(57)【要約】  本発明は、置換インドール誘導体、その生成プロセス、新たな安定形態、医薬品としてのその使用、およびそれを含む医薬組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
三水和物の形態の式（Ｉ）の化合物
【化１７】
2016500057.tif 000034
［式中、
ＸはＣＨまたはＮであり、
ＲはＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ２はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＣＮ、ハロゲン、またはＯＨであり、
Ｒ４およびＲ５は互いに独立してＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する］。
【請求項２】
ＸがＣＨであり、
ＲがＨであり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
請求項１に記載の三水和物。
【請求項３】
ＸがＮであり、
ＲがＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
請求項１に記載の三水和物。
【請求項４】
式（ＩＩＩ）の化合物
【化１８】
2016500057.tif 000035
の三水和物である、請求項１に記載の三水和物。
【請求項５】
リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル三水和物である、請求項１に記載の三水和物。
【請求項６】
医薬品としての使用のための、特にＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する障害または疾患の処置における使用のための、請求項１から５のいずれか一項に記載の三水和物。
【請求項７】
特にそれを必要とする対象における、ＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する疾患または状態の処置または予防方法であって、請求項１から５のいずれか一項に記載の有効量の三水和物を対象に投与するステップを含む方法。
【請求項８】
前記処置または予防が、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、肥満細胞、好酸球または心筋細胞により媒介され得、したがって、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、アテローム性動脈硬化、脳梗塞、血管損傷による血管閉塞、例えば血管形成、再狭窄、線維症（とりわけ肺線維症であるが、他の型の線維症も、例えば腎線維症）、血管新生、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患、例えばアルツハイマー病もしくは筋萎縮性側索硬化症、癌、感染症、例えばＡＩＤＳ、敗血症性ショックもしくは成人呼吸窮迫症候群、虚血／再灌流傷害、例えば心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全もしくは出血性ショック、または外傷性ショックにおいて適応され得る、請求項６に記載の使用のための三水和物、または請求項７に記載の処置方法。
【請求項９】
前記処置または予防が、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、多発性硬化症、乾癬または慢性関節リウマチに向けられる、請求項６に記載の使用のための三水和物、または請求項７に記載の処置方法。
【請求項１０】
リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル、特に三水和物、の結晶形態であって、好ましくは、特に図３および／または表２に示されている、以下の屈折角度２シータ（θ）のピーク１１．８、１４．３、１６．１、１７．８、１９．３、２２．８、２３．９、２６．０、２９．１（それぞれ±０．２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ、より一層好ましくは４つ、特に好ましくは５つ、最も好ましくはすべて、を有するＸ線粉末回折パターンを有する、結晶形態。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ある形態の置換インドール誘導体、その生成プロセス、医薬品としてのその使用、およびそれを含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
薬物製品のバイオアベイラビリティが乏しいことは、医薬として有効な原料の制限因子となることが多い。この問題は、インドール誘導体の特定の分野では、今般、対応する親薬物をその誘導体に変換することにより対処されており、その親化合物と比較して望外に好都合な効果を有すると思われる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
したがって、実施形態１において、本発明は、三水和物の形態の式（Ｉ）の化合物
【０００４】
【化１】
2016500057.tif 000002
［式中、
ＸはＣＨまたはＮであり、
ＲはＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ２はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＣＮ、ハロゲン、またはＯＨであり、
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立してＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する］に関する。
【０００５】
実施形態２は、
ＸがＣＨであり、
ＲがＨであり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ４およびＲ５が、互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
実施形態１の三水和物に関する。
【０００６】
実施形態３は、
ＸがＮであり、
ＲがＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
実施形態１の三水和物に関する。
【０００７】
実施形態４は、式（ＩＩＩ）の化合物
【０００８】
【化２】
2016500057.tif 000003
の三水和物である、実施形態１の三水和物に関する。
【０００９】
実施形態５は、リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル三水和物である、実施形態１の三水和物に関する。
【００１０】
実施形態６は、医薬品としての使用のための、特にＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する障害または疾患の処置における使用のための、前記実施形態１から５のいずれか１つによる三水和物に関する。
【００１１】
実施形態７は、特にそれを必要とする対象における、ＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する疾患または状態の処置または予防方法であって、前記実施形態１から５のいずれか１つの有効量の三水和物を対象に投与するステップを含む方法に関する。
【００１２】
実施形態８は、前記処置または予防が、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、肥満細胞、好酸球または心筋細胞により媒介され得、したがって、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、アテローム性動脈硬化、脳梗塞、血管損傷による血管閉塞、例えば血管形成、再狭窄、線維症（とりわけ肺線維症であるが、他の型の線維症も、例えば腎線維症）、血管新生、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患、例えばアルツハイマー病もしくは筋萎縮性側索硬化症、癌、感染症、例えばＡＩＤＳ、敗血症性ショックもしくは成人呼吸窮迫症候群、虚血／再灌流傷害、例えば心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全、もしくは出血性ショック、または外傷性ショックにおいて適応され得る、実施形態６による使用のための三水和物、または実施形態７による処置方法に関する。
【００１３】
実施形態９は、前記処置または予防が、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、多発性硬化症、乾癬、または慢性関節リウマチに向けられる、実施形態６による使用のための三水和物、または実施形態７による処置方法に関する。
【００１４】
実施形態１０は、リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル、特に三水和物、の結晶形態であって、好ましくは、特に図３および／または表２に示されている、以下の屈折角度２シータ（θ）のピーク１１．８、１４．３、１６．１、１７．８、１９．３、２２．８、２３．９、２６．０、２９．１（それぞれ±０．２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ、より一層好ましくは４つ、特に好ましくは５つ、最も好ましくはすべて、を有するＸ線粉末回折パターンを有する、結晶形態に関する。
【００１５】
本発明は、式（Ｉ）の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物
【００１６】
【化３】
2016500057.tif 000004
［式中、
ＸはＣＨまたはＮであり、
ＲはＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ２はＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＣＮ、ハロゲン、またはＯＨであり、
Ｒ４およびＲ５は互いに独立してＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する］にも関する。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、
ＸがＣＨであり、
ＲがＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
式（Ｉ）の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物に関する。
【００１８】
別の実施形態において、本発明は、
ＸがＣＨであり、
ＲがＨであり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
式（Ｉ）の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物に関する。
【００１９】
別の実施形態において、本発明は、
ＸがＮであり、
ＲがＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨであり、またはＲ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する、
式（Ｉ）の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物に関する。
【００２０】
別の実施形態において、本発明は、
ＸがＮであり、
ＲがＰＯ３Ｈ２であり、
Ｒ１がＨであり、
Ｒ２がＨ、またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｒ３がＨであり、
Ｒ４およびＲ５が互いに独立してＨ、またはＣ１〜４アルキルである、
式（Ｉ）の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物に関する。
【００２１】
別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物
【００２２】
【化４】
2016500057.tif 000005
または医薬として許容できるその塩に関する。
【００２３】
別の実施形態において、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物
【００２４】
【化５】
2016500057.tif 000006
または医薬として許容できるその塩もしくは水和物に関する。
【００２５】
別の実施形態において、本発明は、式（ＩＶ）の化合物
【００２６】
【化６】
2016500057.tif 000007
または医薬として許容できるその塩に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステルの結晶性一水和物（実施例１の一水和物）のＸ線ディフラクトグラムを示す図である。
【図２】実施例１の結晶性一水和物の吸水プロファイル［５０％ＲＨで６時間にわたって平衡化させ、続いて、５０％ＲＨ〜９０％ＲＨ〜０％ＲＨ〜９０％ＲＨ〜０％ＲＨ〜５０％ＲＨを、１０％ＲＨ刻みで２回のＲＨサイクル］を示す図である。ＲＨ＝相対湿度。
【図３】リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステルの結晶性三水和物（実施例１の三水和物）のＸ線ディフラクトグラムを示す図である。
【図４】実施例１の結晶性三水和物の吸水プロファイルを示す図である。ＲＨ＝相対湿度。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
従来技術
Ｎ．Ｆｏｔｏｕｈｉら（ＥＰ１，２２４，１８１）は、置換ピロール誘導体について記載しており、前記ピロール環における化学修飾は多数の変数（ｖａｒｉａｂｌｅｓ）からなり、メチレンヒドロキシまたはメチレンリン酸基も含有し得る。
【００２９】
定義
本明細書で使用されている、「ハロゲン」（またはハロ）という用語は、フッ素、臭素、塩素またはヨウ素を指し、特にフッ素、塩素を指す。
【００３０】
本明細書で使用されている、「アルキル」という用語は、４個までの炭素原子を有する、完全に飽和した分岐または非分岐炭化水素部分を指す。アルキルの代表的な例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどを含むが、それらに限定されない。
【００３１】
本明細書で使用されている、「アルコキシ」という用語は、アルキル−Ｏ−を指し、アルキルは、本明細書にて上で定義されている。アルコキシの代表的な例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、シクロプロピルオキシ−、シクロヘキシルオキシ−などを含むが、それらに限定されない。典型的には、アルコキシ基は１〜４個の炭素原子を有する。
【００３２】
本明細書で使用されている、「シクロアルキル」という用語は、３〜６個の炭素原子、特に３〜５個の炭素原子、とりわけ３〜４個または３個の炭素原子の飽和または不飽和単環式炭化水素基を指す。
【００３３】
本明細書で使用されている、「塩（ｓａｌｔ）」または「塩（ｓａｌｔｓ）」という用語は、本発明の化合物の酸付加塩または塩基付加塩を指す。「塩」は、特に「医薬の許容できる塩」を含む。「医薬として許容できる塩」という用語は、生物学的有効性および本発明の化合物の性質を保つ塩を指し、典型的には塩は、生物学的に、または他に望ましくないことがない。多くの例で、本発明の化合物は、アミノおよび／もしくはカルボキシル基またはそれらに類似した基が存在することによって、酸および／または塩基塩を形成することが可能である。
【００３４】
医薬として許容できる酸付加塩は、無機酸および有機酸を用いて形成できる（例えば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭化物塩／臭化水素酸塩、炭酸水素塩／炭酸塩、硫酸水素塩／硫酸塩、カンファースルホン酸塩、塩素塩／塩酸塩、クロルテオフィロン酸塩、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプテート（gluceptate）塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩およびトリフルオロ酢酸塩）。
【００３５】
塩が由来し得る無機酸は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。
【００３６】
塩が由来し得る有機酸は、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などを含む。医薬として許容できる塩基付加塩は、無機および有機塩基を用いて形成できる。
【００３７】
塩が由来し得る無機塩基は、例えば、周期表のＩ族からＸＩＩ族のアンモニウム塩および金属を含む。ある実施形態において、塩は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛および銅に由来し；特に適切な塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩を含む。
【００３８】
塩が由来し得る有機塩基は、例えば、第一級、第二級および第三級アミン、自然発生する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂などを含む。ある有機アミンは、イソプロピルアミン、ベンザチン、コリネート（cholinate）、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リジン、メグルミン、ピペラジンおよびトロメタミンを含む。
【００３９】
本発明の医薬として許容できる塩は、従来の化学的方法により、親化合物、塩基または酸性部分から合成できる。一般的に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸形態と理論量の適切な塩基（例えば水酸化、炭酸、炭酸水素Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、もしくはＫなど）を反応させることにより、またはこれらの化合物の遊離塩基形態と理論量の適切な酸を反応させることにより、調製できる。そのような反応は、典型的には、水もしくは有機溶媒中で、または、その２つの混合物中で実行される。一般的に、実行可能な場合はエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体の使用が望ましい。さらなる適切な塩の一覧は、例えば、「Remington's Pharmaceutical Sciences」、第20版、Mack Publishing Company、Easton, Pa.(1985年)；およびStahlおよびWermuth著「Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use」（Wiley-VCH、Weinheim、Germany、2002年）で見出すことができる
【００４０】
本明細書で示されているあらゆる式は、化合物の非標識形態ならびに同位体標識形態を表すことも意図している。同位体標識化合物は、１つまたは複数の原子が、選択された原子質量または質量数を有する原子に置き換えられていることを除き、本明細書で示されている式により描写されている構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体、例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉを含む。本発明は、本明細書で定義されている様々な同位体標識化合物、例えば放射性同位体、例として３Ｈおよび１４Ｃが存在するもの、または非放射性同位体、例として２Ｈおよび１３Ｃが存在するものを含む。そのような同位体標識化合物は、代謝の研究（１４Ｃを用いる）、反応動態研究（例えば２Ｈまたは３Ｈを用いる）、薬物もしくは基質の組織分布アッセイを含む検出あるいは撮像技術、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）もしくは単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、または患者の放射性処置に有用である。特に、１８Ｆまたは標識化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ研究に特に望ましいことがある。本発明の同位体標識化合物およびそのプロドラッグは、一般的に、非同位体標識試薬を直ちに利用できる同位体標識試薬に置き換えることにより、スキームまたは実施例で開示されている手順および下に記載されている調製を実行することにより調製できる。
【００４１】
さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち、２ＨまたはＤ）を用いる置換により、代謝安定性がより高いことに起因するある治療的利点、例えばｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長または必要投与量の減少または治療指数の改善を得ることができる。この文脈における重水素は、本発明の化合物の置換基とみなされることが理解される。そのようなより重い同位体、具体的には重水素の濃度は、同位体濃縮係数で定義され得る。本明細書で使用されている「同位体濃縮係数」という用語は、特定の同位体の存在度および天然存在度の間における比を意味する。本発明の化合物の置換基が、表記されている重水素である場合、そのような化合物は、指定の各重水素原子に対して、少なくとも３５００（指定の各重水素原子に５２．５％の重水素が組み込まれている）、少なくとも４０００（６０％の重水素が組み込まれている）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素が組み込まれている）、少なくとも５０００（７５％の重水素が組み込まれている）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素が組み込まれている）、少なくとも６０００（９０％の重水素が組み込まれている）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素が組み込まれている）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素が組み込まれている）、少なくとも６６００（９９％の重水素が組み込まれている）、または少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素が組み込まれている）の同位体濃縮係数を有する。
【００４２】
本発明の同位体標識化合物は、一般的に、当業者に知られている従来の技術により、または、付随する実施例に記載されているものに類似するプロセス、および以前用いられていた標識していない試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用する調製により調製できる。
【００４３】
本発明による医薬として許容できる溶媒和物は、結晶化の溶媒が、例えばＤ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯに同位体置換され得る溶媒和物を含む。
【００４４】
本発明の化合物、例えば、水素結合の供与体および／または受容体として作用することが可能な基を含有する式（Ｉ）の化合物は、適切な共結晶化剤を用いて共結晶の形成が可能なことがある。これらの共結晶は、公知の共結晶を形成する手順により、式（Ｉ）の化合物から調製できる。そのような手順は、すり潰すステップ、加熱するステップ、共昇華するステップ、共溶融するステップ、または結晶化条件下で共結晶化剤と式（Ｉ）の化合物を溶液中で接触させるステップ、およびそれにより形成された共結晶を単離するステップを含む。適切な共結晶化剤は、ＷＯ２００４／０７８１６３に記載されているものを含む。したがって、本発明は、式（Ｉ）の化合物を含む共結晶をさらに提供する。
【００４５】
本明細書で使用されている、「医薬として許容できる担体」という用語は、当業者に知られているように（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、Mack Printing Company、1990年、1289〜1329頁を参照されたい）溶媒、分散媒体、コーティング、界面活性剤、抗酸化剤、防腐剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、防腐剤、薬物、薬物安定化剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、色素など、およびそれらの組み合わせのいずれか、およびすべてを含む。従来のいかなる担体も有効成分と混合できない場合を除き、治療または医薬組成物におけるその使用は検討される。
【００４６】
本発明の化合物の「治療有効量」という用語は、対象の生物学的または医学的反応、例えば、酵素もしくはタンパク質活性の低下もしくは阻害を導く、または症状を改善する、状態を緩和する、疾患の進展を遅くする、もしくは遅延させる、または疾患を予防するなどであろう本発明の化合物の量を指す。非限定的な一実施形態において、「治療有効量」という用語は、対象に投与される場合、（１）（ｉ）プロテインキナーゼＣによって媒介される、または（ｉｉ）プロテインキナーゼＣ活性に関連する、または（ｉｉｉ）プロテインキナーゼＣの（通常もしくは異常）活性に特徴づけられる、状態もしくは障害もしくは疾患を少なくとも部分的に緩和する、阻害する、予防する、および／または改善する；あるいは（２）プロテインキナーゼＣの活性を低下させる、または阻害する；あるいは（３）プロテインキナーゼＣの発現を減少させる、または阻害するために有効な本発明の化合物の量を指す。別の非限定的な実施形態において、「治療有効量」という用語は、細胞または組織または非細胞生体材料、または媒体に投与される場合、プロテインキナーゼＣの活性を少なくとも部分的に低下させる、または阻害する；あるいはプロテインキナーゼＣの発現を少なくとも部分的に減少させる、または阻害するために有効な本発明の化合物の量を指す。
【００４７】
本明細書で使用されている、「対象」という用語は、動物を指す。典型的には、動物は哺乳動物である。対象は、例えば、霊長類（例えば、ヒトの男性または女性）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚類、鳥類なども指す。ある実施形態において、対象は霊長類である。さらに他の実施形態において、対象はヒトである。
【００４８】
本明細書で使用されている、「阻害する（ｉｎｈｉｂｉｔ）」、「阻害（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）」または「阻害すること（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」という用語は、所与の状態、症状もしくは障害または疾患を軽減または抑制する、あるいは生物学的活性またはプロセスのベースライン活性を著しく低下させることを指す。
【００４９】
本明細書で使用されている、あらゆる疾患または障害を「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、一実施形態において、疾患または障害を改善する（すなわち、疾患の発現、または少なくとも１つのその臨床的な症状を遅らせるもしくは停止する、または減少させる）ことを指す。別の実施形態において「処置する」、「処置すること」または「処置」は、患者により識別可能にならないことがある身体的パラメータを含む、少なくとも１つの身体的パラメータを緩和する、または改善することを指す。さらに別の実施形態において、「処置する」、「処置すること」または「処置」は、身体的に、（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的に（例えば、身体的パラメータの安定化）、またはその両方で疾患または障害を調節することを指す。さらに別の実施形態において、「処置する」、「処置すること」または「処置」は、疾患または障害の発症もしくは発現または進展を予防すること、または遅延させることを指す。
【００５０】
本明細書で使用されている対象は、処置「を必要とする」が、その場合、そのような対象は、生物学的に、医学的にまたはクオリティオブライフに関して、そのような処置から利益を得るであろう。
【００５１】
本明細書で使用されている、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、「その（ｔｈｅ）」という用語および、本発明の文脈において（とりわけ請求項の文脈において）使用されている類似した用語は、本明細書に他の指示がない限り、または文脈に明らかに矛盾しない限り、単数形および複数形の両方を包括すると解釈すべきである。
【００５２】
本明細書に記載されているすべての方法は、本明細書に他の指示がない限り、または文脈に明らかに矛盾しない限り、あらゆる適切な順番で行うことができる。本明細書で示されるいずれか、およびすべての例、または例示的な言葉（例えば「例えば（ｓｕｃｈ  ａｓ）」）の使用は、本発明の理解をさらに容易にすることを意図しているにすぎず、他の主張がない限り、本発明の範囲を制限しない。
【００５３】
製造する方法
本発明の化合物は、下で示した方法、例えば、溶媒または塩基（例えば炭酸カリウムなど）の有無にかかわらず、例えばホルムアルデヒドを用いて、式（Ｖａ）のマレイミドを式（Ｖｂ）のアルコールに変換することにより製造でき、ならびに任意で、この反応の前に、（例えば遊離および反応性アミノ基が式（Ｖａ）化合物中に存在する場合）最先端技術を用いた反応に従って保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を導入することにより製造でき、変数Ｘ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、式（Ｉ）に示されている意味を有する。
【００５４】
【化７】
2016500057.tif 000008
【００５５】
式（Ｖｂ）のアルコールは、任意で、例えばトリクロロメチルアセトニトリルおよび適切な塩基、例えばＤＢＵを用いて反応性エステルに変換でき、次いで、適切な溶媒（例えば非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル））の有無を問わず、適切なリン酸化剤、例えばリン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルと反応させることができ、次いで、例えばジクロロメタンまたは１，２−ジクロロエタン中で例えばトリフルオロ酢酸を用いて加水分解して、最終生成物Ｖｃを得ることができる。
【００５６】
あるいは、式（Ｖｂ）のアルコールは、例えば光延反応の条件下でリン酸エステルと（例えばリン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルと）直接的に反応させて、リン酸エステルを得ることができ、次いでこれを、例えばジクロロメタン中で例えばトリフルオロ酢酸を用いて加水分解して、最終生成物Ｖｃを得ることができる。
【００５７】
実験パート：
出発原料の製造について特に記載されていない限り、化合物は公知である、または当業界で公知の、もしくは以下に記載されている方法と同様に調製できる。
【００５８】
以下の例は、本発明の例示であり一切限定されない。
略語：
ｂｓ  広幅一重線
ｄ  二重線
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ｄ．ｎ．  用量補正
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＦＣＣ  フラッシュカラムクロマトグラフィー
ＭｅＯＨ  メタノール
ＭＳ  質量分光法
ｍ  マルチプレット
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ｐ．ｏ．  経口の
ｒ．ｔ．  室温
ｓ  一重線
ｔ  三重線
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＵＰＬＣ  超高速液体クロマトグラフィー
【００５９】
すべての化合物の化学命名法は、ＡｕｔｏＮｏｍ（登録商標）を使用することにより生成された。
【００６０】
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＰＸ  ４００分光計で、室温にてＮＭＲスペクトルを記録した。
【００６１】
使用されるＬＣＭＳ方法：
ＬＣ方法１（Ｒｔ（１））：グラジエント（溶媒Ａ：水＋０．１％ギ酸、溶媒Ｂ：アセトニトリル；ｔ＝０分：９９％Ａ、１％Ｂ；ｔ＝１分  ９８％Ａ、２％Ｂ；ｔ＝２．２５分  １％Ａ、９９％Ｂ；ｔ＝４．５分  ０％Ａ、１００％Ｂ）をかけるＷａｔｅｒｓ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ  ２．１ｘ５０ｍｍカラム（流量＝０．７ｍｌ／分；検出２４０〜３５０ｎｍ；ＤＡＤ）を使用し、Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ２０００質量分析計につなげたＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣシステムで、保持時間（Ｒｔ）を測定した。
【００６２】
ＬＣ方法２（Ｒｔ（２））：グラジエント（（Ｈ２Ｏ＋０．０５％ギ酸＋３．７５ｍＭ酢酸アンモニウム）／（ＣＨ３ＣＮ＋０．０４％ギ酸）１．７分、流速１．２ｍＬ／分、９０／１０から５／９５、次いで０．７分、流速１．４ｍＬ／分、５／９５ならびにオーブン温度４０℃）をかけたＡｓｃｅｎｔｉｓ（登録商標）ＥｘｐｒｅｓｓカラムＣ１８  ２．７μｍ、３０ｘ２．１ｍｍ（Ｓｕｐｅｌｃｏ）を有するＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣシステムで、保持時間（Ｒｔ）を測定した。検出方法ＵＶ２１４〜３５０ｎｍ−ＭＳ。
【００６３】
精製方法：
分取逆相Ｇｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣ
Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡおよびアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡを移動相として有するＷＡＴＥＲＳのカラムＳｕｎＦｉｒｅ  ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤ  ５μｍ、３０ｘ１００ｍｍ。検出方法ＵＶ２２０〜４００ｎｍ。
[実施例]
【実施例１】
【００６４】
リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル
【００６５】
【化８】
2016500057.tif 000009
１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）中の７−｛１−［１−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−ホスホリルオキシメチル）−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．９０ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にてアルゴン下でＴＦＡ（８．２７ｇ、７２．５ｍｍｏｌ）を加えた。ＵＰＬＣ−ＭＳが、出発原料の完全な変換が発生したことを示すまで、反応混合物を０℃にてアルゴン下で３．５時間にわたって撹拌した。１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）を用いて、反応混合物を希釈し、減圧で濃縮して粗生成物を赤色の固体として得た。粗反応生成物を、ＭｅＯＨに溶解し、結晶化が発生し始めるまで、減圧で徐々に濃縮した。ペンタンを加え、固体を濾別し、Ｅｔ２Ｏを用いて洗浄した。ＤＭＳＯ中で粗生成物を懸濁することにより、さらなる精製を遂行し、続いて３０分間音波処理を行った。固体を濾別し、Ｅｔ２Ｏを用いて洗浄し、高真空で（＜１ｍｍＨｇ）乾燥させて、表題化合物を暗赤色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.10 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.65-7.61 (m, 2H), 7.44 (t, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.74 (d, 1H), 6.43 (t, 1H), 6.00 (d, 1H), 5.29 (d, 2H), 3.87-3.01 (m, 6H), 2.37 (s, 3H), 0.97-0.62 (m, 4H). 31P-NMR (162 MHz, DMSO-d6): -6.0. LCMS: [M+1]+ = 574.0, Rt (1) = 1.77分, Rt (2) = 0.71分
【００６６】
７−｛１−［４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【００６７】
【化９】
2016500057.tif 000010
アセトニトリル（６０ｍＬ）中の７−｛１−［１−ヒドロキシメチル−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７．３０ｇ、１２．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下でｒ．ｔ．にてトリクロロアセトニトリル（１７．８ｇ、１２．３ｍＬ、１２３ｍｍｏｌ）中のＤＢＵの溶液（０．３７４ｇ、０．３７１ｍＬ、２．４６ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加えた。ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン６：４）が完全な変換を示すまで、反応混合物をｒ．ｔ．にて５時間にわたり撹拌した。反応混合物を減圧で蒸発乾固させ、残渣をアセトニトリル（６０ｍＬ）中で懸濁した。リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．３６ｇ、１５．９９ｍｍｏｌ）を加え、ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン６：４）が、反応は完了したことを示すまで、ｒ．ｔ．にてアルゴン下で約３．５時間にわたり反応混合物を撹拌した。反応混合物を減圧で濃縮し、残渣でＥｔＯＡｃおよび水の間を分割した。この層を分離し、水を用いて有機相を洗浄した（５回）。Ｎａ２ＳＯ４で有機相を脱水し、減圧で濃縮して赤色の固体を得た。ＦＣＣ（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＳＰ４（商標）システム、ＳｉＯ２、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ２０：８０）により粗生成物を精製して、表題化合物を赤色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.03 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.70-7.65 (m, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.11-7.07 (m, 1H), 6.77(d, 1H), 6.44 (t, 1H), 5.97 (d, 1H), 5.39 (d, 1H), 3.49-3.08 (m, 6H), 2.39 (s, 3H), 1.45 (s, 18H), 1.41 (s, 9H), 0.87-0.56 (m, 4H). 31P-NMR (162 MHz, DMSO-d6): -12.1. LCMS: [M+1]+ = 786.4, Rt (1) = 2.53分, Rt (2) = 1.62分
【００６８】
７−｛１−［１−ヒドロキシメチル−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【００６９】
【化１０】
2016500057.tif 000011
ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の７−｛１−［４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．００ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ｒ．ｔ．にてアルゴン下で３７％ホルムアルデヒド水溶液（９．５ｇ、８．７２ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８５℃に加熱し、４時間にわたり撹拌した。反応混合物を連続して撹拌しながらｒ．ｔ．に冷却し、濾過した。氷水を用いて固体を洗浄し、高真空（＜１ｍｍＨｇ）で乾燥させて、表題化合物を暗赤色の結晶として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 11.96 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.69-7.64 (m, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.12-7.06 (m, 2H), 6.76 (d, 1H), 6.42 (t, 1H), 6.01 (d, 1H), 5.00 (d, 2H), 3.49-3.10 (m, 6H), 2.39 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 0.89-0.57 (m, 4H). LCMS: [M]+ = 593.7, Rt (1)= 2.34分
【００７０】
７−｛１−［４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製。
【００７１】
【化１１】
2016500057.tif 000012
二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２．７７ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．１８ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）を、ｒ．ｔ．にてアルゴン下で、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（５．０ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を１６時間にわたり撹拌し、減圧で濃縮した。残渣で、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびＣＨ２Ｃｌ２の間を分割した。層を分割し、ＣＨ２Ｃｌ２を用いて水性層を抽出した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインを用いて、組み合わせた有機層を洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧で濃縮して、表題化合物をオレンジ色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 11.88 (s, 1H), 11.15 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.68-7.65 (m, 2H), 7.46 (t, 1H), 7.09 (t, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 6.41 (t, 1H), 6.01 (d, 1H), 3.48-3.16 (m, 6H), 2.38 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 0.87-0.54 (m, 4H). LCMS: [M+1]+ = 563.9, Rt(1) = 3.51分, Rt (1) = 2.36分, Rt (2) = 1.37分
【実施例２】
【００７２】
３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−１−ヒドロキシメチル−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン
【００７３】
【化１２】
2016500057.tif 000013
１，２−ジクロロエタン（５ｍＬ）中の７−｛１−［１−ヒドロキシメチル−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−イソキノリン−３−イル｝−４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５００ｍｇ、０．８４２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にてアルゴン下でＴＦＡ（１．４４ｇ、０．９７３ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を加えた。０℃にてアルゴン下で、反応混合物を１時間にわたり撹拌し、その後さらにＴＦＡ（０．７６８ｇ、０．５２ｍＬ、６．７４ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間にわたり０℃で撹拌を続けた。反応混合物を減圧で蒸発乾固させ、粗生成物を、ＭｅＯＨから結晶化させて表題化合物を、赤色の固体（ＴＦＡ塩）として、暗赤色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.01 (d, 1H), 9.06 (bs, 2H), 8.11 (d, 1H), 7.71-7.66 (m, 2H), 7.51 (t, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.14 (t, 1H), 6.77 (d, 1H), 6.45-6.39 (m, 2H), 5.92 (d, 1H), 5.00 (d, 2H), 3.84-3.54 (m, 6H), 2.39 (s, 3H), 0.96-0.67 (m, 4H). LCMS: [M+1]+ = 493.7, Rt (1) = 1.84分
【実施例３】
【００７４】
３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン
【００７５】
【化１３】
2016500057.tif 000014
表題化合物の合成は、ＷＯ０３０８２８５９に実施例６９として記載されている。
【実施例４】
【００７６】
リン酸モノ−｛３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル｝エステル
【００７７】
【化１４】
2016500057.tif 000015
アルゴン下で、リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルクロロメチルエステル（１．２４ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（３．１４ｇ、９．６３ｍｍｏｌ）を、アセトン（４０ｍＬ）中の３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−キナゾリン−４−イル］−ピロール−２，５−ジオン（２．０ｇ、４．０１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物をアルゴン下で５０℃にて１６時間にわたり撹拌し、続いて、減圧で濃縮を行った。残渣でＥｔＯＡｃおよび飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液の間を分割し、層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４で有機層を脱水した。減圧での濃縮により、粗生成物が赤色の泡として得られた。上に記載した逆相Ｇｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣにより粗生成物を精製した。真空内にて望ましい分画を濃縮した後、赤色の固体を得た。ＵＰＬＣ−ＭＳにより、ｔ−ブチルエステル基の部分的な開裂が発生したことが示された。こうして得られた混合物（２８０ｍｇ）を１，２−ジクロロエタン（４ｍＬ）およびアセトニトリル（２．０ｍＬ）の混合物に溶解した。ＴＦＡ（１４５ｍｇ、９８μＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、ＵＰＬＣ−ＭＳにより、出発原料の完全な変換が発生したことが示されたら、生じた溶液を０℃にてアルゴン下で３時間にわたり撹拌した。１，２−ジクロロエタン（４．０ｍＬ）を用いて、反応混合物を希釈し、減圧で濃縮して、粗生成物を赤色の固体として得た。粗反応生成物を、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）に溶解し、結晶化が発生し始めるまで減圧で徐々に濃縮した。結晶を濾別し、Ｅｔ２Ｏおよびペンタンを用いて洗浄して、表題化合物をオレンジ色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.14 (t, 1H), 7.02 (t, 1H), 6.65 (t, 1H), 6.24 (d, 1H), 5.34 (d, 2H), 4.14-3.72 (bs, 4H), 3.00-2.73 (bs, 4H), 2.60 (s, 3H). 31P-NMR (162 MHz, DMSO-d6): -2.7. LCMS: [M]+ = 548.6, Rt (1) = 1.72分, Rt (2) = 0.73分
【００７８】
実施例１の化合物の結晶質（一水和物）の調製：
リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル（実施例Ｎｏ．１）２グラムを、エタノール８００ｍｌおよび水２００ｍｌの混合物に分散した。この懸濁液を、室温で３日間にわたり撹拌した。その後、焼結ガラス濾過器を通して、前記懸濁液を濾過し、そのようにして得られた結晶を通常の大気流中で乾燥させた。これらの結晶１グラムに、８０％エタノール／２０％水（体積／体積）の溶液４ｍｌを加え、生じた混合物を大気圧で蒸発乾固させ、実施例Ｎｏ．１の一水和物を得た。
【００７９】
図１
上の結晶性一水和物のＸ線ディフラクトグラムは、図１に示されており、角度２シータに対するピークは表１に記録されている。
【００８０】
【表１】
2016500057.tif 000016
【００８１】
したがって、本発明は、別の実施形態において、リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル、特に一水和物、の結晶形態を提供し、これは、好ましくは、特に図１に示されている以下の屈折角度２シータ（θ）のピーク９．５２５、１６．３５６、１７．０９１、１８．００５、２０．８５９（それぞれ±０．２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ、より一層好ましくは４つ、特に好ましくは５つ、最も好ましくはすべて、を有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００８２】
【表２】
2016500057.tif 000017
ＤＳＣ（示差走査熱量測定）およびＴＧＡ（熱重量分析）でみられる熱事象を要約した表
【００８３】
【表３】
2016500057.tif 000018
【００８４】
図２
実施例Ｎｏ．１の結晶性一水和物の水収着プロファイルを図２に示す。以下の湿度曝露を施した：５０％ＲＨで６時間平衡化させ、続いて５０％ＲＨ〜９０％ＲＨ〜０％ＲＨ〜９０％ＲＨ〜０％ＲＨ〜５０％ＲＨを、１０％ＲＨ刻みで２ＲＨサイクル。（ＲＨ＝相対湿度）
【００８５】
実施例１の三水和物の調製：
リン酸モノ−［３−［３−（４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクタ−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−ピロール−１−イルメチル］エステル（実施例１）２０ｇを２００ｍｌメタノール中で２０±４℃にて３時間にわたり撹拌した。次いで、固体を濾過し、４０ｍｌメタノールを用いて洗浄した。
【００８６】
生じたウェットケーキを、次のステップ用に直接得、すなわち１００ｍｌのＤＭＳＯ中で２時間にわたり２０±４℃にて撹拌した。固体を濾過し、エタノール（ＰＳＣ  Ａ９／１  ＨＰＬＣ純度≧９８．０％  単一不純物≦１．０％）を用いて洗浄した。
【００８７】
生じたウェットケーキを、溶媒の混合物、すなわちエタノール／水（ｖ／ｖ７５／２５）ｗ／ｗ５９．２５／２５中に一部移し、２０±２℃にて３時間にわたり撹拌した。生じた暗色の固体を濾過し、エタノールを用いて２回洗浄した。
【００８８】
ＤＭＳＯ残渣／（１−ＬＯＤ）≦０．５０％およびＨＰＬＣ純度≧９８．０％（単一の不純物≦１．０％）について単離した固体を分析した。
【００８９】
この固体材料を、次いで、３５℃（ＩＴ）の真空で６３時間にわたり乾燥させた。そのようにして得られた生成物は、三水和物の特性を示すＸＲＰＤパターンを有していた。
【００９０】
１．９７ｇの前記三水和物をさらに乾燥させ、同時にトレイドライヤー中にて、水蒸気雰囲気下で再水和した。トレイドライヤー中における水分活性は５０から９５％の間であった。これは、例えばドライヤーの内側における３０ｍｂａｒの圧力および３０℃の温度により到達した。トレイドライヤーにつなげた恒温貯水器を使用することにより真空下で乾燥／再水和を行った。貯水器から水を蒸発させることにより水８０ｇをトレイドライヤーに供給し、真空ポンプを備えたドライヤーに蒸気を輸送した。望ましいエタノールおよび水含有量に達するまで、乾燥／再水和を行った。これは、Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｃｈｅｒ滴定法による水量の工程間管理（ＩＰＣ）で、およびＧＣ−ＨＳ方法によるエタノール量のＩＰＣで管理された。少なくとも２０時間の乾燥／再水和後に、２ｇの三水和物を得た。８．３８％の水量を得て、０．０５％未満のエタノール含有量が実現した。
【００９１】
調製の代替法
実施例１の２ｇの一水和物を、水４０ｍｌ中で懸濁した。この懸濁液を２５℃で４日間撹拌した。暗褐色の懸濁液を真空下で濾過し、次いでトレイドライヤーで、２５℃および２０ｍｂａｒにて終夜乾燥させた。三水和物修飾のＸＲＰＤパターン特性を示す暗褐色の固体を得た。
【００９２】
実施例１の三水和物の特徴的ＸＲＰＤパターン
以下の機器パラメータを使用して、Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ型Ｂｕｒｋｅｒ  Ｄ８回折計でＸＲＰＤパターンを記録した。波長１．５４１Å（ＣｕＫα）、スキャン範囲：２〜４０°（２シータ）、スキャン速度（連続したスキャン）：０．３ｓ／ステップ、ステップサイズ：０．０１７°（２シータ）。
【００９３】
図３
上の結晶性三水和物のＸ線ディフラクトグラムが図３に示されており、角度２シータに対するピークは表２に記録されている。
【００９４】
【表４】
2016500057.tif 000019
【００９５】
示差走査熱量測定
ＤＳＣにおいて三水和物を加熱する際に、三水和物は２０℃超で水和水の蒸発、続いて２００℃超で発熱分解を示す。１０Ｋ／分の加熱量を使用したＭｅｔｔｌｅｒ  ＤＳＣ８２２ｅ、およびピンホールを有する試料パンで記録したＤＳＣ曲線。試料量は２〜３ｍｇであった。結果は図４に示されている。
化学的安定性
【００９６】
【表５】
2016500057.tif 000020
【００９７】
物理的安定性
一水和物および三水和物の混合物である、実施例１の試料である遊離塩基を、水の有機溶媒水混合物中で懸濁し、約４日間２５°で平衡を保った。試料のＸＲＰＤは、懸濁する前に、一水和物および三水和物の特徴的な回折ピークの混合を示した。平衡後、懸濁液を濾過し、固体材料を単離し、ＸＲＰＤにより分析した。ＸＲＰＤパターンは、実施例１の三水和物である遊離塩基の特徴的なピークしか示さなかった。一水和物を、より安定な三水和物に変換した。
【００９８】
【表６】
2016500057.tif 000021
【００９９】
上の実験に基づいて、実施例１の三水和物は、一水和物より熱力学的に安定であるとみられる。
【０１００】
図４は、実施例１の結晶性三水和物の吸水プロファイルを示す。ＲＨ＝相対湿度。
【０１０１】
バイオ医薬品パート
本発明の化合物、例えば式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物などは、遊離形態または医薬として許容できる塩もしくは水和物形態で、下の試験、例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ試験に記載されている重要な薬理学的性質を呈し、したがって、治療について適応がある。
【０１０２】
Ａ．Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ
１．プロテインキナーゼＣアルファおよびシータアッセイ
以下の方法に従って、異なるＰＫＣアイソタイプで、本発明の化合物をその活性について試験した。すべてのアッセイを、３８４ウェルマイクロタイタープレートで行った。４０例の試験化合物に対する８点連続希釈液、ならびに対照化合物としてスタウロスポリンの１６点連続希釈液２例、それに加えて高対照１６例および低対照１６例を各アッセイプレートに含有させた。液体の取扱いおよびインキュベーション工程は、Ｉｎｎｏｖａｄｙｎｅ  Ｎａｎｏｄｒｏｐ  Ｅｘｐｒｅｓｓを備えている自動化ワークステーションで行った。
【０１０３】
アッセイプレートを、９０％ＤＭＳＯ中の化合物溶液をウェル当たり５０ｎＬ加えることにより調製した。２ｘペプチド／ＡＴＰ−溶液をウェル当たり４．５μｌ、および２ｘ酵素溶液をウェル当たり４．５μｌ段階的に加えることによりキナーゼ反応を開始した。キナーゼ反応中の最終的な試薬濃度は、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１ｍＭのＤＴＴ、０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０、０．０２％ＢＳＡ、０．６％ＤＭＳＯ、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸塩および１０μＭのオルトバナジウム酸ナトリウムであった。ＰＫＣ−アルファおよびＰＫＣ−シータアッセイに使用されるペプチド基質は、Ｄｙ４９５−Ｘ５−ＭＥ−Ｍｐｒ−ＲＦＡＲＫＧＳＬＲＱＫＮＶ−ＣＯＯＨであった。酵素はいずれも、昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＡＧ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で発現した、完全長のヒト組換えタンパク質であった。それぞれのキナーゼアッセイに対して、他の成分を具体的に調整した：ＰＫＣ−アルファ：１２ｐＭの酵素、１７μＭのＡＴＰ、１μＭのペプチド基質、７ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２ｍＭのＣａＣｌ２。ＰＫＣ−シータ：２９ｐＭの酵素、７０μＭのＡＴＰ、１μＭのペプチド基質、７ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２ｍＭのＣａＣｌ２。
【０１０４】
キナーゼ反応を３０℃で６０分間にわたりインキュベートし、続いて、ウェル当たり１６μｌの停止液（１００ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、５％ＤＭＳＯ、０．１％Ｃａｌｉｐｅｒコーティング試薬、１０ｍＭのＥＤＴＡ、および０．０１５％Ｂｒｉｊ３５）を添加することにより終了させた。
【０１０５】
キナーゼ反応を終了させたプレートを、読み取りのためにＣａｌｉｐｅｒ  ＬＣ３０００のワークステーションに移した。Ｃａｌｉｐｅｒのマイクロ流体の流動性を変化させる技術を使用して、リン酸化および非リン酸化ペプチドを分離し、形成されるホスホ−ペプチドの量からキナーゼ活性を計算した。
【０１０６】
【表７】
2016500057.tif 000022
【０１０７】
本明細書の上で、および下で示される試験結果により、本発明の化合物のプロドラッグの概念を裏付けできる。
【０１０８】
２．骨髄細胞増殖（ＢＭ）アッセイ
ＣＢＡマウスの骨髄細胞（平底組織培養マイクロタイタープレートにおいて、ウェル当たり２．５ｘ１０４細胞）を、成長因子および連続希釈した化合物の供給源として１０％ＦＣＳ、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ、Ｂａｓｅｌ  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、５０μＭの２−メルカプトエタノール（Ｆｌｕｋａ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ＷＥＨＩ−３条件培地（７．５％ｖ／ｖ）およびＬ９２９条件培地（３％ｖ／ｖ）を含有する１００μＬのＲＰＭＩ培地中でインキュベートした。試験化合物あたり３倍の希釈工程を７回繰り返し行った。４日間のインキュベーション後、１μＣｉ  ３Ｈ−チミジンを加えた。さらに５時間のインキュベーション期間後、細胞を採取し、組み込んだ３Ｈ−チミジンを、標準的な手順に従って判定した。条件培地を以下のように調製した。ＷＥＨＩ−３細胞（ＡＴＣＣ  ＴＩＢ６８）およびＬ９２９細胞（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ１）を、それぞれ４日間および１週間にわたり集合するまで、ＲＰＭＩ培地中で成長させた。細胞を採取し、同一の培養フラスコ中の、ＷＥＨＩ−３細胞に対する１％ＦＣＳ（Ｓｃｈｒｅｉｅｒ  ａｎｄ  Ｔｅｓｓ  １９８１）およびＬ９２９細胞に対するＲＰＭＩ培地を含有する培地Ｃ中で再懸濁し、２日間（ＷＥＨＩ−３）または１週間（Ｌ９２９）インキュベートした。上清を収集し、０．２μｍを通して濾過し、−８０℃で一定分量ずつ保存した。試験化合物なしの培養、ならびにＷＥＨＩ−３およびＬ９２９の上清なしの培養は、低対照値として使用した。低対照値をすべての値から差し引いた。いかなる試料も伴わない高対照は、１００％増殖として測定した。試料によるパーセント阻害を計算し、５０％阻害（ＩＣ５０値）に必要とされる濃度を判定した。
【０１０９】
【表８】
2016500057.tif 000023
【０１１０】
Ｂ．Ｉｎ  ｖｉｖｏ：
実施例Ｎｏ．１の化合物の投与
実施例１の化合物の単回用量（３．０ｍｇ／ｋｇ）を、オスのビーグル犬３頭にｐ．ｏ．で投与した。化合物１を、メチルセルロース（０．５％）：Ｔｗｅｅｎ８０（１％）（９０：１０）中の結晶性一水和物形態の水性懸濁液として、投与した。静脈穿刺により、血液を一定の間隔で採取し、２４時間までの期間にわたり試料を分析した。実施例１、２および３の化合物を長時間にわたって定量的に評価し、結果を下の表にまとめた：
【０１１１】
【表９】
2016500057.tif 000024
実施例Ｎｏ．１の経口投与後における重要な薬物動態学的パラメータ（１、２および３の平均値±標準偏差（ｎ＝３）。
【０１１２】
【表１０】
2016500057.tif 000025
【０１１３】
実施例Ｎｏ．３の化合物の投与
実施例Ｎｏ．３の化合物を、ハードゼラチンカプセル中の一酢酸塩として、絶食させたオスのビーグル犬６頭に経口的に投与した。１００ｍｇ／イヌの名目用量を投与し、８．９〜１１．３ｍｇ／ｋｇ（イヌの体重は８．９〜１１．３ｋｇに及ぶ）の用量となった。静脈穿刺により、血液を採取し、３２時間まで試料採取を行った。生物学的分析による判定を３に行い、下の表にまとめた：
【０１１４】
【表１１】
2016500057.tif 000026
上に記載した経口投与後における化合物Ｎｏ．３の重要な薬物動態学的パラメータ（平均値または範囲）。
【０１１５】
【表１２】
2016500057.tif 000027
【０１１６】
物理化学の節
溶解度の評価
室温の人工胃液および人工腸液における実施例Ｎｏ．１の化合物の溶解度
【０１１７】
【表１３】
2016500057.tif 000028
人工胃液における実施例Ｎｏ．３（遊離形態／酢酸塩形態）の化合物の溶解度：
【０１１８】
【表１４】
2016500057.tif 000029
安定性の評価
３７℃の人工胃液および人工腸液における実施例Ｎｏ．１の化合物の安定性：
【０１１９】
【表１５】
2016500057.tif 000030
３７℃の人工胃液および人工腸液における実施例Ｎｏ．３の化合物（遊離形態／酢酸塩形態）の安定性：
【０１２０】
【表１６】
2016500057.tif 000031
【０１２１】
有用性の節
本発明の化合物は、ＰＫＣまたは他のキナーゼの伝達物質が役割を果たす障害または疾患、例えばＴリンパ球、Ｂリンパ球、肥満細胞、好酸球または心筋細胞により媒介される疾患または障害の予防または処置に典型的には有用であり、したがって、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、アテローム性動脈硬化、脳梗塞、血管損傷による血管閉塞、例えば血管形成、再狭窄、線維症（とりわけ肺線維症であるが、他の型の線維症も、例えば腎線維症）、血管新生、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患、例えばアルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症、癌、感染症、例えばＡＩＤＳ、敗血症性ショックもしくは成人呼吸窮迫症候群、虚血／再灌流傷害、例えば心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全もしくは出血性ショック、または外傷性ショックに典型的には適応がある。
【０１２２】
本発明の化合物は、急性もしくは慢性炎症性疾患もしくは障害、または自己免疫性疾患（例えばサルコイドーシス）、肺線維症、特発性間質性肺炎、閉塞性気道疾患（例えば喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、特に慢性もしくは長期にわたる喘息（例えば遅発型喘息および気道過敏反応性）の状態を含む）、気管支炎（気管支喘息、小児喘息を含む）、慢性関節リウマチ、変形関節炎、全身性紅斑性狼蒼、ネフローゼ症候群狼瘡（nephrotic syndrome lupus）、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病およびそれに関連する合併症、ＩＩ型成人発症型糖尿病、ブドウ膜炎、ネフローゼ症候群、ステロイド依存性およびステロイド耐性ネフローゼ、掌蹠膿疱症、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、乾癬、乾癬性関節炎、アトピー性湿疹（アトピー性皮膚炎）、アレルギー性接触性皮膚炎、刺激性接触性皮膚炎およびそれに続く湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱性類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管性浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、座瘡、円形脱毛症、好酸球性筋膜炎、アテローム性動脈硬化、結膜炎、角結膜炎、角膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜、シェーグレン症候群、角膜上皮ジストロフィー（dystorphia epithelialis corneae）、角膜白斑、眼天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブス眼症、重度の眼内炎症、粘膜または血管炎症、例えばロイコトリエンＢ４−媒介性疾患、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症によって引き起こされる血管損傷、心臓肥大、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患（例えばクローン病もしくは潰瘍性結腸炎）、壊死性腸炎、腎臓疾患（間質性腎炎を含む）、グッドパスチャー症候群、溶血性尿毒症症候群および糖尿病性腎症、神経疾患（多発性筋炎、ギランバレー症候群、メニエール病および神経根障害から選択される）、膠原病（強皮症、ウェゲナー肉芽腫症およびシェーグレン症候群を含む）、慢性自己免疫肝臓疾患（自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変および硬化性胆管炎）を含む）、肝臓部分切除、急性肝臓壊死（例えば毒素、ウイルス性肝炎、ショックもしくは酸素欠乏によって引き起こされる壊死）、肝硬変、劇症肝炎、膿疱性乾癬、ベーチェット病、活動性慢性肝炎、エヴァンズ症候群、花粉症、特発性上皮小体機能低下症、アジソン病、自己免疫性萎縮性胃炎、ルポイド肝炎、尿細管間質性腎炎、膜性腎炎またはリウマチ熱の処置および／または予防においても有用である。
【０１２３】
本発明の化合物は、腫瘍、例えば乳癌、泌尿生殖器癌、肺癌、消化管癌、類表皮癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部および／もしくは頸部癌または膀胱癌、あるいは広範な意味では、腎臓癌、脳癌または胃癌；特に（ｉ）乳房腫瘍；類表皮腫瘍、例えば類表皮頭部および／または頸部腫瘍もしくは口腔腫瘍；肺腫瘍、例えば小細胞もしくは非小細胞肺腫瘍；消化管腫瘍、例えば、結腸直腸腫瘍；もしくは泌尿生殖器腫瘍、例えば、前立腺腫瘍（とりわけホルモン抗療性前立腺腫瘍）；または（ｉｉ）他の化学療法を用いた処置に抗療性の増殖性疾患；または（ｉｉｉ）多剤耐性のため、他の化学療法を用いた処置に抗療性の腫瘍の処置にも有用である可能性がある。
【０１２４】
化合物は、血液およびリンパ系腫瘍（例えばホジキン病、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、悪性免疫増殖疾患、多発性骨髄腫および悪性形質細胞新生物、リンパ性白血病、急性または慢性骨髄性白血病、急性または慢性リンパ性白血病、単球性白血病、他の特定の細胞型の白血病、不明な細胞型の白血病、他の、および不明なリンパ、造血および関連組織の悪性新生物、例えばびまん性大細胞型リンパ腫、Ｔ−細胞リンパ腫もしくは皮膚Ｔ−細胞リンパ腫）の処置にも有用である可能性がある。骨髄癌は、例えば急性または慢性の骨髄性白血病を含む。
【０１２５】
腫瘍、腫瘍性疾患、癌腫または癌が言及される場合、原発臓器もしくは組織における転移、および／または他のあらゆる部位における転移、あるいは、またはさらに、腫瘍および／または転移のあらゆる部位が示唆される。
【０１２６】
好ましくは、本発明の化合物は、Ｔリンパ球により媒介される疾患または障害、例えば、臓器もしくは組織同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、移植片対宿主病、宿主対移植片病、多発性硬化症、乾癬、または慢性関節リウマチの予防および／または処置に特に有用である。
【０１２７】
薬物製品のバイオアベイラビリティが乏しいことは、医薬として有効な原料の制限因子となることがきわめて多い。さらにバイオアベイラビリティは、種依存性であることがある。例えば、マウス、ラットもしくはイヌなどに十分に吸収される薬物は、ヒトでは適正なバイオアベイラビリティに翻訳されない可能性がある。本発明は、親化合物（複数可）に好都合なバイオアベイラビリティを特にヒトにおいて生じる式（Ｉ）のプロドラッグ化合物を提供する。例えば、実験の節（節Ｂ、ｉｎ  ｖｉｖｏ）で示されているように、実施例１の化合物は、例えば、投与直後に（例えばおよそ１時間後に）血液中にて主な成分として検出できる実施例３の化合物に変換され、その結果、有効な、および好都合な親化合物への変換が実証される。
【０１２８】
上の使用に関して、必要とされる投与量は、投与様式、処置される特定の状態および望ましい効果に応じて、もちろん変化するであろう。一般に、約０．０２から２５ｍｇ／体重ｋｇの一日投与量で全身的に満足すべき結果が得られることが示される。指示された一日投与量は、大型の哺乳動物、例えばヒトでは、典型的には、約０．２ｍｇから約２ｇの範囲で、例えば、一日４回までの分割投与、または遅延（retard）形態で都合よく投与できる。経口投与用の適切な単位剤形は、典型的には、約０．１から５００ｍｇの有効成分を含み得る。
【０１２９】
本発明の化合物は、従来のいかなる経路によっても投与され、特に非経口的には、例えば注射溶液または懸濁液の形態で腸内に投与され、例えば経口的には、例として錠剤またはカプセル剤の形態で投与され、局所的には、例えばローション剤、ゲル剤、軟膏剤もしくはクリーム剤の形態で、または経鼻剤もしくは坐剤の形態で投与され得る。局所投与は、例えば皮膚に対するものであってよい。局所投与のさらなる形態は、眼に対するものであってよい。少なくとも１つの医薬の許容できる担体または希釈剤を伴う、本発明の化合物を含む医薬組成物は、医薬として許容できる担体または希釈剤と混合することにより従来の手段で製造できる。
【０１３０】
本発明の化合物は、例えば上で示されているように、遊離形態で、または医薬として許容できる塩の形態でもしくは水和物形態で投与され得る。そのような塩または水和物は、従来の手段で調製でき、典型的には遊離化合物と同一の活性順序を呈し得る。
【０１３１】
先述の通り、本発明は、
（１）医薬品としての使用のための、本発明の化合物、または医薬として許容できるその塩もしくは水和物；
（２）ＰＫＣ阻害剤としての使用のための、例えば、本明細書に既に記載されている具体的な適応症のいずれかにおける使用のための、本発明の化合物、または医薬として許容できるその塩もしくは水和物；
（３）１つまたは複数の医薬として許容できる希釈剤、もしくはその代わりの担体と一緒に、本発明の化合物、または医薬として許容できるその塩もしくは水和物を含む、例えば、本明細書に既に記載されている適応症のいずれかにおける使用のための、医薬組成物；
（４）ＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する疾患または状態の処置または予防方法、例えば、それを必要とする対象における、本明細書に既に記載されている具体的な適応症のいずれかの処置方法であって、対象に有効量の本発明の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物を投与するステップを含む方法；
（５）ＰＫＣ活性化が役割を担う、または関係する疾患または状態；例えば上で示されているものを処置または予防する薬剤を製造するための、本発明の化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物の使用
も提供する。
【０１３２】
組み合わせ
本発明の化合物は、単独の有効成分として、または、例えば同種もしくは異種移植片の急性もしくは慢性拒絶、または炎症もしくは自己免疫性障害を処置もしくは予防する、例えば免疫抑制または免疫調節レジメンにおける他の薬物、または他の抗炎症剤、化学療法剤または抗感染薬、例えば抗ウイルス剤、例として抗レトロウイルス剤または抗生物質と共に、例えばそれらに対するアジュバントとして投与され得る。
【０１３３】
例えば、本発明の化合物は、カルシニューリン阻害剤、例えばシクロスポリンＡ、ＩＳＡ２４７もしくはＦＫ５０６；ｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、ＣＣＩ７７９、ＡＢＴ５７８、ＴＡＦＡ−９３、ＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３８４１、バイオリムス−７もしくはバイオリムス−９；免疫抑制性を有するアスコマイシン、例えばＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１など；副腎皮質ステロイド；シクロホスファミド；アザチオプリン；メトトレキサート；レフルノミド；ミゾリビン；ミコフェノール酸もしくは塩；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシスペルグアリンまたはその免疫抑制相同体、類似体もしくは誘導体；例えばＷＯ０２／３８５６１もしくはＷＯ０３／８２８５９に開示されているＰＫＣ阻害剤、例として実施例５６もしくは７０の化合物；Ｓ１Ｐ受容体作動薬もしくは調節薬、例えば場合によりそのリン酸化されているＦＴＹ７２０またはその類似体、例えば場合によりリン酸化されている２−アミノ−２−［４−（３−ベンジルオキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル−１，３−プロパンジオール、もしくは１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸もしくは医薬として許容できるその塩；免疫抑制モノクローナル抗体（例えば、白血球受容体に対するモノクローナル抗体、例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６もしくはそのリガンド；他の免疫調節化合物、例えば、ＣＴＬＡ４の細胞外領域もしくはその変異体の少なくとも一部を有する組換え結合分子、例えばＣＴＬＡ４の少なくとも細胞外部分もしくは非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合したその変異体、例えば、ＣＴＬＡ４Ｉｇ（例えばＡＴＣＣ６８６２９に指定される）もしくはその変異体、例えばＬＥＡ２９Ｙ）；接着分子阻害剤、例えばＬＦＡ−１拮抗薬、ＩＣＡＭ−１もしくは−３拮抗薬、ＶＣＡＭ−４拮抗薬もしくはＶＬＡ−４拮抗薬、例えばナタリズマブ（ＡＮＴＥＧＲＥＮ（登録商標））；もしくは抗ケモカイン抗体または抗ケモカイン受容体抗体もしくは低分子量ケモカイン受容体拮抗薬、例えば抗ＭＣＰ−１抗体と組み合わせて使用され得る。
【０１３４】
本発明の化合物は、他の抗増殖剤と組み合わせても使用され得る。そのような抗増殖剤は、
（ｉ）アロマターゼ阻害剤、例えばステロイド、とりわけエキセメスタンおよびホルメスタンおよび特には、非ステロイド、とりわけアミノグルテチミド、ボロゾール、ファドロゾール、アナストロゾール、および特にとりわけレトロゾール；
（ｉｉ）抗エストロゲン剤、例えばタモキシフェン、フルベストラント、ラロキシフェンおよび塩酸ラロキシフェン；
（ｉｉｉ）トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばトポテカン、イリノテカン、９−ニトロカンプトテシンおよび高分子カンプトテシン複合体ＰＮＵ−１６６１４８（ＷＯ９９／１７８０４の化合物Ａ１）；
（ｉｖ）トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えばアントラサイクリンドキソルビシン（リポソーム製剤、例えばＣＡＥＬＹＸ（商標）を含む）、エピルビシン、イダルビシンおよびネモルビシン、アントラキノン、ミトキサントロンおよびロソキサントロン、ならびにポドフィロトキシン、エトポシドおよびテニポシド；
（ｖ）微小管活性剤、例えばタキサン、パクリタキセルおよびドセタキセル、ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチン、とりわけ硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、とりわけ硫酸ビンクリスチンおよびビノレルビン、ディスコデルモライドならびにエポチロン、例えばエポチロンＢおよびＤ；
（ｖｉ）アルキル化剤、例えばシクロホスファミド、イホスファミドおよびメルファラン；
（ｖｉｉ）ヒストンデアセチラーゼ阻害剤；
（ｖｉｉｉ）ファルネシル転移酵素阻害剤；
（ｉｘ）ＣＯＸ−２阻害剤、例えばセレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標））、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ（登録商標））およびルミラコキシブ（ＣＯＸ１８９）；
（ｘ）ＭＭＰ阻害剤；
（ｘｉ）ｍＴＯＲ阻害剤；
（ｘｉｉ）抗新生物代謝拮抗薬、例えば５−フルオロウラシル、テガフール、カペシタビン、クラドリビン、シタラビン、リン酸フルダラビン、フルオロウリジン、ゲムシタビン、６−メルカプトプリン、ヒドロキシウレア、メトトレキサート、エダトレキサートおよびそのような化合物の塩、ならびにさらにＺＤ１６９４（ＲＡＬＴＩＴＲＥＸＥＤ（商標））、ＬＹ２３１５１４（ＡＬＩＭＴＡ（商標））、ＬＹ２６４６１８（ＬＯＭＯＴＲＥＸＯＬ（商標））およびＯＧＴ７１９；
（ｘｉｉｉ）白金化合物、例えばカルボプラチン、シス−プラチンおよびオキサリプラチン；
（ｘｉｖ）プロテインキナーゼ活性を低下させる化合物ならびにさらに抗血管新生化合物、例えば（ｉ）血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）（ｂ）、表皮成長因子（ＥＧＦ）、ｃ−Ｓｒｃ、プロテインキナーゼＣ、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ、ｃ−キット、Ｆｌｔ−３およびインスリン様成長因子Ｉ受容体（ＩＧＦ−ＩＲ）ならびにサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫｓ）の活性を低下させる化合物；（ｉｉ）イマチニブ、ミドスタウリン、Ｉｒｅｓｓａ（商標）（ＺＤ１８３９）、ＣＧＰ７５１６６、バタラニブ、ＺＤ６４７４、ＧＷ２０１６、ＣＨＩＲ−２００１３１、ＣＥＰ−７０５５／ＣＥＰ−５２１４、ＣＰ−５４７６３２およびＫＲＮ−６３３；（ｉｉｉ）サリドマイド（ＴＨＡＬＯＭＩＤ）、セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ）、ＳＵ５４１６およびＺＤ６１２６；
（ｘｖ）ゴナドレリン作動薬、例えばアバレリクス、ゴセレリンおよび酢酸ゴセレリン；
（ｘｖｉ）抗アンドロゲン、例えばビカルタミド（ＣＡＳＯＤＥＸ（商標））；
（ｘｖｉｉ）ベンガミド；
（ｘｖｉｉｉ）ビスホスホネート、例えばエチドロン酸、クロドロン酸、チルドロン酸、パミドロン酸、アレンドロン酸、イバンドロン酸、リセドロン酸およびゾレドロン酸；
（ｘｉｘ）抗増殖抗体（antiproliferative antibodies）、例えばトラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標））、トラスツズマブ−ＤＭ１、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標））、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、ＰＲＯ６４５５３（抗ＣＤ４０）および２Ｃ４抗体；
（ｘｘ）テモゾロミド（ＴＥＭＯＤＡＬ（登録商標））；
（ｘｘｉ）スタチン
を含むが、それらに限定されない。
【０１３５】
コードナンバー、後発品または商品名により同定される活性剤の構造は、標準的な解説である「Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ」の現版から、またはデータベース、例えばＰａｔｅｎｔｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（例えばＩＭＳ  Ｗｏｒｌｄ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ）から選ばれることがある。
【０１３６】
先述の通り、本発明は、
（６）例えば治療有効量のａ）式Ｉの化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物、ならびにｂ）第２の原薬を同時に、または順番に共投与するステップを含む、上で定義した方法であって、前記第２の原薬が、例えば、本明細書に既に記載されている具体的な適応症のいずれかにおける使用のためである方法；
（７）治療有効量の式Ｉの化合物または医薬として許容できるその塩もしくは水和物、ならびに第２の原薬を含む組み合わせ、例えばキットであり、前記第２の原薬が、例えば上に開示した通りのものである、組み合わせ
をさらに提供する。
【０１３７】
本発明の化合物が、他の免疫抑制剤／免疫調節剤、抗炎症剤または抗新生物薬、例えば上で開示したものと共に投与される場合、共投与される薬物または作用剤の投与量は、もちろん、共に用いられる薬物もしくは作用剤の種類または使用される特定の薬物もしくは作用剤、あるいは処置される状態、およびその他に応じて変化するであろう。
【０１３８】
別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物
【０１３９】
【化１５】
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［式中、ＸはＣＨまたはＮであり、ＲはＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、Ｒ１はＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、Ｒ２はＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、Ｒ３はＨ、Ｃ１〜４アルキル、ＣＮ、ハロゲンもしくはＯＨであり、Ｒ４およびＲ５は互いに独立してＨもしくはＣ１〜４アルキルであり、またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に３〜６員のシクロアルキル基を形成する］を製造する方法が提供され、この方法は、
（ａ）場合により、Ｒ１および／またはＲ２が水素である化合物に関して、溶媒、例えばＴＨＦもしくはジクロロメタンおよび／または塩基、例としてトリエチルアミンの有無を問わず、式（Ｖａ）のマレイミドを、例えば二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを用いて処理し、それにより、適当な場合はＲ１および／またはＲ２の水素の代わりにｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を含む、式（Ｖａ）のマレイミドを得るステップ；
（ｂ）溶媒および／または塩基、例えば炭酸カリウムの有無を問わず、場合により保護されている式（Ｖａ）のマレイミドを、例えばホルムアルデヒドを用いて処理し、それによりＲ＝Ｈである式（Ｖｂ）のアルコールを得るステップ；
（ｃ）場合により式（Ｖｂ）のアルコールを、典型的には塩基、例えばＤＢＵもしくはトリメチルアミンの存在下で、例えばトリクロロアセトニトリルを用いて処理して、反応性エステルを形成し、続いて、典型的には塩基、例えばＤＢＵもしくはトリメチルアミンの存在下でリン酸化剤、例えばリン酸エステル、例としてリン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを用いて処理し、その際に溶媒、例えばＴＨＦ、ジクロロメタン、ジクロロエタンなどの存在なしで、生じた中間体エステルを、適切な酸、例えば塩酸もしくはＴＦＡを用いて処理して、一般式（Ｉ）の最終生成物を得るステップ、あるいは、代用ステップ（ｃ）として、式（Ｖｂ）のアルコールを、例えば光延反応条件下でリン酸エステルと、例えばリン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルと直接的に反応させて、リン酸エステルを得て、次いで例えばジクロロメタン中で例えばトリフルオロ酢酸を用いて加水分解して、式（Ｉ）の最終生成物を得ることができるステップ
を含む。
【０１４０】
【化１６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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