【手続補正書】
【提出日】平成30年6月11日(2018.6.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a) 約0.5 mm〜約5 mmまたは約1 mm〜約2 mmという直径または最長寸法における長さを有し得る固体物体、1つまたは複数の凍結乾燥用試薬、および1つまたは複数のPCR試薬を容器中で混合する段階、
(b) 該固体物体、該1つまたは複数の凍結乾燥用試薬、および該1つまたは複数のPCR試薬を凍結乾燥して、凍結乾燥させたPCR試薬を形成する段階、
(c) 該凍結乾燥させたPCR試薬に固形ワックスを容器中で添加する段階、
(d) 該ワックスと該凍結乾燥させたPCR試薬を容器中で加熱して、該ワックスを融解し、該凍結乾燥させたPCR試薬に該ワックスを含浸させる段階、ならびに
(e) 該ワックスを再凝固させて、安定化させた、凍結乾燥させたPCR試薬を形成する段階
を含む、安定化させた、凍結乾燥させたPCR試薬の組成物を作製する方法。
【請求項２】
前記固体物体が、セラミックボール、ガラスボール、磁気ボール、または金属ボールである、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記凍結乾燥用試薬が、トレハロース、デキストラン、マンニトール、スクロース、ラフィノースのうちの1つもしくは複数、またはそれらの組み合わせを含む、請求項1記載の方法。
【請求項４】
段階(d)が真空下で行われる、請求項1記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
[本発明1001]
少なくとも1つの生物学的試薬を含む凍結乾燥ペレットを含む、安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬の組成物であって、該ペレットがワックスで被覆されているかまたは該ペレットにワックスが含浸されている、組成物。
[本発明1002]
少なくとも1つの生物学的試薬がポリペプチドである、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
ポリペプチドが抗体または酵素である、本発明1002の組成物。
[本発明1004]
酵素がポリメラーゼ酵素である、本発明1003の組成物。
[本発明1005]
ポリメラーゼ酵素が、DNAポリメラーゼ、Taqポリメラーゼ、逆転写酵素、RNAポリメラーゼ、またはKlenowポリメラーゼである、本発明1004の組成物。
[本発明1006]
酵素がヌクレアーゼである、本発明1003の組成物。
[本発明1007]
ヌクレアーゼがRNase HまたはRNase H2である、本発明1006の組成物。
[本発明1008]
少なくとも1つの生物学的試薬が少なくとも1つのオリゴヌクレオチドプライマーを含む、本発明1001の組成物。
[本発明1009]
凍結乾燥ペレットが緩衝液をさらに含む、本発明1002の組成物。
[本発明1010]
凍結乾燥ペレットがヌクレオシド三リン酸 (NTP) をさらに含む、本発明1001の組成物。
[本発明1011]
緩衝液が、HEPES、MES、MOPS、TRIS、またはBIS- TRISプロパンである、本発明1009の組成物。
[本発明1012]
NTPが、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP、またはそれらの組み合わせを含む、本発明1010の組成物。
[本発明1013]
凍結乾燥ペレットが少なくとも第1の非天然NTPをさらに含む、本発明1001の組成物。
[本発明1014]
非天然NTPがイソ塩基を含む、本発明1013の組成物。
[本発明1015]
非天然NTPが標識NTPである、本発明1013の組成物。
[本発明1016]
非天然NTPがダブシクル (dabcycl) diGTPまたはビオチン-diGTPである、本発明1014の組成物。
[本発明1017]
非天然NTPがフルオロ標識ヌクレオチドまたはクエンチャー標識ヌクレオチドある、本発明1013の組成物。
[本発明1018]
凍結乾燥ペレットが糖および／または安定剤をさらに含む、本発明1001の組成物。
[本発明1019]
糖が、トレハロース、デキストラン、マンニトール、スクロース、ラフィノース、またはそれらの組み合わせである、本発明1018の組成物。
[本発明1020]
糖が、トレハロースおよびデキストラン、マンニトールおよびデキストラン、またはトレハロースおよびマンニトールである、本発明1018の組成物。
[本発明1021]
凍結乾燥ペレットが、約1体積%〜10体積%のトレハロースおよび／または約1体積%〜10体積%のデキストランを含む、本発明1020の組成物。
[本発明1022]
安定剤がBSAである、本発明1018の組成物。
[本発明1023]
約0.1〜約1.0 mg/mlのBSAを含む、本発明1022の組成物。
[本発明1024]
前記ペレットに第1ワックスが含浸されている、本発明1001の組成物。
[本発明1025]
第1ワックスが含浸されたペレットが第2ワックスで被覆されている、本発明1024の組成物。
[本発明1026]
第1ワックスが室温で液体であり、第2ワックスが室温で固体である、本発明1025の組成物。
[本発明1027]
第1ワックスが第2ワックスよりも高い密度を有する、本発明1025の組成物。
[本発明1028]
ワックスが50℃未満の融点を有する、本発明1001の組成物。
[本発明1029]
ワックスが40℃未満の融点を有する、本発明1001の組成物。
[本発明1030]
ワックスが30℃〜50℃の融点を有する、本発明1001の組成物。
[本発明1031]
ワックスが石油ワックスである、本発明1001の組成物。
[本発明1032]
石油ワックスがパラフィンワックスまたはドコサンワックスである、本発明1031の組成物。
[本発明1033]
ワックスが植物ワックスである、本発明1001の組成物。
[本発明1034]
凍結乾燥ペレットがボールをさらに含む、本発明1001の組成物。
[本発明1035]
ボールがセラミックボールである、本発明1034の組成物。
[本発明1036]
ボールが磁気ボールまたは金属ボールである、本発明1034の組成物。
[本発明1037]
本発明1001〜1033のいずれかの組成物がその中に配置されている、入れ物。
[本発明1038]
チューブまたはウェルである、本発明1037の入れ物。
[本発明1039]
チューブまたはウェルがボールをさらに含む、本発明1038の組成物。
[本発明1040]
ボールが凍結乾燥ペレットの上部にある、本発明1039の組成物。
[本発明1041]
ボールが凍結乾燥ペレットの下部にある、本発明1039の組成物。
[本発明1042]
ボールがワックス中に包埋されている、本発明1039の組成物。
[本発明1043]
(a) 核酸を含む水性液体と、本発明1001のワックス被覆凍結乾燥ペレットとを容器中で混合する段階であって、該ワックス被覆凍結乾燥ペレットが1つまたは複数のPCRまたはRT-PCR試薬を含む、段階、
(b) ワックスを融解させる段階、
(c) 任意で、少なくとも1サイクルの逆転写を行う段階、および
(d) 少なくとも1サイクルのPCRを行う段階
を含む、PCRまたは逆転写 (RT)-PCRを行う方法。
[本発明1044]
段階 (c) または (d) の前に反応溶液を混合する段階をさらに含む、本発明1043の方法。
[本発明1045]
ワックスが凍結乾燥ペレットの下に配置され、水性液体よりも小さい比重を有する、本発明1043の方法。
[本発明1046]
ワックスを融解させ、それが水性液体の中を通って移動できるようにすることによって、反応物を混合する段階
をさらに含む、本発明1043の方法。
[本発明1047]
反応物の混合後に水性液体の均一性を測定する段階
をさらに含む、本発明1044の方法。
[本発明1048]
水性液体が均一でない場合に、付加的な混合を行う段階
をさらに含む、本発明1047の方法。
[本発明1049]
水性液体の均一性を測定する段階が、液体中の蛍光標識の蛍光を測定することを含む、本発明1044の方法。
[本発明1050]
ワックスを、水性液体と混合する前に、融解させる、本発明1043の方法。
[本発明1051]
水性液体が予め加熱され、予め加熱した水性液体とワックス被覆凍結乾燥ペレットとを混合することによってワックスが融解される、本発明1043の方法。
[本発明1052]
組成物がボールを含む、本発明1043の方法。
[本発明1053]
ボールの移動を誘導することによって反応溶液を混合する段階
をさらに含む、本発明1052の方法。
[本発明1054]
ボールの移動が重力によって誘導される、本発明1053の方法。
[本発明1055]
ボールが磁気ボールまたは金属ボールであり、ボールの移動が磁石によって誘導される、本発明1053の方法。
[本発明1056]
ボールが、水性液体／ワックス界面に接触することなく、容器の底から、水性液体／ワックス界面の、ボール直径の2倍以内の位置に移動させられる、本発明1055の方法。
[本発明1057]
(a) 生物学的試薬を凍結乾燥する段階、および
(b) 凍結乾燥させた生物学的試薬と接触しかつこれを取り囲むワックスバリアを形成して、安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬を形成する段階
を含む、安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬の組成物を作製する方法。
[本発明1058]
(a) 生物学的試薬を凍結乾燥する段階、
(b) 凍結乾燥させた生物学的試薬に第1ワックスを含浸させる段階、および
(c) 含浸させ凍結乾燥させた生物学的試薬を取り囲むワックスバリアを第2ワックスで形成して、安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬を形成する段階
を含む、安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬の組成物を作製する方法。
[本発明1059]
ワックスバリアを形成する段階が、生物学的試薬を凍結乾燥する前に、生物学的試薬とワックスを混合することを含む、本発明1057の方法。
[本発明1060]
ワックスが凍結乾燥機内で融解される、本発明1059の方法。
[本発明1061]
ワックスバリアを形成する段階が：
(a) 凍結乾燥させた生物学的試薬と固形ワックスを混合すること、および
(b) 固形ワックスを融解させて液体ワックスを形成すること
を含む、本発明1057の方法。
[本発明1062]
固形ワックスの融解が、ヒートブロック、オーブン、または電子レンジを用いて行われる、本発明1061の方法。
[本発明1063]
固形ワックスの融解が真空下で行われる、本発明1061の方法。
[本発明1064]
ワックスバリアを形成する段階が、凍結乾燥させた生物学的試薬と液体ワックスを混合することを含む、本発明1057の方法。
[本発明1065]
凍結乾燥させた生物学的試薬および液体ワックスを加熱する段階をさらに含む、本発明1064の方法。
[本発明1066]
凍結乾燥させた生物学的試薬および液体ワックスに真空を適用する段階をさらに含む、本発明1064または1065の方法。
[本発明1067]
ワックスを凝固させる段階をさらに含む、本発明1060〜1066のいずれかの方法。
[本発明1068]
安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬の上部にボールを置く段階をさらに含む、本発明1057の方法。
[本発明1069]
安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬の下部にボールを置く段階をさらに含む、本発明1057の方法。
[本発明1070]
安定化させた、凍結乾燥させた生物学的試薬を取り囲むワックス中にボールを包埋する段階をさらに含む、本発明1057の方法。
[本発明1071]
ボールが、セラミックボール、ガラスボール、磁気ボール、または金属ボールである、本発明1068〜1070のいずれかの方法。
[本発明1072]
生物学的試薬が1つまたは複数のPCR試薬を含む、本発明1057の方法。
[本発明1073]
生物学的試薬が1つまたは複数の抗体を含む、本発明1057の方法。
[本発明1074]
ワックスと生物学的試薬との体積比が1:2〜2:1である、本発明1057の方法。
[本発明1075]
(a) ボール、1つまたは複数の凍結乾燥用試薬、および1つまたは複数のPCR試薬を容器中で混合する段階、
(b) ボール、1つまたは複数の凍結乾燥用試薬、および1つまたは複数のPCR試薬を凍結乾燥して、凍結乾燥させたPCR試薬を形成する段階、
(c) 凍結乾燥させたPCR試薬にワックスを添加する段階、
(d) 凍結乾燥させたPCR試薬の周りのワックスを融解させる段階、ならびに
(e) ワックスを再凝固させて、安定化させた、凍結乾燥させたPCR試薬を形成する段階
を含む、安定化させた、凍結乾燥させたPCR試薬の組成物を作製する方法。
[本発明1076]
ボールが、セラミックボール、ガラスボール、または金属ボールである、本発明1075の方法。
[本発明1077]
金属ボールがステンレススチール球である、本発明1076の方法。
[本発明1078]
凍結乾燥用試薬が、トレハロース、デキストラン、マンニトール、スクロース、ラフィノースのうちの1つもしくは複数、またはそれらの組み合わせを含む、本発明1075の方法。
[本発明1079]
PCR試薬が、ポリメラーゼ、逆転写酵素、プライマー、またはヌクレオチド三リン酸のうちの1つまたは複数を含む、本発明1075の方法。
[本発明1080]
ワックスが、パラフィンワックス、ドコサン、またはシリコンワックスである、本発明1075の方法。
本発明のその他の目的、特色、および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、本発明の精神および範囲の内の様々な変更および修正が、この詳細な説明から当業者に明らかとなると考えられるため、詳細な説明および具体例は、本発明のある特定の態様を示しながら、例示として与えられているに過ぎないことが理解されるべきである。