(57)【要約】  本発明は、式Ｉ【化１】2016540007.tif 000067 の化合物（式中Ｘ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、本明細書で定義された通り）、または薬学的に許容可能なその塩を提供する。【選択図】なし
2016540007.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物または薬学的に許容可能なその塩：
【化１】
2016540007.tif 000063
（式中、
Ｘは、
【化２】
2016540007.tif 000064
であり、
Ｒは、Ｈ、メチル、またはエチルであり、
Ｒ２がＨの場合Ｒ１はメチルであり、Ｒ２がメチルの場合Ｒ１はＨであり、
Ｒ３は、ＨまたはＦであり、
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、またはメチルであり、
Ｒ５は、ＯＨ、メチル、メトキシ、またはＦであり、
Ｒ７がＯＨの場合Ｒ６はＨであり、Ｒ７がＦの場合Ｒ６はＦであり、
Ｒ８およびＲ９は、それぞれ独立にＨまたはＦである）。
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ４がＦであり、Ｒ５がＦである、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ４がメチルであり、Ｒ５がメチルである、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ８がＦであり、Ｒ９がＦである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｘが
【化３】
2016540007.tif 000065
である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｘが
【化４】
2016540007.tif 000066
である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項８】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節炎を治療する方法。
【請求項９】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者におけるリウマチ性関節炎を治療する方法。
【請求項１０】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みを治療する方法。
【請求項１１】
療法において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１２】
変形性関節炎の治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１３】
リウマチ性関節炎の治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１４】
変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みの治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１５】
請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩と、１種以上の薬学的に許容可能な基剤、希釈剤、または賦形剤とを含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の概要】
【０００１】
本発明は、ある種の新規のフェノキシエチル化合物、その化合物を含む医薬組成物、その化合物を用いて生理学的障害を治療する方法、ならびにその化合物の合成において有用な中間体およびプロセスに関する。
【０００２】
本発明は、変形性関節炎およびリウマチ性関節炎を含む、関節炎など、ならびにこれらの状態に伴う痛みをさらに含む、炎症状態の治療の分野に属する。関節炎は、米国単独でも数百万の患者を冒し、身体障害の主要原因である。治療は多くの場合、厄介な心血管性副作用を生じ得る、ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）またはＣＯＸ−２阻害剤を含む。したがって、高血圧症などの、不良な心血管プロファイルを有する患者は、ＮＳＡＩＤまたはＣＯＸ−２阻害剤を用いることから除外され得る。したがって、好ましくは現在の治療の副作用が無い、変形性関節炎およびリウマチ性関節炎の別の治療の必要性がある。
【０００３】
以下のような４種のプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）受容体サブタイプが特定されている：ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４。ＥＰ４は、リウマチ性関節炎および変形性関節炎の齧歯類モデルにおける関節炎症性の痛みに関与する一次受容体であることが開示されている（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、３２５、４２５（２００８年）を参照）。したがって、選択的ＥＰ４アンタゴニストは、関節炎の痛みを含む、関節炎を治療することにおいて有用で有り得る。
【０００４】
加えて、ＥＰ４拮抗作用はプロスタノイド、例えばＰＧＩ２およびＴｘＡ２の生合成に干渉しないので、選択的ＥＰ４アンタゴニストは、ＮＳＡＩＤおよびＣＯＸ−２阻害剤で見られる潜在的な心血管性副作用を持たない可能性があることが示唆されている。（例えばＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２１、４８４（２０１１年）を参照。）
【０００５】
国際公開第２０１３／００４２９０号は、ＥＰ４受容体アンタゴニスト活性を有するある種の環状アミン誘導体を開示している。国際公開第２０１３／００４２９１号は、ＥＰ４受容体アゴニスト活性を有するある種の環状アミン誘導体を開示している。
【０００６】
本発明は、ＥＰ４の阻害剤である、ある種の新規の化合物ならびにＥＰ１、ＥＰ２、およびＥＰ３と比較してＥＰ４の選択的阻害剤である、ある種の新規の化合物を提供する。加えて、本発明は、従来のＮＳＡＩＤと比較すると減少した心血管性または胃腸性の副作用の可能性を有するある種の新規の化合物を提供する。
【０００７】
したがって、本発明は、式Ｉの化合物
【化１】
2016540007.tif 000003
（式中、Ｘは、
【化２】
2016540007.tif 000004
であり、
Ｒは、Ｈ、メチル、またはエチルであり、
Ｒ２がＨの場合Ｒ１はメチルであり、Ｒ２がメチルの場合Ｒ１はＨであり、
Ｒ３は、ＨまたはＦであり、
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、またはメチルであり、
Ｒ５は、ＯＨ、メチル、メトキシ、またはＦであり、
Ｒ７がＯＨの場合Ｒ６はＨであり、Ｒ７がＦの場合Ｒ６はＦであり、
Ｒ８およびＲ９は、それぞれ独立にＨまたはＦである）
または薬学的に許容可能なその塩を提供する。
【０００８】
本発明は、治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む、患者における関節炎を治療する方法も提供する。本発明は、治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む、患者における変形性関節炎を治療する方法も提供する。
【０００９】
加えて、本発明は、治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む、患者におけるリウマチ性関節炎を治療する方法を提供する。本発明は、治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む、患者における関節炎に伴う痛みを治療する方法も提供する。本発明は、治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む、患者における変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みを治療する方法をさらに提供する。
【００１０】
さらには、本発明は、療法において使用するための式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を提供する。加えて、本発明は、関節炎の治療において使用するための式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を提供する。さらには、本発明は、変形性関節炎の治療において使用するための式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を提供する。加えて、本発明は、リウマチ性関節炎の治療において使用するための式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を提供する。本発明は、変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みの治療において使用するための式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩も提供する。本発明は、関節炎の治療のための薬物の製造のための、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩の使用も提供する。さらには、本発明は、変形性関節炎の治療のための薬物の製造のための、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩の使用を提供する。本発明は、リウマチ性関節炎の治療のための薬物の製造のための、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩の使用を提供する。本発明は、変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みの治療のための薬物の製造のための、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩の使用も提供する。
【００１１】
本発明は、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩と、１種以上の薬学的に許容可能な基剤、希釈剤、または賦形剤とを含む医薬組成物をさらに提供する。特定の実施形態において、組成物は、１種または複数の他の療法剤をさらに含む。本発明は、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩の合成のための新規の中間体およびプロセスも包含する。
【００１２】
本明細書で使用する場合、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療するため（ｔｏ  ｔｒｅａｔ）」という語には、既存の症状または障害の進行または重症度を抑制する、遅らせる、停止する、または後退させることが含まれる。
【００１３】
本明細書で使用する場合、「患者」と言う語は、マウス、モルモット、ラット、イヌ、またはヒトなどの、哺乳動物を指す。好ましい患者はヒトであることが理解される。
【００１４】
本明細書で使用する場合、「有効量」と言う語は、患者への単回または多回投与で、診断または治療の下で患者における所望の効果を提供する本発明の化合物、または薬学的に許容可能なその塩の量または用量を指す。
【００１５】
有効量は、既知の技術を用いることによっておよび類似の状況下で取得された結果を観察することによって、当業者としての、担当診断医によって容易に決定され得る。患者のための有効量を決定することにおいて、これに限らないが、哺乳動物の種、そのサイズ、年齢、および全体的な健康、関与する特有の疾患または障害、疾患または障害の程度または関与または重症度、個別の患者の反応、投与された特定の化合物、投与の仕方、投与された調製物の生物学的利用能特性、選択された用法、併用薬の使用、ならびに他の関連した状況を含むいくつかの要因が担当診断医によって考慮される。
【００１６】
式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩は、一般には広い投薬量範囲にわたって有効である。例えば、１日当たりの投薬量は、通常は体重の約０．０１から約５０ｍｇ／ｋｇの範囲内に入る。ある場合には前述の範囲の下限を下回る投薬量レベルが、十分よりも多い場合がある一方で、他の場合にはさらにより多い用量が許容可能な副作用を伴って用いられる場合があり、したがって上記の投薬量範囲は、いかなる方法でも本発明の範囲を制限することは意図されない。
【００１７】
本発明の化合物は、好ましくは化合物を生物に利用可能にする任意の経路によって投与される医薬組成物として配合される。最も好ましくは、組成物は、経口投与用である。医薬組成物およびそれを調製するためのプロセスは、当技術分野においてよく知られている。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ、編集者、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、２００６年を参照。）
【００１８】
式Ｉの化合物は、本発明の治療方法において特に有用であるが、ある種の基、置換基、および構成は好ましい。次の段落は、好ましい基、置換基、および構成を記述する。これらの選択は、治療方法および新しい本発明の化合物のどちらにも当てはまることが理解されるであろう。
【００１９】
Ｒは、メチルであることが好ましい。
【００２０】
Ｒがメチルである場合、Ｒ３はＨであることが最も好ましい。
【００２１】
Ｒ４がＦである場合、Ｒ５はＦであることが好ましい。
【００２２】
Ｒ４がメチルである場合、Ｒ５はメチルであることがさらに好ましい。
【００２３】
Ｒ８がＦである場合、Ｒ９はＦであることが好ましい。
【００２４】
Ｘは、
【化３】
2016540007.tif 000005
であることが好ましい。
【００２５】
Ｘは、
【化４】
2016540007.tif 000006
であることが最も好ましい。
【００２６】
Ｒがメチルである場合、Ｒ３はＨであり、Ｘは
【化５】
2016540007.tif 000007
であることが最も好ましい。
【００２７】
Ｒがメチルである場合、Ｒ３はＨであり、Ｘは
【化６】
2016540007.tif 000008
であることが最も特別に好ましい。
【００２８】
好ましい化合物は、
４−（（１Ｓ）−１−（（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２−フェノキシエチル）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−（２−フェノキシエチル）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（１Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−３−（２−フェノキシエチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−４−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｓ）−１−（２−フェノキシエチル）−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−４，４−ジメチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−１−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（１Ｒ）−２−（２−フェノキシエチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
およびその薬学的に許容可能な塩である。
【００２９】
特に好ましい化合物は、
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−（２−フェノキシエチル）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（１Ｓ，４Ｒ，６Ｓ）−３−（２−フェノキシエチル）−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−４−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸、
およびその薬学的に許容可能な塩である。
【００３０】
本明細書で使用する場合、「ｈ」は、時間を指し、「ｋＰａｇ」は、キロパスカルゲージ圧を指し、「Ｂｏｃ」は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を指し、「ＤＭＥＭ」は、ダルベッコ変法イーグル培地を指し、「ＡＣＮ」は、アセトニトリルを指し、「ＤＩＥＡ」は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指し、「ＤＭＡＰ」は、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンを指し、「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシドを指し、「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指し、「ＥｔＯＨ」は、エタノールを指し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを指し、「ＭｅＯＨ」は、メタノールを指し、「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを指し、「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテルを指し、「ＴＢＭＥ」は、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを指し、「ＢＯＰ」は、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファートを指し、「Ｃｂｚ」は、ベンジルオキシカルバマート保護基を指し、「ｍＣＰＢＡ」は、３−クロロ過安息香酸を指し、「ＫＨＭＤＳ」は、カリウムビス（トリメチルシリル）アミドを指し、「ＰＧＥ２」は、プロスタグランジンＥ２を指し、「ＦＢＳ」は、ウシ胎児血清を指し、「ＩＢＭＸ」は、（３−イソブチル−１−メチルキサンチン）を指し、「ＭＥＳ」は、（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸を指し、「ＨＥＰＥＳ」は、（２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸）を指し、「ＨＴＲＦ」は、均一時間分解蛍光法技術を指し、「ＨＥＫ」は、ヒト胎児由来腎臓を指し、「ＨＢＳＳ」は、ハンクス平衡塩類溶液を指し、「ＥＣ８０」は、その薬剤が可能な最大効力の８０％を生じる薬剤の濃度を指し、「ＩＣ５０」は、その薬剤が可能な最大阻害反応の５０％を生じる薬剤の濃度を指す。「Ｐｈ」は、次の構造のフェニル基を指す。
【化７】
2016540007.tif 000009
【００３１】
薬学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な方法は、当技術分野においてよく知られている。例えば、Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．、「Ｓａｌｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ」、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、３３：２０１〜２１７頁（１９８６年）、Ｂａｓｔｉｎ，Ｒ．Ｊ．ら「Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ」、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、４：４２７〜４３５頁（２０００年）、およびＢｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．ら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、６６：１〜１９頁、（１９７７年）を参照されたい。本発明の化合物は、当業者に良く知られている技術および条件を用いて、塩酸塩などの、薬学的に許容可能な塩に容易に変換され、薬学的に許容可能な塩として単離され得ることを合成の当業者は理解するであろう。加えて、式Ｉの化合物は、対応する薬学的に許容可能な塩から対応する遊離塩基または遊離酸に容易に変換され、対応する遊離塩基または遊離酸として単離され得ることを合成の当業者は理解するであろう。
【００３２】
本発明は、全ての個々の鏡像異性体またはジアステレオ異性体、ならびにラセミ体を含む前記化合物の鏡像異性体およびジアステレオ異性体の混合物を企図する。個々の異性体、鏡像異性体、またはジアステレオ異性体は、当業者により本発明の化合物の合成において選択的結晶化技術またはキラルクロマトグラフィーなどの方法によって任意の都合のよい点で分離または分解され得る（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９８１年、ならびにＥ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｅｎ、「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９４年を参照）。
【００３３】
本発明の化合物、または薬学的に許容可能なその塩は、その一部が下記のスキーム、調製、および実施例において例示される、当技術分野において既知の種々の手順によって調製され得る。記載された経路のそれぞれのための特有の合成工程は、式Ｉの化合物、または薬学的に許容可能なその塩を調製するために、異なる方法において、または異なるスキームからの工程と併用して組み合わせてよい。下記のスキームにおけるそれぞれの工程の生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、ろ過、粉砕、および結晶化を含む、従来型の方法によって回収され得る。試薬および出発物質は、当業者にとって容易に入手可能である。全ての置換基は、別段の指定がない限り、前に定義した通りである。これらのスキーム、調製、および実施例は、いかなる方法でも本発明の範囲を制限することは意図されないことが理解される。
【実施例】
【００３４】
調製例１
（２Ｒ＊，６Ｒ＊）−６−メチル−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボン酸エチル（ラセミ）の合成
【化８】
2016540007.tif 000010
【００３５】
窒素雰囲気下で、（２Ｒ＊，６Ｒ＊）−６−メチルピペリジン−２−カルボン酸エチル塩酸塩（５００ｍｇ、２．４１ミリモル）、ＤＭＦ（６．０ｍＬ）、炭酸カリウム（９９８ｍｇ、７．２２ミリモル）、およびβ−ブロモフェネトール（４９４ｍｇ、２．４１ミリモル）の混合物を、撹拌しながら１００℃に一晩加熱する。反応混合物を室温に放冷し、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈する。混合物を水（２×５０ｍＬ）および次いで飽和ＮａＣｌ水溶液（２×５０ｍＬ）で洗い、各洗浄後に水性相を捨てる。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過によって固体を除去して、ろ液を減圧下で濃縮して黄色油を与える。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から６０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色油として与える（２００ｍｇ、収率２９％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２９２（Ｍ＋Ｈ）＋。
調製例２
（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸ベンジルの合成。
【化９】
2016540007.tif 000011
【００３６】
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸（７．００ｇ、２８．８ミリモル）の溶液に、ベンジルアルコール（２．９８ｍＬ、２８．８ミリモル）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（６．６０ｇ、３１．７ミリモル）、およびＤＭＡＰ（３５２ｍｇ、２．８８ミリモル）を加える。混合物を撹拌しながら一晩室温に温める。混合物をろ過して固体を除去し、ろ液を減圧下で濃縮して粗製物質を与える。この物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から２０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色油として与える（６．１０ｇ、収率６４％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２３４（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）、３５６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【化１０】
2016540007.tif 000012
調製例３
（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチルの合成。
【化１１】
2016540007.tif 000013
【００３７】
スキーム１、工程Ａ：ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸（１．０５ｇ、４．３２ミリモル）の室温溶液に、炭酸セシウム（１．５５ｇ、４．７５ミリモル）を加えて５分間撹拌する。次いで、ヨードメタン（４０３μＬ、６．４７ミリモル）を滴下の方法で１５分かけて加える。追加の完了後、混合物を室温で一晩撹拌する。次いで、水（２５ｍＬ）を加え、水性混合物をＴＢＭＥ（２×７５ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を白色固体として与える（１．１０ｇ、収率９９％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２８０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例４
（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メチレンピペリジン−２−カルボン酸メチルの合成。
【化１２】
2016540007.tif 000014
【００３８】
スキーム１、工程Ｂ：窒素雰囲気下で、臭化メチルトリフェニルホスホニウム（３．９０ｇ、１０．９２ミリモル）および無水トルエン（４０ｍＬ）の０℃の混合物に、ＫＨＭＤＳ（トルエン中の０．５Ｍ溶液、１９ｍＬ、９．５ミリモル）を滴下の方法で１５分かけて加える。次いで、混合物を室温に温め、次いで２時間撹拌する。混合物を０℃に冷却して、トルエン（４０ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（１．１０ｇ、４．２８ミリモル）の溶液を滴下の方法で１５かけて加える。混合物を室温に温め、次いで６時間撹拌し次いで混合物を３日間室温に保持する。ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（１００ｍＬ）を加えて、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×２５０ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過して、ろ液を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から４０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を与える（９２０ｍｇ、収率８４％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２７８（Ｍ＋Ｎａ）＋、５３３（２Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００３９】
以下の化合物を、（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチルの代わりに適切なケトンを用いて実質的に調製例４の方法によって調製する。
【表１】
2016540007.tif 000015
調製例６
（Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボン酸メチルの合成。
【化１３】
2016540007.tif 000016
【００４０】
スキーム１、工程Ｃ：窒素雰囲気下でＥｔ２Ｏ（２５ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メチレンピペリジン−２−カルボン酸メチル（９２０ｍｇ、３．６０ミリモル）の０℃の溶液に、ジアゾメタン（Ｅｔ２Ｏ中の０．７２Ｍ溶液、２５ｍＬ、１８．０ミリモル）を滴下の方法で４５分かけて加える。ジアゾメタンの追加中、７部のＰｄ（ＯＡｃ）２（２５ｍｇ、０．１１ミリモル、合計１７５ｍｇ、０．７７ミリモル）を６分間隔で加える。混合物を撹拌しながら一晩室温に温める。酢酸（１００μＬ、１．７５ミリモル）を加え、次いでろ過によって固体を除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を通してすすぐ。組み合わせたろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を含有する混合物を与える（１．０８ｇ、名目上の収率１１１％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２９２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００４１】
以下の化合物を、（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メチレンピペリジン−２−カルボン酸メチルの代わりに適切なアルケンを用いて実質的に調製例６の方法によって調製する。
【表２】
2016540007.tif 000017
調製例８
（１Ｒ＊，４Ｒ，６Ｒ＊）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタン−４−カルボン酸メチルの合成。
【化１４】
2016540007.tif 000018
【００４２】
バッチ１。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−２−カルボン酸メチル（８００ｍｇ、３．３２ミリモル）の０℃の溶液に、ジアゾメタン（Ｅｔ２Ｏ中の０．７２Ｍ溶液、５０ｍＬ、３６．０ミリモル）を１．０ｍＬ部ずつ１５分かけて加える。ジアゾメタンの追加中、４部のＰｄ（ＯＡｃ）２（１２．５ｍｇ、０．０５５ミリモル、合計５０ｍｇ、０．２２ミリモル）を３分間隔で加える。混合物を３５分間撹拌し、次いで酢酸（１．０ｍＬ、１７．５ミリモル）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加える。組み合わせた混合物を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１００ｍＬ）およびＮａＣｌ飽和水溶液（１００ｍＬ）で洗う。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して粗製茶色油（８９８ｍｇ）を標記化合物と未反応の開始アルケンとの８７：１３の混合物として与える。
【００４３】
バッチ２。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）中の（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−２−カルボン酸メチル（８００ｍｇ、３．３２ミリモル）の０℃の溶液に、ジアゾメタン（Ｅｔ２Ｏ中の０．７２Ｍ溶液、５０ｍＬ、３６．０ミリモル）を１．０ｍＬ部ずつ１５分かけて加える。ジアゾメタンの追加中、４部のＰｄ（ＯＡｃ）２（１２．５ｍｇ、０．０５５ミリモル、合計５０ｍｇ、０．２２ミリモル）を３分間隔で加える。混合物を３５分間撹拌し、次いで酢酸（１．０ｍＬ、１７．５ミリモル）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加える。組み合わせた混合物を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１００ｍＬ）およびＮａＣｌ飽和水溶液（１００ｍＬ）で洗う。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して粗製茶色油（８４１ｍｇ）を標記化合物と未反応の開始アルケンとの８６：１４の混合物として与える。
【００４４】
バッチ１および２の組み合わせた粗製物質（１．７４ｇ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１８．７ｍＬ）に溶解して０℃に冷却する。ｍＣＰＢＡ（６４７ｍｇ、１．８７ミリモル）を加えて混合物を撹拌しながら一晩室温に温める。ｍＣＰＢＡの第２の部（３２３ｍｇ、０．８８ミリモル）を加えてさらに５．５時間室温で撹拌する。Ｎａ２ＳＯ３飽和水溶液（８ｍＬ）を加えて１０分間勢いよく撹拌する。混合物を、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１００ｍＬ）およびＮａＣｌ飽和水溶液（１００ｍＬ）で洗う。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過して、ろ液を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から１００％のＣＨ２Ｃｌ２のグラジエントで次いでＣＨ２Ｃｌ２中の０％から１０％のＣＨ３ＯＨのグラジエントで溶離して、標記化合物を２種のジアステレオ異性体の混合物として与える（１．３９ｇ、収率８５％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１５６（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【化１５】
2016540007.tif 000019
調製例９
（±）−１−ベンジルオキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（ラセミ）の合成
【化１６】
2016540007.tif 000020
【００４５】
スキーム２、工程Ａ：１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、４８．６ｍＬ、１９４ミリモル）中のＨＣｌの溶液にラセミ体（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（５．００ｇ、１９．４ミリモル）を溶解して混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して４０℃の真空オーブン内に２時間置き残留酸を除去する。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（９７ｍＬ）、クロロギ酸ベンジル（３．６５ｇ、２１．３８ミリモル）、およびＤＩＥＡ（７．４６ｍＬ、４２．８ミリモル）を加え、室温で２日間撹拌する。塩酸水溶液（１．０Ｎ、１００ｍＬ）を加え、混合物を勢いよく１５分間撹拌する。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して粗製橙色油を与える。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の５０％から１００％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色の、粘性油として与える（２．４４ｇ、収率４３％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２９２（Ｍ＋Ｈ）＋、３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例１０
（±）−１−ベンジルオキシカルボニル−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボン酸メチル（ラセミ）の合成
【化１７】
2016540007.tif 000021
【００４６】
スキーム２、工程Ｂ：ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のラセミ体（±）−１−ベンジルオキシカルボニル−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（２．４４ｇ、８．３８ミリモル）の溶液を０℃に冷却し、次いで三フッ化ジエチルアミノ硫黄（１０．１ｇ、６２．８ミリモル）を、内部温度が５℃未満に留まるような速度で滴下して加える。混合物を０℃で２時間、次いで室温で一晩撹拌する。混合物を０℃に冷却して水（５０ｍＬ）を内部温度が２０℃未満に留まるような速度で滴下の方法で注意深く加える。ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２００ｍＬ）を加え、次いで層を分離して有機層をＮａＣｌ飽和水溶液（２００ｍＬ）で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の２０％から７０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色の、粘性油として与える（１．２４ｇ、４７％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３１４（Ｍ＋Ｈ）＋、３３１（Ｍ＋ＮＨ４）＋、３３６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【化１８】
2016540007.tif 000022
調製例１１
（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−オキソピペリジン−２−カルボン酸（ラセミ）の合成
【化１９】
2016540007.tif 000023
【００４７】
スキーム３、工程Ａ：０℃で撹拌しているラセミ体（±）−５−オキソピペリジン−２−カルボン酸（１．００ｇ、６．９９ミリモル）とＣＨ２Ｃｌ２（１４．０ｍＬ）との混合物に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１．６０ｇ、７．３４ミリモル）およびトリエチルアミン（１．０７ｍＬ、７．６８ミリモル）を加え、混合物を撹拌しながら一晩室温に温める。ｐＨが３．０に達するまでＨＣｌの水溶液（１．０Ｎ）を加え、次いで混合物をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機相をＮａＣｌ飽和水溶液（５０ｍＬ）で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を黄褐色固体として与える（１．３０ｇ、収率７７％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１４４（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋、１８８（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋、２６６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例１２
（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（ラセミ）の合成。
【化２０】
2016540007.tif 000024
【００４８】
スキーム３、工程Ｂ：０℃で撹拌しているトルエン（８ｍＬ）およびＣＨ３ＯＨ（２ｍＬ）中の（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−オキソピペリジン−２−カルボン酸（１．３０ｇ、５．３４ミリモル）の混合物に、トリメチルシリルジアゾメタン（２．９４ｍＬ、５．３４ミリモル）を滴下の方法で加え、次いで混合物を室温に温めて１時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して標記化合物を淡黄色油として与える（１．３０ｇ、収率９５％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１５８（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋、２０２（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋。
調製例１３
（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５，５−ジフルオロピペリジン−２−カルボン酸メチル（ラセミ）の合成。
【化２１】
2016540007.tif 000025
【００４９】
スキーム３、工程Ｃ：撹拌している、トリエチルアミン三フッ化水素酸塩（４．９ｍＬ、３０．３ミリモル）、ＣＨ２Ｃｌ２（４２．９ｍＬ）、およびトリエチルアミン（１．７６ｍＬ、１２．６ミリモル）の室温混合物に、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−Ｓ，Ｓ−ジフルオロスルフィニウムテトラフルオロホウ酸塩（５．２１ｇ、２２．７４ミリモル）、続いてＣＨ２Ｃｌ２（２．５３ｍＬ）中の（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−オキソピペリジン−２−カルボン酸メチル（１．３０ｇ、５．０５ミリモル）の溶液を加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌する。勢いよく撹拌しながら、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（１００ｍＬ）を慎重に加え（注意！激しい発泡！）、次いで混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過して、ろ液を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の５％から３０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色油として与える（６１０ｍｇ、収率４３％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例１４
（２Ｒ＊，５Ｓ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸塩酸塩（ラセミ）の合成。
【化２２】
2016540007.tif 000026
【００５０】
ラセミ体の（２Ｒ＊，５Ｓ＊）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸（１５０ｍｇ、１．０３ミリモル）、２−フェノキシアセトアルデヒド（２８１ｍｇ、２．０７ミリモル）、酢酸（５９μＬ、１．０３ミリモル）、および１，２−ジクロロエタン（５．２ｍＬ）の混合物を室温で３０分間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３０７ｍｇ、１．４５ミリモル）を加えて混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮し、次いで１，４−ジオキサン（５ｍＬ）および１，４−ジオキサン中のＨＣｌの溶液（４．０Ｍ、３．０ｍＬ、１２．０ミリモル）を加える。得られる懸濁液を１０分間撹拌し、次いで固体をろ過によって除去しろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を与える（３２０ｍｇ、収率１００％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２６６（Ｍ＋Ｈ）＋、２８８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【化２３】
2016540007.tif 000027
調製例１５
（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピロリジン−２−カルボン酸メチルの合成。
【化２４】
2016540007.tif 000028
【００５１】
スキーム４、工程Ａ：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−ｃｉｓ−４−ヒドロキシ−Ｄ−プロリンメチルエステル（２．０ｇ、７．９１ミリモル）、デス−マーチンペルヨージナン（４．８４ｇ、１１．０７ミリモル）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）の混合物を室温で２時間撹拌する。ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（７５ｍＬ）、および水（７５ｍＬ）を加え、次いで層を分離して水層をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）で抽出する。有機相を組み合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過して、ろ液を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から５０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を与える（１．３９ｇ、収率７２％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１４４（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋、１８８（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋。
調製例１６
（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボン酸メチルの合成。
【化２５】
2016540007.tif 000029
【００５２】
スキーム４、工程Ｂ：窒素雰囲気下で、（Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−オキソピロリジン−２−カルボン酸メチル（２７０ｍｇ、１．１１ミリモル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２．２２ｍＬ）に溶解して三フッ化ビス（２−メトキシエチル）アミノ硫黄（４９１ｍｇ、２．２２ミリモル）を加える。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで混合物を、氷（５０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液（５０ｍＬ）の混合物上に注ぐ。得られる二相の混合物を１５分間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出して、有機相を減圧下で濃縮する。得られる粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の１０％から５０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物をカルバミン酸塩回転異性体の５３：４７混合物として与える（２０６ｍｇ、収率７０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ４．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，６．０Ｈｚ，０．４７Ｈ），４．４４（ｄｄ，Ｊ＝９．１，４．９Ｈｚ，０．５３Ｈ），３．９０−３．７４（ｍ，２Ｈ），３．７６２（ｓ，１．５９Ｈ），３．７５９（ｓ，１．４１Ｈ），２．７８−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．５２−２．３９（ｍ，１Ｈ），１．４７（ｓ，４．２３Ｈ），１．４２（ｓ，４．７７Ｈ）。
調製例１７
（±）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸（ラセミ）の合成。
【化２６】
2016540007.tif 000030
【００５３】
０℃の撹拌している（±）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸（１５０ｍｇ、０．８５ミリモル）およびＣＨ２Ｃｌ２（１．６９ｍＬ）の混合物に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１８５ｍｇ、０．８５ミリモル）およびトリエチルアミン（１７７μＬ、１．２７ミリモル）を加える。混合物を撹拌しながら一晩室温に温める。ｐＨが３．０に達するまでＨＣｌの水溶液（１．０Ｎ）を加え、次いで混合物をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機相をＮａＣｌ飽和水溶液（５０ｍＬ）で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を与える（２３５ｍｇ、収率１００％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２２２（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋、３００（Ｍ＋Ｎａ）＋、５７７（２Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例１８
（２Ｒ＊，６Ｒ＊）−６−メチル−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボン酸ナトリウム（ラセミ）の合成。
【化２７】
2016540007.tif 000031
【００５４】
（２Ｒ＊，６Ｒ＊）−６−メチル−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボン酸エチル（２００ｍｇ、０．６９ミリモル）を、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）およびＣＨ３ＯＨ（１．０ｍＬ）の混合物に溶解し、次いでＮａＯＨの水溶液（５．０Ｎ、２７５μＬ、１．３７ミリモル）を加えて混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して標記化合物を与える（１９６．５ｍｇ、収率１００％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２６４（Ｍ＋Ｈ）＋、５４９（２Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例１９
（Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボン酸の合成。
【化２８】
2016540007.tif 000032
【００５５】
（Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボン酸メチル（１．０８ｇ、４．０１ミリモル）を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）の混合物に溶解し、次いでＮａＯＨの水溶液（２．０Ｎ、１０ｍＬ、２０ミリモル）を加えて混合物を室温で１．５時間撹拌する。ｐＨが１．０に達するまでＨＣｌの水溶液（１．０Ｎ）を加え、次いで混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機層をＮａＣｌ飽和水溶液（５０ｍＬ）で洗い、層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を含有する混合物を与える（８５０ｍｇ、収率８３％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１５６（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋、２７８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００５６】
以下の化合物を、（Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボン酸メチルの代わりに適切なエステルを用いて実質的に調製例１９の方法によって調製する。
【表３】
2016540007.tif 000033
調製例２５
（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４，４−ジメチルピペリジン−２−カルボン酸の合成
【化２９】
2016540007.tif 000034
【００５７】
パールシェーカー（Ｐａｒｒ  ｓｈａｋｅｒ）内で、（Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボン酸ベンジル（６００ｍｇ、１．７４ミリモル）、氷酢酸（１０ｍＬ）、および５％パラジウム炭素（１００ｍｇ、０．０４７ミリモル）の混合物を、水素で４１３．７ｋＰａｇに加圧する。室温で１時間振とうし、次いで圧力を解放してろ過によって固体を除去し、酢酸（１０ｍＬ）を通してすすぐ。ろ液を圧力容器内に置いて酸化白金（ＩＶ）（２２５ｍｇ、０．９９ミリモル）を加える。容器を水素で１７２４ｋＰａｇに加圧し、１００℃で一晩撹拌する。容器を室温に冷却して圧力を解放する。ろ過によって固体を除去し、酢酸を通してすすぐ。ろ液を減圧下で濃縮する。トルエン（１０ｍＬ）を加え、再び減圧下で濃縮して粗製の、無色膜を与える（３２９ｍｇ）。
【００５８】
この粗製物質に、水酸化ナトリウムの水溶液（２．０Ｎ、６．３ｍＬ、１２．５ミリモル）を加える。次いで、１，４−ジオキサン（３．４ｍＬ）中の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの溶液（３００ｍｇ、１．７ミリモル）を加えて混合物を室温で一晩撹拌する。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１５２ｍｇ、０．７０ミリモル）を加えて室温で６時間撹拌する。混合物を、１．０ＮのＨＣｌ水溶液でｐＨ７に中和し、次いでＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）を加える。水層を１．０ＮのＨＣｌでｐＨ３に酸性化し、次いで水層をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ｍＬ）で抽出する。水層を、１．０ＮのＨＣｌ水溶液でｐＨ２にさらに酸性化し、次いでＥｔＯＡｃ（５×１５ｍＬ）で抽出する。有機層を組み合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過によって固体を除去し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を無色膜として与える（８５．５ｍｇ、収率２２％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：１５８（Ｍ＋Ｈ）＋。
調製例２６
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３０】
2016540007.tif 000035
【００５９】
（±）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルピペリジン−２−カルボン酸（２００ｍｇ、０．８２ミリモル）および４−（（Ｓ）−１−アミノエチル）安息香酸メチル塩酸塩（１７７ｍｇ、０．８２ミリモル）をＤＭＦ（１．６ｍＬ）に加え、次いでトリエチルアミン（４０１μＬ、２．９ミリモル）、続いてＢＯＰ（４７２ｍｇ、１．０７ミリモル）を加える。混合物を、室温で一晩撹拌する。混合物を、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈してＮａＣｌ飽和水溶液（２×２５ｍＬ）で洗う。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過して固体を除去し、ろ液を減圧下で濃縮する。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の２０％から１００％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を無色油として与える（１５８ｍｇ、収率４８％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３０５（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋。
【００６０】
以下の化合物を、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルピペリジン−２−カルボン酸の代わりに適切なカルボン酸を用いて実質的に調製例２６の方法によって調製する。
【表４−１】
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【表４−２】
2016540007.tif 000037
調製例３４
４−（（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボニル）アミノメチル）安息香酸メチルの合成。
【化３１】
2016540007.tif 000038
【００６１】
（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボン酸（２５３ｍｇ、１．０５ミリモル）、４−（アミノメチル）安息香酸メチル塩酸塩（２６０ｍｇ、１．２９ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（６０ｍｇ、０．３９ミリモル）、トリエチルアミン（６００μＬ、４．３０ミリモル）、ＥＤＣ（３００ｍｇ、１．５６ミリモル）、およびＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）の混合物を、室温で２日間撹拌する。混合物を、塩酸の水溶液（１．０Ｎ、２５ｍＬ）、続いてＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（５０ｍＬ）およびＮａＣｌの飽和水溶液（５０ｍＬ）で洗う。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して約８５質量％の標記化合物を含有するガラス状油を与える（４５０ｍｇ、収率９４％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：２８９（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ）＋、３３３（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋、４１１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００６２】
以下の化合物を、（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボン酸の代わりに適切なカルボン酸を用いて、および４−（アミノメチル）安息香酸メチル塩酸塩の代わりに４−（（Ｓ）−１−アミノエチル）安息香酸メチルまたは４−（（Ｓ）−１−アミノエチル）安息香酸メチル塩酸塩を用いて実質的に調製例３４の方法によって調製する。
【表５−１】
2016540007.tif 000039
【表５−２】
2016540007.tif 000040
ａ）生成物を、Ｃ１８シリカゲルの逆相クロマトグラフィーによって精製し、水／アセトニトリルグラジエント中の０．１％ギ酸で溶離する。
ｂ）生成物を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサングラジエントで溶離する。
調製例４１
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メトキシピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３２】
2016540007.tif 000041
【００６３】
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−ヒドロキシピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（４４０ｍｇ、１．０８ミリモル）、ＴＨＦ（５．０ｍＬ）、およびヨードメタン（６７μＬ、１．０８ミリモル）の混合物を０℃に冷却し、次いで水素化ナトリウム（鉱油中の６０％分散液、４３．３ｍｇ、１．０８ミリモル）を加えて０℃で２時間撹拌する。水素化ナトリウムの第２の部（鉱油中の６０％分散液、４３．３ｍｇ、１．０８ミリモル）を加え、０℃で３時間撹拌し、次いで撹拌しながら一晩温度を温める。ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（５ｍＬ）を加え、次いで混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で抽出する。組み合わせた有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗い、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過によって固体を除去し、ろ液を減圧下で濃縮する。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から４０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を澄んだ、無色油として与える（１２８ｍｇ、収率２８％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３６５（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）＋、４２１（Ｍ＋Ｈ）＋。
調製例４２
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩の合成。
【化３３】
2016540007.tif 000042
【００６４】
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（１５８ｍｇ、０．３９ミリモル）を、ジオキサン（２．０ｍＬ、８．０ミリモル）中４．０Ｍの塩化水素の溶液で処理して室温で１時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して標記化合物を白色固体として与える（１３３ｍｇ、収率１００％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６５】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの代わりに適切なカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて実質的に調製例４２の方法によって調製する。
【表６−１】
2016540007.tif 000043
【表６−２】
2016540007.tif 000044
ａ）ＣＨ３ＯＨ（２０ｍＬ／ミリモルの基材）を共溶媒として使用する。
ｂ）１時間の代わりに３日間室温で撹拌する。
ｃ）室温で３時間撹拌し、次いで１，４−ジオキサン中のＨＣｌの第２の部を加え（最初と同等）、単に１時間室温で撹拌する代わりに、さらに２時間室温で撹拌する。
ｄ）ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ／ミリモルの基材）を共溶媒として使用する。
調製例４９
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３４】
2016540007.tif 000045
【００６６】
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（６０ｍｇ、０．１４ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（２．０ｍＬ）に溶解してトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ、１３．２３ミリモル）を加える。混合物を、室温で９０分間撹拌し、次いで水（７．０ｍＬ）および炭酸ナトリウムの１０％水溶液（２０ｍＬ）を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（５ｍＬ）で洗う。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して約８４質量％の標記化合物を含有する混合物を与える（５３ｍｇ、補正収率９７％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３１７（Ｍ＋Ｈ）＋、６３３（２Ｍ＋Ｈ）＋、６５５（２Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００６７】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの代わりに適切なカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用いて実質的に調製例４９の方法によって調製する。
【表７】
2016540007.tif 000046
調製例５５
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３５】
2016540007.tif 000047
【００６８】
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−ベンジルオキシカルボニル−４，４−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（５４０ｍｇ、１．１７ミリモル）をＣＨ３ＯＨ（４．７ｍＬ）に溶解して１０％パラジウム炭素（１２５ｍｇ、０．１２ミリモル）を加える。水素雰囲気下で室温で３日間撹拌する。珪藻土の栓（ｐｌｕｇ  ｏｆ  ｄｉａｔｏｍａｃｅｏｕｓ  ｅａｒｔｈ）に通してろ過し、ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）を通してすすぐ。ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を白色固体として与える（２８０ｍｇ、収率７３％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３２７（Ｍ＋Ｈ）＋、６５３（２Ｍ＋Ｈ）＋、６７５（２Ｍ＋Ｎａ）＋。
調製例５６
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３６】
2016540007.tif 000048
【００６９】
１，２−ジクロロエタン（１．９ｍＬ）中の４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩（１３０ｍｇ、０．３８ミリモル）および２−フェノキシアセトアルデヒド（１０４ｍｇ、０．７６ミリモル）の混合物を室温で３０分間撹拌し、次いでトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１１３ｍｇ、０．５３ミリモル）を加えて室温で３時間撹拌する。混合物を０℃に冷却し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２５ｍＬ）を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（２５ｍＬ）で洗う。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮する。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から１００％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、１３０ｍｇの物質を与える。この物質を、Ｃ１８シリカゲルの逆相クロマトグラフィーにかけ、水／ＣＨ３ＣＮグラジエント中０．１％ギ酸で溶離する。標記化合物を含有する画分をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（２５ｍＬ）で洗う。有機層を分離してＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を無色油として与える（７５ｍｇ、収率４６％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４２５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７０】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩の代わりに適切なアミン塩酸塩および／または２−フェノキシアセトアルデヒドの代わりに適切なアルデヒドを用いて実質的に調製例５６の方法によって調製する。
【表８】
2016540007.tif 000049
ａ）シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、ヘキサン中の１０％から９０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離する。標記化合物は、溶離する第２のジアステレオ異性体である。逆相クロマトグラフィーは無し。
ｂ）シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、ヘキサン中の０％から８０％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離する。逆相クロマトグラフィーは無し。
調製例５９
４−（（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２−フェノキシエチル）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボニル）アミノメチル）安息香酸メチルの合成。
【化３７】
2016540007.tif 000050
【００７１】
室温で４−（（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボニル）アミノメチル）安息香酸メチル塩酸塩（３００ｍｇ、０．９２ミリモル）および２−フェノキシアセトアルデヒド（１４０ｍｇ、１．０３ミリモル）をＣＨ３ＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、酢酸（２００μＬ、３．４９ミリモル）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３００ｍｇ、４．７７ミリモル）を加える。混合物を、室温で一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２０ｍＬ）を加える。層を分離し、有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（２０ｍＬ）で洗う。有機層を減圧下で濃縮し、次いで粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ＥｔＯＡｃ中１００％ＥｔＯＡｃから５％（ＣＨ３ＯＨ中７．０Ｍ  ＮＨ３）のグラジエントで溶離し、標記化合物をガラス状油として与える（２４０ｍｇ、収率６４％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４０９（Ｍ＋Ｈ）＋、４３１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【００７２】
以下の化合物を、４−（（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボニル）アミノメチル）安息香酸メチル塩酸塩の代わりに適切なアミン塩酸塩を用いて実質的に調製例５９の方法によって調製する。
【表９】
2016540007.tif 000051
ａ）順相フラッシュクロマトグラフィーは無し。
ｂ）調製例６１および６２は、同じジアステレオ異性体に関して不純な出発物質から生じる。ジアステレオ異性体をＣ１８シリカゲルの逆相クロマトグラフィーによって分離し、ＣＨ３ＣＮ／水グラジエント中０．１％のギ酸で溶離する。
調製例６３
４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３８】
2016540007.tif 000052
【００７３】
室温で４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（４４ｍｇ、０．１４ミリモル）をＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解し、次いでＤＩＥＡ（７３μＬ、０．４２ミリモル）、１−（２−ブロモエトキシ）−４−フルオロベンゼン（４６ｍｇ、０．２１ミリモル）、およびＮａＩ（１０．５ｍｇ、０．０７ミリモル）を加える。混合物を、撹拌しながら１１０℃に２時間加熱する。混合物をＴＢＭＥ（２５ｍＬ）で希釈して５％ＬｉＣｌ水溶液（２５ｍＬ）、続いてＮａＣｌの飽和水溶液（２５ｍＬ）で洗う。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮する。粗製物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン中の０％から１００％のＥｔＯＡｃのグラジエントで溶離し、標記化合物を白色固体として与える（３８ｍｇ、収率６０％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４５５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７４】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（５Ｒ）−６−アザスピロ［２．５］オクタン−５−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの代わりに適切なアミンおよび／または１−（２−ブロモエトキシ）−４−フルオロベンゼンの代わりに適切な臭化アルキルを用いて実質的に調製例６３の方法によって調製する。
【表１０】
2016540007.tif 000053
ａ）シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、０％から７０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサングラジエントで溶離してジアステレオ異性体の混合物を取得する。次いで、シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、ヘキサン中の５２％のＥｔＯＡｃで溶離して、ジアステレオ異性体を分離する。標記化合物は、溶離する第１のジアステレオ異性体である。
調製例７０
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−１−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）ピロリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの合成。
【化３９】
2016540007.tif 000054
【００７５】
室温で４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−ピロリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩（１．００ｇ、３．２ミリモル）をＤＭＦ（８．０ｍＬ）に溶解し、次いでＫ２ＣＯ３（１．３３ｇ、９．６ミリモル）および１−（２−ブロモエトキシ）−４−フルオロベンゼン（７１５ｍｇ、３．２ミリモル）を加え、次いで混合物を撹拌しながら１００℃に一晩加熱する。混合物を、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、ＮａＣｌの飽和水溶液（２×７５ｍＬ）で洗う。水層を捨て、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で約１０ｍＬの体積まで濃縮する。ヘキサン（１００ｍＬ）を加え、次いで得られる沈殿物をろ過によって収集しヘキサン（２５ｍＬ）ですすぎ空気乾燥して標記化合物を白色固体として与える（７５０ｍｇ、収率５７％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４１５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７６】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−ピロリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩の代わりに４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−４，４−ジフルオロピロリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩を用いて実質的に調製例７０の方法によって調製する。
【表１１】
2016540007.tif 000055
ａ）一晩加熱した後、１当量のＮａＩおよびさらに１当量の臭化アルキルを加える。
ｂ）シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、１０％から１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサングラジエントで溶離する。
実施例１
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸塩酸塩の合成。
【化４０】
2016540007.tif 000056
【００７７】
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル（７０ｍｇ、０．１６ミリモル）をＴＨＦ（１．０ｍＬ）およびＣＨ３ＯＨ（１．０ｍＬ）の混合物に溶解する。水酸化ナトリウムの１．０Ｎ水溶液（３３０μＬ、０．３３ミリモル）を加えて、混合物を室温で一晩撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して固体を与え、次いで１，４−ジオキサン（２．０ｍＬ、８．０ミリモル）中４．０Ｍの塩化水素の溶液を加えて室温で１０分間撹拌する。固体をろ過によって除去し、ＴＨＦ（２ｍＬ）を通してすすぐ。ろ液を減圧下で濃縮して標記化合物を灰白色固体として与える（５２ｍｇ、収率７１％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７８】
以下の化合物を、４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−１−（２−フェノキシエチル）−２−メチルピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチルの代わりに適切なメチルエステルを用いて、実質的に実施例１の方法によって調製する。
【表１２−１】
2016540007.tif 000057
【表１２−２】
2016540007.tif 000058
【表１２−３】
2016540007.tif 000059
【表１２−４】
2016540007.tif 000060
ａ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、反応混合物を５．０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で中和し、減圧下で濃縮して、物質をＥｔＯＡｃと共に粉砕し、溶液相を傾瀉し、次いで溶媒を除去して生成物を取得する。
ｂ）反応混合物を、室温で一晩ではなく７０℃で２時間撹拌する。
ｃ）シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、０％から１０％のＣＨ３ＯＨ／ＥｔＯＡｃグラジエントで溶離する。
ｄ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、１．０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で反応混合物をｐＨ７．０に中和し、次いでＥｔＯＡｃで抽出し、ＮａＣｌ飽和水溶液で洗い、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して生成物を取得する。
ｅ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、１．０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で反応混合物をｐＨ７．０に中和し、次いで減圧下で濃縮し、１：１のエタノール／ＣＨ３ＣＮと共に物質を粉砕し、超音波処理し、ＰＴＦＥフィルターディスクを通してろ過によって固体を除去する。ろ液を減圧下で濃縮して生成物を取得する。
ｆ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、反応混合物を減圧下で濃縮する。
ｇ）粗製物質をＣ１８シリカゲルの逆相クロマトグラフィーにかけ、ＣＨ３ＣＮ／水グラジエント中の０．１％ＴＦＡで溶離して生成物を単一のジアステレオ異性体として取得する。
ｈ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、減圧下で濃縮して有機溶媒を除去し、５．０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で反応混合物をｐＨ１．０に酸性化し、得られる白色沈殿物をろ過によって単離して生成物を取得する。
ｉ）ＨＣｌ／１，４−ジオキサンで酸性化する代わりに、減圧下で濃縮して有機溶媒を除去し、５．０Ｎ  ＨＣｌ水溶液で反応混合物をｐＨ４．０に酸性化し、得られる白色沈殿物をろ過によって単離して生成物を取得する。
実施例１９
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸塩酸塩の合成。
【化４１】
2016540007.tif 000061
【００７９】
４−（（１Ｓ）−１−（（（２Ｒ＊）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−カルボニル）アミノ）エチル）安息香酸メチル塩酸塩（２００ｍｇ、０．５５ミリモル）、β−ブロモフェネトール（１１３ｍｇ、０．５５ミリモル）、炭酸カリウム（２２９ｍｇ、１．６５ミリモル）、ＣＨ３ＣＮ（１．３８ｍＬ）、および水（少なくとも９．９ｍｇ、０．５５ミリモルであるが、２９．７ｍｇ、１．６５ミリモル以下）の混合物を、７０℃で２日間、次いで８２℃で３日間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して固体を与える。沸騰しているエタノール中でこの固体を撹拌し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮する。粗製物質をＣ１８シリカゲルの逆相クロマトグラフィーにかけ、ＣＨ３ＣＮ／水グラジエント中の０．１％ギ酸で溶離して、１６１ｍｇの標記化合物のジアステレオ異性体の混合物を与える。１２５ｍｇのこの混合物を、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ  ５μＭカラムの分取超臨界流体クロマトグラフィーにかけ、超臨界ＣＯ２のＣＨ３ＯＨに対して３：１の混合物中０．２％のイソプロピルアミンで溶離する。溶離する第２の異性体を単離し、減圧下で濃縮する。物質を１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中４．０ＭのＨＣｌの溶液で処理して１０分間撹拌する。減圧下で濃縮して標記化合物を白色固体として与える（５４ｍｇ、収率２７％）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋Ｈ）＋、４５５（Ｍ＋Ｎａ）＋。
Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏでのヒト  ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４への結合
【００８０】
ｈＥＰ１およびｈＥＰ４膜を、ヒトＥＰ１（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＡＹ２７５４７０）またはＥＰ４（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＡＹ４２９１０９）受容体を安定発現する組み換えＨＥＫ２９３細胞から調製する。ｈＥＰ２およびｈＥＰ３膜を、ＥＰ２（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＡＹ２７５４７１）またはＥＰ３（ｉｓｏｆｏｒｍ  ＶＩ：Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＡＹ４２９１０８）受容体プラスミドで一過的にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞から調製する。凍結細胞ペレットを、テフロン（登録商標）／ガラスホモジナイザーを用いて均質化緩衝液中で均質化する。膜タンパク質を分取しドライアイス上で急速冷凍してその後−８０℃で貯蔵する。均質化緩衝液は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、２５０ｍＭスクロース、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．３ｍＭインドメタシンおよびこれに加えてＲｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓから得られるＣｏｍｐｌｅｔｅ（商標）（カタログ番号１  ６９７  ４９８）を、ＥＤＴＡと共に含有した。
【００８１】
それぞれの受容体に結合している［３Ｈ］−ＰＧＥ２のＫｄ値を、飽和結合の調査または相同性競争（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ）によって決定する。化合物を、３倍の希釈系列を用いて９６−ウェル構成において試験し、１０点曲線を生成する。希釈した化合物を、０．３から０．５ｎＭ［３Ｈ］−ＰＧＥ２（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、１１８から１８０Ｃｉ／ミリモル）の存在下で２０μｇ／ウェルのＥＰ１、１０μｇ／ウェルのＥＰ２、１ｕｇ／ウェルのＥＰ３または１０から２０μｇ／ウェルのＥＰ４膜と共に２５℃で９０分間インキュベートする。結合反応は、０．５ｍＬポリスチレン９６−ウェルのディープウェルプレートを用いて２００μＬのＭＥＳ緩衝液（１０ｍＭ  ＭＥＳ  ｐＨ６．０と共にＫＯＨ、１０ｍＭｍｇＣｌ２および１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中で実行する。非特異的結合を、２μＭのＰＧＥ２の存在下および不在下における結合と比較することにより計算する。膜を、ろ過（ＴｏｍＴｅｋ収獲機）によって採取し、冷緩衝液（１０ｍＭ  ＭＥＳ  ｐＨ６．０と共にＫＯＨ、１０ｍＭｍｇＣｌ２）で４回洗い、６０℃の炉で乾燥し、放射能をＴｏｐＣｏｕｎｔ検出器を用いてカウント毎分（ＣＰＭ）として定量化する。特異的な結合の百分率を、２ｕＭのＰＧＥ２の存在下での結合に対して補正された、いかなる阻害剤も無い結合の百分率として計算する。データを、ｙ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））））（式中、ｙ＝特異的阻害％、Ａ＝曲線の底、Ｂ＝曲線の頂点、Ｃ＝相対ＩＣ５０＝頂点から底までのデータの範囲に基づいて５０％阻害を生じる濃度、Ｄ＝ヒル、勾配＝曲線の勾配である）で示されるような４パラメータ非線形ロジスティック方程式（ＡＢａｓｅ  Ｅｑｕａｔｉｏｎ  ２０５）を用いて分析する。Ｋｉ換算はＩＣ５０値から（Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／Ｋｄ）（式中、［Ｌ］は配位子濃度）である。結果を、幾何平均±標準偏差として表わす（ｎ＝独立測定の回数）。標準偏差は、ＳＤｌｏｇＫｉ×幾何平均×ｌｎ（１０）である、デルタ法によって計算する。
【００８２】
本明細書の実施例１〜１９の化合物は、実質的に上で述べた通りに試験して約２μＭより低いｈＥＰ４のＫｉ値を示す。
【表１３】
2016540007.tif 000062
【００８３】
表１におけるデータは、実施例８の化合物が、ｈＥＰ４受容体に対する選択性を示してｈＥＰ４にｈＥＰ１、ｈＥＰ２、およびｈＥＰ３よりも強く結合することを実証する。
Ｉｎ  ＶｉｔｒｏでのヒトＥＰ４機能的アンタゴニスト活性
【００８４】
アッセイを、ヒトＥＰ４受容体を安定発現する組み換えＨＥＫ２９３細胞において行った。細胞株を、高グルコースならびに１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５００μｇ／ｍｌのジェネテシンおよび２ｍＭのＬ−グルタミンを補ったピリドキシン塩酸塩（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含むＤＭＥＭ中で培養することにより維持する。コンフルエント培養を、３７℃で５％ＣＯ２を含有する雰囲気中で成長させる。細胞を、２．５％トリプシン−ＥＤＴＡを用いて採取し、凍結培地（６％ＤＭＳＯを含むＦＢＳ）中に１０７細胞／ｍＬで懸濁させてアリコートを液体窒素中に貯蔵する。アッセイの直前に、細胞をＤＭＥＭ中で融解し、遠心分離し、ｃＡＭＰ緩衝液中に再懸濁させる。
【００８５】
ＥＰ４アンタゴニストによるＰＧＥ２誘発性ｃＡＭＰ産生の阻害を、ＨＴＲＦ（Ｃｉｓｂｉｏカタログ＃６２ＡＭ４ＰＥＢ）を用いて測定する。４０００細胞に相当するアリコートを、ＥＣ８０のＰＧＥ２（Ｓｉｇｍａからの０．１８８ｎＭ  ＰＧＥ２、カタログ＃Ｐ５６４０−１０ｍｇ）およびアンタゴニストを含有する５０μＬのｃＡＭＰアッセイ緩衝液で室温で２０分間インキュベートする。ｃＡＭＰアッセイ緩衝液は、５００ｍＬ  ＨＢＳＳ（ハンクス平衡塩類溶液）、０．１％ＢＳＡ、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳおよび２００μＭ  ＩＢＭＸ（Ｓｉｇｍａ  Ｉ５８７９）を含有する。ＣＪ−０４２７９４（４−｛（１Ｓ）−１−［（｛５−クロロ−２−［（４−フルオロフェニル）オキシ］フェニル｝カルボニル）アミノ］エチル｝安息香酸）は、陽性対照として働く（Ｍｕｒａｓｅ，Ａ．ら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、８２：２２６〜２３２頁（２００８年））。ｃＡＭＰレベルを測定するために、溶解緩衝液中のｃＡＭＰ−ｄ２複合体および抗ｃＡＭＰ−クリプテート複合体を、処理した細胞と共に室温で１時間インキュベートする。ＨＴＲＦシグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を用いて検出して６６５ｎｍから６２０ｎｍにおける蛍光の比率を計算する。生データを、それぞれの実験について生成したｃＡＭＰ標準曲線を用いてｃＡＭＰ量（ピコモル／ウェル）に換算する。データを、ｙ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））））（式中、ｙ＝特異的阻害％、Ａ＝曲線の底、Ｂ＝曲線の頂点、Ｃ＝相対ＩＣ５０＝頂点から底までのデータの範囲に基づいて５０％阻害を生じる濃度、Ｄ＝ヒル、勾配＝曲線の勾配である）で示されるような４パラメータ非線形ロジスティック方程式（ＡＢａｓｅ  Ｅｑｕａｔｉｏｎ  ２０５）を用いて分析する。結果を、幾何平均±標準偏差として表わす（ｎ＝独立測定の回数）。標準偏差は、ＳＤｌｏｇＫｉ×幾何平均×ｌｎ（１０）である、デルタ法によって計算する。
【００８６】
実質的に上で述べた通りの手順に従って、実施例８の化合物は、ヒトＥＰ４において測定された１．７６＋１．５１ｎＭ（ｎ＝６）のＩＣ５０を有する。これは、実施例８の化合物が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでヒトＥＰ４のアンタゴニストであることを実証する。
Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏでのヒト全血におけるアンタゴニスト活性
【００８７】
マクロファージ／単球からのＬＰＳ−誘導性ＴＮＦα産生へのＰＧＥ２の阻害効果は、ＥＰ４受容体によって仲介されると考えられている（Ｍｕｒａｓｅ，Ａ．ら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、８２：２２６〜２３２頁（２００８年）を参照）。ヒト全血におけるＬＰＳ−誘導性ＴＮＦα産生へのＰＧＥ２の阻害効果を逆転させる実施例８の化合物の能力は、機能活性の証拠である。
【００８８】
血液を、健常な有志ドナーからヘパリンナトリウムバキュテナーチューブに集める。ドナーは、血液提供の４８時間以内にＮＳＡＩＤまたはセレコキシブをあるいは２週間以内にグルココルチコイドを摂取していない。全てのチューブ／ドナーを、５０ｍＬのＦａｌｃｏｎコニカル遠心管内に貯めて９８μＬ／ウェルを、９６−ウェル組織培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ  ３０７２）内に分配する。化合物を、ＤＭＳＯ中に最終×１００まで希釈して１μＬ／ウェルを３組にして血液に加え７点濃度反応曲線を与える。血液を、５％ＣＯ２の加湿雰囲気において、３０分間、化合物で３７℃で前処理し、その後０．２ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／ＰＢＳ＋／−１ｍＭ  ＰＧＥ２（Ｃａｙｍａｎ  １４０１０）中の１ｍｇ／ｍＬのリポ多糖（ＬＰＳ）（Ｓｉｇｍａ  ０１１１：Ｂ４）の１μＬ／ウェルの溶液を加えて１０μｇ／ｍＬ＋／−１０ｎＭ  ＰＧＥ２の最終ＬＰＳ濃度を与える。プレートを、５％ＣＯ２加湿雰囲気において３７℃で２０〜２４時間インキュベートする。プレートを、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５８１０Ｒ遠心分離機内で、１８００×ｇで、２２℃で１０分間遠心分離する。血漿を、細胞層から取り出してＶ字底ポリプロピレンプレートに移す。２μＬの血漿におけるＴＮＦαレベルを、Ｉｍｍｕｌｏｎ  ４  ＨＢＸプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  ３８５５）および３，３’，５，５’テトラメチルビフェニル−４，４’−ジアミン基質（ＫＰＬ  ５０−７６−０３）を用いて、市販の酵素免疫アッセイ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＤＹ２１０）によって定量化する。プレートを、ＳＯＦＴｍａｘＰＲＯ（ｖ．４．３．１）ソフトウェアを用いてプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｖｅｒｓａｍａｘ）上でＡ４５０〜Ａ６５０で読み取る。ＩＣ５０を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ｖ．４）非線形回帰、シグモイド用量反応曲線適合を用いて計算する。結果を、幾何平均±標準偏差として表わす（ｎ＝独立測定の回数）。標準偏差は、ＳＤｌｏｇＫｉ×幾何平均×ｌｎ（１０）である、デルタ法によって計算する。
【００８９】
実質的に上で述べた通りの手順に従って、実施例８の化合物は、ヒトＥＰ４において測定された０．０７８２±０．０６１ｕＭ（ｎ＝６）のＩＣ５０を有する。これは、実施例８の化合物が、ヒト血液ＴＮＦα誘導アッセイにおいてＥＰ４アンタゴニストであることを実証する。
【手続補正書】
【提出日】平成28年7月14日(2016.7.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物または薬学的に許容可能なその塩：
【化１】
2016540007.tif 000068
（式中、
Ｘは、
【化２】
2016540007.tif 000069
であり、
Ｒは、Ｈ、メチル、またはエチルであり、
Ｒ２がＨの場合Ｒ１はメチルであり、Ｒ２がメチルの場合Ｒ１はＨであり、
Ｒ３は、ＨまたはＦであり、
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、またはメチルであり、
Ｒ５は、ＯＨ、メチル、メトキシ、またはＦであり、
Ｒ７がＯＨの場合Ｒ６はＨであり、Ｒ７がＦの場合Ｒ６はＦであり、
Ｒ８およびＲ９は、それぞれ独立にＨまたはＦである）。
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ４がＦであり、Ｒ５がＦである、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ４がメチルであり、Ｒ５がメチルである、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ８がＦであり、Ｒ９がＦである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｘが
【化３】
2016540007.tif 000070
である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｘが
【化４】
2016540007.tif 000071
である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項８】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を含む、患者における変形性関節炎を治療するための医薬組成物。
【請求項９】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を含む、患者におけるリウマチ性関節炎を治療するための医薬組成物。
【請求項１０】
有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を含む、患者における変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みを治療するための医薬組成物。
【請求項１１】
療法において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１２】
変形性関節炎の治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１３】
リウマチ性関節炎の治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１４】
変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みの治療において使用するための、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１５】
請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩と、１種以上の薬学的に許容可能な基剤、希釈剤、または賦形剤とを含む、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
実質的に上で述べた通りの手順に従って、実施例８の化合物は、ヒトＥＰ４において測定された０．０７８２±０．０６１ｕＭ（ｎ＝６）のＩＣ５０を有する。これは、実施例８の化合物が、ヒト血液ＴＮＦα誘導アッセイにおいてＥＰ４アンタゴニストであることを実証する。
以下に、本願の当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］  以下の式の化合物または薬学的に許容可能なその塩：
【化４２】
2016540007.tif 000072
（式中、
Ｘは、
【化４３】
2016540007.tif 000073
であり、
Ｒは、Ｈ、メチル、またはエチルであり、
Ｒ２がＨの場合Ｒ１はメチルであり、Ｒ２がメチルの場合Ｒ１はＨであり、
Ｒ３は、ＨまたはＦであり、
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、またはメチルであり、
Ｒ５は、ＯＨ、メチル、メトキシ、またはＦであり、
Ｒ７がＯＨの場合Ｒ６はＨであり、Ｒ７がＦの場合Ｒ６はＦであり、
Ｒ８およびＲ９は、それぞれ独立にＨまたはＦである）。
［２］  Ｒがメチルである、［１］に記載の化合物または塩。
［３］  Ｒ４がＦであり、Ｒ５がＦである、［１］または［２］のいずれかに記載の化合物または塩。
［４］  Ｒ４がメチルであり、Ｒ５がメチルである、［１］または［２］のいずれかに記載の化合物または塩。
［５］  Ｒ８がＦであり、Ｒ９がＦである、［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物または塩。
［６］  Ｘが
【化４４】
2016540007.tif 000074
である、［１］から［５］のいずれかに記載の化合物または塩。
［７］  Ｘが
【化４５】
2016540007.tif 000075
である、［１］から［５］のいずれかに記載の化合物または塩。
［８］  有効量の［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節炎を治療する方法。
［９］  有効量の［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者におけるリウマチ性関節炎を治療する方法。
［１０］  有効量の［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みを治療する方法。
［１１］  療法において使用するための、［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
［１２］  変形性関節炎の治療において使用するための、［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
［１３］  リウマチ性関節炎の治療において使用するための、［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
［１４］  変形性関節炎またはリウマチ性関節炎に伴う痛みの治療において使用するための、［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩。
［１５］  ［１］から［７］のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容可能なその塩と、１種以上の薬学的に許容可能な基剤、希釈剤、または賦形剤とを含む、医薬組成物。
【国際調査報告】
2016540007.tif 000076
2016540007.tif 000077