(57)【要約】  本発明は、式Ｉのデプシペプチドの化学的製造方法またはプロセスであって、式（Ｉ）［式中、記号は、本明細書で定義する意味を有する］のアルデヒドアセタール中間体を用いる方法またはプロセス、新規中間体およびそれらの製造、ならびに本発明の関連実施形態に関する。【化１１２】2016500668.tif 000115 【選択図】  なし
2016500668.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化５７】
2016500668.tif 000060
［式中、
Ａ１は、末端カルボキシもしくはカルバモイル基を有するアミノ酸の２価部分であり、式Ｉにおいてその右側がカルボニルを介して分子の残部に結合しているか、またはＣ１〜８−アルカノイルもしくはリン酸化ヒドロキシ−Ｃ１〜８−アルカノイルであり、
Ｘは、Ａ１のＮを介して結合しており、アシルであるか、またはＡ１がＣ１〜８−アルカノイルもしくはリン酸化ヒドロキシ−Ｃ１〜８−アルカノイルである場合には存在せず、
Ｒ２は、Ｃ１〜８−アルキルであり、
Ｒ３は、アミノ酸の側鎖であり、
Ｒ５は、アミノ酸の側鎖であり、
Ｒ６は、ヒドロキシアミノ酸の側鎖であり、
Ｒ７は、アミノ酸の側鎖であり、
Ｙは、水素またはＣ１〜８−アルキルである］
の環状デプシペプチド化合物またはその塩の調製方法またはプロセスであって、
式ＩＩの化合物を脱保護して、式Ｉの化合物を得ることと、
【化５８】
2016500668.tif 000061
［式中、アルデヒド保護基ＲｋおよびＲｌは、互いに独立して、非置換もしくは置換アルキルであるか、または２個の結合Ｏ原子と、これら２つのＯ原子が結合している炭素原子と共に、非置換もしくは置換の環を形成し、Ｙは、式Ｉの化合物について定義した通りであり、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、それぞれ式ＩのＸ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７に対応するが、ただしこれらの部分の反応性官能基は、少なくともこれらが不要な副反応に関与し得る場合、保護された形態で存在する］
必要に応じて、式Ｉの遊離化合物を塩に変換すること、式Ｉの化合物の塩を式Ｉの化合物の異なる塩に、もしくは式Ｉの遊離化合物に変換すること、および／または式Ｉの化合物の脱水類似体および／または５員環類似体を対応する式Ｉの化合物に変換することと
を含む、方法またはプロセス。
【請求項２】
固相ペプチド合成と液相合成との組み合わせによって、対応する出発アミノ酸および側鎖前駆体から式ＩＩの化合物を製造することを含む、請求項１に記載の方法またはプロセス。
【請求項３】
請求項１に示した式ＩＩの化合物の合成のために、Ｎ末端アミノ基およびＣ末端カルボキシ基を持つ、直鎖状であって、まだ環状ではない式ＩＩの化合物の前駆ペプチドを、前記アミノ基および前記カルボキシ基からのアミド結合の形成を可能にする反応条件下で、好ましくは液相化学反応を利用して、ラクタム環化させることを含む、請求項１または請求項２に記載の方法またはプロセス。
【請求項４】
直鎖状前駆ペプチドが、式ＩＩＩの化合物であり、
【化５９】
2016500668.tif 000062
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義されている通りである］
式ＩＩＩの化合物が、固相ペプチド合成［例えば、ステップ（ｉｉｉ／ｂ）に記載されている通り］から直接、または式ＩＩＩ＊の対応する化合物から脱保護することによって得ることができる、請求項３に記載の方法またはプロセス：
【化６０】
2016500668.tif 000063
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前記式ＩＩの化合物について定義した通りであり、各Ｐｒｏｔ＊＊部分は、請求項５に記載の切断の条件とは異なる条件下で、保護されたアミノを脱保護することによって除去され得る保護基である］。
【請求項５】
式ＩＩＩの化合物または式ＩＩＩ＊の化合物の合成のために、式ＩＶの化合物を切断することをさらに含む、請求項４に記載の方法またはプロセス：
【化６１】
2016500668.tif 000064
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数であり、Ｚは、式ＮＨＰｒｏｔ＊のいずれかの保護されたアミノ基であるか（式中、Ｐｒｏｔ＊は、切断反応の前もしくは途中またはさらにその後に除去されて、式ＩＩＩの化合物を得ることができる（が得られる）保護基である）、またはＺは、式Ｎ（Ｐｒｏｔ＊＊）２の保護されたアミノ基である（式中、各Ｐｒｏｔ＊＊は、前記切断反応の条件とは異なる条件下で除去されて、式ＩＩＩ＊の化合物を得ることができるアミノ保護基である）］。
【請求項６】
式ＩＶの化合物の合成のために、式Ｖ
【化６２】
2016500668.tif 000065
［式中、ＲｋおよびＲｌは、請求項１および上に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｚは、式ＮＨＰｒｏｔ＊のいずれかの保護されたアミノ基であるか｛式中、Ｐｒｏｔ＊は、（ｉｉｉ／ｂ）の切断反応の前もしくは途中またはさらにその後に除去され得る（除去される）保護基である｝、またはＺは、式Ｎ（Ｐｒｏｔ＊＊）２の保護されたアミノ基である（式中、各Ｐｒｏｔ＊＊は、請求項５に記載の切断反応の条件とは異なる条件下で除去され得るアミノ保護基である）］
のアミノ酸または前記アミノ酸の活性化誘導体を、式ＶＩ
【化６３】
2016500668.tif 000066
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることをさらに含む、請求項５に記載の方法またはプロセス。
【請求項７】
式ＶＩの化合物の合成のために、式ＶＩＩ
【化６４】
2016500668.tif 000067
［式中、Ｒ５＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基である］
のアミノ酸または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式ＶＩＩＩ
【化６５】
2016500668.tif 000068
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、請求項６に記載の方法またはプロセス。
【請求項８】
式ＶＩＩＩの化合物の合成のために、式ＩＸ
【化６６】
2016500668.tif 000069
［式中、Ｒ６＊およびＹは、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基である］
のアミノ酸または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式Ｘ
【化６７】
2016500668.tif 000070
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊およびＲ７＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、請求項７に記載の方法またはプロセス。
【請求項９】
式Ｘの化合物の合成のために、式ＸＩ
【化６８】
2016500668.tif 000071
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基であり、Ｒ７＊は請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
のアミノ酸または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式ＸＩＩ
【化６９】
2016500668.tif 000072
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊およびＲ３＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物のヒドロキシル基と反応させることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、請求項８に記載の方法またはプロセス。
【請求項１０】
式ＸＩＩの化合物の合成のために、式ＸＩＩＩ
【化７０】
2016500668.tif 000073
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊は、上で定義した式ＩＩの化合物中に存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得る保護基であり、Ｒ２＊およびＲ３＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
によって表される樹脂結合ジペプチドを、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊＊を除去した後で得られる遊離アミノ基を介して式ＸＩＶ
【化７１】
2016500668.tif 000074
［式中、Ｘ＊＊は、アミノ保護基またはＸ＊であり、このＸ＊およびＡ１＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
の酸または前記酸の反応性誘導体とカップリングさせることと、
Ｘ＊＊がアミノ保護基である場合には、前記アミノ保護基Ｘ＊＊を除去して式ＩＩの誘導体［式中、Ｘ＊の代わりにＨが存在する］を得ることと、対応する酸Ｘ＊−ＯＨ［式中、Ｘ＊は、前記式ＩＩの化合物について定義した通りである］または前記酸の反応性誘導体を使用して、得られたアミノ基をアシル基Ｘ＊とカップリングさせることとをさらに含む、請求項９に記載の方法またはプロセス。
【請求項１１】
式ＸＩＩＩ、とりわけＸＩＩＩＡの化合物の合成のために、式ＸＶ
【化７２】
2016500668.tif 000075
［式中、Ｒ３＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
によって表される樹脂結合アミノ酸を、式ＸＶＩ
【化７３】
2016500668.tif 000076
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得る保護基であり、Ｒ２＊は、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
のアミノ酸または前記アミノ酸の反応性誘導体とカップリングさせることをさらに含む、請求項１０に記載の方法またはプロセス。
【請求項１２】
記号Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、ＸおよびＹまたは対応する保護されていないもしくは保護された部分Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊、Ｒ７＊、Ｘ＊およびＹ３が、得られる式Ｉの化合物またはその塩において、
Ａ１が、そのα−カルボキシ基のカルボニルを介して式ＩのＡ１の右側のアミノ基に結合し、そのα−アミノ基を介してＸに結合しているＬ−グルタミンの２価基であるか、または２Ｓ−（２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ）−プロピオニルであり、
Ｒ２が、メチルであり、
Ｒ３が、イソプロピル、イソブチルまたはベンジル、とりわけイソブチルであり、
Ｒ５が、ｓｅｃ−ブチルまたはベンジル、とりわけｓｅｃ−ブチルであり、
Ｒ６が、４−ヒドロキシベンジルであり、
Ｒ７が、イソプロピルまたはｓｅｃ−ブチル、とりわけｓｅｃ−ブチルであり、
Ｘが、アセチルもしくはイソブチリルであるか、またはＡ１が２Ｓ−（２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ）−プロピオニルである場合には存在せず、
Ｙが、メチルである
ように選択される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法またはプロセス。
【請求項１３】
いずれも請求項１に記載の方法またはプロセスに従って得られる、請求項１に示した式Ｉの化合物の脱水物または請求項１２に定義した置換基を有する式Ｉの化合物の脱水物を、式Ｉの対応する化合物に変換する方法またはプロセスであって、前記脱水物は、式Ｖ
【化７４】
2016500668.tif 000077
［式中、Ｙ、Ｘ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、請求項１および１１のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物について定義した通りである］
および／または副生成物として形成され得、式Ｖ＊を有する、式Ｉのａｈｐ構造の代わりに５員環を有するその対応するヘミアミナール類似体である、方法またはプロセス
【化７５】
2016500668.tif 000078
［式中、Ｙ、Ｘ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、それぞれ、請求項１および１７のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物について定義した通りである］
あるいは、請求項１に記載の方法またはプロセスに従って得た式Ｉの化合物と、その対応する脱水物および／またはヘミアミナールとの混合物の平衡を、式Ｉの化合物に有利にシフトさせる方法またはプロセスであって、反応性溶媒として酸性水溶液を使用して反応を促進させる、方法またはプロセス。
【請求項１４】
式ＸＸ、とりわけ式ＸＸＡの化合物：
【化７６】
2016500668.tif 000079
【化７７】
2016500668.tif 000080
［式中、ＲｋおよびＲｌは、請求項１に記載の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｙは請求項１または特に請求項１４に記載の式Ｉの化合物について定義した通りであり、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、それぞれ、請求項１に定義した式ＩのＸ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７に対応するが、ただしこれらの部分の反応性官能基は、保護された形態で存在する］。
【請求項１５】
請求項６に記載の式Ｖの化合物の合成の方法またはプロセスであって、
（ａ）式Ｖの化合物［式中、ＲｋおよびＲｌは、一緒になって、非置換または置換の低級アルキレン架橋を形成する］の合成の場合には、以下の反応スキームに従い、選択的に（ｉ）１＊→２＊→３＊、（ｉｉ）１＊→２＊→４＊→５＊もしくは（ｉｉｉ）１＊→２＊→３＊→５＊の経路を介し、：
【化７８】
2016500668.tif 000081
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上述した意味を有し、Ｚは、式Ｖの化合物について請求項６に記載の意味を有する］
または
（ｂ）式Ｖの化合物［式中、ＲｋおよびＲｌのそれぞれは、非置換または置換のアルキル部分である］の合成の場合には、以下の反応スキームに従う、方法またはプロセス：
【化７９】
2016500668.tif 000082
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上述した意味を有し、Ｐｒｏｔ＊は、式Ｖの化合物について請求項６に記載の意味を有する］。
【請求項１６】
以下の化合物群から選択される化合物：
ａ）式
【化８０】
2016500668.tif 000083
とりわけ
【化８１】
2016500668.tif 000084
より具体的には
【化８２】
2016500668.tif 000085
の化合物、
式
【化８３】
2016500668.tif 000086
とりわけ
【化８４】
2016500668.tif 000087
より具体的には
【化８５】
2016500668.tif 000088
の化合物、
式
【化８６】
2016500668.tif 000089
とりわけ
【化８７】
2016500668.tif 000090
より具体的には
【化８８】
2016500668.tif 000091
の化合物、
式
【化８９】
2016500668.tif 000092
とりわけ
【化９０】
2016500668.tif 000093
より具体的には
【化９１】
2016500668.tif 000094
［式中、前記部分Ｐｒｏｔ＊、Ｐｒｏｔ＊＊、ＲｋおよびＲｌは、請求項６に記載の式Ｖの化合物について定義した通りである］
の化合物；
ｂ）式ＩＩ
【化９２】
2016500668.tif 000095
［式中、置換基は、請求項１に定義した通りである］、
とりわけ式
【化９３】
2016500668.tif 000096
の化合物または式
【化９４】
2016500668.tif 000097
の化合物；
ｃ）式ＩＩＩ
【化９５】
2016500668.tif 000098
［式中、置換基は、請求項３に定義した通りである］
とりわけ式
【化９６】
2016500668.tif 000099
または式
【化９７】
2016500668.tif 000100
の化合物；および
ｄ）式ＩＩＩ＊
【化９８】
2016500668.tif 000101
［式中、置換基は、請求項４に定義した通りである］
とりわけ、式
【化９９】
2016500668.tif 000102
の化合物、
またはいずれの場合もその塩。
【請求項１７】
以下の化合物の群から選択される化合物：
式
【化１００】
2016500668.tif 000103
とりわけ、式
【化１０１】
2016500668.tif 000104
の化合物、
式
【化１０２】
2016500668.tif 000105
とりわけ、式
【化１０３】
2016500668.tif 000106
の化合物、
式
【化１０４】
2016500668.tif 000107
とりわけ、式
【化１０５】
2016500668.tif 000108
の化合物、
式
【化１０６】
2016500668.tif 000109
特に、式
【化１０７】
2016500668.tif 000110
とりわけ、式
【化１０８】
2016500668.tif 000111
の化合物、および
式
【化１０９】
2016500668.tif 000112
特に、式
【化１１０】
2016500668.tif 000113
とりわけ、式
【化１１１】
2016500668.tif 000114
の化合物
［式中、前記ＲｋおよびＲｌは、１−アリールキル（arylkyl）などの置換アルキル部分であるか、または一緒になって−ＣＨ２−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−などの非置換もしくは置換のアルキレン架橋を形成する］
またはいずれの場合もその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大環状デプシペプチドの製造方法またはプロセス、新規中間体およびそれらの製造、ならびに本発明の関連実施形態に関する。
【背景技術】
【０００２】
環状デプシペプチドは、薬理学において多数の用途がある。例として、ＷＯ２００９／０２４５２７に開示されるデプシペプチドは、様々な疾患の治療に有用である。例えば、ＷＯ２００９／０２４５２７で言及される式ＩＩの化合物は、炎症および／または過剰増殖性および掻痒性の皮膚疾患、例えばアトピー性皮膚炎、乾癬、膿疱性乾癬、酒さ、ケロイド、肥厚性瘢痕、座瘡、ネザートン症候群または結節性痒疹、高齢者の非特異的掻痒症などの他の蕁麻疹、ならびに老化皮膚などの上皮バリア機能不全に伴う他の疾患の治療や予防に有用である。
【０００３】
もともと藍藻（cyanobacterium）のネンジュモ属（Nostoc）から単離されたＮｏｓｔｏｐｅｐｔｉｎ  ＢＮ９２０は、またミクロキスティス属（Microcystis）から単離された。Ｎｏｓｔｏｐｅｐｔｉｎ  ＢＮ９２０は、ＩＣ５０値が３１ｎＭのキモトリプシンを阻害した［J. Nat. Prod. 68 (9), 1324-7 (2005)を参照されたい］。
【０００４】
これらの化合物は、いわゆるａｈｐ−下部構造（ａｈｐ：３−アミノ−６−ヒドロキシ−ピペリジン−２−オン）および対応するデヒドロ−ａｈｐ下部構造（デヒドロ−ａｈｐ：３−アミノ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリジン−２−オン）（本明細書において「脱水物」とも呼ばれる）をそれぞれ含む他のデプシペプチドと共に［コンドロミセス・クロカッス（chondromyces croactus）、粘液細菌を使用して］発酵することによって製造できる。したがって、これらの化合物のいずれか単一のものに関する発酵収率はやや低い。
【０００５】
これまで、このような化合物の合成は、溶液化学手法に基づくもの、または同時係属ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＩＢ２０１２／０５１９７７号中の固相と溶液ペプチド化学手法の組み合わせによるものであった。
【０００６】
重要なステップは、ａｈｐ−下部構造の形成である。刊行された従来技術によれば、これは、不安定なアルデヒド中間体を介した酸化処理による、閉環している大環状ラクトン中の開鎖前駆アミノ酸２−アミノ−５−ヒドロキシ−ペンタン酸の酸化によって主に形成される［例えば、Yokohamaら、Tetrahedron 61 (2005), 1459〜80頁、compound 23; Yokohamaら、Pept. Sci. 38 (2002). 33〜36頁;およびYokohamaら、Tetrahedron Lett. 42 (2001)、5903〜8を参照されたい］。
【０００７】
アルデヒドは、単離するには不安定過ぎる。したがって、その直接使用および合成は不適切である。
【０００８】
アセタールなどのアルデヒド誘導体も、特に、アセタールおよび（とりわけ遊離の）カルボン酸官能基が、同時にまたは（僅かでも）酸性条件下で存在する場合、不安定であることが知られている。
【０００９】
高収率のプロセスと、ａｈｐ部分を含む大環状ラクトン環系の製造の取り扱いが容易なプロセスとを見出す必要がある。
【００１０】
現在、前駆体を２−アミノ−５−ヒドロキシペンタン酸構築ブロックと置き換え、代わりにその５−オキソ−類似体をアセタール形態で使用することが可能であることが見出されている。
【発明の概要】
【００１１】
したがって、本発明は、このような環状デプシペプチドをさらに高い収率かつ／または良好な純度で、またより少数のステップで得ることを可能にするプロセスまたは方法に関する。
【００１２】
多数の異性体の可能性がある錯体分子の合成中、ラセミ化、互変異性化および同様のものの多くのリスクを考慮して、式Ｉの環状デプシペプチドを、良好な収率で、かつ／または必要な立体異性の純度で、とりわけ両方を満たして生成することを可能にし、前駆分子中のヒドロキシル基の酸化ステップを回避する、固相ペプチド合成と溶液中反応の混合を好ましくは含む、製造方法を見出すことが可能である。副生成物、とりわけデヒドロ−ａｈｐ下部構造および／または所望のａｈｐ含有生成物の類似体（ａｈｐの代わりに５員環を含有する）を所望の最終生成物に変換することによって、該副生成物の量を減らし、さらには収率を改善することが可能である。この分野で、固相ペプチド合成を活かして本発明者らの注目をひいた合成はなかった。さらに、酸化ステップを省くことで、高価で、調製が困難なｔ−ブチルエーテルまたはその類似体などの保護変形体の代わりにＮ−Ｍｅ−チロシン（Tyosine）またはその類似体の使用が可能になる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（ｉ／ａ）第１の実施形態において、本発明は、式Ｉ、とりわけ式ＩＡ
【００１４】
【化１】
2016500668.tif 000003
【００１５】
【化２】
2016500668.tif 000004
［式中、
Ａ１は、末端カルボキシもしくはカルバモイル基を有するアミノ酸、とりわけアスパラギンもしくはグルタミンの２価部分であり、式Ｉにおいてその右側がカルボニル（好ましくはそのα−カルボキシル基のカルボニル）を介して分子の残部に結合しているか、またはＣ１〜８−アルカノイルもしくはリン酸化ヒドロキシ−Ｃ１〜８−アルカノイルであり、
Ｘは、Ａ１のＮを介して結合しており、アシルであるか、またはＡ１がＣ１〜８−アルカノイルもしくはリン酸化ヒドロキシ−Ｃ１〜８−アルカノイルである場合には存在せず、
Ｒ２は、Ｃ１〜８−アルキル、とりわけメチルであり、
Ｒ３は、アミノ酸、とりわけロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり、
Ｒ５は、アミノ酸、好ましくはフェニルアラニン、ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり、
Ｒ６は、ヒドロキシアミノ酸、とりわけチロシンの側鎖であり、
Ｒ７は、アミノ酸、好ましくはアミノ酸ロイシン、イソロイシンまたはバリンの側鎖であり、
Ｙは、水素またはＣ１〜８−アルキルである］
の環状デプシペプチド化合物またはその塩の調製方法またはプロセスであって、
式ＩＩ、とりわけ式ＩＩＡ
【００１６】
【化３】
2016500668.tif 000005
【００１７】
【化４】
2016500668.tif 000006
［式中、アルデヒド保護基ＲｋおよびＲｌは、互いに独立して、非置換もしくは置換アルキルであるか、または２個の結合Ｏ原子と、これら２つのＯ原子が結合している炭素原子と共に、非置換もしくは置換の環を形成し（次に、ＲｋおよびＲｌは、好ましくは、非置換または置換アルキレン架橋、とりわけ非置換または置換エチレン、例えば−ＣＨ２−ＣＨ２−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−を形成し）、Ｙは、式Ｉの化合物について定義した通りであり、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、それぞれ式ＩのＸ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７に対応するが、ただしこれらの部分の反応性官能基｛例えばアミノ、イミノ、ヒドロキシ、カルボキシ、スルフヒドリル、アミジノ、グアニジノ、Ｏ−ホスホノ（−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）｝は、少なくともこれらが不要な副反応に関与し得る場合、保護された形態で存在する］
の化合物を脱保護して、式Ｉ、とりわけＩＡの化合物を得ることと、
必要に応じて、式ＩもしくはとりわけＩＡの遊離化合物を塩に変換すること、式Ｉの化合物の塩を、式ＩもしくはとりわけＩＡの化合物の異なる塩に、または式ＩもしくはとりわけＩＡの遊離化合物に変換すること、および／または式ＩもしくはとりわけＩＡの化合物の脱水類似体および／または５員環類似体を、対応する式ＩもしくはとりわけＩＡの対応する化合物に変換することと
を含む、方法またはプロセスに関する。
【００１８】
（ｉｉ／ａ）本発明のさらなる実施形態は、固相ペプチド合成（とりわけ、下記の式ＩＩＩもしくはＩＩＩ＊またはとりわけＩＩＩＡもしくはＩＩＩＡ＊の前駆体を合成する）と、液相合成（とりわけ上記で言及した化合物から最終生成物を合成する）との組み合わせによって、対応する出発アミノ酸および側鎖前駆体から、式ＩＩまたはとりわけＩＩＡの化合物を製造することをさらに含む、上記の方法またはプロセスに言及する。
【００１９】
（ｉ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、上の式ＩＩの化合物の合成のために、Ｎ末端アミノ基およびＣ末端カルボキシ基を持つ、式ＩＩまたはとりわけ式ＩＩＡの化合物の直鎖状前駆ペプチドを、前記アミノ基および前記カルボキシ基からアミド結合の形成を可能にする反応条件下で、好ましくは液相化学反応を利用して、ラクタム環化（cyclization under lactamization）（マクロラクタム環化）させることをさらに含む、上記の方法またはプロセスに関する。
【００２０】
（ｉｉ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、前述の段落（ｉ／ｂ）による方法またはプロセスであって、直鎖状前駆ペプチドが、式ＩＩＩ、とりわけＩＩＩＡ
【００２１】
【化５】
2016500668.tif 000007
【００２２】
【化６】
2016500668.tif 000008
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
を有する化合物であり、この化合物が、固相ペプチド合成［例えば、ステップ（ｉｉｉ／ｂ）に記載されている通り］から直接、または式ＩＩＩ＊、とりわけＩＩＩＡ＊
【００２３】
【化７】
2016500668.tif 000009
【００２４】
【化８】
2016500668.tif 000010
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、各Ｐｒｏｔ＊＊部分は、（ｉｉｉ／ｂ）の切断の条件とは異なる条件下で、保護されたアミノ基を脱保護することによって除去され得る（好ましくは除去しなければならない）保護基であり、とりわけ、それぞれ、式ＩＶの化合物について定義した通り、アリールアルキルアミノ保護基である］
の対応する化合物から脱保護することによって得ることができる方法またはプロセスに関する。
【００２５】
（ｉｉｉ／ｂ）別の実施形態は、式ＩＩＩもしくはとりわけＩＩＩＡの化合物、または式ＩＩＩ＊、とりわけＩＩＩＡ＊の化合物の合成のために、式ＩＶ、とりわけＩＶＡ
【００２６】
【化９】
2016500668.tif 000011
【００２７】
【化１０】
2016500668.tif 000012
［式中、Ｒｋ、Ｒｌ、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数であり、Ｚは、式ＮＨＰｒｏｔ＊のいずれかの保護されたアミノ基であるか（式中、Ｐｒｏｔ＊は、切断反応の前もしくは途中またはさらにその後に除去されて、式ＩＩＩ、とりわけＩＩＩＡの化合物が得られる保護基である）、またはＺは、式Ｎ（Ｐｒｏｔ＊＊）２の保護されたアミノ基である（式中、各Ｐｒｏｔ＊＊は、前記切断反応の条件とは異なる条件下で（特にそのような条件下でのみ）除去されて、式ＩＩＩ＊、とりわけＩＩＩＡ＊の化合物を得ることができるアミノ保護基であり、とりわけ、それぞれ、アリールアルキルアミノ保護基である）］
の化合物を切断することをさらに含む、前述の段落（ｉｉ／ｂ）による方法またはプロセスに言及する。
【００２８】
（ｉｖ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、式ＩＶ、とりわけＩＶＡ
【００２９】
【化１１】
2016500668.tif 000013
【００３０】
【化１２】
2016500668.tif 000014
［式中、ＲｋおよびＲｌは、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｚは、式ＮＨＰｒｏｔ＊のいずれかの保護されたアミノ基であるか｛式中、Ｐｒｏｔ＊は、切断反応の前もしくは途中またはさらにその後に除去され得る（除去される）保護基である｝、またはＺは、式Ｎ（Ｐｒｏｔ＊＊）２の保護されたアミノ基である（式中、各Ｐｒｏｔ＊＊は、（ｉｉｉ／ｂ）の切断反応の条件とは異なる条件下で除去され得るアミノ保護基であり、とりわけ、それぞれ、アリールアルキルアミノ保護基である）］
の化合物の合成のために、式Ｖ、とりわけＶＡのアミノ酸、または前記式ＶもしくはＶＡのアミノ酸の活性化誘導体を、式ＶＩ、とりわけＶＩＡ
【００３１】
【化１３】
2016500668.tif 000015
【００３２】
【化１４】
2016500668.tif 000016
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることをさらに含む、前述の段落（ｉｉｉ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００３３】
（ｖ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、式ＶＩ、とりわけＶＩＡの化合物の合成のために、式ＶＩＩ、とりわけＶＩＩＡ
【００３４】
【化１５】
2016500668.tif 000017
【００３５】
【化１６】
2016500668.tif 000018
［式中、Ｒ５＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、カップリングする生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基である］
のアミノ酸、または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式ＶＩＩＩ、とりわけＶＩＩＩＡ
【００３６】
【化１７】
2016500668.tif 000019
【００３７】
【化１８】
2016500668.tif 000020
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、前述の段落（ｉｖ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００３８】
（ｖｉ／ｂ）さらなる実施形態において、本発明は、式ＶＩＩＩ、とりわけＶＩＩＩＡの化合物の合成のために、式ＩＸ、とりわけＩＸＡ
【００３９】
【化１９】
2016500668.tif 000021
【００４０】
【化２０】
2016500668.tif 000022
［式中、Ｒ６＊およびＹは、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、カップリングする生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基である］
のアミノ酸、または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式Ｘ、とりわけＸＡ
【００４１】
【化２１】
2016500668.tif 000023
【００４２】
【化２２】
2016500668.tif 000024
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊およびＲ７＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物とカップリングさせることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、前述の段落（ｖ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００４３】
（ｖｉｉ／ｂ）本発明の別の実施形態は、式Ｘ、とりわけＸＡの化合物の合成のために、式ＸＩ、とりわけＸＩＡ
【００４４】
【化２３】
2016500668.tif 000025
【００４５】
【化２４】
2016500668.tif 000026
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基であり、Ｒ７＊は上の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
のアミノ酸、または前記アミノ酸の反応性誘導体を、式ＸＩＩ、とりわけＸＩＩＡ
【００４６】
【化２５】
2016500668.tif 000027
【００４７】
【化２６】
2016500668.tif 000028
［式中、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊およびＲ３＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
の化合物のヒドロキシル基と反応させることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、前述の段落（ｖｉ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００４８】
（ｖｉｉｉ／ｂ）さらなる実施形態において、本発明は、式ＸＩＩ、とりわけＸＩＩＡの化合物の合成のために、式ＸＩＩＩ、とりわけＸＩＩＩＡ
【００４９】
【化２７】
2016500668.tif 000029
【００５０】
【化２８】
2016500668.tif 000030
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊は、上で定義した式ＩＩの化合物中に存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得る保護基であり、Ｒ２＊およびＲ３＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
によって表される樹脂結合ジペプチドを、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊＊を除去した後で、得られる遊離アミノ基を介して式ＸＩＶ、特に式ＸＩＶ＊、より具体的には式ＸＩＶ＊＊
【００５１】
【化２９】
2016500668.tif 000031
【００５２】
【化３０】
2016500668.tif 000032
【００５３】
【化３１】
2016500668.tif 000033
［式中、Ｘ＊＊は、アミノ保護基またはＸ＊であり、このＸ＊およびＡ１＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りである］
のアミノ酸、または前記酸の反応性誘導体とカップリングさせることと、Ｘ＊＊がアミノ保護基である場合には、前記アミノ保護基Ｘ＊＊を除去して式ＩＩの誘導体［式中、Ｘ＊の代わりにＨが存在する］を得ることと、対応する酸Ｘ＊−ＯＨ［式中、Ｘ＊は、上の式ＩＩの化合物について定義した通りである］または前記酸の反応性誘導体を使用して、得られたアミノ基をアシル基Ｘ＊とカップリングさせることとをさらに含む、前述の段落（ｖｉｉ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００５４】
（ｉｘ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、式ＸＩＩＩ、とりわけＸＩＩＩＡの化合物の合成のために、式ＸＶ、とりわけＸＶＡ
【００５５】
【化３２】
2016500668.tif 000034
【００５６】
【化３３】
2016500668.tif 000035
［式中、Ｒ３＊は、上で式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｌは切断可能なリンカーであり、ＲＥＳは固体樹脂であり、ｎは０を含まない自然数である］
によって表される樹脂に結合したアミノ酸を、式ＸＶＩ、とりわけＸＶＩＡ
【００５７】
【化３４】
2016500668.tif 000036
【００５８】
【化３５】
2016500668.tif 000037
［式中、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得る保護基であり、Ｒ２＊は、上で式ＩＩの化合物について定義した通りである］
のアミノ酸、または前記アミノ酸の反応性誘導体とカップリングさせることをさらに含む、前述の段落（ｖｉｉｉ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００５９】
（ｘ／ｂ）本発明のさらなる実施形態は、式ＸＶ、とりわけＸＶＡの樹脂に結合したアミノ酸を得るために、式ＸＶＩＩ、とりわけＸＶＩＩＡ
【００６０】
【化３６】
2016500668.tif 000038
【００６１】
【化３７】
2016500668.tif 000039
［式中、Ｒ３＊は、上または下で式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｐｒｏｔ＊＊＊は、存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基である］
のアミノ酸、または式ＩＸの前記アミノ酸の反応性誘導体を、固体樹脂ＲＥＳに結合している切断可能なリンカーＬとカップリングさせることと、保護基Ｐｒｏｔ＊＊＊を除去することとをさらに含む、前述の段落（ｉｘ／ｂ）による方法またはプロセスに関する。
【００６２】
（ｉ／ｃ）本発明の別の実施形態は、記号Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、ＸおよびＹまたは対応する保護されていないもしくは保護された部分Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊、Ｒ７＊、Ｘ＊およびＹが、得られる式Ｉの化合物またはその塩において、
Ａ１が、そのα−カルボキシ基のカルボニルを介して式ＩのＡ１の右側のアミノ基に結合し、そのα−アミノ基を介してＸに結合しているＬ−グルタミンの２価基であるか、または２Ｓ−（２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ）−プロピオニルであり、
Ｒ２が、メチルであり、
Ｒ３が、イソプロピル、イソブチル（どこで使用しても２−メチル−ｎ−プロピル）、とりわけイソブチルであり、
Ｒ５が、ｓｅｃ−ブチルまたはベンジル、とりわけｓｅｃ−ブチルであり、
Ｒ６が、４−ヒドロキシベンジルであり、
Ｒ７が、イソプロピルまたはｓｅｃ−ブチル（どこで使用しても１−メチル−ｎ−プロピル）、とりわけｓｅｃ−ブチルであり、
Ｘが、アセチルもしくはイソブチリルであるか、またはＡ１が２Ｓ−（２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ）−プロピオニルである場合には存在せず、
Ｙが、メチルである
ように選択される、前述の段落（ｉ／ａ）から（ｘ／ｂ）のいずれか一つによる方法またはプロセスに関する。
【００６３】
（ｉ／ｄ）別の特定の実施形態において、本発明は、式ＩＩ、とりわけＩＩａの化合物から得られる脱水物、上の式ＩＩの化合物から得られる式Ｉの化合物または特に前述の段落（ｉ／ｃ）に定義される置換基を有する式Ｉの化合物の脱水物を、式Ｉの対応する化合物に変換する方法またはプロセスであって、前記脱水物は、式ＸＶＩＩＩ、とりわけＸＶＩＩＩＡであり
【００６４】
【化３８】
2016500668.tif 000040
【００６５】
【化３９】
2016500668.tif 000041
［式中、Ｙ、Ｘ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、上の式Ｉの化合物について定義した通りである］
あるいは、とりわけ、式Ｉの化合物と、その対応する脱水物および／またはその対応するヘミアミナール類似体であって、副生成物としても形成され得、式Ｉのａｈｐ構造の代わりに５員環を有し、式ＸＩＸ、とりわけ式ＸＩＸＡ
【００６６】
【化４０】
2016500668.tif 000042
【００６７】
【化４１】
2016500668.tif 000043
［式中、Ｙ、Ｘ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、それぞれ、上の式Ｉの化合物について定義した通りである］
を有するヘミアミナール類似体との混合物の平衡を、式Ｉの化合物に有利にシフトさせる、方法またはプロセスであって、反応性溶媒として酸性水溶液を使用して反応を促進させる、方法またはステップに関する。この方法は、上記および下記の他のプロセスまたは方法に加えて、この方法をとりわけ使用して、収率を上げる、または式Ｖ、とりわけＶＡの化合物および／もしくは式Ｉのａｈｐ構造の代わりに５員環を有する類似体を、対応する式Ｉの化合物に再変換する。
【００６８】
脱水物および／または５員環類似体（常に所望のａｈｐ環に関する）の、式ＩまたはとりわけＩＡの所望の化合物への変換、例えば、実施例３Ｂの化合物Ａ脱水物の化合物Ａへの変換について記載した方法は、この種の化合物の直接的合成を可能にする。これまで、生成物の脱水を回避するために、最終ステップとしての酸処理は回避しなければならなかった。
【００６９】
（ｉ／ｅ）本発明のさらなる実施形態は、酸が、カルボン酸、とりわけハロ置換Ｃ１〜８アルカン酸、より特定するとトリフルオロ酢酸またはトリクロロ酢酸である、前述の段落（ｉ／ｄ）による方法に関する。
【００７０】
（ｉ／ｆ）さらなる実施形態において、本発明は、式ＩＩ、とりわけ式ＩＩＡ
【００７１】
【化４２】
2016500668.tif 000044
【００７２】
【化４３】
2016500668.tif 000045
［式中、ＲｋおよびＲｌは、上の式ＩＩの化合物について定義した通りであり、Ｙは、上の第１の例における式Ｉの化合物について定義した通りである、または詳細には、（ｉ／ｃ）で上に定義した通りであり、Ｘ＊、Ａ１＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、それぞれ、上もしくは下に定義した、または上記の段落（ｉａ）もしくはとりわけ（ｉ／ｃ）に定義した式ＩのＸ、Ａ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７に対応するが、ただしこれらの部分の反応性官能基は、好ましくは、保護された形態で存在する］
の化合物に関する。
【００７３】
（ｉ／ｇ）さらなる実施形態において、本発明は、式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＩＩ＊、ＩＶおよびＶの化合物、とりわけ式ＩＩＡ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＡ＊、ＩＶおよびＶＡの化合物からなる群から、さらにより特定すると以下の（とりわけ、鏡像異性的に濃縮された、または純粋な）化合物：化合物２＊、化合物３＊、化合物５＊、好ましくは化合物２Ａ＊、化合物３Ａ＊、化合物４Ａ＊、化合物５Ａ＊、とりわけ実施例に示される形態：化合物２、化合物３、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、化合物Ａ、化合物９および化合物１０ならびに鏡像異性的に濃縮されたまたはとりわけ純粋な化合物４、ならびに化合物１２、１４、１５、１６および１７からなる群まで選択される新規な化合物に関する。また、下記の式１２＊、１２Ａ＊、１４＊、１４Ａ＊、１５＊、１５Ａ＊、１６＊、１６Ａ＊、１７＊または１７Ａ＊の化合物［式中、ＲｌおよびＲｋは、互いに独立して、１−（Ｃ６〜Ｃ１２アリール）−Ｃ１〜Ｃ７アルキルなどの１−アラルキル、より特定するとベンジルである］ならびに対応する化合物［式中、ＲｌおよびＲｋは共に、非置換または置換アルキレン、とりわけ−ＣＨ２−ＣＨ２−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−を形成する］も好ましい。
【００７４】
（ｉ／ｈ）さらなる実施形態において、本発明は、以下のいずれかに従って、上記の式Ｖ、とりわけ式ＶＡの化合物を合成する方法またはプロセスに関する。
（ａ）（とりわけ）式Ｖの化合物［式中、ＲｋおよびＲｌは共に、非置換または置換低級アルキレン架橋、とりわけ−ＣＨ２−ＣＨ２−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−を形成する］の合成の場合には、以下の反応スキーム：
【００７５】
【化４４】
2016500668.tif 000046
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上記に示した意味を有し、Ｚは、式Ｖの化合物について上で言及した意味を有し、とりわけ化合物１＊、２＊および３＊中では、式Ｖの化合物について定義されるように、Ｎ（Ｐｒｏｔ＊＊）２であり、とりわけ１−（Ｃ６〜Ｃ１２−アリール）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、とりわけベンジルであり、化合物５＊中では、式Ｖの化合物について定義されるように、ＮＨＰｒｏｔ＊であり、Ｐｒｏｔ＊はとりわけアシル保護基、例えばフルオレン−９−イル−メトキシカルボニルであり、式３＊および５＊の化合物は、それぞれ、式Ｖの化合物に対応する］
に従い、選択的に（ｉ）１＊→２＊→３＊、（ｉｉ）１＊→２＊→４＊→５＊もしくは（ｉｉｉ）１＊→２＊→３＊→５＊の経路を介し、
または、とりわけ、式ＶＡの化合物を得るためには、以下の反応スキーム：
【００７６】
【化４５】
2016500668.tif 000047
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上記に示した意味を有し、ＺおよびＰｒｏｔ＊は、式Ｖの化合物について上に言及した意味を有し、とりわけ化合物１Ａ＊、２Ａ＊および３Ａ＊中のＺは、１−（Ｃ６〜Ｃ１２−アリール）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルアミノ、とりわけベンジルアミノであり、化合物５Ａ＊中のＰｒｏｔ＊は、アシル保護基、例えばフルオレン−９−イル−メトキシカルボニルであり、式３Ａ＊および５Ａ＊の化合物は、それぞれ、式ＶＡの化合物に対応する］
に従い、選択的に、（ｉ）１Ａ＊→２Ａ＊→３Ａ＊、（ｉｉ）１Ａ＊→２Ａ＊→４Ａ＊→５Ａ＊、もしくは（ｉｉｉ）１Ａ＊→２Ａ＊→３Ａ＊→５Ａ＊の経路を介し、
１＊または１Ａ＊から２＊または２Ａ＊の反応は、例えばジクロロメタンなどの適切な溶媒中で、トルエンスルホン酸などの酸の存在下、例えば分子篩の存在下で、非置換または置換低級アルキレンジオール、とりわけエチレングリコールを用いたアセタール形成反応であり、２＊もしくは２Ａ＊から３Ａもしくは３Ａ＊の加水分解による、エーテル、例えばジオキサンおよび水の中、アルカリ金属水酸化物、例えばＬｉＯＨなどの塩基の存在下での反応、または２＊、とりわけ２Ａ＊から４＊、とりわけ４Ａ＊の、カルボキシ基およびアミノ基の脱保護下の選択的反応は、例えば接触水素化、例えば貴金属触媒、例えばＰｄもしくはＰｔを、例えば酸化アルミニウムもしくは炭素などの担体に担持させて用いた、適切な溶媒、例えばメタノール、エタノールもしくはイソプロパノールなどのアルコール中での水素化と、後続するアミノ保護基Ｐｒｏｔ＊＊、とりわけアシル保護基、例えばフルオレン−９−イル−メトキシカルボニルの、例えばアシル化条件下もしくは下記のカップリング剤（とりわけ（例えばＦｍｏｃ−）ＨＯＳＵ−エステル、三級塩基、例えばトリエチルアミンおよび適切な溶媒、例えば水および／もしくはアセトニトリルを使用する、アミノ酸もしくは酸とアミノ基とのカップリングのためのカップリング剤）の存在下での再導入によって行われ、また、もう一つの方法として、式４＊、とりわけ４Ａ＊の化合物は、上記で言及した接触水素化によって、式３＊、とりわけ３Ａ＊の化合物から得ることができ、
化合物１＊もしくは１Ａ＊は、RodriguezおよびTaddei、Synthesis 2005、3、493〜495頁に記載の方法によって、またはこれと同様に、得ることができ、
あるいは
（ｂ）［とりわけ上記の式Ｖ、とりわけＶＡの化合物｛式中、ＲｋおよびＲｌそれぞれが非置換または置換アルキル部分、とりわけ１−アラルキル、例えば１−（Ｃ６〜Ｃ１２アリール）−Ｃ１〜Ｃ７アルキル、より特定するとベンジルである。｝の合成の場合の］以下の反応スキーム：
【００７７】
【化４６】
2016500668.tif 000048
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上記に示した意味を有し、Ｐｒｏｔ＊は、式Ｖの化合物について上で言及した意味を有し、とりわけ化合物１７＊中で、アシル保護基、例えばフルオレン−９−イル−メトキシカルボニルであり、式１７＊の化合物は式Ｖの化合物に対応する］
または、とりわけ、式ＶＡの化合物を得るためには、以下のスキーム：
【００７８】
【化４７】
2016500668.tif 000049
［式中、Ｒｋ、Ｒｌは、上記に示した意味を有し、Ｐｒｏｔ＊は、式Ｖの化合物について上で言及した意味を有し、とりわけ化合物１７Ａ＊中で、アシル保護基、例えばフルオレン−９−イル−メトキシカルボニルであり、式１７Ａ＊の化合物は式ＶＡの化合物に対応する］
に従い、
好ましくは、１１から１２＊または１２Ａ＊への反応は、適切な溶媒、例えば塩化メチレン中で、臭素化剤、例えばトリメチルブロモシランを用いて行われ、後続して式Ｒｋ−ＯＨの化合物および式Ｒｌ−ＯＨの化合物（これらは同一であることが好ましい）、ならびに三級塩基、例えばピリジンおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンと酸無水物、例えば無水酢酸との混合物を添加し、化合物１２＊または１２Ａ＊と式１３＊または１３Ａ＊の化合物との反応は、適切な溶媒、例えばジメチルホルムアミドなどの酸アミド、強塩基、例えばカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの中で行われ、結果として得られた式１４＊、とりわけ１４Ａ＊の化合物の、アルカリ金属水酸化物、例えば水酸化カリウムを用いた加水分解は、適切な溶媒、例えばエタノールなどのアルコール中で行われ、後続して脱カルボキシル化するためのウォーミングアップを行い、式１５＊、とりわけ１５Ａ＊の化合物を得、例えばｐＨが７から１０の範囲の適切な緩衝液中、例えばアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムで滴定される水性クエン酸塩緩衝液中、必要に応じて塩化コバルトなどの補因子の存在下、アシラーゼを用いて、アセチル基を除去し、式１６＊、とりわけ１６Ａ＊の化合物を得、適切な溶媒、例えば水および／またはアセトニトリル中、適切な試薬、例えばＦｍｏｃ−ＯＳＵを用いて、保護基Ｐｒｏｔ＊＊、例えばアシル、例えば９−フルオレンイルメトキシカルボニルを導入する。
【００７９】
以下の定義（または上で既に含めた定義も）は、本発明のさらなる実施形態を定義するために、上記または下記の本発明の実施形態において使用されるより一般的な用語を、本発明の実施形態を定義するためにより特殊な用語によって置き換え可能な一般用語の１つ、２つ以上またはすべてのいずれかと置き換えることができる。
【００８０】
すべての反応において、適切な場合に、または必要に応じて、窒素またはアルゴンなどの保護ガスを使用してよく、温度は当業者に知られているものであり、例えば−２５℃から各反応混合物の還流温度まで、例えば−２０から＋９０℃までの範囲である。
【００８１】
ＲｋおよびＲｌが、互いに独立して、非置換または置換アルキルである場合、これは、とりわけＣ１〜Ｃ７−アルキルまたはとりわけ１−（Ｃ６〜Ｃ１２アリール）−Ｃ１〜Ｃ７アルキルなどの１−アラルキル、より特定するとベンジルを指す。
【００８２】
ＲｋおよびＲｌが、２個の結合Ｏ原子およびこの２個のＯ原子が結合している炭素原子と共に、非置換または置換の環を形成する場合、ＲｋおよびＲｌは、好ましくは、非置換または置換アルキレン架橋、とりわけ非置換または置換エチレン、例えば−ＣＨ２−ＣＨ２−を形成し、置換基は、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキルから選択でき、とりわけ２つの該置換基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルでよい。
【００８３】
末端カルボキシまたはカルバモイル基を有するアミノ酸の２価の部分は、好ましくは、アルファ−カルバモイルまたはカルボキシ−Ｃ１〜Ｃ８−置換アミノ酸、とりわけアスパラギンまたはグルタミンの２価の部分であり、カルボニル（好ましくは、そのα−カルボキシル基のカルボニル）を介して、式Ｉにおいてその右側が分子の残部に結合している。
【００８４】
Ｃ１〜８−アルカノイルまたはリン酸化ヒドロキシ−Ｃ１〜８−アルカノイル（ヒドロキシル基およびホスホノ（−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）基を両方有するＣ１〜８−アルカノイル）であるＡ１は、例えば２，３−ジヒドロキシ−プロパノイル（好ましくはＳ型）または２−ヒドロキシ−３−ホスホノ−プロパノイル（好ましくはＳ型）である。
【００８５】
Ｒ２およびＲ２＊は、どこで言及されても、Ｃ１〜８−アルキル、とりわけメチルである。
【００８６】
Ｒ３は、アミノ酸、とりわけ天然アミノ酸の側鎖である。好ましくは、これは、分枝状または直鎖状でよいＣ１〜８アルキルである。最も特定すれば、Ｃ１〜８アルキルは、ｎ−（２−メチル）プロピル（イソブチル）、ｎ−（１−メチル）プロピル（ｓｅｃ−ブチル）またはメチルであり、すなわち、この部分を保有するアミノ酸は、ロイシン、イソロイシンまたはバリンである。
【００８７】
Ｒ３＊は、反応への関与が干渉されていなければならない官能基が存在する場合、保護された形態の対応する側鎖である。好ましくは、これは、とりわけ上記段落に定義した、分枝状または直鎖状でよいＣ１〜８アルキルである。
【００８８】
「アミノ酸の側鎖」は、任意の部分、例えば基底構造中に最大２０個の炭素原子ならびに対応する炭素原子数と置き換わるＮ、ＯおよびＳから独立に選択される０から５個のヘテロ原子を有する、例えば単環式または多環式、直鎖状、飽和、不飽和（例えば、共役二重結合を有する）または部分的に飽和な有機部分から選択されてよく、アミノ、イミノ、ヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフヒドリル、アミジノ、グアニジノ、Ｏ−ホスホノ（−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）から選択される最大３つまでの部分によって置換されてよい。好ましくは、側鎖は、２０個の標準的なアルファ−アミノ酸：アルギニン、ヒスチジン、リシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリンおよびさらにプロリン（それからアルファ−アミノ基を含めた内部環化を有する）から選択される。
【００８９】
本開示において、アミノ酸には、以下の表に従って、各名称または慣例的な３文字表記のいずれかを使用する。
【００９０】
【表１】
2016500668.tif 000050
【００９１】
Ｒ５は、アミノ酸、好ましくは標準的なアミノ酸の側鎖である。好ましくは、これは、分枝状または直鎖状でよく、非置換またはフェニルによって置換されているＣ１〜８アルキルである。最も特定的には、これは、ベンジル、ｎ−（２−メチル）プロピル、イソブチルまたはメチルであり、すなわち、この部分を保有するアミノ酸は、フェニルアラニン、ロイシン、イソロイシンまたはバリンである。
【００９２】
Ｒ６は、ヒドロキシアミノ酸、とりわけチロシンの側鎖である。
【００９３】
Ｒ７は、アミノ酸、とりわけ天然アミノ酸の側鎖である。好ましくは、これは、分枝状または直鎖状であってよいＣ１〜８アルキルである。最も特定的には、これは、ｎ−（２−メチル）プロピル（イソブチル）、ｎ−（１−メチル）プロピル（ｓｅｃ−ブチル）またはメチルであり、すなわち、この部分を保有するアミノ酸は、ロイシン、イソロイシンまたはバリンである。
【００９４】
Ｃ１〜８アルキルは、直鎖状または分枝状が１倍以上であってよく、例えば、ｎ−（２−メチル）プロピル、ｎ−（１−メチル）プロピルまたはメチルであってよい。
【００９５】
すべての化合物は、塩基性基、例えばアミノもしくはイミノ、または酸性基、例えばカルボキシルもしくはフェノール性水酸基などの塩形成基が存在する場合、遊離形態でまたは塩としてまたは塩および遊離形態の混合物として使用することができる。そのため、どこでも言及される化合物には、これらすべての変形形態が含まれる。例えば、塩基性基は、酸、例えばハロゲン化水素酸、例えばＨＣｌ、硫酸または酢酸もしくはトリフルオロ酢酸などの有機酸で塩を形成でき、一方で酸性基は、陽イオン、例えばアンモニウム、アルキルアンモニウム、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジメチルアミノピリジン、アルカリまたはアルカリ土類金属塩カチオン、例えばＣａ、Ｍｇ、Ｎａ、ＫまたはＬｉカチオンまたは同様のもので塩を形成でき、あるいは両性イオン塩または化合物の内部塩が存在してよい。
【００９６】
本開示で使用される「または同様のもの」または「および同様のもの」は、前述したような表現とは別の代替形態が当業者に知られており、詳細に言及したこれらの表現に加えることができることを意味し、他の実施形態では、「または同様のもの」および「および同様のもの」を、１つ以上のまたはすべての本発明の実施形態において削除できる。
【００９７】
アセタール保護基は、とりわけ水の存在下で、酸性条件に高度に感受性である。固相ペプチド合成中、または固体担体からの切断中、アセタール保護基の切断は、遊離のアルデヒド官能基を生じさせると思われ、これは遊離アミノ基と反応して他の副反応を経る可能性がある。したがって、オリゴペプチドの環化を実施して、大環状化合物ＩＩまたはＩＩＡを得るまで、アセタール保護基を維持することが重要である。
【００９８】
本明細書および特許請求の範囲を通してこれまで記載された保護基Ｐｒｏｔ＊＊、Ｐｒｏｔ＊＊＊、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊およびＡ＊、Ｒ２＊、Ｒ３＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊、Ｒ７＊、Ｘ＊の部分に存在する任意のさらなる保護基は、直交保護（orthogonal protection）を可能にするように選択される。
【００９９】
直交保護は、所望に応じて、それぞれ専用の反応条件のセットを有し、他の保護基または樹脂への結合、例えばリンカーを介した固体合成樹脂への結合に影響を与えずに、一度に複数の保護基の１つ（またはすべてではないが複数）を脱保護させる戦略である。他の言い方をすれば、この戦略は、異なる化学機構によって、また固相ペプチド合成の場合、適切なリンカーも使用して（リンカーと樹脂との結合は、共に、カルボキシ保護基として見なしてよい）除去される異なる部類の保護基を使用する。
【０１００】
好ましくは、保護基は、以下のように選択される：
Ｐｒｏｔ＊［（ｉｉｉ／ｂ）の反応中、ＩＶ、とりわけＩＶＡの切断中に除去され得る（すなわち、除去するのに適切である）、または後続して、しかし一方で、他の結合を切断することなく樹脂を付けたままで除去され得る（そのカルボニルを介して結合しているアミノ酸またはペプチド（とりわけ下記のリンカーＬを介して結合するα−カルボキシル基）を切断せず、また存在する他の保護基も切断除去しない）、保護基］、とりわけデプシペプチドまたはデプシペプチド前駆体中の（アミドではなく）エステル結合を切断せずに、存在する他の保護基に対するものとは別の条件下で、同時に、存在する樹脂ＲＥＳへのリンカーを介した結合を残して、除去可能な保護基であり、これは、好ましくは、弱塩基、例えばピペリジン、モルホリン、ジシクロヘキシルアミン、ｐ−ジメチルアミノ−ピリジン、ジイソプロピルアミン、ピペラジン、トリス−（２−アミノエチル）アミンによって、適切な溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレンの中で除去可能であり、Ｐｒｏｔ＊＊は、例えば、フルオレン−９−イルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、２−（２’または４’−ピリジル）エトキシカルボニルおよび２，２−ビス（４’ニトロフェニル）エトキシカルボニルからなる群から選択される。
【０１０１】
Ｐｒｏｔ＊＊は、（ｉｉｉ／ｂ）の切断反応の条件とは異なる条件下で、（とりわけ式ＩＩＩ＊またはとりわけＩＩＩＡ＊の化合物から）除去することができる保護基、とりわけアリールアルキル、とりわけ１−（Ｃ６〜Ｃ１２アリール）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル、より特定するとベンジルであり、これは、酸化アルミニウムまたはとりわけ炭素などの担体に担持されてよいＰｄまたはＰｔなどの貴金属触媒の存在下、例えば水素を用いて、例えば接触水素化によって除去することができる。
【０１０２】
Ｐｒｏｔ＊＊＊（存在する他の保護基に影響を与えず、生成物を樹脂上に残したまま、選択的に切断され得るアミノ保護基）は、Ｐｒｏｔ＊について記載したもの、例えばフルオレン−９−イルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）から選択され、各保護基は、例えば上記または下記の通りに除去することができる。
【０１０３】
Ｐｒｏｔ＊＊＊＊は、とりわけＰｒｏｔ＊＊＊について定義した通りに、存在する他の保護基に影響を与えずに、選択的に切断され得る保護基である。
【０１０４】
この場合の好ましい直交合成法は、固相および液相ペプチド合成を使用するペプチド合成について一般的に知られているＦｍｏｃ保護基戦略を利用する。
【０１０５】
アルデヒド保護基のＲｋおよびＲｌ（これらは、結合Ｏ原子およびそれらを結合する炭素と共に、保護されたアルデヒド基（アセタール）を形成する。）は、水の存在下、酸触媒、とりわけアルファ−ハロ置換アルカン酸、例えばトリフルオロ酢酸またはトリクロロ酢酸によって、除去することができる。
【０１０６】
存在する他の保護基ならびに樹脂ＲＥＳ（存在する場合）への結合用リンカーは、Ｐｒｏｔ＊、Ｐｒｏｔ＊＊、Ｐｒｏｔ＊＊＊およびＰｒｏｔ＊＊＊＊を除去することができる条件下で除去されないことが好ましく、例えばＡ＊において、カルバモイルは例えばトリチル（トリフェニルメチル）でＮ−保護することができ（例えば、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）による切断）、（例えばＲ６＊において）チロシンヒドロキシは、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）保護されていても、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、メトキシメチルもしくは酢酸アリールによって保護されていてもよく（例えばＴＦＡによる切断）、より好ましくは、樹脂ＲＥＳへのリンカーへの結合が好ましくは切断されない、または（脱保護と樹脂からの結合の切断とを同時に行いたいとき）切断もされる（例えば、ＴＦＡなどの酸による切断）条件下にある。
【０１０７】
適切な保護基は、その導入および除去についての方法と同様に、当技術分野で公知である。例えば、保護基、その導入法および除去は、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第３編、T. W. GreenおよびP. G. M. Wuts(編) J. Wiley & Sons, Inc., New York etc. 1999などの標準的な教科書に記載されているものから選択してよい。
【０１０８】
したがって、保護基Ｐｒｏｔ＊、Ｐｒｏｔ＊＊、Ｐｒｏｔ＊＊＊、Ｐｒｏｔ＊＊＊＊および他の保護基は、上記のものに限定されず、むしろ、例えば上記または下記の直交保護に適するように条件を満たすべきである。
【０１０９】
（ピペリジンなどの、Ｆｍｏｃ切断のために記載した塩基は、通常、許容されるが）デプシペプチド（エステル）結合の切断を回避するために、過度の塩基性条件は回避することが推奨される。
【０１１０】
脱保護ステップ中に有用である適切な溶媒または溶媒混合物は、例えば、慣例の溶媒、例えば、ジメチルホルムアミドなどのＮ，Ｎジアルキルホルムアミド、ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタン、エタノール、プロパノールもしくはイソプロパノールなどのアルカノール、ニトリル、例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミドもしくはジエチルホルムアミドなどのアルカン酸アミド、またはさらに芳香族炭化水素、例えばトルエン、または２種以上の混合物から選択してよく、水も存在してよい。温度は周囲温度またはそれより低くても高くてもよく、例えば−２０℃から５０℃の範囲であってよい。
【０１１１】
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）のための可能な固体担体のうち、以下を列挙できる：
−  スペーサーを含まないまたは含むＧｅｌ型の担体：これらは、官能基が等分布している、高溶媒和ポリマーである。この型の担体は、最も普及しており、以下を含む：
ポリスチレン：例えば１〜２％のジビニルベンゼン架橋されたスチレン、ポリアクリルアミドまたはポリメタクリルアミド：ポリスチレンの親水性代替物として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）：ＰＥＧ−ポリスチレン（ＰＥＧ−ＰＳ）は、ポリスチレンよりも安定性であり、ポリマー骨格から合成部位に間隔を空ける、ＰＥＧベースの担体：ＰＥＧ−ポリプロピレングリコールネットワークまたはポリアミドもしくはポリスチレンを有するＰＥＧから構成される（これらは既にスペーサー、ＰＥＧを含む）
−  表面型担体（surface-type support）：制御された多孔質ガラス、セルロース繊維および高度に架橋されたポリスチレンを含めた、表面官能化のために開発された材料
−  複合物：剛性マトリックスによって支持されたＧｅｌ型ポリマー。
【０１１２】
通常、これらのゲルは、上記または下記の様々な前駆体のためのリンカーＬが結合できる反応性基を保有する。例えば、このような基は、アミノメチル基、末端ヒドロキシを有するポリエチレングリコール基および同様のものを含む。
【０１１３】
任意のこのような担体を、本発明の実施形態において使用することができる。
【０１１４】
Ｇｅｌ型担体は、本発明の別の特別な実施形態において使用される。これらのうち、ポリスチレン（架橋されたジビニルベンゼン）、ポリアクリルアミドおよびポリメタクリルアミド樹脂が、とりわけ好ましい。
【０１１５】
可能なリンカーのうち、一般的に知られており適切なものは、すべて使用してよい。
【０１１６】
本発明の可能な実施形態における例は、２−メトキシ−４−ベンジルオキシベンジルアルコールリンカー（Ｓａｓｒｉｎ−リンカー、Ｓａｓｒｉｎは、超酸感受性樹脂を意味し、アルコール性ＯＨを介してアミノ酸またはペプチドを結合する）、トリチルリンカーファミリー（例えば、ＯＨを介してアミノ酸またはペプチドを結合するトリチル、２Ｃｌ−トリチル）、４−（２，４−ジメトキシフェニルヒドロキシメチル）フェノキシメチル−リンカー（Ｒｉｎｋ−Ａｃｉｄ−リンカーは、ＯＨを介してアミノ酸またはペプチドを結合する）、またはトリス（アルコキシ）ベンジルエステルリンカー（ＨＡＬ−リンカーは、ＯＨを介してアミノ酸またはペプチドを結合する）である。
【０１１７】
リンカー基の導入およびそれとアミノ酸とのカップリングは、本質的に実施例に記載されている通りに、または実施例と同様に、実施することができる。例えば、トリチルエステル形成の場合、樹脂（例えば、ジビニルベンゼンで架橋されたアミノメチルポリスチレン樹脂）は、ジアルキル酸アミド、例えばジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒および／またはエタノール、プロパノールもしくはイソプロパノールなどのアルコールの中に懸濁させて、例えば酸のカップリングのための下記のカップリング剤、例えば１−ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下で、ヒドロキシアリール酸リンカー、例えば４−（ジフェニルヒドロキシメチル）−安息香酸と反応させてよい、あるいはクロロ−（２’クロロ）トリチル−ポリスチレン樹脂上で製造する場合、樹脂は、適切な溶媒、例えばジクロロメタンの中に懸濁させ、塩素化剤、例えば塩化アセチルを添加し、次いで、例えば塩基、例えばＮ−メチル−モルホリンなどの第３級アミノ塩基の存在下で、アミノ酸（この用語は常に非保護または保護アミノ酸を含む）のカルボキシル基と反応させる。
【０１１８】
次いで、例えば、式ＩＩＩ、とりわけＩＩＩＡまたはＩＩＩ＊、とりわけＩＩＩ＊Ａの直鎖状前駆ペプチドを実現するために、完全な（保護または非保護）ペプチドの切断を、弱酸性の条件下で、例えば酢酸などの有機アルカン酸の存在下、適切な溶媒、例えばジクロロメタンまたはトリフルオロエタノールの中で実施することができる。
【０１１９】
固体担体からの切断条件は、トリチル、ｔ−ブチル、特にアセタール保護基などの分子中に存在する他の保護基が切断されないように選択されなければならない。アセタール保護基は、とりわけ水の存在下で、酸性条件に高度に感受性である。固相ペプチド合成中または固体担体からの切断中のアセタール保護基の切断は、遊離アルデヒド官能基を生じると思われ、これは遊離アミノ基と反応して他の副反応を経る可能性がある。
【０１２０】
酸、とりわけアミノ酸の反応性誘導体、またはペプチド、例えばジペプチドが言及される場合、これらはインサイチュで形成されてもよく、またはそれ自体が使用されてもよい。
【０１２１】
それ自体を使用する反応性（または活性）誘導体は、反応させる酸のカルボキシ基のハロゲン化物、例えば塩化物、またはニトロフェニルエステル、例えば２，４−ジニトロフェニルエステル、または酸無水物（対称性または、例えば酢酸を有する）を含む。
【０１２２】
インサイチュ形成の場合、慣例のカップリング剤を適用してよい。このような試薬は、当業者に知られており、多くの出典、例えばAldrich ChemFiles - Peptide Synthesis (Aldrich Chemical Co., Inc., Sigma-Aldrich Corporation, Milwaukee, WI, USA) Vol. 7 No. 2, 2007 （http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Aldrich/Brochure/al_chemfile_v7_n2.Par.0001.File.tmp/al_chemfile_v7_n2.pdfを参照されたい）から便利に推定できる。アミドおよびエステル結合の合成に可能なカップリング剤のうち、以下を列挙できる：
トリアゾール、ウロニウムまたはヘキサフルオロホスホニウム誘導体、例えば１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、１−ヒドロキシ−７−アザ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、エチル２−シアノ−２−（ヒドロキシイミノ）アセテート、２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウム（ＨＡＴＵ）、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、１−（メシチレン−２−スルホニル）−３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール（ＭＳＮＴ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、２−スクシンイミド−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボレート（ＴＳＴＵ）、２−（５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシミド）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボレート（ＴＮＴＵ）、Ｏ−［（シアノ（エトキシカルボニル）メチリデン）アミノ］−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム−テトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，３−ジメチル−１，３−ジメチレンウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＭＤＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（テトラメチレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＰｙＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−ビス（ペンタメチレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＰｉｐＵ）、３−ヒドロキシ−４−オキソ−３，４−ジヒドロ−１，２，３−ベンゾトリアジン（ＨＯＤｈｂｔ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールおよびその対応するウロニウム塩もしくはホスホニウム塩、指定されたＨＡＰｙＵおよびＡＯＰ、１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ−ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、クロロトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＣｌｏＰ）、または同様のもの、
カルボジイミド、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド、１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−エチルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−２−モルホリノエチル）カルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド（とりわけカルボキシル基のＯ−アシル尿素形成を介したエステル形成向け）、または
活性エステル形成剤、例えば２−メルカプトベンゾチアゾール（２−ＭＢＴ）、
アジド形成剤、例えばジフェニルホスホリルアジド、
酸無水物、例えばプロパンホスホン酸無水物、
酸ハロゲン化剤、例えば１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチル−１−プロペニルアミン、クロロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ビス（テトラメチレン）ホルムアミジニウムテトラフルオロボレートまたはヘキサフルオロホスフェート、クロロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ビス（テトラメチレン）ホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート、
または同様のもの、あるいは２種以上のこのような助剤の混合物。
【０１２３】
また、式ＸＩまたはＸＩＡの化合物と、式ＸＩＩまたはＸＩＩＡの化合物とのそれぞれのエステルカップリングの場合、対応する反応性カルボキシル化合物を使用してもよく、またはインサイチュで形成してもよい。本明細書では、とりわけＭＳＮＴが、カップリング剤として好ましいが、その理由は、これが高立体特異性を維持させるためである。
【０１２４】
式ＩＩＩ、とりわけＩＩＩＡの化合物のマクロラクトン化にも、アミノ酸のカップリングについて記載したカップリング試薬および条件を使用することができる。
【０１２５】
どちらの場合にも、適切な場合には、反応は、適切な場合にまたは必要に応じて、弱塩基（例えばＮ−メチルモルホリン、トリアルキルアミン、例えばエチルジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンなどのジ−（アルキル）アミノピリジン、または同様のもの）（式Ｉの化合物の前駆体中に存在するエステル基、例えばデプシペプチドエステル基の加水分解を可能にするように、過度に塩基性の条件にしない）の存在下、適切な溶媒または溶媒混合物、例えばジメチルホルムアミドなどのＮ，Ｎジアルキルホルムアミド、ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタン、Ｎ−メチルピロリドンなどのＮ−アルキルピロリドン、ニトリル、例えばアセトニトリル、ジオキサンもしくはテトラヒドロフランなどのエーテル、またはさらに芳香族炭化水素、例えばトルエン、または過度のカップリング剤が存在し、水も存在してよい、２種以上の混合物の存在下で、実施してよい。温度は、周囲温度またはこれより低くても高くてもよく、例えば−２０℃から５０℃の範囲でよい。
【０１２６】
式ＶＩＩ、ＶＩＩＡ、ＩＸ、ＩＸＡ、ＸＩ、ＸＩＡ、ＸＶ、ＸＶＡ、ＸＶＩ、ＸＶＩＡ、ＸＶＩＩ、ＸＶＩＩＡのアミノ酸（例えば、固相ペプチド合成によって得ることができる）は、公知である、またはこれらは、当技術分野において公知の方法に従って合成することができ、市販されており、かつ／または当技術分野において公知の方法と同様に合成することができる。
【０１２７】
また、残っている出発物質、例えば式ＸＩＶの酸も公知である、またはこれらは、当技術分野において公知の方法に従って合成することができ、市販されており、かつ／または当技術分野において公知の方法と同様に合成することができる。
【０１２８】
ジペプチドのためのカップリング反応は、遊離形態または活性化形態のアミノ酸の対応するカルボキシル基を使用する。
【実施例】
【０１２９】
以下の実施例は、その範囲を限定することなく、本発明を説明する。
【０１３０】
略語
ａｑ．    水性
Ｂｏｃ／ＢＯＣ    ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ブライン      塩化ナトリウム水溶液（室温で飽和）
Ｂｚｌ    ベンジル
ＣＯＭＵ    １−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ−ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＣＭ    ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ    Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ    ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ    Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｆｍｏｃ／ＦＭＯＣ    ９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ    Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド
Ｅｔ    エチル
ｈ    時間
ＨＡＴＵ    ２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウム
ＨＯＳＵ    Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ＨＰＬＣ    高速液体クロマトグラフィー
ＨＲ−ＭＳ    高分解能質量分析
ＩＰＣ    工程内管理
ＩＲ    赤外線分光法
ＩＴ    内部温度
Ｋａｉｓｅｒ  ｔｅｓｔ    ＳＰＰＳ中の脱保護をモニターするためのニンヒドリンベースの試験（E. Kaiser, R. L. Colescott, C. D. Bossinger, P. I. Cook, Analytical Biochemistry 34 595 (1970)を参照されたい）、合格の結果が出れば、脱保護が成功裏に行われたという意味である。
Ｍｅ    メチル
ＭＥＤ    ジクロロメタン
ＭＳ    質量分析法
ＭＳＮＴ    １−（メシチレン−２−スルホニル）−３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール
ＮＭＲ    核磁気共鳴分光法
ＰｙＢＯＰ    ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＲＰ    逆相
ＲＴ／ｒｔ    室温
ＳＰＰＳ    固相ペプチド合成
ＴＢＭＥ    ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＴＦＡ    トリフルオロ酢酸
【０１３１】
アミノ酸の略語については、上の表を参照されたい。
【０１３２】
別段指定されなければ、反応は室温で実施する。下記の化合物Ａの合成は、以下の簡略化したスキームに従って、溶液中で行い、より詳細は以下に記述する：
【０１３３】
【化４８】
2016500668.tif 000051
【０１３４】
液相中の２つのステップは、大環化と、脱保護／平衡である。この詳細と前述の反応は、以下の実施例中に記載される。
【０１３５】
反応スキームおよび以下の実施例に記載の２００４ＩＵＰＡＣ勧告文書による化合物の名称は、以下の通りである：
化合物１：ベンジル（２Ｓ）−２−（ジベンジルアミノ）−５−オキソペンタノエート；
化合物２：ベンジル（２Ｓ）−２−（ジベンジルアミノ）−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）ブタノエート；
化合物３：（２Ｓ）−２−（ジベンジルアミノ）−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）ブタン酸；
化合物４：（２Ｓ）−２−アミノ−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）ブタン酸；
化合物５：（２Ｓ）−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−ブタン酸；
化合物６：Ｎ２−（２−メチルプロパノイル）−Ｎ５−（トリフェニルメチル）−Ｌ−グルタミニル−Ｏ−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−（ジベンジルアミノ）−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）ブタノイル］−Ｌ−イソロイシル−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−メチル−Ｌ−チロシニル−Ｌ−イソロイシル｝−Ｌ−トレオニル−Ｌ−ロイシン；
化合物７：Ｎ２−（２−メチルプロパノイル）−Ｎ５−（トリフェニルメチル）−Ｌ−グルタミニル−Ｏ−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−４−（１，３−ジオキソラン−２−イル）ブタノイル］−Ｌ−イソロイシル−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−メチル−Ｌ−チロシニル−Ｌ−イソロイシル｝−Ｌ−トレオニル−Ｌ−ロイシン；
化合物８：２Ｓ）−Ｎ−［（３Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｓ，１９Ｒ）−３，９−ジ［（２Ｓ）−ブタン−２−イル］−６−｛［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル］メチル｝−１２−［２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）エチル］−７，１９−ジメチル−１５−（２−メチルプロピル）−２，５，８，１１，１４，１７−ヘキサオキソ−１−オキサ−４，７，１０，１３，１６−ペンタアザシクロノナデカン−１８−イル］−２−（２−メチルプロパンアミド）−Ｎ’−（トリフェニルメチル）ペンタンジアミド；
化合物９：Ｎ２−（２−メチルプロパノイル）−Ｎ５−（トリフェニルメチル）−Ｌ−グルタミニル−Ｏ−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−５，５−ビス（ベンジルオキシ）ペンタノイル］−Ｌ−イソロイシル−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−メチル−Ｌ−チロシニル−Ｌ−イソロイシル｝−Ｌ−トレオニル−Ｌ−ロイシン；
化合物１０：（２Ｓ）−Ｎ−［（３Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｓ，１９Ｒ）−１２−［３，３−ビス（ベンジルオキシ）プロピル］−３，９−ジ［（２Ｓ）−ブタン−２−イル］−６−｛［４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル］メチル｝−７，１９−ジメチル−１５−（２−メチルプロピル）−２，５，８，１１，１４，１７−ヘキサオキソ−１−オキサ−４，７，１０，１３，１６−ペンタアザシクロノナデカン−１８−イル］−２−（２−メチルプロパンアミド）−Ｎ’−（トリフェニルメチル）ペンタンジアミド；
化合物１２：１，１’−［（３−ブロモプロパン−１，１−ジイル）ビス（オキシメタンジイル）］ジベンゼン；
化合物１３：１，３−ジエチル２−アセトアミドプロパンジオエート；
化合物１４：１，３−ジエチル２−アセトアミド−２−［３，３−ビス（ベンジルオキシ）プロピル］プロパンジオエート；
化合物１５：２−アセトアミド−５，５−ビス（ベンジルオキシ）ペンタン酸；
化合物１６：（２Ｓ）−２−アミノ−５，５−ビス（ベンジルオキシ）ペンタン酸；
化合物１７：（２Ｓ）−５，５−ビス（ベンジルオキシ）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−ペンタン酸；
化合物Ａ：（２Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｒ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｓ，２１Ｒ）−２，８−ジ［（２Ｓ）−ブタン−２−イル］−２１−ヒドロキシ−５−［（４−ヒドロキシフェニル）メチル］−４，１１−ジメチル−１５−（２−メチルプロピル）−３，６，９，１３，１６，２２−ヘキサオキソ−１０−オキサ−１，４，７，１４，１７−ペンタアザビシクロ［１６．３．１］ドコサン−１２−イル］−２−（２−メチルプロパンアミド）ペンタンジアミド。
【０１３６】
実施例１：化合物Ａの合成
１Ａ）エチレングリコール−アセテートシントン化合物３および化合物５の合成：
【０１３７】
【化４９】
2016500668.tif 000052
エチレングリコール−アセテート保護基を有する非天然アミノ酸は、［Rodriguez および Taddei, Synthesis 2005, 3, 493〜495頁］に記載の手順に従って調製した公知のアルデヒド中間体１（スキーム１）から出発して合成した。触媒および分子篩としてのｐ−ＴｓＯＨの存在下でエチレングリコールで処理することによって、アルデヒド１をエチレングリコール−アセテート２に変換した。化合物２のベンジル−エステルをＬｉＯＨで加水分解して、遊離酸化合物３を得、これを対応するオリゴペプチド（化合物６）の調製に使用した。あるいは、化合物２のベンジル保護基を、チャコール（１０％）担持パラジウムを使用して水素化することによって切断し、遊離アミノ酸中間体４を、市販のＦｍｏｃ−ＨＯＳＵエステルで処理して、非天然アミノ酸のＮ−Ｆｍｏｃで保護されたエチレングリコール−アセテート（化合物５）を得た。注目すべきは、化合物３および５の安定性に関して安定性の問題がないことである。このようなアセテートおよび遊離カルボン酸官能基を含む分子では、この安定性は所与のものとは言えない。
【０１３８】
ａ）化合物２の合成：
化合物１（２９ｇ、７２．２３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（７００ｍＬ）に溶かした溶液に、エチレングリコール（１３３ｇ、２．１４ｍｏｌｅ）、ｐ−トルエン−スルホン酸一水和物（１５ｇ、７８．８６ｍｍｏｌ）および分子篩（３オングストローム、４０ｇ）を連続して添加した。反応混合物を、室温で１８時間撹拌した。濾過法によって分子篩を除去し、濾過ケーキを、酢酸エチルで洗浄し、濾過液を減圧下で蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１Ｌ）に溶解し、水（３×３００ｍＬ）で抽出し、有機相を減圧下で蒸発させて、３３．３ｇの粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチル／ヘキサン（４：６）を利用したシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製し、２８．０ｇの純粋な化合物２（収率８７％）を得た。
生成物の１Ｈ−ＮＭＲは、推定構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ２８Ｈ３１ＮＯ４に関する計算値:［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４６．２３２５９。実測値：４４６．２３２４８。
【０１３９】
ｂ）化合物３の合成：
化合物２（２６．８ｇ、６０．１５ｍｍｏｌ）をジオキサン（２５０ｍＬ）に溶解した。ＬｉＯＨ（１０．１ｇ、２４１．０５ｍｍｏｌ）および水（１５０ｍＬ）を添加し、混合物を室温で７２時間撹拌した。形成した懸濁液を水（２００ｍＬ）および酢酸（３２ｇ）で処理して、２つの透明な相を得た。二相混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、相を分離した。水相を分離し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、水（３００ｍＬ）で洗浄した。減圧下で溶媒を蒸発させて、２９ｇの粘稠液の粗生成物を得た。粗生成物を、ＤＣＭ／イソプロパノール（９：１）を溶離液として使用したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、１Ｈ−ＮＭＲによれば約１０ｍｏｌ％のイソプロパノールを含む１７．３ｇの生成物を得た。酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を溶解し、酢酸イソプロピル溶液を水（３×５０ｍＬ）で抽出することによって、残留イソプロパノールを生成物から除去した。最後に、減圧下で溶媒を除去し、生成物を、真空下、７０℃で乾燥して、化合物３（１６ｇ、７４．８％収率）を得た。
生成物の１Ｈ−および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、推定構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ２１Ｈ２５ＮＯ４に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：３５６．１８５６４；［Ｍ＋Ｎａ］＋：３７８．１６７５８。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：３５６．１８５８６；［Ｍ＋Ｎａ］＋：３７８．１６７４８。
【０１４０】
ｃ）化合物３からの化合物４の合成：
化合物３（２．７ｇ、７．５９６ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（６０ｍＬ）に溶解し、触媒（チャコール担持１０％Ｐｄ、３００ｍｇ）を添加した。反応混合物を、室温、大気圧下で、２３時間水素化し、その後、水素化を完了した。反応混合物を水（６０ｍＬ）で希釈し、室温で１時間撹拌して沈降した生成物を溶解した。次いで、反応混合物を濾過して触媒を除去し、濾過ケーキを水／イソプロパノール（１：１）（４５ｍＬ）で洗浄した。減圧下で溶媒を蒸発させ、後続して生成物を、真空下、４０℃で終夜乾燥して、化合物４（１．２４ｇ、９３．１８％収率）を得た。
１Ｈ−および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、化合物４についての推定構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ７Ｈ１３ＮＯ４に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１７６．０９１７４；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１９８．０７３６８。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１７６．０９１７３；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１９８．０７３６２。
【０１４１】
ｄ）化合物２からの化合物４の合成：
大気水素圧下、室温で、溶媒としてのエタノール／水（１：１ｖ／ｖ）中、チャコール担持１０％パラジウムを触媒として使用して、化合物２を水素化することによって、化合物４を調製した。仕上げに、触媒を濾過法により除去し、減圧下で溶媒を蒸発させた。後続して、真空下、４５℃で、生成物を乾燥し、化合物４を定量的収率で得た。
生成物は、上の化合物３から得た化合物４と同一であった。
【０１４２】
ｅ）化合物５の合成：
化合物４（１．２ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）を水（７ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．６９２ｇ）を添加した。この撹拌した混合物に、Ｆｍｏｃ−ＨＯＳＵ−エステル（＝（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２，５−ジオキソピロリジン−１−イルカーボネート）（２．３１ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（６ｇ）に溶かした溶液を添加し、反応混合物を室温で約１時間撹拌した。トリエチルアミンを数滴添加することによって、結果として得られた反応混合物のｐＨ値を８．５〜９．０に調節した。８．５〜９．０のｐＨを維持するために合計で約０．７ｇのトリエチルアミンの添加が必要だった。仕上げに、反応混合物を直接シリカゲルカラムに移すことによって、この反応混合物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにかけた。酢酸エチル／酢酸（９８：２）で各生成物留分を合わせたものを溶出し、溶媒を蒸発させることで、湿潤化合物５が得られた。湿潤生成物をヘキサン中に懸濁させ、室温で１時間撹拌し、沈降物を濾過法により単離した。沈降物を真空下の５０℃で終夜乾燥し、約２０ｍｏｌ％の酢酸を含む生成物を得た。この生成物を６０℃で酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、溶液を室温まで冷却した。種晶（化合物５）を室温で添加し、薄い懸濁液が形成されるまで、懸濁液を撹拌した。４０℃の減圧下で溶媒を部分蒸発させることによって、懸濁液の容積を約１５ｍＬまで減らし、ヘキサン（８９ｍＬ）を室温で３０分かけて懸濁液に添加した。懸濁液を室温でさらに１時間撹拌し、生成物を濾過法により単離した。生成物を真空下の５０℃で終夜乾燥し、化合物５（２．３１ｇ、８４．８５％収率）を得た。ＨＲ−ＭＳ：Ｃ２２Ｈ２３ＮＯ６に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：３９８．１５９８２；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：４１５．１８６３６；［Ｍ＋Ｎａ］＋：４２０．１４１７６。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：３９８．１５９９１；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：４１５．１８６５５；［Ｍ＋Ｎａ］＋：４２０．１４１８３。
1H-NMR (600MHz, d6-DMSO): δ ppm 1.64 (2H, m); 1.68 (1H, m); 1.81 (1H, m); 3.76 (2H, m); 3.87 (2H, m); 3.98 (1H, m); 4.22 (1H, m); 4.27 (2H, m); 4.79 (1H, m); 7.33 (2H, t, J=7.3Hz); 7.42 (2H, t, J=7.3Hz); 7.66 (1H, d, J=8.1Hz); 7.73 (2H, d, 広幅); 7.89 (2H, d, J=7.3Hz); 12.59 (1H, s, 広幅).
13C-NMR (150MHz, d6-DMSO): δ ppm 25.46 (CH2), 2993 (CH2), 46.67 (CH), 53.61 (CH), 64.27 (2xCH2), 65.65 (CH2), 103.12 (CH), 120.12 (2xCH), 125.30 (2xCH), 127.08 (2xCH), 127.67 (2xCH), 140.71 (2xC), 143.79 (2xC), 156.14 (C), 173.68 (C).
ＩＲ：３３４５、３３２１、３０６３、３０２１、２９７４、２９６３、２９４９、２７６７、１９５０、１９１４、１８７８、１７４１、１６９１、１６８２、１６１０、１５４１、１５２５、１４７７、１４６４、１４５１、１４０３、１３６７、１３２３、１２８５、１２７０、１２４９、１２２５、１１８８、１１３８、１１０４、１０８７、１０５５、１０３３、１００８、９８３、９６３、９３９、９２５、８７３、８３６、７９８、７８２、７５９、７４０、６４８、６２２。
【０１４３】
１Ｂ）ＳＰＰＳによる化合物７の合成
【０１４４】
【化５０】
2016500668.tif 000053
化合物７は、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）によって合成し、最後のステップは、以下の簡略化した反応スキーム２で、手短に表される：
【０１４５】
【化５１】
2016500668.tif 000054
【０１４６】
代替の反応において、Ｎ−ジベンジルで保護された化合物３、ならびにＮ−Ｆｍｏｃで保護された化合物５は両方とも、エチレングリコール−アセテートとして保護された、アルデヒド官能基を有する非天然アミノ酸を含む、対応するオリゴペプチド６および７それぞれのＳＰＰＳ合成に使用した（スキーム２）。化合物６のベンジル保護基は、溶液中のチャコール担持パラジウム（１０％）で水素化することによって除去し、化合物７を得た（スキーム２）。あるいは、化合物７は、最後のカップリングステップで非天然アミノ酸のために化合物５をシントンとして使用した場合に、クロロトリチル樹脂上でＳＰＰＳからも直接得た。意外なことに、ＳＰＰＳおよび後続するオリゴペプチド６および７の固体担体からの酸触媒切断の間、アセタール保護基の安定性に関して問題はなかった。詳細を以下に記載する：
【０１４７】
器具：底に濾布を備えたペプチドリアクター。窒素マニホールドは、濾布および底弁を介してリアクターを空にする。
【０１４８】
リンカー樹脂が結合した化合物Ｂは、以下のように製造した：
【０１４９】
１Ｂ）（Ａ）トリチル−リンカーと固体担体とのカップリング：
２００ｇのアミノメチル−ポリスチレン樹脂（１％ジビニルベンゼンで架橋、アミノメチル基のロード１ｍｍｏｌ／ｇ）（供給源：Senn Chemicals AG, Dielsdorf/Switzerland）を、ジメチルホルムアミド（１６００ｍＬ）およびイソプロパノール（１６００ｍＬ）と交互に数回撹拌した。ジメチルホルムアミドによる最後の洗浄を２回行った後、予め調製しておいた４−（ジフェニルヒドロキシメチル）−安息香酸（９１．３ｇ、３００ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール一水和物（４５．９ｇ、３００ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルカルボジイミド（７５．７ｇ、６００ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１６００ｍＬ）に溶かした溶液で樹脂を処理した。反応混合物を１．５時間撹拌し、ニンヒドリン試験を行った。試験は、依然として遊離アミノ酸を示したので、さらにジイソプロピルカルボジイミド（７．６ｇ、６０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を終夜撹拌した。翌朝行ったニンヒドリン試験はマイナスであり、反応混合物を濾過して取り除いた。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空下で乾燥し、２５７ｇの乾燥リンカー−樹脂を得た。この物質は、さらに分析せずに、次の合成ステップに使用した。
【０１５０】
１Ｂ）（Ｂ）Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
前述のステップからのリンカー−樹脂（１９０ｇ、１４７．８ｍｍｏｌ）は、トルエン（１４００ｍＬ）中で撹拌することによって膨潤させた。溶媒を濾過して取り除き、トルエン（１４００ｍＬ）および塩化アセチル（５３ｍＬ、１４７８ｍｍｏｌ）の溶液と置き換えた。この混合物を２時間撹拌し、濾過して取り除き、さらに２時間撹拌した後に濾過により除去した同一の混合物と置き換えた。塩素化樹脂をトルエンで２回洗浄し、ジクロロメタンで３回洗浄した。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１０４．８ｇ、２９６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチル−モルホリン（４９ｍＬ、４４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６００ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。この溶液を樹脂に添加し、終夜撹拌した。翌朝、溶液を濾過し、樹脂をジクロロメタンおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空下で乾燥し、２３４．７ｇの乾燥Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは０．７８７ｍｍｏｌ／ｇと測定され、結果として１８５ｍｍｏｌの収率（理論の１２５％）となった。外部業者先でのアミノ酸分析は、Ｄ−Ｌｅｕ対掌体が０．１％未満であると確定した。
【０１５１】
１Ｂ）（Ｃ）Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
前述のステップからのＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（１４０ｇ、１０９ｍｍｏｌ）は、ジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）中で、２回連続して、それぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基は、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジンで２回続けて洗浄（それぞれ５分および１５分）することによって切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をテトラヒドロフラン（１２００ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨ（１１２．１ｇ、３２８ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルベンゾトリアゾール一水和物（５１．２５ｇ、３３４ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルカルボジイミド（５１ｍＬ、６５５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（６００ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、即座にｐＨを確認した（ｐＨ＝６．５）。反応混合物を、ニンヒドリン試験が反応の完了を示すまで、１．５時間撹拌した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。小型サンプルの樹脂を乾燥し、アミノ酸分析（Ｄ−Ｌｅｕ  ０．１３％、Ｄ−Ｔｈｒ＜０．１％、Ｌ−ａｌｌｏ−Ｔｈｒ＜０．１％、Ｄ−ａｌｌｏ−Ｔｈｒ＜０．１％）のために送り、物質の塊は、さらに乾燥せずに、次のステップにかけた。
【０１５２】
１Ｂ）（Ｄ）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
前述のステップからのＦｍｏｃ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂は、ジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）中で、２回連続して、それぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基は、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジンで２回続けて洗浄（それぞれ５分および１５分）することによって切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（１３８．６ｇ、２２６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（８６．２ｇ、２２６ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（５８．４ｇ、４５２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、即座にｐＨを確認した（ｐＨ＝１０）。反応混合物を、ニンヒドリン試験が反応の完了を示すまで、３時間撹拌した。溶液を濾過し、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
樹脂を真空下で乾燥し、１７０ｇの乾燥Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは０．６０ｍｍｏｌ／ｇと測定され、１０２ｍｍｏｌの収率（最後の２つのステップにわたって理論の９４％）を示した。外部業者先でのアミノ酸分析は、以下の値を出した：（Ｄ−Ｌｅｕ  ０．１３％、Ｄ−Ｔｈｒ＜０．１％、Ｌ−ａｌｌｏ−Ｔｈｒ＜０．１％、Ｄ−ａｌｌｏ−Ｔｈｒ＜０．１％、Ｄ−Ｇｌｎ＜０．８％）。
【０１５３】
１Ｂ）（Ｅ）イソ酪酸のカップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
前述のステップからのＦｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（１６９ｇ、１０１ｍｍｏｌ）は、ジメチルホルムアミド（１３００ｍＬ）中で、２回連続して、それぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基は、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１３００ｍＬ）で２回続けて洗浄（それぞれ５分および１５分）することによって切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、イソ酪酸（１７．９ｇ、２０３ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（１０５．５ｇ、２０３ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（５２．４ｇ、４０６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５５０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、即座にｐＨを確認した（ｐＨ＝９．５）。反応混合物を、ニンヒドリン試験が反応の完了を示すまで、２．５時間撹拌した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
バッチは、乾燥してさらに分析せずに、直接次のステップにかけた。
【０１５４】
１Ｂ）（Ｆ）Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリング（エステル化）
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（前述のステップからの湿潤、１０１ｍｍｏｌ）は、ジクロロメタン（１２００ｍＬ）中で、３回連続して、それぞれ２０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。
溶媒を濾過して取り除き、ＭＳＮＴ（８８ｇ、２９７ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（１０５ｇ、２９７ｍｍｏｌ）を固体で添加した。ジクロロメタン（５００ｍＬ）ならびにＮ−メチルイミダゾール（１８．２ｇ、２２３ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（５１．２ｇ、３９６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶かした溶液を添加した。反応混合物を、プロセス制御におけるＨＰＬＣが反応の完了を示すまで、２時間撹拌した。溶液を濾過して取り除き、樹脂を、ジクロロメタンで３回、ジメチルホルムアミドで３回およびイソプロパノールで３回、続けて洗浄した。樹脂を真空下で乾燥し、１７２ｇの乾燥イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂を得た。Ｆｍｏｃのロードは、０．４１８ｍｍｏｌ／ｇと測定され、したがって７２ｍｍｏｌ（最後の２ステップにわたって７１％）の収率を示した。
【０１５５】
１Ｂ）（Ｇ）Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨのカップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂の調製
前述のステップからのイソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（１７２ｇ、７２ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（１３００ｍＬ）の中でそれぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１４００ｍＬ）で２回続けて洗浄（それぞれ５分および１５分）することによって切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（６８．７ｇ、１４４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５５．１ｇ、１４４ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（７００ｍＬ）に溶かした溶液を調製し、樹脂に添加した。エチルジイソプロピルアミン（３７．５ｇ、２８９ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶かした溶液を撹拌しながら添加した直後、カップリング溶液を添加した直後と反応の１時間後にｐＨを確認し、同じ結果（ｐＨ１０）が得られた。溶液を、ニンヒドリン試験が反応の完了を示すまで、２時間撹拌した。溶液を濾過し、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
バッチを、乾燥してさらに分析せずに、直接次のステップにかけた。
【０１５６】
１Ｂ）（Ｈ）Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（リンカー−樹脂に結合した化合物Ｂ）の調製
前述のステップからの湿潤イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（７２ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（１２００ｍＬおよび１３００ｍＬ）の中でそれぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１４００ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（１１００ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（１０３．９ｇ、２９４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（１２５．９ｇ、２９４ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（７６ｇ、５８８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４４０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（４４０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、反応混合物を２０時間撹拌した。その後、ニンヒドリン試験を行い、反応が完了したことが示された。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空下で乾燥し、１８５．５ｇの乾燥イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは、０．４ｍｍｏｌ／ｇと測定された。したがって、７４ｍｍｏｌの定量的収率が結果として得られた。
【０１５７】
１Ｃ）化合物７の液相合成
１Ｃ）（Ａ）化合物６の合成
ａ）化合物３のカップリング
前述のステップからのイソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（１０．４ｇ、４．３７ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）の中でそれぞれ３０分間ずつ撹拌することによって膨潤させた。ＦＭＯＣ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（５０ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回処理することによって、切断した。樹脂を幾分かのジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に連続して洗浄した。最後に、樹脂をジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄して、次のカップリングステップのために準備した。１００ｍＬのガラス瓶中に、化合物３（３．１ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（４．５５ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）およびエチル−ジイソプロピルアミン（２．２ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。塩基性溶液（ｐＨ１１）を５分間かき混ぜた後、それを樹脂に添加した。反応混合物を３時間撹拌した。次いで、溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで洗浄した。最後に、樹脂をジクロロメタン（５０ｍＬ）で３回洗浄し、ペプチドの切断に備えた。
ｂ）樹脂からの切断
上の化合物３のカップリング後に得た湿潤ペプチド−樹脂に、酢酸（４０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）の混合物を添加し、懸濁液を５時間撹拌した。懸濁液を濾過し、濾過液を丸底フラスコに集めた（濾過液１）。樹脂をジクロロメタン（２０ｍＬ）で２回洗浄し、洗浄液を濾過液１と合わせた。樹脂を新鮮な酢酸（４０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）で処理し、混合物を終夜撹拌した。懸濁液を濾過し、濾過液を丸底フラスコに集めた（濾過液２）。樹脂をジクロロメタン（２０ｍＬ）および濾過液２と合わせた洗浄液で２回洗浄した。すべての濾過液を合わせ、ロータリーエバポレーターで濃縮した。残留酢酸を、トルエン（１００ｍＬ）を用いた共沸蒸留によって除去した。溶媒を完全に蒸発させて、４．５ｇのガラス状赤褐色の残渣を粗生成物として得た。粗生成物を、ＹＭＣ  ＯＤＳ−ＡＱカラムを使用したＲＰ−クロマトグラフィーによって精製した。留分を、ＨＰＬＣを使用して評価し、ロータリーエバポレーターで富化留分を濃縮し、濃縮物を凍結乾燥した。収率：２．８６ｇの化合物６（最後の２ステップで４４％）。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ８５Ｈ１１２Ｎ８Ｏ１４に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１４６９．８３７０８。実測値：１４６９．８３６９１。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、推定構造を確定した。
【０１５８】
１Ｃ）（Ｂ）化合物７（化合物６の脱保護による変形形態）の合成
化合物６（０．５ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をイソプロパノール／水（９５：５ｖ／ｖ、１５ｍＬ）に溶解し、溶液をアルゴンで流した。チャコール担持パラジウム（１０％Ｐｄ、０．２５ｇ）を、アルゴン流の下、添加し、懸濁液をＩＴ３５〜４０℃に加熱した。水素ガスを気相に導入し、混合物を、水素の大気圧下で、ＩＰＣ（ＨＰＬＣ）が反応の完了（５％未満の出発物質）を示すまで、撹拌した。
仕上げに、触媒を濾過法によって取り除き、濾過残渣をイソプロパノールで洗浄した。濾過液を蒸発させて、５００ｍｇの粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチル／メタノール（９３：７）を使用したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、３４８ｍｇの化合物７を得た。収率：７９．３％。
ＨＳ−ＭＳ：Ｃ７１Ｈ１００Ｎ８Ｏ１４に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１２８９．７４３１８；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１３１１．７２５１２。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１２８９．７４３０８；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１３１１．７２４８７。
【０１５９】
１Ｄ）化合物７（化合物５のカップリングによる変形形態）のＳＰＰＳ合成
クロルトリチル樹脂に結合した化合物Ｃを製造し、以下のように使用した：
【０１６０】
１Ｄ）（Ａ）：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨとクロルトリチル−樹脂とのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
クロル−（２’−クロル）トリチル−ポリスチレン樹脂（４７．１５ｇ、５０ｍｍｏｌ）は、ジクロロメタン（３５０ｍＬ）中で終夜撹拌することによって、膨潤させた。溶媒を濾過して取り除き、ジクロロメタン（３３０ｍＬ）および塩化アセチル（１９．７５ｇ、２５０ｍｍｏｌ）の溶液と置き換えた。この混合物を３時間４５分撹拌し、濾過して取り除き、さらに９０分撹拌した後で濾過により取り除いた同一の混合物と置き換えた。この処理を１時間４５分間、もう一度繰り返した。塩素化樹脂をジクロロメタンで３回洗浄した。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３５．４ｇ、１００ｍｍｏｌ）およびＮ−メチル−モルホリン（１５．２ｇ、１５０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。この溶液を樹脂に添加し、終夜撹拌した。翌朝、溶液を濾過して取り除き、樹脂をジクロロメタンおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。樹脂を真空下で乾燥し、６９．１ｇの乾燥Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは０．７４ｍｍｏｌ／ｇと測定され、５１ｍｍｏｌの収率（定量的収率）がもたらされた。
【０１６１】
１Ｄ）（Ｂ）：Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
前述のステップからのＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（６７．１ｇ、４９．７ｍｍｏｌ）は、連続して２回、ジメチルホルムアミド（４００ｍＬおよび３５０ｍＬ）中で、それぞれ３０分間および７５分間撹拌することによって、膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジンで、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をテトラヒドロフラン（３３０ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨ（３３．９５ｇ、９９．４ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルベンゾトリアゾール一水和物（２３．３１ｇ、１５２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルカルボジイミド（３７．６ｇ、２９８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２８５ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、反応混合物を終夜撹拌した。ＨＰＬＣは、完全な反応を示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。最後に、樹脂をＴＢＭＥで５回洗浄し、真空下で乾燥し、６７．５ｇの乾燥Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは０．５８ｍｍｏｌ／ｇと測定され、３９ｍｍｏｌの収率（理論の７９％）がもたらされた。
【０１６２】
１Ｄ）（Ｃ）：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨのカップリング
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
前述のステップからのＦｍｏｃ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（４９．４ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（それぞれ３５０ｍＬ）中で、それぞれ３０分間および７０分間撹拌することによって、膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジンで、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（３４．４ｇ、５７．３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２１．５ｇ、５７．３ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（１４．８ｇ、１１４．６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１９０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、即座にｐＨを確認した（ｐＨ≧８）。反応混合物を２時間３０分撹拌した後、プロセス制御におけるＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
樹脂は乾燥せず、しかし直接次のステップに導入した。
【０１６３】
１Ｄ）（Ｄ）：イソブチリル化
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（前述のステップ由来の湿潤状態にあるもの、２８．７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）で３０分間洗浄した。
Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（４００ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、イソ酪酸（５．０１ｇ、５６．９ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（２９．３３ｇ、５６．４ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（１５．５５、１２０ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１９０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、即座にｐＨを確認した（ｐＨ＝１１）。反応混合物を１時間撹拌した後、プロセス制御におけるＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
バッチを、乾燥してさらに分析せずに、直接次のステップにかけた。
【０１６４】
１Ｄ）（Ｅ）：Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリング（エステル化）
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（前述のステップ由来の湿潤状態にあるもの、２８．７ｍｍｏｌ）を、室温でジクロロメタンによって２回洗浄し、窒素下で、冷やした（０℃）ジクロロメタンによってさらに２回洗浄した。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（３７．６５ｇ、１０６．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルイミダゾール（１０．００ｇ、１２１．８ｍｍｏｌ）およびＭＳＮＴ（３１．６５ｇ、１０６．８ｍｍｏｌ）をＭＥＤ（２１０ｍＬ）に溶かした溶液を、０℃、窒素下で調製した。カップリング溶液を冷やした樹脂に添加し、反応混合物を３０分間撹拌した後、追加の量のＮ−メチルイミダゾール（５．３３ｇ、６４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をさらに３０分間撹拌した後、プロセス制御におけるＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。最後に、樹脂をＴＢＭＥで５回洗浄し、真空下で乾燥し、５５．７ｇの乾燥イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂を得た。Ｆｍｏｃのロードは０．４３ｍｍｏｌ／ｇと測定され、２４．２ｍｍｏｌの収率（最後の３ステップにわたって８４％）をもたらした。
【０１６５】
１Ｄ）（Ｆ）：Ｆｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨのカップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
前述のステップからの乾燥イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（５５．５ｇ、２４．１ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（それぞれ４００ｍＬ）の中で、それぞれ３０分間ずつ撹拌することによって、膨潤させた。
Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（４５０ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（２８０ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
Ｆｍｏｃ−Ｎ−メチル−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（２２．１２ｇ、４７．７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７．８１ｇ、４６．８ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（１２．０９ｇ、９３．５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２８０ｍＬ）に溶かした溶液を調製し、樹脂に添加した。カップリング溶液の添加後、反応混合物のｐＨを即座に確認した（ｐＨ＞８）。溶液を２時間撹拌した後、プロセス制御におけるＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。
バッチを、乾燥してさらに分析せずに、直接次のステップにかけた。
【０１６６】
１Ｄ）（Ｇ）：Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨのカップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂の調製
前述のステップからの湿潤イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（２４．１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）で３０分間洗浄した。Ｆｍｏｃ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（４５０ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回洗浄することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に数回洗浄した。フェノールフタレインおよび水を最終洗浄溶液のサンプルに添加した。ピンク色がないことにより、ピペリジンの除去が成功裏に行われたことが証明された。
樹脂をジメチルホルムアミド（２８０ｍＬ）で３回洗浄し、以下のカップリングステップの準備を行った。
丸底フラスコ中に、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（３３．０１、９３．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（３９．９９ｇ、９３．４ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（２４．１６ｇ、１８７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１１０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（１１０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。
溶液を樹脂に添加し、ｐＨを確認した（ｐＨ＞８）。反応混合物を２時間撹拌した。その後、プロセス制御におけるＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に洗浄した。最後に、樹脂をＴＢＭＥで５回洗浄した。
樹脂を真空下で乾燥し、６１．１ｇの乾燥イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂を得た。Ｆｍｏｃ基によるロードは０．３０ｍｍｏｌ／ｇと測定された。したがって、１８．３ｍｍｏｌの収率という結果になり、これは最後の２ステップにわたり７６％に相当する。
【０１６７】
１Ｄ）（Ｈ）：化合物５のカップリング
化合物７の調製
ａ）カップリング
イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−クロルトリチル樹脂（６．５ｇ、１．８９ｍｍｏｌ）は、後続して２回、ジメチルホルムアミド（４５ｍＬおよび４０ｍＬ）の中で、それぞれ３０分間ずつ撹拌することによって、膨潤させた。
ＦＭＯＣ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（５０ｍＬおよび５５ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、後続して２回処理することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に連続して数回洗浄した。フェノールフタレイン／水による比色試験で、塩基がないことを確認した。最後に、樹脂をジメチルホルムアミド（３×３０ｍＬ）で洗浄し、以下のカップリングステップのために準備した。
丸底フラスコ中に、化合物５（１．５０ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（１．９６ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）およびエチル−ジイソプロピルアミン（０．９８ｇ、７．５４ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶かした溶液を調製した。塩基性溶液（ｐＨ８）を５分間かき混ぜた後、これを樹脂に添加した。反応混合物を２時間撹拌し、反応の進行を、樹脂からサンプルを切断することによって、モニターした。サンプルのＨＰＬＣは、変換が完了したことを示した。溶液を濾過して取り除き、樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで交互に連続して洗浄した。ジメチルホルムアミドで湿潤した樹脂から、ＦＭＯＣ保護基を、ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（６０ｍＬ）で、それぞれ５分間および１５分間、２回連続で処理することによって、切断した。樹脂をジメチルホルムアミドおよびイソプロパノールで数回連続して交互に洗浄した。洗浄の効果をフェノールフタレイン／水で確認した。最後に、樹脂をジクロロメタン（４０ｍＬ）で３回洗浄し、ペプチドの切断のために準備した。
【０１６８】
ｂ）樹脂からの切断
湿潤イソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−化合物５−Ｈ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂に、ジクロロメタン（４０ｍＬ）、酢酸（４．９９ｍＬ）およびトリフルオロエタノール（４．９６ｍＬ）の混合物を添加し、懸濁液を３時間撹拌した。懸濁液を濾過し、丸底フラスコに濾過液を集めた。切断ステップを、同量の切断用混合物を用いて、各回２時間かけて、２回繰り返した。すべての濾過液を集めた。樹脂を、トルエン（４０ｍＬ）および濾過液と合わせた洗浄液で、３回洗浄した。
ロータリーエバポレーターで、生成物を含有する溶液を蒸発させて乾燥した。残留固体をアセトニトリル／水に溶解し、凍結乾燥した。２．９５ｇの凍結乾燥粉末を、粗生成物として単離した。
粗材料を、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  ＲＰ４  １０ｕｍカラム（Ｅｋａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＡＢ、Ｂｏｈｕｓ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、ＲＰ−クロマトグラフィーによって精製した。ＨＰＬＣを使用して留分を評価し、生成物富化留分を合わせ、ロータリーエバポレーターで濃縮し、濃縮物を凍結乾燥して、１．０ｇの化合物７（最後の２ステップで４１％収率）を得た。純度：９２％ａ。
生成物の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、回転異性体の混合物として推定された構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ７１Ｈ１００Ｎ８Ｏ１４に関する計算値；［Ｍ＋Ｈ］＋：１２８９．７４３１８；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１３１１．７２５１２。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１２８９．７４２９２；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１３１１．７２４７３。
【０１６９】
１Ｅ）化合物Ａの合成
合成の最後のステップは、後続するスキームに示す：
【０１７０】
【化５２】
2016500668.tif 000055
【０１７１】
詳細については、合成は、以下に記載のものである：
【０１７２】
１Ｅ）（Ａ）大環状化
化合物８の調製
４−ＤＭＡＰ（１００ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２０５．４ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１５ｍＬ）に溶解した。溶液を０℃まで冷却した。この溶液に、化合物７（３４８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶かした溶液を、１０分以内で、滴加した。反応混合物をさらに１０分間、０℃で撹拌して、環化を完了させた。仕上げに、反応混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸イソプロピル（１５０ｍＬ）を添加し、次いでさらにブライン（１０ｍＬ）を添加した。相を分離し、有機相を希釈ＮａＣｌ水溶液（６０ｍＬ）で再度抽出した。有機相を分離し、減圧下のロータリーエバポレーターで溶媒を蒸発させて、５２３ｍｇの粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチルを移動層として用いたシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、２７８．９ｍｇの化合物８（収率８１．３％）を得た。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ７１Ｈ９８Ｎ８Ｏ１３に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１２７１．７３２６１；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：１２８８．７５９１６；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１２９３．７１４５６。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１２７１．７３２１０；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：１２８８．７５８２０；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１２９３．７１４７８。
1H-NMR (600MHz, d6-DMSO): δ ppm 0.47 (3H, m); 0.73 (3H, m); 0.75-0.87 (12H, m); 0.97-1.05 (8H, m); 1.10 (3H, m); 1.13 (1H, m); 1.25 (9H, m); 1.33 (1H, m); 1.46 (1H, m); 1.56 (6H, m); 1.65 (2H, m); 1.79 (1H, m); 1.96 (1H, m); 2.30 (2H, m); 2.43 (1H, m); 2.68 (4H, m); 3.29 (1H, m); 3.73-3.88 (4H, m); 4.17 (1H, m); 4.19 (1H, m); 4.24 (1H, m); 4.30 (1H, m); 4.42 (1H, m); 4.57 (1H, m); 4.73 (1H, m); 5.17 (1H, m); 5.26 (1H, m); 6.86 (2H, m); 7.12-7.27 (18H, m); 7.90 (1H, m); 7.94 (1H, m); 8.18 (1H, m); 8.51 (2H, m); 8.82 (1H, m).
ＩＲ：３６３７、３４００、３３０６、３０５９、３０３１、２９６８、２９３４、２８７７、１７３８、１６５８、１５０９、１４６９、１４４９、１４１４、１３８８、１３６７、１３３９、１２３９、１１６２、１１００、１０６６、１０３７、９６８、９４６、８５１、７６７、７５３、７４１、７０２、６３７、６２５。
【０１７３】
１Ｅ）（Ｂ）脱保護および平衡
化合物８（２００ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃まで冷却した。トリフルオロ酢酸（１１．５ｇ）を溶液に０℃にて滴加し、反応混合物を０℃でさらに３時間撹拌した。次いで、反応混合物をジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈し、水（２ｍＬ）を添加した。反応温度を２０〜２５℃に上げ、この温度で混合物を１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を、酢酸ナトリウム（１６．３ｇ）を水（８０ｍＬ）に溶かした溶液に注ぎ、酢酸エチル（４０ｍＬ）を添加した。二相混合物を激しく撹拌し、相を分離した。有機相を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、水相を酢酸エチル（４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥した。減圧下、４０〜４５℃で溶媒を蒸発させて、２７０ｍｇの粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチル／イソプロパノール（９：１）を溶離液として使用したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、１０５ｍｇの化合物Ａを得た。収率：７１．８％。
構造は、ＮＭＲデータによって確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ４６Ｈ７２Ｎ８Ｏ１２に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：９２９．５３４２５；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：９４６．５６０８０；［Ｍ＋Ｎａ］＋：９５１．５１６１９。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：９２９．５３４１２；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：９４６．５６１１０；［Ｍ＋Ｎａ］＋：９５１．５１６１１。
【０１７４】
実施例２：非環状アセタール保護基を使用する、化合物Ａの合成：ジベンジルアセタールの使用
以下の反応スキームは、実施例１の化合物７の代替としての化合物９の使用を示す：
【０１７５】
【化５３】
2016500668.tif 000056
【０１７６】
詳細については、スキーム中の対応する前駆体および反応を、以下のように実現する：
【０１７７】
２Ａ）ジベンジル−アセタールシントン（化合物１７）の合成
化合物１７は、下記の合成スキームに従って、調製した：
【０１７８】
【化５４】
2016500668.tif 000057
【０１７９】
２Ｂ）化合物１２の合成：
窒素下、０℃で、３Ｌリアクター中に、塩化メチレン（１．１５ｋｇ）中の乾燥アクロレイン（１０５．３ｇ、１．７８ｍｏｌ）を導入し、トリメチルブロモシラン（２８１．７ｇ、１．７８ｍｏｌ）を３０分にわたって滴下漏斗で滴加し、温度を５℃未満に維持した。１時間３０分の撹拌後、４５分かけてベンジルアルコール（３１１．１ｇ、２．８５ｍｏｌ）を滴加し、混合物を０℃で１６時間撹拌した。オレンジ色の溶液に、ピリジン（２９ｇ、０．３６ｍｏｌ）、無水酢酸（３８ｇ、０．３６ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．４ｇ、０．０４ｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２４時間撹拌し、１０℃に冷やし、ＮａＨＣＯ３の１０％溶液（７５０ｍＬ）をｐＨ＝７になるまで添加した。有機相を水（２×５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を蒸発させて、化合物１２（４２８ｇ、９０％）を未精製の黄色の油（冷蔵庫内に数時間放置すると解離する）として得た。粘性のオレンジ色の下の相を除去した後、６％の酢酸ベンジルは、依然として、未精製の物質中に存在していた。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 2.2 (q, 2H), 3.4 (t, 2H), 4.5 (d, 2H), 4.6 (d, 2H), 4.9 (t, 1H), 7.2 (m, 10H).
【０１８０】
２Ｃ）化合物１４の合成：
３Ｌリアクター中、ジエチルアセトアミドマロネート（化合物１３、２７５ｇ、１．２４１ｍｏｌ）をＮ２下で無水ＤＭＦ（８００ｇ）中に導入した。無水ＤＭＦ（４２４ｇ）に溶解したカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１４４ｇ、１．２４１ｍｏｌ）を、滴下漏斗によって１０分かけて添加した。温度は４５℃まで上がった。混合物を最大８０℃まで加熱し、未精製の化合物１２（４２８ｇ、１．０３４ｍｏｌ）を１時間かけて滴加した。追加のＤＭＦ（１２５ｇ）を使用し、混合物を、不活性雰囲気下、８０℃で２時間撹拌した。次いで、溶媒を蒸発させた。酢酸エチル（１．２Ｌ）および水（２．５Ｌ）を添加した。有機相をＮａＣｌの１０％水溶液（３×１．５Ｌ）で洗浄し、有機溶媒を留去した。ｔ−ブチル−メチルエーテル／ヘプタンからの残留物（幾分か残留酢酸エチルを含有している）の結晶化によって、白色の固体の化合物１４（４２３ｇ、純度９７％）を８７％の収率で得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 1.2 (t, 6H), 1.6 (m, 2H), 2.0 (s, 3H), 2.5 (m, 2H), 4.2 (m, 1H), 4.55 (d, 2H), 4.65 (d, 2H), 4.7 (t, 1H), 6.8 (s, 1H), 7.3 (m, 10H).
【０１８１】
２Ｄ）化合物１５の合成：
３Ｌリアクター中、化合物１４（２１１ｇ、４３４ｍｍｏｌ）および９５０ｍＬエタノール９５％を導入した。１５０ｍＬのエタノール９５％中の水酸化カリウム（３０ｇ、４７７ｍｍｏｌ）を、２５分かけて滴下漏斗で添加した。スラリーは透明な溶液になった。混合物を室温で３時間３０分撹拌した。一酸／モノエステル中間体の変換完了は、ＨＰＬＣによって確証された。混合物を２時間３０分加熱還流して脱カルボキシル化した。次いで、１５０ｍＬのエタノール９５％中の水酸化カリウム（３４ｇ、５６４ｍｍｏｌ）をさらに添加し、混合物を７５℃で２時間撹拌した。次いで、エタノールを１時間かけて留去した。混合物を室温に冷却し、水を添加し、後続してｔ−ブチル−メチル−エーテルを添加して不溶性の副生成物を抽出した。次いで、水相を酢酸でｐＨ５．０まで酸性化し、生成物をｔ−ブチル−メチル−エーテルで再度抽出し、有機相を水で洗浄し、真空下で濃縮した。弱濃度が必要であり、より正確には５０℃未満の温度、優れた真空、および非常に急速である必要があり、そうでなければ環状誘導体に分解してしまうことに留意されたい。回収した油は非常に急速に結晶化する。ｔ−ブチル−メチル−エーテル／ヘプタン（１：２）からの再結晶化により、１４８．６ｇの白色固体の化合物１５（収率：８７％、純度：９８％ａ）を得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 1.8 (s, 3H), 1.9 (m, 2H), 2.0 (m, 2H), 4.5 (q, 1H), 4.6 (d, 2H), 4.7 (d, 2H), 4.8 (t, 1H), 6.4 (d, 1H), 7.3 (m, 10H).
【０１８２】
２Ｅ）化合物１６の合成：
３Ｌリアクター中に、クエン酸塩緩衝剤（１Ｌ、ｐＨ＝５）を導入した。アミノ酸の化合物１５（１４６ｇ、３８５ｍｍｏｌ）を添加し、水酸化ナトリウム３０％（８４ｇ）および追加のクエン酸塩緩衝剤（１３０ｍＬ）でｐＨを８．０〜８．５に調節した。塩化コバルト１ｍＭ（１５０ｍＬ）を添加して０．１ｍＭの濃度補因子を得た。最後に酵素（アシラーゼ「Ａｍａｎｏ」ＡＣＶ１２５０２（Ａｍａｎｏ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｃ．，Ｎａｇｏｙａ、Ｊａｐａｎ）、７．２５ｇ、５％ｗ／ｗ）を３０℃で添加した。茶色の混合物を、ＨＰＬＣが５０％変換を示すまで（約２４時間）、撹拌した。白色のスラリーをｐＨ７．０まで酸性化し、濾過して取り除いた。未精製の固体の濾過は、非常にゆっくりで、適切に進めるには大きな漏斗が必要となることに留意されたい。固体を水（３×）およびアセトン（３×）で洗浄し、最終的には真空下で乾燥した。メタノール／水で再結晶化して、５１．６ｇの白色の固体の化合物１６（４１％の単離収率、純度：９９％）を得た。融点１９０℃で分解する。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 1.8 (m, 4H), 2.5 (s, 2H), 3.1 (t, 1H), 4.5 (d, 2H), 4.6 (d, 2H), 4.7 (t, 1H), 7.3 (m, 10H).
【０１８３】
２Ｆ）化合物１７の合成：
７５０ｍＬリアクター中に、不活性雰囲気下、水（３２０ｍＬ）およびアセトニトリル（８０ｍＬ）中の化合物１６（４０．２ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を導入した。これに白色のスラリーのトリエチルアミン（２４．３ｇ、２４０ｍｍｏｌ）を３５分にわたって添加した。固体の溶解が完了した後、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（４０．５ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間３０撹拌した。酢酸エチルで抽出を実施した。有機相を水で洗浄し、大量の溶媒を留去した。少量の水を加え、混合物をｐＨ４．６に酸性化した。有機相を維持し、水（２×）で洗浄し、最後に真空下で濃縮した。残留物をｔ−ブチル−メチル−エーテル／ヘプタン（１／３）で再結晶化して、白色の固体の化合物１７（５８．２ｇ、８８％収率、純度：９２％ａ、ｅｅ：キラルＨＰＬＣによって１００％が確証された）を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO) δ ppm 1.8 (m, 4H), 4.0 (m, 1H), 4.2 (q, 1H), 4.3 (d, 2H), 4.5 (d, 2H), 4.6 (d, 2H), 4.8 (t, 1H), 7.3 (m, 11H), 7.4 (d, 2H), 7.6 (d, 1H), 7.7 (d, 2H), 7.9 (d, 2H).
【０１８４】
２Ｇ）化合物９の合成：
化合物１７（８．３８８ｇ、１５．２１ｍｍｏｌ）をイソブチリル−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｉｌｅ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）Ｍｅ−Ｉｌｅ−Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−リンカー−樹脂（１０．３ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）に連結させ、リンカー−樹脂に結合したペプチド上で、Ｆｍｏｃ保護基を切断し、化合物６の調製のために上に記載した手順に従って、リンカー−樹脂から生成物を切断した。粗生成物を、ＹＭＣ−ＯＤＳ  ＡＱカラムを使用するＲＰ−クロマトグラフィーによって精製した。留分を、ＨＰＬＣを使用して評価し、生成物富化留分を合わせ、ロータリーエバポレーターで濃縮し、濃縮物を凍結乾燥して、２．３ｇの化合物９（最後の２ステップで３６．８％収率）を得た。ＨＰＬＣ−純度：９２．９％ａ。１Ｈ−ＮＭＲは、回転異性体の混合物としての推定構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ８３Ｈ１１１Ｎ８Ｏ１４に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１４４３．８２１４３。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１４４３．８２１６６。
【０１８５】
２Ｈ）化合物１０の合成（大環状化）：
４−ＤＭＡＰ（２５６ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５２７ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶解する。溶液を０℃に冷却する。この溶液に、化合物９（１．００ｇ、０．６９３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３０ｍＬ）に溶かした溶液を１０分以内で滴加する。反応混合物を０℃でさらに１５分撹拌し、環化を完了させる。仕上げに、反応混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸イソプロピル（２５０ｍＬ）を添加し、後続してブライン（２０ｍＬ）を添加する。相を分離し、有機相を希釈ＮａＣｌ水溶液（６０ｍＬ）で再度抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を４０〜４５℃の減圧下で蒸発させて、１．０８ｇの粗生成物を得る。粗生成物を、酢酸エチルを溶離剤として使用するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、生成物を４０〜４５℃の真空下で乾燥して、０．６２ｇの化合物１０を得た。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ８３Ｈ１０８Ｎ８Ｏ１３につい関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１４２５．８１０８６；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：１４４２．８３７４１；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１４４７．７９２８１；［Ｍ＋Ｋ］＋：１４６３．７６６７５。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：１４２５．８１１４０；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：１４４２．８３７２８；［Ｍ＋Ｎａ］＋：１４４７．７９２４８；［Ｍ＋Ｋ］＋：１４６３．７６６８５。
1H-NMR (600MHz, d6-DMSO): δ ppm 0.47 (br. S., 1H), 0.47-0.54 (m, 1H), 0.63-0-70 (m, 2H), 0.73-0.81 (m, 9H), 0.85 (d, J=6.6Hz, 3H), 0.97-1.05 (m, 7H), 1.08 (d, J=6.6Hz, 2H), 1.16-1.22 (m, 2H), 1.23-1.31 (m, 3H), 1.27 (m, 9H), 1.46-1.52 (m, 1H), 1.53-1.61 (m, 3H), 1.65-1.73 (m, 3H), 1.80-1.88 (m, 2H), 1.94-2.01 (m, 1H), 2.00 (s, 1H), 2.32 (m, 2H), 2.39-2.47 (m, 1H), 2.49-2.55 (m, 2H), 2.68-2.76 (m, 1H), 2.72 (s, 2H), 3.29 (dd, J=14.3, 7.7Hz, 1H), 3.36 (m, 8H). 4.20-4.24 (m, 1H), 4.30-4.34 (m, 1H), 4.48-4.56 (m, 3H), 4.58-4.66 (m, 3H), 4.71 (m, 1H), 5.27-5.35 (m, 1H), 6.84-6.91 (m, 2H), 7.15-7.22 (m, 11H), 7.25-7.31 (m, 8H), 7.32-7.36 (m, 6H), 7.90-7.98 (m, 2H), 8.52 (s, 1H), 8.74-8.83 (m, 1H).
【０１８６】
２Ｉ）化合物１０からの化合物Ａの合成（脱保護および平衡）：
化合物１０（４００ｍｇ、０．２８１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８０ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃まで冷却する。トリフルオロ酢酸（２０．５ｇ）を０℃で激しく撹拌しながら添加する。反応混合物をこの温度でさらに３時間撹拌し、ジクロロメタン（８０ｍＬ）で希釈し、後続して水（４．０ｍＬ）を添加する。次いで、温度を室温まで上げ、反応物を室温で２０時間激しく撹拌した。
次いで、反応混合物を、酢酸ナトリウム（２９．３ｇ）を水（１６０ｍＬ）に溶かした溶液に注ぎ、酢酸エチル（８０ｍＬ）を添加する。二相混合物を激しく撹拌し、相を分離させる。有機相を水（２×４０ｍＬ）で洗浄し、水相を酢酸エチル（８０ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥する。溶媒を４０〜４５℃の減圧下で蒸発させ、５２０ｍｇの粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチル／イソプロパノール（９：１）を溶離剤として使用するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、１７１ｍｇの化合物Ａを得た。収率：６５．５％。
ＮＭＲおよびＨＲ−ＭＳデータは、推定構造を確定した。
ＨＲ−ＭＳ：Ｃ４６Ｈ７２Ｎ８Ｏ１２に関する計算値：［Ｍ＋Ｈ］＋：９２９．５３４２５；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：９４６．５６０８０；［Ｍ＋Ｎａ］＋：９５１．５１６１９。実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋：９２９．５３３４５；［Ｍ＋ＮＨ４］＋：９４６．５６０４５；［Ｍ＋Ｎａ］＋：９５１．５１５３６。
【０１８７】
実施例３：平衡移動
アセタール切断およびａｈｐ形成の可能な副反応は、化合物Ａの脱水形態をもたらし得る。これは、以下の反応スキームに表す脱水形態の水和の簡易手順を使用して、容易に化合物Ａに変換する（戻す）ことができる：
【０１８８】
【化５５】
2016500668.tif 000058
【０１８９】
これは、あらゆるタイプの合成において、化合物Ａの収率を改善させる（本開示にあるような化学物質とする、またはＷＯ２００９／０２４５２７の発酵を使用することによる）。
【０１９０】
例えば、ａｈｐ−サブユニットを含む化合物、例えば実施例１の前のスキームの化合物Ａの中の酸に感受性の保護基の切断中、大量の対応する脱水型副生成物（化合物Ａ脱水物）の形成が観察される。この副生成物は、通常、例えばクロマトグラフィーによって分離し、廃棄する。これは、貴重な生成物の損失を招き、このステップの収率を低くする。例えば、化合物８の脱保護生成物を酸性条件に晒してトリチル−およびｔ−ブチル保護基を切断する場合（スキーム４）、有意な量の化合物Ａ脱水物が副生成物として形成される。酸の濃度および反応条件に応じて、化合物Ａ脱水物は、この生成混合物中の主要生成物として形成されることさえあり得る。
【０１９１】
例えば、化合物Ａ／化合物Ａ脱水物の比率（１：２）は、酸化ステップ（実施例１Ｅ（Ｂ））の後、トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（５：９５ｖ／ｖ）を使用して保護基を切断する際に観察された。
【０１９２】
したがって、脱水副生成物を所望の生成物に変換させるための方法を探求した。これは、周知の条件下、水の存在下で、生成混合物を酸触媒による平衡によって実現することができることが現在判明した。実施例１の反応混合物に水を添加し、後続して室温で１９時間撹拌して、化合物Ａ／化合物Ａ脱水物の比率が約９６：４の生成混合物を得た。したがって、酸触媒脱保護ステップ（スキーム４）の後に水を反応混合物に添加すると、化合物Ａ／化合物Ａ脱水物の比率は、無水条件下での（１：２）から、水の添加および平衡の後での（９６：４）に変化した。
【０１９３】
酸性脱保護条件下での化合物Ａからの化合物Ａ脱水物の形成は、ＤＣＭ中のトリフルオロ酢酸を使用して純粋な化合物Ａを化合物Ａ脱水物に変換させることによって確定した。化合物Ａを、室温で２時間、ＤＣＭ中３３％（ｖ／ｖ）ＴＦＡで処理して、化合物Ａ脱水物／化合物Ａの生成物混合物を、ＨＰＬＣによる７８：２２の比率で得た。脱水は、分子篩などの吸水剤を反応混合物に添加した場合、９５％超まで進めることができる。したがって、純粋な化合物Ａを、ＴＦＡ／ＤＣＭの１：２混合物中、分子篩の存在下で、撹拌して、脱水型生成物を定量的粗収量および約９６面積％で得た。ＨＰＬＣ純度（実施例３Ｂ）。粗生成物中には、依然として約４面積％の化合物Ａが存在していた。
【０１９４】
実施例３Ｂからの化合物Ａ脱水物の化合物Ａへの変換は、化合物Ａ脱水物を、ジクロロメタン中、トリフルオロ酢酸および水の存在下で、撹拌することによって、実証した（実施例３Ｃ）。こうして得た生成物は、ＨＰＬＣによれば、化合物Ａが９５．６面積％を占め、化合物Ａ脱水物は４．４面積％のみ占めていた。
【０１９５】
【化５６】
2016500668.tif 000059
【０１９６】
化合物Ａの物理的データに関しては、実施例１のＥ（Ｂ）および２Ｉ）を参照されたい。
【０１９７】
平衡も、５員環のヘミアミナール異性体を、６環のヘミアミナールである化合物Ａに変換する。５員環のヘミアミナール異性体は、アルデヒド官能基を脱保護した（反応スキーム３）後に、速度支配生成物として大量に形成される。この異性体は、平衡中、熱力学的により安定性の化合物Ａに変換される。
【国際調査報告】
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