(57)【要約】  αヘリックス性セグメントを含む安定化されたαＣＴポリペプチドが本願において提供され、ポリペプチドは式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）  Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ  （Ｉ−１）  Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＣ１−ＸＣ２−ＸＣ３−ＸＣ４−ＸＣ５−ＸＣ６−ＸＣ７−ＸＣ８−ＸＣ９−ＸＣ１０−ＸＣ１１−ＸＣ１２−ＸＣ１３−ＸＣ１４−ＸＣ１５−ＸＣ１６−ＸＣ１７−ＸＣ１８−ＸＣ１９−ＸＣ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ  （Ｉ−２）である。  αＣＴポリペプチドはインスリン受容体に結合し、αＣＴポリペプチドは少なくとも１つのステープル（すなわち２つの架橋されたアミノ酸）および／または少なくとも１つのステッチ（すなわち３つの架橋されたアミノ酸）を含む。さらに、ステープルドまたはステッチドαＣＴポリペプチドを含むインスリンアナログ、その医薬組成物、使用の方法、例えば糖尿病状態またはその合併症を処置する方法が提供される。
2016523241.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
αヘリックス性セグメントを含むポリペプチドであって、
ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、
ポリペプチドは式（Ｉ−１）
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは、式（ｉ）
【化１】
2016523241.tif 000123
の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
または式（ｉｉ）
【化２】
2016523241.tif 000124
の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
式中、
【化３】
2016523241.tif 000125
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数であり、
各［ＸＡＡ］は、独立して、天然または非天然アミノ酸であり、
ｓは、０または１〜５０の整数であり、
ｔは、０または１〜５０の整数であり、
Ｒｆは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、および任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは、置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基であり、
Ｒｅは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、ならびに−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、式中、ＲＥのそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって任意に置換されていてもよいヘテロ環式もしくは任意に置換されていてもよいヘテロアリール環を形成し、
ＸＡ１は、不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ２は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ３はアミノ酸Ｆであり、
ＸＡ４はアミノ酸Ｅであり、
ＸＡ５は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ６は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ７はアミノ酸Ｌであり、
ＸＡ８はアミノ酸Ｈであり、
ＸＡ９はアミノ酸Ｎであり、
ＸＡ１０は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ１１はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＡ１２はアミノ酸ＦまたはＡであり、
ＸＡ１３は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ１４は、不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸である、
前記ポリペプチド。
【請求項２】
αヘリックス性セグメントを含む前駆体ポリペプチドであって、
ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、
ポリペプチドは式（ＩＩ−１）
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＢ１−ＸＢ２−ＸＢ３−ＸＢ４−ＸＢ５−ＸＢ６−ＸＢ７−ＸＢ８−ＸＢ９−ＸＢ１０−ＸＢ１１−ＸＢ１２−ＸＢ１３−ＸＢ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含み、
【化４】
2016523241.tif 000126
式中、
【化５】
2016523241.tif 000127
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、または任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
ＲＬ１は、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ＲＡは、独立して、−ＲＣ、−ＯＲＣ、−Ｎ（ＲＣ）２、または−ＳＲＣであり、式中、ＲＣのそれぞれは、独立して、水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、ヒドロキシル、アミノ、またはチオール保護基であるか、あるいは２つのＲＣ基が一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ＲＢは、独立して、水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、任意にリンカーによってつながっていてもよい標識であり、リンカーは、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、またはアシレンから選択されるか、あるいはＲＡおよびＲＢが一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数であり、
ＸＢ１は、不在であるか、または式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ２は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ３はアミノ酸Ｆであり、
ＸＢ４はアミノ酸Ｅであり、
ＸＢ５は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ６は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ７はアミノ酸Ｌであり、
ＸＢ８はアミノ酸Ｈであり、
ＸＢ９はアミノ酸Ｎであり、
ＸＢ１０は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ１１は、アミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＢ１２は、アミノ酸ＦまたはＡであり、
ＸＢ１３は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ１４は、不在であるか、または式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ただし、ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含む、
前記前駆体ポリペプチド。
【請求項３】
αヘリックス性セグメントを含むポリペプチドであって、
ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、
ポリペプチドは式（Ｉ−２）
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＣ１−ＸＣ２−ＸＣ３−ＸＣ４−ＸＣ５−ＸＣ６−ＸＣ７−ＸＣ８−ＸＣ９−ＸＣ１０−ＸＣ１１−ＸＣ１２−ＸＣ１３−ＸＣ１４−ＸＣ１５−ＸＣ１６−ＸＣ１７−ＸＣ１８−ＸＣ１９−ＸＣ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−２）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは、式（ｉ）
【化６】
2016523241.tif 000128
の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
または式（ｉｉ）
【化７】
2016523241.tif 000129
の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
式中、
【化８】
2016523241.tif 000130
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数であり、
各［ＸＡＡ］は、独立して、天然または非天然アミノ酸であり、
ｓは、０または１〜５０の整数であり、
ｔは、０または１〜５０の整数であり、
Ｒｆは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、ならびに任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは、置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、およびアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基であり、
Ｒｅは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、ならびに−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、式中、ＲＥのそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって任意に置換されていてもよいヘテロ環式もしくは任意に置換されていてもよいヘテロアリール環を形成し、
ＸＣ１は、不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ２は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ３は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ４は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ５はアミノ酸Ｒであり、
ＸＣ６は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ７はアミノ酸Ｔであり、
ＸＣ８はアミノ酸Ｆであり、
ＸＣ９はアミノ酸Ｅであり、
ＸＣ１０は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１１は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１２はアミノ酸Ｌであり、
ＸＣ１３はアミノ酸Ｈであり、
ＸＣ１４はアミノ酸Ｎであり、
ＸＣ１５は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１６はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＣ１７はアミノ酸Ｆであり、
ＸＣ１８はアミノ酸Ｖであり、
ＸＣ１９は、不在であるか、またはアミノ酸Ｗであり、
ＸＣ２０は、不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸である、
前記ポリペプチド。
【請求項４】
αヘリックス性セグメントを含む前駆体ポリペプチドであって、
ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、
ポリペプチドは式（ＩＩ−２）
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＤｌ−ＸＤ２−ＸＤ３−ＸＤ４−ＸＤ５−ＸＤ６−ＸＤ７−ＸＤ８−ＸＤ９−ＸＤ１０−ＸＤ１１−ＸＤ１２−ＸＤ１３−ＸＤ１４−ＸＤ１５−ＸＤ１６−ＸＤ１７−ＸＤ１８−ＸＤ１９−ＸＤ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−２）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含み、
【化９】
2016523241.tif 000131
式中、
【化１０】
2016523241.tif 000132
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、または任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
ＲＬ１は、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ＲＡは、独立して、−ＲＣ、−ＯＲＣ、−Ｎ（ＲＣ）２、または−ＳＲＣであり、式中、ＲＣのそれぞれは、独立して、水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、ヒドロキシル、アミノ、またはチオール保護基であるか、あるいは２つのＲＣ基が一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ＲＢは、独立して、水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、任意にリンカーによってつながっていてもよい標識であり、リンカーは、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、またはアシレンから選択されるか、あるいはＲＡおよびＲＢが一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数であり、
ＸＤ１は、不在であるか、または式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ２は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ３は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ４は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ５はアミノ酸Ｒであり、
ＸＤ６は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ７はアミノ酸Ｔであり、
ＸＤ８はアミノ酸Ｆであり、
ＸＤ９はアミノ酸Ｅであり、
ＸＤ１０は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１１は、天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１２はアミノ酸Ｌであり、
ＸＤ１３はアミノ酸Ｈであり、
ＸＤ１４はアミノ酸Ｎであり、
ＸＤ１５は、天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１６はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＤ１７はアミノ酸Ｆであり、
ＸＤ１８はアミノ酸Ｖであり、
ＸＤ１９は、不在であるか、またはアミノ酸Ｗであり、
ＸＤ２０は、不在であるか、または式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ただし、ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含む、
前記前駆体ポリペプチド。
【請求項５】
式（ｉｖ）の少なくとも１つとその周縁の式（ｉｉｉ）の２つのアミノ酸とをさらに含む、請求項２または４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
架橋されたアミノ酸のそれぞれが、独立して、式（ｉ−ｄ）、（ｉｉ−ｄ）、（ｉ−ｅ）、または（ｉｉ−ｅ）であり、
【化１１】
2016523241.tif 000133
式中、
Ｙ１およびＹ２のそれぞれは、原子価が許す限り、独立して、結合、−ＣＲ５Ｒ６−、または−ＮＲ１−であり、
Ｒ１は、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ５およびＲ６のそれぞれは、独立して、水素、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＣＮ、またはＣ１−６アルキルであり、
ｊ、ｋ、ｊ１、およびｋ１のそれぞれは、独立して、０または１〜１０の整数である、
請求項１または３に記載のポリペプチド。
【請求項７】
Ｒ３ａは式（Ｇ−１）であり、
【化１２】
2016523241.tif 000134
式中、
Ｙ１は、結合、−ＣＲ５Ｒ６−、または−ＮＲ１−であり、
Ｒ５およびＲ６のそれぞれは、独立して、水素、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＣＮ、またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ１は、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
ｊは、０または１〜１０の整数である、
請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
Ｒ３ａが、式（Ｇ−２）または式（Ｇ−３）
【化１３】
2016523241.tif 000135
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項９】
Ｌ１が式（Ｇ−４）または式（Ｇ−５）
【化１４】
2016523241.tif 000136
であり、
式中、ｇおよびｇ１のそれぞれは、独立して、０または１〜１０の整数である、
請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
Ｒ３ｂが式（Ｇ−６）
【化１５】
2016523241.tif 000137
であり、
式中、
Ｙ２は、結合、−ＣＲ５Ｒ６−、または−ＮＲ１−であり、
Ｒ５およびＲ６のそれぞれは、独立して、水素、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＣＮ、またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ１は、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
ｋは、０または１〜１０の整数である、
請求項１〜９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
Ｒ３ｂが式（Ｇ−７）または式（Ｇ−８）
【化１６】
2016523241.tif 000138
である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
Ｌ２が式（Ｇ−９）または式（Ｇ−１０）
【化１７】
2016523241.tif 000139
であり、
式中、ｈおよびｈ１のそれぞれが、独立して、０または１〜１０の整数である、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
【化１８】
2016523241.tif 000140
が単結合である、
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
【化１９】
2016523241.tif 000141
が二重結合である、
請求項１〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
式（ｉｉｉ）の各アミノ酸が、独立して、
【化２０】
2016523241.tif 000142
【化２１】
2016523241.tif 000143
【化２２】
2016523241.tif 000144
およびその塩からなる群から選択され、式中、ｇが０または１〜１０の整数である、
請求項１〜１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
式（ｉｉｉ）の各アミノ酸が、独立して、以下の式
【化２３】
2016523241.tif 000145
【化２４】
2016523241.tif 000146
の１つである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
式（ｉｖ）の各アミノ酸が、独立して、以下の式
【化２５】
2016523241.tif 000147
の１つである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３がＦｍｏｃである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
（ａ）式（ｉｉｉ）
【化２６】
2016523241.tif 000148
のアミノ酸、またはその塩を提供するステップ、
（ｂ）式（ｖ）
【化２７】
2016523241.tif 000149
のアミノ酸、またはその塩を提供するステップ、および
（ｃ）式（ｉｉｉ）および（ｖ）のアミノ酸とαＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントとをカップリングするステップ
を含む、請求項２または４に記載のポリペプチドを調製する方法。
【請求項２０】
（ｄ）式（ｉｖ−ａ）
【化２８】
2016523241.tif 000150
のビスアミノ酸を提供するステップ、
（ｅ）式（ｉｉｉ）、（ｖ）、および（ｉｖ−ａ）のアミノ酸と任意にαＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントとをカップリングするステップ
をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
触媒によって請求項２または４に記載のポリペプチドを処理することを含む、請求項１または３に記載のポリペプチドを調製する方法。
【請求項２２】
触媒がルテニウム触媒である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
パラジウム触媒による処理をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、およびＶから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２５】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｓ、Ｓ、Ｆ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ａ、Ａ、Ｆ、Ｖ、およびＷから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２６】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ａ、Ａ、Ｆ、およびＶから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２７】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｓ、Ｓ、Ｆ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、Ｖ、およびＷから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２８】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｓ、Ｓ、Ｆ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、およびＶから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２９】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、Ｖ、およびＷから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項３０】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ａ、Ａ、Ｆ、およびＶから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項３１】
α−アミノ酸のそれぞれが、独立して、Ｓ、Ｓ、Ｆ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、Ｖ、およびＷから選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項３２】
（ｉ）請求項１〜３１のいずれか一項に記載のポリペプチド、
（ｉｉ）インスリンＡ鎖ポリペプチド、および
（ｉｉ）インスリンＢ鎖ポリペプチド
を含むインスリンアナログであって、
ポリペプチドは、リンカーを介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに連結され、リンカーは、任意に置換されていてもよいアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、または任意に置換されていてもよいヘテロアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−である、
前記インスリンアナログ。
【請求項３３】
リンカーが、式（Ｌ−１）〜式（Ｌ−３）
【化２９】
2016523241.tif 000151
の１つであり、
式中、
ＲＬＮ１またはＲＬＮ２のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、または窒素保護基であり、
ＲＬｃ１、ＲＬｃ２、ＲＬｃ３、ＲＬｃ４、ＲＬｃ５、およびＲＬｃ６のそれぞれが、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ａ１、ａ２、ａ３、ｂ１、ｂ２、およびｂ３のそれぞれが、独立して、１〜１０の整数である、
請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３４】
ａ１が１であり、ｂ１が３、４、５、または６である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３５】
ａ１が５であり、ｂ１が２または３である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３６】
ＲＬＮ１、ＲＬＣ１、およびＲＬＣ２が水素である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３７】
ａ２が１であり、ｂ２が３、４、５、または６である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３８】
ＲＬＮ２、ＲＬＣ３、およびＲＬＣ４が水素である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項３９】
ａ３が１であり、ｂ３が１、２、３、または４である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４０】
ＲＬＣ５およびＲＬＣ６が水素である、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４１】
リンカーが、ポリペプチドのＣ末端アミノ酸およびインスリンＡ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸に取り付けられている、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４２】
インスリンＢ鎖ポリペプチドが、少なくとも１つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに共有結合的に繋がれている、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４３】
インスリンＢ鎖ポリペプチドが、２つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに共有結合的に繋がれている、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４４】
インスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドが、ヒトインスリンである、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４５】
インスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドが、ネイティブなヒトインスリンである、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４６】
インスリンＡ鎖ポリペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＡＳＶＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮのアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４７】
インスリンＡ鎖ポリペプチドが、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮのアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４８】
インスリンＢ鎖ポリペプチドが、ＦＶＮＱＨＬＣＧＤＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴのアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４９】
インスリンＢ鎖ポリペプチドが、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴのアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のインスリンアナログ。
【請求項５０】
（ａ）ポリペプチド−リンカー付加体を与えるために、リンカーと請求項１に記載のポリペプチドのＣ末端アミノ酸をカップリングするステップ、
（ｂ）ポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体を与えるために、インスリンＡ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸とステップ（ａ）からのポリペプチド−リンカー付加体をカップリングするステップ、および
（ｃ）インスリンＢ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸とポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体をカップリングするステップ
を含む、請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログを調製する方法。
【請求項５１】
（ａ）ポリペプチド−リンカー付加体を与えるために、リンカーと請求項１に記載のポリペプチドのＣ末端アミノ酸をカップリングするステップ、
（ｂ）Ａ鎖−Ｂ鎖付加体を与えるために、少なくとも１つのジスルフィド架橋を介してインスリンＢ鎖とインスリンＡ鎖をカップリングするステップ、
（ｃ）ステップ（ｂ）のＡ鎖−Ｂ鎖付加体のＮ末端アミノ酸とステップ（ａ）からのポリペプチド−リンカー付加体をカップリングするステップ
を含む、請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログを調製する方法。
【請求項５２】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩と医薬的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項５３】
請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩と医薬的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項５４】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の有効量を、その必要がある対象に投与することを含む、糖尿病状態またはその合併症を処置する方法。
【請求項５５】
請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量を、その必要がある対象に投与することを含む、糖尿病状態またはその合併症を処置する方法。
【請求項５６】
糖尿病状態が糖尿病または前糖尿病である、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５７】
糖尿病状態が、１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、嚢胞性線維症関連糖尿病、ステロイド糖尿病、または単一遺伝子性糖尿病である、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５８】
糖尿病状態の合併症が、心血管疾患、虚血性心疾患、卒中、末梢血管疾患、血管の損傷、糖尿病網膜症、糖尿病性腎症、慢性腎臓病、糖尿病性ニューロパチー、および糖尿病性足潰瘍である、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の生理学的有効量を対象に投与することを含む、対象中のインスリン受容体の活性を調節する方法。
【請求項６０】
請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の生理学的有効量を対象に投与することを含む、対象中のインスリン受容体の活性を調節する方法。
【請求項６１】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の有効量を、その必要がある対象に投与することを含む、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法。
【請求項６２】
請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量を、その必要がある対象に投与することを含む、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法。
【請求項６３】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の有効量とインスリン受容体を接触させることを含む、インスリン受容体を活性化する方法。
【請求項６４】
請求項３２〜４９のいずれか一項に記載のインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量とインスリン受容体を接触させることを含む、インスリン受容体を活性化する方法。
【請求項６５】
インスリン受容体がインビボで接触させられる、請求項６３または６４に記載の方法。
【請求項６６】
インスリン受容体がインビトロで接触させられる、請求項６３または６４に記載の方法。
【請求項６７】
２つの架橋されたアミノ酸が、αＣＴベース配列中に埋め込まれ、少なくとも２アミノ酸によって離間されている、αＣＴベース配列と２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含む、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項６８】
αＣＴベース配列が、野生αＣＴ配列由来である、請求項６７に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項６９】
αＣＴベース配列が、ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである、請求項６７に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７０】
αＣＴベース配列が、ＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである、請求項６７に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７１】
αＣＴベース配列が、ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷまたはＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷである、請求項６７に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７２】
αＣＴベース配列が、ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである、請求項６７に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７３】
２つの架橋されたアミノ酸のそれぞれが、独立して式（ｉ）
【化３０】
2016523241.tif 000152
である、請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドであって、
式中、
【化３１】
2016523241.tif 000153
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１およびＲａ２のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１は、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１は、独立して、０、１、または２である、
前記インスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７４】
式（ｉｉ）
【化３２】
2016523241.tif 000154
の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含む、請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドであって、
式中、
【化３３】
2016523241.tif 000155
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ２およびＲｃ３のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ２およびｑ３のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数である、
前記インスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７５】
式（ｉ）
【化３４】
2016523241.tif 000156
の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つと、
式（ｉｉ）
【化３５】
2016523241.tif 000157
の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含む、請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドであって、
式中、
【化３６】
2016523241.tif 000158
のそれぞれは、独立して、単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは、独立して、水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は、独立して、結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは、独立して、１〜１０の整数であり、
各［ＸＡＡ］は、独立して、天然または非天然アミノ酸であり、
ｓは、０または１〜５０の整数であり、
ｔは、０または１〜５０の整数であり、
Ｒｆは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、ならびに任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは、置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基であり、
Ｒｅは、水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、ならびに−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、式中、ＲＥのそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって任意に置換されていてもよいヘテロ環式もしくは任意に置換されていてもよいヘテロアリール環を形成する、
前記インスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７６】
それぞれの２つの架橋されたアミノ酸が、２、３、または６アミノ酸によって離間されている、請求項６７〜７５のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７７】
それぞれの３つの架橋されたアミノ酸が、独立して、２および３、２および６、３および３、３および６、または６および６アミノ酸によって離間されている、請求項７４または７６に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７８】
それぞれの２つの架橋されたアミノ酸が、独立して、２、３、または６アミノ酸によって離間されており、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸が、独立して、２および３、２および６、３および３、３および６、または６および６アミノ酸によって離間されている、請求項７５に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項７９】
ポリペプチドがＩＲに結合する、請求項１〜１８および６７〜７９のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項８０】
ポリペプチドがインスリンに結合する、請求項１〜１８および６７〜７９のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項８１】
ポリペプチドが、ＩＲおよびインスリンに結合する、請求項１〜１８および６７〜７９のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項８２】
ポリペプチドが、ＩＲおよびインスリンに同時に結合する、請求項１〜１８および６７〜７９のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【請求項８３】
ポリペプチドが、ＩＲおよびインスリンに順々に結合する、請求項１〜１８および６７〜７９のいずれか一項に記載の安定化されたインスリンαＣＴポリペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、参照によって本願に組み込まれる２０１３年６月１４日出願の米国仮特許出願第ＵＳＳＮ６１／８３５２４２号の米国特許法第１１９条（ｅ）の下における優先権を請求する。
【０００２】
本発明はインスリン受容体調節剤およびその使用に関する。
【０００３】
政府の援助
本発明は、国立衛生研究所（ＮＩＨ）によって授与された助成金番号５Ｒ０１ＣＡ１００７４２−１０の下で米国政府の援助によってなされた。米国政府は本発明にある権利を有する。
【背景技術】
【０００４】
インスリン受容体（ＩＲ）へのインスリンの結合は、グルコースホメオスタシスに必須の役割を果たすシグナル伝達カスケードを開始する。この代謝経路の遮断は糖尿病をもたらし得る。これは２０１１年には米国人口の８．４％を苦しめた疾患である。糖尿病と戦うための鍵となるステップは、リガンド依存的なＩＲシグナル伝達を理解することとＩＲを調節する新たな薬剤を開発することである。驚くべきことに、数十年にまたがる鋭意の努力にもかかわらず、インスリンの結合によるＩＲ活性化の分子機序は未解明のままである。
【０００５】
ＩＲは受容体チロシンキナーゼスーパーファミリーのメンバーであり、ジスルフィド結合によって共有結合的に連結された２つのαおよび２つのβサブユニット（α２β２）からなる糖蛋白質である。例えばSiddle et al., Biochem Soc Trans (2001) 29: 513-525参照。ＩＲの細胞外ドメイン（エクトドメインともまた呼ばれる）は２つのαサブユニットと２つのβサブユニットのＮ末端セグメントとを含み、膜貫通ドメインおよび細胞質チロシンキナーゼ（ＴＫ）ドメインはβサブユニットのＣ末端セグメントを含む。インスリン結合決定因子は全体的にエクトドメイン内にあり、これはα鎖のロイシンリッチリピートドメインＬ１およびＬ２、介在するシステインリッチ（ＣＲ）ドメイン、ならびに３つのフィブロネクチンＩＩＩ型ドメイン（正確にはＦｎ０、Ｆｎ１、およびＦｎ２）からなる。
【０００６】
インスリンそのものはＸ線結晶解析によって構造上解明された最初のペプチドホルモンであり（例えばBlundell et al., Nature (1971) 231: 506-511参照）、過去５０年に渡る鋭意の構造研究の対象であったが、インスリンによるＩＲ活性化の分子機序は未解明のままである。MentingらはＬ１ドメインおよびａＣＴペプチドに結合したインスリンの構造を解明した。Nature, 2013, 493: 241-248参照。ＩＲへのインスリン結合は並外れて高親和性の結合（ｐＭの範囲）および負の協同性によって特徴づけられる。例えばDe Meyts et al., Biochem Biophys Res Commun (1973) 55: 154-161、De Meyts et al., Diabetologia (1994) 37 Suppl 2: S135-148参照。ＩＲ上には２つのインスリン結合部位（部位１および２）があり、ＩＲの１つの単量体上の各部位１は第２の単量体上の部位２’に近く、部位１へのインスリンの結合は部位２’へのその続いての結合を誘導し、これはＩＲエクトドメインの立体配座変化を引き起こし、２つの細胞間ＴＫドメイン間の距離の減少に至り、それによって自己リン酸化を容易にするということを証拠は示唆している。いくつかの証拠は、ＩＲ上の部位１がＬ１ドメインの中心的なβシートとαＣＴと呼称されるＣ末端αサブユニットペプチドセグメント（ａａ７０４−ａａ７１９）とによって形成されるということを示している一方で、部位２はＦｎ０とＦｎ１との間のループ領域にあると信じられている。なぜなら、これはＩＲエクトドメインの二量体構造中の他方の単量体の部位１に面しているからである。例えばHuang et al., J Mol Biol (2004) 341: 529-551、Mynarcik et al., J Biol Chem (1997) 272: 18650-18651、Kurose et al., J Biol Chem (1994) 269: 29190-29197、Mynarcik et al., J Biol Chem (1996) 271: 2439-2442参照。
【０００７】
部位１に結合するペプチドがアゴニストまたはアンタゴニストのいずれかである一方で、部位２に結合するペプチドはアンタゴニストである。二量体化による部位１および部位２ペプチドのさらなる最適化は強力なアゴニストまたはアンタゴニスト（ｐＭのＩＲ結合親和性）のいずれかを連結のモードに依存して同定している。例えばSchaffer et al., Proc Natl Acad Sci USA (2003) 100: 4435-4439、Schaffer et al., Biochem Biophys Res Commun (2008) 376: 380-383、Jensen et al., Biochem J (2008) 412: 435-445参照。興味深いことに、これらのペプチドはインスリンとの配列類似性を示さないが、部位１ペプチドとαＣＴとの間の似通った関係が提案されており、部位１ペプチドがαヘリックス性であるということを指示している。例えばSmith et al., Proc Natl Acad Sci USA (2010) 107: 6771-6776、Menting et al., Biochemistry (2009) 48: 5492-5500参照。これらのペプチドはインスリンミメティックの魅力的な候補であるが、治療上の使用の可能性はそれらの内在的な構造不安定性が原因で限定されている。それゆえに、治療上のさらには科学上の目的のためのＩＲに結合する安定化されたペプチドの必要が依然としてある。
【発明の概要】
【０００８】
ペプチドステープリングおよびステッチはヘリックス安定化を増大させることが公知の合成戦略であり、隣接するまたは続いてのαヘリックスのターン同士が大環状架橋によって架橋される。例えばKim et al., Nat. Protoc. (2011) 6:761-771参照。この組み込まれたステープルは合成ペプチドの生物活性のαヘリックス性立体配座を強化して、増大した標的親和性、堅牢な細胞貫入、および／または延びたインビボ半減期をそれに付与し得る。
【０００９】
本発明は、ステープリングおよびステッチのこの知見から、インスリン受容体（ＩＲ）、具体的にはＩＲのエクトドメインを標的化する安定化された（ステープルドまたはステッチド）αヘリックス性ペプチドを組み立てようとする。本発明は、ＩＲへのインスリン結合に重要な役割を果たすα鎖のＣ末端（αＣＴ）に基づく安定化されたペプチドを提供する。安定化されたαＣＴポリペプチドはインスリン増感薬として作用し得、ＩＲの部位１における高親和性相互作用を有する能力のある「活性」構造へのインスリンの長く仮定されて来た立体配座のシフトを容易にする。安定化された（stablizied）αＣＴポリペプチドはインスリン増感薬としてＩＲまたはインスリンに結合し得る。安定化された（stablizied）αＣＴポリペプチドはインスリン増感薬としてＩＲおよびインスリンに同時にまたは順々に結合し得る。化学的リンカーを介してインスリンと安定化されたαＣＴポリペプチドをライゲーションすることは、ＩＲアゴニスト活性を有するキメラのインスリンアナログを提供する。
【００１０】
１つの側面において、本発明はαヘリックス性セグメントを含む安定化された（ステープルドまたはステッチド）αＣＴポリペプチドを提供し、αＣＴポリペプチドはインスリン受容体に結合する。いくつかの態様において、αＣＴポリペプチドは式（Ｉ−１）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−１）
またはその医薬的に許容される塩である。いくつかの態様において、提供される安定化されたαＣＴポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
【化１】
2016523241.tif 000003
または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
【化２】
2016523241.tif 000004
式中、Ｒｆ、ＸＡＡ、ｓ、ＸＡ１、ＸＡ２、ＸＡ３、ＸＡ４、ＸＡ５、ＸＡ６、ＸＡ７、ＸＡ８、ＸＡ９、ＸＡ１０、ＸＡ１１、ＸＡ１２、ＸＡ１３、ＸＡ１４、ｔ、Ｒｅ、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒｃ１、Ｒｃ２、Ｒｃ３、ｑ１、ｑ２、ｑ３、Ｌ１、Ｌ２、ｙ、およびｚは本願において定義されている通りである。
【００１１】
他の態様において、αＣＴポリペプチドは式（Ｉ−２）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＣ１−ＸＣ２−ＸＣ３−ＸＣ４−ＸＣ５−ＸＣ６−ＸＣ７−ＸＣ８−ＸＣ９−ＸＣ１０−ＸＣ１１−ＸＣ１２−ＸＣ１３−ＸＣ１４−ＸＣ１５−ＸＣ１６−ＸＣ１７−ＸＣ１８−ＸＣ１９−ＸＣ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−２）
またはその医薬的に許容される塩であり、ポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
【化３】
2016523241.tif 000005
または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
【化４】
2016523241.tif 000006
式中、Ｒｆ、ＸＡＡ、ｓ、ＸＣ１、ＸＣ２、ＸＣ３、ＸＣ４、ＸＣ５、ＸＣ６、ＸＣ７、ＸＣ８、ＸＣ９、ＸＣ１０、ＸＣ１１、ＸＣ１２、ＸＣ１３、ＸＣ１４、ＸＣ１５、ＸＣ１６、ＸＣ１７、ＸＣ１８、ＸＣ１９、ＸＣ２０、ｔ、Ｒｅ、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒｃ１、Ｒｃ２、Ｒｃ３、ｑ１、ｑ２、ｑ３、Ｌ１、Ｌ２、ｙ、およびｚは本願において定義されている通りである。
【００１２】
いくつかの態様において、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸はαＣＴポリペプチドのαヘリックス性セグメントのアミノ酸である。いくつかの態様において、αヘリックス性セグメントはインスリン受容体に結合するか、またはインスリン受容体へのαＣＴポリペプチドの結合に寄与する。
【００１３】
いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドは、ステープルドの式（ｉ）の少なくとも１つをｉ，ｉ＋３位置、ｉ，ｉ＋４位置、ｉ，ｉ＋６位置、もしくはｉ，ｉ＋７位置に、またはステッチドの式（ｉｉ）の少なくとも１つをｉ，ｉ＋４＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋７位置、もしくはｉ，ｉ＋４＋７位置に含む。
【００１４】
いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドの１つまたは２つ以上のアミノ酸は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ１〜ＸＡ１４の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つ以上は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ１〜ＸＣ２０の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、または９つ以上は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。いくつかの態様においては、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたαＣＴポリペプチドが提供され、（１）インスリン増感薬活性を付与する改変を含む。これは、（ａ）ＩＲに接触するペプチドの面上の残基の置換、（ｂ）ＮもしくはＣ末端のいずれかにおける残基の欠失、（ｃ）Ｎおよび／もしくはＣ末端のいずれかにおける残基の挿入、（ｄ）逆の配列およびキラリティーのペプチドを含むレトロ−インベルソ（retro-inverso）配列改変（Jameson et al, Nature, 368: 744-746, 1994、Brady et al, Nature, 368: 692-693, 1994）（Ｄ−エナンチオマーを逆向きの合成と組み合わせることの最終的な結果は、各アミド結合中のカルボニルおよびアミノ基の位置が交換される一方で、各α炭素における側鎖基の位置は保存されるということである。例えば、ペプチドモデルが配列ＡＢＣを有するＬ−アミノ酸から形成されているペプチドである場合には、Ｄ−アミノ酸から形成されたレトロ−インベルソペプチドアナログは配列ＣＢＡを有するであろう）、または（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つの組み合わせを含むが、これに限定されない。式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、αＣＴ系ポリペプチドは合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、または１０個まで、または１１個まで、または１２個までのアミノ酸の改変（例えば保存的なまたは非保存的な置換）をネイティブなαＣＴ配列に対して含み得る。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、αＣＴ配列は結合ポケットからの残基７０４−７１５を有する（図４）。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、αＣＴ配列は結合ポケットからの改変された残基７０４−７１５を有する。
【００１５】
別の側面においては、αヘリックス性セグメントを含む前駆体ポリペプチドが提供され、前駆体ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、前駆体ポリペプチドは式（ＩＩ−１）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＢ１−ＸＢ２−ＸＢ３−ＸＢ４−ＸＢ５−ＸＢ６−ＸＢ７−ＸＢ８−ＸＢ９−ＸＢ１０−ＸＢ１１−ＸＢ１２−ＸＢ１３−ＸＢ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、前駆体ポリペプチドは式（ｉｉｉ）の２つのアミノ酸の少なくとも１つと任意に式（ｉｖ）のアミノ酸の少なくとも１つとを含み、
【化５】
2016523241.tif 000007
ただし、前駆体ポリペプチドは式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含み、式中、
【化６】
2016523241.tif 000008
、Ｒｆ、ＸＡＡ、s、ＸＢ１、ＸＢ２、ＸＢ３、ＸＢ４、ＸＢ５、ＸＢ６、ＸＢ７、ＸＢ８、ＸＢ９、ＸＢ１０、ＸＢ１１、ＸＢ１２、ＸＢ１３、ＸＢ１４、ｔ、Ｒｅ、Ｒａ１、Ｒａ３、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒｃ４、Ｒｃ５、Ｒｃ６、ｑ４、ｑ５、ｑ６、ＲＡ、およびＲＢは本願において定義されている通りである。
【００１６】
別の側面においては、αヘリックス性セグメントを含む前駆体ポリペプチドが提供され、前駆体ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、前駆体ポリペプチドは式（ＩＩ−２）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＤ１−ＸＤ２−ＸＤ３−ＸＤ４−ＸＤ５−ＸＤ６−ＸＤ７−ＸＤ８−ＸＤ９−ＸＤ１０−ＸＤ１１−ＸＤ１２−ＸＤ１３−ＸＤ１４−ＸＤ１５−ＸＤ１６−ＸＤ１７−ＸＤ１８−ＸＤ１９−ＸＤ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−２）
またはその医薬的に許容される塩であり、前駆体ポリペプチドは式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含み、
【化７】
2016523241.tif 000009
ただし、前駆体ポリペプチドは式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含み、
【化８】
2016523241.tif 000010
、Ｒｆ、ＸＡＡ、ｓ、ＸＤ１、ＸＤ２、ＸＤ３、ＸＤ４、ＸＤ５、ＸＤ６、ＸＤ７、ＸＤ８、ＸＤ９、ＸＤ１０、ＸＤ１１、ＸＤ１２、ＸＤ１３、ＸＤ１４、ＸＤ１５、ＸＤ１６、ＸＤ１７、ＸＤ１８、ＸＤ１９、ＸＤ２０、ｔ、Ｒｅ、Ｒａ１、Ｒａ３、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒｃ４、Ｒｃ５、Ｒｃ６、ｑ４、ｑ５、ｑ６、ＲＡ、およびＲＢは本願において定義されている通りである。
【００１７】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）および任意に式（ｉｖ）のアミノ酸はポリペプチドのαヘリックス性セグメントのアミノ酸である。いくつかの態様において、αヘリックス性セグメントは、ステープリングまたはステッチ前にインスリン受容体に結合するか、またはインスリン受容体へのポリペプチドの結合に寄与する。いくつかの態様において、αヘリックス性セグメントは、ステープリングまたはステッチ後にインスリン受容体に結合するか、またはインスリン受容体へのポリペプチドの結合に寄与する。いくつかの態様において、αヘリックス性セグメントは、ステープリングまたはステッチ前および後にインスリン受容体に結合するか、またはインスリン受容体へのポリペプチドの結合に寄与する。
【００１８】
いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドは、２つの（ｉ，ｉ＋３）アミノ酸、３つの（ｉ，ｉ＋４）アミノ酸、または６つの（ｉ，ｉ＋７）アミノ酸によって離間された式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した少なくとも２つを含む。いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）のポリペプチドは、式（ｉｖ）のアミノ酸の少なくとも１つとその周縁の式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した少なくとも２つとを含む。いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）のポリペプチドは、式（ｉｖ）のアミノ酸の１つとその周縁の式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した２つとを含む。いくつかの態様において、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれとその周縁の式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した２つとはそれぞれ３（ｉ，ｉ＋４＋４）アミノ酸によって離間、２および３アミノ酸（ｉ，ｉ＋３＋４）によって離間、２および６アミノ酸（ｉ，ｉ＋３＋７）によって離間、または３および６（ｉ，ｉ＋４＋７）アミノ酸によって離間されている。
【００１９】
いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドの１つまたは２つ以上のアミノ酸は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ１〜ＸＢ１４の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つ以上は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ１〜ＸＤ２０の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、または９つ以上は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。いくつかの態様においては、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドが提供され、（１）インスリン増感薬活性を付与する改変を含む。これは、（ａ）ＩＲに接触するペプチドの面上の残基の置換、（ｂ）ＮもしくはＣ末端のいずれかにおける残基の欠失、（ｃ）Ｎおよび／もしくはＣ末端のいずれかにおける残基の挿入、（ｄ）逆の配列およびキラリティーのペプチドを含むレトロ−インベルソ配列改変（Jameson et al., Nature, 368: 744-746, 1994、Brady et al., Nature, 368: 692-693, 1994）（Ｄ−エナンチオマーを逆向きの合成と組み合わせることの最終的な結果は、各アミド結合中のカルボニルおよびアミノ基の位置が交換される一方で、各α炭素における側鎖基の位置は保存されるということである。例えば、ペプチドモデルが配列ＡＢＣを有するＬ−アミノ酸から形成されているペプチドである場合には、Ｄ−アミノ酸から形成されたレトロ−インベルソペプチドアナログは配列ＣＢＡを有するであろう）、または（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つの組み合わせを含むが、これに限定されない。例示的な態様において、αＣＴ系ポリペプチドは合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、または１０個まで、または１１個まで、または１２個までのアミノ酸改変（例えば保存的なまたは非保存的な置換）をネイティブなαＣＴ配列に対して含み得る。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、αＣＴ配列は結合ポケットからの残基７０４−７１５を有する（図４）。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、αＣＴ配列は結合ポケットからの改変された残基７０４−７１５を有する。
【００２０】
ある例示的な態様において、前駆体ポリペプチドは合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、１０個まで、または１１個まで、１２個まで、１３個まで、１４個まで、１５個まで、１６個まで、１７個まで、または１８個までのアミノ酸改変（例えば保存的なまたは非保存的な置換）をネイティブなαＣＴ配列に対して含み得る。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。
【００２１】
別の側面においては、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドを調製する方法が提供され、式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸とαＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントとをカップリングすることを含む。
【化９】
2016523241.tif 000011
いくつかの態様においては、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドを調製する方法が提供され、式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と、αＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントと、式（ｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とをカップリングすることを含み、
【化１０】
2016523241.tif 000012
式（ｉｖ−ａ）の周縁に式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した２つがある。いくつかの態様においては、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドを調製する方法が提供され、αＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントと式（ｉｖ−ａ）の少なくとも１つのアミノ酸とをカップリングすることを含み、
【化１１】
2016523241.tif 000013
式（ｉｖ−ａ）の周縁に式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した２つがある。
【００２２】
別の側面において、本発明は、
（ｉ）式（Ｉ−１）、式（Ｉ−２）、式（ＩＩ−１）、または式（ＩＩ−２）のポリペプチドと、
（ｉｉ）インスリンＡ鎖ポリペプチドと、
（ｉｉ）インスリンＢ鎖ポリペプチドと、
を含むインスリンアナログを提供し、
式（Ｉ−１）、式（Ｉ−２）、式（ＩＩ−１）、または式（ＩＩ−２）のポリペプチドはリンカーを介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに連結される。いくつかの態様において、提供されるインスリンアナログはＩＲアゴニストである。
【００２３】
いくつかの態様において、インスリンＡ鎖ポリペプチドおよび／またはインスリンＢ鎖ポリペプチドを有するインスリンアナログは脊椎動物起源である。いくつかの態様において、インスリンアナログは哺乳動物インスリンアナログ、例えばヒト、マウス、げっ歯類、ウシ、ウマ、またはイヌインスリンアナログである。
【００２４】
いくつかの態様において、インスリンアナログ中のリンカーは任意に置換されていてもよいアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、または任意に置換されていてもよいヘテロアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−である。いくつかの態様においてリンカーは式（Ｌ−１）、（Ｌ−２）、または（Ｌ−３）である。
【化１２】
2016523241.tif 000014
【００２５】
いくつかの態様において、リンカーは、式（Ｉ−１）、式（Ｉ−２）、式（ＩＩ−１）、または式（ＩＩ−２）のポリペプチドのＣ末端アミノ酸とインスリンＡ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸とに取り付けられる。いくつかの態様において、インスリンＢ鎖ポリペプチドは少なくとも１つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドと共有結合的に結びつけられる。いくつかの態様において、インスリンＢ鎖ポリペプチドは２つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドと共有結合的に結びつけられる。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドはヒトインスリンである。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドはネイティブなヒトインスリンである。いくつかの態様において、インスリンＡ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＧＩＶＥＱＣＣＡＳＶＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮを含む。いくつかの態様において、インスリンＡ鎖ポリペプチドはＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮのアミノ酸配列を含む。いくつかの態様において、インスリンＢ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＦＶＮＱＨＬＣＧＤＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴを含む。いくつかの態様において、インスリンＢ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴを含む。
【００２６】
別の側面においては、αＣＴベース配列と２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含む安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドが提供され、２つの架橋されたアミノ酸はαＣＴベース配列中に埋め込まれ、少なくとも２つのアミノ酸によって離間されている。いくつかの態様において、２つの架橋されたアミノ酸は本願に記載されている式（ｉ）である。いくつかの態様において、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドは、本願に記載されている式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つをさらに含む。いくつかの態様において、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドは、本願に記載されている式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つと式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含む。
【００２７】
別の側面においては、本願に記載されているインスリンアナログを調製する方法が提供される。いくつかの態様において、逐次合成手法は式（Ｉ−１）、式（Ｉ−２）、式（ＩＩ−１）、または式（ＩＩ−２）の安定化されたポリペプチドを化学的リンカーによってインスリンＡ鎖のＮ末端にカップリングすることを含み、その次にこれはインスリンＢ鎖に取り付けられる。いくつかの態様において、収束的合成手法は式（Ｉ−１）、式 （Ｉ−２）、式（ＩＩ−１）、または式（ＩＩ−２）の安定化されたポリペプチドを化学的リンカーとカップリングし、その次にインスリンＢ鎖が既に取り付けられたインスリンＡ鎖とのライゲーションを行うことを含む。
【００２８】
別の側面において、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩と任意に医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物が提供される。別の側面において、本願に記載されているインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩と任意に医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物が提供される。本願において提供される医薬組成物は糖尿病または前糖尿病の処置に有用であり得る。
【００２９】
さらに別の側面においては、糖尿病状態またはその合併症を処置または予防する方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドもしくはインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量をその必要がある対象に投与することを含む。いくつかの態様において糖尿病状態は糖尿病または前糖尿病である。いくつかの態様において糖尿病は１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、嚢胞性線維症関連糖尿病、ステロイド糖尿病、または単一遺伝子性糖尿病である。いくつかの態様において、処置または予防されるべき糖尿病状態の合併症は心血管疾患、虚血性心疾患、卒中、末梢血管疾患、血管の損傷、糖尿病網膜症、糖尿病性腎症、慢性腎臓病、糖尿病性ニューロパチー、または糖尿病性足潰瘍である。
【００３０】
さらに別の側面においては、対象中のインスリン受容体の活性を調節する方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドもしくはインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量を対象に投与することを含む。
【００３１】
さらに別の側面においては、細胞のインスリン受容体の活性を調節する方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドもしくはインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量を対象に投与することを含む。
【００３２】
さらに別の側面においては、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドもしくはインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量を対象に投与することを含む。
【００３３】
さらに別の側面においては、インスリン受容体を活性化する方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドもしくはインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量とインスリン受容体を接触させることを含む。いくつかの態様においてインスリン受容体はインビボで接触させられる。いくつかの態様においてインスリン受容体はインビトロで接触させられる。
【００３４】
別の側面において、本発明は、式（Ｉ−１）もしくは式（Ｉ−２）の化合物またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物、水和物、多形体、共結晶、互変異性体、立体異性体、同位体標識された誘導体、もしくはプロドラッグ、あるいはその医薬組成物を含むキットを提供する。本発明のキットは、式（Ｉ−１）もしくは式（Ｉ−２）の化合物またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物、水和物、多形体、共結晶、互変異性体、立体異性体、同位体標識された誘導体、もしくはプロドラッグ、あるいはその医薬組成物の単一用量あるいは複数用量を含み得る。提供されるキットは糖尿病または前糖尿病などの代謝疾患の処置にとって有用であり得る。いくつかの態様において、本願に記載されているキットは、式（Ｉ−１）もしくは式（Ｉ−２）の化合物またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物、水和物、多形体、共結晶、互変異性体、立体異性体、同位体標識された誘導体、もしくはプロドラッグ、あるいはその医薬組成物を投与するための取扱説明書をさらに含む。キットは、対象またはヘルスケア専門家のために使用または処方情報を記載する容器詰め情報をもまた含み得る。かかる情報は米国食品医薬品局（ＦＤＡ）などの規制当局によって要求され得る。キットは、化合物または組成物の投与のためのデバイス、例えば非経口投与のためのシリンジをもまた任意に含み得る。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】インスリン受容体（ＩＲ）α２β２二量体とＩＲ活性化に関わるドメインとを描写している。（Ａ）左：インスリン受容体（ＩＲ）α２β２二量体の模式図。右：ＩＲα２β２二量体のエクトドメイン（ＰＤＢ：３ＬＯＨ）およびチロシンキナーゼドメイン（ＰＤＢ：１ＩＲＫ）両方の高解像度の構造のコンポジット。（Ｂ）ＩＲα鎖のリガンドなしのＩＲのＬ１ドメインに結合したαＣＴ残基６９３−７１０（紫色）の構造（ＰＤＢ：３ＬＯＨ）。（Ｃ）ＩＲのＬ１ドメインおよびαＣＴ残基７０４−７１５（紫色）との複合体のインスリンの構造（ＰＤＢ：３Ｗ１４）。
【００３６】
【図２】ステープルドポリペプチドの第１世代の像を描写している。３つの例示の炭化水素ステープルドポリペプチド。オレフィンメタセシスは全炭化水素架橋を作り出し、これは「ステープル」と呼称され、ペプチド全体に渡るαヘリックス性の性格のテンプレートとなる。各ステープルの種類の生成のために利用されるα−メチルα−アルケニルグリシンアミノ酸は命名法ＸＹを用いて指示され、Ｘはα炭素における立体化学であり（カーン・インゴルド・プレローグ表記）、Ｙはアルケニル側鎖の炭素の長さである。
【００３７】
【図３】ステープルドポリペプチドの第２世代の像を描写している。例示のアミノステープルドポリペプチド。（Ａ）（Ｒ）−Ａｌｌｏｃ−ピロリジンが例示のポリペプチド配列中のｉ位置に、Ｓ８がｉ＋７位置に組み込まれた。閉環メタセシス（ＲＣＭ）の後にＡｌｌｏｃステープルド中間体が得られた。この中間体はＰｄによって媒介されるＣＯ２逆挿入に供され、ｉ，ｉ＋７アミノステープルドペプチドを与えた。（Ｂ）円偏光二色性（ＣＤ）分光法は、例示のペプチド中の第１世代全炭化水素ステープルおよび第２世代アミノステープルド版によるヘリックス誘導の同等のレベルを示した。αヘリックス性ペプチドは２０８ｎｍおよび２２２ｎｍにおいて２つの最小値を有するＣＤスペクトルを表す。
【００３８】
【図４】インスリンおよびαＣＴセグメントの構造を描写している。（Ａ）ＩＲのＬ１ドメインおよびαＣＴ残基７０４〜７１５との複合体のインスリン（Ａ鎖およびＢ鎖）の構造。（Ｂ）上：Ｌ１ドメインまたはインスリンのいずれかへの結合に関与する残基の分析と併せて、αＣＴペプチドの残基７０４〜７１５の配列が示されている。下：例示のアミノステープルドαＣＴペプチドのパネル。Ｌ１またはインスリンとあまり相互作用を有さない残基は非天然架橋アミノ酸との置き換えのための候補である。これらの非天然架橋アミノ酸は星印によって指定されている。２つの場合には、アミノステープリング残基の組み込みのための追加の位置を作り出すためにいずれかの末端においてαＣＴセグメントは１アミノ酸延ばされた。
【００３９】
【図５】図５Ａは、インスリン、αＣＴ、およびインスリン受容体のＬ１ドメインの間で形成された複合体の構造を描写している。差し込み図：インスリンＡ鎖のＮ末端とαＣＴのＣ末端との間の距離はおよそ６Åである（ＰＤＢ：３Ｗ１４）。図５Ｂはインスリン／αＣＴキメラとしてのインスリンアナログの模式像である。インスリンＡ鎖およびαＣＴは化学的リンカーを介して融合している。
【００４０】
【図６】本願に記載されているインスリンアナログを調製するためにインスリンＡ鎖とαＣＴとを繋ぐための例示的な化学的リンカーを描写している。
【００４１】
【図７】本願に記載されているインスリンアナログを調製するための例示的な逐次手法を描写している。化学的リンカーによって繋がれたインスリンＡ鎖および安定化されたαＣＴポリペプチドが、インスリンＡ鎖システイン上にトリチル保護基を用いて固相ポリペプチド合成（ＳＰＰＳ）によって合成される。インスリンＢ鎖の調製は類似の手法に従う。樹脂からの切断および脱保護の後に、２つの断片は適切なフォールディング緩衝液中で組み合わされて、インスリン中に見いだされる３つのネイティブなジスルフィド結合を有する構築物を得る。
【００４２】
【図８】本願に記載されているインスリンアナログを調製するための例示的な収束的手法を描写している。化学的リンカーおよびＣ末端チオエステルを保持する安定化されたαＣＴポリペプチドがＳＰＰＳによって合成される。Ａ鎖およびＢ鎖両方を有するインスリンが合成され、フォールディングされる。もたらされるインスリンはＡ鎖のＮ末端に追加のシステインを保持する。ネイティブケミカルライゲーション（ＮＣＬ）が次に用いられて、ステープルドまたはステッチドインスリン／αＣＴキメラとして本発明のインスリンアナログを生成する。
【００４３】
【図９】本願に記載されているインスリンアナログを合成するための鎖の組み合わせ実験のための例示のペプチドを描写している。
【００４４】
【図１０】インスリンアナログの例示の合成を描写している。αＣＴ−リンカー−Ａ鎖はｐＨ９緩衝液、１００ｍＭのＴＲＩＳ、８Ｍ尿素（等電点（ｐＩ）：４．０）中では可溶性であり、Ｈ２Ｏ、ＡｃＣＮ、ＭｅＯＨ、ＤＭＳＯ、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）、または２−メルカプトエタノール（ＢＭＥ）中では可溶性でない。可溶性を改善するための、インスリンまたは受容体結合にとって必要不可欠でないαＣＴポリペプチドの位置への二重変異の導入。
【００４５】
【図１１】ベクターpD444-NHを用いてＥ．ｃｏｌｉ（ＢＬ２１）中でαＣＴ−リンカー−プレプロインスリンを発現することによる、インスリンアナログの生合成の例を描写している。３つのベクター構築物、インスリン（リスプロバリアント。Ｃ鎖を有する）の元ベクター、インスリンアナログ（（ＧＧＧＳ）２−リンカーおよびαＣＴを含む。Ｃ鎖を有する）のベクター、インスリンアナログ（（ＧＧＧＳ）２−リンカーおよびαＣＴ、末端欠失Ｃ鎖を含む）のベクターが使用されている。（元または末端欠失Ｃ鎖を有する）異なる全長の構築物がＥ．ｃｏｌｉ中で発現される。もたらされる封入体は精製され、プレプロインスリン構築物は続いてリフォールディングされる。ＨｉｓタグおよびＣ鎖の酵素的切断はインスリンアナログを提供する。このプロセスは米国特許出願公開第ＵＳ２０１２／００５８５１３号によって提供されている方法から調整されている。これは亜硫酸分解ステップを回避し、それゆえに還元されたポリペプチドのリフォールディングを導いてフォールディング収率を増大させる。
【００４６】
【図１２−１３】プレプロインスリン構築物の例示的な生合成を描写している。インスリンアナログを合成するための鎖の組み合わせ実験のためのペプチドは、本願に記載されている通りである。
【００４７】
【図１４】架橋されたインスリンアナログの例示的な生合成を描写している。
【００４８】
【図１５】インスリンアナログの合成に用いられる例示的な非天然アミノ酸を描写している。
【００４９】
【図１６−２１】図２３の表４からの例示のインスリンαＣＴポリペプチドの円偏光二色性分光法を描写している。ポリペプチドは１０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．０）緩衝液、ＰＢＳ、またはＭｉｌｌｉＱのＨ２Ｏのいずれかに溶解されている。生データは平均残基楕円率（最初の２つのプロット）またはモル楕円率（プロットの残り）の濃度非依存的な単位に変換されている。αヘリックスは典型的にはおよそ２０８ｎｍおよび２２２ｎｍにおける２つの最小値とおよそ１９２ｎｍにおける最大値とを示す。ＰＢＳ中においては、２００ｎｍ未満では緩衝液の干渉がデータを遮断する。スペクトルはJASCO J-710分光偏光計を用いて得られた（例２参照）。
【００５０】
【図２２】ＣＨＯ−ＩＲ細胞における例示のインスリンαＣＴポリペプチドの用量反応（does-response）リン酸化アッセイを描写している。図２２Ａはｓ−αＣＴ５の用量反応アッセイを示している。図２２Ｂはｓ−αＣＴ１６の用量反応アッセイを示している。
【００５１】
【図２３】表４の例示のインスリンαＣＴポリペプチドを描写している。
【００５２】
【図２４−２９】例示の炭化水素ステープルド、アミノステープルド、およびＡｌｌｏｃステープルドインスリンαＣＴポリペプチドを描写している。ＲγＮは図１５に示されているＲＧＮである。ＲεＮは図１５に示されているＲＥＮである。ＳεＮは図１５に示されているＳＥＮである。
【００５３】
【図３０】αＣＴ−ＰＥＧ２−Ａ鎖の例示のインスリンアナログの例示の質量スペクトルを描写している。
【００５４】
【図３１−３２】図２３に示されている表４からの例示のインスリンαＣＴポリペプチドの円偏光二色性分光法を描写している。
【００５５】
【図３３】ＩＲβリン酸化に及ぼす例示のインスリンαＣＴポリペプチドの効果を描写している（例３参照）。
【００５６】
【図３４】ＩＲβリン酸化に及ぼす例示のインスリンαＣＴポリペプチドｓ−αＣＴ５、ｓ−αＣＴ１４、およびｓ−αＣＴ１６の効果を描写している。
【００５７】
【図３５−３６】Ａｋｔリン酸化に及ぼす例示のインスリンαＣＴポリペプチドの効果を描写している。
【００５８】
【図３７】ＩＲβリン酸化に及ぼす例示のインスリンαＣＴポリペプチドの効果のインスリン依存性を描写している。
【００５９】
【図３８】本願に記載されているインスリンアナログの生合成を描写している。
【００６０】
【図３９】インスリンアナログの生合成における封入体の精製を描写している。
【００６１】
【図４０】インスリンアナログの例示の生合成中のリフォールディング条件の小スケール試験を描写している。希釈された封入体が１０ｍＭグリシン、１ｍＭのＥＤＴＡ、２ｍＭシスチン、および１ｇ／ＬのＰＥＧ１５００中にｐＨ１１．２で溶解された。希釈比は１：１００である。フォールディング反応は異なる条件（ｒｔ対４℃および振とう対静置）で６ｈ実行された。次に、３ｍＭの終濃度に達するようにＺｎ２＋が追加された。沈殿を与えるようにｐＨ値が６．２に調整された。続いての遠心を行い、ペレットはｐＨ８〜１１の５０ｍＭのＴｒｉｓ／６Ｍ尿素中に溶解された。リフォールディングはｒｔまたは４℃、振とうまたは静置で起こるように見える。配列１、２、および３：参照としての図３９からの希釈された封入体。Ａ：振とう、Ｂ：静置。
【００６２】
【図４１】インスリン前駆体のスケールアップされたリフォールディングを描写している。（１Ｌ培養物あたり合計２０ｍＬのうちの）５ｍＬの希釈された封入体が用いられた。リフォールディング条件：一晩４℃で静置。図４１Ａ：リフォールディングはＳｅｑ１および２については４℃一晩静置で起こるように見える。Ｓｅｑ３はリフォールディング後にシフトを示さない。しかしながら、これは全ての３つの構築物のうち最小でもまたあり、著しいシフトを有さないかもしれない。図４１Ｂ：ゲルは、Ｓｅｑ１がｐＨ１１において経時的にアンフォールディングを始める一方で、Ｓｅｑ２（αＣＴを含む）はより安定に留まるということを示唆している。Ｓｅｑ３（末端欠失Ｃ鎖）は以前には上首尾にフォールディングしていないかもしれない。配列１、２、および３：参照としての図３９からの希釈された封入体。Ｐ：ペレット、Ｓ：上清。
【００６３】
【図４２】インスリンアナログの例示の生合成におけるリフォールディング後の急速希釈または透析を描写している。
【００６４】
定義
具体的な官能基および化学用語の定義が下により詳細に記載されている。化学元素はHandbook of Chemistry and Physics, 75th Ed.内表紙の元素周期表ＣＡＳ版にしたがって同定され、具体的な官能基はそこに記載されている通りに一般的に定義される。加えて、有機化学の一般的な法則、さらには具体的な官能部分および反応性は、Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999、Smith and March March's Advanced Organic Chemistry, 5th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001、Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989、およびCarruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3rd Edition, Cambridge University Press, Cambridge, 1987に記載されている。
【００６５】
本願に記載されている化合物は１つまたは２つ以上の不斉中心を含み得、したがって様々な立体異性体形態、例えばエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーとして存在し得る。例えば、本願に記載されている化合物は個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、もしくは幾何異性体の形態であり得、または立体異性体の混合物の形態であり得る（ラセミ混合物および１つまたは２つ以上の立体異性体が濃縮された混合物を含む）。異性体は当業者に公知の方法（キラル高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）ならびにキラル塩の形成および結晶化を含む）によって混合物から単離され得る。または、好ましい異性体が不斉合成によって調製され得る。例えば、Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981)、Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977)、Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962)、およびWilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972)参照。本発明は、加えて、他の異性体を実質的に含まない個々の異性体としての化合物およびその代わりに様々な異性体の混合物としての化合物を包含する。
【００６６】
式中、
【化１３】
2016523241.tif 000015
は不在であるかまたは単結合であり、
【化１４】
2016523241.tif 000016
または
【化１５】
2016523241.tif 000017
は単または二重結合である。
【００６７】
別様に書かれていない限り、本願において描写される構造は、１つまたは２つ以上の同位体濃縮された原子の存在のみが異なる化合物を含むこともまた意味されている。例えば、重水素もしくは三重水素による水素の置き換え、１８Ｆによる１９Ｆの置き換え、または１３Ｃもしくは１４Ｃが濃縮された炭素による炭素の置き換え以外は本発明の構造を有する化合物は、本開示の範囲内である。かかる化合物は例えば生物学的アッセイの分析ツールまたはプローブとして有用である。
【００６８】
値の範囲が挙げられているときには、範囲内の各値および部分範囲を包含することが意図されている。例えば「Ｃ１−６アルキル」は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１−６、Ｃ１−５、Ｃ１−４、Ｃ１−３、Ｃ１−２、Ｃ２−６、Ｃ２−５、Ｃ２−４、Ｃ２−３、Ｃ３−６、Ｃ３−５、Ｃ３−４、Ｃ４−６、Ｃ４−５、およびＣ５−６アルキルを包含することが意図されている。
【００６９】
用語「脂肪族」はアルキル、アルケニル、アルキニル、および炭素環式基を言う。同様に、用語「ヘテロ脂肪族」はヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、およびヘテロ環式基を言う。
【００７０】
用語「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖または分岐の飽和炭化水素基のラジカルを言う（「Ｃ１−１０アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜９つの炭素原子を有する（「Ｃ１−９アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜８つの炭素原子を有する（「Ｃ１−８アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜７つの炭素原子を有する（「Ｃ１−７アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜６つの炭素原子を有する（「Ｃ１−６アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜５つの炭素原子を有する（「Ｃ１−５アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜４つの炭素原子を有する（「Ｃ１−４アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜３つの炭素原子を有する（「Ｃ１−３アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１〜２つの炭素原子を有する（「Ｃ１−２アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は１つの炭素原子を有する（「Ｃ１アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は２〜６つの炭素原子を有する（「Ｃ２−６アルキル」）。Ｃ１−６アルキル基の例は、メチル（Ｃ１）、エチル、（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソプロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソブチル（Ｃ４）、ｎ−ペンチル（Ｃ５）、３−ペンタニル（Ｃ５）、アミル（Ｃ５）、ネオペンチル（Ｃ５）、３−メチル−２−ブタニル（Ｃ５）、第３級アミル（Ｃ５）、およびｎ−ヘキシル（Ｃ６）を含む。アルキル基の追加の例はｎ−ヘプチル（Ｃ７）、ｎ−オクチル（Ｃ８）および同様のものを含む。別様に指定されていない限り、アルキル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換アルキル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換される（「置換アルキル」）。いくつかの態様においてアルキル基は非置換Ｃ１−１０アルキル（例えば−ＣＨ３）である。ある態様においてアルキル基は置換Ｃ１−１０アルキルである。
【００７１】
用語「ハロアルキル」は置換アルキル基であり、水素原子の１つまたは２つ以上が独立してハロゲン（例えばフルオロ、ブロモ、クロロ、またはヨード）によって置き換えられている。「ペルハロアルキル」はハロアルキルの下位集合であり、水素原子の全てがハロゲン（例えばフルオロ、ブロモ、クロロ、またはヨード）によって置き換えられたアルキル基を言う。いくつかの態様においてハロアルキル部分は１〜８つの炭素原子を有する（「Ｃ１−８ハロアルキル」）。いくつかの態様においてハロアルキル部分は１〜６つの炭素原子を有する（「Ｃ１−６ハロアルキル」）。いくつかの態様においてハロアルキル部分は１〜４つの炭素原子を有する（「Ｃ１−４ハロアルキル」）。いくつかの態様においてハロアルキル部分は１〜３つの炭素原子を有する（「Ｃ１−３ハロアルキル」）。いくつかの態様においてハロアルキル部分は１〜２つの炭素原子を有する（「Ｃ１−２ハロアルキル」）。いくつかの態様においてハロアルキル水素原子の全てはフルオロによって置き換えられて、ペルフルオロアルキル基を提供する。いくつかの態様において、ハロアルキル水素原子の全てはクロロによって置き換えられて、「ペルクロロアルキル」基を提供する。ハロアルキル基の例は−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＦＣｌ２、−ＣＦ２Ｃｌ、および同様のものを含む。
【００７２】
用語「ヘテロアルキル」は、酸素、窒素、または硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、１、２、３、または４つのヘテロ原子）を主鎖中に（すなわち、主鎖の隣接する炭素原子間に挿入されて）および／または主鎖の１つもしくは２つ以上の末端位置に置かれてさらに含む、アルキル基を言う。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜１０個の炭素原子および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基を言う（「ヘテロＣ１−１０アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜９つの炭素原子および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−９アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜８つの炭素原子および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−８アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜７つの炭素原子および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−７アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜６つの炭素原子および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−６アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜５つの炭素原子および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−５アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜４つの炭素原子および１つまたは２つのヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−４アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜３つの炭素原子および１つのヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−３アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１〜２つの炭素原子および１つのヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ１−２アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、１つの炭素原子および１つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１アルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は、２〜６つの炭素原子および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する飽和基である（「ヘテロＣ２−６アルキル」）。別様に定められていない限り、ヘテロアルキル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルキル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換ヘテロアルキル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は非置換ヘテロＣ１−１０アルキルである。いくつかの態様において、ヘテロアルキル基は置換ヘテロＣ１−１０アルキルである。
【００７３】
用語「アルケニル」は、２〜１０個の炭素原子および１つまたは２つ以上の炭素−炭素二重結合（例えば、１、２、３、または４つの二重結合）を有する直鎖または分岐炭化水素基のラジカルを言う。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜９つの炭素原子を有する（「Ｃ２−９アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜８つの炭素原子を有する（「Ｃ２−８アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜７つの炭素原子を有する（「Ｃ２−７アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜６つの炭素原子を有する（「Ｃ２−６アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜５つの炭素原子を有する（「Ｃ２−５アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜４つの炭素原子を有する（「Ｃ２−４アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２〜３つの炭素原子を有する（「Ｃ２−３アルケニル」）。いくつかの態様においてアルケニル基は２つの炭素原子を有する（「Ｃ２アルケニル」）。１つまたは２つ以上の炭素−炭素二重結合は、内部（例えば２−ブテニル内）または末端（例えば１−ブテニル内）であり得る。Ｃ２−４アルケニル基の例は、エテニル（Ｃ２）、１−プロペニル（Ｃ３）、２−プロペニル（Ｃ３）、１−ブテニル（Ｃ４）、２−ブテニル（Ｃ４）、ブタジエニル（Ｃ４）、および同様のものを含む。Ｃ２−６アルケニル基の例は、前述のＣ２−４アルケニル基、さらにはペンテニル（Ｃ５）、ペンタジエニル（Ｃ５）、ヘキセニル（Ｃ６）、および同様のものを含む。アルケニルの追加の例は、ヘプテニル（Ｃ７）、オクテニル（Ｃ８）、オクタトリエニル（Ｃ８）、および同様のものを含む。別様に定められていない限り、アルケニル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換アルケニル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換アルケニル」）。いくつかの態様において、アルケニル基は非置換Ｃ２−１０アルケニルである。いくつかの態様において、アルケニル基は置換Ｃ２−１０アルケニルである。アルケニル基中で、立体化学が定められていないＣ＝Ｃ二重結合（例えば−ＣＨ＝ＣＨＣＨ３または
【化１６】
2016523241.tif 000018
）は（Ｅ）または（Ｚ）二重結合であり得る。
【００７４】
用語「ヘテロアルケニル」は、酸素、窒素、または硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、１、２、３、または４つのヘテロ原子）を主鎖中に（すなわち、主鎖の隣接する炭素原子間に挿入されて）および／または主鎖の１つもしくは２つ以上の末端位置に置かれてさらに含む、アルケニル基を言う。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜１０個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する基を言う（「ヘテロＣ２−１０アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜９つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−９アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜８つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−８アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜７つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−７アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜６つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−６アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜５つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−５アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜４つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−４アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜３つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−３アルケニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルケニル基は、２〜６つの炭素原子、少なくとも１つの二重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−６アルケニル」）。別様に定められていない限り、ヘテロアルケニル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルケニル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換ヘテロアルケニル」）。いくつかの態様においてヘテロアルケニル基は非置換ヘテロＣ２−１０アルケニルである。いくつかの態様においてヘテロアルケニル基は置換ヘテロＣ２−１０アルケニルである。
【００７５】
用語「アルキニル」は、２〜１０個の炭素原子および１つまたは２つ以上の炭素−炭素三重結合（例えば、１、２、３、または４つの三重結合）を有する直鎖または分岐炭化水素基のラジカルを言う（「Ｃ２−１０アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜９つの炭素原子を有する（「Ｃ２−９アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜８つの炭素原子を有する（「Ｃ２−８アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜７つの炭素原子を有する（「Ｃ２−７アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜６つの炭素原子を有する（「Ｃ２−６アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜５つの炭素原子を有する（「Ｃ２−５アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜４つの炭素原子を有する（「Ｃ２−４アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２〜３つの炭素原子を有する（「Ｃ２−３アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は２つの炭素原子を有する（「Ｃ２アルキニル」）。１つまたは２つ以上の炭素−炭素三重結合は内部（例えば２−ブチニル内）または末端（例えば１−ブチニル内）であり得る。Ｃ２−４アルキニル基の例は、限定なしに、エチニル（Ｃ２）、１−プロピニル（Ｃ３）、２−プロピニル（Ｃ３）、１−ブチニル（Ｃ４）、２−ブチニル（Ｃ４）、および同様のものを含む。Ｃ２−６アルケニル基の例は、前述のＣ２−４アルキニル基、さらにはペンチニル（Ｃ５）、ヘキシニル（Ｃ６）、および同様のものを含む。アルキニルの追加の例は、ヘプチニル（Ｃ７）、オクチニル（Ｃ８）、および同様のものを含む。別様に定められていない限り、アルキニル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換アルキニル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換アルキニル」）。いくつかの態様において、アルキニル基は非置換Ｃ２−１０アルキニルである。いくつかの態様において、アルキニル基は置換Ｃ２−１０アルキニルである。
【００７６】
用語「ヘテロアルキニル」は、酸素、窒素、または硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、１、２、３、または４つのヘテロ原子）を主鎖中に（すなわち、主鎖の隣接する炭素原子間に挿入されて）および／または主鎖の１つもしくは２つ以上の末端位置に置かれてさらに含む、アルキニル基を言う。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜１０個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する基を言う（「ヘテロＣ２−１０アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜９つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−９アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜８つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−８アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜７つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−７アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜６つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つまたは２つ以上のヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−６アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は２〜５つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−５アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜４つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−４アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜３つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−３アルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は、２〜６つの炭素原子、少なくとも１つの三重結合、および１または２つのヘテロ原子を主鎖中に有する（「ヘテロＣ２−６アルキニル」）。別様に定められていない限り、ヘテロアルキニル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルキニル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換ヘテロアルキニル」）。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は非置換ヘテロＣ２−１０アルキニルである。いくつかの態様において、ヘテロアルキニル基は置換ヘテロＣ２−１０アルキニルである。
【００７７】
用語「カルボシクリル（carbocyclyl）」または「炭素環式」は、３〜１４個の環内炭素原子（「Ｃ３−１４カルボシクリル」）および０個のヘテロ原子を非芳香族環系中に有する非芳香族環式炭化水素基のラジカルを言う。いくつかの態様においてカルボシクリル基は３〜１０個の環内炭素原子を有する（「Ｃ３−１０カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は３〜８つの環内炭素原子を有する（「Ｃ３−８カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は３〜７つの環内炭素原子を有する（「Ｃ３−７カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は３〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ３−６カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は４〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ４−６カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は５〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ５−６カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は５〜１０個の環内炭素原子を有する（「Ｃ５−１０カルボシクリル」）。例示的なＣ３−６カルボシクリル基は、限定なしに、シクロプロピル（Ｃ３）、シクロプロペニル（Ｃ３）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロブテニル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロペンテニル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、シクロヘキセニル（Ｃ６）、シクロヘキサジエニル（Ｃ６）、および同様のものを含む。例示的なＣ３−８カルボシクリル基は、限定なしに、前述のＣ３−６カルボシクリル基、さらにはシクロヘプチル（Ｃ７）、シクロヘプテニル（Ｃ７）、シクロヘプタジエニル（Ｃ７）、シクロヘプタトリエニル（Ｃ７）、シクロオクチル（Ｃ８）、シクロオクテニル（Ｃ８）、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル（Ｃ７）、ビシクロ［２．２．２］オクタニル（Ｃ８）、および同様のものを含む。例示的なＣ３−１０カルボシクリル基は、限定なしに、前述のＣ３−８カルボシクリル基、さらにはシクロノニル（Ｃ９）、シクロノネニル（Ｃ９）、シクロデシル（Ｃ１０）、シクロデセニル（Ｃ１０）、オクタヒドロ−１Ｈ−インデニル（Ｃ９）、デカヒドロナフタレニル（Ｃ１０）、スピロ［４．５］デカニル（Ｃ１０）、および同様のものを含む。先述の例が例示している通り、いくつかの態様において、カルボシクリル基は単環式（「単環式カルボシクリル」）または多環式（例えば、縮合、架橋、もしくはスピロ環系、例えば二環式系（「二環式カルボシクリル」）もしくは三環式系（「三環式カルボシクリル」）を含有する）であり、飽和であり得るか、または１つもしくは２つ以上の炭素−炭素二重もしくは三重結合を含有し得る。「カルボシクリル」は、上で定義されているカルボシクリル環が１つまたは２つ以上のアリールまたはヘテロアリール基と縮合しており、取り付けの点がカルボシクリル環上にある環系をもまた含む。かかる場合には、炭素数は、炭素環式環系中の炭素数を継続して指定する。別様に定められていない限り、カルボシクリル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換カルボシクリル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換カルボシクリル」）。いくつかの態様においてカルボシクリル基は���置換Ｃ３−１４カルボシクリルである。いくつかの態様においてカルボシクリル基は置換Ｃ３−１４カルボシクリルである。
【００７８】
いくつかの態様において、「カルボシクリル」は、３〜１４個の環内炭素原子を有する単環式飽和カルボシクリル基である（「Ｃ３−１４シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は３〜１０個の環内炭素原子を有する（「Ｃ３−１０シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は３〜８つの環内炭素原子を有する（「Ｃ３−８シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は３〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ３−６シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は４〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ４−６シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は５〜６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ５−６シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は５〜１０個の環内炭素原子を有する（「Ｃ５−１０シクロアルキル」）。Ｃ５−６シクロアルキル基の例は、シクロペンチル（Ｃ５）およびシクロヘキシル（Ｃ５）を含む。Ｃ３−６シクロアルキル基の例は、前述のＣ５−６シクロアルキル基、さらにはシクロプロピル（Ｃ３）およびシクロブチル（Ｃ４）を含む。Ｃ３−８シクロアルキル基の例は、前述のＣ３−６シクロアルキル基、さらにはシクロヘプチル（Ｃ７）およびシクロオクチル（Ｃ８）を含む。別様に定められていない限り、シクロアルキル基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換シクロアルキル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換シクロアルキル」）。いくつかの態様においてシクロアルキル基は非置換Ｃ３−１４シクロアルキルである。いくつかの態様においてシクロアルキル基は置換Ｃ３−１４シクロアルキルである。
【００７９】
用語「ヘテロシクリル（heterocyclyl）」または「ヘテロ環式」は、環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する３〜１４員非芳香族環系のラジカルを言い、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「３〜１４員ヘテロシクリル」）。１つまたは２つ以上の窒素原子を含有するヘテロシクリル基において、取り付けの点は原子価が許す限り炭素または窒素原子であり得る。ヘテロシクリル基は単環式（「単環式ヘテロシクリル」）または多環式（例えば、縮合、架橋、またはスピロ環系、例えば二環式系（「二環式ヘテロシクリル」）または三環式系（「三環式ヘテロシクリル」））のいずれかであり得、飽和であり得るか、または１つもしくは２つ以上の炭素−炭素二重もしくは三重結合を含有し得る。ヘテロシクリル多環式環系は、１つまたは２つ以上のヘテロ原子を１つまたは両方の環中に含み得る。「ヘテロシクリル」は、上で定義されているヘテロシクリル環が１つもしくは２つ以上のカルボシクリル基と縮合しており、取り付けの点がカルボシクリルもしくはヘテロシクリル環上にある環系、または上で定義されているヘテロシクリル環が１つもしくは２つ以上のアリールもしくはヘテロアリール基と縮合しており、取り付けの点がヘテロシクリル環上にある環系をもまた含む。かかる場合には、環員数は、ヘテロシクリル環系中の環員数を継続して指定する。別様に定められていない限り、ヘテロシクリルのそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換ヘテロシクリル」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換ヘテロシクリル」）。いくつかの態様においてヘテロシクリル基は非置換３〜１４員ヘテロシクリルである。いくつかの態様においてヘテロシクリル基は置換３〜１４員ヘテロシクリルである。
【００８０】
いくつかの態様において、ヘテロシクリル基は環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜１０員非芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜１０員ヘテロシクリル」）。いくつかの態様において、ヘテロシクリル基は環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜８員非芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜８員ヘテロシクリル」）。いくつかの態様において、ヘテロシクリル基は、環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜６員非芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜６員ヘテロシクリル」）。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロシクリルは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜３つの環内ヘテロ原子を有する。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロシクリルは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜２つの環内ヘテロ原子を有する。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロシクリルは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つの環内ヘテロ原子を有する。
【００８１】
１つのヘテロ原子を含有する例示的な３員ヘテロシクリル基は、限定なしにアジルジニル（azirdinyl）、オキシラニル、およびチイラニル（thiiranyl）を含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な４員ヘテロシクリル基は、限定なしにアゼチジニル、オキセタニル、およびチエタニルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロシクリル基は、限定なしに、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ジヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ジヒドロピロリル、およびピロリル−２，５−ジオンを含む。２つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロシクリル基は、限定なしに、ジオキソラニル、オキサチオラニル、およびジチオラニルを含む。３つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロシクリル基は、限定なしにトリアゾリニル、オキサジアゾリニル、およびチアジアゾリニルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロシクリル基は、限定なしにピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピリジニル、およびチアニルを含む。２つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロシクリル基は、限定なしにピペラジニル、モルホリニル、ジチアニル、ジオキサニルを含む。２つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロシクリル基は、限定なしにトリアジナニルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な７員ヘテロシクリル基は、限定なしにアゼパニル、オキセパニル、およびチエパニルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な８員ヘテロシクリル基は、限定なしにアゾカニル、オキセカニル、およびチオカニルを含む。例示的な二環式ヘテロシクリル基は、限定なしに、インドリニル、イソインドリニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾフラニル、テトラヒドロインドリル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、デカヒドロイソキノリニル、オクタヒドロクロメニル、オクタヒドロイソクロメニル、デカヒドロナフチリジニル、デカヒドロ−１，８−ナフチリジニル、オクタヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピロール、インドリニル、フタルイミジル、ナフタルイミジル、クロマニル、クロメニル、１Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，４］ジアゼピニル、１，４，５，７−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］ピロリル、５，６−ジヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピロリル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピラニル、５，７−ジヒドロ−４Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ−［２，３−ｂ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｂ］ピリジニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジニル、および同様のものを含む。
【００８２】
用語「アリール」は、芳香族環系中に提供された６〜１４個の環内炭素原子および０個のヘテロ原子を有する、単環式または多環式（例えば、二環式または三環式）４ｎ＋２芳香族環系（例えば、環式アレイ中に共有された６、１０、または１４個のπ電子を有する）のラジカルを言う（「Ｃ６−１４アリール」）。いくつかの態様において、アリール基は６つの環内炭素原子を有する（「Ｃ６アリール」、例えばフェニル）。いくつかの態様において、アリール基は１０個の環内炭素原子を有する（「Ｃ１０アリール」、例えばナフチル、例えば１−ナフチルおよび２−ナフチル）。いくつかの態様において、アリール基は１４個の環内炭素原子を有する（「Ｃ１４アリール」、例えばアントラシル（anthracyl））。「アリール」は、上で定義されているアリール環が１つまたは２つ以上のカルボシクリルまたはヘテロシクリル基と縮合しており、ラジカルまたは取り付けの点がアリール環上にある環系をもまた含む。かかる場合には、炭素原子数は、アリール環系中の炭素原子数を継続して指定する。別様に定められていない限り、アリール基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換アリール」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換アリール」）。いくつかの態様においてアリール基は非置換Ｃ６−１４アリールである。いくつかの態様においてアリール基は置換Ｃ６−１４アリールである。
【００８３】
「アラルキル」は「アルキル」の下位集合であり、アリール基によって置換されたアルキル基を言い、取り付けの点はアルキル部分上にある。
【００８４】
用語「ヘテロアリール」は、芳香族環系中に提供された環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する、５〜１４員単環式または多環式（例えば、二環式、三環式）４ｎ＋２芳香族環系（例えば、環式アレイ中に共有された６、１０、または１４個のπ電子を有する）のラジカルを言い、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜１４員ヘテロアリール」）。１つまたは２つ以上の窒素原子を含有するヘテロアリール基において、取り付けの点は原子価が許す限り炭素または窒素原子であり得る。ヘテロアリール多環式環系は、１つまたは２つ以上のヘテロ原子を１つまたは両方の環中に含み得る。「ヘテロアリール」は、上で定義されているヘテロアリール環が１つまたは２つ以上のカルボシクリルまたはヘテロシクリル基と縮合しており、取り付けの点がヘテロアリール環上にある環系を含む。かかる場合には、環員数は、ヘテロアリール環系中の環員数を継続して指定する。「ヘテロアリール」は、上で定義されているヘテロアリール環が１つまたは２つ以上のアリール基と縮合しており、取り付けの点がアリールまたはヘテロアリール環上にある環系をもまた含む。かかる場合には、環員数は、縮合多環式（アリール／ヘテロアリール）環系中の環員数を指定する。１つの環がヘテロ原子を含有しない多環式ヘテロアリール基（例えば、インドリル、キノリニル、カルバゾリル、および同様のもの）は、取り付けの点はいずれの環、すなわちヘテロ原子を保持する環（例えば２−インドリル）またはヘテロ原子を含有しない環（例えば５−インドリル）上でもあり得る。
【００８５】
いくつかの態様において、ヘテロアリール基は、芳香族環系中に提供された環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜１０員芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜１０員ヘテロアリール」）。いくつかの態様において、ヘテロアリール基は、芳香族環系中に提供された環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜８員芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜８員ヘテロアリール」）。いくつかの態様において、ヘテロアリール基は、芳香族環系中に提供された環内炭素原子および１〜４つの環内ヘテロ原子を有する５〜６員芳香族環系であり、各ヘテロ原子は独立して窒素、酸素、および硫黄から選択される（「５〜６員ヘテロアリール」）。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロアリールは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜３つの環内ヘテロ原子を有する。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロアリールは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜２つの環内ヘテロ原子を有する。いくつかの態様において、５〜６員ヘテロアリールは、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つの環内ヘテロ原子を有する。別様に定められていない限り、ヘテロアリール基のそれぞれは独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアリール」）、または１つもしくは２つ以上の置換基によって置換されている（「置換ヘテロアリール」）。いくつかの態様においてヘテロアリール基は非置換５〜１４員ヘテロアリールである。いくつかの態様においてヘテロアリール基は置換５〜１４員ヘテロアリールである。
【００８６】
１つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロアリール基は、限定なしにピロリル、フラニル、およびチオフェニルを含む。２つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロアリール基は、限定なしに、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、およびイソチアゾリルを含む。３つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロアリール基は、限定なしに、トリアゾリル、オキサジアゾリル、およびチアジアゾリルを含む。４つのヘテロ原子を含有する例示的な５員ヘテロアリール基は、限定なしにテトラゾリルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロアリール基は、限定なしにピリジニルを含む。２つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロアリール基は、限定なしにピリダジニル、ピリミジニル、およびピラジニルを含む。３または４つのヘテロ原子を含有する例示的な６員ヘテロアリール基は、限定なしにそれぞれトリアジニルおよびテトラジニルを含む。１つのヘテロ原子を含有する例示的な７員ヘテロアリール基は、限定なしに、アゼピニル、オキセピニル、およびチエピニルを含む。例示的な５，６−二環式ヘテロアリール基は、限定なしに、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、イソベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイソフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、インドリジニル、およびプリニルを含む。例示的な６，６−二環式ヘテロアリール基は、限定なしに、ナフチリジニル、プテリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キノキサリニル、フタラジニル、およびキナゾリニルを含む。例示的な三環式ヘテロアリール基は、限定なしに、フェナントリジニル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、およびフェナジニルを含む。
【００８７】
「ヘテロアラルキル」は「アルキル」の下位集合であり、ヘテロアリール基によって置換されたアルキル基を言い、取り付けの点はアルキル部分上にある。
【００８８】
用語「不飽和結合」は二重または三重結合を言う。
【００８９】
用語「不飽和」または「部分不飽和」は少なくとも１つの二重または三重結合を含む部分を言う。
【００９０】
用語「飽和」は、二重または三重結合を含まない部分、すなわち単結合のみを含む部分を言う。
【００９１】
接尾辞「エン」を基に添えることは、基が二価部分であるということを指示する。例えば、アルキレンはアルキルの二価部分であり、アルケニレンはアルケニルの二価部分であり、アルキニレンはアルキニルの二価部分であり、ヘテロアルキレンはヘテロアルキルの二価部分であり、ヘテロアルケニレンはヘテロアルケニルの二価部分であり、ヘテロアルキニレンはヘテロアルキニルの二価部分であり、カルボシクリレンはカルボシクリルの二価部分であり、ヘテロシクリレンはヘテロシクリルの二価部分であり、アリーレンはアリールの二価部分であり、ヘテロアリーレンはヘテロアリールの二価部分である。
【００９２】
はっきりと別様に定められていない限り、基は任意に置換されていてもよい。いくつかの態様において、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基は任意に置換されていてもよい。「任意に置換されていてもよい」は、置換または非置換であり得る基を言う（例えば、「置換」もしくは「非置換」アルキル、「置換」もしくは「非置換」アルケニル、「置換」もしくは「非置換」アルキニル、「置換」もしくは「非置換」ヘテロアルキル、「置換」もしくは「非置換」ヘテロアルケニル、「置換」もしくは「非置換」ヘテロアルキニル、「置換」もしくは「非置換」カルボシクリル、「置換」もしくは「非置換」ヘテロシクリル、「置換」もしくは「非置換」アリール、または「置換」もしくは「非置換」ヘテロアリール基）。一般的に、用語「置換」は、基の上に存在する少なくとも１つの水素が許容できる置換基（例えば置換によって安定な化合物、例えば転位、環化、脱離、または他の反応などの変換反応を自発的に起こさない化合物をもたらす置換基）によって置き換えられるということを意味する。別様に指示されていない限り、「置換」基は、基の１つまたは２つ以上の置換可能な位置に置換基を有する。いずれかの所与の構造中の１つよりも多くの位置が置換されるときには、置換基は各位置において同じかまたは異なるかのいずれかである。用語「置換」は、有機化合物の全ての許容できる置換基による置換を含むと考えられ、安定な化合物の形成をもたらす本願に記載されている置換基のいずれかを含む。本発明は、安定な化合物にいたるためにいずれかおよび全てのかかる組み合わせを考える。本発明の目的のためには、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基および／またはヘテロ原子の原子価を満足させて安定な部分の形成をもたらす本願に記載されているいずれかの好適な置換基を有し得る。本発明は、本願に記載されている例示的な置換基によって何らかに限定されることは意図されていない。
【００９３】
例示的な炭素原子置換基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−ＯＮ（Ｒｂｂ）２、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｎ（Ｒｂｂ）３＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＲｃｃ）Ｒｂｂ、−ＳＨ、−ＳＲａａ、−ＳＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨＯ、−Ｃ（ＯＲｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２ＯＲａａ、−ＯＳＯ２Ｒａａ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−ＯＳｉ（Ｒａａ）３−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−ＯＰ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（Ｒｃｃ）３、−ＯＰ（Ｒｃｃ）２、−ＯＰ（Ｒｃｃ）３、−Ｂ（Ｒａａ）２、−Ｂ（ＯＲｃｃ）２、−ＢＲａａ（ＯＲｃｃ）、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０ペルハロアルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリールを含むが、これに限定されず、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基によって置換されるか、
あるいは、炭素原子上の２つのジェミナル水素が、基＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮ（Ｒｂｂ）２、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、＝ＮＮＲｂｂＳ（＝Ｏ）２Ｒａａ、＝ＮＲｂｂ、もしくは＝ＮＯＲｃｃによって置き換えられ、
Ｒａａのそれぞれは独立してＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０ペルハロアルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、または２つのＲａａ基がつながって３〜１４員ヘテロシクリルもしくは５〜１４員ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基によって置換され、
Ｒｂｂのそれぞれは独立して水素、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｃｃ）２、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０ペルハロアルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、または、２つのＲｂｂ基がつながって３〜１４員ヘテロシクリルもしくは５〜１４員ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基によって置換され、
Ｒｃｃのそれぞれは、独立して、水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０ペルハロアルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、または、２つのＲｃｃ基がつながって３〜１４員ヘテロシクリルもしくは５〜１４員ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｄｄ基によって置換され、
Ｒｄｄのそれぞれは、独立して、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲｅｅ、−ＯＮ（Ｒｆｆ）２、−Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｎ（Ｒｆｆ）３＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＲｅｅ）Ｒｆｆ、−ＳＨ、−ＳＲｅｅ、−ＳＳＲｅｅ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒｅｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＯＣＯ２Ｒｅｅ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＮＲｆｆＣＯ２Ｒｅｅ、−ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｃ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｒｅｅ、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、−Ｃ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＳＯ２Ｒｅｅ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＳＯ２Ｒｅｅ、−ＳＯ２ＯＲｅｅ、−ＯＳＯ２Ｒｅｅ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−Ｓｉ（Ｒｅｅ）３、−ＯＳｉ（Ｒｅｅ）３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｅｅ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒｅｅ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｅｅ）２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ペルハロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ヘテロＣ１−６アルキル、ヘテロＣ２−６アルケニル、ヘテロＣ２−６アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１０員ヘテロシクリル、Ｃ６−１０アリール、５〜１０員ヘテロアリールから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｇｇ基によって置換されるか、または、２つのジェミナルＲｄｄ置換基がつながって＝Ｏもしくは＝Ｓを形成し得、
Ｒｅｅのそれぞれは独立してＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ペルハロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ヘテロＣ１−６アルキル、ヘテロＣ２−６アルケニル、ヘテロＣ２−６アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、Ｃ６−１０アリール、３〜１０員ヘテロシクリル、および３〜１０員ヘテロアリールから選択され、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｇｇ基によって置換され、
Ｒｆｆのそれぞれは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ペルハロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ヘテロＣ１−６アルキル、ヘテロＣ２−６アルケニル、ヘテロＣ２−６アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１０員ヘテロシクリル、Ｃ６−１０アリール、および５〜１０員ヘテロアリールから選択されるか、または、２つのＲｆｆ基がつながって３〜１０員ヘテロシクリルもしくは５〜１０員ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは、独立して０、１、２、３、４、もしくは５つのＲｇｇ基によって置換され、
Ｒｇｇのそれぞれは、独立して、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１−６アルキル、−ＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）３＋Ｘ−、−ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）２＋Ｘ−、−ＮＨ２（Ｃ１−６アルキル）＋Ｘ−、−ＮＨ３＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＣ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（ＯＨ）（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨ（ＯＨ）、−ＳＨ、−ＳＣ１−６アルキル、−ＳＳ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）、−ＯＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝ＮＨ）Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−ＯＣ（＝ＮＨ）（Ｃ１−６アルキル）、−ＯＣ（＝ＮＨ）ＯＣ１−６アルキル、−Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（ＮＨ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２Ｃ１−６アルキル、−ＳＯ２ＯＣ１−６アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ１−６アルキル、−ＳＯＣ１−６アルキル、−Ｓｉ（Ｃ１−６アルキル）３、−ＯＳｉ（Ｃ１−６アルキル）３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＣ１−６アルキル、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＣ１−６アルキル、−Ｐ（＝Ｏ）２（Ｃ１−６アルキル）、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｃ１−６アルキル）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣ１−６アルキル）２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ペルハロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ヘテロＣ１−６アルキル、ヘテロＣ２−６アルケニル、ヘテロＣ２−６アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、Ｃ６−１０アリール、３〜１０員ヘテロシクリル、５〜１０員ヘテロアリールであるか、または、２つのジェミナルＲｇｇ置換基がつながって＝Ｏもしくは＝Ｓを形成し得、Ｘ−は対イオンである。
【００９４】
用語「ハロ」または「ハロゲン」はフッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）、または要素（ヨード、−Ｉ）を言う。
【００９５】
用語「ヒドロキシル」または「ヒドロキシ」は基−ＯＨを言う。用語「置換ヒドロキシル」または「置換ヒドロキシル」は、敷衍して、親分子に直接的に取り付けられた酸素原子が水素より他の基によって置換されたヒドロキシル基を言い、−ＯＲａａ、−ＯＮ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＣＯ２Ｒａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＳＯ２Ｒａａ、−ＯＳｉ（Ｒａａ）３、−ＯＰ（Ｒｃｃ）２、−ＯＰ（Ｒｃｃ）３、−ＯＰ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、および−ＯＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２から選択される基を含み、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本願において定義されている通りである。
【００９６】
用語「チオール」または「チオ」は基−ＳＨを言う。用語「置換チオール」または「置換チオ」は、 敷衍して、親分子に直接的に取り付けられた硫黄原子が水素より他の基によって置換されたチオール基を言い、−ＳＲａａ、−Ｓ＝ＳＲｃｃ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、および−ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａから選択される基を含み、ＲａａおよびＲｃｃは本願において定義されている通りである。
【００９７】
用語「アミノ」は基−ＮＨ２を言う。用語「置換アミノ」は、敷衍して、一置換アミノ、二置換アミノ、または三置換アミノを言う。いくつかの態様において、「置換アミノ」は一置換アミノまたは二置換アミノ基である。
【００９８】
用語「一置換アミノ」は、親分子に直接的に取り付けられた窒素原子が１つの水素および水素より他の１つの基によって置換されたアミノ基を言い、−ＮＨ（Ｒｂｂ）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＨＣＯ２Ｒａａ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＨＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＨＳＯ２Ｒａａ、−ＮＨＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、および−ＮＨＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２から選択される基を含み、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本願において定義されている通りであり、基−ＮＨ（Ｒｂｂ）のＲｂｂは水素ではない。
【００９９】
用語「二置換アミノ」は、親分子に直接的に取り付けられた窒素原子が水素より他の２つの基によって置換されたアミノ基を言い、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、および−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２から選択される基を含み、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本願において定義されている通りであり、ただし親分子に直接的に取り付けられた窒素原子は水素によって置換されない。
【０１００】
用語「三置換アミノ」は、親分子に直接的に取り付けられた窒素原子が３つの基によって置換されたアミノ基を言い、−Ｎ（Ｒｂｂ）３および−Ｎ（Ｒｂｂ）３＋Ｘ−から選択される基を含み、ＲｂｂおよびＸ−は本願において定義されている通りである。
【０１０１】
用語「スルホニル」は、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＯ２Ｒａａ、および−ＳＯ２ＯＲａａから選択される基を言い、ＲａａおよびＲｂｂは本願において定義されている通りである。
【０１０２】
用語「スルフィニル」は基−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａを言い、Ｒａａは本願において定義されている通りである。
【０１０３】
用語「カルボニル」は、親分子に直接的に取り付けられた炭素がｓｐ２混成しており、酸素、窒素、または硫黄原子によって置換された基、例えば、ケトン（−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）、カルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）、アルデヒド（−ＣＨＯ）、エステル（−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ）、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）、およびイミン（−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ）、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）から選択される基を言い、ＲａａおよびＲｂｂは本願において定義されている通りである。
【０１０４】
本願において用いられる場合、用語「アシル」は、親分子に直接的に取り付けられた炭素がｓｐ２混成しており、酸素、窒素、または硫黄原子によって置換された基、例えば、ケトン（−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）、カルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）、アルデヒド（−ＣＨＯ）、エステル（−ＣＯ２Ｒａａ）、チオエステル（−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ）、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ）チオアミド（−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）、およびイミン（−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ）、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）から選択される基を言い、ＲａａおよびＲｂｂは本願において定義されている通りである。
【０１０５】
本願において用いられる場合, 用語「アジド」は式−Ｎ３の基を言う。
【０１０６】
本願において用いられる場合、用語「シアノ」は式−ＣＮの基を言う。
【０１０７】
本願において用いられる場合、用語「イソシアノ」は式−ＮＣの基を言う。
【０１０８】
本願において用いられる場合、用語「ニトロ」は式−ＮＯ２の基を言う。
【０１０９】
本願において用いられる場合、用語「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）、またはヨウ素（ヨード、−Ｉ）を言う。
【０１１０】
本願において用いられる場合、用語「オキソ」は式＝Ｏの基を言う。
【０１１１】
窒素原子は原子価が許す限り置換または非置換であり得、第１級、第２級、第３級、および第４級窒素原子を含み得る。例示的な窒素原子置換基は、水素、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｃｃ）２、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０ペルハロアルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリールを含むが、これに限定されず、または、Ｎ原子に取り付けられた２つのＲｃｃ基がつながって３〜１４員ヘテロシクリルもしくは５〜１４員ヘテロアリール環を形成し、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、または５つのＲｄｄ基によって置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ、およびＲｄｄは上で定義されている通りである。
【０１１２】
いくつかの態様において、窒素原子上に存在する置換基は窒素保護基である（本願においては「アミノ保護基」ともまた言われる）。窒素保護基は、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、Ｃ１−１０アルキル（例えば、アラルキル、ヘテロアラルキル）、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ヘテロＣ１−１０アルキル、ヘテロＣ２−１０アルケニル、ヘテロＣ２−１０アルキニル、Ｃ３−１０カルボシクリル、３〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６−１４アリール、および５〜１４員ヘテロアリール基を含むが、これに限定されず、各アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アラルキル、アリール、およびヘテロアリールは独立して０、１、２、３、４、または５つのＲｄｄ基によって置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ、およびＲｄｄは本願において定義されている通りである。窒素保護基は当分野において周知であり、参照によって本明細書に組み込まれるProtecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999に詳細に記載されているものを含む。
【０１１３】
例えば、アミド基などの窒素保護基（例えば−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）は、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、フェニルアセトアミド、３−フェニルプロパンアミド、ピコリンアミド、３−ピリジルカルボキサミド、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、ベンズアミド、ｐ−フェニルベンズアミド、ｏ−ニトフェニルアセトアミド、ｏ−ニトロフェノキシアセトアミド、アセトアセトアミド、（Ν’−ジチオベンジルオキシアシルアミノ）アセトアミド、３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド、３−（ｏ−ニトロフェニル）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−ニトロフェノキシ）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−フェニルアゾフェノキシ）プロパンアミド、４−クロロブタンアミド、３−メチル−３−ニトロブタンアミド、ｏ−ニトロケイ皮酸アミド、Ｎ−アセチルメチオニン誘導体、ｏ−ニトロベンズアミド、およびｏ−（ベンゾイルオキシメチル）ベンズアミドを含むが、これに限定されない。
【０１１４】
カルバメート基などの窒素保護基（例えば−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａａ）は、メチルカルバメート、エチルカルバマンテ（ethyl carbamante）、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９−（２−スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、９−（２，７−ジブロモ）フルオロエニルメチルカルバメート、２，７−ジ−ｔ−ブチル−［９−（１０，１０−ジオキソ−１０，１０，１０，１０−テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ−Ｔｍｏｃ）、４−メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２−フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチルカルバメート（Ａｄｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−ハロエチルカルバメート、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ−ｔ−ＢＯＣ）、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エチルカルバメート（Ｂｐｏｃ）、１−（３，５−ジ−ｔ−ブチルフェニル）−１−メチルエチルカルバメート（ｔ−Ｂｕｍｅｏｃ）、２−（２’−および４’−ピリジル）エチルカルバメート（Ｐｙｏｃ）、２−（Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチルカルバメート、ｔ−ブチルカルバメート（ＢＯＣまたはＢｏｃ）、１−アダマンチルカルバメート（Ａｄｏｃ）、ビニルカルバメート（Ｖｏｃ）、アリルカルバメート（Ａｌｌｏｃ）、１−イソプロピルアリルカルバメート（Ｉｐａｏｃ）、シンナミルカルバメート（Ｃｏｃ）、４−ニトロシンナミルカルバメート（Ｎｏｃ）、８−キノリルカルバメート、Ｎ−ヒドロキシピペリジニルカルバメート、アルキルジチオカルバメート、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ−メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）、ｐ−ニトベンジルカルバメート、ｐ−ブロモベンジルカルバメート、ｐ−クロロベンジルカルバメート、２，４−ジクロロベンジルカルバメート、４−メチルスルフィニルベンジルカルバメート（Ｍｓｚ）、９−アントリルメチルカルバメート、ジフェニルメチルカルバメート、２−メチルチオエチルカルバメート、２−メチルスルホニルエチルカルバメート、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチルカルバメート、［２−（１，３−ジチアニル）］メチルカルバメート（Ｄｍｏｃ）、４−メチルチオフェニルカルバメート（Ｍｔｐｃ）、２，４−ジメチルチオフェニルカルバメート（Ｂｍｐｃ）、２−ホスホニオエチルカルバメート（Ｐｅｏｃ）、２−トリフェニルホスホニオイソプロピルカルバメート（Ｐｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−シアノエチルカルバメート、ｍ−クロロ−ｐ−アシルオキシベンジルカルバメート、ｐ−（ジヒドロキシボリル）ベンジルカルバメート、５−ベンゾイソオキサゾリルメチルカルバメート、２−（トリフルオロメチル）−６−クロモニルメチルカルバメート（Ｔｃｒｏｃ）、ｍ−ニトロフェニルカルバメート、３，５−ジメトキシベンジルカルバメート、ｏ−ニトロベンジルカルバメート、３，４−ジメトキシ−６−ニトロベンジルカルバメート、フェニル（ｏ−ニトロフェニル）メ��ルカルバメート、ｔ−アミルカルバメート、Ｓ−ベンジルチオカルバメート、ｐ−シアノベンジルカルバメート、シクロブチルカルバメート，シクロヘキシルカルバメート、シクロペンチルカルバメート、シクロプロピルメチルカルバメート、ｐ−デシルオキシベンジルカルバメート、２，２−ジメトキシアシルビニルカルバメート、ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）ベンジルカルバメート、１，１−ジメチル−３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）プロピルカルバメート、１，１−ジメチルプロピニルカルバメート、ジ（２−ピリジル）メチルカルバメート、２−フラニルメチルカルバメート、２−ヨードエチルカルバメート、イソボリンル（isoborynl）カルバメート、イソブチルカルバメート、イソニコチニルカルバメート、ｐ−（ｐ’−メトキシフェニルアゾ）ベンジルカルバメート、１−メチルシクロブチルカルバメート、１−メチルシクロヘキシルカルバメート、１−メチル−１−シクロプロピルメチルカルバメート、１−メチル−１−（３，５−ジメトキシフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−（ｐ−フェニルアゾフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−フェニルエチルカルバメート、１−メチル−１−（４−ピリジル）エチルカルバメート、フェニルカルバメート、ｐ−（フェニルアゾ）ベンジルカルバメート、２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェニルカルバメート、４−（トリメチルアンモニウム）ベンジルカルバメート、および２，４，６−トリメチルベンジルカルバメートを含むが、これに限定されない。
【０１１５】
スルホンアミド基などの窒素保護基（例えば−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒａａ）は、ｐ−トルエンスルホンアミド（Ｔｓ）、ベンゼンスルホンアミド、２，３，６，−トリメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｒ）、２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｂ）、２，６−ジメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｐｍｅ）、２，３，５，６−テトラメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｅ）、４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｂｓ）、２，４，６−トリメチルベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｓ）、２，６−ジメトキシ−４−メチルベンゼンスルホンアミド（ｉＭｄｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホンアミド（Ｐｍｃ）、メタンスルホンアミド（Ｍｓ）、β−トリメチルシリルエタンスルホンアミド（ＳＥＳ）、９−アントラセンスルホンアミド、４−（４’，８’−ジメトキシナフチルメチル）ベンゼンスルホンアミド（ＤＮＭＢＳ）、ベンジルスルホンアミド、トリフルオロメチルスルホンアミド、およびフェナシルスルホンアミドを含むが、これに限定されない。
【０１１６】
他の窒素保護基は、フェノチアジニル−（１０）−アシル誘導体、Ｎ’−ｐ−トルエンスルホニルアミノアシル誘導体、Ｎ’−フェニルアミノチオアシル誘導体、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、Ｎ−アセチルメチオニン誘導体、４，５−ジフェニル−３−オキサゾリン−２−オン、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−ジチアスクシンイミド（Ｄｔｓ）、Ｎ−２，３−ジフェニルマレイミド、Ｎ−２，５−ジメチルピロール、Ｎ−１，１，４，４−テトラメチルジシリルアザシクロペンタン付加体（ＳＴＡＢＡＳＥ）、５−置換１，３−ジメチル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、５−置換１，３−ジベンジル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、１−置換３，５−ジニトロ−４−ピリドン、Ｎ−メチルアミン、Ｎ−アリルアミン、Ｎ−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチルアミン（ＳＥＭ）、Ｎ−３−アセトキシプロピルアミン、Ｎ−（１−イソプロピル−４−ニトロ−２−オキソ−３−ピローリン（pyroolin）−３−イル）アミン、第４級アンモニウム塩、Ｎ−ベンジルアミン、Ｎ−ジ（４−メトキシフェニル）メチルアミン、Ｎ−５−ジベンゾスベリル（dibenzosuberyl）アミン、Ｎ−トリフェニルメチルアミン（Ｔｒ）、Ｎ−［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］アミン（ＭＭＴｒ）、Ｎ−９−フェニルフルオレニルアミン（ＰｈＦ）、Ｎ−２，７−ジクロロ−９−フルオレニルメチレンアミン、Ｎ−フェロセニルメチルアミノ（Ｆｃｍ）、Ｎ−２−ピコリルアミノＮ’−オキシド、Ｎ−１，１−ジメチルチオメチレンアミン、Ｎ−ベンジリデンアミン、Ｎ−ｐ−メトキシベンジリデンアミン、Ｎ−ジフェニルメチレンアミン、Ｎ−［（２−ピリジル）メシチル］メチレンアミン、Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノメチレン）アミン、Ｎ，Ｎ’−イソプロピリデンジアミン、Ｎ−ｐ−ニトロベンジリデンアミン、Ｎ−サリチリデンアミン、Ｎ−５−クロロサリチリデンアミン、Ｎ−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）フェニルメチレンアミン、Ｎ−シクロヘキシリデンアミン、Ｎ−（５，５−ジメチル−３−オキソ−１−シクロヘキセニル）アミン、Ｎ−ボラン誘導体、Ｎ−ジフェニルボロン酸誘導体、Ｎ−［フェニル（ペンタアシルクロムまたはタングステン）アシル］アミン、Ｎ−銅キレート、Ｎ−亜鉛キレート、Ｎ−ニトロアミン、Ｎ−ニトロソアミン、アミンＮ−オキシド、ジフェニルホスフィンアミド（Ｄｐｐ）、ジメチルチオホスフィンアミド（Ｍｐｔ）、ジフェニルチオホスフィンアミド（Ｐｐｔ）、ジアルキルホスホロアミダート、ジベンジルホスホロアミダート、ジフェニルホスホロアミダート、ベンゼンスルフェンアミド、ｏ−ニトロベンゼンスルフェンアミド（Ｎｐｓ）、２，４−ジニトロベンゼンスルフェンアミド、ペンタクロロベンゼンスルフェンアミド、２−ニトロ−４−メトキシベンゼンスルフェンアミド、トリフェニルメチルスルフェンアミド、および３−ニトロピリジンスルフェンアミド（Ｎｐｙｓ）を含むが、これに限定されない。
【０１１７】
いくつかの態様において、酸素原子上に存在する置換基は酸素保護基である（本願においては「ヒドロキシル保護基」ともまた言われる）。酸素保護基は、−Ｒａａ、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（Ｒｃｃ）３、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、および−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２を含むが、これに限定されず、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本願において定義されている通りである。酸素保護基は当分野において周知であり、参照によって本願に組み込まれるProtecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999に詳細に記載されているものを含む。
【０１１８】
例示的な酸素保護基は、メチル、メトキシルメチル（ＭＯＭ）、メチルチオメチル（ＭＴＭ）、ｔ−ブチルチオメチル、（フェニルジメチルシリル）メトキシメチル（ＳＭＯＭ）、ベンジルオキシメチル（ＢＯＭ）、ｐ−メトキシベンジルオキシメチル（ＰＭＢＭ）、（４−メトキシフェノキシ）メチル（ｐ−ＡＯＭ）、グアイアコールメチル（ＧＵＭ）、ｔ−ブトキシメチル、４−ペンテニルオキシメチル（ＰＯＭ）、シロキシメチル、２−メトキシエトキシメチル（ＭＥＭ）、２，２，２−トリクロロエトキシメチル、ビス（２−クロロエトキシ）メチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチル（ＳＥＭＯＲ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、３−ブロモテトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、１−メトキシシクロヘキシル、４−メトキシテトラヒドロピラニル（ＭＴＨＰ）、４−メトキシテトラヒドロチオピラニル、４−メトキシテトラヒドロチオピラニルＳ，Ｓ−ジオキシド、１−［（２−クロロ−４−メチル）フェニル］−４−メトキシピペリジン−４−イル（ＣＴＭＰ）、１，４−ジオキサン−２−イル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロ−７，８，８−トリメチル−４，７−メタノベンゾフラン−２−イル、１−エトキシエチル、１−（２−クロロエトキシ）エチル、１−メチル−１−メトキシエチル、１−メチル−１−ベンジルオキシエチル、１−メチル−１−ベンジルオキシ−２−フルオロエチル、２，２，２−トリクロロエチル、２−トリメチルシリルエチル、２−（フェニルセレニル）エチル、ｔ−ブチル、アリル、ｐ−クロロフェニル、ｐ−メトキシフェニル、２，４−ジニトロフェニル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ハロベンジル、２，６−ジクロロベンジル、ｐ−シアノベンジル、ｐ−フェニルベンジル、２−ピコリル、４−ピコリル、３−メチル−２−ピコリルＮ−オキシド、ジフェニルメチル、ｐ，ｐ’−ジニトロベンズヒドリル、５−ジベンゾスベリル（dibenzosuberyl）、トリフェニルメチル、α−ナフチルジフェニルメチル、ｐ−メトキシフェニルジフェニルメチル、ジ（ｐ−メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（ｐ−メトキシフェニル）メチル、４−（４’−ブロモフェナシルオキシフェニル）ジフェニルメチル、４，４’，４”−トリス（４，５−ジクロロフタルイミドフェニル）メチル、４，４’，４”−トリス（レブリノイルオキシフェニル）メチル、４，４’，４”−トリス（ベンゾイルオキシフェニル）メチル、３−（イミダゾール−１−イル）ビス（４’，４”−ジメトキシフェニル）メチル、１，１−ビス（４−メトキシフェニル）−１’−ピレニルメチル、９−アントリル、９−（９−フェニル）キサンテニル、９−（９−フェニル−１０−オキソ）アントリル、１，３−ベンゾジチオラン−２−イル、ベンゾイソチアゾリルＳ，Ｓ−ジオキシド、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ジメチルイソプロピルシリル（ＩＰＤＭＳ）、ジエチルイソプロピルシリル（ＤＥＩＰＳ）、ジメチルｔヘキシルシリル、ｔ−ブ��ルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリベンジルシリル、トリ−ｐ−キシリルシリル、トリフェニルシリル、ジフェニルメチルシリル（ＤＰＭＳ）、ｔ−ブチルメトキシフェニルシリル（ＴＢＭＰＳ）、蟻酸、蟻酸ベンゾイル、酢酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、メトキシ酢酸、トリフェニルメトキシ酢酸、フェノキシ酢酸、ｐ−クロロフェノキシ酢酸、３−フェニルプロピオン酸、４−オキソペンタノアート（レブリナート）、４，４−（エチレンジチオ）ペンタノアート（レブリノイルジチオアセタール）、ピバロエート（pivaloate）、アダマントエート（adamantoate）、クロトン酸、４−メトキシクロトン酸、安息香酸、ｐ−フェニル安息香酸、２，４，６−トリメチル安息香酸（メシト酸）、メチルカーボネート、９−フルオレニルメチルカーボネート（Ｆｍｏｃ）、エチルカーボネート、２，２，２−トリクロロエチルカーボネート（Ｔｒｏｃ）、２−（トリメチルシリル）エチルカーボネート（ＴＭＳＥＣ）、２−（フェニルスルホニル）エチルカーボネート（Ｐｓｅｃ）、２−（トリフェニルホスホニオ）エチルカーボネート（Ｐｅｏｃ）、イソブチルカーボネート、ビニルカーボネート、アリルカーボネート、ｔ−ブチルカーボネート（ＢＯＣまたはＢｏｃ）、ｐ−ニトロフェニルカーボネート、ベンジルカーボネート、ｐ−メトキシベンジルカーボネート、３，４−ジメトキシベンジルカーボネート、ｏ−ニトロベンジルカーボネート、ｐ−ニトロベンジルカーボネート、Ｓ−ベンジルチオカーボネート、４−エトキシ−１−ナフトチル（napththyl）カーボネート、メチルジチオカーボネート、２−ヨード安息香酸、４−アジドブチレート、４−ニトロ−４−メチルペンタノアート、ｏ−（ジブロモメチル）安息香酸、２−ホルミルベンゼンスルホン酸、２−（メチルチオメトキシ）エチル、４−（メチルチオメトキシ）酪酸、２−（メチルチオメトキシメチル）安息香酸、２，６−ジクロロ−４−メチルフェノキシ酢酸、２，６−ジクロロ−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノキシ酢酸、２，４−ビス（１，１−ジメチルプロピル）フェノキシ酢酸、クロロジフェニル酢酸、イソ酪酸、モノスクシノアート（monosuccinoate）、（Ｅ）−２−メチル−２−ブテン酸、ｏ−（メトキシアシル）安息香酸、α−ナフトエ酸、硝酸、アルキルΝ，Ν，Ν’，Ν’−テトラメチルホスホロジアミダート、アルキルＮ−フェニルカルバメート、ホウ酸、ジメチルホスフィノチオイル、アルキル２，４−ジニトロフェニルスルフェン酸、硫酸、メタンスルホン酸（メシレート）、ベンジルスルホン酸、およびトシル酸（Ｔｓ）を含むが、これに限定されない。
【０１１９】
いくつかの態様において、硫黄原子上に存在する置換基は硫黄保護基である（「チオール保護基」ともまた言われる）。硫黄保護基は、−Ｒａａ、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（Ｒｃｃ）３、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒｂｂ）２、および−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲｂｂ）２を含むが、これに限定されず、Ｒａａ、Ｒｂｂ、およびＲｃｃは本願において定義されている通りである。硫黄保護基は当分野において周知であり、参照によって本願に組み込まれるProtection Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999に詳細に記載されているものを含む。
【０１２０】
用語「アミノ酸」は、アミノ基およびカルボキシル基（例えばカルボン酸)を両方含有する分子を言う。アミノ酸はα−アミノ酸およびβ−アミノ酸を含み、それらの構造は下で描写されている。いくつかの態様においてアミノ酸はα−アミノ酸である。いくつかの態様においてアミノ酸はβ−アミノ酸である。いくつかの態様においてアミノ酸は非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてアミノ酸は天然アミノ酸である。いくつかの態様においてアミノ酸は非天然アミノ酸である。用語「非天然アミノ酸」は、天然には存在しないがペプチド鎖中には組み込まれ得るアミノ酸を言う。
【化１７】
2016523241.tif 000019
【０１２１】
例示的なアミノ酸は、限定なしに、天然α−アミノ酸、例えばペプチド中に見いだされる２０個の通例の天然に存在するα−アミノ酸（例えば、下で描写されている表１において提供されているＡ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｖ）、非天然α−アミノ酸（下の表２および３において描写されている）、天然β−アミノ酸（例えばβ−アラニン）、および非天然（unnnatural）β−アミノ酸を含む。
【０１２２】
本発明のペプチドの構築に用いられるアミノ酸は、有機合成によって調製され得るか、あるいは例えば蛋白質もしくはペプチドの分解または天然供給源からの単離などの他の経路によって得られる。本発明のいくつかの態様において、式−［ＸＡＡ］−のそれぞれは式
【化１８】
2016523241.tif 000020
の天然または非天然アミノ酸にあたり、式中、ＲおよびＲ’はアミノ酸側鎖（下および本願において定義されている）にあたり、Ｒａは水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、またはアミノ保護基である。
【表１】
2016523241.tif 000021
【表２】
2016523241.tif 000022
【表３】
2016523241.tif 000023
【表４】
2016523241.tif 000024
【０１２３】
多くの公知の非天然アミノ酸があり、それらのいずれかが本発明のペプチド中に含まれ得る。例えばS. Hunt, The Non-Protein Amino Acids: In Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids, edited by G. C. Barrett, Chapman and Hall, 1985参照。非天然アミノ酸のいくつかの限定しない例は、４−ヒドロキシプロリン、デスモシン、γ−アミノ酪酸、β−シアノアラニン、ノルバリン、４−（Ｅ）−ブテニル−４（Ｒ）−メチル−Ｎ−メチル−Ｌ−トレオニン、Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン、１−アミノ−シクロプロパンカルボン酸、１−アミノ−２−フェニル−シクロプロパンカルボン酸、１−アミノ−シクロブタンカルボン酸、４−アミノ−シクロペンテンカルボン酸、３−アミノ−シクロヘキサンカルボン酸、４−ピペリジル酢酸、４−アミノ−１−メチルピロール−２−カルボン酸、２，４−ジアミノ酪酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、２，４−ジアミノ酪酸、２−アミノヘプタン二酸、４−（アミノメチル）安息香酸、４−アミノ安息香酸、オルト、メタ、およびパラ置換フェニルアラニン（例えば、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ６Ｈ５、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ハロ、−ＮＯ２、ＣＨ３によって置換される）、二置換フェニルアラニン、置換チロシン（例えば、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ６Ｈ５、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ハロ、−ＮＯ２、ＣＨ３によってさらに置換される）、ならびにスタチンを含むが、これに限定されない。加えて、本発明への使用に好適なアミノ酸は誘導体化され得、ヒドロキシル化、リン酸化、スルホン化、アシル化、脂質化、ファルネシル化、およびグリコシル化されたアミノ酸残基などを含む。
【０１２４】
用語「アミノ酸側鎖」は、アミノ酸のαまたはβ炭素に取り付けられた基を言い、本願において定義されるアミノ酸側鎖および表１〜３において提供されているアミノ酸側鎖のいずれかを含むが、これに限定されない。例示的なアミノ酸側鎖はメチル（アラニンのα−アミノ酸側鎖はメチルであるため）、４−ヒドロキシフェニルメチル（チロシンのα−アミノ酸側鎖は４−ヒドロキシフェニルメチルであるため）、およびチオメチル（システインのα−アミノ酸側鎖はチオメチルであるため）などを含むが、これに限定されない。
【０１２５】
「末端不飽和アミノ酸側鎖」は、末端不飽和部分、例えば置換または非置換二重結合（例えばオレフィン性またはアルケニル）または三重結合（例えばアセチレン性またはアルキニル）を保持するアミノ酸側鎖を言い、これはポリペプチド鎖中の別の末端不飽和部分との架橋反応に関与し得る。いくつかの態様において「末端不飽和アミノ酸側鎖」は末端オレフィン性アミノ酸側鎖である。いくつかの態様において「末端不飽和アミノ酸側鎖」は末端アセチレン性アミノ酸側鎖である。いくつかの態様において、「末端不飽和アミノ酸側鎖」の末端部分はさらに置換はされない。末端不飽和アミノ酸側鎖は表３に描写されている側鎖を含むが、これに限定されない。
【０１２６】
「ペプチド」または「ポリペプチド」は、ペプチド（アミド）結合によって連結されて一緒になったアミノ酸残基のポリマーを含む。用語（単数または複数）は、本願において用いられる場合、いずれかのサイズ、構造、または機能の蛋白質、ポリペプチド、およびペプチドを言う。典型的には、ペプチドまたはポリペプチドは少なくとも３アミノ酸の長さ、例えば少なくとも３〜１００または１０１以上のアミノ酸の長さであろう。ペプチドまたはポリペプチドは、個々の蛋白質または一連の蛋白質を言い得る。蛋白質は好ましくは天然アミノ酸のみを含有するが、当分野において公知の非天然アミノ酸（すなわち、天然には存在しないがポリペプチド鎖中には組み込まれ得る化合物）および／またはアミノ酸アナログはその代わりに使用され得る。また、ポリペプチドまたは蛋白質中のアミノ酸の１つまたは２つ以上が、例えば化学的実体（例えば炭水化物基、ヒドロキシル基、脂質基、リン酸基、ファルネシル基、イソファルネシル基、脂肪酸基、複合体化、官能化、または他の改変のためのリンカー）の付加によって改変され得る。ポリペプチドは単一分子でもまたあり得、または蛋白質などの多分子複合体であり得る。ポリペプチドまたは蛋白質は、天然に存在する蛋白質またはペプチドの単なる断片であり得る。ポリペプチドまたは蛋白質は、天然に存在する、組み換え、もしくは合成、またはそのいずれかの組み合わせであり得る。本願において用いられる場合、「ジペプチド」は２つの共有結合的に連結されたアミノ酸を言う。
【０１２７】
用語「相同」は、アミノ酸配列のレベルで高度に関連しているポリペプチドおよび蛋白質を言う用語である。互いと相同であるポリペプチドおよび蛋白質同士はホモログと呼称される。相同は２つの配列間の配列類似性の程度を言い得る。２つのポリペプチドまたは蛋白質配列は、ポリペプチドまたは蛋白質の少なくとも２０アミノ酸のわずかな一続きが少なくとも約５０〜６０％同一、好ましくは約７０％同一である場合に、相同であると考えられる。相同性のパーセンテージは、２つの配列間で可能な最大の相同性、すなわち、マッチした（相同な）位置の最大数を有するように２つの配列がアラインメントされたときのパーセントの相同性を反映する。公知の方法、例えばComputational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988、Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993、Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987、Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994、およびSequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991に記載されているものによって、相同性は直ちに計算され得る。配列間の相同性を決定するために通例に使用される方法は、Carillo, H., and Lipman, D., SIAM J Applied Math., 48: 1073 (1988)に開示されているものを含むが、これに限定されない。相同性を決定するための技術は公的に利用可能なコンピュータプログラムにまとめられている。２つの配列間の相同性を決定するための例示的なコンピュータソフトウェアは、ＧＣＧプログラムパッケージ（Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1), 387 (1984)）、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（Atschul, S. F. et al., J Molec. Biol, 215, 403 (1990)）を含むが、これに限定されない。
【０１２８】
本願において用いられる場合、用語「塩」または「医薬的に許容される塩」は、正当な医学的判断の範囲内において、ヒトおよびより下等な動物の組織と接触する使用にとって好適であって、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、および同様のものがなく、適当な効果／リスク比に見合った塩を言う。医薬的に許容される塩は当分野において周知である。例えばBergeらは医薬的に許容される塩を詳細にJ. Pharmaceutical Sciences (1977) 66: 1-19に記載している。本発明の化合物の医薬的に許容される塩は、好適な無機および有機酸および塩基に由来するものを含む。医薬的に許容される非毒性の酸付加塩の例はアミノ基の塩であり、無機酸、例えば塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸によって、または有機酸、例えば酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、もしくはマロン酸によって、あるいは、当分野において用いられる他の方法、例えばイオン交換を用いることによって、形成される。他の医薬的に許容される塩は、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、しょうのう酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、二グルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、蟻酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチニン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩、および同様のものを含む。適切な塩基に由来する塩は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、およびＮ＋（Ｃ１−４アルキル）４塩を含む。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩はナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、および同様のものを含む。さらなる医薬的に許容される塩は、適切なときには、第４級アミノ塩、例えば本願において定義されるカチオン性三置換アミノ基を含む。
【０１２９】
本願において用いられる場合、２つの実体が互いと「複合体化」されるときには、それらは直接的または間接的な共有結合的または非共有結合的な相互作用によって連結される。いくつかの態様において結びつきは共有結合的である。他の態様において結びつきは非共有結合的である。非共有結合的な相互作用は、水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、磁性相互作用、および静電的相互作用を含むが、これに限定されない。間接的な共有結合的な相互作用は、２つの実体が任意にリンカーを介して共有結合的に繋がれるときである。
【０１３０】
本願において用いられる場合、「標識」は、標識が取り付けられた本発明のポリペプチドの検出を可能にする、部分中に組み込まれた少なくとも１つの元素、同位体、または官能基を有する部分を言う。標識は直接的に（すなわち結合によって）取り付けられ得るか、またはリンカー（例えば、例えば置換もしくは非置換アルキレン、置換もしくは非置換アルケニレン、置換もしくは非置換アルキニレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換ヘテロアルケニレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキニレン、置換もしくは非置換アリーレン、置換もしくは非置換ヘテロアリーレン、アシレン（acylene）、またはリンカーを作り得るそのいずれかの組み合わせなど）によって取り付けられ得る。当然のことながら、検出されようとする本発明のポリペプチドの生物活性または特質に干渉しないいずれかの位置において、本発明のポリペプチドに標識が取り付けられ得る。
【０１３１】
一般的に、標識は５つの種類のいずれか１つ（または２つ以上）に属し得る。ａ）同位体部分（これは放射性または重同位体であり得、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、６７Ｇａ、９９ｍＴｃ（Ｔｃ−９９ｍ）、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１６９Ｙｂ、および１８６Ｒｅを含むが、これに限定されない）を含有する標識、ｂ）免疫部分（これは抗体または抗原であり得、酵素（例えば西洋ワサビペルオキシダーゼなど）に結合されており得る）を含有する標識、ｃ）有色、発光、燐光、または蛍光部分である標識（例えば蛍光標識ＦＩＴＣなど）、ｄ）１つまたは２つ以上の光親和性部分を有する標識、ならびにｅ）１つまたは２つ以上の公知の結合パートナーを有するリガンド部分を有する標識（例えばビオチン−ストレプトアビジン、ＦＫ５０６−ＦＫＢＰなど）。上に記載されている標識のそれらの種類のいずれかは、本明細書において定義される「診断剤」とも言われ得る。
【０１３２】
いくつかの態様において、例えば生物学的標的の同定において、標識は、放射性同位体、好ましくは検出可能な粒子（例えばβ粒子）を放出する同位体を含む。いくつかの態様において、標識は、生物学的系における分子間相互作用の直接的な解明のための１つまたは２つ以上の光親和性部分を含む。種々の公知の光反応基が使用され得、主にジアゾ化合物、アジ化物、またはジアジリンからニトレンまたはカルベンへの光変換に頼る（その全体の内容が参照によって本明細書に組み込まれるBayley, H., Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology (1983), Elsevier, Amsterdam参照）。本発明のいくつかの態様において、使用される光親和性標識は１つまたは２つ以上のハロゲン部分によって置換されたｏ−、ｍ−、およびｐ−アジドベンゾイルであり、４−アジド−２，３，５，６−テトラフルオロ安息香酸を含むが、これに限定されない。
【０１３３】
いくつかの態様において標識は１つまたは２つ以上の蛍光部分を含む。いくつかの態様において標識は蛍光標識ＦＩＴＣである。いくつかの態様において標識は１つまたは２つ以上の公知の結合パートナーを有するリガンド部分を含む。いくつかの態様において標識はリガンド部分ビオチンを含む。
【０１３４】
本願において用いられる場合、「診断剤」はイメージング剤を言う。例示的なイメージング剤は、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）、コンピュータ断層撮影（ＣＡＴ）、単一光子放射断層撮影法、ｘ線、蛍光透視、および核磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）に用いられるもの、制吐薬、ならびに造影剤を含むが、それらに限定されない。例示的な診断剤は蛍光部分、発光部分、磁性部分、ガドリニウムキレート（例えば、DTPA、DTPA-BMA、DOTA、およびHP-D03Aを有するガドリニウムキレート）、鉄キレート、マグネシウムキレート、マンガンキレート、銅キレート、クロムキレート、ＣＡＴおよびｘ線イメージングにとって有用なヨウ素系材料、ならびに放射性核種を含むが、これに限定されない。好適な放射性核種は１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３０Ｉ、１３１Ｉ、１３３Ｉ、１３５Ｉ、４７Ｓｃ、７２Ａｓ、７２Ｓｅ、９０Ｙ、８８Ｙ、９７Ｒｕ、１００Ｐｄ、１０１ｍＲｈ、１１９Ｓｂ、１２８Ｂａ、１９７Ｈｇ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１２Ｐｂ、１０９Ｐｄ、１１１Ｉｎ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、６７Ｃｕ、７５Ｂｒ、７７Ｂｒ、９９ｍＴｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、３２Ｐ、３３Ｐ、および１８Ｆを含むが、これに限定されない。蛍光および発光部分は、通例に「色素」、「標識」、または「指示薬」と言われる種々の異なる有機または無機小分子を含むが、これに限定されない。例は、フルオレセイン、ローダミン、アクリジン色素、Ａｌｅｘａ色素、シアニン色素などを含むが、これに限定されない。蛍光および発光部分は種々の天然に存在する蛋白質およびその誘導体、例えば遺伝子組み換えバリアントを含み得る。例えば、蛍光蛋白質は緑色蛍光蛋白質（ＧＦＰ）、強化型ＧＦＰ、赤色、青色、黄色、シアン、およびサファイヤ蛍光蛋白質、サンゴ由来蛍光蛋白質などを含む。発光蛋白質は、ルシフェラーゼ、エクオリン、およびその誘導体を含む。数多くの蛍光および発光色素および蛋白質が当分野において公知である（例えば米国特許公開２００４／００６７５０３、Valeur, B., 「Molecular Fluorescence: Principles and Applications」 John Wiley and Sons, 2002、およびHandbook of Fluorescent Probes and Research Products, Molecular Probes, 9th edition, 2002参照）。
【０１３５】
本願において用いられる場合、「少なくとも１つ」は、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、または５つ以上を言う。
【０１３６】
用語「組成物」および「製剤」は交換可能に用いられる。
【０１３７】
投与が考えられる「対象」は、ヒト（すなわち、いずれかの年齢群の男性または女性、例えば、小児科の対象（例えば、幼児、児童、思春期）または成人の対象（例えば、若年成人、中年成人、または高齢成人））および／または他の非ヒト動物、例えば哺乳動物（例えば霊長類（例えばカニクイザル、アカゲザル）、商業的に関係する哺乳動物、例えばウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、および／またはイヌ）および鳥類（例えば、商業的に関係する鳥類、例えばニワトリ、カモ、ガチョウ、および／またはシチメンチョウ）を含むが、これに限定されない。いくつかの態様において動物は哺乳動物である。動物は成長のいずれかのステージにある雄または雌であり得る。動物はトランスジェニック動物または遺伝子組み換え動物であり得る。いくつかの態様において、対象は非ヒト動物である。いくつかの態様において、動物は魚類または爬虫類である。「患者」は疾患の処置の必要があるヒト対象を言う。対象は植物でもまたあり得る。いくつかの態様において植物は陸生植物である。いくつかの態様において植物は非維管束陸生植物である。いくつかの態様において植物は維管束陸生植物である。いくつかの態様において植物は種子植物である。いくつかの態様において植物は栽培植物である。いくつかの態様において植物は双子葉植物である。いくつかの態様において植物は単子葉植物である。いくつかの態様において植物は顕花植物である。いくつかの態様において植物は禾穀類植物、例えばメイズ、コーン、小麦、米、オートムギ、大麦、ライ麦、またはミレットである。いくつかの態様において植物はマメ科植物、例えば豆植物、例えば大豆である。いくつかの態様において植物は高木または低木である。
【０１３８】
用語「投与する」、「投与すること」、または「投与」は、本願に記載されている化合物またはその組成物を対象にインプラントすること、吸収させること、摂取すること、注射すること、吸入すること、または別様に導入することを言う。
【０１３９】
用語「処置」、「処置する」、および「処置すること」は、本願に記載されている疾患を逆転させること、軽減すること、その発症を遅延させること、またはその進行を阻害することを言う。いくつかの態様において、処置は、疾患の１つまたは２つ以上の兆候または症状が発症したかまたは観察された後に投与され得る。他の態様において、処置は疾患の兆候または症状の非存在下で投与され得る。例えば、処置は、症状の発症に先立って（例えば、症状の既往に照らしておよび／または病原体への曝露に照らして）感受性の対象に投与され得る。例えば再発を遅延させるかまたは予防するために、症状が消散した後にもまた処置は継続され得る。
【０１４０】
用語「状態」、「疾患」、および「障害」は交換可能に用いられる。
【０１４１】
本願に記載されている化合物の「有効量」は、所望の生物学的反応を惹起し、すなわち状態を処置するのに十分な量を言う。当業者には当然のことながら、所望の生物学的エンドポイント、化合物の薬物動態、処置されようとする状態、投与のモード、ならびに対象の年齢および健康などの因子に依存して、本願に記載されている化合物の有効量は変わり得る。有効量は治療および予防処置を包含する。
【０１４２】
本願に記載されている化合物の「治療有効量」は、状態の処置の点で治療効果を提供するかまたは状態と結びついた１つもしくは２つ以上の症状を遅延させるかもしくは最小化するのに十分な量である。化合物の治療有効量は、単独でまたは他の療法と組み合わせて、状態の処置の点で治療効果を提供する治療剤の量を意味する。用語「治療有効量」は、総合的な治療法を改善する、状態の症状、兆候、もしくは原因を減少させるかもしくは回避する、および／または別の治療剤の治療有効性を増強する量を包含し得る。
【０１４３】
本願に記載されている化合物の「予防有効量」は、状態または状態と結びついた１つもしくは２つ以上の症状を予防するかあるいはその再発を予防するのに十分な量である。化合物の予防有効量は、単独でまたは他の剤と組み合わせて、状態の予防の点で予防効果を提供する治療剤の量を意味する。用語「予防有効量」は、総合的な予防法を改善するかまたは別の予防剤の予防有効性を増強する量を包含し得る。
【０１４４】
「剤」はいずれかの治療剤を言い、本願に記載されているステープルドまたはステッチドポリペプチドを含む。
【０１４５】
術語「保存的なアミノ酸置換」は当分野において周知であり、類似の特質（例えば類似の電荷または疎水性、類似の嵩高さ）を有するものによる特定のアミノ酸の置換に関する。例は、グルタミン酸に対するアスパラギン酸、またはロイシンに対するイソロイシンを含む。例示的な保存的なアミノ酸置換の一覧が下の表に与えられている。保存的な置換変異体またはバリアントは１）親配列に対して保存的なアミノ酸置換のみを有し、２）親配列に対して少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の同一性、９６％の同一性、９７％の同一性、９８％の同一性、または９９％を有するであろう。
【表５】
2016523241.tif 000025
【０１４６】
非保存的な変異は、上の表に記された保存的な置換よりも他のいずれかの他のアミノ酸置換である。
【０１４７】
本願において用いられる場合、ペプチドを「架橋する」ことは、ペプチドを共有結合的に架橋することまたはペプチドを非共有結合的に架橋することのいずれかを言う。いくつかの態様においてペプチドは共有結合的に結びつけられる。共有結合的な相互作用は、天然または非天然アミノ酸側鎖などのリンカー基を介して２つのペプチドが共有結合的に繋がれるときである。他の態様においてペプチドは非共有結合的に結びつけられる。非共有結合的な相互作用は水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、磁性相互作用、および静電的相互作用を含む。ペプチドは、ペプチドを別のペプチドと架橋する能力のある天然または非天然アミノ酸をもまた含み得る。
【０１４８】
「ステープルド」または「ステッチド」蛋白質は、ペプチドステープリングまたはステッチを起こした蛋白質を意味する。「ペプチドステープリング」はペプチド内の（ペプチド内）または異なるペプチド間の（ペプチド間）架橋のための１つの方法である。ペプチドステープリングは、架橋を形成するために閉環メタセシス（ＲＣＭ）反応を用いて１つのペプチドまたは異なるペプチド中に存在する２つのオレフィン含有側鎖同士が共有結合的につながれる（「ステープルド」）合成方法論を記載する（J. Org. Chem. (2001) vol. 66, issue 16の表紙絵（αヘリックス性ペプチドのメタセシスに基づく架橋を記載している）、Blackwell et al., Angew Chem. Int. Ed. (1994) 37:3281、およびＵＳ７，１９２，７１３参照）。「ペプチドステッチ」は単一のポリペプチド鎖中に複数の「ステープリング」イベントが関与し、多重ステープルド（「ステッチド」としてもまた公知の）ポリペプチドを提供する（例えばWalensky et al., Science (2004) 305: 1466-1470、米国特許第８，５９２，３７７号、米国特許第７，１９２，７１３号、米国特許出願公開第２００６／０００８８４８号、米国特許出願公開第２０１２／０２７０８００号、国際公開第ＷＯ２００８／１２１７６７号、および国際公開第ＷＯ２０１１／００８２６０号参照）。全炭化水素架橋を用いるペプチドのステープリングは、そのネイティブな立体配座および／または二次構造を特に生理学的に関係する障害下において維持することを助けることが示されている（Schafmiester et al., J. Am. Chem. Soc. (2000) 122:5891-5892、Walensky et al., Science (2004) 305: 1466-1470参照）。いくつかの態様において、本願に記載されている融合蛋白質中に見いだされる非天然アミノ酸は、閉環メタセシス（ＲＣＭ）反応などの架橋反応を用いてオレフィン部分を用いて共有結合的につながる（すなわち「ステープリングされて一緒になる」）能力のある側鎖を含む。
【０１４９】
本願において用いられる場合、「少なくとも１つのセグメント」は少なくとも２つのアミノ酸を有するペプチド配列のいずれかの部分を言う。
【発明を実施するための形態】
【０１５０】
インスリンは、インスリン受容体（ＩＲ）のエクトドメインに結合して、細胞内チロシンキナーゼ（ＴＫ）ドメインの自己リン酸化とインスリン受容体基質（ＩＲＳ）蛋白質の続いてのリン酸化とに至る立体配座変化を誘導することによって生物学的反応を惹起する（Taguchi, A. & White, M. F. Insulin-like signaling, nutrient homeostasis, and life span. Annual review of physiology 70, 191-212 (2008)、Taniguchi, C. M., Emanuelli, B. & Kahn, C. R. Critical nodes in signalling pathways: insights into insulin action. Nature reviews. Molecular cell biology 7, 85-96 (2006)）。インスリンシグナル伝達経路の活性化によって、蛋白質−蛋白質相互作用およびリン酸化イベントのカスケードがグルコース取り込みおよびグリコーゲン合成をもたらす。１型および２型糖尿病は糖尿病の２つの主要な慢性形態であり、それぞれインスリンシグナル伝達経路の不足によって特徴づけられる。
【０１５１】
ＩＲα鎖のＣ末端（αＣＴ）はセグメントＩＲへのインスリン結合を媒介することに重要な役割を果たす。インスリンが結合したＩＲの結晶構造は、１２個のαＣＴ残基（７０４〜７１５）がαヘリックスを形成し、これがインスリンとインスリン受容体のＬ１ドメインとの間の相互作用を媒介するということを示している（Menting, J. G. et al., How insulin engages its primary binding site on the insulin receptor. Nature 493, 241-245 (2013)、McKern, N. M. et al., Structure of the insulin receptor ectodomain reveals a folded-over conformation. Nature 443, 218-221 (2006)）。本発明は構造上安定化されたαＣＴポリペプチドをインスリン増感薬として提供し、これはネイティブなαＣＴセグメントよりも高い親和性でＩＲおよびインスリン両方に協同的に結合することによってインスリンの効力を増強する。さらに、本発明は、化学的リンカーを介してインスリンに融合した安定化されたαＣＴポリペプチドを有するインスリンアナログを提供する。提供されるインスリンアナログは、インスリンがＩＲへの結合時に観察される活性立体配座をとり、ＩＲアゴニスト活性を見せるように誘導する。
【０１５２】
上で一般的に記載された通り、本発明は、ステープルドまたはステッチドαヘリックス性インスリン受容体（ＩＲ）結合セグメントを含むポリペプチドとその「非ステープルド」または「非ステッチド」前駆体ポリペプチドとを提供する。さらに、本願に記載されている式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）のステープルドまたはステッチドポリペプチドと、インスリンＡ鎖ポリペプチドと、インスリンＢ鎖ポリペプチドとを含むインスリンアナログが提供される。さらに、ステープルドまたはステッチドポリペプチドを作る方法、インスリンアナログを作る方法、その医薬組成物、その使用、ステープルドまたはステッチドペプチドおよびインスリンアナログを用いる方法、ならびに糖尿病または前糖尿病を処置および／または予防する方法が提供される。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはインスリン受容体（ＩＲ）のエクトドメインに結合する。ある態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはＩＲの部位１に結合する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはＩＲの部位１のＬ１ドメインに結合する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはインスリン増感薬として作用し、ＩＲに結合する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはインスリン増感薬として作用し、ＩＲおよびインスリンに結合する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはインスリン増感薬として作用し、ＩＲおよびインスリンに同時に結合する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）の安定化されたポリペプチドはインスリン増感薬として作用し、ＩＲおよびインスリンに順々に結合する。
【０１５３】
安定化されたポリペプチドのステープルおよび／またはステッチは、理想的にはＩＲへのポリペプチドの結合に干渉しないように位置づけられる。いくつかの態様において、ステープルおよび／またはステッチは安定化されたポリペプチドのヘリックス性を増大させて、結合を増強する。
【０１５４】
「ステープリング」は、本願において用いられる場合、ポリペプチド鎖中の２つの末端不飽和アミノ酸側鎖が閉環メタセシス（ＲＣＭ）触媒の存在下で互いと反応して、２つのアミノ酸間にＣ−Ｃ二重結合架橋（「ステープル」）を生ずるプロセスである。例えばBernal et al., J. Am. Chem. Soc. (2007) 129: 2456-2457参照。いくつかの態様においてＲＣＭ触媒はルテニウム（ruthenuim）触媒である。好適なＲＣＭ触媒は例えばGrubbs et al., Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446-452、米国特許第５，８１１，５１５号、Schrock et al., Organometallics (1982) 1 1645、Gallivan et al., Tetrahedron Letters (2005) 46:2577-2580、Furstner et al., J. Am. Chem. Soc. (1999) 121:9453、およびChem. Eur. J. (2001) 7:5299に記載されている。ステープリングはαヘリックス性構造などの二次構造上の制約を課す。架橋の長さおよび幾何学的構造は、所望の二次構造内容物の収率を改善するために最適化され得る。提供される制約は、例えば二次構造がアンフォールディングすることを予防および／または二次構造の形状を補強し得、したがって二次構造をより安定にする。ステープルドペプチドは増大したインビボの半減期を有し得、経口的なバイオアベイラビリティを有し得る。
【０１５５】
ステープルドポリペプチドは、１つよりも多くのステープル、すなわち２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、または１１個以上のステープルを含有し得る。いくつかの態様において、ステープルドポリペプチドは１つよりも多くのステープルを含み、ポリペプチドは「ステッチド」ポリペプチドともまた言われ得る。ステッチドポリペプチドは、２つの末端不飽和アミノ酸側鎖を含む少なくとも１つの中心的なアミノ酸と、中心的なアミノ酸の周縁の（いずれの側にも位置する）少なくとも２つのアミノ酸（このそれぞれは少なくとも１つの末端不飽和アミノ酸側鎖を含む）とを含むポリペプチドから生ずる。「ステッチ」は、中心的なおよび周縁のアミノ酸が閉環メタセシス触媒の存在下で互いと反応して、２つのＣ−Ｃ二重結合した架橋（すなわち１つのステープルは１つの周縁のアミノ酸を中心的なアミノ酸に連結し、他方のステープルは他方の周縁アミノ酸を中心的なアミノ酸に連結して、すなわち「ステッチ」を提供する）を生ずるときに起こる。ステープリングおよびステッチの概念は当分野において一般公知である。例えば米国特許第８，５９２，３７７、８，３２４，４２８、７，１９２，７１３、７，７２３，４６９、７，７８６，０７２号、米国特許出願公開第２０１４−００１１９７９、２０１４−０００５１１８、２０１２−０２７０８００、２０１１−０２５７２５１、２０１１−０１４４３０６、２０１０−０１８４６４５、２０１０−０１６８３８８、２０１０−００８１６１１、２００９−０１７６９６４、２００９−０１４９６３０、および２００６−０００８８４８号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／０５２６４７、ＷＯ２０１４／０５５５６４、ＷＯ２０１２／１７４４２３、ＷＯ２０１２／０４０４５９、ＷＯ２０１２／１７４４０９、ＷＯ２０１１／００８２６０、ＷＯ２０１０／０１１３１３、ＷＯ２００８／１２１７６７、ＷＯ２００８／０９５０６３、ＷＯ２００８／０６１１９２、およびＷＯ２００５／０４４８３９号参照。これらはポリペプチドのステープリングおよびステッチを描写しており、参照によって本願に組み込まれる。
【０１５６】
一般的に、本願において考えられる安定化されたポリペプチドはαヘリックス性セグメントを含み、ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、ポリペプチドは式（Ｉ−１）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
【化１９】
2016523241.tif 000026
または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含む。
【化２０】
2016523241.tif 000027
【０１５７】
本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドは、閉環メタセシス（ＲＣＭ）触媒によって本願に記載されている前駆体ポリペプチドから調製され得る。いくつかの態様において、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドは閉環メタセシス（ＲＣＭ）触媒によって本願に記載されている前駆体ポリペプチドから調製され、その次にステープルの追加の合成改変（単数または複数）、例えば−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−逆挿入、もたらされるオレフィンの還元、または標的化部分の付加が行われ得る。
【０１５８】
一般的に、本願において考えられる安定化されたポリペプチドを調製するための前駆体ポリペプチドはαヘリックス性セグメントを含み、前駆体ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、前駆体ポリペプチドは式（ＩＩ−１）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＢ１−ＸＢ２−ＸＢ３−ＸＢ４−ＸＢ５−ＸＢ６−ＸＢ７−ＸＢ８−ＸＢ９−ＸＢ１０−ＸＢ１１−ＸＢ１２−ＸＢ１３−ＸＢ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、
前駆体ポリペプチドは式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含む。
【化２１】
2016523241.tif 000028
【０１５９】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）および任意に式（ｉｖ）のアミノ酸はαヘリックス性セグメントのアミノ酸である。
【０１６０】
いくつかの態様において、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸はαヘリックス性セグメントのアミノ酸である。ステープリングまたはステッチによるαヘリックス性二次構造の安定化は、ステープリングもしくはステッチにとって好適なアミノ酸を有さないポリペプチドまたは前駆体ポリペプチドと比較して、例えば増大したαヘリックス性、酵素的分解に対する低減された感受性、および／または増大した熱安定性をもたらす。
【０１６１】
いくつかの態様において、式（Ｉ−１）、式（ＩＩ−１）、式（Ｉ−２）、または式（ＩＩ−２）のポリペプチド（polypetpdie）は野生インスリンαＣＴ配列に由来する。いくつかの態様において、式（Ｉ−１）、式（ＩＩ−１）、式（Ｉ−２）、または式（ＩＩ−２）のポリペプチドは野生インスリンαＣＴ配列に由来し、合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、または１０個まで、または１１個まで、１２個まで、１３個まで、または１４個までのアミノ酸改変をネイティブなαＣＴ配列に対して含む（例えば保存的なまたは非保存的な置換）。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴ配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。
【０１６２】
一般的に、ＩＲを標的化するポリペプチド領域はαヘリックス性または実質的にαヘリックス性であり、ステープルまたはステッチはこのαヘリックス性領域を安定化する。いくつかの態様において、ＩＲを標的化するポリペプチドは、およそ５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０アミノ酸の長さである配列を含む。他の態様において、ポリペプチドはおよそ５〜１０、５〜２０、５〜３０、５〜４０、５〜５０、１０〜２０、１０〜１６、１０〜１８、１２〜１８、１１４〜１８、１５〜１７、１５〜２０、または１６〜２０アミノ酸の長さである。いくつかの態様において、ＩＲを標的化する本願において提供されるポリペプチドは、インスリンのαヘリックス性セグメントに由来する配列を含む。いくつかの態様において、ＩＲを標的化する本願において提供されるポリペプチドは、α鎖のＣ末端のαヘリックス性セグメント（αＣＴ）セグメントに由来する配列を含む。ある態様において、本願において提供されるポリペプチドはＩＲおよびインスリン両方に結合する。本発明は、αＣＴセグメントのステープルド版がＩＲへのインスリン結合を媒介する能力を有するという発見に一部基づく。いくつかの態様において、媒介はＩＲの部位１へのインスリン結合に関連する。いくつかの態様において、提供されるポリペプチドはインスリン増感薬として働き、ネイティブなαＣＴセグメントよりも高い親和性でＩＲおよびインスリン両方に協同的に結合することによってインスリンの効力を増強する。いくつかの態様において、提供されるポリペプチドはＩＲ活性を作動させる剤として働く。
【０１６３】
本願において用いられる場合、言い回し「実質的にαヘリックス性」は、平均して約（−９０°，−１５°）〜約（−３５°，−７０°）の範囲の骨格（φ，ψ）二面角をとるポリペプチドを言う。その代わりには、言い回し「実質的にαヘリックス性」は、１つの残基のψ二面角および次の残基のφ二面角が合計で平均して約−８０°〜約−１２５°になるような二面角をとるポリペプチドを言う。いくつかの態様において、ポリペプチドは、１つの残基のψ二面角および次の残基のφ二面角が合計で平均して約−１００°〜約−１１０°になるような二面角をとる。いくつかの態様において、ポリペプチドは、１つの残基のψ二面角および次の残基のφ二面角が合計で平均して約−１０５°になるような二面角をとる。なおその上に、言い回し「実質的にαヘリックス性」は、ポリペプチド鎖中に提供されたアミノ酸の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％を、αヘリックス性立体配座でまたは本願において定められている二面角で有するポリペプチドをもまた言い得る。ポリペプチドのαヘリックス性二次構造の確認は、公知の分析技術、例えばｘ線結晶解析、電子結晶解析、繊維回折、蛍光異方性、円偏光二色性（ＣＤ）、および核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法によって確かめられ得る。
【０１６４】
一般的に、ステープルは１つまたは２つのヘリックス性ターンの長さ（すなわち約３つ、約４つ、または約７つのアミノ酸）に渡って延び、ｉおよびｉ＋３、ｉおよびｉ＋４、またはｉおよびｉ＋７に位置するアミノ酸が架橋のために用いられ得る。いくつかの態様において、ステープリングはｉ，ｉ＋３位置、ｉ，ｉ＋４位置、および／またはｉ，ｉ＋７位置において起こり得る。いくつかの態様において、ステッチはｉ，ｉ＋４＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋７位置、またはｉ，ｉ＋４＋７位置において起こり得る。これらのステープリングおよびステッチモチーフの例が図２に描写されている。いくつかの態様において、各ステープル（すなわち、単一のステープルまたはステッチの一部）の長さは、独立して６〜２０原子の長さ、すなわち６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０原子の長さである（α炭素からα炭素まで測定され、各非天然アミノ酸の各α炭素を含む）。いくつかの態様において、各ステープル（すなわち、単一のステープルまたはステッチの一部）の長さは、独立して６〜１４原子の長さ、すなわち６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、または１４の長さである（α炭素からα炭素まで測定され、各非天然アミノ酸の各α炭素を含む）。
【０１６５】
ポリペプチドおよび前駆体
本発明は、具体的にはＩＲのαＣＴセグメントの安定化された形態と、その非ステッチドおよび非ステープルド前駆体ポリペプチドとを考える。例示的なαＣＴセグメントのアミノ酸配列が図４において提供されている。
【０１６６】
本願に一般的に記載されている通り、αヘリックス性セグメントを含む前駆体「非ステープルド」および「非ステッチド」ポリペプチドが提供され、ポリペプチドはインスリン受容体に結合する。いくつかの態様において、前駆体ポリペプチドは式（ＩＩ−１）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＢ１−ＸＢ２−ＸＢ３−ＸＢ４−ＸＢ５−ＸＢ６−ＸＢ７−ＸＢ８−ＸＢ９−ＸＢ１０−ＸＢ１１−ＸＢ１２−ＸＢ１３−ＸＢ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−１）
またはその医薬的に許容される塩であり、
ポリペプチドは式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含み、
【化２２】
2016523241.tif 000029
式中、
【化２３】
2016523241.tif 000030
のそれぞれは独立して単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａは独立して任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、または任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａは独立して任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成し、
Ｌ１は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
ＲＬ１は、独立して、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ４、Ｒｃ５、Ｒｃ６、およびＲｃ７のそれぞれは、独立して、水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは、独立して、０、１、または２であり、
ＲＡは独立して−ＲＣ、−ＯＲＣ、−Ｎ（ＲＣ）２、または−ＳＲＣであり、式中、ＲＣのそれぞれは独立して水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、ヒドロキシル、アミノ、またはチオール保護基であるか、あるいは２つのＲＣ基が一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ＲＢは独立して水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、任意にリンカーによってつながっていてもよい標識であり、リンカーは環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、またはアシレンから選択されるか、あるいはＲＡおよびＲＢが一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ｙおよびｚのそれぞれは独立して１〜１０の整数であり、
ＸＢ１は不在であるかまたは式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ２は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ３はアミノ酸Ｆであり、
ＸＢ４はアミノ酸Ｅであり、
ＸＢ５は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ６は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ７はアミノ酸Ｌであり、
ＸＢ８はアミノ酸Ｈであり、
ＸＢ９はアミノ酸Ｎであり、
ＸＢ１０は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ１１はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＢ１２はアミノ酸ＦまたはＡであり、
ＸＢ１３は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＢ１４は不在であるか、または式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ただし、ポリペプチドは式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含む。
【０１６７】
いくつかの態様において、前駆体ポリペプチドはαヘリックス性セグメントを含み、前駆体ポリペプチドはインスリン受容体に結合し、前駆体ポリペプチドは式（ＩＩ−２）、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＤ１−ＸＤ２−ＸＤ３−ＸＤ４−ＸＤ５−ＸＤ６−ＸＤ７−ＸＤ８−ＸＤ９−ＸＤ１０−ＸＤ１１−ＸＤ１２−ＸＤ１３−ＸＤ１４−ＸＤ１５−ＸＤ１６−ＸＤ１７−ＸＤ１８−ＸＤ１９−ＸＤ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（ＩＩ−２）
またはその医薬的に許容される塩であり、ポリペプチドは式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸と任意に式（ｉｖ）の少なくとも１つのアミノ酸とを含み、
【化２４】
2016523241.tif 000031
式中、
【化２５】
2016523241.tif 000032
のそれぞれは独立して単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａは独立して任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、または任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａは独立して任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成し、
Ｌ１は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
ＲＬ１は独立して任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは独立して０、１、または２であり、
ＲＡは独立して−ＲＣ、−ＯＲＣ、−Ｎ（ＲＣ）２、もしくは−ＳＲＣであり、ＲＣのそれぞれは独立して水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、ヒドロキシル、アミノ、もしくはチオール保護基であるか、または２つのＲＣ基が一緒になって５〜６員ヘテロ環式もしくはヘテロ芳香族環を形成し、
ＲＢは独立して水素、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐の脂肪族、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、任意にリンカーによってつながっていてもよい標識であり、リンカーは環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のアルキニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルケニレン、環式もしくは非環式の分岐もしくは非分岐のヘテロアルキニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、またはアシレンから選択されるか、あるいはＲＡおよびＲＢが一緒になって５〜６員ヘテロ環式またはヘテロ芳香族環を形成し、
ｙおよびｚのそれぞれは独立して１〜１０の整数であり、
ＸＤ１は不在であるかまたは式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ２は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ３は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ４は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ５はアミノ酸Ｒであり、
ＸＤ６は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ７はアミノ酸Ｔであり、
ＸＤ８はアミノ酸Ｆであり、
ＸＤ９はアミノ酸Ｅであり、
ＸＤ１０は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１１は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１２はアミノ酸Ｌであり、
ＸＤ１３はアミノ酸Ｈであり、
ＸＤ１４はアミノ酸Ｎであり、
ＸＤ１５は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸であり、
ＸＤ１６はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＤ１７はアミノ酸Ｆであり、
ＸＤ１８はアミノ酸Ｖであり、
ＸＤ１９は不在であるかまたはアミノ酸Ｗであり、
ＸＤ２０は不在であるかまたは式（ｉｉｉ）もしくは（ｉｖ）のアミノ酸であり、
ただし、ポリペプチドは式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含む。
【０１６８】
いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）または式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドは、２（ｉ，ｉ＋３）アミノ酸、３（ｉ，ｉ＋４）アミノ酸、もしくは６（ｉ，ｉ＋７）アミノ酸によって離間された式（ｉｉｉ）のアミノ酸の独立した２つ、ならびに／またはそれぞれ３（ｉ，ｉ＋４＋４）アミノ酸によって離間、２および３アミノ酸（ｉ，ｉ＋３＋４）によって離間、２および６アミノ酸（ｉ，ｉ＋３＋７）によって離間、もしくは３および６（ｉ，ｉ＋４＋７）アミノ酸によって離間された式（ｉｖ）の１つおよびその周縁の式（ｉｉｉ）の２つのアミノ酸を含む。
【０１６９】
式（ＩＩ−１）中に用いられる場合、ＸＢ２は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ２は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ２はアミノ酸Ｔである。いくつかの態様においてＸＢ２はアミノ酸Ｓである。いくつかの態様においてＸＢ２は式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、または（ｖ）のアミノ酸である。
【０１７０】
式（ＩＩ−１）中に用いられる場合、ＸＢ５は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ５は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ５はアミノ酸Ｄである。いくつかの態様においてＸＢ５はアミノ酸Ｅである。いくつかの態様においてＸＢ５は式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、または（ｖ）のアミノ酸である。
【０１７１】
式 （ＩＩ−１）中に用いられる場合、ＸＢ６は天然もしくは非天然アミノ酸または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ６は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ６はアミノ酸Ｙである。いくつかの態様においてＸＢ６はアミノ酸Ｆである。いくつかの態様においてＸＢ６はアミノ酸Ｗである。いくつかの態様においてＸＢ６は式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、または（ｖ）のアミノ酸である。
【０１７２】
式 （ＩＩ−１）中に用いられる場合、ＸＢ１０は天然もしくは非天然アミノ酸または式 （ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ１０は天然または非天然 アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ１０はアミノ酸Ｖである。いくつかの態様においてＸＢ１０はアミノ酸Ａである。いくつかの態様においてＸＢ１０はアミノ酸Ｉである。いくつかの態様においてＸＢ１０はアミノ酸Ｌである。いくつかの態様においてＸＢ１０は式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、または（ｖ）のアミノ酸である。
【０１７３】
式（ＩＩ−１）中に用いられる場合、ＸＢ１３は天然もしくは非天然アミノ酸、または式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）のアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ１３は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ１３はアミノ酸Ｖである。いくつかの態様においてＸＢ１３はアミノ酸Ａである。いくつかの態様においてＸＢ１３はアミノ酸Ｉである。いくつかの態様においてＸＢ１３はアミノ酸Ｌである。いくつかの態様においてＸＢ１３は式（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、または（ｖ）のアミノ酸である。
【０１７４】
いくつかの態様において、式（ＩＩ−１）の前駆体ポリペプチドはＸＢ２をＴとして、および／またはＸＢ５をＤとして、および／またはＸＢ６をＹとして、および／またはＸＢ１０をＶもしくはＡとして、および／またはＸＢ１３をＶとして有し、ただし、ポリペプチドは式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも２つを含む。
【０１７５】
閉環メタセシスによる式（ＩＩ−１）の前駆体ポリペプチドのステープリングとステープルのもたらされる二重結合を任意に合成的に改変することとは、式（Ｉ−１）のステープルドまたはステッチドポリペプチド、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−１）
またはその医薬的に許容される塩を提供し、ポリペプチドは式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
【化２６】
2016523241.tif 000033
または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
【化２７】
2016523241.tif 000034
式中、
【化２８】
2016523241.tif 000035
のそれぞれは独立して単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは独立して０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは独立して１〜１０の整数であり、
各［ＸＡＡ］は独立して天然または非天然アミノ酸であり、
ｓは０または１〜５０の整数であり、
ｔは０または１〜５０の整数であり、
Ｒｆは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、ならびに任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基であり、
Ｒｅは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、および−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、式中、ＲＥのそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって任意に置換されていてもよいヘテロ環式もしくは任意に置換されていてもよいヘテロアリール環を形成し、
ＸＡ１は不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ２は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ３はアミノ酸Ｆであり、
ＸＡ４はアミノ酸Ｅであり、
ＸＡ５は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ６は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ７はアミノ酸Ｌであり、
ＸＡ８はアミノ酸Ｈであり、
ＸＡ９はアミノ酸Ｎであり、
ＸＡ１０は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ１１はアミノ酸ＶまたはＡであり、
ＸＡ１２はアミノ酸ＦまたはＡであり、
ＸＡ１３は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＡ１４は不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１７６】
閉環メタセシスによる式（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドのステープリングとステープルのもたらされる二重結合を任意に合成的に改変することとは、式（Ｉ−２）のステープルドもしくはステッチドポリペプチド、
Ｒｆ−［ＸＡＡ］ｓ−ＸＣ１−ＸＣ２−ＸＣ３−ＸＣ４−ＸＣ５−ＸＣ６−ＸＣ７−ＸＣ８−ＸＣ９−ＸＣ１０−ＸＣ１１−ＸＣ１２−ＸＣ１３−ＸＣ１４−ＸＣ１５−ＸＣ１６−ＸＣ１７−ＸＣ１８−ＸＣ１９−ＸＣ２０−［ＸＡＡ］ｔ−Ｒｅ
（Ｉ−２）
またはその医薬的に許容される塩を提供し、
ポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つ、
【化２９】
2016523241.tif 000036
または式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つを含み、
【化３０】
2016523241.tif 000037
式中、
【化３１】
2016523241.tif 000038
のそれぞれは独立して単結合、二重結合、または三重結合を表し、
Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基であり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂのそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいアルキル、任意に置換されていてもよいアルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル、任意に置換されていてもよいヘテロアルキル、任意に置換されていてもよいカルボシクリル、任意に置換されていてもよいヘテロシクリルであり、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいアルキレン、非置換ヘテロアルキレン、任意に置換されていてもよいカルボシクリレン、もしくは任意に置換されていてもよいヘテロシクリレンであるか、または任意にＲ２ａおよびＲ３ａがつながって環を形成するか、または任意にＲ２ｂおよびＲ３ｂがつながって環を形成し、
Ｌ１は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、
Ｌ２は独立して結合、任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、
ＲＬ１およびＲＬ２のそれぞれは独立して任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンであり、
Ｒｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは独立して０、１、または２であり、
ｙおよびｚのそれぞれは独立して１〜１０の整数であり、
各［ＸＡＡ］は独立して天然または非天然アミノ酸であり、
ｓは０または１〜５０の整数であり、
ｔは０または１〜５０の整数であり、
Ｒｆは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、ならびに任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは、置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基であり、
Ｒｅは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、ならびに−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、式中、ＲＥのそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって任意に置換されていてもよいヘテロ環式もしくは任意に置換されていてもよいヘテロアリール環を形成し、
ＸＣ１は不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ２は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ３は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ４は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ５はアミノ酸Ｒであり、
ＸＣ６は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ７はアミノ酸Ｔであり、
ＸＣ８はアミノ酸Ｆであり、
ＸＣ９はアミノ酸Ｅであり、
ＸＣ１０は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１１は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１２はアミノ酸Ｌであり、
ＸＣ１３はアミノ酸Ｈであり、
ＸＣ１４はアミノ酸Ｎであり、
ＸＣ１５は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸であり、
ＸＣ１６はアミノ酸Ｖであり、
ＸＣ１７はアミノ酸Ｆであり、
ＸＣ１８はアミノ酸Ｖであり、
ＸＣ１９は不在であるかまたはアミノ酸Ｗであり、
ＸＣ２０は不在であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１７７】
式（Ｉ−１）または式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ポリペプチドは、式（ｉ）の少なくとも１つのステープルをｉ，ｉ＋３位置、ｉ，ｉ＋４位置、もしくはｉ，ｉ＋７位置に、および／または式（ｉｉ）の少なくとも１つのステッチをｉ，ｉ＋４＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋４位置、ｉ，ｉ＋３＋７位置、もしくはｉ，ｉ＋４＋７位置に含む。
【０１７８】
本願において一般的に理解される通り、式（Ｉ−１）のアミノ酸領域［ＸＡ１−ＸＡ２−ＸＡ３−ＸＡ４−ＸＡ５−ＸＡ６−ＸＡ７−ＸＡ８−ＸＡ９−ＸＡ１０−ＸＡ１１−ＸＡ１２−ＸＡ１３−ＸＡ１４］および式（ＩＩ−１）のアミノ酸領域［ＸＢ１−ＸＢ２−ＸＢ３−ＸＢ４−ＸＢ５−ＸＢ６−ＸＢ７−ＸＢ８−ＸＢ９−ＸＢ１０−ＸＢ１１−ＸＢ１２−ＸＢ１３−ＸＢ１４］はαヘリックス性二次構造をとり、ステープリングまたはステッチはこの構造をさらに安定化する。
【０１７９】
式（Ｉ−１）中に用いられる場合、ＸＡ２は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ２は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ２はアミノ酸Ｔである。いくつかの態様においてＸＡ２はアミノ酸Ｓである。いくつかの態様において、ＸＡ２は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８０】
式（Ｉ−１）中に用いられる場合、ＸＡ５は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ５は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ５はアミノ酸Ｄである。いくつかの態様においてＸＡ５はアミノ酸Ｅである。いくつかの態様において、ＸＡ５は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８１】
式（Ｉ−１）中に用いられる場合、ＸＡ６は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ６は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ６はアミノ酸Ｙである。いくつかの態様においてＸＡ６はアミノ酸Ｆである。いくつかの態様においてＸＡ６はアミノ酸Ｗである。いくつかの態様において、ＸＡ６は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８２】
式（Ｉ−１）中に用いられる場合、ＸＡ１０は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ１０は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ１０はアミノ酸Ｖである。いくつかの態様においてＸＡ１０はアミノ酸Ａである。いくつかの態様においてＸＡ１０はアミノ酸Ｉである。いくつかの態様においてＸＡ１０はアミノ酸Ｌである。ある態様において、ＸＡ１０は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８３】
式（Ｉ−１）中に用いられる場合、ＸＡ１３は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ１３は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＡ１３はアミノ酸Ｖである。いくつかの態様においてＸＡ１３はアミノ酸Ａである。いくつかの態様においてＸＡ１３はアミノ酸Ｉである。いくつかの態様においてＸＡ１３はアミノ酸Ｌである。ある態様において、ＸＡ１３は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８４】
本願において一般的に理解される通り、式（Ｉ−２）のアミノ酸領域［ＸＣ１−ＸＣ２−ＸＣ３−ＸＣ４−ＸＣ５−ＸＣ６−ＸＣ７−ＸＣ８−ＸＣ９−ＸＣ１０−ＸＣ１１−ＸＣ１２−ＸＣ１３−ＸＣ１４−ＸＣ１５−ＸＣ１６−ＸＣ１７−ＸＣ１８−ＸＣ１９−ＸＣ２０］および式（ＩＩ−２）のアミノ酸領域［ＸＤ１−ＸＤ２−ＸＤ３−ＸＤ４−ＸＤ５−ＸＤ６−ＸＤ７−ＸＤ８−ＸＤ９−ＸＤ１０−ＸＤ１１−ＸＤ１２−ＸＤ１３−ＸＤ１４−ＸＤ１５−ＸＤ１６−ＸＤ１７−ＸＤ１８−ＸＤ１９−ＸＤ２０］はαヘリックス性二次構造をとり、ステープリングまたはステッチはこの構造をさらに安定化する。
【０１８５】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ２は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ２は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ２はアミノ酸Ｓである。いくつかの態様においてＸＣ２はアミノ酸Ｔである。いくつかの態様において、ＸＣ２は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８６】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ３は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ３は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ３はアミノ酸Ｓである。いくつかの態様においてＸＣ３はアミノ酸Ｔである。いくつかの態様において、ＸＣ３は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８７】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ４は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ４は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ４はアミノ酸Ｆである。いくつかの態様においてＸＣ４はアミノ酸Ｙである。いくつかの態様においてＸＣ４はアミノ酸Ｗである。いくつかの態様において、ＸＣ４は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８８】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ６は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ６は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ６はアミノ酸Ｋである。いくつかの態様においてＸＣ６はアミノ酸Ｒである。いくつかの態様においてＸＣ６はアミノ酸Ｈである。いくつかの態様において、ＸＣ６は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１８９】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ１０は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１０は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１０はアミノ酸Ｄである。いくつかの態様においてＸＣ１０はアミノ酸Ｅである。いくつかの態様において、ＸＣ１０は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１９０】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ１１は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１１は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１１はアミノ酸Ｙである。いくつかの態様においてＸＣ１１はアミノ酸Ｆである。いくつかの態様においてＸＣ１１はアミノ酸Ｗである。いくつかの態様において、ＸＣ１１は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１９１】
式（Ｉ−２）中に用いられる場合、ＸＣ１５は天然もしくは非天然アミノ酸であるか、または別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１５は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様においてＸＣ１５はアミノ酸Ｖである。いくつかの態様においてＸＣ１５はアミノ酸Ａである。いくつかの態様においてＸＣ１５はアミノ酸Ｉである。いくつかの態様においてＸＣ１５はアミノ酸Ｌである。いくつかの態様において、ＸＣ１５は、別のアミノ酸と一緒になって式（ｉ）の架橋を形成するアミノ酸であるか、または２つの他のアミノ酸と一緒になって式（ｉｉ）の架橋を形成するアミノ酸である。
【０１９２】
別の側面においては、αＣＴベース配列と２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含む安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドが本願において提供され、２つの架橋されたアミノ酸はαＣＴベース配列中に埋め込まれ、少なくとも２つのアミノ酸によって離間されている。
【０１９３】
いくつかの態様においてαＣＴベース配列は野生αＣＴ配列である。いくつかの態様においてαＣＴベース配列は野生αＣＴ配列に由来する。いくつかの態様においてαＣＴベース配列は野生αＣＴ配列のセグメントである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列は変異体αＣＴ配列である。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列は合成αＣＴ配列である。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶＷである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶまたはＡｃ−ＳＳＦＲＫＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶである。いくつかの態様においてαＣＴベース配列はＡｃ−ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶＷである。
【０１９４】
安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドのいくつかの態様において、２つの架橋されたアミノ酸のそれぞれは独立して式（ｉ）であり、式（ｉ）は本願において定義される通りである。いくつかの態様において、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドは、式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つをさらに含み、式（ｉｉ）は本願において定義される通りである。いくつかの態様において、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つと式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の少なくとも１つとを含み、式（ｉ）および式（ｉｉ）は本願において定義される通りである。いくつかの態様において、安定化されたインスリンαＣＴポリペプチドは、式（ｉ）の２つの架橋されたアミノ酸の１つと式（ｉｉ）の３つの架橋されたアミノ酸の１つとを含み、式（ｉ）および式（ｉｉ）は本願において定義される通りである。
【０１９５】
いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立して２つ、３つ、または６つのアミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の２つ、３つ、または６つのアミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の２アミノ酸（ｉ，ｉ＋３）によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の３アミノ酸（ｉ，ｉ＋４）によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の６アミノ酸（ｉ，ｉ＋７）によって離間される。
【０１９６】
いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立して２および３、２および６、３および３、３および６、または６および６アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の２および３、２および６、３および３、３および６、または６および６アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立して２および３（ｉ，ｉ＋３，ｉ＋７）アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の２および６（ｉ，ｉ＋３，ｉ＋１０）アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の３および３（ｉ，ｉ＋４，ｉ＋８）アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の６および６（ｉ，ｉ＋７，ｉ＋１４）アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の６および６（ｉ，ｉ＋４，ｉ＋１１）アミノ酸によって離間される。いくつかの態様において、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立してαＣＴベース配列の６および６（ｉ，ｉ＋７，ｉ＋１１）アミノ酸によって離間される。
【０１９７】
いくつかの態様において、それぞれの２つの架橋されたアミノ酸は、独立して２、３、または６アミノ酸によって離間され、それぞれの３つの架橋されたアミノ酸は、独立して２および３、２および６、３および３、３および６、または６および６アミノ酸によって離間される。
【０１９８】
類似の化学的特性を有する別のアミノ酸へのアミノ酸の置換が本発明によって考えられる。例えば、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）、ロイシン（Ｌ）、グルタミン酸（Ｅ）、およびリシン（Ｋ）は、とりわけ高いαヘリックス形成傾向を有する。対照的に、プロリン（Ｐ）およびグリシン（Ｇ）はαヘリックス遮断因子であるが、プロリン（Ｐ）はαヘリックス形成のイニシエーターであることもまた見いだされている。アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）、およびリシン（Ｌ）はアミノ官能化側鎖を含有し、それらは塩基性であり、正に荷電し得る。アスパラギン酸（Ｄ）およびグルタミン酸（Ｅ）はカルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）官能化側鎖を含有し、それらは酸性であり、生理学的なｐＨにおいて負に荷電し得る。セリン（Ｓ）およびトレオニン（Ｔ）はそれぞれヒドロキシル（−ＯＨ）官能化側鎖を含有する。アスパラギン（Ｎ）およびグルタミン（Ｇ）はそれぞれアミド（−ＣＯＮＨ２）官能化側鎖を含有する。アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、フェニルアラニン（Ｆ）、およびトリプトファン（Ｗ）は疎水性として分類される。フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）、およびヒスチジン（Ｈ）は芳香族側鎖を含む。
【０１９９】
本発明は、１つまたは２つ以上のアミノ酸の１つまたは２つ以上の異なるアミノ酸への置換による、上および本願に記載されているアミノ酸配列への１つまたは２つ以上の点変異を考える。いくつかの態様において、ポリペプチドは１つ、２つ、３つ、４つ、または５つの点変異を含む。いくつかの態様において、それらの点変異は前述のパラグラフに記載された保存的な変化（例えばセリンからトレオニンへの変異）であり得る。いくつかの態様において、ポリペプチドは１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ以上の追加のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、ポリペプチドは１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのアミノ酸が配列から除かれる。いくつかの態様において、もたらされるアミノ酸配列は、本願に記載されているアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％相同または同一である。例えば図５に描写されているアミノ酸の配列参照。いくつかの態様において、ポリペプチドは、例えばａ）追加のＲ、Ｑ、もしくはＷ残基を導入すること、および／またはｂ）１つもしくは２つ以上の追加のＲ、Ｑ、もしくはＷ残基をポリペプチドのＮおよび／もしくはＣ末端に付加することによって、細胞透過性を増大させるようにさらに改変され得る。
【０２００】
式（ｉ）または（ｉｉ）の架橋されたアミノ酸および式（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の前駆体ポリペプチドを合成する方法は、米国仮出願第６１／７０８，３７１（２０１２年１０月１日出願）６１／７７９，９１７（２０１３年３月１３日出願）、６１／７０５，９５０（２０１２年９月２６日出願）、６１／７８９，１５７号（２０１３年３月１５日出願）、および国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５８５７５号（２００８年３月２８日出願）に記載されている通りである。これらの全ては参照によって本願に組み込まれる。これらのステープリングおよび／またはステッチテクノロジーの追加の記載は、米国特許第７，１９２，７１３、７，７２３，４６９、７，７８６，０７２号、米国特許出願公開第２０１０−０１８４６４５、２０１０−０１６８３８８、２０１０−００８１６１１、２００９−０１７６９６４、２００９−０１４９６３０、および２００６−０００８８４８号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１０／０１１３１３、ＷＯ２００８／１２１７６７、ＷＯ２００８／０９５０６３、ＷＯ２００８／０６１１９２、およびＷＯ２００５／０４４８３９号、さらにはＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０２５５４４号に見いだされる。これらの全ては参照によって本願に組み込まれる。
【０２０１】
基ＲｆおよびＲｅ
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ−１）、および（ＩＩ−２）について上で一般的に定義されている通り、Ｒｆは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基、ならびに任意にリンカーによってつながっていてもよい標識からなる群から選択されるＮ末端基であり、リンカーは置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基である。
【０２０２】
いくつかの態様においてＲｆは水素であり、−ＮＨ２末端基を提供する。いくつかの態様においてＲｆは置換もしくは非置換脂肪族（例えば−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３）である。ある態様においてＲｆは置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族である。いくつかの態様においてＲｆは置換もしくは非置換アリールである。いくつかの態様においてＲｆは置換もしくは非置換ヘテロアリールである。いくつかの態様においてＲｆはアシル（例えばアセチル（−ＣＯＣＨ３））である。ある態様においてＲｆは樹脂である。いくつかの態様においてＲｆはアミノ保護基（例えば−Ｂｏｃ、−Ｆｍｏｃ）である。
【０２０３】
いくつかの態様において、Ｒｆは任意にリンカーによってつながっていてもよい標識を含み、リンカーは置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、ならびにアシレンの１つまたは２つ以上の組み合わせからなる基である。例示的な標識はＦＩＴＣおよびビオチンを含むが、これに限定されない。
【０２０４】
いくつかの態様において、Ｒｆはポリペプチドに直接的に（すなわち結合によって）つながった標識である。いくつかの態様において、Ｒｆはリンカーを介してポリペプチドに間接的につながった標識であり、リンカーは、置換および非置換アルキレン、置換および非置換アルケニレン、置換および非置換アルキニレン、置換および非置換ヘテロアルキレン、置換および非置換ヘテロアルケニレン、置換および非置換ヘテロアルキニレン、置換および非置換アリーレン、置換および非置換ヘテロアリーレン、アシレン、ならびにその組み合わせからなる群から選択される。
【０２０５】
いくつかの態様において、ポリペプチドに標識をつなぐリンカーは置換もしくは非置換アルキレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換アルケニレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換アルキニレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換ヘテロアルケニレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換ヘテロアルキニレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換アリーレンである。いくつかの態様においてリンカーは置換もしくは非置換ヘテロアリーレンである。いくつかの態様においてリンカーはアシレンである。
【０２０６】
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ）、または（ＩＩ−２）について上で一般的に定義されている通り、Ｒｅは水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリール、−ＯＲＥ、−Ｎ（ＲＥ）２、ならびに−ＳＲＥからなる群から選択されるＣ末端基であり、ＲＥのそれぞれは独立して水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、保護基であるか、あるいは２つのＲＥ基が一緒になって置換もしくは非置換ヘテロ環式または置換もしくは非置換ヘテロアリール環を形成する。
【０２０７】
いくつかの態様においてＲｅは水素であり、例えばアルデヒド（−ＣＨＯ）をＣ末端基として提供する。いくつかの態様において、Ｒｅは、Ｃ末端基としてケトンを提供するために置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールである。
【０２０８】
いくつかの態様においてＲｅは−ＯＲＥであり、ＲＥは水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、またはヒドロキシル保護基であり、例えばカルボン酸またはエステルＣ末端基を提供する。いくつかの態様においてＲｅは−ＯＨであり、例えばカルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）をＣ末端基として提供する。いくつかの態様においてＲｅは−ＯＣＨ３である。
【０２０９】
いくつかの態様においてＲｅは−ＳＲＥであり、ＲＥは水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、または好適なチオール保護基であり、例えばチオ酸またはチオエステルＣ末端基を提供する。
【０２１０】
いくつかの態様においてＲｅは−Ｎ（ＲＥ）２であり、ＲＥのそれぞれは独立して水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、樹脂、アミノ保護基であるか、または２つのＲＥ基が一緒になって置換もしくは非置換５〜６員ヘテロ環式もしくはヘテロ芳香族環を形成し、例えばアミドをＣ末端基として提供する。いくつかの態様においてＲｅは−ＮＨ２である。
【０２１１】
いくつかの態様において、Ｒｆはアシルであり、Ｒｅは水素である。
【０２１２】
基Ｒ２ａ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｌ１、およびＬ２
上で一般的に定義されている通り、Ｒ２ａは独立して置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換ヘテロアルキル、置換または非置換カルボシクリル、置換または非置換ヘテロシクリルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換または非置換Ｃ１−１０アルキルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは非置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換エチルである。ある態様において、Ｒ２ａは非置換エチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換ｎ−プロピルである。いくつかの態様においてＲ２ａは非置換ｎ−プロピルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換イソプロピルである。いくつかの態様においてＲ２ａは非置換イソプロピルである。いくつかの態様においてＲ２ａは置換または非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様においてＲ２ａは少なくとも１つの窒素を有する置換または非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様において、Ｒ２ａは少なくとも１つの窒素を含有する非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様において、Ｒ２ａは少なくとも１つの窒素を含有する置換ヘテロアルキルである。
【０２１３】
上で一般的に定義されている通り、Ｒ３ａは独立して置換もしくは非置換アルキレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換カルボシクリレン、または置換もしくは非置換ヘテロシクリレンであるか、あるいは任意にＲ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素がつながって環を形成する。いくつかの態様においてＲ３ａは置換もしくは非置換アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは置換もしくは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは少なくとも１つの窒素を含有する置換もしくは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは−（ＣＨ２）ｊ−Ｙ１−であり、式中、ｊは独立して０〜１０の整数であり、Ｙ１は独立して結合、−ＣＲ５Ｒ６−、または−ＮＲ１−であり、式中、Ｒ５およびＲ６のそれぞれは独立して水素、ハロゲン、またはＣ１−６アルキルであり、Ｒ１は水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲ３ａは−（ＣＨ２）ｊ−である。いくつかの態様においてＲ３ａは−（ＣＨ２）ｊ−ＮＲ１−である。いくつかの態様においてＲ３ａは−（ＣＨ２）ｊ−ＮＨ−である。いくつかの態様においてＲ３ａは−（ＣＨ２）ｊ＋１−である。いくつかの態様においてｊは０である。いくつかの態様においてｊは１である。いくつかの態様においてｊは２である。いくつかの態様においてｊは３である。いくつかの態様においてｊは４である。いくつかの態様においてｊは５である。いくつかの態様においてｊは６である。いくつかの態様においてｊは７である。いくつかの態様においてｊは８である。いくつかの態様においてｊは９である。いくつかの態様においてｊは１０である。
【０２１４】
上で一般的に定義されている通り、Ｒ１のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲ１は水素である。いくつかの態様においてＲ１はアシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲ１はアシルまたは任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲ１は置換もしくは非置換アルキルである。いくつかの態様においてＲ１は置換もしくは非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲ１は非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲ１はメチル、エチル、またはプロピルである。いくつかの態様においてＲ１はアシルである。いくつかの態様においてＲ１はアセチル（−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）である。いくつかの態様においてＲ１はアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲ１はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０２１５】
いくつかの態様において、Ｒ２ａおよびＲ３ａの少なくとも１つはそれらが取り付けられた炭素原子と一緒になってつながって環を形成する。この場合に、いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、置換または非置換Ｃ３−６カルボシクリルまたはヘテロシクリルである。ある態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、置換もしくは非置換Ｃ３−６カルボシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、少なくとも１つのＯ、Ｎ、またはＳ原子を含有する置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、少なくとも１つの窒素原子を含有する置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、１つの窒素原子を含有する置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ａおよびＲ３ａによって形成される環は、１つの窒素（nitogen）原子を含有する非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。
【０２１６】
いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成する。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３２】
2016523241.tif 000039
であり、式中、Ｙ１は独立して−ＣＲ５−または−Ｎ−であり、ｊおよびｊ１のそれぞれは独立して０、１、２、３、４、５、または６である。いくつかの態様においてｊ１は０であり、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３３】
2016523241.tif 000040
である。いくつかの態様においてｊは０であり、Ｙ１はアミノ酸のα炭素に直接的に連結される。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３４】
2016523241.tif 000041
である。ある態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３５】
2016523241.tif 000042
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３６】
2016523241.tif 000043
である。ある態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３７】
2016523241.tif 000044
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３８】
2016523241.tif 000045
である。ある態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化３９】
2016523241.tif 000046
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４０】
2016523241.tif 000047
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４１】
2016523241.tif 000048
である。
【０２１７】
いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４２】
2016523241.tif 000049
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４３】
2016523241.tif 000050
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４４】
2016523241.tif 000051
もしくは、
【化４５】
2016523241.tif 000052
、またはその立体異性体である。
【０２１８】
いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４６】
2016523241.tif 000053
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４７】
2016523241.tif 000054
である。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４８】
2016523241.tif 000055
、またはその立体異性体である。
【０２１９】
本願において用いられる場合、ｊおよびｊ１のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｊは１である。いくつかの態様においてｊは２である。いくつかの態様においてｊは３である。いくつかの態様においてｊは４である。いくつかの態様においてｊは５である。いくつかの態様においてｊは６である。いくつかの態様においてｊは７である。いくつかの態様においてｊは８である。いくつかの態様においてｊは９である。いくつかの態様においてｊは１０である。いくつかの態様においてｊ１は１である。いくつかの態様においてｊ１は２である。いくつかの態様においてｊ１は３である。いくつかの態様においてｊ１は４である。いくつかの態様においてｊ１は５である。いくつかの態様においてｊ１は６である。いくつかの態様においてｊ１は７である。いくつかの態様においてｊ１は８である。いくつかの態様においてｊ１は９である。いくつかの態様においてｊ１は１０である。
【０２２０】
いくつかの態様においては、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。この場合に、Ｒ３ａは独立して置換もしくは非置換アルキレン、置換もしくは非置換アルケニレン、置換もしくは非置換アルキニレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキレン、または置換もしくは非置換ヘテロシクリレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは独立して置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ａは独立して−（ＣＨ２）ｊ−であり、式中、ｊは０〜１０の整数である。
【０２２１】
いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。この場合に、Ｒ２ａは独立して置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アルケニル、置換もしくは非置換アルキニル、置換もしくは非置換ヘテロアルキル、または置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して非置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して置換エチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して非置換エチルである。いくつかの態様においてＲ２ａは独立して置換もしくは非置換Ｃ２−６アルキルである。
【０２２２】
上で一般的に記載されている通り、Ｒ３ｂは独立して置換もしくは非置換アルキレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換カルボシクリレン、または置換もしくは非置換ヘテロシクリレンであるか、あるいは任意にＲ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素がつながって環を形成する。いくつかの態様においてＲ３ｂは置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは置換もしくは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様において、Ｒ３ｂは少なくとも１つの窒素を有する置換もしくは非置換ヘテロアルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは−（ＣＨ２）ｋ−Ｙ２−であり、式中、ｋは独立して０〜１０の整数であり、Ｙ２は独立して結合、−ＣＲ５Ｒ６−、または−ＮＲ１−であり、式中、Ｒ１、Ｒ５、およびＲ６は本願において定義されている通りである。いくつかの態様においてＲ３ｂは−（ＣＨ２）ｋ−である。いくつかの態様においてＲ３ｂは−（ＣＨ２）ｋ−ＮＲ１−である。いくつかの態様においてＲ３ｂは−（ＣＨ２）ｋ−ＮＨ−である。いくつかの態様においてＲ３ｂは−（ＣＨ２）ｋ＋１である。いくつかの態様においてｋは０である。いくつかの態様においてｋは１である。いくつかの態様においてｋは２である。いくつかの態様においてｋは３である。いくつかの態様においてｋは４である。いくつかの態様においてｋは５である。いくつかの態様においてｋは６である。いくつかの態様においてｋは７である。いくつかの態様においてｋは８である。いくつかの態様においてｋは９である。いくつかの態様においてｋは１０である。
【０２２３】
上で一般的に記載されている通り、Ｒ２ｂは独立して置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アルケニル、置換もしくは非置換アルキニル、置換もしくは非置換ヘテロアルキル、置換もしくは非置換カルボシクリル、または置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは置換もしくは非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様において、Ｒ２ｂは少なくとも１つの窒素原子を有する置換もしくは非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様において、Ｒ２ｂは少なくとも１つの窒素原子を有する非置換ヘテロアルキルである。いくつかの態様において、Ｒ２ｂは少なくとも１つの窒素原子を有する置換ヘテロアルキルである。
【０２２４】
いくつかの態様において、少なくとも１つの場合に、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成する。この場合に、いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、置換または非置換Ｃ３−６カルボシクリルまたはヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、置換もしくは非置換Ｃ３−６カルボシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、少なくとも１つのＯ、Ｎ、またはＳ原子を有する置換または非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、少なくとも１つのＮを有する置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、１つのＮを有する置換もしくは非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。いくつかの態様において、それらが取り付けられた炭素原子と一緒になったＲ２ｂおよびＲ３ｂによって形成される環は、１つのＮを有する非置換Ｃ３−６ヘテロシクリルである。
【０２２５】
いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化４９】
2016523241.tif 000056
であり、式中、Ｙ２は独立して−ＣＲ５−または−Ｎ−であり、ｋは独立して０または１〜１０の整数であり、ｋ１は独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様において、ｋ１は０であり、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５０】
2016523241.tif 000057
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５１】
2016523241.tif 000058
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５２】
2016523241.tif 000059
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５３】
2016523241.tif 000060
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５４】
2016523241.tif 000061
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５５】
2016523241.tif 000062
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５６】
2016523241.tif 000063
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５７】
2016523241.tif 000064
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５８】
2016523241.tif 000065
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化５９】
2016523241.tif 000066
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６０】
2016523241.tif 000067
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６１】
2016523241.tif 000068
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６２】
2016523241.tif 000069
、またはその立体異性体である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６３】
2016523241.tif 000070
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６４】
2016523241.tif 000071
である。いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素によって形成される環は、式
【化６５】
2016523241.tif 000072
、またはその立体異性体である。その。
【０２２６】
本願において用いられる場合、ｋは０〜１０の整数であり、ｋ１は独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｋは０である。いくつかの態様においてｋは１である。いくつかの態様においてｋは２である。いくつかの態様においてｋは３である。いくつかの態様においてｋは４である。いくつかの態様においてｋは５である。いくつかの態様においてｋは６である。いくつかの態様においてｋは７である。いくつかの態様においてｋは８である。いくつかの態様においてｋは９である。いくつかの態様においてｋは１０である。いくつかの態様においてｋ１は１である。いくつかの態様においてｋ１は２である。いくつかの態様においてｋ１は３である。いくつかの態様においてｋ１は４である。いくつかの態様においてｋ１は５である。いくつかの態様においてｋ１は６である。いくつかの態様においてｋ１は７である。いくつかの態様においてｋ１は８である。いくつかの態様においてｋ１は９である。いくつかの態様においてｋ１は１０である。
【０２２７】
いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。この場合に、Ｒ３ｂは独立して置換もしくは非置換アルキレン、置換もしくは非置換アルケニレン、置換もしくは非置換アルキニレン、置換もしくは非置換ヘテロアルキレン、または置換もしくは非置換ヘテロシクリレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは独立して置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲ３ｂは独立して−（ＣＨ２）ｋ−であり、式中、ｋは上で定義されている通りである。
【０２２８】
いくつかの態様において、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。この場合に、いくつかの態様において、Ｒ２ｂは独立して置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキル、置換もしくは非置換アルケニル、置換もしくは非置換アルキニル、置換もしくは非置換ヘテロアルキル、または置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して非置換メチルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して置換エチルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して非置換エチルである。いくつかの態様においてＲ２ｂは独立して置換もしくは非置換Ｃ２−６アルキルである。
【０２２９】
いくつかの態様において、少なくとも１つの場合に、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成せず、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成せず、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成する。いくつかの態様において、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成し、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成しない。いくつかの態様において、少なくとも１つの場合に、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、ならびにＲ２ａおよびＲ３ａが取り付けられた炭素はつながって環を形成し、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、ならびにＲ２ｂおよびＲ３ｂが取り付けられた炭素はつながって環を形成する。
【０２３０】
いくつかの態様においてＲ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは同じである。いくつかの態様においてＲ３ａおよびＲ３ｂのそれぞれは異なる。
【０２３１】
上で一般的に記載されている通り、Ｌ１は独立して結合、置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ１−であり、式中、ＲＬ１は任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ１は置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ１は置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ１は−（ＣＨ２）ｇ−であり、式中、ｇは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｇは０であり、Ｌ１は結合である。いくつかの態様においてｇは１である。いくつかの態様においてｇは２である。いくつかの態様においてｇは３である。いくつかの態様においてｇは４である。いくつかの態様においてｇは５である。いくつかの態様においてｇは６である。いくつかの態様においてｇは７である。いくつかの態様においてｇは８である。いくつかの態様においてｇは９である。いくつかの態様においてｇは１０である。いくつかの態様においてＲＬ１は置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲＬ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｇ１−であり、式中、ｇ１は１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｇ１は１である。いくつかの態様においてｇ１は２である。いくつかの態様においてｇ１は３である。いくつかの態様においてｇ１は４である。いくつかの態様においてｇ１は５である。いくつかの態様においてｇ１は６である。いくつかの態様においてｇ１は７である。いくつかの態様においてｇ１は８である。いくつかの態様においてｇ１は９である。いくつかの態様においてｇ１は１０である。
【０２３２】
上で一般的に記載されている通り、Ｌ２は独立して結合、置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレン、または−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＬ２−であり、式中、ＲＬ２は任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ２は置換もしくは非置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ２は置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＬ２は−（ＣＨ２）ｈ−であり、式中、ｈは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｈは０であり、Ｌ２は結合である。いくつかの態様においてｈは１である。いくつかの態様においてｈは２である。いくつかの態様においてｈは３である。いくつかの態様においてｈは４である。いくつかの態様においてｈは５である。いくつかの態様においてｈは６である。いくつかの態様においてｈは７である。いくつかの態様においてｈは８である。いくつかの態様においてｈは９である。いくつかの態様においてｈは１０である。いくつかの態様においてＲＬ２は置換Ｃ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＲＬ２は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｈ１−であり、式中、ｈ１は１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｈ１は１である。いくつかの態様においてｈ１は２である。いくつかの態様においてｈ１は３である。いくつかの態様においてｈ１は４である。いくつかの態様においてｈ１は５である。いくつかの態様においてｈ１は６である。いくつかの態様においてｈ１は７である。いくつかの態様においてｈ１は８である。いくつかの態様においてｈ１は９である。いくつかの態様においてｈ１は１０である。
【０２３３】
いくつかの態様においてＬ１およびＬ２のそれぞれは同じである。いくつかの態様においてＬ１およびＬ２のそれぞれは異なる。
基Ｒａ
【０２３４】
上で一般的に定義されている通り、Ｒａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、アシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。
【０２３５】
いくつかの態様においてＲａ１は水素である。いくつかの態様においてＲａ１はアシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲａ１はアシルまたは任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。
【０２３６】
いくつかの態様においてＲａ１は置換もしくは非置換アルキルである。いくつかの態様においてＲａ１は置換もしくは非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ１は非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ１はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０２３７】
いくつかの態様においてＲａ１はアシルである。いくつかの態様においてＲａ１はアセチル（−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）である。
【０２３８】
いくつかの態様において、Ｒａ１はアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲａ１はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０２３９】
いくつかの態様においてＲａ２は水素である。いくつかの態様においてＲａ２はアシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲａ２はアシルまたは任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。
【０２４０】
いくつかの態様においてＲａ２は置換もしくは非置換アルキルである。いくつかの態様においてＲａ２は置換もしくは非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ２は非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ２はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０２４１】
いくつかの態様においてＲａ２はアシルである。いくつかの態様においてＲａ２はアセチル（−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）である。
【０２４２】
いくつかの態様においてＲａ２はアミノ保護基である。いくつかの態様において、Ｒａ２はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０２４３】
いくつかの態様においてＲａ３は水素である。いくつかの態様においてＲａ３はアシル、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲａ３はアシルまたは任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。
【０２４４】
いくつかの態様においてＲａ３は置換もしくは非置換アルキルである。いくつかの態様においてＲａ３は置換もしくは非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ３は非置換Ｃ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲａ３はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０２４５】
いくつかの態様においてＲａ３はアシルである。いくつかの態様においてＲａ３はアセチル（−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）である。
【０２４６】
いくつかの態様においてＲａ３はアミノ保護基である。いくつかの態様において、Ｒａ３はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０２４７】
いくつかの態様において、Ｒａ１およびＲａ２のそれぞれは独立して水素、Ｃ１−６アルキル（例えばメチル）、またはアシルである。いくつかの態様においてＲａ１およびＲａ２のそれぞれは水素である。
【０２４８】
いくつかの態様においてＲａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル（例えばメチル）、またはアシルである。いくつかの態様においてＲａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素、メチル、またはアセチルである。いくつかの態様においてＲａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは独立して水素またはメチルである。いくつかの態様においてＲａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれは水素である。いくつかの態様においてＲａ１、Ｒａ２、およびＲａ３のそれぞれはメチルである。
基
【化６６】
2016523241.tif 000073
、Ｒｃ、およびｑ
【０２４９】
上で一般的に定義されている通り、
【化６７】
2016523241.tif 000074
のそれぞれは独立して単結合、二重結合、または三重結合を表す。いくつかの態様において、
【化６８】
2016523241.tif 000075
の少なくとも１つは単結合である。いくつかの態様において、
【化６９】
2016523241.tif 000076
のそれぞれは単結合を表す。いくつかの態様において、
【化７０】
2016523241.tif 000077
の少なくとも１つは二重結合である。いくつかの態様において、
【化７１】
2016523241.tif 000078
のそれぞれは二重結合を表す。
【０２５０】
上で一般的に定義されている通り、Ｒｃ１、Ｒｃ２、Ｒｃ３、Ｒｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロ、またはニトロである。
【０２５１】
上で一般的に定義されている通り、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは独立して０、１、または２である。
【０２５２】
いくつかの態様においてｑ１、ｑ２、およびｑ３のそれぞれは０であり、したがってＲｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３のそれぞれは不在であり、非置換架橋を提供する。いくつかの態様においてｑ１、ｑ２、およびｑ３の少なくとも１つは１であり、したがってＲｃ１、Ｒｃ２、およびＲｃ３の少なくとも１つは非水素置換基である。
【０２５３】
いくつかの態様において、ｑ４、ｑ５、およびｑ６のそれぞれは０であり、したがってＲｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６のそれぞれは不在であり、非置換末端不飽和部分を提供する。いくつかの態様においてｑ４、ｑ５、およびｑ６の少なくとも１つは１であり、したがってＲｃ４、Ｒｃ５、およびＲｃ６の少なくとも１つは非水素置換基である。
［ＸＡＡ］、ｓ、およびｔ
【０２５４】
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ−１）、および（ＩＩ−２）について上で一般的に定義されている通り、ＸＡＡのそれぞれは独立して天然アミノ酸または非天然アミノ酸、すなわち式
【化７２】
2016523241.tif 000079
であり、式中、ＲおよびＲ’のそれぞれは独立して水素、置換および非置換脂肪族、置換および非置換ヘテロ脂肪族、置換および非置換アリール、置換および非置換ヘテロアリールからなる群から選択され、Ｒａは水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、またはアミノ保護基である。いくつかの態様において、ＸＡＡのそれぞれは式
【化７３】
2016523241.tif 000080
のα−アミノ酸である。
【０２５５】
いくつかの態様においてＲａはアミノ保護基である。いくつかの態様においてＲａは水素である。いくつかの態様においてＲａは−ＣＨ３である。いくつかの態様においてＲａはアセチルである。
【０２５６】
いくつかの態様において、ＲおよびＲ’は表１または２に挙げられている基である。例えば、いくつかの態様において、ＸＡＡのそれぞれは独立して天然アミノ酸（例えば表１に挙げられている天然α−アミノ酸または天然β−アミノ酸、例えばβ−アラニンから選択される）または非天然アミノ酸（例えば表２に挙げられている非天然α−アミノ酸から選択される）である。いくつかの態様において、ＸＡＡのそれぞれは独立して天然α−アミノ酸または天然β−アミノ酸である。いくつかの態様において、ＸＡＡのそれぞれは、独立して表１に挙げられている天然α−アミノ酸である。いくつかの態様において、ＸＡＡのそれぞれは、Ｓ、Ｗ、Ｌ、Ｎ、Ｖ、Ｋ、Ｅ、Ｆ、Ｒ、Ｄ、Ｔ、Ｐ、Ａ、Ｙ、Ｈ、およびＱからなる群から独立して選択される天然α−アミノ酸である。いくつかの態様において、ＸＡＡの少なくとも１つはＷである。いくつかの態様において、ＸＡＡの少なくとも１つは非天然アミノ酸、例えば表２に挙げられている非天然α−アミノ酸である。
【０２５７】
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ−１）、および（ＩＩ−２）について上で一般的に定義されている通り、ｓおよびｔは、それぞれＮ末端およびＣ末端のアミノ酸ＸＡＡの数を定義している。いくつかの態様において、ｓは０または１〜５０、１〜４０、１〜３０、１〜２０、１〜１０、もしくは１〜５（例えば１、２、３、４、または５）の整数である。いくつかの態様においてｓは０、１、２、３、または４である。いくつかの態様においてｔは０または１〜５０、１〜４０、１〜３０、１〜２０、１〜１０、もしくは１〜５（例えば１、２、３、４、または５）の整数である。いくつかの態様においてｔは０、１、２、３、または４である。
【０２５８】
いくつかの態様においてｓは０または１〜４０の整数であり、ｔは０または１〜４０の整数である。いくつかの態様においてｓは０または１〜３０の整数であり、ｔは０または１〜３０の整数である。いくつかの態様においてｓは０または１〜２０の整数であり、ｔは０または１〜２０の整数である。いくつかの態様においてｓは０または１〜１０の整数であり、ｔは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｓおよびｔは両方とも０である。
式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、および（ｉｖ）
【０２５９】
上で一般的に定義されている通り、式（ＩＩ−１）または（ＩＩ−２）の前駆体ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）の少なくとも２つのアミノ酸部分と任意に式（ｉｖ）の１つのアミノ酸とをポリペプチド配列の一部として含み、
【化７４】
2016523241.tif 000081
これは、ＲＣＭ触媒による前駆体ポリペプチドの処理によって、式（ｉ）のステープルを含む式（Ｉ−１）もしくは（ＩＩ−２）のポリペプチド、
【化７５】
2016523241.tif 000082
および／または式（ｉｉ）の複数のステープル（「ステッチ」）を含むポリペプチドを提供する。
【化７６】
2016523241.tif 000083
【０２６０】
式（ｉｉｉ）および（ｉｖ）のいくつかの態様において、ｑ４、ｑ５、およびｑ６は０であり、式（ｉｉｉ−ａ）および（ｉｖ−ａ）のアミノ酸が提供される。
【化７７】
2016523241.tif 000084
【０２６１】
式（ｉｉｉ−ａ）のいくつかの態様において、Ｒ２ａはメチルであり、式（ｉｉｉ−ｂ）のアミノ酸が提供される。
【化７８】
2016523241.tif 000085
【０２６２】
式（ｉｉｉ−ｂ）のいくつかの態様において、Ｒ３ａは式（Ｇ−１）であり、
【化７９】
2016523241.tif 000086
式（ｉｉｉ−ｃ）のアミノ酸が提供され、
【化８０】
2016523241.tif 000087
式中、ｊ、Ｙ１、Ｌ１、ＲＡ、ＲＢ、およびＲａ１は本願において定義されている通りである。いくつかの態様においてＹ１およびＬ１は両方とも結合である。いくつかの態様においてＹ１は−ＣＲ５Ｒ６−であり、Ｌ１は結合である。いくつかの態様においてＹ１は−ＮＲ１−であり、Ｌ１は結合である。いくつかの態様においてＹ１は−ＣＲ５Ｒ６−であり、Ｌ１は任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＹ１は−ＮＲ１−であり、Ｌ１は任意に置換されていてもよいＣ１−１０アルキレンである。いくつかの態様においてＹ１は−ＣＲ５Ｒ６−であり、Ｌ１は−（ＣＨ２）ｇ−であり、式中、ｇは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてＹ１は−ＮＲ１−であり、Ｌ１は−（ＣＨ２）ｇ−であり、式中、ｇは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてＹ１は−ＣＲ５Ｒ６−であり、Ｌ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｇ１−であり、式中、ｇは０または１〜１０の整数である。いくつかの態様においてＹ１は−ＮＲ１−であり、Ｌ１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｇ１−であり、式中、ｇ１は０または１〜１０の整数である。
【０２６３】
式（ｉｖ−ａ）のいくつかの態様において、ｙおよびｚのそれぞれは１である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは２である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは３である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは４である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは５である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは６である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは７である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは８である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは９である。いくつかの態様においてｙおよびｚのそれぞれは１０である。
【０２６４】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸は、
【化８１】
2016523241.tif 000088
からなる群から選択される。
【０２６５】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＡ５である。いくつかの態様において式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＡ８である。
【０２６６】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸のα炭素は（Ｓ）立体配置である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸のα炭素は（Ｒ）立体配置である。
【０２６７】
いくつかの態様において式（ｉｉｉ）のアミノ酸は以下の式の１つである。
【化８２】
2016523241.tif 000089
【０２６８】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＳ−Ａ５（本願においてはＳ５ともまた言われる）である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＳ−Ａ８（本願においてはＳ８ともまた言われる）である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＲ−Ａ５ (本願においてはＲ５ともまた言われる)である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＲ−Ａ８(本願においてはＲ８ともまた言われる) である。
【０２６９】
式（ｉｖ）の例示的なアミノ酸は、
【化８３】
2016523241.tif 000090
を含むが、これに限定されない。
【０２７０】
いくつかの態様において、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。
【０２７１】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＡ５であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＳ５であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＲ５であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。
【０２７２】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＡ８であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＳ８であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の少なくとも１つはＲ８であり、式（ｉｖ）のアミノ酸のそれぞれはＢ５である。
【０２７３】
ステープルドまたはステッチドポリペプチドは式（ｉｉｉ）または（ｉｖ）のポリペプチドから調製され得、
（ａ）式（ｉｉｉ）のアミノ酸、
【化８４】
2016523241.tif 000091
またはその塩を提供するステップと、
（ｂ）式（ｖ）のアミノ酸、
【化８５】
2016523241.tif 000092
またはその塩を提供するステップと、
（ｃ）式（ｉｉｉ）および（ｖ）のアミノ酸とαＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントとをカップリングするステップと、
を含む。
【０２７４】
いくつかの態様において、方法は、
（ｄ）式（ｉｖ−ａ）のビスアミノ酸を提供するステップと、
【化８６】
2016523241.tif 000093
（ｅ）式（ｉｉｉ）、（ｖ）、および（ｉｖ−ａ）のアミノ酸とαＣＴポリペプチドの少なくとも１つのセグメントとをカップリングするステップと、
をさらに含む。
【０２７５】
いくつかの態様において、（ｃ）または（ｅ）のカップリングステップは閉環メタセシスである。いくつかの態様においてＲＯＭは触媒の存在下で行われる。いくつかの態様においてＲＯＭ触媒はルテニウム触媒である。
【０２７６】
本願において用いられる場合、αＣＴポリペプチドのセグメントは単一のアミノ酸であるか、または少なくとも１つのアミノ酸を含むアミノ酸配列であり得る。いくつかの態様において、αＣＴポリペプチドのセグメントはＴＦＥＤ、ＬＨＮＶＶＦ、ＦＥＤ、ＬＨＮＶＶＦＶ、ＴＦＥＤ、ＬＨＮ、ＶＦＶ、ＴＦＥ、ＹＬＨＮＶＶＦＶ、ＴＦＥＤＹＬＨＮ、ＶＦＶ、ＴＦＥＤＹＬＨＮＡＡＦＶ、ＳＳＦＲＫＴＦＥＤ、ＶＦＶＷ、Ｓ、ＦＲＫＴＦＥ、ＹＬＨＮＶＶＦＶＷ、ＳＳ、ＲＫＴＦＥＤ、ＬＨＮＶＶＦＶＷ、ＳＦＲ、ＴＦＥＤＹＬＨＮＶＶＦＶ、Ｗ、ＳＳＦＲＫＴＦＥＤ、ＦＲＫＴＦＥ、ＹＬＨＮＶＶＦＶ、およびＬＨＮＶＶＦＶＷからなる群から選択される。いくつかの態様において、αＣＴポリペプチドのセグメントの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つ以上は別の天然または非天然アミノ酸に変異している。いくつかの態様において、αＣＴポリペプチドのセグメントの改変は、（ａ）ＩＲと接触するペプチドの面上の残基の置換、（ｂ）ＮもしくはＣ末端のいずれかにおける残基の欠失、（ｃ）Ｎおよび／もしくはＣ末端のいずれかにおける残基の挿入、（ｄ）逆の配列およびキラリティーのペプチドを含むレトロ−インベルソ配列改変（Jameson et al., Nature, 368: 744-746, 1994、Brady et al., Nature, 368: 692-693, 1994）（Ｄ−エナンチオマーを逆向きの合成と組み合わせることの最終的な結果は、各アミド結合中のカルボニルおよびアミノ基の位置が交換される一方で、各α炭素における側鎖基の位置は保存されるということである。例えば、ペプチドモデルが配列ＡＢＣを有するＬ−アミノ酸から形成されているペプチドである場合には、Ｄ−アミノ酸から形成されたレトロ−インベルソペプチドアナログは配列ＣＢＡを有するであろう）、または（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つの組み合わせを含むが、これに限定されない。例示的な態様において、αＣＴ系ポリペプチドは合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、または１０個まで、または１１個まで、または１２個までのアミノ酸改変をネイティブなαＣＴ配列に対して含み得る（例えば保存的なまたは非保存的な置換）。例示的な態様において、αＣＴ系ポリペプチドは合計１つ、２つまで、３つまで、４つまで、５つまで、６つまで、７つまで、８つまで、９つまで、または１０個まで、または１１個まで、１２個まで、１３個まで、１４個まで、１５個まで、１６個まで、１７個まで、１８個まで、１９個まで、または２０個までのアミノ酸改変をネイティブなαＣＴ配列に対して含み得る（例えば保存的なまたは非保存的な置換）。いくつかの態様においてαＣＴセグメントは結合ポケットのαＣＴ配列の残基７０４〜７１５である。いくつかの態様において、αＣＴセグメントは結合ポケットのαＣＴ配列の改変された残基７０４〜７１５である。
【０２７７】
本願において用いられる場合、保存的な置換は、疎水性アミノ酸を疎水性アミノ酸によって、嵩高いアミノ酸によって嵩高いアミノ酸を、親水性アミノ酸によって親水性アミノ酸を置換することを含むが、これに限定されない。非保存的な置換は、活性のために要求されない箇所に天然に存在しないアミノ酸を挿入することを含む。
【０２７８】
種々の生化学的および構造的な手法が、本発明のポリペプチド中のオレフィン部分を有する非天然アミノ酸による置換のための所望の部位を選択するために使用され得る。ポリペプチド鎖のいずれかの位置が非天然（non-naturally）アミノ酸を組み込むための選択にとって好適であり、選択はいずれかの特定の所望の目的のためにまたは特定の所望の目的のためでなく、合理的設計に基づき得るかまたはランダムな選択により得るということは、当業者には直ちに明白である。所望の部位の選択は、いずれかの所望の特性もしくは活性を有するαＣＴアナログ（アゴニスト、スーパーアゴニスト、インバースアゴニスト、アンタゴニスト、受容体結合調節剤、受容体活性調節剤、二量体または多量体形成を含むが、これに限定されない）、ネイティブな分子と比較して活性または特性に変化を有さないαＣＴアナログを生成するため、または可溶性、凝集、もしくは安定性などのポリペプチドのいずれかの物理的もしくは化学的特性を操作するためであり得る。例えば、本発明のポリペプチドの生物活性のために要求されるポリペプチドの箇所は、当分野において公知の点変異分析、アラニンスキャニング、飽和変異導入および生物活性のスクリーニング、またはホモログスキャニング法を用いて同定され得る。生物活性にとって極めて重要である残基、医薬的な安定性に関与する残基、抗体エピトープ、または受容体もしくはヘパリン結合残基が変異し得る。参照によって本願に組み込まれる米国特許第５，５８０，７２３、５，８３４，２５０、６，０１３，４７８、６，４２８，９５４、および６，４５１，５６１号は、標的物質に対するポリペプチドの活性に影響する活性ドメインを同定することによる、ポリペプチドの構造および機能の体系的分析のための方法を記載している。アラニンまたはホモログスキャニング変異導入によって生物活性に極めて重要であるとして同定されたものよりも他の残基は、天然にコードされないアミノ酸による置換のための良好な候補であり得るが、これはポリペプチドに求められている所望の活性に依存する。その代わりには、生物活性にとって極めて重要であるとして同定された部位もまた非天然アミノ酸による置換のための良好な候補であり得るが、これはポリペプチドに関して求められている所望の活性に再び依存する。別の選択肢は、単純に非天然アミノ酸によるポリペプチド鎖の各位置の順次置換をなし、ポリペプチドの活性に及ぼす効果を観察することであろう。いずれかのポリペプチド中への非天然アミノ酸による置換のための位置を選択するためのいずれかの手段、技術、または方法が本発明への使用にとって好適であるということは、当業者には直ちに明白である。
【０２７９】
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ−１）、または（ＩＩ−２）のポリペプチドは、コンビナトリアル合成法と所望の活性（例えばインスリン受容体結合）についてのスクリーニングとによって調製され得る。例えば、標的蛋白質（例えばインスリンまたはインスリン受容体）と蛍光色素とを有するビーズが本発明のポリペプチドと混合される。このポリペプチドと相互作用するビーズが次に単離され、構造／配列決定のために同定される。
【０２８０】
式（Ｉ−１）、（Ｉ−２）、（ＩＩ−１）、または（ＩＩ−２）のポリペプチドは、標的蛋白質（例えばインスリン受容体）への結合について（例えばファージディスプレイを用いて）スクリーニングされ得る。ファージディスプレイは、治療上の重要性がある標的に高い特異性および親和性で結合する薬物候補を急速に同定することが当業者に周知である（Bratkovic et al., Appl. Biochem. Biotechnol., 2005, 127(2): 125-131、Bratkovic T et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 2005, 332(3): 897-903、Bratkovic T et al., J. Lipid Res., 2005, 46(7): 1512-1516）。
【０２８１】
いくつかの態様において、ＸＡ１およびＸＡ１４は式（Ｉ−１）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＡ１、ＸＡ２、ＸＡ１３、およびＸＡ１４は式（Ｉ−１）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＡ１、ＸＡ２、ＸＡ３、ＸＡ４、ＸＡ５、ＸＡ１０、ＸＡ１１、ＸＡ１２、ΧＡ１３、およびＸＡ１４は式（Ｉ−１）のポリペプチド中に不在である。
【０２８２】
いくつかの態様において、ＸＢ１およびＸＢ１４は式（ＩＩ）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＢ１、ＸＢ２、ΧＢ１３、およびＸＢ１４は式（ＩＩ）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＢ１、ＸＢ２、ＸＢ３、ＸＢ４、ＸＢ５、ＸＢ１０、ＸＢ１１、ＸＢ１２、ＸＢ１３、およびＸＢ１４は式（ＩＩ−１）のポリペプチド中に不在である。
【０２８３】
式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ２、ＸＡ５、ＸＡ６、ＸＡ１０、またはＸＡ１３はいずれかの天然または非天然アミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ２、ＸＡ５、ＸＡ６、ＸＡ１０、またはＸＡ１３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ２はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ２はＴである。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ５はＤである。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ６はいずれかの天然に存在する アミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ６はＹである。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ１０はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ１０はＶである。式（Ｉ−１）のいくつかの態様において、ＸＡ１３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。いくつかの態様においてΧＡ１１はＶである。
【０２８４】
式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ２、ＸＢ５、ＸＢ６、ＸＢ１０、またはＸＢ１３はいずれかの天然または非天然アミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ２、ＸＢ５、ＸＢ６、ＸＢ１０、またはＸＢ１３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ２はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様においてＸＢ２はＴである。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様においてＸＢ５はＤである。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ６はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様においてＸＢ６はＹである。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ１０はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様においてＸＢ１０はＶである。式（ＩＩ−１）のいくつかの態様において、ＸＢ１３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。いくつかの態様においてＸＢ１３はＶである。
【０２８５】
いくつかの態様において、ＸＣ１およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ１９、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ２、ＸＣ１９、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ１１、ＸＣ１５、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ３、ＸＣ１０、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ４、ＸＣ１１、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＣ１、ＸＣ２、ＸＣ６、およびＸＣ２０は式（Ｉ−２）のポリペプチド中に不在である。
【０２８６】
いくつかの態様において、ＸＤ１およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ１９、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ２、ＸＤ１９、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ１１、ＸＤ１５、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ３、ＸＤ１０、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ４、ＸＤ１１、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。いくつかの態様において、ＸＤ１、ＸＤ２、ＸＤ６、およびＸＤ２０は式（ＩＩ−２）のポリペプチド中に不在である。
【０２８７】
式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ２、ＸＣ３、ＸＣ４、ＸＣ６、ＸＣ１０、ＸＣ１１、またはＸＣ１５はいずれかの天然または非天然アミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ２、ＸＣ３、ＸＣ４、ＸＣ６、ＸＣ１０、ＸＣ１１、またはＸＣ１５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ２はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ２はＳである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ３はＳである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ４はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ４はＦである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ６はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ６はＫである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ１０はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ１０はＤである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ１１はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ１１はＹである。式（Ｉ−２）のいくつかの態様において、ＸＣ１５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（Ｉ−２）のいくつかの態様においてＸＣ１５はＶまたはＡである。
【０２８８】
式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ２、ＸＤ３、ＸＤ４、ＸＤ６、ＸＤ１０、ＸＤ１１、またはＸＤ１５はいずれかの天然または非天然アミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ２、ＸＤ３、ＸＤ４、ＸＤ６、ＸＤ１０、ＸＤ１１、またはＸＤ１５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ２はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ２はＳである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ２はＴである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ３はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ３はＳである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ３はＴである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ４はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ４はＦである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ４はＹである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ４はＷである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ６はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ６はＫである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ６はＲである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ６はＨである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ１０はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１０はＤである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１０はＥである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ１１はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１１はＹである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１１はＦである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１１はＷである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様において、ＸＤ１５はいずれかの天然に存在するアミノ酸である。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１５はＶである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１５はＡである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１５はＩである。式（ＩＩ−２）のいくつかの態様においてＸＤ１５はＬである。
【０２８９】
いくつかの態様において、本発明のポリペプチドのステープリング後に、方法は、架橋されたペプチドの不飽和ステープルまたはステッチの追加の合成改変をさらに含む。ステープルドまたはステッチドポリペプチドに対するいずれかの化学的または生物学的改変がなされ得る。いくつかの態様において、改変はポリペプチドのＡｌｌｏｃ部分に対して行われる。いくつかの態様において、改変はステープルドペプチドのＡｌｌｏｃ部分からＣＯ２を逆挿入する。いくつかの態様において、ＣＯ２逆挿入はパラジウム触媒の存在下で行われる。いくつかの態様において、ＣＯ２逆挿入はＰｄ（ＰＰｈ３）４の存在下で行われる。いくつかの態様において、改変はステープルまたはステッチのアミド基のアルキル化（alkyation）を含む。
【０２９０】
いくつかの態様において、ステープルドまたはステッチドペプチドの追加の改変は、メタセシス反応から提供された二重結合の還元、酸化、および求核または求電子付加を含み、合成的に改変されたポリペプチドを提供する。他の改変は、ステープルドポリペプチドの複合体化、またはステープルドポリペプチドを治療活性剤、標識、もしくは診断剤によって、ステープルドポリペプチドの骨組みのどこかにおいて（例えばステープルドポリペプチドのＮ末端、ステープルドポリペプチドのＣ末端、ステープルドポリペプチドのアミノ酸側鎖、または１つもしくは２つ以上の改変されたもしくは未改変のステープルド部位（すなわちステープル）などにおいて）合成的に改変することを含み得る。かかる改変は、細胞、組織、または臓器へのペプチドまたは治療活性剤の送達に有用であり得る。かかる改変は、いくつかの態様において、細胞または組織の特定の種類を標的化することを可能にし得る。
【０２９１】
ポリペプチドのステープルまたはステッチは追加の合成改変（単数または複数）をさらに含み得る。いずれかの化学的または生物学的改変がなされ得る。いくつかの態様においてステープルまたはステッチはＡｌｌｏｃ基を有する。いくつかの態様において、改変はポリペプチドのＡｌｌｏｃ部分に対して行われる。いくつかの態様において、改変はステープルドペプチドのＡｌｌｏｃ部分からＣＯ２を逆挿入する。いくつかの態様において、ＣＯ２逆挿入はパラジウム触媒の存在下で行われる。いくつかの態様において、ＣＯ２逆挿入はＰｄ（ＰＰｈ３）４の存在下で行われる。いくつかの態様において、かかる改変は、架橋のメタセシス反応から提供された二重結合の還元、酸化、および求核または求電子付加を含み、合成的に改変されたステープルドまたはステッチドポリペプチドを提供する。当業者には当然のことながら、かかる変換反応を促進するためには非常に多様な条件が使用され得、それゆえに非常に多様な条件が見込まれる。一般的に、March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, M.B. Smith and J. March, 5th Edition, John Wiley & Sons, 2001、Advanced Organic Chemistry, Part B: Reactions and Synthesis, Carey and Sundberg, 3rd Edition, Plenum Press, New York, 1993、およびComprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, 2nd Edition, John Wiley & Sons, 1999参照。これらのそれぞれの全体はここで参照によって本願に組み込まれる。他の態様において、ポリペプチドのステープル（単数または複数）はさらに改変はされない。
【０２９２】
いくつかの態様において、ステープルまたはステッチは二重結合を有する。いくつかの態様において、改変はステープルドまたはステッチドポリペプチドの二重結合に対して行われる。例示的な条件は、二重結合に対して反応性のいずれかの試薬であり得る。いくつかの態様において試薬は例えば水素化、オスミル化（osmylation）、ヒドロキシル化（モノまたはジ）、アミノ化、ハロゲン化、環化付加（例えば, シクロプロパン化、アジリジン化、エポキシ化）、オキシ水銀化、および／またはヒドロホウ素化（hydroboronation）反応などによって二重結合と反応して、官能化単結合を提供することが可能である。当業者にはごく当然のことながら、これらの上に記載されている変換反応は、特定の安定化された構造と所望の生物学的相互作用と適合性の官能性を導入するであろう。かかる官能性は水素、置換もしくは非置換脂肪族、置換もしくは非置換ヘテロ脂肪族、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、アシル、置換もしくは非置換ヒドロキシル、置換もしくは非置換アミノ、置換もしくは非置換チオール、ハロ、シアノ、ニトロ、アジド、イミノ、オキソ、およびチオオキソを含むが、これに限定されない。
【０２９３】
他の改変は、ポリペプチドの骨組みのどこかの（例えば、ポリペプチドのＮ末端、ポリペプチドのＣ末端、ポリペプチドのアミノ酸側鎖、または１つもしくは２つ以上の改変されたもしくは未改変のステープルド部位などの）、生物活性剤、標識、標的化部分、診断剤とのステープルドもしくはステッチドポリペプチドまたは合成的に改変されたステープルドもしくはステッチドポリペプチドの複合体化をさらに含み得る。かかる改変は、細胞、組織、または臓器へのペプチドまたは生物活性剤の送達に有用であり得る。かかる改変は、細胞または組織の特定の種類への安定化されたポリペプチドの標的化を可能にし得る。ステープルドポリペプチドとの剤（例えば、標識、診断剤、生物活性剤、標的化部分）の複合体化は、種々の異なるやり方で達成され得る。剤は、ポリペプチドとステープリングの部位において、またはポリペプチド（polypetide）のＮ末端もしくはＣ末端と、直接的にまたは間接的に共有結合的に複合体化され得る。その代わりに、剤は、ポリペプチドとステープリングの部位において、またはポリペプチド（polypetide）のＮ末端もしくはＣ末端またはポリペプチドのいずれかの他の部位と、直接的にまたは間接的に非共有結合的に複合体化され得る。間接的な共有結合的な複合体化は１つまたは２つ以上の共有結合的な結合による。間接的な非共有結合的な複合体化は１つまたは２つ以上の非共有結合的な相互作用による。複合体化は非共有結合的および共有結合的な相互作用の組み合わせをもまた介し得る。剤はリンカーを介してもまたポリペプチドと複合体化され得る。本発明のポリペプチドとの生物活性剤および／または診断剤の複合体化には共有結合的な結合のいずれかの数が用いられ得る。かかる結合はアミド結合、エステル結合、ジスルフィド結合、炭素−炭素結合、カルバメート結合、カーボネート結合、尿素結合、ヒドラジド結合、および同様のものを含む。いくつかの態様において、結合は生理学的条件下で切断可能である（例えば、酵素的に切断可能、高または低ｐＨ、熱、光、超音波、ｘ線などによって切断可能）。しかしながら、いくつかの態様において結合は切断可能でない。
【０２９４】
なおその上に、ステープルドまたはステッチドポリペプチドはライゲーションされ得、例えば直接的にまたは間接的にのいずれかによって蛋白質（例えば組み換え蛋白質）と共有結合的に複合体化され得、二機能性ポリペプチドを提供する。例えばＰＣＴ／ＵＳ２００９／００４２６０参照。例えば、αヘリックスなどのポリペプチドの１つのドメインが、ＩＲに結合する標的化部分として作用する。標的化ドメインは、ＩＲのごく近くに連れて来られるかまたは別の生体分子をＩＲのごく近くに動員するペプチドまたは蛋白質と複合体化される。
【０２９５】
いくつかの態様において追加の改変はＰＥＧ化である。ステープルドまたはステッチドポリペプチドのＰＥＧ化は、当分野において公知のＰＥＧ化反応のいずれかを用いて行われ得る。かかる反応は例えば以下の参照に記載されている。Francis et al., (1992), Focus on Growth Factors 3: 4-10、欧州特許第０１５４３１６および０４０１３８４号、ならびに米国特許第４，１７９，３３７号。例えば、ＰＥＧ化は、本願に記載されている反応性ポリエチレングリコール分子（または同類の反応性水可溶性ポリマー）を用いるアシル化反応またはアルキル化反応によって行われ得る。アシル化反応のためには、選択されたポリマーは単一の反応性エステル基を有するべきである。還元的アルキル化のためには、選択されたポリマーは単一の反応性アルデヒド基を有するべきである。反応性アルデヒドは、例えばポリエチレングリコールプロピオンアルデヒド（これは水安定性である）またはそのモノＣ１−１０アルコキシもしくはアリールオキシ誘導体である（例えば米国特許第５，２５２，７１４号参照）。
【０２９６】
いくつかの態様において、ステップ（ｃ）または（ｅ）に用いられるα−アミノ酸は天然または非天然アミノ酸である。いくつかの態様において、ステップ（ｃ）または（ｅ）に用いられるα−アミノ酸は独立してＧ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｍ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｃ、Ｙ、Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、Ｒ、およびＨからなる群から選択される。いくつかの態様において、ステップ（ｃ）または（ｅ）に用いられるα−アミノ酸は独立してＴ、Ｆ、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、Ｎ、Ｖ、Ｖ、Ｆ、およびＶから選択される。
【０２９７】
ステープルドまたはステッチドペプチドを調製する一般的な方法および追加改変は、米国特許第７，１９２，７１３、７，７２３，４６９、７，７８６，０７２号、米国特許出願公開第２０１０−０１８４６４５、２０１０−０１６８３８８、２０１０−００８１６１１、２００９−０１７６９６４、２００９−０１４９６３０、および２００６−０００８８４８号、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１０／０１１３１３、ＷＯ２００８／１２１７６７、ＷＯ２００８／０９５０６３、ＷＯ２００８／０６１１９２、およびＷＯ２００５／０４４８３９号、さらにはＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０２５５４４号に記載されており、これらの全ては参照によって本願に組み込まれる。
【０２９８】
式（ｉ）および（ｉｉ）のいくつかの態様において、ｑ１、ｑ２、およびｑ３は０であり、式（ｉ−ａ）および（ｉｉ−ａ）のアミノ酸が提供される。
【化８７】
2016523241.tif 000094
【０２９９】
式（ｉ−ａ）または（ｉｉ−ａ）のいくつかの態様において、Ｒ２ａおよびＲ２ｂはメチルであり、式（ｉ−ｂ）または（ｉｉ−ｂ）のアミノ酸が提供される。
【化８８】
2016523241.tif 000095
【０３００】
式（ｉ−ｂ）のいくつかの態様においてＲ３ａは式（Ｇ−１）であり、
【化８９】
2016523241.tif 000096
Ｒ３ｂは式（Ｇ−６）である。
【化９０】
2016523241.tif 000097
式（ｉ−ｂ）のいくつかの態様において、Ｒ３ａは式（Ｇ−１）であり、Ｒ３ｂは式（Ｇ−６）であり、Ｙ１、Ｌ１、Ｙ２、およびＬ２は結合であり、
【化９１】
2016523241.tif 000098
は二重結合にあたり、式（ｉ−ｃ）のステープルが提供され、
【化９２】
2016523241.tif 000099
式中、ｊおよびｋは本願において定義されている通りである。いくつかの態様において、ｊおよびｋは両方とも１である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも２である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも３である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも４である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも５である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも６である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも７である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも８である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも９である。いくつかの態様においてｊおよびｋは両方とも１０である。ｊおよびｋが両方とも３であるときには、アミノ酸はステープルドＡ５−Ａ５と言われる。ｊおよびｋが両方とも６であるときには、アミノ酸はステープルドＡ８−Ａ８と言われる。ｊが３でありｋが６であるときには、アミノ酸はステープルドＡ５−Ａ８と言われる。ｊが６でありｋが３であるときには、アミノ酸はステープルドＡ８−Ａ５と言われる。
【０３０１】
式（ｉｉ−ｂ）のいくつかの態様において、Ｒ３ａは式（Ｇ−１）であり、
【化９３】
2016523241.tif 000100
Ｒ３ｂは式（Ｇ−６）
【化９４】
2016523241.tif 000101
である。式（ｉｉ−ｂ）のいくつかの態様において、Ｒ３ａは式（Ｇ−１）であり、Ｒ３ｂは式（Ｇ−６）であり、Ｙ１、Ｌ１、Ｙ２、およびＬ２は結合であり、
【化９５】
2016523241.tif 000102
は単または二重結合にあたり、式（ｉｖ−ｃ）のステッチが提供され、
【化９６】
2016523241.tif 000103
式中、ｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは１である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは２である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは３である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは４である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは５である。いくつかの態様においてｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれは６である。ｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれが３であるときには、アミノ酸はステープルドＡ５−Ｂ５−Ａ５と言われる。ｊ、ｋ、ｙ、およびｚのそれぞれが６であるときには、アミノ酸はステープルドＡ８−Ｂ８−Ａ８と言われる。ｊ、ｙ、およびｚのそれぞれが３でありｋが６であるときには、アミノ酸はステープルドＡ５−Ｂ５−Ａ８と言われる。ｊ、ｙ、およびｚのそれぞれが６でありｋが３であるときには、アミノ酸はステープルドＡ８−Ｂ８−Ａ５と言われる。
【０３０２】
いくつかの態様において、式（ｉ）または（ｉｉ）の架橋されたアミノ酸は式（ｉ−ｄ）、（ｉｉ−ｄ）、（ｉ−ｅ）、または（ｉｉ−ｅ）である。
【化９７】
2016523241.tif 000104
【０３０３】
いくつかの態様において、式（ｉｉｉ）のアミノ酸は以下の式、
【化９８】
2016523241.tif 000105
【化９９】
2016523241.tif 000106
【化１００】
2016523241.tif 000107
【化１０１】
2016523241.tif 000108
およびその塩の１つである。
【０３０４】
いくつかの態様において式（ｉｉｉ）のアミノ酸は以下の式の１つである。
【化１０２】
2016523241.tif 000109
【化１０３】
2016523241.tif 000110
【０３０５】
いくつかの態様において式（ｉｖ）のアミノ酸は以下の式の１つである。
【化１０４】
2016523241.tif 000111
Ｐｒｏロック
【０３０６】
いくつかの態様において、本願に記載されている前駆体ポリペプチドは、式（ｉｉｉ）のアミノ酸の代わりにまたはそれに加えて式（ｖｉ）のアミノ酸を含み、
【化１０５】
2016523241.tif 000112
式中、ｐは１または２であり、Ｌ１、Ｒｃ１、およびｑ１は本願において定義されている通りである。
【０３０７】
あるさらなる態様において、式（ｖｉ）のアミノ酸は式（ｖｉ−ａ）または（ｖｉ−ｂ）である。
【化１０６】
2016523241.tif 000113
【０３０８】
いくつかの態様において、式（ｖｉ）および（ｉｉｉ）のアミノ酸を含む前駆体ポリペプチドは、閉環メタセシス触媒との接触によって式（ｖｉ）のステープルドポリペプチドを生じ、
【化１０７】
2016523241.tif 000114
式中、ｐは１または２であり、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ３ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒａ２、Ｒｃ４、ｐ、およびｑ４は本願において定義されている通りである。
【０３０９】
いくつかの態様において、式（ｖｉ）、（ｉｉｉ）、および（ｉｖ）のアミノ酸を含む前駆体ポリペプチドは、閉環メタセシス触媒との接触によって式（ｖｉｉｉ）のステッチドポリペプチドを生じ、
【化１０８】
2016523241.tif 000115
式中、ｐは１または２であり、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２ｂ、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒｃ５、Ｒｃ６、ｑ５、ｑ６、Ｒｃ５、およびＲｃ６は本願において定義されている通りである。
【０３１０】
いくつかの態様において、「ｐｒｏロック」モチーフはポリペプチドのＮ末端に位置する。
インスリンアナログ
【０３１１】
本開示は、インスリンおよびインスリン増感薬αＣＴポリペプチドのモチーフを組み合わせているインスリンアナログをもまた提供する。本願において提供されるインスリンアナログは高い結合親和性をＩＲに対して示し、それによってＩＲの活性立体配座を延ばす。提供されるインスリンアナログは、
（ｉ）本願に記載されているポリペプチドと、
（ｉｉ）インスリンＡ鎖ポリペプチドと、
（ｉｉ）インスリンＢ鎖ポリペプチドと、
を含み、
ポリペプチドはリンカーを介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに連結され、
リンカーは任意に置換されていてもよいアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、または任意に置換されていてもよいヘテロアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−である。
【０３１２】
提供されるインスリンアナログは、当分野において公知の融合したＡ鎖およびＢ鎖を含有するインスリンアナログまたはいずれかの脊椎動物インスリンのアナログであり得る。いくつかの態様において、インスリンアナログは哺乳動物インスリンアナログ、例えばヒト、マウス、げっ歯類、ウシ、馬、またはイヌインスリンアナログである。他の態様において、インスリンアナログはヒツジ、クジラ、ラット、ゾウ、モルモット、またはチンチラインスリンのアナログである。
【０３１３】
いくつかの態様において、提供されるインスリンアナログは野生型ヒトインスリンのものに類似のまたはそれ未満の等電点を有し、それによって中性ｐＨ条件における蛋白質の可溶性を保存する。
【０３１４】
提供されるインスリンアナログは、既存のインスリンアナログ、改変インスリン、または様々な医薬製剤（例えばヒトインスリンに加えて、レギュラーインスリン、ＮＰＨインスリン、レンテインスリン、またはウルトラレンテインスリン）中に存在するいくつもの変化のいずれかをもまた利用し得るということがさらに見込まれる。提供されるインスリンアナログは、臨床的に用いられてはいないが実験的には依然として有用であるヒトインスリンのアナログ（例えばＤＫＰ−インスリン。これは置換ＡｓｐＢ１０、ＬｙｓＢ２８、およびＰｒｏＢ２９またはＡｓｐＢ９置換を含有する）中に存在する置換をもまた含有し得る。しかしながら、本発明はヒトインスリンおよびそのアナログに限定されない。限定しない例として、ブタ、ウシ、馬、およびイヌインスリンなどの動物インスリンにもまたこれらの置換がなされ得るということもまた見込まれる。なおその上に、ヒトおよび動物インスリン間の類似性とヒト糖尿病患者における動物インスリンの歴史とに鑑みて、インスリンの配列の他の小さい改変、とりわけ「保存的な」置換と考えられる置換が導入され得るということもまた見込まれる。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドはヒトインスリンである。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドおよびＢ鎖ポリペプチドはネイティブなヒトインスリンである。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドはＧＩＶＥＱＣＣＡＳＶＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮのアミノ酸配列を含む。いくつかの態様においてインスリンＡ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮを含む。いくつかの態様においてインスリンＢ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＦＶＮＱＨＬＣＧＤＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴを含む。いくつかの態様においてインスリンＢ鎖ポリペプチドはアミノ酸配列ＦＶＮＱＨＬＣＧＤＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＫＰＴを含む。
【０３１５】
いくつかの態様において、提供されるインスリンアナログは、少なくとも１つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに共有結合的に繋がれたインスリンＢ鎖ポリペプチドを有する。いくつかの態様において、提供されるインスリンアナログは、２つのジスルフィド架橋を介してインスリンＡ鎖ポリペプチドに共有結合的に繋がれたインスリンＢ鎖ポリペプチドを有する。
【０３１６】
リンカーは、ステープルドまたはステッチドペプチドおよびインスリンＡ鎖を取り付けるために鎖の各末端に連結官能基を含有する直線状の親水性ポリマー鎖である。いくつかの態様において、リンカーはポリペプチドのＣ末端アミノ酸およびインスリンＡ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸に取り付けられる。いくつかの態様において、インスリンアナログ中のリンカーは任意に置換されていてもよいアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルケニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアルキニレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロシクロアルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいヘテロアリーレン−Ｃ（＝Ｏ）−、任意に置換されていてもよいアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−、または任意に置換されていてもよいヘテロアラルキレン−Ｃ（＝Ｏ）−である。いくつかの態様において、リンカーはポリグリシン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリメタクリルアミド、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシプロピルメタクリレート、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、またはポリオキシアルケンである。いくつかの態様においてリンカーはポリグリシン（polyglcycine）またはポリエチレングリコールである。いくつかの態様において、リンカーは式（Ｌ−１）〜式（Ｌ−３）の１つであり、
【化１０９】
2016523241.tif 000116
式中、
ＲＬＮ１またはＲＬＮ２のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、または窒素保護基であり、
ＲＬｃ１、ＲＬｃ２、ＲＬｃ３、ＲＬｃ４、ＲＬｃ５、およびＲＬｃ６のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、
ａ１、ａ２、ａ３、ｂ１、ｂ２、およびｂ３のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。
【０３１７】
いくつかの態様においてリンカーは式
【化１１０】
2016523241.tif 000117
であり、式中、ＲＬＮ１は水素、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、または窒素保護基であり、ＲＬｃ１およびＲＬｃ２のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、ａ１およびｂ１のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。
【０３１８】
いくつかの態様においてＲＬＮ１は水素である。いくつかの態様において、ＲＬＮ１は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルまたは窒素保護基である。いくつかの態様において、ＲＬＮ１はメチル、エチル、またはプロピルである。いくつかの態様においてＲＬＮ１は窒素保護基であり、窒素保護基はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０３１９】
いくつかの態様において、ＲＬｃ１は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ１は水素である。いくつかの態様において、ＲＬｃ１は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ１は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ１はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３２０】
いくつかの態様において、ＲＬｃ２は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ２は水素である。いくつかの態様において、ＲＬｃ２は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ２は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ２はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３２１】
いくつかの態様においてａ１は１である。いくつかの態様においてａ１は２である。いくつかの態様においてａ１は３である。いくつかの態様においてａ１は４である。いくつかの態様においてａ１は５である。いくつかの態様においてａ１は６である。いくつかの態様においてａ１は７である。いくつかの態様においてａ１は８である。いくつかの態様においてａ１は９である。いくつかの態様においてａ１は１０である。いくつかの態様においてｂ１は１である。いくつかの態様においてｂ１は２である。いくつかの態様においてｂ１は３である。いくつかの態様においてｂ１は４である。いくつかの態様においてｂ１は５である。いくつかの態様においてｂ１は６である。いくつかの態様においてｂ１は７である。いくつかの態様においてｂ１は８である。いくつかの態様においてｂ１は９である。いくつかの態様においてｂ１は１０である。
【０３２２】
いくつかの態様において、リンカーは式
【化１１１】
2016523241.tif 000118
であり、式中、ａ１およびｂ１のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は１である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は２である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は３である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は４である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は５である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は６である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は７である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は８である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は１である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は２である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は３である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は４である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は５である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は６である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は７である。いくつかの態様においてａ１は２であり、ｂ１は８である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は１である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は２である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は３である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は４である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は５である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は６である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は７である。いくつかの態様においてａ１は３であり、ｂ１は８である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は１である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は２である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は３である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は４である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は５である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は６である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は７である。いくつかの態様においてａ１は４であり、ｂ１は８である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は１である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は２である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は３である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は４である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は５である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は６である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は７である。いくつかの態様においてａ１は５であり、ｂ１は８である。いくつかの態様においてａ１は１であり、ｂ１は１、２、３、４、または５である。
【０３２３】
いくつかの態様において、リンカーは式
【化１１２】
2016523241.tif 000119
であり、式中、ＲＬＮ２は水素、任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキル、または窒素保護基であり、ＲＬｃ３およびＲＬｃ４のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、ａ２およびｂ２のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。
【０３２４】
いくつかの態様においてＲＬＮ２は水素である。いくつかの態様においてＲＬＮ２は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルまたは窒素保護基である。いくつかの態様においてＲＬＮ２はメチル、エチル、またはプロピルである。いくつかの態様においてＲＬＮ２は窒素保護基であり、窒素保護基はＴＢＳ、ＴＢＰＳ、Ｂｎ、ＢＯＣ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、トリフルオロアセチル、トリフェニルメチル、またはＴｓである。
【０３２５】
いくつかの態様においてＲＬｃ３は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ３は水素である。いくつかの態様においてＲＬｃ３は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ３は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ３はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３２６】
いくつかの態様においてＲＬｃ４は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ４は水素である。いくつかの態様においてＲＬｃ４は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ４は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ４はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３２７】
いくつかの態様においてａ２は１である。いくつかの態様においてａ２は２である。いくつかの態様においてａ２は３である。いくつかの態様においてａ２は４である。いくつかの態様においてａ２は５である。いくつかの態様においてａ２は６である。いくつかの態様においてａ２は７である。いくつかの態様においてａ２は８である。いくつかの態様においてａ２は９である。いくつかの態様においてａ２は１０である。いくつかの態様においてｂ２は１である。いくつかの態様においてｂ２は２である。いくつかの態様においてｂ２は３である。いくつかの態様においてｂ２は４である。いくつかの態様においてｂ２は５である。いくつかの態様においてｂ２は６である。いくつかの態様においてｂ２は７である。いくつかの態様においてｂ２は８である。いくつかの態様においてｂ２は９である。いくつかの態様においてｂ２は１０である。
【０３２８】
いくつかの態様において、リンカーは、
【化１１３】
2016523241.tif 000120
であり、式中、ａ２およびｂ２のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は１である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は２である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は３である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は４である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は５である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は６である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は７である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は８である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は１である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は２である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は３である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は４である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は５である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は６である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は７である。いくつかの態様においてａ２は２であり、ｂ２は８である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は１である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は２である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は３である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は４である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は５である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は６である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は７である。いくつかの態様においてａ２は３であり、ｂ２は８である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は１である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は２である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は３である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は４である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は５である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は６である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は７である。いくつかの態様においてａ２は４であり、ｂ２は８である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は１である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は２である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は３である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は４である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は５である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は６である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は７である。いくつかの態様においてａ２は５であり、ｂ２は８である。いくつかの態様においてａ２は１であり、ｂ２は１、２、または３である。
【０３２９】
いくつかの態様において、リンカーは、
【化１１４】
2016523241.tif 000121
であり、式中、ＲＬｃ５およびＲＬｃ６のそれぞれは独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロであり、ａ３およびｂ３のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。
【０３３０】
いくつかの態様において、ＲＬｃ５は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ５は水素である。いくつかの態様において、ＲＬｃ５は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ５は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ５はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３３１】
いくつかの態様において、ＲＬｃ６は独立して水素、任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ６は水素である。いくつかの態様において、ＲＬｃ６は任意に置換されていてもよい脂肪族、任意に置換されていてもよいヘテロ脂肪族、任意に置換されていてもよいアリール、任意に置換されていてもよいヘテロアリール、アシル、任意に置換されていてもよいヒドロキシル、任意に置換されていてもよいチオール、任意に置換されていてもよいアミノ、アジド、シアノ、イソシアノ、ハロゲン、またはニトロである。いくつかの態様においてＲＬｃ６は任意に置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。いくつかの態様においてＲＬｃ６はメチル、エチル、またはプロピルである。
【０３３２】
いくつかの態様においてａ３は１である。いくつかの態様においてａ３は２である。いくつかの態様においてａ３は３である。いくつかの態様においてａ３は４である。いくつかの態様においてａ３は５である。いくつかの態様においてａ３は６である。いくつかの態様においてａ３は７である。いくつかの態様においてａ３は８である。いくつかの態様においてａ３は９である。いくつかの態様においてａ３は１０である。いくつかの態様においてｂ３は１である。いくつかの態様においてｂ３は２である。いくつかの態様においてｂ３は３である。いくつかの態様においてｂ３は４である。いくつかの態様においてｂ３は５である。いくつかの態様においてｂ３は６である。いくつかの態様においてｂ３は７である。いくつかの態様においてｂ３は８である。いくつかの態様においてｂ３は９である。いくつかの態様においてｂ３は１０である。
【０３３３】
いくつかの態様において、リンカーは、
【化１１５】
2016523241.tif 000122
であり、式中、ａ３およびｂ３のそれぞれは独立して１〜１０の整数である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は１である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は２である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は３である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は４である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は５である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は６である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は７である。態様において、ａ３は１であり、ｂ３は８である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は１である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は２である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は３である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は４である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は５である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は６である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は７である。いくつかの態様においてａ３は２であり、ｂ３は８である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は１である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は２である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は３である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は４である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は５である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は６である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は７である。いくつかの態様においてａ３は３であり、ｂ３は８である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は１である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は２である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は３である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は４である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は５である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は６である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は７である。いくつかの態様においてａ３は４であり、ｂ３は８である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は１である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は２である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は３である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は４である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は５である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は６である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は７である。いくつかの態様においてａ３は５であり、ｂ３は８である。いくつかの態様においてａ３は１であり、ｂ３は１、２、または３である。
【０３３４】
提供されるインスリンアナログは逐次手法または収束的手法のいずれかによって化学合成によってなされ得る。一般的な逐次合成手法として、本願に記載されているインスリンアナログを調製する方法は、
（ａ）ポリペプチド−リンカー付加体を与えるためにリンカーと本願に記載されているポリペプチドのＣ末端アミノ酸をカップリングするステップと、
（ｂ）ポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体を与えるためにインスリンＡ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸とステップ（ａ）からのポリペプチド−リンカー付加体をカップリングするステップと、
（ｃ）インスリンＢ鎖ポリペプチドのＮ末端アミノ酸とポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体をカップリングするステップと、
を含む。
【０３３５】
例示の逐次合成手法が図７に示されている。ＳＰＰＳ技術を用いてポリペプチド−リンカー付加体を与えるために、式（Ｉ）のステープルドまたはステッチド（stiched）ポリペプチド（すなわち安定化されたαＣＴポリペプチド）のＣ末端アミノ酸がリンカーとカップリングされる。次に、標準的なＳＰＰＳ技術を用いてポリペプチド−リンカー付加体にインスリンＡ鎖が融合する。固体支持体からポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体を切断した後に、ポリペプチド−リンカー−Ａ鎖付加体はフォールディング条件下でインスリンＢ鎖と共にインキュベーションされて、ネイティブなインスリン中に見いだされる３つのジスルフィド架橋を保持するキメラのインスリン／αＣＴ構築物に到達する。この逐次手法は、種々の化学的リンカーを保持するインスリンアナログ（analgoue）のパネルへの単純な経路を提供する。
【０３３６】
別の例示的な逐次手法はシリルクロリド−スルホキシド法である（Akaji, K., Fujino, K., Tatsumi, T. & Kiso, Y. Total synthesis of human insulin by regioselective disulfide formation using the silyl chloride-sulfoxide method. J Am Chem Soc 115, 11384-11392 (1993)）。この戦略においては、３つの異なるオルトゴナルチオール保護基（トリチル、アセトアミドメチル、およびｔｅｒｔ−ブチル）を有するシステインの複数対がＳＰＰＳによってインスリンＡおよびＢ鎖中に導入される。樹脂からのペプチドの切断後に、保護基が連続的に除かれて、部位特異的なジスルフィド結合形成のために一度に一対のチオール基を開放する。
【０３３７】
その代わりには、提供されるインスリンアナログは収束的手法によって合成され得る。一般的な収束的合成手法として、本願に記載されているインスリンアナログを調製する方法は、
（ａ）ポリペプチド−リンカー付加体を与えるためにリンカーと請求項１のポリペプチドのＣ末端アミノ酸をカップリングするステップ、
（ｂ）Ａ鎖−Ｂ鎖付加体を与えるために少なくとも１つのジスルフィド架橋を介してインスリンＢ鎖とインスリンＡ鎖をカップリングするステップ、
（ｃ）ステップ（ｂ）のＡ鎖−Ｂ鎖付加体のＮ末端アミノ酸とステップ（ａ）からのポリペプチド−リンカー付加体をカップリングするステップ、
を含む。
【０３３８】
例示の収束的合成手法が図８に示されている。逐次（sequenital）合成手法を用いて、Ａ鎖のＮ末端に追加のシステインを保持するＡ鎖−Ｂ鎖付加体が合成され、フォールディングされる。ネイティブケミカルライゲーション（ＮＣＬ）が次に用いられ、ステープルドまたはステッチドポリペプチドをＡ鎖−Ｂ鎖付加体のＮ末端アミノ酸とカップリングしてインスリンアナログを提供する。
医薬組成物
【０３３９】
本開示は、本願に記載されている安定化された(ステッチドまたはステープルド) ポリペプチドと任意に医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。本開示は、本願に記載されているインスリンアナログと任意に医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物をもまた提供する。本開示の目的のためには、言い回し「活性成分」は、一般的に本願に記載されている安定化されたポリペプチドを言う。
【０３４０】
本願において提供される医薬組成物の記載は、ヒトへの投与にとって好適である医薬組成物に主として関するが、当業者には当然のことながら、かかる組成物は一般的にいろいろな動物への投与にとって好適である。組成物を様々な動物への投与にとって好適にするためのヒトへの投与にとって好適な医薬組成物の改変は周知であり、通常の獣医薬理学者はせいぜいごく通常の実験によってかかる改変を設計および／または実施し得る。
【０３４１】
本願に記載されている医薬組成物の製剤は、薬理学の分野において公知であるかまたは今後開発されるいずれかの方法によって調製され得る。一般的に、かかる調製方法は、活性成分を担体および／または１つもしくは２つ以上の他の補助的な成分と結びつけるステップと、次に、必要であるおよび／または望ましい場合には、生成物を所望の単一または複数用量単位に成形および／または容器詰めすることとを含む。
【０３４２】
医薬組成物は、バルクで、単一の単位用量として、および／または複数の単一の単位用量として調製、容器詰め、および／または販売され得る。本願において用いられる場合、「単位用量」は、活性成分の所定量を含む医薬組成物の個別的な量である。活性成分の量は、対象に投与されるであろう活性成分の投与量および／またはかかる投与量の便利な画分、例えばかかる投与量の１／２または１／３と一般的には等しい。
【０３４３】
本開示の医薬組成物中における活性成分、医薬的に許容される賦形剤、および／またはいずれかの追加の成分の相対量は、処置される対象の素性、サイズ、および／または状態に依存して、さらに組成物が投与されるべき経路に依存して変わるであろう。例えば、組成物は０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【０３４４】
医薬組成物は医薬的に許容される賦形剤を含み得、これは、本願において用いられる場合には、いずれかおよび全ての溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体基剤、分散または懸濁助剤、界面活性剤、等張化剤、増粘または乳化剤、保存料、固体結合剤、滑剤、および同様のものを、所望の特定の剤形に適するように含む。RemingtonのThe Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro, (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006)は、医薬組成物を製剤するのに用いられる様々な担体およびその調製のための公知技術を開示している。いずれかの従来の担体媒体がある物質またはその誘導体と不適合性である（例えば、いずれかの望ましくない生物学的効果を生成すること、または別様に、医薬組成物のいずれかの他の成分（単数または複数）と有害な様式で相互作用することによる）限りを除いて、その使用は本開示の範囲内であると考えられる。
【０３４５】
いくつかの態様において、医薬的に許容される賦形剤は少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％純粋である。いくつかの態様において、賦形剤はヒトへの使用および獣医学的使用を認可されている。いくつかの態様において、賦形剤は米国食品医薬品局によって認可されている。いくつかの態様において賦形剤は医薬グレードである。いくつかの態様において、賦形剤は米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、および／または国際薬局方の基準を満たす。
【０３４６】
医薬組成物の製造に用いられる医薬的に許容される賦形剤は、不活性な希釈剤、分散および／もしくは造粒剤、界面活性剤および／もしくは乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存料、緩衝剤、滑剤、ならびに／または油を含むが、これに限定されない。かかる賦形剤は本発明の製剤中に任意に含まれ得る。ココアバターおよび座薬用ワックス、着色料、コーティング剤、甘味料、香料、ならびに芳香剤などの賦形剤は製剤者の判断にしたがって組成物中に存在し得る。
【０３４７】
例示的な希釈剤は、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥澱粉、コーンスターチ、粉糖など、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３４８】
例示的な造粒および／または分散剤は、馬鈴薯澱粉、コーンスターチ、タピオカ澱粉、澱粉グリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、シトラスパルプ、寒天、ベントナイト、セルロースおよび木材生成物、天然海綿、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン（クロスポビドン）、カルボキシメチル澱粉ナトリウム（澱粉グリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、糊化澱粉（スターチ１５００）、微結晶澱粉、水不溶性澱粉、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム（ビーガム）、ラウリル硫酸ナトリウム、第４級アンモニウム化合物など、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３４９】
例示的な界面活性剤および／または乳化剤は、天然乳化剤（例えばアカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドラックス（chondrux）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、ウールファット、コレステロール、ワックス、およびレシチン）、コロイド状粘土（例えばベントナイト［ケイ酸アルミニウム］およびビーガム［ケイ酸アルミニウムマグネシウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えばステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、モノステアリン酸トリアセチン、ジステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリル、およびモノステアリン酸プロピレングリコール、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えばカルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー、およびカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース誘導体（例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート［Ｔｗｅｅｎ−２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ−６０］、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート［Ｔｗｅｅｎ−８０］、ソルビタンモノパルミテート［Ｓｐａｎ−４０］、ソルビタンモノステアレート［Ｓｐａｎ−６０］、ソルビタントリステアレート［Ｓｐａｎ−６５］、グリセリルモノオレエート、ソルビタンモノオレエート［Ｓｐａｎ−８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えばモノステアリン酸ポリオキシエチレン［Ｍｙｒｊ−４５］、ポリオキシエチレン水添ヒマシ油、ポリエトキシル化ヒマシ油、ステアリン酸ポリオキシメチレン、およびソルトール）、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えばクレモフォア）、ポリオキシエチレンエーテル、（例えばポリオキシエチレンラウリルエーテル［Ｂｒｉｊ−３０］）、ポリビニルピロリドン、モノラウリン酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、プルロニックＦ６８、ポロキサマー１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドクサートナトリウムなど、および／またはその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３５０】
例示的な結合剤は、澱粉（例えばコーンスターチおよび澱粉ペースト）、ゼラチン、糖（例えばスクロース、グルコース、ブドウ糖、デキストリン、モラセス、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）、天然および合成ガム（例えばアカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモスエキス、パンワール（panwar）ガム、ガティガム、イサポル（isapol）殻粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、酢酸セルロース、ポリビニルピロリドン）、ケイ酸アルミニウムマグネシウム（ビーガム）、およびカラマツアラボガラクタン）、アルギン酸、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール、無機カルシウム塩、ケイ酸、ポリメタクリレート、ワックス、水、アルコールなど、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３５１】
例示的な保存料は、抗酸化剤、キレート剤、抗微生物保存料、抗真菌保存料、アルコール保存料、酸性保存料、および他の保存料を含み得る。例示的な抗酸化剤は、αトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アコルビル（acorbyl）、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、ピロ亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、および亜硫酸ナトリウムを含むが、これに限定されない。例示的なキレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸、およびエデト酸三ナトリウムを含む。例示的な抗微生物保存料は、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコール、およびチメロサールを含むが、これに限定されない。例示的な抗真菌保存料は、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、およびソルビン酸を含むが、これに限定されない。例示的なアルコール保存料は、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシ安息香酸、およびフェニルエチルアルコールを含むが、これに限定されない。例示的な酸性保存料は、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、β−カロテン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、およびフィチン酸を含むが、これに限定されない。他の保存料は、トコフェロール、酢酸トコフェロール、デテロオキシム（deteroxime）メシレート、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエンド（toluened）（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、ピロ亜硫酸カリウム、Glydant Plus、Phenonip、メチルパラベン、Germall 115、Germaben II、Neolone、Kathon、およびEuxylを含むが、これに限定されない。いくつかの態様において保存料は抗酸化剤である。他の態様において保存料はキレート剤である。
【０３５２】
例示的な緩衝剤は、クエン酸緩衝溶液、酢酸緩衝溶液、リン酸緩衝溶液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルコヘプトン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、二塩基性リン酸カルシウム、リン酸、三塩基性リン酸カルシウム、水酸化リン酸カルシウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質不含水、等張食塩水、リンゲル液、エチルアルコールなど、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３５３】
例示的な滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、麦芽、ベヘン酸（behanate）グリセリル、水添植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムなど、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３５４】
例示的な油は、アーモンド、アンズ核、アボカド、ババス、ベルガモット、クロスグリ種子、ルリジサ、ケード、カモミール、キャノーラ、キャラウェイ、カルナウバ、ヒマシ、シナモン、ココアバター、ココナッツ、タラ肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、亜麻仁、ゲラニオール、ヒョウタン、葡萄種子、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイナッツ、ラバンジン、ラベンダー、レモン、アオモジ、マカデミアナッツ、ゼニアオイ、マンゴー種子、メドウフォーム種子、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、ヤシ、パーム核、ピーチ核、ピーナッツ、ケシ種子、カボチャ種子、セイヨウアブラナ、米ぬか、ローズマリー、ベニバナ、ビャクダン、サザンカ、キダチハッカ、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、椿、ベチバー、クルミ、および小麦胚芽油を含むが、これに限定されない。例示的な油は、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、ミネラルオイル、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーンオイル、およびその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【０３５５】
経口および非経口投与のための液体剤形は、医薬的に許容されるエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁物、シロップ、およびエリキシル剤を含むが、これに限定されない。活性成分に加えて、液体剤形は、当分野において通例に用いられる不活性な希釈剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシ、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物などを含み得る。不活性な希釈剤以外に、経口組成物は、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味料、香料、ならびに芳香剤を含み得る。非経口投与のためのいくつかの態様において、本開示のポリペプチドは、可溶化剤、例えばクレモフォール、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、およびその組み合わせと混合される。
【０３５６】
注射用調製物、例えば無菌の注射用の水性または油性懸濁物が、好適な分散または湿潤剤および懸濁剤を用いて公知技術にしたがって製剤され得る。無菌の注射用調製物は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射用溶液、懸濁物、またはエマルション、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であり得る。使用され得る許容される基剤および溶媒には、水、リンゲル液（ＵＳＰ）、および等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、無菌の不揮発性油が溶媒または懸濁媒として従来使用されている。この目的にはいずれかの無刺激性の不揮発性油が使用され得、合成モノまたはジグリセリドを含む。加えて、オレイン酸などの脂肪酸が注射剤の調製物中に用いられる。
【０３５７】
注射用製剤は、例えば細菌リテーナフィルタによる濾過によって、または無菌化剤を無菌固体組成物の形態（これは、使用に先立って滅菌水または他の無菌の注射用媒体中に溶解または分散され得る）で組み込むことによって、無菌化され得る。
【０３５８】
薬物の効果を長引かせるためには、多くの場合に、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を減速させることが望ましい。これは、不良な水可溶性を有する結晶または非結晶材料の液体懸濁物の使用によって達成され得る。次に薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、これは翻って結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。その代わりに、非経口投与された薬物形態の遅延した吸収は、薬物を油基剤中に溶解または懸濁することによって達成され得る。
【０３５９】
経口投与のための固体剤形は、カプセル剤、錠剤、丸薬、粉末、および顆粒剤を含む。かかる固体剤形において、活性成分は少なくとも１つの不活性な医薬的に許容される賦形剤または担体と混合される。それらは例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、ならびに／あるいはａ）充填剤または増量剤、例えば澱粉、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、ｂ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシア、ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、馬鈴薯もしくはタピオカ澱粉、アルギン酸、あるケイ酸塩、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば第４級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、ｈ）吸着剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土、ならびにｉ）滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびその混合物である。カプセル剤、錠剤、および丸薬の場合には、剤形は緩衝剤を含み得る。
【０３６０】
類似の種類の固体組成物が、ソフトおよびハードの充填ゼラチンカプセル剤の充填剤として使用され得、賦形剤、例えばラクトースまたは乳糖、さらには高分子量ポリエチレングリコールおよび同様のものを用いる。錠剤、糖衣剤、カプセル剤、丸薬、および顆粒剤の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶コーティングおよび医薬製剤分野において周知の他のコーティングによって調製され得る。それらは任意に乳白剤を含み得、活性成分（単数または複数）を、専らまたは優先的に腸管のある部分において、任意に遅延型様式で放出する組成物であり得る。用いられ得る包埋組成物の例は、ポリマー性物質およびワックスを含む。類似の種類の固体組成物が、ソフトおよびハードの充填ゼラチンカプセル剤の充填剤として使用され得、賦形剤、例えばラクトースまたは乳糖、さらには高分子量ポリエチレン（polethylene）グリコールおよび同様のものを用いる。
【０３６１】
活性成分は、上に記されている１つまたは２つ以上の賦形剤を有するマイクロカプセル化形態であり得る。錠剤、糖衣剤、カプセル剤、丸薬、および顆粒剤の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶コーティング、徐放コーティング、および医薬製剤分野において周知の他のコーティングによって調製され得る。かかる固体剤形において、活性成分は、少なくとも１つの不活性な希釈剤、例えばスクロース、ラクトース、または澱粉と混合され得る。かかる剤形は、慣業として、不活性な希釈剤よりも他の追加の物質、例えば錠剤化滑剤および他の錠剤化助剤、かかるステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースを含み得る。カプセル剤、錠剤、および丸薬の場合には、剤形は緩衝剤を含み得る。それらは任意に乳白剤を含み得、活性成分（単数または複数）を、専らまたは優先的に腸管のある部分において、任意に遅延型様式で放出する組成物であり得る。用いられ得る包埋組成物の例は、ポリマー性物質およびワックスを含む。
【０３６２】
本開示のポリペプチドの外用および／または経皮投与のための剤形は、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤、および／またはパッチを含み得る。一般的に、要求される場合に、活性成分は無菌条件下で医薬的に許容される担体および／またはいずれかの必要とされる保存料および／または緩衝液と混合される。加えて、本開示は経皮パッチの使用を考え、これは多くの場合に、体への活性成分の制御された送達を提供するという追加の利点を有する。かかる剤形は、例えば適当な媒体中に活性成分を溶解および／または調合することによって調製され得る。その代わりにまたは加えて、速度は、速度制御膜を提供することによってならびに／または活性成分をポリマーマトリックスおよび／もしくはゲル中に分散することによって制御され得る。
【０３６３】
本明細書に記載される皮内医薬組成物を送達する際の使用のための好適なデバイスは、短針デバイス、例えば米国特許第４，８８６，４９９、５，１９０，５２１、５，３２８，４８３、５，５２７，２８８、４，２７０，５３７、５，０１５，２３５、５，１４１，４９６、および５，４１７，６６２号に記載されているものを含む。皮内組成物は、皮膚中への針の有効挿入長を限定するデバイス、例えばＰＣＴ公開ＷＯ９９／３４８５０に記載されているものおよびその機能上の均等物によって投与され得る。液体噴射注射器によっておよび／または角質層を貫いて真皮に達する噴射を生成する針によって、真皮に液体ワクチンを送達する噴射注射デバイスが好適である。噴射注射デバイスは例えば米国特許第５，４８０，３８１、５，５９９，３０２、５，３３４，１４４、５，９９３，４１２、５，６４９，９１２、５，５６９，１８９、５，７０４，９１１、５，３８３，８５１、５，８９３，３９７、５，４６６，２２０、５，３３９，１６３、５，３１２，３３５、５，５０３，６２７、５，０６４，４１３、５，５２０，６３９、４，５９６，５５６、４，７９０，８２４、４，９４１，８８０、４，９４０，４６０号、ならびにＰＣＴ公開ＷＯ９７／３７７０５およびＷＯ９７／１３５３７に記載されている。圧縮気体を用いて粉末形態のワクチンを加速させ、皮膚の外層を通して真皮に至らせるバリスティックな粉末／粒子送達デバイスが好適である。その代わりにまたは加えて、従来のシリンジが皮内投与の古典的なマントゥー法に用いられ得る。
【０３６４】
外用投与にとって好適な製剤は、液体および／または半液体調製物、例えばリニメント、ローション、水中油および／または油中水エマルション、例えばクリーム、軟膏、および／またはペースト、および／または溶液および／または懸濁物を含むが、これに限定されない。外用投与可能な製剤は例えば約１％〜約１０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得るが、活性成分の濃度は溶媒中への活性成分の可溶性限度ほどまで高くあり得る。外用投与のための製剤は、本願に記載されている追加の成分の１つまたは２つ以上をさらに含み得る。
【０３６５】
医薬品の製剤および／または製造における一般的な考慮事項は、例えばRemington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005に見いだされ得る。
使用および処置の方法
【０３６６】
本発明のポリペプチドおよびインスリンアナログは典型的にはＩＲ調節活性を有する。いくつかの態様において、提供されるポリペプチドはインスリン増感薬として作用し、すなわちインスリンに対するＩＲの感受性を増強する。一般的に、インスリン増感薬としての外来性αＣＴペプチドは、多くの場合に不良な結合親和性をしめし、蛋白質加水分解と腎臓濾過による急速なクリアランスとが原因で短いインビボ半減期を見せ、細胞内標的の場合には細胞膜に貫入する能力がない（Jenssen, H. & Aspmo, S. I. Serum stability of peptides. Methods Mol Biol 494, 177-186 (2008)）。本願に記載されているポリペプチドはそれらのネイティブな生物活性の立体配座で安定化されたαＣＴポリペプチドであり、ＩＲとの高親和性相互作用の能力のある「活性」構造へのインスリンの仮定されて来た立体配座のシフトを容易にする。いくつかの態様において、安定化されたポリペプチドはより長いインビボの半減期（half-live）および／または改善された細胞貫入能力をしめす。
【０３６７】
いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１５〜約１．０×１０−５ＭのＥＣ５０値である。いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１３〜約１．０×１０−７ＭのＩＣ５０値である。いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１２〜約１．０×１０−８ＭのＩＣ５０値である。いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−９ＭのＩＣ５０値である。いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−８ＭのＩＣ５０値である。いくつかの態様において、本発明の安定化されたαＣＴポリペプチドはＩＲに対するインスリンの親和性を改善し、約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−１０ＭのＩＣ５０値である。
【０３６８】
いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは部分的または完全なＩＲアゴニストまたはアゴニスト活性を見せる。すなわち、本発明のインスリンアナログはＩＲに結合し、ＩＲを活性化し、ＩＲによって媒介される活性を作動させる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログはＩＲに対する改善された親和性とより効率的なフォールディングとをしめす。いくつかの態様において、インスリンアナログはＩＲシグナル伝達経路を活性化することによってＩＲ活性を調節する。
【０３６９】
いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１５〜約１．０×１０−５ＭのＥＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１３〜約１．０×１０−７ＭのＩＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１２〜約１．０×１０−８ＭのＩＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−９ＭのＩＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−８ＭのＩＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。いくつかの態様において、本発明のインスリンアナログは約１．０×１０−１１〜約１．０×１０−１０ＭのＩＣ５０値のＩＲに対する結合親和性を見せる。
【０３７０】
本願に一般的に記載されている通り、１つの側面においては糖尿病状態またはその合併症を処置する方法が提供され、本願に記載されている安定化された（ステープルドまたはステッチド）ポリペプチドおよび／またはインスリンアナログの有効量をその必要がある対象に投与することを含む。
【０３７１】
本願において用いられる場合、「糖尿病状態」は糖尿病および前糖尿病を言う。糖尿病は 、個人が高血糖を有する一群の代謝疾患を言い、これは体が十分なインスリンを生成しないからかまたは生成されるインスリンに細胞が反応しないからかのいずれかである。この高血糖は、多尿（頻繁な排尿）、多飲（増大した渇き）、および過食（増大した空腹）という古典的症状を生成する。数種類の糖尿病がある。１型糖尿病は体のインスリンを生成する不全からもたらされ、今のところ個人がインスリンを注射またはインスリンポンプを装着することを要求する。２型糖尿病はインスリン抵抗性（細胞がインスリンを適当に用いることが不全である状態。場合によっては絶対的なインスリン不足と組み合わさっている）からもたらされる。妊娠糖尿病は、糖尿病の既往の診断がない妊婦が高い血中グルコースレベルを発症するときに起こる。糖尿病の他の形態は、先天性糖尿病（これはインスリン分泌の遺伝子欠損が原因である）、嚢胞性線維症関連糖尿病、グルココルチコイドの高用量によって誘導されるステロイド糖尿病、および単一遺伝子性糖尿病の数形態、例えば若年者の若年発症成人型糖尿病（例えばＭＯＤＹ１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０）を含む。前糖尿病は、個人の血中グルコースレベルが普通よりも高いが、糖尿病の診断にとって十分に高くはないときに起こる状態を指示する。
【０３７２】
糖尿病の全ての形態は長期合併症のリスクを増大させる。これらは典型的には何年も後に発症するが、その時よりも前に別様に診断を受けていない者においては第１の症状であり得る。主要な長期合併症は血管の損傷に関係する。糖尿病は、心血管疾患および大血管症、例えば虚血性心疾患（狭心症、心筋梗塞）、卒中、および末梢血管疾患のリスクを倍加させる。糖尿病は細小血管合併症、例えば小血管の損傷をもまた引き起こす。糖尿病網膜症は、眼の網膜中の血管形成を冒し、眼症状、視力低下、および可能性として失明に至り得る。糖尿病性腎症は、腎臓に及ぼす糖尿病の影響であり、腎臓組織の瘢痕性変化、尿中の蛋白質の小量または次第に大量の喪失、およびついには慢性腎臓病に至り得、透析を要求する。糖尿病性ニューロパチーは神経系に及ぼす糖尿病の影響であり、最も通例には足の痺れ、蟻走感、および痛みを引き起こし、変わってしまった感覚が原因の皮膚損傷のリスクをもまた増大させる。脚部の血管疾患と一緒に、ニューロパチーは糖尿病関連の足の問題、例えば糖尿病性足潰瘍（これは処置することが困難であり得、切断術を時には要求する）のリスクに寄与する。
【０３７３】
本願に一般的に記載されている通り、１つの側面においては、対象中のインスリン受容体の活性を調節する方法が提供され、ポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の生理学的有効量を対象に投与することを含む。別の側面においては、対象中のインスリン受容体の活性を調節する方法が提供され、本願に記載されているインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の生理学的有効量を対象に投与することを含む。いくつかの態様において、ＩＲによって媒介される活性または反応を誘導、促進、増強、および／または別様に調節するのに十分な量および条件で、反応性のＩＲは結合される。
【０３７４】
本願に一般的に記載されている通り、１つの側面においては、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法が提供され、本願に記載されているポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の有効量をその必要がある対象に投与することを含む。別の側面においては、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法が提供され、本願に記載されているインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量をその必要がある対象に投与することを含む。別の側面において、本発明は、血中グルコースレベルの減少に用いられる医薬の製造へのポリペプチドまたはインスリンアナログの使用を提供する。いくつかの態様において、提供されるポリペプチドおよび／またはインスリンアナログは、ヒトインスリン受容体保持細胞におけるヒトインスリンの血中グルコース低下能力の少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、またはより多く（例えば約７０〜１００％）だけ血中グルコースレベルを低下させる能力（例えば脂肪細胞の脂肪合成アッセイの結果によって反映される）を有し得る。
【０３７５】
本願に一般的に記載されている通り、１つの側面においてはインスリン受容体を活性化する方法が提供され、本願に記載されているポリペプチドまたはその医薬的に許容される塩の有効量とインスリン受容体を接触させることを含む。別の側面においては、インスリン受容体を活性化する方法が提供され、本願に記載されているインスリンアナログまたはその医薬的に許容される塩の有効量とインスリン受容体を接触させることを含む。いくつかの態様においてインスリン受容体はインビボで接触させられる。いくつかの態様においてインスリン受容体はインビトロで接触させられる。
【０３７６】
安定化されたポリペプチドまたはインスリンアナログは、糖尿病状態または合併症の処置にとって有効ないずれかの量およびいずれかの投与経路を用いて投与され得る。要求される厳密な量は、対象の生物種、年齢、および一般的な状態、感染の重篤度、特定の組成物、その投与のモード、その活性のモード、および同様のものに依存して対象毎に変わり得るであろう。
【０３７７】
安定化されたポリペプチドまたはインスリンアナログは、投与の容易さおよび投与量の均一性のために典型的には単位剤形で製剤される。しかしながら、当然のことながら、医薬組成物の合計の一日量は担当医によって正当な医学的判断の範囲内において判断されるであろう。いずれかの特定の対象のための具体的な有効用量レベルは種々の因子に依存するであろう。それらは、治療されようとする障害および障害の重篤度、使用される具体的な活性成分の活性、使用される具体的な組成物、対象の年齢、体重、一般的な健康、性別、および食事、使用される具体的な活性成分の投与の時、投与経路、および排泄の速度、処置の期間、使用される具体的な活性成分と組み合わせてまたは同時発生的に用いられる薬物、ならびに医学分野において周知の同様の因子を含む。
【０３７８】
安定化されたポリペプチドまたはインスリンアナログはいずれかの経路によって投与され得る。いくつかの態様において、安定化されたポリペプチドは種々の経路によって投与され得、それらは、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、骨髄内、脊髄内、皮下、心室内、経皮、皮内、直腸内、膣内、腹腔内、外用（粉末、軟膏、クリーム、および／もしくは点薬によるような）、粘膜、経鼻、バッカル（bucal）、経腸、舌下、気管内点滴、気管支内点滴、および／もしくは吸入、ならびに／または経口スプレー、鼻腔スプレー、および／またはエアロゾルを含む。一般的に、最も適切な投与経路は種々の因子に依存するであろう。それらは、安定化されたポリペプチドの性質（例えば、胃腸管の環境中でのその安定性）、および／または対象の状態（例えば、対象が経口投与を忍容することが可能であるかどうか）を含む。本開示は、いずれかの適切な経路による本願に記載されている医薬組成物の送達を包含し、薬物送達の科学の起こり得る進歩も考慮に入れる。
【０３７９】
いくつかの態様において、安定化されたポリペプチドまたはインスリンアナログは、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ対象の体重／日を１日１回または２回以上送達して所望の治療効果を得るのに十分な投与量レベルで投与され得る。所望の投与量は、 １日３回、１日２回、１日１回、２日毎、３日毎、毎週、２週毎、３週毎、または４週毎に送達され得る。いくつかの態様において、所望の投与量は複数回の投与（例えば２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、または１５回以上の投与）を用いて送達され得る。
【０３８０】
いくつかの態様においては、方法は、唯一の治療剤として安定化されたポリペプチドを投与することを含むが、いくつかの態様においては、方法は、インスリンおよび／または別の抗糖尿病剤などの別の治療剤と組み合わせて安定化されたポリペプチドを投与することを含む。特定の組み合わせは、治療薬および／または治療の適合性ならびに達成されるべき所望の治療効果を考慮に入れることになろう。「組み合わせて」によって、剤同士が同じ時に投与および／または送達のために一緒に製剤されなければならないと結論づけることは意図されていないが、送達のそれらの方法は本開示の範囲内である。剤は、１つまたは２つ以上の他の所望の治療薬または医学的治療と同時的か、それに先立ってか、またはそれに続いて投与され得る。一般的に、各剤はその剤のために決定されている用量および／またはタイムスケジュールで投与されるであろう。加えて、本開示は、それらのバイオアベイラビリティを改善し得る、それらの代謝を減少させ得るおよび／もしくは改変し得る、それらの排泄を阻害し得る、ならびに／または体内におけるそれらの分布を改変し得る剤と組み合わせての安定化されたポリペプチドの送達を包含する。さらに当然のことながら、この組み合わせに利用される剤同士は、単一の医薬組成物中で一緒に投与または異なる医薬組成物中で別々に投与され得る。一般的には、組み合わせて利用される剤は、それらが個々に利用されるレベルを超えないレベルで利用されるということが予想される。いくつかの態様において、組み合わせて利用されるレベルは個々に利用されるものよりも低いであろう。
【０３８１】
インスリンは通常は皮下で、注射によってまたはインスリンポンプによってのいずれかで与えられる。急性期ケアの場面においては、インスリンは静脈内に与えられ得る。一般的には３種類のインスリンがあり、それらが体内で代謝される速度によって特徴づけられる。それらは速効型インスリン、中間型インスリン、および持効型インスリンである。速効型インスリンの例はレギュラーインスリン（Humulin R、Novolin R）、インスリンリスプロ（Humalog）、インスリンアスパルト（Novolog）、インスリングルリジン（Apidra）、および速効型インスリン亜鉛（Semilente。やや遅く作用する）を含む。中間型インスリンの例はイソフェンインスリン、中性プロタミンHagedorn（NPH）（Humulin N、Novolin N）、およびインスリン亜鉛（Lente）を含む。持効型インスリンの例は持続型インスリンの亜鉛インスリン（Ultralente）、インスリングラルギン（Lantus）、およびインスリンデテミル（Levemir）を含む。
【０３８２】
他の抗糖尿病剤は典型的には経口的に与えられ、スルホニル尿素（例えばトルブタミド、アセトヘキサミド、トラザミド、クロルプロパミド、グリブリド、グリメピリド、グリピジド、グルコピラミド（glucopyramide）、グリキドン）、ビグアニド（例えばメトホルミン、フェンホルミン、ブホルミン）、メグリチニド（例えばレパグリニド、ナテグリニド）、α−グルコシダーゼ阻害剤（例えばアカルボース、ミグリトール、ボグリボース）、およびチアゾリジンジオン（例えばロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン）を含むが、これに限定されない。
【０３８３】
さらに、研究ツールとしての、すなわちＩＲの活性化機序をプローブ調査するための安定化されたポリペプチドの使用が考えられる。
キット
【０３８４】
本開示は、本願において開示されるポリペプチドおよび／またはインスリンアナログの１つまたは２つ以上を含む種々のキットを提供する。例えば、本開示は、本願に記載されているステッチドもしくはステープルドポリペプチドおよび／またはインスリンアナログと使用のための取扱説明書とを含むキットを提供する。キットは複数の異なるポリペプチドを含み得る。キットは、いくつもの追加の成分または試薬のいずれかをいずれかの組み合わせで含み得る。様々な組み合わせの全てが明示的に示されてはいないが、各組み合わせは本開示の範囲に含まれる。
【０３８５】
本開示のいくつかの態様にしたがって、キットは、例えば（ｉ）送達されるべき１つもしくは２つ以上のポリペプチドおよび１つもしくは２つ以上の特定の生物活性剤、ならびに／または（ｉｉ）送達されるべき１つもしくは２つ以上のインスリンアナログおよび１つもしくは２つ以上の特定の生物活性剤、（ｉｉｉ）ポリペプチドおよび／もしくはインスリンアナログをその必要がある対象に投与するための取扱説明書を含み得る。
【０３８６】
キットは典型的には取扱説明書を含み、これは例えばポリペプチドおよび／またはインスリンアナログの生成、その必要がある対象へのポリペプチドおよび／またはインスリンアナログの投与、ポリペプチドおよび／またはインスリンアナログの設計などのためのプロトコールを含み得るおよび／または条件を記載し得る。キットは、一般的に１つまたは２つ以上のベッセルまたは容器を含んで、個々の成分および試薬のいくつかまたは全てが別々に収容され得るようになるであろう。キットは、個々の容器を相対的に近い空間にまとめて市販のために納めるための手段、例えば、プラスチック箱もまた含み得る。その中には、取扱説明書、梱包材、例えばスタイロフォームなどが納められており得る。識別子、例えばバーコード、高周波数識別（ＩＤ）タグなどが、キット中もしくは表面、またはキットに含まれるベッセルもしくは容器の１つもしくは２つ以上に存在し得る。識別子は、例えば、品質管理、在庫管理、トラッキング、ワークステーション間の移動などの目的のために、キットを固有に同定するために用いられ得る。
【実施例】
【０３８７】
本明細書に記載されている本発明をより完全に理解するために以下の例を示す。当然のことながら、これらの例は例示の目的のために過ぎず、本発明を限定するものとして解釈されるべきものではない。
【０３８８】
例１．αＣＴペプチドおよび／またはインスリンアナログの合成
固相ペプチド合成：全てのペプチドは以下の樹脂の１つの上でＦｍｏｃ化学を用いて調製した。Rink Amide MBHA、Rink Amide MBHA Low Loading、PAL-NovaSyn TG、NovaPEG Rink Amide樹脂、またはNovaPEG Rink Amide Low Loading樹脂。乾燥樹脂を典型的にはジクロロメタン中で、次にＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）中で使用前に膨潤させた。Ｆｍｏｃ保護基を、ＮＭＰ中の２５％（ｖ／ｖ）ピペリジンを用いて除いた（４×５ｍｉｎ）。天然アミノ酸は、典型的には４当量のＦｍｏｃ保護したアミノ酸、カップリング試薬としての４当量の（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルフォリノ−カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、および塩基としての８当量のΝ，Ν−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）を用いて６０分間カップリングした。非天然アミノ酸（例えば、Ｓ５、ＰｙｒＲおよびその他）は、典型的には３当量のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸、カップリング試薬としての３当量の（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルフォリノ−カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、および塩基としての６当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）を用いて１２０分間カップリングした。ＮＭＰを用いて、樹脂を各カップリングおよび脱保護ステップ間に洗浄した（５×１ｍｉｎ）。
【０３８９】
Ｎ末端アセチル化：円偏光二色性分光法（ＣＤ）に用いたペプチドを調製した。自由なＮ末端またはアセチル化Ｎ末端のいずれかを有した。固相上でＮ末端をアセチル化するためには、Ｎ末端Ｆｍｏｃを脱保護し、樹脂を続いてＮＭＰによって洗浄する。アセチル化は、典型的にはＮＭＰ中の２０当量の無水酢酸および４０当量のＤＩＰＥＡの溶液によって１〜２時間樹脂結合ペプチドを処理することによって行う。反応の完了後に、樹脂を典型的にはＮＭＰ（５×１ｍｉｎ）、ＤＣＭ（３×１ｍｉｎ）によって洗浄し、メタノールによって乾燥する。
【０３９０】
閉環メタセシス：全ての場合に、閉環メタセシスは、固相上でＮ末端アセチルキャップまたはＮ末端Ｆｍｏｃのいずれかを含有するペプチドを用い、以下の一般的な手順を用いて実施した。樹脂を乾燥１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）中で少なくとも２０分間膨潤させた。樹脂結合ペプチドを、典型的には、次に（樹脂の初期量に対して）２５モル％の第１世代グラブスメタセシス触媒（ベンジリデン−ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ジクロロルテニウム、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウム（ＩＶ）ジクロリド）（ＤＣＥ中におよそ８〜１０ｍｇ／ｍＬの濃度に溶解した）によって２時間処理した。ほとんどの場合に、炭化水素ステープルドまたはＡｌｌｏｃステープルド生成物への完全な変換を達成するためには、触媒による２回または３回の処理が必要であった。各処理間に、過剰な触媒をＤＣＥによる洗浄（３×１ｍｉｎ）によって除いた。触媒による最終処理後に、樹脂は典型的には複数回ＤＣＥによって洗浄し、複数回ＤＣＭによって洗浄し、メタノールによって乾燥した。
【０３９１】
パラジウムによって触媒されるＣＯ２逆挿入：閉環メタセシスによって上の手順を用いて調製したＡｌｌｏｃステープルドペプチドを含有する樹脂を、乾燥ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で少なくとも２０分間膨潤させた。樹脂を次におよそ５〜１０ｍＭの終濃度まで乾燥ＤＣＭ中に溶解した２０〜４０モル％（ステープル中に存在するカルバメートのモルに対し、樹脂の初期量に対して計算した）のＰｄ（ＰＰｈ３）４によって１５〜３０分間処理した。典型的には、Ａｌｌｏｃステープルド出発物質の完全な反応を保証するために２回の処理を実施した。各処理間に、樹脂を乾燥ＤＣＭによって洗浄した（３×１ｍｉｎ）。
【０３９２】
ペプチド切断／脱保護および精製：側鎖保護基を除き、以下の手順を用いて同時に樹脂からペプチドを切断した。乾燥樹脂をトリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：水（９５：２．５：２．５）の溶液によって３時間処理した。インキュベーションの完了後に、溶液の体積をＮ２（ｇ）の流れ下での蒸発によって減少させ、もたらされた残さを冷ジエチルエーテルによって処理した。沈殿したペプチドを遠心によってペレット化し、上清を傾瀉し、ペレットを風乾した。粗製ペプチドは典型的にはアセトニトリル：水の１：１溶液中に溶解し、次に逆相ＨＰＬＣによって０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリルおよび０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸を含有する水を移動相の成分として用いて精製した。ＨＰＬＣ画分の純度をＬＣ／ＭＳによって評価し、きれいな画分を集め、speedvacによって濃縮した。ペプチドを次に乾燥状態まで凍結乾燥した。
【０３９３】
例２．例示のインスリンαＣＴペプチドの生物物理学的キャラクタリゼーション
以下のスペクトルの全ては、１０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．０緩衝液、ＰＢＳ、またはＭｉｌｌｉＱのＨ２Ｏのいずれかに溶解したネイティブなαＣＴペプチドおよび全てのステープルドまたはステッチドαＣＴペプチドを用いて得られた（図１６〜２１）。生データは平均残基楕円率（最初の２つのプロット）またはモル楕円率（プロットの残り）の濃度非依存的な単位に変換した。αヘリックスは典型的にはおよそ２０８ｎｍおよび２２２ｎｍにおける２つの最小値とおよそ１９２ｎｍにおける最大値とを示す。ＰＢＳ中においては、２００ｎｍ未満では緩衝液の干渉がデータを遮断する。スペクトルはJASCO J-710 分光偏光計を用いて得られた。
【０３９４】
例３．インスリン受容体（ＩＲ）リン酸化アッセイ
インスリン増感薬ペプチドによるＣＨＯ−ＩＲ細胞の処理のための一般的な手順
ＣＨＯ−ＩＲ細胞を２４ウェルプレートに播種し、１０％ＦＢＳのハムＦ−１２培地中で＞８０％コンフルエンスまで育てた。次に、ペプチド処理に先立って２時間ＦＢＳなしのハムＦ−１２培地中で細胞を飢餓させた。対照サンプルについては、ＦＢＳなしの新鮮なハムＦ−１２（負の対照）または１ｎＭインスリンの同じ培地（正の対照）中で細胞をインキュベーションした。初期ペプチドスクリーニングのためには、１０μΜの濃度でペプチドを補った１ｎＭインスリン含有培地中で実験ウェルをインキュベーションした。用量反応アッセイのためには、１ｎＭインスリンおよび色々な濃度のペプチド（１０ｎＭ、１００ｎＭ、１μΜ、１０μΜ、１００μΜ）による共処理を実施した。全ての処理は３７℃で３０分間実施した。
【０３９５】
インスリンの非存在下でインスリン増感薬ペプチドの活性を試験するアッセイのためには、インスリンの非存在下で１０μΜペプチドによる処理を用いた。
【０３９６】
ＩＲ自己リン酸化ＥＬＩＳＡアッセイのための一般的な手順
リン酸化ＩＲのＥＬＩＳＡアッセイのためには、清澄化したライセートを標準的なBCA法によって先ず定量し、次に均一な濃度に調整した。全てのサンプルは次に総蛋白質の０．２ｍｇ／ｍｌの濃度でＩＲβマウスｍＡｂコーティングマイクロウェルに追加した。マイクロウェルをテープでしっかり密封し、４℃で一晩インキュベーションした。
【０３９７】
翌日にウェルをドレインし、１×洗浄緩衝液によって４回洗浄した。１００μl の検出抗体（リン酸化ＩＲβのＴｙｒ１１５０／１１５１ウサギｍＡｂ）を各ウェルに追加し、サンプルを３７℃で１ｈインキュベーションした。１×洗浄緩衝液による４回の洗浄後に、１００μｌのＨＲＰ複合体化抗ウサギＩｇＧを各ウェルに追加し、サンプルを３７℃で３０分間インキュベーションした。洗浄手順を繰り返し、１００μｌのＴＭＢ基質を追加した。３７℃での１０分間のインキュベーション後に、１００μｌの停止溶液を追加した。停止溶液を追加して３０分以内にヒューレット・パッカードSpectraMax M5プレートリーダーによって４５０ｎｍの吸光度を読み取った。
Ａｋｔリン酸化アッセイ
【０３９８】
インスリン増感薬ペプチドによるＣＨＯ−ＩＲ細胞の処理のための一般的な手順：
ＣＨＯ−ＩＲ細胞を２４ウェルプレートに播種し、１０％ＦＢＳのハムＦ−１２培地中で＞８０％コンフルエンスまで育てた。次に、ペプチド処理に先立って２時間ＦＢＳなしのハムＦ−１２培地中で細胞を飢餓させた。対照サンプルについては、ＦＢＳなしの新鮮なハムＦ−１２（負の対照）または３ｎＭインスリンの同じ培地（正の対照）中で細胞をインキュベーションした。初期ペプチドスクリーニングのためには、１０μΜの濃度でペプチドを補った３ｎＭインスリン含有培地中で実験ウェルをインキュベーションした。用量反応アッセイのためには、３ｎＭインスリンおよび色々な濃度のペプチド（１０ｎＭ、１００ｎＭ、１μΜ、１０μΜ、１００μΜ）による共処理を実施した。全ての処理は３７℃で３０分間実施した。
【０３９９】
Ａｋｔリン酸化ＥＬＩＳＡアッセイのための一般的な手順：
リン酸化ＡｋｔのＥＬＩＳＡアッセイのためには、清澄化したライセートを先ず標準的なＢＣＡ法によって定量し、次に均一な濃度に調整した。Cell Signaling Technologies PathScan（登録商標）Phospho-Akt1 (Ser473) Chemiluminescent SandwichＥＬＩＳＡキット＃７１３４を次に製造者の取扱説明書にしたがってＥＬＩＳＡアッセイに用いた。
【０４００】
例４．インスリンアナログの生物学的評価
上に記載されたインビトロアッセイを用いて、インスリンシグナル伝達経路の活性化を誘導する能力について全てのインスリンアナログを評価する。インスリンアナログによってこれらのアッセイを実施する際のただ１つの大きな違いは、処理がインスリンとの共処理として実施されるということである。具体的には、未刺激の細胞をインスリンアナログによって処理し、対照サンプルはインスリンによって類似に処理する。インスリンアナログがインスリン受容体のアゴニストとして作用する場合には、処理はインスリンによる処理によって観察されるものよりも低いインスリン受容体活性化のＥＣ５０を生成する。
他の態様
【０４０１】
特許請求の範囲において、「a」、「an」、および「the」などの冠詞は、逆に指示されていないかまたは文脈から別様に明らかでない限り、１つまたは１つよりも多くを意味し得る。「または」を群の１つまたは２つ以上のメンバー間に含む請求項または記載は、群のメンバーの１つ、１つよりも多く、または全てが所与の生成物またはプロセスにおいて存在する、使用される、または別様に関係する場合には、逆に指示されていないかまたは文脈から別様に明らかでない限り満たされていると考えられる。本発明は、所与の生成物またはプロセスにおいて群の厳密に１つのメンバーが存在する、使用される、または別様に関係する態様を含む。本発明は、所与の生成物またはプロセスにおいて群のメンバーの１つよりも多くまたは全てが存在する、使用される、または別様に関係する態様を含む。
【０４０２】
なおその上に、本発明は、挙げられる請求項の１つまたは２つ以上からの１つまたは２つ以上の限定、要素、節、および説明の用語が別の請求項中に導入されている、全ての変形、組み合わせ、および入れ替えを包含する。例えば、別の請求項に依存するいずれかの請求項は、同じ元の請求項に依存するいずれかの他の請求項中に見いだされる１つまたは２つ以上の限定を含むように改変され得る。例えばマーカッシュ群形式において、要素が一覧として提示されている場合には、要素の各下位群もまた開示されており、いずれかの要素（単数または複数）は群から除かれ得る。当然のことながら、一般的に、本発明または本発明の側面が特定の要素および／または特徴を含むと言う場合には、本発明のいくつかの態様または本発明のいくつかの側面は、かかる要素および／もしくは特徴からなるか、または本質的になる。簡単の目的のために、それらの態様は本願において一々具体的には示さなかった。また、用語「を含む」および「を含有する」は開放的であることが意図されており、追加の要素またはステップの包含を許す。範囲が与えられている場合には、エンドポイントが含まれる。さらに、別様に指示されていないかまたは文脈および当業者の理解から別様に明らかでない限り、範囲として表現されている値は、文脈が明らかに別様に述べない限り、本発明の異なる態様において、書かれた範囲内のいずれかの具体的な値または部分範囲を、範囲の下限の単位の１／１０までとり得る。
【０４０３】
本願は、種々の登録済み特許、公開済み特許願、雑誌記事、および他の公開を参照しているが、それらの全ては参照によって本願に組み込まれる。組み込まれた参照のいずれかと本明細書との間に矛盾がある場合には、本明細書が制御するものとする。加えて、従来技術に属する本発明のいずれかの特定の態様は、請求項のいずれか１つまたは２つ以上から明示的に除外され得る。かかる態様は当業者に公知であると見なされるので、その除外が本明細書において明示的に示されていない場合であっても除外され得る。本発明のいずれかの特定の態様は、従来技術の存在に関連するか否かにかかわらず、いずれかの請求項からいずれかの理由で除外され得る。
【０４０４】
当業者は、本願に記載されている具体的な態様の多くの均等物を認識するか、またはごく型通りの実験を用いて確かめることが可能であろう。本願に記載されている本発明の態様の範囲は、上の明細書に限定されることは意図されておらず、正しくは添付された特許請求の範囲において示される通りとする。当業者には当然のことながら、本明細書に対する種々の変化および改変が、以下の特許請求の範囲において定義される本発明の趣旨または範囲から逸脱することなしになされ得る。
【図１Ａ】
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【図１ＢＣ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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