(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
0006934264.tif 000015
を有する化合物。
【請求項２】
式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を溶媒中で窒素雰囲気下にて反応させて式（Ｉ）の化合物を得るステップ：
【化２】
0006934264.tif 000016
を含む、請求項１に記載の化合物の調製方法。
【請求項３】
式（ＩＩ）の前記化合物と式（ＩＩＩ）の前記化合物の反応が、
式（ＩＩ）の前記化合物と式（ＩＩＩ）の前記化合物を反応器中に２．２：１〜２．５：１のモル比で入れ、反応混合物を形成するステップ，
窒素雰囲気下で有機溶媒及び触媒を前記反応混合物に加えるステップ，
前記反応混合物を超音波処理下で２５〜６０℃で１〜３時間加熱するステップ，
前記反応混合物を減圧下で濃縮して粗生成物を得るステップ，及び
酢酸エチルと石油エーテル溶媒との混合物での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーを用いて前記粗生成物を精製し、式（Ｉ）の前記化合物を得るステップ、を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記有機溶媒が、トルエン、アセトニトリル又はテトラヒドロフランであり，式（ＩＩ）の前記化合物と式（ＩＩＩ）の前記化合物とのモル比が、２．２：１であり，前記触媒がトリエチルアミン又は４−ジメチルアミノピリジンであり，前記反応混合物が、６０℃で加熱され，前記反応混合物が、２時間加熱され，石油エーテルと酢酸エチルとの前記混合物が、６：１の体積比を有する、請求項３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品化学領域、より詳細には抗酸化活性を有するヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート及びその調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
三大栄養素の１つとしての油又は脂肪は、日常の食事で不可欠な部分である。油及び脂肪の酸化は、油の品質に影響を及ぼす重要な要素である。油及び脂肪の自動酸化は、直接照明や触媒無しで生じる室温下での活性オレフィン含有基質（不飽和油など）と大気中の酸素との自発的な酸化反応である。酸化により生み出される産物は、食用油及び脂肪の風味、色、食感に逆効果を及ぼし、結果として油及び脂肪の保存可能期間の短縮及び栄養価の低下がもたらされる。油及び脂肪の酸化は、膜組織、酵素及びタンパク質にダメージを与え、加齢に伴う多くの疾患や発がん性ももたらし、ヒトの健康に有害である。従って、食物及び料理用油（ｆａｔｓ）における油及び脂肪の酸化を防止することは、ヒトの健康にとって大きな懸念事項であり、油の酸化を防ぐ最も一般的な方法は、抗酸化物質を添加することである。
【０００３】
式（ＩＩ）の化合物であるヒドロキシチロソール（４−（２−ヒドロキシエチル）−１，２−ベンゼンジオールは、インビトロで抗酸化特性を有するフェノール植物化学物質の一種であるフェニルエタノイドである。本来、ヒドロキシチロソールは、そのエレノール酸エステルであるオレウロペインの形態で及び特に分解後のその単純な形態で、オリーブの葉及びオリーブオイルにおいて見出される。
【化１】
0006934264.tif 000002
【０００４】
ｐ−フェニレンジイソシアネート（１，４−フェニレンジイソシアネート、ＰＰＤＩ）は、対称性芳香族ジイソシアネートである。ＰＰＤＩは、鎖延長剤と反応し、高い凝集エネルギー及び良好な熱抵抗を有するポリウレタンエラストマーを合成する。ポリウレタンＰＵＥエラストマーは、良好な硬度、温度耐性及び動的性能、耐摩耗性、靭性、耐溶剤性、並びに耐熱性及び耐湿性を有し、有望な高機能材料である。
【化２】
0006934264.tif 000003
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明において、ｐ−フェニレンジイソシアネートは、ヒドロキシチロソール構造により修飾され、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートが得られる一方、ｐ−フェニレンジイソシアネートの毒性基は除去される。ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートは、抗酸化製品の分野において、優れた抗酸化活性及び高い医学的研究及び応用価値を有する。
【０００６】
（発明の概要）
１つの実施形態において、本発明は、以下の式（Ｉ）を有する化合物を提供する。
【化３】
0006934264.tif 000004
【０００７】
他の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を調製する方法を提供する。本方法は、式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ることを含む。
【化４】
0006934264.tif 000005
【０００８】
他の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下のステップを含む：式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応器中に２．２：１〜２．５：１のモル比で入れて反応混合物を形成するステップ；窒素雰囲気下で有機溶媒及び触媒を前記反応混合物に加えるステップ；前記反応混合物を超音波処理下で２５〜６０℃で１〜３時間加熱するステップ；前記反応混合物を減圧下で濃縮して粗生成物を得るステップ；及び酢酸エチルと石油エーテル溶媒との混合物での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーを用いて前記粗生成物を精製し、化学式（Ｉ）の化合物を得るステップ。
【０００９】
他の実施形態において、有機溶媒は、トルエン、アセトニトリル又はテトラヒドロフランである。
【００１０】
他の実施形態において、有機溶媒は、トルエンである。
【００１１】
他の実施形態において、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物のモル比は、２．２：１である。
【００１２】
他の実施形態において、触媒は、トリエチルアミン又は４−ジメチルアミノピリジンである。
【００１３】
他の実施形態において、触媒は、トリエチルアミンである。
【００１４】
他の実施形態において、反応混合物は、６０℃で加熱される。
【００１５】
他の実施形態において、反応混合物は、２時間加熱される。
【００１６】
他の実施形態において、溶離液は、酢酸エチル：石油エーテル＝１：６である。
【００１７】
上述の一般的な説明及び以下に述べる詳細な説明はいずれも具体例であって、例示を目的としており、特許請求されている本発明の更なる説明の提供を意図するものであることが理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
添付図面は、本発明の更なる理解を提供するために含めたものであり、同図面は、本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成して本発明の実施形態を図示し、発明の詳細な説明と合まって、本発明の原理を説明する役割を果す。
図面において：
【図１】図１は、ビタミンＣ（Ｖｃ）、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（Ａ）、及びヒドロキシチロソール（Ｂ）のＤＰＰＨラジカル捕捉活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
（図示された実施形態の詳細な説明）
本発明の実施形態を詳細に参照し、その実施例は添付図面で示される。以下の実施例は本発明を示すが、本発明は、以下の実施例に限定されない。
【００２０】
実施例１
【００２１】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化５】
0006934264.tif 000006
【００２２】
１０５．９ｍｇ(０．６８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び４２μＬ（０．３０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのトルエンに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのトルエン中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を６０℃で２時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、１０６．３ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：７３．２１％）。
【００２３】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：９．３１（２Ｈ，ｂｒ）,７．７１（４Ｈ，ｓ），６．９４（２Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｄ），６．７７（２Ｈ，ｄ），５．３２（４Ｈ，ｓ）,４．５０（４Ｈ，ｔ），２．９１（４Ｈ， t)；１３Ｃ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１５４．９，１４６．４, １４４．７，１３４．８，１３２．２，１２２．４，１２１．９，１１７．６，６３．９，３５．６；（Ｍ＋Ｈ）＋に対するＭＳ（ＥＳＩ）： ４６９．５。
【００２４】
実施例２
【００２５】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化６】
0006934264.tif 000007
【００２６】
１２０．３ｍｇ(０．７８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）を１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのアセトニトリル中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を６０℃で１時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、８２．５ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：５６．８４％）。
【００２７】
実施例３
【００２８】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化７】
0006934264.tif 000008
【００２９】
１０５．９ｍｇ(０．６８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び４２μＬ（０．３０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのテトラヒドロフラン中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を２５℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、８６．２ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：５９．３７％）。
【００３０】
実施例４
【００３１】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化８】
0006934264.tif 000009
【００３２】
１２０．３ｍｇ(０．７８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰを１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのトルエンに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのトルエン中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を２５℃で２時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、９０．２ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：６２．１０％）。
【００３３】
実施例５
【００３４】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化９】
0006934264.tif 000010
【００３５】
１０５．９ｍｇ(０．６８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び４２μＬ（０．３０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのアセトニトリル中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、９９．５ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：６８．５５％）。
【００３６】
実施例６
【００３７】
化合物ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（式（Ｉ）の化合物であるビス（３，４−ジヒドロキシフェネチル）１，４−フェニレンジカルバメート）の調製
【化１０】
0006934264.tif 000011
【００３８】
１２０．３ｍｇ(０．７８ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰを１００ｍＬ反応器中で５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、窒素雰囲気下で反応混合物を形成した。５ｍＬのテトラヒドロフラン中の５０ｍｇ(０．３１ｍｍｏｌ)の１，４−フェニレンジイソシアネートを分液漏斗で反応液にゆっくり滴下した。次いで、反応混合物を２５℃で１時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として石油エーテル：酢酸エチル＝６：１での溶離によりシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、６７．１ｍｇのヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートを得た（収率：４６．１９％）。
【００３９】
実施例７
【００４０】
ＤＰＰＨラジカル捕捉活性検査により測定されたヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートの抗酸化活性
【００４１】
２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）は、安定した有機ラジカルから成る有機化合物である。ＤＰＰＨ分子において、ベンゼン環の複数の電子吸引性‐ＮＯ２及び大きいπ結合の存在により、窒素フリーラジカルは安定する。そのメタノール溶液は紫色であり、５１７ｎｍの最大吸収ピークを有する。抗酸化物質を添加後、ＤＰＰＨは、自由電子と対になる電子を捕捉し、紫色は色あせて黄色い物質となる。５１７ｎｍの吸収波長は消え、色あせの程度は、ＤＰＰＨが捕捉する電子数に量的に関連する。この原理に基づき、分光光度計を用いてＤＰＰＨラジカル及び試料溶液の吸光度の変化を検出し、試料が水素原子を提供してフリーラジカルを捕捉する能力を測定できる。
【００４２】
ＤＰＰＨ溶液の調製：２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）の正確な量の測定し、トルエン中に溶解し０．２ｍｍｏｌ／Ｌ のＤＰＰＨ溶液を調製し、０℃で暗所にて保存する。
【００４３】
試験溶液の調製：Ｖｃ（陽性対照），ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（試料）及びヒドロキシチロソール（対照）。試料溶液をトルエンで勾配希釈に付し、２組の対照を一定量のトルエンで試験管中にて別々に溶解し、試料として同じ濃度勾配を調製した。対照溶液の対応する２群を得た（勾配の設定を表１に示す。）
【表１】
0006934264.tif 000012
【００４４】
具体的なステップ：
【００４５】
試料液体吸収測定：２ｍＬの試料溶液を採取し（表１Ｖｃ、Ｂ）、濃度が２＊１０−４ｍｏＬ／ＬのＤＰＰＨ溶液を２ｍＬ加え、混合し、暗所室温で３０分間反応させ、トルエンでゼロまで調整し、５１７ｎｍで測定する。２ｍＬの試料溶液と混合した２ｍＬのトルエンの吸光度Ａｊと２ｍＬのトルエンと混合した２ｍＬのＤＰＰＨ溶液の吸光度Ａｏと同時に吸光度Ａｉを測定した（実験結果を表２に示す）。
【表２】
0006934264.tif 000013
【００４６】
クリアランスの計算: クリアランス率（％）＝［１−（Ａｉ−Ａｊ）/Ａｏ］＊１００％
【表３】
0006934264.tif 000014
【００４７】
表１〜３及び図１の結果より、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートは、濃度に依存してＤＰＰＨに対して有意な捕捉効果を有する。そのＤＰＰＨクリアランス率は、１０．４５％（１．７６ｐｐｍ）〜 ９０．３７％（９１５．２０ｐｐｍ） である。ヒドロキシチロソール（Ｂ）単独と比較して、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（Ａ）は、同じ濃度ではるかに良好なＤＰＰＨラジカル捕捉活性を有する。また、陽性対照Ｖｃ群と比較して、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレート（Ａ）は、同じ濃度で同様のＤＰＰＨラジカル捕捉活性を有する。これらの実験結果は、ヒドロキシチロソールｐ−フェニレンジカルボキシレートが優れた抗酸化活性及び良好な応用展望を有することを示す。
【図１】
0006934264.tif 000017