(57)【要約】  本発明は、生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物に関し、組成物は、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー、水性溶媒、及び生理活性薬剤を含んでなる。注射用組成物は、患者に投与された時点でｉｎ  ｓｉｔｕで自然発生的なゲル化が可能であって、ゲルを形成し、これから有効な量の生理活性薬剤を７日間又はそれより多い期間にわたって放出することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
・  生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー；
・  水性溶媒；及び
・  生理活性薬剤；
を含んでなる、生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物であって、ここにおいて、前記組成物は、液体として注射可能であり、そして前記液体は、生理学的温度においてゲルに転換され、そしてここにおいて、ゲル化組成物は、有効な量の生理活性薬物の、少なくとも７日間の期間にわたる放出を提供する、前記注射用組成物。  
【請求項２】
前記ゲル化組成物が、有効な量の生理活性薬物の、少なくとも１４日間の期間にわたる放出を提供する、請求項１に記載の注射用組成物。
【請求項３】
前記ゲル化組成物が、有効な量の生理活性薬物の、少なくとも２８日間の期間にわたる放出を提供する、請求項１又は２のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項４】
前記ブロックコポリマーが、分岐、超分岐、櫛形、ブラシ状、星形及び樹状からなる群から選択される構造を有する、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項５】
前記ブロックコポリマーが、生分解性星形ブロックコポリマーである、請求項１ないし４のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項６】
前記星形ブロックコポリマーが、式Ａ（ＢＣ）ｎであり、ここにおいて、Ａは、ｎ価の核であり、そしてＢ及びＣの一つは、疎水性ブロックであり、そしてＢ及びＣの他方は、親水性ブロックであり、そしてｎは、整数であり、そして少なくとも３である、請求項５に記載の注射用組成物。
【請求項７】
ＢとＣの重量比が、１０：１から１：１０まで、好ましくは６：１から約１：６まで、更に好ましくは約３：１から約１：３までの範囲である、請求項６に記載の注射用組成物。
【請求項８】
Ｂが、疎水性ブロックであり、そしてＣが、親水性ブロックである、請求項６又は請求項７のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項９】
前記疎水性ブロックが、約５００から約１５，０００まで、好ましくは約１０００から約１０，０００まで、更に好ましくは約１５００から約５０００までの範囲の分子量を有する、請求項８に記載の注射用組成物。
【請求項１０】
Ｂが、生分解性ポリエステルを含んでなる、請求項８又は請求項９のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項１１】
前記ポリエステルが、Ｄ，Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−乳酸、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε−カプロラクトン、ε−ヒドロキシヘキサン（ｈｅｘｏｎｏｉｃ）酸、γ−ブチロラクトン、γ−ヒドロキシ酪酸、δ−バレロラクトン、δ−ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、リンゴ酸、マンデリン酸及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも一つのモノマーから形成される、請求項１０に記載の注射用組成物。
【請求項１２】
前記ポリエステルが、ポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）であり、ここにおいて、乳酸とカプロラクトンのモル比が、９０：１０から１０：９０まで、好ましくは７５：２５から２５：７５までの範囲である、請求項１１に記載の注射用組成物。
【請求項１３】
Ｃが、約１００から約３０００まで、好ましくは約２５０から約２０００まで、更に好ましくは約２００から約１５００までの範囲の分子量を有する親水性ポリマーを含んでなる、請求項８ないし１２のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項１４】
Ｃが、ポリエーテルを含んでなる、請求項８ないし１３のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項１５】
前記ポリエーテルが、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、及びこれらのコポリマーからなる群から選択される、請求項１４に記載の注射用組成物。
【請求項１６】
Ｂ及びＣが、連結基を経由して共有結合的にカップリングされる、請求項６ないし１５のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項１７】
前記連結基が、ジイソシアネートから誘導される、請求項１６に記載の注射用組成物。
【請求項１８】
前記星形ブロックコポリマーが、更なるブロック（Ｄ）を含んでなり、そして式Ａ（ＢＣＤ）ｎのものである、請求項６ないし１７のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項１９】
ｎが、４から８までの範囲の整数である、請求項６ないし１８のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、約５０（重量／重量）％より多くない、好ましくは３０（重量／重量）％より多くない非線形ブロックコポリマーを含んでなる、請求項１ないし１９のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、少なくとも５０（容量／重量）％、好ましくは少なくとも６０（容量／重量）％、そして更に好ましくは少なくとも７０（容量／重量）％の水性溶媒を含んでなる、請求項１ないし２０のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、液体の形態である場合、及びゲルの形態である場合、生理学的温度において、１ないし２０Ｐａの範囲の貯蔵弾性率を有する、請求項１ないし２１のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２３】
前記生理活性薬剤が、親水性薬物、疎水性薬物、タンパク質薬物、ホルモン、遺伝子又は核酸、オリゴヌクレオチド、多糖及び他の糖、脂質、ガングリオシド、血管作動剤、向神経活性剤、抗凝固剤、免疫調節剤、抗癌剤、抗炎症剤、抗生物質  抗ウイルス剤、アンチセンス剤、抗原及び抗体からなる群から選択される、請求項１ないし２２のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２４】
更に、生理活性薬剤の放出の制御を向上する添加剤を含んでなる、請求項１ないし２３のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２５】
前記添加剤が、多糖である、請求項２４に記載の注射用組成物。
【請求項２６】
前記ゲル化組成物からの前記生理活性薬剤の放出が、少なくとも二つの別個の段階にわたって起こる、請求項１ないし２５のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２７】
約３０％より多くない生理活性薬剤が、ゲル形成後の最初の２４時間内に、ゲル化組成物から放出される、請求項１ないし２６のいずれか１項に記載の注射用組成物。
【請求項２８】
患者の疾病又は疾患の予防或いは治療のための医薬の製造における、請求項１ないし２７のいずれか１項に記載の注射用組成物の使用。
【請求項２９】
前記医薬が、インプラントの形態である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
そのような治療を必要とする患者における疾病又は疾患を治療或いは予防する方法であって、前記方法は、前記患者に請求項１ないし２７のいずれか１項に記載の注射用組成物を投与する工程を含んでなる、前記方法。
【請求項３１】
前記方法が、前記患者に組成物を投与するために、シリンジの管腔から組成物を注射することを含んでなる、請求項３０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[1]本発明は、生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物に関する。注射用組成物は、生分解性非線形ポリマーを含んでなり、そして生理学的温度におけるゲル化が可能であって、長時間にわたる生理活性薬剤の制御された送達を提供するゲル化組成物を形成する。
【背景技術】
【０００２】
[2]ポリマーゲルは、化学ゲル又は物理ゲルの分類に収まることができる。化学ゲルにおいて、ポリマーのネットワーク形成又はゲル化は、ポリマー鎖間の共有結合又は架橋の形成に関係する。このような場合の共有結合によるポリマー鎖の架橋は、結合の性質のために不可逆的であり、そして従って、ゲル（半固体又は固体）又はゾル（又は液体又は流動性物質）の復帰不可能である。化学ゲルと対照的に、物理ゲルは、最初、臨界ミセル濃度におけるミセルの形成、そしてその後の浸出した“ミセルネットワーク”へのミセルの凝集によるネットワーク形成による、ポリマー鎖の物理的結合によって形成される。物理ゲル中でゾルからゲルへの転換が起こる温度は、臨界ゲル化温度と呼ばれる。熱に反応する逆転ゲル化挙動を示す物理ゲルは、熱可逆性ゲルと呼ぶことができ、そしてポリマーの場合、これらは熱可逆性ポリマー（ＴＲＰ）と呼ばれる。多くの天然及び合成のＴＲＰが記載され、そしてその熱応答性挙動が調査されている（Ｊｅｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｒｅｖｉｅｗｓ，Ｖｏｌ  ５４，２００２，３７−５１）。多くの合成ＴＲＰは、可逆性熱応答性ゲル化挙動を達成するために、規定された組成の規定された量のポリマーブロックを有することが要求される線形ブロックコポリマーに基づく。
【０００３】
[3]これらの中で、多くのものは、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ポリ（ＮＩＰＡＭ））又はエチレンオキシド及びプロピレンオキシドのポリエーテルブロックコポリマー（ポロキサマー（ｐｏｌｏｘｏｍｅｒ）又はＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、又はポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（プロピレングリコール）−ｂ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ）トリブロックに基づく。ポリ（ＮＩＰＡＭ）に基づくＴＲＰは、そのｉｎ  ｖｉｖｏの毒性のために生物医学的適用に対して、受容不可能であることが見いだされている。ポリエーテルブロックコポリマーの誘導体に基づくＴＲＰは、コポリマーの分子量によるが、生物医学的適用に受容可能であり得る。然しながら、ポリ（ＮＩＰＡＭ）及びポロキサマーのクラスのポリマーの両方の主要な欠点は、生物学的環境におけるその相対的な非分解性である。ポロキサマーと共に形成されたゲルの、分子量の制限の結果としての低い機械的強度は、その使用を制約することができるもう一つの課題である。
【０００４】
[4]特に薬物送達適用のために、生分解性熱可逆性ポリマーを開発するための努力が行われている。然しながら、多くの生分解性ＴＲＰは、形成されたゲルのマトリックスの一貫性の欠如を経験し、インプラント後の不良な形状の保持又はｉｎ  ｖｉｖｏの安定性の欠如を有し、或いは比較的短い時間にわたる薬物放出を与えることができる。
【０００５】
[5]ＲｅＧｅｌ（登録商標）として知られる独占所有権のある線形のＡＢＡブロックコポリマーは、薬物送達に有効であると報告されている、ポリ（乳酸／グリコール酸）−ブロック−ポリ（エチレングリコール）−ブロック−ポリ（乳酸／グリコール酸）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ）コポリマーで構成される生分解性ＴＲＰである。然しながら、ＲｅＧｅｌ（登録商標）に伴う制約は、その比較的短い薬物送達時間である。例えば、親水性生理活性薬物、例えば酵素及びタンパク質が、約１５日でＲｅＧｅｌ（登録商標）から完全に放出されることが報告されている（Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｖｏｌ  １７２，ｐｇ２０３，２００１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２９，ｐｇ５２４，２００６）。ＲｅＧｅｌ（登録商標）に伴う他の制約は、投与後の最初の４８時間内の薬物の有意に拡散制御された突発放出、及び急速な薬物放出に導くポリマーの急速なｉｎ  ｖｉｖｏの分解を含み、これは、酸性のＰＬＧＡ断片の増加による、投与部位の直近のｐＨの望ましくない減少をもたらす。
【０００６】
[6]従来の技術の一つ又はそれより多い不都合に取り組む又は少なくともそれを寛解させる生理活性な薬剤の制御された送達のための注射用組成物を提供することが望ましいことでありものである。
【０００７】
[7]文書、行動、物質、装置、物品等の考察は、本発明のための状況を提供する目的のためのみに本明細書中に含まれる。いずれもの又は全てのこれらの事柄が、従来の技術の基礎の一部を形成するとか、又はそれが、本出願の各請求項の優先権の日付以前に存在したとして、本発明に関連する分野における共通の一般的知識であったことを、示唆又は表現するものではない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｊｅｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｒｅｖｉｅｗｓ，Ｖｏｌ  ５４，２００２，３７−５１；
【非特許文献２】Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｖｏｌ  １７２，ｐｇ  ２０３，２００１；
【非特許文献３】Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２９，ｐｇ  ５２４，２００６。
【発明の概要】
【０００９】
[8]本発明は、生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物を提供する。注射用組成物は、ゲル化が可能であって、注射後にｉｎ  ｓｉｔｕでインプラントを形成する。インプラントは、生分解性であり、そして生理活性薬剤を、７日又はそれより多い期間にわたってインプラントから放出し、継続性生理活性効果を提供することができる。
【００１０】
[9]一つの側面において、本発明は：
・  生分解性、熱可逆性、非線形のブロックコポリマー；
・  水性溶媒；及び
・  生理活性薬剤、
を含んでなる生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物を提供し、ここにおいて、組成物は、液体として注射可能であり、そして液体は、生理学的温度でゲルに転換され、そしてここにおいて、ゲル化組成物は、少なくとも７日間の期間にわたる有効な量の生理活性薬剤の放出を提供する。
【００１１】
[10]一組の態様において、ゲル化組成物は、少なくとも１４日間、好ましくは少なくとも２８日間の期間にわたる有効な量の生理活性薬剤の放出を提供する。
[11]注射用組成物は、生分解性で熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーを含んでなる。非線形ブロックコポリマーは、分岐、超分岐、櫛形、ブラシ状、星形、及び樹状からなる群から選択される構造を有することができる。一組の態様において、非線形ブロックコポリマーは、生分解性星形ブロックコポリマーである。
【００１２】
[12]生分解性で、熱可逆性の、星形のブロックコポリマーは、多価の中心核に接続し、そしてそれから伸長する複数のポリマーの腕を含んでなる。具体的な態様において、それぞれのポリマーの腕は、ブロックコポリマーを含んでなる。一つ又はそれより多い星形ブロックコポリマーの成分（例えば星形コポリマーの核及び／又は腕）は、生分解性である。
【００１３】
[13]生分解性で、熱可逆性の星形のブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣ）ｎのものであることができ、式中、Ａは、ｎ価の核であり、そしてＢ及びＣの一つは、疎水性ブロックであり、そしてＢ及びＣの他方は、親水性ブロックであり、そしてｎは、整数であり、そして少なくとも３である。幾つかの態様において、ｎは、４から８までの範囲の整数である。
【００１４】
[14]ＢとＣの重量比は、好ましくは１０：１から１：１０までの範囲である。幾つかの態様において、ＢとＣの重量比は、６：１から約１：６まで、又は約３：１から約１：３までの範囲である。
【００１５】
[15]生分解性で、熱可逆性の非線形ブロックコポリマー中に存在する疎水性ブロックは、約５００から約１５，０００まで、好ましくは約１０００から約１０，０００まで、更に好ましくは約１５００から約５０００までの範囲の分子量を有することができる。
【００１６】
[16]生分解性で、熱可逆性の非線形ブロックコポリマー中に存在する親水性ブロックは、約１００から約３０００まで、好ましくは約２５０から約２０００まで、更に好ましくは約２００から約１５００までの範囲の分子量を有することができる。
【００１７】
[17]一組の態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性の星形ブロックコポリマーであり、式中、Ｂは、疎水性ブロックであり、そしてＣは、親水性ブロックである。例えば、Ｂは、生分解性ポリエステルを含んでなることができ、そしてＣは、ポリエーテルを含んでなることができる。
【００１８】
[18]非線形ブロックコポリマー中に存在する生分解性ポリエステルは、Ｄ，Ｌ−乳酸、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、グリコール酸、ε−カプロラクトン、ε−ヒドロキシヘキサン酸、γ−ブチロラクトン、γ−ヒドロキシ酪酸、δ−バレロラクトン、δ−ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、リンゴ酸、マンデリン酸及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも一つのモノマーの重合から形成することができる。
【００１９】
[19]一つの態様において、生分解性ポリエステルは、Ｄ，Ｌ−乳酸及びε−カプロラクトンの重合から得られる。従って生分解性ポリエステルは、Ｄ，Ｌ−乳酸及びε−カプロラクトンのコポリマーであることができる。このような態様において、生分解性ポリエステル中のＤ，Ｌ−乳酸とε−カプロラクトンのモル比は、９０：１０から１０：９０まで、好ましくは７５：２５から２５：７５までの範囲であることができる。
【００２０】
[20]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在することができるポリエーテルは、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、及びこれらのコポリマーから選択することができる。
【００２１】
[21]式Ａ（ＢＣ）ｎの星形ブロックコポリマーにおいて、ブロックＢ及びＣは、連結基と共有結合的にカップリングすることができる。一つの形態において、連結基は、ジイソシアネートから誘導される。
【００２２】
[22]幾つかの態様において、星形ブロックコポリマーは、更なるブロック（Ｄ）を含んでなることができる。存在する場合、更なるブロック（Ｄ）は、一般的に星形ブロックコポリマーの腕中であるものである。
【００２３】
[23]一組の態様において、Ｄが存在する場合、星形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣＤ）ｎのものであることができる。
[24]注射用組成物は、約５０（重量／重量）％より多くない、好ましくは３０（重量／重量）％より多くない非線形ブロックコポリマーを含んでなることができる。
【００２４】
[25]注射用組成物は、水性組成物であり、そして少なくとも５０（重量／重量）％、好ましくは少なくとも６０（重量／重量）％、そして更に好ましくは少なくとも７０（重量／重量）％の水性溶媒を含んでなることができる。水性溶媒は、好ましくは水である。
【００２５】
[26]一組の態様において、注射用組成物は生理学的温度で、液体の形態の場合、そしてゲルの形態の場合、１ないし２０Ｐａの範囲の貯蔵弾性率を有する。
[27]注射用組成物は、患者中で治療的又は予防的効果を発揮することが可能である生理活性薬剤を含んでなる。生理活性薬剤は、親水性薬物、疎水性薬物、タンパク質及び抗体、ホルモン、遺伝子又は核酸、オリゴヌクレオチド、アンチセンス療法に対する活性剤（ａｃｔｉｖｅｓ）、多糖及び他の糖、脂質、ガングリオシド、血管作動剤、向神経活性剤、抗凝固剤、免疫調節剤、抗癌剤、抗炎症剤、抗生物質  抗ウイルス剤、ワクチン、及びこれらの組合せからなる群から選択することができる。
【００２６】
[28]注射用組成物は、組成物の約０．０１％から約２０重量％までの範囲の量の生理活性薬剤の量を含んでなることができる。
[29]幾つかの態様において、注射用組成物は、更に、生理活性薬剤の放出の制御を向上する添加剤を含んでなる。一組の態様において、添加剤は多糖である。存在する場合、多糖は、キサンタンガム、ウェランガム、デキストラン、ジェラン、プルラン、グアーガム、ローカストビーン（ｂｅａｍ）ガム、キチン、アルギン酸塩及びこれらの混合物からなる群から選択される。
【００２７】
[30]本発明は、制御されるべき作用の所望の部位における、生理活性薬剤の放出を可能にする。幾つかの態様において、生理活性薬剤の放出は、単一段階で起こる。他の態様において、生理活性薬剤の放出は、少なくとも二つの別個の、そして明確に異なる段階で、更に好ましくは三つの別個の段階で起こる。幾つかの態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、最初は、突発放出であり、続いて拡散制御放出である。幾つかの態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、最初は、突発放出であり、続いて拡散制御放出であり、そして最終的に分解制御下の放出である。
【００２８】
[31]もう一つの側面において、本発明は、患者の疾病又は疾患の予防或いは治療のための医薬の製造における、本明細書中に記載された態様のいずれか一つによる注射用組成物の使用に関する。
【００２９】
[32]更なる側面において、本発明は、疾病又は疾患を治療又は予防する、このような治療又は予防を必要とする患者における方法に関し、この方法は、患者に本明細書中に記載される態様のいずれか一つの注射用組成物を投与する工程を含んでなる。一組の態様において、この方法は、患者に組成物を投与するために、シリンジの管腔から組成物を注射することを含んでなる。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
[33]本発明は、ここに、本発明の特定の態様を例示する付属する図面の図を参照して記載されるものであり、ここにおいて、
【図１】[34]図１は、（ａ）吸収性の親水性ブロック、生分解性の疎水性ブロック及び親水性ブロック及び疎水性ブロック間の連結基を含有する腕を有する星形ブロックコポリマー、並びに（ｂ）強力なゲル化組成物の形成を容易にする末端の架橋可能な基を有する星形ブロックコポリマーを示す、本発明の組成物中に使用することができる非線形ブロックコポリマーの略図的態様である。
【図２】[35]図２は、貯蔵弾性率が、ゲル形成（ゾル−ゲル）中に増加する、星形ブロックコポリマー（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）を含有する組成物に対する温度及び弾性率間の相関関係、及び温度が減少するとゾルに戻るゲルの可逆性を示すグラフである。
【図３】[36]図３は、星形ブロックコポリマー（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）を含んでなる組成物、及び従来の技術の線形ポリマー（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７及びＲｅＧｅｌ（登録商標））を含んでなる匹敵する組成物に対する、モデル薬物（リゾチーム）に対する短期放出研究の結果を例示するグラフである。
【図４】[37]図４は、星形ブロックコポリマー（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）、Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（３５０））４を含んでなる組成物、及び従来の技術の線形ポリマー（ＲｅＧｅｌ（登録商標））を含んでなる匹敵する組成物に対する、モデル薬物（リゾチーム）に対する長期放出研究の結果を例示するグラフである。
【図５】[38]図５は、星形ブロックコポリマー（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）を含有する組成物からの、小分子薬物（薬物１：血小板阻害剤（ジピリダモール）：薬物２抗癌性薬物（ドキソルビシン）に対する長期ざ放出研究の結果を例示するグラフである。
【図６】[39]図６は、１３週後の、ジピリダモール及びドキソルビシンを伴う図５からの（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）のゲル化組成物の分解を証明する研究試料を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
[40]本明細書を通して使用されるものである各種の用語は、当業者によって十分に理解されるものである意味を有する。然しながら、参照の容易さのために、それらの用語の幾つかがここに定義されるものである。
【００３２】
[41]用語“生理活性薬剤”は、本明細書中で使用される場合、治療的、予防的、生物学的、生理学的又は薬理学的効果を誘発するいずれもの化学的又は生物学的物質或いは化合物を指す。
【００３３】
[42]用語“生理学的温度”は、本明細書中で使用される場合、摂氏２５−４０度の範囲の温度を有する条件を指す。
[43]用語“生理学的条件”は、本明細書中で使用される場合、本明細書中に定義されるような生理学的温度及び５−８の範囲のｐＨを有する条件を指す。
【００３４】
[44]用語“生体適合性”は、物質に関して本明細書中で使用される場合、その物質が生組織と適合性であることを意味する。従って、物質は、生組織に対して毒性ではないか、又は少なくとも最小に毒性であり、そして生組織を損傷しないか、又は少なくとも最小に、そして修復的に損傷し；及び／又は生組織に免疫学的反応を起こさないか、又は少なくとも最小に、そして制御可能に起こす。
【００３５】
[45]用語“分解性”及び“生分解性”は、物質又は基（例えばポリマー、ポリマー上の部分、リガンド又はリンカー）に関して本明細書中で使用される場合、その物質又は基が、生理学的条件又は生物学的環境、例えば消化管の環境において分解、開裂又は断片化に対して感受性であることを意味する。このような分解、開裂又は断片化は、選択された生理学的又は生物学的条件下の、適当に不安定な又は分解性の部分の化学的分解により（例えば、加水分解又は還元により）起こることができる。ポリマー物質に関して使用される場合、用語“分解性”及び“生分解性”は、ポリマーの骨格の分子構造の一部を形成する適当に不安定な又は分解性の部分を示す。一つ又はそれより多いポリマー骨格中の分解性部分の開裂又は崩壊は、一般的に、モノマー及び／又は低分子量ポリマー断片への、ポリマーの断片化に導く。
【００３６】
[46]用語“注射用（注射可能）”は、患者への皮下、舌下、頬側、眼内、局所、又は筋肉内投与のための外科的注射針又はカテーテルにより注射することが可能であることを意味する。これは、特異的に静脈内投与を除外する。静脈内投与は、一般的に、組成物が小さい静脈又は動脈中で発生する遮断を起こしうる危険性のために回避される。注射可能は、本明細書中で使用される場合、更に、組成物が揺変性であり、そして室温の静的条件において高度に粘性であるか又は殆ど半固体であるが、しかし組成物の揺変性の特質による剪断によって流動性液体に転換されることができ、これが注射可能になることを可能にする状況を含むことを意図している。
【００３７】
[47]用語“有効な量”は、本明細書中で使用される場合、疾病、疾患、及び／又は症状に罹った又はそれに感受性である患者に、疾病、疾患、及び／又は症状の徴候（類）の開始を治療、診断、予防、及び／又は遅延するために投与される場合に、十分な量を意味する。生理活性薬剤の有効な量は、担当医師によって、慣用的な技術を使用し、そして類似の状況下で得られた結果を観察することによって決定することができる。有効な量の決定において、制約されるものではないが、動物の種、そのサイズ、年齢及び一般的健康状態、関係する具体的症状、症状の重篤度、治療に対する患者の反応、投与される特定の化合物、投与の様式、投与される製剤の生体利用性、選択される投与計画、他の医薬の使用及び他の関連する状況を含む多くの因子が考慮される。
【００３８】
[48]本発明は、生理活性薬物の制御された送達の提供において有用である注射用組成物に関する。
[49]一つの側面において、本発明は：
・  生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー；
・  水性溶媒；及び
・  生理活性薬剤；
含んでなる生理活性薬剤の制御された送達のための注射用組成物を提供し、ここにおいて、組成物は、液体として注射可能であり、そして生理学的温度でゲルに転換され、そしてここにおいて、ゲル化組成物は、少なくとも７日間の期間にわたる有効な量の生理活性薬剤の放出を提供する。
【００３９】
[50]本発明の注射用組成物は、ゲル化を受けて、有効な量の生理活性薬剤を一定の期間にわたり放出できるデポー（ｄｅｐｏｔ）を提供することが可能である。
[51]注射用組成物は、少なくとも７日間の期間にわたる有効な量の生理活性薬剤の放出を提供することが可能である。有効な量であると考えることができる放出される生理活性薬剤の量は、生理活性薬剤の種類及び性質、及び生理活性薬剤によって治療される症状、疾病又は疾患、或いは患者又は被験者によって変化することができる。
【００４０】
[52]幾つかの態様において、注射用組成物は、少なくとも１０日間、少なくとも１４日間、少なくとも２１日間、少なくとも２８日間、少なくとも約３５日間、少なくとも約６０日間、及び少なくとも約９０日間からなる群から選択される期間にわたる、有効な量の生理活性薬剤の放出を提供することが可能である。
【００４１】
[53]幾つかの態様において、注射用組成物は、室温（概略２０℃）では液体であり、そして温度が生理学的温度（ヒトで概略３７℃）に増加されるに従い流動性液体状態（ゾル）から半固体状態（ゲル）に転換される。
【００４２】
[54]他の態様において、本発明の組成物は、揺変性であり（ｔｈｉｘｏｔｏｐｉｃ）、そして室温（概略２０℃）の静的条件下で粘性の液体又は殆ど半固体であることができる。揺変性組成物は、組成物の投与の時点で注射によって流動性液体状態（ゾル）に転換されることが可能である。例えば、組成物は、揺変性の挙動を示すことができ、これは、例えば注射針の管腔又はカテーテルの開口部を通って注射されるときの剪断によって、粘性の組成物が流動性液体になることを可能にする。流動性液体は、その後、温度が生理的温度（ヒトで概略３７℃）に増加されるに従い半固体状態（ゲル）に転換される。
【００４３】
[55]患者の所望の部位への投与において、本発明の注射用組成物は、その後の制御放出のために生理活性薬物をカプセル化したゲルを伴うゲルに固化する。
[56]本発明の注射用組成物は、更に、熱可逆性挙動を示し、ここにおいて、組成物は、温度の減少に反応して固体の形態（ゲル）の形態から液体状態（ゾル）に戻ることができる。
【００４４】
[57]本発明の注射用組成物は、水性媒体中に分散された、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーを含んでなる。生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、分岐、超分岐、櫛形、ブラシ状、星形及び樹状からなる群から選択される構造を有することができる。従来の技術の線形ブロックコポリマー、並びに幾つかの非線形ブロックコポリマー構造の例を、以下のスキーム１に示す。ゲル化は、コポリマー成分がミセルに自己組織化するのに従って起こる。ミセルは、今度は、温度の増加に反応して凝集して、ゲルネットワークの形成をもたらすことができる。
【００４５】
【化１】
2016522169.tif 000002
【００４６】
[58]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、少なくとも二つの異なった種類の繰返しサブユニット又はブロックを含んでなる。異なったブロックは、以下に記載するように、少なくとも二つの異なった種類のモノマーから誘導することができる。分解性の非線形ブロックコポリマーを構築するための二つ又はそれより多い異なったブロックの使用は、ポリマーの組成、構造及び分子量を改変及び制御することを好都合に可能にすることができる。
【００４７】
[59]本発明の注射用組成物に使用される、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、少なくとも一つの親水性ブロック及び少なくとも一つの疎水性ブロックを含んでなる。温度に反応するゾル−ゲル移行を起こすために、非線形ブロックコポリマー中の親水性及び疎水性ブロックの適当な均衡が存在することが必要である。ゾル−ゲル移行は、コポリマー中の親水性及び疎水性ブロックの比を調節することによって改変することができる。
【００４８】
[60]一つの形態によれば、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、生分解性星形ブロックコポリマーである。注射用組成物中で使用される生分解性星形ブロックコポリマーは、中心核から伸長する複数のポリマーの腕を有する。具体的な態様において、それぞれの生分解性星形コポリマーの腕は、ブロックコポリマーを含んでなる。それぞれの腕中に存在するブロックコポリマーは、二つ又はそれより多い異なった種類のブロックで形成される。幾つかの例示的なブロックコポリマーの腕は、以下で更に考察される。
【００４９】
[61]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーの腕は、それぞれ同一の組成を有する。他の態様において、生分解性星形ブロックコポリマーの少なくとも二つの腕は、異なった組成であることができる。
【００５０】
[62]注射用組成物中に使用される生分解性星形ブロックコポリマーは、少なくとも３本の腕を含んでなり、そして幾つかの態様において、４、６又は８本の腕を含んでなることができる。それぞれの腕は、先に記述したようなブロックコポリマーから構成され又はそれを含んでなる。
【００５１】
[63]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣ）ｎのものであることができ、ここにおいて、Ａは、ｎ価の核であり、（ＢＣ）基は、星形ブロックコポリマーの腕であり、そしてｎは、整数であり、そして少なくとも３である。このような態様において、ｎは、星形ポリマー中に存在するポリマー腕の数である。
【００５２】
[64]式Ａ（ＢＣ）ｎ中の（ＢＣ）基は、少なくとも二つの異なったブロックを含んでなるブロックコポリマーの腕である。異なったブロックは、Ｂ基及びＣ基によって表される。一組の態様において、Ｂ及びＣの一つは、疎水性ブロックであり、そしてＢ及びＣの他方は、親水性ブロックである。
【００５３】
[65]幾つかの態様において、ｎは、４、６及び８からなる群から選択される整数である。このような態様において、星形ブロックコポリマーは、４、６又は８本の腕を含んでなることができる。星形ブロックコポリマーが最小３本の腕を有することが必要である。幾つかの態様において、腕の数の増加は、より多い腕は、増加した密度又は強度を伴うゲルネットワークを、或いはゲル化組成物中にカプセル化された生理活性薬剤の放出に対するより大きい制御を提供することを援助することができるために、好都合であることができる。腕の数が多ければ、分子量は高い、然しながらコポリマー複合体の全体のサイズ又は直径は小さい。より小さいミセルは、ゲル中により多い分散した微小構造の形成を援助し、薬物のより良好な分布を、従って線形分子で形成される構造と比較して、より良好なカプセル化及び生理活性薬剤の放出に対するより良好な制御を提供することができる。
【００５４】
[66]注射用組成物の一つの形態において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中の親水性及び疎水性ブロック間の均衡は、親水性及び疎水性ブロック間の重量比が、約１０：１から１：１０までの範囲であるようなものである。幾つかの態様において、親水性及び疎水性ブロック間の重量比は、約６：１から１：６まで、又は約３：１から約１：３までの範囲である。親水性及び疎水性ブロック間の重量比は、注射用組成物の物理的特質に、並びにそのゲル化挙動に影響することができる。
【００５５】
[67]それぞれの疎水性又は親水性ブロックのサイズ又は長さは、非線形ブロックコポリマーの流体力学的直径に影響することができる。これは、今度はその粘度及び／又は弾性率に影響することができる。例えば、より長いブロック及びより高い流体力学的直径は、より高い粘度を与えることができる。親水性及び疎水性の均衡は、更に、非線形ブロックコポリマーの流体力学的直径において役割を演じることができる。理論によって制約されることを望むものではないが、より多い親水性ブロックの存在が、より小さい直径に導くことができ、そして組成物中に含まれる生理活性薬剤に提供されるより大きい溶解性に導くことができると信じられる。
【００５６】
[68]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーが、式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーである場合、星形ブロックコポリマー中のＢとＣの重量比は、１０：１から１：１０までの範囲であることができる。幾つかの態様において、ＢとＣの重量比は、約６：１から約１：６まで、又は３：１から約１：３までの範囲であることができる。
【００５７】
[69]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーのそれぞれの腕中に存在する一つのブロックは、疎水性ブロックであり、一方、もう一つのブロックは、親水性ブロックであることができる。式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーにおいて、Ｂは、疎水性ブロックであり、そしてＣは、親水性ブロックであることができる。別の方法として、Ｂは、親水性ブロックであり、そしてＣは、疎水性ブロックであることができる。
【００５８】
[70]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在する親水性ブロックは、親水性ポリマーを含んでなる。親水性ポリマーは、約１００から約３０００まで、約２５０から約２０００まで、及び約２００から約１５００までからなる群から選択される範囲の分子量を有することができる。
【００５９】
[71]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在する疎水性ブロックは、疎水性ポリマーを含んでなる。疎水性ポリマーは、約５００から約１５，０００まで、約１０００から約１０，０００まで、及び約１５００から約５０００までからなる群から選択される範囲の分子量を有することができる。
【００６０】
[72]生理学的温度におけるゲル化に加えて、注射用組成物中に使用される非線形ブロックコポリマーは、更に生分解性である。これは、非線形ブロックコポリマーが、生分解性である少なくとも一つのブロックを含んでなり、そして少なくとも一つの生分解性部分を含んでなることを意味する。幾つかの態様において、非線形ブロックコポリマーの少なくとも一つのブロックは、複数の生分解性部分を含んでなる。生分解性部分が、選択された条件、例えば生理学的条件下で分解、開裂又は断片化に対して感受性であり、低分子量のポリマー断片の形成をもたらすことを、当業者は理解するものである。
【００６１】
[73]本発明の注射用組成物中に使用される非線形ブロックコポリマーは、生分解性であると同様に、生体適合性である。
[74]幾つかの態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在する親水性及び疎水性ブロックの少なくとも一つは、生分解性である。
【００６２】
[75]幾つかの態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、生分解性ブロックに加えて、少なくとも一つの非生分解性ブロックを含んでなることができる。例えば、親水性及び疎水性ブロックの一つは生分解性であり、一方、親水性及び疎水性ブロックの他方は生分解性でないことができる。このような態様において、非生分解性ブロックは、生体適合性なままである。
【００６３】
[76]一組の態様において、疎水性ブロックは、生分解性であり、そして従って、生分解性ポリマーを含んでなる。生分解性ポリマーは、生分解に対して感受性である連結、例えばエステル、アミド及び酸無水物結合を含んでなる。このような結合が、更に、生理学的条件下の加水分解による分解に対して感受性であり、患者によって容易に代謝することができる低分子量の分解産物を産生するか及び／又は患者の身体から通常の排泄経路を通って排除することができることを、当業者は理解するものである。
【００６４】
[77]幾つかの態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在する親水性ブロックは、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（プロピレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチルオキサゾリン）、多糖又は炭水化物、例えばヒアルロン酸又はデキストランからなる群から選択される親水性ポリマーを含んでなることができる。
【００６５】
[78]幾つかの態様において、親水性ブロックは、ポリエーテルを含んでなる。例示的なポリエーテルは、Ｃ２−Ｃ３ジオールから誘導することができ、そしてポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、及びこれらのコポリマーからなる群から選択することができる。一組の態様において、親水性ブロックは、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含んでなる。ＰＥＧを含んでなる親水性ブロックは、非毒性及び生体適合性であり、そして患者の身体から容易に排除される利点を有する。親水性ブロックは、更に吸収性であることができる。
【００６６】
[79]式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーにおいて、Ｃは、本明細書中に記載されるようなポリエーテルを含んでなる親水性ブロックであることができる。
[80]幾つかの態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー中に存在する疎水性ブロックは、ヒドロキシ酸（例えば乳酸又はグリコール酸）、環式モノマー（例えばカプロラクトン）、アミノ酸、酸無水物、オルトエステル、ホスファゼン、リン酸塩、ポリヒドロキシ酸、及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも一つのモノマーから形成されるポリマーを含んでなることができる。疎水性ブロックは、疎水性であると同様に生分解性であるポリマーを含んでなることができる。
【００６７】
[81]幾つかの態様において、疎水性ブロックは、ポリエステルを含んでなる。ポリエステルは、生理学的環境において分解性であり、そしてポリエステルの組成及び／又は分子量を調節することによって制御された分解を提供するように調整することができる。一組の態様において、疎水性ブロックは、Ｄ，Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−乳酸、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε−カプロラクトン、ε−ヒドロキシヘキサン（ｈｅｘｏｎｏｉｃ）酸、γ−ブチロラクトン、γ−ヒドロオキシ酪酸、δ−バレロラクトン、δ−ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、リンゴ酸、マンデリン酸及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも一つのモノマーから形成されるポリエステルを含んでなる。このようなモノマーから形成されるポリエステルが、加水分解による分解に感受性である分解性エステル部分を含んでなることを、当業者は理解するものである。加水分解は、環境条件の変化（例えば、ｐＨの変化）によって、又は酵素の作用（酵素仲介加水分解）によって仲介することができる。
【００６８】
[82]幾つかの態様において、疎水性ブロックは、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（カプロラクトン）、及びこれらのコポリマーからなる群から選択されるポリエステルを含んでなる。コポリマーの例は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）及びポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）を含む。
【００６９】
[83]一組の態様において、疎水性ブロックは、Ｄ，Ｌ−乳酸及びε−カプロラクトンの重合から形成されるポリエステルを含んでなる。このような態様において、疎水性ブロックは、ポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）であるポリエステルコポリマーを含んでなる。このような態様において、ポリエステルコポリマー中の乳酸とカプロラクトンのモル比は、９０：１０から１０：９０まで、好ましくは７５：２５から２５：７５までの範囲であることができる。
【００７０】
[84]式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーにおいて、Ｂは、本明細書中で記載するようなポリエステルを含んでなる疎水性ブロックであることができる。
[85]一つの態様において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーであり、ここで、Ｂは、ポリエステルを含んでなり、そしてＣは、ポリエーテルを含んでなる。例示的なポリエステル及びポリエーテルは本明細書中に記載されている。
【００７１】
[86]生分解性星形ブロックコポリマー上のそれぞれの腕上に存在するブロックは、連結基を経由して互いに接続することができる。連結基は、一つのブロックをもう一つのブロックと共有結合的に結合する二価の基であることができる。生分解性星形ブロックコポリマーが式Ａ（ＢＣ）ｎのものである場合、Ｂ及びＣは、連結基を経由して接続することができる。非線形ブロックコポリマー中に存在する連結基は、適した連結化合物、例えばジイソシアネート、例えば、ジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）から誘導することができる。
【００７２】
[87]星形コポリマーの腕中に存在する異なったブロック（例えばＢ及びＣ）を、連結基を経由して互いに接続するために、異なったブロックは、連結基を提供する適した連結化合物と反応することが可能な末端反応性官能基を含んでなることが必要である。それぞれの異なったブロック上に存在する末端官能基（例えば、ヒドロキシル基）の、連結化合物との反応は、連結化合物から誘導される連結基を経由するブロックの共有結合をもたらす。当業者は、異なったブロック中に存在する末端官能基の特質を考慮し、同様に連結化合物によって保有されることができるいずれもの所望の物理的特質を有する適当な連結化合物を選択することが可能であるものである。
【００７３】
[88]幾つかの態様において、連結基を形成するために使用される連結化合物は、星形コポリマーの腕を形成するために使用される、異なったブロック上に存在する末端反応性官能基と相補的である官能基を有する、適した多機能性化合物であることができる。多機能性連結化合物は、少なくとも二つの反応性官能基を含んでなる。幾つかの態様において、連結化合物は、三つ、四つ又はそれより多い反応性官能基を含んでなることができる。一組の態様において、連結化合物は、二官能性であり、そして二つの反応性官能基を含んでなる。
【００７４】
[89]“相補的”であることは、一つの分子（例えば連結化合物）上の官能基が、もう一つの分子（例えばポリマーブロック）上に存在する官能基と共有結合的に反応し、二つの分子間の共有結合の形成をもたらすことが可能であることを意味する。
【００７５】
[90]多機能性連結化合物上に存在する官能基は、それぞれの出現において独立に選択することができる。
[91]幾つかの態様において、連結化合物上に存在する官能基は、それぞれ、ヒドロキシ（ＯＨ）、カルボン酸（ＣＯＯＨ）、カルボン酸エステル（ＣＯＯＲ）、カルボン酸ハロゲン化物（ＣＯＸ）、アミノ（ＮＲ１Ｒ２）及びイソシアネート（ＮＣＯ）からなる群から独立に選択することができ、ここで、ＲはＣ１−Ｃ４アルキルであり、Ｘはハロであり、そしてＦ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩからなる群から選択され、そしてＲ１及びＲ２は、それぞれ独立にＨ及びＣ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択される。
【００７６】
[92]幾つかの態様において、連結化合物は、連結化合物の官能基がそれぞれ同一の種類（例えば全てイソシアネート官能基）であるホモ官能性である。他の態様において、連結化合物は、ヘテロ官能性であり、そして二つ又はそれより多い異なった種類の官能基の混合物（例えばアミノ及びヒドロキシ官能基の混合物）を含んでなることができる。
【００７７】
[93]一組の態様において、連結基は、二官能性連結化合物から誘導することができる。例えば、連結基は、ジオール、二カルボン酸、二カルボン酸エステル、二カルボン酸ハロゲン化物、ジアミン、ジアミド、ジチオール及びジイソシアネートからなる群から選択される連結化合物から誘導することができる。
【００７８】
[94]幾つかの態様において、連結基は、開環が可能な環式化合物から誘導することができる。例えば、二価の連結基は、環式酸無水物又は環式イミド、例えば無水コハク酸又はスクシンイミドから誘導することができる。このような態様において、ブロック上に存在する官能基は、環式化合物と共有結合的に反応し、環式化合物の開環及び開環化合物上の官能基の発生をもたらすことができる。開環化合物上に形成された官能基は、その後、もう一つのブロックと、そしてこの様式で反応し、二つの隣接するブロックを一緒に共有結合的に結合することが可能である。
【００７９】
[95]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーが、生分解性星形ブロックコポリマーである場合の特定の態様において、二価の連結基は、星形ブロックコポリマーのそれぞれの腕のＢ及びＣ基を共有結合的に結合することができる（図１ｂを参照されたい）。連結基は、本明細書中に記載したように、二官能性の連結化合物又は環式化合物から誘導することができる。一組の態様において、連結基は、ジイソシアネートから誘導することができる。ジイソシアネートの例は、ジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）、ジイソシアン酸トルエン（ＴＤＩ）、ジイソシアン酸メチレンビスフェニル（ＭＤＩ）及びジイソシアン酸エチルリシン（ＥＬＤＩ）を含む。
【００８０】
[96]具体的な態様において、連結基は、ジイソシアネート連結化合物、更に具体的にはジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）から誘導される。ＨＤＩのような連結化合物は、これがその末端の終端において非常に反応性であり、強烈な反応条件を必要とせず、そして反応を可能にするために試薬を必要としないために、連結基を提供するために有用である。イソシアネートは、その反応性及びきれいな産物を与えるために、使用が非常に好都合である。ＨＤＩの骨格は、更に直鎖炭化水素（ヘキサン）からなり、これは性質上疎水性であり、そして６個のＳＰ３混成炭素原子のために高い程度の回転を有する。非線形ブロックコポリマーが星形ブロックコポリマーである場合、連結基の存在によって与えられるより長い炭素−炭素鎖及びその回転の高い程度は、星形コポリマーの腕の可動性を増加することができ、これは、ゾル−ゲル転移中の必要な高次構造（ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ）の容易な適合を支持する。原理的に分子に構築されたこのような特質は、ゾルからゲルへの、更に規定され、そして迅速な相変化に導く腕に沿った迅速な、そして制限されない動きを可能にすることができる。
【００８１】
[97]連結基を含んでなる生分解性星形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＬＣ）ｎのものであることができ、ここで、Ａは、ｎ価の核であり、Ｂ及びＣの一つは、親水性ブロックであり、一方Ｂ及びＣの他方は、疎水性ブロックであり、Ｌは、連結基であり、そしてｎは、核から伸長する腕の数であり、そして少なくとも３である。親水性ブロック、疎水性ブロック及び連結基（Ｌ）の例は、本明細書中に記載されている。
【００８２】
[98]式Ａ（ＢＣ）ｎの生分解性星形ブロックコポリマーにおいて、ｎ価の核（Ａ）は、適当に官能化された多価化合物から誘導することができる。
[99]一組の態様によれば、Ａは、ペンタエリスリトール、或いはペンタエリスリトールのダイマー又はトリマーから誘導される。ｎが４、６又は８である、ｎ価の核の例を、以下に示す：
【００８３】
【化２】
2016522169.tif 000003
[100]一組の態様において、本発明の注射用組成物中に使用される生分解性星形ブロックコポリマーは、以下の式（Ｉ）、（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の構造を有することができる：
【００８４】
【化３】
2016522169.tif 000004
【００８５】
【化４】
2016522169.tif 000005
【００８６】
[101]同じ種類及び配列の、類似の分子量のポリマーブロックを含んでなることが、生分解性星形ブロックコポリマーのそれぞれの腕のために、望ましいことであることができる。
【００８７】
[102]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーは、ポリマーのそれぞれの腕に更なるブロック（Ｄ）を含んでなることができる。このような態様において、星形ブロックコポリマーは、式Ａ（ＢＣＤ）ｎのものであることができる。更なるブロック（Ｄ）の組成は、星形ブロックコポリマーに更なる官能性（例えば、架橋可能な基の導入）を提供するか、又は星形ブロックコポリマーの物理的特質（例えば、ゲル化動態又は適合性）を制御する更なる手段を提供するために選択することができる。
【００８８】
[103]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーが、生分解性星形ブロックコポリマーである場合、幾つかの態様において、星形コポリマーは、多官能性核化合物を、一つ又はそれより多いモノマーを含んでなるモノマー組成物と、モノマーの重合及び核への複数の最初のポリマーブロックの共有結合的接続を可能にする条件下で反応させることによって調製することができる。幾つかの態様において、多官能性核化合物は、モノマーの重合を開始して、最初のポリマーブロックの核への共有結合的接続をもたらすことができる。最初のブロックは、それぞれ星形ブロックコポリマーの腕の一部を形成する。
【００８９】
[104]一組の態様において、この方法は、ｎ価の核を、一つ又はそれより多いモノマーと、縮合重合の条件下で反応させて、ｎ価の核に共有結合的に接続した複数の最初のブロックを含んでなる中間分子を提供する工程を含んでなることができる。中間体分子は、式Ａ（Ｂ）ｎのものであることができ、ここで、Ａは、ｎ価の核であり、Ｂは、最初のブロックであり、そしてｎは、核に接続された最初のブロックの数であり、そして少なくとも３の整数である。
【００９０】
[105]もう一つの組の態様において、所望の組成のポリマーブロックは、事前形成し、次いでその後、多官能性核化合物と反応させて、事前形成ポリマーブロックの核化合物への共有結合的接続をもたらすことができる。核化合物に接続されたポリマーブロックは、最初のポリマーブロックを形成する。好ましくは、複数の最初のポリマーブロックが核に接続される。
【００９１】
[106]存在する最初のブロックは、それぞれ末端官能基を含んでなることができる。末端官能基は、適した連結化合物との共有結合反応に関与することが可能であって、最初のブロックの終端に対する連結基前駆体を形成することができる。一つの形態によれば、末端官能基は、ヒドロキシ（ＯＨ）及びアミノ（ＮＲ１Ｒ２、ここでＲ１及びＲ２はＨ及びＣ１−Ｃ４アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される）からなる群から選択することができる。
【００９２】
[107]例示的な態様において、それぞれの最初のブロックは、ポリエステルを含んでなることができる。ポリエステルは、本明細書中に記載したように、ヒドロキシ酸モノマー及び／又は環式モノマーの、縮合重合条件下の重合から形成することができる。最初のブロックがポリエステルを含んでなる場合、ヒドロキシ基（ＯＨ）は、最初のブロックの末端官能基として存在することができる。
【００９３】
[108]次いで、最初のブロックは、所望の組成の事前形成ブロックとカップリングされて、最初のブロックへの後続のブロックの接続、及び生分解性星形コポリマーのそれぞれの腕中のブロックコポリマーの形成をもたらすことができる。Ｂが最初のブロックである場合の態様において、Ｂは、Ｃ基によって表される後続のブロックにカップリングして、式（ＢＣ）のブロックコポリマーを形成することができる。得られる星形ブロックコポリマーは、その結果、式Ａ（ＢＣ）ｎのものであり、ここで、星形コポリマーのそれぞれの腕は、ブロックコポリマーを含んでなる。
【００９４】
[109]事前形成されたブロックは、好ましくは末端官能基を含んでなり、これは、相補的官能基との共有結合反応に関与することが可能であって、後続のブロックが最初のブロックとカップリングすることを可能にする。幾つかの態様において、後続のブロックは、ポリエーテルを含んでなる。ポリエーテルは、末端ヒドロキシ基を含んでなることができる。ヒドロキシ基は、相補的官能基、例えばカルボン酸、カルボン酸エステル、カルボン酸ハロゲン化物及びイソシアネート基と反応することが可能である。
【００９５】
[110]一組の態様において、最初のブロックは、後続のブロックと直接カップリングすることができる。このような態様において、最初のブロックの両方に存在する末端官能基は、後続のブロックを形成する事前形成ブロック上に存在する官能基と相補的であることができる。
【００９６】
[111]もう一つの組の態様において、最初のブロック及び後続のブロックは、連結基を経由してカップリングすることができる。連結基は、適した連結化合物から誘導することができる。連結化合物の例は、本明細書中に記載されている。このような態様において、最初のブロック上に存在する末端官能基は、連結化合物と反応し、最初のブロックの終端で連結基前駆体の共有結合的接続をもたらす。得られた連結基は、官能基を含んでなる。連結基前駆体の官能基は、後続のブロックを提供するために選択される事前形成ブロック上に存在する官能基に対して相補的である。連結基前駆体の官能基の事前形成ブロックの官能基との反応は、後続のブロックの接続をもたらす。この様式において、最初のブロック及び後続のブロックは、連結基を経由して一緒にカップリングされる。
【００９７】
[112]一組の態様において、連結化合物は、最初のブロック上に存在する官能基に対して相補的である官能基を含んでなる多機能性連結化合物である。最初のブロックが末端官能基としてヒドロキシ基を含んでなる場合の態様において、多官能性化合物は、カルボン酸（ＣＯＯＨ）、カルボン酸エステル（ＣＯＯＲ、ここで、ＲはＣ１−Ｃ４アルキルである）、カルボン酸ハロゲン化物（ＣＯＸ、ここで、Ｘはハロ、例えばＦ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩである）及びイソシアネート（ＮＣＯ）からなる群から選択される相補性官能基を含んでなることができる。一つの態様において、多官能性連結化合物は、ジイソシアネートである。イソシアネート基は、最初のブロック及び後続のブロック上に存在するヒドロキシ基と反応することが可能である。
【００９８】
[113]もう一つの組の態様において、連結化合物は、最初のブロック上に存在する末端官能基との共有結合的反応において開環することが可能である環式化合物であることができる。使用することができる環式化合物の例は、環式酸無水物及び環式イミド、例えば無水コハク酸又はスクシンイミドを含む。開環された化合物は、最初のブロックの末端の終端において連結基を形成する。例えば、無水コハク酸は、開環を受けて、末端のカルボン酸官能基を有するエチレン（Ｃ２）連結基を提供することが可能である。末端カルボン酸基は、事前形成ブロック上の相補的官能基との共有結合的反応を受けて、これにより後続のブロックを接続することが可能である。
【００９９】
[114]生分解性星形ブロックコポリマーを合成するための一つの方法を、以下のスキーム２に示す。
【０１００】
【化５】
2016522169.tif 000006
【０１０１】
[115]上記に例示するように、多官能性核化合物のペンタエリスリトール（ポリオール）は、乳酸及びカプロラクトン（ヒドロキシ酸モノマー）の混合物を含んでなるモノマー組成物と反応させて、ポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）を含んでなる４個の最初のブロックを、ペンタエリスリトール核に共有結合的に結合することができる。次いで、ジイソシアネート連結化合物のジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）を、ポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）ブロックと反応させて、それぞれのポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）ブロック末端の終端においてイソシアネート官能基を有する連結基を提供する。次いで、連結基のイソシアネート基は、ポリ（エチレングリコール）メチルエーテルを含んでなる事前形成ブロックと共有結合的に反応して、ポリ（エチレングリコール）を含んでなる後続のブロックを、それぞれの最初のポリ（乳酸−ｃｏ−カプロラクトン）ブロックに共有結合的に結合する。
【０１０２】
[116]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーは、更なるブロック（Ｄ）を含んでなり、そして式Ａ（ＢＣＤ）ｎのものであることができる。所望する場合、更なるブロック（Ｄ）は、ブロックＣ上に存在する末端官能基を、更なるブロック（Ｄ）上の相補的末端官能基と、ＣをＤに接続するために共有結合的に反応させることによって星形ブロックコポリマーのそれぞれの腕に導入することができる。他の態様において、ブロックＣは、Ｄとのカップリングの前に、ブロックＣの終端における連結基を提供するために改変することができる。連結基は、末端官能基を含んでなることができ、これは、更なるブロック（Ｄ）中に存在する相補的官能基と反応し、連結基を経由するＤのＣへの共有結合的カップリングをもたらすことができる。
【０１０３】
[117]幾つかの態様において、生分解性星形ブロックコポリマーは、一つ又はそれより多い腕の末端において架橋可能な基を更に含んでなることができる。架橋可能な基は、星形ブロックコポリマーの分子が、組成物の投与後、共有結合的に架橋されることを可能にし、患者に投与された時点で、液体状態に戻ることができない組成物に導く。従って、これらは、注射可能であり、そして投与後ゲルになる目的のために熱可逆性組成物であるが、一旦ゲル化及び架橋された時点で、これらは、“可逆性”挙動をもはや示さない。当技術において既知の化学的又はイオン的に架橋可能な基を、使用することができる。幾つかの態様において、架橋可能な基は、フリーラジカル条件下で重合可能である。このような態様において、架橋可能な基の重合は、可視又は紫外線照射による光重合開始後、又は熱の適用による熱重合開始後に起こることができる。架橋可能な基のこの活性化及び重合は、組成物の投与後に起こる。使用することができる架橋可能な基の例は、不飽和基、例えばビニル基、アリル基、コハク酸塩、アクリル酸塩、ジアクリル酸塩、オリゴアクリル酸塩、メタクリル酸塩、ジメタクリル酸塩、オリゴメタクリル酸塩、又は他の生物学的に受容可能な重合可能な基を含む。これが形成された後のゲル化組成物を架橋する能力は、投与領域又は組成物が注射される欠損にサイズ及び形状的に相補的である強力にゲル化された組成物の形成を容易にする。
【０１０４】
[118]他の構造、例えば分岐、超分岐、櫛形、ブラシ状及び樹状構造を有する、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、更に、本発明の注射用組成物中に使用することができる。このような構造の非線形ブロックコポリマーは、関連技術において既知の慣用的な技術を使用して、当業者によって調製することができる。使用することができる合成のプロトコルの幾つかの例は、Ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，７１，２４５−２５３，２０１１中に記載されている。
【０１０５】
[119]本発明の態様において、注射用組成物は、約３％から約５０重量％までの、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーを含んでなる。幾つかの態様において、注射用組成物は、約５％から約４０％まで、又は約１０％から約３０重量％までの非線形の生分解性ブロックコポリマー含んでなることができる。コポリマーと共に実行可能なゲルの相転移を得るために、一定の最低濃度、例えば３重量％、が必要である。幾つかの態様において、より強い又はより安定なゲルネットワークを形成することができるように、より高いポリマー濃度が好ましいものであることができる。
【０１０６】
[120]非線形ブロックコポリマー、例えば星形ブロックコポリマーの使用に伴う一つの利点は、高いポリマー含有率を含んでなり、それにもかかわらずなお流動性で、そして注射可能である組成物を形成することが可能であることである。生分解性星形ブロックコポリマーの事例において、多数の腕のポリマー構造は、類似の分子量の対応する線形ポリマーを含んでなるポリマー溶液のものより、低い粘度を有するポリマー溶液を調製することを可能にする。より低い粘度は、狭い制限、例えば狭いゲージ番号の注射針を通る組成物の注射の可能性を改良することができる。一組の態様において、本発明の組成物が、２８番ゲージの注射針を通して注射可能であることが望ましい。一組の態様において、本発明の注射用組成物は、液体の形態である場合、約０．００１から２Ｐａ・ｓまでの範囲の粘度を有し、対応する貯蔵弾性率は、そのゲル様特質を反映する。
【０１０７】
[121]非線形ブロックコポリマー、例えば星形ブロックコポリマーの使用に伴う一つの他の利点は、注射用組成物中により高いポリマー固体の含有量を組込む能力のために、より安定なゲル構造を達成することができることである。例えば、文献の報告は、通常のミセル構造は、類似の分子量の線形ポリマーと比較して、星形ポリマーと共により容易に形成されることができることを示唆している（Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ｐａｒｔ  Ａ，２００６，４４，ｐａｇｅｓ  ８８８−８９９）。理論に制約されることを望むものではないが、星形ポリマーによって得ることができる更に均一なミセル構造が、その後、本発明の組成物中の生理活性薬剤の分散及びカプセル化を援助するゲルの微小構造の形成を補助することができ、そして生理活性薬物の放出の制御を改善することを可能にすると信じられる。
【０１０８】
[122]本発明の注射用組成物は、更に、水性溶媒を含んでなる。水性溶媒は、水、又は医薬的に受容可能な水溶性溶媒との混合物中の水であることができる。医薬的に受容可能な水溶性溶媒の例は、エタノールである。
【０１０９】
[123]注射用組成物は、約５０％から約９７（重量／重量）％までの水性溶媒を含んでなることができる。一組の態様において、注射用組成物は、高い比率の水性溶媒、例えば少なくとも６０％、又は少なくとも約７０重量％の溶媒を含んでなる。
【０１１０】
[124]注射用組成物が水を含んでなる場合、得られるゲル化組成物は、幾つかの態様においてヒドロゲルであると考えられる。
[125]生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーが、得られた注射用組成物が、コポリマーの僅かな明白な相分離を伴い、又はそれを伴わずに、均一であるように水性溶媒中に可溶性であることが好ましい。
【０１１１】
[126]本発明の注射用組成物は、更に、生理活性薬剤を含んでなる。生理活性薬剤は、疾病又は疾患の治療或いは予防において使用するための、ある範囲の生理活性薬剤又は医学的に有用な薬剤或いは全ての種類のワクチンから選択することができ、そして本発明は、具体的な生理活性薬剤に制約されるものではない。本発明の注射用組成物中に組込まれ、そしてそれによって送達することができる生理活性薬剤の例は、Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、及びＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓのような参考文献中に記載されている。これらは、親水性薬物、疎水性薬物、タンパク質又は抗体、ホルモン、遺伝子、又は核酸、オリゴヌクレオチド、アンチセンス療法の活性剤、多糖及び他の糖、脂質、ガングリオシド、血管作動剤、向神経活性剤、抗凝固剤、免疫調節剤、抗癌剤、抗炎症剤、抗生物質  抗ウイルス剤及びワクチンを含む。
【０１１２】
[127]幾つかの態様において、生理活性薬剤は、抗癌剤、例えばアクチノマイシンＤ、アナストロゾール、アザシチジン、ベバシズマブ、ビカルタミド、ブレオマイシン、ＢＣＮＵ、ボルテゾミブ、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、セツキシマブ、ダウノルビシン、ダサチニブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エキセメスタン、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゴセレリン、イマチニブ、ＳＴＩ−５７１、イリノテカン、ラパチニブ、レトロゾール、ロイプロリド、メトトレキセート、マイトマイシン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、リツキシマブ、ソラフェニブ、スニチニブ、タモキシフェン、タキソテール、テガフール−ウラシル、テモゾロミド、トラスツズマブ、トリプトレリン、ビノレルビン、ポルカバジン、ダカルバジン、アルトレタミン、ジスプラチン、メルカプトプリン、チオグアニン、フルダラビンリン酸塩、クラドリビン、ペントスタチン、フルオロウラシル、シタラビン、アザシチジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テニポシド、トポテカン、ダクチノマイシン、イダルビシン（ｉｄａｒｕｂｉｎｃｉｎ）、プリカマイシン、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アミノグルテチミド、アムサクリン、ヒドロキシ尿素、アスパラギナーゼ、ミトキサントロン、ミトタン、レチノイン酸誘導体、骨髄増殖因子アミホスチン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、抗−ＶＥＧＦ剤等；統合失調症治療剤、例えばオランザピン及びジプラシドン；抗細菌剤、例えばセフォキシフェン；駆虫剤、例えばイベルメクチン；抗ウイルス剤、例えばアシクロビル；免疫抑制剤、例えばシクロスポリンＡ（環式ポリペプチド型薬剤）、ステロイド、及びプロスタグランジン；心血管治療薬、例えばジピリダモール、及びエプチフィバチドからなる群から選択することができる。
【０１１３】
[128]幾つかの態様において、生理活性薬剤は、小さい分子であることができる。このような生理活性薬剤は、２０００Ｄａより多くない、約１５００より多くない、又は約１０００Ｄａより多くない分子質量を有することができる。
【０１１４】
[129]幾つかの態様において、生理活性薬剤は、大きい分子であることができる。このような生理活性薬剤は、２ｋＤａより多い、５ｋＤａより多い、１０ｋＤａより多い、５０ｋＤａより多い、又は１００ｋＤａより多い分子質量を有することができる。
【０１１５】
[130]ポリペプチド及びタンパク質薬物は、更に、患者への送達のための注射用組成物中の包含のために特に適していることができる。医薬的に有用なポリペプチド及びタンパク質の例は、エリスロポエチン、フォリスタチン、オキシトシン、バソプレシン、副腎皮質刺激ホルモン、上皮増殖因子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、プロラクチン、ルリベリン、黄体化ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、ＬＨＲＨアゴニスト、ＬＨＲＨアンタゴニスト、成長ホルモン（ヒト、ブタ、ウシ、等）、成長ホルモン放出因子、インスリン、ソマトスタチン、グルカゴン、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターフェロン−α、β、又はγ、ガストリン、テトラガストリン、ペンタガストリン、ウロガストリン、セクレチン、カルシトニン、エンケファリン、エンドルフィン、アンギオテンシン、甲状腺ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、ヘパリナーゼ、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、ｈＡＮＰ、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）、レニン、ブラジキニン、バシトラシン、ポリミキシン、コリスチン、チロシジン、グラミシジン、シクロスポリン又は合成類似体、修飾及び薬理学的に活性なその断片、酵素、サイトカイン、抗体又はワクチンであることができる。
【０１１６】
[131]本発明の注射用組成物は、適した量の生理活性薬物を含んでなる。幾つかの態様において、注射用組成物は、約０．０１％から約２０重量％までの生理活性薬物を含んでなる。然しながら、注射用組成物中に組込まれる量は、生理活性薬剤の性質に依存するものであることを当業者は理解するものである。注射用組成物は、従来の技術の薬物送達組成物と比較して、より低い濃度の生理活性薬剤を含有することができる。
【０１１７】
[132]本発明の注射用組成物の一つの利点は、多くの生理活性薬剤の溶解性を増加する非線形ブロックコポリマーの能力である。本発明の注射用組成物中に使用される生分解性星形ブロックコポリマーは、疎水性ブロック（一つ又は複数）及び親水性ブロック（一つ又は複数）の組合せを有し、これは、明確な疎水性及び親水性領域を提供し、そしてブロックコポリマーを両親媒性にする。親水性及び疎水性領域の存在は、組成物中の親水性又は疎水性の生理活性薬剤のそれぞれの安定化及び可溶化を補助することができる。疎水性生理活性薬剤、例えばパクリタキセルにおいて、薬物の溶解性（そして従ってその最終的な生体利用性）を増加する能力は、患者へのその送達を援助することができる。
【０１１８】
[133]幾つかの態様において、本発明の注射用組成物は、更に、一つ又はそれより多い賦形剤（例えば緩衝塩）、添加剤及び／又はアジュバントを含んでなることができる。賦形剤、添加剤又はアジュバントは、一般的にゲルネットワークの形成に寄与しないものであるが、しかし生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーの親水性又は疎水性領域のいずれかに関係し、そして従って、その領域の特質を向上し、そして組成物の特質、例えば粘度、注射性、貯蔵弾性率の一貫性に影響することができる。注射用組成物中に存在する賦形剤、添加剤又はアジュバントは、更に、生理活性薬剤の溶解性を向上することを援助することができる。
【０１１９】
[134]幾つかの態様において、注射用組成物は、多糖、ポリエーテル、及びこれらの混合物からなる群から選択される添加剤を含んでなることができる。多糖及びポリエーテルは、一般的に非毒性及び親水性であり、そして生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーの親水性領域と結合する。親水性領域における添加剤、例えば多糖及び／又はポリエーテルの分割は、生理活性薬物の更なる制御放出を援助することを補助することができる。これに関して、多糖及び／又はポリエーテルは、本発明のゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出を制御する能力を促進する放出制御添加剤であると考えることができる。注射用組成物中の添加剤の包含は、更に、幾つかの態様のゲル化組成物の一貫性を改善することを援助することができる。
【０１２０】
[135]例示的な多糖は、制約されるものではないが、キサンタンガム、ウェランガム、デキストラン、ジェラン、プルラン、グアーガム、ローカストビーンガム、キチン、アルギン酸塩を含む。
【０１２１】
[136]例示的なポリエーテルは、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）である。ポリ（エチレングリコール）は、２００から３０００までの範囲の分子量を有することができる。幾つかの態様において、ポリエーテルは、３５０、５５０、７５０、１０００及び２０００からなる群から選択される分子量を有するポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）である。
【０１２２】
[137]注射用組成物の調製において、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーは、水性溶媒中に分散されて、ブロックコポリマーを含んでなる溶液を形成する。次いで生理活性薬剤を、ポリマー含有溶液に加え、そして混合することができる。組成物中に賦形剤、添加剤及び／又はアジュバントが使用される場合、賦形剤、添加剤又はアジュバント或いはこれらの混合物は、生理活性薬物が溶液中で混合される前、又はその後に溶液に加えることができる。
【０１２３】
[138]幾つかの態様において、生理活性薬剤は、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー混合される前に、生理活性薬剤を調整する処理工程を受けることができる。生理活性薬剤の処理は、そのコポリマーとの相互作用を向上することを援助することができる。一つの形態において、生理活性薬剤は、最初、超音波処理、次いで加熱、そして次いで冷却によって処理される。コポリマーとの改善された相互作用、例えばコポリマーマトリックス中の生理活性薬剤のより均一な分散又はより大きい絡み合いは、生理活性薬物の継続送達を援助することができる。生理活性薬剤の処理は、生理活性薬剤が１０ｋＤａより多い分子量を有する医薬的に有用なタンパク質又はペプチドである場合、特に有益であることができる。
【０１２４】
[139]幾つかの態様において、生理活性薬剤を含んでなる注射用組成物は、生理活性薬剤の、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーとの混合及び相互作用を向上する処理工程を受けることができる。一つの形態において、注射用組成物は、超音波処理、次いで加熱、そして次いで冷却によって処理されて、生理活性薬剤の非線形ブロックコポリマーとの相互作用を促進する。
【０１２５】
[140]幾つかの態様の注射用組成物は、室温（概略２０℃）で液体であり、そして患者に組成物を投与するために室温で注射することができる。注射は、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーが低い粘度を有するために可能であり得る。
【０１２６】
[141]もう一つの組の態様において、注射用組成物は、室温（概略２０℃）における静的条件下で、粘性の液体であることができる。先に考察したように、このような注射用組成物は、組成物が剪断にかけられた場合、例えば組成物が注射針又はカテーテルの管腔を通って注射される場合、組成物が流動性液体に転換されることが可能であるように、揺変性であることができる。
【０１２７】
[142]注射用組成物の投与は、ある範囲の外科的技術又はデバイスを使用して達成することができる。外科的技術又はデバイスが、最小に侵襲性であることが好ましい。例えば、注射用組成物は、概略０．２ｍｍ（２８番ゲージ）又はそれより小さい内径を持つカテーテル送達系又は小さいゲージの注射針によって所望の部位に投与することができる。注射用組成物を最小に侵襲的な技術で投与する能力は、患者によって経験されることができる機械的刺激又はトラウマを有意に減少し、そして患者の遵守及び送達の容易さを援助することができる。
【０１２８】
[143]患者の所望の部位に投与された時点で、注射用組成物は、生理学的温度で自然発生的にゲル化して、ゲル化組成物をｉｎ  ｓｉｔｕで形成する。ゲル化組成物は、注射用組成物中に含有される生理活性薬剤をカプセル化する。注射用組成物の自然発生的ゲル化は、注射用組成物中に存在する、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーのミセルへの自己組織化の結果として起こり、これは、その後、凝集して、ゲルネットワークを形成する。好ましいブロックコポリマーは、本明細書中に記載されるような生分解性星形ブロックコポリマーである。ゲル化組成物は、投与の部位でインプラントを形成することができる。
【０１２９】
[144]一組の態様において、本発明の注射用組成物は、液体の形態及び生理的温度のゲルの形態の場合、約１から２０Ｐａまでの範囲の貯蔵弾性率を有する。本発明の注射用組成物は、組成が液体及びゲルの形態間で変化するのに従って、各種の貯蔵弾性率を示すことができる。幾つかの態様において、注射用組成物は、液体の場合、約１から２Ｐａまでの貯蔵弾性率を有する。温度の増加に伴う液体組成物からゲル状態への転移中に、貯蔵弾性率は、生理学的温度においてゲル化組成物が形成するまで増加する。ゲル化組成物は、液体組成物のものより高い貯蔵弾性率及び粘度を有する。一組の態様において、本発明のゲル化組成物は、約８から２０Ｐａまで、約１０から１５Ｐａまで及び約１２Ｐａからなる群から選択される範囲の貯蔵弾性率を有する。本発明の組成物が熱可逆性であるため、組成物の貯蔵弾性率は、ゲル化組成物が液体の形態に戻った場合、約１から２Ｐａまでの範囲であるように戻ることができる。
【０１３０】
[145]注射用組成物がゲル化された時点で、ゲル化組成物は、そこから有効な量の生理活性薬物を放出することができるデポーを形成する。一組の態様において、有効な量の生理活性薬剤が、少なくとも７日間、少なくとも１４日間、少なくとも２１日間、少なくとも２８日間、少なくとも３５日間、少なくとも４５日間、少なくとも６０日間又は少なくとも９０日間の期間にわたってゲル化組成物から放出される。従って、生理活性薬剤は、その所望の生物学的又は薬理学的効果を、継続した期間にわたって発揮することが可能である。
【０１３１】
[146]注射用組成物及びそれから形成されるゲル化組成物は、生理活性薬剤の所望の速度（又は相）の放出を提供することができる。幾つかの態様において、ゲル化組成物は、単一の段階で、又は複数の段階でおこる生理活性薬剤の放出を提供することができる。
【０１３２】
[147]幾つかの態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、実質的に０次であることができる。幾つかの態様において、ゲル化組成物は、僅かな最初の突発効果を伴う又はそれを伴わない生理活性薬剤の放出を提供することができる。突発効果がないことは、３０％より少ないカプセル化された生理活性薬剤が、ゲル形成後の最初の２４時間内に放出されることと定義することができる。幾つかの態様において、ゲル化組成物は、ゲル形成後最初の２４時間内に、約２０％より多くない、好ましくは約１０％より多くない、そして最も好ましくは約５％より多くない生理活性薬剤の放出を提供する。
【０１３３】
[148]幾つかの態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、少なくとも二つの別個のそして明確に異なる速度又は相で起こり、そして幾つかの態様において、三つの別個の速度又は相で起こることができる。放出段階は、定義された放出機構又は放出動態によって特徴づけることができる。放出段階は、その特定の段階において放出される生理活性薬剤の量に関係することができる。一組の態様において、段階内の生理活性薬剤の放出は、実質的に０次であることができる。
【０１３４】
[149]幾つかの態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、二つの段階で起こることができ（二段階性）、そして最初は突発放出で、続いて拡散制御放出であることができる。幾つかの別の態様において、ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、三つの段階で起こることができ（三段階性）、そして最初は突発放出で、続いて拡散制御放出、そして最終的に分解制御下の放出であることができる。
【０１３５】
[150]生理活性薬剤の放出の速度及び期間は、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーの組成及び／又は特質、並びに注射用組成物中のポリマーの濃度によって影響されることができる。生理活性薬剤の放出特性は、更に、注射用組成物中の添加剤又はアジュバントの存在によっても影響されることができる。従って、これらのパラメータは、疾患又は疾病の治療或いは予防の援助のために選択された生理活性薬剤に対する所望の放出特性を達成するために調節することができる。
【０１３６】
[151]理論によって制約されることを望むものではないが、注射用組成物中の親水性及び疎水性領域を有する、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーの使用は、親水性及び疎水性の生理活性薬剤の制御放出を援助すると信じられる。例えば、疎水性の生理活性薬剤は、非線形ブロックコポリマー中の疎水性領域を攻撃するものであり、そして従って、ゲル化ポリマー構造内に優先的に保持されて、周囲の水性環境と分離されるものであると信じられる。これは、今度は、ゲル化組成物からの長期にわたる生理活性薬剤のゆっくりした、そしてより継続的な放出に寄与すると信じられる。従って、この様式において、非線形ブロックコポリマーの組成物は、拡散機構によるゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出の速度に影響することができる。
【０１３７】
[152]親水性生理活性薬剤において、制御され、そして継続された放出は、ゲル化ポリマー構造の環境を更に親水性にし、そして従って、生理活性薬物に対して更に魅力的にすることによって達成することができる。幾つかの態様において、これは、親水性添加剤、例えばキサンタンガムを本発明の注射用組成物に組込むことによって達成することができる。親水性添加剤は、非線形ブロックコポリマー中の親水性領域と結合することができ、そして従って、親水性生理活性薬剤を優先的にこれらの領域に誘因して、生理活性薬剤を周囲の環境から分離することを援助する。
【０１３８】
[153]ゲル化組成物からの生理活性薬剤の放出は、最初は突発放出であり、続いて拡散制御下の放出であることができる。拡散制御放出は、周囲の環境と比較した、生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーに対する、生理活性薬剤の相対的親和性によって影響されることができる。投与及びゲル形成に続くある期間の時間後、生理活性薬剤の放出は、更に、ゲル化組成物の生分解の速度によっても影響されることができる。幾つかの態様において、ゲル化組成物の生分解が開始され、一方、生理活性薬剤の放出が主として拡散制御下にある場合、放出は、拡散及び分解の制御の組合せによって決定されることができる。生理学的環境におけるゲル化組成物の生分解による生理活性薬剤の放出は、送達の最終の段階であることができる。この最終の段階を、非線形ブロックコポリマー中に存在する生分解性ブロックの組成の適当な選択によって制御することは可能であることができる。
【０１３９】
[154]生理活性薬剤の放出に加えて、他の特質、例えばゲル強度、ゲル化温度及び分解速度も、更に、各種のコポリマーブロックの設計及び調製によって、即ち、親水性ブロック及び疎水性ブロックの重量パーセント、それぞれの種類のブロック中に存在するモノマー単位（例えばカプロラクトン、グリコール酸、乳酸）のモルパーセント、並びに生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマーの分子量及び多分散の変更によって制御することができる。
【０１４０】
[155]使用において、本発明の注射用組成物は、静脈内ではなく、所望の部位における生理活性薬剤の局所的送達を提供するために、治療を必要とする部位の近辺に投与することができる。このような局所的送達は、生理活性薬剤が、例えば癌薬物のような非常に強力な生理活性薬剤である場合に、これが、薬物の静脈内投与から起こる非選択的治療の結果であり得る器官の損傷、又は他の重篤な副作用の可能性を減少するために、好都合であることができる。他の態様において、注射用組成物は、生理活性薬剤の全身性送達のために使用することができる。
【０１４１】
[156]本発明の注射用組成物の一つの利点は、これが、従来の技術の組成物より、長い期間にわたる有効な量の生理活性薬剤の放出を提供することができることである。生理活性薬剤の継続放出（ｓｕｓｔａｎｉｎｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）は、生理活性効力のための時間を増加することができ、一方、向上された送達のために、投与されるために必要な薬物の投与量を減少することができることを意味する。
【０１４２】
[157]生理活性薬剤の継続放出を達成するための能力は、更に、生理活性薬剤の繰り返し投与の必要性を減少し、従って、繰り返し投与から起こり得る患者に対するいずれものトラウマに対する潜在性を減少することができる。これは、急速な分解及び治療に部位からの生理活性薬剤の排除のために、頻繁に送達されることが必要な生理活性薬剤（タンパク質薬物に場合のような）の場合に好都合であることができる。
【０１４３】
[158]本発明の一つの他の利点は、本発明の注射用組成物と共に形成されるゲルネットワークが、得られるゲル中に保持される注射用組成物の高い水性溶媒含有率のために、軟らかく、柔軟で、そして変形可能であることである。従って、固体の注射又は固体のインプラントに伴う違和感を更に減少することもできる。
【０１４４】
[159]ゲル化組成物が、生分解性コポリマーと共に形成されるために、組成物は、患者の身体からのゲルの除去が生理活性効力が消耗された時点で必要なくなるように、ｉｎ  ｖｉｖｏで非毒性代謝産物に分解することが可能である。むしろ、分解産物は、通常の排泄経路を通って身体から排除することができる。例えば、非線形ブロックコポリマー中のポリエステルブロックは、カプロン酸、乳酸、グリコール酸、及び他の対応する代謝産物に特定の時間間隔で分解することができる。更に、ポリエチレングリコールブロックは、排泄によって患者の身体から除去することができる。
【０１４５】
[160]生分解性で、熱可逆性の非線形ブロックコポリマーの使用は、更に、時間をかけた生理学的環境中のポリマーの分解又は侵食の結果としての、ゲル化組成物中にカプセル化された生理活性薬剤の送達を制御するための更なる手段を提供し、これは、更なる量の生理活性薬剤が放出されることを可能にする。
【０１４６】
[161]もう一つの側面において、本発明は、患者の疾病又は疾患を治療或いは予防する方法を提供し、この方法は、本明細書中に記載される態様のいずれか一つによる注射用組成物を患者に投与することを含んでなる。一組の態様において、この方法は、患者に組成物を投与するために、シリンジの管腔から組成物を注射することを含んでなる。
【０１４７】
[162]もう一つの側面において、本発明は、更に、患者の疾病又は疾患を治療或いは予防するための医薬の製造における、本明細書中に記載される態様のいずれか一つによる注射用組成物の使用を提供する。一組の態様において、医薬は、インプラントの形態である。
【０１４８】
[163]一組の態様において、疾病又は疾患は癌であり、そして生理活性薬剤は、抗癌剤である。注射用組成物によって送達することができる抗癌剤の例は、本明細書中に記載されている。
【０１４９】
[164]もう一つの側面において、本発明は、注射によって患者に注射用組成物を投与することを含んでなる、患者の癌を治療する方法、
ここにおいて、注射用組成物は：
・  生分解性で、熱可逆性の、非線形ブロックコポリマー；
・  水性溶媒；及び
・  抗癌剤；
を含んでなり、ここにおいて、組成物は、液体として注射可能であり、これによって、液体は、生理学的温度でゲルに転換され、そしてここにおいて、ゲル化組成物は、少なくとも７日間にわたる有効な量の抗癌剤の放出を提供する。
【０１５０】
[165]本発明は、更に、患者の眼の疾病又は疾患を治療或いは予防する方法を提供する。一つの形態において、眼の疾病及び疾患は、加齢関連の黄斑変性症（ＡＭＤ）であり、そしてこの方法は、注射によって患者に本明細書中に記載されるような注射用組成物を投与することを含んでなり、ここにおいて、注射用組成物は、ベバシズマブ、ラニビズマブ及びペガプタニブナトリウムからなる群から選択される少なくとも一つの生理活性薬剤を含んでなる。好ましくは、組成物は、硝子体内注射によって眼の硝子体液に直接投与される。
【０１５１】
[166]本発明は、更に、患者のケロイド性瘢痕を予防するための方法を提供し、この方法は、患者に本明細書中に記載されるような注射用組成物を投与することを含んでなり、ここにおいて、注射用組成物は、生理活性薬剤としてフォリスタチンを含んでなる。好ましくは注射用組成物は、局所適用される。
【実施例】
【０１５２】
[167]本発明は、以下の実施例を参照して説明される。実施例が、本明細書中に記載される本発明の例示であり、そしてそれを、制約するものでないことは理解されることである。
【０１５３】
材料
[168]ペンタエリスリトール（ＰＥ）ＦＷ１３６（９８％）、ジペンタエリスリトールＦＷ２５４（９８％）、トリペンタエリスリトールＦＷ（９８％）、ジラウリン酸ジブチル錫（ＤＢＴＬ）ＦＷ６３１．５６（９８％）を、Ａｉｄｒｉｃｈから購入し、そして受領したままで使用した。ポリ（エチレン）グリコールメチルエーテル（ＰＲＧ−Ｏ−ＣＨ３）平均ＭＷ３５０、５５０を、Ａｌｄｒｉｃｈから受領し、そして使用前に、４０℃の真空（０．１ｍｍＨｇ）下で一晩乾燥した。ε−カプロラクトンＦＷ１１４．１４（＞９９％）及びＤＬ−乳酸ＦＷ９０．０８（水中の９０％）を、Ｆｌｕｋａから購入し、そして受領したままで使用した。ジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）ＦＷ１６８．２（＞９８％）を、Ｆｌｕｋａから受領し、そして使用前に、減圧下の蒸留によって更に精製した。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９９％）をＡｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓから購入し、そして受領したままで使用した。
【０１５４】
方法
Ａ．四本腕ポリエステルポリオールの典型的な合成
ＰＥ−ＬＡ−ＣＬ（７５：２５）２１００ＭＷ
[169]ペンタエリスリトール（ＰＥ）（３．２１３１ｇ、１モル）、ＤＬ−乳酸（４２．５１７７ｇ、１８モル）（ＬＡ）及びε−カプロラクトン（１６．１６２２ｇ、６モル）を、丸底フラスコ中で、１６０−１７０℃で、２５０ｍＬのＴＨＦ及び１．０ｇのｐ−トルエンスルホン酸一水和物の存在中で加熱した。環流中の反応混合物を、環流及び周囲圧力で３日間撹拌させた。発生した水をディーンスターク装置を使用して収集した。溶媒をデカントし、そして反応混合物を回転蒸発機を使用して濃縮し、そして残留溶媒を高真空下で更に除去して、僅かに黄色のきれいな透明の生成物を製造した（約８０％収率）（理論的ＭＷ−２１１８．４３、観察したＧＰＣ  ＭＷ：Ｍｎ  ２７６６、Ｍｗ  ３４６９、Ｍｐ  ３３５６、Ｍｚ  ４２６６、ＰＤ  １．２５）。以下のスキーム３は、陰影付きのポリマーブロックの繰返し単位を伴う、最初のポリマーブロックが接続された核を調製するために使用された反応を示す。ポリエステルポリオールの特徴は、表１に列挙されている。
【０１５５】
【化６】
2016522169.tif 000007
【０１５６】
[170]全てのポリエステルポリオールを、正確な化学量論的比で、この方法に従って合成した。ポリエステルポリオールの核は、ポリマーを与えるポリエステル、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール及びトリペンタエリスリトールの腕の数を、それぞれ４、６及び８本腕に決定した。調製されたポリマーの分子量の特徴を表１に示す。
【０１５７】
【表１】
2016522169.tif 000008
【０１５８】
Ｂ．ジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＤＩ）による典型的な官能化
[171]ポリエステルポリオールＰＥ−ＬＡ−ＣＬ（７５：２５）（０．５×１０−３モル）を、磁気撹拌子を備えた丸底ガラス中の１５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中に溶解し、そしてＨＤＩ（２０×１０−３モル、１０倍過剰）を室温で加えた。反応混合物を４時間撹拌し、そして１０ｍｇのＤＢＴＬを加えた。混合物を周囲温度で一晩撹拌させた。生成物を乾燥ｎ−ヘプタン（１５００ｍＬ）中で沈殿させ、デカントし、そしてポリマー残渣を、次の官能化工程のために、直ちにＤＣＭ中に再溶解した。最初のポリマーブロックのＨＤＩによる官能化を、スキーム４に示す。
【０１５９】
【化７】
2016522169.tif 000009
【０１６０】
Ｃ．二番目のブロックを加えるための典型的方法：ＰＥＧ−ＯＣＨ３  ３５０ＭＷ
[172]ＨＤＩで官能化されたポリエステルポリオールを、乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）中に溶解し、そして事前乾燥したモノメチルＰＥＧ−Ｏ−Ｈ（３×１０−３モル、１．５当量）を室温で加えた。反応混合物を４時間撹拌し、続いて触媒のＤＢＴＬ（１０ｍｇ）を加えた。溶液を一晩室温で撹拌させた。ポリマー生成物をｎ−ヘプタン（１０００ｍＬ）中で沈殿させ、溶媒をデカントし、沈殿したポリマーを最小量のＤＣＭ中に再溶解し、丸底フラスコ（ｆｌａｓｈ）に移し、そして溶媒を回転蒸発機を使用して除去した。生成物のポリマー中の残留溶媒を高真空で除去して、粗製の最終ポリマーを得た。その後のブロックの接続を、スキーム５に示す。
【０１６１】
【化８】
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【０１６２】
Ｄ．典型的な精製法
[173]粗製の生成物のポリマーを、１０℃以下で脱イオン水中に溶解した。溶解が完了した時点で、混合物を６０℃に加熱した。溶液中のポリマーは、温度の増加に伴い沈殿し、そして単離した。三回の沈殿を行って、きれいな最終ポリマー生成物を得た。
【０１６３】
[174]上記の方法を使用して、ある範囲の生分解性星形ブロックコポリマーを、表２に詳述するように調製した。
【０１６４】
【表２】
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【０１６５】
貯蔵弾性率
[175]ＴＲＰの貯蔵弾性率（Ｇ’）及び損失弾性率（Ｇ’’）を、レオメーターを使用して測定する。動的レオロジーは、粘弾性流体に対する弾性の寄与（貯蔵弾性率）及び適用された応力に対する粘性の寄与（損失弾性率）を表すこれらの特徴を測定することができる。これらの弾性率は、振動する剪断応力下の二つの平行な板間に試料を置き、そして反力を測定することによって測定される。典型的には、ゲルに対してコーンプレート型レオメータが使用される。ゲルはコーン上におかれ、そして底部プレートが振動し、そして捻じれ及び回転の程度が測定される。次いで、剪断応力が計算される。
【０１６６】
[176]図２は、本発明の星形ブロックコポリマーを含有する組成物（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）に対する温度及び弾性率間の相関を示すグラフであり、ここにおいて、貯蔵弾性率は、温度が生理学的温度に増加するのに従って、ゲル形成（ゾル−ゲル）中に増加し、そして温度が減少するのに従い、ゲルの可逆性はゾルに戻す。グラフは、星形ブロックコポリマーの熱可逆性の特質を例示する。
【０１６７】
Ｅ．ＰＥＧブロックを伴う星形ブロックコポリマー及び異なった疎水性ブロック組成物
[177]ある範囲の星形ブロックコポリマーを、親水性及び疎水性ポリマーブロック間に連結基を伴わずに調製した。先に記載した一般的方法を使用して、ＰＥＧブロックを疎水性ブロックに直接カップリングすることによって（即ち、方法Ｂを伴わず）。得られた星形ブロックコポリマーを表３に示す。
【０１６８】
【表３】
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【０１６９】
[178]ポリマーがゾルからゲルへの転移を受ける温度（ＬＣＳＴ）は、星形コポリマーが、線形の均等物（比較実施例１）より高い温度で液体のままであり、そして生理学的温度（＞３６℃）に達するまでゲル化しないことを示す。これは、非線形ポリマー構造が、ヒトの組織への注射後の薬物送達に対するデポーとして作用することが理想的であることを示唆する。
【０１７０】
Ｆ．水性注射用組成物の調製のための典型的な方法：
[179]リゾチームの放出のためのポリマー溶液を、最初に、精製されたポリマー（０．５８２ｇ）を、１ｇの蒸留水に溶解することよって調製した。ポリマーの溶解は、試料をボルテックスミキサーを使用して一定に混合しながら一晩冷蔵庫（５−１０℃）に入れることによって行った。鶏卵の白身（Ｌ６８７６−１Ｇ，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）からのリゾチーム（６０ｍｇ）を、別個に０．３５８ｇの蒸留水中に溶解し、そして完全に溶解したポリマーの溶液に加え、細いスパチュラを使用して、そして最終的にボルテックスミキサーで混合して、最終的な試料を得た。重量で溶液中の３０％ポリマー及び３％リゾチーム濃度になる０．５ｇの試料−リゾチーム混合物を、それぞれの実験で使用した。
【０１７１】
ポリマー及びリゾチーム溶液の温度処理
[180]幾つかの長期放出研究において、酵素を含有するポリマー溶液を、最初、加熱−冷却サイクルにかけ、そしてポリマーを精製水と徹底的に混合した（順化過程）。毎日、リゾチームを含有するポリマー水溶液を冷蔵庫から出し、細いスパチュラを使用し、そしてその後ボルテックスミキサーで混合した。次いでこれを、３７℃で５−１０分間加熱し、そして冷蔵庫に入れた。この方法を、放出研究の開始前に５日間行った。この方法は、ポリマー鎖、そのミセル及びその後に形成されるポリマーゲルマトリックス間の増加した鎖の絡み合いを促進するために続けた。
【０１７２】
Ｇ．放出研究のための酵素溶液の調製のための典型的方法：
[181]放出研究の結果を、必要な対照と一緒に、それぞれのポリマー試料に対して三重で得た。いずれものリゾチームを含まず、ポリマー及び水を含有する試料を、基線を確立するためのブランクとしてそれぞれのポリマーに対して使用した。小さいガラスのバイアルの底部に分注された０．５ｇの水性のポリマー−リゾチーム混合物を含有する三重のそれぞれの試料を、３７℃で３０分間インキュベートしてから、同じ温度に維持された２ｍＬの１×のリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を加えた。全ての試料を、実験中、穏やかに振盪（５０ｒｐｍ）しながらインキュベーターオーブン中で３７℃に保った。ＰＢＳ緩衝溶液から１ｍＬのアリコートを、分析のために、それぞれの試料から、それぞれの時点で取出し、そして新鮮な１ｍＬの３７℃のＰＢＳで置換えた。放出媒体を、放出リゾチームに対してそれぞれの時点で（１０分、２４時間、４８時間、５日、７日、及び１４日）分析した。ポリマー試料から放出された全溶解性及び酵素的に活性なリゾチームの両方を、商業的に入手可能なキット、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈからのビシンコニン酸（ＢＣＡ）タンパク質アッセイキット及びＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎからのＥｎｚＣｈｅｃｋリゾチームアッセイキットを、それぞれ使用して測定した。新しい補正曲線を、それぞれの実験試料のリゾチーム放出の正確な測定を確実にするために必要な範囲内でそれぞれの時点で構築した。
【０１７３】
[182]図３及び５は、上記の方法によって製造された（Ｐ（ＬＡ７５ＣＬ２５−ＨＤＩ−ＰＥＧ（５５０））４）を含有する組成物からのこのタンパク質の放出特性の幾つかを、従来の技術の線形ポリマープルロニックＦ１２７及びＲｅＧｅｌ（登録商標）を含有する組成物と比較して示す。
【０１７４】
Ｈ．放出研究のための小分子薬物溶液の調製のための典型的方法
ジピリダモール（ＤＰ）によるポリマー調製
[183]２０ｍｇのジピリダモール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ，−Ｍｅｒｉｃｋ）中に溶解し、小さい丸底フラスコ中の中の精製されたポリマー（０．６ｇ）に加えた。ポリマー薬物はジクロロメタン中に完全に溶解した。次いで、ＤＣＭを、均一な混合物から回転蒸発機で、そしていずれもの残留ＤＣＭを高真空ポンプを使用して完全に除去した。次いで、ミリＱ水（１．４ｇ）をポリマー／ＤＰ混合物に加え、５−１０℃で十分に混合して、溶解を援助し、一晩水和させた。
【０１７５】
[184]ジピリダモール放出研究のための媒体は、１００ｇのＰＢＳ溶液を得るために、９３．６ｇの１×ＰＢＳ（７．４ｐＨ）に、２．４ｇのＴｗｅｅｎ８０（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）及び４．０ｇのＣｒｅｍｏｐｈｏｒＥＬ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えることによって調製した。
【０１７６】
ドキソルビシン（ＤＲ）によるポリマー調製
[185]２０ｍｇのドキソルビシン（地域の協力者）を、２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ，−Ｍｅｒｉｃｋ）中に溶解し、小さい丸底フラスコ中の中の精製されたポリマー（０．６ｇ）に加えた。ポリマー薬物は、ジクロロメタン中に完全に溶解した。次いで、ＤＣＭを、均一な混合物から回転蒸発機で、そしていずれもの残留ＤＣＭを高真空ポンプを使用して完全に除去した。次いで、ミリＱ水（１．４ｇ）をポリマー／ＤＰ混合物に加え、５−１０℃で十分に混合して、溶解を援助し、一晩水和させた。
【０１７７】
ジピリダモール（ＤＰ）の放出研究
[186]放出研究の結果を、必要な対照と一緒に、それぞれのポリマー試料に対して三重で得た。いずれもの薬物を含まず、ポリマー及び水を含有する試料を、基線を確立するための対照としてそれぞれのポリマーに対して使用した。小さいガラスのバイアルの底部に分注された０．５ｇの水性のポリマー−ジピリダモール混合物を含有する三重のそれぞれの試料を、穏やか（ｇｅｎｅｒａｌ）に振盪しながら（５０ｒｐｍ）、３７℃で３０分間インキュベートしてから、同じ温度に維持された１０ｍＬの１×のリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を加えた。全ての放出研究の試料を、実験中、穏やかに振盪（５０ｒｐｍ）しながらインキュベーターオーブン中で３７℃に保った。放出媒体から５ｍＬのアリコートを、分析のために、それぞれの試料から、それぞれの時点で取出し、そして試料を新鮮な５ｍＬの３７℃のＰＢＳで補給した。アリコートを、放出ドキソルビシンに対してそれぞれの時点で（１０分、２４時間、４８時間、７、１４、３５、４９、６３、７７及び９１日）分析した。抽出溶媒中のポリマー試料から放出された全可溶性ＤＰを、それぞれの試料採取時間におけるそれぞれの薬物の既知の濃度に対して発生された補正曲線に対して定量した。ＤＰに対するλ＝４０８ｎｍにおける吸光度を、１．０、０．５、０．２５、０．１２５及び０．０６２５ｍｇ／ｍＬの濃度に対してＶａｒｉａｎ５０ＢｉｏＵＶ−可視分光計を使用することによって測定した。
【０１７８】
ドキソルビシン（ＤＲ）に対する放出研究
[187]放出研究の結果を、必要な対照と一緒に、それぞれのポリマー試料に対して三重で得た。いずれもの薬物を含まず、ポリマー及び水を含有する試料を、基線を確立するための対照としてそれぞれのポリマーに対して使用した。小さいガラスのバイアルの底部に分注された０．５ｇの水性のポリマー−ドキソルビシン混合物を含有する三重のそれぞれの試料を、穏やか（ｇｅｎｅｒａｌ）に振盪しながら（５０ｒｐｍ）、３７℃で３０分間インキュベートしてから、同じ温度に維持された１０ｍＬの１×のリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を加えた。全ての放出研究の試料を、実験中、穏やかに振盪（５０ｒｐｍ）しながらインキュベーターオーブン中で３７℃に保った。放出媒体から５ｍＬのアリコートを、分析のために、それぞれの試料から、それぞれの時点で取出し、そして試料を新鮮な５ｍＬの３７℃のＰＢＳで補給した。アリコートを、放出ドキソルビシンに対してそれぞれの時点で（１０分、２４時間、４８時間、７、１４、３５、４９、６３、７７及び９１日）分析した。抽出溶媒中のポリマー試料から放出された全可溶性ＤＲを、それぞれの試料採取時間におけるそれぞれの薬物の既知の濃度に対して発生された補正曲線に対して定量した。ＤＲに対するλ＝４７９ｎｍにおける吸光度を、１．０、０．５、０．２５、０．１２５及び０．０６２５ｍｇ／ｍＬの濃度に対して、Ｖａｒｉａｎ５０ＢｉｏＵＶ−可視分光計を使用することによって測定した。結果を図６に示す。
【０１７９】
[188]各種の他の改変及び／又は変更を、本明細書中に概略記載される本発明の思想から逸脱することなく行うことができることは、理解されるものである。
【図６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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2016522169.tif 000020
2016522169.tif 000021