【手続補正書】
【提出日】平成30年10月12日(2018.10.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を同定するための方法であって、化合物−トリマー複合体は、必要な腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節することができ、
ａ）試料中での、化合物の、トリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーへの結合を同定するステップ；及び／又は
ｂ）化合物を含む試料中でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの安定性を測定するステップ；及び／又は
ｃ）化合物を含む試料中での必要な受容体に結合したトリマーＴＮＦスーパーファミリーメンバーのレベルを測定するステップ；及び／又は
ｄ）トリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーへの結合に関する化合物とプローブ化合物との競合を測定するステップ
を含み、並びに、（ａ）における化合物の、トリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーへの結合、及び／又は（ｂ）におけるトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの安定性、及び／又は（ｃ）における必要な受容体に結合したトリマーＴＮＦスーパーファミリーメンバーのレベル、及び／又は（ｄ）で観察された競合のレベルを、対照試料に由来する対応する値と比較するステップ、及びＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、上記方法。
【請求項２】
ａ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバー及び化合物を含有する試料に対して質量分析を行って、ＴＮＦスーパーファミリーメンバーのトリマーの量を検出するステップ；
ｂ）試料中のＴＮＦスーパーファミリーメンバーのトリマーの量と、対照試料とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ａ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーと化合物との試料を、表面に結合した必要なＴＮＦ受容体に加える受容体−リガンド結合アッセイを実行するステップ；
ｂ）必要なＴＮＦ受容体に結合したＴＮＦスーパーファミリーメンバーのトリマーの量と、対照試料とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ａ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーと化合物との試料中でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの温度遷移中点（Ｔｍ）を決定するためのアッセイを実行するステップ；
ｂ）試料中でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＴｍと、対照試料とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ａ）化合物とプローブ化合物とを使用して蛍光偏光アッセイを実行するステップ；
ｂ）化合物の存在下でのプローブ化合物の偏光度と、対照試料中での偏光度とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＴＮＦスーパーファミリーメンバー及び化合物を含有する試料が、不安定化剤をさらに含み、該不安定化剤が、任意でジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）である、請求項１から５までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ａ）等温熱量測定分析を実行して、化合物の存在下での必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合を測定するステップ；
ｂ）必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合と、対照試料とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｃ）が、化合物を含む試料中でのトリマーＴＮＦスーパーファミリーメンバーの、必要な受容体に対する結合親和性を測定することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
ａ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーと化合物との試料中でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーのスーパーファミリー受容体に対する結合親和性（ＫＤ−ｒ）を決定するためのアッセイを実行するステップ；
ｂ）試料中でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒと、対照試料とを比較するステップ；及び
ｃ）ＴＮＦスーパーファミリーメンバーであるトリマータンパク質に結合することができる化合物を選択するステップであって、化合物−トリマー複合体が、必要なＴＮＦスーパーファミリー受容体に結合し、受容体のシグナル伝達を調節する、ステップ
を含む、請求項１又は８に記載の方法。
【請求項１０】
化合物が、化合物の非存在下でのトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの安定性と比較して、トリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの安定性を増加させ、該安定性の増加が、任意で、
（ａ）少なくとも１℃、
（ｂ）少なくとも１０℃、又は
（ｃ）１０℃〜２０℃
のトリマー形態のＴＮＦスーパーファミリーメンバーの温度遷移中点（Ｔｍ）の増加をもたらす、請求項１から９までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦスーパーファミリーメンバーの、その受容体に対する結合親和性と比較して、ＴＮＦスーパーファミリーメンバーの、必要な受容体に対する結合親和性を増加させる、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
（ａ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合に関するｋｏｎ−ｒ及びｋｏｆｆ−ｒ値と比較して、結合速度（ｋｏｎ−ｒ）を増加させること、及び／又は解離速度（ｋｏｆｆ−ｒ）を減少させることにより、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合親和性を増加させる、あるいは
（ｂ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合に関するｋｏｎ−ｒ値と比較して、結合速度（ｋｏｎ−ｒ）を増加させることにより、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーの結合親和性を増加させる、
請求項１１に記載の方法又は化合物。
【請求項１３】
（ａ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒと比較して、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒを減少させ、
（ｉ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒと比較して、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒを１０分の１以下に減少させ、
（ｉｉ）化合物の存在下での必要な受容体への結合に関するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒ値が１０ｎＭ未満であるか、あるいは
（ｂ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒと比較して、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒを減少させ、
（ｉ）化合物が、化合物の非存在下でのその受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒと比較して、必要な受容体に対するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒを４分の１以下に減少させ、
（ｉｉ）化合物の存在下での必要な受容体への結合に関するＴＮＦスーパーファミリーメンバーのＫＤ−ｒ値が６００ｐＭ未満、場合によっては２００ｐＭ未満である、
請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が５００ｎＭ以下のＩＣ５０値を有する、請求項１から１３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ＴＮＦスーパーファミリーメンバーがＴＮＦαであり、受容体がＴＮＦ受容体である、請求項１から１４までのいずれか一項に記載の方法。