【手続補正書】
【提出日】平成30年3月14日(2018.3.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者における癌の治療または緩和するための二重特異的抗体の使用であって、前記二重特異的抗体は、ヒトＣＤ３に結合する第一の抗原結合性ドメイン、ヒトＣＤ２０に結合する第二の抗原結合性ドメイン、及び第一及び第二の抗原結合性ドメインのそれぞれに繋がれたキメラＦｃドメインを含んでおり、そして前記癌の治療または緩和することは、（ａ）前記被験者において腫瘍増殖を抑制すること、（ｂ）前記被験者においてＢ細胞溶解を媒介すること、（ｃ）前記被験者においてＢ細胞癌を治療すること、（ｄ）前記被験者においてＣＤ２０発現が陽性の癌を治療すること、または（ｅ）前記被験者においてＣＤ２０を発現するメラノーマ癌を治療することを包含する、前記使用。
【請求項２】
請求項１の（ａ）における前記腫瘍増殖を抑制することは、（ｉ）腫瘍の成長を阻害すること、（ｉｉ）腫瘍のサイズを減少させること、または（ｉｉｉ）腫瘍の数を減少させることを包含する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
請求項１の（ｂ）における前記Ｂ細胞は、プレＢリンパ球、成熟リンパ球、またはＢ細胞非ホジキンリンパ腫細胞である、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
請求項１の（ｄ）における前記被験者は、残留癌を有することに基づいて選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記癌はリンパ種または白血病である、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記癌は、濾胞性リンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、Ｂ細胞リンパ芽球性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、瀰漫性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、ヘアリー細胞白血病及びバーキットリンパ腫からなる群から選択される、請求個１または５に記載の使用。
【請求項７】
前記被験者は、（ａ）抗ＣＤ２０単一特異性療法単独、または（ｂ）リツキシマブ単剤療法に対して抵抗性であるか、または不完全に反応する腫瘍に罹患している、請求項１ま
たは６に記載の使用。
【請求項８】
前記被験者は、二重特異的抗体の投与の少なくとも１日ないし１年前に、抗ＣＤ２０単一特異性抗体療法を受けている、請求項１、６または７に記載の使用。
【請求項９】
前記抗体は：
（ａ）インビトロアッセイで測定したときに、それがヒトＦｃγＲＩＩＢ、ヒトのＦｃγＲＩ及び／またはヒトのＦｃγＲＩＩＩに結合するよりも高い親和性で、ヒトＦｃγＲＩＩＡに結合することができる；
（ｂ）インビトロアッセイで測定したときに、該抗体がヒトＦｃγＲＩまたはヒトＦｃγＲＩＩＩに結合するよりも高い親和性で、ヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢに結合することができる；
（ｃ）ヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢの両方に特異的に結合し、且つインビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩ及びヒトＦｃγＲＩＩＩの各々に対して１μΜＫD未満の結合親和性を示す；
（ｄ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＢへの結合に比較して、ヒトＦｃγＲＩＩＡについてより高い結合親和性を示す；
（ｅ）ヒトＦｃγＲＩＩＡに結合し、インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＢに対するその結合に比較してより低いＫD値を示す；
（ｆ）２５℃においてヒトＦｃγＲＩＩＡに結合し、インビトロアッセイで測定したときに１０〜３０μＭのＫD値を有する；
（ｇ）２５℃においてヒトＦｃγＲＩＩＢに結合し、インビトロアッセイで測定したときに１００〜２５０μＭのＫD値を有する；
（ｈ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩに対して検出可能な結合親和性を僅かしか、または全く示さない；
（ｉ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＩに対して検出可能な結合親和性を僅かしか、または全く示さない；
（ｊ）インビトロアッセイにおけるＫDの測定により検出されたときに、ヒトＦｃγＲＩＩＡ＞ヒトＦｃγＲＩＩＢ＞ヒトＦｃγＲＩ＞＝ヒトＦｃγＲＩＩＩの序列での抗原に対する結合親和性を示す；または
（ｋ）インビトロアッセイにおけるＫDの測定により検出されたときに、ヒトＦｃγＲＩＩＡ＞ヒトＦｃγＲＩＩＢ＞ヒトＦｃγＲＩＩＩ＞＝ヒトＦｃγＲＩの序列での抗原に対する結合親和性を示す；
請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
請求項９の（ｊ）または（ｋ）における前記ヒトＦｃγＲＩＩＩは、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡまたはヒトＦｃγＲＩＩＩＢである、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記インビトロアッセイは、表面プラズモン共鳴アッセイである、請求項９または１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記抗体は：
（ａ）インビトロ細胞傷害性アッセイで測定したときに、野生型Ｆｃドメインを含む抗体に比較して低下した抗体依存性細胞障害性（ＡＤＣＣ）を示す；
（ｂ）無視できる抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を示し、または検出可能なＡＤＣＣを示さない；
（ｃ）インビトロ細胞傷害性アッセイで測定したときに、野生型Ｆｃドメインを含む抗体と比較して減少した補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を示す；
（ｄ）インビトロアッセイでの細胞溶解の測定により決定したときに、５０％未満の細胞傷害性を示す；
（ｅ）無視できる補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を示し、または検出可能なＣＤＣを示さない；
（ｆ）野生型Ｆｃドメインを含む抗体と比較して、ＮＫ細胞またはマクロファージのようなＦｃ受容体を有する細胞の減少したＴ細胞媒介性死滅を誘導する；または
（ｇ）野生型Ｆｃドメインを備えた抗体に比較して、ＮＫ細胞またはマクロファージのようなＦｃ受容体を有する細胞により媒介される減少したＴ細胞死滅を誘導する；
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】
前記二重特異的抗体は、キメラ重鎖定常（ＣＨ）領域を含み、
（ａ）前記キメラＣＨ領域はヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢに結合し；及び
（ｂ）前記キメラＣＨは、野生型ＣＨ領域を備えた抗体に比較して、より低い親和性または親和性なしで、ヒトＦｃγＲＩ及びヒトのＦｃγＲＩＩＩに結合する；
請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
前記二重特異的抗体は、キメラヒンジを含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
前記キメラヒンジは；
（ａ）位置２２８〜２３６（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ２下側ヒンジ部アミノ酸配列ＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５２）；
（ｂ）位置２１６〜２２７（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ１またはヒトＩｇＧ４上側ヒンジ部のアミノ酸配列；
（ｃ）キメラヒンジのアミノ酸配列ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５３）；または
（ｄ）キメラヒンジのアミノ酸配列ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５４）；
を含む、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記二重特異的抗体は：
（ａ）位置２３７〜３４０（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ４・ＣＨ２ドメインアミノ酸配列；
（ｂ）ヒトＩｇＧ１・ＣＨ３ドメインまたはヒトＩｇＧ４・ＣＨ３ドメイン由来のＣＨ３ドメイン；
（ｃ）ヒトＩｇＧ１・ＣＨ１ドメイン及びヒトＩｇＧ１・ＣＨ３ドメイン；または
（ｄ）ヒトＩｇＧ４・ＣＨ１ドメイン及びヒトＩｇＧ４・ＣＨ３ドメイン；
を含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
（ａ）前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１０を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｂ）前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｃ）前記第二の抗原結合性ドメインは、配列番号２を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｄ）ヒトＣＤ３に特異的に結合する前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１０を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列、及び配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｅ）ヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは、配列番号２を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列、及び配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｆ）前記第一の抗原結合性ドメイン（Ａ１）は、三つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ２は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｖｉ）Ａ１−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む；
（ｇ）ヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは（Ａ２）は、三つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は、配列番号４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ２は、配列番号６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は、配列番号８のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｖｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む；
または、
（ｈ）ヒトＣＤ３に特異的に結合する前記第一の抗原結合性ドメイン（Ａ１）は、三つの重鎖相補性決定領域（Ａ１−ＨＣＤＲ１、Ａ１−ＨＣＤＲ２、Ａ１−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ１−ＬＣＤＲ１、Ａ１−ＬＣＤＲ２、Ａ１−ＬＣＤＲ３）を含み、またヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは（Ａ２）は、三つの重鎖相補性決定領域（Ａ２−ＨＣＤＲ１、Ａ２−ＨＣＤＲ２、Ａ２−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ２−ＬＣＤＲ１、Ａ２−ＬＣＤＲ２、Ａ２−ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ２は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、
（ｖｉ）Ａ１−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含み
（ｖｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は、配列番号４のアミノ酸配列を含み、
（ｖｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ２は、配列番号６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｘ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は、配列番号８のアミノ酸配列を含み、
（ｘ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｘｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｘｉｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む；
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１８】
前記第一の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ３への結合について、以下の：
（ａ）三つの重鎖相補性決定領域（Ａ１−ＨＣＤＲ１、Ａ１−ＨＣＤＲ２及びＡ１−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ１−ＬＣＤＲ１、Ａ１−ＬＣＤＲ２及びＡ１−ＬＣＤＲ３）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、ここで（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は配列番号１２のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ａ１−ＣＤＲ２は配列番号１４のアミノ酸配列を含み、（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は配列番号１６のアミノ酸配列を含み、（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は配列番号２０のアミノ酸配列を含み、（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ
２は配列番号２２のアミノ酸配列を含み、また（ｖｉ）Ａ１−ＣＤＲ３は配列番号２４のアミノ酸配列を含む；もしくは
（ｂ）（ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）；
を含む、基準の抗原結合タンパク質と競合し、
または、
前記第二の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ２０への結合について、以下の：
（ｃ）三つの重鎖相補性決定領域（Ａ２−ＨＣＤＲ１、Ａ２−ＨＣＤＲ２及びＡ２−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ２−ＬＣＤＲ１、Ａ２−ＬＣＤＲ２及びＡ２−ＬＣＤＲ３）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、ここで（ｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は配列番号４のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ａ２−ＣＤＲ２は配列番号６のアミノ酸配列を含み、（ｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を含み、（ｉｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は配列番号２０のアミノ酸配列を含み、（ｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は配列番号２２のアミノ酸配列を含み、また（ｖｉ）Ａ２−ＣＤＲ３は配列番号２４のアミノ酸配列を含む；もしくは
（ｄ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）；
を含む、基準の抗原結合性タンパク質と競合し、
または、
前記第一の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ３への結合について、（ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、また前記第二の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ２０への結合について、（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む、基準の抗原結合性タンパク質と競合する；
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１９】
前記抗体は：
（ａ）ヒトＣＤ３を発現するヒト細胞及びカニクイザルＣＤ３を発現するカニクイザル細胞に結合する；
（ｂ）ヒトＴ細胞及びカニクイザルＴ細胞に結合する；
（ｃ）ヒトＣＤ２０を発現するヒト細胞に結合する；
（ｄ）ヒトＢ細胞に結合する；
（ｅ）１×１０-12Ｍ〜１×１０-6ＭのＥＣ50値で、ＣＤ３を発現するヒトＴ細胞に結合する；
（ｆ）１×１０-9Ｍ〜１×１０-8ＭのＥＣ50値で、ＣＤ３を発現するヒトＴ細胞に結合する；
（ｇ）１×１０-12Ｍ〜１×１０-6ＭのＥＣ50値で、ＣＤ２０を発現するヒトＢ細胞に結合する；
（ｈ）１×１０-9Ｍ〜１×１０-8ＭのＥＣ50値で、ＣＤ２０を発現するヒトＢ細胞に結合する；または
（ｉ）抗ＣＤ２０に媒介される細胞傷害性に対して耐性または不応性であるヒトＢ細胞の、Ｔ細胞に媒介された細胞傷害性を増強する；
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２０】
ヒトＣＤ３に結合する第一の抗原結合性ドメインと、ヒトＣＤ２０に結合する第二の抗原結合性ドメインと、第一及び第二の抗原結合性ドメインのそれぞれに繋がれたキメラＦｃドメインを含む、二重特異的抗体。
【請求項２１】
前記抗体は：
（ａ）インビトロアッセイで測定したときに、それがヒトＦｃγＲＩＩＢ、ヒトのＦｃγＲＩ及び／またはヒトのＦｃγＲＩＩＩに結合するよりも高い親和性で、ヒトＦｃγＲＩＩＡに結合することができる；
（ｂ）インビトロアッセイで測定したときに、該抗体がヒトＦｃγＲＩまたはヒトＦｃγＲＩＩＩに結合するよりも高い親和性で、ヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢに結合することができる；
（ｃ）ヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢの両方に特異的に結合し、且つインビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩ及びヒトＦｃγＲＩＩＩの各々に対して１μΜＫD未満の結合親和性を示す；
（ｄ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＢへの結合に比較して、ヒトＦｃγＲＩＩＡについてより高い結合親和性を示す；
（ｅ）ヒトＦｃγＲＩＩＡに結合し、インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＢに対するその結合に比較してより低いＫD値を示す；
（ｆ）２５℃においてヒトＦｃγＲＩＩＡに結合し、インビトロアッセイで測定したときに１０〜３０μＭのＫD値を有する；
（ｇ）２５℃においてヒトＦｃγＲＩＩＢに結合し、インビトロアッセイで測定したときに１００〜２５０μＭのＫD値を有する；
（ｈ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩに対して検出可能な結合親和性を僅かしか、または全く示さない；
（ｉ）インビトロアッセイで測定したときに、ヒトＦｃγＲＩＩＩに対して検出可能な結合親和性を僅かしか、または全く示さない；
（ｊ）インビトロアッセイにおけるＫDの測定により検出されたときに、ヒトＦｃγＲＩＩＡ＞ヒトＦｃγＲＩＩＢ＞ヒトＦｃγＲＩ＞＝ヒトＦｃγＲＩＩＩの序列での抗原に対する結合親和性を示す；または
（ｋ）インビトロアッセイにおけるＫDの測定により検出されたときに、ヒトＦｃγＲＩＩＡ＞ヒトＦｃγＲＩＩＢ＞ヒトＦｃγＲＩＩＩ＞＝ヒトＦｃγＲＩの序列での抗原に対する結合親和性を示す；
請求項２０に記載の二重特異的抗体。
【請求項２２】
請求項２１の（ｊ）または（ｋ）における前記ヒトＦｃγＲＩＩＩは、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡまたはヒトＦｃγＲＩＩＩＢである、請求項２１に記載の二重特異的抗体。
【請求項２３】
前記インビトロアッセイは、表面プラズモン共鳴アッセイである、請求項２１または２２に記載の二重特異的抗体。
【請求項２４】
前記抗体は：
（ａ）インビトロ細胞傷害性アッセイで測定したときに、野生型Ｆｃドメインを含む抗体に比較して低下した抗体依存性細胞障害性（ＡＤＣＣ）を示す；
（ｂ）無視できる抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を示し、または検出可能なＡＤＣＣを示さない；
（ｃ）インビトロ細胞傷害性アッセイで測定したときに、野生型Ｆｃドメインを含む抗体と比較して減少した補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を示す；
（ｄ）インビトロアッセイでの細胞溶解の測定により決定したときに、５０％未満の細胞傷害性を示す；
（ｅ）無視できる補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を示し、または検出可能なＣＤＣを示さない；
（ｆ）野生型Ｆｃドメインを含む抗体と比較して、ＮＫ細胞またはマクロファージのようなＦｃ受容体を有する細胞の減少したＴ細胞媒介性死滅を誘導する；または
（ｇ）野生型Ｆｃドメインを備えた抗体に比較して、ＮＫ細胞またはマクロファージのようなＦｃ受容体を有する細胞により媒介される減少したＴ細胞死滅を誘導する；
請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項２５】
第一の抗原結合性ドメイン、第二の抗原結合性ドメイン、及びキメラ重鎖定常（ＣＨ）領域を含む二重特異的抗体であって、
（ａ）前記第一の抗原結合性ドメインはＣＤ３に結合し、
（ｂ）前記第二の抗原結合性ドメインはＣＤ２０に結合し、
（ｃ）前記キメラＣＨ領域はヒトＦｃγＲＩＩＡ及びヒトＦｃγＲＩＩＢに結合し、及び
（ｄ）前記決キメラＣＨ領域は、野生型ＣＨ領域を備えた抗体に比較して、より低い親和性または親和性なしで、ヒトＦｃγＲＩ及びヒトのＦｃγＲＩＩＩに結合する、
前記二重特異的抗体。
【請求項２６】
キメラヒンジを含む、請求項２０〜２５のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項２７】
前記キメラヒンジは：
（ａ）位置２２８〜２３６（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ２下側ヒンジ部アミノ酸配列ＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５２）；
（ｂ）位置２１６〜２２７（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ１またはヒトＩｇＧ４上側ヒンジ部アミノ酸配列；
（ｃ）キメラヒンジのアミノ酸配列ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５３）；または
（ｄ）キメラヒンジのアミノ酸配列ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡ（配列番号５４）；
を含む、請求項２６に記載の二重特異的抗体。
【請求項２８】
前記二重特異的抗体は：
（ａ）位置２３７〜３４０（ＥＵ番号付け）のヒトＩｇＧ４・ＣＨ２ドメインアミノ酸配列；
（ｂ）ヒトＩｇＧ１・ＣＨ３ドメインまたはヒトＩｇＧ４・ＣＨ３ドメイン由来のＣＨ３ドメイン；
（ｃ）ヒトＩｇＧ１・ＣＨ１ドメイン及びヒトＩｇＧ１・ＣＨ３ドメイン；または
（ｄ）ヒトＩｇＧ４・ＣＨ１ドメイン及びヒトＩｇＧ４・ＣＨ３ドメイン；
を含む、請求項２０〜２７のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項２９】
（ａ）前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１０を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｂ）前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｃ）前記第二の抗原結合性ドメインは、配列番号２を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｄ）ヒトＣＤ３に特異的に結合する前記第一の抗原結合性ドメインは、配列番号１０を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列、及び配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｅ）ヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは、配列番号２を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）アミノ酸配列、及び配列番号１８を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）アミノ酸配列を含む；
（ｆ）前記第一の抗原結合性ドメイン（Ａ１）は、三つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ２は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｖｉ）Ａ１−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む；
（ｇ）ヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは（Ａ２）は、三つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は、配列番号４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ２は、配列番号６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は、配列番号８のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｖｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む；
または、
（ｈ）ヒトＣＤ３に特異的に結合する前記第一の抗原結合性ドメイン（Ａ１）は、三つの重鎖相補性決定領域（Ａ１−ＨＣＤＲ１、Ａ１−ＨＣＤＲ２、Ａ１−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ１−ＬＣＤＲ１、Ａ１−ＬＣＤＲ２、Ａ１−ＬＣＤＲ３）を含み、またヒトＣＤ２０に特異的に結合する前記第二の抗原結合性ドメインは（Ａ２）は、三つの重鎖相補性決定領域（Ａ２−ＨＣＤＲ１、Ａ２−ＨＣＤＲ２、Ａ２−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ２−ＬＣＤＲ１、Ａ２−ＬＣＤＲ２、Ａ２−ＬＣＤＲ３）を含み、
ここで、
（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は、配列番号１２のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ２は、配列番号１４のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、
（ｖｉ）Ａ１−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含み
（ｖｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は、配列番号４のアミノ酸配列を含み、
（ｖｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ２は、配列番号６のアミノ酸配列を含み、
（ｉｘ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は、配列番号８のアミノ酸配列を含み、
（ｘ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み、
（ｘｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は、配列番号２２のアミノ酸配列を含み、及び
（ｘｉｉ）Ａ２−ＬＣＤＲ３は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む
請求項２０〜２８のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項３０】
前記第一の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ３への結合について、以下の：
（ａ）三つの重鎖相補性決定領域（Ａ１−ＨＣＤＲ１、Ａ１−ＨＣＤＲ２及びＡ１−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ１−ＬＣＤＲ１、Ａ１−ＬＣＤＲ２及びＡ１−ＬＣＤＲ３）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、ここで（ｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ１は配列番号１２のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ａ１−ＣＤＲ２は配列番号１４のアミノ酸配列を含み、（ｉｉｉ）Ａ１−ＨＣＤＲ３は配列番号１６のアミノ酸配列を含み、（ｉｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ１は配列番号２０のアミノ酸配列を含み、（ｖ）Ａ１−ＬＣＤＲ２は配列番号２２のアミノ酸配列を含み、また（ｖｉ）Ａ１−ＣＤＲ３は配列番号２４のアミノ酸配列を含む；もしくは
（ｂ）（ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）；
を含む、基準の抗原結合タンパク質と競合し、
または、
前記第二の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ２０への結合について、以下の：
（ｃ）三つの重鎖相補性決定領域（Ａ２−ＨＣＤＲ１、Ａ２−ＨＣＤＲ２及びＡ２−ＨＣＤＲ３）及び三つの軽鎖相補性決定領域（Ａ２−ＬＣＤＲ１、Ａ２−ＬＣＤＲ２及びＡ２−ＬＣＤＲ３）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、ここで（ｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ１は配列番号４のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）Ａ２−ＣＤＲ２は配列番号６のアミノ酸配列を含み、（ｉｉｉ）Ａ２−ＨＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を含み、（ｉｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ１は配列番号２０のアミノ酸配列を含み、（ｖ）Ａ２−ＬＣＤＲ２は配列番号２２のアミノ酸配列を含み、また（ｖｉ）Ａ２−ＣＤＲ３は配列番号２４のアミノ酸配列を含む；もしくは
（ｄ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）；
を含む、基準の抗原結合性タンパク質と競合し、
または、
前記第一の抗原結合性ドメインはヒトＣＤ３への結合について、（ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び（ｉｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む基準の抗原結合タンパク質と競合し、また前記第二の抗原結合性ドメインはヒトＣＤ２０への結合について、（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、及び配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む、基準の抗原結合性タンパク質と競合する；
請求項２０〜２８のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項３１】
前記抗体は：
（ａ）ヒトＣＤ３を発現するヒト細胞及びカニクイザルＣＤ３を発現するカニクイザル細胞に結合する；
（ｂ）ヒトＴ細胞及びカニクイザルＴ細胞に結合する；
（ｃ）ヒトＣＤ２０を発現するヒト細胞に結合する；
（ｄ）ヒトＢ細胞に結合する；
（ｅ）１×１０-12Ｍ〜１×１０-6ＭのＥＣ50値で、ＣＤ３を発現するヒトＴ細胞に結合する；
（ｆ）１×１０-9Ｍ〜１×１０-8ＭのＥＣ50値で、ＣＤ３を発現するヒトＴ細胞に結合する；
（ｇ）１×１０-12Ｍ〜１×１０-6ＭのＥＣ50値で、ＣＤ２０を発現するヒトＢ細胞に結合する；
（ｈ）１×１０-9Ｍ〜１×１０-8ＭのＥＣ50値で、ＣＤ２０を発現するヒトＢ細胞に結合する；または
（ｉ）抗ＣＤ２０に媒介される細胞傷害性に対して耐性または不応性であるヒトＢ細胞の、Ｔ細胞に媒介された細胞傷害性を増強する；
請求項２０〜３０のいずれか１項に記載の二重特異的抗体。
【請求項３２】
被験者における癌を治療または緩和するための医薬の製造における請求項２０〜３１のいずれか１項に記載の二重特異的抗体の使用であって、前記二重特異的抗体は、ヒトＣＤ３に結合する第一の抗原結合性ドメインと、ヒトＣＤ２０に結合する第二の抗原結合性ドメインと、前記第一及び第二の抗原結合性ドメインの各々に繋がれたキメラＦｃドメインを含み、また前記癌を治療または緩和することは、（ａ）前記被験者において腫瘍増殖を抑制すること、（ｂ）前記被験者においてＢ細胞溶解を媒介すること、（ｃ）前記被験者においてＢ細胞癌を治療すること、（ｄ）前記被験者においてＣＤ２０発現が陽性の癌を治療すること、または（ｅ）前記被験者においてＣＤ２０を発現するメラノーマ癌を治療することを包含する、前記使用。
【請求項３３】
請求項２０〜３１のいずれか１項に記載の二重特異的抗体を作製する方法であって、前記方法は、以下の：
(ａ) 宿主細胞に、（ｉ）抗体の軽鎖をコードする核酸分子であって、該核酸分子は配列番号１８を含むＬＣＶＲをコードするヌクレオチド配列、及びＩｇの定常ＣL領域をコードするヌクレオチド配列を含み、また前記抗体のＬＣＶＲ領域をコードする前記ヌクレオチド配列はＩｇのＣL領域をコードするヌクレオチド配列に動作可能に連結される核酸分子をトランスフェクトすること;
(ｂ) 工程（ａ）の前記宿主細胞に、（ｉ）前記抗体の第一の重鎖をコードする核酸分子であって、該核酸分子は配列番号１０を含むＨＣＶＲをコードするヌクレオチド配列及びＩｇＧのキメラＣH領域をコードするヌクレオチド配列を含み、ここでの前記ＣH領域をコードするヌクレオチド配列は配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０または配列番号３２をコードするヌクレオチド配列を含み、ここでの前記ＨＣＶＲをコードするヌクレオチド配列は、前記ＣH領域をコードするヌクレオチド配列に動作可能に連結される核酸分子と、（ｉｉ）前記抗体の第二の重鎖をコードする核酸分子であって、該核酸分子は配列番号２を含むＨＣＶＲをコードするヌクレオチド配列及びＩｇＧのキメラＣH領域をコードするヌクレオチド配列を含み、ここでの前記ＣH領域をコードするヌクレオチド配列は配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０及び配列番号３２をコードするヌクレオチド配列を含み、前記ＨＣＶＲをコードするヌクレオチド配列は前記ＣH領域をコードするヌクレオチド配列に動作可能に連結される核酸分子をトランスフェクトすること;
ならびに
(ｃ) 前記宿主細胞内で（ａ）及び（ｂ）の核酸分子を共発現させることによって前記抗体を作製すること；
を含む、前記方法。
【請求項３４】
更に、前記工程（ｂ）の宿主細胞を培養し、ここで前記抗体が細胞培養培地の中に分泌されること；及び該抗体を前記細胞培養培地から単離すること、を含む、請求項３３に記載の方法。