(57)【要約】本発明は、ＢＭＰシグナリングの小分子阻害剤を提供する。これらの化合物は、細胞の成長、分化、増殖、およびアポトーシスをモジュレートするために使用することができ、したがって、炎症、心血管疾患、造血系疾患、がん、および骨障害を含めた、ＢＭＰシグナリングに関連する疾患または状態を処置するのにも、ならびに細胞分化および／または増殖をモジュレートするのにも有用となり得る。これらの化合物は、ＡｐｏＢ−１００またはＬＤＬの循環レベルを低下させ、後天性もしくは先天性高コレステロール血症もしくは高リポタンパク質血症、脂質吸収もしくは代謝の欠陥に関連する疾患、障害もしくは症候群、または高脂血症により引き起こされる疾患、障害もしくは症候群を処置または予防するためにも使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの構造を有する化合物
【化３１】
2016510745.tif 000025
（式中、
ＸおよびＹは、ＣＲ１５およびＮから独立して選択され、
Ｚは、ＣＲ３およびＮから選択され、
Ａｒは、置換または非置換のアリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｌ１は存在しないか、または置換もしくは非置換のアルキルおよびヘテロアルキルから選択され、
Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫは、出現毎に独立して、ＣＲ１６およびＮから選択され、
但し、Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫの２個以下しかＮではなく、
Ｒ３は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ハロゲン、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ４は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ１５は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ１６は、出現毎に独立して、存在しないか、またはＨ、および置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される）
または薬学的に許容されるその塩、エステルもしくはプロドラッグであって、但し、以下の化合物
【化３２】
2016510745.tif 000026
を除外する、化合物または薬学的に許容されるその塩、エステルもしくはプロドラッグ。
【請求項２】
Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫがそれぞれ、ＣＲ１６、好ましくはＣＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４が、Ｈ、および置換もしくは非置換のシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、またはスルホンアミドから選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が、
【化３３】
2016510745.tif 000027
（式中、
Ｗは存在しないか、またはＣ（Ｒ２１）２、ＯもしくはＮＲ２１であり、
Ｒ２０は存在しないか、または置換もしくは非置換のアルキル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、およびスルホンアミドから選択され、
Ｒ２１は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される）から選択される、前記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
Ａｒが６員のアリール環またはヘテロアリール環である、前記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｌ１が、二環式コアに対して、Ａｒのパラ位に位置している、前記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｌ１が存在する、前記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｌ１が構造
【化３４】
2016510745.tif 000028
（式中、
Ｑは、ＣＲ１０Ｒ１１、ＮＲ１２、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、およびＳＯ２から選択され、
Ｒ１０およびＲ１１は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
ｎは、０〜４の整数である）
を有する、前記請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｌ１が存在しない場合、
Ｒ４が、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、エステル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｌ１が存在しない場合、
Ｒ４が、Ｈ、および置換もしくは非置換のシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミドまたはアミジノから選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
構造
【化３５】
2016510745.tif 000029
を有する、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１２】
前記請求項のいずれかに記載の化合物、および薬学的に許容される添加剤または溶媒を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
対象においてＡｐｏＢ−１００またはＬＤＬの循環レベルを低下させる方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項１４】
対象において高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症を処置する方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項１５】
前記高コレステロール血症、高脂血症または高リポタンパク質血症が、先天性高コレステロール血症、高脂血症または高リポタンパク質血症である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症が、常染色体優性高コレステロール血症（ＡＤＨ）、家族性高コレステロール血症（ＦＨ）、多遣伝子性高コレステロール血症、家族性複合型高脂血症（ＦＣＨＬ）、高アポベータリポタンパク質血症、または低密度ＬＤＬ症候群（ＬＤＬ表現型Ｂ）である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記高コレステロール血症、高脂血症または高リポタンパク質血症が、後天性高コレステロール血症、高脂血症または高リポタンパク質血症である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記高コレステロール血症、高脂血症または高リポタンパク質血症が、糖尿病、高脂肪食および／または座ることの多いライフスタイル、肥満、代謝症候群、内在性または続発性肝臓疾患、原発性胆汁性肝硬変症または他の胆汁うっ滞障害、アルコール依存症、膵臓炎、ネフローゼ症候群、末期腎疾患、甲状腺機能低下症、チアジド、ベータ遮断薬、レチノイド、高活性抗レトロウイルス剤、エストロゲン、プロゲスチンまたはグルココルチコイドの投与による医原性に関連する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
対象において、脂質吸収もしくは代謝の欠陥に関連するか、または高脂血症により引き起こされる疾患、障害または症候群を処置する方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２０】
対象において、冠動脈、脳、または末梢血管の疾患から発生する続発性心血管イベントを低減する方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２１】
心血管リスクのマーカーが高い対象において、心血管疾患を予防する方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２２】
ＳＭＡＤ１／５／８のＢＭＰ誘発性リン酸化を阻害する方法であって、前記細胞を請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物に接触させる工程を含む、方法。
【請求項２３】
前記方法は、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）シグナリングの阻害により利益を得る対象において疾患または状態を処置または予防する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記疾患または状態が、肺高血圧症、遺伝性出血性毛細血管拡張症候群、心臓弁奇形、心臓構造奇形、進行性骨化性線維異形成症、若年性家族性ポリポーシス症候群、上皮小体疾患、がん、貧血、血管石灰化、アテローム性動脈硬化症、弁石灰化、腎性骨形成異常症、炎症性障害、およびウイルス、細菌、真菌、結核菌および寄生生物による感染症から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記がんが、乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、骨転移、肺転移、骨肉腫、および多発性骨髄腫から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記炎症性障害が強直性脊椎炎である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
細胞の拡大増殖または分化を誘発する方法であって、前記細胞を請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物に接触させる工程を含む、方法。
【請求項２８】
前記細胞が、胚性幹細胞および成体幹細胞から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記細胞がインビトロである、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ５の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子を前記ヒトに投与する工程を含む、方法。
【請求項３１】
前記小分子が、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するそのＩＣ５０よりも１０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ１の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子を前記ヒトに投与する工程を含む、方法。
【請求項３３】
ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ３の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子を前記ヒトに投与する工程を含む、方法。
【請求項３４】
ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ４の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子を前記ヒトに投与する工程を含む、方法。
【請求項３５】
ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ６の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子を前記ヒトに投与する工程を含む、方法。
【請求項３６】
前記小分子が、
【化３６】
2016510745.tif 000030
または薬学的に許容されるその塩ではない、請求項３０から３５のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１３年３月４日に出願された、その全体が本明細書において援用される、米国仮特許出願第６１／７７２，４６５号に対する優先権の利益を主張する。
【０００２】
連邦政府支援の研究または開発に関する陳述
本発明は、米国政府により、国立衛生研究所の助成金ＮＩＨ／ＮＨＬＢＩ  ５Ｋ０８ＨＬ０７９９４３、ＮＩＨ／ＮＨＬＢＩ  ５Ｒ０１ＤＫ０８２９７１、およびＮＩＨ／ＮＩＡＭＳ  ５Ｒ０１ＡＲ０５７３７４の下で一部援助された。米国政府は、本発明における特定の権利を有し得る。
【背景技術】
【０００３】
トランスフォーミング成長因子β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのリガンドが関与するシグナリングは、細胞の成長、分化、およびアポトーシスを含めた広範な細胞プロセスの中核である。ＴＧＦ−βシグナリングは、Ｉ型受容体を動員しかつリン酸化する、ＩＩ型受容体（セリン／トレオニンキナーゼ）へのＴＧＦ−βリガンドの結合が関与する。次いで、このＩ型受容体が受容体制御型ＳＭＡＤ（Ｒ−ＳＭＡＤ、例えば、ＳＭＡＤ１、ＳＭＡＤ２、ＳＭＡＤ３、ＳＭＡＤ５、ＳＭＡＤ８またはＳＭＡＤ９）をリン酸化し、ＳＭＡＤ４に結合し、次に、このＳＭＡＤ複合体は、転写調節においてある役割を果たす核に移行する。リガンドのＴＧＦスーパーファミリーは、２つの主要な分科を含み、ＴＧＦ−β／アクチビン／結節性および骨形成タンパク質（ＢＭＰ）により特徴付けられる。
【０００４】
骨形成タンパク質（ＢＭＰ）リガンドにより媒介されるシグナルは、脊椎動物の一生にわたって多様な役割を果たす。背腹軸は、胚形成の間に、リガンド、受容体、補助受容体、および可溶性阻害剤の協調発現により形成されるＢＭＰシグナリングの勾配によって確立される（Massagueら、Nat.  Rev.  Mol.  Cell.  Biol.１巻：１６９〜１７８頁、２０００年）。過剰なＢＭＰシグナリングは、背側構造を犠牲にした腹側の拡大である腹側化を引き起こす一方、ＢＭＰシグナリングの低下は、腹側構造を犠牲にした背側の拡大である背側化を引き起こす（Nguyenら、Dev.  Biol.１９９巻：９３〜１１０頁、１９９８年；Furthauerら、Dev.  Biol.２１４巻：１８１〜１９６頁、１９９９年；Mintzerら、Development１２８巻：８５９〜８６９頁、２００１年；Schmidら、Development１２７巻：９５７〜９６７頁、２０００年）。ＢＭＰは、原腸形成、中胚葉誘導、器官形成、および軟骨性骨形成の重要な調節因子であり、多能性細胞集団の運命を調節する（Zhao、Genesis３５巻：４３〜５６頁、２００３年）。ＢＭＰシグナルはまた、生理機能および疾患において重大な役割も果たし、原発性肺高血圧症、遺伝性出血性毛細血管拡張症候群、進行性骨化性線維異形成症、および若年性ポリポーシス症候群に関与する（Waiteら、Nat.  Rev.  Genet.４巻：７６３〜７７３頁、２００３年；Papanikolaouら、Nat.  Genet.３６巻：７７〜８２頁、２００４年；Shoreら、Nat.  Genet.３８巻：５２５〜５２７頁、２００６年）。
【０００５】
ＢＭＰシグナリングファミリーは、ＴＧＦ−βスーパーファミリーの多様な部分集団である（Sebaldら、Biol.  Chem.３８５巻：６９７〜７１０頁、２００４年）。２０種を超える公知のＢＭＰリガンドが、３種の異なるＩＩ型受容体（ＢＭＰＲＩＩ、ＡｃｔＲＩＩａおよびＡｃｔＲＩＩｂ）および少なくとも４種のＩ型受容体（ＡＬＫ１、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３およびＡＬＫ６）により認識される。二量体リガンドは、受容体ヘテロマーの構築を容易にし、構成的に活性なＩＩ型受容体セリン／トレオニンキナーゼがＩ型受容体セリン／トレオニンキナーゼをリン酸化するのを可能にする。活性化されたＩ型受容体は、ＢＭＰ応答性（ＢＲ−）ＳＭＡＤエフェクター（ＳＭＡＤ１、ＳＭＡＤ５、およびＳＭＡＤ８）をリン酸化し、ＴＧＦシグナリングもやはり容易にするｃｏ−ＳＭＡＤである、ＳＭＡＤ４との複合体において核転座を容易にする。さらに、ＢＭＰシグナルは、ＳＭＡＤ非依存的に、ＭＡＰＫｐ３８などの細胞内エフェクターを活性化することができる（Noheら、Cell  Signal１６巻：２９１〜２９９頁、２００４年）。ノギン、コーディン、グレムリン、およびホリスタチンなどの可溶性ＢＭＰ阻害剤は、リガンド隔離によりＢＭＰｖを制限する。
ペプチドホルモンであり、全身の鉄のバランスの中心的な調節因子である、ヘプシジンの発現を調節する際のＢＭＰシグナルの役割もまた示唆されてきた（Pigeonら、J.  Biol.  Chem.２７６巻：７８１１〜７８１９頁、２００１年；Fraenkelら、J.  Clin.  Invest.１１５巻：１５３２〜１５４１頁、２００５年；Nicolasら、Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  U.S.A.９９巻：４５９６〜４６０１頁、２００２年；Nicolasら、Nat.  Genet.３４巻：９７〜１０１頁、２００３年）。ヘプシジンは結合して、脊椎動物における唯一の鉄の輸送体であるフェロポーチンの分解を促進する。フェロポーチン活性の喪失は、腸細胞、マクロファージおよび肝細胞中の細胞内貯蔵から血流への鉄の可動化を妨げる（Nemethら、Science３０６巻：２０９０〜２０９３頁、２００４年）。ＢＭＰシグナリングと鉄代謝の間のリンクは、治療法の潜在的な標的となる。
【０００６】
リガンド（現在、２５種より多い異なるリガンド）および受容体（ＢＭＰを認識する４種のＩ型受容体および３種のＩＩ型受容体）のレベルにおけるＢＭＰおよびＴＧＦ−βスーパーファミリーのおびただしい構造的多様性、ならびに受容体結合のヘテロ四量体の様式を考慮すると、可溶性受容体、内在性阻害剤、または中和抗体によってＢＭＰシグナルを阻害する慣習的な手法は、実践的でも効果的でもない。ノギンおよびホリスタチンなどの内在性阻害剤は、リガンドのサブクラスに対して限定的な特異性を有する。単一受容体は、リガンドに対して限定的な親和性を有する一方、受容体ヘテロ四量体は、特定のリガンドに対して一層の特異性を示す。特定のリガンドまたは受容体に対して特異的な中和抗体は既に記載されており、この抗体もまた、このシグナリング系の構造的多様性によって限定される。したがって、ＢＭＰシグナリング経路に特異的に拮抗し、かつ治療的または実験的適用（上の列挙されたものなど）においてこれらの経路を操作するために使用することができる薬理剤に対する必要性が当分野において存在している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Massagueら、Nat.  Rev.  Mol.  Cell.  Biol.１巻：１６９〜１７８頁、２０００年
【非特許文献２】Nguyenら、Dev.  Biol.１９９巻：９３〜１１０頁、１９９８年
【非特許文献３】Furthauerら、Dev.  Biol.２１４巻：１８１〜１９６頁、１９９９年
【非特許文献４】Mintzerら、Development１２８巻：８５９〜８６９頁、２００１年
【非特許文献５】Schmidら、Development１２７巻：９５７〜９６７頁、２０００年
【非特許文献６】Zhao、Genesis３５巻：４３〜５６頁、２００３年
【非特許文献７】aiteら、Nat.  Rev.  Genet.４巻：７６３〜７７３頁、２００３年
【非特許文献８】Papanikolaouら、Nat.  Genet.３６巻：７７〜８２頁、２００４年
【非特許文献９】Shoreら、Nat.  Genet.３８巻：５２５〜５２７頁、２００６年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一態様において、本発明は、一般式Ｉ
【化１】
2016510745.tif 000002
（式中、
ＸおよびＹは、ＣＲ１５およびＮから独立して選択され、
Ｚは、ＣＲ３およびＮから選択され、
Ａｒは、置換または非置換のアリールおよびヘテロアリールから選択され、
Ｌ１は存在しないか、または置換もしくは非置換のアルキルおよびヘテロアルキルから選択され、
Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫは、出現毎に独立して、ＣＲ１６およびＮから選択され、
但し、Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫの２個以下しかＮではなく、
Ｒ３は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ハロゲン、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ４は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ１５は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択され、
Ｒ１６は、出現毎に独立して、存在しないか、またはＨ、および置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される）
により表される化合物を含む、ＳＭＡＤ１／５／８の、ＢＭＰ誘発性リン酸化を阻害する化合物であって、但し、以下の化合物
【化２】
2016510745.tif 000003
を除外する、化合物を提供する。
【０００９】
ある特定の実施形態において、ＹがＮであるか、またはＡｒが環内に窒素原子を含むかのどちらかである。
【００１０】
ある特定の実施形態において、Ａｒは、置換または非置換のヘテロアリール、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、キノリン、およびピリミジンを表す。ある特定の実施形態において、Ａｒは、フェニルなどの置換または非置換のアリールを表す。ある特定の実施形態において、Ａｒは、フェニル環などの６員環であり、ここで、例えば、Ｌ１は、二環式コアに対してＡｒのパラ位上に位置している。
【００１１】
ある特定の実施形態において、Ａｒは、６員のアリールまたはヘテロアリール環を表す。
【００１２】
ある特定の実施形態において、上で議論されている通り、Ａｒ上の置換基は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミド（好ましくは、置換または非置換のアルキル、アルケニル、ヘテロアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、またはシアノ）から選択される。
【００１３】
ある特定の実施形態において、Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫは、ＣＲ１６またはＮであり、但し、Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫの２個以下しかＮではない。
【００１４】
ある特定の実施形態において、Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫは、ＣＨである。
【００１５】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は、連結基Ｍｋを表し、ここで、ｋは、１〜８、好ましくは２〜４の整数であり、Ｍはそれぞれ、Ｃ（Ｒ１８）２、ＮＲ１９、Ｓ、ＳＯ２またはＯから選択される単位、好ましくは２個のヘテロ原子が隣接位に出現しないように選択される単位、より好ましくは任意の窒素原子と別のヘテロ原子との間に少なくとも２個の炭素原子を有する単位を表し、ここで、Ｒ１８は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択され、Ｒ１９は、Ｈ、および置換または非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、オキシド、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択される。
【００１６】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在しない。ある特定の実施形態において、Ｌ１は、置換または非置換のアルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ８鎖、好ましくはＣ２〜Ｃ４鎖）およびヘテロアルキルから選択される。ある特定のこうした実施形態において、Ｌ１は、構造
【化３】
2016510745.tif 000004
【００１７】
（式中、ｎは０〜４の整数であり、Ｑは、ＣＲ１０Ｒ１１、ＮＲ１２、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、およびＳＯ２から選択され、Ｒ１０およびＲ１１は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換または非置換のアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択され、Ｒ１２は、Ｈ、および置換または非置換のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、オキシド、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択される）を有する。ある特定の実施形態において、Ｌ１は、構造
【化４】
2016510745.tif 000005
（式中、Ｑは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｓ、ＳＯ２、またはＯ、好ましくはＯである）を有する。
【００１８】
ある特定の実施形態において、Ｒ４は、
【化５】
2016510745.tif 000006
（式中、Ｒ２１は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換または非置換のアルキル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨ、または低級アルキルから選択される）である。
【００１９】
ある特定の実施形態において、Ｒ４は、例えば、Ｎ、ＳまたはＯなどの１個または２個のヘテロ原子を含むヘテロシクリル（例えば、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、またはラクタム）である。ある特定のこうした実施形態において、Ｒ４は、１個の窒素原子を含むヘテロシクリル、例えば、
【化６】
2016510745.tif 000007
（式中、Ｒ２０は存在しないか、またはそれが結合している環上の、例えば、置換または非置換のアルキル、ヘテロアリール、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、およびスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択される１〜４つの置換基を表す）などのピペリジンまたはピロリジンである。ある特定の実施形態において、Ｒ４は、２個の窒素原子を含むヘテロシクリル、例えば、ピペラジンである。ある特定の実施形態において、Ｒ４は、１個の窒素および１個の酸素原子を含むヘテロシクリル、例えばモルホリンである。
【００２０】
ある特定の実施形態において、Ｒ４は、環の原子内にアミンを含む、ヘテロシクリルまたはヘテロアリール、例えば、ピリジル、イミダゾリル、ピロリル、ピペリジル、ピロリジル、ピペラジル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリルなどであり、かつ／またはアミノ置換基を有する。ある特定の実施形態において、Ｒ４は、
【化７】
2016510745.tif 000008
（式中、Ｒ２０は上で定義されている通りであり、Ｗは結合を表すか、またはＣ（Ｒ２１）２、Ｏ、もしくはＮＲ２１から選択され、Ｒ２１は、出現毎に独立して、Ｈ、および置換または非置換のアルキル、アラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、スルホニル、スルファモイル、またはスルホンアミド、好ましくはＨまたは低級アルキルから選択される）である。
【００２１】
ある特定の実施形態において、上で議論されている通り、Ｒ４上の置換基は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミド（好ましくは、置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル、ヘテロアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノまたはシアノ）から選択される。
【００２２】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在せず、Ｒ４はＡｒに直接結合している。Ｒ４がＡｒに直接結合している６員環であり、かつＮに対して環の４位にアミノ置換基を有する実施形態において、このＮとアミン置換基は、環上でトランス配置してもよい。
【００２３】
ある特定の実施形態において、Ｌ１−Ｒ４は塩基性窒素含有基を含んでおり、例えばＬ１が窒素含有ヘテロアルキルまたはアミン置換アルキルを含むか、あるいはＲ４が置換もしくは非置換の窒素含有ヘテロシクリルまたはヘテロアリールを含む、かつ／またはアミン置換基により置換されているかのどちらかである。ある特定のこうした実施形態において、該塩基性窒素含有基の共役酸のｐＫａは６もしくはそれより高いか、または８もしくはそれより高いことさえある。
【００２４】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は、構造
【化８】
2016510745.tif 000009
（式中、ｎは０〜４の整数であり、Ｒ４はヘテロシクリルである）を有する。
【００２５】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在せず、Ｒ４は、Ｈ、および置換もしくは非置換のアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、エステル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドである。
【００２６】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在せず、Ｒ４は、Ｈ、および置換もしくは非置換のシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミドまたはアミジノである。
【００２７】
ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在せず、Ｒ４は、ヘテロシクリル、とりわけ窒素含有ヘテロシクリルである。ある特定の実施形態において、Ｌ１は存在せず、Ｒ４は、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジンまたはモルホリンである。
【００２８】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１が存在しない場合、Ｒ４はシクロアルキルである。
【００２９】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（とりわけ、窒素含有複素環）である場合、ＹはＣＲ１５であり、ここでＲ１５は上で定義されている通りである。上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がピペリジンである場合、ＹはＣＲ１５であり、ここでＲ１５は上で定義されている通りである。ＹがＣＲ１５である特定の実施形態において、Ｒ１５は、Ｈ、低級アルキル、ヘテロアルキル、およびエステル（例えば、メチルエステルなどの低級アルキルエステル）から選択される。
【００３０】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（とりわけ、窒素含有ヘテロシクリル）である場合、ＸはＣＲ１５であり、ここでＲ１５は上で定義されている通りである。上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がピペリジンである場合、ＸはＣＲ１５であり、ここでＲ１５は上で定義されている通りである。ＸがＲ１５である、ある特定の実施形態において、Ｒ１５は、Ｈ、低級アルキル、およびヘテロアルキルから選択される。
【００３１】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（とりわけ、窒素含有ヘテロシクリル）である場合、ＺはＣＲ３であり、ここでＲ３は上で定義されている通りである。上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がピペリジンである場合、ＺはＣＲ３であり、ここでＲ３は上で定義されている通りである。ＺがＣＲ３である、ある特定の実施形態において、Ｒ３は、Ｈ、低級アルキル、およびヘテロアルキルから選択される。
【００３２】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（とりわけ、ピペリジンなどの窒素含有複素環）である場合、Ｒ１３は、それが結合している環上の２つの置換基を表し、出現毎に独立して、置換もしくは非置換のアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される。
【００３３】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（とりわけ、ピペリジンなどの窒素含有複素環）である場合、Ａｒは、置換または非置換のヘテロアリール（例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、キノリン、およびピリミジン）を表す。ある特定のこうした実施形態において、Ａｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、１つまたは複数の置換基により置換されている。
【００３４】
上で開示されているある特定の実施形態において、Ｌ１がヘテロアルキルであり、Ｒ４がヘテロシクリル（例えば、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、ラクタムなど）である場合、Ｒ４は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、１つまたは複数の置換基により置換されている。
【００３５】
上で開示されているある特定の実施形態において、化合物は、以下の特徴の１つまたは複数を有する：
ＹはＮであるか、またはＡｒは環内に窒素原子を含むかのどちらかである、
Ｌ１は存在しない、
Ｒ４は、シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールである、
ＸはＣＲ１５である、
ＹはＣＲ１５である、
ＺはＣＲ３である、
Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＫはＣＲ１６である、
Ｒ１３は、それが結合している環上の１〜２つの置換基を表し、出現毎に独立して、置換もしくは非置換のアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アシルアミノ、カルバメート、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、
【００３６】
Ａｒは、置換もしくは非置換のアリールまたはヘテロアリール（例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、キノリン、およびピリミジン）を表す、
【００３７】
Ａｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、ハロゲン、アシル、カルボキシル、エステル、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、シアノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、１つまたは複数の置換基により置換されており、
Ｒ４は、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アシル、カルボキシル、エステル、アルキルチオ、アシルオキシ、アミノ、アシルアミノ、カルバメート、アミド、アミジノ、スルホニル、スルホキシド、スルファモイル、またはスルホンアミドから選択される、１つまたは複数の置換基により置換されている。
【００３８】
例示的な式Ｉの化合物には、
【化９】
2016510745.tif 000010
【化１０】
2016510745.tif 000011
およびそれらの塩（薬学的に許容される塩を含む）が含まれる。
【００３９】
一態様において、本発明は、本明細書において開示されている化合物、および薬学的に許容される添加剤または溶媒を含む医薬組成物を提供する。ある特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書において開示されている化合物のプロドラッグを含んでもよい。
【００４０】
別の態様において、本発明は、ＳＭＡＤ１／５／８のＢＭＰ誘発性リン酸化を阻害する方法であって、細胞を本明細書において開示されている化合物に接触させる工程を含む、方法を提供する。
【００４１】
ある特定の実施形態において、本方法は、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）シグナリングの阻害により利益を得る対象において疾患または状態を処置または予防する。ある特定の実施形態において、該疾患または状態は、肺高血圧症、遺伝性出血性毛細血管拡張症候群（hereditary  hemorrhagic  telangectasia  syndrome）、心臓弁奇形、心臓構造奇形、進行性骨化性線維異形成症、若年性家族性ポリポーシス症候群、上皮小体疾患、がん（例えば、乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、骨転移、肺転移、骨肉腫、および多発性骨髄腫）、貧血、血管石灰化、アテローム性動脈硬化症、弁石灰化、腎性骨形成異常症、炎症性障害（例えば、強直性脊椎炎）、ウイルス、細菌、真菌、結核菌および寄生生物による感染症から選択される。
【００４２】
ある特定の実施形態において、本方法は、異常に高いか、または疾患の発症する患者のリスクもしくは望ましくない医療状態を高める、ＡｐｏＢ−１００および／またはＬＤＬおよび／または総コレステロールのレベルを有する対象において、ＡｐｏＢ−１００および／またはＬＤＬおよび／または総コレステロールの循環レベルを低下させる。ある特定の実施形態において、対象において、ＡｐｏＢ−１００および／またはＬＤＬおよび／または総コレステロールの循環レベルを低下させる方法は、原発性または続発性心血管イベントを低減する。ある特定の実施形態において、本方法は、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）シグナリングの阻害により利益を得る対象において疾患または状態を処置または予防する。ある特定の実施形態において、該疾患または状態は、肺高血圧症；遺伝性出血性毛細血管拡張症候群；心臓弁奇形；心臓構造奇形；進行性骨化性線維異形成症（fibrodysplasia  ossificans  progressive）；若年性家族性ポリポーシス症候群；上皮小体疾患；がん（例えば、乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、骨転移、肺転移、骨肉腫、および多発性骨髄腫）；貧血；血管石灰化；血管炎症；アテローム性動脈硬化症；後天性もしくは先天性高コレステロール血症または高リポタンパク質血症；脂質吸収もしくは代謝の欠陥に関連する疾患、障害または症候群；高脂血症により引き起こされる疾患、障害または症候群；弁石灰化；腎性骨形成異常症；炎症性障害（例えば、強直性脊椎炎）、ウイルス、細菌、真菌、結核菌および寄生生物による感染から選択される。
【００４３】
別の態様において、本発明は、対象において高コレステロール血症、高脂血症、高リポタンパク質血症または肝臓脂肪症を処置する方法であって、有効量の本明細書において開示されている化合物を投与する工程を含む、方法を提供する。ある特定のこうした実施形態において、高コレステロール血症、高脂血症、高リポタンパク質血症または肝臓脂肪症は、後天性高コレステロール血症、高脂血症、高リポタンパク質血症または肝臓脂肪症である。ある特定のこうした実施形態において、高コレステロール血症、高脂血症、高リポタンパク質血症、または肝臓脂肪症は、糖尿病、高脂肪食および／または座ることの多いライフスタイル、肥満、代謝症候群、内在性または続発性肝臓疾患、胆汁性肝硬変症または他の胆汁うっ滞障害、アルコール依存症、膵臓炎、ネフローゼ症候群、末期腎疾患、甲状腺機能低下症、チアジド、ベータ遮断薬、レチノイド、高活性抗レトロウイルス剤、エストロゲン、プロゲスチンまたはグルココルチコイドの投与による医原性に関連する。
【００４４】
別の態様において、本発明は、対象において、冠動脈、脳、または末梢血管の疾患から発生する原発性および続発性心血管イベントを低減する方法であって、有効量の本明細書において開示されている化合物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００４５】
別の態様において、本発明は、対象において、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪誘発性肝臓損傷、線維症、肝硬変または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に関連する、対象の肝機能障害を予防および処置する方法であって、有効量の本明細書において開示されている化合物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００４６】
別の態様において、本発明は、細胞の拡大増殖または分化を誘導する方法であって、細胞を本明細書において開示されている化合物に接触させる工程を含む、方法を提供する。ある特定の実施形態において、該細胞は、胚性幹細胞および成体幹細胞から選択される。ある特定の実施形態において、上記細胞はインビトロである。
【００４７】
ある特定の実施形態において、本発明の方法は、細胞を本明細書において開示されている化合物のプロドラッグに接触させる工程を含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１ａは、ＡＬＫ１、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、ＡＬＫ４およびＡＬＫ５に対する、様々なＢＭＰ阻害剤のＩＣ５０値を示す図である。
【００４９】
図１ｂおよび１ｃは、ＡＬＫ２に対する様々なＢＭＰ阻害剤の選択
性の倍率を示す図である。
【００５０】
【図２】図２ａおよび２ｂは、ＡＬＫ２およびＡＬＫ５に対する様々なＢＭＰ阻害剤の選択性を示すグラフである。
【００５１】
【図３】図３ａ、３ｂ、４ａおよび４ｂは、ＢＭＰ応答性（ＢＲＥ−Ｌｕｃ  Ｃ２Ｃ１２）およびＴＧＦ−β応答性（ＣＡＧＡ−Ｌｕｃ２９３Ｔ）細胞をベースとするルシフェラーゼレポーターアッセイ系における、ｃａＡＬＫ１、ｃａＡＬＫ２、ｃａＡＬＫ３、ｃａＡＬＫ４およびｃａＡＬＫ５に関する、様々なＢＭＰ阻害剤の選択性を示す図である。
【図４】図３ａ、３ｂ、４ａおよび４ｂは、ＢＭＰ応答性（Ｂ@0013ＲＥ−Ｌｕｃ  Ｃ２Ｃ１２）およびＴＧＦ−β応答性（ＣＡＧＡ−Ｌｕｃ２９３Ｔ）細胞をベースとするルシフェラーゼレポーターアッセイ系における、ｃａＡＬＫ１、ｃａＡＬＫ２、ｃａＡＬＫ３、ｃａＡＬＫ４およびｃａＡＬＫ５に関する、様々なＢＭＰ阻害剤の選択性を示す図である。
【００５２】
【図５】図５ａは、ＡＬＫ１、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、ＡＬＫ４およびＡＬＫ５に関する、化合物１に相当するＬＤＮ−２１２８５４の阻害プロファイルを示す図である。
【００５３】
図５ｂおよび５ｃは、ＢＭＰＲ２−／−におけるＢＭＰ７誘発性ｐ
ＳＭＡＤ１／５／８、およびＴＧＦ−β１誘発性ｐＳＭＡＤ２を使用する、ＬＤＮ−１９３１８９に対する、化合物１に相当するＬＤＮ−２１２８５４の選択性の向上を示すグラフである。
【００５４】
【図６】図６ａおよび６ｂは、ｃａＡＬＫ２およびｃａＡＬＫ３に関する、化合物１に相当するＬＤＮ−２１２８５４、およびＬＤＮ−１９３１８９の選択性、ならびにＢＭＰ６およびＢＭＰ４誘発性アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）に関して得られた阻害曲線を示すグラフである。
【００５５】
【図７】図７ａは、ヘプシジン発現に及ぼす、化合物１に相当するＬＤＮ−２１２８５４、およびＬＤＮ−１９３１８９の効果を示すグラフである。
【００５６】
【図８】図８ａおよび８ｂは、ｘ線画像、および異所的骨形成を視覚化するためのアリザリンレッド／アルシアンブルー染色、およびＡｄ．Ｃｒｅ注射部位におけるＡＬＫ２Ｑ２０７Ｄ発現を確認するためのＧＦＰ発現を含み、進行性骨化性線維異形成症（ＦＯＰ）変異体マウスにおける、化合物１に相当するＬＤＮ−２１２８５４の効果を示している図である。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
本発明は、ＢＭＰシグナリング経路を阻害する化合物、およびＢＭＰシグナリングの阻害により利益を得る対象において、疾患または状態を処置または予防するための方法を提供する。
Ｉ．化合物
【００５８】
本発明の化合物には、上で開示されている式Ｉの化合物、およびその塩（薬学的に許容される塩を含む）が含まれる。こうした化合物は、本明細書において開示されている組成物および方法に好適である。
ＩＩ．定義
【００５９】
用語「アシル」は、当分野において認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）−、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）−により表される基を指す。
【００６０】
用語「アシルアミノ」は、当分野において認識されており、アシル基により置換されているアミノ基を指し、例えば、式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）ＮＨ−、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−により表すことができる。
【００６１】
用語「アシルオキシ」は、当分野において認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）Ｏ−、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）Ｏ−により表される基を指す。
【００６２】
用語「脂肪族」は、本明細書において使用される場合、完全に飽和しているか、または１つまたは複数の不飽和単位を含有する、直鎖状、鎖状、分岐状、または環状炭化水素を含む。脂肪族基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。
【００６３】
用語「アルコキシ」は、そこに結合しているアルキル基を有している酸素を指す。代表的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが挙げられる。
【００６４】
用語「アルケニル」は、本明細書において使用される場合、少なくとも１つの二重結合を含有する脂肪族基を指し、「非置換アルケニル」および「置換アルケニル」の両方を含むことが意図され、これらの後者である置換アルケニルは、アルケニル基の１個または複数の炭素上の水素を置き換える置換基を有するアルケニル部分を指す。こうした置換基は、１つまたは複数の二重結合に含まれるかまたは含まれない１個または複数の炭素上に出現し得る。さらに、こうした置換基としては、安定性により許容されない場合を除いて、以下で議論される通り、アルキル基に対して企図されるすべてが挙げられる。例えば、アルキル基、カルボシクリル基、アリール基、ヘテロシクリル基またはヘテロアリール基からなる１つまたは複数のものによるアルケニル基の置換が企図される。好ましい実施形態において、直鎖状または分岐鎖状アルケニルは、その主鎖中に１〜１２個の炭素、好ましくはその主鎖中に１〜８個の炭素、より好ましくはその主鎖中に１〜６個の炭素を有する。例示的なアルケニル基としては、アリル、プロペニル、ブテニル、２−メチル−２−ブテニルなどが挙げられる。
【００６５】
用語「アルキル」は、直鎖状アルキル基および分岐鎖状アルキル基を含めた、飽和脂肪族基のラジカルを指す。好ましい実施形態において、直鎖状または分岐鎖状アルキルは、その主鎖中に３０個またはそれより少ない（例えば、直鎖の場合Ｃ１〜Ｃ３０、分岐鎖の場合Ｃ３〜Ｃ３０）、より好ましくは２０個またはそれより少ない炭素原子を有する。ある特定の実施形態において、アルキル基は、低級アルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチルおよびｎ−ペンチルである。
【００６６】
さらに、本明細書、実施例および特許請求の範囲全体を通して使用されている、用語「アルキル」（または「低級アルキル」）は、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方を含むことが意図され、これらの後者である「置換アルキル」は、炭化水素主鎖の１個または複数の炭素上の水素を置き換える置換基を有するアルキル部分を指す。ある特定の実施形態において、直鎖状または分岐鎖状アルキルは、その主鎖中に３０個またはそれより少ない炭素原子を有する（例えば、直鎖の場合、Ｃ１〜Ｃ３０、分岐鎖の場合、Ｃ３〜Ｃ３０）。好ましい実施形態において、上記の鎖は、その主鎖中に１０個またはそれ以下の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ１０）を有する。他の実施形態において、上記鎖は、その主鎖中に６個またはそれより少ない炭素（Ｃ１〜Ｃ６）原子を有する。
【００６７】
こうした置換基としては、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミルまたはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテートまたはチオホルメートなど）、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、またはアリールもしくはヘテロアリール部分を挙げることができる。
【００６８】
用語「Ｃｘ〜ｙ」は、化学部分（アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアルコキシなど）と併せて使用される場合、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する基を含むことを意味する。例えば、用語「Ｃｘ〜ｙアルキル」は、トリフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロエチル（tirfluoroethyl）などのハロアルキル基を含めた、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する直鎖状アルキル基および分岐鎖状アルキル基を含む、置換または非置換の飽和炭化水素基を指す。Ｃ０アルキルは、この基が末端位に存在する場合は水素を示し、内部にある場合、結合を示す。用語「Ｃ２〜ｙアルケニル」および「Ｃ２〜ｙアルキニル」は、長さおよび可能な置換において、上記のアルキルと類似しているが、少なくとも１つの二重結合または三重結合をそれぞれ含有する置換または非置換の不飽和脂肪族基を指す。
【００６９】
用語「アルキルアミノ」は、本明細書において使用される場合、少なくとも１つのアルキル基により置換されているアミノ基を指す。
【００７０】
用語「アルキルチオ」は、本明細書において使用される場合、アルキル基により置換されているチオール基を指し、一般式アルキルＳ−により表すことができる。
【００７１】
用語「アルキニル」は、本明細書において使用される場合、少なくとも１つの三重結合を含有する脂肪族基を指し、「非置換アルキニル」と「置換アルキニル」の両方を含むことが意図され、これらの後者である置換アルキニルは、アルキニル基の１個または複数の炭素上の水素を置き換える置換基を有するアルキニル部分を指す。こうした置換基は、１つまたは複数の三重結合に含まれるかまたは含まれない１個または複数の炭素上に出現し得る。さらに、こうした置換基としては、安定性により許容されない場合を除いて、上で議論されている通り、アルキル基に対して企図されるものすべてが挙げられる。例えば、１つまたは複数のアルキル基、カルボシクリル基、アリール基、ヘテロシクリル基、またはヘテロアリール基によるアルキニル基の置換が企図される。好ましい実施形態において、アルキニルは、その主鎖中に１〜１２個の炭素、好ましくはその主鎖中に１〜８個の炭素、より好ましくはその主鎖中に１〜６個の炭素を有する。例示的なアルキニル基としては、プロピニル、ブチニル、３−メチルペンタ−１−イニルなどが挙げられる。
【００７２】
用語「アミド」は、本明細書において使用される場合、以下の基
【化１１】
2016510745.tif 000012
（式中、Ｒ９およびＲ１０は、それぞれ独立して、水素またはヒドロカルビル基を表すか、またはＲ９とＲ１０は、それらが結合するＮ原子と一緒になって、その環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成させる）を指す。
【００７３】
用語「アミン」および「アミノ」は、当分野において認識されており、非置換アミンと置換アミンの両方、およびそれらの塩、例えば、以下によって表すことができる部分
【化１２】
2016510745.tif 000013
（式中、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１０’は、それぞれ独立して、水素またはヒドロカルビル基を表すか、またはＲ９とＲ１０は、それらが結合するＮ原子と一緒になって、その環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成させる）を指す。
【００７４】
用語「アミノアルキル」は、本明細書において使用される場合、アミノ基により置換されているアルキル基を指す。
【００７５】
用語「アラルキル」は、本明細書において使用される場合、１つまたは複数のアリール基により置換されているアルキル基を指す。
【００７６】
用語「アリール」は、本明細書において使用される場合、環の各原子が炭素である、置換または非置換の単環式芳香族基を含む。好ましくは、この環は、５〜７員環であり、より好ましくは６員環である。アリール基としては、フェニル、フェノール、アニリンなどが挙げられる。
【００７７】
用語「カルバメート」は、当分野において認識されており、以下の基
【化１３】
2016510745.tif 000014
（式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、またはアルキル基などのヒドロカルビル基を表す）を指す。
【００７８】
用語「炭素環」、「カルボシクリル」、および「炭素環式」は、本明細書において使用される場合、該環の各原子が炭素である、飽和または不飽和の非芳香族環を指す。好ましくは、炭素環の環は、３〜１０個の原子、より好ましくは５〜７個の原子を含有する。
【００７９】
用語「カルボシクリルアルキル」は、本明細書において使用される場合、炭素環基により置換されているアルキル基を指す。
【００８０】
用語「カーボネート」は、当分野において認識されており、基−ＯＣＯ２−Ｒ９を指し、ここで、Ｒ９は、アルキル基などのヒドロカルビル基を表す。
【００８１】
用語「カルボキシ」は、本明細書において使用される場合、式−ＣＯ２Ｈにより表される基を指す。
【００８２】
用語「シクロアルキル」は、本明細書において使用される場合、飽和脂肪族環のラジカルを指す。好ましい実施形態において、シクロアルキルは、その環構造中に３〜１０個の炭素原子、より好ましくは、その環構造中に５〜７個の炭素原子を有する。適切なシクロアルキルとしては、シクロヘプチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロブチル、およびシクロプロピルが挙げられる。
【００８３】
用語「エステル」は、本明細書において使用される場合、基−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９を指し、ここで、Ｒ９は、アルキル基またはアラルキル基などのヒドロカルビル基を表す。
【００８４】
用語「エーテル」は、本明細書において使用される場合、酸素を介して別のヒドロカルビル基に連結しているヒドロカルビル基を指す。したがって、ヒドロカルビル基のエーテル置換基は、ヒドロカルビル−Ｏ−であり得る。エーテルは、対称または非対称のいずれかであり得る。エーテルの例としては、以下に限定されないが、複素環−Ｏ−複素環およびアリール−Ｏ−複素環が挙げられる。エーテルには、一般式アルキル−Ｏ−アルキルにより表すことができる、「アルコキシアルキル」基が含まれる。
【００８５】
用語「ハロ」および「ハロゲン」は、本明細書において使用される場合、ハロゲンを意味し、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを含む。
【００８６】
用語「ヘテロアルキル」は、本明細書において使用される場合、少なくとも１個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ５０（ここで、Ｒ５０はＨまたは低級アルキルである場合など））を含む、炭素原子の飽和鎖または不飽和鎖を指し、ここで、２個のヘテロ原子は隣接していない。
【００８７】
用語「ヘトアラルキル（hetaralkyl）」および「ヘテロアラルキル」は、本明細書において使用される場合、ヘトアリール（hetaryl）基により置換されているアルキル基を指す。
【００８８】
用語「ヘテロアリール」および「ヘトアリール」は、置換または非置換の、芳香族単環式構造、好ましくは５〜７員環、より好ましくは５〜６員環を含み、これらの環構造は、少なくとも１個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）、好ましくは１〜４個または１〜３個のヘテロ原子、より好ましくは１個または２個のヘテロ原子を含む。２個またはそれより多いヘテロ原子がヘテロアリール環中に存在する場合、それらのヘテロ原子は同じであってもよく、異なっていてもよい。用語「ヘテロアリール」および「ヘトアリール」はまた、２個またはそれより多い炭素が２つの隣り合っている環に共通している、二環式またはそれより多い環式環を有する多環式環系も含み、ここで、該環の少なくとも１つが、複素芳香族性であり、例えば、他の環式環は、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリールおよび／またはヘテロシクリルであり得る。好ましい多環式環系は、該環の両方が芳香族である二環式環を有する。ヘテロアリール基としては、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、キノリン、およびピリミジンなどが挙げられる。
【００８９】
用語「ヘテロ原子」は、本明細書において使用される場合、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素および硫黄である。
【００９０】
用語「ヘテロシクリル」、「複素環」、および「複素環式」とは、置換または非置換の、非芳香族環構造、好ましくは３〜１０員環、より好ましくは３〜７員環を指し、これらの環構造は、少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１〜４個のヘテロ原子、より好ましくは１個または２個のヘテロ原子を含む。ヘテロシクリル基としては、例えば、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、ラクタムなどが挙げられる。
【００９１】
用語「ヘテロシクリルアルキル」は、本明細書において使用される場合、複素環基により置換されているアルキル基を指す。
【００９２】
用語「ヒドロカルビル」は、本明細書において使用される場合、＝Ｏ置換基または＝Ｓ置換基を有していない、炭素原子を介して結合している基を指し、通常、少なくとも１個の炭素−水素結合、および主に炭素主鎖を有するが、場合によりヘテロ原子を含み得る。したがって、メチル、エトキシエチル、２−ピリジル、およびトリフルオロメチルのような基が本出願の目的のためのヒドロカルビルであると見なされるが、アセチル（連結炭素上に＝Ｏ置換基を有する）、およびエトキシ（炭素ではなく、酸素を介して連結している）などの置換基は、そのように見なされない。ヒドロカルビル基としては、以下に限定されないが、アリール、ヘテロアリール、炭素環、複素環、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびこれらの組合せが挙げられる。
【００９３】
用語「低級」は、アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアルコキシなどの化学部分と併せて使用される場合、置換基中に１０個またはそれより少ない、好ましくは６個またはそれより少ない非水素原子がある基を含むことを意味する。「低級アルキル」は、例えば、１０個またはそれより少ない、好ましくは６個またはそれより少ない炭素原子を含有するアルキル基を指す。直鎖状または分岐鎖状低級アルキルの例としては、メチル、エチル、イソプロピル、プロピル、ブチル、および第三級−ブチルなどが挙げられる。ある特定の実施形態において、本明細書において定義されているアシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルコキシ置換基は、それらが単独で現れても、またはアラルキルという列挙（この場合、例えば、アルキル置換基中の炭素原子を数える場合、そのアリール基内部の原子は数えない）における場合などの他の置換基と組み合わされて現れても、それぞれ、低級アシル、低級アシルオキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、または低級アルコキシである。
【００９４】
用語「ポリシクリル」、「多環」、および「多環式」は、２個またはそれより多い環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリル）であって、２個またはそれより多い原子が２個の隣り合っている環と共通である環を指し、例えば、この環は「縮合環」である。好ましい多環は、２〜３個の環を有する。多環のそれぞれの環は、置換または非置換であり得る。ある特定の実施形態において、多環の各環は、その環中に３〜１０個、好ましくは５〜７個の原子を含有する。
【００９５】
用語「置換されている」とは、主鎖の１個または複数の炭素上の水素を置き換える置換基を有する部分を指す。「置換」または「により置換されている」は、こうした置換が、置換された原子および置換基の容認される価数に従っており、かつその置換が、例えば、転移、環化、脱離などによるなどの変換を自発的に受けない、安定な化合物をもたらすという暗黙の条件を含むことが理解されよう。本明細書において使用される場合、用語「置換されている」は、有機化合物の許容可能な置換基をすべて含むことが企図される。広範な態様において、この許容可能な置換基としては、有機化合物の非環式および環式の、分岐状および非分岐状の炭素環式ならびに複素環式、芳香族ならびに非芳香族置換基が挙げられる。この許容可能な置換基は、適切な有機化合物の場合、１個または複数であり得、かつ同一でありまたは異なり得る。本発明の目的のために、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基、および／またはそのヘテロ原子の価数を満足する、本明細書において記載されている有機化合物の任意の許容可能な置換基を有することができる。置換基としては、本明細書において記載されている任意の置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、またはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテート、またはチオホルメートなど）、アルコキシル、アルキルチオ、アシルオキシ、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくは複素芳香族部分を挙げることができる。
【００９６】
「非置換」と具体的に明記されていない限り、本明細書において化学部分に対する言及は、置換されているバリアントを含むものと理解される。例えば、「アリール」基または部分に対する言及は、置換されたバリアントと非置換のバリアントの両方を暗に含む。
【００９７】
用語「スルフェート」は、当分野において認識されており、基−ＯＳＯ３Ｈ、または薬学的に許容されるその塩もしくはエステルを指す。
【００９８】
用語「スルホンアミド」は、当分野において認識されており、以下の一般式
【化１４】
2016510745.tif 000015
（式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、またはアルキルなどのヒドロカルビルを表す）によって表される基を指す。
【００９９】
用語「スルホキシド」は、当分野において認識されており、基−Ｓ（Ｏ）−Ｒ９を指し、ここで、Ｒ９は、アルキル、アリールまたはヘテロアリールなどのヒドロカルビルを表す。
【０１００】
用語「スルホネート」は、当分野において認識されており、基−ＳＯ３Ｈ、または薬学的に許容されるその塩もしくはエステルを指す。
【０１０１】
用語「スルホン」は、当分野において認識されており、基−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ９を指し、ここで、Ｒ９は、アルキル、アリールまたはヘテロアリールなどのヒドロカルビルを表す。
【０１０２】
用語「チオエステル」は、本明細書において使用される場合、基−Ｃ（Ｏ）ＳＲ９または−ＳＣ（Ｏ）Ｒ９を指し、ここで、Ｒ９はアルキルなどのヒドロカルビルを表す。
【０１０３】
用語「チオエーテル」は、本明細書において使用される場合、酸素が硫黄により置き換えられているエーテルと等しい。
【０１０４】
用語「ウレア」は、当分野において認識されており、以下の一般式
【化１５】
2016510745.tif 000016
（式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、またはアルキルなどのヒドロカルビルを表す）によって表すことができる。
【０１０５】
本明細書中の様々な場所において、本発明の化合物の置換基は、群または範囲で開示されている。本発明は、そのような群および範囲の構成要素の、それぞれのおよびあらゆる個々の下位の組み合わせを含むことが、具体的に意図されている。例えば、用語「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチルなどを個々に開示するよう、具体的に意図される。
【０１０６】
用語「約」により限定される数値に関すると、２％、５％、１０％、または２０％にもなる変動は、限定される数値の範囲内にある。
【０１０７】
本明細書において使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬は、統計的サンプルにおいて、未処置の対照サンプルに比べて、処置されたサンプルにおける障害または状態の出現を低減させるか、または未処置の対照サンプルに比べて、障害もしくは状態の１つまたは複数の症状の発症を遅延させるか、その重症度を低下させる化合物を指す。
【０１０８】
用語「プロドラッグ」は、生理的条件下で、本発明の治療活性剤（例えば、式Ｉまたは式ＩＩの化合物）へ変換される化合物を包含することが意図される。プロドラッグを作製するための共通の方法は、生理的条件下で加水分解されて所望の分子を明らかにする、１つまたは複数の選択された部分を含むことである。他の実施形態において、プロドラッグは、宿主動物の酵素活性により変換される。例えば、エステル（例えば、アルコールまたはカルボン酸のエステル）は、本発明の好ましいプロドラッグである。本明細書において開示されている様々な実施形態（例えば、様々な化合物、組成物、および方法）において、上で表されている製剤中の、式Ａの化合物の一部もしくはすべて、式Ｉもしくは式ＩＩのいずれか１つの化合物、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物のすべてまたは一部分を、好適なプロドラッグにより置き換えることができ、例えば、ここで、親化合物中に存在するヒドロキシルまたはカルボン酸はエステルとして提示されている。
【０１０９】
本明細書において使用される場合、用語「処置する（treating）」または「処置（treatment）」は、対象の状態を向上または安定化するように、症状、臨床的兆候、および状態の根本的な病因を、逆転させる、低減する、または抑止することを含む。本明細書において使用され、かつ当分野で十分に理解される通り、「処置」は、臨床的結果を含めた、有益または所望の結果を得るための手法である。有益または所望の臨床的結果には、以下に限定はされないが、検出可能か検出不可能かに関わらず、１つもしくは複数の症状または状態の緩和あるいは改善、疾患の程度の低下、疾患の状態の安定化（すなわち、悪化させない）、疾患の拡大の予防、疾患進行の遅延または減速、疾患状態の改善または一時的緩和、および寛解（一部であるか、全部であるかに関わらない）が含まれ得る。「処置」は、処置を受けていない場合の予期される生存と比べて、生存が延長することも意味することができる。
【０１１０】
用語「小分子」とは、約２５００ａｍｕ未満、好ましくは約２０００ａｍｕ未満、さらにより好ましくは約１５００ａｍｕ未満、さらにより好ましくは約１０００ａｍｕ未満、または最も好ましくは約７５０ａｍｕ未満の分子量を有する、有機分子を指す。好ましくは、小分子は、１個または複数のヘテロ原子を含有する。
【０１１１】
「ＡＬＫ２の活性」という句は、ＡＬＫ−２酵素活性（例えば、キナーゼ活性など；ＢＭＰ−応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−２の能力）、および／またはＡＬＫ−２媒介性シグナリング（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によりＡＬＫ−２を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−２の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ２の活性」は、ＡＬＫ２媒介性ＢＭＰシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ２の活性」は、ＡＬＫ２媒介性ＢＭＰ−応答性遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ２シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ２活性の測定が可能である。
【０１１２】
「ＡＬＫ５の活性」という句は、ＡＬＫ−５酵素活性（例えば、キナーゼ活性など；ＴＧＦ−β応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−５の能力、ＳＭＡＤ２またはＳＭＡＤ３をリン酸化するＡＬＫ−５の能力）、および／またはＡＬＫ−５媒介性シグナリング（例えば、ＴＧＦ−βリガンドの結合によりＡＬＫ−５を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−５の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ５の活性」は、ＡＬＫ５媒介性ＴＧＦ−βシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ５の活性」は、ＡＬＫ５媒介性ＴＧＦ−β応答性遺伝子転写（例えば、ＴＧＦβ／ＡＬＫ５シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ５活性の測定が可能である。
【０１１３】
「ＡＬＫ１の活性」という句は、ＡＬＫ−１酵素活性（例えば、キナーゼ活性など；ＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−１の能力）、および／またはＡＬＫ−１媒介性シグナリング（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によりＡＬＫ−１を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−１の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ１の活性」は、ＡＬＫ１媒介性ＢＭＰシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ１の活性」は、ＡＬＫ１媒介性ＢＭＰ応答性遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ１シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ１活性の測定が可能である。
【０１１４】
「ＡＬＫ３の活性」という句は、ＡＬＫ−３酵素活性（例えば、キナーゼ活性など；ＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−３の能力）、および／またはＡＬＫ−３媒介性シグナリング（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によりＡＬＫ−３を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−３の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ３の活性」は、ＡＬＫ３媒介性ＢＭＰシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ３の活性」は、ＡＬＫ３媒介性ＢＭＰ応答性遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ３シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ３活性の測定が可能である。
【０１１５】
「ＡＬＫ４の活性」という句は、ＡＬＫ−４酵素活性（例えば、キナーゼ活性など；アクチビン応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−４の能力、ＳＭＡＤ２またはＳＭＡＤ３をリン酸化するＡＬＫ−４の能力）、および／またはＡＬＫ−４媒介性シグナリング（例えば、アクチビンリガンドの結合によりＡＬＫ−４を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−４の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ４の活性」は、ＡＬＫ４媒介性アクチビンシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ４の活性」は、ＡＬＫ４媒介性アクチビン応答性遺伝子転写（例えば、アクチビン／ＡＬＫ４シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ４活性の測定が可能である。
【０１１６】
「ＡＬＫ６の活性」という句は、ＡＬＫ−６酵素活性（例えば、キナーゼ活性；ＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ−６の能力など）、および／またはＡＬＫ−６媒介性シグナリング（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によりＡＬＫ−６を活性化した後の、下流のシグナル伝達および転写活性を媒介する、ＡＬＫ−６の能力など）を意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介性ＢＭＰシグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介性ＧＤＦ５シグナリングを意味する。一部の実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介性ＢＭＰ応答性遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ６シグナル伝達により媒介される転写活性）を意味する。実施例１〜３において記載されているアッセイにより、ＡＬＫ６活性の測定が可能である。
【０１１７】
ヒトＡＬＫ２は、５０９アミノ酸タンパク質である。このタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１１０４５３７．１（ＮＭ＿００１１１１０６７．２における対応するヌクレオチド配列を有する）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＱ０４７７１として公開されている。
【０１１８】
ヒトＡＬＫ５は、少なくとも２つのアイソフォームである、５０３アミノ酸タンパク質（アイソフォーム１）および４２６アミノ酸タンパク質を有する。ヒトＡＬＫ５アイソフォーム１に関するタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００４６０３．１（ＮＭ＿００４６１２．２における、対応するヌクレオチド配列を有する）として公開されている。４２６アミノ酸アイソフォームに関するタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１１２４３８８．１（ＮＭ＿００１１３０９１６．１における、対応するヌクレオチド配列を有する）として公開されている。両方のアイソフォームに関する情報は、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９７としても公開されている。
【０１１９】
ヒトＡＬＫ１は、５０３アミノ酸タンパク質である。このタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１０７０８６９．１（ＮＭ＿００１０７７４０１．１において対応するヌクレオチド配列を有する；転写バリアント２）およびＮＰ＿００００１１．２（ＮＭ＿００００２０．２において対応するヌクレオチド配列を有する；転写バリアント１）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３７０２３として公開されている。
【０１２０】
ヒトＡＬＫ３は、５３２アミノ酸タンパク質である。このタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００４３２０（ＮＭ＿００４３２９．２における対応するヌクレオチド配列を有する）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９４として公開されている。
【０１２１】
ヒトＡＬＫ４は、少なくとも３つのアイソフォームを有する。アイソフォームａは、５０５アミノ酸タンパク質である。このタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００４２９３（ＮＭ＿００４３０２における対応するヌクレオチド配列を有する）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９６として公開されている。
【０１２２】
ヒトＡＬＫ６のアイソフォームａは、５３２アミノ酸タンパク質であり、アイソフォームｂは、５０２アミノ酸タンパク質である。ヒトＡＬＫ６アイソフォームａに関するタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１２４３７２２（ＮＭ＿００１２５６７９３．１における、対応するヌクレオチド配列を有する）として公開されている。ヒトＡＬＫ６アイソフォームｂに関するタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１１９４（ＮＭ＿００１２０３．２における、対応するヌクレオチド配列を有する）として公開されている。
【０１２３】
上述のタンパク質はそれぞれ、さらにシグナル配列の開裂によるなどのインビボ処理を行うと、成熟形態が生じることに留意されたい。
ＩＩＩ．医薬組成物
【０１２４】
本発明の化合物は、患者へ投与するために、医薬組成物中に、例えば、薬学的に許容される担体と組み合わせて使用することができる。そのような組成物はまた、当分野において周知である賦形剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤、および他の物質も含有することができる。用語「薬学的に許容される」は、活性成分の生物活性の有効性を妨げない、非毒性物質を意味する。担体の特性は、投与ルートに依存することになろう。そのような追加の要因および／または薬剤は、医薬組成物中に含まれて、本発明の化合物と相乗効果を生じ得るか、または本発明の化合物により引き起こされる副作用を最小化し得る。
【０１２５】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物が、薬学的に許容される他の担体に加えて、水溶液中で、ミセル、不溶性単一層、液晶、またはラメラ層として凝集形態で存在する脂質などの両親媒性剤と組み合わせた、リポソームまたはミセルの形態であり得る。リポソーム製剤に適した脂質としては、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸などが挙げられるが、これに限定されるものではない。こうしたリポソーム製剤の調製は、これらのすべてが参照により本明細書に組み込まれている、例えば、米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号、同第４，８３７，０２８号、および同第４，７３７，３２３号に開示されている通り、当分野の技術レベルの範囲内である。
【０１２６】
用語「薬学的な有効量」または「治療有効量」は、本明細書において使用される場合、有意な患者の利益、例えば、生理的応答または状態（炎症性状態または疼痛など）の処置、治癒、予防、阻害もしくは改善、またはそのような状態の処置、治癒、予防、阻害もしくは改善の速度の増加を示すのに十分な、医薬組成物または方法の、活性な各構成成分の総量を意味する。上記用語を、単独で投与される個々の活性成分に適用する場合、その用語はその成分単独を指す。ある組合せに適用する場合、上記用語は、組み合わせて、連続して、または同時に投与されるかに関わらず、治療効果をもたらす活性成分の合わせた量を指す。
【０１２７】
本発明の処置または使用の方法はそれぞれ、本明細書において記載される通り、こうした処置または使用を必要とする哺乳動物に、薬学的有効量もしくは治療有効量の本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくはエステル形態を投与する工程を含む。本発明の化合物は、単独または他の治療と組み合わせるかのいずれかで、本発明の方法に従って投与することができる。
【０１２８】
医薬組成物において、または本発明の方法を実施するために使用される本発明の化合物の投与は、様々な慣習的手段で実施することができる。使用することができる、例示的な投与ルートとしては、経口、非経腸、静脈内、動脈内、皮膚内、皮下、筋肉内、局所、頭蓋内、眼窩内、眼内、硝子体内、心室内、嚢内、髄腔内、大槽内、腹腔内、鼻内、エアゾール、中枢神経系（ＣＮＳ）投与、または座剤による投与が挙げられる。
【０１２９】
治療有効量の本発明の化合物が経口投与される場合、本発明の化合物は、錠剤、カプセル剤、散剤、液剤またはエリキシル剤の形態であり得る。錠剤形態で投与される場合、本発明の医薬組成物は、ゼラチンなどの固体担体、またはアジュバントをさらに含有してもよい。錠剤、カプセル剤、および散剤は、約５％〜９５％の本発明の化合物、および好ましくは約１０％〜９０％の本発明の化合物を含有することができる。液体形態で投与される場合、水、石油、動物もしくは植物由来の油、例えば落花生油、鉱物油、リン脂質、ｔｗｅｅｎｓ、中鎖トリグリセリドを含むトリグリセリド、ダイズ油またはゴマ油などの液状担体、または合成油を加えることができる。本医薬組成物の液体形態は、生理食塩水溶液、デキストロース溶液もしくは他の糖溶液、またはエチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールなどのグリコールをさらに含有することができる。液体形態で投与される場合、本医薬組成物は、通常、約０．５〜９０重量％の本発明の化合物、好ましくは約１％〜５０％の本発明の化合物を含有する。
【０１３０】
治療有効量の本発明の化合物が静脈内、皮膚内または皮下注射により投与される場合、本発明の化合物は、発熱物質不含の、非経腸的に許容できる水溶液の形態であり得る。十分に考慮されたｐＨ、等張性、安定性などを有する、こうした非経腸的に許容できる溶液の調製は、当分野の技術の範囲内である。静脈内、皮膚内または皮下注射用の好ましい医薬組成物は、本発明の化合物に加えて、塩化ナトリウム注射、リンガー液注射、デキストロース注射、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射、乳酸加リンガー液注射などの等張性ビヒクル、または当分野において公知の他のビヒクルを含有すべきである。本発明の医薬組成物はまた、安定化剤、保存剤、緩衝剤、抗酸化剤、または当業者に公知の他の添加物も含有し得る。
【０１３１】
本発明の医薬組成物中の本発明の化合物の量は、処置される状態の性質および重症度、ならびに患者が受けた以前の処置の性質に依存することになろう。最終的には、医師が、本発明の化合物の量を決め、その化合物を用いて個々の患者それぞれを処置する。最初に、医師は、低用量の本発明の化合物を投与して、患者の応答を観察することができる。患者に対して最適な治療効果が得られるまで、より多い用量の本発明の化合物を投与することができ、その時点で、投与量はさらに増加させない。本発明の方法を実施するために使用される様々な医薬組成物は、体重１ｋｇ当たり約０．１μｇ〜約１００ｍｇ（好ましくは、約０．１ｍｇ〜約５０ｍｇ、より好ましくは約１ｍｇ〜約２ｍｇ）の本発明の化合物を含有すべきであると企図される。
【０１３２】
本発明の医薬組成物を使用する、静脈内治療の期間は、処置されている疾患の重症度、および個々の患者それぞれの状態および潜在的な特異体質応答に応じて、様々であろう。本発明の化合物の各適用期間は、連続的な静脈内投与の１２〜２４時間の範囲になることが企図される。最終的には、医師は、本発明の医薬組成物を用いる静脈内治療の適切な期間を決めることになろう。
ＩＶ．ポリマーの使用
【０１３３】
本明細書において開示されている化合物は、例えば、化合物の制御送達用ポリマーマトリックスにコンジュゲートすることができる。この化合物は、共有結合または非共有性会合によってコンジュゲートすることができる。本化合物がポリマーマトリックスに共有結合されるある特定の実施形態において、この連結は、生物的条件下で開裂可能な部分（例えば、エステル、アミド、カーボネート、カルバメート、イミドなど）を含むことができる。ある特定の実施形態において、コンジュゲートされた化合物は、本明細書において開示されている化合物の薬学的に許容される塩、エステル、またはプロドラッグであり得る。本明細書において開示されている化合物は、治療剤の送達のために、当分野で公知の任意のタイプのポリマーマトリックスと会合させることができる。
Ｖ．合成的調製
【０１３４】
本明細書において開示されている化合物は、有機合成の当業者に公知の様々な手段で、および本明細書にその合成が記載されている例示的化合物と同様に調製することができる。これらの化合物を調製する際に使用される出発原料は、市販されているか、または公知の方法により調製することができる。化合物の調製は、様々な化学基の保護および脱保護を含み得る。保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択は、当業者により容易に決定することができる。保護基の化学は、その全体が参照により本明細書に組み込まれている、例えば、Greeneおよび  Wuts、Protective  Groups  in  Organic  Synthesis、第４４版、Wiley&Sons、２００６年に見出すことができる。
【０１３５】
本明細書において記載されている方法の反応は、有機合成の当業者により容易に選択することができる、適切な溶媒中で実施することができる。適した溶媒は、反応が実施される温度、すなわちその溶媒の凝固温度からその溶媒の沸騰温度までの範囲とすることができる温度で、出発原料（反応剤）、中間体、または生成物と実質的に非反応性であり得る。所与の反応は、１種の溶媒中、または２種以上の溶媒混合物中で実施することができる。特定の反応工程に応じて、特定の反応工程に適した溶媒を選択することができる。
ＶＩ．使用
【０１３６】
ＢＭＰおよびＴＧＦ−βシグナリング経路は、正常な器官形成およびパターン形成、ならびに成熟組織の正常なおよび病的なリモデリングに必須である。ＢＭＰシグナリング経路における欠陥は、遺伝性出血性毛細血管拡張症候群、原発性肺高血圧症または肺動脈性肺高血圧症、若年性家族性ポリポーシス、ならびに散発性腎細胞癌および前立腺癌を含む、いくつかの先天性および後天性疾患過程に関与する。シグナリング構成成分の欠陥に関連するある種の疾患状態において、ＢＭＰシグナリングの減衰が原因となり得ることが示唆されている一方、本発明者らの知見は、いくつかの状況においては、過剰なＢＭＰシグナリングが病原となり得ることを示唆している（Waiteら、Nat.  Rev.  Genet.４巻：７６３〜７７３頁、２００５年；Yuら、J.  Biol.  Chem.２８０巻：２４４４３〜２４４５０頁、２００３年）。ＢＭＰシグナリングを実験的にモジュレートする能力は、治療を研究するため、およびこれらの状態の根本的原因を決定するための手段を提供する。
Ａ．鉄欠乏および慢性疾患の貧血を含む、貧血の処置
【０１３７】
総説に関しては、Weissら、N.  Engl.  J.  Med.３５２巻：１０１１〜１０２３頁、２００５年を参照されたい。炎症の貧血（慢性疾患の貧血とも呼ばれる）は、慢性感染症、自己免疫疾患（全身性エリテマトーデスおよび関節リウマチ、ならびにキャッスルマン病など）、炎症性腸疾患、がん（多発性骨髄腫を含む）、および腎不全を有する患者において見ることができる。炎症の貧血は、ペプチドホルモンのヘプシジンの不適切な発現によって引き起こされることが多い。ヘプシジンは、マクロファージの細胞内貯蔵から、および腸管上皮細胞からの鉄の輸送を可能にする重要なタンパク質である、フェロポーチンの分解を引き起こす。腎不全を有する多くの患者は、エリスロポエチンの欠乏と過剰なヘプシジン発現とを組み合わせて有する。ＢＭＰシグナリングは、ヘプシジンの発現を誘発し、ＢＭＰ阻害剤によるヘプシジン発現の阻害により、鉄レベルが増加する。本明細書に記載にされている化合物は、慢性疾患または炎症による貧血、および関連性高ヘプシジン状態による貧血の処置に使用することができる。
【０１３８】
多様な病因からなる炎症の貧血におけるＩＬ−６の上昇、インビボでの慢性ＩＬ−６投与の効果、およびＩＬ−６欠損げっ歯類における貧血からの防御（Weissら、N.  Engl.  J.  Med.３５２巻：１０１１〜１０２３頁、２００５年）に基づくと、炎症性サイトカインＩＬ−６は、炎症性状態におけるヘプシジン発現が上昇する主要な原因であると考えられる。ＩＬ−６による肝細胞癌細胞系を刺激すると、ヘプシジン発現が誘導される一方、ＢＭＰ阻害剤による処置は、ＩＬ−６誘発性ヘプシジン発現を止めることが示されている（Yuら、Nat.  Chem.  Biol.４巻：３３〜４１頁、２００８年）。さらに、本発明者らは、ＢＭＰ阻害剤が、インビボでの病原性細菌の注入により誘発されるヘプシジン発現を阻害し得ることを見出している。マウスおよびゼブラフィッシュにおける鉄の全身投与は、ＢＭＰ応答性ＳＭＡＤおよび肝臓でのヘプシジン発現を迅速に活性化すること、ならびにＢＭＰ拮抗作用は、これらの応答を効果的に遮断することも示されている（Yuら、Nat.  Chem.  Biol.４巻：３３〜４１頁、２００８年）。鉄調節におけるＢＭＰシグナリングの機能的重要性は、ＢＭＰ阻害剤がヘプシジン発現を阻害して、インビボでの血清中の鉄レベルを上昇することができるという、本発明者らの知見によって支持される。総合すれば、これらのデータは、ヘプシジンの鉄媒介性および炎症媒介性調節および鉄の循環レベルの調節は、ＢＭＰシグナリングを必要とすることを示唆している。本明細書に記載されている化合物は、治療的利益のため、多様な状況における鉄の利用可能性を変えるために使用することができる。
【０１３９】
本明細書に記載されている化合物は、（ｉ）食事による鉄補給または経口による鉄補給（これらは、鉄の静脈内投与よりも安全である）の効力を高め、血清中の鉄濃度を増加させるため、（ｉｉ）手術を見越して血液中のヘモグロビン増強を高めるか、または手術を見越して自分自身用に献血することを可能にするため、（ｉｉｉ）エリスロポエチンおよびその関連物の効力を高め、これにより、エリスロポエチンの公知の毒性および副作用（すなわち、高血圧症、心血管イベント、および腫瘍成長）を最小化しながら、貧血のために投与されるエリスロポエチン用量の低下を可能にするため、および（ｉｖ）ヘプシジン発現を阻害して、炎症性腸疾患に伴う貧血を治す一助とするために、貧血状態において使用することができる（Wangら、Inflamm.  Bowel  Dis.２０１２年１月；１８巻（１号）：１１２〜９頁、Epub２０１１年２月２３日）。
Ｂ．進行性骨化性線維異形成症（ＦＯＰ）の処置
【０１４０】
ＦＯＰは、罹患した個体において、構成的に活性なＡＬＫ２の変異形態の存在によって引き起こされる（Shoreら、Nat.  Genet.３８巻：５２５〜５２７頁、２００６年）。本明細書に記載されている化合物などのＢＭＰシグナリングの特異的阻害剤は、外傷、筋骨格のストレスまたは炎症に応答した過剰な骨形成を予防するために使用することができる。こうした化合物はまた、病的な骨の退行を助けるためにも使用することができる。ＢＭＰ阻害剤は、全身に、あるいは外傷もしくは炎症の領域に効果を集中または限定するために局部的に投与することができる。
【０１４１】
本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、非常に罹りやすい個体における自発的な骨形成を抑制するための慢性的治療として使用することができる。一時的な治療は、最も頻繁に外傷と関連して骨腫または病的な骨を発症するＦＯＰ個体において、その外傷的出来事の前、最中、または後にでも投与することによって、異常な骨形成を予防するために使用することができる。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤による一時的な治療は、ＦＯＰを有する個体において、必要なもしくは緊急の内科的または外科的手順（および、重要な免疫処置および抜歯でさえも）の前、最中または直後に使用して、病的な石灰化を予防することができる。他の骨阻害剤、免疫調節薬または抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ、ステロイド、シクロスポリン、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、リツキシマブ（rituxumab）、エタネルセプト、または類似の薬など）との組合せ治療は、この障害における異所的骨形成の阻害において、ＢＭＰ阻害剤の有効性を高めることができる。
【０１４２】
Ｃｒｅリコンビナーゼの発現に向かわせるアデノウイルスにより遺伝的に改変されたマウスの膝窩に注射することによって、構成的に活性なＡＬＫ２の変異形態の発現が誘発される、ＦＯＰのマウスモデルが開発されている。このモデルは、ＦＯＰ患者において見られる異所性石灰化および身体障害を再現する。
Ｃ．がんの処置
【０１４３】
ＢＭＰの過剰発現のために、または逆説的に言うと、ＢＭＰＩＩ型受容体発現の喪失の結果として生じ得る、過剰なＢＭＰシグナリングは、乳癌、前立腺癌、骨癌、肺癌および腎臓細胞癌を含めた、ある種の固形腫瘍の腫瘍形成、成長または転移の一因となり得る（Yuら、J.  Biol.  Chem.２８０巻：２４４４３〜２４４５０頁、２００８年；Waiteら、Nat.  Rev.  Genet.４巻：７６３〜７７３頁、２００３年；Alarmoら、Genes、Chromosomes  Cancer４５巻：４１１〜４１９頁、２００６年；Kimら、Cancer  Res.６０巻：２８４０〜２８４４頁、２０００年；Kimら、Clin.  Cancer  Res.９巻：６０４６〜６０５１頁、２００３年；Kimら、Oncogene２３巻：７６５１〜７６５９頁、２００４年）。ＢＭＰ９シグナリングを阻害すると、卵巣がん細胞の成長を防止することができる（Herreraら、Cancer  Res.２００９年１２月１５日；６９巻（２４号）：９２５４〜６２頁）。卵巣がんの成長はＡＬＫ２−ＳＭＡＤシグナリングにより促進され、本明細書に記載されている化合物を用いるなどの、選択的ＡＬＫ２阻害剤により阻害することができる（Tsaiら、Cell  Rep.２０１２年８月３０日；２巻（２号）：２８３〜９３頁、Epub２０１２年８月９日）。
【０１４４】
ＢＭＰ過剰発現またはＢＭＰＩＩ型受容体欠損に関連するＢＭＰ活性の増加が疾患の発病の一因となる場合、ＢＭＰＩ型受容体（リガンドおよびＩＩ型受容体の両方の下流）のレベルで本明細書に記載されている化合物を使用してＢＭＰシグナリング活性を阻害することは、ＢＭＰシグナリング活性の正常化、および腫瘍成長または転移の潜在的阻害の有効な手段となり得る。
【０１４５】
本明細書に記載されている化合物は、補助的または一次化学療法のいずれかとして、臨床的利益のために、こうした腫瘍細胞（および、他の腫瘍構成体の細胞タイプ）の成長または転移を減速または抑止させるために使用することができる。同様に、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、ある種のタイプのがん（例えば、前立腺癌および乳癌などの腺癌）の骨転移特性を妨げるために使用することができる。さらに、本明細書に記載されている化合物は、骨を形成する腫瘍または骨肉種などの骨に由来する腫瘍のいずれかにおける骨芽細胞活性を阻害するために、（補助的または一次化学療法として）使用することができる。さらに、本明細書に記載されている化合物は、破骨活性（ＢＭＰ標的遺伝子であるＲＡＮＫＬの作用を介して、ＢＭＰによっても調節される）を阻害するために使用することができ、この破骨活性は、多発性骨髄腫および他の骨を標的とする腫瘍などの状態において病的に増加する。これらの状態におけるＢＭＰ阻害剤を適用すると、腫瘍の関与による骨溶解性病変および骨折の存在を低減することができる。
Ｄ．ＢＭＰ阻害剤による免疫モジュレーション
【０１４６】
ＢＭＰは、炎症または免疫応答を減衰させることが報告されており（Choiら、Nat.Immunol.７巻：１０５７〜１０６５頁、２００６年；Kerstenら、BMC  Immunol.６巻：９号、２００５年）、これらの応答は、個体が感染症（すなわち、ウイルス、細菌、真菌、寄生生物または結核菌）と戦う能力を損なう恐れがある。したがって、本明細書に記載されているＢＭＰシグナリング阻害剤は、炎症応答または免疫応答を高めることができ、これにより、個体がより迅速に感染を排除することを可能にする。
【０１４７】
リンパ球および他の免疫細胞は、それらの細胞表面上にＢＭＰ受容体を発現し、ＢＭＰが様々な液性および細胞性免疫学的コンパートメントの発達および成熟を調節しているということ、ならびに成熟生物において液性および細胞性免疫応答を調節しているという証拠が増加している。免疫学的に重要な多数のサイトカインの効果について一般に知られているのと同様に、免疫細胞に及ぼすＢＭＰシグナルの効果は状況特異的である可能性が高く、したがって、ＢＭＰシグナルの効果が、特定のリンパ球集団の発達または機能を増大させるかまたは減少させるかは、経験的に決定しなければならない。本明細書に記載されている化合物を使用するＢＭＰ拮抗作用は、治療の場合には、細胞性、自然もしくは液性免疫コンパートメントの発達を意図的に偏らせるための有効な戦略、または成熟した免疫系においては免疫応答を治療上逸脱させるための戦略になり得る。これらの戦略は、細胞性、自然もしくは液性免疫の持って生まれた障害を標的とすることができるか、または（例えば、他の手段による免疫処置が困難または無効である場合の抗原感作の成功を促進するためのアジュバントとして）免疫応答が不適切に弱い障害を標的とすることができるか、または免疫応答が過剰もしくは不適切である場合（例えば、自己免疫および自己感作）の障害を標的とすることができる。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤はまた、いくつかの状況において、免疫寛容の意図的誘発（すなわち、同種移植または自己免疫において）にとって、ならびに自己免疫疾患および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）などの適応症にとって有効にもなり得る（Wangら、Inflamm.  Bowel  Dis.２０１２年１月；１８巻（１号）：１１２〜９頁、  Epub２０１１年２月２３日）。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、炎症性大腸炎のモデルにおいて、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍに応答する、マクロファージ媒介性炎症も減衰し得る（Wang  Lら、J  Clin  Invest.２００９年；１１９巻（１１号）：３３２２頁）
Ｅ．病的骨形成の処置
【０１４８】
本明細書に記載されている化合物は、強直性脊椎炎または他の「血清学的に陰性な」脊椎関節症などの炎症性障害における病的骨形成／骨融合を改善するために使用することができ、この場合、こうした障害における自己免疫および炎症は、骨形成を刺激するように思われる。本化合物の適用の１つは、特に強直性脊椎炎または関節リウマチを有する患者において、関節手術後の過剰な骨形成を防ぐためのものであろう。本明細書に記載されている化合物はまた、全身性エリテマトーデス、強皮症、または皮膚筋炎などの疾患において、石灰沈着症（栄養障害型軟組織石灰化）を予防するために使用することもできる。
【０１４９】
筋肉への鈍的外傷性損傷は、ある特定の個体において、筋肉内に異常な骨形成を引き起こす恐れがあり、これによって外傷性骨化性筋炎と呼ばれる障害を生じる（Cushnerら、Orthop.Rev.２１巻：１３１９〜１３２６頁、１９９２年）。頭部外傷および熱傷はまた、異所的骨形成を誘導する恐れもあり、これは、患者のリハビリテーションおよび回復に著しい弊害がある。場合によってこうした状態のために通常処方される抗炎症薬物（例えば、インドメタシンまたはイブプロフェンなどの非ステロイド系抗炎症性薬）の他に、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤による処置は、罹患しやすい個体における病的な骨形成の予防、または最近もしくはかなり以前に罹患した個体における病変の縮小もしくは退行の一助となり得る。心筋を含めた他の筋肉が、損傷または外傷の存在下で骨化を発症すると記載されているのは非常にまれであり、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤による類似の処置は、これらの状況において役立ち得る。
Ｆ．異所性または不適応骨形成の処置
【０１５０】
ＢＭＰシグナルおよびそれらの転写標的は、モンケベルク血管石灰化疾患およびアテローム性血管疾患における、血管内膜および内側のリモデリングおよび石灰化に関係している（Bostromら、J.  Clin.  Invest.９１巻：１８００〜１８０９頁１９９３年；Tysonら、Arterioscler.  Thromb.  Vasc.  Biol.２３巻：４８９〜４９４頁、２００３年）。ＢＭＰおよびＢＭＰ誘発性骨分化はまた、心臓弁石灰化にも関係している。生得の心臓弁は、特に既に異常がある場合、石灰化する恐れがある。典型的な例は、大動脈二尖弁であり、これらの弁は、通常、石灰化して、狭窄症に至る。石灰性大動脈弁狭窄症を有する患者は、弁置換のための心臓手術を必要とすることが多い。異常な石灰化は、脈管移植補綴物または心臓弁の機能に有害な影響を及ぼす恐れがある。例えば、人工器官の心臓弁は石灰化して、狭小化およびしばしば漏出をもたらす。
【０１５１】
本明細書に記載されている化合物は、単独、またはアテローム性疾患、腎疾患、腎性骨形成異常症もしくは上皮小体疾患と組み合わせて、血管または弁の石灰化疾患を阻害するために使用することができる。
【０１５２】
本明細書に記載されている化合物は、全身もしくは局部投与によって、または補綴物材料もしくは他のインプラントへの直接的組み込みによって（例えば、インプラントまたは補綴物のすべてまたは一部をコーティングまたは構成するポリマーを有する混合物中で）、血管または弁の補綴物材料の石灰化を阻害するために使用することができる。
【０１５３】
一部の例において、骨折後の骨折治癒を遅延させること、または不適応な骨形成による機能障害を予防するために特定の場所において骨折治癒を意図的に阻害することが望ましい。例えば、骨折が生じ、医療的または実施上の理由のため、直ちに手術を行うことができない場合、完全な手術または手技を行うことができるまで、骨折治癒は、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の使用によって一時的に「延期」することができる。これは、例えば、骨フラグメントの適切な付着を確実とするために、後で意図的に再骨折を行う必要性を予防することができる。処置期間が比較的短い場合、ＢＭＰ阻害剤を中止すると、正常な骨折治癒過程が確実となることが予期される。他の場合において、骨折が関節に直接、影響している場合など、新規の骨成長はどのような量であっても、機能を損なう恐れがある。これらの場合において、（局部インプラントまたはマトリックスからの拡散を介した、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の全身的または局部的送達による）ＢＭＰ活性の全体的または局部阻害は、重症領域において、骨折治癒を阻害するため、または骨折仮骨を予防するために使用することができる。
Ｇ．皮膚疾患の処置
【０１５４】
培養したケラチノサイトの拡大増殖−インビトロにおいて、ＢＭＰは、ケラチノサイト増殖を阻害し、分化を促進する（BotchkarevらのDifferentiation７２巻：５１２〜５２６頁、２００４年に概説されている）。皮膚移植を必要としている患者において（例えば、熱傷後）、皮膚移植片は、培養されたケラチノサイトから作製される。このラチノサイトは、他の動物（異種移植片）由来でもあってもよいが、これらは免疫系によって拒絶されるので、単に一時的なものに過ぎない。ケラチノサイトは、患者自身に由来してもよく、かつ実験室内において細胞シートに成長させることができる（培養された上皮自家移植片）。患者は、自分自身の身体に由来するケラチノサイトを拒絶しないであろう。ケラチノサイト培養物へ本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の添加を使用して、ケラチノサイト増殖を容易にすることができ、これにより患者はより早く移植片を受け取ることが可能になる。
【０１５５】
上皮形成の向上−ＢＭＰ６は皮膚損傷部において高度に発現し、高レベルのＢＭＰ６は、様々な病因の慢性的なヒト創傷において検出される（Kaiserら、J.Invest.  Dermatol.１１１巻：１１４５〜１１５２頁、１９９８年）。これらの皮膚にＢＭＰ６を過剰発現しているマウスにおいて、再上皮形成および皮膚創傷の治癒は有意に遅延された（Kaiserら、J.Invest.  Dermatol.１１１巻：１１４５〜１１５２頁、１９９８年）。上皮形成の向上は、瘢痕形成を低減し得る。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の局所または全身投与は、例えば、圧迫潰瘍（とこずれ）、または治癒していないかもしくは治癒が不十分の皮膚潰瘍（例えば、末梢血管疾患、糖尿病、静脈不全を有する患者における）の処置において、皮膚創傷の上皮形成を高めるために使用することができる。化合物はまた、瘢痕形成を低減することも予期される。
【０１５６】
毛髪成長の促進−頭皮の毛包成長は３つの期：発育期（成長期）、退行期（退縮期）、および休止期（静止期）を有するサイクルである。最近の証拠は、ＢＭＰシグナルは休止期から発育期への移行を遅延させることを示唆している（Plikusら、Nature４５１巻：３４０〜３４４頁、２００８年）。本明細書に記載されている化合物を使用するＢＭＰシグナリングの阻害は、休止期を短縮し、発育期における毛包の数を増加することができる。本明細書に記載されている化合物は、毛包が不十分である状況、または毛髪が成長するよりも高い頻度で失われる場合の処置に使用することができる。これらの状況は、アンドロゲン性脱毛症（男性型脱毛症）、円形脱毛症、および休止期脱毛を含む。
【０１５７】
乾癬の処置−乾癬は、炎症性皮膚障害であり、この障害は、時として皮膚外傷、ならびにその後の修復および炎症後に起こる（Ｋｏｅｂｎｅｒ現象）。マウスの皮膚におけるＢＭＰ６の過剰発現は、乾癬を有する患者において見られるものと類似した皮膚病変をもたらすので（Blessingら、J.Cell.Biol.１３５巻：２２７〜２３９頁、１９９６年）、ＢＭＰは、修復、および乾癬を引き起こす炎症性メカニズムに関与する可能性がある。本明細書に記載されている化合物は、確立された乾癬を処置するため、または皮膚損傷後の乾癬発症を予防するため、局所または全身投与することができる。
【０１５８】
角膜瘢痕化の処置−ＢＭＰ６発現は、結膜の瘢痕化に関連する（Andreevら、Exp.  Eye  Res.  ８３巻：１１６２〜１１７０頁、２００６年）。明細書に記載されている化合物は、角膜瘢痕化およびその結果として起こる失明を予防または処置するために使用することができる。
Ｈ．全身性高血圧の処置
【０１５９】
ＢＭＰ４を注入すると、マウスにおいて全身性高血圧を誘発する（Miriyalaら、Circulation１１３巻：２８１８〜２８２５頁、２００６年）。血管平滑筋細胞は、様々なＢＭＰリガンドを発現する。ＢＭＰは、電位依存性カリウムチャネルの発現を増大し、これによって血管平滑筋の収縮を増大させる（Fantozziら、Am.  J.  Physiol.  Lung  Cell.  Mol.  Physiol.２９１巻：Ｌ９９３〜１００４頁、２００６年）。ＢＭＰシグナリングを阻害する本明細書に記載されている化合物は、血圧を低下するために使用することができる。高血圧を有する患者における血圧の持続的低下は、心筋梗塞、うっ血性心不全、脳血管障害、および腎不全を予防することが予期される。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、局部送達を介して（例えば、エアゾールを介して）肺高血圧症におけるものなどの、特異的な血管床における高血圧を標的とするために使用することができる。
Ｉ．肺高血圧症の処置
【０１６０】
ＢＭＰシグナリングは、肺高血圧症の発病の一因となる。例えば、ＢＭＰ４レベルが低下しているマウスは、肺高血圧症、および長期間にわたって低酸素濃度で呼吸することにより誘発される肺性血管リモデリングから防御される（Frankら、Circ.Res.９７巻：４９６〜５０４頁、２００５年）。さらに、ＩＩ型ＢＭＰ受容体（ＢＭＰＲＩＩ）をコードする遺伝子中の変異は、散発性および家族性肺動脈性肺高血圧症を有する患者において頻繁に見出される。ＢＭＰシグナリングの低減は、肺高血圧症を引き起こすことが予想され得る。しかし、Ｙｕおよび共同研究者ら（Yuら、J.  Biol.  Chem.２８０巻：２４４４３〜２４４５０頁、２００８年）は、ＢＭＰＲＩＩ欠損は、一部のＢＭＰリガンドによってＢＭＰシグナリングを逆説的に増大させること、およびこうして本明細書に記載されている化合物を用いたＢＭＰシグナリングの増大は、実際に、肺高血圧症の発症の一因となり得ることを報告した。
【０１６１】
本明細書に記載されている化合物は、肺動脈性肺高血圧症のリスクがある患者（例えば、ＢＭＰＲＩＩ変異を有する患者）においてこの疾患の発症を予防するため、または特発性もしくは後天性肺動脈性肺高血圧症を有する患者を処置するために使用することができる。本明細書に記載されている化合物により処置された個体における肺高血圧症の低減は、息切れ、右心室肥大、および右心室不全を低減することが予期される。
Ｊ．心室肥大の処置
【０１６２】
ＢＭＰ−１０レベルは、高血圧を有するラットの肥大した心室において高まり、このＢＭＰリガンドは、培養された新生仔ラット心室筋細胞において肥大を誘発する（Nakanoら、Am.  J.  Physiol.  Heart.  Circ.  Physiol.２９３巻：Ｈ３３９６〜３４０３頁、２００７年）。Ｓｕｎら（Hypertension２０１３年２月；６１巻（２号）：３５２〜６０頁）は、小分子ＢＭＰ阻害剤が左心室リモデリングの悪化（肥大）を低減することができることを示唆している。本明細書に記載されている化合物によるＢＭＰ−１０シグナリングの阻害は、心室肥大を予防／処置することができる。心室肥大は、拡張機能障害によるうっ血性心不全に至る恐れがある。本明細書に記載されている化合物は、うっ血性心不全を予防／処置することが予期される。
Ｋ．神経障害の処置
【０１６３】
脊髄損傷および神経障害の処置−ＢＭＰは、成人の、脊髄損傷後の脊髄における軸索再生の強力な阻害剤である（Matsuuraら、J.  Neurochem.２００８年）。ＢＭＰ発現は、脊髄挫傷後、損傷部位周囲の希突起神経膠細胞および星状膠細胞において上昇することが報告されている。ＢＭＰ阻害剤であるノギンの髄膜下投与により、脊髄挫傷後の、運動活性の増強および皮質脊髄路の有意な再成長がもたらされた。
【０１６４】
ＲＧＭａは脊髄損傷後の軸索成長および回復、ならびにシナプス再形成を阻害し、その効果は、ＲＧＭａに向かう抗体によって遮断される（Hataら、J.  Cell.  Biol.１７３巻：４７〜５８頁、２００６年；Kyotoら、Brain  Res.１１８６巻：７４〜８６頁、２００７年）。ＲＧＭａはＢＭＰシグナリングを増強し（Babittら、J.  Biol.  Chem.  ２８０巻：２９８２０〜２９８２７頁、２００５年）、これは、ＢＭＰシグナリングが、軸索成長および回復を妨げる原因となり得ることを示唆している。
【０１６５】
これらの考察に基づくと、本明細書に記載されている化合物は、脊髄損傷後の軸索成長および回復を高めることが予期される。本明細書に記載されている化合物は、糖尿病を含む広範な障害に関連する神経障害を予防／処置することが予期される。本明細書に記載されている化合物は、神経障害に関連する疼痛および運動機能障害のどちらも処置することが予期される。
【０１６６】
中枢神経系の炎症に関連する神経障害の処置−ＢＭＰ４および５は、多発性硬化症およびクロイツフェルト−ヤコブ病の病変において検出されている（Deiningerら、Acta  Neuropathol.９０巻：７６〜７９頁、１９９５年）。ＢＭＰはまた、多発性硬化症の動物モデルである、実験的自己免疫脳脊髄炎を有するマウスにおいても検出されている（Araら、J.Neurosci.Res.８６巻：１２５〜１３５頁、２００８年）。本明細書に記載されている化合物は、多発性硬化症、および中枢神経系の炎症に関連するかまたはＢＭＰシグナルによって媒介される不適応な損傷修復過程に関連する他の神経障害を予防または処置するために使用することができる。
【０１６７】
認知症の処置−ＢＭＰシグナリングの阻害剤は、マウスの神経前駆細胞における神経発生を促進することができる（Koikeら、J.  Biol.  Chem.２８２巻：１５８４３〜１５８５０頁、２００７年）。本明細書に記載されている化合物は、脳血管障害およびアルツハイマー病、ならびに他の認知症を含めた、ニューロンの加速度的喪失に関連する様々な神経障害において神経発生を増大するために使用することができる。
【０１６８】
記憶および学習の変化−ＢＭＰシグナリングは、記憶および認知行動に関与するニューロンの発生および維持において重要な役割を有している。例えば、ＢＭＰ阻害剤であるコーディンが欠損しているマウスは、空間学習は高まるが、新規の環境における探査的活動は低下する（Sunら、J.  Neurosci.２７巻：７７４０〜７７５０頁、２００７年）。本明細書に記載されている化合物は、例えば麻酔のために起こる、またはストレスを引き起こす可能性のある他の状況における記憶喪失を含めた、記憶もしくは学習を変化または予防するため、あるいは心的外傷後ストレス障害を予防するために使用することができる。
Ｌ．アテローム性動脈硬化症の処置
【０１６９】
多くの証拠により、ＢＭＰリガンドは、血管壁において炎症促進性およびアテローム促進性であることが示唆されている（Changら、Circulation１１６巻：１２５８〜１２６６頁、２００７年）。ＢＭＰ４発現をノックダウンすると、炎症性シグナルが減少する一方、ＢＭＰ阻害剤（例えば、ホリスタチンまたはノギン）をノックダウンすると、炎症性シグナルが増大する。本明細書に記載されている化合物は、アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の脈管炎に関連する血管炎症を軽減するために使用することができる。アテローム性動脈硬化症を軽減することにより、本明細書に記載されている化合物は、急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性脳虚血発作、発作、末梢血管疾患、および他の虚血性血管イベントの発生ならびに／または重症度を低下させると予想される。さらに、アテローム性動脈硬化症が動脈瘤形成の発病の一因になる限りにおいて、本明細書に記載されている化合物は、動脈瘤形成の進行を減速するために使用することができ、これにより、動脈瘤破裂の頻発および手術の必要性が低減される。
【０１７０】
マトリックスリモデリングに影響を及ぼすＢＭＰ、および多くのＢＭＰ誘発性遺伝子産生物が、初期アテローム硬化性病変において過剰発現しているので、ＢＭＰシグナルは、アテローム性プラーク形成および進行を促進することができる（Bostromら、J  Clin  Invest.９１巻：１８００〜１８０９頁、１９９３年；Dhoreら、Arterioscler  Thromb  Vasc  Biol.２１巻：１９９８〜２００３頁、２００１年）。したがって、アテローム性プラークにおけるＢＭＰシグナリング活性は、不適応な損傷修復の一形態を表し得るか、または炎症の一因となり得る。ＢＭＰシグナルはまた、経時的に、骨芽細胞様細胞へと分化するよう、常在性または新生血管細胞集団を誘発し、これにより、血管内膜および内側の石灰化をもたらし得る（Hruskaら、Circ  Res９７巻：１０５〜１１２頁、２００５年）。石灰化血管疾患または動脈硬化症は、血管進展性の低下ならびに心血管イベントのリスクおよび死亡率の増加に関連しており、根本となるアテローム硬化性疾患を伴う場合、特に問題となる（Bostromら、Crit  Rev  Eukaryot  Gene  Expr.１０巻：１５１〜１５８頁、２０００年）。しかし、アテローム硬化性および石灰化病変の進行の一因となるシグナルを妨害することができる場合、これらの病変はどちらも退行しやすいことがある（Sanoら、Circulation.１０３巻：２９５５〜２９６０頁、２００１年）。ある特定の態様において、ＢＭＰＩ型受容体活性の阻害剤は、インビボにおいてアテローム性プラークおよび血管石灰化の進行を制限するために使用することができる（Derwallら、Arteriosclerosis、Thrombosis、and  Vascular  Biology.２０１２年；３２巻：６１３〜６２２頁）。
Ｍ．高コレステロール血症または高リポタンパク質血症の処置
【０１７１】
低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ−／−）の欠損マウスにおいて、小分子または組換えＢＭＰ阻害剤による処置によって、血管炎症（マクロファージの蓄積およびカテプシン活性により）、アテローム形成、および血管石灰化が軽減する。理論により拘束されることを望むものではないが、血管炎症に対する影響に関して可能性のある説明として、酸化ＬＤＬ（ｏｘＬＤＬ）が、ヒト大動脈内皮細胞において、ＢＭＰ２発現を高めること、および反応性酸素種（ＲＯＳ）の生成を誘発することが見出された。ｏｘＬＤＬにより誘発されるＲＯＳの生成は、小分子または組換えＢＭＰ阻害剤による阻害に基づくと、ＢＭＰシグナリングを必要とするように思われる。小分子ＢＭＰ阻害剤による処置は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ活性を阻害することなく、血漿中の低密度リポタンパク質レベルを低下させ、ＬＤＬコレステロールの生合成の調節におけるＢＭＰシグナリングの役割を示唆している。小分子ＢＭＰ阻害剤はまた、高脂肪餌を与えられたＬＤＬＲ−欠損マウスにおいて、肝脂肪症（hepatosteatosis）を阻害することも見出された。小分子または組換えＢＭＰ阻害剤は、インビトロで肝細胞癌細胞中でのＡｐｏＢ−１００の合成を阻害する。これらの知見は、血管石灰化およびアテローム発生におけるＢＭＰシグナリングを暗示しており、ＢＭＰシグナリングがアテローム性動脈硬化症の発病の一因となり得る、少なくとも２つの新規なメカニズムを提供している。これらの研究は、血管の酸化ストレス、炎症および脂質代謝の調節において、ＢＭＰシグナリングのいくつかの新規機能を特定しつつ、アテローム性動脈硬化症の処置において、ＢＭＰシグナリング経路が治療標的となることを特定している。
【０１７２】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、患者における、ＡｐｏＢ−１００の循環レベルの低下に使用することができる。ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、患者における、ＬＤＬの循環レベルの低下に使用することができる。したがって、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、先天性または後天性高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症を含めた、高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症の処置に使用することができる。
【０１７３】
ある特定の実施形態において、この先天性高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症とは、常染色体優性高コレステロール血症（ＡＤＨ）、家族性高コレステロール血症（ＦＨ）、多遣伝子性高コレステロール血症、家族性複合型高脂血症（ＦＣＨＬ）、高アポベータリポタンパク質血症、または低密度ＬＤＬ症候群（ＬＤＬ表現型Ｂ）である。
【０１７４】
ある特定の実施形態において、後天性高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症は、糖尿病、高脂肪食および／または座ることの多いライフスタイル、肥満、代謝症候群、内在性または続発性肝臓疾患、原発性胆汁性肝硬変症または他の胆汁うっ滞障害、アルコール依存症、膵臓炎、ネフローゼ症候群、末期腎疾患、甲状腺機能低下症、チアジド、ベータ遮断薬、レチノイド、高活性抗レトロウイルス剤、エストロゲン、プロゲスチンまたはグルココルチコイドの投与による医原性に関連する。
【０１７５】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、シトステロール血症、脳腱黄色腫症、または家族性低ベータリポタンパク質血症などの、脂質吸収または代謝の欠陥に関連する疾患、障害または症候群の処置に使用することができる。
【０１７６】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、冠動脈疾患およびその兆候（例えば、心筋梗塞；狭心症；不安定狭心症などの急性冠動脈症候群、心筋梗塞により引き起こされるうっ血性心不全などの心機能不全、または心筋虚血症／梗塞に関連する不整脈）、脳の部分に供給している動脈の閉塞による発作、脳出血、末梢動脈疾患（例えば、腸間膜虚血、腎動脈狭窄、虚血肢および跛行；鎖骨下動脈盗血症候群；腹部大動脈瘤、胸部大動脈瘤、偽動脈瘤、壁内血腫；または穿通性大動脈潰瘍、大動脈解離、大動脈弁狭窄症、血管石灰化、腱または強膜および皮下の黄色腫に影響を及ぼす黄色腫などの黄色腫、黄色板症、または肝脂肪症などの高脂血症により引き起こされる疾患、障害または症候群の処置に使用することができる。ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、正常な脂質循環レベルまたは代謝を示す個体における場合など、脂質循環レベルに関わらず、前記の疾患、障害または症候群の処置に使用することができる。
【０１７７】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、冠動脈、脳、または末梢血管の疾患から発生する、続発性心血管イベントの低減に使用することができる。ある特定のこうした実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、コレステロールおよび脂質の正常な循環レベルを示す個体の処置に使用するなど、脂質レベルに関わらず、個体を処置するために使用することができる。ある特定のこうした実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤と共投与される。
【０１７８】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、心血管リスク（例えば、Ｃ反応性タンパク質）のマーカーの高い個体、または例えば、フラミンガムリスクスコアの高い個体における場合などの、心血管疾患を予防するために使用することができる。ある特定のこうした実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、コレステロールおよび脂質の正常な循環レベルを示す個体における心血管疾患を予防するために使用することができる。
【０１７９】
本明細書に記載されている１種または複数のＢＭＰ阻害剤を前記の疾患、障害または症候群に使用する、ある特定の実施形態において、処置される患者は、１つまたは複数の以下の状態：アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の脈管炎に関連する血管炎症；アテローム硬化性疾患、アテローム性プラーク、および／または血管石灰化；動脈瘤および／または動脈瘤形成；急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性脳虚血発作、発作、末梢血管疾患、または他の虚血性血管イベントの診断を受けていない、かつ／またはそれらを罹患していない。
【０１８０】
本明細書に記載されている１種または複数のＢＭＰ阻害剤を前記の疾患、障害または症候群に使用する（例えば、患者におけるＡｐｏＢ−１００および／もしくはＬＤＬの循環レベル低下のため、先天性もしくは後天性高コレステロール血症、高脂血症、もしくは高リポタンパク質血症を含めた、高コレステロール血症、高脂血症、もしくは高リポタンパク質血症の処置のため、脂質吸収もしくは代謝の欠陥に関連する疾患、障害もしくは症候群の処置のため、高脂血症により引き起こされる疾患、障害もしくは症候群の処置のため、冠動脈、脳、もしくは末梢血管の疾患から発生する続発性心血管イベントの低減のため、または冠動脈、脳、もしくは末梢血管の疾患から発生する続発性心血管イベントの低減のため）他の実施形態において、処置される患者は、１つまたは複数の以下の状態：アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の脈管炎に関連する血管炎症；アテローム硬化性疾患、アテローム性プラーク、および／または血管石灰化；動脈瘤および／または動脈瘤形成；急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性脳虚血発作、発作、末梢血管疾患、または他の虚血性血管イベントの診断をやはり受けている、かつ／またはそれらをやはり罹患している。
Ｎ．インビトロおよびインビボにおける、胚細胞および成体幹細胞を含む前駆細胞の繁殖、生着および分化
【０１８１】
ＢＭＰシグナルは、前駆細胞および幹細胞集団（いくつかの状況においては、組織も）の分化および再生の調節に重要であり、これにより、系列への分化を防ぐ（一方では、他の状況において、方向付ける）。本明細書に記載されている化合物は、（ｉ）インビボまたはインビトロにおいて、幹細胞または多能性細胞集団において多能性状態を維持するため、（ｉｉ）インビボまたはインビトロにおいて、幹細胞または多能性細胞集団を拡大増殖させるため、（ｉｉｉ）インビボまたはインビトロにおいて、幹細胞または多能性細胞集団の分化を方向付けるため、（ｉｖ）単独で、または他の処置と組み合わせて、または他の処置と連続してのいずれかで、インビボまたはインビトロにおいて、幹細胞または多能性細胞集団の分化を操作または方向付けるため、および（ｖ）分化細胞集団から多能性集団または前駆集団への脱分化を調節するために使用することができる。
【０１８２】
多くの幹細胞系列および前駆体系列は、拡大増殖するか、特異的な組織系列に分化するか、特定の組織型にたどり着いて統合するか、またはプログラム細胞死を受けるかを決定するために、ＢＭＰシグナルを必要とする。しばしば、ＢＭＰシグナルは、成長因子（ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ、ＨＢＥＧＦ、ＰｌＧＦ、およびその他）、ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）、ノッチ、およびＷｎｔシグナリング経路によって提供されるシグナルと相互作用し、上記のこうした変化に影響を及ぼす（Okitaら、Curr.Stem  Cell  Res.Ther.１巻：１０３〜１１１頁、２００６年）。本明細書に記載されている化合物は、治療的用途のため、幹細胞（例えば、胚性幹細胞）または組織前駆細胞の特異的系列への分化を方向付けるために使用することができる（Parkら、Development１３１巻：２７４９〜２７６２頁、２００４年；Pashmforoushら、Cell１１７巻：３７３〜３８６頁、２００４年）。あるいは、ある種の細胞集団の場合、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、臨床的用途に有効となるのに十分な数の細胞を生じるために、分化を防ぎ拡大増殖を促進する上で有効となり得る。ＢＭＰ阻害剤と、成長因子またはシグナリング分子との厳格な組合せは、各細胞および組織型に対して非常に特異的となり得る。
【０１８３】
例えば、ある種の胚性幹細胞系は、培養されたある種の胚性幹細胞系の分化を阻害して、多能性を維持するために、白血病阻止因子（ＬＩＦ）との共培養を必要とする（Okitaら、Curr.Stem  Cell  Res.Ther.１巻：１０３〜１１１頁、２００６年）。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の使用は、ＬＩＦの非存在下で多能性を維持するために使用することができる。他のＥＳ細胞系は、多能性を維持するために、特定のフィーダー細胞層との共培養を必要とする。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤を単独または他の薬剤と組み合わせた使用は、フィーダー細胞層による汚染の懸念、またはそのＤＮＡもしくはタンパク質の構成成分が、ヒト治療にとって細胞の使用を困難にするか、または妨げとなる場合、多能性を維持する上で有効となり得る。
【０１８４】
別の例において、一部の状況では、培養物中でＬＩＦの休止直前にノギンなどのタンパク質によってＢＭＰシグナルに拮抗すると、心筋細胞系列への分化を誘発することができる（Yuasaら、Nat.  Biotechnol.２３巻：６０７〜６１１頁、２００５年）。本明細書に記載されている薬理学的ＢＭＰ阻害剤の使用は、類似の効果、もしそうでない場合、一層強力な効果を達成することができる。こうした分化細胞は、疾患のある心筋に治療的に導入することができる。あるいは、こうした処置は、実際には、既に疾患のある心筋にたどり着いている生着前駆細胞に対し、一層有効となり得る。ノギンなどのＢＭＰのタンパク質阻害剤による全身的治療は、非常に費用がかかり、かつ複雑な投与を必要とする。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の全身的または局部的な送達は、インシチュで、こうした前駆細胞の分化を、機能している心筋細胞へと偏らせることができる。
Ｏ．軟骨欠損の処置
【０１８５】
特定のＢＭＰ受容体の選択的阻害は、間葉系幹細胞によって産生される足場の石灰化および無機質化を予防することによる軟骨形成が可能になる（HellingmanらTissue  Eng  Part  A.２０１１年４月；１７巻（７〜８号）：１１５７〜６７頁、Epub２０１１年１月１７日）。したがって、本発明の化合物は軟骨損傷または欠損を有する患者において軟骨修復／再生を促進するのにも、例えば、移植のために間葉系幹細胞などの適切な細胞から軟骨組織をエクスビボまたはインビトロで生成するのにも有用となり得る。
Ｐ．様々な程度の選択性を有する化合物の適用：特定のＢＭＰＩ型受容体を介してＢＭＰシグナリングを阻害する化合物、またはＴＧＦ−β、アクチビン、ＡＭＰキナーゼ、またはＶＥＧＦ受容体を介したシグナリングにも影響を及ぼす化合物
【０１８６】
ＡＬＫ特異的阻害剤−ドルソモルフィンは、ＢＭＰＩ型受容体である、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３およびＡＬＫ６の活性を阻害する。ドルソモルフィンは、ＡＬＫ２およびＡＬＫ３を、ＡＬＫ６よりも高い程度で阻害する（Yuら、Nat.Chem.Biol.４巻：３３〜４１頁、２００８年）。本明細書に記載されている化合物のいくつかは、特定のＢＭＰＩ型受容体に対し相対的により高い選択性を有するであろう。ある種の疾患の発病は、ある特定の受容体のシグナリングの機能障害に起因し得る。例えば、進行性骨化性線維異形成症は、異常な（構成的に活性な）ＡＬＫ２機能によって引き起こされる疾患である（Yuら、Nat.Chem.Biol.４巻：３３〜４１頁、２００８年）。そのような例において、一部のＢＭＰ  Ｉ型受容体の機能に特異的に拮抗する本明細書に記載されている化合物は、毒性もしくは副作用の低下、またはより高い有効性、またはその両方の利点を有し得る。
【０１８７】
本明細書に記載されている化合物の一部は、ＴＧＦ−β、アクチビン、ＡＭＰキナーゼ、およびＶＥＧＦ受容体のシグナリングに比べて、ＢＭＰに対して高い程度の選択性を有し得る。他の化合物は、特異性がより低いことがあり、ＢＭＰシグナリングに加えて他の経路も標的にすることがある。腫瘍の処置において、例えば、特定の患者の腫瘍の分子表現型決定が複数の経路の調節障害を明らかにする場合、ＢＭＰシグナリングおよび１つまたは複数の上記経路を阻害する薬剤は、有益な効果（例えば、腫瘍サイズの低下）を有し得る。
【０１８８】
本明細書に記載されている一部の化合物は、ＡＬＫ１またはＡＬＫ３またはＡＬＫ４またはＡＬＫ５またはＡＬＫ６と比べて、ＡＬＫ２に対して高い程度の選択性を有する。ＡＬＫ１またはＡＬＫ３またはＡＬＫ４またはＡＬＫ５またはＡＬＫ６と比べて、ＡＬＫ２の選択的阻害は、望ましくない効果または毒性を最小化することができる。慢性的なＡＬＫ３阻害により、腸管のクリプト幹細胞リサイクリングにおける公知の重要性による正常な上皮粘膜の代謝回転、および若年性家族性ポリポーシスにおけるＡＬＫ３機能の関与が損なわれ得る。ＡＬＫ１阻害により、正常な血管リモデリングが損なわれ、毛細血管からの漏出、ＡＶ奇形および出血などの、ヒト遺伝性毛細血管拡張症症候群２型（ＨＨＴ２）に似た合併症をもたらし得る。したがって、ＡＬＫ３およびＡＬＫ１に比べて、ＡＬＫ２を選択的に阻害する化合物は、非選択的な阻害剤の使用によって遭遇し得る、このタイプの毒性を回避する一助となり得る。
【０１８９】
ある特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ１の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子をヒトに投与する工程を含む、方法を提供する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するそのＩＣ５０の約２倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するそのＩＣ５０の５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するそのＩＣ５０の１０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するそのＩＣ５０の１５倍、または２０倍、または３０倍、または４０倍、または５０倍、または１００倍、または２００倍、または３００倍、または４００倍、または５００倍、または６００倍、または８００倍、または１０００倍、または１５００倍、または２０００倍、または５０００倍、または１００００倍、または１５，０００倍、または２０，０００倍、または４０，０００倍、または５０，０００倍、または６０，０００倍、または７０，０００倍、または８０，０００倍、または９０，０００倍、または１００，０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、
【化１６】
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または薬学的に許容されるその塩ではない。ある特定の実施形態において、本小分子は、本明細書に記載されている式Ｉの構造を有する。
【０１９０】
ある特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ３の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子をヒトに投与する工程を含む、方法を提供する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するそのＩＣ５０の１５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するそのＩＣ５０の２０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するそのＩＣ５０の３０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するそのＩＣ５０の５０倍、または１００倍、または２００倍、または３００倍、または４００倍、または５００倍、または６００倍、または８００倍、または１０００倍、または１５００倍、または２０００倍、または５０００倍、または１００００倍、または１５，０００倍、または２０，０００倍、または４０，０００倍、または６０，０００倍、または７０，０００倍、または８０，０００倍、または９０，０００倍、または１００，０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、
【化１７】
2016510745.tif 000018
または薬学的に許容されるその塩ではない。ある特定の実施形態において、本小分子は、本明細書に記載されている式Ｉの構造を有する。
【０１９１】
ある特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ４の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子をヒトに投与する工程を含む、方法を提供する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するそのＩＣ５０の１０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するそのＩＣ５０の２０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するそのＩＣ５０の３０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するそのＩＣ５０の４０００倍、または５０００倍、または６０００倍、または７０００倍、または８０００倍、または９０００倍、または１０，０００倍、または１２，０００倍、または１４，０００倍、または１６，０００倍、または１８，０００倍、または２０，０００倍、または２５，０００倍、または３０，０００倍、または４０，０００倍、または５０，０００倍、または６０，０００倍、または７０，０００倍、または８０，０００倍、または９０，０００倍、または１００，０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、
【化１８】
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または薬学的に許容されるその塩ではない。ある特定の実施形態において、本小分子は、本明細書に記載されている式Ｉの構造を有する。
【０１９２】
ある特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ６の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子をヒトに投与する工程を含む、方法を提供する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するそのＩＣ５０の２倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するそのＩＣ５０の５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するそのＩＣ５０の１０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するそのＩＣ５０の１５倍、または２０倍、または３０倍、または４０倍、または５０倍、または１００倍、または２００倍、または３００倍、または４００倍、または５００倍、または６００倍、または８００倍、または１０００倍、または１５００倍、または２０００倍、または５０００倍、または１００００倍、または１５，０００倍、または２０，０００倍、または４０，０００倍、または５０，０００倍、または６０，０００倍、または７０，０００倍、または８０，０００倍、または９０，０００倍、または１００，０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、
【化１９】
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または薬学的に許容されるその塩ではない。ある特定の実施形態において、本小分子は、本明細書に記載されている式Ｉの構造を有する。
【０１９３】
一態様において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ５の活性と比べて、ヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する小分子をヒトに投与する工程を含む、方法を提供する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するそのＩＣ５０の１０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するそのＩＣ５０の２０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するそのＩＣ５０の３０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するそのＩＣ５０の４０００倍、または５０００倍、また６０００倍、または７０００倍、または８０００倍、または９０００倍、または１０，０００倍、または１２，０００倍、または１４，０００倍、または１６，０００倍、または１８，０００倍、または２０，０００倍、または２５，０００倍、または３０，０００倍、または４０，０００倍、または５０，０００倍、または６０，０００倍、または７０，０００倍、または８０，０００倍、または９０，０００倍、または１００，０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。一部のこうした実施形態において、本小分子は、
【化２０】
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または薬学的に許容されるその塩ではない。ある特定の実施形態において、本小分子は、本明細書に記載されている式Ｉの構造を有する。
【０１９４】
本明細書に記載されている化合物は、当業者により適切であると決定された、投与量および投与レジメンの使用により、対象（例えば、ヒト、家庭向けペット、家禽または他の動物）を処置するために使用することができ、これらのパラメータは、例えば、処置される障害のタイプおよび程度、対象の総合的な健康状態、その化合物の治療指数、および投与ルートに応じて様々となり得る。標準的な臨床試験を使用して、本発明の特定の医薬組成物のいずれについても用量および投与頻度を最適化することができる。使用することができる、例示的な投与ルートとしては、経口、非経腸、静脈内、動脈内、皮膚、筋肉内、局所、頭蓋内、眼窩内、眼内、心室内、嚢内、髄腔内、大槽内、腹腔内、鼻内、エアゾール、または座剤による投与が挙げられる。本発明に使用することができる製剤を作製する方法は、当分野で周知であり、例えば、Remington:  The  Science  and  Practice  of  Pharmacy（第２０版、A.R.  Gennaro（編））、Lippincott  Williams  &  Wilkins、２０００年において見出すことができる。
Ｑ．併用療法
【０１９５】
ある特定の例において、ＢＭＰのみを阻害する効果は、それ自体ではそれほど最適ではないことがあり、かつ／または、ＢＭＰシグナリングと機能的相互作用する異なる経路に作用する治療、もしくはＢＭＰ経路それ自体に作用する治療と組み合わせると、相乗性を示すかまたは一層有効性が高いことがあるので、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、現在のまたは将来の他の薬物療法と組み合わせて使用してもよい。ある特定の例において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤と追加的な薬物療法との共投与により、単一療法で使用する場合（例えば、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤の非存在下で）に治療効果を達成する量よりも少なくなるよう、追加的な薬物療法の用量が削減される。併用治療の一部の例は、以下のものを含むことができる。
【０１９６】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、以下に限定されないが、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（例えば、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、またはシンバスタチン）、フィブレート（例えば、ベザフィブレート、シプロフィブレート、クロフィブレート、ゲムフィブロジルまたはフェノフィブレート）、エゼチミブ、ナイアシン、コレステロールエステル転移タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤（例えば、トルセトラピブ、アナセトラピブ、またはダルセトラピブ）、コレスチルアミン、コレスチポール、プロブコール、デキストロチロキシン、胆汁酸隔離剤、または上記の組合せを含む、他の抗高脂血症剤または抗脂血症剤と共投与することができる。
【０１９７】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、以下に限定されないが、スルホニルウレア（例えば、クロルプロパミド、トルブタミド、グリブリド、グリピジド、またはグリメピリド）、肝臓により産生されるグルコース量を低下させる薬物（例えば、メトホルミン）、メグリチニド（例えば、レパグリニドまたはナテグリニド）、腸からの炭水化物の吸収を低下させる薬物（例えば、アカルボースなどのアルファグルコシダーゼ阻害剤）、血糖制御を行う薬物（例えば、プラムリンチドまたはエクセナチド）、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤（例えば、シタグリプチン）、インスリン処置剤、チアゾリジノン（例えば、トログリタゾン、シグリタゾン、ピオグリタゾン、またはロシグリタゾン）、オキサジアゾリジンジオン、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤（例えば、ミグリトールまたはアカルボース）、ベータ細胞のＡＴＰ依存性カリウムチャネルに作用する薬剤（例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド、グリカジド、またはレパグリニド）、ナテグリニド、グルカゴン阻害剤、糖新生および／またはグリコーゲン分解の刺激に関与する肝酵素の阻害剤、または上記の組合せを含む、糖尿病のための処置剤と一緒に共投与することができる。
【０１９８】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、以下に限定されないが、オルリスタット、シブトラミン、フェンジメトラジン、フェンテルミン、ジエチルプロピン、ベンズフェタミン、マジンドール、デキストロアンフェタミン、リモナバント、セチリスタット、ＧＴ３８９−２５５、ＡＰＤ３５６、プラムリンチド／ＡＣ１３７、ＰＹＹ３−３６、ＡＣ１６２３５２／ＰＹＹ３−３６、オキシントモデュリン、ＴＭ３０３３８、ＡＯＤ９６０４、オレオイル−エストロン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、シュードエフェドリン、または薬学的に許容されるそれらの塩、または上記の組合せを含む、肥満の処置剤と共投与することができる。
【０１９９】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、以下に限定されないが、ベータ遮断薬（例えば、アルプレノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、プロプラノロールおよびメトプロロール）、ＡＣＥ（アンジオテンシン変換酵素）阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、キナプリルおよびラミプリル）、カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ニフェジピン、フェロジピン、ニカルジピン、イスラジピン、ニモジピン、ジルチアゼムおよびベラパミル）、およびアルファ遮断薬（例えば、ドキサゾシン、ウラピジル、プラゾシン、およびテラゾシン）、または上記の組合せを含む降圧剤と共投与することができる。
【０２００】
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、以下に限定されないが、赤血球生成促進剤（例えばエリスロポエチン）を含む、貧血（例えば、腎不全および血液透析に関連する炎症の貧血）の処置剤と共投与することができる。
【０２０１】
ＳＵ−５４１６などのチロシンキナーゼ受容体阻害剤および本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤は、血管新生の阻害、特に腫瘍に対する抗血管新生療法において相乗効果を有することがある。ＢＭＰシグナル（ＢＭＰ−４）は、造血／内皮共通前駆体への幹細胞または前駆細胞の運命決定にとって重要であると考えられており、血管新生に必要な成熟内皮細胞の増殖、生存、および移動を促進することができる（Parkら、Development１３１巻：２７４９〜２７６２頁、２００４年）。したがって、本明細書に記載されている化合物を用いたＢＭＰシグナルの拮抗は、内皮前駆体および内皮細胞レベルで、血管新生のさらなる阻害をもたらすことができる。同様に、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤とイマチニブ（グリベック）などの他のチロシンキナーゼ受容体阻害剤との共処置は、血管リモデリングおよびある種の腫瘍の血管新生を阻害するために使用することができる。
【０２０２】
ＢＭＰ経路を阻害すると休止期を短くしながら、ＳＨＨ活性が毛包の休止期（静止期）からの移行を刺激することが知られているので（Paladiniら、J.  Invest.  Dermatol１２５巻：６３８〜６４６頁、２００５年）、ソニックヘッジホッグアゴニストと本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤との組合せは、毛髪の成長を促進するのに特に有用となり得る（Plikusら、Nature４５１巻：３４０〜３４４頁、２００８年）。両者の使用は、発育期または成長期における時間の相対的増加を引き起こすことが予期される。
【０２０３】
ノッチモジュレーター（例えば、ガンマ−セクレターゼ阻害剤）と本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤との組合せ使用は、両者の経路が協同して機能し、細胞分化および血管細胞移動をもたらすことを示唆する証拠が増加しているので（Kluppelら、Bioessays２７巻：１１５〜１１８頁、２００５年）、血管リモデリングまたは骨分化を阻害するように設計された適用において、どちらか一方の薬剤だけよりも有効となり得る。これらの治療は、一方または両方の経路が乱れている腫瘍の処置において相乗性を示し得る（Katoh、Stem  Cell  Rev.３巻：３０〜３８頁、２００７年）。
【０２０４】
インディアンヘッジホッグ（ＩＨＨ）アンタゴニストと本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤との組合せ使用は、病的な骨形成を阻害することができる。ＩＨＨは、軟骨細胞または軟骨形成細胞への骨前駆体の運命決定の原因である。軟骨性骨形成は、軟骨形成（ＢＭＰシグナルおよびＩＨＨシグナルによって促進される）と、ＢＭＰシグナルにより開始される無機質化プログラムによるその後の石灰化の両方の協調された活性を必要とする（Sekiら、J.  Biol.  Chem.２７９巻：１８５４４〜１８５４９頁、２００４年；Mininaら、Development１２８巻：４５２３〜４５３４頁、２００１年）。したがって、ＩＨＨアンタゴニストと本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤との共投与は、過剰に活性なＢＭＰシグナリング（ＦＯＰにおけるものなど）による病的骨成長の阻害、または上記の病的骨形成の炎症性もしくは外傷性障害のいずれにおいても、一層有効となり得る。
【０２０５】
神経膠芽腫の処置に対するＳｍｏ拮抗作用とＢＭＰ拮抗作用の両者の効果について、確固たる実験的証拠が存在する。本明細書に記載されている化合物は、神経膠芽腫を処置するため、Ｓｍｏアンタゴニストと組み合わせて使用することができる。
Ｒ．昆虫におけるＢＭＰシグナリングの阻害
【０２０６】
本明細書に記載されている化合物の一部は、節足動物のＢＭＰ受容体に対し活性を有することがあり、おそらく、脊索動物のＢＭＰ受容体と比較して節足動物のＢＭＰ受容体に対する選択性さえも有する可能性がある。節足動物の幼虫または卵においてＢＭＰシグナリングを阻害すると、深刻な発達異常を引き起こす可能性が高く、おそらく、例えば、ゼブラフィッシュおよびショウジョウバエにおいてこの経路が阻害された場合に観察されるのと同様の背側化を介して、その繁殖能力が損なわれる。本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤が、ヒトＢＭＰ受容体と比較して節足動物ＢＭＰ受容体に対して非常に高い選択性を有する場合、これらの阻害剤は、現在の戦略よりも明らかに毒性が低いか、もしくは環境面で妥当な殺虫剤または有害生物防除剤として使用することができる。
【０２０７】
治療法において患者に投与することに加えて、本明細書に記載されている化合物はまた、エクスビボで、患者に移植される細胞および組織、ならびに構造材料（上記参照）を処理するために使用することもできる。例えば、本化合物は、例えば移植において使用することができる、外植された組織を処理するために使用することができる。
【０２０８】
ここで一般的に記述されている本発明は、単に、本発明のある特定の態様および実施形態の例示目的のために含まれている以下の実施例を参照することによってより容易に理解され、本発明を限定することを意図するものではない。
【実施例】
【０２０９】
ある特定のＢＭＰ阻害剤の合成、ならびにインビトロおよびインビボ評価は、参照により本明細書にその全体が組み込まれている、ＷＯ２００９／１１４１８０に説明されている。
【化２１】
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【０２１０】
（実施例１）
キナーゼアッセイ
０．２％ウシ血清アルブミンを含有し、かつ１０ｍＭ  ＭｎＣｌ２を補充したキナーゼ緩衝液（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）中で、最終濃度をそれぞれ２．５ｎＭ、６μＭ、０．０５μＣｉ／μＬ、および０．５ｍｇ／ｍＬまで希釈した、精製キナーゼ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ＡＴＰ（Ｓｉｇｍａ）、ＡＴＰ［γ−３２Ｐ］（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）、および脱リン酸化カゼイン（Ｓｉｇｍａ）の８μＬの等分量を、最終濃度が０．０１ｎＭ〜１０μＭのキナーゼ緩衝液に希釈した化合物を含有する９６ウェルプレートに、３連で加えた。陽性対照は、化合物を８μＬのキナーゼ緩衝液だけに置き換えることにより生成し、陰性対照は、精製キナーゼと化合物の両方を、一定量８μＬの２つのキナーゼ緩衝液に置き換えることにより生成した。反応は室温で４５分間、進行させて、１０％リン酸１０μＬを添加することによりクエンチした。マルチチャネルピペットを使用して、反応容積（５０μＬ）を全量９６ウェルＰ８１ホスホセルロースフィルタープレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移送し、５分間休ませた。次に、吸引マニホールドシステムを使用して反応液をろ過し、ウェルあたり１％リン酸洗浄用溶液１５０μＬで２０回繰り返し洗浄した。次に、このフィルタープレートを室温で１時間、乾燥し、後側を対応する不透明テープ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）により密封した。マルチチャネルピペットを使用して、ウェルあたりＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ２０シンチレーション液（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）２００μＬをピペット操作で加え、このプレートを光学的に透明な粘着性ＱＰＣＲシール（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して密封した。ウェルあたり１秒の積分時間に設定した光子計数を使用するＳｐｅｃｔｒａｍａｘ  Ｌルミノメーター（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用し、光の出力を測定した。データは、バックグラウンドとしての陰性対照を差し引いた、１００％酵素活性における陽性対照に正規化した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）ソフトウェアを可変ヒル係数を用いるＳ字用量−応答によるグラフ作成および回帰分析に使用した。図１ａおよび２ａは、試験した化合物の一部、およびそれらのそれぞれの選択性プロファイルを示している。対応する構造は、以下である。
【化２２】
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【化２３】
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（実施例２）
細胞培養
【０２１１】
ルシフェラーゼレポーター遺伝子（ＢＲＥ−Ｌｕｃ）に融合したＩｄ１プロモーター由来のＢＭＰ応答性エレメントで安定的にトランスフェクトした筋線維芽細胞Ｃ２Ｃ１２、およびルシフェラーゼレポーター遺伝子（ＣＡＧＡ−Ｌｕｃ）に融合したＰＡＩ−１プロモーター由来のＴＧＦ−β応答性エレメントで安定的にトランスフェクトしたヒト胎児由来腎臓２９３Ｔ細胞を、１０％ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン、およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中、３７℃および１０％ＣＯ２で培養した。ＨｅｐＧ２ヒト肝細胞癌細胞（ＡＴＣＣ）を１０％ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン、およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＥＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中、３７℃および１０％ＣＯ２で培養した。筋線維芽細胞（ＡＴＣＣ）Ｃ２Ｃ１２を１０％ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン、およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中、３７℃および１０％ＣＯ２で培養した。肺動脈平滑筋細胞（ＰＡＳＭＣ）を野生型とＢＭＰＲ２ｆｌｏｘ／ｆｌｏｘマウスの両方から単離し、後者は、以前に記載されている通り（Yu；JBC、２００５年）、アデノウイルス特定Ｃｒｅリコンビナーゼ（Ａｄ．Ｃｒｅ）に曝露して、ＢＭＰＩＩ型受容体欠損（ＢＭＰＲ２ｄｅｌ／ｄｅｌ）細胞を生成した。ＰＡＳＭＣを１０％ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン、およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中、３７℃および５％ＣＯ２で培養した。いくつかの化合物の結果を、図３ａ、３ｂ、４ａおよび４ｂに示している。
（実施例３）
ルシフェラーゼアッセイ（ＢＲＥ−ｌｕｃおよびＣＡＧＡ−ｌｕｃ）
【０２１２】
Ｃ２Ｃ１２  Ｂｒｅ−Ｌｕｃおよび２９３Ｔ  ＣＡＧＡ−Ｌｕｃ細胞を、組織培養処理済み９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ（登録商標）３６１０；Ｃｏｒｎｉｎｇ）中、２％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭをウェルあたり８０μＬ中２０，０００個の細胞を播種した。この細胞を３７℃および１０％ＣＯ２で１時間、インキュベートし、定着して付着させた。対象とする化合物を、最終濃度を１ｎＭ〜１０μＭの１０倍でＤＭＥＭに希釈し、１０μＬの一定量で加えた。陽性対照は、一定量の化合物を、ちょうど１０μＬのＤＭＥＭで置き換えることにより生成した。次に、この細胞を３７℃および１０％ＣＯ２で３０分間、インキュベートした。最後に、構成的に活性なＢＭＰおよびＴＧＦ−βＩ型受容体（ｃａＡＬＫ１−５）を発現するアデノウイルス１０μＬの一定量を加えて、１００種の感染の多様性（ＭＯＩ）を達成した。陰性対照は、化合物と一定量のアデノウイルスの両方をちょうど２０μＬのＤＭＥＭで置き換えることにより生成した。プレートを３７℃および１０％ＣＯ２で１６〜２４時間、一晩、放置してインキュベートした。製造業者の指示書により、ＭＴＴ（臭化３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウム）比色アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）；Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、細胞生存率を決定した後、培地を廃棄し、受動的溶解緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａ）３０μＬを加え、このプレートを室温で１５分間、振とう器上でインキュベートした。マルチチャネルピペットを使用して、ルシフェラーゼアッセイ系（Ｐｒｏｍｅｇａ）溶液１５μＬを各ウェルに加え、このプレートを１５秒間、穏やかに振とうした。ウェルあたり１秒の積分時間に設定した自動範囲を使用するＳｐｅｃｔｒａｍａｘ  Ｌルミノメーター（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用し、光の出力を測定した。データは、バックグラウンドとしての陰性対照を差し引いた、１００％ＢＭＰ活性またはＴＧＦ−βシグナリング活性における陽性対照に正規化した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）ソフトウェアを可変ヒル係数を用いるＳ字用量−応答によるグラフ作成および回帰分析に使用した。いくつかの化合物の結果を、図３ａ、３ｂ、４ａおよび４ｂに示している。
（実施例４）
ウエスタンブロット（ＢＭＰ７対ＴＧＦ−ベータ誘発性ｐＳＭＡＤ）
【０２１３】
ＷＴとＢＭＰＲ２ｄｅｌ／ｄｅｌＰＡＳＭＣの両方を、集密度７５％（ウェルあたり４８０μＬ中に約３７５，０００個の細胞）で、１２ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ（登録商標）；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に播種した。この細胞を３７℃および５％ＣＯ２で１時間、インキュベートし、定着して付着させた。対象とする化合物を１ｎＭ〜２５．６μＭの範囲の最終濃度の５０倍でＲＰＭＩに希釈し、１０μＬの一定量で加えた。陽性対照は、一定量の化合物を、ちょうど１０μＬのＲＰＭＩで置き換えることにより生成した。次に、この細胞を３７℃および１０％ＣＯ２で３０分間、インキュベートした。次に、細胞をそれぞれ２０ｎｇ／ｍＬおよび５ｎｇ／ｍＬの最終濃度のＢＭＰ７およびＴＧＦ−β１リガンドの１０μＬの一定量で刺激した。陰性対照は、化合物と一定量のリガンドの両方を、ちょうど２０μＬのＲＰＭＩで置き換えることにより生成した。下流エフェクタータンパク質（ＢＭＰおよびＴＧＦ−βについて、それぞれｐＳＭＡＤ１／５／８およびｐＳＭＡＤ２）のリン酸化状態を、リガンドによる刺激の３０分後、ウエスタンブロットを行うことにより測定した。ウエスタンブロットを、１００％リガンド誘発性ホスホ−ＳＭＡＤの陽性対照を用いるＩｍａｇｅＪを使用して解析し、バックグラウンドとして陰性対照を差し引いた。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）ソフトウェアを可変ヒル係数を用いるＳ字用量−応答によるグラフ作成および回帰分析に使用した。ＬＤＮ−１９３１８９およびＬＤＮ−２１２８５４に関する結果を、図５ａ、５ｂおよび５ｃに示している。
（実施例５）
ＢＭＰ４／６誘発性ＡＬＰ活性
【０２１４】
組織培養処理済みの透明な９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ（登録商標）３５９６；Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で、２％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ中の筋線維芽細胞Ｃ２Ｃ１２を、ウェルあたり４０μＬ中２，０００個の細胞で播種した。１ｎＭ〜１０μＭの範囲の最終濃度の５倍でＤＭＥＭに希釈した化合物を、四連で１０μＬの一定量で加えた。陽性対照は、一定量の化合物を、ちょうど１０μＬのＤＭＥＭで置き換えることにより生成した。最終濃度２０ｎｇ／ｍＬの５倍でＤＭＥＭに希釈したＢＭＰ４およびＢＭＰ６リガンドを、１０μＬの一定量で加えた。陰性対照は、化合物と一定量のリガンドの両方を、ちょうど２０μＬのＤＭＥＭで置き換えることにより生成した。細胞を３７℃および５％ＣＯ２で６日間、インキュベートし、続いて、５０μＬの１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００中で収穫した。各ウェル由来の抽出物２０μＬを、ＥＬＩＳＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）用のアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）イエロー（ｐＮＰＰ）液体基質１００μＬを用いて、室温で３０分間、インキュベートし、ＡＬＰ活性を製造業者の指示書により、４０５ｎＭでの吸光度により測定した。吸光度データは、１００％ＡＬＰ活性における陽性対照を用いて解析し、バックグラウンドとしての陰性対照を差し引いた。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）ソフトウェアを可変ヒル係数を用いるＳ字用量−応答によるグラフ作成および回帰分析に使用した。ＬＤＮ−１９３１８９およびＬＤＮ−２１２８５４に関する結果を、図６ａおよび６ｂに示している。
（実施例６）
ＩＬ−６誘発性ヘプシジン発現：
【０２１５】
ＨｅｐＧ２細胞を、集密度７５％で、または０．１％ＦＢＳを補充したＥＭＥＭ９８５μＬ中でウェルあたり約１００，０００個の細胞で播種し、３７℃および５％ＣＯ２で６時間、餓飢させた。１ｎＭ〜１２５ｎＭの範囲の最終濃度の２００倍でＥＭＥＭに希釈した化合物を四連で５μＬの一定量を加えることにより、細胞を３０分間、予備処理した。陽性対照は、一定量の化合物を、ちょうど５μＬのＥＭＥＭで置き換えることにより生成した。次に、ヒト組換えインターロイキン−６（ＩＬ−６）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を１０μＬの一定量で、最終濃度１００ｎｇ／ｍＬで加えた。９０分後、培地を除去し、各ウェルをＰＢＳにより２回、洗浄した。ＴＲＩｚｏｌ（登録商標）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＲＮＡ単離と、Ｍ−ＭＬＶ−逆転写酵素（Ｐｒｏｍｅｇａ）およびＭａｓｔｅｒｃｙｌｅｒ（登録商標）ｅｐグラジエントＳ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）を使用するｃＤＮＡ合成のどちらも、製造業者の指示書によって行った。ヘプシジン転写発現量は、ＳＹＢＲ（登録商標）ＦＡＳＴリアルタイムｑＰＣＲキット（Ｋａｐａ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）、ヒトプライマー（フォワード５’−ＣＴＧＡＣＣＡＧＴＧＧＣＴＣＴＧＴＴＴＴＣ−３’、リバース５’−ＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＴＣＧＣＣＴＣ−３’）、およびＭａｓｔｅｒｃｙｌｅｒ（登録商標）ｅｐグラジエントＳ  ｒｅａｌｐｌｅｘ２（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）を使用し、製造業者の指示書によって測定した。ヘプシジンの相対発現量は、ベースライン発現量として陰性対照および最大発現量としての陽性対照を使用して、１８ＳヒトＲＮＡ（フォワード５’−ＧＣＴＧＧＡＡＴＴＡＣＣＧＣＧＧＣＴ−３’、リバース５’−ＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＡＴＣＣＡＡＧＧＡＡ  −３’）に正規化した。Ｅｘｃｅｌ（登録商標）（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ）ソフトウェアをデータ分析およびグラフ作成に使用した。ＬＤＮ−１９３１８９およびＬＤＮ−２１２８５４に関する結果を、図７ａに示している。
（実施例７）
ＦＯＰのＱ２０７Ｄ  ｃａＡＬＫ２マウスモデル
【０２１６】
条件的に発現させた、構成的に活性なＡＬＫ２（ＡＬＫ２Ｑ２０７ＤまたはｃａＡＬＫ２）をコードする遺伝子の単一対立遺伝子を含有するマウスにおいて、既に記載されている（Yu、Nat  Med.２００８年；Fukuda、Genesis２００６年）Ａｄ．Ｃｒｅ（１ｘ１０８プラーク形成単位）を出生後（Ｐ７）の膝窩の後方に注射することにより、異所的骨化を誘発した。ＬＤＮ−１９３１８９とＬＤＮ−２１２８５４の両方を６ｍｇ／ｋｇで、またはビヒクル対照により、マウス（群あたりｎ＝６）を４週間、１日２回（ＢＩＤ）処理し、毎日重量を測定した。骨形成の程度に関係する、可動性の障害を、左の足首の関節の背屈（dorsiflextion）による他動可動域を分析することにより、毎日定量した。点数は、背屈角度０（正常な屈曲、０°〜２０°）、１（軽度の障害、２０°〜９０°）、２（中度の障害、９０°〜１３５°）、３（重度の障害、＞１３５°）に基づいて示した。マウスを犠牲にして、Ｘ線（Ｃａｒｅｓｔｒｅａｍ）により画像化し、軟部組織を固定化し、既に記載されているアリザリンレッドおよびアルシアンブルー法（Komori,T.ら）により染色した。ＬＤＮ−２１２８５４に関する結果を、図８ａおよび８ｂに示している。
【０２１７】
本明細書に引用されている刊行物および特許はすべて、それらの全体が、参照により本明細書に組み込まれている。
【０２１８】
当業者は、型通りの実験だけを使用して、本明細書に記載されている、本発明の具体的な実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または確認することができよう。こうした等価物は、以下の特許請求の範囲により包含されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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