(57)【要約】  本発明は、グルタチオン等の還元剤による生物活性化に適している、ジスルフィドでマスクされたプロドラッグ化合物、組成物および方法に関する。そのようなジスルフィドベースの化合物、組成物および方法は、例えば、治療薬として使用するための新規プロドラッグを提供する上で有用となり得る。化合物は、アニオン電荷をマスクするための配座固定されたジスルフィドホスホトリエステル部分を特色とする。化合物は、１，２−ジチグン（ｄｉｔｈｉｇｎｅ）部分を包含する。【選択図】図２
2016509575.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2016509575.tif 000101
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；
ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして
Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ９は、Ｏ−アリール、Ｏ−フェニル、Ｏ−ナフチル、Ｏ−アルキル−アリールもしくはＯ−ベンジル（そのいずれかは、１以上のハロ基で置換されていてよい）；またはアミン、置換アミン、ＮＨ−ベンジル、ＮＨＲ１２もしくはＮ（Ｒ１２）２であり、ここで、各Ｒ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキル、または１以上のハロ基で置換されているＣ１〜１０アルキルであり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］を有する化合物。
【請求項２】
Ｒ９が：
【化２】
2016509575.tif 000102
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ９が：
【化３】
2016509575.tif 000103
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ９が：
【化４】
2016509575.tif 000104
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ９が：
【化５】
2016509575.tif 000105
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ９が：
【化６】
2016509575.tif 000106
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
下記の式：
【化７】
2016509575.tif 000107
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
下記の式：
【化８】
2016509575.tif 000108
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
下記の式：
【化９】
2016509575.tif 000109
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
下記の式：
【化１０】
2016509575.tif 000110
［式中、Ｌは、存在していてもよいリンカーであり、そして、Ｙは、リガンドおよび／またはポリマーである］
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
下記の式：
【化１１】
2016509575.tif 000111
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
ＮＵＣが：
【化１２】
2016509575.tif 000112
2016509575.tif 000113
2016509575.tif 000114
2016509575.tif 000115
である、請求項１から１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１に記載の化合物であって、
【化１３】
2016509575.tif 000116
2016509575.tif 000117
2016509575.tif 000118
2016509575.tif 000119
2016509575.tif 000120
2016509575.tif 000121
から選択される構造を有する、化合物。
【請求項１４】
Ｒ９が：
【化１４】
2016509575.tif 000122
である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ９が：
【化１５】
2016509575.tif 000123
である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ９が：
【化１６】
2016509575.tif 000124
である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ９が：
【化１７】
2016509575.tif 000125
である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ９が：
【化１８】
2016509575.tif 000126
である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１０がＯである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ１０がＳである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ１がＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘが、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌが、存在していてもよいリンカーであり；そして
Ｙが、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２２】
式ＩＩ：
【化１９】
2016509575.tif 000127
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；
ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；そして
Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；
Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］を有する化合物。
【請求項２３】
下記の式：
【化２０】
2016509575.tif 000128
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
下記の式：
【化２１】
2016509575.tif 000129
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２５】
下記の式：
【化２２】
2016509575.tif 000130
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２６】
下記の式：
【化２３】
2016509575.tif 000131
［式中、Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、リガンドおよび／またはポリマーである］
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２７】
下記の式：
【化２４】
2016509575.tif 000132
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２８】
請求項２２から２７のいずれかに記載の化合物であって、
【化２５】
2016509575.tif 000133
が：
【化２６】
2016509575.tif 000134
2016509575.tif 000135
2016509575.tif 000136
2016509575.tif 000137
である、化合物。
【請求項２９】
請求項２２に記載の化合物であって、
【化２７】
2016509575.tif 000138
2016509575.tif 000139
2016509575.tif 000140
2016509575.tif 000141
2016509575.tif 000142
から選択される構造を有する、化合物。
【請求項３０】
Ｒ１０がＯである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ１０がＳである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ１がＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘが、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌが、存在していてもよいリンカーであり；そして
Ｙが、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のＮ−アセチルガラクトサミン部分を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のフォレート部分を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のペプチド部分を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３６】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のステロイド部分を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のビタミンまたは補因子部分を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３８】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化２８】
2016509575.tif 000143
［式中、ｎは、１から１００の間の整数である］
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化２９】
2016509575.tif 000144
［式中、ｎは、１から１００の間の整数である］
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化３０】
2016509575.tif 000145
［式中、各ｎは、独立に、１から２０までの整数である］
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化３１】
2016509575.tif 000146
［式中、各ｎは、独立に、１から２０までの整数である］
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化３２】
2016509575.tif 000147
［式中、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＲ１１Ｒ１２−または−ＮＲ１１−であり、ここで、Ｒ１１およびＲ１２は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され；ｎは、１、２、３または４である］
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４３】
Ｙが存在する場合、Ｙが：
【化３３】
2016509575.tif 000148
を含む、請求項１から３２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｌが存在する場合、Ｌが、アルキル、カルボニル、アミド、ホスフェート、ホスフェートエステル、ホスホラミデート、チオホスフェートエステル、ジスルフィドまたはポリアルクレングリコール結合を含むリンカーである、請求項１から４３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４５】
前記のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグを含む、組成物。
【請求項４６】
前記のいずれか一項に記載の化合物または組成物と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む、組成物。
【請求項４７】
それを必要とする患者の治療用薬剤の製造のための、治療有効量の、前記のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグ、または組成物の使用。
【請求項４８】
それを必要とする患者の治療のための、治療有効量の、前記のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグ、または組成物の使用。
【請求項４９】
それを必要とする患者におけるウイルス感染症の治療のための、治療有効量の、前記のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグ、または組成物の使用。
【請求項５０】
前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＳＶまたはＨＩＶ感染症である、請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
それを必要とする患者におけるがんの治療のための、治療有効量の、前記のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグ、または組成物の使用。
【請求項５２】
前記がんが、ビラリー管がん、膀胱がん、移行細胞癌、尿路上皮癌、骨肉腫、脳腫瘍、グリオーマ、星状細胞腫、乳癌、化生性癌、子宮頸がん、子宮頸部扁平上皮癌、直腸がん、結腸直腸癌、結腸がん、遺伝性の非ポリポーシス結腸直腸がん、結腸直腸腺癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮内膜癌、子宮内膜間質肉腫、食道がん、食道扁平上皮癌、食道腺癌、眼メラノーマ、ぶどう膜メラノーマ、胆嚢癌、胆嚢腺癌、腎細胞癌、明細胞腎細胞癌、移行細胞癌、尿路上皮癌、ウィルムス腫瘍、白血病、急性リモサイティック白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性（ＣＬＬ）、慢性骨髄性（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性（ＣＭＭＬ）、肝臓がん、肝癌、肝細胞腫、肝細胞癌、胆管癌、肝芽腫、肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、中皮腫、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、上咽頭癌（ＮＰＣ）、神経芽細胞腫、口腔咽頭がん、口腔扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓がん、膵管腺癌、膵新生物、腺房細胞癌、前立腺がん、前立腺腺癌、皮膚がん、メラノーマ、悪性メラノーマ、皮膚メラノーマ、小腸癌、胃がん、胃癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮がん、または子宮肉腫である、請求項５１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権主張
本出願は、２０１２年１２月６日に出願された米国特許仮出願第６１／７３４，０４９号明細書、および２０１３年３月１５日に出願された米国特許仮出願第６１／７８７，３７７号明細書の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、グルタチオン等の還元剤による生物活性化に適する、ジスルフィドでマスクされたプロドラッグ化合物、組成物および方法に関する。そのようなジスルフィドベースの化合物、組成物および方法は、例えば、治療薬として使用するための新規プロドラッグを提供する上で有用となり得る。
【背景技術】
【０００３】
下記は、ある特定のプロドラッグ組成物に関する関連技術分野の考察である。考察は、次の発明の理解のためにのみ提供される。概要は、後述する研究のいずれかが、特許請求されている発明の先行技術であることを容認するものではない。
【０００４】
医薬品化学およびバイオテクノロジーの分野は、十分に実証されたインビトロ活性を有する多数の生物学的に活性な化合物を産出してきた。しかしながら、これらの化合物は、リサーチツールとしてまたはインビボでの治療剤として有用となるために、関心対象の標的細胞および組織へ有効に送達されることが必要である。多くの生物学的に活性な分子は、分子の正味の負（アニオン）電荷、サイズ、またはアニオン電荷およびサイズ両方の組み合わせにより、損なわれたインビボ活性プロファイルを有する。これらの障壁を乗り越えるための試みにおいて、種々の戦略が開発されてきた。オリゴヌクレオチド送達の場合は、ウイルス性および非ウイルス性両方の送達戦略が入り交じった結果を産出し、ほとんどが用量制限毒性または他の安全性の問題を有していた。そのような安全性の問題は、他の荷電分子を関心対象の細胞および組織へ有効に送達する上で直面する課題を代表するものである。これらの課題は、プロドラッグである分岐アプローチにおいて、革新を後押しした。
【０００５】
プロドラッグは、不活性または著しく活性が低い形態で投与される薬理学的物質である。投与されると、生物活性化と称されるプロセスにおいてインビボで代謝されて活性な代謝産物となる。プロドラッグの使用の背後にある論理的根拠は、概して、吸収、分布、代謝および排泄（ＡＤＭＥ）最適化のためである。アニオン・マスキング・プロドッグ（ｐｒｏｄｕｇｓ）は、多様な機構を介してＡＤＭＥ特性を改善するという利点を提供する化合物の新たなプラットフォームを表す。第一に、アニオン・マスキング・プロドラッグは、アニオン電荷を中和し、したがって、細胞の吸収および組織分布の障壁を乗り越える。第二に、ある特定のヌクレアーゼは、アニオン電荷に依存してそれらの基質を同定することから、アニオン・マスキング・プロドラッグは代謝を避けることができる。さらに、プロドラッグの電荷マスキング部分は、改善された標的化、免疫抑制、または溶解性プロファイルを与えることができる種々の化学的実体のための足場として働くこともできる。これらの要因のすべてが、関心対象の化合物または分子の薬物動態および薬力学的特性の改善につながり得る。
【０００６】
アニオン・マスキング・ホスホトリエステル保護基の例が開示されており、例えば、Ｌｅｂｌｅｕ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００），Ｒｕｓｓ．Ｊ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２６，１７４−１８２を参照されたい。しかしながら、このアプローチは、脱保護のために紫外線放射を利用し、故に、インビボで使用するのに適していない。Ｂｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，７２，８０５−８１５は、ある特定のホスホトリエステル・オリゴヌクレオチド・プロドラッグのインビボ生物活性化について記述している。しかしながら、このアプローチは、生物変換時に副産物としてＴＨＦを発生させる。国際公開第２０１０／０３９５４３号パンフレットは、ある特定のアニオン・マスキング・ジスルフィド・ホスホトリエステル・オリゴヌクレオチド・プロドラッグについて記述している。それにもかかわらず、これらのジスルフィドプロドラッグのシクロ脱エステル化（ｃｙｃｌｏｄｅｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）は、反応性チイラン種の放出をもたらし、これが、用量制限毒性により、そのようなプロドラッグの使用を制限し得る。
【０００７】
グルタチオン（ＧＳＨ）は、正常なペプチド結合によってグリシンに付着しているシステインのアミン基とグルタミン酸側鎖のカルボキシル基との間に異常なペプチド結合を含有するトリペプチドである。グルタチオンは、フリーラジカルおよびペルオキシド等の反応性酸素種によって引き起こされる細胞成分への損傷を防止する、重要な酸化防止剤である。グルタチオンチオール基は還元剤であり、およそ５ｍＭの濃度で細胞中に存在する。グルタチオンは、電子供与体として働くことにより、細胞質タンパク質内に形成されたジスルフィド結合を還元してシステインとする。そのプロセスにおいて、グルタチオンは、Ｌ（−）−グルタチオンとも呼ばれるその酸化形態グルタチオンジスルフィド（ＧＳＳＧ）に変換される。酸化されると、グルタチオンは、ＮＡＤＰＨを電子供与体として使用し、グルタチオンレダクターゼによって還元され得る。したがって、グルタチオンは、プロドラッグのための魅力的な生物変換還元剤である。
【０００８】
グルタチオン活性化プロドラッグのある特定の例は、例えば、Ｇｕｎｎａｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３），Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，３２，３２１−３２７およびＴｉｒｏｕｖａｎｚｉａｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６），ＰＮＡＳ，１０３，１２，４６２８−４６３３において開示されている。しかしながら、これらのグルタチオン活性化プロドラッグは、いかなるアニオン電荷マスキング能力も供与しない。したがって、インビボでの生物変換に適する、改善されたアニオン・マスキング・プロドラッグが必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２０１０／０３９５４３号パンフレット
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｌｅｂｌｅｕ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００），Ｒｕｓｓ．Ｊ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２６，１７４−１８２
【非特許文献２】Ｂｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，７２，８０５−８１５
【非特許文献３】Ｇｕｎｎａｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３），Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，３２，３２１−３２７
【非特許文献４】Ｔｉｒｏｕｖａｎｚｉａｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６），ＰＮＡＳ，１０３，１２，４６２８−４６３３
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、アニオン電荷をマスクすることができ、生物変換時に反応種の形成をもたらさないグルタチオン活性化プロドラッグ組成物および方法を提供するという問題に解決策を提供する。
【００１２】
本発明において開示されるのは、プロドラッグ化合物および組成物、ならびにそれをマスクするおよび使用する方法である。本発明のプロドラッグ化合物、組成物および方法は、アニオン電荷をマスクするための配座固定されたジスルフィドホスホトリエステル部分を特色とする。配座固定されたジスルフィドホスホトリエステル部分は、標的化部分、免疫抑制部分、溶解性増強部分等のヘルパー分子を付着させるための足場としても働くことができる。配座固定されたジスルフィドホスホトリエステル部分は、グルタチオン媒介性還元／生物変換による電荷散逸によって駆動されるシクロ脱エステル化を受けて、関心対象の活性アニオン分子を放出し、生物変換プロセス中に任意のヘルパー部分を取り出す。生物変換中に、反応性チイラン種は、分子内１，５−ｅｘｏ−ｔｅｔ閉環により内部でクエンチされて、安定なテトラヒドロチオフェンを生成する。本発明のジスルフィドホスホトリエステル部分は、核酸、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、ホルモン、小分子、抗ウイルス薬、および当技術分野において公知である他の生物学的に活性な分子の、電荷でマスクされたプロドラッグ類似体を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明のジスルフィドでマスクされたプロドラッグのための、非酵素的な化学的に駆動される放出を含む、提案されている機構の非限定的な例を示す図である。理論に拘束されることは望まないが、この機構は、（１）ｐＨ依存性ジスルフィド還元、続いて（２）電荷散逸によって駆動されるシクロ脱エステル化、続いて（３）分子内チイラン転位を含む。標的化基（ＴＧ）は、概して当技術分野において公知であり、存在していてもよいような、任意の標的化基または部分（例えば、リガンド、ペプチド、抗体等）であってよい。脱離基は、好ましくは、概して当技術分野において公知であるような五価リン脱離基であるが、当業者には容易に分かるような他の好適な脱離基（例えば、トリフレート、フルロスルホネート、トシレート、メシレート、カルボニレート、ニトレート、ホスフェート等）を包含し得る。ペイロードは、核酸、ヌクレオチド、ヌクレオシド、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、抗体、ホルモン、小分子、抗ウイルス薬および他の生物学的に活性な分子を包含する、概して当技術分野において公知であるような任意の治療的または予防的化合物等、好ましくは対象に投与される化合物である。
【図２】ＬＣＭＳによってモニターされる通り、７．３のｐＨおよび４０℃でグルタチオン（５０ｍＭ）に曝露された場合の、化合物１６−１および１６−２からのモノ−エステルの放出を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
用語および定義
下記の術語および定義は、本出願において使用されている通りに適用する。
【００１５】
本明細書および添付の請求項において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、内容上明らかに他の意味に解すべき場合を除き、複数の指示対象を包含する。故に、例えば、「細胞」への言及は、２以上の細胞の組み合わせ等を包含する。
【００１６】
あらゆる濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲または整数範囲は、別段の指示がない限り、列挙されている範囲内のあらゆる整数の値、および適切な場合には、その分数（整数の１０分の１および１００分の１等）を包含すると理解すべきである。
【００１７】
「約」または「およそ」は、数字を参照して本明細書において使用される場合、概して、別段の記載がない限り、または文脈から明らかでない限り（そのような数字が考えられる値の１００％を超える場合を除き）、数字のいずれかの方向に（それより大きいまたは小さい）５％の範囲内に収まる数字を包含すると解される。範囲が記載されている場合、別段の記載がない限りまたは文脈から明らかでない限り、終点は該範囲内に包含される。
【００１８】
用語「アルキル」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、直鎖、分枝鎖、アルケニル、アルキニル基および環式基を包含し、芳香族基を除く飽和または不飽和炭化水素を指す。上記にかかわらず、アルキルは、非芳香族ヘテロ環式基も指す。好ましくは、アルキルは、１から１２個の炭素を有する。より好ましくは、アルキルは、１から４個の炭素の低級アルキル、より好ましくは１から４個の炭素である。アルキル基は、置換されているかまたは非置換であってよい。置換されている場合、（１以上の）置換された基は、好ましくは、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、＝Ｏ、＝Ｓ、ＮＯ２、ＳＨ、ＮＨ２、またはＮＲ１Ｒ２（ここで、Ｒ１およびＲ２は、独立に、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルである）である。
【００１９】
用語「アリール」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、共役π電子系を有する少なくとも１つの環を有する芳香族基を指し、炭素環式アリール、ヘテロ環式アリールおよびビアリール基を包含し、それらはいずれも置換されていてもよい。アリール基の好ましい（１以上の）置換基は、ハロゲン、トリハロメチル、ヒドロキシル、ＳＨ、ＯＨ、シアノ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、ＮＨ２、およびＮＲ１Ｒ２基（ここで、Ｒ１およびＲ２は、独立に、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルである）である。
【００２０】
用語「アルキルアリール」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、アリール基（上述した通り）と共有結合しているアルキル基（上述した通り）を指す。炭素環式アリール基は、芳香族環上の環原子がすべて炭素原子である基である。炭素原子は、置換されていてもよい。ヘテロ環式アリール基は、芳香族環中に環原子として１から３個のヘテロ原子を有し、環原子の残りが炭素原子である基である。好適なヘテロ原子は、酸素、硫黄および窒素を包含し、そのようなヘテロ原子を有するヘテロ環式アリール基の例は、フラニル、チエニル、ピリジル、ピロリル、Ｎ−低級アルキルピロロ、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリル等を包含し、いずれも置換されていてもよい。好ましくは、アルキル基はＣ１〜Ｃ４アルキル基である。
【００２１】
用語「アミド」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ（ここで、Ｒは、アルキル、アリール、アルキルアリールまたは水素のいずれかである）を指す。
【００２２】
語句「生体系」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、該系がＲＮＡｉ活性に必要とされる成分を含む、ヒトまたは動物を包含するがこれらに限定されない生物源由来の、精製または未精製形態の材料を指す。故に、該語句は、例えば、細胞、組織、対象もしくは有機体、またはそれらの抽出物を包含する。該用語は、生物源由来の再構成された材料も包含する。
【００２３】
用語「細胞」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。本発明の例示的な核酸分子を参照すると、該用語は、その通常の生物学的意味で使用されており、多細胞生物全体を指しておらず、例えば、具体的に人間を指しているのではない。細胞は、有機体、例えば、鳥類、植物、ならびにヒト、雌ウシ、ヒツジ、類人猿、サル、ブタ、イヌおよびネコ等の哺乳動物において存在し得る。細胞は、原核（例えば、細菌細胞）または真核（例えば、哺乳類または植物細胞）でよい。細胞は、体細胞または生殖細胞系起源、全能性または多能性、分裂性または非分裂性のものであってよい。細胞は、配偶子もしくは胚、幹細胞、または完全に分化した細胞に由来するものであってもよく、またはそれらを含んでいてもよい。
【００２４】
用語「組成物」または「製剤」は、本明細書において使用される場合、当技術分野において概して認められているそれらの意味を指す。これらの用語は、概して、薬学的に許容される担体または賦形剤のように、例えばヒトを包含する細胞または対象への投与、例えば全身または局所投与に好適な形態の、組成物または製剤を指す。好適な形態は、部分的に、使用または侵入経路、例えば、経口、経皮、吸入もしくは注射によるものによって決まる。そのような形態は、組成物または製剤が標的細胞に到達するのを防止してはいけない。例えば、血流に注射される組成物は、可溶性であるべきである。他の要因が当技術分野において公知であり、組成物または製剤がその効果を発揮するのを防止する毒性および形態等の検討事項を包含する。本明細書において使用される場合、医薬製剤は、ヒトおよび獣医学への使用のための製剤を包含する。
【００２５】
用語「フォレート部分」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、下記の化学基：
【化１】
2016509575.tif 000003
【００２６】
を含む部分を指す。
【００２７】
用語「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」（ならびに、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ）」等、その任意の形態）、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（および、「有する（ｈａｓ）」または「有する（ｈａｖｅ）」等、その任意の形態）または「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（および、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」または「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」等、その任意の形態）は、包含的でありかつ制約がなく、追加の、列挙されていない要素または方法ステップを除外しない。
【００２８】
用語「リガンド」は、概して当技術分野において公知であるような化合物および組成物を指す。そのようなリガンドの非限定的な例は、参照により本明細書に具体的に組み込まれる文書を包含し、本明細書において記述されている。そのようなリガンドの非限定的な例は、米国特許出願公開第２００８／０１５２６６１号明細書および同第２００４／０１６２２６０号明細書（例えば、ＣＤＭ−ＬＢＡ、ＣＤＭ−Ｐｉｐ−ＬＢＡ、ＣＤＭ−ＰＥＧ、ＣＤＭ−ＮＡＧ等）、ならびに米国特許出願第１０／４２７，１６０号明細書、同第１０／２０１，３９４号明細書、同第６１／３２２，４２２号明細書、同第６１／３７８，６０９号明細書および同第６１／３１５，２２３号明細書；ならびに米国特許第６，５２８，６３１号明細書；同第６，３３５，４３４号明細書；同第６，２３５，８８６号明細書；同第６，１５３，７３７号明細書；同第５，２１４，１３６号明細書；および同第５，１３８，０４５号明細書において記述されている。Ｍａｎｏｈａｒａｎ，ＡＮＴＩＳＥＮＳＥ＆ＮＵＣＬＥＩＣ  ＡＣＩＤ  ＤＲＵＧ  ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ  １２：１０３−１２８（２００２）も参照されたい。本発明のプロドラッグ分子を、本明細書において記述されているまたは当技術分野において公知の任意の共有結合しているリガンドとともに、製剤化または投与してよい。
【００２９】
用語「リンカー」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において公知であるような意味を指す。リンカーの非限定的な例は、例えば表１において、および参照により本明細書に具体的に組み込まれる文書において含み、本明細書において記述されている。
【表１】
2016509575.tif 000004
【００３０】
用語「哺乳類」または「哺乳動物」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、ヒト、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ハムスター、モルモット、ウサギ、家畜等の任意の温血脊椎動物種を指す。
【００３１】
用語「Ｎ−アセチルガラクトサミン部分」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、下記の化学基：
【化２】
2016509575.tif 000005
【００３２】
を含む部分を指す。
【００３３】
用語「ヌクレオシド」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指し、概して当業者に公知であるようなヌクレオシド類似体、またはその核酸塩基類似体を包含する。本発明のプロドラッグ用途に適し得るヌクレオシドベースの治療化合物（および対応する適応症）の非限定的な例は、以下の表２において記述されているものを包含し、例えば、Ｅｒｒａｓｔｉ−Ｍｕｒｕｇａｒｒｅｎ  ａｎｄ  Ｐａｓｔｏｒ−Ａｎｇｌａｄａ（２０１０），Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ，１１（６），８０９−８４１を参照されたい。
【表２】
2016509575.tif 000006
【００３４】
2016509575.tif 000007
【００３５】
用語「ペプチド部分」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、１以上のペプチド官能基を有する部分を指す。
【００３６】
用語「ポリマー」は、概して当技術分野において公知であるような、高分子化合物、組成物および製剤を指す。高分子送達系を包含するそのようなポリマーの非限定的な例は、参照により本明細書に具体的に組み込まれる文書におけるものを包含し、本明細書において記述されている。本発明の分子または化合物は、本明細書において記述されているまたは当技術分野において公知の任意のポリマーとともに、製剤化または投与してよい。
【００３７】
用語「ステロイド部分」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、コレステロール等の１以上のステロイド官能基を有する部分を指す。
【００３８】
用語「対象」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、本発明の核酸分子を投与することができる有機体を指す。対象は、ヒトまたはヒト細胞を包含する哺乳動物または哺乳類細胞であってよい。該用語は、外植された細胞のドナーもしくはレシピエントである有機体または細胞自体も指す。
【００３９】
語句「全身投与」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該語句は、概して、血流中における薬物のインビボ全身吸収または蓄積、続いて全身にわたる分布を指す。
【００４０】
用語「標的化剤」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、対象または有機体におけるような、１以上の細胞、組織または臓器に、ある程度の標的特異性を与え、故に、そのような細胞、組織または臓器を、関心対象の化合物または組成物で標的化する能力を与える部分を指す。
【００４１】
語句「治療有効量」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、研究者、獣医、医師または他の臨床家が求める、細胞、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発するであろう化合物または組成物の量を指す。例えば、疾患または障害に関連する測定可能なパラメータにおいて少なくとも２５％の低減がある場合に所与の臨床治療が有効とみなされるならば、その疾患または障害の治療のための薬物の治療有効量は、そのパラメータにおいて少なくとも２５％の低減を達成するために必要な量である。
【００４２】
用語「ビタミン部分」は、本明細書において使用される場合、概して当技術分野において認められているようなその意味を指す。該用語は、概して、葉酸、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＤ、ビタミンＢ５、ビタミンＢ１２等の１以上のビタミン官能基を有する部分を指す。
【００４３】
Ｂ．化合物
本明細書で提供されるのは、式Ｉを有する化合物：
【化３】
2016509575.tif 000008
【００４４】
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；
ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；
Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ９は、Ｏ−アリール、Ｏ−フェニル、Ｏ−ナフチル、Ｏ−アルキル−アリールもしくはＯ−ベンジル（そのいずれも、１以上のハロ基で置換されていてよい）；またはアミン、置換アミン、ＮＨ−ベンジル、ＮＨＲ１２もしくはＮ（Ｒ１２）２であり、ここで、各Ｒ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキル、または１以上のハロ基で置換されているＣ１〜１０アルキルであり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］
である。
【００４５】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、Ｒ９は：
【化４】
2016509575.tif 000009
【００４６】
である。
【００４７】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、Ｒ９は：
【化５】
2016509575.tif 000010
【００４８】
である。
【００４９】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、Ｒ９は：
【化６】
2016509575.tif 000011
【００５０】
である。
【００５１】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、Ｒ９は：
【化７】
2016509575.tif 000012
【００５２】
である。
【００５３】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、Ｒ９は：
【化８】
2016509575.tif 000013
【００５４】
である。
【００５５】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化９】
2016509575.tif 000014
【００５６】
である。
【００５７】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１０】
2016509575.tif 000015
【００５８】
である。
【００５９】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１１】
2016509575.tif 000016
【００６０】
である。
【００６１】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１２】
2016509575.tif 000017
【００６２】
［式中、Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、リガンドおよび／またはポリマーである］
である。
【００６３】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１３】
2016509575.tif 000018
【００６４】
である。
【００６５】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物に関して、ＮＵＣは：
【化１４】
2016509575.tif 000019
2016509575.tif 000020
2016509575.tif 000021
2016509575.tif 000022
2016509575.tif 000023
である。
【００６６】
ある特定の実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１５】
2016509575.tif 000024
2016509575.tif 000025
2016509575.tif 000026
2016509575.tif 000027
2016509575.tif 000028
2016509575.tif 000029
2016509575.tif 000030
である。
【００６７】
一実施形態において、式Ｉを有する化合物は：
【化１６】
2016509575.tif 000031
【００６８】
である。
【００６９】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ９は：
【化１７】
2016509575.tif 000032
【００７０】
である。
【００７１】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ９は：
【化１８】
2016509575.tif 000033
【００７２】
である。
【００７３】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ９は：
【化１９】
2016509575.tif 000034
【００７４】
である。
【００７５】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ９は：
【化２０】
2016509575.tif 000035
【００７６】
である。
【００７７】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ９は：
【化２１】
2016509575.tif 000036
【００７８】
である。
【００７９】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ１０はＯである。
【００８０】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ１０はＳである。
【００８１】
ある特定の実施形態において、上記式Ｉを有する任意の化合物に関して、Ｒ１はＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである。
【００８２】
本明細書において、式ＩＩを有する化合物：
【化２２】
2016509575.tif 000037
【００８３】
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして、
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］も提供される。
【００８４】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化２３】
2016509575.tif 000038
【００８５】
である。
【００８６】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化２４】
2016509575.tif 000039
【００８７】
である。
【００８８】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化２５】
2016509575.tif 000040
【００８９】
である。
【００９０】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化２６】
2016509575.tif 000041
【００９１】
［式中、Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、リガンドおよび／またはポリマーである］
である。
【００９２】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化２７】
2016509575.tif 000042
【００９３】
である。
【００９４】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物に関して、
【化２８】
2016509575.tif 000043
【００９５】
は：
【化２９】
2016509575.tif 000044
【００９６】
2016509575.tif 000045
【００９７】
2016509575.tif 000046
【００９８】
2016509575.tif 000047
【００９９】
である。
【０１００】
ある特定の実施形態において、式ＩＩを有する化合物は：
【化３０】
2016509575.tif 000048
2016509575.tif 000049
2016509575.tif 000050
2016509575.tif 000051
2016509575.tif 000052
2016509575.tif 000053
である。
【０１０１】
ある特定の実施形態において、上記式ＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｒ１０はＯである。
【０１０２】
ある特定の実施形態において、上記式ＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｒ１０はＳである。
【０１０３】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｒ１はＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである。
【０１０４】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは、１以上のＮ−アセチルガラクトサミン部分を含む。
【０１０５】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは、１以上のフォレート部分を含む。
【０１０６】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは、１以上のペプチド部分を含む。
【０１０７】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは、１以上のステロイド部分を含む。
【０１０８】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは、１以上のビタミンまたは補因子部分を含む。
【０１０９】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３１】
2016509575.tif 000054
【０１１０】
［式中、ｎは、１から１００の間の整数である］
を含む。
【０１１１】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３２】
2016509575.tif 000055
【０１１２】
［式中、ｎは、１から１００の間の整数である］
を含む。
【０１１３】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３３】
2016509575.tif 000056
【０１１４】
［式中、各ｎは、独立に、１から２０までの整数である］
を含む。
【０１１５】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３４】
2016509575.tif 000057
【０１１６】
［式中、各ｎは、独立に、１から２０までの整数である］
を含む。
【０１１７】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３５】
2016509575.tif 000058
【０１１８】
［式中、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＲ１１Ｒ１２−または−ＮＲ１１−であり、ここで、Ｒ１１およびＲ１２は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され；ｎは、１、２、３または４である］
を含む。
【０１１９】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｙは：
【化３６】
2016509575.tif 000059
【０１２０】
を含む。
【０１２１】
ある特定の実施形態において、上記式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物に関して、Ｌは、アルキル、カルボニル、アミド、ホスフェート、ホスフェートエステル、ホスホラミデート、チオホスフェートエステル、ジスルフィドまたはポリアルクレングリコール結合を含むリンカーである。
【０１２２】
ある特定の実施形態において、本発明は、上記の式ＩもしくはＩＩを有する任意の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグを含む、組成物を特色とする。
【０１２３】
ある特定の実施形態において、本発明は、上記の式ＩまたはＩＩを有する任意の化合物と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む、組成物を特色とする。
【０１２４】
Ｃ．治療用途
ある特定の用途において、本発明の化合物および組成物は、治療的使用に適用される。
【０１２５】
故に、本発明の一態様は、疾患または症状に罹患している、ヒトを包含するがこれに限定されない対象を治療する方法であって、前記対象に、有効量の本発明の化合物または組成物を投与するステップを含む方法を含む。この態様の一実施形態において、化合物は、本明細書における式ＩまたはＩＩのいずれかを含む。
【０１２６】
ある特定の実施形態において、本発明は、それを必要とする患者の治療用薬剤の製造のための、治療有効量の上記式ＩもしくはＩＩを有する少なくとも１つの化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用を特色とする。
【０１２７】
ある特定の実施形態において、本発明は、それを必要とする患者の治療のための、治療有効量の上記式ＩもしくはＩＩを有する少なくとも１つの化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用を特色とする。
【０１２８】
ある特定の実施形態において、本発明は、それを必要とする患者におけるウイルス感染症の治療のための、治療有効量の上記式ＩもしくはＩＩを有する少なくとも１つの化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用を特色とする。そのようなウイルス感染症の非限定的な例は、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＳＶまたはＨＩＶ感染症を包含する。
【０１２９】
ある特定の実施形態において、本発明は、それを必要とする患者におけるがんの治療のための、治療有効量の上記式ＩもしくはＩＩを有する少なくとも１つの化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用を特色とする。そのようながんの非限定的な例は、ビラリー（ｂｉｌａｒｙ）管がん、膀胱がん、移行細胞癌、尿路上皮癌、脳腫瘍、グリオーマ、星状細胞腫、乳癌、化生性癌、子宮頸がん、子宮頸部扁平上皮癌、直腸がん、結腸直腸癌、結腸がん、遺伝性の非ポリポーシス結腸直腸がん、結腸直腸腺癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮内膜癌、子宮内膜間質肉腫、食道がん、食道扁平上皮癌、食道腺癌、眼メラノーマ、ぶどう膜メラノーマ、胆嚢癌、胆嚢腺癌、腎細胞癌、明細胞腎細胞癌、移行細胞癌、尿路上皮癌、ウィルムス腫瘍、白血病、急性リモサイティック白血病（ａｃｕｔｅ  ｌｙｍｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性（ＣＬＬ）、慢性骨髄性（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性（ＣＭＭＬ）、肝臓がん、肝癌、肝細胞腫、肝細胞癌、胆管癌、肝芽腫、肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、中皮腫、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、上咽頭癌（ＮＰＣ）、神経芽細胞腫、口腔咽頭がん、口腔扁平上皮癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓がん、膵管腺癌、膵新生物、腺房細胞癌、前立腺がん、前立腺腺癌、皮膚がん、メラノーマ、悪性メラノーマ、皮膚メラノーマ、小腸癌、胃がん、胃癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮がん、または子宮肉腫を包含する。
【０１３０】
この態様のいくつかの実施形態において、治療的使用は、疾患または症状の治療のためである。疾患または症状は、本明細書において記述されているまたは当技術分野において公知の、がん、増殖性、炎症性、自己免疫性、神経、眼、呼吸、代謝、皮膚科学的、聴覚、肝臓、腎臓、または感染性疾患であってよい。故に、ある特定の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、がん、増殖性、炎症性、自己免疫性、神経、眼、呼吸、代謝、皮膚科学的、聴覚、肝臓、腎臓、または感染性疾患を治療するための方法において有用となり得る。
【０１３１】
ある特定の実施形態において、化合物または組成物の投与は、局所投与または全身投与によるものであってよい。他の実施形態において、本発明は、対象または有機体を、本発明の化合物または組成物と、肺送達を介するような肺細胞および組織等の関連組織または細胞への局所投与によって、接触させることを特色とする。さらに他の実施形態において、本発明は、対象または有機体を、本発明の化合物または組成物と、対象または有機体における関連組織または細胞への全身投与によって（静脈内または皮下投与を介するような）接触させることを特色とする。
【０１３２】
本発明の化合物および組成物は、エクスビボ用途における試薬として使用することもできる。例えば、化合物または組成物を、治療効果のために対象に移植される組織または細胞に導入してよい。細胞および／または組織は、外植を後に受ける有機体または対象に由来するものであってもよいし、移植前の別の有機体または対象に由来するものであってもよい。化合物または組成物を使用して、細胞または組織における１以上の遺伝子の発現を調節することができ、それにより、細胞または組織は、所望の表現型を取得するか、またはインビボで移植された際に機能を実施することができる。一実施形態において、患者からある特定の標的細胞が抽出される。これらの抽出された細胞は、細胞内の特異的なヌクレオチド配列を標的とする本発明の化合物と、これらの細胞による化合物の取り込みに好適な条件下で接触する（例えば、カチオン性脂質、リポソーム等の送達試薬を使用して、または細胞への化合物の送達を容易にするエレクトロポレーション等の技術を使用して）。次いで、細胞を、同じ患者または他の患者に再導入する。
【０１３３】
治療用途では、薬学的有効用量の本発明の化合物または医薬組成物が対象に投与される。薬学的有効用量は、病状を予防する、その発生を阻害する、または治療する（症状をある程度、好ましくは症状のすべてを緩和する）ために必要とされる用量である。当業者ならば、対象のサイズおよび体重、疾患進行または浸透の程度、対象の年齢、健康および性別、投与ルート等の要因を考慮することにより、投与が局所的であるか全身的であるかにかかわらず、所与の対象に投与すべき本発明の化合物または組成物の治療有効用量を容易に決定することができる。概して、１日当たり体重１ｋｇにつき０．１μｇから１４０ｍｇの間の量の活性原料が、本開示の化合物の効力に応じて投与される。単一剤形を生成するために担体材料と組み合わせることができる活性原料の量は、治療されている宿主および特定の投与モードに応じて変動する。最適な投薬スケジュールは、患者の体内における薬物蓄積の測定から算出され得る。本発明の化合物および組成物は、単回用量でまたは複数回用量で投与され得る。
【０１３４】
本発明の化合物または組成物は、月１回、週１回、１日１回（ＱＤ）投与されるか、あるいは、例えば、限定されないが、１日２回（ＢＩＤ）、１日３回（ＴＩＤ）、２週毎に１回のように、複数の月、週、または日用量に分割され得る。当業者であれば、測定された滞留時間および体液または組織中における薬物の濃度に基づいて、投薬の繰返し速度を簡単に推定することができる。
【０１３５】
加えて、投与は、連続的、すなわち毎日、または間欠的であってよい。例えば、本発明の化合物の間欠投与は、１週間当たり１から６日の投与であってよく、またはサイクルでの投与（例えば、連続した２から８週間の連日投与、次いで最大１週間の投与しない休眠期間）を意味していてよく、または隔日での投与を意味していてよい。
【０１３６】
Ｄ．投与
本発明の組成物または製剤は、多様な手法で投与され得る。本発明の投与方法の非限定的な例は、経口、口腔、舌下、非経口（すなわち、関節内、静脈内、腹腔内、皮下、または筋肉内）、局所直腸投与または他の局所投与を包含する。一実施形態において、本発明の組成物は、注入および吸入によって投与され得る。投与は、単回または分割用量により遂行され得る。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ボーラス注射によって静脈内にまたは腹腔内に投与される（例えば、米国特許第５，２８６，６３４号明細書を参照）。
【０１３７】
ビヒクルを加えたまたは加えない本発明の組成物を、直接注射または注入ポンプの使用によって局所的に送達してよい。本開示の化合物および組成物の直接注射は、皮下、筋肉内または皮内のいずれであるかにかかわらず、標準的な針およびシリンジ方法論を使用して、または、Ｃｏｎｒｏｙ  ｅｔ  ａｌ，（１９９９，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５：２３３０）および国際公開第９９／３１２６２号パンフレットにおいて記述されているもの等の無針技術によって、起こり得る。例えば、限定されないが、本発明の化合物を含む脂質粒子を、疾患部位への直接注射によって、または疾患部位から遠位の部位への注射によって投与してよい（例えば、Ｃｕｌｖｅｒ，ＨＵＭＡＮ  ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲＡＰＹ，ＭａｒｙＡｎｎ  Ｌｉｅｂｅｒｔ，Ｉｎｃ．，Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．ｐｐ．７０−７１（１９９４）を参照）。一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤または組成物は、本明細書において記述されている、そして、概して当技術分野において公知である、細胞、対象または有機体に投与される。
【０１３８】
インビボ投与
本発明の治療方法のいずれかにおいて、化合物は、対象に、単剤療法として単独で、またはここで記述されているもしくは当技術分野において公知の追加の療法と組み合わせて、ここで記述されているまたは当技術分野において公知のように、全身的に投与され得る。全身投与は、例えば、概して当技術分野において公知であるような、肺（吸入、噴霧化等）静脈内、皮下、筋肉内、カテーテル挿入、鼻咽頭、経皮、または経口／胃腸投与を包含し得る。
【０１３９】
本発明の治療または予防方法のいずれかにおいて、化合物は、対象に、単剤療法として単独でまたは当技術分野において公知の追加の療法と組み合わせて、局所的に、または、ここで記述されているもしくは当技術分野において公知のように、局所組織に投与され得る。局所投与は、例えば、概して当技術分野において公知であるような、吸入、噴霧化、カテーテル挿入、埋め込み、直接注射、真皮／経皮適用、パッチ、ステント留置術、点耳／点眼薬、または関連組織への門脈投与、あるいは任意の他の局所投与技術、方法または手順を包含し得る。
【０１４０】
一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤または組成物は、概して当技術分野において公知のように、肝臓に投与される（例えば、Ｗｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，１０，２４４−９；Ｍｕｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．，１９，１８０８−１４；Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０，１８０−７；Ｈｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５４，５１−８；Ｈｅｒｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ａｒｃｈ  Ｖｉｒｏｌ．，１４９，１６１１−７；およびＭａｔｓｕｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０，１５５９−６６を参照）。
【０１４１】
一実施形態において、本発明は、本発明の化合物を、単球およびリンパ球を包含する造血細胞へ送達する方法の使用を特色とする。これらの方法は、Ｈａｒｔｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｊ．Ｐｈａｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２８５（２），９２０−９２８；Ｋｒｏｎｅｎｗｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｂｌｏｏｄ，９１（３），８５２−８６２；Ｆｉｌｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，１９９７，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．，１３２９（２），３４５−３５６；Ｍａ  ａｎｄ  Ｗｅｉ，１９９６，Ｌｅｕｋ．Ｒｅｓ．，２０（１１／１２），９２５−９３０；およびＢｏｎｇａｒｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２２（２２），４６８１−８において詳細に記述されている。
【０１４２】
一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤または組成物は、概して当技術分野において公知のように、真皮または濾胞へ直接的にまたは局部的に（例えば、局所的に）投与される（例えば、Ｂｒａｎｄ，２００１，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，３，２４４−８；Ｒｅｇｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ，５，２７５−８９；Ｋａｎｉｋｋａｎｎａｎ，２００２，ＢｉｏＤｒｕｇｓ，１６，３３９−４７；Ｗｒａｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．，９０，８９−１０４；およびＰｒｅａｔ  ａｎｄ  Ｄｕｊａｒｄｉｎ，２００１，ＳＴＰ  ＰｈａｒｍａＳｃｉｅｎｃｅｓ，１１，５７−６８を参照）。一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤または組成物は、アルコール（例えば、エタノールまたはイソプロパノール）、水を含み、ミリスチン酸イソプロピルおよびカルボマー９８０のような追加の物質を包含していてもよい、含水アルコールゲル製剤を使用して、直接的にまたは局部的に投与される。他の実施形態において、化合物は、鼻腔へ局部的に投与されるように製剤化される。局部用調製物を、患部への１日当たり１以上の適用によって投与してよく、有利には、皮膚領域を覆う密封包帯を使用してよい。連続的または持続的送達は、接着性貯留系（ａｄｈｅｓｉｖｅ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ  ｓｙｓｔｅｍ）によって実現され得る。
【０１４３】
一実施形態において、本発明の化合物は、例えば特定の臓器または区画（例えば、眼、眼底、心臓、肝臓、腎臓、膀胱、前立腺、腫瘍、ＣＮＳ等）へ、イオントフォレーシスで投与される。イオントフォレーシス送達の非限定的な例は、例えば、国際公開第０３／０４３６８９号パンフレットおよび国際公開第０３／０３０９８９号パンフレットにおいて記述されており、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１４４】
一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤または組成物は、ここで記述されているように、かつ概して当技術分野において公知であるように、肺に投与される。別の実施形態において、本発明のｓｉＮＡ分子およびその製剤または組成物は、米国特許出願公開第２００６／００６２７５８号明細書；同第２００６／００１４２８９号明細書；および同第２００４／００７７５４０号明細書において記述されているように、肺組織および細胞に投与される。
【０１４５】
エアゾールおよび送達デバイス
エアゾール製剤
本発明の化合物を、単独でまたは他の好適な成分と組み合わせて、吸入により（例えば、鼻腔内または気管内）投与されるエアゾール製剤にしてよい（すなわち、該化合物を「噴霧化」してよい）（Ｂｒｉｇｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｓｃｉ．，２９８：２７８（１９８９）を参照）。エアゾール製剤を、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素のような加圧した許容される噴射剤に入れてよい。
【０１４６】
一実施形態において、本発明の化合物およびその製剤は、吸入デバイスまたはネブライザによって投与されるエアゾールまたはスプレー乾燥製剤の吸入のような、肺送達により投与され、関連肺組織への核酸分子の迅速な局所取り込みを提供する。微粒化化合物の呼吸可能な乾燥粒子を含有する固体粒子組成物は、乾燥または凍結乾燥した組成物を粉砕し、次いで、微粒化組成物を、例えば４００メッシュのスクリーンに通過させて、大きな凝集体を解体または分離除去することによって調製され得る。本発明の化合物を含む固体粒子組成物は、エアゾールおよび他の治療化合物の形成を容易にする働きをする分散剤を含有していてもよい。好適な分散剤はラクトースであり、これを、重量で１対１比率のような任意の好適な比率で化合物と混和してよい。
【０１４７】
本発明の化合物または組成物を含むスプレー組成物は、例えば、水溶液もしくは懸濁液として、または、好適な液化した噴射剤の使用により定量吸入器のような加圧パックから送達されるエアゾールとして、製剤化され得る。一実施形態において、吸入に好適な本発明のエアゾール組成物は、懸濁液または溶液のいずれかであってよく、概して、本発明の化合物と、好適な噴射剤、例えばフルオロカーボンもしくは水素含有クロロフルオロカーボンまたはそれらの混合物、特にヒドロフルオロアルカン、とりわけ、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンまたはそれらの混合物とを含有する。エアゾール組成物は、当技術分野において周知の追加の製剤添加剤、例えば、界面活性剤を含有していてもよい。非限定的な例は、オレイン酸、レシチンもしくはオリゴ乳酸、または誘導体、例えば、国際公開第９４／２１２２９号パンフレットおよび国際公開第９８／３４５９６号パンフレットにおいて記述されているもの、ならびに共溶媒、例えばエタノールを包含する。一実施形態において、本発明の医薬エアゾール製剤は、本発明の化合物と噴射剤としてのフルオロカーボンもしくは水素含有クロロフルオロカーボンまたはそれらの混合物とを含み、界面活性剤および／または共溶媒と組み合わせてもよい。
【０１４８】
本発明のエアゾール製剤は、好適な緩衝剤の添加によって緩衝化してよい。
【０１４９】
エアゾール製剤は、製剤が無菌に調製されていないならば、保存剤を包含する任意の添加物を包含し得る。非限定的な例は、ヒドロキシ安息香酸メチル、酸化防止剤、香料、揮発性油、緩衝剤および乳化剤ならびに他の製剤界面活性剤を包含する。一実施形態において、劣化を低減させより安全な本発明の生体適合性非液体粒子懸濁組成物を提供するために、フルオロカーボンまたはペルフルオロカーボン担体が使用される。別の実施形態において、ネブライザを含むデバイスは、静菌性であるフルオロケミカルを含む本発明の組成物を送達し、それにより、適合性デバイスにおける微生物増殖の可能性を減少させる。
【０１５０】
吸入器または注入器において使用するための本発明の組成物を含むカプセルおよびカートリッジ、例えばゼラチンは、本発明の化合物の吸入用の混合粉体とラクトースまたはデンプンのような好適な散剤基剤とを含有して製剤化され得る。一実施形態において、各カプセルまたはカートリッジは、本発明の化合物および１以上の添加剤を含有する。別の実施形態において、本発明の化合物は、ラクトースのような添加剤を加えずに提供され得る。
【０１５１】
本発明のエアゾール組成物を、呼吸可能なサイズの粒子、例えば、吸入時に鼻、口および喉頭を、ならびに肺の気管支および肺胞を通過するのに十分小さいサイズの粒子を包含する製剤として呼吸器系に投与してよい。概して、呼吸可能な粒子は、約０．５から１０ミクロンまでのサイズの範囲である。一実施形態において、粒子範囲は、１から５ミクロンまでであってよい。別の実施形態において、粒子範囲は、２から３ミクロンまでであってよい。エアゾールに包含されている呼吸不可能なサイズの粒子は、喉に堆積し、飲み込まれる傾向にあり、故に、エアゾール中における呼吸不可能な粒子の分量は最小化される。経鼻投与では、１０〜５００ｕｍの範囲内の粒径が、鼻腔における保持を確実にするために好ましい。
【０１５２】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、例えば、鼻炎の治療のために、加圧ポンプによってまたは噴霧化によって鼻に投与される加圧したエアゾール製剤、水性製剤により、鼻に局部的に投与される。好適な製剤は、この目的のため、賦形剤または担体として水を含有し得る。ある特定の実施形態において、肺または鼻への本発明の組成物の投与のための水性製剤は、緩衝剤、張性調節剤などの従来の添加剤とともに提供される。
【０１５３】
デバイス
本発明の化合物は、上記で論じたように粒子および／またはエアゾールとして製剤化および送達され、当業者に公知の種々のエアゾール化デバイスから分注され得る。
【０１５４】
本発明の化合物または製剤を含む液体または非液体粒子のエアゾールは、超音波またはエア・ジェット・ネブライザのようなネブライザ（例えば米国特許第４，５０１，７２９号明細書を参照）を含むデバイスのような任意の好適な手段によって生成することができる。
【０１５５】
本発明の化合物または製剤と界面活性剤とを含む固体粒子エアゾールは、任意の固体粒子エアゾール発生器を用いて生成され得る。本発明の化合物で使用される１つのタイプの固体粒子エアゾール発生器は、注入器である。第二のタイプの例証的なエアゾール発生器は、定量吸入器（「ＭＤＩ」）を含む。本明細書において教示されている化合物または製剤を含有するＭＤＩは、当技術分野の方法によって調製され得る（例えば、上記Ｂｙｒｏｎ、および国際公開第９６／３２０９９号パンフレットを参照）。
【０１５６】
化合物は、国際公開第０５／０４４３５４号パンフレットにおいて記述され例証されているもののように、流体ディスペンサからの送達のための流体製剤として製剤化してもよい。
【０１５７】
本発明のある特定の実施形態において、ネブライザデバイスは、意識的な自発呼吸下の対象のための、およびあらゆる年齢の制御された人工呼吸器をつけている対象のための用途において使用される。ネブライザデバイスは、肺への標的局部および全身薬物送達に使用され得る。一実施形態において、ネブライザを含むデバイスは、本発明の化合物または製剤を、肺または肺組織へ局所的に送達するために使用される。別の実施形態において、ネブライザを含むデバイスは、本発明の化合物または製剤を全身的に送達するために使用される。
【０１５８】
Ｅ．実施例
ここで、本発明を、下記の非限定的な例を用いて例証する。当業者であれば、本質的に同じ結果を産出するよう変更または修正され得る、多様な重大でないパラメータを容易に認識するであろう。
【０１５９】
化学
グルタチオン（１−１、ＧＳＨ、スキーム１）は、アミノ酸グリシン、システインおよび異常に結合した（γ−）グルタミン酸からなる天然に発生する水溶性トリペプチドである。グルタチオンは、簡易酸化を受けて二量体を形成する（１−２、グルタチオンジスルフィド、ＧＳＳＧ、スキーム１）ことができ、それ故、強力な還元剤である。その還元型に存在する遊離チオール基は活性求核試薬であり、したがって、ＧＳＨは、反応性求電子試薬をクエンチする際にも有効である。これらの特性はいずれも、フリーラジカル、ペルオキシドおよび他の毒素によって提示される酸化ストレスから細胞を保護するというその主な役割にとって良い前兆である（Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ｅ．，「Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ：ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ」，Ｃｈｅｍｉｃｏ−Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  １１１−１１２，１−１４，１９９８を参照）。
【０１６０】
スキーム１
【化３７】
2016509575.tif 000060
【０１６１】
グルタチオンのほとんどは、細胞質中に還元モノマー１−１の形態で存在し、二量体の量は通常１％を超えない。この高度に還元的な細胞内環境は、ＮＡＤＰＨ依存性グルタチオンジスルフィドレダクターゼの作用によって維持される。グルタチオン自体は、その構成要素から、ＡＴＰ依存性グルタメート−システインリガーゼおよびグルタチオンシンターゼにより、細胞の内側でのみ合成される。異常なγ−グルタメート結合の存在は、ＧＳＨをほとんどの異化作用ペプチダーゼに対して抵抗性にし、高い細胞内安定性をもたらす。その劣化は、細胞外空間において動作するγ−グルタミルトランスペプチアーゼ（ｔｒａｎｓｐｅｐｔｉａｓｅ）（γ−ＧＴ）によって媒介される。これは、最終的に、グルタチオンの細胞内の偏在的な存在およびやや低い細胞外濃度につながる（Ｔｏｗｎｓｅｎｄ，Ｄ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ，「Ｔｈｅ  Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｏｆ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｉｓｅａｓｅ」，Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５７，１４５−１５５，２００３）。驚くことではないが、グルタチオンの細胞内濃度上昇が腫瘍細胞において検出され、この上方調節は、放射線および化学療法に対する抵抗性につながる細胞形質転換の重要な成分であるとみなされる（Ｓｉｎｇｈ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，「Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，９，３０３−３１６，２０１２）。
【０１６２】
グルタチオンの細胞内での普遍的な存在および細胞外での非存在は、活性薬物成分の不活性なプロドラッグ形態からの細胞内放出に活用され得る潜在的に有用な化学的トリガーを提供する。加えて、この化学的な非酵素的放出トリガーを標的化リガンドと結合させることにより、組織特異的な方式で治療に関連する細胞内標的と係合するための魅力的なアプローチを供与する。そのようなアプローチの例は、標的化リガンド（葉酸）が、連結した還元的に開裂されたジスルフィドを介して化学療法的に活性なペイロード（ビンブラスチン）と結合されている、ビンタフォリドであり、Ｄｏｓｉｏ，Ｆ．，ｅｔ  ａｌ，「ＥＣ−１４５，ａ  ｆｏｌａｔｅ−ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｖｉｎｃａ  ａｌｋａｌｏｉｄ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｏｌａｔｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒｓ」，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ，１１（１２）：１４２４−３３，２０１０を参照されたい。
【０１６３】
線状ジスルフィド結合は、種々の共役技術において、生物的に還元可能なリンカーとして使用されてきた（Ｓａｉｔｏ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ，「Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  Ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ  Ｃｏｉｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ｖｉａ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｌｉｎｋａｇｅｓ：Ｒｏｌｅ  ａｎｄ  Ｓｉｔｅ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ」，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，５５，１９９−２１５，２００３）。例えば、トラベルサ・セラピューティクスは、国際公開第２０１００３９５４３号パンフレット（２０１０）において、オリゴヌクレオチドをプロドラッグ化する線状ジスルフィドベースの放出機構について記述した。これによると、エトキシエチルリンカーにより脱離基（この例ではホスホジエステル）と結合したジスルフィド結合は、スキーム２のチオモルホリン（２−３）のコンコミッタント（ｃｏｎｃｏｍｍｉｔｔａｎｔ）放出により、還元的にマスクを外され得る。しかしながら、線状ジスルフィドの高い反応性は、このアプローチを、小分子に適用する場合に実現困難なものとしている。
【０１６４】
スキーム２
【化３８】
2016509575.tif 000061
【０１６５】
Ｓｔａｎｄｒｉｎｇ，Ｎ．Ｄら（アイデニックス・ファーマシューティカルズ）は、小分子に関係する同様のシクロ脱エステル化によって駆動される放出機構について記述した（Ｇｌｏｂａｌ  Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｊ．，Ｓｕｐｐｌ．１：２２，２００９）。これによると、ヌクレオシドプロドラッグ３−１の酵素的エステル開裂の後に、チイラン（３−３）の放出による３−２の自発的シクロ脱エステル化が続く。スキーム３。
【０１６６】
スキーム３
【化３９】
2016509575.tif 000062
【０１６７】
同様の脱エステル化は、Ｅ．Ｇｕｎｉｃら（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１７，２４５２−２４５５，２００７）によっても報告された。同じく、ヌクレオシド４−１の酵素媒介性エステル開裂は、不安定なホスホトリエステル４−２を生成し、これが、反応性チイラン３−３の同時形成とともに環式３’−５’−ホスホジエステル４−３を自発的に放出した。１回の追加の酵素媒介性ホスホジエステル開裂により、モノホスフェート４−４を生成した、スキーム４。
【０１６８】
これらの手順はいずれも、実施例３−２および４−２において存在するチオエトキシ基が発生したプロセスを問わず、脱離基（この場合はホスフェート）と結合されていれば自発的な排出を受け、反応性の潜在的に毒性のチイラン（３−３）が生成されることを示唆している。加えて、最初の脱エステル化は偏在的なエステラーゼによって媒介され、組織選択的放出を実現することは困難である。
【０１６９】
スキーム４
【化４０】
2016509575.tif 000063
【０１７０】
本明細書において開示されているプロドラッグは、上記で論じたもののような公知のプロドラッグよりも大きな利点を有する。図１に示す通り、グルタチオン媒介性還元によって５−１から発生したもののように、負に帯電した硫黄含有種は、同様に挙動し、電荷散逸によって駆動されるシクロ脱エステル化を受けることになる。これは、治療的に関連する薬物（「ペイロード」、５−４）の排出につながり、反応性チイランは、１，５−ｅｘｏ−ｔｅｔ閉環により自己クエンチして、５−３のような安定なテトラヒドロチオフェン誘導体を生成することになる。
【０１７１】
線状ジスルフィドとは対照的に、ジチオスレイトール誘導体５−１内に含有されている環式ジスルフィドは化学的に安定であり、このプロドラッグアプローチを、細胞内送達が望ましい治療に関連する分子に適用することができる。細胞質の還元的環境と細胞外空間の中性環境との間の明確な区別は、細胞膜を横断した後のみの部位特異的薬物放出にとって良い前兆である。
【０１７２】
ホスフェートプロドラッグ
本発明者らは、十分に確立された抗ウイルス（ＨＣＶ）特性を持つヌクレオシド：２’−Ｃ−メチル−７−デアザアデノシン（６−１ａ、スキーム６、Ｏｌｓｅｎ，Ｄ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ「Ａ  ７−Ｄｅａｚａ−Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇ  Ｉｓ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ」，４８（１０），３９４４，２００４およびＥｌｄｒｕｐ，Ａ．Ｂ．；ｅｔ  ａｌ．，「Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｏｆ  ｐｕｒｉｎｅ  ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ｆｏｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４７（２１），５２８４，２００４を参照）ならびに２’−Ｃ−メチル−ウリジン（６−１ｂ、スキーム６）を使用してホスフェート脱離基に適用した際の、本技術の有用性を実証することを選んだ。後者の利点は、それぞれのモノホスフェートへのキナーゼ媒介性変換を受けるその能力の低下にある（Ａ．Ｃｈｏ  ｅｔ  ａｌ．「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ２’−Ｃ−Ｍｅ  ｂｒａｎｃｈｅｄ  Ｃ−ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ａｓ  ＨＣＶ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ」，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２２（２０１２）４１２７−４１３２、表１を参照、２’−Ｃ−Ｍｅ−Ｕ  ＧＴ１ｂのＥＣ５０＝１５．２μＭであり、一方、それぞれのトリホスフェート２’−Ｃ−Ｍｅ−Ｕ  ＧＴ１ｂのＥＣ５０＝１．３２μＭである）。それ故、そのヌクレオシドトリホスフェート媒介性抗ウイルス効力は、第一のキナーゼをバイパスしてモノホスフェートを送達するプロドラッグの能力のより信頼度の高いインジケータである。これによると、市販のジチオスレイトールジスルフィド（６−６）を、相間移動条件下、臭化プロパルギルまたはベンジルのような好適なハロゲン化アルキルでアルキル化して、一置換ジチオスレイトールジスルフィド（６−７ｃ，ｄ）を得た。そのビス（ジイソプロピルアミノ）クロロホスフィンとの反応により、中間体６−８ｃ，ｄを生じさせ、これを今度は単離することなくヌクレオシド６−１ａまたは６−１ｂと反応させた。精製したリン中間体６−２を、アセトニトリル水溶液中、チオエチルテトラゾールに曝露して、Ｈ−ホスホネート６−４ａ，ｂを得た。これを、スキーム６に示す通り、アサートン・トッド反応（Ｇｅｏｒｇｉｅｖ，Ｅ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ「Ａｎ  ａｂ  Ｉｎｉｔｉｏ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｔｈｅｒｔｏｎ−Ｔｏｄｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｄｉｍｅｔｈｙｌ  Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｃｈｌｏｒｏ−ａｎｄ  Ｆｌｕｏｒｏ−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ｍｅｔｈａｎｅｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅ���ｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１１５，１０９６４−１０９７３，１９９３を参照）を使用して、最終生成物６−５ａまたは６−５ｂに変換した。中間体６−７を産出する相間移動反応は臭化プロパルギルに限定されず、置換または非置換ジチオスレイトールまたはジチオエリスリトール類似体を基質として使用してもよいことに留意することが妥当である。同様に、６−４のアサートン・トッド反応は、決してベンジルアミンに制限されず、代替的な第一級または第二級アミンでベンジルアミンを置きかえてよい。
【０１７３】
スキーム６
【化４１】
2016509575.tif 000064
【０１７４】
３’，５’−環式ホスホトリエステルプロドラッグは、スキーム７において描写されている通りに合成した。これによると、その調製がスキーム６において記述されているＰ（ＩＩＩ）中間体６−２を、昇温下、内部で環化して、環式中間体７−１を得た。この中間体をｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドで酸化させて、最終プロドラッグ７−２を産出するか、または代替としてビス−フェニルアセチルジスルフィドで酸化させて、それぞれの硫黄類似体７−３を産出してもよい。同じく、反応は、スキーム７に示す例に限定されず、上記で論じた通り、６−２の類似体を用いて成功裏に実施され得る。
【０１７５】
スキーム７
【化４２】
2016509575.tif 000065
【０１７６】
７−１のような化合物も、スキーム８に記述されている手順に準じて調製することができる。これによると、６−１ａ，ｂのような保護されていないヌクレオシドを、ビス−ジイソプロピルホスホラスクロリドと、ジクロロメタンのような好適な溶媒中、周囲温度で反応させ、中間体８−１の環化をＤＭＡＰで誘発する。環式ホスホロアミダイト８−２を単離し、最終化合物７−２により容易にアクセスするための合成中継として使用することができる。この合成シーケンスは、８−３および８−４のような２’−フルオロ−２’−メチル置換リボースならびに２−ジフルオロ誘導体８−５および８−６から誘導されたもののような、他の環式５’−３’−ヌクレオシドプロドラッグの調製に成功裏に適用された。
【０１７７】
スキーム８
【化４３】
2016509575.tif 000066
【０１７８】
プロドラッグ６−５ａ、スキーム６、または７−２および７−３（Ｒ＝プロパルギル、スキーム７）中に存在するアセチレン基は、これらのプロドラッグの治療可能性をさらに増強するための基、例えば標的化リガンドを導入するための好都合なハンドルとして働くことができる。肝細胞中に存在する膜タンパク質であるアシアロ糖タンパク受容体（ＡＳＧＰＲ）と結合することができるＮ−アセチルガラクトサミンを使用して、治療的に関連する分子の肝細胞への取り込みを媒介することができる。関連化学をスキーム９に示す。Ｎ−アセチルガラクトサミン誘導体９−１を、周囲温度でジメチルアミンに曝露して、アセチル保護基の除去を誘発した。次いで、追加の精製なしに、これを、プロパルギル基含有プロドラッグ７−２ａ，ｂとのヒュスゲン環化付加（「クリック反応」）に供して、最終の標的化基含有ヌクレオシド９−２ａ，ｂを生じさせた。
【０１７９】
スキーム９
【化４４】
2016509575.tif 000067
【０１８０】
ホスホネートプロドラッグ
テノフォビル（１０−１、ＴＦＶ、スキーム１０）は、多くのウイルスのウイルス逆転写酵素（ＲＴ）を阻害することができる切頭ヌクレオシド誘導体であり、そのライフサイクルの間、ウイルスＲＮＡをＤＮＡに転写するのをＲＴに依存する。重要な例は、数ある中でも、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）およびＢ型肝炎の原因になるウイルス（ＨＢＶ）を包含する。化合物は最初、アントニン・ホリー（有機化学・生化学研究所、チェコスロバキア科学アカデミー）の実験室内で合成され、その抗ウイルス特性はエリック・ド・クラーク（レガ・インスティテュート・フォー・メディシナル・リサーチ（Ｒｅｇａ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、レーヴェン（Ｌｅａｖｅｎ）大学、ベルギー）によって認識された（Ｄｅ  Ｃｌｅｒｃｑ，Ｅ．，Ｈｏｌｙ，Ａ．，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｉ．，Ｓａｋｕｍａ，Ｔ．，Ｂａｌｚａｒｉｎｉ，Ｊ．，Ｍａｕｄｇｈａｌ，Ｐ．，「Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｂｒｏａｄ−Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ａｎｔｉ−ＤＮＡ  Ｖｉｒｕｓ  Ａｇｅｎｔ」，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３２３，ｐ．４６４，１９８６）。
【０１８１】
スキーム１０
【化４５】
2016509575.tif 000068
【０１８２】
化学的観点から、テノフォビルは、非加水分解性ホスホネート基を含有するアデノシン誘導体である。テノフォビルは、ヌクレオシドモノホスフェートにおいて見られるホスフェート基を模倣し、ヌクレオシドキナーゼの作用によって、それぞれのホスフェート（ＴＦＶ−Ｐ、１０−２）およびジホスフェート（ＴＦＶ−ＰＰ、１０−３）類似体に変換され得る、スキーム１０。テノフォビルジホスフェート（ＴＦＶ−ＰＰ、１０−３）は、天然に発生するヌクレオシドトリホスフェートに似ており、転写中に新生ウイルスＤＮＡ鎖に導入でき、次いでこれが鎖停止およびウイルスライフサイクルの遮断につながる。
【０１８３】
ＴＦＶにおけるホスホネート基と切頭アデノシン残基との恒久的な付着は、第一の、多くの場合律速的であるキナーゼ依存性リン酸化ステップの必要性を緩和する。それに対し、ホスホネート基は、生理的なｐＨで負電荷を担持し、ＴＦＶの傾向を低減させて細胞膜を横断する。この理由で、テノフォビルの経口バイオアベイラビリティはかなり限定されており、そのインビトロ効能はかなり低い（ＥＣ５０＝１．２μＭ、ＨＩＶ−１、ＰＢＭＣ）。同時に、活性種、テノフォビルジホスフェート（１０−３、スキーム１０）は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中におけるその半減期が１００時間超であるため、高いウイルスの存続を有する。
【０１８４】
体循環にテノフォビルを送達するために、経口吸収後に再変換して活性テノフォビルに戻るように設計された種々のテノフォビル誘導体を合成した。これらのプロドラッグは、典型的には、酵素的に誘発された初期ステップの後に活性テノフォビルを放出するように設計されたホスホネートエステルである。このアプローチの例は、ギリアドにより、１日１錠の抗ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤（ビリアード）として販売されている、テノフォビルのジイソプロキシル誘導体（テノフォビルジイソプロキシルフマレート、ＴＤＦ、１１−１、スキーム１１）である。ＴＤＦの活性化シーケンスについて、スキーム１１に記述する。これによると、ＴＤＦのイソプロピルエステル基の１つは、天然に発生するヒドロラーゼによって加水分解されて、不安定なセミ−カーボネート（１１−２）を生成し、これが、二酸化炭素およびホルムアルデヒドを順次に取り出す。これと並行して、第二のエステル基は、同じ分解を受ける。体系的に放出されたテノフォビル（１０−１）は、次いで、ＰＢＭＣの細胞膜に浸透し、順次それぞれのジホスフェート（１０−３）に変換され得る。或いは、ホスホネートジエステル１１−１は、ＰＢＭＣの細胞膜に無傷で浸透することができ、エステル媒介性テノフォビル放出は、細胞内で起こる。ＴＦＶモノ−またはジ−エステルはテノフォビル自体よりも容易にＰＢＭＣの細胞膜に浸透することができるため、後者の事象はより高いＴＦＶ−ＰＰレベルをもたらし得る。
【０１８５】
スキーム１１
【化４６】
2016509575.tif 000069
【０１８６】
テノフォビルの代替的なプロドラッグをスキーム１２に示す。ホスホノアミデートプロドラッグ１２−１（テノフォビルアラフェナミドフマレート、ＴＡＦ、ギリアド）は、エステラーゼ媒介性イソプロピルエステル加水分解によりテノフォビル放出を開始するようにも設計されている。このステップは、細胞のリソソームの区画を動作するセリン−プロテアーゼ、カテプシン−Ａの作用によっても効率的に実施される。この理由で、テノフォビルのほとんどは細胞内で放出され、ＴＤＦと比較してはるかに低い日用量をもたらす（Ｂｉｒｋｕｓ，Ｇ．，Ｋｕｔｔｙ，Ｎ．，Ｈｅ，Ｇ．Ｈ．，Ｍｕｌａｔｏ，Ａ．，Ｌｅｅ，Ｗ．，ＭｃＤｅｒｍｏｔｔ，Ｍ．，Ｃｉｈｌａｒ，Ｔ．，「Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ９−［（Ｒ）−２−［［（Ｓ）−１−（Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ｅｔｈｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｐｈｅｎｏｘｙｐｈｏｓｐｈｉｎｙｌ］−ｍｅｔｈｏｘｙ］ａｄｅｎｉｎｅ（ＧＳ−７３４０）ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｔｅｎｏｆｏｖｉｒ  Ｐｈｏｓｐｈｏｎｏａｍｉｄａｔｅ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｏｔｅａｓｅｓ．」，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，７４：９２−１００，２００８）。リン脂質類似体１２−２（ＣＭＸ１５７、スキーム１２）も、テノフォビルを細胞内で放出するように設計されている（Ｈｏｓｔｅｔｌｅｒ，Ｋ．，「Ａｌｋｏｘｙａｌｋｙｌ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  Ａｃｙｃｌｉｃ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｏｒａｌ  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  Ｒｅｄｕｃｅ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｒｔ．」，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，８２，Ａ８４−Ａ９８，２００９）。抗ウイルス薬として使用される他のヌクレオシドホスホネートプロドラッグの例は、Ｐｅｒｔｕｓａｔｉ，Ｆ．，Ｓｅｒｐｉ，Ｍ．，ＭｃＧｕｉｇａｎ，Ｃ．，「Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ．」，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２２：１８１−２０３（２０１２）による総説において見ることができる。
【０１８７】
スキーム１２
【化４７】
2016509575.tif 000070
【０１８８】
細胞質の普遍的に還元する環境は、細胞内ペイロード放出を開始するために利用できる非酵素的放出トリガーとして使用され得る。ジチオスレイトールのような置換環式ジスルフィドの、テノフォビル中のホスホネート基への付着は、テノフォビルの同時細胞内放出とともに還元的に脱カップリングされる可能性があるホスホネートエステルを発生させることになる。これによると、１３−１におけるジチオスレイトールの最初のグルタチオン媒介性環式ジスルフィド還元は、電荷散逸によって駆動されるシクロ脱エステル化につながってモノ−ホスホン酸１３−４を生成し、置換チイラン１３−２の同時形成を伴う。これは、自発的に自己クエンチ（１，５−ｅｘｏ−ｔｅｔ閉環）して、安定なテトラヒドロチオフェン１３−３を産出することになる。電荷を安定させる脱離基の能力はそれらの酸性度に反映されるため、酸性度の高い基を用いれば排出プロセスがより効率的になることが期待されるといえる。それ故、典型的なヌクレオシドモノホスフェート中に存在するホスフェート基よりも酸性度の低いテノフォビルのホスホネート基は、ペイロードをより緩慢に放出することになる。還元的に放出された環式ジスルフィドモノエステルの後に開裂しなくてはならない、二次電荷遮蔽基（ＲＸ、１３−１、スキーム３）も必要とする。
【０１８９】
スキーム１３
【化４８】
2016509575.tif 000071
【０１９０】
特定の例をスキーム１４に示す。これによると、フェニルエステル１４−１は、環式ジスルフィド基のグルタチオン媒介性還元的排出、続いてホスファターゼ触媒フェニルエステル加水分解を受けることが期待されている。第二のステップは、還元的開始の後で起こることが期待されており、これは、酵素（ホスファターゼ）によるフェニルエステルの認識が、理想的には、ホスホネートモノエステル１４−２上に、生理的なｐＨで存在する負電荷の存在を必要とするからである。同様に、ホスホノアミデート１４−３からのジチオスレイトールの還元的に開始された排出の後に、１４−４のアミダーゼ媒介性加水分解が続く。ホスホノアミデート１４−６は、１４−５からの最初の排出、および自発的フォローアップ加水分解の後に、４−６における窒素の求核性を増大させるように設計されている（Ｃａｒｅｎ  Ｌ．Ｆｒｅｅｌ  Ｍｅｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｆ．Ｂｏｒｃｈ：「Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ．」，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０００，４３，４３１９−４３２７）。
【０１９１】
スキーム１４
【化４９】
2016509575.tif 000072
【０１９２】
フェニルエステル１５−２の調製の代表例を、スキーム１５において記述する。これによると、テノフォビル１０−１を、ＤＣＣを使用してフェノールでエステル化してモノエステル１５−１を生成し、これを、標準的なＰｙＢＯＰ媒介性エステル化により最終ジエステル１５−２に変換した。
【０１９３】
スキーム１５
【化５０】
2016509575.tif 000073
【０１９４】
ある特定の実施形態において、化合物１６−１および１６−２を、７．３のｐＨおよび４０℃でグルタチオン（５０ｍＭ）に曝露した、スキーム１６。モノ−エステルの放出をＬＣＭＳによってモニターし、データを図２にまとめる。
【０１９５】
スキーム１６
【化５１】
2016509575.tif 000074
【０１９６】
実施例
中間体
すべての非加水分解反応は、別段の指示がない限り、アルドリッチから購入した乾燥溶媒中で行った。ＨＰＬＣ分析は、アミダイトを除き、６０Ｃで、アジレント・ゾルバックス・エクリプス・プラスＣ１８、２．１×５０ｍｍ、１．８ミクロンカラムを使用して、０．８ｍＬ／分流速で実施し、調節剤としてギ酸（０．１％）を加えた、アセトニトリルおよび水の勾配（５から９５％）で溶離した。アミダイトは、スペルコアセンティスＣ１８、１００×４．６ｍｍ、２．７ミクロンカラム、および調節剤としてギ酸アンモニウム（３ｍＭ）を使用し、それ以外は同一の条件下で分析した。ＵＶトレースは２２０ｎｍで記録し、アジレントテクノロジー６１４０四重極型ＬＣ／ＭＳ質量分析計を正および負両方のイオンモードで使用して質量スペクトルを取得した。分取精製は、プレパックカラムを使用するテレダイン・イスコ・コンビフラッシュＲｆでの勾配クロマトグラフィーによって実施した。ＮＭＲスペクトルは、バリアンユニティー６００、５００または４００分析計で記録した。
【０１９７】
中間体１
【化５２】
2016509575.tif 000075
【０１９８】
（４Ｓ／Ｒ，５Ｒ／Ｓ）−５−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール
コンデンサおよびアバーヘッド（ａｖｅｒｈｅａｄ）スターラが装備された２５０ｍＬの三つ口フラスコに、５Ｎ  ＫＯＨ（１００ｍＬ、５００ｍｍｏｌ）、続いて８０ｍＬの２−メチルテトラヒドロフラン、（４Ｓ／Ｒ，５Ｒ／Ｓ）−１，２−ジチアン−４−オール（１０ｇ、６５．７ｍｍｏｌ）および硫酸水素テトラブチルアンモニウム（４．４６ｇ、１３．１４ｍｍｏｌ）を投入した。激しく撹拌した混合物に、１２時間の間に、シリンジポンプにより臭化プロパルギル（９．３８ｇ、７９ｍｍｏｌ）の２−メチルテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の溶液を添加した。周囲温度での撹拌を更に１２時間続けた。有機層を分離し、水性物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（１×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過および真空での溶媒の除去により、１０．４ｇの粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、２２０ｇ、メタノール−ジクロロメタン：０％から５％のメタノール）によってさらに精製して、５．２５ｇ（４２％）の純粋生成物を無色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：４．２７（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，２Ｈ），３．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．９，８．５，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．２３（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．０７（ｂｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），２．８８（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８０（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，１０．２Ｈｚ，１Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：８１．５（ｂｒ），８０．３，７５．１，７３．４（ｂｒ），５７．２，４０．６（ｂｒ），３７．６（ｂｒ）。
【０１９９】
中間体２
【化５３】
2016509575.tif 000076
【０２００】
（４Ｓ／Ｒ，５Ｓ／Ｒ）−５−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール
この化合物は、ジチオエリスリトールジスルフィドおよび臭化プロパルギルから、中間体１について記述したものに類似する手順を使用して調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ：（ｂｓ，１Ｈ），４．２５（ｓ，２Ｈ），３．７（ｂｍ，３Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝２．４０Ｈｚ，１Ｈ），３．１３（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，８．１Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ：８１．２３，７７．６４，７５．９２（ｂｒ），７０．４３（ｂｒ），６５．４８（ｂｒ），５６．３３（ｂｒ．）。
【０２０１】
中間体３
【化５４】
2016509575.tif 000077
【０２０２】
（４Ｓ／Ｒ，５Ｒ／Ｓ）−５−｛２−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝−１，２−ジチアン−４−オール
この化合物は、ジチオエリスリトールジスルフィドおよび２−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］エチル４−メチルベンゼンスルホネートから、中間体１について記述したものに類似する手順を使用して調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：３．９２（ｓ，１Ｈ），３．７９（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．３，６．０，２．７Ｈｚ，１Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），３．５４（ｍ，８Ｈ），３．４５（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，３．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，１０．３Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：８３．５，７３．５，７１．８，７０．３５，７０．３３，７０．３０，７０．２５，５８．２，６９．３，４０．８，３７．９。
【０２０３】
中間体４
【化５５】
2016509575.tif 000078
【０２０４】
（４Ｓ，５Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オールおよび（４Ｒ，５Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール
トランス−４，５−ジヒドロキシ−１，２−ジチアン（１０ｇ、６５．７ｍｍｏｌ）および臭化ベンジル（１２．３６ｇ、７２．３ｍｍｏｌ）を、２−メチル−ＴＨＦ（１００ｍｌ）中、室温で撹拌した。ＫＯＨの溶液（水中５Ｍ）（１００ｍｌ、５００ｍｍｏｌ）を添加し、続いて硫酸水素テトラブチルアンモニウム（５．５８ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１８時間激しく撹拌した。得られた混合物を、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とに分配した。水性層を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残留物を、ヘキサン中１０％酢酸エチルを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９．０ｇ（３７．１ｍｍｏｌ、５６％）の生成物のラセミ混合物を得た。これを、ＳＦＣ−ＨＰＬＣ（ディアセル（Ｄｉａｃｅｌ）キラルパックＡＳ、３０×２５０ｍｍ、３０％ＭｅＯＨ／ＣＯ２、７０ｍＬ／分）によってさらに精製して、４．３ｇの（４Ｒ，５Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール（１７．７ｍｍｏｌ、２７．０％）および４．２ｇの（４Ｓ，５Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール（１７．３ｍｍｏｌ、２６％）を得た。
【０２０５】
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オールでは、ＬＣＭＳ：Ｃ１１Ｈ１１Ｏ２Ｓ２について、計算値２４２．０、測定値２４３．０［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：７．３５（ｍ，５Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５９，（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｍ，１Ｈ），３．５２（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄｄ，Ｊ＝１３．４，２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１３８．６６，１２８．３４，１２７．９７，１２７．６６，７１．３０。
【０２０６】
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オールでは、ＬＣＭＳ：Ｃ１１Ｈ１１Ｏ２Ｓ２について、計算値２４２．０，実測値２４３．０［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：７．３６（ｍ，５Ｈ），４．７１（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．６６，（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．４２（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．１３（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１３８．６６，１２８．３４，１２７．９７，１２７．６６，７１．３０。
【０２０７】
中間体５
【化５６】
2016509575.tif 000079
【０２０８】
（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ピリジン−４−イルメトキシ）−１，２−ジチアン−４−オールは、中間体２において記述されている同じ手順を使用して合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ１０Ｈ１３ＮＯ２Ｓ２について、計算値２４３．０，実測値２４４．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０９】
中間体６
【化５７】
2016509575.tif 000080
【０２１０】
（４Ｓ／Ｒ，５Ｓ／Ｒ）−５−メトキシ−１，２−ジチアン−４−オールは、硫酸ジメチルをアルキル化剤として使用し、中間体２について記述されている手順に準じて４０％収率で合成した。最終生成物は、２つの鏡像異性体の混合物である。化学式：Ｃ５Ｈ１０Ｏ２Ｓ２。厳密な質量：１６６．０１。ＬＣＭＳ分析のＵＶおよびＭＳ検出なし。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：３．６６（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｓ，３Ｈ），３．３６（ｄｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２５（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．９８（ｄｄ，１３．４Ｈｚ，１０．１Ｈｚ），２．８６（ｄｄ，１３．３Ｈｚ，１０．１Ｈｚ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：８３．４４，７２．５１，５６．６６，４０．１５，３６．６２。
【０２１１】
中間体７
【化５８】
2016509575.tif 000081
【０２１２】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（ジイソプロピルアミノ）−７−ヒドロキシ−７−メチルテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
Ｎ２の保護下、１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）−３−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（２６０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３９０ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ）を、３Åのモレキュラーシーブス（２ｇ）を加えた１０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解した。混合物を０℃に冷却した後、ビス（ジイソプロピルアミノ）クロロホスフィン（３２２ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、室温までゆっくり加温し、３時間撹拌した。ＤＭＡＰ（６１．５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加して、環化を容易にした。反応物を室温で１６時間撹拌した。固体を濾過によって除去した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物を、ヘキサン中２５％アセトンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１６３ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ、４２％）の純粋生成物を取得した。ＬＣＭＳ：Ｃ１６Ｈ２６Ｎ３Ｏ６Ｐについて、計算値３８７．２、測定値３８８．０［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：９．２９（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），７．４０（ｍ，１Ｈ），５．９４（ｓ，１Ｈ），５．６８（ｄｄ，Ｊ＝４．０，４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４２（ｍ，１Ｈ），４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，１０．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｍ，２Ｈ），３．５６（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．４７（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），１．２２（ｍ，１２Ｈ），１．１７（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１４０．１６，１０２．２９，９３．１０，６６．６１，４４．４４，４４．３４，２４．２０，２４．１５，１９．７１，−５．１１。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１５０．４３。
【０２１３】
中間体８
【化５９】
2016509575.tif 000082
【０２１４】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（ジイソプロピルアミノ）−７−フルオロ−７−メチルテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、中間体１について記述されている手順を使用して合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ１６Ｈ２５ＦＮ３Ｏ５Ｐについて、計算値３８９．２、測定値３９０．０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１５０．４２。
【０２１５】
中間体９
【化６０】
2016509575.tif 000083
【０２１６】
４−アミノ−１−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（ジイソプロピルアミノ）−７，７−ジフルオロテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オンは、中間体１について記述されている手順を使用して合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ１５Ｈ２３Ｆ２Ｎ４Ｏ４Ｐについて、計算値３９２．１、測定値３９３．０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１５２．４０。
【０２１７】
実施例１
【化６１】
2016509575.tif 000084
【０２１８】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−ヒドロキシ−７−メチル−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（ジイソプロピルアミノ）−７−ヒドロキシ−７−メチルテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１１５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中の溶液に、室温で撹拌下、５−（ピリジン−４−イルメトキシ）−１，２−ジチアン−４−オール（１０８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（１９．３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４時間撹拌し、このときｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド（４０．１ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で更に３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を、ジクロロメタン中１０％ＭｅＯＨを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ、１１％）の純粋生成物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２０Ｈ２４Ｎ３Ｏ９ＰＳ２について、計算値５４５．１、測定値５４６．０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−１．４９，−４．６３，−５．００，−６．９１。
【０２１９】
実施例２
【化６２】
2016509575.tif 000085
【０２２０】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−ヒドロキシ−７−メチル−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、実施例１において記述されている手順に準じて、中間体４および７から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ２１Ｈ２５Ｎ２Ｏ９ＰＳ２について、計算値５４４．１、測定値５６２．０［Ｍ＋Ｈ２Ｏ］。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−４．１０，−４．４９，−６．４４，−６．６２。
【０２２１】
実施例３
【化６３】
2016509575.tif 000086
【０２２２】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−ヒドロキシ−７−メチル−２−スルフィドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドの代わりにジフェニルアセチルジスルフィドを用いて酸化を実施したことを除き、実施例１において記述したものに類似する手順に準じて、中間体４および７から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ２１Ｈ２５Ｎ２Ｏ８ＰＳ３について、計算値５６０．０、測定値５８３．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：６５．７９，６２．１２，６１．９５。
【０２２３】
実施例４
【化６４】
2016509575.tif 000087
【０２２４】
４−アミノ−１−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７，７−ジフルオロ−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オンは、実施例１において記述されている手順に準じて、中間体４および９から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ２０Ｈ２２Ｆ２Ｎ３Ｏ７ＰＳ２について、計算値５４９．１、測定値５５０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−５．１４，−５．３４，−７．７６，−８．０２。
【０２２５】
実施例５
【化６５】
2016509575.tif 000088
【０２２６】
４−アミノ−１−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＲ）−７，７−ジフルオロ−２−オキシド−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オンは、実施例１において記述されている手順に準じて、中間体１および９から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ１６Ｈ１８Ｆ２Ｎ３Ｏ７ＰＳ２について、計算値４９７．０、測定値４９８．０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−５．３３，−５．６８，−７．９１。
【０２２７】
実施例６
【化６６】
2016509575.tif 000089
【０２２８】
４−アミノ−１−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＲ）−７，７−ジフルオロ−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オンは、実施例１において記述されている手順に準じて、中間体３および９から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ２０Ｈ３０Ｆ２Ｎ３Ｏ１０ＰＳ２について、計算値６０５．１、測定値６０６．１［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−５．０１，−５．４２，−７．７１，−７．９３。
【０２２９】
実施例７
【化６７】
2016509575.tif 000090
【０２３０】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−２−（（（４Ｒ／Ｓ，５Ｒ／Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−フルオロ−７−メチル−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、実施例１において記述されている手順に準じて、中間体４および８から合成した。ＬＣＭＳ：Ｃ２１Ｈ２４ＦＮ２Ｏ８ＰＳ２について、計算値５４６．１、測定値５４５．０［Ｍ−Ｈ］−。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：−５．５５，−５．６７，−８．０９，−８．３６。
【０２３１】
実施例８
【化６８】
2016509575.tif 000091
【０２３２】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−７−ヒドロキシ−２−（（（４Ｓ／Ｒ，５Ｓ／Ｒ）−５−メトキシ−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−メチル−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、実施例１において記述されている手順を使用して、中間体６および７から合成した。最終生成物は、４つのジアステレオマーの混合物であった。ＬＣＭＳ：Ｃ１５Ｈ２１Ｎ２Ｏ９ＰＳ２について、計算値４６８．０、測定値４９１．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：−５．１９，−５．６８，−７．７４，−７．６７。
【０２３３】
実施例９
【化６９】
2016509575.tif 000092
【０２３４】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−７−フルオロ−２−（（（４Ｓ／Ｒ，５Ｓ／Ｒ）−５−メトキシ−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−７−メチル−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、実施例１において記述されている手順を使用して、中間体６および８から合成した。最終生成物は、４つのジアステレオマーの混合物であった。ＬＣＭＳ：Ｃ１５Ｈ２０ＦＮ２Ｏ８ＰＳ２について、計算値４７０、測定値４９３．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：−５．５４，−５．８３，−８．１７，−８．２９。
【０２３５】
実施例１０
【化７０】
2016509575.tif 000093
【０２３６】
１−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＲ）−７，７−ジフルオロ−２−（（（４Ｓ，５Ｓ）−５−メトキシ−１，２−ジチアン−４−イル）オキシ）−２−オキシドテトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンは、実施例１において記述されている手順を使用して、中間体６および９から合成した。最終生成物は、４つのジアステレオマーの混合物であった。ＬＣＭＳ：Ｃ１４Ｈ１７Ｆ２Ｎ２Ｏ８ＰＳ２について、計算値４７４、測定値４７５［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：−５．８１，−６．１８，−８．２１。
【０２３７】
実施例１１
【化７１】
2016509575.tif 000094
【０２３８】
フェニルハイドロゲン（（（（Ｒ）−１−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロパン−２−イル）オキシ）メチル）ホスホネート
１００ｍｌの三つ口フラスコに、テノフォビル（１．２５ｇ、４．３５ｍｍｏｌ）、フェノール（０．８１９ｇ、８．７０ｍｍｏｌ）およびＮＭＰ（１１ｍＬ）を投入した。混合物を８５℃に加熱し、ＴＥＡ（０．７８９ｍＬ、５．６６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、ＤＣＣ（１．４３７ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（２．４ｍＬ）中の溶液を、１００℃でゆっくり添加した。加熱を１６時間続けた。反応物を４５℃に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、２５℃に冷却した。固体を濾過によって除去し、水（５ｍＬ）ですすいだ。合わせた濾液およびすすぎ液を減圧下で濃縮して、黄褐色スラリーとした。これを水で希釈した。得られた黄褐色溶液を、ＬＣ−ＭＳ（水中５〜６５％ＡＣＮ）によって精製して、０３２９５３１−０１３８（３５０ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ、２２．１４％収率）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１５Ｈ１８Ｎ５Ｏ４Ｐについて、計算値３６３．１１、測定値３６４．２０［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１５．０９。
【０２３９】
実施例１２
【化７２】
2016509575.tif 000095
【０２４０】
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−イルフェニル（（（（Ｒ）−１−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロパン−２−イル）オキシ）メチル）ホスホネート
調製が実施例１２において記述されているモノフェニルエステル（１２０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）、（４Ｒ，５Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−１，２−ジチアン−４−オール（１２０ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（２５８ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）および１ｇのモレキュラーシーブスのＤＭＦ（２ｍｌ）中の混合物に、ＤＩＥＡ（０．２３１ｍｌ、１．３２１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１８時間撹拌後、固体を濾過除去した。濾過したものを真空で濃縮して、橙色のゲルを得た。残留物をＡＣＮ／水の１：１混合物に溶解し、ＬＣ−ＭＳ（水中１０〜７０％ＡＣＮ）によって精製して、０３２９５３１−０１４２（６０ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ、３０．９％収率）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２６Ｈ３０Ｎ５Ｏ５ＰＳ２について、計算値５８７．１４、測定値５８８．００［Ｍ＋Ｈ］＋。３１Ｐ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）δ：１８．８８。
【０２４１】
バイオロジー
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に対して活性なヌクレオシドを使用して、本明細書において開示されているプロドラッグの治療可能性を実証した。表３および表４は、遺伝子型１ａ、１ｂおよび２ａに対するサブゲノム・レプリコン・アッセイ（ＲＨＥＰＴＡＱ）において評価されたこれらのプロドラッグの測定された活性をまとめたものである。
【表３】
2016509575.tif 000096
【表４】
2016509575.tif 000097
【０２４２】
複数ラウンドＨＩＶ−１感染症アッセイにおいて抗ウイルス効力を評価する
テノフォビルプロドラッグの抗ウイルス活性を、次の通りに実施されたバイキングアッセイにおいて評価した。ＨＩＶ−１複製を、ＧＦＰレポーター遺伝子を保有するように修飾されたＭＴ−４細胞であり、レポーター遺伝子の発現がＨＩＶ−１発現タンパク質ｔａｔおよびｒｅｖに依存するＭＴ４−ｇａｇ−ＧＦＰクローンＤ３（以後、ＭＴ４−ＧＦＰと指定する）を使用してモニターした。ＨＩＶ−１によるＭＴ４−ＧＦＰ細胞の増殖感染は、感染のおよそ２４時間後にＧＦＰ発現をもたらす。
【０２４３】
ＭＴ４−ＧＦＰ細胞を、１０％ウシ胎仔血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシンおよび４００μｇ／ｍｌのＧ４１８を補充したＲＰＭＩ１６４０中、３７℃／５％ＣＯ２／９０％相対湿度で維持して、レポーター遺伝子を維持した。感染のために、ＭＴ４−ＧＦＰ細胞を、Ｇ４１８を欠く同じ培地に入れ、同じインキュベーション条件において、およそ０．０１の感染多重度でＨ９ＩＩＩＢウイルスを終夜感染させた。次いで、細胞を洗浄し、１０％正常ヒト血清を含有するＲＰＭＩ１６４０に１．６×１０５細胞／ｍＬで（１０％ＮＨＳ条件）または１００％正常ヒト血清に２×１０５細胞／ｍＬで（１００％ＮＨＳ条件）のいずれかで再懸濁した。化合物プレートは、ＤＭＳＯに溶解した化合物を３８４ウェルポリＤリジンコーティングプレート（０．２μｌ／ウェル）のウェルに、ＥＣＨＯ音響ディスペンサを使用して分注することによって調製した。各化合物を、１０点連続３倍希釈で試験した（典型的な最終濃度：４．２μＭ〜０．２１ｎＭ）。対照は、阻害剤なし（ＤＭＳＯのみ）で、３つの抗ウイルス剤の組み合わせ（エファビレンツ、インジナビル、およびインテグラーゼストランド伝達阻害剤Ｎ１−エチル−Ｎ１−（（７Ｓ，１０Ｒ）−２−（（４−フルオロベンジル）−カルバモイル）−３−ヒドロキシ−７−メトキシ−４−オキソ−４，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピリミド−［１，２−ａ］アゼピン−１０−イル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルオキザルアミドを、各４μＭの最終濃度で）を包含していた。化合物プレートに細胞（５０μＬ／ウェル）を添加し、感染細胞を、３７℃／５％ＣＯ２／９０％相対湿度で維持した。
【０２４４】
２つの時点、感染後約４８時間および約７２時間に、アキュメンｅＸ３スキャナを使用して各ウェル中における緑色細胞の数を計数することにより、感染細胞を定量化した。約２４時間にわたる緑色細胞の数の増大により、再生産率、Ｒ０が得られ、これは典型的には５〜１５であり、対数期にあることが実験的に示された（データは示されていない）。Ｒ０の阻害を各ウェルについて算出し、ＩＣ５０を非線形４パラメータ曲線あてはめによって決定する。データを表５にまとめる。
【表５】
2016509575.tif 000098
2016509575.tif 000099
2016509575.tif 000100
当業者であれば、本発明が、目的を達成し言及されている目標および利点ならびにそれらに固有のものを取得するようによく適応していることが容易に分かるであろう。本明細書において記述されている方法および組成物は、現在好ましい実施形態に代表されるように例示的なものであり、本発明の範囲に対する限定として意図されるものではない。その中での変更および他の使用は当業者が想到するものであり、それらは、本発明の趣旨に包括され、特許請求の範囲によって定義される。
【図１】
2016509575.tif 000149
【図２】
2016509575.tif 000150
【手続補正書】
【提出日】平成27年8月10日(2015.8.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2016509575.tif 000151
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；
ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；
Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ９は、Ｏ−フェニル、Ｏ−ナフチルもしくはＯ−ベンジル（そのいずれも、１以上のハロ基で置換されていてよい）；またはアミン、置換アミン、ＮＨ−ベンジル、ＮＨＲ１２もしくはＮ（Ｒ１２）２であり、ここで、各Ｒ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキル、または１以上のハロ基で置換されているＣ１〜１０アルキルであり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］を有する化合物。
【請求項２】
下記の式：
【化２】
2016509575.tif 000152
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
下記の式：
【化３】
2016509575.tif 000153
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ＮＵＣが：
【化４】
2016509575.tif 000154
2016509575.tif 000155
2016509575.tif 000156
である、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
【化５】
2016509575.tif 000157
2016509575.tif 000158
2016509575.tif 000159
2016509575.tif 000160
2016509575.tif 000161
2016509575.tif 000162
2016509575.tif 000163
から選択される構造を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１０がＯである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１がＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘが、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌが、存在していてもよいリンカーであり；そして
Ｙが、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
式ＩＩ：
【化６】
2016509575.tif 000164
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリル、またはＸ−Ｌ−Ｙであり；
ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；
Ｙは、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーであり；
Ｒ４は、ＳまたはＯであり；
各Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、ハロまたは上記のＲ１であり；
Ｒ１０は、ＳまたはＯであり；そして
ＮＵＣは、ヌクレオシド、ヌクレオシド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、またはその核酸塩基類似体である］を有する化合物。
【請求項９】
下記の式：
【化７】
2016509575.tif 000165
を有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
下記の式：
【化８】
2016509575.tif 000166
を有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１１】
下記の式：
【化９】
2016509575.tif 000167
［式中、Ｌは、存在していてもよいリンカーであり；そして、Ｙは、リガンドおよび／またはポリマーである］
を有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
請求項８から１１のいずれか一項に記載の化合物であって、
【化１０】
2016509575.tif 000168
が：
【化１１】
2016509575.tif 000169
2016509575.tif 000170
2016509575.tif 000171
2016509575.tif 000172
である、化合物。
【請求項１３】
請求項８に記載の化合物であって、
【化１２】
2016509575.tif 000173
2016509575.tif 000174
2016509575.tif 000175
2016509575.tif 000176
2016509575.tif 000177
から選択される構造を有する、化合物。
【請求項１４】
Ｒ１０がＯである、請求項８〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１がＸ−Ｌ−Ｙであり；ここで、Ｘが、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）、Ｃ１〜６アルキル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルケニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルケニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキニル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルキニル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルキニル、Ｃ１〜６アルコキシル、１以上のヒドロキシル基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、１以上のハロ基で置換されているＣ１〜６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＮＨＣ１〜６アルキル、アリールＣ１〜６アルキル、ヘテロアリールＣ１〜６アルキル、ヘテロシクリルＣ１〜６アルキル、グアニジニル、Ｃ１〜６アルキルＣ（Ｏ）Ｏ−、アリールＣ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロシクリルＣ（Ｏ）Ｏ−、Ｏ−プロパルギル、Ｓ−プロパルギル、Ｏ−アリル、Ｓ−アリルであり；
Ｌが、存在していてもよいリンカーであり；そして
Ｙが、存在していてもよい、標的化剤、リガンドおよび／またはポリマーである、請求項８〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のＮ−アセチルガラクトサミン部分を含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のフォレート部分を含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｙが存在する場合、Ｙが、１以上のペプチド部分を含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｌが存在する場合、Ｌが、アルキル、カルボニル、アミド、ホスフェート、ホスフェートエステル、ホスホラミデート、チオホスフェートエステル、ジスルフィドまたはポリアルキレングリコール結合を含むリンカーである、請求項１から１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１から１９のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグと、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む、組成物。
【請求項２１】
それを必要とする患者における、ウイルス感染症の治療用薬剤の製造のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用であって、ウイルス感染症が、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＳＶまたはＨＩＶ感染症である、使用。
【請求項２２】
それを必要とする患者における、がんの治療用薬剤の製造のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載の化合物または化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、エステルもしくはプロドラッグの使用であって、がんが、ビラリー管がん、膀胱がん、移行細胞癌、尿路上皮癌、骨肉腫、脳腫瘍、グリオーマ、星状細胞腫、乳癌、化生性癌、子宮頸がん、子宮頸部扁平上皮癌、直腸がん、結腸直腸癌、結腸がん、遺伝性の非ポリポーシス結腸直腸がん、結腸直腸腺癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮内膜癌、子宮内膜間質肉腫、食道がん、食道扁平上皮癌、食道腺癌、眼メラノーマ、ぶどう膜メラノーマ、胆嚢癌、胆嚢腺癌、腎細胞癌、明細胞腎細胞癌、移行細胞癌、尿路上皮癌、ウィルムス腫瘍、白血病、急性リモサイティック白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性（ＣＬＬ）、慢性骨髄性（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性（ＣＭＭＬ）、肝臓がん、肝癌、肝細胞腫、肝細胞癌、胆管癌、肝芽腫、肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、中皮腫、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、上咽頭癌（ＮＰＣ）、神経芽細胞腫、口腔咽頭がん、口腔扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓がん、膵管腺癌、膵新生物、腺房細胞癌、前立腺がん、前立腺腺癌、皮膚がん、メラノーマ、悪性メラノーマ、皮膚メラノーマ、小腸癌、胃がん、胃癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、子宮がん、または子宮肉腫である、使用。
【国際調査報告】
2016509575.tif 000178
2016509575.tif 000179