(57)【要約】  一般式（Ｉ）で表される二環式置換ピリミジン型ＰＤＥ−５阻害剤のプロドラッグ、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体を提供する。これらのプロドラッグ化合物、医薬製剤及び医薬組成物を調製する方法、並びに性機能不全及び下部尿路症状を治療及び／又は予防する薬剤の製造におけるこれらの化合物、医薬製剤及び医薬組成物の使用も提供する。    【化１】2016516736.tif 000060
2016516736.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体：
【化１】
2016516736.tif 000054
（式中、
Ｒ１は６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１２員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員〜１２員の含窒素架橋ヘテロシクリルを表し、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１はＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
前記置換基はハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル又はＣ１〜６アルコキシカルボニルから選択され、
Ｒ２は水素原子、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル又はＣ１〜６アルコキシから選択され、
Ｒ３及びＲ４は各々独立して水素、又はハロゲン原子、ヒドロキシル、カルボキシルから選ばれる１個〜３個の基で置換されてもよいＣ１〜６アルキルを表し、
ｍは０〜３であり、
Ｚは水素、又はリン酸と塩を形成することが可能な無機塩基若しくは有機塩基のカチオンであり、
Ｒ５及びＲ６は各々独立して水素原子又は−Ｑ−Ｒ７を表し、
Ｑは結合、又は置換されてもよいＣ１〜６アルキリデンを表し、該置換基はハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ又はＣ１〜６アルコキシから選択され、
Ｒ７は６員〜１４員のアリール、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく
前記置換基はハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、カルボキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、スルホニルアミノ又はＣ１〜６アルキルスルホニルアミノから選択される）。
【請求項２】
Ｒ２が水素原子、ヒドロキシル又はメチルから選択され、
Ｒ６が水素原子を表す、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項３】
Ｒ３及びＲ４が独立して水素であり、
ｍが０、１又は２であり、
Ｚが水素又はナトリウムイオンである、請求項２に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項４】
Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
ＱがＣ１〜６アルキリデンから選択され、
Ｒ７が６員〜１０員のアリール、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、
前記置換基がハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、カルボキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、スルホニルアミノ又はＣ１〜６アルキルスルホニルアミノから選択される、請求項３に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項５】
Ｒ１が６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１２員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員〜１２員の含窒素架橋ヘテロシクリルから選択され、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１がＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
前記置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル又はＣ１〜６アルコキシカルボニルから選択される、請求項４に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項６】
Ｒ１が６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１０員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員若しくは８員の含窒素架橋ヘテロシクリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１がＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
前記置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択され、
Ｒ３及びＲ４が各々独立して水素であり、
ｍが０、１又は２であり、
Ｚが水素又はナトリウムイオンであり、
Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
ＱがＣ１〜４アルキリデンから選択され、
Ｒ７がフェニル、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、
前記置換基がハロゲン原子、メチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、ジメチルアミノ又はカルボキシメチルから選択され、
Ｒ２が水素原子から選択され、
Ｒ６が水素原子から選択される、請求項５に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項７】
Ｒ１が６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル又は７員〜１０員の含窒素スピロヘテロシクリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１がＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
前記置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択され、
Ｒ３及びＲ４が独立して水素であり、
ｍが０、１又は２であり、
Ｚが水素又はナトリウムイオンであり、
Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
Ｑがメチレン又はエチレンから選択され、
Ｒ７がフェニル、ピロリル、フリル、ピリジル、チアゾリル、ナフチル、ベンゾピロリル、インデニル、キノリル又はインドリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、
前記置換基がフッ素原子、塩素原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択される、請求項６に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項８】
Ｒ１が以下の基：
【化２】
2016516736.tif 000055
から選択され、
Ｒ３及びＲ４が独立して水素であり、
ｍが０又は１であり、
Ｚがナトリウムイオンであり、
Ｒ５が以下の基：
【化３】
2016516736.tif 000056
から選択される、請求項７に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項９】
前記化合物が、
【化４】
2016516736.tif 000057
【化５】
2016516736.tif 000058
【化６】
2016516736.tif 000059
から選択される、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体と、１以上の薬学的に許容可能な担体及び／又は希釈剤とを含む医薬製剤。
【請求項１１】
血管拡張剤、プロスタグランジンＥ１、プロスタサイクリン、α−アドレナリン受容体抑制剤、混合α，β−遮断薬、α−遮断薬、５α−還元酵素阻害剤、α２−アドレナリン受容体抑制剤、ＡＣＥ阻害剤、ＮＥＰ阻害剤、中枢ドーパミン剤、血管作動性腸管ペプチド、カルシウムチャネル遮断薬、チアジン、又はそれらの混合物から選択される１以上の第２の治療活性剤を更に含むことを特徴とする、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体を含む医薬組成物。
【請求項１２】
薬剤の製造における請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体の使用であって、前記薬剤がＰＤＥ−ｔ阻害剤であり、かつ性機能不全疾患及び下部尿路症状の治療及び／又は予防に有用である、使用。
【請求項１３】
薬剤の製造における請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体の使用であって、前記薬剤が高血圧、心不全、肺高血圧、勃起不全、過活動膀胱症候群、前立腺肥大及び女性性機能不全から選択される疾患の治療及び／又は予防に有用である、使用。
【請求項１４】
前記疾患が勃起不全、過活動膀胱症候群及び良性前立腺肥大である、請求項１２又は１３に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬の技術分野に関し、具体的には二環式置換ピリミジン型ＰＤＥ−５阻害剤のプロドラッグ、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体、これらのプロドラッグ化合物を調製する方法、その医薬製剤、その医薬組成物、及びｃＧＭＰシグナル伝達を増進する薬剤の製造におけるこれらの化合物の使用に関する。特に、本発明は、性機能不全及び下部尿路症状を治療及び／又は予防する薬剤の製造におけるこれらの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ｃＧＭＰ（環状グアノシン−３’，５’−一リン酸、環状ＧＭＰ）は環状ヌクレオチドであり、動物及び植物の細胞に存在し、種々の細胞反応に関与する細胞内二次メッセンジャーであり、ＰＤＥ−５（ホスホジエステラーゼ−５）によって加水分解されることができる。ＰＤＥ−５が阻害されると、ｃＧＭＰのレベルが増加し、血管平滑筋拡張等の多くの生理学的効果が生じる。したがって、ＰＤＥ−５阻害剤を、高血圧、心不全、肺動脈高血圧、勃起不全、前立腺肥大及び女性性機能不全等のｃＧＭＰシグナル伝達障害に起因する疾患の治療に用いることができる。
【０００３】
勃起不全（ＥＤ）は成人男性において最も一般的な性機能不全であり、継続的に陰茎の勃起を達成又は維持して性生活を楽しむことができない疾患を指す。ＥＤには器質性ＥＤ、心因性ＥＤ及び混合性ＥＤが含まれる。ＥＤは命に関わる疾患ではないが、生活の質及び配偶者間の好意に強い影響を与える。
【０００４】
ＥＤの治療には多くの療法があるが、主として末梢薬物療法、中枢薬物療法及び遺伝療法の３つの態様が含まれる。末梢薬物療法は、主としてホスホジエステラーゼ−５阻害剤（例えばシルデナフィル）の適用、並びにパパベリン、可溶性グアニル酸シクラーゼ活性剤、Ｒｈｏキナーゼアゴニスト及び局所アルプロスタジルの適用を指す。中枢薬物療法は、ドーパミン受容体作動薬、αアドレナリン受容体拮抗薬、５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）受容体作動薬、オキシトシン及びオキシトシン受容体作動薬等の薬物を用いる療法を指す。遺伝療法では、イオンチャネルが海綿体平滑筋の緊張の調節に重要な物的基礎であるということに基づき、ｈＳｌｏ遺伝子を発現するプラスミドベクターｈＭａｘｉ−Ｋ（ｐＶＡＸ−ｈＳＬＯ）を海綿体に注入し、このプラスミドは海綿体平滑筋で発現し、より多くのカリウムチャネルを生成して、海綿体の弛緩をもたらす。
【０００５】
現在、ＥＤの治療には多くの療法があるが、中でもホスホジエステラーゼ−５（ＰＤＥ−５）阻害剤（シルデナフィル（バイアグラ）が代表的なものである）が、ＥＤの治療の第一選択薬であり、最も患者に人気のある療法である。現時点では、市販されているＰＥＤ−５阻害剤として、シルデナフィル（Sildenafil）、バルデナフィル(Vardenafil)、タダラフィル(Tadalafil)、ウデナフィル(Udenafil)及びアバナフィル(Avanafil)等が挙げられる。これらの薬物は経口摂取され、好都合に、迅速に作用し、良好な働きを有する。その中でも、シルデナフィル及びタダラフィルは、それぞれPfizer及びEli Lilly Companyの最も利益の高い製品である。したがって、これらの薬物の市場規模は巨大である。
【０００６】
【化１】
2016516736.tif 000003
【０００７】
田辺製薬株式会社の特許文献１（２００１年３月２２日公開）では、以下の化合物が開示されている：
【０００８】
【化２】
2016516736.tif 000004
【０００９】
疫学の観点からすると、多くの高齢の男性ＥＤ患者が、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、過活動膀胱症候群（ＯＡＢ）等を含む下部尿路症状（ＬＵＴＳ）等の他の泌尿生殖器系の疾患を伴うＥＤを有する。これらの疾患は高齢患者に多大な苦痛を与え、彼らの生活に深刻な影響を与える。病理分析から、ＥＤ及びＬＵＴＳが同じ病因を有し、どちらも平滑筋収縮又は平滑筋細胞増殖に関連することが示される。このため、ＰＤＥ−５阻害剤を病因の同じＬＵＴＳの治療に使用することもできる。タダラフィルの良性前立腺肥大の治療における使用がＦＤＡにより認可されている。
【００１０】
ＰＤＥ−５阻害剤の臨床応用では、幾つかの潜在的な安全性の問題が徐々に現れる。中でも、シルデナフィル及びバルデナフィルはＰＤＥ−５を阻害するだけでなく、ＰＤＥ−６を一定の阻害作用を有し、ＰＤＥ−６は網膜機能に影響を与えるため、これら２つの薬物はヒトの視覚に影響を与える可能性があり、特にこの場合における、シルデナフィルに関するより多くの報告がある。それゆえ、これら２つの薬物のＰＤＥ−５に対する選択性が乏しい。タダラフィルはＰＤＥ−６に対してより良好な選択性を有するが、ＰＤＥ−１１に対しても或る程度の阻害効果を有する。ＰＤＥ−１１の臨床薬理効果は未知であるが、潜在的なリスクがある。一部の文献では、タダラフィルが坐骨神経痛を引き起こす場合があることが報告されており、依然としてＰＤＥ−１１との関連性を決定する研究がより必要とされている。加えて、バルデナフィルはバイオアベイラビリティが低く、投与量の増量を必要とするため、長期投薬に関して不利益である。ヒトにおいて約１６時間の長さのタダラフィルの半減期は、もし患者が他の薬物を同時に服用していたら、薬物相互作用を容易にもたらし得る。例えば、亜硝酸薬とタダラフィルとを併用する場合、患者の血圧が過度に低下することにより、生命の危険が生じる可能性がある。
【００１１】
アバナフィルは第二世代のＰＤＥ−５阻害剤に属し、ＰＤＥ−６に対して良好な選択性を有し、ＰＤＥ−６／ＰＤＥ−５の比率は約１２０である。さらに、ＰＤＥ−１１を阻害せず、臨床治療の安全性が確保される。しかしながら、この薬物はｉｎ  ｖｉｔｒｏ酵素活性が低く、その臨床投与量は非常に高く（５０ｍｇ、１００ｍｇ及び２００ｍｇ）、シルデナフィル、バルデナフィル及びタダラフィルの臨床投与量よりも高く、これが患者の臨床治療に対して安全上の問題をもたらす。加えて、投与量の増加に伴い、治療コストも増加する。そのため、アバナフィルは少なくとも薬剤経済学の観点から更に改善する必要がある。臨床研究報告に最もよく見られる副作用としては、アバナフィルを投与した男性における頭痛、紅潮、鼻閉、鼻咽頭炎又は背部痛が挙げられる。アバナフィルのまれな副作用としてこの薬物を服用している男性の突発性の視力減退又は失明がある。アバナフィルはバイオアベイラビリティが比較的低く、臨床投与量が高く、半減期が短い（ｉｎ  ｖｉｖｏで約１．２時間の短さ）。それで、アバナフィルは勃起不全の単回治療にしか使用することができず、ＢＰＨ、ＯＡＢ等の治療に好適ではない。したがって、高齢患者の生活の質の改善（ＥＤ、ＢＰＨ及びＬＵＴＳの治療）するために、高い選択性、より強力な薬理活性、高いバイオアベイラビリティ、より高い安全性及び好適な（比較的長いが過度に長くはない）半減期を有するＰＤＥ−５阻害剤を開発することは有意義である。
【００１２】
しかしながら、これらの化合物の大半が低い水溶性という欠点を有し、高い錠剤負荷量等の患者への薬物送達の問題を引き起こす。化合物の低い水溶性は製剤形成の欠点であり、界面活性剤等の共溶媒を使用する必要がある場合がある。これらの化合物の投与はソフトゼラチンカプセルに封入された液体等の一部の特定の液体投与形態に厳密に制限される。これらの化合物の水溶性を改善するために、化合物の単位用量当たりの薬物負荷を増大させる必要がある場合があり、これは人体に深刻な副作用を引き起こし得る。加えて、高い錠剤負荷量は患者への１日投与量を更に増大させ、患者のコンプライアンスを損ない得るため、薬物治療の最適な治療効果を達成することができない。さらに、これらの化合物の低い溶解度は貯蔵及び／又は輸送条件下での溶液からの結晶化及び沈殿の潜在的可能性を意味し、臨床的意義における薬物安全性の問題をもたらし得る。
【００１３】
要約すると、ＰＤＥ−５阻害効果、かつ、良好な活性、高い選択性を有し、これらの化合物の溶解度の低さの問題を解決することが可能な化合物を見出し、経口製剤、静脈注射製剤及び筋肉内注射製剤等の様々な製剤を形成することの難点を効果的に克服し、臨床応用を拡大することが現在の研究のホットスポットである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】国際公開第２００１／１９８０２号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
国際出願ＰＣＴ／ＣＮ２０１３／０００９５３３号では、本発明者らは良好な活性及び高い選択性を有するＰＤＥ−５阻害剤群を提供している。本発明では、国際出願ＰＣＴ／ＣＮ２０１３／０００９５３号に開示される式（Ｉ）の化合物をプロドラッグへと調製する。これらのプロドラッグは、これらの化合物の物理的及び化学的な特性、標的部位に対するより高い選択性、並びにｉｎ  ｖｉｖｏでの吸収、分散、輸送及び代謝等の薬物動態を改善した。その製剤及び結晶形態の開発は非常に重要である。このため、本発明の目的は二環式置換ピリミジン型ＰＤＥ−５阻害剤のプロドラッグを提供することである。具体的には、本発明は以下のものに関する：
（１）一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体：
【００１６】
【化３】
2016516736.tif 000005
【００１７】
（式中、
Ｒ１は６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１２員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員〜１２員の含窒素架橋ヘテロシクリルを表し、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１はＮ原子を介してピリミジン環に結合し、
前記置換基はハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル又はＣ１〜６アルコキシカルボニルから選択され、
Ｒ２は水素原子、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル又はＣ１〜６アルコキシから選択され、
Ｒ３及びＲ４は各々独立して水素、又はハロゲン原子、ヒドロキシル、若しくはカルボキシルから選ばれる１個〜３個の基で置換されてもよいＣ１〜６アルキルを表し、
ｍは０〜３であり、
Ｚは水素、又はリン酸と塩を形成することが可能な無機塩基若しくは有機塩基のカチオンであり、
Ｒ５及びＲ６は各々独立して水素原子又は−Ｑ−Ｒ７を表し、
Ｑは結合、又は置換されてもよいＣ１〜６アルキリデンを表し、該置換基はハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、アミノ、シアノ、ニトロ又はＣ１〜６アルコキシから選択され、
Ｒ７は６員〜１４員のアリール、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、
前記置換基はハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、カルボキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、スルホニルアミノ又はＣ１〜６アルキルスルホニルアミノから選択される）。
【００１８】
（２）Ｒ２が好ましくは水素原子、ヒドロキシル又はメチルであり、Ｒ６が好ましくは水素原子である、（１）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００１９】
（３）Ｒ３が好ましくは水素であり、Ｒ４が好ましくは水素であり、
ｍが好ましくは０、１又は２であり、
Ｚが好ましくは水素又はナトリウムイオンである、（１）又は（２）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００２０】
（４）Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
ＱがＣ１〜６アルキリデンから選択され、
Ｒ７が６員〜１０員のアリール、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく
前記置換基がハロゲン原子、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、カルボキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、ハロＣ１〜６アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、シアノ、ニトロ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、スルホニルアミノ又はＣ１〜６アルキルスルホニルアミノから選択される、（１）〜（３）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００２１】
（５）Ｒ１が６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１２員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員〜１２員の含窒素架橋ヘテロシクリルを表し、いずれも１個〜４個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１がＮ原子を介してピリミジン環に結合し
前記置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜６アルキル、ハロＣ１〜６アルキル、ヒドロキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルカルボニル又はＣ１〜６アルコキシカルボニルから選択される、（１）〜（４）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００２２】
（６）Ｒ１が１個〜３個の置換基で置換されてもよい６員若しくは７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１０員の含窒素スピロヘテロシクリル又は７員若しくは８員の含窒素架橋ヘテロシクリルから選択され、Ｒ１がＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
前記置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択され、
Ｒ３及びＲ４が各々独立して水素であり、
ｍが０、１又は２であり、
Ｚが水素又はナトリウムイオンであり、
Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
ＱがＣ１〜４アルキリデンから選択され、
Ｒ７が１個〜３個の置換基で置換されてもよいフェニル、５員〜７員のヘテロシクリル又は８員〜１０員の縮合シクリルから選択され、
前記置換基がフッ素原子、塩素原子、メチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、ジメチルアミノ又はカルボキシメチルから選択され、
Ｒ２が水素原子から選択され、
Ｒ６が水素原子から選択される、（１）〜（５）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００２３】
（７）Ｒ１が６員又は７員の含窒素縮合ヘテロシクリル、７員〜１０員の含窒素スピロヘテロシクリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、Ｒ１がＮ原子を介して式（Ｉ）のピリミジン環に結合し、
置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択され、
Ｒ１が更に好ましくは
【００２４】
【化４】
2016516736.tif 000006
【００２５】
から選択され、
Ｒ３が好ましくは水素であり、Ｒ４が好ましくは水素であり、
ｍが好ましくは０、１又は２であり、ｍが更に好ましくは０又は１であり、
Ｚが好ましくは水素又はナトリウムイオンであり、Ｚが更に好ましくはナトリウムイオンであり、
Ｒ５が−Ｑ−Ｒ７を表し、
Ｑがメチレン又はエチレンから選択され、
Ｒ７がフェニル、ピロリル、フリル、ピリジル、チアゾリル、ナフチル、ベンゾピロリル、インデニル、キノリル又はインドリルから選択され、いずれも１個〜３個の置換基で置換されてもよく、
置換基がハロゲン原子、シアノ、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜４アルキル、ハロＣ１〜４アルキル、ヒドロキシルＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４アルコキシから選択され、
Ｒ５が更に好ましくは
【００２６】
【化５】
2016516736.tif 000007
【００２７】
から選択される、（６）に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体。
【００２８】
特に好ましい化合物は以下のものを含む。
【００２９】
【表１】
2016516736.tif 000008
【００３０】
【表２】
2016516736.tif 000009
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明では、「ハロ」という用語は、「ハロゲン原子」で置換されていることを指し、「ハロゲン原子」はフッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子などを指す。
【００３２】
本発明では、「Ｃ１〜６アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、２−メチルブチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、１，２−ジメチルプロピル等の炭素数１〜６の直鎖又は分岐アルキルを指し、Ｃ１〜４アルキルが好ましい。本発明では、「Ｃ１〜４アルキル」という用語は、１個〜４個の炭素原子を含有する上記の例を指す。
【００３３】
本発明では、「Ｃ１〜６アルキリデン」という用語は、上記のアルキルから１つの水素原子を取り除いで得られる直鎖又は分岐アルキル誘導体を指し、−（ＣＨ２）ｔ−（ｔは１〜６の整数である）、例えばメチレン、エチレン、プロピリデン等が挙げられ、Ｃ１〜４アルキリデンが好ましい。本発明では、「Ｃ１〜４アルキリデン」という用語は１個〜４個の炭素原子を含有する上記の例を指す。
【００３４】
本発明では、「Ｃ１〜６アルコキシ」という用語は、「Ｃ１〜６アルキル」が酸素原子を介して別の構造に結合した基、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ、ヘキソキシ等を指す。
【００３５】
本発明では、「ハロＣ１〜６アルキル」という用語は、１以上の水素原子が１以上の「ハロゲン原子」により置換された「Ｃ１〜６アルキル」に由来する基を指し、「ハロゲン原子」及び「Ｃ１〜６アルキル」という用語は、上に規定されたものである。
【００３６】
本発明では、「ヒドロキシルＣ１〜６アルキル」という用語は、１以上の水素原子が１以上のヒドロキシル基により置換された「Ｃ１〜６アルキル」に由来する基を指し、「Ｃ１〜６アルキル」という用語は、上に規定されたものである。
【００３７】
本発明では、「カルボキシルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ」という用語は、それぞれＨＯＯＣ−Ｃ１〜６アルキル−、−Ｃ１〜６アルキル−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１〜６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１〜６アルキル−ＮＨ−、（Ｃ１〜６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１〜６アルキル−ＳＯ２−ＮＨ−の形態で別の構造に接続した基を指し、ここで、「Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキリデン」は上に規定されたものである。カルボキシルＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルキルカルボニル、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、Ｃ１〜４アルキルスルホニルアミノが好ましく、そして、「カルボキシルＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルキルカルボニル、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜４アルキル）アミノ、Ｃ１〜４アルキルスルホニルアミノ」という用語は、炭素数が１〜４の上記の例を指し、「Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルキリデン」は上に規定されたものである。
【００３８】
本発明では、「Ｃ２〜６アルケニル」は、少なくとも１つの２重結合と２個〜６個の炭素原子とを含有する直鎖又は分岐又は環状アルケニル、例えば、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、１，３−ブタジエニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、１，３−ペンタジエニル、１，４−ペンタジエニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１，４−ヘキサジエニル、シクロペンテニル、１，３−シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、１，４−シクロヘキサジエニル等を指す。
【００３９】
本発明では、「Ｃ２〜６アルキニル」は、少なくとも１つの３重結合と２個〜６個の炭素原子とを含有する直鎖又は分岐アルキニル、例えば、エチニル、プロピニル、２−ブチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−メチル−２−ペンチニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、５−メチル−２−ヘキシニル等を指す。
【００４０】
本発明では、「６員又は７員の含窒素縮合ヘテロシクリル」は、６個又は７個の炭素原子及び／又はヘテロ原子を含有し、少なくとも２つの環が隣接する２つの原子を共有し、ヘテロ原子の少なくとも１つが窒素原子である、６員又は７員の飽和した又は部分的に飽和した含窒素縮合ヘテロシクリルを含む、一種の環状構造を指す（「ヘテロ原子」の例としてはＮ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ又はＳＯ２が挙げられるが、これらに限定されない）。具体例としては、
【００４１】
【化６】
2016516736.tif 000010
【００４２】
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４３】
本発明では、「７員〜１２員の含窒素スピロヘテロシクリル」は、７個〜１２個の炭素原子及び／又はヘテロ原子を含有し（ヘテロ原子の少なくとも１つが窒素原子である）、１つの原子を共有する少なくとも２つの環により形成される、一種の環状構造を指す（「ヘテロ原子」の例としてはＮ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ又はＳＯ２が挙げられるが、これらに限定されない）。具体例としては、
【００４４】
【化７】
2016516736.tif 000011
【００４５】
が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、７員〜１０員の含窒素スピロヘテロシクリルは７個〜１０個の環原子を含有する上記の例の環状構造を指す。
【００４６】
本発明では、「７員〜１２員の含窒素架橋ヘテロシクリル」は、７個〜１２個の炭素原子及び／又はヘテロ原子を含有し（ヘテロ原子の少なくとも１つが窒素原子である）、互いに隣接していない２つの原子を共有する少なくとも２つの環により形成される、一種の環状構造を指す（「ヘテロ原子」の例としてはＮ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ又はＳＯ２が挙げられるが、これらに限定されない）。具体例としては、
【００４７】
【化８】
2016516736.tif 000012
【００４８】
が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、７員又は８員の含窒素架橋ヘテロシクリルは７個又は８個の環原子を含有する上記の例の環状構造を指す。
【００４９】
本発明では、「５員〜７員のヘテロシクリル」は、５個〜７個の環原子（少なくとも１つのヘテロ原子を含む）を含有する環状構造を指す（「ヘテロ原子」の例としてはＮ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ又はＳＯ２が挙げられるが、これらに限定されない）。具体例としては、テトラヒドロフリル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピロリル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピペリジル、モルホリニル、ピペラジニル、２−オキソ−アザシクロヘプチル、２−オキソ−ピペラジニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピリミジル、ピリジル、ピラジニル、テトラヒドロオキサゾリル、テトラヒドロイソオキサゾリル、テトラヒドロチアゾリル、１，１−ジオキソ−イソチアゾリニル、４，５−ジヒドロイミダゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、２−ピリドニル、４−ピリドニル、１，２−ジアザシクロヘプタトリエニル、１，３−ジアザシクロヘプタトリエニル、１，４−ジアザシクロヘプタトリエニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５０】
本発明では、「８員〜１０員の縮合シクリル」は、８個〜１０個の炭素原子及び／又はヘテロ原子を含有し、隣接する２つの原子を共有する少なくとも２つの環により形成される、一種の環状構造を指す（「ヘテロ原子」の例としてはＮ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ又はＳＯ２が挙げられるが、これらに限定されない）。具体例としては、
【００５１】
【化９】
2016516736.tif 000013
【００５２】
等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
「６員〜１４員のアリール」という用語は、６員〜８員のアリール及び８員〜１４員の縮合アリールを含む６個〜１４個の炭素原子を含有する芳香族基を指す。６員〜８員のアリールはフェニル、シクロオクタテトラエニル等の６個〜８個の炭素原子を含有する単環アリールを指す。８員〜１４員の縮合アリールは、８個〜１４個の環炭素原子を含有し、隣接する２つの原子を共有する少なくとも２つの環により形成される芳香族不飽和縮合環状基を指す。具体例としては、ナフタレン、アントラセン、フェナントレンが挙げられるが、これらに限定されない。「６員〜１０員のアリール」は上記の例の６個〜１０個の環原子を含有する環状構造を指す。
【００５４】
上記の本発明の化合物は、以下の方法及び／又は当業者に既知の他の方法によって合成することができるが、以下の方法に限定されない。
【００５５】
本発明では、略語の意味は以下の様である。
ＴＨＦはテトラヒドロフランを指し、
ＴＬＣは薄層クロマトグラフィーを指し、
ＭＴＢＥはメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを指し、
ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指し、
ＤＩＥＡはＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指し、
ＨＡＴＵは２−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを指す。
【００５６】
反応スキーム：
【化１０】
2016516736.tif 000014
Raw material：原料、Intermadiate：中間体、trimethyl phospate：リン酸トリメチル
Alkali：アルカリ、Compound of Formula (I)：一般式（Ｉ）で表される化合物
【００５７】
反応工程：
工程１：中間体１の合成
原料２を有機溶媒に溶解し、有機アルカリを滴加し、室温で撹拌し、原料１を氷浴条件下で添加する。反応生成物を室温で反応終了まで撹拌し、減圧で蒸発させて溶媒を除去する。一定量の酢酸エチル及び水を抽出のために添加し、得られた有機層を乾燥させ、油状物質が得られるまで、減圧で蒸発させて溶媒を除去する。一定量の有機溶媒（例えばメタノール）を添加し、固体を沈殿させ、吸引濾過し、得られた濾過ケーキを真空乾燥させて中間体１を得る。有機溶媒は好ましくはメタノール、ＤＣＭ又はＴＨＦ、より好ましくはＴＨＦであり、有機アルカリは好ましくはトリエチルアミンである。
【００５８】
工程２：中間体２の合成
中間体１を有機溶媒に溶解し、ｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）のジクロロメタン溶液を氷浴条件下で滴加する。反応を室温で行い、飽和無機アルカリ溶液を添加して反応をクエンチする。抽出後に有機相を飽和無機アルカリ溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれで洗浄する。有機層を乾燥させ（無水硫酸ナトリウムで乾燥させ）、濾過して中間体２を得て、これを精製することなく直接次の反応に使用する。有機溶媒は好ましくはジクロロメタンであり、飽和無機アルカリ溶液は好ましくは飽和重炭酸ナトリウム溶液である。
【００５９】
工程３：中間体３の合成
撹拌条件下で、原料３を中間体２に添加し、有機アルカリを氷浴下で滴加する。反応を室温で行い、飽和無機アルカリ溶液を添加して反応をクエンチし、その後、抽出、乾燥及び濃縮により油状物質を得る。油状物質を有機溶媒に溶解させ、撹拌し、吸引濾過して中間体３を得る。有機溶媒は好ましくはメタノールであり、有機アルカリは好ましくはトリエチルアミンであり、飽和無機アルカリ溶液は好ましくは飽和塩化アンモニウム溶液である。
【００６０】
工程４：中間体４の合成
中間体３を有機溶媒に溶解し、無機アルカリ溶液を添加する。その溶液を反応終了まで還流させ、その後、室温に冷却する。無機酸（例えば塩酸）を添加してｐＨ＝３に調節し、固体を析出させる。溶媒を除去した後、水を添加し、撹拌し、濾過し、真空乾燥させて中間体４を得る。有機溶媒は好ましくはメタノール、テトラヒドロフラン、又はテトラヒドロフランとメタノールとの混合溶媒、より好ましくはテトラヒドロフランとメタノールとの混合溶媒であり、無機アルカリ溶液は好ましくは水酸化ナトリウム溶液である。
【００６１】
工程５：中間体５の合成
中間体４を有機溶媒に溶解し、有機アルカリを氷浴下で滴加した後、ＨＡＴＵを添加し、原料４を撹拌下で添加する。室温で、反応が終了するまで反応生成物を撹拌し、水を添加して固体を析出させる。吸引濾過後に濾過ケーキを水で洗浄し、空気乾燥させた後、アセトンで再結晶化して中間体５を得る。有機溶媒は好ましくはＤＭＦであり、有機アルカリ溶液は好ましくはＤＩＥＡである。
【００６２】
工程６：中間体６の合成
中間体５を有機溶媒に溶解し、ＰＯＣｌ３を氷浴下で滴加する。室温で反応終了まで反応生成物を撹拌する。反応液を氷浴下で冷却し、無機アルカリ溶液を添加して固体を生成する。濾過後に、固体を分取クロマトグラフィーによって精製して中間体６を得る。該有機溶媒は好ましくはリン酸トリメチルであり、無機アルカリ溶液は好ましくはＮａＨＣＯ３溶液である。
【００６３】
工程６：一般式（Ｉ）で表される化合物の合成
中間体６を有機溶媒に溶解し、アルカリ溶液を氷浴下で滴加し、不溶性物質を生成するまで反応生成物を撹拌する。濾過後に、固体を少量の水及びアセトンで洗浄して、一般式（Ｉ）で表される化合物として白色の固体を得る。有機溶媒は好ましくはメタノールであり、アルカリ溶液は好ましくは水酸化ナトリウム溶液、ＮａＨＣＯ３溶液又はＮａ２ＣＯ３溶液である。
【００６４】
ここで原料２はＲ５Ｒ６Ｎ、原料３はＲ１Ｈであり、上記反応スキームにおいて、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＺは上に規定されたとおりである。
【００６５】
本発明により、以下の塩を含む、式（Ｉ）の化合物の「薬学的に許容可能な塩」の保護を試みている：
アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等；アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩等；他の金属塩、例えば、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等；無機アルカリ塩、例えば、アンモニウム塩；有機アルカリ塩、例えば、ｔｅｒｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エタンジアミン塩、Ｎ−メチルグルコサミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエタンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェニルエチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリ（ヒドロキシメチル）メチルアンモニウム塩等；ハロゲン酸（haloid acid）の塩、例えば、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等；無機酸塩、例えば、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等；低級アルキルスルホン酸塩、例えば、メチルスルホン酸塩、トリフルオロメチルスルホン酸塩、エチルスルホン酸塩等；アリールスルホン酸塩、例えば、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ベンゼンスルホン酸塩等；有機酸塩、例えば、酢酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩；アミノ酸塩、例えば、グリシン塩、トリメチルグリシン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン塩、アスパラギン酸塩等。
【００６６】
本発明では、一般式（Ｉ）で表される化合物の「立体異性体」は配座異性体及び配置異性体を含み、配置異性体はシス−トランス異性体及び光学異性体を更に含む。立体異性体とは、本発明の化合物が１以上の不斉中心を含有するとき、そのそれぞれが２つの光学異性体を生成する。本発明の範囲は考え得る全ての光学異性体及びジアステレオ異性体の混合物及び純粋又は部分的に純粋な化合物を包含する。本発明の化合物がオレフィン二重結合を含有する場合、特に記載のない限り、本発明はそのシス異性体及びトランス異性体を含む。本発明のいずれの化合物も、１以上の二重結合のシフトに起因して異なる水素結合点を有する互変異性形態で存在し得る。例えば、ケトン及びそのエノールはケトン−エノール互変異性体である。互変異性体及びその混合物の全てが本発明の範囲内である。
【００６７】
本発明では、「プロドラッグ」は、化合物がエステルを形成することが可能なヒドロキシル等の基を有する場合に有機酸若しくは無機酸と共に形成される活性化合物のエステルを指す。上記プロドラッグは無機アルカリ若しくは有機アルカリと更に反応して塩を形成することができ、これも「プロドラッグ」と規定される。「プロドラッグ」は、活性化合物の溶解度等の物理的及び化学的な特性の問題を改善することに役立ちうる。プロドラッグは水又は酸溶液中で安定であり、酵素又は非酵素条件下での解離によって遊離活性化合物へと移行し、薬理作用を発揮する。活性化合物は「原薬」とも呼ばれる。プロドラッグはより良好な溶解度を有し、動物体又は人体に容易に吸収され、血中で本来の活性化合物へと迅速に変換されて薬理作用を発揮する。
【００６８】
一般式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容可能な塩、エステル及び立体異性体は、経口投与、非経口（静脈内、筋肉内、皮下又は直腸内）投与、肺内投与又は局所投与等によってヒト等の哺乳動物に使用することができる。医薬製剤中の本発明の化合物の含量は単一製剤に対して１重量％〜約１００重量％である。投与量は投与対象、投与経路、疾患及び症状に応じて異なる。例えば、本発明の化合物（活性成分として使用される）は糖尿病患者（体重約６０ｋｇ）に１日約０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１日５ｍｇ〜５００ｍｇ、より好ましくは１日５０ｍｇ〜３００ｍｇの用量で経口投与することができる。この用量は単回投与で一度に投与しても、又はバッチで１日数回投与してもよい。
【００６９】
本発明の式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容可能な塩又は立体異性体は、１以上の薬学的に許容可能な担体と医薬組成物を形成することができる。前記医薬組成物は、かかる治療を必要とする患者に経口投与又は非経口投与で適用することができる従来の臨床医薬製剤を形成することができる。製剤は例えば錠剤、顆粒、カプセル、粉末、注射剤、吸入剤、舌下投与用の製剤、シロップ、ゲル、軟膏、坐剤、ローション、点鼻薬、噴霧剤、経皮製剤等であり得る。これらの製剤は、賦形剤、結合剤、増湿剤、崩壊剤、増粘剤等の薬学的に許容可能な担体を添加することで従来の方法によって調製することができる。
【００７０】
本発明の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩若しくは立体異性体は、１以上の第２の治療活性剤と共に医薬組成物に調製されることができ、治療活性剤は血管拡張剤、プロスタグランジンＥ１、プロスタサイクリン、α−アドレナリン受容体抑制剤、混合α，β−遮断薬、α−遮断薬、５α−還元酵素阻害剤、α２−アドレナリン受容体抑制剤、ＡＣＥ阻害剤、ＮＥＰ阻害剤、中枢ドーパミン剤、血管作動性腸管ペプチド、カルシウムチャネル遮断薬、チアジン、又はそれらの混合物から選択される。
【００７１】
本発明の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩若しくは立体異性体は、ＰＤＥ−５（ホスホジエステラーゼ−５）を阻害するより良好な活性を有し、そのためｃＧＭＰシグナル伝達機能不全に起因する性機能不全及び下部尿路症状等の疾患の治療及び／又は予防用の薬剤の製造に使用することができる。
【００７２】
本発明の化合物の有益な効果を、以下のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物動態実験、薬理活性を決定するｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験及び溶解度実験によって更に説明する。しかしながら、本発明の化合物が以下の有益な効果を有するのみであるとの認識と解釈すべきではない。
【００７３】
説明：本発明の化合物の分子構造特徴は、或る特定のｐＨ条件下で加水分解してアルコール構造を形成することができるホスフェートベースの二ナトリウム塩を特徴とする。例えば、本発明の化合物１は加水分解脱酸により本来の活性化合物Ｑを生成することができ、化合物Ｑの具体的な構造は以下の通りである：
【００７４】
【化１１】
2016516736.tif 000015
【００７５】
化合物Ｑは本発明の化合物の「原薬」である。プロドラッグは水への溶解度が高く、ｉｎ  ｖｉｖｏで代謝されて「原薬」へと変化する。プロドラッグは患者に投与する際に不活性であってもよく、ｉｎ  ｖｉｖｏで活性化合物へと変換されることができる。式（Ｉ）の化合物がヒドロキシル基を有する場合、アミノ酸、リン酸等とエステル型プロドラッグを形成することができる。
【００７６】
実験１：本発明の化合物のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物動態の決定（静脈注射、経口投与）
１．実験設計
【００７７】
【表３】
2016516736.tif 000016
【００７８】
２．試験サンプル
幾つかの本発明の化合物を実施例の方法に従って調製し、生理食塩水溶液に溶解した。上記の構造を有するアバナフィルは市販のものであり、内部標準として使用し、メタノールに溶解した。
【００７９】
３．装置
機器及び設備：ＡＰＩ４０００  ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ
クロマトグラフカラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  ＸＤＢ  Ｃ１８（２．１×５０ｍｍ、５μｍ）
【００８０】
４．採血
ラットにおける採血：動物を固定し、各時点の１０分前に尾部を水浴で温め、約２００μＬの血液を尾静脈から採取し、ヘパリンナトリウムの入った抗凝固管に採取した血液を入れた。血液サンプルを４℃、８０００ｒｐｍで６分間遠心分離し、血漿サンプルを得た。血漿は採血後３０分以内に調製しなければならない。血漿は試験まで−８０℃の冷凍庫で保管した。
【００８１】
５．実験方法
１）試験対象のサンプルを冷凍庫（−８０℃）から取り出し、そのまま室温で溶かした後、５分間かき混ぜる；
２）２０μＬのサンプルを正確に１．５ｍＬ容の遠心分離管に移す；
３）２００μＬの内部標準液を添加する；
４）３分間かき混ぜた後、５分間遠心分離する（１２０００ｒｐｍ）；
５）５０μＬの上清を正確に取り、１５０μＬの水を添加し、３分間かき混ぜ、分析のためにＬＣ−ＭＳ／ＭＳに供する。
【００８２】
６．追跡検出
【００８３】
【表４】
2016516736.tif 000017
【００８４】
０．０８３時間の時点でプロドラッグ化合物１の濃度は１６５．３３ｎｇ／ｍＬであり、これは１１０４ｎｇ／ｍＬという原薬化合物Ｑの濃度よりも低かった。殆どのプロドラッグ化合物１がこの時点で原薬化合物Ｑへと変換された。本発明の化合物１は化合物Ｑのプロドラッグである。静脈注射（IV）後に化合物１の血漿濃度はＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって０．０８３時間の時点でのみ検出することができ、化合物１は他の全時点で血漿中に検出することができなかったが、化合物Ｑの血漿濃度は０．０８３時間の後に検出することができたため、プロドラッグ化合物１がラットにおいて原薬化合物Ｑへと迅速に（０．０８３時間以内）変換されることが示された。化合物１は胃内投与（ＰＯ）後の各時点でＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって血漿中に検出されなかったが、原薬化合物Ｑが検出されたため、プロドラッグ化合物１が胃に入った後即座に原薬化合物Ｑへと変換されることが示された。これにより、本発明の化合物１が静脈注射及び胃内投与の後に本来の化合物Ｑへと完全に変換されることが確認された。したがって、本実験における化合物１の実験結果は原薬化合物Ｑの血漿濃度の追跡検出によって得られた。
【００８５】
７．データ処理の方法
試験サンプル（血漿サンプル）の濃度は、AB CompanyのＡｎａｌｙｓｔ  １．５．１を用いて出力した。パラメーター、平均値、標準偏差及び変数係数（Ａｎａｌｙｓｔ  １．５．１によって出力したこれらは算出しなかった）はＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌによって算出した。ＰＫパラメーターはPharsightのＰｈｏｅｎｉｘ  ６．２ソフトウェアを用いて算出した。
【００８６】
【表５】
2016516736.tif 000018
【００８７】
【表６】
2016516736.tif 000019
【００８８】
【表７】
2016516736.tif 000020
【００８９】
【表８】
2016516736.tif 000021
【００９０】
ここで、Ｔ１／２は半減期を表し、ＡＵＣｉｎｆは薬物−時間曲線下面積０→∞を表し、ＣＬはクリアランス率を表し、Ｖｓｓは見掛けの分布容積を表し、Ｃｍａｘは化合物の血中ピーク濃度を表し、Ｔｍａｘは化合物の血中ピーク濃度到達時間を表し、Ｆ％は絶対的バイオアベイラビリティを表す。
【００９１】
実験の結論：
プロドラッグ化合物１が、ラットにおいて薬理活性を実際に発揮する原薬化合物Ｑへとほぼ完全に変換され、本発明の化合物１及び化合物Ｑの両方が良好な薬物動態特徴を示したことが表１、表２及び表３で示された。化合物１のラットへの投与後に、検出された化合物Ｑの薬物動態特徴は、単独で投与された化合物Ｑのクリアランス率、ＡＵＣ等の薬物動態特徴と同様であった。化合物１がラットにおいてその原薬化合物Ｑへと変換され、薬理活性が化合物Ｑによって発揮され、化合物Ｑにより調製されるプロドラッグ化合物１は化合物Ｑの固有の薬理活性に影響を及ぼさなかったことが示された。このため、本発明の化合物１はＰＤＥ−５シグナル経路の異常発現に起因する性機能不全に対して良好な阻害効果を示す。
【００９２】
プロドラッグ化合物１が、ラットにおいて実際に薬理活性を発揮する原薬化合物Ｑへとほぼ完全に変換されたことが表１、表２及び表３で示された。アバナフィルと比較して、本発明の化合物は、ラットにおいて、ＩＶ及びＰＯ投与後、より長い半減期及び薬理活性の持続時間、増大された曝露用量及びバイオアベイラビリティを有する。プロドラッグ化合物４及び９（原薬化合物４−Ａ及び９−Ｂにより検出される）は、ラットにおいてアバナフィルと比較して半減期、曝露用量、薬理活性の持続時間及びバイオアベイラビリティの点で優れたＰＫパラメーターを示したことが表４及び表５から明らかである。このため、本発明の化合物はより良好な薬物能を有し、特に、本発明の化合物の経口バイオアベイラビリティをアバナフィルと比較して顕著に上昇させるため、本発明の化合物は臨床用途においてより有望であった。
【００９３】
実験２：化合物Ｑのｉｎ  ｖｉｔｒｏ薬理活性の決定
試験サンプル：上記の構造を有する化合物Ｑは実施例１の工程１〜８に従って調製した。上記の構造を有するアバナフィルを市場から購入した。
【００９４】
実験方法：酵素アッセイ、キャリパー移動度シフト（Caliper Mobility-Shift）ＰＤＥ−５Ａアッセイ：
試験サンプルを正確に秤量し、ＤＭＳＯに溶解し、十分に混合して１０ｍＭ溶液を得た。次いで、母液をＤＭＳＯで０．５ｍＭの濃度に希釈した後、３．１６２倍の勾配にて段階希釈し、合計１１の濃度を得た。
【００９５】
９６ウェルプレートに１０μＭ  ＦＬ−ｃＧＭＰ基質を２０μＬ（緩衝液が２ｍＭから１０μＭまで希釈された）、化合物を含むＤＭＳＯ溶液又は化合物を含まないＤＭＳＯ溶液を１μＬ溶液、続いて２９μＬの１．３８ｎｇ／μＬ  ＰＤＥ−５Ａ酵素緩衝液（緩衝液を１００ｎｇ／μＬから１．３８ｎｇ／μＬまで希釈した）を添加し、化合物の最大最終濃度を１０μＭとした。３０℃で１時間インキュベートした後、２０μＬの７０μＭ  ＥＤＴＡを添加して反応を終了させ、各ウェルの２６μＬの反応液を３８４ウェルプレートに移し、ＥＺ  ｒｅａｄｅｒ  ＩＩによって検出した。阻害率を以下の式によって算出し、Ｐｒｉｓｍ  ５．０を用いて阻害率からＩＣ５０値を算出した。
阻害率＝［変換率（ＺＰＥ）−変換率（サンプル）］×１００／［変換率（ＺＰＥ）−変換率（ＨＰＥ）］
注記：ＨＰＥ：酵素非存在下のブランク対照；ＺＰＥ：化合物非存在下のブランク対照。
【００９６】
緩衝溶液の調製：
【００９７】
【表９】
2016516736.tif 000022
【００９８】
上記の成分を溶解し、１Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ７．５に調節し、２００ｍＬの一定容量まで希釈し、４℃で保管した。
【００９９】
実験結果及び結論：
【０１００】
【表１０】
2016516736.tif 000023
【０１０１】
結論：化合物ＱがＰＤＥ−５Ａに対して良好な阻害活性を有していたことが表６から明らかである。化合物Ｑをそのプロドラッグ化合物１に調製した場合、化合物１はｉｎ  ｖｉｖｏで化合物Ｑにより効果を発揮することができ、その薬理活性は影響を受けなかった。
【０１０２】
実験３：化合物Ｑのｉｎ  ｖｉｔｒｏ薬理活性の決定
試験サンプル：上に規定の構造を有する化合物Ｑは実施例１の工程１〜８に従って調製した。上に規定の構造を有するアバナフィルは市場より購入された。
【０１０３】
実験方法：酵素アッセイ
シンチレーション計数器（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ、Packard）ＰＤＥ−５アッセイ：
ＰＤＥ−５源、ヒト血小板
【０１０４】
試験サンプルを正確に秤量し、ＤＭＳＯに溶解し、十分に混合して１０ｍＭの濃度の原液を調製し、半対数（half-log）（３．１６２倍）に希釈し、８つの濃度を得た。
【０１０５】
化合物又は溶媒を３５μｇ／ｍＬ酵素溶液（トリス−ＨＣｌ緩衝溶液（ｐＨ７．５）に溶解した）とともに２５℃で１５分間プレインキュベートした後、１μＭ  ｃＧＭＰ及び０．０１μＭ  ［３Ｈ］ｃＧＭＰを添加して反応を開始させた。２０分間のインキュベーション後に、反応を１００℃で終了させ、ヘビ毒ヌクレオチダーゼを添加して生成物［３Ｈ］ｃＧＭＰを［３Ｈ］グアノシンへと変換させ、ＡＧ１−Ｘ２樹脂によって分離し、生成した［３Ｈ］グアノシンの量を計測した。反応に関わる化合物の最大濃度は１μＭであった。
【０１０６】
化合物を基質含有（１．０１μＭ  ［３Ｈ］ｃＧＭＰ＋ｃＧＭＰ）緩衝溶液５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２に添加し、２５℃で１５分間インキュベートし、酵素ＰＤＥ−５を添加し、混合物を２５℃で２０分間インキュベートし、生成物［３Ｈ］グアノシンを定量的に決定した。反応に関わる化合物の最大濃度は１μＭであった。
【０１０７】
ＩＣ５０値はＭａｔｈＩＱ（商標）ソフトウェア（ID Business Solutions Ltd.，UK）によって算出した。
【０１０８】
【表１１】
2016516736.tif 000024
【０１０９】
実験の結論：化合物Ｑが対照薬の阻害活性と同等のＰＤＥ−５酵素に対する良好な阻害活性を有し、ＰＤＥ−５酵素に関する疾患、特にＰＤＥ−５酵素によって媒介される疾患又は障害の治療に使用することができることが表７で示された。これは顕著な臨床的有意性を有する。このため、プロドラッグ化合物１はＰＤＥ−５酵素に対して同じ阻害活性を有していた。
【０１１０】
実験４：化合物１及び化合物Ｑの溶解度の比較試験
試験サンプル：本発明の化合物１（実施例１の方法に従って調製した）及び化合物Ｑ。
【０１１１】
実験方法：
１．化合物１のサンプルを調製する方法：６部の試験サンプルを正確に秤量し、各２ｍｇであり、ｐＨ４、ｐＨ５、ｐＨ６、ｐＨ７、ｐＨ８、ｐＨ９の緩衝溶液４０μＬに別個にそれぞれ添加した。振動させ（５分間の超音波処理）、目視観察によって検出した。
２．化合物Ｑのサンプルを調製する方法：４部の試験サンプルを正確に秤量し、各１ｍｇであり、ｐＨ３、ｐＨ５、ｐＨ７、ｐＨ９の緩衝溶液１ｍＬに別個に添加し、５分間超音波処理し、０．４５μｍ有機濾過膜で濾過した。濾液を試験サンプル溶液として使用した。各１０μＬを高速液体クロマトグラフに注入し、ピーク面積を記録した。
【０１１２】
化合物Ｑの対照溶液：
４．８８ｍｇの試験サンプルを正確に秤量し、１０ｍＬ容の容量フラスコに入れ、１ｍＬのメタノールに添加して溶解させた後、メタノールで一定の容量まで希釈して、１ｍＬ当たり０．４８８ｍｇの対照を含有する溶液を得て、これを母液Ａとして使用した。母液Ａをメタノールで徐々に希釈し、１ｍＬ当たり０．０４８８ｍｇ若しくは０．００９７６ｍｇを含有する対照溶液を得た。
【０１１３】
線形回帰を、対照濃度（Ｃ）を横座標、ピーク面積（Ｙ）を縦座標として用いて行い、一次方程式を得た。試験サンプル溶液の濃度は、試験サンプル溶液のピーク面積を一次方程式に代入することによって得た。
化合物Ｑの対照一次方程式：Ｙ＝２４２６２Ｃ、相関係数ｒ＝１．００００。
【０１１４】
３．装置：
機器及び設備：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００  ＨＰＬＣ
クロマトグラフィーカラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ−Ｐｒｏ  Ｃ１８（１５０×４．６ｍｍ、５μｍ）
電子スケール：Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  ＣＰＡ２２５Ｄ
【０１１５】
４．分析条件：
緩衝溶液：０．０２ｍｏｌ／Ｌのアンモニウム二水素ホスフェート（０．２％トリエチルアミンを添加し、リン酸でｐＨ＝６．０に調節した）
Ａ相：アセトニトリル−緩衝溶液＝１０：９、Ｂ相：アセトニトリル−緩衝溶液＝８０：２０
移動相：Ａ相：Ｂ相＝６５：３５
流量：１ｍＬ／分
検出波長：２５４ｎｍ
サンプルサイズ：１０μＬ
【０１１６】
５．緩衝溶液の調製：
１）ｐＨ４．０の塩酸／フタル酸水素カリウム溶液：
１．０２ｇのフタル酸水素カリウムを秤量し、０．０５ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ塩酸溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を１００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１１７】
２）ｐＨ５．０の水酸化ナトリウム／フタル酸水素カリウム溶液
１．０２ｇのフタル酸水素カリウムを秤量し、１１．３ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を１００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１１８】
３）ｐＨ６．０のリン酸緩衝液
０．６８ｇのリン酸二水素カリウムを秤量し、２．８ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を１００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１１９】
４）ｐＨ７．０のリン酸緩衝液
０．６８ｇのリン酸二水素カリウムを秤量し、１４．５５ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を１００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１２０】
５）ｐＨ８．０の水酸化ナトリウム／塩化カリウム／ホウ酸溶液
０．７５ｇの塩化カリウム及び０．６２ｇのホウ酸を秤量し、３．９ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を２００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１２１】
６）ｐＨ９．０の水酸化ナトリウム／塩化カリウム／ホウ酸溶液
０．７５ｇの塩化カリウム及び０．６２ｇのホウ酸を秤量し、２０．８ｍＬの０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び適量の水に添加して溶解させ、水を２００ｍＬまで添加することによって希釈し、均一に混合して対象溶液を得た。
【０１２２】
６．実験結果：
【表１２】
2016516736.tif 000025
【０１２３】
化合物ＱがｐＨ５、ｐＨ７、ｐＨ９の緩衝溶液に対して非常に低い溶解度を有するが、ｐＨ３の緩衝生食水溶液に対する溶解度が増大していることが表８から示された。溶解度増大の理由は、化合物Ｑが酸性条件下でアミン塩を形成し、これが増加した溶解度を引き起こしたためである。
【０１２４】
【表１３】
2016516736.tif 000026
【０１２５】
化合物１はｐＨ５、ｐＨ６、ｐＨ７、ｐＨ８、ｐＨ９の緩衝溶液４０μＬに添加した後、完全に溶解した。しかしながら、化合物１はｐＨ４の緩衝溶液４０μＬに添加した当初は溶解し、約５分後に析出し、ｐＨ４の緩衝溶液８０μＬを更に添加すると再び溶解し、約５秒後に再び析出し、徐々にペースト状になった。ｐＨ４の緩衝溶液２００μＬを更に添加しても化合物１はもはや溶解せず、ペースト状のままであった。
【０１２６】
したがって、化合物１の溶解度はｐＨ５、ｐＨ６、ｐＨ７、ｐＨ８、ｐＨ９の緩衝溶液において５０ｍｇ／ｍＬ以上であるが、ｐＨ４の緩衝溶液では減少した。溶解度減少の理由は、化合物１がリン酸エステルの二ナトリウム塩からリン酸モノエステルへと変化し、塩がエステルになった時にその溶解度が減少するためであった。
【０１２７】
７．実験の結論：
緩衝溶液のｐＨ値が５、７、９である場合、化合物Ｑの測定濃度は、ｐＨ値の同じ対応する緩衝溶液における本発明の化合物１の測定濃度よりも低いことが表８及び表９から示された。このことは本発明の化合物１の溶解度が化合物Ｑの溶解度よりも顕著に良好であることを示した。本発明の化合物１の溶解度は、緩衝溶液が弱酸性条件から弱アルカリ性条件へと徐々に変化する場合に増大した。さらに、本発明の化合物１が任意の薬学的に許容可能な投与形態の製造、特に注射剤の製造を容易にし得ると断定される。
【０１２８】
実験５：水における本発明の化合物の溶解度の比較
試験サンプル：実施例の方法に従って調製した幾つかの本発明の化合物。
【０１２９】
実験方法：
化合物４、４−Ａ、化合物９、及び９−Ｂのサンプルを調製する方法：２ｍｇの試験サンプルを取り、超純水に徐々に添加し、目視観察によりサンプルの完全に溶解するまでいずれも５分間超音波処理した。
【０１３０】
実験結果：
【０１３１】
【表１４】
2016516736.tif 000027
【０１３２】
実験の結論：
上記の結果から、化合物４の水への溶解度がその原薬化合物４−Ａの水への溶解度よりも２０００倍高いことが示された。さらに、本発明のプロドラッグ化合物の物理的及び化学的な特性が良好でありると断定でき、これが薬学的に許容可能な投与形態、特に注射剤の製造を容易にし、臨床用の投与形態の開発が効果的に展開され得るであろう。
【０１３３】
結論：
実施例４及び実施例５の実験結果から、本発明の式（Ｉ）の化合物がより良好な溶解度を有し、動物体又は人体に容易に吸収されることが示された。加えて、これらの実験から、式（Ｉ）の化合物が血中でＰＤＥ−５酵素に対して良好な阻害活性を有する原薬化合物へと有利に変換され得ることが確認された。このため、本発明の化合物は好ましくはＰＤＥ−５酵素を阻害する薬理活性を発揮し得る。
【実施例】
【０１３４】
４．発明の特定の実施形態
上記の本発明の内容を特定の実施例の形態で更に詳細に説明する。しかしながら、本発明の範囲は以下の実施例に限定されると解釈されるものではない。上記の本発明の内容に基づく全ての技術が本発明の範囲内にある。
【０１３５】
実施例１：Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩（化合物１）の調製
【０１３６】
【化１２】
2016516736.tif 000028
【０１３７】
（１）３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４−ジオンの調製
【０１３８】
【化１３】
2016516736.tif 000029
【０１３９】
三ツ口フラスコに１Ｌの氷酢酸を添加し、３−オキソビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４−ジオン（２００ｇ、１．７８４ｍｏｌ）を撹拌下で添加し、ベンジルアミン（２８８ｇ、２．７ｍｏｌ）を氷水浴下で滴加した。滴加後に、この反応生成物を徐々に昇温し、１３０℃で還流し、１２時間撹拌し、ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。反応の終了後に、反応液を室温まで冷却し、水（１０Ｌ）に注いで大量の白色固体を析出させた。濾過後に、濾過ケーキを０．８倍量のイソプロパノールで洗浄し、濾過し、真空乾燥して２７０ｇの白色固体生成物を得た。収率は７５％であった。
【０１４０】
（２）３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン塩酸塩の調製
【０１４１】
【化１４】
2016516736.tif 000030
【０１４２】
三ツ口フラスコに１．５Ｌのテトラヒドロフランを添加し、Ｒｅｄ−Ａｌ（７０％トルエン溶液）（１１４８ｍＬ、３．９７６ｍｏｌ）を撹拌下で添加した後、３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４−ジオン（２００ｇ、０．９９４ｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を滴加した。この反応生成物を室温で１２時間撹拌した。ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。反応の終了後に、水（２００ｍＬ）を氷水浴下で慎重に滴加することによって反応をクエンチした。酢酸エチル（５００ｍＬ）を添加し、珪藻土を用いて濾過を行い、テトラヒドロフランを減圧下で留去した。酢酸エチル（１Ｌ）を添加し、液相を分離し、水相を酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて溶媒を除去した。ＭＴＢＥ（５００ｍＬ）を添加し、塩化水素−エタノール溶液（１００ｍＬ）を約−２０℃で滴加し、ｐＨ値を１〜２に調節した。大量の白色固体が析出したため、ＭＴＢＥ（５００ｍＬ）を再び添加し、該混合物を低温で３０分間撹拌し、吸引濾過及び空気乾燥により白色固体（１８０ｇ、収率８６．３％）を得た。
【０１４３】
（３）３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン塩酸塩の調製
【０１４４】
【化１５】
2016516736.tif 000031
【０１４５】
三ツ口フラスコにおいて、３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン塩酸塩（１２０ｇ、５７２ｍｍｏｌ）をエタノール（１０００ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（１７ｇ）を添加し、水素ガス雰囲気下、反応生成物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ−ＭＳを用いて反応をモニタリングした。反応の終了後に珪藻土を用いて濾過を行い、濾液を直接回転蒸発（ロータリーエバポレーション）で濃縮し、少量の酢酸エチルでの洗浄及び乾燥により白色固体生成物（６１．６ｇ、収率９１．３％）を得た。
【０１４６】
（４）４−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−２−メチルチオピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１４７】
【化１６】
2016516736.tif 000032
【０１４８】
フラスコにテトラヒドロフラン（４．５Ｌ）を添加し、３−クロロ−４−メトキシベンジルアミン塩酸塩（５００ｇ、２．４ｍｏｌ）を撹拌下で添加し、トリエチルアミン（８３６ｍＬ、６．０１ｍｏｌ）を滴加し、混合物を室温で３０分間撹拌し、氷水で冷却した後、４−クロロ−２−メチルチオピリミジン−５−カルボン酸エチル（４６６ｇ、２．０ｍｏｌ）を添加し、反応生成物を室温で一晩撹拌した。ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。反応の終了後に、溶媒を減圧下での蒸発によって除去した。酢酸エチル（２．５Ｌ）及び水（１Ｌ）を添加し、その混合液相を分離し、有機相を連続して希塩酸、水（１Ｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（１Ｌ）及び飽和塩化ナトリウム（１Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後に溶媒を減圧下での蒸発によって除去し、油状物質を得て、これにメタノール（３Ｌ）を添加し、大量の白色固体を析出させた。３０分間撹拌した後、濾過を行い、濾過ケーキを真空乾燥させて生成物（６５０ｇ、収率８８．３％）を得た。
【０１４９】
（５）４−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−２−メチルスルフィニルピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１５０】
【化１７】
2016516736.tif 000033
【０１５１】
反応フラスコにジクロロメタン（３Ｌ）を添加し、４−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−２−メチルチオピリミジン−５−カルボン酸エチル（５００ｇ、１．３５９ｍｏｌ）を撹拌下で添加し、その後、ｍ−クロロ過安息香酸（２３５ｇ、１．３５９ｍｏｌ）のジクロロメタン（１Ｌ）溶液を氷浴下で滴加した。滴加の終了後に、反応生成物の温度を室温まで自然に上昇させた。ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。２時間撹拌した後、原料は完全には反応せず、ｍ−クロロ過安息香酸（７０ｇ、０．４ｍｏｌ）を添加し、反応生成物を２時間継続して撹拌した。反応の終了後に、飽和重炭酸ナトリウム溶液（１Ｌ）を用いて反応をクエンチした。有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した。有機相を合わせ、連続して飽和重炭酸ナトリウム、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、更に精製することなく直接次の反応に使用した。
【０１５２】
（６）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１５３】
【化１８】
2016516736.tif 000034
【０１５４】
反応フラスコに、乾燥させた４−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジルアミノ）−２−メチルスルフィニルピリミジン−５−カルボン酸エチルの濾液を添加し、撹拌下で３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン塩酸塩（１７８．８ｇ、１．５ｍｏｌ）を添加し、トリエチルアミン（２８４ｍＬ、２．０４ｍｏｌ）を氷浴下で滴加した。滴加の終了後に、反応生成物の温度を室温まで自然に上昇させた。ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。室温で一晩撹拌した後、飽和塩化アンモニウム（１Ｌ）を添加により反応をクエンチした。有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した。有機相を合わせ、連続して、希塩酸、飽和重炭酸ナトリウム及び飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下での蒸発により溶媒を除去して油状物質を得た。３Ｌのメタノールを添加して大量の白色固体を析出させ、３０分間撹拌し、吸引濾過して、白色固体の２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（４８５ｇ、収率８８．６％）を得た。
【０１５５】
（７）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸の調製
【０１５６】
【化１９】
2016516736.tif 000035
【０１５７】
反応フラスコに、テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）及びメタノール（２０ｍＬ）を添加し、２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（４８５ｇ、１．２ｍｏｌ）を撹拌下で添加した後、３Ｎ水酸化ナトリウム溶液（１．２Ｌ、３．６ｍｍｏｌ）を滴加し、反応生成物を還流するまで加熱した。ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。一晩撹拌した後、反応を完了させ、室温まで冷却し、３Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ、０．８ｍｏｌ）を添加してｐＨ＝３に調節し、白色固体を析出させた。テトラヒドロフラン及びメタノールを減圧下での蒸発により除去し、水（５００ｍＬ）を添加し、１時間撹拌し、濾過し、真空乾燥させて、２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（４５０ｇ、収率９９．６％）を得た。
【０１５８】
（８）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｑ）の調製
【０１５９】
【化２０】
2016516736.tif 000036
【０１６０】
反応フラスコにＤＭＦ（２Ｌ）を添加し、２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（３００ｇ、０．８ｍｏｌ）を撹拌下で添加し、ＤＩＥＡ（２０９ｍＬ、１．２ｍｏｌ）を氷水下で滴加した後、ＨＡＴＵ（４５６ｇ、１．２ｍｏｌ）を添加し、該混合物を３０分間撹拌し、トランス−４−アミノシクロヘキサノール（１３８．２ｇ、１．２ｍｏｌ）を添加した。反応生成物の温度を室温まで自然に上昇させ、撹拌を２時間行い、ＴＬＣを用いて反応をモニタリングした。反応の終了後に反応液を水（３Ｌ）に注ぎ、固体を析出させ、濾過し、濾過ケーキを水で洗浄し、空気乾燥させた後、アセトンで２回再結晶化して白色固体（２４０ｇ、収率６３％）を得た。
【０１６１】
（９）Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェートの調製
【０１６２】
【化２１】
2016516736.tif 000037
trimethyl phosphate:リン酸トリメチル
【０１６３】
２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピリミジン−５−カルボキサミド（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）をリン酸トリメチル（１４ｍＬ）に溶解し、ＰＯＣｌ３（１．６２ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を氷浴条件下で滴加した。反応液を室温で１２時間撹拌し、ＬＣ−ＭＳを用いて反応終了まで反応をモニタリングした。反応液を氷水浴内で冷却し、ＮａＨＣＯ３（２．３５ｇ、２７．９７ｍｍｏｌ）水溶液を滴加し、大量の白色固体を生成させた。濾過後に、白色固体を分取クロマトグラフ（Ｃ１８カラム、Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ：１００：０−８０：２０）によって精製し、Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェート（０．５ｇ、収率４３．１％）を得た。
【０１６４】
（１０）Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩の調製
【０１６５】
【化２２】
2016516736.tif 000038
【０１６６】
Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェート（５００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１０ｍＬ）に懸濁し、ナトリウムメトキシド（９．８ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を氷水浴下で添加して溶液を透明にし、撹拌を３時間行うと少量の不溶性物質が生じた。溶液を濾過し、濾液を減圧下で蒸発・乾燥し、得られた固体を少量の水及びアセトンで洗浄し、Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩の白色固体（３５０ｍｇ、収率６４．５％）を得た。
【０１６７】
分子式：Ｃ２４Ｈ２９ＣｌＮ５Ｎａ２Ｏ６Ｐ  分子量：５９５．９  ＭＳ（ｍ／ｚ）：５５１．９（Ｍ＋１）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ−ｄ４）δ：８．２１（ｓ，１Ｈ）、７．３７（ｓ，１Ｈ）、７．２３〜７．２６（ｍ，１Ｈ）、７．０１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．５５（ｓ，２Ｈ）、４．０１〜４．０３（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．７２〜３．８０（ｍ，３Ｈ）、３．４５〜３．４８（ｍ，２Ｈ）、２．２６〜２．２８（ｍ，２Ｈ）、１．８５〜１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．６２〜１．６４（ｍ，２Ｈ）、１．３９〜１．４８（ｍ，４Ｈ）、０．７３〜０．７８（ｍ，１Ｈ）、０．１１〜０．１４（ｍ，１Ｈ）。
【０１６８】
実施例２：Ｎ−トランス−４−（４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩（化合物４）の調製
【０１６９】
【化２３】
2016516736.tif 000039
【０１７０】
（１）４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルスルフィニル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１７１】
【化２４】
2016516736.tif 000040
【０１７２】
４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸（２００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、ｍ−ＣＰＢＡ（１０１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を氷水浴下で添加し、反応生成物を室温まで加熱し、反応を５時間行わせた。反応生成物に水を添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮して固体を得た。生成物を精製せずに、次の反応に使用した。
【０１７３】
（２）４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１７４】
【化２５】
2016516736.tif 000041
【０１７５】
４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルスルフィニル）ピリミジン−５−カルボン酸（１９６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び５−アザスピロ［２．４］ヘプタン塩酸塩（１４．６ｍｇ、１０９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１６７ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を氷水浴下で滴加し、反応生成物を室温まで加熱し、反応は５時間行った。反応生成物に水を添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮して固体を得た。生成物を精製せずに、次の反応に使用した。
【０１７６】
（３）４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸の調製
【０１７７】
【化２６】
2016516736.tif 000042
【０１７８】
４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（３．４ｇ、８．１７ｍｍｏｌ）及び水酸化ナトリウム（１．１４ｇ、２８．５７ｍｍｏｌ）を、水（１０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）の混合物に溶解し、６０℃で１０時間反応させた。反応液を室温まで冷却し、希塩酸で希釈してｐＨ＝４に調節した。固体を析出させ、濾過し、メタノールで洗浄し、乾燥させて４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸（１．７ｇ、収率５４％）を得た。
【０１７９】
（４）エチル４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物４−Ａ）の調製
【０１８０】
【化２７】
2016516736.tif 000043
【０１８１】
４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（２１０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、トランス−４−アミノシクロヘキサノール（１３８．２ｇ、１．２ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．２ｍＬ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（２６６ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を氷水浴下で添加した。反応を室温で１８時間行い、濃縮後に水を添加し、酢酸エチルで抽出した。有機層を乾燥及び濃縮した後、シリカゲルカラム（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１）で分離して表題の化合物（１１５ｍｇ、収率４４％）を得た。
【０１８２】
（５）Ｎ−トランス−４−（４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェートの調製
【０１８３】
【化２８】
2016516736.tif 000044
trimethyl phosphate：リン酸トリメチル
【０１８４】
４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）をリン酸トリメチル（２ｍＬ）に溶解し、オキシ塩化リン（９２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を氷浴下で滴加し、反応生成物を一晩撹拌し、重炭酸ナトリウム（１３４ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）水溶液（５ｍＬ）を氷浴下で添加した。混合物を濾過し、乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフ（水：メタノール＝２５：７５）によって分離及び精製して表題の化合物（８０ｍｇ、収率７１％）を得た。
【０１８５】
（６）Ｎ−トランス−４−（４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩の調製
【０１８６】
【化２９】
2016516736.tif 000045
【０１８７】
Ｎ−トランス−４−（４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェート（８０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（１５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応生成物を室温で２時間撹拌し、回転蒸発により乾燥させて表題の化合物（６０ｍｇ、収率７０％）を得た。
【０１８８】
分子式：Ｃ２５Ｈ３１ＣｌＮ５Ｎａ２Ｏ６Ｐ；分子量：６１０．０；ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６１１（Ｍ＋１）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ−ｄ４）δ：８．５５（ｓ，１Ｈ）、８．２７（ｓ，１Ｈ）、７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．５４（ｓ，２Ｈ）、４．０３〜４．０４（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．６７〜３．７９（ｍ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，２Ｈ）、２．２７（ｓ，２Ｈ）、１．８７〜１．９０（ｍ，４Ｈ）、１．４０〜１．４９（ｍ，４Ｈ）、０．６３〜０．６４（ｍ，４Ｈ）。
【０１８９】
実施例３：Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（（４−メトキシ−３−メチルベンジル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩（化合物９）の調製
【０１９０】
【化３０】
2016516736.tif 000046
【０１９１】
（１）４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１９２】
【化３１】
2016516736.tif 000047
【０１９３】
４−クロロ−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（１．５ｇ、６．４６ｍｍｏｌ）、３−メチル−４−メトキシベンジルアミン（０．７２ｇ、４．７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１．３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、反応生成物を室温で３０分間撹拌した。反応液を水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して表題の化合物（２．１ｇ、収率９２％）を黄色の油状物質として得た。
【０１９４】
（２）４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−２−（メチルスルフィニル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１９５】
【化３２】
2016516736.tif 000048
【０１９６】
４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（２．２ｇ、６．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、ｍ−ＣＰＢＡ（ｍ−クロロ過安息香酸、１．１ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３０分間反応を行った。次いで、反応液を水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して表題の化合物を得た。生成物を精製せず、次の反応に使用した。
【０１９７】
（３）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルの調製
【０１９８】
【化３３】
2016516736.tif 000049
【０１９９】
上記の生成物４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−２−（メチルスルフィニル）ピリミジン−５−カルボン酸エチルをジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン塩酸塩（０．８ｇ、６．６７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１８時間行い、水を反応液に添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウム及び回転蒸発で乾燥させ、３．１ｇの表題の化合物を薄黄色の油状物質として得た。この生成物を精製せず、直接次の反応に使用した。
【０２００】
（４）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸の調製
【０２０１】
【化３４】
2016516736.tif 000050
【０２０２】
２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（１．５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）及び水酸化ナトリウム（２６０ｍｇ、６．５ｍｍｏｌ）を水（５ｍＬ）、エタノール（５ｍＬ）及びＴＨＦ（１５ｍＬ）の混合物に溶解し、反応を室温で５時間行った。溶媒を留去した後、水を添加し、ジクロロメタンで洗浄し、水相を希塩酸でｐＨ＝２に調節し、再びジクロロメタンで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して表題の化合物（１．２ｇ、収率８６％）を薄黄色の固体として得た。
【０２０３】
（５）２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物９−Ｂ）の調製
【０２０４】
【化３５】
2016516736.tif 000051
【０２０５】
２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（４−メトキシ−３−メチルベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（５７４ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミン（１８７ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（４８５ｍｇ、４．７９ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（２−（７−アゾベンゾトリアゾリル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、７４３ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解し、室温で１７時間反応を行わせた。溶媒を留去し、水を添加した後、ジクロロメタンで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１）で分離して、表題の化合物（３８０ｍｇ、５２％）を薄黄色の固体として得た。
【０２０６】
（６）Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（（４−メトキシ−３−メチルベンジル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェートの調製
【０２０７】
【化３６】
2016516736.tif 000052
trimethyl phosphate：リン酸トリメチル
【０２０８】
２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−Ｎ−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−４−（（４−メトキシ−３−メチル−ベンジル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をリン酸トリメチル（２ｍＬ）に溶解し、オキシ塩化リン（１０１ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を氷浴下で滴加し、反応生成物を一晩撹拌した。重炭酸ナトリウム（１４８ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）水溶液（５ｍＬ）を氷浴下で滴加した。混合物を濾過し、乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフ（水：メタノール＝３０：７０）によって分離及び精製して、表題の化合物（３０ｍｇ、収率２６％）を得た。
【０２０９】
（７）Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（（４−メトキシ−３−メチルベンジル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシルホスフェート二ナトリウム塩の調製
【０２１０】
【化３７】
2016516736.tif 000053
【０２１１】
Ｎ−トランス−４−（２−（３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−４−（（４−メトキシ−３−メチルベンジル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）シクロヘキシル二水素ホスフェート（３０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）をメタノール（１ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（６ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物を室温で２時間撹拌し、回転蒸発で乾燥して表題の化合物（２８ｍｇ、収率８７．５％）を得た。
【０２１２】
分子式：Ｃ２５Ｈ３２Ｎ５Ｎａ２Ｏ６Ｐ；分子量：５７５．５；ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５７６（Ｍ＋１）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ−ｄ４）δ：８．５５（ｓ，１Ｈ）、８．２４（ｓ，１Ｈ）、７．１２〜７．１４（ｍ，２Ｈ）、６．８３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、４．５２（ｓ，２Ｈ）、４．０２〜４．０３（ｍ，１Ｈ）、３．８１〜３．８５（ｍ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７３〜３．７６（ｍ，２Ｈ）、３．４７〜３．５０（ｍ，２Ｈ）、２．２６（ｓ，２Ｈ）、２．１７（ｓ，３Ｈ）、１．８８〜１．８９（ｍ，２Ｈ）、１．６３〜１．６５（ｍ，２Ｈ）、１．３９〜１．４４（ｍ，４Ｈ）、０．７６〜０．７８（ｍ，１Ｈ）、０．１４〜０．１５（ｍ，１Ｈ）。
【手続補正書】
【提出日】平成27年11月24日(2015.11.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７２】
４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（２００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、ｍ−ＣＰＢＡ（１０１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を氷水浴下で添加し、反応生成物を室温まで加熱し、反応を５時間行わせた。反応生成物に水を添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮して固体を得た。生成物を精製せずに、次の反応に使用した。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７５】
４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（メチルスルフィニル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（１９６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び５−アザスピロ［２．４］ヘプタン塩酸塩（１４．６ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１６７ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を氷水浴下で滴加し、反応生成物を室温まで加熱し、反応は５時間行った。反応生成物に水を添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮して固体を得た。生成物を精製せずに、次の反応に使用した。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７８】
４−（（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（３．４ｇ、８．１７ｍｍｏｌ）及び水酸化ナトリウム（１．１４ｇ、２８．５７ｍｍｏｌ）を、水（１０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）の混合物に溶解し、６０℃で１０時間反応させた。反応液を室温まで冷却し、希塩酸で希釈してｐＨ＝４に調節した。固体を析出させ、濾過し、メタノールで洗浄し、乾燥させて４−（３−クロロ−４−メトキシベンジルアミノ）−２−（５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル）ピリミジン−５−カルボン酸（１．７ｇ、収率５４％）を得た。
【国際調査報告】
2016516736.tif 000061
2016516736.tif 000062
2016516736.tif 000063
2016516736.tif 000064