【手続補正書】
【提出日】平成30年5月18日(2018.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
位置の順で、５’−隣接領域、非ガイド領域、ループ領域、ガイド領域および３’−隣接領域からなる人工一次ｍｉＲＮＡ転写産物（ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ）をコードする核酸であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、核酸。
【請求項２】
前記５’−隣接領域が、前記非ガイド領域と接して連結され、前記ループ領域が、前記非ガイド領域と前記ガイド領域との間に配置され、前記ガイド領域が、前記３’−隣接領域と接して連結される、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】
前記５’−隣接領域が、前記非ガイド領域と接して連結された５’−連結配列を含む、請求項１または２に記載の核酸。
【請求項４】
前記５’−連結配列が、５〜８ヌクレオチドからなる、請求項３に記載の核酸。
【請求項５】
前記５’−連結配列が、７ヌクレオチドからなる、請求項４に記載の核酸。
【請求項６】
前記５’−連結配列が、ＧＵＧＡＧＣＧＡ（配列番号１３）またはＧＵＧＡＧＣＧＣ（配列番号１４）をコードする、請求項３に記載の核酸。
【請求項７】
前記５’−隣接領域が、前記５’−連結配列の上流に配置された５’−バルジ配列をさらに含む、請求項３から６のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項８】
前記５’−バルジ配列が、クローニング部位を含む、請求項７に記載の核酸。
【請求項９】
前記５’−バルジ配列が、約１〜１０ヌクレオチドからなる、請求項７に記載の核酸。
【請求項１０】
前記５’−バルジ配列が、ＵＡＡＡＣＵＣＧＡ（配列番号１５）をコードする、請求項７に記載の核酸。
【請求項１１】
前記５’−隣接領域が、前記５’−バルジ配列の上流に配置された５’−スペーサー配列をさらに含む、請求項７から１０のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項１２】
前記５’−スペーサー配列が、１０〜１２ヌクレオチドからなる、請求項１１に記載の核酸。
【請求項１３】
前記５’−スペーサー配列が、ＵＧＧＵＡＣＣＧＵＵ（配列番号１６）をコードする、請求項１１に記載の核酸。
【請求項１４】
前記５’−隣接領域が、前記５’−スペーサー配列の上流に配置された５’−上流配列をさらに含む、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項１５】
前記５’−上流配列が、長さが約３０〜２０００ヌクレオチドである、請求項１４に記載の核酸。
【請求項１６】
前記３’−隣接領域が、前記ガイド領域と接して連結された３’−連結配列を含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項１７】
前記３’−連結配列が、５〜８ヌクレオチドからなる、請求項１６に記載の核酸。
【請求項１８】
前記３’−連結配列が、前記５’−連結配列に対して少なくとも約８５％相補的である、請求項１６に記載の核酸。
【請求項１９】
前記３’−連結配列が、ＣＧＣＣＵＡＣ（配列番号１８）をコードする、請求項１６に記載の核酸。
【請求項２０】
前記３’−隣接領域が、前記３’−連結配列の下流に配置された３’−バルジ配列をさらに含む、請求項１６から１９のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２１】
前記３’−バルジ配列が、クローニング部位を含む、請求項２０に記載の核酸。
【請求項２２】
前記３’−バルジ配列が、約１〜１０ヌクレオチドからなる、請求項２０に記載の核酸。
【請求項２３】
３’−バルジ配列が、ＵＡＧ（配列番号３０）をコードする、請求項２０に記載の核酸。
【請求項２４】
前記５’−バルジ配列が、前記バルジ配列の各末端の１ヌクレオチドのみにおいて、前記３’−バルジ配列に対して相補的である、請求項２０に記載の核酸。
【請求項２５】
前記３’−隣接領域が、前記３’−バルジ配列の下流に配置された３’−スペーサー配列をさらに含む、請求項２０から２４のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２６】
前記３’−スペーサー配列が、１０〜１２ヌクレオチドからなる、請求項２５に記載の核酸。
【請求項２７】
前記３’−スペーサー配列が、ＡＧＣＧＧＣＣＧＣＣＡ（配列番号１９）をコードする、請求項２５に記載の核酸。
【請求項２８】
前記３’−スペーサー配列が、前記５’−スペーサー配列に対して少なくとも約７０％相補的である、請求項２５から２７のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項２９】
前記３’−隣接領域が、前記３’−スペーサー配列の下流に配置された３’−下流配列をさらに含む、請求項２５から２８のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３０】
前記５’−上流配列が、前記３’−下流配列と顕著には対合しない、請求項２９に記載の核酸。
【請求項３１】
前記３’−下流配列は、長さが約３０〜２０００ヌクレオチドである、請求項２９または３０に記載の核酸。
【請求項３２】
前記ループ領域は、長さが１５〜２５ヌクレオチドである、請求項１から３１のいずれか一項に記載の核酸。
【請求項３３】
請求項１から３２のいずれか一項に記載の核酸によってコードされるＲＮＡ。
【請求項３４】
請求項１から３２のいずれか一項に記載の単離された核酸をコードする発現カセット。
【請求項３５】
前記核酸と接して連結されたプロモーターをさらに含む、請求項３４に記載の発現カセット。
【請求項３６】
前記プロモーターが、ｐｏｌＩＩまたはｐｏｌＩＩＩプロモーターである、請求項３５に記載の発現カセット。
【請求項３７】
前記ｐｏｌＩＩＩプロモーターが、Ｕ６プロモーターである、請求項３６に記載の発現カセット。
【請求項３８】
前記ｐｏｌＩＩＩプロモーターが、マウスＵ６プロモーターである、請求項３６に記載の発現カセット。
【請求項３９】
前記プロモーターが、ｐｏｌＩＩプロモーターである、請求項３６に記載の発現カセット。
【請求項４０】
前記プロモーターが、組織特異的プロモーターである、請求項３５に記載の発現カセット。
【請求項４１】
前記プロモーターが、誘導性プロモーターである、請求項３５に記載の発現カセット。
【請求項４２】
マーカー遺伝子をさらに含む、請求項３５から４１のいずれか一項に記載の発現カセット。
【請求項４３】
請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセットを含むベクター。
【請求項４４】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである、請求項４３に記載のベクター。
【請求項４５】
前記ＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６および／またはＡＡＶ９である、請求項４４に記載のベクター。
【請求項４６】
前記ＡＡＶがＡＡＶ２である、請求項４５に記載のベクター。
【請求項４７】
前記ＡＡＶがＡＡＶ２／１である、請求項４５に記載のベクター。
【請求項４８】
位置の順で、５’−隣接領域、非ガイド領域、ループ領域、ガイド領域および３’−隣接領域からなる人工一次ｍｉＲＮＡ転写産物（ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ）をコードする核酸を含む、長さが８０〜４０００ヌクレオチドの間の単離された核酸であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、単離された核酸。
【請求項４９】
Ｐｒｉ−ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ（配列番号８）、Ｐｒｉ−ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ（配列番号９）、Ｐｒｅ−ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ（配列番号１０）またはＰｒｅ−ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ（配列番号１１）からなる、単離された核酸。
【請求項５０】
核酸のガイド領域および核酸の非ガイド領域を含む、単離されたＲＮＡ二重鎖であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、単離されたＲＮＡ二重鎖。
【請求項５１】
前記二重鎖は、長さが１９〜３０塩基対の間にある、請求項５０に記載の単離されたＲＮＡ二重鎖。
【請求項５２】
請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む非ヒト動物。
【請求項５３】
ＲＮＡ干渉を誘導するための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖の有効量を含む、組成物。
【請求項５４】
治療における使用のための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む、組成物。
【請求項５５】
ハンチントン病を処置するための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む、組成物。
【請求項５６】
３’末端においてオーバーハングを有する請求項１に記載の核酸を含む、単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項５７】
前記オーバーハングが、２〜５ヌクレオチドのリピートである、請求項５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項５８】
前記マイクロＲＮＡ分子が、天然に存在するマイクロＲＮＡである、請求項５６または５７に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項５９】
前記マイクロＲＮＡ分子が、人工マイクロＲＮＡである、請求項５６または５７に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項６０】
前記マイクロＲＮＡ分子が、減少したレベルのオフターゲット毒性を生じる、請求項５６から５９のいずれか一項に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項６１】
前記オーバーハングが、ＵＵ（配列番号２４）、ＵＵＵ（配列番号２５）またはＵＵＵＵ（配列番号２６）配列である、請求項５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項６２】
前記オーバーハングが、ＣＵＵ（配列番号２７）、ＣＵＵＵ（配列番号２８）またはＣＵＵＵＵ（配列番号２９）配列である、請求項５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
【請求項６３】
低毒性ＲＮＡ干渉を誘導するための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む、組成物。
【請求項６４】
前記発現カセットが、ｐｏｌＩＩプロモーターを含む、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６５】
低毒性ＲＮＡ干渉を誘導するための組成物であって、ｍｉＲＮＡをコードする核酸に作動可能に連結したｐｏｌＩＩプロモーターをコードする請求項３５に記載の発現カセットを含む、組成物。
【請求項６６】
前記ｍｉＲＮＡが、２または３ヌクレオチドの５’または３’−オーバーハングを含む、請求項６５に記載の組成物。
【請求項６７】
前記ｍｉＲＮＡが、２ヌクレオチドの３’−オーバーハングを含む、請求項６５または６６に記載の組成物。
【請求項６８】
前記ｍｉＲＮＡが人工ｍｉＲＮＡである、請求項６５から６７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６９】
ハンチントン病を有する被験体を処置するための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む、組成物。
【請求項７０】
前記組成物が、直接または血流を介して前記被験体の脳に投与されることを特徴とする、請求項５３または６３から６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７１】
前記組成物が、頭蓋内投与されることを特徴とする、請求項７０に記載の組成物。
【請求項７２】
前記組成物が、前記被験体の大槽、線条体、皮質もしくは室、くも膜下腔および／または髄腔内に投与されることを特徴とする、請求項７１に記載の組成物。
【請求項７３】
前記被験体がヒトである、請求項７０から７２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７４】
前記組成物が、ＣＮＳ中の１〜５つの場所において注射されることを特徴とする、請求項７０から７３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７５】
前記組成物が、脳中の単一の場所において注射されることを特徴とする、請求項７０から７３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７６】
ハンチントン病を処置するための組成物であって、請求項１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、請求項３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、請求項４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または請求項５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含み、前記核酸、発現カセット、ベクターまたは二重鎖が細胞と接触させられることを特徴とし、前記細胞が、上衣、軟膜、内皮、脳室および／または髄膜細胞である、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
本発明は、ハンチントン病を処置するために、細胞を、本明細書に記載される核酸、発現カセット、ベクターまたは二重鎖と接触させる方法もまた提供し、この細胞は、上衣、軟膜、内皮、脳室および／または髄膜細胞である。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
位置の順で、５’−隣接領域、非ガイド領域、ループ領域、ガイド領域および３’−隣接領域からなる人工一次ｍｉＲＮＡ転写産物（ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ）をコードする核酸であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、核酸。
（項目２）
前記５’−隣接領域が、前記非ガイド領域と接して連結され、前記ループ領域が、前記非ガイド領域と前記ガイド領域との間に配置され、前記ガイド領域が、前記３’−隣接領域と接して連結される、項目１に記載の核酸。
（項目３）
前記５’−隣接領域が、前記非ガイド領域と接して連結された５’−連結配列を含む、項目１または２に記載の核酸。
（項目４）
前記５’−連結配列が、５〜８ヌクレオチドからなる、項目３に記載の核酸。
（項目５）
前記５’−連結配列が、７ヌクレオチドからなる、項目４に記載の核酸。
（項目６）
前記５’−連結配列が、ＧＵＧＡＧＣＧＡ（配列番号１３）またはＧＵＧＡＧＣＧＣ（配列番号１４）をコードする、項目３に記載の核酸。
（項目７）
前記５’−隣接領域が、前記５’−連結配列の上流に配置された５’−バルジ配列をさらに含む、項目３から６のいずれか一項に記載の核酸。
（項目８）
前記５’−バルジ配列が、クローニング部位を含む、項目７に記載の核酸。
（項目９）
前記５’−バルジ配列が、約１〜１０ヌクレオチドからなる、項目７に記載の核酸。
（項目１０）
前記５’−バルジ配列が、ＵＡＡＡＣＵＣＧＡ（配列番号１５）をコードする、項目７に記載の核酸。
（項目１１）
前記５’−隣接領域が、前記５’−バルジ配列の上流に配置された５’−スペーサー配列をさらに含む、項目７から１０のいずれか一項に記載の核酸。
（項目１２）
前記５’−スペーサー配列が、１０〜１２ヌクレオチドからなる、項目１１に記載の核酸。
（項目１３）
前記５’−スペーサー配列が、ＵＧＧＵＡＣＣＧＵＵ（配列番号１６）をコードする、項目１１に記載の核酸。
（項目１４）
前記５’−隣接領域が、前記５’−スペーサー配列の上流に配置された５’−上流配列をさらに含む、項目１１から１３のいずれか一項に記載の核酸。
（項目１５）
前記５’−上流配列が、長さが約３０〜２０００ヌクレオチドである、項目１４に記載の核酸。
（項目１６）
前記３’−隣接領域が、前記ガイド領域と接して連結された３’−連結配列を含む、項目１から１５のいずれか一項に記載の核酸。
（項目１７）
前記３’−連結配列が、５〜８ヌクレオチドからなる、項目１６に記載の核酸。
（項目１８）
前記３’−連結配列が、前記５’−連結配列に対して少なくとも約８５％相補的である、項目１６に記載の核酸。
（項目１９）
前記３’−連結配列が、ＣＧＣＣＵＡＣ（配列番号１８）をコードする、項目１６に記載の核酸。
（項目２０）
前記３’−隣接領域が、前記３’−連結配列の下流に配置された３’−バルジ配列をさらに含む、項目１６から１９のいずれか一項に記載の核酸。
（項目２１）
前記３’−バルジ配列が、クローニング部位を含む、項目２０に記載の核酸。
（項目２２）
前記３’−バルジ配列が、約１〜１０ヌクレオチドからなる、項目２０に記載の核酸。
（項目２３）
３’−バルジ配列が、ＵＡＧ（配列番号３０）をコードする、項目２０に記載の核酸。
（項目２４）
前記５’−バルジ配列が、前記バルジ配列の各末端の１ヌクレオチドのみにおいて、前記３’−バルジ配列に対して相補的である、項目２０に記載の核酸。
（項目２５）
前記３’−隣接領域が、前記３’−バルジ配列の下流に配置された３’−スペーサー配列をさらに含む、項目２０から２４のいずれか一項に記載の核酸。
（項目２６）
前記３’−スペーサー配列が、１０〜１２ヌクレオチドからなる、項目２５に記載の核酸。
（項目２７）
前記３’−スペーサー配列が、ＡＧＣＧＧＣＣＧＣＣＡ（配列番号１９）をコードする、項目２５に記載の核酸。
（項目２８）
前記３’−スペーサー配列が、前記５’−スペーサー配列に対して少なくとも約７０％相補的である、項目２５から２７のいずれか一項に記載の核酸。
（項目２９）
前記３’−隣接領域が、前記３’−スペーサー配列の下流に配置された３’−下流配列をさらに含む、項目２５から２８のいずれか一項に記載の核酸。
（項目３０）
前記５’−上流配列が、前記３’−下流配列と顕著には対合しない、項目２９に記載の核酸。
（項目３１）
前記３’−下流配列は、長さが約３０〜２０００ヌクレオチドである、項目２９または３０に記載の核酸。
（項目３２）
前記ループ領域は、長さが１５〜２５ヌクレオチドである、項目１から３１のいずれか一項に記載の核酸。
（項目３３）
項目１から３２のいずれか一項に記載の核酸によってコードされるＲＮＡ。
（項目３４）
項目１から３２のいずれか一項に記載の単離された核酸をコードする発現カセット。
（項目３５）
前記核酸と接して連結されたプロモーターをさらに含む、項目３４に記載の発現カセット。
（項目３６）
前記プロモーターが、ｐｏｌＩＩまたはｐｏｌＩＩＩプロモーターである、項目３５に記載の発現カセット。
（項目３７）
前記ｐｏｌＩＩＩプロモーターが、Ｕ６プロモーターである、項目３６に記載の発現カセット。
（項目３８）
前記ｐｏｌＩＩＩプロモーターが、マウスＵ６プロモーターである、項目３６に記載の発現カセット。
（項目３９）
前記プロモーターが、ｐｏｌＩＩプロモーターである、項目３６に記載の発現カセット。
（項目４０）
前記プロモーターが、組織特異的プロモーターである、項目３５に記載の発現カセット。
（項目４１）
前記プロモーターが、誘導性プロモーターである、項目３５に記載の発現カセット。
（項目４２）
マーカー遺伝子をさらに含む、項目３５から４１のいずれか一項に記載の発現カセット。
（項目４３）
項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセットを含むベクター。
（項目４４）
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである、項目４３に記載のベクター。
（項目４５）
前記ＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６および／またはＡＡＶ９である、項目４４に記載のベクター。
（項目４６）
前記ＡＡＶがＡＡＶ２である、項目４５に記載のベクター。
（項目４７）
前記ＡＡＶがＡＡＶ２／１である、項目４５に記載のベクター。
（項目４８）
位置の順で、５’−隣接領域、非ガイド領域、ループ領域、ガイド領域および３’−隣接領域からなる人工一次ｍｉＲＮＡ転写産物（ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ）をコードする核酸を含む、長さが８０〜４０００ヌクレオチドの間の単離された核酸であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、単離された核酸。
（項目４９）
Ｐｒｉ−ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ（配列番号８）、Ｐｒｉ−ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ（配列番号９）、Ｐｒｅ−ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ（配列番号１０）またはＰｒｅ−ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ（配列番号１１）からなる、単離された核酸。
（項目５０）
核酸のガイド領域および核酸の非ガイド領域を含む、単離されたＲＮＡ二重鎖であって、前記ガイド領域は、配列番号３７（ｍｉＨＤｓｓ３）、配列番号６（ｍｉＨＤＳ１ｖ５Ｕ）または配列番号７（ｍｉＨＤＳ１ｖ６Ａ）からなり、前記非ガイド領域は、前記ガイド領域に対して少なくとも８０％相補的である、単離されたＲＮＡ二重鎖。
（項目５１）
前記二重鎖は、長さが１９〜３０塩基対の間にある、項目４４に記載の単離されたＲＮＡ二重鎖。
（項目５２）
項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を含む非ヒト動物。
（項目５３）
項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖の有効量を被験体に投与することを含む、ＲＮＡ干渉を誘導する方法。
（項目５４）
治療における使用のための、項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖。
（項目５５）
ハンチントン病を処置するための、項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖の使用。
（項目５６）
３’末端においてオーバーハングを有する項目１に記載の核酸を含む、単離されたマイクロＲＮＡ分子。
（項目５７）
前記オーバーハングが、２〜５ヌクレオチドのリピートである、項目５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
（項目５８）
前記マイクロＲＮＡが、天然に存在するマイクロＲＮＡである、項目５６または５７に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
（項目５９）
前記マイクロＲＮＡが、人工マイクロＲＮＡである、項目５６または５７に記載の単離されたマイクロＲＮＡ分子。
（項目６０）
前記マイクロＲＮＡ分子が、減少したレベルのオフターゲット毒性を生じる、項目５６から５９のいずれか一項に記載の単離されたマイクロＲＮＡ。
（項目６１）
前記オーバーハングが、ＵＵ（配列番号２４）、ＵＵＵ（配列番号２５）またはＵＵＵＵ（配列番号２６）配列である、項目５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ。
（項目６２）
前記オーバーハングが、ＣＵＵ（配列番号２７）、ＣＵＵＵ（配列番号２８）またはＣＵＵＵＵ（配列番号２９）配列である、項目５６に記載の単離されたマイクロＲＮＡ。
（項目６３）
項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を被験体に投与することを含む、低毒性ＲＮＡ干渉を誘導する方法。
（項目６４）
前記発現カセットが、ｐｏｌＩＩプロモーターを含む、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
ｍｉＲＮＡをコードする核酸に作動可能に連結したｐｏｌＩＩプロモーターをコードする項目３５に記載の発現カセットを被験体に投与することを含む、低毒性ＲＮＡ干渉を誘導する方法。
（項目６６）
前記ｍｉＲＮＡが、２または３ヌクレオチドの５’または３’−オーバーハングを含む、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記ｍｉＲＮＡが、２ヌクレオチドの３’−オーバーハングを含む、項目６５または６６に記載の方法。
（項目６８）
前記ｍｉＲＮＡが人工ｍｉＲＮＡである、項目６５から６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
ハンチントン病を有する被験体を処置する方法であって、前記ハンチントン病を処置するために、項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖を前記被験体に投与することを含む、方法。
（項目７０）
前記治療剤が、直接または血流を介して前記被験体の脳に投与される、項目５３または６３から６９のいずれか一項に記載の方法。
（項目７１）
前記治療剤が、頭蓋内投与される、項目７０に記載の方法。
（項目７２）
前記治療剤が、前記被験体の大槽、線条体、皮質もしくは室、くも膜下腔および／または髄腔内に投与される、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
前記被験体がヒトである、項目７０から７２のいずれか一項に記載の方法。
（項目７４）
前記薬剤が、ＣＮＳ中の１〜５つの場所において注射される、項目７０から７３のいずれか一項に記載の方法。
（項目７５）
前記薬剤が、脳中の単一の場所において注射される、項目７０から７３のいずれか一項に記載の方法。
（項目７６）
ハンチントン病を処置するために、細胞を、項目１から３３もしくは４８から４９のいずれか一項に記載の核酸、項目３４から４２のいずれか一項に記載の発現カセット、項目４３から４７のいずれか一項に記載のベクター、または項目５０から５１のいずれか一項に記載の二重鎖と接触させる方法であって、前記細胞が、上衣、軟膜、内皮、脳室および／または髄膜細胞である、方法。