(57)【要約】  本発明は、癌治療における補助薬剤の調製にある。本発明によれば、ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせて腫瘍性疾患の治療で使用するための全細胞マイコバクテリアであって、非病原性熱殺菌マイコバクテリアであるマイコバクテリアがある。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせた腫瘍性疾患の治療における使用のための全細胞マイコバクテリアであって、前記マイコバクテリアが非病原性熱殺菌マイコバクテリアである、マイコバクテリア。
【請求項２】
前記マイコバクテリアが、マイコバクテリウム  バッカエ（Ｍ．ｖａｃｃａｅ）、マイコバクテリウム  オブエンス（Ｍ．ｏｂｕｅｎｓｅ）、マイコバクテリウム  パラフォツイツム（Ｍ．ｐａｒａｆｏｒｔｕｉｔｕｍ）、マイコバクテリウム  オーラム（Ｍ．ａｕｒｕｍ）、マイコバクテリウム  インディカス  プラニイ（Ｍ．ｉｎｄｉｃｕｓ  ｐｒａｎｉｉ）、マイコバクテリウム  フレイ（Ｍ．ｐｈｌｅｉ）およびこれらの組み合わせから選択される、請求項１に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項３】
前記マイコバクテリアがラフ型変異株である、請求項２に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項４】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムス、またはメトホルミンおよびこれらの組み合わせから選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項５】
前記ｍＴＯＲ阻害剤がラパマイシン（シロリムス）である、請求項４に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項６】
前記マイコバクテリアが、前記ｍＴＯＲ阻害剤の投与前、それと同時および／または後に被験者に投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項７】
前記マイコバクテリアおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤が反復投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項８】
前記腫瘍性疾患が、子宮癌、前立腺癌、肝臓癌、腎臓癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、膵臓癌、脳腫瘍、肝細胞癌、リンパ腫、白血病、胃癌、子宮頚癌、卵巣癌、甲状腺癌、黒色腫、癌腫、頭頚部癌、皮膚癌または軟部組織肉腫である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項９】
前記腫瘍性疾患が膵臓癌である、請求項８に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１０】
前記治療が、手術可能なようにおよび／または転移形成を低減するように、癌性腫瘍のサイズを縮小する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１１】
前記マイコバクテリアが、細胞数１０７〜１０９である有効量の非病原性熱殺菌マイコバクテリアを含む単位用量中に存在する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１２】
前記マイコバクテリアが、非経口、経口、舌下、経鼻または肺経路で投与するためのものである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１３】
前記非経口経路が、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮内、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、腹腔内、静脈内または小胞体内注入から選択される、請求項１２に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１４】
前記マイコバクテリアが皮内経路で投与するためのものである、請求項１３に記載の使用のためのマイコバクテリア。
【請求項１５】
被験者において原発新生物、腫瘍または癌を治療する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含み、前記マイコバクテリアが非病原性熱殺菌マイコバクテリアである、方法。
【請求項１６】
原発新生物、腫瘍または癌の転移を治療する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含み、前記マイコバクテリアが非病原性熱殺菌マイコバクテリアである、方法。
【請求項１７】
前記治療が、（ｉ）全生存、（ｉｉ）無進行生存率、（ｉｉｉ）全応答率、（ｉｖ）転移性疾患の低下の１以上から選択される、１以上の疾患状態および進行のマーカの臨床的に関連のある改善をもたらす、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記新生物、腫瘍、癌または転移が、前立腺癌、肝臓癌、腎臓癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、膵臓癌、脳腫瘍、肝細胞癌、リンパ腫、白血病、胃癌、子宮頚癌、卵巣癌、甲状腺癌、黒色腫、癌腫、頭頚部癌、皮膚癌および軟部組織肉腫から選択される癌と関連する、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記新生物、腫瘍、癌または転移が、膵臓癌と関連する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記新生物、腫瘍または癌が転移性である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記非病原性熱殺菌マイコバクテリアが、マイコバクテリウム  バッカエ（Ｍ．ｖａｃｃａｅ）、マイコバクテリウム  オブエンス（Ｍ．ｏｂｕｅｎｓｅ）、マイコバクテリウム  パラフォツイツム（Ｍ．ｐａｒａｆｏｒｔｕｉｔｕｍ）、マイコバクテリウム  オーラム（Ｍ．ａｕｒｕｍ）、マイコバクテリウム  インディカス  プラニイ（Ｍ．ｉｎｄｉｃｕｓ  ｐｒａｎｉｉ）、マイコバクテリウム  フレイ（Ｍ．ｐｈｌｅｉ）およびこれらの組み合わせから選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記マイコバクテリアがマイコバクテリウム  オブエンス（Ｍ．ｏｂｕｅｎｓｅ）である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記非病原性熱殺菌マイコバクテリアがラフ型変異株である、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記非病原性熱殺菌マイコバクテリアが、非経口、経口、舌下、経鼻または肺経路で投与するためのものである、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記非経口経路が、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮内、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、腹腔内、静脈内または小胞体内注入から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記非経口経路が腫瘍内注射を含まない、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記有効量の非病原性熱殺菌マイコバクテリアが細胞数１０７〜１０９である、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記マイコバクテリアが、前記治療的に有効な量のｍＴＯＲ阻害剤の前、それと同時および／または後に投与され、任意には前記マイコバクテリアおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤が反復投与される、請求項１５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムスもしくはメトホルミンから選択される、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ｍＴＯＲ阻害剤がシロリムスである、請求項２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌治療分野に関する。具体的には、本発明は、被験者内での腫瘍または転移の発現を予防する、治療するまたは阻害する方法およびｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせてこのような療法で使用するための免疫調節薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、免疫応答は、非常に早い段階で多くの腫瘍を消失させ、時にはそれらを何年も平衡状態で、完全に消失しないように維持することで、癌生物学において中心的役割を担っていることが明らかになってきている（非特許文献１）。疾患の臨床症状を有するこの平衡相からの最終的な脱出は、例えば、慢性炎症または免疫抑制などを示す異常調節免疫応答を伴う。免疫システムが癌の発現、構造的性質および進行に大きく関与していることが強力にかつより一層裏付けられることにより、この分類の疾患を治療するための免疫療法戦略に新たな関心が寄せられている。現在まで、こうした戦略を開発するほとんどの試みは、患者自身の腫瘍または腫瘍細胞株から誘導された抗原の使用およびｅｘ?ｖｉｖｏで拡大させた腫瘍抗原特異的細胞傷害性細胞集団および抗原提示細胞集団の移行を活用することに基づいたものであった。
【０００３】
Ｒｕｄｏｌｆ  Ｖｉｒｃｈｏｗが新生物組織内に白血球を発見し、炎症と癌とを初めて結び付けた１８６３年以来、癌は炎症と関連付けられている（非特許文献２）。それ以来、慢性的な炎症は癌の危険因子であると考えられている。こうした報告により、炎症性環境が腫瘍の発達を助長し、腫瘍部位で観測されたものと一致することがわかる。しかし、癌と炎症との関係は、慢性炎症による疾患の発症に限定されるものではない。Ｓｃｈｗａｒｔｓｂｕｒｄ（非特許文献３）は、腫瘍環境ストレスにより慢性炎症が発生することおよびこれにより免疫システムから防御物が発生することを提示した。近年、腫瘍微小環境は、血流の増加、悪性疾患に伴う免疫抑制、および腫瘍転移に関する新血管新生および脈管膨張の双方に寄与するケモカイン、サイトカイン、リンパ球およびマクロファージを介して、腫瘍の進行をかなり支持しており、炎症部位に似ていることが明らかになった。さらに、この炎症部位腫瘍発現微小環境は、免疫システムからの防御および癌進行の促進におけるその重要な役割とは別に、現在の癌治療の成功に対する悪影響を有する。
【０００４】
さらに、転移性癌細胞は、腫瘍をリンパ球、血小板および腫瘍細胞を含む微小コロニーとして残す。炎症は、腫瘍の増殖をもたらすサイトカイン環境を作り出すことによって、転移部位において引き続き役割を果たす。
【０００５】
免疫ホメオスタシスは、炎症誘発性シグナルと抗炎症性シグナルとの緊密に調節された相互作用からなる。例えば、抗炎症性シグナルの損失により、慢性炎症および増殖シグナルの伝達がもたらされる。興味深いことに、腫瘍細胞の増殖の促進および抑制をいずれも行うサイトカインが腫瘍部位で作り出される。例えば癌が発生する場合、これらの様々な過程の影響が不均衡であることが腫瘍の促進をもたらす。
【０００６】
癌の治療に最も効果的な種類の免疫応答は、ＣＤ４＋Ｔｈ１細胞応答およびＣＤ８＋ＣＴＬ応答の誘導を促進するタイプ１であると考えられる。癌免疫療法との関連で、多くの免疫刺激剤が使用可能であり、これらの免疫刺激剤により、Ｔｈ１応答の発現が促進される。例えば、ＢＣＧ（カルメット−ゲラン桿菌）つまりＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染に対するワクチンとして開発されたＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ．ｂｏｖｉｓの弱毒菌も、膀胱癌および皮膚黒色腫などの様々な他の症状の治療にも用いられる。膀胱の表在性移行細胞癌に対するＢＣＧの小胞体内注入は、この疾患に対する一次治療であると現在考えられている。小胞体内ＢＣＧを伴う重篤な合併症は一般的ではないが、これらは個体内で生じ、局所症状から肝炎、肺炎、敗血症および死に及ぶ可能性もある。ＳＲＬ−１７２は、ＢＣＧと同じ属のメンバーであるＭ．ｖａｃｃａｅの熱殺菌製剤であるが、Ｔｈ２応答の免疫調節およびタイプ１増強効果の両方を誘発するため、更なる免疫学的特性を有する。
【０００７】
現在まで、効果的な癌免疫療法を開発する試みにとって大きな障壁は、腫瘍部位で免疫抑制を破壊できず、免疫反応性の正常なネットワークを復元できないことである。免疫療法の生理学的方法は、内因性腫瘍抗原が認識され、これらの抗原を保有する細胞に対して効果的な細胞傷害性反応が発現するように免疫反応性を正常化することである。
【０００８】
化学療法および放射線治療の作用に伴う抗癌免疫応答が詳細に検討され、こうした応答が、残留癌細胞の排除および休止状態の微小転移巣の維持による治療の成功に欠かせないことが示されている（非特許文献４）。しかしながら、この参考文献では、そのような免疫応答を常に増強するために使用できる単純な免疫療法戦略は存在しないことが明らかにされている。
【０００９】
腫瘍を治療するための外科的療法および化学療法の組み合わせを提供する努力が当該技術分野でなされてきた。特許文献１および特許文献２は、転移性腫瘍を治療するための光力学療法と組み合わせた免疫アジュバントの使用を開示している。これらの文献は、免疫アジュバントがマイコバクテリア細胞壁骨格およびデ−３−Ｏ−アセチル化脂質Ａを含み、腫瘍内に注射投与されることを開示している。Ｃａｓｔａｎｏら（非特許文献５）、Ｋｏｒｂｅｌｉｋら（非特許文献６）およびＫｏｒｂｅｌｉｋら（非特許文献７）も、光力学療法と免疫アジュバントとしてのマイコバクテリア細胞壁抽出物の投与の組み合わせを使用する腫瘍の治療を開示している。マイコバクテリア細胞壁は、既知の免疫刺激剤であるトレハロースジミコレートおよびムラミルジペプチドなどの化合物を含有する。従来技術の併用療法で使用されるマイコバクテリア細胞壁抽出物も、炎症誘発性サイトカイン、反応性窒素種を誘導し、かつ消化管に虚血性病変および出血性病変を有する関連脂血症、低血糖および腹膜炎を伴う、ＴＮＦ?α媒介悪液質による体重減少などの病理学と関連する白血球を誘引する。このため、当該分野の併用療法は、炎症反応を悪化させ、重篤な副作用を有し得る。
【００１０】
特許文献３は、抗癌剤（ラパマイシンなど）とともに弱毒化した生きた微生物を投与するという概念を開示している。弱毒化した微生物は、マクロファージを感染させてマクロファージ内でアポトーシスを誘発する能力を保持する必要がある。
【００１１】
特許文献４は、患者に対して再投与するためのドナー細胞の単離前または後にドナー細胞を処置するべくマイコバクテリア成分を使用することを開示している。意図は、ドナー細胞を処置して移植片対宿主病の作用を低減することである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２０００／０６４４７６号公報
【特許文献２】米国特許公開２００５／０１８７２０７号公報
【特許文献３】欧州特許硬化２０８５４６６号公報
【特許文献４】国際公開ＷＯ２００６／１０９３００号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｄｕｎｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００４；２２：３２９−３６０
【非特許文献２】Ｂａｌｋｗｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ  ２００１；３５７：５３９−５４５
【非特許文献３】Ｓｃｈｗａｒｔｓｂｕｒｄ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｔ  Ｒｅｖ  ２００３；２２：９５−１０２
【非特許文献４】Ｚｉｔｖｏｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２００８；１１８，１９９１〜２００１
【非特許文献５】Ｃａｓｔａｎｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒｓ  ２００６；６：５３５
【非特許文献６】Ｋｏｒｂｅｌｉｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ  １９９８；４４：１５１
【非特許文献７】Ｋｏｒｂｅｌｉｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ  ２００１；７３：４０３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明の目的は、従来技術で認められた腫瘍に対する併用療法に関連する問題を解決することであり、具体的には、原発性癌の部位から離れたところに原発性癌が転移することによって形成された続発性癌の治療を提供することである。
【００１５】
本発明は、全細胞マイコバクテリアと相乗的に作用するｍＴＯＲ阻害剤を使用することによって癌を治療および／または予防するための効果的な方法を提供する。ゆえに、本発明は、特定の種類の免疫療法とのｍＴＯＲ阻害剤の併用療法を提供する。本発明者らは、両療法の組み合わせが個々に使用する各療法の効果を単純に足したものを超えて相乗的であることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の第一態様において、ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせて腫瘍性疾患の治療で使用するための全細胞マイコバクテリアであって、該マイコバクテリアは非病原性熱殺菌マイコバクテリアである。
【００１７】
本発明の第二態様において、被験者において原発新生物、腫瘍または癌を予防、治療、低減、阻害および／または制御する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含む方法がある。
【００１８】
本発明の第三態様において、原発新生物、腫瘍または癌から離れた１以上の部位での原発新生物、腫瘍または癌の転移の形成または構築を予防、治療、低減、阻害および／または制御する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含み、該マイコバクテリアが非病原性熱殺菌マイコバクテリアである、方法がある。
【００１９】
ゆえに、本発明は、特定の種類の免疫療法とのｍＴＯＲ阻害剤の併用療法を提供する。本発明者らは、両療法の組み合わせが個々に使用する各療法の効果を単純に足したものを超えて相乗的であることを見出した。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
以下の図面を参照して本発明を説明する。
【図１】ＫＰＣ細胞の同所注入後のマウス（ＫＣマウス）における自然発生膵臓癌モデルにおける生存に対する、ラパマイシンの共投与を伴うまたは伴わないＩＭＭ−１０１の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
「腫瘍」、「癌」、「新生物」および「腫瘍性疾患」という用語は互換可能に使用され、成長、増殖または生存が通常の対照細胞の成長、増殖または生存よりも大きい（例えば、細胞増殖性または分化性疾患）細胞または細胞集団を言う。典型的には、成長は制御されていない。「悪性」という用語は、隣接組織への浸潤を言う。「転移」という用語は、腫瘍、癌または新生物の、被験者内の他の部位、場所または領域（これらの部位、場所または領域は原発性腫瘍または癌とは異なる）への拡散または播種を言う。
【００２２】
「ｍＴＯＲ」という用語は、ラパマイシンのセリン−トレオニンキナーゼ哺乳類標的を言う。現在認識されているｍＴＯＲの多分子シグナル伝達形態は、ｍＴＯＲ複合体１（ｍＴＯＲＣ１）およびｍＴＯＲ複合体２（ｍＴＯＲＣ２）の２つである。
【００２３】
「阻害剤」という用語は、当該技術分野で使用されているような従来の意味を有し、つまり、酵素に結合し、その活性を低減することができる実体である。好ましくは、ｍＴＯＲ阻害剤は、ｍＴＯＲＣ１に結合してその構成成分からのその形成を予防または実質的に予防してｍＴＯＲＣ１の活性を低減することができる。ｍＴＯＲ阻害剤はまた同様の効果を有するｍＴＯＲＣ２に結合するともできる場合がある。より好ましくは、ｍＴＯＲ阻害剤は、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムスもしくはメトホルミンまたはそれらの医薬的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、クラスレート、プロドラッグ、類似体または誘導変異体および／またはそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、ｍＴＯＲ阻害剤はシロリムスまたは先に列挙したようなその誘導体である。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、「患者」および／または「被験者」という用語は互換可能に使用される。
【００２５】
本明細書に規定されるように、「同時」投与は、マイコバクテリアとｍＴＯＲ阻害剤とを互いに約２時間または約１時間以下の間に、さらにより好ましくは同時に投与することを包含する。
【００２６】
本明細書に規定されるように、「個別」投与は、マイコバクテリアとｍＴＯＲ阻害剤とを約１２時間、または約８時間、または約６時間または約４時間または約２時間よりも長く空けて投与することを包含する。
【００２７】
本明細書に規定されるように、「順次」投与は、マイコバクテリアとｍＴＯＲ阻害剤とを複数のアリコ?トでおよび／もしくは用量で並びに／または別々の時にそれぞれ投与することを含む。任意には、マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前またはその後に引き続き被験者に投与される。あるいは、マイコバクテリアは、腫瘍退縮治療後に引き続き被験者に投与される。
【００２８】
ラパマイシン（ｍＴＯＲ）経路の哺乳類の標的は細胞成長および増殖の重要なレギュレータであり、この分野の研究は、ｍＴＯＲの調節異常が様々な癌において重要な役割を果たすことを明らかにした。ｍＴＯＲは、翻訳を調節するための成長因子などのマイトジェンおよび栄養素によって引き起こされるシグナル伝達において中心的な役割を果たすようである。多くの細胞プロセスのレギュレータとしてのｍＴＯＲの役割および治療標的としてのその可能性の背後にある科学を理解することは、数種類の癌における治療可能性を広げてきた。ｍＴＯＲは、栄養素および成長因子刺激からのシグナルを統合するその能力によって細胞成長と細胞周期の進行との両方を調節する２９０ｋＤａのセリン−トレオニンキナーゼである。フォスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）−キナーゼ関連キナーゼ（ＰＩＫＫ）スーパーファミリーのメンバーであるｍＴＯＲは、高度に保存されたドメインに分類される２５４９のアミノ酸から構成される。ｍＴＯＲは、ｍＲＮＡ翻訳機構に対する効果によりタンパク質産生を制御する細胞内キナーゼである。これらのタンパク質は、細胞代謝、細胞成長、細胞分裂および低酸素症またはＤＮＡ損傷などの細胞ストレスに対する反応に重要な幾つかのプロセスの重要な構成成分を含む。
【００２９】
ｍＴＯＲは、細胞環境内での成長状態を感知し、細胞がこの環境内での変化に応答する
手助けをする。活性ｍＴＯＲは、細胞周期レギュレータに対するその効果を通して直接的に、かつ、栄養素輸送体の産生を通じた細胞内への栄養素供給および血管新生の促進を通じた細胞の環境内への栄養素供給を維持することによって間接的に、細胞成長における応答を調整する。ｍＴＯＲの活性化は、細胞ストレス（低酸素症、ＤＮＡ損傷、熱ショック、外部ｐＨ、浸透ストレス、酸化ストレスなど）の状態を監視しつつ、細胞成長に必要な基本材料（アミノ酸、グルコース、エネルギーなど）ならびに他の細胞および組織（ホルモン、成長因子）からの成長調節シグナルのアベイラビリティを考慮に入れる決定点を表す。このように、細胞は、細胞内部の栄養素およびエネルギーの供給が試みを支持するには十分でない場合に生じる成長および増殖すべき細胞外部のシグナルから保護される。
【００３０】
成長促進経路の上流には、ｍＴＯＲに集中する重要な分子があり、これらはしばしば何らかの様式で癌において調節緩和される（ｄｅｒｅｇｕｌａｔｅｄ）。癌に見られる幾つかの変異はｍＴＯＲスイッチを活性化する不適切なシグナルを産生し、癌細胞の成長および増殖を推進する。
【００３１】
ｍＴＯＲは、栄養素［例えば、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、グルコース、アミノ酸、コレステロールおよび鉄］のアベイラビリティを感知し、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／結節性硬化症（ＴＳＣ）経路を介した成長因子シグナル伝達とこの情報を統合する。活性化されたｍＴＯＲは、翻訳タンパク質Ｓ６キナーゼ（Ｓ６Ｋ）および４Ｅ結合タンパク質１（４Ｅ−ＢＰ１）をリン酸化することによって選択ｍＲＮＡに関するタンパク質合成率を調節する。ｍＴＯＲ活性化は、細胞成長および血管新生を刺激して細胞代謝を調節する下流エフェクターを増大させる。
【００３２】
ｍＴＯＲが細胞増殖に対するその調節効果を発揮する主な方法は、サイクリンＤ１の産生を制御することによるものである。サイクリンは、細胞周期の臨界的なＧ１−Ｓ制限点を通じてサイクリン依存キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれる酵素の活性を調節し、順次細胞の通過（ｐａｓｓａｇｅ）を調節するタンパク質である。最近、サイクリンＤ１は、遺伝子転写、細胞代謝および細胞移動において役割を果たすことが示されている。
【００３３】
サイクリンＤ１の過剰発現は、乳癌、結腸癌、前立腺癌、リンパ腫および黒色腫などのいくつかの癌と関連付けられている。
【００３４】
腫瘍硬化症複合体（ｔｕｍｏｕｒ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｃｏｍｐｌｅｘ）（ＴＳＣ１またはＴＳＣ２）における変異もまたｍＴＯＲの過剰活性化につながり得る。この過剰活性化により、ＴＳＣを伴う患者において細胞増殖および多系統腫瘍が調節されなくなる。下流シグナル伝達タンパク質の過剰リン酸化によって証明されるように、ｍＴＯＲ活性化の増大は、ＴＳＣ関連病変において観察されている。
【００３５】
ｍＴＯＲは、血管新生、すなわち、酸素および栄養素を成長し分裂する細胞に提供するための新たな血管の形成において重要な役割を果たす。ｍＴＯＲは、低酸素症誘導因子１（ＨＩＦ−１）／低酸素症誘導因子２（ＨＩＦ−２）の翻訳を増大させる。ＨＩＦ転写因子は低酸素ストレス応答遺伝子（血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）などの血管新生成長因子、血小板由来成長因子β（ＤＧＦ−β）および形質転換成長因子−α（ＴＧＦ−α））の発現を引き起こす。
【００３６】
ＨＩＦ−１αおよびＨＩＦ−１βレベルの増加は、いくつかの腫瘍タイプ（子宮頸癌、乳癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、頭頚部癌および消化管間質腫瘍など）における死亡率の増加と相関性があることが示されている。さらに、フォン・ヒッペル・リンドウ（ＶＨＬ）タンパク質の喪失（これもＨＩＦ−１αレベルの増加をもたらす）は、多くの場合の腎細胞癌（ＲＣＣ）の主要な原因であり、膵臓癌および神経内分泌腫瘍（ＮＥＴ）にも関与する。
【００３７】
生体エネルギー研究は、ｍＴＯＲが細胞代謝を調節する上で重要な役割を果たすことを示している。ｍＴＯＲは栄養素輸送体タンパク質の表面発現を増大させる。これらタンパク質の増加により、細胞によるアミノ酸および他の栄養の摂取が増え、異常な細胞成長および生存に対する十分な栄養素の支持が得られる。さらに、異常に活性化したｍＴＯＲは、解糖に必要なコア酵素の産生を増大させることによって癌細胞に競合的な成長の利点を与え、それにより癌細胞は低酸素条件下でさえ生存し成長することができる。
【００３８】
ｍＴＯＲ活性が細胞の生存に役割を果たすという証拠には幾つかの系統がある。この研究の大部分は、ｍＴＯＲ阻害が細胞死経路に対する感受性を増大することを明らかにしているが、ｍＴＯＲ活性化が腫瘍進行に寄与する抗アポトーシスタンパク質の活性化を通じて細胞生存を促進する上で役割を果し得るという新たな証拠もある。
【００３９】
細胞進行、血管新生、細胞代謝およびアポトーシスにおける異常な活性をもたらす上流経路の異常調節によるｍＴＯＲの過剰活性化は様々な癌の種類に関与している。
【００４０】
腎細胞癌
ｍＴＯＲは、ＲＣＣにおける重要なタンパク質であるＨＩＦ−１αの産生を制御し、ここでその未調節の活性は疾患の病因と因果関係がある。ｍＴＯＲはＲＣＣにおいて幾つかの血管新生成長因子の産生を調節する。ｍＴＯＲは、成長因子に応答する血管新生細胞の能力を制御し得る。ｍＴＯＲはＲＣＣおよび腫瘍微小血管系細胞における細胞成長および細胞分裂を制御し、多くの場合、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ経路におけるｍＴＯＲの上流で欠陥をシグナル伝達することによって腎臓癌において異常調節される。ｍＴＯＲは栄養摂取と細胞代謝を調節し、ＲＣＣにおける特徴的な代謝変化に寄与する。
【００４１】
神経内分泌腫瘍（ＮＥＴ）
ＮＥＴにおける幾つかの重要な分子変化は、ｍＴＯＲ経路と結びついている。成長因子シグナル伝達、つまり、ｍＴＯＲの上流での上皮成長因子（ＥＧＦ）およびインスリン様成長因子（ＩＧＦ）シグナル伝達の増大がＮＥＴにおいて頻繁に認められてきた。また、インスリン分泌は膵臓β細胞腫瘍におけるｍＴＯＲの自己分泌活性化に関与すると考えられている。ｍＴＯＲはＮＥＴと関連する多くの遺伝子変異（ＶＨＬ遺伝子の生殖細胞系欠失）により活性化される。ｍＴＯＲは、血管新生を調節することによって栄養素の供給を癌細胞に向ける。ＮＥＴは高度に脈管系である。ＶＥＧＦ発現は消化管カルチノイドおよび膵島細胞腫瘍の８０〜８６％に認められている。
【００４２】
胃癌
ｍＴＯＲは、胃腺癌の６０〜８０％で活性化され、びまんおよび腸サブタイプの両方において、および、リンパ管に浸潤する腫瘍細胞において、初期および進行期の疾患内で発現される。ｍＴＯＲ経路は、多くの胃腫瘍において過剰発現している複数の成長因子受容体、すなわち上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）、インスリン様成長因子１型受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）によって活性化される。ｍＴＯＲは、新たな血管形成を促進し、胃癌患者における不良な結果を予測する血管新生因子（ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ）の産生を調節する。ｍＴＯＲは栄養摂取および細胞代謝を調節し、癌における特徴的な代謝変化に寄与する。ＨＩＦ−１αは、大部分の胃癌において発現し、浸潤した腫瘍縁部でのＨＩＦ−１α発現は進行期疾患、リンパ節転移および生存不良と関連する。
【００４３】
乳癌
ｍＴＯＲシグナル伝達は、乳癌の病因において重要である。ｍＴＯＲシグナル伝達はエストロゲン受容体（ＥＲ）活性化および適応エストロゲン過敏症に関連し得る。ｍＴＯＲ経路シグナル伝達は、内分泌療法に抵抗性のＨＥＲ２＋腫瘍細胞において増大される。ｍＴＯＲ活性化は内分泌療法で治療した患者に関するより悪い臨床的結果を予測する。ｍＴＯＲは、栄養摂取、細胞代謝および血管新生を調節することによって癌細胞への栄養素の供給を制御する。
【００４４】
肺細胞癌（ＨＣＣ）
ｍＴＯＲ依存性シグナル伝達はＨＣＣの２５〜４５％で活性である。活性化はより短い全生存と相関し、ｍＴＯＲ活性化は手術後再発の独立した予測因子である。ｍＴＯＲは血管新生因子の産生を調節する。高いＶＥＧＦレベルは、腫瘍細胞増殖、腫瘍小結節のカプセル化不良、血管浸潤、より高いグレードおよび切除後の予後不良と関連している。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路を通じたｍＴＯＲ活性化は、ＨＣＣ細胞増殖および生存を促進するＥＧＦ、ＴＧＦ−α、ＩＧＦおよび肺細胞成長因子（ＨＧＦ）などの成長因子の発現増大と関連している。
【００４５】
リンパ腫
非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）のおよそ８５％がＢ細胞系統の細胞から生じる。ｍＴＯＲシグナル伝達はホジキンリンパ腫細胞系および原発腫瘍において活性化される。サイクリンＤ１過剰発現はマントル細胞リンパ腫特有の特徴である。ＰＩ３ＫおよびＡｋｔ過剰発現は幾つかのＢ細胞リンパ腫において頻繁に認められる。
【００４６】
本発明の１つの態様において、全細胞マイコバクテリアは熱殺菌される。本発明で使用するためのマイコバクテリア種の例としては、Ｍ．ｖａｃｃａｅ、Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｒｅｓｉｓｔｉｂｉｌｅ、Ｍ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｍ．ｄｕｖａｌｉｉ、Ｍ．ｐｈｌｅｉ、Ｍ．ｏｂｕｅｎｓｅ、Ｍ．ｐａｒａｆｏｒｔｕｉｔｕｍ、Ｍ．ｓｐｈａｇｎｉ、Ｍ．ａｉｃｈｉｅｎｓｅ、Ｍ．ｒｈｏｄｅｓｉａｅ、Ｍ．ｎｅｏａｕｒｕｍ、Ｍ．ｃｈｕｂｕｅｎｓｅ、Ｍ．ｔｏｋａｉｅｎｓｅ、Ｍ．ｋｏｍｏｓｓｅｎｓｅ、Ｍ．ａｕｒｕｍ、Ｍ．ｉｎｄｉｃｕｓ  ｐｒａｎｉｉ、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍ．ｍｉｃｒｏｔｉ、Ｍ．ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｍ．ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍ．ｍａｒｉｎｕｍ、Ｍ．ｓｉｍｉａｅ、Ｍ．ｇａｓｔｒｉ、Ｍ．ｎｏｎｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍ．ｔｅｒｒａｅ、Ｍ．ｔｒｉｖｉａｌｅ、Ｍ．ｇｏｒｄｏｎａｅ、Ｍ．ｓｃｒｏｆｕｌａｃｅｕｍ、Ｍ．ｐａｒａｆｆｉｎｉｃｕｍ、Ｍ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ、Ｍ．ａｖｉｕｍ、Ｍ．ｘｅｎｏｐｉ、Ｍ．ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍ．ｄｉｅｒｎｈｏｆｅｒｉ、Ｍ．ｓｍｅｇｍａｔｉｓ、Ｍ．ｔｈａｍｎｏｐｈｅｏｓ、Ｍ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｍ．ｆｏｒｔｕｉｔｕｍ、Ｍ．ｐｅｒｅｇｒｉｎｕｍ、Ｍ．ｃｈｅｌｏｎｅｉ、Ｍ．ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍ．ｌｅｐｒａｅ、Ｍ．ｌｅｐｒａｅｍｕｒｉｕｍおよびこれらの組み合わせを含む。
【００４７】
熱殺菌マイコバクテリアは、非病原性である。非病原性熱殺菌マイコバクテリアは、好ましくは、Ｍ．ｖａｃｃａｅ、Ｍ．ｏｂｕｅｎｓｅ、Ｍ．ｐａｒａｆｏｒｔｕｉｔｕｍ、Ｍ．ａｕｒｕｍ、Ｍ．ｉｎｄｉｃｕｓ  ｐｒａｎｉｉ、Ｍ．ｐｈｌｅｉおよびこれらの組み合わせから選択される。更に好ましくは、非病原性熱殺菌マイコバクテリアは、ラフ変異株である。患者へのマイコバクテリア投与量は、患者の免疫システムが癌に対し効果的な免疫応答を行えるように、患者の保護免疫応答の誘導に十分な量である。本発明のある実施形態では、マイコバクテリアを特定の量および／または投薬スケジュールで被験者に投与することが好ましい。このように、本発明のある実施形態では、本発明において使用するために有効量の熱殺菌マイコバクテリアを含む封じ込め手段が提供される。この手段では、典型的に、微生物数は１０３〜１０１１、好ましくは１０４〜１０１０、更に好ましくは１０６〜１０１０、更により好ましくは１０６〜１０９であってよい。本発明において使用するための有効量の熱殺菌マイコバクテリアは、微生物数１０３〜１０１１、好ましくは微生物数１０４〜１０１０、好ましくは微生物数１０６〜１０１０、更に好ましくは微生物数１０６〜１０９であってよい。本発明において使用するための熱殺菌マイコバクテリアの量は、最も好ましくは、微生物数１０７〜１０９である。典型的には、本発明による組成物は、ヒトおよび動物に使用する場合、投与量１０８〜１０９細胞で投与してもよい。あるいは、用量は、懸濁液または乾燥製剤のいずれかとして示される微生物重量が約０．０１ｍｇ〜１ｍｇまたは約０．１ｍｇ〜１ｍｇである。
【００４８】
Ｍ．ｖａｃｃａｅおよびＭ．ｏｂｕｅｎｓｅが特に好ましい。
【００４９】
Ｍ．ｖａｃｃａｅおよびＭ．ｏｂｕｅｎｓｅは、宿主において複合免疫応答を誘導する。これらの製剤を用いた治療では、先天的かつタイプ１の免疫（Ｔｈ１）（マクロファージ活性化および細胞障害性細胞活性を含む）を刺激する。それらはまた免疫調節機構を介して不適切なＴｈ２応答を下方調節する。これは免疫系の健康なバランスを回復させる。
【００５０】
本発明を使用して、腫瘍性疾患を治療するために使用することができる。本明細書中で使用する場合、「治療」は、腫瘍性疾患の予防、低減、制御および／または阻害を包含する。このような疾患としては、肉腫、癌腫、腺癌、黒色腫、骨髄腫、芽腫、膠腫、リンパ腫または白血病が挙げられる。癌の例としては、癌腫、肉腫、腺癌、黒色腫、神経（芽腫、膠腫）、中皮種および細網内皮性、リンパ性または造血性腫瘍性疾患（骨髄腫、リンパ腫または白血病）が挙げられる。特定の態様において、新生物、腫瘍または癌としては肺腺癌、肺癌、びまん性または間質性胃癌、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌、乳癌、膵臓腺癌、卵巣腺癌、副腎腺癌、子宮内膜腺癌または子宮腺癌が挙げられる。
【００５１】
新生物、腫瘍および癌としては良性、悪性、転移性および非転移性タイプが挙げられ、新生物、腫瘍または癌のいずれかの段階（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶまたはＶ）もしくはグレード（Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３など）、または進行中、悪化中、安定化したまたは回復期の新生物、腫瘍、癌または転移が挙げられる。本発明により治療され得る癌としては、膀胱、血液、骨、骨髄、脳、胸、結腸、食道、胃腸、歯肉、頭、腎臓、肝臓、肺、鼻咽頭、首、卵巣、前立腺、皮膚、胃、睾丸、舌または子宮の細胞または新生物が挙げられるが、これらに限定されない。また癌は具体的には以下の組織型であってよいがこれらに限定されるものではない：悪性新生物；癌腫；未分化癌腫；巨細胞癌および紡錘形細胞腫瘍；小細胞癌；乳頭癌；扁平上皮癌；リンパ上皮癌；基底細胞癌；毛母細胞腫；移行細胞癌；乳頭状移行細胞癌；腺癌；悪性ガストリノーマ；胆管癌；肝細胞癌；肝細胞癌と胆管癌との複合癌；小柱腺癌；腺様嚢胞癌；腺腫性ポリープ内腺癌；家族性大腸ポリポージス腺癌；固形癌；悪性カルチノイド腫瘍；細気管支肺胞腺癌；乳頭腺癌；嫌色素性細胞癌；好酸性細胞癌；好酸性腺腫；好塩基性腺腫；透明細胞腺癌；顆粒細胞癌；濾胞状腺癌；乳頭および濾胞状腺癌；非被包性硬化性癌；副腎皮質細胞癌；子宮内膜性腫瘍；皮膚付属器腫瘍；アポクリン腺癌；皮脂腺癌；耳垢腺癌；粘液性類表皮癌；嚢胞腺癌；乳頭状嚢胞腺癌；乳頭状漿液性嚢胞腺癌；ムチン性嚢胞腺癌；粘液腺癌；印環細胞癌；浸潤性導管癌；髄様癌；小葉癌；炎症性癌；乳房パジェット病；腺房細胞癌；腺扁平上皮癌；扁平上皮化生を伴う腺癌；悪性胸腺腫；悪性卵巣間質細胞癌；悪性莢膜細胞腫、；悪性顆粒膜細胞腫；悪性男性胚細胞腫、；セルトリ細胞癌；悪性ライディッヒ細胞癌；悪性脂質細胞癌；悪性傍神経節腫；悪性乳房外傍神経節腫；褐色細胞腫；悪性グロームス腫瘍（ｇｌｏｍａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）；悪性黒色腫；メラニン欠乏性黒色腫；表在拡大型黒色腫；悪性黒色腫巨細胞色素性母斑；類上皮細胞黒色腫；悪性青色母斑；肉腫；線維肉腫；悪性線維性組織球腫；粘液肉腫；脂肪肉腫；平滑筋肉腫；横紋筋肉腫；胎児性横紋筋肉腫；胞巣状横紋筋肉腫；間質細胞肉腫；混合腫瘍；ミューラー混合腫瘍；腎芽細胞腫；肝芽腫；癌肉腫；悪性間葉細胞腫；悪性ブレンナー腫；悪性葉状腫瘍；滑膜肉腫；悪性中皮腫；未分化胚細胞腫；胎生期癌；悪性奇形腫；悪性卵巣甲状腺腫；絨毛癌；悪性中腎腫；血管肉腫；悪性血管内皮腫；カポジ肉腫；悪性血管周囲細胞腫；リンパ管肉腫；骨肉腫；傍骨性骨肉腫；軟骨肉腫；悪性軟骨芽細胞腫；間葉性軟骨肉腫；骨巨細胞腫；ユーイング肉腫；悪性歯原性腫瘍；エナメル上皮肉腫；悪性エナメル上皮腫；悪性エナメル上皮線維肉腫；悪性松果体腫；脊索腫；悪性神経膠腫；上衣細胞腫；星状細胞腫；原形質性星状細胞腫；線維性星状細胞腫；星状芽細胞腫；グリア芽細胞腫；乏突起膠腫；乏突起膠芽細胞腫；未分化神経外胚葉性腫瘍；小脳肉腫；神経節芽細胞腫；神経芽細胞腫；網膜芽細胞腫；嗅神経原性腫瘍；悪性髄膜腫；神経線維肉腫；悪性神経鞘腫；悪性顆粒細胞腫；悪性リンパ腫；ホジキン病；ホジキン；側肉芽腫；小リンパ球性悪性リンパ腫；びまん性大細胞悪性リンパ腫；濾胞性悪性リンパ腫；菌状息肉腫；他の特異的非ホジキンリンパ腫；悪性組織球増殖症；多発性骨髄腫；肥満細胞肉腫；免疫増殖性小腸疾患；白血病；リンパ性白血病；形質細胞性白血病；赤白血病；リンパ肉腫細胞性白血病；骨髄性白血病；好塩基球性白血病；好酸球性白血病；単球性白血病；肥満細胞白血病；巨核芽球性白血病；骨髄性肉腫；および有毛細胞性白血病。好ましくは、腫瘍性疾患は、前立腺癌、肝臓癌、腎癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、膵臓癌、脳腫瘍、肝細胞癌、リンパ腫、白血病、胃癌、子宮頸癌、卵巣癌、甲状腺癌、悪性黒色腫、頭頸部癌、皮膚癌と軟部組織肉腫および／または他の形態の癌腫から選択される癌に関連する腫瘍であってよい。腫瘍は、転移性または悪性腫瘍であり得る。
【００５２】
より好ましくは、治療すべき腫瘍性疾患は、膵臓癌、乳癌、前立腺癌および皮膚癌である。最も好ましくは、治療すべき腫瘍性疾患は膵臓癌である。
【００５３】
本発明の実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤をマイコバクテリアとの併用療法において使用して原発性腫瘍もしくは癌の他の部位への転移、または原発性腫瘍もしくは癌から離れた他の部位での転移性腫瘍もしくは癌の形成もしくは構築を低減または阻害し、それにより腫瘍もしくは癌の再発または腫瘍もしくは癌進行を阻害または低減する。
【００５４】
更なる実施形態において、本発明の方法は、とりわけ、１）潜在的に転移を呈する腫瘍または癌細胞の成長、増殖、移動性または侵襲性を低減または阻害すること、２）原発性腫瘍または癌とは異なる１以上の部位、場所または領域への原発性腫瘍または癌から生じる転移の形成または構築を低減または阻害すること、３）転移が形成または構築された後、原発性腫瘍または癌とは異なる１以上の他の部位、場所または領域での転移の成長または増殖を低減または阻害すること、および４）転移が形成または構築された後、更なる転移の形成または構築を低減または阻害することを包含する。
【００５５】
本発明の実施形態において、マイコバクテリアとの併用療法におけるｍＴＯＲ阻害剤の投与は、所与の被験者の症状における検出可能または測定可能な改善、例えば、細胞増殖性または細胞過剰増殖性疾患、新生物、腫瘍もしくは癌または転移の存在と関連する１以上の逆の（物理的）症状または結果の軽減または緩和、すなわち治療的利点または治療的効果をもたらす。
【００５６】
治療的利点または治療的効果は、任意の客観的もしくは主観的、一過性、一時的もしくは長期的な症状もしくは病状の改善、または新生物、腫瘍もしくは癌または転移などの細胞過剰増殖性疾患もしくは細胞増殖に関連するかもしくはそれにより引き起こされる有害症状の発症、重篤性、期間もしくは頻度の低減である。本発明による治療方法の満足ゆく臨床的なエンドポイントは、例えば、１もしくはそれ以上の関連する病状、有害症状もしくは合併症の重篤性、期間もしくは頻度が漸進的または部分的に低減するか、または新生物、腫瘍もしくは癌または転移などの細胞過剰増殖性疾患もしくは細胞増殖の１もしくはそれ以上の生理学的、生化学的もしくは細胞兆候もしくは特徴の阻害または逆転がある場合に達成される。ゆえに、治療的利点または改善は、新生物、腫瘍もしくは癌または転移などの細胞過剰増殖性疾患もしくは細胞増殖に関連するかもしくはそれにより引き起こされる有害症状または合併症の低減であり得る。しかしながら、治療的利点または改善は、すべての標的増殖細胞（新生物、腫瘍もしくは癌または転移など）の治癒または完全な破壊である必要はない。例えば、腫瘍または癌の進行または悪化を阻害することによる腫瘍または癌の質量、サイズまたは細胞数の安定化は、腫瘍または癌の質量、サイズまたは細胞数（ｃｅｌｌｓ）の一部分または大部分が残っていたとしても、死亡率を低減し、わずか数日、数週間または数か月でも寿命を延長し得る。
【００５７】
治療的利点の特定の非限定例としては、新生物、腫瘍もしくは癌または転移の容積（サイズまたは細胞量）もしくは細胞数の低減、新生物、腫瘍もしくは癌の容積増加を阻害もしくは防止する（すなわち安定化する）、新生物、腫瘍もしくは癌の進行、悪化もしくは転移、を遅延させるもしくは阻害する、または新生物、腫瘍もしくは癌の増殖、成長もしくは転移を阻害することを包含する。
【００５８】
発明の方法は即座に効力を生じないことがある。例えば、治療の後に腫瘍容積に対する効果の遅延および／または新生物、腫瘍もしくは癌の細胞数もしくは量の初期増加がみられることがあるが、時間が経つにつれて、最終的には所与の被験者における腫瘍の細胞量、サイズまたは細胞数の安定化または低減が続いて起こり得る。
【００５９】
阻害、低減、低下、遅延または予防され得る新生物、腫瘍、癌および転移に関連する更なる有害症状および合併症としては、例えば、吐き気、食欲不振、無気力、痛みおよび不快感が挙げられる。よって、細胞過剰増殖性疾患に関連するもしくはそれによって引き起こされる有害症状もしくは合併症の重篤度、期間または頻度の部分的もしくは完全な低下もしくは低減、エネルギー、食欲、精神面での健康などの被験者の健康の改善は全て、治療的利点の具体的な非限定例である。
【００６０】
ゆえに、治療的利点または改善には、治療を受けた被験者の生活の質の主観的な改善も含むことができる。
【００６１】
更なる実施形態において、方法は被験者の寿命（生存）を延ばすまたは延長する。更なる実施形態において、方法は、被験者の生活の質を改善する。
【００６２】
「有効量」または「治療的に有効な量」という用語は、所望の生物学的、治療的および／または予防的結果をもたらすのに十分な剤の量を言う。その結果とは、疾患の兆候、症状もしくは原因の１以上の低減、改善、緩和、軽減、遅延および／または削減、または生物系のその他所望の改変であり得る。癌に関して、有効量は、腫瘍を縮小させるおよび／または腫瘍の成長率を低下させる（腫瘍成長を抑制するなど）または他の望ましくない細胞増殖を防ぐまたは遅延させるのに十分な量を含む。幾つかの実施形態において、有効量は、発症を遅延させるのに十分な量である。幾つかの実施形態において、有効量は、再発を予防するまたは遅延させるのに十分な量である。有効量は、１以上の投与において投与可能である。薬剤または組成物の有効量は、（ｉ）癌細胞の数を減らし得る；（ｉｉ）腫瘍サイズを低減し得る；（ｉｉｉ）癌細胞の周辺器官への浸潤をある程度まで阻害する、妨害する、遅らせるおよび好ましくは停止し得る；（ｉｖ）腫瘍転移を阻害し得る（すなわち、ある程度まで遅らせるおよび好ましくは停止し得る）；（ｖ）腫瘍成長を阻害し得る；（ｖｉ）腫瘍の発生および／もしくは再発を予防するまたは遅延させ得る；ならびに／または（ｖｉｉ）癌に関連する症状の１以上をある程度まで緩和し得る。
【００６３】
最も好ましい実施形態において、マイコバクテリアとの併用療法にてｍＴＯＲ阻害剤を投与することにより、以下の１以上から選択される病状および進行の１以上のマーカにおける臨床的に関連性のある改善が得られる：（ｉ）全生存；（ｉｉ）無進行生存；（ｉｉｉ）全応答率；（ｉｖ）転移性疾患の低減；（ｖ）関連する場合には、癌関連抗原の血中濃度；（ｖｉ）栄養状態（体重、食欲、血清アルブミン）または（ｖｉｉ）疼痛管理または鎮痛用途。
【００６４】
熱殺菌全細胞Ｍ．ｖａｃｃａｅおよびＭ．ｏｂｕｅｎｓｅでの予備治療は、より複雑な免疫を生じさせ、このような免疫は、先天的免疫かつタイプ１の免疫の発現だけでなく、適切な免疫機能をより効果的に回復させる免疫調節も含む。
【００６５】
本発明によるマイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせて投与される。
【００６６】
好ましい実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤は、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムスもしくはメトホルミン、またはこれらの医薬的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、クラスレートもしくはプロドラッグ、類似体または誘導変異体、またはそれらの組み合わせから選択されてもよい。
【００６７】
最も好ましい実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤はラパマイシン（シロリムス）である。
【００６８】
本明細書全体で使用される場合、「組み合わせ」という用語は、マイコバクテリアの投与と同時に、別々にまたは順次にｍＴＯＲ阻害剤を投与することを包含することが意図される。したがって、ｍＴＯＲ阻害剤およびマイコバクテリアは、同じまたは別個の医薬製剤中に、同時にまたは別々の時に存在し得る。
【００６９】
よって、マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤は、同時にまたは別々の時に投与するための別個の薬剤として提供されてもよい。
【００７０】
好ましくは、マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤は、別々の時に投与するための別個の薬剤として提供される。別々の時に別々に投与される場合、マイコバクテリアまたはｍＴＯＲ阻害剤のいずれかを初めに投与してもよいが、マイコバクテリアの後にｍＴＯＲ阻害剤を投与するのが好ましい。さらに、両方を同日にまたは別々の日に投与することができ、治療サイクル中に同じスケジュールを用いてまたは異なるスケジュールで投与することができる。
【００７１】
ｍＴＯＲ阻害剤の各サイクルの期間は、約１〜約３日または最大約５２週またはそれ以上であってもよい。必要に応じて、各薬剤に対して複数のサイクルを与えることができる。よって、本発明の実施形態において、治療サイクルは、毎日、毎週、隔週または毎月、ｍＴＯＲ阻害剤と同時にマイコバクテリアを投与することからなる。あるいは、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前および／または後に、マイコバクテリアを投与する。
【００７２】
投与遅延および／または投与低減およびスケジュール調整は、個々の患者の治療耐性に合わせて必要に応じて行われる。
【００７３】
マイコバクテリアの有効量は、任意には約２日または約２週または約４週または約８週の間隔で、複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。
【００７４】
別の実施形態において、治療計画は、マイコバクテリアを最初の３回については２日ごとまたは最大で２週ごとに投与し、次いで残り４週は次の３回については２週ごとに投与し、次いで４週ごとに投与し、前記マイコバクテリアの最初の投与後から少なくとも１日〜１４日目にｍＴＯＲ投与を開始することを含む。
【００７５】
本発明の更なる実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の有効量（任意には、約０．５ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、例えば約１．５ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、任意には経口経路）は、マイコバクテリアの投与前に、それと同時におよび／または後に、複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。例えば、マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤のいずれも、少なくとも約２回、４回、６回、８回、１０回、１２回、１５回、２０回またはそれ以上反復投与され、任意にはｍＴＯＲ阻害剤は毎日投与される。
【００７６】
本発明の更なる実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の有効量（任意には、約０．５ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、例えば約１．５ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日または約５ｍｇ／日〜１０ｍｇ／日、任意には経口経路、ｍＴＯＲ阻害剤はエベロリムスである）は、マイコバクテリアの投与前、それと同時および／または後に、複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。
【００７７】
本発明の更なる実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の有効量（任意には、約０．５ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、例えば約２ｍｇ／日〜約６ｍｇ／日、任意には経口経路、ｍＴＯＲ阻害剤はラパマイシンである）は、マイコバクテリアの投与前、それと同時および／または後に、複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上反復投与されてもよい。
【００７８】
マイコバクテリアは、非経口、経口、舌下、経鼻または肺経路で患者に投与されてもよい。好ましい実施形態において、マイコバクテリアは、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮内、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、腹腔内、静脈内および小胞体内注入から選択される非経口経路により投与される。より好ましくは、非経口経路による投与はマイコバクテリア細胞壁抽出物の腫瘍内注射を含まない。
【００７９】
本発明による投薬スケジュールは、前記ｍＴＯＲ阻害剤投与日の前およびその日に、約０．２５時間〜約２週間マイコバクテリアを投与し、次いで約２日ごと〜約２週ごとまたは約４週後に前記マイコバクテリアをさらに投与することを包含する。さらに、マイコバクテリアの投薬量を、毎日、毎週または隔週または毎月の間隔、例えば約８週間以上、または約１０週および約１２週またはそれ以上にわたって投与してもよい。最初の投与を行った後、マイコバクテリアを引き続き最大１２か月間またはそれ以上投与してもよい。
【００８０】
本発明によるｍＴＯＲ阻害剤療法を受けるべき被験者は、マイコバクテリアの投与と同時に、別々にまたは順次にそれを受けてもよい。マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前に患者に投与されてもよい。より具体的には、マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤投与前約４週〜約１日またはそれ以下で患者に投与されてもよい。あるいは、マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前４週〜約１日またはそれ以下に１以上の時間間隔で、有効量のマイコバクテリアを各々含有する１以上のアリコートとして投与されてもよい、および／またはマイコバクテリアはｍＴＯＲ阻害剤の投与後に適用されてもよい。更なる代替として、マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤後４週〜約１日またはそれ以下に１以上の時間間隔で、有効量のマイコバクテリアを各々含有する１以上のアリコートとして投与されてもよい、および／またはマイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤の投与後に適用され、かつ、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前および／または後に、少なくとも約２回、４回、６回、８回、１０回、１２回、１５回、２０回またはそれ以上反復されてもよい。
【００８１】
本発明の好ましい実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせて腫瘍性疾患の治療に使用するためのマイコバクテリアであって、前記マイコバクテリアがｍＴＯＲ阻害剤の投与前、それと同時および／または後に被験者に投与される、マイコバクテリアがある。
【００８２】
本発明のさらに好ましい実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせて腫瘍性疾患の治療に使用するためのマイコバクテリアであって、ｍＴＯＲ阻害剤の投与前、それと同時および／または後に被験者に投与され、前記マイコバクテリアおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤が反復投与されるべきものである、マイコバクテリアがある。
【００８３】
本発明のさらに好ましい実施形態において、被験者において原発新生物、腫瘍または癌を予防、治療、低減、阻害および／または制御する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含み、前記マイコバクテリアがｍＴＯＲ阻害剤の投与前、それと同時および／または後に被験者に投与され、任意には前記マイコバクテリアおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤が反復投与されるべきものである、方法がある。
【００８４】
本発明の別の好ましい実施形態において、原発新生物、腫瘍または癌から離れた１以上の部位で原発新生物、腫瘍または癌の転移の形成または構築を予防、治療、低減、阻害および／または制御する方法であって、治療的に有効な量の（ｉ）ｍＴＯＲ阻害剤と（ｉｉ）全細胞マイコバクテリアとを被験者に対して同時に、別々にまたは順次投与することを含み、前記マイコバクテリアが、前記ｍＴＯＲ阻害剤が投与される前、それと同時におよび／または後に被験者に投与され、任意には前記マイコバクテリアおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤が反復投与されるべきものである、方法がある。
【００８５】
本発明の１つの実施形態において、マイコバクテリアは、投薬形態で患者に投与される薬剤の形態であってもよい。
【００８６】
本発明の更なる実施形態において、有効量のマイコバクテリアは単回投与として投与されてもよい。あるいは、有効量のマイコバクテリアは複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。例えば、マイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤投与前約４週〜約１日またはそれ以下に投与されてもよい。投与は単回または複数回投与で示されてもよい。
【００８７】
本発明の更なる実施形態において、有効量のマイコバクテリアは、ｍＴＯＲ阻害剤投与と同時に、複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。例えば、マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤はいずれも、少なくとも約２回、４回、６回、８回、１０回、１２回、１５回、２０回またはそれ以上反復投与されてもよく、任意にはｍＴＯＲ阻害剤は毎日投与される。マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤双方の投与は複数回投与で示されてもよい。
【００８８】
本発明の更なる実施形態において、有効量のｍＴＯＲ阻害剤（任意には、約０．５ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、例えば約１．５ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日または約５ｍｇ／日〜１０ｍｇ／日、任意には経口経路）は、マイコバクテリア投与前、それと同時および／または後に、毎日複数回（反復）投与、例えば２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、１０回以上または２０回以上投与されてもよい。例えば、マイコバクテリアおよびｍＴＯＲ阻害剤はいずれも、少なくとも約２回、４回、６回、８回、１０回、１２回、１５回、２０回またはそれ以上反復投与されてもよく、任意にはｍＴＯＲ阻害剤は毎日投与される。
【００８９】
本発明の容器は、特定の例においては、バイアル、アンプル、注射器、カプセル、錠剤またはチューブであってもよい。場合によっては、マイコバクテリアは、投与前に再懸濁させるために、凍結乾燥し、配合されてもよい。しかし、その他の場合、マイコバクテリアは、薬学的に許容可能な液体容積中に懸濁される。最も好ましい実施形態の幾つかには、薬学的に許容可能な担体に懸濁されるマイコバクテリアの単回投与量を含む容器が提供され、単位用量は約１ｘ１０６〜約１ｘ１０１０ＣＦＵのマイコバクテリアを含む。一部の非常に特定の実施形態では、懸濁されたマイコバクテリアを含む液体は、約０．１ｍｌ〜１０ｍｌ、約０．３ｍｌ〜２ｍｌまたは約０．５ｍｌ〜２ｍｌの容量で提供される。特定の場合において、封じ込め手段でマイコバクテリアを含む組成物が凍結（すなわち、摂氏約ゼロ度未満で維持する）されることが更に理解されるであろう。前述の組成物は、本明細書に記載の免疫療法を適用するために、理想的な単位を提供する。
【００９０】
本明細書に記述されている他の任意の方法または組成物に関して、本発明の方法および／または組成物について論じている実施形態を使用してもよい。よって、１つの方法または組成物に関する実施形態は、本発明の他の方法および組成物にも適用し得る。
【００９１】
場合によっては、非病原性熱殺菌マイコバクテリアは、被験者上のまたは被験者内の特定部位に投与される。例えば、特にＭ．ｏｂｕｅｎｓｅを含む組成物など、本発明によるマイコバクテリア組成物は、腫瘍周囲の組織の水分を抜くものなど、腫瘍に隣接してまたはリンパ節に隣接して投与され得る。このため、特定の例においては、マイコバクテリア組成物の投与部位は、後頚部、扁桃後部、後腋窩、後鼠径部、前頚部、顎下腺、顎下リンパ節または鎖骨上リンパ節付近であってよい。このような投与部位は、身体の右側、左側またはその両方であってよい。非常に特定の実施形態では、マイコバクテリア組成物は、腋窩、頸部および／または鼠径リンパ節付近に送達される。例えば、マイコバクテリアの用量は、右側および左側腋窩リンパ節および右側および左側鼠径リンパ節に近接する組織内に分布し得る。
【００９２】
非常に特定の実施形態では、マイコバクテリア投与物は皮内注入により被験者に投与され、投与物は身体の両側の腋窩部および鼠径部に分布され、各部位に２回注入（すなわち、２つの丘疹）する。
【００９３】
本発明の更なる幾つかの実施形態において、本発明の方法は、１日またはそれを超える期間をおいてマイコバクテリアを２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、または１０回以上別個に投与することを含む。例えば、このような別個の投与は、１日または数日間、１週間、２週間、または１ヶ月以上間をあけて行われる。例えば、本発明による方法は、３週間以上にわたり、マイコバクテリアを１〜５回投与することを含み得る。更なる実施形態では、本発明の方法は約１〜約３週間にわたり１〜５回、１〜４回、１〜３回、１〜２回または２回、マイコバクテリアを投与することを含む。各投与量は、前回の投与量または次回の投与量と同じであっても異なってもよい。例えば、ある場合において、好ましくは、マイコバクテリアの用量は、以前投与されたいかなる用量よりも少ない。このため、いくつかの特定の場合では、１回分の非病原性熱殺菌マイコバクテリアの投与量は、以前のあらゆる治療において投与された量の約半分で投与されることもある。このような方法は、その後の治療中にマイコバクテリアに対する被験者の免疫応答が大きい場合に好ましい。このため、ある場合において、マイコバクテリアは最小限の回数、例えば、１０回、９回、８回、７回、６回、５回、４回、または３回以下の別個の投与で投与し得る。幾つかの例では、マイコバクテリア組成物は２回投与される。あるいは、マイコバクテリアは、癌または腫瘍（複数可）が患者に存在する期間あるいは癌が退行するかまたは安定するまでの期間、投与され得る。また、マイコバクテリアは、一旦癌または腫瘍が退行するかあるいは安定した後も、患者に引き続き投与され得る。
【００９４】
本発明によるマイコバクテリア組成物は、典型的には医薬的に許容可能な担体中に分散している、有効量のマイコバクテリアを含む。語句「医薬的にまたは薬理学的に許容可能な」は、必要に応じて動物、例えば、ヒトに投与したとき、副作用、アレルギー反応またはその他の有害反応を生み出さない分子的実体および組成物を言う。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）に例示されているように、マイコバクテリアを含む医薬組成物の調製は、本開示を考慮して、当業者にとって既知であろう。さらに、動物（例えば、ヒト）に投与する場合、製剤は、無菌性、発熱性、一般的安全性および純度に関する標準に適合するべきであることは理解されるであろう。本明細書に記載されているとおり、薬理学的に許容可能な担体の具体的な例は、ホウ酸塩緩衝剤または滅菌生理食塩水（０．９％ＮａＣＩ）である。
【００９５】
本明細書で使用する場合、「医薬的に許容可能な担体」は、任意かつすべての溶媒、分散媒、被覆剤、界面活性剤、酸化防止剤、防腐剤（例えば、抗菌剤、抗真菌薬）、等張剤、吸収遅延剤、塩、防腐剤、薬剤、薬剤安定剤、ゲル、結合剤、賦形剤、崩解剤、潤滑剤、甘味剤、香料添加剤、染料、同様の材料およびこれらの組み合わせを含み、当業者に周知のとおりである（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０、ｐｐ．１２８９〜１３２９を参照）。
【００９６】
好ましい実施形態では、マイコバクテリアは皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮内、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、腹腔内、静脈内、小胞体注入から選択される非経口経路を介して投与される。皮内注入はマイコバクテリア組成物の全集団を、免疫学的監視に接近しやすく、したがって局所的リンパ節における抗癌免疫応答の選定および免疫細胞増殖の促進が可能な真皮層に送達できる。
【００９７】
本発明の非常に好ましい実施形態では、マイコバクテリア組成物は直接の皮内注入により投与されるが、幾つかの場合には、その他の投与方法を用いてもよいことが企図される。このため特定の例では、当業者に周知のように（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０参照）、本発明の熱殺菌マイコバクテリアは、注射、注入、持続注入、静脈内注入、皮内注入、動脈内注入、腹腔内注入、病変内注入、硝子体内注入、腟内注入、直腸内注入、局所内注入、腫瘍内注入、筋肉内注入、腹腔内注入、皮下内注入、結膜内注入、小胞体内注入、粘膜内注入、心膜内注入、臍帯内注入、眼内注入、経口注入、頭蓋内注入、関節内注入、前立腺内注入、胸膜内注入、気管内注入、鼻腔内注入、局所注入、部分的注入、吸入（例えば、エアロゾル吸入）、カテーテル経由、洗浄経由、またはその他の方法もしくは前述の任意の組み合わせにより投与され得る。更に好ましくは、非経口経路による投与は、マイコバクテリア細胞壁抽出物の腫瘍内注入を含まない。
【００９８】
上の明細書に記述されているすべての出版物は、参考として本明細書に援用される。記載されている方法の様々な修正形態および変更形態ならびに本発明のシステムは、本発明の範囲および趣旨から逸脱せず、当業者には明らかであろう。本発明は、特定の好ましい実施形態に関して記載されているが、請求項に係る本発明がそのような特定の実施形態に不当に限定されないことが理解されるべきである。実際に、生化学および免疫学または関連分野の当業者にとって明らかである本発明を実施するために記載された様式の種々の修正形態は、以下の特許請求の範囲内であることを意図したものである。
【実施例】
【００９９】
本発明は、更に、以下の非限定実施例を参照して記述される。
【０１００】
実施例１
本実施例は、有効かつ臨床的に関連のある膵臓癌の遺伝子マウスモデルにおける熱殺菌全細胞Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｏｂｕｅｎｓｅ（ＩＭＭ?１０１）およびｍＴＯＲ阻害剤ラパマイシン（シロリムス）の投与を調査する試験について記載する。ＫｒａｓおよびＰｄｘ−Ｃｒｅの変異を有する遺伝的改変マウス（ＫＣマウス）をＨｉｎｇｏｒａｎｉら（Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，２００３，４；４３７−５０）に記載される方法に従って飼育し、これらマウスの一部は、侵襲性かつ転移性腺癌に進行し得るヒト膵臓上皮内原発腫瘍に類似する管病変を発症する。Ｋｒａｓ、ｐ５３およびＰｄｘ−Ｃｒｅ（Ｈｉｎｇｏｒａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ、２００５、７：４６９−４８）の変異を保有する１０５ＫＰＣ細胞をＫＣマウスに生後１００日目に同所注入した。１１４日目（図１では０日目）にマウスを以下のように処理した。
【０１０１】
−未処理マウス１２匹（対照）；
−本試験期間中、毎日２ｍｇ／ｋｇのラパマイシンを腹腔内投与する処理を受けたマウス１２匹；
−本試験期間中、５日間にわたって、０．１ｍｇＩＭＭ−１０１／マウスを一日おきに首筋と尾基底部に交互に皮下注射して２日空けるという処理を受けたマウス１２匹；
−単独で使用したラパマイシンおよびＩＭＭ−１０１に関して上述した投与量およびスケジュールにてこれら２つの化合物の組み合わせで処理したマウス１２匹。
【０１０２】
予想されるように、未処理のままであったマウスは２０日以内に疾患で死亡した。ｍＴｏｒ阻害剤による処理は生存に対して有意な効果を有しておらず、ラパマイシンで処理したマウスは、対照動物とちょうど同じくらい生存した。しかしながら、もっとも驚くべきことは、ｍＴＯＲ阻害剤（ラパマイシン）およびマイコバクテリア（ＩＭＭ−１０１）の組み合わせは、対照マウスと比較して、かつ、最も重要には、単独で使用した化合物で処理したマウスと比較して、このような処理マウスの生存を有意に延長した（図１を参照）。マイコバクテリアによってもたらされる効果とｍＴｏｒ阻害剤の効果との組み合わせは、予想外の様式で相乗的に作用し、単独で使用したときのそれらの効果によっては説明できないもののようである。
【０１０３】
参考文献
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【図１】
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【国際調査報告】
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2016520057.tif 000004
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