【手続補正書】
【提出日】平成30年7月26日(2018.7.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
共有結合した２つのポリペプチドを含む修飾ＧＤＦ１５二量体であって、２つのポリペプチドそれぞれが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、ポリペプチドが、それぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１中の対応するアミノ酸の置換の以下の対：
ｉ）Ｋ９１ＮおよびＤ９３Ｔ／ＳまたはＤ９３ＮおよびＧ９５Ｔ／Ｓ；
ｉｉ）Ｄ５Ｔ／ＳおよびＲ２１Ｎ；
ｉｉｉ）Ｒ１６ＮおよびＨ１８Ｔ／Ｓ；
ｉｖ）Ｓ２３ＮおよびＥ２５Ｔ／Ｓ；
ｖ）Ｓ５０ＮおよびＦ５２Ｔ／ＳまたはＦ５２ＮおよびＡ５４Ｔ／Ｓ；
ｖｉ）Ｒ５３ＮおよびＡ５５Ｔ／Ｓ；
ｖｉｉ）Ｓ６４ＮおよびＨ６６Ｔ／Ｓ；
ｖｉｉｉ）Ｔ９４ＮおよびＶ９６Ｔ／ＳまたはＶ９６ＮおよびＬ９８Ｔ／Ｓ；
ｉｘ）Ｓ９７ＮおよびＱ９９Ｔ／Ｓ；ならびに
ｘ）Ａ１０６ＮおよびＤ１０８Ｔ／Ｓ
の少なくとも１つを含む、前記修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項２】
前記２つのポリペプチドが、それぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項３】
前記２つのポリペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のＮ末端に存在している最初の３個のアミノ酸を欠いている、請求項１または２に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項４】
前記２つのポリペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項５】
前記ポリペプチドの少なくとも一つが、異種ポリペプチドに融合されており、任意で該異種ポリペプチドが、血清アルブミン、マルトース結合タンパク質、または免疫グロブリンＦｃポリペプチドであり、かつ該異種ポリペプチドが、該少なくとも一つのポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にコンジュゲートされている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項６】
前記ダイマーが、Ｎ−グリコシル化されている、請求項１〜５のいずれか1項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項７】
２つのポリペプチドが同じアミノ酸配列を含むホモ二量体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項８】
前記２つのポリペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列からなる、請求項１〜７のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体をコードし、任意で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで該核酸分子を発現させる発現制御エレメントに機能的に連結されている、核酸分子。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸分子を含み、任意で、ウイルスベクターを含む、ベクター。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体を発現する宿主細胞。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体、および製剤的に許容可能な希釈剤、担体、もしくは賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の医薬組成物を含み、任意で、シリンジである、滅菌容器。
【請求項１４】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体の生成方法であって、
修飾ＧＤＦ１５二量体を発現する宿主細胞を培養する工程；および
発現した修飾ＧＤＦ１５二量体を精製する工程を含む、前記方法。
【請求項１５】
対象の体重障害またはグルコース代謝障害の治療または予防に使用するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項１６】
前記グルコース代謝障害が、糖尿病である、請求項１５に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項１７】
前記対象が、肥満である、請求項１５または１６に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項１８】
前記対象が、ヒトである、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の修飾ＧＤＦ１５二量体。
【請求項１９】
対象の体重障害またはグルコース代謝障害の治療または予防に使用するための、請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記グルコース代謝障害が、糖尿病である、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記対象が、肥満である、請求項１９または２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記対象が、ヒトである、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
特定の投与経路または投与計画に限定されないが、いくつかの実施形態では、投与は、非経口的（例えば、皮下）注入によるものである。
[本発明1001]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のアミノ酸配列と少なくとも90％同一である連続アミノ酸配列を含むポリペプチドであって、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の対応するアミノ酸の置換の以下の対：
ｉ）Ｄ5Ｔ／ＳおよびＲ21Ｎ；
ｉｉ）Ｒ16ＮおよびＨ18Ｔ／Ｓ；
ｉｉｉ）Ｓ23ＮおよびＥ25Ｔ／Ｓ；
ｉｖ）Ｓ50ＮおよびＦ52Ｔ／ＳまたはＦ52ＮおよびＡ54Ｔ／Ｓ；
ｖ）Ｒ53ＮおよびＡ55Ｔ／Ｓ；
ｖｉ）Ｓ64ＮおよびＨ66Ｔ／Ｓ；
ｖｉｉ）Ｋ91ＮおよびＤ93Ｔ／ＳまたはＤ93ＮおよびＧ95Ｔ／Ｓ；
ｖｉｉｉ）Ｔ94ＮおよびＶ96Ｔ／ＳまたはＶ96ＮおよびＬ98Ｔ／Ｓ；
ｉｘ）Ｓ97ＮおよびＱ99Ｔ／Ｓ；ならびに
ｘ）Ａ106ＮおよびＤ108Ｔ／Ｓ
の少なくとも1つを含む、前記ポリペプチド。
[本発明1002]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の対応するアミノ酸の置換の以下の対：
Ｄ5ＴおよびＲ21Ｎ；
Ｓ23ＮおよびＥ25ＴまたはＳ23ＮおよびＥ25Ｓ；
Ｒ53ＮおよびＡ55ＴまたはＲ53ＮおよびＡ55Ｓ；
Ｓ64ＮおよびＨ66ＴまたはＳ64ＮおよびＨ66Ｓ；
Ｋ91ＮおよびＤ93ＴまたはＫ91ＮおよびＤ93Ｓ；
Ｄ93ＮおよびＧ95ＴまたはＤ93ＮおよびＧ95Ｓ；
Ｓ97ＮおよびＱ99ＴまたはＳ97ＮおよびＱ99Ｓ；ならびに
Ａ106ＮおよびＤ108ＴまたはＡ106ＮおよびＤ108Ｓ
の少なくとも1つを含む、本発明1001のポリペプチド。
[本発明1003]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の対応するアミノ酸の置換の以下の対：
Ｄ5ＴおよびＲ21Ｎ；
Ｓ64ＮおよびＨ66Ｔ；
Ｋ91ＮおよびＤ93Ｔ；
Ｄ93ＮおよびＧ95Ｔ；ならびに
Ｓ97ＮおよびＱ99Ｔ
の少なくとも1つを含む、本発明1001のポリペプチド。
[本発明1004]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の対応するアミノ酸の置換の以下の対：
Ｋ91ＮおよびＤ93Ｔ／Ｓ；ならびに
Ｄ93ＮおよびＧ95Ｔ／Ｓ
の少なくとも1つを含む、本発明1001のポリペプチド。
[本発明1005]
前記連続アミノ酸配列が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のアミノ酸配列と少なくとも95％同一である、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1006]
前記連続アミノ酸配列が、少なくとも98アミノ酸長であり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のアミノ酸配列と少なくとも95％同一であり、前記ポリペプチドのＣ末端側アミノ酸が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の位置112でイソロイシンに対応する、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1007]
前記連続アミノ酸配列が、少なくとも98アミノ酸長であり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のＮ末端に存在している最初の3個のアミノ酸に対応する最初の3個のアミノ酸を含まず、前記Ｃ末端側アミノ酸が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の位置112でイソロイシンに対応する、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1008]
前記連続アミノ酸配列が、少なくとも98アミノ酸長であり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のＮ末端に存在している最初の6個のアミノ酸に対応する最初の6個のアミノ酸を含まず、前記Ｃ末端側アミノ酸が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1中の位置112でイソロイシンに対応する、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1009]
前記連続アミノ酸配列が、少なくとも98アミノ酸長であり、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1のＮ末端に存在している最初の14個のアミノ酸に対応する最初の14個のアミノ酸を含まない、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1010]
Ｎ末端にシグナル配列を含む、前記本発明のいずれかのポリペプチド。
[本発明1011]
前記シグナル配列が、ＩｇＫシグナル配列である、本発明1010のポリペプチド。
[本発明1012]
前記シグナル配列が、リンカーを介して前記ポリペプチドにコンジュゲートされている、本発明1010または1011のポリペプチド。
[本発明1013]
前記リンカーが、開裂可能リンカーである、本発明1012のポリペプチド。
[本発明1014]
異種ポリペプチドに融合されている、本発明1001〜1013のいずれかのポリペプチド。
[本発明1015]
前記異種ポリペプチドが、血清アルブミン、マルトース結合タンパク質、または免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、本発明1014のポリペプチド。
[本発明1016]
前記異種ポリペプチドが、血清アルブミンであり、該血清アルブミンが、ヒト血清アルブミン、カニクイザル（ｃｙｎｏ）血清アルブミンまたはウシ血清アルブミンである、本発明1015のポリペプチド。
[本発明1017]
前記異種ポリペプチドが、免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、本発明1015のポリペプチド。
[本発明1018]
前記異種ポリペプチドが、前記ポリペプチドのＮ末端にコンジュゲートされている、本発明1014〜1017のいずれかのポリペプチド。
[本発明1019]
前記異種ポリペプチドが、前記ポリペプチドのＣ末端にコンジュゲートされている、本発明1014〜1017のいずれかのポリペプチド。
[本発明1020]
Ｎ末端からＣ末端に連続的に、以下：
異種ポリペプチド−［（Ｇ4Ｓ）］5−ＧＤＦ15；
異種ポリペプチド−［（Ｇ4Ｓ）］5−ΔＮ3−ＧＤＦ15；または
異種ポリペプチド−［（Ｇ4Ｓ）］5−ΔＮ6−ＧＤＦ15
を含む融合タンパク質。
[本発明1021]
前記異種ポリペプチドが、血清アルブミン、マルトース結合タンパク質、または免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、本発明1020の融合タンパク質。
[本発明1022]
前記異種ポリペプチドが、血清アルブミンであり、該血清アルブミンが、ヒト血清アルブミン、カニクイザル血清アルブミンまたはウシ血清アルブミンである、本発明1021の融合タンパク質。
[本発明1023]
前記Ｎ末端にシグナル配列を含む、本発明1020〜1022のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1024]
前記シグナル配列が、ＩｇＫシグナル配列である、本発明1023の融合タンパク質。
[本発明1025]
互いに共有結合した2つの本発明1001のポリペプチドを含み、Ｎ−グリコシル化されている、修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体。
[本発明1026]
前記2つのポリペプチドそれぞれが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：2、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：4、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：8、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：9、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：10、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：13、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：14、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：17、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：18、もしくはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：30、または5個までのアミノ酸が異なるアミノ酸から選択されるアミノ酸配列を含み；前記ポリペプチドは、Ｎ−グリコシル化されている少なくとも1つのＮ−グリコシル化部位を含有する、本発明1025の修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体。
[本発明1027]
前記2つのポリペプチドそれぞれが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：81、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：83、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：87、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：88、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：89、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：92、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：93、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：96、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：97またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：100から選択されるアミノ酸配列からなる、本発明1026の修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体。
[本発明1028]
それぞれ同じアミノ酸配列を含む2つのポリペプチドを有するホモ二量体であり、該ポリペプチドが、Ｎ−グリコシル化されている少なくとも1つのＮ−グリコシル化部位を含有する、本発明1025〜1027のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体。
[本発明1029]
本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体をコードする核酸分子。
[本発明1030]
ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで、前記ポリペプチドまたは前記融合タンパク質をコードする前記核酸分子を発現させる発現制御エレメントに機能的に連結されている、本発明1029の核酸分子。
[本発明1031]
本発明1029または本発明1030の核酸分子を含むベクター。
[本発明1032]
ウイルスベクターを含む、本発明1031のベクター。
[本発明1033]
本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体を発現する宿主細胞。
[本発明1034]
本発明1029〜1030のいずれかの核酸分子または本発明1031〜1032のいずれかのベクターを含む宿主細胞。
[本発明1035]
本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体、および製剤的に許容可能な希釈剤、担体、もしくは賦形剤を含む医薬組成物。
[本発明1036]
少なくとも1つの追加の予防薬または治療薬を更に含む、本発明1035の医薬組成物。
[本発明1037]
本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、または本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体に特異的に結合する抗体。
[本発明1038]
本発明1037の抗体および製剤的に許容可能な希釈剤、担体または賦形剤を含む医薬組成物。
[本発明1039]
少なくとも1つの追加の予防薬または治療薬を更に含む、本発明1038の医薬組成物。
[本発明1040]
本発明1035、1036、1038または1039のいずれかの医薬組成物を含む滅菌容器。
[本発明1041]
シリンジである、本発明1040の滅菌容器。
[本発明1042]
本発明1040〜1041のいずれかの滅菌容器を含むキット。
[本発明1043]
本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体の生成方法であって、
前記ポリペプチドまたは前記融合タンパク質を発現する宿主細胞を培養する工程；および
前記発現したポリペプチドまたは融合タンパク質を精製する工程を含む、前記方法。
[本発明1044]
対象の体重障害の治療または予防方法であって、該対象に本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体を投与する工程を含み、前記ポリペプチドまたは前記融合タンパク質が、前記対象の前記体重障害を治療または予防するのに効果的な量で投与される、前記方法。
[本発明1045]
対象のグルコース代謝障害の治療または予防方法であって、該対象に本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド、本発明1020〜1024のいずれかの融合タンパク質、または本発明1025〜1028のいずれかの修飾ＧＤＦ15Ｎ−グリコシル化二量体を投与する工程を含み、前記ポリペプチドまたは前記融合タンパク質が、前記対象の前記グルコース代謝障害を治療または予防するのに効果的な量で投与される、前記方法。
[本発明1046]
前記対象の食物摂取を減少させることを含む、本発明1044〜1045のいずれかの方法。
[本発明1047]
前記対象の体重を減少させることを含む、本発明1044〜1045のいずれかの方法。
[本発明1048]
前記治療または予防が、前記対象の体重の減少を含む、本発明1044〜1045のいずれかの方法。
[本発明1049]
前記治療または予防が、前記対象の食物摂取の減少を含む、本発明1044〜1045のいずれかの方法。
[本発明1050]
前記治療または予防が、前記対象の血中グルコースの減少を含む、本発明1044〜1045のいずれかの方法。
[本発明1051]
前記グルコース代謝障害が、糖尿病である、本発明1045の方法。
[本発明1052]
前記対象が、ヒトである、本発明1044〜1051のいずれかの方法。
[本発明1053]
前記対象が、肥満である、本発明1044〜1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
前記投与が、非経口的注入によるものである、本発明1044〜1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
前記非経口的注入が、皮下である、本発明1054の方法。