(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式Aで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む眼疾患の予防または治療用経口投与剤:
【化１】
0006821050.tif 000030
ここで、前記眼疾患は、眼圧上昇及び緑内障のうち1つ以上を含む。
【請求項２】
メチルセルロース（ＭＣ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及び蒸留水からなる群から選択される１つ以上を含む賦形剤をさらに含む請求項１に記載の眼疾患の予防または治療用経口投与剤。
【請求項３】
前記賦形剤は、０．５ｗｔ％メチルセルロースを含む請求項２に記載の眼疾患の予防または治療用経口投与剤。
【請求項４】
前記化学式Aで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、粉末状にカプセル内に充填される請求項1に記載の眼疾患の予防または治療用経口投与剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、眼疾患の予防または治療、さらには、眼圧上昇及び緑内障の予防または治療に有用に使われるアデノシン誘導体を含む薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アデノシン（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）は、特殊な細胞膜の受容体を通じて多くの生理学的機能を行う物質であって、細胞外に存在するアデノシンは、多くの生理学的体系で神経伝達物質として作用するが、一般的に、与えられた器官の過多活動を補償し、ストレスの有害な効果から保護する作用を行う（Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｋ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３５，４０７−４２２，１９９２）。このような作用は、細胞内または細胞外のＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）が分解されて生成されたアデノシンによる細胞のエネルギー要求を減らし、酸素の供給を増加させようとする部分的に生成された陰性フィードバックループ（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ｌｏｏｐ）によるものである。アデノシンは、脳、心臓、腎臓のような必須的な器官の恒常性保持のために重要であり、例えば、脳に外部からアデノシンアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）を投与すれば、神経保護作用があることが証明されており、疼痛、認知、運動または睡眠にもかかわっていることが知られている。
【０００３】
アデノシン受容体（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）は、現在まで薬理学的研究及び分子クローニングを通じて、それぞれＰ１とＰ２受容体とに分類される。Ｐ１受容体は、アデノシンが基質として作用し、Ｐ２受容体は、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＵＴＰ及びＵＤＰが基質として作用して、生理活性を発現する。そのうちから、Ｐ１受容体は、４個の互いに異なるサブタイプのアデノシン受容体が確認され、リガンド（ｌｉｇａｎｄ）に対する親和力、体内分布、作用経路などによって、Ａ１、Ａ２またはＡ３に分類され、Ａ２は、再びＡ２ＡとＡ２Ｂとに分類される。これらアデノシン受容体は、Ｇタンパク質共役受容体（Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）群の一部類であって、アデノシンＡ１、Ａ２Ａ及びＡ２Ｂ受容体は、多くの選択的なリガンドを使用して薬理学的に確認されているが、アデノシンＡ３受容体は、１９９２年に最初に明らかになった受容体（Ｚｈｏｕ，Ｑ．Ｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８９，７４３２−７４３６，１９９２）であって、この受容体の病態生理学的な機能を確認するために多くの研究がなされている。
【０００４】
アデノシンＡ１及びＡ２受容体アゴニストは、主にアデノシンの誘導体であって、血圧降下剤、精神病治療剤、不整脈治療剤、脂肪代謝抑制剤（糖尿病治療剤）、脳保護剤として多く研究され、その拮抗剤（ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）は、キサンチン（ｘａｎｔｈｉｎｅ）誘導体であるか、多様な二環式が接合されたものであって、喘息治療剤、抗うつ剤、不整脈治療剤、腎臓保護剤、パーキンソン病治療剤、知能開発剤などとして開発されている。それにも拘らず、現在商品化されたものは、上室性頻拍（ｓｕｐｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）の治療目的として使用中であるアデノシン自体と心臓手術後に来る血液凝固を防止するために、ワーファリン（ｗａｒｆａｒｉｎ）の補助制として使用中であるアデノシン運搬阻害剤であるジピリダモール（ｄｉｐｙｒｉｄａｍｏｌｅ）だけである。このように商品化が円滑ではない理由は、アデノシン受容体が全身に広がっており、受容体の活性化時に伴われる多様な薬理作用のためであり、すなわち、所望の組織のアデノシン受容体のみを活性化させることができる化合物がないためである。
【０００５】
アデノシン受容体のうち、アデノシンＡ３受容体は、広く知られたアデノシンＡ１及びＡ２の受容体とは異なって、最も最近に明らかになった受容体であって、その役割が多く明らかになっておらず、選択的な受容体調節剤の開発のために多くの研究が進行中である。アデノシンＡ３受容体を薬理学的に研究するために、［１２５Ｉ］ＡＢＡ（Ｎ６−（４−アミノ−３−［１２５Ｉ］ヨードベンジル）−アデノシン、Ｎ６−（４−ａｍｉｎｏ−３−［１２５Ｉ］ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）、［１２５Ｉ］ＡＰＮＥＡ（Ｎ６−２−（４−アミノ−３−［１２５Ｉ］ヨードフェニル）−エチルアデノシン、Ｎ６−２−（４−ａｍｉｎｏ−３−［１２５Ｉ］ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）−ｅｔｈｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ）または［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ（（Ｎ６−（４−アミノ−３−［１２５Ｉ］ヨードベンジル）−アデノシン−５’−Ｎ−メチルカルボキサミド、Ｎ６−（４−ａｍｉｎｏ−３−［１２５Ｉ］ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ−５’−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）である３個の放射性標職されたリガンドが用いられている。前記放射性標職されたリガンドを利用した薬理学的に研究を通じて、アデノシンＡ３受容体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣｈｉｎｅｓｅＨａｍｓｔｅｒ  Ｏｖａｒｙ、ＣＨＯ）細胞に発現させた時、Ａ３受容体は、ＡＴＰからｃＡＭＰを生成させる酵素であるアデニル酸シクラーゼ（ａｄｅｎｙｌｙｌ  ｃｙｃｌａｓｅ）の抑制作用があり、Ａ３受容体は、アゴニストによって活性化される時、脳でホスファチジルイノシトール（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ  ｉｎｏｓｉｔｏｌ）を分解させて、イノシトールリン酸（ｉｎｏｓｉｔｏｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）とＤＡＧとを生成させる酵素であるＧＴＰ−依存性ホスホリパーゼＣ（Ｇｕａｎｏｓｉｎｅ  ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｃ）を活性化させるという事実が証明されている（Ｒａｍｋｕｍａｒ，Ｖ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８，１６８８７１−１６８８９０，１９９３；Ａｂｂｒａｃｃｈｉｏ，Ｍ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４８，１０３８−１０４５，１９９５）。このような発見は、脳虚血（ｂｒａｉｎ  ｉｓｃｈｅｍｉａ）でのＡ３受容体活性化作用による反応経路の可能性を説明可能にするが、その理由は、このような２次伝達物質体系が脳虚血での神経傷害の反応経路を意味するためである。また、Ａ３受容体のアゴニストは、炎症媒介体である腫瘍壊死因子ＴＮＦ−α（ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ）の放出を抑制し、やはり炎症媒介体であるＭＩＰ−１α、インターロイキン−１２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１２）及びインターフェロン−γ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−γ）の生成を抑制し、癲癇のような脳疾患に対する保護効果だけではなく、心臓に対しても保護効果があると知られている。一方、アデノシンＡ３受容体の不活性化は、肥満細胞（ｍａｓｔ  ｃｅｌｌ）からヒスタミンのような炎症誘発因子の放出を引き起こせ、気管支を収縮する作用を行い、兔疫細胞で細胞死（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）を引き起こせる。したがって、アデノシンＡ３拮抗剤は��消炎剤及び喘息治療剤としての開発可能性がある。したがって、薬物学的選択性を有した化合物を開発することができるならば、喘息、炎症、脳虚血、心臓疾患、癌など多様な疾病に対する新たな治療薬物の開発が可能であると考えられる。
【０００６】
現在まで研究開発された物質のうち、代表的なヒトアデノシンＡ３アゴニストは、ヌクレオシド系であるＮ６−（３−ヨードベンジル）−５’−（Ｎ−メチルカルバモイル）−アデノシン（Ｎ６−（３−ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−５’−（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ；ＩＢ−ＭＥＣＡ）及びＮ６−（３−ヨードベンジル）−２−クロロ−５’−（Ｎ−メチルカルバモイル）−アデノシン（Ｎ６−（３−ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−２−ｃｈｌｏｒｏ−５’−（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ；ＣＩ−ＩＢ−ＭＥＣＡ）であって、アデノシンＡ１及びＡ２受容体に比較して、Ａ３受容体に対して高い親和力及び選択性を有する物質である。一方、高い親和力及び選択性を示すアデノシンＡ３拮抗剤は、ほとんどヌクレオシド骨格ではない非プリン（ｎｏｎｐｕｒｉｎｅ）系の二環式化合物であって、ヒトの受容体では高い活性を示しているが、ラットのＡ３受容体に対しては活性が弱いか、ほとんどないので、臨床適用が可能な薬物の開発のために必須的な動物実験が不可能であるという短所が指摘されている（Ｂａｒａｌｄｉ，Ｐ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１２，１３１９−１３２９，２００５）。しかし、非プリン系の二環式化合物に比べて、ヌクレオシド系の化合物は、種間に関係なく、高い親和力と選択性とを示すために、動物実験が容易な長所があるので、新薬としての開発可能性が非常に大きいと考えられ、したがって、この系列の選択的Ａ３拮抗剤の導出が至急な課題であると言える。
【０００７】
本発明者らは、多様な先行研究の分析を通じて、アデノシンＡ３受容体のアゴニストとして作用するためには、その代表物質であるＩＢ−ＭＥＣＡとＣＩ−ＩＢ−ＭＥＣＡとの構造のうち、糖の５位のＮ−メチルカルバモイル基が必然的に存在しなければならず、塩基部分は、プリンの６番位置がアリールアミノ基またはアルキルアミノ基で置換されていなければならないということが分かった。したがって、糖の５位のＮ−メチルカルバモイル基は、水素結合を通じて受容体のアゴニスト作用に必須的な構造変化（ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｎｇｅ）を起こすので（Ｋｉｍ，Ｓ−Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｇｒａｐｈ．Ｍｏｄｅｌ．，２５，５６２−５７７，２００６）、糖の５位のＮ−メチルカルバモイル基を除去した物質を合成すれば、Ａ３受容体拮抗剤として開発されると考えられる。
【０００８】
一方、眼疾患（ｅｙｅ  ｄｉｓｅａｓｅ）の一種である緑内障（ｇｌａｕｃｏｍａ）は、眼房水（ａｑｕｅｏｕｓ  ｈｕｍｏｒ）の生成または排出機転に問題が発生して、眼圧（ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）が上昇することによって誘発される疾患であって、眼圧が上昇すれば、血液供給に障害が生じて、視神経の機能に異常をもたらし、末期には、失明に至ることができるために、全世界的に深刻な疾患として認識されている。
【０００９】
これにより、本発明者らは、眼圧上昇及びこれより誘発されるか、このような症状を伴う緑内障の予防及び治療剤としてアデノシンＡ３受容体拮抗剤を最初に研究して、毛様体（ｃｉｌｉａｒｙ  ｂｏｄｙ）で眼房水の生成を抑制し、抗線維化の促進による線維柱帯（ｔｒａｂｅｃｕｌａｒ  ｍｅｓｈｗｏｒｋ）組織のリモデリングを通じて、眼房水の排出を促進する二重薬理機転（ｄｕａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）を通じて眼圧を効果的に降下することができる新規なアデノシン誘導体化合物を合成した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明が解決しようとする課題は、眼圧上昇及び緑内障などの眼疾患を予防または治療することができるアデノシンＡ３受容体拮抗剤として作用するアデノシン誘導体を含む薬学的組成物を提供するところにある。
【００１１】
本発明の課題は、前述した技術的課題に制限されず、言及されていないさらに他の技術的課題は、下記の記載から当業者に明確に理解されるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
前記課題を解決するための本発明の一実施例による眼疾患の予防または治療用薬学的組成物は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む。
[化１]
【化１】
0006821050.tif 000002
【００１３】
（前記式において、Ａは、Ｓであり、Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ６〜Ｃ１０のアリールで置換された直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ５のアルキル、非置換されるか、独立して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ４のアルコキシ基が、１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジルであり、Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。
【００１４】
また、前記眼疾患は、眼圧上昇及び緑内障のうち１つ以上を含みうる。
【００１５】
また、前記化学式１は、下記化学式Ａで表される化合物であり得る。
[化Ａ]
【化２】
0006821050.tif 000003
【００１６】
前記他の課題を解決するための本発明の一実施例による眼疾患の予防または治療用経口投与剤は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む。
［化１］
【化３】
0006821050.tif 000004
【００１７】
（前記式において、Ａは、Ｓであり、Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ６〜Ｃ１０のアリールで置換された直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ５のアルキル、非置換されるか、独立して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ４のアルコキシ基が、１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジルであり、Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。
【００１８】
また、前記眼疾患は、眼圧上昇及び緑内障のうち１つ以上を含みうる。
【００１９】
また、メチルセルロース（Ｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ、ＭＣ）、ジメチルスルホキシド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ、ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ、ＰＥＧ）、及び蒸留水からなる群から選択される１つ以上を含む賦形剤をさらに含みうる。
【００２０】
また、前記賦形剤は、０．５ｗｔ％メチルセルロースを含みうる。
【００２１】
また、前記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、粉末状にカプセル内に充填される。
【００２２】
また、前記化学式１は、下記化学式Ａで表される化合物であり得る。
［化Ａ］
【化４】
0006821050.tif 000005
【００２３】
その他の実施例の具体的な事項は、詳細な説明及び図面に含まれている。
【発明の効果】
【００２４】
本発明のアデノシン誘導体は、眼圧上昇及び緑内障などの眼疾患を予防または治療することができるアデノシンＡ３受容体拮抗剤として作用することができて、眼疾患の予防及び治療に非常に適し、経口投与時に、薬物の吸収に優れ、体内毒性がほとんどなくて、生体親和的であり、経口投与剤として剤形化時に、保管安定性に優れて、眼疾患の予防及び治療のための経口投与に非常に適した薬学的組成物として使われる。
【００２５】
また、本発明のアデノシン誘導体は、毛様体での眼房水の生成抑制と、抗線維化の促進による線維柱帯組織のリモデリングを通じる眼房水の排出促進という二重薬理機転を示すことができるために、緑内障の予防及び治療に非常に適した薬学的組成物として使われる。
【００２６】
本発明の実施例による効果は、以上で例示された内容によって制限されず、さらに多様な効果が、本明細書内に含まれている。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】アゴニストとしてＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡを処理したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞に対して、本発明の実施例４の化合物の拮抗効果を示す図面である。
【図２】本発明の化合物（実施例２、実施例３及び実施例４）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。
【図３】本発明の化合物（実施例１及び実施例６）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。
【図４】本発明の化合物（実施例５、実施例７及び実施例８）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。
【図５】本発明の化合物（実施例１５及び実施例１６）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。
【図６】実験例８で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図７】実験例９で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図８】実験例１０で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図９】実験例１０で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図１０】実験例１０で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図１１】実験例１０で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図１２】実験例１０で実験動物の眼圧を測定した結果を示すグラフである。
【図１３】実験例１１で実験動物の眼球の線維柱帯組織で細胞外基質タンパク質（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ、ＳＭＡ及びＭＹＯＣ）の発現変化を観察した写真である。
【図１４】実験例１２で実験動物の眼球の線維柱帯組織でＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素タンパク質とｍＲＮＡ発現量とを測定した結果を示すグラフである。
【図１５】実験例１２で実験動物の眼球の線維柱帯組織でＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素タンパク質とｍＲＮＡ発現量とを測定した結果を示すグラフである。
【図１６】実験例１２で実験動物の眼球の線維柱帯組織でＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素タンパク質とｍＲＮＡ発現量とを測定した結果を示すグラフである。
【図１７】実験例１２で実験動物の眼球の線維柱帯組織でＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素タンパク質とｍＲＮＡ発現量とを測定した結果を示すグラフである。
【図１８】実験例１４（１４−１及び１４−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。
【図１９】実験例１５（１５−１及び１５−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。
【図２０】実験例１６の血中濃度−時間データから得たグラフである。
【図２１】実験例１７（１７−１、１７−２及び１７−３）の血中濃度−時間データから得たグラフである。
【図２２】実験例１８（１８−１及び１８−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
以下、本発明を詳しく説明する。
【００２９】
本発明は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含有するアデノシン誘導体を提供する。
【００３０】
[化１]
【化５】
0006821050.tif 000006
【００３１】
前記式において、
Ａは、Ｓであり、
Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ６〜Ｃ１０のアリールで置換された直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ５のアルキル、非置換されるか、独立して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または側鎖状のＣ１〜Ｃ４のアルコキシ基が、１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジルであり、
Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である。
【００３２】
望ましくは、
前記Ａは、ＯまたはＳであり、
前記Ｒは、メチル、エチル、プロピル、ナフチルメチル、ベンジル、独立して、または選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、及びＣ１〜Ｃ３のアルコキシ基からなる群から選択される１または２以上の置換基で置換されたベンジル、またはトルイル酸（ｔｏｌｕｉｃ  ａｃｉｄ）であり、
前記Ｙは、ＨまたはＣｌである。
さらに望ましくは、
前記Ａは、ＯまたはＳであり、
前記Ｒは、メチル、エチル、１−ナフチルメチル、ベンジル、２−クロロベンジル、３−フルオロベンジル、３−クロロベンジル、３−ブロモベンジル、３−ヨードベンジル、２−メトキシ−５−クロロベンジル、２−メトキシベンジルまたは３−トルイル酸であり、
前記Ｙは、ＨまたはＣｌである。
【００３３】
本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体の望ましい例は、次の通りである。
【００３４】
１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００３５】
２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００３６】
３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００３７】
４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００３８】
５）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００３９】
６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４０】
７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４１】
８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４２】
９）３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸；
【００４３】
１０）２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４４】
１１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４５】
１２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４６】
１３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４７】
１４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；
【００４８】
１５）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール；及び
【００４９】
１６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール。
【００５０】
本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体は、薬学的に許容可能な塩の形態で使用することができる。前記塩としては、薬学的に許容される多様な有機酸または無機酸によって形成された酸付加塩が有用である。適した有機酸としては、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、マイレン酸、安息香酸、サリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸などを使用し、適した無機酸としては、例えば、塩酸、硫酸などのハロゲン酸またはリン酸などを使用することができる。
【００５１】
本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体は、薬学的に許容可能な塩だけではなく、通常の方法によって製造可能なあらゆる塩、水化物及び溶媒化物をいずれも含みうる。
【００５２】
また、本発明は、前記化学式１で表されるアデノシン誘導体を製造する方法を提供する。
【００５３】
具体的に、下記の反応式１に示されたように、
【００５４】
化学式２の化合物を出発物質として、ルイス酸触媒の存在下でシリル化されたプリン化合物と反応させて、化学式３のβ−アノマー化合物を得る段階（段階１）；前記段階１で得た化学式３の化合物に塩酸を添加して、化学式４のジオール化合物を得る段階（段階２）；及び前記段階２で得た化学式４のジオール化合物を塩基触媒下でアミン化合物と反応させて、アデノシン誘導体を得る段階（段階３）；を含んでなる化学式１のアデノシン誘導体の製造方法を提供する。
[反１]
【化６】
0006821050.tif 000007
【００５５】
前記反応式１において、Ａ、Ｒ及びＹは、化学式１で定義したようである。
【００５６】
以下、本発明の製造方法を段階別に詳細に説明する。
【００５７】
本発明による段階１は、化学式２の化合物を出発物質として、ルイス酸触媒の存在下でシリル化されたプリン化合物と反応させて、化学式３のβ−アノマー化合物を得る段階である。
【００５８】
前記化学式３の化合物は、化学式２の化合物とシリル化されたプリン化合物とをルイス酸存在下で反応させて得られるが、前記ルイス酸としては、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ）を使用することができる。また、前記段階１の溶媒としては、ジクロロエタン、クロロホルム、アセトニトリル、ジクロロメタンなどを使用することが望ましい。その中でも、ジクロロエタンがさらに望ましい。前記シリル化されたプリン化合物は、化学式５のプリン化合物をヘキサメチルジシラザン（ＨＭＤＳ）及び硫酸アンモニウム触媒下で反応させて得られる。
【００５９】
本発明による段階２は、前記段階１で得た化学式３の化合物に塩酸を添加して、化学式４のジオール化合物を得る段階である。この際、塩酸の代わりに、酢酸、硫酸、ｐ−トルエンスルホン酸を使用することができる。
【００６０】
本発明による段階３は、前記段階２で得た化学式４のジオール化合物を塩基触媒下でアミン化合物と反応させて、アデノシン誘導体を得る段階である。
【００６１】
前記塩基触媒としては、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、１，４−ジオキサンなどを使用することが望ましく、その中でも、トリエチルアミンがさらに望ましい。また、段階３の溶媒としては、メタノール及びエタノールのような低級アルコールあるいは１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン及びクロロホルムのような溶媒が望ましい。
【００６２】
本発明のアデノシン誘導体の製造方法において、出発物質である化学式２の化合物は、置換基Ａの種類によって、下記の反応式２または反応式３の方法で製造可能である。
【００６３】
Ａが硫黄（Ｓ）である場合、下記の反応式２に示されたように、
化学式６のＤ−マンノース化合物を酸触媒下で２，２−ジメトキシプロパンと反応させて、化学式７のジアセトニド化合物を得る段階（段階ａ１）；前記段階ａ１で得た化学式７の化合物を還元剤存在下に開環させて、化学式８のジオール化合物を得る段階（段階ａ２）；前記段階ａ２で得た化学式８の化合物をメシル化して、化学式９のジメシル化合物を得る段階（段階ａ３）；前記段階ａ３で得た化学式９の化合物を環化させて、化学式１０のチオ糖化合物を得る段階（段階ａ４）；前記段階ａ４で得た化学式１０の化合物を選択的に加水分解させて、化学式１１のジオール化合物を得る段階（段階ａ５）；及び前記段階ａ５で得た化学式１１の化合物を触媒存在下に化学式２ａのアセテート化合物を得る段階（段階ａ６）；を含んでなる。
【００６４】
[反２]
【化７】
0006821050.tif 000008
【００６５】
（前記反応式２において、化合物２ａは、化学式２の化合物である）。
【００６６】
以下、本発明の化学式２の化合物の製造方法を段階別に詳細に説明する。
【００６７】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ１は、化学式６のＤ−マンノース化合物を酸触媒下で２，２−ジメトキシプロパンと反応させて、化学式７のジアセトニド化合物を得る段階である。
【００６８】
前記化学式７の化合物は、化学式６のＤ−マンノースを酸触媒及び無水酢酸存在下に２，２−ジメトキシプロパンと反応させて得られるが、この際、前記酸触媒としては、濃い硫酸または塩酸ガスのような無機酸、ｐ−トルエンスルホン酸のような有機酸を使用することができる。
【００６９】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ２は、前記段階ａ１で得た化学式７の化合物を還元剤存在下に開環させて、化学式８のジオール化合物を得る段階である。
【００７０】
前記化学式８の化合物は、還元剤である水素化ホウ素ナトリウムと反応させて得られる。前記水素化ホウ素ナトリウムの代わりに、水素化アルミニウムリチウムのようなメタルハイドライド、亜硫酸ナトリウムなどを使用することができる。
【００７１】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ３は、前記段階ａ２で得た化学式８の化合物をメシル化して、化学式９のジメシル化合物を得る段階である。
【００７２】
前記化学式９の化合物は、化学式８の化合物をメタンスルホニルクロリド（ＭｓＣｌ）と反応させて得られるが、この際、反応溶媒としては、エチルエーテル、石油エーテル、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような不活性溶媒を使用することが望ましい。
【００７３】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ４は、前記段階ａ３で得た化学式９の化合物を環化させて、化学式１０のチオ糖化合物を得る段階である。
【００７４】
前記化学式１０の化合物は、化学式９の化合物を硫化ナトリウムと反応させて得られるが、この際、硫化ナトリウムの代わりに、メチルチオアセテートなどのチオエステルと置換反応後、ナトリウムアルコキシドなどを反応させて得られることもある。前記段階ａ４において、溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどを使用することができる。
【００７５】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ５は、前記段階ａ４で得た化学式１０の化合物を選択的に加水分解させて、化学式１１のジオール化合物を得る段階である。
【００７６】
前記化学式１１の化合物は、化学式１０の化合物を酢酸を用いて５，６−アセトニドを選択的に加水分解して得られるが、この際、酢酸の代わりに、硫酸、塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸などを使用することもできる。
【００７７】
本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ６は、前記段階ａ５で得た化学式１１の化合物を触媒存在下に化学式２ａのアセテート化合物を得る段階である。
【００７８】
前記化学式２ａの化合物は、化学式１１の化合物をレッドテトラアセテート（Ｐｄ（ＯＡｃ）４）と反応させて得られる。
【００７９】
また、本発明による出発物質２において、Ａが酸素（Ｏ）である場合、下記の反応式３に示されたように、
【００８０】
前記出発物質である化学式２の化合物は、下記の反応式３に示されたように、
【００８１】
化学式１２の化合物を還元剤と反応させて、化学式１３のラクトール化合物を得る段階（段階ｂ１）；及び前記段階ｂ１で得た化学式１３の化合物を無水酢酸と反応させて、化学式２ｂのアセテート化合物を得る段階（段階ｂ２）；を含んでなる。
【００８２】
[反３]
【化８】
0006821050.tif 000009
【００８３】
（前記反応式３において、化合物２ｂは、化学式２の化合物である）。
【００８４】
以下、本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法を段階別に詳細に説明する。
【００８５】
本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法による前記段階ｂ１は、化学式１２の化合物を還元剤と反応させて、化学式１３のラクトール化合物を得る段階である。
【００８６】
前記化学式１３の化合物は、容易に合成して得られる化学式１２の化合物を水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ）触媒を用いて還元させて得られる。
【００８７】
本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法による前記段階ｂ２は、化学式１３の化合物を無水酢酸と反応させて、化学式２ｂのアセテート化合物を得る段階である。
【００８８】
前記化学式２の化合物は、化学式１３のラクトール化合物を無水酢酸と反応させて得られる。
【００８９】
また、本発明は、化学式１で表されるアデノシン誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含有するアデノシンＡ３拮抗剤を提供する。
【００９０】
さらに、本発明は、化学式１で表されるアデノシン誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含有する炎症性疾患の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。
【００９１】
アデノシンＡ３受容体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞に発現させた時、Ａ３受容体は、ＡＴＰからｃＡＭＰを生成させる酵素であるアデニル酸シクラーゼの抑制作用があり、Ａ３受容体は、アゴニストによって活性化される時、脳でホスファチジルイノシトールを分解させて、イノシトールリン酸とＤＡＧとを生成させる酵素であるＧＴＰ−依存性ホスホリパーゼＣを活性化させるという事実が証明されている（Ｒａｍｋｕｍａｒ，Ｖ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８，１６８８７１−１６８８９０，１９９３；Ａｂｂｒａｃｃｈｉｏ，Ｍ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４８，１０３８−１０４５，１９９５）。前記２次伝達物質体系が脳虚血での神経傷害の反応経路を意味するので、このような発見は、脳虚血でのＡ３受容体活性化作用による反応経路を説明することができる。また、アデノシンＡ３アゴニストは、炎症媒介体である腫瘍壊死因子ＴＮＦ−αの放出を抑制し、やはり炎症媒介体であるＭＩＰ−１α、インターロイキン−１２及びインターフェロン−γの生成を抑制し、癲癇のような脳疾患に対する保護効果だけではなく、心臓に対しても保護効果があると知られている。また、アデノシンＡ３受容体の不活性化は、肥満細胞からヒスタミンのような炎症誘発因子の放出を引き起こせ、気管支を収縮させる作用を行い、兔疫細胞で細胞死を引き起こせる。したがって、アデノシンＡ３拮抗剤は、消炎剤及び喘息治療剤としての開発可能性がある。
【００９２】
本発明のアデノシン誘導体のヒトアデノシン受容体（ｈＡＲ）に対する結合親和力及び選択性を評価するために行った受容体結合親和力（Ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｆｆｉｎｉｔｙ）の測定実験において（実験例１参照）、本発明のアデノシン誘導体は、ヒトアデノシンＡ３（ｈＡ３  ＡＲ）受容体に対して高い結合親和力を示し、アデノシンＡ１及びＡ２Ａ受容体に対しては、低い親和力、すなわち、大きな選択性を示した。特に、本発明の実施例１２の化合物は、ｈＡ３受容体に対して、Ｋｉ値が１．５０±０．４０ｎＭに最も高い親和力を示し、その次に、実施例２の化合物（Ｋｉ＝１．６６±０．９０ｎＭ）、実施例１４の化合物（Ｋｉ＝２．５０±１．００ｎＭ）、実施例１０の化合物（Ｋｉ＝３．６９±０．２５ｎＭ）及び実施例４の化合物（Ｋｉ＝４．１６±０．５０ｎＭ）の順に結合親和力が高く表われた。本発明の実施例４の化合物は、また、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から発現されたラットのアデノシンＡ３受容体に対しても高い親和力（Ｋｉ＝３．８９±１．１５ｎＭ）を示した。また、４’−Ｏであるオキソヌクレオシド形態を帯びるアデノシン誘導体である実施例１５及び実施例１６の化合物も、高い結合親和力と選択性とを示した（表１参照）。
【００９３】
また、本発明のアデノシン誘導体の抗炎症活性を調査するために行った実験で（実験例３〜実験例６参照）、対照群として用いられたヒドロコルチゾンに比べれば、少ない変化であるが、本発明のアデノシン誘導体が、抗炎症活性を有するということが分かった。
【００９４】
実施例２ないし実施例４の化合物をアセトンに希釈して処理した後、抗炎症活性を調査した結果からＴＰＡによって誘導されたマウス耳浮腫が、化合物４の処理によって浮腫減少効果があることを確認することができた（図２参照）。また、本発明の実施例１及び実施例６の化合物をアセトンに希釈して処理した後、調査した抗炎症活性は、実施例２ないし実施例４の化合物よりも４倍以上格段に増加した阻害率を示すことが分かった（図３参照）。
【００９５】
蒸留水とアセトンとの混合溶媒（１：４）に０．５％に希釈した本発明の実施例５ないし実施例７の化合物を用いて調査した抗炎症活性は、それぞれ１７％、３４％及び５３％の炎症阻害率を示した（図４参照）。そして、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）とアセトンとの混合溶媒（１：９）に０．５％に希釈した本発明の実施例１５及び実施例１６の化合物を用いて調査した炎症阻害率は、それぞれ５９％及び７９％に観察されることにより（図５参照）、本発明のアデノシン誘導体化合物が、抗炎症活性を有するということを確認することができた。
【００９６】
したがって、本発明の化学式１で表されるアデノシン誘導体は、アデノシンＡ３受容体に対して高い結合親和力及び選択性を示すので、優れたアデノシンＡ３拮抗剤として有用に用いられうる。また、本発明のアデノシン誘導体は、アデノシンＡ３受容体に対して拮抗作用して抗炎症活性を示すので、炎症性疾患の予防及び治療剤として利用できる。
【００９７】
また、本発明による前記炎症性疾患としては、変質性炎症、滲出性炎症、化膿性炎症、出血性炎症または増殖性炎症などの急性及び慢性炎症疾患を含む。
【００９８】
本発明は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩を含むアデノシン誘導体を有効成分として含有する眼疾患の予防及び／または治療用薬学的組成物を提供する。
【００９９】
眼疾患は、網膜疾患、角膜疾患、結膜疾患、ブドウ膜疾患、緑内障、白内障など目と関連したあらゆる疾病、疾患または症状などを含み、特に、眼圧上昇と、これより誘発されるか、このような症状を伴う緑内障を含みうる。
【０１００】
前記化学式１で表されるアデノシン誘導体の望ましい例は、下記化学式Ａで表される化合物である（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールであり得る。
【０１０１】
［化Ａ］
【化９】
0006821050.tif 000010
【０１０２】
本発明の眼疾患の予防及び／または治療用薬学的組成物は、点眼剤または経口投与剤で剤形化される。
【０１０３】
点眼剤は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩と点眼液とを含みうる。点眼液は、溶解剤（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｒ）、粘度向上剤（ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ  ｅｎｈａｎｃｅｒ）、抗酸化剤（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）、保存剤（ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ）、及びバッファ溶液（ｂｕｆｆｅｒ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）からなる群から選択される１つ以上を含みうる。例示的な実施例において、点眼液は、クレモフォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）ＥＬ、グリセリン（Ｇｌｙｃｅｒｉｎ）、クエン酸（Ｃｉｔｒｉｃ  ａｃｉｄ）及びメチルパラベン（Ｍｅｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ）が溶解または混合されたｐＨ６．８のバッファ溶液であり得る。
【０１０４】
経口投与剤は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩が固型製剤または液状製剤で剤形化されたものである。
【０１０５】
固型製剤は、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などであり、液状製剤は、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などであり得るが、これに限定されるものではない。
【０１０６】
経口投与剤は、賦形剤をさらに含みうる。賦形剤は、メチルセルロース（ＭＣ）、スクロース（Ｓｕｃｒｏｓｅ）、ラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ステアリン酸マグネシウム（Ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  Ｓｔｅａｒａｔｅ）、炭酸カルシウム、ゼラチン、タルク（ｔａｌｃ）、蒸留水（Ｄｉｓｔｉｌｌｅｄ  ｗａｔｅｒ、ＤＷ）、流動パラフィンなどからなる群から選択される１つ以上を含み、望ましくは、０．５ｗｔ％メチルセルロースを含みうる。
【０１０７】
例示的な実施例において、経口投与剤は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩が粉末状または前述した賦形剤に溶解された溶液状にカプセルなどに充填されたものである。但し、これに制限されるものではない。
【０１０８】
本発明の眼疾患の予防及び／または治療用薬学的組成物は、前述した点眼または経口投与を通じて患者に点眼剤または経口剤で投与される。但し、これに制限されるものではなく、静脈投与などのその他の非経口投与方法でも投与される。
【０１０９】
本発明のアデノシン誘導体は、毛様体での眼房水の生成を抑制すると共に、線維柱帯組織での線維化を抑制して（抗線維化）、眼房水の排出を促進する二重薬理機転を表わすことができる（実験例１１及び実験例１２参照）。
【０１１０】
これにより、投与量依存的に眼圧を効果的に降下させるために（実験例８〜実験例１０参照）、緑内障などの眼疾患の予防及び／または治療に非常に適した薬学的組成物として使われる。
【０１１１】
また、本発明のアデノシン誘導体は、経口投与に適した物理化学的特性を示し（実験例１３参照）、経口投与時の血中濃度及び安定性に優れ（実験例１４〜実験例１８参照）、体内毒性がほとんどない生体親和的な物質であると同時に（実験例１９参照）、経口投与剤で剤形化時の保管安定性に優れるために（実験例２０参照）、眼疾患を予防及び／または治療するための経口投与に非常に適した有効成分として使われる。
【０１１２】
出発物質の製造
【０１１３】
＜製造例１＞（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造
【０１１４】
段階ａ１．（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オールの製造
【０１１５】
アセトン（５０ml）に、Ｄ−マンノース（１．７４ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）と２，２−ジメトキシプロパン（２．４５ml、１９．５５ｍｍｏｌ）とを添加した後、撹拌混合し、０℃に冷却した。これに濃い硫酸（０．４５ｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物は、室温で２４時間撹拌した。その混合物にトリエチルアミンを添加して中和させ、減圧濃縮した。濃縮後、得た混合物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、白色固体の目的化合物（１．６１ｇ、９５％）を得た。
【０１１６】
ｍｐ  １２０．３−１２０．５℃；
【０１１７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．３４（ｓ、１Ｈ）、４．７６−４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．５８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．３４−４．３９（ｍ、１Ｈ）、４．１５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、７．２Ｈｚ）、４．００−４．０８（ｍ、２Ｈ）；
【０１１８】
［α］２５Ｄ  １１．７１（ｃ  ０．１１、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１１９】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２０】
段階ａ２．（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メタノールの製造
【０１２１】
エタノール（２５ml）に、前記段階ａ１で製造した（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（１．５０ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）を気をつけて分配して添加し、０℃に冷却した。これに水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＨＢ４、４４０ｍｇ、１１．５３ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した。その反応混合物を酢酸で中和した後、減圧濃縮した。その混合物を酢酸エチルと水とを用いて抽出した後、有機層を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥し、濾過した後、再び減圧濃縮した。濃縮後、得た混合物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（１．３８ｇ、９２％）を得た。
【０１２２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．３３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．６、７．２Ｈｚ）、４．２４−４．２８（ｍ、１Ｈ）、４．０６−４．１３（ｍ、２Ｈ）、３．９２−３．９７（ｍ、１Ｈ）、３．７６−３．８５（ｍ、２Ｈ）、３．５９−３．６１（ｍ、１Ｈ）、１．４８（ｓ、３Ｈ）、１．３８（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３Ｈ）；
【０１２３】
［α］２５Ｄ−３．８８（ｃ  ０．４４、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１２４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２５】
段階ａ３．（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｓ，５Ｓ）−２，２−ジメチル−５−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチルメタンスルホン酸の製造
【０１２６】
ジクロロメタン（３００ml）とトリエチルアミン（１６３．７５ml、１．１７ｍｏｌ）との混合物に、前記段階ａ２で製造した（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メタノール（３８．５２ｇ、１４６．８５ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（４−ＤＭＡＰ、５．３８ｍｇ、４４．０６ｍｍｏｌ）とを添加した後、混合し、０℃に冷却した。これにジメタンスルホニルクロリド（４７．５９ml、５８７．４２ｍｍｏｌ）を気をつけて滴加した。１時間室温で撹拌した後に、その反応混合物をジクロロメタンで抽出し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）水溶液で洗浄した。有機層を集める間に無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥し、濾過した後、再び減圧濃縮した。濃縮後、得た褐色シロップ形態のジメシル化合物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（５：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（５７．８３ｇ、９４％）を得た。
【０１２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．７５（ｐｓｅｕｄｏ  ｔ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、４．３３−４．４５（ｍ、４Ｈ）、４．０６−４．２０（ｍ、３Ｈ）、３．１２（ｓ、３Ｈ）、３．０７（ｓ、３Ｈ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３７（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３Ｈ）；
【０１２８】
［α］２５Ｄ  ３８．３２（ｃ  ０．２９、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１２９】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３０】
段階ａ４．（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−４−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソールの製造
【０１３１】
ＤＭＦ（５０ml）に、前記段階ａ３で製造した（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｓ，５Ｓ）−２，２−ジメチル−５−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチルメタンスルホン酸（９９３．８０ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を溶解させて、これに硫化ナトリウム（３４８．３０ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）を添加した後、その混合物を８０℃で夜から朝まで還流撹拌した。反応完了後、減圧で溶媒を除去し、その残留物を酢酸エチルと水とを用いて抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥し、濾過した後、再び減圧濃縮した。濃縮後、得た残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（８：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（４５３．０ｍｇ、７８％）を得た。
【０１３２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．９２（ｄｔ、１Ｈ、Ｊ＝１．８、５．６Ｈｚ）、４．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０、６．０Ｈｚ）、４．２６−４．３０（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｓ、１Ｈ）、３．７９（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝３．８Ｈｚ）、３．３１−３．３２（ｍ、１Ｈ）、３．１９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．４、１２．０Ｈｚ）、２．８４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．６、１２．０Ｈｚ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３２（ｄｄ、６Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）；
【０１３３】
［α］２５Ｄ−９６．０４（ｃ  ０．２０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１３４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３５】
段階ａ５．１−（（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）エタン−１，２−ジオルの製造
【０１３６】
６０％酢酸水溶液（２５０ml）に、前記段階ａ４で製造した（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−４−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール（２１．７８ｇ、８３．６６ｍｍｏｌ）を溶解させ、室温で２時間撹拌した。その反応混合物を減圧で濃縮し、得た残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１：２、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、白色固体の目的化合物（１４．８５ｇ、８１％）を得た。
【０１３７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．９２（ｄｔ、１Ｈ、Ｊ＝１．８、５．６Ｈｚ）、４．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０、６．０Ｈｚ）、４．２６−４．３０（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｓ、１Ｈ）、３．７９（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝３．８Ｈｚ）、３．３１−３．３２（ｍ、１Ｈ）、３．１９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．４、１２．０Ｈｚ）、２．８４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．６、１２．０Ｈｚ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３２（ｄｄ、６Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）；
【０１３８】
［α］２５Ｄ−９６．０４（ｃ  ０．２０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１３９】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４０】
段階ａ６．（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造
【０１４１】
酢酸エチル（３００ml）に、前記段階ａ５で製造した１−（（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）エタン−１，２−ジオル（１４．８５ｇ、６７．４１ｍｍｏｌ）を溶解させ、０℃に冷却した。これにレッドテトラアセテート（Ｐｂ（ＯＡｃ）４、１５７．３１ｇ、３３７．０６ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で夜から朝まで撹拌した。その反応混合物をセライトで濾過し、その濾液を酢酸エチルで希釈した。その有機層をジクロロメタンで希釈し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。濃縮後、得た残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（８：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（８．８２ｇ、６０％）を得た。
【０１４２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．０３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６、９．６Ｈｚ）、４．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６、８．８Ｈｚ）、３．２１−３．２７（ｍ、２Ｈ）、３．０１（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝０．８、１２．８Ｈｚ）、２．０５（ｓ、３Ｈ）、１．５０（ｓ、３Ｈ）、１．３１（ｓ、３Ｈ）；
【０１４３】
［α］２５Ｄ−２５８．１５（ｃ  ０．１８、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１４４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１８［Ｍ］＋。
【０１４５】
＜製造例２＞（３ａＳ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造
【０１４６】
段階ｂ１．（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−  ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オールの製造
【０１４７】
トルエン（２０ml）に、２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリスロノラクトン（２，３−Ｏ−ｉｓｏｐｒｏｐｙｌｉｄｅｎｅ−Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅ、１．０４ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を溶解させた後、１Ｍの水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ）／ＴＨＦ溶液を−７８℃で添加した。その反応混合物を同じ温度で３０分間撹拌した後、メタノールを徐々に添加して反応を終結させた。その懸濁液をセライトで濾過し、酢酸エチルと水とで抽出した後、それに対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（３：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（１．９４ｇ、９６％）を得た。
【０１４８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．３９（ｓ、１Ｈ）、４．８２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、６．０Ｈｚ）、４．５５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．０５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．２Ｈｚ）、４．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ）、１．４５（ｓ、３Ｈ）、１．３０（ｓ、３Ｈ）。
【０１４９】
段階ｂ２．（３ａＳ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−  ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造
【０１５０】
ピリジン（１０ml）に、前記製造例２の段階ｂ１で製造したラクトール化合物（８７５．９ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を溶解させた後、無水酢酸（０．６７ml、６．５６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した後、減圧濃縮した。濃縮後、残留物を酢酸エチルと水とで抽出した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、再び減圧濃縮した。その残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（８：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（７０２．１ｍｇ、６５％）を得た。
【０１５１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ６．１６（ｓ、１Ｈ）、４．８６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、６．０Ｈｚ）、４．６６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、３．９９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．８Ｈｚ）、２．０５（ｓ、３Ｈ）、１．４８（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３Ｈ）。
【０１５２】
＜実施例１＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１５３】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０１５４】
ヘキサメチルジシラザン（ＨＭＤＳ、５０ml）に、２，６−ジクロロプリン（２．２９ｇ、２２．１２ｍｍｏｌ）と硫酸アンモニウム（４３８ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）とを溶解させた後、不活性の乾燥された条件で夜から朝まで還流させた。その反応混合物を減圧で濃縮した後、得た固体混合物を冷たい１，２−ジクロロエタン（２０ml）に再び溶解させた。前記製造例１で得た（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテート（１．４１ｇ、１１．０６ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（２０ml）に溶解させて、前記溶液に再び滴加した。その混合物にトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ、４．０ml、２２．１２ｍｍｏｌ）を滴加し、０℃で３０分間撹拌した後、室温で１時間撹拌した後、８０℃に加熱して、２時間撹拌した。反応混合物を冷却した後、ジクロロメタンで希釈し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）水溶液で洗浄した。その有機層を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥した後、減圧濃縮して、黄色のシロップ形態の残留物を得た。その残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（５０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、泡（ｆｏａｍ）状の目的化合物（３．０３ｇ、７９％）を得た。
【０１５５】
ＵＶ（ＣＨ２Ｃｌ２）λｍａｘ  ２７５．０ｎｍ；
【０１５６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）δ８．１７（ｓ、１Ｈ）、５．８７（ｓ、１Ｈ）、５．３２（ｐｓｅｕｄｏ  ｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、５．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、３．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１２．８Ｈｚ）、３．２６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｓ、３Ｈ）；
【０１５７】
［α］２５Ｄ−４２．０４（ｃ  ０．１６、ＣＨ２Ｃｌ２）；
【０１５８】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３４７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１５９】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１６０】
テトラヒドロフラン（２０ml）に、前記段階１で製造した２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンを溶解させた後、２Ｎの塩酸を添加し、夜から朝まで室温で撹拌した。その混合物を１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液で中和させた後、気をつけて減圧で濃縮した。濃縮後、残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、白色固体の目的化合物（１．９４ｇ、９６％）を得た。
【０１６１】
ｍｐ  １９８．３−２００．３℃；
【０１６２】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７５．０ｎｍ；
【０１６３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．８７（ｓ、１Ｈ）、６．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、４．６９（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．２Ｈｚ）、４．４８（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）、３．５６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１１．２Ｈｚ）、２．９７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．４、１１．２Ｈｚ）；
【０１６４】
［α］２５Ｄ−５０．４３（ｃ  ０．１２、ＤＭＳＯ）；
【０１６５】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１６６】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１６７】
室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール（１当量）と３−フルオロベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混合物を２〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１０ｇ、８０％）を得た。
【０１６８】
ｍｐ  １８３．２−１８３．５℃；
【０１６９】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７５．０ｎｍ；
【０１７０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９１（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．３３−７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．１８（ｍ、２Ｈ）、７．０６（ｄｔ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１１．６Ｈｚ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．６５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．６０（ｍ、１Ｈ）、４．３３−４．３５（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、２．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；
【０１７１】
［α］２５Ｄ−９６．２１（ｃ  ０．１２、ＤＭＳＯ）；
【０１７２】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３９６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７３】
＜実施例２＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１７４】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０１７５】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０１７６】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１７７】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０１７８】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１７９】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−クロロベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、８３％）を得た。
【０１８０】
ｍｐ  １６３．３−１６５．３℃；
【０１８１】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．５ｎｍ；
【０１８２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．４１（ｓ、１Ｈ）、７．２４−７．３４（ｍ、３Ｈ）、５．９４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．７５（ｂｒｓ、２Ｈ）、４．６１（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．２Ｈｚ）、４．４５（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、３．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．８、１１．２Ｈｚ）、２．９５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．８Ｈｚ）；
【０１８３】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１１［Ｍ］＋。
【０１８４】
＜実施例３＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１８５】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０１８６】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０１８７】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１８８】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０１８９】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１９０】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ブロモベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８３％）を得た。
【０１９１】
ｍｐ  １８４．０−１８５．０℃；
【０１９２】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．０ｎｍ；
【０１９３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９１（ｂｒｓ、１Ｈ−ＮＨ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．３３−７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２６−７．３０（ｍ、１Ｈ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３８（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６０−４．６３（ｍ、３Ｈ）、４．３４（ｓ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１１．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；
【０１９４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４５６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９５】
＜実施例４＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１９６】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０１９７】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０１９８】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０１９９】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２００】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２０１】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１４ｇ、８４％）を得た。
【０２０２】
ｍｐ  １９８．７−１９９．９℃；
【０２０３】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．０ｎｍ；
【０２０４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９０（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１３（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６０（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．３４（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．３８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）；
【０２０５】
［α］２５Ｄ−７８．９１（ｃ  ０．１３、ＤＭＳＯ）；
【０２０６】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５０４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０７】
＜実施例５＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２０８】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２０９】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２１０】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２１１】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２１２】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２１３】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、２−クロロベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、８１％）を得た。
【０２１４】
ｍｐ  １９８．７−１９９．７℃；
【０２１５】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７３．５ｎｍ；
【０２１６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．３５（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．４５−７．４７（ｍ、１Ｈ）、７．３９−７．４３（ｍ、１Ｈ）、７．２５−７．２９（ｍ、２Ｈ）、５．９５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．６０−４．６３（ｍ、１Ｈ）、４．４５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、８．０Ｈｚ）、３．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．８、１０．８Ｈｚ）、２．９５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）；
【０２１７】
［α］２５Ｄ−９６．２１（ｃ  ０．１２、ＤＭＳＯ）；
【０２１８】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１９】
＜実施例６＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２２０】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２２１】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２２２】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２２３】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２２４】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２２５】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、５−クロロ−２−メトキシベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、７８％）を得た。
【０２２６】
ｍｐ  １８８．８−１８９．８℃；
【０２２７】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７５．５ｎｍ；
【０２２８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６４（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８５−６．８９（ｍ、１Ｈ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６１−４．６３（ｍ、２Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．４Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．４、１０．８Ｈｚ）；
【０２２９】
［α］２５Ｄ−９６．１０（ｃ  ０．２１、ＤＭＳＯ）；
【０２３０】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４４２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３１】
＜実施例７＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ＞−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２３２】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２３３】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２３４】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２３５】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２３６】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２３７】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、２−メトキシベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８８％）を得た。
【０２３８】
ｍｐ  １８８．０℃；
【０２３９】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７６．５ｎｍ；
【０２４０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．６５（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８５−６．８９（ｍ、１Ｈ）、５．８３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５．５８（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３９（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）、４．６２−４．６４（ｍ、２Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、１Ｈ）、３．４２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．４Ｈｚ）、２．７９−２．８２（ｍ、１Ｈ）；
【０２４１】
［α］２５Ｄ−９３．５３（ｃ  ０．１７、ＤＭＳＯ）；
【０２４２】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４３】
＜実施例８＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチルベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２４４】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２４５】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２４６】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２４７】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２４８】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチルベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２４９】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、ナフタレン−１−イルメチルベンジルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１３ｇ、９０％）を得た。
【０２５０】
ｍｐ  ２２６．３℃（ｄｅｃｏｍｐ）；
【０２５１】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２８１．０ｎｍ；
【０２５２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９６（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、８．２５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．９５−７．９７（ｍ、１Ｈ）、７．８３−７．８５（ｍ、１Ｈ）、７．５３−７．６１（ｍ、２Ｈ）、７．４３−７．４６（ｍ、２Ｈ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、５．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．５９−４．６１（ｍ、１Ｈ）、４．３４−４．３５（ｍ、１Ｈ）、３．４０−３．４４（ｍ、１Ｈ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．４、６．８Ｈｚ）；
【０２５３】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５４】
＜実施例９＞３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸の製造
【０２５５】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２５６】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２５７】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２５８】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２５９】
段階３．３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸の製造
【０２６０】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−（アミノメチル）安息香酸を使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８４％）を得た。
【０２６１】
ｍｐ  ２５４．０−２５６．９℃；
【０２６２】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７５．５ｎｍ；
【０２６３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９５（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．５２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．４３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５７（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．３８（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．７１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．６０（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．３４（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；
【０２６４】
［α］２５Ｄ−９４．５５（ｃ  ０．１１、ＤＭＳＯ）；
【０２６５】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６６】
＜実施例１０＞２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２６７】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２６８】
前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０２６９】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２７０】
前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０２７１】
段階３．２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２７２】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、メチルアミンを使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．８９ｇ、９０％）を得た。
【０２７３】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２６９．５ｎｍ（ｐＨ７）；
【０２７４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ２．９９（１Ｈ、ｄｄ、４’−ＣＨ、Ｊ＝４．４、１０．８Ｈｚ）、３．１２（３Ｈ、ｂｒｓ、ＮＨ−ＣＨ３）、３．４４（１Ｈ、ｄｄ、４’−ＣＨ、Ｊ＝４、１０．８Ｈｚ）、４．４１（１Ｈ、ｍ、２’−ＣＨ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、４．４７（１Ｈ、ｍ、３’−ＣＨ）、５．８９（１Ｈ、ｄ、１’−ＣＨ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、８．４０（ｓ、１Ｈ、８−ＣＨ）；
【０２７５】
［α］２５Ｄ−３４．８（ｃ  ０．１１５、ＤＭＳＯ）；
【０２７６】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７７】
＜実施例１１＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２７８】
段階１．６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０２７９】
２，６−クロロプリンの代わりに、６−クロロプリン（２．２９ｇ、２２．１２ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例１の段階１と同じ条件で合成を行って、泡状の目的化合物（１．８４ｇ、９１％）を得た。
【０２８０】
ＵＶ（ＣＨ２Ｃｌ２）λｍａｘ  ２６５．０ｎｍ；
【０２８１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．６７（ｐｓｅｕｄｏ  ｔ、１Ｈ、Ｊ＝１．４Ｈｚ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、５．８８（ｓ、１Ｈ）、５．２３（ｍ、２Ｈ）、３．６９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１３．２Ｈｚ）、３．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ）、１．５２（ｓ、３Ｈ）、１．２９（ｓ、３Ｈ）；
【０２８２】
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５２．０５、１５１．３９、１５１．０９、１４４．３４、１３２．５６、１１１．９０、８９．６０、８４．３１、７０．３０、４０．７６、２６．４０、２４．６３；
【０２８３】
［α］２５Ｄ−１５７．６４（ｃ  ０．１５、ＭｅＯＨ）；
【０２８４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８５】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２８６】
前記段階１で製造した６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリン（１．８４ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例１の段階２と同じ条件で合成を行って、白色固体の目的化合物（１．２７ｇ、７９％）を得た。
【０２８７】
ｍｐ  １９２．３−１９２．８℃；
【０２８８】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２６４．５ｎｍ；
【０２８９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０２（ｓ、１Ｈ）、８．８２（ｓ、１Ｈ）、６．０２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．６２（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．４３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．７０−４．７４（ｍ、１Ｈ）、４．３６−４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．４７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、２．８４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１１．２Ｈｚ）；
【０２９０】
［α］２５Ｄ−１０９．１５（ｃ  ０．１６、ＤＭＳＯ）；
【０２９１】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９２】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０２９３】
室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール（１当量）と３−フルオロベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混合物を２〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１１ｇ、８２％）を得た。
【０２９４】
ｍｐ  １８０．５−１８０．７℃；
【０２９５】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７３．５ｎｍ；
【０２９６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．３１−７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．１２−７．１８（ｍ、２Ｈ）、７．０１−７．０５（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３５−４．３７（ｍ、１Ｈ）、３．３９−３．４３（ｍ、１Ｈ）、３．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．２、１１．２Ｈｚ）；
【０２９７】
［α］２５Ｄ−１４１．２（ｃ  ０．１１、ＤＭＳＯ）；
【０２９８】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９９】
＜実施例１２＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３００】
段階１．６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０３０１】
前記実施例１１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０３０２】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３０３】
前記実施例１１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０３０４】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３０５】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−クロロベンジルアミンを使用して、前記実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８５％）を得た。
【０３０６】
ｍｐ  １６５．０−１６５．３℃；
【０３０７】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．５ｎｍ；
【０３０８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４７（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．２６−７．３５（ｍ、３Ｈ）、５．９１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３３−４．３７（ｍ、１Ｈ）、３．４０−３．４８（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．２、１０．４Ｈｚ）；
【０３０９】
［α］２５Ｄ−１６２．５（ｃ  ０．１０、ＤＭＳＯ）；
【０３１０】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１１】
＜実施例１３＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３１２】
段階１．６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０３１３】
前記実施例１１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０３１４】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３１５】
前記実施例１１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０３１６】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３１７】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ブロモベンジルアミンを使用して、前記実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、７０％）を得た。
【０３１８】
ｍｐ  １８３．０−１８４．０℃；
【０３１９】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７０．０ｎｍ；
【０３２０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．５３（ｓ、１Ｈ）、７．３９−７．４２（ｍ、１Ｈ）、７．３４−７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２４−７．２８（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３５−４．３７（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３．０６（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；
【０３２１】
［α］２５Ｄ−１００．７２（ｃ  ０．１４、ＤＭＳＯ）；
【０３２２】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２３】
＜実施例１４＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３２４】
段階１．６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０３２５】
前記実施例１１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。
【０３２６】
段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３２７】
前記実施例１１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。
【０３２８】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造
【０３２９】
３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、７２％）を得た。
【０３３０】
ｍｐ  １９８．８−１９９．８℃；
【０３３１】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７１．５ｎｍ；
【０３３２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．７２（ｓ、１Ｈ）、７．５６−７．５９（ｍ、１Ｈ）、７．３５−７．３６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．０１−７．１２（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３４−４．３８（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；
【０３３３】
［α］２５Ｄ−９７．０８（ｃ  ０．１４、ＤＭＳＯ）；
【０３３４】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３５】
＜実施例１５＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオールの製造
【０３３６】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０３３７】
前記製造例２で得た（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（７０２．１ｇ、３．４７２ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例１の段階１と同じ条件で合成を行って、泡状の目的化合物（７９３．０ｍｇ、６９％）を得た。
【０３３８】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７６．５ｎｍ；
【０３３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．１５（ｓ、１Ｈ）、６．０７（ｓ、１Ｈ）、５．４１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．２６−５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．２５−４．３１（ｍ、２Ｈ）、１．５７（ｓ、３Ｈ）、１．４１（ｓ、３Ｈ）；
【０３４０】
［α］２５Ｄ−２１．００（ｃ  ０．１０、ＤＭＳＯ）；
【０３４１】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４２】
段階２．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造
【０３４３】
前記段階１で製造した２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリン（９００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を使用して、前記段階２と同じ条件で合成を行って、白色固体の目的化合物（０．４６ｇ、８０％）を得た。
【０３４４】
ｍｐ  １２２．７−１２３．４℃；
【０３４５】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７６．５ｎｍ；
【０３４６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９８（ｓ、１Ｈ）、５．９６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３２（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６９−４．７４（ｍ、１Ｈ）、４．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、９．２Ｈｚ）、４．２９−４．３２（ｍ、１Ｈ）、３．８７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０、９．６Ｈｚ）；
【０３４７】
［α］２５Ｄ−６８．０９（ｃ  ０．１４、ＤＭＳＯ）；
【０３４８】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２９１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４９】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造
【０３５０】
室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオール（１当量）と３−ブロモベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混合物を２〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１２ｇ、８２％）を得た。
【０３５１】
ｍｐ  １８１．５−１８１．７℃；
【０３５２】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．５ｎｍ；
【０３５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９２（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．４３（Ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｓ、１Ｈ）、７．４４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．３３−７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２６−７．３０（ｍ、１Ｈ）、５．８１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．４７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４，０Ｈｚ）、４．６６−４．６９（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｓ、２Ｈ）、４．３２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、９．２Ｈｚ）、４．２５（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．６、９．２Ｈｚ）；
【０３５４】
［α］２５Ｄ−６２．７５（ｃ  ０．１０、ＤＭＳＯ）；
【０３５５】
【０３５６】
＜実施例１６＞（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造
【０３５７】
段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造
【０３５８】
前記実施例１５の段階１と同じ方法によって、シロップ形態の泡状の目的化合物を得た。
【０３５９】
段階２．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造
【０３６０】
前記実施例１５の段階２と同じ方法によって、シロップ形態の白色固体の目的化合物を得た。
【０３６１】
段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造
【０３６２】
３−ブロモベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記実施例１５の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１３ｇ、７８％）を得た。
【０３６３】
ｍｐ  １９５．５−１９５．８℃；
【０３６４】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）λｍａｘ  ２７４．０ｎｍ；
【０３６５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．９１（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、８．４４（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．３６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１３（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、５．８１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５．４７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５．２３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４、１０．８Ｈｚ）、４．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．３４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、９．２Ｈｚ）、３．８１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．２、９．２Ｈｚ）；
【０３６６】
［α］２５Ｄ−６８．０７（ｃ  ０．１２、ＤＭＳＯ）；
【０３６７】
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３６８】
＜実験例１＞アデノシン受容体に対する結合親和力の評価
【０３６９】
本発明の誘導体のヒトアデノシン受容体（ｈＡＲ）中のＡ１、Ａ２Ａ及びＡ３受容体に対する親和力及び選択性を評価するために、下記のような実験を行った。
【０３７０】
アデノシンＡ１及びＡ３受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ、ＡＴＣＣ；米国細胞株銀行Ｎｏ．ＣＣＬ−６１）細胞は、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）とペニシリン／ストレプトマイシン（１００ユニット／mlと１００μｇ／ml）とを含むＦ−１２（Ｇｉｂｃｏ社、米国）培地で３７℃、５％二酸化炭素の条件下で培養されて使われた。５０／１０／１緩衝溶液を試験管に入れ、適したｈＡＲが発現されたＣＨＯ細胞一定量と各アデノシンＡ１及びＡ３受容体に選択的に結合する標識リガンド（１ｎＭ［３Ｈ］ＣＣＰＡ及び０．５ｎＭ［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ）とを混合させた。多様な濃度の本発明の誘導体をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に先に溶解させた後、緩衝溶液と希釈されるが、ＤＭＳＯの最終濃度は、１％を超過しないように注意し、３７℃の恒温槽で１時間培養させた後、細胞収集器（ＴＯＭＴＥＣ社、米国）を使用して、迅速に減圧濾過した。次いで、試験管は、３ml緩衝液で３回洗浄した後、放射性をγ−カウンターを使用して決定した。非特異的結合（Ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｂｉｎｄｉｎｇ）は、全体結合を測定するための条件と同じ条件で、非標識リガンドである５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ）の１０μＭ存在下で決定され、平衡定数であるＫｉ値は、［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡのＫｄ値が１．４８ｎＭであるという仮定下でチェンプルソフ（Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ）方程式に基づいて決定した。特異的結合は、全体結合で非特異的結合を減算して算出した。このように測定された特異的結合からさまざまな受容体に対するそれぞれの試料の結合親和力を求めた。
【０３７１】
また、ＨＥＫ２９３細胞（ヒト腎臓内皮細胞株）から発現されたＡ２Ａ受容体と標識リガンド、［３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０（２−（（（４−（２−カルボキシエチル）フェニル）エチルアミノ）−５’−Ｎ−エチルカルバモイル）アデノシン）の結合測定は、次のように行われるが、アデノシンデアミナーゼ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｄｅａｍｉｎａｓｅ）は、脳膜を３０℃で３０分間培養する時に放射性リガンドを入れ、培養する間に共に入れ、少なくとも６回の異なる濃度でそれぞれの実施例の化合物に対するＩＣ５０値を定め、この数値をプロットプログラムを用いてＫｉ値を決定した。本発明による実施例の化合物の構造、置換基及び結合親和力の測定結果、得たＫｉ値を表１に共に示した。
【０３７２】
【表１−１】
0006821050.tif 000011
【表１−２】
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【表１−３】
0006821050.tif 000013
【表１−４】
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【０３７３】
表１に示されたように、本発明の実施例の化合物は、ヒトアデノシンＡ３受容体に対して高い結合親和力を示し、アデノシンＡ１及びＡ２Ａ受容体に対しては、低い親和力、すなわち、大きな選択性を示した。特に、本発明の実施例１２の化合物は、ｈＡ３受容体に対して、親和力定数、Ｋｉ値が１．５０±０．４０ｎＭに最も高い親和力を示し、その次に、実施例２の化合物（Ｋｉ＝１．６６±０．９０ｎＭ）、実施例１４の化合物（Ｋｉ＝２．５０±１．００ｎＭ）、実施例１０の化合物（Ｋｉ＝３．６９±０．２５ｎＭ）及び実施例４の化合物（Ｋｉ＝４．１６±０．５０ｎＭ）の順に結合親和力が高く表われた。本発明の実施例４の化合物は、また、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から発現されたラットのアデノシンＡ３受容体に対しても、高い親和力（Ｋｉ＝３．８９±１．１５ｎＭ）を示し、ヒトアデノシンＡ２Ｂ受容体に対しては、アゴニストまたは拮抗剤として活性を示さななかった。
【０３７４】
また、ハロベンジル置換基を有する実施例の化合物で結合親和力は、Ｃｌ＞Ｉ＞Ｆ＞Ｂｒの順序に従うが、３−クロロベンジルを有する実施例２の化合物は、２−クロロベンジルを有する実施例５の化合物（Ｋｉ＝２５．８±６．３ｎＭ）よりもｈＡ３アデノシン受容体に対してさらに高い親和力を示した。また、ヒトアデノシンＡ３受容体は、結合親和力において、ベンゼン環の３−位置が置換された実施例の化合物を２−または４−置換された化合物または２，５−二置換された化合物よりもさらに好むものと表われた。そして、４’−Ｏであるオキソヌクレオシド形態を帯びるアデノシン誘導体である実施例１５及び実施例１６の化合物も、高い結合親和力と選択性とを示したが、それに相応する４’−Ｓであるチオヌクレオシド形態を帯びるアデノシン誘導体、実施例３及び実施例４の化合物よりもさらに良いものではなく、プリン塩基の２位のクロロ基を水素で置換した実施例１０ないし実施例１４の化合物は、２−クロロである化合物よりも親和力及び選択性に優れると確認された。
【０３７５】
＜実験例２＞本発明の誘導体によるアデノシンＡ３受容体に対する拮抗効果及びｃＡＭＰ抑制実験
【０３７６】
本発明の誘導体が、ヒトアデノシンＡ３受容体に対して拮抗剤として効果があるかを調べるために、ＣＨＯ細胞に実施例４の化合物及びＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡを共に処理して、本発明の誘導体の拮抗効果及びｃＡＭＰ抑制実験を行った。
【０３７７】
図１に示されたように、ヒトアデノシンＡ３受容体に対して、本発明の実施例４の化合物を濃度を異ならせて処理したＣＨＯ細胞で１００％純粋アゴニストであるＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡのアゴニスト効果は、実施例４の化合物の濃度に依存して阻害されると確認された。これは、本発明の化合物とＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡとが受容体の同じ結合部位に互いに競争的に作用するものであることを示す結果である。また、ＣＨＯ細胞でヒトアデノシンＡ３受容体を媒介とするｃＡＭＰ抑制実験結果、本発明の実施例の化合物は、１００％純粋アデノシンＡ３拮抗剤であるということが分かる。したがって、本発明から合成された化合物は、Ｓｃｈｉｌｄ分析によって測定した解離定数ＫＢ値は１．９２ｎＭであった。
【０３７８】
＜実験例３〜実験例６＞本発明の誘導体による抗炎症活性の測定
【０３７９】
本発明の誘導体の抗炎症活性を調べるために、下記のような動物実験を行った。生後７週齢の雄ＩＣＲマウスは、右側耳にＴＰＡ（１２−Ｏ−ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ  １３−ａｃｅｔａｔｅ、２０μｌ）が処理された。１５分以内に本発明の実施例１〜実施例１６の化合物をアセトン（２０μｌ）または蒸留水あるいはＤＭＳＯとアセトンとを混合した混合溶媒（その組成は、表２ないし表５に示す）に０．５％の濃度で希釈してマウスに投与した。対照群で炎症治療剤として用いられるヒドロコルチゾン（ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）を同じ濃度で処理して、同じ実験を行った。
【０３８０】
引き続き、ＴＰＡ処理から６時間後に、本発明のアデノシン誘導体化合物を二番目に処理した。再びＴＰＡ処理から２４時間後に、実験動物を首脱臼方法（ｃｅｒｖｉｃａｌ  ｄｉｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）を用いて安楽死させた。次いで、６ｍｍ直径のパンチを用いて右側耳のサンプルを得た。その活性は、微量天秤を用いて重量を測定することで確認することができた。阻害率（％）は、下記数式１を用いて計算された。実験例３ないし実験例６の処理組成及び処理量は、表２ないし表５に示し、その抗炎症活性の測定結果を図２ないし図５に示した。
【０３８１】
【数１】
0006821050.tif 000015
【０３８２】
【表２】
0006821050.tif 000016
【０３８３】
【表３】
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【０３８４】
【表４】
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【０３８５】
【表５】
0006821050.tif 000019
【０３８６】
図２に示されたように、対照群として用いられたヒドロコルチゾンに比べれば、極めて少ない変化であるが、実施例２、実施例３及び実施例４の化合物をアセトンに希釈して処理した後、抗炎症活性を調査した結果、ＴＰＡによって誘導されたマウスの耳浮腫が少量減少することを確認することができた。
【０３８７】
図３に示されたように、本発明の実施例１及び実施例６の化合物をアセトンに希釈して処理した後、調査した抗炎症活性は、図２示された実施例２ないし実施例４の化合物よりも４倍以上格段に増加した阻害率を示すことが分かった。
【０３８８】
図４に示されたように、蒸留水とアセトンとの混合溶媒（１：４）に０．５％に希釈した本発明の実施例５、実施例６及び実施例７の化合物を用いて調査した抗炎症活性は、それぞれ１７％、３４％及び５３％の炎症阻害率を示した。
【０３８９】
図５に示されたように、ＤＭＳＯとアセトンとの混合溶媒（１：９）に０．５％に希釈した本発明の実施例１５及び実施例１６の化合物を用いて調査した炎症阻害率は、それぞれ５９％及び７９％であって、前記化合物が抗炎症活性を有するということが分かった。
【０３９０】
＜実験例７＞毒性試験
【０３９１】
本発明の実施例の化合物の毒性を試験するために、動物実験を行った。２５±５ｇのＩＣＲ系マウス（中央実験動物）と２３５±１０ｇの特定の病院部材（ＳＰＦ）スプラグ−ダウリー（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ、中央実験動物）ラットとをそれぞれ３匹ずつ３群に分けて、本発明の実施例２の化合物をそれぞれ２０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇの容量で腹腔投与した後、２４時間毒性の有無を観察した。
【０３９２】
実験の結果、３群いずれもで死亡した例を全く観察することができず、体重増加、飼料摂取量などで外見上対照群と何らの症状が見られず、したがって、本発明の誘導体化合物が、安全な薬物であることを確認することができた。
【０３９３】
＜実験例８＞本発明の誘導体を含む点眼剤の眼圧降下効能の実験（１）
【０３９４】
本発明の誘導体の点眼投与による眼圧降下効能を調べるために、下記のような動物実験を行った。クレモフォールＥＬ、グリセリン、クエン酸及びメチルパラベンが溶解されたｐＨ６．８のバッファ溶液に実施例２の化合物を混合して、実施例２の化合物がそれぞれ２５０μＭ、５００μＭ及び７５０μＭの濃度で含まれるように製造した点眼剤をそれぞれ２ｄｒｏｐずつ２．５〜３．０ｋｇの正常雄Ｎｅｗ  Ｚｅａｌａｎｄ  ｗｈｉｔｅ  ｒａｂｂｉｔに点眼投与した。陽性対照群（ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｏｌ）として緑内障治療剤として用いられる点眼剤であるＸａｌａｔａｎ(R)を同じ方法で投与し、陰性対照群（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｏｌ）として実験動物に別途の処理を行っていない。
【０３９５】
引き続き、３０分、１時間、２時間、３時間、６時間、１２時間及び２４時間後に、実験動物の眼圧を測定し、その結果を図６に示した。図６において、Ｃｏｎｔｒｏｌは、陰性対照群、Ｄｒｕｇ  ２５０、５００及び７５０は、実施例２の化合物をそれぞれ２５０μＭ、５００μＭ及び７５０μＭの濃度で含む点眼剤、Ｘａｌａｔａｎは、陽性対照群を示す。
【０３９６】
図６に示されたように、本発明のアデノシン誘導体を含む点眼剤を投与したｒａｂｂｉｔで、前記点眼剤の投与量に依存的な眼圧低下効果があったことを確認することができる。
【０３９７】
＜実験例９＞本発明の誘導体を含む点眼剤の眼圧降下効能の実験（２）
【０３９８】
本発明の誘導体の点眼投与による眼圧降下効能を調べるために、下記のような動物実験を行った。緑内障が誘発されたＤＡＢ  ２Ｊ  ｍｏｕｓｅに実験例８で製造した点眼剤を一日に２回ずつ点眼投与した。陽性対照群として緑内障治療剤として用いられる点眼剤であるＸａｌａｔａｎ(R)を同じ方法で投与し、陰性対照群として実験動物に別途の処理を行っていない。
【０３９９】
引き続き、点眼剤を投与する期間の間に、約２日ごとに実験動物の眼圧を測定し、その結果を図７に示した。図７において、Ｃｏｎｔｒｏｌは、陰性対照群、Ｄｒｕｇ  ２５０、５００及び７５０は、実施例２の化合物をそれぞれ２５０μＭ、５００μＭ及び７５０μＭの濃度で含む点眼剤、Ｘａｌａｔａｎは、陽性対照群を示す。
【０４００】
図７に示されたように、本発明のアデノシン誘導体を含む点眼剤を投与したｍｏｕｓｅで、前記点眼剤の投与量に依存的な眼圧低下効果があったことを確認することができる。
【０４０１】
＜実験例１０＞本発明の誘導体の経口投与による眼圧降下効能の実験
【０４０２】
本発明の誘導体の経口投与による眼圧降下効能を調べるために、下記のような動物実験を行った。１０週齢の正常Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ  ｍｉｃｅにデキサメタゾン（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）を点眼投与して眼圧を上昇させ、互いに異なる個体に実施例２の化合物をそれぞれ５ｍｇ／ｋｇ  １日１回、１０ｍｇ／ｋｇ  １日１回、２０ｍｇ／ｋｇ  １日１回及び１０ｍｇ／ｋｇ  １日２回を賦形剤であるＤＭＳＯ、ＰＥＧ４００及び生理食塩注射液と共に経口投与した。対照群として眼圧が上昇した実験動物に前記賦形剤のみ１日１回経口投与するか、実験動物にデキサメタゾン処理を行わないか、眼圧降下剤であるアセタゾラミド（Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）４．１７ｍｇ／ｋｇを１日１回投与した。
【０４０３】
引き続き、２２日間所定の週期で実験動物の眼圧を測定し、その結果を図８ないし図１２に示した。図８ないし図１２において、Ｃｏｎｔｒｏｌは、実験動物にデキサメタゾン処理を行っていない対照群、Ｖｅｈｉｃｌｅは、眼圧が上昇した実験動物に賦形剤のみ経口投与した対照群、Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅは、眼圧が上昇した実験動物に眼圧降下剤であるアセタゾラミドを投与した対照群を示す。
【０４０４】
図８ないし図１２に示されたように、本発明のアデノシン誘導体を経口投与したｍｉｃｅで、前記アデノシン誘導体の投与量に依存的な眼圧低下効果があり、実施例２の化合物を２０ｍｇ／ｋｇ  １日１回及び１０ｍｇ／ｋｇ  １日２回投与したｍｉｃｅは、投与２２日からデキサメタゾン処理を行っていない正常ｍｉｃｅ対照群と類似した眼圧を示したことを確認することができる。
【０４０５】
＜実験例１１＞本発明のアデノシン誘導体の線維柱帯組織の抗線維化（ａｎｔｉｆｉｂｒｏｔｉｃ）効能の実験
【０４０６】
本発明のアデノシン誘導体が、眼球の線維柱帯組織に対する線維化を抑制する効能があるか否かを調べるために、下記のような動物実験を行った。
【０４０７】
実験例１０で眼圧の測定が完了した各実験動物の眼球組織を摘出し、それを切片した後、抗体を利用した免疫染色法で細胞外基質タンパク質（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ、ＳＭＡ及びＭＹＯＣ）の発現変化を確認し、その結果を図１３に示した。図１３において、Ｎｏｒｍａｌは、実験例１０でデキサメタゾン処理を行っていなかった動物の線維柱帯組織、Ｃｏｎｔｒｏｌは、実験例１０で賦形剤のみ投与した動物の線維柱帯組織、Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅは、実験例１０でアセタゾラミドを投与した動物の線維柱帯組織を示す。蛍光染色された組織は、蛍光顕微鏡で同じ条件（倍率２００ｘ、露出時間１秒）下に観察した。
【０４０８】
図１３に示されたように、賦形剤のみを投与した動物や眼圧降下剤であるアセタゾラミドを投与した動物の線維柱帯組織では、フィブロネクチン（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ）、平滑筋アクチン（ｓｍｏｏｔｈ  ｍｕｓｃｌｅ  ａｃｔｉｎ、ＳＭＡ）及びミオシリン（ＭＹＯＣ）タンパク質発現の増加が観察される一方、実施例２の化合物２０ｍｇ／ｋｇを１日１回投与した動物と１０ｍｇ／ｋｇを１日２回投与した動物との線維柱帯組織では、前記３種のタンパク質の発現が大きく減少したことを確認することができる。
【０４０９】
＜実験例１２＞本発明のアデノシン誘導体のＭＭＰ酵素及びＴＩＭＰ酵素タンパク質発現効能の実験
【０４１０】
本発明のアデノシン誘導体の線維柱帯組織に対する抗線維化効能が細胞外基質の変化を調節するＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素タンパク質の発現と関連があるか否かを確認するために、次のような動物実験を行った。
【０４１１】
実験例１０で眼圧の測定が完了した各実験動物の眼球組織に対してＭＭＰ及びＴＩＭＰ酵素を対象にして、これらタンパク質とｍＲＮＡ発現量とを測定し、その結果を図１４ないし図１７に示した。図１４及び図１５は、それぞれＭＭＰ（ＭＭＰ２、ＭＭＰ９）及びＴＩＭＰ（ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２）酵素のタンパク質発現量を示したものであり、図１６及び図１７は、ｍＲＮＡ発現量を示したものである。図１４ないし図１７において、Ｎｏｒｍａｌは、実験例１０でデキサメタゾン処理を行っていながった動物の発現量、Ｃｏｎｔｒｏｌは、実験例１０で賦形剤のみ投与した動物の発現量、Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅは、実験例１０でアセタゾラミドを投与した動物の発現量を示す。
【０４１２】
図１４ないし図１７に示されたように、賦形剤のみを投与した動物や眼圧降下剤であるアセタゾラミドを投与した動物の線維柱帯組織では、正常群（Ｎｏｒｍａｌ）に比べて、ＭＭＰ酵素のタンパク質とｍＲＮＡ発現量が、有意的に減少し、ＴＩＭＰ酵素のタンパク質とｍＲＮＡ発現量は、有意的に増加した。一方、実施例２の化合物２０ｍｇ／ｋｇを１日１回投与した動物と１０ｍｇ／ｋｇを１日２回投与した動物との線維柱帯組織では、正常群に比べて、ＭＭＰ酵素のタンパク質とｍＲＮＡ発現量が、有意的に増加し、ＴＩＭＰ酵素のタンパク質及びｍＲＮＡ発現量は、有意的に減少したことを確認することができる。
【０４１３】
前述したような一連の実験の結果を通じて、本発明のアデノシン誘導体は、アデノシンＡ３受容体拮抗剤が共通して有していると知られている眼房水の生成抑制を通じる眼圧降下効果の以外にも、線維柱帯組織の線維化抑制を通じる眼房水の排出促進を通じる二重薬理機転を通じて眼圧を低下させる作用を行うと確認された。
【０４１４】
販売中である緑内障治療剤は、前述した２種の薬理機転中の１種の機転を通じて眼圧を降下させるが、本発明のアデノシン誘導体は、２種の作用機転をいずれも有しているために、緑内障の予防及び治療に非常に適した組成物として使われうるということを確認することができる。
【０４１５】
＜実験例１３＞本発明のアデノシン誘導体の物理化学的特性の試験
【０４１６】
本発明のアデノシン誘導体の物理化学的特性を試験するために、生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で実施例２の化合物に対する実験を実施し、その結果を表６に示した。血しょう（ｐｌａｓｍａ）安定性（ｓｔａｂｉｌｉｔｙ）及びタンパク質結合度（ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ）は、Ｒａｔとヒトとの血しょうを用いて測定した。
【０４１７】
【表６】
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【０４１８】
表６に示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、経口製剤による経口投与に適した吸収、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）の特性値を有するという点を確認することができる。
【０４１９】
＜実験例１４〜実験例１８＞本発明のアデノシン誘導体の経口投与に対する薬物動態学の試験
【０４２０】
本発明のアデノシン誘導体の経口投与後の吸収、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）の特性を試験するために、生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で実施例２の化合物のＰＫ（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ）特性を測定した。
【０４２１】
表７のように、実験動物に実施例２の化合物を投与方法を異ならせて投与した。静脈投与は、大腿静脈に挿入したチューブ（ｔｕｂｅ）を通じて投与し、経口投与は、強制経口投与（ｏｒａｌ  ｇａｖａｇｅ）を用いて口腔に投入する方式で行った。
【０４２２】
【表７】
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【０４２３】
投与後、２４時間所定時間間隔で採血して血液を遠心分離した後、血しょうを分離し、適正有機溶媒を使用して血しょう試料を前処理した後、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳで濃度を分析した。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、ＵＳＡ）を用いて実施例２の化合物の血中濃度−時間データを分析し、これについてのグラフを図２０ないし図２４に示し、これより算出したｎｏｎｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ｐａｒａｍｅｔｅｒに対する結果を表８ないし表１２に示した。図１８ないし図２２において、Ｉ．Ｖ．は、静脈投与群、Ｐ．Ｏ．は、口腔投与群を示し、表８ないし表１２の各パラメータに対する定義は、表１３に示した。
【０４２４】
【表８】
0006821050.tif 000022
【０４２５】
【表９】
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【０４２６】
【表１０】
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【０４２７】
【表１１】
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【０４２８】
【表１２】
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【０４２９】
【表１３】
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【０４３０】
図１８と表８は、実験例１４（１４−１及び１４−２）の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値であり、図１９と表９は、実験例１５（１５−１及び１５−２）の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値である。図１８及び図１９と表８及び表９とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、半減期（Ｔ１／２）が最大３．３４時間以上に長期間露出され、静脈投与と比較する時に、生体利用率（Ｆｔ）が最大９９．９％以上に経口投与に適した特性を有するということを確認することができる。
【０４３１】
図２０と表１０は、実験例１６の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値である。図２０と表１０とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、ｍｉｃｅでも半減期（Ｔ１／２）が３．６１時間程度に長期間露出されて、経口投与に適した特性を有するという点を確認することができる。
【０４３２】
図２１と表１１は、実験例１７（１７−１、１７−２及び１７−３）の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値である。図２１において、Ｇ２及びＧ３は、それぞれ溶媒に溶解させて経口投与した場合と、カプセル内粉末状に経口投与した場合と、を示す。図２１と表１１とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、ｄｏｇで半減期（Ｔ１／２）が最大５．５３時間以上にｒａｔやｍｉｃｅよりも長期間露出されて、経口投与に適した特性を有し、特に、カプセル内に粉末状に充填して投与した場合、半減期（Ｔ１／２）及び生体利用率（Ｆｔ）などの特性がより向上するという点を確認することができる。
【０４３３】
図２２と表１２は、実験例１８（１８−１及び１８−２）の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値である。図２２と表１２とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、経口投与において、メチルセルロース（ＭＣ）と共に投与されることが従来の賦形剤であるジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、蒸留水（Ｄ．Ｗ．）などと共に投与されることよりも優れた特性を有するという点を確認することができる。
【０４３４】
＜実験例１９＞本発明のアデノシン誘導体の毒性試験
【０４３５】
本発明のアデノシン誘導体の毒性を試験するために、実施例２の化合物に対して、細胞毒性（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）、心臓毒性（ｈＥＲＧ  ｌｉｇａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｓｓａｙ）、遺伝毒性及び単回毒性を評価した。
【０４３６】
まず、実施例２の化合物の細胞毒性を試験するために、Ｃｙｔｏ  ＸＴＭ  ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔを利用した。試験の結果、実施例２の化合物によるＩＣ５０が、それぞれの細胞株で１０μＭ以上であって、一般細胞毒性に対して安全であると評価された。
【０４３７】
実施例２の化合物の心臓毒性を試験するために、ｒｅｄ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  ｈＥＲＧ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｌｉｇａｎｄ  ｔｒａｃｅｒのｈＥＲＧ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ結合程度による蛍光偏光（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）評価を通じて心臓安定性を評価するｎｏｎ−ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ試験法を使用した。試験の結果、実施例２の化合物１０μＭに対する阻害率は、基準値である５０％以下であって、心臓毒性に対して安全であると評価された。
【０４３８】
実施例２の化合物の遺伝毒性を試験するために、ヒスチジン要求性サルモネラ菌（ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５及びＴＡ１５３７菌株）及びトリプトファン要求性大腸菌（ＷＰ２ｕｖｒＡ（ｐＫＭ１０１）菌株）を用いて代謝活性化非存在下及び存在下のそれぞれの場合に対して、実施例２の化合物の遺伝子突然変異誘発性を評価した。評価の結果、実施例２の化合物は、代謝活性化の有無に関係なく、各菌株のあらゆる容量で復帰変異コロニー数が陰性対照群の２倍を超過せず、容量依存的な増加も観察されず、陽性対照群では、各菌株に対する復帰変異コロニー数が陰性対照群と比較して、２倍以上確実に増加した。以上の結果から、実施例２の化合物は、遺伝毒性に対して安全であると評価された。
【０４３９】
実施例２の化合物の単回毒性を試験するために、ｍａｌｅ  ｒａｔとｆｅｍａｌｅ  ｒａｔの５匹のそれぞれに実施例２の化合物２，０００ｍｇ／ｋｇを単回投与した。試験の結果、死亡した実験動物はなく、前記結果によって、実施例２の化合物は、単回毒性に対して安全であると評価された。
【０４４０】
表１４は、以上の本発明のアデノシン誘導体に対する毒性試験の結果を整理したものである。表１４に示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、細胞毒性、心臓毒性、遺伝毒性及び単回毒性に対して安全であるという点を確認することができる。
【０４４１】
【表１４】
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【０４４２】
＜実験例２０＞本発明のアデノシン誘導体を含む経口投与剤の安定性の評価
【０４４３】
本発明のアデノシン誘導体を含む経口投与剤の安定性を評価するために、下記のように実験した。
【０４４４】
経口投与剤の賦形剤として使われる０．５ｗｔ％メチルセルロースを実施例２の化合物に添加して音波処理（ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）し、均質化した後、室温で保管する群と４℃で保管する群とに分けて、それぞれ１、３、７及び１０日後に、Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣを用いて対照群である０．５％メチルセルロースとの濃度比較を通じて安定性を測定し、その結果を表１５に示した。
【０４４５】
【表１５】
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【０４４６】
表１５に示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、経口投与剤で調剤された時、その安定性が保管条件及び保管時間によって有意な差を示していないので、本発明のアデノシン誘導体は、経口製剤による経口投与に適していることを確認することができる。
【０４４７】
以上、添付図面を参照して、本発明の実施例を説明したが、当業者ならば、本発明のその技術的思想や必須的な特徴を変更せずとも、他の具体的な形態で実施可能であることを理解できるであろう。したがって、前述した実施例は、あらゆる面で例示的なものであり、限定的ではないということを理解せねばならない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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