【手続補正書】
【提出日】平成30年8月29日(2018.8.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を含む組成物であって、
前記組成物は、ＣＤ３を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約４０％は、ＣＤ３を発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、組成物。
【請求項２】
前記組成物は、インターフェロンガンマ（「ＩＦＮγ」）を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２％は、ＩＦＮγを発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ＣＤ３を発現するＭＩＬの前記集団は、インターフェロンガンマ（「ＩＦＮγ」）を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２％は、ＩＦＮγを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、ＣＸＣＲ４を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
ＣＤ４を発現するＭＩＬの集団を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ＣＤ４を発現するＭＩＬの前記集団は、ＣＸＣＲ４を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
ＣＤ４を発現するＭＩＬの前記集団は、４−１ＢＢを発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
ＣＤ８を発現するＭＩＬの集団を含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
ＣＤ８を発現するＭＩＬの前記集団は、ＣＸＣＲ４を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
ＣＤ８を発現するＭＩＬの前記集団は、４−１ＢＢを発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、請求項８または９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物は、４−１ＢＢを発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、請求項１〜６、８および９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物を生成するための方法であって、２１％未満の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、方法。
【請求項１３】
骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を活性化するための方法であって、２１％未満の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、方法。
【請求項１４】
活性化ＭＩＬを含む、被験体のがんを処置するための組成物であって、前記活性化ＭＩＬは、以下：
前記被験体から骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を取り出すステップ、および
２１％未満の酸素を含む環境において前記ＭＩＬをインキュベートするステップ
を含む方法によって産生される、組成物。
【請求項１５】
約１％の酸素から約７％の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、請求項１２から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において少なくとも約２４時間インキュベートされる、請求項１２から１３および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約１日間から約２０日間インキュベートされる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約３日間から約１４日間インキュベートされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＭＩＬを、約２１％の酸素を含む環境においてインキュベートするステップをさらに含む、請求項１２から１３および１５から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＭＩＬは、約２１％の酸素を含む環境において約４日間インキュベートされる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
被験体のがんを処置するための、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を調製するための方法であって、
ＭＩＬをｉｎ  ｖｉｔｒｏで低酸素条件下において第１の期間にわたり増殖させるステップ、および
低酸素増殖に続いて前記ＭＩＬを正常酸素条件下において第２の期間にわたり増殖させるステップを含む、方法。
【請求項２３】
前記低酸素条件は、２１％未満の酸素である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記低酸素条件は、約１％の酸素から約７％の酸素である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記低酸素条件は、約１％から約３％の酸素である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記低酸素条件は、約２％の酸素である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記第１の期間は、約１日間から約２０日間である、請求項２２から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記第１の期間は、約３日間から約１４日間である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１の期間は、約３日間である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記正常酸素条件は、約２１％の酸素である、請求項２２から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記第２の期間は、約３から約７日間である、請求項２２から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記第２の期間は、約４日間である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記第１の期間および前記第２の期間は、約３日間から約２４日間である、請求項２２から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記第１の期間および前記第２の期間は、約３から約１０日間である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）製剤であって、請求項２２から３４のいずれか一項に記載の方法によって調製されるＭＩＬを含む、製剤。
【請求項３６】
低酸素条件下、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて増殖させた治療上有効な骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）製剤。
【請求項３７】
患者のがんを処置するための、請求項３５または３６に記載の製剤。
【請求項３８】
ＭＩＬを含む、患者のがんを処置するための組成物であって、前記ＭＩＬは、以下：
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を前記患者から取り出すステップ、
前記ＭＩＬを低酸素条件下において増殖させるステップ、および
前記ＭＩＬを正常酸素条件下において増殖させるステップ
を含む方法によって産生される、組成物。
【請求項３９】
前記方法は、約１％の酸素から約７％の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項４０】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において少なくとも約２４時間インキュベートされる、請求項１４に記載の組成物。
【請求項４１】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約１日間から約２０日間インキュベートされる、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約３日間から約１４日間インキュベートされる、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記方法は、前記ＭＩＬを、約２１％の酸素を含む環境においてインキュベートするステップをさらに含む、請求項３９〜４２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
前記ＭＩＬは、約２１％の酸素を含む環境において約４日間インキュベートされる、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて低酸素で活性化され正常酸素で増殖した骨髄浸潤リンパ球の集団を含む組成物であって、前記集団の約６０％から約１００％はＣＤ３を発現し、前記集団の少なくとも２１％は４−１ＢＢを発現する、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
一部の態様では、本発明は、被験体のがんを処置するための方法に関する。本方法は、被験体にＭＩＬを含む組成物を投与するステップを含んでもよい。一部の実施形態では、本方法は、被験体から骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を取り出すステップおよび２１％未満の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートし、それにより活性化ＭＩＬを生じさせるステップを含む。
本発明は、例えば、以下を提供する。
（項目１）
骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を含む組成物であって、
前記組成物は、ＣＤ３を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約４０％は、ＣＤ３を発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、組成物。
（項目２）
前記組成物は、インターフェロンガンマ（「ＩＦＮγ」）を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２％は、ＩＦＮγを発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、項目１に記載の組成物。
（項目３）
ＣＤ３を発現するＭＩＬの前記集団は、インターフェロンガンマ（「ＩＦＮγ」）を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２％は、ＩＦＮγを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、項目１に記載の組成物。
（項目４）
前記組成物は、ＣＸＣＲ４を発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、先行する項目のいずれか一項に記載の組成物。
（項目５）
ＣＤ４を発現するＭＩＬの集団を含む、先行する項目のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６）
ＣＤ４を発現するＭＩＬの前記集団は、ＣＸＣＲ４を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、項目５に記載の組成物。
（項目７）
ＣＤ４を発現するＭＩＬの前記集団は、４−１ＢＢを発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、項目５または６に記載の組成物。
（項目８）
ＣＤ８を発現するＭＩＬの集団を含む、先行する項目のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９）
ＣＤ８を発現するＭＩＬの前記集団は、ＣＸＣＲ４を発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約９８％は、ＣＸＣＲ４を発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、項目８に記載の組成物。
（項目１０）
ＣＤ８を発現するＭＩＬの前記集団は、４−１ＢＢを発現する複数のＭＩＬを含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現する前記複数のＭＩＬ由来のＭＩＬである、項目８または９に記載の組成物。
（項目１１）
前記組成物は、４−１ＢＢを発現するＭＩＬの集団を含み、
前記組成物中の細胞の少なくとも約２１％は、４−１ＢＢを発現するＭＩＬの前記集団由来のＭＩＬである、項目１〜６、８および９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２）
先行する項目のいずれか一項に記載の組成物を生成するための方法であって、２１％未満の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、方法。
（項目１３）
骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を活性化するための方法であって、２１％未満の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、方法。
（項目１４）
被験体のがんを処置するための方法であって、
前記被験体から骨髄浸潤リンパ球（「ＭＩＬ」）を取り出すステップ、
２１％未満の酸素を含む環境において前記ＭＩＬをインキュベートし、それにより活性化ＭＩＬを生じさせるステップ、および
前記活性化ＭＩＬを前記被験体に投与するステップ
を含む、方法。
（項目１５）
約１％の酸素から約７％の酸素を含む環境においてＭＩＬをインキュベートするステップを含む、項目１２から１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において少なくとも約２４時間インキュベートされる、項目１２から１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約１日間から約２０日間インキュベートされる、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記ＭＩＬは、２１％未満の酸素を含む環境において約３日間から約１４日間インキュベートされる、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記ＭＩＬを、約２１％の酸素を含む環境においてインキュベートするステップをさらに含む、項目１２から１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記ＭＩＬは、約２１％の酸素を含む環境において約４日間インキュベートされる、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
被験体のがんを処置するための方法であって、前記被験体に項目１から１１のいずれか一項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法。
（項目２２）
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を調製するための方法であって、
ＭＩＬをｉｎ  ｖｉｔｒｏで低酸素条件下において第１の期間にわたり増殖させるステップ、および
低酸素増殖に続いて前記ＭＩＬを正常酸素条件下において第２の期間にわたり増殖させるステップを含む、方法。
（項目２３）
前記低酸素条件は、２１％未満の酸素である、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記低酸素条件は、約１％の酸素から約７％の酸素である、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記低酸素条件は、約１％から約３％の酸素である、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記低酸素条件は、約２％の酸素である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記第１の期間は、約１日間から約２０日間である、項目２２から２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記第１の期間は、約３日間から約１４日間である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記第１の期間は、約３日間である、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記正常酸素条件は、約２１％の酸素である、項目２２から２９のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記第２の期間は、約３から約７日間である、項目２２から３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記第２の期間は、約４日間である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記第１の期間および前記第２の期間は、約３日間から約２４日間である、項目２２から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
前記第１の期間および前記第２の期間は、約３から約１０日間である、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）製剤であって、項目２２から３４のいずれか一項に記載の方法によって調製されるＭＩＬを含む、製剤。
（項目３６）
低酸素条件下、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて増殖させた治療上有効な骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）製剤。
（項目３７）
患者のがんを処置する方法であって、前記患者に項目３５または３６に記載の製剤を投与するステップを含む、方法。
（項目３８）
患者のがんを処置する方法であって、
骨髄浸潤リンパ球（ＭＩＬ）を前記患者から取り出すステップ、
前記ＭＩＬを低酸素条件下において増殖させるステップ、
前記ＭＩＬを正常酸素条件下において増殖させるステップ、および
前記ＭＩＬを前記患者に投与するステップ
を含む、方法。