(57)【要約】  本発明は、がんを治療する新規なインゲノール誘導化合物に関する。他の実施態様として、本発明は、医薬組成物、医薬品、がんを治療する方法及び投与形態に関する。【選択図】図1
2016502509.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式Iを有するインゲノール誘導化合物であって、
化学式I
【化９】
2016502509.tif 000011
Aは、フェニル、CH3-又はCH2=CH-であり、
Bは、-CH=CH-、[-CH2-]x又は[-CH2-]yであり、
xは、1から10の範囲の整数であり、
yは、1から10の範囲の整数であり、
但し、Aがフェニルの場合、Bは、-CH=CH-であり、
AがCH3-の場合、Bは、[-CH2-]xであり、
AがCH2=CH-の場合、Bは、[-CH2-]yである、がんを治療するためのインゲノール誘導化合物。
【請求項２】
前記がんは、乳がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項３】
前記がんは、大腸がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項４】
前記がんは、頭部がんと頸部がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項５】
前記がんは、脳ガンである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項６】
前記がんは、前立腺がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項７】
前記がんは、絨毛がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項８】
前記がんは、子宮頸がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項９】
前記がんは、白血病である、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１０】
前記がんは、皮膚がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１１】
前記がんは、肺がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１２】
前記がんは、食道がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１３】
前記がんは、膵臓がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１４】
前記がんは、膀胱がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１５】
前記がんは、卵巣がんである、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１６】
xは、2から6の範囲内であり、
yは、8から10の範囲内である、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１７】
3-シンナミル-インゲノール、3-ヘキサノイル-インゲノール、3-ドデカノイル-インゲノール又は3-ドデカ-11-エノイル-インゲノールのうちの1つ又は複数である、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１８】
化学式Iの化合物のアイソマー、代謝産物、結晶、水和物、溶媒和物又は医薬的に許容可能な塩である、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項１９】
以下の構造
【化１０】
2016502509.tif 000012
【化１１】
2016502509.tif 000013
又は
【化１２】
2016502509.tif 000014
のうちの1つを含む、請求項1に記載のがんを治療するための化合物。
【請求項２０】
1又は複数の化学式Iの化合物及び1又は複数の医薬的に許容可能な賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
化学式Iの化合物以外に少なくとも一つの追加の有効成分を含む、請求項20に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記少なくとも一つの有効成分は、抗腫瘍薬、抗レトロウイルス薬、抗生物質、抗悪液質薬、神経学的有効成分、抗糖尿病薬、抗高血圧薬及びプロトンポンプ阻害剤の中から選択される、請求項21に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
薬物療法において使用される、請求項20から22のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２４】
請求項1に規定する少なくとも一つの化学式Iの化合物を含む、医薬品。
【請求項２５】
薬物療法において使用される、請求項24に記載の医薬品。
【請求項２６】
がんを治療するのに有効な製品の調製において使用される、請求項1に記載の1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導体の使用。
【請求項２７】
がんを治療する方法であって、
請求項1に記載の1又は複数の化学式1のインゲノール誘導体をかかる治療を必要とする患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項２８】
がんを治療する方法であって、
請求項20から22のいずれかに記載の組成物又は請求項24に記載の医薬品を、かかる治療を必要とする患者に投与するステップを含む、方法。
【請求項２９】
がんの治療において使用される、請求項1に記載の1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物の使用。
【請求項３０】
請求項1に記載の1又は複数の化学式Iの化合物を0.01から5000mg含む、がんを治療するための投与形態。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、一般に、がんを治療するのに有効な新規なインゲノール誘導化合物に関する。他の実施態様として、本発明は、医薬組成物、薬剤、用途、がんを治療する方法及び投与形態に関する。
【０００２】
発明の背景
がんは、共通して、組織及び臓器に侵入する無秩序な細胞生長性を有し、身体の他の領域まで広がること(いわゆる転移)ができる100を超える疾患群に与えられた名前である。
【０００３】
種々のタイプのがんは、身体の様々な細胞タイプに対応する。例えば、皮膚は、複数の細胞タイプを含むため、数種類の皮膚がんが存在する。がんが上皮組織(例えば皮膚又は粘膜)において起こると、上皮性悪性腫瘍と呼ばれる。それが結合組織(例えば骨、筋肉又は軟骨)において起こると、非上皮性悪性腫瘍と呼ばれる。がんの1つのタイプとその他のものとを区別する他の特徴は、細胞増殖速度と、その発生源付近又はそこから離れた組織及び臓器に侵入するそれらの能力である。
【０００４】
がんを効果的に治療することが困難なのは、身体における悪性細胞と正常細胞との識別を確立することに関係がある。両細胞とも同じ発生源を由来として非常に類似しているため、免疫系が脅威を効果的に認識することができない。今日、がんは、手術、化学療法、放射線療法及び免疫療法(モノクローナル抗体療法)によって治療する場合がある。位置、腫瘍グレード及び疾患のステージ並びに患者の一般的な状態に依存して治療が選択される。残りの生体を損傷することなく腫瘍を完全に除去することは、治療の主要な目的である。これは、時には、手術によって達成することができるが、近接する組織に侵入する又は離れた部位に広がる(転移する)傾向の疾患は、多くの場合、その効果は限定的である。化学療法の効果は、ほとんどの場合、その毒性によって正常組織に損傷を与える可能性がある放射線療法と同様に、生体の他の組織(細胞)対する毒性によって制限される。免疫療法において、発がん性細胞は、免疫反応から逃れるメカニズム(治療に対する抵抗性として知られている現象)を発達させている。
【０００５】
後述する図は、ヒト腫瘍株に本発明の化合物を曝露することによって得られたIC50値を指す。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図1は、乳がんに関するHB4A、MDA-MB-231、MDA-MB-468、BT20、HT587T、MCF7及びMCF7/AZ株である。
【図２】図2は、結腸直腸がんに関するSW480、SW620、CO115、HCT15、HT29、SK-CO-10、DLD1、LOVO、DIFI及びCaco2株である。
【図３】図3は、頸部及び頭部がんに関するJHU28、JHU13、JHU12、HN13、SCC25、SCC4、SCC14及びFADU株である。
【図４】図4は、肺がんに関するH292及びA549株、メラノーマに関するGRM、COLO858、COLO679、A375、WN1617、WN9、WMM852、WN793及びSKMEL37株、扁平上皮がんに関するA431m株、及び髄芽細胞腫に関するDAOY及びONS76株である。
【図５】図5は、前立腺がんに関するPC-3 LNCaP及びPNT2株、膀胱がんに関するT24、5637、HT1376及びMCR株、絨毛がんに関するJEG3株、子宮頸がんに関するSIHA、CASKI、C33及びHELA株である。
【図６】図6は、食道がんに関するKYSE30、KYSE70、KYSE279及びKYSE410株、膵臓癌に関するMiaPaCa-2、PANC1、PSN-1及びBXPC-3株である。
【図７】図7は、グリオーマに関するU87-MG、U373、U251、GAMG、SW1088、SW1783、NHA、SNB19、RES186、RES259、KNS42、UW479及びSF188株である。
【図８】図8は、白血病のJurkat株並びに卵巣がんに関するPA-1及びSW626株である。
【図９】図9は、脳ガンの治療において使用する薬であるテモゾロマイド化合物(TMZと明示)によって得られた値と比較した、いくつかのがん細胞株である。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
発明の詳細な説明
がんを治療する新規な方法に関する調査は、継続的に続けるプロセスであり、この流れの中で、新規な有効成分が、低毒性と相まって、がんの治療に有効であるとして開発された。
【０００８】
第一態様において、本発明は、がんを治療する、インゲノールから誘導された化合物(化学式I)に関するものであり、
化学式I
【化１】
2016502509.tif 000003
Aは、フェニル、CH3-又はCH2=CH-であり、
Bは、-CH=CH-、[-CH2-]x又は[-CH2-]yであり、
xは、1から10、好ましくは2から6の範囲の整数であり、
yは、1から10、好ましくは8から10の範囲の整数であり、
但し、Aがフェニルの場合は、Bは-CH=CH-であり、
AがCH3-の場合は、Bは[-CH2-]xであり、
AがCH2=CH-の場合は、Bは[-CH2-]yである。
【０００９】
特に、そして、他の代替物を除外するものではないが、本発明のインゲノール誘導化合物は、乳がん、大腸がん、頭部がん、首がん、脳ガン(例えば、グリオーマ及び髄芽細胞腫)、前立腺がん、膀胱がん、絨毛がん、子宮頸がん、白血病、皮膚がん(例えば、扁平上皮がん及びメラノーマ)、食道がん、膵臓がん及び卵巣がんの治療に適している。
【００１０】
本発明に適しているインゲノール誘導体の特定の例は、限定するものではないが、
3-シンナミル-インゲノール
【化２】
2016502509.tif 000004
3-ヘキサノイル-インゲノール
【化３】
2016502509.tif 000005
3-ドデカノイル-インゲノール
【化４】
2016502509.tif 000006
3-ドデカ-11-エノイル-インゲノール
【化５】
2016502509.tif 000007
である。
【００１１】
化学式Iは、本願明細書に示されている構造のアイソマーと、それらの医薬的に活性のある誘導体(例えば、塩、プロドラッグ、代謝産物、結晶、水和物及び溶媒和物)を含む。
【００１２】
医薬的に活性のある誘導体は、一般的に、遊離塩基分子と同様の挙動を示すものである。
【００１３】
化学式Iの化合物の医薬的に許容可能な塩は、医薬的に活性のある誘導体の範囲内である。本発明の化合物の任意の塩の一部である特定の対イオンは、一般的に重要な性質を示さない。ただし、塩は、全体として薬理的に許容可能であり、対イオンは、全体として塩に関する望ましくない特性に関与しない。
【００１４】
その他のものを除外するものではないが、酸付加塩は、医薬的に許容可能な塩として、例えば、無機塩(例：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸及びリン酸)又は有機塩(例：酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、メタンスルホン酸、p-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、トリメチル酢酸、t-ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタル酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸、マンデル酸及び2-ヒドロキシエタンスルホン酸)を挙げることができる。
【００１５】
その他のものを除外するものではないが、塩基付加塩は、医薬的に許容可能な塩として、例えば、アンモニウム塩、アルカリ金属塩(例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム又はマグネシウム)、有機塩基との塩(例えば、第一級、第二級又は第三級アミン(例：イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリイソプロピルアミン、トリ-n-プロピルアミン、エタノールアミン、2-ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、ジシクロヘキシルアミン、N-メチル-D-グルカミン)の塩)及びアミノ酸(例えば、アルギニン、リシン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリン等)との塩を挙げることができる。可能性があるいくつかの実施形態において、窒素含有塩基性基は、ハロゲン化アルキル型の薬剤(例えばメチル、エチル、プロピル又はブチルクロライド、ブロミド及びヨード)、長鎖のハロゲン化物(例えばデシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルクロライド、ブロミド及びヨード)を用いて第四級化することができる 。
【００１６】
別の態様においては、本発明は、1又は複数の化学式Iの化合物及び1又は複数の医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物に関する。以下の刊行物は、かかる賦形剤の情報源として挙げることができる:"Remington: The Science and Practice of Pharmacy"、20th Edition or later, Lippincott, Williams and Wilkins publishing house;"Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1999) H.C. Ansel et al., 7th edition, Lippincott, Williams & Wilkins Publishing House; "Handbook of Pharmaceutical Excipients" (2000) A. H. Kibbe et al, 3rd edition, American Pharmaceutical Association Publishing House。
【００１７】
本発明のインゲノール誘導体及びそれらを含む組成物は、カテーテル又はステント等を用いて、任意の適切なルート(例えば、経口、非経口、静脈内、動脈内、腹腔内、経皮的、舌下、直腸、筋肉内、経頬的、鼻腔内、リポソーム、吸入、膣、皮下、脂質内、眼内、関節内又は髄腔内ルート)によってヒト又は動物(非ヒト)患者に投与することができる。
【００１８】
本発明のインゲノール誘導化合物を含む投与形態に関して特に制限するものはない。例えば、タブレットトローチ、カプセル、顆粒、ペレット等を固形経口投与のために用いることができる。液体経口投与のために、溶液、分散液、懸濁液、乳濁液、オイル等を用いることができる。他の適切な投与形態は、リポソーム及びナノ粒子、又は、当業者にとって既知の任意の他の形態である。投与形態は、即効型、持続型又は制御型であってもよい。
【００１９】
特定の態様において、本発明の組成物は、1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物に加えて、これとは異なる少なくとも一つの追加の有効成分(例えば、抗腫瘍薬、抗レトロウイルス薬、抗生物質、抗腫瘍薬、抗悪液質薬、神経系薬剤、抗糖尿病薬、抗高血圧薬、プロトンポンプ阻害剤等から選択されるもの)を含む。
【００２０】
別の態様においては、本発明は、1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物を含む医薬品に関する。
【００２１】
別の態様においては、本発明は、がんの治療に有効な製品の調製における1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物の使用に関する。更に別の特定の態様において、本発明は、がんを治療する方法に関するものであり、1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物をそのまま又は組成物の形で患者に投与する特徴を有する。
【００２２】
更に別の特定の態様において、本発明は、がんを治療するための1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物の使用に関する。
【００２３】
更に別の特定の態様において、本発明は、がんを治療する投与形態に関するものであり、請求項1に従う、1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導を0.01〜5000mg含むことに特徴を有する。本発明によれば治療に十分な用量は、1回又は時間に応じて数回投与することができる。
【実施例】
【００２４】
本発明の実施形態の特定の実施例は、いくつかのインゲノール誘導体に関して以下に挙げているが、いかなる形であれ本発明をかかる実施例だけに制限することを意図するものではない。
【００２５】
以下に示す化学式Iのインゲノール誘導体の例において、参照の容易さのために、本願明細書においてインゲノールA、インゲノールB及びインゲノールCとの名称を用いた。各化合物に関して空間的立体配座として示している点に留意する必要がある。
インゲノールA
【化６】
2016502509.tif 000008
インゲノールB
【化７】
2016502509.tif 000009
インゲノールC
【化８】
2016502509.tif 000010
【００２６】
実施例1
いくつかのがん細胞株は、in vitroで試験して(試験は後述する)、μm(マイクロモル)での、細胞活性を50%阻害するのに必要な濃度である50%抑制濃度(IC50)を決定した。
【００２７】
試験において使用する細胞の調製
試験がん細胞は、25又は75cm2のポリエチレンの培養バイアル又は培養プレートにおいて、10%ウシ胎児血清(Life Technologies)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシン(Life Technologies)を補充したDEMEM培地(ダルベッコ変法イーグル培地)又はRPMI培地(ロズウェルパーク記念研究所)1640(いずれもAmerican company Life Technologiesが提供)にて、37℃、5%CO2及び90%湿度、1x106の平均密度で、コンフルエンスに達するまで生育させた。コンフルエンスに達した後、細胞をトリプシン処理(0.05%トリプシン溶液/0.53mM EDTA - TripLE Express製品(Life Technologies)）して、平板培養し、以下の試験のために上述の条件下に維持した。
【００２８】
IC50測定
この測定のために、製造業者が比色法と記載している製品「Cell Titer 96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(米国企業Promegaが提供)を用いて水溶液中の細胞生存アッセイを使用し、細胞毒性又は増殖中の生細胞数を測定した。CellTiter 96には、テトラゾリウム化合物[(3-(4,5-ジメチル-2-イル)-5-(3-カルボキシメトキシフェニル)-2-(4-スルホフェニル)-2H-テトラゾリウム、分子内塩; MTS]及び電子結合試薬(フェナジンエトサルフェート; PES)を含ませている。PESは、化学的安定性が向上しており、MTSとの組み合わせによって色が安定した溶液を形成することができる。種々の試験及びコントロールサンプルにおいて測定した吸光度によって、各サンプルにおける生細胞数が同程度であるか否かを決定することができる。このアッセイのために、3-5×103の細胞を96穴プレートに同じのものを3つ播種して、本発明の化合物の希釈物(0、2.5、5、7.5、10及び20μM-DMSO(ジメチルスルホキシド)にて希釈)をそこに加えた。細胞がわずか1%のDMSO/ウェルを受けるように化合物の希釈を行った。吸光度は、72時間の処理後、ELISAプレートリーダー(Flash Varioskan装置(米国企業Thermo Scientificが提供))を用いて490nmで測定した。データを収集して、DMSOだけで処理したサンプルの平均生存度(生存度を100%とした)に関して正規化した。実験は、実験的及び生物学的に3つ同時に行った。
【００２９】
吸光度値の結果を細胞生存度のパーセンテージに変換した。ビヒクル(DMSO)存在下の細胞をコントロールとして使用し、生存度を100%とした。プログラムGraphpad Prism(米国企業Graphpad Softwareが提供)を使用した非線形回帰分析を、生存度の結果に対して実行し、細胞生存度を50%低下させるのに必要な物質の濃度(IC50)を算出するために用いる方程式を得た。
【００３０】
図1から8で分かるように、本発明によるインゲノール誘導化合物は、抗がん活性を有する。これは、多数のがん株でのin-vitro IC50試験(最大抑制濃度の50%)において証明された。
【００３１】
図9で分かるように、本発明のインゲノール誘導体を用いて実施した試験の結果は、テモゾロマイド(脳ガンを治療するために腫瘍科において使用される抗腫瘍製品)と比較して、より強力且つ効果的であった。
【００３２】
当業者は、本願明細書に含まれる教示によって、本発明の利点を容易に評価することができ、添付の特許請求の範囲において定義している本発明の要旨を逸脱しない範囲内で、明示していない実施形態の修正形態及び等価な変更形態を提案する方法を知っているだろう。
【図１】
2016502509.tif 000015
【図２】
2016502509.tif 000016
【図３】
2016502509.tif 000017
【図４】
2016502509.tif 000018
【図５】
2016502509.tif 000019
【図６】
2016502509.tif 000020
【図７】
2016502509.tif 000021
【図８】
2016502509.tif 000022
【図９】
2016502509.tif 000023
【手続補正書】
【提出日】平成27年9月7日(2015.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明に適しているインゲノール誘導体の特定の例は、限定するものではないが、
3-シンナミル-インゲノール
【化２】
2016502509.tif 000024
3-ヘキサノイル-インゲノール
【化３】
2016502509.tif 000025
3-ドデカノイル-インゲノール
【化４】
2016502509.tif 000026
3-ドデカ-11-エノイル-インゲノール
【化５】
2016502509.tif 000027
である。
本発明、特に、上で示すものから導き出される製品は、代謝の後の有毒分解産物を発生させる可能性が低い点で卓越している。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
その他のものを除外するものではないが、塩基付加塩は、医薬的に許容可能な塩として、例えば、アンモニウム塩、アルカリ金属塩(例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム又はマグネシウム)、有機塩基との塩(例えば、第一級、第二級又は第三級アミン(例：イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリイソプロピルアミン、トリ-n-プロピルアミン、エタノールアミン、2-ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、ジシクロヘキシルアミン、N-メチル-D-グルカミン)の塩)及びアミノ酸(例えば、アルギニン、リシン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリン等)との塩を挙げることができる。可能性があるいくつかの実施形態において、窒素含有塩基性基は、ハロゲン化アルキル型の薬剤(例えばメチル、エチル、プロピル又はブチルクロライド、ブロミド及びヨード)、長鎖のハロゲン化物(例えばデシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルクロライド、ブロミド及びヨード)を用いて第四級化することができる。
本発明のインゲノール誘導体は、例えば、植物原料(例：国際特許出願WO2007000618に記載の、ミドリサンゴL.のラテックスからのブタノール抽出物をクロマトグラフィーから分離した有効画分)、又は、任意の他の適切な原料(例えば、遊離塩基性インゲノール、テルペン等)からの合成又は半合成プロセスによる、当業者に知られている種々の方法によって調製することができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
別の態様においては、本発明は、1又は複数の化学式Iの化合物及び1又は複数の医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物に関する。「医薬的に許容可能な賦形剤」という用語は、自身には医薬活性がない希釈液、ビヒクル又は添加物として医薬組成物に使用する不活性物質に関する。以下の刊行物は、かかる賦形剤の情報源として挙げることができる:"Remington: The Science and Practice of Pharmacy"、20th Edition or later, Lippincott, Williams and Wilkins publishing house;"Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1999) H.C. Ansel et al., 7th edition, Lippincott, Williams & Wilkins Publishing House; "Handbook of Pharmaceutical Excipients" (2000) A. H. Kibbe et al, 3rd edition, American Pharmaceutical Association Publishing House。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明のインゲノール誘導化合物を含む投与形態に関して特に制限するものはない。例えば、タブレットトローチ、カプセル、顆粒、ペレット等を固形経口投与のために用いることができる。液体経口投与のために、溶液、分散液、懸濁液、乳濁液、オイル等を用いることができる。他の適切な投与形態は、リポソーム及びナノ粒子、又は、当業者にとって既知の任意の他の形態である。投与形態は、即効型、持続型又は制御型であってもよい。
「リポソーム」という用語は、それ自身を自発的に水性媒体に配置する1又は複数の同心性のリン脂質二重層からなる小さい小胞を意味する。それらは、医薬徐放システムとして使用することができる。リポソームは、有効成分を化学、物理的及び酵素分解から保護することができ、標的サイトにおける薬の濃度を高めることができ、疎水性薬物を可溶化するために無毒性の賦形剤として用いることができ、そして、循環系における小胞及び薬の寿命を伸ばすことができることから、有効成分の薬動学的特性及び毒性に対してポジティブな効果を発揮する。
「ナノ粒子」という用語は、制御された薬剤放出システムとして使用する際に潜在的に有利な特性を示し、有効成分又は薬をカプセル化又は保護することができる極薄(一般的に直径が1から100ナノメートル)の粒子を意味する。ナノ粒子は、有効成分を化学、物理的及び酵素分解から保護することができ、標的サイトにおける薬の濃度を高めることができ、疎水性薬物を可溶化するために無毒性の賦形剤として用いることができ、そして、循環系における小胞及び薬の寿命を伸ばすことができることから、有効成分の薬動学的特性及び毒性に対してポジティブな効果を発揮する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
特定の態様において、本発明の組成物は、1又は複数の化学式Iのインゲノール誘導化合物に加えて、これとは異なる少なくとも一つの追加の有効成分(例えば、抗腫瘍薬、抗レトロウイルス薬、抗生物質、抗腫瘍薬、抗悪液質薬、神経系薬剤、抗糖尿病薬、抗高血圧薬、プロトンポンプ阻害剤等から選択されるもの)を含む。
「有効成分」という用語は、生物活性物質を意味する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
実施例2
国際特許出願WO2007000618に記載の、ミドリサンゴL.からのラテックスのブタノール抽出物(以下インゲノールプール)をクロマトグラフィーにて分離した有効画分からインゲノールを得るプロセス。
加水分解反応は、300mLのメタノール及び6mLのナトリウムメトキシドにおいて溶出した18gのインゲノールプールを用いて実施した。反応は、1.5mL/分にて、7分で5-70%のABグラジエントにおいて、4.6×50mm、3μmのカラムを用いて、YMC Pro C18にて214及び290nmでHPLC分析を行なうことによって30分毎にモニターした。溶媒:溶媒A-0.1%のTFAを含む水、溶媒B-0.08%のTFAを含むアセトニトリル。
反応は、1mlの氷酢酸によって中和した。その後の精製は、75%の酢酸エチルを含むヘプタン溶液を300gのシリカを含むフラッシュカラムに加えて実施した。カラムを同じ溶媒で平衡化させた。インゲノールを100gの酢酸エチルにて溶出させた。溶出は、紫外線検出器にて290nmでモニターした。1つにまとめた画分を蒸発させた。
実施例3
ヒドロキシル基5及び20を保護するためのインゲノール-5,20-アセトニド中間体の調製
インゲノールアセトニド形成のために、76,0 mgの(1S)-(+)-10-ショウノウスルホン酸(C2107; 0.0104重量当量; 99%)と250mLのアセトン(34,1体積当量)にて溶出された、実施例2(1,00 当量; 21,1mmol)由来の7,34gの加水分解インゲノールにおいて反応を実施した。反応は、1.5mL/分にて、7分で5-70%のABグラジエントにおいて、4.6×50mm、3μmのカラムを用いて、YMC Pro C18にて214及び290nmでHPLC分析を行なうことによって15分毎にモニターした。溶媒:溶媒A-0.1%のTFAを含む水、溶媒B-0.08%のTFAを含むアセトニトリル。1.5時間の反応後、78%の5,20-インゲノールアセトニド及び9.8%のインゲノールが検出された。反応は、140μLのトリエチルアミン(47.9m当量; 1.01mmol)を用いて中和した。5,20-インゲノールアセトニドの精製は、35℃/30'/10Torrでの蒸発によって実施して、トルエンから結晶化した。
実施例4
実施例3の5,20アセトニドのエステル化、得られた中間体の脱保護、インゲノール3-ドデカノアート(インゲノールC)の調製。
当業者にとって公知であり既に言及したインゲノールA及びBは、ドデカン酸、桂皮無水物又は酸(インゲノールA用)及びカプロン酸又は無水物(インゲノールB用)の代わりに、この実施例で述べる方法と類似の方法にて調製することができる。
エステル化
実施例3に従って生産した3.60gの5,20-インゲノールアセトニド(1.00当量; 9.27mmol)は、4.17gのドデカン酸(1.50当量; 13.9mmol)及び4.53gの炭酸セシウム(1.50当量; 13.9mmol)と80mLのアセトニトリル(22.2当量)にて溶出させた。
反応は、1.5mL/分にて、7分で5-70%のABグラジエントにおいて、4.6×50mm、3μmのカラムを用いて、YMC Pro C18にて214及び290nmでHPLC分析を行なうことによって15分毎にモニターした。溶媒:溶媒A-0.1%のTFAを含む水、溶媒B-0.08%のTFAを含むアセトニトリル。
次に、得られた中間体である5,20-イソプロピリデン-インゲノール-3-ドデカノアートを抽出及び精製した。
ジクロロメタン及び水での合成におけるこのステップでの製品の抽出を実施した。有機相を硫酸マグネシウムにて乾燥させて、35℃/30'/10Torrで蒸発させた。続いて、これを、5%の酢酸エチルを含むヘプタンに可溶化して80gのシリカを含むフラッシュカラムに加えて精製した。カラムを同じ溶媒で平衡化させた。その後で、カラムを、5%の酢酸エチルを含むヘプタン溶液にて洗浄した。中間体である5,20-イソプロピリデン-インゲノール-3-ドデカノアートを、10%の酢酸エチルを含むヘプタン溶液にて溶出した。溶出は紫外線検出器にて290nmでHPLCによってモニターした。1つにまとめた画分を35℃/30'/10mbarで蒸発させた。
脱保護
中間構造の脱保護のために、4.90gの5,20-イソプロピリデン-インゲノール-3-ドデカノアート(1.00当量、8.29mmol; 96%)を、4.60mLの1N塩酸(1M; 0.555当量; 4.60mmol)と80mLのメタノール(19.9体積当量)にて溶出した。続いて、これを、トルエン及び水にて抽出した。有機相を硫酸マグネシウムにて乾燥させて、35℃/30'/10Torrで蒸発させた。
インゲノール3-ドデカノアートインゲノールは、ほぼ97%の純度にて得られた。
当業者は、本願明細書に含まれる教示によって、本発明の利点を容易に評価することができ、添付の特許請求の範囲において定義している本発明の要旨を逸脱しない範囲内で、明示していない実施形態の修正形態及び等価な変更形態を提案する方法を知っているだろう。
【国際調査報告】
2016502509.tif 000028
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