【手続補正書】
【提出日】平成30年1月26日(2018.1.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１５】
参考文献
2017505621.tif 000001
2017505621.tif 000002
2017505621.tif 000003
（１）
高親和性ＴＣＲ、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞および／または目的ペプチドに特異的なＴＣＲを形成し得るＴ細胞受容体（ＴＣＲ）ポリペプチド鎖をコードする核酸を得る方法であって、
ａ．ＴＣＲを発現し得る細胞、および／またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞を含んでなる細胞集団に、ベイトＴＣＲポリペプチド鎖をコードするベイト核酸を形質導入すること、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖は、前記目的ペプチドと特異的に結合するカウンター鎖ＴＣＲポリペプチド鎖とともに親ＴＣＲを構成し得るものである；
ｂ．形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養すること；ならびに
ｃ．下記の１以上：
ｉ）工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から、前記目的ペプチドと選択的に結合する、ベイトＴＣＲポリペプチド鎖とプレイＴＣＲポリペプチド鎖を含んでなるＴＣＲを発現する組換え細胞を得ること；
ｉｉ）工程（ｃ）（ｉ）で得られた細胞から、プレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸を単離すること；および／または
ｉｉｉ）工程（ｃ）（ｉｉ）において単離された、単離されたプレイ核酸と、発現された際に高親和性ＴＣＲを提供するベイト核酸をペアとすること
を含んでなる、方法。
（２）
工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から、前記目的ペプチドと選択的に結合する、ベイトＴＣＲポリペプチド鎖とプレイＴＣＲポリペプチド鎖を含んでなるＴＣＲを発現する組換え細胞を得る工程が、形質導入されたベイトＴＣＲポリペプチド鎖を発現し、かつ、目的ペプチドと結合する細胞集団の１以上の細胞を単離することを含んでなる、（１）に記載の方法。
（３）
前記プレイ核酸が前記プレイ核酸をクローニングすることにより単離される、（１）〜（２）のいずれか一つに記載の方法。
（４）
前記プレイＴＣＲポリペプチド鎖が、対照ＴＣＲポリペプチドＣＤＲ３領域のＣＤＲ３領域、場合により親ＴＣＲにおける同族ポリペプチド鎖のＣＤＲ３領域、に比べて少なくとも１つのアミノ酸修飾を含んでなるＣＤＲ３領域を含んでなる、（１）〜（３）のいずれか一つに記載の方法。
（５）
前記方法が、
ｉ）ベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下でＴＣＲを発現し得る細胞またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞に、単離されたプレイ核酸およびベイト核酸を導入すること；ｉｉ）プレイＴＣＲポリペプチド鎖とベイトＴＣＲポリペプチド鎖とを含んでなるＴＣＲのアビディティーおよび／または親和性を測定すること；ならびに、ｉｉｉ）プレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸クローンを単離すること、ここで、前記ベイトＴＲポリペプチド鎖および前記プレイＴＣＲポリペプチド鎖は、対照ＴＣＲ、場合により親ＴＣＲに比べて目的ペプチドに対して増大したアビディティーおよび／または親和性を有するＴＣＲを構成するものである、
をさらに含んでなる、（１）〜（４）のいずれか一つに記載の方法。
（６）
カウンター鎖ＴＣＲポリペプチドとともに目的ペプチドに特異的なＴＣＲを構成するＴＣＲポリペプチド鎖をコードする核酸を得るための（１）〜（５）のいずれか一つに記載の方法であって、以下の工程：
ａ．ＴＣＲを発現し得る細胞、またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞を含んでなる細胞集団に、カウンター鎖ＴＣＲポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成するベイトＴＣＲポリペプチド鎖であって、場合によりＴＣＲαおよびＴＣＲβポリペプチド鎖から選択されるＴＣＲポリペプチド鎖をコードするベイト核酸を形質導入し、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖は、前記目的ペプチドを認識するＴ細胞から従前に単離されたものであり、
ｂ．前記形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養し、
ｃ．工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する細胞を得、かつ
ｄ．工程（ｃ）で得られた細胞から、前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸によりコードされるポリペプチドとともにＴＣＲを構成するプレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸を単離すること
を含んでなる、方法。
（７）
ＴＣＲを発現する組換え細胞を得る工程が、形質導入された細胞集団を、目的ペプチドを提示する抗原提示細胞とともに培養する工程を含んでなる、（１）〜（６）のいずれか一つに記載の方法。
（８）
形質導入された細胞集団から目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を得る工程が、セルソーティング、場合により蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を使用することを含んでなる、（１）〜（７）のいずれか一つに記載の方法。
（９）
目的ペプチドに特異的なＴＣＲをコードする核酸のペアを得るための（１）に記載の方法であって、以下の工程：
ａ．細胞集団に、ＴＣＲを構成するベイトポリペプチド鎖の群から選択されるベイトＴＣＲポリペプチド鎖をコードするベイト核酸を形質導入すること、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖は、目的ペプチドを認識するＴ細胞から発現され、従前に単離されたものであり、前記細胞集団は、ＴＣＲを発現し得る細胞、またはＴＣＲを発現する細胞に分化し得る細胞を含んでなるものであり、
ｂ．前記形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養し、
ｃ．工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を得、
ｄ．工程（ｃ）で得られた細胞から、前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸によりコードされるポリペプチドとともにＴＣＲを構成するポリペプチドをコードするプレイ核酸を単離し、かつ
ｅ．工程（ａ）で前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸と工程（ｄ）で単離されたプレイ核酸をペアとすること
を含んでなる、方法。
（１０）
工程（ｃ）で組換え細胞を得ることが、形質導入された細胞集団を、目的ペプチドを提示する抗原提示細胞とともに培養する工程を含んでなる、（１）〜（９）のいずれか一つに記載の方法。
（１１）
前記細胞集団が末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、場合によりＣＤ３リガンドで活性化されたＰＢＭＣの集団である、（１）〜（１０）のいずれか一つに記載の方法。
（１２）
工程（ａ）で前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸がＴＣＲα鎖またはＴＣＲβ鎖をコードする、（１）〜（１１）のいずれか一つに記載の方法。
（１３）
工程（ａ）で前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸が、ＴＣＲによるペプチド認識に主として寄与するＴＣＲ鎖をコードする、（１）〜（１２）のいずれか一つに記載の方法。
（１４）
形質導入が２回、３回、４回、５回および／または６回繰り返される、（１）〜（１３）のいずれか一つに記載の方法。
（１５）
プレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードする単離されたプレイ核酸がＴＣＲを発現し得る細胞、またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞に形質導入され、場合により、ここで、前記単離されたプレイ核酸は、プレイＴＣＲポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成するＴＣＲポリペプチド鎖をコードする核酸、場合によりベイトＴＣＲ核酸、と組み合わせて形質導入され、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を含んでなる形質導入された細胞集団を生産する、（１）〜（１４）のいずれか一つに記載の方法。
（１６）
細胞集団または細胞がまた、内在性ＴＣＲ鎖の発現を抑制するためのアンチセンス分子でも形質導入される、（１）〜（１５）のいずれか一つに記載の方法。
（１７）
形質導入された１以上の前記核酸、場合によりベイト核酸、のコドンが最適化される、（１）〜（１６）のいずれか一つに記載の方法。
（１８）
配列番号４、６、８、１０、１２、１４、５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜８６、８８〜９１、９４、９６、９８、１１２、１１４、１１６〜１２２から選択される配列および／または配列番号４、６、８、１０、１２、１４、５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜８６、８８〜９１、９４、９６、９８、１１２、１１４、１１６〜１２２から選択される配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する配列および／または配列番号３、５、７、９、１１、１３、５１、５３、５５、５７、５９、６１、９３、９５、９７、１１１、１１３、１１５のいずれか１つによりコードされる配列および／または３、５、７、９、１１、１３、５１、５３、５５、５７、５９、６１、９３、９５、９７、１１１、１１３、１１５から選択される配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含んでなり、ならびに、４、６、８、１０、１２、１４、５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜８６、８８〜９１、９４、９６、９８、１１２、１１４、１１６〜１２２から選択されるポリペプチドをコードするか、またはＣＤＲ領域もしくは非ＣＤＲ領域などのその一部を含んでなり、場合により、本明細書の配列から少なくとも１つのアミノ酸変異を含んでなるか、もしくはコードし、および／または本明細書のいずれかの核酸配列のコドン最適化型を含んでなる配列を含んでなる、単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド。
（１９）
相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含んでなり、前記ＣＤＲの配列が、
ＣＤＲ１：配列番号２０、２２、２４、２６、２８、３０、１００、１０２、１０４；
ＣＤＲ２：配列番号３６、３８、４０、４２、４４、４６、１０６、１０８、１１０；および
ＣＤＲ３：配列番号５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜９１、１１２、１１４、１１６〜１２２
から選択され、ならびに／または
前記ＣＤＲ配列は、
ＣＤＲ１：配列番号２０、２２、２４、２６、２８、３０、１００、１０２；
ＣＤＲ２：配列番号３６、３８、４０、４２、４４、４６、１０６、１０８、１１０；および
ＣＤＲ３：配列番号５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜９１、１１２、１１４、１１６〜１２２
から選択される配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有するものである、
（１８）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド。
（２０）
前記ＣＤＲ配列が、
ＣＤＲ１：配列番号２０、２２、２４、２６、２８、３０、１００、１０２；
ＣＤＲ２：配列番号３６、３８、４０、４２、４４、４６、１０６、１０８；および
ＣＤＲ３：配列番号５２、５４、５６、５８、６０、６２、８１〜９１、１１２、１１４、１１６〜１２２
から選択される、（１９）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２１）
前記ＴＣＲポリペプチド鎖がＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含んでなるＴＲＣβポリペプチド鎖であり、前記ＣＤＲ配列は、
ＣＤＲ１：配列番号２０、２２、１００、１０２；
ＣＤＲ２：配列番号３６、３８、１０６、１０８；および
ＣＤＲ３：配列番号５２、５４、８１〜９１、１１２、１１４、１１６〜１２２
から選択される、（２０）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２２）
前記ＴＣＲβポリペプチド鎖が、ＭＡＲＴ１２７−３５ペプチドと特異的に結合するＴＣＲαポリペプチドカウンター鎖とともに親ＴＣＲを構成し得る、（２１）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２３）
ＴＣＲαポリペプチドカウンター鎖が、配列番号２を有するＳＩＧ３５α鎖である、（２２）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２４）
前記ＴＣＲβポリペプチド鎖が、配列番号４、６、９４、９６および９８から選択される配列を有する、（１９）〜（２３）のいずれか一つに記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２５）
前記ＴＣＲポリペプチド鎖が、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含んでなるＴＲＣαポリペプチド鎖であり、ＣＤＲ配列が、
ＣＤＲ１：配列番号２４、２６、２８、３０；
ＣＤＲ２：配列番号４０、４２、４４、４６；および
ＣＤＲ３：配列番号５６、５８、６０、６２
から選択される、（１９）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２６）
前記ＴＣＲα鎖が、ＷＴ１２３４−２４３ペプチドと特異的に結合するＴＣＲβポリペプチドカウンター鎖とともに親ＴＣＲを構成し得る、（２５）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２７）
前記ＴＣＲβポリペプチドカウンター鎖が配列番号１６を有するＴＡＫ１β鎖である、（２５）または（２６）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２８）
前記ＴＣＲαポリペプチド鎖が配列番号８、１０、１２、および１４から選択される配列を有する、（２５）〜（２７）のいずれか一つに記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド鎖。
（２９）
前記ＴＣＲポリペプチドがＴＣＲβポリペプチド鎖であり、前記ＣＤＲ３領域が配列番号５２、５４、８１〜９１、１１２、１１４および１１６〜１２２のいずれか１つを含んでなる、（１８）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド。
（３０）
前記ＴＣＲポリペプチドがＴＣＲαポリペプチド鎖であり、前記ＣＤＲ３領域が配列番号５６、５８、６０および６２のいずれか１つを含んでなる、（１８）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲポリペプチド。
（３１）
（１８）〜（３０）のいずれか一つに記載の、ＴＣＲポリペプチド鎖をコードする単離されたおよび／または組換え操作された核酸。
（３２）
ｉ）配列番号３、５、７、９、１１、１３、５１、５３、５５、５７、５９、６１、９３、９５、９７、１１１、１１３および１１５のいずれか１つに示される配列；
ｉｉ）配列番号５２、５４、８１〜９１、１１２、１１４および１１６〜１２２から選択されるＣＤＲ３領域アミノ酸配列を含んでなるＴＣＲβポリペプチド鎖をコードするもの；
ｉｉｉ）配列番号４、６、９４、９６または９８から選択されるアミノ酸配列をコードするもの；
ｉｖ）配列番号５６、５８、６０および６２からなる群から選択されるＣＤＲ３領域アミノ酸配列を含んでなるＴＣＲαポリペプチド鎖をコードするもの；または
ｖ）配列番号８、１０、１２および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるＴＣＲαポリペプチド鎖をコードするもの
を含んでなる、（３１）に記載の単離されたおよび／または組換え操作された核酸。
（３３）
ＴＣＲαポリペプチド鎖とＴＣＲβポリペプチド鎖とを含んでなり、前記ＴＣＲβポリペプチド鎖は、配列番号５２、５４、８１〜９１、１１２、１１４および１１６〜１２２のいずれか１つの配列を含んでなるＣＤＲ３領域を含んでなり、ならびに／または前記ＴＣＲαポリペプチド鎖は、配列番号５６、５８、６０および６２のいずれか１つの配列を含んでなるＣＤＲ３領域を含んでなり、場合により、前記ＴＣＲは膜画分に含まれる、単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲ。
（３４）
前記ＴＣＲαポリペプチド鎖が、配列番号１６を有するＴＡＫ１βポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成する、（３３）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲ。
（３５）
前記ＴＣＲβポリペプチド鎖が、配列番号２を有するＳＩＧ３５αポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成する、（３３）または（３４）に記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲ。
（３６）
前記ＴＣＲが１以上の哺乳動物ＴＣＲポリペプチド鎖、場合によりヒトＴＣＲポリペプチド鎖および／またはハイブリッドＴＣＲポリペプチド鎖、を含んでなる、（３３）〜（３５）のいずれか一つに記載の単離されたおよび／または組換え操作されたＴＣＲ。
（３７）
（１８）〜（３６）のいずれか一つに記載の単離された核酸、ＴＣＲポリペプチド鎖またはＴＣＲを含んでなる組換え細胞。
（３８）
プレイ核酸を含んでなり、および、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現し、前記ＴＣＲが対照ＴＣＲに比べて増大した親和性および／またはアビディティーを有し、（１）〜（１７）のいずれか一つに記載の方法により得られる、（３７）に記載の組換え細胞。
（３９）
（１８）〜（３８）のいずれか一つに記載の前記ＴＣＲポリペプチド鎖、該ＴＣＲポリペプチド鎖をコードする核酸、ＴＣＲポリペプチド鎖および／または組換え細胞を、場合により薬学上許容可能な担体と組み合わせて含んでなる組成物。
（４０）
（３８）に記載の組換え細胞を含んでなる（３９）に記載の組成物。
（４１）
必要とする対象に治療上有効な量の（３８）に記載の組換え細胞または（４０）に記載の組成物を投与する工程を含んでなる、障害を改善または治療するための方法。
（４２）
前記細胞集団を投与工程の前にサイトカインおよび／または抗原ペプチドで活性化する工程をさらに含んでなる、（４１）に記載の方法。
（４３）
障害を治療するための（１８）〜（４０）のいずれか一つに記載の方法を用いて生産された核酸、ＴＣＲポリペプチド、ＴＣＲ、組成物または組換え細胞。
（４４）
障害を治療するための（９）〜（４０）のいずれか一つに記載の方法を用いて生産された核酸のペア、ＴＣＲ、組成物および／または組換え細胞の使用。
（４５）
前記障害が、白血病、固形腫瘍などの癌、肝炎、インフルエンザウイルスまたはＨＩＶなどのウイルス、結核菌、ＭＲＳＡ、またはＶＲＥなどの細菌）、アスペルギルス属、カンジダ属、およびクリプトコッカス属などの真菌によって引き起こされる感染性疾患から選択される、（４１）〜（４４）のいずれか一つに記載の方法、核酸、ＴＣＲポリペプチド、ＴＣＲ、組成物または組換え細胞。
（４６）
組換え細胞が同種異系反応性を軽減するように選択されている、（４１）〜（４４）のいずれか一つに記載の方法、核酸、ＴＣＲポリペプチド、ＴＣＲ組成物または組換え細胞または使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高親和性ＴＣＲ、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞および／または目的ペプチドに特異的なＴＣＲを形成し得るＴ細胞受容体（ＴＣＲ）ポリペプチド鎖をコードする核酸を得る方法であって、
ａ．ＴＣＲを発現し得る細胞、および／またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞を含んでなる細胞集団に、ベイトヒトＴＣＲポリペプチド鎖、場合によりＴＣＲα鎖またはＴＣＲβ鎖をコードするベイト核酸を形質導入すること、ここで、前記ベイトヒトＴＣＲポリペプチド鎖は、前記目的ペプチドと特異的に結合するカウンター鎖ＴＣＲポリペプチド鎖とともに親ＴＣＲを構成し得るものである；
ｂ．形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養すること；ならびに
ｃ．
ｉ）工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から、前記目的ペプチドと選択的に結合する、ベイトＴＣＲポリペプチド鎖とプレイＴＣＲポリペプチド鎖を含んでなるＴＣＲを発現する組換え細胞を得ること、ここで、工程（ｃ）（ｉ）は組換え細胞のアビディテーを試験することおよび形質導入されたベイトＴＣＲポリペプチド鎖を発現し、かつ、目的ペプチドと結合する細胞集団の１以上の細胞を単離することを含んでなり；
ｉｉ）工程（ｃ）（ｉ）で得られた細胞から、場合によりプレイ核酸をクローニングすることにより、プレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸を単離すること；および／または
ｉｉｉ）場合により、工程（ｃ）（ｉｉ）において単離された、単離されたプレイ核酸と、発現された際に高親和性ＴＣＲを提供するベイト核酸をペアとすること
を含んでなり、
ここで、ベイトＴＣＲ鎖とペアをなすプレイＴＣＲ鎖は、従前に選択された親和性よりも高い親和性を有するＴＣＲを構成するものである、方法。
【請求項２】
前記プレイＴＣＲポリペプチド鎖が、対照ＴＣＲポリペプチドＣＤＲ３領域のＣＤＲ３領域、場合により親ＴＣＲにおける同族ポリペプチド鎖のＣＤＲ３領域、に比べて少なくとも１つのアミノ酸修飾を含んでなるＣＤＲ３領域を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法が、
ｉ）ベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下でＴＣＲを発現し得る細胞またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞に、単離されたプレイ核酸およびベイト核酸を導入すること；ｉｉ）プレイＴＣＲポリペプチド鎖とベイトＴＣＲポリペプチド鎖とを含んでなるＴＣＲのアビディティーおよび／または親和性を測定すること；ならびに、ｉｉｉ）プレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸クローンを単離すること、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖および前記プレイＴＣＲポリペプチド鎖は、対照ＴＣＲ、場合により親ＴＣＲに比べて目的ペプチドに対して増大した親和性を有するＴＣＲを構成するものである、
をさらに含んでなる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
カウンター鎖ＴＣＲポリペプチドとともに目的ペプチドに特異的なＴＣＲを構成するＴＣＲポリペプチド鎖をコードする核酸を得るための請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法であって、以下の工程：
ａ．ＴＣＲを発現し得る細胞、またはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞を含んでなる細胞集団に、カウンター鎖ＴＣＲポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成するベイトＴＣＲポリペプチド鎖であって、場合によりＴＣＲαおよびＴＣＲβポリペプチド鎖から選択されるＴＣＲポリペプチド鎖をコードするベイト核酸を形質導入し、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖は、前記目的ペプチドを認識するＴ細胞から従前に単離されたものであり、
ｂ．前記形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養し、
ｃ．工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を得、工程（ｃ）は組換え細胞のアビディテーを試験することおよび形質導入されたベイトＴＣＲポリペプチド鎖を発現し、かつ、目的ペプチドと結合する細胞集団の１以上の細胞を単離することを含んでなり；かつ
ｄ．工程（ｃ）で得られた細胞から、前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸によりコードされるポリペプチドとともにＴＣＲを構成するプレイＴＣＲポリペプチド鎖をコードするプレイ核酸を単離すること
を含んでなり、
ここで、ベイトＴＣＲ鎖とペアをなすプレイＴＣＲ鎖は、従前に選択された親和性よりも高い親和性を有するＴＣＲを構成するものである、方法。
【請求項５】
形質導入された細胞集団から目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を得る工程が、セルソーティング、場合により蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を使用することを含んでなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
目的ペプチドに特異的なＴＣＲをコードする核酸のペアを得るための請求項１に記載の方法であって、以下の工程：
ａ．細胞集団に、ＴＣＲを構成するベイトポリペプチド鎖の群から選択されるベイトＴＣＲポリペプチド鎖をコードするベイト核酸を形質導入すること、ここで、前記ベイトＴＣＲポリペプチド鎖は、目的ペプチドを認識するＴ細胞から発現され、従前に単離されたものであり、前記細胞集団は、ＴＣＲを発現し得る細胞、またはＴＣＲを発現する細胞に分化し得る細胞を含んでなるものであり、
ｂ．前記形質導入された細胞集団をベイトＴＣＲポリペプチド鎖の発現を許容する条件下で培養し、
ｃ．工程（ｂ）で得られた形質導入された細胞集団から、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を得、工程（ｃ）は組換え細胞のアビディテーを試験することおよび形質導入されたベイトＴＣＲポリペプチド鎖を発現し、かつ、目的ペプチドと結合する細胞集団の１以上の細胞を単離することを含んでなり；
ｄ．工程（ｃ）で得られた細胞から、前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸によりコードされるポリペプチドとともにＴＣＲを構成するポリペプチドをコードするプレイ核酸を単離し、かつ
ｅ．工程（ａ）で前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸と工程（ｄ）で単離されたプレイ核酸をペアとすることを含んでなり、
ここで、ベイトＴＣＲ鎖とペアをなすプレイＴＣＲ鎖は、従前に選択された親和性よりも高い親和性を有するＴＣＲを構成するものである、方法。
【請求項７】
工程（ｃ）で組換え細胞を得ることが、形質導入された細胞集団を、目的ペプチドを提示する抗原提示細胞とともに培養する工程を含んでなる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記細胞集団が末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、場合によりＣＤ３リガンドで活性化されたＰＢＭＣの集団である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
工程（ａ）で前記細胞集団に形質導入されたベイト核酸が、ＴＣＲによるペプチド認識に主として寄与するＴＣＲ鎖をコードする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
形質導入が２回、３回、４回、５回および／または６回繰り返される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記単離されたプレイ核酸は単独で、またはプレイＴＣＲポリペプチド鎖とともにＴＣＲを構成するＴＣＲポリペプチド鎖をコードする核酸、場合によりベイトＴＣＲ核酸、と組み合わせて、ＴＣＲを発現し得るかまたはＴＣＲを発現し得る細胞に分化し得る細胞に形質導入され、目的ペプチドに特異的なＴＣＲを発現する組換え細胞を含んでなる形質導入された細胞集団を生産する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
細胞集団または細胞がまた、内在性ＴＣＲ鎖の発現を抑制するためのアンチセンス分子でも形質導入される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
形質導入された１以上の前記核酸、場合によりベイト核酸、のコドンが最適化される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。