(57)【要約】本発明は、式Ｉの化合物：【化１】2016536355.tif 000039またはその薬学的に許容される塩を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2016536355.tif 000037
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
【化２】
2016536355.tif 000038
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
患者における糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項１または請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項４】
患者における１型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項１または請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項５】
患者における２型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項１または請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項６】
療法に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項７】
糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項８】
１型糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項９】
２型糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
請求項１または請求項２に記載の化合物または塩を、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（新規尿素化合物）
本発明は、新規尿素化合物、その化合物を含む医薬組成物、その化合物を使用して生理的障害を治療する方法、ならびにその化合物の合成において有用な中間体およびプロセスに関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、糖尿病および他の疾患の治療、ならびに高血糖と関連した障害の分野におけるものである。糖尿病は高レベルの血中グルコースによって特徴づけられる疾患のグループである。２０１１年のＮａｔｉｏｎａｌ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ（Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）によれば、糖尿病は米国中のおよそ２５００万人に影響を与え、米国における死亡の第７位の主要原因でもある。ナトリウム共役グルコース・コトランスポーター（ＳＧＬＴ）は、炭水化物（グルコース等）の吸収に関与することが公知であるトランスポーターの１つである。より具体的には、ＳＧＬＴ１は小腸の刷子縁膜を横切るグルコースの輸送に関与する。ＳＧＬＴ１の阻害は、小腸においてグルコースの吸収の低減をもたらし、したがって糖尿病の治療への有用なアプローチを提供し得る。
【０００３】
特許文献１は、ＳＧＬＴ１および／またはＳＧＬＴ２の阻害活性を有する、１−（β−Ｄ−グリコピラノシル）−３で置換された窒素含有複素環式化合物を開示し、それは高血糖（糖尿病等）と関連した疾患の防止または治療のために有用なものとして更に開示される。加えて、特許文献２は、ＳＧＬＴ阻害剤であるインドール誘導体を開示し、それは糖尿病および関連する病態の治療または予防のために有用なものとして更に開示される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００８／０１３９４８４Ａ１号
【特許文献２】米国特許第７，８５１，６１７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
糖尿病のための代替の薬物および治療についての必要性がある。本発明は、糖尿病の治療のために好適であり得るＳＧＬＴ１の特定の新規阻害剤を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
したがって、本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
2016536355.tif 000002
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００７】
本発明は、患者における糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法も提供する。本発明は、患者における１型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法を更に提供する。加えて、本発明は、患者における２型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法を提供する。本発明は、患者における耐糖能異常（ＩＧＴ）、空腹時グルコース異常（ＩＦＧ）またはメタボリックシンドロームを治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法も提供する。
【０００８】
さらに、本発明は、療法に使用するため、特に糖尿病の治療のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。加えて、本発明は、１型糖尿病の治療に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。加えて、本発明は、２型糖尿病の治療に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明は、糖尿病の治療のための医薬品の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用も提供する。さらに、本発明は、１型糖尿病の治療のための医薬品の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。本発明は、２型糖尿病の治療のための医薬品の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用も提供する。本発明は、ＩＧＴ、ＩＦＧまたはメタボリックシンドロームの治療のための医薬品の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用も提供する。
【０００９】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、医薬組成物を更に提供する。本発明は、式Ｉの化合物の合成のための新規中間体およびプロセスも包含する。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本明細書において使用される場合、「治療する」または「治療すること」という用語は、既存の症状または障害の進行または重症度を、制止、減速、停止、または回復させることを含む。
【００１１】
本明細書において使用される場合、「患者」という用語は、哺乳動物（マウス、モルモット、ラット、イヌまたはヒト等）を指す。好ましい患者がヒトであることを理解されたい。
【００１２】
本明細書において使用される場合、「有効量」という用語は、患者への単一用量または複数用量投与に際して、診断または治療下で患者において所望される効果を提供する、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の量または用量を指す。
【００１３】
有効量は、公知の技法の使用によって、および類似の状況下で得られた結果を観察することによって、当業者としての担当診断医により容易に決定することができる。患者のための有効量の決定において、多数の要因が担当診断医によって考慮され、それらには、哺乳動物の種；そのサイズ、年齢および全体的な健康；関与する特定の疾患または障害；疾患または障害の程度または関与または重症度；個々の患者の応答；投与された特定の化合物；投与様式；投与された調製物の生物学的利用特性；選択された用量レジメン；併用医薬物の使用；ならびに他の関連する状況が含まれるが、これらに限定されない。
【００１４】
式Ｉの化合物は、幅広い投薬量範囲にわたって概して有効である。例えば、１日あたりの投薬量は、通常は約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内である。いくつかの実例において、前記範囲の下限よりも下の投薬量レベルが十分以上であってもよく、一方で他の事例において、あらゆる有害な副作用を引き起こさずにさらに多い用量を用いることができ、したがって上記の投薬量範囲は本発明の範囲を限定することを決して意図しない。
【００１５】
本発明の化合物は、好ましくは化合物を生体利用可能にする任意の経路によって投与される医薬組成物として製剤化される。最も好ましくは、かかる組成物は経口投与用である。かかる医薬組成物およびそれを調製するプロセスは当技術分野において周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ編、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、２００６年）を参照）。
【００１６】
本発明の更なる態様において、本化合物は、１種または複数の治療剤（抗糖尿病薬等）と組み合わせて投与される。組み合わせの投与には同時投与または連続投与が含まれる。加えて、組み合わせの同時投与は、単一の組み合わせ用量または各々の治療剤の別個の用量としてであってもよい。抗糖尿病剤の例には、メトホルミン；ＤＰＰＩＶ阻害剤（シタグリプチンまたはリナグリプチン等）；スルホニル尿素（グリメピリド等）；チアゾリジンジオン（ピオグリタゾン等）；基礎インスリン（グラルギン等）；速効型インスリン（ＨＵＭＡＬＯＧまたはＮＯＶＯＬＯＧ等）；ＧＬＰ−１アゴニスト（エクセナチドまたはリラグルチド等）；ＳＧＬＴ２阻害剤（ダパグリフロジンまたはエンパグリフロジン等）；グルカゴン受容体拮抗薬（ＬＹ２４０９０２１等）；および同種のものが含まれる。
【００１７】
以下の調製例、実施例およびスキームに例示されるように、式Ｉの化合物が調製される。試薬および出発材料は当業者に容易に利用可能である。すべての置換基は、特別の定めのない限り、今までに定義された通りである。これらのスキーム、調製例および実施例は、本発明の範囲に限定されるとは決して意図されないことが理解される。
【００１８】
分割の例には、選択的な結晶技法またはキラルクロマトグラフィーが含まれる（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９８１年、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ、「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９４年を参照）。式Ｉの個々のジアステレオマーもしくは幾何異性体または式Ｉをもたらす中間体の個々のジアステレオマーもしくは幾何異性体のクロマトグラフィー、キラルクロマトグラフィーまたは選択的な結晶化による、分離および単離は、合成における任意の好都合な点で起こり得ることは、当業者に更に明らかであろう。
【００１９】
本明細書において使用される場合、「δ」は、テトラメチルシランからのｐｐｍでの低磁場を指し、「ｍｉｎ」は分を指し、「ｈｒｓ」は時間を指し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを指し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを指し、「ＭｅＯＨ」はメタノールまたはメチルアルコールを指し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を指し、「ＤＰＰＡ」はジフェニルホスホリルアジドを指し、「ＨＡＴＵ」はＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファートを指し、「ＣＤＩ」は１，１’−カルボニルジイミダゾールを指し、「ＤＤＱ」は２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノンを指し、「Ｘｐｈｏｓ」は２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニルを指し、「ＭＴＢＥ」はメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを指し、「ｍｉｎｓ」は分を指し、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィーを指し、「Ａｃ」は、以下の構造：
【化２】
2016536355.tif 000003
のアセチル置換基を指し、「ＢＯＣ」という用語はｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を指す。
【００２０】
薬学的に許容される塩およびそれらの調製のための一般的な方法論は当該技術分野において周知である。例えばＧｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．、「Ｓａｌｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ」、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、３３：２０１−２１７（１９８６）；Ｂａｓｔｉｎら、「Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ」、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、４：４２７−４３５（２０００）；およびＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｖｏｌ．６６、Ｎｏ．１、１９７７年１月を参照されたい。合成分野の当業者は、アミンとしての式Ｉの化合物が有機塩基であり、それらは当業者に周知の技法および条件を使用して容易に転換され、薬学的に許容される塩として単離されることを認識するだろう。
【化３】
2016536355.tif 000004
【００２１】
調製例１
３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−１Ｈ−インドール
【化４】
2016536355.tif 000005
スキームＩ、工程Ａ：ＴＦＡ（１１４．４ミリモル）を、氷浴中で前冷却されたジクロロメタン（１０ｍＬ）中の４−ブロモベンズアルデヒド（７６．２ミリモル）、４−メチルインドール（７６．２ミリモル）およびトリエチルシラン（２２８．４ミリモル）の溶液へ添加する。混合物を室温に加温し、２時間撹拌する。追加のトリエチルシラン（２２８．４ミリモル）を添加し、混合物を油浴中で３０℃で一晩加温する。反応物を水（１００ｍＬ）により希釈し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）により抽出する。有機相を分離し、水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。石油エーテル中の０〜１０％の酢酸エチルにより溶出するシリカゲル（１２０ｇのカートリッジ）上でのフラッシュクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物（８ｇ、２６．６ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０１（Ｍ＋１）
【００２２】
調製例２
３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドリン
【化５】
2016536355.tif 000006
スキームＩ、工程Ｂ：シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１３．３ミリモル）を、酢酸（２０ｍＬ）中の３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−１Ｈ−インドール（２６．６ミリモル）の溶液へ添加し、室温で一晩撹拌する。反応物を水（２００ｍＬ）により希釈し、ｐＨ＝６が達成されるまで重炭酸ナトリウムを添加する。酢酸エチル（３×１００ｍＬ）により抽出し、合わせた有機層を水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄する。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。石油エーテル中の０〜１５％の酢酸エチルにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって精製して、表題化合物（２．２ｇ、７．３ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ＋１）。
【００２３】
調製例３
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドリン−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化６】
2016536355.tif 000007
スキームＩ、工程Ｃ：［（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−３，４，５，６−テトラアセトキシテトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１０．６ミリモル）および３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドリン（１０．６ミリモル）を、メタノール（８０ｍＬ）中の酢酸（６９．８ミリモル）の溶液へ添加する。室温で一晩撹拌する。ガラスフリットを介して反応混合物を濾過し、メタノール（２×１０ｍＬ）により濾過ケーキを洗浄する。真空下で濾過ケーキを乾燥して、表題化合物（２．３ｇ、３．６ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：６３２（Ｍ＋Ｈ）。
【００２４】
調製例４
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化７】
2016536355.tif 000008
スキームＩ、工程Ｄ：酸化マンガン（ＩＶ）（１７２．５ミリモル）を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドリン−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（５．８５ミリモル）の溶液へ添加する。室温で４８時間撹拌する。珪藻土を介して反応物を濾過し、減圧下で濃縮する。粗製生産物をジクロロメタン／メタノール（１０：１で３０ｍＬ）により処理し、１５分間撹拌する。もたらされた沈殿物を濾過し、濾過ケーキをメタノール（２×１０ｍＬ）によりすすぐ。真空下で濾過ケーキを乾燥して、無色の固体として表題化合物（２．５ｇ、３．９７ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：６３０（Ｍ＋Ｈ）。
【００２５】
調製例５
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−ヒドロキシブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化８】
2016536355.tif 000009
スキームＩ、工程Ｅ：［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１．６７ミリモル）、３−ブテン−１−オール（５ミリモル）、トリエチルアミン（３５．８ミリモル）およびアセトニトリル（１０ｍＬ）を合わせ、窒素により１０分間パージする。この混合物へ、酢酸パラジウム（０．１７ミリモル）およびトリ−ｏ−トリルホスフィン（０．３３ミリモル）を添加する。この混合物を８０℃で２時間加熱し、次いで室温に冷却する。酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）により希釈する。有機相を分離し、ブライン（５０ｍＬ）により洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。ジクロロメタン中の５〜８０％の酢酸エチルにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって精製して、黄褐色泡状物として表題化合物（０．８ｇ、１．２ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：６２２．０（Ｍ＋Ｈ）。
【化９】
2016536355.tif 000010
【００２６】
調製例６
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［４−メチル−３−［［４−［（Ｅ）−４−メチルスルホニルオキシブト−１−エニル］フェニル］メチル］インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化１０】
2016536355.tif 000011
スキームＩＩ、工程Ａ：室温にてジクロロメタン（５０ｍＬ）およびトリエチルアミン（３．６ミリモル）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−ヒドロキシブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１．２ミリモル）の溶液へ、メタンスルホニルクロリド（１．５６ミリモル）を５分間にわたって滴加する。室温で１時間撹拌し、次いで反応物をジクロロメタン（１００ｍＬ）により希釈する。有機層を、水（２×１００ｍＬ）、続いてブライン（１００ｍＬ）により洗浄する。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、淡黄色泡状物として表題化合物（０．８４ｇ、１．２ミリモル）を得る。更なる精製なしで次の工程（スキームＩＩ、工程Ｂ）においてこの材料を使用する。
【００２７】
調製例７
１−［２−（４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル）−２−オキソ−エチル］−３−イソブチル尿素
【化１１】
2016536355.tif 000012
【００２８】
ベンジル２−（イソブチルカルバモイルアミノ）アセテートの調製
【化１２】
2016536355.tif 000013
３−メチルブタン酸（１０６．３６ｇ）、トルエン（８００ｍｌ）およびトリエチルアミン（１２６．４６ｇ）を三つ首フラスコ（Ｒ１）に充填する。Ｒ１を９０℃で加熱する。トルエン（４００ｍｌ）中のＤＰＰＡ（２８９．３ｇ）の溶液を徐々に添加する（注意：Ｎ２が放出される）。Ｒ１を９０℃で３０〜６０分間撹拌し、次いで２０〜３０℃に冷却する。別個のフラスコ（Ｒ２）中に、ベンジル２−アミノアセテート塩酸塩（２００ｇ）、トリエチルアミン（１５０．５４ｇ）およびトルエン（１０００ｍｌ）を充填し、２０〜３０℃で１〜２時間撹拌する。Ｒ１混合物をＲ２の中へ添加漏斗を介して２０〜３０℃で徐々に滴加して、１〜２時間撹拌する。反応混合物を水（２０００ｍｌ）へ激しく撹拌しながら徐々に添加する。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１０００ｍｌ）により抽出する。有機層を合わせ、１Ｎ塩酸（１０００ｍｌ）、次いで７％ＮａＨＣＯ３水溶液（１０００ｍｌ）、次いで水（１０００ｍｌ）、次いで１５％ブライン（１０００ｍｌ）により洗浄する。減圧下で濃縮する。残留物をヘプタン（１０００ｍｌ）によりスラリー化し、次いで固体を濾過する。４０℃未満の減圧下で濾過ケーキを乾燥して、ベンジル２−（イソブチルカルバモイルアミノ）アセテート（２１８ｇ；９８．１％アッセイ；８１．５％収率）を得る。
【００２９】
２−（イソブチルカルバモイルアミノ）酢酸の調製
【化１３】
2016536355.tif 000014
ベンジル２−（イソブチルカルバモイルアミノ）アセテート（２００ｇ；９８．１％アッセイ）、無水Ｐｄ／Ｃ（２０ｇ；１０％ｗ／ｗ）およびイソプロピルアルコール（２０００ｍｌ）をオートクレーブの中へ充填する。真空下で脱気し、水素により３回パージする。５０〜６０ｐｓｉのＨ２下で６０℃で４時間撹拌する。混合物を２０〜３０℃に冷却し、珪藻土を介して濾過し、濾液を４５〜５０℃で減圧下で１〜２体積へ濃縮する。アセトニトリル（１０００ｍｌ）を添加し、４５〜５０℃で減圧下で２〜３体積へ濃縮する。混合物を５〜１０℃に冷却し、濾過する。４５〜５０℃で減圧下でケーキを乾燥して、２−（イソブチルカルバモイルアミノ）酢酸（１１２ｇ；９５．２％アッセイ；８２．５％収率）を得る。
【００３０】
最終的な表題化合物の調製
ｔｅｒｔ−ブチル４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート塩酸塩（１．３８ミリモル）、２−（イソブチルカルバモイルアミノ）酢酸（１．１５ミリモル）、ジメチルホルムアミド（３．８ｍＬ）、トリエチルアミン（１．７２ミリモル）およびＨＡＴＵ（１．２６ミリモル）を、丸底フラスコへ添加する。室温で１６時間撹拌し、次いで水（５０ｍＬ）および酢酸エチル（５０ｍＬ）により希釈する。有機相を、濃塩化アンモニウム（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。酢酸エチル中の０〜１０％のメタノールにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって中間体を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル９−［２−（イソブチルカルバモイルアミノ）アセチル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシレート（０．３８ｇ、０．９３ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１１．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００３１】
１，４−ジオキサン（１．７５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル９−［２−（イソブチルカルバモイルアミノ）アセチル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシレート（０．３８ｇ、０．９３ミリモル）の溶液へ、１，４−ジオキサン（８．７７ミリモル）中の４ＭのＨＣｌを添加する。反応物を室温で５時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮する。メタノール中に溶解し、ＳＣＸ（イオン交換）カラムの中へ負荷することによって、残留物を精製する。負荷したカラムをメタノール（３×２５ｍＬ）によりすすぎ、次いでカラムをメタノール中の２Ｎアンモニアによりフラッシュする。アンモニア洗浄物を合わせて濃縮して、最終的な表題化合物、１−［２−（４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル）−２−オキソ−エチル］−３−イソブチル−尿素（０．２５ｇ、０．８１ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１１．０（Ｍ＋Ｈ）。
【００３２】
実施例１ａ
１−イソブチル−３−［２−［４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］−２−オキソ−エチル］尿素
【化１４】
2016536355.tif 000015
【００３３】
スキームＩＩ、工程Ｂ：アセトニトリル（２．５ｍＬ）中の１−［２−（４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル）−２−オキソ−エチル］−３−イソブチル−尿素（０．２１ミリモル）の溶液へ、［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［４−メチル−３−［［４−［（Ｅ）−４−メチルスルホニルオキシブト−１−エニル］フェニル］メチル］インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（０．１７ミリモル）、続いてジイソプロピルエチルアミン（０．６９ミリモル）を添加する。密封した反応混合物を８０℃で１６時間加熱する。減圧下で粗製反応物を濃縮し、次いで粗製中間体をメタノール（５ｍＬ）中で溶解し、ナトリウムメトキシド（メタノール中の３０％溶液として０．５３ミリモル）を添加する。室温で１時間撹拌し、次いでドライアイスの小片の添加によって反応物をクエンチする。減圧下で粗製反応物を濃縮する。５〜７０％の水（０．１％ギ酸）／アセトニトリル（０．１％ギ酸）により溶出するフラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇのＣ１８カラム）によって精製する。画分を含有する生産物を合わせて、減圧下で濃縮する。生産物を水（５０ｍＬ）中で溶解し、水相を濃重炭酸ナトリウムにより中和する。水相をデカントし、残りの油をジクロロメタン／メタノール（１０：１で５０ｍＬ）中で溶解する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、オフホワイトの泡状物として表題化合物（０．０８ｇ、０．６３ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：７４６．５（Ｍ＋１）。
【化１５】
2016536355.tif 000016
【００３４】
調製例９
ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート
【化１６】
2016536355.tif 000017
【００３５】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−クロロプロピル）−４−シアノ−ピペリジン−１−カルボキシレートの調製
【化１７】
2016536355.tif 000018
１７８０ｇのＴＨＦおよび８６．６ｇのジイソプロピルアミンをＲ１に充填する。Ｒ１中の混合物を−４０℃〜−６０℃に冷却する。２１０．５ｇのｎ−ＢｕＬｉ（１．６当量）をＲ１の中へ滴加し、混合物を０．５〜１時間撹拌する。８９０ｇのＴＨＦ、次いで１００．０ｇのｔｅｒｔ−ブチル４−シアノピペリジン−１−カルボキシレートをＲ２の中へ充填する。Ｒ２中のｔｅｒｔ−ブチル４−シアノピペリジン−１−カルボキシレートの溶液をＲ１へ滴加し、温度を−４０℃〜−６０℃にて制御する。Ｒ１中の混合物を１〜２時間撹拌する。８９０ｇのＴＨＦおよび１３０．５ｇの１−ブロモ−３−クロロ−プロパンをＲ２の中へ充填する。Ｒ２中の１−ブロモ−３−クロロ−プロパンの溶液をＲ１へ滴加し、温度を−４０℃〜−６０℃にて制御する。Ｒ１中の混合物を３時間−４０〜−６０℃で撹拌し、次いで混合物を２０〜２５℃へ徐々に加温し、１３〜１６時間撹拌する。混合物を０〜５℃に冷却する。５２５ｇのＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）、次いで５００ｇの水をＲ１の中へ滴加する。混合物を全重量１０００〜１１００ｇへ４０℃未満で濃縮し、次いで３８０ｇのＭＴＢＥを添加する。混合物を１０〜２０℃で２０〜４０分間撹拌し、次いで３０〜６０分間静置させる。水層を分離し、２×５００ｇのＨ２Ｏにより有機層を洗浄する。混合物を３００ｇの全重量へ５０℃未満で濃縮する。１３６ｇのｎ−ヘプタンを添加し、次いで混合物を３００ｇの全重量へ５０℃未満で濃縮する。混合物を０〜５℃に冷却し、次いで３４０ｇのｎ−ヘプタンを滴加する。混合物を５〜１０時間撹拌し、次いで懸濁物を濾過する。６８．０ｇのｎ−ヘプタンによりフラスコをすすぎ、次いでケーキを洗浄して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−クロロプロピル）−４−シアノ−ピペリジン−１−カルボキシレート（１１８ｇ、８７．２％アッセイ、７５．４％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２３１（Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）。フラスコへケーキを移し、６１０．０ｇのトルエンを添加する。混合物を５００ｇの全重量へ５０℃未満で濃縮する。必要とされるまで、生産物をトルエン溶液として保存する。
【００３６】
ｔｅｒｔ−ブチル４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレートの調製
【化１８】
2016536355.tif 000019
４３５ｇのトルエン、次いで３０２．１ｇのナトリウムビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウム水素化物をＲ１へ充填する。混合物を−５℃〜５℃に冷却する。６５２．５ｇのトルエンおよび５０ｇのｔｅｒｔ−ブチル４−（３−クロロプロピル）−４−シアノ−ピペリジン−１−カルボキシレートをＲ２の中へ充填し、透明になるまで混合物を撹拌する。Ｒ２中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−クロロプロピル）−４−シアノ−ピペリジン−１−カルボキシレートの溶液をＲ１へ滴加し、温度を５℃未満で制御する。Ｒ１中の混合物を−５℃〜５℃で０．５時間撹拌し、次いで混合物を１５〜２０℃に加温し、１〜３時間撹拌する。２５ｇの炭酸ナトリウムをＲ２へ充填し、次いで１５００ｇの水を添加し、０〜１０℃に混合物を冷却する。Ｒ１中の混合物をＲ２へ滴加し、温度を１０℃未満で制御する。混合物を２０〜４０℃に加温し、１０〜２０分間撹拌し、次いで４０〜６０分間静置させる。水層を分離し、有機層を、２×２５０ｇの水、次いで２９７．５ｇの２５％塩化ナトリウム水溶液により洗浄する。有機層を１００ｇの全重量へ５０℃未満で濃縮し、次いで２７３．０ｇのアセトニトリルを添加する。有機層を、２５０ｇの全重量の表題化合物、ｔｅｒｔ−ブチル４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレートへ５０℃未満で濃縮し、溶液として保存する。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２５５（Ｍ＋Ｈ）。
【００３７】
ｔｅｒｔ−ブチル４−ブト−３−イニル−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート；シュウ酸の調製
【化１９】
2016536355.tif 000020
【００３８】
２３．７ｇのＣＨ３ＣＮ、１０ｇのｔｅｒｔ−ブチル４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート、９．２ｇのＫ２ＣＯ３、次いで８．４ｇの４−ブロモブト−１−インをこの順序でＲ１へ充填する。混合物を６５〜７０℃へ加熱し、混合物を６５〜７０℃で１２〜１８時間撹拌する。混合物を全重量３０〜４０ｇへ５０℃未満で濃縮し、次いで７６ｇのＭＴＢＥおよび５０ｇの水を添加する。混合物を２０〜２５℃で３０分間撹拌し、次いで３０分間静置させる。水層を分離する。４９ｇの水中の１ｇのＫＯＨの溶液を調製し、これを２０〜２５℃で有機層へ添加する。混合物を２０〜２５℃で３０分間撹拌し、次いで２０〜２５℃で２０〜３０分間静置させる。水層を分離させ、有機層を５０ｇの水により洗浄する。有機相を４０〜５０ｇの全重量へ５０℃未満でＲ１中で濃縮する。３９．５ｇのアセトン中の７．４ｇのシュウ酸二水和物の溶液を調製し、次いで２０〜２５℃でシュウ酸／アセトン溶液をＲ１の中へ滴加する。懸濁物を２０〜２５℃で２〜３時間撹拌し、次いで濾過する。ケーキを１５．２ｇのＭＴＢＥにより洗浄する。ケーキを８９ｇのＴＨＦ中でスラリー化し、混合物を５０℃で６〜８時間撹拌する。混合物を２０〜２５℃に冷却し、濾過する。ケーキを１７．８ｇのＴＨＦにより洗浄する。再び、ケーキを８９ｇのＴＨＦ中でスラリー化し、混合物を５０℃で６〜８時間撹拌する。混合物を２０〜２５℃に冷却し、濾過する。ケーキを１７．８ｇのＴＨＦにより洗浄する。真空下でケーキを５０〜６０℃で１６〜１８時間乾燥して、表題化合物、ｔｅｒｔ−ブチル４−ブト−３−イニル−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート；シュウ酸を得る。
【００３９】
最終的な表題化合物の調製
ｔｅｒｔ−ブチル４−ブト−３−イニル−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート；シュウ酸（２．５６モル；１．０２ｋｇ）、水酸化カリウム（１０％ｗ／ｗ水溶液；７．６９モル；４．３１ｋｇ）およびＭＴＢＥ（３４．１９モル；４．０６Ｌ；３．０１ｋｇ）を、底部出口弁を備えた２０Ｌの容器に充填する。２つの透明な相が形成されるまで、混合物を撹拌する。有機層を除去し、水層をＭＴＢＥ（１．５Ｌ）により抽出する。有機層を合わせ、水（４Ｌ）、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液（４Ｌ）により洗浄し、減圧下で濃縮する。トルエン（２Ｌ）を残留物へ添加し、減圧下で濃縮する。再び、トルエン（２Ｌ）を残留物へ添加し、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル８−ブト−３−イニル−３，８−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−カルボキシレート（７８７ｇ；約２％ｗ／ｗトルエンを含有；９８％収率）を得る。
【００４０】
ｔｅｒｔ−ブチル８−ブト−３−イニル−３，８−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−カルボキシレート（２．４１モル；７５０．８６ｇ）、塩化ジルコノセン（２４０．７３ミリモル；６２．０８ｇ）、トリエチルアミン（２４０．７３ミリモル；３３．５５ｍＬ；２４．３６ｇ）および２−メチルテトラヒドロフラン（７３８ｍＬ）の混合物へ、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２．５３モル；３２３．４９ｇ）を添加する。６０℃で混合物を加熱し、一晩撹拌する。混合物を冷却し、ジクロロメタンにより溶出するシリカのプラグを通過させる。減圧下で濾液を濃縮して、最終的な表題化合物、ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（１０７２ｇ、約９４％純度、９６％収率）を得る。
【００４１】
最終的な表題化合物の代替の調製
ｔｅｒｔ−ブチル４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート塩酸塩（４６．０７ミリモル）および炭酸セシウム（１１５．２ミリモル）を、アセトニトリル（２００ｍＬ）の溶液へ添加する。室温で２０分間撹拌した後に、４−ブロモブチン（６９．１ミリモル）を添加し、混合物を撹拌しながら一晩加熱還流する。室温に冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）により希釈する。反応物をガラスフリットを介して濾過し、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）によりすすぐ。減圧下で粗製混合物を濃縮し、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、有機層を水（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）により洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製ｔｅｒｔ−ブチル４−ブト−３−イニル−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（１３．６ｇ、４４．４ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０７．２（Ｍ＋Ｈ）。窒素下で丸底フラスコへ、ｔｅｒｔ−ブチル４−ブト−３−イニル−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（４４．４ミリモル）、トリエチルアミン（４．４４ミリモル）、塩化ジルコノセン（４．４４ミリモル）および４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（４８．８ミリモル）を添加する。この混合物を６０℃で３時間加熱し、次いで室温で一晩撹拌する。混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）中で溶解し、ヘキサン中の１５〜８５％の酢酸エチルにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（３３０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって精製して、最終的な表題化合物、ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（２９．９ミリモル）を淡黄色油として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００４２】
調製例１０
ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート
【化２０】
2016536355.tif 000021
スキームＩＩＩ、工程ａ：［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（２７．８ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（２９．９ミリモル）、および炭酸カリウム（８３．３ミリモル）を、ＴＨＦ（１５ｍＬ）および水（２０ｍＬ）の溶液へ添加する。溶液を窒素によりパージし、次いで酢酸パラジウム（１．１ミリモル）およびＸｐｈｏｓ（１．１ミリモル）を添加する。混合物を６５℃で１６時間加熱する。室温に冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）により希釈する。有機相を分離し、水（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）により洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。ジクロロメタン中の１０〜１００％の酢酸エチルにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（３３０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって残留物を精製して、表題化合物（１９．４ｇ、２２．６ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：８５８．０（Ｍ＋Ｈ）。
【００４３】
調製例１１
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−［９−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）アセチル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル］ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化２１】
2016536355.tif 000022
【００４４】
スキームＩＩＩ、工程Ｂ：１，４−ジオキサン（１１２．５ミリモル）中の４ＮのＨＣｌを、ジクロロメタン（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（２２．５ミリモル）の溶液へ室温で添加する。３時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮して、粗製［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−（４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル）ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩（２２．５ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：７５８．０（Ｍ＋Ｈ）。トリエチルアミン（１１２．５ミリモル）を、ジクロロメタン（２００ｍＬ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−（４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル）ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩（２２．５ミリモル）の溶液へ添加する。別個のフラスコ中で、ＣＤＩ（２８．１ミリモル）を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中の２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）酢酸（２７ミリモル）の溶液へ少量ずつ添加する。室温で４５分間撹拌した後に、以前に調製したアミン溶液へ溶液を添加し、室温で１時間撹拌する。濃重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍｌ）により洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製表題化合物（２１．６ｇ、２２．５ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：９１５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【化２２】
2016536355.tif 000023
【００４５】
調製例１２
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−［９−（２−アミノアセチル）−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル］ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩
【化２３】
2016536355.tif 000024
スキームＩＶ、工程Ａ：１，４−ジオキサン（１１３．３ミリモル）中の４ＮのＨＣｌを、ジクロロメタン（２００ｍＬ）中の粗製［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−［９−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）アセチル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル］ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（２２．５ミリモル）の溶液へ添加する。室温で４．５時間撹拌し次いで減圧下で濃縮して、黄褐色固体として粗製表題化合物（２２．６ｇ、２２．５ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：８１５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００４６】
実施例１ｂ
１−イソブチル−３−［２−［４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］−２−オキソ−エチル］尿素の代替合成
【化２４】
2016536355.tif 000025
スキームＩＶ、工程Ｂ：イソブチルイソシアネート（３０．６ミリモル）を、ジクロロメタン（３００ｍＬ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−［９−（２−アミノアセチル）−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル］ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩（２２．５ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（１１３．３ミリモル）の溶液へ添加し、０℃に冷却する。室温に加温し、２時間撹拌する。水（２００ｍＬ）により希釈し、有機相を分離する。有機相をブライン（２００ｍＬ）により洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。メタノール（１００ｍＬ）およびナトリウムメトキシド（１１．３ミリモル）を添加する。室温で１６時間撹拌し、次いでドライアイスの小片の添加によってクエンチする。減圧下で濃縮する。５〜８０％の水（０．１％ギ酸）中のアセトニトリル（０．１％ギ酸）により３部で溶出するフラッシュクロマトグラフィー（４００ｇのＣ１８カートリッジ）によって精製する。減圧下で濃縮して少量の不純物を含有するギ酸塩として表題化合物（１３．４ｇ、１８ミリモル）を得る。塩（１２ｇ）を水（５００ｍＬ）中で溶解する。溶液を濃重炭酸ナトリウム溶液により中和する。もたらされた沈殿物をガラスフリット上で収集し、水（２×１００ｍＬ）によりすすぐ。ジクロロメタン中の１５％のメタノールにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（３３０ｇのシリカゲルカートリッジ）によって精製する。減圧下で生産物画分を濃縮して、表題化合物（８．８ｇ、１１．８ミリモル）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：７４６．６（Ｍ＋Ｈ）．Ｈ１  ＮＭＲ（４００．３１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．０７（ｓ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３５（ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２６（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１５（ｄｔ，Ｊ＝１６．０，６．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），５．２９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０９（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．０Ｈｚ，２Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｔ，５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｂｓ，２Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｍ，２Ｈ），３．５９−３．１５（ｍ，１１Ｈ），３．１２（ｄ，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．７６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．３４−２．０８（ｍ，９Ｈ），１．６１−１．１７（ｍ，１０Ｈ）．０．７８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）
【化２５】
2016536355.tif 000026
【００４７】
調製例１３
４−メチルインドリン
【化２６】
2016536355.tif 000027
方法Ａ
スキームＶ、工程Ａ：４−メチル−１Ｈ−インドール（５００ｇ；１．０当量；３．８１１モル）および酢酸（２０００ｍＬ）を、２０Ｌのフラスコへ室温で充填する。０℃（内部温度）に溶液を冷却し、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３５９．２ｇ；１．５当量；５．７１モル）を５つの等しい部分で添加するが、反応混合物が１０℃を超えて加温しないようにする。添加が完了した時に、反応混合物を室温で２時間撹拌する。反応混合物を０℃に冷却し、氷（５ｋｇ）を添加する。水酸化ナトリウム（４Ｍ）の前冷却した（５℃）溶液を非常にゆっくり添加して、ｐＨ１４の反応混合物を達成する。反応混合物を酢酸エチル（２×１０Ｌ）により抽出する。有機層を合わせて、水（１×１０Ｌ）およびブライン（１×１０Ｌ）により洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（４６０ｇ、９０％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１３４（Ｍ＋１）。
【００４８】
方法Ｂ
スキームＶ、工程Ａ：トリフルオロ酢酸（７．６２モル；５７６．４２ｍＬ）を、温度計、磁性撹拌機、窒素ラインおよび滴下漏斗を備えた、２０００ｍＬの三つ首フラスコへ充填する。氷／水浴中にフラスコを設置し、混合物を１３℃（内部温度）に冷却する。４−メチル−１Ｈ−インドール（７６２．３３ミリモル；９４．２５ｍＬ；１００．００ｇ）を３分間にわたって添加し、反応混合物の温度が２５℃を上回らないようにする。添加が完了した後に混合物を約１分間撹拌し、反応混合物の温度が２０℃を達成するようにし、次いでフラスコを氷浴から除去し、２０℃で１０分間撹拌する。トリエチルシラン（８７６．６８ミリモル；１４０．４７ｍＬ；１０１．９４ｇ）を、反応物へ４１分間にわたって滴加し、温度が２５℃に上昇するようにし、次いで必要に応じて冷水浴を使用して、２５℃〜３０℃の間の温度を維持する。添加が完了した時に、反応混合物を８０分間撹拌する。反応混合物を１０℃に冷却し、次いで氷（１０００ｇ）、５Ｍ塩酸（８００ｍｌ）およびＭＴＢＥ（２０００ｍｌ）の混合物の中へ撹拌しながら注ぐ。二相性系の中でクエンチして不純物の形成を防止することが重要であることに注意されたい。水相を分離し、有機相を塩酸（４００ｍｌ；２Ｍ）、次いで塩酸（２×２００ｍｌ；２Ｍ）により抽出する。水性抽出物を合わせ、氷水中で冷却する。５０％ｗ／ｗのＮａＯＨを添加してｐＨ＞１０を達成し、３０℃未満の温度を維持する。水溶性混合物をＭＴＢＥ（１０００ｍｌ、次いで２００ｍｌ）により抽出する。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（７３ｇ；６８％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１３４（Ｍ＋１）。
【００４９】
方法Ｃ
スキームＶ、工程Ａ：テトラヒドロフラン（７５．００ｍＬ）中の４−メチル−１Ｈ−インドール（１１４．３５ミリモル；１５．００ｇ）の溶液を、水（７５．００ｍＬ）中のｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１３７．２２ミリモル；２３．６３ｇ）の溶液へ室温で撹拌しながら添加する。二酸化炭素のブランケット下で５％の炭素担持白金（Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｍａｔｔｈｅｙタイプ１０３；１．５０ｇ）を添加する。混合物を水素（４．２ｂａｒ）の雰囲気下に設置し、室温で一晩振動させる。反応混合物を水酸化ナトリウム（２Ｍ水溶液；１４８．６５ミリモル；７４．３３ｍＬ）により希釈し、ＭＴＢＥ（１５０．００ｍＬ）と共に撹拌する。珪藻土を介して混合物を濾過し、パッドをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）により洗浄する。濾液を分離し、水層をＭＴＢＥ（１００ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（１４．８０ｇ；９７．１７％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１３４（Ｍ＋１）。
【００５０】
調製例１４
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドリン−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化２７】
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方法Ａ
スキームＶ、工程Ｂ：エタノール：水（８０００ｍｌ：１０００ｍｌ）およびＤ−グルコース（１４８０ｇ；８．２５モル）中の４−メチルインドリン（１０００ｇ；７．５１モル）の溶液を、２０Ｌの三つ首フラスコへ充填する。混合物を８０℃で６時間加熱する。減圧下で混合物を濃縮し、ピリジン：ジクロロメタン（８０００ｍｌ：８０００ｍｌ）中で残留物を溶解する。ジメチルアミノピリジン（９１．７９ｇ；０．７５モル）を添加し、反応混合物を１０℃（内部温度）に冷却する。無水酢酸（９０００ｍｌ）を滴加する。添加が完了した時に、反応混合物を４５℃で１時間撹拌し、次いで室温で一晩撹拌する。減圧下で混合物を濃縮する。酢酸エチル（２０Ｌ）および水（１０Ｌ）を残留物へ添加する。有機層を分離し、酢酸エチル（２×１０Ｌ）により水層を抽出する。有機層を合わせ、水中のクエン酸（５ｋｇ）の飽和溶液により洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をエタノールから結晶させて、表題化合物（３２０５．５ｇ；９２．１１％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４６４．２（Ｍ＋１）。
【００５１】
方法Ｂ
スキームＶ、工程Ｂ：水（６６ｍＬ）によりＤ−グルコース（５１７．３０ミリモル；９３．２０ｇ）を湿らせて、次いでエタノール（３９４ｍＬ）中の４−メチルインドリン（６５．６２ｇ；４９２．６７ミリモル）を添加する。混合物を窒素によりパージし、窒素雰囲気下で一晩加熱還流する。次いで室温に冷却し、減圧下で濃縮する。もたらされた残留物へ、ジクロロメタン（３９４ｍＬ）、トリエチルアミン（２．８２モル；３９３．７２ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチル−４−ピリジンアミン（２４．６３ミリモル；３．０１ｇ）を添加する。氷浴中で混合物を冷却し、次いで無水酢酸（３．９４モル；３７２．５７ｍＬ）を３０分間にわたって滴加する。減圧下で混合物を濃縮し、酢酸エチル（９８４ｍＬ）により残留物を希釈し、水（２００ｍＬ）中のクエン酸（飽和水溶液；５０ｍＬ）により混合物を洗浄する。層を分離し、酢酸エチル（６００ｍＬ、次いで３００ｍＬ）により水層を抽出する。有機層を合わせて、ブライン（６００ｍＬ）により洗浄し、減圧下で濃縮する。エタノール（６５６ｍＬ）を添加し、５０℃で１０分間混合する。混合物を室温に冷却し、次いで氷／水中へ置く。もたらされた混合物を濾過し、減圧下で乾燥して、表題化合物（１１２．２ｇ；４９．１４％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４６４．２（Ｍ＋１）。
【００５２】
調製例１５
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドール−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化２８】
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方法Ａ
スキームＶ、工程Ｃ：［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドリン−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（４２００ｇ；９．０８モル）を、２０Ｌのフラスコへ充填する。１，４ジオキサン（４２０００ｍＬ）を添加し、溶液を１０℃に冷却する。ＤＤＱ（２０５７ｇ；９．０８モル）を５つの等しい部分で添加し、温度を１０℃に維持する。添加が完了した後に、混合物を室温に加温し、２時間撹拌する。反応混合物を濾過し、固体を１，４−ジオキサン（３回）により洗浄する。減圧下で濾液を濃縮し、ヘキサン中の０％〜２０％の酢酸エチルにより溶出するカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製する。２５００ｇの［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドリン−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテートから開始して類似の様式で調製された材料の分離したロットと純粋な画分を合わせ、減圧下で濃縮する。残留物を酢酸エチル（５０Ｌ）中で溶解し、重炭酸ナトリウムの飽和溶液（２×２０Ｌ）、次いで水（１×１０Ｌ）により洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、エタノール（１０Ｌ）から結晶化して、表題化合物（４．６３２ｋｇ；６９％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４６２．５（Ｍ＋１）。
【００５３】
方法Ｂ
スキームＶ、工程Ｃ：１，４−ジオキサン（１．６８Ｌ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドリン−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１１２．２ｇ；２４２．０８ミリモル）を室温で溶解する。混合物を氷／水浴中で冷却し、次いで４，５−ジクロロ−３，６−ジオキソ−シクロヘキサ−１，４−ジエン−１，２−ジカルボニトリル（２４４．５０ミリモル；５５．５０ｇ）を少量ずつ添加し、反応混合物の温度を１５℃未満で維持する。添加が完了した時に、混合物を５分間撹拌し、次いで氷浴から除去し、更に５分間撹拌する。混合物を濾過し、固体を１，４−ジオキサン（５６１．００ｍＬ）により洗浄する。減圧下で濾液を濃縮し、次いでエタノール（５６１．００ｍＬ）を残留物へ添加し、４０℃で２０分間撹拌する。混合物を１５分間氷水中で冷却し、濾過し、得られた固体を冷エタノール（１００ｍＬ）により洗浄する。減圧下で固体を乾燥して、表題化合物（８２．５ｇ；７３．９％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４６２．０（Ｍ＋１）。
【００５４】
調製例１６
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−（４−ブロモベンゾイル）−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化２９】
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スキームＶ、工程Ｄ：窒素によりパージした２０Ｌの撹拌された反応器へ、三塩化アルミニウム（４．４２モル；５８９．４５ｇ）およびジクロロメタン（３．４０Ｌ）をこの順序で充填する。反応器ジャケットを０℃に冷却し、次いで反応混合物を１０℃未満に冷却する。４−ブロモベンゾイルクロリド（１．７７モル；３８８．０７ｇ）を添加し、１０℃未満の温度を維持する。ジクロロメタン（３．４０Ｌ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（４−メチルインドール−１−イル）テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１．４７モル；６８０．００ｇ）の溶液を徐々に添加し、反応混合物の温度を１５℃未満に維持する。添加が完了した時に、反応器ジャケットを室温に加温する。８時間後に、反応器ジャケットを４℃に冷却し、混合物を一晩撹拌する。ジャケットを０℃に冷却し、氷冷水（６．８０ｋｇ）を含有する第２の撹拌された容器の中へ混合物を徐々にポンプで送り込む。添加が完了した後、相を分離させる。減圧下で有機相を濃縮する。もたらされた残留物へＭＴＢＥ（７．４８Ｌ）を添加し、塩酸（０．５Ｍ；５．１０Ｌ）、次いで水（７．４８Ｌ）、および次いで重炭酸ナトリウム（５％ｗ／ｗ水溶液；３．４０Ｌ）により洗浄する。珪藻土のパッド（２００ｇ）を介して有機層を濾過し、次いで減圧下で濾液を濃縮する。４０００ｍＬの全体積を生ずるようにＭＴＢＥにより残留物を希釈し、次いでこの溶液を、３５ｍｌ／分の速度で、迅速に撹拌しながら冷（０℃）イソ−ヘキサン（１３．６０Ｌ）へ添加する。添加が完了した時に、混合物を１５分間撹拌し、次いで濾過する。生産物を風乾し、生産物ケーキを一晩吸引する。減圧下で固体を更に乾燥して、ＬＣＭＳによって判断されるように６３％の純度で表題化合物（８９８．４ｇ；５９．６０％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：６４４．２／６４６．２（Ｍ＋１）。
【００５５】
調製例１７
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）−ヒドロキシ−メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化３０】
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スキームＶ、工程Ｅ：窒素によりパージした２０Ｌの撹拌された反応器へ、テトラヒドロホウ酸ナトリウム（２．１５モル；８１．３６ｇ）、次いでテトラヒドロフラン（３．５０Ｌ）を充填する。反応器ジャケットを０℃に設定し、反応混合物が２℃の時に、塩化セリウム（ＩＩＩ）七水和物（２．１５モル；５３０ｇ）を充填する。テトラヒドロフラン（３．０１Ｌ）中の［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−（４−ブロモベンゾイル）−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（７１６．８６ミリモル；７００．００ｇ）の溶液を徐々に添加し、反応混合物の温度が１０℃を上回らないようにする。テトラヒドロフラン（５０４．００ｍＬ）およびエタノール（５０４．００ｍＬ）の混合物を徐々に添加し、次いでエタノール（５０４．００ｍＬ）を徐々に添加し、反応混合物の温度が１０℃を上回らないようにする（注意：エタノールの両方の追加は、潜在的な発熱が観察され得るので、徐々に注意して行うべきである）。混合物を１０分間撹拌する。分離した容器へ、塩酸（２Ｍ；７．００Ｌ）、水（１０．５Ｌ）および氷（１０．５ｋｇ）を充填し、次いで反応混合物を冷塩酸混合物の中へ徐々にポンプで送り込む。混合物を酢酸エチル（５．０７Ｌ、次いで２．６６Ｌ）により抽出し、有機抽出物を合わせる。合わせた有機抽出物を、重炭酸ナトリウム（５％ｗ／ｖ水溶液；３．５０Ｌ）、次いで塩化ナトリウム（１０％ｗ／ｖ水溶液；３．５０Ｌ）により洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮する。もたらされた残留物をＭＴＢＥ（１．００Ｌ）中で溶解し、減圧下で濃縮して、次の工程において更なる精製なしで使用される十分な純度で、ジアステレオ異性体の混合物として表題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：６２８．２／６３０．２（Ｍ＋１−１８）。
【００５６】
調製例１８
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート
【化３１】
2016536355.tif 000032
スキームＶ、工程Ｆ：２０Ｌの温度制御反応器へ、［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）−ヒドロキシ−メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１４９２．５ｇ；６５％純度；１．５０６モル）、次いでアセトニトリル（４．８７Ｌ）、および次いでジクロロメタン（４．８７Ｌ）を充填する。混合物を０℃に冷却する。トリエチルシラン（３．７７モル；４３７．８３ｇ）を５分間にわたって添加する。反応器ジャケットを−５℃に設定する。反応混合物の温度が−２℃である時に、三フッ化ホウ素エーテラート（３．７７モル；５３４．４ｇ）の添加を開始する。注意：開始時に、この添加は、有意な発熱（最初の約１０ｍｌの添加の間に約８℃に温度が増加）をもたらす。一旦初期の発熱性事象が起こったなら、５℃〜７℃の間の温度を維持する速度で三フッ化ホウ素エーテラートの残りを添加する。添加が完了した時に、反応混合物を５℃で５０分間撹拌する。氷（６ｋｇ）、および次いで水（約１５℃；３．７４ｋｇ）を、底部出口弁を備えた５０Ｌのガラスフラスコに充填する。重炭酸ナトリウム（１１．１６モル；９３７．５５ｇ）を添加し、混合物を５分間撹拌する。反応混合物を重炭酸ナトリウム混合物の中へ約５分間にわたってポンプで送り込む。少ない沸騰は観察されるが、発泡する傾向はない。酢酸エチル（１７．０４Ｌ）を添加し、混合物を１０分間撹拌する。撹拌を停止し、混合物を３０分間静置させる。層を分離し、有機相をブライン（４．８７Ｌ）により洗浄し、減圧下で濃縮する。混合物を２つのおよそ等しい部分に分割し、４．５Ｋｇのシリカのパッドを通過させ、ジクロロメタンにより溶出することによって各々を精製する。適切な画分を濃縮して、表題化合物（９９０ｇ、約７０％純度）を得た（定量的ＮＭＲによって決定された場合；［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−（４−ブロモベンゾイル）−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテートから７３％収率）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：６３０．２／６３２．２（Ｍ＋１）。
【００５７】
調製例１９
ｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート
【化３２】
2016536355.tif 000033
スキームＶ、工程Ｇ：２０Ｌの温度制御反応器へ、［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［（４−ブロモフェニル）メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート（１．３７モル；１．１８ｋｇ；７３％純度）、ｔｅｒｔ−ブチル８−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−３，８−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−カルボキシレート（１．７９モル；７７６．４６ｇ）、炭酸カリウム（３．８５モル；５３２．０３ｇ）、ＴＨＦ（１１．８０Ｌ）および水（１．１８Ｌ）を充填する。混合物を表面下窒素パージによって３０分間脱気し、次いでＰｄ（ＯＡｃ）２（５４．９９ミリモル；１２．３５ｇ）およびＸＰｈｏｓ（５４．９９ミリモル；２６．２２ｇ）を添加する。混合物を６５℃に加熱し、一晩撹拌する。追加のＸＰｈｏｓ（１３．７５ミリモル；６．５５ｇ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（１３．７５ミリモル；３．０９ｇ）を充填し、６５℃で約１時間撹拌を続ける。ＴＨＦ（５００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル８−［（Ｅ）−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ブト−３−エニル］−３，８−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−カルボキシレート（３４３．７１ミリモル；１４９．３２ｇ）の溶液を調製し、窒素による表面下のパージによって５分間脱気する。この溶液を主反応混合物へ添加し、６５℃で約３時間撹拌を続ける。反応混合物を室温に冷却し、底部出口弁を備えた５０Ｌの容器の中へポンプで送り込む。イソ−ヘキサン（１１．８０Ｌ）により混合物を希釈し、ブライン（１１．８０Ｌ）により洗浄する。層を分離し、有機相をシリカゲルのパッド（２．９５ｋｇ）を介して濾過する。パッドをＴＨＦ（５．９０Ｌ）およびイソ−ヘキサン（５．９０Ｌ）の混合物により２回洗浄する。減圧下で濾液を濃縮して、表題化合物（１．６９５ｋｇ；定量的ＮＭＲによって判断された場合６２％純度；８８％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：８５８．４（Ｍ＋１）。
【００５８】
調製例２０
［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−（４，９−ジアゾニアスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル）ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩
【化３３】
2016536355.tif 000034
スキームＶ、工程Ｈ：ジクロロメタン（８．３６Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシレート（１．２２モル；１．６８ｋｇ）を溶解し、塩化水素（ジオキサン中４Ｍ；８．５２モル；２．１３Ｌ）を添加し、反応物を３０℃未満に維持する。反応物を室温で一晩撹拌する。減圧下で混合物を濃縮する。残留物へ、ジクロロメタン（１．０４Ｌ）を撹拌しながら添加する。もたらされた溶液を、ＭＴＢＥ（１０．４５Ｌ）へ徐々に撹拌しながら添加する。もたらされた固体を濾過によって収集し、ＭＴＢＥ（２Ｌ）によりケーキを洗浄する。減圧下で固体を乾燥して、表題化合物（１．４９ｋｇ、６６％純度；９７．１９％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：７５８．４［Ｍ（遊離塩基）＋１］。
【００５９】
実施例１ｃ
１−イソブチル−３−［２−［４−［（Ｅ）−４−［４−［［４−メチル−１−［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］インドール−３−イル］メチル］フェニル］ブト−３−エニル］−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−イル］−２−オキソ−エチル］尿素の代替合成
【化３４】
2016536355.tif 000035
【００６０】
スキームＶ、工程Ｉ：２５℃に設定されたジャケットを備えた１０Ｌの反応器へ、［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−［３−［［４−［（Ｅ）−４−（４，９−ジアゾニアスピロ［５．５］ウンデカン−４−イル）ブト−１−エニル］フェニル］メチル］−４−メチル−インドール−１−イル］テトラヒドロピラン−２−イル］メチルアセテート二塩酸塩（７８２．３４ミリモル；６５０．０ｇ）、ジクロロメタン（２．３５Ｌ）、および次いでトリエチルアミン（３．９１モル；５４５．２２ｍＬ）を添加する。混合物を１０分間撹拌する。この反応器をＡと標識する。２−（イソブチルカルバモイルアミノ）酢酸（８９９．６９ミリモル；１８３．３０ｇ）およびジクロロメタン（２．３５Ｌ）を、別個の２０Ｌのフラスコに充填し、次いで１分間にわたって１，１’−カルボニルジイミダゾール（９３８．８０ミリモル；１５２．２３ｇ）を添加する。注意：ＣＤＩの添加に際して若干のガス発生がある。混合物を５分間撹拌する。この反応器をＢと標識する。反応器Ｂ中の混合物を、約３８００ｍＬ／分の速度で反応器Ａの中へポンプで送り込む。反応物を室温で約２時間撹拌する。清浄なフラスコへ、２−（イソブチルカルバモイルアミノ）酢酸（８９．９７ミリモル；１８．３３ｇ）およびジクロロメタン（２３４．７ｍＬ）ならびに次いで１，１’−カルボニルジイミダゾール（９３．８８ミリモル；１５．２２ｇ）を添加する。混合物を５分間撹拌し、次いで反応器Ａへ添加する。混合物を約１０分間撹拌する。反応混合物を水（５．０４Ｌ）の中へポンプで送り込み、撹拌する。撹拌を停止し、有機相を分離し、減圧下で濃縮する。残留物をメタノール（３８．６６モル；１．５６Ｌ；１．２４ｋｇ）中で溶解し、ナトリウムメトキシド（ＭｅＯＨ中で２５％ｗ／ｗ；１．５６モル；３５２．２１ｍＬ）を１０分間にわたって添加する。混合物を３０分間撹拌する。減圧下で反応混合物を濃縮する。残留物をメタノール（２５０．００ｍＬ）中で溶解し、ジクロロメタン（１．５０Ｌ）を添加する。溶液を迅速に撹拌したＭＴＢＥ（１０．００Ｌ）へ５分間にわたって添加する。もたらされた懸濁物を濾過し、一晩風乾する。固体を、ジクロロメタン（５Ｌ）中の２０％ＭｅＯＨ中で溶解し、ジクロロメタン中の１５％ｖ／ｖのＭｅＯＨにより溶出する６Ｋｇのシリカパッドを通過させる。適切な画分を合わせて、減圧下で濃縮する。炭酸水素アンモニウム水溶液（１０ｍＭ）中の２５〜８０％のアセトニトリルにより溶出するフラッシュクロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）によって残留物を更に精製し、次いで適切な画分を合わせて、表題化合物を得る。［α］Ｄ２０＝−６．６°（Ｃ＝０．９７６、メタノール）。
【００６１】
ナトリウム依存性グルコーストランスポーター１（ＳＧＬＴ１）アッセイ
ヒトＳＧＬＴ１（ｓｌｃ５ａ１、ＮＭ＿０００３４３）およびマウスＳＧＬＴ１（ｓｌｃ５ａ１、ＮＭ＿０１９８１０．４）をコードするｃＤＮＡを、Ｏｐｅｎｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入する。ｃＤＮＡを哺乳動物発現のためにｐｃＤＮＡ３．１＋内にクローニングし、標準的な哺乳動物トランスフェクション手順を使用して、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）−Ｋ１細胞内に安定的にトランスフェクトする。各々の過剰発現細胞株のＳＧＬＴ発現サブクローンは、ネオマイシン（ジェネティシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）への耐性、および１４Ｃ−ａ−メチル−Ｄ−グルコピラノシド（１４Ｃ−ＡＭＧ）取り込みアッセイにおける活性に基づいて選択される（以下参照）。安定的なＳＧＬＴ発現細胞は標準的な細胞培養技法を使用して維持する。
【００６２】
ＳＧＬＴ活性は、上記の細胞株におけるナトリウム依存性１４Ｃ−ＡＭＧ取り込みとして、以下に記述されるように測定する。３０，０００細胞を含有する１００ｍＬの培養培地を、９６ウェルのＢｉｏＣｏａｔポリ−Ｄ−リジンプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｓｏｎ）の各々のウェルへ播種し、３７℃で一晩培養する。培養培地を吸引し、細胞を、２００ｍＬの反応緩衝液（１４０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＣａＣｌ２、ＭｇＣｌ２および１４ｍＭのＮ−２−ヒドロエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ヘペス）、ｐＨ７．５）により２回洗浄する。過剰の緩衝液をペーパータオルの上へ打ち出す。３５ｍＬの反応緩衝液を各々のウェルへ添加する。変動濃度の試験化合物を含有するか、または対照として化合物なしの、５ｍＬの反応緩衝液中の１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を、各々のウェルの中に分注する。反応は、反応緩衝液中へ１０ｍＬの１４Ｃ−ＡＭＧを添加して４ｍＭの最終的な濃度にすることによって開始される。プレートを３７℃で１２５分間インキュベートする。反応は、反応緩衝液を吸引し、次いで２００ｍＬの氷冷反応緩衝液により３回洗浄することによって終結させる。手動式吸引を適用して反応緩衝液の完全な除去を確実にする。１０ｍＬの０．１ＮのＮａＯＨを各々のウェルへ添加し、次いで１００ｍＬのＳｕｐｅｒｍｉｘシンチレーションカクテル（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を添加する。混合後に、プレート中のシンチレーションシグナルをＭｉｃｒｏＢｅｔａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）中でカウントする。１０用量反応曲線を、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ（ＩＤ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を使用して、経験的な４パラメーターのモデルにフィッティングさせて、最大半量阻害（ＩＣ５０）での阻害剤濃度を決定する。
【００６３】
本明細書における実施例１の化合物は本質的に上述のように試験され、ヒトＳＧＬＴ１についてのＩＣ５０は１７．４±１４．６ｎＭ（ｎ＝９）、およびマウスＳＧＬＴ１についてのＩＣ５０は１３．６±７．３ｎＭ（ｎ＝６）であることが示される。これらのデータは、実施例１の化合物がインビトロでヒトおよびマウスのＳＧＬＴ１を阻害することを実証する。
【００６４】
経口グルコース耐性試験（ＯＧＴＴ）におけるグルコース低下効果
試験化合物は、１％ヒドロキシエチルセルロース、０．２５％のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０ｗ／０．０５％消泡剤のビヒクルを前計量した試験化合物へ添加して、１ｍｇ／ｍｌの溶液を作製することによって製剤化される。混合物をおよそ１分間プローブ超音波処理する。撹拌子を添加し、もたらされた懸濁物は投薬を通して連続的に撹拌する。
【００６５】
単独飼育されたＣ５７Ｂｌ／６マウスの２セットのうちの１つを計量し、体重を使用して、２６〜３０ｇの作業範囲内で研究群（ｎ＝５）を決定する。群分け後に、１０ｍｌ／ｋｇの試験化合物調製物またはビヒクルを、マウスに、３０秒間隔で強制経口投与する。これらのマウスを使用して、１８時間後のＯＧＴＴにおける化合物の効果を実証する。次いで両セットのマウスを餌へ接近させず、試験日前の夕方近くから一晩絶食させる。翌朝に、残りのマウスを計量し、グルコースのために採血する（尾部の小さな切れ目を介して）。絶食グルコース値を使用して、８０〜１００ｍｇ／ｄｌの作業範囲内で研究群（ｎ＝５）を決定する。群分け後に、前日と同じプロトコルを使用して、マウスに強制経口投与する。
【００６６】
それぞれの化合物処理が各々開始された８時間および１８時間後に、ベースラインの血液サンプルをグルコースの測定のために採取する（第１の動物から）。次いで動物に、３ｇ／ｋｇの経口用量で５０％デキストロース（Ｈｏｓｐｉｒａ（登録商標））を直ちに与える。グルコースについての血液サンプルを、正確に３０秒間隔で尾静脈を経由して採取し、その結果、血液はデキストロース投薬後に２０、４０および６０分で各々の動物において収集される。
【表１】
2016536355.tif 000036
【００６７】
表１に示されるように、投与の８時間または１８時間後に５０％デキストロース（Ｈｏｓｐｉｒａ（登録商標））の経口ボーラスを正常血糖のＣ５７Ｂｌ／６マウスへ与えた場合、実施例１の化合物はグルコース変動幅の減少を達成する。実施例１は、両方のＯＧＴＴの間のベースライン調整グルコース曲線下面積（ＡＵＣ）の減少も実証する。加えて、実施例１は、ＯＧＴＴの間の血漿グルコースの平均最高濃度（Ｃｍａｘ）を減少させる一方で、グルコースが最高濃度に到達するのにかかる平均時間（Ｔｍａｘ）を増加させる。
【手続補正書】
【提出日】平成28年4月12日(2016.4.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2016536355.tif 000040
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
【化２】
2016536355.tif 000041
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
療法に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項５】
１型糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項６】
２型糖尿病の治療に使用するための、請求項１または請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項７】
請求項１または請求項２に記載の化合物または塩を、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
表１に示されるように、投与の８時間または１８時間後に５０％デキストロース（Ｈｏｓｐｉｒａ（登録商標））の経口ボーラスを正常血糖のＣ５７Ｂｌ／６マウスへ与えた場合、実施例１の化合物はグルコース変動幅の減少を達成する。実施例１は、両方のＯＧＴＴの間のベースライン調整グルコース曲線下面積（ＡＵＣ）の減少も実証する。加えて、実施例１は、ＯＧＴＴの間の血漿グルコースの平均最高濃度（Ｃｍａｘ）を減少させる一方で、グルコースが最高濃度に到達するのにかかる平均時間（Ｔｍａｘ）を増加させる。
本発明は、以下の態様を含む。
［１］
以下の式の化合物：
【化３５】
2016536355.tif 000042
またはその薬学的に許容される塩。
［２］
【化３６】
2016536355.tif 000043
である、［１］に記載の化合物。
［３］
患者における糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、［１］または［２］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
［４］
患者における１型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、［１］または［２］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
［５］
患者における２型糖尿病を治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、［１］または［２］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、方法。
［６］
療法に使用するための、［１］または［２］に記載の化合物または塩。
［７］
糖尿病の治療に使用するための、［１］または［２］に記載の化合物または塩。
［８］
１型糖尿病の治療に使用するための、［１］または［２］に記載の化合物または塩。
［９］
２型糖尿病の治療に使用するための、［１］または［２］に記載の化合物または塩。
［１０］
［１］または［２］に記載の化合物または塩を、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、医薬組成物。
【国際調査報告】
2016536355.tif 000044
2016536355.tif 000045