(57)【要約】本発明は、造血幹細胞（ＨＳＣ）、骨髄幹細胞（ＢＭＳＣ）など、対象における幹細胞動員を増大するための動員剤使用方法を提供する。一実施形態では、果実、キノコ、微生物、母体体液、及びこれらの抽出物のブレンド組成物が、幹細胞の輸送を促進するために使用され、その結果、組織及び／または器官内の維持及び修復する特定部位への幹細胞の遊走をもたらす。身体内におけるＨＳＣ及び／またはＢＭＳＣの循環並びに維持部位及び自然再生機構への遊走の増大。フコイダン投与のための投与レジメン及び幹細胞の放出及び循環を増大する方法が更に提供される。【選択図】図１Ｂ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における幹細胞動員を増大させる方法であって、
幹細胞の動員を増大させることができる動員剤を提供することと、
前記対象において幹細胞の動員を増大させるために十分な量で、ある量の前記動員剤を前記対象に投与すること、とを含む方法。
【請求項２】
前記動員剤は、アロエもしくはその抽出物、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物からなる群から選択される１種以上の成分を含む組成物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記動員剤はアロエを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記アロエは、アロエマクロクラーダである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記幹細胞は、骨髄由来幹細胞（ＢＭＳＣ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記幹細胞は、造血幹細胞（ＨＳＣ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記量を投与することは、経口投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
経口投与は２回／日以上である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
経口投与は毎日である、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記経口投与は、カプセル剤の使用を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記カプセル剤は、約５０、１００、１５０、２００、２５０ｍｇ以下の量の前記一つ以上の動員剤を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記カプセル剤は、約２５０、５００、７５０、または１０００ｍｇ以下の量の前記一つ以上の動員剤を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
７５０ｍｇ以下のアロエマクロクラーダを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アロエもしくはその抽出物、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物からなる群から選択される１種以上の成分及び製薬上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物はアロエを含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記アロエは、アロエマクロクラーダである、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記１つ以上の成分の量が約５０、１００、１５０、２００、２５０ｍｇ以下を含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記１つ以上の成分の量が約２５０、５００、７５０、または１０００ｍｇ以下を含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
７５０ｍｇ以下のアロエマクロクラーダを含む、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
７５０ｍｇ以下のアロエマクロクラーダ及び１０００ｍｇ以下の、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物からなる群から選択される１種以上の成分を含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、幹細胞の動員増大方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書のすべての刊行物は、各個の刊行物または特許出願が参照によって組み込まれるよう、具体的かつ個別に示されたのと同じ範囲への参照によって組み込まれる。以下の説明には、本発明の理解に有用であり得る情報が含まれている。本明細書で提供されるいかなる情報も、先行技術であるもしくは現在の請求されている発明に関連すること、または具体的にもしくは暗黙的に参照されているいかなる刊行物も先行技術であることを承認するものではない。
【０００３】
幹細胞（ＳＣ）は、有機体の全生涯を通じて自己複製する及び体のさまざまな細胞型に分化する固有の能力を有する細胞として定義される。二つのよく知られている幹細胞型は、胚性幹細胞及び成体幹細胞である。胚性幹細胞（ＥＳＣ）は、胞胚と称される５〜１０日齢胚から抽出される。一旦分離されると、ＥＳＣは、インビトロで増殖させ、かつ、さまざまな組織細胞型（例えば心臓細胞、肝細胞、神経細胞及び腎細胞）への分化へと誘導することができ、その後に、組織を再生するためにそれらを特定の組織に注入することができる。
【０００４】
成体幹細胞（ＡＳＣ）は、自己複製し、さまざまな組織の特殊化した細胞に分化することができる未分化細胞または単純胞であり、出生後にいかなる生体においても見出される。ＡＳＣは、肝臓（卵形細胞）、腸（腸陰窩幹細胞）、筋肉（サテライト細胞）、脳（神経幹細胞）及び近年では、膵臓（ネスチン陽性膵臓幹細胞）など、さまざまな組織から分離されてきた。臍帯幹細胞及び胎盤幹細胞は、ＡＳＣとみなされる。
【０００５】
組織のＡＳＣ（組織幹細胞）の役割は、自身が見出される組織を維持して、修復することであるが、近年の研究では、１つの組織からのＡＳＣは、他の組織に特有の細胞型に進化する能力を有し得ることが報告されている。例えば、肝臓の卵形細胞は、インスリン産生膵臓細胞になる能力を有することがインビトロで示された。それにもかかわらず、一般的な見解としては、局所幹細胞は、それらが存在する組織の軽微な修復に主に関与しているというものだ。重大な損傷または変性が認められる場合、治癒組織で見つかる新規組織細胞の数は、局所幹細胞の能力をはるかに超えて複製及び分化し、これにより、他の部位由来の幹細胞が、必ず修復プロセスに関与していることが示唆される。
【０００６】
多くの組織が自身の組織幹細胞の特異的集団を含むにもかかわらず、主要な関心である特定のＡＳＣが主に骨髄及び血液で見つかる。組織幹細胞は、他の組織に分化するそれらの能力が制限されると伝統的に考えられている。しかしながら、骨髄幹細胞（ＢＭＳＣ）は、最近、他の組織の細胞になる重要な能力を有することが示された。
【０００７】
体内において、再生機構の凝集性で包括的な類似物を遅れずに抽出するためにこれらのプロセスを停止することは、困難である。それにもかかわらず、体内での異なる幹細胞、ＢＭＳＣ、ＨＳＣ、髄間質細胞（ＭＳＣ）、ＭＡＰＣ（多分化能成人前駆細胞）、ＶＳＥＬ（極小胚様幹細胞）、ＥＬＳＣ（胚盤葉上層幹細胞）またはＢＬＳＣ（卵割球様幹細胞）のどれかが体内自然治癒システムの広幅成分を構築することを確認するために、十分な情報が入手可能である。幹細胞は、幅広い種類の細胞型に分化することができるため、さまざまな組織及び器官の治癒及び再生プロセスにおいて重要な役割を担う。髄間質細胞（ＭＳＣ）などの骨髄幹細胞は、起源の組織から放出されて、対象の循環系または免疫系において循環し、さまざまな器官及び組織に遊走して、成熟細胞、最終分化細胞となる。したがって、幹細胞輸送（すなわち、放出、循環、ホーミング及び／または遊走）の向上により、これらの生理的プロセスを増幅することができ、また、潜在的治療法をさまざまな病理にもたらすことができる。治療的アプローチとして、幹細胞動員を利用する組成物及び方法がある。しかし、幹細胞動員を促進する既存の方法では、動的性能不良、高コスト、不便宜な投与方法及び不要な副作用など、重大な欠点がある。１つの主要なアプローチである、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）またはその組換え型形状の注入では、ピーク循環ＨＳＣ数に到達するまでに日数を要する。インターロイキン−８（ＩＬ−８）の投与では、数分内のみ作用して、血流で循環ＨＳＣレベルの上昇に一時的な影響を有するという、相反する問題が存在する。Ｇ−ＣＳＦ及び異なる分子、ＣＸＣＲ４アンタゴニストＡＭＤ３１００は、特に、出血、脾臓の破裂、血痰、骨疾患など、有意な副作用を有し得る。このため、副作用がなく、低コストで明白な臨床的利点を得るために、ヒト対象に幹細胞動員剤を送達する効果的かつ簡便な方法が当分野において必要である。
【０００８】
したがって、本明細書で開示される本発明の組成物及び方法により、活力度を向上させて発病率を低下させるために、体内での幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または動員を増大させ、損傷した組織の治癒及び治療を促進し、かつ、細胞の若干の損失を受けている組織の再生を補助する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
以下の実施形態及びその態様は、範囲に限定することなく、代表的、例示的であることを意図した組成物及び方法と組み合わせて説明及び図示する。一実施形態において、本発明は、対象において、幹細胞動員を増やすことが可能な動員剤を提供することと、対象において、幹細胞動員を増やすのに十分な量で対象にその動員剤を投与すること、を含む幹細胞動員を増やす方法を含む。別の実施形態では、動員剤は、アロエもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物の群から選択した成分の１種以上を含む組成物である。別の実施形態では、動員剤は、フコイダンである。別の実施形態では、フコイダンはワカメから抽出される。別の実施形態では、フコイダンの量は２５０ｍｇである。別の実施形態では、幹細胞は、骨髄由来の幹細胞（ＢＭＳＣ）である。別の実施形態では、幹細胞は、造血幹細胞（ＨＳＣ）である。別の実施形態では、その数量の投与には、経口投与が含まれる。別の実施形態では、経口投与にはカプセル剤または錠剤の使用が含まれる。他の実施形態では、経口投与は２回／日以上である。他の実施形態では、経口投与は毎日行う。他の実施形態では、カプセル剤または錠剤は、一つまたは複数の動員剤が約５０、１００、１５０、２００、２５０ｍｇ以下である量を含む。他の実施形態では、カプセル剤または錠剤は、一つ以上の動員剤が約２５０、５００、７５０、または１０００ｍｇ以下である量を含む。他の実施形態では、カプセル剤または錠剤は、７５０ｍｇ以下のアロエマクロクラーダを含む。さまざまな実施形態では、医薬組成物はアロエマクロクラーダを７５０ｍｇ以下、及びツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物１種以上を１０００ｍｇ以下含む。さまざまな実施形態では、この方法により、動員剤の投与後、幹細胞輸送が得られる。一実施形態では、動員剤を対象に提供することによって、１２日未満、６日未満、３日未満、２日未満、１日未満など、ある特定の期間内でのその対象の幹細胞の放出が増大する。代替的実施形態では、期間は投与後、１２時間未満、６時間、約４時間未満、約２時間未満または約１時間未満である。さまざまな実施形態では、投与後約１時間、２時間または３時間から、幹細胞が循環へ放出される。別の実施形態では、放出された幹細胞は、循環系に入り、対象の体内での循環幹細胞数が増加する。別の実施形態では、正常なベースラインと比較した循環幹細胞数の増加率は、対照と比較したとき、約２５％、約５０％、約１００％、または約１００％以上の増加であり得る。一実施形態では、対照は、同じ対象のベースライン値である。別の実施形態では、対照は、未処置対象者またはプラセボまたは薬理学的担体で処置した対象における循環幹細胞数である。
【００１０】
本発明の別の実施形態では、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物からなる群から選択される成分の１種以上を含む医薬組成物を提供する。さまざまな実施形態では、医薬組成物にはアロエが含まれる。さまざまな実施形態では、アロエは、アロエマクロクラーダである。さまざまな実施形態では、医薬組成物は１種以上の成分を約５０、１００、１５０、２００、２５０ｍｇ以下の量で含む。さまざまな実施形態では、医薬組成物は１種以上の成分を約２５０、５００、７５０または１０００ｍｇ以下の量で含む。さまざまな実施形態では、医薬組成物はアロエマクロクラーダを７５０ｍｇ以下含む。さまざまな実施形態では、医薬組成物はアロエマクロクラーダを７５０ｍｇ以下、及びツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物の１種以上を１０００ｍｇ以下含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
代表的実施形態は参照図に示される。実施形態及び本明細書で開示される図は、制限するというよりも、例示であると考慮される。
【図１Ａ】本発明のさまざまな実施形態による、内在性幹細胞の動員及び遊走を示す。造血幹細胞は、正常な生理学的条件下または疾患もしくは傷害に応答して、骨（Ａ）などの分画から動員し、血流（Ｂ）に循環して組織へ遊走し、身体（Ｃ）のさまざまな部分での修復及び再生を促進する。
【図１Ｂ】本発明のさまざまな実施形態による、内在性幹細胞の動員及び遊走を示す。造血幹細胞は、正常な生理学的条件下または疾患もしくは傷害に応答して、骨（Ａ）などの分画から動員し、血流（Ｂ）に循環して組織へ遊走し、身体（Ｃ）のさまざまな部分での修復及び再生を促進する。
【図１Ｃ】本発明のさまざまな実施形態による、内在性幹細胞の動員及び遊走を示す。造血幹細胞は、正常な生理学的条件下または疾患もしくは傷害に応答して、骨（Ａ）などの分画から動員し、血流（Ｂ）に循環して組織へ遊走し、身体（Ｃ）のさまざまな部分での修復及び再生を促進する。
【図２】本発明の実施形態による、ＣＸＣＲ４の役割を強調し、幹細胞の移動に伴うステップの概略図を示す。
【図３】は、本発明の様々な実施形態に従い、（Ａ）全ナガバクコ（ＬＢ）及び（Ｂ）初乳（Ｃｏｌ）の消費後、ヒト身体内における幹細胞の移動の典型的な時間経過を示すグラフを示す。いずれの生成物も、細線は、それぞれの応答を示す。ＬＢでは、太い点線が平均応答であり、太線は、４５分での平均ピーク応答の応答時間の経過を示す。初乳では、全参加者が６０分の時点でピークを示し、太線は、応答の平均時間経過を示す。
【図４】本発明の実施形態による、（Ａ）キノコ（冬虫夏草  、マンネンタケ、ヤマブシタケ）の多糖類豊富分画及び（Ｂ）スピルリナもしくはその抽出物の消費後のヒト体内における幹細胞の遊走の典型的な時間経過を示すグラフである。
【図５Ａ】それぞれ本発明の実施形態による、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類の摂取後のヒトボランティアの末梢血に由来するＣＤ３４＋リンパ球の割合を示す血液サンプルのフローサイトメトリープロファイルである。Ｘ軸は、幹細胞マーカーの蛍光強度を示す。Ｍ１マーカーは、幹細胞マーカーＣＤ３４に対して陽性を示す事象を示す。
【図５Ｂ】それぞれ本発明の実施形態による、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類の摂取後のヒトボランティアの末梢血に由来するＣＤ３４＋リンパ球の割合を示す血液サンプルのフローサイトメトリープロファイルである。Ｘ軸は、幹細胞マーカーの蛍光強度を示す。Ｍ１マーカーは、幹細胞マーカーＣＤ３４に対して陽性を示す事象を示す。
【図５Ｃ】それぞれ本発明の実施形態による、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類の摂取後のヒトボランティアの末梢血に由来するＣＤ３４＋リンパ球の割合を示す血液サンプルのフローサイトメトリープロファイルである。Ｘ軸は、幹細胞マーカーの蛍光強度を示す。Ｍ１マーカーは、幹細胞マーカーＣＤ３４に対して陽性を示す事象を示す。
【図６】本発明の実施形態による、ＬＢ、Ｃｏｌ、及びキノコ多糖類の消費前及び消費後の、ＣＤ３４＋循環幹細胞の表面上のＣＸＣＲ４分子の発現を図示するグラフである。
【図７】本発明の実施形態による、ナガバクコ、初乳、スピルリナ、キノコ（冬虫夏草、マンネンタケ、ヤマブシタケ）の多糖類豊富分画の消費の後のヒト体内における幹細胞の遊走の典型的な時間経過を示すグラフである。
【図８】本発明のさまざまな実施形態による、ワカメから抽出したフコイダンの経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ３４＋造血幹細胞の変化を示す。末梢血幹細胞のベースラインレベルは、ボランティアにおいて定量化された。次いで、ボランティアは、ワカメから抽出した、２５０ｍｇのフコイダンを摂取した。幹細胞のレベルを、その後、４５分、９０分、及び１８０分の時点で測定した。循環幹細胞数は、それぞれ、平均で１７％、２３％（Ｐ＜０．０２）及び３２％（Ｐ＜０．０２）増加した。
【図９】本発明のさまざまな実施形態による藻類の種であるクサモズクに由来するフコイダンを消費した結果を示す。クサモズクに由来する２５０ｍｇのフコイダンの消費により、同じ条件下で循環幹細胞数の平均的低下が得られた。
【図１０】本発明の種々の実施形態による藻類の種であるツルドクダミ、藍藻類及びフコイダンを組み合わせたものを消費した結果を示す。ツルドクダミを含む組み合わせの消費は、同じ条件下でのプラセボと比較して循環幹細胞数は、一時的に増加した。ツルドクダミ含む組み合わせは、循環幹細胞数が１３±６％（ｎ＝７）（ｐ＜０．０５）増加する、中程度の増加を誘発することが示された。ボランティアのうちの２名において、２５％を超える増加が認められた。
【図１１】本発明のさまざまな実施形態による、アロエマクロクラーダ由来抽出物の経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ３４＋造血幹細胞の変化を示す。その後に幹細胞レベルは、図示したように、６０分、１２０分、１８０分、及び２４０分の時点で測定し、６０分超から１２０分までの時点では、急速な増加速度を有し、その後、１８０分及び２４０分にわたる時点での測定まで持続した。
【図１２】固有のペレット形状と比較したとき、本発明のさまざまな実施形態によるアロエマクロクラーダの抽出物の経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ４５ｄｉｍＣＤ３４＋造血幹細胞の変化を示す。固有のペレット（３４０ｍｇ）は、ＣＤ４５ｄｉｍＣＤ３４＋細胞に対していかなる影響も有さなかった。しかし、１２０分の時点で２７％及び３２％に到達する循環ＣＤ４５ｄｉｍＣＤ３４＋細胞数の増加を誘発した１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇは、この影響を介して有意性を得られなかった。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。貯留時、１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１２０分の時点での循環ＣＤ４５ｄｉｍＣＤ３４＋細胞数の２９．６％の増加（ｐ＜０．０２）が明らかになった。
【図１３】固有部レットの経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ３４＋造血幹細胞の変化を示す。固有ペレット（３４０ｍｇ）は、循環ＣＤ３４＋細胞数の１８％の増大を誘発したが、有意性には到達しなかった。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇの投与量により、１２０分の時点で２９．８％及び３２％に到達した循環ＣＤ３４＋細胞数の増加が誘発された。しかし、２５０ｍｇで認められた影響のみ、有意（ｐ＜０．０４）に到達した。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果では、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１２０分の時点での循環ＣＤ３４＋細胞数の２９．９％の増加（ｐ＜０．００１）が明らかになった。
【図１４】固有のペレット形状と比較したとき、本発明のさまざまな実施形態によるアロエマクロクラーダの抽出物の経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−造血幹細胞の変化を示す。固有ペレット（３４０ｍｇ）により、１２０分の時点での循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞の２１．９％の増大（ｐ＜０．０３）が誘発された。１２０分の時点で４２．４％及び１８０分の時点で２２％の循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞数の増加を誘発した投与量２５０ｍｇでは、その影響を介して、有意性には到達しなかった。１２０分の時点で４７．２％及び１８０分の時点で２７．２％の循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞数の増加を誘発した投与量７５０ｍｇでは、その影響を介して、有意性には到達しなかった。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果では、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いた全データから、１２０分の時点での有意な循環ＣＤ３４＋細胞数の４４．８％の増加（ｐ＜０．０１）及び１８０分の時点での２４．７％の増加（ｐ＜０．０２）が明らかになった。
【図１５】固有のペレット形状と比較したとき、本発明の種々の実施形態によるアロエマクロクラーダの抽出物の経口投与後のヒトボランティアにおける循環ＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋造血幹細胞の変化を示す。固有ペレット（３４０ｍｇ）により、それぞれ、１２０分の時点でＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞数の８０．６％の増加（ｐ＜０．０２）、及び１８０分の時点での循環細胞数の６９％の増加（ｐ＜０．０３）が誘発された。循環ＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞は、１２０分の時点で３２．４％、１８０分の時点で４６．８％の増加をそれぞれ誘発した投与量２５０ｍｇでは、１８０分の時点での影響のみを介して、有意性に到達している（ｐ＜０．００３）。投与量７５０ｍｇでは、１８０分の時点での循環ＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞数の有意な増加７５．４％（ｐ＜０．０２）を引き起こした。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１８０分の時点での循環ＣＤ３４＋細胞数の６１．１％の増加（ｐ＜０．０００４）が明らかになった。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本明細書で引用されるすべての参考文献は、詳細に示されるかのように、それらの全体において参考として援用される。別に定義されていない限り、本発明の属する当業者に一般に理解されるとおり、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、同一の意味を有する。Ａｌｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２２ｎｄ  ｅｄ．，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２０１２年９月１５日）；Ｈｏｍｙａｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｎａｎｏｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  （２００８）；Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｓａｉｎｓｂｕｒｙ，  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，改訂、  Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ  ２００６）；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ７ｔｈ  ｅｄ．，  Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ  ２０１３）；  Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ，  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，  Ｗｉｌｅｙ−Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ（２０１２年１１月２８日）；及びＧｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｓａｍｂｒｏｏｋ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ４ｔｈ  ｅｄ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  （Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＮＹ  ２０１２）、当業者に本願において使用される用語のうちの多くに一般的なガイドを提供する。例えば、抗体の調整方法に関する参考文献は、Ｇｒｅｅｎｆｉｅｌｄ，  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ２ｎｄ  ｅｄ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ  （Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  ＮＹ，  ２０１３）；  Ｋoｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，  Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｔｉｓｓｕｅ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｌｉｎｅｓ  ｂｙ  ｃｅｌｌ  ｆｕｓｉｏｎ，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９７６  Ｊｕｌ，６（７）：５１１−９；Ｑｕｅｅｎ  ａｎｄ  Ｓｅｌｉｃｋ，  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ，米国特許第５，５８５，０８９号（１９９６年１２月）；及びＲｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，  Ｎａｔｕｒｅ１９８８  Ｍａｒ  ２４，３３２（６１６２）：３２３−７を参照されたい。
【００１３】
当業者は、本発明の実施において使用され得る、本明細書で記載されるものに類似もしくは等価な、多くの方法及び材料を認識する。実際に、本発明は、本明細書に記載される方法に決して限定されない。本発明の目的で、次の用語が、以下に定義される。
【００１４】
「投与」及び／もしくは「投与する」は、本明細書で使用される場合、医薬組成物を患者に送達する任意の経路を指す。送達経路は、非侵襲性の経口経路（口を通る）、局所経路（皮膚）、経粘膜経路（鼻、口内／舌下、膣、眼及び直腸）及び吸入経路、及び非経口経路、並びに当該分野で公知の他の方法を含み得る。非経口とは、眼窩内、輸液、動脈内、頸動脈内、嚢内、心内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、脊椎内、胸骨内、髄腔内、子宮内、静脈内、くも膜下、被膜下、皮下、経粘膜、または経気管など、一般に注射に関する送達経路を指す。非経口経路を介して、組成物は、輸液用溶液または注射用溶液または懸濁液の形態もしくは凍結乾燥粉末として、存在し得る。
【００１５】
本明細書で使用するとき、「アロエ」は、アロエ属のすべての種を指す。アロエ属には、アロエ属内では約４００種に加えて、Ａｌｏｅｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ（アロエ・バルバデンスィス）、Ａ．ａｆｒｉｃａｎａ（アロエアフリカナ）、Ａ．ａｌｂｉｄａ（アロエ・アルビダ）、Ａ．ａｌｂｉｆｌｏｒａ（アロエ・アルビフロラ）、Ａ．ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ（キダチアロエ）、Ａ．ａｒｇｅｎｔｉｃａｕｄａ、Ａ．ａｒｉｓｔａｔａ（アロエアリスタータ）、Ａ．ａｕｓａｎａ（アロエアウサナ）、Ａ．ｂａｉｎｅｓｉｉ（アロエバイネシー）、Ａ．ｂａｌｌｉｉ（アロエバリー）、Ａ．ｃａｍｐｅｒｉ（アロエカンペリ）、Ａ．ｃａｐｉｔａｔａ（アロエカピタータ）、Ａ．ｃｉｌｉａｒｉｓ（アロエキリアリス）、Ａ．ｃｏｍｍｉｘｔａ（アロエコミックスタ）、Ａ．ｃｏｒａｌｌｉｎａ、Ａ．ｄｅｗｉｎｔｅｒｉ、Ａ．ｄｉｃｈｏｔｏｍａ（アロエディコトマ）、Ａ．ｄｉｎｔｅｒｉ（アロエディンテリー）、Ａ．ｅｍｉｎｅｎｓ（アロエエミネンス）、Ａ．ｅｒｉｎａｃｅａ（アロエエリナケア）、Ａ．ｅｘｃｅｌｓａ（アロエエクセルサ）、Ａ．ｆｅｒｏｘ（アロエフェロックス）、Ａ．ｆｏｒｂｅｓｉｉ、Ａ．ｇｒａｃｉｌｉｓ（アロエグラキリス）、Ａ．ｈａｅｍａｎｔｈｉｆｏｌｉａ（アロエハエマンティフォリア）、Ａ．ｈｅｌｅｎａｅ（アロエヘレナエ）、Ａ．ｈｅｒｅｒｏｅｎｓｉｓ（アロエヘレロエンシス）、Ａ．ｉｎｄｉｃａ、Ａ．ｉｎｅｒｍｉｓ（アロエイネルミス）、Ａ．ｉｎｙａｎｇｅｎｓｉｓ（アロエインヤンゲンシス）、Ａ．ｊｕｄｄｉｉ、Ａ．ｋｉｌｉｆｉｅｎｓｉｓ（アロエキリフィエンシス）、Ａ．ｋｈａｍｉｅｓｅｎｓｉｓ（アロエカミエンシス）、Ａ．ｍａｃｕｌａｔａ（アロエマクラータ）、Ａ．ｍａｃｒｏｃｌａｄａ（アロエマクロクラーダ）、Ａ．ｍａｒｌｏｔｈｉｉ（アロエマルロシー）、Ａ．ｎａｍｉｂｅｎｓｉｓ（アロエナミベンシス）、Ａ．ｎｙｅｒｉｅｎｓｉｓ（アロエニエリエンシス）、Ａ．ｐｅｇｌｅｒａｅ（アロエペグレラエ）、Ａ．ｐｅｒｆｏｌｉａｔａ（アロエノビリス）、Ａ．ｐｌｉｃａｔｉｌｉｓ（アロエプリカティリス）、Ａ．ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ（アロエポリフィラ）、Ａ．ｓａｐｏｎａｒｉａ（アロエサポナリア）、Ａ．ｓｃｏｂｉｎｉｆｏｌｉａ（アロエスコビニフォリア）、Ａ．ｓｉｎｋａｔａｎａ（アロエシンカタナ）、Ａ．ｓｌａｄｅｎｉａｎａ（アロエスラデニアーナ）、Ａ．ｓｑｕａｒｒｏｓａ（アロエスクアローサ）、Ａ．ｓｔｒｉａｔｕｌａ（アロエストリアーチュラ）、Ａ．ｓｕｃｃｏｔｒｉｎａ（アロエスッコトリナ）、Ａ．ｓｕｚａｎｎａｅ（アロエスザンナエ）、Ａ．ｔｅｎｕｉｏｒ（アロエテヌイオル）、Ａ．ｔｈｒａｓｋｉｉ（アロエスラスキー）、Ａ．ｖａｒｉｅｇａｔａ（アロエチヨダニシキ）、Ａ．ｖｅｒａ（アロエベラ）、Ａ．ｖｉｒｉｄｉｆｌｏｒａ（アロエビリディフローラ）、Ａ．ｖｕｌｇａｒｉｓ（アロエブルガリス）、Ａ．ｗｉｌｄｉｉ（アロエワイルディー）が挙げられる。
【００１６】
「初乳」とは、本明細書で使用される場合、乳汁分泌の最初の数日の間に、雌性哺乳動物の乳腺によって分泌される体液を指し、この体液には、種々の栄養素及び消化プロセスによって初乳が破壊されないようにするプロテアーゼインヒビターが含まれる。ヒトは、出産後の最初の２日間に、比較的少量の初乳を生成するが、ウシは、約９ガロンの初乳を生成する。初乳は、転移因子、ＰＲＰ、ＩＧＦ−１、ｎ−アセチルノイラミン酸、ＧＭＰ、核酸及びディフェンシンなどの濃縮レベルの重要な免疫モジュレーターを含む。初乳抽出物は、単球により食作用が活性化され、多形核細胞における反応性酸素バーストを増大させることがわかった。また、初乳はナチュラル・キラー（ＮＫ）細胞活性化を誘発し、また、インビトロでの細胞ベースのアッセイにおいて抗炎症性サイトカインの分泌を誘発することが示された。また、本明細書での初乳への言及は、その誘導体及び人工代替物を含む。
【００１７】
「分化」は、本明細書で使用される場合、生物学的機能を発揮するために細胞がより特異化するプロセスを示す。例えば、造血幹細胞、造血前駆体及び／または幹細胞は、多分化能性幹細胞から、特徴的な機能を有する、例えば、成熟した体細胞など、特定の系統及び／または細胞に注力された細胞へと変化し得る。分化は、悪性の形質転換を受けた細胞によって、多くの場合、完全にもしくは部分的に失われる特性である。
【００１８】
「増大」、「増大する」または「増大すること」とは、本明細書で使用される場合、細胞もしくは生物の能力の改善または細胞もしくは生物の特定のパラメーターの他の生理学的に有益な増大を指す。ときおり、現象の増大は、特定のパラメーターの測定値の低下として定量化される。例えば、幹細胞の遊走は、循環系において循環幹細胞数の減少として測定され得るが、それにもかかわらず、これは、これら細胞が有益な生理学的結果を発揮するかもしくは促進し得る（失われたかまたは損傷した機能を置き換えるか、もしくは修正する細胞へと分化することが挙げられるが、これらに限定されない）身体の領域へのそれら細胞の移動の増大を表し得る。一実施形態において、増大とは、循環幹細胞数の１５％、２０％、３０％もしくは５０％を超える減少を示す。１つの具体的な非限定的例において、幹細胞遊走の増大は、非造血系統の細胞集団の減少（例えば、細胞集団または細胞集団の応答の１５％、２０％、３０％、５０％、７５％以上の減少）を生じるかまたはこれらによって測定され得る。一実施形態において、増大されたパラメーターは、幹細胞の輸送である。一実施形態では、増大されたパラメーターは、起源の組織からの幹細胞の放出である。一実施形態において、増大されたパラメーターは、幹細胞の移動である。別の実施形態において、パラメーターは、幹細胞の分化である。別の実施形態において、パラメーターは、幹細胞のホーミングである。
【００１９】
「フコイダン」とは、本明細書で使用される場合、藻類から得られる硫酸化フカンを表す。以下の非網羅的リストにおいて提供されるように、幅広い範囲の藻類種から得られた：オキナワモズク、ナガマツモ、ホソマツモ、モツキチャソウメン、デスマレスチア・インテルメディア、ウイキョウモ、アミジグサ、パディナ・パボニカ、スパトグルッスム・スクロエデリ、アデルノシスチス・ユトリクラリス、ピライエラ・リトラリス、アスコフィルム・ノドスム、ビフルカリア・ビフルカタ、フクス・ベシクロスス、フクス・スピラリス、フクス・セラツス、ヒバマタ、ヒマンタリア・ロレア、ヒジキ、ペルベチア・カナリクラタ、エゾイシゲ、サルガッスム・ステノフィルム、アカモク、サルガッスム・ケルマニウム、タマハハキモク、オニワカメ、クシロワカメ、ネコアシコンブ、ツルモ、クロメ、カジメ、アラメ、ミツイシコンブ、ラミナリア・ブラジリエンシス、ラミナリア・クロウストニ、ラミナリア・ディギタータ、マコンブ、ホソメコンブ、カラフトコンブ、マクロシスティス・インテグリフォリア、マクロシスティス・ピリフェラ、ネレオシスチス・ルーキアナ、ワカメ、セイヨウハバノリ、カヤモノリ。実質的な薬学的研究は、フコイダンに関して、主に、２つの異なる形態、＞９５％がフコースの硫酸化エステルから構成されるＦ−フコイダン及び約２０％グルクロン酸であるＵ−フコイダンに焦点を当てて行われてきており、これらは、それぞれ、本明細書で使用される場合、用語「フコイダン」に含まれる。フコイダンの供給源に依存して、フコイダンは、特定の実施形態では放出因子として作用し得る一方で、他の実施形態では、フコイダンは、遊走因子として作用し得る。
【００２０】
「造血剤」とは、本明細書で使用される場合、化合物、抗体、核酸分子、蛋白質、細胞または造血に影響を与える他の分子を指す。分子因子は、自然発生分子または合成分子であってもよい。いくつかの場合において、因子は、造血細胞の成長、増殖、成熟、遊走または分化、もしくは放出に影響を及ぼす。
【００２１】
「造血幹細胞」とは、本発明において使用される場合、すべての血球（赤血球、白血球、巨核球及び血小板を含む）に最終的に分化し得る多分化能性幹細胞を意味する。これは、前駆細胞もしくは芽細胞への分化の中間段階を包含し得る。用語「造血前駆体」、「前駆細胞」もしくは「芽細胞」は、本発明において同義的に使用され、低い分化能を有するが、骨髄系統もしくはリンパ系統など、特定の系列の異なる細胞へとなお成熟する能力がある、成熟ＨＳＣを示す。「造血前駆体」としては、赤芽球バースト形成単位、顆粒球、マクロファージ、巨核球コロニー形成単位、顆粒球、赤血球、マクロファージ、及び顆粒球マクロファージコロニー形成単位が挙げられる。
【００２２】
「ホーミング」とは、本明細書で使用される場合、循環系から組織または器官へと遊走する細胞のプロセスを示す。いくつかの場合、ホーミングは、組織特異的接着分子及び接着プロセスを介して達成される。ホーミングは、骨髄へ戻る遊走を指し得る。
【００２３】
「単離された生物学的成分」（例えば、核酸分子、ポリペプチド、多糖又類は他の生物学的分子）は、本明細書で使用される場合、その成分が自然に発生する他の生物学的成分から実質的に分離されたかまたは精製された生物学的成分を指す。核酸及びタンパク質は、標準的な精製法、宿主細胞における組換え発現法によって単離され得るか、または化学合成され得る。
【００２４】
本明細書で使用するとおり、「ナガバクコ（ＬｙｃｉｕｍＢａｒｂａｒｕｍ）」または「ナガバクコ（Ｌ．ｂａｒｂａｒｕｍ）」は、小さい明るい橙赤色の楕円形のベリーまたは果実を指す。１つの例示的供給源は、中国北部にあり、主に、寧夏回族自治区にあり、枸杞（ｇｏｊｉ  ｂｅｒｒｙ）または枸杞（ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ）とも呼ばれる。ナガバクコは、ジャガイモ、トマト、なす、及びトウガラシ（パプリカ）などの数百もの植物食品を含むＳｏｌａｎａｃｅａｅ  ｆａｍｉｌｙ（ナス科の植物）に属する。本明細書で使用される場合、ナガバクコ及びその抽出物は、ナガバクコからのあらゆる分画、抽出物もしくは単離分子または精製分子を指す。例えば、成分はタンパク質または核酸または多糖類、植物化学物質、またはナガバクコの分画である。したがって、本発明の特定の実施形態では、ナガバクコ成分は、ナガバクコを破壊する、無機または有機溶媒を添加する、及び分画を収集することによって得られる。分画の特定の非限定例は、高速液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーまたは蒸留を用いて単離される。分画は、ナガバクコ成分の分子量または疎水性に基づいてもよい。
【００２５】
「調節」または「調節する」または「調節すること」とは、本明細書で使用される場合、１つまたは２つを組み合わせてまたは別個にした応答のアップレギュレーション（すなわち、活性化または刺激）、ダウンレギュレーション（すなわち、阻害または抑制）指す。
【００２６】
「遊走」とは、本明細書で使用される場合、多細胞生物の発生及び維持における細胞の移動のための中心的プロセスを指す。細胞は、多くの場合、一般には、化学走性と称される特定の外部シグナルに応答して、及びこれに向かって遊走する。遊走は、循環系から組織または器官へと移動する細胞のプロセスを包含する。より具体的には、循環幹細胞は、細胞表面の接着分子の発現を介して毛細管内皮の表面につなぎとめられ、内皮細胞及び幹細胞の両方において細胞骨格が変化し、毛細管壁を経由して貫通し、組織及び／または器官部位への移動が可能になる。いくつかの場合、ホーミングは、組織特異的接着分子及び接着プロセスを介して達成される。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「遊走剤」は、細胞が循環系から組織または器官に移動するプロセスを促進することができる動員剤である。幹細胞の遊走は、例えば、循環系または免疫系での循環幹細胞の減少によって、もしくは細胞表面上での表面マーカー及び／または接着分子の発現によって示され得る。これは、毛細管内皮などの血管表面への循環幹細胞のホーミング、つなぎとめ、及び／または血管外遊出に関連する。遊走因子の例としては、ナガバクコ抽出物の多糖類豊富分画（分画Ａ）などのナガバクコから抽出された単離成分または精製成分、初乳抽出物のタンパク質豊富分画（分画Ｂ）などの初乳、クサモズク、または他の藻類もしくはその抽出物など、例えば、藻類抽出物の多糖類豊富分画（分画Ｃ）において見出される化合物など、藻類から抽出された単離成分もしくは化合物などのフコイダン、冬虫夏草もしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、ヤマブシタもしくはその抽出物などのキノコ抽出物の多糖類豊富分画（分画Ｄ）において見出される化合物など、キノコから抽出された単離成分もしくは化合物などのキノコ、シアノバクテリア、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａ、もしくはその抽出物などのスピルリナが挙げられる。異なる実施形態において、この因子は、ＣＤ３４ｈｉｇｈ（ＣＤ３４＋）細胞など、幹細胞の遊走に影響を及ぼす。一実施形態において、遊走因子は、末梢血中に循環する骨髄由来幹細胞及び／もしくは造血幹細胞数を減少させる。別の実施形態において、遊走因子は、循環幹細胞上でのＣＸＣＲ４の増大された発現に関与する。
【００２８】
「キノコ多糖類」とは、本明細書で使用される場合、例えば、冬虫夏草、ヤマブシタケ、及びマンネンタケなど、種々の種のキノコにおいて主に見出されるグルカンに関する。また、これには先天免疫応答及び細胞媒介性の免疫応答を増大し得、かつ動物及びヒトにおいて抗腫瘍活性を示し得る薬効のあるキノコに由来する、多くの生物活性多糖類もしくは多糖類−タンパク質複合体が挙げられる。
【００２９】
「製薬上許容可能な担体」とは、本明細書で使用される場合、本発明において有用な従来からの薬学的に許容可能な担体を指す。
【００３０】
「多糖類」とは、本明細書で使用される場合、分枝鎖もしくは非分枝鎖においてグリコシド結合された約１０個を超える単糖類残基の高分子を指す。
【００３１】
「前駆細胞」とは、本明細書で使用される場合、規定された細胞系統において子孫を生じる細胞を指す。
【００３２】
本明細書で使用される場合、幹細胞の「動員」は、循環系中の幹細胞が組織または器官内の特定部位に遊走するプロセスを指す。動員は、化学誘引シグナルまたは細胞受容体などの化合物または分子によって促進され得る。例えば、ＣＸＣＲ４及びＳＤＦ−１はともに、幹細胞のホーミング及び遊走において確認された役割を有する。
【００３３】
「放出因子」とは、本明細書で使用される場合、幹細胞を起源の組織から放出及び出ることを促進し得る動員剤である。起源の組織からの幹細胞の放出は、例えば、循環系もしくは免疫系での循環幹細胞の増大によって、または、骨髄など、起源の組織から幹細胞が出ることに関連したマーカーの発現によって、明らかになり得る。例えば、放出因子により、末梢血中の骨髄由来幹細胞及び／もしくは造血幹細胞数が増加する。別の実施形態では、この因子は、ＣＤ３４ｈｉｇｈ（ＣＤ３４＋）細胞など、末梢血中に循環する幹細胞数に影響を及ぼす。
【００３４】
「幹細胞」とは、本明細書で使用される場合、最終的に分化しておらず、従って、他のタイプの細胞を生成し得る細胞である。幹細胞の特徴としては、心臓細胞、皮膚細胞、または神経細胞など、特定の形状及び固有機能を有する成熟細胞になる可能性がある。幹細胞は、全能性、多能性、及び多分化能性など、３つのタイプに分けられる。「全能性幹細胞」とは、身体におけるあらゆる細胞へと成長及び分化することができ、このため、生物全体の細胞及び組織を形成することができる。「多能性幹細胞」は、自己再生及び２つ以上の細胞または組織タイプへの分化が可能である。「多分化能性幹細胞」とは、自己再生及び成体細胞または組織タイプへの分化が可能なクローン性細胞である。多分化能性幹細胞分化は、低下した分化能の前駆細胞または芽細胞への分化の中間段階を伴い得るが、特定の系統の異なる細胞へとなお成熟し得る。用語「幹細胞」とは、本明細書で使用される場合、自己再生及び分化が可能である多能性幹細胞及び多分化能性幹細胞を指す。「骨髄由来幹細胞」は、造血系を再構成し得、内皮、間葉、及び多能性の能力を有する、骨髄において見出される最も原始的な幹細胞である。幹細胞は、接着性の間質細胞タイプとして、または、ＣＤ３４を発現する更に分化した細胞として、のいずれかで、細胞表面上に、または細胞が細胞表面ＣＤ３４に対して陰性である様式のいずれかにおいて骨髄に存在し得る。
【００３５】
「成体幹細胞」は、自己再生能力を若干有する成体生物において見出される幹細胞の集団であり、複数の細胞タイプへと分化し得る。幹細胞の他の例は、骨髄間質細胞（ＭＳＣ）、ＨＳＣ、多分化能性成体前駆細胞（ＭＡＰＣ）、極小胚様幹細胞（ＶＳＥＬ）、胚盤葉上層様幹細胞（ＥＬＳＣ）または割球様幹細胞（ＢＬＳＣ）である。
【００３６】
「幹細胞循環因子」（ＳＣＣＡ）、「動員剤及び／もしくは「動員因子」とは、本明細書で使用される場合、１種以上の化合物、抗体、核酸分子、タンパク質、多糖類、細胞、または他の分子を指し、これらとしては、循環系から組織または器官への幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または遊走に影響を及ぼす神経ペプチド及び他のシグナル伝達分子が挙げられるが、これらに限定されない。分子因子は、自然発生分子または合成分子であってもよい。動員剤の例としては、起源の組織から幹細胞が出ることを促進し得る「放出因子」、及び、循環系から組織または器官へと移動する細胞のプロセスを促進し得る「遊走剤」も挙げられる。
【００３７】
「対象」とは、本明細書で使用される場合、哺乳動物及び他の動物などのすべての動物であり、これらに限定されないが、コンパニオンアニマル、家畜及び動物園動物が挙げられる。用語「動物」は、任意の生きている多細胞脊椎生物（例えば、哺乳動物、鳥類、サル、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、齧歯類などを含むカテゴリー）を含み得る。同様に、用語「哺乳動物」は、ヒト及び非ヒト哺乳動物の両方を含む。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「多肉」とは、リュウゼツラン科、サボテン科、ベンケイソウ科、ツルナ科、キョウチクトウ科、カナボウノキ科、トウダイグサ科、ツルボラン科、スベリヒユ科内の全植物種を指す。これには、更に、水の貯留に適応する貯蔵器官を有することが周知の植物も含み、貯蔵器官は、葉、茎、根、または他の場所に位置する。
【００３９】
「治療有効量」とは、本明細書で使用される場合、処置を受けている対象において所望の効果を達成するために十分な特定の組成物、または組成物中の活性因子の量を指す。例えば、これは、組織を補充するか、修復するか、または回復させる幹細胞の遊走の増大に有効な量であり得る。別の実施形態において、「治療有効量」は、血流中での循環幹細胞の上昇したレベルによって示され得るように、幹細胞の放出を増大させるなど、幹細胞輸送の増大に有効な量である。なお別の実施形態において、「治療有効量」とは、血流中の循環幹細胞のレベル並びに／またはホーミング及び遊走に関連する表面マーカーの発現の減少が示され得るため、循環系から種々の組織または器官への幹細胞のホーミング及び遊走を増大するための有効な量である。治療有効量は、これらに限定されないが、対象の生理学的状態（年齢、性別、疾患のタイプ及びステージ、全身状態、所定の投与量に対する応答性、所望の臨床効果など）及び投与経路など、種々の要因に依存して、変更し得る。臨床分野及び薬理学分野の当業者は、慣用的な実験作業を介して治療有効量を決定し得る。
【００４０】
「輸送」とは、本明細書で使用される場合、起源の組織からの細胞の移動、循環系または免疫系内での移動、並びに組織及び／または器官内の部位に向かう局在化のプロセスを指す。また、輸送は幹細胞の動員を包含し、例えば、骨髄から幹細胞が出ることなど、起源の組織から放出されることにより開始する。輸送は上記起源の組織からの細胞の移動、内皮への接着によるホーミング、遊出、並びに標的組織及び／または器官内の最終的な遊走を更に含む。さらに、輸送は、免疫系の細胞の移動のプロセスを包含し得る。輸送の１つの具体的な非限定的例は、遊走とも称される標的器官への幹細胞の移動である。輸送の別の具体的な非限定的例は、骨髄から離れて、標的器官へと動くＢ細胞またはプレＢ細胞の移動である。
【００４１】
「処置する」、「処置すること」及び「処置」とは、本明細書で使用される場合、治療的処置及び防止（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）手段の両方を指し、その目的は、たとえ処置が最終的に奏功しなかったとしても、標的とされた状態、疾患または障害（まとめて「病気」）を予防または遅延させる（減少させる）ことである。処置が必要な場合としては、病気が既にある場合、及び病気を有する傾向にある場合または病気が予防されるべき場合が挙げられる。
【００４２】
上記のように、幹細胞は、より特殊化した細胞へと分化する能力を有する特有の細胞である。幹細胞の１つの特定のタイプである造血幹細胞（ＨＳＣ）は、多くの異なるタイプの血液細胞へと分化し得る。さらに、ＨＳＣは、典型的には、骨髄にあり、細胞の増殖及び自己再生により、ＨＳＣが造血系の支持及び維持に関与し得る。既存の科学文献は、造血系統細胞誘導体へと進化するＨＳＣの能力に主に焦点を当ててきた。新たに出てきた証拠から、非造血性組織特異的細胞へも分化するＨＳＣの能力が更に確認された。近年、ＨＳＣは、筋細胞、肝細胞、骨細胞、グリア細胞、及びニューロンなど、種々の組織特異的細胞タイプへと分化する能力を有することが見出された。その結果として、ＨＳＣは、身体の実質的にあらゆる細胞タイプの不断の維持及び免疫防御を担う血液細胞及び免疫細胞を形成する。
【００４３】
同様に、骨髄幹細胞（ＢＭＳＣ）は、最近、他の組織の細胞になる重要な能力を有することが示された。骨髄において、幹細胞は、２つの娘細胞が同一ではないことによる「非対称細胞分裂」として公知のプロセスを使用して倍加し、一方の細胞は、元のＤＮＡを保持して、骨髄に残り、他方の細胞は、そのＤＮＡのコピーを含み、血液中に放出され、修復が必要な種々の組織へ遊走する。ＢＭＳＣは、可塑性の能力をほとんど有さず、赤血球、リンパ球、血小板、骨及び結合組織へのそれらの発生に限定されていると伝統的にはみなされてきた。しかし、過去数年間にわたって発表された多くの科学研究から、ＢＭＳＣの例外的な可塑性が示されている。例えば、移植後、ＢＭＳＣ及びＨＳＣは、筋細胞、心臓細胞、毛細管内皮細胞、肝細胞、並びに肺、腸、皮膚、及び脳細胞になる能力を有することが示された。更なる例示的例としては、いくつかの試験により、特異的肝臓由来分子との接触時に肝臓細胞となり、このプロセスが数時間内に起こる、ＨＳＣの能力が報告されている。簡潔には、ＨＳＣを、半透膜（分子を通過させるには十分大きいが、一方の区画から他方の区画への細胞の通過を防ぐのに十分小さい孔、孔サイズ０．４μｍ）によって分離した正常のまたは損傷した肝臓組織のいずれかとともに共培養した。ＨＳＣ（ＣＤ４５）または肝細胞（アルブミン）のいずれかに対して特異的な分子を検出するための免疫蛍光アッセイ法を使用して、研究者らは、上方の区画に置いた細胞集団の形質転換を追跡し得た。ＨＳＣを単独で８時間培養した場合、それらは、ＣＤ４５が発現したのみでアルブミンは発現しなかった。このことから、ＨＳＣが肝細胞に分化しなかったことが示された。しかし、損傷した肝臓組織にＨＳＣを曝露させた場合、それらは、迅速にアルブミンに対して陽性になった。時間の経過と共に、ＣＤ４５に対して陽性である細胞集団が減少し始め、それにつれて、アルブミンに対して陽性である集団が増加し始めた。アルブミン陽性細胞は、処置を開始して８時間程度の早さで認められ、発生頻度では、４８時間において３．０％へと増大した。こうした変換はＨＳＣが無傷肝臓（損傷に関する対照）に曝露されると、最小限であり、遅延した。
【００４４】
ＨＳＣ及びＢＭＳＣは、身体の種々の組織及び器官の治癒プロセス及び再生プロセスにおいて、身体の造血系及び免疫系の維持におけるそれらの伝統的な役割を上回る重要な役割を果たすことから、幹細胞輸送の活性化及び増大は、これらの生理学的プロセスを増幅させることができ、種々の病状に対する潜在的治療を提供し得る。ＨＳＣ及びＢＭＳＣの古典的な供給源は骨髄であり、それには、股関節、肋骨、胸骨及び他の骨構造物が挙げられる。骨は、特定の間葉細胞タイプ（骨芽細胞）、細胞外マトリクス糖タンパク質及び唯一の豊富な鉱物のミネラルの用法指示との相互作用を含む、ＨＳＣ及びＢＭＳＣに対する特有の調節微小環境を提供する。この幹細胞の「ニッチ」は、特定の生理学的状態への幹細胞の応答を誘導する非常に多くの重要な分子相互作用を含む。ニッチは、幹細胞活性に根差した再生プロセスの変化をもたらす組織状態の変化の重要な限局点であり得る（Ａｄａｍｓ  ａｎｄ  Ｓｃａｄｄｅｎ，  ２００６）。
【００４５】
ＨＳＣは、骨髄中で見い出されるＨＳＣ集団を超えて、正常かつ健常な個体の末梢血流にも存在する。より近年の研究から、ドナーに顆粒球−コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）などのサイトカインを注射することによって、より多数のＨＳＣにより、骨髄から血液へ動員させることが示された。こうした進歩にも拘わらず、幹細胞が骨髄から放出され、組織及び／または器官内の部位へ向かって遊走する自然プロセスは、完全には理解されていない。主要なモデルは、ケモカインである間質由来因子−１（ＳＤＦ−１）及びその特異的レセプターであるＣＸＣＲ４を包含する。この能力において、ＳＤＦ−１とＣＸＣＲ４との結合は、細胞膜表面上の接着分子の発現の増大を介して、骨髄への幹細胞の接着をもたらす。このため、骨髄への幹細胞の接着の妨害により、末梢血流への幹細胞の動員が促進される（図１Ｃ）。
【００４６】
Ｇ−ＣＳＦまたはＩＬ−８などいくつかの因子は、タンパク質分解酵素の増大した活性化またはＳＤＦ−１リガンドの分解を介して、接着に干渉し得る。Ｌ−セレクチンブロッカーなど、他のタイプの分子は、代わりに、ＣＸＣＲ４発現をダウンレギュレートすることができ、続いて、骨髄環境への幹細胞接着を減少させる。概して、ＣＸＣＲ４へのＳＤＦ−１の結合の増大により、接着が促進され、このため、ＣＸＣＲ４発現を減少させる硫酸化フカンなどのＬ−セレクチンブロッカーが、幹細胞動員を誘発し得る。
【００４７】
末梢血流中を循環する幹細胞は、ホーミング及び管外遊出を介して修復及び再生が必要な組織の部位に動員される。こうした血流への幹細胞の動員、及びその後の組織損傷部位への遊走は、機械的シグナルと化学誘引シグナルとの組み合わせから生じる。機械的力または他の因子は、幹細胞の表面上のＬ−セレクチンを活性化し得る。Ｌ−セレクチンの活性化は、続いて、そのレセプターＣＸＣＲ４の発現の増加を促進し得る。組織損傷部位における細胞は、また、ＳＤＦ−１リガンドを分泌することができ、それによって、レセプターＣＸＣＲ４を発現する幹細胞を損傷部位へと誘引する。ＳＤＦ−１とＣＸＣＲ４との相互作用により、末梢血流における幹細胞の循環を停止させるために十分な接着が促進される（図１Ｂ）。このモデルに基づいて、硫酸化フカンなどのＬ−セレクチンブロッカーは、ＨＳＣが血流へ動員するための重要な能力を有し得、その後、組織へのホーミング、管外遊出及び遊走は、生物における細胞及び組織の再生的維持及び修復を促進する。Ｇ−ＣＳＦは、損傷した組織から放出され、血流中のその存在は、骨髄からのＨＳＣ放出を誘発し、Ｌ−セレクチンブロッカーから構成される栄養補助食品は、身体における自然の再生及び修復という現象を場合によっては支持し得る。
【００４８】
アロエ。植物幹細胞を単離することができ、また、細胞株として培養し得る植物種の一例としては、アロエ属由来の植物が挙げられる。アロエ属のメンバーは、化粧品用途及び医薬品用途に使用されてきており、アロエベラなどの特定の植物は、「砂漠のユリ」「永続の植物」及び「薬用植物」とも称されてきた。アロエから抽出された成分は、多くの他の適用の中でも、治癒／創傷修復、抗炎症及び酸化防止効果に使用されてきた。これらの効果は、属由来の植物に存在するグルコマンナン及びアセマンナンなどの生物学的成分に起因し得る。アロエ中のこれらの生物学的活性成分は、多くの場合、アロエ植物の葉の内側部分に認められる透明な、濃いゲル中に見出される。このゲルは、９９％が水であり、既知の生物学的活性成分、グルコマンナン（保湿剤）、アセマンナン（マクロファージ活性化及びサイトカインの生成など、免疫機能の調節）、ｂｒａｄｋｉｎｉｎａｓｅ（抗炎症）、乳酸マグネシウム（止痒効果）など、幅広い範囲の糖タンパク質及び多糖類を含むことは既知である。しかし、幹細胞再生及び修復の促進に使用する目的でのアロエ抽出物の適用は、ほとんど不明である。
【００４９】
所望の目的は、良く知られている南アフリカのアロエフェロックス及び北アフリカのアロエベラなどの種とは異なるマダガスカル特有のアロエマクロクラーダ種である。茎のないアロエマクロクラーダは、南中央マダガスカルの草原内で、１５００ｍまで広がり、幅広い葉を有し、多くの場合、赤味がかった直立の非分枝花序であり、特定の気候条件：平均温度（１４〜２２℃）及び降雨量（１，０００ｍｍ超）、乾燥季６ヶ月の高地で生育する（標高１，０００ｍ超）。アロエゲルは、記述された薬用目的で使用されてきたが、アロエマクロクラーダ植物または構造は、マダガスカルにおいて、ある伝統的な医薬慣例に存在するような、経口摂取に好適な粗調製物またはカプセルに圧縮されてもよく、これらの組成物の固有の使用は、パレットを介し、アロエマクロクラーダの焼いた植物材料を含む場合もある。こうした治療的アプローチの機序は、理解されていないが、アロエゲル内のみでなく、根、葉または他の植物のアロエ構造に存在するために、生物学的活性成分である可能性が示唆される。いくつかの実施形態では、こうした成分を抽出、単離または精製し、これらの治療的効果を増大することが目的であり得る。
【００５０】
アロエ抽出物。抽出物は、当業者に既知の任意の数の方法によって調製され得る。概して、抽出手順には、適切な混合により、固体材料が溶媒に確実に適切に曝露され、抽出成分が溶媒に取り込まれ得る時間量で、固体植物材料と溶媒とを接触させることを含む。溶媒は、極性及び非極性が変化する成分の抽出時に使用するために、水性、アルコール性及び有機溶媒であってもよい。一例として、植物材料は、機械的に破砕し、ｐＨ６〜８で、０．５〜８時間、温度４〜５０℃にて、水性ＴＲＩＳ−ＨＣｌ緩衝液に接触させて置き、植物材料から適切な成分を抽出する。固体植物材料と液体溶媒とを接触させた後、固体不溶性物質を分離し、粗抽出調整物及び固体分画として、液体を生成する。遠心分離、濾過、クロマトグラフィーまたは当業者に周知の任意の他の方法など、種々の方法によって、液体と固体分画とを分離させてもよい。遠心分離後の水性溶媒のデカントなど、液体分画の分離後、残存固体は、アルコール性溶媒など第２の溶媒及びメタノールまたは水などの共媒と接触させてもよい。再び遠心分離することにより、液体分画での不溶性固体植物と可溶性成分との分離手段が提供される。アルコール性抽出物中でのこれらの成分は、凍結乾燥機、ｓｐｅｅｄ  ｖａｃ、ロータリーエバポレーターまたは真空ポンプを用いて回収し、乾燥させ得る。有機抽出物は、ジメチルスルホキシドまたはジクロロメタンなど、好適な有機溶媒の存在下で、残留固体の振盪により、更に得てもよい。また、非極性生物学的活性成分を抽出するために、リポソームの添加など、高親油性薬剤の添加により、脂質分画も得られる。いずれの場合においても、これらのさまざまな分離プロセスを使用して、目的の生物学的活性成分を単離し得る。例えば、アロエ中に存在することが公知の生物学的活性成分としては、グルコマンナン、アセマンナン、ブラジキナーゼ（ｂｒａｄｙｋｉｎａｓｅ）、乳酸マグネシウム、サリチル酸、抗プロスタグランジン、マロイルグルカン、ベラシルグルカンＡ、ベラシルグルカンＢ、ベラシルグルカンＣ、マンノース−６−リン酸、ジ（２−エチルヘキシル）フタレート（ＤＥＨＰ）、イソクエン酸カルシウム、アロイン、アロエモジン及び他のアントラキノングリコシドが挙げられる。
【００５１】
ツルドクダミ。塊茎ｆｌｅｅｃｅｆｌｏｗｅｒとしても公知のツルドクダミ植物の乾燥塊根は、伝統的な漢方薬（Ｈｅ  ｓｈｏｕ  ｗｕと称される）として使用されており、この薬物治療は、死刑判決を言い渡され、食料または飲料を与えられずに投獄された有名な中国の陸軍士官の物語のＴＣＭ（伝統的漢方医学）で評判を得たものである。この陸軍士官は、ツル様草、ツルドクダミの葉及び根を消費することによって生残り、士官を捕らえた人は、後に、その遺体がなおも光沢のある黒髪を有することを発見した。この物語の起源の出典は疑わしいが、ツルドクダミは身体の修復性及び再生の可能性を利用するための重要な性質を有するとの長年抱き続けられてきた概念を示すのに有用である。近年の科学的研究では、ツルドクダミ抽出物が実際に、ソニック・ヘッジホッグ（Ｓｈｈ）の発現及びβ−カテニンの発現の増大を介して毛嚢の生育を促進し得ることを確認した−−この２つの重要な経路は、いずれも初期の胚形成に伴い、幹細胞の同一性を維持する。
【００５２】
ツルドクダミ抽出物を更に分析することにより、この植物が生物活性化合物類の豊富な供給源であることが確認された。２つの注目すべき例としては、アントラキノン及び誘導体並びにヒドロキシスチルベンである。アントラキノン及び誘導体は、抗マラリア薬、緩下剤、化学療法の基礎としての役割を果たしてきた。２，３，５，４’−テトラヒドロキシスチルベン−２−Ｏ−β−Ｄ−グルコシドなどのヒドロキシスチルベンは、異なる神経変性病の症状を回避する重要な神経保護作用を提供するものであることがわかっている。合わせて、これらの結果から、ツルドクダミ抽出物の成分は、おそらく、炎症を調節すること、癌増殖のリスクを低減すること、及び／または身体の細胞、組織及び器官に保護作用を提供することによって、身体の治癒及び修復のための重要な性質を有していることがわかる。
【００５３】
ある特定の状態でのツルドクダミにおけるこれらの成分の作用は、ある程度理解されているが、ツルドクダミの成分が、特異的に身体内の幹細胞に影響を及ぼし得るかに関する知識はほとんどない。記載されているように、幹細胞が身体の自然治癒機構及び再生機構において内在性役割を担っているのであれば、これは驚くことである。この主題に関する数少ない既存の研究の１つは、ツルドクダミ抽出物のマウスへの投与後に、骨髄幹細胞数及びリンパ前駆細胞の増加によって示されるように、ツルドクダミ抽出物が幹細胞及び前駆細胞の増殖を促進することを示している。同様に米国特許出願第１２／００６，２２１号には、マウスに投与後のＧＭ−ＣＳＦ及び幹細胞因子（ＳＣＦ）の発現の増加が記載されている。これらの結果は、上述のように、幹細胞の遊走及び動員に重要な役割を担うため、ＧＭ−ＣＳＦ及びＳＣＦがいずれも関与しているのであれば、ツルドクダミ抽出物が幹細胞の活性に影響を及ぼす可能性について、興味のある問いを呈している。
【００５４】
フコイダン。フコイダンは、硫酸化フカン多糖類であるＬ−セレクチンアゴニストであり、静脈注射の際に、ＨＳＣが骨髄中の区画から末梢血流へと出て行くことを促進することが示されたが、この効果は、Ｌ−セレクチンのその刺激に関連しないようであった。末梢血流中のＨＳＣの循環は、身体における幹細胞の再生及び修復の機構を促進するにあたって、重大なステップである。硫酸化フカンとして、フコイダンは、種々の藻類の種において見出される。他の硫酸化フカンは、棘皮動物（例えば、ウニ及びナマコ）などの動物種においても見出された。
【００５５】
動物モデルでのインビボデータが、静脈内フコイダン投与後にＨＳＣレベルが有意に上昇したことを示すにも拘わらず、ヒト対象における明確な臨床効果の観察は、遙かに限定されている。重要な輸送のレセプターＣＸＣＲ４を発現するＨＳＣの百分率は、フコイダンの経口投与４日後に顕著に増大した。しかし、ごくわずかな変化のみが、末梢血中に循環するＨＳＣの絶対数において観察された。
【００５６】
記載されるように、フコイダン（当該分野ではフコイジンまたは硫酸フカンとしても公知である）は、硫酸化フコース多糖類であるＬ−セレクチンリガンドである。セレクチン活性は、シアル化、フコシル化、及び硫酸化など、重要な炭水化物またはポリペプチド改変に依存する。例えば、Ｐ−セレクチン及びＬ−セレクチンにおけるフコイダンなどの硫酸化フカンの結合部位が存在することにより、フコイダンが、ＢＭからのＨＳＣの脱離を促進する機構が少なくとも部分的であることが示された。
【００５７】
おそらく、より顕著なことには、フコイダンなどの硫酸化フカンは、競合結合を介して、内皮表面または骨髄に占有されたＳＤＦ−１をＳＤＦ−１に存在するヘパリン結合ドメインに置き換えることを示した。ヘパリン結合部位のＳＤＦ−１にフコイダンが占有することにより、細胞表面へのつなぎとめが防止され、それによって、血漿中での循環ＳＤＦ−１レベルが増大する。いかなる特定の理論によっても束縛されないが、このために、血流中のＳＤＦ−１リガンドレベルが増大することにより、ＢＭからＣＸＣＲ４レセプター発現ＨＳＣが出ることを促進し得る（図１Ｃ）。このモデルに基づいて、本発明者らは、フコイダンなどのＬ−セレクチンリガンドが、ＨＳＣを動員させる重要な能力を有することができ、フコイダンから構成される栄養補助食品の経口投与により、身体における自然の再生及び修復を最良に支援し得ると仮定した。
【００５８】
動物モデルにおける、注目すべきインビボデータでは、マウス及び霊長類におけるフコイダンの静脈内（ＩＶ）投与後の循環ＨＳＣレベルの顕著な上昇が示されているが、重大な欠点により、ヒトの治療的使用に関する制限が示される。最近の報告では、未処置対照と比較して、マウスへのフコイダン（供給源未知）注射の３時間後に、劇的な１２倍である循環ＨＳＣ、ＨＳＣ前駆体及び誘導細胞タイプ（赤芽球バースト形成単位、顆粒球、赤血球、マクロファージ、巨核球コロニー形成単位、顆粒球、赤血球、マクロファージ、及び顆粒球マクロファージコロニー形成単位など）レベルの増加が示された。毎日、３日間注射した後にＨＳＣ、ＨＳＣ前駆体及び誘導細胞タイプのレベルの上昇が持続した類似の結果が報告された。
【００５９】
また、霊長類におけるフコイダンの注射により、投与６時間後に１１〜２６倍、ＨＳＣ及びＨＳＣ誘導物レベルを増大させ、最大２４時間後まで、持続した上昇がなお観察可能であることが示された。これら明確な観察にも拘わらず、いくつかの難題が、ヒト対象におけるフコイダンの治療的使用を妨げ得る。治療的幹細胞活性の基礎をなす幹細胞のホーミング及び管外遊出のプロセスを可能にするために、持続したまたは反復した上昇期間が必要とされ得るために、循環ＨＳＣ及び骨髄由来幹細胞の上昇の一時的かつ暫時的効果からは、幹細胞の再生及び修復の機構の明確な臨床的利益を十分に実現できない可能性がある。この制約は、ＩＶ注射を日常的に行う困難性及び不便さに鑑みると、更に増す。
【００６０】
ヒト対象における既存の観察は制限があり、ヒトにおけるフコイダンの経口投与に関して利用可能なデータは、ＩＶ注射を使用する動物研究の明確な臨床効果を反映するものではない。他者によって報告された試験では、重要な輸送のレセプターであるＣＸＣＲ４を発現するＨＳＣの百分率が、フコイダンの経口投与（ワカメ由来の１０％ｗ／ｗまたは７５％ｗ／ｗフコイダン抽出物を１日に３ｇ）の１２日後に、顕著に増大した（４５％から９０％）ことが示された。しかし、末梢血中を循環するＨＳＣの絶対数においてごくわずかな変化（約１２％）が観察された（最大効果は、フコイダン抽出物投与の４日後に１．６４〜１．８５細胞／μｌであった）。重要なことには、経口投与を伴う治療的応用に関しては、フコイダンは、胃中の酸性条件において残存し得、有害な副作用を示すことはない。これは、フコイダンを代謝する触媒のフコイダナーゼ（ｆｕｃｏｉｄｉｎａｓｅ）が、海洋性無脊椎動物（ｍａｒｉｎｅ  ｉｎｔｅｒｖｅｒｂｒａｔｅ）のみにおいて見出され、陸生哺乳動物においては見出されないという報告と一致する。これにより、治療効果を持続させるためのフコイダンなどの硫酸化フカンの投与による高い持続性及び安定性のある重大な治療的利益が提供され得る。これは、血流への拡散が、最初に、口、食道、及び腸において、更に、胃における高酸性条件において、酵素処理に耐える経口使用に特に理想的である。
【００６１】
本発明者らは、フコイダンの供給源及び適切な投与レジメンは、フコイダンの経口投与を介するＨＳＣの動員を促進するための重要な特徴であることを発見した。フコイダンは、硫酸化フカンの幅広いクラスのメンバーであり、これは、Ｌ−フコースが豊富な多糖類であり、２つの供給源、藻類及び海洋性無脊椎動物から主に得られる。これら２つの供給源から得られる硫酸化フカンは、組成及び構造が大いに異なる。この分子構造の多様性は、藻類の異なる種に由来するフコイダンに更に存在する。Ｌ−フコースから構成される約２０，０００分子量の多糖類として一般に記載されるが、正確なフコイダン構造は、一部、供給源の生物に依存する。一例として、最もよく研究されている、Ｆ．ｖｅｓｃｕｌｏｓｕｓ由来のフコイダンは、α（１→３）グリコシド結合及び４位に硫酸基を有し、５ユニットごとに硫酸化フコース分枝を有する、Ｌ−フコースから主に構成されていると報告されている。対照的には、異なる藻類であるアスコフィラムノドサム由来のフコイダンは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）研究において示されるように、オリゴ糖形成と、おそらくわずかの硫酸化分枝点とが交互になっているα（１→３）グリコシド結合及びα（１→４）グリコシド結合の繰り返しの大部分を有する（Ｂｅｒｔｅａｕ，２００３）。まとめると、異種由来のフコイダンは、構造的に異なり、不均質であり、多様である。
【００６２】
本発明は、動員剤の投与によって、それが必要な対象に幅広い範囲の臨床的利益及び生理学的利益を提供するための新規組成物及び方法を提供する。いかなる特定の理論に束縛されるものではないが、本発明者らは、本発明の組成物の投与を介して得られる有益かつ他の生理学的な結果が、動員剤投与後の幹細胞の輸送及び遊走を増大させることから生じると考える。
【００６３】
本明細書では、アロエまたはその抽出物、ツルドクダミまたはその抽出物、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類（例えば、冬虫夏草，ヤマブシタケ（Ｌｉｏｎ’ｓ  ｍａｎｅ（ライオンの鬣））、マンネンタケ（霊芝））、フコイダン（任意により藻類（例えば、ワカメ、クサモズク（Ｌｉｍｕ）から抽出される）、スピルリナ（例えば、シアノバクテリア、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａ）、これらの類縁物質、これらの誘導体、これらの抽出物、その合成等価物または医薬等価物、その画分、並びに前述の項目のうちのいずれかの組み合わせからなる群から選択される１種以上の成分を含む動員剤を含む組成物について記載する。動員剤は、１種以上の組成物中で一緒に合わせられてもよいし、レジメンの一部として別個に投与または消費されてもよい。それらは、例えば、放出因子及び遊走因子の両方の役割をするなど、互いに個々の生理学的効果、付加的効果、及び／または相乗的効果を有し得る。いくつかの実施形態において、動員剤は、遊走剤として機能することができ、循環系から組織または器官へ移動する細胞のプロセスを促進することができる。いくつかの実施形態において、動員剤は、放出因子として機能することができ、起源の組織から幹細胞が出ることを促進し得る。さまざまな実施形態では、組成物は上記成分及び製薬上許容可能な担体を含む、医薬組成物である。
【００６４】
一実施形態では、動員剤、例えばアロエが対象に投与されるが、対象は、アロエと他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、アロエ植物を丸ごと消費し、消化する。植物は、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、アロエは、丸ごとの植物及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、動員剤は、アロエの抽出物またはアロエから抽出した単離成分または化合物（アロエ抽出物の多糖類豊富分画に見られる化合物など）である。アロエは、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。一実施形態において、アロエは、遊走因子として機能し得る。特定の実施形態では、アロエは、アロエマクロクラーダである。
【００６５】
一実施形態では、動員剤、例えばツルドクダミが対象に投与されるが、対象は、ツルドクダミと他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、丸ごとツルドクダミ植物を消費し、消化する。植物は、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、ツルドクダミは、丸ごとの植物及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、動員剤は、ツルドクダミの抽出物またはツルドクダミから抽出した単離成分または化合物（ツルドクダミ抽出物の多糖類豊富分画に見られる化合物など）である。ツルドクダミは、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。
【００６６】
代替実施形態では、藻類抽出物は、対象に提供されるか、または投与される。別の実施形態では、藻類は、丸ごとの植物及びその抽出物を包含する。別の実施形態では、藻類は、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。別の実施形態では、抽出物は、高度に硫酸化されたポリアニオン性の可溶性繊維である。一実施形態では、抽出物は単離されたフコイダンである。異なる実施形態において、フコイダンは、単離後に精製される。代替の実施形態において、多糖類画分は、対象に投与される。別の実施形態において、高度に硫酸化された、ポリアニオン性の可溶性繊維は、対象に投与される。一実施形態において、単離フコイダンは、対象に投与される。異なる実施形態において、精製フコイダンは、対象に投与される。一実施形態において、ワカメは、対象への投与後に、放出因子として機能し得る。
【００６７】
一実施形態では、動員剤、例えばナガバクコが対象に投与されるが、対象は、ナガバクコと他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、ナガバクコベリーを丸ごと消費し、消化する。ベリーは、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、ナガバクコは、丸ごとのベリー及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、動員剤は、ナガバクコの抽出物またはナガバクコから抽出した単離成分または化合物（ナガバクコ抽出物の多糖類豊富分画に見られる化合物など）である。ナガバクコは、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。
【００６８】
一実施形態では、動員剤、例えば初乳が対象に投与されるが、対象は、初乳と他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、初乳を丸ごと消費し、消化する。初乳は、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、初乳は、丸ごとの初乳及びその抽出物の両方を含む。一実施形態において、動員剤は、初乳抽出物、または初乳から抽出された単離成分または化合物（例えば、初乳抽出物のタンパク質豊富画分中で見出される化合物など）であり、初乳は、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、もしくは製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。
【００６９】
一実施形態では、キノコまたはキノコのブレンドが対象に投与されるが、対象は、キノコと他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、キノコを丸ごと消費し、消化する。キノコは、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、キノコは、丸ごとのキノコ及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、この因子は、冬虫夏草またはその抽出物である。一実施形態では、この動員剤は、マンネンタケまたはその抽出物である。一実施形態では、この動員剤は、ヤマブシタケまたはその抽出物である。キノコは、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。
【００７０】
一実施形態では、藻類が対象に投与されるが、対象は、藻類と他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、藻類を丸ごと消費し、消化する。藻類は、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、藻類は、丸ごとの藻類及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、この動員剤は、クサモズクまたはその抽出物である。藻類は、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。一実施形態において、藻類は、遊走因子として機能し得る。
【００７１】
一実施形態では、スピルリナが対象に投与されるが、対象は、スピルリナと他の動員剤との混合物が提供され得る。いくつかの実施形態では、対象は、スピルリナを丸ごと消費し、消化する。スピルリナは、新鮮であってもよいし、凍結されていても、凍結乾燥されていても、脱水されていても、いくつかの他の様式で保存されていてもよい。このため、本明細書で記載される場合、スピルリナは、丸ごとのスピルリナ及びその抽出物の両方を含む。一実施形態では、この動員剤は、シアノバクテリア、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａまたはその抽出物である。スピルリナは、単離物質または精製物質として単独で提供され得るか、または製薬上許容可能な担体を含む組成物の一部であり得る。
【００７２】
さまざまな実施形態では、組成物中の１種以上の動員因子のそれぞれの投与量としては、動員剤の１〜５、５〜１０、１０〜２５、２５〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００ｍｇ以上を含み得る。例えば、組成物中の１種以上の動員剤は、これらの可変の投与量のそれぞれで、組み合わせることができる。例えば、組成物での代表的な投与量セットを表１に示す。さまざまな実施形態では、組成物は、１〜５、５〜１０、１０〜２５、２５〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００ｍｇ以上のアロエまたはその抽出物、ツルドクダミまたはその抽出物、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類（例えば、冬虫夏草、ヤマブシタケ（Ｌｉｏｎ’ｓ  ｍａｎｅ））、マンネンタケ（霊芝）、フコイダン（任意により藻類（例えば、ワカメ、クサモズク（Ｌｉｍｕ）から抽出される）、スピルリナ（例えば、シアノバクテリア、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａ）、これらの類縁物質、これらの誘導体、これらの抽出物、その合成等価物または医薬等価物、その画分、並びに前述の項目のうちのいずれかの組み合わせを含む。特定の実施形態では、アロエは、アロエマクロクラーダである。さまざまな実施形態では、投与量には、総量５０〜２５０、２５０〜５００、５００〜７５０、７５０〜１０００、１０００〜２０００、２０００〜３０００、３０００ｍｇ以上の１種以上の動員剤を含み得る。例えば、さまざまな実施形態では、医薬組成物はアロエマクロクラーダを７５０ｍｇ以下、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物の１種以上を１０００ｍｇ以下含む。
【００７３】
さまざまな実施形態では、総投与量は、１日以上、または１日において数回、毎日投与される。
【００７４】
本発明は、対象内での幹細胞の輸送の増大方法を更に提供する。一実施形態では、幹細胞の輸送レベルは、対象の末梢血中の循環造血幹細胞（ＨＳＣ）数に関与する。別の実施形態では、幹細胞の輸送レベルは、対象の末梢血中の循環骨髄由来幹細胞数に関与する。さまざまな実施形態では、対象において、幹細胞の輸送を増大することには、動員剤の治療有効量を投与することを含み、これによって、投与経路に関係なく、対象内での幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または遊走が増大する。
【００７５】
別の実施形態では、それによって対象内での幹細胞の輸送が増大される、アロエもしくはその抽出物、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物の群から選択される成分の１種以上を含む、治療有効量の組成物を投与することを含む本明細書で提供される方法により、対象内での幹細胞の輸送が増大される。一実施形態では、幹細胞輸送の増大は、それによって、対象内での幹細胞の輸送が増大される、アロエもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草もしくはその抽出物の群から選択される成分の１種以上を含む組成物の特定の投与量に対する幹細胞の応答を分析することによって、測定することができる。
【００７６】
別の実施形態では、対象での幹細胞の輸送を増大する方法としては、動員剤投与後の幹細胞など、循環幹細胞集団の過渡の増大を含む。一実施形態では、幹細胞は、造血幹細胞（ＨＳＣ）である。別の実施形態では、幹細胞は、骨髄由来の幹細胞である。様々な実施形態において、幹細胞は、ＣＤ４５ｄｉｍ  ＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋ＫＤＲ−またはＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋、ＣＤ３４＋ＣＤ１３３−、ＣＤ３４＋ＣＤ１３３＋であり、またはこれらのマーカーのさまざまな副組合せを発現する。別の実施形態では、動員剤の抽出物の投与により、循環幹細胞でのＣＸＣＲ４の発現の増大を招く。
【００７７】
一実施形態では、動員剤を対象に提供することによって、１２日未満、６日未満、３日未満、２日未満、１日未満など、ある特定の期間内でのその対象の幹細胞の放出を増大する。代替的実施形態では、期間は投与後、１２時間未満、６時間、約４時間未満、約２時間未満または約１時間未満である。さまざまな実施形態では、投与後約１時間、２時間または３時間、幹細胞が循環へ放出される。
【００７８】
別の実施形態では、放出された幹細胞は、循環システムに入り、対象の体内での幹細胞の循環数が増加する。別の実施形態では、正常なベースラインと比較して幹細胞の循環数の増加率は、対照と比較して、約２５％、約５０％、１００％、または１００％以上の増加である。一実施形態では、対照は、同じ対象のベースライン値である。別の実施形態では、対照は、未処置対象者またはプラセボまたは薬理学的担体で処置した対象における幹細胞の循環数である。
【００７９】
別の実施形態では、対象での幹細胞の輸送を増大する方法としては、動員因子投与後の幹細胞など、対象体内での循環幹細胞数の過渡の減少を含む。別の実施形態では、対象での幹細胞の輸送を増大する方法としては、幹細胞など、対象体内での循環幹細胞の集団中での過渡の減少を誘引すること含む。一実施形態では、幹細胞は、造血幹細胞（ＨＳＣ）である。別の実施形態では、幹細胞は、骨髄由来の幹細胞である。さまざまな実施形態において、幹細胞は、ＣＤ４５ｄｉｍＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋ＫＤＲ−またはＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋、ＣＤ３４＋ＣＤ１３３−、ＣＤ３４＋ＣＤ１３３＋であり、またはこれらのマーカーのさまざまな副組合せを発現する。別の実施形態では、動員剤の抽出物の投与により、循環幹細胞でのＣＸＣＲ４の発現の増大を招く。
【００８０】
一実施形態では、動員剤を対象に提供することによって、投与後、５時間未満、４時間未満、２時間未満、１時間未満など、ある特定の期間内でのその対象の幹細胞の遊走が増大される。他の実施形態では、動員剤は、初乳、キノコ多糖類（冬虫夏草、ヤマブシタケ）、マンネンタケ、フコイダン（クサモズクなど）、スピルリナ（シアノバクテリア及び／またはＡｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａなど）である。さまざまな実施形態では、正常なベースラインと比較して循環幹細胞数の減少率は、対照と比較して、約２５％、約５０％、約７５％、または更には約１００％以上の増加である。一実施形態では、対照は、同じ対象のベースライン値である。別の実施形態では、対照は、未処置対象者またはプラセボまたは薬理学的担体で処置した対象における幹細胞の循環数である。
【００８１】
一実施形態では、動員剤の投与により、投与約１時間後から約３時間後、循環から組織への幹細胞の遊走を招く。循環幹細胞は、循環システムに残り、このため、対象の体内での幹細胞の循環数が減少する。正常なベースラインと比較して循環幹細胞数の減少率は、対照と比較して、約１５％、約３０％、約５０％または７５％超の減少である。一実施形態では、対照は、同じ対象のベースライン値である。別の実施形態では、対照は、未処置対象者またはプラセボまたは薬理学的担体で処置した対象における幹細胞の循環数である。
【００８２】
別の実施形態では、動員剤の投与により、対象体内での循環幹細胞数の過渡の減少によって測定される幹細胞のホーミング速度が増す。正常なベースラインと比較して循環幹細胞数の減少率は、対照と比較して、約２５％、約５０％、約７５％または更に約１００％の減少である。一実施形態では、対照は、同じ対象のベースライン値である。別の実施形態では、対照は、未処置対象者またはプラセボまたは薬理学的担体で処置した対象における幹細胞の循環数である。別の実施形態では、動員剤の抽出物の投与により、循環幹細胞でのＣＸＣＲ４の発現の増大を招く。
【００８３】
さまざまな実施形態では、治療有効量の組成物を投与することには、１〜５、５〜１０、１０〜２５、２５〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００ｍｇ以上の量の１種以上の動員剤を含む投与量を経口投与することを含む。例えば、組成物中の１種以上の動員剤は、これらの可変の投与量のそれぞれで、組み合わせることができる。例えば、組成物での代表的な投与量セットを表１に示す。各種実施形態では、組成物は、１〜５、５〜１０、１０〜２５、２５〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００ｍｇ以上のアロエまたはその抽出物、ツルドクダミまたはその抽出物、ナガバクコ、初乳、キノコ多糖類（例えば、冬虫夏草、ヤマブシタケ（Ｌｉｏｎ’ｓ  ｍａｎｅ））、マンネンタケ（霊芝）、フコイダン（任意により藻類（例えば、ワカメ、クサモズク（Ｌｉｍｕ）から抽出される）、スピルリナ（例えば、シアノバクテリア、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｍａｘｉｍａ）、これらの類縁物質、これらの誘導体、これらの抽出物、その合成等価物または医薬等価物、その画分、並びに前述の項目のうちのいずれかの組み合わせを含む。特定の実施形態では、アロエは、アロエマクロクラーダである。さまざまな実施形態では、投与量には、総量５０〜２５０、２５０〜５００、５００〜７５０、７５０〜１０００、１０００〜２０００、２０００〜３０００、３０００ｍｇ以上の１種以上の動員剤を含み得る。例えば、さまざまな実施形態では、医薬組成物はアロエマクロクラーダを７５０ｍｇ以下、ツルドクダミもしくはその抽出物、ナガバクコもしくはその抽出物、初乳もしくはその抽出物、スピルリナもしくはその抽出物、フコイダン、ヤマブシタケもしくはその抽出物、マンネンタケもしくはその抽出物、及び／または冬虫夏草またはその抽出物の１種以上を１０００ｍｇ以下含む。さまざまな実施形態では、総投与量は、１日以上、または１日において数回、毎日投与される。
【００８４】
いくつかの実施形態では、動員剤を投与される対象は、健常である。他の実施形態において、対象は、免疫抑制、慢性疾患、外傷性傷害、変性疾患、感染、またはこれらの組み合わせなど、ある疾患または生理学的状態に罹患している。特定の実施形態において、対象は、皮膚、消化器系、神経系、リンパ系、心血管系、内分泌系、またはこれらの組み合わせの疾患または状態に罹患している可能性がある。具体的実施形態において、対象は、骨粗鬆症、アルツハイマー病、心筋梗塞、パーキンソン病、外傷性脳損傷、多発性硬化症、肝硬変、以下の実施例に記載される疾患及び状態のうちのいずれか、またはこれらの組み合わせに罹患している。治療有効量の動員剤の投与により、上記の状態のうちのいずれかを予防、処置、及び／もしくはその重篤度を低下させ得るか、または上記の状態のうちのいずれかに関して有益な臨床利益を別の方法で提供するが、本発明の方法の適用及び本発明の動員剤の使用は、これらの使用に限定されない。さまざまな実施形態において、新規組成物及び方法により、特に、骨格組織（例えば、骨、軟骨、腱及び靱帯）、並びに変性疾患（例えば、パーキンソン病及び糖尿病）の処置において治療的有用性が見出される。血液から組織への幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または遊走の増大により、修復効率の上昇のために、欠陥部位への幹細胞のより効率的な送達をもたすことができる。また、本発明の新規組成物及び方法は、遺伝子治療アプローチに関しても使用され得る。
【００８５】
本発明は、対象への投与のための種々の組成物を更に提供する。一実施形態において、投与は、眼、膣、直腸、鼻内、表皮、及び経皮などの局所的である。一実施形態では、投与は経口である。一実施形態において、経口投与のための組成物としては、散剤、顆粒剤、懸濁剤もしくは水または非水性媒体中の液剤、カプセル剤、サシェ、錠剤、トローチ剤、もしくは発泡剤が挙げられる。別の実施形態において、経口投与用組成物は、増粘剤、香料添加剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤または結合剤を更に含む。
【００８６】
幹細胞の輸送を促進するために動員剤及び動員剤の使用方法が、本明細書に記載される。循環系から組織または器官へと動く幹細胞のプロセスを促進するために遊走因子及び遊走因子の使用方法が、本明細書に更に記載される。また、幹細胞が起源の組織から出ることを促進するために放出因子及び放出因子の使用方法が、本明細書に記載される。また、末梢血液循環へのＨＳＣの顕著な放出を生じる動員剤の経口投与方法が、本明細書に記載される。本発明者らは、ヒト身体における幹細胞関連維持及び修復を増大するために幹細胞動員剤の有効な投与を示し、それによって、安全で、便利で、かつ効率的な方法を達成することを示した。幹細胞の病理学については、非常に重要でかつ関心があり、本明細書で開示される主題に係わるが、本発明の根底にある範囲は、血液から組織への幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または遊走が、損傷組織の修復及び既存組織の生命力及び健康状態の維持における有意性である。したがって、この目的を達成するための開発中の方法及び組成物の重要性は、本発明の焦点及び目的の中にある。
【００８７】
したがって、本発明は、とりわけ、幹細胞の輸送を支援することによって、身体において組織の自然治癒及び再生を増大するための新規組成物及び方法を提供する。さらに、本発明は、哺乳動物において幹細胞の輸送を促進することによって、哺乳動物における健康問題の発生を予防するか、遅延させるか、別の方法で減少させるための新規組成物及び方法を提供する。本明細書で開示される組成物及び方法は、組織への幹細胞の放出、循環、ホーミング及び／または遊走を支援し、このため、組織修復のプロセスを支援することによって、既存の組織の再生を更に増大させ得る。
【実施例】
【００８８】
以下の実施例は、本願発明をよりよく示すために提供され、主題の範囲を限定するものと解釈されるべきでない。特定の材料が言及される程度まで、それは、例示目的に過ぎず、本発明を限定するとは解釈されない。当業者は、本発明の能力の使用なく、及び本発明の範囲から逸脱することなく、等価な手段、組成物または反応物を開発し得る。
（実施例１）
ナガバクコの生成及び調製
【００８９】
ナガバクコに由来する多糖類を、Ｌｕｏら（２００４）の方法によって調製した。乾燥させた果実サンプル（１００ｇ）を、微細な粉末になるまで挽いて、１．５リットルの沸騰水中に入れ、中国薬用草本（ｃｈｉｎｅｓｅ  ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｈｅｒｂ）用の伝統的な方法によって２時間煎じた。煎じたものを室温へと冷却し、濾過し、次いで、凍結乾燥して、粗多糖類を得た。
【００９０】
乾燥した粗製多糖類を、３回還流して、１５０ｍｌのクロロホルム：メタノール溶媒（２：１）（ｖ／ｖ）で脂質を除去した。濾過した後、その残渣を風乾した。得られた生成物を、３００ｍｌの熱水（９０℃）で３回抽出し、次いで、濾過した。その合わせた濾液を、それぞれ、１５０ｍｌの９５％エタノール、１００％エタノール及びアセトンを使用して沈殿させた。濾過及び遠心分離後、沈殿物を収集し、真空乾燥したところ、所望の多糖類（１３ｇ）を得た。多糖類含有量を、フェノール硫酸法により測定した。その結果から、抽出物中の多糖類含有量が、９７．５４％に達し得ることが判明した。
（実施例２）
ナガバクコ消費後の幹細胞の遊走
【００９１】
ナガバクコ、化合物の消費は、ＣＤ３４＋幹細胞の動員及び遊走を増大する（循環系に入る幹細胞の模式図については、図２を参照されたい）。
【００９２】
健常なヒトボランティアを特定し、ＣＤ３４＋細胞の割合を、ナガバクコの消費前に、及び消費後１時間ごとに最大４時間まで、各人の末梢血中（循環するＣＤ３４＋細胞）で評価した。ボランティアに、ナガバクコの消費前後に、一定時間にわたって肉体的及び精神的活動を制限するように指示した。
【００９３】
各人に、５ｇの乾燥ナガバクコまたはナガバクコから抽出した１ｇの多糖類を提供した。各ボランティアから得た全血サンプル中の赤血球を、ＦＡＣＳ溶解溶液（Ｂｅｃｋｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，Ｃａｌｉｆ．）を使用して溶解した。残っている細胞を洗浄し、フルオレセインイソチオシアネートと結合体化したモノクローナル抗体ＨＰＣＡ−２で染色した。サンプルを、１％ホルマリンで固定し、ＦａｃｓＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  Ｃａｌｉｆ．）及びＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェア（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  Ｃａｌｉｆ．）を使用して、フローサイトメトリーによって分析した。
【００９４】
図３Ａは、ナガバクコの消費が、循環幹細胞の強力な一時的減少を誘発したことを図示する。具体的には、Ｘ軸は、コントロールレベルのパーセンテージとして表される、ナガバクコ摂取後の代表的実験の時間経過を示す。摂取時には、循環ＣＤ３４＋細胞の割合は、対照と同じである。循環ＣＤ３４＋細胞のピーク減少は、消費約１〜２時間後に認められた。この時点では、循環ＣＤ３４＋細胞数は、対照値より３０％減少した。ナガバクコ摂取の４時間後までに、循環ＣＤ３４＋細胞は、ベースライン値まで戻った。循環幹細胞数の減少は、循環幹細胞の膜上のＣＸＣＲ４の発現の増大によって達成された（図６）。
【００９５】
したがって、ナガバクコ（またはナガバクコの生物学的成分）により、循環から組織への内因性幹細胞（例えば、ＣＤ３４＋細胞）の遊走が増大し得る。ナガバクコ（またはナガバクコの生物学的成分）の消費が、ＣＤ３４＋幹細胞の遊走を誘発し（例えば、図３を参照されたい）、それによって、遊走因子としてのナガバクコの有効性が示される。
（実施例３）
初乳消費後の幹細胞の遊走
【００９６】
実施例２のように、及び図３Ｂを参照すると、初乳の投与は、幹細胞の遊走をもたらす。
（実施例４）
【００９７】
キノコ消費後の幹細胞の遊走
実施例２のように、及び図４を参照すると、キノコ（冬虫夏草、マンネンタケ、ヤマブシタケ）の多糖類豊富画分の投与により、幹細胞の遊走がもたらされる。
（実施例５）
フコイダンまたはスピルリナ消費後の幹細胞の遊走
【００９８】
実施例２のように、クサモズクなど藻類である海藻に由来するフコイダンの投与により、間接的ではあるが、最終的には、幹細胞の遊走を補助し得る特定の有益な結果が促進される。例えば、クサモズクに由来するフコイダンが消費されることにより、循環ＣＤ３４＋ＨＳＣの数の減少をもたらし（図９）、このことは、幹細胞の遊走を支援することにおける有効な役割を示唆する。実施例２のように、スピルリナが投与されることにより、幹細胞の遊走がもたらされ（図４Ｂ）、また、スピルリナと、ナガバクコ、初乳及びキノコを投与することにより、幹細胞の遊走がもたらされる（図７）。
（実施例６）
ＬＢ、初乳、スピルリナ及びキノコのブレンドの消費後の幹細胞の遊走
【００９９】
表１に列挙される以下の成分を含む組成物は、哺乳動物対象に提供される。これら組成物の投与は、幹細胞遊走をもたらす。
【表１】
2016522265.tif 000003
（実施例７）
複数の遠隔組織に存在する骨髄由来幹細胞
【０１００】
マウスモデルを選択して、ＬＢ、初乳及びキノコの混合物が、組織への幹細胞の遊走をどのように刺激し得るか、また、このために、身体の遠隔組織に存在し、それを修復し得るかを評価する。
【０１０１】
骨髄ドナー動物として雄性マウスを選択し、すべてのレシピエントマウスは、雌性である。雌性レシピエントを、ＧＦＰ＋雄性骨髄細胞をそれらの尾静脈に注射する前に、致死量未満で照射する。２つのマウス群を評価する。第１の群の２０匹の動物を、致死量未満で照射し、骨髄を注射し、通常の飼料を与える。第２の群の２０匹の動物を、同様に、致死量未満で照射し、雄性骨髄を与え、通常の飼料＋ＬＢ、初乳及びキノコの混合物の食餌を与える。ＧＦＰ＋細胞の組み込みは、脳、心筋、筋肉、肝臓、膵臓、小腸のセクション、及び肺組織において試験する。
【０１０２】
これらデータには、ＬＢ、初乳及びキノコの混合物を含む食餌により、種々の組織への骨髄幹細胞のホーミング及び遊走を促進させる範囲を記録する。
（実施例８）
外傷を受けた組織の増大した幹細胞再増殖
【０１０３】
マウスモデルを選択して、ＬＢ、初乳及びキノコの混合物が、組織への幹細胞の遊走をどのように刺激し得るか、また、このために、身体の遠隔組織に存在し、それを修復し得るかを評価する。
【０１０４】
骨髄ドナー動物として雄性マウスを選択し、すべてのレシピエントマウスは、雌性である。雌性レシピエントを、ＧＦＰ＋雄性骨髄細胞をそれらの尾静脈に注射する前に、致死量未満で照射する。２つのマウス群を評価する。第１の群の２０匹の動物を、致死量未満で照射し、骨髄を注射し、通常の飼料を与える。第２の群の２０匹の動物を、同様に、致死量未満で照射し、雄性骨髄を与え、通常の飼料＋ＬＢ、初乳及びキノコの混合物の食餌を与える。
【０１０５】
骨髄移植後及び食餌試験の開始の数日前に動物を損傷（例えば、脛骨筋におけるカルジオトキシンの注射）させ、冠動脈の結紮による心臓発作、皮膚の穿孔、レーザー誘導性脳卒中、または他の損傷を誘発させる。両方の群のマウスの回復を、全身蛍光画像化を使用して、６週間モニターする。６週間後、動物を屠殺し、損傷組織を分析して、組織修復の程度を評価する。また、ＧＦＰ＋細胞の組み込みは、脳、心筋、筋肉、肝臓、膵臓、小腸のセクション、及び肺組織において試験を行うものとする。
【０１０６】
これらデータでは、ＬＢ、初乳及びキノコの混合物を含む食餌により、損傷組織への骨髄幹細胞のホーミング及び遊走を促進させ、このため、組織の修復及び治癒を増大させる範囲を記録する。
（実施例９）
幹細胞動員剤としてのフコイダンに関する一般的研究設計
【０１０７】
２種の消耗品、Ｕｎｄａｒｉａから抽出したフコイダン及びプラセボを、ヒト対象において試験した。インフォームド・コンセント後、２０〜４５歳齢の健康なヒトボランティアから末梢静脈血サンプルを得た。血液及び骨髄サンプルを、無菌条件下で得て、直ぐに処理した。１ｇのフコイダンまたはプラセボを、４〜６オンスの水とともにボランティアに与えた。プラセボの外観はフコイダンの外観と同一であり、植物性カプセルに被包した、褐色に染色し、微細に挽いたジャガイモフレークからなった。
（実施例１０）
インビボ試験デザイン
【０１０８】
以下の排除基準を使用した：２０歳未満または６５歳超、妊娠中、毎日の投薬を要する重篤な喘息及びアレルギー、任意の既知の慢性病または以前の／現在の性病、頻回の娯楽的な薬物使用、及び消化機能障害（以前の大規模な胃腸手術を含む）。３名のボランティアを、１週間の間隔を空けて、２日の試験日を指定した。試験を常に、その日の同じ時刻に（午前８〜１１時）行って、日周期変動の影響を最小限にした。他のタイプのリンパ球の放出対ホーミングを伴うストレスからの干渉に起因して、試験中のいかなる肉体的及び精神的ストレスをも努めて最小にした。さらに、各試験日に、その特定の試験日に個人に影響を及ぼし得る任意の例外的ストレス関連環境を決定することを目的として、質問票に記入するようにボランティアに指示した。最終分析からの所定の排除基準には、顕著な睡眠不足及び重度の不安を含めた。質問票に記入した後、ボランティアに、４時間にわたって安静にして、椅子に快適に座っているように指示した。最初の１時間の後、ベースライン血液サンプルを採血した。ベースラインサンプルの採血直後、消耗品を提供した。血液サンプルを、消耗品摂取の６０分後、９０分後及び１８０分後に採取した。各時点で、５ｍＬの血液をヘパリンに採取し、２ｍＬの血液を、ＥＤＴＡ中に採取した。その血液バイアルを、使用するまで振盪プレートの上に置いた。
（実施例１１）
ＦＡＣＳソーティングを使用する、幹細胞集団の測定
【０１０９】
ＥＤＴＡ中に採取した血液を、コールターカウンタ−（Ｍｉｃｒｏ  Ｄｉｆｆ  ＩＩ，  Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して、白血球百分率で得るために差による全血球算定（ＣＢＣ）を使用した。すべてのＣＢＣを、サンプルを採血して１時間以内に行った。すべてのＣＢＣを、三通り行った。ヘパリン化血液を、勾配遠心分離によるＰＢＭＣ画分の精製のために使用し、免疫染色及びフローサイトメトリーのために処理した。幹細胞マーカーＣＤ３４−ＦＩＴＣ（クローン８Ｇ１２，  ＢＤ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  ＣＡ，  ＵＳＡ）及びＣＤ１３３−ＰＥ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，  Ａｕｂｕｒｎ，  ＣＡ，  ＵＳＡ）を、２色免疫蛍光のために使用した。ＣＤ３４−ＦＩＴＣ／ＣＤ１３３−ＰＥでの全サンプルの染色を、三通り行った。ＩｇＧ１−ＦＩＴＣ及びＩｇＧ１−ＰＥアイソタイプ対照（ＢＤ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ）を、類似サンプルにおいて使用した。各ドナーの別個の陽性対照サンプルには、ＣＤ４５−ＦＩＴＣ及びＣＤ１４−ＰＥを含めた。染色したＰＢＭＣを、１％ホルマリンで固定し、フローサイトメトリーによって直ぐに獲得した。各々三通りのサンプルに対して２００，０００事象のファイルを集めた。ＣＤ３４＋ＣＤ１３３−、ＣＤ３４＋ＣＤ１３３＋、及びＣＤ３４−ＣＤ１３３＋のサブセットの百分率を別個に分析し、ＣＢＣ白血球百分率によって得られた三通りのリンパ球数の平均から得られたときに、そのリンパ球細胞数を掛けて再度分析した。
（実施例１２）
ワカメ由来のフコイダンの経口投与後の末梢血中に循環するＣＤ３４＋ＨＳＣの増大
【０１１０】
本発明者らは、ヒト対象の末梢血流におけるＨＳＣの動員を実現するこれらの能力に関して、いくつかの異なる藻類種に由来するフコイダンの経口投与の試験を行った。ある種（ワカメ）由来のフコイダンは、４５分、９０分及び１８０分の測定間隔で起こる、１７％、２３％（Ｐ＜０．０２）及び３２％（（Ｐ＜０．０２）の増大を伴う循環ＣＤ３４＋ＨＳＣ数の有意な上昇を生じ、それによって、放出因子としての有効性が示される（図８）。本発明者らの知見の及ぶ限りでは、これは、文献において報告される最も顕著な増加であり、更に、また、ワカメ由来のフコイダンの経口投与の試験も行った、Ｉｒｉｍｅｈ  ｅｔ  ａｌによって以前に報告された、１４日後での１２％増加を上回る顕著な改善である。重要なことには、Ｉｒｉｍｅｈ  ｅｔ  ａｌは、３ｇのフコイダンを毎日投与したことを報告したのに対して、本発明者らは、２５０ｍｇ投与量レジメンを使用して改善された結果を達成した。このことは、フコイダンを経口投与して、ＣＤ３４＋ＨＳＣの放出及び循環を促進するために、特定の投与量を適用することの重要な役割を強調する。さらに、より低い投与量は、より長期間の患者の使用（例えば、日常的な毎日の投与）を可能にし得るが、より高い投与量は、反復使用及び／または日常的使用と適合しない可能性がある。
（実施例１３）
クサモズク由来のフコイダンの経口投与後に末梢血中に循環するＣＤ３４＋ＨＳＣの増大
【０１１１】
これら観察から拡張して、本発明者らは、クサモズクなど、いくつかの他の藻類種由来のフコイダンでは、ヒト対象におけるＣＤ３４＋ＨＳＣの循環数を増加させることはできないことを発見した（図９）。上記のようにワカメ由来のフコイダンの有効な２５０ｍｇ投与量など、いくつかの投与レジメンの適用にも拘わらず、クサモズク由来のフコイダンにより、おそらく、循環ＨＳＣの表面上でＣＸＣＲ４発現が増加した結果として、循環ＣＤ３４＋ＨＳＣ数の減少をもたらした。これら結果は、フコイダンの正確な供給源と、有効な治療用量の特定との間での複雑な相互作用を反映するものである。同じフコイダン調製法を使用し、ボランティアにおいて同じ条件下で投与した、クサモズク由来のこのフコイダンの２５０ｍｇの消費により、循環幹細胞数の平均的減少をもたらし（図３）、それによって、幹細胞の遊走の支援における有効な役割が示された。
【０１１２】
これら結果は、異なる供給源由来のフコイダンが構造−活性相関において相違するとの以前の報告と一致する。アスコフィラムノドサム及びＰｅｌｖｅｔｉａ  ｃａｎｃｕｌａｔａ由来のフコイダン画分は、ＨＳＣ動員に関与する三硫酸化二糖類ヘパリン様モチーフを介して、抗凝固活性を有することが報告された。硫酸化パターンが、それらの抗凝固活性と相関するという報告は、特に注目に値した。ガラクタン、３−結合した、規則的に２−Ｏ−硫酸化したガラクタンのファミリーからの類似の分子は、対応する３−結合した、規則的に２−Ｏ−硫酸化したフカンにおいては見出されない抗凝固活性を有する。抗凝固活性に関するこれらの報告、及びＨＳＣの動員に関する本発明者らの観察は、フコイダンなどの硫酸化フカンの構造−活性相関は、特定の化学基の存在または非存在からくる電荷密度など、一般的特徴から生じるものではないことを明らかに示す。代わりに、生物学的活性は、多糖類の正確な構造に、決定的に依存する。必然的に、藻類の異なる種由来の異なる構造のフコイダンにより、ＨＳＣの動員など、種々の治療的適応についての複雑な有効性範囲がもたらされることが予期される。上記のように、これはまた、異なる種由来のフコイダンを使用する場合に変動し得る、有効な治療用量を制定する必要がある。
（実施例１４）
ツルドクダミ単独の消費後またはツルドクダミ、ナガバクコ、フコイダン、初乳、スピルリナ及びキノコのブレンドに含有されるときの幹細胞の動員
【０１１３】
ツルドクダミは、循環幹細胞数が１３±６％（ｎ＝７）（ｐ＜０．０５）増加する、中程度の増加を誘発することが示された。ボランティアのうちの２名において、２５％を超える増加が認められた。その結果は、図１０に示す。
（実施例１５）
アロエマクロクラーダの経口投与後の末梢血中に循環するＣＤ３４＋ＨＳＣの増大
【０１１４】
本発明者らは、ヒト対象の末梢血流におけるＨＳＣの動員を増大させるこれらの能力に関して、アロエ属由来のアロエマクロクラーダの経口投与の試験を更に行った。図１１に示すように、図示するとおり、６０分、１２０分、１８０分及び２４０分の時点で、幹細胞レベルを実質的に測定し、６０分超〜１２０分の時点での急速な上昇率を有し、その後の測定を介して、１８０分及び２４０分の時点で持続している。
（実施例１６）
アロエマクロクラーダ抽出物の有効性と固有ペレットＩとの比較
【０１１５】
骨髄幹細胞の動員に関して、マダガスカル先住民の手製によるアロエマクロクラーダペレットの効果を最初に文書にした後、発明者らは、幹細胞の動員に及ぼす効果に関して、植物のさまざまな部分の試験を行った。
【０１１６】
固有ペレットが本質的に残留ｓａｐ及び植物灰の粗調製物から作られて、おそらく治療的有効成分の破壊を招く植物原料の燃焼によって調製されていることを考慮して、発明者は、改良組成物植物ｓａｐ及びゲルを調製し、ペレット初期量３４０ｍｇに対して、このブレンドのヒト対象への２つの投与、２５０ｍｇ及び７５０ｍｇの試験を行った。
（実施例１７）
さまざまな幹細胞タイプにおけるアロエマクロクラーダによる幹細胞輸送の増大
【０１１７】
興味深いことに、粗調製技術であるにもかかわらず、アロエマクロクラーダの固有ペレット並びに発明者らの発明したｓａｐとゲルとのブレンド調製物はいずれも、幹細胞の４つのタイプすなわち、ＣＤ４５ｄｉｍ  ＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋、ＣＤ３４＋ＫＤＲ−、及びＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋の動員に影響を及ぼす可能性があり、発明者が改良した組成物も一様に、これらのすべての幹細胞タイプにわたって、有意な増加を誘発することが示された。
【０１１８】
図１２に示すとおり、固有のペレット（３４０ｍｇ）は、ＣＤ４５ｄｉｍ  ＣＤ３４＋細胞に対していかなる影響も有さなかった。しかし、１２０分の時点で２７％及び３２％に到達した循環ＣＤ４５ｄｉｍ  ＣＤ３４＋細胞数の増加を誘発した１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇは、その影響の有意性を得られなかった。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。貯留時、１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１２０分の時点での循環ＣＤ４５ｄｉｍ  ＣＤ３４＋細胞数の２９．６％の増加（ｐ＜０．０２）が明らかになった。
（実施例１８）
アロエマクロクラーダ調製物の投与量がＣＤ３４＋細胞タイプに及ぼす可変的影響
【０１１９】
図１３に示すとおり、固有ペレット（３４０ｍｇ）は、循環ＣＤ３４＋細胞数の１８％の増加を誘発したが、これは、有意性には到達しなかった。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇの投与量により、１２０分の時点で２９．８％及び３２％に到達した循環ＣＤ３４＋細胞数の増加が誘発された。しかし、２５０ｍｇによって認められた影響のみ有意性に到達した（ｐ＜０．０４）。
【０１２０】
１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１２０分の時点での循環ＣＤ３４＋細胞数の２９．９％の増加（ｐ＜０．００１）が明らかになった。
（実施例１９）
アロエマクロクラーダ調製物の投与量がＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞タイプに及ぼす可変的影響
【０１２１】
図１４に示すとおり、固有ペレット（３４０ｍｇ）により、１２０分の時点での循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞の２１．９％の増大（ｐ＜０．０３）が誘発された。１２０分の時点で４２．４％及び１８０分の時点で２２％の循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞数の増加を誘発した投与量２５０ｍｇでは、その影響は有意性には到達しなかった。１２０分の時点で４７．２％及び１８０分の時点で２７．２％の循環ＣＤ３４＋ＫＤＲ−細胞数の増加を誘発したが、投与量７５０ｍｇでは、その影響は有意性には到達しなかった。
【０１２２】
１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いた全データから、１２０分の時点での有意な循環ＣＤ３４＋細胞数の４４．８％の増加（ｐ＜０．０１）及び１８０分の時点での２４．７％の増加（ｐ＜０．０２）が明らかになった。
（実施例２０）
アロエマクロクラーダ調製物の投与量がＣＤ４５−ＣＤ３４＋ＫＤＲ＋細胞タイプに及ぼす影響
【０１２３】
図１５に示すとおり、固有ペレット（３４０ｍｇ）により、それぞれ、１２０分の時点でＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞数の８０．６％の増加（ｐ＜０．０２）、及び１８０分の時点での循環細胞数の６９％の増加（ｐ＜０．０３）が誘発された。循環ＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞は、１２０分の時点で３２．４％、１８０分の時点で４６．８％の増加をそれぞれ誘発したが、投与量２５０ｍｇでは、１８０分の時点での影響のみが有意性に到達している（ｐ＜０．００３）。投与量７５０ｍｇでは、１８０分の時点での循環ＣＤ４５−ＣＤ３１＋ＫＤＲ＋細胞数の有意な増加７５．４％（ｐ＜０．０２）を引き起こした。１ｓａｐ／ゲル当たり２５０ｍｇ及び７５０ｍｇにより示された結果により、いかなる有意差も認められず、このため、共に貯留した。１ｓａｐ／ゲル（ｎ＝８）を用いたデータから、１８０分の時点での循環ＣＤ３４＋細胞数の６１．１％の増加（ｐ＜０．０００４）が明らかになった。
【０１２４】
上記の種々の方法及び技術は、本発明を実施するためのいくつかの方法を提供する。当然のことながら、記載されるすべての目的や利点が、必ずしも本明細書に記載される任意の特定の実施形態に従って達成されるとは限らないことが理解されるべきである。従って、例えば、当業者は、上記方法が、本明細書で教示され得るかまたは示唆され得るように、他の目的または利点を必ずしも達成することなく、本明細書で教示されるような１つの利点または利点の群を達成または最適化する様式において実施され得ることを認識する。種々の有利な及び不利な代替が、本明細書で言及される。いくつかの好ましい実施形態は、１つの、別の、またはいくつかの有利な特徴を具体的に含む一方で、他は、１つの、別の、またはいくつかの不利な特徴を具体的に排除すると同時に、なお他のものは、１つの、別の、またはいくつかの有利な特徴の包含によって、現在の不利な特徴を具体的に軽減することは理解されるべきである。
【０１２５】
さらに、当業者は、異なる実施形態から種々の特徴の適用可能性を認識する。同様に、上記で考察される種々の要素、特徴及びステップ、並びに各このような要素、特徴またはステップの他の公知の等価物は、本明細書で記載される原理に従って方法を実施するために、当業者によって混合及び適合され得る。上記種々の要素、特徴、及び工程の中でも、いくつかは、具体的に含められ、他のものは、多様な実施形態において具体的に排除される。
【０１２６】
本発明は、特定の実施形態及び実施例の文脈において開示されたが、本発明の実施形態が、上記具体的に開示される実施形態を超えて、他の代替の実施形態並びに／またはその使用及び改変及び等価物まで拡がることは、当業者によって理解される。
【０１２７】
多くの変形要素及び代替要素は、本発明の実施形態において開示されてきた。なおさらなる変化要素及び代替要素は、当業者に明らかである。これら変化形態の中には、限定なく、幹細胞動員剤の供給源、幹細胞動員剤、その類縁物質、その誘導体の調製方法、単離方法または精製方法、幹細胞動員剤、その類縁物質、その誘導体を用いた個々の疾患及び／または状態の処置方法、そこで使用される技術及び組成物及び解決法の使用、並びに本発明の教示を介して作り出される生成物の特定の使用がある。本発明の種々の実施形態は、いかなるこれら変化形態または要素も具体的に含め得るかまたは排除し得る。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、本発明の特定の実施形態を記載及び請求するために使用される成分の量、特性（例えば、濃度、反応条件など）を表す数字は、いくつかの場合には、用語「約」によって修飾されると理解されるべきである。それ故に、いくつかの実施形態において、記述された説明及び添付の特許請求の範囲に示される数値パラメーターは、特定の実施形態によって得ようとされる所望の特性に依存して変動し得る近似値である。いくつかの実施形態において、数値パラメーターは、報告された有効数字の数値に鑑みて、及び通常の四捨五入法を適用することによって、解釈されるべきである。本発明のいくつかの実施形態の広い範囲を示す数値範囲及びパラメーターが近似値であるにも拘わらず、具体例に示される数値は、実行可能であるように正確に報告される。本発明のいくつかの実施形態に示される数値は、それらそれぞれの試験測定値において見出だされる標準偏差から必然的に生じる特定の誤差を含み得る。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、本発明の特定の実施形態を記載する文脈（特に、以下の特許請求の範囲の特定の文脈において）において使用される用語「１つの、ある（ａ）」及び「１つの、ある（ａｎ）」及び「この（ｔｈｅ）」並びに類似の表示は、単数形及び複数形の両方を網羅すると解釈され得る。本明細書中の値の範囲の記載は、この範囲内に入る各別個の値に個々を指す簡略な表現法として機能すると解釈されるに過ぎない。本明細書で別段示されなければ、各個々の値は、これが本明細書で個々に記載されるかのように、本明細書に援用される。本明細書で記載されるすべての方法は、本明細書で別段示されなければ、または別段文脈によって明らかに矛盾しなければ、任意の好適な順序で行われ得る。本明細書中の特定の実施形態に関して提供される任意の及びすべての例、または例示的言語（例えば、「例えば、〜のような（ｓｕｃｈ  ａｓ）」）の使用は、本発明をよりよく示すに過ぎないと解釈され、別に特許請求される本発明の範囲に対する限定とはならない。本明細書における言語は、本発明の実施に必須ないかなる特許請求されていない要素を示すものとして解釈されるべきでない。
【０１３０】
本明細書で開示される、本発明の代替の要素または実施形態のグループ分けは、限定するものとして解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個々に、または本明細書で見出されるグループの他のメンバーまたは他の要素との任意の組み合わせにおいて言及され得、かつ、特許請求され得る。グループの１つ以上のメンバーは、便宜性及び／または特許性があることという理由で、グループに含められ得るかまたはそこから削除され得る。任意のこのような包含または削除が起こる場合、本明細書は、ここで改変されたとおりのグループを含むとみなされ、従って、添付の特許請求の範囲において使用されるすべてのマーカッシュグループの記載される説明を満たす。
【０１３１】
本発明の好ましい実施形態は、本発明を実施するにあたって、発明人に既知の最良の様式など、本明細書に記載される。これらの好ましい実施形態の変形形態は、前述の説明を読んだときに、当業者にとって明かであろう。当業者が必要に応じてこのような変化形態を使用し得ること、及び、本発明が本明細書に具体的に記載されるのとは別の方法で実施され得ることが企図される。したがって、多くの本発明の実施形態は、適用法によって許容される場合、本明細書に添付される特許請求の範囲に記載される主題のすべての改変及び等価物を含む。さらに、すべての考えられるその変化形態における上記の要素の任意の組み合わせは、本明細書で別段示されなければ、または別段文脈によって明らかに矛盾しなければ、本発明によって包含される。
【０１３２】
さらに、多くの言及が、本明細書全体を通じて特許及び印刷された刊行物に対してなされてきた。上に引用した参考文献及び出版物は、その全体が参考として本明細書に援用される。
【０１３３】
最後に、本明細書に開示の本発明の実施形態は、本発明の原理の適用を例示しているにすぎないことが理解される。利用され得る他の変更形態は、本発明の範囲内であり得る。限定するものではないが、一例として、本発明の代替的構成は、本明細書の教示によって利用し得る。したがって、本発明の実施形態は、正確に図示し、説明するようなものに限定されない。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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