【手続補正書】
【提出日】平成30年1月16日(2018.1.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（a）式V1-L1-V2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖であって、式中、V1およびV2は免疫グロブリン可変領域であり、L1およびL2はリンカーであり、L2は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CH1は第1の免疫グロブリン重鎖定常領域である、第1のポリペプチド鎖；ならびに
（b）式V3-L3-V4-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖であって、式中、V3およびV4は免疫グロブリン可変領域であり、L3およびL4はリンカーであり、L4は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CLは免疫グロブリン軽鎖定常領域である、第2のポリペプチド鎖
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
V1およびV3がVL領域でありかつV2およびV4がVH領域であるか、またはV1およびV3がVH領域でありかつV2およびV4がVL領域であり；
V1およびV4の一方が、免疫グロブリン重鎖可変（VH）領域であり、もう一方が、免疫グロブリン軽鎖可変（VL）領域であり、V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV3の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）および（b）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含み；
V1、V2、V3、およびV4が、異なるアミノ酸配列を有し；
ヘテロ二量体性二重特異性抗体が、標的細胞および免疫エフェクター細胞に結合し、かつ／または免疫エフェクター細胞による標的細胞の細胞溶解を媒介する、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２】
（a）の第1のポリペプチド鎖および／または（b）の第2のポリペプチド鎖の半減期延長部分が、Fcポリペプチド鎖である、請求項1に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３】
標的細胞ががん細胞である、請求項1または2に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項４】
免疫エフェクター細胞がT細胞、NK細胞、マクロファージ、単球、または好中球である、請求項1〜3のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項５】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG Fcポリペプチド鎖であり、好ましくはヒトIgG1 Fcポリペプチド鎖、ヒトIgG2 Fcポリペプチド鎖、ヒトIgG3 Fcポリペプチド鎖、もしくはヒトIgG4 Fcポリペプチド鎖、または、配列のアミノ酸100個あたり10個以下の単一アミノ酸の欠失、挿入、もしくは置換を含むその変異体である、請求項1〜4のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項６】
L1およびL3が、それぞれ12アミノ酸長以下であるか、好ましくはそれぞれ10アミノ酸長以下である、請求項1〜5のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項７】
エフェクター細胞が、ヒトTCR-CD3複合体の一部であるエフェクター細胞タンパク質を発現し、エフェクター細胞タンパク質が、好ましくはCD3ε鎖（CD3ε）である、請求項1〜6のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項８】
第1のポリペプチド鎖および第2のポリペプチド鎖が、それぞれFcポリペプチド鎖を含み、
各Fcポリペプチド鎖が、少なくとも1つの電荷対置換（charge pair substitution）を含む、
請求項1〜7のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項９】
第1のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第2のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含むか、または
第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第1のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含む、
請求項8に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１０】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、Fcγ受容体（FcγR）の結合を阻害する1つまたは複数の改変を含む、請求項8または9に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１１】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、改変L234A、L235A、および／または位置297における任意の置換を含む、請求項10に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１２】
半減期を延長するFc改変を含む、請求項8〜11のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１３】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、EUナンバリングシステムによる残基384と385との間に挿入部を含み、該挿入部がSEQ ID NO:54〜65のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、請求項12に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１４】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分に、ADCCを増強する改変を含む、請求項8〜13のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１５】
（a）式VH1-L1-VL2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH2-L3-VL1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（b）式VL2-L1-VH1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL1-L3-VH2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（c）式VH2-L1-VL1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH1-L3-VL2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；ならびに
（d）式VL1-L1-VH2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL2-L3-VH1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖
からなる群より選択される2つのポリペプチド鎖を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
L1、L2、L3、およびL4が、リンカーであり；
L2およびL4が、存在するか、または存在せず；
VH1およびVL1が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、標的細胞に結合することができ；
VH2およびVL2が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、免疫エフェクター細胞に結合することができ；
VH1およびVH2が、異なるアミノ酸配列を有し；
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）〜（d）に記載された式によって表される領域から下流に半減期延長部分を含む、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１６】
第1および第2のポリペプチド鎖が、それぞれ、（a）〜（d）に記載された式を有するアミノ酸配列から下流にFcポリペプチド鎖を含む、請求項15に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１７】
SEQ ID NO:42、44、または82中の重鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列、ならびにSEQ ID NO:43、45、または83中の軽鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む、請求項1〜16のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１８】
SEQ ID NO:42、44、もしくは82のアミノ酸配列を含むVH領域、またはSEQ ID NO:42、44、もしくは82に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体；および
SEQ ID NO:43、45、もしくは83のアミノ酸配列を含むVL領域、またはSEQ ID NO:43、45、もしくは83に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体
を含む、請求項17に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１９】
請求項1〜18のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする1種または複数種の核酸。
【請求項２０】
請求項19に記載の核酸を含む、1種または複数種のベクター。
【請求項２１】
請求項19に記載の核酸または請求項20に記載のベクターを含有する、宿主細胞。
【請求項２２】
ヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする核酸を発現するような条件下で請求項21に記載の宿主細胞を培養する段階、および
細胞集団または細胞培養上清から抗体を回収する段階
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体を作製する方法。
【請求項２３】
医薬として使用するための請求項1〜18のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２４】
請求項1〜18のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む薬学的組成物。