(57)【要約】  本発明は、ドリペネム一水和物の製造方法に関し、より具体的には、ドリペネム−ＰＮＢを有機溶媒とホスフェート水溶液とから構成された混合溶媒中で亜鉛粉末と反応させて脱保護反応させるステップ（ステップ１）; 前記ステップ１の生成物からホスフェートを除去するステップ（ステップ２）; および前記ステップ２の生成物を結晶化用溶媒によりドリペネム一水和物を結晶化するステップ（ステップ３）を通じて製造されるドリペネム一水和物の製造方法に関する。それによるドリペネム一水和物の製造方法は、高価の金属触媒および特殊設備を用いることなく常温、常圧の温和な条件で行うことができるため、経済的で、安全であるだけでなく、高収率のドリペネム一水和物を得ることができる。したがって、本発明の製造方法は、ドリペネム一水和物と関連した産業分野に有用に適用することができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）下記化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢを有機溶媒とホスフェート水溶液とから構成された混合溶媒中で亜鉛粉末と反応させて脱保護反応させるステップ;
２）前記ステップ１の生成物からホスフェートを除去するステップ; および
３）前記ステップ２の生成物を結晶化用溶媒により下記化学式１で表されるドリペネム一水和物を結晶化するステップを含む、ドリペネム一水和物の製造方法。
【化１】
2016501259.tif 000007
【請求項２】
前記ステップ１の亜鉛粉末は、前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の４倍乃至１２倍が用いられることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記ステップ１のホスフェートは、ＫＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｈ３ＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群から選択されるいずれか１つ以上であることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
前記ステップ１の有機溶媒は、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトン、エチルアセテート、塩化メチレンおよびクロロホルムからなる群から選択されるいずれか１つ以上であることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項５】
前記ステップ１の混合溶媒のｐＨは４乃至７であることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項６】
前記ステップ１の混合溶媒中のホスフェートの濃度は０．５Ｍ乃至２Ｍであることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項７】
前記ステップ１は２０℃乃至４０℃で０．５時間乃至３時間行われることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項８】
前記ステップ２は、前記ステップ１の生成物を吸着レジンに添加し攪拌してスラリー化した後に水で濾過してホスフェートを除去することを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項９】
前記水は、前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の５０倍乃至２００倍を用いることを特徴とする、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
前記ホスフェートを除去した後、メチルアセテート、エチルアセテート、ブチルアセテート、イソブチルアセテート、ジエチルエーテル、ジメチルエーテル、イソプロピルエーテルまたはメチルエチルケトンの有機溶媒と水の混合溶液で前記レジンからドリペネムを回収することを特徴とする、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１１】
前記混合溶液は、前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の１０倍乃至１００倍を用いることを特徴とする、請求項１０に記載の製造方法。
【請求項１２】
前記ステップ２は、前記ステップ１の生成物をメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、アセトンまたはアセトニトリルの有機溶媒と水の混合溶媒でホスフェート塩を結晶化してホスフェートを除去することを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【請求項１３】
前記混合溶媒は、前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の１０倍乃至４０倍を用いることを特徴とする、請求項１２に記載の製造方法。
【請求項１４】
前記ステップ３の結晶化用溶媒は、水または水とメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、アセトンまたはアセトニトリルの混合溶媒であることを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドリペネム一水和物の製造方法に関し、より具体的には、下記化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢを有機溶媒とホスフェート水溶液とから構成された混合溶媒中で亜鉛粉末と反応させて脱保護反応させるステップ（ステップ１）; 前記ステップ１の生成物からホスフェートを除去するステップ（ステップ２）; および前記ステップ２の生成物を結晶化用溶媒により下記化学式１で表されるドリペネム一水和物を結晶化するステップ（ステップ３）を通じて製造されるドリペネム一水和物の製造方法に関する。
【０００２】
【化１】
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【背景技術】
【０００３】
１９４０年代、現代的な概念の抗生剤として初めて用いられたペニシリンは感染疾患を有した数多くの患者の生命を助けることによって奇蹟の薬と知らされてきた。しかし、ペニシリンが用いられるや否や、それに対して耐性を有するブドウ状球菌が登場し、１９６０年代に半合成ペニシリンであるメチシリンが開発されてペニシリン耐性ブドウ状球菌の感染症の治療に用いられた。しかし、その後、メチシリンに耐性を有するメチシリン耐性ブドウ状球菌（ＭＲＳＡ）が発生し始め、１９８０年代に入って、各種のセファロスポリン製剤とキノロン、カルバペネム、モノバクタム、グリコシドなど、数多くの抗生剤が開発されて臨床に用いられた。
【０００４】
カルバペネム系抗生物質はβ−ラクタム系抗生物質のうち最も強力な坑菌効果を示し、薬品の安全性と治療効果に優れて小児や免疫の弱い老弱者の重症患者を治療するのに用いられている。また、治療が難しい耐性菌にも優れた坑菌効果を示すので、それに対する治療剤として用いられている。
【０００５】
カルバペネム系抗生物質は全合成によって製造され、一般的に４−アセトキシアゼチジノンを核心中間体として用いて立体選択的に合成する。４−アセトキシアゼチジノンから立体選択的反応を通じてβ−メチル基を導入し、その後、多段階反応を通じて様々なカルバペネム系抗生剤（メロペネム、エルタペネム、ビアペネム、ドリペネムなど）の核心中間体であるβ−メチルビニルホスフェートカルバペネムを合成している。
【０００６】
一方、ドリペネム一水和物（Ｄｏｒｉｐｅｎｅｍ・Ｈ２Ｏ、化学名：（４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−（（Ｒ）−１−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ）−４−ｍｅｔｈｙｌ−７−ｏｘｏ−３−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（ｓｕｌｆａｍｏｙｌａｍｉｎｏ）ｍｅｔｈｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ−３−ｙｌｔｈｉｏ）−１−ａｚａ−ｂｉｃｙｃｌｏ［３．２．０］ｈｅｐｔ−２−ｅｎｅ−２−ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｈｙｄｒａｔｅ）はカルバペネム系抗生物質であって、グラム陽性菌およびグラム陰性菌に対して広い抗生効能を有する化合物である。一般的にドリペネム一水和物は、カルボキシル基がｐ−ニトロベンジル基で保護されたドリペネム−ＰＮＢを脱保護反応させる方法によって製造している。
【０００７】
ヨーロッパ特許登録番号ＥＰ  ０５２８６７８  Ｂ１には、下記反応式１に示すように、ＭＡＰを側鎖物質（ｓｉｄｅ  ｃｈａｉｎ）とカップリング反応させてカルボキシル基がｐ−ニトロベンジル基で保護されたドリペネム−ＰＮＢを製造し、それを適当量のテトラヒドロフランと水の混合溶媒に溶解させた後、１０％パラジウム−カーボン、０．１Ｍ−ＭＥＳ（２−（Ｎ−ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏ）ｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）緩衝液（ｐＨ  ７．０）を添加して室温で４時間水素化させ、触媒を濾過し、エチルアセテートで洗浄した後、残留水溶液を減圧蒸留、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体樹脂カラムクロマトグラフィーで分離した後に凍結乾燥してドリペネム一水和物を得る工程を開示している。
【０００８】
【化２】
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【０００９】
国際特許公開番号ＷＯ２００６−１１７７６３には、ドリペネム−ＰＮＢをエチルアセテートとＮ−メチルモルホリン／酢酸緩衝液（ｐＨ  ６．０乃至７．０）の混合溶媒に溶解させ、５％パラジウム−カーボンを添加して水素大気下の室温で４時間反応させた後、触媒濾過および水層を分離し、室温でメチルアルコールに添加し、結晶化過程を経て目的とするドリペネムを得る方法を記載している。前記方法は、前記ヨーロッパ特許登録番号ＥＰ  ０５２８６７８  Ｂ１と比較して、テトラヒドロフランを用いず、エチルアセテートとバッファ混合溶媒において触媒水素化反応を行うため、カラムクロマトグラフィー、凍結乾燥、分離および回収過程なしで水溶液から直ちに目的化合物を得ることができるという長所がある。
【００１０】
また、テトラヒドロフランと精製水の混合溶媒にドリペネム−ＰＮＢを溶解させ、１０％パラジウム／カーボン触媒、塩化マグネシウムを添加して水素大気下の室温で２時間反応させた後、触媒濾過および水層を分離し、メチルアルコールを用いて結晶化過程を経て目的とするドリペネムを得る方法が公知されている（Ｙｕｔａｋａ  Ｎｉｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｅｖ．２００３、７、ｐ８４６−５０）。
【００１１】
前記で記載されたように、従来のドリペネム一水和物の製造方法は、脱保護反応のために高価のパラジウム／カーボンを用いるので経済性が落ちるという短所がある。また、還元剤として爆発危険の非常に大きい水素ガスを用いなければならないので安全性に問題があり、特殊設備が必要であるので別途の設備投資がなされなければならないという短所がある。したがって、経済性および安全性が確保されたドリペネム一水和物の製造技術が必要な現状である。
【００１２】
前記のような背景下、本発明者らは、特殊設備と高価の触媒が必要ではなく、安全な工程を通じたドリペネム一水和物の製造方法を研究している間、脱保護反応として高価の金属触媒および水素ガスの代わりに亜鉛粉末とホスフェート水溶液を用いて高収率のドリペネム一水和物を得ることができるということを確認し、本発明を完成するに至った。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】ヨーロッパ特許登録番号ＥＰ  ０５２８６７８  Ｂ１
【特許文献２】国際特許公開番号ＷＯ２００６−１１７７６３
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Ｙｕｔａｋａ  Ｎｉｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｅｖ．２００３、７、ｐ８４６−５０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明の目的は、特殊設備を用いることなく常温、常圧の温和な反応条件を通じた高収率の結晶性ドリペネム一水和物の製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
前記課題を解決するために、本発明は、下記化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢを有機溶媒とホスフェート水溶液とから構成された混合溶媒中で亜鉛粉末と反応させて脱保護反応させるステップ（ステップ１）; 前記ステップ１の生成物からホスフェートを除去するステップ（ステップ２）; および前記ステップ２の生成物を結晶化用溶媒により下記化学式１で表されるドリペネム一水和物を結晶化するステップ（ステップ３）を含むドリペネム一水和物の製造方法を提供する。
【００１７】
【化３】
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【００１８】
前記ステップ１は、前記化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢからカルボキシル基保護基であるＰＮＢ（４−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌ）およびアミン保護基であるＰＮＺ（４−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌ  ｏｘｙ  ｃａｒｂｏｎｙｌ）を脱保護するために、亜鉛粉末を前記化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢが溶解している有機溶媒とホスフェート水溶液の混合溶媒に入れて脱保護反応させるステップである。前記亜鉛粉末は、前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の４倍乃至１２倍が用いられることが好ましく、急激な発熱による目的化合物の分解を防止するために徐々に分割投入して適正温度を維持することが好ましい。
【００１９】
前記ホスフェートは、ＫＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｈ３ＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群から選択されるいずれか１つ以上であることが好ましい。前記有機溶媒は、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトン、エチルアセテート、塩化メチレンおよびクロロホルムからなる群から選択されるいずれか１つ以上であることが好ましい。また、前記混合溶媒のｐＨは４乃至７であることが好ましく、前記混合溶媒中のホスフェートの濃度は０．５Ｍ乃至２Ｍであることが好ましい。仮に、前記のｐＨ範囲またはホスフェート濃度範囲を外れて反応を行う場合、保護基のニトロ部分だけアミンに還元される中間体に留まり、目的化合物を最大に得ることができず、収率低下の問題が発生し得る。
【００２０】
前記ステップ１は２０℃乃至４０℃で０．５時間乃至３時間行われることが好ましい。仮に、温度が２０℃未満であれば、１次還元されたアミン中間体にまで反応が行われて完全な反応にならない。４０℃を超過すれば、反応速度および完結度が速くなる反面、目的化合物が多量分解されて収率および純度低下の問題が発生し得る。
【００２１】
また、前記ステップ１は、脱保護反応が完結した後、濾過および洗浄して亜鉛粉末を除去した後、有機溶媒を除去するステップをさらに含むことが好ましい。前記洗浄は反応に用いられた有機溶媒と水の混合溶液を用いて行うことが好ましく、前記有機溶媒はメチルアセテート、ブチルアセテート、イソブチルアセテート、ジエチルエーテル、ジメチルエーテル、イソプロピルエーテル、メチルエチルケトンまたはジクロロメタンを用いて抽出を通じて除去することができる。仮に、前記有機溶媒を除去するために濃縮をすると、弱酸性の反応液において目的化合物が次第に分解されて収率および含量が低下するという問題が発生し得る。
【００２２】
前記ステップ２は前記ステップ１の生成物からホスフェートを除去するステップであり、吸着レジンスラリー抽出法または共沈法を利用して行うことができる。
【００２３】
前記吸着レジンスラリー抽出法は、前記ステップ１の生成物を吸着レジンに添加し攪拌してスラリー化した後、水で濾過してホスフェートを除去することを意味する。前記吸着レジンはＳＰ−２０７、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＸＡＤ−４、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＸＡＤ−７、Ｄｉａｉｏｎ  ＨＰ−２０またはＨＰ−４０を用いることができるが、これらに制限されるものではない。
【００２４】
前記水は前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の５０倍乃至２００倍を用いることができ、好ましくは５０倍乃至１００倍である。前記ホスフェートを除去した後、メチルアセテート、エチルアセテート、ブチルアセテート、イソブチルアセテート、ジエチルエーテル、ジメチルエーテル、イソプロピルエーテルまたはメチルエチルケトンの有機溶媒と水の混合溶液で前記レジンからドリペネムを回収することが好ましい。前記混合溶液は前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の１０倍乃至１００倍を用いることが好ましい。
【００２５】
従来の吸着レジンを用いたホスフェート除去方法は、特殊設備に吸着レジンを充填した後にドリペネムを吸着させ、過量の水で洗浄してホスフェートを除去し、溶出液を用いて５０℃以下で長時間濃縮して行った。よって、特殊設備が必要であり、熱および濃縮時間によって不純物が多量発生して収率および純度が低下するという問題点がある。
【００２６】
その反面、本発明の前記吸着レジンスラリー抽出法は、特殊なレジンカラム設備を用いることなく一般の反応器で行うことができ、溶出液として水と混合されず吸着レジンに吸着しているドリペネムより吸着レジンとの親和力のより大きい極性有機溶媒と水を混合して用いることによって単純な層分離によりドリペネムを回収することができる。
【００２７】
前記共沈法は、前記ステップ１の生成物をメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、アセトンまたはアセトニトリルの有機溶媒と水の混合溶媒でホスフェート塩を結晶化してホスフェートを除去することを意味する。前記混合溶媒は前記ドリペネム−ＰＮＢ重量の１０倍乃至４０倍を用いることが好ましく、前記混合溶液は発熱によって不純物が発生するのを防止するために０℃乃至１０℃に冷却して用いることが好ましい。
【００２８】
本発明の前記共沈法は、従来に通常的に用いられたレジン工程が排除されることにより、溶出液の濃縮なしで目的化合物を回収することができる。したがって、熱および濃縮時間による不純物の生成を最小化できるので、高純度および高収率のドリペネムを得ることができる。
【００２９】
前記ステップ２は、ホスフェート除去後に回収されたドリペネムをメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトンまたはテトラヒドロフランに滴加した後に濾過し、常温で真空乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物を製造するステップをさらに含むことが好ましい。
【００３０】
前記ステップ３は、結晶性ドリペネム一水和物を収得するために、前記ステップ２の生成物を結晶化用溶媒により結晶化するステップである。前記結晶化用溶媒は、水または水とメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、アセトンまたはアセトニトリルの混合溶媒であることが好ましい。
【発明の効果】
【００３１】
本発明によるドリペネム一水和物の製造方法は、高価の金属触媒および特殊設備を用いることなく常温、常圧の温和な条件で行うことができるため、経済的で、安全であるだけでなく、高収率のドリペネム一水和物を得ることができる。
【００３２】
また、ホスフェート除去後、ドリペネム回収ステップにおいて、濃縮なしで単純な層分離だけで回収することができるため、濃縮過程で発生する不純物を最小化して高純度のドリペネム一水和物を製造することができる。
【００３３】
したがって、本発明の製造方法は、ドリペネム一水和物と関連した産業分野に有用に適用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の一実施例によるドリペネム一水和物の粉末Ｘ線回折分析の結果を示すグラフである。
【図２】本発明の一実施例によるドリペネム一水和物の熱重量（ＴＧＡ）分析の結果を示すものである。
【図３】本発明の一実施例によるドリペネム一水和物の示差走査熱量（ＤＳＣ）分析の結果を示すものである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
以下、実施例および実験例によって本発明をより詳細に説明する。但し、下記の実施例および実験例は本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の範囲がこれらのみに限定されるものではない。
【実施例】
【００３６】
製造例：ドリペネム−ＰＮＢの製造
下記反応式２によりドリペネム−ＰＮＢを製造した。化学式３で表される化合物９８ｇをメタノール４９０ｍｌに入れた後、硫酸２５ｍｌを徐々に添加し、内部温度６０℃乃至６５℃を維持しながら３時間反応させた。反応終結後、減圧濃縮してメタノールを除去し、水１００ｍｌ、エチルアセテート１００ｍｌで抽出した。有機層を回収し、水と５％塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムを用いて有機層に残っている水を除去し減圧濃縮した。濃縮された溶液に化学式４で表される化合物１００ｇとジメチルホルムアミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）１００ｍｌを添加して溶かし、０℃乃至５℃に冷却した後、ジイソプロピルエチルアミン（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）４７ｍｌを滴加した。同一温度で１０時間以上攪拌した後、エチルアセテート１００ｍｌと水１００ｍｌを添加して反応液を攪拌し層分離した。エチルアセテート層に１Ｎ  ＨＣｌ  １００ｍｌを加えて残留する塩基を除去し、飽和塩水１００ｍｌで洗浄した。無水硫酸マグネシウムを用いて残っている水を除去し、濾液であるエチルアセテート溶液を減圧濃縮した。濃縮された溶液をトルエンに徐々に投入し、常温で１時間攪拌した後に濾過し、化学式２で表されるドリペネム−ＰＮＢ  １３２．５１ｇを収得した（収率９８％）。
【００３７】
【化４】
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【００３８】
実施例１：非結晶性ドリペネム一水和物の製造−吸着レジンスラリー抽出法
収率確認のために、２種類の容量の非結晶性ドリペネム一水和物を製造した。
【００３９】
１）２０ｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  ２０ｇをテトラヒドロフラン１００ｍｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）４０ｇを溶かした水２００ｍｌを添加して３０℃に加温した。その次、亜鉛粉末１６０ｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン２００ｍｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランおよび不純物を除去した。吸着レジンＳＰ−２０７を加えて攪拌し、ドリペネムを吸着させた。レジンを濾過し、水１Ｌで洗浄して反応に用いたポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。反応器にエチルアセテート２００ｍｌと水１００ｍｌの混合溶液を添加し攪拌した後に濾過してドリペネムを溶出させた。溶出液は層分離し、ドリペネムが入っている水層はイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌した。濾過および室温減圧乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物１０．２６ｇを収得した（収率９０％）。
【００４０】
２）１ｋｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  １ｋｇをテトラヒドロフラン１０Ｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）３ｋｇを溶かした水２０Ｌを添加して３０℃に加温した。その次、亜鉛粉末８ｋｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン１０Ｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランを完全に除去した。吸着レジンＳＰ−２０７  ３０Ｌを加えて攪拌し、ドリペネムを吸着させた。レジンを濾過し、水１Ｌで洗浄して反応に用いたポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。反応器にエチルアセテート１０Ｌと水５Ｌの混合溶液を添加し攪拌した後に濾過および洗浄してドリペネムを溶出させた。溶出液は層分離し、ドリペネムが入っている水層はイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌した。濾過および室温減圧乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物０．５１ｋｇを収得した（収率９０％）。
【００４１】
実施例２：非結晶性ドリペネム一水和物の製造−共沈法
収率確認のために、２種類の容量を用いて非結晶性ドリペネム一水和物を製造した。
【００４２】
１）２０ｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  ２０ｇをテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）６０ｇを溶かした水４００ｍｌを添加して３０℃に加温した。その次、亜鉛粉末１６０ｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン２００ｍｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランおよび不純物を除去した。水層にイソプロピルアルコールを滴加し３０分間攪拌してホスフェートを結晶化した。結晶を濾過してポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。濾液をイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌し、濾過および室温減圧乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物１０．８１ｇを収得した（収率９５％）。
【００４３】
２）１ｋｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  １ｋｇをテトラヒドロフラン１０Ｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）３ｋｇを溶かした水２０Ｌを添加して３０℃に加温した。その次、亜鉛粉末８ｋｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン１０Ｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランおよび不純物を除去した。水層にイソプロピルアルコールを滴加し３０分間攪拌してホスフェートを結晶化した。結晶を濾過してポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。濾液をイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌し、濾過および室温減圧乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物０．５４ｋｇを収得した（収率９５％）。
【００４４】
実施例３：結晶性ドリペネム一水和物の製造
前記実施例２の非結晶性ドリペネム一水和物２０ｇを水１００ｍｌで溶解し、０℃乃至５℃に冷却させた後に攪拌して結晶を析出させた。同一温度で２時間攪拌した後、濾過および５０℃減圧乾燥して結晶性ドリペネム一水和物１６ｇを収得した（収率８０％、含量９９％）。
【００４５】
比較例１：非結晶性ドリペネム−パラジウム／カーボン
収率比較のために、非結晶性ドリペネムを製造した。
【００４６】
１）２０ｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  ２０ｇをテトラヒドロフラン４００ｍｌに溶解させた。これに０．１Ｍ  ＭＥＳバッファ（ｐＨ  ７．０）２００ｍｌを添加し、この溶液に触媒としてパラジウム／カーボン（１０％  ｗ／ｗ）１３．５ｇを添加した。その次、前記混合物を水素気流下で４時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して触媒を除去し、エチルアセテートで洗浄して有機層を除去した後、水溶液層を濃縮した。前記濃縮した水溶液をＨＰ−２０  ｒｅｓｉｎカラムクロマトグラフィーをして吸着させた。５乃至１０％エタノール溶液でレジンカラムに展開させ、吸着レジンからドリペネムを回収した。前記回収した母液を凍結乾燥して非結晶性ドリペネムを９．１ｇを収得した（収率８０％）。
【００４７】
比較例２：非結晶性ドリペネム一水和物の製造−吸着レジンカラム
収率比較のために、２種類の容量の非結晶性ドリペネム一水和物を製造した。
【００４８】
１）２０ｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  ２０ｇをテトラヒドロフラン２００ｍｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）６０ｇを溶かした水４００ｍｌを添加して３０℃に加温した。その次、亜鉛粉末１６０ｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン２００ｍｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランおよび不純物を除去し、ドリペネム母液を製造した。吸着レジンＳＰ−２０７  ６００ｍｌをレジンカラムに充填し、ドリペネム母液を通過させてドリペネムを吸着させた。水１Ｌをレジンカラムに展開させ、反応に用いたポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。そして７０％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）２Ｌをレジンカラムに展開させ、吸着レジンからドリペネムを回収した。ドリペネムが入っている分画を集め、ドリペネム−ＰＮＢ重量に対比して５倍の体積になるまでに濃縮した。濃縮液はイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌した。濾過および乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物８．０ｇを収得した（収率７０％）。
【００４９】
２）１ｋｇのドリペネム−ＰＮＢ
前記製造例のドリペネム−ＰＮＢ  １ｋｇをテトラヒドロフラン１０Ｌに溶解させた。これにリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）３ｋｇを溶かした水２０Ｌを添加して２７℃に加温した。その次、亜鉛粉末８ｋｇを分けて徐々に添加した後、３０℃乃至３５℃の間で２時間攪拌した。反応が完了した後に濾過して亜鉛粉末を除去した。濾液を塩化メチレン１０Ｌで３回洗浄して水層に存在するテトラヒドロフランおよび不純物を除去し、ドリペネム母液を製造した。吸着レジンＳＰ−２０７  ３０Ｌをレジンカラムに充填し、ドリペネム母液を通過させてドリペネムを吸着させた。水５０Ｌをレジンカラムに展開させ、反応に用いたポタシウムホスフェート塩と不純物を除去した。そして７０％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）１００Ｌをレジンカラムに展開させ、吸着レジンからドリペネムを回収した。ドリペネムが入っている分画を集め、ドリペネム−ＰＮＢ重量に対比して５倍の体積になるまでに濃縮した。濃縮液はイソプロピルアルコールに滴加して結晶を析出させ、０℃乃至５℃で１時間攪拌した。濾過および乾燥して非結晶性ドリペネム一水和物０．６８ｋｇを収得した（収率６０％）。
【００５０】
前記実施例１、実施例２および比較例１、比較例２の非結晶性ドリペネム一水和物を比較した結果、実施例１および実施例２が比較例１および比較例２の製造方法に比べて顕著に向上した収率で非結晶性ドリペネム一水和物を収得できることを確認した。
【００５１】
実験例１：粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＤ）
前記実施例１および２で製造されたドリペネム一水和物のＸ線回折パターンの結果を下記図１に示す。
【００５２】
回折角度（２θ）＝１０．９１°、１３．０７°、１５．０°、１５．９０°、１６．６４°、１８．１０°、２０．６３°、２１．０９°、２３．４７°、２３．８９°、２４．１９°、２４．４７°、２６．０６°、２６．９６°、２７．５３°、２８．２３°、２８．９１°および３４．１５°。
【００５３】
実験例２：熱重量分析（ＴＧＡ）
前記実施例１および２で製造されたドリペネム一水和物の熱重量分析を行った。熱重量分析（ＴＧＡ）から得られるデータは色々な因子、例えば、加熱速度、サンプルの純度、結晶大きさおよびサンプル大きさに影響を受ける。分析のために、３５℃乃至２５０℃、１０℃／ｍｉｎの速度で熱重量分析（ＴＧＡ）を実施し、その結果を図２に示す。
【００５４】
図２に示すように、ドリペネム一水和物は１２５．２４℃乃至１３２．７４℃において５．１９％の一水和物の重さ減少を示し、１６８．３８℃乃至１８７．６１℃において１７．２５％のドリペネムの分解による重さ減少を示した。
【００５５】
実験例３：示差走査熱量分析（ＤＳＣ）
前記実施例１および２で製造されたドリペネム一水和物の示差走査熱量分析を行った。溶融吸熱ピークの温度は融点で記録した。示差走査熱量分析（ＤＳＣ）から得られるデータは色々な因子、例えば、加熱速度、サンプルの純度、結晶大きさおよびサンプル大きさに影響を受ける。したがって、下記の融点は前記実施例によって製造されたサンプルの代表例である。分析のために、前記実施例１および２で製造されたドリペネム一水和物３．３０ｍｇを用いて示差走査熱量分析（ＤＳＣ）を実施し、その結果を図３に示す。
【００５６】
図３に示すように、前記実施例１および２のドリペネム一水和物は１８０．０２℃において吸熱ピークを示した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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