(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
0006855636.tif 000047
（式中、
Ｘは、−（ＣＨ２）２−および−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−からなる群から選択され、
Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２および
【化２】
0006855636.tif 000048
からなる群から選択され、
Ｒは、
【化３】
0006855636.tif 000049
からなる群から選択される）
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｑが、−Ｃ（ＣＨ３）２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒが、
【化４】
0006855636.tif 000050
からなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘが、−（ＣＨ２）２−である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘが、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−である、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒが、
【化５】
0006855636.tif 000051
である、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒが、
【化６】
0006855636.tif 000052
である、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物が、１−［２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）エチル］−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
前記化合物が、１−［（１Ｒ）−２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤からなる群から選択される少なくとも１つとを含む、薬学的組成物。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療剤。
【請求項１２】
以下の式の中間体化合物：
【化７】
0006855636.tif 000053
（式中、
Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２および
【化８】
0006855636.tif 000054
からなる群から選択される）
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
Ｑが、−Ｃ（ＣＨ３）２である、請求項１２に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、イミダゾリジン化合物またはその薬学的に許容される塩および療法における該化合物の使用を提供する。本発明のイミダゾリジン化合物は、アポトーシスシグナル調節キナーゼ１（ＡＳＫ１）の阻害剤である。
【０００２】
ＡＳＫ１は、大型マイトジェン活性化プロテインキナーゼキナーゼキナーゼ（「ＭＡＰ３Ｋ」）ファミリーのメンバーである。ＡＳＫ１の活性化およびシグナル伝達は、広範な疾患と関係している。ＡＳＫ１を阻害する化合物が、ＡＳＫ１媒介症状の治療における使用に望まれている。
【０００３】
ＡＳＫ１を阻害する化合物が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用に望まれている。非アルコール性脂肪性肝炎は、大滴性肝脂肪症、炎症性肝細胞風船様変性および線維症を特徴とする病因学的特定症状群を有する肝疾患である。現在、非アルコール性脂肪性肝炎の治療専用の承認された医薬品はない。非アルコール性脂肪性肝炎に罹患している患者に追加の治療選択肢を提供するための医薬品が必要とされている。
【０００４】
米国特許第８，７４２，１２６号は、ＡＳＫ１阻害剤としての５−（４−シクロプロピル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−２−フルオロ−４−メチルベンズアミドを開示している。
【０００５】
米国特許出願公開第２０１５／０３４２９４３号は、ＡＳＫ１阻害剤を使用して肝疾患を予防および／または治療する方法を開示している。
【０００６】
ＡＳＫ１阻害活性を有する化合物が必要とされている。
【０００７】
本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
0006855636.tif 000002
（式中、
Ｘは、−（ＣＨ２）２−および−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−からなる群から選択され、
Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２および
【化２】
0006855636.tif 000003
からなる群から選択され、
Ｒは、
【化３】
0006855636.tif 000004
からなる群から選択される）
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００８】
本発明は、式ＩＩの化合物：
【化４】
0006855636.tif 000005
（式中、
Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２および
【化５】
0006855636.tif 000006
からなる群から選択される）
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００９】
実施形態において、Ｘは、−（ＣＨ２）２−であり、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、かつＲは、以下からなる群から選択される。
【化６】
0006855636.tif 000007
またはその薬学的に許容可能な塩。
【００１０】
実施形態において、Ｘは、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−であり、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、かつＲは、以下からなる群から選択される。
【化７】
0006855636.tif 000008
またはその薬学的に許容可能な塩。
【００１１】
実施形態において、Ｘは、−（ＣＨ２）２−であり、Ｑは
【化８】
0006855636.tif 000009
であり、かつＲは、以下からなる群から選択される。
【化９】
0006855636.tif 000010
またはその薬学的に許容可能な塩。
【００１２】
実施形態において、Ｘは、−（ＣＨ２）２−であり、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、かつＲは、以下からなる群から選択される。
【化１０】
0006855636.tif 000011
またはその薬学的に許容可能な塩。
【００１３】
実施形態において、Ｘは、−（ＣＨ２）２−であり、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、かつＲは、以下からなる群から選択される。
【化１１】
0006855636.tif 000012
またはその薬学的に許容可能な塩。
【００１４】
実施形態において、Ｘは、−（ＣＨ２）２−であり、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、Ｒは、
【化１２】
0006855636.tif 000013
からなる群から選択され、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１５】
実施形態において、Ｑは、−Ｃ（ＣＨ３）２であり、かつＲ２は、ＣＨ３であり、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１６】
実施形態において、該化合物は、１−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）イミダゾリジン−２−オン、またはその薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物の調製において有用な中間体である。
【００１７】
実施形態において、１−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）イミダゾリジン−２−オン、またはその薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物の調製において有用な中間体である。
【００１８】
実施形態において、式Ｉの化合物は、１−［２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）エチル］−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１９】
実施形態において、式Ｉの化合物は、１−［（１Ｒ）−２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン、またはその薬学的に許容される塩である。
【００２０】
本発明は、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とともに、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物を提供する。
【００２１】
本発明は、治療を必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、ＡＳＫ１活性によって媒介される状態を治療する方法を提供する。本発明はまた、それを必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、肝疾患を治療する方法を提供する。本発明は、それを必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を治療する方法を提供する。
【００２２】
別の実施形態では、本発明は、治療に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。さらに、肝疾患の治療に使用するための本発明の化合物、その薬学的に許容される塩または薬学的組成物が提供される。さらに、ＮＡＳＨの治療に使用するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩または薬学的組成物が提供される。
【００２３】
別の実施形態では、肝疾患の治療用の医薬の製造に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。好ましくは、医薬はＮＡＳＨの治療用である。
【００２４】
本発明の化合物は、好ましくは、化合物を生体利用可能にする任意の経路によって投与される薬学的組成物として製剤化される。より好ましくは、そのような組成物は経口投与用である。そのような薬学的組成物およびそれらを調製するための方法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，２２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２）を参照されたい。
【００２５】
本発明の化合物は薬学的に許容される塩として提供することができる。「薬学的に許容される塩」とは、臨床的および／または獣医学的用途のために許容されると考えられる本発明の化合物の塩をいう。薬学的に許容される塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）を参照されたい。
【００２６】
ヒトが好ましい哺乳動物である。本明細書中で使用される場合、「患者」とは、治療を必要とする哺乳動物を指す。本明細書で使用される場合、化合物の「有効量」または「治療有効量」という用語は、本明細書に記載のとおりＮＡＳＨ、慢性腎臓病、または糖尿病性腎症などの障害または疾患を治療するために有効な量または投薬量を指す。主治医の診断医は、当業者として、従来技術の使用によって、および類似の状況下で得られた結果を観察することによって、有効量を容易に決定することができる。化合物の有効量または用量を決定する際に、投与される化合物、使用される場合は他の薬物の共投与、哺乳動物の種、そのサイズ、年齢、および全般的な健康状態、障害の程度または重症度、個々の患者の応答、投与の様式、投与される調製物の生物学的利用能特性、選択される投薬レジメン、他の併用薬の使用、およびその他の関連する状況を含むがこれらに限定されない多くの要因が考慮される。
【００２７】
薬学的組成物は、肝疾患、より具体的にはＮＡＳＨを治療するために有効な量で患者に投与される。患者を治療するために有効な適切な量または用量は、医療従事者によって決定され得る。
【００２８】
本明細書で使用される用語「治療」および「治療する」は、全てのプロセスを指すことを意図しており、既存の障害および／またはその症状の進行の遅延、中断、停止、制御、または停止があり得るが、必ずしも全ての症状の完全な排除を示すとは限らない。
【００２９】
本明細書で使用される「肝疾患」という用語は、ＡＳＫ１媒介に関連する肝臓の状態または症状、例えば代謝性肝疾患、脂肪症、肝線維症、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、肝硬変、肝線維症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝虚血再灌流障害、および原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）を包含する。
【００３０】
用語「薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤」は、担体、希釈剤、および賦形剤が組成物の他の成分と薬学的に適合性であることを意味する。特定の実施形態では、薬学的組成物は経口投与用の錠剤またはカプセル剤として製剤化される。錠剤またはカプセル剤は、肝疾患、特にＮＡＳＨを治療するために有効な量で本発明の化合物を含み得る。
【００３１】
本明細書で使用される略語は、Ａｌｄｒｉｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．１，１９８４に従って定義される。他の略語は以下のように定義される。「ＡＣＮ」はアセトニトリルを指し、「ＡＤＰ」はアデノシン二リン酸を指し、「ＡＴＰ」はアデノシン三リン酸を指し、「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを指し、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを指し、「ＤＭＥＭ」は、ダルベッコ変法イーグル培地を指し、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを指し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを指し、「ＤＴＴ」はジチオトレイトールを指し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを指し、「ＦＡ」はギ酸を指し、「ＦＢＳ」はウシ胎児血清を指し、「ＨＥＫ」はヒト胎児腎臓を指し、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィーを指し、「ＩＣ５０」は、薬剤について可能な最大阻害応答の５０％を生じる該薬剤の濃度を指し、「ＭＡＰ」はマイトジェン活性化タンパク質を指し、「ＭｅＯＨ」はメタノールまたはメチルアルコールを指し、「ＭＯＰＳ」は（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）を指し、「ｐＡＳＫ１」はリン酸化ＡＳＫ１を指し、「ＰＥ」は石油エーテルを指し、「ＴＢＡＦ」はフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムを指し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を指し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを指し、「ＴＩＰＳ」はトリイソプロピルシリルを指し、「ｔ（Ｒ）」は保持時間を指し、「ＸａｎｔＰｈｏｓ」は４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンを指し、「Ｘａｎｔｐｈｏｓ  ＰＤ  Ｇ３」は４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン）−２−（２’−アミノ−１，１’−ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）メタンスルホナートを指す。
【００３２】
以下の調製物に記載されている中間体は、多数の窒素、ヒドロキシ、およびエステルなどの酸保護基を含み得る。可変保護基は、実施される特定の反応条件および特定の変換に応じて、出現ごとに同じでも異なっていてもよい。保護および脱保護条件は当業者に周知であり、文献に記載されている。例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，（Ｔ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｗｕｔｓ  ｅｄｓ．，２ｄ  ｅｄ．１９９１）を参照されたい。
【００３３】
本発明の化合物またはその塩は、当業者に既知の様々な手順によって調製されてもよく、そのうちのいくつかが、以下のスキーム、調製物、および実施例で説明されている。本発明の化合物またはその塩を調製するために、記載される経路の各々についての特定の合成ステップを異なる様式で組み合わせてもよい。各ステップの生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、磨砕、および結晶化を含む、当該技術分野で周知の従来の方法によって回収することできる。試薬および出発材料は、当業者にとって容易に入手可能である。他のものは、任意の新規な方法を含む以下の調製物および実施例に記載される方法および既知の構造的に類似の化合物の合成に類似する有機および複素環化学の標準的な技術によって製造することができる。
【００３４】
全ての置換基は、別途指示のない限り、すでに定義されたとおりである。試薬および出発物質は概して、当業者の１人にとって容易に入手可能である。他のものは、任意の新規な方法を含む以下の調製物および実施例に記載される方法および既知の構造的に類似の化合物の合成に類似する有機および複素環化学の標準的な技術によって製造することができる。
【００３５】
調製物および実施例
【化１３】
0006855636.tif 000014
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のイミダゾリジン−２−オン（２０．０ｇ、２３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（１１３ｇ、５１１ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（０．５７３ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を添加する室温（１５〜２０℃）で添加する。この反応混合物を７０℃で１６時間撹拌する。この反応混合物を水（６００ｍＬ）に注ぎ、濾過する。フィルターケークを乾燥させ、表題化合物（５５．０ｇ、８１．９％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３１（Ｍ−５５）。
【００３６】
【化１４】
0006855636.tif 000015
ＡＣＮ（２００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−オキソイミダゾリジン−１，３−ジカルボキシラート（５５．０ｇ、１９０ｍｍｏｌ）および過塩素酸マグネシウム（８．７５ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）の混合物を５５℃で１６時間撹拌する。反応混合物を真空下で濃縮する。水を残渣（３００ｍＬ）に添加し、残渣をＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を鹹水（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９８：２）により精製して、表題化合物（１４．０ｇ、３１．６％）を黄色の油として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３２（Ｍ＋２Ｎａ）。
【００３７】
【化１５】
0006855636.tif 000016
２−クロロ−６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン（１．０ｇ、４．２６６４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート（１．９８６ｇ、８．５３２８ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ  ＰＤ  Ｇ３（２１２．９５ｍｇ、０．２１３３２ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（１２７．２ｍｇ、０．２１３３２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．１７ｇ、１２．７９９ｍｍｏｌ）を一緒に１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）中に添加し、結果として得られた混合物を１１０℃でマイクロ波条件下で２時間撹拌する。この混合物をＤＣＭで希釈し、濾過し、濃縮して、表題生成物（１．６７２ｇ、１００％）を褐色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７３（Ｍ＋１）。
【００３８】
【化１６】
0006855636.tif 000017
ＴＦＡ（３ｍＬ、３９．６８ｍｍｏｌ）を室温でＤＣＭ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］−２−オキソ−イミダゾリジン−１−カルボキシラート（１．６７２ｇ、４．２６５ｍｍｏｌ）に添加する。この混合物を室温で４時間撹拌する。この混合物を濃縮し、ＤＣＭ中の４％ＭｅＯＨで溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題生成物（４０６ｍｇ、３０．７６％）を黄色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７３（Ｍ＋１）。
【００３９】
【化１７】
0006855636.tif 000018
水酸化カリウム（７３．９ｍｇ、１．３１７７ｍｍｏｌ％）およびｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｒ）−２−ブロモプロピル］カルバマート（２３０．１ｍｇ、０．９６６３４ｍｍｏｌ）を０℃でＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の４−シクロプロピル−１Ｈ−イミダゾール（１００ｍｇ、０．０８７８４９ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。この混合物を室温で約６５時間撹拌する。この反応を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する（３回）。この有機抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄し（３回）、Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させる。この残渣を、ＤＣＭ中の４％ＭｅＯＨを用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を２つの位置異性体の混合物（１１２ｍｇ、２２．８２％）としておよび黄色の油として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６６（Ｍ＋１）。
【００４０】
【化１８】
0006855636.tif 000019
ＴＦＡ（２ｍＬ、２６．４５ｍｍｏｌ）を室温で、ラセミ体ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］カルバマートと、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のラセミ体ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（５−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］カルバマート（１１２ｍｇ、０．２００５ｍｍｏｌ）とに添加する。この混合物を室温で１時間撹拌し、濃縮して、粗製の表題化合物を黄色の油としての位置異性体の混合物（６９．８ｍｇ、１００％）として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６６（Ｍ＋１）。
【００４１】
【化１９】
0006855636.tif 000020
室温で、ＤＣＭ（５ｍＬ）および酢酸（１５．６ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）中のラセミ体−１−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）プロパン−２−アミンおよびラセミ体−１−（５−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）プロパン−２−アミン（６９．７ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−オキソエチル）カルバマート（３３．６ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５６．９ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）を添加する。この混合物を室温で１８時間撹拌する。この反応を飽和ＮａＨＣＯ３の添加によってクエンチする。この混合物をＤＣＭで抽出し（３回）、有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗表題化合物（１３０ｍｇ、１００％）を黄色の油としての位置異性体の混合物として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０９（Ｍ＋１）。
【００４２】
【化２０】
0006855636.tif 000021
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６８．１ｍｇ、０．６００７ｍｍｏｌ）をＮ２下で、室温でＴＨＦ（５ｍＬ）中のラセミ体ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］アミノ］エチル］カルバマートおよびラセミ体ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−（５−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］アミノ］エチル］カルバマート（１３０ｍｇ、０．２００２ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。混合物を６０℃で２時間撹拌する。この反応混合物を水の添加によってクエンチする。この混合物をＤＣＭで抽出し（３回）、有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させる。この残渣をＤＣＭ中の６％ＭｅＯＨを用いたシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を黄色の油としての位置異性体の混合物（３７．６ｍｇ、３８．１％）として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３５（Ｍ＋１）。
【００４３】
【化２１】
0006855636.tif 000022
窒素雰囲気下、０℃で、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４−シクロプロピル−１Ｈ−イミダゾール（２００ｍｇ、１．８４９５ｍｍｏｌ）の溶液に、鉱油（１４８ｍｇ、３．６９８９ｍｍｏｌ）中のＮａＨ（６０質量％）を添加する。この混合物を０℃で１５分間撹拌する。１，２−ジブロモエタン（０．５０４ｍＬ  ５．５４８４ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、この混合物を窒素雰囲気下、室温で４時間撹拌する。この反応を水の添加によってクエンチする。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出する（３回）。有機相を飽和ＮａＣｌで洗浄し（３回）、Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させる。この残渣を、ＤＣＭ中の３％ＭｅＯＨを用いたシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を無色の油としての１−（２−ブロモエチル）−４−シクロプロピル−イミダゾールと１−（２−ブロモエチル）−５−シクロプロピル−イミダゾール一異性体の混合物（１２０ｍｇ、２８．７％）として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２１５（Ｍ＋１）。
【化２２】
0006855636.tif 000023
【００４４】
【化２３】
0006855636.tif 000024
Ｎ２下で、室温で１，４−ジオキサン（４ｍＬ）中の５−ブロモ−２−シクロプロピル−ピリミジン（２００ｍｇ、０．９５４ｍｍｏｌ）、２−［（Ｅ）−２−エトキシビニル］−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２１９ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体（３９．８ｍｇ、０．０４７７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（３９５．８ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）の溶液に、水（１ｍＬ）を添加する。混合物をＮ２下で９０℃で１８時間撹拌する。この混合物をＤＣＭで希釈し、Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させる。この残渣を、ヘキサン中の１３％ＥｔＯＡｃを用いたシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（１６４ｍｇ、８５．８％）を無色の油として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：１９１（Ｍ＋１）。
【００４５】
【化２４】
0006855636.tif 000025
Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）中のＨＣｌ（４ｍｏｌ／Ｌ）を、室温でＴＨＦ（６ｍＬ）中の２−シクロプロピル−５−［（Ｅ）−２−エトキシビニル］ピリミジン（１６４ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。混合物を８０℃で１時間撹拌する。飽和ＮａＨＣＯ３の添加によってこの反応をクエンチして、ｐＨを７より大に調整する。この混合物をＤＣＭで抽出する（３回）。この有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、粗生成物（１３９．８ｍｇ  １００．００％）を黄色の油として得る。粗生成物は、さらに精製することなく使用される。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６３（Ｍ＋１）。
【００４６】
【化２５】
0006855636.tif 000026
パラジウム（１０％）活性炭（１０ｍｇ）を室温でＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の２−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）アセトアルデヒド（１３９．８ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−アミノエチル）カルバマート（２０７．１ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。この混合物を室温で１気圧のＨ２下で２時間撹拌する。この混合物を珪藻土で濾過し、濾液を濃縮して、粗生成物（２６４．１ｍｇ、１００．０％）を無色の油として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０７（Ｍ＋１）。
【００４７】
【化２６】
0006855636.tif 000027
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２７８．４ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ）をＮ２下で、室温でＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）エチルアミノ］エチル］カルバマート（２６４．１ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。混合物をＮ２下で６０℃で２時間撹拌する。この反応を水の添加によってクエンチし、ＤＣＭで抽出する（３回）。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。この残渣を、ＤＣＭ中の４％ＭｅＯＨを用いたシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（８７ｍｇ、４３．５％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３３（Ｍ＋１）。
【００４８】
【化２７】
0006855636.tif 000028
ＭｅＯＨ（１．５Ｌ）中のメチル６−アミノピリジン−２−カルボキシラート（１４５ｇ、９５３ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドラジン水和物（１１８ｇ、２３１０ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を窒素雰囲気下の７５℃で１６時間撹拌する。冷却後、結果として得られた沈殿物を濾過によって集め、真空乾燥させて、表題化合物（１３０ｇ、８９．７％）を白色の固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ−）δ９．１５（ｂｒ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０７（（ｂｒ，２Ｈ），４．４７（（ｂｒ，２Ｈ）．
【００４９】
【化２８】
0006855636.tif 000029
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（６００ｇ、５０４０ｍｍｏｌ）中の６−アミノピリジン−２−カルボヒドラジド（６５．０ｇ、４２７ｍｍｏｌ）の混合物を９５℃で１時間撹拌する。この反応を冷却し、減圧下で濃縮して、黄色の残渣を得る。残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に懸濁し、２５℃で３０分間撹拌する。生成した沈殿物を濾過によって集め、真空乾燥させることで標題化合物（９５．０ｇ、８４．８％）を白色の固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．８５（ｓ、１Ｈ）、８．０６（ｓ、１Ｈ）、７．６８（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０〜７．４５（ｍ、１Ｈ）、６．９１（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．１３（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｓ、３Ｈ）、２．８６（ｓ、６Ｈ）
【００５０】
【化２９】
0006855636.tif 000030
ＡＣＮ（４５０ｍＬ）および酢酸（１２０ｍＬ）中のＮ，６−ビス［（Ｅ）−ジメチルアミノメチレンアミノ］ピリジン−２−カルボキサミド（１０５．０ｇ、３６０ｍｍｏｌ）の溶液に、温度を３０℃未満に維持しながら、プロパン−２−アミン（１００ｇ、１６９０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加する。得られた混合物を１１０℃で６０時間撹拌する。反応混合物を２５℃に冷却し、溶媒を減圧下で除去する。残渣を水（５００ｍＬ）に溶かし、ｐＨをＮａＯＨ水溶液（１Ｎ）で約１０に調整する。沈殿物を濾過により集め、ＤＣＭ（５００ｍＬ）に溶かし、無水Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、灰白色の残渣を得る。この残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に懸濁し、１５分間撹拌した後、ＰＥ（２００ｍＬ）を緩徐に添加する。結果として得られた沈殿物を濾過により集め、真空乾固させて、表題化合物（４７．０ｇ、６２．９％）を灰白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２０４．１（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ：ｔ（Ｒ）＝０〜３０％ＡＣＮ中で０．５６５分かつ０．０５％ＴＦＡ水溶液で７．０分超（カラム：Ｘｔｉｍａｔｅ  Ｃ１８、２．１×３０ｍｍ、３μｍ）、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．７５（ｓ、１Ｈ）、７．５７（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．６５（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．５２（ｓｐｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｈ）、１．５２（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【００５１】
【化３０】
0006855636.tif 000031
塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（１３３．２ｇ、５７８．４ｍｍｏｌ）を０℃でＤＣＭ（１２００ｍＬ）中の６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミン（６０．０ｇ、２８９．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加する。亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（１２４．８ｇ、１１５６．８ｍｍｏｌ）を滴下によって添加する。混合物を３０℃に温め、１７時間撹拌する。この反応をＮａＨＣＯ３水溶液（１２００ｍＬ）の添加によってクエンチし、生成物をＤＣＭで抽出する（１５００ｍＬ×３回）。有機抽出物を鹹水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、真空濃縮して、粗生成物（６４．３６３ｇ、２８９．２ｍｍｏｌ）を黄色の固体として得、これをＤＣＭ中の０％〜１％ＭｅＯＨの勾配で溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（３６．４ｇ、５２．６％）を褐色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）：２２３．０／２２５．０（Ｍ＋１），１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３７（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｄｄ，Ｊ＝０．８，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝０．８，７．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６７−５．５７（ｍ，１Ｈ），１．５９−１．５４（ｍ，６Ｈ）および１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝１５０．６３，１５０．０３，１４８．３１，１４２．４９，１３９．８２，１２４．７２，１２２．３８，４９．１８，２３．７２．
【化３１】
0006855636.tif 000032
Ｒ６が、
【化３２】
0006855636.tif 000033
からなる群から選択される本発明の化合物は、一般に、実施例に実質的に説明される方法を使用して、スキーム２に例示されるように調製される。
【００５２】
【化３３】
0006855636.tif 000034
２−ブロモエチニル（トリイソプロピル）シラン（１．５ｇ、５．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５０ｍＬ）および硫酸銅（ＩＩ）五水和物（０．１３８ｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）を、１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾ−ル−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン（１．５０ｇ、５．５１ｍｍｏｌ）、リン酸三カリウム（２．３４ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）および１，１０−フェナントロリン（０．１９９ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を入れたマイクロ波容器へ添加する。混合物をＮ２で脱気し、８０℃まで２時間加熱する。この混合物を濾過し、真空濃縮し、ＤＣＭ中の０％〜５％のＭｅＯＨの勾配で溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（２．０８ｇ、７５．１％、９０％純度）を褐色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５３（Ｍ＋１）。
【００５３】
【化３４】
0006855636.tif 000035
ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ）（４．６ｍＬ、４．６ｍｍｏｌ）を１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］−３−（２−トリイソプロピルシリルエチニル）イミダゾリジン−２−オン（２．０８ｇ、４．１４ｍｍｏｌ、９０質量％）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に添加する。混合物を室温で１時間撹拌する。溶媒を真空下で除去し、残渣を、ＤＣＭ中の０％〜４％のＭｅＯＨの勾配で溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（８９７．８ｍｇ、７１．７％、９８％純度）を黄色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２９７（Ｍ＋１）。
【００５４】
【化３５】
0006855636.tif 000036
１−エチニル−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン（１００ｍｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）、５−ブロモ−２−メチルピリジン（８７０．８ｍｇ、０．５０６２ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０４０２１ｇ、０．０３３７５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（３２ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を一緒にマイクロ波バイアルの中に入れて密封し、Ｎ２で脱気する（３回）。ジイソプロピルアミン（４ｍＬ）およびトルエン（２ｍＬ）を一緒に添加し、反応物を室温で１時間撹拌し、マイクロ波反応器上で８０℃で１時間加熱する。ＬＣＭＳは、所望の生成物の形成を示す。反応物を濾過し、真空濃縮し、ＨＰＬＣ精製によって精製する。条件：（移動相：ＡＣＮ水溶液（１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３）１５分間超で１２〜２７％、２１分間で停止）。表題化合物を得られ（７．９ｍｇ、６％、９５％純度）、白色の固体として単離する。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８８（Ｍ＋１）
【００５５】
【化３６】
0006855636.tif 000037
５−ブロモ−２−メチル−ピリミジン（０．１５１８ｇ、０．８７７５ｍｍｏｌ）、１−エチニル−３−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン（２００ｍｇ、０．６７５０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０８０４１ｇ、０．０６７５０ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（９．０ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）を一緒にマイクロ波バイアルの中に入れて密封し、Ｎ２で脱気する（３回）。この混合物にジイソプロピルアミン（４ｍＬ）およびトルエン（２ｍＬ）を添加し、反応物を８０℃で１時間加熱する。残渣を、ＤＣＭ中の０％〜５％のＭｅＯＨの勾配で溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（２０ｍｇ、３．３％、４３％純度）を黄色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８９（Ｍ＋１）。
【００５６】
【化３７】
0006855636.tif 000038
鉱油（１９．４ｍｇ、０．４８４８ｍｍｏｌ）中の水素化ナトリウム（６０質量％）を、０℃でＤＭＦ（２ｍＬ）中の１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン（５０ｍｇ、０．１６１６ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。混合物を０℃で１５分間撹拌する。３−（２−ブロモエチル）ピリジン（８０ｍｇ、０．４０８４９ｍｍｏｌ）をこの混合物に加え、混合物を室温で１時間撹拌する。この反応を水の添加によってクエンチし、混合物をＤＣＭで抽出する（３回）。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。この残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：水（１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３）、Ｂ：ＡＣＮ、９分間超で１６〜３１％Ｂ）によって精製して、表題化合物（２２ｍｇ、３４．２７％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７８（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．６２−８．６０（ｍ、２Ｈ）、８．３５−８．３４（ｍ、２Ｈ）、７．９０（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．７８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６−７．４７（ｍ、１Ｈ）、７．２９−７．２６（ｍ、１Ｈ）、５．６０−５．５３（ｍ、１Ｈ）、４．００−３．９７（ｍ、２Ｈ）、３．６２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．４５（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．９５（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【００５７】
【化３８】
0006855636.tif 000039
ラセミ体１−［２−（４−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］イミダゾリジン−２−オンおよびラセミ体１−［２−（５−シクロプロピルイミダゾール−１−イル）−１−メチル−エチル］イミダゾリジン−２−オン（３７．６ｍｇ、０．０７６２ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ  ＰＤ  Ｇ３（７６．１ｍｇ、０．００７６２ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（ＸａｎｔＰｈｏｓ）（４５．５ｍｇ、０．００７６２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（７４．５ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ）を一緒に１，４−ジオキサン（２ｍＬ）に添加し、結果として得られた混合物をマイクロ波条件下、１３０℃で２時間撹拌する。混合物をＤＣＭで希釈し、濾過し、濃縮乾固させる。この残渣を分取ＨＰＬＣ（Ａ：水（０．１％のＦＡ）、Ｂ：ＡＣＮ（０．１％のＦＡ）、１０分間で７〜２２％のＢ）によって精製して、表題化合物（２７ｍｇ、７７．５％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２１（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．８０（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、６．７０（ｓ、１Ｈ）、５．５７−５．５１（ｍ、１Ｈ）、４．３０−４．２３（ｍ、１Ｈ）、４．１３（ｄｄ、Ｊ＝７．０、１４．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３−３．９６（ｍ、２Ｈ）、３．４９−３．３２（ｍ、１Ｈ）、３．２３−３．２２（ｍ、１Ｈ）、１．８６−１．７９（ｍ、１Ｈ）、１．５６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）、１．３２（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）、０．８６−０．８１（ｍ、１Ｈ）、０．７３−０．６８（ｍ、１Ｈ）。
【００５８】
【化３９】
0006855636.tif 000040
鉱物油（３９．４ｍｇ、０．９８３８ｍｍｏｌ）のＮａＨ（６０質量％）を窒素雰囲気下で、０℃でＤＭＦ（２ｍＬ）中の１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］イミダゾリジン−２−オン（９４ｍｇ、０．３２７９ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。混合物を０℃で１５分間撹拌し、１−（２−ブロモエチル）−４−シクロプロピルイミダゾールおよび１−（２−ブロモエチル）−５−シクロプロピルイミダゾール（１２０ｍｇ、０．２６５０ｍｍｏｌ）の混合物を０℃で添加し、この溶液を窒素雰囲気下で室温で１時間撹拌する。この反応を水の添加によってクエンチし、この混合物をＤＣＭで抽出する（３回）。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製する：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％のＦＡ）、Ｂ：ＡＣＮ（０．１％のＦＡ）、勾配：１５分間超で５〜１５％のＢ、２２分間で停止。カラム温度：室温、流量：３０ｍＬ／分、ｔ（Ｒ）＝１１．２分間（ＵＶ）。材料を濃縮し、水に溶かし、凍結乾燥させて、表題化合物（３２ｍｇ、２２．８％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０７（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．３３（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．８１（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４４（ｓ、１Ｈ）、６．７３（ｓ、１Ｈ）、５．５７−５．５２（ｍ、１Ｈ）、４．１３（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．１４（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．８７−１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．５６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）、０．８７−０．８４（ｍ、２Ｈ）、０．７４−０．７１（ｍ、２Ｈ）。
【００５９】
【化４０】
0006855636.tif 000041
２−クロロ−６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン（１２５．１ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）、１−［２−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）エチル］イミダゾリジン−２−オン（８７ｍｇ、０．３５６ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（３３．６ｍｇ、０．０３５６ｍｍｏｌ）、ＸａｎｔＰｈｏｓ（４２．５ｍｇ、０．０７１２ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（３４７．８ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を一緒に１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中に添加する。混合物をマイクロ波条件下で１３０℃で２時間撹拌する。混合物をＤＣＭで希釈し、濾過し、濃縮乾固させる。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製する：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％のＦＡ）、Ｂ：ＡＣＮ（０．１％のＦＡ）、勾配：１０分間超で２４〜３９％のＢ、１７分間で停止、カラム温度：室温、流量：３０ｍＬ／分、ｔ（Ｒ）＝６．０分間（ＵＶ）。材料を水に溶かし、凍結乾燥させて表題化合物（１２０ｍｇ、７６．５６％）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１９（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４８（ｓ、２Ｈ）、８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．３３（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．５９−５．５３（ｍ、１Ｈ）、４．０１（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．４８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．８７（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．２５−２．２０（ｍ、１Ｈ）、１．５６（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、６Ｈ）、１．１２−１．０６（ｍ、４Ｈ）。
【００６０】
【化４１】
0006855636.tif 000042
２−クロロ−６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン（１００ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ）、イミダゾリジン−２−オン（０．１１６ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）、ＸａｎｔＰｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ３（２２．４ｍｇ、０．０２２５ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８９．０ｍｇ、８９．８ｍｍｏｌ）を一緒にマイクロ波バイアルに入れ、混合物をマイクロ波バイアル内に密封し、Ｎ２で脱気する（３回）。１，４−ジオキサン（５ｍＬ）を添加し、反応物を１４０℃で３時間加熱する。反応混合物を濾過し、濃縮し、ＨＰＬＣによって精製し、条件：（移動相：ＡＣＮ水溶液（１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３）８〜２３％、９分間で停止とする。表題化合物（１．８ｍｇ、１．４％、９３％純度）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７３（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．８６（ｓ、１Ｈ）、８．３６（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．６３−５．５８（ｍ、１Ｈ）、４．２１（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．６１（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、６Ｈ）。
【００６１】
【化４２】
0006855636.tif 000043
１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］−３−［２−（２−メチルピリミジン−５−イル）エチニル］イミダゾリジン−２−オン（２０ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ、４３純度％）を、パラジウム炭素（２０％）（１０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）懸濁液に添加する。反応物をＨ２で脱気し、Ｈ２雰囲気下で１時間撹拌した。反応物を濾過し、真空濃縮し、以下の条件でＨＰＬＣによって精製する；（移動相：水（０．１％のＦＡ）中のＡＣＮ（０．１％のＦＡ）１０分間超で１８〜３３％、１７分間で停止。表題化合物（２ｍｇ、２１．８６％、９５％純度）を白色の固体として得る。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６８（ｓ、２Ｈ）、８．２９（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．８９（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．６２−５．５７（ｍ、１Ｈ）、４．１１（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．６７−３．６１（ｍ、４Ｈ）、２．９８（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、６Ｈ）。
【００６２】
【化４３】
0006855636.tif 000044
１−［６−（４−イソプロピル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−２−ピリジル］−３−［２−（６−メチル−３−ピリジル）エチニル］イミダゾリジン−２−オン（７．９ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）をパラジウム炭素（２０％）（１０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）懸濁液に添加する。反応物をＨ２で脱気し、Ｈ２雰囲気下で１時間撹拌した。反応物を濾過し、濃縮し、以下の条件でＨＰＬＣによって精製する：（移動相：水中ＡＣＮ（１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３））１０分間超で１８〜２８％、１５分間で停止。表題化合物（２ｍｇ、９２％、９５％純度）を白色の固体として単離する。ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９２（Ｍ＋１）、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．８５（ｓ、１Ｈ）、８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．３２−８．３０（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｄｄ、Ｊ＝７．６、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４−７．７１（ｍ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．６０−５．５１（ｍ、１Ｈ）、４．０８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．６１−３．５８（ｍ、４Ｈ）、２．９６（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．５１（ｓ、３Ｈ）、１．６０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【００６３】
生物学的アッセイ
ＡＳＫ１酵素アッセイにより測定されたＡＳＫ１阻害剤の効果
このアッセイの目的は、ＡＳＫ１によるＡＤＰの生成に対するＡＳＫ１阻害剤の効果を決定することである。グルタチオンＳ−トランスフェラーゼでタグ付けされた組換えヒトＡＳＫ１（ｈＡＳＫ１）触媒ドメインが使用され、ヒスチジンタグ付き全長ヒトＭＡＰキナーゼキナーゼ６（ＭＫＫ６）およびＡＴＰは、それぞれ基質および補因子である。
【００６４】
以下の変更を加えて製造元のプロトコールに従ってＡＤＰ−Ｇｌｏ（商標）Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｃａｔａｌｏｇ＃Ｖ９１０２）を使用し、アッセイを行う。簡単に説明すると、緩衝液（１０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、１０ｍＭ酢酸Ｍｇ、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．０２５％ＮＰ−４０、０．０５％ＢＳＡ、１．５％グリセロール）中のｈＡＳＫ１（０．２５ｎＭ）およびＭＫＫ６（３００ｎＭ）を、１５分間１０．００μＭから０．１７ｎＭの範囲の様々な濃度のＡＳＫ１阻害剤と一緒にインキュベートし、続いて室温で３０分間ＡＴＰ（１００μＭ）と一緒にインキュベートする。ＡＤＰ−Ｇｌｏ（商標）Ｒｅａｇｅｎｔを添加してキナーゼ反応を停止させ、残りのＡＴＰを使い果たす。次に、Ｋｉｎａｓｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔを添加してＡＤＰをＡＴＰに変換する。新しく合成されたＡＴＰをルシフェラーゼ／ルシフェリン反応を用いて測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によって決定する。１００％および０％の阻害についてＤＭＳＯビヒクルおよび標準として５−（４−シクロプロピル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−｛６−［４−（プロパン−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］ピリジン−２−イル｝ベンズアミドの効果をそれぞれ用いて、発光強度をＧｅｎｅＤａｔａにより分析し、４パラメータ用量反応−阻害剤ロジスティック曲線に当てはめてＩＣ５０値を決定する。
【００６５】
実施例を、本質的に先に説明したとおりに検査し、以下の表１に示すとおりのＩＣ５０値を呈する。
【表１】
0006855636.tif 000045
【００６６】
これらの結果は、実施例の化合物が、表１に示すようにＡＳＫ１酵素活性を阻害することを示す。
【００６７】
ＡＳＫ１自己リン酸化（Ｔｈｒ８３８）アッセイにより決定されるＡＳＫ１阻害剤効果
このアッセイの目的は、ヒトＡＳＫ１を過剰発現しているＨＥＫ２９３細胞におけるＴｈｒ８３８でのＨ２Ｏ２刺激ＡＳＫ１自己リン酸化に対するＡＳＫ１阻害剤の効果を決定することである。
【００６８】
ヒトインフルエンザヘマグルチニン−（ＨＡ−）標識全長ヒトＡＳＫ１を過剰発現しているＨＥＫ２９３細胞を、１０％ＦＢＳを添加したＤＭＥＭ中で３７℃および５％ＣＯ２において維持する。アッセイのために、細胞をマトリゲル被覆９６ウェルプレートに播種し（２５，０００細胞／ウェル）、一晩インキュベートする。細胞を１０．００μＭ〜０．１７ｎＭの範囲の様々な濃度のＡＳＫ１阻害剤で１時間処理し、続いて１ｍＭのＨ２Ｏ２で１０分間刺激する。次いで、細胞をホスファターゼ阻害剤（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、Ｃａｔａｌｏｇ＃７８４３０）を含有するＨｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ  Ｔｉｍｅ−Ｒｅｓｏｌｖｅｄ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＨＴＲＦ（登録商標））溶解緩衝液（Ｃｉｓｂｉｏ、Ｃａｔａｌｏｇ＃６４ＫＬ１ＦＤＦ）で溶解させる。それぞれ６２０および６６６ｎｍの発光および励起波長を備えたＥｎｖｉｓｉｏｎ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）において、Ｃｉｓｂｉｏによってカスタマイズされた抗ＨＡおよび抗ｐＡＳＫ１（Ｔｈｒ８３８）抗体対を使用して、ｐＡＳＫ１をＨＴＲＦ（登録商標）によって定量する。６６５ｎｍおよび６２０ｎｍでの蛍光強度の比をＧｅｎｅＤａｔａによって分析し、１００％および０％阻害としてのＤＭＳＯビヒクルおよび標準としての５−（４−シクロプロピル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−｛６−［４−（プロパン−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］ピリジン−２−イル｝ベンズアミドの効果をそれぞれ用いて、ＩＣ５０値を決定するために４パラメータ用量反応−阻害剤ロジスティック曲線に当てはめる。
【００６９】
化合物を、本質的に先に説明したとおりに検査し、以下の表２に示すとおりのＩＣ５０値を呈する。
【表２】
0006855636.tif 000046
【００７０】
これらの結果は、実施例の化合物が、上述の表２に示すように、ＨＥＫ２９３細胞内のＴｈｒ８３８でのＨ２Ｏ２刺激性ＡＳＫ１自己リン酸化を阻害することを示す。