(57)【要約】  組織に対して電気穿孔を実施するための胸腔鏡電気穿孔デバイスは、吸引ヘッド（１０）および複数の針電極を備える。針電極は、第１の電極となる中央針（１１）と、吸引ヘッドの周囲のまわりに間隔を置いて配置された複数の第２の針（１２、１３、１４、１５、１６、１７）とを備える。第２の針は、格納構成から展開構成へと可動であり、それによって吸引ヘッドから延びる。吸引ヘッドは、格納送達構成および拡張展開構成を有する。吸引ヘッドは、適切な可撓性材料を含み、吸引ヘッドを拡張展開構成に付勢するための付勢手段（２０）を備える。吸引ヘッドは、針のためのチャネル（２１）を有し、針は、このチャネルを通って格納構成から展開構成へと可動である。展開構成では、中央の第１の針が、第２の針を越えて延びる。真空が、中央の第１の針から空気を引き出すことによって印加される。治療剤が、電気穿孔の前、その間、またはその後に、組織に施されてもよい。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織に対して電気穿孔を実施するための胸腔鏡電気穿孔デバイスであって、組織に対して電気穿孔を実施するように適合された、吸引ヘッドおよび複数の針電極を備え、前記吸引ヘッドが、格納送達構成および拡張展開構成と、前記吸引ヘッドを前記拡張展開構成に付勢するための付勢手段とを有する、デバイス。
【請求項２】
前記付勢手段が、付勢要素を備える、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記付勢手段が、前記デバイスの長手軸に対して軸方向に間隔を置いて配置された少なくとも２つの付勢要素を備える、請求項２に記載のデバイス。
【請求項４】
前記付勢要素が、形状記憶材料を備える、請求項２または３に記載のデバイス。
【請求項５】
前記付勢要素が、膨張性材料を備える、請求項２から４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項６】
前記付勢要素が、格納送達構成から拡張展開構成へと拡張可能なバルーンを備える、請求項５に記載のデバイス。
【請求項７】
前記吸引ヘッドが、カップ状である、請求項１から６のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項８】
前記吸引ヘッドが、内側部品と、前記展開構成で前記内側部品の半径方向外方に延びる外側部品とを備える、請求項１から７のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項９】
前記外側部品が、前記内側部品よりも可撓性である、請求項８に記載のデバイス。
【請求項１０】
前記内側部品が、剛性材料製のものであり、前記外側部品が、可撓性材料製のものである、請求項８または９に記載のデバイス。
【請求項１１】
前記外側部品が、格納送達構成から拡張展開構成へと可動である、請求項８から１０のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１２】
前記吸引ヘッドが、前記針の少なくとも数本のための通路を備え、前記針が、前記通路を通って前記格納構成から前記展開構成へと可動である、請求項１から１１のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１３】
前記針電極が、第１の電極となる少なくとも１本の針と、第２の電極となる複数の第２の針とを備える、請求項１から１２のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１４】
前記電極の少なくとも数本が、格納構成から展開構成へと軸方向に可動であり、前記針が、前記展開構成にある前記吸引ヘッドから延びる、請求項１から１３のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１５】
前記第２の針が、前記吸引ヘッドの周囲のまわりに間隔を置いて配置される、請求項１から１４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１６】
前記第２の電極の少なくとも数本が、半径方向格納構成から半径方向拡張展開構成へと可動である、請求項１から１５のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１７】
前記第１の針が、前記格納構成で前記吸引ヘッドの中央長手軸に概ね沿って配置される、請求項１３から１６のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１８】
前記第１の針が、前記展開構成で前記吸引ヘッドの中央長手軸に概ね沿って配置される、請求項１３から１７のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項１９】
前記展開構成で、前記第１の電極針が、前記第２の電極針を越えて延びる、請求項１から１８のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２０】
前記複数の第２の針が、前記格納構成と前記展開構成との両構成において、前記吸引ヘッドに沿って概ね長手方向に延びる、請求項１から１９のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２１】
前記デバイスが、前記吸引ヘッドから延びるシャフトを備える、請求項１から２０のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２２】
前記シャフトが、その長さの少なくとも一部にわたって剛性である、請求項２１に記載のデバイス。
【請求項２３】
前記シャフトが、その長さの少なくとも一部にわたって可撓性である、請求項２１または２２に記載のデバイス。
【請求項２４】
前記シャフトが、その長さの少なくとも一部にわたって可鍛性である、請求項２１から２３のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２５】
前記吸引ヘッドを組織に引き付けるための真空印加手段を備える、請求項１から２４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２６】
前記第１の針電極が、中空針である、請求項１から２５のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項２７】
真空が、前記中空の第１の針電極を用いて印加される、請求項２６に記載のデバイス。
【請求項２８】
治療剤が、前記第１の針電極を用いて施される、請求項２６または２７に記載のデバイス。
【請求項２９】
添付の図面を参照しながら実質的に上記で説明された胸腔鏡電気穿孔デバイス。
【請求項３０】
組織に対して電気穿孔を実施するための方法であって、
吸引ヘッドおよび複数の針電極を設けるステップであって、前記吸引ヘッドが、格納送達構成および拡張展開構成と、前記吸引ヘッドを前記拡張展開構成に付勢するための付勢手段とを有するステップと、
前記吸引ヘッドを前記格納構成で組織に送達するステップと、
前記吸引ヘッドを関心部位で展開させるステップと、
前記吸引ヘッドに真空を印加するステップと、
展開された前記吸引ヘッドから前記針を前進させるステップと、
前記針電極を用いて、前記関心部位にある組織に電気穿孔を施すステップと
を含む、方法。
【請求項３１】
電気穿孔を施す前、その間、またはその後に、治療剤を前記関心部位にある前記組織に送達するステップを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記治療剤が、前記針の少なくとも１本から送達される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記関心部位が、肺領域にある、請求項３０から３２のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、組織に対して予防手技または処置手技を実施する際に使用するためのデバイスおよび装置に関する。本発明はまた、本発明のデバイスまたは装置を用いた、組織の予防法または処置法に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺癌は、既存の治療法では適切に対処されない。現在、患者の８０％〜８５％が、外科手術処置には適さないと考えられる。放射線療法、または例えばレビーン針を用いた高周波焼灼療法（ＲＦＡ：Ｒａｄｉｏ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ａｂｌａｔｉｏｎ）には、熱を用いて周囲組織を全て変性させ、直ちに破壊することによって治療効果を引き出すという欠点がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明によれば、組織に対して電気穿孔を実施するための胸腔鏡電気穿孔デバイスであって、組織に対して電気穿孔を実施するように適合された、吸引ヘッドおよび複数の針電極を備え、吸引ヘッドが、格納送達構成および拡張展開構成と、吸引ヘッドを拡張展開構成に付勢するための付勢手段とを有する、デバイスが提供される。
【０００４】
一実施形態では、付勢手段は、付勢要素を備える。
付勢手段は、デバイスの長手軸に対して軸方向に間隔を置いて配置された少なくとも２つの付勢要素を備えることができる。
【０００５】
一ケースでは、付勢要素は、形状記憶材料を備える。
付勢要素は、膨張性材料を備えてもよい。
一実施形態では、付勢要素は、格納送達構成から拡張展開構成へと拡張可能なバルーンを備える。
【０００６】
一ケースでは、吸引ヘッドは、カップ状である。
一実施形態の吸引ヘッドは、内側部品と、展開構成で内側部品の半径方向外方に延びる外側部品とを備える。外側部品は、内側部品よりも可撓性でよい。一ケースでは、内側部品は、剛性材料製のものであり、外側部品は、可撓性材料製のものである。外側部品は、格納送達構成から拡張展開構成へと可動でよい。
【０００７】
一実施形態では、吸引ヘッドは、針の少なくとも数本のための通路を備え、針は、この通路を通って格納構成から展開構成へと可動である。
針電極は、第１の電極となる少なくとも１本の針と、第２の電極となる複数の第２の針とを備えることができる。電極の少なくとも数本は、格納構成から展開構成へと可動でよく、針は、展開構成にある吸引ヘッドから延びる。
【０００８】
一実施形態では、第２の針は、吸引ヘッドの周囲のまわりに間隔を置いて配置される。
第２の電極の少なくとも数本は、格納構成から展開構成へと可動であり、第２の針は、展開構成にある吸引ヘッドから延びる。
【０００９】
第１の針は、格納構成で吸引ヘッドの中央長手軸に概ね沿って配置されてよい。
第１の針は、展開構成で吸引ヘッドの中央長手軸に概ね沿って配置されてよい。
一実施形態では、展開構成で、第１の電極針は、第２の電極針を越えて延びる。
【００１０】
一実施形態では、複数の第２の針は、格納構成と展開構成との両構成において、吸引ヘッドに沿って概ね長手方向に延びる。
一実施形態では、本デバイスは、吸引ヘッドから延びるシャフトを備える。
【００１１】
シャフトは、その長さの少なくとも一部にわたって剛性でよい。あるいは、またはさらに、シャフトは、その長さの少なくとも一部にわたって可撓性でもよい。あるいは、またはさらに、シャフトは、その長さの少なくとも一部にわたって可鍛性でもよい。
【００１２】
本デバイスは、吸引ヘッドを組織に引き付けるための真空印加手段を備えてもよい。
一実施形態では、第１の針電極は、中空針である。真空が、この中空の第１の針電極を用いて印加され得る。治療剤が、第１の針電極を用いて施されてもよい。
【００１３】
また、組織に対して電気穿孔を実施するための方法であって、
吸引ヘッドおよび複数の針電極を設けるステップであって、吸引ヘッドが、格納送達構成および拡張展開構成と、吸引ヘッドを拡張展開構成に付勢するための付勢手段とを有するステップと、
吸引ヘッドを格納構成で組織に送達するステップと、
吸引ヘッドを関心部位で展開させるステップと、
吸引ヘッドに真空を印加するステップと、
展開された吸引ヘッドから針を前進させるステップと、
針電極を用いて、関心部位にある組織に電気穿孔を施すステップと
を含む、方法が提供される。
【００１４】
一実施形態では、本方法は、電気穿孔を施す前、その間、またはその後に、治療剤を関心部位にある組織に送達するステップを含む。治療剤は、針の少なくとも１本から送達され得る。
【００１５】
一ケースでは、関心部位は、肺領域にある。
本発明によれば、組織に対して電気穿孔を実施するために使用される装置、特に吸引ヘッドおよび複数の針電極を備える胸腔鏡電気穿孔デバイスが提供される。
【００１６】
一実施形態では、針電極は、第１の電極となる少なくとも１本の針と、第２の電極となる複数の第２の針とを備える。
電極の少なくとも数本は、格納構成から展開構成へと可動とすることができ、針は、展開構成にある吸引ヘッドから延びる。
【００１７】
一ケースでは、第２の針は、吸引ヘッドの周囲のまわりに間隔を置いて配置される。
第１の針は、吸引ヘッドの中央長手軸に概ね沿って配置されてよい。
一実施形態では、吸引ヘッドは、格納送達構成および拡張展開構成を有する。吸引ヘッドは、可撓性材料を備えることができる。吸引ヘッドは、吸引ヘッドを拡張展開構成に付勢するための付勢手段を備えることができる。付勢手段は、ニチノールなどの形状記憶材料製の付勢要素を備えることができる。
【００１８】
一実施形態では、吸引ヘッドは、針のためのチャネルを備え、針は、このチャネルを通って格納構成から展開構成へと可動である。
一ケースでは、展開構成で、第１の電極針は、第２の電極針を越えて延びる。
【００１９】
本装置は、カップを組織に引き付けるための真空印加手段を備えてもよい。
一実施形態では、第１の針電極は、中空針である。真空が、この中空の第１の針電極を用いて印加され得る。治療剤が、第１の針電極を用いて施されてもよい。
【００２０】
本発明は、添付の図面を参照しながら、単なる例によって示されるその実施形態の以下の説明から、より明確に理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明による電気穿孔法を実施するための装置の斜視図である。
【図２】図１のデバイスの端面図である。
【図３】本装置に使用される付勢要素の斜視図である。
【図４】本装置の送達を示す図である。
【図５】本装置の展開を示す図である。
【図６】本装置の展開を示す図である。
【図７】本装置の使用中の一段階を示す図である。
【図８】本装置の使用中の一段階を示す図である。
【図９】本装置の使用中の一段階を示す図である。
【図１０】本装置の使用中の一段階を示す図である。
【図１１】本装置の一使用における一ステップを示す図である。
【図１２】本装置の一使用における一ステップを示す図である。
【図１３】本発明の装置を組み込んだ一手術デバイスの斜視図である。
【図１４】本発明の装置を組み込んだ別の手術デバイスの斜視図である。
【図１５】本発明による別のデバイスの等角図である。
【図１６】図１５のデバイスの付勢要素部品の等角図である。
【図１７】操作ハンドルを含んだ図１５のデバイスの図である。
【図１８】針が格納構成にある図１５から図１７のデバイスの図である。
【図１９】針が格納構成にある図１５から図１７のデバイスの図である。
【図２０】吸引ヘッドおよび針が拡張したデバイスの図である。
【図２１】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２２】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２３】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２４】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２５】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２６】使用中の図１５〜２０のデバイスを示す図である。
【図２７】本発明の別のデバイスの吸引ヘッドおよび針の等角図である。
【図２８】図２７のデバイスの付勢要素部品の等角図である。
【図２９】操作ハンドルを含んだ図２７のデバイスの図である。
【図３０】セグメント化された付勢要素が格納構成にある図２７のデバイスの図である。
【図３１】付勢要素が拡張し、針が延びた図３０と同様の図である。
【図３２】格納構成にある図３１の付勢要素の等角図である。
【図３３】拡張構成にある図３１の付勢要素の等角図である。
【図３４】先細り遠位先端部を有する本発明のデバイスの一部分の等角図である。
【図３５】針が格納された本発明による別のデバイスの図である。
【図３６】針が軸方向に延びた本発明による別のデバイスの図である。
【図３７】別の付勢システムを有する本発明のデバイスを示す図である。
【図３８】別の付勢システムを有する本発明のデバイスを示す図である。
【図３９】中央針が周囲の針を越えて延びた図３８と同様の図である。
【図４０】操作ハンドルが付随した図３８７〜３９のデバイスの図である。
【図４１】本発明による別のデバイスの等角図である。
【図４２】図４１のデバイスの付勢要素部品の等角図である。
【図４３】使用中の図３７〜４２のデバイスを示す図である。
【図４４】使用中の図３７〜４２のデバイスを示す図である。
【図４５】使用中の図３７〜４２のデバイスを示す図である。
【図４６】使用中の図３７〜４２のデバイスを示す図である。
【図４７】使用中の図３７〜４２のデバイスを示す図である。
【図４８】マウスのＣＭＴ肺腫瘍モデルの肺癌電気化学療法処置のＦＡＣＳ免疫プロファイリングを示す棒グラフである。図４８Ａは、電気穿孔され、かつシスプラチン処置された（ＥＣＴ：  ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｅｄ  ＋  ｃｉｓｐｌａｔｉｎ  ｔｒｅａｔｅｄ）腫瘍内のＣＤ４／ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞の下方制御を示す図である。図４８Ｂは、ＥＣＴ処置された腫瘍内のＣＤ８＋Ｔエフェクタ細胞の増大を示す図である。図２８Ｃは、インターフェロンガンマ（細胞傷害性マーカ）について二重染色したＣＤ８を％によって示す、細胞傷害性ＣＤ８＋応答を示す図である。
【図４９】肺転移の対照モデル（非処置）、シスプラチン単独モデル、電気穿孔法単独モデル対電気穿孔法とシスプラチンとの組合せで処置された処置群の免疫調節の比較を示す画像である。マウスの肺転位画像（Ｆｅｋｅｔｔｓアッセイ、すなわち腫瘍が白色で染色）は、電気穿孔法およびシスプラチン処置による、その位置での腫瘍消散（ｔｕｍｏｕｒ  ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）が、肺転位の確立を禁じるのに有効であることを実証している。
【図５０】生体内データを示すグラフである。電気穿孔薬物送達（ＥＤＤ：ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）処置されたマウスの肺癌腫瘍モデル（ルイス肺癌）は、１ヵ月にわたる追跡調査で完全寛解を示す。一方、薬物単独群、電気穿孔法単独群、および対照群は全て成長し続け、その寸法のため２４日目までに処分された（１群あたりＮ＝８、開始時平均腫瘍容積＝１５０ｍｍ３）。
【図５１】腫瘍成長と、腫瘍間質圧力との相関関係を示すグラフである。
【図５２】マウスモデルの腫瘍間質圧力（ＴＩＰ：ｔｕｍｏｕｒ  ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）に対する真空効果を示すグラフである。
【図５３】エバンスブルー灌流試験の結果を示す図である。
【図５４】様々な高周波焼灼療法（ＲＦＡ）試験後のＣＴスキャンである。
【図５５】低用量シスプラチンと組み合わせた電気穿孔法（ＥＣＴ）後のＣＴスキャンである。
【図５６】腫張／出血および外傷に関連するＣＴデータからの染影を示す棒グラフである。
【図５７】空気漏れを示す棒グラフである。
【図５８】排液／出血を示す棒グラフである。
【図５９−１】免疫系に対する電気穿孔法の効果を示す棒グラフである。
【図５９−２】免疫系に対する電気穿孔法の効果を示す棒グラフである。
【図５９−３】免疫系に対する電気穿孔法の効果を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
図面のまずは図１から図１０を参照すると、組織に対して電気穿孔法を実施する際に使用するための装置が示される。本装置は、吸引ヘッド１０および複数の針電極を備える。針電極は、第１の電極となる中央針１１と、複数の第２の針とを備える。このケースでは、６本第２の針１２、１３、１４、１５、１６、１７が、吸引ヘッド１の周囲のまわりに間隔を置いて配置される。
【００２３】
電極１２、１３、１４、１５、１６、１７は、格納構成から展開構成へと可動であり、図１、９、および１０に示される展開構成では、針は、吸引ヘッド１から延びる。
吸引ヘッド１は、図４に示される格納送達構成と、拡張展開構成とを有する。吸引ヘッド１は、適切な可撓性材料を備え、吸引ヘッドを拡張展開構成に付勢するための付勢手段を備える。付勢手段は、例えば、ニチノールなどの適切な形状記憶材料製の付勢要素２０（図３）を備えることができる。
【００２４】
吸引ヘッド１０は、針のためのチャネル２１を有し、針は、チャネル２１を通って格納構成から展開構成へと可動である。
展開構成では、中央の第１の針１１は、周囲の針１２、１３、１４、１５、１６、１７を越えて延びることができる。
【００２５】
このケースでは、第１の電極となる中央針１１は、中空である。このため、この中央電極を用いて真空を引くことが可能となる。あるいは、またはさらに、中央針１１は、化学治療剤などの治療剤を極めて標的化された形で腫瘍に送達するために使用されてもよい。
【００２６】
ヘッドの周囲のまわりに延びる第２の針は、中央針よりも可撓性である。例えば、第２の針は、断面がより細くてもよい。こうすることによって、送達中の格納構成と、展開時の拡張構成と、係合解除時の格納構成との間で移動しやすくなる。いくつかのケースでは、針は、半径方向に格納された構成から半径方向に拡張された構成へと可動である。半径方向格納構成と、半径方向拡張構成との間の移動は、付勢手段の作用に直接応答するものでよい。あるいは、またはさらに、この移動は、付勢手段の作用に間接的に応答した結果として行われてもよい。例えば、針は、吸引ヘッドによって担持されたスリーブ／通路中を延びることができ、かつ／または付勢手段によって作動してもよい。付勢手段に応答して、スリーブ／通路は、針とともに半径方向外方に拡張しても、またはスリーブ／通路がまず拡張し、次いで針がその半径方向に拡張したスリーブ／通路中を前進してもよい。
【００２７】
真空が、適切な任意の形で吸引カップに印加され得る。あるケースでは、真空は、中央針１１から空気を引き出すことによって印加される。
薬物または抗体などの治療剤が、電気穿孔の前、その間、またはその後に、組織に施されてもよい。中空針は、治療剤の局所的な送達に使用され得る便宜的な送達システムとなる。
【００２８】
適切ないかなる電気穿孔処置も、電極を用いて施され得る。記載のいかなる電気穿孔パルスシーケンスも使用され得る。特に図２を参照すると、１つの中央電極と、任意の数、通常は５本から８本であり、このケースでは６本の外側針電極とがある。
【００２９】
一ケースでは、電気穿孔シーケンスは、内側電極１１と、外側電極１２から１７の全てとの間のパルスが関与する。あるいは、最適な処置のために、より複雑なシーケンス体制では、内側電極１１がまず外側電極１２および１３とパルス化され、次いで外側電極１３、１４と、次いで１４、１５と、次いで１５、１６と、次いで１６、１７と、その後１７、１２とパルス化される。
【００３０】
電気穿孔法では、より高い電圧が短時間で印加される。これは、低電圧が長時間にわたって印加される焼灼療法とは異なる。
本発明のデバイスの針電極を用いて印加される典型的な電気穿孔パラメータは、以下の通りである。
１）薬物が伴う場合
電圧８００〜１３００Ｖ／ｃｍ、１Ｈｚ〜５ＫＨｚの間の周波数の１００マイクロ秒のパルスを８回行う。
２）薬物が使用されない場合（不可逆電気穿孔法）
電圧１５００〜２５００Ｖ／ｃｍ、１Ｈｚ〜５ＫＨｚの間の周波数の１００マイクロ秒のパルスを８０〜２００回行う。
３）治療剤がＤＮＡプラスミドである場合
１３００Ｖ／ｃｍで１００マイクロ秒のパルスを１回後、１〜５秒以内に、３０〜２００Ｖ／ｃｍの電圧、１Ｈｚの周波数の５０ミリ秒パルスを連続して４回行う。
【００３１】
本発明の装置は、適切ないかなる器具の遠位端にも設けられ得る。例えば、図１３に示されるように、そのような一器具５０は、可動の近位ハンドル部分５１、５２を有することができ、このケースでは、吸引ヘッド１が展開し、次いで吸引ヘッド１から針が展開するように回転可能である。別の器具６０の近位端が、図１４に示される。このケースでは、装置の様々な機能を近位端から操作するために使用され得るいくつかのオペレータ制御部６１、６２、６３、６４がある。
【００３２】
図１５から２６を参照すると、本発明による別のデバイスが示され、先の実施形態の部品に類似した部品には同じ参照符号が割り当てられる。このケースでは、付勢手段は、バルーンなどの少なくとも１つの膨張要素を備える。このケースでは、操作の制御性を向上させるために吸引ヘッドに沿って軸方向に間隔を置いて配置された２つのバルーン７０、７１がある。バルーン７０、７１はそれぞれ中央孔７２を有し、バルーンが拡張構成にあるときも、格納構成にあるときも、中央針１１はこの中央孔７２を通り抜けることができる。円周方向に間隔を置いて配置されたスリーブ７５がヘッドの周囲のまわりに設けられ、それによって第２の針が軸方向に移動することが可能となり、かつ第２の針が、半径方向格納構成と、半径方向拡張構成との間で移動することが可能となる。
【００３３】
図２７〜２９を参照すると、本発明による別のデバイスが示され、先の実施形態の部品に類似した部品には同じ参照符号が割り当てられる。このケースでは、付勢手段はバルーンなどの単一の膨張要素８０を備え、この要素は中央孔８１を有し、バルーンが拡張構成にあるときも、格納構成にあるときも、中央針はこの中央孔８１を通り抜けることができる。円周方向に間隔を置いて配置されたスリーブ８５がヘッドの周囲のまわりに設けられ、それによって第２の針が軸方向に移動することが可能となり、かつ第２の針が、半径方向格納構成と、半径方向拡張構成との間で移動することが可能となる。
【００３４】
図３０〜３４を参照すると、本発明による別のデバイスが示され、先の実施形態の部品に類似した部品には同じ参照符号が割り当てられる。このケースでは、付勢手段は中央要素８４を備え、その周りにいくつか（典型的には５個以上）のアーム８７が連結される。セグメントまたはアーム８７は、通常は格納構成にある。アーム８７は、中央要素８４をヘッドの中心に軸方向に押すことによって、半径方向外方に移動する。中央先端部８４の遠位先端部８９は、ヘッドに入り、そこに進んでアーム８７を押し広げやすくするように先細りになっている（図３４）。アームは、このようにして、アーム８７を拡張位置へと外方に梃子式に動かすハンドルとの連結を介して拡張される（図３３）。この段階で、第２の針は、各アーム内のチャネル／キャビティライン８８（図３１）を通って展開され、組織に挿入され得る。アーム８７は、中央要素８４が格納されると、格納構成に戻るように適合されてもよい。
【００３５】
次に、図３５〜４７を参照すると、本発明による別のデバイスが示され、先の実施形態の部品に類似した部品には同じ参照符号が割り当てられる。このケースでは、操作の制御性を向上させるために吸引ヘッドに沿って軸方向に間隔を置いて配置された２つのバルーン７０、７１がある。バルーンはそれぞれ中央孔７２を有し、バルーンが拡張構成にあるときも、格納構成にあるときも、中央針はこの中央孔７２を通り抜けることができる。円周方向に間隔を置いて配置されたスリーブ７５がヘッドの周囲のまわりに設けられ、それによって第２の針が軸方向に移動することが可能となり、かつ第２の針が、半径方向格納構成と、半径方向拡張構成との間で移動することが可能となる。このケースでは、組織の把持をしやすくする遠位カップ状要素９０もある。カップ状要素９０は、外側部品９１および内側部品９２を備える。外側部品９１は、比較的剛性の内側部品９２よりも可撓性である。内側部品９２は、強度を高め、一方外側部品９１は、格納構成と拡張構成との間の移動時の折畳みおよび拡張を促進する。内側部品は、例えば比較的剛性のポリカーボネート材料またはペバックス（ｐｅｂａｘ）製のものでよく、外側部品は、より可撓性のポリウレタン材料製のものでよい。外側部品はまた、中央針がそこを通り抜けて延びることができる孔９４を有する。
【００３６】
本発明は、具体的には肺癌の電気透過処置に使用するための胸腔鏡検査デバイスを提供するものであるが、本デバイスは、腹腔鏡によってアクセス可能な他の腫瘍にも用途を有する。肺癌は、既存の治療法では適切に対処されず、低侵襲腫瘍消散法を提示する重要な機会をもたらすものである。現在、患者の８０％〜８５％が、外科手術処置には適さないと考えられる。例えばレビーン針などの高周波焼灼療法（ＲＦＡ）、放射線療法、または外科手術などの他の方法とは異なり、電気透過の使用は、電気エネルギーを用いて、細胞膜を一時的に多孔性にするように特有に設計されており、一方ＲＦＡなどの他の焼灼療法は、熱を用いて周囲組織を全て変性させ、直ちに破壊することによって治療効果を引き出すものである。
【００３７】
本発明による器具は、近位端および遠位端を有し、その遠位端に可撓性吸引カップを備える。遠位カップは、電気穿孔処置を送達するために使用される小径の針（典型的には直径が０．１〜０．２ｍｍの間）のアレイを備える。吸引カップヘッド（典型的には直径が２ｃｍ〜３ｃｍの間）は、折畳み送達構成と、拡張展開構成とを有する。吸引カップは処置部位で展開され、腫瘍組織上に配置される。組織の適切な領域を把持するために、吸引が使用される。次いで、電気穿孔針が展開され、処置される組織まで、典型的には深さ１ｃｍ〜３．５ｃｍの間まで延びる。針のアレイは、中央針と、周囲に間隔を置いて配置された複数の針を備える縁部群とを備える。このケースでは、電気穿孔を送達するために、中央針が陽極を成し、縁部針群が陰極を成す。
【００３８】
この器具は、肺などの関心部位に、患者の胸壁を介して送達され得る。
一ケースでは、この器具は腹腔鏡であり、腹腔鏡の中央コアが、吸引カップヘッドを含む。腹腔鏡の近位ハンドルが、電気穿孔針を展開するために使用され得る。
【００３９】
本発明のデバイスの主な利点は、以下の通りである
１．鍵穴手技
２．優れた有効性
３．最小限の副作用
４．免疫調節性
５．迅速性
６．真空の使用による組織との係合および針展開の制御
本発明の胸腔鏡検査システムは、制御され、標的化された形で電極を腫瘍組織に送達する。組織を把持し、針電極が隣接する腫瘍組織に刺さりやすくなるように、真空がデバイスのヘッドで使用される。この真空はまた、針によって生じる外傷を最小限に抑え、処置後の空気漏れの危険を低減させる。真空は、処置の臨床的有効性を支持するのに不可欠な、別の重要な特徴を有する。印加された真空は、腫瘍間質圧力を陽圧から陰圧（ｍｍＨｇ）へと低減させることができ、それによって薬物が腫瘍内によりよく分散されることになる。
【００４０】
腫瘍の周囲の電極間で電界が生成され、それによって組織が確実に多孔性となり、局所的に存在するブレオマイシンまたはシスプラチンなどの化学療法マクロ分子が受動的に拡散することになる。吸収は、電気穿孔された領域にだけ生じ、したがって腫瘍に標的化され、周囲の健康な組織は影響を受けずにすむ。本システムの重要な利点の１つは、腫瘍を取り囲む健康な細胞および組織が、放射線療法および高周波焼灼療法などの従来の焼灼療法よりも高い度合いで処置され得る点である。組織を多孔性にさせ、それ自体は破壊的でない電気穿孔の送達と、本質的に熱を用いて、周囲組織を直ちに破壊する高周波焼灼療法との相違は重要な違いである。本発明では、電気穿孔電極は、数秒以内で視覚的に配置され得る。処置時間の観点から、電気穿孔法では、１ミリ秒すなわち０．００１秒未満しかかからず、一方、ＲＦＡでは１０〜２０分の間、すなわち１２００秒かかることがあり、これは１２０万倍の差である。
【００４１】
さらに、電極配置の観点では、従来のＲＦＡ針の使用は、放射線によるガイダンス下で実施され、動脈または血管付近への配置が非常に重要とされる。これとは全く異なり、本発明のデバイスは、ビデオを介した視覚ガイダンス下で配置され、配置はほんの数秒で実現される。
【００４２】
免疫学的な影響が、本発明の電気穿孔デバイスを用いた処置の最も重要な利点の１つである。外科手術では、腫瘍組織は患者から除去されるので免疫反応は引き出されず、むしろこの手技の物理的応力は、ほとんどの場合で免疫抑制性である。ＲＦＡおよび放射線療法などの処置と同様に、局所効果は、癌に対する免疫応答を高めやすくするのではなく、免疫抑制性である。ＲＦＡはまた、腫瘍組織および関連抗原を熱的に破壊し、したがって腫瘍が死滅する際に、免疫系が益する能力が低減することになる。本発明の電気穿孔システムを用いると、有益な免疫応答が見られ、この応答は、本発明者らが、マウスモデルにおいて、抗原提示細胞（ＡＰＣ：  ａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）、例えば樹状細胞の存在の増大、および対応するＣＤ８＋細胞傷害性ｔ細胞のレベルの上昇によって、癌に対する免疫結合が高まることを実証した。本発明者らは、本発明の電気穿孔手法を用いると、マウスモデルの処置後に、肺転位が減少したことを実証した。
【００４３】
図４８は、マウスのＣＭＴ肺腫瘍モデルにおける肺癌の電気化学療法処置のＦＡＣＳ免疫プロファイリングを示す棒グラフである。図４８Ａは、電気穿孔され、かつシスプラチン処置された（ＥＣＴ）腫瘍内のＣＤ４／ＣＤ２５−制御性Ｔ細胞の下方制御を示す。図４８Ｂは、ＥＣＴ処置された腫瘍内のＣＤ８＋Ｔエフェクタ細胞の増大を示す。図４８Ｃは、インターフェロンガンマ（細胞傷害性マーカ）について二重染色したＣＤ８を％によって示す、細胞傷害性ＣＤ８＋応答を示す。
【００４４】
図４９は、肺転移の対照モデル（非処置）、シスプラチン単独モデル、電気穿孔法単独モデル対電気穿孔法とシスプラチンとの組合せで処置された処置群の免疫調節の比較を示す画像である。マウスの肺転位画像（Ｆｅｋｅｔｔｓアッセイ、すなわち腫瘍が白色で染色）は、電気穿孔法およびシスプラチン処置による、その位置での腫瘍消散が、肺転位の確立を禁じるのに有効であることを実証している。
【００４５】
本発明の電気穿孔システムのいくつかの利点は、以下の通りである。
１．免疫応答を腫瘍関連抗原の免疫認識が改善される方向に好都合に調節する。
２．樹状細胞（ＡＰＣ）の数を腫瘍部位に増加させ、腫瘍が崩壊するときの腫瘍関連抗原の認識を助ける。
３．トール様受容体を腫瘍に対する適応免疫応答の方向に好都合に調節し、さらに追加のＢ７．１／２細胞発現モジュレータ、例えばラクトフェリンまたはビタミンＥ類似体を存在させることによってさらに調節することができる。
４．腫瘍が完全に除去される外科手術、および腫瘍抗原が処置後に変性するＲＦＡとは異なり、腫瘍が崩壊しても、腫瘍抗原は元の位置に残される。
【００４６】
本発明の、既存の方法／材料／デバイス／現況技術に優る他の利点および改善点には、以下が含まれる。
・標的化された送達：薬物吸収は、本デバイスによって処置される領域に局所化され、使用される薬物は、標準に比べてほんの少量ですむ（したがって患者の副作用がより少ない）。
・健康な組織：これまでの研究では、健康な組織は、腫瘍組織に比べてほとんど影響を受けないため、腫瘍のまわりのより広い範囲で処置が可能となり、それによって再発の可能性が低減することが示される。
・反復性：処置は、必要とされれば複数回送達され得る。
・低侵襲性および非毒性：使用される薬物の用量は、従来の化学療法で使用される用量の１％未満である。内視鏡に応用することによって、より多くの患者が処置を受けることが可能となる。
・他の焼灼療法とは異なり、本方法による細胞死は、主にアポトーシスであり、非ネクローシスな応答である。
・新治療法：本デバイスは、今後、遺伝子療法、および抗体療法と組み合わせて使用される可能性がある。
・電気穿孔処置は迅速に施されることが可能であり、麻酔からの回復時間が、通常の一般的な外科手術に比べて短縮する。
・本技術は、既存の治療法と相補的であり、実施が容易で、経済的にコスト削減の利点を有する。
【００４７】
針は、ハンドル部にあるツイスト機構を介して展開され得る。好ましくは、処置ヘッドは可撓性であり、第１の段階で埋込み／折畳み段階としてスコープ内に送達され、体内に入った後は、「吸引カップ状」へと完全に開く。
【００４８】
実施に際しては、処置ヘッドは、体内に挿入された後、開いて、組織と接触するように備える（Ａ）。吸引カップが組織を一旦把持した後は（Ｂ）、針がカップを貫通してその下にある組織に展開される（Ｃ）。中央針は、独立して展開され得る（Ｄ）。これには、電極が腫瘍に展開される間、外科医が組織を把持できるという利点がある。
【００４９】
マウスＣＭＴ肺腫瘍モデルの肺癌の電気化学療法処置のＦＡＣＳ免疫プロファイリング。Ａ．電気穿孔され、かつシスプラチン処置された（ＥＣＴ）腫瘍内のＣＤ４／ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞の下方制御を示す。Ｂ．ＥＣＴ処理された腫瘍内のＣＤ８＋Ｔエフェクタ細胞の増大を示す。Ｃ．インターフェロンガンマ（細胞傷害性マーカ）について二重染色したＣＤ８を％によって示す、細胞傷害性ＣＤ８＋応答を示す。
【００５０】
肺転移の対照モデル（非処置）、シスプラチン単独モデル、電気穿孔法単独モデル対電気穿孔法とシスプラチンとの組合せで処置された処置群の免疫調節の比較。マウスの肺転位（Ｆｅｋｅｔｔｓアッセイ、すなわち腫瘍が白色で染色））の画像は、電気穿孔法およびシスプラチン処置による、その位置での腫瘍消散が、肺転位の確立を禁じるのに有効であることを実証している。
【００５１】
この手技は、手術室で全身麻酔下の患者で行われる。腫瘍は、その位置、容積、および全体的な分布を査定するために、あらかじめ放射線で病期診断されていた（ＣＴ／ＰＥＴスキャン）ものでよい。
【００５２】
本処置は、確立されたＶＡＴＳ（ビデオ補助下胸腔鏡手術：ｖｉｄｅｏ  ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｔｈｏｒａｓｃｏｐｉｃ  ｓｕｒｇｅｒｙ）にならう。ＶＡＴＳのための器機使用は、５ｍｍまたは１０ｍｍの光ファイバスコープに連結されたカメラの使用を含む。腹腔鏡検査とは異なり、ＶＡＴＳでは、胸腔の固有のアーチ様形状のため、二酸化炭素送気は一般に必要でない。しかし、肺の、ＶＡＴＳが実施されている胸部側でのガス抜きは、器具を視覚化し、胸郭に通すことが可能となるように必須であり、これは通常、一側肺換気を可能とするダブルルーメン気管内チューブによって、または標準のシングルルーメン気管内チューブを介して送達される気管支ブロッカによって遂行される。
【００５３】
本発明のデバイスは、１０ｍｍの套管針アクセスポートから挿入され、腫瘍部位付近の位置まで運ばれる。腫瘍位置は、ビデオカメラ、および放射線病期診断の知識を用いて視覚的に標的化される。
【００５４】
処置ヘッドは、定位置に来るとフルサイズに拡張され、肺組織上に配置される。デバイスを組織に対して押し付ける穏やかな圧力が印加され、真空吸引ポートが作動される。肺組織を把持し、腫瘍間質圧力を低減させやすくするために、０〜７００ｍｍＨＧの間の圧力が使用され、それによって薬物が腫瘍にアクセスし、その中を循環するのを助ける。
【００５５】
針は、外側リム、および中央針から展開される。中央針は、腫瘍に電気穿孔パルスを送達し、治療剤を腫瘍に注入するために使用される。
治療剤が注入された後、電気穿孔パルスが、発生器を介して送達される。針は、第１の組の電気穿孔パルス後、組織により深く展開され得、この手技は、本デバイスの針が組織により深く進むにつれて、ステップごとに繰り返される。針は、組織に送達される電流を最小限に抑えるために、針先端部の下までコーティングされてもよい。この例では、電界は、処置ヘッド針の全長に沿ってではなく、先端部周辺でしか生成されない。
【００５６】
針は、組織に挿入しやすく、また針の展開に必要となる力を最小限に抑えるために、潤滑にされてもよい。
針は、適用後格納され、処置ヘッドは、腫瘍の全表面積が確実に処置されるように再配置されてもよい。
【００５７】
中央針は、処置ヘッドの外側リムにある周囲の針よりも高いゲージのものである。より細いゲージ針は、周囲の健康な組織に対する外傷を最小限に抑え、肺では、処置後の空気漏れの可能性を低減させる。
【００５８】
中央針はまた、組織のインピーダンスを監視し、腫瘍内または健康な組織内でのその存在を発生器にフィードバックする。腫瘍組織のインピーダンスは、固有の周波数読取り値を有し、また、電気穿孔パルスが送達された後に調整される。中央針からのインピーダンス測定読取り値／フィードバックは、腫瘍組織内でのその存在、その有効な電気穿孔をオペレータに示すことができ、また、針が腫瘍を通り抜けて健康な組織にまで達していないか、すなわち針が腫瘍を完全に貫通していないかを示すことができる。
【００５９】
本発明のデバイスを用いた電気穿孔の免疫強化効果をさらに高めるために、免疫調節剤がさらに使用されてもよい。こうした免疫調節剤は、通常は処置の数日前に栄養補助剤を介して添加されるか、または電気穿孔時の処置前に腫瘍内に直接注入することによって添加される。そのような調節剤には、イピリムマブ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＰＤ１、およびＰＤ−Ｌなどの抗体が含まれる。これらの調節剤は、直接的な抗癌作用、ならびにＢ７／１およびＢ７／２細胞表面発現の上方制御（これは、樹状細胞などの抗原提示細胞が抗原提示するために重要である）によって免疫応答を容易にする。
【００６０】
拡張可能な処置ヘッド
組織を把持し、腫瘍間質圧力を低減させる真空
生成される電界の容積を制御するための針コーティング
上記で概括された免疫調節
カメラおよび中央針でのインピーダンス測定値を介した配置
肺癌は、先進国では、男女ともに癌関連死亡率の主な死因である。世界中で年間１２０万人を超える新患があり、１００万人が死亡している（世界保健機関（ＷＨＯ））。肺癌の有病率は、男性では前立腺癌、女性では乳癌に次いで第２位である。肺癌を発病した患者の大部分は喫煙者であり、心臓および肺に喫煙に関連した損傷を有するため、積極的外科手術または集学的治療は実行可能な選択肢とはなりにくい。
【００６１】
従来の肺癌処置には、（初期段階の癌について）なおも唯一の有効な根治処置と考えられている外科手術介入、化学療法、放射線療法、および高周波焼灼療法またはベバシズマブ／アバスチンなどの生物剤の使用などの新しい処置様式が含まれる。しかし、肺癌処置の近年のあらゆる進歩にもかかわらず、成果はなおも極めて低いままである。肺癌は、癌による死因の２２％を占め、全死因の６％を占める。（Ｆｒｏｓｔ  ＆  Ｓｕｌｌｉｖａｎ社による欧州肺癌市場調査レポート）。
【００６２】
本発明のデバイスは、肺癌処置の新規な手法である。本発明のデバイスは、手術不可能な肺腫瘍、および手術可能な肺腫瘍の両処置において、低侵襲ツールとして鍵穴手術を介して適用され得る。
【００６３】
本デバイスを用いて腫瘍組織に直接電気穿孔を施すことによって、腫瘍細胞が一時的に透過性となり、その結果腫瘍細胞は多孔性となり、遥かに高濃度の化学療法薬物が吸収されることになり、したがって健康な組織および器官が毒性から温存される。吸収される薬物の濃度が大幅に向上されるので、必要となる全体濃度が大幅に低減され得、したがって毒性関連の副作用も低減する。肺癌治療に使用される主な化学療法薬物の１つであるシスプラチンは、こうした組合せ処置に理想的であり、通常は３週間ごとに６０〜１００ｍｇ／ｍ２の濃度で肺癌患者に投与される。これが、１回量２ｍｇの薬物の腫瘍への直接注入にまで低減でき、最小で１／３０〜１／５０の濃度低減が可能となる。
【００６４】
腫瘍焼灼に対するこの手法は、悪性黒色腫、メルケル細胞癌、乳癌、ＳＣＣ、頭頚部癌、および他の皮膚に起因する癌に有効であることが臨床的に実証されてきている。全体の客観的奏効率は８５％であったことが報告され、以前は処置に対して奏功しない癌も含まれる。
【００６５】
従来の治療法が不十分である理由として、疾患が診察時に、治療の適用または有効性が制限される進行期にあること、薬物耐性腫瘍の成長、完全な切除または焼灼を妨げる癌の解剖学的構造の位置、および診断または処置時に検知不可能なマイクロ転移の存在を含めた要因に起因すると考えられ得る。現在の抗癌治療の他の側面として、癌特異性が乏しく、望ましくない副作用が生じる結果となり、したがって治療用量が制限される。肺癌治療の結果の低さを考慮すると、代替のより有効な処置様式の開発が不可避である。
【００６６】
電気穿孔法および本発明のデバイスを使用した手法は、標準のケアに比べて、臨床医、患者、および医療従事者に利点をもたらす。ＴｈｏｒａＶｅデバイスを用いた手技は、低侵襲的な形で行われ得（鍵穴手術）、使用される薬物濃度は大幅に低く、したがって処置関連の副作用が低減する可能性が高い。さらに、患者の「入院」期間が短縮され得、その結果医療従事者にとって大幅なコスト節減が実現される。
【００６７】
電気穿孔の効果は一時的であり、それ自体は腫瘍成長または組織機能に影響を及ぼさない。それ自体では浸透性の低い化学療法薬物には最小限の生物活性しかないが、電気穿孔法と組み合わせると、それらの薬物の細胞内濃度は対数倍で増大し、その結果、強力な細胞破壊効果が得られる。したがって、治療の影響は、電界の領域内に留められる。シスプラチンは、そのような浸透性の低い抗癌剤であり、電気穿孔プロトコルと組み合わせると有効かつ安全である。
【００６８】
臨床試験では、軽度の電気パルスを化学療法と組み合わせて使用することは、悪性黒色腫、頭頚部癌、および局所再発乳癌など、組織学的に異なる種類の腫瘍にわたって広く有効であることが判明した。膜透過性、ならびに化学療法薬物ブレオマイシンおよびシスプラチンの細胞傷害性は、電気穿孔法によって劇的に高められ得、したがって全身の薬物濃度は低減し、かつ副次的な損傷が伴うことなく、より高い抗腫瘍有効性が実現される（図１７）。Ｍｅｒｃｙ大学病院のＣｏｒｋ癌研究センター（ＣＣＲＣ：Ｃｏｒｋ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｒｅ）では、電気化学療法プロトコルを用いた皮膚電極電気穿孔法を使用して、３００人を超える非奏功な腫瘍小結節、および手術不可能な腫瘍小結節の患者の治療に成功してきた。
【００６９】
図５０は、生体内データを示し、電気穿孔薬物送達（ＥＤＤ）処置されたマウスの肺癌腫瘍モデル（ルイス肺癌）は、１ヵ月にわたる追跡調査で完全寛解を示した。一方、薬物単独群、電気穿孔法単独群、および対照群は全て成長し続け、その寸法のため２４日目までに処分された（１群あたりＮ＝８、開始時平均腫瘍容積＝１５０ｍｍ３）。
【００７０】
これまで、電気穿孔法に基づいた治療の応用は、マクロ針電極に依存するため、主に外部からアクセスできる腫瘍または組織の処置に限られていた。本発明のデバイスは、こうした制約を克服し、肺癌、および腹腔鏡によってアクセス可能な他の腫瘍のどちらにも電気穿孔法を適用することを可能とする。現在、多数の患者が、外科手技の侵襲的な性質のため根治的な外科手術には適さない。全患者の約６５パーセントを高齢者が占めているにもかかわらず、高齢者に対する適切な治療の実現が困難な状況にある。低侵襲手技を用いて肺腫瘍を減量または処置するという選択肢は、外科医が利用できる選択肢に大きな前進をもたらすものである。低侵襲な手法を用いて原発性腫瘍が管理されれば、手術不可能とみなされる腫瘍を有する患者の多くにとって、処置の選択が可能となるであろう。
【００７１】
灌流
Ａ．化学療法の有効性を低下させる生理学的障害の１つは、毛細管からの腫瘍細胞を取り囲む間質空間を介した薬物拡散が低いことに関連する。リンパ排液が少なく、脈管構造が不規則であるため、腫瘍間質圧力は、腫瘍が成長するにつれて時間とともに増大することになる。この陽圧は、間質圧力が僅かに陰圧の正常組織とは逆であり、正常組織では、この陰圧のため毛細管全体にわたって分子が対流することなる。図５１を参照すると、Ｘ軸は腫瘍容積をｃｍ３で表し、Ｙ軸は腫瘍間質圧力（ＴＩＰ：ｔｕｍｏｕｒ  ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）の読取り値をｍｍＨｇで表す。各点は、所与の腫瘍容積におけるＴＩＰの一読取り値を表す。直線は、腫瘍容積とＴＩＰとの間の相関係数を表す。
【００７２】
Ｂ．腫瘍組織内の陽圧は、腫瘍組織に直接真空をかけることによって直ちに打ち消されることが可能である。本発明者らは、本デバイスを用い、−２００ｍｍＨｇの真空により、圧力を＋８ｍｍＨｇの陽圧から−５５ｍｍＨｇへと数秒内で減少させて上記を実現し、これについてはＹ軸が内部腫瘍圧力をｍｍＨｇで示し、Ｘ軸が時間変化を示す図５２を参照されたい。実証されたように、本発明のデバイスによる真空の印加は、ＴＩＰを＋８ｍｍＨｇから−５５ｍｍＨｇへと直ちに減少させる。このため、毛細管からＴＩＰへのマクロ分子の対流を可能にすることによって、薬物が腫瘍間質空間（細胞間）全体にわたってよりよく灌流しやすくなる。
【００７３】
Ｃ．この補正により、毛細管から腫瘍組織への化学療法の灌流が可能になる。この妥当性を確認するための実験は、腫瘍を有するマウスの血液供給に青色染料（エバンスブルー）を注入するものである。１５分後、マウスの器官は青くなったが、腫瘍が切除され分解される際、周辺だけが染料を吸収し、腫瘍のコアは、高い陽圧間質圧力のため影響を受けないままとなることが明らかである。しかし、２００ｍｍＨｇの陰圧で真空が腫瘍に１分間印加されると、薬物が腫瘍組織に灌流したことがコントラストから明らかである。腫瘍組織全体にわたって染料が深く透過し、したがって薬物を本質的に腫瘍細胞の入口まで搬送し、そこで電気穿孔によってその入口を開き、薬物を中に入れることが可能となり、これについては図５３を参照されたい。
【００７４】
穿孔
Ａ．本発明のデバイスは、肺腫瘍への鍵穴手術アクセスを促進する。本デバイスは、ビデオ補助下胸腔鏡手術（ＶＡＴＳ）手技の一部として使用され、この手技では外傷を最小限に抑えるために、本デバイスは閉鎖／折畳み構成で胸部に挿入される。罹患した肺は、気管支ブロッカを用いて虚脱され、それによって胸部腔／肺腔の内部で操作するための空間を得る。胸部空間内に入ると、処置ヘッドは上述のように拡張され、処置される肺組織に対して軽く押し当てて配置される。手技中に処置ヘッドが組織を把持し、保持するように、また、腫瘍間質圧力を低減させ、腫瘍全体に薬物が十分灌流するように、処置ヘッドから真空が印加される。
【００７５】
Ｂ．豚の肺組織に対する本デバイスの評価では、レビーン針を用いた高周波焼灼療法と比較して、本発明のデバイスでは、手技後の時間および日数で空気漏れを分析し（図５７）、出血からの排液の量を定量化する（図５８）ことによって測定すると外傷の大幅な低減が実証された。本発明者らはまた、処置前および処置後の肺組織のＣＴスキャンを利用し、ＲＦＡと、本デバイスを用いた電気穿孔法とを比較した。ＣＴスキャンデータ（図５４／５５）は、本発明のデバイスの染影の度合いから（図５６は腫張／出血および外傷に関連したＣＴデータからである）、レビーン針を用いたＲＦＡに比べて、周囲組織への副次的な損傷は大幅に低減した状態で、処置がより標的化されて送達されたことを明らかに実証した。図５は、レビーン針アレイを用いてＲＦＡ前処理された豚の肺組織のＣＴスキャンを示す。直後に矢印間の領域に顕著な外傷が観察され、顕著な出血および炎症を示している。一方、図５５は、本発明のデバイスを用いた電気穿孔によって前処理された豚の肺組織のＣＴスキャンを示す。直後に黄色の矢印間の領域に最小限の外傷が観察され、周囲の健康な組織に対する影響が最小限に抑えられた状態での標的化処置を示している。
【００７６】
プライミング（図５９）。
・手術前の腫瘍塊内に腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ：ｔｕｍｏｕｒ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ）が存在すると、全生存期間について最も高い予後指標をもたらし得ることを示す証拠が増えつつある。免疫療法による手法を用いて腫瘍に対して強い免疫応答と結合させる可能性はまた、多くの癌についても普及しつつあり、現在、末期疾病の全生存期間の増大が実証され、例えばイピリムマブがある。したがって、根治を目指した外科手術を改善する本発明者らの能力は、能動的な免疫結合を新補助療法として促進することによって高められ得る。
・電気穿孔技術は、低用量の化学療法剤の灌流および吸収のどちらをも促進することができ、それと同時に堅固な免疫細胞結合を誘発するという点において、新補助療法として大きな可能性をもたらすものである。電気穿孔法とは、短く強い電気パルスの印加後の細胞膜の透過を説明するために使用される用語である。この透過は、電界の大きさおよび持続時間、ならびにパルス回数の関数として、一時的（可逆電気穿孔法）にも恒久的（不可逆電気穿孔法）にもなり得る。皮膚癌に関して、腫瘍の縮小、および生活の質の向上の観点から肯定的な結果が達成されてきている。
・電気穿孔後、腫瘍細胞が死滅する際に、主にアポトーシスな機構を介して細胞からＡＴＰが大量に放出され、損傷関連分子パターン分子（ＤＡＭＰ：ｄａｍａｇｅｄ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）経路を誘発することにより、樹状細胞、および他のリンパ球細胞が、処置後腫瘤に浸潤することになる。
・本発明者らは、ＥＣＴによって、腫瘍内にマクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞が増加し、ＣＤ８＋Ｔ細胞が大幅に増加することを実証した。本発明者らのデータは、ＥＣＴと負の免疫抑制フィードバックを停止させる免疫調節性薬物とを組み合わせることによって、広範にわたる全身性免疫応答が腫瘍抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞によって引き起こされることを示す。
【００７７】
本発明は、前述の実施形態のみに限定されるものではなく、構成および詳細において変形され得る。
【図１】
2016500329.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１−２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図５１】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９−１】
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【図５９−２】
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【図５９−３】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【国際調査報告】
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