(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性医薬組成物であって、
・約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇの化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと
【化１】
0006964679.tif 000026
・約２．５重量％〜１０重量％のグリシンである増量剤と、
・約０．０５重量％〜０．４重量％のポリソルベート２０である界面活性剤と、
・リン酸緩衝水溶液であって、前記リン酸緩衝液の総量が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸緩衝水溶液と、を含み、
前記水性医薬組成物のｐＨが約７〜８である、水性医薬組成物。
【請求項２】
水性医薬組成物であって、
・約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・約３重量％〜６重量％のグリシンと、
・約０．１重量％〜０．３重量％のポリソルベート２０と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液であって、前記リン酸ナトリウム緩衝水溶液の濃度が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記水性医薬組成物のｐＨが７．５±０．２である、請求項１に記載の水性医薬組成物
。
【請求項３】
水性医薬組成物であって、
・約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・５±０．５重量％のグリシンと、
・約０．３重量％のポリソルベート２０と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液であって、前記リン酸ナトリウム緩衝水溶液の濃度が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記水性医薬組成物のｐＨが７．５±０．２である、請求項１に記載の水性医薬組成物。
【請求項４】
結晶形態である前記化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドが、前記組成物の調製に使用される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の水性医薬組成物。
【請求項５】
凍結乾燥医薬組成物の調製方法であって、前記方法の医薬が、
ａ）請求項１〜４のいずれか一項に記載の水性医薬組成物を調製する工程と、
ｂ）前記水性医薬組成物を凍結乾燥して、ケーキを形成する工程であって、
（ｉ）前記液体製剤を固体状態に変換するのに十分な期間にわたって第１の温度で前記水性医薬組成物を凍結させる工程であって、前記第１の温度が約−５５℃〜−２５℃の範囲である、工程と、
（ｉｉ）前記凍結組成物を第２の温度でアニーリングする工程であって、前記第２の温度が約−２０℃〜−１℃の範囲である、工程と、
（ｉｉｉ）前記凍結組成物を第３の温度で真空に曝す工程であって、前記第３の温度が約−５５℃〜−２５℃の範囲である、工程と、
（ｉｖ）前記組成物を前記真空中で第４の温度で乾燥させる工程であって、前記第４の温度が約２０℃〜４０℃の範囲である、工程と、を含む方法を使用する工程と、を含む、方法。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の水性医薬組成物を凍結乾燥することによって調製される、凍結乾燥医薬組成物。
【請求項７】
前記凍結乾燥医薬組成物が容器中にある、請求項６に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項８】
前記凍結乾燥医薬組成物が、約２重量％未満の残存水分含量を有する、請求項６又は７に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項９】
前記凍結乾燥医薬組成物が、室温及び約７５％以下の相対湿度で少なくとも６ヶ月間化学的に安定かつ物理的に安定である、請求項６〜８のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１０】
薬剤として使用するための、請求項１〜４又は６〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
潰瘍、手指潰瘍、糖尿病性壊疽、糖尿病性足潰瘍、肺高血圧症、肺動脈高血圧症、フォンタン病及びフォンタン病に関連する肺高血圧、サルコイドーシス及びサルコイドーシス
に関連する肺高血圧、末梢循環障害、結合組織疾患、任意のステージの糸球体腎炎及び糖尿病性腎症を含む慢性腎疾患、器官若しくは組織の線維症が関与する疾患、又は呼吸器疾患の予防又は治療に使用するための、請求項１〜４又は６〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
再構成された医薬組成物の調製方法であって、請求項６〜９のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物を、少なくとも１つの希釈剤を前記凍結乾燥組成物に添加することによって再構成する工程を含む、方法。
【請求項１３】
請求項６〜８のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物から調製される、再構成された医薬組成物。
【請求項１４】
前記再構成された医薬組成物が容器中にある、請求項１３に記載の再構成された医薬組成物。
【請求項１５】
前記再構成された医薬組成物が、約２分未満の再構成時間で再構成される、請求項１３又は１４に記載の再構成された医薬組成物。
【請求項１６】
前記再構成された医薬組成物が、希釈剤としての注射用水又は生理食塩水を使用して再構成され、前記再構成された医薬組成物の総体積が、約２〜１０ｍＬである、請求項１３又は１４に記載の再構成された医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の再構成された医薬組成物又は前記再構成された医薬組成物の一部が、さらに希釈された組成物であって、約４．５μｇ／ｍＬ、９μｇ／ｍＬ、１３．５μｇ／ｍＬ、１８μｇ／ｍＬ、２２．５μｇ／ｍＬ、２７μｇ／ｍＬ、３１．５μｇ／ｍＬ、又は３６μｇ／ｍＬの量の化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドを含有する、前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物。
【請求項１８】
前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物が、約１０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満のオスモル濃度を有する、請求項１７に記載の再構成されて、さらに希釈された医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、静脈内（ｉ．ｖ．）投与に好適である、２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド（セレキシパグ（Selexipag）、ＮＳ−３０４、ＡＣＴ−２９３９８７；以後、化合物）に関する。
【０００２】
【化１】
0006964679.tif 000002
【背景技術】
【０００３】
セレキシパグ及びその活性代謝産物２−（４−（（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ）ブトキシ）酢酸（ＭＲＥ−２６９、ＡＣＴ−３３３６７９）の調製及び医薬使用は、国際公開第２００２／０８８０８４号、同第２００９／１５７３９６号、同第２００９／１０７７３６号、同第２００９／１５４２４６号、同第２００９／１５７３９７号、同第２００９／１５７３９８号、同第２０１０／１５０８６５号、同第２０１１／０２４８７４号、Ｎａｋａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ（２００７），１５，７７２０−７７２５、Ｋｕｗａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ（２００７），３２２（３），１１８１−１１８８、Ｋｕｗａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ（２００８），３２６（３），６９１−６９９、Ｏ．Ｓｉｔｂｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ（２０１５），３７３，２５２２−３３、Ａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ（２００７），１５，６６９２−６７０４、Ａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１５），５８，７１２８−７１３７に記載されている。ある特定の製剤は、国際公開第２０１３／０２４０５１号及び同第２０１４／０６９４０１号に開示されている。
【０００４】
具体的には、セレキシパグ又はその活性代謝産物は、潰瘍、手指潰瘍、糖尿病性壊疽、糖尿病足潰瘍、褥瘡（床ずれ）、高血圧症、肺高血圧症、肺動脈高血圧症、フォンタン病及びフォンタン病に関連する肺高血圧、サルコイドーシス及びサルコイドーシスに関連する肺高血圧、末梢循環障害（例えば、慢性動脈閉塞、間欠性跛行、末梢塞栓症、振動症候群、レイノー病）、結合組織疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、強皮症、混合性結合組織疾患、血管炎症候群）、経皮経管冠動脈形成術後（ＰＴＣＡ）の再閉塞／再狭窄、動脈硬化、血栓症（例えば、急性期脳血栓症、肺塞栓症）、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）、糖尿病性神経障害、虚血性障害（例えば、脳梗塞、心筋梗塞）、狭心症（例えば、安定狭心症、不安定狭心症）、任意のステージの糸球体腎炎及び糖尿病性腎症を含む慢性腎疾患、アレルギー、気管支喘息、アテレクトミー及びステント移植などの冠動脈インターベンション後の再狭窄、透析による血小板減少症、臓器又は組織の線維症が関与する疾患［例えば、尿細管間質性腎炎などの腎疾患）、呼吸器疾患（例えば、（通常の）間質性肺炎／（特発性）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患）、消化性疾患（例えば、肝硬変、ウイルス性肝炎、慢性膵炎、及びスキルス胃癌）、心血管疾患（例えば、心筋線維症）、骨及び関節
疾患（例えば、骨髄線維症及び関節リウマチ）、皮膚疾患（例えば、手術後の瘢痕、熱傷による瘢痕、ケロイド、及び肥厚性瘢痕）、産科疾患（例えば、子宮筋腫）、泌尿器疾患（例えば、前立腺肥大）、他の疾患（例えば、アルツハイマー病、硬化性腹膜炎、Ｉ型糖尿病、及び手術後臓器癒着）］、勃起機能不全（例えば、糖尿病性勃起機能不全、心因性勃起機能不全、精神病性勃起機能不全、慢性腎不全に関連する勃起機能不全、前立腺を除去するための骨盤内手術後の勃起機能不全、並びに老化及び動脈硬化に関連する血管性勃起機能不全）、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病、腸結核、虚血性大腸炎、及びベーチェット病に関連する腸潰瘍）、胃炎、胃潰瘍、虚血性眼科障害（例えば、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、虚血性視神経障害）、突発性難聴、無血管性骨壊死、非ステロイド性抗炎症剤の投与によって引き起こされる腸損傷、並びに腰部脊柱管狭窄症に関連する症状の予防剤又は治療薬として有用であり得る。
【０００５】
セレキシパグは、肺動脈高血圧症の治療に有益であることが示された。第ＩＩＩ相臨床試験では、肺動脈高血圧症を有する患者間で、肺動脈高血圧症に関連する死又は合併症の主要な複合エンドポイントのリスクは、プラセボを受けた患者間よりもセレキシパグを受けた患者間で有意に低かった。セレキシパグは、例えば、米国で販売承認を受けており、疾患の進行を遅延させ、ＰＡＨの入院リスクを低減させるための肺動脈高血圧症（ＰＡＨ、ＷＨＯグループＩ）の治療について示されている。
【０００６】
これまでに、１日２回の経口投与を意図したセキシパグの標準的なフィルムコーティング錠剤製剤が使用されており、賦形剤は、Ｄ−マンニトール、コーンスターチ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びステアリン酸マグネシウムを含み、錠剤は、ヒプロメロース、プロピレングリコール、二酸化チタン、カルナウバワックスを酸化鉄の混合物と一緒に含有するコーティング材料でフィルムコーティングされる。
【０００７】
セレキシパグは、哺乳動物、特にヒトにおいて、活性代謝産物２−（４−（（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ）ブトキシ）酢酸の持続的な選択的ＩＰ受容体アゴニスト活性を発揮することができるプロドラッグとして（ＩＰ受容体に対するある程度のアゴニスト活性をそれ自体で保持しながら）機能すると考えられる。セレキシパグのインビボ代謝は、可能性として、活性を延長し、かつ高濃度のＰＧＩ２アゴニストに関連する典型的な有害反応を低減させる「遅放出機構」のような作用を発揮し得る（Ｋｕｗａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ（２００７），３２２（３），１１８１−１１８８）。
【０００８】
ＰＧＩ２アゴニストに関連する有害反応はまた、特定のアップタイトレーション（up-titration）スケジュールによって対処される。経口セレキシパグの推奨開始用量は、２００マイクログラムであり、１日２回付与される。次いで、１日２回での２００マイクログラムの増分で、通常は１週間の間隔をもって、１日２回での最大１６００マイクログラムの最大許容用量まで、用量を増加させる。患者が許容することができない用量に達した場合、投与量は前の許容用量まで低減されるべきである。
【０００９】
ある特定の場合では、セレキシパグの経口製剤の使用は、（例えば、緊急ケアにおいて、又は患者が何らかの理由で錠剤を飲み込めない場合に）不適切又は不可能であり得る。さらに、ある特定の疾患の治療は、短期間の治療又は治療／非治療の交互期間を含む治療を必要とするだけかもしれず、この場合、当該のアップタイトレーションスケジュールは不適切であり得る。そのような疾患は、例えば、潰瘍、手指潰瘍、糖尿病性壊疽、糖尿病足潰瘍、褥瘡（床ずれ）、末梢循環障害などを含み得る。したがって、セレキシパグのための安定かつ再現可能な静脈内製剤を開発する必要がある。第１相試験「絶対的経口バイオアベイラビリティ試験、健康な被験体における新規な経口プロスタサイクリンＩＰ受容
体アゴニスト」では、セレキシパグは、経口投与されたとき、又は静脈内注入により投与されたとき、概して良好な耐容性を示した（Ｈｕｒｓｔ，Ｐ．Ｋａｕｆｍａｎｎ，Ｍ．Ｒｉｃｈａｒｄ，Ｂ．Ａｓｔｒｕｃ，Ｊ．Ｄｉｎｇｅｍａｎｓｅ、２０１６年９月２５〜２７日の米国ベセスダでのＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ年次会合で提示されたポスター）。さらに、「安定した肺動脈高血圧症を有する被検体における経口セレキシパグから静脈内セレキシパグへの切り替えの安全試験」は、２０１７年６月１５日に投稿されている（ｈｔｔｐｓ：／／ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０３１８７６７８）。
【００１０】
セレキシパグを含むこのような静脈内製剤の開発における特定の困難は、セレキシパグの必要な投与量が１日当たりマイクログラム〜１桁ミリグラムの範囲にある可能性が高いことであり、それにより注入用量の厳格な定量的制御を必要とするという事実から生じる。例えば、シリンジ又は管に対する活性成分の吸着は、セレキシパグ静脈内製剤の適合性に影響を及ぼし得る。さらに、セレキシパグが加水分解性プロドラッグであるとの性質により、活性代謝産物への早期加水分解は、そのような静脈内製剤では防止されるべきである。したがって、化学的安定性を含む安定性は、静脈内投与に好適な医薬組成物の選択のための別の重要な基準であり得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
セレキシパグ、増量剤、界面活性剤、及び緩衝液を含むある特定の組成物のみが、安定したケーキに再現可能に凍結乾燥することができ、静脈内投与に好適な制御された組成物に再構成することができる、化学的及び物理的に安定な水性製剤をもたらすことが今や見出された。管及びシリンジへの活性成分の吸着を回避することができた。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
１）第１の実施形態は、水性医薬組成物であって、
・（当該水性医薬組成物の総重量に対して）約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ、特に約０．５ｇ／ｋｇの化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと
【００１３】
【化２】
0006964679.tif 000003
・約２．５重量％〜１０重量％のグリシンである増量剤（特に約３重量％〜６重量％のグリシン、特に約５重量％のグリシン）（すなわち、約２５〜１００ｇ／ｋｇ、特に約３０〜６０ｇ／ｋｇ、特に約５０ｇ／ｋｇのグリシン）と、
・約０．０５重量％〜０．４重量％のポリソルベート２０である界面活性剤（特に約０．１重量％〜０．３重量％のポリソルベート２０、特に約０．１、０．２、又は０．３重量％のポリソルベート２０）（好ましくは、約５〜４０ｇ／ｋｇ、特に約１０〜３０ｇ／ｋｇ、特に約１０、２０、又は３０ｇ／ｋｇの約１０重量％ポリソルベート２０の水溶液が使用される）と、
・リン酸緩衝水溶液（特にリン酸ナトリウム緩衝水溶液（すなわち、Ｈ３ＰＯ４及びＮａＯＨからなる緩衝水溶液））であって、当該リン酸緩衝液の総量は、（当該水性医薬組成物の総重量に対して）約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇであり、特に約１０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水と、を含み、
当該水性医薬組成物のｐＨが、約７〜８である（特にｐＨが７．５±０．３であり、特に７．５±０．２である）、水性医薬組成物に関する。
【００１４】
実施形態１）による本組成物は、遊離塩基形態の化合物を含有する液体等方性混合物である。化合物は、非晶質、又は１つ若しくは２つ以上の結晶形態、又は非晶質及び結晶形態（複数可）の混合物の本組成物の調製に使用され得る。結晶形態は、無水物、又は溶媒和物若しくは水和物形態であってもよい。このような形態学的形態は、化合物の範囲に包含される。好ましくは、化合物は結晶形態で使用される。本組成物は、本質的に純粋な形態の化合物を包含する。化合物の量は、実際の化学純度、又は化合物の溶媒和物若しくは水和物の存在を考慮して調整され得る。
【００１５】
「増量剤」という用語は、活性医薬成分、及び組成物のさらなる賦形剤と化学的に適合性であり、凍結乾燥組成物に質量を加える物質又は構成成分を指す。本発明の実施形態１）による医薬組成物に好適な増量剤は、グリシンである。医薬組成物に典型的に使用される増量剤は、例えば、マンニトール、トレハロース、Ｌ−プロリン、及びポリビニルピロリドンである。
【００１６】
本発明の範囲内で使用される賦形剤ポリソルベート２０又はポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートは、市販のポリソルベート２０（ＣＡＳ番号９００５−６４−５，Ｅ４３２）、好ましくはＣｒｏｄａ  Ａｍｅｒｉｃａｓ／Ｍｅｒｃｋ  ＣｈｅｍｉｃａｌｓからのＴｗｅｅｎ（登録商標）２０／Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０  ＥＭＰＲＯＶＥ（登録商標）を指す。ポリソルベート２０の代替商業形態は、例えば、Ａｒｍｏｔａｎ（登録商標）ＰＭＬ２０、Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）ＰＯＥ−Ｌ、Ｃｒｉｌｌｅｔ（商標）１、Ｅｕｍｕｌｇｉｎ（登録商標）ＳＭＬ２０、Ｇｌｙｃｏｓｐｅｒｓｅ（登録商標）Ｌ−２０、Ｌｉｐｏｓｏｒｂ（登録商標）Ｌ−２０、Ｍｏｎｔａｎｏｘ（商標）２０、Ｎｏｎｉｏｎ（登録商標）ＬＴ−２２１、Ｒｉｔａｂａｔｅ２０、Ｓｏｒｂａｘ  ＰＭＬ−２０、Ｔ−Ｍａｚ（登録商標）２０、Ｐｒｏｔａｓｏｒｂ（商標）Ｌ−２０、Ｔｅｇｏ（登録商標）ＳＭＬ２０、Ａｌｋｅｓｔ（登録商標）ＴＷ２０、Ｗｉｌｓｕｒｆ（登録商標）ＴＦ−２０である。
【００１７】
ポリソルベート２０は、（非イオン性）界面活性剤（detergent）／乳化剤／界面活性剤（surfactant）として定義することができる。界面活性剤、特に市販の界面活性剤製品は、通常は純粋な化合物ではないが、むしろ１つの主な界面活性剤成分を含有する化合物の複雑な混合物であり得る。ポリソルベート２０は、例えば、ソルビタンのエトキシル化後にラウリン酸を添加することによって形成されるポリソルベート型非イオン性界面活性剤である。エトキシル化プロセスは、２０個の繰り返し単位のポリエチレングリコールを有する分子を残存させる。実際には、これらは４つの異なる鎖にわたって分布し、これにより、ある範囲の化学種を含有する商業製品となる。ポリソルベート２０は、様々な量の前記の主な界面活性剤成分、及び残存量のさらなる成分、例えば、残存ポリエチレングリコール（化学生成プロセスに由来し得る）などを含有し得る。化学種、及び商業製品に含まれる可能性があるさらなる残存成分の上述の変動は、本明細書で使用される「ポリソルベート２０」の用語の範囲に包含される。
【００１８】
実施形態１）、及び以下の実施形態２）〜６）に定義される医薬組成物の総重量％は１００である。
【００１９】
あらゆる疑義を避けるために、実施形態１）及び以下の実施形態２）〜６）に定義される医薬組成物は、さらなる従来の成分及び／又は添加剤をさらに含んでもよく、これらは、単独で又は組み合わせて使用されてもよい（必要量、すなわち、前記のさらなる従来の成分及び／又は添加剤の最大量は、総重量％を１００とするために低減する必要があり得
ることは周知である）。実施形態１）及び以下の実施形態２）〜６）で定義される医薬組成物は、さらなる増量剤又はさらなる界面活性剤を含まないと理解される。
【００２０】
本明細書に言及されるこれらの及び他の医薬的に許容される賦形剤並びに手順のための対象について広範な文献を参照するが、例えば、Ｒ．Ｃ．Ｒｏｗｅ，Ｐ．Ｊ．Ｓｅｓｋｅｙ，Ｓ．Ｃ．Ｏｗｅｎ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  ２００６；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５），Ｐａｒｔ  ５，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ」［Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓにより出版］）を参照のこと。
【００２１】
このような従来の成分又は添加剤の例は、塩（例えば、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２）などの等張調整剤である。さらなる従来の成分又は添加剤は、例えば、注射用静菌水中で使用されるような抗菌性防腐剤である。例はベンジルアルコールである。
【００２２】
各々の薬学的に許容される賦形剤の絶対量及び他の薬学的に許容される賦形剤についての相対的な量は、医薬組成物の所望の特性に依存し、日常的な実験によって選択することができる。
【００２３】
医薬組成物の総重量パーセントは１００である。
【００２４】
「医薬組成物」という用語は、「製剤」又は「組成物」という用語と交換可能である。
【００２５】
温度に関して使用されない限り、数値「Ｘ」の前に位置する「約」という用語は、本出願において、Ｘ−Ｘの１０％〜Ｘ＋Ｘの１０％にわたる間隔、好ましくはＸ−Ｘの５％〜Ｘ＋Ｘの５％にわたる間隔を指す（それぞれ１００％超の０％未満のパーセント値は適用可能ではないことは十分に理解される）。約という用語が範囲の前に位置する場合、それぞれの間隔は範囲の両方の値に適用される。約という用語が特定の値の列挙の前に位置する場合、それぞれの間隔は列挙の全ての値に適用される。例えば、約１０、２０、又は３０ｇ／ｋｇの約１０重量％ポリソルベート２０の水溶液は、１０±１、２０±２、又は３０±３ｇ／ｋｇの１０±１重量％ポリソルベート２０の水溶液、好ましくは１０±０．５、２０±１、又は３０±１．５ｇ／ｋｇの１０±０．５重量％ポリソルベート２０の水溶液を指す。温度の特定の場合において、温度「Ｙ」の前に位置する「約」という用語は、本出願において、Ｙ−１０℃〜Ｙ＋１０℃の温度にわたる間隔を指し、好ましくは、温度が少なくとも３０℃である場合、Ｙ−５℃〜Ｙ＋５℃にわたる間隔を指し、又は温度が３０℃未満である場合、Ｙ−２℃〜Ｙ＋２℃にわたる間隔を指す。
【００２６】
「〜（between）」又は「〜（to）」という語が数値範囲を説明するために使用される場合はいつでも、示された範囲の端点は明示的に開示され、その範囲内に含まれると理解すべきである。例えば、温度範囲が４０℃〜８０℃（between）（又は４０℃〜８０℃（to））であると記載されている場合、これは、端点４０℃及び８０℃がその範囲内に含まれることを意味し、あるいは、変数が１〜４（又は１〜４）の整数であると定義されている場合、これは、その変数が整数１、２、３、又は４であることを意味する。
【００２７】
「重量％（ｗｗ％）」（又は％（ｗ／ｗ））との表示は、考慮される組成物の総重量と比較した重量パーセントを指す。別に明記しない限り、考慮される総重量は医薬組成物の総重量である。ある特定の値が％値として与えられている場合、さらなる特定がない場合には、そのような値は重量％を指す。比率に関する表示（ｗｔ／ｗｔ）は、それぞれの成分の重量比を指す。
【００２８】
「から本質的になる」という用語は、本発明の文脈では、特に、それぞれの組成物が、それぞれの実施形態において明示される量で、少なくとも９０重量％、特に少なくとも９５重量％、特に少なくとも９９重量％の量、好ましくは１００重量％の量のそれぞれの組成物（すなわち、「からなる」の意で）からなることを意味すると理解される。「含む（comprising）」という用語は、好ましくは、「から本質的になる」という用語の意味で理解される。
【００２９】
「本質的に」という用語は、例えば、「本質的に純粋」などの用語で使用される場合、本発明の文脈では、特に、それぞれの組成物／化合物などが、少なくとも９０重量％、特に少なくとも９５重量％、特に少なくとも９９重量％の量のそれぞれの純粋な組成物／化合物などからなることを意味すると理解される。
【００３０】
本発明のさらなる実施形態を以下に提示する：
２）別の実施形態では、本発明は、
・約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ、特に約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・約３重量％〜６重量％のグリシン、特に５±０．５重量％のグリシン（すなわち、５０±５ｇ／ｋｇのグリシン）と、
・約０．１重量％〜０．３重量％（特に約０．１重量％、０．２重量％、又は０．３重量％）のポリソルベート２０（好ましくは、約１０ｇ／ｋｇ、２０ｇ／ｋｇ、又は３０ｇ／ｋｇの１０重量％ポリソルベート２０の水溶液が使用される）と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液（Ｈ３ＰＯ４及びＮａＯＨからなる）であって、当該リン酸ナトリウム緩衝水溶液の濃度が、約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇ、特に約１０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記医薬組成物のｐＨが、７．５±０．２である、実施形態１）に記載の医薬組成物に関する。
【００３１】
３）別の実施形態では、本発明は、
・約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ、特に約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・５±０．５重量％のグリシン（すなわち、５０±５ｇ／ｋｇのグリシン）と、
・約０．３重量％のポリソルベート２０（好ましくは、約３０ｇ／ｋｇの約１０重量％ポリソルベート２０の水溶液が使用される）と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液（すなわち、Ｈ３ＰＯ４及びＮａＯＨからなる緩衝水溶液）であって、当該リン酸ナトリウム緩衝液の濃度が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇ、特に約１０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記医薬組成物のｐＨが、７．５±０．２である、実施形態１）に記載の医薬組成物に関する。
【００３２】
４）別の実施形態では、本発明は、
・約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ、特に約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・５±０．５重量％のグリシン（すなわち、５０±５ｇ／ｋｇのグリシン）と、
・約０．２重量％のポリソルベート２０（好ましくは、約２０ｇ／ｋｇの約１０重量％ポリソルベート２０の水溶液が使用される）と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液（すなわち、Ｈ３ＰＯ４及びＮａＯＨからなる緩衝水
溶液）であって、当該リン酸ナトリウム緩衝液の濃度が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇ、特に約１０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記医薬組成物のｐＨが、７．５±０．２である、実施形態１）に記載の医薬組成物に関する。
【００３３】
５）別の実施形態では、本発明は、
・約０．１ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ、特に約０．５ｇ／ｋｇの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドと、
・５±０．５重量％のグリシン（すなわち、５０±５ｇ／ｋｇのグリシン）と、
・約０．１重量％のポリソルベート２０（好ましくは、約１０ｇ／ｋｇの約１０重量％ポリソルベート２０水溶液が使用される）と、
・リン酸ナトリウム緩衝水溶液（すなわち、Ｈ３ＰＯ４及びＮａＯＨからなる緩衝水溶液）であって、当該リン酸ナトリウム緩衝液の濃度が約５ｍｍｏｌ／ｋｇ〜２０ｍｍｏｌ／ｋｇ、特に約１０ｍｍｏｌ／ｋｇである、リン酸ナトリウム緩衝水溶液と、を含み、
前記医薬組成物のｐＨが、７．５±０．２である、実施形態１）に記載の医薬組成物に関する。
【００３４】
６）別の実施形態では、本発明は、結晶形態、特に、本質的に純粋な結晶形態（好ましくは、本質的に純粋な結晶形態Ｉ又は国際公開第２０１０／１５０８６５号に開示されるような本質的に純粋な結晶形態ＩＩ）の化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドが、前記組成物の調製に使用される、実施形態１）〜５）のいずれか１つに記載の医薬組成物に関する。
【００３５】
本発明による医薬組成物は、凍結乾燥前には、好ましくは、凍結乾燥ケーキの貯蔵に好適であり、かつ医薬組成物のその後の再構成に好適である、容器（単位用量又は複数用量容器、例えばバイアル）に充填される。そのような容器は、不活性ガス雰囲気（特に窒素雰囲気など）下で充填されてもよい。そのような不活性ガス雰囲気は、活性成分の酸化的分解を低減し得る。したがって、さらなる実施形態は、例えば、実施形態１）〜６のいずれか１つに記載の医薬組成物を充填したバイアル、アンプル、シリンジ、連結チャンバ装置、ペン装置、又はオートインジェクタ装置、特にバイアルなどの容器に関する。
【００３６】
７）さらなる実施形態は、凍結乾燥医薬組成物（すなわち、凍結乾燥ケーキ）の調製方法であって、前記方法医薬が、
ａ）実施形態１）〜６）のいずれか１つに記載の水性医薬組成物を調製する工程と、
ｂ）前記水性医薬組成物を凍結乾燥して、ケーキを形成する工程であって、
（ｉ）液体製剤を固体状態に変換するのに十分な期間にわたって（特に少なくとも約１時間の期間にわたって）第１の温度で前記水性医薬組成物を凍結させる工程であって、前記第１の温度が、約−５５℃〜−２５℃の範囲（特に約−４５℃）である、工程と、
（ｉｉ）凍結した組成物を第２の温度で（特に少なくとも約１時間、特に少なくとも約２時間）アニーリングする工程であって、前記第２の温度が、約−２０℃〜−１℃の範囲（特に約−１０℃〜−２℃、特に約−３℃）である、工程と、
（ｉｉｉ）凍結した組成物を第３の温度で真空（特に約０．１〜１．５ｍｂａｒ、特に約０．２〜１．２ｍｂａｒ、特に０．５±０．１ｍｂａｒの真空）に曝す工程であって、前記第３の温度が、約−５５℃〜−２５℃の範囲（特に約−４５℃）である、工程と、
（ｉｖ）前記真空中、第４の温度で（特に少なくとも約２時間、特に少なくとも約５時間、特に約５〜１５時間、約５〜１９時間、好ましくは約５〜２２時間又は５〜１５時間）、組成物を乾燥させる工程であって、前記第４の温度が、約２０℃〜４０℃の範囲
、特に約２５℃〜３５℃の範囲、特に約３５℃である、工程と、を含む方法を使用する工程と、を含み、
（ｖ）任意選択で、組成物を約２０℃〜３５℃、好ましくは２０℃のクロージング（closing）温度で保持してもよい、方法に関する。
【００３７】
「ケーキ」という用語は、液体製剤が凍結乾燥された（lyophilized）又は凍結乾燥された（freeze dried）ときに生じる乾燥固体材料を指す。
【００３８】
８）さらなる実施形態は、実施形態１）〜６）のいずれか１つに記載の水性医薬組成物を凍結乾燥することによって調製される、特に実施形態７）の方法を使用することによって調製される、凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００３９】
９）別の実施形態では、本発明は、前記凍結乾燥医薬組成物が容器中にある、特にバイアル又はシリンジ中、特にバイアル中にある、実施形態８）に記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００４０】
１０）別の実施形態では、本発明は、前記凍結乾燥医薬組成物が、約２重量％未満（例えば、カール・フィッシャー分析を使用して決定される）、特に約１．５重量％未満の残存含水量を有する、実施形態８）又は９）に記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００４１】
１１）別の実施形態では、本発明は、前記凍結乾燥医薬組成物が、室温及び約７５％以下の相対湿度で（特に約２５℃及び約６０％の相対湿度で）少なくとも６ヶ月間化学的に安定である、実施形態７）〜１０）のいずれか１つに記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００４２】
１２）別の実施形態では、本発明は、前記凍結乾燥医薬組成物が、約２〜８℃及び約７５％以下の相対湿度（特に約６０％の相対湿度）で少なくとも１２ヶ月間化学的に安定である、実施形態７）〜１０）のいずれか１つに記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００４３】
１３）別の実施形態では、本発明は、前記凍結乾燥医薬組成物の前記ケーキが、室温及び約７５％以下の相対湿度で（特に約２５℃及び約６０％の相対湿度で）少なくとも６ヶ月間物理的に安定である、実施形態７）〜１０）のいずれか１つに記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００４４】
１４）さらなる実施形態は、再構成された医薬組成物の調製方法であって、実施形態８）〜１３）のいずれか１つに記載の凍結乾燥医薬組成物を、少なくとも１つの希釈剤を前記凍結乾燥組成物に添加することによって再構成する工程を含む、方法に関する。
【００４５】
前記医薬組成物を再構成するのに好適な希釈剤には、安全で安定した、かつ薬学的に許容される担体である任意の希釈剤が含まれる。等張調整剤又はいくつかの等張調整剤の混合物を任意選択で含有する、特に注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）又は注射用静菌水（ＢＷＦＩ）などの注射用水（ＷＦＩ）が好ましい。好ましい希釈剤は、ＷＦＩ、特に（好ましくは生理的）生理食塩水溶液である。
【００４６】
１５）別の実施形態では、本発明は、前記希釈剤が、注射用水又は生理食塩水（特に生理食塩水、特に、約０．９重量％の濃度を有する生理的食塩水／生理食塩水溶液）である、実施形態２０）に記載の方法に関する。
【００４７】
１６）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、第２の希釈剤でさらに希釈される（特に約５０ｍＬの総体積に希釈される）（前記第２の希釈剤は、第１
の希釈剤と同じ又は異なっていてもよいと理解される）、実施形態１４）又は１５）による方法に関する。
【００４８】
１７）別の実施形態では、本発明は、前記第２の希釈剤が、生理食塩水、特に、約０．９重量％の濃度を有する生理的食塩水／生理食塩水溶液である、実施形態１６）に記載の方法に関する。
【００４９】
１８）さらなる実施形態は、実施形態８）〜１３）のいずれか１つに記載の凍結乾燥医薬組成物から調製される、特に実施形態１４）又は１５）の方法に従って調製される、再構成された医薬組成物であって、特に前記再構成された医薬組成物が、希釈剤として、注射用水（特に注射用滅菌水）又は生理食塩水（特に、約０．９重量％の濃度を有する生理的食塩水／生理食塩水溶液）を使用して再構成される、再構成された医薬組成物に関する。
【００５０】
１９）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、容器中にあり、特に、バイアル、アンプル、又はシリンジ中、特にバイアル中にある、実施形態１８）に記載の凍結乾燥医薬組成物に関する。
【００５１】
２０）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、約２分未満、特に約１分以下、特に約３０秒以下の再構成時間で再構成される、実施形態１８）又は１９）に記載の再構成された医薬組成物に関する。
【００５２】
２１）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、希釈剤として、注射用水（特に注射用滅菌水）又は生理食塩水（特に、約０．９重量％の濃度を有する生理的食塩水／食塩水溶液）を使用して再構成され、前記再構成された医薬組成物の総体積が、特に約２〜１０ｍＬ、特に約３〜４．５ｍＬ、又は好ましくは約８〜８．５ｍＬである、実施形態１８）〜２０）のいずれか１つに記載の再構成された医薬組成物に関する。
【００５３】
２２）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、約１５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満、特に約１０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満のオスモル濃度、特に約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満のオスモル濃度を有し、総体積が、特に約８ｍＬ〜８．５ｍＬである、実施形態１８）〜２１）のいずれか１つに記載の再構成された医薬組成物に関する。
【００５４】
２３）別の実施形態では、本発明は、前記再構成された医薬組成物が、約０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬ、特に約０．２２５ｍｇ／ｍＬの化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドを含有する、実施形態１８）〜２２）のいずれか１つに記載の再構成された医薬組成物に関する。
【００５５】
２４）さらなる実施形態は、前記再構成された医薬組成物又は前記再構成された医薬組成物の一部が、特に実施形態１６）又は１７）の方法に従ってさらに希釈され（特に、約５０ｍＬの総体積にさらに希釈され）、前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物が、約４．５μｇ／ｍＬ、９μｇ／ｍＬ、１３．５μｇ／ｍＬ、１８μｇ／ｍＬ、２２．５μｇ／ｍＬ、２７μｇ／ｍＬ、３１．５μｇ／ｍＬ、又は３６μｇ／ｍＬの化合物２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミドを含有し、前記量の許容誤差は、特に１０％、特に５％である、実施形態１８）〜２３）のいずれか１つに記載の静脈内投与用の再構成された医薬組成物に関する。
【００５６】
２５）別の実施形態では、本発明は、前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物が、生理食塩水（特に低張生理食塩水又は生理的食塩水、特に、約０．９重量％の濃度を有する生理的食塩水／生理食塩水溶液）を使用してさらに希釈され、特に、前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物の総体積が５０ｍＬである、実施形態２４）に記載の再構成されて、さらに希釈された医薬組成物に関する。
【００５７】
２６）別の実施形態では、本発明は、前記再構成されて、さらに希釈された医薬組成物が、約１０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満（特に約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満、特にほぼ等張）のオスモル濃度を有する、実施形態２４）又は２５）に記載の再構成されて、さらに希釈された医薬組成物に関する。
【００５８】
オスモル濃度は、流体１ｋｇ当たりの溶質の数によって表される流体濃度の測定値である。ヒト体内の細胞外流体の正常なオスモル濃度は、約２７５〜２９５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。高張溶液は、細胞外流体よりも高いオスモル濃度（約３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ超）を有し、生理的（又は等張）溶液は、体のオスモル濃度（約２７５〜２９５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）と同様のオスモル濃度を有し、低張溶液は、体液吸収を能動的に促進する、体よりも低いオスモル濃度（約２５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ未満）を有する。
【００５９】
本発明による医薬組成物は、薬剤として使用し得る。
【００６０】
本発明による医薬組成物は、静脈内投与に好適であり、皮下投与若しくは筋肉内投与などの代替の非経口投与経路、又はエアゾールに変換させる場合には吸入投与に好適であり得る。
【００６１】
本発明による医薬組成物は、特に、潰瘍、手指潰瘍、糖尿病性壊疽、糖尿病足潰瘍、褥瘡（床ずれ）、高血圧症、肺高血圧症、肺動脈高血圧症、フォンタン病及びフォンタン病に関連する肺高血圧、サルコイドーシス及びサルコイドーシスに関連する肺高血圧、末梢循環障害（例えば、慢性動脈閉塞、間欠性跛行、末梢塞栓症、振動症候群、レイノー病）、結合組織疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、強皮症、混合性結合組織疾患、血管炎症候群）、経皮経管冠動脈形成術後（ＰＴＣＡ）の再閉塞／再狭窄、動脈硬化、血栓症（例えば、急性期脳血栓症、肺塞栓症）、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）、糖尿病性神経障害、虚血性障害（例えば、脳梗塞、心筋梗塞）、狭心症（例えば、安定狭心症、不安定狭心症）、任意のステージの糸球体腎炎及び糖尿病性腎症を含む慢性腎疾患、アレルギー、気管支喘息、アテレクトミー及びステント移植などの冠動脈インターベンション後の再狭窄、透析による血小板減少症、臓器又は組織の線維症が関与する疾患［例えば、尿細管間質性腎炎などの腎疾患）、呼吸器疾患（例えば、間質性肺炎／（特発性）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患）、消化性疾患（例えば、肝硬変、ウイルス性肝炎、慢性膵炎、及びスキルス胃癌）、心血管疾患（例えば、心筋線維症）、骨及び関節疾患（例えば、骨髄線維症及び関節リウマチ）、皮膚疾患（例えば、手術後の瘢痕、熱傷による瘢痕、ケロイド、及び肥厚性瘢痕）、産科疾患（例えば、子宮筋腫）、泌尿器疾患（例えば、前立腺肥大）、他の疾患（例えば、アルツハイマー病、硬化性腹膜炎、Ｉ型糖尿病、及び手術後臓器癒着）］、勃起機能不全（例えば、糖尿病性勃起機能不全、心因性勃起機能不全、精神病性勃起機能不全、慢性腎不全に関連する勃起機能不全、前立腺を除去するための骨盤内手術後の勃起機能不全、並びに老化及び動脈硬化に関連する血管性勃起機能不全）、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病、腸結核、虚血性大腸炎、及びベーチェット病に関連する腸潰瘍）、胃炎、胃潰瘍、虚血性眼科障害（例えば、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、虚血性視神経障害）、突発性難聴、無血管性骨壊死、非ステロイド性抗炎症剤の投与によって引き起こされる腸損傷、並びに腰部脊柱管狭窄症に関連する症状の治療での使用のための医薬品の調製に使用されてもよく、及び／又はそれらの治療での使用に好適である。
【００６２】
本発明による医薬組成物は、特に、潰瘍、手指潰瘍、糖尿病性壊疽、糖尿病足潰瘍、高血圧症、肺高血圧症、肺動脈高血圧症、フォンタン病及びフォンタン病に関連する肺高血圧、サルコイドーシス及びサルコイドーシスに関連する肺高血圧、末梢循環障害（例えば、間欠性跛行、レイノー病）、結合組織疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、強皮症）、任意のステージの糸球体腎炎及び糖尿病性腎症を含む慢性腎疾患、臓器若しくは組織の線維症が関与する疾患［例えば、尿細管間質性腎炎などの腎疾患）、又は呼吸器疾患（例えば、（通常の）間質性肺炎／（特発性）肺線維症）］の治療での使用のための医薬品の調製に使用されてもよく、及び／又はそれらの治療での使用に特に好適である。
【００６３】
水性（例えば、再構成された、又は再構成されて、さらに希釈された）医薬組成物は、ある特定の期間中に、化合物の最初の含量の少なくとも８０％、好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９５％が、前記期間にわたって可溶化（solubilized）状態で維持される場合に物理的に「安定」であるとして考慮される。
【００６４】
凍結乾燥組成物（すなわち凍結乾燥ケーキ）は、ある特定期間中に、再構成時間及び／又は残存水分に関して３０％未満、好ましくは２０％未満、最も好ましくは１０％未満の変動が観察される場合、物理的に「安定」であるとして考慮される。さらに、ケーキの外観は、凍結乾燥組成物の物理的安定性を決定するための基準として考慮されてもよい。
【００６５】
医薬組成物は、特定条件下で及び特定期間中に、化合物の最初の含量の少なくとも８０％、特に少なくとも９５％、特に少なくとも９８％、好ましくは少なくとも９９％が前記条件下及び前記期間にわたって分解することなく維持される場合、化学的に「安定」であるとして考慮される。特に分解は、特定条件下で及び特定期間中に、１％未満、好ましくは０．５％未満の２−（４−（（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ）ブトキシ）酢酸（すなわち、化合物の加水分解から生じる生成物）を生じる分解として定義され得る。
【００６６】
さらに、特に任意の水性医薬組成物について、光への曝露下での化学的安定性（例えば、ＯＳＲＡＭ  Ｌ５８Ｗ／８４０ランプを６５ｃｍの距離で使用することによって測定される）をさらに考慮してもよい。化学的安定性を定義する当該の値は、光へのさらなる曝露がない場合である。
【００６７】
好ましくは、本発明の凍結乾燥医薬組成物は、５℃〜５０℃の温度及び約７５％以下の相対湿度で維持したときに、少なくとも６ヶ月間、好ましくは少なくとも１２ヶ月間化学的及び物理的に「安定」である。より好ましくは、それらは、１５℃〜４５℃の温度及び約７５％以下の相対湿度で維持したときに、少なくとも６ヶ月間又は好ましくは１２ヶ月間安定である。最も好ましくは、それらは、２５℃〜４０℃の温度及び約７５％以下の相対湿度、特に４０℃及び７５％の相対湿度、又は特に２５℃及び６０％の相対湿度で維持したときに、少なくとも６ヶ月間又は好ましくは１２ヶ月間安定である。
【００６８】
好ましくは、本発明の水性医薬組成物（例えば、凍結乾燥前の水性組成物、再構成された製剤、又は再構成されて、さらに希釈された製剤）は、５℃〜５０℃の温度で維持したときに、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間化学的及び物理的に「安定」である。より好ましくは、それらは、１５℃〜４５℃の温度に維持したときに、少なくとも６時間又は好ましくは１２時間安定である。最も好ましくは、それらは、２５℃〜４０℃の温度、特に室温で維持したときに、少なくとも６時間又は好ましくは１２時間安定である。
【００６９】
医薬組成物の化学的安定性は、従来の様式で、例えば、化合物及びその分解生成物（特
に、２−（４−（（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）（イソプロピル）アミノ）ブトキシ）酢酸など）を測定することによって試験してもよい。化合物及びその分解生成物の含量は、従来のＨＰＬＣを介して評価してもよい。
【００７０】
医薬組成物の物理的安定性は、従来の様式で、例えば、所定の期間にわたってある特定の温度及び相対湿度での貯蔵後に、再構成時間、含水量、凍結乾燥組成物（すなわち凍結乾燥ケーキ）の外観及び／又は顕微鏡検査を測定することによって、並びに所定の期間にわたってある特定の温度での貯蔵後に、薬物可溶化を維持し、沈殿を防止する水性製剤（例えば、凍結乾燥前の水性組成物、再構成された製剤、又は再構成されて、さらに希釈された製剤）の能力を測定することによって試験してもよい。
【００７１】
実施形態１）〜６）のいずれか１つに記載の水性医薬組成物は、容器中で製剤化されてもよい。例えば、５００ｍｇの化合物に対応するバッチサイズ（１ｋｇの医薬組成物のバッチサイズ）から、バイアル当たり約３．８ｇの医薬組成物の２５０バイアルが得られ、以下のように構成されてもよい：
【００７２】
【表１】
0006964679.tif 000004
【００７３】
量は、それぞれの成分の純度に対して調整されてもよく、このためには化合物の量を増加してもよい。
【００７４】
当該凍結乾燥医薬組成物を調製するためのプロセス、及び本発明による容器中に充填するプロセスは、以下の工程を含んでもよい：
・化合物：目標値：０．５００ｇの量（例えば、１５００ｍＬガラスビーカー中）を、ＷＦＩ：目標値：８００ｇ、グリシン：目標値：５０．００ｇ、１０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０：目標値：３０．００ｇ、１５％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ：目標値：３．１６ｇ、及びリン酸，８５％（ｗ／ｗ）：目標値：１．１５３ｇのそれぞれの量と混合する；
・均質に撹拌する。
・１．０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨを使用して、ｐＨをｐＨ７．５に調整する。
・ＷＦＩを添加して、目標重量：１０００ｇとする。
・（例えば、０．２２μｍのＰＶＤＦ膜フィルターを通る層流条件下で）濾過する。
・（例えば、層流条件下で）バイアルに充填する：目標充填重量：３．８０ｇ±３％。
【００７５】
当該医薬組成物の凍結乾燥プロセスは、例えば、以下の工程を含んでもよい：
【００７６】
【表２】
0006964679.tif 000005
【００７７】
当該医薬組成物の凍結乾燥の代替プロセスは、例えば、以下の工程を含んでもよい：
【００７８】
【表３】
0006964679.tif 000006
【００７９】
当該プロセスにおけるアニーリング工程（工程４〜６）は任意選択である。アニーリング工程を含むプロセスは、ケーキ底部領域の収縮及びケーキの蓋状物（lid）の形成を防止することができる。
【００８０】
当該医薬組成物の凍結乾燥のさらなる代替プロセスは、例えば、以下の工程を含んでもよい：
【００８１】
【表４】
0006964679.tif 000007
【００８２】
換言すれば、クロージング温度は、実施形態７）に関して、第５の温度、すなわち約２０℃であってもよい。ここでも、当該プロセスにおけるアニーリング工程（工程４〜６）は任意選択である。アニーリング工程を含むプロセスは、ケーキ底部領域の収縮及びケーキの蓋状物の形成を防止することができる。
【００８３】
当該医薬組成物の凍結乾燥プロセスに続いて、例えば、以下のプロセスを用いて圧着することによってバイアルを密封してもよい：
・各バイアル上にキャップを置き、例えば、半自動又は完全自動圧着機又は同等物を用いて圧着する。
【００８４】
凍結乾燥医薬組成物は、以下のプロセスを使用して再構成してもよい：
生理食塩水又はＷＦＩ（例えば、目標値８．１ｍＬ）を添加し、ケーキが完全に溶解するまで穏やかに振盪する。
【実施例】
【００８５】
（本明細書で使用される場合及び当該説明における）略語：
ａｑ．                水溶液
ａｔｍ                大気圧
ＤＳＣ                示差走査熱量測定
ＨＰＬＣ              高速液体クロマトグラフィー
ｍｉｎ                分
ポロキサマー１８８    ポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンコポリマー、例えばＫｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）Ｐ１８８
ＰＳ２０              ポリソルベート２０、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）２０
ＰＳ８０              ポリソルベート８０、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）８０
ｒＨ                  相対湿度
ＲＰ                  逆相
ＲＴ                  室温
ＷＦＩ                注射用水
【００８６】
原材料を市販の供給元から購入した：
【００８７】
【表５】
0006964679.tif 000008
【００８８】
以下の器機を使用した。
【００８９】
ＨＰＬＣ装置
製造業者：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ，ＵＳＡ）
タイプ：１１００シリーズ
デガッサ：Ｇ１３２２Ａ
ＢｉｎＰｕｍｐ：Ｇ１３１２Ａ
ＡＬＳ：Ｇ１３２９Ａ
ＡＬＳＴｈｅｒｍ：Ｇ１３３０Ａ
ＣｏｌＣｏｍ：Ｇ１３１６Ａ
ＶＷＤ：Ｇ１３１４Ａ
クロマトグラフィー管理ソフトウェア：Ｄｉｏｎｅｘ，Ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎ  ６．８０
Ａｇｉｌｅｎｔ，Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ  Ｂ．０４．０３  ＳＰ１
Ｗｙａｔｔ，Ａｓｔｒａ６．１
【００９０】
ＵＶ分光光度計：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃａｒｙ５０；精製水供給：Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｕｌｔｒａ  Ｃｌｅａｎ  ＵＶ  ＵＦ（商標）；ｐＨメーター：Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＳｅｖｅｎＭｕｌｔｉ；電極：ＩｎＬａｂ  Ｍｉｃｒｏ；天秤：Ｋｅｒｎ  ＥＷ  ６２００−２ＮＭ
【００９１】
化合物の調製：
セレキシパグ（化合物：２−｛４−［Ｎ−（５，６−ジフェニルピラジン−２−イル）−Ｎ−イソプロピルアミノ］ブチルオキシ｝−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド）の調製は、国際公開第２００２／０８８０８４号に記載されている。多形形態、すなわち、遊離塩基の結晶形態Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩの調製は、国際公開第２０１０／１５０８６５号に開示されている。薬学的に許容される塩の多形形態は、国際公開第２０１１／０２４８７４号に開示されている。以下の実施例及びアッセイにおいて、遊離塩基の形態、特に多形形態Ｉの結晶形態で化合物を使用した。
【００９２】
分析方法：
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
凍結バルク薬物製品の溶液の熱特性は、示差走査熱量測定によって評価される。ＤＳＣ相転移温度（すなわち、結晶点及び融点）は、空の参照パンと比較して冷却／加熱されたときの試料の挙動を測定することによって同定することができる。融解のような吸熱反応が生じたときに、システムは、両者を同じ温度レベルで維持するために、参照よりも多くのエネルギーを試料に投入しなければならない。この必要な電力を測定し、相転移温度及びエンタルピーの計算に使用する。
【００９３】
凍結乾燥前の組成物の相転移温度は、ＤＳＣ−８０００（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）を使用して示差走査熱量測定によって決定される。約２０ｍｇの対応する溶液を５０μＬのアルミニウム試料パンに秤量する。アルミニウムＤＳＣカバーで閉じてパンを密封する。空のアルミニウム試料パンを参照として使用する。以下のサイクルを行う：
【００９４】
【表６】
0006964679.tif 000009
【００９５】
融点の評価は第２の加熱工程で行われる。
【００９６】
含量及び純度分析のための逆相ＨＰＬＣ
ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して、凍結乾燥組成物中の化合物を定量化し、潜在的不純物から化合物を分離して、生成物の純度を評価する。ＲＰ−ＨＰＬＣ測定値は、計算によってそれぞれの試料中の化合物濃度に変換される。
【００９７】
クロマトグラフィーパラメーター
移動相：３．２４ｇのオクタン−１−スルホン酸ナトリウム塩を１５００ｍＬの精製水に溶解させる。１．５ｍＬのｏ−リン酸８５％を添加する。３５００ｍＬのメタノールを添加する。
流速：１．０ｍＬ／分アイソクラティック
温度：４０℃
ＶＷＤ：３０２ｎｍ
注入量：１０μＬ
試料温度：１０℃
実行時間：４０分
【００９８】
参照溶液及び較正曲線
希釈剤：７０％メタノール、３０％精製水（ｖ／ｖ）
【００９９】
標準ストック溶液（１００μｇ／ｍＬ化合物）：
２００ｍＬの体積測定褐色ガラス容器に１８０ｍＬの希釈剤を充填する。続いて、２０ｍｇの化合物参照材料を添加する。混合物を超音波浴中で２０℃で１０分間処理する。化合物の完全な溶解後、体積を充填して２００ｍＬにする。
【０１００】
標準溶液（５μｇ／ｍＬ）：希釈剤を使用して、標準ストック溶液（１００μｇ／ｍＬ）を１：２０（ｖ／ｖ）に希釈する。
【０１０１】
較正曲線：
５つの異なる注入体積の参照溶液（５μｇ／ｍＬ）を、各分析シーケンスの開始時及び終了時に等間隔工程（すなわち、５μＬ、１０μＬ、１５μＬ、２０μＬ、及び２５μＬ）でカラムに適用する。検出されたピーク面積はそれぞれの適用された量とアラインされ、ＵＶ測定反応の化合物質量への変換式は平均値の線形回帰によって生成される。
【０１０２】
サンプルの調製
希釈剤：７０％メタノール、３０％精製水（ｖ／ｖ）。
【０１０３】
分析前に、希釈剤を使用して１０μｇ／ｍＬの濃度に試料を希釈し、又は濃度が１０μｇ／ｍＬ未満である場合には未希釈で試料を使用した。
【０１０４】
残存水分分析のためのカール・フィッシャー滴定
各凍結乾燥サイクルの５０〜１００ｍｇの３つのランダムなバイアルを、クリンプキャップで密封されたガラスバイアルに秤量する。１００℃に加熱されたカール・フィッシャー電量計（７５６／７７４；Ｍｅｔｒｏｈｍ）のオーブンに試料を移す。キャップの隔壁は注射針によって貫通されており、生成した水蒸気は乾燥窒素流によってカール・フィッシャー電量計の滴定チャンバ内に直接移送される。空のガラスバイアルをブランク補正用に使用する。
【０１０５】
視覚的外観
各凍結乾燥サイクル後に、例示的なバイアルの写真を撮る。
【０１０６】
ガラスバイアルを慎重に壊すことによって凍結乾燥物をバイアルから取り出し、凍結乾燥ケーキを垂直に切断して、その内部層を陥没（collapse）区域について撮影する。
【０１０７】
走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）
凍結乾燥物をＳＥＭで分析して、その微細構造を評価する。それぞれの凍結乾燥物を慎重に切断し、垂直断面及び上面／底面をＳＥＭにより分析する。
【０１０８】
実施例１：
バイアル当たり約３．８ｇの医薬組成物の２５０バイアルが得られる５００ｍｇの化合物に対応するバッチサイズ（１ｋｇの医薬組成物のバッチサイズ）は、以下のように構成され、調製された：
【０１０９】
【表７】
0006964679.tif 000010
【０１１０】
・１５００ｍＬのガラスビーカー中にＷＦＩ：目標値：８００ｇの量を充填する。
・１５％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ：目標値：３．１６ｇの量を添加する。
・均質に撹拌する。
・化合物：目標値：０．５００ｇの量を添加する。
・均質に撹拌する。
・グリシン：目標値：５０．００ｇの量を添加する。
・均質に撹拌する。
・１０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０：目標値３０．００ｇの量を添加する。
・均質に撹拌する。
・リン酸、８５％（ｗ／ｗ）：目標値：１．１５３ｇの量を添加する。
・均質に撹拌する。
・１．０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨを使用して、ｐＨをｐＨ７．５に調整する。
・ＷＦＩを添加して、目標重量：１０００ｇとする。
・０．２２μｍのＰＶＤＦ膜フィルターを通して層流条件下で濾過する。
・層流条件下でバイアルを充填する：目標充填重量：３．８０ｇ±３％。
【０１１１】
バイアルを以下の手順を用いて凍結乾燥した。
【０１１２】
【表８】
0006964679.tif 000011
【０１１３】
当該医薬組成物の凍結乾燥のプロセス後に、以下のプロセスを用いてバイアルを圧着することにより、バイアルを密封した：
・各バイアル上にキャップを置き、例えば、半自動又は完全自動圧着機を用いて圧着する。
【０１１４】
実施例２：
以下の組成物（１０ｍｍｏｌ／ｋｇリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）中の０．５０ｍｇ／ｇ化合物、５重量％グリシン、０．３重量％ポリソルベート２０）の６０バイアルのバッチサイズを調製した：
【０１１５】
【表９】
0006964679.tif 000012
１．配合容器中にａ）を充填する
２．撹拌下でｂ）を添加する
３．撹拌下でｃ）を添加して、光の不在下で透明な溶液を得る
４．撹拌下でｄ）を添加し、透明な溶液を得る
５．撹拌下でｅ）を添加する
６．撹拌下でｆ）を添加する
７．ｇ）を用いてｐＨを調整する（目標：ｐＨ７．５）
８．ｈ）を充填して３．８００ｍｇの最終重量とする
９．目標ｐＨの二重チェックを行う
【０１１６】
当該手順を用いて、６０バイアルを加工した。
【０１１７】
以下の手順を用いて、バイアルを凍結乾燥した：
Ａ：０．８５ｍｂａｒの真空を使用した凍結乾燥実行のプロセスパラメーター
【０１１８】
【表１０】
0006964679.tif 000013
【０１１９】
目視検査により、高密度の構造を示す、底部領域及び上面（蓋状物とも称する）においてわずかな収縮を有する凍結乾燥ケーキが明らかとなり、当該構造は、おそらくケーキの抵抗に起因して底部領域において収縮／密度の増加を生じさせている。
【０１２０】
凍結乾燥ケーキの分析：
残存水分含量（カール・フィッシャー）は０．４１％であった。
【０１２１】
凍結乾燥薬剤製品中の化合物含量及び純度について、２つのランダムなバイアルを３．６ｍＬの食塩水で再構成した。再構成された溶液を希釈剤を用いて１：５０に希釈し、その後にＲＰ−ＨＰＬＣにより分析した：
化合物含量（目標値＝０．５０ｍｇ／ｍＬ）：０．５４ｍｇ／ｍＬ；化合物純度：１００％
【０１２２】
Ｂ：０．５ｍｂａｒの真空を使用した凍結乾燥実行のプロセスパラメーター
【０１２３】
【表１１】
0006964679.tif 000014
【０１２４】
目視検査により、高密度の蓋状物の形成及び底部領域における収縮を有する凍結乾燥ケーキが明らかになった。
【０１２５】
凍結乾燥ケーキの分析：
残存水分含量（カール・フィッシャー）は０．５０％であった。
【０１２６】
凍結乾燥薬剤製品中の化合物含量及び純度について、２つのランダムなバイアルを３．６ｍＬの生理食塩水で再構成した。再構成された溶液を希釈剤を用いて１：５０に希釈し、その後にＲＰ−ＨＰＬＣにより分析した：
化合物含量（目標値＝０．５０ｍｇ／ｍＬ）：０．５２ｍｇ／ｍＬ；化合物純度：１００％
【０１２７】
Ｃ：アニーリング工程を含む凍結乾燥のプロセスパラメーター
【０１２８】
【表１２】
0006964679.tif 000015
【０１２９】
目視検査により、ケーキの底部領域に収縮がなく、蓋状物の形成がない凍結乾燥ケーキが明らかになった。
【０１３０】
凍結乾燥ケーキの分析：
残存水（カール・フィッシャー）：０．２０％
化合物含量（目標値＝０．５０ｍｇ／ｍＬ）：０．５１ｍｇ／ｍＬ
化合物純度：１００％
【０１３１】
残存水分含量は、アニーリング工程によって０．２０％に有意に減少した。
【０１３２】
実施例３：
実施例２と同様に、以下の組成物（１０ｍｍｏｌ／ｋｇリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）中の０．５０ｍｇ／ｇ化合物、５重量％グリシン、０．１重量％ポリソルベート２０）の６０バイアルのバッチサイズを調製した。
【０１３３】
【表１３】
0006964679.tif 000016
【０１３４】
実施例３の組成物を実施例２Ａ）〜Ｃ）に記載の凍結乾燥条件に供した。
【０１３５】
目視検査により、同じ条件下で実施例２の組成物で得られたそれぞれのケーキとは異なる凍結乾燥ケーキが明らかになった。
【０１３６】
実施例４：使用時安定性試験
化合物の注入セット（infusion set）への潜在的な吸着を評価するために、以下の手順を適用した：
シリンジ中で直接混合することによる、それぞれ４．５μｇ／ｍＬ及び３６μｇ／ｍＬの化合物含量を有する０．９％  ＮａＣｌ中の疑似注入溶液の調製：
それぞれの凍結乾燥物を３．６ｍＬの生理食塩水中で再構成し（０．５ｍｇ／ｍＬの化合物濃度を有する約３．８ｍＬの総体積が得られる）、化合物濃度をＲＰ−ＨＰＬＣにより評価した（サンプリング点１）。５０ｍＬのＰＰ琥珀色注射器のプランジャーを取り除き、シリンジをｌｕｅｒ  ｌｏｃｋコンビキャップ（combi cap）によって閉じた。４．５μｇ／ｍＬ化合物について：４９．５５ｇの０．９％  ＮａＣｌ（２５℃での密度＝１．００３ｇ／ｍＬ）を５０ｍＬのシリンジに充填した。３６μｇ／ｍＬ化合物について：４６．４０ｇの０．９％  ＮａＣｌ（２５℃での密度＝１．００３ｇ／ｍＬ）を５０ｍＬのシリンジに充填した。
【０１３７】
４．５μｇ／ｍＬ化合物について：０．４５０ｍＬの再構成製剤変型物（variant）（０．５ｍｇ／ｍＬの化合物）を１０Ｒガラスバイアルから採取し、生理食塩水を充填した５０ｍＬのＰＰシリンジに移し、４．５μｇ／ｍＬの注入用の化合物濃度を得た。３６μｇ／ｍＬの化合物について：３．６ｍＬの再構成製剤変型物（０．５ｍｇ／ｍＬの化合物）を１０Ｒガラスバイアルから採取し、生理食塩水を充填した５０ｍＬのＰＰシリンジに移し、３６μｇ／ｍＬの注入用の化合物濃度を得た。プランジャーを挿入することによって、シリンジを閉じた。穏やかに振盪することによって、溶液を均質に混合した。真っすぐ立てた位置にしてクロージャーキャップを慎重に開くことにより、シリンジ中の過圧を解放した。室温及び光の不在下で４時間（最も悪い場合として）、シリンジを貯蔵した。注入菅を注射器に連結し、注入溶液で洗い流した。最初のｍＬを回収し（サンプリング点２）、ＲＰ−ＨＰＬＣにより分析した。化合物濃度及び不純物プロファイルを評価した。室温で８０分間及び光の不存在下での総抽出時間（０．６２５ｍＬ／分の注入フローの試験）後、残りの注入溶液を放出及び回収し、最後の１ｍＬを分析用の琥珀色ガラスＨＰＬＣバイアルに直接サンプリングした（サンプリング点３）。化合物濃度及び不純物プロファイルを評価した。前の工程における放出された総注入体積を回収し、均質化した。総体積を記録し、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して化合物及び不純物プロファイルの濃度を決定した（サンプリング点４）。溶液中の化合物の全ての純度及び含量の決定を、標準曲線を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣにより二重で行った。
【０１３８】
患者に送達される化合物の総用量を判断するために、異なるサンプリング点で測定した
化合物の含量を総質量収支で合計した（サンプリング点４）。再構成バイアル中の測定された化合物濃度の参照（１００％）に対する相対的総用量を以下に示す。
【０１３９】
【表１４】
0006964679.tif 000017
【０１４０】
化合物含量の相対的な減少は、高希釈の注入溶液（４．５μｇ／ｍＬ）での方が低希釈剤（３６μｇ／ｍＬ）より大きい。４．５μｇ／ｇの化合物では、変型物＃５において最大の減少を観察でき、変型物＃１ａにおいて最小の減少を観察することができた。３６μｇ／ｇの化合物を用いた変型物では、注入セットへの吸着は、全ての試験された変型物において化合物含量の３％〜４％の損失に相当した。
【０１４１】
４．５μｇ／ｇの化合物を用いた変型物＃１ｂでの３倍濃度のポリソルベート２０を用いた使用時安定性試験は、０．１％ポリソルベート２０を用いた変型物＃１ａでの９０％の観察された化合物回収率よりも３〜４％のさらなる改善をもたらした。
【０１４２】
実施例５：物理的及び化学的安定性試験
緩衝液及び試料の調製
化合物ストック溶液（ＮａＯＨ中で予め溶解させることによる１０ｍｍｏｌ／ｋｇ  Ｎａ−ＰＯ４（ｐＨ７．５）中の１ｍｇ／ｇ化合物）：
１６８０ｍｇの４Ｍ  ＮａＯＨに５００ｇの精製水を添加した後、６００ｍｇの化合物を添加した。透明な溶液が得られるまで、混合物をステンレス鋼ビーカー中で室温で６０分間撹拌した。６９１．２ｍｇのｏ−リン酸（８５％）を添加し、１Ｍ  ＮａＯＨを使用してｐＨを７．５に調整した。最後に、溶液に精製水を充填して６００ｇの最終質量とした。
【０１４３】
増量剤ストック溶液（１０ｍｍｏｌ／ｋｇ  Ｎａ−ＰＯ４（ｐＨ７．５）中の１０％ｗ／ｗ増量剤）：
２８７．５ｍｇのｏ−リン酸（８５％）に７５．０ｇの精製水を添加した。１０．００ｇのそれぞれの増量剤を添加し、透明な溶液が得られるまで混合物を撹拌した。その後、１Ｍ  ＮａＯＨを使用してｐＨを７．５に調整し、溶液を充填して最終質量１００ｇとした。
【０１４４】
界面活性剤ストック溶液（１０ｍｍｏｌ／ｋｇのＮａ−ＰＯ４（ｐＨ７．５）中の１０％ｗ／ｗ界面活性剤）：
１．００ｇのそれぞれの界面活性剤に１０ｍｍｏｌ／ｋｇ  Ｎａ−ＰＯ４（ｐＨ７．５）を充填して１０．０ｇとし、透明な溶液が得られるまで撹拌した。
【０１４５】
凍結乾燥のための製剤変型物の配合及びアリコート作製：
９００ｍｇのそれぞれの界面活性剤ストック溶液、４５ｇのそれぞれの増量剤ストック溶液、及び４５ｇの化合物ストック溶液をステンレス鋼ビーカー中で混合し、ｐＨ７．５の１０ｍｍｏｌ／ｋｇリン酸ナトリウム緩衝液中の０．５ｍｇ／ｇ化合物、５％（ｗ／ｗ）増量剤、及び０．１％（ｗ／ｗ）界面活性剤を含有するそれぞれの製剤変型物を得た。その後、得られた溶液を０．２２μｍのＰＶＤＦフィルターを通して濾過し、３．８ｍＬのアリコートにより１０Ｒバイアルに充填した。バイアルをリオストッパー及び適切な圧着キャップで密封した。
【０１４６】
以下の試料を調製した：
【０１４７】
【表１５】
0006964679.tif 000018
【０１４８】
全ての製剤変型物に好適であると考えられる伝統的な凍結乾燥サイクルを選択した。アニーリング工程は、文献Ｘｉａｏｌｉｎ  Ｔａｎｇ  ａｎｄ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｊ．Ｐｉｋａｌ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．２，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２００４）に従って行った。
【０１４９】
【表１６】
0006964679.tif 000019
【０１５０】
物理的安定性：
グリシン（＃６、＃１１、及び＃１６）及びマンニトール（＃７及び＃１２）を含有する変型物は、ほとんど目に見えないケーキの変形を示した。トレハロースを含有する変型物（＃８及び＃１３）はわずかな収縮を示し、それによるひび割れは観察できなかった。Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）１７ＰＦ（＃９、＃１４、及び＃１９）を含有する変型物は、強い収縮及びケーキのひび割れを示した。Ｌ−プロリン（＃１０、＃１５、及び＃２０）は、これらの特定の組成物において好適ではなかった。比較的低い温度レベルにもかかわらず、Ｌ−プロリンを含有する凍結乾燥物は凍結乾燥プロセス中に融解し、これにより昇華圧が生じて、ケーキが上方に押し上げられた。
【０１５１】
化学的安定性：
異なる調製工程後、ＲＰ−ＨＰＬＣによる含量及び純度分析のための６つの異なる試料を各製剤変型物から採取した。
【０１５２】
３０２ｎｍにおける相対ピーク面積を計算することにより、異なるサンプリング時間における化合物の純度を測定した。
【０１５３】
【表１７】
0006964679.tif 000020
【０１５４】
配合、濾過、及び凍結乾燥中において、化合物は全ての製剤マトリックス中で十分に安定であった：含量及び純度の有意な減少は観察されなかった。凍結乾燥プロセスは、含量及び純度に対する検出可能な影響を有さない。４０℃で貯蔵された試料は、含量及び純度の低減をほとんど又は全く示さなかった。６０℃での強制分解試験中の凍結乾燥物の高温のへの曝露は、マンニトールを含有する凍結乾燥物（＃７、＃１２）に対して低い安定性を示し、グリシン（＃６、＃１１、＃１６）及びトレハロース（＃８、＃１３）を含有する変型物に対して最良の化学的安定性を示した。
【０１５５】
実施例６：吸着試験
参考例６ａ：
０．１ｍｇ／ｇの化合物を含有する凍結乾燥物を、以下の組成物を使用して７．５の目標ｐＨで調製した：
【０１５６】
【表１８】
0006964679.tif 000021
【０１５７】
参考例６ｂ：
２０ｍＬの琥珀色バイアル中の０．５ｍｇの化合物を含有する凍結乾燥物を、以下の組成物を使用して７．５の目標ｐＨで調製した：
【０１５８】
【表１９】
0006964679.tif 000022
【０１５９】
組成物を、２０ｍＬのビヒクルを用いてバイアル中で再構成し、任意選択で、シリンジ中のさらなるビヒクルで直接希釈することによって１／２濃度の化合物にさらに希釈した。
【０１６０】
０．３ｍＬ／分の流速を注入セットにおいて適用することによって、吸着を試験する。凍結乾燥バイアル（参照値）中の［任意選択で、希釈工程（Ｔｓ）後にシリンジ中の］化合物の濃度を、Ｔ０（注入セットから流出する第１の液滴）で、及び注入セットを通るフローの５分後（Ｔ５）及び１０分後（Ｔ１０）に測定する。
【０１６１】
ａ）ビヒクルとしての再構成組成物０．９％生理食塩水（さらなる希釈なし）は、以下のように注入セットへの吸着を示す：
【０１６２】
【表２０】
0006964679.tif 000023
【０１６３】
２重量％  ＰＥＧ４００、１０重量％エタノール、又は６％プロピレングリコールをビヒクルに添加することにより、Ｔ０でそれぞれ７０％、７６％、６７％の回収率となる。
【０１６４】
ｂ）ｉ）０．９％生理食塩水＋４０重量％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ｉｉ）０．９％生理食塩水＋３重量％  Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）、又はｉｉｉ）０．９％生理食塩水＋２重量％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０をビヒクルとして使用した再構成組成物（さらなる希釈はしない）は、以下のように注入セットへの吸着を示す：
【０１６５】
【表２１】
0006964679.tif 000024
【０１６６】
ｃ）０．９％生理食塩水＋０．１重量％  Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）、又はｉｉ）０．９％生理食塩水＋０．１重量％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０をビヒクルとして使用し、化合物の１／２濃度にさらに希釈した再構成組成物を試験することにより、Ｔ０での吸着を防止できることが確認される。
【０１６７】
【表２２】
0006964679.tif 000025
【０１６８】
絶対的バイオアベイラビリティ試験では、生理食塩水で再構成された参考例６ａの組成物を使用し、８μｇ／ｍＬ超の濃度を使用し、参考例６ａの再構成組成物で注入セット全体を洗い流し、０．１〜０．３ｍＬ／分などの低注入速度を使用することによって、吸着を克服した。