(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サポニン精製段階を事前に経ないパナックスジンセン（Panax ginseng C.A. Meyer (Araliaceae)）を水、エタノール及びこれらの混合物から選択された溶媒による抽出に付してパナックスジンセン抽出液を得る工程と、
１０℃〜７０℃の温度で１〜７２時間ｐＨ３〜８の条件下でパナックスジンセン抽出液にペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを加える工程と、
発酵したパナックスジンセン抽出液を濃縮して発酵パナックスジンセン濃縮液を製造する工程と
を含む発酵パナックスジンセン濃縮液の製造方法。
【請求項２】
前記パナックスジンセンが、尾参、白参、水参、乾参、紅参、太極参、高麗人参、中国人参、日本人参、アジア人参、アメリカ人参、及びこれらの組合わせの１つ以上である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記添加が、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを同時に添加することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記添加が、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを異なる時間に添加することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記濃縮後に発酵パナックスジンセン濃縮液を乾燥させて発酵パナックスジンセン粉末を製造する工程をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記乾燥が、減圧乾燥、高温空気乾燥、噴霧乾燥、流動層乾燥、流動層顆粒化または凍結乾燥により行われるものである請求項５に記載の方法。
【請求項７】
サポニン精製段階を事前に経ないパナックスジンセン（Panax ginseng C.A. Meyer (Araliaceae)）を第１の水、エタノール及びこれらの混合物から選択された溶媒に懸濁してパナックスジンセン溶液を製造する工程と、
１０℃〜７０℃の温度で約１〜７２時間ｐＨ３〜８の条件下で、パナックスジンセン溶液にペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを加える工程と、
発酵したパナックスジンセン溶液を第２の水、エタノール及びこれらの混合物から選択された溶媒での抽出に付して発酵パナックスジンセン抽出液を製造する工程と、
発酵パナックスジンセン抽出液を濃縮して発酵パナックスジンセン濃縮液を製造する工程と
を含む発酵パナックスジンセン濃縮液の製造方法。
【請求項８】
前記パナックスジンセンが、尾参、白参、水参、乾参、紅参、太極参、高麗人参、中国人参、日本人参、アジア人参、アメリカ人参、及びこれらの組合わせの１つ以上である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記添加が、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを同時に添加することを含む請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記添加が、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを異なる時間に添加することを含む請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記濃縮後に発酵パナックスジンセン濃縮液を乾燥させて発酵パナックスジンセン粉末を製造する工程をさらに含む請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記乾燥が、減圧乾燥、高温空気乾燥、噴霧乾燥、流動層乾燥、流動層顆粒化または凍結乾燥により行われるものである請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、発酵高麗人参濃縮液または粉末の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
高麗人参（Panax ginseng C. A. Meyer(Araliaceae)）は、中国、韓国、日本などのアジア諸国で長きに渡り伝統的に各種疾病の治療に用いられてきた薬草の１種である。特に、高麗人参の主な活性成分であるジンセノサイド（高麗人参サポニン）は、抗老化、抗炎症、中枢神経系、心血管系及び免疫系での抗酸化活性（Wu JYら、J. Immunol. , 148: 1519-25(1992); Lee, Facts about ginseng, the elixir of life. Hollyn International. New Jersey(1992); Huang, The pharmacology of Chinese herbs. CRC Press. Florida(1999)、抗糖尿活性（Chang, Pharmacology and application of Chinese material medica. Vol 1. World Scientific. Singapore(1986)）及び抗腫瘍活性（Satoら、Biol. Pharm. Bull. 17: 635-9(1994); Mochizukiら、Biol. Pharm. Bull. 18: 1197-1202(1995)）などのような様々な生理活性を有することが知られている。
【０００３】
さらに、前記ジンセノサイドは、摂取後にヒトの腸内細菌により代謝され、その代謝産物も様々な生理活性を有することが知られている（Karikuraら、Chem. Pharm. Bull, 39: 2357-61(1991); Kanaodaら、J. Tradit. Med. 11: 241-5(1994); Akaoら、Biol. Pharm. Bull. 21: 245-9(1998)）。例えば、プロトパナキサジオール系ジンセノサイドであるＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃは、ヒトの腸内微生物によりＩＨ−９０１（２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール）に代謝され（Hasegawaら、Planta Medica 63: 463-40(1997); Tawabら、Drug Metab. Dispos. 31: 1065-71(2003)）、プロトパナキサトリオール系ジンセノサイドであるＲｅとＲｇ１は、ジンセノサイドＲｈ１又はジンセノサイドＦ１に代謝され（Hasegawaら、Planta Medica 62: 453-7(1996); Tawabら、Drug Metab. Dispos. 31: 1065-71(2003)）、前記代謝産物であるＩＨ−９０１、Ｒｈ１及びＦ１は、様々な生理活性を示す。
【０００４】
特に、前記ＩＨ−９０１は、主に抗糖尿作用（Choiら、J Ginseng Res. 31(2): 79-85(2007)）及び免疫増強作用をすることが知られている。また、腫瘍の侵入を防いだり、染色体変異と腫瘍形成を予防することによって、抗転移または抗癌効果を誘導することが知られている（Wakabayashiら、Oncol. Res. 9: 411-7(1998); Leeら、Cancer Lett. 144: 39-43(1999)）。
【０００５】
一部研究者らは、化学的合成、弱酸加水分解、アルカリ分解などによって真性プロサポゲニン（genuine prosapogenin）またはサポゲニンを生産しようと試みた（Hanら、Planta Medica 44: 146-9(1982); Chenら、Chem. Pharm. Bull. 35: 1653-5(1987); Elyakovら、Synthesis of the ginseng glycosides and their analogs. Proc. 6th Int. Ginseng Symp. Seoul 74-83(1993)）。しかし、前記方法は、エピマー化、水和、ヒドロキシル化等のような様々な副反応を引き起こす。
【０００６】
そこで、酵素（Koら、Biosci. Biotechnol. Biochem. 64: 2739-43(2000); Koら、Planta Med. 69: 285-6(2003)）と腸内細菌（Hasegawaら、Planta Medica 63: 463-40(1997)；Baeら、J. Microbial. Biotechnol. 13: 9-14(2003)）などを用いた穏和な条件でジンセノサイドを転換させる多くの方法が研究されている。具体的には、ジオール系ジンセノサイドをナリンギナーゼ酵素で加水分解してＩＨ−９０１を製造する方法や、前記ジオール系ジンセノサイドをラットに経口投与した後、大腸で分解させてＩＨ−９０１を製造する方法が開発されている。しかし、前記製造方法は、ＩＨ−９０１の生成収率が極めて低いだけでなく、様々な２次代謝産物が生成され、高純度のＩＨ−９０１を生産するのに問題があった（Karikuraら、Chem. Pharm. Bull. 38: 2859(1990)）。
【０００７】
さらに最近は、様々な酵素をジンセノサイドと反応させてＩＨ−９０１を製造する方法（韓国特許出願公開第２００３−９４７５７号；韓国特許第４１８６０４号及び第３７７５４６号）が研究されているが、これら方法を用いて製造されたＩＨ−９０１の量は、任意の有意な効果を有するのには少な過ぎることが明らかになった。また、前記方法は、複雑な工程を含み、ＩＨ−９０１を多量に含有する発酵高麗人参濃縮液を製造するのには不適切である。
本発明は、前記のような問題を克服したものである。
【発明の概要】
【０００８】
発明の概要
本発明は、発酵高麗人参濃縮液の製造方法に関するものである。
前記方法は、まず、高麗人参に溶媒を加えて高麗人参抽出液を製造する。次いで、前記製造された高麗人参抽出液にペクチナーゼとベータガラクトシダーゼを、高麗人参抽出液を発酵させるのに有効な量で加える。次に、発酵した高麗人参抽出液を濃縮させて発酵高麗人参濃縮液を生産する。
【０００９】
また、本発明はまた、発酵高麗人参濃縮液の製造方法に関するものである。前記方法は、また、高麗人参に第１溶媒を加えて高麗人参液を製造する。次いで前記高麗人参液にペクチナーゼとベータガラクトシダーゼを高麗人参抽出液を発酵させるのに有効な条件下で加える。その後、発酵した高麗人参液を第２溶媒を用いて抽出して発酵高麗人参液を得る。最終的に、発酵高麗人参抽出液を濃縮して発酵高麗人参濃縮液の製造方法を得る。
【００１０】
さらに、本発明の別態様は、前記方法により製造された発酵高麗人参濃縮液及び発酵高麗人参粉末、及びこのような発酵高麗人参濃縮液及び粉末を含有する食品組成物または機能性食品組成物に関するものである。
【００１１】
本発明による発酵高麗人参濃縮液及び発酵高麗人参粉末を製造する方法は、単純な工程を含み、高いＩＨ−９０１の含有量を有する発酵高麗人参濃縮液または粉末を製造することができる。高含有量のＩＨ−９０１によって、本発明の方法によって製造された発酵高麗人参濃縮液または粉末は、機能性食品組成物に効果的に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明の発酵高麗人参濃縮液の高圧液体クロマトグラフィー分析結果を示すグラフである。
【図２】本発明の発酵高麗人参濃縮液を摂取した被験者についての時間に対するＩＨ−９０１の平均血漿濃度を示すグラフである。
【図３】各被験者のＩＨ−９０１の最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）を示すグラフである。
【図４】各被験者のＩＨ−９０１の最大血漿濃度に至る時間（Ｔｍａｘ）を示すグラフである。
【図５】各被験者の血漿濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を示すグラフである。
【００１３】
発明の詳細な説明
本発明は、発酵高麗人参濃縮液の製造方法に関するものである。
【００１４】
前記方法は、まず、高麗人参を溶媒を用いて抽出して高麗人参抽出液を得ることを含む。高麗人参の例としては、尾参、白参、水参、乾参、紅参、太極参、高麗人参、中国人参、日本人参、アジア人参、アメリカ人参、これらの抽出液、これらの粉末及びこれらの組合わせからなる群から選択されたものを含むが、これらに制限されない。
【００１５】
高麗人参の抽出に用いられる溶媒は、前記方法に用いられる酵素の活性に影響を与えない限り、水性溶媒（例：水）、有機溶媒またはこれらの組合わせのような任意の溶媒であることができる。ある実施態様において、有機溶媒はこれに限定されないが、アセトニトリル、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール及びこれらの組合わせを含んでもよい。
【００１６】
ある実施態様において、高麗人参は、任意の公知の溶媒抽出方法を用いて前記溶媒で抽出されてもよい。ある例では、水と有機溶媒の適切な混合物が抽出に用いることができ、ここで混合物中の有機溶媒は、水に不溶性である高麗人参中の成分及び／又は酵素反応から生成された中間体の溶解度を増加させることができ、最終生成物、即ち、発酵高麗人参濃縮液または粉末中のＩＨ−９０１の含有量の全般的な増加をもたらすことができる。
【００１７】
次に、高麗人参抽出液を発酵させるのに有効な条件下で、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを高麗人参抽出液に加える。ある実施態様では、高麗人参抽出液はペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを加える前に溶媒で希釈されてもよい。ある実施態様では、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを高麗人参抽出液に一緒に、または同時に加える。他の例では、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを高麗人参抽出液に別々にまたは異なる時間に加える。
【００１８】
ある実施態様では、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを高麗人参抽出液に約１００：１〜約１：１００、約５０：１〜約１：５０、約２０：１〜約１：２０、約１０：１〜約１：１０、約５：１〜約１：５、約３：１〜約１：３、または約２：１〜約１：２の割合で加えてもよい。他の例では、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを約１００：１、約５０：１、約２０：１、約１０：１、約５：１、約３：１、約２：１、約１：３、約１：５、約１：１０、約１：２０、約１：５０、または約１：１００の割合で加えてもよい。
【００１９】
ある実施態様では、高麗人参抽出液に加えられるペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼの全量は、高麗人参抽出液または高麗人参の全重量を基準に約０．０１重量％〜約５０重量％、約０．０５重量％〜約５０重量％、約０．１重量％〜約５０重量％、約０．５重量％〜約５０重量％、約１重量％〜約５０重量％、約２重量％〜約５０重量％、約５重量％〜約５０重量％、約１０重量％〜約５０重量％、約２５重量％〜約５０重量％、約０．０１重量％〜約０．０５重量％、約０．０１重量％〜約０．１重量％、約０．０１重量％〜約０．５重量％、約０．０１重量％〜約１重量％、約０．０１重量％〜約２重量％、約０．０１重量％〜約５重量％、約０．０１重量％〜約１０重量％、約０．０１重量％〜約２５重量％、約０．０５重量％〜約０．１重量％、約０．１重量％〜約０．５重量％、約０．５重量％〜約１重量％、約１重量％〜約２重量％、約２重量％〜約５重量％、約５重量％〜約１０重量％、約１０重量％〜約２５重量％の範囲であってもよい。他の例では、高麗人参抽出液に加えられるペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼの全量は高麗人参抽出液または高麗人参の全重量を基準に約０．０１重量％、約０．０５重量％、約０．１重量％、約０．５重量％、約１重量％、約２重量％、約５重量％、約１０重量％、約２５重量％または約５０重量％であってもよい。
【００２０】
ある実施態様では、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼが高麗人参抽出液に加えられ、ｐＨ約３〜約８、約４〜約８、約４．５〜約８、約５〜約８、約６〜約８、約３〜約４、約３〜約４．５、約３〜約５、約３〜約６、約４〜約４．５、約４．５〜約５、または約５〜約６で反応が行われる。他の例では、ｐＨ約３、約４、約４．５、約５、約６または約８で反応が行われる。しかし、前記反応は、ペクチナーゼとベータガラクトシダーゼの活性が維持される限り、任意のｐＨで行うことができる。ｐＨは、これに限定されないが、リン酸塩溶液、クエン酸溶液及びクエン酸ナトリウム緩衝溶液を高麗人参抽出溶液に加えて調節することができる。
【００２１】
ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを加える反応温度は、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼの活性が維持される限り、任意の温度とすることができる。ある実施態様では、反応温度は、約１０℃〜約７０℃、約３０℃〜約７０℃、約４０℃〜約７０℃、約５０℃〜約７０℃、約６０℃〜約７０℃、約１０℃〜約３０℃、約１０℃〜約４０℃、約１０℃〜約５０℃、約１０℃〜約６０℃、約３０℃〜約４０℃、約４０℃〜約５０℃、約５０℃〜約６０℃の範囲を有してもよい。他の例では、反応温度は、約１０℃、約３０℃、約４０℃、約５０℃、約６０℃または約７０℃であってもよい。
【００２２】
また、反応時間は、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼの活性が維持される限り、任意の時間とすることができる。ある実施態様では、反応時間は、約１時間〜約７２時間、約１２時間〜約７２時間、約２４時間〜約７２時間、約４８時間〜約７２時間、約６０時間〜約７２時間、約１時間〜約１２時間、約１時間〜約２４時間、約１時間〜約４８時間、約１時間〜約６０時間、約１２時間〜約２４時間、約２４時間〜約４８時間または約４８時間〜約６０時間の範囲であってもよい。他の例では、反応時間は、約１時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約６０時間または約７２時間であってもよい。
【００２３】
最後に、発酵高麗人参抽出液を濃縮して発酵高麗人参濃縮液を得ることができる。ある実施態様では、発酵高麗人参抽出液の濃縮は、初めに発酵高麗人参抽出液の遠心分離を行った後、分離された上澄液のみを濃縮することを含んでもよい。他の例では、発酵高麗人参抽出液の濃縮は、任意の予備処理工程なしに発酵高麗人参抽出液を濃縮させることを含んでもよい。発酵高麗人参抽出液は、真空減圧濃縮機のような通常用いられる装置を用いて濃縮してもよいが、これに限定されない。
【００２４】
ある実施態様では、本発明の方法は、製造された発酵高麗人参濃縮液（液状であってもよい）を乾燥させて発酵高麗人参粉末を製造することをさらに含むことができる。前記乾燥は、減圧乾燥、高温空気乾燥、噴霧乾燥、流動層乾燥、流動層顆粒化及び凍結乾燥のような任意の通常の乾燥方法で行ってもよいが、これに限定されない。
【００２５】
本発明はまた、発酵高麗人参濃縮液の製造方法に関するものである。前記方法は、まず、第１溶媒中に高麗人参を懸濁して高麗人参溶液を得ることを含む。次いで、高麗人参溶液を発酵させるのに有効な条件下で、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを前記高麗人参溶液に加える。その後、発酵した高麗人参溶液を第２溶媒で抽出して発酵高麗人参抽出液を得る。ある実施態様では、前記第１及び第２溶媒は、水性溶媒（例：水）、有機溶媒またはこれらの混合物であってもよい。最後に、発酵高麗人参抽出液を濃縮し、発酵高麗人参濃縮液を得る。本発明で用いられる多様な条件、例えば、前述したペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼの添加、抽出及び濃縮に関する説明はここでは繰り返さないこととする。
【００２６】
本発明の他の態様は、前記方法により製造された発酵高麗人参濃縮液及び発酵高麗人参粉末に関するものである。本発明の前記方法は、高麗人参抽出液または高麗人参溶液に、これらを発酵させるのに有効な条件下で、ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを直接添加することを含み、従って、高いＩＨ−９０１の含有量を有する発酵高麗人参抽出液または粉末を製造する簡単な方法である。本発明の前記方法により製造された発酵高麗人参濃縮液及び粉末は、高いＩＨ−９０１の含有量を有するため、機能性食品組成物として効果的に用いられる。
【００２７】
本発明の他の態様は、前記発酵高麗人参濃縮液または粉末を含有する食品組成物及び前記発酵高麗人参濃縮液または粉末の治療的有効量を含有する機能性食品組成物に関するものである。
【００２８】
本発明の発酵高麗人参濃縮液及び粉末は、免疫機能強化、抗糖尿、抗癌、抗老化及び抗酸化活性を有すると知られているＩＨ−９０１を多量に含有することができる。当学者は、機能性食品組成物の使用目的に応じて、本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末の添加量を適宜決定することができる。一般に、本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末は、機能性食品組成物に機能性食品組成物の全重量を基準に約０．１重量％〜約１００重量％の範囲の量で添加することができる。ある例では、健康管理のために長期間、機能性食品組成物を摂取するような場合、機能性食品組成物に添加される本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末の量は前記範囲より少なくてもよい。しかし、安全性の問題は存在しないため、本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末は非常に多量に用いられてもよい。
【００２９】
ある実施態様では、本発明の食品組成物または機能性食品組成物は、任意の予備処理なしに本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末、あるいはこれらの混合物を添加して製造してもよい。他の実施態様では、本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末は、初めに公知の方法で加工した後、他の食品成分を添加してもよい。本発明の食品組成物または機能性食品組成物に添加してもよい食品成分は、食品組成物または機能性食品組成物の形態によって異なり、本発明の発酵高麗人参濃縮液または粉末と混合する場合に任意の副作用を誘発しない限り、限定されない。
【００３０】
本発明の食品組成物または機能性食品組成物は、経口用に好適な形態、例えば、軟質または硬質カプセル、錠剤、ロゼンジ、分散性粉末または顆粒、エマルジョン、懸濁液及び公知の方法で製造された乾燥粉末からなるティーバッグであってもよい。ある実施態様では、機能性食品組成物は、免疫強化、抗糖尿、抗癌、抗酸化及び／又は抗老化作用を提供するために飲料、ガム、キャンディ、スナック、ビタミン複合剤、健康機能性食品等のような多様な食品に添加してもよいが、これに限定されない。
【実施例】
【００３１】
以下、本発明を実施例により詳しく説明する。ただし、下記実施例は、本発明を例示するものであるだけで、本発明の内容は下記実施例により限定されない。
【００３２】
＜実施例１＞
ペクチナーゼ及びベータガラクトシダーゼを用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
【００３３】
＜１−１＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参５ｇと白参５ｇを水とエタノールの混合液（１：１の混合比、対原料５００％）で８０℃で３時間間隔で４回抽出して高麗人参抽出液７ｇを得た。水１００ｍｌを加えた後、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇを高麗人参抽出液に加え、反応混合液を５０℃、ｐＨ４〜５で４８時間維持した。反応液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液６．３ｇを製造した。
【００３４】
＜１−２＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
実施例＜１−１＞に記載した通り、高麗人参抽出液７ｇを製造した。水１００ｍｌ、次いで、ベータガラクトシダーゼ１ｇを前記高麗人参抽出液に加え、反応混合液を５０℃で２４時間維持した後、混合液を８０℃で３時間静置して酵素を不活性化させた。反応液を冷却させ、クエン酸でｐＨを４〜５に調整した。次いで、ペクチナーゼ０．３ｇを添加し、混合液を２４時間反応させた。その後、反応混合液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液５．９ｇを製造した。
【００３５】
＜１−３＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参５ｇと白参それぞれ５ｇを水とエタノールの混合液（１：１の混合比、対原料５００％）で抽出して高麗人参抽出液７ｇを得た。水１００ｍｌを加えた後、ペクチナーゼ０．５ｇとベータガラクトシダーゼ０．７ｇを高麗人参抽出液に加え、反応混合液を５０℃、ｐＨ４〜５で４８時間維持した。反応液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液６．２ｇを製造した。
【００３６】
＜１−４＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参５ｇと白参５ｇを水とエタノールの混合液（１：１の混合比、対原料５００％）で抽出して高麗人参抽出液７ｇを得た。水１００ｍｌを加えた後、ペクチナーゼ０．９ｇとベータガラクトシダーゼ０．６ｇを高麗人参抽出液に加え、反応混合液を５０℃、ｐＨ４〜５で４８時間維持した。反応液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液５．９ｇを製造した。
【００３７】
＜１−５＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参５ｇと白参５ｇを水とエタノールの混合液（１：１の混合比、対原料５００％）で抽出して高麗人参抽出液７ｇを得た。水１００ｍｌを加えた後、ペクチナーゼ１．２ｇとベータガラクトシダーゼ０．２ｇを高麗人参抽出液に加え、反応混合液を５０℃、ｐＨ４〜５で４８時間維持した。反応液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液６．３ｇを製造した。
【００３８】
＜１−６＞尾参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参１０ｇを水１００ｍｌで抽出して得た高麗人参抽出液７ｇを、クエン酸でｐＨ３〜４になるように調整した後、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇを高麗人参抽出液に入れ、５０℃で４８時間反応させた。次いで、これを実施例＜１−１＞と同様の方法で濾過した後、濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液（Ｉ）６．５ｇを製造した。
また、尾参１０ｇを前記＜実施例１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で抽出して得た抽出物７．２ｇを、クエン酸でｐＨ３〜４になるように調整した後、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇを高麗人参抽出液に加え、混合物を前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応、濾過及び濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液（II）６．８ｇを製造した。
【００３９】
＜１−７＞尾参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
尾参１０ｇを水１００ｍｌで抽出して高麗人参抽出液７ｇを得た。高麗人参抽出液に水１００ｍｌを加えた後、ベータガラクトシダーゼ１ｇを加え、反応混合液を５０℃で２４時間維持させた。その後、混合液を８０℃で３時間静置して酵素を不活性化した。反応液を冷却させ、クエン酸でｐＨを４〜５に調整した後、ペクチナーゼ０．３ｇを加え、５０℃で２４時間反応させた。次いで、反応液を濾過し、８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液６．５ｇを製造した。
【００４０】
＜１−８＞白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
１ｋｇの白参をエタノール５ｌで抽出して得た抽出物５４０ｇのうち７ｇを濃縮し、再度水に懸濁した。ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇをそこに入れ、混合物を前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応、濾過及び濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液５．２ｇを製造した。
【００４１】
＜１−９＞白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
１ｋｇの白参をエタノール５ｌで抽出して得た抽出物５４０ｇのうち７ｇを濃縮し、再度水に懸濁した。ペクチナーゼ０．５ｇとベータガラクトシダーゼ０．５ｇをそこに入れ、混合物を前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応、濾過及び濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液５．１ｇを製造した。
【００４２】
＜１−１０＞白参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
１ｋｇの白参をエタノール５ｌで抽出して得た抽出物５４０ｇのうち７ｇを濃縮し、再度水に懸濁した。ペクチナーゼ１．５ｇとベータガラクトシダーゼ０．２ｇをそこに入れ、混合物を前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応、濾過及び濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液６．２ｇを製造した。
【００４３】
＜１−１１＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスし、滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、クエン酸でｐＨ３〜４．５になるように調整し、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇをそこに入れて、混合物を５０℃で７２時間反応させた。反応液を前記実施例＜１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で８０℃で４時間４回抽出した。その後、濾過し、濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液３．５ｇを製造した。
【００４４】
＜１−１２＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、ベータガラクトシダーゼ１ｇを入れて、混合物を５０℃で２４時間反応させ、８０℃で３時間不活性化させた。反応液を冷却させ、クエン酸でｐＨを４〜５に調整した。その後、ペクチナーゼ０．３ｇを加え、５０℃で２４時間反応させた。次いで、反応液を濾過した後、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で８０℃で４時間４回抽出した。その後、濾液を８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液２．９ｇを製造した。
【００４５】
＜１−１３＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、クエン酸でｐＨ３〜４になるように調整した。その後、ペクチナーゼ０．７ｇとベータガラクトシダーゼ０．６ｇをそこに入れて、混合物５０℃で７２時間反応させた。次いで、反応液を濾過した後、濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液２．９ｇを製造した。
【００４６】
＜１−１４＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、ベータガラクトシダーゼ０．７ｇを入れて、５０℃で２４時間反応させ、８０℃で３時間不活性化させた。反応液を冷却させ、クエン酸でｐＨを４〜５に調整した。その後、ペクチナーゼ０．６ｇを加え、５０℃で２４時間反応させた。次いで、反応液を濾過した後、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で８０℃で４時間４回抽出した。その後、濾液を８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液２．３ｇを製造した。
【００４７】
＜１−１５＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、クエン酸でｐＨ３〜４．５になるように調整した。その後、ペクチナーゼ０．９ｇとベータガラクトシダーゼ０．５ｇをそこに入れて、５０℃で７２時間反応させた。反応液を濾過した後、濃縮して本発明による発酵高麗人参濃縮液２．５ｇを製造した。
【００４８】
＜１−１６＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、クエン酸でｐＨ３〜４．５になるように調整した。その後、ペクチナーゼ２ｇとベータガラクトシダーゼを０．２ｇをそこに入れて、混合物を５０℃で７２時間反応させた。反応液を濾過した後、濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液３．３ｇを製造した。
【００４９】
＜１−１７＞水参を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
水参６ｇをスライスして滅菌した。水参のかけらを水に懸濁した後、ベータガラクトシダーゼ０．５ｇをそこに入れて、混合物を５０℃で２４時間反応させ、８０℃で３時間不活性化させた。反応液を冷却させ、クエン酸でｐＨを４〜５に調整した。その後、ペクチナーゼ１．５ｇを加え、５０℃で２４時間反応させた。次いで、反応液を濾過した後、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で８０℃で４時間４回抽出した。その後、濾液を８０℃で減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液３．１ｇを製造した。
【００５０】
＜１−１８＞高麗人参粉末を用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
高麗人参粉末７ｇを水に懸濁した。クエン酸でｐＨ３〜４．５になるように調整した。懸濁した高麗人参粉末をペクチナーゼ０．３ｇ及びベータガラクトシダーゼ１ｇと反応させ、前記実施例＜１−１１＞と同様の方法で抽出した後、濾過し、濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液３．７ｇを製造した。
【００５１】
＜比較例１＞
ペクチナーゼのみを用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
前記実施例＜１−１＞と同様の方法で製造された高麗人参抽出液７ｇに水１００ｍｌを加えた。その後、ペクチナーゼ１．３ｇを入れ、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応及び減圧濃縮して、本発明による発酵高麗人参濃縮液５．６ｇを製造した。
【００５２】
＜比較例２＞
ベータガラクトシダーゼのみを用いた発酵高麗人参濃縮液の製造
前記実施例＜１−１＞と同様の方法で製造された高麗人参抽出液７ｇに水１００ｍｌを加えた。その後、ベータガラクトシダーゼ１．３ｇを入れ、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で反応及び減圧濃縮して、発酵高麗人参濃縮液５．４ｇを製造した。
【００５３】
＜実験例１＞
本発明による発酵高麗人参濃縮液のＩＨ−９０１の含量
前記実施例＜１−１＞で製造された本発明による発酵高麗人参濃縮液のＩＨ−９０１の含有量（２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール）を分析するために、前記発酵高麗人参濃縮液１ｇを取って水飽和ブタノール６０ｍｌで４回に渡って抽出した。ブタノール留分を濃縮して濃縮物１２０ｍｇを得て、濃縮物をメタノールに溶解させ、高圧液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）を通じてＩＨ−９０１の含量を分析した。その結果を図１に示す。
一方、前記実施例＜１−１＞で製造された高麗人参抽出液に対しても、ＩＨ−９０１の含有量を前記と同様の方法で分析した。
また、前記＜比較例１＞または＜比較例２＞で製造された発酵高麗人参濃縮液のＩＨ−９０１の含有量を前記と同様の方法で分析した。
前記分析結果を下記表１にまとめた。
【００５４】
【表１】
0006170674.tif 000002
前記表１に示したように、本発明による発酵高麗人参濃縮液は、高麗人参抽出液とは対照的に、ＩＨ−９０１を多量に含有している。さらに、発酵高麗人参濃縮液中のＩＨ−９０１の含有量は、ベータガラクトシダーゼのみを投与した場合に比べて３．６倍多く、ペクチナーゼのみを投与した場合に比べて１．５倍多いことが分かった。
【００５５】
＜実験例２＞
本発明による発酵高麗人参抽出液のＩＨ−９０１の体内吸収に関する研究
理想体重の２０％内の体重を有する、年齢２０〜４５歳の範囲の健康な男性志願者２４人を本研究に用いた（無作為、２×２交差デザイン）。
各志願者は、薬物動態学特性評価のために、発酵高麗人参抽出液または高麗人参抽出液を与えられた。発酵高麗人参抽出液または高麗人参抽出液の投与後、０、０．５、１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、１０、１２及び２４時間で血液標本を採取し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。時間に対するＩＨ−９０１の平均血漿濃度を図２に示す。測定された平均最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、最大血漿濃度に至る平均時間（Ｔｍａｘ）及び血漿濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）値を下記表２に示すが、ここでＣｍａｘは、時間にかかわりない各被験者の最大濃度値の平均であり、Ｔｍａｘは各被験者のＣｍａｘ値に該当する時間の平均である。各被験者のＣｍａｘ、Ｔｍａｘ及びＡＵＣ値を図３〜５に示す。
【００５６】
【表２】
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前記表２に示したように、発酵高麗人参濃縮液中のＩＨ−９０１のＣｍａｘ、Ｔｍａｘ及びＡＵＣは、高麗人参濃縮液に比べてそれぞれ２４倍高く、１５倍高く、３．７倍低かった。
【００５７】
従って、高麗人参濃縮液を摂取する場合、各個人は、ジンセノサイドをＩＨ−９０１に代謝することについて異なる能力を示し、体内に専ら少量のＩＨ−９０１のみが吸収されることが明らかになった。さらに、高麗人参濃縮液を摂取する場合、各個人は、最大血漿濃度に至るにおいて異なる平均時間を示した。
対照的に、発酵高麗人参濃縮液を摂取した場合、吸収されたＩＨ−９０１の量と最大血漿水準に至る平均時間は各個人について一定であった。さらに、発酵高麗人参濃縮液を摂取した場合、多量のＩＨ−９０１が体内に吸収された。
従って、前記結果は、発酵高麗人参濃縮液を摂取する場合に一貫して一定の効果（個人別格差が特にない）が期待できることを示す。
【００５８】
＜実施例２＞
本発明による発酵高麗人参粉末の製造
【００５９】
＜２−１＞尾参と白参を用いた発酵高麗人参粉末の製造
前記実施例＜１−１＞と同様の方法で製造された高麗人参抽出液７ｇに水１００ｇを加えた。その後、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇを抽出液に入れて、５０℃、ｐＨ４〜５で２４時間反応させ、８０℃で減圧乾燥して、本発明による発酵高麗人参粉末４．２３ｇを製造した。
【００６０】
＜２−２＞高麗人参粉末を用いた発酵高麗人参粉末の製造
高麗人参粉末７ｇを水に懸濁した後、クエン酸でｐＨ３〜４．５になるように調整した。これに、ペクチナーゼ０．３ｇとベータガラクトシダーゼ１ｇを懸濁液に入れた後、５０℃で２４時間反応させ、前記実施例＜１−１＞と同様の方法で水とエタノールの混合液で８０℃で４時間４回抽出した。抽出物を減圧乾燥して、本発明による発酵高麗人参粉末２．６ｇを製造した。
【００６１】
たとえ本発明を例示のために詳しく説明したとしても、このような記載は専ら例示を目的とし、関連分野の熟練者により、以下の請求の範囲により定義される本発明の思想と範囲を外れることなく、変形され得ることが理解されなければならない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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