(57)【要約】  複数の治療ナノ粒子と水性懸濁媒質とを含む治療ナノ粒子懸濁液の有効量を、固形腫瘍癌の治療を必要とする患者に、静脈内投与することを含む固形腫瘍癌を治療する方法であって、前記複数の治療ナノ粒子は、ドセタキセル、１６ｋＤａのＭｎを有するポリ乳酸及び５ｋＤａのＭｎを有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ乳酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、２０ｋＤａのＭｎを有するポリ乳酸及びペンチレン末端基を有し５ｋＤａのＭｎを有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ乳酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー及び界面活性剤を含み、前記懸濁液を、前記患者に１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回又は４週間に１回投与する方法。
2016523915.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数の治療ナノ粒子と水性懸濁媒質とを含む治療ナノ粒子懸濁液の有効量を、固形腫瘍癌の治療を必要とする患者に、静脈内投与することを含む固形腫瘍癌を治療する方法であって、
前記複数の治療ナノ粒子は、
ドセタキセル、
約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー及び
界面活性剤を含み、
前記懸濁液を、前記患者に１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回又は４週間に１回投与する方法。
【請求項２】
約３５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有するドセタキセルナノ粒子懸濁液を、固形腫瘍癌の治療を必要とする患者に、一定期間にわたって連続投与し、該連続投与後に一定の休薬期間を置くことを含む固形腫瘍癌を治療する方法であって、
ドセタキセルナノ粒子懸濁液は、複数の治療ナノ粒子と水性懸濁媒質とを含み、
前記複数の治療ナノ粒子は、
ドセタキセル、
約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー及び
界面活性剤を含む方法。
【請求項３】
該連続投与を少なくとも１回繰り返す請求項２に記載の方法。
【請求項４】
該ドセタキセルナノ粒子懸濁液を、週１回、３週間にわたって投与し、それに続いて７日間の休薬期間が置くことを含む請求項２又は３に記載の方法。
【請求項５】
約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有するドセタキセルナノ粒子懸濁液を、週１回、３週間にわたって連続投与することを含む請求項２〜４のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６】
ヒト患者における固形腫瘍癌を治療するためのレジメンであって、前記レジメンが、毎月サイクルの治療において、治療ナノ粒子懸濁液を該患者に送達することを含み、前記毎月サイクルが、１週間当たり約３５ｍｇ／ｍ２及び約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有する治療ナノ粒子懸濁液の第１投与量を該サイクルの少なくとも１週間にわたって静脈内投与し、それに続いて治療ナノ粒子懸濁液が投与されない少なくとも１週間を置くことを含み、
前記治療ナノ粒子懸濁液が複数の治療ナノ粒子と水性懸濁媒質とを含み、
前記複数の治療ナノ粒子が、
ドセタキセル、
約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー及び
界面活性剤を含むレジメン。
【請求項７】
該毎月サイクルが、３回の１週用量の投与を含む請求項６に記載のレジメン。
【請求項８】
該治療ナノ粒子懸濁液が、２〜１２サイクルにわたって送達される請求項６に記載のレジメン。
【請求項９】
該毎月サイクルが連続的である請求項６に記載のレジメン。
【請求項１０】
該固形腫瘍癌が、難治性又は再発性の癌である請求項１〜９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１】
該固形腫瘍癌が、乳癌、前立腺癌、腺癌、非小細胞肺癌又は卵巣癌の１つ又はそれ以上である請求項１〜１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１２】
該懸濁液が、毎週投与される請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
該懸濁液が、約１５ｍｇ／ｍ２〜５０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上又は約３０ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上のドセタキセルの用量で投与される請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
該懸濁液が、週１回、３週間にわたって投与され、１週間の無処置がそれに続く請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記懸濁液が、週１回、少なくとも約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルの用量で投与される請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
投与が、３つの段階的増加用量レベルを含み、各用量レベルが、該患者に、週１回、少なくとも３週間にわたって投与される請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
治療ナノ粒子懸濁液の投与レジメンの投与用のキットであって、
該キットが、
約３０ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は３５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２又は約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含む治療ナノ粒子懸濁液の投与量を、週１回、最初の３週間にわたって患者に投与し、
第４週において、治療ナノ粒子懸濁液を患者に投与せず、
任意に、該投与レジメンを繰り返す、投与レジメンにしたがって治療ナノ粒子懸濁液を投与するのに充分量の治療ナノ粒子懸濁液と、
任意に、該投与レジメンにしたがって治療ナノ粒子懸濁液を投与するための説明書を含み、
前記治療ナノ粒子懸濁液が、複数の治療ナノ粒子と、水性懸濁媒質とを含み、
前記複数の治療ナノ粒子が、
ドセタキセル、
約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー及び
界面活性剤を含むキット。
【請求項１８】
治療ナノ粒子懸濁液であって、治療ドセタキセルナノ粒子及び水性懸濁媒質を含み、該懸濁液中のドセタキセル濃度が約４ｍｇ／ｍＬ〜約６ｍｇ／ｍＬであり、該治療ドセタキセルナノ粒子が
ドセタキセル、
約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー及び
界面活性剤
を含む治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項１９】
前記懸濁液が、
約４．２５〜約５．７５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル、
約４６ｍｇ／ｍＬのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、
約１．２ｍｇ／ｍＬの標的化ポリマー及び
約３ｍｇ／ｍＬの界面活性剤を含む請求項１８に記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２０】
前記界面活性剤がポリソルベート８０である請求項１８又は１９に記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２１】
前記水性懸濁媒質がスクロースを含む請求項１８〜２０のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２２】
前記水性懸濁媒質が、約３２重量パーセントのスクロース及び約６８重量パーセントの水である請求項１８〜２１のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２３】
前記懸濁液が約５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル濃度を有する請求項１８〜２２のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２４】
前記懸濁液が約２５パーセント未満の遊離ドセタキセル濃度を有する請求項１８〜２３のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子懸濁液。
【請求項２５】
前記標的化ポリマーが下記式によって表されるポリマーである請求項１８〜２４のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子懸濁液。
2016523915.tif 000027
［式中、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
【請求項２６】
約９〜１０重量パーセントのドセタキセル、
約８０〜約９０重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーであって、前記ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー及び
約２〜約３重量パーセントの下記式で示される標的化部分を含む治療ナノ粒子。
2016523915.tif 000028
［式中、ｎは約２００〜約３５０であり、ｍは約１１０〜約１２０である］。
【請求項２７】
ｎが約２８０であり、ｍが約１１５である請求項２６に記載の治療ナノ粒子。
【請求項２８】
約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの直径を有する請求項２６又は２７に記載の治療ナノ粒子。
【請求項２９】
約１００ｎｍの直径を有する請求項２６〜２８のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子。
【請求項３０】
該ナノ粒子が約５〜約６重量パーセントのポリソルベート８０をさらに含む請求項２６〜２９のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子。
【請求項３１】
約８３重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーを含む請求項２６〜３０のいずれか１つに記載の治療ナノ粒子。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１３年６月２８日に出願された米国仮特許出願第６１／８４０，９５０号及び２０１３年８月２９日に出願された米国仮特許出願第６１／８７１，４５３号に対する利益及び優先権を主張し、各出願は全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
種々の癌が医学文献に詳しく記載されている。癌の例は下記を包含する：膀胱癌、脳癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌（大腸癌を含む）、食道癌、頭頸部癌、前立腺癌、肝臓癌、肺癌（小細胞癌及び非小細胞癌の両方）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎臓癌、肉腫（骨肉種を含む）、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌及び血液癌。癌の発生率は、母集団の年齢と共に、及び新しい癌の発生と共に、増加し続けている。しかし、癌治療の選択肢は限られている。例えば、特に、１回又は複数回の従来の化学療法が失敗した場合、癌の治療選択肢はわずかしかない。
【０００３】
ほとんどすべての化学療法薬は毒性であり、化学療法は、激しい吐き気、骨髄抑制及び免疫抑制を含む、重大な、かつ多くの場合危険な副作用を生じる。さらに、化学療法薬の組合せを投与した場合でも、多くの腫瘍細胞は、化学療法薬に耐性であるか又は耐性を生じる。実際に、治療プロトコルにおいて使用された特定の化学療法薬に耐性の細胞は、他の薬剤（それらの薬剤が、特定の治療に使用された薬剤と異なる機序によって作用する場合でさえ）に耐性であることが判明することが多い。この現象は、多面的薬剤耐性又は多剤耐性と呼ばれる。薬剤耐性により、多くの癌が、標準化学療法治療プロトコルに不応性であることが判明している。
【０００４】
活性薬剤を含み、かつ例えば特定の組織型又は細胞型を標的とするか又は特定の疾患組織を標的とするが正常組織は標的としない治療法は、標的としない体組織における薬剤の量を減少させることができ、より有効かつより低い毒性であることができる。これは、細胞毒性用量の薬剤が周囲非癌細胞を殺さずに癌細胞に送達されることが望ましい癌などの状態を治療する場合に特に重要である。効果的な薬剤標的化は、抗癌療法に一般的な、望ましくない、時には致死的な副作用を、減少させることができる。さらに、そのような治療法は、他の方法では到達できないある一定の組織に薬剤が到達することを可能にする。
【０００５】
制御放出及び／又は標的化療法を与える治療法は、有効量の薬剤を送達することもできなければならず、これは他のナノ粒子送達システムにおける公知の限界である。例えば、有利な送達特性を有するのに充分に小さいナノ粒子サイズを維持しつつ、適切な量の薬剤を各ナノ粒子と会合させるナノ粒子システムを製造することが課題となり得る。
【０００６】
したがって、治療レベルの薬剤、例えばより高いレベルの薬剤を、癌のような疾患を治療するために送達することができ、さらに、特に有効治療に必要なより高いレベルが投与された場合に、患者副作用も減少させる、ナノ粒子治療法及びそのようなナノ粒子の製造法が必要とされている。癌及び他の疾患及び状態、特に標準治療（例えば、手術、放射線療法、化学療法及びホルモン療法）に不応性である疾患に関して、従来療法に関連した毒性及び／又は副作用を減少させるか又は回避しつつ、治療、予防及び管理する安全かつ有効な方法が極めて必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
本開示は、概して、ドセタキセルを含有するポリマーナノ粒子の懸濁液及び組成物、ならびに開示されている組成物を使用して治療を必要とする患者において難治性癌又は薬剤耐性癌を包含する種々の癌を治療する方法に関する。
【０００８】
一実施態様において、癌又は難治性癌の治療を必要とする患者において、該癌又は難治性癌を治療する方法が提供される。該方法は、有効量の治療ナノ粒子懸濁液を患者に静脈内投与することを含み、該治療ナノ粒子懸濁液は、下記物質：
・複数の治療ナノ粒子であって、
・ドセタキセル；
・約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；
・標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー；及び
・界面活性剤；
を含む複数の治療ナノ粒子；及び
・水性懸濁媒質；
を含み、該治療ナノ粒子懸濁液は、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回又は４週間に１回投与される。
【０００９】
意図する方法は、いくつかの実施形態において、患者に開示懸濁液を１週間に１回、例えば、約１５ｍｇ／ｍ２〜５０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上、又は約３０ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上の用量（例えば、週用量）のドセタキセルを投与することを含む。
【００１０】
特定の実施形態において、ドセタキセルの累積最大耐性用量は、開示懸濁液が１週間に１回投与される場合、該懸濁液が３週間に１回投与される場合より多い。例えば、ある実施形態において、３週間に１回投与される場合のドセタキセルの累積最大耐性用量は約６０ｍｇ／ｍ２である。他の実施形態において、１週間に１回投与される場合のドセタキセルの累積最大耐性用量は、約１２０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上又は約４０ｍｇ／ｍ２ｘ３もしくはそれ以上である。
【００１１】
ある実施形態において、意図する懸濁液が３週間にわたって１週間に１回投与され、それに続く１週間は治療を行わない。例えば、本明細書において、固形腫瘍癌の治療を必要とする患者において該固形腫瘍癌を治療する方法が提示され、該方法は、患者に約３５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセル（例えば、約４０ｍｇ／ｍ２）を含有するドセタキセルナノ粒子懸濁液を一定期間にわたって連続投与し、該連続投与に続いて休薬期間を置くことを含み、該ドセタキセルナノ粒子懸濁液は下記を含む：複数の治療ナノ粒子であって、下記物質：ドセタキセル；約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー；及び界面活性剤；を含む複数の治療ナノ粒子；及び水性懸濁媒質。例えば、該連続投与は少なくとも１回繰り返すことができる。いくつかの実施形態において、ドセタキセルナノ粒子懸濁液を３週間にわたって週１回投与し（例えば、約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有するドセタキセルナノ粒子懸濁液を３週間にわたり週１回連続投与）、それに続いて７日間の休薬期間を置くことができる。
【００１２】
本明細書において、ヒト患者において固形腫瘍癌を治療するためのレジメンが提示され、前記レジメンは、毎月サイクルの治療において患者に治療ナノ粒子懸濁液を送達することを含み、前記毎月サイクルは、該毎月サイクルにおいて少なくとも１週間、１週間につき約３５ｍｇ／ｍ２及び約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有する治療ナノ粒子懸濁液の第１投与量を静脈内投与し、それに続いて少なくとも１週間にわたって治療ナノ粒子懸濁液を投与しないことを含み、該治療ナノ粒子懸濁液は下記を含む：複数の治療ナノ粒子であって、下記物質：ドセタキセル；約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー；及び界面活性剤；を含む複数の治療ナノ粒子；及び水性懸濁媒質。例えば、毎月サイクルは、３回の週用量投与を含む。
【００１３】
ある実施形態において、開示されている方法及び治療ナノ粒子によって治療される癌は、乳癌、前立腺癌、腺癌、非小細胞肺癌又は卵巣癌の少なくとも１種である。
【００１４】
ある実施形態において、意図する懸濁液が約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルの用量で週１回投与される。
【００１５】
ある実施形態において、意図する懸濁液が３週間にわたって週１回投与され、第４週の間は該懸濁液が投与されない。
【００１６】
ある実施形態において、意図する懸濁液での１月サイクルの治療は、３週間にわたる４０ｍｇ／ｍ２での週１回の治療及び１週間の無治療を含む。
【００１７】
ある実施形態において、ドセタキセルの平均週用量は３０ｍｇ／ｍ２である。
【００１８】
他の実施態様において、治療ナノ粒子が提供される。治療ナノ粒子は下記を含む：
・約９〜１０重量パーセントのドセタキセル；
・約８０〜約９０重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーであって、前記ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、約１５〜２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約４〜約６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー；及び
・約２〜約３重量パーセントの下記式で示される標的化部分：
2016523915.tif 000003
［式中、ｎは約２００〜約３５０であり、ｍは約１１０〜約１２０である］。
ある実施形態において、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である。
【００１９】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子は、約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの直径を有する。例えば、ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子は約１００ｎｍの直径を有する。
【００２０】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子は、約５〜約６重量パーセントの界面活性剤をさらに含有する。例えば、ある実施形態において、界面活性剤はポリソルベート８０である。
【００２１】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子は、約８３重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーを有する。
【００２２】
ある実施形態において、意図するナノ粒子のポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーは、約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む。
【００２３】
さらに他の実施態様において、治療ナノ粒子懸濁液が提供される。該治療ナノ粒子懸濁液は、下記を含む：
・複数の治療ナノ粒子であって、
・ドセタキセル；
・約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；
・標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている標的化ポリマー；及び
・界面活性剤；
を含む複数の治療ナノ粒子；及び
・水性懸濁媒質。
そのような開示治療ナノ粒子懸濁液は、下記の濃度を有することができる。
・約４．２５〜約５．７５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル；
・約４６ｍｇ／ｍＬのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；
・約１．２ｍｇ／ｍＬの標的化ポリマー：及び
・約３ｍｇ／ｍＬの界面活性剤。
【００２４】
ある実施形態において、意図する懸濁液中の界面活性剤は、ポリソルベート８０である。
【００２５】
ある実施形態において、意図する懸濁液の水性懸濁媒質はスクロースを含む。例えば、ある実施形態において、水性懸濁媒質は、約３２重量パーセントのスクロース及び約６８重量パーセントの水である。
【００２６】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子懸濁液は、約５ｍｇ／ｍＬの濃度のドセタキセルを含有する。
【００２７】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子懸濁液は、約２５パーセント未満の遊離ドセタキセル濃度を有する。
【００２８】
ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子の標的化ポリマーは、下記式によって示される：
2016523915.tif 000004
［式中、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１Ａ】開示されている標的化ポリマーの例示的合成スキームを示す。
【図１Ｂ】開示されている標的化ポリマーの例示的合成スキームを示す。
【図１Ｃ】開示されている標的化ポリマーの例示的合成スキームを示す。
【図２】開示されているナノ粒子を形成するためのエマルジョン法のフローチャートである。
【図３Ａ】開示されているエマルジョン法のフローダイアグラムを示す。図３Ａは粒子の形成及び硬化（上流処理）を示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは粒子の後処理及び精製（下流処理）を示す。
【図４】ドセタキセル（上のスペクトル）及びポリマーリガンドを有する開示ナノ粒子、及びポリマーリガンドを有さない粒子（下のスペクトル）の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを示す（ＤＭＦ内部標準濃度＝各試料につき３００μＭ）。
【発明の詳細な説明】
【００３０】
本開示は概して、ドセタキセルを含有するポリマーナノ粒子の懸濁液及び組成物ならびに開示組成物を使用して難治性又は薬剤耐性癌を包含する種々の癌を、該癌の治療を必要とする患者において治療する方法に関する。
【００３１】
開示ナノ粒子は、約０．２〜約３５重量パーセント、約３〜約４０重量パーセント、約５〜約１２重量パーセント、約９〜約１１重量パーセント、約９〜約１０重量パーセント又は約９．５重量パーセントの活性物質、例えば抗新生物薬、例えばタキサン系薬剤（例えばドセタキセル）を含有することができる。例えば、無水ドセタキセル［（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリンの５−２０−エポキシ−１，２，４，７，１０，１３−ヘキサヒドロキシタキサ−１１−エン−９−オン  ４−アセテート  ２−ベンゾエートとのＮ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、１３−エステル］は、開示ナノ粒子の一部を形成することができ、白色〜ほぼ白色の粉末であり、実質的に水不溶性であり、メタノール中で１０ｍｇ／ｍＬの濃度において−３７．５°〜−４２．５°の比旋光度を有する。無水ドセタキセルの化学式はＣ４３Ｈ５３ＮＯ１４である。無水ドセタキセルの分子量は８０７．９ｇ／ｍｏｌである。活性物質又は薬剤は、治療薬、例えば抗新生物薬、例えばｍＴｏｒ阻害剤（例えば、シロリムス、テムシロリムス、又はエベロリムス）、ビンカアルカロイド、例えばビンクリスチン、ジテルペン誘導体又はタキサン、例えばパクリタキセル（又はその誘導体、例えば、ＤＨＡ−パクリタキセル又はＰＧ−パクリタキセル）であってよい。
【００３２】
開示ナノ粒子はＰＬＡ−ＰＥＧ及び標的化ポリマーを含有し、該標的化ポリマーは、本明細書に開示されているようなＰＭＳＡリガンドにコンジュゲートした、即ち共有結合したＰＬＡ−ＰＥＧを含み、該ＰＬＡ−ＰＥＧはアルキレン（例えばペンチレン）リンカーを介してＰＥＧによって該リガンドに結合するかもしれない。ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、及びポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドは、本明細書において、一括して「ＰＬＡ」と称される。ある実施形態において、開示ナノ粒子は、約１０〜約９９重量パーセントの生体適合性ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールを含有する。
【００３３】
本明細書に開示されている粒子は、ポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー（ＰＬＡ−ＰＥＧ）、及びポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーを含む標的化ポリマー又は標的化部分を含有する。例えばＰＥＧがリガンドにコンジュゲートしているか又はコンジュゲートしていない場合、いずれかのＰＬＡ−ＰＥＧ部分のＰＥＧ部分は終端されてよく、かつ／又は末端基を有してよいと考えられる。例えば、ＰＥＧは、ヒドロキシル基、メトキシ基もしくは他のアルコキシ基、メチル基もしくは他のアルキル基、アリール基、又はアルキレン基もしくはフェニレン基、例えば、ブチレン基、メチレン基、ペンチレン基で終端するか又は該基を含有することができ、該基は、例えば標的化ポリマーの一部である場合、アミド結合を介してＰＳＭＡ標的化部分に結合することができる。
【００３４】
開示治療ナノ粒子は、標的化部分又は標的化ポリマーを含有することができる。ある実施形態において、低分子量リガンド、例えば低分子量ＰＳＭＡリガンドが、ＰＬＡ−ＰＥＧポリマーにコンジュゲートし、ナノ粒子は、リガンドコンジュゲートポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ−リガンド）と非官能化ポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ）との特定の比率を有する。リガンドコンジュゲートポリマーは、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーであってよく、該ポリ乳酸は、約１５ｋＤａ〜約２５ｋＤａ（例えば、約２０ｋＤａ）の数平均分子量を有し、該ポリ（エチレン）グリコールは、約５ｋＤａの数平均分子量を有しペンチレン末端基を有し、該ペンチレン末端基は、アミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている。
【００３５】
例えば標的化ポリマーを形成するために、ＰＬＡ−ＰＥＧへのコンジュゲートが意図されるリガンドは、下記を包含することができる。
2016523915.tif 000005
【００３６】
例えば、開示ナノ粒子は、下記式によって示される標的化部分を含有することができる。
2016523915.tif 000006
［式中、ｎは約２００〜約３５０であり、ｍは約１０５〜約１２５であるか又はｎは約２５０〜約３００であり、ｍは約１１０〜約１２０であるか又はｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
例えば、下記を含有する治療ナノ粒子が本明細書において提示される：
・約８〜１１重量パーセント又は約９〜１０重量パーセント又は約９〜約１１重量パーセント、例えば約９．５重量パーセントのドセタキセル；
・約８０〜約９０重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー（又は約７５〜約９０重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー又は約８０〜約８７、例えば、約８２、８３、８４又は８５重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー）であって、前記ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが約１５〜２０ｋＤａ（例えば約１６ｋＤａ）の数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約４〜約６ｋＤａ（例えば約５ｋＤａ）の数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー；及び
・標的化部分、例えば、約１〜約３重量パーセント又は約２〜約３重量パーセントの標的化部分であって、下記式で示される標的化部分：
2016523915.tif 000007
［式中、ｎは約２００〜約３５０であり、ｍは約１１０〜約１２０であり、例えば、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
【００３７】
意図される治療ナノ粒子は、約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍ、約８０ｎｍ〜約１２０ｎｍの直径、例えば約１００ｎｍの直径を有することができる。
【００３８】
開示ナノ粒子は、界面活性剤又は他の賦形剤をさらに含有することができ、例えば、約５〜約６重量パーセントの界面活性剤、例えばポリソルベート８０を含有していてもよい。
【００３９】
特定の実施形態において、下記を含有する治療ナノ粒子が提供される：
・約９〜１０重量パーセントのドセタキセル；
・約８３〜約８４重量パーセントのポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマーであって、前記ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ乳酸−ポリエチレングリコールブロックコポリマー；
・約５〜約６重量パーセントの界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；及び
・約２〜約３重量パーセントの標的化部分であって、下記式で示される標的化部分：
2016523915.tif 000008
［式中、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
【００４０】
開示ナノ粒子は、例えば、サッカリドを含有し得る溶液中で、少なくとも約３日間、約４日間又は少なくとも約５日間、室温又は２５℃で、安定であることができる（例えば、実質的に全ての活性物質を保持し得る）。
【００４１】
いくつかの実施形態において、開示ナノ粒子は、薬剤放出速度を増加させ得る脂肪族アルコールを含有していてもよい。例えば、開示ナノ粒子は、Ｃ８−Ｃ３０アルコール、例えば、セチルアルコール、オクタノール、ステアリルアルコール、アラキジルアルコール、ドコソナール又はオクタソナールを含有することができる。
【００４２】
ナノ粒子は制御放出特性を有することができ、例えば、ある量の活性物質を、患者に、例えば患者の特定部位に、長時間にわたって、例えば、１日、１週間又はそれ以上にわたって、送達することができる。いくつかの実施形態において、開示ナノ粒子は、例えば室温及び／又は３７℃でリン酸緩衝液に入れた場合、実質的に即時に（例えば、約１分〜約３０分にわたって）、約２％未満、約５％未満又は約１０％未満の活性物質（例えば、タキサン）を放出する。
【００４３】
本発明の薬学的組成物は、経口及び非経口（例えば、静脈内）経路を包含する当分野で公知の任意の方法によって、患者に投与することができる。本明細書において使用されている「患者」又は「対象」という用語は、ヒトならびに非ヒト（例えば、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類及び魚類を包含する）を意味する。例えば、非ヒトは、哺乳類（例えば、齧歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、霊長動物又はブタ）であってよい。ある実施形態において、非経口経路は消化管に見出される消化酵素との接触を回避するので、非経口経路が好ましい。そのような実施形態によると、本発明組成物は、注射（例えば、静脈内注射、皮下又は筋肉内注射、腹腔内注射）、直腸投与、膣投与、局所投与（例えば、パウダ、クリーム、軟膏又は滴剤による）又は吸入（スプレによる）によって投与することができる。
【００４４】
特定の実施形態において、本明細書に開示されているナノ粒子は、それを必要とする対象に、全身的に、例えばＩＶ注入又は注射によって、投与される。
【００４５】
いくつかの実施形態において、水性組成物中に複数の開示ナノ粒子を含有する治療組成物が提供される。例えば、そのような組成物は、約３０〜約４０重量パーセントのジサッカリド、例えばスクロース、又は例えば約３２重量パーセントのスクロース及び残余の水、例えば約６８重量パーセントの水を含有する媒質中に、開示ナノ粒子を含有することができる。
【００４６】
例えば、下記を含有する治療ナノ粒子懸濁液が本明細書において提示される：
・複数の治療ナノ粒子であって、各ナノ粒子が下記物質：
・ドセタキセル；
・約１５〜２０ｋＤａ又は約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約４〜６ｋＤａ又は約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールブロックコポリマー；
・標的化ポリマーであって、約１５〜約２５ｋＤａ又は約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸、及びペンチレン末端基を有し約４〜６ｋＤａ又は約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含む標的化ポリマーであり、該標的化ポリマーの該ポリエチレングリコールの該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー；及び
・界面活性剤；
を実質的に含有する複数の治療ナノ粒子；及び
・水性懸濁媒質。
【００４７】
標的化ポリマーは、ある実施形態において、下記式で示される：
2016523915.tif 000009
［式中、ｎは約２８０であり、ｍは約１１５である］。
【００４８】
そのような開示治療ナノ粒子懸濁液は、下記濃度の物質を含有することができる。約４．２５〜約５．７５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル；約４０〜５０ｍｇ／ｍＬ又は約４５〜約４７ｍｇ／ｍＬ又は約４６ｍｇ／ｍＬのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールブロックコポリマー；約１〜約２ｍｇ／ｍＬ、又は約１．１〜約１．３又は約１．２ｍｇ／ｍＬの標的化ポリマー：及び約２〜４ｍｇ／ｍＬ又は約３ｍｇ／ｍＬの界面活性剤（例えばポリソルベート８０）。
【００４９】
ある実施形態において、水性懸濁媒質は、スクロース、例えば、約３０〜３５重量パーセント又は約３２重量パーセントのスクロースを含有する。一実施形態において、水性懸濁媒質は、約６８重量パーセントの水を含有する。
【００５０】
開示されている治療ナノ粒子懸濁液は、約４ｍｇ／ｍＬ〜約６ｍｇ／ｍＬ、例えば、約５ｍｇ／ｍＬの濃度のドセタキセルを含有していてもよい。ある実施形態において、意図する治療ナノ粒子懸濁液は、約２０パーセント未満又は約２５パーセント未満の遊離ドセタキセル（例えば、懸濁液のナノ粒子と実質的に会合していないか又は該ナノ粒子で被包されていないドセタキセル）濃度を有することができる。
【００５１】
いくつかの実施形態において、本発明の標的化粒子は、癌を治療し、軽減し、改善し、緩和し、発症を遅らせ、進行を阻止し、重症度を減少させ及び／又は発症を減少させることを必要とする患者又は対象において、それらを行うために使用することができる。いくつかの実施形態において、本発明のナノ粒子又は組成物は、固形腫瘍、例えば、癌及び／又は癌細胞を治療するために使用することができる。ある実施形態において、開示されているナノ粒子及び組成物は、癌治療を必要とする対象において、癌細胞表面上又は腫瘍新生血管（前立腺又は非前立腺固形腫瘍の新生血管を包含する）中にＰＳＭＡが発現しているあらゆる癌を治療するために使用することができる。例えば、ＰＳＭＡ関連適応症は、前立腺癌、乳癌、非小細胞肺癌、大腸癌腫及びグリア芽細胞腫を包含するが、それらに限定されない。対象は、ヒト又は非ヒト動物であることができる。対象の例は、哺乳類、例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ロバ、ウサギ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラット、マウス、モルモット、ハムスタ、霊長動物、ヒト等を包含するが、それらに限定されない。
【００５２】
「癌」という用語は、前悪性癌ならびに悪性癌を包含する。癌は下記を包含するが、それらに限定されない。前立腺癌、胃癌、大腸癌、皮膚癌、例えば黒色腫又は基底細胞癌、肺癌、乳癌、頭頸部癌、気管支癌、膵臓癌、膀胱癌、脳又は中枢神経系癌、末梢神経系癌、食道癌、口腔又は咽頭癌、肝臓癌、腎臓癌、精巣癌、胆管癌、小腸又は虫垂癌、唾液腺癌、甲状腺癌、副腎癌、骨肉種、軟骨肉腫、血液組織の癌等。「癌細胞」は、腫瘍の形態であってよく、対象（例えば、白血病細胞）内に単独で存在するか又は癌由来細胞株であってよい。
【００５３】
癌は、様々な身体症状を伴うかもしれない。癌の症状は、一般に、腫瘍の型及び位置に依存する。例えば、肺癌は、咳、息切れ及び胸部痛を生じることがあり、結腸癌は、下痢、便秘及び下血を生じることが多い。しかし、ほんの数例を挙げれば、一般に下記の症状が多くの癌に伴うことが多い。発熱、寒気、寝汗、咳、呼吸困難、体重減少、食欲不振、拒食症、吐き気、嘔吐、下痢、貧血症、黄疸、肝肥大、喀血、疲労、不快感、認知機能不全、抑うつ症、ホルモン障害、好中球減少症、疼痛、非治癒性の傷、肥大リンパ節、末梢神経障害、及び性機能不全。
【００５４】
本発明の一実施態様において、癌（例えば、前立腺癌又は乳癌）の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、癌の治療は、治療有効量の開示粒子又は組成物を、それを必要とする対象に、所望の結果を得るために必要な量及び期間で、投与することを含む。本発明のある実施形態において、本発明の標的化粒子の「治療有効量」は、癌の１つ又はそれ以上の症状又は特徴を、治療し、軽減し、改善し、緩和し、発症を遅らせ、進行を阻止し、重症度を減少させ及び／又は発症を減少させるために有効な量である。
【００５５】
ある実施形態において、本明細書に提示されている化合物及び治療法を使用して治療し、予防し又は管理することができる癌は、下記を包含するが、それらに限定されない。膀胱癌、脳癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌（大腸癌を含む）、食道癌、頭頸部癌、白血病、肝臓癌、肺癌（小細胞癌及び非小細胞癌の両方）、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎臓癌、肉腫（骨肉種を含む）、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、胃癌、精巣癌、甲状腺癌及び子宮癌。意図する方法は、癌、例えば、腎臓癌、外陰癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、肝胆道癌、膵臓癌、虫垂癌、子宮癌、腎臓癌、腺癌、胃食道癌、乳癌、尿路上皮癌、黒色腫、及び／又は乳頭部癌に罹患した患者を治療することを含む。該癌は、他の治療に対して、再発性又は不応性又は耐性であるかもしれない。
【００５６】
例えば、該癌は下記の癌であってもよい。膀胱癌（加速性及び転移性膀胱癌を含む）、乳癌（例えば、エストロゲン受容体陽性乳癌；エストロゲン受容体陰性乳癌；ＨＥＲ−２陽性乳癌；ＨＥＲ−２陰性乳癌；プロゲステロン受容体陽性乳癌；プロゲステロン受容体陰性乳癌；エストロゲン受容体陰性、ＨＥＲ−２陰性及びプロゲステロン受容体陰性乳癌（即ち、トリプルネガティブ乳癌）；炎症性乳癌）、結腸癌（大腸癌を含む）、腎臓癌（例えば、移行上皮癌）、肝臓癌、肺癌（小細胞及び非小細胞肺癌、肺腺癌及び扁平上皮癌を含む）、尿生殖路癌、例えば、卵巣癌（卵管癌及び腹膜癌を含む）、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、腎臓癌及び尿管癌、リンパ系癌、直腸癌、喉頭癌、膵臓癌（外分泌膵臓癌を含む）、食道癌、胃癌、胆嚢癌、甲状腺癌、皮膚癌（扁平上皮癌を含む）、脳癌（多形グリア芽細胞腫を含む）、頭頸部癌（例えば、原発不明癌）、ならびに軟部組織の癌（例えば、カポジ肉腫（例えば、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫）、平滑筋肉腫、血管肉腫及び組織球腫）。癌は、下記の癌を包含する：乳癌（例えば、転移性又は局所進行性乳癌）、前立腺癌（例えば、ホルモン不応性前立腺癌）、腎細胞癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、及び扁平上皮癌、例えば、切除不能な、局所進行性又は転移性の非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、及び扁平上皮癌）、膵臓癌、胃癌（例えば、転移性胃腺癌）、大腸癌、直腸癌、頭頸部の扁平上皮癌、リンパ腫（ホジキンリンパ腫又は非ホジキンリンパ腫）、腎細胞癌、尿路上皮の癌、軟部組織肉腫（例えば、カポジ肉腫（例えば、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫）、平滑筋肉腫、血管肉腫、及び組織球腫）、神経膠腫、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫）、黒色腫（例えば、進行性又は転移性黒色腫）、胚細胞腫瘍、卵巣癌（例えば、進行性卵巣癌、例えば、進行性卵管又は腹膜癌）及び胃腸癌。
【００５７】
一実施形態において、癌は、１つより多い化学療法薬に耐性であり、例えば、癌は多剤耐性癌である。一実施形態において、癌は、１つ又はそれ以上の白金系薬剤、アルキル化剤、アントラサイクリン及びビンカアルカロイドに耐性である。一実施形態において、癌は、１つ又はそれ以上の白金系薬剤、アルキル化剤、タキサン及びビンカアルカロイドに耐性である。
【００５８】
一実施形態において、組成物は、１つ又はそれ以上の付加的抗癌物質、例えば化学療法薬、例えば本明細書に記載されている１つの化学療法薬又は化学療法薬組合せ及び放射線と併用して投与される。
【００５９】
例えば、癌又は難治性癌の治療を必要とする患者において、該癌又は難治性癌を治療する方法であって、有効量の開示ナノ粒子懸濁液を該患者に静脈内投与することを含む方法が本明細書において提示される。例示的癌又は難治性癌は、前記の癌、ならびに、例えば、乳癌、前立腺癌、卵巣癌及び／又は胃食道癌を包含する。いくつかの実施形態において、難治性癌、例えば、難治性の胃食道癌又は乳癌を治療する方法が提供され、該方法において、患者は、開示ナノ粒子懸濁液の投与前に、事前放射線治療を行うか又は行わずに、第１選択レジメン、及び任意に第２選択治療及び／又は第３選択治療によって事前に治療されている。例えば、種々の癌を治療する方法が提示され、該方法において、患者は事前に、放射線治療、及び／又はタキソール（溶液形態）及び／又はタキソテレ、及び／又はＡｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）及び／又はシクロホスファミド及び／又はカルボプラチンのレジメン、及び／又は、例えば５−ＦＵ、ロイコボリン、オキサプラチン及び／又はＧＩ１５２の第２選択治療を受けている。
【００６０】
いくつかの実施形態において、意図する方法は、開示ナノ粒子又は懸濁液を、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回又は４週間に１回、例えば毎週投与することを含む。ある実施形態において、懸濁液を１週間、２週間又は３週間にわたって毎週投与し、その後に1週間の無治療又はそれ以上の無治療を続けることができる。例えば約５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル量を含有する開示懸濁液を、約１５ｍｇ／ｍ２〜５０ｍｇ／ｍ２又はそれ以上又は約３０ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２又はそれ以上のドセタキセルの用量で投与することができる。
【００６１】
ある実施形態において、開示懸濁液が投与される場合のドセタキセルの累積最大耐性用量は、毎週投与される場合に、該懸濁液を３週間ごとに投与される場合より多い。例えば、開示懸濁液が３週間ごとに投与される場合のドセタキセルの累積最大耐性用量は約６０ｍｇ／ｍ２であることができ、それに対して、該開示懸濁液が毎週投与される場合のドセタキセルの累積最大耐性用量は約１２０ｍｇ／ｍ２もしくはそれ以上、又は約４０ｍｇ／ｍ２ｘ３もしくはそれ以上である。一実施形態において、開示懸濁液の毎週投与は、患者へのドセタキセルの平均１週曝露を５０％増加させる。
【００６２】
いくつかの実施形態において、開示懸濁液は、ドセタキセルの増加用量又は同用量で、例えば週ベースで、投与される。いくつかの実施形態において、該増加用量は、少なくとも、第１用量レベル及び第２用量レベルを含む。いくつかの実施形態において、該増加用量は、少なくとも、第１用量レベル、第２用量レベル及び第３用量レベルを含む。いくつかの実施形態において、該増加用量は、第４用量レベルをさらに含む。いくつかの実施形態において、該増加用量は、第１用量レベル、第２用量レベル、第３用量レベル、第４用量レベル及び第５用量レベルを含む。いくつかの実施形態において、第６、第７、第８、第９及び第１０用量レベルが考えられる。
【００６３】
いくつかの実施形態において、各用量レベルは、すぐ後の用量レベルの６７％以下又は５０％以下である。いくつかの実施形態において、各用量レベルは、すぐ後の用量レベルの３３％以下である。いくつかの実施形態において、各用量レベルは、すぐ後の用量レベルの２０％以下である。いくつかの実施形態において、用量レベルは、１／２ｌｏｇ単位で離れている。いくつかの実施形態において、用量レベルは、１ｌｏｇ単位で離れている。他の実施形態において、用量レベルは等しい。
【００６４】
いくつかの実施形態において、患者に投与される第１用量レベル（例えば、開示ナノ粒子懸濁液の用量に存在するドセタキセルによって測定）は、約１ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は約３．５ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は約１０ｍｇ／ｍ２〜約３０ｍｇ／ｍ２である。そのような第１用量レベルは、例えば、患者の投与レジメンの第１週に投与することができる。いくつかの実施形態において、第２用量レベル（例、患者の投与レジメンの第２週に投与）は、約７ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は約１５ｍｇ／ｍ２〜約３０ｍｇ／ｍ２である。いくつかの実施形態において、第３用量レベルは、約１５ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は約１５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２である。他の実施形態において、各用量レベルは各投与において同じであり、例えば、約１５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２が、例えば週に１回、例えば３週間にわたって投与される。
【００６５】
いくつかの実施形態において、第１、第２及び第３用量レベルが、対象に、２１又は２８サイクルで投与され、例えば、各用量レベルは、最初の３週間に増加されるか又は一定に維持され、１週間の無投与計画を伴う。いくつかの実施形態において、第１、第２又は第３用量レベルが、対象に、例えば毎週、約１〜約４、５又は６週間にわたって投与される。
【００６６】
いくつか実施形態において、第１用量レベルが対象に１週間にわたって（例えば、第１週に１回、例えば第１日）投与され、第２用量レベルが対象に１週間にわたって（例えば、第２週に１回、例えば第８日）投与され、第３用量レベルが対象に１週間にわたって（例えば、第３週に1回、例えば第１５日）投与される。いくつかの実施形態において、第１、第２及び第３用量レベルはほぼ同じであり、例えば約１５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２、例えば約４０ｍｇ／ｍ２である。例示的実施形態において、第４週にはいかなる用量も投与されない。
【００６７】
いくつかの実施形態において、第１用量レベルが対象に２週間にわたって投与され、第２用量レベルが対象に２週間にわたって投与され、第３用量レベルが対象に２週間にわたって投与される。
【００６８】
例えば、固形腫瘍癌の治療を必要とする患者において、該固形腫瘍癌を治療する方法が本明細書において提示され、該方法は、患者に、ドセタキセルナノ粒子懸濁液、例えば約３５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有する開示ナノ粒子懸濁液を、一定期間にわたって連続投与し（例えば、毎週１用量を、例えば１週間、２週間、３週間、４週間又はそれ以上にわたって投与）、該連続投与に続いて休薬期間（例えば、１週間、２週間、３週間又はそれ以上）を置くことを含む。そのような連続投与を、少なくとも１回、２回、３回、４回又はそれ以上繰り返すことができる。例えば、ドセタキセルナノ粒子懸濁液を、週１回、３週間にわたって投与し、それに続いて７日間の休薬期間を置くことができる。そのような方法は、約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有するドセタキセルナノ粒子懸濁液を、週１回、３週間にわたって連続投与し、それに続いて１週間の開示組成物無投与の休薬期間を置くことを含むことができる。
【００６９】
さらに、本明細書において、ヒト患者において固形腫瘍癌を治療するためのレジメンが提示され、前記レジメンは、毎月サイクルの治療において患者に開示治療ナノ粒子懸濁液を送達することを含み、前記毎月サイクルは、該サイクルにおいて少なくとも１週間にわたって、１週間につき例えば約３５ｍｇ／ｍ２及び約４５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含有する治療ナノ粒子懸濁液の第１投与量を静脈内投与し、それに続いて少なくとも１週間にわたって治療ナノ粒子懸濁液を投与しないことを含む。
【００７０】
さらに、本明細書において、治療ナノ粒子懸濁液の投与レジメンの投与用のキットが提示され、該キットは、
・下記投与レジメンにしたがって治療ナノ粒子懸濁液を投与するのに充分な量の治療ナノ粒子懸濁液：約３０ｍｇ／ｍ２〜約４０ｍｇ／ｍ２又は３５ｍｇ／ｍ２〜約４５ｍｇ／ｍ２又は約２０ｍｇ／ｍ２〜約６０ｍｇ／ｍ２又は約４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含む治療ナノ粒子懸濁液の投与量を、週１回、最初の３週間にわたって患者に投与し；第４週において、治療ナノ粒子懸濁液を患者に投与せず；任意に、該投与レジメンを繰り返す；及び
・任意に、該投与レジメンにしたがって治療ナノ粒子懸濁液を投与するための説明書；
を含むキットであり、
該治療ナノ粒子懸濁液は、下記物質：
・複数の治療ナノ粒子であって、
・ドセタキセル；
・約１６ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳酸）及び約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含む、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー；
・標的化ポリマーであって、約２０ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（乳）酸及びペンチレン末端基を有し約５ｋＤａの数平均分子量を有するポリ（エチレン）グリコールを含むポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールポリマーを含み、該ペンチレン末端基がアミド結合を介してＳ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸部分にコンジュゲートしている、標的化ポリマー；及び
・界面活性剤；
を含む複数の治療ナノ粒子；及び
・水性懸濁媒質
を含む治療ナノ粒子懸濁液である。
【００７１】
本発明を全般的に説明したが、本発明は下記の実施例を参照することによって、より容易に理解され、該実施例は本発明のある特定の実施態様及び実施形態を例示するためにだけに示され、本発明を決して限定するものではない。
【実施例】
【００７２】
本発明を全般的に説明したが、本発明は下記の実施例を参照することによって、より容易に理解され、該実施例はある特定の実施態様及び実施形態を例示するためにだけに示され、本発明を決して限定するものではない。
【００７３】
実施例１：低分子量ＰＳＭＡリガンド（ＧＬ２）の合成
スキーム１
2016523915.tif 000010
５ｇ（１０．６７ｍｍｏｌ）の出発化合物を、１５０ｍＬの無水ＤＭＦに溶解させた。この溶液に、臭化アリル（６．３ｍＬ、７２ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１．４７ｇ、１０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。その反応を２時間撹拌し、溶媒を除去し、粗物質をＡｃＯＥｔに溶解し、ｐＨが中性になるまでＨ２Ｏで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４（無水）で乾燥し、蒸発させて、５．１５ｇ（９５％）の物質を得た。（ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝２０：１）Ｒｆ＝０．９、出発化合物Ｒｆ＝０．１、ニンヒドリン及び紫外線で検出）。
【００７４】
スキーム２
2016523915.tif 000011
ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）中の前記化合物（５．１５ｇ、１０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ２ＮＨ（２０ｍＬ、０．１９ｍｏｌ）を添加した。その反応を室温で４０分間撹拌した。溶媒を除去し、化合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＡｃＯＥｔ＝３：２）によって精製して、２．６ｇ（９０％）を得た。（ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）Ｒｆ＝０．４、ニンヒドリンで検出（化合物は紫色である））。
1H-NMR (CDCl3, 300 MHz) δ5.95-5.85 (m, 1H, -CH2CHCH2), 5.36-5.24 (m, 2H, -CH2CHCH2), 4.62-4.60 (m, 3H, -CH2CHCH2, NHBoc), 3.46 (t, 1H, CH(Lys)), 3.11-3.07 (m, 2H, CH2NHBoc), 1.79 (bs, 2H, NH2), 1.79-1.43 (m, 6H, 3CH2(Lys)), 1.43 (s, 9H, Boc).
【００７５】
スキーム３
2016523915.tif 000012
ＣＨ２Ｃｌ２（１４３ｍＬ）中のジアリルグルタメート（３．９６ｇ、１５ｍｍｏｌ）及びトリホスゲン（１．４７ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、−７８℃で、ＣＨ２Ｃｌ２（２８ｍＬ）中のＥｔ３Ｎ（６．４ｍＬ、４６ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温に温め、１．５時間撹拌した。次に、ＣＨ２Ｃｌ２（３６ｍＬ）溶液中のリジン誘導体（２．６ｇ、９．０９ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加し、その反応を室温で１２時間撹拌した。その溶液をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏで２回洗浄し、ＭｇＳＯ４（無水）で乾燥し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＡｃＯＥｔ＝３：１→２：１→ＡｃＯＥｔ）によって精製して、４ｇ（８２％）を得た。（ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝２０：１）Ｒｆ＝０．３、ニンヒドリンで検出）。
1H-NMR (CDCl3, 300 MHz) δ5.97-5.84 (m, 3H, 3-CH2CHCH2), 5.50 (bt, 2H, 2NH尿素), 5.36-5.20 (m, 6H, 3-CH2CHCH2), 4.81 (bs, 1H, NHBoc), 4.68-4.40 (m, 8H, 3-CH2CHCH2, CH(Lys), CH(glu)), 3.09-3.05 (m, 2H, CH2NHBoc), 2.52-2.39 (m, 2H, CH2(glu.)), 2.25-2.14及び2.02-1.92 (2m, 2H, CH2(glu.)), 1.87-1.64 (m, 4H, 2CH2(Lys)), 1.51-1.35 (m, 2H, CH2(Lys)), 1.44 (s, 9H, Boc).
【００７６】
スキーム４
2016523915.tif 000013
乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中の前記化合物（４ｇ、７．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＦＡ（９ｍＬ）を添加した。その反応を室温で１時間撹拌した。完全に乾燥するまで溶媒を真空下に除去して、４．１ｇ（定量的）を得た。（ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝２０：１）Ｒｆ＝０．１、ニンヒドリンで検出）。
1H-NMR (CDCl3, 300 MHz) δ6.27-6.16 (2d, 2H, 2NH尿素), 5.96-5.82 (m, 3H, 3-CH2CHCH2), 5.35-5.20 (m, 6H, 3-CH2CHCH2), 4.61-4.55 (m, 6H, 3-CH2CHCH2), 4.46-4.41 (m, 2H, CH(Lys), CH(glu)), 2.99 (m, 2H, CH2NHBoc),  2.46 (m, 2H, CH2(glu.)), 2.23-2.11及び2.01-1.88 (2m, 2H, CH2(glu.)), 1.88-1.67 (m, 4H, 2CH2(Lys)), 1.45 (m, 2H, CH2(Lys)).
【００７７】
スキーム５
2016523915.tif 000014
ＤＭＦ（無水）（６２ｍＬ）中の前記化合物（２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下で、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．７ｇ、０．６ｍｍｏｌ）及びモルホリン（５．４ｍＬ、６０．７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。その反応を室温で１時間撹拌した。溶媒を除去した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２で２回洗浄し、次に、Ｈ２Ｏに溶解させた。この溶液にＮａＯＨの希薄溶液（０．０１Ｎ）を、ｐＨが強塩基性になるまで添加した。溶媒を減圧下に除去した。固形物を再び、ＣＨ２Ｃｌ２、ＡｃＯＥｔ、及びＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）混合物で洗浄し、Ｈ２Ｏに溶解し、アンバーライトＩＲ−１２０  Ｈ＋樹脂で中和した。溶媒を蒸発させ、化合物をＭｅＯＨで沈殿させて、１ｇ（８７％）のＧＬ２を得た。
1H-NMR (D2O, 300 MHz) δ4.07 (m, 2H, CH(Lys), CH(glu)), 2.98 (m, 2H, CH2NH2), 2.36 (m, 2H, CH2(glu.)), 2.08-2.00 (m, 1H, CH2(glu)), 1.93-1.60 (m, 5H, CH2(glu.), 2CH2(Lys)), 1.41 (m, 2H, CH2(Lys)). Mass ESI: 320.47 [M + H+], 342.42 [M + Na+].
【００７８】
実施例２：ＰＬＡ−ＰＥＧの調製
その合成は、下記に示されるように、マクロ開始剤としてのα−ヒドロキシ−ω−メトキシポリ（エチレングリコール）での、ｄ，ｌ−ラクチドの開環重合によって行われ、高温でスズ（ＩＩ）２−エチルヘキサノエートを触媒として使用して行われる（ＰＥＧ  Ｍｎ約５，０００Ｄａ；ＰＬＡ  Ｍｎ約１６，０００Ｄａ；ＰＥＧ−ＰＬＡ  Ｍｎ約２１，０００Ｄａ）。
スキーム６
2016523915.tif 000015
【００７９】
ジクロロメタン中に前記ポリマーを溶解させ、ヘキサンとジエチルエーテルとの混合物中で該ポリマーを沈殿させることによって、前記ポリマーを精製する。この段階から回収したポリマーを乾燥炉で乾燥させる。
【００８０】
実施例３：ＰＬＡ−ＰＥＧ−リガンドの調製
図１Ａ〜１Ｃに示されている合成は、ジメチルホルムアミド中でＦＭＯＣ、ＢＯＣリジンを臭化アリル及び炭酸カリウムと反応させることによって、ＦＭＯＣ、ＢＯＣリジンをＦＭＯＣ、ＢＯＣ、アリルリジンに変換することから開始し、次に、アセトニトリル中におけるジエチルアミンでの処理を行う。次に、ＢＯＣ、アリルリジンをトリホスゲン及びジアリルグルタメートと反応させ、次に、塩化メチレン中においてトロフルオロ酢酸で処理して、化合物「ＧＬ２Ｐ」を形成する。
【００８１】
次に、ＧＬ２Ｐにおけるリジンの側鎖アミンを、ＥＤＣ及びＮＨＳを使用するヒドロキシ−ＰＥＧ−カルボン酸の付加によってＰＥＧ化する。ＧＬ２ＰのＰＥＧへのコンジュゲーションは、アミド結合を介する。得られたこの化合物の構造は「ＨＯ−ＰＥＧ−ＧＬ２Ｐ」と称される。ＰＥＧ化に続いて、開始剤としてのＨＯ−ＰＥＧ−ＧＬ２Ｐ中のヒドロキシル基によるｄ，ｌ−ラクチドの開環重合（ＲＯＰ）を使用して、エステル結合を介してポリラクチドブロックポリマーをＨＯ−ＰＥＧ−ＧＬ２Ｐに結合させて、「ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬ２Ｐ」を得る。スズ（ＩＩ）２−エチルヘキサノエートを開環重合のための触媒として使用する。
【００８２】
最後に、ジクロロメタン中においてモルホリン及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（触媒として）を使用して、ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬ２Ｐ上のアリル基を除去して、最終生成物ＰＬＡ−ＰＥＧ−リガンドを得る。該最終化合物を３０／７０％（ｖ／ｖ）ジエチルエーテル／ヘキサン中での沈殿によって精製する。
【００８３】
実施例４：ナノ粒子調製−エマルジョン法
有機相を、ドセタキセル（ＤＴＸＬ）とポリマー（ホモポリマー、コポリマー、及びリガンドを有するコポリマー）との混合物から構成する。有機相を水性相と約１：５の比率（油相：水性相）で混合し、該水性相は界面活性剤及びある溶解溶媒から構成される。高薬剤負荷を得るために、有機相中約３０％の固形物を使用する。図２、３Ａ及び３Ｂは、以下の工程を図で示している。
【００８４】
単純混合下に又はロータ・ステータ・ホモジナイザの使用により、前記の２つの相を組み合わすことよって、一次粗エマルジョンを形成する。該ロータ／ステータは均質乳状溶液を生じ、一方、撹拌子は可視的により大きい粗エマルジョンを生じた。撹拌子法は、供給容器の側面に付着する顕著な油相小滴を生じることが観察され、粗エマルジョンサイズは品質に重要な工程パラメータではないが、歩留まり損失又は相分離を防止するために適切な微細さにすべきであることを示唆している。したがって、該ロータ／スタータが粗エマルジョン形成の標準法として使用されるが、高速ミキサはより大きい規模において好適となるかもしれない。
【００８５】
次に、高圧ホモジナイザを使用することにより、一次エマルジョンを微細エマルジョンに形成する。粗エマルジョンのサイズは、ホモジナイザＭ−１１０−ＥＨにおける連続パス（１０３）後の粒径に有意な影響を与えない。
【００８６】
ホモジナイザ供給圧力は、得られる粒径に有意な影響を及ぼすことが見出された。圧気式及び電動のＭ−１１０ＥＨホモジナイザの両方において、供給圧力を減少させることが粒径も減少させることが見出された。したがって、Ｍ−１１０ＥＨに使用される標準作動圧力は、１つのインタラクションチャンバにつき４０００〜５０００ｐｓｉであり、これはそのユニットにおける最低処理圧力である。Ｍ−１１０ＥＨは、１つ又は２つのインタラクションチェンバの選択肢も有する。それは、より弱い制限性の２００μｍ  Ｚ−チェンバと直列に、制限性Ｙ−チャンバが標準装備されている。Ｙ−チャンバを除去し、ブランクチャンバで置き換えた場合に、粒径が実際に減少することが見出された。さらに、Ｙ−チャンバの除去は、処理中のエマルジョンの流量を有意に増加させる。
【００８７】
２〜３パス後に粒径は有意に減少せず、連続パスは粒径増加さえ生じ得る。プラシーボ有機相は、５０：５０の１６．５／５  ＰＬＡ／ＰＥＧ：８．２  ＰＬＡの２５．５％ポリマー原料から構成された。有機相を標準水性相で５：１のＯ：Ｗに乳化し、複数の慎重なパスを行い、各パス後に小部分のエマルジョンをクエンチした。示されている規模は、配合物の全固形物を表す。粒径に対する規模の作用は、驚くべき規模依存性を示した。その傾向は、２〜１０ｇバッチサイズ範囲において、より大きいバッチほどより小さい粒子を生じることを示す。１０ｇ規模バッチより大きいバッチを考えた場合、この規模依存性はなくなることが示された。油相において使用された固形物の量は約３０％であった。プラシーボバッチの場合、％固形物の数値は、その％固形物が標準２０％ｗ／ｗにおいて存在する薬剤であったことを示す。表Ａは、乳化工程パラメータを要約している。
【表Ａ】
2016523915.tif 000016
【００８８】
次に、微細エマルジョンを、混合下に所定温度で、脱イオン水に添加することによってクエンチする。クエンチユニット稼働において、エマルジョンを、撹拌下に、冷たいクエンチ水に添加する。これは、かなりの部分の油相溶媒を抽出する作用をし、下流濾過のためにナノ粒子を効果的に硬化させる。クエンチ水の冷却は、薬物封入を有意に向上させた。クエンチ水：エマルジョンの比率は約５：１である。
【００８９】
３５％（ｗｔ％）のＴｗｅｅｎ  ８０の溶液をクエンチ水に添加して、全体で約２％のＴｗｅｅｎ  ８０を得る。エマルジョンをクエンチした後、薬剤可溶化剤として作用するＴｗｅｅｎ−８０の溶液を添加して、濾過の間の未封入薬剤の効果的除去を可能にする。表Ｂは、各クエンチ工程パラメータを示す。
【表Ｂ】
2016523915.tif 000017
【００９０】
温度は、粒子のＴｇより低い温度に維持するために、充分に希薄な懸濁液（充分に低い濃度の溶媒）を使用して充分に低く保たなければならない。Ｑ：Ｅ比率が充分に高くない場合、より高い濃度の溶媒が粒子を可塑化し、薬剤漏出を許す。逆に、より低い温度は、低いＱ：Ｅ比率（約３：１まで）における高薬剤封入を可能にして、その工程をより効率的に実行することを可能にする。
【００９１】
次に、ナノ粒子を、タンジェンシャルフロー濾過法によって分離して、ナノ粒子懸濁液を濃縮し、クエンチ溶液からの溶媒、遊離薬剤及び薬剤可溶化剤を水に緩衝液交換する。再生セルロース膜を３００の分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）で使用する。
【００９２】
クエンチ溶媒、遊離薬剤及びＴｗｅｅｎ−８０を除去するために、定量ダイアフィルトレーション（ＤＦ）を行う。定量ＤＦを行うために、濾液を除去するのと同じ速度で、緩衝液を保持液容器に添加する。ＴＦＦ操作の工程パラメータが表Ｃに要約されている。クロスフロー速度は、供給路を通って膜を横切る溶液流の速度を意味する。この流れは、膜を詰まらせ濾液流を制限し得る分子を一掃する力を与える。その膜横断圧力は、透過可能分子が膜を通るようにする力である。
【表Ｃ】
2016523915.tif 000018
【００９３】
次に、濾過されたナノ粒子スラリーを、後処理の間に、高温への熱サイクルにかける。小部分（一般に５〜１０％）の封入薬剤が、２５℃への最初の曝露後に非常に速くナノ粒子から放出される。この現象により、全後処理の間に冷たく維持されているバッチは、送達中又は未凍結貯蔵のあらゆる場面で、遊離薬剤又は薬剤結晶の形成を受けやすい。後処理の間にナノ粒子スラリーを高温に曝露することによって、この「緩く封入された」薬剤を除去することができ、薬剤負荷の少しの減少という犠牲を払って、生成物安定性を向上させることができる。表Ｄは、２５℃処理の２つの例を要約している。他の実験は、生成物を２５℃に曝露するための約２〜４ダイア容量後に、該生成物が、大部分の封入薬剤を失わずに充分に安定であることを示した。２５℃処理の前の冷間処理の量として、５ダイア容量が使用される。
【表Ｄ】
2016523915.tif 000019
１２５℃後処理サブロットを、少なくとも５ダイア容量後に様々な時間にわたって２５℃に曝露した。２５℃曝露の複数のサブロットが存在したので、範囲が示されている。
２安定性データは、最終生成物が、スラリー中での結晶形成（顕微鏡使用により可視）の前に、２５℃において１０〜５０ｍｇ／ｍＬナノ粒子濃度に維持できた時間を示す。
３生体外バーストは、第一時点（実質的に即時）で放出された薬剤を示す。
【００９４】
濾過工程後に、ナノ粒子懸濁液を、滅菌グレードフィルタ（０．２μｍ絶対精度）に通す。その工程のために合理的な濾過面積／時間を使用するために、滅菌グレードフィルタを保護する前置フィルタを使用する。数値が表Ｅに要約されている。
【表Ｅ】
2016523915.tif 000020
【００９５】
濾過系統は、以下の通りである：Ｅｒｔｅｌ  Ａｌｓｏｐ  Ｍｉｃｒｏｍｅｄｉａ  ＸＬデプスフィルタＭ９５３Ｐ膜（名目０．２μｍ）；Ｓｅｉｔｚ  ＥＫＳＰデプスフィルタメディア（名目０．１〜０．３μｍ）を有するＰａｌｌ  ＳＵＰＲＡｃａｐ；Ｐａｌｌ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｓｕｐｏｒ  ＥＫＶ  ０．６５／０．２ミクロン滅菌グレードＰＥＳフィルタ。デプスフィルタに関してはナノ粒子１ｋｇ当たり０．２ｍ２の濾過表面積、及び滅菌グレードフィルタに関してはナノ粒子１ｋｇ当たり１．３ｍ２の濾過表面積を使用することができる。
【００９６】
実施例５：ナノ粒子懸濁液
生物分解性及び生体適合性ポリマーＰＬＡ−ＰＥＧ及びＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬから成るポリマーマトリックスに物理的に封入されたドセタキセルを含有するＩＶ投与用の滅菌水性粒子懸濁液であるナノ粒子懸濁液（「組成物Ａ」）を調製する。該粒子をスクロース水溶液に懸濁させる。
【００９７】
ＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬポリマーは、組成物ＡのＰＳＭＡ標的化成分である。該ポリマーは、Ｓ，Ｓ−２−｛３−［１−カルボキシ−５−アミノ−ペンチル］−ウレイド｝−ペンタン二酸（ＧＬ）で末端官能化されたＰＬＡ−ＰＥＧ、尿素結合によってカップリングしているＬ−グルタミン酸及びＬ−リジンを含むヘテロダイマーである。ＧＬ部分はＰＥＧ末端に、リジン側鎖アミンへのアミド結合を介して結合している。ＰＥＧセグメント（数平均分子量、５，０００Ｄａ）は、ＰＬＡ（２０，０００Ｄａ）にエステル結合を介して結合している。ＧＬの分子量は３１９Ｄａである。
【００９８】
ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｂ−エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）は、生体適合性ジブロックコポリマーであり、それの構成成分は、薬剤製品及び医療用具におけるヒト使用が承認されている。ＰＬＡ−ＰＥＧの式は、ＨＯ（Ｃ３Ｈ４Ｏ２）ｙ−（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｚＣＨ３である。ＰＬＡの数平均分子量は１６，０００Ｄａであり、ＰＥＧの数平均分子量は５，０００Ｄａであり、ＰＬＡ−ＰＥＧの数平均分子量は２１，０００Ｄａである。
【００９９】
組成物Ａの製造に使用される成分は表Ｆにアルファベット順に示され、製造は実施例４に記載のように行った。
【表Ｆ】
2016523915.tif 000021
ａ薬剤製品を配合するために使用されるＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬの量は、２．５ｍｏｌ％のＰＬＡ−ＰＥＧ及びＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬである。
【０１００】
ナノ粒子を含有する最終組成物（組成物Ａ）が表Ｇに示されている。ナノ粒子は、５ｍｇ／ｍＬのドセタキセル濃度において１０ｍＬ（１１．４ｇ）の懸濁液を含有する３０ｍＬ透明ガラスバイアルに入れる。
【表Ｇ】
2016523915.tif 000022
【０１０１】
実施例６：ゼータ電位による表面電荷
希薄塩溶液（１ｍＭのＫＣｌ又はＮａＣｌ）を分散剤として使用して、実施例５のＡナノ粒子懸濁液のゼータ電位を測定した。測定値は、２５℃で、Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎ  ＺｅｔａＰＡＬｓ測定装置によって３５ｍＷ固体レーザ６６０ｎｍで取った。ソフトウエア（ＺｅｔａＰＡＬｓバージョン２．５）は、ゼータ電位を計算するためのＳｍｏｌｕｃｈｏｗｓｋｉモデル（Ｈｏｓｏｋａｗａら、２００７）を使用した。結果は、開示ナノ粒子の表面電荷が弱い負電荷であり、約−１０〜−１５ｍＶのゼータ電位を有することを示した。０〜１０％のＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬを使用して配合した粒子は全て、−１０〜−１５ｍＶのゼータ電位を示し、これは、表面電荷が、組成物Ａのナノ粒子に使用されている低レベルのＧＬ標的化リガンドの存在によって強い影響を受けなかったことを示している。
【０１０２】
実施例７：１Ｈ  ＮＭＲ分光法によるナノ粒子表面ＧＬ分析
１Ｈ  ＮＭＲ分光法を使用して、実施例５の粒子の粒子表面におけるＧＬリガンドの存在を評価した。ＧＬ濃度は、従来のＮＭＲ法の検出限界に近い。表面リガンドを観察する方法の感度を高めるために、６００−ＭＨｚ分光計を使用してＮＭＲスペクトルを得た。粒子保存溶液（水中３０％のスクロース）をＤ２Ｏと交換するため、及び１００ｇ／ｍＬの粒子濃度に懸濁液を濃縮するために、遠心濾過を使用して、試料を調製した。ＧＬに関するピークに対してそれらの有意に大きいサイズにより、ＰＥＧ及び残留Ｈ２Ｏからのシグナルを、予備飽和法を使用して抑制した。図４は、実施例６の組成物Ａナノ粒子、ならびにＰＬＡ−ＰＥＧ及びドセタキセルを含むがＰＬＡ−ＰＥＧ−ＧＬは含まない組成物Ａ様ナノ粒子のスペクトルを示している。ＧＬリガンドプロトンに帰属する充分に分解された共鳴が示されている。リガンド帰属共鳴の検出は、ＧＬリガンドが粒子の表面に提示されていることを示す。
【０１０３】
実施例８：Ｑ３Ｗ投与
実施例５のナノ粒子懸濁液を使用して、非盲検の、安全性、薬物動態学的及び薬力学的用量漸増の試験を行った。ナノ粒子を、静脈内（ＩＶ）注入によって、進行癌又は転移癌の患者に投与した。該試験は、ＩＶによって３週間に１回、２１日計画（Ｑ３Ｗ）の第１日に投与した場合の、該組成物の用量制限毒性（ＤＬＴ）及び最大耐性用量（ＭＴＤ）を評価するものであった。該試験はまた、Ｑ３Ｗ計画に沿ってＩＶ注入した後の組成物Ａの薬物動態を特性決定し、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１）画像評価を使用して化合物Ａの抗腫瘍活性の予備的証拠を評価し、かつ、ＰＳＡ、ＣＡ  １２５、ＣＡ  １５−３及びＣＡ  ２７．２９又はＣＡ  １９−９を含む血清腫瘍マーカにおける変化を評価しようとするものであった。
【０１０４】
患者は、用量コホートに登録されて、組成物Ａ（実施例５と同様）のＩＶ用量を２１日計画（Ｑ３Ｗ）の第１日に投与された。次の用量レベルへの漸増は、各コホート内の患者に投与された第１サイクル内で観察されたＤＬＴの発生に依存した。用量は、ＭＴＤＱ３Ｗに達するまで漸増させた。
【０１０５】
各患者は、第１サイクルの第１日に、１用量の組成物Ａを投与された。１サイクルは２１日と定義された。患者は、医学的配慮又は管理的配慮によって試験を中断するまで、各追加サイクルの第１日に組成物Ａで処置された。患者は、コルチコステロイド及び抗ヒスタミン剤で前処置された。
【０１０６】
用量は、３．５ｍｇ／ｍ２（ドセタキセルの量に基づく）から開始して、ＭＴＤＱ３Ｗに達するまで漸増された。ＭＴＤは、ＤＬＴの定義を満たさない最も高い用量レベルとして定義された。ＤＬＴ用量レベルは、その用量群における最大６人の患者のうち２人又はそれ以上の患者においてＤＬＴが経験される最も低い用量レベルとして定義された。
【０１０７】
１用量レベルにつき１患者での加速漸増は、患者の第１サイクルの治療においてその患者がグレード≧２毒性を有するまで続けられた。グレード≧２毒性が疾患進行に明らかに関係していなければ、加速段階を終了し、非加速段階を開始した。非加速設計への変更のきっかけとなった用量において、及び各後続用量レベルにおいて、最低３人の評価可能な患者が得られた。加速段階の間に、現在のより低い用量レベルの患者が少なくとも２１日間観察される（第１サイクル終了）まで、その患者は次のより高い用量レベルに登録されなかった。
【０１０８】
非加速段階において、前記３人の患者のうち１人がＤＬＴを有している場合、コホートは最大６人の患者に拡大された。該６人の患者のうち唯１人がＤＬＴを有している場合、用量漸増を継続した。２人の患者がＤＬＴを有している場合、用量漸増を中止した。６人の患者のうち２人がＤＬＴを有している用量レベルは、ＭＴＤより少なくとも１用量レベル高いと考えられた。次に、そのすぐ下の用量は、６人までの患者を治療することによってより充分に評価された。２人又はそれ以上の患者がこのより低い用量レベルにおいてＤＬＴを有している場合、その用量レベルに登録された最初の６人の患者のうち０人又は唯１人がＤＬＴを有している用量レベルが同定されるまで、漸減を継続した。これは、ＭＴＤＱ３Ｗとして同定された。ＭＴＤ（用量レベルに登録された初期６人の患者のうち０人又は１人がＤＬＴを有している用量レベル）が同定された後、合計１２人の患者（即ち、追加患者６人）が有害事象及び薬物動態をさらに特性決定するために登録された。
【０１０９】
下記の表Ｈは、Ｑ３Ｗ試験に使用された用量漸増計画を示している。
【表Ｈ】
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【０１１０】
用量グループは、２１日計画（Ｑ３Ｗ）の第１日に投与される組成物（０．９％塩化ナトリウム溶液中又は５％デキストロース溶液中）のＩＶ注入の漸増用量を、６０分間にわたって投与された。患者は、コルチコステロイド及び抗ヒスタミン剤での標準前投薬を受けた。ＭＴＤは、ＩＶによって３週間に１回、２１日計画（Ｑ３Ｗ）の第１日に投与した場合、６０ｍｇ／ｍ２であることが確認された。
【０１１１】
実施例９：Ｑ１Ｗ投与
実施例５の懸濁液の非盲検の、安全性、薬物動態学的及び薬力学的用量漸増の試験を行った。組成物Ａ中のナノ粒子を、静脈内（ＩＶ）注入によって、進行癌又は転移癌の患者に投与した。該試験は、ＩＶによって週に１回、２８日計画（Ｑ１Ｗ）の第１日、第８日及び第１５日に投与した場合の、化合物Ａの用量制限毒性（ＤＬＴ）及び最大耐性用量（ＭＴＤ）を評価するために行われた。該試験はまた、Ｑ１Ｗ計画に沿ってＩＶ注入した後の該組成物の薬物動態を特性決定し、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１）画像評価を使用して該組成物の抗腫瘍活性の予備的証拠を評価し、かつ、ＰＳＡ、ＣＡ  １２５、ＣＡ  １５−３及びＣＡ  ２７．２９又はＣＡ  １９−９を含む血清腫瘍マーカにおける変化を評価しようとするものであった。
【０１１２】
各患者は、第１サイクルの第１日、第８日及び第１５日に、１用量の組成物Ａを投与された。１サイクルは２８日と定義された。患者は、試験を中断するまで、各追加サイクルの第１日、第８日及び第１５日に、組成物Ａで処置された。患者は、コルチコステロイド及び抗ヒスタミン剤で前処置された。
【０１１３】
試験に使用した開始用量は１５ｍｇ／ｍ２であり、これは２８日の期間内で４５ｍｇ／ｍ２の累積用量に相当する。次に、患者は、２５、３０、３５及び４０ｍｇ／ｍ２用量レベルへの後続漸増用量を投与された。
【０１１４】
最低３人の患者を、各用量レベルで治療した。３人の患者のうち１人がＤＬＴを有している場合、コホートを最大６人の患者に拡大した。６人の患者のうち唯１人がＤＬＴを有している場合、用量漸増を継続した。２人の患者がＤＬＴを有している場合、用量漸増を終了した。６人の患者のうち２人がＤＬＴを有している用量レベルは、ＭＴＤより少なくとも１用量レベル高いと考えられた。次に、そのすぐ下の用量は、６人までの患者を治療することによってより充分に評価された。２人又はそれ以上の患者がこのより低い用量レベルにおいてＤＬＴを有している場合、その用量レベルに登録された最初の６人の患者のうち０人又は唯１人がＤＬＴを有している用量レベルが同定されるまで、漸減を継続した。これは、ＭＴＤＱ１Ｗとして同定された。
【０１１５】
下記の表Ｉは、Ｑ１Ｗ試験に使用された用量漸増スキームを示している。
【表Ｉ】
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【０１１６】
用量グループは、週に１回、２８日計画（Ｑ１Ｗ）の第１日、第８日及び第１５日に投与される２５０ｍＬの０．９％塩化ナトリウム溶液又は５％デキストロース溶液中の組成物ＡのＩＶ注入の漸増用量を、６０分間にわたって投与された。患者は、注入の１時間前の８ｍｇのデキサメタゾンの経口投与によるか又は注入前の８ｍｇのデキサメタソンのＩＶ投与によって、標準前投薬を受けた。表Ｊは、患者集団についての情報を示し、表Ｋは、患者の特定の癌についての情報を示している（ＰＤ：進行性疾患；Ｄ：安定疾患）。
【表Ｊ】
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【表Ｋ】
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【０１１７】
試験に登録された胃食道癌に罹患した１人の患者は、３０ｍｇ／ｍ２用量の組成物Ａに応答した。この患者は、事前に、タキソール及びカルボプラチンの第１選択レジメン、Ｇｌ１５２、５−ＦＵ、ロイコボリン、オキサリプラチン及びラムシルマブの第２選択レジメン、ならびにＣＰＴ１１１の第３選択レジメンで治療されていた。該患者は胃食道接合部を標的とする放射線治療を受けていた。乳癌に罹患した第２の患者も、３０ｍｇ／ｍ２用量の組成物Ａに応答した。この患者は、事前に、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）及びシクロホスファミドの第１選択レジメン、ならびにタモキシフェンの第２選択レジメンで治療されていた。この患者は、事前に放射線療法を受けていなかった。
【０１１８】
実施例１０
実施例５のナノ粒子懸濁液を使用して、非盲検の、安全性、薬物動態学的及び薬力学的用量漸増の試験を設計する。ナノ粒子を、静脈内（ＩＶ）注入によって、進行癌又は転移癌の患者に投与する。該試験は、ＩＶによって週に１回、２８日計画の第１日、第８日及び第１５日に投与した場合の組成物について考察する。該試験はまた、３週間投薬／1週間休薬の計画に沿ってＩＶ注入した後の組成物Ａの薬物動態を特性決定し、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１）画像評価を使用して化合物Ａの抗腫瘍活性の予備的証拠を評価し、かつ、ＰＳＡ、ＣＡ  １２５、ＣＡ  １５−３及びＣＡ  ２７．２９又はＣＡ  １９−９を含む血清腫瘍マーカにおける変化を評価しようとするものである。患者は、用量コホートに登録されて、組成物Ａ（実施例５と同様）のＩＶ用量を２１日計画（Ｑ３Ｗ）の第１日に投与される。
【０１１９】
各患者は、第１サイクルの第１日に、組成物Ａによって１用量（４０ｍｇ／ｍ２）のドセタキセルを投与された。１サイクルは２１日（又は７日間の休薬を含む２８日間）として定義される。患者を、コルチコステロイド及び抗ヒスタミン剤で前処置してもよい。
【０１２０】
患者における組成物Ａの投与は、４０ｍｇ／ｍ２のドセタキセル用量において３週間にわたって週１回投薬／１週間休薬でナノ粒子組成物を投与した場合、例えば６０ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを３週間に１回投与した場合と比較して、好中球減少症の誘発は少なくなり得る。週１回の投与は、有効性にプラス効果を有する可能性のあるより高い薬剤曝露を可能にする。
【０１２１】
均等物
当業者は、本明細書に記載されている本発明の特定実施形態の多くの均等物を、認識するか又は単に日常実験を使用して確認することができる。そのような均等物は、下記の特許請求の範囲に含まれるものとする。
【０１２２】
参照による組み入れ
本明細書において引用されている全ての特許、公開特許出願、ウエブサイト及び他の参考文献の全内容は、全体として参照により本明細書に明示的に組み入れられる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【国際調査報告】
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