【手続補正書】
【提出日】平成30年6月29日(2018.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フローサイトメーターを使用して粒子を特徴付ける方法であって、
流体流中の１つ以上の粒子を、前記フローサイトメーターの光線に通すことと、
前記流体流中の１つ以上の粒子が前記光線を通ったときの放射光を検出し、前記検出した放射光に基づいて波形を生成することと、
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することと、
前記多重ピーク波形を評価して単一の粒子と複数の粒子とを区別することによって、前記１つ以上の粒子を特徴付けることと、を含む、方法。
【請求項２】
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することは、前記波形の大きさを、１つ以上の閾値と比較して、所定の期間内の前記波形の少なくとも２つのピークを特定することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記波形は、少なくとも２回閾値を上回る、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記第１のピークは、第１の閾値を上回り、前記第２のピークは、第２の閾値を上回る、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することは、前記少なくとも２つのピーク間の谷を特定することを更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記所定の期間は、最大許容可能パルス幅であり、前記最大許容可能パルス幅は、前記流体流を生成するノズルのサイズの関数及び前記光線の幅の関数として計算される、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記光線の前記幅の判定を、
前記流体流中の既知のサイズのビーズを、前記光線及び第２の光線に通すことと、
前記ビーズが前記光線を通るときの放射光を検出することと、
前記ビーズが前記光線を通るときに検出された前記放射光に基づいて、前記ビーズが前記光線を通る第１の時間の長さを計算することと、
前記ビーズが前記光線から前記第２の光線まで通る時間の長さ、及び前記光線と前記第２の光線との間の既知の距離から、前記流体流の速度を計算することと、
前記流体流の速度及び前記第１の時間の長さから前記光線の幅を計算することと、によって行うことを更に含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記所定の期間は、前記流体流が、前記光線の前記幅の２倍の距離を進む期間よりも短いか、又はそれに等しい、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記放射光は、前方散乱、側方散乱、及び蛍光のうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
放射光を検出し、前記波形を生成することは、光電子倍増管検出器を使用して電圧波形を生成することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記多重ピーク波形を評価することは、前記多重ピーク波形の幅を最小許容可能パルス幅と比較し、前記多重ピーク波形の前記幅が、前記最小許容可能パルス幅よりも狭い場合に、前記１つ以上の粒子を複数の粒子として特徴付けることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記最小許容可能パルス幅は、０．８倍（閾値光線幅の２倍）〜０．９倍（閾値光線幅の２倍）の範囲にある、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記多重ピーク波形を評価することは、前記多重ピーク波形の谷の形状を評価することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記谷の形状を評価することは、前記谷の前記形状を、緩やかな曲線及び鋭利な曲線のうちの１つとして分類し、前記１つ以上の粒子を、緩やかな曲線として分類された場合には単一の粒子として特徴付け、鋭利な曲線として分類された場合には複数の粒子として特徴付けることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記多重ピーク波形を評価することは、前記１つ以上の粒子と関連する第２の波形を評価することを含む多重チャネル分析を行うことを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
フローサイトメーターであって、
流体流を生成するように構成された流体ノズルであって、前記流体流がその中に粒子を含む、流体ノズルと、
前記流体流及び前記粒子を照射するための光線を生成するように構成された光源と、
前記流体流からの放射光を検出し、前記粒子と関連する波形を生成するように構成された検出器と、
少なくとも１つの処理デバイスであって、
多重ピーク波形を特定することと、
前記多重ピーク波形を評価して、前記多重ピーク波形のうちの少なくとも一部を単一の粒子と関連すると特定し、前記多重ピーク波形のうちの少なくとも他の部分を複数の粒子と関連すると特定することと、
前記評価に基づいて、前記粒子を単一の粒子又は複数の粒子のいずれかとして特徴付けることと
を行うように構成されている、少なくとも１つの処理デバイスと、
を備える、フローサイトメーター。
【請求項１７】
前記粒子の前記特徴付けを使用して、分類を決定するようにプログラムされた分類コントローラを含む、分類システムを更に備える、請求項１６に記載のフローサイトメーター。
【請求項１８】
前記検出器は、前方散乱光を検出するように位置付けられており、側方散乱光及び蛍光のうちの１つを検出するように位置付けられた第２の検出器を更に備え、前記多重ピーク波形の前記評価は、前記第２の検出器によって生成された波形を評価することを更に含む、請求項１６に記載のフローサイトメーター。
【請求項１９】
フローサイトメーターであって、
光線を生成し、流体流を照射するように配置される、光源と、
前記光源による照射後に前記流体流から放射される光を検出し、出力信号を生成する、検出器と、
少なくとも１つの処理デバイスであって、
前記出力信号を評価して多重ピークイベントを特定することと、
前記多重ピークイベントを単一のイベントとして特徴付けることと
を行う多重ピーク評価エンジンを実行する、少なくとも１つの処理デバイスと、
を備える、フローサイトメーター。
【請求項２０】
前記多重ピーク評価エンジンは、更に、
第２の多重ピークイベントを特定し、
前記第２の多重ピークイベントを少なくとも２つのイベントとして特徴付けるように実行される、請求項１９に記載のフローサイトメーター。
【請求項２１】
前記多重ピークイベントは、谷によって分離された少なくとも２つのピークを含み、前記ピークのうちの少なくとも１つが、閾値を上回る大きさを有し、前記谷は、前記閾値に満たない大きさを有する、請求項１９に記載のフローサイトメーター。
【請求項２２】
前記多重ピーク評価エンジンは、更に、前記多重ピークイベントが存在しない前記第１の粒子と関連する波形の特徴を推定するように実行される、請求項１９に記載のフローサイトメーター。
【請求項２３】
前記波形の前記特徴を推定するように実行することは、更に、
前記多重ピークイベントの複数のピークの大きさ及び前記多重ピークイベントの幅に少なくとも部分的に基づいて、前記波形の最大高さ及び面積を推定するように実行される、請求項２２に記載のフローサイトメーター。
【請求項２４】
前記多重ピーク波形を評価することは、前記１つ以上の粒子と関連する第２の波形を評価することと、前記１つ以上の粒子を、前記第２の波形が単一のピークを有する場合には単一の粒子として特徴付け、前記第２の波形が複数のピークを有する場合には複数の粒子として特徴付けることとを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記多重ピーク波形を評価することは、前記１つ以上の粒子と関連する第２の波形を評価することを含む多重チャネル分析を行うことを更に含む、請求項１３に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
更なる態様は、光線を生成し、流体流を照射するように配置される、光源と、光源による照射後に流体流から放射される光を検出し、出力信号を生成する、検出器と、出力信号を評価し、多重ピークイベントを特定し、多重ピークイベントを単一のイベントとして特徴付けるように多重ピーク評価エンジンを実行する、少なくとも１つの処理デバイスと、を備える、フローサイトメーターである。
本発明は、例えば、以下を提供する。
（項目１）
フローサイトメーターを使用して粒子を特徴付ける方法であって、
流体流中の１つ以上の粒子を、前記フローサイトメーターの光線に通すことと、
前記流体流中の１つ以上の粒子が前記光線を通ったときに放射される光を検出し、前記検出した放射光に基づいて波形を生成することと、
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することと、
前記多重ピーク波形を評価して単一の粒子と複数の粒子とを区別することによって、前記１つ以上の粒子を特徴付けることと、を含む、方法。
（項目２）
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することは、前記波形の大きさを、１つ以上の閾値と比較して、所定の期間内の前記波形の少なくとも２つのピークを特定することを含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記波形は、少なくとも２回閾値を上回る、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記第１のピークは、第１の閾値を上回り、前記第２のピークは、第２の閾値を上回る、項目２に記載の方法。
（項目５）
前記波形が多重ピーク波形であることを判定することは、前記少なくとも２つのピーク間の谷を特定することを更に含む、項目２に記載の方法。
（項目６）
前記所定の期間は、最大許容可能パルス幅であり、前記最大許容可能パルス幅は、前記流体流を生成するノズルのサイズの関数及び前記光線の幅の関数として計算される、項目２に記載の方法。
（項目７）
前記光線の前記幅の判定を、
前記流体流中の既知のサイズのビーズを、前記光線及び第２の光線に通すことと、
前記ビーズが前記光線を通るときに放射される光を検出することと、
前記ビーズが前記光線を通るときに検出された前記放射光に基づいて、前記ビーズが前記光線を通る第１の時間の長さを計算することと、
前記ビーズが前記光線から前記第２の光線まで通る時間の長さ、及び前記光線と前記第２の光線との間の既知の距離から、前記流体流の速度を計算することと、
前記流体流の速度及び前記第１の時間の長さから前記光線の幅を計算することと、によって行うことを更に含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記所定の期間は、前記流体流が、前記光線の前記幅の２倍の距離を進む期間よりも短いか、又はそれに等しい、項目２に記載の方法。
（項目９）
前記放射光は、前方散乱、側方散乱、及び蛍光のうちの少なくとも１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目１０）
放射光を検出し、前記波形を生成することは、光電子倍増管検出器を使用して電圧波形を生成することを含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記多重ピーク波形を評価することは、前記多重ピーク波形の幅を最小許容可能パルス幅と比較し、前記多重ピーク波形の前記幅が、前記最小許容可能パルス幅よりも狭い場合に、前記１つ以上の粒子を複数の粒子として特徴付けることを含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記最小許容可能パルス幅は、０．８倍（閾値光線幅の２倍）〜０．９倍（閾値光線幅の２倍）の範囲にある、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記多重ピーク波形を評価することは、前記多重ピーク波形の谷の形状を評価することを含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記谷の形状を評価することは、前記谷の前記形状を、緩やかな曲線及び鋭利な曲線のうちの１つとして分類し、前記１つ以上の粒子を、緩やかな曲線として分類された場合には単一の粒子として特徴付け、鋭利な曲線として分類された場合には複数の粒子として特徴付けることを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記多重ピーク波形を評価することは、前記１つ以上の粒子と関連する第２の波形を評価することを含む多重チャネル分析を行うことを更に含む、項目１に記載の方法。
（項目１６）
フローサイトメーターであって、
流体流を生成するように構成された流体ノズルであって、前記流体流がその中に粒子を含む、流体ノズルと、
前記流体流及び前記粒子を照射するための光線を生成するように構成された光源と、
前記流体流からの放射光を検出し、前記粒子と関連する波形を生成するように構成された検出器と、
少なくとも１つの処理デバイスであって、
多重ピーク波形を特定することと、
前記多重ピーク波形を評価して、前記多重ピーク波形のうちの少なくとも一部を単一の粒子と関連すると特定し、前記多重ピーク波形のうちの少なくとも他の部分を複数の粒子と関連すると特定することと、
前記評価に基づいて、前記粒子を単一の粒子又は複数の粒子のいずれかとして特徴付けることと
を行うように構成されている、少なくとも１つの処理デバイスと、
を備える、フローサイトメーター。
（項目１７）
前記粒子の前記特徴付けを使用して、分類を決定するようにプログラムされた分類コントローラを含む、分類システムを更に備える、項目１６に記載のフローサイトメーター。
（項目１８）
前記検出器は、前方散乱光を検出するように位置付けられており、側方散乱光及び蛍光のうちの１つを検出するように位置付けられた第２の検出器を更に備え、前記多重ピーク波形の前記評価は、前記第２の検出器によって生成された波形を評価することを更に含む、項目１６に記載のフローサイトメーター。
（項目１９）
フローサイトメーターであって、
光線を生成し、流体流を照射するように配置される、光源と、
前記光源による照射後に前記流体流から放射される光を検出し、出力信号を生成する、検出器と、
１つの処理デバイスであって、
前記出力信号を評価して多重ピークイベントを特定することと、
前記多重ピークイベントを単一のイベントとして特徴付けることと
を行うように多重ピーク評価エンジンを実行する、少なくとも１つの処理デバイスと、
を備える、フローサイトメーター。
（項目２０）
前記多重ピーク評価エンジンは、更に、
第２の多重ピークイベントを特定し、
前記第２の多重ピークイベントを少なくとも２つのイベントとして特徴付けるように実行される、項目１９に記載のフローサイトメーター。
（項目２１）
前記多重ピークイベントは、谷によって分離された少なくとも２つのピークを含み、前記ピークのうちの少なくとも１つが、閾値を上回る大きさを有し、前記谷は、前記閾値に満たない大きさを有する、項目１９に記載のフローサイトメーター。
（項目２２）
前記多重ピーク評価エンジンは、更に、前記多重ピークイベントが存在しない前記第１の粒子と関連する波形の特徴を推定するように実行される、項目１９に記載のフローサイトメーター。
（項目２３）
前記波形の前記特徴を推定するように実行することは、更に、
前記多重ピークイベントの複数のピークの大きさ及び前記多重ピークイベントの幅に少なくとも部分的に基づいて、前記波形の最大高さ及び面積を推定するように実行される、項目２２に記載のフローサイトメーター。