(57)【要約】【構成】本発明は、新規なセクリニン類似体およびノルセクリニン類似体に関し、またこれら類似体を細胞増殖性疾患の治療に使用することに関する。【選択図】図１
2016538243.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造を有する単離されたセクリニン類似体。
2016538243.tif 000084
但し、ＸはＣ、Ｃ−Ｃ、Ｃ＝ＣまたはＣ≡Ｃであり、そしてＲは置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、ヘテロアリール、５〜６の環原子（環原子のうちの１〜３はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルキル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フルオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドピリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チエニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシルエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリンまたはこれらの組み合わせである。
【請求項２】
前記構造を以下の群から選択する請求項１に記載の単離されたセクリニン類似体。
2016538243.tif 000085
2016538243.tif 000086
2016538243.tif 000087
2016538243.tif 000088
2016538243.tif 000089
【請求項３】
請求項１に記載の単離されたセクリニン類似体および製薬上許容できる基剤を有する製薬組成物。
【請求項４】
さらに、ワクチン接種用抗原を有する請求項３に記載の製薬組成物。
【請求項５】
請求項１の単離されたセクリニン類似体を治療上有効な量で増殖している細胞に投与することからなる被検体における細胞増殖を抑制する方法。
【請求項６】
下記構造をもつ単離されたセクリニン類似体。
2016538243.tif 000090
但し、Ｒは置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、５〜６の環原子（１〜３の環原子はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルケニル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フルオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドピリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チェニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシルエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリン、またはこれらの組み合わせである。
【請求項７】
下記構造をもつ単離されたノルセクリニン誘導体。
2016538243.tif 000091
但し、ＸはＣ、Ｃ−Ｃ、Ｃ＝ＣまたはＣ≡Ｃであり、そしてＲは置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、ヘテロアリール、５〜６の環原子（１〜３の環原子はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルケニル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フルオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドピリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チェニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシルエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリン、またはこれらの組み合わせである。
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第６１/８８６，４４８（出願日：２０１３年１０月３日）、米国仮特許出願第６１/９４２，８８０（出願日：２０１４年２月２１日）、および米国仮特許出願第６２/０５１，５９５（出願日：２０１４年９月１７日）の優先権を主張する出願であり、これら公報全てを完全に援用する出願である。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、セクリニンおよびノルセクリニンから誘導される小分子化合物の合成に関するもので、各種の細胞信号経路の調節におけるこれら化合物の有効性を明らかにする発明であり、癌、炎症性疾病および感染症にこれら化合物を使用することに関する。
【背景技術】
【０００３】
セクリニン（Ｃ１３Ｈ１５ＮＯ２；分子量２１７，２６３７；ＣＨＥＭＢＬ３０３０６２としても知られている；セクリニン；セクリナン−１１−オン；５６１０−４０−２；セクリニン、（・・）・・；ＵＮＩＩ−Ｇ４ＶＳ５８０Ｐ５Ｅ；ＮＳＣ１０７４１３、立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ）ビロセクリニンおよびアロセクリニンとしても知られている）は、以下の二次元構造をもつことが判明している小分子である。
2016538243.tif 000003
【０００４】
セクリニンは植物由来アルカロイドであり、以前から神経関連疾病に対して効能があることがわかっている。また、最近予期しない再転位誘導体、ノルセクリニンに関して報告がある（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ２０１２、６８、３９７２−３９７９）。
2016538243.tif 000004
【０００５】
セクリニンについては、効力のあるＧＡＢＡＡレセプター拮抗剤として報告があり、それ以外の細胞毒性はきわめて小さい（Ｂｅｕｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  ３３０（１）；１３５−１４０、１９８５；Ｌｕｂｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ．２００７  Ｎｏｖ．；８２（５）：１０６２−９）。セクリニンに関しては、さらに高投与量で前骨髄球性白血病細胞および大腸癌細胞の細胞死を誘導し、かつ低投与量で広範囲の骨髄球白血病細胞系だけでなく一次白血病患者サンプルの単球分化を誘導することが確認されている（Ｒａｎａ  ｅｔ  ａｌ．、２０１０、Ｔｈｅ  ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ．、２４（６）２１２６−２１３４；Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、Ｚｈｏｎｇｇｕｏ  ｙａｏ  ｌｉ  ｘｕｅ  ｂａｏ＝Ａｃｔａ  Ｐｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａ  Ｓｉｎｉｃａ  ２０．３（１９９９）：２６７−２７０；Ｇｕｐｔａ  ｅｔ  ａｌ．、ＰｌｏＳ  ＯＮＥ  ６（６）：ｅ２１２０３．ｄｏｉ：１０．１３７１/ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００２１２０３、２０１１）。セクリニンが、乳がんなどの他の癌細胞タイプの細胞死につながることも見いだされている（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ６９：２１７−２３（２０１４））。追加的な研究は、セクリニン分子の合成から誘導された適応構造に集中し、寄生虫病などの広範な感染症に対する潜在的な有用性を明らかにしている。例えば、各種誘導体間のトキソプラズマ成長に関する活性差も調べられている（Ｈｏｌｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ  １２７．２（２０１１）：３７０−３７５）。セクリニンについては、真菌類に対しても活性があることも判明している（Ｓａｈｎｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｍｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ３３．２（２００５）：９７−１０３）。
【０００６】
また、セクリニンについては、ホストの免疫反応を強める能力を通じて感染症を緩和する活性を有することも判明している。例えば、セクリニンはマクロファージのバクテリア細菌をクリアする能力を強化するものである（Ｌｕｂｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ８２．５（２００７）：１０６２−１０６９）。
【０００７】
セクリニンンのγ、δ二重結合を還元する天然リダクターゼも確認されており、骨髄細胞活性を一部変更し、（Ｃ１５に官能基が結合している）還元セクリニンの各種誘導体も提供されている（Ｇｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｌｅｔｔｅｒｓ２７．１６（２００５）：１１８９−１１９３；米国公開特許出願第２０１４００１８３８３）。バックボーンとしてセクリニンが与える明らかな多様な細胞活性を前提として、研究対象はより効力のある類似体の発見に向けられ、また類似体が相互作用することが可能な病気・疾病の新規な細胞標的に向けられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国公開特許出願第２０１４００１８３８３
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ２０１２、６８、３９７２−３９７９
【非特許文献２】Ｂｕｅｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  ３３０（１）；１３５−１４０、１９８５
【非特許文献３】Ｌｕｂｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ．２００７  Ｎｏｖ．；８２（５）：１０６２−９
【非特許文献４】Ｒａｎａ  ｅｔ  ａｌ．、２０１０、Ｔｈｅ  ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ．、２４（６）２１２６−２１３４
【非特許文献５】Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、Ｚｈｏｎｇｇｕｏ  ｙａｏ  ｌｉ  ｘｕｅ  ｂａｏ＝Ａｃｔａ  Ｐｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａ  Ｓｉｎｉｃａ  ２０．３（１９９９）：２６７−２７０
【非特許文献６】Ｇｕｐｔａ  ｅｔ  ａｌ．、ＰｌｏＳ  ＯＮＥ  ６（６）：ｅ２１２０３．ｄｏｉ：１０．１３７１/ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００２１２０３、２０１１
【非特許文献７】Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ６９：２１７−２３（２０１４）
【非特許文献８】Ｈｏｌｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ  １２７．２（２０１１）：３７０−３７５）
【非特許文献９】Ｓａｈｎｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｍｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ３３．２（２００５）：９７−１０３）。
【非特許文献１０】Ｌｕｂｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ８２．５（２００７）：１０６２−１０６９
【非特許文献１１】Ｇｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｌｅｔｔｅｒｓ２７．１６（２００５）：１１８９−１１９３
【非特許文献１２】ｅｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ｈｕｂｐａｇｅｓ．ｃｏｍ/ｈｕｂ/Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ−Ｅｆｆｅｃｔｓ−Ｐｒｏｄｒｕｇｓ−Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ−Ｅｘａｍｐｌｅｓ−ａｎｄ−Ｓｏｕｒｃｅｓ−ｏｆ−Ｄｒｕｇ−Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
【非特許文献１３】Ｙａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５９（５）３０２１−３０２５（１９８４）
【非特許文献１４】Ｗｅｉｌ  ｅｔ  ａｌ．、ＰＮＡＳ  ８４：２０５７−２０６１（１９８７）
【非特許文献１５】ｗｗｗ．ｋｉｍ２．ｕｎｉｋｌｉｎｉｋｕｍ−ｊｅｎａ．ｄｅ/ｅｎ/ＫＩＭ＋ＩＩ/Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ＋ａｎｄ＋Ｍｅｄｉｃａｌ＋Ｏｎｃｏｌｏｇｙ/Ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ＋Ｃｅｎｔｅｒ＋ｆｏｒ＋Ｍｙｅｌｏｉｄ＋Ｄｉｓｅａｓｅｓ．ｈｔｍｌ
【非特許文献１６】Ｓｈｉｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、２０１２、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ７（９）：ｅ４１２７８.ｄｏｌ：１０．１３７１/ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００４１２７８
【非特許文献１７】Ｎｅｇａｎｏｖａ  ｅｔａｌ．、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｊ．（２００１）５（３）：２０８−２１４
【発明の概要】
【００１０】
本発明は、下記構造を有するセクリニン類似体を提供するものである。
2016538243.tif 000005
構造中、
ＸはＣ、Ｃ−Ｃ、Ｃ＝ＣまたはＣ≡Ｃであり、そしてＲは置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、水素、ハロゲン、ヘテロアリール、５〜６の環原子（１〜３の環原子はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルケニル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フルオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドピリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チエニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシルエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト（ｃａｒｂｏｘｙａｔｏ）、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリン、またはこれらの組み合わせである。
【００１１】
さらに、本発明は、本発明の実施態様のセクリニン類似体を有する薬剤組成物を提供するものである。
【００１２】
本発明は、上記類似体の一種かそれ以上を被検者または細胞に投与することからなるセクリニン類似体の使用方法を提供するものである。本明細書に開示するように、セクリニン類似体は腫瘍成長を抑制し、かつ細胞分化および細胞死を誘導するものである。従って、本発明方法は癌などの腫瘍成長および白血病、大腸癌や乳癌などの誤った細胞成熟などの状態に適用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】セクリニン類似体およびノルセクリニン類似体の合成の概要を示す図である。
【図２】セクリニン類似体およびノルセクリニン類似体の基本構造の概要を示す図である。
【発明の詳細な説明】
【００１４】
本発明は、セクリニン誘導小分子およびノルセクリニン誘導小分子、即ちセクリニンおよびノルセクリニンの合成類似体を提供するものである。また、本発明は部分的には以下のナンバリングに従って、官能基がＣ１４に結合したセクリニンの非還元γ、δ二重結合を提供するものである。
2016538243.tif 000006
また、本発明は官能基がＣ１４に結合した非還元γ、δ二重結合をもつノルセクリニン異性体から誘導したさらに別な類似体を提供するものであり、さらにＣ１４および／またはＣ１５にセクリニンおよびノルセクリニンおよび官能基が結合した還元γ、δ二重結合をもつ化合物を提供するものである。
【００１５】
本発明は、以下の構造式で示されるセクリニン誘導化合物およびノルセクリニン化合物を提供するものである：
2016538243.tif 000007
上記構造式において、ＸはＣ、Ｃ−Ｃ、Ｃ＝ＣまたはＣ≡Ｃであり、そしてＲは置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、水素、ハロゲン、ヘテロアリール、５〜６の環原子（１〜３の環原子はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルキル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フルオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドピリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チェニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシルエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト（ｃａｒｂｏｘｙａｔｏ）、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリン、またはこれらの組み合わせおよびこれらの製薬上許容できる塩である。また、例示として、Ｒは以下の構造を有していてもよい。
2016538243.tif 000008
【００１６】
本発明は、次式で表されるセクリニンおよびノルセクリニンの小分子アルキニル類似体を提供するものである：
2016538243.tif 000009
上記式中、ＲまたはＲ１は置換または未置換Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル、Ｃ２−Ｃ２４アルキニル、Ｃ３−Ｃ２０アリール、ヘテロアリール、水素、ハロゲン、５〜６の環原子（１〜３の環原子はＮ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＮＣ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、ＯおよびＳから独立して選択される）を含有するヘテロシクロアルキル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロシクロプロピル、シクロペンチル；イソプロペニル、シクロペンテニル；ベンジル、フェニル、アミノフェニル、ジメチルアミノフェニル、アジドフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、ブチルフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、フロオロフェニル、シアノフェニル、ピリジル、Ｎ−オキシドプリジル、エトキシ、Ｎ−ジメチルアミノメチル、Ｎ−ジエチルアミノメチル、Ｎ−ジプロピルアミノメチル、（トリイソプロピルシリル）オキシメチル、シクロペンチルメチル、フェノキシメチル、ベンゾキシメチル、ｔ−ブトキシメチル、プロペニルオキシメチル、チェニル、メトキシナフタレニル、フェナンスレニル、フェニル、フェニルメチル、フェニルメチルプロピル、ピラン、フェノール、シクロヘキシル、ヘキシル、ペンチル、プロピル、エチル、メチル、ヘプチル、オクチル、ニトロ、ニトロソ、フルオロメチルフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ビストリフルオロメチルフェニル、ブロモフェニル、ジブロモフェニル、オキシエチル、ヒドロキシエチル、Ｏ−メチルフェニル、フルオロフェニル、シクロプロピル、メチルシクロペンチル、ヘテロアレーン、アジド、イミノ、Ｏ−メチルナフチル、ナフチル、アントラシル、フェナントラシル、ピリミジル、フリル、ジエチルメチルエーテル、チオフィル、チオアリール、チオアルキル、フェニルニトリル、スルフヒドリル、スルフィル、スルフォナト、カルボキシ、アニリン、アニソール、フェニルメタノール、ビフェニル、フェニルアミル、ニトリル、Ｏトリフルオロメチル、ジフルオロフェニル、シリル、シリルエーテル、Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−（トリイソプロピル）シリル、メチル−Ｏ−メチル、フェニルメチルニトリル、ブチルニトリル、カルボキシアト（ｃａｒｂｏｘｙａｔｏ）、メチル−Ｏ  ｔ−ブチル、フェニル−Ｏ−（トリフルオロ）メチル、プロピルフェニル、ジメチルアミン、メチルアミン、ホスホ、トリメチルアミン、ジメチルアミノフェニル、ジプロピルメチルアミン、トルエン、キシレン、アニリン、またはこれらの組み合わせおよびこれらの製薬上許容できる塩である。また、例示として、ＲおよびＲ１は以下の構造を有していてもよい。
2016538243.tif 000010
2016538243.tif 000011
【００１７】
本発明は、Ｃ１４に官能基が結合し、非還元γ、δ二重結合をもつセクリニンおよびノルセクリニン類似体を提供するものである。セクリニンのγ−ヨード誘導体（セクリニンのＣ１４−ヨード誘導体、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａ）は、Ｎ−ヨードスクシンイミド（Ｎ−ｉｏｄｏｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ）のＭｅＯＨ溶液を使用してセクリニンから調製できる（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２０１２、６８、３９７２−３９７９を参照）。
2016538243.tif 000012
反応混合物からの生成物の単離時、副生物としてＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＢおよびＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｄも単離することができる。次に、中間体ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＡおよびＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＢからセクリニンのＣ−１４類似体を調製できる。当業者ならば、本明細書に示す合成経路に一部変更を加えることによって、本明細書に開示する類似体を得ることができるはずである。
【００１８】
セクリニンのＣ−１４アルキル/アリール類似体の合成例では、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａおよび対応するボロン酸/エステルを次式に従って反応させて合成を実施できる。
2016538243.tif 000013
【００１９】
制限ではなく、例示を目的として説明すると、無水トルエンまたはテトラヒドロフランなどの溶剤とＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＡまたはＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｂとからなる溶液に二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）を添加し、次に対応するボロン酸および炭酸カリウム/水を加える。次に窒素雰囲気下で反応混合物を脱気してから、８０℃〜１００℃に加熱する。次に、反応混合物を抽出、乾燥、濃縮する。適当な溶剤系を使用するクロマトグラフィーによって粗生成物を精製処理して、セクリニンの目的のＣ−１４アルキル/アリール類似体を得る。収率は４０〜７０％である。上記を利用して、以下のセクリニンのＣ−１４アルキル/アリール類似体が調製されている。
2016538243.tif 000014
【００２０】
セクリニンおよびノルセクリニンのＣ−１４アルキル類似体の合成プロセスでは、以下の反応式に示すように、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＡまたはＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｂおよび対応する末端アルキンを使用できる。
2016538243.tif 000015
上記式中、Ｒはアルキル、アリールまたはビニルである。
【００２１】
さらに例示を続ける。ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＡまたはＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｂの無水１，４−ジオキサン/テトラヒドロフラン溶液に、二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、ヨウ化銅（Ｉ）およびトリエチルアミンを添加する。次に窒素雰囲気下で反応混合物を脱気してから、徐々に８０℃まで加熱する。次に除熱して、反応混合物を室温まで下げ、対応するアルキンを添加する。次に反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルなどを使用して抽出処理を行い、乾燥および濃縮処理を行う。上記反応方法を使用してセクリニンの以下のＣ−１４アルキニル類似体を合成した。
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【００２２】
別な実施態様では、各種の製薬上有用な塩の合成プロセスを以下のように実施できる。即ち、０℃で２Ｎ  ＨＣｌ/１，４−ジオキサン溶液混合物に加えた１，４−ジオキサンにセクリニンまたはノルセクリニン類似体を溶解する。反応生成物がゆっくり析出している間、反応混合物を撹拌する。ヘキサンまたはエーテルを次に添加し、固体をろ過し、洗浄して、対応するＨＣｌ塩を得る。同様に、セクリニン類似体をメタノールに溶解し、酒石酸を添加する。反応生成物がゆっくり析出している間、反応混合物を８０℃まで徐々に加熱する。次にエーテルを添加し、固体をろ過し、洗浄して対応する酒石酸塩を得る。あるいは、酒石酸を添加したメタノールにセクリニン類似体またはノルセクリニン類似体を溶かす。反応混合物を８０℃まで加熱し、生成物を析出させる。次にエーテルを添加し、固体をろ過し、洗浄して対応する酒石酸塩を得る。このようにして、セクリニン類似体の以下に示す各種の薬学上有用な塩を調製し、単離し、同定した。
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【００２３】
以下に、本明細書に開示する方法によって調製したセクリニンおよび／またはノルセクリニン類似体の実施例をリストアップする。
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【００２４】
また、本発明は、本明細書に記載するセクリニンおよび／またはノルセクリニン化合物を成分として有する製薬組成物を提供するものでもある。製薬組成物は、本明細書に記載する少なくとも一種のセクリニンまたはノルセクリニン誘導体またはその塩、および公知な製薬上許容できる基剤を有する。製薬上許容できる基剤は希釈剤、充てん剤、塩、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤、および公知なその他の剤があり、通常は塩、緩衝剤、保存剤、相溶性基剤であり、適宜他の治療剤である。当業者ならば、中間的な非製薬上許容できる塩を使用して、製薬上許容できる塩を調製でき、これら塩も本発明の範囲から除外できるものではないことを理解できるはずである。制限する意図はないが、製薬上許容できる塩には、以下の酸、即ち塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、クエン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸などがある。同様に、製薬上許容できる塩については、ナトリウム塩、カリウム塩やカルシウム塩などのアルカリ金属塩やアルカリ土類塩として調製できる。
【００２５】
本明細書に記載するセクリニンおよび／またはノルセクリニン類似体は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、軟膏、溶剤、座薬、吸入薬や注射薬などの固体製剤、半固体製剤、液体製剤、気体製剤として製剤化することができ、また通常の投与形態で、例えば経口投与、非経口投与、静脈内投与、胃内投与、直腸投与、腹腔内投与、動脈内投与、皮下投与、血管内投与、局所投与、眼球投与、鼻腔内投与、気管内投与、頭蓋内投与、筋肉内投与、心臓内投与、胸腔内投与、頭蓋内投与や手術時投与などの形態で投与可能である。もちろん、本明細書に記載のセクリニン化合物およびノルセクリニン化合物は、プロドラッグとしてもよく、プロドラッグ（ｐｒｏｄｒｕｇ）は、公知なように、保護基などのさらに別な基が、被検体それ自体の生理作用によって、例えば化合物の代謝（例えばチトクロームｐ４５０や他の酵素反応によって）や、酵素減成、周囲のｐＨ変化、イオン環境変化や温度変化によって除去される化合物に共有結合するものである（例えばｅｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ｈｕｂｐａｇｅｓ．ｃｏｍ/ｈｕｂ/Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ−Ｅｆｆｅｃｔｓ−Ｐｒｏｄｒｕｇｓ−Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ−Ｅｘａｍｐｌｅｓ−ａｎｄ−Ｓｏｕｒｃｅｓ−ｏｆ−Ｄｒｕｇ−Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを参照）。プロドラッグは、上記化合物の投与、目的部位への到達、代謝および／または排出を改善することができる。また、プロドラッグは投与された類似体の半減期を改善し、治療指数を高め、あるいは有効投与量（例えばＥＤ５０）を変えることを可能にするものである。例えば、保護基は、ノルセクリニンにおける再転位環の酸素分子結合メチルにおいてエーテルまたはエステルとして簡単に導入できるものである。
【００２６】
本発明は、本明細書に記載のセクリニン類似体およびノルセクリニン類似体の使用方法を提供するものでもある。セクリニンおよび／またはノルセクリニン類似体は、生体内器官細胞または生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｏｒ  ｅｘ  ｖｉｖｏ）から単離された細胞などの細胞に投与することができる。細胞は、器官例えば肺、腎臓、肝臓、腸、脳、皮膚、胆嚢、循環系、心臓、目、精巣、卵巣、膀胱、前立腺、大腸やリンパの要部を構成し、また細胞は器官系例えば循環系、消化系、心血管系、免疫系、リンパ系、骨格系、生殖系、泌尿系、内分泌系、呼吸系、筋肉系や神経系の内部に存在する。
【００２７】
セクリニン類似体は、細胞内や細胞表面にある小分子例えばタンパク質、酵素、核酸、炭水化物、イオン、陰イオン、脂質やアミノ酸に投与してもよく、あるいはこれらに接触させて、触媒活性を改善することによって（例えば抑制分子を阻害するか、あるいは触媒ドメインへのアクセスを改善することによって）、あるいは小分子上の活性部位例えば別な相互作用分子を対象とする触媒ドメインまたは結合部位を阻害することによって、細胞内の小分子の機能を改変するものである。細胞は真核生物などの生物から単離してもよく、あるいはその要部であってもよい。また、細胞としては病的な細胞、あるいは機能不全細胞、例えば望ましくない遺伝子またはタンパク質が発現している状態にある細胞でもよい。あるいは、適正に成熟できないほど異常に抑制された細胞でもよい。
【００２８】
本発明方法では、本明細書に記載のセクリニン類似体またはノルセクリニン類似体治療の必要性があることが判明しているか、あるいは必要性があると考えられる細胞または被検体を選択する。例えば、後述の実施例に記載するように、セクリニン類似体およびノルセクリニン類似体は、細胞の悪性化、細胞増殖、腫瘍成長、炎症、免疫系変調、骨髄障害や酵素触媒作用などの各種症状に対して治療効果、または緩和効果が明らかになっている。また、細胞または被検体は、合併症が疑われる場合を想定して選択してもよい。また、被検体は被検体の症候および生理機能（ｏｖｅｒａｌｌ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ）の分析時の医者の診断に基づいて選択してもよく、細胞は発現型や周知の/確認されている分類に基づいて選択してもよい。被検体は哺乳類、爬虫類、両生類、鳥類、魚類や植物でもよい。被検体は哺乳類動物、例えばヒト、ウシ科の動物、イヌ科の動物、ネコ科の動物、豚、ウマ科の動物、ネズミ科の動物、有袋目の哺乳類、羊などの哺乳類動物や関連哺乳類動物であってもよい。治療に適する細胞または被検体は、従来公知の評価に従って決定できる。例えば、過剰発現タンパク質や過少発現タンパク質、変形遺伝子、突然変異による翻訳後修飾タンパク質などのバイオマーカーについては、クロマトグラフィー、ブロッティング、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、ＥＬＩＳＡ、ＬＣ−ＭＳ/ＭＳなどの従来公知の各種手法によって検出できる。検出後、基礎的な症状を確認またはその誤りを確認するために、必要に応じて分析を行ってもよい。
【００２９】
本発明の方法では、異常成長している細胞例えば腫瘍性細胞、悪性細胞、転移細胞や腫瘍細胞などを治療または緩和する。本明細書に記載するように、セクリニン類似体およびノルセクリニン類似体は制御できない、あるいは突然変異による細胞成長を現している各種細胞に対して治療効果があることが証明されている。従来公知なように、細胞は機能不全になり、異常増殖するものであるが、その原因は広範に及び、ＤＮＡまたは遺伝子突然変異、不適切に発現または翻訳されたタンパク質、異常な遺伝子発現、異常なＤＮＡまたは遺伝子修復、化学的発癌物質への暴露、禁止された細胞死、環境暴露、ライフスタイルの選択や、これらが複合したものである。本発明は部分的には、本明細書に記載するセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を治療上有効な量で、即ち治療対象である動物やヒトの組織系の生物学的反応またはメディカルレスポンスを引き出し、少なくとも統計学上有意な被検体数に対して有利な効果、例えば徴候の改善、治癒、疾病負荷の減少、腫瘍体の減少、寿命延長、ＱＯＬ（ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅ）の改善が認められる量でセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を投与することによって細胞内の異常に対処するか、あるいは修正する方法を提供するものである。本発明のセクリニンまたはノルセクリニン類似体に癌性細胞を接触させると、癌性細胞の細胞死を誘発または誘導することが可能になる。また、本発明のセクリニンまたはノルセクリニン類似体に癌性細胞を接触させると、細胞成熟などの細胞分化を誘導でき、これによって全体的な細胞増殖を抑制することが可能になる。
【００３０】
また、本発明は本明細書に記載のセクリニン類似体またはノルセクリニン類似体と公知の化学療法薬とを併用することによって癌または癌性細胞を治療する併用療法を提供するものでもある。癌性細胞の場合、悪性または比非悪性癌または腫瘍部分になり得る。癌または腫瘍には、制限するものではないが、良性腫瘍、悪性腫瘍があり、以下例示すると、急性リンパ芽球白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、ＡＩＤＳ関連癌、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、（小脳または大脳）星細胞腫、基底細胞癌、胆管癌（胆管細胞癌）、膀胱癌、骨部腫瘍（骨肉腫/悪性線維性組織球腫瘍）、脳幹グリオーマ、脳癌、脳腫瘍（小脳星細胞腫、大脳星細胞/悪性グリオーマ、上衣腫、髄芽腫、テント上初生神経外胚葉性腫瘍、視路および視床下部グリオーマ）、乳癌、気管支アデノーマ／カルチノイド、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍（胃腸）、癌腫、小脳星細胞腫、大脳星細胞腫/悪性グリオーマ、子宮頚癌、幼児癌、慢性気管支炎、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、結腸癌、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、線維形成性円形小細胞腫瘍、気腫、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、ユーイング肉腫、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝臓外胆管癌、眼の癌（眼内メラノーマ、網膜芽細胞腫）、胆嚢癌、胃癌、胃腸カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、胚細胞腫瘍（頭蓋外、性腺外、卵巣）、妊娠性絨毛腫瘍、胃カルチノイド、有毛状細胞性白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝細胞性（肝臓）癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、視床下部および視覚路グリオーマ、眼内メラノーマ、膵島細胞カルシノーマ（膵臓内分泌腺）、カポジ肉腫、腎臓癌（腎臓細胞癌）、喉頭癌、白血病（急性リンパ芽球白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病）、口唇癌および口腔癌、脂肪肉腫、肝臓癌、肺癌（肺非小細胞癌、肺小細胞癌）、リンパ腫（ＡＩＤＳ関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ−細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫）、ワルデンシュトローム型マクログロブリン血症、男性乳癌、骨の悪性線維性組織球腫/骨肉腫、髄芽腫、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫（幼児期）、（原発腫瘍が潜在している（ｗｉｔｈ  ｏｃｃｕｌｔ  ｐｒｉｍａｒｙ））転移性扁平細胞頸部癌、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫/形質細胞腫瘍、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成疾患/骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、骨髄腫、多発性骨髄腫、骨髄増殖性症、鼻腔および副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、口腔癌、口腔咽頭癌、骨肉腫/骨の悪性線維性組織球腫、卵巣癌、上皮性卵巣癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性潜在腫瘍、膵臓癌、鼻腔および副鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、陰茎星細胞腫、松果体胚種、松果体芽腫およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍、下垂体腺腫、胸膜肺芽腫、中枢神経原発リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫（ユーイングファミリー腫瘍、カポジ肉腫、軟組織肉腫、子宮癌）、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉腫、扁平細胞癌、原発腫瘍���潜在している扁平頸部尿管癌、胃癌、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、精巣癌、咽頭癌、胸腺腫および胸腺癌、甲状腺癌、腎盂および尿管の移行細胞癌、トロホブラスト腫瘍、尿管癌および腎盂癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、視覚路および視床下部グリオーマ、外陰癌、ワルデンシュトローム型マクログロブリン血症およびウィルムス腫瘍（腎臓癌）などがある。
【００３１】
当業者ならば、本明細書に記載のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体は互いに併用できることを理解できるはずである。
【００３２】
本発明は部分的には、本明細書に記載の一種かそれ以上のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を生体外、生体内あるいは体外（ｅｘ  ｖｉｖｏ）のいずれかにおいて癌性細胞に投与することによって癌性細胞を治療する方法を提供するものである。癌性細胞は被検体由来のものでもよく、あるいは骨髄性白血病や骨髄性疾患に罹患している被検体由来のものでもよい。制限するものではないが例示すると、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄増殖性異形成症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成/骨髄増殖性腫瘍（ＭＤＳ/ＭＰＮ）、好酸球増多症およびＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＧＦＲＢおよびＦＧＦＲ１の異常を伴う骨髄腫瘍およびリンパ性腫瘍、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、真性多血症（ＰＶ）、本態性血小板血症（ＥＴ）、原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）、慢性好酸球性白血病（ＣＥＬ）、全身性肥満細胞症（ＳＭ）、およびまだ分類されていない骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ−Ｕ）がある。
【００３３】
本明細書で明らかにするように、ヒトの前骨髄白血病細胞および骨髄白血病細胞（例えばＨＬ６０、Ｍｏｌｍ−３およびＯＣｌ）に本明細書に記載のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を投与および/または接触させたところ、細胞分化が改善した。表１に、試験に使用した化合物および試験結果を示す。当業者ならば、セクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を他の分化誘導剤例えば全トランス型レチノイン酸、シタラビンおよび/またはアントラサイクリンなどと併用すると、さらに効果が増すことを理解できるはずである。また、当業者ならば、分化を誘導すると、ラジカル誘導酵素の存在がより少なくなるため、酸化障害がさらに減少することを理解できるはずである（例えばＹａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５９（５）３０２１−３０２５（１９８４）およびＷｅｉｌ  ｅｔ  ａｌ．、ＰＮＡＳ  ８４：２０５７−２０６１（１９８７）を参照）。
【００３４】
本発明は部分的には、被検体の細胞などの細胞の分化を誘導する方法を提供するものでもある。未分化細胞に本発明のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を接触させるか、あるいは投与することによって分化を誘導することができる。本明細書に記載するように、本発明のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体は、適正成熟できない異常細胞、例えば骨髄細胞の顆粒白血球や好中球の骨髄性細胞への分化を誘導するさいに親分子に対して予期しない改善効果をもつことが判明した。他の分化系疾患例えばＡＭＬやＡＰＬだけでなく増殖時細胞が適正に分化しない特徴をもつ一般的な癌も、本明細書に記載するセクリニン誘導体および/またはノルセクリニン誘導体を異常分化細胞に投与するか、あるいは接触させることによって分化が適正化するように調節または誘導できる。これら方法の場合、さらに、分化が適正化していない細胞の診断に基づいて随時被検体を選択し、かつ治療上有効量のセクリニン誘導体および/またはノルセクリニン誘導体を投与する。
【００３５】
本発明は部分的には、癌性細胞に本明細書に記載のセクリニン誘導体および/またはノルセクリニン誘導体を投与するか、あるいは接触させ、これによって増殖を抑制および/または癌細胞の細胞死を引き起こす癌全般の治療を提供するものでもある。セクリニン類似体およびノルセクリニン類似体それ自体は、骨髄成長を抑制するだけでなく、細胞の不可逆的な成長を阻止する骨髄分化を促すさいに有効であることが判明している（表１を参照）。さらに、本発明実施例で明らかにするように、また表２に示すように、本発明類似体は急性骨髄球白血病細胞成長、大腸癌細胞成長および卵巣癌細胞成長の抑制に効力があることが判明している。本明細書に記載のセクリニン誘導体またはノルセクリニン誘導体を治療上有効な量で癌細胞または癌に罹患している被検体に接触させるか投与すると、被検体の細胞または癌性細胞の増殖を抑制でき、また細胞死を引き起こすことができる。本発明は、被検体、あるいは骨髄細胞、その調節細胞またはその前駆体などの細胞に本発明のセクリニン類似体および／またはノルセクリニン類似体を接触させるか、あるいは投与することによって骨髄疾患を治療または改善する方法を提供するものでもある。骨髄疾患には、従来知られているように、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄増殖性異形成症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成/骨髄増殖性腫瘍（ＭＤＳ/ＭＰＮ）、好酸球増多症およびＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＧＦＲＢおよびＦＧＦＲ１の異常を伴う骨髄腫瘍およびリンパ性腫瘍、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、真性多血症（ＰＶ）、本態性血小板血症（ＥＴ）、原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）、慢性好酸球性白血病（ＣＥＬ）、全身性肥満細胞症（ＳＭ）、およびまだ分類されていない骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ−Ｕ）がある。当業者ならば、骨髄性疾患はクローンマーカー（Ｃｌｏｎａｌ  ｍａｒｋｅｒ）を基準にするなどバイオマーカーの存在や発現を通して検出することが可能である（フィラデルフィア染色体/ＢＣＲ−ＡＢＬ融合遺伝子）。さらに、骨髄性疾患の分子基本原則は一つの分子欠損ではなく、多重レベルプロセス内にあり、例えばＪＡＫ２突然変異、活性化チロシンキナーゼＰＤＧＦＲ−Ａ、ＰＤＧＦＲ−ＢまたはＦＧＦＲ１であり、あるいはＴＥＴ２、ＥＺＨ２、ＣＢＬなどのエピジェネティックな活性タンパク質遺伝子の突然変異である（例えばｗｗｗ．ｋｉｍ２．ｕｎｉｋｌｉｎｉｋｕｍ−ｊｅｎａ．ｄｅ/ｅｎ/ＫＩＭ＋ＩＩ/Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ＋ａｎｄ＋Ｍｅｄｉｃａｌ＋Ｏｎｃｏｌｏｇｙ/Ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ＋Ｃｅｎｔｅｒ＋ｆｏｒ＋Ｍｙｅｌｏｉｄ＋Ｄｉｓｅａｓｅｓ．ｈｔｍｌを参照）。
【００３６】
また、本発明は被検体の炎症または免疫異常症を治療する方法であって、被検体に本明細書に記載のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を接触させることからなる方法を提供するものである。セクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体は単球を刺激し、免疫反応を強めるために利用できる（例えばＳｈｉｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、２０１２、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ７（９）：ｅ４１２７８.ｄｏｌ：１０．１３７１/ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００４１２７８を参照）。この強められた免疫反応の一つの利用方法では、被検体が病原体感染を調節することを助ける。
【００３７】
また、本発明は本明細書に記載するようにある症状を治療する方法であって、有害な副作用の少ない方法を提供するものである。従来公知なように、セクリニンはＧＡＢＡＡレセプターを中和する。また、セクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体は、レセプターの結合/中和を抑制することが判明している（例えばＮｅｇａｎｏｖａ  ｅｔａｌ．、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｊ．（２００１）５（３）：２０８−２１４を参照）。ＧＡＢＡレセプターが結合するため、マウスに取り込まれるセクリニンとは異なり、Ｃ１４置換類似体やＣ１５置換類似体はいずれも高投与量（１００ｍｇ/ｋｇ以下）でマウスに取り込まれることはない。
【００３８】
また、本発明はセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体をアジュバントとして使用する方法を提供するものでもある。従来公知なように、アジュバントは、別な剤の薬学的効果または免疫学的効果を変更する剤を指す。アジュバントは、免疫反応を抑え込むために投与されたワクチンに使用されることが多い。アジュバントは処方を安定化する。セクリニンに関しては、ＧＡＢＡＡレセプターに作用することによって単球を刺激することが報告されている。即ち、本発明は例えばデング熱、ポリオ、麻疹、おたふくかぜ、風疹、ジステンパー、疱瘡、水疱瘡、帯状疱疹、エボラ熱、ＨＩＶ、炭疽病、ジフテリア、ＨＢＶ、ＨＰＶ、インフルエンザ、肝炎（Ａ、Ｂ）、脳炎、髄膜炎、百日咳、肺炎、狂犬病、腸チフス、破傷風や黄熱病など対象としたワクチンを調製する抗原とともに免疫アジュバントとしてセクリニン類似体およびノルセクリニン類似体を投与する方法を提供するものでもある。
【００３９】
さらに、本発明は病原体を治療する方法を提供するものでもある。セクリニンの場合、トキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）成長に対して抑制的な活性をもつＧＡＢＡＡレセプター拮抗剤として確認されている（Ｈｏｌｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．、２０１１Ｅｘｐ．Ｐａｒｉｓｉｔｏｌ.１２７：３７０−３７５）。即ち、本発明は病原体に本明細書に記載のセクリニン類似体および/またはノルセクリニン類似体を接触させることによって病原体の成長を抑制する方法を提供するものである。
【実施例】
【００４０】
非還元類似体の合成
本合成例では、Ｎ−ヨードスクシンイミドのＭｅＯＨ溶液を使用してセクリニンからセクリニンのγ−ヨード誘導体（セクリニンのＣ１４−ヨード誘導体、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａ）を調製する（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２０１２、６８、３９７２−３９７９に報告されている）。反応混合物からの生成物の単離時、副生物としてＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＢおよびＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｄも単離する。中間生成物ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２ＡおよびＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ｂを使用して、さらにセクリニンのＣ−１４類似体を下記反応式に従って調製する。
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【００４１】
本合成例では、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａおよび対応するボロン酸/エステルを以下の反応式に従って使用して、セクリニンのＣ−１４アルキル/アリール類似体を合成する。
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セクリニンのＣ−１４アルキル/アリール類似体：
【００４２】
ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａ（３４．３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の撹拌されている無水トルエン溶液か、あるいは無水テトラヒドロフラン溶液（０．７５ｍｌ）に二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（７ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を添加し、次に対応するボロン酸（０．２ｍｍｏｌ）を添加し、この後炭酸カリウム/水（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ/７５ｕＬ）を加えた。窒素雰囲気下で１５分間反応混合物を脱気してから、徐々に８０℃〜１００℃に加熱した。反応の進行をＴＬＣによって観察し、出発原料が完全に費消されるまで上記温度で１〜２時間反応混合物を撹拌した。水（２ｍｌ）に反応混合物を注ぎ、酢酸エチル（２×３ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層を食塩水（５ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、回転蒸発器で濃縮した。粗生成物を高真空乾燥し、適切な溶剤系を使用したシリカゲルクロマトグラフィーによって精製処理し、目的のセクリニンのＣ−１４アルキル/アリール類似体を４０〜７０％の収率で得た。上記に従って、セクリニンの以下のＣ−１４アルキル/アリール類似体を合成した。すべての化合物を１Ｈ  ＮＭＲによって評価した。
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【００４３】
別な合成例では、ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａおよび対応する末端アルキンを下記の反応式に従って使用してセクリニンのＣ−１４アルキニル類似体を合成できる。
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セクリニンのＣ−１４アルキニル類似体：
【００４４】
ＩＮＶＳ−ＭＧ−５２Ａ（２６ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン/テトラヒドロフラン（０．７５ｍｌ）溶液に二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（２．６ｍｇ、０．００３７５ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１．５ｍｇ、０．００７５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５２ｕＬ、０．３７５ｍｍｏｌ）に添加した。窒素雰囲気下で１０分間反応混合物を脱気し、次に徐々に８０℃に加熱した。この時点で、反応混合物は均質澄明な、茶褐色溶液になっていた。加熱を止め、反応混合物を室温に戻し、対応するアルキン（０．１１２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応の進行をＴＬＣによって観察し、出発原料が完全に費消されるまで、室温で反応混合物を１〜２時間撹拌した。水（２ｍｌ）に反応混合物を注ぎ、酢酸エチル（２×３ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層を食塩水（５ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、回転蒸発器で濃縮した。粗生成物を高真空乾燥し、適切な溶剤系を使用したシリカゲルクロマトグラフィーによって精製処理し、対応するセクリニンのＣ−１４アルキニル類似体を得た。上記に従って、セクリニンの以下のＣ−１４アルキニル類似体を合成した（収率は高く５０〜９０％）。すべての化合物を１Ｈ  ＮＭＲによって評価した。
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製薬上有用な塩の調製：
【００４５】
別な合成例では、以下に従って対応するセクリニン類似体から各種の製薬上有用な塩を合成する。
【００４６】
４−ジオキサン（０．５ｍｌ）にセクリニン類似体（０．１ｍｍｏｌ）を溶解し、２ＮＨＣｌ/１，４−ジオキサン溶液を反応混合物に０℃で添加した。反応混合物を３０分間〜２時間０℃で撹拌した。この間に、生成物がゆっくり析出した。ヘキサンまたはエーテル１ｍｌを加え、固形物をろ過処理し、ヘキサン/エーテル１ｍｌで洗浄し、対応するＨＣｌ塩を得た。
【００４７】
メタノールにセクリニン類似体（０．１ｍｍｏｌ）を溶解し、酒石酸（０．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を数時間８０℃に徐々に加熱した。この間に、生成物がゆっくり析出した。エーテル１ｍｌを加え、固形物をろ過処理し、エーテル１ｍｌで洗浄し、対応する酒石酸塩を得た。
【００４８】
以下の各種の製薬上有用なセクリニン類似体の塩を調製し、１Ｈ  ＮＭＲによって評価した。
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Ｃ−１５還元類似体
【００４９】
セクリニンのＣ−１５還元類似体を調製した。以下の一般的な反応式に従って、チアール/アミンの１，６−共役付加によってセクリニンＣ−１５類似体を調製できる。
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当業者ならば、同様にノルセクリニンを使用して、Ｃ−１５還元類似体を調製できることを理解できるはずである。
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【００５０】
テフロンキャップ付きのセプタ（ｓｅｐｔａ）または４ｍｌのバイアルを備えたオーブン乾燥式反応フラスコに５４．３ｍｇのセクリニン（０．２５ｍｍｏｌ）および０．３〜０．４ｍｍｏｌの対応するアミン/チアールを秤量した。１ｍｌのアセトニトリル、次にトリエチルアミン（１３９ｕＬ、１ｍｍｏｌ）を加え、室温で窒素雰囲気下で反応混合物を撹拌した。反応混合物をＴＬＣによって観察した。出発原料が完全に費消されるまで、あるいは生成物生成が最大化するまで、反応混合物を室温で約８時間〜２日間撹拌した。反応混合物中の揮発性成分をすべて減圧蒸発し、適切なヘキサン/アセトン溶剤系を使用して、シリカゲル担持フラッシュカラムクロマトグラフィーによって粗生成物を精製した。上記に従って、セクリニンの以下のＣ−１５類似体を合成した（収率は高く５０〜９５％）。すべての化合物を１Ｈ  ＮＭＲによって評価した。
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癌細胞に対するセクリニンおよびノルセクリニン類似体の効力
【００５１】
次に、ＨＬ６０細胞の分化および成長に対する本発明の類似体の影響力に関して試験、評価を行った。表１に代表的な化合物の生物学的データを示す。
【００５２】
[表１]
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【００５３】
本発明類似体を次に各種癌細胞系ＡＭＬ（Ｍｏｌ３、ＯＣＩ）、大腸癌（ＨＣＴ１１６）および卵巣癌（ＳＫＯＶ３）に対する成長抑制について試験した。表２にＩＣ５０を示す。
【００５４】
[表２]
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【００５５】
本明細書で言及した刊行物、特許公報および特許出願については、いずれも個々に本明細書に援用するものとする。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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