【手続補正書】
【提出日】平成30年3月26日(2018.3.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における組織低酸素を診断するためのシステムであって、
前記対象からの試料中のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸（（Ｓ）−２−ヒドロキシグルタル酸または「Ｌ−２ＨＧ」））のレベルを測定するための手段を含み、
測定レベルが正常酸素状態に相関する基準レベルから有意差を示すときに、前記対象が組織低酸素と診断される、システム。
【請求項２】
対象における低酸素誘発性傷害を診断するためのシステムであって、
前記対象からの試料中のＬ−２ＨＧのレベルを測定するための手段を含み、
測定レベルが正常酸素状態に相関する基準レベルから有意差を示すときに、前記対象が低酸素誘発性傷害と診断される、システム。
【請求項３】
前記対象からの試料中の少なくとも２つのバイオマーカーを測定するための手段であって、ここで前記少なくとも２つのバイオマーカーの１つはＬ−２ＨＧである、手段をさらに含み、
測定レベルが正常酸素状態を表す基準レベルから有意差を示すときに、前記対象が組織低酸素または低酸素誘発性傷害と診断される、請求項１または２に記載のシステム。
【請求項４】
低酸素誘発性傷害の処置において有用な薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が、
（１）薬剤を対象となる細胞または組織と接触させ、
（２）前記薬剤が存在するときの前記組織中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記組織中のＬ−２ＨＧレベルに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し、
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより高い場合、Ｌ−２ＨＧを増加させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものを超す場合に、低酸素誘発性傷害の前記処置において前記薬剤が有用であると決定されるステップを含む、方法。
【請求項５】
前記傷害が、敗血症性ショック、虚血性脳卒中、心筋梗塞、貧血症、肺疾患、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、膿胞性線維症、癌、または外科的処置中であるかまたはこれを含む、低酸素に関連する疾患、障害または病態を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記傷害が、敗血症性ショック、虚血性脳卒中、心筋梗塞、貧血症、肺疾患、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、膿胞性線維症、癌、または外科的処置中であるかまたはこれを含む、低酸素に関連する疾患、障害または病態を含む、請求項２に記載のシステム。
【請求項７】
対象における組織低酸素またはその根本的原因を処置するための医薬品を含む組成物であって、前記対象のＬ−２ＨＧレベルが正常酸素状態の基準対象と比較して少なくとも２倍である、組成物。
【請求項８】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、正常酸素状態の対象と比較して、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍に上昇している、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記医薬品が、赤血球濃厚液、カフェインおよびビタミンを含む群から選択される、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
前記低酸素が慢性である、請求項１〜３および６のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項１１】
前記低酸素が慢性である、請求項４または５に記載の方法。
【請求項１２】
前記低酸素が慢性である、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記低酸素治療が、慢性低酸素または慢性低酸素の根本的原因に向けられている、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
慢性低酸素の前記根本的原因が、慢性閉塞性肺障害、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、及び膿胞性線維症を含む群から選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
Ｌ−２ＨＧのレベルを、低酸素治療により対象における組織低酸素またはその根本的原因を処置することを決定するための指標とする方法であって、前記対象が正常酸素状態の基準対象と比較して少なくとも２倍のＬ−２ＨＧレベルを有するときに、前記対象が低酸素治療により処置されると示される、方法。
【請求項１６】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、正常酸素状態の対象と比較して、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍に上昇している、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記低酸素治療が、酸素補充療法、赤血球濃厚液の輸血、カフェイン、ビタミン療法、機械的換気、陽圧療法、身体運動、または外科的介入を含む群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記低酸素が慢性である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記低酸素治療が、慢性低酸素または慢性低酸素の根本的原因に向けられている、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
慢性低酸素の前記根本的原因が、慢性閉塞性肺障害、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、及び膿胞性線維症を含む群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｌ−２ＨＧの前記測定が、組織試料から得られる、請求項１〜３および６のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項２２】
前記組織試料が、心臓の組織、動脈、脳、腫瘍、またはそれらの組み合わせを含む、請求項２１に記載のシステム。
【請求項２３】
前記試料が、血液、尿、血清、リンパ及び脳脊髄液を含む群から選択される、請求項１〜３、６、２１および２２のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項２４】
Ｌ−２ＨＧの前記測定が、血液試料から取得される、請求項２３に記載のシステム。
【請求項２５】
前記血液試料が、静脈血試料である、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２６】
Ｌ−２ＨＧのレベルを調節する薬剤を含む、虚血性組織傷害を処置するための組成物。
【請求項２７】
前記薬剤が、前記対象におけるＬ−２ＨＧの前記レベルを増加させる、請求項７または２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記薬剤が、前記対象におけるＬ−２ＨＧの前記レベルを低減させる、請求項７または２６に記載の組成物。
【請求項２９】
Ｌ−２ＨＧを含み、前記組織への送達を達成する経路を介して前記対象へ投与されることを特徴とする、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
ＬＤＨＡの阻害剤を含み、前記組織への送達を達成する経路を介して前記対象へ投与されることを特徴とする、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３１】
前記組成物が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を調節する薬剤を含む、請求項６または２６に記載の組成物。
【請求項３２】
前記薬剤が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を増加させる、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記薬剤が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を低減させる、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、α−ケトグルタル酸、α−ケトグルタル酸の細胞透過性変異体（例えば、α−ケトグルタル酸ジメチル）、グルタミン、またはグルタミン酸塩を含む、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を阻害する、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３６】
前記組成物が、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を促進する、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３７】
対象において組織低酸素を促進するための組成物であって、前記組成物が、そのＬ−２ＨＧレベルが正常酸素状態の基準対象と比較して最大で５０％である対象に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項３８】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、正常酸素状態の基準対象と比較して、最大で４０％、最大で３０％、最大で２０％、最大で１０％、または最大で５％である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
幹細胞または前駆細胞である細胞の多能性または自己複製を維持するまたは促進する方法であって、前記細胞中のＬ−２ＨＧのレベルを調節することを含む、方法。
【請求項４０】
Ｌ−２ＨＧのレベルを調節することが、前記細胞をＬ−２ＨＧと接触させることを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
Ｌ−２ＨＧのレベルを調節することが、前記細胞中のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を阻害することを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
癌に罹患している対象において癌を処置するための組成物であって、１つまたは複数の用量のＬＤＨＡの阻害剤、または１つまたは複数の用量のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼの刺激剤を含み、前記組成物が、１つまたは複数の用量のＬＤＨＡの阻害剤、または１つまたは複数の用量のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼの刺激剤で前記対象に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項４３】
前記対象が、野生型イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１または２（ＩＤＨ１／２）を有する、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
ＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを含む、腫瘍血管新生を阻害するための組成物であって、前記組成物を腫瘍と接触させることを特徴とする、組成物。
【請求項４５】
ＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを含む、細胞分化を促進させるための組成物であって、前記組成物を、幹細胞または前駆細胞である細胞と接触させることを特徴とする、組成物。
【請求項４６】
前記細胞が癌幹細胞である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
癌の処置において有用な薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が、
（１）薬剤を、癌細胞を含む系と接触させ、
（２）前記薬剤が存在するときの前記系中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または組織中のＬ−２ＨＧレベルに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し、
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより低い場合、Ｌ−２ＨＧを低減させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより低い場合に、癌の処置において前記薬剤が有用であると決定されるステップを含む、方法。
【請求項４８】
前記系が腫瘍であるかまたは腫瘍を含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを含む、敗血症性ショックの症状を有する対象を処置するための組成物。
【請求項５０】
治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを含む、心筋梗塞の症状を有するまたは心筋梗塞のリスクがある対象を処置するための組成物。
【請求項５１】
治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを含む、虚血性脳卒中の症状を有するまたは虚血性脳卒中のリスクがある対象を処置するための組成物。
【請求項５２】
ＬＤＨＡ活性の阻害において有用である薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が、
（１）薬剤を、ＬＤＨＡを発現する細胞を含有する試料またはＬＤＨＡを含有する無細胞溶液と接触させ、
（２）前記薬剤が存在するときの前記試料中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記試料中のＬ−２ＨＧに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し、
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより低い場合、Ｌ−２ＨＧを低減させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより低い場合に、ＬＤＨＡ活性の阻害において前記薬剤が有用であると決定されるステップを含む、方法。
【請求項５３】
Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性の促進において有用である薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が、
（１）薬剤を、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼを発現する細胞を含有する試料またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼを含有する無細胞溶液と接触させ、
（２）前記薬剤が存在するときの前記試料中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記試料中のＬ−２ＨＧに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し、
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより高い場合、Ｌ−２ＨＧを増加させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものに類似する場合、またはＬ−２ＨＧを低減させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより高い場合に、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性の促進において前記薬剤が有用であると決定されるステップを含む、方法。
【請求項５４】
細胞におけるヒストンのメチル化を促進する方法であって、前記細胞を、Ｌ−２ＨＧ、ＬＤＨＡのアクチベーター、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、またはそれらの組み合わせと接触させることを含む、方法。
【請求項５５】
細胞におけるヒストンのメチル化を阻害する方法であって、前記細胞を、ＬＤＨＡの阻害剤、またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターと接触させることを含む、方法。
【請求項５６】
前記ヒストンのメチル化が、ヒストン３リジン９のトリメチル化（Ｈ３Ｋ９ｍｅ３）を含む、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５７】
対象から得られた組織における低酸素の異質性について試験する方法であって、
（１）前記組織の１つの領域内のＬ−２ＨＧのレベルを測定し、
（２）Ｌ−２ＨＧの前記測定レベルを、前記組織の少なくとも１つの異なる領域と比較するステップを含み、前記測定レベルがステップ（１）にて前記領域から測定された前記レベルから有意差を示すときに組織低酸素の異質性が診断される、方法。
【請求項５８】
対象から得られた組織における低酸素の異質性について試験する方法であって、
（１）前記組織の１つの領域内のＨ３Ｋ９ｍｅ３のレベルを測定し、
（２）Ｈ３Ｋ９ｍｅ３の前記測定レベルを、前記組織の少なくとも１つの異なる領域と比較するステップを含み、前記測定レベルがステップ（１）にて前記領域から測定された前記レベルから有意差を示すときに組織低酸素の異質性が診断される、方法。
【請求項５９】
前記組織が、腫瘍由来である、請求項５７または５８に記載の方法。
【請求項６０】
腫瘍が、膠芽腫を有する対象由来である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
Ｌ−２ＨＧと反応する薬剤を含む、組織中の低酸素をイメージングするための組成物。
【請求項６２】
低酸素の前記イメージングが、対象で実行されることを特徴とする、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
前記薬剤が、Ｌ−２ＨＧに特異的に結合する、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６４】
前記薬剤が、臨床イメージング法によるその視覚化を可能にする部分を含む、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６５】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析または酵素アッセイによって測定される、請求項４、５、４７、４８、５２、５３および５７〜６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルの測定が、質量分析の使用を含む、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記測定が、ガスクロマトグラフィー質量分析の使用を含む、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０、６５および６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
２−ヒドロキシグルタル酸をキラル誘導化試薬と反応させるステップをさらに含む、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記基準レベルが、正常酸素状態の個体対象に由来する、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記正常酸素状態の個体対象が前記対象である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記基準レベルが、正常酸素状態の対象の集団に由来する、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象に由来する、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象の集団に由来する、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７４】
前記試料において測定された前記１つまたは複数のバイオマーカーの前記レベルと前記基準レベルとの間の前記差が、前記対象における慢性低酸素の重症度と相関する、請求項４、５、４７、４８、５２、５３、５７〜６０および６５〜７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析または酵素アッセイによって測定される、請求項１〜３および６のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項７６】
Ｌ−２ＨＧの前記レベルの測定が、質量分析の使用を含む、請求項１〜３、６および７５のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項７７】
前記測定が、ガスクロマトグラフィー質量分析の使用を含む、請求項１〜３、６、７５および７６のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項７８】
２−ヒドロキシグルタル酸をキラル誘導化試薬と反応させるステップをさらに含む、請求項１〜３、６、７５、７６および７７のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項７９】
前記基準レベルが、正常酸素状態の個体対象に由来する、請求項１〜３、６および７６〜７８のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項８０】
前記正常酸素状態の個体対象が前記対象である、請求項７９に記載のシステム。
【請求項８１】
前記基準レベルが、正常酸素状態の対象の集団に由来する、請求項１〜３、６および７６〜７８のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項８２】
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象に由来する、請求項１〜３、６および７６〜７８のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項８３】
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象の集団に由来する、請求項１〜３、６および７６〜７８のいずれか一項に記載のシステム。
【請求項８４】
前記試料において測定された前記１つまたは複数のバイオマーカーの前記レベルと前記基準レベルとの間の前記差が、前記対象における慢性低酸素の重症度と相関する、請求項１〜３、６および７５〜８３のいずれか一項に記載のシステム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
いくつかの実施形態では、本開示は、Ｌ−２ＨＧを正確に検出することができる組成物またはシステムを記載する。いくつかの実施形態では、本開示は、Ｌ−２ＨＧとＲ−２ＨＧを区別できる組成物またはシステムを記載する。いくつかの実施形態では、本開示は、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析または酵素アッセイを含む組成物またはシステムを記載する。いくつかの実施形態では、本開示は、２ＨＧをキラル誘導化試薬と接触させることにより２−ヒドロキシグルタル酸を処理するための組成物またはシステムを記載する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
対象において組織低酸素を診断する方法であって、
（１）前記対象からの試料中のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸（（Ｓ）−２−ヒドロキシグルタル酸または「Ｌ−２ＨＧ」））のレベルを測定し；
（２）前記測定レベルと正常酸素状態に相関する基準レベルとを比較するステップを含み、組織低酸素は、前記測定レベルが前記基準レベルから有意差を示すときに診断される、前記方法。
（項目２）
対象において低酸素誘発性傷害を診断する方法であって：
（１）前記対象からの試料中のＬ−２ＨＧのレベルを測定し；
（２）前記測定レベルと正常酸素状態に相関する基準レベルとを比較するステップを含み、低酸素誘発性傷害は、前記測定レベルが前記基準レベルから有意差を示すときに診断される、前記方法。
（項目３）
（１）前記対象からの試料中の少なくとも２つのバイオマーカーを測定し、ここで前記少なくとも２つのバイオマーカーの１つはＬ−２ＨＧであり；及び
（２）前記測定レベルと低酸素または正常酸素状態を表す基準レベルとを比較するステップをさらに含み、組織低酸素または低酸素誘発性傷害は、前記測定レベルが前記基準レベルから有意差を示すときに診断される、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
低酸素誘発性傷害の処置において有用な薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が：
（１）薬剤を対象となる細胞、組織または生体と接触させ；
（２）前記薬剤が存在するときの前記組織中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記組織または生体中のＬ−２ＨＧレベルに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し；
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより高い場合、Ｌ−２ＨＧを増加させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものを超す場合に、低酸素誘発性傷害の前記処置において前記薬剤が有用であると決定するステップを含む、前記方法。
（項目５）
前記傷害が、敗血症性ショック、虚血性脳卒中、心筋梗塞、貧血症、肺疾患、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、膿胞性線維症、癌、または外科的処置中であるかまたはこれを含む、低酸素に関連する疾患、障害または病態を含む、項目２または４に記載の方法。
（項目６）
対象において組織低酸素またはその根本的原因を処置する方法であって、前記方法が、そのＬ−２ＨＧレベルが正常酸素状態の基準対象と比較して少なくとも２倍である対象に、低酸素治療を施すことを含む、前記方法。
（項目７）
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、正常酸素状態の対象と比較して、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍に上昇している、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記低酸素治療が、酸素補充療法、赤血球濃厚液の輸血、カフェイン、ビタミン療法、機械的換気、陽圧療法、身体運動、または外科的介入を含む群から選択される、項目６に記載の方法。
（項目９）
前記低酸素が慢性である、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記治療が、慢性低酸素または慢性低酸素の根本的原因に向けられている、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
慢性低酸素の前記根本的原因が、慢性閉塞性肺障害、気道閉塞、急性呼吸窮迫症候群、肺炎、気胸症、肺気腫、先天性心臓欠陥、アテローム性動脈硬化症、血栓症、肺塞栓症、肺水腫、喘息、及び膿胞性線維症を含む群から選択される、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
Ｌ−２ＨＧの前記測定が、組織試料から得られる、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記組織試料が、心臓の組織、動脈、脳、腫瘍、またはそれらの組み合わせを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１４）
前記試料が、血液、尿、血清、リンパ及び脳脊髄液を含む群から選択される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
Ｌ−２ＨＧの前記測定が、血液試料から取得される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記血液試料が、静脈血試料である、項目１６に記載の方法。
（項目１７）
虚血性組織傷害を処置する方法であって、虚血性組織傷害を有する対象に、Ｌ−２ＨＧのレベルを調節する治療を施すことを含む、前記方法。
（項目１８）
前記治療が、前記対象におけるＬ−２ＨＧの前記レベルを増加させる、項目６または１７に記載の方法。
（項目１９）
前記治療が、前記対象におけるＬ−２ＨＧの前記レベルを低減させる、項目６または１７に記載の方法。
（項目２０）
前記治療が、前記組織への送達を達成する経路を介した前記対象へのＬ−２ＨＧを含む組成物の投与を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
前記治療が、前記組織への送達を達成する経路を介した前記対象へのＬＤＨＡの阻害剤の投与を含む、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
前記治療が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を調節する薬剤の投与を含む、項目６または１７に記載の方法。
（項目２３）
前記薬剤の前記投与が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を増加させる、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記薬剤の前記投与が、ＬＤＨＡ、ＭＤＨ１、またはＭＤＨ２のレベルまたは活性を低減させる、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
前記処置が、これらに限定されないが、α−ケトグルタル酸、α−ケトグルタル酸の細胞透過性変異体（例えば、α−ケトグルタル酸ジメチル）、グルタミン、またはグルタミン酸塩を含む組成物を投与することを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２６）
前記処置が、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を阻害することを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２７）
前記処置が、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を促進することを含む、項目１９に記載の方法。
（項目２８）
対象において組織低酸素を促進する方法であって、前記方法が、そのＬ−２ＨＧレベルが正常酸素状態の基準対象と比較して最大で５０％である対象に治療を施すことを含む、前記方法。
（項目２９）
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、正常酸素状態の基準対象と比較して、最大で４０％、最大で３０％、最大で２０％、最大で１０％、または最大で５％である、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
幹細胞または前駆細胞である細胞の多能性または自己複製を維持するまたは促進する方法であって、前記細胞中のＬ−２ＨＧのレベルを調節することを含む、前記方法。
（項目３１）
Ｌ−２ＨＧのレベルを調節することが、前記細胞をＬ−２ＨＧと接触させることを含む、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
Ｌ−２ＨＧのレベルを調節することが、前記細胞中のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼレベルまたは活性を阻害することを含む、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
癌に罹患している対象において癌を処置する方法であって、１つまたは複数の用量のＬＤＨＡの阻害剤、または１つまたは複数の用量のＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼの刺激剤の投与を含む治療レジメンを前記対象に投与することを含む、前記方法。
（項目３４）
前記対象が、野生型イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１または２（ＩＤＨ１／２）を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
腫瘍血管新生を阻害する方法であって、腫瘍を、治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターと接触させることを含む、前記方法。
（項目３６）
細胞分化を促進させる方法であって、幹細胞または前駆細胞である細胞を、有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターと接触させることを含む、前記方法。
（項目３７）
前記細胞が癌幹細胞である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
癌の処置において有用な薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が：（１）薬剤を、癌細胞を含む系と接触させ；
（２）前記薬剤が存在するときの前記系中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記組織または生体中のＬ−２ＨＧレベルに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し；
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより低い場合、Ｌ−２ＨＧを低減させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより低い場合に、癌の処置において前記薬剤が有用であると決定するステップを含む、前記方法。
（項目３９）
前記系が腫瘍であるかまたは腫瘍を含む、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
敗血症性ショックの症状を有する対象を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを投与することを含む、前記方法。
（項目４１）
心筋梗塞の症状を有するまたは心筋梗塞のリスクがある対象を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを投与することを含む、前記方法。
（項目４２）
虚血性脳卒中の症状を有するまたは虚血性脳卒中のリスクがある対象を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量のＬＤＨＡの阻害剤またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターを投与することを含む、前記方法。
（項目４３）
ＬＤＨＡ活性の阻害において有用である薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が：
（１）薬剤を、ＬＤＨＡを発現する細胞を含有する試料またはＬＤＨＡを含有する無細胞溶液と接触させ；
（２）前記薬剤が存在するときの前記試料中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記試料中のＬ−２ＨＧに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し；
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより低い場合、Ｌ−２ＨＧを低減させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものと類似する場合、またはＬ−２ＨＧを増加させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより低い場合に、ＬＤＨＡ活性の阻害において前記薬剤が有用であると決定するステップを含む、前記方法。
（項目４４）
Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性の促進において有用である薬剤を同定するまたは特徴づける方法であって、前記方法が：
（１）薬剤を、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼを発現する細胞を含有する試料またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼを含有する無細胞溶液と接触させ；
（２）前記薬剤が存在するときの前記試料中のＬ−２ＨＧのレベルを、それが不在のとき、または前記試料中のＬ−２ＨＧに及ぼすその効果が知られている基準薬が存在するときと比較して測定し；
（３）前記薬剤が存在するときの前記測定されたＬ−２ＨＧレベルが、それが不在のときのものより高い場合、Ｌ−２ＨＧを増加させると知られている基準薬が存在するときに測定されたものに類似する場合、またはＬ−２ＨＧを低減させないと知られている基準薬が存在するときに測定されたものより高い場合に、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性の促進において前記薬剤が有用であると決定するステップを含む、前記方法。
（項目４５）
細胞におけるヒストンのメチル化を促進する方法であって、前記細胞を、Ｌ−２ＨＧ、ＬＤＨＡのアクチベーター、Ｌ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、またはそれらの組み合わせと接触させることを含む、前記方法。
（項目４６）
細胞におけるヒストンのメチル化を阻害する方法であって、前記細胞を、ＬＤＨＡの阻害剤、またはＬ−２−ヒドロキシグルタル酸デヒドロゲナーゼのアクチベーターと接触させることを含む、前記方法。
（項目４７）
前記ヒストンのメチル化が、ヒストン３リジン９のトリメチル化（Ｈ３Ｋ９ｍｅ３）を含む、項目４５または４６に記載の方法。
（項目４８）
組織における低酸素の異質性について試験する方法であって、
（１）前記組織の１つの領域内のＬ−２ＨＧのレベルを測定し；
（２）Ｌ−２ＨＧの前記測定レベルを、前記組織の少なくとも１つの異なる領域と比較するステップを含み、前記測定レベルがステップ（１）にて前記領域から測定された前記レベルから有意差を示すときに組織低酸素の異質性が診断される、前記方法。
（項目４９）
組織における低酸素の異質性について試験する方法であって、
（１）前記組織の１つの領域内のＨ３Ｋ９ｍｅ３のレベルを測定し；
（２）Ｈ３Ｋ９ｍｅ３の前記測定レベルを、前記組織の少なくとも１つの異なる領域と比較するステップを含み、前記測定レベルがステップ（１）にて前記領域から測定された前記レベルから有意差を示すときに組織低酸素の異質性が診断される、前記方法。
（項目５０）
前記組織が、腫瘍由来である、項目４８または４９に記載の方法。
（項目５１）
腫瘍が、膠芽腫を有する対象由来である、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
組織中の低酸素をイメージングする方法であって、Ｌ−２ＨＧと反応する薬剤を含む組成物を投与することを含む、前記方法。
（項目５３）
低酸素の前記イメージングが、対象で実行される、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記薬剤が、Ｌ−２ＨＧに特異的に結合する、項目５２に記載の方法。
（項目５５）
前記薬剤が、臨床イメージング法によるその視覚化を可能にする部分を含む、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
Ｌ−２ＨＧの前記レベルが、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析または酵素アッセイによって測定される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
Ｌ−２ＨＧの前記レベルの測定が、質量分析の使用を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目５８）
前記測定が、ガスクロマトグラフィー質量分析の使用を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
２−ヒドロキシグルタル酸をキラル誘導化試薬と反応させるステップをさらに含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記基準レベルが、正常酸素状態の個体対象に由来する、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
前記正常酸素状態の個体対象が前記対象である、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記基準レベルが、正常酸素状態の対象の集団に由来する、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象に由来する、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
前記基準レベルが、急性的に低酸素の対象の集団に由来する、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６５）
前記試料において測定された前記１つまたは複数のバイオマーカーの前記レベルと前記基準レベルとの間の前記差が、前記対象における慢性低酸素の重症度と相関する、先行項目のいずれか一項に記載の方法。