(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
漢方薬の成分比率は、
質量部に従って、柴胡２０〜６０、当帰２０〜６０、炒白朮２０〜６０、白芍２０〜６０、薄荷８〜２０、炙甘草８〜２０であって、
調製方法は、
１）前記の成分薬材に６−１０倍の重量の６０〜９０％のエタノールを添加し、２回抽出し、毎回１−３時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮してアルコール抽出クリアペーストを得るステップと、
２）薬滓に６−１０倍の重量の水に添加し、２回抽出し、毎回１−３時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して水抽出クリアペーストを得た後、アルコール含量が６０〜８０％に達するまでにエタノールを水抽出ペーストに添加し、２４時間放置し、上澄液を取り、クリアペーストに濃縮するステップと、
３）クリアペーストとアルコール抽出クリアペーストを合わせ、均一に混合した後、濃厚ペーストに濃縮し、マイクロ波減圧乾燥し、粉砕して８０メッシュ篩にかけ、漢方薬エキスを得るステップとを含むことを特徴とする、抗うつ効果を有する漢方薬エキス。
【請求項２】
前記漢方薬の成分比率は、
質量部に従って、柴胡３０、当帰３０、炒白朮３０、白芍３０、薄荷１０、炙甘草１５であることを特徴とする、請求項１に記載の漢方薬エキス。
【請求項３】
ステップ１）において、
添加する前記エタノールの重量は薬材の重量の８倍であり、エタノール濃度は７５％であり、毎回の抽出時間は２時間であることを特徴とする、請求項１に記載の漢方薬エキス。
【請求項４】
ステップ２）において、
添加する前記水の重量は薬材の重量の８倍であり、毎回の抽出時間は２時間であることを特徴とする、請求項１に記載の漢方薬エキス。
【請求項５】
ステップ３）において、
エタノールを水抽出クリアペーストに添加した後、アルコール含量が７０％であることを特徴とする、請求項１に記載の漢方薬エキス。
【請求項６】
アルコール抽出クリアペースト、水抽出クリアペースト、クリアペーストの密度は１．０８〜１．１０に制御され、濃厚ペーストの密度は１．２４〜１．２６に制御されることを特徴とする請求項１に記載の漢方薬エキス。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の漢方薬エキスを有効成分とする、うつ病治療用医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかに記載の漢方薬エキスを含む漢方薬顆粒剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、漢方薬エキスの分野に属し、特には、うつ病に効果がする漢方薬エキス及びその調製方法と使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、うつ病の治療は、主に、薬物治療、心理治療及び物理治療の三つの方法があるが、その中でも化学薬物による治療が一番効果を示す。現在発売されている抗うつ薬は、種類が限定され、メカニズムが単調で、有効率が低くて７０％以下である。そして、うつ病を治療する際の患者への便秘や性欲の低下などの副作用が大きな障害となっている。臨床上、西洋薬によるうつ病を治療するときには、治療有効率、作用メカニズム、用量選択、副作用、薬物的な相互作用などの要素を総合的に考慮しなければならない。しかも、双極性多極性うつ病、１種あるいは多種の疾病と共存する複雑なうつ病に対して、理想的な改善が得られないのは事実である。
【０００３】
既存の西洋薬の欠陥と市場需要の緊迫性から、国内と国外の学者は漢方薬エキスに注目している。  漢方薬に基づき明確な抗うつ薬の効果を有する薬剤開発にあたり、独特な薬効の特徴を持つこと、新型の抗うつ作用メカニズムを持つこと、特殊な病状に対する効果があること、新しい適応症に治療効果があること、副作用が相対的に小さいこと、多標的、多効果などの特徴を備える新型の抗うつ薬を開発することは、将来的な抗うつ薬の開発の一般的な傾向である。
【０００４】
逍遥散は疏肝解鬱の古典漢方薬における有名な処方である。前期、本課題グループが有する二つの登録特許（201010110283.7と201110084715.6）は、酢酸エチルと石油エーテルによる抽出方法を採用し、逍遥散が明確な抗うつ効果を持つことが判明したが、工業化生産には潜在的な危険が多くあり、プロセスの制御性が低く、一方、逍遥散の元の処方には薬用材料種類が多く、また服用量が多く、品質のコントロールが困難であった。そこで、本発明は、逍遥散に対する研究に基づき、処方がより簡単で、プロセスがパイロット生産により適切なアルコール水抽出法で漢方薬エキスを調製し、その抗うつ効果の特徴を研究した。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の目的は、処方が簡単で、プロセスが科学的かつ合理的な、うつ病に伴う症候群の複数の症状を顕著に改善する薬力学的効果の特性を有する、抗うつ効果を有する漢方薬エキス及びその調製方法を提供することである。
【０００６】
本発明に係る抗うつ効果を有する漢方薬エキスは、
漢方薬の成分比率は、
質量比に従って、柴胡２０〜６０、当帰２０〜６０、炒白朮２０〜６０、白芍２０〜６０、薄荷８〜２０、炙甘草８〜２０であって、
調製方法は、
１）前記成分薬材に６−１０倍の重量の６０〜９０％のエタノールを添加し、抽出は２回し、毎回は１−３時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮してアルコール抽出クリアペースト(清膏)を得るステップと、
２）薬滓に６−１０倍の重量の水に添加し、抽出は２回し、毎回は１−３時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して水抽出クリアペーストを得た後、アルコール含量が６０〜８０％に達するようにエタノールを水抽出クリアペーストに添加し、２４時間に放置し、上澄液を取り、クリアペーストに濃縮するステップと、
３）クリアペーストとアルコール抽出クリアペーストを合わせ、均一に混合した後、濃厚ペースト（稠膏）に濃縮し、マイクロ波で減圧乾燥し、粉砕して８０メッシュ篩にかけ、漢方薬エキスを得るステップとを含むことを特徴とする。
【０００７】
好ましくは、前記漢方薬の成分比率は、質量比に従って、柴胡３０、当帰３０、炒白朮３０、白芍３０、薄荷１０、炙甘草１５である。
【０００８】
ステップ１）において、添加する前記エタノールの重量は薬材の重量の８倍であり、エタノール濃度は７５％であり、毎回の抽出時間は２時間である。
【０００９】
ステップ２）において、添加する前記水の重量は薬材の重量の８倍であり、毎回の抽出時間は２時間である。
【００１０】
ステップ３）において、エタノールを水抽出クリアペーストに添加した後、アルコールの濃度が７０％である。
【００１１】
前記アルコール抽出クリアペースト、水抽出クリアペースト、クリアペーストの密度は１．０８〜１．１０であり、濃厚ペーストの密度は１．２４〜１．２６である。
【００１２】
実験により、前記のような漢方薬エキスは、うつ病に顕著な効果があることが証明され、うつ病を治療する薬物の調製において使用できる。
【００１３】
本発明が提供する漢方薬顆粒剤は、上記のような漢方薬エキスや補助材料などを含む。
【００１４】
本発明は以下の利点を有する。
１．本発明が提供している処方は、逍遥散と比較してより簡単で、服用量がより少なく、品質がさらに制御可能で、薬理活性が抗うつ西洋薬であるベンラファキシン、抗うつ漢方薬である舒肝解鬱及び逍遥散と同等又はそれ以上の効果を有する。
２．プロセスがより合理的かつ安全で、パイロット工業化生産により実現しやすいアルコール水抽出法を採用し、最大限にかつより全面的に有効成分を抽出し、不純物を除去し、ペーストの収率を減らすことから、患者の服用量が減少する。
３．臨床でよく使用される抗うつ西洋薬のベンラファキシンと比較して、抗うつ作用は相当である。そして、（１）ベンラファキシンによる便秘、胃腸の不調及び性欲の低下の副作用がない、（２）ラットが患ったＣＵＭＳうつ病に伴う学習及び記憶能力の低下と不安情緒を改善する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図1は、本発明に係る漢方薬エキスの調製プロセスのフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明をより詳細に説明するために、以下の具体的な実施形態を示すが、本発明を説明するものにすぎない、本発明の保護範囲を限定するためのものではない。
【実施例】
【００１７】
［実施例１］
【００１８】
質量比に従って、柴胡３０部、当帰３０部、炒白朮３０部、白芍３０部、薄荷１０部、炙甘草１５部を量り、８倍の重量の７５％エタノールを添加し、抽出は２回し、毎回は２時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．０９であるアルコール抽出クリアペーストを得た。薬滓に８倍の重量の水に添加し、２時間ごとに２回抽出し、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．０９である水抽出クリアペーストを得た。アルコール含量が７０％に達するようにエタノールを水抽出クリアペーストに添加し、２４時間（４℃）を静置し、上澄液を取り、相対密度が１．０８であるクリアペーストに濃縮した。このクリアペーストをアルコール抽出クリアペーストと合わせ、均一に混合した後、相対密度が１．２５である濃厚ペーストに濃縮し、マイクロ波で減圧乾燥し、乾燥エキスを得、粉砕して８０メッシュ篩にかけ、漢方薬エキスを得た。
【００１９】
［実施例２］
質量部に従って、柴胡３０部、当帰３０部、炒白朮２０部、白芍２０部、薄荷１０部、炙甘草１５部を量り、８倍の重量の６０％のエタノールを添加し、２回抽出し、毎回２時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．０８であるアルコール抽出クリアペーストを得た。薬滓に８倍の重量の水に添加し、２時間ごとに２回抽出し、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．０８である水抽出クリアペーストを得た。アルコール含量が６０％に達するようにエタノールを水抽出クリアペーストに添加し、２４時間（４℃）放置し、上澄液を取り、相対密度が１．０８であるクリアペーストに濃縮した。このクリアペーストをアルコール抽出クリアペーストと合わせ、均一に混合した後、相対密度が１．２４である濃厚ペーストに濃縮し、マイクロ波減圧乾燥し、乾燥エキスを得、粉砕して８０メッシュ篩にかけ、漢方薬エキスを得た。
【００２０】
［実施例３］
質量部に従って、柴胡３０部、当帰３０部、炒白朮３０部、白芍２０部、薄荷１０部、炙甘草１５部を量り、８倍の重量の９０％のエタノールを添加し、２回抽出し、毎回２時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．１０であるアルコール抽出クリアペーストを得る。薬滓に８倍の重量の水に添加し、２回抽出し、毎回２時間であり、濾過し、濾液を合わせ、濃縮して相対密度が１．１０である水抽出クリアペーストを得た。アルコール含量が８０％に達するまでにエタノールを水抽出クリアペーストに添加し、２４時間（４℃）放置し、上澄液を取り、相対密度が１．１０であるクリアペーストに濃縮した。アルコール抽出クリアペーストと合わせ、均一に混合した後、相対密度が１．２６である濃厚ペーストに濃縮し、マイクロ波減圧乾燥し、乾燥エキスを得、粉砕して８０メッシュ篩にかけ、漢方薬エキスを得た。
【００２１】
［実施例４］抗うつ効果試験
【００２２】
４．１  実験動物
ＳＤ成年オス健康ラット（中国北京維通利華実験動物技術有限公司、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（京）２０１４−００１２）
【００２３】
４．２  実験薬品と薬材
塩酸ベンラファキシン（中国成都康弘薬業集団股分有限公司、規格：２５ｍｇ／錠、中国医薬品承認番号：国薬準字Ｈ２００７０２６９）
舒肝解鬱カプセル（中国成都康弘薬業集団股分有限公司、規格：０．３６ｇ／錠、中国医薬品承認番号：国薬準字Ｚ２００８０５８０）
実施例１において調製した漢方薬エキスは、その中の柴胡、当帰、炒白朮、白芍、炙甘草と薄荷のいずれも中国山西省華陽薬業有限公司で購入され、中国山西大学漢方薬現代研究中心の主任の秦雪梅（ＣＨＥＮ  ＸＵＥＭＥＩ）教授によって規格品と鑑定されたものである。
【００２４】
４．３  動物のグルーピング及び投与
ラットは環境を適応させるための飼育を１週間行った、その間に糖水トレーニングを行い、体重によってラットをランダムに７つの群に分け、各群１０匹とする。
（１）ブランク対照群（Ｋ）
（２）モデルグループ対照群（Ｍ）
（３）ベンラファキシン群（３５ｍｇ／ｋｇ）（Ｙ）
（４）舒肝解鬱群（１５０ｍｇ／ｋｇ）（Ｓ）
（５）漢方薬エキス高用量群（１６．６ｇ生薬／ｋｇ）（Ｇ）
（６）漢方薬エキス中用量群（８．３ｇ生薬／ｋｇ）（Ｚ）
（７）漢方薬エキス低用量群（４．２ｇ生薬／ｋｇ）（Ｄ）
すべての薬物は、いずれも蒸留水で溶解し、各群動物は、体重によって毎日1回強制投与を行う（１ｍｌ／１００ｇ）。
【００２５】
４．４  モデル構築
刺激因子には、禁食、禁水、４℃の氷水での水泳、５０℃の熱刺激、尾挟み、間欠足裏電撃、束縛、超音波による刺激、昼夜逆転が含まれる。毎日ランダムに一種の刺激を与え、刺激ごとに２−３回使う。ブランク対照群を除く、残りの各群はいずれも単一のケージで飼育し、モデリングプロセスを実行し、モデリング周期は２８日である。モデリングの開始後、同時に薬を強制投与し、薬物群には、対応する濃度の薬物溶液を投与し、モデルグループとブランク対照群には、同じ体積の蒸留水を投与した。
【００２６】
４．５  測定項目
体重：実験の０、７、１４、２１、２８日目にラットの体重を測定した。
糖水好み率：モデリング終了後、ラットの１％糖水消耗量を測定し、糖水好み率を計算した。
オープンフィールド試験（ｏｐｅｎ  ｆｉｅｌｄ  ｔｅｓｔ）：ラットをオープンフィールドボックスに５分間入れ、最後の４分間以内にラットがグリッドを通過した回数及び直立した回数を記録した。
【００２７】
４．６  実験結果
表１、２、３により、漢方薬エキスがＣＵＭＳラットの体重、糖水好み率とオープンフィールド試験などの項目に与える影響がわかる。漢方薬エキスは、ＣＵＭＳモデリングによるストレスによって引き起こされたラットの体重増加が遅くなること、オープンフィールド実験においての動きが減少すること、及びショ糖の甘味に対する好みが低下することを改善し、漢方薬エキスは良好な抗うつ効果を有し、その薬理活性は市販の抗うつ西洋薬のビンラファシン及び抗うつ漢方薬の舒肝解鬱と同等またはそれ以上の効果を示した。
【００２８】
【表１】
0006880236.tif 000002
【００２９】
【表２】
0006880236.tif 000003
【００３０】
【表３】
0006880236.tif 000004
【００３１】
［実施例５］
抗うつ薬の特徴−ＣＵＭＳうつ病ラットの胃腸機能の改善に関する研究
【００３２】
５．１  実験動物
実施例４と同じである。
【００３３】
５．２  実験薬品と薬剤
実施例４と同じである。
【００３４】
５．３  動物のグルーピング及び投与
実施例４と同じである。
【００３５】
５．４  モデル構築
実施例４と同じである。
【００３６】
５．５  測定項目
糞便：モデリングの終了後、実験の各群のラットを代謝ケージに入れ、プラスチック製ビーカーでラットの糞便を１２時間に収集し、糞便の数量を点検し、重さを量る（湿重量）。オーブンで乾燥させ（７０℃、３時間）た後、再度重さを量る（乾燥重量）。糞便の水分含有量＝（乾燥重量）／湿重量×１００％により糞便の水分含有量を計算する。
【００３７】
小腸推進（ｓｍａｌｌ  ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ  ｐｒｏｐｕｌｓｉｏｎ）及び胃内容排出実験：ラットを殺す前日、１２時間絶食をさせたが、絶水をさせなった。翌日、ラットを殺す３０分前に、１ｍｌ／１００ｇの量で自製半固体栄養ペーストを強制飼養で投与した。３０分後にラットを殺し、速やかに解剖し、胃全体を取り出し、胃噴門、胃幽門及び回盲部を結紮し、濾紙で水分を除いた後、重さを量って胃の総重量（ｇ）と小腸を得た。外科用ハサミで胃の壁を大彎に沿って切り、蒸留水で胃の内容物を洗浄し、濾紙で水分を除いた後、重さを量って胃のネット重量（ｇ）を得た。
【００３８】
胃内残存率＝（胃の総重量−胃のネット重量）／自製半固体栄養ペーストの重量×１００％
【００３９】
小腸推進率＝小腸の全長／自製半固体栄養ペーストが推進されたところまでの距離×１００％
【００４０】
５．６  実験結果
表４は、ＣＵＭＳストレスによって、ラットの排便量が増加し、糞便の水分含有量が減少することを示す。この現象を改善できず、負の調節を呈するベンラファキシンと比較すると、漢方薬エキスは投与された後、上記項目指標の異常を改善できる、これは漢方薬エキスがＣＵＭＳラットのうつ病症状を改善するとともに、糞便を異常する副作用を引き起こさないことを示した。表５及び６は、モデリングによるストレスがラットの小腸蠕動と胃排出機能を遅くさせ、ベンラファキシンがモデルグループと比較して小腸推進率と胃内残存率とを減少させる傾向があることを示した、これはベンラファキシンは胃腸機能を低下させる副作用があるおそれがあり、漢方薬エキスはうつ病を治療するとともに、ラットの胃腸機能を改善できることを示唆した。
【００４１】
【表４】
0006880236.tif 000005
【００４２】
【表５】
0006880236.tif 000006
【００４３】
【表６】
0006880236.tif 000007
【００４４】
［実施例６］抗うつ薬の効果特徴−ＣＵＭＳうつ病ラットの性的機能の改善に関する研究
【００４５】
６．１  実験動物
実施例４と同じである。
【００４６】
６．２  実験薬品と薬剤
実施例４と同じである。
【００４７】
６．３  動物のグルーピング及び投与
実施例４と同じである。
【００４８】
６．４  モデル構築
実施例４と同じである。
【００４９】
６．５  測定項目
実験の４８時間前に、メスラットにエストラジオール１０μｇ（０．１ｍｌのサフラワー油に溶解させた）を皮下注射し、実験の２時間前に、１０μｇのプロゲステロンを皮下注射した。ＣＵＭＳのオスラットと発情期のメスラットを一つのケージに入れ、午後７時〜９時に、３０分間以内のオスラットの交尾行為を観察し、乗駕行動潜時と乗駕行動回数を記録した。
【００５０】
６．６  実験結果
交尾実験におけるオスラットの乗駕行動は、ある程度、その性欲の強度を反映できる。表７は、ＣＵＭＳストレスは、ラットの乗駕行動潜時を延長し、乗駕行動回数を減少したことを示し、ある程度、ラットの性欲の誘起はモデリングによるストレスの影響を受けていることを示した。この項目に対して負の調節を示したベンラファキシンと比較すれば、漢方薬エキスを投与後、上記の項目の異常を改善できる、これは漢方薬エキスがＣＵＭＳラットのうつ病の症状を改善できるとともに、性欲を低下する副作用を引き起こさないと示した。
【００５１】
【表７】
0006880236.tif 000008
【００５２】
［実施例７］抗うつ薬の効果特徴−ＣＵＭＳうつ病ラットに伴う学習記憶能力の低下及び不安の改善に関する研究
【００５３】
７．１  実験動物
実施例４と同じである。
【００５４】
７．２  実験薬品と薬剤
実施例４と同じである。
【００５５】
７．３  動物のグルーピング及び投与
実施例４と同じである。
【００５６】
７．４  モデル構築
実施例４と同じである。
【００５７】
７．５  測定指標
モデリングの終了後、モリス水迷路（Ｍｏｒｒｉｓ  ｗａｔｅｒ  ｍａｚｅ）と高架式十字迷路（Ｈｉｇｈ  ｐｌｕｓ  ｍａｚｅ）の実験を行った。モリス水迷路における場所ナビゲーション（ｐｌａｃｅ  ｎａｖｉｇａｔｉｏｎ）期と、空間プローブ潜時（ｓｐａｔｉａｌ  ｐｒｏｂｅ  ｌａｔｅｎｃｙ）と、プラットフォーム横断回数（ｔｉｍｅｓ  ａｃｒｏｓｓ  ｔｈｅ  ｐｌａｔｆｏｒｍ）とを選んでＣＵＭＳラットの認知機能に対する考察とし、高架式十字迷路におけるクローズドアームとオープンアームに入る回数割合と、オープンアームに入る時間割合とを選んでＣＵＭＳラットの不安に対する考察とした。
【００５８】
７．６  実験結果
表８は、空間プローブ期におけるＣＵＭＳうつ病ラットのプラットフォーム横断回数及び目標象限（ｔａｒｇｅｔ  ｑｕａｄｒａｎｔ）までの行程が減少することを示した、これはＣＵＭＳうつ病に伴う認知障害が発生したと示した。この現象を調節できないベンラファキシンと比較すれば、漢方薬エキスを投与された後、この症状を改善できた。
【００５９】
【表８】
0006880236.tif 000009
【００６０】
ＣＵＭＳうつ病ラットが高架式十字迷路におけるオープンアームに入る時間割合とオープンアームに入る回数割合は減少した、これはＣＵＭＳうつ病に伴う不安が発生したと示した。ベンラファキシンと漢方薬エキスとの両方は、投与後にいずれもこの症状を改善できた。
【００６１】
【表９】
0006880236.tif 000010
【００６２】
［実施例８］無糖顆粒剤
【００６３】
漢方薬エキスの粉末とプレゲル化デンプン（ｐｒｅｇｅｌａｔｉｎｉｚｅｄ  ｓｔａｒｃｈ）とを５：２の割合で混合し、乾式造粒（ｄｒｙ  ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ）によって顆粒を製作した。造粒時、乾式造粒機のパラメータは、押出速度６．０ｒｐｍ、供給速度７．０ｒｐｍ、造粒速度１０．０ｒｐｍ、サイドシール圧力１３Ｍｐａ、押出圧力２７Ｍｐａに調整する。造粒に用いた篩は１０メッシュで、整粒用篩は４０メッシュである。顆粒を整粒し、複合フィルムで包装し、最終製品を得た。
【００６４】
［実施例９］糖含有顆粒剤
漢方薬エキスの粉末、ショ糖及びデキストリンを２：０．５：０．５の割合で混合し、湿潤剤として７５％エタノールを使用し、スイング式造粒機を採用し、１０メッシュのステンレススチールメッシュで造粒し、乾燥させた後、４０メッシュの篩にかけ、複合フィルムで包み、最終製品を得た。
【図１】
0006880236.tif 000011