【手続補正書】
【提出日】平成29年11月28日(2017.11.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有する植物を含んでなるタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
【請求項２】
前記植物からの葉が、前記変異を欠く植物からの葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、請求項1に記載のタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
【請求項３】
前記植物からの乾葉（cured leaf）が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のタバコ特異的ニトロソアミン(TSNA)の減少した量を示す、請求項2に記載のタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
【請求項４】
SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載のタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種により産生された種子。
【請求項５】
ニコチアナ・タバカム(Nicotiana tabacum)細胞において変異誘発を引き起こして突然変異細胞を作製する段階；
該突然変異細胞から1つまたは複数の植物を得る段階；および
SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を含む植物の少なくとも1つを同定する段階；
を含んでなる、タバコ植物の作出方法。
【請求項６】
前記変異を欠く植物からの葉と比べて少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す葉を含む前記植物の少なくとも1つを同定する段階をさらに含む、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
乾燥した場合に、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す葉を含む前記植物の少なくとも1つを同定する段階をさらに含む、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
変異誘発が化学的変異原または電離放射線を用いて引き起こされる、請求項5に記載の方法。
【請求項９】
化学的変異原が亜硝酸、アジ化ナトリウム、アクリジンオレンジ、臭化エチジウム、およびメタンスルホン酸エチル(EMS)からなる群より選択される、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
電離放射線がX線、ガンマ線、高速中性子照射、およびUV照射からなる群より選択される、請求項8に記載の方法。
【請求項１１】
変異誘発がTALENを用いて引き起こされる、請求項5に記載の方法。
【請求項１２】
変異誘発がジンクフィンガー技術を用いて引き起こされる、請求項5に記載の方法。
【請求項１３】
第1のタバコ系統の少なくとも1つの植物を第2のタバコ系統の少なくとも1つの植物と交配させる段階であって、第1のタバコ系統の植物は、SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有する、段階；および
該変異を有する後代タバコ植物について選択する段階；
を含んでなる、タバコ植物の作出方法。
【請求項１４】
前記変異を欠く植物からの葉と比べて少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す葉を含む後代タバコ植物について選択する段階をさらに含む、請求項13に記載の方法。
【請求項１５】
乾燥した場合に、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す葉を含む後代タバコ植物について選択する段階をさらに含む、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有するタバコ植物からの乾葉を含むタバコ製品。
【請求項１７】
葉が、前記変異を欠く植物からの葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、請求項16に記載のタバコ製品。
【請求項１８】
乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す、請求項17に記載のタバコ製品。
【請求項１９】
SEQ ID NO: 27、17、19、21、23、25、29、31、86、88、90、1、3、5、7、9、11、13、15、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、および84からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有するタバコ植物からの乾葉を提供する段階；および
該乾葉を用いてタバコ製品を製造する段階；
を含んでなる、タバコ製品の製造方法。
【請求項２０】
前記乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、請求項19に記載の方法。
【請求項２１】
前記乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す、請求項19に記載の方法。
【請求項２２】
前記変異が点変異、挿入、欠失、および置換からなる群より選択される、請求項1〜21のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
請求項1〜3のいずれか一項に記載の植物からの植物材料を提供する段階；および
植物組織中の1種または複数種のアルカロイドの量を測定する段階；
を含んでなる、植物のスクリーニング方法。
【請求項２４】
植物組織が葉である、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
植物組織が根である、請求項23に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
[本発明1001]
SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有する植物を含んでなるタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
[本発明1002]
前記植物からの葉が、前記変異を欠く植物からの葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、本発明1001のタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
[本発明1003]
前記植物からの乾葉（cured leaf）が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のタバコ特異的ニトロソアミン(TSNA)の減少した量を示す、本発明1002のタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種。
[本発明1004]
SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を含む、本発明1001〜1003のいずれかのタバコ交雑種、品種、系統、または栽培品種により産生された種子。
[本発明1005]
ニコチアナ・タバカム(Nicotiana tabacum)細胞において変異誘発を引き起こして突然変異細胞を作製する段階；
該突然変異細胞から1つまたは複数の植物を得る段階；および
SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を含む植物の少なくとも1つを同定する段階；
を含んでなる、タバコ植物の作出方法。
[本発明1006]
前記変異を欠く植物からの葉と比べて少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す葉を含む前記植物の少なくとも1つを同定する段階をさらに含む、本発明1005の方法。
[本発明1007]
乾燥した場合に、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す葉を含む前記植物の少なくとも1つを同定する段階をさらに含む、本発明1006の方法。
[本発明1008]
変異誘発が化学的変異原または電離放射線を用いて引き起こされる、本発明1005の方法。
[本発明1009]
化学的変異原が亜硝酸、アジ化ナトリウム、アクリジンオレンジ、臭化エチジウム、およびメタンスルホン酸エチル(EMS)からなる群より選択される、本発明1008の方法。
[本発明1010]
電離放射線がX線、ガンマ線、高速中性子照射、およびUV照射からなる群より選択される、本発明1008の方法。
[本発明1011]
変異誘発がTALENを用いて引き起こされる、本発明1005の方法。
[本発明1012]
変異誘発がジンクフィンガー技術を用いて引き起こされる、本発明1005の方法。
[本発明1013]
第1のタバコ系統の少なくとも1つの植物を第2のタバコ系統の少なくとも1つの植物と交配させる段階であって、第1のタバコ系統の植物は、SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有する、段階；および
該変異を有する後代タバコ植物について選択する段階；
を含んでなる、タバコ植物の作出方法。
[本発明1014]
前記変異を欠く植物からの葉と比べて少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す葉を含む後代タバコ植物について選択する段階をさらに含む、本発明1013の方法。
[本発明1015]
乾燥した場合に、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す葉を含む後代タバコ植物について選択する段階をさらに含む、本発明1014の方法。
[本発明1016]
SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有するタバコ植物からの乾葉を含むタバコ製品。
[本発明1017]
葉が、前記変異を欠く植物からの葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、本発明1016のタバコ製品。
[本発明1018]
乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す、本発明1017のタバコ製品。
[本発明1019]
SEQ ID NO: 1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、および90からなる群より選択される配列を有する1つまたは複数の内因性核酸に変異を有するタバコ植物からの乾葉を提供する段階；および
該乾葉を用いてタバコ製品を製造する段階；
を含んでなる、タバコ製品の製造方法。
[本発明1020]
前記乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のアルカロイドの減少した量を示す、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記乾葉が、前記変異を欠く植物からの乾葉と比べて、少なくとも1種のTSNAの減少した量を示す、本発明1019の方法。
[本発明1022]
前記変異が点変異、挿入、欠失、および置換からなる群より選択される、本発明1001〜1021のいずれかの方法。
[本発明1023]
本発明1001〜1003のいずれかの植物からの植物材料を提供する段階；および
植物組織中の1種または複数種のアルカロイドの量を測定する段階；
を含んでなる、植物のスクリーニング方法。
[本発明1024]
植物組織が葉である、本発明1023の方法。
[本発明1025]
植物組織が根である、本発明1023の方法。
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