゼを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
前記１つ以上のヘパリナーゼがヘパリナーゼＩ、ＩＩ及び／またはＩＩＩを含む、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記１つ以上の酵素が、コンドロイチナーゼＡＣ、コンドロイチナーゼＢ、コンドロイチナーゼＣ、コンドロイチナーゼＡＢＣ及びケラタナーゼからなる群から選択される、項目１または２に記載の方法。
（項目６）
前記二糖の混合物が、二糖Ｉ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、ＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、ＩＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ）、ＩＶ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ）、ＩＩ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ，６Ｓ）及び／またはＩＶ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ）を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記測定することが、誘導体化されたＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、誘導体化されたＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ，６Ｓ）、誘導体化されたＩＩＩ−Ｓ（ΔＵＡ，２Ｓ−ＧｌｃＮＳ）、誘導化されたＩＶ−Ｓ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＳ）、誘導体化されたＩＩ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ，６Ｓ）、及び誘導体化されたＩＶ−Ａ（ΔＵＡ−ＧｌｃＮＡｃ）のそれぞれの量を測定することを含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記二糖の混合物が疎水性部分で誘導体化されている、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記二糖の混合物が、４−ブチルアニリン、２−アミノベンズアミド（２−ＡＢ）、２アミノ安息香酸（アントラニル酸、２−ＡＡ）、または２−アミノアクリドン（ＡＭＡＣ）で誘導体化されている、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記工程ｃ）が、
（ｉ）前記個々の誘導体化された二糖をクロマトグラフィーにより分離することと、
（ｉｉ）前記各個々の誘導体化された二糖を質量分析で測定することと、を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記クロマトグラフィーが逆相液体クロマトグラフィーである、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記各個々の誘導体化された二糖が内部標準物質と比較して測定される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記各個々の二糖が４−ブチルアニリンで誘導体化されており、各対応する二糖の内部標準物質が１３Ｃ６−４−ブチルアニリンで標識されている、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記生体試料中の前記グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルが、前記測定した個々の二糖の量に基づいて合計した二糖のレベル値により決定される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記生体試料が脳脊髄液（ＣＳＦ）試料である、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記ＣＳＦ試料が約１０μｌ〜約１００μｌの範囲の量を有する、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記ＣＳＦ試料が約４５μｌ〜約５５μｌの範囲の量を有する、項目１５に記載の方法。
（項目１８）
前記生体試料が血液試料である、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記生体試料が血しょう試料または尿試料である、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記生体試料が、グリコサミノグリカンを抽出するために最初に処理される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記生体試料が、０．１μＭ超の濃度でグリコサミノグリカンを含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
リソソーム蓄積症の治療を監視する方法であって、前記方法が、
投与間隔で対象に置換酵素の治療有効量を投与することを含む治療過程で、リソソーム蓄積症を患う対象を治療することと、
先行項目のいずれか一項に記載の方法による治療過程中、対象から得た生体試料のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルを測定することと、を含む前記方法。
（項目２３）
前記リソソーム蓄積症が、ＭＰＳＩ、ＭＰＳＩＩ、ＭＰＳＩＩＩＡ、ＭＰＳＩＩＩＢ、ＭＰＳＩＩＩＣ、ＭＰＳＩＩＩＤ、ＭＰＳＩＶＡ、ＭＰＳＩＶＢ、ＭＰＳＶＩ、ＭＰＳＶＩＩ、ＭＰＳＩＸ、アルファマンノース症、アスパルチルグルコサミン尿症、ファブリー病、フコシド蓄積症、ガラクトシアリドーシス、ゴーシェ病、ＧＭ１ガングリオシドーシス、ＧＭ２活性化因子欠損症、シアリドーシス、クラッベ病、異染性白質ジストロフィー、ムコリピドーシスＩＶ型、多種スルファターゼ欠損症、ポンペ病、サンドホフ病、テイサックス病、ＡＢ型シンドラー病、サラ病、ベータマンノース症、及びグロボイド細胞白質ジストロフィーからなる群から選択される、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記投与が髄腔内投与または静脈内投与である、項目２２または２３に記載の方法。
（項目２５）
前記投与量が、１０ｍｇ、４５ｍｇ、９０ｍｇ及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目２２〜２４のいずれか１項に記載の方法。
（項目２６）
前記置換酵素が、組み換えヒトヘパランＮ−スルファターゼまたは組み換えイデュルスルファーゼである、項目２２〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記投与間隔が、毎日、毎週、隔週、毎月、隔月、毎年またはこれらの組み合わせである、項目２２〜２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記生体試料が、脳脊髄液（ＣＳＦ）、全血、細胞、組織、血しょう、血清、血液、尿、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目２２〜２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目２９）
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び／または前記投与間隔を維持することを更に含む、項目２２〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記ＧＡＧのレベルが少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上減少する、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び／または投与間隔を調節することを更に含む、項目２２〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記治療に有効な用量及び投与レベルを調節することが、前記投与量及び／もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び／もしくは投与間隔を減少させることを含む、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記ＧＡＧレベルが１％以下、２％以下、３％以下、４％以下、５％以下、６％以下、７％以下、８％以下、９％以下もしくは１０％以下減少する、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記ＧＡＧのレベルが対照ＧＡＧのレベルと比べて増加する場合、前記治療的に有効な用量及び／または投与間隔を調節することを更に含む、項目２２〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
前記治療に有効な用量及び投与レベルを調節することが、前記投与量及び／もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び／もしくは投与間隔を減少させることを含む、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記ＧＡＧのレベルが少なくとも１％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上増加する、項目３４に記載の方法。
（項目３７）
前記対照ＧＡＧのレベルが、ｉ）リソソーム蓄積症を患っている対象のＧＡＧレベル、ｉｉ）治療の初期の時点で測定されたリソソーム蓄積症を患っている対象のＧＡＧレベル、またはｉｉｉ）未治療の対照対象のＧＡＧレベルである、項目２９〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
治療を必要とする対象に、組み換えイズロン酸−２−スルファターゼ（Ｉ２Ｓ）の治療に有効な用量を定期的に髄腔内投与して、その結果、脳脊髄液（ＣＳＦ）のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）のレベルが、先行項目のいずれか一項に記載の方法により測定される、治療前のベースラインのＧＡＧレベルと比較して８５％超減少することを含む、ハンター症候群を治療する方法。