【手続補正書】
【提出日】平成30年2月27日(2018.2.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
修飾スルファミダーゼであって、グリカン認識受容体に対するエピトープを実質的に含まないことにより、哺乳動物の血液脳関門を通じた前記スルファミダーゼの輸送が可能であり、ここで、前記スルファミダーゼが、前記哺乳動物の脳において触媒活性を有する、修飾スルファミダーゼ。
【請求項２】
非修飾組換えスルファミダーゼの天然グリカン部分の含量に対する天然グリカン部分の相対含量が約２５％である、請求項１に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項３】
前記スルファミダーゼの天然グリカン部分が、単結合切断及び二重結合切断によって破壊されるものであって、単結合切断の程度がオリゴマンノースグリカンの少なくとも６０％である、請求項１又は２に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項４】
前記エピトープが、マンノース−６−リン酸部分、マンノース部分及びガラクトース部分から選択される少なくとも１つのタイプの部分を示す、請求項１〜３のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項５】
マンノース−６−リン酸部分、マンノース部分及びガラクトース部分を含まない、請求項４に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項６】
前記エピトープが、マンノース−６リン酸受容体タイプ１及び２、マンノース受容体及びガラクトース受容体から選択される少なくとも１つのグリカン認識受容体によって認識される、請求項４又は５に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項７】
配列番号１で定義されるアミノ酸配列からなるポリペプチド、又は配列番号１で定義されるアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項８】
前記エピトープが、５つのＮ−グリコシル化部位：配列番号１の位置２１のＮ（Ｎ（２１））、位置１２２のＮ（Ｎ（１２２））、位置１３１のＮ（Ｎ（１３１））、位置２４４のＮ（Ｎ（２４４））及び位置３９３のＮ（Ｎ（３９３）、の少なくとも４つを有さない、請求項７に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項９】
前記エピトープが、前記修飾スルファミダーゼポリペプチドのＮ−グリコシル化部位Ｎ（２１）、Ｎ（１２２）、Ｎ（２４４）、及びＮ（３９３）を有さない、請求項８に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項１０】
Ｎ（１３１）部位のオリゴマンノースグリカンを含み、前記オリゴマンノースが単結合切断及び二重結合切断によって破壊されており、前記破壊が、少なくとも６０％の単結合切断の程度を特徴とする、請求項７〜９のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項１１】
前記スルファミダーゼは、そのＣ末端部分が無傷であって、前記Ｃ末端部分が任意の方法で、配列番号１のアミノ酸４３６〜４８４によって表される、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項１２】
前記触媒活性を提供する配列番号１の位置５０のＣα−ホルミルグリシン残基（ＦＧｌｙ５０）を含む、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項１３】
前記触媒活性が、リソソーム蓄積症を罹患している前記哺乳動物の脳におけるリソソーム蓄積の減少を提供する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ。
【請求項１４】
過ヨウ素酸アルカリ金属塩（alkali metal periodate）及び水素化ホウ素アルカリ金属塩（alkali metal borohydride）との逐次反応によりスルファミダーゼが調製され、それによりスルファミダーゼのグリカン認識受容体に対するエピトープを修飾し、前記スルファミダーゼの触媒活性を保持する一方、前記受容体に対するスルファミダーゼの活性を低下させた、修飾スルファミダーゼ。
【請求項１５】
グリカン認識受容体のためのエピトープを実質的に有さず、それにより哺乳動物の血液脳関門を通じた前記スルファミダーゼの輸送を可能にし、活性部位において１を超えるＣα−ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）対セリン（Ｓｅｒ）比を有し、それにより前記哺乳動物の脳において触媒活性を提供する、修飾スルファミダーゼを含む、スルファミダーゼ組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼを含む、請求項１５に記載のスルファミダーゼ組成物。
【請求項１７】
１０１０ｋＤa超の分子量を有する多量体形態において、５％以下（重量）のスルファミダーゼを含む、請求項１５又は１６のいずれか１項に記載のスルファミダーゼ組成物。
【請求項１８】
修飾スルファミダーゼを調製する方法であって、前記方法が：
ａ）グリコシル化スルファミダーゼを過ヨウ素酸アルカリ金属塩と反応させ、及び、
ｂ）前記スルファミダーゼを水素化ホウ素アルカリ金属塩と２時間以下の時間反応させること；を含み、
それによって前記スルファミダーゼのグリカン部分を修飾し、前記スルファミダーゼの触媒活性を保持する一方、グリカン認識受容体に対する前記スルファミダーゼの活性を低下させる、方法。
【請求項１９】
前記水素化ホウ素アルカリ金属塩が、１０〜８０ｍＭの濃度で使用される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記工程ａ）が、４時間以下、例えば３時間以下、例えば２時間以下、例えば１時間以下、例えば約０．５時間実施される、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
工程ａ）及び工程ｂ）が中間工程を実行することなく順番に実施される、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記工程ａ）が、以下のｉ）〜ｉｉｉ）：
ｉ）前記過ヨウ素酸アルカリ金属塩が、メタ過ヨウ素酸ナトリウムである；
ｉｉ）前記過ヨウ素酸塩が、２０ｍＭ以下、例えば１５ｍＭ以下、例えば約１０ｍＭの濃度で使用される、及び、
ｉｉｉ）前記反応が、０〜２２℃の温度、例えば０〜８℃の温度、例えば０〜４℃の温度、例えば約８℃、例えば約０℃にて実施される、
の少なくとも１つ、例えば少なくとも２つ、例えば全てによって、さらに特徴づけられる、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
工程ａ）の前記反応が、ｐＨ３〜７で実施される、請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記工程ｂ）が、以下のｉ）〜ｉｖ）：
ｉ）前記水素化ホウ素アルカリ金属塩が、水素化ホウ素ナトリウムであり；
ｉｉ）前記水素化ホウ素塩が、前記過ヨウ素酸塩の濃度の４倍以下、例えば前記過ヨウ素酸塩の濃度の３倍以下、例えば前記過ヨウ素酸塩の濃度の２．５倍以下、例えば前記過ヨウ素酸塩の濃度の０．５〜４倍の濃度で使用される；
ｉｉｉ）前記反応が、１．５時間以下、例えば１時間以下、例えば０．７５時間以下、例えば約０．５時間の期間実施される；
ｉｖ）前記反応が、０〜８℃の温度で実施される、
の少なくとも１つ、例えば少なくとも２つ、例えば全てによってさらに特徴づけられる、請求項１８〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記工程ａ）及び工程ｂ）の各々が、個別に２時間以下の期間実施され、かつ、前記水素化ホウ素塩が、任意に、前記過ヨウ素酸塩の０．５〜４倍の濃度で使用される、請求項１８〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記工程ａ）が３時間以下の期間実施され、かつ、前記工程ｂ）が１時間以下実施され、かつ、前記水素化ホウ素塩が、任意に、前記過ヨウ素酸の４倍以下の濃度で使用される、請求項１８〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
ａ２）工程ａ）より生じる反応を反応停止すること（ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ）、をさらに含む、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
ｂ２）工程ｂ）より生じる反応を反応停止すること、をさらに含む、請求項１８〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記グリコシル化スルファミダーゼポリペプチドが、少なくとも４つのアスパラギン残基にグリカン部分を含む、請求項１８〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記過ヨウ素酸アルカリ金属塩が、グリカン部分のシス−グリコール基をアルデヒド基に酸化する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記水素化ホウ素アルカリ金属塩が、前記アルデヒドをアルコールに還元する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項１８〜３１のいずれか１項に記載の方法によって得られる修飾スルファミダーゼ。
【請求項３３】
治療に使用するための、請求項１〜１７及び３２のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ又はスルファミダーゼ組成物。
【請求項３４】
リソソーム蓄積症、特にムコ多糖症ＩＩＩＡ（ＭＰＳ  ＩＩＩＡ）に罹患した哺乳動物の治療に使用するための、請求項３３に記載の修飾スルファミダーゼ又はスルファミダーゼ組成物。
【請求項３５】
リソソーム蓄積症、例えばムコ多糖症ＩＩＩＡ（ＭＰＳ  ＩＩＩＡ）に罹患している哺乳動物を治療するための医薬組成物であって、治療上有効な量の修飾スルファミダーゼを含み、前記修飾スルファミダーゼが：
ａ）請求項１〜１４及び３２のいずれか１項に記載の修飾スルファミダーゼ；
ｂ）請求項１５〜１７のいずれか１項に記載のスルファミダーゼ組成物、及び、
ｃ）修飾スルファミドであって、ここで、前記修飾が、前記修飾スルファミダーゼを過ヨウ素酸アルカリ金属塩及び水素化ホウ素アルカリ金属塩で逐次処理することを含み、それにより、触媒活性を維持する一方でグリカン認識受容体に対する活性を低下させるように化学的に修飾されたグリカン部分を有する、修飾スルファミド、
から選択される、医薬組成物。