【手続補正書】
【提出日】平成30年3月19日(2018.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
モノホスホリルリピッドＡ（ＭＰＬＡ）含有リポソーム組成物および少なくとも１種のサポニンを含むアジュバント製剤であって、前記リポソーム組成物は、ｉ）炭化水素鎖が２３℃以上の水中融解温度を有するリン脂質で構成された脂質二重層およびｉｉ）コレステロールを約５０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）を超えるモルパーセント濃度で含む、アジュバント製剤。
【請求項２】
前記サポニンが、ＱＳ−７、ＱＳ−１８、ＱＳ−２１またはそれらの混合物から選択される、請求項１に記載のアジュバント製剤。
【請求項３】
前記サポニンが、ＱＳ−２１である、請求項１または請求項２のいずれかに記載のアジュバント製剤。
【請求項４】
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％〜約７１％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項５】
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項６】
リポソームが、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）およびジステアリルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）からなる群から選択されるホスファチジルコリン（ＰＣ）を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項７】
前記リポソーム組成物が、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）およびジステアリルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）からなる群から選択されるホスファチジルグリセロール（ＰＧ）をさらに含む、請求項６に記載のアジュバント製剤。
【請求項８】
前記ＰＣ対前記ＰＧ（ｍｏｌ／ｍｏｌ）の比が、約０．５：１、約１：１、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約６：１、約７：１、約８：１、約９：１、約１０：１、約１１：１、約１２：１、約１３：１、約１４：１または約１５：１である、請求項７に記載のアジュバント製剤。
【請求項９】
前記リポソーム組成物が、約５ｍｇ以下、約４ｍｇ以下、約３ｍｇ以下、約２ｍｇ以下、約１ｍｇ以下、約０．９ｍｇ以下、約０．８ｍｇ以下、約０．７ｍｇ以下、約０．６ｍｇ以下、約０．５ｍｇ以下、約０．４ｍｇ以下、約０．３ｍｇ以下、約０．２ｍｇ以下、約０．１ｍｇ以下、約０．０９ｍｇ以下、約０．０８ｍｇ以下、約０．０７ｍｇ以下、約０．０６ｍｇ以下、約０．０５ｍｇ以下、約０．０４ｍｇ以下、約０．０３ｍｇ以下、約０．０２ｍｇ以下または約０．０１ｍｇ以下のＭＰＬＡ（リポソーム懸濁液１ｍｌ当たりの総重量）を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項１０】
前記リポソーム組成物が、約１：５．６〜約１：８８０または約１：８８〜約１：２２０のＭＰＬＡ：リン脂質モル比を有する、請求項１から９のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項１１】
サポニンの含量（リポソーム懸濁液１ｍｌ当たりの総重量）が、約１ｍｇ以下、約０．９ｍｇ以下、約０．８ｍｇ以下、約０．７ｍｇ以下、約０．６ｍｇ以下、約０．５ｍｇ以下、約０．４ｍｇ以下、約０．３ｍｇ以下、約０．２ｍｇ以下、約０．１ｍｇ以下、約０．０９ｍｇ以下、約０．０８ｍｇ以下、約０．０７ｍｇ以下、約０．０６ｍｇ以下、約０．０５ｍｇ以下、約０．０４ｍｇ以下、約０．０３ｍｇ以下、約０．０２ｍｇ以下または約０．０１ｍｇ以下である、請求項１から１０のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項１２】
前記リポソーム組成物が、多層小胞（ＭＬＶ）または小型単層小胞（ＳＵＶ）を含み、小型単層小胞は、直径が約５０〜約１００ｎｍであり、多層小胞は、直径が約１〜約４μｍである、請求項１から１１のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
【請求項１３】
免疫原および請求項１から１２のいずれか一項に記載のアジュバント製剤を含む免疫原性組成物。
【請求項１４】
生理学的に許容される媒体をさらに含む、請求項１３に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５】
前記免疫原が、天然に存在するまたは人工的に創り出されるタンパク質、組換えタンパク質、糖タンパク質、ペプチド、炭水化物、ハプテン、全ウイルス、細菌、原生動物およびウイルス様粒子からなる群から選択される、請求項１３または請求項１４のいずれかに記載の免疫原性組成物。
【請求項１６】
前記免疫原が、ＨＩＶ−１エンベロープタンパク質である、請求項１５に記載の免疫原性組成物。
【請求項１７】
動物を免疫するためのワクチンとして使用するための、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１８】
アジュバントとしてのサポニンの毒性を低減する、またはアジュバント製剤を調製する方法であって、
モノホスホリルリピッドＡ（ＭＰＬＡ）含有リポソーム組成物を、前記サポニンに加える工程を含み、前記リポソーム組成物は、ｉ）炭化水素鎖が２３℃以上の水中融解温度を有するリン脂質を含む脂質二重層およびｉｉ）コレステロールを約５０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）を超えるモルパーセント濃度で含む、方法。
【請求項１９】
前記サポニンが、ＱＳ−７、ＱＳ−１８、ＱＳ−２１およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記サポニンが、ＱＳ−２１である、請求項１８または請求項１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％〜約７１％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、請求項１８から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、請求項１８から２１のいずれか一項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
ＨＩＶ−１エンベロープタンパク質に対する非中和結合抗体は、第３相有効性試験において、予防に相関することが報告されたが、中和抗体は、ＨＩＶ−１に対する予防的ワクチンにとって重要であると広く考えられている。このために、ＡＬＦおよびＡＬＦＱがアジュバントとしての役割を果たし、モデルｇｐ１４０エンベロープタンパク質に対する中和抗体を誘導する能力を試験した。マウス群の貯留血清サンプルを、２つのｔｉｅｒ  １、ｃｌａｄｅ  Ｃ  ＨＩＶ初代分離株に対して試験した。図１２に示されているように、１つのＡＬＦ−アジュバント化および２つのＡＬＦＱ−アジュバント化ワクチン群は、ＭＷ９６５．２６ＰＶ（図１２Ａ）およびＧＳ０１５ＰＶ（図１２Ｂ）の両方を、高ＩＤ５０で中和する抗−ｇｐ１４０抗血清を誘導した。ＭＰＬＡ：リン脂質比が１：５．６であるＡＬＦは、最も高い中和力価を誘導し、一方、ＭＰＬＡ：リン脂質比が１：８８および１：２２０であるＡＬＦＱも、中和抗体を誘導したが、それは幾分低い力価であった。
本発明は、以下の態様を包含し得る。
［１］
モノホスホリルリピッドＡ（ＭＰＬＡ）含有リポソーム組成物および少なくとも１種のサポニンを含むアジュバント製剤であって、前記リポソーム組成物は、ｉ）炭化水素鎖が２３℃以上の水中融解温度を有するリン脂質で構成された脂質二重層およびｉｉ）コレステロールを約５０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）を超えるモルパーセント濃度で含む、アジュバント製剤。
［２］
前記サポニンが、ＱＳ−７、ＱＳ−１８、ＱＳ−２１またはそれらの混合物から選択される、上記［１］に記載のアジュバント製剤。
［３］
前記サポニンが、ＱＳ−２１である、上記［１］または上記［２］のいずれかに記載のアジュバント製剤。
［４］
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％〜約７１％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、上記［１］から［３］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［５］
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、上記［１］から［４］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［６］
リポソームが、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）およびジステアリルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）からなる群から選択されるホスファチジルコリン（ＰＣ）を含む、上記［１］から［５］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［７］
前記リポソーム組成物が、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）およびジステアリルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）からなる群から選択されるホスファチジルグリセロール（ＰＧ）をさらに含む、上記［６］に記載のアジュバント製剤。
［８］
前記ＰＣ対前記ＰＧ（ｍｏｌ／ｍｏｌ）の比が、約０．５：１、約１：１、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約６：１、約７：１、約８：１、約９：１、約１０：１、約１１：１、約１２：１、約１３：１、約１４：１または約１５：１である、上記［７］に記載のアジュバント製剤。
［９］
前記リポソーム組成物が、約５ｍｇ以下、約４ｍｇ以下、約３ｍｇ以下、約２ｍｇ以下、約１ｍｇ以下、約０．９ｍｇ以下、約０．８ｍｇ以下、約０．７ｍｇ以下、約０．６ｍｇ以下、約０．５ｍｇ以下、約０．４ｍｇ以下、約０．３ｍｇ以下、約０．２ｍｇ以下、約０．１ｍｇ以下、約０．０９ｍｇ以下、約０．０８ｍｇ以下、約０．０７ｍｇ以下、約０．０６ｍｇ以下、約０．０５ｍｇ以下、約０．０４ｍｇ以下、約０．０３ｍｇ以下、約０．０２ｍｇ以下または約０．０１ｍｇ以下のＭＰＬＡ（リポソーム懸濁液１ｍｌ当たりの総重量）を含む、上記［１］から［８］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［１０］
前記リポソーム組成物が、約１：５．６〜約１：８８０または約１：８８〜約１：２２０のＭＰＬＡ：リン脂質モル比を有する、上記［１］から［９］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［１１］
サポニンの含量（リポソーム懸濁液１ｍｌ当たりの総重量）が、約１ｍｇ以下、約０．９ｍｇ以下、約０．８ｍｇ以下、約０．７ｍｇ以下、約０．６ｍｇ以下、約０．５ｍｇ以下、約０．４ｍｇ以下、約０．３ｍｇ以下、約０．２ｍｇ以下、約０．１ｍｇ以下、約０．０９ｍｇ以下、約０．０８ｍｇ以下、約０．０７ｍｇ以下、約０．０６ｍｇ以下、約０．０５ｍｇ以下、約０．０４ｍｇ以下、約０．０３ｍｇ以下、約０．０２ｍｇ以下または約０．０１ｍｇ以下である、上記［１］から［１０］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［１２］
前記リポソーム組成物が、多層小胞（ＭＬＶ）または小型単層小胞（ＳＵＶ）を含み、小型単層小胞は、直径が約５０〜約１００ｎｍであり、多層小胞は、直径が約１〜約４μｍである、上記［１］から［１１］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤。
［１３］
免疫原および上記［１］から［１２］のいずれか一項に記載のアジュバント製剤を含む免疫原性組成物。
［１４］
生理学的に許容される媒体をさらに含む、上記［１３］に記載の免疫原性組成物。
［１５］
前記免疫原が、天然に存在するまたは人工的に創り出されるタンパク質、組換えタンパク質、糖タンパク質、ペプチド、炭水化物、ハプテン、全ウイルス、細菌、原生動物およびウイルス様粒子からなる群から選択される、上記［１３］または上記［１４］のいずれかに記載の免疫原性組成物。
［１６］
前記免疫原が、ＨＩＶ−１エンベロープタンパク質である、上記［１５］に記載の免疫原性組成物。
［１７］
上記［１３］から［１６］のいずれか一項に記載の免疫原性組成物を投与する工程を含む、動物を免疫する方法。
［１８］
アジュバントとしてのサポニンの毒性を低減する、またはアジュバント製剤を調製する方法であって、
モノホスホリルリピッドＡ（ＭＰＬＡ）含有リポソーム組成物を、前記サポニンに加える工程を含み、前記リポソーム組成物は、ｉ）炭化水素鎖が２３℃以上の水中融解温度を有するリン脂質を含む脂質二重層およびｉｉ）コレステロールを約５０％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）を超えるモルパーセント濃度で含む、方法。
［１９］
前記サポニンが、ＱＳ−７、ＱＳ−１８、ＱＳ−２１およびそれらの混合物からなる群から選択される、上記［１８］に記載の方法。
［２０］
前記サポニンが、ＱＳ−２１である、上記［１８］または上記［１９］のいずれかに記載の方法。
［２１］
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％〜約７１％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、上記［１８］から［２０］のいずれか一項に記載の方法。
［２２］
前記リポソーム組成物が、コレステロールを約５５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のモルパーセント濃度で含む、上記［１８］から［２１］のいずれか一項に記載の方法。