(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉの化合物：
【化１】
0006955563.tif 000028
又は医薬的に許容し得るその塩。
【請求項２】
絶対配置が（下式ＩＡ）
【化２】
0006955563.tif 000029
の化合物である、２−｛４−［（シクロプロピルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ− ｛４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）］−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシエチル］フェニル｝アセトアミドに一致する請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
絶対配置が（下式ＩＢ）
【化３】
0006955563.tif 000030
の化合物である、２− ｛４−［（シクロプロピルメチル）スルホニル］フェニル｝ −Ｎ− ｛４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）］ −２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシエチル］フェニル｝アセトアミドに一致する請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
下記式ＶＩの化合物、
【化４】
0006955563.tif 000031
２− ［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］ −Ｎ− ［４− ［１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド、
（−）−２− ［４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］ −Ｎ− ［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド、
（−）−２− ［４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］ −Ｎ− ［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド、
（＋）−２− ［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］ −Ｎ− ［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド、
（＋）−２− ［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］ −Ｎ− ［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド、又は医薬的に許容し得るその塩。
【請求項５】
下式（ＩＩ）
【化５】
0006955563.tif 000032
のアミンを下式（ＩＩＩ）
【化６】
0006955563.tif 000033
の化合物と反応させることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を製造する方法。
【請求項６】
治療に使用するための、請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物又は医薬的に許容し得るその塩。
【請求項７】
ＲＯＲｙ媒介性の疾患又は病状の治療に使用するための、請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物又は医薬的に許容し得るその塩。
【請求項８】
関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病及び多発性硬化症の治療に使用するための、請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物又は医薬的に許容し得るその塩。
【請求項９】
請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を含むことを特徴とする医薬。
【請求項１０】
請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物又は医薬的に許容し得るその塩及び１種若しくはそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１１】
治療上有効な薬剤を追加的に少なくとも１種、更に含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、ＲＯＲγのモジュレータである化合物、その化合物を含む医薬組成物、及びＲＯＲγが媒介する疾患又は病状、特に自己免疫疾患及び炎症性疾患を治療するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｔヘルパー（ＴＨ）細胞は、それらが特定の病原体に対する防御を調整するので、適応免疫系において極めて重要な役割を果たす。ＴＨ１７細胞などのＴＨ細胞のインターロイキン１７（ＩＬ−１７）産生系統は、乾癬、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、クローン病、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アトピー性皮膚炎、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎及び過敏性腸疾患を含む、多数の自己免疫疾患及び炎症性疾患の病理に直接関与しているがこれらに限定するわけではない。
【０００３】
インターロイキン１７及びインターロイキン２３（ＩＬ−２３）の２種は、ＴＨ１７生物学における中枢的なサイトカインである。ＩＬ−１７はＴＨ１７細胞から分泌され、組織炎症を強力に誘導する。ＩＬ−２３は、ＩＬ−２３受容体（ＩＬ−２３Ｒ）を介したＴＨ１７細胞型の増殖の増幅及び安定化における重要な関与体であることが示されている。
【０００４】
レチノイン酸受容体が関連するオーファン受容体γｔ（ＲＯＲγｔ）は、ＴＨ１７細胞の発生の主要レギュレータとして作用し、かつ又、例えばγδＴ細胞等の非ＴＨ１７  ＩＬ−１７産生細胞における極めて重要な成分としても作用する。ＲＯＲ遺伝子ファミリーは、核ホルモン受容体スーパーファミリーの一部であり、そして３種のメンバー（ＲＯＲα、ＲＯＲβ、及びＲＯＲγ）からなる。各遺伝子は発現されて、異なるアイソフォームとなり、そのＮ末端配列が最も異なる。ＲＯＲγの２種のアイソフォームとしては、ＲＯＲγ１及びＲＯＲγ２（ＲＯＲγｔとしても知られている）が同定されている。ＲＯＲγという用語は、本明細書ではＲＯＲγ１及び／又はＲＯＲγ２の両方を説明するために使用される。
【０００５】
ＲＯＲγモジュレータ化合物は、特許文献１に記載されている。
【０００６】
免疫疾患及び炎症性疾患においてＲＯＲγに重要な役割があると仮定すれば、ＲＯＲγが媒介する疾患の治療に使用出来るような、安全特性を改善したＲＯＲγのモジュレータを調製することが望ましい。本出願は、そのような安全特性を改善した新規なＲＯＲγモジュレータ化合物を提供するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際特許出願ＷＯ２０１５／０８２５３３
【発明の概要】
【０００８】
従って、本出願は、下記（式Ｉ）
【化１】
0006955563.tif 000002
により、表され、
かつ、その化合物（Ｉ）の絶対配置が、下記（式ＩＡ）又は下記（式ＩＢ）の化合物に対応する、
【化２】
0006955563.tif 000003
２−４−［（シクロプロピルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ−｛４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシエチル］フェニル｝アセトアミド又は医薬的に許容し得る塩、
【化３】
0006955563.tif 000004
２−｛４−［（シクロプロピルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ−４−１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシエチル］フェニル｝アセトアミド又は医薬的に許容し得るその塩  
である新規なＲＯＲγモジュレータ化合物を提供する。
【０００９】
特記しない限り、以下の定義は、本出願の要素を本明細書に記載するために使用する様々な用語の意味及び範囲を例示し、定義するために表明したものである。
【００１０】
前記（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）で表される化合物の医薬的に許容し得る塩という用語は、ヒト及び下等な動物の組織と接触しても、医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などがなく、かつ、合理的な利益／リスク比に見合って使用するのに適した塩を表す。医薬的に許容し得る塩は当技術分野において周知である。化合物の酸官能基は、有機塩基又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水酸化リチウムのような無機塩基と反応させても良い。
【００１１】
前記（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）で表される化合物、医薬的に許容し得るその塩の他に、それらの溶媒和物及び水和物も又本願の範囲内である。
【００１２】
本出願の別の態様において、本出願の化合物（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）はプロドラッグとして投与し得ることも発見された。
【００１３】
このプロドラッグは、スルホニル基の代わりにスルフィニル基を有する（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物に対応する（式ＶＩ）、（式ＶＩＡ）、（式ＶＩＢ）、（式ＶＩＣ）又は（式ＶＩＤ）の化合物として定義される。プロドラッグのキラル中心の絶対配置は決定しておらず、無作為に割り当てた。当業者には、スルホキシドはそのスルホン対応物と比較すると、より優れた水溶性を示し得ることが知られている。
【００１４】
【化４】
0006955563.tif 000005
２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］−Ｎ−［４−［１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。      
【００１５】
【化５】
0006955563.tif 000006
（−）−２−［４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド又は医薬的に許容し得るその塩。
【００１６】
【化６】
0006955563.tif 000007
（−）−２−［４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド又は医薬的に許容し得るその塩。
【００１７】
【化７】
0006955563.tif 000008
（＋）−２−［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド又は医薬的に許容し得るその塩。
【００１８】
【化８】
0006955563.tif 000009
（＋）−２−［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド又は医薬的に許容し得るその塩。
【００１９】
更に、本出願の化合物は顕著な毒性を全く示さず、従って医薬として使用するのに適している。
【００２０】
本出願の化合物はＲＯＲγ活性を阻害する。ＲＯＲγ活性の調節は、例えば生物物理学的（天然）リガンド置換試験、生化学的ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ又はＦＲＥＴアッセイ、細胞ＧＡＬ４レポーター遺伝子アッセイ、例えばＴＨ１７偏光条件下でのマウス脾細胞又はヒト末梢血単核球（ＰＢＭＣ培養）を用いる細胞ＩＬ−１７プロモーターレポーターアッセイ又は機能的ＩＬ−１７  ＥＬＩＳＡアッセイ、を用いて測定することができる。
【００２１】
そのようなアッセイにおいて、化合物とＲＯＲγとの相互作用は、例えば、補因子由来ペプチドとＲＯＲγリガンド結合ドメインとの化合物調節相互作用（ＩＣ５０）を測定することにより、又は、例えば、ルシフェラーゼレポーターアッセイ又はＩＬ−１７  ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、化合物調節ＲＯＲγ媒介転写の遺伝子産生物を測定することにより決定できる。
【００２２】
当業者は、望ましいＩＣ５０値が試験する化合物に依存することを認識するであろう。例えば、１０−５Ｍ未満の生物学的標的に対して、ＩＣ５０値を有する化合物は、一般に薬剤選択の候補としてみなされる。実施形態によっては、この値が１０−６Ｍより低いものもある。
【００２３】
安全特性は、ヒトエーテル−ア−ゴ−ゴ−関連遺伝子（ｈＥＲＧ）イオンチャネル阻害及びＣＹＰ３Ａ４阻害により評価した。
【００２４】
ヒトのエーテル−ア−ゴ−ゴ−関連遺伝子（ｈＥＲＧ、Ｋｖ  １１．１）チャンネルは心臓の安全性において特に重要な役割を果たしており、ｈＥＲＧパッチクランプアッセイは、初回臨床試験の前における重要な規制要件である（ＦＤＡガイダンス）。
【００２５】
心臓活動電位の再分極相に関与するｈＥＲＧ電流（ＩＫｒ）の阻害は、心臓活動電位を延長し、心電図におけるＱＴ間隔の延長を引き起こすことが示されており、その結果、「トルサード・ド・ポワント」と呼ばれる、ヒトにおける潜在的に致命的な心室性不整脈のリスクの増加をもたらす。
【００２６】
ｈＥＲＧをＣＨＯ細胞中で発現させるｈＥＲＧアッセイは、化合物とｈＥＲＧチャネルとの相互作用についての情報を提供する。ｈＥＲＧカリウムチャネルテール電流の振幅を、制御下の、かつ様々な濃度の化合物溶液下で記録する。次いで、ＩＣ５０値を用量反応曲線から決定する。
【００２７】
創薬のできるだけ早い段階でＣＹＰ３Ａ４阻害を特定することは、薬物間相互作用に関連する潜在的な有害毒性作用を防ぐための鍵となる（ＦＤＡガイダンス）。
【００２８】
ＣＹＰ３Ａ４阻害アッセイでは、ＣＹＰ３Ａ４に対する直接阻害剤としての試験化合物のインビトロＩＣ５０をＣＹＰ３Ａ４（ミダゾラム及びテストステロン）のプローブ基質のそれらの特定の代謝産物、すなわち１’−ヒドロキシミダゾラム、ヒト肝臓ミクロソーム中の６β‐ヒドロキシテストステロンへの代謝回転の阻害を測定することにより、決定する。
【００２９】
当業者なら、望ましいＩＣ５０値は試験した化合物に依存することを認識するであろう。  例えば、上記試験においてＩＣ５０値が高ければ高いほど、心臓の安全性の問題のリスクと薬物間相互作用に関連した潜在的な有害な毒性効果とが低減することにより、安全性の特性がより良好になる。
【００３０】
本出願は又、（式Ｉ）、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物、又はその化合物の医薬的に許容し得る塩を、医薬的に許容し得る賦形剤、及び場合により他の治療上有効な薬剤と混合して含む医薬組成物に関する。
【００３１】
本出願は又、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物又はその化合物の医薬的に許容し得る塩を、医薬的に許容し得る賦形剤及び場合により他の治療上有効な薬剤と混合して含む医薬組成物に関する。
【００３２】
本出願は又、（式Ｉ）、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩及び１種又はそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００３３】
本出願は又、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩及び１種又はそれ以上の医薬的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００３４】
この賦形剤は、組成物の他の成分と相溶性であり、かつそのレシピエントに害を与えないという意味で「許容し得る」ものでなければならない。
【００３５】
本出願は又、少なくとも１種の治療上有効な薬剤を追加的に含む医薬組成物に関する。
【００３６】
本出願は更に、１種又はそれ以上の他の薬剤と組合せて（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物を含む。
【００３７】
本出願は更に、１種又はそれ以上の他の薬剤と組合せて（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物を含む。
【００３８】
組成物としては、例えば、経口、舌下、皮下、静脈内、筋肉内、鼻腔内、局所又は直腸内投与などに適したものを含み、全てが投与のための単位剤形である。
【００３９】
経口投与の場合、本出願の化合物は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、懸濁剤などのような個別の単位として提供しても良い。
【００４０】
非経口投与の場合、本出願の化合物の医薬組成物は、単回投与又は複数回投与用の容器、例えば密封バイアル及びアンプル中に所定量の注射液で提供してもよく、及び、使用前に、滅菌した液体担体、例えば水を添加するだけで良い凍結乾燥（凍結乾燥）した状態で貯蔵しても良い。  
【００４１】
そのような医薬的に許容し得る賦形剤と混合して、有効薬剤を丸剤、錠剤などの固体投与単位に圧縮するか、又はカプセル剤もしくは坐剤に加工しても良い。医薬的に許容し得る液体を用いて、有効薬剤を流体組成物、即ち、溶液、懸濁液、乳濁液形態の注射剤として、又はスプレー例えば、鼻スプレーとして、適用しても良い。
【００４２】
固体投与単位を製造するために、充填剤、着色剤、ポリマーバインダーなどのような従来の添加剤の使用が考えられる。一般に、化合物の有効な機能を妨害しない医薬的に許容し得る賦形剤を任意に使用しても良い。本出願の化合物と共に固体組成物として投与出来る適切な賦形剤としては、ラクトース、デンプン、セルロース誘導体など、又はそれらの混合物が含まれ、適切な量で使用される。非経口投与のためには、水性懸濁液、等張食塩水及び滅菌注射用溶液を使用しても良く、それはプロピレングリコール又はブチレングリコールのような医薬的に許容し得る分散剤及び／又は湿潤剤を含有する。
【００４３】
本出願は更に、本明細書中に既述したように、医薬組成物と前記組成物に適した包装材料とを組み合わせて含み、前記包装材料は本明細書中に既述したような使用のための組成物の使用説明書を含む。
【００４４】
本出願の化合物、又はその医薬組成物の正確な投与量及び投与計画は、特定の化合物、投与経路、ならびに薬剤を投与すべき個々の患者の年齢及び状態によって変えても良い。
【００４５】
一般に、非経口投与は、他の投与方法よりも必要とする投与量が少なく、それは吸収についてより強く依存している。然しながら、ヒトへの投与量は、好ましくは体重１ｋｇあたり０．０００１〜１００ｍｇを含む。所望の用量は、一日を通して適切な間隔で投与される１回用量として又は多数回の副用量として提供し得る。
【００４６】
本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、医薬として使用しても良い。
【００４７】
本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、医薬として使用しても良い。
【００４８】
本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、療法における医薬として使用しても良い。
【００４９】
本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、療法における医薬として使用しても良い。
【００５０】
本出願のさらなる態様は、療法における、本出願による（式Ｉ）（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物の、又は医薬的に許容し得るその塩の、使用に存在する。
【００５１】
本出願のさらなる態様は、療法における本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物の又は医薬的に許容し得るその塩の、使用に存在する。
【００５２】
本出願のさらなる態様は、ＲＯＲγ媒介疾患又はＲＯＲγ媒介病状を治療するための、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩の使用に存在する。
【００５３】
本出願のさらなる態様は、ＲＯＲγ媒介疾患又はＲＯＲγ媒介病状を治療するための、本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩の使用に存在する。
【００５４】
本出願の別の態様は、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を自己免疫疾患の治療のために使用することに存在し、特にそれらの疾患において、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００５５】
本出願の別の態様は、本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を自己免疫疾患の治療のために使用することに存在し、特にそれらの疾患において、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００５６】
これらには、関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病及び多発性硬化症の治療が含まれるが、これに限定するわけではない。
【００５７】
別の態様では、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を、これに限定するわけではないが、呼吸器疾患、変形性関節症及び喘息等の、炎症性疾患の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００５８】
別の態様では、本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を、これに限定するわけではないが、呼吸器疾患、変形性関節症及び喘息等の、炎症性疾患の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００５９】
又、（式Ｉ）、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物又はそれらの医薬的に許容し得る塩は、これに限定するわけではないが、粘膜リーシュマニア症等の、感染症の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び／又は非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００６０】
又、（式ＩＡ）もしくは（式ＩＢ）の化合物又はそれらの医薬的に許容し得る塩を、これに限定するわけではないが、粘膜リーシュマニア症等の、感染症の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び／又は非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００６１】
本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を、これに限定するわけではないが、川崎病及び橋本病の甲状腺炎等、他の疾患の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００６２】
本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を、これに限定するわけではないが、川崎病及び橋本病の甲状腺炎等、他の疾患の治療に使用でき、ここでは、ＴＨ１７の特徴的サイトカインを発現するＴＨ１７細胞及び非ＴＨ１７細胞が顕著な役割を果たしている。
【００６３】
更に別の態様では、本出願は、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を多発性硬化症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、慢性関節リウマチ、喘息、変形性関節症、川崎病、橋本病の甲状腺炎、癌、及び、粘膜リーシュマニア症の治療に使用することにある。
【００６４】
更に別の態様では、本出願は、本出願による（式ＩＡ）又は（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩を多発性硬化症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、慢性関節リウマチ、喘息、変形性関節症、川崎病、橋本病の甲状腺炎、癌、及び、粘膜リーシュマニア症の治療に使用することにある。
【００６５】
別の態様では、医薬の調製のための本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は多発性硬化症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬及び慢性関節リウマチ、喘息、変形性関節症、川崎病、橋本甲状腺炎、癌及び粘膜リーシュマニア症を治療し又は予防するための療法に使用しても良い。
【００６６】
別の態様では、医薬の調製のための本出願による（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は多発性硬化症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬及び慢性関節リウマチ、喘息、変形性関節症、川崎病、橋本甲状腺炎、癌及び粘膜リーシュマニア症を治療し又は予防するための療法に使用しても良い。
【００６７】
別の態様において、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は乾癬を治療又は予防するために使用しても良い。
【００６８】
別の態様において、本出願による（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は乾癬を治療又は予防するために使用しても良い。
【００６９】
更に別の態様では、本出願による（式Ｉ）、（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、炎症性腸疾患を治療するために使用しても良い。
【００７０】
更に別の態様では、本出願による（式ＩＡ）若しくは（式ＩＢ）の化合物又は医薬的に許容し得るその塩は、炎症性腸疾患を治療するために使用しても良い。
【実施例】
【００７１】
本出願を参考とともに実施例により説明する。然しながら、本出願の範囲を、以下の実施例に限定するわけではない。
【００７２】
本出願の化合物は、容易に入手可能な出発物質、試薬、又は前に記載した中間体及び従来の合成手順を使用して、以下の反応スキーム又はその修正した方法に従って容易に調製出来る。
【００７３】
【化９】
0006955563.tif 000010
【００７４】
このスキームで使用する略語及びこれらの実験の詳細を以下に列挙するが、更に追加すべきものがあるならば、それは合成化学の当業者には、既知と見なされるべきものである。
【００７５】
本明細書で使用する略語は以下の通りである。ＴＭＳＣＦ３：トリフルオロメチルトリメチルシラン、ＴＢＡＦ：テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド、ＴＭＳ：トリメチルシリル、ＬｉＨＭＤＳ：リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、Ｐｄ２（ｄｂａ）３：トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、Ｔ３Ｐ：１−プロパンホスホン酸無水物、ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピル−プロパン−２−アミン、ＲＴ：室温、ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＣＭ：ジクロロメタン、ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、Ｅｔ２Ｏ：：ジエチルエーテル、ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド、ＥｔＯＨ：エタノール、ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー、ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル、ＡＣＮ、ＣＨ３ＣＮ：アセトニトリル、ＭｅＯＨ：メタノール、ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸、ＨＣｌ：塩酸、Ｅｔ３Ｎ、ＴＥＡ：トリエチルアミン、ＮａＣｌ：塩化ナトリウム、ＮａＨＣＯ３：重炭酸ナトリウム、Ｈ２Ｏ：水、ＭｇＳＯ４：硫酸マグネシウム、Ｎａ２ＳＯ４：硫酸ナトリウム。
【００７６】
化学名はＵＰＡＣ名が好ましく、Ａｃｃｅｌｒｙｓ  Ｄｒａｗ  ４．１を使用して生成した。
化学化合物が化学構造と化学名の両方を使用して参照し、かつ、構造と名前の間にあいまいさが存在する場合には、構造を優位とする。
【００７７】
実施例１
２−［４−（シクロプロピルメチルスルホニル）フェニル］−Ｎ−［４−［１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
【化１０】
0006955563.tif 000011
【００７８】
工程１：
【化１１】
0006955563.tif 000012
【００７９】
アルゴン下、０℃でＴＨＦ１００ｍＬ中の１−（４−ブロモフェニル）−２，２−ジフルオロ−エタノン（１０．５ｇ）の溶液にＴＭＳＣＦ３（１２．７ｇ）を加え、続いてＴＨＦ（９０ｍＬ）中のＴＢＡＦ１Ｍ溶液を４５分以上かけて添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いでＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×２００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、次いで減圧下で濃縮した。溶離剤としてシクロヘキサン中０％から２０％のＥｔＯＡｃを使用するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより残留物を精製して、２−（４−ブロモフェニル）−１，１，１，３，３−ペンタフルオロ−プロパン−２−オール、１１．５ｇ（８４％）を黄色油状物として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ３０２．９／３０４．９［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ６．７０（ｔ，Ｊ＝５３．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ）．
【００８０】
工程２：
【化１２】
0006955563.tif 000013
【００８１】
アルゴン下、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の２−（４−ブロモフェニル）−１，１，１，３，３−ペンタフルオロ−プロパン−２−オール（１１．４ｇ）の溶液に、ＴＨＦ（１１２ｍＬ）中のＬｉＨＭＤＳの１Ｍ溶液、２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）ビフェニル（１．６ｇ）を添加し、続いてＰｄ２（ｄｂａ）３（２．１６ｇ）を加えた。反応混合物を還流下で１時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、次に１２Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１５ｍＬ）を滴下しして加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（４００ｍＬ）に注ぎ、次いでＥｔＯＡｃ（２ｘ３００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、乾燥し、そして減圧下で濃縮した。生成物をＤＣＭ中で沈殿させ、濾過し、次いで、最小量のＤＣＭで洗浄して所望の生成物（４．７５ｇ）を得た。溶離液としてシクロヘキサン中０％から５０％のＥｔＯＡｃを使用して、シリカゲル上でカラムクロマトグラフィーにより濾液を精製して所望の生成物１．４ｇを得た。２−（４−アミノフェニル）−１，１，１，３，３−ペンタフルオロ−プロパン−２−オール（６．１５ｇ、６８％）をオフホワイトの固体として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２４２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ５．２７（ｓ，２Ｈ），６．２２−６．７４（ｍ，３Ｈ），７．１１−７．３５（ｍ，３Ｈ）。
【００８２】
工程３：
【化１３】
0006955563.tif 000014
【００８３】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−（４−アミノフェニル）−１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−プロパン−２−オール（０．５５ｇ）の溶液に、２−［４−（シクロプロピルメチルスルホニル）フェニル］酢酸（０．５８ｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピル−プロパン−２−アミン（１．１９ｍＬ）を加え、続いてＤＣＭ（０．８ｍＬ）中の５０％Ｔ３Ｐ溶液を滴下して加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中で粉砕し、濾過し、ペンタン（５ｍＬ）中１０％ＤＣＭで洗浄し、次いで乾燥させて、２−［４−（シクロプロピルメチルスルホニル）フェニル］−Ｎ−［４−［１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド０．７２ｇ（６６％）をオフホワイトの固体として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４７８．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００８４】
実施例２及び３
２つのエナンチオマーを、カラムＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ  ２０μｍ、７６．５×３５０ｍｍ及び移動相ＥｔＯＨ：ＭｅＯＨ  ９０：１０、３５０ｍＬ／分、２５４ｎｍでのＵＶ検出を用いるキラルクロマトグラフィーにより、実施例１から分離した。
【００８５】
ＥｔＯＨ５００ｍＬ中のラセミ体５ｇから出発して、その溶液の注入を５回実施し、濃縮の後に、実施例２（最初に溶出されるエナンチオマー）を２．１７ｇ、及びの実施例３を２．０２ｇ得た。
【００８６】
実施例２−（式Ｉ−Ａ）の化合物：
（＋）−２−［４−（シクロプロピルメチルスルホニル）フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１］［ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
【化１４】
0006955563.tif 000015
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４７８．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ０．１１（ｍ，２Ｈ），０．４４（ｍ，２Ｈ），０．８２（ｍ，１Ｈ），３．２４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），６．６７（ｔ，Ｊ＝５３．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．４２（ｓ，１Ｈ）．
旋光度：［α］Ｄ２０＝＋１．５°（ｃ＝３ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【００８７】
実施例３−（式Ｉ−Ｂ）の化合物：
（−）−２−［４−（シクロプロピルメチルスルホニル）フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１］［ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
【化１５】
0006955563.tif 000016
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４７８．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ０．１１（ｍ，２Ｈ），０．４４（ｍ，２Ｈ），０．８２（ｍ，１Ｈ），３．２４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），６．６７（ｔ，Ｊ＝５３．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．４２（ｓ，１Ｈ）．  
旋光度：［α］Ｄ２０＝−４．６°（ｃ＝３ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【００８８】
実施例４  −Ｘ線単結晶回折
実施例２及び３の絶対配置を、異常分散及びＢｉｊｖｏｅｔ差分析を用いてＸ線単結晶回折（ＸＲＳＣＤ）データから決定した。
単結晶回折データからの結晶構造決定に適した結晶学的品質の単結晶は、クロロホルム中の実施例２及び３の溶液の低速蒸発実験から単離した。
【００８９】
実施例２の絶対配置
データはＢｒｕｋｅｒ  Ｓｍａｒｔ  Ａｐｅｘ単結晶回折計で収集した。モリブデン１μＳマイクロフォーカスＸ線源を使用し、５０ｋＶ及び０．６ｍＡで操作し、Ｍｏ−Ｋα線（λ＝０．７１０７３１Å）を照射した。電荷結合素子（ＣＣＤチップ：４Ｋ、６２ｍｍ）領域検出器を６．０ｃｍに配置した。Ｏｘｆｏｒｄ  Ｃｒｙｏｓｙｓｔｅｍｓ窒素クライオスタット（Ｃｒｙｏｓｔｒｅａｍ  Ｐｌｕｓ７００シリーズ）を使用して、１００ＫでＸＲＳＣＤ実験を実行出来た。サイズ２５ｘ２５０ｘ２５０μｍ３の単結晶を、Ｐａｒａｔｏｎｅ  ＮTMオイルから、バックグラウンドの低いｍｙｌａｒ  ＭｉＴｅＧｅｎループ上に滴下して、マウントした。Ｅｗａｌｄの反射球のすべてを収集した（フレーム幅０．３°を有する６８０フレームの３オメガスキャン）。蓄積時間は、取得するフレームごとに８０秒に設定した。配向マトリックス及び単位セルは、ＣＥＬＬ＿ＮＯＷ（ｖ２００８／４）プログラムを使用して確立している。３Ｄ反射特性とすべての反射の統合はＳＡＩＮＴ（ｖ８．３４Ａ）プログラムで実行した。ＴＷＩＮＡＢＳ（ｖ２０１２／１）プログラムを、ローレンツ効果と偏光効果の補正、及びサンプルによる吸収の補正に使用した。更に、ＨＫＬＦ４とＨＫＬＦ５の両方のデータは、解明と精緻化のためにＳＨＥＬＸＴＬ（ｖ２０１４／７）プログラムスイートにより、それぞれ生成したものである。
【００９０】
結晶構造データは以下の通りである。
・三斜系、空間グループＰ１
・ａ＝７．９８９２（１３）Å、ｂ＝１１．４３０１（１８）Å、ｃ＝１１．６９３６（１９）Å、
・α＝８３．０２２（２）°、β＝７７．００６（２）°、γ＝８１．０７１（２）°
・Ｖ＝１０２３．７（３）Å３、Ｚ＝２、Ｔ＝１００（２）Ｋ、
・１１７０４反射測定（３．６≦２Θ≦５８．２）、１１７０４固有（Ｒシグマ＝０．０２２９）
・７３６のパラメーターと３つの制限
【００９１】
最終的なＲ１は２．７％（Ｉ＞２σ（Ｉ））で、ｗＲ２は７．１％（全データ）、Ｇｏｆ＝１．０３０である。
【００９２】
Ｘ線回折技術を用いた絶対構造の決定をするための標準的な手順は、最小二乗精密化手順の一部として、それに付随する標準的な不確実性を伴うＦｌａｃｋパラメータ（ｘ）の決定に基づいている。期待値は、正しい場合は０（標準偏差３以内）（within  ３esd's）であり、反転絶対構造の場合は＋１である。実施例２の場合−（式ＩＡ）の化合物は、すべての強度に対する古典的な当てはめによりＦｌａｃｋ  ｘ＝０．０９５（３３）であり、及び、選択された３９６９の商からの０．０７２（２１）（より高い精度を与えるＰａｒｓｏｎｓの方法）であることより、実施例２の場合−（式ＩＡ）の化合物の絶対配置が確実に決定されたことを示す。
【００９３】
更に、ベイジアン統計アプローチに基づく精密化後の手順（Ｆｌａｃｋアプローチとはまったく異なる方法）を適用した。最尤推定とベイズ統計の組み合わせを使用して、絶対構造の定性的な割り当てだけでなく、その割り当ての信頼性の定量的な推定も取得した。実施例２−尤度法を用いた（式Ｉ−Ａ）絶対構造の化合物の分析は、Ｏｌｅｘ２ソフトウェアパッケージを用いて行った。結果の値はＨｏｏｆｔ  ｙ＝０．１３（５）であり、絶対構造が正しく決定されていることを示している（８８％のＢｉｊｔペアカバレッジを持つＳｔｕｄｅｎｔのｔ分布を使用したＢｉｊｔペア分析：４６３９ペア使用）。この方法は又、構造が反転する確率はゼロに等しいと計算した。
【００９４】
従って、これらの結果は、実施例２−（式Ｉ−Ａ）の化合物の絶対配置がＲ（１００％の確率）であることを示している。
【００９５】
実施例３の絶対配置
データはＢｒｕｋｅｒ  Ｓｍａｒｔ  Ａｐｅｘ単結晶回折計で収集した。モリブデン１μＳマイクロフォーカスＸ線源を使用し、５０ｋＶ及び０．６ｍＡで操作し、Ｍｏ−Ｋα線（λ＝０．７１０７３１Å）を照射した。電荷結合素子（ＣＣＤチップ：４Ｋ、６２ｍｍ）領域検出器を６．０ｃｍに配置した。Ｏｘｆｏｒｄ  Ｃｒｙｏｓｙｓｔｅｍｓ窒素クライオスタット（Ｃｒｙｏｓｔｒｅａｍ  Ｐｌｕｓ  ７００シリーズ）を使用して、１００ＫでＸＲＳＣＤ実験を実行出来た。サイズ４０ｘ１５０ｘ２００μｍ３の単結晶を、Ｐａｒａｔｏｎｅ  ＮTMオイルから、バックグラウンドの低いｍｙｌａｒ  ＭｉＴｅＧｅｎループ上に滴下して、マウントした。Ｅｗａｌｄの反射球のすべてを収集した（フレーム幅０．３°を有する６８０フレームの３オメガスキャン）。蓄積時間は、取得するフレームごとに７５秒に設定した。
配向マトリックス及び単位セルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ａｐｅｘ２（ｖ２０１４．１１ ０）プログラムスイートを使用して確立している。３Ｄ反射特性とすべての反射の統合はＳＡＩＮＴ（ｖ８．３４Ａ）プログラムで実行した。ＳＡＤＡＢＳ（ｖ２０１４／５）プログラムを、ローレンツ効果と偏光効果の補正、及びサンプルによる吸収の補正に使用した。暫定的な空間群はＸＰＲＥＰ（ｖ２０１４／２）プログラムで決定した。ＳＨＥＬＸＴＬ  ＸＴ（ｖ２０１４／４）プログラムは、本質的な位相調整法により構造を解明するために使用した。ＳＨＥＬＸＴＬ  ＸＬＭＰ（ｖ２０１４／７）プログラムは、  Ｆ2に関するフルマトリックス最小二乗計算によって、前記結果を精緻化するために使用した。
【００９６】
結晶構造データは以下の通りである。
・三斜系、空間群Ｐ１
・ａ＝８．００２２（５）Å、ｂ＝１１．４３９４（８）Å、ｃ＝１１．７０４４（８）Å
・α＝８３．００３０（１０）°、β＝７６．９８４０（１０）°、γ＝８０．９８５０（１０）°
・Ｖ＝１０２６．８３（１２）Å３、Ｚ＝２、Ｔ＝１００（２）Ｋ
・１０４３０反射測定（３．６≦２Θ≦５７．８）、８９３２固有（Ｒｉｎｔ＝０．００８１）
・７３７のパラメーターと３つの制限
【００９７】
最終的なＲ１は２．５％（Ｉ＞２σ（Ｉ））であり、そしてｗＲ２は６．８％（全データ）であり、Ｇｏｆ＝１．０２４であった。
【００９８】
Ｘ線回折技術を用いた絶対構造の決定をするための標準的な手順は、最小二乗精密化手順の一部として、それに付随する標準的な不確実性を伴うＦｌａｃｋパラメータ（ｘ）の決定に基づいている。期待値は、正しい場合は０（標準偏差３以内）、反転絶対構造の場合は＋１である。実施例３の場合−（式ＩＢ）の化合物は、すべての強度に対する古典的な当てはめによりＦｌａｃｋ  ｘ＝０．０６３（４７）であり、及び、選択された３９６９の商からの０．０５８（９）（より高い精度を与えるＰａｒｓｏｎｓの方法）であることより、実施例３の場合−（式ＩＢ）の化合物の絶対配置が確実に決定されたことを示す。
【００９９】
更に、ベイジアン統計アプローチに基づく精密化後の手順を適用した。最尤推定とベイズ統計の組み合わせを使用して、絶対構造の定性的な割り当てだけでなく、その割り当ての信頼性の定量的な推定も取得した。
【０１００】
実施例３−尤度法を用いた（式ＩＢ）絶対構造の化合物の分析は、Ｏｌｅｘ２ソフトウェアパッケージを用いて行った。結果の値はＨｏｏｆｔ  ｙ＝０．０５９（８）であり、絶対構造を正しく決定していることを示していた（７５％のＢｉｊｔペアカバレッジを持つＳｔｕｄｅｎｔのｔ分布を使用したＢｉｊｔペア分析：４０４９ペア使用）。この方法による計算では、又、構造が反転する確率はゼロに等しかった。
【０１０１】
従って、これらの結果は、実施例３−（式ＩＢ）の化合物の絶対配置がＳ（１００％の確率）であることを示している。
【０１０２】
実施例５  −ＲＯＲγＧＡＬ４レポーター遺伝子アッセイ
本発明の式ＩＡの化合物及び式ＩＢの化合物の実施例２〜３と、国際特許出願第ＷＯ２０１５／０８２５３３号からの実施例番号３７とを、ＲＯＲγＧＡＬ４レポーター遺伝子アッセイにおいて、それらがＲＯＲγ活性を阻害する能力について試験した。
【０１０３】
アッセイ手順を以下に記載し、結果を表１に示す。
【０１０４】
ルシフェラーゼ読み出しを用いるＧＡＬ４ワンハイブリッドレポーターシステムを用いて確立することにより、２９３ＦＴ細胞におけるＲＯＲγの阻害を決定した。ＲＯＲγリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）を酵母ＧＡＬ４  ＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）に融合させ、発現ベクターｐＦＮ２６Ａ（Ｐｒｏｍｅｇａ）及び標準的な組換えＤＮＡクローニング法を用いてヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）即時型プロモーターの制御下に置いた。アッセイにおける対照として役立てるために、ＧＡＬ４−ＤＢＤが構成的転写活性化因子である単純ヘルペスウイルスタンパク質１６（ＶＰ１６）に融合されている類似のベクターを生成した。
【０１０５】
ＲＯＲγに対する化合物の阻害効果をモニターするために、転写レポーター構築物を使用した。ｐＧＬ４．３５ベクター（Ｐｒｏｍｅｇａ）は、９個のコピーのＧＡＬ４上流アクチベーター配列（ＵＡＳ）を含む。この配列は、例えば上記のＧＡＬ４−ＲＯＲγ−ＬＢＤ及びＧＡＬ４−ＶＰ１６発現ベクターによって発現されるように、ＧＡＬ４  ＤＮＡ結合ドメインを含む融合タンパク質の結合に応答してルシフェラーゼレポーター遺伝子ｌｕｃ２Ｐの転写を駆動する。ＧＡＬ４融合タンパク質がルシフェラーゼレポーターの発現を駆動することを可能にするために、ｐＧＬ４．３５発現ベクター及び適切なＧＡＬ４融合タンパク質発現ベクターを、標準的なトランスフェクション技術を用いて２９３ＦＴ細胞にバルクトランスフェクトした。
【０１０６】
トランスフェクションの翌日、細胞を９６ウェルプレートに蒔き、試験化合物を加え、プレートを一晩インキュベートした。続いて、ルシフェラーゼ検出試薬及びルミネセンス読み出しを用いてホタルルシフェラーゼ活性を定量した。
【０１０７】
アッセイの詳細な説明
２９３ＦＴ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にＧＡＬ４融合タンパク質発現ベクター（上記の通り）及び転写レポーター構築物（ｐＧＬ４．３５、Ｐｒｏｍｅｇａ）をトランスフェクトした。ＴｒａｎｓＩＴ−２９３トランスフェクション試薬（Ｍｉｒｕｓ  Ｂｉｏ）６０μＬをＯｐｔｉ−ＭＥＭ  Ｉ低血清培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）１５００μｌに滴下して加え、室温（ＲＴ）で５〜２０分間インキュベートした。この試薬混合物１５００μＬをＧＡＬ４融合タンパク質発現ベクター５μｇ及び転写レポーター構築物５μｇに添加し、そして室温で２０分間インキュベートした。
【０１０８】
Ｔ７５フラスコから２９３ＦＴ細胞を回収するために、最初に培地を細胞から取り除いた。続いて、細胞をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）（Ｌｏｎｚａ）で洗浄し、その後ＰＢＳを除去した。細胞を解離させるために、ＴｒｙｐＬＥ  Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）１ｍｌをフラスコに添加し、続いて細胞が視覚的に剥離し始めるまで室温でインキュベートした。細胞をアッセイ培地（ＤＭＥＭ培地（Ｌｏｎｚａ）、１０％透析ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＰｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｌｏｎｚａ））５ｍＬの中に収集して単一細胞懸濁液を得た。１０×１０６細胞を遠心し、アッセイ培地１０ｍＬに再懸濁した。続いて、細胞懸濁液をトランスフェクションミックスチューブに加え、次いで全体としてＴ７５フラスコ（Ｇｒｅｉｎｅｒ）に移し、続いて３７℃及び５％ＣＯ２で一晩（１６〜２４時間）インキュベートした。
【０１０９】
化合物をスクリーニングするために、細胞を（上記のように）収集し、次に計数した。１３ｘ１０６細胞を遠心し、上清を吸引し、細胞を１７．３ｍＬのアッセイ培地に再懸濁して、０．７５×１０６細胞／ｍＬの細胞懸濁液を得た。１ウェルあたり８０μＬの細胞懸濁液（６０，０００細胞）を、白色の平底の組織培養処理した９６ウェルスクリーニングプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ）に蒔いた。
【０１１０】
試験化合物の希釈を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１０ｍＭ原液から始め、ＤＭＳＯ中の最終試験濃度が５００倍となるまで段階希釈した。続いて、これらの溶液をアッセイ培地中で２段階の１０倍希釈工程で最終試験濃度の５倍に希釈した。５倍試験化合物溶液の最終ＤＭＳＯ濃度は１％であった。この５倍試験化合物溶液２０μｌを、細胞懸濁液８０μｌが前もって蒔いてある９６ウェルプレートの各試験ウェルに添加し、０．２％ＤＭＳＯを有する最終試験濃度を得た。プレートは３７℃及び５％ＣＯ２で一晩（１６〜２４時間）インキュベートした。
【０１１１】
ルシフェラーゼの読取りのために、ルシフェラーゼ試薬（Ｂｒｉｔｅｌｉｔｅ  Ｐｌｕｓ、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を室温にした。スクリーニングプレートの各試験ウェルに、２．５倍希釈したＢｒｉｔｅｌｉｔｅ  Ｐｌｕｓ試薬１００μＬを加え、続いて室温で１０分間インキュベートした。ルシフェラーゼ発光シグナルをＷａｌｌａｃ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を用いて測定した。
【０１１２】
試験化合物についての最大半数阻害濃度（ＩＣ５０）値を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＧｒａｐｈＰａｄ  ｓｏｆｔｗａｒｅ社）を使用して、ルシフェラーゼシグナルから計算した。
【０１１３】
実施例６  末梢血単核球（ＰＢＭＣ）ＩＬ−１７アッセイ
ヒト血液から単離した抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＩＬ−１７Ａ産生を阻害する能力について、本出願の実施例２〜３と国際特許公開第２０１５／０８２５３３号の実施例３７とを、試験した。そのアッセイ手順を以下に記載し、結果を表１に示した。
このアッセイは、ＲＯＲγが媒介するＩＬ−１７Ａ産生の阻害を測定する目的で、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激ＰＢＭＣから分泌されたＩＬ−１７Ａのレベルを測定するように設計されている。
【０１１４】
アッセイの詳細な説明
アッセイ培地は、ＲＰＭＩ  １６４０（Ｌｏｎｚａ社）９０％、熱不活性化ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｌｏｎｚａ社）１０％、及びペニシリン／ストレプトマイシン溶液１００Ｕ／ｍＬからなる。
【０１１５】
抗ＣＤ３抗体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社）をＰＢＳ（Ｌｏｎｚａ社）中で１０μｇ／ｍｌに希釈した。１０μｇ／ｍｌ抗ＣＤ３溶液３０μＬを、９６ウェル細胞培養処理Ｕ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ社）の内側６０ウェルに添加した。プレートを３７℃及び５％ＣＯ２で一晩（１６〜２４時間）インキュベートした。
【０１１６】
製造元のプロトコールに従って、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＲＥＭＩＵＭ分離培地（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を用いて軟膜（Ｓａｎｑｕｉｎ社）から末梢血単核球を分離し、アッセイ培地に３７℃で再懸濁した。
【０１１７】
試験化合物の希釈を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１０ｍＭ原液から始め、ＤＭＳＯ中の最終試験濃度が２００倍となるまで段階希釈した。続いて、これらの溶液をアッセイ培地中で２段階の希釈工程で最終試験濃度の５倍に希釈した。５倍試験化合物溶液の最終ＤＭＳＯ濃度は２．５％であった。
【０１１８】
抗ＣＤ２８抗体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社）をアッセイ培地中で１０μｇ／ｍＬに希釈した。ＰＢＭＣをアッセイ培地中、３７℃で２．２×１０６細胞／ｍＬの濃度に希釈した。
【０１１９】
化合物をスクリーニングするために、抗ＣＤ３で被覆したプレートをＰＢＳで２回洗浄した。続いてウェルを真空を用いて吸引した。各スクリーニングウェルに、ＰＢＭＣ懸濁液９０μＬ、抗ＣＤ２８溶液３０μＬ及び５倍試験化合物溶液３０μＬを添加し、０．５％ＤＭＳＯを含む最終試験濃度とした。蒸発を防ぐために全ての外側ウェルをＰＢＳで満たした。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で５日間インキュベートした。
【０１２０】
インキュベーション後、プレートを１５００ｒｐｍで４分間遠心し、次いで上清を収集した。続いて、製造元のプロトコルに従ってＩＬ−１７Ａ  ＡｌｐｈａＬＩＳＡキット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を使用し、上清中のＩＬ−１７Ａのレベルを決定した。
【０１２１】
試験化合物についての最大半数阻害濃度（ＩＣ５０）値を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＧｒａｐｈＰａｄ  ｓｏｆｔｗａｒｅ社）を使用して、ＩＬ−１７Ａシグナルから計算した。
【０１２２】
【表１】
0006955563.tif 000017
【０１２３】
実施例７  −ｈＥＲＧチャネルプロトコル
本出願の実施例２〜３及び国際特許出願第ＷＯ２０１５／０８２５３３号に記載の実施例３７を、ｈＥＲＧ（ヒトエーテル−ア−ゴ−ゴ−関連遺伝子）カリウムチャネルに対してインビトロで試験した。アッセイ手順を以下に記載し、結果を表２に示す。
【０１２４】
アッセイの詳細な説明
ｈＥＲＧチャンネルを安定的に発現している凍結ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞を解凍し、ペトリ皿のカバーガラスに播種した。細胞を、１０％ウシ胎児血清、ペニシリン１００ＩＵ／ｍＬ、ストレプトマイシン１００μｇ／ｍＬ及びＧ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）５００μｇ／ｍＬを補充したＨＡＭのＦ−１２培地中、３７℃下、空気９５％／ＣＯ２５％の雰囲気で培養した。ＣＨＯ細胞を１〜５日間培養した後、パッチクランプの準備をした。Ａｘｏｐａｔｃｈ  ２００Ｂ増幅器（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ  ＣＡ）を用いるホールセルパッチクランプ法を用いて、ｈＥＲＧ電流を室温で記録した。電極（１〜３ＭΩ抵抗）をＴＷ１５０Ｆガラス毛細管（Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）から作り、以下（ｍＭで）のアスパラギン酸カリウム  １２０、ＫＣｌ  ２０、Ｎａ２ＡＴＰ  ４、ＨＥＰＥＳ  ５；ＭｇＣｌ２  １を含む溶液で満たし、ＫＯＨでｐＨ７．２に調整した。外部記録溶液は以下（ｍＭで）のＮａＣｌ  １３０、ＫＣｌ  ４、酢酸ナトリウム２．８、ＭｇＣｌ２  １；ＨＥＰＥＳ、１０、グルコース１０、ＣａＣｌ２  １を含み、ＮａＯＨでｐＨ７．４に調整した。ｈＥＲＧ電流は、＋２０ｍＶへの２秒の脱分極パルス、続いて０．１Ｈｚの周波数で−８０ｍＶの保持電位から−４０ｍＶへの１．６秒の再分極によって誘発された。ｐＣＬＡＭＰソフトウェアスイート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社）を使用して電流を分析した。データの非線形最小二乗当てはめによって−４０ｍＶステップの間のピークテール電流を用いて薬物のＩＣ５０値を得た（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）。
【０１２５】
実施例８  −ＣＹＰ３Ａ４阻害プロトコル
本出願の実施例２〜３及び国際特許出願ＷＯ２０１５／０８２５３３号からの実施例３７を、２つの異なるプローブであるミダゾラム及びテストステロンを用いてＣＹＰ３Ａ４阻害について試験した。
【０１２６】
アッセイ手順を以下に記載し、そして結果を表２に示す。
アッセイの詳細な説明
選択した濃度でＤＭＳＯに溶解した試験化合物を、ヒト肝ミクロソーム（０．１ｍｇ／ｍＬ）、ＭｇＣｌ２（６ｍＭ）及びＥＤＴＡ（０．５ｍＭ）ならびにＣＹＰ３Ａプローブ基質、ミダゾラムのいずれか（３μＭ）を含有するリン酸緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）に加えた。試験化合物を濃度１、３、１０及び３０μＭで評価し、インキュベーション中の最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。１ＭのＮＡＤＰＨを加えた後、混合物を３７℃で１０分間（ミダゾラム）又は３０分間（テストステロン）インキュベートした。内部標準を含む冷ＣＨ３ＣＮを添加することにより、反応を停止させ、遠心分離し、ＣＹＰ３Ａ特異的代謝産物（１’−ヒドロキシミダゾラム又は６−β−ヒドロキシテストステロンの何れか）を形成し、これをＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって定量した。各試験濃度における相対的なＣＹＰ３Ａの活性を計算し、ＸＬｆｉｔを用いてＩＣ５０値を決定した。
【０１２７】
【表２】
0006955563.tif 000018
【０１２８】
本出願は、実施例２及び３に記載の新規なＲＯＲγモジュレータ化合物を提供するものであり、これは、ＲＯＲγ活性を阻害し、かつ、そのために、先行技術の化合物（国際特許出願ＷＯ２０１５／０８２５３３号からの実施例３７）と比較したとき、ｈＥＲＧ阻害及びＣＹＰ３Ａ４阻害の両方を減少させる。従って、（式ＩＡ）及び（式ＩＢ）の化合物は、ＲＯＲγ調節活性を維持しながら、心臓の安全性の問題及び薬物間相互作用に関連する潜在的な有害な毒性の効果のリスクをそれぞれ制限すると思われる。
【０１２９】
実施例９、１０、１１、１２及び１３：プロドラッグの合成
実施例９  （式ＶＩ）の化合物：２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］−Ｎ−［４−［１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
【化１６】
0006955563.tif 000019
【０１３０】
工程１
【化１７】
0006955563.tif 000020
１００ｍＬの三口丸底フラスコ中、アルゴン下で、過酸化水素（２．６４ｍＬ、２５．８８ｍｍｏｌ、水中３０％）を、１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロプロパン−２−オール（１２．５３ｍＬ、１１３．８４ｍｍｏｌ）中の、２−［４−（シクロプロピルメチルスルファニル）フェニル］酢酸エチル（３ｇ、１１．９８ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、続いて食塩水（１０ｍＬ）を加えた。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残渣をＡＣＮ（１５ｍＬ）に入れ、減圧下で濃縮し、そして高真空下で乾燥させて、３．１６ｇのエチル２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］アセテートを白色の固体として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２６７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ７．６２（ｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．０３Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｓ，２Ｈ），２．７２−２．８７（ｍ，２Ｈ），１．１８（ｔ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ，３Ｈ），０．８２−０．９６（ｍ，１Ｈ），０．４５−０．６１（ｍ，２Ｈ），０．１９−０．３６（ｍ，２Ｈ）．
【０１３１】
工程２
【化１８】
0006955563.tif 000021
１００ｍＬ丸底フラスコ中で、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（５．４１ｍＬ、５．４１ｍｍｏｌ）を、２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］酢酸エチル（４００ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２５ｍＬ）溶液に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次に真空下で濃縮した。残渣を水に取り、次いでｐＨ１に達するまで１Ｎ  ＨＣｌ水溶液で酸性化した。水層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮して、２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］酢酸３０６ｍｇを白色の固体として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２３９．１［Ｍ＋Ｈ］＋．  
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ７．６１（ｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｓ，２Ｈ），２．７１−２．８９（ｍ，２Ｈ），０．８５−０．９６（ｍ，１Ｈ），０．４６−０．６４（ｍ，２Ｈ），０．２０−０．３６（ｍ，２Ｈ）．
【０１３２】
工程３
【化１９】
0006955563.tif 000022
２−（４−アミノフェニル）−１，１，１，３，３−ペンタフルオロ−プロパン−２−オール（１５１．８ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピル−プロパン−２−アミン（０．３３ｍＬ、１．８９ｍｍｏｌ）及び２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスフィナン２，４，６−三酸化物（ＤＣＭ中５０％、０．４８ｍＬ、０．８２ｍｍｏｌ、滴下）を、アルゴン下、氷浴中に予め置かれていた２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］酢酸（１５０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２５ｍＬ）中の溶液に添加した。。３０分間撹拌した後、氷浴を取り外し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＤＣＭ及び水を添加し、そして水層をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層をＮａＨＣＯ３の飽和水溶液、０．５Ｎ  ＨＣｌ水溶液、水、そして最後にブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮した。溶離剤としてＭｅＯＨ中の９８％〜９５％のＤＣＭを使用するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより残渣を精製し、２−［４−（シクロプロピルメチルスルフィニル）フェニル］−Ｎ−［４−［１−（ジフルオロメチル）］−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド２０６ｍｇをオフホワイトの泡状として得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．４５−７．７９（ｍ，９Ｈ），６．３８−６．８８（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．６７−２．９０（ｍ，２Ｈ），０．７５−０．９６（ｍ，１Ｈ），０．４５−０．６２（ｍ，２Ｈ），０．１４−０．３７（ｍ，２Ｈ）．
【０１３３】
実施例１０、１１、１２及び１３：
立体異性体ＶＩＡ及びＶＩＤを、カラムＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ  ２０μｍ、３５０×７６．５ｍｍ及び移動相としての、ヘプタン：ＥｔＯＨが５０：５０、４００ｍＬ／分を用い、２５４ｎｍでのＵＶ検出を使用するキラルクロマトグラフィーにより、ＶＩから分離した。
ヘプタン：ＥｔＯＨが５０：５０の１００ｍＬ中の、ラセミ体１６０ｍｇから出発して、その溶液の注入を１回行ない、濃縮後に、実施例１０（最初に溶出させるエナンチオマー）３４ｍｇ、実施例１３（最後に溶出させるエナンチオマー）３５ｍｇ、及び実施例１１及び１２の混合物７０ｍｇを得た。
立体異性体ＶＩＢ及びＶＩＣを、対応する混合物から、カラムセルロース−４５μｍ、２５０×４．６ｍｍ及び移動相、ヘプタン：ＥｔＯＨが７０：３０、４５ｍＬ／分を用いた２５４ｎｍでのＵＶ検出から、キラルクロマトグラフィーにより分離した。
ＥｔＯＨ８ｍＬ中の混合物７０ｍｇから出発して、その溶液の注入を４回行ない、濃縮後に、ＶＩＢ（最初に溶出させるエナンチオマー）２９ｍｇ、及びＶＩＣ３０ｍｇを得た。
【０１３４】
実施例１０−（式ＶＩＡ）の化合物：（−）−２−４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
絶対配置は任意に割り当てた。
【化２０】
0006955563.tif 000023
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６２．２［Ｍ＋Ｈ］＋．  
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６４（ｔ，Ｊ＝５３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝６．９ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），２，７４（ｄｄ，Ｊ＝７．７ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），０．８９（ｍ，１Ｈ），０．４９a  ０．５８（ｍ，２Ｈ），０．２３a  ０．３３（ｍ，２Ｈ）．
旋光度：［α］Ｄ２０＝−６３．６°（ｃ＝３．８ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【０１３５】
実施例１１−（式ＶＩＢ）の化合物：（−）−２−［４−［（Ｓ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２］−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
絶対配置は任意に割り当てた。
【化２１】
0006955563.tif 000024
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６２．２  ［Ｍ＋Ｈ］＋．  
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６４（ｔ，Ｊ＝５３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝６．９ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．７ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），０．８９（ｍ，１Ｈ），０．４９a  ０．５８（ｍ，２Ｈ），０．２３a  ０．３３（ｍ，２Ｈ）．
旋光度：［α］Ｄ２０＝−８３．１°（ｃ＝４．２ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【０１３６】
実施例１２−（式ＶＩＣ）の化合物：（＋）−２−［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｒ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２］−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
絶対配置は任意に割り当てた。
【化２２】
0006955563.tif 000025
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝９，０Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６４（ｔ，Ｊ＝５３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝６．９ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．７ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），０．８９（ｍ，１Ｈ），０．４９a  ０．５８（ｍ，２Ｈ），０．２３a  ０．３３（ｍ，２Ｈ）．
旋光度：［α］Ｄ２０＝＋８５．６°（ｃ＝５．８ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【０１３７】
実施例１３  −（式ＶＩＤ）の化合物：（＋）−２−［４−［（Ｒ）−シクロプロピルメチルスルフィニル］フェニル］−Ｎ−［４−［（１Ｓ）−１−（ジフルオロメチル）−２，２，２］−トリフルオロ−１−ヒドロキシ−エチル］フェニル］アセトアミド。
絶対配置は任意に割り当てた。
【化２３】
0006955563.tif 000026
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ４６２．０  ［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６４（ｔ，Ｊ＝５３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝６．９ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．７ｅｔ  １３．３Ｈｚ，１Ｈ），０．８９（ｍ，１Ｈ），０．４９a  ０．５８（ｍ，２Ｈ），０．２３a  ０．３３（ｍ，２Ｈ）．
旋光度：［α］Ｄ２０＝＋６０．９°（ｃ＝３．８ｍｇ／ｍＬ，ＤＭＳＯ）．
【０１３８】
実施例１４−水性平衡溶解度
サンプル調製
試験した化合物を水性リン酸緩衝液（ｐＨ＝７．４で５０ｍＭ）中の目標濃度２ｍｇ／ｍＬに正確に秤量した。溶液を室温で一晩振とうし（ロックンロールシェーカー）、光から保護した（約２４時間）。溶液を板状フィルター装置（一体型ＰＴＦＥフィルターを有するマイクロプレートＭｉｌｌｉｐｏｒｅ「Ｓｏｌｖｉｎｅｒｔ」；０．４５μｍ）中で濾過し、その濾液をＬＣ／ＵＶ法により投与した。
【０１３９】
参考（標準）調製
試験化合物を、ＤＭＳＯ中０．１ｍｇ／ｍＬの目標濃度に正確に秤量した。溶液を室温で超音波処理し、光から保護した。参照溶液をＬＣ／ＵＶ法により投与し、可溶化画分のｐＨを測定した。
【０１４０】
【表３】
0006955563.tif 000027