(57)【要約】  本発明はとりわけ、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、期間もしくは頻度が軽減されるよう、またはその発生が遅延するような投与間隔において、有効用量で定期的に投与される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法。
【請求項２】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、期間もしくは頻度が軽減されるよう、またはその発生が遅延するような投与間隔において、有効用量で定期的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状または特徴が、大動脈拡大、大動脈解離、水晶体転位、僧帽弁逸脱、関節過度可動性、網膜剥離、斜視、白内障、緑内障、閉塞性肺疾患、脊柱側弯症、顎関節障害、硬膜拡張、およびオステオペニアからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記マルファン関連障害が、ロイス−ディーツ症候群、家族性大動脈瘤、大動脈拡張を伴う大動脈二尖弁、家族性水晶体偏位症（水晶体の転位）、僧帽弁逸脱症候群、マルファン体型、先天性拘縮性くも状指趾症（ビールス症候群）、スティックラー症候群、シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群、ヴァイル−マルケザーニ症候群、およびエーラース−ダンロス症候群からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが非経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記非経口投与が、静脈内、皮内、吸入、経皮（局所）、眼内、筋肉内、皮下、筋肉内、および／または経粘膜投与から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、毎月、毎週、毎日、または変動間隔で投与される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約４００〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、１種または複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬と組み合わせて投与される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記１つまたは複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬が、ベータ遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン）、抗凝固剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、配列番号１の機能的等価体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記機能的等価体が、線状ペプチドである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られる７個のアミノ酸に由来するアミノ酸を、少なくとも４個含む配列を含んでおり、該少なくとも４個のアミノ酸が、該天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られるとおりの相対位置を維持している、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記線状ペプチドが、４〜２５個のアミノ酸を含有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のフラグメントである、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記線状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記機能的等価体が、環状ペプチドである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記環状ペプチドが、アミノ酸の間に連結を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記連結が、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）中のＴｙｒ４位およびＰｒｏ７位に対応する残基に位置している、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記連結が、チオエーテル架橋である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記環状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列と、他の点で同一のアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記環状ペプチドが、以下の式
【化８】
2016520592.tif 000011
を有する４，７環化アンジオテンシン（１−７）である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、プロテアーゼ抵抗性、血清安定性、および／または生体利用率を向上させるために、１つまたは複数の化学修飾を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２９】
前記１つまたは複数の化学修飾が、ペグ化を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法。
【請求項３１】
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが、非ペプチドアゴニストである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記非ペプチドアゴニストが、以下の構造
【化９】
2016520592.tif 000012
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが経口投与される、請求項３０から３２のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、その開示全体が参考として本明細書に援用される、２０１３年５月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／８２７，２７１に対して優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
マルファン症候群は、およそ５，０００名の個体に１名の割合で罹患する結合組織障害であり、細胞外マトリックスタンパク質であるフィブリリン−１（ＦＢＮ１）をコードする遺伝子における変異によって引き起こされる遺伝性の常染色体優性疾患である。マルファン症候群は、様々な形で現れ得るものであり、眼組織、心血管組織および骨格組織の１つまたは複数を冒すことが多い。最も深刻なものは、大動脈拡張および大動脈解離をもたらし得る心臓への作用であり、迅速かつ侵襲的な処置を行わないと死に至る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明の以前には、マルファン症候群に対する公知の有効な治療法はなかった。代わりに、マルファン罹患者の処置は、発症した症状の支持処置に限定されていた。
【０００４】
本発明は、とりわけ、マルファン症候群およびマルファン関連障害を含む、結合組織疾患、障害、または状態を処置するための方法および組成物を提供する。本発明は、少なくとも一部には、アンジオテンシン（１−７）ペプチドおよび／またはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが、マルファン症候群および関連結合組織障害の１つまたは複数の症状を処置するために使用することができるという認識に基づいている。アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、本発明の以前には、血管新生（血管組織）を促進するのに有効であることが知られているが、アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、マルファン症候群などの、１つまたは複数の結合組織障害の症状を改善し得ることは知られていなかった。
【０００５】
一部の実施形態では、本発明は、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、期間もしくは頻度が軽減されるよう、またはその発生が遅延するような投与間隔において、有効用量で定期的に投与される。一部の実施形態では、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状または特徴は、大動脈拡大、大動脈解離、水晶体転位、僧帽弁逸脱、関節過度可動性、網膜剥離、斜視、白内障、緑内障、閉塞性肺疾患、脊柱側弯症、顎関節障害、硬膜拡張、およびオステオペニアからなる群から選択される。
【０００６】
マルファン症候群自体の処置の他に、本発明は、様々なマルファン関連障害を処置する方法も提供する。一部の実施形態では、マルファン関連障害は、ロイス−ディーツ症候群、家族性大動脈瘤、大動脈拡張を伴う大動脈二尖弁、家族性水晶体偏位症（水晶体の転位）、僧帽弁逸脱症候群、マルファン体型（Ｍａｒｆａｎ  Ｈａｂｉｔｕｓ）、先天性拘縮性くも状指趾症（ビールス症候群）、スティックラー症候群、シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群、ヴァイル−マルケザーニ症候群、およびエーラース−ダンロス症候群からなる群から選択される。
【０００７】
様々な実施形態によれば、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、様々な経路のいずれかにより、投与することができる。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、非経口投与される。一部の実施形態では、非経口投与は、静脈内、皮内、吸入、経皮（局所）、眼内、筋肉内、皮下、筋肉内、および／または経粘膜投与から選択される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、経口投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、ある投与間隔に従って投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、毎月、毎週、毎日、または変動間隔で投与される。
【０００８】
様々な実施形態は、異なる量のアンジオテンシン（１−７）ペプチドを使用することができるよう企図される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約４００〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１、２、４、６、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０または１，０００μｇ／ｋｇ／日から選択される有効用量で投与される。
【０００９】
一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、マルファン症候群もしくはマルファン関連障害、または１つもしくは複数のこれらの症状を処置するために使用される、１つまたは複数の薬と共に使用することができる。一部の実施形態では、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の１つまたは複数の薬は、ベータ遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン）、抗凝固剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【００１０】
様々なアンジオテンシン（１−７）ペプチドが、様々な実施形態において使用され得ることが企図される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む。
【００１１】
一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、配列番号１の機能的等価体である。一部の実施形態では、機能的等価体は、線状ペプチドである。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られる７個のアミノ酸に由来するアミノ酸を、少なくとも４個含む配列を含んでおり、これらの少なくとも４個のアミノ酸が、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られるとおりのそれらの相対位置を維持している。一部の実施形態では、線状ペプチドは、４〜２５個のアミノ酸を含有する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のフラグメントである。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含有する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する。
【００１２】
一部の実施形態では、機能的等価体は、環状ペプチドである。一部の実施形態では、環状ペプチドは、アミノ酸の間に連結を含む。一部の実施形態では、連結は、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）中のＴｙｒ４位およびＰｒｏ７位に対応する残基に位置している。一部の実施形態では、連結は、チオエーテル架橋である。一部の実施形態では、環状ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列と、他の点で同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、環状ペプチドは、以下の式
【化１】
2016520592.tif 000002
を有する４，７環化アンジオテンシン（１−７）である。
【００１３】
一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ抵抗性、血清安定性、および／または生体利用率を向上させるために、１つまたは複数の化学修飾を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の化学修飾は、ペグ化を含む。
【００１４】
一部の実施形態では、本発明は、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、非ペプチドアゴニストである。一部の実施形態では、非ペプチドアゴニストは、以下の構造
【化２】
2016520592.tif 000003
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、経口投与される。
【００１５】
本出願において使用する場合、用語「約」および「およそ」は、等価なものとして使用される。約／およそを伴うまたは伴わずに本出願において使用される任意の数字は、当業者によって理解される、任意の正常な変動を包含することが意図される。
【００１６】
本発明の他の特徴、目的、および利点は、以下の詳細説明において明らかとなる。しかし、詳細説明は、本発明の実施形態を示すが、例示目的に過ぎず、限定ではないことを理解すべきである。詳細説明から、本発明の範囲内の様々な変更および修正が当業者に明らかになろう。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、６０日間、５００μｇ／ｋｇ／日のＴＸＡ１２７またはプラセボに曝露された野生型またはＦｂｎ１Ｃ１０３９Ｇ＋マウスから生じた心エコー図のデータから決定された、大動脈基部の増大の例示的なグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
定義
本発明が一層容易に理解されるよう、ある種の用語を、以下でまず定義する。以下の用語および他の用語に関する追加の定義が、本明細書全体にわたって記載されている。
【００１９】
アゴニスト：本明細書で使用する場合、用語「アゴニスト」とは、目的のタンパク質の機能に正の影響を及ぼす任意の分子を指す。一部の実施形態では、アゴニストは、直接または間接的に、目的のタンパク質の活性を増強する、強化する、活性化するおよび／または向上させる。特定の実施形態では、アゴニストは、目的のタンパク質と直接相互作用する。こうしたアゴニストは、例えば、タンパク質、化学化合物、低分子、核酸、抗体、薬物、リガンド、または他の薬剤とすることができる。
【００２０】
動物：本明細書で使用する場合、用語「動物」とは、動物界の任意のメンバーを指す。一部の実施形態では、「動物」とは、任意の発達段階にあるヒトを指す。一部の実施形態では、「動物」とは、任意の発達段階にある非ヒト動物を指す。ある種の実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長動物、および／またはブタ）である。一部の実施形態では、動物は、以下に限定されないが、哺乳動物、鳥、爬虫類、両生類、魚、昆虫、および／または蠕虫を含む。一部の実施形態では、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作されている動物、および／またはクローンであってもよい。
【００２１】
およそまたは約：本明細書で使用する場合、興味対象の１つまたは複数の値に適用される用語「およそ」または「約」は、明記されている参照値と同様の値を指す。ある種の実施形態では、用語「およそ」または「約」は、他に明記されない、またはそうでない場合、文脈から明白でない限り、明記されている参照値のどちらかの方向（より大きいまたはより小さい）に、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれ未満の範囲内におさまる、一連の値を指す（そのような数が、可能な値の１００％を超過する場合を除く）。
【００２２】
生物活性な：本明細書で使用する場合、「生物活性な」という言い回しは、生物系において、特に生物において活性を有する任意の作用剤の特徴を指す。例えば、生物に対して投与された場合に、その生物に対して生物的効果を有する作用剤は、生物活性であると考えられる。特定の実施形態では、ペプチドが生物活性である場合、ペプチドの少なくとも１種の生物活性を分担しているそのペプチドの一部分が、「生物活性な」部分と通常呼ばれる。ある種の実施形態では、ペプチドは、内在性の生物活性を有していないが、１つまたは複数の天然に存在するアンジオテンシン化合物の効果を阻害するペプチドが、生物活性であると考えられる。
【００２３】
担体または賦形剤：本明細書で使用する場合、用語「担体」および「賦形剤」とは、医薬製剤の調製に有用である、薬学的に許容される（例えば、ヒトへの投与に安全かつ無毒性の）担体または希釈用物質を指す。例示的な賦形剤には、滅菌水、静菌性注射用水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝溶液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）、滅菌生理食塩水溶液、リンガー溶液、またはデキストロース溶液が含まれる。
【００２４】
剤形：本明細書で使用する場合、用語「剤形」および「単位剤形」とは、処置される患者用の治療剤の物理的な個別単位を指す。それぞれの単位は、所望の治療効果を生じるように計算された、所定量の活性物質を含有する。しかし、組成物の総投与量は、妥当な医学的判断の範囲内で、主治医によって決定されることが理解されよう。
【００２５】
投与レジメン：「投与レジメン」（または「治療レジメン」）とは、その用語を本明細書で使用する場合、通常、ある期間により分けられる、対象に個々に投与される単位用量一式（通常、２回分以上）のことである。一部の実施形態では、所定の治療剤は、１回または複数の用量を含み得る、推奨される投与レジメンを有する。一部の実施形態では、投与レジメンは、それらの各々が同じ長さの期間によって互いに分けられている、複数の用量を含み、一部の実施形態では、投与レジメンが、複数の用量、および個々の用量を分ける少なくとも２つの異なる期間を含む。一部の実施形態では、治療剤は、所定の期間にわたって継続的に投与される。一部の実施形態では、治療剤は、１日１回（ＱＤ）または１日２回（ＢＩＤ）、投与される。
【００２６】
機能的等価体または誘導体：本明細書で使用する場合、用語「機能的等価体」または「機能的誘導体」とは、元の配列のそれと実質的に類似した生物活性（機能または構造のいずれか）を保持している分子を意味する。機能的誘導体または等価体は、天然の誘導体であってもよく、または合成により調製される。例示的な機能的誘導体には、１個または複数のアミノ酸の置換、欠失、または付加を有するアミノ酸配列が含まれるが、但し、タンパク質の生物活性は保存されている条件とする。置換するアミノ酸は、置換されるアミノ酸のそれと類似の物理化学特性を有するのが望ましい。望ましい類似の物理化学特性には、電荷、かさ高さ、疎水性、親水性などが含まれる。
【００２７】
改善する、向上する、または低減する：本明細書で使用する場合、用語「改善する」、「向上する」、もしくは「低減する」、または文法上の等価語は、本明細書に記載されている処置の開始前の同じ個体における測定値、または本明細書に記載されている処置の非存在下における１つの対照個体（または、複数の対照個体）における測定値などの、ベースライン測定値に対する値を指す。「対照個体」とは、処置されている個体とほぼ同じ年齢である（処置されている個体および対照個体における疾患の段階が、同等であることを確実とするため）、処置されている個体と同じ形態の疾患に罹患している個体である。
【００２８】
インビトロ：本明細書で使用する場合、用語「インビトロ」とは、多細胞生物内ではなく、人工環境において、例えば試験管中または反応容器中、細胞培養中などで行われる事象を指す。
【００２９】
インビボ：本明細書で使用する場合、用語「インビボ」とは、ヒトおよび非ヒト動物などの多細胞生物内で行われる事象を指す。細胞をベースとする系の文脈において、この用語は、生存細胞内で行われる事象を指すために使用されてもよい（例えば、インビトロ系の対語として）。
【００３０】
単離された：本明細書で使用する場合、用語「単離された」とは、（１）最初に産生された際に、関連していた少なくとも一部の構成要素から分離された（自然界における、および／または実験環境におけるかどうかにかかわらず）、ならびに／または（２）人間の手によって生成、調製および／もしくは製造された物質および／または実体を指す。単離された物質および／または実体は、それらが最初に関連していた他の構成要素の、少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％、約９９％、実質的に１００％、または１００％から分離されてもよい。一部の実施形態では、単離された作用剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％超、実質的に１００％、または１００％純粋である。本明細書で使用する場合、物質は、他の構成要素を実質的に含まない場合、「純粋」である。本明細書で使用する場合、用語「単離された細胞」とは、多細胞生物中に含有されていない細胞を指す。
【００３１】
予防する：本明細書で使用する場合、用語「予防する」または「予防」とは、疾患、障害、および／または状態の発生に関連して使用する場合、疾患、障害、および／または状態を発症するリスクを低減することを指す。「リスク」の定義を参照されたい。
【００３２】
ポリペプチド：本明細書で使用する用語「ポリペプチド」とは、ペプチド結合を介して一緒に連結されているアミノ酸の連続鎖を指す。この用語は、任意の長さのアミノ酸鎖を指すために使用されるが、当業者は、この用語は長鎖に限定されないこと、およびペプチド結合を介して一緒に連結されている２個のアミノ酸を含む最小の鎖を指すことができることを理解するであろう。当業者に公知の通り、ポリペプチドはプロセシングされてもよく、かつ／または修飾されてもよい。
【００３３】
タンパク質：本明細書で使用する用語「タンパク質」とは、個別の単位として機能する１種または複数のポリペプチドを指す。単一のポリペプチドが個別の機能単位となっており、個別の機能単位を形成するために、他のポリペプチドと永続的または一時的な物理的関連性を必要としない場合、用語「ポリペプチド」および「タンパク質」は、互換的に使用することができる。個別の機能単位が、相互に物理的に関連する２種以上のポリペプチドから構成される場合、用語「タンパク質」とは、物理的にカップリングされており、かつ個別の単位として一緒に機能する、複数のポリペプチドを指す。
【００３４】
リスク：文脈から理解される通り、疾患、障害、および／または状態の「リスク」は、特定の個体が疾患、障害、および／または状態（例えば、マルファン症候群またはマルファン関連障害）を発症する見込みを含む。一部の実施形態では、リスクは、百分率として表現される。一部の実施形態では、リスクは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、最大１００％である。一部の実施形態では、リスクは、参照標本または参照標本の群に関連するリスクに対するリスクとして表現される。一部の実施形態では、参照標本または参照標本の群は、疾患、障害、状態、および／または事象（例えば、マルファン症候群またはマルファン関連障害）の公知のリスクを有する。一部の実施形態では、参照標本または参照標本の群は、特定の個体と同等の個体に由来する。一部の実施形態では、相対リスクは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ超である。
【００３５】
安定性：本明細書で使用する場合、用語「安定な」とは、治療剤が、長期間にわたり、その治療効力を維持する能力（例えば、所期の生物活性および／または物理化学的完全性のすべて、または大部分）を指す。治療剤の安定性、およびそのような治療剤の安定性を維持する医薬組成物の能力は、長期間（例えば、少なくとも１、３、６、１２、１８、２４、３０、３６か月、またはそれ超）にわたり、評価することができる。ある種の実施形態では、本明細書に記載されている医薬組成物は、それと一緒に製剤化される１つまたは複数の治療剤を安定化することができるよう、あるいはその分解を遅延させるか防止することができるよう製剤化される。製剤の文脈において、安定な製剤は、その中の治療剤が、保管時および処理（凍結／解凍、機械的混合、および凍結乾燥など）中に、その物理的および／または化学的完全性、ならびに生物活性を本質的に保持するものである。
【００３６】
対象：本明細書で使用する場合、用語「対象」とは、ヒトまたは任意の非ヒト動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、または霊長動物）を指す。ヒトは、出生前および出生後の形態を含む。多くの実施形態では、対象はヒトである。対象は、患者とすることができ、患者とは、疾患の診断または処置のため、医療提供者を訪問するヒトを指す。用語「対象」は、本明細書では、「個体」または「患者」と互換的に使用される。対象は、疾患または障害に罹患し得るか、または罹患しやすいが、疾患または障害の症状を示してもよく、または示さなくてもよい。
【００３７】
実質的に：本明細書で使用する場合、用語「実質的に」とは、興味対象の特徴または特性の、全体またはほぼ全体の範囲または程度を示す、質的状態を指す。生物学の分野にいる当業者は、生物学的および化学的現象が、あるとしても、完了するおよび／もしくは完全に向かって進む、または絶対的な結果を実現するもしくは回避することはまれであることを理解するであろう。したがって、用語「実質的に」とは、多くの生物学的および化学的現象において、本来備わっている完全性が欠如している可能性をとらえるために、本明細書において使用される。
【００３８】
〜に罹患している：疾患、障害、および／または状態「に罹患している」個体は、疾患、障害、および／または状態と診断されているか、またはそれらの１つもしくは複数の症状を示す。
【００３９】
〜に罹患しやすい：疾患、障害、および／または状態「に罹患しやすい」個体は、疾患、障害、および／または状態と診断されていない。一部の実施形態では、疾患、障害、および／または状態に罹患しやすい個体は、疾患、障害、および／または状態の症状を示さないことがある。一部の実施形態では、疾患、障害、状態、または事象（例えば、筋ジストロフィー）に罹患しやすい個体は、１つまたは複数の以下のものが特徴となり得る。（１）疾患、障害、および／または状態の発症に関連する遺伝子の突然変異；（２）疾患、障害、および／または状態の発症に関連する遺伝子多型；（３）疾患、障害、および／または状態に関連するタンパク質の発現および／または活性の向上および／または減少；（４）疾患、障害、状態、および／または事象の発症に関連する習慣および／または生活スタイル、（５）移植を受けた、受ける予定である、または必要としている。一部の実施形態では、疾患、障害、および／または状態に罹患しやすい個体は、疾患、障害、および／または状態を発症するであろう。一部の実施形態では、疾患、障害、および／または状態に罹患しやすい個体は、疾患、障害、および／または状態を発症しないであろう。
【００４０】
治療有効量：本明細書で使用する場合、治療剤の「治療有効量」という用語は、疾患、障害、および／または状態に罹患しているか、または罹患しやすい対象に投与されると、疾患、障害、および／または状態の症状を処置する、診断する、予防する、および／またはこれらの発生を遅延させるのに十分な量を意味する。治療有効量は、少なくとも１単位用量を含む投与レジメンによって、通常、投与されることは、当業者により理解されよう。
【００４１】
処置すること：本明細書で使用する場合、用語「処置する」、「処置」、または「処置すること」とは、部分的にまたは完全に、特定の疾患、障害および／または状態の１つまたは複数の症状または特徴を軽減する、寛解させる、緩和する、阻害する、予防する、それらの発生を遅延させる、それらの重症度を低減する、および／または発生率を低減するために使用される任意の方法を指す。処置は、疾患に関連する病変を発症するリスクを減少させるために、疾患の徴候を示さない、および／または疾患の初期徴候しか示さない対象に実施することができる。
【００４２】
本発明は、とりわけ、マルファン症候群およびマルファン関連障害などの、結合組織疾患、障害および／もしくは状態を処置する、またはこれらのリスクを低減するための改善された組成物および方法を提供する。
【００４３】
本発明の様々な態様は、以下の項目において詳細に記載されている。項目の使用は、本発明を限定することを意図するものではない。それぞれの項目は、本発明の任意の態様に適用することができる。本出願において、「または」の使用は、他に明記されない限り、「および／または」を意味する。
マルファン症候群
【００４４】
マルファン症候群は、フィブリリン−１（ＦＢＮ−１）遺伝子における、１つまたは複数の変異に起因する、全身性結合組織障害である。こうした変異は、少なくとも１つの共通のもの、正常な範囲を超える１つまたは複数の組織の拡張を伴う一群の様々な症状をもたらす。例えば、マルファン症候群の最も深刻な症状の１つは大動脈拡張であり、心臓組織の伸縮が、機械的安定性およびまたは機械的コンプライアンスが損なわれ、大動脈解離などの不全に至らしめる可能性がある点にまで達することにより引き起こされる。
【００４５】
マルファン症候群は、大部分が、遺伝状態であり、常染色体優性であるが、マルファン罹患者のおよそ２５％が自発変異の結果として疾患を発症すると推測されている。ＦＢＮ１の調節異常により、ＴＧＦ−βシグナル伝達が増加することが推測されている。
【００４６】
マルファン罹患者の多くは、マルファン様体型（以下に記載されている、マルファンの体型）として公知の一連の骨格症状を示す。マルファン様体型または類似の症候性症状の他に、マルファン罹患者は、以下に限定されないが、大動脈拡大、大動脈解離、水晶体転位、僧帽弁逸脱、網膜剥離、斜視、白内障、緑内障、閉塞性肺疾患、脊柱側弯症、顎関節障害、硬膜拡張、およびオステオペニアを含めた、幅広い他の症状を示すことがある。
【００４７】
マルファン罹患者に対する現在の処置は、一般に、症状が生じたときのそれらの症状の処置を含めた、支持処置に限定されている。症候性処置の一例として、マルファン症候群により引き起こされる心臓異常の発症は、大動脈拡張の進行を遅延させるために、心臓をよりゆっくりと、かつそれほど力強くなく拍動させる、ベータ遮断薬により、通常、処置される。大動脈拡張が一旦、進行すると、破裂により数分で死をもたらす恐れがあるので、手術を使用して、心臓が破裂する前に拡張部位を交換することが多い。特定の理論に拘泥することを望むものではないが、マルファン症候群における血管病変は、最終的に大動脈壁劣化をもたらす、機械的コンプライアンスの低下、異常な細胞外マトリックスモデリング、および進行性動脈瘤の発症により現れる結合組織構成の変化を伴うと考えられる。
マルファン様体型
【００４８】
マルファン様体型は、長脚、くも指、および関節の過弛緩（すなわち、関節過度可動性）の症状を通常、含む、マルファン関連障害である。マルファン様体型の罹患者の中で一般的な別の症状には、脊柱側弯症、胸壁異常、扁平足、および口蓋の高度の曲がりが含まれるが、他のものも同様に示されることがある。マルファン様体型の罹患者は、マルファン罹患者の中では一般的な、大動脈および眼に問題が現れる傾向はない。一般に、マルファン様体型を含む骨格の問題は、生命を脅かすものではないが、罹患個体において、かなりの不快感および能力障害さえも引き起こす。
ロイス−ディーツ症候群
【００４９】
ロイス−ディーツ症候群は、常染色体優性遺伝性障害であり、この障害は、脊柱側弯症、関節過度可動性、および心臓の先天的な問題を含む、マルファン症候群と多くの特徴を共有する。しかし、ロイス−ディーツ症候群の遺伝学的基礎は、マルファン症候群の場合のようなＦＢＮ１遺伝子における変異というよりもむしろ、形質転換増殖因子ベータ受容体−１または２（それぞれ、ＴＧＦＢＲ１またはＴＧＦＢＲ２）をコードする遺伝子における１つまたは複数の変異である。
【００５０】
ロイス−ディーツ症候群の罹患者は、マルファン罹患者とは区別される症状を示し得る。これらの症状には、以下に限定されないが、離れた目、口蓋裂、内反尖足および皮膚の半透明が含まれる。マルファン症候群の場合と同様に、この障害に対する公知の治癒法はなく、大動脈瘤および大動脈解離を含む心臓異常は、ロイス−ディーツの最も深刻な影響である。
先天性拘縮性くも状指趾症（ビールス症候群）
【００５１】
ビールス症候群は、マルファン症候群に内在するＦＢＮ−１変異とは対照的に、フィブリリン−２（ＦＢＮ−２）遺伝子における１つまたは複数の変異をその遺伝的基礎として有する、マルファン関連障害である。ビールス症候群罹患者は、通常、肘および／または膝などの大関節の中程度の拘縮から大きな拘縮までの範囲の程度を含め、出生時に拘縮があり、脊柱側弯症、および時として脊柱後弯症さえももたらす。重症な拘縮は、通常、手術により処置される。
【００５２】
ビールス症候群の罹患者は、拘縮を伴う長くて細い手指および足指を通常、有しており、指趾を真っ直ぐにするのが制限されている、または妨げられていることさえある。同様に、罹患者は、しわだらけに見える通常ではない耳を有することが多く、しばしば膝において、関節転位（膝蓋骨転位）があることがある。一部の場合、拘縮は、出生時から存在していることがあり、経時的に重症度が軽減するが、一部の罹患者は、拘縮が有意に軽減しない。一部の場合、拘縮は、長骨が骨折するほど深刻なことがあるが、これは一般的ではない。
【００５３】
ビールス症候群は、しわだらけの耳、およびマルファン罹患者において通常、観察されないものである、他の先天性拘縮の観察により診断され得る。さらに、ビールス罹患者には、マルファン罹患者において見られる、眼および心血管の合併症は、通常、現れない。
スティックラー症候群
【００５４】
スティックラー症候群は、結合組織、具体的にはコラーゲンのマルファン関連障害である。スティックラー症候群は、独特な顔面の異常、眼の問題および関節の問題によって最も特徴付けられることが多い。マルファン症候群とは異なり、スティックラー罹患者において、２つ以上の遺伝子が冒され得るように思われる。ＣＯＬ２Ａ１、ＣＯＬ１１Ａ１、ＣＯＬ１１Ａ２、およびＣＯＬ９Ａ１遺伝子における変異がすべて報告されており、ＣＯＬ２Ａ１における変異が、最も一般的である（スティックラー罹患者の約７５％に認められる）。
【００５５】
スティックラー症候群に特有の特徴は、扁平な顔面の外観である。これは、ほお骨および鼻筋を含む、顔の中央部における未発達の骨により引き起こされると考えられている。スティックラー罹患者には、ピエールロバン連鎖として公知の一連の症状を示すことも一般的である。このピエールロバン連鎖には、Ｕ形状、またはＶ形状にもなる口蓋裂、小さな下顎、および小さな下顎により形成される空間に対して大きすぎる舌が含まれる。スティックラー罹患者には、ピエールロバン連鎖による、気道の閉塞を有することもやや一般的である。
【００５６】
スティックラー罹患者のために使用される最も一般的な処置は、顎顔面の欠陥を矯正する、および閉塞気道をなくすための手術である。さらに、解剖学的奇形による不快感を緩和するために、疼痛薬が時として必要である。
シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群
【００５７】
シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群（ＳＧＳ）は、頭蓋骨癒合、多発性腹部ヘルニア、認知障害、および他の骨格奇形を通常、含む、非常に希な、多発性異常症候群である。障害の原因に関しては不確かであり、一部の報告では、ＦＢＮ１遺伝子に発生を関連付けており、他のものはこうした因果関係を見出していない。
【００５８】
マルファン症候群とは対照的に、ＳＧＳ罹患者は、認知性欠陥、ならびに肺水腫および側脳室の拡張などの脳の異常を示す。診断は、ＳＧＳ罹患者はまた、僧帽弁逸脱、大動脈弁逆流、およびくも指、脊柱側弯症、関節過度可動性を含む骨格異常を含めた、心血管奇形を示し得るという事実によって、時として複雑であり、マルファン症候群または他のマルファン関連障害よりも診断が、時として困難である。
【００５９】
他のマルファン関連障害の場合と同様に、ＳＧＳの処置は、手術、理学療法、および疼痛管理を含む、対症処置に限られる。
ヴァイル−マルケザーニ症候群
【００６０】
ヴァイル−マルケザーニ症候群（ＷＭＳ）は、短身、広い頭部、ならびに短い手指および小さく特に転位しやすい眼の球状水晶体を含めた、他の顔面および手の異常により特徴付けられる、マルファン関連結合組織障害である。男性の罹患者の平均身長は、４フィート８インチから５フィート６インチの間である一方、女性の罹患者は、４フィート３インチから５フィート２インチの間の範囲になる傾向がある。
【００６１】
ＷＭＳ罹患者は、そのＦＢＮ１遺伝子における変異を有することがあるが、ＡＤＡＭＴＳ１０遺伝子における変異も一般的であり、ＷＭＳ罹患者が、そのＦＢＮ１またはＡＤＡＭＴＳ１０遺伝子のどちらにも変異を有していない場合がある。報告された症例は、常染色体優性徴候と常染色体劣性徴候の両方を有する。この遺伝的なばらつきの結果として、ＷＭＳの原因は、理解に乏しい。いくつかのマルファン関連障害と同様に、処置は本質的にほとんど支持的なものであり、公知の治癒法は存在しない。
エーラース−ダンロス症候群
【００６２】
エーラース−ダンロス症候群は、コラーゲン（Ｉ型またはＩＩＩ型）の合成における、１つまたは複数の欠陥により特徴付けられる、マルファン関連結合組織障害である。欠陥の重症度は、特定の臨床的徴候に応じて、温和または生命を脅かし得る、幅広い範囲の症状をもたらす。これらの症状は、過屈曲性関節、脊柱側弯症、および様々な心血管異常を含む、他のマルファン関連症候群において観察されるものに類似している。他のマルファン関連障害と同様に、治癒法はなく、処置は本質的に支持的なものである。
【００６３】
マルファン症候群とは異なり、エーラース−ダンロス罹患者はまた、容易に裂ける脆い皮膚、異常な創傷治癒、ならびに前腕および／または脛の脂肪成長を含む、様々な皮膚関連状態を示し得る。エーラース−ダンロス罹患者により示される症状の範囲は、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ１Ａ２、ＣＯＬ３Ａ１、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、およびＴＮＸＢを含めた障害の発症において役割を果たし得る、幅広い範囲の遺伝的異常によるものとすることができる。これらの遺伝子の変異は、適切なコラーゲンの構造、プロセシングまたは産生の１つまたは複数に影響を及ぼすことが知られている。
家族性大動脈瘤
【００６４】
家族性大動脈瘤は、マルファン罹患者において現れることが多い、マルファン関連障害である。これは、大動脈の常染色体優性障害である。家族性大動脈瘤は、マルファン症候群に内在するものなどの遺伝的異常の他に、正常な加齢によって引き起こされる恐れがある、コラーゲン、エラスチンおよび平滑筋の断裂により引き起こされる。大動脈瘤により、速やかに死に至る恐れがある、大動脈解離のリスクが有意に増加する。
大動脈拡張を伴う大動脈二尖弁
【００６５】
大動脈二尖弁は、大動脈弁の弁膜の２つが癒着している状態であり、正常な大動脈三尖弁とは対照的に、二尖弁となる。大動脈二尖弁から起こる合併症は、心雑音から大動脈弁狭窄症、または大動脈弁逆流にもなる、範囲のものである。二尖弁は、マルファン症候群に伴うことが多い状態であり、したがって、本明細書では、マルファン関連障害と見なされる。
水晶体偏位症（水晶体の転位）
【００６６】
水晶体偏位症は、眼の水晶体が、その正常な位置から偏位する、マルファン関連障害である。水晶体偏位症は、様々な原因を有し得るが、マルファン罹患者間では、より高い頻度で遺伝している。部分的な転位はまた、水晶体亜脱臼とも呼ぶことができる一方、完全な転位は、水晶体脱臼とも呼ぶことができる。水晶体偏位症は、近視、乱視（眼の不規則な弯曲）、および不安定な視力または霧視を含めて、いくつかが困難になる。
僧帽弁逸脱症候群
【００６７】
僧帽弁逸脱は、収縮期中の、異常に厚い僧帽弁膜が左心室に偏位することにより特徴付けられる。僧帽弁逸脱は、重症度はかなり変動し得るが、重症な形態は、僧帽弁逆流、うっ血性心不全、および心停止さえ起こり得る。依然として明確ではない理由のために、僧帽弁逸脱は、一般集団よりもマルファン罹患者において一般的であり、本明細書では、僧帽弁逸脱をマルファン関連障害と見なす。
アンジオテンシン（１−７）ペプチド
【００６８】
本明細書で使用する場合、用語「アンジオテンシン（１−７）ペプチド」とは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）と、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）の任意の機能的等価体、アナログ、または誘導体の両方を指す。本明細書で使用する場合、「ペプチド」および「ポリペプチド」とは、互換的な用語であり、ペプチド結合によって一緒に結合している２個またはそれ超のアミノ酸を指す。本明細書で使用する場合、用語「ペプチド」および「ポリペプチド」には、線状ペプチドと環状ペプチドの両方が含まれる。用語「アンジオテンシン（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ）−（１−７）」、「アンジオテンシン（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ）−（１−７）」および「Ａｎｇ−（１−７）」は、互換的に使用される。
天然に存在するアンジオテンシン（１−７）
【００６９】
天然に存在するアンジオテンシン（１−７）（Ａｎｇ−（１−７）とも呼ばれる）は、以下に示される７個のアミノ酸ペプチドである。
【００７０】
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）
【００７１】
それは、レニン−アンジオテンシン系の一部であり、アンジオテンシノーゲンとしても公知である前駆体から変換されるものであり、アンジオテンシノーゲンは、主に肝臓によって構成的に産生され、血液循環の中に放出されるα−２−グロブリンである。アンジオテンシノーゲンは、セルピンファミリーのメンバーであり、レニン基質としても公知である。ヒトアンジオテンシノーゲンは、４５２個のアミノ酸長であるが、他の種は、様々なサイズのアンジオテンシノーゲンを有する。通常、最初の１２個のアミノ酸は、アンジオテンシン活性にとって最も重要である。
【００７２】
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０−Ｖａｌ１１−Ｉｌｅ１２（配列番号３）。
【００７３】
異なるタイプのアンジオテンシンは、様々な酵素の作用によって形成され得る。例えば、アンジオテンシン（１−７）は、アンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）の作用によって産生される。
【００７４】
Ａｎｇ−（１−７）は、Ｍａｓ受容体に対する内因性リガンドである。Ｍａｓ受容体は、７つの膜貫通領域を含有するＧ−タンパク質共役型受容体である。本明細書で使用する場合、用語「アンジオテンシン−（１−７）受容体」は、Ｇタンパク質共役型Ｍａｓ受容体を包含する。
【００７５】
本明細書で使用する場合、用語「天然に存在するアンジオテンシン（１−７）」には、天然源から精製された任意のアンジオテンシン（１−７）ペプチドおよび天然に存在するアンジオテンシン（１−７）と同一のアミノ酸配列を有する、任意の組換え産生されたかまたは化学的に合成されたペプチドが含まれる。
Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価体、アナログ、または誘導体
【００７６】
一部の実施形態では、本発明に適したアンジオテンシン（１−７）ペプチドは、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体である。本明細書で使用する場合、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に対してアミノ酸配列の同一性を共有し、かつ天然に存在するＡｎｇ−（１−７）と同じまたは類似する活性を実質的に保持する任意のペプチドを指す。例えば、一部の実施形態では、本明細書に記載されている天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体は、本明細書に記載されているか、もしくは当分野において公知の方法を使用して決定される血管新生促進活性、または一酸化窒素放出、血管拡張、内皮機能の改善、抗利尿、もしくは血管新生に正の影響を及ぼす、本明細書において議論されている他の特性の１つなどの活性を有する。一部の実施形態では、本明細書に記載されている天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体は、本明細書に記載されているかまたは当分野において公知の様々なアッセイを使用して決定される、アンジオテンシン−（１−７）受容体（例えば、Ｇタンパク質共役型Ｍａｓ受容体）に結合するか、またはそれを活性化することができる。一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価体は、アンジオテンシン（１−７）アナログ、または誘導体、または機能的誘導体とも呼ばれる。
【００７７】
通常、アンジオテンシン（１−７）の機能的等価体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に対してアミノ酸配列の類似性を共有する。一部の実施形態では、本発明によるＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に見られる７個のアミノ酸に由来するアミノ酸を、少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個）含む配列を含有しており、この場合、少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、または少なくとも７個）のアミノ酸が、それらが天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に見られる、それらの相対的な位置および／または間隔を維持している。
【００７８】
一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）の機能的等価体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）のアミノ酸配列と少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％または９０％）が同一な配列を含有する、任意のペプチドも包含する。アミノ酸配列同一性の百分率は、アミノ酸配列のアライメントによって決定することができる。アミノ酸配列のアライメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの、公的に入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当分野の技術の範囲内にある様々な方法で実現することができる。当業者は、比較される完全長の配列に対して最大限のアライメントを実現するために必要とする任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。好ましくは、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２ソフトウェアは、アミノ酸配列の同一性を決定するために使用される（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、２６６巻、４６０〜４８０頁（１９９６年）；ｈｔｔｐ：／／ｂｌａｓｔ．ｗｕｓｔｌ／ｅｄｕ／ｂｌａｓｔ／ＲＥＡＤＭＥ．ｈｔｍｌ）。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２では、いくつかの検索パラメータが使用され、これらのパラメータの大部分は、デフォルト値に設定されている。調整可能なパラメータは、以下の値により設定される：オーバーラップスパン（ｏｖｅｒｌａｐ  ｓｐａｎ）＝１、オーバーラップフラクション（ｏｖｅｒｌａｐ  ｆｒａｃｔｉｏｎ）＝０．１２５、ワード閾値（ｗｏｒｄ  ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）（Ｔ）＝１１。ＨＳＰスコア（Ｓ）およびＨＳＰ  Ｓ２パラメータは、動的な値であり、特定の配列の組成に応じて、プログラム自体によって確立されるが、最小値は、上記に示されている通り、調整して設定することができる。
【００７９】
一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価体、アナログ、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）のフラグメントである。一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価体、アナログ、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）において、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含有する。Ａｎｇ−（１−７）機能的等価体、アナログ、または誘導体は、置換、付加、および／または欠失によりアミノ酸配列を改変することによって作製することができる。例えば、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）（配列番号１）の配列内の１個または複数のアミノ酸残基は、類似した極性の別のアミノ酸によって置換することができ、これは機能的等価体として作用し、サイレント改変をもたらす。配列内のアミノ酸に対する置換は、アミノ酸が属するクラスの他のメンバーから選択されてもよい。例えば、正に荷電している（塩基性）アミノ酸には、アルギニン、リシン、およびヒスチジンが含まれる。非極性（疎水性）アミノ酸には、ロイシン、イソロイシン、アラニン、フェニルアラニン、バリン、プロリン、トリプトファン、およびメチオニンが含まれる。非荷電極性アミノ酸には、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、およびグルタミンが含まれる。負に荷電している（酸性）アミノ酸には、グルタミン酸およびアスパラギン酸が含まれる。アミノ酸のグリシンは、非極性アミノ酸ファミリーまたは非荷電（中性）極性アミノ酸ファミリーのいずれかに含まれていてもよい。アミノ酸のファミリー内で行われる置換は、保存的置換であることが一般に理解される。例えば、ペプチド阻害剤のアミノ酸配列は、修飾または置換することができる。
【００８０】
Ａｎｇ−（１−７）機能的等価体、アナログ、および誘導体の例は、以下の「例示的なアンジオテンシン（１−７）ペプチド」と題する項目に記載されている。
【００８１】
アンジオテンシン−（１−７）ペプチドは、任意の長さとすることができる。一部の実施形態では、本発明によるアンジオテンシン−（１−７）ペプチドは、例えば、４〜２５個のアミノ酸（例えば、４〜２０、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、４〜７個のアミノ酸）を含有することができる。一部の実施形態では、線状ペプチドは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５個のアミノ酸を含有する。
【００８２】
一部の実施形態では、アンジオテンシン−（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ抵抗性、血清安定性、および／または生体利用率を向上させるために、１つまたは複数の修飾を含有する。一部の実施形態では、適切な修飾は、ペグ化、アセチル化、グリコシル化、ビオチン化、Ｄ−アミノ酸および／もしくは非天然アミノ酸による置換、ならびに／またはペプチドの環化から選択される。
【００８３】
本明細書で使用する場合、用語「アミノ酸」とは、その最も広範な意味において、ポリペプチド鎖の中に組み込むことができる任意の化合物および／または物質を指す。ある種の実施形態では、アミノ酸は、一般的な構造Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｈ）（Ｒ）−ＣＯＯＨを有する。ある種の実施形態では、アミノ酸は、天然に存在するアミノ酸である。ある種の実施形態では、アミノ酸は、合成または非天然アミノ酸（例えばα，α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸）であり、一部の実施形態では、アミノ酸はｄ−アミノ酸であり、ある種の実施形態では、アミノ酸はｌ−アミノ酸である。「標準アミノ酸」とは、天然のペプチド中に両方が組み込まれているｌ−アミノ酸とｄ−アミノ酸の両方を含めて、天然に存在するペプチドにおいて一般に見出される２０個の標準アミノ酸のいずれかを指す。「非標準」または「非慣用アミノ酸」とは、それが合成して調製されるか、または天然源から得られるかどうかにかかわらず、標準アミノ酸以外の、任意のアミノ酸を指す。本明細書で使用する場合、「合成または非天然アミノ酸」は、以下に限定されないが、塩、アミノ酸誘導体（アミドなど）、および／または置換体を含む、化学的に修飾されているアミノ酸を包含する。ペプチド中にカルボキシおよび／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、および／またはその活性に悪影響を及ぼすことなく、ペプチドの循環半減期を変化させることができる他の化学基による置換によって修飾することができる。非慣用または非天然アミノ酸の例には、以下に限定されないが、シトルリン、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、４−（Ｅ）−ブテニル−４（Ｒ）−メチル−Ｎ−メチルトレオニン（ＭｅＢｍｔ）、Ｎ−メチル−ロイシン（ＭｅＬｅｕ）、アミノイソ酪酸、スタチン、およびＮ−メチル−アラニン（ＭｅＡｌａ）が含まれる。アミノ酸は、ジスルフィド結合に関与していてもよい。用語「アミノ酸」は、「アミノ酸残基」と互換的に使用され、遊離アミノ酸および／またはペプチドのアミノ酸残基を指すことができる。それが遊離アミノ酸またはペプチドの残基を指すかどうかは、用語が使用されている文脈から明らかとなろう。
【００８４】
ある種の実施形態では、アンジオテンシン−（１−７）ペプチドは、１個または複数のＬ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、および／または非天然アミノ酸を含有する。
【００８５】
天然に存在するアミノ酸のみを含有するペプチドに加えて、ペプチド模倣薬またはペプチドアナログもまた、本発明によって包含される。ペプチドアナログは、鋳型ペプチドのそれと類似する特性を有する非ペプチド薬物として製薬産業において一般に使用されている。非ペプチド化合物は、「ペプチドミメティック」またはペプチド模倣薬と称される（Ｆａｕｃｈｅｒｅら、Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．５４巻：２８３〜２８７頁（１９８６年）；Ｅｖａｎｓら、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．３０巻：１２２９〜１２３９頁（１９８７年））。治療上有用なペプチドと構造的に関連するペプチドミメティックは、等価なまたは増強された治療的または予防的効果をもたらすように使用することができる。一般に、ペプチド模倣薬は、天然に存在する受容体結合ポリペプチドなどのパラダイムポリペプチド（ｐａｒａｄｉｇｍ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）（すなわち、生物活性または薬理学的活性を有するポリペプチド）に構造的に類似しているが、当分野において周知の方法による−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＨ２ＳＯ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＯＣＨ２−などの連結によって、場合により置き換えられている１個または複数のペプチド連結を有する（Ｓｐａｔｏｌａ、Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ、１巻（３号）：２６７頁（１９８３年）；Ｓｐａｔｏｌａら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．３８巻：１２４３〜１２４９頁（１９８６年）；Ｈｕｄｓｏｎら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  Ｒｅｓ．１４巻：１７７〜１８５頁（１９７９年）；およびＷｅｉｎｓｔｅｉｎ．  Ｂ．、１９８３年、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ、Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ）。そのようなペプチドミメティックは、より経済的な産生、より高い化学安定性、増強されている薬理学的特性（例えば、半減期、吸収、効力、効率など）、低下した抗原性などを含む、天然に存在するポリペプチドにまさる、有意な利点を有することがある。
【００８６】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドはまた、ペプチドの正常な一部ではない、追加の化学部位を含有する、他のタイプのペプチド誘導体も含むが、但し、その誘導体は、ペプチドの所望の機能的な活性を保持していることを条件とする。そのような誘導体の例には、（１）アシル基が、アルカノイル基（例えば、アセチル、ヘキサノイル、オクタノイル）、アロイル基（例えば、ベンゾイル）、またはＦ−ｍｏｃ（フルオレニルメチル−Ｏ−ＣＯ−）などのブロック基とすることができる、アミノ末端または別の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体、（２）カルボキシ末端または別の遊離カルボキシ基もしくは遊離ヒドロキシル基のエステル、（３）アンモニアまたは適切なアミンとの反応によって生成するカルボキシ末端または別の遊離カルボキシル基のアミド、（４）リン酸化誘導体、（５）抗体または他の生物的リガンドにコンジュゲートされている誘導体および他のタイプの誘導体、ならびに（６）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖にコンジュゲートされている誘導体が含まれる。
【００８７】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、合成技法（例えば、完全固相合成法（ｅｘｃｌｕｓｉｖｅ  ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、部分的固相合成法、フラグメント縮合、古典的な溶液合成、ネイティブケミカルライゲーション）および組換え技法を含む、当業者に公知のペプチド合成のいかなる方法によっても得ることができる。例えば、ペプチドまたはペプチド誘導体は、固相ペプチド合成によって得ることができ、これは、手短に言えば、Ｃ−末端アミノ酸のカルボキシル基を樹脂（例えば、ベンズヒドリルアミン樹脂、クロロメチル化樹脂、ヒドロキシメチル樹脂）にカップリングし、連続的にＮ−α保護アミノ酸を添加することからなる。保護基は、当分野において公知のいかなるそのような基とすることができる。新たなアミノ酸の各々が成長中の鎖に添加される前に、該鎖に添加された前のアミノ酸の保護基が除去される。そのような固相合成法は、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．８５巻：２１４９頁（１９６４年）；Ｖａｌｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２１３巻：１３９４〜１３９７頁（１９８１年）により、米国特許第４，３０５，８７２号および米国特許第４，３１６，８９１号、Ｂｏｄｏｎｓｋｙら、Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｄ．（Ｌｏｎｄｏｎ）、３８巻：１５９７頁（１９６６年）；ならびにＰｉｅｔｔａおよびＭａｒｓｈａｌｌ、Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍ．６５０頁（１９７０年）において、Ｌｕｂｅｌｌらの「Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２１．１１、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｄｅｓ．  Ｔｈｉｅｍｅ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、７１３〜８０９頁（２００５年）において概説されている技法により開示されている。適切な樹脂へのアミノ酸のカップリングは、当分野において周知でもあり、米国特許第４，２４４，９４６号において開示されている（Ｈｏｕｖｅｒ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．、Ｅ２２ａ巻、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ、編集主任Ｍｕｒｒａｙ  Ｇｏｏｄｍａｎ、Ｔｈｉｅｍｅ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ．  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ２００２年において概説されている）。
【００８８】
他に定義されていない限り、本明細書で使用されている科学用語および技術用語および命名は、本発明が関係する当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。一般に、細胞培養、感染、分子生物学的方法などの手順が、当分野において使用される一般的な方法である。そのような標準的技法は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２００１年；およびＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第３版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．、２００１年などの参照手引書において見出すことができる。
【００８９】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドの調製の任意の過程の間に、関係するいずれかの分子上の感受性反応基を保護することが望ましいことがある。これは、Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．  ＷｕｔｓによるＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９９１年、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ、ならびにＳｅｗａｌｄおよびＪａｋｕｂｋｅによる、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２００２年、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、Ｗｈｅｉｎｈｅｉｍ、１４２頁において記載されているものなどの、従来の保護基によって実現することができる。例えば、αアミノ保護基には、アシル型保護基（例えば、トリフルオロアセチル、ホルミル、アセチル）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、シクロヘキシルオキシカルボニル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、フルオレニル−９−メトキシ−カルボニル（Ｆｍｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、Ｃｂｚ誘導体）、およびアルキル型保護基（例えば、トリフェニルメチル、ベンジル）が含まれる。アミノ酸側鎖の保護基には、ベンジル（ＴｈｒおよびＳｅｒ用）、Ｃｂｚ（Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ）、メチルエチル、シクロヘキシル（Ａｓｐ、Ｈｉｓ）、Ｂｏｃ（Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｃｙｓ）などが含まれる。保護基は、当分野において公知の方法を使用して、後続の好都合な段階で除去することができる。
【００９０】
さらに、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、保護基を含む有機相において、ＦＭＯＣプロトコルに従って合成することができる。望ましくは、このペプチドは、Ｃ１８クロマトグラフィーカラム上で高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により収率７０％で精製され、１０〜６０％のアセトニトリルグラジエントにより溶出される。ペプチドの分子量は、質量分析法によって確認することができる（Ｆｉｅｌｄｓ，  Ｇ．Ｂ．「Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、２８９巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９９７年において概説されている）。
【００９１】
あるいは、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、例えば、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を使用して、組換え系において調製することができる。ポリペプチドは、同じポリペプチド内に、上記修飾を２箇所以上、含有してもよいことが理解される。
【００９２】
ペプチドは、インビトロにおいて生物活性を誘発するのに有効なことがあるが、インビボにおけるそれらの有効性は、プロテアーゼの存在によって低下し得る。血清プロテアーゼは、特異的な基質要件を有する。この基質は、Ｌ−アミノ酸と開裂に対するペプチド結合の両方を有していなければならない。さらに、エキソペプチダーゼは、血清におけるプロテアーゼ活性の最も顕著な構成要素に相当し、通常、ペプチドの第１のペプチド結合に作用し、遊離Ｎ−末端を必要とする（Ｐｏｗｅｌｌら、Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．１０巻：１２６８〜１２７３頁（１９９３年））。この点を考慮すると、ペプチドの修飾版を使用するのが有利であることが多い。修飾ペプチドは、Ａｎｇ−（１−７）の所望の生物活性を与える、元のＬ−アミノ酸ペプチドの構造的な特徴を保持するが、有利には、プロテアーゼおよび／またはエキソペプチダーゼによる開裂に対して容易に影響を受けない。
【００９３】
同じタイプのＤ−アミノ酸（例えば、Ｌ−リシンの代わりにＤ−リシン）を含むコンセンサス配列の１個または複数のアミノ酸の体系的な置換を使用して、より安定なペプチドを生成することができる。したがって、本発明のペプチド誘導体またはペプチド模倣薬は、順方向または逆方向の順序のどちらかで、すべてＬのペプチド、すべてＤのペプチド、またはＤ、Ｌのペプチドの混合とすることができる。ペプチダーゼがＤ−アミノ酸を基質として利用することができないので、Ｎ−末端またはＣ−末端のＤ−アミノ酸の存在により、ペプチドのインビボ安定性が向上する（Ｐｏｗｅｌｌら、Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．１０巻：１２６８〜１２７３頁（１９９３年））。逆方向のＤペプチドは、Ｌ−アミノ酸を含有するペプチドに対して、逆方向の配列で配置されているＤ−アミノ酸を含有するペプチドである。したがって、Ｌ−アミノ酸ペプチドのＣ−末端残基は、Ｄ−アミノ酸ペプチドにとってＮ−末端などになる。逆方向のＤ−ペプチドは、Ｌ−アミノ酸ペプチドと同じ二次的な立体配座を、したがって、同様の活性を保持するが、インビトロおよびインビボにおける酵素的分解に対してより抵抗性があり、したがって、元のペプチドよりも大きな治療効力を有することができる（ＢｒａｄｙおよびＤｏｄｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：６９２〜６９３頁（１９９４年）；Ｊａｍｅｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：７４４〜７４６頁（１９９４年））。同様に、逆方向のＬペプチドは、標準的な方法を使用して生成することができ、この場合、親ペプチドのＣ−末端は、逆方向のＬペプチドのＮ−末端の場所をとるようになる。重要な二次構造を有していない（例えば、短鎖ペプチド）、Ｌ−アミノ酸ペプチドの逆方向のＬ−ペプチドは、Ｌ−アミノ酸ペプチドの側鎖と同じ間隔および立体配座を保持しており、それ故に、多くの場合、元のＬ−アミノ酸ペプチドと同様の活性を有することが考えられる。さらに、逆方向のペプチドは、Ｌ−およびＤ−アミノ酸の組合せを含有してもよい。アミノ酸の間の間隔および側鎖の立体配座は保持され、これにより、元のＬ−アミノ酸ペプチドと同様の活性をもたらし得る。
【００９４】
ペプチドのＮ−末端またはＣ−末端残基に作用するペプチダーゼに対する抵抗性を与える別の有効な手法は、ペプチド末端に化学基を追加することであり、その結果、この修飾ペプチドは、もはやペプチダーゼに対する基質ではない。そのような化学修飾の１つは、一方または両方の末端におけるペプチドのグリコシル化である。ある種の化学修飾、特に、Ｎ−末端グリコシル化は、ヒト血清におけるペプチドの安定性を向上することが示されている（Ｐｏｗｅｌｌら、Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．１０巻：１２６８〜１２７３頁（１９９３年））。血清安定性を強化する他の化学修飾には、以下に限定されないが、アセチル基などの１〜２０個の炭素の低級アルキルからなるＮ−末端アルキル基の追加、および／またはＣ−末端アミド基もしくは置換アミド基の追加が含まれる。特に、本発明は、Ｎ−末端アセチル基および／またはＣ−末端アミド基を有するペプチドからなる修飾ペプチドを含む。
【００９５】
ペプチドの部分配列（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｃｅ）における天然アミノ酸を天然に存在しないアミノ酸に置換すると、やはりタンパク質分解に対する抵抗性が付与され得る。そのような置換は、例えば、生物活性に影響を及ぼすことなく、Ｎ−末端に作用するエキソペプチダーゼによるタンパク質分解に対する抵抗性を付与することができる。天然に存在しないアミノ酸の例には、α，α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、Ｃ−α−メチルアミノ酸、β−アミノ酸、およびβ−メチルアミノ酸が含まれる。本発明において有用なアミノ酸アナログは、以下に限定されないが、β−アラニン、ノルバリン、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、オルニチン（ｏｒｉｔｈｉｎｅ）、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、システイン酸、シクロヘキシルアラニン、２−アミノイソ酪酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、フェニルグリシン、ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、および他の非慣用アミノ酸を含むことができる。さらに、天然に存在しないアミノ酸を有するペプチドの合成は、当分野において決まった手順である。
【００９６】
さらに、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列の変異を含む、拘束性ペプチドは、当分野で周知の方法によって生成することができる（ＲｉｚｏおよびＧｉｅｒａｓｃｈ、Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１巻：３８７〜４１８頁（１９９２年））。例えば、拘束性ペプチドは、ジスルフィド架橋を形成することができるシステイン残基を追加することによって生成され、それによって、環状ペプチドをもたらすことができる。環状ペプチドは、遊離Ｎ−末端またはＣ−末端を有しないように構築することができる。したがって、環状ペプチドは、エンドペプチターゼに対して影響を受け得るが、エキソペプチダーゼによるタンパク質分解に対して影響を受けず、ペプチド末端において開裂しない。Ｎ−末端またはＣ−末端Ｄ−アミノ酸を有するペプチド、および環状ペプチドのアミノ酸配列は、それぞれ、Ｎ−末端もしくはＣ−末端Ｄ−アミノ酸残基の存在またはそれらの環式構造を除いて、それらが対応するペプチドの配列と、通常、同一である。
環状ペプチド
【００９７】
一部の実施形態では、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価体、アナログ、または誘導体は、環状ペプチドである。本明細書で使用する場合、環状ペプチドは、隣接していない２つの残基の間に分子内共有結合を有する。分子内結合は、主鎖と主鎖、側鎖と主鎖、または側鎖と側鎖の結合であってよい（すなわち、線状ペプチドの末端官能基、および／または末端もしくは内部残基の側鎖官能基が、連結して環化を達成することができる）。通常の分子内結合には、ジスルフィド結合、アミド結合、およびチオエーテル結合が含まれる。こうしたペプチドに行うことができる多数の他の修飾と同様に、ポリペプチドを環化するための様々な手段が、当分野において周知である。一般的な議論に関すると、それらの内容が参照により本明細書に組み込まれている、国際特許出願番号ＷＯ０１／５３３３１およびＷＯ９８／０２４５２を参照されたい。こうした環式結合および他の修飾も、本発明の環状ペプチドおよび誘導体化合物に適用することができる。
【００９８】
本明細書に記載されている環状ペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、またはそれらの任意に組み合わせた残基を含むことができる。アミノ酸は、天然源または非天然源に由来することができるが、但し、少なくとも１つのアミノ基および少なくとも１つのカルボキシル基が、分子内に存在していることを条件とし、α−およびβ−アミノ酸が、一般に好ましい。環状ペプチドはまた、幅広い様々な側鎖修飾および／もしくは置換（例えば、メチル化、ベンジル化、ｔ−ブチル化、トシル化、アルコキシカルボニル化など）を伴うかまたは伴わない、１個または複数の希アミノ酸（４−ヒドロキシプロリンまたはヒドロキシリシンなど）、有機酸もしくはアミド、および／または一般的なアミノ酸の誘導体（エステル化（例えば、ベンジル、メチル、またはエチルエステル）もしくはアミド化されているＣ−末端カルボキシレートを有する、および／またはＮ−末端アミノ基の修飾（例えば、アセチル化もしくはアルコキシカルボニル化）を有するアミノ酸など）を含有することができる。適切な誘導体には、Ｎ−アセチル基（環化前に線状ペプチドのＮ−末端に相当するアミノ基がアセチル化されているように）および／またはＣ−末端アミド基（すなわち、環化前の線状ペプチドのカルボキシ末端がアミド化されている）を有するアミノ酸が含まれる。環状ペプチドと共に存在することができる、一般的なアミノ酸以外の残基には、以下に限定されないが、ペニシラミン、β，β−テトラメチレンシステイン、β，β−ペンタメチレンシステイン、β−メルカプトプロピオン酸、β，β−ペンタメチレン−β−メルカプトプロピオン酸、２−メルカプトベンゼン、２−メルカプトアニリン、２−メルカプトプロリン、オルニチン、ジアミノ酪酸、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、およびα，β−ジアミノプロピオン酸が含まれる。
【００９９】
Ｎ−アセチル化および／またはＣ−アミド化を伴うまたは伴わない線状ペプチドの合成後に、当分野において周知の様々な技法のいずれかによって環化を実現することができる。一実施形態の範囲内では、反応性アミノ酸の側鎖間で結合が生成されてもよい。例えば、ジスルフィド架橋は、２個のチオール含有残基を含む線状ペプチドから、様々な方法のいずれかを使用してペプチドを酸化することにより形成することができる。そのような一方法の範囲内では、塩基性または中性の水性媒体を使用し、数日間にわたるチオールの空気酸化により、ジスルフィド連結を生成することができる。このペプチドは高希釈で使用され、凝集および分子間の副反応を最小限にする。あるいは、Ｉ２およびＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６などの強酸化剤を使用して、ジスルフィド連結を形成させることができる。当業者は、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＨｉｓの感受性側鎖を酸化しないように注意しなければならないということを認識するであろう。さらなる実施形態の範囲内では、環化は、アミド結合の形成によって実現することができる。例えば、ペプチド結合は、末端官能基（すなわち、環化前の線状ペプチドのアミノ末端とカルボキシ末端）間で形成することができる。別のそのような実施形態の範囲内では、線状ペプチドは、Ｄ−アミノ酸を含む。あるいは、環化は、Ｎ−末端アセチル基および／またはＣ−末端アミドを伴ってまたは伴うことなく、一方の末端と残基側鎖とを連結することによって、または２つの側鎖を使用することによって実施することができる。ラクタム結合を形成することができる残基には、リシン、オルニチン（Ｏｒｎ）、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、グルタミン酸、またはアスパラギン酸が含まれる。アミド結合を形成する方法は、当分野において一般に周知である。こうした一方法の範囲内では、カルボン酸とＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＡＣ、またはＤＣＣＩとの反応によって、カルボジイミドを媒介とするラクタム形成を実施することができ、これにより、環化を完了するための遊離アミノ基と直ちに反応させることができるＯ−アシル尿素が形成する。あるいは、環化は、アジド法を使用して実施することができ、この場合、反応性アジド中間体が、ヒドラジドを経てアルキルエステルから生成する。あるいは、環化は、活性化エステルを使用して実施することができる。エステルのアルコキシ炭素上の電子吸引性置換基が存在していることにより、アミノリシスに対するそれらの感受性が向上する。ｐ−ニトロフェノール、Ｎ−ヒドロキシ化合物、およびポリハロゲン化フェノールのエステルの高い反応性により、これらの「活性エステル」は、アミド結合の合成において有用となる。さらなる実施形態の範囲内では、チオール含有残基の側鎖と適切に誘導体化されているα−アミノ酸との間に、チオエーテル連結を形成することができる。例として、リシン側鎖は、カルボジイミドカップリング法（ＤＣＣ、ＥＤＡＣ）により、ブロモ酢酸とカップリングし、次いで、上記のチオール含有残基のいずれかの側鎖と反応させて、チオエーテル連結を形成させることができる。ジチオエーテルを形成させるために、任意の２個のチオール含有側鎖を、ＤＭ���中で、ジブロモエタンとジイソプロピルアミンと反応させることができる。
例示的なアンジオテンシン−（１−７）ペプチド
線状アンジオテンシン（１−７）ペプチド
【０１００】
ある種の態様では、本発明は、線状アンジオテンシン−（１−７）ペプチドを提供する。上で議論されている通り、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の構造は、以下の通りである。
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）
【０１０１】
本発明のペプチドおよびペプチドアナログは、以下の配列
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７（配列番号４）
によって、一般に表すことができ、または薬学的に許容されるその塩である。
【０１０２】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸またはジカルボン酸である。ある種の実施形態では、Ｘａａ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｃｐｃ（１−アミノシクロペンタンカルボン酸）、Ａｌａ、Ｍｅ２Ｇｌｙ（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン）、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ（ベタイン、水酸化１−カルボキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルメタンアミニウム）、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｓａｒ（サルコシン）、またはＳｕｃ（コハク酸）である。ある種のこうした実施形態では、Ｘａａ１は、ＡｓｐまたはＧｌｕなどの負に荷電しているアミノ酸であり、通常Ａｓｐである。
【０１０３】
Ｘａａ２は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｃｉｔ（シトルリン）、Ｏｒｎ（オルニチン）、アセチル化Ｓｅｒ、Ｓａｒ、Ｄ−Ａｒｇ、およびＤ−Ｌｙｓである。ある種の実施形態では、Ｘａａ２は、ＡｒｇまたはＬｙｓなどの正に荷電しているアミノ酸であり、通常Ａｒｇである。
【０１０４】
Ｘａａ３は、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ（ノルロイシン）、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、ＨｙｄｒｏｘｙＰｒｏ（ヒドロキシプロリン）、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）、Ａｃｐｃ、またはＴｙｒである。ある種の実施形態では、Ｘａａ３は、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅなどの脂肪族アミノ酸であり、通常、ＶａｌまたはＮｌｅである。
【０１０５】
Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ３）、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒ（ホモセリン）、ａｚａＴｙｒ（アザ−α１−ホモ−Ｌ−チロシン）またはＡｌａである。ある種の実施形態では、Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、ＳｅｒまたはＴｈｒなどのヒドロキシル置換アミノ酸であり、通常Ｔｙｒである。
【０１０６】
Ｘａａ５は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｖａｌ、またはＧｌｙである。ある種の実施形態では、Ｘａａ５は、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅなどの脂肪族アミノ酸であり、通常Ｉｌｅである。
【０１０７】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、または６−ＮＨ２−Ｐｈｅ（６−アミノフェニルアラニン（６−ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌａｌａｉｎｅ））である。ある種の実施形態では、Ｘａａ６は、ＡｒｇまたはＨｉｓなどの、完全にまたは部分的に正に荷電しているアミノ酸である。
【０１０８】
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである。
【０１０９】
ある種の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ７の１つまたは複数が、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。ある種のこうした実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ７の１つまたは２つ以外のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。
【０１１０】
ある種の実施形態では、Ｘａａ３は、Ｎｌｅである。Ｘａａ３が、Ｎｌｅである場合、Ｘａａ１〜Ｘａａ２およびＸａａ４〜７の１つまたは複数は、場合により、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。ある種のこうした実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ２およびＸａａ４〜７の１つまたは２つ以外のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ２およびＸａａ４〜７のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一であり、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号５）となる。
【０１１１】
ある種の実施形態では、ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）またはＡｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号６）を有する。
【０１１２】
一部の実施形態では、線状アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９の配列（配列番号２３）を有する、Ａｎｇ（１−９）ペプチドである。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｎｇ（１−９）の誘導体である。Ａｎｇ（１−９）誘導体を含む、例示的なＡｎｇ（１−９）ペプチドに関しては、その開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許公開第２０１２／０１７２３０１号を参照されたい。
【０１１３】
一部の実施形態では、線状アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、アラマンジン、またはアラマンジン誘導体である。アラマンジンは、レニン−アンジオテンシン系の構成要素であることが公知の、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７というアミノ酸配列（配列番号２４）を有する、天然に存在するペプチドである（Ｌａｕｔｎｅｒら、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌａｍａｎｄｉｎｅ、２０１３年、Ｃｉｒｃ．  Ｒｅｓ．１１２巻（８号）：１１０４〜１１１１頁を参照されたい）。アラマンジンおよびアラマンジン誘導体の議論は、その開示が参照により本明細書に組み込まれている、欧州特許出願第２，２６４，０４８号に見出すことができる。
例示的な環式アンジオテンシン（１−７）ペプチド
【０１１４】
ある種の態様では、本発明は、ＡｎｇにおけるＴｙｒ４位およびＰｒｏ７位に相当するアミノ酸の側鎖間などの連結を含む環状アンジオテンシン−（１−７）（Ａｎｇ−（１−７））ペプチドアナログを提供する。これらのペプチドアナログは、通常、７個のアミノ酸残基を含むが、開裂可能な配列も含むことができる。より詳細に以下に議論される通り、本発明は、フラグメント、および１個または複数のアミノ酸が別のアミノ酸によって置換されているアナログ（フラグメントを含む）を含む。こうしたアナログの一例は、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２２）であり、ここで、Ｓｅｒ４とＣｙｓ７との間に、連結が形成されている。
【０１１５】
以下の項目は、４位および７位における残基を連結するチオエーテル結合に関する本発明の態様を説明するが、他の連結（上記の通り）が、チオエーテル架橋に置き換えられて、他の残基が環化し得ることを理解すべきである。チオエーテル架橋はまた、一硫化架橋とも、またはＡｌａ−Ｓ−Ａｌａの場合、ランチオニン架橋とも呼ばれる。チオエーテル架橋含有ペプチドは、以下の式
【化３−１】
2016520592.tif 000004
【化３−２】
2016520592.tif 000005
の１つを有する２個のアミノ酸によって形成することができる。
【０１１６】
これらの式において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、独立して、−Ｈ、アルキル基（例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、またはアラルキル基であり、これらのアルキル基およびアラルキル基は、１つまたは複数のハロゲン、−ＯＨ、または−ＮＲＲ’基（ＲおよびＲ’は、独立して、−ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルである）によって場合により置換されている。ある種の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、−Ｈまたは−ＣＨ３であり、こうした場合、すべて−Ｈである。
【０１１７】
ある種の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）によるチオエーテル架橋を含むＡｎｇアナログまたは誘導体を提供する。通常、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＣＨ３から独立して選択される。式（Ｉ）によるチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、ランチビオティック酵素によってまたはジスルフィドの硫黄押出しによって、生成することができる。一例では、硫黄が押し出されるジスルフィドは、４位におけるＤ−システインおよび７位におけるＬ−システインによって、または４位におけるＤ−システインおよび７位におけるＬ−ペニシラミンによって、形成することができる（例えば、Ｇａｌａｎｄｅ、ＴｒｅｎｔおよびＳｐａｔｏｌａ（２００３年）、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ、７１巻、５３４〜５５１頁を参照されたい）。
【０１１８】
他の実施形態では、２個のアミノ酸の連結は、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）において示されている架橋とすることができる。式（ＩＩ）によるチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位におけるＤ−ホモシステインおよび７位におけるＬ−システインによって形成されるジスルフィドの硫黄押出しによって、作製することができる。同様に、式（ＩＩＩ）にある通りのチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位におけるＤ−システインおよび７位におけるＬ−ホモシステインによって形成されるジスルフィドの硫黄押出しによって、作製することができる。
【０１１９】
上で議論されている通り、本発明のＡｎｇアナログおよび誘導体は、長さおよびアミノ酸組成が変動する。本発明のＡｎｇアナログおよび誘導体は、好ましくは、生物活性を有するか、またはタンパク質分解により活性化され得る不活性前駆体分子である（１０個のアミノ酸を有するアンジオテンシン（Ｉ）が、２個のアミノ酸の開裂によってどのように活性フラグメントに変換されるかなど）。Ａｎｇアナログまたは誘導体のサイズは、変動し得るが、３〜７個のＮｌｅ−チオエーテル環構造を含む「コア」の五量体セグメントが包含されている限り、通常、約５〜１０個の間のアミノ酸である。本発明のアナログまたは誘導体のアミノ酸配列は、変動し得るが、通常、それが、生物活性であるか、またはタンパク質分解により活性化されている状態になることができることを条件とする。アナログまたは誘導体の生物活性は、放射性リガンド結合の試験、インビトロ細胞活性化アッセイ、およびインビボ実験を含む、当分野において公知の方法を使用して決定することができる。例えば、ＧｏｄｅｎｙおよびＳａｙｅｓｋｉ（２００６年）Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９１巻：Ｃ１２９７〜１３０７頁；Ｓａｒｒら、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．  Ｒｅｓ．（２００６年）７１巻：７９４〜８０２頁；ならびにＫｏｚｉａｒｚら（１９３３年）Ｇｅｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４巻：７０５〜７１３頁を参照されたい。
【０１２０】
ペプチドの長さしか変動しない、Ａｎｇアナログおよび誘導体は、以下を含む：
天然Ａｎｇ−（１−７）（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号７）から誘導される、［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と命名される４，７−環化アナログ
天然アンジオテンシンＩ（Ａｎｇ−（１−１０））（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０、配列番号８）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）と命名される４，７−環化アナログ；
天然アンジオテンシンＩＩ（Ａｎｇ−（１−８））（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号９）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−８）と命名される４，７−環化アナログ；
天然アンジオテンシンＩＩＩ（Ａｎｇ−（２−８））（Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１０）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（２−８）と命名される４，７−環化アナログ；
天然アンジオテンシンＩＶ（Ａｎｇ−（３−８））（Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１１）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（３−８）と命名される４，７−環化アナログ；
天然Ａｎｇ−（１−７）（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号１２）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と命名される４，７−環化アナログ；および
天然Ａｎｇ−（１−９）（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９、配列番号１３）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−９）と命名される４，７−環化アナログ。
これらのアナログは、Ｃｙｃ４−７部位として、式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）において示されているチオエーテル架橋の１つを有することができ、例えば、Ｒ１〜Ｒ４がそれぞれ、−Ｈまたは−ＣＨ３であり、通常−Ｈである場合などの、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７が、式（Ｉ）によって表される。
【０１２１】
天然アンジオテンシンペプチドのアミノ酸配列と比較して、Ｃｙｃ４−７アナログの４位および７位のアミノ酸は修飾されて、上に示されているチオエーテル環構造の導入が可能になる。Ａｎｇアナログの長さに加えて、３、４、および７以外の位置にあるアミノ酸は、天然に存在するペプチドと同じであるかまたは異なるものとすることができるが、但し、通常、アナログが、生物的機能を保持していることを条件とする。［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）のような不活性前駆体のアナログに関すると、生物的機能とは、それを開裂して、生物活性なフラグメント（例えば、Ａｎｇ−（１−８）またはＡｎｇ−（１−７））にすることができるアンジオテンシン変換酵素に対するアナログの感受性またはフラグメント自体の生物活性の一方または両方を指す。ある種の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログまたは誘導体は、内在性の機能を有していないが、１つまたは複数の天然に存在するアンジオテンシン化合物の効果を阻害する。
【０１２２】
ある種の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログは、式（ＩＶ）
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７（ＩＶ、配列番号１４）
によって表される。
【０１２３】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸であるが、通常、ＧｌｕまたはＡｓｐなどの負に荷電しているアミノ酸であり、より典型的にはＡｓｐである。
【０１２４】
Ｘａａ２は、ＡｒｇまたはＬｙｓなどの正に荷電しているアミノ酸であり、通常Ａｒｇである。
【０１２５】
Ｘａａ３は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌなどの脂肪族アミノ酸であり、通常、Ｖａｌである。
【０１２６】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と一緒になって、チオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、通常、Ｄ−立体異性体とすることができる。Ｃｙｃ４（Ｃｙｃ７と一緒になって）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）において示されている。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）におけるＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、とりわけ−Ｈである。
【０１２７】
Ｘａａ５は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌなどの脂肪族アミノ酸であり、通常、Ｉｌｅである。
【０１２８】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１２９】
Ｃｙｃ７は、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）におけるものなどの、Ｃｙｃ４と一緒になってチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、通常、Ｌ−立体異性体とすることができる。Ｃｙｃ７（Ｃｙｃ４と一緒になって）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）において示されている。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）におけるＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、とりわけ−Ｈである。
【０１３０】
ある種の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の１つまたは複数（Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７を除く）が、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。ある種のこうした実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の１つまたは２つ以外のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６のすべてが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）における対応するアミノ酸と同一である。
【０１３１】
ある種の実施形態では、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７は、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）およびＡｌａ（アラニン）から独立して選択され、この場合、Ａｌａは、少なくとも１つの位置に存在している。したがって、環状アナログは、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４は、それぞれ−Ｈである）、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ３は−Ｈであり、Ｒ４は−ＣＨ３である）、または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１、Ｒ３、およびＲ４は−Ｈであり、Ｒ２は−ＣＨ３である）によって形成されるチオエーテル連結を有することができる。環状アナログの具体例は、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結を含む。
【０１３２】
ある種の実施形態では、本発明は、以下の構造図
【化４】
2016520592.tif 000006
によって表される、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１５）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１６）を有する、４位と７位との間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−７）アナログを提供する。
【０１３３】
ある種の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログまたは誘導体は、式（Ｖ）
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｖ、配列番号１７）
によって表される。上で議論されている通り、Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０の１つまたは複数が、ある種の実施形態において存在していない。例えば、（１）Ｘａａ１０が存在しない、（２）Ｘａａ９およびＸａａ１０が存在しない、（３）Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が存在しない、（４）Ｘａａ１が存在しない、（５）Ｘａａ１およびＸａａ１０が存在しない、（６）Ｘａａ１、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が存在しない、（７）Ｘａａ１、Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が存在しない、（８）Ｘａａ１およびＸａａ２が存在しない、（９）Ｘａａ１、Ｘａａ２、およびＸａａ１０が存在しない、（１０）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が存在しない、または（１１）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が存在しない。これらの実施形態のそれぞれの場合、残りのアミノ酸は、以下に記載される意味（ｖａｌｕｅ）を有する。
【０１３４】
Ｘａａ１は、存在している場合、任意のアミノ酸であるが、通常、ＧｌｕまたはＡｓｐなどの負に荷電しているアミノ酸であり、より典型的にはＡｓｐである。
【０１３５】
Ｘａａ２は、存在する場合、ＡｒｇまたはＬｙｓなどの正に荷電しているアミノ酸であり、通常Ａｒｇである。
【０１３６】
Ｎｌｅ３は、ノルロイシンである。
【０１３７】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と一緒になって、チオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、通常、Ｄ−立体異性体とすることができる。Ｃｙｃ４（Ｃｙｃ７と一緒になって）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）において示されている。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）におけるＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、とりわけ−Ｈである。
【０１３８】
Ｘａａ５は、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、またはＶａｌなどの脂肪族アミノ酸であり、通常、Ｉｌｅである。
【０１３９】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１４０】
Ｃｙｃ７は、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）におけるものなどの、Ｃｙｃ４と一緒になってチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、通常、Ｌ−立体異性体とすることができる。Ｃｙｃ７（Ｃｙｃ４と一緒になって）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）において示されている。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）におけるＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、とりわけ−Ｈである。
【０１４１】
Ｘａａ８は、存在する場合、Ｐｒｏ以外のアミノ酸であり、通常、ＰｈｅまたはＩｌｅである。ある種の実施形態では、Ｉｌｅは、Ａｎｇ（１−８）の阻害剤となる。ある種の実施形態では、Ｐｈｅは、Ａｎｇ（１−８）またはＡｎｇ（１−１０）の生物活性を維持している。
【０１４２】
Ｘａａ９は、存在する場合、Ｈｉｓである。
【０１４３】
Ｘａａ１０は、存在する場合、脂肪族残基、例えば、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはＬｅｕ、通常、Ｌｅｕである。
【０１４４】
ある種の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０（Ｎｌｅ３、Ｃｙｃ４、およびＣｙｃ７を除く）の１つまたは複数が、天然に存在するＡｎｇ（Ａｎｇ−（１−７）、Ａｎｇ（１−８）、Ａｎｇ（１−９）、Ａｎｇ（１−１０）、Ａｎｇ（２−７）、Ａｎｇ（２−８）、Ａｎｇ（２−９）、Ａｎｇ（２−１０）、Ａｎｇ（３−８）、Ａｎｇ（３−９）、およびＡｎｇ（３−１０）を含む）における対応するアミノ酸と同一である。ある種のこうした実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０の１つまたは２つ以外のすべて（存在するものについて）が、天然に存在するＡｎｇにおける対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０はすべて（存在するものについて）が、天然に存在するＡｎｇにおける対応するアミノ酸と同一である。
【０１４５】
ある種の実施形態では、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７は、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）およびＡｌａ（アラニン）から独立して選択され、この場合、Ａｌａは、少なくとも１つの位置に存在している。したがって、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４は、それぞれ−Ｈである）、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ３は−Ｈであり、Ｒ４は−ＣＨ３である）、または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は−Ｈであり、Ｒ２は−ＣＨ３である）によって形成されるチオエーテル連結を含む環状アナログが包含される。特定の環状アナログは、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結を含む。
【０１４６】
特に、本発明は、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１８）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１９）を有する、４位と７位との間にチオエーテル架橋を有する、Ａｎｇ−（１−７）アナログまたは誘導体を提供する。
【０１４７】
別の態様では、本発明は、Ａｎｇ−（１−８）アンタゴニスト活性を有する、４位と７位との間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−８）アナログまたは誘導体、特に、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７−Ｉｌｅ８（配列番号２０）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７−Ｉｌｅ８（配列番号２１）を有するＡｎｇ（１−８）アナログまたは誘導体を提供する。
【０１４８】
アルキル基は、完全に飽和している直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。通常、直鎖または分岐アルキル基は、１〜約２０個、好ましくは、１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、およびオクチルが含まれる。Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分岐アルキル基は、「低級アルキル」基とも呼ばれる。
【０１４９】
アラルキル基は、アリール基によって置換されているアルキル基である。芳香族（アリール）基には、フェニル、ナフチルおよびアントラシルなどの炭素環式芳香族基、ならびにイミダゾリル、チエニル、フリル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリルおよびテトラゾリルなどのヘテロアリール基が含まれる。芳香族基には、炭素環式芳香環またはヘテロアリール環が１つまたは複数の他のヘテロアリール環と縮合している、縮合多環式芳香族環系も含まれる。例には、ベンゾチエニル、ベンゾフリル、インドリル、キノリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾール、キノリニル、イソキノリニルおよびイソインドリルが含まれる。
Ａｎｇ（１−７）受容体アゴニスト
【０１５０】
一部の実施形態では、本発明は、１種または複数の脳状態に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを投与するステップを含む、脳状態を処置する方法を提供する。本明細書で使用する場合、用語「アンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニスト」は、アンジオテンシン−（１−７）受容体、特にＧ−タンパク質共役型Ｍａｓ受容体の機能に正の影響を及ぼす、いかなる分子も包含している。一部の実施形態では、アンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、直接または間接的に、アンジオテンシン−（１−７）受容体（すなわち、Ｍａｓ受容体）活性を増強する、強化する、活性化する、および／または向上させる。一部の実施形態では、アンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、直接、アンジオテンシン−（１−７）受容体（すなわち、Ｍａｓ受容体）と相互作用する。こうしたアゴニストは、例えば、タンパク質、化学化合物、低分子、核酸、抗体、薬物、リガンド、または他の作用剤を含む、ペプチドまたは非ペプチドとすることができる。一部の実施形態では、本アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、非ペプチドアゴニストである。
【０１５１】
例示的なクラスのアンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、１−（ｐ−チエニルベンジル）イミダゾールである。これらの非ペプチドアンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの例は、式（ＶＩ）
【化５】
2016520592.tif 000007
によって表されるか、または薬学的に許容されるその塩である［式中、
【０１５２】
Ｒ１は、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ８）−アルコキシ（１〜６個の炭素原子が、ヘテロ原子Ｏ、ＳまたはＮＨによって（好ましくは、Ｏによって）置き換えられている）、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシ（テトラヒドロピランまたはテトラヒドロフランなどの飽和環状エーテルによって置換されている）、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルケニル、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルアリール、またはアリールオキシ（無置換であるか、またはハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルコキシ、およびトリフルオロメチルから選択される置換基によって置換されている）であり、
【０１５３】
Ｒ２は、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、または（３）ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり、
【０１５４】
Ｒ３は、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはアリールであり、
【０１５５】
Ｒ４は、水素、ハロゲン（クロロ、ブロモ、フルオロ）、または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり、
【０１５６】
Ｘは、酸素または硫黄であり、
【０１５７】
Ｙは、酸素または−ＮＨ−であり、
【０１５８】
Ｒ５は、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル、または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルアリールであり、Ｙが−ＮＨ−である場合、Ｒ５は水素であり、
【０１５９】
Ｒ６は、（Ｃ１〜Ｃ５）−アルキルである］。
【０１６０】
ある種の実施形態では、Ｒ２が、ＣＯＯＨまたはＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルである場合、Ｒ１はハロゲンではない。
【０１６１】
一部の実施形態では、アンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、以下の構造
【化６】
2016520592.tif 000008
によって表される、ＡＶＥ０９９１、５−ホルミル−４−メトキシ−２−フェニル−１［［４−［２−（エチルアミノカルボニルスルホンアミド）−５−イソブチル−３−チエニル］−フェニル］−メチル］−イミダゾールである。
【０１６２】
別の例示的なクラスのアンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、ｐ−チエニルベンジルアミドである。これらの非ペプチドアンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの例は、構造式（ＶＩＩ）
【化７】
2016520592.tif 000009
によって表されるか、または薬学的に許容されるその塩である［式中、
【０１６３】
Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ５）−アルキル（無置換であるか、またはＮＨ２、ハロゲン、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルおよびＣＯ２Ｈから選択されるラジカルによって置換されている）、（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ６〜Ｃ１０）−アリール（無置換であるか、またはハロゲンおよびＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルによって置換されている）、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０）−アリール（アリールラジカルは無置換であるか、またはハロゲンおよびＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルによって置換されている）、（Ｃ１〜Ｃ５）−ヘテロアリール、または（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ１〜Ｃ５）−ヘテロアリールであり、
【０１６４】
Ｒ２は、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル（無置換であるか、またはハロゲンおよびＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルによって置換されている）、（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ６〜Ｃ１０）−アリール（無置換であるか、またはハロゲン、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、およびＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルのなかから選択されるラジカルによって置換されている）、または（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０）−アリール（無置換であるか、またはハロゲンおよびＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルによって置換されている）であり、
【０１６５】
Ｒ３は、水素、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり、
【０１６６】
Ｒ４は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり、
【０１６７】
Ｒ５は、水素または（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキルであり、
【０１６８】
Ｒ６は、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、または（Ｃ２〜Ｃ６）−アルケニルであり、
【０１６９】
Ｘは、酸素またはＮＨである］。
【０１７０】
アンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストのさらなる例は、その内容が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第６，２３５，７６６号において記載されている。
【０１７１】
上記の様々なアンジオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、薬学的に許容される塩として存在することができる。本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」とは、ペプチドまたは等価な化合物の所望の活性を保持しているが、好ましくは、ペプチドの活性またはペプチドを使用する系の他の構成要素の活性に悪影響を及ぼさない塩を指す。そのような塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などにより形成される酸付加塩である。塩はまた、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸などの有機酸により形成されてもよい。陽イオン性物質から形成される塩は、これらの無機酸および有機酸の共役塩基を利用してもよい。塩はまた、亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケルなどの多価金属陽イオンにより、あるいはＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンもしくはエチレンジアミン、またはそれらの組合せから形成される有機カチオンにより形成されてもよい（例えば、タンニン酸亜鉛塩）。無毒性の、生理学的に許容される塩が好ましい。
【０１７２】
塩は、この塩が不溶性である溶媒もしくは媒体中または水などの溶媒中（これらの溶媒または媒体は、次に真空で、または凍結乾燥により除去される）、遊離酸または遊離塩基形態の生成物を、１当量またはそれ超の適切な酸または塩基と反応させることによる、あるいは存在している塩の陽イオンを適切なイオン交換樹脂上の別の陽イオンで交換することによるなどの従来的な手段によって形成することができる。
【０１７３】
アルキル基は、完全に飽和している直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。通常、直鎖または分岐アルキル基は、１〜約２０個、好ましくは１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、およびオクチルが含まれる。Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分岐アルキル基はまた、「低級アルキル」基とも呼ばれる。
【０１７４】
アルケニル基は、１つまたは複数の二重結合を含む直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。通常、直鎖または分岐アルケニル基は、２〜約２０個、好ましくは２〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルケニル基の例には、エテニル、ｎ−プロペニル、およびｎ−ブテニルが含まれる。
【０１７５】
芳香族（アリール）基には、フェニル、ナフチル、およびアントラシルなどの炭素環式芳香族基、ならびにイミダゾリル、チエニル、フリル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリル、およびテトラゾリルなどのヘテロアリール基が含まれる。芳香族基には、炭素環式芳香環またはヘテロアリール環が１つまたは複数の他のヘテロアリール環と縮合している、縮合多環式芳香族環系も含まれる。例には、ベンゾチエニル、ベンゾフリル、インドリル、キノリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾール、キノリニル、イソキノリニル、およびイソインドリルが含まれる。
【０１７６】
アラルキル基は、アリール基によって置換されているアルキル基である。
製剤
【０１７７】
本発明の方法によれば、本発明の本明細書に記載されているＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、単独で（例えば、精製済みペプチドまたは化合物として）、または本明細書に記載されている組成物もしくは医薬の構成要素（例えば、疾患の処置のための医薬製造において）として、対象に投与することができる。本組成物は、生理学的に許容される担体または添加剤と一緒に製剤化して、医薬組成物を調製することができる。担体および組成物は、無菌とすることができる。製剤は、投与、例えば静脈内または皮下投与の形式に好適となるべきである。組成物の製剤化方法は、当分野で公知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ編集）（１９８９年）を参照されたい）。
【０１７８】
適切な薬学的に許容される担体には、以下に限定されないが、水、塩の溶液（例えば、ＮａＣｌ）、生理食塩水、緩衝生理食塩水、アルコール、グリセロール、エタノール、アラビアガム、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭水化物（ラクトース、アミロースまたはデンプンなど）、糖（マンニトール、スクロース、またはその他）、デキストロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ｐｙｒｏｌｉｄｏｎｅ）など、およびそれらの組合せが含まれる。医薬調製物は、所望の場合、活性化合物と反応して有害とならないか、またはそれらの活性を妨害しない補助剤（例えば、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝液、着色物質、および／または芳香物質など）と混合することができる。好ましい実施形態では、静脈内投与に適した水溶性担体が使用される。
【０１７９】
本組成物または医薬は、所望の場合、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝化剤も含有することができる。本組成物は、液状溶液、懸濁液、エマルション、徐放製剤、または粉末とすることができる。本組成物はまた、従来の結合剤およびトリグリセリドなどの担体と共に坐剤として製剤化することもできる。
【０１８０】
本組成物または医薬は、ヒトに投与するようになされた医薬組成物として、決まった手順に従って製剤化することができる。例えば、好ましい実施形態では、静脈内投与向け組成物は、通常、無菌の等張水性緩衝液中の溶液である。必要な場合、本組成物は、溶解補助剤、および注射部位における痛みを緩和するための局所麻酔薬を含んでもよい。一般に、成分は、別々または単位剤形中に一緒に混合されて供給される（例えば、乾燥した凍結乾燥散剤、またはアンプルなどの気密密封されている容器中の水不含濃縮製剤、または活性剤の量を示しているサシェ（ｓａｃｈｅｔｔｅ）として）。本組成物が注入によって投与されることになる場合、無菌医薬グレードの水、生理食塩水、またはデキストロース／水を含有している注入用ボトルに分注することができる。組成物が注射によって投与される場合、注射用の滅菌水または生理食塩水のアンプルを用意し、投与前に、成分を混合することができる。
【０１８１】
一部の実施形態では、医薬製剤として提供されるものを含めた、提供される組成物は、以下に限定されないが、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、血清含有溶液、ハンクス溶液、他の水性の生理的平衡溶液、油、エステル、およびグリコールなどの液状担体を含む。
【０１８２】
本明細書に記載されている、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、中性または塩形態として製剤化することができる。薬学的に許容される塩には、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するものなどの、遊離アミノ基と形成されるもの、および水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するものなどの、遊離カルボキシル基と形成されるものが含まれる。
経口用製剤
【０１８３】
一部の実施形態では、好適な医薬組成物は、経口用製剤である。任意の医薬として許容される経口用製剤が、本発明の範囲内で使用することができるものと企図される。
【０１８４】
一部の実施形態では、提供される組成物は、少なくとも１種のｐＨ低下剤を含む。本発明の一部の実施形態において使用するために好適なｐＨ低下剤には、任意の薬学的に許容されるｐＨ低下剤、あるいはａ）消化管に毒性を示さないｐＨ低下剤、ｂ）水素イオンを送達することができるかもしくは局部環境からより多くの水素イオン含有物を誘発することができるかのいずれかのｐＨ低下剤、および／またはｃ）腸管において見出されるプロテアーゼに対して最適なｐＨ未満に局部腸管のｐＨを低下させるのに十分な量で経口投与することができるｐＨ低下剤の組合せが含まれることが企図される。様々な試験を使用して、ｐＨ低下剤が本発明に好適であるかどうか、およびどのような量が適切であるかどうかを決定することができる。例えば、１種のｐＨ低下剤、または複数のｐＨ低下剤の組合せは、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム１０ミリリットルの溶液にある特定の量が加えられた場合、この量がこの溶液のｐＨを、５．５、４．７、または３．５以下まで低下させる場合、本発明に好適である。一部の実施形態では、１種または複数のｐＨ低下剤の量は、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム１０ミリリットルの溶液において、ｐＨを３．４、３．２、３．０または２．８以下まで低下させるよう添加され得る。
【０１８５】
一部の実施形態では、好適な１種または複数のｐＨ低下剤には、ｐＫａが４．２以下（例えば、４．０、３．８、３．６、３．４、３．２、３．０または２．８以下）を有する少なくとも１種のｐＨ低下剤が含まれる。本発明に好適な、例示的なｐＨ低下剤には、以下に限定されないが、アセチルサリチル酸、酢酸、アスコルビン酸、クエン酸、フマル酸、グルクロン酸、グルタル酸、グリセリン酸、グリココール酸、グリオキシル酸、イソクエン酸、イソ吉草酸、乳酸、マレイン酸、オキサロ酢酸、オキサロコハク酸、プロピオン酸、ピルビン酸、コハク酸、酒石酸および吉草酸などのカルボン酸；塩化アルミニウム；塩化亜鉛；アセチルグルタミン酸、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、ベタイン、カルニチン、カルノシン、シトルリン、クレアチン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシリシン、ヒドロキシプロリン、ヒポタウリン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチルヒスチジン、ノルロイシン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、サルコシン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンの酸塩を含めたアミノ酸（またはその誘導体）の酸塩が含まれる。フルクトース１，６ジホスフェートおよびグルコース１，６ジホスフェートを含めたある種のリン酸エステルも、ある特定の実施形態では、適切なｐＨ低下剤とすることができる。特定の実施形態では、クエン酸または酒石酸が、ｐＨ低下剤として使用される。
【０１８６】
任意の特定のｐＨ低下剤または複数のｐＨ低下剤の組合せの必要な量は、様々であり得る。通常、好適な量は、当分野で公知の、および本明細書に記載されている様々な試験を使用して決定することができる（例えば、上記の０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム１０ミリリットルの溶液中でｐＨ低下試験を使用する）。非限定例として、本発明による製剤中に使用されるｐＨ低下剤の好適な量は、約１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４２５ｍｇ、４５０ｍｇ、４７５ｍｇ、５００ｍｇ、５２５ｍｇ、５５０ｍｇ、５７５ｍｇ、６００ｍｇ、６２５ｍｇ、６５０ｍｇ、６７５ｍｇ、７００ｍｇ、７２５ｍｇ、７５０ｍｇ、７７５ｍｇ、８００ｍｇ、８２５ｍｇ、８５０ｍｇ、８７５ｍｇ、９００ｍｇ、９２５ｍｇ、９５０ｍｇ、９７５ｍｇもしくは１，０００ｍｇの量、またはそれ超とすることができる。他の実施形態では、使用されるクエン酸の量は、１，０００ｍｇを超えてもよい。
【０１８７】
一部の実施形態では、使用されるｐＨ低下剤（例えば、クエン酸または酒石酸）の好適な量は、特定の剤形の総重量の％として測定することができる。非限定例として、使用されるｐＨ低下剤の好適な量は、固形剤形の総重量の約１０％（例えば１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％もしくは９５％、またはそれ超）の量またはそれ超とすることができる。
【０１８８】
様々な実施形態では、本発明の組成物は、１種または複数の吸収促進剤を含む。本明細書で使用する場合、吸収促進剤とは、それらが放出される水性もしくは疎水性環境のどちらかにおいて他の構成要素の溶解度を向上させる作用剤、および／または活性ペプチド（例えば、アンジオテンシン（１−７）ペプチド）の腸管壁への取込みを増強する作用剤を指す。一部の実施形態では、吸収促進剤は、溶解度増強剤および／または取込み増強剤と呼ばれる。
【０１８９】
一部の実施形態では、吸収促進剤の混合物を持たせることができ、この場合、一部は、溶解度の増強をもたらし、一部は取込みの増強をもたらし、一部は、これらの両方をもたらす。所与の実施形態では、非限定的に、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０種の吸収促進剤を含めた、様々な数の吸収促進剤を持たせることが可能である。
【０１９０】
表面活性剤は、溶解度増強剤と取込み増強剤の両方の特性を有する、有用な吸収促進剤の一例である。一部の実施形態では、表面活性剤が吸収促進剤として使用される場合、これらは、製造過程中の、混合およびカプセルへの充填を容易にするための、易流動性粉末とすることができる。他の実施形態では、表面活性剤がアンジオテンシン（１−７）ペプチドの生体利用率を向上させるために使用される場合、この表面活性剤は、（ａ）コレステロール誘導体などの陰イオン性表面活性剤（例えば胆汁酸）、（ｂ）陽イオン性表面剤（例えばアシルカルニチン、リン脂質など）、（ｃ）非イオン性表面活性剤、および（ｄ）陰イオン性表面活性剤と負電荷中和剤との混合物、ならびにそれらの組合せからなる群から選択され得る。負電荷中和剤には、以下に限定されないが、アシルカルニチン、塩化セチルピリジニウムなどが含まれる。
【０１９１】
一部の実施形態では、酸可溶性胆汁酸および陽イオン性表面活性剤が、吸収促進剤として一緒に使用されよう。アシルカルニチン（ラウロイルカルニチンなど）、リン脂質および胆汁酸が、一部の実施形態において特に有効な吸収促進剤となり得る。
【０１９２】
様々な吸収促進剤が、様々な実施形態において使用するのに好適であるが、以下の例示的なリストは、本発明の一部の実施形態を例示するよう意図されている。非限定的に、一部の好適な吸収促進剤には、（ａ）サリチル酸ナトリウム、３−メトキシサリチル酸ナトリウム、５−メトキシサリチル酸ナトリウムなどのサリチル酸塩、およびホモバニリン酸塩、（ｂ）タウロコール酸、タウロデオキシコール酸、デオキシコール酸、コール酸、グリコール酸、リトコール酸、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、ウルソコール酸、デヒドロコール酸、フシジン酸などの胆汁酸、（ｃ）ポリオキシエチレンエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ３６Ｔ、Ｂｒｉｊ５２、Ｂｒｉｊ５６、Ｂｒｉｊ７６、Ｂｒｉｊ９６、テキサホールＡ６、テキサホールＡ１４、テキサホールＡ６０など）、ｐ−ｔ−オクチルフェノールポリオキシエチレン（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−４５、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−３０５など）、ノニルフェノキシポリオキシエチレン（ｎｏｎｙｌｐｈｅｎｏｘｙｐｏｌｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅｓ）（例えば、Ｉｇｅｐａｌ  ＣＯシリーズ）、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えば、Ｔｗｅｅｎ−２０、Ｔｗｅｅｎ−８０など）などの非イオン性界面活性剤、（ｄ）スルホコハク酸ジオクチルナトリウムなどの陰イオン性界面活性剤、（ｅ）リソレシチンおよびリソホスファチジルエタノールアミンなどのリソリン脂質、（ｆ）ラウロイルカルニチン、ミリストイルカルニチン、パルミトイルカルニチン、ラウリルコリン、ミリストイルコリン、パルミトイルコリン、ヘキサデシルリシン、Ｎ−アシルフェニルアラニン、Ｎ−アシルグリシンなどのアシルカルニチン、アシルコリンおよびアシルアミノ酸、ｇ）ジヘプタノイルホスファチジルコリン、ジオクチルホスファチジルコリンなどの水溶性リン脂質、（ｈ）中鎖長脂肪酸（カプリル酸、カプロン酸およびラウリン酸）を含有するモノ、ジ、およびトリグリセリドの混合物である、中鎖グリセリド、（ｉ）エチレン−ジアミン四酢酸、（ｊ）塩化セチルピリジニウムなどの陽イオン性界面活性剤、（ｋ）ラブラゾール、ラブラファックなどのポリエチレングリコールの脂肪酸誘導体、ならびに（ｌ）ラウロイルマルトシド、ラウロイルスクロース、ミリストイルスクロース、パルミトイルスクロースなどのアルキルサッカライドが含まれる。
【０１９３】
一部の実施形態では、吸収促進剤は、医薬組成物の全重量（通常、腸溶コーティング剤を除く）に対する重量％として測定される量で存在することになろう。さらなる非限定例として、実施形態において存在する吸収促進剤の量は、０．１〜２０重量％、０．５〜２０重量％、１．０〜２０重量％、２．０〜２０重量％、３．０〜２０重量％、４．０〜２０重量％、５．０〜２０重量％、５．０〜１５重量％、５．０〜１４重量％、５．０〜１３重量％、５．０〜１２重量％、５．０〜１２重量％、５．０〜１１重量％、５．０〜１０重量％、６．０〜１０重量％、７．０〜１０重量％、８．０〜１０重量％、９．０〜１０重量％、５．０〜９．０重量％、５．０〜８．０重量％、５．０〜７．０重量％、および５．０〜６．０重量％の範囲とすることができる。
【０１９４】
一部の実施形態では、ｐＨ低下剤と吸収促進剤との重量比は、約３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、または上記の例示的な比の任意の２つの間とすることができる。所与の医薬組成物におけるすべてのｐＨ低下剤の総重量およびすべての吸収促進剤の総重量は、上記の例示的な比に含まれる。例えば、医薬組成物が、２種のｐＨ低下剤および３種の吸収促進剤を含む場合、上記の比は、両方のｐＨ低下剤の合わせた総重量と３種の吸収促進剤すべてを合わせた総重量に基づいて計算されよう。
【０１９５】
一部の実施形態では、吸収促進剤はｐＨ５．５未満、特にｐＨ３．０〜ｐＨ５．０の間などの酸性ｐＨにおいて可溶であろう。
【０１９６】
一部の実施形態では、提供される組成物は、１種または複数の保護ビヒクルを含む。本明細書で使用する場合、保護ビヒクルとは、担体、層、コーティング剤または他のビヒクルなどの、胃のプロテアーゼから活性ペプチド（例えば、アンジオテンシン（１−７）ペプチド）を保護する、任意の保護性構成要素および／または構築物を指す。通常、保護ビヒクルは最終的に溶解し、その結果、特定の剤形中の活性成分および他の成分が放出され得る。保護ビヒクルの一般的な形態は、腸溶コーティング剤である。一部の実施形態では、好適な腸溶コーティング剤は、０．１Ｎ  ＨＣｌ中で少なくとも２時間、本発明の医薬組成物の崩壊を防止することができ、次に、この医薬組成物が１分間あたり１００回転数で回転された溶出浴中で、ｐＨが６．３まで上昇した後、３０分以内に前記組成物のすべての内容物を完全に放出することができる。
【０１９７】
多くの腸溶コーティング剤が当分野で公知であり、１つまたは複数の実施形態において有用である。腸溶コーティング剤の非限定例には、酢酸フタル酸セルロース、コハク酸ヒドロキシプロピルメチルエチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシルメチルエチルセルロースおよびメタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマーが含まれる。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチド、溶解度増強剤および／または取込み増強剤などの吸収促進剤、ならびにｐＨ低下剤が、本実施形態の構成要素の胃への保護通過を可能にする、十分に粘ちょうな保護シロップ中に含まれる。
【０１９８】
好適な腸溶コーティング剤は、例えば、本発明の活性な構成要素および他の構成要素がカプセル内に充填された後、カプセル剤に施用することができる。他の実施形態では、腸溶コーティング剤は、錠剤の外側上にコーティングされるか、または活性な構成要素の粒子の外側表面上にコーティングされ、次に、錠剤形態に圧縮されるか、またはカプセルに充填される。
【０１９９】
一部の実施形態では、本発明のすべての構成要素は、担体またはビヒクルから放出されて、できる限り同時に、腸環境で溶解することが望ましいものとなり得る。一部の実施形態では、ビヒクルまたは担体は、小腸において活性な構成要素を放出し、ここで、細胞間輸送または傍細胞輸送を高める取込み増強剤が、同じ取込み増強剤が結腸において後から放出される場合よりも、望ましくない副作用を引き起こす可能性が低いことがやはり好ましいものとなり得る。しかし、本発明は、結腸においておよび小腸において有効であると考えられることが理解されよう。上で議論したものの他に、多数のビヒクルまたは担体が、当分野で公知である。
【０２００】
一部の実施形態では、（とりわけ、本発明の構成要素が、どのように同時に放出されるかを最適化する際には）腸溶コーティング剤の量を低く保つことが望ましいことがある。一部の実施形態では、腸溶コーティング剤は、固形剤形などの医薬組成物の残りの重量に対して３０％以下で加える（「残り」とは、腸溶コーティング剤自体を除いた医薬組成物である）。他の実施形態では、腸溶コーティング剤は、２０％未満、１９％未満、１８％未満、１７％未満、１６％未満、１５％未満、１４％未満、１３％未満、１２％未満、１１％未満、または１０％未満を加える。一部の実施形態では、腸溶コーティング剤などの保護ビヒクルは、医薬組成物（例えば、固形剤形）の総重量のおよそ２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％の量、またはそれ未満を構成する。
【０２０１】
一部の実施形態では、組成物は、治療有効量で、および／または特定の所望の転帰（例えば、マルファン症候群またはマルファン関連障害の処置、またはそのリスクの低減）に相関する投与レジメンに従って投与される。
【０２０２】
本発明に従って投与すべき具体的な用量または量は、例えば、所望の転帰の特質および／もしくは程度、投与経路および／もしくはタイミングの詳細、ならびに／または１種もしくは複数の特徴（例えば、体重、年齢、個人の経歴、遺伝的特徴、生活スタイルパラメータ、心臓欠損の重症度および／もしくは心臓欠損のリスクレベルなど、またはそれらの組合せ）に応じて、変わり得る。そのような用量または量は、当業者によって決定することができる。一部の実施形態では、適切な用量または量は、標準的な臨床技法に従って決定される。例えば、一部の実施形態では、適切な用量または量は、疾患重症度指数スコアを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％またはそれ超で低下させるのに十分な用量または量である。例えば、一部の実施形態では、適切な用量または量は、疾患重症度指数スコアを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％低下させるのに十分な用量または量である。あるいは、または追加的に、一部の実施形態では、適切な用量または量は、投与すべき所望投与量または至適投与量の範囲または量を特定する手助けとなる、１種または複数のインビトロまたはインビボアッセイの使用により決定される。
【０２０３】
様々な実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、治療有効量で投与される。本明細書で使用する場合、用語「治療有効量」とは、本発明の医薬組成物に含有されている、治療剤の総量に基づいて、主に決定される。一般に、治療有効量は、対象に有意な利益（例えば、根本的な疾患または状態を処置する、変調する、治癒する、予防する、および／または寛解させる）を実現するのに十分である。一部の特定の実施形態では、投与されるべき適切な用量または量は、インビトロまたは動物モデルの試験システムに由来する用量応答曲線から推定することができる。
【０２０４】
様々な実施形態では、誘導体、アナログ、および／または塩を含めた、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストの治療有効投与量は、様々な量で存在し得る。例えば、一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドの治療有効量は、約１０〜１０００ｍｇ（例えば、約２０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、３０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、４０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、６０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、７０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、８０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、９０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、約１０〜９００ｍｇ、１０〜８００ｍｇ、１０〜７００ｍｇ、１０〜６００ｍｇ、１０〜５００ｍｇ、１００〜１０００ｍｇ、１００〜９００ｍｇ、１００〜８００ｍｇ、１００〜７００ｍｇ、１００〜６００ｍｇ、１００〜５００ｍｇ、１００〜４００ｍｇ、１００〜３００ｍｇ、２００〜１０００ｍｇ、２００〜９００ｍｇ、２００〜８００ｍｇ、２００〜７００ｍｇ、２００〜６００ｍｇ、２００〜５００ｍｇ、２００〜４００ｍｇ、３００〜１０００ｍｇ、３００〜９００ｍｇ、３００〜８００ｍｇ、３００〜７００ｍｇ、３００〜６００ｍｇ、３００〜５００ｍｇ、４００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、１００ｍｇ〜９００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、３００ｍｇ〜７００ｍｇ、４００ｍｇ〜７００ｍｇ、および５００ｍｇ〜６００ｍｇ）の範囲の量とすることができる。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、約１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇの量またはそれ超で存在している。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、約１０００ｍｇ、９５０ｍｇ、９００ｍｇ、８５０ｍｇ、８００ｍｇ、７５０ｍｇ、７００ｍｇ、６５０ｍｇ、６００ｍｇ、５５０ｍｇ、５００ｍｇ、４５０ｍｇ、４００ｍｇ、３５０ｍｇ、３００ｍｇ、２５０ｍｇ、２００ｍｇ、１５０ｍｇもしくは１００ｍｇの量またはそれ未満で存在している。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１回用量で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１日に提供される。
【０２０５】
他の実施形態では、治療有効投与量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜５００ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜４００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜３００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜９０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜８０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜７０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜６０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜４０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重とすることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１回用量で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１日に提供される。
【０２０６】
さらに他の実施形態では、治療有効投与量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重とすることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１回用量で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療有効量は、１日に提供される。
【０２０７】
さらに他の実施形態では、治療有効投与量は、例えば、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００２ｍｇ／ｋｇ体重とすることができる。一部の実施形態では、治療有効用量は、０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００２ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００３ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００４ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００５ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００６ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００７ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００８ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００９ｍｇ／ｋｇ体重、０．００１ｍｇ／ｋｇ体重、０．００２ｍｇ／ｋｇ体重、０．００３ｍｇ／ｋｇ体重、０．００４ｍｇ／ｋｇ体重、０．００５ｍｇ／ｋｇ体重、０．００６ｍｇ／ｋｇ体重、０．００７ｍｇ／ｋｇ体重、０．００８ｍｇ／ｋｇ体重、０．００９ｍｇ／ｋｇ体重、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、０．０２ｍｇ／ｋｇ体重、０．０３ｍｇ／ｋｇ体重、０．０４ｍｇ／ｋｇ体重、０．０５ｍｇ／ｋｇ体重、０．０６ｍｇ／ｋｇ体重、０．０７ｍｇ／ｋｇ体重、０．０８ｍｇ／ｋｇ体重、０．０９ｍｇ／ｋｇ体重、または０．１ｍｇ／ｋｇ体重とすることができる。特定の個体のための有効用量は、個体の必要性に応じて、経時的に変えることができる（例えば、増量または減量）。
【０２０８】
一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日（例えば、約１〜９００μｇ／ｋｇ／日、１〜８００μｇ／ｋｇ／日、１〜７００μｇ／ｋｇ／日、１〜６００μｇ／ｋｇ／日、１〜５００μｇ／ｋｇ／日、１〜４００μｇ／ｋｇ／日、１〜３００μｇ／ｋｇ／日、１〜２００μｇ／ｋｇ／日、１〜１００μｇ／ｋｇ／日、１〜９０μｇ／ｋｇ／日、１〜８０μｇ／ｋｇ／日、１〜７０μｇ／ｋｇ／日、１〜６０μｇ／ｋｇ／日、１〜５０μｇ／ｋｇ／日、１〜４０μｇ／ｋｇ／日、１〜３０μｇ／ｋｇ／日、１〜２０μｇ／ｋｇ／日、１〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲）の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜１００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１、２、４、６、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、または１，０００ｕｇ／ｋｇ／日から選択される有効用量で投与される。
投与経路
【０２０９】
本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニスト（または、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドもしくはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有する組成物もしくは医薬）は、任意の適切な経路によって投与することができる。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、非経口投与される。一部の実施形態では、非経口投与は、静脈内、皮内、吸入、経皮（局所）、眼内、筋肉内、皮下、筋肉内、および／または経粘膜投与から選択される。一部の実施形態では、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、皮下投与される。本明細書で使用する場合、用語「皮下組織」とは、皮膚の直下にある、緩く、不規則な結合組織の層として定義される。例えば、皮下投与は、以下に限定されないが、大腿部、腹部、殿部、または肩甲部を含む領域に組成物を注射することにより実施することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、静脈内投与される。他の実施形態では、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、心臓または筋（例えば、筋肉内）、腫瘍（腫瘍内）、神経系（例えば、脳、脳室内、くも膜下内への直接注射）などの標的組織への直接投与により投与される。あるいは、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニスト（または、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有している組成物もしくは医薬）は、吸入、非経口、皮内、経皮、または経粘膜（例えば、経口または鼻内）により投与することができる。所望の場合、２つ以上の経路を、同時に使用することができる。
【０２１０】
一部の実施形態では、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、経口投与される。一部の実施形態では、本発明は、経口投与向けの、本明細書に記載されているアンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストの固形剤形であって、（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチド、（ｂ）少なくとも１種の薬学的に許容されるｐＨ低下剤、（ｃ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生体利用を促進するのに有効な少なくとも１種の吸収促進剤、および（ｄ）保護ビヒクルを含む、固形剤形を提供する。一部の実施形態では、固形剤形は、カプセル剤または錠剤である。経口用製剤を作製するための様々な方法および成分が当分野で公知であり、当業者であれば、これらの方法および成分のいずれが、本明細書において記載されている発明および／またはその全体の開示が本明細書に組み込まれている、２０１２年９月１７日出願の米国仮特許出願第６１／７０１，９７２号における発明に適合可能であるかを決定することができることが予期される。こうした方法および成分も、本発明の範囲内のものとして企図される。
投与スケジュール
【０２１１】
様々な実施形態には、様々な投与レジメンが含まれ得る。一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、連続注入によって投与される。一部の実施形態では、この連続注入は静脈内である。他の実施形態では、この連続注入は皮下である。あるいは、または追加的に、一部の実施形態では、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、２か月毎、毎月、毎月２回、３週間毎、２週間毎、毎週、毎週２回、毎週３回、毎日、毎日２回、または別の臨床的に望ましい投与スケジュールに基づいて投与される。単一の対象のための投与レジメンは、一定間隔である必要はないが、対象の必要性に応じて、経時的に変えることができる。
併用療法
【０２１２】
一部の実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、併用療法の一部として使用されよう。１つまたは複数の脳状態のための公知の任意の治療薬または処置が、本明細書において開示されている、１種または複数のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストと共に使用されてもよいことが企図される。併用療法として、１種または複数のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストと共に使用されてもよい例示的な化合物には、以下に限定されないが、ベータ遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン）、抗凝固剤、およびそれらの組合せが含まれる。
キット
【０２１３】
一部の実施形態では、本発明は、Ａｎｇ（１−７）ペプチド、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニスト、またはそれを含有する製剤を含有するキットまたは他の製造品をさらに提供し、その再構成（凍結乾燥である場合）および／または使用のための指示書を提供する。キットまたは他の製造品は、投与（例えば、皮下、吸入による）において有用な容器、注射器、バイアル、および任意の他の物品、デバイス、または機器を含むことができる。好適な容器は、例えば、ボトル、バイアル、注射器（例えば、予め充填されている注射器）、アンプル、カートリッジ、リザーバ、またはｌｙｏ−ｊｅｃｔを含む。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成することができる。一部の実施形態では、容器は、予め充填されている注射器である。好適な予め充填されている注射器は、以下に限定されないが、焼成シリコーンコーティングを有するホウケイ酸ガラス注射器、吹付けシリコーンを有するホウケイ酸ガラス注射器、またはシリコーンを有していないプラスチック樹脂製注射器を含む。
【０２１４】
通常、容器は、製剤、ならびに再構成および／または使用のための指示を表示することができる該容器上のラベル、またはその容器に付随したラベルを保持することができる。例えば、ラベルは、製剤が上記の濃度に再構成されることを表示することができる。ラベルはさらに、製剤が、例えば皮下投与に有用であること、または皮下投与向けであることを表示することができる。一部の実施形態では、容器は、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有する、単回用量の安定な製剤を含有することができる。様々な実施形態では、単回用量の安定な製剤は、約１５ｍｌ、１０ｍｌ、５．０ｍｌ、４．０ｍｌ、３．５ｍｌ、３．０ｍｌ、２．５ｍｌ、２．０ｍｌ、１．５ｍｌ、１．０ｍｌ、または０．５ｍｌ未満の容量で存在する。あるいは、製剤を保持する容器は、製剤の繰り返し投与（例えば、２〜６回の投与）を可能にする、多目的のバイアルであってもよい。キットまたは他の製造品はさらに、好適な賦形剤（例えば、ＢＷＦＩ、生理食塩水、緩衝生理食塩水）を含む第２の容器を含んでもよい。賦形剤および製剤の混合に際して、再構成された製剤中の最終タンパク質濃度は、一般に、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ（例えば、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも３０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも４０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌ）になろう。キットまたは他の製造品はさらに、使用のための指示書と共に、他の緩衝液、賦形剤、フィルター、針、注射器、および添付文書を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の材料を含むことができる。一部の実施形態では、キットまたは他の製造品は、自己投与のための指示書を含んでいてもよい。
【実施例】
【０２１５】
（実施例１）
大動脈環拡張を低下させるアンジオテンシン（１−７）ペプチド
【０２１６】
この実施例では、マルファン症候群の公知の容認されているモデルである、ＦＢＮ１Ｃ１０３９Ｇ／＋マウスを使用して、これらのマウスにおいて通常、見られる大動脈拡張に及ぼす、いくつかのアンジオテンシン（１−７）ペプチド、およびアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストであるＡＶＥ０９９１の効果を評価する。Ｘｉｏｎｇら、Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ  ｄｅｌａｙｓ  ａｎｅｕｒｙｓｍ  ｒｕｐｔｕｒｅ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｍａｒｆａｎ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ、２００８年、Ｊ．  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｕｒｇ４７巻、１６６〜１７２頁を参照されたい。フィブリリン−１（ＦＢＮ１）遺伝子のこうした変異により、これらのマウスは、死に至らしめることが多い、一生を通じての、散発性大動脈解離を伴う進行性大動脈基部拡張を発症する。
【０２１７】
この実施例では、３種のアンジオテンシン（１−７）ペプチド、すなわちＴＸＡ１２７（配列番号１）、ＰａｎＣｙｔｅ（配列番号２２）、およびＴＸＡ３０１（配列番号２）、ならびに低分子アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストであるＡＶＥ０９９１を使用して、経時的な大動脈拡張の進行に及ぼすこれらの効果を試験する。具体的には、１１０匹のＦＢＮ１Ｃ１０３９Ｇ／＋マウス（群あたり１０匹）を以下の表１に概説している群の１つに入れる。
【０２１８】
【表１】
2016520592.tif 000010
【０２１９】
この実施例では、ＴＸＡ１２７、ＴＸＡ３０１、ＰａｎＣｙｔｅおよびＡＶＥ０９９１は、生理食塩水中で調製し、２８日間、毎日、１００μｌ／マウスの用量の体積で肩甲下注射により皮下投与する。投与用溶液は、３日毎に新しく調製する。
【０２２０】
最後の注射をして１週間後、各動物を犠牲にして、大動脈環を切り取って分析し、アンジオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストの投与が、対照動物と比べて、処置マウスの大動脈拡張の程度を低下させるのに十分であるかどうかを決定する。
【０２２１】
アンジオテンシン（１−７）ペプチドの投与により、ＦＢＮ１Ｃ１０３９Ｇ／＋マウスにおける大動脈環拡張が低下することが予期される。アンジオテンシン（１−７）ペプチドの投与はまた、ＦＢＮ１Ｃ１０３９Ｇ／＋マウスにおいて、関節の弛緩程度も低下させるであろう。
（実施例２）
大動脈瘤の増大の低下におけるＴＸＡ１２７
【０２２２】
この実施例では、マルファン罹患者において通常観察される、大動脈基部の増大を衰弱させる、ＴＸＡ１２７の能力を記載する。大動脈基部の増大は、この疾患の最も深刻、かつ多くの場合、致死性の影響の１つである。
【０２２３】
この実施例では、「マルファンマウス」とも呼ばれる、合計２０匹のマウス（８匹のマウスは野生型であり、１２匹は、Ｆｂｎ１Ｃ１０３９Ｇ＋マウスである）を使用し、これらのマウスは、それぞれ、Ｆｂｎ１の上皮増殖因子様ドメインにおいて、システインの置換体である、Ｃｙｓ１０３９Ｇｌｙ（Ｃ１０３９Ｇ）（Ｆｂｎ１Ｃ１０３９Ｇ／＋）をコードする、フィブリリン−１（Ｆｂｎ１）アレルに対する同型接合体である。
【０２２４】
これらのＦｂｎ１Ｃ１０３９Ｇマウスは、十分に容認されているマルファン症候群のモデルであり、Ｆｂｎ１変異は、マルファン症候群を引き起こす、最も一般的な変異のクラスである。通常、Ｆｂｎ１Ｃ１０３９Ｇマウスにおける大動脈基部は、早ければ２週齢で明白となる進行性拡張を受ける。７週齢までに、変異体マウスにおけるこの大動脈基部は、野生型マウスにおけるものよりもかなり大きくなる。このように観察されるサイズの差異は一般に、経時的に一層、顕著になる。１４週齢のＦｂｎ１Ｃ１０３９Ｇマウスの組織学的分析により、弾性線維の断片化および錯綜配列を伴う、大動脈中膜の異常な肥厚が明らかにされる。さらに、Ｆｂｎ１Ｃ１０３９Ｇマウスは、ＴＧＦ−βシグナル伝達の増加の間接的なマーカーである、コラーゲン沈着の増加を示す。リン酸化、ならびにその後の、ＴＧＦ−βシグナル伝達により誘発されるＳｍａｄ２（ｐＳｍａｄ２）およびＥｒｋ１／２（ｐＥＲＫ１／２）の核転座が、野生型マウスに比べて、Ｆｂｎ１Ｃ１０３９Ｇマウスの大動脈中膜において、顕著に増加する。
【０２２５】
疾患発症の通常の経過に及ぼす、アンジオテンシン（１−７）ペプチド、ここではＴＸＡ１２７の効果を決定するため、野生型マウスとマルファンマウスの両方を、これらのマウスが２か月齢に到達すると、２つの群にそれぞれ分けた。野生型マウスおよびマルファンマウスのそれぞれにおいて、プラセボ対照群に６０日間、毎日、皮下に生理食塩水の注射を与えた一方、ＴＸＡ１２７群に６０日間、毎日、５００μｇ／ｋｇ／日の用量のＴＸＡ１２７の皮下注射を与えた。
【０２２６】
この試験における一次エンドポイントは、インビボでの心エコー検査により測定される、６０日間の処置期間にわたって観察される大動脈増大の程度であった。ベースラインの心エコー図は、処置期間の開始直前に行い、次に、犠牲にする直前に再度行った。６０日間の処置期間後、マウスを犠牲にし、組織学分析および他の分析用に組織試料を採取した。
【０２２７】
図１に示されている通り、マルファンマウスでは、５００μｇ／ｋｇ／日のＴＸＡ１２７による処置によって、プラセボにより処置されたマルファンマウスと比べて、大動脈基部の増大の程度がかなり有意に低下した。実際に、これらのデータにより、大動脈基部の増大が、ＴＸＡ１２７群において、本質的になくなったことを示す。図１はまた、ＴＸＡ１２７による処置は、プラセボにより処置された野生型マウスと比べて、野生型マウスの大動脈基部の増大に対して統計的に有意な効果を有さないことも示す。
【０２２８】
この実施例は、アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、マルファン症候群の最も致死的な症状の１つに対して有意な効果を有することが示されたことを、最初に表したものである。したがって、本発明のいくつかの実施形態は、マルファン罹患者に対する強力かつ全く新規な処置クラスを提供する。
均等物および範囲
【０２２９】
当業者は、決まった手順の実験だけを使用して、本明細書に記載されている本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または確認することができるであろう。本発明の範囲は、上の詳細説明に限定されることを意図するものではなく、むしろ以下の特許請求の範囲において説明される。
【図１】
2016520592.tif 000013
【配列表】
2016520592000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成28年1月21日(2016.1.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンジオテンシン（１−７）ペプチドを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置するための組成物であって、該組成物はマルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に投与されることで特徴付けられる、組成物。
【請求項２】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、期間もしくは頻度が軽減されるよう、またはその発生が遅延するような投与間隔において、有効用量で定期的に投与される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状または特徴が、大動脈拡大、大動脈解離、水晶体転位、僧帽弁逸脱、関節過度可動性、網膜剥離、斜視、白内障、緑内障、閉塞性肺疾患、脊柱側弯症、顎関節障害、硬膜拡張、およびオステオペニアからなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記マルファン関連障害が、ロイス−ディーツ症候群、家族性大動脈瘤、大動脈拡張を伴う大動脈二尖弁、家族性水晶体偏位症（水晶体の転位）、僧帽弁逸脱症候群、マルファン体型、先天性拘縮性くも状指趾症（ビールス症候群）、スティックラー症候群、シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群、ヴァイル−マルケザーニ症候群、およびエーラース−ダンロス症候群からなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが非経口投与される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記非経口投与が、静脈内、皮内、吸入、経皮（局所）、眼内、筋肉内、皮下、筋肉内、および／または経粘膜投与から選択される、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが経口投与される、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、毎月、毎週、毎日、または変動間隔で投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、４００〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、１種または複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬と組み合わせて投与される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記１つまたは複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬が、ベータ遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン）、抗凝固剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、配列番号１の機能的等価体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記機能的等価体が、線状ペプチドである、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られる７個のアミノ酸に由来するアミノ酸を、少なくとも４個含む配列を含んでおり、該少なくとも４個のアミノ酸が、該天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られるとおりの相対位置を維持している、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記線状ペプチドが、４〜２５個のアミノ酸を含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のフラグメントである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２１】
前記線状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記機能的等価体が、環状ペプチドである、請求項１５に記載の組成物。
【請求項２３】
前記環状ペプチドが、アミノ酸の間に連結を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記連結が、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）中のＴｙｒ４位およびＰｒｏ７位に対応する残基に位置している、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記連結が、チオエーテル架橋である、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２６】
前記環状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列と、他の点で同一のアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２７】
前記環状ペプチドが、以下の式
【化１】
2016520592.tif 000014
を有する４，７環化アンジオテンシン（１−７）である、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２８】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、プロテアーゼ抵抗性、血清安定性、および／または生体利用率を向上させるために、１つまたは複数の化学修飾を含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項２９】
前記１つまたは複数の化学修飾が、ペグ化を含む、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置するための組成物であって、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に投与されることで特徴付けられる、組成物。
【請求項３１】
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが、非ペプチドアゴニストである、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記非ペプチドアゴニストが、以下の構造
【化２】
2016520592.tif 000015
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが経口投与される、請求項３０から３２のいずれか一項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
本発明の他の特徴、目的、および利点は、以下の詳細説明において明らかとなる。しかし、詳細説明は、本発明の実施形態を示すが、例示目的に過ぎず、限定ではないことを理解すべきである。詳細説明から、本発明の範囲内の様々な変更および修正が当業者に明らかになろう。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法。
（項目２）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、期間もしくは頻度が軽減されるよう、またはその発生が遅延するような投与間隔において、有効用量で定期的に投与される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記マルファン症候群および／またはマルファン関連障害の少なくとも１つの症状または特徴が、大動脈拡大、大動脈解離、水晶体転位、僧帽弁逸脱、関節過度可動性、網膜剥離、斜視、白内障、緑内障、閉塞性肺疾患、脊柱側弯症、顎関節障害、硬膜拡張、およびオステオペニアからなる群から選択される、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記マルファン関連障害が、ロイス−ディーツ症候群、家族性大動脈瘤、大動脈拡張を伴う大動脈二尖弁、家族性水晶体偏位症（水晶体の転位）、僧帽弁逸脱症候群、マルファン体型、先天性拘縮性くも状指趾症（ビールス症候群）、スティックラー症候群、シュプリンツェン−ゴールドバーグ症候群、ヴァイル−マルケザーニ症候群、およびエーラース−ダンロス症候群からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが非経口投与される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記非経口投与が、静脈内、皮内、吸入、経皮（局所）、眼内、筋肉内、皮下、筋肉内、および／または経粘膜投与から選択される、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが経口投与される、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、毎月、毎週、毎日、または変動間隔で投与される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、約４００〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、１種または複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬と組み合わせて投与される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記１つまたは複数のマルファン症候群および／またはマルファン関連障害の薬が、ベータ遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン）、抗凝固剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、配列番号１の機能的等価体である、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記機能的等価体が、線状ペプチドである、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られる７個のアミノ酸に由来するアミノ酸を、少なくとも４個含む配列を含んでおり、該少なくとも４個のアミノ酸が、該天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において見られるとおりの相対位置を維持している、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記線状ペプチドが、４〜２５個のアミノ酸を含有する、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のフラグメントである、項目１６に記載の方法。
（項目２０）
前記線状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）において、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含有する、項目１６に記載の方法。
（項目２１）
前記線状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記機能的等価体が、環状ペプチドである、項目１５に記載の方法。
（項目２３）
前記環状ペプチドが、アミノ酸の間に連結を含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記連結が、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）中のＴｙｒ４位およびＰｒｏ７位に対応する残基に位置している、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記連結が、チオエーテル架橋である、項目２３に記載の方法。
（項目２６）
前記環状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）という天然に存在するアンジオテンシン（１−７）アミノ酸配列と、他の点で同一のアミノ酸配列を含む、項目２２に記載の方法。
（項目２７）
前記環状ペプチドが、以下の式
【化８】
2016520592.tif 000016
を有する４，７環化アンジオテンシン（１−７）である、項目２２に記載の方法。
（項目２８）
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、プロテアーゼ抵抗性、血清安定性、および／または生体利用率を向上させるために、１つまたは複数の化学修飾を含む、項目１５に記載の方法。
（項目２９）
前記１つまたは複数の化学修飾が、ペグ化を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
マルファン症候群および／またはマルファン関連障害に罹患しているか、または罹患しやすい対象に、アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストを投与するステップを含む、マルファン症候群および／またはマルファン関連障害を処置する方法。
（項目３１）
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが、非ペプチドアゴニストである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記非ペプチドアゴニストが、以下の構造
【化９】
2016520592.tif 000017
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記アンジオテンシン（１−７）受容体アゴニストが経口投与される、項目３０から３２のいずれか一項に記載の方法。
【国際調査報告】
2016520592.tif 000018
2016520592.tif 000019