(57)【要約】  フローサイトメトリの操作のためのセットアップステップを自動的に実行するための装置および方法について説明する。本発明は、フローストリームの空間決定と、後続の分析デバイスおよび／または収集器の自動位置合わせとを実現する。フローストリーム特性の自動決定は、自動構成フローサイトメータパラメータを提供する。
2016521362.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フローサイトメータの検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、前記メモリは、前記フローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、前記フローストリームの前記１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
を備えるシステムであって、
前記プロセッサは、前記データ信号に応答して前記フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成され、
前記プロセッサは、
ａ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの空間位置を決定し、前記フローストリームの前記空間位置に対応するデータ信号を生成するか、
ｂ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの物理的寸法を決定し、前記フローストリームの前記物理的寸法に対応するデータ信号を生成するか、または、
ｃ）前記捕捉画像における前記フローストリームの有無を判断し、前記フローストリームが前記捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するために前記フローサイトメータのパラメータを評価し、前記予想されたパラメータと前記捕捉画像が一致しない場合に示す警告を生成する
ように構成されていることを特徴とするシステム。
【請求項２】
支持台をさらに備えることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
支持台と前記フローストリームの前記決定された空間位置とを自動的に位置合わせするように構成されていることを特徴とする請求項２に記載のシステム。
【請求項４】
容器と前記フローストリームとを自動的に位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に前記検出フィールドにおける前記フローストリームの前記位置をマッピングするステップと、
前記Ｘ−Ｙ平面に前記容器の前記位置をマッピングするステップと、
前記Ｘ−Ｙ平面において前記容器の前記位置を前記フローストリームの前記位置と一致させるステップと
を含むことを特徴とする請求項３に記載のシステム。
【請求項５】
第２の検出フィールドで前記フローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された第２の画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、前記メモリは、前記第２の検出フィールドにおける前記フローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、前記第２の検出フィールドにおける前記フローストリームの前記１つまたは複数の特性に対応する第２のデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
をさらに備えることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項６】
前記プロセッサは、前記第２の検出フィールドにおける前記フローストリームの前記空間位置を決定し、前記第２の検出フィールドにおける前記フローストリームの前記空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するように構成されていることを特徴とする請求項５に記載のシステム。
【請求項７】
前記プロセッサは、
ａ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの幅を決定し、前記フローストリームの前記幅に対応するデータ信号を生成し、
ｂ）前記１つまたは複数の画像からフローセルのノズルオリフィスの直径を決定し、前記フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成する
ように構成されていることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項８】
前記プロセッサは、前記決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、前記フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成され、
前記フローサイトメータの前記パラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、液滴駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択されることを特徴とする請求項３に記載のシステム。
【請求項９】
前記予想されたパラメータと前記捕捉画像とが一致しないという前記警告は、ノズルの詰まりを示すことを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項１０】
フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
前記検出フィールドにおける前記フローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
前記フローストリームの前記１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
前記データ信号に応答して前記フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を含む、方法であり、
ａ）前記検出フィールドにおける前記フローストリームの空間位置を決定し、前記フローストリームの前記空間位置に対応するデータ信号を生成するステップ、または、
ｂ）前記検出フィールドにおける前記フローストリームの物理的寸法を決定し、前記フローストリームの前記物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップ、または、
ｃ）前記捕捉画像における前記フローストリームの有無を判断し、前記フローストリームが前記捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するために前記フローサイトメータのパラメータを評価し、前記予想されたパラメータと前記捕捉画像が一致しない場合に示す警告を生成するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１１】
前記フローストリームの前記決定された空間位置に基づいて、支持台を自動的に位置合わせするステップをさらに含むことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記支持台と前記フローストリームの前記空間位置とを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に前記検出フィールドにおける前記フローストリームの前記位置をマッピングするステップと、
前記Ｘ−Ｙ平面に容器の前記位置をマッピングするステップと、
前記Ｘ−Ｙ平面において前記容器の前記位置を前記フローストリームの前記位置と一致させるステップと
を含むことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ａ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの幅を決定し、前記フローストリームの前記幅に対応するデータ信号を生成するステップと、
ｂ）前記１つまたは複数の画像からフローセルのノズルオリフィスの直径を決定し、前記フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するステップと
をさらに含むことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記予想されたパラメータと前記捕捉画像とが一致しないという警告の生成は、ノズルの詰まりを示すことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
フローサイトメータの試料ポートに試料を注入するステップを含み、前記フローサイトメータは、プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備えるシステムを備え、前記システムは、
検出フィールドで前記試料を含むフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
前記検出フィールドにおける前記フローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
前記フローストリームの前記１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
前記データ信号に応答して前記フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を行うように自動化され、
前記プロセッサは、前記データ信号に応答して前記フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成される、方法であり、
ａ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの空間位置を決定し、前記フローストリームの前記空間位置に対応するデータ信号を生成するステップ、または、
ｂ）前記１つまたは複数の画像から前記フローストリームの物理的寸法を決定し、前記フローストリームの前記物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップ、または、
ｃ）前記捕捉画像における前記フローストリームの有無を判断し、前記フローストリームが前記捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するために前記フローサイトメータのパラメータを評価し、前記予想されたパラメータと前記捕捉画像が一致しない場合に示す警告を生成するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
当技術分野で知られているフローサイトメータは、血液試料の細胞または他の任意のタイプの生体もしくは化学試料の対象となる粒子などの流体試料中の粒子の分析および分取のために使用される。フローサイトメータは、通常、血液試料などの流体試料を受け取るための試料貯蔵部と、シース流体を含むシース貯蔵部とを含む。フローサイトメータは、細胞ストリームとして流体試料中の粒子（以下、「細胞」と呼ばれる）をフローセルに輸送すると同時に、シース流体もフローセルに誘導する。
【背景技術】
【０００２】
フローセル内では、細胞ストリームに対して実質的に一定の速度を与えるため、細胞ストリームの周りに液体シースが形成される。フローセルは、フローセルでレーザビームの中心を通過するようにストリーム中の細胞を流体力学的に絞り込む。細胞がレーザビームと交差するポイントは、インタロゲーション（ｉｎｔｅｒｒｏｇａｔｉｏｎ）ポイントとして一般的に知られている。細胞がインタロゲーションポイントを通って移動する過程で、細胞は、レーザ光を散乱させる。また、レーザ光は、流体試料に追加されて対象となるある細胞に付着した蛍光マーカまたはストリームに混入された蛍光ビーズなど、細胞ストリーム中の蛍光特性を有する成分を励起する。フローサイトメータは、光電子増倍管、光ダイオードまたは他の光検出デバイスからなる適切な検出システムを含み、それらは、インタロゲーションポイントで焦点が合わせられる。フローサイトメータは、検出された光を分析して、細胞の物理および蛍光特性を測定する。フローサイトメータは、さらに、これらの測定特性に基づいて細胞を分取することができる。フローストリームは、流体工学システムおよび所望の分取速度に適切なノズル直径を有するノズルを介してフローセルを出る。
【０００３】
静電法で細胞を分取するため、荷電した液滴中に所望の細胞を含めなければならない。液滴を生成するため、圧電素子などの音響デバイスによってフローセルに急速に振動が与えられる。液滴の量は、フローストリームの流体力学的な特性およびノズル寸法によって従来通り推定される。液滴を荷電するため、フローセルは、その電位を急速に変更できる荷電要素を含む。細胞ストリームは、実質的に垂直下方にフローセルを出すため、液滴もまた、形成後にその方向に伝搬する。液滴は、荷電の有無にかかわらず、偏向板によって生成された１つまたは複数のフローストリームを収集するように適切に誘導される試料収集器で収集しなければならない。それに従って、液滴およびその中に含まれる細胞は、プレートの下流の適切な収集器で収集することができる。
【０００４】
上記で説明されるタイプと同様の公知のフローサイトメータは、例えば、米国特許第３，９６０，４４９号明細書、米国特許第４，３４７，９３５号明細書、米国特許第４，６６７，８３０号明細書、米国特許第５，４６４，５８１号明細書、米国特許第５，４８３，４６９号明細書、米国特許第５，６０２，０３９号明細書、米国特許第５，６４３，７９６号明細書および米国特許第５，７００，６９２号明細書で説明されており、各特許の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。公知のフローサイトメータの他のタイプは、ＦＡＣＳＶａｎｔａｇｅ（登録商標）、ＦＡＣＳｏｒｔ（登録商標）、ＦＡＣＳＣｏｕｎｔ（登録商標）、ＦＡＣＳｃａｎ（登録商標）およびＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（登録商標）システムであり、各々は、本発明の譲受人であるＢｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙによって製造されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第６５８９７９２号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
この方法は、一般に、フローサイトメータが、分取した細胞を収集器に分配し、したがって、妥当な精度で対象となる細胞を分取できるようにするが、方法は、セットアップ時にかなりの量のユーザ入力を必要とする。フローストリームと収集器とは、従来通り手動で位置合わせされる。流速やシース流体組成などの流体工学パラメータは、適切なノズル直径と一致させなければならない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示の態様は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するためのシステムを含む。ある実施形態によるシステムは、フローサイトメータのフローストリームの検出フィールドの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された画像センサと、１つまたは複数の捕捉画像からデータ信号を生成するように構成されたプロセッサとを含み、その結果、システムは、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整する。
【０００８】
ある実施形態では、対象システムは、フローサイトメータを用いた試料分析の間のユーザ入力または手動調整の必要性を低減するように構成される。いくつかの実施形態では、フローサイトメータのパラメータに対する調整がプロセッサによって制御されるように、対象となるシステムを部分的にまたは完全に自動化することができる。ある実施形態では、対象システムは、人間による入力なしで、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成される。
【０００９】
ある実施形態では、本開示は、フローサイトメータからの液体フローのストリーム位置を自動的に局在させるためのシステムであって、第１の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、第１の台とを備えるシステムであり、第１の台は、第１のカメラに動作上接続され、第１の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成される、システムを提供する。
【００１０】
システムは、第２のカメラをさらに含み得、第２のカメラは、第２の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第２の信号を生成するように適合され、第１および第２のカメラの第１および第２の検出フィールドは、ＸＹ平面で実質的に直交配向され、第１の台は、第２のカメラに動作上接続され、第１の信号に加えて第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成される。いくつかの実施形態では、第１の台上に、レーザが取り付けられ、収集デバイスが取り付けられる。
【００１１】
いくつかの実施形態では、システムは第２の台を含み得、収集デバイスは第２の台上に取り付けられ、第２の台は第１の信号および第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成される。システムは、第２のカメラからの第２の信号に応答してフローストリームの電荷を調整するように構成された電気系統をさらに備える。カメラと台との間の動作上の接続は、プロセッサによって仲介され、プロセッサは、第１のカメラ、第１および第２のカメラならびに第１の台に接続され、プロセッサは、第１および第２のカメラから信号を受信し、第１の台の最適位置を計算するように構成される。いくつかの実施形態では、動作上の接続は、プロセッサによって仲介され、プロセッサは、第１および第２のカメラならびに第２の台に接続され、プロセッサは、第１および第２のカメラから信号を受信し、第２の台の最適位置を計算するように構成される。いくつかの実施形態では、ストリームは、一連の液滴を含み得る。
【００１２】
ある実施形態による、ノズル開口部の直径を自動的に決定するためのシステムであって、第１の検出フィールドでストリーム寸法を検出し、ストリーム寸法を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、ストリーム寸法からノズル開口部の直径に対する値を決定し、値をフローサイトメータに伝送するように構成された、命令をその上に有するメモリを有するプロセッサとを備える、システムが提供される。ストリーム寸法は、ストリームの幅であり得る。いくつかの実施形態では、フローサイトメータは、伝送された値を受信した後に、一連のパラメータを自動的に調整するように構成することができる。一連のパラメータは、静水圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相を含む群から選択することができる。
【００１３】
また、本開示の態様は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法も含む。ある実施形態による方法は、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップとを含む。
【００１４】
また、本開示の態様は、対象方法を実践するためのコンピュータ制御システムであって、本明細書で説明される方法の１つまたは複数のステップを自動化するように構成されたプロセッサを有する１つまたは複数のコンピュータをさらに含む、システムも含む。いくつかの実施形態では、システムは、コンピュータプログラムがその上に格納されたコンピュータ可読記憶媒体を有するコンピュータを含み、コンピュータプログラムは、コンピュータ上にロードされる際、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するためのアルゴリズムと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令とを含む。ある例では、システムは、コンピュータプログラムがその上に格納されたコンピュータ可読記憶媒体を有するコンピュータを含み、コンピュータプログラムは、コンピュータ上にロードされる際、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するためのアルゴリズムと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令とを含む。
【００１５】
本発明は、以下の詳細な説明から、添付の図面と併せて読み進めると、最も良く理解することができる。図面には以下の図が含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】ある実施形態によるシステムの概略図について描写する。
【図２】ある実施形態による本開示の方法を実践するためのステップを示すフローチャートについて描写する。
【図３】ある実施形態による本開示の方法を実践するためのステップを示すフローチャートについて描写する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明をさらに詳細に説明する前に、説明される特定の実施形態は変化し得るため、この発明は、そのような実施形態に限定されないことを理解されたい。また、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書で使用される用語は、単に特定の実施形態を説明することを目的とし、限定することを意図しないことも理解されたい。
【００１８】
値の範囲が提供されている場合、文脈において明確に別段の指示がない限り、下限値の単位の１０分の１まで、その範囲の上限値と下限値との間に介在する各値、および、その示された範囲の他の示されたまたは介在する値が、本発明の範囲内に包含されると理解されたい。これらのより狭い範囲の上限値および下限値は、より狭い範囲に独立して含めることができ、これらも本発明の範囲内に包含され、示された範囲内で明確に除外されたいかなる限度値も対象とする。示された範囲が限度値の一方または両方を含む場合、それらの含まれる限度値のいずれかまたは両方を除外する範囲も本発明に含まれる。
【００１９】
特に別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学的用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書で説明されているものと同様のまたは均等ないかなる方法および材料も本発明の実践または試験に使用できるが、ここでは、代表的な例示的な方法および材料について説明する。
【００２０】
この明細書で引用されるすべての刊行物および特許は、個々の刊行物または特許の各々が参照により組み込まれるために具体的かつ個々に示されているかのように参照により本明細書に組み込まれ、刊行物が引用されるものに関連して方法および／または材料を開示および説明するために参照により本明細書に組み込まれる。いかなる刊行物の引用も、出願日前の刊行物の開示を目的とするものであり、本発明が以前の発明を理由にそのような刊行物に先行する権利がないことを容認するものと解釈すべきではない。さらに、提供される公開日は、実際の公開日と異なり得、独立して確認する必要があり得る。
【００２１】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈において明確に別段の指示がない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。特許請求の範囲は任意選択の要素を除外するように起案できることにもさらに留意されたい。したがって、この言明は、特許請求の範囲の要素の記述に関連した「唯一（ｓｏｌｅｌｙ）」、「のみ（ｏｎｌｙ）」および同様のものなどの排他的な用語の使用、または、「否定的な」限定の使用のための先行詞としての役割を果たすことを意図する。
【００２２】
この開示を読み進める上で当業者にとって明らかであるように、本明細書で説明され、示されている個々の実施態様の各々は、本発明の範囲または精神から逸脱することなく、他のいくつかの実施態様のいずれかの特徴から容易に分離することも、同特徴と組み合わせることもできる別々の構成要素および特徴を有する。記述されるいかなる方法も、記述される事象の順序または論理的に可能な他の任意の順序で実施することができる。
【００２３】
上記で要約されるように、本開示は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータの調整を自動化するように構成されたシステムを提供する。本開示のさらに説明する実施形態では、最初に、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成されたシステムについてさらに詳細に説明する。次に、対象システムを用いてフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法について説明する。また、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータに対する調整を自動化するコンピュータ制御システムも提供される。
【００２４】
フローサイトメータのパラメータを調整するためのシステム
本開示の態様は、フローサイトメータのパラメータを調整するように構成されたシステムを含む。「調整する」という用語は、本明細書では、フローサイトメータの１つまたは複数の機能パラメータを変更することを指すために従来の意味で使用される。以下でさらに詳細に説明されるように、所望の調整は、目標の観点で異なり得、いくつかの例では、所望の調整は、例えば、他の調整の中で特に、細胞分取精度の改善、粒子収集の強化、コンポーネント機能障害の特定（例えば、フローセルのノズルの詰まり）、エネルギー消費量、粒子荷電効率、より精度が高い粒子荷電、細胞分取の間の粒子偏向の強化など、いくつかの望ましいパラメータの効率の強化を最終的にもたらす調整である。実施形態では、対象システムは、フローサイトメータを用いた試料分析の間のユーザ入力または手動調整の必要性を低減するように構成される。ある実施形態では、対象となるシステムは、フローサイトメータのパラメータに対する調整がプロセッサによって制御されるように、完全に自動化することができる。「完全に自動化する」は、フローストリームの１つまたは複数のパラメータに対応するデータ信号や、フローストリームの１つまたは複数の捕捉画像から得られたデータ信号に応答して行われた調整が、対象システムへの人間の介入または手動入力をほとんどまたは全く必要としないことを意味する。ある実施形態では、対象システムは、人間の介入なしで、フローストリームの１つまたは複数のパラメータに対応するデータ信号に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成される。
【００２５】
上記で要約されるように、システムは、１つまたは複数の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの画像を捕捉するように構成された１つまたは複数の画像センサを含む。「検出フィールド」は、１つまたは複数の画像センサによって画像化されたフローストリームの領域を意味する。検出フィールドは、取り調べられている（ｉｎｔｅｒｒｏｇａｔｅｄ）フローストリームの特性に応じて異なり得る。実施形態では、検出フィールドは、フローストリームの０．００１ｍｍ以上（フローストリームの０．００５ｍｍ以上、０．０１ｍｍ以上、０．０５ｍｍ以上、０．１ｍｍ以上、０．５ｍｍ以上、１ｍｍ以上、２ｍｍ以上、５ｍｍ以上など、および１０ｍｍ以上を含む）に及び得る。例えば、対象システムがフローストリームの物理的寸法（例えば、幅）を決定するように構成される場合、検出フィールドは、フローストリームの平面断面であり得る。別の例では、対象システムがフローストリームの空間位置を決定する（例えば、フローセルのノズルの軸に対してフローストリームによって形成された角度を決定するなど）ように構成される場合、検出フィールドは、フローストリームの既定の長さであり得る。
【００２６】
対象システムによって取り調べられる検出フィールドは、調整されているフローサイトメータのパラメータに応じて異なり得る。いくつかの実施形態では、検出フィールドは、フローセルのノズルオリフィスを含む。他の実施形態では、検出フィールドは、対象となる粒子を含む液滴が荷電されるフローストリームの位置（すなわち、連続的なフローストリームが離散液滴を形成し始める「ブレイクオフ」ポイント）を含む。さらなる他の実施形態では、検出フィールドは、荷電粒子が細胞分取の間に偏向板によって偏向される領域を含む。
【００２７】
システムは、検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉するように構成された１つまたは複数の画像センサを含む。画像センサは、光学画像の捕捉および電子データ信号への光学画像の変換が可能な任意の適切なデバイスであり得、これらに限定されないが、電荷結合素子、半導体電荷結合素子（ＣＣＤ）、アクティブピクセルセンサ（ＡＰＳ）、相補型金属酸化膜半導体（ＣＭＯＳ）撮像素子またはＮ型金属酸化膜半導体（ＮＭＯＳ）撮像素子を含む。いくつかの実施形態では、画像センサは、ＣＣＤカメラである。例えば、カメラは、電子増倍型ＣＣＤ（ＥＭＣＣＤ）カメラまたは増強ＣＣＤ（ＩＣＣＤ）カメラであり得る。他の実施形態では、画像センサは、ＣＭＯＳ型カメラである。
【００２８】
取り調べられている検出フィールドの数および対象となるフローサイトメータパラメータの数に応じて、対象システムの画像センサの数は、要求通りに異なり得る。例えば、対象システムは、１つ以上の画像センサ（２つ以上の画像センサ、３つ以上の画像センサ、４つ以上の画像センサ、５つ以上の画像センサなど、１０以上の画像センサを含む）を含み得る。ある実施形態では、システムは、１つの画像センサを含む。他の実施形態では、システムは、２つの画像センサを含む。システムが２つ以上の画像センサを含む場合、各画像センサは、１０°〜９０°（１５°〜８５°、２０°〜８０°、２５°〜７５°など、および３０°〜６０°を含む）の角度で他の画像センサに対して配向することができる（Ｘ−Ｙ平面で示される通り）。ある実施形態では、各画像センサは、互いに直交配向される（Ｘ−Ｙ平面で示される通り）。例えば、対象システムが２つの画像センサを含む場合、第１の画像センサは、第２の画像センサに対して直交配向される（Ｘ−Ｙ平面で示される通り）。
【００２９】
対象システムが２つ以上の画像センサを含む場合、各画像センサは、同じセンサまたはセンサの組合せであり得る。例えば、対象システムが２つの画像センサを含む場合、いくつかの実施形態では、第１の画像センサはＣＣＤ型のデバイスであり、第２の画像センサはＣＭＯＳ型のデバイスである。他の実施形態では、第１の画像センサと第２の画像センサとは両方ともＣＣＤ型のデバイスである。さらなる他の実施形態では、第１の画像センサと第２の画像センサとは両方ともＣＭＯＳ型のデバイスである。
【００３０】
いくつかの実施形態では、画像センサは固定されており、フローサイトメータ内で単一の位置を維持する。他の実施形態では、画像センサは、フローストリームの経路に沿って移動するように構成することができる。例えば、画像センサは、フローストリーム沿いに上流および下流を移動して複数の検出フィールドで画像を捕捉するように構成することができる。例えば、システムは、フローストリームに沿って２つ以上の異なる検出フィールド（３つ以上の検出フィールド、４つ以上の検出フィールドなど、および５つ以上の検出フィールドを含む）で画像を捕捉するように適合された画像センサを含み得る。画像センサがフローストリームに沿って移動するように構成された場合、画像センサは、フローストリーム経路に沿って連続的にまたは離散間隔で移動することができる。いくつかの実施形態では、画像センサを、連続的に移動させる。他の実施形態では、画像センサを、フローストリーム経路に沿って離散間隔で（例えば、１ｍｍ以上の増分、２ｍｍ以上の増分など、および５ｍｍ以上の増分を含む）移動させることができる。
【００３１】
画像センサがフローストリームの経路に沿って異なる位置で画像を捕捉するように構成された場合、画像センサは、連続的にまたは離散間隔で画像を捕捉するように構成することができる。いくつかの例では、対象となる画像センサは、連続的に画像を捕捉するように構成される。他の例では、画像センサは、離散間隔で測定を行うように（０．００１ミリ秒ごと、０．０１ミリ秒ごと、０．１ミリ秒ごと、１ミリ秒ごと、１０ミリ秒ごと、１００ミリ秒ごと（１０００ミリ秒ごとを含む）または他のいくつかの間隔でフローストリームの画像を捕捉するなど）構成される。
【００３２】
以下でさらに詳細に説明されるように、画像センサは、各検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成される。例えば、画像センサは、各検出フィールドでフローストリームの２つ以上の画像（３つ以上の画像、４つ以上の画像、５つ以上の画像、１０以上の画像、１５以上の画像など、および２５以上の画像を含む）を捕捉するように構成することができる。検出フィールドで複数の画像が捕捉される場合、プロセッサは（以下で論じられるように）、複数の画像をまとめるためのデジタル画像処理アルゴリズムを含み得る。
【００３３】
フローストリーム速度および所望の画像解像度に応じて、画像センサは、完全なセンサを読み出す際、１００ｍｓ以下の露光時間（７５ｍｓ以下、５０ｍｓ以下、２５ｍｓ以下、１０ｍｓ以下、５ｍｓ以下、１ｍｓ以下、０．１ｍｓ以下、０．０１ｍｓ以下、０．００１ｍｓ以下、０．０００１ｍｓ以下、０．００００１ｍｓ以下など、および０．０００００１ｍｓ以下の露光時間を含む）を有し得る。例えば、フローセルのノズルオリフィスでフローストリームの画像を捕捉する検出フィールドにおける画像センサの露光時間は、０．０００１ｍｓ〜１０ｍｓ（０．００１ｍｓ〜５ｍｓ、０．０１ｍｓ〜２ｍｓなど、および０．１ｍｓ〜１ｍｓを含む）の露光時間を有し得る。ノズルオリフィスの下流のフローサイトメータのフローストリームの画像を捕捉する検出フィールドにおける画像センサの露光時間は、０．０００１ｍｓ〜１０ｍｓ（０．００１ｍｓ〜５ｍｓ、０．０１ｍｓ〜２ｍｓなど、および０．１ｍｓ〜１ｍｓを含む）の露光時間を有し得る。
【００３４】
ある実施形態では、対象システムの画像センサは、１Ｍ以上（１．５Ｍ以上など、例えば、２Ｍ以上、２．５Ｍ以上または３Ｍ以上）のアクティブピクセルを有し得る。ある態様では、ピクセルは、約０．３μｍの実際の物理的寸法に相当する。検出フィールドに応じて、いくつかの例では、画像センサは、１５０ｍｍ2 以上（約１５０ｍｍ2 〜約１７５ｍｍ2 、約１７５ｍｍ2 〜約２００ｍｍ2 、約２００ｍｍ2 〜約２２５ｍｍ2 、約２２５ｍｍ2 〜約２５０ｍｍ2 、約２５０ｍｍ2 〜約３００ｍｍ2 、約３００ｍｍ2 〜約４００ｍｍ2 、約４００ｍｍ2 〜約５００ｍｍ2 、約５００ｍｍ2 〜約７５０ｍｍ2 、約７５０ｍｍ2 〜約１０００ｍｍ2 または約１０００ｍｍ2 以上など）のセンサ面積を有する。
【００３５】
検出フィールドがフローストリームの画像を捕捉できる限り、画像センサは、フローサイトメータのフローストリームから任意の適切な距離で配置することができる。例えば、画像センサは、フローストリームから０．０１ｍｍ以上（フローサイトメータのフローストリームから０．０５ｍｍ以上、０．１ｍｍ以上、０．５ｍｍ以上、１ｍｍ以上、２．５ｍｍ以上、５ｍｍ以上、１０ｍｍ以上、１５ｍｍ以上、２５ｍｍ以上など、および５０ｍｍ以上を含む）の位置に配置することができる。
【００３６】
いくつかの実施形態では、画像センサは、フローストリーム軸に対してある角度で配置することができる。例えば、画像センサは、フローストリームの軸に対して、１０°〜９０°（１５°〜８５°、２０°〜８０°、２５°〜７５°など、および３０°〜６０°を含む）の角度で配置することができる。ある実施形態では、画像センサは、フローストリームの軸に対して、９０°の角度で配置される。
【００３７】
いくつかの例では、画像センサは、光学調整プロトコルも含む。「光学調整」は、画像センサによる検出フィールドの画像の捕捉を要求通りに変更できる（捕捉寸法を増加もしくは減少するため、または、画像の光学解像度を向上させるためなど）ことを意味する。いくつかの例では、光学調整は、画像センサによって捕捉される検出フィールドのサイズを増加する（画像センサの検出フィールドを５％以上、１０％以上、２５％以上、５０％以上など、および７５％以上増加することを含む）ように構成された拡大プロトコルである。他の例では、光学調整は、画像センサによって捕捉される検出フィールドのサイズを減少する（スリット状のビームの幅を５％以上、１０％以上、２５％以上、５０％以上など、および７５％以上減少することを含む）ように構成された縮小プロトコルである。ある実施形態では、光学調整は、捕捉画像の解像度を向上させる（捕捉画像の解像度を５％以上、１０％以上、２５％以上、５０％以上など、および７５％以上向上させることを含む）ように構成された解像度向上プロトコルである。画像センサによる検出フィールドの画像の捕捉は、任意の便利な光学調整プロトコルを用いて調整することができ、これらに限定されないが、レンズ、鏡、フィルタおよびそれらの組合せを含む。ある実施形態では、画像センサは、集光レンズを含む。集光レンズは、例えば、縮小レンズであり得る。他の実施形態では、集光レンズは、拡大レンズである。
【００３８】
また、本開示の画像センサは、１つまたは複数の波長分離器も含み得る。「波長分離器」という用語は、本明細書では、検出のために多色光をその波長成分に分離するための光学プロトコルを指すために従前の意味で使用される。ある実施形態によれば、波長分離は、多色光の特定の１つまたは複数の波長の範囲を選択的に通過または阻止することを含み得る。光の波長を分離するため、透過光は、任意の便利な波長分離プロトコルを通過することができ、これらに限定されないが、他の波長分離プロトコルの中で特に、着色ガラス、バンドパスフィルタ、干渉フィルタ、ダイクロイックミラー、回折格子、モノクロメータおよびそれらの組合せを含む。検出フィールド、光源および視覚化されているフローストリームに応じて、システムは、１つまたは複数の波長分離器（２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上など、および１０以上の波長分離器を含む）を含み得る。一例では、画像センサは、１つのバンドパスフィルタを含む。別の例では、画像センサは、２つ以上のバンドパスフィルタを含む。別の例では、画像センサは、２つ以上のバンドパスフィルタと、１つの回折格子とを含む。さらなる別の例では、画像センサは、複数のバンドパスフィルタと、１つのモノクロメータとを含む。ある実施形態では、画像センサは、フィルタホイールセットアップに構成された複数のバンドパスフィルタおよび回折格子を含む。画像センサが２つ以上の波長分離器を含む場合、波長分離器は、多色光を波長成分に分離するため、個別にまたは直列で利用することができる。いくつかの実施形態では、波長分離器は、直列に配列される。他の実施形態では、波長分離器は、波長分離器の各々を使用して１つまたは複数の測定が行われるように、個別に配列される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、システムは、１つまたは複数のバンドパスフィルタなどの１つまたは複数の光学フィルタを含む。例えば、いくつかの例では、対象となる光学フィルタは、２ｎｍ〜１００ｎｍの最小帯域幅を有するバンドパスフィルタ（３ｎｍ〜９５ｎｍ、５ｎｍ〜９５ｎｍ、１０ｎｍ〜９０ｎｍ、１２ｎｍ〜８５ｎｍ、１５ｎｍ〜８０ｎｍなど、および２０ｎｍ〜５０ｎｍの最小帯域幅を有するバンドパスフィルタを含む）である。他の例では、光学フィルタは、例えば、１６００ｎｍ以下の光の波長を減衰させるロングパスフィルタ（１５５０ｎｍ以下、１５００ｎｍ以下、１４５０ｎｍ以下、１４００ｎｍ以下、１３５０ｎｍ以下、１３００ｎｍ以下、１０００ｎｍ以下、９５０ｎｍ以下、９００ｎｍ以下、８５０ｎｍ以下、８００ｎｍ以下、７５０ｎｍ以下、７００ｎｍ以下、６５０ｎｍ以下、６００ｎｍ以下、５５０ｎｍ以下、５００ｎｍ以下など、および４５０ｎｍ以下の光の波長を減衰させるロングパスフィルタを含む）などのロングパスフィルタである。さらなる他の例では、光学フィルタは、例えば、２００ｎｍ以上の光の波長を減衰させるショートパスフィルタ（２５０ｎｍ以上、３００ｎｍ以上、３５０ｎｍ以上、４００ｎｍ以上、４５０ｎｍ以上、５００ｎｍ以上、５５０ｎｍ以上など、および６００ｎｍ以上の光の波長を減衰させるショートパスフィルタを含む）などのショートパスフィルタである。
【００４０】
他の実施形態では、波長分離器は、回折格子である。回折格子は、これらに限定されないが、透過型、分散型または反射型の回折格子を含み得る。回折格子の適切な間隔は、光源、検出フィールド、画像センサおよび他の存在する光学調整プロトコル（例えば、集光レンズ）の構成に応じて異なり得、０．０１μｍ〜１０μｍ（０．０２５μｍ〜７．５μｍ、０．５μｍ〜５μｍ、０．７５μｍ〜４μｍ、１μｍ〜３．５μｍなど、および１．５μｍ〜３．５μｍを含む）である。
【００４１】
いくつかの実施形態では、各画像センサは、検出フィールドでフローストリームに照射するための１つまたは複数の光源と動作可能に結合される。いくつかの実施形態では、光源は、例えば、５０ｎｍ以上に及ぶもの（１００ｎｍ以上、１５０ｎｍ以上、２００ｎｍ以上、２５０ｎｍ以上、３００ｎｍ以上、３５０ｎｍ以上、４００ｎｍ以上など、および５００ｎｍ以上に及ぶものを含む）などの広範囲の波長を有する光を放射する広帯域光源である。例えば、ある適切な広帯域光源は、２００ｎｍ〜１５００ｎｍの波長を有する光を放射する。適切な広帯域光源の別の例は、４００ｎｍ〜１０００ｎｍの波長を有する光を放射する光源を含む。他の広帯域光源の中で特に、ハロゲンランプ、ジュウテリウムアークランプ、キセノンアークランプ、安定化ファイバ結合広帯域光源、連続スペクトルを有する広帯域ＬＥＤ、スーパールミネセンス発光ダイオード、半導体発光ダイオード、広スペクトルＬＥＤ白色光源、複数のＬＥＤが統合された白色光源またはそれらの任意の組合せなどの任意の便利な広帯域光源プロトコルを使用することができる。
【００４２】
他の実施形態では、光源は、特定の波長または狭範囲の波長を放射する狭帯域光源である。いくつかの例では、狭帯域光源は、例えば、５０ｎｍ以下などの狭範囲の波長を有する光を放射する（４０ｎｍ以下、３０ｎｍ以下、２５ｎｍ以下、２０ｎｍ以下、１５ｎｍ以下、１０ｎｍ以下、５ｎｍ以下、２ｎｍ以下など、および特定の波長の光（すなわち、単色光）を放射する光源を含む）。狭範囲の波長のＬＥＤ、１つもしくは複数の光学バンドパスフィルタと、回折格子ともしくはモノクロメータと結合されたレーザダイオードもしくは広帯域光源、または、それらの任意の組合せなどの任意の便利な狭帯域光源プロトコルを使用することができる。
【００４３】
対象システムは、要求通りに、１つまたは複数の光源（２つ以上の光源、３つ以上の光源、４つ以上の光源、５つ以上の光源など、および１０以上の光源を含む）を含み得る。光源は、光源のタイプの組合せを含み得、例えば、２つの光源が使用される場合、第１の光源は、広帯域白色光源（例えば、広帯域白色光ＬＥＤ）であり得、第２の光源は、広帯域近赤外線光源（例えば、広帯域近赤外線ＬＥＤ）であり得る。他の例では、２つの光源が使用される場合、第１の光源は、広帯域白色光源（例えば、広帯域白色光ＬＥＤ）であり得、第２の光源は、狭スペクトル光源（例えば、狭帯域可視光線または近赤外線ＬＥＤ）であり得る。さらなる他の例では、光源は、複数の狭帯域光源（２つ以上のＬＥＤのアレイ、３つ以上のＬＥＤのアレイ、５つ以上のＬＥＤのアレイなど、および１０以上のＬＥＤのアレイを含む）であり、各々が特定の波長を放射する。
【００４４】
いくつかの実施形態では、光源は、２００ｎｍ〜１５００ｎｍ（２５０ｎｍ〜１２５０ｎｍ、３００ｎｍ〜１０００ｎｍ、３５０ｎｍ〜９００ｎｍなど、および４００ｎｍ〜８００ｎｍを含む）の波長を有する光を放射する。例えば、光源は、２００ｎｍ〜９００ｎｍの波長を有する光を放射する広帯域光源を含み得る。他の例では、光源は、２００ｎｍ〜９００ｎｍの波長を放射する複数の狭帯域光源を含む。例えば、光源は、複数の狭帯域ＬＥＤ（１ｎｍ〜２５ｎｍ）であり得、各々が２００ｎｍ〜９００ｎｍの波長を有する光を独立して放射する。いくつかの実施形態では、狭帯域光源は、狭帯域カドミウムランプ、セシウムランプ、ヘリウムランプ、水銀ランプ、水銀カドミウムランプ、カリウムランプ、ナトリウムランプ、ネオンランプ、亜鉛ランプまたはそれらの任意の組合せなどの２００ｎｍ〜９００ｎｍの光を放射する１つまたは複数の狭帯域ランプである。
【００４５】
ある実施形態では、光源は、定期的な閃光によってフローストリームが照射されるストロボ光源である。光源（例えば、閃光ランプ、パルス状レーザ）に応じて、ストロボの周波数は異なり得、０．０１ｋＨｚ以上（０．０５ｋＨｚ以上、０．１ｋＨｚ以上、０．５ｋＨｚ以上、１ｋＨｚ以上、２．５ｋＨｚ以上、５ｋＨｚ以上、１０ｋＨｚ以上、２５ｋＨｚ以上、５０ｋＨｚ以上など、および１００ｋＨｚ以上を含む）であり得る。これらの実施形態では、ストロボライトは、ストロボ周波数を規制する周波数生成器を有するプロセッサと動作可能に結合することができる。いくつかの例では、周波数生成器は、ストロボライトが液滴生成と同期化するように、液滴駆動生成器と結合される。他の例では、ストロボライトの周波数生成器は、ストロボライトの周波数が画像捕捉の周波数と同期化するように、１つまたは複数の光学センサと動作可能に結合される。ある例では、適切なストロボ光源および周波数コントローラは、これらに限定されないが、その開示が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，７００，６９２号明細書および米国特許第６，３７２，５０６号明細書で説明されているものを含む。また、ストロボおよびパルス光源については、その開示が参照により本明細書に組み込まれるＳｏｒｅｎｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．２，ｐｐ．１１５−２２（１９９３）およびＷｈｅｅｌｅｓｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｅｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．１，ｐｐ．２６５−２６８（１９７６）で説明されている。
【００４６】
上記で要約されるように、システムは、画像センサと動作可能に結合された１つまたは複数のプロセッサを含み、プロセッサは、捕捉画像からデータ信号を生成し、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成される。実施形態では、プロセッサは、捕捉画像から得られたデータ信号に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するため、メモリから命令を実行するように構成される。本開示の実施形態に従って調整することができるフローサイトメータのパラメータは、これらに限定されないが、静水圧、液滴荷電電圧、偏向板電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相を含む。ある実施形態では、プロセッサは、１つまたは複数の支持台と動作可能に結合され、支持台の配置は、捕捉画像から得られたデータ信号に応答して調整することができる。
【００４７】
実施形態では、プロセッサは、光源を用いて検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームに照射するステップ、フローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップ、捕捉画像に基づいてフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップ、および、データ信号に応答してフローサイトメータのパラメータを調整するステップなど、対象方法（以下でさらに詳細に説明される）のステップを実行するための複数の命令を有するメモリを含む。対象システムは、ハードウェアコンポーネントとソフトウェアコンポーネントとの両方を含み得、ハードウェアコンポーネントは、１つまたは複数のプラットホームの形態（例えば、サーバの形態）を取ることができ、その結果、機能要素、すなわち、システムの特定のタスク（情報の入力および出力の管理、情報の処理など）を行うシステムのそれらの要素は、システムを表す１つまたは複数のコンピュータプラットホーム上および１つまたは複数のコンピュータプラットホームにわたってソフトウェアアプリケーションを実行することによって行うことができる。プロセッサは、光源を用いて検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームに照射するステップ、フローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップ、捕捉画像に基づいてフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップ、および、データ信号に応答してフローサイトメータのパラメータを調整するステップなど、対象方法のステップを実行するための命令がその上に格納されたメモリを含む。
【００４８】
実施形態では、プロセッサは、捕捉画像からフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するように構成される。フローストリームが連続的な検出フィールドでは、プロセッサは、フローストリームの空間位置、フローストリームの寸法（フローストリーム幅など）、ならびに、流速およびフロー乱流に対応するデータ信号を生成するように構成することができる。フローストリームが離散液滴で構成される検出フィールドでは、プロセッサは、フローストリームの空間位置、液滴サイズ（液滴直径および量を含む）、液滴駆動周波数、液滴振幅、ならびに、液滴サイズおよび周波数の均一性に対応するデータ信号を生成するように構成することができる。ある実施形態では、プロセッサは、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力データに基づいて予想されるフローストリームのサイズと比較したフローストリームのサイズの比率に対応するデータ信号を生成するように構成することができる。他の実施形態では、プロセッサは、特定の検出フィールドにおけるフローストリームの有無を判断するために捕捉画像を評価するように構成することができる。さらなる他の実施形態では、プロセッサは、フローセルのノズルオリフィスのサイズを決定するためにフローストリームの捕捉画像を評価するように構成することができる。
【００４９】
いくつかの実施形態では、プロセッサは、検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉する画像センサと動作可能に結合され、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成する。例えば、プロセッサは、検出フィールドにおけるフローストリームの捕捉画像を取り入れ、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの空間位置をマッピングすることができる。いくつかの例では、Ｘ−Ｙ平面におけるフローストリームの位置は、フローセルのノズルによって形成された垂直軸に対するフローストリームの位置を決定するため、フローセルのノズルの垂直軸の空間位置と比較される。検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置に基づいて、プロセッサは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成する。
【００５０】
これらの実施形態では、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するためにプロセッサで使用することができる。いくつかの例では、データ信号は、細胞分取のためなど、粒子を収集するための１つまたは複数の容器を有する支持台の位置を調整するために使用される。ある実施形態では、プロセッサは、フローストリームの位置に対応するデータ信号を生成し、支持台の位置を調整し、その結果、支持台上の収集容器は、フローストリームの軌道と位置合わせされる。例えば、プロセッサは、Ｘ−Ｙ平面に各検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングし、Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングし、Ｘ−Ｙ平面における容器の位置をＸ−Ｙ平面におけるフローストリームの位置と一致させ、収集容器とフローストリームとを位置合わせするように構成することができる。いくつかの例では、対象システムは、２つの検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするように構成される。これらの例では、プロセッサは、Ｘ−Ｙ平面に第１の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置をマッピングし、Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置をマッピングする。第１および第２の検出フィールドにおけるフローストリームのマッピングされた位置に基づいて、プロセッサは、フローサイトメータにおけるフローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するように構成される。
【００５１】
これらの実施形態では、プロセッサは、フローストリームの収集を最適化するため、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成し、Ｘ−Ｙ平面における支持台の位置を自動的に調整する。例えば、収集の最適化は、フローストリームと収集容器との位置ずれが原因で支持台上の容器によって収集されないフローストリームの粒子の数を低減することを含み得る。例えば、位置ずれが原因で支持台上の容器によって収集されない粒子の数は、データ信号に応答して調整されない支持台上の容器と比較して５％以上（１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）低減される。言い換えれば、ある例では、プロセッサは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して支持台の位置を自動的に位置合わせし、その結果、容器によって収集される粒子の数は、データ信号に応答して調整されない支持台上の容器と比較して５％以上（１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）増加される。他の例では、細胞分取の間に荷電粒子を収集するための容器を有する支持台の位置の調整は、データ信号に応答して調整されない支持台での収集と比較して２倍以上（３倍以上、５倍以上など、および１０倍以上を含む）増加することができる。
【００５２】
いくつかの実施形態では、支持台は、偏向板の下流に配置され、電荷（すなわち、正、負および中性）に基づいて分離された分取細胞を収集するための容器を含む。いくつかの例では、支持台は、３つ以上の容器を含み得る。他の例では、支持台は、分取細胞を収集するための３つ以上のコンパートメントに区切られた単一の容器を含む。画像センサは、偏向板の下流の検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉するように構成され、画像センサと動作可能に結合されたプロセッサは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成する。これらの実施形態では、プロセッサは、各フローストリームの捕捉画像を取り入れ、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの空間位置をマッピングする。いくつかの例では、偏向板の影響に起因する偏差を決定するため、Ｘ−Ｙ平面におけるフローストリームの位置は、偏向板に入る前のフローストリームの位置と比較される。これらの実施形態では、プロセッサは、中性粒子のフローストリーム、負の粒子のフローストリームおよび正の粒子のフローストリームの位置、または、それらの任意の組合せに対応する異なるデータ信号を生成することができる。一例では、プロセッサは、偏向板による偏向の後の中性粒子のフローストリーム位置に対応するデータ信号を生成する。別の例では、プロセッサは、偏向板による偏向の後の負の粒子のフローストリーム位置に対応するデータ信号を生成する。さらなる別の例では、プロセッサは、偏向板から来る正の粒子のフローストリーム位置に対応するデータ信号を生成する。さらなる別の例では、プロセッサは、正の粒子、負の粒子および中性粒子のフローストリーム位置に対応するデータ信号を生成する。
【００５３】
各フローストリームの決定された空間位置に基づいて、プロセッサは、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整する。例えば、データ信号は、正の粒子、負の粒子および中性粒子を収集するための容器を有する支持台の位置を調整するために使用することができる。これらの例では、プロセッサは、収集を最適化するため、各フローストリーム（すなわち、中性粒子のストリーム、正の粒子のストリームおよび負の粒子のストリーム）の空間位置に対応するデータ信号を生成し、支持台の位置を自動的に調整して、収集容器とフローストリームの各々とを位置合わせする。例えば、支持台の位置は、収集容器と各フローストリームとを位置合わせするために自動的に調整することができ、その結果、容器によって収集される粒子の数は、データ信号に応答して調整されない支持台上の容器と比較して５％以上（１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）増加される。
【００５４】
上記で要約されるように、本開示の実施形態によるシステムは、フローサイトメータのフローストリームの捕捉画像から得られたデータ信号に基づいて、フローサイトメータのパラメータを調整するように自動化される１つまたは複数のプロセッサを含む。ある実施形態では、調整することができるフローサイトメータのパラメータは、シース流体圧、静水圧、液滴荷電電圧、偏向板電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相を含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して静水圧を調整するように構成することができる。いくつかの例では、静水圧は、０．１ｐｓｉ以上増加することができる（０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上静水圧を増加することを含む）。例えば、静水圧は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上静水圧を増加することを含む）。他の例では、静水圧は、０．１ｐｓｉ以上低減される（０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上静水圧を低減することを含む）。例えば、静水圧は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上静水圧を低減することを含む）。
【００５６】
さらなる他の実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴荷電電圧を調整するように構成することができる。いくつかの例では、液滴荷電電圧は、０．０１Ｖ以上増加される（０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．５Ｖ以上、１Ｖ以上、５Ｖ以上、１０Ｖ以上、１５Ｖ以上、２５Ｖ以上、５０Ｖ以上など、および７５Ｖ以上液滴荷電電圧を増加することを含む）。例えば、液滴荷電電圧は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴荷電電圧を増加することを含む）。他の例では、液滴荷電電圧は、０．０１Ｖ以上低減される（０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．５Ｖ以上、１Ｖ以上、５Ｖ以上、１０Ｖ以上、１５Ｖ以上、２５Ｖ以上、５０Ｖ以上など、および７５Ｖ以上液滴荷電電圧を低減すること含む）。例えば、液滴荷電電圧は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴荷電電圧を低減することを含む）。
【００５７】
さらなる他の実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して偏向板電圧を調整するように構成することができる。いくつかの例では、偏向板電圧は、５Ｖ以上増加される（１０Ｖ以上、５０Ｖ以上、１００Ｖ以上、２５０Ｖ以上、５００Ｖ以上、１０００Ｖ以上など、および２０００Ｖ以上偏向板電圧を増加すること含む）。例えば、偏向板電圧は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上偏向板電圧を増加することを含む）。他の例では、偏向板電圧は、０．５Ｖ以上低減される（５Ｖ以上、１０Ｖ以上、５０Ｖ以上、１００Ｖ以上、２５０Ｖ以上、５００Ｖ以上、１０００Ｖ以上など、および２０００Ｖ以上偏向板電圧を低減すること含む）。例えば、偏向板電圧は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上偏向板電圧を低減することを含む）。
【００５８】
さらなる他の実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴駆動周波数を調整するように構成することができる。いくつかの例では、液滴駆動周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）増加される。例えば、液滴駆動周波数は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴駆動周波数を増加することを含む）。他の例では、液滴駆動周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）低減される。例えば、液滴駆動周波数は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴周波数を低減することを含む）。さらなる他の実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴遅延を調整するように構成することができる。いくつかの例では、液滴遅延は、０．０１マイクロ秒以上増加される（０．０５マイクロ秒以上、０．１マイクロ秒以上、０．３マイクロ秒以上、０．５マイクロ秒以上、１マイクロ秒以上、２．５マイクロ秒以上、５マイクロ秒以上、７．５マイクロ秒以上など、および１０マイクロ秒以上液滴遅延を増加することを含む）。例えば、液滴遅延は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴遅延を増加することを含む）。他の例では、液滴遅延は、０．０１マイクロ秒以上低減される（０．０５マイクロ秒以上、０．１マイクロ秒以上、０．３マイクロ秒以上、０．５マイクロ秒以上、１マイクロ秒以上、２．５マイクロ秒以上、５マイクロ秒以上、７．５マイクロ秒以上など、および１０マイクロ秒以上液滴遅延を低減することを含む）。例えば、液滴遅延は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴遅延を低減することを含む）。
【００５９】
さらなる他の実施形態では、プロセッサは、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴振幅を調整するように構成することができる。いくつかの例では、液滴振幅は、０．０１Ｖ以上増加される（０．０２５Ｖ以上、０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．２５Ｖ以上、０．５Ｖ以上など、および１Ｖ以上液滴振幅を増加すること含む）。例えば、液滴振幅は、１％以上増加することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴振幅を増加することを含む）。他の例では、液滴振幅は、０．０１Ｖ以上低減される（０．０２５Ｖ以上、０．０５Ｖ以上、０．０７５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．２５Ｖ以上など、および１Ｖ以上液滴振幅を低減すること含む）。例えば、液滴振幅は、１％以上低減することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上など、および９０％以上液滴振幅を低減することを含む）。
【００６０】
いくつかの実施形態では、プロセッサは、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの画像を捕捉する画像センサと動作可能に結合され、捕捉画像に基づいてフローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成する。フローストリームが連続的なストリームである場合、いくつかの例では、プロセッサは、捕捉画像を取り入れ、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するように構成される。フローストリームが離散液滴で構成される検出フィールドでは、いくつかの例では、プロセッサは、液滴直径に対応するデータ信号を生成するように構成される。
【００６１】
ある実施形態では、プロセッサは、捕捉画像から決定されたフローストリームの物理的寸法を、フローサイトメータの実験的特性（フローセルのノズルオリフィスのサイズおよびシース流体圧など）およびユーザによって入力されたパラメータに基づいて予想される寸法と比較するように構成することができる。これらの実施形態では、プロセッサは、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力パラメータに基づいて予想されるフローストリーム寸法と比較したフローストリームの物理的寸法の比率に対応するデータ信号を生成するように構成される。例えば、プロセッサは、フローストリームが、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力パラメータに基づいて予想されるフローストリームのサイズの９９％以下（予想されるフローストリームのサイズの９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、５０％以下、２５％以下など、および１０％以下を含む）であることを示すデータ信号を生成するように構成することができる。他の実施形態では、プロセッサは、フローストリームが、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力パラメータに基づいて予想されるサイズより大きい（フローストリームのサイズの１０５％以上、１１０％以上、１２５％以上など、および１５０％以上を含む）ことを示すデータ信号を生成するように構成することができる。これらの実施形態では、プロセッサは、捕捉画像からのフローストリームサイズとフローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力に基づいて予想されるフローストリームのサイズとの比率に対応するデータ信号に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータに対する調整を自動化するように構成することができる。例えば、プロセッサは、決定された比率に応答してポンプ速度、静水圧および液滴駆動周波数を自動的に調整するように構成することができる。
【００６２】
ある例では、プロセッサは、フローセルのノズル開口部の直径を決定するように構成される。これらの実施形態では、プロセッサは、フローセルのノズルのオリフィスにおけるフローストリームの画像を捕捉する画像センサと動作可能に結合され、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成する。フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号に基づいて、プロセッサは、フローセルのノズル開口部の直径を決定するように構成される。いくつかの例では、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号に基づいて、プロセッサは、フローセルのノズル開口部の直径が２５μｍ以上（３５μｍ以上、４５μｍ以上、５０μｍ以上、６０μｍ以上、７５μｍ以上、１００μｍ以上など、および１５０μｍ以上を含む）であることを決定することができる。例えば、システムは、２５μｍ〜２００μｍ（３５μｍ〜１７５μｍ、５０μｍ〜１５０μｍなど、および７５μｍ〜１００μｍを含む）のフローストリームの物理的寸法からフローセルのノズル開口部の直径を決定するように構成することができる。
【００６３】
ある例では、ノズル開口部の直径は、フローストリームの幅に基づいて決定される。他の例では、ノズル開口部の直径は、液滴量に基づいて決定される。
【００６４】
ある例では、プロセッサは、決定されたノズル開口部の直径に基づいて、例えば、上記で論じられるような、静水圧、シース流体圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅、電荷位相およびそれらの任意の組合せなどの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成することができる。
【００６５】
いくつかの実施形態では、プロセッサは、フローストリームの捕捉画像を使用して決定されたフローセルのノズルオリフィスのサイズに対応するデータ信号に応答して液滴駆動周波数を自動的に調整するように構成することができる。例えば、液滴駆動周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）増加することができる。他の例では、プロセッサは、フローストリームの捕捉画像を使用して決定されたフローセルのノズルオリフィスのサイズに応答して液滴駆動周波数を自動的に低減するように構成される（０．０１Ｈｚ以上、０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）。
【００６６】
他の実施形態では、プロセッサは、フローストリームの捕捉画像を使用して決定されたフローセルのノズルオリフィスのサイズに対応するデータ信号に応答してシース流体圧を自動的に調整するように構成することができる。例えば、シース流体圧は、０．００１ｐｓｉ以上増加することができる（０．００５ｐｓｉ以上、０．０１ｐｓｉ以上、０．０５ｐｓｉ以上、０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を増加することを含む）。他の例では、プロセッサは、フローストリームの捕捉画像を使用して決定されたフローセルのノズルオリフィスのサイズに応答してシース流体圧を自動的に低減するように構成される（０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を低減することを含む）。
【００６７】
いくつかの実施形態では、対象となるシステムは、フローストリームのブレイクオフポイントにおける検出フィールドで画像を捕捉するように構成された画像センサを含む。「ブレイクオフポイント」という用語は、本明細書では、連続的なフローストリームが液滴を形成し始めるポイントを指すために従前の意味で使用される。これらの実施形態では、対象システムは、プロセッサを含み、プロセッサは、画像センサと動作可能に結合され、ブレイクオフポイントの下流の液滴の落下量に対応するデータ信号を生成するように構成される。プロセッサは、フローストリームの液滴の捕捉画像を取り入れ、落下量を測定する。落下量に対応するデータ信号は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するためにプロセッサで使用することができる。
【００６８】
いくつかの実施形態では、落下量に対応するデータ信号は、フローストリームの液滴駆動周波数を自動的に調整するためにプロセッサで使用される。例えば、プロセッサは、液滴駆動周波数を自動的に低減するように構成することができる（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）。他の例では、プロセッサは、決定された落下量に対応するデータ信号に応答して２倍以上（３倍以上、４倍以上、５倍以上など、および１０倍以上を含む）液滴駆動周波数を自動的に低減するように構成される。さらなる他の例では、プロセッサは、液滴駆動周波数を自動的に増加するように構成される（落下量に対応するデータ信号に応答して５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）。さらなる他の例では、プロセッサは、２倍以上（３倍以上、４倍以上、５倍以上など、および１０倍以上を含む）液滴駆動周波数を自動的に増加するように構成される。
【００６９】
他の実施形態では、落下量に対応するデータ信号は、細胞分取の間の試料収集量を自動化するためにプロセッサで使用することができる。例えば、各収集試料の所望の量は、プロセッサに入力することができ、落下量に対応するデータ信号に基づいて、フローサイトメータは、収集容器を取り外すかまたはフローサイトメータによってフローストリームを停止させることによってなど、既定の時間量の後に試料の収集を停止するように自動化することができる。
【００７０】
いくつかの実施形態では、プロセッサは、検出フィールドにおけるフローストリームの有無を判断するように構成することができる。対象となるシステムは、フローセルのノズルのオリフィスを出たフローサイトメータのフローストリームの画像を捕捉するように構成された画像センサと、画像センサと動作可能に結合され、検出フィールドにおけるフローストリームの有無を判断するために捕捉画像を評価するように構成されたプロセッサとを含み得る。例えば、フローセルのノズルオリフィスの捕捉画像におけるフローストリームの有無の判断は、フローセルのノズルの詰まりがあるかどうかを判断するために使用することができる。これらの実施形態では、画像センサによる捕捉画像は、プロセッサによって評価され、プロセッサによってフローストリームが画像で検出された場合、プロセッサは、フローストリームの存在を示す信号を生成するように構成される。他方では、捕捉画像を評価した後でフローストリームが捕捉画像に存在しないとプロセッサが判断した場合、プロセッサは、フローストリームの不在を示す信号を生成するように構成することができる。
【００７１】
フローストリームが捕捉画像に存在しないとプロセッサが判断した場合、ある実施形態では、対象システムは、フローストリームの不在がフローサイトメータの機能障害（ノズルの詰まりなど）の結果生じたものであるとユーザに自動的に警告するように構成される。これらの実施形態では、プロセッサは、フローストリームの不在に対応するデータ信号を、フローストリームが予想されるべきであるかどうかに関するユーザからの入力と相関させる。いくつかの実施形態では、ユーザは、ノズルからのフローストリームがフローストリームを形成することなく廃液容器に誘導される「クローズドループ」構成を有するようにシステムを構成することができる。これらの実施形態では、フローストリームが予想されないため、フローサイトメータは、機能障害（例えば、ノズルの詰まり）についてユーザに警告しない。しかし、フローストリームが予想される場合（通常の使用の間など）は、プロセッサは、捕捉画像を評価した後にフローストリームが検出されなければ、機能障害についてユーザに警告するように自動化される。
【００７２】
ある実施形態では、プロセッサが捕捉画像に基づいてフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成した後、出力モジュールは、フローサイトメータのパラメータを伝達することができ、フローサイトメータのパラメータは、データ信号に応答して調整することができる。いくつかの例では、出力モジュールは、フローサイトメータのパラメータを調整する対象システムと連動して出力を伝達する。他の例では、出力モジュールは、調整の前にパラメータを伝達し、ユーザによる調整の確認を必要とする場合がある。プロセッサからの出力は、例えば、モニタ上に表示することによってまたはレポートを印刷することによってなど、任意の便利なプロトコルによってユーザに伝達することができる。
【００７３】
上記で論じられるように、いくつかの実施形態では、システムは、プロセッサと動作可能に結合された１つまたは複数の支持台を含む。適切な支持台は、他のタイプの支持構造の中で特に、平面基板、輪郭成形された取り付けデバイス、円筒状または管状の支持構造、レーザまたはＬＥＤホルダなど、対象システムの１つまたは複数のコンポーネントを適切な位置で保持するように構成されたいかなる便利な取り付けデバイスでもあり得る。いくつかの例では、支持台は、レーザまたはＬＥＤなどの照射デバイス用のマウントである。他の例では、システムは、フローストリームから粒子を収集するための１つまたは複数の容器を保持するための支持構造を含む。例えば、支持台は、これらに限定されないが、他のタイプの容器の中で特に、試験管、円錐管、マイクロタイタープレート（例えば、９６ウェルプレート）などのマルチコンパートメント容器、遠心分離管、培養管、マイクロ管、キャップ、キュベット、ボトル、直線状ポリ容器を含む、容器を適切な位置で保持するように構成することができる。
【００７４】
対象となるシステムは、要求通りに、１つまたは複数の支持台（２つ以上、３つ以上、４つ以上など、および５つ以上の支持台を含む）を含み得る。例えば、支持台の数は、１〜１０の支持台（２〜７の支持台など、３〜５の支持台を含む）であり得る。ある実施形態では、対象となるシステムは、１つの支持台を含む。他の実施形態では、システムは、２つの支持台を含む。一例では、対象システムは、フローストリームから液滴を収集するための容器を有する支持台を含む。別の例では、対象システムは、取り付けられたレーザを有する支持台を含む。さらなる別の例では、対象システムは、取り付けられたレーザを有する第１の支持台と、フローストリームから液滴を収集するための容器を有する第２の支持台とを含む。
【００７５】
いくつかの実施形態では、支持台は可動である。例えば、一例では、支持台は、収集容器がフローストリームと位置合わせされるように、支持台上の収集容器の位置を調整するように移動することができる。別の例では、支持台は、レーザの位置を調整するように移動することができる。いくつかの例では、支持台は、フローストリームの軸と直交するＸ−Ｙ平面でなど、二次元で移動させる。他の例では、支持台は、三次元で移動させる。支持台が移動するように構成される場合、支持台は、連続的にまたは離散間隔で移動することができる。いくつかの実施形態では、支持台は、連続動作で移動させる。他の実施形態では、支持台は、離散間隔で（例えば、０．０１ミクロン以上の増分、０．０５ミクロン以上、０．１ミクロン以上、０．５ミクロン以上、１ミクロン以上、１０ミクロン以上、１００ミクロン以上、５００ミクロン以上、１ｍｍ以上、５ｍｍ以上、１０ｍｍ以上など、および２５ｍｍ以上の増分を含む）移動させる。
【００７６】
いかなる変位プロトコルも、モータ作動移動台、リードスクリュー移動アセンブリ、ギア式移動デバイス（他のタイプのモータの中で特に、ステッパモータ、サーボモータ、ブラシレス電動モータ、ブラシ付きＤＣモータ、マイクロステップ駆動モータ、高分解能ステッパモータを使用するものなど）を備える支持台を移動するなど、支持構造を移動するために使用することができる。
【００７７】
本開示のある実施形態は、図１を参照して説明することができる。本発明の実施形態を使用するフローサイトメータ１００が図１に示される。上記で論じられるように、フローサイトメータ１００は、フローセル１０４と、フローセルに流体試料（例えば、血液試料）を提供するための試料貯蔵部１０６と、フローセルにシース流体を提供するためのシース貯蔵部１０８とを含む。フローサイトメータ１００は、フローストリーム中に細胞を有する流体試料をシース流体の層流と併せてフローセル１０４に輸送するように構成される。フローセル１０４内のインタロゲーションゾーン１０３におけるフローストリームの分析は、試料の特性を決定して分取パラメータを制御する（本明細書で説明されるように）ために使用することができる。試料インタロゲーションプロトコルは、フローストリームに照射するための光源（例えば、レーザ）１１２と、１つもしくは複数の検出器１０９（例えば、光電子増倍管（ＰＭＴ）、電荷結合素子（ＣＣＤ））または他の任意の適切なタイプの光検出デバイスとを含み得る。光源からの光がインタロゲーションゾーン１０３の試料ストリームと交差するところでは、試料ストリーム流体によって、特に、試料ストリーム中に存在する細胞によって、レーザ光が散乱する。散乱したレーザ光の第１の部分は、試料ストリームと交差する前の方向に伝搬する（本明細書では、前方散乱光と呼ばれる）。インタロゲーションポイントで交差するレーザ光の第２の部分は、伝搬方向とは異なる角度で散乱する（本明細書では、側方散乱光と呼ばれる）。フローセル１０４内では、シース流体が細胞ストリームを取り囲み、組み合わされたシース流体と細胞ストリームとは、オリフィス１１０を有するノズル１０２を通じて、フローストリーム１１１としてフローセル１０４を出る。フローストリームは、液滴生成器の動作に応じて、連続的な流体フローまたは一連の液滴であり得る。
【００７８】
フローストリーム１１１は、例えば、５０μｍ、７０μｍ、１００μｍの直径または他の任意の適切な直径を有し得るノズルオリフィス１１０でノズル１０２を出る。ノズル直径は、ストリーム寸法、液滴ブレイクオフポイントおよび落下量など、フローストリームの特性に影響を及ぼす。フローストリーム１１１を観察するため、任意選択により、ＬＥＤストロボ、レーザまたは他の任意の照射デバイスなどの光源１１２を利用することができ、試料流体ストリーム１１１の領域に配置することができる。カメラ１１３または他の画像収集デバイスを配置して、第１の検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉することができる。いくつかの実施形態では、フローストリームは、連続的なストリームまたは一連の液滴を含み得る。フローストリームが連続的な液体フローであれば、検出フィールドでカメラによって捕捉された画像は、フローストリームの位置および／または寸法を決定するのに十分な情報をユーザまたはコントローラに提供することができる。
【００７９】
この発明のいくつかの態様では、カメラ１１３または他の検出デバイスは、カメラ１１３によって収集された画像に基づいて、フローサイトメータ１００の何らかの動作に影響を及ぼすことができる。コンピュータアルゴリズムを含むセットアップコントローラ１１４は、フローストリームの画像を受信し、フローサイトメータによって実行されるべき何らかの動作を決定することができ、有利には、手動のセットアップタスクからユーザを解放することができる。いくつかの実施形態では、ノズル開口部１１０の直径は、カメラ１１３によって捕捉されたフローストリーム１１１の寸法の画像分析に基づいて決定することができる。いくつかの実施形態では、セットアップコントローラ１１４は、フローサイトメータ１００に動作上接続され、カメラによって受信された画像から決定されたノズル直径に基づいて、フローサイトメータにおける一連のパラメータの調整を自動的に開始することができる。パラメータは、静水圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相などのいかなるフローサイトメトリパラメータも含み得る。
【００８０】
セットアップコントローラ１１４は、フローサイトメータ１００のフローストリーム１１１の速度を制御することができる流体システム１１５に動作上接続することができる。セットアップコントローラ１１４は、カメラ１１３から受信された画像に基づいて、フローストリームの一時停止を開始することができる。
【００８１】
検出フィールドでカメラ１１３から収集されたフローストリーム１１１の画像は、ＸＹ平面におけるフローストリームの位置についての追加情報を提供することができる。カメラは、１つまたは複数の台１１６、１１９に動作上接続することができ、１つまたは複数の台の位置は、カメラまたはカメラに接続されたセットアップコントローラからの信号に応答して移動することができる。収集デバイスまたは発光デバイス（レーザ１１７など）は、台に固定し、有利には、カメラ１１３からの画像に応答してフローストリーム１１１を途中で捕らえるように位置合わせすることができる。発光デバイスは、フローストリームの受光量を最大にするように位置合わせすることができる。収集デバイス１１８は、第１の台または第２の台１１９に固定し、フローストリームの収集を最大にするかまたは収集デバイス上の「ホームポジション」に対してフローストリームを配向するように位置合わせすることができる。フローストリームとのレーザまたは収集デバイスの自動位置合わせの改善は、ユーザによる台の手動調整を有益に低減する。
【００８２】
第２のカメラ１２０またはデータ収集デバイスは、第１のカメラ１１３またはデータ収集デバイスの下方に配置し、第２の検出フィールドで画像を収集するように構成することができる。第１のカメラに対して直交するようにＸＹ平面に第２のカメラを配置するか、または、任意選択により、第１および第２の検出フィールドが直交配向されるようにＸＹ平面に一連の光学機器を配置することができる。また、第２のカメラ１２０は、直接またはセットアップコントローラ１１４を介して、１つまたは複数の可動台１１６、１１９に動作上接続することもできる。収集または分析デバイスは、台に固定することができる。第２の検出フィールドは、第１の検出フィールドに対して直交配向することができる。第２のカメラからの画像は、第１のカメラから決定されたフローストリーム位置を改良し、フローストリームと関連付けられた１つまたは複数の台の配置の改善を実現するために使用することができる。カメラ１１３および１２０は例示目的として個々の検出器として示されているが、複数の検出フィールドでフローストリームを検出するために複数のカメラを使用することができる。追加光源１２３は、この位置でフローストリームの画像を捕捉できるほど十分な照射を提供するために利用することができる。あるいは、レーザ１１７が十分な照射を提供することができる。その上、光をフィルタリングするため、または、検出フィールドの分解能もしくは方向を調整するため、カメラ１１３および１２０のそれぞれの受光領域の前に、フィルタまたは他の光学機器１２１および１２２を配置することができる。
【００８３】
第１および／または第２のカメラ１１３、１２０からの画像は、検出フィールドにおけるフローストリームの位置またはフローストリームの寸法など、フローストリームのいかなる数の特性も決定するため、セットアップコントローラ１１４によって分析することができる。いくつかの実施形態では、検出フィールドにおけるフローストリームの位置に対応する信号は、セットアップコントローラ１１４に伝送するかまたは可動台１１６、１１９に直接伝送し、フローストリームに対する、台に固定されたデバイスまたは器の自動位置合わせを開始することができる。
【００８４】
フローストリームは、１対の偏向板１２４によって部分的に偏向され、複数のストリーム１２５、１２６、１２７となる一連の液滴であり得る。さらに示されるように、フローサイトメータは、複数のフローストリームを収集するための複数の収集器１１８、１２８および１２９を含み得る。収集器は、９６もしくは３６４ウェルプレートなどの複数のウェルを備える単一の器、または、一連の器であり得る。図１に示される例では、インタロゲーションゾーンで負に荷電された液滴１２７は、偏向板１２４に印加された電位によって収集器１２８に向けて誘導される。正にも負にも荷電されていない液滴１２６は、偏向板１２４に印加された電位によって偏向されないため、元の経路に沿って中央の収集器１１８に落下し続ける。正に荷電された液滴１２５は、偏向板１２４に印加された電位によって収集器１２９に向けて偏向される。偏向されたフローストリームに対する収集器の位置合わせは、分取細胞の収集を最大にするために不可欠である。
【００８５】
１つまたは複数の収集器は、ＸＹ平面におけるフローストリームの位置を決定するために第１および／または第２のカメラ１１３、１２０からデータを収集することによって自動的に位置合わせすることができる。収集器は、コントローラ１１４と連通するかまたは第１および第２のカメラ１１３、１２０と直接連通する可動台１１９に固定することができる。カメラは、検出フィールドにおけるストリームの位置を決定し、コントローラへの信号を生成することができる。コントローラ１１４は、フローストリームに対する収集器の位置を最適化するため、フローストリームの真下に配置された収集器１１８の位置を自動的に制御することができる。いくつかの実施形態では、コントローラは、液滴の一部によって受け取られる電荷の大きさも制御することができる。電荷の大きさは、液滴が体験する偏向の度合いひいてはＸＹ平面における液滴の位置に影響を及ぼすことができる。
【００８６】
セットアップコントローラ１１４は、デバイスに入力されたパラメータに応じてさらなる動作を取ることができる。本発明の一態様は、セットアップコントローラ１１４への落下量の入力値の適用である。落下量は、定義された時間で特定のノズル直径からの設定数の液滴が収集された後の量の実験的測定などのいかなる手段によっても決定することができる。次いで、落下量は、セットアップコントローラ１１４に入力することができる。いくつかの実施形態では、コントローラは、設定量が収集器１１８に分配された後で流体工学システム１１５を一時停止させることができる。較正された落下量の使用は、収集回数を制御するために液滴計数に依存する従来の方法より正確な収集量の決定を提供することができるため、この方法は、収集プロトコルを有益に改善する。この発明の方法や利用可能な分取流体量情報を使用することで、分取プロセスの追加の「停止規則」を実装することができる。
【００８７】
この発明のいくつかの態様では、セットアップコントローラは、ノズルの詰まりと、フローストリームを生成しないように具体的に設計されたクローズドループノズルとを区別するために使用することができる。「クローズドループ」ノズルは、廃液に直接つながる管システムに接続された出力を有する。「クローズドループ」ノズルは、オープンな分取可能なストリームを作成せず、分析のためだけに使用される。このノズルと、オープンな分取可能なストリームを作成すべきであるが何らかの理由でそれができない詰まった分取ノズルとを見分けられることが重要である。いくつかの実施形態では、セットアップコントローラは、クローズドループノズルが設置された際にそれを電気的に検知する。電気的検知は、「プルアップ」抵抗回路へのグランドを提供する挿入クローズドループノズルなど、いかなる形態も取り得る。この方法でクローズドループノズルが検知される場合、カメラによるストリーム画像は予想されず、したがって、ストリーム画像が見られない場合にノズルの詰まりが誤って報告されることはない。分取ノズルの場合、ストリーム画像が予想され、その画像の領域値を使用してノズルサイズが決定され、ノズルに対する適切な機器設定値が実行される。ストリーム画像が見られず、クローズドループノズルの存在を示す電気信号が検出されない場合は、分取ノズルが設置されており、詰まっていると判断される。セットアップコントローラは、この事象における一連の動作を開始することができる。例えば、ユーザは、ノズルの詰まりについての通知を受けることができ、流体システムを一時停止するかまたは他の任意の動作を開始することができる。
【００８８】
フローサイトメータのパラメータを調整するための方法
また、本開示の態様は、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法も含む。ある実施形態による方法は、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップとを含む。
【００８９】
上記で論じられるように、「調整する」という用語は、フローサイトメータの１つまたは複数の機能パラメータを変更することを指す。所望の調整は、目標の観点で異なり得、いくつかの例では、所望の調整は、例えば、他の調整の中で特に、細胞分取精度の改善、粒子収集の強化、コンポーネント機能障害の特定（例えば、フローセルのノズルの詰まり）、エネルギー消費量、粒子荷電効率、より精度が高い粒子荷電、細胞分取の間の粒子偏向の強化など、いくつかの望ましいパラメータの効率の強化を最終的にもたらす調整である。実施形態では、対象方法は、フローサイトメータを用いた試料分析の間のユーザ入力または手動調整の必要性を低減するかまたは完全に排除する。ある実施形態では、対象となる方法は、フローストリームの１つまたは複数のパラメータに対応するデータ信号に応答して行われる調整が人間の介入またはユーザによる手動入力をほとんどまたは全く必要としないように、完全に自動化することができる。ある実施形態では、方法は、人間の介入なしで、フローストリームの１つまたは複数のパラメータに対応するデータ信号に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータ（２つ以上のパラメータ、３つ以上のパラメータ、４つ以上のパラメータなど、５つ以上のパラメータを含む）を調整するステップを含む。いくつかの実施形態では、方法は、静水圧、シース流体圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅、電荷位相およびそれらの任意の組合せを調整するステップを含み得る。
【００９０】
ある実施形態による実践方法では、フローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像は、検出フィールドで捕捉される。上記で論じられるように、検出フィールドは、取り調べられているフローストリームの特性に応じて異なり得る。実施形態では、方法は、フローストリームの０．００１ｍｍ以上（フローストリームの０．００５ｍｍ以上、０．０１ｍｍ以上、０．０５ｍｍ以上、０．１ｍｍ以上、０．５ｍｍ以上、１ｍｍ以上、２ｍｍ以上、５ｍｍ以上など、および１０ｍｍ以上を含む）に及ぶ検出フィールドで画像を捕捉するステップを含み得る。取り調べられる検出フィールドは異なり得る。いくつかの実施形態では、検出フィールドは、フローセルのノズルオリフィスを含む。他の実施形態では、検出フィールドは、対象となる粒子を含む液滴が荷電されるフローストリームの位置（すなわち、連続的なフローストリームが離散液滴を形成し始める「ブレイクオフ」ポイント）を含む。さらなる他の実施形態では、検出フィールドは、荷電粒子が細胞分取の間に偏向板によって偏向される領域を含む。
【００９１】
フローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉する際、検出フィールドは、光源によって照射される。いくつかの実施形態では、フローストリームは、広帯域光源によってまたは狭帯域の光によって照射される（上記で説明されるように）。適切な広帯域光源プロトコルは、これらに限定されないが、他の広帯域光源の中で特に、ハロゲンランプ、ジュウテリウムアークランプ、キセノンアークランプ、安定化ファイバ結合広帯域光源、連続スペクトルを有する広帯域ＬＥＤ、スーパールミネセンス発光ダイオード、半導体発光ダイオード、広スペクトルＬＥＤ白色光源、複数のＬＥＤが統合された白色光源またはそれらの任意の組合せを含み得る。適切な狭帯域光源は、これらに限定されないが、狭範囲の波長のＬＥＤ、１つもしくは複数の光学バンドパスフィルタと、回折格子ともしくはモノクロメータと結合されたレーザダイオードもしくは広帯域光源、または、それらの任意の組合せを含む。
【００９２】
ある実施形態では、光源は、定期的な閃光によってフローストリームが照射されるストロボ光源である。例えば、ストロボの周波数は、０．０１ｋＨｚ以上（０．０５ｋＨｚ以上、０．１ｋＨｚ以上、０．５ｋＨｚ以上、１ｋＨｚ以上、２．５ｋＨｚ以上、５ｋＨｚ以上、１０ｋＨｚ以上、２５ｋＨｚ以上、５０ｋＨｚ以上など、および１００ｋＨｚ以上を含む）であり得る。いくつかの例では、ストロボ周波数は、液滴駆動周波数と同期化される。他の例では、ストロボ周波数は、画像捕捉と同期化される。
【００９３】
フローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップは、光源の組合せ（２つ以上の光源、３つ以上の光源、４つ以上の光源によってなど、および５つ以上の光源を含む）によってフローストリームに照射するステップを含み得る。２つ以上の光源が使用される場合、フローストリームは、光源によって同時に、連続してまたはそれらの組合せで照射することができる。例えば、２つの光源によって照射することによってフローストリームの画像を捕捉する場合、対象方法は、両方の光源によってフローストリームに同時に照射するステップを含み得る。他の実施形態では、フローストリームの画像を捕捉するステップは、２つの光源によって連続して照射するステップを含み得る。２つの光源が連続して照射する場合、各光源がフローストリームに照射する時間は、独立して、０．００１秒以上（０．０１秒以上、０．１秒以上、１秒以上、５秒以上、１０秒以上、３０秒以上など、および６０秒以上を含む）であり得る。２つ以上の光源によって連続して照射することによってフローストリームの画像が捕捉される実施形態では、各光源によってフローストリームが照射される時間は、同じである場合も、異なる場合もあり得る。
【００９４】
フローストリームの画像は、連続的にまたは離散間隔で捕捉することができる。いくつかの例では、方法は、連続的に画像を捕捉するステップを含む。他の例では、方法は、離散間隔で画像を捕捉するステップを含む（０．００１ミリ秒ごと、０．０１ミリ秒ごと、０．１ミリ秒ごと、１ミリ秒ごと、１０ミリ秒ごと、１００ミリ秒ごと、および１０００ミリ秒ごとを含む）（または他のいくつかの間隔でフローストリームの画像を捕捉するなど）。
【００９５】
各検出フィールドでは、１つまたは複数の画像（各検出フィールドにおけるフローストリームの２つ以上の画像、３つ以上の画像、４つ以上の画像、５つ以上の画像、１０以上の画像、１５以上の画像など、および２５以上の画像を含む）を捕捉することができる。各検出フィールドで２つ以上の画像が捕捉される場合、デジタル画像処理アルゴリズムを有するプロセッサによって複数の画像を自動的にまとめることができる。
【００９６】
各検出フィールドにおけるフローストリームの画像は、フローストリームの使用可能な画像が捕捉される限り、フローストリームから任意の適切な距離で捕捉することができる。例えば、各検出フィールドにおける画像は、フローストリームから０．０１ｍｍ以上（フローサイトメータのフローストリームから０．０５ｍｍ以上、０．１ｍｍ以上、０．５ｍｍ以上、１ｍｍ以上、２．５ｍｍ以上、５ｍｍ以上、１０ｍｍ以上、１５ｍｍ以上、２５ｍｍ以上など、および５０ｍｍ以上を含む）で捕捉することができる。また、各検出フィールドにおけるフローストリームの画像は、フローストリームから任意の角度で捕捉することもできる。例えば、各検出フィールドにおける画像は、フローストリームの軸に対して、１０°〜９０°（１５°〜８５°、２０°〜８０°、２５°〜７５°など、および３０°〜６０°を含む）の角度で捕捉することもできる。ある実施形態では、各検出フィールドにおける画像は、フローストリームの軸に対して、９０°の角度で捕捉することができる。
【００９７】
いくつかの実施形態では、フローストリームの画像を捕捉するステップは、フローストリームの経路沿いに１つまたは複数の画像センサを移動するステップを含む。例えば、画像センサは、フローストリーム沿いに上流または下流を移動して複数の検出フィールドで画像を捕捉することができる。例えば、方法は、２つ以上の異なる検出フィールド（３つ以上の検出フィールド、４つ以上の検出フィールドなど、および５つ以上の検出フィールドを含む）でフローストリームの画像を捕捉するステップを含み得る。画像センサは、連続的にまたは離散間隔で移動することができる。いくつかの実施形態では、画像センサは、連続的に移動させる。他の実施形態では、画像センサは、フローストリーム経路に沿って離散間隔で（例えば、１ｍｍ以上の増分、２ｍｍ以上の増分など、および５ｍｍ以上の増分を含む）移動させることができる。
【００９８】
上記で要約されるように、方法は、捕捉画像からフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップを含む。フローストリームが連続的な検出フィールドでは、方法は、捕捉画像に基づいて、フローストリームの空間位置、フローストリームの寸法（フローストリーム幅など）、ならびに、流速およびフロー乱流に対応するデータ信号を生成するステップを含み得る。フローストリームが離散液滴で構成される検出フィールドでは、方法は、フローストリームの空間位置、液滴サイズ（液滴直径および量を含む）、液滴駆動周波数、液滴振幅、ならびに、液滴サイズおよび周波数の均一性に対応するデータ信号を生成するステップを含み得る。ある実施形態では、方法は、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力データに基づいて予想されるフローストリームのサイズと比較したフローストリームのサイズの比率に対応するデータ信号を生成するステップを含む。他の実施形態では、方法は、特定の検出フィールドにおけるフローストリームの有無を判断するために捕捉画像を評価するステップを含む。さらなる他の実施形態では、方法は、フローセルのノズルオリフィスのサイズを決定するためにフローストリームの捕捉画像を評価するステップを含む。
【００９９】
いくつかの実施形態では、方法は、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、捕捉画像に基づいて検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む。例えば、方法は、検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉するステップと、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの空間位置をマッピングするステップとを含み得る。いくつかの例では、Ｘ−Ｙ平面におけるフローストリームの位置は、フローセルのノズルによって形成された垂直軸に対するフローストリームの位置を決定するため、フローセルのノズルの垂直軸と比較される。フローストリームの空間位置が２つ以上の検出フィールドで決定される場合、フローストリームの空間位置は、各検出フィールドでＸ−Ｙ平面にマッピングされて、Ｘ−Ｙ平面においてフローストリームの正確な空間位置を微調整するために比較することができる。検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置に基づいて、方法は、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップを含み得る。
【０１００】
対象方法による実施形態では、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して調整される。いくつかの例では、データ信号は、細胞分取の間など、粒子を収集するための容器を有する支持台の位置を調整するために使用される。ある実施形態では、方法は、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップと、支持台上の収集容器がフローストリームの軌道と位置合わせされるように、支持台の位置を自動的に調整するステップとを含む。例えば、方法は、Ｘ−Ｙ平面に各検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、Ｘ−Ｙ平面における容器の位置をＸ−Ｙ平面におけるフローストリームの位置と一致させ、収集容器とフローストリームとを位置合わせするステップとを含み得る。いくつかの例では、方法は、２つの検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップを含む。これらの例では、フローストリームの空間位置は、第１の検出フィールドでＸ−Ｙ平面にマッピングされ、フローストリームの空間位置は、第２の検出フィールドでＸ−Ｙ平面にマッピングされる。第１および第２の検出フィールドにおけるフローストリームのマッピングされた位置に基づいて、フローサイトメータにおけるフローストリームの空間位置に対応するデータ信号が生成される。
【０１０１】
これらの実施形態では、フローストリームの収集を最適化するため、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号が生成され、Ｘ−Ｙ平面における支持台の位置が自動的に調整される。例えば、粒子の収集の最適化は、フローストリームと収集容器との位置ずれが原因で支持台上の容器によって収集されない粒子の数を、データ信号に応答して調整されない支持台上の容器にフローストリームを収集する場合と比較して５％以上（１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）低減することを含み得る。
【０１０２】
上記で説明されるように、支持台は、フローストリームから粒子を収集する際、要求通りにフローストリームに沿ってどこにでも配置することができる。いくつかの例では、粒子は、フローストリーム液滴が電荷（例えば、正、負および中性）に基づいて分離される偏向板の下流に配置された支持台上の容器に収集される。これらの例では、方法は、偏向板の下流の検出フィールドにおけるフローストリームの画像を捕捉するステップと、正、負および中性粒子のフローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む。捕捉画像からのフローストリームの決定された空間位置に基づいて、マルチコンパートメント容器（または３つの別々の容器）を有する支持台の位置は、各フローストリームの収集を最適化するように自動的に調整することができる。例えば、方法は、フローストリームの収集が、データ信号に応答して調整されない支持台上にフローストリームを収集する場合と比較して５％以上（１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）改善されるように、支持台の位置を調整するステップを含み得る。
【０１０３】
ある実施形態による方法は、図２に示されるステップの組合せで概説される。この発明のステップは、いかなる順番でも、いかなる組合せでも起こり得る。例えば、図２では、実験的なセットアップは、所望の分取タスクに適切なノズルの設置を含み得る。フローストリームが開始され、カメラ１によってフローストリームの画像が収集される。ノズル開口部は、フローストリームの画像から決定することができ、いかなる数のパラメータも、この値に基づいて自動的に決定および設定することができる。レーザは、第１のカメラからの信号に従って自動的に大ざっぱに位置合わせすることができる。フローストリームがカメラ２を流れ過ぎると同時に、第２の画像を捕捉することができる。カメラ１およびカメラ２からの２つの画像は、ＸＹ平面におけるフローストリームの正確な局在化を実現することができる。この情報に基づいてレーザを自動的に精密に配置することができ、この情報に基づいて収集器を自動的に配置することができる。いくつかの実施形態では、レーザの精密な位置合わせは、収集器の位置合わせを容易にすることができる。
【０１０４】
上記で要約されるように、本開示の実施形態による方法は、フローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の検出フィールドにおける捕捉画像から得られたデータ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップを含む。ある実施形態では、方法は、シース流体圧、液滴荷電電圧、偏向板電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相、または、それらの組合せを調整するステップを含む。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答してシース流体圧を調整するステップを含む。いくつかの例では、シース流体圧は、０．００１ｐｓｉ以上増加することができる（０．００５ｐｓｉ以上、０．０１ｐｓｉ以上、０．０５ｐｓｉ以上、０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を増加することを含む）。他の例では、シース流体圧は、０．００１ｐｓｉ以上低減される（０．００５ｐｓｉ以上、０．０１ｐｓｉ以上、０．０５ｐｓｉ以上、０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を低減することを含む）。
【０１０６】
さらなる他の実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴荷電電圧を調整するステップを含む。いくつかの例では、液滴荷電電圧は、０．０１Ｖ以上増加される（０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．５Ｖ以上、１Ｖ以上、５Ｖ以上、１０Ｖ以上、１５Ｖ以上、２５Ｖ以上、５０Ｖ以上など、および７５Ｖ以上液滴荷電電圧を増加することを含む）。他の例では、液滴荷電電圧は、０．０１Ｖ以上低減される（０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．５Ｖ以上、１Ｖ以上、５Ｖ以上、１０Ｖ以上、１５Ｖ以上、２５Ｖ以上、５０Ｖ以上など、および７５Ｖ以上液滴荷電電圧を低減すること含む）。
【０１０７】
さらなる他の実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して偏向板電圧を調整するステップを含む。いくつかの例では、偏向板電圧は、５Ｖ以上増加される（１０Ｖ以上、５０Ｖ以上、１００Ｖ以上、２５０Ｖ以上、５００Ｖ以上、１０００Ｖ以上など、および２０００Ｖ以上偏向板電圧を増加すること含む）。他の例では、偏向板電圧は、５Ｖ以上低減される（１０Ｖ以上、５０Ｖ以上、１００Ｖ以上、２５０Ｖ以上、５００Ｖ以上、１０００Ｖ以上など、および２０００Ｖ以上偏向板電圧を低減すること含む）。
【０１０８】
さらなる他の実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴駆動周波数を調整するステップを含む。いくつかの例では、液滴駆動周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）増加される。他の例では、液滴周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）低減される。
【０１０９】
さらなる他の実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴遅延を調整するステップを含む。いくつかの例では、液滴遅延は、０．０１マイクロ秒以上増加される（０．０５マイクロ秒以上、０．１マイクロ秒以上、０．３マイクロ秒以上、０．５マイクロ秒以上、１マイクロ秒以上、２．５マイクロ秒以上、５マイクロ秒以上、７．５マイクロ秒以上など、および１０マイクロ秒以上液滴遅延を増加することを含む）。他の例では、液滴遅延は、０．０１マイクロ秒以上低減される（０．０５マイクロ秒以上、０．１マイクロ秒以上、０．３マイクロ秒以上、０．５マイクロ秒以上、１マイクロ秒以上、２．５マイクロ秒以上、５マイクロ秒以上、７．５マイクロ秒以上など、および１０マイクロ秒以上液滴遅延を低減することを含む）。
【０１１０】
さらなる他の実施形態では、方法は、捕捉画像に基づいて決定されたフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号に応答して液滴振幅を調整するステップを含む。いくつかの例では、液滴振幅は、０．０１Ｖ以上増加される（０．０２５Ｖ以上、０．０５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．２５Ｖ以上、０．５Ｖ以上など、１Ｖ以上液滴振幅を増加すること含む）。他の例では、液滴振幅は、０．０１Ｖ以上低減される（０．０２５Ｖ以上、０．０５Ｖ以上、０．０７５Ｖ以上、０．１Ｖ以上、０．２５Ｖ以上など、および１Ｖ以上液滴振幅を低減すること含む）。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、方法は、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、捕捉画像に基づいて検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を特徴付けるステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含む。フローストリームが連続的なストリームである検出フィールドでは、方法は、捕捉画像を取り入れるステップと、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するステップとを含み得る。フローストリームが離散液滴で構成される検出フィールドでは、方法は、捕捉画像を取り入れるステップと、液滴直径などの液滴サイズに対応するデータ信号を生成するステップとを含み得る。
【０１１２】
ある例では、方法は、捕捉画像に基づいてフローセルのノズルオリフィスの直径を決定するステップを含み得る。これらの例では、方法は、フローセルのノズルのオリフィスにおけるフローストリームの画像を捕捉するステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含み得る。フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号に基づいて、フローセルのノズル開口部の直径が決定される。ある例では、方法は、フローストリームの幅を使用してフローセルのノズル開口部の直径を決定するステップを含む。他の例では、方法は、液滴直径を使用してフローセルのノズル開口部の直径を決定するステップを含む。これらの実施形態では、方法は、決定されたフローセルのノズル開口部の直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータに対する調整を自動化するステップをさらに含み得る。例えば、方法は、上記で論じられるように、シース流体圧、液滴駆動周波数、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅、電荷位相、および／または、それらの組合せを自動的に調整するステップを含み得る。
【０１１３】
ある実施形態では、方法は、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して液滴駆動周波数に対する調整を自動化するステップを含み得る。例えば、液滴駆動周波数は、０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）増加することができる。他の例では、方法は、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して液滴駆動周波数を０．０１Ｈｚ以上（０．０５Ｈｚ以上、０．１Ｈｚ以上、０．２５Ｈｚ以上、０．５Ｈｚ以上、１Ｈｚ以上、２．５Ｈｚ以上、５Ｈｚ以上、１０Ｈｚ以上など、および２５Ｈｚ以上を含む）低減するステップを含む。
【０１１４】
他の実施形態では、方法は、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答してシース流体圧に対する調整を自動化するステップを含み得る。例えば、シース流体圧は、０．００１ｐｓｉ以上増加することができる（０．００５ｐｓｉ以上、０．０１ｐｓｉ以上、０．０５ｐｓｉ以上、０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を増加することを含む）。他の例では、方法は、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答してシース流体圧を０．００１ｐｓｉ以上低減するステップを含む（０．００５ｐｓｉ以上、０．０１ｐｓｉ以上、０．０５ｐｓｉ以上、０．１ｐｓｉ以上、０．５ｐｓｉ以上、１ｐｓｉ以上、５ｐｓｉ以上、１０ｐｓｉ以上、２５ｐｓｉ以上、５０ｐｓｉ以上、７５ｐｓｉ以上など、および１００ｐｓｉ以上シース流体圧を低減することを含む）。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、方法は、捕捉画像から決定されたフローストリームの物理的寸法を、フローサイトメータの実験的特性（フローセルのノズルオリフィスのサイズおよびシース流体圧など）およびユーザによって入力されたパラメータに基づいて予想される寸法と比較するステップを含み得る。これらの例では、方法は、フローサイトメータの実験的特性およびユーザ入力パラメータに基づいて予想されるフローストリーム寸法と比較した捕捉画像から決定されたフローストリームの物理的寸法の比率に対応するデータ信号を生成するステップを含む。例えば、方法は、捕捉画像から決定されたフローストリームが、予想されるフローストリームのサイズの９９％以下（予想されるフローストリームのサイズの９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、５０％以下、２５％以下など、および１０％以下を含む）であることを示すデータ信号を生成するステップを含み得る。他の実施形態では、方法は、捕捉画像から決定されたフローストリームが、予想されるサイズより大きい（フローストリームのサイズの１０５％以上、１１０％以上、１２５％以上など、および１５０％以上を含む）ことを示すデータ信号を生成するステップを含み得る。これらの実施形態では、方法は、生成されたデータ信号に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータに対する調整を自動化するステップをさらに含み得る。例えば、方法は、シース流体ポンプ速度、シース流体圧または液滴駆動周波数を自動的に調整するステップを含み得る。
【０１１６】
また、対象となる方法は、フローストリームのブレイクオフポイントにおける検出フィールドの画像を捕捉するステップと、ブレイクオフポイントの下流の液滴の落下量に対応するデータ信号を生成するステップと、決定された落下量に応答してフローサイトメータの１つまたは複数の特性を調整するステップとを含み得る。いくつかの実施形態では、方法は、決定された落下量に応答してフローストリームの液滴駆動周波数を自動的に調整するステップを含む。例えば、方法は、液滴駆動周波数を低減するステップを含み得る（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）。他の例では、方法は、決定された落下量に応答して液滴駆動周波数を増加するステップを含み得る（５％以上、１０％以上、１５％以上、２５％以上、５０％以上、７５％以上、９０％以上、９５％以上など、および９９％以上を含む）。
【０１１７】
他の実施形態では、方法は、決定された落下量に基づいて細胞分取の間の試料収集量を自動的に規制するステップを含む。例えば、各収集試料の所望の量は、プロセッサに入力することができ、落下量に対応するデータ信号に基づいて、フローサイトメータは、収集容器を取り外すかまたはフローサイトメータによってフローストリームを停止させることによってなど、既定の時間量の後に試料の収集を停止するように自動化することができる。
【０１１８】
さらなる他の実施形態では、方法は、検出フィールドでフローストリームの画像を捕捉するステップと、検出フィールドにおけるフローストリームの有無を判断するステップと、判断されたフローストリームの有無に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップとを含み得る。上記で論じられるように、フローセルのノズルオリフィスの捕捉画像におけるフローストリームの有無を判断するための対象方法は、フローセルのノズルの詰まりがあるかどうかを判断するために使用することができる。これらの実施形態では、画像センサによる捕捉画像が評価され、フローストリームが画像で検出された場合、フローストリームの存在を示すデータ信号が生成される。他方では、捕捉画像を評価した後でフローストリームが捕捉画像に存在しないと判断された場合、フローストリームの不在を示すデータ信号が生成される。
【０１１９】
フローストリームが捕捉画像に存在しない場合、ある実施形態では、方法は、フローストリームの不在がフローサイトメータの機能障害（ノズルの詰まりなど）の結果生じたものであるとユーザに自動的に警告するステップを含み得る。これらの実施形態では、フローストリームの不在に対応するデータ信号は、フローストリームが予想されるべきであるかどうかに関するユーザからの入力と相関させる。いくつかの実施形態では、ユーザが、「クローズドループ」構成を有するようにシステムを構成した場合、フローストリームは予想されない。これらの実施形態では、フローストリームが予想されないため、フローサイトメータは、機能障害（例えば、ノズルの詰まり）についてユーザに警告しない。
【０１２０】
図３は、本開示のある実施形態によるフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法を示すフローチャートについて描写する。上記で要約されるように、方法は、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップを含む。ある例では、画像は、２つ以上の検出フィールド（３つ以上など、４つ以上の検出フィールドを含む）で捕捉することができる。いくつかの実施形態では、方法は、フローストリームの有無を判断するステップを含む。フローストリームが不在であると判断され、フローストリームが予想される場合（通常の使用の間など）、可能な機器の機能障害（例えば、ノズルの詰まり）に関する警告をユーザに伝えることができる。他の実施形態では、方法は、フローストリームの空間位置を決定するかまたはフローストリームの物理的寸法を決定するステップを含む。ある例では、方法は、最初に、フローストリームが１つまたは複数の捕捉画像に存在するかを判断し、次に、フローストリームの空間位置を決定するステップを含む。他の例では、方法は、フローストリームが１つまたは複数の捕捉画像に存在するかを判断し、次に、フローストリームの物理的寸法を決定するステップを含む。いくつかの実施形態では、方法は、捕捉画像からのフローストリームの物理的寸法に基づいて、フローサイトメータの物理的特性を決定するステップを含む。例えば、フローセルのノズルオリフィスは、捕捉画像からのフローストリームの物理的寸法に基づいて決定することができる。
【０１２１】
また、方法は、捕捉画像から得られたデータ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するステップも含み、シース流体圧、液滴荷電電圧、偏向板電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相、または、それらの組合せを調整するなどが挙げられる。ある実施形態では、１つまたは複数のパラメータは、例えば、細胞分取の間にフローストリーム粒子を収集するための容器を有する支持台など、１つまたは複数の支持台の位置の調整を含む。
【０１２２】
上記で論じられるように、対象方法は、人間の介入またはユーザによる手動入力があったとしてもほとんどない状態で、フローストリームの１つまたは複数のパラメータに対応するデータ信号に応答して調整が行われるように、完全に自動化することができる。
【０１２３】
コンピュータ制御システム
本開示の態様は、対象方法を実践するためのコンピュータ制御システムであって、本明細書で説明される方法を実践するためのシステムの完全な自動化または部分的な自動化のための１つまたは複数のコンピュータをさらに含む、システムをさらに含む。いくつかの実施形態では、システムは、コンピュータプログラムがその上に格納されたコンピュータ可読記憶媒体を有するコンピュータを含み、コンピュータプログラムは、コンピュータ上にロードされる際、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するためのアルゴリズムと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令とを含む。ある例では、システムは、コンピュータプログラムがその上に格納されたコンピュータ可読記憶媒体を有するコンピュータを含み、コンピュータプログラムは、コンピュータ上にロードされる際、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するためのアルゴリズムと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令とを含む。
【０１２４】
実施形態では、システムは、入力モジュール、処理モジュールおよび出力モジュールを含む。対象となる処理モジュールは、上記で説明されるように、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成および自動化された１つまたは複数のプロセッサを含み得る。例えば、処理モジュールは、上記で説明されるように、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するように構成および自動化された２つ以上のプロセッサ（３つ以上のプロセッサ、４つ以上のプロセッサなど、５つ以上のプロセッサを含む）を含み得る。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、対象システムは、入力モジュールを含み得、その結果、対象方法を実践する前に、流体試料、シース流体圧、静水圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相や、フローセルのノズルオリフィスや、支持台、画像センサ、光源、光学調整プロトコルおよび増幅器の位置や、画像センサの特性、分解能および感度についてのパラメータまたは情報を入力することができる。
【０１２６】
上記で説明されるように、各プロセッサは、検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップ、検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップ、フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップ、および、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップなど、対象方法のステップを実行するための複数の命令を有するメモリを含む。プロセッサが対象方法のステップのうちの１つまたは複数を実行した後、プロセッサは、上記で説明される調整などのフローサイトメータのパラメータに対する調整を行うように自動化することができる。
【０１２７】
対象システムは、ハードウェアコンポーネントとソフトウェアコンポーネントとの両方を含み得、ハードウェアコンポーネントは、１つまたは複数のプラットホームの形態（例えば、サーバの形態）を取ることができ、その結果、機能要素、すなわち、システムの特定のタスク（情報の入力および出力の管理、情報の処理など）を行うシステムのそれらの要素は、システムを表す１つまたは複数のコンピュータプラットホーム上および１つまたは複数のコンピュータプラットホームにわたってソフトウェアアプリケーションを実行することによって行うことができる。
【０１２８】
システムは、表示およびオペレータ入力デバイスを含み得る。オペレータ入力デバイスは、例えば、キーボード、マウスまたは同様のものであり得る。処理モジュールは、対象方法のステップを実行するための命令がその上に格納されたメモリへのアクセスを有するプロセッサを含む。処理モジュールは、オペレーティングシステム、グラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コントローラ、システムメモリ、記憶装置、入力出力コントローラ、キャッシュメモリ、データバックアップユニットおよび他の多くのデバイスを含み得る。プロセッサは、市販のプロセッサであり得るか、または、プロセッサは、入手可能であるかもしくは入手可能になる他のプロセッサの１つであり得る。プロセッサは、オペレーティングシステムを実行し、オペレーティングシステムは、周知の方式でファームウェアおよびハードウェアとインターフェースを取り、当技術分野で知られるような、Ｊａｖａ、Ｐｅｒｌ、Ｃ＋＋、他の高水準または低水準言語、および、それらの組合せなどの様々なプログラミング言語で記載され得る様々なコンピュータプログラムの機能を調和させて実行する際にプロセッサを促進する。オペレーティングシステムは、通常、プロセッサと協働して、コンピュータの他のコンポーネントの機能を調和させて実行する。また、オペレーティングシステムは、スケジューリング、入力出力制御、ファイルおよびデータ管理、メモリ管理、通信制御、ならびに、関連サービスをすべて公知の技法に従って提供する。
【０１２９】
システムメモリは、様々な公知のまたは将来の記憶装置のいずれかであり得る。例は、一般的に利用可能なランダムアクセスメモリ（ＲＡＭ）、磁気媒体（常駐するハードディスクまたはテープなど）、光媒体（読み取りおよび書き込みコンパクトディスクなど）、フラッシュメモリデバイスまたは他の記憶装置を含む。記憶装置は、コンパクトディスクドライブ、テープドライブ、リムーバブルハードディスクドライブまたはディスケットドライブを含む、様々な公知のまたは将来のデバイスのいずれかであり得る。そのようなタイプの記憶装置は、通常、コンパクトディスク、磁気テープ、リムーバブルハードディスクまたはフレキシブルディスクなどのそれぞれのプログラム記憶媒体（図示せず）からの読み取りおよび／またはプログラム記憶媒体への書き込みを行う。現在使用中のまたは後に開発され得るこれらのプログラム記憶媒体または他のもののいずれかは、コンピュータプログラム製品と見なすことができる。理解されるように、これらのプログラム記憶媒体は、通常、コンピュータソフトウェアプログラムおよび／またはデータを格納する。コンピュータソフトウェアプログラム（コンピュータ制御論理とも呼ばれる）は、通常、システムメモリに、および／または、記憶装置と併せて使用されるプログラム記憶装置に格納される。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、制御論理（コンピュータソフトウェアプログラム、プログラムコードを含む）がその中に格納されたコンピュータ使用可能媒体を備えるコンピュータプログラム製品について説明する。制御論理は、プロセッサによって実行されると、本明細書で説明される機能をプロセッサに実行させる。他の実施形態では、いくつかの機能は、例えば、ハードウェア状態機械を使用して、ハードウェアで主に実装される。本明細書で説明される機能を実行するためのハードウェア状態機械の実装は、当業者であれば明らかであろう。
【０１３１】
メモリは、磁気、光学またはソリッドステート記憶装置（固定またはポータブル式の、磁気もしくは光ディスクもしくはテープ、ＲＡＭ、または、他の任意の適切なデバイスを含む）など、プロセッサがデータの格納および回収を行える適切ないかなるデバイスでもあり得る。プロセッサは、必要なプログラムコードを有するコンピュータ可読媒体から適切にプログラムされた汎用デジタルマイクロプロセッサを含み得る。プログラミングは、通信チャネルを通じてリモート操作でプロセッサに提供することも、メモリまたはメモリに関連するそれらのデバイスのいずれかを使用する他の何らかのポータブルもしくは固定式のコンピュータ可読記憶媒体など、コンピュータプログラム製品にあらかじめ保存しておくこともできる。例えば、磁気または光ディスクは、プログラミングを有し得、ディスクライタ／リーダによって読み取ることができる。また、本発明のシステムは、例えば、コンピュータプログラム製品の形態で、上記で説明されるような方法を実践する際に使用するためのアルゴリズムのプログラミングを含む。本発明によるプログラミングは、コンピュータ可読媒体（例えば、コンピュータによる直接的な読み取りおよびアクセスが可能な任意の媒体）上に記録することができる。そのような媒体は、これらに限定されないが、磁気記憶媒体（フレキシブルディスク、ハードディスク記憶媒体および磁気テープなど）、光記憶媒体（ＣＤ−ＲＯＭなど）、電気記憶媒体（ＲＡＭおよびＲＯＭなど）、ポータブル式のフラッシュドライブおよびこれらのカテゴリのハイブリッド（磁気／光記憶媒体など）を含む。
【０１３２】
また、プロセッサは、リモート位置に存するユーザと通信するために通信チャネルへのアクセスも有し得る。リモート位置は、ユーザがシステムと直接連絡を取っているのではなく、移動電話（すなわち、スマートフォン）を含む、広域ネットワーク（「ＷＡＮ」）、電話網、衛星ネットワークまたは他の任意の適切な通信チャネルに接続されたコンピュータなどの外部のデバイスから入力マネージャに入力情報を中継することを意味する。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、本開示によるシステムは、通信インターフェースを含むように構成することができる。いくつかの実施形態では、通信インターフェースは、ネットワークおよび／または別のデバイスと通信するための受信機および／または送信機を含む。通信インターフェースは、これらに限定されないが、無線周波数（ＲＦ）通信、（例えば、無線自動識別（ＲＦＩＤ））、Ｚｉｇｂｅｅ通信プロトコル、ＷｉＦｉ、赤外線、ワイヤレスユニバーサルシリアルバス（ＵＳＢ）、超広帯域（ＵＷＢ）、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）通信プロトコル、および、セルラ通信（符号分割多重アクセス（ＣＤＭＡ）またはグローバルシステムフォーモバイルコミュニケーションズ（ＧＳＭ）など）を含む、有線または無線通信用に構成することができる。
【０１３４】
一実施形態では、通信インターフェースは、例えば、対象システムと、同様の相補的なデータ通信用に構成されたコンピュータ端末（例えば、診療所におけるまたは病院環境での）などの他の外部のデバイスとの間のデータ通信を可能にする、ＵＳＢポート、ＲＳ−２３２ポートまたは他の任意の適切な電気接続ポートなどの物理的なポートまたはインターフェースなどの１つまたは複数の通信ポートを含むように構成される。
【０１３５】
一実施形態では、通信インターフェースは、対象システムが他のデバイス（ユーザが併用できるコンピュータ端末および／またはネットワーク、通信可能携帯電話、携帯情報端末または他の任意の通信デバイスなど）と通信できるようにするため、赤外線通信、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）通信または他の任意の適切な無線通信プロトコル用に構成される。
【０１３６】
一実施形態では、通信インターフェースは、セルフォンネットワーク、ショートメッセージサービス（ＳＭＳ）、インターネットに接続されるローカルエリアネットワーク（ＬＡＮ）上のパーソナルコンピュータ（ＰＣ）へのワイヤレス接続、または、ＷｉＦｉホットスポットにおけるインターネットへのＷｉＦｉ接続を通じてインターネットプロトコル（ＩＰ）を利用するデータ転送のための接続を提供するように構成される。
【０１３７】
一実施形態では、対象システムは、通信インターフェースを介して（例えば、８０２．１１もしくはＢｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）ＲＦプロトコルなどの共通規格またはＩｒＤＡ赤外線プロトコルを使用して）サーバデバイスと無線通信するように構成される。サーバデバイスは、別のポータブルデバイス（スマートフォン、携帯情報端末（ＰＤＡ）またはノートパソコンなど）または大型デバイス（デスクトップコンピュータ、器具など）であり得る。いくつかの実施形態では、サーバデバイスは、液晶ディスプレイ（ＬＣＤ）などのディスプレイと、ボタン、キーボード、マウスまたはタッチスクリーンなどの入力デバイスとを有する。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、通信インターフェースは、上記で説明される通信プロトコルおよび／またはメカニズムのうちの１つまたは複数を使用して、ネットワークまたはサーバデバイスによって、対象システムに（例えば、任意選択のデータ記憶ユニットに）格納されたデータを自動的または半自動的に伝達するように構成される。
【０１３９】
出力コントローラは、人間または機械にかかわらず、ローカルまたはリモートにかかわらず、ユーザに情報を提示するための様々な公知の表示デバイスのいずれかのためのコントローラを含み得る。表示デバイスのうちの１つが視覚情報を提供する場合、この情報は、通常、ピクチャエレメントのアレイとして論理的および／または物理的に組織化することができる。グラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コントローラは、システムとユーザとの間のグラフィカルな入力および出力インターフェースを提供するための、ならびに、ユーザ入力を処理するための、様々な公知のまたは将来のソフトウェアプログラムのいずれかを含み得る。コンピュータの機能要素は、システムバスを介して互いに通信することができる。これらの通信のいくつかは、代替の実施形態では、ネットワークまたは他のタイプのリモート通信を使用して達成することができる。また、出力マネージャは、公知の技法に従って、例えば、インターネット、電話または衛星ネットワーク上で、処理モジュールによって生成された情報をリモート位置に存するユーザに提供することができる。出力マネージャによるデータの提示は、様々な公知の技法に従って実装することができる。いくつかの例として、データは、ＳＱＬ、ＨＴＭＬもしくはＸＭＬ文書、Ｅメールもしくは他のファイル、または、他の形式のデータを含み得る。データは、ユーザがリモートソースから追加のＳＱＬ、ＨＴＭＬ、ＸＭＬまたは他の文書もしくはデータを回収できるように、インターネットＵＲＬアドレスを含み得る。対象システムに存在する１つまたは複数のプラットホームは、いかなるタイプの公知のコンピュータプラットホームでも、将来開発される予定のタイプのものでもあり得るが、１つまたは複数のプラットホームは、通常、一般的にサーバと呼ばれるコンピュータクラスのものである。しかし、１つまたは複数のプラットホームは、メインフレームコンピュータ、ワークステーションまたは他のコンピュータタイプでもあり得る。１つまたは複数のプラットホームは、ネットワーク接続されているかまたは別の方法で接続されている、いかなる公知のまたは将来のタイプのケーブルまたは他の通信システム（ワイヤレスシステムを含む）も介して接続することができる。１つまたは複数のプラットホームは、同一場所に配置するか、または、１つまたは複数のプラットホームは、物理的に分離させることができる。様々なオペレーティングシステムは、恐らくは選ばれたコンピュータプラットホームのタイプおよび／または機種に応じて、いずれかのコンピュータプラットホーム上で使用することができる。適切なオペレーティングシステムは、Ｗｉｎｄｏｗｓ  ＮＴ（登録商標）、Ｗｉｎｄｏｗｓ  ＸＰ、Ｗｉｎｄｏｗｓ７、Ｗｉｎｄｏｗｓ８、ｉＯＳ、Ｓｕｎ  Ｓｏｌａｒｉｓ、Ｌｉｎｕｘ（登録商標）、ＯＳ／４００、Ｃｏｍｐａｑ  Ｔｒｕ６４  Ｕｎｉｘ（登録商標）、ＳＧＩ  ＩＲＩＸ、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｒｅｌｉａｎｔ  Ｕｎｉｘおよび他のものを含む。
【０１４０】
利用性
対象システム、方法およびコンピュータシステムは、細胞を特徴付けたり、生体試料から細胞を分取したりするための高速の信頼できるシステムを実現するためにフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータに対する調整を自動化することが望ましい様々な異なる応用における利用法を見出す。本開示の実施形態は、研究やハイスループット実験室試験など、システムへの人間による入力および調整への依存量の最小化が望ましい利用法を見出す。また、本開示は、細胞分取精度の改善、粒子収集の強化、コンポーネントの機能障害（例えば、フローセルのノズルの詰まり）に関する警告を提供するシステム、エネルギー消費量の低減、粒子荷電効率、より精度が高い粒子荷電および細胞分取の間の粒子偏向の強化をフローサイトメータに提供することが望ましい利用法も見出す。実施形態では、本開示は、フローサイトメータを用いた試料分析の間のユーザ入力または手動調整の必要性を低減する。ある実施形態では、対象システムは、使用の間のフローサイトメータに対する調整が、人間による入力が必要であったとしてもほとんど必要とされないように、完全に自動化されたプロトコルを提供する。
【０１４１】
また、本開示は、生体試料から準備された細胞が、研究および実験室試験に対してまたは治療における使用に対して望まれる可能性がある応用における利用法も見出す。いくつかの実施形態では、対象方法およびデバイスは、目標流体または組織の生体試料から準備された個々の細胞を得ることを容易にすることができる。例えば、対象方法およびシステムは、癌などの病気のための研究または診断用試料として使用される予定の流体または組織試料から細胞を得ることを容易にする。同様に、対象方法およびシステムは、治療で使用される予定の流体または組織試料から細胞を得ることを容易にする。本開示の方法およびデバイスにより、従来のフローサイトメトリシステムと比較して、強化された効率と低コストで、生体試料（例えば、器官、組織、組織片、流体）からの細胞の分離および収集が可能になる。
【０１４２】
添付の請求項にもかかわらず、本明細書に記載される本開示は、以下の付記によっても定義される。
１．フローサイトメータの検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、メモリは、フローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
を備えるシステムであって、
プロセッサは、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成されているシステム。
２．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの空間位置を決定し、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１に記載のシステム。
３．検出フィールドの下流に配置された支持台をさらに備える付記１または２に記載のシステム。
４．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を自動的に調整するように構成されている付記３に記載のシステム。
５．二次元で支持台の位置を調整するように構成されている付記４に記載のシステム。
６．支持台はレーザを有する付記３〜５のいずれか一項に記載のシステム。
７．支持台は容器を有する付記３〜５のいずれか一項に記載のシステム。
８．容器とフローストリームの決定された空間位置とを自動的に位置合わせするように構成されている付記７に記載のシステム。
９．容器とフローストリームとを自動的に位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記８に記載のシステム。
１０．第２の検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された第２の画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応する第２のデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
をさらに備える付記１〜９のいずれか一項に記載のシステム。
１１．プロセッサは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するように構成されている付記１０に記載のシステム。
１２．第１の支持台の下流に配置された第２の支持台をさらに備える付記１１に記載のシステム。
１３．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を自動的に調整するように構成されている付記１２に記載のシステム。
１４．二次元で第２の支持台の位置を調整するように構成されている付記１３に記載のシステム。
１５．第２の支持台は、フローストリームを収集するための容器を備える付記１３に記載のシステム。
１６．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを自動的に位置合わせするように構成されている付記１５に記載のシステム。
１７．容器を自動的に位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１６に記載のシステム。
１８．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの物理的寸法を決定し、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１に記載のシステム。
１９．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定し、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１８に記載のシステム。
２０．プロセッサは、フローセルのノズルオリフィスの直径を決定し、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１９に記載のシステム。
２１．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成されている付記２０に記載のシステム。
２２．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記２１に記載のシステム。
２３．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、シース流体圧を自動的に調整するように構成されている付記２２に記載のシステム。
２４．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、振動子駆動周波数を自動的に調整するように構成されている付記２２に記載のシステム。
２５．画像センサはＣＣＤカメラである付記１〜２４のいずれか一項に記載のシステム。
２６．フローサイトメータからの液体フローのストリーム位置を自動的に局在させるためのシステムであって、
第１の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、第１の台とを備えるシステムであり、
第１の台は、第１のカメラに動作上接続され、第１の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されているシステム。
２７．第２の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第２の信号を生成するように適合された第２のカメラをさらに備えるシステムであって、
第１および第２のカメラの第１および第２の検出フィールドは、ＸＹ平面で実質的に直交配向され、
第１の台は、第２のカメラに動作上接続され、第１の信号に加えて第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記２６に記載のシステム。
２８．レーザは第１の台上に取り付けられている付記２６または２７に記載のシステム。
２９．収集デバイスは第１の台上に取り付けられている付記２６または２７に記載のシステム。
３０．第２の台をさらに備えるシステムであって、収集デバイスは、第２の台上に取り付けられ、第２の台は、第１の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記２６に記載のシステム。
３１．第２の台をさらに備えるシステムであって、収集デバイスは、第２の台上に取り付けられ、第２の台は、第１の信号に加えて第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記３０に記載のシステム。
３２．第２のカメラからの第２の信号に応答してフローストリームの電荷を調整するように構成された電気系統をさらに備える付記３０に記載のシステム。
３３．動作上の接続は、第１のカメラ、第１および第２のカメラならびに第１の台に接続されたコントローラによって仲介され、コントローラは、第１および第２のカメラから信号を受信し、第１の台の最適位置を計算するように構成されている付記３０に記載のシステム。
３４．動作上の接続は、第１および第２のカメラならびに第２の台に接続され、第１および第２のカメラから信号を受信し、第２の台の最適位置を計算するように構成されたコントローラによって仲介される付記３３に記載のシステム。
３５．ストリームは、一連の液滴からなる付記２６〜３４のいずれか一項に記載のシステム。
３６．ノズル開口部の直径を自動的に決定するためのシステムであって、
第１の検出フィールドでストリーム寸法を検出し、ストリーム寸法を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、
ストリーム寸法からノズル開口部の直径に対する値を決定し、値をフローサイトメータに伝送するように構成されたコンピュータアルゴリズムを含むコントローラと
を備えるシステム。
３７．ストリーム寸法は、ストリームの幅である付記３６に記載のシステム。
３８．フローサイトメータは、伝送された値を受信した後に、一連のパラメータを自動的に調整するように構成されている付記３６または３７に記載のシステム。
３９．一連のパラメータは、静水圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相を含む群から選択される付記３８に記載のシステム。
４０．フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を含む方法。
４１．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記４０に記載の方法。
４２．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記４０または４１に記載の方法。
４３．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記４０に記載の方法。
４４．フローストリームの空間位置を決定するステップは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングするステップを含む付記４３に記載の方法。
４５．フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記４４に記載の方法。
４６．支持台はレーザを有する付記４５に記載の方法。
４７．支持台は収集容器を有する付記４５に記載の方法。
４８．容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記４７に記載の方法。
４７．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記４８に記載の方法。
４８．第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと
をさらに含む付記４０〜４７のいずれか一項に記載の方法。
４９．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するステップとを含む付記４８に記載の方法。
５０．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記４８に記載の方法。
５１．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記４８に記載の方法。
５２．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記４８に記載の方法。
５３．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップを含む付記４８に記載の方法。
５４．第２の支持台は、収集容器を有する付記５３に記載の方法。
５５．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記５４に記載の方法。
５６．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記５５に記載の方法。
５７．検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記４０に記載の方法。
５８．１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定するステップと、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記５７に記載の方法。
５９．フローセルのオリフィスの直径を決定するステップと、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するステップとをさらに含む付記５８に記載の方法。
６０．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップをさらに含む付記５９に記載の方法。
６１．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記６０に記載の方法。
６２．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、液滴駆動周波数を調整するステップをさらに含む付記６１に記載の方法。
６３．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、シース流体圧を調整するステップをさらに含む付記６２に記載の方法。
６４．検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
フローストリームが捕捉画像に存在しないと判断するステップと、
フローストリームが捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するため、ユーザによって入力されたフローサイトメータのパラメータを評価するステップと、
フローサイトメータの機能障害を示すユーザへの警告を生成するステップと
を含む方法。
６５．機能障害はノズルの詰まりである付記６４に記載の方法。
６６．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記６４に記載の方法。
６７．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記６４に記載の方法。
６８．フローサイトメータが開口されたフローセルのノズルオリフィスを備えることを入力するステップをさらに含む付記６４に記載の方法。
６９．フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
フローサイトメータの試料ポートに試料を注入するステップを含み、フローサイトメータは、プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備えるシステムを備え、システムは、
検出フィールドで試料を含むフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を行うように自動化される方法。
７０．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記６９に記載の方法。
７１．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記６９に記載の方法。
７２．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記６９に記載の方法。
７３．フローストリームの空間位置を決定するステップは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングするステップを含む付記７２に記載の方法。
７４．フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記６９に記載の方法。
７５．支持台はレーザを有する付記７４に記載の方法。
７６．支持台は収集容器を有する付記７４に記載の方法。
７７．容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記７６に記載の方法。
７８．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記７７に記載の方法。
７９．第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと
をさらに含む付記６９に記載の方法。
８０．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するステップとを含む付記７９に記載の方法。
８１．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記８０に記載の方法。
８２．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記８０に記載の方法。
８３．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記８０に記載の方法。
８４．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップを含む付記７９に記載の方法。
８５．第２の支持台は、収集容器を有する付記８４に記載の方法。
８６．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記８５に記載の方法。
８７．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記８６に記載の方法。
８８．検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記６９に記載の方法。
８９．１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定するステップと、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記８８に記載の方法。
９０．フローセルのオリフィスの直径を決定するステップと、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するステップとをさらに含む付記８９に記載の方法。
９１．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップをさらに含む付記９０に記載の方法。
９２．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記９１に記載の方法。
９３．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、振動子駆動周波数を調整するステップをさらに含む付記９２に記載の方法。
９４．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、シース流体圧を調整するステップをさらに含む付記９２に記載の方法。
９５．フローサイトメータを構成するためのシステムであって、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備え、メモリは、その上に格納された命令を含み、命令は、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するためのアルゴリズムと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令と
を含むシステム。
９６．メモリは、検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記９５に記載のシステム。
９７．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記９５に記載のシステム。
９８．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記９５に記載のシステム。
９９．メモリは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングすることを含むフローストリームの空間位置を決定するためのアルゴリズムを含む付記９５に記載のシステム。
１００．メモリは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するためのアルゴリズムを含む付記９５に記載のシステム。
１０１．支持台は収集容器を有する付記１００に記載のシステム。
１０２．メモリは、容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするためのアルゴリズムを含む付記１０１に記載のシステム。
１０３．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１０２に記載のシステム。
１０４．メモリは、
第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するためのアルゴリズムと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと
をさらに含む付記９５に記載のシステム。
１０５．メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記１０４に記載のシステム。
１０６．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記１０４に記載のシステム。
１０７．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記１０４に記載のシステム。
１０８．メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するためのアルゴリズムをさらに含む付記１０４に記載のシステム。
１０９．メモリは、第２の支持台上の容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするためのアルゴリズムを含む付記１０４に記載のシステム。
１１０．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１０９に記載のシステム。
１１１．メモリは、検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定し、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記９５に記載のシステム。
１１２．物理的寸法はフローストリームの幅である付記１１１に記載のシステム。
１１３．メモリは、フローセルのオリフィスの直径を決定し、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムをさらに含む付記１１１に記載のシステム。
１１４．メモリは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するためのアルゴリズムをさらに含む付記１１３に記載のシステム。
１１５．１つまたは複数のパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記１１４に記載のシステム。
１１６．フローサイトメータを構成するためのシステムであって、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備え、メモリは、
その上に格納された命令を含み、命令は、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
フローストリームが捕捉画像に存在しないと判断するためのアルゴリズムと、
フローストリームが捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するため、ユーザによって入力されたフローサイトメータのパラメータを評価するためのアルゴリズムと、
フローサイトメータの機能障害を示すユーザへの警告を生成するための命令と
を含むシステム。
１１７．機能障害はノズルの詰まりである付記１１６に記載のシステム。
１１８．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記１１６に記載のシステム。
１１９．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記１１６に記載のシステム。
１２０．入力されたパラメータは、フローサイトメータが開口されたフローセルのノズルオリフィスを有することを示すことを含む付記１１６に記載のシステム。
【０１４３】
前述の発明は、理解を明確にする目的で例示および例として多少詳細に説明してきたが、当業者であれば、この開示の教示を踏まえて、添付の特許請求の範囲の精神または範囲から逸脱することなく、発明に対してある変更や修正を行うことができることが容易に明らかであろう。
【０１４４】
それに従って、前述の記載は、単に、本発明の原理を示す。当業者は、本明細書で明示的に説明されても示されてもいないが、本発明の原理を具体化する様々な構成を考案することができ、それらの構成はその精神および範囲内に含まれることが理解されよう。その上、本明細書に記載のすべての例や条件語句は、主に、そのような具体的な記載の例および条件に対する制限がない本発明の原理を理解する上で読者を支援することを意図する。その上、本発明の原理、態様および実施形態ならびにそれらの特定の例について記載する本明細書のすべての言明は、それらの構造上の均等物と機能上の均等物の両方を包含することを意図する。それに加えて、そのような均等物は、現在知られている均等物と将来開発される均等物の両方（すなわち、構造にかかわらず、同じ機能を実行して開発されるいかなる要素）を含むことを意図する。したがって、本発明の範囲は、本明細書で示され説明される例示的な実施形態に限定されることを意図しない。むしろ、本発明の範囲および精神は、添付の特許請求の範囲によって具体化される。
【０１４５】
関連出願の相互参照
米国特許法第１１９条（ｅ）に準じて、この出願は、２０１３年４月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／８１１，４６５号明細書の出願日に対する優先権を主張し、同出願の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2016521362.tif 000003
【図２】
2016521362.tif 000004
【図３】
2016521362.tif 000005
【手続補正書】
【提出日】平成27年10月21日(2015.10.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
添付の請求項にもかかわらず、本明細書に記載される本開示は、以下の付記によっても定義される。
１．フローサイトメータの検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、メモリは、フローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
を備えるシステムであって、
プロセッサは、データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成されているシステム。
２．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの空間位置を決定し、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１に記載のシステム。
３．検出フィールドの下流に配置された支持台をさらに備える付記１または２に記載のシステム。
４．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を自動的に調整するように構成されている付記３に記載のシステム。
５．二次元で支持台の位置を調整するように構成されている付記４に記載のシステム。
６．支持台はレーザを有する付記３〜５のいずれか一項に記載のシステム。
７．支持台は容器を有する付記３〜５のいずれか一項に記載のシステム。
８．容器とフローストリームの決定された空間位置とを自動的に位置合わせするように構成されている付記７に記載のシステム。
９．容器とフローストリームとを自動的に位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記８に記載のシステム。
１０．第２の検出フィールドでフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するように構成された第２の画像センサと、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサであって、メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応する第２のデータ信号を生成するという、その上に格納された命令を含む、プロセッサと
をさらに備える付記１〜９のいずれか一項に記載のシステム。
１１．プロセッサは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するように構成されている付記１０に記載のシステム。
１２．第１の支持台の下流に配置された第２の支持台をさらに備える付記１１に記載のシステム。
１３．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を自動的に調整するように構成されている付記１２に記載のシステム。
１４．二次元で第２の支持台の位置を調整するように構成されている付記１３に記載のシステム。
１５．第２の支持台は、フローストリームを収集するための容器を備える付記１３に記載のシステム。
１６．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを自動的に位置合わせするように構成されている付記１５に記載のシステム。
１７．容器を自動的に位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１６に記載のシステム。
１８．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの物理的寸法を決定し、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１に記載のシステム。
１９．プロセッサは、１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定し、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１８に記載のシステム。
２０．プロセッサは、フローセルのノズルオリフィスの直径を決定し、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するように構成されている付記１９に記載のシステム。
２１．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを自動的に調整するように構成されている付記２０に記載のシステム。
２２．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記２１に記載のシステム。
２３．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、シース流体圧を自動的に調整するように構成されている付記２２に記載のシステム。
２４．プロセッサは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、振動子駆動周波数を自動的に調整するように構成されている付記２２に記載のシステム。
２５．画像センサはＣＣＤカメラである付記１〜２４のいずれか一項に記載のシステム。
２６．フローサイトメータからの液体フローのストリーム位置を自動的に局在させるためのシステムであって、
第１の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、第１の台とを備えるシステムであり、
第１の台は、第１のカメラに動作上接続され、第１の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されているシステム。
２７．第２の検出フィールドでストリーム位置を検出し、ストリーム位置を表す第２の信号を生成するように適合された第２のカメラをさらに備えるシステムであって、
第１および第２のカメラの第１および第２の検出フィールドは、ＸＹ平面で実質的に直交配向され、
第１の台は、第２のカメラに動作上接続され、第１の信号に加えて第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記２６に記載のシステム。
２８．レーザは第１の台上に取り付けられている付記２６または２７に記載のシステム。
２９．収集デバイスは第１の台上に取り付けられている付記２６または２７に記載のシステム。
３０．第２の台をさらに備えるシステムであって、収集デバイスは、第２の台上に取り付けられ、第２の台は、第１の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記２６に記載のシステム。
３１．第２の台をさらに備えるシステムであって、収集デバイスは、第２の台上に取り付けられ、第２の台は、第１の信号に加えて第２の信号に応答してＸＹ平面を移動するように構成されている付記３０に記載のシステム。
３２．第２のカメラからの第２の信号に応答してフローストリームの電荷を調整するように構成された電気系統をさらに備える付記３０に記載のシステム。
３３．動作上の接続は、第１のカメラ、第１および第２のカメラならびに第１の台に接続されたコントローラによって仲介され、コントローラは、第１および第２のカメラから信号を受信し、第１の台の最適位置を計算するように構成されている付記３０に記載のシステム。
３４．動作上の接続は、第１および第２のカメラならびに第２の台に接続され、第１および第２のカメラから信号を受信し、第２の台の最適位置を計算するように構成されたコントローラによって仲介される付記３３に記載のシステム。
３５．ストリームは、一連の液滴からなる付記２６〜３４のいずれか一項に記載のシステム。
３６．ノズル開口部の直径を自動的に決定するためのシステムであって、
第１の検出フィールドでストリーム寸法を検出し、ストリーム寸法を表す第１の信号を生成するように適合された第１のカメラと、
ストリーム寸法からノズル開口部の直径に対する値を決定し、値をフローサイトメータに伝送するように構成されたコンピュータアルゴリズムを含むコントローラと
を備えるシステム。
３７．ストリーム寸法は、ストリームの幅である付記３６に記載のシステム。
３８．フローサイトメータは、伝送された値を受信した後に、一連のパラメータを自動的に調整するように構成されている付記３６または３７に記載のシステム。
３９．一連のパラメータは、静水圧、液滴電荷、偏向電圧、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相を含む群から選択される付記３８に記載のシステム。
４０．フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を含む方法。
４１．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記４０に記載の方法。
４２．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記４０または４１に記載の方法。
４３．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記４０に記載の方法。
４４．フローストリームの空間位置を決定するステップは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングするステップを含む付記４３に記載の方法。
４５．フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記４４に記載の方法。
４６．支持台はレーザを有する付記４５に記載の方法。
４７．支持台は収集容器を有する付記４５に記載の方法。
４８．容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記４７に記載の方法。
４９．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記４８に記載の方法。
５０．第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと
をさらに含む付記４０〜４９のいずれか一項に記載の方法。
５１．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するステップとを含む付記５０に記載の方法。
５２．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記５０に記載の方法。
５３．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記５０に記載の方法。
５４．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記５０に記載の方法。
５５．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップを含む付記５０に記載の方法。
５６．第２の支持台は、収集容器を有する付記５５に記載の方法。
５７．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記５６に記載の方法。
５８．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記５７に記載の方法。
５９．検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記４０に記載の方法。
６０．１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定するステップと、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記５９に記載の方法。
６１．フローセルのオリフィスの直径を決定するステップと、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するステップとをさらに含む付記６０に記載の方法。
６２．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップをさらに含む付記６１に記載の方法。
６３．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴駆動周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記６２に記載の方法。
６４．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、液滴駆動周波数を調整するステップをさらに含む付記６３に記載の方法。
６５．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、シース流体圧を調整するステップをさらに含む付記６４に記載の方法。
６６．検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
フローストリームが捕捉画像に存在しないと判断するステップと、
フローストリームが捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するため、ユーザによって入力されたフローサイトメータのパラメータを評価するステップと、
フローサイトメータの機能障害を示すユーザへの警告を生成するステップと
を含む方法。
６７．機能障害はノズルの詰まりである付記６６に記載の方法。
６８．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記６６に記載の方法。
６９．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記６６に記載の方法。
７０．フローサイトメータが開口されたフローセルのノズルオリフィスを備えることを入力するステップをさらに含む付記６６に記載の方法。
７１．フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための方法であって、
フローサイトメータの試料ポートに試料を注入するステップを含み、フローサイトメータは、プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備えるシステムを備え、システムは、
検出フィールドで試料を含むフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップと
を行うように自動化される方法。
７２．検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記７１に記載の方法。
７３．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記７１に記載の方法。
７４．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記７１に記載の方法。
７５．フローストリームの空間位置を決定するステップは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングするステップを含む付記７４に記載の方法。
７６．フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記７１に記載の方法。
７７．支持台はレーザを有する付記７６に記載の方法。
７８．支持台は収集容器を有する付記７６に記載の方法。
７９．容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記７８に記載の方法。
８０．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記７９に記載の方法。
８１．第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するステップと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するステップと
をさらに含む付記７１に記載の方法。
８２．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定するステップと、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するステップとを含む付記８１に記載の方法。
８３．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記８２に記載の方法。
８４．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記８２に記載の方法。
８５．第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップをさらに含む付記８２に記載の方法。
８６．第１および第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するステップを含む付記８１に記載の方法。
８７．第２の支持台は、収集容器を有する付記８６に記載の方法。
８８．容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするステップを含む付記８７に記載の方法。
８９．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記８８に記載の方法。
９０．検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定するステップと、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記７１に記載の方法。
９１．１つまたは複数の画像からフローストリームの幅を決定するステップと、フローストリームの幅に対応するデータ信号を生成するステップとを含む付記９０に記載の方法。
９２．フローセルのオリフィスの直径を決定するステップと、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するステップとをさらに含む付記９１に記載の方法。
９３．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するステップをさらに含む付記９２に記載の方法。
９４．フローサイトメータのパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記９３に記載の方法。
９５．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、振動子駆動周波数を調整するステップをさらに含む付記９４に記載の方法。
９６．決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に応答して、シース流体圧を調整するステップをさらに含む付記９４に記載の方法。
９７．フローサイトメータを構成するためのシステムであって、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備え、メモリは、その上に格納された命令を含み、命令は、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するためのアルゴリズムと、
フローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと、
データ信号に応答してフローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するための命令と
を含むシステム。
９８．メモリは、検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記９７に記載のシステム。
９９．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記９７に記載のシステム。
１００．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記９７に記載のシステム。
１０１．メモリは、Ｘ−Ｙ平面にフローストリームの位置をマッピングすることを含むフローストリームの空間位置を決定するためのアルゴリズムを含む付記９７に記載のシステム。
１０２．メモリは、フローストリームの空間位置に対応するデータ信号に応答して、支持台の位置を調整するためのアルゴリズムを含む付記９７に記載のシステム。
１０３．支持台は収集容器を有する付記１０２に記載のシステム。
１０４．メモリは、容器とフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするためのアルゴリズムを含む付記１０３に記載のシステム。
１０５．容器とフローストリームとを位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１０４に記載のシステム。
１０６．メモリは、
第２の検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性を決定するためのアルゴリズムと、
第２の検出フィールドにおけるフローストリームの１つまたは複数の特性に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムと
をさらに含む付記９７に記載のシステム。
１０７．メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置を決定し、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記１０６に記載のシステム。
１０８．第２の検出フィールドにおけるフローストリームは離散液滴を含む付記１０６に記載のシステム。
１０９．第２の検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの下流のフローストリームを含む付記１０６に記載のシステム。
１１０．メモリは、第２の検出フィールドにおけるフローストリームの空間位置に対応する第２のデータ信号に応答して、第２の支持台の位置を調整するためのアルゴリズムをさらに含む付記１０６に記載のシステム。
１１１．メモリは、第２の支持台上の容器と第２の検出フィールドにおけるフローストリームの決定された空間位置とを位置合わせするためのアルゴリズムを含む付記１０６に記載のシステム。
１１２．容器を位置合わせするステップは、
Ｘ−Ｙ平面に第２の検出フィールドにおけるフローストリームの位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面に容器の位置をマッピングするステップと、
Ｘ−Ｙ平面において容器の位置をフローストリームの位置と一致させるステップと
を含む付記１１１に記載のシステム。
１１３．メモリは、検出フィールドにおけるフローストリームの物理的寸法を決定し、フローストリームの物理的寸法に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムを含む付記９７に記載のシステム。
１１４．物理的寸法はフローストリームの幅である付記１１３に記載のシステム。
１１５．メモリは、フローセルのオリフィスの直径を決定し、フローストリームの決定された幅に基づいて、フローセルのノズルオリフィスの直径に対応するデータ信号を生成するためのアルゴリズムをさらに含む付記１１３に記載のシステム。
１１６．メモリは、決定されたフローセルのノズルオリフィスの直径に基づいて、フローサイトメータの１つまたは複数のパラメータを調整するためのアルゴリズムをさらに含む付記１１５に記載のシステム。
１１７．１つまたは複数のパラメータは、静水圧、シース流体圧、フローストリーム電荷、偏向電圧、振動子駆動周波数、電荷補正値、液滴遅延、液滴周波数、液滴振幅および電荷位相からなる群から選択される付記１１６に記載のシステム。
１１８．フローサイトメータを構成するためのシステムであって、
プロセッサと動作可能に結合されたメモリを有するプロセッサを備え、メモリは、
その上に格納された命令を含み、命令は、
検出フィールドでフローサイトメータのフローストリームの１つまたは複数の画像を捕捉するための命令と、
フローストリームが捕捉画像に存在しないと判断するためのアルゴリズムと、
フローストリームが捕捉画像に存在することが予想されるかどうかを判断するため、ユーザによって入力されたフローサイトメータのパラメータを評価するためのアルゴリズムと、
フローサイトメータの機能障害を示すユーザへの警告を生成するための命令と
を含むシステム。
１１９．機能障害はノズルの詰まりである付記１１８に記載のシステム。
１２０．検出フィールドは、フローストリームのブレイクオフポイントの上流のフローストリームを含む付記１１８に記載のシステム。
１２１．検出フィールドにおけるフローストリームは連続的である付記１１８に記載のシステム。
１２２．入力されたパラメータは、フローサイトメータが開口されたフローセルのノズルオリフィスを有することを示すことを含む付記１１８に記載のシステム。
【国際調査報告】
2016521362.tif 000006
2016521362.tif 000007
2016521362.tif 000008