(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）の一般式で示される、ソホロリピッド誘導体。
式（１）
【化１】
0006954548.tif 000015
（式中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立して、水素、炭素数２〜２２の脂肪酸エステル、または上記ＳＬ基であるが、Ｒ１〜Ｒ３の少なくとも１つはＳＬ基である。ＳＬ基中のＲは、同一または異なって、水素またはアセチル基を表し、ｎは１１〜１９の整数を表す。）
【請求項２】
下記式（２）の化学式で表されるいずれかの化合物である、ソホロリピッド誘導体。
式（２）
【化２】
0006954548.tif 000016
（式中のＳＬ基は、上記式（１）での定義と同一であり、Ｒ’は炭素数２〜２２の脂肪酸エステルを表す。）
【請求項３】
請求項１または２に記載のソホロリピッド誘導体からなる界面活性剤、洗浄剤、分散剤、または乳化剤。
【請求項４】
飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品、または化粧品用の、請求項３に記載の界面活性剤、洗浄剤、分散剤、または乳化剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ソホロリピッド誘導体および該誘導体を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
親水基が糖で構成される糖型界面活性剤のうち、微生物由来の天然界面活性剤であり安全性の高い糖型バイオ界面活性剤は、優れた界面活性剤として知られている。これらのうちソホロリピッドは、糖脂質であり両親媒性構造を有するため強い界面活性作用を有し、生分解性と安全性が高いことから、バイオサーファクタントの主役として用途開発が進められている。
【０００３】
ソホロリピッドを生産する酵母としては、担子菌酵母であるスタルメレラ・ボンビコラ（Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）が代表的であり、そのバイオサーファクタントの生産力は培養液１Ｌ当たり４００ｇ以上にも達するため、商業ベースの生産に使用されている。
ソホロリピッドは、グルコースが２→１位でエーテル結合してできた二糖であるソホロースの1位に、ヒドロキシ脂肪酸がエーテル結合してできた下記式（３）で表されるラクトン型（ＬＳＬ）と、下記式（４）で表される酸型（ＡＳＬ）の分子構造を有する糖脂質である。微生物生産物中にはこれらが一種または複数種含まれる混合物として存在する。
【０００４】
ソホロリピッドのラクトン型（非イオン型）と酸型（アニオン型）とでは、界面活性剤としての性質が大きく異なり、これらの組成の異なる混合物やこれらを作り分ける方法など、ソホロリピッド製品の構造や機能のバラエティを拡充する技術開発が行われている。
例えば、上記のスタルメレラ・ボンビコラ（Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）が生産するソホロリピッドは、一般的にラクトン型と酸型がおおよそ６〜８：２〜４の混合物として得られ、主成分であるラクトン型は酸型と比べて低濃度で優れた表面張力低下能を示す（非特許文献１）ほか、高い抗菌活性を示すことが報告されている（非特許文献２）。
【０００５】
一方、加水分解によってラクトン環を開環して化学的に安定な高純度の酸型ソホロリピッドを得て、これを配合した洗浄剤が報告されている（特許文献１）。また、キャンディダ・フロリコラ（Ｃａｎｄｉｄａ  ｆｌｏｒｉｃｏｌａ）を生産菌として培養することで、酸型ソホロリピッドのみを選択的に製造する方法が報告されている（特許文献２）。
さらに、複数存在する官能基が修飾されたソホロリピッド誘導体のほか、ソホロリピッド重合体などのラクトン型、酸型とは分類の異なる新規構造の誘導体も報告されている（特許文献３、非特許文献３）。
【０００６】
式（３）
【化３】
0006954548.tif 000002
（ＬＳＬ）
式（４）
【化４】
0006954548.tif 000003
（ＡＳＬ）
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００６−７０２３１号公報
【特許文献２】特開２００８−２４７８４５号公報
【特許文献３】国際公開第２０１５／２０１１４号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Journal of Oleo Science (2013) Vol.62, p.857-864
【非特許文献２】Journal of Microbiology and Biotechnology (2002) Vol.12, p.235-241
【非特許文献３】Carbohydrate Research (2012) Vol.348, p.33-41
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従来知られているソホロリピッドの構造は、おおよそ上記のラクトン型と酸型の二つのパターンしかなく、物性・機能の拡充のためには、構造のバラエティの拡張が求められている。
本発明は、飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品、または化粧品などの広範囲の分野に適用することができる、新規なソホロリピッド誘導体を提供することを課題とする。
また、本発明は、新規ソホロリピッドを含む組成物、特に界面活性剤、洗浄剤、または乳化剤を提供することをその課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らはソホロリピッド生産菌として広く研究されているＳｔａｒｍｅｒｅｌｌａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａの培養生産物中に、従来知られているソホロリピッドとは分子構造が異なる未知の成分が存在することを各種機器分析によって確認し、これらを単離・精製して構造解析を行い、新規構造のソホロリピッド誘導体であることを解明した。
物性解析によれば、これら新規ソホロリピッド誘導体は、従来のソホロリピッドとは異なる界面活性、自己組織化特性を示し、優れた洗浄成分として機能することを確認して、本発明の完成に至った。
【００１１】
本発明は、下記（１）、（２）に記載のソホロリピッド誘導体に関する。
（１）下記式（１）の一般式で示される、ソホロリピッド誘導体。
式（１）
【化１】
0006954548.tif 000004
（式中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立して、水素、炭素数２〜２２の脂肪酸エステル、または上記ＳＬ基であるが、Ｒ１〜Ｒ３の少なくとも１つはＳＬ基である。ＳＬ基中のＲは、同一または異なって、水素またはアセチル基を表し、ｎは１１〜１９の整数を表す。）
（２）下記式（２）の化学式で表されるいずれかの化合物である、ソホロリピッド誘導体。
式（２）
【化２】
0006954548.tif 000005
（式中のＳＬ基は、上記式（１）での定義と同一であり、Ｒ’は炭素数２〜２２の脂肪酸エステルを表す。）
【００１２】
また、本発明は、下記（３）、（４）に記載の界面活性剤、洗浄剤、分散剤、または乳化剤に関する。
（３）上記（１）または（２）に記載のソホロリピッド誘導体からなる界面活性剤、洗浄剤、分散剤、または乳化剤。
（４）飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品、または化粧品用の、上記（３）に記載の界面活性剤、洗浄剤、分散剤、または乳化剤。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の新規ソホロリピッド誘導体は、従来のソホロリピッドとは異なる界面活性や自己集合特性を示し、優れた洗浄成分として機能するので、ソホロリピッド製品の構造・機能バラエティを拡充できる。従来のソホロリピッドと比較して、水溶性が高い非イオン型界面活性剤として機能する。
また、安全性の高い天然物由来のソホロリピッド誘導体であるから、各製品の安全性を高めることもでき、飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品または化粧品などの広範囲の分野に適用できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例１で取得したＳＬ混合物固体の順相ＴＬＣ分析の結果を示す。
【図２】実施例１で取得したＳＬ混合物固体の逆相ＴＬＣ分析の結果を示す。
【図３】実施例１で取得したＳＬ混合物固体を逆相カラムクロマトグラフィーに供したクロマトグラムを示す。
【図４】実施例４で分離した化合物ＡのＬＣ／ＭＳ解析の結果を示す。
【図５】実施例４で分離した化合物ＢのＬＣ／ＭＳ解析の結果を示す。
【図６】実施例４で分離した化合物ＣのＬＣ／ＭＳ解析の結果を示す。
【図７】化合物Ｂの１Ｈ−ＮＭＲの結果を示す。
【図８】化合物Ｂの１Ｈ−ＮＭＲの結果（拡大）を示す。
【図９】化合物Ａの１Ｈ−ＮＭＲの結果を示す。
【図１０】化合物Ｃの１Ｈ−ＮＭＲの結果を示す。
【図１１】化合物Ａ、Ｂ、Ｃそれぞれに蒸留水を加えた、０．１ｗｔ％水溶液の写真。
【図１２】化合物Ａ、Ｂ、Ｃのそれぞれの表面張力低下能を示す。Ａは薄い●、Ｂは○、Ｃは●。
【図１３】実施例１で取得したＳＬ混合物固体のＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ解析の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、新規ソホロリピッド誘導体と、該誘導体を含む組成物に係るものである。
本発明のソホロリピッド誘導体（以下、「ＳＬ誘導体」ということがある。）は、下記の一般式（１）で示される。
式（１）
【化１】
0006954548.tif 000006
ここで、式中のＲ１〜Ｒ３はそれぞれ独立して、水素、炭素数２〜２２のいずれかの脂肪酸エステル、または上記ＳＬ基のいずれかである。ただし、Ｒ１〜Ｒ３の少なくとも１つはＳＬ基である。
炭素数２〜２２のいずれかの脂肪酸エステルは、−（Ｏ）Ｃ−炭化水素基で表され、この炭化水素基の炭素数は１〜２１である。
また、ＳＬ基中のＲは、同一または異なってもよく、水素またはアセチル基を表し、ｎは１１〜１９の整数を表す。
【００１６】
本発明のＳＬ誘導体は、下記の化学式（２）で表される化合物のいずれか一つであってよい。
式（２）
【化２】
0006954548.tif 000007
ここで、式中のＳＬ基は、上記式（１）での定義と同一である。Ｒ’は炭素数２〜２２の脂肪酸エステルであり、−（Ｏ）Ｃ−炭化水素基で表され、この炭化水素基の炭素数は１〜２１である。
【００１７】
本発明のＳＬ誘導体は、ＳＬ生産菌の培養物中から得られるが、ＳＬのグリセリドであるため化学的に合成することができる。
たとえば、ＳＬとグリセリンを非アルコール系の有機溶媒（クロロホルム、トルエン、アセトン等）中または無溶媒下で、リパーゼなどの固定化酵素を触媒としてエステル化（エステル交換または加水分解の逆反応）を行うことにより、または、グリセリンの代わりに植物油（トリグリセリド）を用いて、同様にエステル交換反応を行うことにより製造することができる。特に、反応性に優れたラクトン型（ＬＳＬ）を用いれば、グリセリン等と混合して加熱撹拌することで、本発明のＳＬ誘導体を製造することができる。
【００１８】
本発明の組成物は、本発明のＳＬ誘導体の有する界面活性に依る界面活性剤として、または乳化剤、分散剤として、飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品または化粧品、及びこれらの添加物に適用することができる。
本発明の組成物に含まれるＳＬ誘導体の量は、特に限定されないが、０．０１〜１００ｗｔ％、好ましくは０．１〜５０ｗｔ％、より好ましくは１〜３０ｗｔ％である。組成物におけるＳＬ誘導体の量が１ｗｔ％以下のように少ない場合、水溶性が小さくなり、一方、５０ｗｔ％以上のように多い場合、経済性が低下する。
［実施例］
【００１９】
以下、実施例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に制限されるものではない。実施例では、「％」は、「ｗｔ％」を意味する。
【実施例１】
【００２０】
ソホロリピッドの生産・回収
スタルメレラ・ボンビコラ（Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）ＡＴＣＣ２２２１４株の培養
（１）種培養
保存培地（酵母エキス１０ｇ／Ｌ、ペプトン２０ｇ／Ｌ、グルコース２０ｇ／Ｌ、寒天２０ｇ／Ｌ）に保存しておいた上記のスタルメレラ・ボンビコラ（Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａ）ＡＴＣＣ２２２１４株を、酵母エキス１０ｇ／Ｌ、ペプトン２０ｇ／Ｌ、グルコース２０ｇ／Ｌの組成の液体培地４ｍＬが入った試験管に１白金耳接種し、２８℃で振とう培養を１日間行った。
（２）本培養
（１）で得られた菌体培養液を、１０ｇ／Ｌの酵母エキス、２０ｇ／Ｌのペプトン、１００ｇ／Ｌのグルコースおよび１００ｇ／Ｌのなたね油の組成の液体培地３０ｍＬが入った三角フラスコに接種し、振とう培養を２８℃にて７日間行った。
（３）ソホロリピッドの回収
（２）で得られた培養液を１時間静置することで下層にＳＬ相が生じる。このＳＬ相を回収し、水酸化ナトリウム水溶液で中和、水で洗浄することでＳＬ混合物を水溶液の状態で回収した。また、得られたＳＬ混合物水溶液について以降の実験を行うために、ヘキサンを添加して撹拌、遠心分離することでヘキサン相に残存油脂や脂肪酸を抽出・除去し、水相を凍結乾燥してＳＬ混合物固体を回収した。
（４）ラクトン型ソホロリピッド、酸型ソホロリピッド標品の精製
以降の実験で標品として利用するために既知の精製手法によって、ラクトン型ＳＬ（ＬＳＬ）および酸型ＳＬ（ＡＳＬ）を分離した。すなわち、上記ＳＬ混合物固体をアセトンに溶解してシリカゲル（ワコーゲルＣ−２００）をガラスカラム管に充填したシリカゲルカラムに供し、クロロホルムとアセトンの混合液を展開溶媒とするカラムクロマトグラフィー法によって精製した。クロロホルムとアセトンの割合は、８：２でＬＳＬを、続いて２：８で酸型ＳＬをそれぞれ分離回収し、それぞれの回収した画分が目的のＬＳＬ標品、ＡＳＬ標品であることを、後述する薄層クロマトグラフィー解析によって確認した。
【実施例２】
【００２１】
ソホロリピッドの薄層クロマトグラフィー解析
実施例１で得られたＳＬ混合物固体について、メタノールに溶解して薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）解析を行った。
まず、シリカゲルＴＬＣガラスプレート（Ｍｅｒｃｋ社製ＴＬＣシリカゲル６０Ｆ２５４ガラスプレート）を用いて、展開溶媒にクロロホルム／メタノール／アンモニア水＝８０／２０／２混合溶媒を用いた、従来の順相系でのＴＬＣ分析を行った。アンスロン硫酸指示薬で成分の検出を行うと、糖骨格を含む化合物は青緑色で検出される。その結果、非極性のＬＳＬが上部に、高極性のＡＳＬが下部に展開される結果となった（図１）。
次に、逆相修飾シリカゲルＴＬＣプレート（Ｍｅｒｃｋ社製ＴＬＣシリカゲル６０ＲＰ−１８Ｆ２５４Ｓガラスプレート）を用いて、展開溶媒にメタノール／水＝９５／５混合溶媒を用いた逆相系での分析を行ったところ、予想通り順相時とは逆に高極性のＡＳＬが上部に、非極性のＬＳＬが中部に展開されるとともに、さらに下部に従来法では検出されなかった構造未知の糖脂質と思われるスポットが検出された（図２）。
この結果から、実施例１で得られたＳＬ混合物には、従来知られているＬＳＬ、ＡＳＬとは異なる糖脂質が含まれていることが明らかとなった。
【実施例３】
【００２２】
ソホロリピッドの高速液体クロマトグラフィー解析
実施例１で得られたＳＬ混合物固体について、メタノールで溶解し高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）解析を行った。コロナ荷電化粒子検出器（ＣＡＤ）（Ｔｈｅｒｍｏ社製ＣｏｒｏｎａＴＭＶｅｏＴＭ）を搭載したＨＰＬＣ（Ｔｈｅｒｍｏ社製Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ３０００  ＨＰＬＣ）を用い、分析カラムは逆相系ＯＤＳカラム（ＧＬサイエンス社製ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎＴＭ  ＶＣ１８）を用いて、カラム温度は４０℃、溶離液は５ｍＭギ酸アンモニウムメタノール／５ｍＭギ酸アンモニウム水混合溶媒系で、グラジエントプログラムをメタノール７０％（ステップ０分→３分）、７０％→１００％（グラジエント３分→１８分）、１００％（ステップ１８分→２５分）、７０％（ステップ２５分→３５分）とし、流速０．３ｍＬ／ｍで成分分析を行った。得られたクロマトグラムを図３に示す。
分析の結果、保持時間３分〜１０分にＡＳＬ、１２分〜１６分ＬＳＬが検出された後、１８分前後、２０分前後、２２分前後にそれぞれ未知成分ピークが３つ（Ａ、Ｂ、Ｃ）検出された。これらの結果は、実施例２の逆相ＴＬＣ解析でＡＳＬ、ＬＳＬの後から未知糖脂質が検出される結果と一致するものであった。
【実施例４】
【００２３】
構造未知糖脂質の分離・精製
実施例３で新たに検出された３つのピーク成分を単離するために、シリカゲルカラムクロマトグラフィー法による成分分離を行った。まず実施例１（４）と同様のクロロホルム／アセトン混合溶媒を用いた順相カラム法により、クロロホルム／アセトン＝５０／５０溶媒でＬＳＬ画分をほぼ全量溶出させ、その後アセトン１００％やメタノール１００％溶媒でＡＳＬや目的の未知糖脂質が混在する残りの成分を回収した。次にオクタデシル基で修飾されたシリカゲル（ワコーゲル１００Ｃ１８）を充填したカラムを用いて、メタノール／水混合溶媒を展開溶媒とする逆相カラムクロマトグラフィー法により、ＡＳＬと未知糖脂質を分離する２段階のカラム精製法によって未知糖脂質を分離・回収した。分離した各成分は逆相ＴＬＣ解析および逆相ＨＰＬＣ解析によってほぼ単一スポット、単一ピークの成分であることを確認した。
以降は逆相カラムから溶出された順に化合物Ａ、Ｂ、Ｃとする。化合物Ａは透明粘稠な固体、ＢはＡよりも硬質な透明固体、Ｃは蝋状の白色固体であった。
【実施例５】
【００２４】
構造未知糖脂質のマススペクトル解析
実施例４で分離した化合物Ａ、Ｂ、Ｃについて、液体クロマトグラフィー／マススペクトル（ＬＣ／ＭＳ）解析を行った。電子スプレーイオン化マススペクトロメトリー（ＥＳＩ−ＭＳ）（Ｔｈｅｒｍｏ社製Ｅｘａｃｔｉｖｅ  Ｐｌｕｓ）を連結した実施例３に記載のＨＰＬＣを用い、分離条件は実施例３と同様の条件でＬＣ／ＭＳ解析を行った結果を、それぞれ図４〜６に示す。
化合物Ａの主成分はｍ／ｚ＝１４６８、Ｂはｍ／ｚ＝２１５７、Ｃはｍ／ｚ＝１７３１（全て検出はネガティブモード）であり、その他各主成分から−４２の成分（１４２６、２１１５、１６８９）が混在していた。これは糖脂質型バイオ界面活性剤によくみられるパターンで、アセチル基が１個外れた化合物であるものと予想された。さらに、各成分から＋１１４の成分（１５８２、２２７１、１８４５）やそこから−４２の成分も混在しており、これらは全て主成分の官能基が一部修飾されたものと予想された。化合物Ａ〜Ｃ中には、基本骨格は同じで脂肪酸組成の異なるものが混在していることが予想される。
【実施例６】
【００２５】
構造未知糖脂質の構造解析
実施例４で分離した化合物Ａ、Ｂ、Ｃについて、核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）解析により化学構造の同定を行った。Ｂｒｕｋｅｒ社製ＮＭＲ（ＡＶ−４００）を用いて、まず最も含有量の多い化合物Ｂについて１Ｈ−ＮＭＲ解析を行ったところ、構造既知のＡＳＬとほぼ同じパターンのスペクトルであることが確認された（図７）。
一方、糖骨格部分のスペクトルを拡大して比較したところ、５．３ｐｐｍ付近にＡＳＬとは異なる新しいピークが現れたとともに、４．１〜４．４ｐｐｍ付近のピーク面積比が基準ピークとなるソホロース１位のピークと比較して明らか大きいことが確認された。これらのピークをさらに詳細に解析するために１Ｈ−１ＨＣＯＳＹ解析を行ったところ、元々４．１〜４．４ｐｐｍ付近に現れるソホロース６位由来のピークとは別の新しいピークがこの位置で重なっており、これらが５．３ｐｐｍ付近の新しいピークと相関していることが分かった（図８）。
【００２６】
化合物ＢのＮＭＲデータを表１に示す。
【表１】
0006954548.tif 000008
【００２７】
以上の結果より、化合物ＢはＡＳＬの構造に加えて、これら２種類のピークを示す化学構造を持つＳＬ誘導体であることが分かった。これら５．３ｐｐｍ付近と４．１〜４．４ｐｐｍ付近にピークが現れる典型的な化合物の例として、油脂（脂肪酸トリグリセリド）のグリセリン骨格が挙げられる。以上を踏まえて、化合物Ｂはグリセリンの３つの水酸基にＡＳＬがエステル結合した化学式（６）の化合物であると推定された。
実施例５で確認された化合物Ｂの主成分は、ｍ／ｚ＝２１５７であり、これは脂肪酸部位がＣ１８：１のＡＳＬが２個、Ｃ１８：２のＡＳＬが１個グリセリンにエステル結合したトリグリセリド構造の化合物の分子量と完全に一致した。以上を総合して、化合物Ｂは化学式（６）の化合物であると同定した。
式（６）
【化６】
0006954548.tif 000009
【００２８】
同様の解析を化合物ＡとＣについて行った。化合物ＡとＣの１Ｈ−ＮＭＲ解析の結果を、図９と１０に示す。また、化合物ＡまたはＣのＮＭＲデータを、表２または表３に示す。
【表２】
0006954548.tif 000010
【００２９】
【表３】
0006954548.tif 000011
【００３０】
ＮＭＲ測定結果から推定される最も可能性の高い代表的な構造の化合物として、化合物ＡはグリセリンにＡＳＬが２個結合した化学式（５）の化合物、化合物ＣはグリセリンにＡＳＬが２個と長鎖脂肪酸が１個エステル結合した化学式（７）の化合物であると推定された。いずれも実施例５で確認された各化合物主成分の分子量と一致しており、この構造解析の結果を支持するものであった。
ただし、生産菌培養物中に含まれる誘導体はこれらに限られるものではない。
式（５）
【化５】
0006954548.tif 000012
式（７）
【化７】
0006954548.tif 000013
【実施例７】
【００３１】
新規ソホロリピッド誘導体Ａ〜Ｃの水溶液
実施例４で分離した化合物Ａ、Ｂ、Ｃについて、それぞれ１０ｍｇをメスフラスコ中に秤取し、蒸留水を加えてメスアップすることで、１ｍｇ／ｍＬ（０．１ｗｔ％）水溶液を調製した（図１１）。
化合物Ａ、Ｂは完全に溶解して透明の水溶液が得られたが、Ｃは白濁した。さらＡ、Ｂについては同様の方法で、１０ｍｇ／ｍＬ（１ｗｔ％）水溶液を調製したところ、Ａは白濁し、Ｂは完全に溶解した。さらに、白濁した化合物Ａ、Ｃの水溶液を冷蔵庫中に静置したところ、どちらも完全に溶解して透明な水溶液となった。
この温度に応じた水溶液の状態変化は可逆的な現象であり、これは室温（２５℃以下）以下に曇点を有することを示すものであった。すなわち化合物ＡとＣが実施例６で構造決定された通り、非イオン性界面活性剤であることを支持するものであった。また以上の結果から、長鎖脂肪酸が結合している化合物Ｃと比べてそれが無い化合物Ａの方が高い水溶性を示し、さらに化合物Ｂはこれらと比べて高分子量でありながら極めて水溶性の高い非イオン性界面活性剤であることが確認された。
【実施例８】
【００３２】
新規ＳＬ誘導体Ａ〜Ｃの表面張力低下能
実施例４で分離した化合物Ａ、Ｂ、Ｃについて、各濃度の水溶液を調製し、接触角計（協和界面科学社製ＤＭｏ−５００）を使用してペンダントドロップ法（Ｙｏｕｎｇ  Ｌａｐｌｈａｓ法）により水溶液の表面張力測定を行った。水溶液濃度−表面張力を対数プロットしたグラフを図１２に示す。
化合物Ｃは濃度によらず水溶液の表面張力値にほとんど変化が無かったが、Ａ、Ｂでは濃度の増加に伴って表面張力が大きく低下した。また、どちらも濃度の増加に伴いプロットの中で２段階の変曲点があることが確認され、表面張力値が一定になる後半の変曲点から臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）を算出すると、化合物ＡはＣＭＣ＝１．９１ｇ／Ｌ（約１．３×１０−３Ｍ）、その時の表面張力値（γＣＭＣ）は４０．４ｍＮ／ｍ、化合物ＢはＣＭＣ＝２．９９g／Ｌ（約１．４×１０−３Ｍ）、γＣＭＣは４１．４ｍＮ／ｍであった。ＬＳＬ、ＡＳＬのこれらの値は文献よりそれぞれＬＳＬ：ＣＭＣ＝１．４×１０−５Ｍ、γＣＭＣ＝３２．３ｍＮ／ｍ、ＡＳＬ：ＣＭＣ＝１．２×１０−４Ｍ、γＣＭＣ＝３７．１ｍＮ／ｍであり、今回見出された新規ＳＬ誘導体はこれらと比較して非イオン性界面活性剤でありながら極めて水溶性が高く、穏やかな表面張力低下能を示すこと、すなわち水系での使用に非常に適した界面活性剤であることが示された。
【実施例９】
【００３３】
ソホロリピッドのマトリックス支援レーザーイオン化飛行時間マススペクトル（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ）解析
実施例１で得られたＳＬ混合物固体について、日本分光社製ＪＭＳ−３０００ ＳｐｉｒａｌＴＯＦ−ＭＳを用い、マトリックスに２',４',６'-トリヒドロキシアセトフェノン（ＴＨＡＰ）を用いてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ解析を行った（図１０）。
従来のＬＳＬ、ＡＳＬとは異なるｍ／ｚ＝８０３．４の構造未同定化合物のピークが検出された。これはＳＬがグリセリンにエステル結合した化合物Ａ〜Ｃの構造を参考にして、分子量から算出すると、化学式（８）のようなグリセリンに脂肪酸部位がＣ１８：１のＡＳＬが１個エステル結合した化合物（Ｎａ付加体）であることが推定された。
式（８）
【化８】
0006954548.tif 000014
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明の新規ＳＬ誘導体は、水溶性、表面張力低下能、自己組織化特性に優れており、安全性の高い天然物由来のソホロリピッド誘導体であるから、飼料、肥料、飲食品、農薬、医薬品、医薬部外品および化粧品などの幅広い分野に適用できる。
【要約】      （修正有）【課題】水溶性が高く、かつ界面活性を有する新規ソホロリピッド誘導体を提供する。【解決手段】ソホロリピッド生産菌Ｓｔａｒｍｅｒｅｌｌａ  ｂｏｍｂｉｃｏｌａの培養生産物から単離精製した、複数の新規構造のソホロリピッド誘導体。下記一般式で示される。0006954548.tif 000017（式中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立して、水素、炭素数２〜２２の脂肪酸エステル、または上記ＳＬ基であるが、Ｒ１〜Ｒ３の少なくとも１つはＳＬ基である。ＳＬ基中のＲは、同一または異なって、水素またはアセチル基を表し、ｎは１１〜１９の整数を表す。）【選択図】なし【図１】
0006954548.tif 000018
【図２】
0006954548.tif 000019
【図３】
0006954548.tif 000020
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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