(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
柿の果実の搾汁液と水と炭酸ナトリウムによるアルカリ水溶液との混合物を主原料とし、この主原料を全体量に対して少なくとも１％含有した新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）不活性化剤。
【請求項２】
柿の果実の搾汁液と水との混合溶液に、炭酸ナトリウムによるアルカリ水溶液を添加した混合物を全体量に対して少なくとも１％含有させる新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）不活性化剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）不活性化剤及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
昨今、猛威を振るう新型コロナウイルス（SARS-CoV-2ウイルス）に対しては、しだいにウイルス特性が判明し、ワクチンが開発されつつある。しかし、今度は変異種が登場し、ワクチンも効果が不安定で、現状では副作用が危惧されているものもある。【０００３】
感染の予防剤、抑制剤としては、例えば特許文献１（特開２０００−４４４７３号公報）には茶ポリフェノールを有効成分としたコロナウイルス感染予防剤が、特許文献２（特開２０１２−１３６４３６号公報）には松樹皮、ピーナッツ渋皮、ぶどう種子、小豆からポリフェノール成分を水抽出した乳酸菌発行物が抗コロナウイルス活性を向上させると、それぞれ記載されている。【０００４】
しかしながら、上記はいずでもコロナウイルス(SARSやMERS)に対するものであり、新型コロナウイルスに対するものではなかった。したがって、新型コロナウイルスに対して有効な感染予防剤、感染抑制剤は存在しない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０００−４４４７３号公報
【特許文献２】特開２０１２−１３６４３６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
解決しようとする問題は、新型コロナウイルスの感染予防、感染抑制に対して有効な不活性化剤が未だ存在しないことである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するため、本発明の新型コロナウイルス不活性化剤は、柿の果実の搾汁液と水と炭酸ナトリウムによるアルカリ水溶液との混合物を主原料とし、この主原料を全体量に対して少なくとも１％含有した。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、新型コロナウイルスの感染価を１／１００００程度まで下げることができた。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本発明の試験結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、新型コロナウイルスを不活性化するという目的を、柿の果実の搾汁液と水と炭酸ナトリウムによるアルカリ水溶液との混合物を主原料とし、この主原料を全体量に対して少なくとも１％含有したことで達成した。
【００１１】
また、上記新型コロナウイルス不活性化剤を得るためには、柿の果実の搾汁液と水との混合溶液に、炭酸ナトリウムによるアルカリ水溶液を添加した混合物を全体量に対して少なくとも１％含有させる手順を経ればよい。
【００１２】
例えば添加するアルカリ水溶液は、添加後の水素イオン指数ｐＨが８．５〜９．０であることが望ましい。この理由は、ｐＨ＝８．５より低いと酸化力の付与が不十分となり、ｐＨ＝９．０より高いと還元力がより多く失われるからである。
【００１３】
また、アルカリ水溶液としては、炭酸ナトリウム水溶液を用いることが望ましい。他に水酸化物も使用可能であるが、劇薬であり、操作に注意を要する他、人体への影響を考慮すると望ましくない。なお、クエン酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムは、柿の果実の搾汁液のｐＨを８．５程度とするために必要な量を溶解させることができなかった。
【００１４】
このようにすることで、柿の果実の搾汁液が完全にアルカリ化されるわけではないので、還元力という特性を損なうことなく酸化力という特性を付加することが可能となり、その結果、後述する低濃度であっても新型コロナウイルスの感染価を低下させることができたのではないかと推測する。
【実施例】
【００１５】
以下、図１を参照して、本発明の試験結果について説明する。試験材料及び被験物質など各種条件、試験手法は次のとおりである。【００１６】
（ウイルス）
SARS-CoV-2/JP/Hiroshima-46059T/2020
事前にDMEM(※Dulbecco's Modified Eagle Medium)で調整した冷凍保管ウイルス溶液（血清含まず）を使用。※ダルベッコ・フォークト変法イーグル最小必須培地【００１７】
（細胞）
VeroE6/TMPRSS2  ※アフリカミドリザルの腎臓細胞【００１８】
（被験物質）
・実施例１：本発明の１％水溶液
・比較例１：柿の果実の搾汁液と水の混合物の１％水溶液
・比較例２：緑茶エキスの５％水溶液
・比較対象：滅菌水【００１９】
（ウイルスとの反応条件）
被験物質：ウイルス  ＝  ９：１（容量比）
室温で３０分
※血清非存在下【００２０】
（試験方法）
被験物質とウイルス溶液を混合し、所定の反応を行った。
細胞毒性確認用に、被験物質とEMEM（Eagle's minimum; essential medium:イーグル最小必須培地）を混合し、所定の反応を行った。【００２１】
本反応液５０μリットルを４５０μリットルのEMEMと混合した。
EMEMで１０倍希釈を繰り返し、８段階希釈系を作成した。
細胞毒性確認用として、４段階希釈系を作成した。【００２２】
細胞に各希釈液１００μリットルを加え、３７℃、５％Ｃｏ2 下で１時間の感染処理を行った。ウイルス感染後、２０％FCS(※)含有EMEMを５０μリットル加え、Ｃｏ2 インキュベーター内で２日間培養した。※(FCS＝Fetal Calf Serum：ウシ胎児血清)
経日的に顕微鏡下で細胞変性効果（cytopathic effect；CPE）を確認した。【００２３】
細胞がウェルからはがれたことを確認後、１００μリットルのイソプロパノールを加え、１００μリットル固定液（エタノール：酢酸  ＝  ５：１）を加え、一晩静置した。【００２４】
固定液を捨て、染色液（０．５％アミドブラック入りエタノール：酢酸：水  ＝  ４５：１０：４５）を各ウェルに３０μリットル分注し、ウェル全体に行きわたらせ、１分程度おいて流水ですすぎ、ウイルス感染の有無を目視で判定した。【００２５】
５０％感染量(TCID50／ｍリットル)は、Behrens-karber法で算出した。
TCID：Tissue Culture Infectious Dose＝組織培養感染量
Behrens-karber法による算出
CID50＝（最も低い希釈倍率）×（段階希釈した倍率）Σ-0.5
Σ＝（各希釈段階における細胞変性が認められたウェル数）／（検体数）の総和【００２６】
（結果）
上記試験の結果を図１と下記表１に示す。図１において斜線ハッチングはウイルス感染価(SARS-CoV-2添加)、ドットハッチングは細胞毒性(SARS-CoV-2無添加)を示す。図１において、本発明の細胞毒性は確認されなかった。
また、下記、表１においては、本発明は、比較対象に対して常用対数で４．８のSARS-CoV-2の不活性効果を有した。さらに、本発明は、比較例１，２に対して常用対数で共におよそ１．５のSARS-CoV-2の不活性効果を有した。【００２７】
【表１】
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【要約】
【課題】新型コロナウイルスに対して有効な感染予防剤、感染抑制剤が未だ存在しないことに対応することを課題とする。
【解決手段】本発明は、柿の果実の搾汁液と水とアルカリ水溶液との混合物を主原料としている。
【効果】本発明によれば、新型コロナウイルスの感染価を１／１００００程度下げることができた。
【選択図】図１【図１】
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