(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第２電極系上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第１対極、前記第２作用極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記第３対極として、前記第１作用極、前記第１対極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法。
【請求項２】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いる請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行う請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行う請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含む請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含む請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第４対極と前記第３作用極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法。
【請求項９】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含む請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含む請求項８〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記バイオセンサが、第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系を更に備え、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第４対極として、前記第２対極を用い、
前記方法は、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いる請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行う請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行う請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第５作用極と第５対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第５電極系と、
第６作用極と第６対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第６電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第５電極系の第５対極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第５電極系の第５作用極と前記第６電極系の第６作用極上には、前記試薬層は配置されず、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第５対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記第６対極として、前記第１作用極および前記第１対極のいずれか一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第５電極系に第５電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値を検出する第５工程と、
前記第６電極系に第６電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値を検出する第６工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法。
【請求項１８】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行う請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含む請求項１７〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含む請求項１７〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行う請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行う請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程が行われる請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含む請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含む請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記バイオセンサが、第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系を更に備え、
前記第２試薬層は、前記第２電極系上にも配置され、
前記方法は、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である請求項１７に記載の方法。
【請求項３０】
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いる請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いる請求項２９または３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行う請求項２９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行う請求項２９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記第１工程および前記第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行う請求項２９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含む請求項２９〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含む請求項２９〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である請求項２９に記載の方法。
【請求項３８】
前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行う請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程が行われる請求項３７または３８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液中の血液成分の量を測定する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
臨床検査や糖尿病患者の血糖値自己測定等において、生体試料の成分を測定するためのセンサが従来から使用されている。このようなセンサは、例えば、その表面に作用極および対極が形成された絶縁基板の上に、スペーサーを介してカバーが配置されている構成である。前記作用極および対極の上には、酸化還元酵素およびメディエータ（電子伝達体）等を含む試薬が配置されており、この部分が分析部となる。この分析部には、血液を導入するための流路の一端が連通しており、前記流路の他端は外部に向かって開口しており、ここが血液供給口となる。このようなセンサを用いた生体試料（例えば血液）の成分の分析（例えば、血糖値）は、例えば、次のようにして行われる。すなわち、まず、前記センサを専用の測定装置（メータ）にセットする。そして、指先等をランセットで傷つけて出血させ、これに前記センサの血液供給口を接触させる。血液は、毛細管現象によりセンサの流路に吸い込まれ、これを通って分析部に導入され、ここで、前記試薬と接触する。そして、血液中の成分と、酸化還元酵素とが反応して酸化還元反応が起こり、これによりメディエータを介して電流が流れる。この電流を検出し、この電流値に基づき、前記測定装置において血液成分量を算出し、これを表示する。【０００３】
健康管理への要求の高まりから、年々、生体試料の成分を測定するための高精度なセンサが強く求められてきている。例えば、２０１３年５月に発効したＩＳＯ１５１９７（体外検査システム−糖尿病管理における事故測定のための血糖モニターシステムに対する要求事項）においては、２００３年に発効したＩＳＯ１５１９７と比較して基準が厳しくなっている。【０００４】
【表１】
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【０００５】
高精度に測定するためのバイオセンサとして、例えば、作用極３２と対極３６の電極系の上に試薬層３９が、作用極３３と対極３５の電極系の上に別の試薬層４０が、それぞれ配置されたバイオセンサが報告されている（特許文献１）。別の電極３７は、ヘマトクリット値を測定するための電極であり、試薬層３９および試薬層４０は、接触していない。試薬層３９は、酸化還元酵素とメディエータを、試薬層４０は、メディエータを含む。このような電極３７と、前記作用極３２、対極３６、作用極３３、対極３５のいずれか一つとに、電圧を印加することにより、ヘマトクリット値を測定することができる。【０００６】
また、３つの電極（作用極Ｗ１、Ｗ２、参照電極Ｒ）の上に試薬が配置されたバイオセンサが報告されている（特許文献２）。この作用極Ｗ１と参照電極Ｒの上には酸化型のレドックス媒介物、作用極Ｗ２の上には酸化型のレドックス媒介物と酵素が配置されている。このような作用極Ｗ１と参照電極Ｒとの間に電圧を印加することにより、抵抗値（ｒ値）が測定され、そのｒ値を用いてヘマトクリット値を算出することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２００５／１０３６６９号パンフレット
【特許文献２】特許第４０６００７８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従来、高精度に血液成分を測定するため、バイオセンサのキャピラリ内に導入された血液のヘマトクリット（Ｈｃｔ）値を測定し、この値に応じて血液成分の量を補正することが行われている。【０００９】
しかしながら、従来の技術においては、キャピラリ内に導入された血液の分布に偏りがあり、従来の測定方法によっては、そのようなバイオセンサを用いて血液成分を正確に測定することは困難であった。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、キャピラリ内に導入された血液の分布の偏りについて詳細に検討したところ、以下の図１に示すような知見が得られた。図１は、２つ試薬部を有するバイオセンサに血液を導入した際の、前記バイオセンサ内の血液分布のばらつきを表す画像である。図１（ａ）および図１（ｂ）において、図に向かって左側が血液点着側であり、右側が空気孔側である。血液は図に向かって左側から右側へ進行する。図１において、赤血球が多く存在する箇所は黒色、赤血球があまり存在しない箇所は灰色に色づいている。図１（ａ）において、血液点着側の試薬部において、灰色に色づいており、その場所では血漿成分が多く、赤血球が少ないことが理解できる。また、図１（ｂ）においては、空気孔側の試薬部において、灰色に色づいており、その場所では血漿成分が多く、赤血球が少ないことが理解できる。このようにバイオセンサ内の試薬部において、赤血球の分布に偏りがあり、キャピラリ内の全体のヘマトクリット値を適切に測定できないという問題がある。このような問題に対し、本発明者らは特定の構成を有するバイオセンサを用い、特定の測定工程を含み、血液中の血液成分の量を、高精度に測定する方法の提供を実現した。【００１１】
従来の測定方法では、バイオセンサのキャピラリ内にヘマトクリット値を測定するための電極系を設けて、その電極系を用いてヘマトクリット値を測定していた。本発明の測定方法は、バイオセンサのキャピラリ内に複数のヘマトクリット値を測定するための電極系を設け、キャピラリ内の互いに異なる位置でヘマトクリット値を測定することを特徴とする。このようにキャピラリ内の複数の箇所でヘマトクリット値を測定することにより、キャピラリ内に導入された血液の分布にばらつきにかかわらず、より正確なヘマトクリット値を測定することが可能である。【００１２】
本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第２電極系上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第１対極、前記第２作用極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記第３対極として、前記第１作用極、前記第１対極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（本文中、「血液成分の量の第１測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１３】
また、本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第４対極と前記第３作用極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（本文中、「血液成分の量の第２測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１４】
また、本発明は、
血液成分の量の第１測定方法であって、
前記バイオセンサが、第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系を更に備え、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第４対極として、前記第２対極を用い、
前記方法は、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（本文中、「血液成分の量の第３測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１５】
また、本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第５作用極と第５対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第５電極系と、
第６作用極と第６対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第６電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第５電極系の第５対極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第５電極系の第５作用極と前記第６電極系の第６作用極上には、前記試薬層は配置されず、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第５対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記第６対極として、前記第１作用極および前記第１対極のいずれか一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第５電極系に第５電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値を検出する第５工程と、
前記第６電極系に第６電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値を検出する第６工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（本文中、「血液成分の量の第４測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１６】
また、本発明は、
血液成分の量の第４測定方法であって、
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（本文中、「血液成分の量の第５測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１７】
また、本発明は、
血液成分の量の第４測定方法であって、
前記バイオセンサが、第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系を更に備え、
前記第２試薬層は、前記第２電極系上にも配置され、
前記方法は、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（本文中、「血液成分の量の第６測定方法」と呼ぶことがある）である。【００１８】
また、本発明は、
血液成分の量の第６測定方法であって、
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（本文中、「血液成分の量の第７測定方法」と呼ぶことがある）である。
【発明の効果】
【００１９】
このように、本発明の血液成分の測定方法では、バイオセンサ内で血液の分布がばらつく問題を解消するよう試薬部と電極が構成されているため、複数の電極系へ電圧を印加することにより、血液の分布のばらつきを考慮した測定を行うことができるため、バイオセンサ内で血液の分布がばらついたとしても、測定精度が向上することを特徴とする。【００２０】
なお、本文中、単に「血液成分の測定方法」に言及する場合は、「血液成分の量の第１測定方法」、「血液成分の量の第２測定方法」、「血液成分の量の第３測定方法」、「血液成分の量の第４測定方法」、「血液成分の量の第５測定方法」、「血液成分の量の第６測定方法」および「血液成分の量の第７測定方法」の全てを指す。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、本発明におけるバイオセンサの電極構成において、キャピラリ内の血液分布のばらつきを表す画像である。
【図２】図２は、本発明の測定方法において用いる測定装置の一例を示す斜視図である。
【図３】図３は、本発明の測定方法において用いるバイオセンサの一例を示す分解斜視図である。
【図４】図４は、図３の前記バイオセンサの断面図である。
【図５Ａ】図５Ａは、図３の前記バイオセンサの平面図である。
【図５Ｂ】図５Ｂは、図３中のＡ部の拡大図である。
【図６】図６は、本発明の測定方法において用いるバイオセンサの別の一例を示す分解斜視図である。
【図７】図７は、図６の前記バイオセンサの断面図である。
【図８Ａ】図８Ａは、図６の前記バイオセンサの平面図である。
【図８Ｂ】図８Ｂは、図６中のＢ部の拡大図である。
【図９】図９は、本発明の測定方法において用いるバイオセンサの別の一例を示す分解斜視図である。
【図１０】図１０は、図９の前記バイオセンサの断面図である。
【図１１Ａ】図１１Ａは、図９の前記バイオセンサの平面図である。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、図９中のＣ部の拡大図である。
【図１２】図１２は、実施形態１Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図１３】図１３は、実施形態１Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図１４】図１４は、実施形態１Ａにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図１５】図１５は、実施形態１Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図１６】図１６は、実施形態１Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図１７】図１７は、実施形態１Ｂにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図１８】図１８は、実施形態１Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図１９】図１９は、実施形態１Ｃにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図２０】図２０は、実施形態２において、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図２１】図２１は、実施形態２において、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図２２】図２２は、実施形態２において使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図２３】図２３は、実施形態３Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図２４】図２４は、実施形態３Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図２５】図２５は、実施形態３Ａにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図２６】図２６は、実施形態３Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図２７】図２７は、実施形態３Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図２８】図２８は、実施形態３Ｂにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図２９】図２９は、実施形態３Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図３０】図３０は、実施形態３Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図３１】図３１は、実施形態３Ｃにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図３２】図３２は、実施形態３Ｄにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図３３】図３３は、実施形態３Ｄにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図３４】図３４は、実施形態３Ｄにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図３５】図３５は、実施形態４において、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図３６】図３６は、実施形態４において、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図３７】図３７は、実施形態４において使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図３８】図３８は、実施形態５において、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図３９】図３９は、実施形態５において、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図４０】図４０は、実施形態５において使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図４１】図４１は、実施形態６Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図４２】図４２は、実施形態６Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図４３】図４３は、実施形態６Ａにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図４４】図４４は、実施形態６Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図４５】図４５は、実施形態６Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図４６】図４６は、実施形態６Ｂにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図４７】図４７は、実施形態６Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図４８】図４８は、実施形態６Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図４９】図４９は、実施形態６Ｃにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図５０】図５０は、実施形態６Ｄにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図５１】図５１は、実施形態６Ｄにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図５２】図５２は、実施形態６Ｄにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図５３】図５３は、実施形態７Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図５４】図５４は、実施形態７Ａにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図５５】図５５は、実施形態７Ａにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図５６】図５６は、実施形態７Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図５７】図５７は、実施形態７Ｂにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図５８】図５８は、実施形態７Ｂにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図５９】図５９は、実施形態７Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電圧値の時間的な変化を示す図である。
【図６０】図６０は、実施形態７Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【図６１】図６１は、実施形態７Ｃにおいて使用するバイオセンサの電極と電極系とを示す表である。
【図６２】図６２は、本発明の測定方法において用いるバイオセンサを装着した血液成分測定装置の電気ブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
つぎに、本発明を詳しく説明する。
【００２３】
本発明の血液成分の量の第１測定方法、血液成分の量の第２測定方法、血液成分の量の第３測定方法、血液成分の量の第４測定方法、血液成分の量の第５測定方法、血液成分の量の第６測定方法および血液成分の量の第７測定方法における測定対象の成分は、例えば、グルコース、ケトン、ＨｂＡ１ｃ、乳酸、尿酸、ビリルビンおよびコレステロール等である。本発明の測定方法において用いられるバイオセンサにおいて、前記試薬部が含む酵素は、測定対象の生体試料の成分に応じ適宜選択される。
【００２４】
なお、本発明の血液成分の量の第１測定方法、血液成分の量の第２測定方法、血液成分の量の第３測定方法、血液成分の量の第４測定方法、血液成分の量の第５測定方法、血液成分の量の第６測定方法および血液成分の量の第７測定方法は、キャピラリ全体の血液の挙動を得て、測定精度を向上させるための構成ならびに測定方法の一部であり、これらに限定されるものではない。
【００２５】
＜第１の実施形態：血液成分の量の第１測定方法＞
本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第２電極系上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第１対極、前記第２作用極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記第３対極として、前記第１作用極、前記第１対極および前記第２対極の少なくとも一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（血液成分の量の第１測定方法）である。
【００２６】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第１工程および前記第２工程の後に、前記第３工程を行うのが好ましい。これは、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する工程が終わった後なので、ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する際の電極系の対極として、前記血液成分の量に依存する第１または第２電流値を検出する工程で用いる第１電極系および第２電極系の作用極および対極のいずれも使用することが出来るからである。
【００２７】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００２８】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いてもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００２９】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は同一であってもよい。または、各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は異なっていてもよい。
【００３０】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は同一であってもよい。または、各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は異なっていてもよい。
【００３１】
前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第２工程を行ってもよい。また、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程、および１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第３工程は、２回以上行ってもよい。
【００３２】
本発明の血液成分の量の第１測定方法、血液成分の量の第２測定方法、血液成分の量の第３測定方法、血液成分の量の第４測定方法、血液成分の量の第５測定方法、血液成分の量の第６測定方法および血液成分の量の第７測定方法において、
前記第１試薬層および前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータは、特に制限されず、例えば、フェリシアン化物、ｐ−ベンゾキノン、ｐ−ベンゾキノン誘導体、フェナジンメトサルフェート、メチレンブルー、フェロセン、フェロセン誘導体があげられる。この中で、フェナンスレンキノン（９，１０−フェナンスレンキノン）、３−フェニルイミノ−３Ｈ−フェノチアジンまたは、フェリシアン化物（フェリシアン化カリウム）が好ましい。前記メディエータの配合量は、特に制限されず、１回の測定当り若しくはバイオセンサ１個当り、例えば、０．１〜１０００ｍＭであり、好ましくは１〜５００ｍＭであり、より好ましくは、１０〜３００ｍＭである。例えば、血液（生体試料）中のグルコース値（血液成分）を測定する際、酵素としてグルコースデヒドロゲナーゼ（酸化還元酵素）を用い、メディエータとしてフェリシアン化カリウムを用いたバイオセンサの場合、例えば、以下のようにしてＧｌｕに依存する電流値を得る。バイオセンサにおいて、前記酸化還元酵素とメディエータが血液と接触し、これらが血液中に溶解される。そうすると、血液中の基質であるＧｌｕと前記酸化還元酵素との間で酵素反応が進行し、前記メディエータが還元されて、フェロシアン化物が生成する。この反応終了後、還元されたメディエータを電気化学的に酸化し、このとき得られる電流から血液中のＧｌｕに依存する電流値を得る。
【００３３】
本発明の血液成分の量の第１測定方法、血液成分の量の第２測定方法、血液成分の量の第３測定方法、血液成分の量の第４測定方法、血液成分の量の第５測定方法、血液成分の量の第６測定方法および血液成分の量の第７測定方法において、
前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素は、測定対象の血液成分に応じ適宜選択される。前記酸化還元酵素としては、例えば、グルコースオキシダーゼ、ラクテートオキシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、グルコースデヒドロゲナーゼ、ラクテートデヒドロゲナーゼなどがある。測定対象の血液成分がグルコースの場合、酸化還元酵素は、グルコースオキシダーゼおよびグルコースデヒドロゲナーゼが好ましい。前記酸化還元酵素の量は、例えば、バイオセンサ１個当り、若しくは１回の測定当り、例えば、０．０１〜１００Ｕであり、好ましくは、０．０５〜１０Ｕであり、より好ましくは、０．１〜５Ｕである。
【００３４】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００３５】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第２工程を２回以上行う場合、前記第２電圧と前記第２電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００３６】
前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００３７】
前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第２電圧の関係であってもよい。
【００３８】
前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第１電圧および前記第２電圧は、前記第１電圧≧前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第１電圧の印加時間≦前記第２電圧の印加時間の関係であってもよい。
【００３９】
前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５Ｖ〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０Ｖ〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、かつ、例えば、前記第３電圧＞前記第２電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【００４０】
＜第２実施形態：血液成分の量の第２測定方法＞
本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第４対極と前記第３作用極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（血液成分の量の第２測定方法）である。
【００４１】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００４２】
前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。その場合、前記第３工程の後に、さらに１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第３工程は、２回以上行ってもよい。
【００４３】
前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第４工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第４工程は、前記第１工程および前記第３工程の後に行ってもよい。前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第４工程は、２回以上行ってもよい。
【００４４】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００４５】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００４６】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００４７】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００４８】
前記血液成分の量の第２測定方法において、
前記第４電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第４電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第４工程を２回以上行う場合、前記第４電圧と前記第４電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００４９】
前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第４電圧は、前記第４電圧＞前記第１電圧の関係であってもよい。
【００５０】
前記血液成分の量の第２測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第４電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、かつ、例えば、前記第４電圧＞前記第１電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第４電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【００５１】
＜第３実施形態：血液成分の量の第３測定方法＞
本発明は、前記血液成分の量の第１測定方法において、
前記バイオセンサが、第４作用極と第４対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第４電極系を更に備え、
前記第４作用極として、前記第１対極を用い、
前記第４対極として、前記第２対極を用い、
前記方法は、
前記第４電極系に第４電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値を検出する第４工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第４電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（血液成分の量の第３測定方法）である。
【００５２】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００５３】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いてもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００５４】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００５５】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００５６】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。その場合、前記第３工程の後に、さらに１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。また、前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。その場合、前記第３工程の後に、さらに１回または２回以上の前記第２工程を行ってもよい。前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第３工程は、２回以上行ってもよい。
【００５７】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第４工程は、１回または２回以上の前記第１工程および１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。また、前記第４工程は、前記第１工程、第２工程および前記第３工程の後に行ってもよい。前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第４工程は、２回以上行ってもよい。
【００５８】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００５９】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００６０】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００６１】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第２工程を２回以上行う場合、前記第２電圧と前記第２電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００６２】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００６３】
前記血液成分の量の第３測定方法において、
前記第４電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第４電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第４工程を２回以上行う場合、前記第４電圧と前記第４電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００６４】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第４電圧は、前記第４電圧＞前記第１電圧の関係であってもよい。
【００６５】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第２電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第４電圧は、前記第４電圧＞前記第２電圧の関係であってもよい。
【００６６】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第１電圧および前記第２電圧は、前記第１電圧≧前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第１電圧の印加時間≦前記第２電圧の印加時間の関係であってもよい。
【００６７】
前記血液成分の量の第３測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第４電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、かつ、前記第３電圧＞前記第２電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第４電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【００６８】
＜第４実施形態：血液成分の量の第４測定方法＞
本発明は、
第１作用極と第１対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第１電極系と、
第３作用極と第３対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第３電極系と、
第５作用極と第５対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第５電極系と、
第６作用極と第６対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第６電極系とを備えたバイオセンサを用いて、血液中の血液成分の量を測定する方法であり、
前記バイオセンサにおいて、
前記第１電極系上に第１試薬層が配置され、
前記第５電極系の第５対極上に第２試薬層が配置され、
前記第１試薬層と前記第２試薬層は、離れて配置され、
前記第５電極系の第５作用極と前記第６電極系の第６作用極上には、前記試薬層は配置されず、
前記第１試薬層および前記第２試薬層は、前記血液中の血液成分の量を測定するための試薬をそれぞれ含み、
前記第３作用極として、前記第５対極を用い、
前記第３対極として、前記第１作用極を用い、
前記第６対極として、前記第１作用極および前記第１対極のいずれか一つを用い、
前記方法は、
前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程と、
前記第３電極系に第３電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程と、
前記第５電極系に第５電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値を検出する第５工程と、
前記第６電極系に第６電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値を検出する第６工程と、
前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程を含む方法（血液成分の量の第４測定方法）である。
【００６９】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００７０】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行うのが好ましい。
【００７１】
前記血液成分の量の第４測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第３工程、前記第５工程および前記６工程は、それぞれ２回以上行ってもよい。
【００７２】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００７３】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００７４】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００７５】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００７６】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第５工程を２回以上行う場合、前記第５電圧と前記第５電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００７７】
前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第６工程を２回以上行う場合、前記第６電圧と前記第６電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００７８】
前記血液成分の量の第４測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。
【００７９】
前記血液成分の量の第４測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、前記第５電圧＞前記第１電圧、かつ前記第６電圧＞前記第１電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【００８０】
＜第５実施形態：血液成分の量の第５測定方法＞
本発明は、前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（血液成分の量の第５測定方法）である。
【００８１】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００８２】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行うのが好ましい。
【００８３】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行うのが好ましい。
【００８４】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程が行われるのが好ましい。
【００８５】
前記血液成分の量の第５測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第７工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。前記血液成分の量の第１測定方法において、前記第３工程、前記第５工程、前記６工程および前記第７工程は、それぞれ２回以上行ってもよい。
【００８６】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００８７】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【００８８】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００８９】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００９０】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第５工程を２回以上行う場合、前記第５電圧と前記第５電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００９１】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第６工程を２回以上行う場合、前記第６電圧と前記第６電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００９２】
前記血液成分の量の第５測定方法において、
前記第７電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第７電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第７工程を２回以上行う場合、前記第７電圧と前記第７電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【００９３】
前記血液成分の量の第５測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第１電圧の関係であってもよい。また、前記第１電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第１電圧の関係であってもよい。また、前記第１電圧および前記第７電圧は、前記第７電圧＞前記第１電圧の関係であってもよい。
【００９４】
前記血液成分の量の第５測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第７電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、前記第５電圧＞前記第１電圧、前記第６電圧＞前記第１電圧、かつ前記第７電圧＞前記第１電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第７電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【００９５】
＜第６実施形態：血液成分の量の第６測定方法＞
本発明は、前記血液成分の量の第４測定方法において、
前記バイオセンサが、第２作用極と第２対極とを有する血液成分の量に依存する電流値を測定するための第２電極系を更に備え、
前記第２試薬層は、前記第２電極系上にも配置され、
前記方法は、
前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（血液成分の量の第６測定方法）である。
【００９６】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第１電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第１電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００９７】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第２工程を２回以上行い、
前記血液成分の量を算出する工程における前記血液成分の量に依存する第２電流値として、得られた２つ以上の前記血液成分の量に依存する第２電流値を用いてもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。
【００９８】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
全ての前記第１工程と前記第２工程を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は同一であってもよい。または、各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は異なっていてもよい。
【００９９】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第１工程と前記第２工程の一部を同時に行ってもよい。この際、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。この際、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。または、この際、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は同一であってもよい。または、各第１電圧が同一電圧であり、各第２電圧が同一電圧である場合、前記第１電圧と前記第２電圧は異なっていてもよい。
【０１００】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第１工程および前記第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行うのが好ましい。
【０１０１】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。
【０１０２】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第２工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第３工程、前記第５工程、および前記６工程は、それぞれ２回以上行ってもよい。
【０１０３】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【０１０４】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【０１０５】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１０６】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第２工程を２回以上行う場合、前記第２電圧と前記第２電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１０７】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１０８】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第５工程を２回以上行う場合、前記第５電圧と前記第５電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１０９】
前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第６工程を２回以上行う場合、前記第６電圧と前記第６電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１１０】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。
【０１１１】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第２電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。
【０１１２】
前記血液成分の量の第６測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、前記第５電圧＞前記第１電圧、前記第６電圧＞前記第１電圧、前記第３電圧＞前記第２電圧、前記第５電圧＞前記第２電圧、かつ前記第６電圧＞前記第２電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【０１１３】
＜第７実施形態：血液成分の量の第７測定方法＞
本発明は、前記血液成分の量の第６測定方法において、
前記バイオセンサが、第７作用極と第７対極とを有するヘマトクリット値に依存する電流値を測定するための第７電極系を更に備え、
前記第７作用極として、前記第５作用極および前記第６作用極のいずれか一つを用い、
前記第７対極として、前記第５対極を用い、
前記方法は、
前記第７電極系に第７電圧を印加し、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値を検出する第７工程を更に含み、
前記血液成分の量を算出する工程が、前記血液成分の量に依存する第１電流値と、前記血液成分の量に依存する第２電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第３電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第５電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第６電流値と、前記ヘマトクリット値に依存する第７電流値とを用いて、前記血液成分の量を算出する工程である方法（血液成分の量の第７測定方法）である。
【０１１４】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行うのが好ましい。
【０１１５】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
１回または２回以上の前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に１回または２回以上の前記第１工程が行われるのが好ましい。
【０１１６】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第１工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第１工程の後に、行ってもよい。
【０１１７】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第２工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第２工程の後に、行ってもよい。
【０１１８】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第３工程は、１回または２回以上の前記第７工程の後に、行ってもよい。また、前記第５工程は、１回または２回以上の前記第７工程を行ってもよい。また、前記第６工程は、１回または２回以上の前記第７工程の後に、行ってもよい。
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第３工程、前記第５工程、前記６工程および前記第７工程は、それぞれ２回以上行ってもよい。
【０１１９】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、メディエータをそれぞれ含むのが好ましい。前記メディエータについては、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【０１２０】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第１試薬層と前記第２試薬層が、酸化還元酵素を更に含むのが好ましい。前記酸化還元酵素については、前記血液成分の量の第１測定方法において説明したとおりである。
【０１２１】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第１工程を２回以上行う場合、前記第１電圧と前記第１電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２２】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖである。前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第２工程を２回以上行う場合、前記第２電圧と前記第２電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２３】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第３工程を２回以上行う場合、前記第３電圧と前記第３電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２４】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第５工程を２回以上行う場合、前記第５電圧と前記第５電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２５】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第６工程を２回以上行う場合、前記第６電圧と前記第６電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２６】
前記血液成分の量の第７測定方法において、
前記第７電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖである。前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。前記第７工程を２回以上行う場合、前記第７電圧と前記第７電圧の印加時間は、それぞれの回で同一であっても異なっていてもよい。
【０１２７】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第１電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第１電圧および前記第７電圧は、前記第７電圧＞前記第１電圧の関係であるのが好ましい。
【０１２８】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第２電圧および前記第３電圧は、前記第３電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第５電圧は、前記第５電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第６電圧は、前記第６電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。また、前記第２電圧および前記第７電圧は、前記第７電圧＞前記第２電圧の関係であるのが好ましい。
【０１２９】
また、前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第１電圧の印加時間＞前記第３電圧の印加時間の関係であってもよい。また、前記第１電圧の印加時間＞前記第４電圧の印加時間であってもよい。また、前記第１電圧の印加時間＞前記第６電圧の印加時間であってもよい。また、前記第１電圧の印加時間＞前記第７電圧の印加時間であってもよい。
【０１３０】
また、前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第２電圧の印加時間＞前記第３電圧の印加時間の関係であってもよい。また、前記第２電圧の印加時間＞前記第４電圧の印加時間であってもよい。また、前記第２電圧の印加時間＞前記第６電圧の印加時間であってもよい。また、前記第２電圧の印加時間＞前記第７電圧の印加時間であってもよい。
【０１３１】
前記血液成分の量の第７測定方法において、前記第１電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第２電圧は、例えば、０．１Ｖ〜１．０Ｖ、好ましくは０．２Ｖ〜０．８Ｖ、より好ましくは０．３Ｖ〜０．６Ｖであり、前記第３電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第５電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第６電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、前記第７電圧は、例えば、１．０Ｖ〜５．０Ｖ、好ましくは１．５〜４．５Ｖ、より好ましくは２．０〜４．０Ｖであり、例えば、前記第３電圧＞前記第１電圧、前記第５電圧＞前記第１電圧、前記第６電圧＞前記第１電圧、前記第７電圧＞前記第１電圧、前記第３電圧＞前記第２電圧、前記第５電圧＞前記第２電圧、前記第６電圧＞前記第２電圧、かつ前記第７電圧＞前記第２電圧であり、前記第１電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第２電圧の印加時間は、例えば０．０５〜２秒、好ましくは０．１〜１秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第３電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第５電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第６電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒であり、前記第７電圧の印加時間は、例えば０．０５〜１秒、好ましくは０．１〜０．５秒、より好ましくは０．１〜０．３秒である。
【０１３２】
本発明の血液成分の測定方法において用いられるバイオセンサは、前記のように、所定の電極系を備える。さらに、このバイオセンサは、絶縁基板を有し、この上に各電極系と、前記各電極系に血液を導入するための流路とが形成され、前記流路の一端は、バイオセンサ外部に開口して血液供給口となっていることが好ましい。この場合、前記血液供給口は一つであり、前記流路は、その途中で分岐しており、分岐した各流路の端部は前記各分析部に連通している構成であってもよい。その他、前記流路の途中に電極系が位置し、その後方に別の電極系が位置している構成であってもよい。
【０１３３】
本発明の血液成分の測定方法において用いられるバイオセンサは、さらに、スペーサーおよびカバーを有し、前記絶縁基板の上に、前記スペーサーを介して前記カバーが配置されている構成が好ましい。
【０１３４】
本発明の血液成分の測定方法において用いられるバイオセンサにおいて、前記試薬部がメディエータ、またはメディエータおよび酸化還元酵素を含む場合、さらに酵素安定化剤および／または結晶均質化剤を含むのが好ましい。
【０１３５】
前記酵素安定化剤としては、例えば、糖アルコールがあげられる。前記糖アルコールとしては、例えば、ソルビトール、マルチトール、キシリトール、マンニトール、ラクチトール、還元パラチノース、アラビニトール、グリセロール、リビトール、ガラクチトール、セドヘプチトール、ペルセイトール、ボレミトール、スチラシトール、ポリガリトール、イジトール、タリトール、アリトール、イシリトール、還元澱粉糖化物、イシリトールなどの鎖状の多価アルコールや環式糖アルコールがあげられる。また、これらの糖アルコールの立体異性体、置換体または誘導体であってもよい。これらの糖アルコールは、単独で使用してもよいし、２種類以上で併用してもよい。これらの中で、好ましいのは、マルチトールである。前記酵素安定化剤の配合量は、１回の測定当り若しくは１センサ当り、例えば、０．１〜５００ｍＭの範囲であり、好ましくは、０．５〜１００ｍＭの範囲であり、より好ましくは１〜５０ｍＭの範囲である。
【０１３６】
前記結晶均質化剤は、試薬部の結晶状態を均質にするためのものであり、例えば、アミノ酸があげられる。前記アミノ酸としては、例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、アルギニン、リシン、ヒスチジン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリン、サルコシン、ベタイン、タウリン、これらの塩、置換体および誘導体があげられる。これらは、単独で使用してもよいし、２種類以上で併用してもよい。これらのなかで、グリシン、セリン、プロリン、トレオニン、リシン、タウリンが好ましく、より好ましくは、タウリンである。前記結晶均質化剤の配合量は、１回の測定当り若しくは１センサ当り、例えば、０．１〜１０００ｍＭであり、好ましくは、１０〜５００ｍＭであり、より好ましくは２０〜２００ｍＭである。
【０１３７】
本発明の血液成分の測定方法において用いられるバイオセンサは、更に、血液検知電極を有し、この血液検知電極は、前記血液供給口から前記各電極系の少なくとも一つよりも後方に位置し、この血液検知電極により、前記各電極系の少なくとも一つに確実に血液が導入されたことが検知可能であることが好ましい。より好ましくは、前記血液検知電極が、前記各電極系の最後方に位置することである。前記血液検知電極は、前記電極系の一つとしても、用いられてもよい。
【０１３８】
図２の斜視図に、本発明の測定方法において用いられるバイオセンサを装着した状態の測定装置の一例を示す。図示のように、この測定装置２は、その一端にセンサの装着口５を有し、ここにセンサ３を装着して保持する。なお、符号１０は、センサ３の血液供給口である。また、この測定装置２の略中央には表示部４を有し、ここに測定結果を表示する。
【０１３９】
図６２には、本発明の測定方法において用いられるバイオセンサを装着した状態の測定装置の電気ブロック図の一例を示す。本発明の測定装置において、本発明の一実施形態にかかる測定装置の入力端子部２０６には、電圧を印加する電圧印加部２３７と、電流−電圧変換部２３８が接続されている。電圧印加部２３７には、制御部２３９から電圧が印加され、この電圧は、入力端子部２０６を介して、バイオセンサ３の各電極系および血液成分導入検知極のうち所望の電極へ一定時間印加される。この電圧印加によりバイオセンサ３において電極間に流れる電流は、電流−電圧変換部２３８にて電圧に変換され、その後、この電圧はＡ／Ｄ変換部２３０でデジタル変換され、このデジタル変換された電圧が判定手段２３１によって閾値と比較される。
【０１４０】
また、制御部２３９に接続された表示部２３２には、前記バイオセンサ３で検出した血液成分の量や、前記判定手段２３１による判定結果が表示されるようになっている。なお、図６２の符号２３３は電源部で、前記各部に電源を供給するためのものである。符号２３４は、ヘマトクリット値と血液成分の測定時の印加電圧、印加時間等からなるテーブルや環境温度から予め作成した検量線および検量テーブルを備えたメモリである。
【０１４１】
また、前記制御部２３９には、時計２３５が接続され、制御部２３９は、この時計２３５の時刻および時間を活用して、各種制御動作を実行するように構成されている。さらに、制御部２３９内には、補正手段２３６が設けられ、測定した血液成分の量をヘマトクリット値によって補正することで、血液成分の量の測定精度を高めるものである。
【０１４２】
次に、本発明の血液成分の量の測定方法の実施例について、図面に基づき説明する。
【０１４３】
［実施形態１Ａ］
実施形態１Ａは、本発明の血液成分の量の第１測定方法の一例である。
図３、図４、図５Ａおよび図５Ｂに、本発明の測定方法において用いるバイオセンサ（以下、「第１バイオセンサ」と呼ぶことがある）の一例を示す。図３は、前記第１バイオセンサの分解斜視図であり、図４は図３の前記バイオセンサの断面図であり、図５Ａは図３の前記バイオセンサの平面図であり、図５Ｂは、図３中のＡ部の拡大図である。前記四図において、同一部分には同一符号を付している。この第１バイオセンサは、一例として、血液成分としてグルコースを測定するためのセンサである。
【０１４４】
図示のように、この第１バイオセンサは、絶縁基板１０１の上に、６個の電極１２、１３、１４、１５、１６および１７が形成されている。これらの電極は、作用極と対極に切り換え可能である。電極１７の表面は、ＣＭＣ等の高分子材料で被覆されている。電極１２および１６の一部を覆うように第１試薬層６が、電極１３、１４および１５の一部を覆うように第２試薬層７が、配置されている。前記第１試薬層６と前記第２試薬層７は、離れて配置されている。前記第２試薬層７は、血液中の血液成分の量を測定するための試薬、好ましくは酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）、より好ましくは酸化還元酵素とメディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。前記第１試薬層は、好ましくはメディエータを含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。
【０１４５】
前記絶縁基板１０１の上には、一方の端部（図において右側端部）を残してスペーサ１０２を介しカバー１０３が配置されている。この第１バイオセンサには、各電極（１２、１３、１４、１５、１６および１７）に血液を導入するために、絶縁基板１０１、スペーサ１０２およびカバー１０３から成る流路８が形成されている。この流路８の先端は、第１バイオセンサの他方の端部（図において左側端部）まで延伸しており、外部に対し開口すること血液供給口１０となっている。前記６個の電極（１２、１３、１４、１５、１６および１７）は各々リードと連結し、これらのリードは、前記一方の端部側（図において右側端部）に延びており、リードの先端はカバーに覆われずに露出している。前記カバー１０３において、流路８の右側端部に対応する部分（第２の試薬層７上もしくは、電極１４上）には、空気孔９が形成されている。さらに、流路８内に、前記電極１７、前記第１試薬層６、前記第２試薬層７がそれぞれ離れて配置されている。
【０１４６】
本発明において、前記絶縁基板の材質は、特に制限されず、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリイミド（ＰＩ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリオキシメチレン（ＰＯＭ）、モノマーキャストナイロン（ＭＣ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、メタクリル樹脂（ＰＭＭＡ）、ＡＢＳ樹脂（ＡＢＳ）、ガラス等が使用でき、このなかで、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）およびポリイミド（ＰＩ）が好ましく、より好ましくは、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）である。絶縁基板の大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０５〜２ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．１〜１ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．１〜０．６ｍｍである。前記絶縁基板の材質および大きさについては、後述の実施形態においても同様である。
【０１４７】
絶縁基板上の電極およびリードは、例えば、金、白金、パラジウム等を材料として、スパッタリング法あるいは蒸着法により導電層を形成し、これをレーザーにより特定の電極パターンに加工することで形成できる。レーザーとしては、例えば、ＹＡＧレーザー、ＣＯ2レーザー、エキシマレーザー等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０１４８】
前記第２試薬層７は、次のようにして形成する。例えば、酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）を０．１〜５Ｕ／センサ、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、酵素安定化剤（例えばマルチトール等）を１〜５０ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層７をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極１３、１４および１５の一部を覆うように試薬層７が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０１４９】
前記第１試薬層６は、次のようにして形成する。例えば、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層６をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極１２および１６の一部を覆うように試薬層６が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０１５０】
本発明において、スペーサ１０２の材質は、特に制限されず、例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。また、スペーサの大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜１ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０．５ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．２５ｍｍである。この例のスペーサには、血液導入のための流路となるＩ字形状の切欠部が形成されているが、その大きさは、例えば、全長０．５〜８ｍｍ、幅０．１〜５ｍｍ、好ましくは、全長１〜１０ｍｍ、幅０．２〜３ｍｍ、より好ましくは、全長１〜５ｍｍ、幅０．５〜２ｍｍである。この切欠部は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、スペーサの形成時に、切欠部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記スペーサの材質および大きさ並びに切欠部については、後述の実施形態においても同様である。
【０１５１】
本発明において、カバー１０３の材質は、特に制限されない。例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。カバーの血液を導入するための流路の天井部に相当する部分は、親水処理されることがさらに好ましい。親水処理としては、例えば界面活性剤を塗布する方法、プラズマ処理などによりカバー表面に水酸基、カルボニル基、カルボキシル基などの親水性官能基を導入する方法等がある。また、試薬層上にレシチン等の界面活性剤からなる層を形成してもよい。カバーの大きさは、特に制限されない。例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅３〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜０.５ｍｍであり、好ましくは、全長１０〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０.２５ｍｍであり、より好ましくは、全長１５〜３０ｍｍ、幅５〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．１ｍｍである。カバーには空気孔９が形成されていることが好ましく、形状は、例えば、円形、楕円形、多角形等である。その大きさは、例えば、最大直径０．０１〜１０ｍｍ、好ましくは、最大直径０．０５〜５ｍｍ、より好ましくは、最大直径０．１〜２ｍｍである。この空気孔は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、カバーの形成時に、空気抜き部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記カバーの材質および大きさ並びに空気孔については、後述の実施形態においても同様である。
【０１５２】
さらに、この第１バイオセンサは、絶縁基板１０１、スペーサ１０２およびカバー１０３をこの順序で積層し、一体化することで製造できる。前記３つの部材は、接着剤あるいは熱融着等で貼り合わせることにより一体化される。前記接着剤としては、例えば、エポキシ系接着剤、アクリル系接着剤、ポリウレタン系接着剤、また熱硬化性接着剤（ホットメルト接着剤等）、ＵＶ硬化性接着剤等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０１５３】
この第１バイオセンサを用いた血液成分量、例えば、血糖値の測定は、次のようにして実施される。まず、専用のランセットで指先等を穿刺し、出血させる。一方、前記第１バイオセンサを専用の測定装置（メータ）にセットする。出血した血液に、測定装置にセットした第１バイオセンサの血液供給口を接触させ、毛細管現象により血液を第１バイオセンサ内部に導入する。この第１バイオセンサによる分析は、次のステップにより行われる。
【０１５４】
なお、この実施形態１Ａにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１の電極系、第２の電極系、第３の電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図１４に示す。
【０１５５】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０１５６】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図１２に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。測定装置２は、第１バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０１５７】
このとき、測定装置２は、図１３に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第２電圧は、第２電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｇを含む）との間に印加させる。図１３において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、３００ｍＶ〜５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、６回行う。
【０１５８】
前記第２工程を２回以上行う場合において、各第２電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。これは、異なる電圧で反応する妨害物質の影響をみることが出来るためである。
【０１５９】
この工程Ｂにおいては、第２工程の後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）に電圧を印加させる（第１工程）。図１３において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、４回行う。例えば、第２工程、第２工程、第１工程、第２工程のように、順番に行う。前記第１工程を２回以上行う場合において、各第１電圧は、同一の電圧であってもよい。これは、たとえば、時間軸における応答値（電流値）の推移をみることができるためである。
【０１６０】
この工程Ｂにおいては、前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第２工程と、前記第１工程を、互い違いに行ってもよい。
【０１６１】
この工程Ｂにおいて、第１工程と第２工程は、入れ替えてもよい。すなわち、図１２における例では、第２工程を一番先に行っているが、第１工程を一番先に行ってもよい。
【０１６２】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第１電流値と、前記第２電極系に前記第２電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第２電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０１６３】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図１２に示すように血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程および第２工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０１６４】
このとき、測定装置２は、図１３に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図１３において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られた第３ヘマトクリット値に依存する電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０１６５】
なお、この実施形態においては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極は使用しない。
【０１６６】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０１６７】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０１６８】
【数１】
0006893579.tif 000003
【０１６９】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する電流値（第１電流値と第２電流値）とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０１７０】
血液成分の量を算出した後、第１バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０１７１】
この実施形態１Ａによれば、血液成分を測定するための第１電極系と第２電極系に、それぞれ異なる電圧を印加することにより、異なる電圧で反応する妨害物質の影響を、最終的に得られる血液成分の量に反映させることができる。
【０１７２】
［実施形態１Ｂ］
実施形態１Ｂは、本発明の血液成分の量の第１測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態１Ｂにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系および第３電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図１７に示す。
【０１７３】
実施形態１Ｂにおいては、測定装置２は、図１５に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第２電圧は、第２電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｇを含む）との間に印加させる。図１６において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、６回行う。この工程Ｂにおいては、第２工程と同時に、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。図１６において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、３００〜６００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、４回行う。
【０１７４】
測定装置２は、図１６に示すように血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程および第２工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この実施形態１Ｂにおいては、第３工程の後にも、血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程および第２工程）を行う点以外は、実施形態１Ａと同様である。
【０１７５】
この実施形態１Ｂにおいては、図１７に示す第１電極系（Ｇｌｕ−１）と第２電極系（Ｇｌｕ−２）の対極として用いられる電極を、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極と対極として用いて、ヘマトクリット値に依存する電流値を検出することができる。図１７においては、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極として電極Ｄ、対極として電極Ｇを用いているが、第１電極系の対極の一つである電極Ｅも、第３電極系の作用極または対極として用いてもよい。第１電極系（Ｇｌｕ−１）と第２電極系（Ｇｌｕ−２）の対極として用いられる電極を、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極と対極として用いるため、グルコース測定により受ける影響は軽微であり、よって、血液成分の量に依存する第１および第２電流値を検出する第１工程および第２工程を行っている途中で、ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程を行うことができる。
【０１７６】
［実施形態１Ｃ］
実施形態１Ｃは、本発明の血液成分の量の第１測定方法の一例である。
図６、図７、図８Ａおよび図８Ｂに、本発明の測定方法において用いるバイオセンサの別の一例（以下、「第２バイオセンサ」と呼ぶことがある）を示す。図６は、前記第２バイオセンサの分解斜視図であり、図７は図６の前記バイオセンサの断面図であり、図８Ａは図６の前記バイオセンサの平面図であり、図８Ｂは、図６中のＢ部の拡大図である。前記四図において、同一部分には同一符号を付している。この第２バイオセンサは、一例として、血液成分としてグルコースを測定するためのセンサである。
【０１７７】
図示のように、この第２バイオセンサは、絶縁基板１１１の上に、５個の電極４２、４３、４４、４５および４６が形成されている。これらの電極は、作用極と対極に切り換え可能である。電極４２、４３、４４、４５および４６の表面は、ＣＭＣ等の高分子材料で被覆されている。電極４２および４６の一部を覆うように第１試薬層３６が、電極４３、４４および４５の一部を覆うように第２試薬層３７が、配置されている。前記第１試薬層３６と前記第２試薬層３７は、離れて配置されている。前記第１試薬層は、血液中の血液成分の量を測定するための試薬、好ましくは酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）、より好ましくは酸化還元酵素とメディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。前記第２の試薬層は、血液中の血液成分の量を測定するための試薬、好ましくは酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）、より好ましくは酸化還元酵素とメディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。
【０１７８】
前記絶縁基板１１１の上には、一方の端部（図において右側端部）を残してスペーサ１０２を介しカバー１０３が配置されている。この第２バイオセンサには、各電極（４２、４３、４４、４５および４６）に血液を導入するために、絶縁基板１１１、スペーサ１０２およびカバー１０３から成る流路８が形成されている。この流路８の先端は、第２バイオセンサの他方の端部（図において左側端部）まで延伸しており、外部に対し開口すること血液供給口１０となっている。前記５個の電極（４２、４３、４４、４５、および４６）は各々リードと連結し、これらのリードは、前記一方の端部側（図において右側端部）に延びており、リードの先端はカバーに覆われずに露出している。前記カバー１０３において、流路８の右側端部に対応する部分（第２試薬層３７上もしくは、電極４４上）には、空気孔９が形成されている。さらに、流路８内に、前記第１試薬層３６、前記第２試薬層３７がそれぞれ離れて配置されている。
【０１７９】
本発明において、前記絶縁基板の材質は、特に制限されず、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリイミド（ＰＩ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリオキシメチレン（ＰＯＭ）、モノマーキャストナイロン（ＭＣ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、メタクリル樹脂（ＰＭＭＡ）、ＡＢＳ樹脂（ＡＢＳ）、ガラス等が使用でき、このなかで、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）およびポリイミド（ＰＩ）が好ましく、より好ましくは、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）である。絶縁基板の大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０５〜２ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．１〜１ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．１〜０．６ｍｍである。前記絶縁基板の材質および大きさについては、後述の実施形態においても同様である。
【０１８０】
絶縁基板上の電極およびリードは、例えば、金、白金、パラジウム等を材料として、スパッタリング法あるいは蒸着法により導電層を形成し、これをレーザーにより特定の電極パターンに加工することで形成できる。レーザーとしては、例えば、ＹＡＧレーザー、ＣＯ2レーザー、エキシマレーザー等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０１８１】
前記第２試薬層３７は、次のようにして形成する。例えば、酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）を０．１〜５Ｕ／センサ、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、酵素安定化剤（例えばマルチトール等）を１〜５０ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層３７をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極４３、４４および４５の一部を覆うように試薬層３７が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０１８２】
前記第１試薬層３６は、次のようにして形成する。例えば、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層３６をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極４２および４６の一部を覆うように試薬層３６が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０１８３】
本発明において、スペーサ１０２の材質は、特に制限されず、例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。また、スペーサの大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜１ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０．５ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．２５ｍｍである。この例のスペーサには、血液導入のための流路となるＩ字形状の切欠部が形成されているが、その大きさは、例えば、全長０．５〜８ｍｍ、幅０．１〜５ｍｍ、好ましくは、全長１〜１０ｍｍ、幅０．２〜３ｍｍ、より好ましくは、全長１〜５ｍｍ、幅０．５〜２ｍｍである。この切欠部は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、スペーサの形成時に、切欠部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記スペーサの材質および大きさ並びに切欠部については、後述の実施形態においても同様である。
【０１８４】
本発明において、カバー１０３の材質は、特に制限されない。例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。カバーの血液を導入するための流路の天井部に相当する部分は、親水処理されることがさらに好ましい。親水処理としては、例えば界面活性剤を塗布する方法、プラズマ処理などによりカバー表面に水酸基、カルボニル基、カルボキシル基などの親水性官能基を導入する方法等がある。また、試薬層上にレシチン等の界面活性剤からなる層を形成してもよい。カバーの大きさは、特に制限されない。例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅３〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜０.５ｍｍであり、好ましくは、全長１０〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０.２５ｍｍであり、より好ましくは、全長１５〜３０ｍｍ、幅５〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．１ｍｍである。カバーには空気孔９が形成されていることが好ましく、形状は、例えば、円形、楕円形、多角形等である。その大きさは、例えば、最大直径０．０１〜１０ｍｍ、好ましくは、最大直径０．０５〜５ｍｍ、より好ましくは、最大直径０．１〜２ｍｍである。この空気孔は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、カバーの形成時に、空気抜き部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記カバーの材質および大きさ並びに空気孔については、後述の実施形態においても同様である。
【０１８５】
さらに、この第２バイオセンサは、絶縁基板１１１、スペーサ１０２およびカバー１０３をこの順序で積層し、一体化することで製造できる。前記３つの部材は、接着剤あるいは熱融着等で貼り合わせることにより一体化される。前記接着剤としては、例えば、エポキシ系接着剤、アクリル系接着剤、ポリウレタン系接着剤、また熱硬化性接着剤（ホットメルト接着剤等）、ＵＶ硬化性接着剤等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０１８６】
この第２バイオセンサを用いた血液成分量、例えば、血糖値の測定は、次のようにして実施される。まず、専用のランセットで指先等を穿刺し、出血させる。一方、前記第２バイオセンサを専用の測定装置（メータ）にセットする。出血した血液に、測定装置にセットした第２バイオセンサの血液供給口を接触させ、毛細管現象により血液をセンサ内部に導入する。この第２バイオセンサによる分析は、次のステップにより行われる。
【０１８７】
なお、この実施形態１Ｃにおいては、第２バイオセンサにおける電極４２を電極Ａ、電極４３を電極Ｃ、電極４４を電極Ｄ、電極４５を電極Ｅ、および電極４６を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、および第３電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図１９に示す。なお、図１８は、実施形態１Ｃにおいて、電圧印加パターンにおける電極と印加電圧と印加タイミングと印加時間とを示す表である。
【０１８８】
実施形態１Ｃは、第１バイオセンサの代わりに第２バイオセンサを用い、第３電極系として作用極として電極Ｇ、対極として電極Ｅを用いた以外は、実施形態１Ｂと同一である。
【０１８９】
この実施形態１Ｃにおいては、図１９に示す第１電極系（Ｇｌｕ−１）と第２電極系（Ｇｌｕ−２）の対極として用いられる電極を、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極と対極として用いて、ヘマトクリット値に依存する電流値を検出することができる。図１９においては、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極として電極Ｇ、対極として電極Ｅを用いているが、第１電極系の対極の一つである電極Ｄも、第３電極系の作用極または対極として用いてもよい。第１電極系（Ｇｌｕ−１）と第２電極系（Ｇｌｕ−２）の対極として用いられる電極を、第３電極系（Ｈｃｔ−３）の作用極と対極として用いるため、グルコース測定により受ける影響は軽微であり、よって、血液成分の量に依存する第１および第２電流値を検出する第１工程および第２工程を行っている途中で、ヘマトクリット値に依存する第３電流値を検出する第３工程を行うことができる。
【０１９０】
［実施形態２］
実施形態２は、本発明の血液成分の量の第２測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態２においては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第４電極系および第３電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図２２に示す。
【０１９１】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０１９２】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図２０に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、前記バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０１９３】
このとき、測定装置２は、図２１に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図２１において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０１９４】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０１９５】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図２０に示すように血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０１９６】
このとき、測定装置２は、図２１に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系との間に印加させる。図２１において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０１９７】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第４電圧の電圧値および印加時間を制御し、第４電極系（作用極としての電極Ｄと、対極としての電極Ｇを含む）に電圧を印加させる（第４工程）。図２１において、「Ｈｃｔ−４」で示す電圧印加が、この第４工程における電圧印加である。この第４電圧は、２５００ｍＶである。前記第４電極系に前記第４電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第４電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０１９８】
なお、この実施形態においては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極は使用しない。
【０１９９】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０２００】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０２０１】
【数２】
0006893579.tif 000004
【０２０２】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第４電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０２０３】
血液成分の量を算出した後、前記バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０２０４】
［実施形態３Ａ］
実施形態３Ａは、本発明の血液成分の量の第３測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態３Ａにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第４電極系および第３電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図２５に示す。
【０２０５】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０２０６】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図２３に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０２０７】
このとき、測定装置２は、図２４に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図２４において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、２００ｍＶ〜５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２０８】
前記第１工程を２回以上行う場合において、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。これは、異なる電圧で反応する妨害物質の影響をみることが出来るためである。
【０２０９】
この工程Ｂにおいては、第１工程とは別に、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図２４において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、４回行う。例えば、第１工程、第２工程、第１工程、第２工程のように、順番に行う。前記第２工程を２回以上行う場合において、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。これは、たとえば、時間軸における応答値（電流値）の推移をみることができるためである。
【０２１０】
この工程Ｂにおいては、前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第２工程と、前記第１工程を、互い違いに行ってもよい。
【０２１１】
この工程Ｂにおいて、第１工程と第２工程は、入れ替えてもよい。すなわち、図２４における例では、第１工程を一番先に行っているが、第２工程を一番先に行ってもよい。
【０２１２】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第１電流値と、前記第２電極系に前記第２電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第２電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２１３】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図２３に示すように血液成分の量に依存する第１電流値の測定工程（第１工程）および血液成分の量に依存する第２電流値の測定工程（第２工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０２１４】
このとき、測定装置２は、図２４に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図２４において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２１５】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第４電圧の電圧値および印加時間を制御し、第４電極系に電圧を印加させる（第４工程）。図２４において、「Ｈｃｔ−２」で示す電圧印加が、この第４工程における電圧印加である。この第４電圧は、２５００ｍＶである。前記第４電極系に前記第４電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第４電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２１６】
なお、この実施形態においては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極は使用しない。
【０２１７】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０２１８】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０２１９】
【数３】
0006893579.tif 000005
【０２２０】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第４電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値と、血液成分に依存する第２電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０２２１】
血液成分の量を算出した後、バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０２２２】
［実施形態３Ｂ］
実施形態３Ｂは、本発明の血液成分の量の第３測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態３Ｂにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系および第４電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図２８に示す。
【０２２３】
実施形態３Ｂにおいては、測定装置２は、図２６に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図２７において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、４００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と異なるタイミングに、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図２７において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、４００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、４回行う。
【０２２４】
この実施形態３Ｂにおいては、第１電圧と第２電圧が一定である点以外は、実施形態３Ａと同様である。
【０２２５】
［実施形態３Ｃ］
実施形態３Ｃは、本発明の血液成分の量の第３測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態３Ｃにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系および第４電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図３１に示す。
【０２２６】
実施形態３Ｃにおいては、測定装置２は、図２９に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図３０において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と同時に、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図３０において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２２７】
この実施形態３Ｃにおいては、第１工程と第２工程が同じタイミングである点以外は、実施形態３Ｂと同様である。
【０２２８】
［実施形態３Ｄ］
実施形態３Ｄは、本発明の血液成分の量の第３測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態１Ａで用いた第１バイオセンサと同一である。なお、この実施形態３Ｄにおいては、第１バイオセンサにおける電極１２を電極Ａ、電極１３を電極Ｃ、電極１４を電極Ｄ、電極１５を電極Ｅ、電極１６を電極Ｇ、および電極１７を電極Ｆとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系および第４電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図３４に示す。
【０２２９】
実施形態３Ｄにおいては、測定装置２は、図３２に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図３３において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と同時または別のタイミングで、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図３３において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２３０】
この実施形態３Ｄにおいては、第１電圧と第２電圧の一部が同じタイミングである点以外は、実施形態３Ｂと同様である。
【０２３１】
［実施形態４］
実施形態４は、本発明の血液成分の量の第４測定方法の一例である。
図９、図１０、図１１Ａおよび図１１Ｂに、本発明の測定方法において用いるバイオセンサの別の一例（以下、「第３バイオセンサ」と呼ぶことがある）を示す。図９は、前記第３バイオセンサの分解斜視図であり、図１０は図９の前記バイオセンサの断面図であり、図１１Ａは図９の前記バイオセンサの平面図であり、図１１Ｂは、図９中のＣ部の拡大図である。前記四図において、同一部分には同一符号を付している。このバイオセンサは、一例として、血液成分としてグルコースを測定するためのセンサである。
【０２３２】
図示のように、このセンサは、絶縁基板１２１の上に、６個の電極７２、７３、７４、７５、７６および７７が形成されている。これらの電極は、作用極と対極に切り換え可能である。電極７２、７３、７４、７５、７６および７７の表面は、ＣＭＣ等の高分子材料で被覆されている。電極７２および７６の一部を覆うように第１試薬層６６が、電極７３、７４および７５の一部を覆うように第２試薬層６７が、配置されている。電極７７の上には、第１試薬層６６も第２試薬層６７も配置されていない。前記第１試薬層６６と前記第２試薬層６７は、離れて配置されている。前記第２試薬層は、血液中の血液成分の量を測定するための試薬、好ましくは酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）、より好ましくは酸化還元酵素とメディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。前記第３の試薬層は、血液中の血液成分の量を測定するための試薬、好ましくは酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）、より好ましくは酸化還元酵素とメディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を含み、任意成分として、酵素安定化剤、結晶均質化剤等を含む。
【０２３３】
前記絶縁基板１２１の上には、一方の端部（図において右側端部）を残してスペーサ１０２を介しカバー１０３が配置されている。この第３バイオセンサには、各電極（７２、７３、７４、７５、７６および７７）に血液を導入するために、絶縁基板１２１、スペーサ１０２およびカバー１０３から成る流路８が形成されている。この流路８の先端は、第３バイオセンサの他方の端部（図において左側端部）まで延伸しており、外部に対し開口すること血液供給口１０となっている。前記６個の電極（７２、７３、７４、７５、７６および７７）は各々リードと連結し、これらのリードは、前記一方の端部側（図において右側端部）に延びており、リードの先端はカバーに覆われずに露出している。前記カバー１０３において、流路８の右側端部に対応する部分（第２試薬層６７上もしくは、電極７４上）には、空気孔９が形成されている。さらに、流路８内に、前記第１試薬層６６、前記第２試薬層６７がそれぞれ離れて配置されている。
【０２３４】
本発明において、前記絶縁基板の材質は、特に制限されず、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリイミド（ＰＩ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリオキシメチレン（ＰＯＭ）、モノマーキャストナイロン（ＭＣ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、メタクリル樹脂（ＰＭＭＡ）、ＡＢＳ樹脂（ＡＢＳ）、ガラス等が使用でき、このなかで、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリカーボネート（ＰＣ）およびポリイミド（ＰＩ）が好ましく、より好ましくは、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）である。絶縁基板の大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０５〜２ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．１〜１ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．１〜０．６ｍｍである。前記絶縁基板の材質および大きさについては、後述の実施形態においても同様である。
【０２３５】
絶縁基板上の電極およびリードは、例えば、金、白金、パラジウム等を材料として、スパッタリング法あるいは蒸着法により導電層を形成し、これをレーザーにより特定の電極パターンに加工することで形成できる。レーザーとしては、例えば、ＹＡＧレーザー、ＣＯ2レーザー、エキシマレーザー等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０２３６】
前記第２試薬層６７は、次のようにして形成する。例えば、酸化還元酵素（例えばグルコースデヒドロゲナーゼ等）を０．１〜５Ｕ／センサ、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、酵素安定化剤（例えばマルチトール等）を１〜５０ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層６７をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極７３、７４および７５の一部を覆うように試薬層７が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０２３７】
前記第１試薬層６６は、次のようにして形成する。例えば、メディエータ（例えばフェリシアン化カリウム等）を１０〜２００ｍＭ、結晶均質化剤（例えばタウリン等）を２０〜２００ｍＭ含む水溶液を円形のスリット部に滴下し、乾燥させる。このスリット部を設置することで、滴下された水溶液の拡がりを抑制することができ、試薬層６６をより正確な位置に配置することができる。これにより、電極７２および７６の一部を覆うように試薬層６が形成される。前記乾燥は、例えば、自然乾燥でも温風を用いた強制乾燥でもよい。
【０２３８】
本発明において、スペーサ１０２の材質は、特に制限されず、例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。また、スペーサの大きさは、特に制限されず、例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅２〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜１ｍｍであり、好ましくは、全長７〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０．５ｍｍであり、より好ましくは、全長１０〜３０ｍｍ、幅３〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．２５ｍｍである。この例のスペーサには、血液導入のための流路となるＩ字形状の切欠部が形成されているが、その大きさは、例えば、全長０．５〜８ｍｍ、幅０．１〜５ｍｍ、好ましくは、全長１〜１０ｍｍ、幅０．２〜３ｍｍ、より好ましくは、全長１〜５ｍｍ、幅０．５〜２ｍｍである。この切欠部は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、スペーサの形成時に、切欠部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記スペーサの材質および大きさ並びに切欠部については、後述の実施形態においても同様である。
【０２３９】
本発明において、カバー１０３の材質は、特に制限されない。例えば、絶縁基板と同様の材料が使用できる。カバーの血液を導入するための流路の天井部に相当する部分は、親水処理されることがさらに好ましい。親水処理としては、例えば界面活性剤を塗布する方法、プラズマ処理などによりカバー表面に水酸基、カルボニル基、カルボキシル基などの親水性官能基を導入する方法等がある。また、試薬層上にレシチン等の界面活性剤からなる層を形成してもよい。カバーの大きさは、特に制限されない。例えば、全長５〜１００ｍｍ、幅３〜５０ｍｍ、厚み０．０１〜０.５ｍｍであり、好ましくは、全長１０〜５０ｍｍ、幅３〜２０ｍｍ、厚み０．０５〜０.２５ｍｍであり、より好ましくは、全長１５〜３０ｍｍ、幅５〜１０ｍｍ、厚み０．０５〜０．１ｍｍである。カバーには空気孔９が形成されていることが好ましく、形状は、例えば、円形、楕円形、多角形等である。その大きさは、例えば、最大直径０．０１〜１０ｍｍ、好ましくは、最大直径０．０５〜５ｍｍ、より好ましくは、最大直径０．１〜２ｍｍである。この空気孔は、例えば、レーザーやドリル等で穿孔して形成してもよいし、カバーの形成時に、空気抜き部が形成できるような金型を使用して形成してもよい。前記カバーの材質および大きさ並びに空気孔については、後述の実施形態においても同様である。
【０２４０】
さらに、この第３バイオセンサは、絶縁基板１２１、スペーサ１０２およびカバー１０３をこの順序で積層し、一体化することで製造できる。前記３つの部材は、接着剤あるいは熱融着等で貼り合わせることにより一体化される。前記接着剤としては、例えば、エポキシ系接着剤、アクリル系接着剤、ポリウレタン系接着剤、また熱硬化性接着剤（ホットメルト接着剤等）、ＵＶ硬化性接着剤等が使用できる。これについても、後述の実施形態において同様である。
【０２４１】
この第３バイオセンサを用いた血液成分量、例えば、血糖値の測定は、次のようにして実施される。まず、専用のランセットで指先等を穿刺し、出血させる。一方、前記センサを専用の測定装置（メータ）にセットする。出血した血液に、測定装置にセットしたセンサの血液供給口を接触させ、毛細管現象により血液をセンサ内部に導入する。このセンサによる分析は、次のステップにより行われる。
【０２４２】
なお、この実施形態４においては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第３電極系、第５電極系および第６電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図３７に示す。
【０２４３】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０２４４】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図３５に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０２４５】
このとき、測定装置２は、図３６に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図３６において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２４６】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２４７】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図３５に示すように血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０２４８】
このとき、測定装置２は、図３６に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図３６において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２４９】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第５電圧の電圧値および印加時間を制御し、第５電極系（作用極としての電極Ｆと、対極としての電極Ａおよび電極Ｇを含む）に電圧を印加させる（第５工程）。図３６において、「Ｈｃｔ−５」で示す電圧印加が、この第５工程における電圧印加である。この第５電圧は、２５００ｍＶである。前記第５電極系に前記第５電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第５電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２５０】
この工程Ｃにおいては、第３工程および第５工程とは別に、第６電圧の電圧値および印加時間を制御し、第６電極系（作用極としての電極Ｆと、対極としての電極Ｃ、電極Ｅおよび電極Ｄを含む）に電圧を印加させる（第６工程）。図３６において、「Ｈｃｔ−６」で示す電圧印加が、この第６工程における電圧印加である。この第６電圧は、２５００ｍＶである。前記第６電極系に前記第６電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第６電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２５１】
なお、この実施形態においては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極を使用する。
【０２５２】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０２５３】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０２５４】
【数４】
0006893579.tif 000006
【０２５５】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第５電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第６電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０２５６】
血液成分の量を算出した後、バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０２５７】
［実施形態５］
実施形態５は、本発明の血液成分の量の第５測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態５においては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第３電極系、第５電極系、第６電極系および第７電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図４０に示す。
【０２５８】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０２５９】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図３８に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０２６０】
このとき、測定装置２は、図３９に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図３９において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、４００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２６１】
前記第１工程を２回以上行う場合において、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。これは、異なる電圧で反応する妨害物質の影響をみることが出来るためである。
【０２６２】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第１電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２６３】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図３８に示すように血液成分の量に依存する第１電流値の測定工程（第１工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０２６４】
このとき、測定装置２は、図３９に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図３９において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２６５】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第５電圧の電圧値および印加時間を制御し、第５電極系に電圧を印加させる（第５工程）。図３９において、「Ｈｃｔ−５」で示す電圧印加が、この第５工程における電圧印加である。この第５電圧は、２５００ｍＶである。前記第５電極系に前記第５電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第５電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２６６】
この工程Ｃにおいては、第３工程および第５工程とは別に、第６電圧の電圧値および印加時間を制御し、第６電極系に電圧を印加させる（第６工程）。図３９において、「Ｈｃｔ−６」で示す電圧印加が、この第６工程における電圧印加である。この第６電圧は、２５００ｍＶである。前記第６電極系に前記第６電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第６電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２６７】
この工程Ｃにおいては、第３工程、第５工程および第６工程とは別に、第７電圧の電圧値および印加時間を制御し、第７電極系に電圧を印加させる（第７工程）。図３９において、「Ｈｃｔ−７」で示す電圧印加が、この第７工程における電圧印加である。この第７電圧は、２５００ｍＶである。前記第７電極系に前記第７電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第７電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２６８】
この工程Ｃにおいて、前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０２６９】
また、この工程Ｃにおいて、前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行ってもよい。
【０２７０】
また、この工程Ｃにおいて、少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程を行ってもよい。
【０２７１】
なお、この実施形態５においては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極を使用する。
【０２７２】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０２７３】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０２７４】
【数５】
0006893579.tif 000007
【０２７５】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第５電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第６電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第７電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０２７６】
血液成分の量を算出した後、バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０２７７】
［実施形態６Ａ］
実施形態６Ａは、本発明の血液成分の量の第６測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態６Ａにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系および第６電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図４３に示す。
【０２７８】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０２７９】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図４１に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０２８０】
このとき、測定装置２は、図４２に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図４２において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、２００ｍＶ〜５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０２８１】
前記第１工程を２回以上行う場合において、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。これは、異なる電圧で反応する妨害物質の影響をみることが出来るためである。
【０２８２】
この工程Ｂにおいては、第１工程とは別に、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図４２において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、４回行う。例えば、第１工程、第２工程、第１工程、第２工程のように、順番に行う。前記第２工程を２回以上行う場合において、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。これは、たとえば、時間軸における応答値（電流値）の推移をみることができるためである。
【０２８３】
この工程Ｂにおいては、前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第２工程と、前記第１工程を、互い違いに行ってもよい。
【０２８４】
この工程Ｂにおいて、第１工程と第２工程は、入れ替えてもよい。すなわち、図４１における例では、第１工程を一番先に行っているが、第２工程を一番先に行ってもよい。
【０２８５】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第１電流値と、前記第２電極系に前記第２電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第２電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２８６】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図４１に示すように血液成分の量に依存する第１電流値の測定工程（第１工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０２８７】
このとき、測定装置２は、図４２に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図４２において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２８８】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第５電圧の電圧値および印加時間を制御し、第５電極系に電圧を印加させる（第５工程）。図４２において、「Ｈｃｔ−５」で示す電圧印加が、この第５工程における電圧印加である。この第５電圧は、２５００ｍＶである。前記第５電極系に前記第５電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第５電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２８９】
この工程Ｃにおいては、第３工程および第５工程とは別に、第６電圧の電圧値および印加時間を制御し、第６電極系に電圧を印加させる（第６工程）。図４２において、「Ｈｃｔ−６」で示す電圧印加が、この第６工程における電圧印加である。この第６電圧は、２５００ｍＶである。前記第６電極系に前記第６電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第６電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０２９０】
この工程Ｃにおいて、全ての第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０２９１】
この工程Ｃにおいて、全ての第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０２９２】
なお、この実施形態６Ａにおいては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極を使用する。
【０２９３】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０２９４】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０２９５】
【数６】
0006893579.tif 000008
【０２９６】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第５電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第６電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値と、血液成分に依存する第２電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０２９７】
血液成分の量を算出した後、バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０２９８】
［実施形態６Ｂ］
実施形態６Ｂは、本発明の血液成分の量の第６測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態６Ｂにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系および第６電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図４６に示す。
【０２９９】
実施形態６Ｂにおいては、測定装置２は、図４４に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｅおよび電極Ｄを含む）との間に印加させる。図４５において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、４００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と異なるタイミングで、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図４５において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、４００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、４回行う。
【０３００】
なお、この実施形態６Ｂにおいては、第１工程における第１電圧と第２工程における第２電圧が一定である以外は、実施形態６Ａと同様である。
【０３０１】
［実施形態６Ｃ］
実施形態６Ｃは、本発明の血液成分の量の第６測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態６Ｃにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系および第６電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図４９に示す。
【０３０２】
実施形態６Ｃにおいては、測定装置２は、図４７に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図４８において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と同時に、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図４８において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０３０３】
この実施形態６Ｃにおいては、第１工程と第２工程が同じタイミングである点以外は、実施形態６Ｂと同様である。
【０３０４】
この工程Ｃにおいて、全ての第１工程および第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３０５】
［実施形態６Ｄ］
実施形態６Ｄは、本発明の血液成分の量の第６測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態６Ｄにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系および第６電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図５２に示す。
【０３０６】
実施形態６Ｄにおいては、測定装置２は、図５０に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図５１において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と同時または別のタイミングで、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図５１において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０３０７】
この実施形態６Ｄにおいては、第１電圧と第２電圧の一部が同じタイミングである点以外は、実施形態６Ｂと同様である。
【０３０８】
この工程Ｃにおいて、全ての第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３０９】
この工程Ｃにおいて、全ての第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３１０】
［実施形態７Ａ］
実施形態７Ａは、本発明の血液成分の量の第７測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態７Ａにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系、第６電極系および第７電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図５５に示す。
【０３１１】
（工程Ａ：検体（血液）の検知）
電極Ｄと電極Ｅの両電極間に電圧を印加し、血液の導入に伴う電流値の変化により血液の導入を検知する。血液の導入を確認したら、以降のステップを開始する。この工程Ａでの印加電圧は、例えば、０．０５〜１Ｖ、好ましくは０．７Ｖである。そして、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させる。なお、この工程Ａは任意の工程である。
【０３１２】
（工程Ｂ：血液成分の量に依存する電流値の測定工程）
測定装置２は、図５３に示すように、血液中のグルコースとグルコース酸化還元酵素とを一定時間反応させた後、第１電圧の電圧値および印加時間を制御し、第１電極系に電圧を印加させる（第１工程）。測定装置２は、バイオセンサ３に測定対象の血液が導入されて検知電極系（電極Ｄと電極Ｅ）によって血液を検知すると、電流の計測を開始する。
【０３１３】
このとき、測定装置２は、図５４に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｄおよび電極Ｅを含む）との間に印加させる。図５４において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、２００ｍＶ〜５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。
【０３１４】
前記第１工程を２回以上行う場合において、各第１電圧は、それぞれ異なる電圧であってもよい。これは、異なる電圧で反応する妨害物質の影響をみることが出来るためである。
【０３１５】
この工程Ｂにおいては、第１工程とは別に、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図５４において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第２電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、４回行う。例えば、第１工程、第２工程、第１工程、第２工程のように、順番に行う。前記第２工程を２回以上行う場合において、各第２電圧は、同一の電圧であってもよい。これは、たとえば、時間軸における応答値（電流値）の推移をみることができるためである。
【０３１６】
この工程Ｂにおいては、前記第１工程を２回以上行い、
前記第２工程を２回以上行い、
前記第２工程と、前記第１工程を、互い違いに行ってもよい。
【０３１７】
この工程Ｂにおいて、第１工程と第２工程は、入れ替えてもよい。すなわち、図５４における例では、第１工程を一番先に行っているが、第２工程を一番先に行ってもよい。
【０３１８】
前記第１電極系に前記第１電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第１電流値と、前記第２電極系に前記第２電圧を印加して得られた血液成分の量に依存する第２電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０３１９】
（工程Ｃ：Ｈｃｔ値の測定工程）
測定装置２は、図５３に示すように血液成分の量に依存する電流値の測定工程（第１工程および第２工程）の後、第３電圧の電圧値および印加時間を制御し、第３電極系に電圧（第３工程）を印加させる。なお、この例においては工程Ｂ、次いで工程Ｃを行っているが、工程Ｃを先に行い、次いで工程Ｂを行ってもよい。
【０３２０】
このとき、測定装置２は、図５４に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第３電圧は、第３電極系（作用極としての電極Ａと、対極としての電極Ｃを含む）との間に印加させる。図５４において、「Ｈｃｔ−３」で示す電圧印加が、この工程における電圧印加である。この第３電圧は、２５００ｍＶである。前記第３電極系に前記第３電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第３電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０３２１】
この工程Ｃにおいては、第３工程とは別に、第５電圧の電圧値および印加時間を制御し、第５電極系に電圧を印加させる（第５工程）。図５４において、「Ｈｃｔ−５」で示す電圧印加が、この第５工程における電圧印加である。この第５電圧は、２５００ｍＶである。前記第５電極系に前記第５電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第５電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０３２２】
この工程Ｃにおいては、第３工程および第５工程とは別に、第６電圧の電圧値および印加時間を制御し、第６電極系に電圧を印加させる（第６工程）。図５４において、「Ｈｃｔ−６」で示す電圧印加が、この第６工程における電圧印加である。この第６電圧は、２５００ｍＶである。前記第６電極系に前記第６電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第６電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０３２３】
この工程Ｃにおいては、第３工程、第５工程および第６工程とは別に、第７電圧の電圧値および印加時間を制御し、第７電極系に電圧を印加させる（第７工程）。図３９において、「Ｈｃｔ−７」で示す電圧印加が、この第７工程における電圧印加である。この第７電圧は、２５００ｍＶである。前記第７電極系に前記第７電圧を印加して得られたヘマトクリット値に依存する第７電流値は、以下の血液成分の量を算出する工程において用いる。
【０３２４】
この工程Ｃにおいて、全ての前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３２５】
この工程Ｃにおいて、全ての前記第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３２６】
また、この工程Ｃにおいて、前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行ってもよい。
【０３２７】
また、この工程Ｃにおいて、少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程を行ってもよい。
【０３２８】
なお、この実施形態７Ａにおいては、ＣＭＣ等の高分子を除き、前記第２試薬層および前記第３試薬層が配置されていない電極Ｆ、すなわち、裸の電極を使用する。
【０３２９】
（工程Ｄ：血液成分の量を算出する工程）
得られた複数、例えば複数の前記血液成分の量に依存する電流値は、以下のように処理して、前記血液成分の量に依存する電流値として用いる。
【０３３０】
上記抽出した複数の所定時間における測定電流値や上記抽出した生体情報測定装置の温度情報などに基づいた複数のパラメータ（ｘ１，ｘ２，ｘ３・・・，ｘ１０）を算出し（「所定のパラメータを計算する」）、重回帰式（たとえば、下記式１）により、補正量を算出し、血液成分の量に依存する電流値を算出する。
【０３３１】
【数７】
0006893579.tif 000009
【０３３２】
前記工程Ｃで得られたＨｃｔ値に依存する第３電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第５電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第６電流値と、Ｈｃｔ値に依存する第７電流値と、前記工程Ｂで得られた血液成分に依存する第１電流値と、血液成分に依存する第２電流値とを用いて、血液成分の量を得る。これは、予め作成した検量線（検量テーブルを含む）に基づき行うことが好ましい。得られた血液成分の量は、測定装置に表示若しくは記憶される。
【０３３３】
血液成分の量を算出した後、バイオセンサを廃棄し、表示部などをオフした後、測定器もオフして、生体試料の成分の測定を終了する。
【０３３４】
［実施形態７Ｂ］
実施形態７Ｂは、本発明の血液成分の量の第７測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態７Ｂにおいては、第３バイオセンサにおける電極７２を電極Ａ、電極７３を電極Ｃ、電極７４を電極Ｄ、電極７５を電極Ｅ、電極７６を電極Ｆ、および電極７７を電極Ｇとして用いる。それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系、第６電極系および第７電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図５８に示す。
【０３３５】
実施形態７Ｂにおいては、測定装置２は、図５６に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。第１電圧は、第１電極系（作用極としての電極Ｃと、対極としての電極Ｅおよび電極Ｄを含む）との間に印加させる。図５７において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、４００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、５回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と異なるタイミングで、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図５７において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、４００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、４回行う。
【０３３６】
なお、この実施形態７Ｂにおいては、第１工程における第１電圧と第２工程における第２電圧が一定である以外は、実施形態７Ａと同様である。
【０３３７】
［実施形態７Ｃ］
実施形態７Ｃは、本発明の血液成分の量の第７測定方法の一例である。
この方法において用いるバイオセンサは、実施形態４で用いた第３バイオセンサと同一である。なお、この実施形態７Ｃにおいては、それぞれの電極を第１電極系、第２電極系、第３電極系、第５電極系、第６電極系および第７電極系の対極および作用極のいずれとして用いるかは、図６１に示す。
【０３３８】
実施形態７Ｃにおいては、測定装置２は、図５９に示すように、電圧印加電極、印加電圧、印加時間および印加タイミングを変化させる。図６０において、「Ｇｌｕ−１」で示す電圧印加が、この第１工程における電圧印加である。この第１電圧は、５００ｍＶである。また、前記第１電極系に第１電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する第１電流値を検出する第１工程は、複数回、例えば、４回行う。この工程Ｂにおいては、第１工程と別のタイミングで、第２電圧の電圧値および印加時間を制御し、第２電極系に電圧を印加させる（第２工程）。図６９において、「Ｇｌｕ−２」で示す電圧印加が、この第２工程における電圧印加である。この第２電圧は、３００ｍＶ〜５００ｍＶである。また、前記第２電極系に第２電圧を印加し、前記血液成分の量に依存する電流値を検出する第２工程は、複数回、例えば、６回行う。
【０３３９】
この実施形態７Ｃにおいては、第１電圧と第２電圧の大きさが異なる点以外は、実施形態７Ｂと同様である。
【０３４０】
この工程Ｃにおいて、全ての前記第１工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３４１】
この工程Ｃにおいて、全ての前記第２工程の後に、前記第３工程、前記第５工程、および前記第６工程を行ってもよい。
【０３４２】
また、この工程Ｃにおいて、前記第３工程、前記第５工程、前記第６工程より前に、前記第７工程を行ってもよい。
【０３４３】
また、この工程Ｃにおいて、少なくとも１つの前記第１工程の後に、前記第７工程を行い、その後に更に前記第１工程を行ってもよい。
【産業上の利用可能性】
【０３４４】
以上のように、本発明のバイオセンサの製造方法は、生体試料の成分をさらに高精度に測定することが可能なバイオセンサを製造することができる。従って、本発明のバイオセンサの製造方法は、生物学、生化学および医学等の血液成分を測定する、あらゆる分野に好ましく使用でき、特に臨床検査の分野に好適である。
【符号の説明】
【０３４５】
２    測定装置
３    センサ
４    表示部
５    装着口
１０  血液供給口
１０１、１１１、１２１  絶縁基板
１０２  スペーサ
１０３  カバー
６、３６、６６  第１の試薬層
７、３７、６７  第２の試薬層
８  流路
９  空気孔
１２、４２、７２  電極Ａ
１３、４３、７３  電極Ｃ
１４、４４、７４  電極Ｄ
１５、４５、７５  電極Ｅ
１６、４６、７６  電極Ｇ
７７  電極Ｆ
２０６  入力端子部
２３０  Ａ／Ｄ変換部
２３１  判定手段
２３２  表示部
２３３  電源部
２３４  メモリ
２３５  時計
２３６  補正手段
２３７  電圧印加部
２３８  電流−電圧変換部
２３９  制御部
【図１】
0006893579.tif 000010
【図２】
0006893579.tif 000011
【図３】
0006893579.tif 000012
【図４】
0006893579.tif 000013
【図５Ａ】
0006893579.tif 000014
【図５Ｂ】
0006893579.tif 000015
【図６】
0006893579.tif 000016
【図７】
0006893579.tif 000017
【図８Ａ】
0006893579.tif 000018
【図８Ｂ】
0006893579.tif 000019
【図９】
0006893579.tif 000020
【図１０】
0006893579.tif 000021
【図１１Ａ】
0006893579.tif 000022
【図１１Ｂ】
0006893579.tif 000023
【図１２】
0006893579.tif 000024
【図１３】
0006893579.tif 000025
【図１４】
0006893579.tif 000026
【図１５】
0006893579.tif 000027
【図１６】
0006893579.tif 000028
【図１７】
0006893579.tif 000029
【図１８】
0006893579.tif 000030
【図１９】
0006893579.tif 000031
【図２０】
0006893579.tif 000032
【図２１】
0006893579.tif 000033
【図２２】
0006893579.tif 000034
【図２３】
0006893579.tif 000035
【図２４】
0006893579.tif 000036
【図２５】
0006893579.tif 000037
【図２６】
0006893579.tif 000038
【図２７】
0006893579.tif 000039
【図２８】
0006893579.tif 000040
【図２９】
0006893579.tif 000041
【図３０】
0006893579.tif 000042
【図３１】
0006893579.tif 000043
【図３２】
0006893579.tif 000044
【図３３】
0006893579.tif 000045
【図３４】
0006893579.tif 000046
【図３５】
0006893579.tif 000047
【図３６】
0006893579.tif 000048
【図３７】
0006893579.tif 000049
【図３８】
0006893579.tif 000050
【図３９】
0006893579.tif 000051
【図４０】
0006893579.tif 000052
【図４１】
0006893579.tif 000053
【図４２】
0006893579.tif 000054
【図４３】
0006893579.tif 000055
【図４４】
0006893579.tif 000056
【図４５】
0006893579.tif 000057
【図４６】
0006893579.tif 000058
【図４７】
0006893579.tif 000059
【図４８】
0006893579.tif 000060
【図４９】
0006893579.tif 000061
【図５０】
0006893579.tif 000062
【図５１】
0006893579.tif 000063
【図５２】
0006893579.tif 000064
【図５３】
0006893579.tif 000065
【図５４】
0006893579.tif 000066
【図５５】
0006893579.tif 000067
【図５６】
0006893579.tif 000068
【図５７】
0006893579.tif 000069
【図５８】
0006893579.tif 000070
【図５９】
0006893579.tif 000071
【図６０】
0006893579.tif 000072
【図６１】
0006893579.tif 000073
【図６２】
0006893579.tif 000074