(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む組成物であって、前記抗ヒトＴｉｍ−３抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、組成物。
【請求項２】
前記抗ヒトＴｉｍ−３抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
前記抗ヒトＴｉｍ−３抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項５】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項５に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項６に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記癌が、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
前記肺癌が非小細胞肺癌である、請求項８に記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記抗ヒトＴｉｍ−３抗体および前記抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
前記抗ヒトＴｉｍ−３抗体および前記抗ヒトＰＤ−L１抗体のうちの少なくとも１つが、１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野に属する。特に、本発明は、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体と組み合わせることができるヒトＴ細胞免疫グロブリンおよびムチンドメイン含有タンパク質−３（Ｔｉｍ−３）に対する抗体、そのような抗ヒトＴｉｍ−３抗体または抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体を含む組成物、ならびに固形腫瘍および血液腫瘍の治療のために、単独でまたは化学療法、電離放射線、および他の癌療法とのさらなる組み合わせで、そのような抗ヒトＴｉｍ−３抗体を抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせて使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍細胞は、そのいくつかが免疫チェックポイント経路の操作を含む、複数の作用機序によって免疫系による検出および排除を回避する。免疫チェックポイント経路は自己寛容の維持およびＴ細胞活性化の調節において使用されるが、癌細胞はこれらの経路を操作して腫瘍の生存を延長し得る。ＰＤ−１／ヒトプログラム細胞死１リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）経路はそのような免疫チェックポイントの１つである。ヒトＰＤ−１はＴ細胞上で発現され、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の結合はＴ細胞増殖およびサイトカイン産生を阻害することが示されている。さらに、一部の腫瘍はＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２を発現することが既知であり、そのような発現は腫瘍内免疫応答を阻害するのに寄与し得る。
【０００３】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路に加えて、腫瘍抗原を認識するＴ細胞はまた、Ｔｉｍ−３などの他のチェックポイント受容体を発現することができる。特に、Ｔｉｍ−３を発現するＴ細胞は、細胞傷害性機能、エフェクターサイトカイン産生、および増殖の機能障害を特徴とする疲弊表現型を示し得る。これに関して、抗Ｔｉｍ−３抗体は、いくつかのマウス癌モデルにおいて抗腫瘍免疫を回復し得ることが示されている。さらに、抗ＰＤ−１処置に対する適応耐性を示す一部の患者はまた、それらのＴ細胞においてＴｉｍ−３のアップレギュレーションを示すことが示されている。
【０００４】
ヒトＴｉｍ−３に対する抗体は既知である。ヒトＴｉｍ−３に対するヒト化抗体は、ＷＯ１５１１７００２に記載されている。抗ヒトＴｉｍ−３抗体であるＭＢＧ４５３は、現在、ヒト臨床試験において、単剤としておよび抗ヒトＰＤ−１抗体と組み合わせて試験されている。しかしながら、Ｔｉｍ−３を標的とする抗体はヒトでの治療的使用について認可されておらず、抗ヒトＴｉｍ−３抗体が抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせた場合にヒト腫瘍に対する有効性の増強を示すことも示されていない。したがって、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせることができる抗ヒトＴｉｍ−３抗体、ならびにヒトの癌を処置するための他の治療法が依然として必要とされている。
【０００５】
Ｔｉｍ−３（配列番号１）は、ガレクチン−９（配列番号１５）、ホスファチジルセリン（Ｃ１３Ｈ２４ＮＯ１０Ｐ）、高移動度群ボックス１（ＨＭＧＢ１）、および癌胎児性抗原関連細胞接着分子１（ＣＥＡＣＡＭ１）（配列番号１４）と相互作用することが示されている。上述のＴｉｍ−３リガンドの全てがＴｉｍ−３の占有的な（ｅｘｃｌｕｓｉｖｅ）リガンドではないので、これらのリガンドがＴｉｍ−３とは無関係に免疫系を調節することができることから、上記リガンドの活性を区別して阻止する治療用抗Ｔｉｍ−３抗体を提供することが望ましい。そのような戦略は、Ｔｉｍ−３活性をより特異的に調節するための代替的な方法を提供することができ、必要に応じた免疫腫瘍学に基づく患者のための治療法を可能にする。さらに、そのような抗Ｔｉｍ−３抗体は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体との併用療法の選択肢を提供することができる。したがって、ヒトＴｉｍ−３と結合し、Ｔｉｍ−３といくつかのＴｉｍ−３のリガンドとの相互作用を阻害するが他のものとの相互作用は阻害せず、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせることができる抗体を提供する必要性もまた依然として存在している。
【発明の概要】
【０００６】
本明細書に記載の抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）がヒトガレクチン−９（配列番号１５）およびホスファチジルセリンに結合することを阻止することができるが、同時に、ヒトＴｉｍ−３およびヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）の結合を阻止せず、癌の治療のために抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせることができる。
【０００７】
癌免疫療法のためにＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を標的とする抗体は一部の癌に対して有効であることが証明されているが、一部の癌は経時的にＰＤ−Ｌ１療法に対する感受性が低くなるか、または全く反応しない。いくつかの実施形態において、本発明は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体療法の下で、進行したまたは進行中の患者に投与することができる抗ヒトＴｉｍ−３抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体療法を以前に受けたことがない患者に抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせて投与することができる抗ヒトＴｉｍ−３抗体を提供する。
【０００８】
本発明は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせるための、それぞれ配列番号２、３、４、５、６、および７のアミノ酸配列からなるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに／または配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む。
【０００９】
既知の抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体の非限定的な例には、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、およびＢＭＳ−９３６５５９が含まれる。本明細書で使用されるアテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、およびＢＭＳ−９３６５５９は、様々な細胞株を使用し、様々な製造方法を使用して作製することができ、結果としていくつかの違いを示し得ることを認識されたい。アテゾリズマブは、配列番号２９のアミノ酸配列を有する軽鎖および配列番号３０のアミノ酸配列を有する重鎖を含む抗体である。デュルバルマブは、配列番号３１のアミノ酸配列を有する軽鎖および配列番号３２のアミノ酸配列を有する重鎖を含む抗体である。アベルマブは、配列番号３３のアミノ酸配列を有する軽鎖および配列番号３４のアミノ酸配列を有する重鎖を含む抗体である。ＢＭＳ−９３６５５９は、配列番号３５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）および配列番号３６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含む抗体、好ましくは完全ヒトＩｇＧ４抗体である。
【００１０】
他の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体の非限定的な例には、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体が含まれる。
【００１１】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００１２】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００１３】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００１４】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００１５】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００１６】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００１７】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００１８】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００１９】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００２０】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２１】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２２】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。
【００２３】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肺癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、肺癌は非小細胞肺癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は頭頸部癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は大腸癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膵臓癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は胃癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は腎臓癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膀胱癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は前立腺癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は乳癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は卵巣癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は食道癌である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は軟部組織肉腫である。癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肝臓癌である。
【００２４】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００２５】
癌の治療を必要としている患者に、有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を、有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与することを含む、癌を処置する方法であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの少なくとも１つを含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００２６】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００２７】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００２８】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２９】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００３０】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００３１】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００３２】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００３３】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００３４】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００３５】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００３６】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００３７】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。
【００３８】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肺癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、肺癌は非小細胞肺癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は頭頸部癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は大腸癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膵臓癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は胃癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は腎臓癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膀胱癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は前立腺癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は乳癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は卵巣癌である。有効量の抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための有効量の本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は食道癌である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は軟部組織肉腫である。抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肝臓癌である。
【００３９】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００４０】
抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００４１】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
【００４２】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００４３】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００４４】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００４５】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００４６】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００４７】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、なららびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００４８】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００４９】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００５０】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５１】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５２】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。
【００５３】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肺癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌はメラノーマである。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、肺癌は非小細胞肺癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は頭頸部癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体の使用であって、該医薬は、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に投与され、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は大腸癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膵臓癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は胃癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は腎臓癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は膀胱癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は前立腺癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は乳癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は卵巣癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は食道癌である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は軟部組織肉腫である。癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、癌は肝臓癌である。
【００５４】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００５５】
癌処置のための医薬の製造のための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体であって、任意選択により、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含み、抗ヒトＴｉｍ−３抗体および抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つは、電離放射線および／または１つ以上の化学療法剤と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される。
【００５６】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キット。本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。
【００５７】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００５８】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００５９】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００６０】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００６１】
本発明の抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物および抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体を含む第２の医薬組成物を含む、癌処置用キットであって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００６２】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止する（ｂｌｏｃｋ）が、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止しない。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＴｉｍ−３抗体はまた、ヒトガレクチン−９（配列番号１５）へのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止する。
【００６３】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＴｉｍ−３抗体はまた、ヒトガレクチン−９（配列番号１５）へのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止し、癌は、メラノーマ、肺癌、頭頸部癌、大腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、食道癌、軟部組織肉腫、または肝臓癌である。
【００６４】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＴｉｍ−３抗体はまた、ヒトガレクチン−９（配列番号１５）へのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止し、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。
【００６５】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトホスファチジルセリンへのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止するが、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（配列番号１４）へのヒトＴｉｍ−３の結合は阻止せず、抗ヒトＴｉｍ−３抗体はまた、ヒトガレクチン−９（配列番号１５）へのヒトＴｉｍ−３の結合を阻止し、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００６６】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）の以下の５０、５５、６２〜６５（両端を含む）、７２、１１１、および１１３〜１１８（両端を含む）のうちの少なくとも１個のアミノ酸残基と接触する。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）の以下の５０、５５、６２〜６５（両端を含む）、７２、１１１、および１１３〜１１８（両端を含む）のうちの少なくとも１個のアミノ酸残基と接触し、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、上記残基のうちの少なくとも２個、好ましくは上記残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１３個、またはより好ましくは上記残基の全てと接触する。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）の以下の５０、５５、６２〜６５（両端を含む）、７２、１１１、および１１３〜１１８（両端を含む）のうちの少なくとも１個のアミノ酸残基と接触し、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、上記残基のうちの少なくとも２個、好ましくは上記残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１３個、またはより好ましくは上記残基の全てと接触し、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、以下の５６〜６１（両端を含む）、１０７、１１９〜１２０（両端を含む）、および１２２のうちの少なくとも１つの残基とさらに接触する。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）抗体と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）の以下の５０、５５、６２〜６５（両端を含む）、７２、１１１、および１１３〜１１８（両端を含む）のうちの少なくとも１個のアミノ酸残基と接触し、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、上記残基のうちの少なくとも２個、好ましくは上記残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは上記残基のうちの少なくとも１３個、またはより好ましくは上記残基の全てと接触し、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、以下のうちの少なくとも１つの残基：５６〜６１（両端を含む）、１０７、１１９〜１２０（両端を含む）、および１２２とさらに接触し、接触している残基は、Ｘ線結晶学によって決定した際に、抗ヒトＴｉｍ−３抗体の６オングストローム以下以内である。
【００６７】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、以下の（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号１９のアミノ酸を有するＨＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、ならびに（ｃ）配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖のうちの１つ以上を含む。
【００６８】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００６９】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００７０】
癌の治療において、抗ヒトＰＤ−Ｌ１（配列番号１６）を含む第２の医薬組成物と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて使用するための、抗ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）抗体を含む第１の医薬組成物であって、抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含み、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２６のアミノ酸配列を有する軽鎖を含むか、またはアテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である。
【００７１】
本発明の抗体は、技術操作された天然に存在しないポリペプチド複合体である。本発明のＤＮＡ分子は、本発明の抗体中のポリペプチドのうちの１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、天然に存在しないＤＮＡ分子である。
【００７２】
本発明の抗体はＩｇＧ型抗体であり、鎖内および鎖間ジスルフィド結合を介して架橋されている２つの「重」鎖および２つの「軽」鎖を有する。各重鎖は、Ｎ末端ＨＣＶＲおよび重鎖定常領域（「ＨＣＣＲ」）からなり、同じアミノ酸配列を有する。各軽鎖は、ＬＣＶＲおよび軽鎖定常領域（「ＬＣＣＲ」）からなり、同じアミノ酸配列を有する。ある特定の生物系で発現されるとき、天然のヒトＦｃ配列を有する抗体はＦｃ領域においてグリコシル化される。典型的には、グリコシル化は、高度に保存されたＮ−グリコシル化部位の抗体のＦｃ領域に生じる。Ｎ−グリカンは、典型的にはアスパラギンに結合する。抗体はまた、他の位置でグリコシル化されていてもよい。
【００７３】
任意選択により、本明細書に記載のある特定の抗Ｔｉｍ−３抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来するＦｃ部分を含む。ＩｇＧ１は、Ｆｃガンマ受容体ファミリー（ＦｃγＲ）のタンパク質、およびＣ１ｑに結合することが周知である。これらの受容体との相互作用は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導し得る。したがって、任意選択により、本明細書に記載のある特定の抗Ｔｉｍ−３抗体は、Ｆｃエフェクター機能を欠失する完全ヒトモノクローナル抗体（ＩｇＧ１、Ｆｃ−ヌル（Ｆｃ−ｎｕｌｌ））である。Ｆｃ−ヌルＩｇＧ１抗体を達成するために、残基の選択的突然変異誘発がそのＩｇＧ１  Ｆｃ領域のＣＨ２領域内で必要である。アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７ＡをＩｇＧ１  Ｆｃに導入してＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、およびＦｃγＲＩＩＩへの結合を減少させ、置換Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを導入してＣ１ｑ媒介性補体固定を減少させる。ヒトに投与したときの免疫応答の潜在的な誘導を減少するために、ある特定のアミノ酸は、抗体生殖細胞系配列と適合させるために復帰突然変異を必要とし得る。
【００７４】
任意選択により、本明細書に記載のある特定の抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来するＦｃ部分を含み得る。ＩｇＧ１は、Ｆｃガンマ受容体ファミリー（ＦｃγＲ）のタンパク質、およびＣ１ｑに結合することが周知である。これらの受容体との相互作用は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導し得る。したがって、任意選択により、本明細書に記載のある特定の抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆｃエフェクター機能を欠失する完全ヒトモノクローナル抗体（ＩｇＧ１、λ、Ｆｃ−ヌル（Ｆｃ−ｎｕｌｌ））である。Ｆｃ−ヌルＩｇＧ１抗体を達成するために、残基の選択的突然変異誘発がそのＩｇＧ１  Ｆｃ領域のＣＨ２領域内で必要である。アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７ＡをＩｇＧ１  Ｆｃに導入してＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、およびＦｃγＲＩＩＩへの結合を減少させ、置換Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを導入してＣ１ｑ媒介性補体固定を減少させる。ヒトに投与したときの免疫応答の潜在的な誘導を減少するために、ある特定のアミノ酸は、抗体生殖細胞系配列と適合させるために復帰突然変異を必要とし得る。したがって、本明細書に記載のある特定の抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体は、可変重鎖中にＥ１ＱおよびＳ９４Ｒ変異を含み、可変軽鎖中にＴ７６ＳおよびＡ８０Ｓ変異を含む。
【００７５】
ＨＣＶＲ領域およびＬＣＶＲ領域は、フレームワーク領域（「ＦＲ」）と呼ばれるより保存されている領域とともに点在する、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と呼ばれる超可変領域にさらに細分することができる。各ＬＣＶＲおよびＨＣＶＲは、以下のＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置している３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原と特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。現在、配列表示に使用される抗体のための３つのＣＤＲ帰属（ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ）システムがある。ＮｏｒｔｈのＣＤＲの定義（Ｎｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｎｅｗ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ＣＤＲ  Ｌｏｏｐ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８−２５６（２０１１））は、多数の結晶構造を有する親和性伝搬クラスタ化（ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づいている。本発明の目的のために、ＮｏｒｔｈのＣＤＲ定義を使用する。
【００７６】
ＨＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＨＣＶＲをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、例えば、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。
【００７７】
ＬＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＬＣＶＲをコードするＤＮＡを軽鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長軽鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。軽鎖定常領域は、ヒトカッパまたはラムダ定常領域であり得る。本発明の抗ヒトＴｉｍ−３抗体については、軽鎖定常領域はヒトカッパ定常領域であることが好ましい。
【００７８】
本発明のポリヌクレオチドは、配列が発現制御配列に作動可能に連結された後に宿主細胞において発現される。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、または宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、およびジヒドロ葉酸レダクターゼを含有する。
【００７９】
本明細書に記載される抗体は、哺乳動物細胞で容易に産生され得、該哺乳動物細胞の非限定的な例には、ＣＨＯ、ＮＳ０、ＨＥＫ２９３、またはＣＯＳ細胞が含まれる。宿主細胞は、当該技術分野において周知の技術を使用して培養される。
【００８０】
目的のポリヌクレオチド配列（例えば、抗体のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび発現制御配列）を含有するベクターは、細胞宿主の種類に応じて異なる周知の方法によって宿主細胞に導入され得る。
【００８１】
タンパク質精製の様々な方法が用いられ得、そのような方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １８２：８３−８９（１９９０）、およびＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（１９９４）に記載される。
【００８２】
本発明の別の実施形態において、抗体または抗体をコードする核酸は単離形態で提供される。本明細書で使用する場合、「単離」という用語は、細胞環境に見出される任意の他の高分子種を含まないか、または実質的に含まない、タンパク質、ペプチド、または核酸を指す。「実質的に含まない」とは、本明細書中で使用する場合、目的のタンパク質、ペプチド、または核酸が（モル基準で）８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超の本発明の高分子種を含む。
【００８３】
本発明の抗体または本発明の抗体を含む医薬組成物は、非経口経路（例えば、皮下および静脈内）によって投与することができる。本発明の抗体は、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と一緒に単回用量または複数回用量で患者に投与することができる。本発明の医薬組成物は、当該技術分野で周知の方法によって調製することができ（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ  ｅｄ．（２０１２），Ａ．Ｌｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）、本明細書に開示される抗体、および１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。
【００８４】
投薬計画は、最適な所望の反応（例えば、治療効果）を提供するように調整され得る。安全性および有効性を最適化するために処置投与量を滴定し得る。局所的もしくは全身性またはそれらの組み合わせで、静脈内（ｉ．ｖ．）または非静脈内投与するための、投与スケジュールは、典型的には、単一ボーラス投与もしくは連続注入から、１日当たり複数回の投与（例えば、４〜６時間おき）までの範囲であるか、または治療する医師および患者の状態によって示されるとおりである。
【００８５】
本明細書で使用する場合、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」（「処置する（ｔｒｅａｔ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」）という用語は、既存の症状、障害、状態、または疾患の進行または重症度を遅延、妨害、抑制、緩和、停止、軽減、または反転させることを指す。
【００８６】
「有効量」とは、研究者、医師、または他の臨床医によって求められている組織、系、動物、哺乳動物、またはヒトの生物学的もしくは医学的応答またはそれらに対する所望の治療効果を惹起する、本発明の抗体または本発明の抗体を含む医薬組成物の量を意味する。有効量の抗体は、個人の病状、年齢、性別、および体重、ならびに個人における所望の応答を誘発する抗体の能力などの要因に応じて変動し得る。有効量はまた、抗体の任意の毒性効果または有害効果よりも治療的に有益な効果が上回る量である。
【００８７】
抗体の作製、発現、および精製
本発明の抗体は、ファージディスプレイ、トランスジェニック動物、および／またはヒト化を用いることを含むがこれらに限定されない、既知の方法によって作製し得る。抗ヒトＴｉｍ−３抗体を作製するために、ヒトＴｉｍ−３タンパク質を使用前にＰＮＧａｓｅＦ酵素で前処理することができる。さらに、上記のように誘導された抗体は、本明細書に記載のアッセイを用いてさらにスクリーニングすることができる。
【００８８】
重鎖および軽鎖の可変領域のポリペプチド、抗体ＡおよびＢの完全な重鎖および軽鎖アミノ酸配列、ならびにそれらをコードするヌクレオチド配列は、「アミノ酸およびヌクレオチド配列」と題する項目に列挙されている。さらに、抗体ＡおよびＢの軽鎖、重鎖、軽鎖可変領域、および重鎖可変領域の配列番号がまた、以下に示されている。抗体Ａおよび抗体Ｂを含むがこれらに限定されない本発明の抗体は、本質的に以下のようにして作製および精製することができる。ＨＥＫ２９３またはＣＨＯなどの適切な宿主細胞は、最適な所定のＨＣ：ＬＣベクター比を用いて抗体を分泌するための発現系、またはＨＣ（重鎖）およびＬＣ（軽鎖）の両方をコードする単一のベクター系で、一過性でまたは安定的にトランスフェクトすることができる。抗体が分泌された清澄化培地は、多くの一般的に使用される技術のうちのいずれかを使用して精製され得る。例えば、培地は、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）などの適合した緩衝液で平衡化された、Ｆａｂフラグメント用のＭａｂＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）またはＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に好都合に適用され得る。カラムは、非特異的結合成分を除去するために洗浄され得る。結合抗体は、例えば、ｐＨ勾配（２０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液ｐＨ７〜１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ３．０、またはリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４〜１００ｍＭグリシン緩衝液ｐＨ３．０など）によって溶出され得る。抗体画分は、紫外線吸光度またはＳＤＳ−ＰＡＧＥ等によって検出され得、次いで、プールされてもよい。意図する使用に応じて、さらなる精製は任意選択的である。抗体は、一般的な技術を使用して濃縮および／または滅菌濾過され得る。可溶性凝集体および多量体は、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、マルチモーダル、またはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む一般的な技術によって効果的に除去され得る。これらのクロマトグラフィーステップ後の抗体の純度は、典型的には、９５％を超える。生成物は、−７０℃ですぐに冷凍されてもよく、または凍結乾燥されてもよい。
【００８９】
【表１】
0006839761.tif 000002
【００９０】
ＷＩＮＮアッセイ
本発明の抗体は、ＷＩＮＮアッセイを用いて、インビボ免疫調節活性について試験することができる。ＷＩＮＮアッセイでは、ヒトＮＳＣＬＣ腫瘍細胞ＮＣＩ−Ｈ２９２およびヒト免疫細胞（同種異系）を混合し、免疫不全マウスに同時移植し（ｃｏ−ｉｍｐｌａｎｔｅｄ）、次いで免疫調節剤を投与する。免疫調節剤が腫瘍形成を阻害もしくは遅延する能力または腫瘍内存続性を支持する能力は、以下のようにして評価することができる。
【００９１】
０日目に、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからのＮＳＧマウス（７週齢、雌、８〜１０匹のマウス群）の側腹部に、ＨＢＳＳ（総体積０．２ｍｌ）中の２×１０６個のＨ２９２細胞または２×１０６個のＨ２９２細胞および１×１０６個のヒトＰＢＭＣの混合物を皮下移植する。０日目に開始して、マウスを１０ｍｇ／ｋｇの対照ヒトＩｇＧまたは１ｍｇ／ｋｇもしくは１０ｍｇ／ｋｇの抗体Ａの腹腔内注射で６週間、週に１回処置する。グルーミングおよび歩行を含む動物の健康および行動を週に少なくとも２回モニタリングする。
【００９２】
ＣＤ３およびＣＤ８を染色し、Ａｐｅｒｉｏ  ＳｃａｎＳｃｏｐｅ（商標）で分析することによってＣＤ３陽性およびＣＤ８陽性Ｔ細胞の存在を測定することより、このモデルから得た腫瘍切片を、ＣＤ３陽性およびＣＤ８陽性Ｔ細胞の存続性について分析することができる。ＩＨＣ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｉｍａｇｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｍａｃｒｏは、ユーザーによって選択された領域中の個々の細胞の標的色原体についての核染色を検出し、その強度を定量化する．３〜５のアノテーション（ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ）が生存腫瘍領域から作られ、アルゴリズム結果によって一致した細胞同定が得られるまで、パラメータの調整に用いられる。次いで、マクロを保存し、分析のためにスライド（ｓｌｉｄｅ）をログインする。全細胞数のパーセントとしての％ＣＤ３陽性およびＣＤ８陽性細胞をＡｐｅｒｉｏソフトウェアによって計算する。
【００９３】
本質的にこのＷＩＮＮアッセイに記載されるように行った実験において、ＩＨＣ分析により、ＮＣＩ−Ｈ２９２腫瘍およびＰＢＭＣを同時移植して１０ｍｇ／ｋｇの抗体Ａを投与したマウスは、ＮＣＩ−Ｈ２９２腫瘍およびＰＢＭＣを同時移植して対照ＩｇＧ（６．５％）で処置したマウスと比較して、ヒトＣＤ３陽性ＣＤ８陽性腫瘍内Ｔ細胞の有意な増加（３０％）をもたらす（Ｐ＝０．０３）。
【００９４】
初代ヒトＴ細胞でヒト化したＮＳＧマウスにおける定着ヒト腫瘍の異種移植モデル
本発明の抗体の有効性は、ＮＣＩ−ＨＣＣ８２７ヒトＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）異種移植片モデルで試験することができ、モデルにおける定着腫瘍を遅延または破壊する能力を評価する。０日目に、１×１０７個のＮＣＩ−ＨＣＣ８２７細胞をＮＳＧマウス（７週齢、雌、１群あたりマウス８匹）の側腹部に皮下移植する。腫瘍が約４００ｍｍ３の体積に達したら（約３０〜３２日目）、マウスに２．５×１０６個の事前に増殖させたヒトＴ細胞を注入する（ｉ．ｖ．）。この事前に増殖させたヒトＴ細胞は、全血からヒトＴ細胞を分離し、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  Ｔ−Ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８を用いて１０日間増殖させることによって生成される。この事前に増殖させたヒトＴ細胞は、後で使用するために凍結保存してもよい。Ｔ細胞注入の１日後、マウスにヒトＩｇＧまたは抗体Ａを１０ｍｇ／ｋｇで毎週（合計４回投与）、腹腔内注射により投与する。グルーミングおよび歩行を含む動物の健康および行動を週に少なくとも２回モニタリングする。
【００９５】
体重および腫瘍体積を週に２回測定する。腫瘍体積を、上記のように電子キャリパーを用いて細胞移植後４日目から始めて週に２回測定した。腫瘍体積（ｍｍ３）＝π／６＊長さ＊幅２。抗腫瘍有効性はＴ／Ｃ比としてパーセントで表され、以下に要約されるようにして計算される：幾何平均値のΔＴ＞０の場合、％Ｔ／Ｃは式１００ΔＴ／ΔＣによって計算される。ΔＴ＝研究最終日の薬物処置群の平均腫瘍体積−投与の初日の薬物処置群の平均腫瘍体積、ΔＣ＝研究最終日の対照群の平均腫瘍体積−投与の初日の対照群の平均腫瘍体積である。さらに、ΔＴ＜０の場合、％退縮は式＝１００×ΔＴ／Ｔ初日を用いて計算される。測定可能な腫瘍を有していない動物を完全奏効（ＣＲ）とみなし、５０％超の退縮を有する腫瘍を部分奏効（ＰＲ）とみなす。
【００９６】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａ（抗ヒトＴｉｍ−３）による処置は、ヒトＩｇＧによる処置と比較して、ヒト化ＮＳＧマウスにおける腫瘍増殖を有意に阻害する（表２）。７６日目に、抗体Ａによる処置はＴ／Ｃ＝２％をもたらす。１１０日目に、抗体Ａ処置は３／８ＣＲをもたらす。
【００９７】
【表２】
0006839761.tif 000003
【００９８】
混合リンパ球反応
本発明の抗体によってＴｉｍ−３シグナルを阻止する機能は、Ｔ細胞活性化の際のサイトカインの放出を測定することによって評価することができる。Ｔ細胞活性化が本発明の抗体による処置によって促進されるとき、ＩＦＮ−γなどのある特定のサイトカインのレベルは増加すると予想される。
【００９９】
ヒト単球単離キットＩＩ（Ｍｉｌｔｅｎｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて、健常なドナーから得た新鮮なヒトＰＢＭＣ（ＡｌｌＣｅｌｌｓ）からのネガティブセレクションによって、ＣＤ１４＋単球を単離する。ＣＤ１４＋単球を６２．５ｎｇ／ｍｌのｈＧＭ−ＣＳＦおよび２０ｎｇ／ｍｌのヒトhＩＬ−４の存在下での完全ＲＰＭＩ−１６４０培地中で７日間培養することによって、ヒト単球由来の樹状細胞を生成する。ＣＤ４Ｔ細胞単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を用いたネガティブセレクションによって、異なる健常なドナーの新鮮なヒトＰＢＭＣ（ＡｌｌＣｅｌｌｓ）からＣＤ４＋Ｔ細胞を精製する。次いで、２種類の細胞を、ウェルあたり１×１０５個のＣＤ４＋Ｔ細胞および２×１０４個の未成熟ＤＣを含有する１００μｌの完全ＡＩＭ−Ｖ培地を含む９６ウェルプレートの個々のウェル中で混合する。１００ｎＭのヒトＩｇＧ１または抗体Ａを含有する１００μｌの完全ＡＩＭ−Ｖ培地を６連（ｒｅｐｌｉｃａｔｅ）で添加する。３７℃、５％ＣＯ２で３日間インキュベートした後、上清を回収し、ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてヒトＩＦＮ−γについて測定する。対応のないｔ検定を用いて、群を比較する。
【０１００】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａの添加は、対照ヒトＩｇＧ１の添加と比較して、ＩＦＮ−γの分泌を有意に増加させる（３，０３６±３６７対１，６４４±２６１ｐｇ／ｍＬのｈＩＦＮ−γ、ｐ＝０．０３８４）。
【０１０１】
ＥＬＩＳＡ分析：抗体Ａは組換えＴｉｍ−３に結合する。
本発明の抗体がヒトＴｉｍ−３に結合する能力は、ＥＬＩＳＡアッセイにより測定することができる。Ｔｉｍ−３結合アッセイのために、９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ）をヒトＴｉｍ−３−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）で４℃で一晩コーティングする。ウェルをブロッキング緩衝液（３％ウシ血清アルブミンを含有するＰＢＳ）で２時間ブロッキングする。ウェルを０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。次いで、抗体Ａまたは対照ＩｇＧ（１００μｌ）を添加し、室温で１時間インキュベートする。洗浄後、プレートを１００μｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆ（ａｂ’）２−ＨＲＰコンジュゲート（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）とともに室温で１時間インキュベートする。プレートを洗浄し、次いで１００μｌの３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジンとともにインキュベートする。４５０ｎｍにおける吸光度をマイクロプレートリーダーで読み取る。半数効果濃度（ＥＣ５０）をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ６ソフトウェアを用いて計算する。
【０１０２】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａは、２．０７×１０−１１ＭのＥＣ５０でヒトＴｉｍ−３に結合する。
【０１０３】
フローサイトメトリー分析：抗体Ａは細胞表面Ｔｉｍ−３に結合する
本発明の抗体が細胞表面ヒトＴｉｍ−３に結合する能力は、フローサイトメトリーアッセイを用いて測定することができる。ヒトＴｉｍ−３発現ＤＯ１１．１０細胞系であるＴｉｍ−３ＤＯ１１．１０細胞をこのアッセイに用いる。
【０１０４】
Ｔｉｍ−３ＤＯ１１．１０細胞は以下のようにして得ることができる。全長Ｔｉｍ−３遺伝子はＯｒｉｇｅｎｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，  Ｉｎｃ．から購入することができ、ＰＣＲを用いて、Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｉｅｓ，  Ｉｎｃ．からのｐＬＶＸ−ＩＲＥＳ−Ｎｅｏレンチウイルスベクターにクローニングすることができる。Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｉｅｓ，Ｉｎｃ．からのＬｅｎｔｉ−Ｘ（商標）システムを用いて、高力価の組換え複製不全ビリオンを作製する。このビリオンは、標的細胞を感染させるために直ちに使用されるか、または等分して使用まで−８０℃で凍結される。マウスＴ細胞ハイブリドーマＤＯ１１．１０細胞株は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｅｗｉｓｈ  Ｈｅａｌｔｈ（登録商標）から入手することができる。ＤＯ１１．１０細胞をこの細胞株に付随したプロトコルに従って培養し、維持する。０日目に、ＤＯ１１．１０細胞を計数し、培地を遠沈して除去する。細胞ペレットをヒトＴＩＭ−３遺伝子またはベクター対照を含有するビリオンと混合し、３７℃で２４時間インキュベートする。細胞およびビリオンを混合するときに、最終濃度８μｇ／ｍｌに達するまでポリブレンを添加する。２４時間後、ＤＯ１１．１０細胞を再びペレット化し、新鮮な培地に再懸濁し、３７℃で３日間インキュベートする。次に、ＤＯ１１．１０細胞を３日ごとにペレット化し、１ｍｇ／ｍｌＧｅｎｅｔｉｃｉｎ（登録商標）を含有する選択培地に再懸濁して、安定して形質導入された細胞を選択する。Ｔｉｍ−３発現をＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓから入手した抗体を用いてフローサイトメトリーによってモニタリングする。選択培地中で２〜３週間後、得られたＴｉｍ−３発現ＤＯ１１．１０細胞を選別して単一細胞クローンを樹立する。
【０１０５】
ＤＯ１１．１０およびＴｉｍ−３Ｄｏ１１．１０細胞を、染色緩衝液（３％ＢＳＡを含有するＤＰＢＳ）中、１ウェルあたり１×１０５個の細胞（１００μｌ／ウェル）で９６ウェルＶ底プレートに添加する。細胞を、氷上にて、３０μｇ／ｍＬのヒトＩｇＧを含む染色緩衝液中で１時間Ｆｃブロッキングする。抗体Ａまたは対照ヒトＩｇＧをＡ４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（登録商標））で標識し、両方の抗体の１２点滴定（ｔｉｔｒａｔｉｏｎ）（１：３段階希釈）を６６．７ｎＭの開始濃度で染色緩衝液中で調製する。標識抗体を細胞に添加し、暗所にて４℃で１時間インキュベートする。１２００ＲＰＭで５分間回転させて上清をデカントすることにより、細胞をＰＢＳで２回洗浄する。生細胞／死細胞色素７−ＡＡＤ（ＰＢＳ中１：１０００）を３μｌ／ウェルで各ウェルに添加し、細胞を氷上で１５分間インキュベートする。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、０．５％ＢＳＡを含有する１００μｌのＤＰＢＳに再懸濁し、Ｉｎｔｅｌｌｉｃｔｙｅ  ｉＱｕｅで分析する。全ての染色は３つ組で行われる。データをＦｌｏｗＪｏソフトウェアで分析して生細胞集団を同定し、ＡＦ４８８（ＦＬ１）検出チャンネルを用いて各サンプルの中央蛍光強度（ｍｅｄｉａｎ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ）を決定する。個々のＭＦＩ（すなわち中央蛍光強度）値をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアに入れて濃度応答曲線を作成し、該曲線からＥＣ５０値を外挿する。
【０１０６】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａは、０．０９ｎＭのＥＣ５０値で、Ｔｉｍ−３ＤＯ１１．１０細胞上の細胞結合ヒトＴｉｍ−３に用量依存的に結合する。
【０１０７】
フローサイトメトリー分析：抗体Ａは、ホスファチジルセリンとヒトＴｉｍ−３との相互作用を阻止する。
本発明のある特定の抗体がＴｉｍ−３へのホスファチジルセリンの結合を阻止する能力は、ＦＡＣＳ分析によって測定することができる。この受容体−リガンド阻止アッセイのために、１×１０６個／ｍｌのＤＯ１１．１０細胞を１２μＭカンプトテシン（Ｓｉｇｍａ（登録商標））で３７℃で３時間処理して、アポトーシスを誘導する。ＦＩＴＣ−アネキシンＶ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ（登録商標））をホスファチジルセリンの存在を検出するための陽性対照として用いる。ビオチン化ｈＴＩＭ−３−Ｆｃは、カンプトテシン処理細胞に強く結合するが、非処理細胞には結合しない。カンプトテシン処理細胞を冷ＰＢＳで洗浄し、１×１０６個細胞／ｍｌで結合緩衝液（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｎｓｏｎ（登録商標））に再懸濁する。５０μｇ／ｍｌのマウスＩｇＧおよびラットＩｇＧを細胞に添加し、室温で３０分間インキュベートすることによって、Ｆｃ受容体をブロッキングする。抗体Ａの６点滴定（１：３段階希釈）を開始濃度を９０ｎＭとして結合緩衝液中で調製し、１ｍｌの細胞に添加し、次いで細胞を室温で６０分間インキュベートする。次いで、ｈＴＩＭ−３−Ｆｃビオチンを、０．０５μｇ／ウェルで、２００μｌの体積中の適切な試料に添加し、室温で３０分間インキュベートする。次いで、１２００ＲＰＭで５分間の遠心分離により、細胞を結合緩衝液で２回洗浄する。２．４μｌ／ウェルのストレプトアビジン−ＦＩＴＣ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ（登録商標））を含有する溶液（ＤＰＢＳ中１：１０希釈）および５μｌ／ウェルのヨウ化プロピジウムを各ウェルに添加し、暗所にて室温で３０分間インキュベートする。細胞を結合緩衝液で２回洗浄し、１００μｌのＰＢＳに再懸濁する。試料をＩｎｔｅｌｌｉＣｙｔ  ｉＱｕｅフローサイトメーターで読み取り、データをＦｌｏｗＪｏソフトウェアで分析した。個々のＭＦＩ（すなわち平均蛍光強度）値をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアに入れて濃度応答曲線を作成し、該曲線からＩＣ５０値を外挿する。
【０１０８】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａは、０．３２ｎＭのＩＣ５０値で、および表３にさらに示すように、ヒトＴｉｍ−３とホスファチジルセリンとの相互作用を用量依存的に阻止する。
【０１０９】
【表３】
0006839761.tif 000004
【０１１０】
ガレクチン−９阻止アッセイ：抗体Ａは、ヒトのガレクチン−９とヒトＴｉｍ−３との相互作用を阻止する。
本発明の抗体がヒトガレクチン−９のヒトＴｉｍ−３への結合を阻止する能力は、以下のようにして測定することができる。この受容体−リガンド阻止アッセイのために、９６ウェルのストレプトアビジンでコーティングしたＭＳＤプレート（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を１５０μｌのブロッキング緩衝液（５％ウシ血清アルブミンを含有するＰＢＳＴ）で２時間ブロッキングする。ウェルを、０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有する２００μｌのＰＢＳで３回洗浄する。組換えヒトガレクチン−９（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）をＥＺ−Ｌｉｎｋ（商標）ビオチン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標））を用いてビオチン化し、次いで２５μｌの０．２１μｇ／ｍｌのヒト組換えガレクチン−９−ビオチンを次いで添加し、室温で２時間インキュベートする。プレートを、０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。ヒトＴｉｍ−３−Ｆｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）をスルホ−タグ（ｓｕｌｆｏ−ｔａｇ）ＮＨＳ−エステル試薬（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（登録商標））を用いてルチニル化し（ｒｕｔｈｉｎｙｌａｔｅｄ）、使用するまで少量のアリコーティングを−８０℃で保存する。抗体を段階希釈し（１３．５μｇ／ｍｌから開始）、５０μｌの各抗体を５０μｌの０．０５μｇ／ｍｌの希釈ｈＴｉｍ−３−Ｆｃ−ｒｕｔｈと混合し、室温で１時間インキュベートする。次いで、５０μｌの各組み合わせをプレートに添加し、室温で１．５時間インキュベートする。プレートを、０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。次いで、１５０μｌの１×ｒｅａｄ緩衝液（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）をプレートの各ウェルに添加し、プレートをＳｅｃｔｏｒ  Ｉｍａｇｅｒ  ２４００（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で読み取る。
【０１１１】
本質的に上記のように行った実験において、７．８ｎＭのＩＣ５０値を有する対照ポリクローナル抗ヒトＴｉｍ−３抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）と比較して、抗体Ａは、５．６ｎＭのＩＣ５０値で、ヒトＴｉｍ−３とヒトガレクチン−９との相互作用を阻止する。しかしながら、ポリクローナル抗ヒトＴｉｍ−３抗体は、ヒトガレクチン−９とのヒトＴｉｍ−３の相互作用を最大１００％阻止することができるが、抗体Ａは、このアッセイにおいて部分的な阻止しか達成しない。
【０１１２】
ＣＥＡＣＡＭ−１阻止アッセイ：抗体Ａは、ヒトＣＥＡＣＡＭ１とヒトＴｉｍ−３との相互作用を阻止しない。
本発明の抗体がヒトＴｉｍ−３へのヒトＣＥＡＣＡＭ１の結合を阻止する能力は、以下のようにして測定することができる。この受容体−リガンド阻止アッセイのために、９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ  ４ＨＢＸプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を１００μｌ／ウェルの１μｇ／ｍｌのヒトＴｉｍ−３−Ｆｃで４℃でコーティングする。プレートを０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄し、室温で１時間、３％ＢＳＡを含む２００μｌ／ウェルのＰＢＳでブロッキングする。次いでブロッキング緩衝液を除去し、５０μｌの滴定したＡｂ（ポリクローナル抗ヒトＴｉｍ−３、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、抗体Ａ、および対照ヒトＩｇＧを含む）を６００ｎＭで開始してプレートに添加し、室温で１時間インキュベートする。次いで５０μｌの２０μｇ／ｍｌのＣＥＡＣＡＭ１（ＢＩＯＴＡＮＧ）を直接ウェルに添加し、室温で１時間インキュベートする（抗体の最終濃度は３００ｎＭであり、ＣＥＡＣＡＭ１の最終濃度は１０μｇ／ｍｌである）。プレートを０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄し、１００μｌの０．２μｇ／ｍｌのビオチン化ヒトＣＥＡＣＡＭ１抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加し、次いで室温で１時間インキュベートする。プレートを０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄し、次いで１００μｌのストレプトアビジンペルオキシダーゼ（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を添加し、次いで室温で１時間インキュベートする。プレートを０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで６回洗浄し、１００μｌ／ウェルの１：１ＴＭＢ基質溶液ＡおよびＢ（ＫＰＬ）を用いて室温で１０分間発色させる。次いで、反応を１００μｌ／ウェルの０．１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を用いて停止し、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）プレートリーダーで４５０ｎｍで読み取る。
【０１１３】
本質的に上記のように行った実験において、以下の表４に示されるように、抗体Ａは、ヒトＴｉｍ−３へのＣＥＡＣＡＭ１の結合を有意に阻止しない。
【０１１４】
【表４】
0006839761.tif 000005
【０１１５】
エピトープ
抗体ＡのＦａｂは、抗体Ａを固定化（アガロース樹脂）パパイン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で酵素的に切断し（ｃｌｉｐｐｉｎｇ）、続いて遊離の可溶なＦｃおよび切断されていないＩｇＧを抜き取るための標準ＰｒｏＡカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）精製によって生成される。Ｆａｂを含有するフロースルーを収集して、濃縮し、緩衝液の交換をする。ｈＴｉｍ−３−ＩｇＶ−ＦＬＡＧを、標準抗ＦＬＡＧ樹脂（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）プロトコルを用いて２９３ＨＥＫ上清から精製する。ｈＴｉｍ−３−ＩｇＶドメインは、ヒトＴｉｍ−３（配列番号１）のアミノ酸残基Ｓ２２〜Ｋ１３０を表す。フロースルーを樹脂カラム中に複数回戻す。各実験後、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（ＮｕＰＡＧＥ  Ｎｏｖｅｘ  ４〜１２％ビス−Ｔｒｉｓゲル；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびＨＰＬＣ（ＴＳＫｇｅｌ  Ｇ３０００  ＳＷ  ＸＬ（寸法：７．８ｍｍ、ＩＤ３０ＣＭ、５μＭ；ＴＯＳＨＯ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ）を用いて、ｈＴｉｍ−３−ＦＬＡＧタンパク質の品質を決定する。最良のラウンドのタンパク質を一緒に合わせて、最終バッチを作製する。
【０１１６】
ｐＨ７．２のＴＢＳ緩衝液中２．１７ｍｇ／ｍＬのｈＴｉｍ−３−ＩｇＶ−ＦＬＡＧと６．７９ｍｇ／ｍＬの抗体Ａ−Ｆａｂとを１：１のモル比で混合し、複合体をサイズ排除クロマトグラフィーにより、ｐＨ７．４の２０ｍＭヘペス（ｈｅｐｅｓ）および１５０ｍＭ塩化ナトリウム中の６．９ｍｇ／ｍＬの最終濃度で単離する。Ｔｉｍ−３−抗Ｔｉｍ−３複合体を、シッティングドロップ蒸気拡散法を用いて、５つのＱｉａｇｅｎ  ｇｒｉｄ  ｓｃｒｅｅｎにて、８℃および２１℃の両方でスクリーニングする。０．３μＬのタンパク質の上部に０．３μＬの結晶化溶液を分注するＡｒｔ  Ｒｏｂｂｉｎｓ  Ｐｈｏｅｎｉｘ液体操作ロボットを用いて、滴下を設定する。１００〜２００μｍの連晶（ｉｎｔｅｒｇｒｏｗｎ）プリズムが、２０％ＰＥＧ３３５０および０．２Ｍ塩化リチウム中で２１℃で得られる。結晶を採取し、液体窒素中で瞬間凍結する前に、２０％エチレングリコールを補充した結晶化条件からなる溶液中で凍結防止する。データセットをＡｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙで収集し、セルパラメータａ＝７４．６２Å、ｂ＝５７．８５Å、およびｃ＝７４．７１Åを有する空間群Ｐ２１で２．２Åに回折する。
【０１１７】
ヒトＴｉｍ−３との複合体中の抗体Ａ−Ｆａｂの構造を、プログラムＰｈａｓｅｒを用いて分子置換（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）によって決定する。高解像度の一般的に入手可能なＦａｂ構造およびマウスＴｉｍ−３の公表されている構造を分子置換（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）モデルとして用いることができる。プログラムＲｅｆｍａｃを用いて構造を精密化し、プログラムＣＯＯＴを用いてモデルを再構築する。最終精密化Ｒファクターは、Ｒｗｏｒｋ＝２０．２％、Ｒｆｒｅｅ＝２３．４％である。ラマチャンドラン違反のものはなく、残基の９６．４％はラマチャンドランプロットの好まれる（ｆａｖｏｒｅｄ）領域にある。Ｔｉｍ−３（配列番号１）のＡｓｎ９９においてグリコシル化を示す密度がある。
【０１１８】
Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００を利用して、捕捉された抗体Ａ−Ｆａｂに対するｈＴｉｍ−３−ＩｇＶ−ＦＬＡＧの結合キネティクスを決定する。ランニング緩衝液としてのＨＢＳ−ＥＰ中において、２５℃でのこの複合体の１：１結合は３．６２Ｅ＋０５  １／Ｍｓのｋｏｎ、２．８６Ｅ−０３  １／ｓのｋｏｆｆ、および７．９２Ｅ−０９ＭのＫＤを有する。
【０１１９】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ａ−Ｆａｂ／ｈＴｉｍ−３複合体の解像を行い、エピトープ／パラトープが以下の表５に示される。以下の表５は、ｈＴｉｍ−３（配列番号１）の列挙された残基の６Å以内にある抗体Ａ−Ｆａｂの残基を列挙する。抗体Ａ−Ｆａｂの重鎖はｈＴｉｍ−３と６２個の接触（カットオフ６Å）を有する一方、軽鎖は３４個の接触（カットオフ６Å）を有する。
【０１２０】
【表５】
0006839761.tif 000006
【０１２１】
抗体Ａのキネティクス／親和性研究
Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ１００機器を用いて、捕捉抗体ＡへのヒトＴｉｍ−３−ＩｇＶ−Ｆｃ単一アーム抗原（ＳＡＧ）の結合のキネティクスを測定することができる。ヒトＦａｂバインダー（Ｈｕｍａｎ  Ｆａｂ  Ｂｉｎｄｅｒ）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）をＢｉａｃｏｒｅ  ＣＭ５センサーチップ表面にアミンカップリングさせることにより、ヒトＦａｂバインダー表面を調製する。ランニング緩衝液としてＨＢＳ−ＥＰ緩衝液（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて、試験抗体をチップにより捕捉する。Ｔｉｍ−３  ＳＡＧを３の希釈係数で３０ｎＭから開始してランニング緩衝液に希釈して、０．０４、０．１２、０．３７、１．１１、３．３３、１０および３０ｎＭの濃度を得る。希釈したＴｉｍ−３  ＳＡＧ分析物または緩衝液を３０μｌ／分で１８０秒間注入し、複合体の解離を１２００秒間モニタリングする。各分析物結合サイクルの間に、３０μｌ／分の１０ｍＭグリシン−ＨＣｌ  ｐＨ２．１の注入を用いて、５つの低濃度については２回の注入を３０秒、および２つの高濃度については２回の注入を６０秒にて行うことで、結合表面が再生される。所与の抗原／Ａｂ相互作用の実験データを、質量輸送モデルを用いた１：１ラングミュアーを用いてフィッティングする。
【０１２２】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａは、表６に示されるキネティクスおよび親和性定数でヒトＴｉｍ−３に結合する。
【０１２３】
【表６】
0006839761.tif 000007
【０１２４】
ＰＢＭＣおよび抗体Ｂでヒト化したＮＳＧマウスにおける定着（ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ）ヒト腫瘍の異種移植モデル
抗体Ｂの有効性は、ＮＣＩ−Ｈ８２７ヒトＮＳＣＬＣ異種移植片モデルで試験することができ、モデルにおける定着腫瘍を遅延または破壊する能力を評価する。０日目に、１×１０７個のＨ８２７細胞をＮＳＧマウスの側腹部に皮下移植する（７週齢、雌、１群あたりマウス１０匹）。ヒト異種移植腫瘍が定着したら、３４日目にマウスに５×１０６個のヒトＰＢＭＣを注入する（ｉ．ｖ．）。３５日目に開始して、マウスにヒトＩｇＧまたは抗体Ｂ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）のいずれかを１０ｍｇ／ｋｇで毎週（合計３回投与）、腹腔内投与する。グルーミングおよび歩行を含む動物の健康および行動を週に少なくとも２回モニタリングする。体重および腫瘍体積を週に２回測定する。
【０１２５】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ｂによる処置は、ヒトＩｇＧによる処置と比較して、ヒト化ＮＳＧマウスにおける腫瘍増殖を有意に阻害する（表７）。
【０１２６】
【表７】
0006839761.tif 000008
【０１２７】
【表８】
0006839761.tif 000009
【０１２８】
結合キネティクスおよび親和性
表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）を用いて、ヒトＰＤ−Ｌ１のキネティクスおよび平衡解離定数（ＫＤ  ）を抗体Ｂについて決定する。
【０１２９】
センサーチップ表面へのリガンドとしての抗体Ｂの固定化を２５℃で行う。可溶性ヒトＰＤ−Ｌ１−Ｆｃ融合タンパク質（およびいくつかの場合には、カニクイザルＰＤ−Ｌ１−Ｆｃ融合タンパク質）を分析物として０．０１２３ｎＭ〜９ｎＭの範囲の濃度で注射する。分析を３７℃で行う。各試料の接触時間は３０μｌ／分で１８０秒である。解離時間は２４０〜１５００秒とした。固定化表面を０．９５Ｍ  ＮａＣｌ／２５ｍＭ  ＮａＯＨを用いて３０μｌ／分で１８秒間再生し、次いで３０秒間安定化させる。結合キネティクスをＢｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（バージョン３．０）を用いて分析する。データはブランクのフローセルを参照基準とし、データを１：１結合モデルにフィッティングする。
【０１３０】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ｂは、８２ｐＭのＫＤでヒトＰＤ−Ｌ１に結合する。
【０１３１】
【表９】
0006839761.tif 000010
【０１３２】
ＥＬＩＳＡ分析：抗体Ｂは組換えＰＤ−Ｌ１に結合する。
抗体ＢがヒトＰＤ−Ｌ１に結合する能力は、ＥＬＩＳＡによって測定することができる。ＰＤ−Ｌ１結合アッセイのために、９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ）をヒトＰＤ−Ｌ１−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）で４℃で一晩コーティングする。ウェルをブロッキング緩衝液（５％脱脂粉乳を含むＰＢＳ）で２時間ブロッキングする。ウェルを０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。次いで抗体Ｂまたは対照ＩｇＧ（１００μｌ）を添加し、室温で１時間インキュベートする。洗浄後、プレートを１００μｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆ（ａｂ’）２−ＨＲＰコンジュゲート（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）とともに室温で１時間インキュベートする。プレートを洗浄し、次いで１００μｌの３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジンとともにインキュベートする。４５０ｎｍにおける吸光度をマイクロプレートリーダーで読み取る。半数効果濃度（ＥＣ５０）をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ６ソフトウェアを用いて計算する。
【０１３３】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ｂは、０．１１ｎＭのＥＣ５０でヒトＰＤ−Ｌ１に結合する。抗体Ｂは、４℃、２５℃、および４０℃の３つ全ての温度条件下で４週間後にその結合活性を保持する。
【０１３４】
フローサイトメトリー分析：抗体Ｂは細胞表面ＰＤ−Ｌ１に結合する。
抗体Ｂが細胞表面の発現ヒトＰＤ−Ｌ１に結合する能力は、フローサイトメトリーによって測定することができる。ＭＤＡ−ＭＢ２３１細胞（ＰＤ−Ｌ１陽性ヒト乳房腺癌細胞株）を、２００μｌの染色緩衝液中の１ウェル当たり１．５×１０５個の細胞で９６ウェルＵ底プレートに添加し、３０分間４℃でインキュベートする。プレートを１２００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を除去する。１００μｌの抗体Ｂ−ビオチン（１０μｇ／ｍｌから始めて１：４で段階希釈する）を添加する。合計６つの段階希釈物を評価する。３０分間４℃でインキュベートした後、細胞をＤＰＢＳで２回洗浄する。５μｌのストレプトアビジン−ＰＥを含有する１００μｌの検出緩衝液を添加する。４℃でさらに３０分間インキュベートした後、プレートを遠心分離し、ＤＰＢＳで２回洗浄する。ＦＡＣＳ分析のために、細胞を２００μｌのＤＰＢＳに再懸濁する。
【０１３５】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ｂは、０．１４ｎＭのＥＣ５０で、ＭＤＡ−ＭＢ２３１細胞上の細胞表面ＰＤ−Ｌ１に用量依存的に結合する。
【０１３６】
ＥＬＩＳＡ分析：抗体ＢはＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との相互作用を阻止する。
本発明の抗体がＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻止する能力は、ＥＬＩＳＡによって測定することができる。受容体−リガンド阻止アッセイのために、様々な量の抗体Ｂまたは対照ＩｇＧを一定量のビオチン化ＰＤ−Ｌ１−Ｆｃ融合タンパク質（１００ｎｇ／ウェル）と混合し、室温で１時間インキュベートする。混合物をＰＤ−１−Ｆｃ（１μｇ／ｍｌ）でプレコーティングした９６ウェルプレートに移し、次いで室温でさらに１時間インキュベートする。洗浄後、ストレプトアビジンＨＲＰコンジュゲートを添加し、４５０ｎｍでの吸光度を読み取る。ＩＣ５０は、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合の５０％阻害に必要な抗体濃度を表す。
【０１３７】
本質的にこのアッセイで記載されるように行った実験において、抗体Ｂは、０．９５ｎＭのＩＣ５０でＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との相互作用を阻止する。抗体Ｂは、４℃、２５℃、および４０℃の３つ全ての温度条件下で４週間後にその阻止活性を保持する。
【０１３８】
ＥＬＩＳＡ分析：抗体ＢはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との相互作用を阻止する。
ヒトＰＤ−Ｌ１はＢ７−１にも結合する。抗体ＢがＢ７−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻止する能力は、ＥＬＩＳＡによって測定することができる。ＰＤ−Ｌ１／Ｂ７−１阻止アッセイの手順は、プレートを１μｇ／ｍｌのＢ７−１−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）でコーティングすることを除いて、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１阻止アッセイと同様である。ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合の５０％阻害に必要な抗体濃度（ＩＣ５０）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  ｐｒｉｓｍ６ソフトウェアを用いて計算する。
【０１３９】
本質的にこのアッセイに記載されるように行った実験において、抗体Ｂは、２．４ｎＭのＩＣ５０でＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との相互作用を阻止する。
【０１４０】
抗体Ａは、抗ヒトＰＤ−Ｌ１抗体の存在下で、インビトロで刺激されたヒトＰＢＭＣからのインターフェロン−ガンマ産生を増強する。
本発明の抗体によってＴｉｍ−３シグナルを阻止する機能は、Ｔ細胞活性化の際のサイトカインの放出を測定することによって評価することができる。Ｔ細胞活性化が本発明の抗体による処置によって促進されるとき、ＩＦＮ−γなどのある特定のサイトカインのレベルは増加すると予想される。
【０１４１】
ヒト単球単離キットＩＩ（Ｍｉｌｔｅｎｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて、健常なドナーから得た新鮮なヒトＰＢＭＣ（ＡｌｌＣｅｌｌｓ）からのネガティブセレクションによって、ＣＤ１４＋単球を単離する。ＣＤ１４＋単球を６２．５ｎｇ／ｍｌのｈＧＭ−ＣＳＦおよび２０ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ−４の存在下での完全ＲＰＭＩ−１６４０培地中で３日間培養することによって、ヒト単球由来の樹状細胞を生成する。新鮮なヒトＰＢＭＣは異なる健常なドナーから単離された（ＡｌｌＣｅｌｌｓ）。次いで、１ウェル当たり７．５×１０４個のＰＢＭＣ細胞および１．５×１０４個の未成熟ＤＣを含有する１００μｌの完全ＡＩＭ−Ｖ培地を含む９６ウェルプレートの個々のウェル中で、２種類の細胞を混合する。１００ｎＭのヒトＩｇＧ１、１００ｎＭの抗体Ａ、４ｎＭまたは１．３３ｎＭのアテゾリズマブ、０．０７ｎＭまたは０．２２ｎＭのＬｉｌｌｙ  ＰＤ−Ｌ１抗体、抗体Ｂ、または１００ｎＭの抗体Ａをアテゾリズマブまたは抗体Ｂと組み合わせて含有する１００μｌの完全ＡＩＭ−Ｖ培地を８連で添加する。３７℃、５％ＣＯ２で６日間インキュベートした後、上清を回収し、ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてヒトＩＦＮ−γについて測定する。対応のないｔ検定を用いて、群を比較する。
【０１４２】
本質的に上記のように行った実験において、抗体Ａまたはアテゾリズマブの添加は、ヒトＩｇＧ１の添加と比較して、ＩＦＮ−γの分泌を増加させる。以下の表９に示されるように、抗体Ａとアテゾリズマブとの組み合わせは、１．３３ｎＭ用量（Ｐ＝０．００１４）の用量でのアテゾリズマブ単独の添加と比較して、ＩＦＮ−γの分泌を有意に増加させる。このＭＬＲアッセイにおいて、抗体Ａは、抗体Ｂと組み合わせたときにＩＦＮ−γの分泌を増加させる（表１０）。
【０１４３】
【表１０】
0006839761.tif 000011
【０１４４】
【表１１】
0006839761.tif 000012
【０１４５】
初代ヒトＴ細胞でヒト化したＮＳＧマウスにおける定着ヒト腫瘍の異種移植モデル
本発明の抗体の有効性は、ＮＣＩ−ＨＣＣ８２７ヒトＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）異種移植片モデルで試験することができ、モデルにおける定着腫瘍を遅延または破壊する能力を評価する。０日目に、１×１０７個のＮＣＩ−ＨＣＣ８２７細胞をＮＳＧマウスの側腹部に皮下移植する（７週齢、雌、１群あたりマウス８匹）。腫瘍が約４００ｍｍ３の体積に達したら（約３０〜３２日目）、マウスに２．５×１０６個の事前に増殖させたヒトＴ細胞を注入する（ｉ．ｖ．）。この事前に増殖させたヒトＴ細胞は、全血からヒトＴ細胞を分離し、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  Ｔ−Ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８を用いて１０日間増殖させることによって生成される。この事前に増殖させたヒトＴ細胞は、後で使用するために凍結保存してもよい。Ｔ細胞注入の同じ日に、マウスにヒトＩｇＧまたは抗体Ａを１０ｍｇ／ｋｇで毎週（合計４回投与）、腹腔内注射により投与する。グルーミングおよび歩行を含む動物の健康および行動を週に少なくとも２回モニタリングする。
【０１４６】
体重および腫瘍体積を週に２回測定する。腫瘍体積を、上記のように電子キャリパーを用いて細胞移植後４日目から始めて週に２回測定した。腫瘍体積（ｍｍ３）＝π／６＊長さ＊幅２。抗腫瘍有効性はＴ／Ｃ比としてパーセントで表され、以下に要約されるようにして計算される：幾何平均値のΔＴ＞０の場合、％Ｔ／Ｃは式１００ΔＴ／ΔＣによって計算される。ΔＴ＝研究最終日の薬物処置群の平均腫瘍体積−投与の初日の薬物処置群の平均腫瘍体積、ΔＣ＝研究最終日の対照群の平均腫瘍体積−投与の初日の対照群の平均腫瘍体積である。さらに、％退縮は、ΔＴ＜０の場合、式＝１００×ΔＴ／Ｔ初日を用いて計算される。測定可能な腫瘍を有していない動物を完全奏効（ＣＲ）とみなし、５０％超の退縮を有する腫瘍を部分奏効（ＰＲ）とみなす。
【０１４７】
本質的に上記のように行った実験において、３つの治療すべてが、４回の毎週の投与後、６３日を経たときに腫瘍増殖阻害を示し、その後は処置停止後に腫瘍の再増殖を示した（表１１）。１０ｍｇ／ｋｇでの抗体Ａ処置は、６３日を経たときに５７％のＴ／Ｃ％で腫瘍増殖を遅延させる（ｐ＝０．０６５）。抗体Ｂは、６３日を経たときに２９％のＴ／Ｃ％でＨＣＣ８２７腫瘍の増殖を有意に阻害し、その後は腫瘍が再増殖した。抗体Ａおよび抗体Ｂの組み合わせは、このモデルにおいて、抗体Ｂ処置単独に対して追加の抗腫瘍利益を与えなかった（ｐ＝０．８４）。
【０１４８】
【表１２】
0006839761.tif 000013
【０１４９】
アミノ酸およびヌクレオチド配列
配列番号１（ヒトＴｉｍ−３）（ホモサピエンス）
ＭＦＳＨＬＰＦＤＣＶＬＬＬＬＬＬＬＬＴＲＳＳＥＶＥＹＲＡＥＶＧＱＮＡＹＬＰＣＦＹＴＰＡＡＰＧＮＬＶＰＶＣＷＧＫＧＡＣＰＶＦＥＣＧＮＶＶＬＲＴＤＥＲＤＶＮＹＷＴＳＲＹＷＬＮＧＤＦＲＫＧＤＶＳＬＴＩＥＮＶＴＬＡＤＳＧＩＹＣＣＲＩＱＩＰＧＩＭＮＤＥＫＦＮＬＫＬＶＩＫ
配列番号２（抗体ＡのＨＣＤＲ１）（人工配列）
ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＳ
配列番号３（抗体ＡのＨＣＤＲ２）（人工配列）
ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号４（抗体ＡのＨＣＤＲ３）（人工配列）
ＡＲＹＡＲＴＡＦＤＬ
配列番号５（抗体ＡのＬＣＤＲ１）（人工配列）
ＱＡＳＱＤＩＹＮＹＬＮ
配列番号６（抗体ＡのＬＣＤＲ２）（人工配列）
ＹＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号７（抗体ＡのＬＣＤＲ３）（人工配列）
ＱＱＡＮＳＦＰＰＴ
配列番号８（抗体ＡのＨＣＶＲ）（人工配列）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＡＲＴＡＦＤＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号９（抗体ＡのＬＣＶＲ）（人工配列）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＧＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＹＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号１０（抗体ＡのＨＣ）（人工配列）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＡＲＴＡＦＤＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＥＧＡＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号１１（抗体ＡのＬＣ）（人工配列）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＧＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＹＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１２（抗体ＡのＨＣのＤＮＡ）（人工配列）
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＴＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＧＧＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＧＣＡＧＣＣＴＣＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＣＧＣＴＧＣＧＡＧＣＧＧＧＴＴＴＡＣＴＴＴＣＴＣＧＴＣＧＴＡＣＴＡＴＡＴＧＴＣＧＴＧＧＧＴＧＡＧＡＣＡＡＧＣＡＣＣＡＧＧＴＡＡＡＧＧＡＣＴＴＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＣＴＡＴＣＴＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＣＡＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＧＧＡＴＴＣＡＧＴＣＡＡＧＧＧＡＡＧＡＴＴＣＡＣＴＡＴＣＴＣＧＣＧＣＧＡＣＡＡＴＴＣＣＡＡＧＡＡＣＡＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＣＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＧＣＴＧＣＧＧＧＣＡＧＡＡＧＡＴＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＴＧＣＣＣＧＣＴＡＣＧＣＣＣＧＧＡＣＣＧＣＣＴＴＣＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＡＧＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＴＧＴＣＴＣＣＴＣＡＧＣＴＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＡＴＣＧＧＴＣＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＡＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＴＧＧＧＧＧＣＡＣＡＧＣＧＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＣＧＧＴＧＴＣＧＴＧＧＡＡＣＴＣＡＧＧＣＧＣＡＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＣＣＣＧＧＣＴＧＴＣＣＴＡＣＡＧＴＣＣＴＣＡＧＧＡＣＴＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＴＧＧＧＣＡＣＣＣＡＧＡＣＣＴＡＣＡＴＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＡＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＣＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＴＣＡＣＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＧＣＣＧＡＧＧＧＧＧＣＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＴＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＴＣＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＡＧＴＣＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＴＡＴＴＣＣＡＡＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＡＡＡ
配列番号１３（抗体ＡのＬＣのＤＮＡ）（人工配列）
ＧＡＣＡＴＣＧＴＧＡＴＧＡＣＴＣＡＡＡＧＣＣＣＴＴＣＡＡＧＣＣＴＣＴＣＧＧＣＧＴＣＡＧＴＣＧＧＴＧＡＴＧＧＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＡＣＣＴＧＴＣＡＡＧＣＡＴＣＣＣＡＡＧＡＣＡＴＣＴＡＣＡＡＣＴＡＣＴＴＧＡＡＴＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＡＧＧＧＡＡＡＧＣＣＣＣＧＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＣＧＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＡＣＴＴＣＡＧＡＧＣＧＧＡＧＴＧＣＣＡＴＣＣＣＧＣＴＴＴＴＣＣＧＧＡＴＣＧＧＧＧＡＧＣＧＧＡＡＣＧＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＧＡＣＣＡＴＣＴＣＧＴＣＧＣＴＧＣＡＡＣＣＧＧＡＧＧＡＣＴＴＣＧＣＧＡＣＴＴＡＣＴＡＴＴＧＣＣＡＧＣＡＧＧＣＴＡＡＣＴＣＧＴＴＣＣＣＧＣＣＣＡＣＴＴＴＣＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＣＧＡＡＡＴＣＡＡＡＣＧＡＡＣＴＧＴＧＧＣＴＧＣＡＣＣＡＴＣＴＧＴＣＴＴＣＡＴＣＴＴＣＣＣＧＣＣＡＴＣＴＧＡＴＧＡＧＣＡＧＴＴＧＡＡＡＴＣＴＧＧＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＧＴＴＧＴＧＴＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＡＧＡＧＧＣＣＡＡＡＧＴＡＣＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＧＧＡＴＡＡＣＧＣＣＣＴＣＣＡＡＴＣＧＧＧＴＡＡＣＴＣＣＣＡＧＧＡＧＡＧＴＧＴＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＧＡＣＡＧＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＣＡＧＣＣＴＣＡＧＣＡＧＣＡＣＣＣＴＧＡＣＧＣＴＧＡＧＣＡＡＡＧＣＡＧＡＣＴＡＣＧＡＧＡＡＡＣＡＣＡＡＡＧＴＣＴＡＣＧＣＣＴＧＣＧＡＡＧＴＣＡＣＣＣＡＴＣＡＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＣＧＣＣＣＧＴＣＡＣＡＡＡＧＡＧＣＴＴＣＡＡＣＡＧＧＧＧＡＧＡＧＴＧＴ
配列番号１４（ヒトＣＥＡＣＡＭ１）（ホモサピエンス）
ＭＧＨＬＳＡＰＬＨＲＶＲＶＰＷＱＧＬＬＬＴＡＳＬＬＴＦＷＮＰＰＴＴＡＱＬＴＴＥＳＭＰＦＮＶＡＥＧＫＥＶＬＬＬＶＨＮＬＰＱＱＬＦＧＹＳＷＹＫＧＥＲＶＤＧＮＲＱＩＶＧＹＡＩＧＴＱＱＡＴＰＧＰＡＮＳＧＲＥＴＩＹＰＮＡＳＬＬＩＱＮＶＴＱＮＤＴＧＦＹＴＬＱＶＩＫＳＤＬＶＮＥＥＡＴＧＱＦＨＶＹＰＥＬＰＫＰＳＩＳＳＮＮＳＮＰＶＥＤＫＤＡＶＡＦＴＣＥＰＥＴＱＤＴＴＹＬＷＷＩＮＮＱＳＬＰＶＳＰＲＬＱＬＳＮＧＮＲＴＬＴＬＬＳＶＴＲＮＤＴＧＰＹＥＣＥＩＱＮＰＶＳＡＮＲＳＤＰＶＴＬＮＶＴＹＧＰＤＴＰＴＩＳＰＳＤＴＹＹＲＰＧＡＮＬＳＬＳＣＹＡＡＳＮＰＰＡＱＹＳＷＬＩＮＧＴＦＱＱＳＴＱＥＬＦＩＰＮＩＴＶＮＮＳＧＳＹＴＣＨＡＮＮＳＶＴＧＣＮＲＴＴＶＫＴＩＩＶＴＥＬＳＰＶＶＡＫＰＱＩＫＡＳＫＴＴＶＴＧＤＫＤＳＶＮＬＴＣＳＴＮＤＴＧＩＳＩＲＷＦＦＫＮＱＳＬＰＳＳＥＲＭＫＬＳＱＧＮＴＴＬＳＩＮＰＶＫＲＥＤＡＧＴＹＷＣＥＶＦＮＰＩＳＫＮＱＳＤＰＩＭＬＮＶＮＹＮＡＬＰＱＥＮＧＬＳＰＧＡＩＡＧＩＶＩＧＶＶＡＬＶＡＬＩＡＶＡＬＡＣＦＬＨＦＧＫＴＧＲＡＳＤＱＲＤＬＴＥＨＫＰＳＶＳＮＨＴＱＤＨＳＮＤＰＰＮＫＭＮＥＶＴＹＳＴＬＮＦＥＡＱＱＰＴＱＰＴＳＡＳＰＳＬＴＡＴＥＩＩＹＳＥＶＫＫＱ
配列番号１５（ヒトガレクチン９）（ホモサピエンス）
ＭＡＦＳＧＳＱＡＰＹＬＳＰＡＶＰＦＳＧＴＩＱＧＧＬＱＤＧＬＱＩＴＶＮＧＴＶＬＳＳＳＧＴＲＦＡＶＮＦＱＴＧＦＳＧＮＤＩＡＦＨＦＮＰＲＦＥＤＧＧＹＶＶＣＮＴＲＱＮＧＳＷＧＰＥＥＲＫＴＨＭＰＦＱＫＧＭＰＦＤＬＣＦＬＶＱＳＳＤＦＫＶＭＶＮＧＩＬＦＶＱＹＦＨＲＶＰＦＨＲＶＤＴＩＳＶＮＧＳＶＱＬＳＹＩＳＦＱＰＰＧＶＷＰＡＮＰＡＰＩＴＱＴＶＩＨＴＶＱＳＡＰＧＱＭＦＳＴＰＡＩＰＰＭＭＹＰＨＰＡＹＰＭＰＦＩＴＴＩＬＧＧＬＹＰＳＫＳＩＬＬＳＧＴＶＬＰＳＡＱＲＦＨＩＮＬＣＳＧＮＨＩＡＦＨＬＮＰＲＦＤＥＮＡＶＶＲＮＴＱＩＤＮＳＷＧＳＥＥＲＳＬＰＲＫＭＰＦＶＲＧＱＳＦＳＶＷＩＬＣＥＡＨＣＬＫＶＡＶＤＧＱＨＬＦＥＹＹＨＲＬＲＮＬＰＴＩＮＲＬＥＶＧＧＤＩＱＬＴＨＶＱＴ
配列番号１６（ヒトＰＤ−Ｌ１）（ホモサピエンス）
ＭＲＩＦＡＶＦＩＦＭＴＹＷＨＬＬＮＡＦＴＶＴＶＰＫＤＬＹＶＶＥＹＧＳＮＭＴＩＥＣＫＦＰＶＥＫＱＬＤＬＡＡＬＩＶＹＷＥＭＥＤＫＮＩＩＱＦＶＨＧＥＥＤＬＫＶＱＨＳＳＹＲＱＲＡＲＬＬＫＤＱＬＳＬＧＮＡＡＬＱＩＴＤＶＫＬＱＤＡＧＶＹＲＣＭＩＳＹＧＧＡＤＹＫＲＩＴＶＫＶＮＡＰＹＮＫＩＮＱＲＩＬＶＶＤＰＶＴＳＥＨＥＬＴＣＱＡＥＧＹＰＫＡＥＶＩＷＴＳＳＤＨＱＶＬＳＧＫＴＴＴＴＮＳＫＲＥＥＫＬＦＮＶＴＳＴＬＲＩＮＴＴＴＮＥＩＦＹＣＴＦＲＲＬＤＰＥＥＮＨＴＡＥＬＶＩＰＥＬＰＬＡＨＰＰＮＥＲＴＨＬＶＩＬＧＡＩＬＬＣＬＧＶＡＬＴＦＩＦＲＬＲＫＧＲＭＭＤＶＫＫＣＧＩＱＤＴＮＳＫＫＱＳＤＴＨＬＥＥＴ
配列番号１７（抗体ＢのＨＣＤＲ１）（人工配列）
ＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳ
配列番号１８（抗体ＢのＨＣＤＲ２）（人工配列）
ＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧ
配列番号１９（抗体ＢのＨＣＤＲ３）（人工配列）
ＡＲＳＰＤＹＳＰＹＹＹＹＧＭＤＶ
配列番号２０（抗体ＢのＬＣＤＲ１）（人工配列）
ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ
配列番号２１（抗体ＢのＬＣＤＲ２）（人工配列）
ＹＧＮＳＮＲＰＳ
配列番号２２（抗体ＢのＬＣＤＲ３）（人工配列）
ＱＳＹＤＳＳＬＳＧＳＶ
配列番号２３（抗体ＢのＨＣＶＲ）（人工配列）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＰＤＹＳＰＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号２４（抗体ＢのＬＣＶＲ）（人工配列）
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＱＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＤＳＳＬＳＧＳＶＦＧＧＧＩＫＬＴＶＬＧ
配列番号２５（抗体ＢのＨＣ）（人工配列）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＰＤＹＳＰＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＥＧＡＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号２６（抗体ＢのＬＣ）（人工配列）
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＱＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＤＳＳＬＳＧＳＶＦＧＧＧＩＫＬＴＶＬＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＡＥＣＳ
配列番号２７（抗体ＢのＨＣのＤＮＡ）（人工配列）
ＣＡＧＧＴＣＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＡＧＴＣＡＧＧＧＧＣＣＧＡＧＧＴＣＡＡＡＡＡＧＣＣＡＧＧＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＡＡＡＧＴＧＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＧＣＡＣＡＴＴＴＴＣＣＡＧＣＴＡＣＧＣＴＡＴＣＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＡＧＧＧＣＡＧＧＧＴＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＧＧＡＡＴＣＡＴＴＣＣＣＡＴＣＴＴＣＧＧＧＡＣＣＧＣＣＡＡＣＴＡＣＧＣＴＣＡＧＡＡＧＴＴＴＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＴＣＡＣＴＡＴＴＡＣＣＧＣＣＧＡＣＡＡＡＡＧＣＡＣＡＴＣＴＡＣＴＧＣＴＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＴＡＧＴＣＴＧＡＧＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＡＣＣＧＣＡＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＧＣＣＣＧＧＡＧＴＣＣＣＧＡＣＴＡＴＡＧＣＣＣＴＴＡＣＴＡＴＴＡＣＴＡＴＧＧＣＡＴＧＧＡＴＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＡＡＣＣＡＣＡＧＴＧＡＣＡＧＴＣＴＣＡＴＣＣＧＣＴＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＡＴＣＧＧＴＣＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＡＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＴＧＧＧＧＧＣＡＣＡＧＣＧＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＣＧＧＴＧＴＣＧＴＧＧＡＡＣＴＣＡＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＣＣＣＧＧＣＴＧＴＣＣＴＡＣＡＧＴＣＣＴＣＡＧＧＡＣＴＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＴＧＧＧＣＡＣＣＣＡＧＡＣＣＴＡＣＡＴＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＡＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＣＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＴＣＡＣＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＧＣＣＧＡＧＧＧＧＧＣＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＴＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＴＣＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＡＧＴＣＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＴＡＴＴＣＣＡＡＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＡＡＡ
配列番号２８（抗体ＢのＬＣのＤＮＡ）（人工配列）
ＣＡＧＴＣＣＧＴＣＣＴＧＡＣＡＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＣＡＣＣＣＣＴＧＧＧＣＡＧＣＧＡＧＴＧＡＣＡＡＴＣＴＣＴＴＧＴＴＣＴＧＧＧＡＧＴＴＣＣＴＣＡＡＡＴＡＴＴＧＧＴＡＧＴＡＡＣＡＣＣＧＴＧＡＡＴＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＣＣＣＧＧＣＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＧＡＡＡＣＴＣＡＡＡＴＡＧＧＣＣＡＴＣＣＧＧＡＧＴＣＣＣＣＧＡＣＣＧＧＴＴＣＴＣＴＧＧＴＡＧＴＡＡＡＴＣＡＧＧＣＡＣＴＴＣＣＧＣＣＡＧＣＣＴＧＧＣＴＡＴＴＡＧＣＧＧＧＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＧＧＡＣＧＡＡＧＣＣＧＡＴＴＡＣＴＡＴＴＧＣＣＡＧＴＣＴＴＡＣＧＡＴＴＣＣＡＧＣＣＴＧＴＣＴＧＧＡＡＧＴＧＴＧＴＴＴＧＧＣＧＧＡＧＧＧＡＴＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＣＣＴＧＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＡＧＧＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＧＴＣＡＣＴＣＴＧＴＴＣＣＣＧＣＣＣＴＣＣＴＣＴＧＡＧＧＡＧＣＴＴＣＡＡＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＧＴＧＴＧＴＣＴＣＡＴＡＡＧＴＧＡＣＴＴＣＴＡＣＣＣＧＧＧＡＧＣＣＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＣＣＴＧＧＡＡＧＧＣＡＧＡＴＡＧＣＡＧＣＣＣＣＧＴＣＡＡＧＧＣＧＧＧＡＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＣＣＡＣＡＣＣＣＴＣＣＡＡＡＣＡＡＡＧＣＡＡＣＡＡＣＡＡＧＴＡＣＧＣＧＧＣＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＡＣＧＣＣＴＧＡＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＴＣＣＣＡＣＡＧＡＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＧＣＣＡＧＧＴＣＡＣＧＣＡＴＧＡＡＧＧＧＡＧＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＴＧＧＣＣＣＣＴＧＣＡＧＡＡＴＧＣＴＣＴ
配列番号２９（アテゾリズマブＬＣ）（人工配列）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号３０（アテゾリズマブＨＣ）（人工配列）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号３１（デュルバルマブＬＣ）（人工配列）
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＳＳＮＷＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号３２（デュルバルマブＨＣ）（人工配列）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＤＣＫＡＳＧＩＴＦＳＮＳＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＹＤＧＳＫＲＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＮＤＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
配列番号３３（アベルマブＬＣ）（人工配列）
ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＧＹＮＹＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＳＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＴＳＳＳＴＲＶＦＧＴＧＴＫＶＴＶＬＧＱＰＫＡＮＰＴＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＧＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＫＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ
配列番号３４（アベルマブＨＣ）（人工配列）
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＩＭＭＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＹＰＳＧＧＩＴＦＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＫＬＧＴＶＴＴＶＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号３５（ＢＭＳ−９３６５５９  ＬＣＶＲ）（人工配列）
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号３６（ＢＭＳ−９３６５５９  ＨＣＶＲ）（人工配列）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＴＳＧＤＴＦＳＴＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＫＡＨＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＫＦＨＦＶＳＧＳＰＦＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
【配列表】
0006839761000001.app