【手続補正書】
【提出日】平成30年3月20日(2018.3.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液脳関門シャトルであって、
（ａ）少なくとも実質的に５Ｃ１抗体由来のＣＤＲを有する抗体を含む脳エフェクターエンティティー、ここで、５Ｃ１は配列番号９を含むアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４を含むアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を特徴とするマウス抗体である；および
（ｂ）血液脳関門受容体に結合する一価の結合エンティティー；
を含み、前記脳エフェクターエンティティーが前記一価の結合エンティティーと連結されている、血液脳関門シャトル。
【請求項２】
脳エフェクターエンティティー抗体が、配列番号１０、１１、および１２のアミノ酸配列をそれぞれ有する３つの重鎖ＣＤＲと、配列番号２５、２６、および２７のアミノ酸配列をそれぞれ有する３つの軽鎖ＣＤＲとを含む、請求項１に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３】
血液脳関門シャトルであって、
（ａ）ヒトα−シヌクレインに結合する抗体を含む脳エフェクターエンティティー、ここで、全長ヒトα−シヌクレインの残基１１８−１２６のアラニンスキャニング変異導入法は、残基１２０、１２１、および１２２のそれぞれが残基１２３および１２４のそれぞれよりも結合に寄与し、残基１２３および１２４のそれぞれが残基１１８、１１９、１２５および１２６のそれぞれよりも結合に寄与していることを示す；および
（ｂ）血液脳関門受容体に結合する一価の結合エンティティー；
を含み、前記脳エフェクターエンティティーが前記一価の結合エンティティーと連結されている、血液脳関門シャトル。
【請求項４】
脳エフェクターエンティティー抗体が、本質的に配列番号１の残基１２０−１２２からなり、かつ配列番号１の残基１１８−１１９を除くエピトープでヒトα−シヌクレインに結合する、請求項１−３のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項５】
脳エフェクターエンティティー抗体が、配列番号１の残基１２０−１２４からなるエピトープでヒトα−シヌクレインに結合する、請求項１−３のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項６】
脳エフェクターエンティティー抗体が、キメラ抗体、ベニヤ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体である、請求項１−５のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項７】
脳エフェクターエンティティー抗体がヒト化抗体である、請求項１−６のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項８】
脳エフェクターエンティティー抗体のアイソタイプがヒトＩｇＧ１である、請求項１−７のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項９】
脳エフェクターエンティティー抗体が、定常領域に少なくとも１つ変異を有する、請求項１−８のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１０】
変異が、定常領域による補体結合または活性化を減少させる、請求項９に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１１】
脳エフェクターエンティティー抗体が、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、またはｓｃＦｖである、請求項１−１０のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１２】
血液脳関門シャトルであって、
（ａ）Ｈ４（配列番号１７）に少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域およびＬ３（配列番号３１）に少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域を含む抗体を含む、脳エフェクターエンティティーであって、前記抗体がヒトα−シヌクレインに特異的に結合する、脳エフェクターエンティティー；および
（ｂ）血液脳関門受容体に結合する一価の結合エンティティー；
を含み、前記脳エフェクターエンティティーが前記一価の結合エンティティーと連結されている、血液脳関門シャトル。
【請求項１３】
脳エフェクターエンティティー抗体が、配列番号９の３つのＫａｂａｔ ＣＤＲと、配列番号２４の３つのＫａｂａｔ ＣＤＲとを含む、請求項１２に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１４】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｈ１１、Ｈ２７、Ｈ３０、Ｈ４８、およびＨ７３の少なくとも１つが、Ｌ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、およびＫによりそれぞれ占められ、および脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｌ１２およびＬ１４の少なくとも１つが、Ｓにより占められている、請求項１３に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１５】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｈ１１、Ｈ２７、Ｈ３０、Ｈ４８、およびＨ７３が、それぞれＬ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、およびＫにより占められ、脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｌ１２およびＬ１４が、Ｓにより占められている、請求項１４に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１６】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｈ６７、Ｈ６９、およびＨ９４の少なくとも１つが、Ａ、Ｌ、およびＳによりそれぞれ占められている、請求項１３−１５のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１７】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｈ６７、Ｈ６９、およびＨ９４が、Ａ、Ｌ、およびＳによりそれぞれ占められている、請求項１６に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項１８】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｈ９４がＳによって占められている、請求項１６の血液脳関門シャトル。
【請求項１９】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｌ２、Ｌ４９、およびＬ８７の少なくとも１つが、Ｖ、Ｎ、およびＦによりそれぞれ占められている、請求項１３−１５のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２０】
脳エフェクターエンティティー抗体の位置Ｌ２、Ｌ４９、およびＬ８７がＶ、Ｎ、およびＦによりそれぞれ占められている、請求項１９に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２１】
脳エフェクターエンティティー抗体が、Ｈ４（配列番号１７）に少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域と、Ｌ３（配列番号３１）に少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域とを含む、請求項１２−２０のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２２】
脳エフェクターエンティティー抗体の成熟重鎖可変領域および成熟軽鎖可変領域のＣＤＲにおける、それぞれＨ４（配列番号１７）およびＬ３（配列番号３１）のＣＤＲとのいずれの違いも、位置Ｈ６０−Ｈ６５に存在する、請求項１２−２１のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２３】
脳エフェクターエンティティー抗体の成熟重鎖可変領域が、Ｈ４と名付けられたアミノ酸配列（配列番号１７）を有し、脳エフェクターエンティティー抗体の成熟軽鎖可変領域がＬ３と名付けられたアミノ酸配列（配列番号３１）を有する、請求項１２に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２４】
脳エフェクターエンティティー抗体の成熟重鎖可変領域がＨ５と名付けられたアミノ酸配列（配列番号１８）を有し、脳エフェクターエンティティー抗体の成熟軽鎖可変領域がＬ３と名付けられたアミノ酸配列（配列番号３１）を有する、請求項１２に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２５】
一価の結合エンティティーが、血液脳関門受容体リガンド、抗体フラグメント、または他のポリペプチドを含む、請求項１−２４のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２６】
一価の結合エンティティーが、ｓｃＦｖ、Ｆｖ、ｓｃＦａｂ、ｓＦａｂ、またはＶＨＨである抗体フラグメントを含む、請求項２５に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２７】
抗体フラグメントが、ｓＦａｂである、請求項２６に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２８】
血液脳関門受容体が、トランスフェリン受容体、インスリン受容体、インスリン様成長因子受容体、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質８、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質１、またはヘパリン結合性上皮細胞成長因子様成長因子である、請求項１−２７のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項２９】
血液脳関門受容体がトランスフェリン受容体である、請求項２８に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３０】
一価の結合エンティティーが、トランスフェリン受容体に特異的に結合するｓＦａｂを含む、請求項１−２９のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３１】
ｓＦａｂが、配列番号４３、配列番号４４、および／または配列番号４５内のエピトープに結合する、請求項３０に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３２】
脳エフェクターエンティティーが、第一のリンカーにより一価の結合エンティティーに連結されている、請求項１−３１のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３３】
第一のリンカーがペプチドリンカーである、請求項３２に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３４】
ペプチドリンカーが、少なくとも２０のアミノ酸長を有する、請求項３３に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３５】
ペプチドリンカーが２５〜５０のアミノ酸長を有する、請求項３４に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３６】
ペプチドリンカーが、配列番号４１のアミノ酸配列を有する、請求項３４に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３７】
一価の結合エンティティーが、第一のリンカーにより、脳エフェクターエンティティー抗体の重鎖のＣ末端に連結されている、請求項３２−３６のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３８】
一価の結合エンティティーがＣＨ２−ＣＨ３ Ｉｇエンティティーおよび血液脳関門受容体に特異的に結合するｓＦａｂを含み、前記ｓＦａｂが前記ＣＨ２−ＣＨ３ ＩｇエンティティーのＣ末端に連結されている、請求項１−３７のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項３９】
（ａ）一価の結合エンティティーが、ＣＨ２−ＣＨ３ Ｉｇエンティティーおよび血液脳関門受容体に特異的に結合するｓＦａｂを含み；
（ｂ）第一のリンカーによりＣＨ２−ＣＨ３ ＩｇドメインのＮ末端が脳エフェクターエンティティーに連結され；かつ
（ｃ）第二のリンカーによりＣＨ２−ＣＨ３ ＩｇドメインのＣ末端がｓＦａｂに連結されている、
請求項１−３８のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４０】
ＣＨ２−ＣＨ３ Ｉｇエンティティーが、ＣＨ２−ＣＨ３ ＩｇＧエンティティーである、請求項３８または３９に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４１】
脳エフェクターエンティティー抗体が重鎖のＦｃ領域を含み、一価の結合エンティティーが前記重鎖のＦｃ領域のＣ末端と連結されている、請求項１−１０または１２−２９のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４２】
脳エフェクターエンティティー抗体が２つの重鎖を含み、一価の結合エンティティーが前記重鎖の一方のＦｃ領域のＣ末端とのみ連結されている、請求項４１に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４３】
脳エフェクターエンティティー抗体が、第一および第二の二量体形成モジュールを含むヘテロ二量体化重鎖を含み、前記第一および第二の二量体形成モジュールの一方のみが一価の結合エンティティーに連結されている、請求項４１に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４４】
第一の二量体形成モジュールがノブを含み、第二の二量体形成モジュールが前記ノブを受けるホールを含む、請求項４３に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４５】
（ａ）脳エフェクターエンティティー抗体がＦｃ領域を含むＩｇＧ重鎖を含み；
（ｂ）一価の結合エンティティーがｓＦａｂを含み；
（ｃ）脳エフェクターエンティティー抗体重鎖のＦｃ領域のＣ末端がｓＦａｂの可変軽鎖ドメインのＮ末端に連結されており；かつ
（ｄ）ｓＦａｂのＣ−κ軽鎖ドメインのＣ末端が、ｓＦａｂの可変重鎖ドメインのＮ末端に連結されている、
請求項４１−４４のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４６】
血液脳関門シャトルであって：
（ａ）配列番号５９を含むアミノ酸配列を有する軽鎖と、配列番号５３および６９をそれぞれ含む、または配列番号５５および７０をそれぞれ含むアミノ酸配列を有する第一および第二の二量体形成モジュールを伴うヘテロ二量体化重鎖とを伴う抗体を含む、脳エフェクターエンティティー；
（ｂ）第一のリンカー；および
（ｃ）配列番号６４を含むアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号６３を含むアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域とを含む８Ｄ３−ｓｃＦａｂを含む一価の結合エンティティーであって、前記８Ｄ３−ｓｃＦａｂの重鎖および軽鎖が第二のリンカーにより連結されている、一価の結合エンティティー；
を含み、前記脳エフェクターエンティティー抗体の第一および第二の二量体形成モジュールの一方のみが、第一のリンカーにより一価の結合エンティティーと連結されている、血液脳関門シャトル。
【請求項４７】
８Ｄ３−ｓｃＦａｂが、それぞれ配列番号６２および６１を含むアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖を含む、請求項４６に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４８】
第一のリンカーが、脳エフェクターエンティティー抗体の重鎖のＣ末端を、一価の結合エンティティーのＮ末端と連結する、請求項４６または４７に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項４９】
第一のリンカーが配列番号４１、４２、または７３を含むアミノ酸配列を有する、請求項４６−４８のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトル。
【請求項５０】
請求項１−４９のいずれか一項で規定される血液脳関門シャトル、および医薬上許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項５１】
請求項１−４９のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトルをコードする核酸。
【請求項５２】
配列番号５３、５７、および／または５９を含むアミノ酸配列をコードする核酸。
【請求項５３】
配列番号５５、５８、および／または５９を含むアミノ酸配列をコードする核酸。
【請求項５４】
請求項５１−５３のいずれか一項に記載の核酸を含む、組換え発現ベクター。
【請求項５５】
配列番号５３、５７、および５９をそれぞれ含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む、３つの組換え発現ベクターを含む、遺伝子導入混合物。
【請求項５６】
配列番号５５、５８、および５９をそれぞれ含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む、３つの組換え発現ベクターを含む、遺伝子導入混合物。
【請求項５７】
請求項５４に記載の組換え発現ベクター、または請求項５５−５６のいずれか一項に記載の遺伝子導入混合物により形質転換された宿主細胞。
【請求項５８】
患者のシヌクレイン病を治療または予防する方法であって、請求項１−４９のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトルの効果的な投与計画を、患者に施すことを含む方法。
【請求項５９】
シヌクレイン病がレビー小体病である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
患者が、ＲＥＭ睡眠行動障害（ＲＢＤ）を有する、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
シヌクレイン病を有するか、もしくはそのリスクがある患者のα−シヌクレインの凝集を抑制するか、またはα−シヌクレイン凝集体を減らす方法であって、患者に請求項１−４９のいずれか一項に記載の血液脳関門シャトルを有効量投与することを含む方法。
【請求項６２】
シヌクレイン病がパーキンソン病である、請求項５８−６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
シヌクレイン病が、多系統萎縮症（ＭＳＡ）またはレビー小体型認知症（ＤＬＢ）である、請求項５８、６０、または６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
患者の認知機能の低下を防ぐ、請求項５８−６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
神経突起の、および／または軸索の、α−シヌクレイン凝集体を減らす、請求項５８−６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
患者の神経突起のジストロフィーを減らす、請求項５８−６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
シナプスの、および／または樹状突起の密度を保つ、請求項５８−６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
（ａ）配列番号５９を含むアミノ酸配列をそれぞれ有する、一対の軽鎖；
（ｂ）配列番号５３を含むアミノ酸配列を有する第一の重鎖；および
（ｃ）配列番号５７を含むアミノ酸配列を有する第二の重鎖；
を含み、第一の重鎖と第二の重鎖がヘテロ二量体を形成する抗体。
【請求項６９】
（ａ）配列番号５９を含むアミノ酸配列をそれぞれ有する、一対の軽鎖；
（ｂ）配列番号５５を含むアミノ酸配列を有する第一の重鎖；および
（ｃ）配列番号５８を含むアミノ酸配列を有する第二の重鎖；
を含み、第一の重鎖と第二の重鎖がヘテロ二量体を形成する抗体。