(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）に示す化合物の塩であって、
【化１】
0006950092.tif 000027
前記塩は、リン酸塩の結晶型Ｂであり、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が１５．２°±０．２°、１５．９°±０．２°、１９．２°±０．２°、２３．３°±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする式（Ｉ）に示す化合物の塩。
【請求項２】
前記リン酸塩の結晶型ＢのＸ線粉末回折パターンは、更に２θ値が２２．９°±０．２°、２３．１°±０．２°、２６．９°±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする請求項１に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩。
【請求項３】
前記リン酸塩の結晶型ＢのＸ線粉末回折パターンは、更に２θ値が２０．２°±０．２°、２０．９°±０．２°、２４．６°±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする請求項２に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩。
【請求項４】
前記リン酸塩の結晶型Ｂは、一水和物であることを特徴とする請求項１から３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法であって、
前記リン酸塩の結晶型Ｂは、以下方法のように製造することを特徴とする式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法。
非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩をエタノール、イソプロパノールもしくはイソペンタノールに溶解した後、溶媒揮発によりリン酸塩の結晶型Ｂを得る；または、
非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩をイソペンタノールと水との混合溶媒、もしくはイソプロパノールとメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとの混合溶媒に溶解した後、結晶型Ｂの種結晶を加えて誘導結晶化を行うことによりリン酸塩の結晶型Ｂを得る；
前記非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩は、以下方法のように製造する：
前記式（Ｉ）に示す化合物及びリン酸をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルが存在する環境において反応させた後、撹拌により沈殿を生成させるまたは溶媒を揮発させることで非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を得る
【請求項６】
前記リン酸塩の結晶型Ｂを製造する際に使用する前記混合溶媒において、前記イソペンタノールと前記水との体積比は１８〜２０：１であり、前記混合溶媒において、前記イソプロパノールと前記メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとの体積比は０．８〜１．２：１であることを特徴とする請求項５に記載の製造方法。
【請求項７】
前記リン酸塩の結晶型Ｂを製造する際、２０〜３０℃で前記溶媒揮発を行うことを特徴とする請求項５に記載の製造方法。
【請求項８】
活性成分及び薬学的に許容される担体を含む薬物組成物において、前記活性成分は請求項１から４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩であることを特徴とする薬物組成物。
【請求項９】
ジペプチジルペプチダーゼ活性阻害用薬の製造に用いられる、請求項１から４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩の使用。
【請求項１０】
哺乳類動物の糖尿病の治療、緩和または予防用薬物の製造に用いられる、請求項１から４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に示す化合物の塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
「関連出願の相互参照」
本願は、２０１８年４月２６日に提出された中国特許出願（出願番号：ＣＮ２０１８１０３８４３４９．８）の優先権を主張し、その全ての内容を参照として本発明に取り込まれる。
【０００２】
本発明は、化学及び医薬の分野に係り、より詳しくは、セタグリプチン（Ｃｅｔａｇｌｉｐｔｉｎ）の塩及びその製造方法、薬物組成物、並びにその使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
セタグリプチンの化学名称は、（８Ｒ）−７−［（３Ｒ）−３−アミノ−１−オキシ−４−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブチル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−８−メチル−３−（トリフルオロメチル）イミダゾ［１，５−ａ］ピラジンであり、その構造式は、式（Ｉ）に示すとおりである。
【０００４】
【化１】
0006950092.tif 000002
【０００５】
セタグリプチンの製造方法は、中国特許出願公告第ＣＮ１０３３５１３９１号の実施例１を参照する。セタグリプチンは、ジペプチジルペプチダーゼに関する疾患、例えば、糖尿病、特に２型糖尿病を治療または予防する薬物である。
【０００６】
これまでには、遊離塩基形態のセタグリプチンは粘稠油状物であり、薬物として製造しにくく、セタグリプチンの塩及びその結晶型に関する報道はなかった。そのため、セタグリプチンの塩を開発し、その結晶型について研究することは大きな意義を有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、系統的に選別することにより、一部のセタグリプチンの塩は予想外の効果を有し、製剤の加工に特に適し、良好な薬効を備え、毒性と副作用が少なく、薬物として開発すれば重要な価値を有することを見出した。
【０００８】
本発明は、リン酸塩及びシュウ酸塩を含み、薬物の研究及び産業化適する式（Ｉ）に示す化合物の塩を提供することを目的とし、かかるリン酸塩は非晶質形態または結晶形態であり、２種の結晶型を有する。本発明では、リン酸塩の結晶形態をそれぞれリン酸塩の結晶型Ａ及びリン酸塩の結晶型Ｂと命名し、かかるシュウ酸塩は非晶質形態または結晶形態であり、本発明では、シュウ酸塩の結晶形態をシュウ酸塩の結晶型Ａと命名する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、上記目的を達成するためになされたものであり、以下の態様を含む。
【００１０】
本発明の第１の態様は、式（Ｉ）に示す化合物の塩を提供する。
【００１１】
【化２】
0006950092.tif 000003
【００１２】
前記塩は、結晶形態もしくは非晶質形態のリン酸塩であり、または結晶形態もしくは非晶質形態のシュウ酸塩である。
【００１３】
さらに、式（Ｉ）に示す化合物の塩において、式（Ｉ）に示す化合物と酸とのモル比は１：１である。
【００１４】
本発明に係るリン酸塩の非晶質形態は、そのＸ線粉末回折パターンがほぼ図１に示すとおりである。
【００１５】
本発明に係るリン酸塩の非晶質形態は、１５０℃に加熱すると、その重量が約７．０％減少し、その熱重量分析曲線はほぼ図２に示すとおりである。
【００１６】
本発明に係るリン酸塩の非晶質形態は、そのガラス転移温度が４７．６℃（中間点温度）であり、その示差走査熱量測定曲線はほぼ図２に示すとおりである。
【００１７】
さらに、前記塩は、リン酸塩で且つ結晶型Ａであり、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が１５．８°±０．２°、１７．５°±０．２°、１９．１°±０．２°、２３．３°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００１８】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が１５．２°±０．２°、２０．１°±０．２°、２４．５±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００１９】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が７．６°±０．２°、２２．８°±０．２°、２６．８°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００２０】
具体的に一つの好ましい態様において、そのＸ線粉末回折パターンは、ほぼ図４に示すとおりである。
【００２１】
本発明に係るリン酸塩の結晶型Ａは、１５０℃に加熱すると、その重量が約６．４％減少し、その熱重量分析曲線はほぼ図５に示すとおりである。
【００２２】
本発明に係るリン酸塩の結晶型Ａは、分解前に、１００．９℃及び１３２．７℃（ピーク温度）にある２つの吸熱ピークを有し、その示差走査熱量測定曲線はほぼ図５に示すとおりである。
【００２３】
さらに、前記塩はリン酸塩で且つ結晶型Ｂであり、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が１５．２°±０．２°、１５．９°±０．２°、１９．２°±０．２°、２３．３°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００２４】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値２２．９°±０．２°、２３．１°±０．２°、２６．９°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００２５】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が２０．２°±０．２°、２０．９°±０．２°、２４．６°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００２６】
一つの具体的で好ましい態様において、そのＸ線粉末回折パターンはほぼ図７に示すとおりである。
【００２７】
本発明に係るリン酸塩の結晶型Ｂは、１５０℃に加熱すると、その重量が約６．１％減少し、その熱重量分析曲線はほぼ図８に示すとおりである。
【００２８】
本発明に係るリン酸塩の結晶型Ｂは、分解前に、１０３．２℃及び１３３．５℃（ピーク温度）である２つの吸熱ピークを有し、その示差走査熱量測定曲線はほぼ図８に示すとおりである。
【００２９】
さらに、前記結晶型Ｂは一水和物である。
【００３０】
さらに、前記塩はシュウ酸塩で且つ結晶型Ａであり、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が９．８°±０．２°、１７．３°±０．２°、２４．９°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００３１】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が１６．７°±０．２°、２７．０°±０．２°、２９．５°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００３２】
さらに、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が２０．５°±０．２°、２１．３°±０．２°、２５．３°±０．２°に特徴的なピークを有する。
【００３３】
具体的に一つの好ましい態様において、そのＸ線粉末回折パターンは、ほぼ図２６に示すとおりである。
【００３４】
本発明に係るシュウ酸塩の結晶型Ａは、１３０℃に加熱すると、その重量が約７．６％減少し、その熱重量分析曲線はほぼ図２７に示すとおりである。
【００３５】
本発明に係るシュウ酸塩の結晶型Ａは、分解前に、１２１．３℃（ピーク温度）にある１つの吸熱ピークを有し、その示差走査熱量測定曲線はほぼ図２７に示すとおりである。
【００３６】
本発明の第２の態様は、式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法を提供し、前記式（Ｉ）に示す化合物及びリン酸をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルが存在する環境において反応させた後、撹拌により沈殿を生成させる、または溶媒を揮発させることで、非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を得た。
【００３７】
本発明の第３の態様は、非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩をイソペンタノールと水との混合溶媒に溶解した後、溶媒揮発により結晶型Ａを得る、式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法を提供する。
【００３８】
好ましくは、前記混合溶媒において、前記イソペンタノールと前記水との体積比が１８〜２０：１である。
【００３９】
好ましくは、前記非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を次の方法により製造する：前記式（Ｉ）に示す化合物及びリン酸をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルが存在する環境において反応させる後、撹拌により沈殿生成させるまたは溶媒を揮発させることで製造する。
【００４０】
本発明の第４の態様は、非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩をエタノール、イソプロパノールもしくはイソペンタノールに溶解した後、溶媒揮発により結晶型Ｂを得る、または、非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を、イソペンタノールと水との混合溶媒もしくはイソプロパノールとメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとの混合溶媒に溶解した後、結晶型Ｂの種結晶を加えて誘導結晶化を行うことにより結晶型Ｂを得る、式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法を提供する。
【００４１】
好ましくは、２０〜３０℃で前記溶媒揮発を行う。
【００４２】
好ましくは、前記混合溶媒において、前記イソペンタノールと前記水との体積比が１８〜２０：１であり、前記混合溶媒において、前記イソプロパノールと前記メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとの体積比が０．８〜１．２：１である。
【００４３】
好ましくは、前記非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を次の方法により製造する：前記式（Ｉ）に示す化合物及びリン酸をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルが存在する環境において反応させた後、撹拌により沈殿を生成させるまたは溶媒を揮発させることで製造する。
【００４４】
本発明の第５の態様は、式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法を提供する：前記式（Ｉ）に示す化合物及びシュウ酸をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルが存在する環境において反応させた後、撹拌により沈殿を生成させるまたは溶媒を揮発させることで式（Ｉ）に示す化合物の非晶質のシュウ酸塩を得る。
【００４５】
本発明の第６の態様は、式（Ｉ）に示す化合物の塩の製造方法を提供する：前記式（Ｉ）に示す化合物及びシュウ酸をメタノールが存在する環境において反応させた後、撹拌により沈殿を生成させるまたは溶媒を揮発させることで結晶型Ａを得る。
【００４６】
本発明の第７の態様は、活性成分である前記式（Ｉ）に示す化合物の塩と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物を提供する。
【００４７】
本発明の第８の態様は、ジペプチジルペプチダーゼ活性阻害用薬の製造に用いられる、前記式（Ｉ）に示す化合物の塩の使用を提供する。
【００４８】
本発明の第９の態様は、哺乳類動物の２型糖尿病の治療、緩和または予防用薬物の製造に用いられる、前記式（Ｉ）に示す化合物の塩の使用を提供する。
【００４９】
本発明の第１０の態様は、哺乳類動物の高血糖症の治療、緩和または予防用薬物の製造に用いられる前記式（Ｉ）に示す化合物の塩の使用を提供する。
【発明の効果】
【００５０】
上記の態様にて実施することにより、本発明は従来技術と比べ以下の利点を有する。
【００５１】
本発明の発明者は、式（Ｉ）に示す化合物に対し、塩形成による選別及び関連研究を行うことにより、薬物の開発に適する新規の塩を見出し、薬物の溶解度を向上させる。
【００５２】
特に、本発明のリン酸塩の結晶型Ｂは、高い結晶度、低い吸湿性及び良好な安定性を有し、リン酸塩の結晶型Ｂの経口生体利用率が優れ、長期投与しても良好な耐性を有し、低血糖を誘発しにくく、血清ＤＰＰＩＶに対する阻害効果に優れ、将来の薬物開発のために優れた選択肢を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】図１は、実施例１の非晶質リン酸塩のＸＲＰＤパターンである。
【図２】図２は、実施例１の非晶質リン酸塩のＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線である。
【図３】図３は、実施例１の非晶質リン酸塩の１ＨＮＭＲスペクトルである。
【図４】図４は、実施例２のリン酸塩の結晶型ＡのＸＲＰＤパターンである。
【図５】図５は、実施例２のリン酸塩の結晶型ＡのＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線である。
【図６】図６は、実施例２のリン酸塩の結晶型Ａを５０℃で４８ｈ加熱して得たリン酸塩の結晶型ＢのＸＲＰＤパターンであり、上方のスペクトル線は結晶型Ａに対応し、中間のスペクトル線は結晶型Ａを５０℃に加熱した状態に対応し、下方のスペクトル線は結晶型Ｂに対応する。
【図７】図７は、実施例３のリン酸塩の結晶型ＢのＸＲＰＤパターンである。
【図８】図８は、実施例３のリン酸塩の結晶型ＢのＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線である。
【図９】図９は、実施例３のリン酸塩の結晶型Ｂの１ＨＮＭＲスペクトルである。
【図１０】図１０は、実施例３のリン酸塩の結晶型Ｂの安定性を表すＸＲＰＤ重ね合わ図であり、上方のスペクトル線は４０℃／７５％ＲＨと１週間に対応し、第２のスペクトル線は２５℃／６０％ＲＨと１週間に対応し、第３のスペクトル線は８０℃と２４ｈに対応し、下方のスペクトル線は初期状態に対応する。
【図１１】図１１は、実施例３のリン酸塩の結晶型ＢのＤＶＳ曲線である。
【図１２】図１２は、ＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤパターンであり、上方のスペクトル線はＤＶＳ試験前に対応し、下方のスペクトル線はＤＶＳ試験後に対応する。
【図１３】図１３は、実施例６のリン酸塩の結晶型ＢのＸＲＰＤパターンであり、上方のスペクトル線は実施例６で調製した試料に対応し、下方のスペクトル線は実施例３の試料に対応する。
【図１４】図１４は、実施例７のリン酸塩の結晶型Ｂの単結晶の顕微鏡写真である。
【図１５】図１５は、リン酸塩の結晶型Ｂの化学構造である。
【図１６】図１６は、結晶型Ｂの立体構造図である。
【図１７】図１７は、結晶型Ｂの分子構造式である。
【図１８】図１８は、結晶型Ｂの楕円図である。
【図１９】図１９は、結晶型Ｂの単結晶の単位セル図である。
【図２０】図２０は、結晶型Ｂの単結晶の水素結合を概略的に示す図である。
【図２１】図２１は、結晶型Ｂの単結晶の１次元の鎖状構造を示す図である。
【図２２】図２２は、結晶型Ｂの単結晶の堆積図である。
【図２３】図２３は、結晶型Ｂの単結晶の構造からシミュレーションしたＸＲＰＤと実施例７で製造した結晶型Ｂの透過ＸＲＰＤとを比較する図であり、上方のスペクトル線は結晶型Ｂに対応し、下方のスペクトル線はシミュレーションしたＸＲＰＤに対応する。
【図２４】図２４は、反射ＸＲＰＤを用いて３〜７°において３ｈ走査した図である。
【図２５】図２５は、各グループの血清ＤＰＰＩＶ抑制率であり、抑制率はいずれもモデル対照グループと比較した結果（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図２６】図２６は、実施例９のシュウ酸塩の結晶型ＡのＸＲＰＤパターンである。
【図２７】図２７は、実施例９のシュウ酸塩の結晶型ＡのＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線である。
【図２８】図２８は、リン酸塩の結晶型ＢのＩＣＲマウスのＤＰＰＩＶに対する影響（平均値±標準偏差、ｎ＝３）である。
【図２９】図２９は、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１長期投与のＤＩＯマウスの禁食血糖に対する影響（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３０】図３０は、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１投与２８日目の各グループの禁食血糖データであり、抑制率はいずれもモデル対照グループと比較する結果（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３１】図３１は、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１長期投与のＤＩＯマウスの体重に対する影響（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３２】図３２は、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１投与２８日目の各グループの体重データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３３】図３３は、各グループの血清遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３４】図３４は、各グループの血清総コレステロール（ＴＣＨＯ）データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３５】図３５は、各グループの血清トリグリセリド（ＴＧ）データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３６】図３６は、各グループの血清インスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【図３７】図３７は、各グループの摂餌量データ（平均値±標準偏差、ｎ＝１１）である。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
以下、具体的な実施例にて本発明をさらに説明するが、その内容は本発明の保護範囲を限定するためのものではない。当業者は請求範囲において製造方法及び用いた装置に対し改良を行うことができ、これらの改良も本発明の保護範囲に含まれるものとする。従って、本発明の保護範囲は各請求項に準拠すべきである。
【００５５】
本発明では、特に説明しなければ、比率とは体積比を意味する。
【００５６】
本発明に用いた略称の意味は以下に示すとおりであり、溶媒の略記は表１を参照する。
【００５７】
ＸＲＰＤ：Ｘ線粉末回折；ＤＳＣ：示差走査熱量測定；ＴＧＡ：熱重量分析；ＤＶＳ：動的水蒸気吸着；１Ｈ−ＮＭＲ：プロトン（液体）核磁気共鳴スペクトル；ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；ＩＣ：イオンクロマトグラフィー。
【００５８】
【表１】
0006950092.tif 000004
【００５９】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）：ＸＲＰＤパターンは、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ社のＥｍｐｙｒｅａｎ型Ｘ線粉末回折装置で測定し、ＸＲＰＤパラメータを表２に示す。
【００６０】
【表２】
0006950092.tif 000005
【００６１】
熱重量分析（ＴＧＡ）及び示差走査熱量測定（ＤＳＣ）：ＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線はそれぞれＴＡ社のＱ５００／５０００型熱重量分析装置及びＴＡ社のＱ２００／２０００型示差走査熱量測定装置で測定し、試験パラメータを表３に示す。
【００６２】
【表３】
0006950092.tif 000006
【００６３】
動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）：動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）曲線はＳＭＳ（Ｓｕｒｆａｃｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）社のＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃで測定する。２５℃における相対湿度（ＲＨ）をＬｉＣｌ、Ｍｇ（ＮＯ３）２及びＫＣｌの潮解点で補正する。ＤＶＳ計測パラメータを表４に示す。
【００６４】
【表４】
0006950092.tif 000007
【００６５】
プロトン（液体）核磁気共鳴（１Ｈ  ＮＭＲ）：プロトン（液体）核磁気共鳴スペクトルはＢｒｕｋｅｒ社の４００Ｍ型プロトン（液体）核磁気共鳴装置で測定し、ＤＭＳＯ−ｄ６を溶媒として使用する。
【００６６】
カールフィッシャー水分測定（ＫＦ）：水分測定はメトローム社の８７０型カールフィッシャー水分測定装置で行われ、滴定試薬はＳｉｇｍａ−ａｌｄｒｉｃｈ社のＨｙｄｒａｎａｌ（登録商標）−Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ  ５（３４８０５−１Ｌ−Ｒ、バッチ番号＃ＳＺＢＤ３３３０Ｖ）の市販製品を使用する。水分測定装置は純水を用いて補正する。メタノール（ＨＰＬＣ用）を溶媒として使用する。
【００６７】
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）：高速液体クロマトグラムはＡｇｉｌｅｎｔ社の１２６０ＨＰＬＣで測定する。装置の詳細及び実験パラメータを表５に示す。
【００６８】
【表５】
0006950092.tif 000008
【００６９】
イオンクロマトグラフィー（ＩＣ）：イオンクロマトグラムはＩＣＳ  １１００で測定する。装置の詳細及び実験パラメータを表６に示す。
【００７０】
【表６】
0006950092.tif 000009
【００７１】
本発明の式（Ｉ）に示す化合物の製造方法は、中国特許出願公告第ＣＮ１０３３５１３９１号の実施例１を参照する。
【００７２】
「実施例１：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の非晶質形態の製造方法」
【００７３】
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル０．５ｍＬに溶解した後、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でリン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を回収して得られる。
【００７４】
測定したところ、得られた固体はリン酸塩の非晶質形態であって、そのＸＲＰＤパターンが図１に、ＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線が図２に、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルが図３に示すとおりである。ＸＲＰＤの結果から、当該固体が非晶質であることを表明できる。図２では、ＴＧＡの結果が当該試料を１５０℃に加熱すると、その重量が７．０％減少し、ｍＤＳＣの結果が試料のガラス転移温度が４７．６℃（中間点温度）であることを示す。図３の１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）スペクトル及び次の表７のＫＦ結果（４．３％）は、当該固体には残留した溶媒としてジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブタノール及び水が含まれたことを示す。
【００７５】
【表７】
0006950092.tif 000010
【００７６】
実施例１で製造した非晶質形態のリン酸塩の大略の溶解度を測定し、試験では、先に実施例１で製造した非晶質形態のリン酸塩約２ｍｇを秤量し、３ｍＬガラス瓶に加え、そして次の表８に示す溶媒をそれぞれ毎回２０μＬ加え、試料が完全に溶解するか否かを観察した。溶媒を２．０ｍＬ加えた後も、試料が依然として完全に溶解しなければ、試験を終了する。大略の溶解度結果を表８に示す。
【００７７】
【表８】
0006950092.tif 000011
【００７８】
「比較例１〜比較例３」
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメタノール０．５ｍＬに溶解してから、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でリン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を得ず、引き続き室温で揮発させるが、依然として固体を得なかった。
【００７９】
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをアセトン０．５ｍＬに溶解してから、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でリン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を得ず、引き続き室温で揮発させるが、依然として固体を得なかった。
【００８０】
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇを体積比１９：１のイソプロパノールと水との混合溶媒０．５ｍＬに溶解してから、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でリン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を得ず、引き続き室温で揮発させるが、依然として固体を得なかった。
【００８１】
「実施例２：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の結晶型Ａの製造方法」
【００８２】
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩を体積比１９：１のイソペンタノールと水との混合溶媒に溶解し、溶液を徐々に揮発させ、固体を回収して得た。
【００８３】
測定したところ、得られた固体はリン酸塩の結晶型Ａであり、そのＸＲＰＤデータを次の表９に、そのＸＲＰＤパターンを図４に、ＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線を図５に示す。ＸＲＰＤ結果から、結晶度が高いことを示し、ＴＧＡ結果から試料を１５０℃に加熱するとその重量が６．４％減少したことを示し、ＤＳＣ結果は試料が分解前に、１００．９℃及び１３２．７℃（ピーク温度）である２つの吸熱ピークを有することを示す。図６のＸＲＰＤパターンから、リン酸塩の結晶型Ａを５０℃で４８ｈ加熱した後、リン酸塩の結晶型Ｂになったことを示す。
【００８４】
【表９】
0006950092.tif 000012
【００８５】
「実施例３：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の結晶型Ｂの製造方法」
【００８６】
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇをエタノール１ｍＬに溶解し、室温（２５±２℃）で徐々に揮発させて固体を得た。
【００８７】
測定したところ、得られた固体はリン酸塩の結晶型Ｂであり、そのＸＲＰＤデータを次の表１０に、そのＸＲＰＤパターンを図７に、ＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線を図８に、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを図９に示す。ＸＲＰＤ結果から、当該結晶型の結晶度が高いことを示す。ＴＧＡ結果から試料を１５０℃に加熱するとその重量が６．１％減少したことを示す。ＤＳＣ結果から試料が分解前に、１０３．２℃及び１３３．５℃（ピーク温度）である２つの吸熱ピークを有することを示す。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）スペクトルはイソプロパノールのピークが存在しないことを示し、結晶型Ｂの試料がＴＧＡにおいて加熱されるとその重量が減少したことを組み合わせて、結晶型Ｂは水和物であることを判定できる。繰り返し製造したリン酸塩の結晶型Ｂの化学量論比をＨＰＬＣ／ＩＣ法により測定したところ、遊離塩基とリン酸との比が１：１であることを示す。
【００８８】
【表１０】
0006950092.tif 000013
【００８９】
「物理的性質の研究」
【００９０】
当該実施例で製造したリン酸塩の結晶型Ｂを１．５ｍＬバイアルに入れ、バイアルを，それぞれ４０℃／７５％ＲＨ、２５℃／６０％ＲＨの開口状態で１週間、８０℃で２４ｈのような異なる条件に静置した。得られた試料に対しＸＲＰＤ計測及びＨＰＬＣ計測をそれぞれ行い、５℃で密封して静置した試料をＨＰＬＣ純度計測用の参照試料（初期）として用いた。試料を８０℃で２４ｈ静置した後、その外観は白色固体から黄色固体に変化した。図１０及び次の表１１の結果によると、１週間にわたる安定性試験では試料のＸＲＰＤパターンが変わらないため結晶型の転変が生じず、その純度にも明らかな変化がないことから、リン酸塩の結晶型Ｂは計測条件において良好な物理的・化学的安定性を有することが分かった。図１１のＤＶＳ結果より、試料が２５℃／４０％ＲＨから２５℃／８０％ＲＨまでの区間において、水分の吸着／脱着の変化が緩やかであることを示す。２５℃／８０％ＲＨにおいて、は０％ＲＨに対し重量が６．５％増加した。図１２のＸＲＰＤ結果から、リン酸塩の結晶型ＢのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤが一致し、結晶形の変化が生じなかったことを示す。
【００９１】
【表１１】
0006950092.tif 000014
【００９２】
「リン酸塩の結晶型Ｂの血中濃度と血清ＤＰＰＩＶ活性との関係の研究」
【００９３】
被検試料及び陽性薬：実施例３でリン酸塩の結晶型Ｂ（ＤＰＰＩＶ−Ｐ１と命名する）を製造した。リン酸塩の結晶型Ｂを秤量して一定濃度の溶液を調製し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇとする。陽性対照薬としてリン酸シタグリプチンを秤量し、溶液に調製し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇとする。
【００９４】
実験動物：ＣＤ−１（ＩＣＲ）マウス、４週齢、体重約１８〜２２ｇである。
【００９５】
グルーピング及び投与方案：マウスを予備飼育し、実験開始前１日に、体重に基づき無作為にグルーピングを行い、一晩禁食させた。次のように６つの実験グループに分けた：（１）陰性対照グループ；（２）リン酸シタグリプチン３ｍｇ／ｋｇ；（３）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ０．１ｍｇ／ｋｇ；（４）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ０．３ｍｇ／ｋｇ；（５）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  １ｍｇ／ｋｇ；（６）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ３ｍｇ／ｋｇ。さらに、ＤＰＰＩＶの初期値検出用として、１グループを別途設置した。実験グルーピングを行った後、別途設置した１グループを採血し、これ以外の全ての動物に対し、投与体積を１０ｍＬ／ｋｇとする胃内投与を実施する；投与後に採血し、これ以外の全ての動物に葡萄糖を投与して刺激した。葡萄糖投与後に２０ｍｉｎ、４０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ及び１２０ｍｉｎ経過すると、再びそれぞれ採血し、血漿を採取して血中濃度、ＤＰＰＩＶ活性を検出した。ＤＰＰＩＶ−Ｐ１は動物の体重に影響を与え、各グループの体重データを表１２に示す。
【００９６】
【表１２】
0006950092.tif 000015
【００９７】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＩＣＲマウスの血清ＤＰＰＩＶ活性に対する影響として、ＤＰＰＩＶ活性検出結果を図２８に示す。図２８により、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１が良好な投与量―反応の関係（ｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ）を有することが分かった。
【００９８】
薬力学−薬物濃度相関性研究：投与後１ｈ、１．３３ｈ、１．６７ｈ、２ｈ及び３ｈの時点に採血して血中濃度を測定し、結果を次の表１３に示す。ＤＰＰＩＶ−Ｐ１の薬物血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈ）は、１６．０９ｎｇ・ｈ／ｍＬ、５２．６５ｎｇ・ｈ／ｍＬ、１６２．３ｎｇ・ｈ／ｍＬ及び５４２．２８ｎｇ・ｈ／ｍＬというように、投与量の増加に伴い増加した。また投与量が同じである条件において、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ３ｍｇ／ｋｇグループの薬物血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈ）が５４２．２８ｎｇ・ｈ／ｍＬで、リン酸シタグリプチン３ｍｇ／ｋｇグループの薬物血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈ）＝３６９．７４ｎｇ・ｈ／ｍＬより高かった。
【００９９】
【表１３】
0006950092.tif 000016
【０１００】
＊血中濃度の単位はｎｇ／ｍＬであり、＊＊薬物血中濃度時間曲線下面積はＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈと記し、単位はｎｇ・ｈ／ｍＬである。
【０１０１】
結論：ＩＣＲマウスのＰＫ／ＰＤ実験過程では、投与後１ｈ、１．３３ｈ、１．６７ｈ、２ｈ及び３ｈの時点で血液試料を採取し、化合物の濃度及びＤＰＰＩＶ活性を検出することにより、薬効と血中濃度との相関性を初歩的に研究した。当該モデルでは、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１が投与量依存的にＤＰＰＩＶの活性を阻害し、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１の薬物血中濃度時間曲線下面積が投与量の増加に伴い増加し、良好な投与量依存性を示している。投与量が同じである条件において、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１の薬物血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈ）は５４２．２８ｎｇ・ｈ／ｍＬで、リン酸シタグリプチンの薬物血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣｅｆｆ０〜３ｈ）＝３６９．７４ｎｇ・ｈ／ｍＬより高めた。これも、リン酸シタグリプチンと比べ、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１がより優れた経口生体利用率を有することを表明している。
【０１０２】
「リン酸塩の結晶型Ｂの長期投与のＤＩＯマウスに対する血糖降下効果の研究」
【０１０３】
被検試料及び陽性薬：実施例３で製造したリン酸塩の結晶型Ｂ（ＤＰＰＩＶ−Ｐ１）。リン酸塩の結晶型Ｂを秤量して一定濃度の溶液に調製し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇとする。陽性対照薬としてリン酸シタグリプチンを秤量し、溶液を調製し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇとする。
【０１０４】
実験動物：Ｃ５７ＢＬ１６マウス、５週齢、体重約１３〜１６ｇ。
【０１０５】
グループ化及び投与方法：予備飼育し、正常対照グループ及びモデルグループに分け、高脂肪飼料（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｄｉｅｔｓ、Ｄ１２４９２）を用いて飼育した。マウスの空腹時血糖値が７ｍＭ以上になると、マウスがＤＩＯマウスになったと見なし、血糖降下薬効試験に組み入れる。組み入れたＤＩＯマウスを血糖及び体重に基づき階層的かつ無作為にグループ化した。合計で次のように６つの実験グループに分けた：（１）リーンマウス（ｌｅａｎ  ｍｏｕｓｅ（やせ型マウス））対照グループ；（２）モデル対照グループ；（３）リン酸シタグリプチン３０ｍｇ／ｋｇ；（４）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ０．３ｍｇ／ｋｇ；（５）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ３ｍｇ／ｋｇ；（６）ＤＰＰＩＶ−Ｐ１  ３０ｍｇ／ｋｇ。実験開始後に、毎日動物に胃内投与を実施し、投与体積は１０ｍ１／ｋｇとする。毎週体重を秤量し、空腹血糖値を測定した。給餌量、余剰量を記録して、摂餌量を算出した。投与終了後に、一晩禁食させ、採血し、血清を採取して遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）、総コレステロール（ＴＣＨＯ）、トリグリセリド（ＴＧ）、インスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）及びＤＰＰＩＶ活性を測定した。
【０１０６】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＤＩＯマウスの血糖レベルに対する影響として、実験期間の血糖監視結果を表１４及び図２９に、投与後２８日目の禁食血糖データを表１５及び図３０に示す。結果から分かるように、実験終了時に、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１は投与量依存的に血糖の上昇を抑制し、抑制率はそれぞれ１４．２％、９．９％及び１８．５％であった。モデル対照グループと比べて、有意差または非常な有意差を有する（ｐ＜０．０５または０．０１）。
【０１０７】
【表１４】
0006950092.tif 000017
【０１０８】
表中、モデル対照グループと比べた結果であり、＊はｐ＜０．０５を表し、＊＊はｐ＜０．０１を表す。
【０１０９】
【表１５】
0006950092.tif 000018
【０１１０】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＤＩＯマウスの体重に対する影響として、実験期間の体重検出結果を図３１及び表１６に、投与後２８日目の体重を図３２及び表１７に示す。投与後２８日目の体重及び投与開始時の体重にはいずれも有意差がない。
【０１１１】
【表１６】
0006950092.tif 000019
【０１１２】
【表１７】
0006950092.tif 000020
【０１１３】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＤＩＯマウスの関連代謝パラメータに対する影響については、実験終了時に、一晩（１６ｈ）禁食させた処理を行い、採血して血清を分離し、遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）、総コレステロール（ＴＣＨＯ）、トリグリセリド（ＴＧ）、インスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）及びＤＰＰＩＶ活性を検出した。図３３、図３４、図３５、図３６及び図３７はそれぞれＮＥＦＡ、ＴＣＨＯ、ＴＧ、ｉｎｓｕｌｉｎ及び摂餌量のデータ統計結果である。これらのデータから分かるように、長期投与終了時に、モデル対照グループと比べ、リン酸シタグリプチン−３０グループ及びＤＰＰＩＶ−Ｐ１−３０グループの総コレステロール（ＴＣＨＯ）はそれぞれ２５．４％（ｐ＜０．０１）及び１８．４％（ｐ＜０．０１）降下し、リン酸シタグリプチン−３０グループ及びＤＰＰＩＶ−Ｐ１−０．３グループのインスリン（ｉｎｓｕｌｉｎ）はそれぞれ５８．３％及び２８．３％降下し（ただし、モデル対照グループと比べて有意差がない）、その他の代謝データにはいずれも有意差がない。表１８は各代謝パラメータのデータをまとめた表である。
【０１１４】
【表１８】
0006950092.tif 000021
【０１１５】
＊＊はモデル対照グループと比べてｐ＜０．０１
【０１１６】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＤＩＯマウスのＤＰＰＩＶ活性に対する影響として、薬物の各グループの血清ＤＰＰＩＶに対する阻害効果を図２５に示す。ＤＰＰＩＶ−Ｐ１のＤＰＰＩＶに対する阻害効果は投与量依存性を示し、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１−０．３、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１−３及びＤＰＰＩＶ−Ｐ１−３０の抑制率はそれぞれ４７．１％、８２．７％及び９５．３％であり、モデル対照グループと比べて非常に有意差がある（ｐ＜０．０１）。リン酸シタグリプチン−３０の抑制率は６６．４％であり、この結果は血糖の抑制率とほぼ一致する。
【０１１７】
結論：食事誘導により糖尿病を罹患させたＤＩＯマウスに対し長期投与を行い、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１の作用を観察する。その結果は、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１を長期投与した後、動物の禁食血糖にとって明らかな影響がなく、陽性薬であるリン酸シタグリプチンと一致することを示すことから、かかる薬物は食前の低血糖を引き起こしにくいことを表明している。
【０１１８】
また、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１を長期経口投与した後、動物の体重、摂餌量、血清遊離脂肪酸、トリグリセリド等指標に対していずれも明らかな影響がなく、動物の正常な脂質代謝に影響を与えない。一方、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１及び陽性薬であるリン酸シタグリプチンはいずれも血清インスリンのレベルを降下させることができ、両者は異なる投与量においても同じ程度の降下を認めているのが、薬物による血糖降下がインスリンの分泌不足を誘発することに関係する。
【０１１９】
ＤＰＰＩＶ−Ｐ１を長期投与した後、血清ＤＰＰＩＶに対する阻害作用はリン酸シタグリプチンをはるかに上回り、３ｍｇ／ｋｇ投与量ではリン酸シタグリプチンを３０ｍｇ／ｋｇ投与する場合と同等な効果を有する。
【０１２０】
以上から分かるように、ＤＰＰＩＶ−Ｐ１を長期投与する場合、良好な耐性を有し、低血糖を誘発しにくと共に、リン酸シタグリプチンと比べ、より優れた血清ＤＰＰＩＶの阻害作用を有する。
【０１２１】
「実施例４：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の結晶型Ｂの製造方法」
【０１２２】
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇをイソプロパノールに溶解して飽和溶液に調製した後、室温（２５±２℃）で徐々に揮発させて固体を得た。測定したところ、得られた固体はリン酸塩の結晶型Ｂである。
【０１２３】
「実施例５：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の結晶型Ｂの製造方法」
【０１２４】
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇをイソペンタノール０．３ｍＬに溶解した後、室温（２５±２℃）で徐々に揮発させて固体を得た。測定したところ、得られた固体はリン酸塩の結晶型Ｂである。
【０１２５】
「実施例６：式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩の結晶型Ｂの製造方法」
【０１２６】
１．実施例１で製造した非晶質リン酸塩１５０ｍｇを秤量し、２０ｍＬのガラス瓶に入れた。
【０１２７】
２．イソペンタノール／水（１９／１、ｖ／ｖ）の混合溶液４ｍＬを加え、撹拌して溶解させた。
【０１２８】
３．上記ガラス瓶に実施例３で製造したリン酸塩の結晶型Ｂの種結晶５ｍｇを加えた。
【０１２９】
４．室温で磁気撹拌（５００ｒｐｍ）し、１８ｈ後にサンプリングして分析し、ＸＲＰＤ結果から、リン酸塩の結晶型Ｂを得たことを示し、そのＸＲＰＤパターンを図１３に示す。
【０１３０】
「実施例７」
１．実施例１で製造した非晶質のリン酸塩１５０ｍｇを秤量し、２０ｍＬのガラス瓶に入れた。
【０１３１】
２．イソプロパノール／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１／１、ｖ／ｖ）の混合溶液４ｍＬを加え、撹拌して溶解させた。
【０１３２】
３．上記ガラス瓶に実施例３で製造したリン酸塩の結晶型Ｂの種結晶５ｍｇを加えた。
【０１３３】
４．室温で徐々に揮発させてリン酸塩の結晶型Ｂの単結晶を得た。
【０１３４】
図１４はリン酸塩の結晶型Ｂの単結晶の顕微鏡写真である。
【０１３５】
リン酸塩の結晶型Ｂの針状の単結晶を選択し、単結晶の回折データを収集することで、単結晶の構造を解析した。次の表１９には単結晶の構造及び構造補正データを示している。図１５は結晶型Ｂの化学構造である。図１６、図１７、図１８はそれぞれ結晶型Ｂの立体構造図、分子構造図及び楕円図を示す。単結晶構造の解析により結晶型Ｂの化学構造を確定し、当該構造では遊離塩基、リン酸根及び水分子のモル比が１：１：１である。単結晶構造の解析により、結晶型Ｂの不斉炭素原子Ｃ８（Ｒ）及びＣ１４（Ｒ）の絶対配置も確認した。結晶型Ｂの構造において、Ｏ６及びＯ６’は同一の水分子が無秩序であることを示し、当該水分子の熱振動が激しく、Ｏ６及びＯ６’位置に出現する確率はいずれも５０％である。図１９は結晶型Ｂの単結晶の単位セル図である。結晶の基本構造単位では、合計で６つの結晶型Ｂの基本単位を有し、すなわち、６つの遊離塩基、６つのリン酸イオン及び６つの水分子を有する。図２０は結晶型Ｂの単結晶の水素結合を概略的示す図である。図２１のように、結晶型Ｂの構造では、各遊離塩基のアミノ基がＮ−Ｈ…Ｆ水素結合を介して、隣接する２つの遊離塩基と連結され、ｃ軸方向に延伸して１次元の鎖状構造を形成する。リン酸イオンはＮ−Ｈ…Ｏという水素結合を介してこれらの１次元鎖を結合させて、ｃ軸方向の１次元空洞構造を形成し、水分子はＯ−Ｈ…Ｏという水素結合を介してリン酸イオンに結合されて、遊離塩基とリン酸イオンから形成された１次元空洞に填充されている。図２２は結晶型Ｂの単結晶の堆積図である。図２３は結晶型Ｂの単結晶構造からシミュレーションしたＸＲＰＤパターンと、実施例７で製造した結晶型Ｂの透過ＸＲＰＤパターンとを比較した図であり、該図から分かるように、単結晶構造からシミュレーションしたＸＲＰＤパターンは結晶型ＢのＸＲＰＤパターンとほぼ一致し、シミュレーションしたパターンにおいて、２θが４．３８°における回折ピークは、透過ＸＲＰＤパターンでは明らかでなく（図２４は反射ＸＲＰＤを用いて３〜７°において３ｈスキャンした結果であり、回折ピークが確認された）、これは優先方位に配向することによる可能性がある。
【０１３６】
単結晶試料の顕微鏡写真は上海測維社のＰＸＳ９−Ｔ型実体顕微鏡を用いて室温で撮影した。単結晶の回折データはＢｒｕｋｅｒ社のＤ８  ＡＤＶＡＮＣＥ型単結晶回折装置（Ｍｏ  Ｋα，λ＝０．７１０７３Å）を用いて２９０（２）Ｋで測定した。結晶構造は直接法（ＳＨＥＬＸＴＬ及びＯＬＥＸ２）で解析し、そして差Ｆｏｕｒｉｅｒ合成法を複数回繰り返して全ての非水素原子の座標を確定し、さらにフルマトリクス最小二乘法を用いて全ての非水素原子について異方性温度因子補正を行った。構造図はＤｉａｍｏｎｄで生成し、単位セル図及び理論的にシミュレーションしたＸＲＰＤパターンはＭｅｒｃｕｒｙで生成した。透過ＸＲＰＤデータはＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ社のＥｍｐｙｒｅａｎ型Ｘ線粉末回折装置で測定した。反射ＸＲＰＤデータはＸｐｅｒｔ３型Ｘ線粉末回折装置で測定した。
【０１３７】
【表１９】
0006950092.tif 000022
【０１３８】
「比較例４」
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇを１．５ｍＬバイアルに加え、次の表に示す溶媒をそれぞれ０．２〜０．５ｍＬ加えることで懸濁液を得て、室温で３日間磁気撹拌し、遠心分離して固体を得て、ＸＲＰＤパターンを計測し、結果を次の表２０に示し、Ｎ／Ａは固体を得なかったことを示す。また、本発明では、５℃及び５０℃でそれぞれ懸濁撹拌実験を行ったが、いずれも結晶形を得なかった。
【０１３９】
【表２０】
0006950092.tif 000023
【０１４０】
「比較例５」
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇをＭｅＯＨ、ＩＰＡｃ、ＡＣＮ、Ａｃｅｔｏｎｅ、２−Ｂｕｔａｎｏｎｅ、ＴＨＦ、２−ＭｅＴＨＦ、１，４−Ｄｉｏｘａｎｅ、Ｈ２Ｏ、Ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１／１）、Ａｃｅｔｏｎｅ／ＩＰＡｃ（１／１）、Ａｃｅｔｏｎｅ／ＤＣＭ（１／１）、ＥｔＯＨ／ＣＨＣｌ３（１／１）、ＩＰＡ／Ｈｅｐｔａｎｅ（１／１）、ＴＨＦ／Ｔｏｌｕｅｎｅ（１／１）、ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３（５／１）、ＭｅＯＨ／Ｈｅｐｔａｎｅ（５／１）にそれぞれ溶解して清澄溶液を得た後、室温（２５±２℃）で徐々に揮発させたところ、いずれも固体を得なかった。
【０１４１】
「比較例６」
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇをＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、ＩＰＡｃ、ＡＣＮ、Ａｃｅｔｏｎｅ、２−Ｂｕｔａｎｏｎｅ、ＴＨＦ、２−ＭｅＴＨＦ、１，４−Ｄｉｏｘａｎｅ、Ｈ２Ｏ、Ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１／１）、Ａｃｅｔｏｎｅ／ＩＰＡｃ（１／１）、Ａｃｅｔｏｎｅ／ＤＣＭ（１／１）、ＥｔＯＨ／ＣＨＣｌ３（１／１）、ＩＰＡ／Ｈｅｐｔａｎｅ（１／１）、ＴＨＦ／Ｔｏｌｕｅｎｅ（１／１）、ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３（５／１）、ＭｅＯＨ／Ｈｅｐｔａｎｅ（５／１）にそれぞれ溶解して清澄溶液を得た後、室温あるいは５℃で徐々に揮発させたところ、いずれも固体を得なかった。
【０１４２】
「比較例７」
実施例１で製造した非晶質形態の式（Ｉ）に示す化合物のリン酸塩１５ｍｇを３ｍＬバイアルに加え、次の表に示す良溶媒をそれぞれ加えて清澄溶液を得て、このガラス瓶を開口状態で対応する貧溶媒（次の表２１を参照）４ｍＬを入れた２０ｍＬガラス瓶内に置き、密封して室温で５日間静置し、結果を次の表２１に示し、いずれも固体を得なかった。
【０１４３】
【表２１（１）】
0006950092.tif 000024
【表２１（２）】
0006950092.tif 000025
【０１４４】
本発明ではさらに、複数種の溶媒による気体−固体浸透実験、貧溶媒添加試験、貧溶媒−良溶媒添加試験、緩慢降温試験、ポリマー誘導試験、イオン液体誘導試験、湿式研磨試験、緩慢晶析試験も行ったが、いずれも結晶型を得なかった。
【０１４５】
「実施例８：式（Ｉ）に示す化合物のシュウ酸塩の非晶質形態の製造方法」
【０１４６】
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル０．５ｍＬに溶解し、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でシュウ酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を回収して得られた。測定したところ、得られた固体はシュウ酸塩の非晶質形態である。
【０１４７】
「実施例９：式（Ｉ）に示す化合物のシュウ酸塩の結晶型Ａの製造方法」
【０１４８】
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメタノール０．５ｍＬに溶解し、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でシュウ酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を回収して得られた。
【０１４９】
測定したところ、得られた固体はシュウ酸塩の結晶型Ａであり、そのＸ線粉末回折データを次の表２２に、そのＸＲＰＤパターンを図２６に、ＴＧＡ曲線及びＤＳＣ曲線を図２７に示す。ＸＲＰＤ結果から、その結晶度が高いことを示し、ＴＧＡ結果から試料を１３０℃に加熱するとその重量が７．６％減少したことを示し、ＤＳＣ結果から、試料が分解前に、１２１．３℃（ピーク温度）にある１つの吸熱ピークを有することを示す。
【０１５０】
【表２２】
0006950092.tif 000026
【０１５１】
「比較例８」
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル０．５ｍＬに溶解してから、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比でニコチン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を得ず、引き続き室温で揮発させたところ、依然として固体を得なかった。
【０１５２】
「比較例９」
式（Ｉ）に示す化合物２０ｍｇをメタノール０．５ｍＬに溶解し、式（Ｉ）に示す化合物と等モル比のニコチン酸を加え、室温（２５±２℃）で撹拌しながら１２ｈ反応させた後、固体を得ず、引き続き室温で揮発させたところ、依然として固体を得なかった。
【０１５３】
上記実施例は、本発明の主旨やその特徴を説明するためのものに過ぎず、本発明の保護範囲を限定することなく、当業者がこの説明により本発明の内容を把握して実施できるようにするためのものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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