【手続補正書】
【提出日】平成30年9月7日(2018.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
成熟ｍｉＲ−２９ａ、ｍｉＲ−２９ｂ、またはｍｉＲ−２９ｃ配列を含む、約２３〜約２６リボヌクレオチドの第１の鎖と、
前記第１の鎖と実質的に相補的な配列を含み、少なくとも１つの修飾されたヌクレオチドを有する、約２２〜約２３リボヌクレオチドの第２の鎖と
を含むｍｉＲ−２９模倣化合物であって、前記第１の鎖が、前記第２の鎖に対して３’ヌクレオチド突出部を有する、ｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２】
前記第１の鎖が、１つまたは複数の２’フルオロヌクレオチドを有する、請求項１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項３】
前記第１の鎖が、修飾されたヌクレオチドを有さない、請求項１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項４】
前記第２の鎖内の前記少なくとも１つの修飾されたヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾されたヌクレオチドである、請求項１から３のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項５】
前記第２の鎖が、前記第１の鎖に対してミスマッチを１つ、２つ、または３つ有する、請求項１から４のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項６】
前記第２の鎖が、前記第１の鎖に対して、３’末端から４位、１３位、および／または１６位におけるミスマッチを含有する、請求項１から５のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項７】
前記第２の鎖が、その３’末端または５’末端においてコレステロール分子と結合している、請求項１から６のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項８】
前記コレステロール分子が、前記第２の鎖と少なくとも６炭素リンカーを通じて結合している、請求項７に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項９】
前記第１の鎖における前記３’突出部を含むヌクレオチドが、ホスホロチオエート結合によって結合している、請求項１から８のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１０】
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ｂ配列を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１１】
前記第１の鎖が、配列番号２、１８〜２１、または３１〜３４から選択される配列を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１２】
前記第２の鎖が、配列番号１、８〜１７、または２８〜３０から選択される配列を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１３】
前記第１の鎖が配列番号１９の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１４】
前記第１の鎖が配列番号１９の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１５の配列を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１５】
前記第１の鎖が配列番号３３の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１６】
前記第１の鎖が配列番号３４の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１７】
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ａ配列を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１８】
前記第１の鎖が、配列番号６、７または２７の配列を含む、請求項１から９および１７のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項１９】
前記第２の鎖が、配列番号３〜５から選択される配列を含む、請求項１から９および１７から１８のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２０】
前記第１の鎖が配列番号２７の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号５の配列を含む、請求項１から９および１７から１９のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２１】
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ｃ配列を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２２】
前記第１の鎖が、配列番号２５、２６、または３５の配列を含む、請求項１から９および２１のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２３】
前記第２の鎖が、配列番号２２〜２４から選択される配列を含む、請求項１から９および２１から２２のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２４】
前記第１の鎖が配列番号３５の配列を含み、前記第２の鎖が、配列番号２４の配列を含む、請求項１から９および２１から２３のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
【請求項２５】
有効量の請求項１から２４のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物または薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項２６】
吸入用組成物である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
細胞において細胞外マトリックス遺伝子を制御するための、請求項１から２４のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物を含む組成物または請求項２５もしくは２６に記載の組成物であって、前記組成物は、前記細胞と接触されることを特徴とする、組成物。
【請求項２８】
前記細胞が哺乳動物細胞である、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記細胞が線維芽細胞または上皮細胞である、請求項２７または２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記細胞がｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏにおけるものである、請求項２７から２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３１】
組織線維症の処置または予防を必要とする対象において組織線維症を処置または予防するための、請求項１から２４のいずれか一項に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物を含む組成物または請求項２５もしくは２６に記載の組成物であって、前記組成物は、前記対象に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項３２】
前記組織線維症が、心臓線維症、肺線維症、腎線維症、肝線維症、強皮症、眼線維症、皮膚線維症である、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記皮膚線維症が、肥厚性瘢痕（ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ  ｓｃａｒｒｉｎｇ）、ケロイド、手、関節または腱の線維症、およびペイロニー病からなる群から選択される、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記投与が吸入によるものである、請求項３１から３３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、定量用量吸入器、乾燥粉末吸入器、ネブライザー、加熱式気化器、ソフトミスト吸入器、温熱エアロゾル吸入器、または電気流体力学に基づく溶液ミスト化吸入器によって投与されることを特徴とする、請求項３１から３４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３６】
ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の前後の対象の細胞または線維性組織における１種または複数種の遺伝子の発現レベルを、ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた前記処置の有効性の指標とする方法であって、前記ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の前に対象の細胞または線維性組織における１種または複数種の遺伝子の発現のレベルを決定するステップであって、前記１種または複数種の遺伝子が、ｍｉＲ−２９によって調節される遺伝子のセットから選択されるステップと、前記ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置後に前記対象の細胞／線維性組織における同じ１種または複数種の遺伝子の発現レベルを決定するステップとを含み、ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた前記処置の前後の前記対象の細胞または線維性組織における１種または複数種の遺伝子の発現レベルが、前記処置に効果があるか、効果が少ないか、または効果がないかを示す、方法。
【請求項３７】
ｍｉＲ−２９によって調節される前記１種または複数種の遺伝子が、表５から選択される、請求項３６に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明は、ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の有効性を評価するための方法であって、ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の前に対象の細胞または線維性組織における１種または複数種の遺伝子の発現のレベルを決定するステップであって、当該１種または複数種の遺伝子が、ｍｉＲ−２９によって調節される遺伝子のセットから選択されるステップと、ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置後に対象の細胞／線維性組織における同じ１種または複数種の遺伝子の発現レベルを決定するステップと、処置の前後の発現レベルに基づいて、処置に効果があるか、効果が少ないか、または効果がないかを決定するステップとを含む方法も提供する。一実施形態では、ｍｉＲ−２９によって調節される１種または複数種の遺伝子は、表５から選択される。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
成熟ｍｉＲ−２９ａ、ｍｉＲ−２９ｂ、またはｍｉＲ−２９ｃ配列を含む、約２３〜約２６リボヌクレオチドの第１の鎖と、
前記第１の鎖と実質的に相補的な配列を含み、少なくとも１つの修飾されたヌクレオチドを有する、約２２〜約２３リボヌクレオチドの第２の鎖と
を含むｍｉＲ−２９模倣化合物であって、前記第１の鎖が、前記第２の鎖に対して３’ヌクレオチド突出部を有する、ｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２）
前記第１の鎖が、１つまたは複数の２’フルオロヌクレオチドを有する、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目３）
前記第１の鎖が、修飾されたヌクレオチドを有さない、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目４）
前記第２の鎖内の前記少なくとも１つの修飾されたヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾されたヌクレオチドである、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目５）
前記第２の鎖が、前記第１の鎖に対してミスマッチを１つ、２つ、または３つ有する、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目６）
前記第２の鎖が、前記第１の鎖に対して、３’末端から４位、１３位、および／または１６位におけるミスマッチを含有する、項目５に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目７）
前記第２の鎖が、その３’末端または５’末端においてコレステロール分子と結合している、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目８）
前記コレステロール分子が、前記第２の鎖と少なくとも６炭素リンカーを通じて結合している、項目７に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目９）
前記第１の鎖における前記３’突出部を含むヌクレオチドが、ホスホロチオエート結合によって結合している、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１０）
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ｂ配列を含む、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１１）
前記第１の鎖が、配列番号２、１８〜２１、または３１〜３４から選択される配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１２）
前記第２の鎖が、１、８〜１７、または２８〜３０から選択される配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１３）
前記第１の鎖が配列番号１９の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１４）
前記第１の鎖が配列番号１９の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１５の配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１５）
前記第１の鎖が配列番号３３の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１６）
前記第１の鎖が配列番号３４の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号１の配列を含む、項目１０に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１７）
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ａ配列を含む、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１８）
前記第１の鎖が、配列番号６、７または２７の配列を含む、項目１７に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目１９）
前記第２の鎖が、配列番号３〜５から選択される配列を含む、項目１８に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２０）
前記第１の鎖が配列番号２７の配列を含み、前記第２の鎖が配列番号５の配列を含む、項目１７に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２１）
前記第１の鎖が、成熟ｍｉＲ−２９ｃ配列を含む、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２２）
前記第１の鎖が、配列番号２５、２６、または３５の配列を含む、項目２１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２３）
前記第２の鎖が、配列番号２２〜２４から選択される配列を含む、項目１９に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２４）
前記第１の鎖が配列番号３５の配列を含み、前記第２の鎖が、配列番号２４の配列を含む、項目２１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物。
（項目２５）
有効量の項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物または薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
（項目２６）
吸入用組成物である、項目２５に記載の医薬組成物。
（項目２７）
細胞において細胞外マトリックス遺伝子を制御する方法であって、前記細胞を、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物または項目２５に記載の医薬組成物と接触させるステップを含む方法。
（項目２８）
前記細胞が哺乳動物細胞である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記細胞が線維芽細胞または上皮細胞である、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記細胞がｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏにおけるものである、項目２７に記載の方法。
（項目３１）
組織線維症の処置または予防を必要とする対象において組織線維症を処置または予防する方法であって、前記対象に、項目１に記載のｍｉＲ−２９模倣化合物または項目２５に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
（項目３２）
前記組織線維症が、心臓線維症、肺線維症、腎線維症、肝線維症、強皮症、眼線維症、皮膚線維症である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記皮膚線維症が、肥厚性瘢痕（ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ  ｓｃａｒｒｉｎｇ）、ケロイド、手、関節または腱の線維症、およびペイロニー病からなる群から選択される、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記投与が吸入によるものである、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記ｍｉＲ−２９模倣化合物または前記医薬組成物が、定量用量吸入器、乾燥粉末吸入器、ネブライザー、加熱式気化器、ソフトミスト吸入器、温熱エアロゾル吸入器、または電気流体力学に基づく溶液ミスト化吸入器によって投与される、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の有効性を評価するための方法であって、前記ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置の前に対象の細胞または線維性組織における１種または複数種の遺伝子の発現のレベルを決定するステップであって、前記１種または複数種の遺伝子が、ｍｉＲ−２９によって調節される遺伝子のセットから選択されるステップと、前記ｍｉＲ−２９アゴニストまたはｍｉＲ−２９アンタゴニストを用いた処置後に前記対象の細胞／線維性組織における同じ１種または複数種の遺伝子の発現レベルを決定するステップと、前記処置の前後の前記発現レベルに基づいて、前記処置に効果があるか、効果が少ないか、または効果がないかを決定するステップとを含む方法。
（項目３７）
ｍｉＲ−２９によって調節される前記１種または複数種の遺伝子が、表５から選択される、項目３６に記載の方法。