(57)【要約】  ヘテロアリールジヒドロピリミジン（ＨＡＰ）系蛍光染色剤（化合物）、ならびにそのような染色剤の診断剤、ウイルス追跡剤、および／または創薬用ツールとしての使用を開示する。
2016522271.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化４８】
2016522271.tif 000050
［式中：
ＱはＡｒ１またはＡｋ１であり；
Ａｒ１はアリールまたはヘテロアリールであり；
ＲＣは水素であり；
ＡｋおよびＡｋ１は、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり；
Ｚは
【化４９】
2016522271.tif 000051
（式中、ｎは１、２、３、４、５、または６であり；ｙは６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；ｚは１、２、３、または４であり；ＲはＨまたはアルキルである）
であり；
ＲＤは、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択され；
ＲＥはフルオロフォアであり；
ＹはＯ、Ｓ、またはＨＮであり；
ＲＡは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択され；
ＲＢは、独立して、０〜３の置換基を表し、各場合において、ハロゲンであるか、または、その各々が、置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択される］
を有する化合物、またはその塩。
【請求項２】
ＲＡが２−クロロ−４−フルオロを表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−チアゾリル、２−チエニル、２−フラニル、２−（１−メチル）イミダゾリル、２−ピリミジニル、２−ナフチル、２−ピロリジニル、フェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−ピリジルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ＱがＡｒ１であり、ＲＢが存在しない、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
ＹがＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
ＲＤがメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ＲＥが
【化５０】
2016522271.tif 000052
［式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキルもしくはアルコキシが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、もしくはＣ１〜Ｃ１８アルコキシ；または−ＳＯ３Ｘ（ここで、ＸはＨまたは対イオンである）であり；
Ｒ１およびＲ６はＨであり；あるいはＲ１はＲ２と組み合わされて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わされて、または双方によって、−ＳＯ３Ｘによって１回または複数回置換されていてもよい縮合芳香族６員環を形成し；
ＡはＮＲ８Ｒ９であり；ここで、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＣはＯＲ１７またはＮＲ１８Ｒ１９であり、
ここで、Ｒ１７はＨ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ１８およびＲ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ１８はＲ１９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ１９はＲ５と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＢはＯまたはＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＳＯ３Ｘ、カルボン酸、カルボン酸の塩、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ６〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドであり、その該アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、−ＳＯ３Ｘ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々の該アルキル部分は１〜６個の炭素を有し；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、またはカルボン酸の塩によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮもしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立に置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
式：
【化５１】
2016522271.tif 000053
を有する、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１０】
ＲＥが：
【化５２】
2016522271.tif 000054
［式中、
Ｒ１およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８アルコキシであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキル、アルコキシもしくはアルキルチオが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、Ｒ１８がＣ１〜Ｃ４アルキルである−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシもしくはＣ１〜Ｃ１８アルキルチオ；またはアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、もしくはアルコキシであり、その該アルキル部分は、独立して、１〜６個の炭素を有し；あるいはＲ３およびＲ４の一方または双方は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）２であり、ここで、Ｒ１７は、Ｈ、生物学的に適合する対イオン、１〜６個の炭素を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８であり；
ＡはＯＲ７またはＮＲ８Ｒ９であり、
ここで、各Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アシル、ここで各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有し、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、もしくは−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；または各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有するトリアルキルシリルであり；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ１８アシルであり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、１個または複数のメチルによって置換されていてもよい飽和５または６員環を形成し；あるいはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンまたはピペラジンである飽和５または６員複素環を形成し；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ；またはスルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはその該アルキルもしくはアリール部分が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、スルホン酸、スルホン酸の塩、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分が１〜６個の炭素を有するＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミドもしくはＣ１〜Ｃ１８アリールアミドであり；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立して置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
式：
【化５３】
2016522271.tif 000055
を有する、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１２】
ＲＥが
【化５４】
2016522271.tif 000056
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、アシルまたはスルホである］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
式：
【化５５】
2016522271.tif 000057
を有する、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１４】
ＲＥが
【化５６】
2016522271.tif 000058
［式中、
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、またはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
またはＲ７と組み合わせたＲ６；
Ｒ８と組み合わせたＲ７；
Ｒ９と組み合わせたＲ８；
Ｒ１７と組み合わせたＲ１６；
Ｒ１８と組み合わせたＲ１７；および
Ｒ１９と組み合わせたＲ１８
から独立して選択されるメンバーは、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−または−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成し、ここで、Ｒ１はアミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、ここで、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によって置換されていてもよく；
ｐは１、２または３であり；
ｑは０、１、２または３であり；
Ｒ１２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ１３はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
またはＲ１３およびＲ１４は組み合わされて、置換されていてもよい５もしくは６員飽和もしくは不飽和環を完成し；
スルホはスルホン酸またはスルホネートである］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
ＲＥが
【化５７】
2016522271.tif 000059
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ４１、Ｒ４２、およびＲ４６は、独立して、水素、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルコキシは、カルボン酸、スルホン酸またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、アジド、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ１はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ４１はＲ４２と組み合わせられて、または双方によって、１回または複数回スルホン化されていてもよい縮合芳香族またはヘテロ芳香族環を形成し；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、芳香族またはヘテロ芳香族環からなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、ヒドロキシ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記芳香族またはヘテロ芳香族環は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ２はＲ３と組み合わせられて、Ｒ４２はＲ４３と組み合わせられて、もしくはＲ３はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ４３はＲ４４と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
Ｒ５およびＲ４５は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキル、またはヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ４はＲ５と組み合わせられて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わせられて、もしくはＲ４４はＲ４５と組み合わせられて、もしくはＲ４５はＲ４６と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
ここで、Ｅ、Ｅ’、Ｘ’およびＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ８であり、但し、ＥおよびＸまたはＥ’およびＸ’は共には存在せず；
ここで、Ｒ８は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく；
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４は、独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、カルボン酸、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドからなる群から選択され、ここで、前記Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４の前記アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、スルホン酸、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノおよびＣ２〜Ｃ６アルコキシからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；あるいは隣接するＲ３０およびＲ３１またはＲ３３およびＲ３４置換基の対は、組み合わされると、カルボン酸によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成する］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
ＲＥが
【化５８】
2016522271.tif 000060
［式中、
Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキル、スルホメチル、スルホメチルの生物学的に適合する塩、ハロメチル、またはアリールであり；
Ｒ５はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ６はＨ、メチル、ハロゲン、またはＳＯ３Ｘであり；
Ｒ７はＨまたはＮＲ１Ｒ２であり；ここで、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ１８アリール、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールアルカノイルであり；
または、Ｒ１はＲ２と組み合わせられて、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
またはＲ１は式：
【化５９】
2016522271.tif 000061
（式中、
Ｒ９およびＲ１０はＨ、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであるか、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏであり；Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である）
の２−ニトロベンジルオキシカルボニルであり；
Ｒ８はＨ、ハロゲン、ＳＯ３Ｘ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
ＸはＨ、または生物学的に適合するカチオンである］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
ＨＢＶを診断し、検出し、追跡し、および／またはＨＢＶに競合的に結合するのに有効な量の請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種または複数の化合物を含む組成物。
【請求項１８】
１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはそれらの組合せをさらに含む、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
細胞および組織においてＨＢＶを検出し、診断し、および／または追跡する方法であって、
ａ）細胞と、ＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の、請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）任意の過剰な前記１種または複数の化合物を洗い流す工程；
ｃ）前記混合物に刺激を施して、蛍光シグナルを誘導する工程；ならびに
ｄ）前記刺激された混合物を分析する工程
を含む方法。
【請求項２０】
前記細胞が組織培養、新鮮な生検材料、固定された切片、または他の供給源に由来する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
分析が、バルク蛍光を調べることによって、蛍光顕微鏡観察により個々の細胞を調べることによって、セルソーターによって、または別のメカニズムによって達成される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
溶液中のＨＢＶコアを検出し、診断し、および／または追跡する方法であって、
ａ）清澄化血清、成長培地、または試験すべき他の液体、ならびにＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物またはその組成物を含む溶液をインキュベートする工程；
ｂ）必要であれば、イオン強度を調整して、ｅ−抗原アセンブリを検出する目的で前記アセンブリを誘導する工程；
ｃ）ＨＢＶコアに結合した前記１種または複数の化合物から未結合の前記１種または複数の化合物を分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；ならびに
ｄ）前記未結合および結合相に関連する蛍光を分析する工程
を含む方法。
【請求項２３】
ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、遠心分離、または他の技術によって達成される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法であって、
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、前記抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）前記１種または複数の化合物の蛍光の変化を測定する工程；および
ｃ）前記抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について前記混合物を分析する工程
を含む方法。
【請求項２５】
抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法であって、
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、前記抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）未結合の前記抗ＨＢＶ薬候補および未結合の前記１種または複数の化合物を前記抗ＨＢＶ薬候補およびＨＢＶコアに結合した前記１種または複数の化合物から分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；
ｃ）前記未結合および結合相に関連する蛍光を測定する工程；ならびに
ｄ）前記抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について前記混合物を分析する工程
を含む方法。
【請求項２６】
ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、遠心分離、または他の技術によって達成される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ａ）請求項１から１６のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物またはその組成物；および
ｂ）溶媒
を含む、ＨＢＶを検出し、診断し、および／もしくは追跡し、ならびに／またはＨＢＶのＨＡＰポケットに競合的に結合する化合物を同定するためのキット。
【請求項２８】
構造式（Ｉ）：
【化６０】
2016522271.tif 000062
を有する化合物またはその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）構造式：
【化６１】
2016522271.tif 000063
の化合物を、適切に活性化されたフルオロフォアと反応させることを含み、
ここで、Ｑ、ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、Ｒ、ＲＡ、ＲＢ、ｎ、ｙ、およびｚは請求項１で定義した通りである、プロセス。
【請求項２９】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが
【化６２】
2016522271.tif 000064
［式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキルもしくはアルコキシが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、もしくはＣ１〜Ｃ１８アルコキシ；または−ＳＯ３Ｘ（ここで、ＸはＨまたは対イオンである）であり；
Ｒ１およびＲ６はＨであり；あるいはＲ１はＲ２と組み合わされて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わされて、または双方によって、−ＳＯ３Ｘによって１回または複数回置換されていてもよい縮合芳香族６員環を形成し；
ＡはＮＲ８Ｒ９であり；
ここで、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＣはＯＲ１７またはＮＲ１８Ｒ１９であり、ここで、Ｒ１７はＨ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ１８およびＲ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ１８はＲ１９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ１９はＲ５と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＢはＯまたはＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＳＯ３Ｘ、カルボン酸、カルボン酸の塩、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ６〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドであり、その該アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、−ＳＯ３Ｘ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々の該アルキル部分は１〜６個の炭素を有し；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、またはカルボン酸の塩によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮもしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立に置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成し、
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項３０】
前記反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、請求項２９に記載のプロセス。
【請求項３１】
前記活性化されたエステルがテトラフルオロフェニルエステルである、請求項３０に記載のプロセス。
【請求項３２】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが
【化６３】
2016522271.tif 000065
［式中、
Ｒ１およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８アルコキシであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキル、アルコキシもしくはアルキルチオが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、Ｒ１８がＣ１〜Ｃ４アルキルである−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシもしくはＣ１〜Ｃ１８アルキルチオ；またはアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、もしくはアルコキシであり、その該アルキル部分は、独立して、１〜６個の炭素を有し；あるいはＲ３およびＲ４の一方または双方は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）２であり、ここで、Ｒ１７は、Ｈ、生物学的に適合する対イオン、１〜６個の炭素を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８であり；
ＡはＯＲ７またはＮＲ８Ｒ９であり、
ここで、各Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アシル、ここで各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有し、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、もしくは−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；または各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有するトリアルキルシリルであり；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ１８アシルであり、ここで、該アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、１個または複数のメチルによって置換されていてもよい飽和５または６員環を形成し；あるいはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンまたはピペラジンである飽和５または６員複素環を形成し；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ；またはスルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはその該アルキルもしくはアリール部分が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、スルホン酸、スルホン酸の塩、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分が１〜６個の炭素を有するＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミドもしくはＣ１〜Ｃ１８アリールアミドであり；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立して置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成し；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項３３】
前記反応性基Ｒｘがイソチオシアネートである、請求項３２に記載のプロセス。
【請求項３４】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが、
【化６４】
2016522271.tif 000066
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、アシルまたはスルホであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項３５】
前記反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、請求項３４に記載のプロセス。
【請求項３６】
前記活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、請求項３５に記載のプロセス。
【請求項３７】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが
【化６５】
2016522271.tif 000067
［式中、
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、またはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
またはＲ７と組み合わせたＲ６；
Ｒ８と組み合わせたＲ７；
Ｒ９と組み合わせたＲ８；
Ｒ１７と組み合わせたＲ１６；
Ｒ１８と組み合わせたＲ１７；および
Ｒ１９と組み合わせたＲ１８
から独立して選択されるメンバーは、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−または−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成し、ここで、Ｒ１はアミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、ここで、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によって置換されていてもよく；
ｐは１、２または３であり；
ｑは０、１、２または３であり；
Ｒ１２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ１３はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
またはＲ１３およびＲ１４は組み合わされて、置換されていてもよい５もしくは６員飽和もしくは不飽和環を完成し；
スルホはスルホン酸またはスルホネートであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項３８】
前記反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、請求項３７に記載のプロセス。
【請求項３９】
前記活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、請求項３８に記載のプロセス。
【請求項４０】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが
【化６６】
2016522271.tif 000068
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ４１、Ｒ４２、およびＲ４６は、独立して、水素、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルコキシは、カルボン酸、スルホン酸またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、アジド、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ１はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ４１はＲ４２と組み合わせられて、または双方によって、１回または複数回スルホン化されていてもよい縮合芳香族またはヘテロ芳香族環を形成し；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、芳香族またはヘテロ芳香族環からなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、ヒドロキシ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記芳香族またはヘテロ芳香族環は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ２はＲ３と組み合わせられて、Ｒ４２はＲ４３と組み合わせられて、もしくはＲ３はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ４３はＲ４４と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
Ｒ５およびＲ４５は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキル、またはヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ４はＲ５と組み合わせられて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わせられて、もしくはＲ４４はＲ４５と組み合わせられて、もしくはＲ４５はＲ４６と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
ここで、Ｅ、Ｅ’、Ｘ’およびＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ８であり、但し、ＥおよびＸまたはＥ’およびＸ’は共には存在せず；
ここで、Ｒ８は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく；
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４は、独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、カルボン酸、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドからなる群から選択され、ここで、前記Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４の前記アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、スルホン酸、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノおよびＣ２〜Ｃ６アルコキシからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；あるいは隣接するＲ３０およびＲ３１またはＲ３３およびＲ３４置換基の対は、組み合わされると、カルボン酸によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項４１】
前記反応性基であるＲｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、請求項４０に記載のプロセス。
【請求項４２】
前記活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、請求項４１に記載のプロセス。
【請求項４３】
前記適切に活性化されたフルオロフォアが
【化６７】
2016522271.tif 000069
［式中、
Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキル、スルホメチル、スルホメチルの生物学的に適合する塩、ハロメチル、またはアリールであり；
Ｒ５はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ６はＨ、メチル、ハロゲン、またはＳＯ３Ｘであり；
Ｒ７はＨまたはＮＲ１Ｒ２であり；ここで、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ１８アリール、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールアルカノイルであり；
または、Ｒ１はＲ２と組み合わせられて、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
またはＲ１は式：
【化６８】
2016522271.tif 000070
（式中、
Ｒ９およびＲ１０はＨ、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであるか、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏであり；
Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である）
の２−ニトロベンジルオキシカルボニルであり；
Ｒ８はＨ、ハロゲン、ＳＯ３Ｘ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
ＸはＨ、または生物学的に適合するカチオンであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項４４】
前記反応性基であるＲｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、請求項４３に記載のプロセス。
【請求項４５】
前記活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、請求項４４に記載のプロセス。
【請求項４６】
ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１がフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルである、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物、組成物、方法、キットまたはプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、合衆国法典第１１９条（ｅ）に基づき、ここで参照されることによりその内容の全体が組み込まれる２０１３年３月２０日に出願された米国仮出願第６１／８０３，５５４号の利益を主張する。
【０００２】
本発明は、ヘテロアリールジヒドロピリミジン（ＨＡＰ）系蛍光染色剤（化合物）、ならびに診断試薬、ウイルス追跡剤（ｖｉｒａｌ−ｔｒａｃｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、および／または創薬用のツールに関する。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は世界中で流行している。２０億人の人々がＨＢＶに感染しており、ほぼ４億人の人々が慢性ＨＢＶ（１）に罹っている。本年、約６００，０００人の人々がＨＢＶ関連肝細胞癌腫、硬変、および肝不全で死亡すると予想される。合衆国単独では慢性ＨＢＶを持つ約２００万人の個人が存在する。
【０００４】
ＨＢＶは、２０面体コアを持つエンベロープウイルスである。コアは、コア（キャプシド）蛋白質、ウイルスプレゲノムＲＮＡ、ウイルス逆転写酵素およびいくつかの宿主蛋白質から細胞質中で組み立てられる（C. Bourne, et al., 2008, J.Virol., 82:10262-10270）。ＨＢＶは、その３２００塩基対ゲノム中に４つのオープンリーディングフレームを有しており、そのうち１つはコア蛋白質（ＨＢｃＡｇまたはＣｐ）をコードし、その１８３残基蛋白質の２４０コピーがホモダイマーとしてほぼ球状のキャプシドに自己組織化される（Bourne, et al., 2008）。全複合体は、ウイルスゲノムおよび適当なアクセサリー蛋白質と共にパッケージングされると、ウイルスコアと言われ、これは、（プレゲノムからの）ウイルスＤＮＡ合成および細胞内トラフィッキングにおいて不可欠の役割を有する（Ganem, D., and R. J. Schneider, 2001, Hepadnaviridae: the viruses and their replication, 4th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA）。コア遺伝子の代替開始コドンは、Ｎ末端の伸長、Ｃ末端のトランケーション、ダイマーとして血清中に分泌されることを除いて、コア蛋白質と同一なｅ抗原の発現をもたらす。
【０００５】
慢性ＨＢＶは、その症状やその治療への必要性において様々であり得る。ＨＢＶに対する支配的な抗ウイルス治療戦略は、これまでは、ウイルスの逆転写酵素を攻撃するものであった。驚くべきことではないが、ＨＢＶ逆転写酵素阻害剤は、ＨＢＶにおいて（Deres, K., and H. Rubsamen-Waigmann, 1999, Infection 27(Suppl. 2):S45-S51；Tennant, B. C., et al., 1998, Hepatology 28:179-191；Zhang, et al., 2003, J. Med. Virol. 71:24-30）、さらにヒト免疫不全ウイルスにおいても（Lewis-Hall, F. C, 2007, Re: Important information regarding BARACLUDE (entecavir) in patients co-infected with HIV and HBV. Food and Drug Administration MedWatch Program. Food and Drug Administration, Washington, DC）、薬物抵抗性突然変異体を引き起こす。ＨＢＶにおける広範な遺伝子重複のために、抵抗性は、より広範な影響を及ぼす可能性がある。というのは、いくつかの逆転写酵素突然変異は、ＨＢＶワクチンによって生じた抗体に対して感受性でない表面蛋白質に導くからである（Torresi, J., et al., 2002, Virology 293:305-313）。治療の進行の間、特に、肝臓移植が必要な場合、ＨＢＶの活性を評価し、それにより、肝臓における感染の程度を決定する必要があると予想される。ウイルスの活性を示す１つの方法は、コア蛋白質およびＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）について肝臓生検材料を染色することである。また、血清中のＨＢＶコア、ウイルスおよびｅ抗原のための試験も重要である。現在、ほとんどのＨＢＶ活性測定および／またはＨＢＶ関連試験は、抗体ベースのアッセイを用いて行われる。
【０００６】
ヘテロアリールジヒドロピリミジン（ＨＡＰ）は、広い濃度範囲にわたってＨＢＶキャプシド蛋白質組立ての速度および程度を増強して、キャプシド蛋白質の六角形アレイが優勢の異常な粒子に導くことが見出されている。ＨＡＰは、また、ウイルスコアを安定化し、それにより、ウイルスゲノムの正常な解離および放出を妨げる（Stray, S. J., et al., 2005, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:8138-8143）。そのような化合物はＨＢＶ組立てを破壊し、キャプシドの形成のタイミング、キャプシドの安定性、またはキャプシド形成の幾何学のいずれかを改変し、それに応じて、ウイルス感染に干渉すると考えられている。したがって、ヒトホモログを有しないＨＢＶキャプシド蛋白質組立てを標的化することは、抗ＨＢＶ治療剤を開発するための強力な一般的なアプローチであると予想される。疎水性溝、または「ＨＡＰポケット」が、ＨＢＶコア内での蛋白質−蛋白質界面においてギャップとして存在する（Bourne et al. 2008）。その溝、またはＨＡＰポケットが満たされると、ＨＡＰ分子、プロペンアミドによって、またはコア蛋白質突然変異によって、効果は抗ウイルス性である。かくして、これまでの全ての公知のＨＢＶ特異的コア蛋白質組立てエフェクターはＨＡＰポケット内で結合する。したがって、ＨＢＶのＨＡＰポケットに対して高い親和性を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）が入手できれば、抗ウイルス候補としての分子を同定するための手段としての競合結合アッセイが可能になると予想される。
【０００７】
コア蛋白質についての蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）は、例えば、細胞および器官中のＨＢＶコアを追跡するにおいて、ＨＢＶ生物学を研究する者にとってやはり興味深いものであると予想される。ＨＢＶのライフサイクルはよく定義されていない。組立て部位、コアが蓄積する部位の位置特定、および開口分泌機構とのコア相互作用に関して多数の疑問が存在する。細胞中に拡散し、ＨＢＶコアがある部位に蓄積する培養培地に添加するための蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）が入手できれば、培養された細胞におけるＨＢＶコアについての位置特定部位の容易な同定が可能になると予想される。動物（例えば、マウス、ウッドチャック、ヒト）においては、そのような染色剤を用いて、「潜在」感染が予測されるようなＨＢＶコアが蓄積する、肝臓や他の可能性のある器官の感染領域を同定することができよう。
【０００８】
活性なＨＢＶ感染の他と区別される特徴は、ＨＢＶコアおよびコア含有デーン粒子（すなわち、ＨＢｃＡｇまたはｃ抗原）の血清中での存在である。これらは、現在、抗体を用いる臨床アッセイで検出される。蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）が入手できれば、ＨＢＶコアに対して高度に特異的な代替物が得られると予想される。同様に、ｅ抗原、すなわち、ＨＢＶコア抗原の前記した変種の存在または不存在は、活発に複製するＨＢＶについてのマーカーである。ｃ抗原陽性、ｅ抗原陰性である感染は、ひどい進行性慢性感染に関連付けられている。ｅ抗原についての抗体ベースのアッセイは、ＨＢＶコア（すなわち、ｃ抗原）との交差反応性で困難性を有していた。血清試料の条件を調整することで（例えば、イオン強度の上昇）、ｅ抗原を蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）によって容易に検出できるようになると予測される。
【０００９】
蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）の入手可能性によって可能となる組織中でのＨＢＶコアについての迅速な効果的試験は、生検材料を調べるために価値があり、感染肝臓損傷を病期分類し、類別するための他の組織試料は、急性感染のクリアランスが不明瞭な患者を調べるのに診断的価値があり、感染のレベルについての、および他の標的化器官におけるＨＢＶについての移植候補の評価を可能にし、再感染の証拠についての最近の被移植者からの試料の調査を可能にすると予想される。かくして、組織学的調査と共同したＨＢＶ感染の直接的検出は、肝臓損傷を有するが進行中の感染の証拠が少ない患者にとっての治療選択肢を考えるために価値があると予想される。
【００１０】
抗体ベースのＨＢＶ活性測定および／またはＨＢＶ関連試験の現在の入手可能性に拘わらず、ｉ）抗体ベースのＨＢＶ診断試薬に対する臨床的代替物、ｉｉ）効果的なＨＢＶ追跡剤、およびｉｉｉ）抗ＨＢＶ薬創薬のための新しいツールの必要性が依然として存在し、その必要性の全てが、蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）の入手可能性によって支持されると予想される。
【発明の概要】
【００１１】
ＨＢＶ検出および診断、ＨＢＶ追跡で、ならびに抗ＨＢＶ薬創薬で用いられる化合物、組成物、方法、およびキットが本明細書に記載される。本明細書に記載される化合物は、広い励起および発光範囲にわたって効果的に励起可能な蛍光ＨＡＰ染色剤であり、これは、細胞膜を容易に横切り、ＨＢＶキャプシドに結合し、それにより、会合したフルオロフォアを濃縮して、ＨＢＶ発現細胞の明るい蛍光点状染色を提供する（蛍光ＨＡＰ染色剤の１２０までのコピーが、ＨＢＶキャプシド当たり結合される）。本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）は、高いナノモル濃度の親和性で予め組み立てられたＨＢＶコアのＨＡＰポケット中で結合し、ＨＢＶキャプシド組立ての速度および程度を増強し、ＨＢＶキャプシドを安定化して、さらに異常なキャプシド組立てを誘導し、それにより、ＨＡＰの臨界的特性を保持する。本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）は、ＨＡＰポケットに結合する分子を同定するために、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ診断試薬の代わりに、および／またはそれと組み合わせて抗ＨＢＶ薬創薬で用いて、ＨＢＶコア、コア含有デーン粒子（すなわち、ＨＢｃＡｇまたはｃ抗原）、および／またはｅ抗原の血清中での存在を検出することができる。また、開示された組成物、方法およびキットで用いられる蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）を調製するプロセスも本明細書に記載される。
【００１２】
本発明の例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）：
【００１３】
【化１】
2016522271.tif 000003
［式中：
ＱはＡｒ１またはＡｋ１であり；
Ａｒ１はアリールまたはヘテロアリールであり；
ＲＣは水素であり；
ＡｋおよびＡｋ１は、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり；
Ｚは
【００１４】
【化２】
2016522271.tif 000004
（式中、ｎは１、２、３、４、５、または６であり；ｙは６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；ｚは１、２、３、または４であり；ＲはＨまたはアルキルである）
であり；
ＲＤはアルキル、各々が置換されていてもよい、ヘテロアルキル、アルケニル、またはアルキニルであり；
ＲＥはフルオロフォアであり；
ＹはＯ、Ｓ、またはＨＮであり；
ＲＡは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択され；
ＲＢは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロゲンであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択される］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００１５】
Ｑ、ＲＤ、ＲＥ、Ａｒ１、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ａｋ１、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢの各々の種々の属および亜属の全ての可能な組合せは、本明細書に記載される化合物の追加の例示的な実施形態を表すと理解されるものとする。化合物のそれらの追加の例示的な実施形態の各々は、本明細書に記載される組成物、方法、および／またはキットのいずれかにおいて用いることができるとさらに理解されるものとする。
【００１６】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその塩が記載され、ここで：ＱはＡｒ１であり、ここで、
Ａｒ１は、２−チアゾリル、２−チエニル、２−フラニル、２−（１−メチル）イミダゾリル、２−ピリミジニル、２−ナフチル、２−ピロリジニル、フェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルであり；ＲＤ、ＲＥ、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢの各々は、本明細書に記載される実施形態のいずれかで定義した通りである。
【００１７】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその塩が記載され、ここで：ＱはＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１はフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルであり；ＲＤ、ＲＥ、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢの各々は、本明細書に記載される実施形態のいずれかで定義した通りである。
【００１８】
別の例示的な実施形態において、ＨＢＶ検出、ＨＢＶ診断、ＨＢＶ追跡、および／または抗ＨＢＶ薬創薬で用いられる組成物が記載され、この組成物は、ＨＢＶを検出し、診断し、追跡し、および／またはＨＢＶに競合的に結合するのに有効な量の本明細書に記載される１種または複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）を含む。本明細書に記載される組成物は、限定されるものではないが、他の診断的に活性な化合物、および／または１種もしくは複数の担体、希釈剤、賦形剤等を含めた、他の構成要素および／または成分を含んでよいと理解されるものとする。
【００１９】
本発明の別の例示な実施形態は、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法を提供し、該方法は、例えば、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ検出および／または診断方法と組み合わせて用いるのに適合しており：
ａ）細胞と、有効量の本明細書に記載される１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）任意の過剰な前記１種または複数の化合物を洗い流す工程；
ｃ）混合物に刺激を施して、蛍光シグナルを誘導する工程；および
ｄ）刺激された混合物を分析する工程
を含む。
【００２０】
別の例示的な実施形態は、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法を提供し、該方法は、例えば、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ検出および／または診断方法と組み合わせて用いるのに適合しており：
ａ）清澄化血清、成長培地、または試験すべき他の液体、ならびに有効量の本明細書に記載される１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその組成物を含む溶液をインキュベートする工程；
ｂ）必要であれば、イオン強度を調整して、ｅ抗原アセンブリを検出する目的で前記アセンブリを誘導する工程；
ｃ）ＨＢＶコアに結合した前記１種または複数の化合物から未結合の前記１種または複数の化合物を分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；ならびに
ｄ）未結合および結合相と関連する蛍光を分析する工程
を含む。
【００２１】
別の例示的な実施形態は、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法を提供し、該方法は：
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、有効量の本明細書に記載される１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）１種または複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）の蛍光の変化を測定する工程；および
ｃ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む。
【００２２】
別の例示的な実施形態は、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法を提供し、該方法は：
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、有効量の本明細書に記載される１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）未結合の前記抗ＨＢＶ薬候補および未結合の前記１種または複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）を、ＨＢＶコアに結合した前記抗ＨＢＶ薬候補および前記１種または複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）から分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；
ｃ）未結合相および結合相に関連する蛍光を測定する工程；ならびに
ｄ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む。
【００２３】
別の例示的な実施形態は、ＨＢＶを検出し、診断し、および／または追跡し、同様にＨＢＶのＨＡＰポケットに競合的に結合する化合物を同定するためのキットを提供し、該キットは、例えば、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ検出および／または診断試薬と組み合わせて用いるのに適合しており：
ａ）本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）；および
ｂ）適当な溶媒
を含む。
【００２４】
別の例示的な実施形態は、構造式（Ｉ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤を調製するプロセスを提供し、
該プロセスは：
（ａ）構造式：
【００２５】
【化３】
2016522271.tif 000005
のＨＡＰ化合物を適切に活性化されたフルオロフォアと反応させることを含み、ここで：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり；ＲＣ、ＲＤ、Ａｋ、Ａｋ１、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、ＲＢ、ｎ、ｙ、ｚおよびフルオロフォアは本明細書中に定義した通りである。
【００２６】
該プロセスの別の実施形態が記載され、ここで、ＱはＡｒ１であり、ここで、ＲＣ、ＲＤ、Ａｋ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、ＲＢ、ｎ、ｙ、ｚおよびフルオロフォアは本明細書中で定義した通りである。本発明の追加の例示的な態様、特徴および利点は、現在認識されている発明を実施する最良の様式を例示する以下の詳細な記載を考慮すれば当業者に明らかとなると予想される。しかしながら、以下の詳細な記載および具体的な実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しつつ、説明のみとして与えられると理解されるものとする。本発明の本質および範囲内にある種々の変形および修飾は当業者に明らかとなると期待される。
【００２７】
詳細な記載は、特に、添付の図面に言及する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８がＨＢＶキャプシド組立て速度を増強させることを示す。
【図２】図２は、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８が、アセンブリの安定性を増加させ、ダイマーではなく、ＨＢＶキャプシドに特異的に結合することを示す。
【図３】図３は、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８が高い親和性でＨＢＶキャプシドに結合し、ゆっくりと解離することを示す。
【図４】図４は、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８がＨＢＶ産生細胞のみを標識することを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本明細書中に記載される発明は種々の修飾および代替形態を許容するが、本発明の原理の理解を促進する目的で、ここに多数の例示的な実施形態について述べ、具体的な言語を用いてそれを説明する。しかしながら、本発明を記載された特別な形態に限定する意図はなく、むしろ、反対に、本発明は、本発明の精神および範囲内に入る全ての修飾、同等物、および代替物を網羅するものである。
【００３０】
本発明は、ＨＢＶ検出および診断、ＨＢＶ追跡で、ならびに抗ＨＢＶ薬創薬で用いられる化合物、組成物、方法およびキットを含む。本明細書に記載される化合物は、広い励起および発光範囲にわたって効果的に励起可能な蛍光ＨＡＰ染色剤であり、これは、細胞膜を容易に横切り、ＨＢＶキャプシドに結合し、それにより、会合したフルオロフォアを濃縮して、ＨＢＶ発現細胞の明るい蛍光点状染色を提供する（蛍光ＨＡＰ染色剤の１２０までのコピーが、ＨＢＶキャプシド当たり結合される）。本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）は、高いナノモル濃度の親和性で予め組み立てられたＨＢＶコアのＨＡＰポケット中で結合し、ＨＢＶキャプシド組立ての速度および程度を増強し、ＨＢＶキャプシドを安定化して、さらに異常なキャプシド組立てを誘導し、それにより、ＨＡＰの臨界的特性を保持する。本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）は、ＨＡＰポケットに結合する分子を同定するために、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ診断試薬の代わりに、および／またはそれと組み合わせて抗ＨＢＶ薬創薬で用いて、ＨＢＶコア、コア含有デーン粒子（すなわち、ＨＢｃＡｇまたはｃ抗原）、および／またはｅ抗原の血清中での存在を検出することができる。また、本明細書で開示された組成物、方法およびキットで用いられる蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）を調製するプロセスも本明細書に記載される。
【００３１】
本発明の例示的な態様において、構造式（Ｉ）：
【００３２】
【化４】
2016522271.tif 000006
［式中：
ＱはＡｒ１またはＡｋ１であり；
Ａｒ１はアリールまたはヘテロアリールであり；
ＲＣは水素であり；
ＡｋおよびＡｋ１は、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり；
Ｚは
【００３３】
【化５】
2016522271.tif 000007
（式中、ｎは１、２、３、４、５、または６であり；ｙは６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；ｚは１、２、３、または４であり；ＲはＨまたはアルキルである）
であり；
ＲＤはアルキル、各々が置換されていてもよい、ヘテロアルキル、アルケニル、またはアルキニルであり；
ＲＥはフルオロフォアであり；
ＹはＯ、Ｓ、またはＨＮであり；
ＲＡは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択され；
ＲＢは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロゲンであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびそれらの誘導体からなる群から選択される］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００３４】
ＲＤ、ＲＥ、Ａｒ１、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ａｋ１、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢの各々の種々の属および亜属の全ての可能な組合せは、本明細書に記載される発明の化合物の追加の例示的な実施形態を表すと理解されるものとする。化合物のそれらの追加の例示的な実施形態の各々は、本明細書に記載される組成物、方法、および／またはキットのいずれかにおいて用いることができるとさらに理解されるものとする。
【００３５】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその塩が記載され、ここで：
ＱはＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は、２−チアゾリル、２−チエニル、２−フラニル、２−（１−メチル）イミダゾリル、２−ピリミジニル、２−ナフチル、２−ピロリジニル、フェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルであり；ＲＤ、ＲＥ、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢは、本明細書に記載される実施形態のいずれかで定義した通りである。
【００３６】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその塩が記載され、ここで：
Ａｒ１はフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルであり；ＲＤ、ＲＥ、Ｚ、Ｙ、Ａｋ、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢは、本明細書に記載される実施形態のいずれかで定義した通りである。
【００３７】
例示的な実施形態において、構造式（Ｉ）もしくは（Ｉａ）を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその塩が記載され、ここで、フルオロフォアは、限定されるものではないが、フルオレセイン、ローダミン、ロドール、ロサミン、およびそれらの誘導体を含めたキサンテン、クマリン、アクリジン、フラン、インドール、キノリン、シアニン、ベンゾフラン、キナゾリノン、ベンズアゾール、ホウ素−ジピロメテン、ならびにそれらの誘導体からなる群から選択される。
【００３８】
別の例示的な実施形態において、ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−ピリジルまたは３−ピリジルである式（Ｉ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＲＢが存在しない式（Ｉ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＹがＯまたはＳである式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＲＤがメチルである式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ａｋ１がＣ１〜Ｃ４またはＣ１〜Ｃ３またはＣ１〜Ｃ２である式（Ｉａ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ａｋ１がＣＨ２である式（Ｉａ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−ピリジルであり、ＲＢが存在せず、ＹがＯであり、ＲＤがメチルである式（Ｉ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−ピリジルであり、ＲＢが存在せず、ＹがＯであり、ＲＤがメチルであり、フルオロフォアがローダミン誘導体、フルオレセインもしくはその誘導体、またはホウ素−ジピロメテン誘導体である式（Ｉ）の化合物が記載される。
【００３９】
Ｑ、ＲＤ、ＲＥ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、Ｒ、ＲＡ、およびＲＢの各々の種々の属および亜属の全ての可能な組合せは、本明細書に記載される発明の化合物の追加の例示的な実施形態を表すと理解されるものとする。化合物の前記した追加の例示的な実施形態の各々は、本明細書に記載される組成物、方法、および／またはキットのいずれかで用いることができるとさらに理解されるものとする。
【００４０】
これまでの態様の各々および以下の実施形態の各々において、式は化合物の全ての医薬上および診断上許容される塩を含み、およびそれを表すのみならず、化合物式のいずれかのおよび全ての水和物および／または溶媒和物を含むのも理解されるものとする。ヒドロキシ、アミノ、および同様な基のようなある種の官能基は、化合物の種々の物理的形態である、水および／または種々の溶媒とで錯体および／または配位化合物を形成すると認められる。したがって、前記式はそれらの種々の水和物および／また溶媒和物を含み、およびそれを表すと理解されるものとする。これまでのおよび以下の実施形態の各々において、式は、立体異性体および幾何異性体のような各可能な異性体を、個々に、ならびにいずれかおよび全ての可能な混合物中にて、含み、およびそれを表すとさらに理解されるものとする。これまでのおよび以下の実施形態の各々において、式は化合物のいずれかならびに全ての結晶形態、部分的に結晶性の形態、ならびに非結晶性および／またはアモルファス形態を含み、およびそれを表すとも理解されるものとする。
【００４１】
別の例示的な実施形態において、構造式（ＩＩＩ）もしくは（ＩＶ）：
【００４２】
【化６】
2016522271.tif 000008
［式中、ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＤは本明細書中において定義した通りであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキルもしくはアルコキシが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、もしくはＣ１〜Ｃ１８アルコキシ；または−ＳＯ３Ｘ（ここで、ＸはＨまたは対イオンである）であり；
Ｒ１およびＲ６はＨであり；あるいはＲ１はＲ２と組み合わされて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わされて、または双方によって、−ＳＯ３Ｘによって１回または複数回置換されていてもよい縮合芳香族６員環を形成し；
ＡはＮＲ８Ｒ９であり、ここで、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＣはＯＲ１７またはＮＲ１８Ｒ１９であり；ここで、
Ｒ１７はＨ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキルであり、
Ｒ１８およびＲ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ１８はＲ１９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ１９はＲ５と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＢはＯまたはＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＳＯ３Ｘ、カルボン酸、カルボン酸の塩、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ６〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドであり、そのアルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、−ＳＯ３Ｘ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分は１〜６個の炭素を有し；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、またはカルボン酸の塩によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮもしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立に置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００４３】
１つの例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５の少なくとも１つが−ＳＯ３Ｘである式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ８はＲ２と組み合わせられて、またはＲ９はＲ３と組み合わせられて、またはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、Ｒ１９はＲ５と組み合わせられて、飽和または不飽和であり、炭素原子において少なくとも１つの−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されている５または６員環を形成する式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ４が、各々、−ＳＯ３Ｘである式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がカルボン酸、カルボン酸の塩、または−ＳＯ３Ｘであり；Ｒ１１が存在しない式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６の少なくとも３つがＦまたはＣｌである式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＡがＮＲ８Ｒ９であり、ＢがＯであり、ＣがＯＲ１７である式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の態様において、ＡがＮＲ８Ｒ９であり、ＢがＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり、ＣがＮＲ１８Ｒ１９である式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ４が、各々、−ＳＯ３Ｘである式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。
【００４４】
別の例示的な態様において、Ｒ８はＲ２と組み合わせられて、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；Ｒ１９はＲ５と組み合わせられて、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成する式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ９およびＲ１８が、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、またはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩である式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ８はＲ２と組み合わせられて、Ｒ１９はＲ５と組み合わせられて、各々、飽和５または６員環を形成し；Ｒ３およびＲ４は、各々、−ＳＯ３Ｘである式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ８はＲ２と組み合わせられて、飽和または不飽和であり、−ＣＨ２ＳＯ３Ｘによって置換された５または６員環を形成し；Ｒ１９はＲ５と組み合わせられて、飽和または不飽和であり、炭素原子において、−ＣＨ２ＳＯ３Ｘによって置換された５または６員環を形成する式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、およびＲ６がＨであり；Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１８、およびＲ１９がＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩である式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物が記載される。
【００４５】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｖ）または（ＶＩ）：
【００４６】
【化７】
2016522271.tif 000009
［式中：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、
ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＢは本明細書中において定義した通りであり、
Ｒ１およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８アルコキシであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキル、アルコキシもしくはアルキルチオが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、Ｒ１８がＣ１〜Ｃ４アルキルである−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシもしくはＣ１〜Ｃ１８アルキルチオ；またはアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、もしくはアルコキシであり、そのアルキル部分は、独立して、１〜６個の炭素を有し；あるいはＲ３およびＲ４の一方または双方は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）２であり、ここで、Ｒ１７は、Ｈ、生物学的に適合する対イオン、１〜６個の炭素を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８であり；
ＡはＯＲ７またはＮＲ８Ｒ９であり、
ここで、各Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アシル、ここで各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有し、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、もしくは−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；または各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有するトリアルキルシリルであり；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ１８アシルであり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、１個または複数のメチルによって置換されていてもよい飽和５または６員環を形成し；あるいはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンまたはピペラジンである飽和５または６員複素環を形成し；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ；またはスルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはそのアルキルもしくはアリール部分が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、スルホン酸、スルホン酸の塩、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分が１〜６個の炭素を有するＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミドもしくはＣ１〜Ｃ１８アリールアミドであり；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立して置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００４７】
１つの例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６の少なくとも３つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、またはＲ５の少なくとも１つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２およびＲ５がＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、またはＲ１６の少なくとも１つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、またはＲ１６のいずれもＦでない式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１３、Ｒ１５、またはＲ１６の少なくとも１つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６の各々がＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６のいずれもＦでない式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＡがＯＲ７である式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、各Ｒ７がＨである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６の少なくとも１つがＦであり；Ｒ１１がＨである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。
【００４８】
別の例示的な態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５またはＲ１６の少なくとも１つがＦであり；Ｒ１１がＨである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がカルボン酸またはカルボン酸の塩である式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＡがＮＲ８Ｒ９である式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ６が、独立して、ＨまたはＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がスルホン酸またはスルホン酸の塩である式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６の各々がＦまたはＨのいずれかであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６の少なくとも１つがＦである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ６がＨであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５が、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＡがＯＲ７であり、Ｒ３およびＲ４の一方または双方が−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）である式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物が記載される。
【００４９】
別の例示的な実施形態において、構造式（ＶＩＩ）：
【００５０】
【化８】
2016522271.tif 000010
［式中：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、
ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＢは本明細書中において定義した通りであり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、アシルまたはスルホである］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００５１】
１つの例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６が、各々、アルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ３がアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ３がアリールである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６が、各々、Ｈである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ５がアリールである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２およびＲ６がアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２およびＲ６がアリールである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ４がアリールである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ３がシクロアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。
【００５２】
別の例示的な態様において、Ｒ４がアリールアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ３がハロゲンである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ２がアシルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ５がスルホである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がＨである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ５がアシルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ４がアリールアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ５がシクロアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がＨである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がアリールである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３およびＲ５がハロゲンである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５がアリールアルキルである式（ＶＩＩ）の化合物が記載される。
【００５３】
別の実施形態において、各々、一般式（ＩＩＩ）、（Ｖ）および（ＶＩＩ）、ならびにそれらの塩の代表的なものである、以下の例示的化合物５、６および７が記載される：
【００５４】
【化９】
2016522271.tif 000011
【００５５】
前記した化合物の例示的誘導体は、限定されるものではないが、本明細書に記載される化合物から合成により調製することができる化合物、ならびに本明細書に記載されるものと同様な方法で調製することができるが、出発物質の選択が異なる化合物の双方を含む。加えて、それらの化合物の誘導体は、種々の芳香族環上の異なる位置において同一または異なる官能基を有する化合物も含むと理解されるべきである。同様に、誘導体は、Ｑ、ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＢのような、本明細書に記載される化合物上の他の官能基の平行変形を含む。
【００５６】
別の例示的な実施形態において、構造式（ＶＩＩＩ）もしくは（ＩＸ）：
【００５７】
【化１０】
2016522271.tif 000012
［式中：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、
ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＤは本明細書中において定義した通りであり；
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、またはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
またはＲ７と組み合わせたＲ６；
Ｒ８と組み合わせたＲ７；
Ｒ９と組み合わせたＲ８；
Ｒ１７と組み合わせたＲ１６；
Ｒ１８と組み合わせたＲ１７；および
Ｒ１９と組み合わせたＲ１８
から独立して選択されるメンバーは、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−または−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成し、ここで、Ｒ１はアミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、ここで、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によって置換されていてもよく；
ｐは１、２または３であり；
ｑは０、１、２または３であり；
Ｒ１２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ１３はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
またはＲ１３およびＲ１４は組み合わされて、置換されていてもよい５もしくは６員飽和もしくは不飽和環を完成し；
スルホはスルホン酸またはスルホネートである］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００５８】
１つの例示的な態様において、Ｒ２がスルホアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がエチルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ４がメチルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１４がメチルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、スルホアルキル基の各々がスルホプロピル基である式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７およびＲ１７がスルホである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ｎが１である式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ｎが２である式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１６がアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２がアルキルまたはスルホアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１２がアルキルまたはスルホアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１３がスルホアルキルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。
【００５９】
別の例示的な態様において、Ｒ４、Ｒ１３およびＲ１４が、各々、メチルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７およびＲ１７が、各々、スルホである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ２およびＲ１２が、独立して、メチルまたはスルホプロピルである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８が、各々、Ｈである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１６およびＲ１８が、各々、Ｈである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１６、およびＲ１８が、各々、Ｈである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７がスルホである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１７がハロゲンである式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ６はＲ７と組み合わせられて、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−またはＲ１がスルホである−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成する式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物が記載される。
【００６０】
別の例示的な実施形態において、構造式（Ｘ）：
【００６１】
【化１１】
2016522271.tif 000013
［式中：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、
ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＤは本明細書中において定義した通りであり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ４１、Ｒ４２、およびＲ４６は、独立して、水素、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルコキシは、カルボン酸、スルホン酸またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、アジド、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ１はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ４１はＲ４２と組み合わせられて、または双方によって、１回または複数回スルホン化されていてもよい縮合芳香族またはヘテロ芳香族環を形成し；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、芳香族またはヘテロ芳香族環からなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、ヒドロキシ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記芳香族またはヘテロ芳香族環は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ２はＲ３と組み合わせられて、Ｒ４２はＲ４３と組み合わせられて、もしくはＲ３はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ４３はＲ４４と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
Ｒ５およびＲ４５は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキル、またはヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ４はＲ５と組み合わせられて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わせられて、もしくはＲ４４はＲ４５と組み合わせられて、もしくはＲ４５はＲ４６と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
ここで、Ｅ、Ｅ’、Ｘ’およびＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ８であり、但し、ＥおよびＸまたはＥ’およびＸ’は共には存在せず；
ここで、Ｒ８は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく；
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４は、独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、カルボン酸、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドからなる群から選択され、ここで、前記Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４の前記アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、スルホン酸、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノおよびＣ２〜Ｃ６アルコキシからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；あるいは隣接するＲ３０およびＲ３１またはＲ３３およびＲ３４置換基の対は、組み合わされると、カルボン酸によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成する］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００６２】
１つの例示的な態様において、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４が、各々、メチルである式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ１およびＲ４１の各々が、独立して、Ｈまたはスルホン酸である式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ６およびＲ４６がＨである式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、スルホン酸によって１回または複数回置換されている式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４３、Ｒ４４、およびＲ４５が、独立して、メチルまたはエチルである式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３０がスルホン酸またはカルボン酸である式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ３２およびＲ３３の一方がＨ、Ｆ、またはＣｌである式（Ｘ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、ＸおよびＸ’の双方がＳである式（Ｘ）の化合物が記載される。
【００６３】
別の例示的な実施形態において、構造式（ＸＩ）：
【００６４】
【化１２】
2016522271.tif 000014
［式中：ＱはＡｋ１またはＡｒ１であり、
ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、およびＲＤは本明細書中において定義した通りであり、
Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキル、スルホメチル、スルホメチルの生物学的に適合する塩、ハロメチル、またはアリールであり；
Ｒ５はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ６はＨ、メチル、ハロゲン、またはＳＯ３Ｘであり；
Ｒ７はＨまたはＮＲ１Ｒ２であり；ここで、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ１８アリール、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールアルカノイルであり；
または、Ｒ１はＲ２と組み合わせられて、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
またはＲ１は式：
【００６５】
【化１３】
2016522271.tif 000015
（式中、
Ｒ９およびＲ１０はＨ、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであるか、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏであり；Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である）
の２−ニトロベンジルオキシカルボニルであり；
Ｒ８はＨ、ハロゲン、ＳＯ３Ｘ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
ＸはＨ、または生物学的に適合するカチオンである］
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）、またはその塩が記載される。
【００６６】
１つの例示的な態様において、Ｒ３、Ｒ６またはＲ８の少なくとも１つがＳＯ３Ｘである式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ４がスルホメチル、ハロメチル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキルである式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７がＮＲ１Ｒ２であり、Ｒ１およびＲ２が、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ１８アルキルである式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７がＮＲ１Ｒ２であり、ここで、Ｒ２はＨであり、Ｒ１は式：
【００６７】
【化１４】
2016522271.tif 000016
［式中、Ｒ９およびＲ１０はＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシであり、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−であり；Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である］の２−ニトロベンジルオキシカルボニルである式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ４がＣＨ３である式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ７がＮＨ２である式（ＸＩ）の化合物が記載される。別の例示的な態様において、Ｒ８がＨである式（ＸＩ）の化合物が記載される。
【００６８】
別の実施形態において、ＱがＡｒ１である先行する実施形態のいずれか１つの化合物、組成物、方法またはキットが記載される。
【００６９】
本発明のいくつかの例示的な実施形態は、以下の項によって記載される。
【００７０】
１．式（Ｉ）：
【００７１】
【化１５】
2016522271.tif 000017
［式中：
ＱはＡｒ１またはＡｋ１であり；
Ａｒ１はアリールまたはヘテロアリールであり；
ＲＣは水素であり；
ＡｋおよびＡｋ１は、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンであり；
Ｚは
【００７２】
【化１６】
2016522271.tif 000018
（式中、ｎは１、２、３、４、５、または６であり；ｙは６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；ｚは１、２、３、または４であり；ＲはＨまたはアルキルである）
であり；
ＲＤは、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択され；
ＲＥはフルオロフォアであり；
ＹはＯ、Ｓ、またはＨＮであり；
ＲＡは、独立して、０〜３個の置換基を表し、各場合において、ハロであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択され；
ＲＢは、独立して、０〜３の置換基を表し、各場合において、ハロゲンであるか、または、その各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノおよびその誘導体、ならびにヒドロキシルおよびその誘導体からなる群から選択される］
を有する化合物、またはその塩。
【００７３】
２．ＲＡが２−クロロ−４−フルオロを表す、前記項に記載の化合物。
【００７４】
３．ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−チアゾリル、２−チエニル、２−フラニル、２−（１−メチル）イミダゾリル、２−ピリミジニル、２−ナフチル、２−ピロリジニル、フェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルである、前記項のいずれか一項に記載の化合物。
【００７５】
３．１．ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１はフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルである、前記項のいずれか一項に記載の化合物。
【００７６】
３．２．ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１は２−ピリジルである、前記項のいずれか一項に記載の化合物。
【００７７】
３．３．ＱがＡｋ１であり、ここで、Ａｋ１はＣ１〜Ｃ４、またはＣ１〜Ｃ３、またはＣ１〜Ｃ２アルキレンである、前記項のいずれか一項に記載の化合物。
【００７８】
３．４．ＱがＡｋ１であり、ここで、Ａｋ１はＣＨ２である、前記項のいずれか一項に記載の化合物。
【００７９】
４．ＱがＡｒ１であり、ＲＢが存在しない、項１から３．４のいずれか一項に記載の化合物。
【００８０】
５．ＹがＯである、項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【００８１】
６．ＲＤがメチルである、項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【００８２】
７．ＲＥが
【００８３】
【化１７】
2016522271.tif 000019
［式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキルもしくはアルコキシが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、もしくはＣ１〜Ｃ１８アルコキシ；または−ＳＯ３Ｘ（ここで、ＸはＨまたは対イオンである）であり；
Ｒ１およびＲ６はＨであり；あるいはＲ１はＲ２と組み合わされて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わされて、または双方によって、−ＳＯ３Ｘによって１回または複数回置換されていてもよい縮合芳香族６員環を形成し；
ＡはＮＲ８Ｒ９であり；ここで、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＣはＯＲ１７またはＮＲ１８Ｒ１９であり、
ここで、Ｒ１７はＨ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ１８およびＲ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ１８はＲ１９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ１９はＲ５と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＢはＯまたはＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＳＯ３Ｘ、カルボン酸、カルボン酸の塩、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ６〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドであり、そのアルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、−ＳＯ３Ｘ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分は１〜６個の炭素を有し；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、またはカルボン酸の塩によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮもしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立に置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【００８４】
８．式：
【００８５】
【化１８】
2016522271.tif 000020
を有する、項１に記載の化合物、またはその塩。
【００８６】
９．ＲＥが：
【００８７】
【化１９】
2016522271.tif 000021
［式中、
Ｒ１およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８アルコキシであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキル、アルコキシもしくはアルキルチオが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、Ｒ１８がＣ１〜Ｃ４アルキルである−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシもしくはＣ１〜Ｃ１８アルキルチオ；またはアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、もしくはアルコキシであり、そのアルキル部分は、独立して、１〜６個の炭素を有し；あるいはＲ３およびＲ４の一方または双方は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）２であり、ここで、Ｒ１７は、Ｈ、生物学的に適合する対イオン、１〜６個の炭素を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８であり；
ＡはＯＲ７またはＮＲ８Ｒ９であり、
ここで、各Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アシル、ここで各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有し、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、もしくは−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；または各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有するトリアルキルシリルであり；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ１８アシルであり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、１個または複数のメチルによって置換されていてもよい飽和５または６員環を形成し；あるいはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンまたはピペラジンである飽和５または６員複素環を形成し；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ；またはスルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはそのアルキルもしくはアリール部分が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、スルホン酸、スルホン酸の塩、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分が１〜６個の炭素を有するＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミドもしくはＣ１〜Ｃ１８アリールアミドであり；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立して置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成する］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【００８８】
１０．式：
【００８９】
【化２０】
2016522271.tif 000022
を有する、項１に記載の化合物、またはその塩。
【００９０】
１１．ＲＥが
【００９１】
【化２１】
2016522271.tif 000023
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、アシルまたはスルホである］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【００９２】
１２．式：
【００９３】
【化２２】
2016522271.tif 000024
を有する、項１に記載の化合物、またはその塩。
【００９４】
１３．ＲＥが
【００９５】
【化２３】
2016522271.tif 000025
［式中、
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、またはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
またはＲ７と組み合わせたＲ６；
Ｒ８と組み合わせたＲ７；
Ｒ９と組み合わせたＲ８；
Ｒ１７と組み合わせたＲ１６；
Ｒ１８と組み合わせたＲ１７；および
Ｒ１９と組み合わせたＲ１８
から独立して選択されるメンバーは、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−または−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成し、ここで、Ｒ１はアミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、ここで、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によって置換されていてもよく；
ｐは１、２または３であり；
ｑは０、１、２または３であり；
Ｒ１２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ１３はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
またはＲ１３およびＲ１４は組み合わされて、置換されていてもよい５もしくは６員飽和もしくは不飽和環を完成し；
スルホはスルホン酸またはスルホネートである］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【００９６】
１４．ＲＥが
【００９７】
【化２４】
2016522271.tif 000026
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ４１、Ｒ４２、およびＲ４６は、独立して、水素、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルコキシは、カルボン酸、スルホン酸またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、アジド、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ１はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ４１はＲ４２と組み合わせられて、または双方によって、１回または複数回スルホン化されていてもよい縮合芳香族またはヘテロ芳香族環を形成し；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、芳香族またはヘテロ芳香族環からなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、ヒドロキシ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記芳香族またはヘテロ芳香族環は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ２はＲ３と組み合わせられて、Ｒ４２はＲ４３と組み合わせられて、もしくはＲ３はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ４３はＲ４４と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
Ｒ５およびＲ４５は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキル、またはヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ４はＲ５と組み合わせられて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わせられて、もしくはＲ４４はＲ４５と組み合わせられて、もしくはＲ４５はＲ４６と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
ここで、Ｅ、Ｅ’、Ｘ’およびＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ８であり、但し、ＥおよびＸまたはＥ’およびＸ’は共には存在せず；
ここで、Ｒ８は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく；
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４は、独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、カルボン酸、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドからなる群から選択され、ここで、前記Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４の前記アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、スルホン酸、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノおよびＣ２〜Ｃ６アルコキシからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；あるいは隣接するＲ３０およびＲ３１またはＲ３３およびＲ３４置換基の対は、組み合わされると、カルボン酸によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成する］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【００９８】
１５．ＲＥが
【００９９】
【化２５】
2016522271.tif 000027
［式中、
Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキル、スルホメチル、スルホメチルの生物学的に適合する塩、ハロメチル、またはアリールであり；
Ｒ５はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ６はＨ、メチル、ハロゲン、またはＳＯ３Ｘであり；
Ｒ７はＨまたはＮＲ１Ｒ２であり；ここで、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ１８アリール、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールアルカノイルであり；
または、Ｒ１はＲ２と組み合わせられて、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
またはＲ１は式：
【０１００】
【化２６】
2016522271.tif 000028
（式中、
Ｒ９およびＲ１０はＨ、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであるか、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏであり；Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である）
の２−ニトロベンジルオキシカルボニルであり；
Ｒ８はＨ、ハロゲン、ＳＯ３Ｘ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
ＸはＨ、または生物学的に適合するカチオンである］
である、項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【０１０１】
１６．ＨＢＶを診断し、検出し、追跡し、および／またはＨＢＶに競合的に結合するのに有効な量の項１から１５のいずれか一項に記載の１種または複数の化合物を含む組成物。
【０１０２】
１７．１種もしくは複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはそれらの組合せをさらに含む、項１６に記載の組成物。
【０１０３】
１８．細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法であって、
ａ）細胞と、ＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の、項１から１５のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物または項１６もしくは１７の組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）任意の過剰な前記１種または複数の化合物を洗い流す工程；
ｃ）混合物に刺激を施して、蛍光シグナルを誘導する工程；ならびに
ｄ）刺激された混合物を分析する工程
を含む方法。
【０１０４】
１９．細胞が組織培養、新鮮な生検材料、固定された切片、または他の供給源に由来する、項１８に記載の方法。
【０１０５】
２０．分析が、バルク蛍光を調べることによって、蛍光顕微鏡観察により個々の細胞を調べることによって、セルソーターによって、または別のメカニズムによって達成される、項１８または１９に記載の方法。
【０１０６】
２１．溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法であって、
ａ）清澄化血清、成長培地、または試験すべき他の液体、ならびにＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の項１から１５のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物または項１６もしくは１７の組成物を含む溶液をインキュベートする工程；
ｂ）必要であれば、イオン強度を調整して、ｅ抗原アセンブリを検出する目的で前記アセンブリを誘導する工程；
ｃ）ＨＢＶコアに結合した前記１種または複数の化合物から未結合の前記１種または複数の化合物を分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；ならびに
ｄ）未結合および結合相に関連する蛍光を分析する工程
を含む方法。
【０１０７】
２２．ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、遠心分離、または他の技術によって達成される、項２１に記載の方法。
【０１０８】
２３．抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法であって、
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の項１から１５のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物または項１６もしくは１７の組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）１種または複数の化合物の蛍光の変化を測定する工程；および
ｃ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む方法。
【０１０９】
２４．抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法であって、
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の項１から１５のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物または項１６もしくは１７の組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）未結合の前記抗ＨＢＶ薬候補および未結合の前記１種または複数の化合物を、ＨＢＶコアに結合した前記抗ＨＢＶ薬候補および前記１種または複数の化合物から分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；
ｃ）未結合および結合相に関連する蛍光を測定する工程；ならびに
ｄ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む方法。
【０１１０】
２５．ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、遠心分離、または他の技術によって達成される、項２４に記載の方法。
【０１１１】
２６．ａ）項１から１５のいずれか一項に記載の１種もしくは複数の化合物または項１６もしくは１７の組成物；および
ｂ）溶媒
を含む、ＨＢＶを検出し、診断し、および／もしくは追跡し、ならびに／またはＨＢＶのＨＡＰポケットに競合的に結合する化合物を同定するためのキット。
【０１１２】
２７．構造式（Ｉ）：
【０１１３】
【化２７】
2016522271.tif 000029
を有する化合物またはその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）構造式：
【０１１４】
【化２８】
2016522271.tif 000030
の化合物を、適切に活性化されたフルオロフォアと反応させることを含み、
ここで、Ｑ、ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、Ｒ、ＲＡ、ＲＢ、ｎ、ｙ、およびｚは項１で定義した通りである、プロセス。
【０１１５】
２８．適切に活性化されたフルオロフォアが
【０１１６】
【化２９】
2016522271.tif 000031
［式中、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキルもしくはアルコキシが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、もしくはＣ１〜Ｃ１８アルコキシ；または−ＳＯ３Ｘ（ここで、ＸはＨまたは対イオンである）であり；
Ｒ１およびＲ６はＨであり；あるいはＲ１はＲ２と組み合わされて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わされて、または双方によって、−ＳＯ３Ｘによって１回または複数回置換されていてもよい縮合芳香族６員環を形成し；
ＡはＮＲ８Ｒ９であり；
ここで、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＣはＯＲ１７またはＮＲ１８Ｒ１９であり、ここで、Ｒ１７はＨ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ１８およびＲ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、もしくはＣ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩であり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；またはＲ１８はＲ１９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、もしくはＣ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
あるいはＲ１８はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ１９はＲ５と組み合わせられて、または双方によって、飽和または不飽和であり、１個または複数のＣ１〜Ｃ６アルキルまたは−ＣＨ２ＳＯ３Ｘ部位によって置換されていてもよい５または６員環を形成し；
ＢはＯまたはＮ＋Ｒ１８Ｒ１９であり；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＳＯ３Ｘ、カルボン酸、カルボン酸の塩、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ６〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドであり、そのアルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、−ＳＯ３Ｘ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分は１〜６個の炭素を有し；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、またはカルボン酸の塩によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮもしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立に置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成し；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１１７】
２９．反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、項２８に記載のプロセス。
【０１１８】
３０．活性化されたエステルがテトラフルオロフェニルエステルである、項２９に記載のプロセス。
【０１１９】
３１．適切に活性化されたフルオロフォアが
【０１２０】
【化３０】
2016522271.tif 000032
［式中、
Ｒ１およびＲ６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルまたはＣ１〜Ｃ１８アルコキシであり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ；または各アルキル、アルコキシもしくはアルキルチオが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、Ｒ１８がＣ１〜Ｃ４アルキルである−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシもしくはＣ１〜Ｃ１８アルキルチオ；またはアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、もしくはアルコキシであり、そのアルキル部分は、独立して、１〜６個の炭素を有し；あるいはＲ３およびＲ４の一方または双方は−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＲ１７）２であり、ここで、Ｒ１７は、Ｈ、生物学的に適合する対イオン、１〜６個の炭素を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８であり；
ＡはＯＲ７またはＮＲ８Ｒ９であり、
ここで、各Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アシル、ここで各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有し、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、もしくは−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；または各アルキル基は、独立して、１〜６個の炭素を有するトリアルキルシリルであり；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキル、Ｃ１〜Ｃ６カルボキシアルキルの塩、Ｃ１〜Ｃ６スルホアルキルの塩、またはＣ１〜Ｃ１８アシルであり、ここで、アルキル部分は、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよく；あるいはＲ８はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ９はＲ３と組み合わせられて、または双方によって、１個または複数のメチルによって置換されていてもよい飽和５または６員環を形成し；あるいはＲ８はＲ９と組み合わせられて、その各々が、メチル、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによって置換されていてもよい、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンまたはピペラジンである飽和５または６員複素環を形成し；
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ；またはスルホン酸、スルホン酸の塩、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ；またはそのアルキルもしくはアリール部分が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステル、スルホン酸、スルホン酸の塩、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、またはアルコキシによって１回または複数回置換されていてもよく、各々のアルキル部分が１〜６個の炭素を有するＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルエステル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミドもしくはＣ１〜Ｃ１８アリールアミドであり；あるいは隣接する置換基Ｒ１２およびＲ１３またはＲ１５およびＲ１６の１つの対は、組み合わされると、カルボン酸、カルボン酸の塩、Ｃ１〜Ｃ６アルキルのカルボン酸エステル、または−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ１８のカルボン酸エステルによってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
Ｒ１１はＨ、ヒドロキシ、ＣＮまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；あるいはＲ１１はＲ１２と組み合わせられて、Ｈ、ＦまたはＣＨ３によって独立して置換されていてもよい、５もしくは６員スピロラクトン環または５もしくは６員スピロスルトン環を形成し；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１２１】
３２．反応性基Ｒｘがイソチオシアネートである、項３１に記載のプロセス。
【０１２２】
３３．適切に活性化されたフルオロフォアが、
【０１２３】
【化３１】
2016522271.tif 000033
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、アシルまたはスルホであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１２４】
３４．反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、項３３に記載のプロセス。
【０１２５】
３５．活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、項３４に記載のプロセス。
【０１２６】
３６．適切に活性化されたフルオロフォアが
【０１２７】
【化３２】
2016522271.tif 000034
［式中、
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、またはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１６はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１７はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１８はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
Ｒ１９はＨ、アミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によってさらに置換されていてもよく；
またはＲ７と組み合わせたＲ６；
Ｒ８と組み合わせたＲ７；
Ｒ９と組み合わせたＲ８；
Ｒ１７と組み合わせたＲ１６；
Ｒ１８と組み合わせたＲ１７；および
Ｒ１９と組み合わせたＲ１８
から独立して選択されるメンバーは、それらが結合している原子と一緒になって、−ＣＨ−または−ＣＲ１−を含む芳香族環を形成し、ここで、Ｒ１はアミノ、スルホ、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノであり、ここで、その各アルキル部分は、カルボキシ、スルホ、アミノ、およびヒドロキシルからなる群から選択される置換基によって置換されていてもよく；
ｐは１、２または３であり；
ｑは０、１、２または３であり；
Ｒ１２はＣ１〜Ｃ２２アルキルまたはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、またはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回または複数回置換されていてもよく；
Ｒ１３はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ２２アルキルもしくはＣ７〜Ｃ２２アリールアルキルであり、その各アルキル部分は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される６個までのヘテロ原子を取り込んでいてもよく、その各アルキル部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスフェート、アミノ、スルフェート、ホスホネート、シアノ、ニトロ、アジド、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、もしくはＣ２〜Ｃ１２ジアルキルアミノ、もしくはＣ３〜Ｃ１８トリアルキルアンモニウムによって１回もしくは複数回置換されていてもよく；
またはＲ１３およびＲ１４は組み合わされて、置換されていてもよい５もしくは６員飽和もしくは不飽和環を完成し；
スルホはスルホン酸またはスルホネートであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１２８】
３７．反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、項３６に記載のプロセス。
【０１２９】
３８．活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、項３７に記載のプロセス。
【０１３０】
３９．適切に活性化されたフルオロフォアが
【０１３１】
【化３３】
2016522271.tif 000035
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ４１、Ｒ４２、およびＲ４６は、独立して、水素、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルコキシは、カルボン酸、スルホン酸またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、アジド、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ１はＲ２と組み合わせられて、もしくはＲ４１はＲ４２と組み合わせられて、または双方によって、１回または複数回スルホン化されていてもよい縮合芳香族またはヘテロ芳香族環を形成し；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ４３、およびＲ４４は、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、芳香族またはヘテロ芳香族環からなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、ヒドロキシ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記芳香族またはヘテロ芳香族環は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ２はＲ３と組み合わせられて、Ｒ４２はＲ４３と組み合わせられて、もしくはＲ３はＲ４と組み合わせられて、もしくはＲ４３はＲ４４と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
Ｒ５およびＲ４５は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキル、またはヘテロアリールからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキル、シアノ、ハロゲン、カルボン酸、スルホン酸、またはハロメチルによって１回または複数回置換されていてもよく；
あるいはＲ４はＲ５と組み合わせられて、もしくはＲ５はＲ６と組み合わせられて、もしくはＲ４４はＲ４５と組み合わせられて、もしくはＲ４５はＲ４６と組み合わせられて、またはその任意の組合せによって、５または６員脂環式環を形成し；
ここで、Ｅ、Ｅ’、Ｘ’およびＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ８であり、但し、ＥおよびＸまたはＥ’およびＸ’は共には存在せず；
ここで、Ｒ８は、独立して、水素、メチル、カルボキシメチル、Ｃ２〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ここで、前記アルキルは、カルボン酸、スルホン酸、アミノ、またはハロゲンによって置換されていてもよく；
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４は、独立して、水素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、スルホン酸、カルボン酸、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、アジド、アミノ、ヒドラジノ、またはＣ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイルアミノ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルアミノカルボニル、Ｃ２〜Ｃ３６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１８アルキルオキシカルボニル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールカルボキシアミドからなる群から選択され、ここで、前記Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３３およびＲ３４の前記アルキルまたはアリール部分は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ヒドロキシ、カルボン酸、Ｃ１〜Ｃ６アルコールのカルボン酸エステル、スルホン酸、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノおよびＣ２〜Ｃ６アルコキシからなる群から選択される置換基によって１回または複数回置換されていてもよく；あるいは隣接するＲ３０およびＲ３１またはＲ３３およびＲ３４置換基の対は、組み合わされると、カルボン酸によってさらに置換されていてもよい縮合６員芳香族環を形成し；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１３２】
４０．反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、項３９に記載のプロセス。
【０１３３】
４１．活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、項４０に記載のプロセス。
【０１３４】
４２．適切に活性化されたフルオロフォアが
【０１３５】
【化３４】
2016522271.tif 000036
［式中、
Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ１〜Ｃ１８ペルフルオロアルキル、スルホメチル、スルホメチルの生物学的に適合する塩、ハロメチル、またはアリールであり；
Ｒ５はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ６はＨ、メチル、ハロゲン、またはＳＯ３Ｘであり；
Ｒ７はＨまたはＮＲ１Ｒ２であり；ここで、
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ１８アリール、Ｃ１〜Ｃ１８アルカノイル、もしくはＣ７〜Ｃ１８アリールアルカノイルであり；
または、Ｒ１はＲ２と組み合わせられて、ピペリジン、モルホリン、ピロリジンもしくはピペラジンである飽和５もしくは６員複素環を形成し；
またはＲ１は式：
【０１３６】
【化３５】
2016522271.tif 000037
（式中、
Ｒ９およびＲ１０はＨ、もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシであるか、またはＲ９およびＲ１０は組み合わされて、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏであり；
Ｒ１１はＨ、ＣＨ３、カルボン酸またはカルボン酸の生物学的に適合する塩である）
の２−ニトロベンジルオキシカルボニルであり；
Ｒ８はＨ、ハロゲン、ＳＯ３Ｘ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
ＸはＨ、または生物学的に適合するカチオンであり；
ＲＸはカルボン酸の活性化されたエステル、アジ化アシル、アルデヒド、ハロゲン化アルキル、無水物、ハロゲン化スルホニル、マレイミド、イソシアネート、およびイソチオシアネートからなる群から選択される反応性基である］
である、項２７に記載のプロセス。
【０１３７】
４３．反応性基Ｒｘがカルボン酸の活性化されたエステルである、項４２に記載のプロセス。
【０１３８】
４４．活性化されたエステルがスクシンイミジルエステルである、請求項４３に記載のプロセス。
【０１３９】
４５．ＱがＡｒ１であり、ここで、Ａｒ１がフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジルである、前記項のいずれか一項に記載の化合物、組成物、方法、キットまたはプロセス。
【０１４０】
上述の項の一群の列挙において、特徴の全ての可能な組合せ、ならびに全ての可能な亜属および部分組合せが記載されていると理解されるものとする。
【０１４１】
これまでの各々を含めた、本明細書に記載される実施形態は、本明細書に記載される実施形態の部分集合を生じさせるために、全ての化学的に関連する方法で組み合わせてよいと理解されるものとする。したがって、全てのそのような部分集合もまた、本明細書に記載される発明の例示的な実施形態であるともさらに理解されるものとする。
【０１４２】
本明細書に記載される化合物は、１個もしくは複数のキラル中心を含有してよく、またはそうでなければ、多数の立体異性体として存在することができよう。１つの実施形態において、本明細書に記載される発明は、いずれかの特別な立体化学要件に限定されず、化合物、ならびにそれらを含む組成物、方法、およびキットは光学的に純粋であってもよいし、またはエナンチオマーのラセミおよび他の混合物、ジアステレオマーの他の混合物等を含めた、種々の立体異性体混合物であってもよいと理解されるものとする。また、立体異性体のそのような混合物は、１個または複数の他のキラル中心における立体化学立体配置の混合物を含めつつ、１個または複数のキラル中心における単一の立体化学立体配置を含んでよいと理解されるものとする。
【０１４３】
同様に、本明細書に記載される化合物は、シス、トランス、Ｅ、およびＺ二重結合のような幾何学的中心を含んでよい。別の実施形態において、本明細書に記載される発明はいずれかの特別な幾何異性体の要件に制限されず、化合物、ならびにそれらを含む組成物、方法、およびキットは純粋であってもよいし、または種々の幾何異性体混合物であってもよいと理解されるものとする。また、幾何異性体のそのような混合物は、１個または複数の他の二重結合において幾何学の混合物を含みつつ、１個または複数の二重結合における単一の立体配置を含んでよいと理解されるものとする。
【０１４４】
本明細書中で用いるように、用語「アルキル」は、分岐していてもよい炭素原子の鎖を含む。本明細書中で用いるように、用語「アルケニル」および「アルキニル」は、分岐していてもよく、各々、少なくとも１個の二重結合または三重結合を含む炭素原子の鎖を含む。アルキニルもまた、１個または複数の二重結合を含んでもよいと理解されるものとする。ある実施形態において、これまでの各々は一価（すなわち、１個の結合を介して式の残りに結合している）または多価（すなわち、１個を超える結合を介して式の残りに結合している）であってよいと理解されるものとする。ある実施形態において、アルキルは、有利には、Ｃ１〜Ｃ２４、Ｃ１〜Ｃ１２、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４を含めた限定された長さのものであるとさらに理解されるものとする。ある実施形態において、アルケニルおよび／またはアルキニルは、各々、有利には、Ｃ２〜Ｃ２４、Ｃ２〜Ｃ１２、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４を含めた限定された長さのものであってよいとさらに理解されるものとする。ここで、より短いアルキル、アルケニル、および／またはアルキニル基は化合物により小さい親油性を与えることができ、それに応じて、異なる薬物動態挙動を有すると予想されることが認識される。例示的なアルキル基は、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル等である。
【０１４５】
本明細書中で用いるように、用語「シクロアルキル」は、鎖の少なくとも一部が環状の、分岐していてもよい炭素原子の鎖を含む。シクロアルキルアルキルはシクロアルキルの部分集合であると理解されるものとする。シクロアルキルは多環であってよいと理解されるものとする。例示的なシクロアルキルは、限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、２−メチルシクロプロピル、シクロペンチルエタ−２−イル、アダマンチル等を含む。本明細書中で用いるように、用語「シクロアルケニル」は、鎖の少なくとも一部が環状の、分岐していてもよく、少なくとも１個の二重結合を含む炭素原子の鎖を含む。１個または複数の二重結合は、シクロアルケニルの環状部分および／またはシクロアルケニルの非環状部分に存在してよいと理解されるものとする。シクロアルケニルアルキルおよびシクロアルキルアルケニルは、各々、シクロアルケニルの部分集合であると理解されるものとする。シクロアルキルは多環であってよいと理解されるものとする。ある実施形態において、これまでの各々は一価（すなわち、１個の結合を介して式の残りに結合された）または多価（すなわち、１個を超える結合を介して式の残りに結合された）であってよいと理解されるものとする。例示的なシクロアルケニルは、限定されるものではないが、シクロペンテニル、シクロヘキシルエテン−２−イル、シクロヘプテニルプロペニル等を含む。シクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成する鎖は、有利には、Ｃ３〜Ｃ２４、Ｃ３〜Ｃ１２、Ｃ３〜Ｃ８、Ｃ３〜Ｃ６、およびＣ５〜Ｃ６を含めた制限された長さのものであるとさらに理解されるものとする。ここで、各々、シクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成するより短いアルキルおよび／またはアルケニル鎖は、化合物により小さい親油性を与えることができ、それに応じて、異なる薬物動態挙動を有すると予想されることが認識される。
【０１４６】
本明細書中で用いるように、用語「アルキレン」は、分岐していてもよい炭素原子の二価鎖を含む。本明細書中で用いるように、用語「アルケニレン」および「アルキニレン」は、分岐していてもよく、各々、少なくとも１個の二重結合または三重結合を含む炭素原子の二価鎖を含む。アルキニレンもまた、１個または複数の二重結合を含んでもよいと理解されるものとする。ある実施形態において、アルキレンは、有利には、Ｃ１〜Ｃ２４、Ｃ１〜Ｃ１２、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４、ならびにＣ２〜Ｃ２４、Ｃ２〜Ｃ１３、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４等を含めた制限された長さのものであるとさらに理解されるものとする。例示的には、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４、ならびにＣ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４等を含めた、そのような特に制限された長さのアルキレン基は、低級アルキレンと言うことができる。ある実施形態において、アルケニレンおよび／またはアルキニレンは、各々、有利には、Ｃ２〜Ｃ２４、Ｃ２〜Ｃ１２、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４、ならびにＣ３〜Ｃ２４、Ｃ３〜Ｃ１２、Ｃ３〜Ｃ８、Ｃ３〜Ｃ６およびＣ３〜Ｃ４等を含めた制限された長さのものであってよいとさらに理解されるものとする。例示的には、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４、ならびにＣ３〜Ｃ８、Ｃ３〜Ｃ６、およびＣ３〜Ｃ４等を含めた、そのような特に制限された長さのアルケニレンおよび／またはアルキニレン基は低級アルケニレンおよび／またはアルキニレンと言うことができる。ここで、より短いアルキレン、アルケニレンおよび／またはアルキニレン基は、化合物により小さい親油性を与えることができ、それに応じて、異なる薬物動態挙動を有すると予想されることが認識される。本明細書に記載される発明の実施形態において、各場合において、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンの記載は、本明細書中で定義したアルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンを指し、低級アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンを言うこともできる。例示的なアルキレン基は、限定されるものではないが、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、イソプロピレン、ｎ−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、ペンチレン、１，２−ペンチレン、１，３−ペンチレン、へキシレン、ヘプチレン、オクチレン等である。
【０１４７】
本明細書中で用いるように、用語「ヘテロアルキル」は、炭素および少なくとも１個のヘテロ原子の双方を含み、分岐していてもよい原子の鎖を含む。例示的なヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄を含む。ある変形において、例示的なヘテロ原子はリン、およびセレンも含む。本明細書中で用いるように、ヘテロシクリルおよび複素環を含めた用語「シクロヘテロアルキル」は、ヘテロアルキルのように、炭素および少なくとも１個のヘテロ原子の双方を含み、分岐していてもよい原子の鎖を含み、ここで、該鎖の少なくとも一部は環状である。例示的なヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄を含む。ある実施形態において、これまでの各々は一価（すなわち、１個の結合を介して式の残りに結合された）または多価（すなわち、１個を超える結合を介して式の残りに結合された）であってよいと理解されるべきである。ある変形において、例示的なヘテロ原子はリン、およびセレンも含む。例示的なシクロヘテロアルキルは、限定されるものではないが、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、キヌクリジニル等を含む。
【０１４８】
本明細書中で用いるように、用語「アリール」は、その各々が置換されていてもよい、単環および多環の芳香族炭素環基を含む。本明細書に記載される例示的な芳香族炭素環基は、限定されるものではないが、フェニル、ナフチル等を含む。本明細書中で用いるように、用語「ヘテロアリール」は、その各々が置換されていてもよい芳香族複素環基を含む。例示的な芳香族複素環基は、限定されるものではないが、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、キノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズイソチアゾリル等を含む。
【０１４９】
本明細書中で用いるように、用語「アミノ」は基ＮＨ２、アルキルアミノ、およびジアルキルアミノを含み、ここで、ジアルキルアミノ中の２個のアルキル基は同一または異なってよく、すなわち、アルキルアルキルアミノであってよい。例示的には、アミノは、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ等を含む。加えて、アミノアルキル、またはアシルアミノのように、アミノが修飾し、または別の用語によって修飾される場合、用語アミノの前記変形はその中に含まれると理解されるものとする。例示的には、アミノアルキルは、Ｈ２Ｎ−アルキル、メチルアミノアルキル、エチルアミノアルキル、ジメチルアミノアルキル、メチルエチルアミノアルキル等を含む。例示的には、アシルアミノは、アシルメチルアミノ、アシルエチルアミノ等を含む。
【０１５０】
本明細書中で用いるように、用語「アミノおよびその誘導体」は本明細書に記載されるアミノ、およびアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、ヘテロアルケニルアミノ、ヘテロアルキニルアミノ、シクロアルキルアミノ、シクロアルケニルアミノ、シクロヘテロアルキルアミノ、シクロヘテロアルケニルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールアルケニルアミノ、アリールアルキニルアミノ、ヘテロアリールアミノ、ヘテロアリールアルキルアミノ、ヘテロアリールアルケニルアミノ、ヘテロアリールアルキニルアミノ、アシルアミノ等を含み、その各々は置換されていてもよい。用語「アミノ誘導体」は、尿素、カルバメート等も含む。
【０１５１】
本明細書中で用いるように、用語「ヒドロキシおよびその誘導体」は、ＯＨ、およびアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、ヘテロアルケニルオキシ、ヘテロアルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルケニルオキシ、シクロヘテロアルキルオキシ、シクロヘテロアルケニルオキシ、アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、アリールアルケニルオキシ、アリールアルキニルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルケニルオキシ、ヘテロアリールアルキニルオキシ、アシルオキシ等を含み、その各々は置換されていてもよい。用語「ヒドロキシ誘導体」はカルバメート等も含む。
【０１５２】
本明細書中で用いるように、用語「チオおよびその誘導体」は、ＳＨ、およびアルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、ヘテロアルキルチオ、ヘテロアルケニルチオ、ヘテロアルキニルチオ、シクロアルキルチオ、シクロアルケニルチオ、シクロヘテロアルキルチオ、シクロヘテロアルケニルチオ、アリールチオ、アリールアルキルチオ、アリールアルケニルチオ、アリールアルキニルチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールアルキルチオ、ヘテロアリールアルケニルチオ、ヘテロアリールアルキニルチオ、アシルチオ等を含み、その各々は置換されていてもよい。用語「チオ誘導体」は、チオカルバメート等も含む。
【０１５３】
本明細書中で用いるように、用語「アシル」は、ホルミル、およびアルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルキニルカルボニル、ヘテロアルキルカルボニル、ヘテロアルケニルカルボニル、ヘテロアルキニルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルケニルカルボニル、シクロヘテロアルキルカルボニル、シクロヘテロアルケニルカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アリールアルケニルカルボニル、アリールアルキニルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアリールアルキルカルボニル、ヘテロアリールアルケニルカルボニル、ヘテロアリールアルキニルカルボニル、アシルカルボニル等を含み、その各々は置換されていてもよい。
【０１５４】
本明細書中で用いるように、用語「カルボニルおよびその誘導体」は、基Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、Ｃ（ＮＨ）およびそれらの置換されたアミノ誘導体を含む。
【０１５５】
本明細書中で用いるように、用語「カルボキシレートおよびその誘導体」は、基ＣＯ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミド、ならびにＣＮを含む。
【０１５６】
本明細書中で用いるように、用語「スルフィニルまたはその誘導体」は、ＳＯ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【０１５７】
本明細書中で用いるように、用語「スルホニルまたはその誘導体」は、ＳＯ３Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【０１５８】
本明細書中で用いるように、用語「ホスフィニルまたはその誘導体」は、Ｐ（Ｒ）Ｏ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含み、ここで、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、シクロヘテロアルキル、シクロヘテロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルであり、その各々は置換されていてもよい。
【０１５９】
本明細書中で用いるように、用語「ホスホニルまたはその誘導体」は、ＰＯ３Ｈ２およびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【０１６０】
用語「置換されていてもよい」は、本明細書中で用いるように、置換されていてもよいラジカル上の他の官能基での水素原子の置換を含む。そのような他の官能基は、例示的には、限定されるものではないが、アミノ、ヒドロキシル、ハロ、チオール、アジド、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体等を含む。例示的には、アミノ、ヒドロキシル、チオール、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれも置換されていてもよい。
【０１６１】
本明細書中で用いるように、用語「置換されていてもよいアリール」および「置換されていてもよいヘテロアリール」は、置換されていてもよいアリールまたはヘテロアリール上の他の官能基での水素原子の置換を含む。そのような他の官能基は、例示的には、限定されるものではないが、アミノ、アジド、ヒドロキシ、ハロ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体等を含む。例示的には、アミノ、ヒドロキシ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれも置換されていてもよい。
【０１６２】
例示的な置換基は、限定されるものではないが、ｘが０〜６の整数であり、ＺＸがハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイルオキシを含めたアルカノイルオキシ、置換されていてもよいアロイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルを含めたアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシを含めたアルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルを含めたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルコキシを含めたシクロアルコキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルを含めたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニルを含めたアルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキルを含めたハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシを含めたハロアルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８ハロシクロアルキルを含めたハロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ハロシクロアルコキシを含めたハロシクロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アミノ、アルキルカルボニルアミノ、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノ、アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノアルキル、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アミノアルキル、アルキルカルボニルアミノアルキル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノアルキル、シアノ、アジド、およびニトロから選択され；またはＺＸが−ＣＯ２Ｒ４および−ＣＯＮＲ５Ｒ６から選択され、ここで、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、各々、独立して、各出現において、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびヘテロアリール−Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択されるラジカル−（ＣＨ２）ｘＺＸを含む。
【０１６３】
用語「有効量」とは、本明細書中で用いるように、研究者、獣医、医師または他の臨床家によって求められている、組織系、細胞、生物学的または結合アッセイ、試験等において所望の応答を誘導する、本明細書に記載される蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）の量を言う。１つの態様において、有効量は、ＨＢＶの診断を可能とすることができるものである。別の態様において、有効量は、ＨＢＶの検出を可能とすることができるものである。別の態様において、有効量は、ＨＢＶの細胞内追跡を可能とすることができるものである。別の態様において、有効量は、抗ＨＢＶ薬候補のＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合の測定を可能とするものである。本明細書に記載される化合物のいずれか１つまたはそれらの混合物の有効量は、公知の技術の使用によって、および／または類似の状況下で得られた結果を観察することによって、研究者、獣医、医師または他の臨床家が容易に決定することができると理解されるものとする。
【０１６４】
本明細書中で用いるように、用語「ＦＬ−ＨＡＰ」、「ＦＩ−ＨＡＰ」、または「蛍光ＨＡＰ」とは、蛍光ヘテロアリールジヒドロピリミジン系の染色剤（化合物）を言い、その染色剤は、検出試薬、診断試薬、ウイルス追跡剤、および／または創薬のためのツールである。
【０１６５】
本明細書中で用いるように、用語「染色剤」とは、光を発して、観察可能な検出可能シグナルを生じさせる化合物を言う。
【０１６６】
本明細書中で用いるように、用語「フルオロフォア」または「発蛍光性」とは、光励起に際して光を再発光できることを示す化合物、組成物、または化学成分を言う。フルオロフォアまたは発蛍光性の化合物、組成物、もしくは化学成分は、注目する生物学的化合物、標的もしくは分析物への結合に際しておよび／または酵素による切断に際して、蛍光の変化を呈することができると理解されるものとする。本明細書に記載されるフルオロフォアを置換して、該フルオロフォアの溶解性、スペクトル特性または物理的特性を改変することができると理解されるものとする。
【０１６７】
本明細書中で用いるように、用語「組成物」とは、一般に、特定の量の特定の成分を含むいずれかの生成物、ならびに特定の量の特定の成分の組合せから直接的にまたは間接的に得られるいずれかの生成物を言う。本明細書に記載される組成物は、本明細書に記載される単離された蛍光ＨＡＰ化合物（染色剤）から、またはそれらの化合物の塩、溶液、水和物、溶媒和物、および他形態から調製することができると理解されるものとする。また、組成物は、本明細書に記載される化合物の種々のアモルファス、非アモルファス、部分的に結晶性、結晶性、および／または他の形態学的形態から調製することができるのも理解されるものとする。それに応じて、本明細書に記載される化合物を列挙したそのような組成物は、それらの化合物の種々の形態学的形態および／または溶媒和物もしくは水和物形態の各々、またはそれらのいずれかの組合せを含むと理解されるものとする。例示的には、組成物は１種または複数の担体、希釈剤、および／または賦形剤を含んでよい。本明細書に記載される化合物、またはそれらを含有する組成物は、本明細書に記載される方法に適したいずれかの慣用的形態にて診断的に有効な量にて処方することができる。
【０１６８】
別の例示的な実施形態において、ＨＢＶ検出、ＨＢＶ診断、ＨＢＶ追跡、および／または抗ＨＢＶ薬創薬で用いられる組成物が記載され、その組成物は、ＨＢＶを検出し、診断し、追跡し、および／またはＨＢＶに競合的に結合するのに有効な量の、本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）および（ＸＩ）の１種または複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）を含む。本明細書に記載される組成物は、限定されるものではないが、他の診断的に活性な化合物および／または１種もしくは複数の担体、希釈剤、賦形剤等を含めた、他の構成要素および／または成分を含んでよいと理解されるものとする。
【０１６９】
本発明の別の例示的な実施形態において、細胞または組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が提供され、該方法は、例えば、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ検出および／または診断方法と組み合わせて用いるのに適合しており：
ａ）細胞と、ＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の、本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）および（ＸＩ）の１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）任意の過剰な前記１種または複数の化合物を洗い流す工程；
ｃ）混合物に刺激を施して、蛍光シグナルを誘導する工程；ならびに
ｄ）刺激された混合物を分析する工程
を含む。
【０１７０】
１つの例示的な態様において、細胞が組織培養に由来する、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、細胞が新鮮な生検材料に由来する、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、細胞が固定された切片に由来する、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。さらに別の例示的な態様において、細胞が組織培養、新鮮な生検材料、または固定された切片以外の供給源に由来する、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。
【０１７１】
別の例示的な態様において、該刺激された混合物の分析が、バルク蛍光を調べることによって達成される、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、該刺激された混合物の分析が、蛍光顕微鏡観察により個々の細胞を調べることによって達成される、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、該刺激された混合物の分析がセルソーターによって達成される、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。さらに別の例示的な態様において、該刺激された混合物の分析が、バルク蛍光を調べ、蛍光顕微鏡観察により個々の細胞を調べ、またはセルソーターで細胞を選別する以外のメカニズムによって達成される、細胞および組織においてＨＢＶを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。
【０１７２】
別の例示的な実施形態は、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法を提供し、該方法は：
ａ）清澄化血清、成長培地、または試験すべき他の液体、ならびにＨＢＶを診断し、検出し、および／または追跡するのに有効な量の、本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）および（ＸＩ）の１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物を含む溶液をインキュベートする工程；
ｂ）必要であれば、イオン強度を調整して、ｅ抗原アセンブリを検出する目的で前記アセンブリを誘導する工程；
ｃ）ＨＢＶコアに結合した前記１種または複数の化合物から未結合の前記１種または複数の化合物を分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；ならびに
ｄ）未結合および結合相に関連する蛍光を分析する工程
を含む。
【０１７３】
１つの例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィーによって達成される、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、限外濾過によって達成される、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、遠心分離によって達成される、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。さらに別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、または遠心分離以外の技術によって達成される、溶液中のＨＢＶコアを検出、診断および／または追跡する方法が記載される。
【０１７４】
別の例示的な実施形態は、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法を提供し、該方法は：
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）および（ＸＩ）の１種もしくは複数の蛍光−ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）１種または複数の化合物の蛍光の変化を測定する工程；ならびに
ｃ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む。
【０１７５】
別の例示的な実施形態は、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法を提供し、該方法は：
ａ）抗ＨＢＶ薬候補と、予め組み立てられたＨＢＶコアと、前記抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合を検出するのに有効な量の本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）および（ＸＩ）の１種もしくは複数の蛍光ＨＡＰ染色剤（化合物）またはその組成物との混合物をインキュベートする工程；
ｂ）未結合の前記抗ＨＢＶ薬候補および未結合の前記１種または複数の化合物を、ＨＢＶコアに結合した前記抗ＨＢＶ薬候補および前記１種または複数の化合物から分離して、各々、未結合相および結合相を生じさせる工程；
ｃ）未結合および結合相に関連する蛍光を測定する工程；ならびに
ｄ）抗ＨＢＶ薬候補によるＨＢＶのＨＡＰポケットへの競合的結合について混合物を分析する工程
を含む。
【０１７６】
１つの例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィーによって達成される、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法が記載される。別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、限外濾過によって達成される、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法が記載される。別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、遠心分離によって達成される、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法が記載される。別の例示的な態様において、ＨＢＶコアに結合した化合物からの未結合化合物の分離が、ゲル浸透クロマトグラフィー、限外濾過、または遠心分離以外の技術によって達成される、抗ＨＢＶ薬創薬を行う方法が記載される。
【０１７７】
別の例示的な実施形態において、ＱがＡｒ１である先行する実施形態のいずれか１つの方法が記載される。
【０１７８】
別の例示的な実施形態は、ＨＢＶを検出し、診断し、および／または追跡し、同様にＨＢＶのＨＡＰポケットに競合的に結合する化合物を同定するためのキットを提供し、該キットは、例えば、現在入手可能な抗体ベースのＨＢＶ検出および／または診断試薬と組み合わせて用いるのに適合し：
ａ）本明細書に記載される式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）または（ＸＩ）の蛍光ＨＡＰ染色剤；および
ｂ）適当な溶媒
を含む。
【０１７９】
別の実施形態において、ＱがＡｒ１である先行する実施形態のキットが記載される。
【０１８０】
別の例示的な実施形態は、構造式（Ｉ）：
【０１８１】
【化３６】
2016522271.tif 000038
を有する蛍光ＨＡＰ染色剤を調製するプロセスであって、
（ａ）構造式（ＩＩ）：
【０１８２】
【化３７】
2016522271.tif 000039
のＨＡＰ化合物を、一般に、スキームＩに示されたように、適切に活性化されたフルオロフォアと反応させることを含み、ここで、Ｑ、ＲＣ、ＲＤ、Ａｒ１、Ｚ、Ａｋ、Ａｋ１、ＲＡ、ＲＢ、ｎおよびフルオロフォアは本明細書中において定義した通りである、プロセスを提供する。置換されたベンズアルデヒドおよびアセトアセテート誘導体の最初の縮合により、β−アリール、α，β−不飽和１，３−ジカルボニル化合物ａが得られ、これは、アミジノ−ヘテロアリール化合物との反応を受けて、ヘテロアリールジヒドロピリミジン（ＨＡＰ）ｂを生じる。Ｂｏｃ−ピペラジンでの引き続いてのアミノリシス、続いての、Ｂｏｃ保護基のＴＦＡ媒介除去により、ピペラジニル−ＨＡＰｃを得る。（変換の同様なシリーズが、構造式（ＩＩ’）および（ＩＩ”）のＨＡＰ化合物を適切に活性化されたフルオロフォアと反応させるのに考えられる）。所望のＢｏｃ保護アミノ酸のカルボジイミド媒介カップリング、続いての、Ｂｏｃ保護基のＴＦＡ媒介除去により、アミノアシル−ピペラジニル−ＨＡＰｄを得る。ｄの遊離アミンへの変換に続き、適切に活性化されたフルオロフォアのカップリングにより、蛍光ＨＡＰ化合物ｅを得る。
【０１８３】
【化３８】
2016522271.tif 000040
【実施例】
【０１８４】
以下の実施例は、本発明の具体的な実施形態をさらに説明するが、以下の例示的な実施例は断じて本発明を限定すると解釈されないものとする。
【０１８５】
ＨＢＶのための蛍光ＨＡＰ染色剤の合成
ＨＢＶのキャプシド蛋白質への特異的結合を呈する３つの例示的フルオロフォア含有化合物を調製した。各化合物は異なるフルオロフォアを有し：化合物５は（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎからの）Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８を含有し；化合物６はフルオレセインを含有し；化合物７は（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎからの）ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）ＦＬを含有する。
【０１８６】
【化３９】
2016522271.tif 000041
【０１８７】
化合物５への代表的な合成経路
【０１８８】
【化４０】
2016522271.tif 000042
【０１８９】
化合物１の合成：
【０１９０】
【化４１】
2016522271.tif 000043
【０１９１】
２−クロロ−４−フルオロベンズアルデヒド（３．２ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）および４−クロロアセト酢酸メチル（２．３１ｍＬ、２０．０ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのトルエンに溶解し、ディーンスタークトラップを用いて４時間還流して、水を除去した。溶媒を真空中で除去した。残存する油をエーテルに溶解し、水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃くして、５．２ｇの粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー（１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、２．０５ｇ（３５％収率）の化合物１（異性体ミックス）を油として得た。
【０１９２】
化合物２の合成：
【０１９３】
【化４２】
2016522271.tif 000044
【０１９４】
化合物１（２．０ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）、２−アミジノピリジン塩酸塩（１．０８ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（６８ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ、０．１２当量）をイソプロパノール（１５ｍＬ）に溶解し、溶液を１８時間還流した。溶媒を真空中で除去し、残存する固体をエーテルおよび１Ｎ  ＨＣｌ溶液に溶解した。エーテル層を追加のＨＣｌ溶液で洗浄した。合わせた酸性水層を炭酸水素ナトリウムで塩基性とした。この水性層をエーテル（３×）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃くして、１．０７ｇの粗生成物油を得た。生成物をフラッシュカラム（２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、４０２ｍｇ（１５％収率）の化合物２を黄色油として得た。油の一部をエーテル／ペンタンから結晶化して、２２３ｍｇの化合物２を黄色結晶性固体として得た。融点１６４〜１６６℃  ＥＳＩマススペクトル３９４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９５】
化合物３の合成：
【０１９６】
【化４３】
2016522271.tif 000045
【０１９７】
化合物２（５５．２ｍｇ、０．１４０ｍｍｏｌ、１当量）、ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチル（１３０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ、５当量）およびジイソプロピルエチルアミン（２４．４μＬ、０．１４０ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。１８時間後、溶媒を真空中で除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製した。純粋な画分を真空中で濃くして、Ｂｏｃ保護３（６９．９ｍｇ、９２％収率）をフォームとして得た。該フォームを５０％トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中に０．５時間で溶解することによって、Ｂｏｃ保護基を除去した。溶媒を真空中で除去して、残渣をＤＣＭに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃くして、化合物３（５０．４ｍｇ、８８％収率）を淡黄色油として得た。
【０１９８】
化合物４の合成：
【０１９９】
【化４４】
2016522271.tif 000046
【０２００】
ジ−Ｂｏｃ−ＧＡＢＡ−ＯＨ（４４．７ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１．３当量）を乾燥したフラスコ中の無水ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解した。ＣＤＩ（２３．９ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１．３当量）を加え、混合物を２時間撹拌し、続いて、化合物３（５０．３ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。１８時間後、溶液を真空中で濃くし、粗生成物を５０％アセトニトリル／水に可溶化させた。溶液をＨＰＬＣ（１０分間にわたる移動相３０〜９０％ＡＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ、１ｍＬ／分、２１７ｎｍでの検出、および蒸発光スプレー検出（Evaporative Light Spray Detection）（ＥＬＳＤ））によって分析した。主生成物（ジ−Ｂｏｃ保護４）は９．５５分の保持時間にて見られた。生成物を分取用ＨＰＬＣ（１０分間にわたる５０〜９０％ＡＣＮ、０．１％ＴＦＡ、２１７ｎｍ）によって精製した。純粋な画分を真空中で濃くして、１００．７ｍｇの黄色油を得た。この油を５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ（２ｍＬ）に１時間で溶解した。ＨＰＬＣは４．９４分において新しい生成物のピークへの完全な変換を示した。溶媒を真空中で減少させて、油が得られ、これを少量のメタノールを含むＤＣＭに再溶解して、可溶化を助けた。溶媒を再度除去して、残存するＴＦＡを除去するのを助けた。生成物を１８時間高真空下において、１１２ｍｇの化合物４のＴＦＡ塩を黄色油として得た。正確なＥＳＩ  ＭＳ：Ｃ２６Ｈ３１Ｎ６Ｏ３ＦＣｌ（Ｍ＋Ｈ）＋として、実測値５２９．２１０８；計算値５２９．２１３０。
【０２０１】
化合物５の合成：
【０２０２】
【化４５】
2016522271.tif 000047
【０２０３】
化合物４（１．７ｍｇ、２．２５μｍｏｌ、２当量）を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（１μＬ）を加え、得られた溶液をＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８  ＴＦＰエステル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（１．０ｍｇ、１．１３μｍｏｌ、１当量）のバイアルに加えた。１８時間後、溶媒を真空中で除去し、残渣を５０％ＡＣＮ／水に溶解し、溶液をＨＰＬＣ（１０分間にわたって移動相３０〜９０％ＡＣＮ／水、緩衝液０．１％ＴＦＡ、１ｍＬ／分、２１７および４９５ｎｍでの検出、ならびに蒸発光スプレー検出（ＥＬＳＤ））によって分析した。４９５ｎｍにおいて吸収した生成物ピークが４．９４分に見られた。このピークを分取用ＨＰＬＣによって収集し、真空中で濃くして、化合物５を固体として得て、これを真空下で一晩乾燥した。そのＵＶ吸収消衰係数に基づいて、質量は０．７ｍｇ（６１％収率）であると計算された。ＥＳＩマススペクトル１０４５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０４】
化合物６の調製：
【０２０５】
【化４６】
2016522271.tif 000048
【０２０６】
従前に記載された代表的な経路を用い、化合物４（５ｍｇ、７．７８μｍｏｌ）をフルオレセイン−５−イソチオシアネート（ＦＩＴＣ‘異性体１’）（５．４ｍｇ、１４μｍｏｌ）と反応させて、化合物６（３．２ｍｇ、４５％収率）を得た。正確なＥＳＩ  ＭＳ：Ｃ４７Ｈ４２Ｎ７Ｏ８ＳＣｌＦ（Ｍ＋Ｈ）＋として、実測値９１８．２４６０；計算値９１８．２４８８。
【０２０７】
化合物７の調製：
【０２０８】
【化４７】
2016522271.tif 000049
【０２０９】
従前に記載された代表的な経路を用い、化合物４（５ｍｇ、７．７８μｍｏｌ）をＢＯＤＩＰＹ（登録商標）ＦＬスクシンイミジルエステル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（５．０ｍｇ、１３μｍｏｌ）と反応させて、化合物７（１．５ｍｇ、２４％収率）を得た。正確なＥＳＩ  ＭＳ：Ｃ４０Ｈ４４Ｎ８Ｏ４ＢＳＣｌＦ３（Ｍ＋Ｈ）＋として、実測値８０３．３１９７；計算値８０３．３２１９。
【０２１０】
本明細書に記載される方法による蛍光ＨＡＰ染色剤の調製で用いられる、既に適切に活性化された、または適切な活性化を受ける追加のフルオロフォアは、限定されるものではないが、７−アミノ−４−メチルクマリンとしてのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの部門）から商業的に入手可能なフルオロフォア、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４０５、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ（登録商標）、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｙｅｌｌｏｗ（商標）、ダンシル、ジメチルアミノクマリン、Ｍａｒｉｎａ  Ｂｌｕｅ（登録商標）、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ（商標）、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｏｒａｎｇｅ（商標）、メトキシクマリン、ヒドロキシクマリン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６１０−Ｒ−フィコエリスリン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７−Ｒ−フィコエリスリン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６８０−Ｒ−フィコエリスリン、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、エオシン、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（登録商標）４８８、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｇｒｅｅｎ（商標）、ローダミン６Ｇ、Ｒ−フィコエリスリン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５５５、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５９４、ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）ＴＲ−Ｘ、ローダミン６Ｇ、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｒｅｄ（商標）、テトラメチルローダミン、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ（登録商標）、Ｘ−ローダミン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６８０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６８０−アロフィコシアニン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７００、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７００−アロフィコシアニン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７５０−アロフィコシアニン、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）７９０、およびアロフィコシアニンを含む。
【０２１１】
ＨＢＶのための蛍光ＨＡＰ染色剤の生物学的試験
図１は、ＦＬ−ＨＡＰが組立て速度を増強させることを示す。この実験においては、１５０ｍＭ  ＮａＣｌの添加によってアセンブリを誘導するに先立って、５μＭのＣｐを、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）と共に、またはそれなくして、インキュベートした。ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）の濃度の増加は、コア蛋白質の組立てを加速する。
【０２１２】
図２は、ＦＬ−ＨＡＰがアセンブリ安定性を増加させ、ダイマーではなく、キャプシドに特異的に結合することを示す。この実験においては、５μＭのＣｐをＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）と混合し、次いで、１５０ｍＭ  ＮａＣｌで組み立てるのを誘導した。２４時間後、反応をスーパーロース（Ｓｕｐｅｒｏｓｅ）６カラムで分解した。キャプシドは９．５ｍＬにおいて溶出し、８ｍＬにおいて凝集し、Ｃｐダイマーは１８ｍＬにおいてそうする。ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）の増大は、徐々により大きな複合体のより多くのアセンブリに導いた。４９５ｎｍ（下方）において可視化し、そこでは、蛍光分子のみが光を吸収し、組み立てられたＣｐ（すなわち、キャプシド）のみがＦＬ−ＨＡＰによって結合されるのは明らかである。
【０２１３】
図３は、ＦＬ−ＨＡＰが高い親和性でＨＢＶキャプシドに結合し、ゆっくりと解離することを示す。左側に示されるもの：ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）で染色されたキャプシドをスクロース濃度勾配で分離した。キャプシドは２つのサイズで生じ、よって、２つの明るい（緑色）バンドが生じる。右側に示さるもの：リストされた濃度において、キャプシドは、電気泳動に先立って、２５ｎＭのＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）で染色した。これらの非平衡条件下においてさえ、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８結合はｎＭ濃度において明らかであった。
【０２１４】
図４は、ＦＬ−ＨＡＰがＨＢＶ産生細胞のみを標識することを示す。左側のパネルにおいて、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）で染色された対照ＨｅｐＧ２細胞が蛍光顕微鏡写真で示され；カメラは高利得に設定され、それにも拘わらず、緑色斑点は見られない。ＲＮＡ充填ＨＢＶコアを発現するＨｅｐＧ２細胞（右側パネル）においては、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）での染色後に、多数の斑点および斑点の凝集体が見られる。
【０２１５】
ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）は、ＨＡＰ分子のいくつかの臨界的特性を保持する。それはＨＢＶコア蛋白質のダイマーの組立てを誘導し（図１）、組立ての程度を増強して（図２）、異常な粒子の形成に導く（図１および図２）。ＦＬ−ＨＡＰが異常な組立てを誘導することを示すために、光散乱の量は遊離キャプシド過剰であり（図１）、組立て生成物はキャプシドよりもサイズ排除カラム（ＳＥＣ）でより速く動く（図２）ことに注意することができる。加えて、ＳＥＣ実験は、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８を加えるにつれて、遊離ＨＡＢダイマーが徐々に少なくなることを示し、ＦＬ−ＨＡＰがキャプシドを安定化することを示す。最も重要なことには、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）が、高い親和性で、予め組み立てられたコアに結合する。これは、（ｉ）サイズ排除クロマトグラフィー（図２）、（ｉｉ）ＨＢＶコアの試料の染色およびスクロース濃度勾配でのそれらの単離（図３、左側）、ならびに（ｉｉｉ）引き続いて、アガロースゲルで電気泳動により精製されたＨＢＶコアの染色（図３、右側）によって示された。図２におけるサイズ排除クロマトグラフィーピークを横切ってのフルオロフォア吸収に対する蛋白質の比を調べることによって、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）のほぼ１２０コピーがＨＢＶキャプシドに結合すること、すなわち、毎２つのコア蛋白質について１つであることが判明した。これらのデータは、どのようにしてＨＢＶキャプシドが蛍光を劇的に集中することができるかを機構的に証明する。データは、ＦＬ−ＨＡＰが組み立てられたＨＢＶコアを定量するための強力なツールであることも示す。
【０２１６】
ＦＬ−ＨＡＰの種々の形態を合成することができ、それにより、蛍光染色剤の得られる溶解性特性を変化させる。より可溶性の形態が、溶液または血清中のＨＢＶコアを観察するのに特に有用であり；それらは、細胞内ＨＢＶコアを明るく染色するのにも有用であると予想される。細胞膜を横切り、ＨＢＶ発現細胞を標識し、特異的に、それらの細胞におけるＨＢＶコアの濃度を標識する、例示的ＦＬ−ＨＡＰ化合物であるＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）の能力は図４に示される。ＨＢＶを発現しない細胞はＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）を濃縮せず、標識を示さない（図４）。他の実験においては（データは示さず）、ＦＬ−ＨＡＰＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）４８８（化合物５）蛍光が、Ｃｐ特異的抗体と共局所化することが観察された。ＦＬ−ＨＡＰのより疎水性の形態（例えば、化合物６および化合物７）が組織試料の迅速な染色に特に有用である。
【０２１７】
今回、本発明を、それが属する技術分野における当業者がそれを実施することができるように十分な、明瞭な、簡易な、かつ正確な用語で記載した。これまでのものは、本発明の好ましい実施形態および実施例を記載し、特許請求の範囲に記載された発明の精神または範囲を逸脱することなく、そこでは修飾をなすことができると理解されるものとする。
【０２１８】
本明細書中で引用された文献の各々、およびそこに開示された方法の全てをここに引用して組み込む。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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