(57)【要約】【課題】本発明は、対象物からのタガントの回収性を高めるための方法を提供する。【解決手段】本方法は、タガントを溶液に組み込む工程と；第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含む溶液を摂動剤と混合する工程と；第２の摂動剤タガントポリマー溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と；タガントコーティングされた対象物を形成するために、第２の摂動剤タガントポリマー溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含む。タガントでマーキングされた対象物の認証方法もまた提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象物からのタガントの回収性を高めるための方法であって、
タガントを溶液に組み込む工程と；
第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含む溶液を摂動剤と混合する工程と；
第２の摂動剤タガントポリマー溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と；
タガントコーティングされた対象物を形成するために、第２の摂動剤タガントポリマー溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程と；
を含む方法。
【請求項２】
タガントが、核酸を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
摂動剤が、ポリオール、ヒドロキシプロピルデンプン、およびピロリドン化合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
摂動剤が、ポリエチレングリコール（PEG）およびアルキルグリコールからなる群から選択されるポリオールを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
タガントコーティングされた対象物のコーティングが、ポリウレタン、セラック、ラッカー、アクリル化合物、エポキシ系化合物、またはそれらの混合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ポリマーが、エポキシアクリレート、エポキシウレタン、ポリカーボネート（PC）、ポリメタクリル酸メチル（PMMA）、ポリウレタン（PU）、ポリスチレン（PS）、ポリアミド、ポリプロピレン（PP）、ポリ塩化ビニル（PVC）、ポリスルホン、ポリ酢酸ビニル（PVA）、ポリエステル（PES）、ポリエチレンテレフタレート（PET）、ポリエチレン（PE）、ベンゾシクロブテン（BCB）、高密度ポリエチレン（HDPE）、ポリ塩化ビニリデン（PVDC）、低密度ポリエチレン（LDPE）、耐衝撃性ポリスチレン（HIPS）、アクリロニトリルブタジエンスチレン（ABS）、フェノール−ホルムアルデヒド樹脂（PF）、メラミンホルムアルデヒド（MF）、ポリエーテルエーテルケトン（PEEK）、ポリエーテルイミド（PEI）、ポリイミド、ポリエーテルイミド、ポリエーテルケトンイミド、ポリ乳酸（PLA）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、ポリメチルペンテン、ポリエーテルケトン、ポリエーテルスルホン、ポリフェニレンスルフィド、ポリテトラフルオロエチレン、ブチルゴム、フルオロポリマー、シリコーン、アイオノマー、成形用エラストマー、エチレンビニルアルコール（EVOH）、メタロセンポリマー、およびポリエチレンナフタレート、またはそれらの２種以上の混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
摂動剤の量が、第２の摂動剤タガントポリマー溶液中のポリマーに対して約０．１〜約３０％ｗ／ｗの範囲である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
タガントが、ＩＲアップコンバージョン蛍光体（UCP）またはＵＶフルオロフォアをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
対象物を認証するための方法であって、
タガント、摂動剤、およびポリマーを含むコーティングを含む対象物を提供する工程と；
対象物からタガントを回収する工程と；
タガントを識別することによって対象物の真贋を検証する工程と；
を含む方法。
【請求項１０】
タガントが、ＤＮＡ、ＩＲアップコンバージョン（UCP）、ＵＶフルオロフォア、セラミックＩＲマーカー、アミノ酸、タンパク質、フェロモン、香気、微量元素、希土類元素、またはそれらのいずれか２種以上の組合せからなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
タガントが、ＤＮＡと、ＩＲアップコンバージョン蛍光体（UCP）およびＵＶフルオロフォアから選択される光学マーカーとから本質的になる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
摂動剤が、ポリオール、ヒドロキシプロピルデンプン、およびピロリドン化合物からなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
摂動剤が、ポリエチレングリコール（PEG）およびポリプロピレングリコールからなる群から選択されるポリオールを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
タガント、摂動剤、およびポリマーを含むコーティングを含む、タガントでマーキングされた対象物。
【請求項１５】
対象物を認証するための方法であって、
１または複数のタガント、少なくとも１種の摂動剤、およびポリマーを含む対象物を提供する工程と；
対象物から１または複数のタガントを回収する工程と；
タガントを識別することによって対象物の真贋を検証する工程と；
を含む方法。
【請求項１６】
タガントが、ＤＮＡ、ＩＲアップコンバージョン（UCP）、ＵＶフルオロフォア、セラミックＩＲマーカー、アミノ酸、タンパク質、フェロモン、香気、微量元素、希土類元素、またはそれらのいずれか２種以上の組合せからなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
タガントが、ＤＮＡを含み、摂動剤が、ポリオール、デンプン、界面活性剤、またはそれらの２種以上の組合せを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１種のポリオールが、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびポリプロピレングリコールからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
対象物から回収されたＤＮＡタガントが、ＰＣＲまたはＦＩＳＨを含む方法を使用して認証される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＤＮＡタガントが、ＤＮＡタガントに特異的なプライマーを使用して特異的アンプリコンを生成するＰＣＲ反応と、ポリメラーゼ連鎖反応において増幅された特異的アンプリコンの数および特異的アンプリコンのそれぞれの長さの識別とにおいて認証される、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[0002]  本発明は、ポリマーへの追跡可能なタガント(taggant)の組み入れを容易にするための、ならびにそのようなタガントを対象物の美的外観または対象物のマトリックスを変化させることなく回収および検出するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
[0004]  核酸は、比較的単純なヌクレオチドビルディングブロックから構成されるにもかかわらず、莫大な情報をコードすることが可能である：その証拠に、ヒトゲノムは、脳の神経回路網から骨格、組織および臓器の複雑な構造まで、人体のすべての構成要素の合成および構築に必要なすべての情報をコードしている。核酸は、デオキシリボ核酸（DNA）およびより不安定なリボ核酸（RNA）を含む。核酸配列は固有かつ複雑となり得ることから、製品の認証およびトラッキングならびに偽造製品の検出など、いくつかの一般的なコーディング問題を解決する際にこれらの特定の特徴を利用することは、近年大きな関心を集めている。
【０００３】
[0005]  多くの製品製造業者は、「トレードドレス」として識別可能な外観品質および確定的デザインを利用してその高品質かつ高価値の製品を一意的に識別し、それによって顧客の信頼を獲得する。偽造防止のためにラベルを付加する場合もある。従来の偽造防止ラベルは、一般的に、特に標的とされる物理的または化学的特徴を有する材料から形成され、たとえば、小切手帳上の磁気ストリップ、クレジットカード上のレーザーホログラム、株券上の蛍光インク、および機密文書上の感熱インクである。偽造防止ラベルはまた、識別される必要がある対象物に特有の抗原を付加することによっても作製されており、抗原はその後、その抗原に特異的な抗体を用いて検出することができる。しかしながら、抗原および抗体は、多くの温度および湿度の環境条件下で安定性が乏しいことを特徴とするタンパク質であり、変性またはさらには分解しやすく、結果として活性を失い、容易に破壊される可能性があり、それによって識別の精度および信頼性が低下する。
【０００４】
[0006]  そのため、たとえば、基本的な遺伝情報をコードするデオキシリボ核酸（DNA）およびリボ核酸（RNA）などの核酸が、一般に使用される偽造防止用のラベルおよびマーカーに対する改良された代替物として注目されている。ＤＮＡおよびＲＮＡは、ヌクレオチド鎖からなるポリマーであり、２０〜５０塩基長程度までの比較的短い鎖からなる「オリゴヌクレオチド」、またはより長い鎖の場合「ポリヌクレオチド」と称される。これらのオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド鎖は、糸に通したビーズのように次々と互いに連結された多数のヌクレオチドからなる。各ヌクレオチドは、４種類のみの窒素塩基：ＤＮＡの場合、アデニン（多くの場合、短縮形で「A」と表される）、グアニン（「G」と表される）、シトシン（「C」と表される）およびチミン（「T」と表される）；ならびにＲＮＡの場合、アデニン（A）、グアニン（G）、シトシン（C）およびウラシル（U）のうちの１つと連結したリボース糖−リン酸からなる。オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドは、同じ糖−リン酸主鎖を共有する。リボース糖の３’−ヒドロキシル基は、その隣接するヌクレオチドの５’−リン酸基と共有結合して鎖構造を形成し、平面状の窒素塩基が、櫛の歯と同じように鎖から突き出している。
【０００５】
[0007]  １本のオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド鎖中の塩基Ａ、Ｔ、Ｇ、およびＣはそれぞれ、異なる鎖中の別の塩基と特異的に対合して二本鎖構造を形成する、または同じ鎖と二本鎖のループまたはヘアピン構造を形成することが可能である：アデニンは、ＤＮＡでは、２つの水素結合によってチミンと（またはRNAでは、ウラシルと）特異的に結合し、シトシンは、３つの水素結合によってグアニンと特異的に結合する。つまり、ＴはＡと、ＧはＣと結合することにより、２本のヌクレオチド鎖が一緒になって二本鎖を形成する、または１本のヌクレオチド鎖の２つの部分が一緒になって二重鎖の各鎖がループによって接合された二本鎖領域を形成する。
【０００６】
[0008]  マーカーまたはタガントとして使用される核酸のさらなる利点は、これらの分子は、適正に保護することにより、長期間保存できることである。氷河、氷床、タールピットおよび沼、ならびに湿地中の保存標本からの証拠は、ＤＮＡが、何千年も、場合によっては何百万年もにわたり分解に耐えることを示す。そのような証拠は、古代人ならびに植物および動物の祖先ならびに起源に関する情報をたどるために使用されている。保護されたマーカーＤＮＡは、長期間存続するように、目的の高価値の物品または対象物をコーティングするためのポリマー中で安定化することもでき、その後、識別、認証およびトラッキングのために使用することができる。長期にわたり持続するこの能力を、例として、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を使用した増幅による、少数の分子を検出する高感度の方法と併用することで、核酸、特にＤＮＡは、マーカーとして使用される魅力的な候補物質となる。そのうえ、可能な固有の配列の数は、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの配列の塩基の追加ごとに４倍増加することから、核酸は、ほぼ無限のコーディング容量を提供する。
【０００７】
[0009]  Ｓｈｅｕら（米国特許第７，１１５，３０１号）は、目的の品物の全部または一部のみのコーティングに使用できる多様な媒体にＤＮＡを組み込むことによって、ＤＮＡを、固体の物品または物質をマーキングするために使用できることを開示した。Ｓｈｅｕらによって開示されているそのようなコーティングに有用ないくつかの媒体としては、ポリカーボネート（PC）、ポリメタクリル酸メチル（PMMA）、ポリスチレン（PS）、およびポリプロピレン（PP）、またはアクリル／エポキシ樹脂系配合物が挙げられる。多くの場合、貴重な物品、たとえば、絵画または易損品のタグ付けには、マーキングされた物品の美的外観および完全性を保存するため、非侵襲的または非破壊的なサンプリング方法が必要とされる。しかしながら、タガントの回収が困難となる場合もあり、またはその方法の適用可能性を限定するほど低い回収率をもたらす場合もある。
【０００８】
[0010]  アクリルまたはエポキシ系樹脂のポリマーなどのポリマーは、タガントの担体媒体として使用することができる。残念なことに、これらのポリマーからのタガントの回収は、多くの場合困難であり、そのような問題点に対処するための溶剤の組合せが開発されている（例として、Elwell、米国特許第４，２７８，５５７号を参照されたい）。しかしながら、そのようなポリマーのコーティングとしての使用を採用するほとんどの用途の場合、検証を目的としたポリマーコーティングからのタガントの適切な回収を達成するために、ポリマーの全溶解は必要でない（また通常は可能でない）。さらに、ポリマーが付着された貴重な物品または対象物に対するそのような溶剤の使用は、物品または対象物を変色または損傷させる場合があるため、望ましくなく、通常は推奨されない。購入品の認証に関心のある所有者または善意の購入者（bona fide purchaser）が、著しく侵襲的または破壊的な方法の使用を承認するとは思われない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
[0011]  したがって、タグ付けされた物品を物品の審美性を損なう場合がある過酷な溶剤処理に供することなく、価値のある物品上の重合コーティングからタガントを取り出すことを可能にする系が、当技術分野において必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
[0013]  本発明の例示的な実施形態は、物品を損傷させるまたはその外観の審美性を損なうことなく、タグ付けされた物品表面からタガントを抽出するための方法を提供する。
【００１１】
[0014]  本発明のある例示的な実施形態では、対象物のコーティングに有用なポリマーマトリックスへの追跡可能なタガントの組み入れを容易にするための方法が提供される。本方法は、タガントを溶液に組み込む工程と、第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含んだ溶液を摂動剤（perturbant）と混合する工程と、第２の摂動剤タガント溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と、対象物のタガントコーティングされた部分を形成するために、第２の摂動剤タガント溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含む。
【００１２】
[0015]  別の例示的な実施形態では、本発明は、対象物のコーティング中のポリマーマトリックスに組み込まれた追跡可能なタガントの回収性を高めるための方法を提供する。本方法は、タガントを溶液に組み込む工程と、第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含む溶液を摂動剤と混合する工程と、第２の摂動剤タガント溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と、第２の摂動剤タガント溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含み、ここで、タガントの回収は、摂動剤によって向上する。
【００１３】
[0016]  本発明のさらに別の例示的な実施形態では、対象物を認証する(authenticating)ための方法が提供される。本方法は、タガント、たとえば核酸、摂動剤、たとえばポリオール、およびポリマーコーティングを含むコーティングを含む対象物を提供する工程と；対象物からタガントを回収する工程と、タガントを識別することによって対象物の真贋(authenticity)を検証する工程とを含む。
【００１４】
[0017]  本発明の別の例示的な実施形態によれば、タガントでマーキングされた対象物が提供される。対象物は、目的の対象物の表面の少なくとも一部分を覆うコーティングを含むことができ；ここで、コーティングは、ポリマー中の核酸タガントおよび摂動剤を含む。あるいは、対象物は、対象物全体に均一に分布した、ポリマー中の核酸タガントおよび摂動剤を含むこともできる。別の代替形態では、対象物は、コーティングの一部分および／または表面コーティングを含まない対象物の一部分などに、対象物に不均一に分布した、ポリマー中の核酸タガントおよび摂動剤を含むこともできる。
【００１５】
[0018]  本発明のまた別の実施形態によれば、対象物を認証するための方法が提供される。本方法は、タガント、少なくとも１種の摂動剤、たとえばポリオールを含むコーティングを有する対象物を提供する工程と、対象物からタガントを回収することと、下記に詳述する周知の方法のいずれかによってタガントを識別することによって対象物の真贋を検証することとを含む。
【００１６】
[0019]  本発明の別の実施形態によれば、タガントでマーキングされた対象物が提供される。マーキングされた対象物は、核酸タガント、少なくとも１種の摂動剤（たとえばポリオール）、および溶剤を含むコーティングを含み；このコーティングを硬化および／または乾燥させて、タガントならびに単数もしくは複数のポリオールならびに硬化および／または乾燥工程後の残留溶剤を組み込んだコーティングされた対象物を得ることができる。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
[0021]  定義：
[0022]  本明細書で使用される用語「タガント」は、対象物の特性、例として、その製造源などを示すために対象物に取り付けられる物質を表すのに使用される。タガントでマーキングされる対象物は、任意の追跡可能な固体の品物、たとえば、保管中かまたは輸送中の、電子デバイス、衣料品、紙、繊維、もしくは布地、または他の任意の商品、または現金もしくは貴重品であることができる。あるいは、タガントでマーキングされる商品は、液体、例として、インク、染料、またはスプレーなどであることもできる。別の代替形態では、商品は、コモディティ品、たとえば、紙、金属、木材、プラスチック、または粉末であることもできる。タガントは、たとえば、会社もしくは品物のタイプに特有のもの（たとえば型番）、品物の特定のロットもしくはバッチに特有のもの（ロット番号）、または実際の品物に特有のもの、例として、品物に固有のシリアルナンバーなどのものなどであることができる。加えて、タガントは、多様な他の有用なデータ項目のいずれか１または複数を示すこともできる；たとえば、タガントは、タグ付けされた製品もしくは品物を製造した会社の名称および連絡先情報、製造日、販売業者、ならびに／または製品もしくは品物の予定小売業者を示すデータをエンコードすることができる。タガントはまた、たとえば、品物に組み込まれた成分の供給源または製品もしくは品物の製造に使用された生産プラントもしくは機械の識別情報などの成分データ；製品もしくは品物が出荷された日、販売業者による受領日、および／または小売業者への納入日、ならびに他の任意の有用な商業的または他のデータ、例として、特注品の所有者の個人情報などを示すこともできるがこれらに限定されない。データまたはインディシア（indicia）の各要素は、タガント中に暗号化またはエンコードすることができ、対象物から回収されたタガントから解読し、本明細書に記載された方法に従ってデコードまたは復号することができる。次いで、デコードまたは復号されたデータを使用して、対象物の特性を検証する、または対象物を認証する、または偽造の品物を排除することができる。
【００１８】
[0023]  用語「ＰＣＲ」は、ポリメラーゼ連鎖反応を指す。ＰＣＲは、ＤＮＡポリメラーゼ、好ましくは、好熱性細菌（サーマス・アクアティカス（Thermus aquaticus））から元来単離された熱安定性Ｔａｑポリメラーゼなどの熱安定性ＤＮＡポリメラーゼの存在下で、鋳型核酸配列に接する特有の配列に相補的な短いプライマーオリゴヌクレオチドの対を用いて、溶融、再アニーリングおよび重合のサイクルの温度サイクリングによって鋳型核酸配列のコピー数を増大させるのに有用な増幅技術である。ＰＣＲとしては、ＤＮＡ鎖がコピーされて元のＤＮＡ鎖の１００万以上のコピーをもたらす、標準的なＰＣＲ法（たとえば、ランダムプライマーを使用したPCR:例として、PCR with Arbitrary Primers: Approach with Care. W.C. Black IV、Ins. Mol. Biol. 2: 1-6、2007年12月を参照されたい）；ＰＣＲ産物の量を各サイクルでモニタリングすることができる、リアルタイムＰＣＲ技術（Real time quantitative PCR: C.A. Heid、J. Stevens、K.J. LivakおよびP.M. Williams、1996 Genome Research 6: 986-994）；まずＲＮＡがＤＮＡ鎖にコピーされ、その後ＤＮＡ鎖が標準的なＰＣＲ反応によって増幅される、逆転写−ＰＣＲ（たとえば、Quantitative RT-PCR: Pitfalls and Potential: W.F. Freeman、S.J. WalkerおよびK.E. Vrana; BioTechniques 26:112-125、1999年1月を参照されたい）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００１９】
[0024]  本明細書で使用される用語「モノマー」は、１または複数の他の化学物質(chemical entity)と共有結合により連結してオリゴマーまたはポリマーを形成し得る任意の化学物質を指す。「モノマー」の例としては、ヌクレオチド、アミノ酸、糖類、およびアミノ酸等が挙げられる。
【００２０】
[0025]  用語「核酸」は、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドであり得るヌクレオチドから構成されるポリマーを意味する。これらの化合物は、天然のまたは合成的に生成されたデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドであり得る。合成的に生成された核酸は、天然に存在する配列または非天然の固有の配列を持つことができる。
【００２１】
[0026]  用語「リボ核酸」および「ＲＮＡ」は、リボヌクレオチドから構成されるポリマーを表す。用語「デオキシリボ核酸」および「ＤＮＡ」は、デオキシリボヌクレオチドから構成されるポリマーを表す。
【００２２】
[0027]  用語「ヌクレオチド」は、窒素含有塩基、デオキシリボヌクレオチドの場合、通常はアデニン（A）、グアニン（G）、シトシン（C）またはチミン（T）、およびリボヌクレオチドの場合、通常はアデニン（A）、グアニン（G）、シトシン（C）またはウラシル（U）と共有結合した糖リン酸、通常はリボース−５’−リン酸または２’−デオキシリボース−５’−リン酸を含むモノマー単位を意味する。
【００２３】
[0028]  本明細書において使用される用語「オリゴヌクレオチド」は、２〜約２０ヌクレオチド長の鎖を形成する、ヌクレオチドモノマーから共有結合により構成される一本鎖または二本鎖のポリマーを指す。
【００２４】
[0029]  本明細書において使用される用語「ポリヌクレオチド」は、一般的には約２０を超えるヌクレオチド長の鎖を形成する、ヌクレオチドモノマーから共有結合により構成される一本鎖または二本鎖のポリマーを指す。
【００２５】
[0030]  天然に存在する配列を有する核酸は、核酸と配列特異的にハイブリダイズすることができる。つまり、それらは、相補的塩基対であるＡ：Ｔ（アデニン:チミン）およびＧ：Ｃ（グアニン:シトシン）が分子間（または分子内）水素結合を形成するハイブリダイゼーション反応と、π電子を介した各鎖中の平面状の隣接塩基間の協同的スタッキング相互作用とに関与することができ、これらは併せてワトソン−クリック型塩基対合相互作用として公知である。核酸鎖の塩基はまた、Ｇ（グアニン）がＵ（ウラシル）と対合する、あるいはＩ（イノシン）がＣ（シトシン）、Ｕ（ウラシル）またはＡ（アデニン）と対合する、いわゆる「ゆらぎ（wobble）」相互作用によって、非ワトソン−クリック型塩基対を形成するようにハイブリダイズすることもできる。
【００２６】
[0031]  用語「識別可能な配列」または「検出可能な配列」は、識別すべき標的ヌクレオチド配列と特異的に相互作用するように設計されたプライマーまたはプローブによるハイブリダイゼーションおよび／またはＰＣＲ技術によって検出することができるヌクレオチド配列を意味する。標的ヌクレオチド配列と特異的なプローブまたはプライマーとの相互作用を、光学的および／または視覚的手段によって検出して、標的ヌクレオチド配列の存在を決定することができる。
【００２７】
[0032]  本発明の実施形態は、本発明の実例を示す非限定的な例として下記に列挙されるが、本発明の範囲に対する限定と見なされることを意図したものではなく、これは、当業者にはすぐに明らかとなろう。
【００２８】
[0033]  例示的な実施形態は、対象物の外観を損なうことなく対象物からのタガントの回収性を高めるための方法を提供する。本発明のいくつかの例示的な実施形態を下記に詳述する。
【００２９】
[0034]  本発明の例示的な実施形態はまた、タガントを使用して対象物を認証するための方法を提供する。たとえば、本発明のある例示的な実施形態は、対象物からのタガントの回収性を高めるための方法であって、タガントを溶剤に組み込む工程と、第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含む溶液を摂動剤と混合する工程と、第２のタガント溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と、対象物のタガントコーティングされた部分を形成するために、第２のタガント溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含む方法を提供する。タガントは、水溶液に可溶であってもよい。水溶性タガントの例としては、核酸、糖類、ペプチド、および多くのタンパク質が挙げられる。あるいは、タガントは、水溶液または有機溶剤に不溶であってもよい。水溶液または有機溶剤に不溶であるタガントの例としては、微粒子タガント、例としてアップコンバージョン蛍光体(up-converting phosphor)（UCP）タガントなどが挙げられ、これは、核酸連結ＵＣＰなど、任意の好適なＵＣＰタガントであることができる。
【００３０】
[0035]  本発明のある例示的な実施形態は、対象物からのタガントの回収性を高めるための方法であって、タガントを溶液に組み込む工程と、第１の摂動剤タガント溶液を形成するために、タガントを含む溶液を摂動剤と混合する工程と、第２のタガント溶液を形成するために、第１の摂動剤タガント溶液をポリマーと混合する工程と、対象物のタガントコーティングされた部分を形成するために、第２のタガント溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含む方法をさらに提供する。タガントが組み込まれる溶液は、水溶液または有機溶剤であることができる。
【００３１】
[0036]  目的の対象物のコーティングに回収可能なタガントを組み込むための本発明の実施におけるコーティングとして有用なポリマーは、対象物上にコーティングを形成するのに使用できる任意のポリマー、たとえば、エポキシ−アクリレート、エポキシ−ウレタン、ポリカーボネート（PC）、ポリメタクリル酸メチル（PMMA）、ポリウレタン（PU）、ポリスチレン（PS）、ポリアミド（たとえば、ナイロン6、ナイロン66）、ポリプロピレン（PP）、ポリ塩化ビニル（PVC）、ポリスルホン、ポリ酢酸ビニル（PVA）、ポリエステル（PES）、ポリエチレンテレフタレート（PET）、ポリエチレン（PE）、ベンゾシクロブテン（BCB）、高密度ポリエチレン（HDPE）、ポリ塩化ビニリデン（PVDC）、低密度ポリエチレン（LDPE）、耐衝撃性ポリスチレン（HIPS）、アクリロニトリルブタジエンスチレン（ABS）、フェノール樹脂（PF）、メラミンホルムアルデヒド（MF）、ポリエーテルエーテルケトン（PEEK）、ポリアミド、ポリエーテルイミド（PEI）、ポリイミド、ポリエーテルイミド、ポリエーテルケトンイミド、ポリ乳酸（PLA）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、ポリメチルペンテン、ポリエーテルケトン、ポリエーテルスルホン（PES）、ポリフェニレンスルフィド、ポリテトラフルオロエチレン、ブチルゴム、フルオロポリマー（fluropolymer）、シリコーン、アイオノマー、成形用エラストマー、エチレンビニルアルコール（EVOH）、メタロセンポリマー、およびポリエチレンナフタレートなどであることができる。
【００３２】
[0037]  加えて、本発明の方法に従ってタガントを組み込むことができ、対象物の表面の全部または一部のコーティングに使用することもできる他のポリマーとしては、たとえば、アクリルガラスとも呼ばれる、メタクリル酸メチルの透明熱可塑性合成ポリマーであるポリメタクリル酸メチル（PMMA）などのアクリル化合物；およびポリメタクリル酸メチル−ポリアクリロニトリルコポリマーなどのアクリルコポリマー；および樹脂化合物と硬化剤または活性化剤の重合によって形成されるエポキシコポリマーなどの熱硬化性エポキシ系ポリマー化合物が挙げられる。樹脂は、各末端にエポキシ基を有するモノマーまたは短鎖である。たとえば、一般に使用されるエポキシ樹脂は、エピクロロヒドリン（別称、塩化グリシジルおよび1-クロロ-2,3-エポキシプロパン）などの反応性エポキシドと、ビスフェノール−Ａなどの反応性芳香族化合物との反応によって形成される。一般に使用される硬化剤の例は、トリエチレンテトラミン（TETA）であるが、ほぼあらゆるポリアミンで代用することができる。あるいは、前述のアクリル化合物およびエポキシ系化合物のいずれかの２種以上の混合物を、本発明のある実施形態によるコーティングに使用することもできる。
【００３３】
[0038]  別の例示的な実施形態では、本発明のタガントを組み入れるエポキシ系化合物としては、２個以上のエポキシ基を有する化合物および樹脂を挙げることができる。これらの化合物は、液体であっても、ゲル状であっても、固形であってもよい。たとえば、本発明の実施において有用なエポキシ系化合物としては、以下：ビスフェノールＡ、ビスフェノールＦ、ビスフェノールＳ、ヘキサヒドロビスフェノールＡ、テトラメチルビスフェノールＡ、ジアリル−ビスフェノールＡ、ヒドロキノン、カテコール、レゾルシン、クレゾール、テトラブロモビスフェノールＡ、トリヒドロキシビフェニル、ベンゾフェノン、ビスレゾルシノール、ビスフェノールヘキサフルオロアセトン、テトラメチルビスフェノールＡ、テトラメチルビスフェノールＦ、トリス（ヒドロキシフェニル）メタン、ビキシレノール、フェノール−ノボラック、またはクレゾール−ノボラックなどの多価フェノールとエピクロロヒドリンとを反応させることによって得られるグリシジルエーテル；グリセリン、ネオペンチルグリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ヘキシレングリコール、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールなどの脂肪族多価アルコールとエピクロロヒドリンとを反応させることによって得られるポリグリシジルエーテル；ｐ−ヒドロキシ安息香酸またはβ−ヒドロキシナフトエ酸などのヒドロキシカルボン酸とエピクロロヒドリンとを反応させることによって得られるグリシジルエーテルエステル；フタル酸、メチルフタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、テトラヒドロフタル酸、ヘキサヒドロフタル酸、エンドメチレンテトラヒドロフタル酸、エンドメチレンヘキサヒドロフタル酸、トリメリット酸、および重合脂肪酸などのポリカルボン酸から得られるポリグリシジルエステル；アミノフェノールおよびアミノアルキルフェノールから得られるグリシジルアミノ−グリシジルエーテル；アミノ安息香酸から得られるグリシジルアミノ−グリシジルエステル；アニリン、トルイジン、トリブロモアニリン、キシリレンジアミン、ジアミノシクロヘキサン、ビスアミノメチル−シクロヘキサン、４，４’−ジアミノジフェニルメタン、および４，４’−ジアミノジフェニルスルホンから得られるグリシジルアミン；ならびにエポキシ化ポリオレフィンなどのエポキシ樹脂が挙げられる。
【００３４】
[0039]  ある例示的な実施形態では、本発明によるタガントを組み込むためのポリマーのアクリル化合物は、たとえば、アクリレート化合物、アクリレートポリマー、アクリル繊維、アクリル塗料、アクリル樹脂、またはアクリルガラス等であることができる。
【００３５】
[0040]  本発明のある例示的な実施形態では、ポリマーは、たとえば、天然ポリマー、ワニス、ポリウレタン、セラック、またはラッカーである。ワニス、ポリウレタン、セラック、またはラッカーは、任意の好適なワニス、ポリウレタン、セラック、またはラッカーであることができ、例として、Ｍｉｎｗａｘ（登録商標）Ｃｏ．、Ｕｐｐｅｒ  Ｓａｄｄｌｅ  Ｒｉｖｅｒ、ＮＪ製のポリウレタンワニスなどであるがこれらに限定されない。あるいは、コーティングとして有用なポリマーは、蜜蝋、たとえば、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｒｏｓｅ  Ｈｅｒｂｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲから入手可能な蜜蝋などの天然ポリマーであることもできる。
【００３６】
[0041]  別の例示的な実施形態では、ポリマーは、たとえば印刷インクなどのポリマー含有組成物の成分である。たとえば、ある例示的な実施形態では、インクは、製品番号４４０８Ｒなどの熱硬化型エポキシ−アクリレートインクまたは９７０シリーズＴｏｕｃｈ  Ｄｒｙ（登録商標）ペレット、それぞれＭａｒｋｅｍ（登録商標）、Ｋｅｅｎｅ、ＮＨ製であってもよい。あるいは、Ｄｕｐｏｎｔ（登録商標）によって販売されているＡｒｔｉｓｔｒｉ（登録商標）Ｐ５０００＋シリーズの顔料インク、または製品番号００−９８８、Ｒａｈｎ  ＵＳＡ  Ｃｏｒｐ．などのエポキシアクリレートインクを使用することもできる。
【００３７】
[0042]  本発明のタガントとしては、たとえば、核酸タガントが挙げられる。核酸は、デオキシリボ核酸（DNA）またはリボ核酸（RNA）を表す総称であり、合成、または動物、植物、細菌、ウイルス、真菌、もしくは合成ベクター由来または上記に列挙された核酸等のいずれかの断片であり得る。なお、合成核酸は、動物、植物、細菌、真菌、ウイルスもしくは他の任意の生物または合成ベクターの、天然に存在する核酸の配列を有することができる。あるいは、合成核酸は、天然には存在しない固有の配列を有することもできる。そのような固有の非天然配列は天然に存在する配列のストレッチを有していてもよいが、全体としての非天然配列は固有であり、いずれの植物、動物もしくはウイルスにも、または他のいずれの天然生物にも存在しないことを理解されたい。特に、本発明のタガント中に暗号化またはエンコードされるデータまたはインディシアの要素をコードする核酸配列は、固有の非天然配列であり、それによって目的の対象物の認証における使用に適している。
【００３８】
[0043]  本発明の実施において有用なタガントは、任意の好適な検出可能なまたは追跡可能なタガント、たとえば、化学的マーカーまたは生物学的マーカーであることができる。本発明の方法のある実施形態では、タガントは、ＵＶフルオロフォア、セラミックＩＲマーカー、ＤＮＡ、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、脂質、糖、多糖、フェロモン、香気、微量元素、希土類元素、またはそれらのいずれか２種以上の組合せから選択される。
【００３９】
[0044]  本発明のある実施形態では、タガントは、核酸を含む。一実施形態では、タガントは、ＤＮＡから本質的になり、識別または認証に有用な他の重要な成分は存在しない。
【００４０】
[0045]  加えて、たとえば、紫外線（UV）タガント、アップコンバージョン蛍光体（UCP）赤外線（IR）タガント、ＵＶマーカータガント、ＵＶフルオロフォアタガント、セラミックＩＲマーカータガント、タンパク質タガント、および／または微量元素タガントなどの他のタガントを、核酸タガントと組み合わせて使用することもできる。ある例示的な実施形態では、使用されるタガントとしては、たとえば、ＤＮＡタガントおよびＩＲアップコンバージョン蛍光体（UCP）タガントの組合せを挙げることができる。あるいは、別の例示的な実施形態では、使用されるタガントとしては、たとえば、ＤＮＡタガント、ＩＲアップコンバージョン蛍光体（UCP）タガント、およびＵＶタガントの組合せを挙げることもできる。たとえば、ある例示的な実施形態では、ＩＲ（UCP）タガントは、たとえば、緑色、青色、または赤色の（UCP）ＩＲタガント、例として、Ｂｏｓｔｏｎ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ製の、緑色ＩＲマーカー、製品番号ＢＰＰ−１０６９；青色ＵＣＰ、製品番号ＢＰＰ−１０７０；または赤色ＵＣＰ、製品番号ＢＰＰ−１０７１などであることができる。
【００４１】
[0046]  本発明の方法に従って可溶性タガントが溶解される溶液としては、たとえば、水、ＴＥ緩衝液（１０ｍＭのTris・HCl、１ｍＭのEDTA）、Ｔｒｉｓ−グリシン緩衝液、Ｔｒｉｓ−ＮａＣｌ緩衝液、ＴＢＥ緩衝液（Tris-ホウ酸-EDTA）、ＴＡＥ緩衝液（Tris-酢酸-EDTA）およびＴＢＳ緩衝液（Tris緩衝生理食塩水）、ＨＥＰＥＳ緩衝液（N-（2-ヒドロキシエチル）ピペラジン-N'-エタンスルホン酸）、ＭＯＰＳ緩衝液（3-（N-モルホリノ）プロパンスルホン酸）、ＰＩＰＥＳ緩衝液（ピペラジン-N,N'-ビス（2-エタンスルホン酸））、ＭＥＳ緩衝液（2-（N-モルホリノ）エタンスルホン酸）、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）、ＰＢＰ緩衝液（リン酸ナトリウム+EDTA）、ＴＥＮ緩衝液（Tris/EDTA/NaCl）、ＴＢＳＴ緩衝液（Tris-HCl、NaCl、およびTween20）、ＰＢＳＴ緩衝液（Tween20を含むリン酸緩衝生理食塩水）、ならびに生物学および化学において使用される他の多くの公知の緩衝液のいずれかを挙げることができる。
【００４２】
[0047]  ある例示的な実施形態では、本発明の実施に有用な摂動剤は、任意の好適な摂動剤、たとえば、ポリオールまたはジオールもしくはグリコール、デンプン、またはピロリドンであることができる。ポリオールは、任意の好適なポリオール、たとえばポリエチレングリコールポリマー、例としてＰＥＧ２００、すなわち、鎖１本あたりエチレングリコール単位２００の平均分子数を有するポリエチレングリコール（PEG200 Mn200製品番号Ｐ３０１５など）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯであることができる。あるいは、別の実施形態では、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ１０，０００ポリオールポリマー、たとえば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製のＰＥＧ１０，０００製品番号Ｐ３０１５、Ｍｎ１０，０００であることもできる。
【００４３】
[0048]  別の実施形態では、本発明による摂動剤として有用なグリコールは、任意の好適なグリコールまたはジオール、例として、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製のエチレングリコール、ジエチレングリコール、グリセロール、メタンジオール、トリエチレングリコール、プロピレングリコール、またはＦｌｕｋａ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ製の１，２−ブタンジオールもしくは１，４−ブタンジオールなどであることができる。
【００４４】
[0049]  別の実施形態では、デンプンは、たとえば、Ｇｒａｉｎ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｕｓｃａｔｉｎｅ、ＩＡ製のＺｅｉｎａ（登録商標）Ｂ８６０などのヒドロキシルプロピルデンプンであることができる。さらに別の実施形態では、本発明のピロリドン摂動剤は、任意の好適なピロリドン、例として、Ｎ−アルキルピロリドン、またはカプリリルピロリドン界面活性剤：Ａｓｈｌａｎｄ  Ｉｎｃ．、Ｃｏｖｉｎｇｔｏｎ、ＫＹから入手可能なＳｕｒｆａｄｏｎｅ（登録商標）ＬＰ１００などであることができる。
【００４５】
[0050]  ある例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約０．１％〜約３０％ｗ／ｗの量で使用することができる。別の例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１％〜約２５％ｗ／ｗの量で使用することができる。あるいは、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約５％〜約２０％ｗ／ｗの量で使用することもできる。別の例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約７％〜約１５％ｗ／ｗの量で使用することができる。さらに別の例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１０％ｗ／ｗの量で使用することができる。
【００４６】
[0051]  あるいは、例示的な一実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約０．１％〜約３０％ｗ／ｗの量で使用することもできる。別の例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約５％〜約３０％ｗ／ｗの量で使用することができる。あるいは、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１０％〜約３０％ｗ／ｗの量で使用することもできる。
【００４７】
[0052]  例示的な一実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１％〜約２５％ｗ／ｗの量で使用することができる。ある例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１％〜約２０％ｗ／ｗの量で使用することができる。ある例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１％〜約１５％ｗ／ｗの量で使用することができる。ある例示的な実施形態では、本発明の摂動剤は、ポリマーおよびタガントを含有する溶液において、溶液中のタガントに対して約１％〜約１０％ｗ／ｗの量で使用することができる。
【００４８】
[0053]  理論に束縛されることを望むものではないが、本発明の摂動剤は、重合したポリマー中に微小間隙（microcrevice）およびマイクロポケットならびに微小環境を作り出すことにより、そのような摂動剤を欠いている重合コーティングからよりも効率的に、タガント（たとえばDNAタガント）の回収を容易にすると考えられる。
【００４９】
[0054]  本発明の例示的な実施形態によるタガントでコーティングされる目的の対象物としては、たとえば、セラミック表面、プラスチックフィルム、ビニルシート、骨董品、宝飾品、ＩＤカード、クレジットカード、磁気ストリップカード、絵画、芸術品、記念品、スポーツ収集品、および他の収集品が挙げられる。次いで、対象物の上にコーティングされたタガントを、たとえば下記にさらに詳述する方法によって回収し識別することによって、これらの対象物の真贋を検証することができる。
【００５０】
[0055]  目的の対象物に施すことができる本発明のタガントを組み入れるまたは組み込むコーティングは、安定でありタガントを組み込むことが可能な任意の好適なコーティング、たとえば、プラスチック、ワニス、ポリウレタン、セラック、またはラッカーであることができる。あるいは、コーティングは、蜜蝋であることもできる。
【００５１】
[0056]  あるいは、目的の対象物に施される本発明のコーティングは、たとえば、インク、塗料、シール材、接着剤、１種もしくは複数の染料、１種もしくは複数の染色物質または１種もしくは複数の顔料を含有するコーティング、および他のそのような一般的なコーティングであることもできる。
【００５２】
[0057]  本発明の別の実施形態では、本方法は、タガント溶液を形成するためにタガントを溶液に組み込む工程または溶解する工程の後、核酸タガントを摂動剤と混合する工程と、第２の溶液を形成するために、この第１の溶液をポリマーと混合する工程と、対象物のタガントコーティングされた部分を形成するために、第２の溶液を対象物の少なくとも一部分に塗布する工程とを含み、ここで、タガントは、対象物から回収可能である。
【００５３】
[0058]  一実施形態では、第２の溶剤は、非極性溶剤である。一実施形態では、第２の溶剤は、メチルエチルケトン（MEK）、アセトン、アルコール、例として、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、もしくはイソブタノール等、またはエーテル、例として、ジメチルエーテル、メチルエチルエーテル、およびジエチルエーテル等からなる群から選択される。あるいは、第２の溶剤は、２種以上のケトン、アルコール、またはエーテルの組合せであることもできる。別の代替形態では、第２の溶剤は、上記の溶剤のいずれか２種以上の組合せであることもできる。
【００５４】
[0059]  別の実施形態では、タガントは、ＩＲアップコンバージョン蛍光体（UCP）タガントおよびＤＮＡタガントを含み、ここで、摂動剤は、ポリオールである。
【００５５】
[0060]  さらに別の実施形態では、ポリマーは、ワニス、ポリウレタン、セラック、またはラッカーである。
【００５６】
[0061]  本発明の一実施形態では、溶解向上剤（solution enhancer）は、少なくとも１種のポリオールを含む。ポリオールは、任意の好適なポリオール、たとえば、エチレングリコール、ジエチレングリコール、グリセロール、メタンジオール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオール、トリエチレングリコール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコール（PEG）であることができる。ポリエチレングリコールは、任意の好適なサイズのものであることができ、例として、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ２０００、ＰＥＧ３３５０、またはＰＥＧ１０，０００などであるがこれらに限定されない。
【００５７】
[0062]  たとえば、ポリエチレングリコールは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯから入手可能な任意の好適なポリエチレングリコールであることができる。ＰＥＧ２００は、たとえば、Ｍｎ２００、製品番号Ｐ３０１５であってもよい。ＰＥＧ４００は、たとえば、Ｍｎ４００、製品番号２０２３９８であってもよい。ＰＥＧ６００は、たとえば、Ｍｎ６００の蝋状湿潤固体、製品番号２０２４０１であってもよい。ＰＥＧ２，０００は、たとえば、Ｍｎ１９００〜２２００のフレーク状固体、製品番号２９５９０６−２５０Ｇであってもよい。ＰＥＧ３３５０は、たとえば、Ｍｎ３０００〜３７００、製品番号８３２７２であってもよい。別の例示的な実施形態では、ＰＥＧ１０，０００は、たとえば、Ｍｎ１０，０００、製品番号３０９０２８であってもよい。
【００５８】
[0063]  別の実施形態では、ポリマーは、ポリカーボネート（PC）、ポリメタクリル酸メチル（PMMA）、ポリウレタン（PU）、ポリスチレン（PS）、ナイロン、またはポリプロピレン（PP）からなる群から選択され、これらはすべて、市販で容易に入手可能である。別の実施形態では、ポリマーは、熱、ＵＶまたは触媒によってその重合を開始させ固化させることができる重合性（polymeric）化合物を含む第１の溶剤を含む。
【００５９】
[0064]  一実施形態では、本発明の方法は、対象物上に塗布された第２の溶液を硬化または乾燥させて、タガントを含むコーティングを得ることをさらに含む。コーティングは、識別、バリデート、認証、またはトラッキングすべき対象物の全部または一部に対するものであることができる。
【００６０】
[0065]  本発明の方法に従ってタガント含有ポリマーで対象物をコーティングした後、コーティングが対象物に付着するようにコーティングを乾燥または硬化させ、それによって認証、トラッキング、および偽造防止機能を有する対象物を得ることができる。
【００６１】
[0066]  本発明の例示的な実施形態では、タガントは、対象物の外観を損なうことなく、対象物のタガントコーティングされた部分から回収することができる。たとえば、タガントは、対象物の表面を拭き取ることによって、対象物のタガントコーティングされた部分から回収することができる。例示的な一実施形態では、対象物は、コットンスワブ、綿球、綿布、フィルターもしくはティッシュペーパー、または他の任意の好適なサンプリング媒体で拭き取ることができる。たとえば、ある例示的な実施形態では、タガントは、綿棒などの塗布具で任意の好適な溶剤を使用して、対象物のタガントコーティングされた部分から回収される。溶剤は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈなどの試薬供給業者から入手可能な任意の好適な溶剤であることができる。好適な溶剤としては、例として、いくつか挙げると、エタノール、メタノール、プロパノール、トルエン、キシレン、およびメチルエチルケトン（MEK、2-ブタノン）が挙げられる。他の好適な一般に入手可能な溶剤は、当業者には容易に特定可能であろう。
【００６２】
[0067]  本発明のある実施形態では、溶解向上剤およびタガントを含有する第１の溶液が混合されるポリマーは、ガソリンもしくはディーゼル燃料などの、ガソリン、ディーゼル燃料、モーターオイルなどの潤滑油、灯油、ケロシン、ジェット燃料、または未精製の原油等であることができる。
【００６３】
[0068]  本発明の例示的な実施形態はまた、対象物を認証するための方法であって、タガント、摂動剤、およびポリマーを含むコーティングを含む対象物を提供する工程と、識別のために対象物からタガントを回収する工程と、固有のタガントを識別することによって対象物をトラッキングするまたは対象物の真贋を検証する工程とを含む方法を提供する。一実施形態では、固有のタガントは、固有のＤＮＡ配列を有するＤＮＡタガントであり、固有の非天然のＤＮＡ配列は、固有のＤＮＡ配列を固有のタガントでコーティングされた対象物に対応するデータ要素とマッチングするデータベースに保存される。データベースは、タガントが回収されたタグ付けされた対象物の位置特定、トラッキング、認証、および同一性の検証のためにアクセスできるコンピュータ上に位置付けることができる。
【００６４】
[0069]  下記の実施例において有用なＤＮＡタガントとしては、任意の好適なＤＮＡタガントが挙げられ、例として、一実施形態では、ＤＮＡタガントは、約４０塩基対〜約１０００塩基対の長さの二本鎖ＤＮＡオリゴマーである。他の実施形態では、ＤＮＡタガントは、約８０〜５００塩基対の長さの二本鎖ＤＮＡオリゴマーである。別の実施形態では、ＤＮＡタガントは、約１００〜約２５０塩基対の長さの二本鎖ＤＮＡオリゴマーである。あるいは、ＤＮＡタガントは、一本鎖ＤＮＡであることもでき、または任意の好適な長さ、たとえば、約４０塩基〜約１０００塩基；約８０〜５００塩基；もしくは約１００〜約２５０塩基であることもできる。ＤＮＡタガントは、天然源から単離されたかまたは合成の、天然型ＤＮＡであってもよく；またはＤＮＡタガントは、合成的に生成された非天然配列であってもよい。ＤＮＡの全部または一部分は、識別可能な配列を含むことができる。
【００６５】
[0070]  例示的な一実施形態では、ＤＮＡタガントは、任意の好適な検出および／または識別法、たとえば、タガント配列に特異的な核酸プローブを用いたハイブリダイゼーション、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法（蛍光in situハイブリダイゼーション:FISHを含む）、定量的／リアルタイムＰＣＲなどのポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を使用した増幅、および多様な周知の標準的方法のいずれかによる増幅配列（アンプリコン）の検出などによって識別可能である。
【００６６】
[0071]  たとえば、ＰＣＲ識別法では、対象物から回収された核酸タガント、たとえばＤＮＡタガントをポリメラーゼ連鎖反応（PCR）によって増幅し、ゲル電気泳動によって解明する。本発明の核酸タガントの配列は固有であり、タグ付けされた対象物に特有であることから、元の核酸は、固有のタガント配列の一部分に相補的な特有の配列を有するプライマーの使用によってのみ増幅される。この手順によって、検査された対象物が元の核酸を保有する場合、ＰＣＲ手順は抽出された核酸を増幅して、所定のサイズおよびタガントの元の核酸配列の一部分と同一配列のアンプリコンを生成する。対照的に、検査された対象物から回収されたサンプルが真正な対象物に対応する固有の核酸を含まない場合、増幅核酸産物は存在しないと思われる、またはプライマーが回収された核酸を現に増幅して１または複数のランダムなアンプリコンを生成する場合でも、これらの１または複数のアンプリコンは、真正な対象物由来の固有のタガント核酸配列を有し得ない。さらに、偽造品に由来するランダムなアンプリコンはまた、ランダムな長さであり、タガント特異的なプライマーによって指定される正確な長さのアンプリコンを生成する可能性はほとんどない。したがって、ＰＣＲ産物のサイズを比較することによって、標識された対象物の真贋を検証することができ、真正でない対象物をスクリーニングおよび拒絶することができ、こうして、偽造防止スクリーニングの目的が達成される。
【００６７】
増幅されたアンプリコンの数およびアンプリコンの長さは、例として、任意の好適なマトリックス媒体中、たとえば、アガロースゲル、ポリアクリルアミドゲルまたは混合アガロース−ポリアクリルアミドゲル中でのゲル電気泳動などであるがこれらに限定されない、任意の分子量または物理的寸法に基づく分離の後に決定することができ、電気泳動分離は、スラブゲル中またはキャピラリー電気泳動によるものであってもよい。
【実施例】
【００６８】
[0072]  記載されている以下の実施例は、単に実例を示すことを意図したものであり、本発明の例示的な実施形態は、そこに記述された条件または材料に限定されないことを理解されたい。
【００６９】
[0073]  以下の実施例は、以下の方法に従って、コーティングされた対象物上のタガントコーティングからのタガントの回収性を向上させるための本発明の実施形態の実例を示す：タガントを溶液に組み込むまたは溶解し、タガント溶液を摂動剤と混合して、第１の摂動剤タガント溶液を形成し；次いで、この摂動剤タガント溶液をポリマーと混合して、摂動剤タガントポリマー溶液を形成し；対象物の少なくとも一部分をコーティングして、タガントコーティングされた対象物を形成する。
【００７０】
[0074]  実施例１：
[0075]  溶剤系トップコートワニスへのＵＶタガントおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにＤＮＡタガントの回収
[0076]  ５パーセント溶液（w/w）のＵＶタガントおよび最終濃度１ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、十分なＳｕｒｆａｄｏｎｅ（登録商標）ＬＰ１００を添加して最終体積の７％の濃度（v/w）とした後、ワニス１Ｌに添加する。混合物を１０分間パドルでブレンドし、プラスチックフィルムに塗布して、オーブンにおいて６０℃で終夜乾燥させる。ワニスフィルムを、３０％ＥｔＯＨ溶液に浸したコットンスワブを使用してワニス塗布面を数回拭き取ってサンプリングする。ＵＶタガントは、ワニスの外観を損なうことなくスワブによって採取され、スワブで移した抽出サンプルを、ＤＮＡ認証に使用する。
【００７１】
[0077]  実施例２
[0078]  ポリウレタンワニスへのアップコンバージョン蛍光体（UCP）ＩＲおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[0079]  ５パーセント（w/w）のＵＣＰ  ＩＲおよび最終濃度５ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガント（DNA連結UCPタガントの形態であってもよい）をまず互いに混合し、溶融したＰＥＧ１０，０００（平均分子数:Mn10,000、製品番号３０９０２８、Sigma-Aldrich）１０ｇに添加した後、ポリウレタンワニス（Minwax（登録商標）Co.、Upper Saddle River、NJ）１Ｌに添加する。次いで、混合物を１０分間パドルでブレンドし、ビニルシートに塗布して、６０℃のオーブンにおいて１時間乾燥させる。ワニス塗布フィルムを、１００％ＭＥＫ溶液に浸したコットンスワブ（Cotton tipped Applicator番号２５−８２６  ５ＷＣ Puritan Medical Products、Guilford、ME）を使用してワニス塗布面を数回拭き取ることによってサンプリングする。ＵＣＰ連結ＤＮＡタガントは、対象物の外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲに基づく解析によってＤＮＡを認証する。
【００７２】
[0080]  実施例３
[0081]  セラックなどの天然ワニスへの微粒子ＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[0082]  最終濃度５ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをＰＥＧ２００  １０ｇに添加した後、ワニス１Ｌに添加する。混合物を１０分間パドルでブレンドし、プラスチックフィルムに塗布して、室温で硬化させる。次いで、ワニスフィルムを、２０％ＥｔＯＨ（Sigma-Aldrich）に浸したコットンスワブを使用してワニス塗布面を数回拭き取ることによってサンプリングする。ＤＮＡタガントは、ワニスの外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲに基づく解析によってＤＮＡを認証する。
【００７３】
[0083]  実施例４
[0084]  熱硬化印刷インクへのＵＣＰ  ＩＲおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[0085]  １０パーセント（w/w）のＵＣＰ  ＩＲタガントと連結した最終濃度１０ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、５％ｇのヒドロキシプロピルデンプンに添加した後、印刷インク１Ｌに添加する。次いで、混合物を１０分間ブレンドし、セラミック表面への印刷に使用し、１２０℃のオーブンにおいて２４時間乾燥させる。乾燥したインクを、１００％ＭＥＫに浸したコットンスワブを使用して印刷面を数回拭き取ることによってサンプリングする。ＵＣＰ連結タガントは、印刷の外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲに基づくアッセイを利用してＤＮＡを認証する。
【００７４】
[0086]  実施例５
[0087]  ＵＶ硬化印刷インクへのＵＣＰ  ＩＲおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[0088]  ５パーセント（w/w）のＵＣＰ  ＩＲタガントおよびＤＮＡタガントをまず互いに混合し、溶融したＰＥＧ１０，０００  ５０ｇに添加した後、印刷インク１Ｌに添加する。次いで、混合物を１０分間パドルでブレンドし、セラミック表面に印刷し、高輝度水銀ランプに５秒間供して硬化させる。次いで、硬化したインクを、１００％ＭＥＫ溶液に浸したコットンスワブを使用して印刷面を数回拭き取ってサンプリングする。ＵＣＰタガントは、印刷の外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲに基づくアッセイを利用することによってＤＮＡを認証する。
【００７５】
[0089]  実施例６
[0090]  二成分接着剤系へのＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[0091]  二成分接着剤系の成分のうちの１つは、接着剤を硬化させる触媒として作用する。１パーセント（w/w）のＵＣＰ  ＩＲタガント、１パーセント（w/w）のＵＶマーカー、および最終濃度２０ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、プロピレングリコール５０ｇに添加した後、接着剤の１または両方の成分（樹脂および硬化剤）１Ｌに添加する。次いで、接着剤の２つの成分を混合し、硬化させる。次いで、硬化した接着剤を、１００％ＭＥＫに浸したコットンスワブを使用して印刷面を数回拭き取ってサンプリングする。タガントは、硬化した接着剤ブロックの外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲアッセイによってＤＮＡを認証する。
【００７６】
[0092]  実施例７
[0093]  ポリウレタン（polyurathane）ワニスへのアップコンバージョン蛍光体（UCP）ＩＲおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[0094]  ５パーセント（w/v）のＵＣＰ  ＩＲタガント（たとえば、H.W. Sands Corp.、Jupiter、FL製のADA-3253）および最終濃度５ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、５０ｐｐｍのエチレングリコールに添加した後、溶剤系ポリウレタンワニス１Ｌに添加する。次いで、混合物をブレンドし、ビニルシートに塗布して、赤外光ステーション下で５分間硬化させる。ワニス塗布フィルムを、１００％ＥｔＯＨに浸したコットンスワブを使用してワニス塗布面を数回拭き取ることによってサンプリングする。ＵＣＰタガントが採取され、ＰＣＲに基づく解析によってＤＮＡを認証する。
【００７７】
[0095]  実施例８
[0096]  溶剤系トップコートワニスへのＵＶタガントおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[0097]  ５パーセント（w/v）の水溶性ＵＶタガントおよび最終濃度１ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、最終体積の５％のＰＥＧ２，０００（w/v）に添加した後、ＭＥＫ系ワニス１Ｌに添加する。混合物を１０分間パドルでブレンドし、プラスチックフィルムに塗布して、６０℃のオーブンにおいて終夜乾燥させる。ワニスフィルムを、３０％ＥｔＯＨ溶液に浸したコットンスワブを使用してワニス塗布面を数回拭き取ることによってサンプリングする。ＤＮＡタガントを伴うＵＶタガントは、ワニスの外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、このスワブをＤＮＡ認証に使用する。
【００７８】
[0098]  実施例９
[0099]  ＵＶ硬化印刷インクへのＵＣＰ  ＩＲおよびＤＮＡタガントの組み入れならびにそれらの回収
[00100]  ５パーセント（w/v）のＵＣＰ  ＩＲタガントおよび最終濃度１０ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをまず互いに混合し、ＰＥＧ４００  ２５ｍＬに添加した後、ＭＥＫ系印刷インク１Ｌに添加する。次いで、混合物を１０分間パドルでブレンドし、エポキシ表面への印刷に使用し、高輝度水銀ランプからの熱に１分間供して硬化させる。次いで、硬化したインクを、１００％エーテルに浸したコットンスワブを使用して印刷面を数回拭き取ってサンプリングする。ＵＣＰタガントは、印刷の外観を損なうことなくスワブによって採取され、ＰＣＲに基づくアッセイによってＤＮＡを認証する。
【００７９】
[00101]  実施例１０
[00102]  ワニスまたはセラックへの微粒子ＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[00103]  最終濃度５ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガントをグリセロール１０ｇに添加した後、ワニス（Minwax（登録商標）Co.、Upper Saddle River、NJ）１Ｌに添加する。混合物を１０分間パドルでブレンドし、プラスチックフィルムに塗布して、室温で硬化させる。次いで、ワニスフィルムを、１００％アセトンに浸したコットンスワブを使用してワニス塗布面を数回拭き取ってサンプリングする。ＤＮＡタガントは、ワニスの外観を損なうことなくスワブによって採取され、次いで、ＰＣＲに基づくアッセイによってＤＮＡを認証する。
【００８０】
[00104]  実施例１１
[00105]  潤滑剤へのＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[00106]  １０ｎｇ／ｍｌ（最終濃度）のＤＮＡタガントをＰＥＧ４００（平均Mn400、製品番号２０２３９８、Sigma-Aldrich）１００μＬと混合した後、潤滑剤（Chevron USAによって販売されているHavoline（登録商標）モーターオイル）１Ｌを組み込む。潤滑剤からＤＮＡを精製し、次いで、ＰＣＲに基づくアッセイを利用してＤＮＡを認証する。
【００８１】
[00107]  実施例１２
[00108]  蜜蝋へのＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[00109]  １０ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガント（最終濃度）を１００ｐｐｍの溶融したＰＥＧ３３５０（平均Mn3000〜3700、製品番号８３２７２、Sigma-Aldrich）に添加した後、溶融した蜜蝋（Mountainroseherbs.com、Eugene、OR）１Ｌに添加する。蝋からＤＮＡを精製し、次いで、ＰＣＲに基づくアッセイを利用することによってＤＮＡを認証する。
【００８２】
[00110]  実施例１３
[00111]  溶剤系インクジェットインクへのＤＮＡタガントの組み入れおよびそれらの回収
[00112]  １０ｎｇ／ｍｌのＤＮＡタガント（最終濃度）を１％のＰＥＧ２００（平均Mn200、製品番号Ｐ３０１５、Sigma-Aldrich）に添加した後、溶剤系インクジェットインク（たとえば、９７０シリーズTouch Dry（登録商標）ペレット;またはMarkem（登録商標）、Keene、NHによって販売されている４４０８Ｒ熱硬化型インク;Dupont（登録商標）によって販売されているArtistri（登録商標）Ｐ５０００＋シリーズの顔料インク、またはエポキシアクリレートインク、製品番号００−９８８、Rahn USA Corp.）１Ｌに混合する。ＭＥＫに浸漬した綿棒で拭き取ることによってＤＮＡタガントが採取され、次いで、ＰＣＲに基づく解析法を使用してＤＮＡを認証する。
【００８３】
[00113]  本発明の全範囲は、本明細書において引用された米国特許および参考文献を考慮して正しく認識され、それらの開示全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【００８４】
[00114]  本発明の例示的な実施形態を説明してきたが、さらに注記すると、添付の特許請求の範囲の境界（metes and bounds）によって規定される本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく様々な変更を加えられることは、当業者には容易に明らかとなろう。
【国際調査報告】
2016500518.tif 000002