(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物。
【請求項２】
アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物。
【請求項３】
組成物が、飲食品組成物または医薬組成物である、請求項１または請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品。
【請求項５】
アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、運動性溶血抑制剤および運動性溶血性貧血抑制・改善用組成物に関し、より詳細には、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤、運動性溶血を抑制するためのアスタキサンチンの使用、運動性溶血性貧血を抑制および／または改善するためのアスタキサンチンの使用、ならびに、アスタキサンチンを使用して運動性溶血を抑制することにより運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
貧血とは、溶血や出血、血液の希釈、造血不良などを原因として、血液単位容積中のヘモグロビン濃度が正常範囲未満にまで低下した病態をいう。貧血時には、倦怠感、集中力低下等の酸素運搬能の低下に伴う症状が生じ、さらに、貧血を代償する機序として、動悸、息切れ等の循環器または呼吸器症状が生じる。貧血の原因の分類を図１に示す。【０００３】
従来、スポーツ選手特有の貧血が知られており、図１に示すように、スポーツ貧血、または運動性貧血と呼ばれている。そして、スポーツ貧血（運動性貧血）は、鉄欠乏性、溶血性、出血性、希釈性の４つに分類される（非特許文献１）。運動性の鉄欠乏性貧血は、通常の貧血と同様、運動性貧血の中で最も頻度が高く、鉄の供給量が少ないか、または鉄の排出量が多くなって鉄が欠乏し、赤芽球のヘモグロビン合成が低下することにより発症する貧血であり、その対策として、従来、鉄分の多い食材を摂取する（供給対策）、鉄分を含有したサプリメントや薬剤を摂取する（供給対策）、静注することにより直接血中へ鉄分を供給する（供給対策）、運動を控える（排出対策）、といったことがなされている。また、運動性の溶血性貧血（運動性溶血性貧血）は、例えば、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを原因とする貧血であり、当該破壊される赤血球数（溶血数）が造血により新しく作られる赤血球数（造血数）を上回った場合に発症する貧血である。その対策として、従来、運動を控える、靴にインソールを敷設する、厚底スニーカーを履く、といったことがなされている。また、運動性の出血性貧血は、例えば、激しい運動による消化管の微細な出血による貧血が報告されているものの（非特許文献１）、その発症は稀であるが、症状は深刻であり、医師による治療が必要となる。運動性の希釈性貧血は、循環血漿量の増加により発症する貧血であり、見かけの貧血とも呼ばれ、治療の必要はない。【０００４】
すなわち、運動性貧血（スポーツ貧血）は、概ね、鉄欠乏性と溶血性が起因となる貧血といえるところ、現状、当該貧血を発症した選手のほとんどが、鉄分の多い食材を摂取する、鉄分を含有したサプリメントや薬剤を摂取する、静注することにより直接血中へ鉄分を供給するといった、鉄の供給に頼っている。そして昨今、鉄の過剰摂取が人体に深刻な悪影響を及ぼしかねないことを知らずに、過剰に鉄を摂取してしまうケースの他、鉄欠乏の状態でないにもかかわらずに注射により鉄を直接投与してしまうケース、鉄が不足していないにもかかわらずにパフォーマンスアップを目的として鉄を摂取してしまうケース、貧血の予防と称して安易に鉄を摂取してしまうケースが頻発しており、それらによる健康被害が問題となり、公益財団法人日本陸上競技連盟（日本陸連）による注意喚起がなされているほどである（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｅｄ．ｏｒ．ｊｐ／ｓｐｏｒｔｓｄｏｃｔｏｒ／ｗｐ−ｃｏｎｔｅｎｔ／ｕｐｌｏａｄｓ／２０１９／０３／ｔｅｔｕｚａｉ＿ｒｉｋｕｒｅｎ．ｐｄｆ）。特に、運動性溶血性貧血の抑制や改善については、鉄の供給に頼る必要がない場合が多々あるものの、反面、運動性溶血性貧血の抑制や改善に有効とされる飲食品や剤が見当たらないというのが現状である。【０００５】
一方、アスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ，ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎｅ，３，３’−ジヒドロキシ−β，β−カロテン−４，４’−ジオン）は、ニンジンのβカロテンやトマトのリコペンと同じカロテノイドの一種であってキサントフィル類に分類される食経験豊富な赤橙色の色素物質であるところ、長年、食品添加物の色素として、あるいは養殖魚の色揚げ剤として使用されてきたが、ビタミンＥの１０００倍もの優れた抗酸化作用が見出されてからというもの、医薬品、サプリメントなどの健康食品、基礎化粧品などにおいて利用されているが、その後、アスタキサンチンにおける様々な作用効果が見出され、その用途は拡大の一途を辿っている。【０００６】
運動性溶血性貧血の関連ではないが、自己免疫溶血性貧血（免疫炎症性障害による溶血性貧血）に対してアスタキサンチンが使用されていることが報告されている（特許文献１）。また、アスタキサンチンの抗酸化作用により、赤血球膜を酸化的損傷から保護する効果を有することによって、希釈による溶血が抑制されることが報告されている（特許文献２）
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特表２００７−５３８０８３号公報
【特許文献２】特開２００２−２２６３６８号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】平澤元章「高校生の長距離走と運動性貧血」麗澤大学紀要、第９６巻、ｐ９０、２０１３年７月
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、酸化的損傷による溶血（赤血球の酸化的損傷）を抑制する効果は、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）のを抑制する効果とは異質の効果であり、本明細書実施例においてもそれが明らかにされている。他方、自己免疫性の溶血（免疫炎症性障害による溶血）は、図１に示す「自己抗体異常による溶血」に該当することから、打撃などの衝撃を伴う運動や行動を起因とする溶血（打撃などの衝撃を伴う運動や行動による物理的な赤血球の破壊）とは異質であり、従って、自己免疫溶血性貧血（免疫炎症性障害による溶血を原因とする貧血）を抑制する効果と、打撃などの衝撃を伴う運動や行動を起因とする溶血を原因とする貧血（打撃などの衝撃を伴う運動や行動による物理的な赤血球の破壊を原因とする貧血）を抑制する効果もまた、互いに異質な効果であるといえる。【００１０】
本発明は、運動性溶血性貧血であるにもかかわらず、上述したような、鉄の過剰摂取が人体に深刻な悪影響を及ぼしかねないことを知らずに、過剰に鉄を摂取してしまうといった問題、鉄欠乏の状態でないにもかかわらずに注射により鉄を直接投与してしまうといった問題、鉄が不足していないにもかかわらずにパフォーマンスアップを目的として鉄を摂取してしまうといった問題、貧血の予防と称して安易に鉄を摂取してしまうといった問題を解決するためになされたものであり、食経験豊富なアスタキサンチンを用いて、例えば、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを抑制する組成物などを提供することを目的とし、ひいては、当該破壊される赤血球数（溶血数）を、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）よりも下回らせて、当該物理的な赤血球の破壊（溶血）を原因とする運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する組成物などを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、鋭意研究の結果、アスタキサンチン（遊離体および誘導体を含む。）が、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを抑制し、さらにその結果、当該破壊される赤血球数（溶血数）が、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）よりも下回るようになり、いわゆる運動性溶血性貧血を抑制および／または改善することを見出し、下記の各発明を完成した。【００１２】
（１）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物。【００１３】
（２）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物。【００１４】
（３）組成物が、飲食品組成物または医薬組成物である、（１）または（２）に記載の組成物。【００１５】
（４）酸化的損傷による溶血を除く運動性溶血である、（１）から（３）のいずれか一項に記載の組成物。【００１６】
（５）アスタキサンチンがヘマトコッカス藻抽出物由来である、（１）から（４）のいずれか一項に記載の組成物。【００１７】
（６）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品。【００１８】
（７）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品。【００１９】
（８）酸化的損傷による溶血を除く運動性溶血である、（６）または（７）に記載の飲食品。【００２０】
（９）アスタキサンチンがヘマトコッカス藻抽出物由来である、（６）から（８）のいずれか一項に記載の飲食品。【００２１】
（１０）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤。【００２２】
（１１）アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤。【００２３】
（１２）酸化的損傷による溶血を除く運動性溶血である、（１０）または（１１）に記載の剤。【００２４】
（１３）鉄を含有しない、（１０）から（１２）のいずれか一項に記載の剤。【００２５】
（１４）アスタキサンチンがヘマトコッカス藻抽出物由来である、（１０）から（１３）のいずれか一項に記載の剤。【００２６】
（１５）運動性溶血を抑制するためのアスタキサンチンの使用。【００２７】
（１６）運動性溶血性貧血を抑制および／または改善するためのアスタキサンチンの使用。【００２８】
（１７）酸化的損傷による溶血を除く運動性溶血である、（１５）または（１６）に記載の使用。【００２９】
（１８）飲食物または薬剤としての使用である、（１５）から（１７）のいずれか一項に記載の使用。【００３０】
（１９）鉄とともに使用しない、（１５）から（１８）のいずれか一項に記載の使用。【００３１】
（２０）アスタキサンチンがヘマトコッカス藻抽出物由来である、（１５）から（１９）のいずれか一項に記載の使用。【００３２】
（２１）アスタキサンチンを使用して運動性溶血を抑制することにより運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する方法。【００３３】
（２２）酸化的損傷による溶血を除く運動性溶血である、（２１）に記載の方法。【００３４】
（２３）飲食物または薬剤としてのアスタキサンチンの使用である、（２１）または（２２）に記載の方法。【００３５】
（２４）鉄を使用しない、（２１）から（２３）のいずれか一項に記載の方法。【００３６】
（２５）アスタキサンチンがヘマトコッカス藻抽出物由来である、（２１）から（２４）のいずれか一項に記載の方法。
【発明の効果】
【００３７】
本発明によれば、運動性溶血、すなわち、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを抑制することができ、さらには、当該破壊される赤血球数（溶血数）を、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）よりも下回らせることができて、当該物理的な赤血球の破壊（溶血）を原因とする運動性溶血性貧血を抑制および／または改善することができる。そしてその結果、鉄の供給に依存することがないばかりか、運動性溶血性貧血であるにもかかわらず、鉄の過剰摂取が人体に深刻な悪影響を及ぼしかねないことを知らずに、過剰に鉄を摂取してしまうといった問題、鉄欠乏の状態でないにもかかわらずに注射により鉄を直接投与してしまうといった問題、鉄が不足していないにもかかわらずにパフォーマンスアップを目的として鉄を摂取してしまうといった問題、貧血の予防と称して安易に鉄を摂取してしまうといった問題などを解消することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】貧血の原因の分類を示す図である。
【図２】本明細書実施例における被験者と一般人の、平均歩数と平均移動距離を示す図である。
【図３】一般人の赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化を示す図である。
【図４】「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間中の赤血球数の変化率とその推移を示す図である。図中、（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間中の赤血球数の変化率を表し、（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日から観察期間終了日までの赤血球数の変化率の推移を表す。
【図５】「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率とその推移を示す図である。図中、（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率を表し、（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日から観察期間終了日までの血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の推移を表す。
【図６】「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間開始日および観察期間終了日の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値、ならびに観察期間中の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値の推移を示す図である。図中、（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間終了日の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値を表した図であり、（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間開始日から観察期間終了日までの血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値の推移を表した図である。
【図７】「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）における８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値ならびに試験期間中の８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値の推移を示す図である。図中、（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目、４週目および８週目における８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値を表した図であり、（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目まで、すなわち試験期間中の８−ＯＨｄＧの生成速度測定値の平均値の推移を表した図であり、（Ｃ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目まで、すなわち試験期間中のイソプラスタンの生成速度測定値の平均値の推移を表した図である。
【図８】「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）における総抗酸化の測定値の平均値ならびに試験期間中の総抗酸化の測定値の平均値の推移を示す図である。図中、（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目、４週目および８週目における総抗酸化の測定値の平均値を表した図表であり、（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける０週目から８週目まで、すなわち試験期間中の総抗酸化の測定値の平均値の推移を表した図である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
以下、本発明に係るアスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤、アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤、運動性溶血を抑制するためのアスタキサンチンの使用、運動性溶血性貧血を抑制および／または改善するためのアスタキサンチンの使用、ならびに、アスタキサンチンを使用して運動性溶血を抑制することにより運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する方法について詳細に説明する。本発明において、「運動性溶血抑制用組成物」、「運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「運動性溶血抑制用飲食品」、「運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、「運動性溶血抑制剤」、ならびに、「運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」は、いずれも、アスタキサンチンを有効成分として含有し（有効成分とし）、本発明において、「運動性溶血を抑制するための使用」、「運動性溶血性貧血を抑制および／または改善するための使用」、「運動性溶血を抑制する方法」、ならびに、「運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する方法」は、いずれも、運動性溶血の抑制および運動性溶血性貧血の抑制および／または改善に有効な物質としてアスタキサンチンを使用する。
【００４０】
アスタキサンチン（３，３’−ジヒドロキシ−β，β−カロテン−４，４’−ジオン）は、カロテノイドの一種である。カロテノイドとは、テルペノイドの一種である一群の化合物群のことをいい、黄色ないし赤色の色素（カロテノイド色素）で、多数の共役二重結合を含む脂肪族または脂環式のポリエン類の総称である。
【００４１】
また、アスタキサンチンは、エビ、カニなどの甲殻類、サケ、タイなどの魚類、緑藻ヘマトコッカスなどの藻類、赤色酵母ファフィアなどの酵母類など、天然、特に海洋に広く分布する、食経験が豊かな赤色の色素であり、ビタミンＥの約１，０００倍、β−カロテンの約４０倍もの強力な抗酸化作用を有することの他、酸化防止効果、抗炎症効果、皮膚老化防止効果、美白効果などの生体活性を有するとともに、黄色から赤色の範囲の顔料として知られている。アスタキサンチンには、分子の両端に存在する環構造の３（３’）位の水酸基の立体配置により、３Ｓ，３’Ｓ体、３Ｓ，３’Ｒ体（メソ体）、３Ｒ，３’Ｒ体の三種の異性体が存在する。また、さらに分子中央の共役二重結合のシス、トランスの幾何異性体も存在する。例えば全トランス−、９−シス体と１３−シス体などがある。さらに、３（３’）位の水酸基は、脂肪酸とエステル体を形成することができる。
【００４２】
また、アスタキサンチンは、突然変異原性が観察されず安全性が高い化合物であることが知られており、食品添加物として広く用いられている（高橋二郎ほか：ヘマトコッカス藻アスタキサンチンの毒性試験−Ａｍｅｓ試験、ラット単回投与毒性試験、ラット９０日反復経口投与毒性試験―臨床医薬，２０：８６７−８８１，２００４）。
【００４３】
本発明において、「アスタキサンチン」には、アスタキサンチンの他、アスタキサンチンの遊離体および／またはそのエステルなどの誘導体が含まれる。また、アスタキサンチンのエステルにはモノエステル体および／またはジエステル体が含まれる。例えば、ヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）から得られるアスタキサンチンは、３Ｓ，３’Ｓ体で、脂肪酸が１個結合したモノエステル体が多く含まれていることが知られており（Ｒｅｎｓｔｒｏｍ，Ｂ．ｅｔ．ａｌ．，Ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄｓ  ｏｆ  ｓｏｍｅ  ｅｓｔｅｒｉｆｉｅｄ  ｃａｒｏｔｅｎｏｌｓ，Ｃｏｍｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂ，Ｃｏｍｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８１，６９，ｐ．６２５−６２７）、また、オキアミから得られるアスタキサンチンは、脂肪酸が２個結合したジエステル体が多く含まれていることが知られている（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｋ．ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ  ｐｉｇｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｎｔａｒｃｔｉｃ  ｋｒｉｌｌ  Ｅｕｐｈａｕｓｉａ  ｓｕｐｅｒｂａ，Ｂｕｌｌ．Ｊａｐ．Ｓｏｓ．Ｓｃｉ．Ｆｉｓｈ．，１９８３，４９，ｐ．１４１１−１４１５）が、本発明の「アスタキサンチン」には、これらのアスタキサンチンもまた含まれる。
【００４４】
また、ファフィア・ロドジマ（Ｐｈａｆｆｉａ  Ｒｈｏｄｏｚｙｍａ）より得られるアスタキサンチンは、３Ｒ，３’Ｒ体（Ａｎｄｒｅｗｅｓ，Ａ．Ｇ．ｅｔ．ａｌ．，（３Ｒ，３’Ｒ）−Ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｙｅａｓｔ  Ｐｈａｆｆｉａ  ｒｈｏｄｏｚｙｍａ，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ．，１９７６，１５，ｐ．１００９−１０１１）であることが知られており、通常天然に見出される３Ｓ，３’Ｓ体と反対の構造を持っていて、脂肪酸とエステルを形成していない非エステル体、すなわちフリー体として存在している（Ａｎｄｒｅｗｅｓ，Ａ．Ｇ．ｅｔ．ａｌ．，Ｃａｒｏｔｅｎｉｄｓ  ｏｆ  Ｐｈａｆｆｉａ  ｒｈｏｄｏｚｙｍａ，ａ  ｒｅｄ  ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ  ｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇ  ｙｅａｓｔ，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ．，１９７６，１５，ｐ．１００３−１００７）が、本発明の「アスタキサンチン」には、このようなアスタキサンチンもまた含まれる。
【００４５】
一方、本発明における「アスタキサンチン」には、天然のアスタキサンチンの他、合成アスタキサンチンが包含される。天然のアスタキサンチンとしては、例えば、ヘマトコッカスなどの藻類；ファフィアなどの酵母類；エビ、オキアミ、カニなどの甲殻類；イカ、タコなどの頭足類；種々の魚介類；アドニスなどの植物類；Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．Ｎ８１１０６、Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ ｓｐ．ＳＤ２１２、Ｅｒｙｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．ＰＣ６などのバクテリア類；Ｇｏｒｄｏｎｉａ ｓｐ．ＫＡＮＭＯＮＫＡＺ−１１２９などの放線菌；Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｙｍ ｓｐ．ＫＨ１０５などのラビリンチュラ類；アスタキサンチン産生遺伝子組み換え生物体；などから得られるアスタキサンチン含有抽出物そのもの、およびそのアスタキサンチン含有抽出物から適宜精製されたアスタキサンチンを挙げることができ、好ましくはヘマトコッカスなどの微細藻類から抽出される微細藻類抽出物由来のアスタキサンチン、より好ましくはヘマトコッカス藻から抽出されるヘマトコッカス藻抽出物由来のアスタキサンチンである。また、合成アスタキサンチンとしては、例えば、ＡｓｔａＳａｎａ（ＤＳＭ社）、Ｌｕｃａｎｔｉｎ Ｐｉｎｋ（登録商標）（ＢＡＳＦ社）などを挙げることができる。また、天然由来の他のカロテノイドを化学的に変換して得た合成アスタキサンチンとしては、例えば、ＡｓｔａＭａｒｉｎｅ（ＰＩＶＥＧ社）などを挙げることができる。
【００４６】
天然のアスタキサンチンが得られるヘマトコッカス藻としては、例えば、ヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）、ヘマトコッカス・ラキュストリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｕｓｔｒｉｓ）、ヘマトコッカス・カペンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｐｅｎｓｉｓ）、ヘマトコッカス・ドロエバゲンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｅｒｏｅｂａｋｅｎｓｉｓ）、ヘマトコッカス・ジンバビエンシス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｚｉｍｂａｂｗｉｅｎｓｉｓ）などを挙げることができる。
【００４７】
これらヘマトコッカス緑藻類を培養する方法としては、異種微生物の混入・繁殖がなく、その他の夾雑物の混入が少ない密閉型の培養方法が好ましく、そのような培養方法としては、例えば、一部解放型のドーム形状、円錐形状又は円筒形状の培養装置と装置内で移動自在のガス吐出装置を有する培養基（国際公開第１９９９／０５０３８４号パンフレット）を用いて培養する方法の他、ヘマトコッカス藻類に乾燥ストレスを加えて藻類のシスト化を誘発し、そのシスト化した藻類の培養物からアスタキサンチンを採取する方法（特開平８−１０３２８８号公報）、密閉型の培養装置に光源を入れ内部から光を照射して培養する方法、平板状の培養槽やチューブ型の培養層を用いる方法を挙げることができる。
【００４８】
また、本発明における「アスタキサンチン」には、例えば、上述したヘマトコッカス藻を、必要に応じて、特開平５−０６８５８５号公報などに開示された方法に従い細胞壁を破砕し、アセトン、エーテル、クロロホルムおよびアルコール（エタノール、メタノールなど）などの有機溶剤や、超臨界状態の二酸化炭素などの抽出溶媒・溶剤を加えて抽出したアスタキサンチン含有抽出物や、当該アスタキサンチン含有抽出物を必要に応じて適宜精製したものもまた含まれる。当該アスタキサンチン含有抽出物のアスタキサンチン含有量は、好ましくは３〜４０％（ｗ／ｗ）、より好ましくは３〜１２％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは５〜１０％（ｗ／ｗ）である。
【００４９】
また、本発明における「アスタキサンチン」には、市販品のアスタキサンチンもまた含まれる。そのような市販品としては、例えば、アスタリールオイル２００ＳＳ（ヘマトコッカス藻からの脂溶性抽出物であり、アスタキサンチンをフリー体換算で約２０％含有する）、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｌ１０、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｏｉｌ  ５０Ｆ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｏｉｌ  ５０ＦＣ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｏｉｌ  ５Ｆ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｐ２ＡＦ、ＡｓｔａＴＲＯＬ−Ｘ、アスタリールオイル５０ＦＣ、アスタリールパウダー２０Ｆ、水溶性アスタリール液、アスタリールＷＳ液、アスタリール１０ＷＳ液、アスタリールＡＣＴ、アスタビータｅ、アスタビータスポーツ、アスタビータぜんしん、赤いめぐみ、アスタメイトなどのアスタリール、アスタビータおよびアスタメイトシリーズ（すべて登録商標；アスタリール社製、富士化学工業社製）；ＡＳＴＯＴＳ−Ｓ、ＡＳＴＯＴＳ−１０Ｏ、ＡＳＴＯＴＳ−ＥＣＳ、ＡＳＴＰＴＳ−２．０ＰＷ、ＡＳＴＯＴＳ−３．０ＭＢなどのＡＳＴＯＴＳシリーズ（ＡＳＴＯＴＳはすべて登録商標；富士フイルム社製）；ＢｉｏＡｓｔｉｎ（登録商標；サイアノテック  コーポレーション社）；Ａｓｔａｚｉｎｅ ＴＭ（ＢＧＧ Ｊａｐａｎ社製）；アスタキサンチンパウダー１．５％、アスタキサンチンパウダー２．５％、アスタキサンチンオイル５％、アスタキサンチンオイル１０％（バイオアクティブズジャパン社製）；アスタキサンチン（オリザ油化社）；サンアクティブＡＸ（登録商標；太陽化学社製）；ヘマトコッカスＷＳ３０（ヤエガキ発酵技研社製）；ＡｓｔａＭａｒｉｎｅ（ＰＩＶＥＧ社製）などを挙げることができる。
【００５０】
なお、アスタリール社製および富士化学工業社製のアスタリールオイル２００ＳＳ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｏｉｌ  ５０ＦＣ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｐ２ＡＦ、ＡｓｔａＴＲＯＬ−Ｘ、アスタリールオイル５０ＦＣおよびアスタリールパウダー２０Ｆは、それぞれ「ハラル認証」を受けており、アスタリール社製および富士化学工業社製のＡｓｔａＲｅａｌ  Ｏｉｌ  ５０ＦＣ、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｐ２ＡＦ、ＡｓｔａＴＲＯＬ−Ｘ、アスタリールオイル５０ＦＣおよびアスタリールパウダー２０Ｆは、それぞれ「コーシャ」認証を受けている。さらに、ＡｓｔａＲｅａｌ  Ｌ１０は、Ｎｏｎ−ＧＭＯ（非遺伝子組み換え認証）を受けている。
【００５１】
一方、「運動性溶血」とは、上述の通り、例えば、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことをいい、「運動性溶血性貧血」とは、上述の通り、「運動性溶血」を原因とする貧血であって、かつ、当該破壊される赤血球数（溶血数）が造血により新しく作られる赤血球数（造血数）を上回った場合に発症する貧血である。「運動性溶血」および「運動性溶血性貧血」が発症し得る運動としては、例えば、マラソン、トライアスロン、競歩などの長距離走、バレーボール、バスケットボール、サッカー、ラグビー、アメリカンフットボール、テニスなどの球技のような、継続して足裏を地面にたたきつける状況が続く運動の他、ボクシング、キックボクシング、空手、合気道、柔術、柔道、テコンドー、レスリング、剣道などの格闘技、プレートコンパクターやタンピングランマーといった転圧機械や締固め用機械などを継続して取り扱う行動のような、身体への打撃や衝撃が継続し得る運動や行動を挙げることができる。
【００５２】
すなわち、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」、および、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤」とは、継続して足裏を地面にたたきつける状況が続く運動や身体への打撃や衝撃が継続し得る運動や行動により、物理的に赤血球が破壊される（溶血する）のを抑制する組成物、飲食品または剤をいい、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、ならびに、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」とは、継続して足裏を地面にたたきつける状況が続く運動や身体への打撃や衝撃が継続し得る運動や行動により、物理的に赤血球が破壊される（溶血する）のを抑制した結果、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）と比較して、当該破壊される赤血球数（溶血数）の方が少なくなることにより、当該物理的な赤血球の破壊（溶血）を原因とする貧血を抑制および／または改善する組成物、飲食品または剤をいう。従って、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」、および、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤」は、本発明における「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、ならびに、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」になり得る。
【００５３】
他方、本発明において、「運動性溶血を抑制するためのアスタキサンチンの使用」とは、継続して足裏を地面にたたきつける状況が続く運動や身体への打撃や衝撃が継続し得る運動や行動により、物理的に赤血球が破壊される（溶血する）のを抑制するためにアスタキサンチンを使用することをいい、本発明において、「動性溶血性貧血を抑制および／または改善するためのアスタキサンチンの使用」、ならびに、「アスタキサンチンを使用して運動性溶血を抑制することにより運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する方法」とは、継続して足裏を地面にたたきつける状況が続く運動や身体への打撃や衝撃が継続し得る運動や行動により、物理的に赤血球が破壊される（溶血する）のを抑制するとともに、当該破壊される赤血球数（溶血数）を、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）よりも下回らせて、当該物理的な赤血球の破壊（溶血）を原因とする貧血を抑制および／もしくは改善するためにアスタキサンチンを使用すること、または使用する方法をいう。
【００５４】
なお、本明細書においては、「抑制」との語は、「予防」、「防止」との語と置換可能に用いられる場合があり、「改善」との語は、「治癒」、「治療」との語と置換可能に用いられる場合がある。
【００５５】
ここで、本明細書実施例における被験者と一般人の、平均歩数と平均移動距離を図２に示す。図２に示すように、本明細書実施例における被験者は、一般人と比較して、１日の平均歩数が多く、かつ、平均移動距離が長いことから、図２より、本明細書実施例における被験者が「走行していた」ことがわかる。
【００５６】
また、一般人の赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化を図３に示す。図３に示すように、アスタキサンチンを含有した試験食品を摂取した「アスタキサンチン群」と、アスタキサンチンを含有しない試験食品を摂取した「対照群」とでは、当該試験食品の摂取前後において、赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）に有意差がなく、従って、激しい運動を行わない一般人では、物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことがないために、赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）の減少が顕著には認められず、また、アスタキサンチンの摂取による赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）の減少の抑制も認められないことが分かる。
【００５７】
次に、本発明において、「運動性溶血」からは、酸化的損傷による溶血が除外される。このことは、上述の通り、本明細書実施例において明らかにされている。なお、酸化損傷による溶血が抑制されているか否かは、当業者により適宜選択可能な手法により、確認、判断をすることができる。そのような手法としては、例えば、被験者の尿に含まれる８−ＯＨｄＧやイソプラスタンの生成速度を測定する手法を挙げることができる。尿中８−ＯＨｄＧは、活性酸素などの酸化ストレスによるＤＮＡの酸化損傷を反映するバイオマーカーであり、８−ＯＨｄＧの生成速度を測定することにより、酸化ストレスの大きさやＤＮＡの酸化的損傷レベルを評価することができ、また、尿中イソプラスタンは、リン脂質がフリーラジカルにより酸化されて形成されるプロスタグランジン様化合物であり、イソプラスタンの生成速度を測定することにより、生体内における脂質酸化の評価が可能であるためである。
【００５８】
また、本発明における「運動性溶血抑制」効果および「運動性溶血性貧血抑制」効果は、アスタキサンチンが有する抗酸化能とは連関しないことが本明細書実施例において明らかにされている。なお、抗酸化能と連関するか否かは、当業者により適宜選択可能な手法により、確認、判断をすることができる。そのような手法としては、例えば、被験者の血清に含まれる水溶性抗酸化物質の濃度を測定して総抗酸化能を測定する手法を挙げることができる。血清中の水溶性抗酸化物質を検出して、酸化ストレスに対する総合的な総抗酸化能（Ｓｅｒｕｍ  Ｔｏｔａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ）を知ることができるためである。
【００５９】
次に、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤」、ならびに、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」は、鉄を含有しなくてもよい。本発明において、「鉄」とは、水に溶解したとき二価または三価の鉄イオンを生成する化合物をいい、そのような「鉄」としては、例えば、クエン酸鉄アンモニウム、フマル酸第一鉄、塩化第二鉄、クエン酸第一鉄ナトリウム、グルコン酸第一鉄ナトリウム、グルコン酸第一鉄、乳酸鉄、ピロリン酸鉄、硫酸第一鉄、黄酸化鉄、黄色三二酸化鉄、褐色酸化鉄、黒酸化鉄、三二酸化鉄フマル酸第一鉄、硫酸第一鉄などを挙げることができる。
【００６０】
次に、本発明における「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」および「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」は、飲食品組成物または医薬組成物であることが好ましい。飲食品組成物としては、例えば、当業者によって適宜選択可能な手法により、サプリメント、固形食品、流動食品、飲料などの飲食品とすることができ、医薬組成物としては、例えば、当業者によって適宜選択可能な手法により、水剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒、散剤、チュアブル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤などの経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤、経鼻剤、経皮剤など非経口剤など、通常の製剤形態が挙げられるが、経口剤であることが好ましい。上記製剤は、本発明に係る「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」および「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」と、賦形剤などの製薬上許容される他の成分とを使用して、常法により調製することができる。
【００６１】
また、本発明における「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」および「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」は、運動性溶血抑制または運動性溶血性貧血抑制および／または改善効果を期待して、特定保健用食品（トクホ）などの特別用途食品や機能性表示食品、栄養機能食品、乳児用調製粉乳、幼児用粉乳等食品、授乳婦用粉乳等食品、保健機能食品、病者用食品、乳製品、発酵乳などとして摂取することもできる。さらに、液状、ペースト状、粉末、固形状などの形態を問わず、各種の飲食品に配合することで、飲食品として摂取することもできる。そのような飲食品としては、例えば、牛乳、清涼飲料、粉末飲料、発酵乳、乳酸菌飲料、酸性飲料、ヨーグルト、チーズ、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、流動食、病者用食品、栄養食品、冷凍食品、食品組成物、加工食品、その他の市販食品などを挙げることができる。本発明における「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」および「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」を酸性の剤や飲食品の形態とした場合には、そのｐＨは２．０〜６．０、好ましくは３．０〜５．０に設定することができる。また、摂取量としては、フリー体のアスタキサンチンとして、通常、成人一人につき、１日あたり０．０３ｍｇ〜１００ｍｇ程度、好ましくは０．０５ｍｇ〜６０ｍｇ程度を経口で摂取すればよく、体質や症状に応じて適宜増減すればよい。
【００６２】
本発明における「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」ならびに「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」には、本発明の特徴を損なわない範囲において、他のカロテノイド、ビタミン類、ペプチド類、ミネラル類、有機酸または短鎖脂肪酸、脂肪酸エステル、有機塩基などを付加的に配合することもでき、また、本発明の特徴を損なわない範囲において、食味や美観の改善等を目的として、香料、甘味料、酸味料、あるいは着色料等を配合することもでき、さらには各種油脂を配合することができる。
【００６３】
また、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤」、ならびに、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」が、水を含有する場合、水は食品、医薬品、化粧品として用いられるものであれば特に限定されず、例えば、精製水、純水、イオン交換水、アルカリイオン水、深層水、波動水、天然水などを用いることができる。
【００６４】
さらに、本発明において、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用飲食品」、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血抑制剤」、ならびに、「アスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善剤」は、本発明の特徴を損なわない範囲であれば、いかなる物質も含んでよい。
【実施例】
【００６５】
以下、本発明に係るアスタキサンチンを有効成分とする運動性溶血性貧血抑制および／または改善用組成物について、実施例に基づいて説明する。なお、本発明の技術的範囲は、これらの実施例によって示される実施態様に限定されない。【００６６】
《実施例１》アスタキサンチンを用いた運動性溶血の抑制についての確認試験
アスタキサンチンを含有する試験食品を被験者が経口摂取することにより、運動性溶血性貧血の原因である運動性溶血を抑制できるか否かの確認試験を、下記のように実施した。【００６７】
［１−１］試験食品および被験者
ヘマトコッカス藻由来色素を含有する「アスタキサンチン群用カプセル」と、ヘマトコッカス藻由来色素を含有しない「対照群用カプセル」の２種類を試験食品として用意した。また、東海大学陸上部に所属する１８歳から２２歳の男子中長距離選手２８名を被験者として２グループに分け、当該被験者の１３名を「アスタキサンチン群」、同１５名を「対照群」とした。試験食品である「アスタキサンチン群用カプセル」と「対照群カプセル」の内容物の名称（原料名）、その配合量、１日あたりの摂取量、仕様等を、下掲の表１に示す。【００６８】
［表１］
0006868879.tif 000002
【００６９】
［１−２］試験方法
運動性溶血性貧血は、上述の通り、足底部に与えられた衝撃により物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを主な原因とする貧血であり、当該破壊される赤血球数（溶血数）が造血により新しく作られる赤血球数（造血数）を上回った場合に発症する貧血である。従って、本試験は、造血数が溶血数を上回るために運動性溶血が観察されにくい高地での走行トレーニングをあらかじめ実施することにより、被験者を馴化した後、溶血数が造血数を上回るために運動性溶血が観察されやすい平地での走行トレーニングを実施して、当該平地での走行トレーニングの期間における「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者における赤血球数の変化率、血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率および血漿ハプトグロビン濃度の推移を観察することにより行った。【００７０】
具体的には、先ず、高地での走行トレーニングの期間を「馴化期間（０〜４週）」として、高地での走行トレーニングを４週間実施した後、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者に対して採血を実施して、赤血球数、血色素量（ヘモグロビン濃度）および血漿ハプトグロビン濃度を測定し、続いて、平地での走行トレーニングの期間を「観察期間（４〜８週）」として、平地での走行トレーニングを４週間実施した後、再度、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者に対して採血を実施して、赤血球数、血色素量（ヘモグロビン濃度）および血漿ハプトグロビン濃度を測定し、当該測定した「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、観察期間の開始日から終了日における赤血球数の変化率、血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率および血漿ハプトグロビン濃度の推移を観察することにより本試験を行った。なお、「アスタキサンチン群」には「アスタキサンチン群用カプセル」を毎日摂取させ（アスタキサンチンの摂取量はフリー体換算で１２ｍｇ／日）、「対照群」には「対照群用カプセル」を毎日摂取させた。【００７１】
［１−３］赤血球数、血色素量（ヘモグロビン濃度）および血漿ハプトグロビン濃度の測定方法
赤血球数は、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者から採血した血液を、ＥＤＴＡ−２Ｋを用いて処理し、シースフロー電気抵抗検出法により測定した。一方、血色素量（ヘモグロビン濃度）は、当該採血した血液を、ＥＤＴＡ−２Ｋを用いて処理し、Ｓｏｄｉｕｍ  Ｌａｕｒｙｌ  Ｓｕｌｆａｔｅ−Ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（ＳＬＳ−Ｈｂ）法により測定した。他方、血漿ハプトグロビン濃度は、当該採血した血液をＥＤＴＡ−２Ｎａ入りチューブに移し、遠心分離処理をして血漿画分を分取した後、ハプトグロビン定量用ＥＬＩＳＡキット（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ  ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（商品コード：ＤＨＡＰＧ０）；アールアンドディーシステムス社）を用いて測定した。【００７２】
［１−４］赤血球数の変化率、血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率および血漿ハプトグロビン濃度の観察
「アスタキサンチン群」の観察期間開始日および観察期間終了日におけるそれぞれの赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）と、「対照群」の観察期間開始日および観察期間終了日におけるそれぞれの赤血球数および血色素量（ヘモグロビン濃度）を測定して、「アスタキサンチン群」および「対照群」における観察期間開始日の赤血球数測定値および血色素量（ヘモグロビン濃度）測定値をそれぞれ１００として観察期間終了日の赤血球数測定値の割合および血色素量（ヘモグロビン濃度）測定値の割合をそれぞれ算出し、それらを「観察期間中の赤血球数の変化率」および「観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率」とした後、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、当該観察期間中の赤血球数の変化率の平均値および血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の平均値を比較した。なお、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、赤血球数の変化率の平均値および血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の平均値の比較は、対応のないｔ検定を実施することにより行い、「アスタキサンチン群」および「対照群」の赤血球数の変化率の平均値に差がない、ならびに、「アスタキサンチン群」および「対照群」の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の平均値に差がないとの仮説をｐ＜０．１において棄却した。また、測定した「アスタキサンチン群」の観察期間開始日および観察期間終了日におけるそれぞれの血漿ハプトグロビン濃度の平均値と、測定した「対照群」の観察期間開始日および観察期間終了日におけるそれぞれの血漿ハプトグロビン濃度の平均値をそれぞれ算出して比較した。「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間中の赤血球数の変化率とその推移を図４に示し、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率とその推移を図５に示し、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日および観察期間終了日の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値、ならびに観察期間中の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値の推移を図６に示す。【００７３】
図４（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間中の赤血球数の変化率を表した図であり、図４（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日から観察期間終了日までの赤血球数の変化率の推移を表した図である。図４（Ａ）および（Ｂ）に示すように、「対照群」における観察期間中の赤血球数の変化率の値と比較して、「アスタキサンチン群」における観察期間中の赤血球数の変化率の値は高値であった。また、図５（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率を表した図であり、図５（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日から観察期間終了日までの血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の推移を表した図である。「対照群」における観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の値と比較して、「アスタキサンチン群」における観察期間中の血色素量（ヘモグロビン濃度）の変化率の値もまた、高値であった。これらのことから、「アスタキサンチン群」では、溶血すなわち物理的な赤血球の破壊による赤血球数の減少、および、血色素量（ヘモグロビン濃度）の低下が抑えられたことが明らかとなった。【００７４】
一方、図６（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間終了日の血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値を表した図であり、図６（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける観察期間開始日から観察期間終了日までの血漿ハプトグロビン濃度測定値の平均値の推移を表した図である。物理的に赤血球が破壊されるか否かの程度、すなわち、溶血の程度は、血漿ハプトグロビン濃度を測定することで知ることができ、血漿ハプトグロビン濃度の低下は溶血が生じたことを示すところ、図６（Ｂ）に示すように、観察期間開始日における「アスタキサンチン群」の血漿ハプトグロビン濃度の値と「対照群」の血漿ハプトグロビン濃度の値には、ほとんど差がなかったが、図６（Ａ）および（Ｂ）に示すように、観察期間終了日における「対照群」の血漿ハプトグロビン濃度の値と比較して、観察期間終了日における「アスタキサンチン群」の血漿ハプトグロビン濃度の値は極めて高値であったことから、これにより、「アスタキサンチン群」においては、溶血すなわち物理的な赤血球の破壊が抑制されたことが明らかとなった。【００７５】
以上の結果から、アスタキサンチンを含有する試験食品が、溶血すなわち物理的な赤血球の破壊を抑制する効果を有することや、それによる赤血球数の減少を抑制する効果、および、血色素量（ヘモグロビン濃度）の低下を抑制する効果を有することが明らかとなったことから、アスタキサンチンを含有する飲食品や剤が運動性溶血を抑制することが示され、さらには、運動性溶血性貧血を抑制して改善することが示された。【００７６】
《実施例２》「アスタキサンチン群」における酸化的損傷による溶血の抑制の存否についての確認試験
実施例１の「アスタキサンチン群」において酸化的損傷による溶血が抑制されているか否か（赤血球の酸化的損傷が抑制されているか否か）を確認するために、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者の尿に含まれる８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度の確認を、実施例１の「馴化期間（０〜４週）」および「観察期間（４〜８週）」を通じた、０〜８週の「試験期間」にて行った。当該確認試験の期間を、「馴化期間（０〜４週）」および「観察期間（４〜８週）」を通じた０〜８週の「試験期間」としたのは、酸化的損傷による溶血が生じるか否かと、走行トレーニングを高地または平地で行うこととの因果関係が存在しないためである。【００７７】
具体的には、０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）に「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者に対して採尿を実施して、８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度を測定した後、それぞれの平均値を算出し、当該算出した「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目における８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度の平均値の推移を観察することにより本試験を行った。【００７８】
［２−１］８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度の測定方法
尿中８−ＯＨｄＧ濃度は、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者から採取した尿について、Ｎｅｗ  ８−ＯＨｄＧ  Ｃｈｅｃｋ  ＥＬＩＳＡ（ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ  ｆｏｒ  ８−ＯＨｄＧ（商品コード：ＫＯＧ−２００Ｓ／Ｅ）；日研ザイル社）を用いてＥＬＩＳＡ法にて測定した。体重および時間あたりの８−ＯＨｄＧ生成速度は、下記に示す式で算出した。
８−ＯＨｄＧ生成速度（ｎｇ／ｋｇ／ｈｒ）＝｛尿中８−ＯＨｄＧ濃度（ｎｇ／ｍＬ）×採尿量（ｍＬ）｝／｛前回排尿時からの経過時間（ｈ）×被験者の体重（ｋｇ）｝【００７９】
尿中イソプラスタン濃度は、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者から採取した尿について、尿中イソプラスタン測定ＥＬＩＳＡキット（８−ｉｓｏ−ＰＧＦ２α  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（商品コード：ＡＤＩ−９００−０１０）；Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を用いてＥＬＩＳＡ法にて測定した。体重および時間あたりのイソプラスタン生成速度は、下記に示す式で算出した。
イソプラスタン生成速度（ｎｇ／ｋｇ／ｈｒ）＝｛尿中イソプラスタン濃度（ｎｇ／ｍＬ）×採尿量（ｍＬ）｝／｛前回排尿時からの経過時間（ｈ）×被験者の体重（ｋｇ）｝【００８０】
［２−２］８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度の平均値の統計方法および観察
「アスタキサンチン群」および「対照群」の試験期間中（０週目から８週目まで）におけるそれぞれの８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度の平均値の比較は、対応のないｔ検定を実施することにより行い、「アスタキサンチン群」および「対照群」の平均値に差がないとの仮説をｐ＜０．１において棄却した。また、「アスタキサンチン群」と「対照群」それぞれにおける８−ＯＨｄＧ生成速度およびイソプラスタン生成速度の平均値について、０週目と４週目の比較および０週目と８週目の比較は、ダネット検定を実施することにより行い、０週目と４週目の平均値に差がない、もしくは０週目と８週目の平均値に差がないとの仮説をｐ＜０．１において棄却した。「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）の、８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値ならびに試験期間中の８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値の推移を図７に示す。【００８１】
図７（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目、４週目および８週目における８−ＯＨｄＧおよびイソプラスタンの生成速度測定値の平均値を表した図表であり、図７（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける０週目から８週目まで、すなわち試験期間中の８−ＯＨｄＧの生成速度測定値の平均値の推移を表した図であり、図７（Ｃ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目まで、すなわち試験期間中のイソプラスタンの生成速度測定値の平均値の推移を表した図である。尿中８−ＯＨｄＧは、活性酸素などの酸化ストレスによるＤＮＡの酸化損傷を反映するバイオマーカーであり、８−ＯＨｄＧの生成速度を測定することにより、酸化ストレスの大きさやＤＮＡの酸化的損傷レベルを評価することができ、また、尿中イソプラスタンは、リン脂質がフリーラジカルにより酸化されて形成されるプロスタグランジン様化合物であり、イソプラスタンの生成速度を測定することにより、生体内における脂質酸化の評価が可能であるところ、図７（Ａ）、（Ｂ）および（Ｃ）に示すように、試験期間中の８−ＯＨｄＧの生成速度測定値の平均値については、「アスタキサンチン群」と「対照群」との間に有意差がなく、一方、イソプラスタン生成速度測定値の平均値については、０週目において「対照群」と比較して「アスタキサンチン群」の方が低い値であったが、４週目および８週目においては「対照群」と「アスタキサンチン群」との間に差が認められなかった。このことから、「アスタキサンチン群」において酸化的損傷による溶血が抑制されていない（赤血球の酸化的損傷が抑制されていない）ことが明らかとなった。なお、試験食品の摂取前後について比較をしたところ、「対照群」では差が認められなかったのに対し、「アスタキサンチン群」の平均値は摂取後に上昇したため、摂取前と比べて差が認められた。【００８２】
以上の結果から、実施例１で示された、アスタキサンチンを含有する試験食品が発揮する、溶血すなわち物理的な赤血球の破壊を抑制する効果、および、それによる赤血球数の減少を抑制する効果と、アスタキサンチンが有するとされている、酸化的損傷による溶血すなわち赤血球の酸化的損傷を抑制する効果とは、連関しないことが示された。【００８３】
《実施例３》「アスタキサンチン群」における抗酸化能についての確認試験
実施例１の「アスタキサンチン群」における抗酸化能を確認するために、「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者の血清に含まれる水溶性抗酸化物質の濃度を、実施例１の「馴化期間（０〜４週）」および「観察期間（４〜８週）」を通じた、０〜８週の「試験期間」において測定した。当該確認試験の期間を、「馴化期間（０〜４週）」および「観察期間（４〜８週）」を通じた０〜８週の「試験期間」としたのは、当該抗酸化能と、走行トレーニングを高地または平地で行うこととの因果関係が存在しないためである。【００８４】
具体的には、０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）に「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者に対して採血を実施して、血清中水溶性抗酸化物質の濃度を測定することにより総抗酸化能を測定した後、平均値を算出し、当該算出した「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目における総抗酸化能の平均値の推移を観察することにより本試験を行った。【００８５】
［３−１］総抗酸化能の測定方法
「アスタキサンチン群」および「対照群」の被験者から採血した血液を、遠心分離処理をして血清画分を分取した後、抗酸化能測定キット（Ｒａｎｄｏｘ  Ｔｏｔａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ（商品コード：ＮＸ２３３２）；ＲＡＮＤＯＸ  ＲＥＡＧＥＮＴＳ社）を用いて、比色法により血清中水溶性抗酸化物質の濃度を測定し、総抗酸化能を測定した。【００８６】
［３−２］総抗酸化能の平均値の統計方法および観察
「アスタキサンチン群」および「対照群」の試験期間中（０週目から８週目まで）におけるそれぞれの総抗酸化能の平均値の比較は、対応のないｔ検定を実施することにより行い、「アスタキサンチン群」および「対照群」の平均値に差がないとの仮説をｐ＜０．１において棄却した。また、「アスタキサンチン群」と「対照群」それぞれにおける総抗酸化能の平均値について、０週目と４週目の比較および０週目と８週目の比較は、ダネット検定を実施することにより行い、０週目と４週目の平均値に差がない、もしくは０週目と８週目の平均値に差がないとの仮説をｐ＜０．１において棄却した。「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれにおける０週目（試験食品摂取開始日）、４週目および８週目（試験食品摂取最終日）における総抗酸化能の測定値の平均値、ならびに試験期間中の総抗酸化能の測定値の平均値の推移を図８に示す。【００８７】
図８（Ａ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目、４週目および８週目における総抗酸化能の測定値の平均値を表した図表であり、図８（Ｂ）は、「アスタキサンチン群」および「対照群」それぞれの、０週目から８週目まで、すなわち試験期間中の総抗酸化能の測定値の平均値の推移を表した図である。血清中の水溶性抗酸化物質を検出して、酸化ストレスに対する総合的な総抗酸化能（Ｓｅｒｕｍ  Ｔｏｔａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ）を知ることができるところ、図８（Ａ）および（Ｂ）に示すように、試験期間中の総抗酸化能の測定値の平均値について、「アスタキサンチン群」と「対照群」との間に有意差がなく、これにより、「アスタキサンチン群」と「対照群」とでは、抗酸化能に差がないことが明らかとなった。【００８８】
以上の結果から、実施例１で示された、アスタキサンチンを含有する試験食品が発揮する、溶血すなわち物理的な赤血球の破壊を抑制する効果、および、それによる赤血球数の減少を抑制する効果と、アスタキサンチンが有する抗酸化能とは、連関しないことが示された。
【要約】
【課題】  食経験豊富なアスタキサンチンを用いて、例えば、走り続けることにより継続して足裏を地面にたたきつけるといったような、打撃などの衝撃を伴う運動や行動によって物理的に赤血球が破壊される（溶血する）ことを抑制する組成物などを提供し、ひいては、当該破壊される赤血球数（溶血数）を、造血により新しく作られる赤血球数（造血数）よりも下回らせて、当該物理的な赤血球の破壊（溶血）を原因とする運動性溶血性貧血を抑制および／または改善する組成物などを提供する。
【解決手段】  アスタキサンチンを有効成分とする。【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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