(57)【要約】  本発明は、１つまたはそれ以上のアルデヒド結合性化合物、例えばＬ−もしくはＤ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、またはその薬学的に許容しうる塩を活性化合物として含有し、場合により、スルファイトおよびキシリトールから選択される１つまたはそれ以上のさらなる活性化合物を含有する無毒性組成物に関する。本発明の組成物は、対象が胃、および間接的に小腸および大腸の癌に罹患するリスクを低下するために用いられる。本発明の組成物は、カプセルに入れられた顆粒からなる制御放出製剤に調製する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
胃に存在するアルデヒドの量を局所的に低減することにより、対象が胃、および間接的に小腸および大腸の癌に罹患するリスクを低下するための、Ｌ−またはＤ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびそれらの薬学的に許容しうる塩からなる群から選択される１つまたはそれ以上のシステイン化合物を活性化合物として含有する無毒性組成物であって、
２つまたはそれ以上の添加剤を用いて制御放出製剤に調製され、該製剤は、カプセルに入れられる、１つまたはそれ以上の活性化合物を含有する顆粒からなり、それにより少なくとも１つの添加剤がカプセルを形成し、少なくとも１つの添加剤が顆粒中の結合剤として機能し、
場合により、アルデヒドを結合することができるスルファイト、および胃に運ばれるアルデヒド生成微生物を不活性化することができるキシリトールから選択される１つまたはそれ以上のさらなる活性化合物を含む、
組成物。
【請求項２】
胃領域の癌を発症するリスクを低下するために、食事と関連して、アルコール飲料摂取と関連して、または喫煙と関連して対象に投与するためのものである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
システイン化合物を単位用量当たり50〜500mg、好ましくは50〜300mg、より好ましくは100〜250mg、最も好ましくは100〜200mg含有する、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
投与後３０分を超える時間、好ましくは０．５〜８時間、最も好ましくは２〜４時間にわたり活性化合物を放出する、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
カプセルが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）またはゼラチン、例えば硬質ゼラチンで形成され、最も好ましくはＨＰＭＣで形成される、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
結合剤が、ポリマー、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリプロピレン、Carbopol、またはメタクリレート、好ましくは溶解ｐＨが６〜７のポリマー、最も好ましくは商品名Eudragit L、Eudragit SおよびEudragit RSで知られるメタクリレート誘導体から選択される、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
結合剤であるポリマーの量が、２〜５％、好ましくは３〜４％である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
顆粒が、多孔性フィルムを形成する物質、例えばエチルセルロース（ＥＣ）およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、好ましくはそれらの混合物、より好ましくはＥＣとＨＰＭＣとの相対量が１／１ないし５／１、好適には２／１ないし５／１、最も好適には３／２ないし７／３の混合物を用いて形成されるポリマーフィルムで別にコーティングされる、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
カチオン性およびゲル形成性ポリマーから選択され、マトリックスを形成するポリマー、例えばメタクリレートポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリプロピレン、Carbopol、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、キトサンおよびアルギネート、好ましくはメタクリレート誘導体であるEudragit L、S、RL、RSまたはNEから選択される少なくとも１つの添加剤を含有する、請求項１〜８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
水酸化アルミニウムおよび炭酸水素ナトリウムから選択される、１つまたはそれ以上の、ポリマーではないゲル形成性添加剤をさらに含有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
ゲル形成性添加剤の含量が、１０〜５０重量％、好ましくは２０〜４０重量％、最も好ましくは２０〜３０重量％である、請求項９または１０に記載の組成物。
【請求項１２】
胃で溶解しないポリマー、好ましくはEudragit RSもしくはSまたはエチルセルロースから選択される少なくとも１つの添加剤を含有する、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
１つまたはそれ以上の増量剤、好ましくはリン酸水素カルシウム、微結晶セルロース（ＭＣＣ）、ラクトースまたは他の対応する水溶性もしくは水不溶性増量剤から選択される増量剤を含有する、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
増量剤の含量が、２０〜７０重量％、好ましくは４０〜６０重量％、最も好ましくは約５０重量％である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
１つまたはそれ以上のプロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）を活性化合物としてさらに含有し、胃酸過多、H. pylori感染、胃食道もしくは食道逆流性疾患または萎縮性胃炎の症状を改善するためのものである、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
胃に存在するアルデヒドの量を局所的に低減することにより、対象が胃、および間接的に小腸および大腸の癌に罹患するリスクを低下する方法であって、１つまたはそれ以上の活性化合物を含有する無毒性カプセル化組成物を対象に投与することを含んでなり、該活性化合物の少なくとも１つは、Ｌ−またはＤ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびそれらの薬学的に許容しうる塩からなる群から選択され、該組成物は、２つまたはそれ以上の添加剤を用いて制御放出製剤に調製され、該製剤は、カプセルに入れられる、１つまたはそれ以上の活性化合物を含有する顆粒からなり、それにより少なくとも１つの添加剤がカプセルを形成し、少なくとも１つの添加剤が顆粒中の結合剤として機能する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、対象の胃、小腸および／または大腸にける癌のリスクを低下するために対象の胃においてアルデヒドを結合するのに有効なカプセル化組成物に関する。本発明はまた、アルデヒドによる胃腸管における癌発生のリスクを低下する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルコールおよび喫煙は共に、上部消化管癌の危険因子であり、それらの共存は、上部消化管癌発生の危険度を１５０倍まで増大させる(Salaspuro, 2003；およびFrancheschi et al. 1990)。
【０００３】
エタノールの第一代謝物であるアセトアルデヒドは、細胞培養および動物実験において示されるように、高い毒性、変異原性および発癌性を有する(IARC, 1999)。さらに、疫学的、遺伝学的、微生物学的および生化学的研究により、アセトアルデヒドがヒト上部消化管における局所的な、および蓄積する発癌物質として作用することが強く示唆されている(Salaspuro, 2009; Seitz and Stickel, 2010)。したがって、アルコール飲料に含まれるアセトアルデヒドおよび体内でエタノールから生成するアセトアルデヒドは、国際がん研究機関（International Agency for Research on Cancer (IARC)）により最近、ヒトに対し発癌性がある（グループ１）と分類された(Secretan et al. 2009)。
【０００４】
アルコールは臓器の液体相に均等に分配される。故に、アルコールを摂取した後、そして臓器中にアルコールが存在する限り、血液、唾液、胃液中のアルコール含量と腸内のアルコール含量は等しい。この場合、消化管内の微生物がアルコールをアセトアルデヒドに酸化できる。例えば、中程度の量のエタノール(０．５g/kg)の摂取後でも、微生物起源のアセトアルデヒドの高含量(１８−１４３μM)がヒト唾液中に見出されている；言い換えれば、アセトアルデヒドは、微生物代謝の中間産物として唾液中に蓄積する(Homann et al, 1997)。
【０００５】
アセトアルデヒドは、喫煙および大気汚染への暴露の結果としても生成される（特に、口腔、咽頭および上部気道において）。慢性喫煙が微生物による唾液中のアセトアルデヒド生成を顕著に増大することがわかっている。実際、喫煙に伴う癌のリスクは、よく知られた多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）によるだけでなく、アルデヒド、特にアセトアルデヒドおよびホルムアルデヒドによる割合が大きく（４０％にも達する）、アクリルアルデヒドはそれ以外の毒性作用の８８．５％までをもたらすことが示されている。したがって、煙草のアルデヒド含量を低下することが推奨されている(Haussmann, 2012)。
【０００６】
生体におけるアセトアルデヒド生成は主として、口腔、特に唾液中で起こる。
【０００７】
ヒトが分泌する唾液の平均量は、２．５リットル／日である。唾液中に含まれるアセトアルデヒドの影響を受ける領域には、口腔、咽頭、食道および胃が含まれる。その結果、アセトアルデヒドの影響は、上部消化管領域全体に及び得る。一方、発癌性アセトアルデヒドは、とりわけ塩酸欠乏の胃において、糖または炭水化物高含量の様々な食品から口腔微生物により内因的にも生成され得る。萎縮性胃炎および塩酸欠乏症は、胃癌の危険因子としてよく知られている。
【０００８】
胃に酸がないか、または投薬により酸不含有状態にされているとき、胃において微生物代謝の結果、アセトアルデヒドが蓄積する。胃液中には、例えば緑色連鎖球菌のような、アセトアルデヒド産生能が高いことがわかっている細菌が存在する。ナイセリア属、ロチア属、およびストレプトコッカス・サリバリウス属も、酸不含有の胃内でアセトアルデヒド産生能が高いことが示されている(Vaekevaeinen et al., 2002)。
【０００９】
本発明者らの最近の研究によると、塩酸欠乏の胃において、口腔の通常の細菌叢に存在する細菌、または食品中に存在する酵母、例えば一般的なパン酵母またはビール酵母により、アルコール発酵が迅速に開始され得る。これらの微生物は、例えば炭水化物含有食品、例えば米から、大量のアセトアルデヒドおよびエタノールを生成しうる。これは特に、炭水化物含有食品が加糖されている場合に起こる。例えば、アジア諸国において、米に甘いソース類を合わせることは非常に一般的である。疫学的研究によると、米食は胃癌の高い危険度をもたらす。
【００１０】
酸性の胃においては、アルコール発酵は起こらない。一方、ヘリコバクター・ピロリ感染およびプロテインポンプ阻害剤(ＰＰＩ)のようなある種の薬剤は、胃のｐＨを上昇させ、それにより同様の問題が生じる。
【００１１】
胃に対するさらなる危険因子の一つは、アセトアルデヒドを含む食品である。本発明者らの最近の研究は、糖類(サッカロース、マルトース、ラクトース)含有食品（飲料を含む）はいずれも、かなりの量のアセトアルデヒド（５ないし２０００μＭ）およびエタノール（０．１ないし０．５‰）を含み得るか、または該食品中にそれらが形成されることを示した。乳酸飲料、ヨーグルトおよびジュースには、それ自体アセトアルデヒドおよびエタノールを含むものがある(PCT/FI2006/000104)。
【００１２】
大腸の通常の細菌叢に存在する細菌がエタノールをアセトアルデヒドに変換できるため、大腸にアセトアルデヒドが蓄積することもわかっている(Jokelainen et al, 1996)。腸においては、内生エタノール、すなわち微生物の影響により無酸素条件下で腸内で形成されるエタノールも見出され得る。アセトアルデヒドは、例えば、このエタノールが粘膜近くで酸素と接触するときに形成される。
【００１３】
アセトアルデヒドを結合する化合物を含む医薬組成物は既報であり、それらの効果は、有効物質と血中および／または細胞中のアセトアルデヒドの反応に基づく(例えば、ＵＳ５２０２３５４、ＵＳ４４９６５４８、ＵＳ４５２８２９５、ＵＳ５９２２３４６)。
【００１４】
アルコール摂取時およびその後に体内で形成されるアセトアルデヒドは、二日酔いと称される生理的症状の原因である。これまでに、アスコルビン酸、チアミン、システインまたはシステイン酸、およびフラボノイドまたはフラボノイド複合体を含む経口摂取用錠剤形態の製剤を、アルコール摂取と共に、あるいはアルコール摂取前または摂取後に摂取することにより、アセトアルデヒドが原因の症状を軽減するための努力がなされている。嚥下したとき、その有効物質が胃および小腸に達し、そしてそこから血液循環に入る(ＵＳ５２０２３５４およびＵＳ４４９６５４８)。
【００１５】
口腔で舐めるまたは噛む、Ｌ−システイン、メチオニン、タウリンまたはアルギニンのようなアミノ酸、アスコルビン酸、ビタミンＡおよびＥを含む製剤を、煙草製品を使用するとき、またはそれに暴露されるときに形成される有害なフリーラジカル化合物の影響を減少させるために使用することが示唆されている。吸収された後、アミノ酸は種々の組織で作用すると考えられている(ＵＳ５９２２３４６；ＷＯ９９／００１０６)。
【００１６】
ＷＯ０２／３６０９８は、唾液、胃または大腸からのアセトアルデヒドの局所的かつ長期的結合のための遊離スルフヒドリルおよび／またはアミノ基を含む化合物の使用を示唆する。該化合物は、口腔、胃または大腸の条件下で少なくとも３０分間にわたるその放出を可能とする物質と混合された。
【００１７】
ＷＯ２００６／０３７８４８は、喫煙中の唾液のアルデヒド含量を除去または低下するための、１つまたはそれ以上の遊離スルフヒドリルおよび／またはアミノ基を含む組成物を示唆する。
【００１８】
本発明者らの最近の研究に基づくと、アルデヒドは、特に塩酸欠乏の胃（例えばＰＰＩ投薬による）を有するヒトにおいて、胃癌の発症にかなり関与する。したがって、無害な方法で胃のアルデヒドを結合する別の方法を発見する必要性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
本発明の課題は、胃におけるアルデヒド含量を低下するために用いうる新規組成物を提供することである。本発明の他の目的は、胃においてアルデヒドを結合する新規方法を提供することである。
【００２０】
本発明の課題は、特に、例えば活性化合物の味をマスクするかまたはその即時の放出を防ぐよう、活性化合物を保護した新規組成物を提供することである。
【００２１】
これらの課題および他の課題、そしてそれによる既知の組成物および方法を凌ぐ利点が、下記に説明され特許請求の範囲に記載される本発明により達成される。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
本発明は、胃に存在するアルデヒドの量を局所的に低減し、また、場合によりそのようなアルデヒドの生成を低減することにより、対象が胃、および間接的に小腸および大腸の癌に罹患するリスクを低下するための、１つまたはそれ以上のシステイン化合物を含む無毒性組成物に関する。
【００２３】
本発明の組成物は、少なくとも胃に存在するアルデヒドを結合することができ、１つまたはそれ以上のアルデヒド結合性化合物（例えばシステインまたはその誘導体）を、少なくとも、胃に対する該活性化合物の持続放出をもたらす無毒性添加剤との組み合わせとして含む。
【００２４】
具体的には、本発明の組成物は、発明を特徴付ける請求項１の記載により特徴付けられる。
【００２５】
本発明は、相当な利点を提供する。アルデヒド結合性化合物を含む本発明の組成物は、胃、小腸および／または大腸における増大した癌リスクを有するヒトにおいて、これらの領域の癌発生リスクを低下するために使用できる。本発明の組成物および方法により、萎縮性胃炎、塩酸欠乏症および低胃酸症の患者を、特に、胃における酸生成低下をもたらす薬剤と組み合わせた投与において、処置し得る。そのような個体において、中性環境の胃において生き延びることができる口腔由来の細菌により、それがアルコールまたは糖をアセトアルデヒドに代謝するので、アセトアルデヒドが局所的に生成される。
【００２６】
さらに、本発明の組成物は、アルデヒドを、特にそれが食事と関連して摂取されるとき、またはアルコール摂取と関連して摂取されるとき、結合するのに効果的である。
【００２７】
喫煙または他の方法による煙草の摂取もしくは使用に関しても同じことが言える。すなわち、本発明の組成物は、アルデヒドを、それが喫煙または他の方法による煙草の使用と関連して摂取されるとき、結合するのに特に効果的であり有用である。
【００２８】
本発明の組成物は摂取されると、所望の胃腸管領域（胃）での局所的放出によってアルデヒドを主に局所的に結合するが、それは全身的作用も提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】図１は、Ｌ−システインを含有する本発明のカプセルを用いた溶解試験の結果を示す。このＬ−システインの放出速度は、制御されているが、胃からの排出前にアセトアルデヒドと反応する時間を与えるよう充分に速い。
【図２】図２は、アセトアルデヒドレベルに対するＬ−システイン投与（またはプラセボ投与）の効果を示す。
【図３】図３は、Ｌ−システイン含有試験製剤投与後の、ボランティアの胃液中の平均システイン濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本発明は、１つまたはそれ以上のアルデヒド結合性化合物、好ましくはシステイン化合物、例えばＬ−もしくはＤ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、または薬学的に許容しうるその塩、および場合により１つまたはそれ以上のさらなる活性化合物を含有する無毒性組成物に関する。
【００３１】
前記のさらなる活性化合物は、アルデヒドを結合することができるスルファイト、および胃に運ばれるアルデヒド生成微生物を不活性化することができるキシリトールから選択しうる。
【００３２】
本発明の組成物は、胃に存在するアルデヒドの量を局所的に低減することにより、対象が胃、および間接的に小腸および大腸の癌に罹患するリスクを低下するために用いる。したがって、本発明の組成物の活性化合物は、（アルデヒド結合性化合物に加えて）アルデヒドの生成を低減する化合物も含みうる。このような活性化合物はすべて、最終的な胃のアルデヒド含量の低下に寄与する。
【００３３】
本発明の組成物は、２つまたはそれ以上の添加剤を用いて、カプセルに入れられた、前記活性化合物の少なくとも一部を含有する顆粒からなる、制御放出製剤に調製される。したがって、添加剤の少なくとも１つがカプセルを形成し、他の少なくとも１つの添加剤が顆粒中の結合剤として機能する。
【００３４】
活性化合物は薬学的に有効な量で使用し、これは、アルデヒド結合性化合物については、食物もしくは飲料の摂取または煙草製品の煙により、対象の胃腸管にもたらされ、または胃腸管において生成される量のアルデヒドを結合または不活性化することができる量を意味する。
【００３５】
アルデヒド結合性化合物の少なくとも１つは、システイン化合物、好ましくはＬ−もしくはＤ−システインまたはその誘導体もしくは薬学的に許容しうる塩から選択される。特に好ましいシステイン誘導体は、Ｎ−アセチルシステインである。下記のものを用いてもよい：
シスチン、
システイン酸、
システイン グリシン、
トレオまたはエリトロ−β−フェニル−ＤＬ−システイン、
β−テトラメチレン−ＤＬ−システイン、
Ｄ−ペニシラミンおよびＮ末端を有するそのジペプチド、
末端システインを有するペプチドまたはタンパク質
グルタチオン、
還元グルタチオン、
Ｄ,Ｌ−ホモシステイン、
Ｄ,Ｌ−ホモシステイン酸、
Ｌ−システイニル−Ｌ−バリン、
β−β−テトラメチレン−ＤＬ−システイン、
システイニル−グリシン、
ｔｒｅ−(５)−β−フェニル−ＤＬ−システイン、
エリトロ−β−フェニル−ＤＬ−システイン、および
塩酸システイン。
【００３６】
本発明の組成物の単一の単位または製剤は通常、システイン化合物を50〜500mg、好ましくは50〜300mg、より好ましくは100〜250mg、最も好ましくは100〜200mg含有する。ただし、そのような単位１〜２個を一度に投与することができる。
【００３７】
システイン化合物の割合は1〜40重量％、好ましくは5〜40重量％、より好ましくは10〜30重量％であり、通常20〜25重量％である。
【００３８】
組成物がさらなる活性化合物としてキシリトールを含有する場合、その含量は組成物の重量に対して、好ましくは１０〜９０％、より好ましくは１０〜６０％、特に２０〜６０％、最も好ましくは４０〜６０％である。通例、この含量は約５０％である。
【００３９】
場合により用いられる、もう１つの種類のさらなる活性化合物はスルファイトであり、これは通例、５０〜４００ｐｐｍ、好ましくは５０〜３００ｐｐｍ、最も好ましくは５０〜２００ｐｐｍでありうる、より少ない量で用いられる。
【００４０】
本発明の組成物は、アルデヒド結合性化合物の胃における徐放をもたらす無毒性添加剤を少なくとも１つ含有する。ここで、徐放とは、前記アルデヒド結合性化合物の、胃内条件下における少なくとも３０分間にわたる放出を意味する。好ましくは、前記化合物は、0.5〜8時間、好ましくは2〜6時間、最も好ましくは2〜4時間にわたって放出される。カプセルは、特にカプセルの材料および直径によって、ある程度の遅延放出をもたらす。しかしながら、放出を遅延させる添加剤を別に使用することが好ましい。
【００４１】
本発明において、用語「添加剤」は、担体、賦形剤、結合剤、顆粒コーティング、ならびに香味剤、着色剤および非機能的添加剤を包含する。そのような添加剤は無毒性であり、好ましくは、少なくとも一部の添加剤は、活性化合物の放出が胃において特異的に、かつ最も好適には徐放的に、起こるよう制御することにより機能する。添加剤使用のもう一つの目的は、活性化合物を保護すること、その味をマスクすることである。
【００４２】
本発明の一態様においては、少なくとも１つの添加剤（例えばポリマー添加剤）が前記カプセルを形成し、その中に組成物の他の成分が入れられる。好ましくは、そのようなカプセルに、他の成分を顆粒形態で入れ、各顆粒には場合により、さらなるポリマーフィルムによる被覆を施しうる。
【００４３】
前記顆粒は、製薬分野でよく知られた方法および装置を用いて、組成物の成分の乾燥混合物を湿潤させ、それを造粒することによって製造しうる。
【００４４】
本発明の組成物がカプセルの形態である場合、その直径を少なくとも７ｍｍ、好ましくは８〜１５ｍｍ、より好ましくは１１〜１５ｍｍとすることがさらに有利である。これは、該単位が、アルデヒド結合性化合物の徐放をもたらすのに充分な時間、胃において溶解しないでいるのを助ける。
【００４５】
好ましくは、カプセルの大きさおよび添加剤は、胃内条件下に１時間で４０〜８０ｍｇの量のシステイン化合物の放出を達成するように選択する。
【００４６】
例えば、２分子のＬ−システインは、特に従来の速放性剤形において単独で用いられる場合には、容易に反応し合って、胃に存在するアルデヒドを効果的に結合および不活性化することができないシスチンを形成する（二量化による）。しかしながら、本発明は、長期作用を提供し前記二量化を防止する剤形（特に、対象に嚥下させるカプセル）を提供する。さらに、食物および／またはアルコールが胃に存在する間中、アセトアルデヒドは生成する。したがって、前記製剤は、アセトアルデヒド暴露が予測される時間にわたって維持されるＬ−システイン源を提供する。
【００４７】
好ましくは、使用する添加剤は、活性化合物が胃において局所的に、３０分を超える時間、好ましくは０．５〜８時間、より好ましくは２〜４時間にわたり放出されるよう、放出を制御しうるものから選択される。
【００４８】
本発明の好ましい態様においては、組成物は、食事に伴って、すなわち食事の直前、食事中もしくは食事の直後に、またはアルコール摂取に伴って、すなわちアルコール摂取の直前、アルコール摂取中もしくはアルコール摂取後に投与される。
【００４９】
本発明の他の好ましい一態様においては、組成物は、喫煙または他の煙草使用に伴って、すなわち喫煙（または他の煙草使用）の直前、その最中またはその直後に投与される。
【００５０】
他の有利な態様においては、組成物の１用量（例えば１単位）を食事、飲酒または喫煙の直前に、そしてさらなる１用量を食事、飲酒または喫煙の直後に投与する。
【００５１】
用語「直前」および「直後」とは、食事、アルコール摂取または喫煙（または他の方法での煙草使用）の前または後の５分間までの時間枠、好ましくは２分間までの時間枠、より好ましくは１分間までの時間枠、最も好ましくは０．５分間までの時間枠を意味する。
【００５２】
しかしながら、本発明の組成物は、連続的に、例えば１０分置きに使用することもできる。本発明の好ましい態様においては、５〜１５分間隔、好ましくは５〜１０分間隔で、繰り返し投与を行う（アルコール摂取または喫煙が該間隔よりも長い時間続く場合）。本発明の組成物を４〜１０時間間隔、好ましくは６〜８時間間隔で投与することもできる。
【００５３】
「喫煙」とは、煙草製品の喫煙、嗅ぎ煙草の使用、噛み煙草の使用、または煙草製品もしくはその一部が口に入るかもしくは口腔に近づく他の煙草製品使用を意味する。したがって煙草製品は、紙巻き煙草、葉巻、嗅ぎ煙草、噛み煙草またはパイプ煙草でありうる。
【００５４】
「アルデヒドの結合」とは、好ましくは、アルデヒドと、システイン（または同様の化合物）の遊離スルフヒドリル基もしくはアミノ基またはその両方との化学反応を指し、ここで、アルデヒドは「アルデヒド結合性化合物」と結合してより大きな分子を形成する。システインとの反応において、例えばアセトアルデヒドは、主としてシステインのスルフヒドリル基およびアミノ基に結合して、2-メチル-L-チアゾリジン-4-カルボン酸(および水)を形成する。
【００５５】
本発明によると、システインとの化学結合によりアルデヒドから生成する化合物は、対象に安全である。
【００５６】
しかしながら、アルデヒド（遊離形態のもの）は、対象にとり無害ではない。例えばヒト口腔におけるアセトアルデヒドの有害／発癌性量は、概ね２０〜８００μmol／L唾液であり、細胞レベルで約２０〜５０μＭの低含量でも発癌性ＤＮＡ付加体をもたらす。一般に、４０〜１００μＭを超えるレベルは変異原性であると考えられる。さらに、ホルムアルデヒドはある種の発癌作用に関与し、アクロレインは他の毒性作用を引き起こす。胃に運ばれる唾液も胃内アルデヒドの主因であるから、同様の数値が本発明にも当てはまる。
【００５７】
本発明の組成物を投与することにより、胃内のアルデヒド含量を、該組成物を用いない場合よりも実質的に低いレベルまで低下することができる。これは、本発明の組成物を使用しない対応する状況と比較して、アルデヒド含量を、少なくとも２０％低いレベル、好ましくは４０％以上低いレベル、より好ましくは６０％以上低いレベルに保つことができることを意味する。
【００５８】
ヒトの胃、また他の胃腸管部分における、そのような有害または発癌性量のアルデヒドは、アルコール飲料、特に強いアルコール飲料、もしくはアルコール含有食品の摂取によって、または喫煙の結果として、またはアルデヒド含有製品（例えば食品）の摂取によって生じうる。
【００５９】
アルデヒドは、口腔微生物によって、生じたエタノールから生成しうる。そのような微生物および生成したアルデヒドのいずれも、特に対象が嚥下するとき、唾液と共に絶えず胃に運ばれる。「口腔微生物」は、口腔内の口腔細菌および微生物、例えば、連鎖球菌、乳酸桿菌、コリネバクテリア、口腔スピロヘータ、嫌気性球菌、特にPorphyromonas gingivalis、ならびにC. glabrata、C. parapsilosis、C. tropicalis、C. dubliniensis、C. guilliermondii、C. albicansおよびC. krusei（咽頭における）を含むさまざまなカンジダ種を包含することが意図される。しかしながら、アルデヒドは、アルコール性飲料中もしくは食品中にも、製造過程の生成物として、すなわち発酵生成物として含まれ得るか、または飲料もしくは食品にそれ自体添加され得る。
【００６０】
「アルコール性飲料」とは、エタノールを含有する飲料であり、そのエタノール含量は０．７〜８４容量％の範囲である。
【００６１】
「アルコール性食品」とは、エタノールを少なくとも０．７重量％含有する食品を指す。そのような食品は、例えば、発酵ジュース、ヨーグルト、漬け物類もしくは他の保存食品、または少量のアルコールで防腐された食品、リキュール入りのペストリー、ゼリーおよびムース類、または対応するアルコール含有製品でありうる。
【００６２】
「アルデヒド含有食品」とは、摂取される前において（すなわち、アルデヒドが食品を摂取した対象の口腔において生成するのとは対照的に）アルデヒドを含有する食品を指す。とりわけ、アセトアルデヒドが、発酵に関連して生成するエタノールから前記食品において生成し得、例えばビール、リンゴ酒、ワイン、自家製ビールおよび他のアルコール性飲料ならびに多くのジュースにおいて生成しうる。ある種の食品、例えばある種の乳製品においては、アセトアルデヒドが防腐目的で使用され、また香味付けのために添加され、あるいはアセトアルデヒドが微生物活動の結果として生成する。例えば、糖分を含むジュースまたは食品は一般に、アセトアルデヒド産生微生物にとって好適な基質を提供する。ヨーグルトのような発酵乳製品においても高濃度のアセトアルデヒドが生成する。その場合、主に、ヨーグルトを作るために用いられる微生物がアセトアルデヒドを産生する。アルコール性飲料については、シェリーおよびカルヴァドスも特に多量のアセトアルデヒドを含有する。
【００６３】
低アルコール、すなわちアルコールを少量しか含有しない飲料または食品を摂取する場合も（０．７％未満の濃度でも）、そのような量も長期間続けば発癌性であるから、本発明組成物の使用が有益でありうる。
【００６４】
本発明の組成物中の添加剤は、物質の組み合わせを包含し、特に、担体、賦形剤、結合剤、顆粒コーティング、香味剤および他の種類の添加剤として機能しうる。
【００６５】
本発明の好ましい一態様においては、組成物は、胃において溶解しないか、または僅かしか溶解しない少なくとも１つの添加剤を含む。これを達成する１つの方法は、顆粒を、実質的に水不溶性のフィルム、またはカプセルで被覆することである。
【００６６】
本発明の他の好ましい一態様においては、組成物は、胃内容中の組成物成分の浮遊を長時間維持するのに役立つゲルを胃内条件下に形成する添加剤から選択される少なくとも１つの添加剤を含む。そのようなゲル形成性添加剤は、造粒する乾燥混合物に添加するか、または予め別に形成した顆粒と共にカプセルに入れることができる。
【００６７】
胃で溶解しない適当な添加剤は、ポリマー、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリプロピレン、Carbopol、またはメタクリレートポリマー、例えばEudragit RL、RS、NEもしくはS、またはエチルセルロースを包含し、通常、その不溶性および膨潤性に基づく機能を有する。ゲルを提供するために用いる添加剤は、さまざまなキトサン、アルギネート、例えばアルギン酸ナトリウム、水酸化アルミニウム、炭酸水素ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および炭酸水素ナトリウム（WO 02/36098に記載される）である。
【００６８】
ゲルを形成するか、または水性の胃内容物よりも低い密度を本質的に有し、それにより浮遊を可能にするポリマー、例えばアルギン酸を添加剤として使用することにより、胃内容中に浮遊する製剤を製造することが特に好ましい。
【００６９】
胃において浮遊するゲルは、アルギン酸ナトリウム、水酸化アルミニウム、炭酸水素ナトリウムおよび水から調製することもでき、そこに、アルデヒド結合性化合物またはそれから形成した顆粒を加えることができる。
【００７０】
対応する製剤は、アルデヒド結合性化合物またはそれから形成した顆粒をキトサンの水性分散液に加えることによっても得られる。
【００７１】
本発明の組成物中の前記ポリマーまたは他のゲル形成剤の含量は、好ましくは１０〜５０重量％、より好ましくは２０〜４０重量％、最も好ましくは２０〜３０重量％である。
【００７２】
本発明の組成物の添加剤はまた、好ましくはリン酸水素カルシウム、微結晶セルロース（ＭＣＣ）、ラクトースまたは他の対応する水溶性もしくは水不溶性増量剤から選択される、１つまたはそれ以上の増量剤または賦形剤を含みうる。特に、増量剤は、非膨潤性物質から選択される。それを好ましくは造粒前に活性化合物と混合し、それにより増量剤を顆粒内に含ませる。
【００７３】
本発明の組成物に場合により使用されるそのような増量剤の含量は、好ましくは２０〜７０重量％、より好ましくは４０〜６０重量％、最も好ましくは約５０重量％である。
【００７４】
さらに、本発明の組成物の添加剤は、１つまたはそれ以上の香味剤、例えば香料を含み得、それを特にカプセル形成材料中に含ませる。香味剤は通常、炭水化物（または糖）、例えばグルコース、ソルビトール、ユーカリプトール、チモール、スクロース、サッカリンナトリウム、サチリル酸メチル、メントールおよびキシリトールを包含し、好ましくはグルコース、ソルビトール、スクロースおよびキシリトールから選択される。しかしながら、前記のとおり、キシリトールは活性化合物としても存在し得、したがってその少なくとも大部分はカプセルの内容物に含まれうる。
【００７５】
前記のとおり、本発明の組成物は、カプセルを形成し、他の組成物成分をその中に含ませることによって調製する。カプセルは、好ましくはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）またはゼラチン、例えば硬質ゼラチンで形成し、最も好ましくはＨＰＭＣで形成する。他の成分の少なくとも大部分（例えば５０重量％を超える部分）を、顆粒形態でカプセルに入れる。
【００７６】
そのために、好ましい一態様においては、他の成分を混合し、その乾燥混合物を、腸溶性ポリマーを結合剤として用いて造粒する。腸溶性ポリマーは、好ましくは溶解ｐＨが６〜７のポリマー、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリプロピレン、Carbopol、またはメタクリレートから選択され、最も好ましくは商品名Eudragit L、Eudragit SおよびEudragit RSで知られるメタクリレート誘導体から選択される。製剤中の腸溶性ポリマーの量は、好ましくは２〜５％、より好ましくは３〜４％である。
【００７７】
顆粒を場合により、さらなるポリマーフィルムでコーティングしうる。そのようなポリマーフィルムは、多孔性フィルムを形成する物質、例えばエチルセルロース（ＥＣ）およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を用いて形成しうる。それらの混合物を使用することが好ましく、ＥＣとＨＰＭＣとの相対量が１／１ないし５／１、好適には２／１ないし５／１、最も好適には３／２ないし７／３の混合物を使用することがより好ましい。
【００７８】
そのような混合物は、ＨＰＭＣが水溶性ポリマーでありＥＣが水不溶性ポリマーであるので、成分の異なる特性の故に有利な溶解特性を有する。胃内条件下に水溶性ポリマーが溶解して、水不溶性ポリマーに孔が形成される。そのような場合、水溶性の高いシステイン化合物の放出は、フィルムに形成された孔からのその拡散に基づく。そのようなフィルム形成物質は、システイン化合物の味をマスクするのにも有効である。
【００７９】
顆粒を含むカプセルの形態の組成物は、例えば、
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を顆粒中に含み、該顆粒はＨＰＭＣカプセルに入れられる。
【００８０】
本発明の組成物に、前記活性化合物および添加剤に加え、クロム、ビタミンＢ１２、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ナイアシン、ビオチン、チアミン、ビタミンＢ２、ビタミンＢ５、ビタミンＢ６および葉酸ならびに微量元素、例えばクロム、マンガン、セレン、亜鉛および鉄からなる群から選択される少なくとも１つの物質を添加することが有利である。
【００８１】
本発明の好ましい一態様においては、本発明の組成物は、プロトンポンプ阻害剤のような胃塩酸欠乏を引き起こす薬剤の投与に関連する塩酸欠乏の胃を有するヒトに投与される。
【００８２】
胃液の一成分は、胃体部の胃壁または酸分泌細胞の分泌産物である塩酸(HCl)である。ＨＣｌを分泌する胃の能力は、胃壁細胞数にほぼ比例することが知られている(Yao et al. 2003, Samuelson et al. 2003)。酸分泌は、胃壁細胞の小管膜に存在するH＋/K＋ ATPaseまたはプロトンポンプの機能に依存する。
【００８３】
ATPaseを非競合的に結合し不活性化し、それにより酸分泌を強力に阻害する薬剤がいくつか開発されている。そのような薬剤はプロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）を包含し、例えば
・デクスランソプラゾール
・エソメプラゾール
・ランソプラゾール
・オメプラゾール
・パントプラゾール
・ラベプラゾール
・テナトプラゾール
である。
【００８４】
例えば、オメプラゾール(例えばPrilosec)は、ATPase上の２個のシステインに共有結合して、その不可逆的不活性化をもたらす、酸活性化プロドラッグである。ランソプラゾール(Prevacid)、エソメプラゾール(Nexium)、ラベプラゾール(Aciphex)およびパントプラゾール(Protonix)を含む他のプロトンポンプ阻害剤(ＰＰＩ)も、同様の作用機序を有する(Hellstrom et al. 2004, Sachs et al 1994, Shamburek et al. 1992, Welag et al. 2003)。
【００８５】
本発明の特に好ましい態様においては、組成物は、（アルデヒド結合性化合物に加えて）１つまたはそれ以上の前記ＰＰＩを含有し、それにより、胃酸過多、H. pylori感染、胃食道もしくは食道逆流性疾患または萎縮性胃炎の症状の改善を意図した組み合わせ生成物を得る。
【００８６】
以下の実施例において、本発明の好ましい態様おいて得られる利点を説明するが、実施例は本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００８７】
本発明のカプセルの製造
カプセル剤を製造するために、L-システイン（Gonmisol S.A., Spain）500g、マトリックス構造を形成するEudragit RS-PO（Evonik Roehm GmbH, Germany）500g、およびリン酸水素カルシウム（Emcompress（登録商標） Anhydrous; Mendell a Penwest Company, Lakeville, MN）1kgを、Turbula Powder Blender（Glen Mills Inc., Clifton, NJ）で10分間混合した。
【００８８】
混合物をエタノールを用いて湿式造粒した。得られた湿潤顆粒を2mm篩で篩過した後、換気フード内で室温で24時間乾燥した。乾燥した顆粒を1.68mmおよび1.18mmの篩で篩過し、得られた中間フラクションをカプセル封入用に回収した。
【００８９】
同様に、L-システインを同量のCaHPO4で置き替えたプラセボ製剤を全く同じ手順で調製した。
【００９０】
得られたマトリックス顆粒を、１カプセル当たり所望量のシステインが得られるよう、ＨＰＭＣカプセルに量り入れた。顆粒のＬ−システイン濃度は、キャピラリー法によって測定した（顆粒４００ｍｇが９８ｍｇのＬ−システインを含有した）。適当な用量の選択を容易にするために、１カプセル当たりのＬ−システイン量を５０ｍｇとした（Ｌ−システインの用量を１００ｍｇまたは２００ｍｇとする場合、２または４個のカプセルを実質的に同時に対象に投与した）。
【００９１】
二酸化チタンをも含有する同様のカプセルを調製した。この賦形剤がカプセルの所望の機能に影響しないことがわかった。
【００９２】
上記のように調製されたカプセルは、胃におけるアセトアルデヒド量の増加が、例えばアルコール飲料摂取に関連して起こり易い場合に、摂取され、局所的にアセトアルデヒドが原因となる癌のリスクを低下する。投与は、血中にアルコールが存在する限り４〜６時間毎に行う。
【実施例２】
【００９３】
カプセルの溶解試験
実施例１のカプセル剤に対し、ＵＳＰ  Ｉ法（ＵＳＰ２４）（米国薬局方２００１）にしたがって溶解試験を行った。標準曲線を０．０１〜０．６ｍｇ／ｍｌの間で作成した（ｙ＝２．１９６＋０．００１６、ｒ２＝０．９９９９）。溶媒として、ｐＨ１．２のＨＣｌ緩衝液５００ｍｌを用いた。バスケットの回転速度を１００ｒｐｍ、溶媒温度を３７℃（±０．５）とした。最初の３０分間は５分間隔で、その後さらに２時間の間、１０分間隔で、サンプルを採取した。流通型セル（１０ｍｍ）中で波長２１３ｎｍでＬ−システインを検出した。結果を溶解ソフトウェアを用いて計算した。システムは浴およびポンプを備え(Sotax AT7 UV Dissolution System, Stax, Allschwil, Switzerland)、分光光度計(PerkinElmer, Lambda 25, PerkinElmer, Inc., Waltham, MA)を備え、試験および結果計算に用いたソフトウェアはWinSotax(Sotax)であった。
【００９４】
本溶解試験により、前記製剤がＬ−システインを、制御された速度で、かつ、胃からの排出前にアセトアルデヒドと反応する時間を与えるよう充分速く、放出したことが示された。この結果を図１に示す。造粒しない場合、Ｌ−システインは急速に溶解した（５分後に１００％）。
【実施例３】
【００９５】
アルデヒドの結合
試験方法：
塩酸欠乏性萎縮性胃炎を有するボランティア７人（男性２人、女性５人）が試験に参加した。平均年齢±ＳＤは５７±７歳、平均体重は７５±２２ｋｇであった。ボランティアは全員、非喫煙者であり、かつ、平均エタノール摂取量が１週間当たり５０ｇまたはそれ以下の、一般的な、付き合いで飲酒する程度の人であった。
【００９６】
無作為化二重盲検プラセボ対照試験デザインを用い、対照は各参加者当人とした。２つの試験日の間を少なくとも３日間空けた。ボランティアに、試験前２４時間のアルコール摂取および１２時間の食物摂取を控えるよう指示した。
【００９７】
各試験日の始めに、経鼻胃管(Duodenal tube Levin, CH10, Unomedical, Denmark)を対象に５５ｃｍの深さまで挿入した。管は、エタノールを含有しないXylocainゲル（AstraZeneca, Soedertaelje, Sweden）で潤滑させた。管の配置中、管の嚥下を促進するために１００ｍｌの水をボランティアに与えた。
【００９８】
実施例１にしたがって調製した、システイン（各カプセル中５０ｍｇ）またはプラセボのいずれかを含むカプセル４個を、２００ｍｌの水と共に、二重盲検で対象に経口投与した。その直後に、水で１５体積％に希釈したエタノール（０．３ｇ／ｋｇ体重）を、ボランティアの胃に経鼻胃管から注入した。
【００９９】
エタノール注入から６０分後まで、または胃が空になる（これは吸引不能によって示される）まで、胃液サンプル（５ｍｌ）を前記管から５分間隔で吸引した。サンプルのｐＨならびにアセトアルデヒド、エタノールおよびシステイン濃度を分析した。
【０１００】
分析：
アセトアルデヒド濃度を測定するために、胃液４５０μｌを直ちに、６モル／ｌの過塩素酸５０μｌを含有するヘッドスペースバイアルに入れた。過塩素酸は、システイン−アセトアルデヒド結合を加水分解しない。
【０１０１】
エタノールの分析のためには、胃液を精製水で１０倍希釈し、希釈した胃液５００μｌをヘッドスペースバイアルに入れた。
【０１０２】
並列の２つのサンプルを測定に使用し、平均値を計算した。文献に記載されるヘッドスペース・ガスクロマトグラフィーによって（Vaekevaeinen et al., 2002）、アセトアルデヒドおよびエタノールのレベルを分析した。
【０１０３】
胃液サンプルのＬ−システイン濃度を、ＨＰＬＣ法を用いて測定した。濃度０．０６２５〜２．０ｍｇ／ｍｌの間の標準曲線を作成した（y = 851.06x + 8.52, r2 = 0.9704）。並列の２つのサンプルを調製した。胃液６０μｌを試験管に量り入れ、ｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩液３０μｌ、およびジメチルホルムアミド中の２０体積％のトリ−ｎ−ブチルホスフィン３０μｌを加えた。サンプルを＋４℃で３０分間インキュベートした後、１ｍＭ  Ｎａ２ＥＤＴＡを含有する１０％トリクロロ酢酸９０μｌを加え、サンプルを２分間ボルテックスし、次いで４５００ｒｐｍで１０分間遠心した。イソクラチック移動相としてｐＨ７．０のリン酸緩衝液およびメタノール（９５：５）を用いた。流速は１ｍｌ／分、保持時間は６分であった。蛍光検出器を用いてＬ−システイン濃度を測定した（励起：３８５ｎｍ；蛍光５１５ｎｍ）。
【０１０４】
結果：
Ｌ−システイン投与（またはプラセボ投与）のアルデヒドレベルに対する効果を図２に示す。いずれの測定においても、胃液中の平均アセトアルデヒド濃度は、プラセボ投与の場合、システイン投与よりも２．６倍高かった。システイン処置とプラセボ処置との間にエタノール濃度の有意な差は無かった。胃液中の平均エタノール濃度は、最初のサンプルにおいては５．０体積％で、４０分後のサンプルにおいて０．９体積％に低下した。アルデヒド濃度とエタノール濃度との間に正の相関関係が認められた。
【０１０５】
Ｌ−システイン含有試験製剤の投与後、すべての対象の胃液中にＬ−システインが検出された。平均システイン濃度を図３に示す。プラセボ製剤を投与した場合は、Ｌ−システインは検出されなかった。システイン濃度とアルデヒド濃度との間には有意な相関関係は認められなかった。
【０１０６】
文献
2016510799.tif 000003
【０１０７】
2016510799.tif 000004
【図１】
2016510799.tif 000005
【図２】
2016510799.tif 000006
【図３】
2016510799.tif 000007
【国際調査報告】
2016510799.tif 000008
2016510799.tif 000009
2016510799.tif 000010