(57)【要約】  組織プロテーゼが少なくとも一つの表面を有する支持構造体を含み、該構造体は基材を含む。支持構造体は、さらに哺乳動物組織源からの少なくとも一つの細胞外マトリックス（ＥＣＭ）材料を有するＥＣＭ組成物を含む。組織プロテーゼが損傷した生体組織の近傍に配置されたときに、組織プロテーゼは損傷した生体組織に対する変調された治癒を誘導する。
2016500526.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つの表面を有し、基材を含む支持構造体を含んでなる組織プロテーゼであって、
前記支持構造体は、さらに細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含み、前記ＥＣＭ組成物は、哺乳動物組織源からの少なくとも一つのＥＣＭM材料を含み、
前記組織プロテーゼが損傷した生体組織の近傍に配置されたときに、前記プロテーゼは前記損傷した生体組織に対する変調された治癒を誘導することを特徴とする組織プロテーゼ。
【請求項２】
前記支持構造体が、Dacron（商標）、Orion（商標）、Fortisan （商標）、ナイロン、ニットポリプロピレン、ミクロ多孔性延伸ポリテトラフルオロエチレン、シリコーンゴム補強Dacron（商標）及びポリエステルから成る群から選択された合成材料からなる、請求項１に記載の組織プロテーゼ。
【請求項３】
前記支持構造体が、処理された羊の皮膚コラーゲン、架橋したウシ心膜及び保存した人間の硬膜から成る群から選択された天然材料からなる、請求項１に記載の組織プロテーゼ。
【請求項４】
前記支持構造体が、タンタルガーゼ及びステンレスメッシュから成る群から選択される金属構造からなる、請求項１に記載の組織プロテーゼ。
【請求項５】
前記ＥＣＭ材料が、小腸粘膜下組織（SIS）、膀胱粘膜下組織（UBS）、尿基底膜（UBM）、肝臓基底膜（LBM）、胃粘膜下組織（SS）、中皮組織、皮下細胞外マトリックス、大腸細胞外マトリックス、胎盤細胞外マトリックス、大網細胞外マトリックス、心臓細胞外マトリックス及び肺細胞外マトリックスから成る群から選択される、請求項１に記載の組織プロテーゼ。
【請求項６】
前記ＥＣＭ材料が、脱細胞化ＥＣＭ材料からなる、請求項1に記載の組織プロテーゼ。
【請求項７】
前記ECM材料が、少なくとも一つの補足的な生物学的活性剤を含む、請求項1に記載の組織プロテーゼ。
【請求項８】
前記生物学的活性剤が、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、形質転換増殖因子アルファ（ＴＧＦ‐α）、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ‐β）、線維芽細胞増殖因子‐２（ＦＧＦ‐２）、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、血管上皮増殖因子（VEGF）、肝細胞増殖因子（HGF）、インスリン様成長因子（IGF）、神経成長因子（NGF）、血小板由来増殖因子（PDGF）、腫瘍壊死因子アルファ（TNA-α）、及び胎盤増殖因子（PLGF）から成る群から選択される成長因子からなる、請求項7に記載の組織プロテーゼ。
【請求項９】
前記生物学的活性剤が、ヒト胚性幹細胞、胎児心筋細胞、筋線維芽細胞、間葉幹細胞、自家移植拡張心筋細胞、脂肪細胞、全能性細胞、多能性細胞、血液幹細胞、筋芽細胞、成体幹細胞、骨髄細胞、間葉細胞、胚性幹細胞、実質細胞、上皮細胞、内皮細胞、中皮細胞、線維芽細胞、筋線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、外因性細胞、内因性細胞、造血性幹細胞、心筋細胞、骨格細胞、胎児細胞、未分化細胞、多能性前駆細胞、単能性前駆細胞、単球心筋芽細胞、骨格筋芽細胞、マクロファージ、毛細血管内皮細胞、異種細胞、同種細胞等、及び出生後の幹細胞から成る群から選択された細胞を含む、請求項７に記載の組織プロテーゼ。
【請求項１０】
前記生物学的活性剤が、コラーゲン（タイプＩ-Ｖ）、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）、糖タンパク質、サイトカイン、細胞表面付随性タンパク質、細胞接着分子（ＣＡＭ）、内皮リガンド、マトリカイン、カドヘリン、免疫グロブリン、線維性コラーゲン、非線維性コラーゲン、基底膜コラーゲン、マルチプレキシン、小型ロイシンリッチプロテオグリカン、デコリン、ビグリカン、フィブロモジュリン、ケラトカン、ルミカン、エピフィカン、ヘパリン硫酸プロテオグリカン、パールカン、アグリン、テスティカン、シンデカン、グリピカン、セルグリシン、セレクチン、レクチカン、アグリカン、ベルシカン、ニューロカン、ブレビカン、細胞質内ドメイン‐４４（ＣＤ４４）、マクロファージ刺激因子、アミロイド前駆体タンパク質、ヘパリン、コンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）、コンドロイチン硫酸Ａ、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、テネイシン、エラスチン、フィブリリン、ラミニン、ニドジェン／エンタクチン、フィビュリンI、フィビュリンII、インテグリン、膜貫通分子、トロンボスポンジン、オステオポンチン、及びアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）から成る群より選択される活性剤を含む、請求項7に記載の組織プロテーゼ
【請求項１１】
前記生物学的活性剤は薬物を含む、請求項7に記載の組織プロテーゼ。
【請求項１２】
前記薬物が、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗腫瘍薬、鎮痙薬、細胞 - 細胞外マトリックス相互作用のモジュレーター、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤、抗血栓剤、DNA、RNA、修飾DNA及びRNA、NSAID、DNAの阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質及び血管拡張剤から成る群から選択される、請求項1に記載の組織プロテーゼ。
【請求項１３】
前記薬物がHMG-CoA還元酵素阻害剤を含む、請求項1の組織プロテーゼ。
【請求項１４】
前記HMG-CoA還元酵素阻害剤が、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン及びシンバスタチンから成る群から選択される、請求項１３に記載の組織プロテーゼ。
【請求項１５】
前記ECM組成物が前記支持構造体の表面上に堆積される、請求項1に記載の組織プロテーゼ。
【請求項１６】
前記ＥＣＭ組成物が前記支持構造体の基材内に含浸される、請求項1に記載の組織プロテーゼ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体組織を処置するための移植可能な生物学的プロテーゼに関する。
特に、本発明は、様々な形状に設計でき、損傷又は罹患した生体組織を治療し、増強し、または置き換えるために使用できる非抗原性で、弾力性がある、生体適合性のある組織プロテーゼ又は移植片に関する。
【背景技術】
【０００２】
当技術分野でよく知られているように、組織プロテーゼ又は移植片が、しばしば、損傷又は罹患した生体組織を治療又は置き換えるために使用される。しかし、医療技術の成長、高度化にもかかわらず、損傷した生体組織を治療又は交換するための移植片の使用は、医療において頻繁かつ深刻な問題を残す。その問題は、多くの場合、移植片を構築するために使用される材料に関連している。
【０００３】
また、当技術分野で知られているように、最適な移植片材料は、化学的に不活性で、発癌性がなく、機械的応力に耐えることができ、必要な形態に作製でき、さらに滅菌可能でなければならない。さらに、その材料は、組織液による物理的変形に耐えるべきで、炎症反応を発生させるものでなく、場合によってはアレルギーまたは過敏症の症状を引き起こすものでなく、内臓癒着を促進するものでないことが必要である。例えば、ジェンキンスら、Surgery 第94（2）巻、pp.392-398（1983）を参照のこと。
【０００４】
様々な材料及び/又は構造が、このように、タンタルガーゼ、ステンレスメッシュ、Dacron（商標）、Orion（商標）、Fortisan（商標）、ナイロン（商標）、編んだポリプロピレン（例えば、Marlex（商標））、ミクロ多孔性延伸ポリテトラフルオロエチレン（例えば、Gore-Tex（商標））、シリコーンゴム補強ダクロン（例えば、Silastic（商標））、ポリグラクチン910（例えば、Vicryl（商標））、ポリエステル（例えば、Mersilene（商標））、ポリグリコール酸（例えば、Dexon（商標））、処理された羊の皮膚強化コラーゲン、架橋したウシ心膜（例えば、Peri-Guard（商標））、及び保存された人間硬膜（例えば、Lyodura（商標））を含む、上述の最適な特徴を満たす移植片を構成するために採用された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
以下に詳細に説明するように、上記移植片材料のいくつかは、上記の最適な特徴の一部を満たすが、最適な特性の全てを満足しない。
【０００６】
金属性メッシュ、例えばステンレス鋼メッシュの主な利点は、それらが、不活性で、感染に耐性があり、線維増殖を刺激することができるということである。いくつかの主要な欠点は、多くの場合、投与の最初の年後に発生する断片化し、さらに、展性の欠如である。
【０００７】
合成メッシュが容易に成形できるという利点をもち、ナイロンを除いて、体内又はその上で引張り強度を保持する。欧州特許第91122196.8は、三重層の血管プロテーゼが、中心層として非吸収性の合成メッシュを利用することを開示する。合成繊維メッシュ層は、膠原線維の層が付加される中央のフレームとして使用され、その結果、三層のプロテーゼデバイスとなる。
【０００８】
非吸収性合成メッシュに関連するいくつかの欠点および不利な点がある。主な欠点として、不活性、感染に対する感受性、および創傷治癒との干渉の欠如がある。
【０００９】
非吸収性の合成メッシュとは対照的に、吸収性の合成メッシュが展開部位で永続性でないという利点を有するが、多くの場合、適切な細胞及び組織の内方成長の前に（ホストによる溶解の結果として）、機械的強度が低下するという欠点を有する。
【００１０】
ヘルニア修復中に腹壁の交換のため及び補強のために最も広く使用されている移植片材料はMarlex（商標）、すなわちポリプロピレンである。ポリプロピレンメッシュの移植片に関連する主要な欠点は、ポリプロピレンメッシュの移植片が、瘢痕拘縮とともに、歪み、周囲の正常組織から分離する点である。
【００１１】
Gore-Tex（商標）は、すなわちポリテトラフルオロエチレンは、現在最も化学的に不活性な移植片材料であると考えられている。しかし、ポリテトラフルオロエチレンの使用に関連した主な問題は、汚染された創傷では、感染症の治療を制限する高分子排膿を可能にしないということである。
【００１２】
コラーゲンは一般的に用いられる他の移植片材料である。コラーゲンは、それは様々な動物源から豊富に供給された天然の生物学的移植片の代替物だったので、まず医療用の材料として有用性を得た。
【００１３】
元々のオリジナルのコラーゲン移植片のための設計目標は、合成ポリマー移植片の場合と同じで、移植片が、持続し、本質的に不活性物質として作用すべきことにあった。この目的に鑑み、精製及び架橋方法は、機械的強度を向上させ、コラーゲンの分解速度を減少させるために開発された。
【００１４】
元々使用された架橋剤は、グルタルアルデヒド、ホルムアルデヒド、ポリエポキシド、イソシアネート及びアシルアジドを含んでいた。グルタルアルデヒドはまた、殺菌剤として使用された。
【００１５】
しかし、コラーゲン架橋の主な欠点は、コラーゲン架橋が、抗原エピトープを結合することによって、それらを貪食にアクセスできないように、または免疫系によって認識できないようにすることにより、その材料の抗原性を減少させることである。
【００１６】
コラーゲンを架橋することは、したがって、一般に、機械的にも生物学的にも、天然の生物学的組織以上に合成材料に似たコラーゲン材料を生成する。
【００１７】
哺乳動物組織に由来する組織プロテーゼ又は移植片材料、すなわち細胞外マトリックス（ＥＣＭ）が、しばしば、組織プロテーゼ又は移植片を構築するために使用される。その移植片材は、米国特許第33,562,820号（コラーゲン線維ペーストのような結合剤ペーストを使用することによって、又は酸またはアルカリ性媒体を使用することによって、互いに貼り合わされた粘膜下組織から作製された管状、シート状および細片上の移植片）、及び同第4,902,508号（粘膜下組織を含む小腸由来の三層組織移植片、粘膜筋板、および粘膜の緻密層）に図示されている。
【００１８】
ＥＣＭベースの多数の組織プロテーゼ又は移植片は、前述の最適な特徴の多くを満たすが、腹壁欠損や血管構造のような生体組織の修復、促進を成功裏に行うことができるプロテーゼ及び／又は移植片への改良が続けられ、それによって、宿主自身の細胞を修復プロセスにおいて、最適に利用することができる。
【００１９】
したがって、変調された治癒、特に、血管新生、宿主組織の増殖、バイオリモデリング、及び組織の再生並びに部位特異的な構造及び機能的特性に関連する構造体を誘導する組織プロテーゼを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、様々な形状へと操作でき、哺乳動物の組織及び器官を修復し、増強し、又は置き換えるために使用できる非抗原性で、弾力性のある、生体再構築可能な生体適合性組織プロテーゼに関する。
【００２１】
好ましい実施形態では、組織プロテーゼは、支持構造体と細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含む。本発明にしたがって、支持構造体は、様々な従来の金属、合成及び天然材料（限定ではないが、タンタルガーゼ、ステンレスメッシュ、Dacron（商標）、Orion（商標）、Fortisan （商標）、ナイロン、ニットポリプロピレン（例えば、Marlex（商標））、ミクロ多孔性延伸ポリテトラフルオロエチレン（例えば、Gore-Tex（商標））、シリコーンゴム補強Dacron（商標）（例えば、Silastic（商標））、ポリグラクチン910（例えば、Vicryl（商標））、ポリエステル（例えば、Mersilene（商標））、ポリグリコール酸（例えば、Dexon（商標））、処理された羊の皮膚コラーゲン、架橋したウシ心膜（例えば、Peri-Guard（商標）））、及び保存した人間の硬膜（例えば、Lyodura（商標））を含む。
【００２２】
本発明のいくつかの実施形態では、支持構造体は、ＥＣＭ組成物でコーティングされる。いくつかの実施形態では、支持構造体は、ＥＣＭM組成物を含浸させられる。
【００２３】
本発明の好ましい実施形態では、ＥＣＭ組成物は、少なくとも1つのＥＣＭ材料を含む。本発明にしたがって、ＥＣＭ材料は、様々な哺乳動物組織源組織（小腸、大腸、胃、肺、肝臓、腎臓、膵臓、胎盤、心臓、膀胱、前立腺、中皮、成長しているエナメルの周囲の組織、成長している骨の周囲の組織、および任意の哺乳動物の器官からの胎児組織、それらの調製のための方法）から得ることができる。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＥＣＭ組成物は、さらに、損傷した組織の治療および/または組織再生過程を容易にするために1つ以上の追加の生物学的に活性な成分を含む。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＥＣＭ組成物は、少なくとも一つの薬物又は薬理組成物（限定はされないが、抗生物質または抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗腫瘍薬、鎮痙薬、細胞 - 細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤及び/又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡ及びＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はタンパク質合成の阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞移動を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調整する化合物、並びに血管拡張剤を含むことができる）を含む。
【００２６】
本発明のいくつかの態様において、薬物は、具体的には、抗炎症剤または組成物を含む。
【００２７】
本発明のいくつかの態様において、生物学的に活性な成分はスタチンを含む。本発明に従って、適切なスタチンは、限定されないが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、およびシンバスタチンを含む。
【００２８】
本発明のいくつかの態様において、生物学的に活性な成分は、キチン、キトサンまたはその誘導体を含む。
【００２９】
本発明のいくつかの態様において、生物学的に活性な成分は細胞を含む。
【００３０】
本発明のいくつかの態様において、生物学的に活性な成分はタンパク質を含む。
【００３１】
本発明によれば、本発明の組織プロテーゼの展開の際に、部位特異的な構造的及び機能的特性を有する組織構造の変調された治癒及び再生が達成される。
【００３２】
さらなる特徴及び利点が、添付の図面に図示されているように、本発明の好適な実施形態に係る以下のより具体的な記載から明らかになるであろう。図面の同様の参照文字は、図面を通して、概して、同じ部分又は同じ要素を指す。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は本発明による組織プロテーゼの一実施形態の斜視図である。
【図２】図２は、本発明による図1に示された組織プロテーゼの部分断面側面図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
本発明を詳細に説明する前に、本発明は、具体的に例示された装置、システム、組成物または方法に限定されることなく、当然に変化し得ることが理解されるべきである。従って、本発明の実施において、本明細書に記載されるものと同様又は均等な多数のシステム、組成物及び方法が使用され得るが、本明細書においては、好適なシステム、組成物及び方法が説明される。
【００３５】
また、本明細書で使用される用語は、本発明の具体的な実施形態を説明することのみを目的とし、限定することを意図しないことも理解されるべきである。
【００３６】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的な用語は、本発明が属する分野の当業者によって共通して理解されるものと同様の意味を有する。
【００３７】
さらに、本明細書において前に、または後に参照される全ての出版物、特許及び特許出願は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００３８】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される、単数形「一つの（ａ）」、「一つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別途明白に定めない限り、複数形の参照を含む。よって、例えば、「薬剤」への言及は、２つ以上のそのような薬剤等を含む。
【００３９】
定義
用語「組織プロテーゼ」および「移植片」は、本明細書において交換可能に使用され、損傷又は罹患した生体組織を治療又は交換するために、生体組織上又はそれを覆って配置され、又は血管構造内に配置されるように構成されたプロテーゼ、例えばステントを意味し、含む。
【００４０】
用語「損傷した組織」と「罹患した組織」は、本明細書において交換可能に使用され、心外膜、心内膜及び/又は心筋への損傷を含む疾患、疾患、傷害又は損傷に起因する異常な生体組織の任意の領域を意味し、含む。心血管組織損傷の原因の例としては、急性又は慢性ストレス（全身性高血圧、肺高血圧症、弁機能障害等）、冠動脈疾患、虚血又は梗塞、炎症性疾患及び心筋症が含まれるが、これらに限定されない。
【００４１】
用語「予防する」及び「予防すること」は本明細書で互換的に使用され、疾病、症状又は疾患の頻度又は重症度を低減させることを意味し、含む。該用語は、疾病、又は疾患の完全な除去を要しない。むしろ、この用語は、疾病発生の機会を低減させることを含む。
【００４２】
用語「治療する」および「治療」は、本明細書において互換的に使用され、疾病、症状又は疾患を治す、改善する、安定化する、又は予防する意図を有する者の医学的管理を意味し、含む。用語は、「積極的治療」、すなわち、疾病、病状、又は患者の改善を特に目的とする治療と、「原因療法」、すなわち、疾病、病状、又は疾患に関連する原因の除去を目的とする治療を含む。
【００４３】
用語「治療する」及び「治療」はさらに、「待機療法」、すなわち、疾病、病状、又は疾患を治すというよりは症状の軽減のために設計された治療、「予防的治療」、すなわち、関連する疾病、病状、又は疾患の発現を最小限にする、又は部分的若しくは完全に抑えることを目的とする治療、及び「支持療法」、すなわち、関連する疾病、病状、又は疾患の改善を目的とする他の特定の療法を補うために使用される治療を含む。
【００４４】
本明細書で使用する用語「血管新生」は、既存の血管からの新たな血管の成長を伴う生理的プロセスを意味する。
【００４５】
本明細書で使用する用語「新血管形成」は、血液又は血液成分によって灌流され得る機能的血管ネットワークの形成を意味し、含む。新血管形成は、血管新生、出芽（budding）血管新生、嵌入（intussuceptive）血管新生、萌出（sprouting）血管新生、治療的血管新生及び脈管形成を含む。
【００４６】
用語「細胞外マトリックス」、「細胞外マトリックス材料」、及び「ＥＣＭ材料」は、本明細書において互換的に使用され、動物組織の細胞間に見られ、組織内で構造的要素として機能するコラーゲンを豊富に含む物質を意味する。それは典型的に、細胞によって分泌されるタンパク質及び多糖類の混合物を含む。細胞外マトリックスは、種々の方法で単離し処理することができる。細胞外マトリックス（ＥＣＭ）材料は、小腸粘膜下層、胃粘膜下層、膀胱粘膜下層、組織粘膜、硬膜、肝臓基底膜、心膜又は他の組織から単離することができる。単離及び処理を受けて、それは、一般に、細胞外マトリックス又はＥＣＭ材料と呼ばれる。
【００４７】
用語「薬物」、「医薬品」、「作用剤」、「活性剤」、「薬剤」、及び「活性剤製剤」は、本明細書において互換的に使用され、何らかの治療的効果、多くの場合は有益な効果をもたらす、作用剤、薬剤、化合物、組成物又はそれらの混合物、例えばその製剤等を意味し、含む。これは、温血動物、ヒト及び霊長類；鳥類；ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマ及びブタ等の家庭や農場の動物；マウス、ラット及びモルモット等の実験動物；魚；爬虫類；動物園や野生の動物等の動物において局所的、又は全身的な影響又は複数の影響をもたらす任意の生理活性物質又は薬理活性物質を含む。
【００４８】
用語「薬物」、「医薬品」、「作用剤」、「活性剤」、「薬剤」、及び「活性剤製剤」は、従って、抗生物質、抗ウイルス剤、鎮痛剤、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗悪性腫瘍薬、鎮痙薬、細胞‐細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素および酵素阻害剤、抗凝固剤及び／又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡやＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はタンパク質合成阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞遊走を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調節する化合物、及び血管拡張剤を意味し含むが、これらに限定されない。
【００４９】
用語「抗炎症薬」及び「抗炎症剤」も本明細書において互換的に使用され、「薬物」及び／又は「活性剤製剤」を意味し、含み、それは治療上有効な量が対象に投与されるとき、身体上の組織の炎症、すなわち、有害物資及び傷害された組織の両方を破壊し、弱め、遮断するように働く、組織の傷害又は破壊に対する組織の防御反応を防ぎ、又は治療する。従って、抗炎症剤は、アルクロフェナク、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アルゲストンアセトニド、アルファアミラーゼ、アムシナファル、アムシナフィド、アンフェナクナトリウム、アミプリロース塩酸塩、アナキンラ、アニロラク、アニトラザフェン、アパゾン、バルサラジド二ナトリウム、ベンダザック、ベノキサプロフェン、ベンジダミン塩酸塩、ブロメライン、ブロペラモール、ブデソニド、カルプロフェン、シクロプロフェン、シンタゾン、クリプロフェン、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾン、クロピラク、プロピオン酸クロチカゾン、コルメタゾンアセテート、コルトドキソン、デカン酸塩、デフラザコート、デラテストリル、デポテストステロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾンジプロピオネート、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、二酢酸ジフロラゾン、ジフルミドンナトリウム、ジフルニサル、ジフルプレドナート、ジフタロン、ジメチルスルホキシド、ドロシノニド、エンドリソン、エンリモマブ、エノリカムナトリウム、エピリゾール、エトドラク、エトフェナマート、フェルビナク、フェナモール、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンドサール、フェンピパロン、フェンチアザク、フラザロン、フルアザコルト、フルフェナム酸、フルミゾール、フルニソリド酢酸、フルニキシン、フルニキシンメグルミン、フルオコルチンブチル、フルオロメトロン酢酸塩、フルクァゾン、フルルビプロフェン、フルレトフェン、プロピオン酸フルチカゾン、フラプロフェン、フロブフェン、ハルシノニド、ハロベタゾールプロピオン酸、酢酸ハロプレドン、イブフェナク、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロフェンピコノール、イロニダップ、インドメタシン、インドメタシンナトリウム、インドプロフェン、インドキソール、イントラゾール、イソフルプレドン酢酸、イソキセパク、イソキシカム、ケトプロフェン、塩酸ロフェミゾール、ロモキシカム、エタボン酸ロテプレドノール、メクロフェナム酸ナトリウム、メクロフェナム酸、メクロリゾンジブチレート、メフェナム酸、メサラミン、メセクラゾン、メステロロン、メタンドロステノロン、メテノロン、メテノロン酢酸エステル、スレプタン酸メチルプレドニゾロン、モミフルマート、ナブメトン、ナンドロロン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキソール、ニマゾン、オルサラジンナトリウム、オルゴテイン、オルパノキシン、オキサンドロロン、オキサプロジン、オキシフェンブタゾン、オキシメトロン、パラニリン塩酸塩、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、フェンブタゾンナトリウムグリセラート、ピルフェニドン、ピロキシカム、ケイ皮酸ピロキシカム、ピロキシカムオラミン、ピルプロフェン、プレドナザート、プリフェロン、プロドール酸、プロカゾン、プロキサゾール、プロキサゾールクエン酸塩、リメキソロン、ロマザリット、サルコレクス、サルナセジン、サルサレート、サンギナリウムクロリド、セクラゾン、セルメタシン、スタノゾロール、スドキシカム、スリンダク、スプロフェン、タルメタシン、タルニフルマート、タロサラート、テブフェロン、テニダップ、テニダップナトリウム、テノキシカム、テシカム、テシミド、テストステロン、テストステロンブレンド、テトリダミン、チオピナク、チクソコルトールピバル酸エステル、トルメチン、トルメチンナトリウム、トリクロニド、トリフルミダート、ジドメタシン、及びゾメピラックナトリウムを含むが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書で使用する用語「キトサン」は、変化量のβ（１→４）結合したＮ‐アセチル‐２アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄ‐グルコース残基及び２‐アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄグルコース残基から成る鎖状多糖のファミリー、及びそれらの全ての誘導体を意味し、含む。
【００５１】
用語「活性剤製剤」、「薬物製剤」、及び「作用剤製剤」も本明細書において互換的に使用され、１つ又は複数の薬学的に許容される担体及び／又は追加の不活性成分と任意で組み合わせられる活性剤（及びキトサン）を意味し、含む。本発明に従って、製剤は、溶液又は担体中の懸濁液の形態のいずれかであり得る。
【００５２】
本明細書で使用する用語「薬理組成物」は、「薬物」、及び／又は「細胞外マトリックス材料」、及び／又は「薬物製剤」、及び／又は任意の追加の作用剤、又は本明細書において特定される成分を含む組成物を意味し、含む。
【００５３】
本明細書で使用される用語「治療上有効」は、投与される「薬理組成物」、及び／又は「薬物」、及び／又は「活性剤製剤」の量が、一つ以上の原因、症状、又は疾病若しくは疾患の続発症を改善するために十分な量であることを意味する。そのような改善は、原因、症状、疾病又は疾患の続発症の減少又は変更のみを要し、必ずしも除去を要しない。
【００５４】
用語「患者」及び「対象」は本明細書において互換的に使用され、温血動物、ヒト及び霊長類；鳥類；ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマ及びブタ等の家庭や農場の動物；マウス、ラット及びモルモット等の実験動物；魚；爬虫類；動物園や野生の動物等を意味し、含む。
【００５５】
用語「含む（comprise）」、及び「含む（comprising）」、「含む（comprises）のような変化形は、「含むが、限定されない」ことを意味し、例えば、他の添加物、成分、整数または工程を排除することを意図しない。
【００５６】
以下の開示は、本発明の１つ以上の実施形態を実施するための最良の形態を実施可能にするようにさらに説明するため提供される。本開示はさらに、いかなる場合も本発明を限定するのではなく、本発明の原理及びその利点について理解と認識を高めるために提供される。本発明は、本出願の係属中になされる任意の補正及びそれらの請求項から生ずる全ての均等物を含む添付の特許請求の範囲によってのみ画定される。
【００５７】
当業者に容易に理解されるように、本発明は、損傷又は罹患した生体組織を治療する従来技術の方法に関連する不利点及び欠点を実質的に低減又は排除する。
【００５８】
概して、本開示は、様々な形状へと操作でき、哺乳動物の組織及び器官を修復し、増強し、又は置き換えるために使用できる非抗原性で、弾力性のある、生体再構築可能な生体適合性組織プロテーゼに関する。
【００５９】
好ましい実施形態では、組織プロテーゼは、支持構造体と細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含む。本発明にしたがって、支持構造体は、様々な従来の金属、合成及び天然材料（限定ではないが、タンタルガーゼ、ステンレスメッシュ、Dacron（商標）、Orion（商標）、Fortisan （商標）、ナイロン、ニットポリプロピレン（例えば、Marlex（商標））、ミクロ多孔性延伸ポリテトラフルオロエチレン（例えば、Gore-Tex（商標））、シリコーンゴム補強Dacron（商標）（例えば、Silastic（商標））、ポリグラクチン910（例えば、Vicryl（商標））、ポリエステル（例えば、Mersilene（商標））、ポリグリコール酸（例えば、Dexon（商標））、処理された羊の皮膚コラーゲン、架橋したウシ心膜（例えば、Peri-Guard（商標）））、及び保存した人間の硬膜（例えば、Lyodura（商標））を含む。
【００６０】
本発明のいくつかの実施形態では、支持構造体は本発明のＥＣＭM組成物でコーティングされている。いくつかの実施形態では、支持構造体は本発明のＥＣＭ組成物を含浸させている。
【００６１】
本発明に従って、本発明の組織プロテーゼを損傷又は罹患した生体組織（又はその近接）への投与したとき、調整されて治癒（部位特異的な構造的及び機能的特性を有する組織構造の再生を含む）が達成される。
【００６２】
本明細書中で使用される語句「変調された治癒」およびこの語句の変形は一般的に、局所的な組織の損傷に反応して組織の修復を自然に生じさせ、それらの炎症効果を実質的に抑える一連の過程のプロセスの変調（たとえば、変化、遅延、遅滞、縮小等）を示す。（本明細書で使用される）変調された治癒は、上皮成長、フィブリン沈着、血小板活性化および付着、阻害、増殖及び/又は分化、結合線維組織の生成および機能、血管形成、および急性および/または慢性炎症のいくつかの段階、ならびにそれらの互いの相互作用を含む多くの異なる生物学的プロセスを含む。
【００６３】
たとえば、いくつかの実施形態において、本発明のＥＣＭ組成物は、具体的には、限定的ではないが、炎症期（たとえば、血小板またはフィブリン沈着）および増殖期を含む損傷組織の治癒に関連した一つ以上の期間を変更し、遅延させ、低減させ、および／または留めておくために、決定される。
【００６４】
いくつかの実施形態では、「変調された治癒」とは、組織の治癒過程の開始時に相当な炎症期（たとえば、血小板またはフィブリン沈着）を変更するためのＥＣＭ組成物の能力を指す。本明細書において使用される語句は、「実質的な炎症期を変える」は、実質的に損傷部位での炎症反応を軽減するＥＣＭ組成物の能力を意味する。
【００６５】
そのような場合には、少量の炎症が確かに、組織損傷の反応であるが、炎症反応、たとえば、血小板および/またはフィブリン沈着のこのレベルは、本発明のＥＣＭ組成物が存在しないときに起こる炎症と比較した場合、実質的に減少する。
【００６６】
たとえば、本明細書で議論されたＥＣＭ組成物が、損傷した組織に関連した炎症反応、ならびに組織の損傷に続く線維組織の過度の形成を遅らせ、または変えることが実験的に示された。ＥＣＭ組成物がまた、組織の損傷後の血液接触表面へのフィブリン沈着および血小板の付着を低減することが実験的に示された。
【００６７】
本発明のいくつかの実施形態では、「変調された治癒」は、新血管形成、たとえば、脈管形成、血管形成、および部位特異的な構造的および機能的特性をもつ組織構成の再生を含む、宿主組織の増殖、生体再構築を誘導するための、本発明のＥＣＭ組成物の能力を指す。
【００６８】
本発明の好ましい実施形態では、ＥＣＭ組成物は、少なくとも1つの細胞外マトリックス（以下、「ＥＣＭ材料」）を含む。本発明に従って、ＥＣＭ材料は、米国特許第７，５５０，００４号、第７，２４４，４４４号、第６，３７９，７１０号、第６，３５８，２８４号、第６，２０６，９３１号、第５，７３３，３３７号、及び第４，９０２，５０８号、並びに米国特許出願第１２／７０７，４２７号（それらの全体が参照文献として本明細書に組み込まれる）等に開示されているように、種々の哺乳動物組織源からの由来のものであり、開示の調整方法によって得ることができる。哺乳動物の組織供給源としては、これらに限定されないが、小腸、大腸、胃、肺、肝臓、腎臓、膵臓、胎盤、心臓、膀胱、前立腺、成長しているエナメルの周囲の組織、成長している骨の周囲の組織、及び任意の哺乳類からの胎児組織を含む。
【００６９】
当技術分野でよく知られているように、膀胱粘膜下組織は、粘膜（移行上皮層および固有層を含む）、粘膜下層、筋層の三層、および外膜（疎性結合組織）を有する細胞外マトリックスである。この一般的な構成では、小腸粘膜下組織（ＳＩＳ）と胃の粘膜下層（ＳＳ）についても同様である。
【００７０】
肝臓や膵臓などの他の組織は、基底膜と呼ばれるＥＣＭ材料を有する。基底膜は、一般に、粘膜下組織で見られある種の引張強さを示さない。しかし、他の有用な特性は、肝臓、膵臓、胎盤および肺組織（すべてが、基底膜又は（肺のように）間質膜のいずれかを持っている）のような組織のＥＣＭ材料から日和見的に、採用することができる。例えば、膵臓の細胞外膜は、膵臓機能に不可欠なベータ膵島細胞を支持している。また、例えば、肝臓は、それ自体を再生すると知られていることから、特別な性質は、このプロセスを容易にする助ける肝臓基底膜に存在することができる。成長する歯のエナメル質および成長する骨を取り巻くＥＣＭ材料はまた、骨及びエナメル質の硬組織の増殖並びに分化を支持する点で、他のマトリックスを超える特定の利点をもつ。
【００７１】
本発明にしたがって、ＥＣＭ材料は、例えばＥＣＭ材料が、下にある固有層、粘膜下層、筋層、および漿液膜を有する基底膜（または過渡的上皮層）を含むことができように、全体的に又は部分的に使用することができる。組成物のＥＣＭ材料の成分は、これらの層のいずれかまたはすべてを含むことができ、したがって、おそらく粘膜下組織を除いて、基底膜部分のみを含むことができる。しかし、一般に、特に、粘膜下組織が体内での再生のために必要な活性成長因子及び他のタンパク質を含み、支持すると考えられているので、任意の供給源からのＥＣＭまたはマトリックス組成物は、細胞の成長及び分化、並びに組織再生をサポートする活性細胞外マトリックスの部分を含むことになる。
【００７２】
本発明の目的のために、いずれかの哺乳動物の組織由来のＥＣＭ材料は、ＥＣＭ材料と広く呼ばれるいくつかの基本的に分離できない層からなる。例えば、粘膜下層からの基底膜の分離が、それが薄く、互いに裂くことが不可能であるために、不可能ではないにしろ、非常に困難な場合、特定の層からのＥＣＭ材料は、おそらく必然的に粘膜下層を有する基底膜を含むであろう。
【００７３】
本発明に従って、本発明のＥＣＭ組成物はまた、2つまたはそれ以上の哺乳動物供給源からのＥＣＭ材料を含むことができる。したがって、例えば、組成物は、例えば、限定はしないが、小腸粘膜下組織、肝臓基底膜、胃粘膜下組織、膀胱粘膜下組織、胎盤基底膜、膵臓基底膜、大腸粘膜下組織、肺間質膜、気道粘膜下層、心臓ＥＣＭ材料、真皮マトリックス、及び、一般的に、任意の哺乳動物胎児組織からのＥＣＭ材料のような供給源からのＥＣＭ材料の組み合わせを含む。ＥＣＭ材料の供給源はまた、異なる哺乳動物又は哺乳動物の完全に異なる種を含むことができる。
【００７４】
ＥＣＭ組成物は、このように、哺乳類の三つの組織源は、哺乳類の四つの組織源、哺乳類の五つの組織源、哺乳類の六つの組織源、そしておそらく十個又はそれ以上の組織供給源からのＥＣＭ材料を含むことができる。組織源は、同じ哺乳類（例えば、同じウシ、同じブタ、同じげっ歯類、同じヒトなど）、同じ種の哺乳類（例えば、ウシ、ブタ、げっ歯類、ヒト）、又は異なる哺乳類であるが異なる種（例えば、牛１及び牛２、またはブタ１及びブタ２）、又は異なる種の哺乳類（例えば、ブタからの肝臓マトリックス、ウシからの小腸粘膜下組織、イヌかららの膀胱粘膜下組織、全てを混合した組成物）からのものである。
【００７５】
本発明に従って、ＥＣＭ材料は混合された固形粒子を含んでもよい。ＥＣＭ材料はまた、混合されたエマルジョン、混合されたジェル、混合されたペーストを形成するために、米国特許第5,275,826号、第6,579,538号及び第6,933,326号に記載されたように、微粒子に形成され、流動化されてもよい。
【００７６】
本発明に従って、ＥＣＭ組成物の液体または半固形成分（すなわち、ゲル、エマルジョン又はペースト）は、種々の濃度のものを含むことができる。好ましくは、ＥＣＭ組成物の液体または半固形成分の濃度は約0.001mg/mlから約200 mg / mlの範囲である。したがって、適切な能動範囲は、限定ではないが、約5mg/mlから約150 mg / mlの範囲、約10mg/mlから約125 mg / mlの範囲、約25mg/mlから約100 mg / mlの範囲、約20mg/mlから約75 mg / mlの範囲、約25mg/mlから約60 mg / mlの範囲、約30mg/mlから約50 mg / mlの範囲、約35mg/mlから約45 mg / mlの範囲、約40mg/mlから約42 mg / mlの範囲を含む。
【００７７】
しかし、上記濃度範囲は、単に、例示であり、網羅的または限定的であることを意図するものではない。上記されている範囲内の任意の値が、ＥＣＭ 組成物の液体又は半固形の成分の濃度に対して、合理的かつ有用な値と見なされることは理解されよう。
【００７８】
本発明に従って、二つのＥＣＭ材料のゲルエマルジョン又はペーストを形成する乾燥粒子又は再構成された微粒子は、種々の割合で一緒に混合することができる。例えば、微粒子は、50％の膵臓基底膜と、50％の小腸粘膜下組織とを混合したものを含む。次いで、混合物は、同様に、生理食塩水などの適切な緩衝液中で水和することにより流動化することができる。
【００７９】
本発明に従って、本発明のＥＣＭ組成物は、さらに、損傷を受けた組織の治療を助成し、さらに/又は組織再生プロセスを容易にするために1つまたは複数の追加の生物活性剤又は成分を含むことができる。
【００８０】
いくつかの態様では、本発明のＥＣＭ組成物は、少なくとも一つの薬物又は組成物（限定はされないが、抗生物質又は抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症剤、非ステロイド性抗炎症薬、抗腫瘍薬、鎮痙薬、細胞 - 細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤及び/又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡ及びＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はタンパク質合成の阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞移動を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調整する化合物、並びに血管拡張剤を含むことができる）を含む。
【００８１】
適切な薬物及び薬理組成物は、従って、限定ではないが、アトロピン、トロピカミド、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾン、ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノロンアセトニド、酢酸アネコルタブ、ブデソニド、シクロスポリン、ＦＫ‐５０６、ラパマイシン、ルボキシスタウリン、ミドスタウリン、フルルビプロフェン、スプロフェン、ケトプロフェン、ジクロフェナク、ケトロラク、ネパフェナク、リドカイン、ネオマイシン、ポリミキシンｂ、バシトラシン、グラミシジン、ゲンタマイシン、オキシテトラサイクリン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、トブラマイシン、アミカシン、バンコマイシン、セファゾリン、チカルシリン、クロラムフェニコール、ミコナゾール、イトラコナゾール、トリフルリジン、ビダラビン、ガンシクロビル、アシクロビル、シドフォビル、ａｒａ‐ａｍｐ、ホスカルネット、イドクスウリジン、アデホビルジピボキシル、メトトレキサート、カルボプラチン、フェニレフリン、エピネフリン、ジピベフリン、チモロール、６‐ヒドロキシドーパミン、ベタキソロール、ピロカルピン、カルバコール、フィゾスチグミン、デメカリウム、ドルゾラミド、ブリンゾラミド、ラタノプロスト、ヒアルロン酸ナトリウム、インスリン、ベルテポルフィン、ペガプタニブ、ラニビズマブ、及び他の抗体、抗腫瘍薬、ＶＥＧＦ抗体、毛様体神経栄養因子、脳由来神経栄養因子、ｂＦＧＦ、カスパーゼ‐１阻害剤、カスパーゼ‐３阻害剤、α‐アドレナリン受容体作動薬、ＮＭＤＡ拮抗薬、グリア細胞系由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、色素上皮由来因子（ＰＥＤＦ）、及びＮＴ‐３、ＮＴ‐４、ＮＧＦ、ＩＧＦ‐２を意味し、含む。
【００８２】
本発明に従って、本発明のＥＣＭ組成物に添加される薬剤の量は、もちろん、薬剤ごとに変化する。例えば、一実施形態（薬剤は、ジクロフェナク（Voltaren（商標）を含む場合）では、ＥＣＭ組成物中に含まれるジクロフェナクの量は、好適には、10μg-75mgの範囲である。
【００８３】
本発明の実施形態では、薬剤は、具体的には抗炎症薬を含む。本発明に従って、適切な抗炎症薬は、限定することなく、アルクロフェナク、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アルゲストンアセトニド、アルファアミラーゼ、アムシナファル、アムシナフィド、アンフェナクナトリウム、アミプリロース塩酸塩、アナキンラ、アニロラク、アニトラザフェン、アパゾン、バルサラジド二ナトリウム、ベンダザック、ベノキサプロフェン、ベンジダミン塩酸塩、ブロメライン、ブロペラモール、ブデソニド、カルプロフェン、シクロプロフェン、シンタゾン、クリプロフェン、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾン、クロピラク、プロピオン酸クロチカゾン、コルメタゾンアセテート、コルトドキソン、デカン酸塩、デフラザコート、デラテストリル、デポテストステロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾンジプロピオネート、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、二酢酸ジフロラゾン、ジフルミドンナトリウム、ジフルニサル、ジフルプレドナート、ジフタロン、ジメチルスルホキシド、ドロシノニド、エンドリソン、エンリモマブ、エノリカムナトリウム、エピリゾール、エトドラク、エトフェナマート、フェルビナク、フェナモール、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンドサール、フェンピパロン、フェンチアザク、フラザロン、フルアザコルト、フルフェナム酸、フルミゾール、フルニソリド酢酸、フルニキシン、フルニキシンメグルミン、フルオコルチンブチル、フルオロメトロン酢酸塩、フルクァゾン、フルルビプロフェン、フルレトフェン、プロピオン酸フルチカゾン、フラプロフェン、フロブフェン、ハルシノニド、ハロベタゾールプロピオン酸、酢酸ハロプレドン、イブフェナク、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロフェンピコノール、イロニダップ、インドメタシン、インドメタシンナトリウム、インドプロフェン、インドキソール、イントラゾール、イソフルプレドン酢酸、イソキセパク、イソキシカム、ケトプロフェン、塩酸ロフェミゾール、ロモキシカム、エタボン酸ロテプレドノール、メクロフェナム酸ナトリウム、メクロフェナム酸、メクロリゾンジブチレート、メフェナム酸、メサラミン、メセクラゾン、メステロロン、メタンドロステノロン、メテノロン、メテノロン酢酸エステル、スレプタン酸メチルプレドニゾロン、モミフルマート、ナブメトン、ナンドロロン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキソール、ニマゾン、オルサラジンナトリウム、オルゴテイン、オルパノキシン、オキサンドロロン、オキサプロジン、オキシフェンブタゾン、オキシメトロン、パラニリン塩酸塩、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、フェンブタゾンナトリウムグリセラート、ピルフェニドン、ピロキシカム、ケイ皮酸ピロキシカム、ピロキシカムオラミン、ピルプロフェン、プレドナザート、プリフェロン、プロドール酸、プロカゾン、プロキサゾール、プロキサゾールクエン酸塩、リメキソロン、ロマザリット、サルコレクス、サルナセジン、サルサレート、サンギナリウムクロリド、セクラゾン、セルメタシン、スタノゾロール、スドキシカム、スリンダク、スプロフェン、タルメタシン、タルニフルマート、タロサラート、テブフェロン、テニダップ、テニダップナトリウム、テノキシカム、テシカム、テシミド、テストステロン、テストステロンブレンド、テトリダミン、チオピナク、チクソコルトールピバル酸エステル、トルメチン、トルメチンナトリウム、トリクロニド、トリフルミダート、ジドメタシン、及びゾメピラックナトリウムを含む。
【００８４】
本発明に従って、本発明のＥＣＭ組成物に添加される抗炎症剤の量は、同様に、抗炎症性毎に代わる。例えば、本発明の一実施形態（薬物が、イブプロフェン（Advil（商標）を含む場合）では、イブプロフェンの量は、100μgから200mgの範囲であることが好ましい。
【００８５】
本発明の実施態様では、薬剤は、スタチン、すなわち、ＨＭＧ-ＣｏＡ還元酵素阻害剤を含む。本発明に従って、適切なスタチンは、限定しないが、アトルバスタチン（LIPITOR（商標））、セリバスタチン、フルバスタチン（Lescol（商標））、ロバスタチン（Mevacor（商標）、Altocor（商標）、Altoprev（商標））、メバスタチン、ピタバスタチン（Livalo（商標）、Pitava（商標））、プラバスタチン（Pravachol（商標）、Selektine（商標）、Lipostat（商標））、ロスバスタチン（Crestor（商標））、及びシンバスタチン（Zocor（商標）、Lipex（商標））から成る群から選択される）である。スタチンと他の薬剤の組み合わせ（エゼチミブ/シンバスタチン（Vytorin（商標）））を含む活性剤も望ましい。
【００８６】
出願人は、上記スタチンがいくつかの有益な生化学的作用および活性を提供する多数の有益な特性を示すことを見出した。そこから生じるいくつかの重要な特性と有益な作用が下述される。追加の特性および有益な作用は、米国同時係属出願第13/373569号（その全体が参照として本明細書に組み込まれる。）に説明されている。
【００８７】
抗炎症性/作用
スタチンは、血管壁細胞及び心血管系に対する多くの有利な効果を有する。一具体例では、スタチンは、血小板活性化および凝集、並びに接着分子及びケモカインの増加を低下させるＧタンパク質共役受容体、トロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）の減少を促進する。
【００８８】
スタチンは、さらに、ras homilog遺伝子ファミリー、メンバーＡ（RhoA）活性化をブロックすることにより、血管壁細胞及び心臓血管系に影響を与える。RhoA活性化をブロックすることは、マクロファージ成長、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ-ＰＡ）、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター1型（ＰＡＩ-１）、平滑筋細胞（ＳＭＣ）増殖、一酸化窒素（ＮＯ）の生成、エンドセリン、及びアンジオテンシン受容体などの多数のシステムに影響を与える。
【００８９】
マクロファージの成長が、RhoAの作用をブロックすることにより減少することで、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）及び組織因子（ＴＦ）が減少する。ＭＭＰが低下することで、ＥＣＭに付着したＭＭＰが創傷部位にある血栓又は損傷したＥＣＭに存在するために、血栓の存在が低下する。
【００９０】
線維素溶解特性/作用
RhoAの活性化をブロッキングすることはまた、組織プラスミノーゲンアクチベーター（tPA）及びプラスミノーゲンアクチベーターインヒビター1型（PAI-1）（線維素溶解の主要な阻害剤である）の存在に影響を与える。スタチンによって誘発されるRhoA活性をブロッキングすることで、t-PAの存在が上昇し、PAI-1が減少すると、繊維素が止血栓の重合メッシュを形成する機会を減少させるために、血栓減少効果が実現されている。
【００９１】
ＮＯの調整特性/作用
RhoAの活性化をブロッキングすることはまた、心臓血管系における一酸化窒素（ＮＯ）の存在に影響を与える。血管平滑筋の収縮および増殖、血小板の凝集、並びに内皮への白血球接着を阻害することで、ＮＯは血管の恒常性機能に寄与する。
【００９２】
RhoAの活性化のブロッキング特性/作用
スタチンの投与はまた、エンドセリン及びアンギオテンシン受容体の存在を高めることができる。エンドセリン及びアンギオテンシン受容体はまた、スタチンの投与に関連したRhoA活性のその後のブロッキングの影響を受けることができる。
【００９３】
エンドセリンには三つのイソ形、すなわち、 ET-1、ET-2、ET-3がある。ET-1は主にスタチン及びRhoA活性のブロッキングによる影響を受けるイソ形である。内皮からのET-1の分泌は血管収縮を知らせ、局所的な細胞の増殖と生存に影響する。
【００９４】
アンギオテンシン受容体は主エフェクターホルモンアンジオテンシンIIの血管収縮刺激のシグナル伝達を担うタンパク質結合受容体である。アンギオテンシン受容体II タイプI（AT-1）は、スタチン投与とRhoA活性化のブロッキングの影響を主に受けたアンギオテンシン受容体である。AT-1はとりわけ血管収縮、心臓肥大、血管平滑筋細胞増殖の仲立ちをする。
【００９５】
C反応性タンパク質低減特徴/作用
C反応性タンパク質（ＣＲＰ）もまたスタチンによって減少する。ＣＲＰは血液中に発見され、そのレベルは、炎症の異なるレベルに応じてずれる。
【００９６】
接着分子低減特性/作用
スタチンはまた、内皮細胞での接着分子の存在を減少させる。接着分子は、細胞表面上にあり、血管内皮細胞における炎症及びトロンビン形成に関与するタンパク質である。
【００９７】
Rac-1削減特性/作用
Rac-1の発現はまた、スタチンによって削減される。Rac-1はヒト細胞で見出されるタンパク質で、内皮細胞遊走、細管形成、接着性、透過性において中心的な役割を果たす。Rac-1の存在の減少は、反応性酸素種（ROS）の減少をもたらす。
【００９８】
本発明に従って、ＥＣＭ支持部材（または材料）は、所望の組織内でのスタチンのより高い濃度を達成するために10mg以上のスタチンを含むことができ、所望の組織内のスタチンのより低い濃度を達成するためには10μg以下のスタチンを含むことができる。
【００９９】
本発明に従って、本発明の薬理組成物に添加されるスタチンの量は、好適には20mg以下、より好適には約10mg以下である。
【０１００】
本発明のいくつかの実施形態では、ＥＣＭ材料は、100μg−5mgのスタチンを含む。本発明のいくつかの実施形態では、ＥＣＭ材料は、500μg−2mgのスタチンを含む。
【０１０１】
本発明のいくつかの実施形態では、ＥＣＭ支持部材（または材料）キトサンまたはその誘導体を含む。また、同時係属米国特許出願第13/573569号に詳細に記載されているように、キトサンは、いくつかの有益な生化学的作用およ活動を提供する多数の有益な特性を示す。
【０１０２】
本発明に従って、本発明の薬理学的組成物に添加されるキトサンの量は、好適には50ml以下、より好適には約20 ml以下である。
【０１０３】
本発明のいくつかの実施形態では、キトサンは、米国特許出願公開第第2008/0254104号及び第2009/0062849号（その全体が本明細書に組み込まれる）に開示されているような、ポリマーネットワークに組み込まれている。
【０１０４】
本発明のいくつかの実施形態で、生物学的活性剤は細胞を含む。本発明に従って、細胞は、限定することなく、幹細胞を含む場合があり、例えば、ヒト胚性幹細胞、胎児細胞、胎児心筋細胞、筋線維芽細胞、間葉幹細胞、自家移植拡張心筋細胞、脂肪細胞、全能性細胞、多能性細胞、血液幹細胞、筋芽細胞、成体幹細胞、骨髄細胞、間葉細胞、胚性幹細胞、実質細胞、上皮細胞、内皮細胞、中皮細胞、線維芽細胞、筋線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、外因性細胞、内因性細胞、幹細胞、造血性幹細胞、多能性幹細胞、骨髄由来前駆細胞、前駆細胞、心筋細胞、骨格細胞、未分化細胞、多能性前駆細胞、単能性前駆細胞、単球、心筋細胞、心筋芽細胞、骨格筋芽細胞、マクロファージ、毛細血管内皮細胞、異種細胞、及び同種細胞等を含む場合がある。
【０１０５】
本発明のいくつかの実施形態で、生物学的活性剤はタンパク質を含む。本発明に従って、タンパク質は、限定することなく、増殖因子、コラーゲン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）鎖、糖タンパク質、サイトカイン、細胞表面付随性タンパク質、細胞接着分子（ＣＡＭ）、血管新生増殖因子、内皮リガンド、マトリカイン、マトリックスメタロプロテアーゼ、カドヘリン、免疫グロブリン、線維性コラーゲン、非線維性コラーゲン、基底膜コラーゲン、マルチプレキシン、小型ロイシンリッチプロテオグリカン、デコリン、ビグリカン、フィブロモジュリン、ケラトカン、ルミカン、エピフィカン、ヘパラン硫酸プロテオグリカン、パールカン、アグリン、テスティカン、シンデカン、グリピカン、セルグリシン、セレクチン、レクチカン、アグリカン、ベルシカン、ニューロカン、ブレビカン、細胞質内ドメイン‐４４（ＣＤ４４）、マクロファージ刺激因子、アミロイド前駆体タンパク質、ヘパリン、コンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）、コンドロイチン硫酸Ａ、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、フィブロネクチン（Ｆｎ）、テネイシン、エラスチン、フィブリリン、ラミニン、ニドジェン／エンタクチン、フィビュリンI、フィビュリンII、インテグリン、膜貫通分子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、形質転換増殖因子アルファ（ＴＧＦ‐α）、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ‐β）、線維芽細胞増殖因子‐２（ＦＧＦ‐２）（別名、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ））、トロンボスポンジン、オステオポンチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、および血管内皮増殖因子（vascular epithelial growth factor）（ＶＥＧＦ）を含み得る。
【０１０６】
本発明のいくつかの実施形態では、ＥＣＭ組成物は、特にスタチンおよびキトサンを含む。スタチンとキトサンの組み合わせが損傷又は罹患した生体組織に投与されたとき、その組み合わせによって示される相乗的な作用が、血管新生の誘導、宿主組織の増殖、バイオリモデリング、新組織と関連した構造体の再生（部位特異的な構造的および機能的特性とともに）を著しく高めることが見出された。
【０１０７】
本発明に従って、上で参照した生物学的活性剤は、任意の形態を含むことができる。本発明のいくつかの実施形態において、生物活性成分又は複数の成分、例えば、シンバスタチン及び／又はキトサンは、マイクロカプセルを含み、それはその中に収容される薬剤が遅れて送達されるようにする。
【０１０８】
本発明のいくつかの実施形態において、上記のように、本発明の一つ以上のＥＣＭ組成物は、本発明の組織プロテーゼ又は移植片を形成するために、支持構造体上にコーティングされる。本発明のいくつかの態様において、本発明の一つ以上のＥＣＭ組成物は、本発明の組織プロテーゼを形成するために支持構造体に組み込まれる。本発明のいくつかの態様において、本発明の一つ以上のＥＣＭ組成物は、組織プロテーゼを形成するために支持構造にコーティングされ、さらに組み込まれる。
【０１０９】
図１及び図２には、ＥＣＭ組成物のコーティングをもつ支持構造体１２を有する本発明の10の組織プロテーゼが示されている。上述したように、支持構造体は、様々な従来の金属、合成及び天然材料（限定ではないが、タンタルガーゼ、ステンレスメッシュ、Dacron（商標）、Orion（商標）、Fortisan （商標）、ナイロン、ニットポリプロピレン（例えば、Marlex（商標））、ミクロ多孔性延伸ポリテトラフルオロエチレン（例えば、Gore-Tex（商標））、シリコーンゴム補強Dacron（商標）（例えば、Silastic（商標））、ポリグラクチン910（例えば、Vicryl（商標））、ポリエステル（例えば、Mersilene（商標））、ポリグリコール酸（例えば、Dexon（商標））、処理された羊の皮膚コラーゲン、架橋したウシ心膜（例えば、Peri-Guard（商標）））、及び保存した人間の硬膜（例えば、Lyodura（商標））を含む。支持構造体１２はまた、ＥＣＭベースの材料を含むことができる。
【０１１０】
本発明に従って、種々の従来の手段が、スプレーコート法、ディップ法などを含む、組織プロテーゼ１０を形成するために使用することができ
【０１１１】
いくつかの想定実施形態において、生体組織への本発明の組織プロテーゼの係合を強化するために、支持構造体１２はまた、米国特許出願第13/686131号（その全文が明示的に本明細書に組み込まれる）に開示されているような、マイクロニードル支持構造を含むことができる。
【０１１２】
当業者には容易に理解されるように、本発明は、損傷した心臓組織を治療するための従来技術の方法及びシステムと比較して多数の利点を提供する。とりわけ、以下のような利点がある。
・損傷又は罹患した生体組織に送達された場合に、部位特異的な構造的及び機能的特性を有する組織構造の再生を含む変調された治癒を誘導する組織プロテーゼの提供。
・ベースプロテーゼ支持構造を採用した場合には、部位特異的な構造的及び機能的特性を有する宿主組織の増殖、バイオリモデリング及び組織構造の再生を誘導する細胞外マトリックス（ECM）の組成物の提供。
・改善された方法及び薬理組成物、特に、損傷又は罹患した生体組織に直接ＥＣＭ組成物を投与するための装置の提供。
【０１１３】
本発明の思想及び範囲から逸脱することなく、当業者は、種々の変更及び修正を本発明に加え、種々の用法及び条件に適合させ得る。このように、これらの変更及び修正は、適切に、公正に、及び意図されて、以下の特許請求の範囲の均等物の全範囲内にある。
【図１】
2016500526.tif 000003
【図２】
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【国際調査報告】
2016500526.tif 000005