【手続補正書】
【提出日】平成30年9月6日(2018.9.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞培養物においてステビオールグリコシド前駆体を生産することが可能な組み換え宿主細胞であって、
（ａ）ファルネシル二リン酸（ＦＰＰ）およびイソペンテニル二リン酸（ＩＰＰ）からゲラニルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｂ）ＧＧＰＰからｅｎｔ−コパリル二リン酸を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｃ）ｅｎｔ−コパリル二リン酸からｅｎｔ−カウレンを合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｄ）ｅｎｔ−カウレンからｅｎｔ−カウレン酸を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｅ）チトクロムＰ４５０複合体を還元することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；および／または
（ｆ）ｅｎｔ−カウレン酸からステビオールを合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
を含み、ここで、少なくとも１つの遺伝子が組み換え遺伝子である、前記細胞。
【請求項２】
請求項１に記載の組み換え宿主細胞であって、
（ａ）ファルネシル二リン酸（ＦＰＰ）およびイソペンテニル二リン酸（ＩＰＰ）からゲラニルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）を合成することが可能なポリペプチドが、配列番号４９に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｂ）ＧＧＰＰからｅｎｔ−コパリル二リン酸を合成することが可能なポリペプチドが、配列番号３７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｃ）ｅｎｔ−コパリルピロリン酸からｅｎｔ−カウレンを合成することが可能なポリペプチドが、配列番号６に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｄ）ｅｎｔ−カウレンからｅｎｔ−カウレン酸を合成することが可能なポリペプチドが、配列番号５４に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号７０、７１、または７９のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７２または７５に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号７７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号７８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｅ）チトクロムＰ４５０複合体を還元することが可能なポリペプチドが、配列番号２２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性；配列番号２８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号６９、７４、７６、または８７のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７３に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性；または配列番号９８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；および
（ｆ）ｅｎｔ−カウレン酸からステビオールを合成することが可能なポリペプチドが、配列番号６８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号８２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号９１に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、
前記細胞。
【請求項３】
細胞培養物においてステビオールグリコシド前駆体を生産することが可能な組み換え宿主細胞であって、
（ａ）配列番号５４に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号７０、７１、または７９のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７２または７５に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号７７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号７８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、ｅｎｔ−カウレンからｅｎｔ−カウレン酸を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｂ）配列番号２２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性；配列番号２８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号６９、７４、７６、または８７のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７３に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性；または配列番号９８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、チトクロムＰ４５０複合体を還元することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；および
（ｃ）配列番号６８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号８２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号９１に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチド含む、ｅｎｔ−カウレン酸からステビオールを合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
を含み、ここで、少なくとも１つの遺伝子が組み換え遺伝子である、前記細胞。
【請求項４】
請求項３に記載の組み換え宿主細胞であって、
（ａ）配列番号４９に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、ファルネシル二リン酸（ＦＰＰ）およびイソペンテニル二リン酸（ＩＰＰ）からゲラニルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｂ）配列番号３７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、ＧＧＰＰからｅｎｔ−コパリル二リン酸を合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；および
（ｃ）配列番号６に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、ｅｎｔ−コパリルピロリン酸からｅｎｔ−カウレンを合成することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
をさらに含み、ここで、少なくとも１つの遺伝子が組み換え遺伝子である、前記細胞。
【請求項５】
小胞体膜ポリペプチドをコードする遺伝子をさらに含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６】
小胞体膜ポリペプチドが、配列番号１１４に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、請求項５に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項７】
ｅｎｔ−カウレンからｅｎｔ−カウレン酸を合成することが可能なポリペプチドが、融合コンストラクトである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項８】
融合コンストラクトが、配列番号１１８または１２０に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するか、または配列番号１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、または１１２のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、請求項７に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞であって、
（ａ）ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１３ヒドロキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｂ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ３’のベータ１，３グリコシル化が可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｃ）ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１９カルボキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチドをコードする遺伝子；
（ｄ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第一ポリペプチドをコードする第一遺伝子；および／または
（ｅ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第二ポリペプチドをコードする第二遺伝子；
をさらに含み、
ここで、少なくとも１つの遺伝子が組み換え遺伝子である；および
ここで、宿主が１以上のステビオールグリコシドを生産することが可能である、
前記細胞。
【請求項１０】
請求項９に記載の組み換え宿主細胞であって、
（ａ）ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１３ヒドロキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチドが、配列番号３０に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５５％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｂ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ３’のベータ１，３グリコシル化が可能なポリペプチドが、配列番号８３に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｃ）ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１９カルボキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチドが、配列番号２９に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５５％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；
（ｄ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第一ポリペプチドが、配列番号８４または８８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドを含む；および
（ｅ）ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第二ポリペプチドが、配列番号８６に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性を有するポリペプチドを含む、
前記細胞。
【請求項１１】
植物細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、真菌細胞、または細菌細胞である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１２】
細菌細胞が、エスケリキア細菌細胞、ラクトバシラス細菌細胞、ラクトコッカス細菌細胞、コルネバクテリウム細菌細胞、アセトバクター細菌細胞、アシネトバクター細菌細胞、またはシュードモナス細菌細胞を含む、請求項１１に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１３】
真菌細胞が酵母細胞を含む、請求項１１に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１４】
酵母細胞が、サッカロミセス・セレビシエ、シゾサッカロミセス・ポンベ、ヤロウイア・リポリティカ、カンジタ・グラブラタ、アシュビア・ゴシピ、シバリンドネラ・ジャディニ、ピキア・パストリス、クルイヴェロミセス・ラクティス、ハンセヌラ・ポリモルファ、カンジタ・ボイジニ、アークスラ・アデニニボランス、キサントフィロミセス・デンドロラス、またはカンジタ・アルビカンス種からの細胞である、請求項１３に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１５】
酵母細胞がサッカロミセス属である、請求項１４に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１６】
酵母細胞がサッカロミセス・セレビシエ種からの細胞である、請求項１５に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１７】
ヤロウイア・リポリティカ細胞である、請求項１に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞であって、１以上のステビオールグリコシドが、ステビオール−１３−Ｏ−グルコシド（１３−ＳＭＧ）、ステビオール−１，２−ビオシド、ステビオール−１，３−ビオシド、ステビオール−１９−Ｏ−グルコシド（１９−ＳＭＧ）、ステビオシド、１，３−ステビオシド、ルブソシド、レバウジオシドＡ（ＲｅｂＡ）、レバウジオシドＢ（ＲｅｂＢ）、レバウジオシドＣ（ＲｅｂＣ）、レバウジオシドＤ（ＲｅｂＤ）、レバウジオシドＥ（ＲｅｂＥ）、レバウジオシドＦ（ＲｅｂＦ）、レバウジオシドＭ（ＲｅｂＭ）、レバウジオシドＱ（ＲｅｂＱ）、レバウジオシドＩ（ＲｅｂＩ）、ズルコシドＡ、ジグリコシル化ステビオール、トリグリコシル化ステビオール、テトラグリコシル化ステビオール、ペンタグリコシル化ステビオール、ヘキサグリコシル化ステビオール、ヘプタグリコシル化ステビオール、またはその異性体を含む、前記細胞。
【請求項１９】
遺伝子が発現され、および、ステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドが宿主細胞によって生産される条件下で、細胞培養物において請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞を培養することを含む、ステビオールグリコシド前駆体、ステビオール、または１以上のステビオールグリコシドを生産する方法。
【請求項２０】
遺伝子が恒常的に発現され、および／または、遺伝子の発現が誘導される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
細胞によって生産される１３−ＳＭＧの量が、１以上の組み換え遺伝子を欠損する対応する宿主細胞に対して少なくとも２倍増加される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
細胞によって生産される１３−ＳＭＧ、ステビオール−１，２−ビオシド、ルブソシド、ＲｅｂＢ、ＲｅｂＡ、ＲｅｂＤ、およびＲｅｂＭの全量が、１以上の組み換え遺伝子を欠損する対応する宿主細胞に対して少なくとも約１０％増加される、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
宿主細胞が、ある温度である期間、発酵槽において成長させられ、ここで、当該温度および期間はステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドの生産を促進する、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを細胞培養物から単離することをさらに含む、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、単離する工程が、細胞培養物の固相から細胞培養物の液相を分離して、生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを含む上清を得ることを含み、および
（ａ）上清を１以上の吸着樹脂と接触させて、生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドの少なくとも一部を得ること；または
（ｂ）上清を１以上のイオン交換または逆相クロマトグラフィーカラムと接触させて、生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドの少なくとも一部を得ること；または
（ｃ）生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを結晶化または抽出すること；
をさらに含み、これによって、生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを単離する、前記方法。
【請求項２６】
細胞培養物から生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを回収することをさらに含む、請求項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
回収された１以上のステビオールグリコシドを含む組成物が、ステビア植物のステビオールグリコシド組成物に対してレバウジオシドＭについて濃縮され、および、植物に由来するステビア抽出物から得られたステビオールグリコシド組成物に対してステビア植物に由来する成分の低減されたレベルを有する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを生産するための方法であって、
（ａ）配列番号４９に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有する、ファルネシル二リン酸（ＦＰＰ）およびイソペンテニル二リン酸（ＩＰＰ）からゲラニルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）を合成することが可能なポリペプチド；
（ｂ）配列番号３７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有する、ＧＧＰＰからｅｎｔ−コパリル二リン酸を合成することが可能なポリペプチド；
（ｃ）配列番号６に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性を有する、ｅｎｔ−コパリルピロリン酸からｅｎｔ−カウレンを合成することが可能なポリペプチド；
（ｄ）配列番号５４に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号７０、７１、または７９のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７２または７５に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号７７に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号７８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有する、ｅｎｔ−カウレンからｅｎｔ−カウレン酸を合成することが可能なポリペプチド；
（ｅ）配列番号２２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性；配列番号２８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性；配列番号６９、７４、７６、または８７のいずれか１つに示されたアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の配列同一性；配列番号７３に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性；または配列番号９８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有する、チトクロムＰ４５０複合体を還元することが可能なポリペプチド；
（ｆ）配列番号６８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性；配列番号８２に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも４０％の配列同一性；または配列番号９１に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有する、ｅｎｔ−カウレン酸からステビオールを合成することが可能なポリペプチド；
（ｇ）配列番号３０に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５５％の配列同一性を有する、ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１３ヒドロキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチド；
（ｈ）配列番号８３に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５０％の配列同一性を有する、ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ３’のベータ１，３グリコシル化が可能なポリペプチド；
（ｉ）配列番号２９に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも５５％の配列同一性を有する、ステビオールまたはステビオールグリコシドをそのＣ−１９カルボキシル基でグリコシル化することが可能なポリペプチド；
（ｊ）配列番号８４または８８に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第一ポリペプチド；および
（ｋ）配列番号８６に示されたアミノ酸配列に対して少なくとも６５％の配列同一性を有する、ステビオールグリコシドの１３−Ｏ−グルコース、１９−Ｏ−グルコース、または１３−Ｏ−グルコースおよび１９−Ｏ−グルコースの両方のＣ２’のベータ１，２グリコシル化が可能な第二ポリペプチド
を使用する、組み換え宿主細胞の細胞培養物における、植物に由来するかまたは合成のステビオールおよび／またはステビオールグリコシドの全細胞生物変換を含み、ここで、少なくとも１つのポリペプチドが、宿主細胞において発現された組み換えポリペプチドであり；および、これによって、ステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドを生産する、前記方法。
【請求項２９】
宿主細胞が、植物細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、真菌細胞、藻類細胞、または細菌細胞である、請求項１９〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
１以上のステビオールグリコシドが、１３−ＳＭＧ、ステビオール−１，２−ビオシド、ステビオール−１，３−ビオシド、１９−ＳＭＧ、ステビオシド、１，３−ステビオシド、ルブソシド、ＲｅｂＡ、ＲｅｂＢ、ＲｅｂＣ、ＲｅｂＤ、ＲｅｂＥ、ＲｅｂＦ、ＲｅｂＭ、ＲｅｂＱ、ＲｅｂＩ、ズルコシドＡ、ジグリコシル化ステビオール、トリグリコシル化ステビオール、テトラグリコシル化ステビオール、ペンタグリコシル化ステビオール、ヘキサグリコシル化ステビオール、ヘプタグリコシル化ステビオール、またはその異性体を含む、請求項１９〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞を含む細胞培養物であって、
（ａ）宿主細胞によって生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシド；
（ｂ）グルコース、フルクトース、スクロース、キシロース、ラムノース、ＵＤＰ−グルコース、ＵＤＰ−ラムノース、ＵＤＰ−キシロース、および／またはＮ−アセチル−グルコサミン；および
（ｃ）微量金属、ビタミン、塩、酵母窒素原礎培地（ＹＮＢ）、および／またはアミノ酸を含む補助栄養素；
をさらに含み、
ここで、ステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドが、細胞培養物の少なくとも１ｍｇ／リットルの濃度で存在し；
ここで、細胞培養物が、ステビア植物からのステビオールグリコシド組成物に対して、ステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドについて濃縮され、および、植物に由来するステビア抽出物に対してステビア植物に由来する成分の低減されたレベルを有する、
前記培養物。
【請求項３２】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞を含む細胞培養物からの細胞ライセートであって、
（ａ）宿主細胞によって生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシド；
（ｂ）グルコース、フルクトース、スクロース、キシロース、ラムノース、ＵＤＰ−グルコース、ＵＤＰ−ラムノース、ＵＤＰ−キシロース、および／またはＮ−アセチル−グルコサミン；および／または
（ｃ）微量金属、ビタミン、塩、酵母窒素原礎培地（ＹＮＢ）、および／またはアミノ酸を含む補助栄養素；
を含み、ここで、宿主細胞によって生産されたステビオールグリコシド前駆体または１以上のステビオールグリコシドが、細胞培養物の少なくとも１ｍｇ／リットルの濃度で存在する、前記ライセート。
【請求項３３】
ステビア植物からのステビオールグリコシド組成物と異なる相対量で存在し、および、植物に由来するステビア抽出物に対してステビア植物に由来する成分の低減されたレベルを有する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞によって生産された１以上のステビオールグリコシド。
【請求項３４】
ステビア植物からのステビオールグリコシド組成物と異なる相対量で存在し、および、植物に由来するステビア抽出物に対してステビア植物に由来する成分の低減されたレベルを有する、請求項１９〜３０のいずれか一項に記載の方法によって生産された１以上のステビオールグリコシド。
【請求項３５】
請求項３３または３４に記載の１以上のステビオールグリコシドを含む、甘味料組成物。
【請求項３６】
請求項３５に記載の甘味料組成物を含む、食品。
【請求項３７】
請求項３５に記載の甘味料組成物を含む、飲料または飲料濃縮物。