(57)【要約】  本発明の開示は、概ねアルファへリックス模倣構造、特に、βカテニンの阻害剤であるアルファへリックス模倣構造に関する。本発明の開示は、また、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の治療における適用、並びに、かかるアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤等を含む医薬組成物に関する。【選択図】図１Ｂ
2016502498.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１以上の眼疾患の治療のためのアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物であって、下記化学式（Ｉ）：
【化１】
2016502498.tif 000004
（式中、:
Ａは−ＣＨＲ７−
（式中、Ｒ７は、水素、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルである）であり；
Ｇは−ＮＨ−、−ＮＲ６−、−Ｏ−、−ＣＨＲ６−又は−Ｃ（Ｒ６）２−
（式中、Ｒ６は、置換されていてもよいアルキル、アルケニルおよびアルキニルから独立して選択される）であり；
Ｒ１は、置換されていてもよいアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル又はヘテロシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ２は−Ｗ２１−Ｗ２２−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、Ｗ２１は−（ＣＯ）−又は−（ＳＯ２）−であり；Ｗ２２は、結合、−Ｏ−、−ＮＨ−、又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；Ｒｂは結合又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；且つＲ２０は、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルである）；且つ
Ｒ３は、置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルである）
を有するアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物又はその製薬上許容し得る塩。
【請求項２】
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４、７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソヘキサヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］オキサジアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（（２−アミノベンゾ［ｄ］チアゾール−４−イル）メチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４、７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１、２、４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、 
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（ナフタレン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、 
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−２，６−ジメチルベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾール−４−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−８−（イソキノリン−５−イルメチル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−８−（（５−クロロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノキサリン−５−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、および
（６Ｓ，９Ｓ）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、および
（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１、２又は３に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項５】
１以上の眼疾患が、黄斑変性症、加齢性黄斑変性症、緑内障、白内障、網膜色素変性症、脈絡叢血管新生、網膜変性症、および酸素誘発性網膜症から選択される、
請求項１、２又は３に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１、２又は３に記載の化合物を有効量投与することを含む、眼疾患の治療方法。
【請求項７】
疾患が緑内障である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
疾患が黄斑変症症である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
疾患が加齢性黄斑変性症である、請求項８に記載の方法。 
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
開示の背景
Ｗｎｔ遺伝子ファミリーは、Ｉｎｔ１/Ｗｎｔ１ガン原遺伝子および Drosophilaのwingless（"Wg"）、DrosophilaのＷｎｔ１ホモログに関連する分泌タンパクの大クラスをコードする（Cadigan et al. （1997） Genes & Development 11 :3286−3305）。Ｗｎｔは、多様な組織および器官において発現され、Drosophilaのセグメンテーション、C. elegansの内胚葉発生、並びに、哺乳類における四肢の極性の確立、神経堤分化、腎臓の形態形成、性別決定および脳発生などの多くの発生過程に必要である（Parr, et al. （1994）Curr. Opinion Genetics & Devel. 4:523−528）。Ｗｎｔ経路は、胚発生中および成体の両方の発生においてマスター制御因子である（Eastman, et al. （1999） Curr Opin Cell Biol 11: 233−240; Peifer, et al. （2000） Science 287: 1606−1609）。
【０００２】
Ｗｎｔシグナルは、Frizzled（”FZ”） ファミリーの７回膜貫通型ドメイン受容体によって伝達される（Bhanot et al. （1996） Nature 382:225−230）。Frizzled細胞表面受容体（Fzd）は、カノニカルおよび非カノニカルの両方のＷｎｔシグナルにおいて本質的な役割を果たす。カノニカル経路では、Ｗｎｔタンパク質によるＦｚｄおよびＬＲＰ５／６（低濃度リポタンパク質受容体関連タンパク質５および６）の活性化時に、「βカテニン破壊複合体」によるβカテニンのリン酸化および分解を妨げるシグナルが生成され、安定したβカテニンの核への移動および蓄積を可能にし、ひいてはＷｎｔシグナル伝達を可能にする（Perrimon （1994） Cell 76:781−784）（Miller, J. R. （2001） Genome Biology; 3（1）: 1−15）。非カノニカルなＷｎｔシグナル経路は、あまり明確に定義されていないが、平面内細胞極性（PCP）経路、Ｗｎｔ／Ｃａ＋＋ 経路、および収束伸長（convergence extension）経路などの、少なくとも２つの非カノニカルなＷｎｔシグナル経路が提案されている。
【０００３】
グリコーゲンシンターゼキナーゼ３（GSK3）、腫瘍サプレッサ遺伝子産物ＡＰＣ（adenomatous polyposis coli）（Gumbiner （1997） Curr. Biol. 7:R443−436）、および足場タンパク質アキシン（Axin）は、いずれもＷｎｔ経路の負の制御因子であり、組み合わさって「βカテニン破壊複合体」を形成する。Ｗｎｔリガンドが存在しない場合は、これらのタンパク質は、複合体を形成し、βカテニンのリン酸化と分解を促進する。一方、Ｗｎｔシグナルは、複合体を不活性化し、βカテニンの分解を妨げる。安定化したβカテニンは、結果として核に移動し、ＴＣＦ（Ｔ細胞因子）転写因子（リンパ球エンハンサー結合因子−１（LEF1）としても知られている）を結合させ、ＴＣＦ／ＬＥＦ誘導性転写の共活性化因子として機能する（Bienz, et al. （2000）Cell 103: 311−320; Polakis, et al. （2000） Genes Dev 14: 1837−1851）。
【０００４】
Ｗｎｔシグナルは、カノニカルおよび非カノニカルな機構を経由して生じる。カノニカル経路では、Ｗｎｔタンパク質によるＦｚｄおよびＬＲＰ５／６の活性化時に、安定化されたβカテニンが核に蓄積し、ＴＣＦ標的遺伝子の活性化を引き起こす（上述した通りMiller, J. R. （2001） Genome Biology; 3（1）: 1−15）。非カノニカルＷｎｔシグナル経路はあまり定義されていないが、平面内細胞極性（PCP）経路およびＷｎｔ／Ｃａ＋＋経路などの、少なくとも２つの非カノニカルＷｎｔシグナル経路が提案されている。
【０００５】
視神経および網膜の疾患および変性状態は、世界中において失明（blindness）の主要な原因である。黄斑変性症（MD）は、高視力視野に関与する黄斑と呼ばれる一部の中心網膜における光受容体の欠損である。加齢性黄斑変性症（AMD）は、「乾燥性」又は「湿性」のいずれかとして記載される。湿性かつ滲出性の血管新生型のＡＭＤは、ＡＭＤ患者の約１０％が冒され、また、血管網膜色素上皮（RPE）を通って異常な血管が成長するという特徴があり、出血（hemorrhage）、滲出（exudation）、瘢痕化（scarring）、又は漿液性網膜剥離をもたらす。９０パーセントのＡＭＤ患者は、網膜色素上皮の萎縮および黄斑光受容体の欠損を特徴とする乾燥型を罹患している。光線力学療法（photodynamic thrapy）を用いて軽症化に成功する例が得られているが、今のところ、ＭＤ又はＡＭＤのどの形態に対する治療法も存在しない。
【０００６】
緑内障は、視神経に対する損傷により失明を起こす数種の異なる眼病がもたらす疾患である。不十分な眼球の排水（ocular drainage）に起因する眼内圧力（IOP）の上昇が緑内障の最も多い原因である。緑内障は目が老化するにつれてよく発症し、あるいは、眼球の損傷、炎症、腫瘍の結果として又は、白内障もしくは糖尿病が進行した症例において生じ得る。また、ステロイド治療により起こるＩＯＰ増加によっても生じ得る。緑内障に有効であると証明されている薬物療法は、硝子体液の産生を減少させること、又は眼球の排水を促進することのいずれかにより、ＩＯＰを減少させる。このような薬剤は、交感神経系に作用するので、多くの場合、血管拡張剤であり、アドレナリン拮抗薬が挙げられる。
【０００７】
黄斑変性症（MD）、加齢性黄斑変性症（AMD）、緑内障、白内障、網膜色素変性症、脈絡叢血管新生、網膜変性症、および酸素誘発性網膜症などの眼障害（ophthalmic disorder）のための新たな治療法が早急に必要である。
【発明の概要】
【０００８】
開示の簡単な概要
本発明の開示は、概ねアルファへリックス模倣構造に関し、特に、βカテニンの阻害剤であるアルファへリックス模倣構造に関する。また、本発明の開示は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の治療における適用、並びにこれらのアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤を含む医薬組成物に関する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１Ａ〜１Ｄ。化合物Ａを用いた処置の後の分裂中の免疫細胞、グリア細胞、星状細胞およびミュラー細胞の数である。化合物Ａは、４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェートである。（Ａ）化合物Ａ処置は、免疫細胞応答には影響を及ぼさなかった。（Ｂ−Ｄ）化合物Ａを用いて処置された眼球では、コントロールのビヒクル（vehicle）のレベルと比較すると、網膜剥離後の増殖中のグリア細胞（Ａ）、ミュラー細胞（Ｂ）、および星状細胞（Ｄ）の数の増加が弱められた。
【図２】図２Ａ〜２Ｂ。化合物Ａ処置後のグリア性瘢痕（glial scar）の頻度およびサイズの定量分析。（Ａ）化合物Ａの処置後、グリア性瘢痕の頻度は、有意に減少した。（Ｂ）化合物Ａの処置後、平均のグリア性瘢痕の長さは、有意に減少した。
【図３】図３Ａ〜３Ｄ。免疫組織化学によって、網膜下腔に延びるビメンチン標識されたミュラー細胞の突起があるようにみえる網膜下の神経膠症（subretinal gliosis）（又は瘢痕化（scarring））を確認する。ＯＳ、外層/網膜下腔；ＯＮＬ、外核層;ＧＣＬ、神経節細胞（ganglion cell）層。（Ａ−Ｂ）ビヒクル処置眼球。剥離後には、ミュラー細胞においてビメンチン発現が増加し、ミュラー細胞突起が、網膜下腔に延びるのが見える（矢印）。矢頭は、分裂中のミュラー細胞を指す。（Ｃ−Ｄ）化合物Ａ処置眼球。ミュラー細胞の網膜下腔への成長は観察されなかった。１の分裂細胞（星状細胞）がＧＣＬに存在する（矢印）。
【図４】図４Ａ〜４Ｂ。化合物Ａ又は化合物Ｃ処置後のＣＮＶ損傷サイズ。化合物Ｃは、（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミドである。（Ａ）１５日目の平均ＣＮＶ損傷サイズ。（Ｂ）２２日目の平均ＣＮＶ損傷サイズ。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
開示の詳細な説明
近頃、生理活性タンパク質又はペプチドにおいて発見された二次構造の折れ曲がりを模倣する非ペプチド化合物が開発されている。例えば、米国特許番号５，４４０，０１３および公開ＰＣＴ出願番号ＷＯ９４／０３４９４、ＷＯ０１／００２１０Ａ１、およびＷＯ０１／１６１３５Ａ２は、それぞれ折れ曲がり（reverse-turns）の三次元的構造を模倣する、立体配座的に制約された非ペプチド化合物を開示する。また、米国特許番号５，９２９，２３７およびその一部継続出願米国特許番号６，０１３，４５８は、生理活性ペプチドおよびタンパク質の二次構造の折れ曲がり部位を模倣する、立体配座的に制約された化合物を開示する。ＷＯ２００７／０５６５１３およびＷＯ２００７／０５６５９３では、折れ曲がり模倣薬に関し、生理活性ペプチドおよびタンパク質の二次構造のアルファへリックス部位を模倣する、立体配座的に制約された化合物が開示されている。
【００１１】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の関連構造および化合物が、ＷＯ２０１０／０４４４８５、ＷＯ２０１０／１２８６８５、ＷＯ２００９／１４８１９２、およびＵＳ２０１１／００９２４５９において開示され、それぞれその全体が参照されることにより本明細書中に組み込まれる。これらの化合物は、現在、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患および障害の治療において有用であることが分かっている。拘束されることを望むものではないが、 これらの疾患の治療におけるこれらの化合物の有効性は、部分的には、これらの化合物が、βカテニンを阻害し、ひいてはＷｎｔ経路シグナルを変更することができることに基づいており、そのことが種々の眼病および眼疾患を改善することが分かっている。
【００１２】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の好ましい構造は以下の化学式（Ｉ）：
【００１３】
【化１】
2016502498.tif 000003
【００１４】
（式中、Ａは−ＣＨＲ７−
（式中、
Ｒ７は、置換されていてもよいアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル又はヘテロシクロアルキルアルキルである）であり；
Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ６−、又は−Ｏ−
（式中、
Ｒ６は、低級アルキル又は低級アルケニルである）であり；
Ｒ１は、−Ｒａ−Ｒ１０；
（式中、
Ｒａは、置換されていてもよい低級アルキレンであり、かつ 
Ｒ１０は、置換されていてもよい二環式縮合アリール又は二環式縮合ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、−（ＣＯ）−ＮＨ−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、 
Ｒｂは、結合又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；かつ
Ｒ２０は、置換されていてもよいアリール又はヘテロアリールである）であり；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキルである）を有する。
これらの化合物は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の予防および／又は治療において特に有用である。 
【００１５】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤のさらに好ましい構造は、上記式（Ｉ）において以下の置換基：
Ａは−ＣＨＲ７−、
（式中、
Ｒ７は、ヒドロキシル又はＣ１−４アルキルで置換されていてもよいアリ
ールアルキルである）であり；
Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ６−、又は−Ｏ−
（式中、
Ｒ６はＣ１−４アルキル又はＣ１−４アルケニルである）であり；
Ｒ１は、−Ｒａ−Ｒ１０；
（式中、
Ｒａは、Ｃ１−４アルキレンであり、且つ
Ｒ１０は、ハロゲン又はアミノ基で置換されていてもよい、二環式縮合アリール又は二環式縮合ヘテロアリールである）であり；
Ｒ２は、−（ＣＯ）−ＮＨ−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、 
Ｒｂは、結合又はＣ１−４アルキレンであり；且つ
Ｒ２０は、アリール又はヘテロアリールである）であり；且つ
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキルである）
を有する化合物である。
これらの化合物は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の予防および／又は治療において特に有用である。
【００１６】
本発明の最も好ましいアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤は次のとおりである: 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソヘキサヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］オキサジアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（（２−アミノベンゾ［ｄ］チアゾール−４−イル）メチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２、４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（ナフタレン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−２，６−ジメチルベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾール−４−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２、９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−８−（イソキノリン−５−イルメチル）−２，９−ジメチル−４、７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−８−（（５−クロロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノキサリン−５−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、および
（６Ｓ，９Ｓ）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド。
これらの化合物は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の予防および／又は治療において特に有用である。
【００１７】
最も好ましい実施形態における化合物は、： 
４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート（化合物Ａ）、又は
（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４、７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド（化合物C）である。
これらの化合物は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患の予防および／又は治療において特に有用である。
【００１８】
特に、本発明のアルファへリックス模倣薬は、βカテニンの阻害剤として有用であることが分かっている。本明細書中に開示されているのは、眼病および眼疾患の治療のためのアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物である。
【００１９】
「βカテニン阻害剤」は、βカテニン活性を減少又は抑制し得る薬物である。βカテニン活性としては、核への転位、ＴＣＦ（Ｔ細胞因子）転写因子の結合、およびＴＣＦ転写因子誘導性のＴＣＦ標的遺伝子の転写の共活性化が挙げられる。
【００２０】
「眼病」又は「眼疾患」は、眼球および眼領域に影響を及ぼす如何なる病気、疾患又は障害であってもよく、黄斑変性症（ＭＤ）、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、白内障、網膜色素変性症、脈絡叢血管新生、網膜変性症、および酸素誘発性網膜症が挙げられるがこれらに限定されない。
【００２１】
本明細書中において使用されるように、「治療」とは、治療される個人又は細胞の疾病の経過を変化させるための試みにおける臨床的介入（clinical intervention）をいい、臨床的な病状の経過の間に行われ得る。治療の治療的効果としては、疾患の再発の抑制、症状の緩和、疾患の直接的又は間接的な病理学的帰結（pathological consequences）を軽減すること、疾患進行の速度を減少させること、病態の改善（amelioration）もしくは緩和（palliation）、および寛解（remission）、又は予後を改善することが挙げられるがこれに限定されない。
【００２２】
本明細書中に使用されているように、「治療有効量」および「有効量」という用語は、眼疾患の進行もしくは発症、又はその１以上の症状を抑制するという結果をもたらすために、別の治療の効果を増強もしくは改善するために、および／又は眼疾患の１以上の症状を改善するために十分な上記発明の組成物の量に言及すべく、区別せずに使用される。
【００２３】
治療の有効量が、疾患の進行を緩和し、改善し、安定化し、食い止め、もしくは遅らせ、又は異なる方法で疾患の病理学的帰結（pathological consequences）を軽減させるために、あるいは疾患の症状を軽減させるために十分な１回分以上の用量で患者へ投与され得る。改善又は軽減は、恒久的である必要はなく、少なくとも１時間、少なくとも１日、又は少なくとも１週間以上の範囲の期間にわたるものであってもよい。有効量は、概して医者によって個別的に決定され、当該技術分野の当業者の技能の範囲内である。有効量を得るための適切な用量を決定するときには、いくつかの要因が、通常は考慮される。これらの要因としては、患者の年齢、性別および体重、治療すべき疾患、疾患の重症度、並びに投与ルート、剤形、処方計画および所望の結果が挙げられる。
【００２４】
本明細書中に使用されるように、「対象」および「患者」という用語は、区別することなく用いられ、動物、 好ましくは、非霊長類（例えば、牛、豚、馬、猫、犬、ラット等）および霊長類（例えば、サルおよびヒト）等の哺乳動物、最も好ましくはヒトのことをいう。
【００２５】
本明細書中に記載されたアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤は、本明細書中に記載された障害（disorder）の治療又は予防のために、単独又は組み合せて対象への投与用医薬組成物に包含され得る。上記組成物は、通常、活性薬剤および製薬上許容し得る担体を含む。本明細書中に使用されるように、「製薬上許容し得る担体」という用語は、製薬上の投与と両立可能な、生理食塩水、溶媒、分散媒（dispersion media）、コーティング、抗細菌および抗真菌剤、等張性（isotonic）および吸収遅延性の薬剤等を含む。また、追加の活性化合物についても組成物に包含され得る。
【００２６】
本明細書中に記載された化合物および組成物は、黄斑変性症および緑内障等の眼疾患および眼病の治療に有用である。
【００２７】
本明細書中に記載されたアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤は、疾患の予防および治療に有用である。特に、該開示は、眼病又は眼疾患のリスクのある（又はかかりやすい）対象を処置する予防および治療方法の両方を提供する。従って、本方法は、それを必要とする対象に対し、有効量のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤を投与することによる対象の眼疾患の予防および／又は治療を提供する。例えば、対象は、眼病又は眼疾患の原因となる１以上の要因を改善するための取り組みにおいてβカテニン阻害剤組成物を投与され得る。
【００２８】
本技術の一態様は、治療目的のために対象の眼疾患を軽減させる方法を含む。治療用途において組成物又は薬剤は、上記疾患の疑いがある、又は既に罹患している対象に疾患の進行においてその合併症および中間的な表現型（intermediate pathological phenotypes）などの疾患の症状を治療するために、又は少なくとも部分的に阻止するために十分な量を投与される。このように、本発明の開示は、眼疾患に苦しむ人を治療する方法を提供する。いくつかの実施態様では、本技術は、哺乳動物においてアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤を投与することによって、白内障、網膜色素変性症、緑内障、脈絡叢血管新生、網膜変性症、および酸素誘発性網膜症等の特定の眼障害を治療する又は予防する方法を提供する。
【００２９】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、白内障を治療又は予防するべく、対象に投与される。白内障は、目の通常の透明性を低下させることを特徴とする先天的又は後天的疾患である。白内障の患者は、レンズ表面の混濁、レンズ内側の混濁、および／又はレンズのむくみなどの、１以上の症状を示し得るがこれに限定されない。先天的白内障関連疾患の典型的な例は、偽白内障、膜状白内障（membrane cataracts）、冠状白内障、層状白内障、点状白内障（punctuate cataracts）、および糸状白内障（filamentary cataracts）である。後天的白内障関連疾患の典型的な例は、老人性白内障、後発白内障、褐色白内障、併発白内障、糖尿病性白内障、および外傷性白内障である。後天的白内障は、電気的ショック、放射線、超音波、薬物、全身性疾患および栄養障害によっても誘導され得る。後天的白内障としては、術後白内障が更に挙げられる。
【００３０】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、網膜色素変性症を治療又は予防するべく、対象に投与される。網膜色素変性症は、桿体視細胞および／又は錐体視細胞損傷を特徴とする障害である。網膜に暗い線（dark line）が存在することは、網膜色素変性症を罹患する人に典型的である。また、網膜色素変性症の患者は、頭痛、四肢の痺れ又はうずき（tingling）、光フラッシュ（light flashes）および／又は視覚的変化などの多様な症状も示すが、それらに限定されない。例えば、Heckenlively et al., Am J. Ophthalmol. 105（5）: 504−511 （1988）を参照すること。
【００３１】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、緑内障を治療又は予防するべく、対象へ投与される。緑内障は、眼内の圧力の増加を特徴とする遺伝的疾患であり、視野の減少を引き起こす。緑内障は、外傷、手術、および他の構造的奇形（structural malformations）等の個体に既に存在する種々の眼科疾患から生じ得る。緑内障は、如何なる年齢においても生じ得るが、しばしば高齢者において進行し、失明（blindness）を引き起こす。緑内障患者は、典型的には２１ｍｍＨｇを超える眼内圧力を有する。しかしながら、緑内障性の変調（glaucomatous alterations）が視野および視神経乳頭において発見される正常眼圧緑内障は、かかる眼内圧力の増大、すなわち、２１ｍｍＨｇを超える眼内圧力を伴わずに生じ得る。緑内障の症状としては、視覚のぼけ（blurred vision）、激しい眼痛、頭痛、光の周囲に光輪（haloes）が見えること、 吐き気、および/又は嘔吐が挙げられるが、それらに限定されない。
【００３２】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、黄斑変性症を治療又は予防すべく、対象に投与される。黄斑変性症は、典型的には加齢による疾患である。黄斑変性症の一般的な範疇としては、湿性の、乾燥性の、および加齢と関連性のない黄斑変性症が挙げられる。乾燥性の黄斑変性症は、全ケースの約８０〜９０パーセントの割合を占め、萎縮性の、非滲出性の、又はドルーゼン性黄斑変性症（drusenoid macular degeneration）としても知られている。乾燥性の黄斑変性症に伴って、ドルーゼン（drusen）が、通常、網膜色素上皮組織の真下に蓄積する。ドルーゼンが黄斑において光受容体の機能を妨げるときに、続いて失明が起こる。乾燥性の黄斑形成症（dry macular generation）の症状としては、乱視（distorted vision）、中心視野の歪み（center vision distortion）、明暗の歪み（light or dark distortion）、および／又は色覚の変調などが挙げられるが、それらに限定されない。乾燥性の黄斑変性症は、緩やかな失明を引き起こし得る。
【００３３】
湿性の黄斑変性症は、血管新生、網膜下血管新生、滲出性、又は円盤状の変性としても知られている。湿性の黄斑変性症に伴って、異常な血管が黄斑の真下に成長する。血管が、黄斑へ体液を漏入させ、光受容体細胞を損傷させる。湿性黄斑変性症は、急速に進行し、中心視野に重度の損傷を与え得る。湿性および乾燥性の黄斑変性症は、同じ症状を有する。しかしながら、加齢と関連性のない黄斑変性症は、まれであり、遺伝、糖尿病、栄養不良、損傷、感染、又は他の要因に関連し得る。また、加齢と関連性のない黄斑変性症の症状としては、乱視、中心視野の歪み、明暗の歪み、および／又は色覚の変調などが挙げられるが、それらに限定されない。
【００３４】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤が、脈絡叢血管新生を治療又は予防すべく、対象に投与される。脈絡叢血管新生（ＣＮＶ）は、目の脈絡膜層（choroid layer）における新たな血管の発達を特徴とする疾患である。新たに形成された血管は、脈絡膜においてブルッフ膜を通って成長し、網膜下腔に進入する。ＣＮＶは、視野障害又は完全な失明を引き起こし得る。ＣＮＶの症状としては、病気に冒された目の視野のちらつき、点滅、もしくは灰点（gray spots）、視覚のぼけ（blurred vision）、乱視、および/又は失明が挙げられるが、それらに限定されない。
【００３５】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、網膜変性症を治療又は予防すべく、対象に投与される。網膜変性症は、網膜の破壊（break-down of the retina）に関する遺伝的疾患である。網膜組織は、動脈又は静脈の閉塞、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、および/又は後水晶体線維形成（retrolental fibroplasia）等の種々の理由のために劣化し得る。網膜の劣化としては、一般的には網膜分離症、格子様変性（lattic degeneration）などが挙げられるが、進行性黄斑変性症に関連している。網膜劣化の症状としては、視覚障害（impaired vision）、失明、夜盲症（night blindness）、視野狭窄、周辺視野の喪失、網膜剥離、および/又は光過敏症を含む。
【００３６】
一の実施態様では、βカテニン阻害剤は、酸素誘発性網膜症を治療又は予防するべく、対象に投与される。酸素誘発性網膜症（OIR）は、微小血管の変性を特徴とする疾患である。ＯＩＲは、未熟児網膜症を研究するための確立されたモデルである。ＯＩＲは、異常な血管新生に至る血管細胞の損傷と関係がある。微小血管の変性は、ＯＩＲと関係がある物理的変化の一因となる虚血を引き起こす。また、内皮細胞が過酸化損傷を受けやすいＯＩＲの血管閉塞において酸化的ストレスも重要な役割を果たす。しかしながら、周皮細胞、平滑筋細胞、および血管周囲の星状細胞（perivascular astrocytes）は、概ね過酸化損傷に抵抗性である。例えば、Beauchamp et al., Role of thromboxane in retinal microvascular degeneration in oxygen-induced retinopathy, J Appl Physiol. 90: 2279−2288 （2001）を参照すること。未熟児網膜症などのＯＩＲは、一般的には身体に症状を引き起こさない。しかしながら、異常な眼球運動、内斜視（crossed eyes）、重度の近視、および/又は白色瞳孔が、ＯＩＲ又は未熟児網膜症の兆候となり得る。
【００３７】
一の態様では、本発明は、眼疾患の１以上の兆候又はマーカーを調整するアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤を対象に投与することによって対象の眼疾患を予防する方法を提供する。眼疾患のリスクのある対象は、例えば、診断のもしくは予後の如何なる分析又はその組み合わせによって識別し得る。予防薬の適用において、アルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の医薬組成物又は薬剤は、病気もしくは疾患の疑いのある、又はそうでなければ病気もしくは疾患のリスクのある対象に、疾患の進行中にみられる生化学的、組織学的および／又は行動的な疾患の症状、その合併症および中間的な病理学的表現型（pathological phenotypes）などの、疾患のリスクを除去又は減少させ、重症度を軽減させ、あるいは疾患の発生を遅らせるのに十分な量が投与される。βカテニン阻害剤の投与は、疾患又は障害が予防され、そうでなければその進行を遅らせるように、その異常（aberrancy）に特有の症状が現れる前に行われ得る。
【００３８】
本明細書中に記載された化合物の有効量を哺乳動物、特にヒトに提供するために、如何なる適切な投与ルートも用いられ得る。例えば、経口、直腸、局所、非経口、眼、肺領域、鼻等のルートが用いられ得る。剤形は、錠剤、トローチ、分散剤（dispersions）、懸濁剤、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、噴霧器（aerosol）等が挙げられる。好ましくは、本明細書中に記載された化合物は経口で投与される。
【００３９】
使用された活性成分の有効量は、使用された特定の化合物、投与方法、治療される疾患および治療される疾患の重症度に応じて変化し得る。上記用量は、当業者によって容易に確認され得る。
【００４０】
本明細書中に記載された化合物の治療に適応される眼疾患および眼病を治療又は抑制するときには、本明細書中に記載された化合物が動物体重１キログラム当たり約０．１ミリグラム〜約１００ミリグラムの1日投与量で投与された場合、好ましくは、１日に１度、又は１日に２〜６回に分割した用量において、又は徐放性製剤において与えられた場合に、おおむね満足な結果が得られる。大部分の大型哺乳動物には、毎日の合計投薬量は約１．０ミリグラム〜約１０００ミリグラムである。７０ｋｇの成人の場合、毎日の合計投薬量は、概ね約１ミリグラム〜約５００ミリグラムだろう。特に強力な化合物では、成人のための用量が０．１ｍｇにまで減少し得る。いくつかの場合には、毎日の投薬量が１グラムにまで多くなり得る。投薬計画は、最適な治療効果を提供すべく、この範囲内又はこの範囲外においても調整され得る。
【００４１】
経口投与は、通常、錠剤又はカプセルを用いてなされるだろう。錠剤およびカプセルにおける用量の例は、０．１ｍｇ、０．２５ ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、および７５０ｍｇである。他の経口剤形も、同一又は同様の用量を有し得る。
【００４２】
また、本明細書中に記載された化合物および製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物が、本明細書中に記載される。本明細書中に記載された医薬組成物は、製薬上許容し得る担体、および所望により他の治療成分とともに、活性成分として、本明細書中に記載された化合物又は製薬上許容され得る塩を含む。また、プロドラッグが投与される場合には、医薬組成物は、プロドラッグ、又はその製薬上許容し得る塩を含み得る。
【００４３】
如何なる既定の場合においても最も適切なルートは、治療される疾患の特性および重症度および活性成分の特性によって決まるが、組成物は、経口投与、直腸投与、局所投与、非経口投与（皮下用、筋肉内用、および静脈用など）、眼投与（眼科用）、肺領域投与（点鼻もしくはバッカル吸入（buccal inhalation））、又は点鼻投与に適し得る。それらは便宜上、単位剤形において提示され、薬学分野において周知の方法によって調製され得る。
【００４４】
実用的な用途において本明細書中に記載された化合物は、従来の医薬品配合技術に従って、活性成分として密な混合物（intimate admixture）内において製薬上の担体と併用され得る。担体は、例えば、経口又は非経口（静脈内など）等の投与のために望ましい製剤の形態に応じて、多岐にわたる形態をとり得る。経口用剤形としての組成物の調製では、如何なる通常の製薬上の溶剤（pharmaceutical media）も、使用し得、例えば、懸濁剤、エリキシル剤および溶液などの経口液体製剤の場合には、例えば、水、グリコール、油、アルコール類、香味料、保存料、着色剤等が使用し得、例えば、粉末、硬カプセルおよびソフトカプセル、並びに錠剤等の経口固形製剤の場合には、でんぷん、砂糖、結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤等の担体が使用し得、液体製剤よりも、経口固形製剤が好ましい。
【００４５】
投与の容易さのため、固形の医薬担体が使用される場合には、錠剤およびカプセルが最も都合のよい経口の用量単位剤形に相当する。必要に応じて、錠剤は、標準的な水性（aqueous）又は非水性（nonaqueous）の技術でコーティングされ得る。上記組成物および製剤は、少なくとも０．１パーセントの活性化合物を含む必要がある。これらの組成物における活性化合物の割合は、言うまでもなく、変化し得、便宜上そのユニットの約２重量パーセント〜約６０重量パーセントであり得る。上記治療に有用な組成物における活性化合物の量は、有効量が得られる程度である。また、活性化合物は、例えば、液滴（liquid drops）又は噴霧剤として鼻腔内に投与され得る。
【００４６】
また、錠剤、丸薬（pills）、カプセル等は、トラガントガム、アカシア、コーンスターチ、又はゼラチン等の結合剤、第二リン酸カルシウム等のビヒクル、コーンスターチ、馬鈴薯デンプン、アルギン酸等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、およびスクロース、ラクトース又はサッカリン等の甘味剤を含み得る。用量単位形態がカプセル剤の場合、上記類型の原料に加えて、脂肪油等の液体担体を含み得る。
【００４７】
コーティングとして、又は用量単位の物理的形状を修飾するべく、種々の他の原料が提示され得る。例えば、錠剤は、シェラック、砂糖又はその両方でコーティングされ得る。シロップ剤又はエリキシル剤は、活性成分に加えて、甘味剤としてのスクロース、保存料としてのメチルパラベンおよびプロピルパラベン、色素およびサクランボ又はオレンジフレーバー等の香料を含み得る。
【００４８】
眼科適用では、治療化合物は、目における使用に適した溶液、懸濁剤、および軟膏に製剤化される。眼科用製剤は、一般的に、Mitra （ed.）, Ophthalmic Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y. （1993） およびHavener, W. H., Ocular Pharmacology, C.V. Mosby Co., St. Louis （1983）を参照すること。眼科用の医薬組成物は、溶液、懸濁剤、軟膏、クリームの形態において、又は固形の挿入物として目への局所性投与のために適合し得る。単回投与のために、０．１ｎｇ〜５０００μｇ、１ｎｇ〜５００μｇ、又は１０ｎｇ〜１００μｇの間の芳香族カチオンペプチド（aromatic-cationic peptides）が、ヒトの目に用いられ得る。
【００４９】
眼科用製剤は、例えば、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、メチルパラベンおよびプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコールもしくはフェニルエタノール等の使用時に無害な抗菌成分等の非毒性補助物質、塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム又はグルコン酸バッファー等の緩衝成分、およびソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート（polyoxyethylene sorbitan monopalmitylate）、エチレンジアミンテトラ酢酸等の他の標準的な成分等を含み得る。
【００５０】
眼科用溶液又は懸濁剤は、目のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の許容し得る濃度を維持するべく、必要とされる度に投与され得る。哺乳動物の目への投与は、毎日１回又は２回であり得る。
【００５１】
また、本明細書中に記載された化合物は、非経口的にも投与され得る。これらの活性化合物の溶液又は懸濁剤は、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリソルベート８０、中鎖および長鎖脂肪酸のモノおよびジグリセリド等の界面活性剤又は界面活性剤の混合液と水中において適切に混合されて調製され得る。また、分散剤は、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびその油中混合物において調製され得る。通常の貯蔵および使用条件下においてこれらの製剤は、微生物の増殖を妨げるための防腐剤を含む。
【００５２】
注射用途に適した医薬品形態としては、無菌の水溶液又は分散剤、および無菌の注射可能な溶液もしくは分散剤を用時調製するための無菌の粉末が挙げられる。全てのケースにおいて、その形態は、無菌であり、容易に注射が可能である程度に流動性がある必要がある。製造および貯蔵条件において安定であり、細菌および真菌等の微生物の混入作用に対して保護される必要がある。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液剤ポリエチレングリコール）、それらの適切な混合物、および植物油を含有する溶剤又は分散媒であり得る。
【００５３】
本発明の開示は、さらに下記の限定されない実施例によって説明される。
【実施例】
【００５４】
実施例１．ＰＶＲ調査
本調査の目的は、網膜剥離に続いて起こる増殖性硝子体網膜症（ＰＶＲ）のラットモデルにおいて化合物Ａ、アルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物の抗線維化効果（anti-fibrotic efficacy）を評価することであった。化合物Ａは、４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェートである。
【００５５】
この動物モデルにおける明確に定義された正常の網膜剥離の結果は、網膜のグリア細胞（一次ミュラー細胞（primarily Muller cells））の過剰増殖、免疫細胞の増加、およびグリア性瘢痕（glial scars）の形成である。有効な治療が行われれば、グリア性瘢痕が減少するということになる。
【００５６】
網膜剥離は、１６匹のロングエバンスラットの右目の網膜下腔へヒーロン（Ｈｅａｌｏｎ）の希釈溶液（０．２５％）を注入することによって引き起こされた。８匹の動物において網膜剥離手術後直ちに５マイクロリットルの２０ｍｇ／ｍｌの化合物Ａが硝子体内に注入された。他の８匹の動物は、硝子体内にコントロールとしてビヒクルを注射された。左目は、実験に使われていないコントロールとして扱われた。剥離後７日間、網膜を放置したところ、網膜においてひだが形成された。網膜剥離後７日目に全動物がＣＯ２を用いて安楽死させられた。
【００５７】
安楽死後に、網膜は４％パラホルムアルデヒト中において２４時間固定された。約３ｍｍ四方の３つの網膜部位が、それぞれ剥離された網膜とコントロールの網膜との内側からサンプルとして採取された。網膜は、アガロースに埋め込まれ、ビブラトームを用いて１００ミクロンの厚みに処理された。切片は、中間径フィラメントタンパク質（ビメンチン）および増殖細胞に対する抗体（phosphohistone H3）を用いて免疫標識された。また、免疫細胞（isolectin B4）に対するマーカーおよび核染色剤（Hoescht）も使用された。全４プローブが同じ切片に加えられた（すなわち、４倍標識）。
【００５８】
切片は、オリンパスＦＶ１０００共焦点顕微鏡を用いて撮像された。デジタル画像が取得され、１）網膜下のグリア性瘢痕の数およびサイズ、２）分裂中の細胞の数と、例えば、免疫又はグリア起源等の細胞タイプ、３）ミクログリアが「活性化」されているか否か、および４）マクロファージが存在するか否か、を決定するために用いられた。
【００５９】
データは、両側Ｔ検定を用いて分析された。０．０５未満のＰ値の平均差が、有意であると判断された。
【００６０】
網膜剥離部位に存在する分裂中の免疫細胞の数と、分裂中のグリア細胞（星状細胞およびミュラー細胞）の数とを決定するべく、特定の組織染色が本調査において利用された。この分析結果は、図１Ａ〜１Ｄにまとめられる。実験に使われていない網膜（データは図示されていない）と比較した場合、網膜剥離後に分裂中の免疫細胞が増加した。化合物Ａ処置は、この免疫細胞応答に如何なる効果も及ぼさなかった（図１Ａ）。網膜剥離は、典型的には、分裂中のグリア細胞、ミュラー細胞、および星状細胞の数を増加させる。この増加量は、化合物Ａ処置眼球では大幅に減少した（図１Ｂ〜１Ｄ）。ミュラー細胞数／ｍｍは、化合物Ａ処理によって有意に影響を受けた（図１Ｃ）。
【００６１】
増殖中のミュラー細胞におけるこの減少の生物学的重要性は、グリア性瘢痕形成に関する化合物Ａの効果において更に示される（図２Ａ〜２Ｂ）。瘢痕（scar）の頻度は、各網膜の顕著な瘢痕の合計数を調査された合計面積で割ることによって算出された。平均的な瘢痕サイズ／長さは、既定の網膜の瘢痕の長さの合計をその網膜において計数された瘢痕の合計数で割ることによって算出された。化合物Ａは、グリア瘢痕形成の頻度を有意に減少させ（図２Ａ）、その結果、平均的な瘢痕サイズも有意に減少した（図２Ｂ）。
【００６２】
免疫組織化学。グリア瘢痕、細胞増殖、および免疫細胞浸潤（immune cell infiltrates）のための動物定性評価（４匹は生理食塩水、４匹は化合物Ａで処置）が行われた。ラット５〜８（ＰＶＲ＋生理食塩水）および１３〜１６（ＰＶＲ＋化合物Ａ）からの３つの網膜部位が、目から切除され、薄片にされ、また、抗体で標識された（それぞれの目から２５以下の切片が調査された）。
【００６３】
網膜下のグリオーシス（又は瘢痕化）は、網膜下腔へ延びるビメンチン標識ミュラー細胞突起が存在することに特徴づけられ、生理食塩水処理された目において観察されたが（図３Ａ〜３Ｂ）、グリア瘢痕は、化合物Ａ処置されたどの被験動物においても顕著でなかった（図３Ｃ〜３Ｄ）。
【００６４】
従って、化合物Ａの投与は、グリア瘢痕を治療又は予防する。
【００６５】
実施例２.ＣＮＶ調査
本調査の目的は、レーザ−により誘導された脈絡叢血管新生のラットモデルにおいて化合物Ａ、すなわちアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物と、化合物Ｃ、すなわち化合物Ａの活性代謝物との抗血管新生／血管攪乱（vascular disrupting）効果を評価することであった。化合物Ａは、４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェートである。化合物Ｃは、（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミドである。
【００６６】
化合物Ａに関し、４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェートの８０ｍｇ／ｍｌ溶液が無菌のＰＢＳで作製された。この溶液は、さらに１：４に希釈されて２０ｍｇ／ｍｌ溶液が作製された。２０ｍｇ／ｍｌ溶液は、１：４に希釈されて５ｍｇ／ｍｌ溶液が作製された。
【００６７】
化合物Ｃに関し、０．５％ＮａＣＭＣおよび０．５％ポリソルベート８０（ツイーン８０）含有溶液は、ＵＳＰグレード水で作製された。２０ｍｇの（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミドは、（ピペット置換を用いて）ガラスバイアル中において１ｍｌのＵＳＰグレードのＰＥＧ４００に溶解された。必要であれば、わずかな加熱および超音波処理／ボルテックス処理が行われた。２０ｍｇ／ｍｌの化合物Ｃ溶液を含むガラスバイアルは、磁気攪拌プレート上に置かれ、等しい容積（１ｍｌ）のＣＭＣ／ツイーン８０溶液が、化合物Ｃ／ＰＥＧ４００溶液に（攪拌棒を用いた連続的な混合の間、ゆっくり滴下させる方法において）加えられた。結果として得られた製剤は、１０ｍｇ／ｍｌの化合物Ｃ、５０％ＰＥＧ４００、０．２５％ＮａＣＭＣ、および０．２５％ツイーン８０を含有する透明溶液であった。
【００６８】
ＣＮＶ損傷を生じさせるためのレーザの適用。動物は、１％サイクロジル溶液を用いて瞳孔を拡張させ、光線から保護した。観察可能に拡張した後、動物は、ケタミン／キシラジンを用いて鎮静させられた。鎮静させられた動物の眼底が、マイクロンIII小型動物眼底鏡（Ｐｈｏｅｎｉｘリサーチ）を用いて観察および録画された。レーザ処理が、マイクロンIIIカスタムレーザの取り付け具を介して接続されたサーマルレーザを用いて行われた。目１つ当たり合計３つの損傷が、５２０ｎｍの波長を用いて付された。
【００６９】
レーザが首尾よくブルッフ膜を通して気泡を生成したことを確認すべく、眼底画像が記録された。全てのレーザスポットの５〜１０％が、定量化可能なＣＮＶを全く発症させないと予測された。
【００７０】
硝子体内注射。動物は、ケタミン／キシラジンを用いて麻酔され、その後、テスト化合物が、ハミルトン注射器および３２ゲージ針を用いて、毛様体扁平部を通して硝子体液へ５μｌの容積を注射された。注射後に、動物は、両目に等量の局所用抗生物質軟膏剤を与えられた。レーザ照射又は硝子体内注射後に出血（hemorrhage）の兆候を示すどの目も分析から除外された。
【００７１】
フルオレセイン血管造影法。動物は、ケタミン／キシラジンを用いて麻酔され、その後、体重１グラム当たり１μｌの割合の１０％フルオレセインナトリウムのＩＰ注射を受けた。その後、眼底画像は、マイクロンIIIおよび４８８ｎｍの標的波長の励磁／障壁フィルターを用いて８ビットＴＩＦＦファイルとして記録された。基準のカラー眼底写真についても、目ごとに記録された。
【００７２】
画像化および損傷の定量化。全てのＴＩＦＦ画像は、コンピュータ制御画像分析ソフトウェアを用いて定量化された（ImageJ, NIH, USA）。その後、ピクセルの面積を定量するべく、損傷が個別にフリーハンドでトレースされ、また、カラー眼底写真が損傷位置の基準として使用された。損傷中心の駆血（avascularization）部位は、算出される面積から除外された。出血又は２つの損傷の重複が生じた場合には、これらの損傷は分析から除外された。
【００７３】
統計解析。有意性のテューキーの事後検定とともに分散（variance）の一方向分析（ANOVA）を使用するグラフパッドプリズムソフトウェア（version 5）を用いて統計解析が行われた。ｐ値が０．０５未満の変化のみが統計的に有意であると判断された。
【００７４】
動物。レーザー処理時に生後８週間の雌のブラウンノルウェーラット。
【００７５】
結果。ビヒクル（PBS）、抗VEGF抗体Ab（陽性コントロール）、化合物Ａ（３つの異なる投与量；２５μｇ、１００μｇおよび４００μｇ）、又は化合物Ｃ（50 μg）の２つの両側の硝子体内投与の効果（３日目および１０日目）がレーザ−によって誘導された脈絡叢血管新生（CNV）のラットモデルにおいて評価された。１５および２２日目に（レーザー処理後２および３週間）、これらのラットにおいてＣＮＶ損傷のサイズ（面積）を定量するべく、眼底の撮影およびフルオレセイン血管造影法が行われた。平均的な損傷のサイズは、１５日目に全ての処置において小さくなり（ビヒクルコントロールと比較した）、また、抗ＶＥＧＦ抗体（陽性コントロール；ｐ＜０．００１）、５０μｇ化合物Ｃ（ｐ＜０．０５）、又は４００μｇ化合物Ａ（ｐ＜０.０１）を投与された処置グループでは統計的に有意だった（図４Ａ）。２２日目には、抗ＶＥＧＦ（ｐ＜０．００１）および１００μｇ化合物Ａ（ｐ＜０.０１）のみが有意性を実証した（図４Ｂ）。
【００７６】
抗血管新生又は血管撹乱活性（vascular disruption actrivity）の観点においてテストされた製剤（化合物Ａおよび化合物Ｃ）は、いずれも薬効を有することがＣＮＶのラットモデルにおいて実証された。化合物Ａでは、多い方の２つのテスト投与量（１００μｇ又は４００μｇ）のときのみ、統計的有意性を実証された投与効果があった。化合物Ｃ（５０μｇ）についても損傷のサイズに有意な効果があった。
【００７７】
従って、化合物Ａおよび化合物Ｃは、血管新生の治療および予防に有効である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【国際調査報告】
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