(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
インスリンおよびトリホスフェートを含み、前記トリホスフェートの濃度が、約１０〜約３０ｍＭである、薬学的組成物であって、但し、糖マルチマーおよびＥＤＴＡのいずれも含まない、薬学的組成物。
【請求項２】
前記トリホスフェートの濃度が、約２０〜約２５ｍＭである、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記トリホスフェートの濃度が、約２０ｍＭである、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
亜鉛をさらに含む、請求項１〜３のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記亜鉛の濃度が、約０．２〜約５ｍＭである、請求項４に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
等張化剤をさらに含む、請求項１〜５のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記等張化剤が、グリセロールである、請求項６に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
１つ以上の防腐剤をさらに含む、請求項１〜７のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記１つ以上の防腐剤が、フェノール、メタクレゾール、およびベンジルアルコールからなる群から選択される、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記インスリンが、ヒトインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、およびインスリングルリジンからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記インスリンの濃度が、約４０〜約５００ＩＵ／ｍＬである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記インスリンの濃度が、約１００〜約２００ＩＵ／ｍＬである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
薬剤として使用するための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
糖尿病の治療に使用するための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１２に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、製品。
【請求項１６】
複数回使用バイアルである、請求項１５に記載の製品。
【請求項１７】
再利用可能なペン型注入器である、請求項１６に記載の製品。
【請求項１８】
プレフィルド式使い捨てペンである、請求項１７に記載の製品。
【請求項１９】
自動注入器である、請求項１８に記載の製品。
【請求項２０】
ＣＳＩＩのためのポンプである、請求項１９に記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、食事および食事後の血糖の変動を抑えるための非経口的な注入用の薬学的インスリン組成物である。組成物は、インスリンとポリホスフェート化合物とを含み、既存の市販のインスリン組成物よりも注入部位からのインスリンの取り込みが速い。組成物は、インスリンが必要とされる場合、例えば食物が消費される場合に、インスリン活性を迅速に提供するのに有用である。
【０００２】
真性糖尿病は、インスリン分泌、インスリン作用、またはその両方の欠陥に起因する高血糖症を特徴とする慢性疾患である。１型真性糖尿病は、インスリン分泌能がほぼないことを特徴とし、１型真性糖尿病の患者は生存のためにインスリンを必要とする。２型真性糖尿病では、インスリン分泌不全およびインスリン抵抗性の複合された効果が、血糖値の上昇をもたらす。２型真性糖尿病を有する患者の少なくとも３分の１では、疾患はインスリン療法の絶対的な必要性に進行する。
【０００３】
インスリンの時間作用プロファイルは、食事後の血糖値を制御するために重要である。健康な人では、膵臓は吸収された食物に反応してインスリンのスパイクを分泌し、その結果、数分以内に血中インスリンレベルが上昇する。１型糖尿病の個体、および２型糖尿病の特定の個体では、インスリンを投与しなければならない。しかしながら、投与されたインスリンは、内因性に分泌されたインスリンよりもゆっくりと血液に入り、遅い発現は食事後の初期の間に高血糖症をもたらし得る。作用期間が長すぎると、食事と食事の間に過剰なインスリンが生じる場合があり、遅れた食事後の低血糖および／または体重増加をもたらす。
【０００４】
以前にインスリン製品の時間作用の加速が試みられている。「迅速に作用する」インスリン類似体は、１９９０年代および２０００年代初頭に利用可能になった。インスリンリスプロ（ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標））、インスリンアスパルト（ＮＯＶＯＬＯＧ（登録商標））、およびインスリングルリジン（ＡＰＩＤＲＡ（登録商標））などのいわゆる「迅速に作用する」インスリン類似体でも、最大循環するインスリンの濃度は、注入後５０〜９０分まで到達しない。これは、炭水化物の吸収プロファイルと一致するほどの十分な迅速さではない。
【０００５】
上述のものよりもより迅速な時間作用プロファイルを備えた製品を開発する試みにおいて、ごく最近、研究が遂行されている。例えば、ＵＳ２０１４／０３７８３８３は、部分的に置換されたカルボキシル官能基を有する１〜８個のヘキソース糖ユニットから形成された糖骨格からなる置換されたアニオン化合物と、ポリアニオン化合物との組み合わせを含む、インスリン組成物を開示しており、かかる組み合わせは、血液へのインスリンの通過を加速することが可能になると明言している。同様に、ＵＳ２０１５／０２３１１６０は、オリゴ糖とポリアニオン化合物との組み合わせを含むインスリン組成物を開示しており、この組み合わせは、迅速に作用するインスリン類似体製剤の作用を開始する時間の大幅な短縮を可能にすると明言している。これらの開示は、トリホスフェートなどのポリリン酸を含む、ポリアニオン化合物のアレイについてそれぞれ説明しているが、トリホスフェートを含むが置換されたアニオン化合物のそれぞれをさらに含まない組成物は記載されておらず、この用語はＵＳ２０１４／０３７８３７３で使用され、またはオリゴ糖はＵＳ２０１５／０２３１１６０で説明されているとおりであり、さらの、トリホスフェートまたは他のいかなるポリリン酸を含む組成物の薬物動態または薬力学に関するデータは提供されていない。ＵＳ２０１４３５７５５４およびＵＳ２０１５２７３０２２は、ＥＤＴＡ、シトラート、およびマグネシウム含有化合物を含む、インスリン作用の迅速な発現を示すと言われる組成物を記載しており、その一例はピロホスフェートマグネシウムである。マグネシウム化合物は、注入部位の刺激を最小限にすると明言されているが、「皮下吸収の速度は変化しない」、およびピロホスフェートマグネシウムを含む組成物に関するデータは記載されていない。
【０００６】
既存の市販インスリン製品よりも、注入部位からのインスリンの取り込みが迅速であり、かつ、作用の発現が迅速である、食事時間での使用を意図したインスリンの組成物の必要性が残存する。
【０００７】
本発明は、既存の市販インスリン製品よりも、血中へのインスリンの取り込みがより迅速であり、かつ、作用の発現がより迅速である、薬学的に許容されるインスリン製剤を提供することにより、これらのニーズを満たすことを追求する。
【０００８】
本発明の第１の態様に従って、インスリンと、ピロホスフェート、トリメタホスフェート、トリホスフェート、およびテトラホスフェートからなる群から選択されるポリホスフェート化合物とを含む薬学的組成物であって、但し、糖マルチマーおよびＥＤＴＡのいずれも含まない、薬学的組成物が提供される。
【０００９】
特定の実施形態において、ポリホスフェートの濃度は、約５〜約５０ｍＭである。特定の実施形態において、ポリホスフェートの濃度は、約１０〜約３０ｍＭである。特定の実施形態において、ポリホスフェートの濃度は、約２０〜約２５ｍＭである。特定の実施形態において、ポリホスフェートの濃度は、５、１０、１５、２０、２５、または３０ｍＭからなる群から選択される。
【００１０】
特定の実施形態において、組成物は亜鉛をさらに含む。特定の実施形態おいて、亜鉛の濃度は、約０．２〜約５ｍＭである。
【００１１】
特定の実施形態において、組成物は等張化剤をさらに含む。特定の実施形態において、等張化剤はグリセロールである。
【００１２】
特定の実施形態において、組成物は、１つ以上の防腐剤をさらに含む。特定の実施形態において、１つ以上の防腐剤は、フェノール、メタクレゾール、およびベンジルアルコールからなる群から選択される。
【００１３】
特定の実施形態において、インスリンは、ヒトインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、およびインスリングルリジンからなる群から選択される。特定の実施形態において、インスリンの濃度は、約４０〜約５００ＩＵ／ｍＬである。特定の実施形態において、インスリンの濃度は、約１００〜約２００ＩＵ／ｍＬである。
【００１４】
本発明の別の態様に従って、糖尿病を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、上記で説明される組成物のうちの１つの有効量を投与することを含む、方法が提供される。
【００１５】
本発明の別の態様に従って、薬剤として使用するための上記で説明される組成物のうちの１つが提供される。
【００１６】
本発明の別の態様に従って、糖尿病の治療に使用するための上記で説明される組成物のうちの１つが提供される。
【００１７】
本発明の別の態様に従って、上記で説明される組成物のうちの１つを含む製品が提供される。特定の実施形態において、製品は、複数回使用バイアルである。特定の実施形態おいて、製品は、プレフィルド式使い捨てペンである。特定の実施形態において、製品は、再利用可能なペンである。特定の実施形態において、製品は、自動注入器である。特定の実施形態において、製品は、持続皮下インスリン注入療法（ＣＳＩＩ）のためのポンプである。
【００１８】
本明細書で使用する場合、「糖マルチマー」は、例えば、ＵＳ２０１４／０３７８３８３に記載される置換されたアニオン化合物、およびＵＳ２０１５／０２３１１６０に記載されるオリゴ糖を含む、一緒に結合した２つ以上の糖ユニットを含む任意の化合物を意味する。
【００１９】
本明細書で使用される場合、「糖マルチマーおよびＥＤＴＡを含まない」という用語は、組成物が糖マルチマーおよびＥＤＴＡを含まないこと、またはインスリンの時間作用プロファイルが影響を受けないように僅少の糖マルチマーもしくはＥＤＴＡのみを含むことを意味する。
【００２０】
本明細書で使用される場合、「インスリン」は、ヒトインスリン、またはヒトインスリンの機能的活性を有するヒトインスリンの構造バリアント、変異体、または類似体を意味する。ヒトインスリンの類似体には、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、およびインスリングルリジン、または他の「迅速に作用する」インスリン類似体が含まれるが、これらに限定されない。市販の製品のインスリンは、組換えＤＮＡ法を使用して、または化学合成によって生産され得る。組換え法は、周知であり、強く推奨されている。ヒトインスリンの分子（ＣＡＳ番号１１０６１−６８−０）は、２つのアミノ酸鎖のＡとＢとからなり、その配列は周知である。鎖は、２つのジスルフィド結合：ＣｙｓＡ７−ＣｙｓＢ７およびＣｙｓＡ２０−ＣｙｓＢ１９で連結されている。Ａ鎖は、ＣｙｓＡ６−ＣｙｓＡ１１に鎖内ジスルフィド結合を有する。
【００２１】
ヒトインスリンＡ鎖は、以下のアミノ酸の配列を有する：
Ｇｌｙ  Ｉｌｅ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ｇｌｎ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｃｙｓ  Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｇｌｎ  Ｌｅｕ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  （配列番号１）
【００２２】
ヒトインスリンＢ鎖は、以下のアミノ酸の配列を有する：
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｔｈｒ  （配列番号２）。
【００２３】
ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）の原薬である、インスリンリスプロ（ＣＡＳ番号１３３１０７−６４−９）は、モル基準でヒトインスリンと等効性があることが示されているが、皮下注入後のその効果は、注入される可溶性ヒトインスリンよりも迅速であり、および持続時間が短い。Ｔｍａｘおよび半減期が短く、Ｃｍａｘが高い速度論の一貫したパターンは、ヒトインスリンと比較してインスリンリスプロで観察された。インスリンリスプロは、培養されたリンパ球、ヒト胎盤およびヒト肝臓でのインスリン受容体結合、ならびに脂肪細胞でのグルコース輸送を含む、いくつかのインビトロ試験においてインスリンと生物学的に同等である。ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）には、防腐剤および安定剤としてのｍ−クレゾール、等張化調節剤（グリセリン）、緩衝剤（二塩基性リン酸ナトリウム）、安定剤（酸化亜鉛）、ならびにビヒクルのｐＨ調整が含まれる。
【００２４】
インスリンリスプロの分子は、インスリンリスプロＢ鎖で架橋されたヒトインスリンＡ鎖からなり、そのアミノ酸配列は、以下の配列番号３で定められる：
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｔｈｒ  （配列番号３）。
インスリンリスプロの１単位は、０．０３４７ｍｇのインスリンリスプロと同等である。
【００２５】
ＮＯＶＯＬＯＧ（登録商標）の原薬であるインスリンアスパルト（ＣＡＳ番号１１６０９４−２３−６）は、別の迅速に発現するインスリン類似体である。その構造は、以下のアミノ酸配列に反映されているように、ヒトインスリンのＡ鎖とＢ鎖類似体とからなる：
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ａｓｐ  Ｌｙｓ  Ｔｈｒ  （配列番号４）。
インスリンアスパルトの１単位は、６ｎｍｏｌに相当し、０．０３５ｍｇの無塩無水インスリンアスパルトに相当する。
【００２６】
ＡＰＩＤＲＡ（登録商標）の原薬であるインスリングルリジン（ＣＡＳ番号２０７７４８−２９−６）は、さらに別の迅速に発現するインスリン類似体である。インスリングルリシンの分子は、以下のアミノ酸配列に反映されているように、ヒトインスリンＡ鎖とヒトインスリンと比較して修飾されたＢ鎖とからなる：
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｇｌｕ  Ｔｈｒ  （配列番号５）。
インスリングルリジンの１単位は、およそ０．０３４９ｍｇのインスリングルリジンに相当する。
【００２７】
本発明の組成物は、０．２４〜３ｍＭ（４０〜５００ＩＵ／ｍＬ；１．４ｍｇ／ｍＬ〜１７．５ｍｇ／ｍＬ）のインスリンの濃度を有する。本発明の組成物は、４０、１００、２００、３００、４００、および５００ＩＵ／ｍＬ（１．４、３．５、７、１０．５、１４、および１７．５ｍｇ／ｍＬ）の特定の濃度を有する可能性が高い。好ましい濃度は、１００および２００ＩＵ／ｍＬである。
【００２８】
ポリホスフェートは、Ｐ−Ｏ−Ｐ結合を介して共有結合した２つ以上のリン酸基からなる無機であり、マルチ荷電である、多価アニオンである。それらは、他の用途の中でも、キレート剤、緩衝剤、および架橋剤として、洗剤、食品、化粧品、および生物医学用途において広く使用されている。いくつかのポリホスフェートは、食品での使用について米国食品医薬品局によって「一般に安全と認められ（ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  ｒｅｇａｒｄｅｄ  ａｓ  ｓａｆｅ）」（「ＧＲＡＳ」）ており、例えば以下の表１に列挙されるものが含まれる。
【表１】
0006920471.tif 000002
表１．ＧＲＡＳのピロホスフェートの例。
【００２９】
トリホスフェートは、ポリマー系ナノ担体、特にキトサン系ナノ担体の架橋剤として、例えば、抗原、抗がん剤、遺伝物質、およびインスリンを含むタンパク質などの医学的に重要な広範囲なペイロードの経口、経鼻、非経口、または経皮送達に使用されている。Ｋｏｕｃｈａｋ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔｓ  ｏｆ  ｃｈｉｔｏｓａｎ  ｏｎ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｌｏａｄｅｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｂｙ  ｉｏｎ  ｇｅｌａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ，”４  Ｉｎｔｅｒｎａｔ’ｌＪ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．＆Ｒｅｓ．２７１（２０１２）。しかしながら、本発明とは異なり、かかる担体は、投与されたインスリンの時間作用プロファイルを加速することに対して向けていない。
【００３０】
注入部位からのインスリン吸収速度の増加に有用であることが本明細書で示されているポリホスフェートは、ピロホスフェート（ジホスフェート、「Ｏ３−Ｐ−Ｏ−Ｐ−Ｏ３」−４、Ｐ２Ｏ７）、およびトリホスフェート（「Ｏ３−Ｐ−Ｏ−（ＰＯ２）−Ｏ−Ｐ−Ｏ３」−５、Ｐ３Ｏ１０）である。インスリン吸収への効果は、これらのポリホスフェート、ならびにトリメタホスフェート（Ｐ３Ｏ９）およびテトラホスフェート（Ｐ４Ｏ１３−６）によって提供されると考えられている。使用される特定のポリホスフェート化合物は、酸性形態または様々な塩形態、特にアルカリ（例えば、ナトリウムおよびカリウム）塩であり得る。ピロホスフェート、トリホスフェート、トリメタホスフェートおよびテトラホスフェート、ならびにそれらの様々な塩、特にそれらのアルカリ（例えば、ナトリウムおよびカリウム）およびアルカリ土類金属（例えば、カルシウムおよびマグネシウム）塩は、本発明において使用され得る。これらのうち、トリホスフェートおよびその塩が好ましい。組成物中のポリホスフェートの濃度は、５ｍＭ〜５０ｍＭ、特に５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０または５０ｍＭの範囲である。特定の組成物は、１０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲のポリホスフェートの濃度を有する。特定の組成物は、１５ｍＭ〜２５ｍＭの範囲のポリホスフェートの濃度を有する。
【００３１】
市販のインスリン組成物は、インスリンの６分子あたり約２．４原子の亜鉛（ＨＵＭＵＬＩＮ（登録商標）Ｒ  Ｕ−５００）を有し、一部はインスリンの６分子あたり約３．０原子の亜鉛（ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）、ＮＯＶＯＬＯＧ（登録商標））を有する。本発明の特定の実施形態は、インスリンの６分子あたり約２〜４亜鉛原子を提供するのに十分な濃度の亜鉛を含む。他の実施形態は、最大約５ｍＭの濃度の亜鉛を含む。特定の実施形態において、亜鉛の濃度は、約０．２〜約５ｍＭの範囲である。特定の実施形態において、亜鉛の濃度は、約０．５〜約２ｍＭの範囲である。特定の実施形態において、亜鉛の濃度は、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．３、および２ｍＭからなる群から選択される。
【００３２】
組成物は、最初に製造された際に無菌である。複数回使用バイアルまたはカートリッジで提供される場合、製剤の他の成分と互換性のある抗菌防腐剤化合物または化合物の混合物は、通常、規制および薬局方の抗菌防腐剤要件を満たすのに十分な強度で追加される。米国薬局方のモノグラフを参照されたい。インスリンリスプロ注入。ＵＳＰ２９−ＮＦ２４；イギリス薬局方のモノグラフ２００８  第ＩＩＩ巻：インスリンアスパルト注入；米国薬局方のモノグラフ。インスリンアッセイ；および米国薬局方の一般的な章。ＵＳＰ２９−ＮＦ２４。Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ：米国薬局方条約；２００５。抗菌効果試験；ｐｐ．２４９９−２５００。好ましい防腐剤は、アリール酸およびフェノール化合物、またはかかる化合物の混合物である。インスリン製品において最も一般的に使用される防腐剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、およびベンジルアルコールである。有効濃度は、上記に参照される方法を使用して容易に確認できる。現在の市販の組成物は、例えば、３．１５ｍｇ／ｍＬのｍ−クレゾール（ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）およびＡＰＩＤＲＡ（登録商標）））、１．７２ｍｇ／ｍＬのｍ−クレゾールおよび１．５０ｍｇ／ｍＬフェノール（ＮＯＶＯＬＯＧ（登録商標））、ならびに２．５ｍｇ／ｍＬのｍ−クレゾール（ＨＵＭＵＬＩＮ（登録商標）Ｒ  Ｕ−５００）を含む。
【００３３】
本発明のインスリン組成物のｐＨは、典型的には７．０〜７．８であり、生理学的に好適な酸および塩基、典型的には塩酸１０％および水酸化ナトリウム１０％を使用して調整される。市販のインスリン製剤のｐＨは、通常７．２〜７．６の範囲であり、一般的な標的ｐＨとして７．４±０．１である。
【００３４】
体液とほぼ等張ではない溶液は、投与する際に痛みを伴う刺すような感覚を生じるため、組成物を投与するときに、注入部位の体液の張度（すなわち、浸透圧）を可能な限り厳密に一致させることが望ましい。したがって、組成物は、注入の部位で体液とほぼ等張であることが望ましい。等張化剤の非存在下における組成物の浸透圧が、組織の浸透圧よりも十分に小さい場合（血液の場合、約３００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ；浸透圧に対する欧州薬局方の要件は＞２４０ｍＯｓｍ／ｋｇである）に、その後、等張化剤は、通常、組成物の等張を約３００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇに上げるために添加されるべきである。典型的な等張化剤は、グリセロール（グリセリン）および塩化ナトリウムである。追加する等張化剤の量は、標準的な手法を使用して容易に決定される。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｄａｖｉｄ  Ｂ．Ｔｒｏｙ  ａｎｄ  Ｐａｕｌ  Ｂｅｒｉｎｇｅｒ，ｅｄｓ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００６，ｐｐ．２５７−２５９；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｌｉｎｄａ  Ｅｄ  Ｆｅｌｔｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１３，ｐｐ．２７７−３００。
【００３５】
本発明の組成物は、典型的には、プレフィルド式使い捨てペン、再利用可能なペン、自動ペン型注入器、複数回使用バイアル、またはＣＳＩＩのためのポンプからのいずれかで複数回の毎日の注入（ＭＤＩ）において皮下に投与される。
【００３６】
本発明の追加の実施形態は、以下に記載されるものが含まれる：
１．インスリンと、ピロホスフェート、トリホスフェート、トリメタホスフェートおよびテトラホスフェートからなる群から選択されるポリホスフェート化合物とを含む、薬学的組成物。
２．糖マルチマーおよびＥＤＴＡのいずれも含まない、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
３．ポリホスフェート化合物がトリホスフェートである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
４．ポリホスフェート化合物がピロホスフェートである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
５．ポリホスフェートの濃度が、約５〜約５０ｍＭである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
６．ポリホスフェートの濃度が、約１０〜約３０ｍＭである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
７．ポリホスフェートの濃度が、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０および５０ｍＭからなる群より選択される、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
８．亜鉛をさらに含む、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
９．亜鉛の濃度が、約０．２〜約５ｍＭである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１０．亜鉛の濃度が、約０．５〜約２ｍＭの範囲である、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１１．亜鉛の濃度が、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．３、２、および５ｍＭからなる群から選択される、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１２．等張化剤をさらに含む、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１３．グリセロールである等張化剤をさらに含む、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１４．１つ以上の防腐剤をさらに含む、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１５．１つ以上の防腐剤が、フェノール、メタクレゾール、およびベンジルアルコールからなる群から選択される、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１６．インスリンが、ヒトインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、およびインスリングルリジンからなる群から選択される、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１７．インスリンの濃度が、約４０〜約５００ＩＵ／ｍＬである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１８．インスリンの濃度が、約１００〜約２００ＩＵ／ｍＬである、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
１９．糖尿病を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物の有効量を投与することを含む、方法。
２０．薬剤として使用するための上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
２１．糖尿病の治療に使用するための上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
２２．ピロホスフェート、トリホスフェート、トリメタホスフェート、およびテトラホスフェートからなる群から選択される２つ以上のポリホスフェート化合物の混合物を含む、上記実施形態のうちのいずれかの薬学的組成物。
２３．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、製品。
２４．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、複数回使用バイアル。
２５．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、再利用可能なペン型注入器。
２６．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、プレフィルド式使い捨てペン。
２７．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、自動ペン型注入器。
２８．上記に記載の薬学的組成物のうちのいずれか１つを含む、ＣＳＩＩのためのポンプ。
【００３７】
薬物動態（ＰＫ）および薬力学的（ＰＤ）研究
研究１．２５ｍＭピロホスフェートまたは２５ｍＭトリホスフェート
【００３８】
以前に装着された血管アクセスポートを備えた１５匹の糖尿病（アロキサン誘発）の去勢された雄のユカタン小型ブタ（平均齢１７ヶ月、平均体重４０ｋｇ）を使用する。糖尿病の動物は、個別に収容され、常に新鮮な水を自由に摂取できる。それらは規定食Ｓ−９の１日２回の食事を給餌され、糖尿病の状態を管理するために１日２回、適切な維持管理の基礎および食事インスリンを受ける。
【００３９】
試験物品（製剤ＡおよびＢ）は製剤化され、研究施設に一晩低温梱包で輸送される。それらは投与の時点まで冷蔵保存され、その後全ての動物の投与が完了した後に冷蔵庫に戻される。投与期間中、試験物品は取り出されない際は断熱箱内にとどまる。ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）インスリン対照は、市販のバイアルからである。
【表２】
0006920471.tif 000003
表２．試験および対照物品の組成。
【００４０】
研究は、３方向のクロスオーバーデザインとして設計されている。このデザインにより、それぞれ個々の動物が、各研究日（各３日、７日間隔）に１つの試験物品を投与することにより、３つの試験物品のそれぞれを受けることが可能になる。研究の前日に、動物は日常の配給量の半分を給餌され、それらの朝の維持管理で０．２Ｕ／ｋｇのＨｕｍａｌｏｇ  Ｍｉｘ７５／２５インスリンを受ける。全ての研究動物は一晩絶食させ、研究当日の薬物投与前に、それらの夕方のインスリンまたは食事を受けない。
【００４１】
研究の朝、全ての動物は拘束のためにスリングに入れ、それらの血管アクセスポートにアクセスして（採血に備えて）、開通性を確認した。動物は、無作為に治療群に配置される（群あたりｎ＝５の３群は治療あたりｎ＝１５をもたらす）。
【００４２】
２つの基準の血液試料が収集された後（−３０分および−２０分）に、動物は檻に戻され、約３００ｇのＳ−９食が給餌される。完全に消費された食事の提示の２０分後に、動物は、テルモインスリン注射器（０．５ｍｌ  １／２”針）を用いて脇腹（０分）に試験物品を皮下に注入される。投与には、インスリン活性の０．２Ｕ／ｋｇの単回注入が含まれる。全ての研究動物は、残りの採血期間中、清潔で新鮮な水を自由に摂取できる。
【００４３】
定期的な血液試料（各２．０ｍＬ）は、以下の時点で各動物から収集される：−３０、−２０（その後すぐに給餌）、０（投与直前）、ＳＣ投与後５、１０、１５、３０、４５、６０、７５、９０、１０５、１２０、１５０、１８０、２４０、および３６０分。血液試料（抗凝固剤：無し［血清］）は、凝固を可能にするために周囲温度で少なくとも３０分間、但し２時間以内の間維持される。次に、血清は遠心分離によって分離され、２つのアリコートに分けて、およそ−７０°Ｃで凍結保存される。
【００４４】
血清グルコースの濃度は、自動化されたＣｏｂａｓ  ｃ３１１臨床化学分析装置（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ）を使用して決定される。２匹の動物は、Ｈｕｍａｌｏｇ治療群から除外され、その試験物品についてｎ＝１３がもたらされた。１匹の動物は、＞２００ｍｇ／ｄＬの基準グルコースの範疇を満たしていないため除外され、別の動物は、ポートの開通性の問題のため参加しなかった。インスリンリスプロ含有製剤（時間０で０．２Ｕ／ｋｇ）で治療した後の血清グルコースの濃度（ｍｇ／ｄＬ）は、以下の表３に提供される。
【表３】
0006920471.tif 000004
表３．血清グルコースの濃度（ｍｇ／ｄＬ）。
【００４５】
血清インスリンの濃度は、競合放射免疫測定（ＲＩＡ）を使用して決定される。内因性ブタインスリンおよび外因性インスリンの両方を測定するＲＩＡでは、血清インスリンは、モルモット抗ラットインスリンへの結合のために１２５Ｉ−インスリンを置換した。抗体複合体は、ヤギ抗モルモットＩｇＧ血清試薬で沈降される。ＲＩＡの定量の上限および下限は、熱処理されてチャコールを取り除いた血清において、それぞれ５０００および２０  ｐＭである。非区画の薬物動態分析は、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ  ６．３を使用して実施される。定量下限値を下回る値は、計算のために２０ｐＭの値が割り当てられた。定量の上限を上回る試料は、希釈および再分析されるか、または無視された。上述されるように、ＨＵＭＡＬＯＧ治療からの１匹の動物は、ポートの開通性の問題のために研究に参加せず、その試験物品に対してｎ＝１４をもたらす。
【表４】
0006920471.tif 000005
表４．ＰＫデータ。略記＝Ｔｍａｘ−最大濃度での時間、Ｃｍａｘ−最大濃度、ＡＵＣＩＮＦ−０〜無限大までの曲線下面積、ＣＬ／Ｆ−クリアランス／バイオアベイラビリティ。
【００４６】
ＰＫ／ＰＤデータは、ＨＵＭＡＬＯＧと比較して、ピロホスフェートまたはトリホスフェートが時間作用を加速させ、Ｔｍａｘを低減させたこと論証する。ピロホスフェートを有する製剤Ａは、ＨＵＭＡＬＯＧよりも〜４７％速い（Ｔｍａｘの中央値が〜３３％速い）Ｔｍａｘを有し、ＨＵＭＡＬＯＧと同等の平均値Ｃｍａｘを有した。トリホスフェートを有する製剤Ｂは、ＨＵＭＡＬＯＧよりも約７７％速い（Ｔｍａｘ中央値で約６７％速く）平均値Ｔｍａｘを有し、ＨｕｍａｌｏｇよりもＣｍａｘが〜１２５％高い。２５ｍＭのピロホスフェートまたは２５ｍＭのトリホスフェートを含む製剤は、ＨＵＭＡＬＯＧと比較してより速いＴｍａｘ、およびより速いＣｍａｘを引き起こした。
【００４７】
研究２．ＰＫ／ＰＤへのトリホスフェートの濃度の影響
以前に装着された血管アクセスポートを備えた１４匹の糖尿病（アロキサン誘発）の去勢された雄のユカタン小型ブタ（平均齢１４ヶ月、平均体重３５ｋｇ）が使用される。糖尿病の動物は、個別に収容され、常に新鮮な水を自由に摂取できる。それらは規定食Ｓ−９の１日２回の食事を給餌され、糖尿病の状態を管理するために１日２回、適切な維持管理の基礎および食事インスリンを受ける。
【００４８】
試験物品は製剤化され、一晩低温梱包で輸送される。それらは投与の時点まで冷蔵保存され、その後全ての動物の投与が完了した後に冷蔵庫に戻される。投与期間中、試験物品は取り出されない際は断熱箱内にとどまった。ＨＵＭＡＬＯＧ対照は、市販のバイアルである。
【表５】
0006920471.tif 000006
表５．試験および対照物品の組成。
【００４９】
この研究は、各研究日（各４日、７日間隔）に１つの試験物品を投与することにより、それぞれ個々の動物が３つの試験物品のそれぞれおよび対照を受けることを可能にする、４方向クロスオーバーデザインに設計されている。
【００５０】
研究の前日に、動物は日常の配給量の半分を給餌され、それらの朝の維持管理で０．２Ｕ／ｋｇのＨｕｍａｌｏｇ  Ｍｉｘ７５／２５インスリンを受ける。全ての研究動物を一晩絶食させ、研究当日の薬物投与前に、それらの夕方のインスリンまたは食事を受けない。
【００５１】
研究の朝、全ての動物は拘束のためにスリングに入れ、それらの血管アクセスポートにアクセスして（採血に備えて）、開通性を確認した。動物は、無作為に治療群に配置される（群あたりｎ＝３〜４の４群は治療あたりｎ＝１４をもたらす）。２匹の豚は、獣医に観察されて、研究されておらず、他の除外の前に合計ｎ＝１４がｎ＝１２への減少を引き起こした。包含基準を満たさないため、１匹の動物は、ＨＵＭＡＬＯＧ群からを除外され、２匹の動物は、インスリンリスプロ＋１０ｍＭのトリホスフェート群から除外され、これにより、これらの群に対してそれぞれｎ＝１１、およびｎ＝１０をもたらす。
【００５２】
２つの基準の血液試料が収集された後（−３０分および−２０分）に、動物は檻に戻され、約３００ｇのＳ−９食が給餌される。完全に消費された食事の提示の２０分後に、動物は、テルモインスリン注射器（０．５ｍＬ、１／２”針）を用いて脇腹（０分）に試験物品を皮下に注入される。全ての研究動物は、残りの採血期間中、清潔で新鮮な水を自由に摂取できる。
【００５３】
定期的な血液試料（各２．０ｍＬ）は、以下の時点で各動物から収集される：−３０、−２０（その後すぐに給餌）、０（投与直前）、ＳＣ投与後５、１０、１５、３０、４５、６０、７５  、９０、１０５、１２０、１５０、１８０、２４０、および３６０分。血液試料（抗凝固剤：無し［血清］）は、凝固を可能にするために周囲温度で少なくとも３０分間、但し２時間以内の間維持された。次に、血清を遠心分離によって分離し、２つのアリコートに分けて、およそ−７０°Ｃで凍結保存する。アリコートは、翌日の輸送サービスによりドライアイス上で輸送される。
【００５４】
血清インスリン濃度は、上述されるように、競合放射免疫測定（ＲＩＡ）を使用して決定される。データは、上述されるように、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ  ６．３を使用する非区画の薬物動態分析を利用して分析される。血清グルコースの濃度は、自動化されたＣｏｂａｓ  ｃ３１１臨床化学分析装置（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、Ｉｎｄｉａｎａ）を使用して決定される。
血清グルコースの結果（ｍｇ／ｄＬ）は、以下の表６に与えられる。
【表６】
0006920471.tif 000007
表６．血清グルコースの結果（ｍｇ／ｄＬ）。
【００５５】
トリホスフェートの濃度の関数としてのＰＫパラメータは、以下の表７に与えられる。
【表７】
0006920471.tif 000008
表７．ＰＫデータ。略記＝Ｔｍａｘ−最大インスリン濃度での時間、Ｃｍａｘ−最大インスリン濃度、ＡＵＣＩＮＦ−０〜無限大までの曲線下面積、ＣＬ／Ｆ−クリアランス／バイオアベイラビリティ。
【００５６】
ＨＵＭＡＬＯＧと同様の製剤における５、１０、または２０ｍＭのトリホスフェートは、ＨＵＭＡＬＯＧ（登録商標）と比較して用量依存的に時間作用を促進し、Ｔｍａｘを低減させ、Ｃｍａｘを増加させた。
【００５７】
研究３．異なる市販のインスリンへの影響
以前に装着された血管アクセスポートを備えた１５匹の糖尿病（アロキサン誘発）の去勢された雄のユカタン小型ブタは、異なる市販のインスリンの血清グルコースおよび血清インスリン時間作用プロファイルへのトリホスフェートの影響を研究するために使用される。動物の飼育および栄養接種、ならびに試験および対照物品の輸送および保管は、研究１および２において上述されるとおりである。
【００５８】
試験物品（以下の表における製剤Ｆ、Ｇ、Ｈ）は、ＨＵＭＵＬＩＮ−Ｒ（登録商標）、ＮＯＶＯＬＯＧ（登録商標）、およびＡＰＩＤＲＡ（登録商標）の市販のバイアルに十分なトリホスフェートを追加して、２０ｍＭのトリホスフェートの濃度に到達させることにより製剤化される。以下の表に列挙される他の原料の濃度は、それらの製品の市販のバイアル内のそれらの原料の濃度を反映していることに注意されたい；濃度は、トリホスフェートの追加に起因するわずかな希釈を考慮して、調整されていない。
【表８】
0006920471.tif 000009
表８．試験および対照物品の組成。
【００５９】
研究は、各研究日（各４日、７日間隔）に１つの試験物品を投与することにより、それぞれ個々の動物が３つの試験物品のそれぞれおよび対照を受けることを可能にする、４方向クロスオーバーデザインである。動物は、研究１および２に関して上述されたように研究のために調製される。
【００６０】
動物は、無作為に治療群に配置される（群あたりｎ＝３〜４の４群は治療あたりｎ＝１５をもたらす）。ポート不備のため、１匹の動物は、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｒ＋２０ｍＭトリホスフェート、およびＮＯＶＯＬＯＧ＋２０ｍＭトリホスフェート群から除外され、これらの群に対してｎ＝１４をもたらす。１匹の動物は、ポート不備のためＨＵＭＡＬＯＧ群から除外され、１匹の動物は、包含基準を満たしていないためＨＵＭＡＬＯＧ群から除外され、この群に対してｎ＝１３をもたらす。
【００６１】
基準の血液試料の収集、試験物品の注入、血液試料の収集および調製、血液および血清試料の輸送および測定は、研究１および２に関して前述したように実行される。
【００６２】
血清グルコース濃度は、自動化されたＡＵ４８０臨床化学分析装置（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して決定される。血清グルコースの結果（ｍｇ／ｄＬ）は、以下の表９に与えられる。
【表９】
0006920471.tif 000010
表９．血清グルコースの結果（ｍｇ／ｄＬ）。
【００６３】
血清インスリン濃度は、研究１および２に関して前述されたように、競合放射免疫測定法（ＲＩＡ）を使用して決定される。データは、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎＬｉｎを使用する非区画の薬物動態分析を利用して分析される。トリホスフェートの濃度の関数としての薬物動態パラメータは、以下の表１０に与えられる。
【表１０】
0006920471.tif 000011
表１０．ＰＫデータ。略記＝Ｔｍａｘ−最大インスリン濃度での時間、Ｃｍａｘ−最大インスリン濃度、ＡＵＣＩＮＦ−０〜無限大までの曲線下面積、ＣＬ／Ｆ−クリアランス／バイオアベイラビリティ。
【００６４】
ＰＫ／ＰＤデータは、様々な市販のインスリンの製剤においてトリホスフェートを使用すると、トリホスフェート無しのＨＵＭＡＬＯＧと比較して、時間作用を促進させ、Ｔｍａｘを低減させることを示す。２０ｍＭのトリホスフェートを含む全ての製剤は、ＨＵＭＡＬＯＧ単独と比較して速いＴｍａｘを引き起こした。２０ｍＭのトリホスフェートを含むＡＰＩＤＲＡおよびＨＵＭＵＬＩＮを含む製剤は、ＨＵＭＡＬＯＧ単独と比較して高いＣｍａｘを引き起こした。
【００６５】
臨床研究
臨床研究は、本発明の組成物の薬物動態学的および薬力学的効果を研究するために実施される。この研究は、トリホスフェート無しのインスリンリスプロの製剤と比較して、異なる濃度のトリホスフェートと共にインスリンリスプロを含む４つの製剤の皮下（ＳＣ）に投与した後の効果を比較する５期間クロスオーバー研究として設計されている。試験物品は、十分な量のトリホスフェートおよび塩化マグネシウムをインスリンリスプロのＵ２００市販製剤に追加して、以下の表１１に示す濃度に到達させることにより製剤化される。
【表１１】
0006920471.tif 000012
表１１．試験および対照物品の組成。インスリンリスプロに追加して、試験物品を作製するためにトリホスフェートおよびＭｇＣｌ２が追加されたＵ−２００  ＨＵＭＡＬＯＧ製剤には、５ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１６ｍｇ／ｍＬのグリセリン、３．１５ｍｇ／ｍＬのｍ−クレゾール、０．０４６  ｍｇ／ｍＬのＺｎ２＋がさらに含まれる。
【００６６】
健康な対象が登録され、各対象は、インスリンリスプロ単独の１５単位ＳＣ投与、および各試験製剤の１５インスリン単位ＳＣ投与を含む治療列に無作為化される。個々の対象に投与する機会の間には、最低３日が必要である。
【００６７】
血液試料は、複数の時点で収集され、インスリンリスプロの血清濃度を経時的に測定する。インスリンリスプロの血清濃度は、インスリンリスプロに特定の確証された酵素結合免疫吸着アッセイ法を使用して測定される。薬物動態分析は、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）バージョン７．０（またはそれ以降）およびＳ−ＰＬＵＳ（登録商標）ソフトウェア（バージョン８．２）を使用した分析の標準的な非区画法を使用して実施される。遊離血清インスリンリスプロの濃度は、薬物動態パラメータを計算するために使用される。結果は、以下の表１２に提供される。
【表１２】
0006920471.tif 000013
表１２．ＰＫデータ。略記：ＬＳ−最小二乗、ＣＩ−信頼区間、Ｔ発現−インスリンが現れる発現までの時間、初期５０％Ｔｍａｘ−最大半量薬物濃度の初期までの時間、ＡＵＣ（０〜１５分）−時間ゼロ〜１５分までの曲線下面積、ＡＵＣ（０〜３０分）−時間ゼロ〜３０分までの曲線下面積、後期５０％ｔｍａｘ−最大半量薬物濃度の後期までの時間。Ｈｕｍａｌｏｇ対照＜０．０００１と比較した全ての試験物品のＰ値。
【００６８】
結果は、トリホスフェート含有製剤は、トリホスフェート非含有対照と比較して、薬物動態パラメータを加速したことを示す。
【００６９】
さらに、５時間の正常血糖グルコースクランプが各時点において遂行され、各治療に対する糖力学的反応の評価が可能になる。この評価では、経時的なグルコース注入速度（ＧＩＲ）が、インスリン効果の尺度として使用される。局所的に重み付けされた散布図平滑化（ＬＯＥＳＳ）関数は、Ｓ−ＰＬＵＳソフトウェアバージョン８．２を使用して、各治療群および／または時点における全ての個体のＧＩＲ対時間プロファイルに適用される。各対象の適合データは、グルコダイナミックパラメータの計算に使用される。
【００７０】
データの分析により、トリホスフェート含有製剤は、トリホスフェート非含有対照と比較して、改善された薬力学的パラメータを示す。上述される研究は、インスリン製剤へのピロホスフェートまたはトリホスフェートなどの特定のポリホスフェートの少量の追加が、インスリン薬物動態プロファイルにおいてより早いＴｍａｘ、およびより高いＣｍａｘを引き起こすことができることを示す。
配列
ヒトインスリンＡ鎖
Ｇｌｙ  Ｉｌｅ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ｇｌｎ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｃｙｓ  Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｇｌｎ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ（配列番号１）
ヒトインスリンＢ鎖
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｔｈｒ（配列番号２）。
インスリンリスプロＢ鎖
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｔｈｒ（配列番号３）。
インスリンアスパルトＢ鎖
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ａｓｐ  Ｌｙｓ  Ｔｈｒ（配列番号４）。
インスリングルリシンＢ鎖
Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｌｅｕ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｇｌｕ  Ｔｈｒ（配列番号５）。
【配列表】
0006920471000001.app