(57)【要約】本発明は、線維芽細胞増殖因子−２（ＦＧＦ２）の活性を、阻害または促進することにより、ｉｎ  ｖｉｖｏ抗体産生を、それぞれ増加または減少させる方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
内因性抗体の産生の増加を必要とし、がんの治療を必要としない哺乳動物において、内因性抗体の産生を増加させる方法であって、
内因性抗体の産生の増加を必要とし、がんの治療を必要としない哺乳動物に：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
哺乳動物が老齢のヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
哺乳動物が免疫不全症を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
哺乳動物がヒトである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
哺乳動物において、免疫原のワクチン接種に対する液性免疫応答を増加させる方法であって、
免疫原に対する哺乳動物のワクチン接種と併せて、哺乳動物に：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
【請求項７】
哺乳動物がヒトである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
哺乳動物ががんの治療を必要としない、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物がヒトである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させるための医薬の調製における：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１１】
哺乳動物における免疫不全症の治療のための医薬の調製における：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１２】
哺乳動物における微生物感染またはウイルス感染の治療のための医薬の調製における：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１３】
哺乳動物において免疫原のワクチン接種に対する液性免疫応答を増強させるための医薬の調製における：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミンＬ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、から成る群より選択される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
[0002]本発明は、液性免疫の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
[0003]生命体は、免疫応答中に複数のステップで抗体産生を制御しており、この応答は、侵入している病原体に対して注意深く適合させなければならない。応答が過剰である場合は、自己免疫の異常が宿主組織を損傷する可能性があるのに対して、応答が不十分な場合は、病原体が生き残り、生存を脅かし得る。液性免疫応答を刺激する可溶性因子が同定されているが、この過程の負の調節因子についての我々の知識はかなり限られている（Ｒａｖｅｔｃｈら、２０００、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９０：８４）。実際、その機能喪失が抗体産生の増強につながる可溶性サイトカインは、ほとんど同定されていない。
【０００３】
[0004]液性免疫応答中、一連の複雑なシグナル伝達事象が抗体産生を指揮する。その過程は、末梢の成熟Ｂ細胞への抗原提示から始まり、そのＢ細胞は増殖し、胚中心へと遊走する。抗原に対して最も親和性が高いＢ細胞受容体を所有する細胞は、生存に恵まれているが、低親和性のものは、より容易にアポトーシスされる。この選択を生き抜いた活性化Ｂ細胞は、記憶Ｂ細胞または抗体を分泌する形質細胞に分化する。多くのＢ細胞は、胚中心選択過程の他に、濾胞外応答においても抗体を分泌する（ＭａｃＬｅｎｎａｎら、２００３、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１９４：８）。Ｔ細胞非依存性抗原への曝露後の濾胞外応答は、重要であると考えられている（Ｆａｇａｒａｓａｎら、２０００、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９０：８９；Ｍａｒｔｉｎら、２００１、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １４：６１７）。抗原が除去されると、Ｂ細胞は休止状態に戻る。オフ状態のＢ細胞活性化の遮断は、抗体分泌の恒常性再設定のため、および病的な自己免疫状態を防ぐために必要である。失活過程を制御する可溶性因子については、あまり知られていない。
【０００４】
[0005]細胞外調節因子の線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリーは、事実上すべての高等脊椎動物組織の生理機能および発生を制御することが示されている。２３種のＦＧＦリガンドが哺乳動物において同定されており、これらのリガンドは、５つの異なる遺伝子によってコードされる細胞表面受容体と相互作用する（Ｗｉｅｄｅｍａｎｎら、２０００、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ６９：２７５；Ｏｒｎｉｔｚら、２００１、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ．２）。リガンド結合ドメインにおける選択的スプライシングは、ＦＧＦ受容体の可変型を生成し、それによって多様性が増す。
【０００５】
[0006]ＦＧＦ２または塩基性ＦＧＦは、最初に同定されたＦＧＦファミリーメンバーであり（Ａｂｒａｈａｍら、１９８６、ＥＭＢＯ  Ｊ．５：２５２３）、最も広範囲に研究されているものの１つである。ほとんどの胚組織および成体組織において発現されると、選択的開始部位における翻訳開始により、ＦＧＦ２は高分子量や低分子量のアイソフォームで存在する。ＦＧＦ２は、５つの受容体すべてに結合するが、受容体１〜３の「ｃ」選択的スプライシング型が優先される（Ｏｒｎｉｔｚら、１９９６、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１５２９２）。ＦＧＦ２は、増殖、分化、アポトーシス、および遊走を含めたさまざまな作用を刺激することが示されている。その結果、ＦＧＦ２シグナルは、細胞の状況に応じて異なって解釈される。
【０００６】
[0007]米国特許第４，９９４，５５９号は、ヒト塩基性線維芽細胞増殖因子について開示している。
【０００７】
[0008]米国特許第５，２２９，５０１号は、ヒト線維芽細胞増殖因子受容体の発現および使用について開示している。
【０００８】
[0009]米国特許第５，２２８，８５５号は、ヒト線維芽細胞増殖因子受容体の細胞外形について開示している。
【０００９】
[00010]米国特許第５，７０７，６３２号は、線維芽細胞増殖因子の受容体について開示している。
【００１０】
[00011]米国特許第５，８９１，６５５号は、ＦＧＦ活性を調節する分子およびＦＧＦ受容体活性化のオリゴ糖モジュレーターを同定する方法について開示している。
【００１１】
[00012]米国特許第６，０７１，８８５号は、強心配糖体およびそのアグリコン誘導体の投与による、ＦＧＦ介在病態の治療について開示している。
【００１２】
[00013]米国特許第６，３５０，５９３号は、線維芽細胞増殖因子の受容体ならびに線維芽細胞増殖因子および線維芽細胞増殖因子受容体に対する拮抗作用のための組成物を評価する方法について開示している。
【００１３】
[00014]米国特許第６，２５５，４５４号は、ヒト線維芽細胞増殖因子受容体およびその可溶性型受容体の発現および使用について開示している。
【００１４】
[00015]米国特許第６，９００，０５３号は、線維芽細胞増殖因子受容体２の発現のアンチセンス調節について開示している。
【００１５】
[00016]複数のヒトに対する療法は、免疫応答を増強するように設計されるが、それらをヒトに使用することで、重度の副作用を併発する。例えば、外因性のＩＬ−２は、抗腫瘍免疫応答を刺激するために、進行性黒色腫患者に投与される。しかし、Ｔ細胞を直接活性化する全身性サイトカインとしてのこの生物製剤は、危険な低血圧などのひどい副作用を伴う。必要とされることは、免疫機能、特に、液性免疫を増強する新規な方法である。
【発明の概要】
【００１６】
発明の概要
[00017]液性免疫応答の負の調節において線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）シグナル伝達が果たす新規な役割が、本発明者によって発見された。１型非依存性抗原に対する抗体産生は、ＦＧＦ２の非存在下で増強され、反対に、ＦＧＦ２が過剰に発現すると抑制されることが見出された。したがって、ＦＧＦ２は、液性免疫応答の阻害剤である。加えて、脾胚中心は、効率的な形成にＦＧＦ２を必要とすることが発見された。
【００１７】
[00018]本発明の１つの実施態様は、哺乳動物または他の高等脊椎動物において、免疫原のワクチン接種、例えば、抗原または生ワクチンもしくは不活化ワクチンの接種に対する液性免疫応答を増加させる方法であって、ＦＧＦ２以外の免疫原に対する哺乳動物のワクチン接種と併せて、哺乳動物において、ＦＧＦ２などの線維芽細胞増殖因子の活性を阻害し、それによって抗原に対する液性免疫応答を増加させることを含む方法を提供する。１つの改変例では、免疫原は、線維芽細胞増殖因子以外および線維芽細胞増殖因子受容体以外である。
【００１８】
[00019]本発明の他の実施態様は、ヒトなどの哺乳動物において免疫不全症を治療する方法であって、哺乳動物においてＦＧＦ２などの線維芽細胞増殖因子の活性を阻害することによって、哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させることを含む方法を提供する。
【００１９】
[00020]本発明のさらなる実施態様は、ヒトなどの哺乳動物において微生物感染を治療する方法であって、微生物感染の治療を必要とする哺乳動物において、哺乳動物において抗体産生を増加させるのに有効な程度まで、ＦＧＦ２などの線維芽細胞増殖因子の活性を阻害することを含む方法を提供する。阻害ステップは、ＦＧＦ２アンタゴニストなどの線維芽細胞増殖因子アンタゴニストを、哺乳動物において抗体産生を増加させるのに有効な量で、哺乳動物に投与することを含み得るかまたはそれから成り得る。その方法は、微生物感染に対して活性な抗生物質または抗ウイルス剤を、哺乳動物に投与するステップをさらに含み得る。
【００２０】
[00021]本発明の他の実施態様は、がんを有していないヒトなどの哺乳動物において、ｉｎ  ｖｉｖｏでの抗体産生を増加させる方法であって、哺乳動物において、ＦＧＦ２などの線維芽細胞増殖因子の活性を阻害するステップを含む方法を提供する。１つの改変例では、哺乳動物は老齢のヒトである。
【００２１】
[00022]本発明のさらなる実施態様は、そのような低減を必要とするヒトなどの哺乳動物において病的な抗体産生などの抗体産生を減少させる方法であって、哺乳動物に、哺乳動物において抗体産生を減少させるのに有効な量で、ＦＧＦ２もしくはＦＧＦ２アゴニストなどの線維芽細胞増殖因子もしくはそのアゴニスト、またはＦＧＦ２などの線維芽細胞増殖因子を結合させるＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、およびＦＧＦＲ３などの受容体のアゴニストを投与することにより減少させる方法を提供する。
【００２２】
[00023]本発明の追加の特徴、利点、および実施態様は、明記されるか、または以下の詳細な説明、図面、および特許請求の範囲の考察から明らかであり得る。その上、上記の発明の概要および下記の詳細な説明は例示的なものであり、請求された本発明の範囲を限定することなく、さらなる説明を提供することを意図するものであることが理解されるべきである。
図面の簡単な説明
[00024]添付の図面は、本発明のさらなる理解を与えるために含まれており、本明細書に組み込まれ、その一部を構成するものであり、本発明の好ましい実施態様を説明し、詳細な説明とともに本発明の原理を説明するのに役立つ。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】[00025]図１Ａは、ＦＧＦ２欠失マウスが、１型胸腺非依存性抗原に対してより強く応答することを示す。
【００２４】
[00026]図１Ｂは、免疫化後に同腹仔対照と比較した、ＦＧＦ２欠失動物の抗体力価の差異を示す。
【図２】[00027]図２Ａは、ＦＧＦ２トランスジェニックマウスが、１型胸腺非依存性抗原に対してより弱く応答することを示す。
【００２５】
[00028]図２Ｂは、免疫化後に同腹仔対照と比較した、ＦＧＦ２トランスジェニック動物の抗体力価の定量を示す。
【図３】[00029]図３は、ＦＧＦ２欠失が、胚中心に影響を及ぼすが、シンデカン発現には影響を及ぼさないことを示す。
【図４】[00030]図４は、ＦＧＦ２の異所性発現が、胚中心形成を抑制しないことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
詳細な説明
[00031]ここで、液性免疫応答は、ＦＧＦ２変異マウスにおいて変化することを示す。ＦＧＦ２欠失マウスは、１型非依存性抗原に対してより多くの抗体を産生するが、ＦＧＦ２を過剰に発現するマウスは、同一の病原刺激に対する抗体産生の抑制を示す。加えて、胚中心形成は、ＦＧＦ２の非存在下で障害される。驚いたことに、シングルコピーのＦＧＦ２を欠損しているマウスにおいて、抗体産生および胚中心形成の変化が観察され、このことは、リンパ球がＦＧＦ２遺伝子投与量に特に感受性であることを実証するものである。これらの研究は、ＦＧＦシグナル伝達が、液性免疫応答および成熟Ｂ細胞の機能に非常に重要な調節因子であるという第１の証拠を提供する。 
材料および方法
[00032]マウス
[00033]ＦＧＦ２−／−（ホモ接合体遺伝子ノックアウト）マウスは、２つの学術源から得た。これらのマウスは、創傷治癒、血圧調節、および皮質神経発生に比較的良性の異常を示し、検出可能なレベルのＦＧＦ２タンパク質を発現しない（Ｏｒｔｅｇａら、１９９８．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：５６７２；Ｚｈｏｕら、１９９８、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ４：２０）。両方のセットのノックアウトは、抗体産生の増加を示した。図１および図３のデータは、シンシナティ大学から得られた動物についてのものである。ヘテロ接合体動物（１２９ＳｖＥｖ：Ｂｌａｃｋ  Ｓｗｉｓｓの混合）を交配させ、ヘテロ接合体動物およびヌル動物を同腹仔対照と比較した。雌雄両方の成体マウスを使用した。ＦＧＦ２トランスジェニック動物は、骨異形成および内皮の恒常性の破壊を示す（Ｆｕｌｇｈａｍら、１９９９、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  ６：１８５；Ｃｏｆｆｉｎら、１９９５、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ  ６：１８６１）。遺伝子導入のためのヘテロ接合体動物（ＦＶＢＮ）を野生型と交配させ、雌雄両方の成体動物を同腹仔対照と比較した。動物を、施設基準に従って、無菌施設で維持した。プロトコールは、ＩＡＣＵＣガイドラインに忠実に従った。
【００２７】
[00034]液性免疫応答
[00035]ＰＢＳ中の完全フロイントアジュバントを用いて乳化したＴＮＰ−ＬＰＳ（トリ−ニトロフェノールリポ多糖）５０μｇ（最終容量２００μｌ）を用い、マウスを腹腔内免疫した。血清を後眼窩眼出血により採取した。血液を凝固後に遠心分離し、アジ化ナトリウム（０．０１％）を加えた。ＴＮＰ特異的抗血清のＥＬＩＳＡを、ＴＮＰ−ＢＳＡ（Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ）でコーティングされたプレート上で行い、１次抗血清を４℃で一晩結合させた。アルカリホスファターゼに結合したヤギ抗マウスＩｇＧ（すべてのＩｇアイソタイプ）を、２次抗血清（Ｊａｃｋｓｏｎ）として使用した。血清の遺伝子型は、実験者には未知であった。吸光度（４０５ｎＭ）をＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓの分光光度計で、三連で測定した。値を平均化し、ダイナミックレンジの中央にある吸光度から測定値を取得した。抗体力価の差異の定量について、連続希釈法を行い、すべての動物の血清から平均値をプロットした（最小ｎ＝５、±ｓ．ｅ．ｍ．）。１次または２次抗血清を取り除くことによって、シグナルがバックグラウンドレベルに低下した。
【００２８】
[00036]免疫組織化学
[00037]ホルマリンで固定してパラフィン包埋した脾臓から作製した５μｍの組織切片について、免疫組織化学を行った。切片を、１０％正常ウサギ血清を含有するＰＢＳＴ（０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含むＰＢＳ）中でブロックし、レクチンピーナッツ凝集素で染色し、次いでビオチン化抗ピーナッツ凝集素（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）を加えるか、またはラット抗ＣＤ１３８（シンデカン−１）（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を加えた後、ビオチン化ヤギ抗ラットＩｇＧ２次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）を加えた。１次抗体を、４℃で一晩または室温で１時間インキュベートした。１次または２次抗血清を除去することによって、特異的シグナルが消失した。
【００２９】
[00038]切片の出所を知らない実験者らが胚中心数に評点をつけた。それぞれの脾臓について、少なくとも３つの連続切片に評点をつけた。結果は、１遺伝子型当たり２匹以上の動物に由来する、３つの独立した実験に基づいている。最大数の動物を使用した最終実験からのデータを提示する。
【００３０】
[00039]Ｂ細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏ増殖
[00040]成体野生型マウス（Ｃ５７Ｂｌ６）を屠殺し、脾臓を迅速に取り出した。脾細胞は、解離させて単細胞の懸濁液にし、ＮＨ４Ｃｌで赤血球を溶解させた後、フィコール勾配遠心分離によって単離した。続いて、Ｂリンパ球を、２つの方法、補体を介在した溶解またはＣＤ４３の負の選択のうちの１つによって精製した。補体溶解に関して、細胞を、抗Ｔｈｙ１抗体（Ｊ１Ｊ）、抗Ｌ３Ｔ４（ＧＫ１．５）、抗Ｌｙ２（ＴＩＢ１０５、ＡＴＣＣ）、およびウサギ補体（Ｓｉｇｍａ）とともに、３７℃で２時間インキュベートした。ＣＤ４３の負の選択は、製造業者の使用説明書に従って、抗ＣＤ４３（Ｓｅｒｏｔｅｃ）およびＭｉｌｔｅｎｙｉマイクロビーズを使用して行った。細胞を、ＲＰＭＩ１６４０、１０％ウシ胎仔血清中、抗ＣＤ４０（ｍＡｂ  １Ｃ１０、ワイルコーネル大学医学部Ｈｓｉｏｕ−Ｃｈｉ  Ｌｉｏｕ氏より寄贈）および抗ＩｇＭ  Ｆａｂ’２断片（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）の存在下で３日間培養した。ＦＧＦ１（１００ｎｇ／ｍｌ）およびヘパリン（１０μｇ／ｍｌ）を加え、コールターカウンター（Ｃｏｕｌｔｅｒ）またはトリパンブルー色素排除法を使用して、細胞数を三連で測定し、ヘパリン単独と比較したところ、同一の結果が得られた。
結果
[00041]ＦＧＦ２は液性免疫応答を調節する
[00042]研究の過程で、多発性骨髄腫におけるＦＧＦシグナル伝達の役割を評価するために、Ｂ細胞の機能がＦＧＦ変異マウスにおいて変化し得るかどうかを検討することにした。ＦＧＦシグナル伝達が成熟Ｂ細胞の活性に影響を及ぼすのであれば、液性免疫応答は、ＦＧＦファミリーメンバーの１つにおける機能喪失型の突然変異によって影響を受けることが予測される。この問題に対処するために、最も広範に発現するＦＧＦの１つであるＦＧＦ２を欠失したマウスにおいて液性免疫応答を調べた。
【００３１】
[00043]１型非依存性抗原であるＴＮＰ−ＬＰＳによる免疫化は、典型的には、ポリクローナルＢ細胞の活性化および増殖を刺激する。この抗原は、Ｔ細胞枯渇動物において抗体産生を惹起することができ、このことは、その応答がＴ細胞の援助とは概ね無関係であり得ることを示唆している。ＴＮＰ−ＬＰＳに対する液性応答は、ＦＧＦ２の非存在下で増強された（図１Ａ）。ピーク応答の規模およびベースラインへの減衰は、ＦＧＦ２欠失によって強化される。免疫化後３週目では、抗ＴＮＰ抗体力価は、同腹仔対照に比べておよそ３倍高い（図１Ｂ）。この強化作用の大きさは、抑制性ＦＣ受容体であるＢ細胞固有の遺伝子ＦＣγＲＩＩＢで見られるものより大きい（Ｔａｋａｉら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ  ３７９：３４６）。驚いたことに、シングルコピーのＦＧＦ２を欠損しているマウスは、より多くの抗ＴＮＰ抗体を産生する（図１Ａ、１３日目および２２日目時点）。これらの結果は、ＦＧＦ２が、１次液性免疫応答を負に調節し、抗体分泌の正常な不活性化に必要とされることを実証するものである。
【００３２】
[00044]図１  ＦＧＦ２欠失マウスは、１型胸腺非依存性抗原に対してより強く応答する。マウスをＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで免疫し、抗ＴＮＰ特異的抗体をＥＬＩＳＡによって測定した。図１Ａにおいて、データポイントは、少なくとも５匹の動物の血清由来の平均吸光度を表す。アスタリスクは、統計的差異がｐ＜．０５であることを示す（スチューデントｔ検定）。図１Ｂは、免疫化後１９日目に同腹仔対照と比較した、ＦＧＦ２欠失動物の抗体力価の差異の定量を示す。データポイントは、それぞれの遺伝子型について、示された希釈度における平均吸光度±ｓ．ｅ．ｍ．を表す。対応する縦線を有する曲線間の破線は、同一の吸光度における抗体力価の差異を描いたものである。
【００３３】
[00045]ＦＧＦ２が抗体産生を調節するのに十分であるかどうかを決定するために、ＦＧＦ２トランスジェニックマウスにおける液性免疫応答について調べた。これらの動物は、遍在的に活性な促進剤であるホスホグリセリン酸キナーゼによって駆動するヒトＦＧＦ２遺伝子を発現させる（Ｃｏｆｆｉｎら、１９９５、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ  ６：１８６１）。ＦＧＦ２タンパク質の異なる形態は、いくつかの高分子量および低分子量のアイソフォームを含めたＦＧＦ２遺伝子から産生される。ＦＧＦ２トランスジェニック動物では、脾臓を含めた選択された組織において、１８ｋＤ型ＦＧＦ２の発現に顕著な増加が見られる（Ｃｏｆｆｉｎら、１９９５、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ  ６：１８６１）。
【００３４】
[00046]図２  ＦＧＦ２トランスジェニックマウスは、１型胸腺非依存性抗原に対してより弱く応答する。マウスをＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで免疫し、抗ＴＮＰ特異的抗体をＥＬＩＳＡによって、ＴＮＰ−ＢＳＡでコーティングされたプレートを使用して測定した。アスタリスクは、統計的差異がｐ＜０．０５であることを示す（スチューデントｔ検定）。図２Ｂは、免疫化後２１日目に同腹仔対照と比較した、ＦＧＦ２トランスジェニック動物の抗体力価の定量を示す。データポイントは、示された希釈度における平均吸光度±ｓ．ｅ．ｍ．を表す。対応する縦線を有する曲線間の破線は、同一の吸光度における抗体力価の差異を描いたものである。
【００３５】
[00047]図２Ａに示すように、ＴＮＰ−ＬＰＳに応答した抗体産生は、ＦＧＦ２トランスジェニック動物において、著しく減少することが見出された。抗体産生の抑制は、１次応答のあいだ、比較的後期に始まり、免疫原の投与後２１日目まで、統計的有意差は観察することができなかった。抗体力価の低下は、ＦＧＦ２の非存在下で見られた増強に比べて、わずかに大きい（４倍）。したがって、ＦＧＦ２は、液性免疫応答を制御するのに必要かつ十分である。総合すると、これらの観察結果は、ＦＧＦ２を、抗体産生の可溶性調節因子として同定するものである。
【００３６】
[00048]抗原によって活性化されると、Ｂ細胞は胚中心に遊走し、その場所で高親和性の、体細胞突然変異した抗体が生成される。胚中心がＦＧＦ２によって影響を受けるかどうかを決定するために、ＦＧＦ２ヌルマウスにおいて形成される脾胚中心の数を調べた。レクチン染色によると、ＴＮＰ−ＬＰＳで免疫化後およそ２週目に、胚中心の数が実質的に低下し、ヌル動物において形成される胚中心は６分の１少ないことが明らかである（図３、パネルＡ〜Ｃ；表２）。より少ない胚中心は、免疫化後２日目にも観察される（表１）。予想外に、胚中心は、ヘテロ接合体動物においても低下する。
【００３７】
【表１】
2016520060.tif 000002
【００３８】
【表２】
2016520060.tif 000003
【００３９】
[00049]表１および２  胚中心形成は、ＦＧＦ２遺伝子投与量に依存する。ＦＧＦ２＋／＋、＋／−、−／−マウスを、ＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで腹腔内免疫した。免疫化後２日目（表１）およびおよそ２週目に（表２）、胚中心の発現のために脾臓をピーナッツ凝集素で染色した。免疫化後１６日目に、ＦＧＦ２ヘテロ接合体マウス（ｐ＜０．０１）およびヌルマウス（ｐ＜０．０１）において、形成された胚中心は有意により少なかった（スチューデントｔ検定）。免疫化後２日目に、ＦＧＦ２ヌルマウスにおいて、形成された胚中心は有意により少なかった（ｐ＜０．０５）。
【００４０】
[00050]脾臓の肉眼的形態学的特徴は、３つの遺伝子型において類似している。形質細胞の発生がＦＧＦ２欠失動物に影響されるかどうかを決定するために、形質細胞上に発現される細胞表面ヘパリン硫酸プロテオグリカンであるシンデカン−１の発現を調べた。シンデカン陽性形質細胞の数は、著しく異なっているわけではなく、このことから、ＦＧＦ２は、脾臓の形質細胞の運命の採択に影響を及ぼさないことが示唆される（図３、パネルＤ〜Ｆ）。これらの結果は、脾胚中心形成が、ＦＧＦ２遺伝子投与量に依存することを実証するものである。
【００４１】
[00051]図３  ＦＧＦ２欠失は、胚中心に影響を及ぼすが、シンデカン発現には影響を及ぼさない。ＦＧＦ２＋／＋、＋／−、−／−マウスを、ＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで腹腔内免疫した（Ａ〜Ｃ）。免疫化後２週目に、胚中心の発現のために脾臓をピーナッツ凝集素で染色した（Ｄ〜Ｆ）。シンデカン−１の発現は、モノクローナル抗体である抗ＣＤ１３８（ＢＤ）によって測定した。
【００４２】
【表３】
2016520060.tif 000004
【００４３】
[00052]表３  胚中心形成は、ＦＧＦ２の異所性発現によって影響を受けない。ＦＧＦ２トランスジェニックマウスおよび同腹仔対照を、ＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで腹腔内免疫した。免疫化後１４日目に、胚中心の発現のために脾臓をピーナッツ凝集素で染色した。
【００４４】
[00053]胚中心がＦＧＦ２の過剰発現によって影響を受けるかどうかを決定するために、ＦＧＦ２トランスジェニック動物において同一の実験を行った。ＦＧＦ２が過剰に発現すると、胚中心がより少なくなる傾向があるが、その差異は統計的に有意ではないことを見出した（表３）。これらのデータは、ＦＧＦ２の過剰発現は、１型非依存性抗原での免疫化後２週目の胚中心形成を調節するのに十分ではないことを示している。
【００４５】
[00054]図４  ＦＧＦ２の異所性発現は、胚中心形成を抑制しない。ＦＧＦ２トランスジェニックおよび同腹仔対照を、ＴＮＰ−ＬＰＳ５０μｇで腹腔内免疫した（Ａ、Ｂ）。免疫化後２週目に、胚中心の発現のために脾臓をピーナッツ凝集素で染色した。
【００４６】
[00055]ＦＧＦ２は、リガンドのＦＧＦファミリーの中でより広範に発現するメンバーの１つであり、複数の組織において強い発現が見られる。ＦＧＦ２が脾臓で発現されるかどうかを決定するために、ＦＧＦ２レベルをＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）によって評価した。ＦＧＦ２は３０２±１７ｐｇ／ｍｌ（平均±ｓ．ｄ．、ｎ＝４）で見出されることを発見し、これは、他のＦＧＦ２応答組織に見出されるものに匹敵するレベルであることを実証している。加えて、機能的な研究により、ＦＧＦ１およびＦＧＦ２が、肝細胞増殖を刺激できる形態で脾臓に存在することが実証されている（Ｓｕｚｕｋｉら、１９９２、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１８６：１１９２）。
【００４７】
[00056]ＦＧＦがＢ細胞の活性化を直接制御することができるかどうかを決定するために、外因性ＦＧＦの追加がｉｎ  ｖｉｔｒｏでＢ細胞増殖に影響を及ぼすかどうかを探求した。Ｂ細胞を脾臓から精製し、刺激抗体を使用して、ＣＤ４０およびＢＣＲシグナル伝達を同時に活性化した。これらの系を誘導することにより、強力な成長シグナルおよび生存シグナルを伝達し、急速な増殖をもたらす。ＦＧＦシグナル伝達がこの応答に影響を及ぼし得るかどうかを検討するために、細胞をＦＧＦ１の存在下でインキュベートした。ＦＧＦ２の代わりにＦＧＦ１を使用したのは、それが最も広範なＦＧＦ受容体（８）を刺激するためである。これらの条件下で、Ｂ細胞数はＦＧＦ刺激によって阻害され（表３）、このことは、ＦＧＦ１が抗原に刺激されたＢ細胞を直接阻害できることを示唆している。
【００４８】
【表４】
2016520060.tif 000005
【００４９】
[00057]表４  ＦＧＦシグナル伝達は、脾臓のＢ細胞増殖を阻害する。成体野生型マウス由来の脾臓を解剖し、Ｂ細胞の非常に濃縮された集団を精製した。細胞を、血清含有培地中、ＣＤ４０活性化モノクローナル抗体（１Ｃ１０）および抗マウスＩｇＭ  Ｆａｂ’２断片（Ｊａｃｋｓｏｎ）の存在下で３日間培養した。値は、１００ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ１を加えて観察し、ヘパリン（１０μｇ／ｍｌ）単独と比較した、全細胞数の減少％（三連で測定した）を表している。Ｘ＝平均±ｓ．ｅ．ｍ．、１サンプルのｔ検定、ｐ＜０．０１。
考察
[00058]機能獲得型および機能喪失型のマウスモデルを使用して、ＦＧＦ２が液性免疫応答を制御することを示した。これらの観察結果は、この多面発現性シグナル伝達因子の大ファミリーのうちの任意のメンバーが、液性免疫応答に影響を及ぼすという第１の指摘を構成する。
【００５０】
[00059]その広範な発現および多様な細胞型に及ぼすその強力な影響に基づいて、ＦＧＦ２は、複数の生物学的プロセスを制御すると仮定される。しかしながら、この遺伝子を欠損しているマウスを用いた研究は、この考えに対して異議を唱えており、他のＦＧＦファミリーメンバーを関与させたり、またはＦＧＦシグナル伝達は必須ではないことを示唆したりしている（Ｏｒｔｅｇａら、１９９８．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：５６７２；Ｚｈｏｕら、１９９８、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ４：２０１；Ｄｏｎｏら、１９９８、ＥＭＢＯ  Ｊ．１７：４２１３）。これらの限定された表現型を考慮すると、シングルコピーのＦＧＦ２を欠損しているマウスが免疫機能に異常を示すことは予期されなかった。このように、他の系とは対照的に、リンパ系組織がＦＧＦ２遺伝子投与量に特に感受性であるように思われる。ＦＧＦファミリーメンバーは広範に発現されるため、これらの結果は、さらなる検討によって、リンパ球機能に及ぼすＦＧＦ依存性の影響についての追加の証拠が明らかになる可能性を高めるものである。
【００５１】
[00060]２つ以上の受容体ファミリーメンバーへのＦＧＦリガンドの結合能を考えると、ＦＧＦ２欠失に対して、２２種の他のＦＧＦのうちの１つによる補償が観察されなかったのは驚くべきことである。これに関し、ＦＧＦ１は、ＦＧＦ２に構造的に類似しており、脾臓でも発現されるため、有望な候補者である（Ｓｕｚｕｋｉら、１９９２、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１８６：１１９２）。一方、ＦＧＦ−１／２ダブルノックアウトマウスを用いた研究は、ＦＧＦ２ヌルマウスにおける、軽度の創傷治癒および神経系の表現型が、ＦＧＦ２の代わりとなるＦＧＦ１の結果ではないことを示唆している（Ｍｉｌｌｅｒら、２０００、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２０：２２６０）。１型非依存性抗原であるリポ多糖は、グラム陰性細菌の細胞壁に存在する主要な病原物質である。この分子における繰り返しエピトープが、Ｂ細胞の表面上にある、ＢＣＲ、ＴＬＲ２、およびＴＬＲ４を含めた受容体の大規模な関与をもたらす（Ｙａｎｇら、１９９８、Ｎａｔｕｒｅ  ３９５：２８４；Ｔａｋｅｕｃｈｉら、１９９９、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １１：４４３）。Ｂ細胞の進化が、そのような頻繁な脅威に対する、迅速および活発な既存の防御を発展させてきており、その結果として、この刺激に応答した抗体分泌は強力である。ＦＧＦ２非存在下でのより大きい応答は、ＦＧＦ２が１次液性免疫応答を負に調節することを実証するものである。増強された応答の規模は、ＦＣ受容体であるＦＣγＲＩＩＢで見られる増強より大きく、その欠失は、免疫化後３週目におけるＬＰＳに対する応答に全く影響を及ぼさない（Ｔａｋａｉら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ  ３７９：３４６）。これは、遺伝子の欠失により、ＬＰＳに応答した抗体産生が増強した第１の例を表すと考えられる。
【００５２】
[00061]ＦＧＦ２を過剰に発現する動物は、ＬＰＳに対する液性免疫応答が抑制されており、このことは、機能獲得型の表現型が、機能喪失型の表現型の正反対であることを実証するものである。ＦＧＦ２は、抗体産生を調節するのに必要かつ十分であると結論付けられる。
【００５３】
[00062]理論によって限定されるものではないが、液性免疫応答のどのステップがＦＧＦ２シグナル伝達によって阻害されるのか、現在明らかではない。形質細胞の生成における差異が他のリンパ系組織で起こる可能性を除外することはできないが、脾臓におけるシンデカン陽性細胞数に実質的な差異を有することなく阻害が起こる（図３、パネルＤ〜Ｆ）。故に、ＦＧＦ２は、骨髄における抗体分泌細胞の形質芽球の遊走、完全な最終分化、または代謝機能などの、シンデカン−１発現の後のステップを調節するのかもしれない。この後者の考えと一致して、ＦＧＦ２は、骨髄における複数の細胞型によって強く発現される（Ｂｒｕｎｎｅｒら、１９９３、Ｂｌｏｏｄ  ８１：６３１；Ｃｈｏｕら、２００３、Ｌｅｕｋ．Ｒｅｓ．２７：４９９）。
【００５４】
[00063]ＦＧＦ２は、Ｂ細胞へ直接的にシグナル伝達することによって、または形質細胞の活性を調節する細胞に間接的に影響を及ぼすことによって、抗体産生を制御し得る。直接的なモデルは、初代成熟Ｂリンパ球のＦＧＦシグナル伝達に応答した増殖減少を示す、本発明者らのデータと一致する（表３）。細胞数の減少は穏やかであるが、ＣＤ４０およびＢＣＲの同時関与によって作動する強い成長シグナルおよび生存シグナルを克服できる物質はほとんどないことを念頭に置くべきである。直接的な作用機序と一致して、以前の研究は、ＦＧＦ受容体が正常ヒト末梢血Ｂ細胞上に存在することを報告している（Ｇｅｎｏｔら、１９８９、Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２２：４２４）。しかしながら、観察された影響を他の細胞型が介在できる可能性を現在除外することはできない。
【００５５】
[00064]抗体産生と胚中心数との間に負の相関が見出された。一見したところ、この観察結果が矛盾しているように思われるのは、胚中心の低減が抗体産生を減少させることを研究者は予期し得たためである。しかしながら、多数の例は、胚中心数を液性応答から切り離せることを実証している。ＴＮＦ受容体ヌル動物は、胚中心を欠損しているが、水疱性口内炎ウイルスに応答して、実質的な抗体力価を生ずる（Ｋａｒｒｅｒら、２０００、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：７６８）。同様に、ＴＮＦ−αヌル動物は、脾臓の形態に劇的な変化を示すが、ＬＰＳに対する抗体産生は影響されない（Ｐａｓｐａｒａｋｉｓら、１９９６、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１３９７）。
【００５６】
[00065]このように、本明細書に記載の研究は、ＦＧＦ２が、液性免疫応答において、２つの明確かつ相補的な役割を果たすことを実証するものである。ＦＧＦ２は、胚中心形成を促進し、それによって、病原刺激に対して防御する活性化Ｂ細胞の生成に貢献する。一方、ＦＧＦ２は、形質細胞の活性を低下させ、その際に、抗体産生に制限を与える。ＦＧＦ２は、Ｂ細胞応答のあいだ種々の時間に、相反する力を発揮するため、免疫系におけるその活性は、確かに複雑である。そのような複雑さが他の組織における観察結果と一致するのは、ＦＧＦシグナル伝達が、その時間的および空間的な作用地点に応じて、根本的に異なった影響を刺激できる場合である。
【００５７】
[00066]哺乳動物におけるＦＧＦ２活性の阻害に関する実施態様
[00067]複数の病状において、ワクチン接種による保護は不十分であり、低いセロコンバージョン率が観察される（Ｃｏｈｅｎ  Ｄ．ら、Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．、ＢＭＪ．２０１０、Ｍａｙ  １４；３４０：ｃ２５４１）。液性免疫応答を増加させるために本発明を使用し得るワクチンの非限定的な例としては、マラリアワクチン（Ｍ．Ｅｓｅｎら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００９、Ｎｏｖ  １６；２７（４９）：６８６２−８．Ｓａｆｅｔｙ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ＧＭＺ２−ａ  ＭＳＰ３−ＧＬＵＲＰ  ｆｕｓｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍａｌａｒｉａ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ）；ＨＩＶワクチン（Ｈｏｘｉｅ  ＪＡ．、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．２０１０；６１：１３５−５２．Ｔｏｗａｒｄ  ａｎ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｂａｓｅｄ  ＨＩＶ−１  ｖａｃｃｉｎｅ．）；インフルエンザワクチン（Ｎｇｕｙｅｎ  ＭＬら、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．２００９、Ｎｏｖ；７７（１１）：４７１４−２３．Ｔｈｅ  ｍａｊｏｒ  ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｈｒａｘ  ｌｅｔｈａｌ  ａｎｄ  ｅｄｅｍａ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｒｅ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｏ  ｎｏｎ−ｃｒｏｓｓ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｅｐｉｔｏｐｅｓ）；老齢患者におけるインフルエンザワクチン（Ｆｒａｓｃａ  Ｄ．、Ｄｉａｚ  Ａ．、Ｒｏｍｅｒｏ  Ｍ．ら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２０１０、Ｏｃｔ  ２２．Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ｉｎ  Ｂ  ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｓｅａｓｏｎａｌ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｌｄｅｒｌｙ  ｈｕｍａｎｓ．）；および炭疽菌ワクチン（Ｎｇｕｙｅｎ  ＭＬら、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．２００９、Ｎｏｖ；７７（１１）：４７１４−２３．Ｔｈｅ  ｍａｊｏｒ  ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｈｒａｘ  ｌｅｔｈａｌ  ａｎｄ  ｅｄｅｍａ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｒｅ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｏ  ｎｏｎ−ｃｒｏｓｓ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｅｐｉｔｏｐｅｓ．）が挙げられる。
【００５８】
[00068]本発明は、例えば、免疫不全症に罹患しているヒト患者などの患者における抗体産生および／または液性免疫を増加させるために使用することができ、そのような免疫不全症には、分類不能型免疫不全症（Ｒｅｚａｅｉ  Ｎら、Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８、Ａｐｒ；１５（４）：６０７−１１、Ｓｅｒｕｍ  ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃａｌ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ  ａｓ  ａ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｍｍｏｎ  ｖａｒｉａｂｌｅ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．）；原発性免疫不全障害（ＰＩＤＤ）、Ｉｇ欠損症、ＩｇＧ欠損症；およびＨＩＶ疾患（後天性免疫不全症候群）が含まれるが、それらに限定されるものではない。
【００５９】
[00069]本発明の１つの実施態様は、哺乳動物において、免疫原、例えば抗原または生ワクチンのワクチン接種に対する液性免疫応答を増加させる方法であって、ＦＧＦ２以外の免疫原に対する哺乳動物のワクチン接種と併せて、哺乳動物において、ＦＧＦ２の活性を阻害し、それによって抗原に対する液性免疫応答を増加させることを含む方法を提供する。１つの改変例では、免疫原は、線維芽細胞増殖因子以外および線維芽細胞増殖因子受容体以外である。哺乳動物は、老齢のヒトなどのヒトであり得る。ヒトであり得る哺乳動物は、限定されるものではないが、分類不能型免疫不全症；原発性免疫不全障害（ＰＩＤＤ）、ＩｇＧ欠損症などの免疫グロブリン欠損症およびＨＩＶ疾患などの免疫不全症を有し得る。
【００６０】
[00070]本発明の他の実施態様は、ヒトなどの哺乳動物において免疫不全症を治療する方法であって、哺乳動物においてＦＧＦ２の活性を阻害することによって、哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させることを含む方法を提供する。１つの改変例では、哺乳動物はがんを有さない。免疫不全症は、例えば、限定されるものではないが、分類不能型免疫不全症；原発性免疫不全障害（ＰＩＤＤ）、ＩｇＧ欠損症などの免疫グロブリン欠損症およびＨＩＶ疾患であり得る。非ヒト哺乳動物も、免疫不全症に罹患しており、本発明に従って治療することができる。例えば、本発明の方法は、飼いネコなどのネコにおけるネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）に関連する免疫不全症を治療するために使用され得る。
【００６１】
[00071]本発明のさらなる実施態様は、ヒトなどの哺乳動物において微生物感染を治療する方法であって、微生物感染の治療を必要とする哺乳動物に、ＦＧＦ２アンタゴニストを投与することを含み、ＦＧＦ２アンタゴニストは、哺乳動物において抗体産生を増加させるのに有効な量で投与される方法を提供する。その方法は、微生物感染に対して活性である抗生物質または抗ウイルス剤を、哺乳動物に投与するステップをさらに含み得る。抗生物質または抗ウイルス剤は、哺乳動物において、抗生物質または抗ウイルス剤の効果とＦＧＦ２アンタゴニストの効果とが、時間的に重なり合うように投与される。微生物感染は、例えば、細菌感染、ウイルス感染、または寄生性真核生物感染であり得る。その方法は、ＦＧＦ２アンタゴニストを投与する前に、哺乳動物が微生物感染を有することを決定するステップをさらに含み得る。
【００６２】
[00072]本発明の他の実施態様は、がんを有しないヒトなどの哺乳動物において、ｉｎ  ｖｉｖｏ抗体産生を増加させる方法であって、哺乳動物においてＦＧＦ２の活性を阻害することを含む方法を提供する。１つの改変例では、哺乳動物は、老齢のヒト、または老齢の飼いイヌまたはネコなどの非ヒト哺乳動物である。
【００６３】
[00073]関連のある実施態様は、非ヒト哺乳動物において、一般に所望の免疫原に対する抗血清またはポリクローナル抗体の産生を増強する方法であって：本明細書に記載の方法およびやり方のいずれかに従って、非ヒト哺乳動物においてＦＧＦ２の活性を阻害するステップ；ならびに非ヒト哺乳動物を、線維芽細胞増殖因子でも線維芽細胞増殖因子受容体でもない免疫原で免疫するステップを含み、それによって、哺乳動物において免疫原に対する抗体の産生を、ＦＧＦ２活性を阻害しない比較し得る免疫化に対して、増強、増加、および／または加速させることを含む方法を提供する。その方法は、ポリクローナル血清を非ヒト哺乳動物から回収するステップ、および任意で単離するステップをさらに含み得る。免疫化ステップは、例えば、免疫原による２回以上の時間的に離れた免疫化を含むことができ、そして、例えば免疫化アジュバントの含めることによって補助することができる。抗血清およびポリクローナル抗体の産生方法は、当該技術分野において周知であり、長年にわたって確立されている。例えば米国特許第５，４４０，０２１号を参照されたい。
【００６４】
[00074]哺乳動物におけるＦＧＦ２活性の阻害に応答した抗体産生の増加は、本発明の全体的な特徴であり、本発明は、ＦＧＦ２活性を阻害するために哺乳動物に投与されるＦＧＦ２阻害剤の種類に限定されない。ＦＧＦ２活性の阻害剤の好ましい種類には、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体ならびにそれらの結合断片が含まれ、それらは、ＦＧＦ２に結合して、ＦＧＦ結合受容体とモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体との相互作用を遮断するもの、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、およびＦＧＦＲ３などのＦＧＦ受容体に結合して、リガンド（ＦＧＦ２）の受容体への結合を遮断するものである。例えば、ＦＧＦ２を中和する単鎖モノクローナルｓｃＦｖ抗体を使用することができ、そのような抗体は、Ｔａｏら、Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ−２．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０１０、Ａｐｒ  ９；３９４（３）：７６７−７３．Ｅｐｕｂ  ２０１０、Ｍａｒ  １７に記載のもの、またはその中に記載の方法によって得られるものなどである。Ｓｕｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２９２：９６４−９７６、２００７に記載のもの、またはこの論文の方法に従って得られるものなどの、ＦＧＦＲ１を遮断する抗体を使用することができる。Ｇｏｒｂｅｎｋら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、Ｖｏｌｕｍｅ  ２８、Ｎｕｍｂｅｒ  ４、２００９も、抗ＦＧＦＲ１抗体の産生およびそれらの製造について記載している。ＦＧＦＲ３に対するモノクローナル抗体およびそれらの製造は、Ｑｉｎｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１９：１２１６−１２２９（２００９）、およびＧｏｒｂｅｎｋｏら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、Ｖｏｌｕｍｅ  ２８、Ｎｕｍｂｅｒ  ４、２００９、２９５−３００に記載されている。
【００６５】
[00075]抗体は、抗原と特異的に結合する１以上の抗原結合部位を含有する。抗体には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、およびヒト化抗体が含まれるが、それらに限定されるものではない。免疫学的に活性な部分には、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単鎖可変ドメイン（ｓＶＤ）、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、およびＦ（ａｂ’）２断片などの１価および２価の断片が含まれる。免疫学的に活性な部分は、２重特異性抗体、３重特異性抗体などから多価に組み込むことができる。抗体には、ファージ上に提示される抗原結合断片、および抗体コンジュゲートをさらに含まれる。
【００６６】
[00076]「単離された抗体」は、（１）成分の混合物から、部分的に、実質的に、または完全に精製された；（２）その自然環境の成分から同定、分離、および／または回収された；（３）モノクローナルである；（４）同一種由来の他のタンパク質を含まない；（５）異なる種由来の細胞によって発現される；あるいは（６）天然に存在しない抗体である。単離された抗体は、例えば、本発明に従って、ＦＧＦ２活性の阻害剤として使用され得る。単離された抗体の例には、ＦＧＦ２を使用して親和性精製された抗ＦＧＦ２抗体、ハイブリドーマまたは他の細胞株によってｉｎ  ｖｉｔｒｏで作製された抗ＦＧＦ２抗体、ファージライブラリーなどのライブラリーから単離されたヒト抗ＦＧＦ２抗体、およびトランスジェニックマウスに由来するヒト抗ＦＧＦ２抗体が含まれる。
【００６７】
[00077]一般に、天然に存在する抗体分子は、２本の同一の重鎖および２本の軽鎖で構成される。それぞれの軽鎖は通常、鎖間ジスルフィド結合によって重鎖に共有結合しており、２本の重鎖は、ヒンジ領域で、複数のジスルフィド結合によって、互いにさらに結合している。個々の鎖は、類似のサイズ（約１１０〜１２５個のアミノ酸）および構造を有するが機能が異なるドメインにフォールディングする。軽鎖は、１つの可変ドメイン（ＶＬ）および１つの定常ドメイン（ＣＬ）を含む。重鎖は、１つの可変ドメイン（ＶＨ）および、抗体のクラスまたはアイソタイプに応じて、３つまたは４つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４）を含む。マウスおよびヒトでは、アイソタイプは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭであり、ＩｇＡおよびＩｇＧは、サブクラスまたはサブタイプにさらに細分される。ＶＬおよびＶＨドメインから成る抗体の部分は、「Ｆｖ」と称され、抗原結合部位を構成する。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）は、１つのポリペプチド鎖にＶＬドメインおよびＶＨドメインを含有する、遺伝子工学的に作製されたタンパク質であり、一方のドメインのＮ末端と他方のドメインのＣ末端が、柔軟性のあるリンカーによって連結されている。「Ｆａｂ」は、ＶＬ−ＣＬ（すなわち軽鎖）およびＶＨ−ＣＨ１（「Ｆｄ」とも称される）から成る抗体の部分を表す。
【００６８】
[00078]抗体は、限定されるものではないが、単一可変ドメイン（ｓＶＤ）とｓＶＤを含む抗原結合タンパク質とを含む。ｓＶＤ結合部位は、抗原特異的Ｆｖ領域（ＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む）から得ることができる。多くの場合、Ｆｖ領域の結合親和性および結合特異性は、主として、可変ドメインの１つによって寄与されることを示すことができる。あるいは、ｓｃＦｖは、直接得ることができる。ｓＶＤの直接源には、ＶＨドメインのみを含有する抗体を自然に発現する哺乳動物（例えばラクダ科）が含まれる。さらに、ファージディスプレイライブラリーを構築し、単一可変ドメインのみを発現させることができる。例えば、ヒトドメイン抗体ファージディスプレイライブラリーは、Ｄｏｍａｎｔｉｓ（英国、ケンブリッジ）から市販されている。
【００６９】
[00079]抗体可変ドメインは、特に抗原結合部位の位置において、１つの抗体から次の抗体までかなりのアミノ酸配列多様性を示す。「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる３つの領域は、ＶＬおよびＶＨのそれぞれに見出される。抗体のＣＤＲは、「超可変領域」といわれることが多い。
【００７０】
[00080]「Ｆｃ」は、一対の重鎖定常ドメインを含む抗体の部分の名称である。ＩｇＧ１抗体では、例えば、Ｆｃは、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインを含む。ＩｇＡ抗体またはＩｇＭ抗体のＦｃは、ＣＨ４ドメインをさらに含む。Ｆｃは、Ｆｃ受容体結合、補体介在性細胞障害作用および抗体依存性細胞障害作用の活性化と関連する。複数のＩｇＧ様タンパク質の複合体であるＩｇＡおよびＩｇＭなどの自然抗体に関して、複合体形成は、Ｆｃ定常ドメインを必要とする。
【００７１】
[00081]最後に、「ヒンジ」領域は、抗体のＦａｂ部分とＦｃ部分とを分離し、Ｆａｂの、互いに対する可動性およびＦｃに対する可動性を提供し、その上２本の重鎖の共有結合のための複数のジスルフィド結合を含む。このように、本発明の抗体には、抗原と特異的に結合する、天然に存在する抗体、（Ｆａｂ’）２などの２価の断片、Ｆａｂなどの１価の断片、単鎖抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単一ドメイン抗体、多価単鎖抗体、２重特異性抗体、３重特異性抗体などのが含まれるが、それらに限定されるものではない。
【００７２】
[00082]抗体断片には、本発明の抗体の可変領域または超可変領域のアミノ酸配列に実質的に類似したアミノ酸配列を有するポリペプチドも含まれる。実質的に同一のアミノ酸配列は、本明細書において、ＰｅａｒｓｏｎおよびＬｉｐｍａｎ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４−２４４８（１９８８）に従って、ＦＡＳＴＡ検索方法によって決定される場合、比較対象のアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％の相同性または同一性を有する配列と定義される。
【００７３】
[00083]本発明に従って阻害剤として用いられ得る抗体には、「キメラ」抗体およびその結合断片が含まれる。そのような抗体は、一般に、ある１つの抗体の可変ドメインと、異なる抗体の定常ドメインとを含む。典型的には、抗体に対する宿主の免疫応答を最小限にするために、そして抗体エフェクター機能を保持することによって、抗体標的に対する宿主の応答を増強するために、キメラ抗体の定常ドメインは、そのキメラ抗体が投与される同一種から取得される。
【００７４】
[00084]本発明に従って阻害剤として用いられ得る抗体には、「ヒト化」抗体も含まれる。ヒト化可変ドメインの構築は、非ヒト起源の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むアミノ酸配列が、ヒトフレームワーク領域（ＦＲ）に移植されて行われる。例えば、Ｊｏｎｅｓ，Ｐ．Ｔ．ら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１、５２２−２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎ，Ｌ．ら、１９８８、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２、３２３−２７；およびＱｕｅｅｎらの米国特許第５，５３０，１０１号を参照されたい。ヒト化構築物は、例えば、非ヒト源に由来する抗原結合ドメインを、ヒトの治療に使用することが望まれる場合に、有害な免疫原性を排除するのに特に価値がある。可変ドメインは、高度の構造的相同性を有しており、ＣＤＲおよびＦＲに相当する可変ドメイン内のアミノ酸残基の容易な同定を可能にする。例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら、１９９１、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．第５版、全米バイオテクノロジー情報センター、国立衛生研究所、メリーランド州ベセスダを参照されたい。このように、抗原結合に直接関わりそうなアミノ酸が容易に同定される。加えて、移植されたＣＤＲを含むヒト化結合ドメインの、抗原に対する親和性を保存または増強するための方法が開発されている。１つのやり方は、レシピエントの可変ドメインに、ＣＤＲ領域の立体構造に影響を及ぼす外来フレームワーク残基を含めることである。２つ目のやり方は、外来可変領域に対する相同性が最も近いヒト可変ドメインに、外来ＣＤＲを移植することである。Ｑｕｅｅｎ，Ｃ．ら、１９８９、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６、１００２９−３３。ＣＤＲは、所望のＣＤＲ配列を含む重複プライマーを使用して、個々のＦＲ配列を最初に増幅し、得られた遺伝子断片をその後の増幅反応において加えることによって、異なるＦＲ上に最も容易に移植される。異なる可変ドメインへのＣＤＲの移植は、アミノ酸配列中のＣＤＲに隣接しているアミノ酸残基の置換、またはＣＤＲの立体構造に影響を及ぼすフォールディングされた可変ドメイン構造内のＣＤＲに接触してパッキングされているアミノ酸残基の置換をさらに包含することができる。したがって、本発明のヒト化可変ドメインには、１つ以上の非ヒトＣＤＲを含むヒトドメイン、および結合特性を保存または増強するために追加の置換が行われたようなドメインが含まれる。
【００７５】
[00085]表面に露出した残基を置換することによって、免疫原性をより低下させ、抗体が免疫系に対して自己として見えるようにした可変ドメインを有する抗体も、阻害剤として使用され得る（Ｐａｄｌａｎ，Ｅ．Ａ．、１９９１、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８、４８９−９８）。抗体は、このプロセスによって、親和性を消失することなく変更されている（Ｒｏｇｕｓｋａら、１９９４、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１、９６９−９７３）。抗原結合部位の近傍のアミノ酸残基の内部パッキングは変化しないままであるため、親和性は保存される。免疫原性を低下させるために本発明に従って表面に露出した残基の置換は、ＣＤＲ残基または結合特性に影響を及ぼす隣接残基の置換を意味するものではない。
【００７６】
[00086]抗体のレシピエントがヒトである場合は、本質的にヒトである可変ドメインを用いることが好ましい場合が多い。ヒト抗体は、ヒトＶＨおよびＶＬフレームワーク領域（ＦＷ）ならびにヒト相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。好ましくは、ＶＨおよびＶＬ可変ドメインの全体がヒトであるかまたはヒト配列に由来する。抗体は、ヒト細胞から、例えばヒトハイブリドーマを作り出すことによって、直接得ることができる。
【００７７】
[00087]あるいは、ヒト抗体は、再配列されていないヒトＩｇ遺伝子断片が導入され、内因性マウスＩｇ遺伝子が不活性化されたトランスジェニック動物から得ることができる（ＢｒｉｉｇｇｅｍａｎｎおよびＴａｕｓｓｉｇ、１９９７、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８、４５５−５８に概説されている）。好ましいトランスジェニック動物は、サイズが１Ｍｂを超える非常に大きな連続したＩｇ遺伝子断片を含有する（Ｍｅｎｄｅｚら、１９９７、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．１５、１４６−５６）が、中程度の親和性のヒトＭａｂは、より小さな遺伝子座を含有するトランスジェニック動物から得ることができる（例えば、Ｗａｇｎｅｒら、１９９４、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４２、２６７２−８１；Ｇｒｅｅｎら、１９９４、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．７、１３−２１を参照されたい）。
【００７８】
[00088]ヒト抗体は、抗体ＶＨおよび／またはＶＬドメインのライブラリーからも得ることができる。例えば、可変ドメインライブラリーは、ヒトゲノム配列からまたは生産的に再配列された可変領域遺伝子を発現させる末梢血リンパ球から得ることができる。さらに、ヒト遺伝子ライブラリーは、合成することができる。１つの実施態様では、ランダムな配列または部分的にランダムな配列を含むように合成される１つ以上のＣＤＲとともにヒトフレームワーク領域を含む、可変ドメインライブラリーを作り出すことができる。例えば、ヒトＶＨ遺伝子断片およびＣＤＲ３Ｈ領域の合成配列（すなわち、合成ＤＨ−ＪＨ遺伝子断片）によってメンバーがコードされる、ヒトＶＨ可変ドメインライブラリーを作り出すことができる。同様に、ヒトＶＬ可変ドメインは、ヒトＶＬ遺伝子断片およびＣＤＲ３Ｌ領域の合成配列（すなわち、合成ＪＬ遺伝子断片）によってコードされ得る。他の実施態様では、ヒトフレームワークは、それらが公知のヒト抗体配列またはヒト配列のサブグループから誘導されたコンセンサス配列を有するという点で、合成的であり得る。他の代替形態では、１つ以上のＣＤＲは、再配列された可変ドメインを発現させるヒトリンパ球から増幅し、次いで特定のヒトフレームワーク内に組換えを行うことによって得られる。
【００７９】
[00089]可変ドメインのライブラリーをスクリーニングするためには、ヒト重鎖および軽鎖可変ドメインの組合せが、糸状ファージの表面上にディスプレイされるファージディスプレイライブラリーを用いるのが一般的である（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８、５５２−５４；Ａｕｊａｍｅら、１９９７、Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ８、１５５−６８を参照されたい）。可変ドメインの組合せは、典型的には、ＦａｂまたはｓｃＦｖの形で、糸状ファージ上にディスプレイされる。所望の抗原結合特性を有する可変ドメインの組合せを保有するファージについて、ライブラリーがスクリーニングされる。好ましい単一ドメインと可変ドメインとの組合せは、選択された抗原に対する高親和性および他の関連抗原に対する低交差反応性を示す。抗体断片の非常に大きなレパートリーをスクリーニングすることによって（例えば、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、１９９４、ＥＭＢＯ  Ｊ．１３、３２４５−６０を参照されたい）、多様性に富んだ高親和性の結合ドメインが単離され、その多くが、所望の抗原に対してナノモル以下の親和性を有することが期待される。
【００８０】
[00090]生理学的免疫応答では、発現抗体遺伝子の突然変異および選択が、それらの標的抗原に対して高親和性を有する抗体の産生につながる。本発明の抗体に組み込まれるＶＨおよびＶＬドメインを、同様にｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏ突然変異およびスクリーニング手法に供して、親和性および／または特異性を変更することができる。それ故に、本発明の結合ドメインは、直接突然変異、親和性成熟法または鎖シャッフリングによって、ＣＤＲおよび／またはＦＷ領域を変異させることによって、結合特性が改善されたものを含む。単一ドメイン抗体の結合の１次決定基であるアミノ酸残基は、カバットによって定義されたＣＤＲの範囲内であり得るが、他の残基も同様に含み得ることは理解される。ｓＶＤについて、抗原結合にとって重要な残基は、他にＶＨ−ＶＬヘテロ二量体の界面に位置するアミノ酸も含む可能性がある。典型的には、ファージディスプレイを使用して、そのような突然変異体（ｍｕｔａｎｔ）をスクリーニングし、所望の結合特性を有するものを同定する（例えば、Ｙａｎｇら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２５４：３９２−４０３（１９９５）を参照されたい）。突然変異は、種々のやり方で行うことができる。１つのやり方は、個々の残基または残基の組合せをランダム化して、他の同一配列の集団において、２０アミノ酸のすべてまたはそのサブセットが特定の位置に見出されるようにすることである。あるいは、エラープローンＰＣＲ法（例えばＨａｗｋｉｎｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２６：８８９−８９６（１９９２）を参照されたい）によって、一連のＣＤＲ残基にわたって突然変異を誘導してもよい。例えば、重鎖および軽鎖の可変領域遺伝子を含有するファージディスプレイベクターを、大腸菌の突然変異誘発株の中で増殖させてもよい（例えば、Ｌｏｗら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２５０：３５９−３６８（１９９６）を参照されたい）。これらの突然変異誘発の方法は、当業者に知られている多くの方法の一例である。
【００８１】
[00091]本発明に従って使用され得る阻害剤は、非免疫グロブリン骨格から遺伝子工学的に作製された抗原結合タンパク質も含む。例えば、アフィボディは、黄色ブドウ球菌プロテインＡの免疫グロブリン結合ドメインから誘導されるものであり、ジスルフィド結合を全く所有せず、可逆的なフォールディングを示す。別の例はフィブロネクチンであり、これは抗体様構造を有し、ＣＤＲ様ループを示す。抗体とは対照的に、フィブロネクチンドメイン構造は、ジスルフィド結合に依存しないが、高い熱力学的安定性を示す。結合部位は、例えば、コドンを特定の位置で多様化することおよび所望の抗原への結合についてスクリーニングすることによって、そのような骨格に遺伝子工学的に作製することができる。コドンは、ループ、平面、空洞またはそのような位置の組合せにおいて、ランダム化することができる。さらに、ペプチド配列を、通常はループに挿入することができる。得られたライブラリーの標的結合変異体（ｖａｒｉａｎｔ）は、当該技術分野において周知のスクリーニング技術の選択を使用して単離することができ、そのような技術には、ファージディスプレイ、リボソームディスプレイ、細菌または酵母表面ディスプレイなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。治療を意図した抗原結合タンパク質について、潜在的な免疫原性を最小限にするために、種々の戦略が利用できる。ヒト骨格を用いることができ、例えば、ペグ化またはＴ細胞エピトープ工学技術（すなわち、Ｔ細胞反応性配列の最小化）によって、免疫原性を最小限にすることができる。
【００８２】
[00092]非免疫グロブリン骨格由来の抗原結合タンパク質は、多くの場合、免疫グロブリン型タンパク質に比べてより経済的に製造することができる。例えば、ジスルフィド結合または遊離システインが存在しないことにより細菌細胞質の還元環境における機能性分子の発現が可能になり、それによって、通常は細胞周辺の発現に比べてより高収率が得られ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏリフォールディングに比べてより好都合である。Ｂｉｎｚ，Ｈ．Ｋ．ら（Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１２５７−６８、２００５）は、種々のそのような抗原特異的結合タンパク質およびそれらの開発のための技術を開示する。
【００８３】
[00093]ＦＧＦ２または他のＦＧＦのそれらの受容体への結合を阻害する抗体または他の分子の同定または選択は、試験薬剤の存在下および非存在下で結合を比較する、通常のリガンド−受容体結合アッセイに従って行われ得る。これは、ＦＧＦ２およびその受容体の完全な配列が、ヒトなどの種々の哺乳動物において知られているためである。リガンド−受容体結合アッセイについては、例えば米国特許第５，４４０，０２１号を参照されたい。
【００８４】
[00094]ＦＧＦ２活性の阻害剤の別の好ましいタイプは、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、およびＦＧＦＲ３の可溶性の形などの、可溶性のＦＧＦ２結合受容体またはＦＧＦ結合受容体の可溶性部分である。可溶性の受容体配列は、例えば、それが投与される種に適合させることがあり、すなわち、ヒト受容体配列は、ヒトレシピエントなどに使用され得る。例えば、ＦＰ−１０３９は、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）のＦｃ領域に結合されたヒトＦＧＦＲ１の細胞外ドメインからなる可溶性融合タンパク質であり、本発明に従って、ＦＧＦ２阻害剤／アンタゴニストとして使用され得る（Ｆｉｖｅ  Ｐｒｉｍｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンフランシスコ；Ｋｅｅｒら、ＡＳＣＯ  ２０１０、抄録番号ＴＰＳ２６０）。
【００８５】
[00095]ＦＧＦ２活性はまた、本発明に従って、対象哺乳動物に、ＦＧＦ２自体に対するあるいはＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、および／またはＦＧＦＲ３に対するワクチン接種を行うことによって阻害され得る。例えば、ＦＧＦ２のヘパリン結合部分を標的とするペプチドワクチンを使用して、Ｐｌｕｍら、Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ＦＧＦ２  ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ａｆｆｅｃｔ  ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ  ｏｒ  ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｃｏｌ．２００４、Ｆｅｂ；２６（１）：２９−４１の方法に従って、哺乳動物に、特異的抗ＦＧＦ２抗体応答を生成することができる。
【００８６】
[00096]抗体または可溶性受容体などの可溶性ポリペプチドを使用してＦＧＦ２活性を阻害する実施態様について、例えば、ヒトへの静脈内投与のための組成物は、０．１〜２０ｍｇ、例えば０．１〜１０ｍｇなどのポリペプチドを含み得、これは日用量であり得る。より一般的には、対象１人当たり０．１ｍｇ／日から約１００ｍｇ／日までの投与量が、１日または複数日間使用され得る。投与可能な組成物を調製する方法は、当業者に周知であり、レミントンの薬学、第１９版、Ｍａｃｋ出版社、ペンシルバニア州イーストン（１９９５）のような出版物に、より詳細に記載されている。対象への投与のためのポリペプチドは、例えば、凍結乾燥された形で提供され、投与前に滅菌水で再水和され得る。次いで、ポリペプチド溶液は、米国薬局方０．９％塩化ナトリウムを含有する輸液バッグに加え、例えば０．５から１５ｍｇ／ｋｇ体重までの投与量で投与され得る。あるいは、例えば、ポリペプチドは、ボーラス注射として、例えば、０．５〜３０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量で投与することができる。
【００８７】
[00097]ＦＧＦ２活性阻害剤のさらに他の適したタイプは、例えば、ＦＧＦ２またはＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２およびＦＧＦＲ３のうちの１つもしくは複数を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。その上さらなる適した阻害剤は、小分子阻害剤であり、例えば、米国特許第６，０７１，８８５号に記載の強心配糖体またはアグリコン誘導体および米国特許第５，８９１，６５５号に記載のＦＧＦ活性を調節するオリゴ糖が挙げられる。Ｓａｒｋｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２００８；１４（７）２０７５−８１に記載のＴＫＩ２５８は（ＣＨＩＲ−２５８としても知られている）、別の適した小分子ＦＧＦ受容体阻害剤である。Ｂｈｉｄｅら、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．；９（２）Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２０１０、３６９−７８に記載のＦＧＦＲ１キナーゼ阻害剤であるブリバニブ（Ｂｒｉｖａｎｉｂ）は、さらに別の適した小分子阻害剤である。
【００８８】
[00098]哺乳動物におけるＦＧＦ２活性の増加に関する実施態様
[00099]本発明は、哺乳動物においてＦＧＦ２の活性を増加させることにより、例えば、哺乳動物において抗体産生を低下させるのに有効な量で、ＦＧＦ２を哺乳動物に投与すること、あるいはＦＧＦ２のアゴニストまたはＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、もしくはＦＧＦＲ３などのＦＧＦ２受容体のアゴニストを哺乳動物に投与することにより、ヒトなどの哺乳動物において、ｉｎ  ｖｉｖｏ抗体産生を意図的に低下させる実施態様も提供する。ＦＧＦ２を哺乳動物レシピエントに投与する場合、ペプチド配列は、例えば、それが投与される種に、少なくとも実質的にまたは完全に同一に適合させることができ、すなわち、ヒト受容体配列は、ヒトレシピエントなどに使用することができる。
【００８９】
[000100]本発明のこの態様は、実際の適用が、急性毒性状態における抗体産生の抑制であることが分かる。多くの場合、侵入している病原体に対する応答は、病的な自己免疫作用を引き起こし、リンパ球活性が急上昇して制御不能になる可能性がある。このような状況において、ＦＧＦ２の投与は、制御不良の抗体分泌を軽減させる。
【００９０】
[000101]同様に、ヒトの複数の病理は、自己免疫抗体の分泌に起因する。ＦＧＦ２およびＦＧＦリガンドの投与は、これらの抗体産生を軽減させ、ひいては自己免疫疾患を改善するのに役立つ。例えば、自己免疫抗体は、全身性エリテマトーデス（Ｃｏｈｅｎ  Ｄ.ら、Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．、ＢＭＪ．２０１０、Ｍａｙ  １４；３４０：ｃ２５４１）、ならびに関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、および若年性特発性関節炎を含めた多様な関節炎疾患（Ｃａｌｅｒｏ  Ｉ．ら、Ｂ  ｃｅｌｌ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｆｏｒ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ｂｅｙｏｎｄ  Ｂ  ｃｅｌｌ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ．、Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．２０１０、Ｍａｙ；３６（２）：３２５−４３）において観察される。加えて、哺乳動物におけるＦＧＦ２活性の増加を使用して、ヒト臓器移植患者などの臓器移植患者において、低下した抗体産生レベルを低下または維持し、患者に移植された臓器に対する負の免疫応答を減少させ、それに対する寛容性を増加させることができる。
【００９１】
[000102]したがって、本発明の１つの実施態様は、病的な抗体産生などの抗体産生を低下させることを必要とするヒトなどの哺乳動物において、病的な抗体産生などの抗体産生を低下させる方法であって、抗体産生を低下させるのに有効な量で、ＦＧＦ２もしくはＦＧＦ２アゴニスト、またはＦＧＦ２と結合するＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、およびＦＧＦＲ３などの受容体のアゴニストを哺乳動物に投与することにより低下させる方法を提供する。１つの改変例では、哺乳動物は、全身性エリテマトーデス、ならびに関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、および若年性特発性関節炎を含めた多様な関節炎疾患の治療を受けているかまたはその必要があってもよく、その方法は、これらの哺乳動物において、自己免疫抗体の産生を低下させ、それによって状態を治療するものである。他の改変例では、哺乳動物は、ヒト臓器移植患者などの臓器移植患者であり、その方法は、移植された臓器に対する抗体応答を低下させるものである。
【００９２】
[000103]線維芽細胞増殖因子およびそれらの受容体の配列は、ヒトおよび非ヒト哺乳動物において、よく特徴付けられている。例えば、以下の配列が公知であり、本開示の一部を形成する：ヒトＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００２００６．４；配列番号１ペプチド、配列番号２ヌクレオチド）、ヒトＦＧＦＲ１（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号Ｍ３４１８５．１；配列番号３ペプチド、配列番号４ヌクレオチド）、ヒトＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿０００１４１．４；配列番号５ペプチド、配列番号６ヌクレオチド）、ヒトＦＧＦＲ３（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿０００１４２．４；配列番号７ペプチド、配列番号８ヌクレオチド）、ヒトＦＧＦＲ４（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＡＦ２０２０６３．１；配列番号９ペプチド、配列番号１０ヌクレオチド）、ウシＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿１７４０５６．３；配列番号１１ペプチド、配列番号１２ヌクレオチド）、ウシＦＧＦＲ１（Ｇｅｎｂａｎｋ寄託番号ＮＭ＿００１１１０２０７．１；配列番号１３ペプチド、配列番号１４ヌクレオチド）、ウシＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００２６９８５４６．１；配列番号１５ペプチド、配列番号１６ヌクレオチド）；ウシＦＧＦＲ３（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿１７４３１８．３；配列番号１７ペプチド、配列番号１８ヌクレオチド）、ウシＦＧＦＲ４（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００２６８９００８．１；配列番号１９ペプチド、配列番号２０ヌクレオチド）、イノシシＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００３１２９２１３．１；配列番号２１ペプチド、配列番号２２ヌクレオチド）、イノシシＦＧＦＲ１（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００１９２８６７８．２；配列番号２３ペプチド、配列番号２４ヌクレオチド）、イノシシＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００１０９９９２４．１；配列番号２５ペプチド、配列番号２６ヌクレオチド）、イノシシＦＧＦＲ３（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＢＶ７２６８０８．１；配列番号２７  ｃｄｓヌクレオチド）、イノシシＦＧＦＲ４（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００３１２３６８２．１；配列番号２８ペプチド、配列番号２９ヌクレオチド）、アカゲザルＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００１０９９２８４．２；配列番号３０ペプチド、配列番号３１ヌクレオチド）、カニクイザルＦＧＦＲ１（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＡＢ２２０４１７．１；配列番号３２ペプチド、配列番号３３ヌクレオチド）、アカゲザルＦＧＦＲ２部分（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＡＹ０８３５４８．１；配列番号３４ペプチド、配列番号３５ヌクレオチド）、アカゲザルＦＧＦＲ３（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００２８０２１６７．１；配列番号３６ペプチド、配列番号３７ヌクレオチド）、アカゲザルＦＧＦＲ４（ＮＣＢＩ参照配列ＸＭ＿００１０８７２４３．２；配列番号３８ペプチド、配列番号３９ヌクレオチド）、ハツカネズミＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００８００６．２；配列番号４０ペプチド、配列番号４１ヌクレオチド）、ハツカネズミＦＧＦＲ１（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿０１０２０６．２；配列番号４２ペプチド、配列番号４３ヌクレオチド）、ハツカネズミＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿０１０２０７．２；配列番号４４ペプチド、配列番号４５ヌクレオチド）、ハツ��ネズミＦＧＦＲ３（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００８０１０．４；配列番号４６ペプチド、配列番号４７ヌクレオチド）、およびハツカネズミＦＧＦＲ４（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００８０１１．２；配列番号４８ペプチド、配列番号４９ヌクレオチド）。
【００９３】
[000104]限定されるものではないが、本発明は、以下に列挙された化合物またはその薬理学的に許容される塩を投与することにより、ヒトなどの哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させる方法も提供する。
【００９４】
[000105]１．  ＢＩＢＦ１１２０（バルガテフ（Ｖａｒｇａｔｅｆ））ベーリンガー・インゲルハイム
化学名：メチル（３Ｚ）−３−［（｛４−［Ｎ−メチル−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセトアミド］フェニル｝アミノ）（フェニル）メチリデン］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−カルボキシレート
【００９５】
【化１】
2016520060.tif 000006
【００９６】
Ｆ．Ｈｉｌｂｅｒｇら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００８、Ｊｕｎ  １５；６８（１２）：４７７４−８２．ｄｏｉ：１０．１１５８／０００８−５４７２．ＣＡＮ−０７−６３０７．ＢＩＢＦ  １１２０：ｔｒｉｐｌｅ  ａｎｇｉｏｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｉｔｈ  ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ａｎｄ  ｇｏｏｄ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｉｃａｃｙ．
[000106]２．  ＴＫＩ２５８（ドビチニブ（Ｄｏｖｉｔｉｎｉｂ））ノバルティス
化学名：４−アミノ−５−フルオロ−３−［５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロナフタレン−２（１Ｈ）−オン
【００９７】
【化２】
2016520060.tif 000007
【００９８】
Ｔｒｕｄｅｌ  Ｓ．ら、Ｂｌｏｏｄ．２００５、Ａｐｒ  １；１０５（７）：２９４１−８．Ｅｐｕｂ  ２００４、Ｄｅｃ  １４．ＣＨＩＲ−２５８、ａ  ｎｏｖｅｌ，ｍｕｌｔｉｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔ（４；１４）ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ．
[000107]３．  ＢＭＳ５８２６６４（ブリバニブ）ブリストル・マイヤーズ  スクイブ
化学名：（１Ｒ）−２−［［４−［（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）オキシ］−５−メチルピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イル］オキシ］−１−メチルエチル（２Ｓ）−２−アミノプロパノエート
【００９９】
【化３】
2016520060.tif 000008
【０１００】
Ｂｈｉｄｅ  ＲＳら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６、Ａｐｒ  ６；４９（７）：２１４３−６．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  （Ｒ）−１−（４−（４−ｆｌｕｏｒｏ−２−ｍｅｔｈｙｌ−１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−５−ｙｌｏｘｙ）−５−ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｏ［２，１−ｆ］［１，２，４］ｔｒｉａｚｉｎ−６−ｙｌｏｘｙ）ｐｒｏｐａｎ−２−ｏｌ（ＢＭＳ−５４０２１５），ａｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｐｏｔｅｎｔ  ＶＥＧＦＲ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．
[000108]４．  Ｅ７０８０  エーザイ
化学名：４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド
【０１０１】
【化４】
2016520060.tif 000009
【０１０２】
Ｂｏｓｓ  ＤＳら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．２０１２、Ｍａｙ  ８；１０６（１０）：１５９８−６０４．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｂｊｃ．２０１２．１５４．Ｅｐｕｂ  ２０１２．Ａｐｒ  １９．Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｅ７０８０，ａ  ｍｕｌｔｉｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｕｒｓ．
[000109]５．  ＡＺ２１７１（セディラニブ（Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ））アストラゼネカ
化学名：４−［（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）オキシ］−６−メトキシル−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン
【０１０３】
【化５】
2016520060.tif 000010
【０１０４】
Ｗｅｄｇｅ  ＳＲら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００５、Ｍａｙ  １５；６５（１０）：４３８９−４００．ＡＺＤ２１７１：ａ  ｈｉｇｈｌｙ  ｐｏｔｅｎｔ，ｏｒａｌｌｙ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ，ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−２  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ．
[000110]６．  ＡＺＤ４５４７  アストラゼネカ
化学名：Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド
【０１０５】
【化６】
2016520060.tif 000011
【０１０６】
Ｇａｖｉｎｅ  ＰＲ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１２、Ａｐｒ  １５；７２（８）：２０４５−５６．ｄｏｉ：１０．１１５８／０００８−５４７２．ＣＡＮ−１１−３０３４．Ｅｐｕｂ  ２０１２、Ｆｅｂ  ２７．ＡＺＤ４５４７：ａｎ  ｏｒａｌｌｙ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ，ｐｏｔｅｎｔ，ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｆａｍｉｌｙ．
[000111]７．  ＴＳＵ６８（ＳＵ６６６８）大鵬薬品
化学名：（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸
【０１０７】
【化７】
2016520060.tif 000012
【０１０８】
Ｙｏｒｏｚｕｙａ  Ｋ．ら、Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．２００５、Ｓｅｐ；１４（３）：６７７−８２．ＴＳＵ−６８（ＳＵ６６６８）ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｌｏｃａｌ  ｔｕｍｏｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｌｉｖｅｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ  ｖｉａ  ａｎｔｉ−ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．
[000112]８．  ＢＧＪ３９８  ノバルティス
化学名：３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素
【０１０９】
【化８】
2016520060.tif 000013
【０１１０】
[000113]Ｇｕａｇｎａｎｏ  Ｖ．ら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１、Ｏｃｔ  ２７；５４（２０）：７０６６−８３．ｄｏｉ：１０．１０２１／ｊｍ２００６２２２．Ｅｐｕｂ  ２０１１、Ｓｅｐ  ２１．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ３−（２，６−ｄｉｃｈｌｏｒｏ−３，５−ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−ｐｈｅｎｙｌ）−１−｛６−［４−（４−ｅｔｈｙｌ−ｐｉｐｅｒａｚｉｎ−１−ｙｌ）−ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ］−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−４−ｙｌ｝−１−ｍｅｔｈｙｌ−ｕｒｅａ（ＮＶＰ−ＢＧＪ３９８），ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ．
[000114]９．  ＥＮＭＤ２０７６  Ｍｉｉｋａｎａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ
化学名：６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミン  Ｌ−タルトレート
【０１１１】
【化９】
2016520060.tif 000014
【０１１２】
Ｍａｔｕｌｏｎｉｓ  ＵＡ．ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．２０１３、Ｊａｎ；４９（１）：１２１−３１．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｊｃａ．２０１２．０７．０２０．Ｅｐｕｂ  ２０１２、Ａｕｇ  ２１．ＥＮＭＤ−２０７６、ａｎ  ｏｒａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ａｎｄ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｋｉｎａｓｅｓ，  ｈａｓ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ，  ｐｌａｔｉｎｕｍ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ．
[000115]１０．  ＡＰ２４５３４（ポナチニブ（Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ））Ａｒｉａｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ
化学名：ベンズアミド，３−（２−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イルエチニル）−４−メチル−Ｎ−［４−［（４−メチル−１−ピペラジンイル）メチル］−３−（トリフルオロメチル）フェニル］
【０１１３】
【化１０】
2016520060.tif 000015
【０１１４】
Ｃｈａｓｅ  Ａ．ら、Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．２０１３、Ｊａｎ；９８（１）：１０３−６．ｄｏｉ：１０．３３２４／ｈａｅｍａｔｏｌ．２０１２．０６６４０７．Ｅｐｕｂ  ２０１２、Ａｕｇ  ８．Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ＦＧＦＲ１  ｆｕｓｉｏｎｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ８ｐ１１  ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．
[000116]１１．  ＡＸＬ１７１７  Ａｘｅｌａｒ
化学名：フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン，５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−，（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−Ｅｋｍａｎ  Ｓ．、Ａｃｔａ．Ｏｎｃｏｌ．２０１１、Ａｐｒ；５０（３）：４４１−７．ｄｏｉ：１０．３１０９／０２８４１８６Ｘ．２０１０．４９９３７０．Ｅｐｕｂ  ２０１０、Ａｕｇ  １１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｗｉｔｈ  ａｎ  Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ：ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．
[000117]１２．  ＦＰ１０３９（融合タンパク質）Ｆｉｖｅ  Ｐｒｉｍｅ、Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、グラクソ・スミスクライン。ＦＰ１０３９は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分に結合したヒト線維芽細胞増殖因子受容体１ｃ（ＦＧＦＲ１）の細胞外ドメインを含む。この分子は、ＦＧＦＲ１リガンドを捕捉し、ＦＧＦ受容体への結合を妨げるように設計されている。Ｈａｒｄｉｎｇら、Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ＦＰ−１０３９（ＦＧＦＲ１：Ｆｃ）ｉｎ  ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｏｄｅｌｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ＦＧＦＲ２．第１０１回  米国がん学会総会：抄録２５９７、１７  Ａｐｒ  ２０１０
[000118]１３．  ＭＦＧＲ  １８７７Ｓ  ＦＧＦＲ３Ｍａｂ  ジェネンテック。Ｑｉｎｇ  Ｊ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００９、Ｍａｙ；１１９（５）：１２１６−２９．ｄｏｉ：１０．１１７２／ＪＣＩ３８０１７．Ｅｐｕｂ  ２００９、Ａｐｒ  ２０．Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｂａｓｅｄ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ＦＧＦＲ３  ｉｎ  ｂｌａｄｄｅｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ａｎｄ  ｔ（４；１４）−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ  ｉｎ  ｍｉｃｅ．
[000119]１４．  Ａｖｅｏ  ＧＰ３６９  ＦＧＦＲ２  ｍＡｂ。Ｂａｉ  Ａ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１０、Ｏｃｔ  １；７０（１９）：７６３０−９．ｄｏｉ：１０．１１５８／０００８−５４７２．ＣＡＮ−１０−１４８９．Ｅｐｕｂ  ２０１０、Ａｕｇ  １３．ＧＰ３６９，ａｎ  ＦＧＦＲ２−ＩＩＩｂ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｅｘｈｉｂｉｔｓ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｃａｎｃｅｒｓ  ｄｒｉｖｅｎ  ｂｙ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ＦＧＦＲ２  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．
[000120]１５．  ＦＧＦＲ１  ｍＡｂおよびＦＧＦＲ３  ｍＡｂ、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ。Ｓｕｎ  ＨＤ  ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２００７、Ｍａｒ；２９２（３）：Ｅ９６４−７６．Ｅｐｕｂ  ２００６、Ｎｏｖ  ２８．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｏｆ  ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ  ＦＧＦＲ１  ｃａｕｓｅ  ｐｏｔｅｎｔ  ｂｕｔ  ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｈｙｐｏｐｈａｇｉａ  ａｎｄ  ｗｅｉｇｈｔ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｒｏｄｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｏｎｋｅｙｓ；Ｄｅｅｖｉ  ＤＳ．、Ｄｉｒｅｎｚｏ  Ｒ．、Ｌｉ  Ｈ．、Ｍａｌａｂｕｎｇａ  Ｍ．、Ｐｒｅｗｅｔｔ  ＭＣ．、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＦＧＦＲ３  ｆｏｒ  ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｉｓｐｌａｔｉｎ  ｏｎ  ｂｌａｄｄｅｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．、２００７、ＡＡＣＲ−ＮＣＩ−ＥＯＲＴＣ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．：１７６−１７７（＋ポスター）抄録Ｂ４８、２２  Ｏｃｔ  ２００７．
[000121]１６．  ＦＧＦ２  ｍＡｂおよびＦＧＦＲ２  ｍＡｂ、Ｇａｌａｘｙ  Ｂｉｏｔｅｃｈ。Ｗａｎｇ  Ｌ．ら、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．２０１２、Ａｐｒ；１１（４）：８６４−７２．ｄｏｉ：１０．１１５８／１５３５−７１６３．ＭＣＴ−１１−０８１３．Ｅｐｕｂ  ２０１２、Ｆｅｂ  １６．Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｏ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ２  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ；Ｚｈａｏ  ＷＭ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１０、Ｄｅｃ  １；１６（２３）：５７５０−８．ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８−０４３２．ＣＣＲ−１０−０５３１．Ｅｐｕｂ  ２０１０、Ｊｕｌ  ２９．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｔｕｍｏｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ．
[000122]１７．  ＳＡＲ１０６８８１、サノフィ・アベンティス  リサーチプログラム  ＦＧＦＲアゴニスト
【０１１５】
【化１１】
2016520060.tif 000016
【０１１６】
Ｇｕｉｌｌｏ、Ｍａｋｉｎｇ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｒｏｍ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ＳＡＲ１０６８８１，ａ  ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈ  ｉｎ  ＦＧＦＲｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｒｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｄｕｃｅ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ．第２４０回  米国化学会全国学会：（＋口頭発表）抄録ＭＥＤＩ  ２３、２２  Ａｕｇ  ２０１０．
[000123]１８．  ＪＮＪ４２７５６４９３  ＦＧＦＲアンタゴニスト  Ａｓｔｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ。Ｓｑｕｉｒｅｓら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＦＧＦＲ）ｋｉｎａｓｅ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｂａｓｅｄ  ａｐｐｒｏａｃｈ．第１０１回  米国がん学会総会：抄録３６２６、１７  Ａｐｒ  ２０１０．
[000124]化合物またはその薬理学的に許容される塩は、例えば、内因性抗体の産生増加を必要とし、がんの治療を必要としないヒトなどの哺乳動物に、治療有効量で投与することができる。哺乳動物は、液性免疫不全または本明細書に記載の免疫不全症などの免疫不全症を有していてもよい。哺乳動物は、例えば老齢であり得る。化合物またはその薬学的に許容される塩は、例えば、ワクチン接種への液性免疫応答を改善するために、免疫原（ＦＧＦ２またはＦＧＦ以外）のワクチン接種と併せて、内因性抗体の産生を増加させるのに有効な量で投与することができる。化合物またはその薬学的に許容される塩は、例えば、微生物感染またはウイルス感染の治療を必要とするヒトなどの哺乳動物に、例えば、単独でまたは抗生物質もしくは抗ウイルス剤の投与に加えて（またはそれと併せて）、内因性抗体の産生を増加させるのに有効な量で投与することができる。いずれの方法においても、哺乳動物は、がんの治療を必要としないものであり得る。本発明は、本開示に記載の治療方法のそれぞれについて、対応する第１のおよび第２の医学的用途も提供する。したがって、本発明は、記載した病態を治療するための薬剤の使用を提供し、記載した病態を治療するための医薬の製造のための薬剤の使用も提供する。
【０１１７】
[000125]本発明が使用され得る非ヒト哺乳動物には、例えば、ウシ科などの畜産動物、例えば雌ウシおよびヒツジ、ブタ、ウマなどのウマ科、伴侶動物としての飼いイヌなどのイヌ科、伴侶動物としての飼いネコなどのネコ科、霊長類、ウサギなどのウサギ目の動物、ならびにラットおよびマウスなどの齧歯目の動物が含まれる。本発明は、家禽などの鳥、例えば、ニワトリ、シチメンチョウおよびウズラ、アヒルおよびガチョウにも適用できる。したがって、本発明は、哺乳動物について本明細書に記載しているが上述の鳥類などの鳥類に適用されるような、対応する実施態様および改変例を提供する。セキショクヤケイＦＧＦ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿２０５４３３．１；配列番号５０ペプチド、配列番号５１ヌクレオチド）、セキショクヤケイＦＧＦＲ１（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿２０５５１０．１；配列番号５２ペプチド、配列番号５３ヌクレオチド）、セキショクヤケイＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿２０５３１９．１；配列番号５４ペプチド、配列番号５５ヌクレオチド）、およびセキショクヤケイＦＧＦＲ３（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿２０５５０９．２；配列番号５６ペプチド、配列番号５７ヌクレオチド）の配列も本開示の一部を形成する。
【０１１８】
[000126]上記の例は、ＦＧＦ２およびその受容体に関連するものであるが、本発明は、一般に線維芽細胞増殖因子および／またはＦＧＦ受容体に関して、ならびに限定されるものではないがＦＧＦ１およびＦＧＦ３などの他の特定の線維芽細胞増殖因子に関して、本明細書に記載のそれぞれの実施態様および改変例に対応する実施態様も提供する。
【０１１９】
[000127]本開示に引用された特許および他の出版物のそれぞれは、その全体が援用される。
【０１２０】
[000128]前述の説明は、本発明の好ましい実施態様に関するものであるが、他の改変例および変更例は、当業者に明らかであり、本発明の精神または範囲から逸脱することなく実施し得ることが留意される。その上、本発明の１つの実施態様に関連して記載された特徴は、たとえ上記に明示されていなくとも、他の実施態様と併せて使用され得る。
【０１２１】
[0001]本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットでＥＦＳ−Ｗｅｂによって提出された配列表を含む。この配列表は、その全体が本明細書に援用される。２０１３年５月６日に作成された前記ＡＳＣＩＩの写しは、ファイル名がＡＢ００１ＷＳｑ．ｔｘｔであり、サイズが２７５，３３０バイトである。
【図１】
2016520060.tif 000017
【図２】
2016520060.tif 000018
【図３】
2016520060.tif 000019
【図４】
2016520060.tif 000020
【配列表】
2016520060000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成28年5月6日(2016.5.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させるための医薬組成物であって、ＦＧＦ２に結合してその活性を阻害する抗体またはその断片を含む、前記医薬組成物。
【請求項２】
哺乳動物ががんを有していない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
哺乳動物がヒトである、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ヒトがＨＩＶ疾患を有している、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ヒトが老齢のヒトである、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項６】
哺乳動物において、ＦＧＦ２以外の免疫原のワクチン接種に対する液性免疫応答を増加させるための医薬組成物であって、ＦＧＦ２に結合してその活性を阻害する抗体またはその断片を含む、前記医薬組成物。
【請求項７】
哺乳動物がヒトである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ヒトが老齢のヒトである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
哺乳動物における液性免疫不全症を治療するための医薬組成物であって、ＦＧＦ２に結合してその活性を阻害する抗体またはその断片を含む、前記医薬組成物。
【請求項１０】
哺乳動物において微生物感染またはウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、ＦＧＦ２に結合してその活性を阻害する抗体またはその断片を含む、前記医薬組成物。
【請求項１１】
哺乳動物において内因性抗体の産生を増加させるための医薬組成物であって：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミン  Ｌ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、
から成る群より選択されるＦＧＦ２活性に対する阻害化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。
【請求項１２】
哺乳動物において、ＦＧＦ２以外の免疫原のワクチン接種に対する液性免疫応答を増加させるための医薬組成物であって：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミン  Ｌ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、
から成る群より選択されるＦＧＦ２活性に対する阻害化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。
【請求項１３】
哺乳動物において液性免疫不全症を治療するための医薬組成物であって：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミン  Ｌ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、
から成る群より選択されるＦＧＦ２活性に対する阻害化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。
【請求項１４】
哺乳動物において微生物感染またはウイルス感染を治療するための医薬組成物であって：バルガテフ；ドビチニブ；ブリバニブ；セディラニブ；ポナチニブ；ＳＡＲ１０６８８１；
４−［３−クロロ−４−（３−シクロプロピルウレイド）フェノキシ］−７−メトキシキノリン−６−カルボキシアミド；
Ｎ−［５−［２−（３，５−ジメトキシフェニル）エチル］−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−４−（３，５−ジメチルピペラジン−１−イル）ベンズアミド；
（Ｅ）−３−［２，４−ジメチル−５−［（２−オキソインドリン−３−イリデン）メチル］−１Ｈ−ピロール−３−イル］プロパン酸；
３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素；
６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｎ−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ピリミジン−４−アミン  Ｌ−タルトレート；および
フロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オン、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−、（５Ｒ−（５−α，５ａ−α，８ａ−α，９−α））−、
から成る群より選択されるＦＧＦ２活性に対する阻害化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。
【国際調査報告】
2016520060.tif 000021
2016520060.tif 000022