(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）で示されるリン酸／ホスホン酸誘導体に関し、ただし、Ｒ１又はＲ２は、（Ｑ１）、又は（Ｑ２）、又は（Ｑ３）という構造を表示する。Ｑ１はＬ−アミノ酸のエステル誘導体を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、Ｑ２はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキサン誘導体を表示し、Ｑ３はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキソール誘導体を表示し、Ｒ１又はＲ２は同一又は異なり、少なくとも一つがＱ２又はＱ３であり、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、式（ＩＩ）はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ１とＲ２が異なる場合、Ｒ１とＲ２に連結されるＰ原子の立体配置はＲ配置又はＳ配置である。2016520070.tif 000094【選択図】なし
2016520070.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2016520070.tif 000076
で示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物であって、
ただし、Ｒ１又はＲ２は、
【化２】
2016520070.tif 000077
という構造を表示し、
Ｑ１はＬ−アミノ酸のエステル誘導体を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、Ｑ２はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキサン誘導体を表示し、Ｑ３はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキソール誘導体を表示し、Ｒ１又はＲ２は同一又は異なり、少なくとも一つがＱ２又はＱ３であり、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化３】
2016520070.tif 000078
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ１とＲ２が異なる場合、Ｒ１とＲ２に連結されるＰ原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置である、式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項２】
構造は、
【化４】
2016520070.tif 000079
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化５】
2016520070.tif 000080
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示する、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項３】
構造は、
【化６】
2016520070.tif 000081
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化７】
2016520070.tif 000082
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示する、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項４】
構造は、
【化８】
2016520070.tif 000083
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化９】
2016520070.tif 000084
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、ホスフィン／リン原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置である、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項５】
構造は、
【化１０】
2016520070.tif 000085
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化１１】
2016520070.tif 000086
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、ホスフィン／リン原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置である、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項６】
【化１２】
2016520070.tif 000087
2016520070.tif 000088
2016520070.tif 000089
2016520070.tif 000090
2016520070.tif 000091
2016520070.tif 000092
2016520070.tif 000093
という構造から選ばれる、請求項１−５に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体。
【請求項７】
活性成分としての請求項１−６に記載の式Ｉで示される化合物又はその薬学的に許容される塩又はその溶媒和物、及び一種又は複数種の薬学的な担体又は賦形剤を含む、薬物組成物。
【請求項８】
肝炎を治療する薬物を製造するための請求項１−６に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。
【請求項９】
ウイルス性肝炎を治療する薬物を製造するための請求項１−６に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。
【請求項１０】
高脂血症や高血糖症等の、肝臓代謝障害による疾患を治療する薬物を製造するための請求項１−６に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分子中にリン酸又はホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の新規な肝臓標的プロドラッグ誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩、水和物又は溶媒和物、及び活性成分としての該プロドラッグ誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩、水和物又は溶媒和物、及び適宜の賦形剤を含んで形成される薬物組成物、及び肝疾患又は代謝性疾患を治療する薬物を製造するための該プロドラッグ誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩、水和物又は溶媒和物、該プロドラッグ誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩、水和物又は溶媒和物を活性成分として含む薬物組成物の用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
肝臓は、ウイルス性肝炎、肝硬変、肝臓癌の標的器官であり、糖類・脂質代謝の主器官である。これら疾患の治療技術、治療方法及び治療薬物の研究に対して、十年近く、重要な進歩を遂げているが、臨床のニーズを満たすことができない。例えば、慢性ウイルス性肝炎に対して、インターフェロンは治療効果が不安定で、副作用が大きく、抗Ｂ型肝炎ウイルス薬であるラミブジンは薬剤耐性を生じやすく、アデフォビルジピボキシルは用量制限性の腎臓毒性を有し、唯一の小分子抗Ｃ型肝炎ウイルス薬であるリバビリンは長期投与による深刻な血液毒性をもたらす。肝臓癌に対して、通常の化学療法薬の全身性副作用が大きい。肝線維症と肝硬変に対して、臨床においてまだ安全で有効な薬物がない。糖尿病及び高脂血症に対して、臨床においても新規で有効な治療方法が緊急に必要とされる。
【０００３】
ヌクレオシドリン酸／ホスホン酸は、抗ウイルス薬の重要な成分である。例えば、ラミブジン、テルビブジン、エンテカビル、リバビリン、ＰＳＩ−６１３０等のヌクレオシド類似体は、いずれもリン酸化により薬理活性を有するヌクレオチド類似体を形成して、抗ウイルス作用を発揮させるものである。
【化１】
2016520070.tif 000003
【０００４】
アデフォビル（ＰＭＥＡ）、テノフォビル（ＰＭＰＡ）及びＰＭＰＤＡＰは、抗ＨＩＶ・ＨＢＶ活性を有する非環状ヌクレオシドホスホン酸類似体である。
【化２】
2016520070.tif 000004
【０００５】
ＭＢ０５０３２は血糖降下作用を有するホスホン酸系フルクトース１，６−ビスホスファターゼ阻害剤であり、ＭＢ０７３４４は脂質降下作用を有するホスホン酸系甲状腺受容体アゴニストである。
【化３】
2016520070.tif 000005
【０００６】
しかしながら、リン酸又はホスホン酸基を含む薬理学的活性分子は、リン酸又はホスホン酸基の極性が高く、細胞膜を透過しにくいため、その経口投与の生物学的利用能が低く、有効治療濃度に達しにくい。従って、安全で有効な、リン酸又はホスホン酸基を含む薬理学的活性分子のプロドラッグの研究開発は、該薬物の研究開発の重要なこととなる。
【０００７】
ホスホン酸基を含む薬物分子を、カルボキシレート又はカルボナートプロドラッグに製造することにより、ホスホン酸系薬物の経口生物学的利用能を顕著に向上させることができる。アデフォビルジピボキシルとＬＢ−８０３８０はピバル酸の活性エステルのプロドラッグであり、テノフォビルジソプロキシルは炭酸イソプロピルのプロドラッグである。アデフォビルジピボキシルとテノフォビルジソプロキシルは、臨床において幅広く応用される抗ウイルス薬である。
【化４】
2016520070.tif 000006
【０００８】
しかしながら、アデフォビルピバレート、ＬＢ−８０３８０及びテノフォビルジソプロキシルは化学安定性が悪く、その原料薬及び製剤が温度や湿度に敏感で、分解して人体に吸収されないモノエステルを形成しやすく、その体内代謝産物のホルムアルデヒドが人体に有毒で、且つ胃腸管で不安定で、加水分解して強酸性のホスホン酸化合物を生成しやすいため、胃腸管に刺激を与える。また、アデフォビルピバレートとＬＢ−８０３８０が体内に入って加水分解して生成したピバル酸は、代謝・排泄しにくく、一定の副作用をもたらす。
【０００９】
ＭＣＣ−４７８は、化学安定性が高く、抗Ｂ型肝炎ウイルス作用を有する非環状ヌクレオチドのトリフルオロエタノールエステルである。ＭＣＣ−４７８は体内に入った後、加水分解して遊離酸（６０２０７６）を放出し、抗ウイルス作用を発揮させるが、第Ｉ期臨床の薬物動態研究結果として、ＭＣＣ−４７８の人体内での主な代謝産物がヌクレオチドモノエステル（６０２０７４）であり、遊離酸６０２０７６の血中薬物濃度がモノエステル６０２０７４の１／１０だけであり（非特許文献１）、モノエステル６０２０７４の細胞毒性（ＣＣ５０＝５４８μＭ）がＭＣＣ−４７８と６０２０７６より顕著に高い（ＣＣ５０＞１０００μＭ）（非特許文献２）ことが明らかになった。
【化５】
2016520070.tif 000007
【００１０】
通常のリン酸／ホスホン酸系薬物によく用いられるプロドラッグの設計戦略は、Ｓ−アセチルチオエチルエステル（ＳＡＴＥ）の設計も含む。例えば、ｄｄＵＭＰとホスカルネットとのビス（Ｓ−アセチルチオエチルエステル）は、ｄｄＵＭＰとホスカルネットとの経口生物学的利用能を顕著に向上させることができる。
【化６】
2016520070.tif 000008
【００１１】
しかしながら、リン酸／ホスホン酸系薬物のＳ−アセチルチオエチルエステル（ＳＡＴＥ）は体内に入り、強力なアルキル化試薬であるビニル硫化物を生じるものである。
【００１２】
ＣＧＳ２５４６３とＣＧＳ２６３９３は、体内に入って活性ホスホン酸薬物を放出できる、ホスホン酸誘導体のビスフェノールエステルプロドラッグである。
【化７】
2016520070.tif 000009
【００１３】
ＰＳＩ−７９７７とＩＮＸ−０８１８９はそれぞれ、抗ＨＩＶ活性を有するヌクレオチドのフェノールホスホラミデートとナフトールホスホラミデートのプロドラッグであり、体内に入った後スヌクレオシド一リン酸誘導体を放出し、更に三リン酸生成物に転化して、抗ＨＣＶ作用を発揮させる。
【化８】
2016520070.tif 000010
【００１４】
しかしながら、ＣＧＳ２５４６３、ＣＧＳ２６３９３、ＰＳＩ−７９７７及びＩＮＸ−０８１８９は体内に入った後、高毒性のフェノール系物質を生じるものである。
【００１５】
Ｐｒａｄｅｆｏｖｉｒ、ＭＢ０７８１１及びＭＢ０７１３３はそれぞれ、抗Ｂ型肝炎薬物ＰＭＥＡ、甲状腺受容体アゴニストＭＢ０７３４４及び抗腫瘍薬シトシンアラビノシドのフェニル置換環状ホスホン酸エステルのプロドラッグであり、該プロドラッグは化学安定性が高く、胃腸管と血液中で安定するが、肝臓中でシトクロムＰ４５０酵素に選択的に酸化され、肝臓で活性薬物ＰＭＥＡ、ＭＢ０７３４４又はシトシンアラビノシドを標的放出し、抗Ｂ型肝炎ウイルス作用、脂質降下作用又は抗肝臓癌作用を発揮させる。
【化９】
2016520070.tif 000011
【００１６】
しかしながら、Ｐｒａｄｅｆｏｖｉｒ、ＭＢ０７８１１及びＭＢ０７１３３は体内に入った後、高発癌性の代謝中間体を生じ、発癌作用をもたらすものである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Ｃｌａｒｋ  Ｃｈａｎ、  ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏ−ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  Ａｌａｍｉｆｏｖｉｒ  ａｎｄ  Ｉｔｓ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  Ａｎｔｉｖｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、２００５、４９（５）：１８１３−１８２２．
【非特許文献２】Ｋａｍｉｙａ  Ｎ、  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ＭＣＣ−４７８、  ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｄ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ  Ｖｉｒｕｓ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２００２  、４６（９）：２８７２．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
本発明は、上記リン酸／ホスホン酸系プロドラッグの不足を克服するために、式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体を提供し、
【化１０】
2016520070.tif 000012
ただし、Ｒ１又はＲ２は、
【化１１】
2016520070.tif 000013
という構造を表示し、
Ｑ１はＬ−アミノ酸のエステル誘導体を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、Ｑ２はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキサン誘導体を表示し、Ｑ３はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキソール誘導体を表示し、Ｒ１又はＲ２は同一又は異なり、少なくとも一つがＱ２又はＱ３であり、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化１２】
2016520070.tif 000014
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ１とＲ２が異なる場合、Ｒ１とＲ２に連結されるＰ原子の立体配置は、Ｒ配置又はＳ配置である。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明者は、多く検討した結果、従来技術に比べて、式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体が高生物活性と高生物安全性を有することを見出し、更に、目的化合物が胃腸管と血液中で安定するが、肝臓中で活物質を十分に放出でき、高肝臓標的性を有することを予想外に見出し、また、式Ｉで示される目的化合物が、経口投与後、肝臓保護作用を有し、肝炎ウイルスによる肝損傷を阻害し、肝炎ウイルスによるトランスアミナーゼ上昇を迅速に低下させることができることを予想外に見出す。
【００２０】
従って、本発明は、ウイルス性肝炎等の肝疾患を治療する薬物を製造するための式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩の用途を提供する。
【００２１】
本発明は更に、高脂血症や高血糖症等の、肝臓代謝障害による疾患を治療する薬物を製造するための式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩の用途を提供する。
【００２２】
一方、本発明は、活性成分及び薬用賦形剤としての式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩を含む薬物組成物を提供し、これらの薬物組成物は、即時放出性錠剤、徐放性錠剤、放出制御性錠剤、フィルムコート錠、糖衣錠、口腔錠、舌下錠等の錠剤であってよく、硬カプセル剤、軟カプセル剤等のカプセル剤であってよく、無菌又は抑菌剤含有の水性注射液、油性注射液、冷凍乾燥粉末注射剤、注射用マイクロスフェア等の注射剤等であってよい。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体は、下記合成経路どおりに製造される。
【００２４】
経路１：５−ヒドロキシベンゾジオキソランＰＭＥＡジエステル誘導体の製造を例として、Ｒ１もＲ２もＱ２又はＱ３であるホスホン酸エステル系目的化合物は、合成経路１どおりに製造されることができる。
【化１３】
2016520070.tif 000015
【００２５】
ジシクロヘキシルカルボジイミドの作用下で、ＰＭＥＡと５−ヒドロキシベンゾジオキソランのヒドロキシ基を縮合させて、目的化合物を得る。
【００２６】
経路２：アシクロビルの５−ヒドロキシベンゾジオキソランリン酸エステル誘導体の製造を例として、Ｒ１もＲ２もＱ２又はＱ３であるリン酸エステル系目的化合物は、合成経路２どおりに製造されることができる。
【化１４】
2016520070.tif 000016
【００２７】
アシクロビルとオキシ塩化リンを作用させ、塩化ホスホリル中間体ＩＩ１を生成し、ＩＩ１と５−ヒドロキシベンゾジオキソランを反応させて、目的化合物を得る。
【００２８】
経路３：ＰＭＰＡのモノホスホンアミダート誘導体の製造を例として、Ｒ１がＱ１であり、Ｒ２がＱ２又はＱ３であるモノホスホンアミダート系目的化合物は、経路３どおりに製造されることができる。
【化１５】
2016520070.tif 000017
【００２９】
まず、ジシクロヘキシルカルボジイミドの作用下で、ＰＭＥＡと５−ヒドロキシベンゾジオキソランのヒドロキシ基を縮合させて、モノエステル誘導体ＩＩＩ１を得、ＩＩＩ１と塩化チオニルを作用させて、ホスホニルクロライドモノエステル中間体ＩＶ１を生成し、ＩＶ１とアミノ酸エステルを反応させて、目的化合物を得る。
【００３０】
経路４：アシクロビルのモノホスホラミデート誘導体の製造を例として、Ｒ１がＱ１であり、Ｒ２がＱ２又はＱ３であるモノホスホラミデート系目的化合物は、合成経路４どおりに製造されることができる。
【化１６】
2016520070.tif 000018
【００３１】
ジクロロホスホリルエステル誘導体とアミノ酸誘導体を反応させて塩素化ホスホラミデート誘導体Ｖを得、Ｖとアシクロビル側鎖のヒドロキシ基を反応させて、目的化合物を得る。
【実施例】
【００３２】
以下、実施例により、本発明を詳しく説明するが、本発明の範囲は下記実施例に制限されるものではない。
【００３３】
参照実施例１  ９−［［ビス−（フェノキシ）−ホスホノ−メトキシ］−エチル］−アデニン（ｉ−１）の製造
【化１７】
2016520070.tif 000019
【００３４】
１３ｇの９−［（ホスホノ−メトキシ）−エチル］−アデニン（ＰＭＥＡ）と９．４ｇのフェノールを１００ｍｌのＮ−メチルピロリドンに加えて、９０℃まで加熱して撹拌し、その後、順に１０ｍｌのトリエチルアミン、２０ｇのジシクロヘキシルカルボジイミドを加えて、９０℃で１５時間加熱撹拌した。一晩自然冷却し、固体を濾過して除去し、濾液を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルで溶解させ、順に炭酸ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）と塩化ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで一晩乾燥させ、乾燥剤を濾過して除去し、濾液を減圧蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール（２０：１）混合溶媒で溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、ｉ−１を４．１ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；７．３４−７．３７（ｍ，４Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；７．２０−７．２５（ｍ，６Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９２−３．９０（ｔ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）。
【００３５】
参照実施例２  ９−［［ビス−（ナフトキシ）−ホスホノ−メトキシ］−エチル］−アデニン（ｉ−２）の製造
【化１８】
2016520070.tif 000020
【００３６】
参照実施例１の方法を参照し、フェノールの代わりにナフトールをＰＭＥＡと反応させ、反応生成物を分離精製して、ｉ−２を得、収率は２７％である。８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；７．７３−７．７７（ｍ，２Ｈ）；７．４５−７．５９（ｍ，１０Ｈ）、７．２０−７．２５（ｍ，６Ｈ）；６．２２−６．３４（ｍ，２Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９２−３．９０（ｔ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）。
【００３７】
参照実施例３  ５’−［（（フェノキシ−１−メトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−２’，３’−ジデオキシ−３’−チオシチジン（Ｃｆ１１０９）の製造
【化１９】
2016520070.tif 000021
【００３８】
２．１ｇ（０．０１ｍｏｌ）のフェノールジクロロホスフェートと１．３ｇ（０．０１ｍｏｌ）のＬ−アラニンメチルを３０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解させ、−７８℃まで冷却した。撹拌しながら、２ｍｌのトリエチルアミンを滴下して２０ｍＬの無水ジクロロメタン溶液に溶解させ、滴下速度を制御することにより、温度−７８℃で反応させた。滴下終了後、反応温度が室温までゆっくり昇温した後、１時間撹拌し続けた。溶媒を減圧蒸発させ、残留物に３０ｍｌの無水ジエチルエーテルを加えて、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、無色の油状物を得、即ちホスファミド中間体Ｖ１であり、次の反応に直接に使用する。
【００３９】
０．２１ｇのラミブジンを５０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、７ｍｌのピリジンを加えて、窒素ガスを充填し、１ｍｌの１Ｍｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリドのＴＨＦ溶液を加えて、０．５ｈ撹拌し、撹拌しながら２ｍｌの１Ｍ  Ｖ１のＴＨＦ溶液を加えて、２ｈ撹拌した。反応液に５０ｍｌのジクロロメタン、１００ｍｌの飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて抽出した後、有機層を取り出し、水層をジクロロメタンで抽出し（３Ｘ５０ｍｌ）、有機層を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、その後、無水硫酸マグネシウムで一晩乾燥させ、濾過し、濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール：トリエチルアミン（１００：５：１）混合溶媒で溶離し、所望の成分を収集し、蒸発後、目的化合物を０．１８ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．６８（ｄ，１Ｈ）；７．２５−７．３０（ｍ，７Ｈ）；６．２３（ｔ，１Ｈ）；６．１１（ｍ，１Ｈ）；５．７２（ｄ，１Ｈ）；５．３５（ｔ，１Ｈ）；４．２７（ｍ，２Ｈ）；３．８８（ｍ，１Ｈ）；３．５８（ｓ，３Ｈ）；３．４２（ｑ，１Ｈ）；３．０５（ｍ，２Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）。
【００４０】
参照実施例４  ９−［（Ｒ）−２−［［（Ｓ）−［［（Ｓ）−１−（イソプロポキシカルボニル）−エチル］−アミノ］−フェノキシホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニンフマル酸塩（ＧＳ−７３４０）の製造
【化２０】
2016520070.tif 000022
【００４１】
５０ｍｌのＮ−メチルピロリドンに１４．６ｇの９−［（Ｒ）−２−（ホスホノメトキシ）−プロピル］−アデニン（ＰＭＰＡ）、９．６ｇのフェノールを加えて、８５℃まで加熱し、６．３ｍｌのトリエチルアミンを加えた。撹拌しながら、１３．４ｇのＤＣＣをゆっくり加えて、１００℃で一晩加熱撹拌し、冷却後、３０ｍｌの水を加えた。放置し、固体を濾過して除去し、濾液を合わせ、減圧蒸発させ、３０ｍｌの水を加えて、２５％の水酸化ナトリウムでｐＨを１１まで調整し、固体を濾過して除去し、濾液を合わせ、３０ｍｌの酢酸エチルで抽出した。水溶液のｐＨを３７％の塩酸で３．１まで調整し、放置して固体を析出させた。固体を濾別し、５０ｍｌのメタノールを加えて撹拌洗浄し、濾過し、真空乾燥させて、ＰＭＰＡのフェノールモノエステル誘導体を７．２ｇ得た。
【００４２】
前の生成物７．１ｇを３０ｍｌのアセトニトリルに加えて、撹拌しながら、６．２ｇの塩化チオニルを加えて、５０℃以下で保温した。反応混合物を７５℃で固体が溶解するまで加熱し、その後、８０℃まで加熱し、蒸発させた。２５℃まで冷却し、４０ｍｌのジクロロメタンを加えて、−３０℃まで冷却し、３０ｍｉｎ内で６．５ｇのＬ−アラニンイソプロピルを３５ｍｌのジクロロメタン溶液に滴下し、−１８℃で保温した。その後、１５ｍｉｎ内で７ｍｌのトリエチルアミンを滴下し、−１８℃〜−１１℃で保温した。室温で２ｈ撹拌し、１０％のリン酸二水素ナトリウム溶液で洗浄した（３Ｘ１５ｍｌ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後に濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、アセトンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、油状物を３．６ｇ得、キラル分取クロマトグラフィー（Ｄｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ）で分離させ、３０％メタノール含有のアセトニトリルで溶離し、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、黄褐色の固体を１．３ｇ得た。２５ｍｌのアセトニトリル、０．３ｇのフマル酸を加えて、固体が溶解するまで加熱還流し、熱いうちに濾過し、濾液を５℃まで冷却し、一晩放置した。濾過し、乾燥させて、白色の固体を１．２ｇ得、融点は１２０−１２２℃であり、［α］Ｄ２０は−４１．７°（ｃ  １．０、酢酸）である。
【００４３】
参照実施例５  ５’−［（Ｓ）−［［（Ｓ）−１−（イソプロポキシカルボニル）−エチル］−アミノ］−フェノキシホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（ＰＳＩ−７９７７）の製造
【化２１】
2016520070.tif 000023
【００４４】
２．１ｇ（０．０１ｍｏｌ）のフェノキシジクロロホスフィンオキシドと１．６ｇ（０．０１ｍｏｌ）のＬ−アラニンイソプロピルを３０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解させ、−７８℃まで冷却した。撹拌しながら、２ｍｌのトリエチルアミンを滴下し２０ｍＬの無水ジクロロメタン溶液に溶解させ、滴下速度を制御することにより、温度−７８℃で反応させた。滴下終了後、反応温度が室温までゆっくり昇温した後、１時間撹拌し続けた。溶媒を減圧蒸発させ、残留物に３０ｍｌの無水ジエチルエーテルを加えて、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、無色の油状物を得、即ちホスファミド中間体Ｖ２であり、次の反応に直接に使用する。
【００４５】
１．５ｇのβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（済南中科一通化学工業有限公司製、純度９８％）を３０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、３ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、Ｖ２を加えて２０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第２の成分を収集し、減圧蒸発させて、ＰＳＩ−７９７７を０．２１ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．２１（ｓ，１Ｈ）；７．５２（ｄ，１Ｈ）；７．３６−７．３０（ｍ，２Ｈ）；７．２０−７．１２（ｍ，３Ｈ）；６．０５−５．９５（ｍ，２Ｈ）；５．８０（ｍ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；４．８１（ｑ，１Ｈ）；４．３６−４．３０（ｍ，１Ｈ）；４．２１−４．１６（ｍ，１Ｈ）；４．００−３．９４（ｍ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，２Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１８（ｄ，３Ｈ）；１．１０（ｄ，６Ｈ）。
【００４６】
参照実施例６  ５’−［（（フェノキシ−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（ＰＳＩ−３５３６６１）の製造
【化２２】
2016520070.tif 000024
【００４７】
参照実施例５の方法を参照し、β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジンの代わりにβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（済南中科一通化学工業有限公司製、純度９８％）をホスファミド中間体Ｖ２と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物ＰＳＩ−３５３６６１を得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．７０（ｓ，１Ｈ）；７．３８−７．３２（ｍ，２Ｈ）；７．２２−７．１５（ｍ，３Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，３Ｈ）；５．８２（ｍ，１Ｈ）；４．８４（ｑ，１Ｈ）；４．３９−４．３３（ｍ，１Ｈ）；４．２５−４．１９（ｍ，１Ｈ）；４．０３−３．９７ｍ，１Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，２Ｈ）；１．２４（ｄ，３Ｈ）；１．２２（ｄ，３Ｈ）；１．１２（ｄ，６Ｈ）。
【００４８】
参照実施例７  ９−［［［（フェノキシ−１−メトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−オキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（ｉ−３）の製造
【化２３】
2016520070.tif 000025
【００４９】
参照実施例３の方法を参照し、ラミブジンの代わりにアシクロビルをホスファミド中間体Ｖ１と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物ｉ−３を得た。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８３（ｓ，１Ｈ）；７．３８−７．１４（ｍ，５Ｈ）；６．５３（ｓ，２Ｈ）；６．００−５．９３（ｍ，１Ｈ）；５．３６（ｓ，２Ｈ）；４．１３−４．０５（ｍ，２Ｈ）；３．８５−３．８０（ｍ，１Ｈ）；３．７２−３．６３（ｍ，２Ｈ）；３．５９（ｓ，３Ｈ）；１．２３−１．１９（ｍ，３Ｈ）。
【００５０】
参照実施例８  ２−アミノ−１，９−ジヒドロ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（（Ｒ）−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニルエチルアミノ−フェノールオキシ−ホスホリル）−オキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−６Ｈ−プリン−６−オン（ｉ−４）及び２−アミノ−１，９−ジヒドロ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（（Ｓ）−（（Ｓ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ−フェノールオキシ−ホスホリル）−オキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−６Ｈ−プリン−６−オン（ｉ−５）の製造
【化２４】
2016520070.tif 000026
【００５１】
５．５ｇの無水エンテカビルを５０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、６ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、６．３ｇのＶ２を加えて３０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の成分を収集し、減圧蒸発させて、ｉ−４を０．２０ｇ得、第２の成分を収集し、減圧蒸発させて、ｉ−５を０．２４ｇ得た。
【００５２】
ｉ−４のＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５１（ｂｓ，１Ｈ）；７．６３（ｓ，１Ｈ）；７．３９−７．３５（ｍ，２Ｈ）；７．２２−７．１７（ｍ，３Ｈ）；６．０９（ｍ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０６（ｍ，１Ｈ）；４．８９（ｄ，１Ｈ）；４．８５−４．８３（ｍ，２Ｈ）；４．５２（ｍ，１Ｈ）；４．４０（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．０４（ｍ，１Ｈ）；１．１９（ｄ，３Ｈ）；１．１６（ｄ，６Ｈ）。
【００５３】
ｉ−５のＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５４（ｂｓ，１Ｈ）；７．６７（ｓ，１Ｈ）；７．３８−７．３３（ｍ，２Ｈ）；７．２１−７．１５（ｍ，３Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；６．０３（ｍ，１Ｈ）；５．８０（ｍ，１Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０７（ｍ，１Ｈ）；４．８７−４．８３（ｍ，３Ｈ）；４．５８（ｍ，１Ｈ）；４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５０（ｍ，１Ｈ）；２．２１（ｍ，１Ｈ）；２．０３（ｍ，１Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【００５４】
実施例１  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−アデニン（Ｉ１）の製造
【化２５】
2016520070.tif 000027
【００５５】
１３．７ｇの９−［（ホスホノ−メトキシ）−エチル］−アデニン（ＰＭＥＡ）と１３．８ｇの４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランを１００ｍｌのＮ−メチルピロリドンに加えて、９０℃まで加熱して撹拌し、その後、順に１０ｍｌのトリエチルアミン、２０ｇのジシクロヘキシルカルボジイミドを加えて、９０℃で１５時間加熱撹拌した。一晩自然冷却し、固体を濾過して除去し、濾液を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルで溶解させ、順に炭酸ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）と塩化ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで一晩乾燥させ、乾燥剤を濾過して除去し、濾液を減圧蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール（２０：１）混合溶媒で溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、Ｉ１を３．２ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，２Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，２Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，２Ｈ）；５．９７−５．９８（ｄ，４Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９２−３．９０（ｔ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）。
【００５６】
実施例２  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−アデニン（Ｉ２）の製造
【化２６】
2016520070.tif 000028
【００５７】
実施例１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランの代わりに５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランをＰＭＥＡと縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２を得、収率は１４％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．１５（ｓ，１Ｈ）；８．１１（ｓ，１Ｈ）；７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９３−３．９１（ｔ，２Ｈ）；３．８０−３．７８（ｄ，２Ｈ）。
【００５８】
実施例３  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，４］ジオキサン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−アデニン（Ｉ３）の製造
【化２７】
2016520070.tif 000029
【００５９】
実施例１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランの代わりに５−ヒドロキシベンゾ［１，４］ジオキサンをＰＭＥＡと縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３を得、収率は１９％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．５８−６．６２（ｔ，２Ｈ）；６．５１−６．５３（ｄ，２Ｈ）；６．４１−６．４３（ｄ，２Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；４．２０−４．２４（ｍ，８Ｈ），３．９２−３．９０（ｔ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）。
【００６０】
実施例４  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−アデニン（Ｉ４）の製造
【化２８】
2016520070.tif 000030
【００６１】
実施例１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランの代わりに５−ヒドロキシベンゾ［１，４］ジオキサンをＰＭＥＡと縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ４を得、収率は１４％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；４．２０−４．２４（ｍ，８Ｈ）；３．９２−３．９０（ｔ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）。
【００６２】
実施例５  ９−［（Ｒ）−２−［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ５）の製造
【化２９】
2016520070.tif 000031
【００６３】
実施例１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと９−（Ｒ）−［２−（ホスホメトキシ）−プロピル］−アデニン（Ｒ−ＰＭＰＡ）を縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ５を得、収率は２３％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．６０（ｂ，２Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，２Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，２Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，２Ｈ）；５．９７−５．９８（ｓ，４Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｄ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；１．２９（ｄ，３Ｈ）。
【００６４】
実施例６  ９−［（Ｒ）−２−［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ６）の製造
【化３０】
2016520070.tif 000032
【００６５】
実施例１の方法を参照し、５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＲ−ＰＭＰＡを縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ６を得、収率は１９％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｄ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；１．２９（ｄ，３Ｈ）。
【００６６】
実施例７  ２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−プリン（Ｉ７）の製造
【化３１】
2016520070.tif 000033
【００６７】
実施例１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［（ホスホノ−メトキシ）−エチル］−プリンを縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ７を得、収率は１４％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．８９（ｓ，１Ｈ）；７．５４（ｄ，２Ｈ）；７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．９１（ｄ，２Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，２Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，２Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，２Ｈ）；５．９７−５．９８（ｓ，４Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９３−３．９１（ｔ，２Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．７８（ｄ，２Ｈ）。
【００６８】
実施例８  ２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−プリン（Ｉ８）の製造
【化３２】
2016520070.tif 000034
【００６９】
実施例１の方法を参照し、５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［（ホスホノ−メトキシ）−エチル］−プリンを縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ８を得、収率は１６％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．８９（ｓ，１Ｈ）；７．５４（ｄ，２Ｈ）；７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．９１（ｄ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９３−３．９１（ｔ，２Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．７８（ｄ，２Ｈ）。
【００７０】
実施例９  ［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸−ビス−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−エステル（Ｉ９）の製造
【化３３】
2016520070.tif 000035
【００７１】
実施例１の方法を参照し、５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸を縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ９を得、収率は２７％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．９９（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．７１（ｓ，２Ｈ）；６．６８−６．５３（ｍ，７Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；４．０３（ｄ，２Ｈ）；３．７７（ｓ，２Ｈ）；３．０２（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，６Ｈ）；１．０８（ｄ，６Ｈ）。
【００７２】
実施例１０  ［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸−ビス−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−エステル（Ｉ１０）の製造
【化３４】
2016520070.tif 000036
【００７３】
実施例１の方法を参照し、５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸を縮合させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１０を得、収率は１４％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．５０（ｄ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．４５（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ
）；２．１１（ｄ，２Ｈ）；１．４３（ｍ，１Ｈ）；０．９７（ｄ，６Ｈ）。
【００７４】
実施例１１  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−ホスホリルオキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（Ｉ１１）の製造
【化３５】
2016520070.tif 000037
【００７５】
１００ｍｌの乾燥ＴＨＦに４．５ｇの無水アシクロビルを加えて、窒素ガスを充填し、反応混合物を−１５℃〜−２０℃まで撹拌冷却する。撹拌しながら、２．８ｇのオキシ塩化リンと８ｍｌの無水ジクロロメタン溶液を滴下し、−１５℃〜−２０℃まで反応混合物を保温し、アシクロビルが完全に反応するまで連続的に撹拌し、反応液を減圧蒸発させて、アシクロビルのジクロロリン酸エステル誘導体ＩＩ１を得た。
【００７６】
ＩＩ１を５０ｍｌの無水ジクロロメタンで溶解させ、−７８℃まで冷却し、撹拌しながら、８．３ｇの４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと６ｇの蒸留した直後のトリエチルアミンを５０ｍｌの無水ジクロロメタン溶液に滴下した。滴下終了後に撹拌し、室温までゆっくり昇温し、一晩撹拌した。濾過し、濾液を減圧蒸発させ、残留物を酢酸エチルで溶解させ、順に炭酸ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）と塩化ナトリウム飽和溶液（２Ｘ２００ｍｌ）で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで一晩乾燥させ、乾燥剤を濾過して除去し、濾液を減圧蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール（２０：１）混合溶媒で溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、Ｉ１１を１．２ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｓ，１Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，２Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，２Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，２Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；５．９７−５．９８（ｓ，４Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｔ，２Ｈ）。
【００７７】
実施例１２  ９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリルオキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（Ｉ１２）の製造
【化３６】
2016520070.tif 000038
【００７８】
実施例１１の方法を参照し、４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランの代わりに５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランをＩＩ１と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１２を得、収率は１７％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｔ，２Ｈ）。
【００７９】
実施例１３  ２−アミノ−６−メトキシ−９−［［［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリルオキシ］−エトキシ］−メチル］−プリン（Ｉ１３）の製造
【化３７】
2016520070.tif 000039
【００８０】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりに２−アミノ−６−メトキシ−９−［（２−ヒドロキシエトキシ）−メチル］−プリンをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、２−アミノ−６−メトキシ−９−［（２−ジクロロホスホリルオキシ−エトキシ）−メチル］−プリン（ＩＩ２）を得た。
【００８１】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ２を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１３を得、収率は２０％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｔ，２Ｈ）。
【００８２】
実施例１４  ５’−ビス−［（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリル］−２’，３’−ジデオキシ−３’−チオシチジン（Ｉ１４）の製造
【化３８】
2016520070.tif 000040
【００８３】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりにラミブジンをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、ラミブジンのジクロロリン酸エステル誘導体ＩＩ３を得た。
【００８４】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ３を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１４を得、収率は１２．０％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．７１（ｄ，１Ｈ）；７．３０（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．２５（ｔ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．７４（ｄ，１Ｈ）；５．３８（ｔ，１Ｈ）；４．２９（ｍ，２Ｈ）；３．８９（ｍ，１Ｈ）；３．０６（ｍ，２Ｈ）。
【００８５】
実施例１５  ９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（ビス−（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリル）−オキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−グアニン（Ｉ１５）の製造
【化３９】
2016520070.tif 000041
【００８６】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりにエンテカビルをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、エンテカビルのジクロロリン酸エステル誘導体ＩＩ４を得た。
【００８７】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ４を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１５を得、収率は２３％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．５４（ｂｓ，１Ｈ）；７．６６（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．４２（ｓ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．３６（ｍ，１Ｈ）；５．１０（ｍ，１Ｈ）；４．８７（ｄ，１Ｈ）；４．８４（ｍ，１Ｈ）；４．５６（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５３（ｍ，２Ｈ）；２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．０４（ｍ，１Ｈ）。
【００８８】
実施例１６  ２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（ビス−（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリル）−オキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリン（Ｉ１６）の製造
【化４０】
2016520070.tif 000042
【００８９】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりに２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリンをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（ジクロロホスホリルオキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリン（ＩＩ５）を得た。
【００９０】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ５を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１５を得、収率は１５％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９６（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．４２（ｓ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．３６（ｍ，１Ｈ）；５．１０（ｍ，１Ｈ）；４．８７（ｄ，１Ｈ）；４．８４（ｍ，１Ｈ）；４．５６（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．９４（ｓ，３Ｈ）；３．５３（ｍ，２Ｈ）；２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．０４（ｍ，１Ｈ）。
【００９１】
実施例１７  ５’−Ｏ−［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（Ｉ１７）の製造
【化４１】
2016520070.tif 000043
【００９２】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりに２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリンをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−（ジクロロホスホリルオキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリン（ＩＩ６）を得た。
【００９３】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ６を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１５を得、収率は１２．５％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３７（ｓ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；５．９５（ｄ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，３Ｈ）；３．６３−３．６０（ｍ，１Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）。
【００９４】
実施例１８  ５’−Ｏ−［ビス−（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（Ｉ１８）の製造
【化４２】
2016520070.tif 000044
【００９５】
実施例１１の方法を参照し、アシクロビルの代わりに５’−Ｏ−ホスホリル−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシンをオキシ塩化リンと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、５’−Ｏ−（ジクロロホスホリル）−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（ＩＩ７）を得た。
【００９６】
５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランとＩＩ７を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ１５を得、収率は１３．９％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，６Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，２Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）。
【００９７】
実施例１９  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−メトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ１９）の製造
【化４３】
2016520070.tif 000045
【００９８】
１５０ｍｌのＮ−メチルピロリドンに２９．２ｇの９−［（Ｒ）−２−（ホスホノメトキシ）−プロピル］−アデニン（ＰＭＰＡ）、２７．６ｇの５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランを加えて、８５℃まで加熱し、１２ｍｌのトリエチルアミンを加えた。撹拌しながら、２６ｇのＤＣＣをゆっくり加えて、１００℃で一晩加熱撹拌し、冷却後に１００ｍｌの水を加えた。放置し、固体を濾過して除去し、濾液を合わせ、減圧蒸発させ、１００ｍｌの水を加えて、２５％の水酸化ナトリウムでｐＨを１１まで調整し、固体を濾過して除去し、水洗し、濾液を合わせ、３０ｍｌの酢酸エチルで抽出した。水溶液のｐＨを３７％塩酸で３．１まで調整し、放置し固体を析出させた。固体を濾別し、５０ｍｌのメタノールを加えて撹拌洗浄し、濾過し、真空乾燥させて、９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（ＩＩＩ１）の白色固体を１３．５ｇ得た。
【００９９】
１．４２ｇの前の生成物ＩＩＩ１を１０ｍｌのアセトニトリルに加えて、撹拌しながら、１．３ｇの塩化チオニルを滴下し、５０℃以下で保温した。反応混合物を７５℃で固体が溶解するまで加熱し、その後、８０℃まで加熱し、蒸発させて、９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−モノクロロ−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（ＩＶ１）を得て、次の反応に直接に使用する。
【０１００】
ＩＶ１を１０ｍｌの乾燥ジクロロメタンで溶解させ、−３０℃まで冷却し、３０ｍｉｎ内で、１．３ｇのＬ−アラニンメチルを１０ｍｌのジクロロメタン溶液に滴下し、−１８℃で保温した。その後、１５ｍｉｎ内で、１．４ｍｌのトリエチルアミンを滴下し、−１８℃〜−１１℃で保温した。室温で２ｈ撹拌し、１０％のリン酸二水素ナトリウム溶液で洗浄した（３Ｘ１０ｍｌ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後に濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、アセトンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）混合溶媒で溶離し、所望の溶離成分を収集して、Ｉ１９を０．４１ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．５９（ｓ，３Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２８（ｄ，３Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）。
【０１０１】
実施例２０  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−エトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２０）の製造
【化４４】
2016520070.tif 000046
【０１０２】
実施例１９の方法を参照し、Ｌ−アラニンメチルの代わりにＬ−アラニンエチルをＩＶ１と反応させ、反応生成物を１０％のリン酸二水素ナトリウム溶液で洗浄した（３Ｘ１０ｍｌ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後に濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、アセトンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、油状物を０．７３ｇ得て、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール（９５：５）混合溶媒で溶離し、所望の溶離成分を収集して、Ｉ１９を０．４１ｇ得た。類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２０を得、収率は１１．３％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．６２（ｍ，２Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２８（ｄ，３Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．１５（ｍ，３Ｈ）。
【０１０３】
実施例２１  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２１）及びその異性体の製造
【化４５】
2016520070.tif 000047
【０１０４】
２．８４ｇのＩＩＩ１を２０ｍｌのアセトニトリルに加えて、撹拌しながら、２．６ｇの塩化チオニルを滴下し、５０℃以下で保温した。反応混合物を７５℃で固体が溶解するまで加熱し、その後、８０℃まで加熱し、蒸発させ、ＩＶ１を得て、次の反応に直接に使用する。ＩＶ１を２０ｍｌの乾燥ジクロロメタンで溶解させ、−３０℃まで冷却し、３０ｍｉｎ内で、３．１ｇのＬ−アラニンメチルを２０ｍｌのジクロロメタン溶液に滴下し、−１８℃で保温した。その後、１５ｍｉｎ内で、２．８ｍｌのトリエチルアミンを滴下し、−１８℃〜−１１℃で保温した。室温で２ｈ撹拌し、１０％のリン酸二水素ナトリウム溶液で洗浄した（３Ｘ２０ｍｌ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後に濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、アセトンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させて、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：イソプロパノール（９５：５）混合溶媒で溶離し、所望の溶離成分を収集し、減圧蒸発させて、Ｉ２１を０．７５ｇ得た。
【０１０５】
Ｉ２１をキラル分取クロマトグラフィー（Ｄｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ）で分離させ、３０％メタノール含有のアセトニトリルで溶離し、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、９−［（Ｒ）−２−［［（Ｒ）−［［（Ｓ）−１−（イソプロポキシカルボニル）−エチル］−アミノ］−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２１−ａ）を０．３２ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、９−［（Ｒ）−２−［［（Ｓ）−［［（Ｓ）−１−（イソプロポキシカルボニル）−エチル］−アミノ］−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２１−ｂ）を０．３５ｇ得た。
【０１０６】
Ｉ２１−ａのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．７６（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２７（ｄ，３Ｈ）；１．２０（ｄ，３Ｈ）；１．１５（ｄ，６Ｈ）。
【０１０７】
Ｉ２１−ｂのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．７６（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２６（ｄ，３Ｈ）；１．２２（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【０１０８】
実施例２２  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニル−２−メチル−プロピルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２２）の製造
【化４６】
2016520070.tif 000048
【０１０９】
実施例１９の方法を参照し、Ｌ−アラニンメチルの代わりにＬ−バリンイソプロピルをＩＶ１と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２２を得、収率は１８．２％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．７６（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．０９−１．２８（ｍ，１６Ｈ）。
【０１１０】
実施例２３  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニル−３−メチル−ブチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２３）の製造
【化４７】
2016520070.tif 000049
【０１１１】
実施例１９の方法を参照し、Ｌ−アラニンメチルの代わりにＬ−ロイシンイソプロピルをＩＶ１と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２３を得、収率は１２．８％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．７６（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．０９−１．２８（ｍ，１８Ｈ）。
【０１１２】
実施例２４  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２４）の製造
【化４８】
2016520070.tif 000050
【０１１３】
実施例１９の方法を参照し、５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランの代わりに４−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランをＰＭＰＡと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（ＩＩＩ２）を得た。
【０１１４】
実施例１９の方法を参照し、ＩＩＩ１の代わりにＩＩＩ２を塩化チオニルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−モノクロロ−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（ＩＶ２）を得た。
【０１１５】
実施例１９の方法を参照し、ＩＶ１の代わりにＩＶ２をＬ−アラニンイソプロピルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、Ｉ２４を得、収率は１３．７％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，１Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，１Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，１Ｈ）；５．９７（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．６３（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．１２−１．２８（ｍ，１２Ｈ）。
【０１１６】
実施例２５  ９−［（Ｒ）−２−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−シクロヘキシルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−プロピル］−アデニン（Ｉ２５）の製造
【化４９】
2016520070.tif 000051
【０１１７】
実施例１９の方法を参照し、Ｌ−アラニンメチルの代わりにＬ−アラニンシクロヘキシルをＩＶ１と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２５を得、収率は１６．３％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０８（ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；７．３３（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．４１（ｍ，１Ｈ）；３．９２−３．９０（ｍ，２Ｈ）；３．７９−３．７７（ｄ，２Ｈ）；３．６４（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．５８（ｍ，４Ｈ）；１．１８−１．３９（ｍ，９Ｈ）。
【０１１８】
実施例２６  ２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロピルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−プリン（Ｉ２６）の製造
【化５０】
2016520070.tif 000052
【０１１９】
実施例１９の方法を参照し、ＰＭＰＡの代わりに２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［（ホスホノ−メトキシ）−エチル］−プリンを５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−ホスホノ］−メトキシ］−エチル］−プリン（ＩＩＩ３）を得た。
【０１２０】
実施例１９の方法を参照し、ＩＩＩ１の代わりにＩＩＩ３を塩化チオニルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、２−アミノ−６−（４−メトキシフェニルチオ）−９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−モノクロロホスホノ］−メトキシ］−エチル］−プリン（ＩＶ３）を得た。
【０１２１】
実施例１９の方法を参照し、ＩＶ１の代わりにＩＶ３をＬ−アラニンイソプロピルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、Ｉ２６を得、収率は１０．４％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．８９（ｓ，１Ｈ）；７．５４（ｄ，２Ｈ）；７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．９１（ｄ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．３５−４．３３（ｔ，２Ｈ）；３．９３−３．９１（ｔ，２Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．７８（ｄ，２Ｈ）；３．６３（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．１２−１．２８（ｍ，９Ｈ）。
【０１２２】
実施例２７  ９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロピルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−オキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（Ｉ２７）の製造
【化５１】
2016520070.tif 000053
【０１２３】
１５．３ｇのオキシ塩化リンと１３．８ｇの５−ヒドロキシベンゾジオキソランを２５０ｍｌの無水ジエチルエーテル溶液に加えて、アルゴンの保護下で、−７８℃まで冷却し、１３．４ｍｌのトリエチルアミンを滴下し、滴下終了後に−７８℃で３０分間撹拌し、その後、室温で一晩撹拌した。濾過し、濾液を減圧蒸発させて、ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドを得て使用に備える。
【０１２４】
２．６ｇの（０．０１ｍｏｌ）ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドと１．６ｇの（０．０１ｍｏｌ）Ｌ−アラニンイソプロピルを３０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解させ、−７８℃まで冷却した。撹拌しながら、２ｍｌのトリエチルアミンを２０ｍＬの無水ジクロロメタン溶液に滴下し、滴下速度を制御することにより、反応温度−７８℃を保持する。滴下終了後、反応温度が室温までゆっくり昇温した後、１時間撹拌し続けた。溶媒を減圧蒸発させ、残留物に３０ｍｌの無水ジエチルエーテルを加えて、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、無色の油状物を得、即ちホスファミド中間体Ｖ３であり、次の反応に直接に使用する。
【０１２５】
０．２２ｇのアシクロビルを５０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、７ｍｌのピリジンを加えて、窒素ガスを充填し、１ｍｌの１Ｍｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリドのＴＨＦ溶液を加えて、０．５ｈ撹拌し、撹拌しながら、２ｍｌの１Ｍ  Ｖ３のＴＨＦ溶液を加えて、２ｈ撹拌した。反応液に５０ｍｌのジクロロメタン、１００ｍｌの飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて抽出した後、有機層を取り出し、水層をジクロロメタンで抽出し（３Ｘ５０ｍｌ）、有機層を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、その後、無水硫酸マグネシウムで一晩乾燥させ、濾過し、濾液を減圧蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、ジクロロメタン：メタノール：トリエチルアミン（１００：５：１）混合溶媒で溶離し、所望の成分を収集し、蒸発後、目的化合物Ｉ２７を０．１５ｇ得た。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．１２−１．２８（ｍ，９Ｈ）。
【０１２６】
実施例２８  ９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−シクロヘキシルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−オキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（Ｉ２８）の製造
【化５２】
2016520070.tif 000054
【０１２７】
実施例２７の方法を参照し、Ｌ−アラニンイソプロピルの代わりにＬ−アラニンシクロヘキシルをベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、ホスファミド中間体Ｖ４を得て、次の反応に直接に使用する。
【０１２８】
Ｖ３の代わりにＶ４をアシクロビルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２８を得、収率は１４．２％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｍ，３Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．５５（ｍ，４Ｈ）；１．１５−１．３７（ｍ，９Ｈ）。
【０１２９】
実施例２９  ２−アミノ−６−メトキシ−９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロピルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−オキシ］−エトキシ］−メチル］−プリン（Ｉ２９）の製造
【化５３】
2016520070.tif 000055
【０１３０】
実施例２７の方法を参照し、アシクロビルの代わりに２−アミノ−６−メトキシ−９−［（２−ヒドロキシエトキシ）−メチル］−プリンをＶ３と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ２９を得、収率は１６．９％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；４．１−４．０（ｔ，２Ｈ）；３．７−３．６（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．１２−１．２８（ｍ，９Ｈ）。
【０１３１】
実施例３０  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−エトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（Ｉ３０）の製造
【化５４】
2016520070.tif 000056
【０１３２】
実施例２７の方法を参照し、Ｌ−アラニンイソプロピルの代わりにＬ−アラニンエチルをベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、ホスファミド中間体Ｖ５を得て、次の反応に直接に使用する。
【０１３３】
実施例２７の方法を参照し、Ｖ５とβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジンを反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３０を得、収率は１３．５％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３７（ｓ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．９５（ｄ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，３Ｈ）；３．６３−３．６０（ｍ，３Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．１２−１．２８（ｍ，９Ｈ）。
【０１３４】
実施例３１  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（Ｉ３１）及びその異性体の製造
【化５５】
2016520070.tif 000057
【０１３５】
４．５ｇのβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（済南中科一通化学工業有限公司製、純度９８％）を８０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、９ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、１０．５ｇのＶ３を加えて５０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３１−ａを０．２８ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３１−ｂを０．２３ｇ得た。
【０１３６】
Ｉ３１−ａのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３７（ｓ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．９５（ｄ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，３Ｈ）；３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．２０（ｄ，３Ｈ）；１．１５（ｄ，６Ｈ）。
【０１３７】
Ｉ３１−ｂのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３７（ｓ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．９５（ｄ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，３Ｈ）；３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２４（ｄ，３Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１４（ｄ，６Ｈ）。
【０１３８】
実施例３２  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−シクロヘキシルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチルウリジン（Ｉ３２）の製造
【化５６】
2016520070.tif 000058
【０１３９】
実施例２７の方法を参照し、２−アミノ−６−メトキシ−９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］−プリンとＶ４を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３２を得、収率は９．８％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３７（ｓ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．９５（ｄ，１Ｈ）；５．５１（ｄ，１Ｈ）；３．８２−３．７０（ｍ，３Ｈ）；３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．５５（ｍ，４Ｈ）；１．１５−１．３７（ｍ，１２Ｈ）。
【０１４０】
実施例３３  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−エトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（Ｉ３３）の製造
【化５７】
2016520070.tif 000059
【０１４１】
実施例２７の方法を参照し、Ｖ５とβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシンを反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３３を得、収率は２４．２％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，２Ｈ）；３．６２（ｍ，２Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１５（ｍ，３Ｈ）。
【０１４２】
実施例３４  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（Ｉ３４）及びその異性体の製造
【化５８】
2016520070.tif 000060
【０１４３】
６．０ｇのβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−・BR>N−メチルグアノシン（済南中科一通化学工業有限公司製、純度９８％）を８０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、９ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、１０．５ｇのＶ３を加えて５０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３４−ａを０．３１ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３４−ｂを０．２５ｇ得た。
【０１４４】
Ｉ３４−ａのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．２２（ｄ，３Ｈ）；１．１４（ｄ，６Ｈ）。
【０１４５】
Ｉ３４−ｂのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２４（ｄ，３Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【０１４６】
実施例３５  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−シクロヘキシルオキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（Ｉ３５）の製造
【化５９】
2016520070.tif 000061
【０１４７】
実施例２７の方法を参照し、５’−Ｏ−ホスホリル−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシンとＶ４を反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３５を得、収率は１３．０％である。Ｈ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．５５（ｍ，４Ｈ）；１．１５−１．３７（ｍ，１２Ｈ）。
【０１４８】
実施例３６  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−２’，３’−ジデオキシ−３’−チオシチジン（Ｉ３６）の製造
【化６０】
2016520070.tif 000062
【０１４９】
実施例２７の方法を参照し、アシクロビルの代わりにラミブジンをＶ３と反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３６を得た。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．６８（ｄ，１Ｈ）；７．２６（ｓ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．２３（ｔ，１Ｈ）；６．１１（ｍ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．７２（ｄ，１Ｈ）；５．３５（ｔ，１Ｈ）；４．２７（ｍ，２Ｈ）；３．８８（ｍ，１Ｈ）；３．６１（ｍ，１Ｈ）；３．４２（ｑ，１Ｈ）；３．０５（ｍ，２Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１２（ｄ，６Ｈ）。
【０１５０】
実施例３７  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−メトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−２’，３’−ジデオキシ−３’−チオシチジン（Ｉ３７）の製造
【化６１】
2016520070.tif 000063
【０１５１】
実施例２７の方法を参照し、Ｌ−アラニンイソプロピルの代わりにＬ−アラニンメチルをベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、ホスファミド中間体Ｖ６を得て、次の反応に直接に使用する。
【０１５２】
実施例２７の方法を参照し、Ｖ６とラミブジンを反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ３７を得、収率は２１．７％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．６８（ｄ，１Ｈ）；７．２６（ｓ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．２３（ｔ，１Ｈ）；６．１１（ｍ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．７２（ｄ，１Ｈ）；５．３５（ｔ，１Ｈ）；４．２７（ｍ，２Ｈ）；３．８８（ｍ，１Ｈ）；３．５８（ｓ，３Ｈ）；３．４２（ｑ，１Ｈ）；３．０５（ｍ，２Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）。
【０１５３】
実施例３８  ９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ−ホスホリル）−オキシメチル］−２−メチレンシクロペンチル］−グアニン（Ｉ３８）及びその異性体の製造
【化６２】
2016520070.tif 000064
【０１５４】
８．２５ｇのエンテカビルを８０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、９ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、１０．５ｇのＶ３を加えて５０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３９−ａを０．２８ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３９−ｂを０．２２ｇ得た。
【０１５５】
Ｉ３９−ａのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５１（ｂｓ，１Ｈ）；７．６３（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．０９（ｍ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０６（ｍ，１Ｈ）；４．８９（ｄ，１Ｈ）；４．８５−４．８３（ｍ，２Ｈ）；４．５２（ｍ，１Ｈ）；４．４０（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．０４（ｍ，１Ｈ）；１．１９（ｄ，３Ｈ）；１．１６（ｄ，６Ｈ）。
【０１５６】
Ｉ３９−ｂのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５４（ｂｓ，１Ｈ）；７．６７（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；５．９８−６．０３（ｍ，３Ｈ）；５．８０（ｍ，１Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０７（ｍ，１Ｈ）；４．８７−４．８３（ｍ，３Ｈ）；４．５８（ｍ，１Ｈ）；４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５０（ｍ，１Ｈ）；２．２１（ｍ，１Ｈ）；２．０３（ｍ，１Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【０１５７】
実施例３９  ９−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ−ホスホリル）−オキシメチル］−２−メチレンシクロペンチル］−グアニン（Ｉ３９）の製造
【化６３】
2016520070.tif 000065
【０１５８】
１５．３ｇのオキシ塩化リンと１３．８ｇの４−ヒドロキシベンゾジオキソランを２５０ｍｌの無水ジエチルエーテル溶液に加えて、アルゴンの保護下で、−７８℃まで冷却し、１３．４ｍｌのトリエチルアミンを滴下し、滴下終了後に−７８℃で３０分間撹拌し、その後、室温で一晩撹拌した。濾過し、濾液を減圧蒸発させて、ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドを得て使用に備える。
【０１５９】
２．６ｇ（０．０１ｍｏｌ）のベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ−ジクロロホスフィンオキシドと１．６ｇ（０．０１ｍｏｌ）のＬ−アラニンイソプロピルを３０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解させ、−７８℃まで冷却した。撹拌しながら、２ｍｌのトリエチルアミンを２０ｍＬの無水ジクロロメタン溶液に滴下し、滴下速度を制御することにより、反応温度−７８℃を保持する。滴下終了後、反応温度が室温までゆっくり昇温した後、１時間撹拌し続けた。溶媒を減圧蒸発させ、残留物に３０ｍｌの無水ジエチルエーテルを加えて、濾過した。濾液を減圧蒸発させ、無色の油状物を得、即ちホスファミド中間体Ｖ７であり、次の反応に直接に使用する。
【０１６０】
８．２５ｇのエンテカビルを８０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、９ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、１０．５ｇのＶ７を加えて５０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３９−ａを０．２７ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ３９−ｂを０．２０ｇ得た。
【０１６１】
Ｉ３９−ａのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５１（ｂｓ，１Ｈ）；７．６３（ｓ，１Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，１Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，１Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，１Ｈ）；６．０９（ｍ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０６（ｍ，１Ｈ）；４．８９（ｄ，１Ｈ）；４．８５−４．８３（ｍ，２Ｈ）；４．５２（ｍ，１Ｈ）；４．４０（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５２（ｍ，１Ｈ）；２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．０４（ｍ，１Ｈ）；１．１９（ｄ，３Ｈ）；１．１６（ｄ，６Ｈ）。
【０１６２】
Ｉ３９−ｂのＨ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：１０．５４（ｂｓ，１Ｈ）；７．６７（ｓ，１Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，１Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，１Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，２Ｈ）；５．９８−６．０３（ｍ，３Ｈ）；５．８０（ｍ，１Ｈ）；５．３２（ｍ，１Ｈ）；５．０７（ｍ，１Ｈ）；４．８７−４．８３（ｍ，３Ｈ）；４．５８（ｍ，１Ｈ）；４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．２３（ｍ，１Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；２．５０（ｍ，１Ｈ）；２．２１（ｍ，１Ｈ）；２．０３（ｍ，１Ｈ）；１．２１（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【０１６３】
実施例４０  ５’−［（（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−４−イル）−オキシ）−１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−β−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（Ｉ４０）及びその異性体の製造
【化６４】
2016520070.tif 000066
【０１６４】
６．０ｇのβ−Ｄ−２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−Ｃ−メチル−６−Ｏ−メチルグアノシン（済南中科一通化学工業有限公司製、純度９８％）を８０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、その後、９ｇのＮ−メチルイミダゾールを加えて、１０．５ｇのＶ７を加えて５０ｍｌのＴＨＦ溶液に溶解した。室温で一晩撹拌し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離させ、２％イソプロパノール含有のジクロロメタンで溶離し、所望の成分を収集し、減圧蒸発させた。残留物を２０％イソプロパノール含有のアセトニトリルで溶解させ、キラル分取クロマトグラフィーで分離させ、カラムはＤｉａｃｅｌ’ｓ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳであり、移動相は２０％イソプロパノール含有のアセトニトリル溶液であり、流速は８ｍｌ／ｍｉｎであり、第１の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ４０−ａを０．２２ｇ得、第２の主ピークを収集し、減圧蒸発させて、Ｉ４０−ｂを０．２４ｇ得た。
【０１６５】
Ｉ４０−ａのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，１Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，１Ｈ）；６．５３−６．５５（ｄ，１Ｈ）；６．５２（ｓ，２Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．２２（ｄ，３Ｈ）；１．１４（ｄ，６Ｈ）。
【０１６６】
Ｉ４０−ｂのＨ  ＮＭＲ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９８（ｓ，１Ｈ）；６．６７−６．７１（ｔ，１Ｈ）；６．５８−６．６０（ｄ，１Ｈ）；６．５２−６．５５（ｍ，３Ｈ）；６．０８−５．９２（ｍ，４Ｈ）；３．９１（ｓ，３Ｈ）；３．８５−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ）；１．２０（ｄ，３Ｈ）；１．１３（ｄ，６Ｈ）。
【０１６７】
実施例４１  ９−［［［（（（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−オキシ）−１−メトキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホリル］−オキシ］−エトキシ］−メチル］−グアニン（Ｉ４１）の製造
【化６５】
2016520070.tif 000067
【０１６８】
実施例２７の方法を参照し、Ｖ３の代わりにＶ６をアシクロビルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ４１を得、収率は２３．３％である。７．８３（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．６８（ｓ，１Ｈ）；６．５（ｂｓ，２Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；６．００−５．９３（ｍ，３Ｈ）；５．３６（ｓ，２Ｈ）；４．１３−４．０５（ｍ，２Ｈ）；３．８５−３．８０（ｍ，１Ｈ）；３．７２−３．６３（ｍ，２Ｈ）；３．５９（ｓ，３Ｈ）；１．２３−１．１９（ｍ，３Ｈ）。
【０１６９】
実施例４２  ［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−エステル−（１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホンアミド（Ｉ４２）の製造
【化６６】
2016520070.tif 000068
【０１７０】
実施例１９の方法を参照し、ＰＭＰＡの代わりに［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸を５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−モノエステル（ＩＩＩ４）を得た。
【０１７１】
実施例１９の方法を参照し、ＩＩＩ１の代わりにＩＩＩ４を塩化チオニルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、［（３，５−ジメチル−４−（４’−ヒドロキシ−３’−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−メチル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−モノエステルモノホスホニルクロライド（ＩＶ４）を得た。
【０１７２】
実施例１９の方法を参照し、ＩＶ１の代わりにＩＶ４をＬ−アラニンイソプロピルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ４２を得、収率は１５．５％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．９９（ｓ，１Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，１Ｈ）；６．７１（ｓ，１Ｈ）；６．６８−６．５３（ｍ，７Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，２Ｈ）；４．０３（ｄ，２Ｈ）；３．７７（ｓ，２Ｈ）；３．６３（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；３．０２（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，６Ｈ）；１．０５−１．２３（ｍ，１５Ｈ）。
【０１７３】
実施例４３  ［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−エステル−（１−イソプロポキシカルボニルエチルアミノ）−ホスホンアミド（Ｉ４３）の製造
【化６７】
2016520070.tif 000069
【０１７４】
実施例１９の方法を参照し、［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸ＰＭＰＡと５−ヒドロキシベンゾ［１，３］ジオキソランを反応させ、類似方法で処理して分離精製して、［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−モノエステル（ＩＩＩ５）を得た。
【０１７５】
実施例１９の方法を参照し、ＩＩＩ１の代わりにＩＩＩ５を塩化チオニルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、［５−［２−アミノ−５−（２−メチルプロピル）−チアゾール−４−イル］−フラン−２−イル］−ホスホン酸−（ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−モノエステルモノホスホニルクロライド（ＩＶ５）を得た。
【０１７６】
実施例１９の方法を参照し、ＩＶ１の代わりにＩＶ５をＬ−アラニンイソプロピルと反応させ、類似方法で処理して分離精製して、目的化合物Ｉ４３を得、収率は１１％である。Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．３２（ｂ，２Ｈ）；６．７７−６．７５（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｓ，２Ｈ）；６．５０（ｄ，１Ｈ）；６．４９−６．４７（ｄ，２Ｈ）；６．４５（ｄ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，４Ｈ）；３．６３（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；２．１１（ｄ，２Ｈ）；１．４３（ｍ，１Ｈ）；０．９８−１．２４（ｍ，１５Ｈ）。
【０１７７】
実施例４４  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗ＨＢＶ活性の選別
Ｈｅｐ  Ｇ  ２．２．１５細胞を９６ウェルプレートに接種し、細胞数３．５×１０４個であり、培養し、ＣＯ２インキュベーターに置いて、細胞密度が８０％となるまでインキュベーションし、培養液を捨て、濃度の異なる被検薬が含まれる新しい培養液を加えて、３つの平行ウェルを設定し、２日間おきに培養液を変更した。投与後の１０日目に、１００μｌの上清を取り出し、定量ＰＣＲ方法により、ＨＢＶ  ＤＮＡの含有量を測定し、ＩＣ５０値を計算した。結果は表１に示される。
【０１７８】
【表１】
2016520070.tif 000070
【０１７９】
実施例４５  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性の評価
Ｈｅｐ  Ｇ  ２．２．１５細胞を９６ウェルプレートに接種し、細胞数５．５×１０４個であり、３日間培養し続け、濃度の異なる薬物が含まれる新しい培養液を加えて、３つの平行ウェルを設定し、投与後の３日目に、ＭＴＴを７．５ｍｇ／ｍｌとなるまで加えて、２時間培養し続け、上清を捨て、１０％ツイーンＸ−１００含有イソプロパノールを１２０mｌ／ウェル加えて、更に、０．４mｌ／ウェル加えて、マイクロプレートリーダーを用いて５４０ｎｍにおける吸収を測定し、５０％ＣＣ５０値を計算した。結果は表２に示される。
【０１８０】
【表２】
2016520070.tif 000071
【０１８１】
実施例４６  肝臓標的性の評価
高速液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析法（ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いて、目的化合物をマウスに強制経口投与した後の様々な時点における血液と肝組織中の活性薬物（遊離ホスホン酸又は遊離リン酸）の濃度／含有量を測定し、肝臓薬物濃度／血中薬物濃度の比率を計算し、肝臓標的性を比較した。
【０１８２】
機器は、米国Ｆｉｎｎｉｇａｎ公司製の、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  Ｓｕｒｖｅｙｏｒ  ＬＣポンプ、Ｓｕｒｖｅｙｏｒ  ＡＳオートサンプラー、エレクトロスプレーイオン化電離源（ＥＳＩ）、及びトリプルタンデム質量分析計で構成されるＴＳＱ  Ｑｕａｎｔｕｍ型液体クロマトグラフィー−質量分析計（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）である。制御ソフトウェアはＸｃａｌｉｂｕｒ  １．４であり、質量分析データをＬｃｑｕａｎ  ２．０データ処理システムにより解析する。カラムはＤｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＯＤＳカラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）、Ｃ１８保護カラム（４ｍｍ×３．０ｍｍ）であり、移動相はメタノール−水−ギ酸（１０−３０：９０−７０：０．５、Ｖ／Ｖ／Ｖ）であり、流速は０．７ｍｌ／ｍｉｎであり、試料注入量は２０μＬであり、カラム温度は室温である。
【０１８３】
動物実験
１６ｈ断食した雄性Ｂａｌｂ／Ｃマウスを、各グループが３匹となるように３つのグループにランダムに分けて、それぞれホスホマイシン（２００ｍｇ／ｋｇ）又は等モル用量の目的化合物のカルボキシメチルセルロースナトリウム懸濁液を強制経口投与し、それぞれ投与後の１時間と６時間に採血し、遠心分離させて血清を取り出し、同時に肝組織を取り出してホモジェネートを製造し、遠心分離させて上清を取り出し、血液と肝組織中の活性薬物（遊離ホスホン酸又は遊離リン酸）の濃度／含有量を測定し、肝臓薬物濃度／血中薬物濃度の比率を計算した。結果は表３に示される。
【０１８４】
【表３】
2016520070.tif 000072
【０１８５】
実施例４７  抗ＣＣｌ４によるマウス肝損傷作用の評価
昆明マウス（２０ｇ）をグループ（各グループ８匹）にランダムに分けた。０．２ｍｍｏｌの被験化合物を経口投与し、投与１ｈ後、０．１％ＣＣｌ４のピーナッツ油溶液（１０ｍＬ／ｋｇ）を皮下注射し、肝損傷モデルを製造し、生理的食塩水を正常な対照群として注射した。モデル製造後の１２時間後、再び０．２ｍｍｏｌの被験化合物を経口投与した。二回目投与後の２４時間に、採血して血清試料を取り出し、ＡＬＴ、ＡＳＴを測定した。結果は表４に示される。
【０１８６】
【表４】
2016520070.tif 000073
【０１８７】
実施例４８  抗Ｄ−ガラクトサミンによるマウス肝損傷作用の評価
昆明マウス（２０ｇ）をグループ（各グループ８匹）にランダムに分けた。０．２ｍｍｏｌの被験化合物を経口投与し、投与２ｈ後に、７５０ｍｇ／ｋｇの用量でＤ−ガラクトサミンを腹腔内注射投与し、肝損傷モデルを製造し、生理的食塩水を正常な対照群として皮下注射した。モデル製造後の１２ｈ後、再び０．２ｍｍｏｌの被験化合物を経口投与した。二回目投与後の２４時間に、採血して血清試料を取り出し、ＡＬＴ、ＡＳＴを測定した。結果は表５に示される。
【０１８８】
【表５】
2016520070.tif 000074
【０１８９】
実施例４９  体内抗Ｂ型肝炎ウイルス作用の評価
垂直伝播で感染し、ＤＨＢＶ  ＤＮＡ検出が陽性となったツクシガモをグループ（各グループ５匹）にランダムに分けた。それぞれ水、及び用量の異なる被験化合物を強制経口投与し、毎日一回、１４日間投与した。それぞれ投与前、投与後の１４日目、及び投与中止後の７日目に静脈採血し、外部標準ＴａｑＭａｎリアルタイム蛍光ＰＣＲ法により、血清のＤＨＢＶ  ＤＮＡ含有量を測定し、溶媒群と比較し、抑制率を計算した。結果は表６に示される。
【０１９０】
【表６】
2016520070.tif 000075
【手続補正書】
【提出日】平成27年12月17日(2015.12.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2016520070.tif 000095
で示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物であって、
ただし、Ｒ１又はＲ２は、
【化２】
2016520070.tif 000096
Ｑ１はＬ−アミノ酸のエステル誘導体を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、Ｑ２はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキサン誘導体を表示し、Ｑ３はヒドロキシ基で置換されるベンゾジオキソール誘導体を表示し、Ｒ１又はＲ２は同一又は異なり、少なくとも一つがＱ２又はＱ３であり、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化３】
2016520070.tif 000097
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ１とＲ２が異なる場合、Ｒ１とＲ２に連結されるＰ原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置であり、
式Ｉで示される化合物におけるＤは、２’− アジド含有のヌクレオシド残基ではなく、且つ、２’− デオキシ−５−フルオロウリジン残基でもないと規定される、式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項２】
構造は、
【化４】
2016520070.tif 000098
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化５】
2016520070.tif 000099
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示する、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項３】
構造は、
【化６】
2016520070.tif 000100
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化７】
2016520070.tif 000101
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、
式Ｉで示される化合物におけるＤは、２’− デオキシ−５−フルオロウリジン残基ではないと規定される、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項４】
構造は、
【化８】
2016520070.tif 000102
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化９】
2016520070.tif 000103
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、ホスフィン／リン原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置であり、
式Ｉで示される化合物におけるＤは、２’− アジド含有のヌクレオシド残基ではないと規定される、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項５】
構造は、
【化１０】
2016520070.tif 000104
で示され、
ただし、Ｄはリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子の残基を表示し、即ち、
【化１１】
2016520070.tif 000105
はリン酸／ホスホン酸基を含む薬理学的活性分子を表示し、Ｒ３は炭素数１−６のアルキル基又はシクロアルキル基であり、Ｒ４はＨ又は炭素数１−６のアルキル基であり、ホスフィン／リン原子における置換基の立体配置はＲ配置又はＳ配置である、請求項１に記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物。
【請求項６】
【化１２】
2016520070.tif 000106
2016520070.tif 000107
2016520070.tif 000108
2016520070.tif 000109
2016520070.tif 000110
2016520070.tif 000111
2016520070.tif 000112
という構造から選ばれる、請求項１−５のいずれか一つに記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体。
【請求項７】
活性成分としての請求項１−６のいずれか一つに記載の式Ｉで示される化合物又はその薬学的に許容される塩又はその溶媒和物、及び一種又は複数種の薬学的な担体又は賦形剤を含む、薬物組成物。
【請求項８】
肝炎を治療する薬物を製造するための請求項１−６のいずれか一つに記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。
【請求項９】
ウイルス性肝炎を治療する薬物を製造するための請求項１−６のいずれか一つに記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。
【請求項１０】
高脂血症や高血糖症等の、肝臓代謝障害による疾患を治療する薬物を製造するための請求項１−６のいずれか一つに記載の式Ｉで示されるリン酸／ホスホン酸誘導体及びその非毒性薬学的に許容される塩及びその溶媒和物の用途。 
【国際調査報告】
2016520070.tif 000113
2016520070.tif 000114
2016520070.tif 000115
2016520070.tif 000116