(57)【要約】  本開示は、概して、抗ウイルス化合物に関し、より具体的には、C型肝炎ウイルス(HCV)によりコードされるNS5A タンパク質の機能を阻害できる化合物の組み合わせ、かかる組み合せを含む組成物およびNS5A タンパク質の機能を阻害するための方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
NS5A標的化化合物およびNS5A相乗化剤を含む組み合わせであって、投与されると該NS5A標的化化合物のみに対して抵抗性を与える変異を含む変異体に対する相乗的抗HCV活性をもたらすものであり、該NS5A相乗化剤は、式(I):
【化１】
2016527232.tif 000097
[式中、AおよびBは、
【化２】
2016527232.tif 000098
から独立して選択され;
R1は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され;
R2は水素であるか；または
R1およびR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により1または2つのメチル基で置換されていてもよい；
R1'は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され;
R2'は水素であるか；または
R1'およびR2'は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により2つのメチル基で置換されていてもよい；
R3およびR3'は、アルコキシ、ヒドロキシおよび-NRaRbから独立して選択され；
RaおよびRbは、水素、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、ポリシクロアルキル、(ポリシクロアルキル)アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ヒドロキシアルキル、-NRcRd、(NRcRd)アルキル、(NRcRd)カルボニルアルキル、フェニルアルキルおよびピラニルから独立して選択され、ここで該シクロアルキル、該(シクロアルキル)アルキルのシクロアルキル部分および該フェニルアルキルのフェニル部分は、所望により、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノカルボニル、シアノ、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される1または2つの基で置換されていてもよく;該(NRcRd)アルキルのアルキル部分は、ヒドロキシ基で置換されていてもよい；または
RaおよびRbは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、モルホリン、ピペリジンおよびピペラジンから選択される環を形成しており、各環は、所望により、アルコキシカルボニル、アルキル、ハロ、オキソ、および所望によりハロで置換されていてもよいフェニルから選択される1または2つの基で置換されていてもよい；ならびに
RcおよびRdのうちの1つは、水素およびアルキルから選択され、もう一方は水素、アルコキシカルボニルおよびアルキルから選択されるか；または
RcおよびRdは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、オキサゾリジノン環を形成する]
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、組み合わせ。
【請求項２】
式(I)の化合物が、
【化３】
2016527232.tif 000099
【化４】
2016527232.tif 000100
【化５】
2016527232.tif 000101
【化６】
2016527232.tif 000102
【化７】
2016527232.tif 000103
【化８】
2016527232.tif 000104
【化９】
2016527232.tif 000105
【化１０】
2016527232.tif 000106
【化１１】
2016527232.tif 000107
あるいはその医薬的に許容される塩から選択される、請求項1に記載の組合せ。
【請求項３】
請求項1に記載の組み合わせ、および１以上の医薬的に許容される担体を含む、組成物。
【請求項４】
抗HCV活性を有する1または2つの別の化合物をさらに含む、請求項3に記載の組成物。
【請求項５】
別の化合物のうちの少なくとも1つが、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項4に記載の組成物。
【請求項６】
インターフェロンが、インターフェロンα2B、ペグ化インターフェロンα、ペグ化インターフェロンλ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2Aまたはリンパ芽球様インターフェロンτから選択される、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
少なくとも１つの別の化合物が、HCV感染症の治療のために、HCVプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質またはIMPDHから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、請求項4に記載の組成物。
【請求項８】
治療上有効な量の請求項1に記載の組み合わせまたはそれらの医薬的に許容される塩を患者に投与することを特徴とする、患者におけるHCV感染症を治療する方法。
【請求項９】
抗HCV活性を有する1または2つの別の化合物を、該組み合わせまたはそれらの医薬的に許容される塩より前、後または同時に投与することをさらに特徴とする、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
別の化合物のうちの少なくとも1つが、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項9に記載の方法。
【請求項１１】
インターフェロンが、インターフェロンα 2B、ペグ化インターフェロンα、ペグ化インターフェロンλ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα 2Aまたはリンパ芽球様インターフェロンτから選択される、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも１つの別の化合物が、HCV感染症の治療のために、HCVプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質またはIMPDHから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、請求項9に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
この出願は、2013年7月17日に提出された米国仮出願番号第61/847,440号の恩恵を享受するものであり、その全ては出典明示により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、概して抗ウイルス性化合物に関するものであり、さらに具体的には、C型肝炎ウイルス(HCV)によりコードされるNS5Aタンパク質の機能を阻害し得る化合物の組み合わせ、該組み合わせを含む組成物、およびNS5Aタンパク質の機能を阻害する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
HCVは主要なヒト病原体であり、世界中で推定1億7千万人が感染しており-これはヒト免疫不全ウイルス1型による感染数のおよそ5倍である。これらHCV感染者のかなりの割合が、肝硬変および肝細胞癌を含む重篤な進行性肝疾患を発症する。
【０００４】
過去10年にわたって、慢性HCVを治療するための標準治療はペグ化インターフェロンおよびリバビリンの組み合わせを用いてきた。該治療は、6つの主要なHCV遺伝子型に対する持続性ウイルス陰性化(sustained viral response)(SVR)の達成において最高の成功率ではなく(特に、遺伝子型1に対して成功率が低い)、また多くの副作用も引き起こす。HCV NS3/4Aプロテアーゼ(PIs)を標的とする最近認可された薬物(ビクトレリス(登録商標)およびインシベック(登録商標))をペグ化インターフェロンおよびリバビリンとともに投与すると、SVRを経験する患者の割合およびSVRを達成するのに必要な治療期間において、大きな改善がもたらされる。しかしながら、プロテアーゼ阻害剤耐性に対抗し、全てのHCV遺伝子型にわたって効力を改善し、かつ抗ウイルス療法をインターフェロンフリー療法という最終目標に向かって前進させるためにさらなる療法を開発することが、明確かつ早急に必要とされている。
【０００５】
HCVは約9500ヌクレオチド長のプラス鎖RNAウイルスであり、約3000のアミノ酸である単一の大きなポリタンパク質をコードする単一のオープンリーディングフレーム(ORF)を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼにより複数の部位で切断され、構造タンパク質および非構造(NS)タンパク質を生じる。HCVの場合、成熟非構造タンパク質(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、およびNS5B)の生成は、２つのウイルスプロテアーゼによりもたらされる。１つめのものは、メタロプロテアーゼであって、NS2-NS3接合部を切断すると考えられており；２つめは、NS3のN-末端領域内に含まれるセリンプロテアーゼ(本明細書においてNS3プロテアーゼとも称される)であり、NS3の下流、すなわちNS3-NS4A切断部位においてはシスで、残りのNS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B部位についてはトランスでの両方における以降の切断の全てを仲介する。該NS4Aタンパク質は、NS3プロテアーゼの補助因子である。NS3-NS4A複合体の形成は、適切なプロテアーゼ活性のために必要である。該NS3タンパク質は、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびRNAヘリカーゼ活性も示す。NS5Aは、ウイルスRNA複製およびビリオンアセンブリに必要とされる多機能タンパク質である。NS5B(本明細書においてHCVポリメラーゼとも称される)は、RNAウイルス合成に関与するRNA-依存性のRNAポリメラーゼである。
【０００６】
HCVゲノム全体にわたって、ヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列内に、プルーフリーディング能が欠如しているコード化RNA依存性RNAポリメラーゼの高いエラー率に起因して、かなりの多様性が見いだされる。HCVの遺伝的多様性の臨床的意義は、単独療法による治療中に起こる変異傾向であり、そのため全遺伝子型(pan-genotype)対象であって独立したメカニズムを介して作用するHCV阻害剤を用いる組み合わせ療法が望まれている。
【０００７】
HCVウイルス複製を選択的に阻害し、かつHCV-感染患者の治療に有用である化合物が望ましい。特に、NS5Aタンパク質の機能を効果的に阻害する化合物が望ましい。HCV複製におけるNS5Aタンパク質の機能および重要な役割は、例えば、以下の文献：非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；C. Riceらの特許文献１に記載されている。
【０００８】
HCV NS5A阻害剤(例えば、BMS-790052(2011年7月13日に出願された特許文献２))と組み合わされた場合に、HCVレプリコン活性の相乗的阻害を示す化合物を同定する方法が記載されている。簡単に説明すると、各化合物は、いくつかのNS5A抵抗性変異体に対して個別に試験した場合、本質的に不活性であるか、または殆ど活性がなく、NS5A標的化化合物と組み合わせて試験した場合に相乗的阻害活性を有するのみである。該相乗的な化合物は、固定濃度のHCV NS5A阻害剤(例えば、BMS-790052)の存在下における試験化合物のタイトレーションを用いて同定された。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】WO2006093867
【特許文献２】PCT/US2011/043785
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】S. L. Tan, et al., Virology, 284：1-12 (2001)
【非特許文献２】K.-J. Park, et al., J.  Biol. Chem., 30711-30718 (2003)
【非特許文献３】T. L. Tellinghuisen, et al., Nature, 435, 374 (2005)
【非特許文献４】R. A. Love, et al., J. Virol, 83, 4395 (2009)
【非特許文献５】N. Appel, et al., J. Biol. Chem., 281, 9833 (2006)
【非特許文献６】L. Huang, J. Biol. Chem., 280, 36417 (2005)
【非特許文献７】M. Gao, et al, Nature (2010)
【発明を実施するための形態】
【００１１】
第1の態様において、本発明は、NS5A標的化化合物およびNS5A相乗化剤を含む組み合わせを提供するものであって、該組み合わせは、投与されると該NS5A標的化化合物のみに対して抵抗性を与える変異を含む変異体に対する相乗的抗HCV活性をもたらし、ここで該NS5A相乗化剤は、式(I)：
【化１】
2016527232.tif 000002
[式中、
AおよびBは、
【化２】
2016527232.tif 000003
から独立して選択され；
R1は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2は水素であるか；または
R1およびR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により1または2つのメチル基で置換されていてもよい；
R1'は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2'は水素であるか；または
R1'およびR2'は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により2つのメチル基で置換されていてもよい；
R3およびR3'は、アルコキシ、ヒドロキシおよび-NRaRbから独立して選択され；
RaおよびRbは、水素、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、ポリシクロアルキル、(ポリシクロアルキル)アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ヒドロキシアルキル、-NRcRd、(NRcRd)アルキル、(NRcRd)カルボニルアルキル、フェニルアルキルおよびピラニルから独立して選択され、ここで該シクロアルキル、該(シクロアルキル)アルキルのシクロアルキル部分および該フェニルアルキルのフェニル部分は、所望により、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノカルボニル、シアノ、ハロ、ヒドロキシおよびフェニルから独立して選択される1または2つの基で置換されていてもよく；該(NRcRd)アルキルのアルキル部分は、ヒドロキシ基で置換されていてもよい；または
RaおよびRbは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、モルホリン、ピペリジンおよびピペラジンから選択される環を形成しており、各環は、所望によりアルコキシカルボニル、アルキル、ハロ、オキソおよびフェニルから選択される1または2つの基で置換されていてもよい；ならびに
RcおよびRdのうちの1つは、水素およびアルキルから選択され、もう一方は水素、アルコキシカルボニルおよびアルキルから選択されるか；または
RcおよびRdは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、オキサゾリジノン環を形成する]
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、組み合わせを提供する。
【００１２】
第1の態様の第1の実施態様において、本発明は、前記組合せ、および１以上の医薬的に許容し得る担体を含む組成物を提供する。第2の実施態様において、前記組成物は、抗HCV活性を有する1または2つの別の化合物を含む。第3の実施態様において、少なくとも１つの別の化合物は、インターフェロンまたはリバビリンである。第4の実施態様において、インターフェロンは、インターフェロンα 2B、ペグ化インターフェロンα、ペグ化インターフェロンλ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα 2Aおよびリンパ芽様インターフェロンτから選択される。第5の実施態様において、前記組成物は、抗HCV活性を有する1または2つの別の化合物を含み、ここで該少なくとも１つの別の化合物が、HCV感染の治療のためにHCV プロテアーゼ、HCV ポリメラーゼ、HCV ヘリカーゼ、HCV NS4B タンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5A タンパク質およびIMPDHから選択される標的の機能を阻害するのに有効である。
【００１３】
第2の態様において、本発明は、治療上有効な量の前記組合せ、またはその医薬的に許容される塩の組合せを患者に投与することを特徴とする、患者におけるHCV 感染の治療方法を提供する。第2の態様の第1の実施態様において、本方法は、抗HCV活性を有する1または2つの別の化合物を、該組み合わせまたはそれらの医薬的に許容される塩より前、後または同時に投与することをさらに特徴とする、方法を提供する。第2の実施態様において、少なくとも１つの別の化合物は、インターフェロンまたはリバビリンである。第3の実施形態において、インターフェロンは、インターフェロンα 2B、ペグ化インターフェロンα、ペグ化インターフェロンλ、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2Aおよびリンパ芽球様インターフェロンτから選択される。第4の実施形態において、少なくとも１つの別の化合物が、HCV感染症の治療のために、HCVプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質およびIMPDHから選択される標的の機能を阻害するのに有効である。
【００１４】
別の態様において、本発明は、NS5A標的化化合物およびNS5A相乗化剤を含む組み合わせを提供するものであって、投与されると該NS5A標的化化合物のみに対して抵抗性を与える変異を含む変異体に対する相乗的抗HCV活性をもたらし、ここで該NS5A相乗化剤は、式(II)：
【化３】
2016527232.tif 000004
[式中、
AおよびBは、
【化４】
2016527232.tif 000005
から独立して選択され；
R1は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2は、水素であるか；または
R1およびR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により、2つのメチル基で置換されていてもよい；
R1'は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2'は水素であるか；または
R1'およびR2'は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により2つのメチル基で置換されていてもよい；
R3およびR3'は、アルコキシおよび-NRaRbから独立して選択され；
RaおよびRbは、水素、アルコキシカルボニルアルキル、アルキルおよび-NRcRdから独立して選択され；または
RaおよびRbは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン環を形成しており、該環は、所望により、1つまたは2つのハロ基で置換されていてもよく；
RcおよびRdのうちの1つは水素であり、もう一方がアルコキシカルボニルである]
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、組み合わせを提供する。
【００１５】
別の態様において、本発明は、NS5A標的化化合物およびaNS5A相乗化剤を含む組み合わせを提供するものであり、該組み合わせは、投与されると該NS5A標的化化合物のみに対して抵抗性を与える変異を含む変異体に対する相乗的抗HCV活性をもたらし、ここで該NS5A相乗化剤は、式(III)：
【化５】
2016527232.tif 000006
[式中、
AおよびBは、
2016527232.tif 000007
から独立して選択され；
R1は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2は、水素であるか；または
R1およびR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により1または2つのメチル基で置換されていてもよい；
R1'は、アルコキシ、アルキル、ハロアルキルおよびヒドロキシから選択され；
R2'は水素であるか；または
R1'およびR2'は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、ジオキソラニル環を形成しており、該ジオキソラニル環は、所望により2つのメチル基で置換されていてもよい；
R3およびR3'は、アルコキシおよび-NRaRbから独立して選択され；
RaおよびRbは、水素、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、ヒドロキシアルキル、-NRcRd、-(NRcRd)カルボニルアルキル、フェニルアルキルおよびピラニルから独立して選択され、ここで該シクロアルキルおよび該(シクロアルキル)アルキルのシクロアルキル部分は、所望により、シアノ、ハロおよびヒドロキシから独立して選択される1または2つの基で置換されていてもよく；または
RaおよびRbは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、モルホリン、ピペリジンおよびピペラジンから選択される環を形成しており、各環は、所望により、アルコキシカルボニル、アルキル、ハロ、オキソおよびフェニルから選択される1または2つの基で置換されていてもよく；
RcおよびRdのうちの1つは、水素およびアルキルから選択され、もう一方は水素、アルコキシカルボニルおよびアルキルから選択される]
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、組み合わせを提供する。
【００１６】
本発明の他の態様は、本明細書に記載の実施態様の適切な組み合わせを含み得る。
【００１７】
さらに他の態様および実施態様は、本明細書の記載中に見いだされ得る。
【００１８】
本明細書における本発明の記載は、化学結合の法則および原理と一致して解釈されるべきである。場合によっては、任意の所与の位置に置換基を配置するために、水素原子を除去することが必要な場合もあり得る。
【００１９】
場合によって、任意の特定の基における炭素原子の数は、該基の表記の前に記載される。例えば、用語「C2-6アルケニル」は2〜6つの炭素原子を含むアルケニル基を示す。これらの表記がされている場合、それらを本明細書に含まれる全ての他の定義に優先する。
【００２０】
本発明により包含される化合物は、医薬品として使用するために適切に安定であることが理解されるべきである。
【００２１】
分子中の特定の位置でのあらゆる置換基または変数の定義は、該分子中の他の部分におけるその定義から独立していることを意図する。
【００２２】
本明細書に記載の全ての特許、特許出願、および参考文献は、引用によりその全体が本明細書に援用される。一貫性に欠ける場合、本出願の開示(定義を含む)を優先する。
【００２３】
本明細書で用いられる通り、以下の用語は指定の意味を有する。
本明細書において用いる単数形「a」、「an」および「the」は、他に明確に指示されない限り、複数の言及も含む。
【００２４】
特に指定のない限り、本発明の全てのアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクリル基は、それらの各々の定義に記載の通り置換されていてよい。例えば、アリールアルキル基のアリール部分は、用語「アリール」の定義に記載された通りに置換されていてよい。
【００２５】
本明細書で用いる用語「NS5A相乗化剤」は、単独ではHCV野生型に対してNS5A標的化化合物より弱い活性を示すが、NS5A標的化化合物と組み合わされた場合に、NS5A標的化化合物単独の効力よりも3倍以上大きいEC50効力を示す分子を言う。
【００２６】
本明細書で用いる用語「相乗的抗HCV活性」は、NS5A標的化化合物単独の効力よりも3倍以上大きいEC50効力を言う。
【００２７】
本明細書で用いる用語「NS5A標的化化合物」は、NS5Aタンパク質に、最も一般的にはNS5Aの最初の100残基内に(これに限定するもものではないが)、少なくとも1つの抵抗性置換が存在するHCV複製を阻害する分子を言う。
【００２８】
本明細書で用いる用語「アルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルキル基を言う。
本明細書で用いる用語「アルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルコキシ基を言う。
本明細書で用いる用語「アルコキシカルボニルアルキル」は、1または2つのアルコキシカルボニル基で置換されたアルキル基を言う。
本明細書で用いる用語「アルキル」は、1から7つの炭素原子を有する、直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素由来の基を言う。
【００２９】
本明細書で用いる用語「アミノカルボニル」は、-C(O)NH2である。
【００３０】
本明細書で用いる用語「シアノ」は、-CNである。
【００３１】
本明細書で用いる用語「シクロアルキル」は、3〜7員単環式の炭素環を言う。
【００３２】
本明細書で用いる用語「(シクロアルキル)アルキル」は、1、2、または3つのシクロアルキル基で置換されたアルキル基を言う。
【００３３】
本明細書で用いる用語「ハロ」は、Cl、Br、F、またはIを言う。
【００３４】
本明細書で用いる用語「ハロアルキル」は、1、2、3、または4つのハロゲン原子で置換されたアルキル基を言う。
【００３５】
本明細書で用いる用語「ヒドロキシ」は、-OHを言う。
本明細書で用いる用語「ヒドロキシアルキル」は、1、2、または3つのヒドロキシ基で置換されたアルキル基を言う。
【００３６】
本明細書で用いる用語「(NRcRd)アルキル」は、1、2、または3つの-NRcRd基で置換されたアルキル基を言う。
【００３７】
本明細書で用いる用語「(NRcRd)カルボニル」は、カルボニル基を介して親分子部分に結合した-NRcRd基を言う。
本明細書で用いる用語「(NRcRd)カルボニルアルキル」は、1、2、または3つの(NRcRd)カルボニル基で置換されたアルキル基を言う。
【００３８】
本明細書で用いる用語「オキソ」は、=Oを言う。
【００３９】
本明細書で用いる用語「フェニルアルキル」は、1、2、または3つのフェニル基で置換されたアルキル基を言う。
【００４０】
本明細書で用いる用語「ポリシクロアルキル」は、5〜12個の炭素原子および0個のヘテロ原子を有する多環式飽和縮合環、架橋環またはスピロ環系の炭化水素環系を言う。
【００４１】
本明細書で用いる用語「(ポリシクロアルキル)アルキル」は、1、2、または3つのポリシクロアルキル基で置換されたアルキル基を言う。
【００４２】
本発明の化合物には不斉中心が存在する。これら中心は、キラル炭素原子の周囲の置換基の配置によって、記号「R」または「S」により示される。本発明は、NS5Aを阻害する能力を有する全ての立体化学的な異性体、またはその混合物を包含することが理解されるべきである。化合物の個々の立体異性体は、キラル中心を有する市販の出発物質から合成的に製造することができるか、あるいは、エナンチオマーの生成物の混合物を製造した後、ジアステレオマーの混合物への変換に続く分離もしくは再結晶化、クロマトグラフ技法、またはキラルクロマトグラフィーカラムでのエナンチオマーの直接分離などといった分離を行うことによって製造することができる。特定の立体化学の出発化合物は、市販であるか、あるいは当業者に公知の方法により製造および分割され得る。
【００４３】
本発明のある特定の化合物も、異なる安定した立体構造形態で存在していてもよく、それは分離可能であり得る。非対称単結合について制限された回転に起因するねじれ非対称(Torsional asymmetry)(例えば、立体障害または環の歪みが原因である)により、異なる配座異性体の分離が可能になり得る。本発明は、これら化合物の各配座異性体およびその混合物を含む。
【００４４】
本発明の化合物は、互変異性体としても存在する；従って、本発明は、全ての互変異性体もまた包含する。
【００４５】
該用語「本発明の化合物」および同等の表現は、本発明の組み合わせを構成する化合物ならびにその医薬的に許容されるエナンチオマー、ジアステレオマーおよび塩を包含することを意味する。同様に、中間体についての言及は、内容的に許される限りそれらの塩を包含することを意味する。
【００４６】
本発明は、本発明の化合物に出現する原子の全ての同位体を含むことを意図する。同位体には、原子番号が同一であるが質量数が異なる原子が含まれる。一般的な例として、限定されることなく、水素の同位体にはジュウテリウムおよびトリチウムが含まれる。炭素の同位体としては13Cおよび14Cが挙げられる。同位体で標識された本発明の化合物は一般に、当業者に公知の通常の技法によるか、または本明細書に記載されたものと類似した方法によって、他で用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体-標識試薬を用いて、製造することができる。そのような化合物は、例えば、生物活性の決定における標準物質および試薬として、様々な使用可能性を有しうる。安定な同位体の場合、そのような化合物は、生物学的、薬理学的、または薬物動態学的特性を都合よく修飾する能力を有しうる。
【００４７】
本発明の化合物は、医薬的に許容される塩として存在し得る。本明細書で用いる用語「医薬的に許容される塩」は、本発明の化合物の塩または双性イオン形態を意味し、それは水または油-溶性または分散性であり、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織に接触して用いるのに適していて、それらの使用目的に有効である。該塩は化合物の最終的な単離および精製の間に製造することができるか、あるいは別途、適切な窒素原子を適切な酸と反応させることにより製造することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩(camphorate)、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩(digluconate)、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩(palmoate)、ペクチン酸塩(pectinate)、過硫酸塩、3-フェニルプロプリオン酸塩(phenylproprionate)、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、炭酸水素塩、パラ-トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。医薬的に許容される付加塩の形成に用いることができる酸の例としては、無機酸(例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸)および有機酸(例えば、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸およびクエン酸)が挙げられる。
【００４８】
塩基付加塩は、カルボキシ基を、適切な塩基(例えば、金属カチオンのヒドロキシド、カーボネートもしくはビカーボネート)と反応させるか、あるいはアンモニア、または有機第一級、第二級、もしくは第三級アミンと反応させることにより、化合物の最終的な単離および精製の間に製造され得る。医薬的に許容される塩のカチオンとしては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム、ならびに無毒性のアミンカチオン(例えば、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、N,N-ジメチルアニリン、N-メチルピペリジン、N-メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、N,N-ジベンジルフェネチルアミン、およびN,N'-ジベンジルエチレンジアミン)が挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンとしては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、およびピペラジンが挙げられる。
【００４９】
治療で用いるために、治療上有効な量の組み合わせの各化合物ならびにその医薬的に許容される塩を、未加工の化学薬品(raw chemical)として投与することができる場合、活性成分を医薬組成物として存在させることができる。従って、本発明は、治療上有効な量の、組み合わせを構成する化合物またはその医薬的に許容される塩ならびに1つ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬組成物をさらに提供する。本明細書で用いる用語「治療上有効な量」は、有意義な患者利益(例えば、ウイルス量の持続的減少)を示すのに十分である各活性成分の総量を言う。単独で投与される個々の活性成分に適用する場合、該用語は成分単独の量を言う。組み合わせに適用する場合、該用語は、組み合わせて、連続して、あるいは同時に投与されるかどうかにかかわらず、治療効果をもたらす活性成分を合わせた量を言う。該組み合わせに関する化合物およびその医薬的に許容される塩は上記の通りである。該担体、希釈剤、または賦形剤は、製剤の他の成分に適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で許容可能でなくてはならない。本発明の別の態様によると、組み合わせの化合物またはその医薬的に許容される塩を、1つ以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と混合することを含む、医薬製剤の製造方法もまた提供する。本明細書で用いる用語「医薬的に許容される」は、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに患者の組織に接触させて用いるのに適していて、その使用目的に有効である、化合物、物質、組成物、および/または剤形を言う。
【００５０】
医薬製剤は、単位用量あたりに所定の量の活性成分を含む単位剤形であってもよい。本発明の化合物が1日あたり約0.01から約250ミリグラム/キログラム(「mg/kg」)体重、好ましくは1日あたり約0.05から約100 mg/kg体重である投与量濃度が、HCV介在疾患の予防および治療に対する単独療法においては典型的である。通常、本発明の医薬組成物は、1日あたり約1から約5回の投与か、あるいは持続投与される。そのような投与は、長期治療または救急治療として用いられ得る。担体材料と組み合わせて単一剤形を製造し得る活性成分の量は、治療する症状、症状の重篤性、投与回数、投与経路、用いた化合物の排出速度、治療期間、ならびに患者の年齢、性別、体重、および状態によって変わり得る。好ましい単位用量製剤は、活性成分の、本明細書において上記した１日量もしくはそれ以下、またはその適当な画分を含むものである。通常、化合物の至適用量よりかなり少ない少用量で治療を開始する。その後、該条件下での最適な効果に達するまで用量を少しずつ増加させる。一般に、いずれの有害または有毒な副作用も引き起こさずに抗ウイルス効果が通常得られる濃度レベルで、該化合物を投与することが最も望ましい。
【００５１】
本発明の組成物が、本発明の化合物と1つ以上の別の治療薬もしくは予防薬を組み合わせて含む場合、該化合物と別の薬物の両方とも、通常、単独療法レジメンにおいて標準的に投与される用量の約10から150％、より好ましくは約10から80％の用量濃度で存在する。
【００５２】
医薬製剤は、いずれの適当な経路、例えば、経口(頬側または舌下を含む)、直腸、経鼻、局所的(頬側、舌下、または経皮を含む)、膣、または非経口(皮下、皮内、筋肉内、関節内、滑液嚢内(intrasynovial)、胸骨内、髄腔内、病巣内、静脈内、または皮内注射もしくは注入を含む)経路による投与に適応しうる。そのような製剤は、薬学の分野において公知のいずれの方法よっても(例えば、活性成分と担体もしくは賦形剤を会合させることにより)、製造されうる。経口投与または注射による投与が好ましい。
【００５３】
経口投与に適応した医薬製剤は、カプセル剤もしくは錠剤；粉末剤または顆粒剤；水性または非水性液体中の液剤または懸濁剤；食用フォーム剤またはホイップ剤；あるいは水中油液体エマルジョン剤または油中水エマルジョン剤といった、別々のユニットであってもよい。
【００５４】
例えば、経口投与用に、錠剤またはカプセル剤の形態において、活性薬物成分を、経口で無毒の医薬的に許容される不活性担体(例えば、エタノール、グリセロール、水など)と合わせることができる。粉末剤は、化合物を適切な微粒子サイズに細かく粉末化し、同様に粉末化された食用炭水化物(例えばデンプンまたはマンニトール)などの医薬担体と混合することにより製造される。着香剤、保存剤、分散剤、および着色剤もまた存在し得る。
【００５５】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を製造し、成型ゼラチンシース(gelatin sheath)に詰めることにより製造される。充填工程の前に、流動化剤および滑沢剤(例えばコロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、または固体のポリエチレングリコール)を該粉末混合物に加えることができる。カプセル剤が摂取される際の薬剤のアベイラビリティを高めるために、崩壊剤または可溶化剤(例えば、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム)を加えることもできる。
【００５６】
さらに、所望される場合もしくは必要な場合、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤を混合物に加えることもできる。適切な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖(例えばグルコースまたはβ-ラクトース)、コーンシロップ、天然および合成ガム(例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム)、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。これらの剤形に用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。これらの剤形に用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられるが、これに限定はしない。錠剤は、例えば、粉末混合物を製造し、顆粒化もしくは充填し、滑沢剤および崩壊剤を加え、そして錠剤に圧縮することにより製剤化される。粉末混合物は、適切に粉末化された化合物と、上記の希釈剤または塩基、ならびに所望により、結合剤(例えばカルボキシメチルセルロース、アルギネート(aliginate)、ゼラチン(gelating)、またはポリビニルピロリドン)、溶解遅延剤(例えばパラフィン)、吸収促進剤(例えば第四級塩)および/または吸収剤(例えばベントナイト、カオリン、またはリン酸水素カルシウム)とを混合することにより製造される。結合剤(例えばシロップ、デンプン糊、アカシア粘液(acadia mucilage)、またはセルロース系物質もしくはポリマー系物質の溶液)で湿らせて、ふるいに押し通すことにより、粉末混合物を顆粒化することができる。顆粒化の別法として、該粉末混合物を錠剤機に通して、不完全に成型されたスラグを得た後、顆粒に粉砕することができる。該顆粒を、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱物油の添加により滑らかにして、錠剤成形型への接着を防ぐことができる。次いで、滑らかにした混合物を錠剤へと圧縮する。また、本発明の化合物を、自由流動性不活性担体と合わせて、顆粒化工程または成形工程(slugging step)を経ずに直接、錠剤へと圧縮することができる。シェラックのシールコート(sealing coat)、糖もしくはポリマー材のコーティング、およびワックスの艶出しコーティングから成る、澄明もしくは不透明な保護コーティングを施すことができる。これらのコーティングに染料を加えて、異なる単位用量を区別することができる。
【００５７】
経口液剤(例えば液剤、シロップ剤、およびエリキシル剤)は、所定の分量が所定の量の化合物を含むように単位用量形態で製造され得る。シロップ剤は、適切に風味付けされた水溶液中に化合物を溶解させることにより製造でき、一方エリキシル剤は無毒のビヒクルを用いることにより製造され得る。可溶化剤および乳化剤(例えばエトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル)、保存剤、香味添加剤(例えばペパーミント油あるいは天然甘味剤、またはサッカリンもしくは他の人工甘味剤など)を加えることもできる。
【００５８】
必要に応じて、経口投与のための単位用量製剤をマイクロカプセル化することができる。該製剤はまた、例えば、ポリマー、ワックスなどの中に粒子状物質をコーティングまたは組み込むことによって、放出を遅延もしくは持続するように製造され得る。
【００５９】
式(I)の化合物、およびその医薬的に許容される塩はまた、リポソームデリバリーシステム(例えば、小型の単層ベシクル、大型の単層ベシクル、および多重層ベシクル)の形態で投与することもできる。リポソームは、様々なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンから形成することができる。
【００６０】
該組み合わせの化合物およびその医薬的に許容される塩はまた、化合物分子が結合した個々の担体としてモノクローナル抗体を用いることによって送達されうる。また、該化合物を、標的化可能な薬物担体としての可溶性ポリマーと結合させてもよい。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパリトイル(palitoyl)残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを挙げることができる。さらに、該化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマーの類、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン(polepsilon caprolactone)、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロック共重合体に結合していてよい。
【００６１】
経皮投与に適した医薬製剤は、長期間、レシピエントの表皮と密接な接触を維持することを目的とした、個別のパッチであってもよい。例えば、Pharmaceutical Research 1986, 3(6), 318に一般的に記載されるように、該活性成分はイオントフォレーシスによってパッチから送達されうる。
【００６２】
局所投与に適した医薬製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、粉末剤、液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤、または油剤として製剤化されうる。
【００６３】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療において、該製剤は好ましくは、局所用軟膏剤もしくはクリーム剤として塗布される。軟膏剤に製剤化する場合、該活性成分はパラフィン系(paraffinic)かまたは水-混和性のいずれかの軟膏基剤とともに用いられうる。別法として、該活性成分は水中油型クリーム基剤もしくは油中水型基剤を用いてクリーム剤に製剤化されうる。
【００６４】
眼への局所投与に適した医薬製剤としては、該活性成分が適切な担体(とりわけ水性溶媒)に溶解または懸濁されている点眼剤が挙げられる。
【００６５】
口への局所投与に適した医薬製剤としては、ドロップ剤(lozenge)、トローチ剤(pastille)、および口腔洗浄剤(mouth wash)が挙げられる。
【００６６】
直腸投与に適した医薬製剤は、坐薬または浣腸剤であってよい。
【００６７】
担体が固体である、経鼻投与に適した医薬製剤としては、例えば20〜500ミクロンの粒子サイズを有する粗粉末(course powder)が挙げられ、それは、嗅ぎ薬を摂取する方法、すなわち、鼻に近づけられた粉末剤の容器から鼻腔を介して急速吸入することにより、投与される。鼻腔用スプレーまたは点鼻薬として投与するための、担体が液体である適切な製剤としては、活性成分の水性または油性液剤が挙げられる。
【００６８】
吸入による投与に適した医薬製剤としては、微粒子粉末または微粒子ミストが挙げられ、それは様々なタイプの定量加圧エアロゾル、ネブライザー、または吸入器を用いて発生されうる。
【００６９】
膣内投与に適した医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤、またはスプレー製剤であってよい。
【００７０】
非経口投与に適した医薬製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤(bacteriostat)、および製剤を対象のレシピエントの血液と等張にする塩(soute)を含みうる水性および非水性の無菌注射液剤；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含みうる水性および非水性の無菌懸濁剤が挙げられる。該製剤は、単回投与もしくは多回投与(multi-dose)用容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアルに入っていてよく、使用の直前に無菌の液体担体(例えば注射用の水)の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存してもよい。即時調製(Extemporaneous)注射液剤および懸濁剤は、無菌粉末剤、顆粒剤、および錠剤から調製されうる。
【００７１】
具体的に上述した成分に加えて、該製剤は、当該製剤のタイプを考慮して当分野で通常のその他の剤を含んでもよい(例えば経口投与に適した製剤は香味剤を含んでもよい)ことが理解されるべきである。
【００７２】
該用語「患者」には、ヒトおよび他の哺乳動物の両方が含まれる。
【００７３】
該用語「治療」は：(i)疾患、障害、および/または症状に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない患者において、疾患、障害、または症状の発症を予防すること；(ii)疾患、障害、または症状の抑制、すなわち、その進行を抑止すること；ならびに(iii)疾患、障害、または症状を軽減すること、すなわち、疾患、障害、および/または症状の退行をもたらすことを言う。
【００７４】
本発明の化合物はまた、シクロスポリン、例えばシクロスポリンAとともに投与することができる。シクロスポリンAは、臨床試験においてHCVに対して活性であることが示されている(Hepatology 2003, 38, 1282； Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004, 313, 42； J. Gastroenterol. 2003, 38, 567)。
【００７５】
以下の表Aに、本発明の化合物とともに投与することができる化合物のいくつかの実例を記載する。本発明の化合物は、併用療法において、一緒にまたは別個に、あるいは該化合物を組成物中に混合することによって、他の抗HCV活性化合物とともに投与することができる。
表A
【表１】
2016527232.tif 000008
【表２】
2016527232.tif 000009
2016527232.tif 000010
【表３】
2016527232.tif 000011
【表４】
2016527232.tif 000012
【表５】
2016527232.tif 000013
【００７６】
本発明の化合物は、実験用試薬として用いてもよい。化合物は、HCV疾患メカニズムの知識をさらに高めるための、ウイルス複製アッセイの設計、動物アッセイ系の検証および構造生物学研究に対する研究ツールの提供において有益でありうる。さらに、本発明の化合物は、例えば競合阻害により、他の抗ウイルス性化合物の結合部位の確立または決定に有用である。
【００７７】
本発明の化合物はまた、物質のウイルス汚染を処理もしくは防止するのに用いてもよく、それにより、そのような物質(例えば血液、組織、手術器具および手術着、実験器具および実験着、ならびに採血または輸血の器具および材料)と接触する、実験もしくは医療の関係者または患者のウイルス感染の危険性を低下させうる。
【００７８】
本発明は、合成プロセスまたは代謝プロセス［ヒトもしくは動物体内(in vivo)で生じるもの、またはin vitroで生じるプロセスを含む］により作られる、式(I)で示される化合物を包含することを意図する。
【００７９】
特に以下の例示スキームおよび実施例中のものを含む本出願で使用される略語は、当業者には周知である。使用される略語のいくつかは以下の通りである：RTまたはrtは室温または保持時間(文脈によって決定される)；Rtは保持時間；TFAはトリフルオロ酢酸；minsまたはminは分；ACNまたはMeCNはアセトニトリル；DIEAはジイソプロピルエチルアミン；hまたはhrまたはhrsは時間；EtOAcは酢酸エチル；HOATは1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール；EDCは1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド ハイドロクロライド；DMAPは4-(ジメチルアミノ)ピリジン；DMFはN,N−ジメチルホルムアミド；HATUはO-(7-アザベンゾトリアゾール-1−イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩；THFはテトラヒドロフラン(注：全てのTHFは新たにナトリウム/ベンゾフェノンケチル上で蒸留された)；MeOHはメタノール；DCMはジクロロメタン；およびNMPは1-メチル-2-ピロリジノンである。
【００８０】
本開示は特定の実施態様に関連して記載されるが、それはその発明の範囲を制限することを意図するものではない。一方、本開示は、全ての代替形態、改変形態、および同等形態を、特許請求の範囲内に含み得るものとして包含する。従って、特定の実施態様を含む以下の実施例は、本発明の1つの実例を説明し、該実施例は特定の実施態様の例示目的であり、そしてその方法および概念的態様の最も有用で且つ容易に理解される記載であると考えられるものを提供するために提示するものであると解される。
【実施例】
【００８１】
出発物質は、商業的供給源から得ることができるか、または当業者には公知の十分に確立された文献の方法によって製造することができる。
【００８２】
LC/MS 条件MD-1：
カラム = Phenomenex-Luna, 2.0 X 50 mm, 3 μm
溶媒 A = 0.1 % TFA/10% メタノール/90% 水
溶媒 B = 0.1 % TFA/90% メタノール/10% 水
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 4分
流速 = 0.8 mL/分
波長 = 220 nm または 254 nm
オーブン温度 = 40℃
【００８３】
LC/MS 条件MD-2：
カラム = Phenomenex-Luna C18, 2.0 X 50 mm, 3 μm
溶媒 A = 10 mM 酢酸アンモニウム/5% アセトニトリル/95% 水
溶媒 B = 10 mM 酢酸アンモニウム/90% アセトニトリル/5% 水
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 4分
流速 = 0.8 mL/分
波長 = 220 nm または 254 nm
オーブン温度= 40℃
【００８４】
LC/MS 条件B-12：
カラム = Ascentis Express C18, 2.1 X 50 mm, 2.7 μm
溶媒 A = CH3CN (2%) + 10 mM ギ酸アンモニウム/H2O (98%)
溶媒 B = CH3CN (98%) + 10 mM ギ酸アンモニウム/H2O (2%)
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 1.4分
流速 = 1 mL/分；波長 = 220 nm
【００８５】
LC/MS 条件B-32：
カラム = Sunfire C18, 4.6 X 150 mm, 3.5 um
溶媒 A = 緩衝液：CH3CN (95：5)
溶媒 B = 緩衝液：CH3CN (5：95)
緩衝液 = 0.05% TFA/H2O (pH 2.5, 希アンモニアで調整)
開始% B = 10；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 12分
流速 = 1 mL/分
波長 = 220 & 254 nm
【００８６】
LC/MS 条件B-35：
カラム = Xbridge phenyl, 4.6 X 150 mm, 3.5 um
溶媒 A = 緩衝液：CH3CN (95：5)
溶媒 B = 緩衝液：CH3CN (5：95)
緩衝液 = 0.05% TFA/H2O (pH 2.5, 希アンモニアで調整)
開始%B = 10；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 12分
流速 = 1 mL/分
波長 = 220 & 254 nm
【００８７】
逆相分取HPLC 条件MD-1：
別段の記載が無ければ、実施例MD-1〜MD-61の精製のための全ての逆相prepHPLC条件は、以下の通りである：
カラム = Phenomenex Luna Axia C-18, 30 x 100 mm, 10μm
溶媒 A = 0.1 % TFA/メタノール/90% 水
溶媒 B = 0.1 % TFA/90% メタノール/10% 水
グラジエント：直線のグラジエント, 各実施例につき固有
グラジンエント時間：各実施例に対して固有
流速= 40 mL/分
波長 = 254 nm
【００８８】
分析的HPLC 条件：
MD-A：
カラム = Xbridge C18, 3.0 x 150 mm, 3.5 μm
溶媒 A = 10 mM NH4HCO3/5% メタノール/95% 水
溶媒 B = 10 mM NH4HCO3/95% メタノール/5% 水
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 30分
流速 = 1.0 mL/分
波長 = 220 nm または 254 nm
【００８９】
MD-B：
カラム = Xbridge phenyl, 3.0 x 150 mm, 3.5 μm
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 30分
流速 = 1.0 mL/分；波長 = 220 nm または 254 nm
溶媒 A = 10 mM NH4HCO3/5% メタノール/95% 水
溶媒 B = 10 mM NH4HCO3/95% メタノール/5% 水
【００９０】
MD-C：
カラム = Sunfire C18, 3.0 x 150 mm, 3.5 μm
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 30分
流速 = 1.0 mL/分；波長 = 220 nm または 254 nm
溶媒 A = 0.05% TFA/5% ACN/95% 水
溶媒 B = 0.05% TFA/95% ACN/5% 水
【００９１】
MD-D：
カラム = Xbridge phenyl, 3.0 x 150 mm, 3.5 μm
開始%B = 0；終了時%B = 100
グラジンエント時間 = 30分
流速 = 1.0 mL/分；波長 = 220 nm または 254 nm
溶媒 A = 0.05% TFA/5% ACN/95% 水
溶媒 B = 0.05% TFA/95% ACN/5% 水
【００９２】
実施例MD-1
【化６】
2016527232.tif 000014
実施例MD-1, 工程a
【化７】
2016527232.tif 000015
1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(500 mg, 1.262 mmol)および(R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸(700 mg, 2.052 mmol)(WO2012129353-A1に記載した方法に従って製造)/無水ACN(15 mL)の懸濁液に、0℃で、ゆっくりとDIEA(485 μL, 2.78 mmol)を添加した。この反応溶液を、N2により十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、18時間攪拌して、室温までゆっくりと昇温させた。溶媒を、真空除去して、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜60% 酢酸エチル/ヘキサン, 10倍のカラム体積)により精製して、表題化合物(880 mg)を白色固体として得た。1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ 8.04 (d, J=8.4 Hz, 4H), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 4H), 5.53 (d, J=16.4 Hz, 2H), 5.34 (d, J=16.3 Hz, 2H), 3.16 - 2.99 (m, 2H), 2.83 (dd, J=16.4, 8.2 Hz, 2H), 2.58 - 2.22 (m, 6H), 2.14 - 1.86 (m, 4H), 1.48 (s, 18H).
【００９３】
実施例MD-1, 工程b
【化８】
2016527232.tif 000016
圧力瓶(48 mL)に、N2下において、実施例MD-1, 工程a (880 mg, 1.136 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(2.65 g, 34.4 mmol)、イミダゾール(462 mg, 6.79 mmol)および無水トルエン(18 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、キャップを閉めて、110℃で18時間加熱した。この反応溶液を、EtOAc(300 mL)で希釈して、有機層を、飽和NaHCO3水溶液(70 mL)、水(2 x 50 mL)、塩水(1 x 50 mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、濾過して、濃縮して、真空乾燥させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 12以上のカラム体積で100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル)により精製して、表題化合物(510 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 735,  Rt = 3.401分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  7.73 (br. s., 2H), 7.60 (br. s., 4H), 7.32 - 7.15 (m, 4H), 3.33 - 3.23 (m, 2H), 2.78 - 2.50 (m, 4H), 2.18 - 1.75 (m, 8H), 1.43 - 1.24 (m, 18H).
【００９４】
実施例MD-1, 工程c
【化９】
2016527232.tif 000017
激しく攪拌しながら実施例MD-1, 工程b(508 mg, 0.691 mmol)/無水ジクロロメタン(8 mL)由来の物質の懸濁液に、TFA(10.0 mL， 130 mmol)を加えた。この反応懸濁液を、室温で125分間静置して、次いで揮発性物質を、穏やかなN2ストリーム下にて除去した。残留物を、トルエン(30 mL)に懸濁して、溶媒を、真空除去して、表題化合物(785 mg)を、褐色固体としてトリスTFA塩を得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 623, Rt = 3.02分；1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ  14.6 (m, 3H), 12.5 (m, 1H), 8.19 (s, 2H), 8.00 - 7.96 (m, 4H), 7.96 - 7.87 (m, 4H), 3.62 - 3.52 (m, 2H), 3.05 - 2.90 (m, 4H), 2.42 - 2.20 (m, 4H), 2.09 - 1.96 (m, 4H)；19F NMR (470 MHZ, DMSO-d6) δ -64.84 (s, 6F), -74.51 (s, 9F).
【００９５】
実施例MD-1
N2下において、無水ジクロロメタン(3 mL)中の実施例MD-1, 工程c(44.3 mg, 0.046 mmol)から得た物質、(S)-メチル 2-アミノ-3-メチルブタノエート, HCl (67.8 mg, 0.4.4 mmol)およびHOAT(18.7 mg, 0.137 mmol)の混合液に、EDC(62.4 mg, 0.326 mmol)およびDIEA(130 μL, 0.744 mmol)を加えた。該反応混合液を、N2を用いてフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。DMAP(23.4 mg, 0.192 mmol)を加えて、この反応を、室温で4日間攪拌した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下においてエバポレートして、粗生成物を、11分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて、逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、表題化合物(16.8 mg)のビスTFA塩を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 849,  Rt = 3.31分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.90 (s, 2H), 7.90 - 7.85 (m, 8H), 4.29 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.72 (s, 6H), 3.71 - 3.66 (m, 2H), 3.03 - 2.97 (m, 2H), 2.97 - 2.90 (m, 2H), 2.42 - 2.31 (m, 2H), 2.24 - 2.09 (m, 8H), 0.91 (d, J=6.9 Hz, 6H), 0.89 (d, J=6.9 Hz, 6H).
分析的HPLC MD-A：Rt = 27.37分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 27.12分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 5.65分, λ = 254 nm
分析的HPLC MD-D：Rt = 6.29分, λ = 254 nm
【００９６】
実施例MD-2
【化１０】
2016527232.tif 000018
無水ジクロロメタン(4 mL)中の実施例MD-1, 工程c(47 mg, 0.049 mmol)から得た物質、4-フルオロピペリジン,HCl(76 mg, 0.544 mmol)およびHOAT(19.6 mg, 0.144 mmol)の混合液に、N2下において、EDC(83 mg, 0.433 mmol)およびDIEA(160 μL, 0.916 mmol)を加えた。該反応混合液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。イミダゾール(150 mg, 2.203 mmol)および追加のEDC(190 mg, 0.991 mmol)を加えて、反応混合液を室温で18時間攪拌させた。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下においてエバポレートして、粗生成物を、11分かけて30% 溶媒B/70% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて、逆相分取HPLC 条件MD-1により精製して、純粋でない表題化合物のトリスTFA塩を白色固体として得た。
LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 793,  Rt = 3.2分. 純粋でない表題化合物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：25分かけて30〜70% B、次いで5分間 100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSを介して更に精製して、純粋な表題化合物(11.4 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 7.81 (br. s., 4H), 7.69 (br. s., 4H), 7.55 (br. s., 2H), 4.95 - 4.78 (m, 2H), 3.67 - 3.42 (m, 10H), 2.96 (dd, J=16.0, 7.3 Hz, 2H), 2.69 (d, J=16.0 Hz, 2H), 2.32-2.23 (m,  2H), 2.22-2.12 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 7H), 1.76 - 1.52 (m, 5H).
【００９７】
実施例MD-3
【化１１】
2016527232.tif 000019
実施例MD-1, 工程c(70 mg, 0.073 mmol)から得た物質、2-メチルプロパン-1-アミン(65.7 mg, 0.898 mmol)およびHOAT(14 mg, 0.103 mmol)/無水DMF(4 mL)の混合液に、EDC (90 mg, 0.469 mmol)を加えた。該反応混合液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、55℃で18時間攪拌した。揮発性物質を、穏やかなN2ストリーム下において留去して、粗生成物を、10分かけて25% 溶媒B/75% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLC 条件MD-1により精製して、表題化合物のTFA塩(9.0 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 733,  Rt = 3.38分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ 7.90 (s, 2H), 7.90 - 7.85 (m, 8H), 3.76 - 3.59 (m, 2H), 3.06 - 3.00 (m, 2H), 2.98 - 2.92 (m, 2H), 2.91 - 2.81 (m, 4H), 2.40-2.30 (m., 2H), 2.26 - 2.10 (m, 6H), 1.73 (m, J= 6.7 Hz, 2H), 0.88 (d, J=6.7 Hz, 6H), 0.87 (d, J=6.7 Hz, 6H)；19F NMR (470 MHZ, CD3OD) δ  -67.89 (s, 6F), -77.10 (s, 6F).  
【００９８】
実施例MD-4
【化１２】
2016527232.tif 000020
実施例MD-3に記述した反応物から単離したものも、白色固体として上記に示された表題化合物(16.9 mg)のTFA塩であった。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 678,  Rt = 3.17分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.91 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.89 - 7.86 (m, 8H), 3.74 - 3.63 (m, 2H), 3.06 - 2.99 (m, 3H), 2.98 - 2.86 (m, 3H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 2.23 - 2.12 (m, 6H), 1.72 (dquart, J= 6.7 Hz, 1H), 0.87 (d, J=6.7 Hz, 3H), 0.86 (dd, J= 6.7 Hz, 3H)；19F NMR (470 MHZ, CD3OD) δ  -67.33 (s, 3F), -68.74 (s, 3F), -77.07 (s, 6F).
【００９９】
実施例MD-5
【化１３】
2016527232.tif 000021
実施例MD-5, 工程a
【化１４】
2016527232.tif 000022
(R)-ジベンジル 2-ヒドロキシスクシネート(J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1：Organic and Bio-Organic Chemistry (1972-1999), 1995, # 22, p.2877-2882に記述した方法に従って製造した)(1.0 g, 3.18 mmol)/ヨードエタン(60 mL)の素早く攪拌した溶液に、酸化銀(I)(3.90 g, 16.83 mmol)を加えた。該反応溶液を、窒素でフラッシュして、80℃に48時間加熱した。固体を濾去して、溶媒を真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜35% 酢酸エチル/65% ヘキサン、10以上のカラム体積)で精製して、表題化合物(682 mg)を無色油状物として得た。LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 343,  Rt = 3.36分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  7.42 - 7.30 (m, 10H), 5.21 - 5.10 (m, 4H), 4.37 (dd, J=8.2, 4.9 Hz, 1H), 3.74 (dq, J=9.0, 7.0 Hz, 1H), 3.50 (dq, J=9.1, 7.0 Hz, 1H), 2.91 - 2.78 (m, 2H), 1.19 (t, J=7.0 Hz, 3H).
【０１００】
実施例MD-5, 工程b
【化１５】
2016527232.tif 000023
MD-5, 工程a(682 mg, 1.992 mmol)/メタノール(40 mL)の物質の素早く攪拌した溶液に、30% Pd/C(385 mg)を加えた。得られる黒色の懸濁液を、窒素でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、H2を用いて十分パージして、H2下において、終夜室温で攪拌した。反応溶液を、N2でフラッシュして、触媒を濾去して、小さなCeliteパッドを通して、溶媒を真空除去して、表題化合物(323 mg)を白色固体として得た。1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  4.31 (dd, J=7.0, 4.7 Hz, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.72 - 3.59 (m, 1H), 3.02 - 2.84 (m, 2H), 1.27 (t, J=6.9 Hz, 3H).
【０１０１】
実施例MD-5, 工程c
【化１６】
2016527232.tif 000024
無水ジクロロメタン(15 mL)中のMD-5, 工程b(273 mg, 1.684 mmol)から得た物質の素早く攪拌した溶液に、無水トリフルオロ酢酸(20 mL， 142 mmol)を加えた。得られる淡黄色溶液を、室温で20分間攪拌して、次いで溶媒を、真空除去した。残留物を、無水ジクロロメタン(7 mL)に再溶解させて、蒸発乾固させて、表題化合物(243 mg)をTFA塩として得た。1H NMR (400 MHZ, CDCl3) δ  4.51 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 1H), 4.04 (dq, J=9.3, 7.0 Hz, 1H), 3.70 (dq, J=9.0, 7.0 Hz, 1H), 3.26 (dd, J=18.7, 8.7 Hz, 1H), 2.96 (dd, J=18.7, 5.6 Hz, 1H), 1.27 (t, J=7.0 Hz, 3H). 
【０１０２】
実施例MD-5, 工程d
【化１７】
2016527232.tif 000025
MD-5, 工程c(243 mg, 1.684 mmol)の物質/THF(1.5 mL)の素早く攪拌した溶液に、ベンジルアルコール(185 μL, 1.78 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて十分にフラッシュして、24時間60℃の砂浴に静置した。溶媒を、真空除去して、残留物を、ジクロロメタン(10 mL)に溶解して、溶媒を、再度真空除去して、表題化合物(425 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  7.48 - 7.31 (m, 5H), 5.29 - 5.17 (m, 2H), 4.34 (dd, J=8.2, 4.7 Hz, 1H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.56 (dq, J=9.1, 7.0 Hz, 1H), 2.92 - 2.77 (m, 2H), 1.23 (t, J=6.9 Hz, 3H).  
【０１０３】
実施例MD-5, 工程e
【化１８】
2016527232.tif 000026
無水ジクロロメタン(1.5 mL)中の、MD-5, 工程d(212 mg, 0.842 mmol)から得た物質、メチル 2-イソプロピルヒドラジンカルボキシレート(117 mg, 0.885 mmol)および1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(10 mg, 0.073 mmol)の溶液に、EDC(200 mg, 1.043 mmol)、その直後にDIEA(190 μL, 1.088 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて短時間フラッシュして、キャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。この反応溶液を、ジクロロメタン(200 mL)で希釈して、有機層を、飽和NaHCO3(50 mL)、水(50 mL)、塩水(50 mL)で洗浄して、Na2SO4で乾燥させて、濾過し、真空下にて蒸発乾固させた。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(40 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン to 75% 酢酸エチル/ジクロロメタン, 12以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(161 mg)を無色フィルムとして得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 367；[M+Na]+ 389,  Rt = 3.32分；LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 367；[M-H]- 365,  Rt = 2.62分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  7.48 - 7.31 (m, 5H), 5.21 (s, 2H), 4.80 (ddd, J=19.6, 13.2, 6.6 Hz, 1H), 4.57 - 4.32 (m, 1H), 3.64 - 3.40 (m, 1H), 3.09 - 2.83 (m, 1H), 2.74 - 2.50 (m, 1H), 1.28 - 0.95 (m, 10H).
【０１０４】
実施例MD-5, 工程f
【化１９】
2016527232.tif 000027
MD-5, 工程e(161 mg, 0.439 mmol)の物質/ジオキサン(2.15 mL)および水(1.3 mL)の混合物の溶液に、水酸化ナトリウム (21.0 mg, 0.91 mmol)を40分間かけて加えた。添加が完了した後に、得られる溶液を、室温で95分間攪拌して、短時間冷却して、1.0 M HCl水溶液(1 mL， 1.0 mmol)でクエンチした。該反応溶液を、ジクロロメタン(60 mL)で希釈して、水層をジクロロメタン(3 x 25 mL)で逆抽出した。有機層を合わせて、Na2SO4およびMgSO4で乾燥して、濾過し、真空にて蒸発乾固させて、表題化合物(190 mg)を無色油状物として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 277；[M+Na]+ 299,  Rt = 2.39分.
【０１０５】
実施例MD-5, 工程g
【化２０】
2016527232.tif 000028
0℃で、無水ACN(5 mL)中のMD-5, 工程fから得た物質(121 mg, 0.438 mmol)および1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(77 mg, 0.194 mmol)の溶液に、ゆっくりとDIEA (120 μL, 0.687 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら、18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(24 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% EtOAc, 12以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(133.2 mg)を無色油状物として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 787,  Rt = 3.91分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  8.04 (t, J=8.9 Hz, 4H), 7.77 (d, J=6.3 Hz, 4H), 5.72 - 5.33 (m, 4H), 4.95 - 4.74 (m, 2H), 4.69 - 4.52 (m, 2H), 3.97 - 3.74 (m, 8H), 3.71 - 3.48 (m, 2H), 3.26 (dd, J=14.5, 9.5 Hz, 1H), 3.04 (d, J=9.6 Hz, 1H), 2.87 - 2.64 (m, 2H), 1.34 - 0.98 (m, 18H).
【０１０６】
実施例MD-5
MD-5, 工程g(67.3 mg, 0.086 mmol)/無水トルエン(3.1 mL)の物質の溶液に、酢酸アンモニウム(268.7 mg, 3.49 mmol)およびイミダゾール(37.8 mg, 0.555 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、90℃の油浴中で2時間45分間静置した。加熱後に、反応溶液を、室温で18時間攪拌して、100℃に75分加熱して、次いでDIEA(150 μL, 0.859 mmol)を加えて、加熱を100℃で更に3時間45分続けた。溶媒を、濾去して、穏やかなN2ストリーム下において、残留物を、12分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて逆相分取HPLC 条件MD-1により精製して、純粋でない表題化合物(9.2 mg)をTFA塩として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 747,  Rt = 3.06分.
【０１０７】
純粋でない表題化合物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：20分かけて20〜60% B、次いで100% Bで5分間保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSをにより更に精製して、純粋な表題化合物(2.6 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 12.45 - 12.12 (m, 2H), 9.71 (br. s., 2H), 7.97 - 7.43 (m, 10H), 4.86 (d, J=6.7 Hz, 2H), 4.68 - 4.42 (m, 2H), 3.75 - 3.64 (m, 14H), 1.09 - 0.89 (m, 18H).
【０１０８】
実施例MD-6
【化２１】
2016527232.tif 000029
実施例MD-6, 工程a
【化２２】
2016527232.tif 000030
無水ジクロロメタン(1.6 mL)中のMD-5, 工程d(212 mg, 0.842 mmol)から得た物質、イソブチルアミン(115 μL, 1.148 mmol)およびHOAT(20 mg, 0.147 mmol)の溶液に、EDC(200 mg, 1.043 mmol)、その直後にDIEA(200 μl, 1.145 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて短時間フラッシュして、キャップを閉めて、室温で1時間攪拌して、次いで溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において終夜除去した。粗生成物を、ジクロロメタン(5 mL)に溶解して、フラッシュカラムクロマトグラフィー(24 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル、12以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(161 mg)を無色フィルムとして得た。
LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 308；[M+Na]+ 330,  Rt = 3.50分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ 7.50 - 7.32 (m, 5H), 6.08 (br. s., 1H), 5.29 - 5.13 (m, 2H), 4.32 (dd, J=8.6, 3.7 Hz, 1H), 3.76 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H), 3.62 - 3.44 (m, 1H), 3.13 (dt, J=13.2, 6.5 Hz, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.74 - 2.66 (m, 1H), 2.62 - 2.52 (m, 1H), 1.76 (dt, J=13.4, 6.7 Hz, 1H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H), 0.92 (dd, J=6.6, 0.4 Hz, 6H).
【０１０９】
実施例MD-6, 工程b
【化２３】
2016527232.tif 000031
MD-6, 工程a(177 mg, 0.576 mmol)由来の物質/メタノール(75 mL)の溶液に、30% パラジウム/炭素(78 mg)を加えた。該反応溶液を、N2を用いてフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、次いでH2ガスを用いて十分にパージして、H2雰囲気下において、18時間室温で攪拌した。この反応溶液を、45μフリットを通して濾過して、溶媒を真空除去して、表題化合物(126.9 mg)を無色油状物として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 240,  Rt = 2.39分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  7.88 - 7.43 (brs, 1H), 6.45 (t, J=5.3 Hz, 1H), 4.26 (dd, J=7.1, 4.8 Hz, 1H), 3.87 - 3.73 (m, 1H), 3.64 - 3.48 (m, 1H), 3.23 - 3.02 (m, 2H), 2.80 (dd, J=15.2, 4.8 Hz, 1H), 2.67 (dd, J=15.3, 7.2 Hz, 1H), 1.80 (dt, J=13.4, 6.7 Hz, 1H), 1.25 (t, J=7.0 Hz, 3H), 0.93 (d, J=6.7 Hz, 6H).
【０１１０】
実施例MD-6, 工程c
【化２４】
2016527232.tif 000032
無水ACN(3.5 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(51 mg, 0.129 mmol)およびMD-6, 工程b(62.1 mg, 0.286 mmol)からの物質の懸濁に、0℃でDIEA(80 μL, 0.458 mmol)をゆっくりと加えた。得られるオフホワイトの懸濁液に、N2を用いて十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル、11以上のカラム容量)で精製して、表題化合物(79.7 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 669,  Rt = 3.93分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ 8.12 - 7.98 (m, 4H), 7.84 - 7.69 (m, 4H), 6.18 (t, J=5.7 Hz, 2H), 5.58 - 5.38 (m, 4H), 4.51 (dd, J=8.4, 4.1 Hz, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.62 (dq, J=9.0, 7.1 Hz, 2H), 3.24 - 3.06 (m, 4H), 2.89 (dd, J=14.8, 4.1 Hz, 2H), 2.72 (dd, J=14.9, 8.3 Hz, 2H), 1.80 (dt, J=13.4, 6.7 Hz, 2H), 1.29 (t, J=7.0 Hz, 6H), 0.95 (d, J=6.7 Hz, 12H).
【０１１１】
実施例MD-6
48 mLの圧力瓶に、N2下において、実施例MD-6, 工程c(42.3 mg, 0.063 mmol)からの物質、酢酸アンモニウム(170 mg, 2.205 mmol)、イミダゾール(25 mg, 0.367 mmol)および無水トルエン(3 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、100℃で6時間加熱した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下にて留去して、粗生成物を、10分かけて30% 溶媒B/70% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLCの 条件MD-1により精製して、表題化合物(8.3 mg)のTFA塩を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 629,  Rt = 3.21分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ 7.94 (s, 2H), 7.89 (s, 8H), 5.18 (t, J=6.5 Hz, 2H), 3.71 - 3.61 (m, 4H), 3.05 - 3.01 (m, 4H), 2.95 (dd, J=8.2, 6.6 Hz, 4H), 1.78 (dt, J=13.5, 6.7 Hz, 2H), 1.27 (t, J=6.9 Hz, 6H), 0.92 (dd, J=6.6, 0.7 Hz, 12H).
分析的HPLC MD-A：Rt = 25.67分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 25.32分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 8.90分, λ = 254 nm
【０１１２】
実施例MD-7
【化２５】
2016527232.tif 000033
実施例MD-7, 工程a
【化２６】
2016527232.tif 000034
無水ACN(25 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(800 mg, 2.02 mmol)および(4R,5R)-5-(メトキシカルボニル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-カルボン酸(BMCL, 2003 , vol.13, No. 10 p. 1713-1716)(950 mg, 4.65 mmol)の懸濁液に、0℃で、DIEA(850 μL, 4.87 mmol)をゆっくりと加えた。得られるオフホワイトの懸濁液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜70% 酢酸エチル/ヘキサン, 11以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(1.11 g)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 665,  Rt = 3.79分. 1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  8.04 (d, J=8.7 Hz, 4H), 7.77 (d, J=8.5 Hz, 4H), 5.61 (d, J=16.2 Hz, 2H), 5.44 (d, J=16.2 Hz, 2H), 5.12  (d, 2H, J = 5.3 Hz), 5.07 (d, 2H, J = 5.3 Hz), 3.88 (s, 6H), 1.60 (s, 6H), 1.56 (s, 6H).
【０１１３】
実施例MD-7, 工程b
【化２７】
2016527232.tif 000035
マイクロ波用バイアルに、N2下において、実施例MD-7, 工程a(108.1 mg, 0.168 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(330 mg, 4.28 mmol)および無水トルエン(4 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、110℃で45分間加熱した。この反応溶液を、次いで106℃で5時間、その後60℃で18時間加熱した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において、留去して、残留物を、EtOAcおよび飽和NaHCO3水溶液との相間に分配した。水層を、EtOAcで逆抽出して、有機層を合わせて、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、濾過して、蒸発乾固させた。粗生成物を、11分かけて25% 溶媒B/75% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、表題化合物(26.8 mg)のTFA塩を、白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 603,  Rt = 2.88分. 1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ 8.00 (s, 2H), 7.93 - 7.86 (m, 8H), 5.67 (d, J=6.7 Hz, 2H), 4.98 (d, J=6.7 Hz, 2H), 3.87 (s, 6H), 1.64 (s, 6H), 1.55 (s, 6H).
【０１１４】
実施例MD-7
2〜5 mLのマイクロ波用バイアルに、N2下において、実施例MD-7, 工程b(18 mg, 0.022 mmol)から得た物質、2-メチルプロパン-1-アミン(100 mg, 1.367 mmol)および無水MeOH(2 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、マイクロ波加熱装置内で高出力下にて155℃で90分間加熱し、高出力下にて130℃で16時間更に加熱した。揮発性物質を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、粗生成物を、10分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒 A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLC条件MD-1により精製して、表題化合物(7.8 mg)のTFA塩を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 685,  Rt = 3.31分；1H NMR (400 MHZ, CD3OD) δ  8.00 (s, 2H), 7.89 (s, 8H), 5.45 (d, J=7.7 Hz, 2H), 4.79 (d, J=7.7 Hz, 2H), 3.22 - 3.14 (m, 2H), 3.12 - 3.06 (m, 2H), 1.89 (m, 2H), 1.67 (s, 6H), 1.61 (s, 6H), 0.98 - 0.93 (m, 12H).
分析的HPLC MD-A：Rt = 25.18分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 25.07分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 10.66分, λ = 254 nm
分析的HPLC MD-D：Rt = 11.83分, λ = 254 nm
【０１１５】
実施例MD8
【化２８】
2016527232.tif 000036
実施例MD-8, 工程a
【化２９】
2016527232.tif 000037
無水ジクロロメタン(5 mL)中の(4R,5R)-5-(メトキシカルボニル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-カルボン酸(BMCL, 2003 , vol.13, # 10 p. 1713 - 1716)(610 mg, 2.99 mmol)、メチル 2-イソプロピルヒドラジンカルボキシレート(375.5 mg, 2.84 mmol)およびHOAT(62 mg, 3.19 mmol)の懸濁液に、EDC(612 mg, 3.19 mmol)、直後にDIEA(600 μl, 1.209 mmol)を加えた。該反応懸濁液を、N2を用いて短時間フラッシュして、キャップして、室温で18時間攪拌した。この反応懸濁液を、ジクロロメタン(50 mL)で希釈して、有機層を、飽和NaHCO３水溶液(1 x 50 mL)、水(1 x 25 mL)、塩水(1 x 50 mL)で洗浄して、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、溶媒を、真空除去した。粗生成物を、ジクロロメタン(10 mL)に溶解して、フラッシュカラムクロマトグラフィー(120 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜80% 酢酸エチル/ジクロロメタン, 10以上のカラム容量で)で精製して、表題化合物(320 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 319,  Rt = 2.71分；LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 319；[M-H]- 317,  Rt = 2.09分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ 5.30 - 5.20 (m, 1H), 5.02 - 4.67 (m, 2H), 3.87 - 3.76 (m, 6H), 1.55 - 1.41 (m, 6H), 1.29 - 1.10 (m, 6H).
【０１１６】
実施例MD-8, 工程b
【化３０】
2016527232.tif 000038
ジオキサン(5 mL)および水(3 mL)の混合液中のMD-8, 工程a(315 mg, 0.990 mmol)から得た物質の溶液に、30分かけてゆっくりと水酸化ナトリウム(47.4 mg, 2.06 mmol)を加えた。該反応溶液を、室温で1時間攪拌して、-20℃のフリーザー内で短時間冷却して、1.0N HCl(1.4 mL)でクエンチした。この反応溶液を、ジクロロメタン(80 mL)および水(4 mL)で希釈して、有機層を分離して、Na2SO4/MgSO４上で乾燥して、濾過し、溶媒を真空除去して、表題化合物(255 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 327,  Rt = 2.38分.
【０１１７】
実施例MD-8, 工程c
【化３１】
2016527232.tif 000039
無水ACN(15 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(130 mg, 0.328 mmol)およびMD-8, 工程b (250 mg, 0.822 mmol)から得た物質の懸濁液に、0℃で、ゆっくりとDIEA (200 μL, 1.145 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。この反応溶液を、ジクロロメタン(10 mL)で希釈して、1時間-20℃まで冷却して、白色沈殿物を濾去して、表題化合物(184 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 865,  Rt = 3.708分.
【０１１８】
実施例MD-8
乾燥した5〜10 mL マイクロ波用バイアルに、N2下において、MD-8, 工程c(82 mg, 0.097 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(280 mg, 3.63 mmol)、イミダゾール(40 mg, 0.588 mmol)および無水トルエン(3.5 mL)を加えた。得られる懸濁液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で5分間攪拌して、次いで100℃まで3.5時間加熱して、次いで室温で18時間加熱した。得られる粗固体を、トルエン(3 x 2 mL)で洗い、溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、得られる粗製固体を、11分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLC 条件MD-1により精製して、表題化合物のTFA塩(10.8 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 803, Rt = 3.32分. 1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.97 (s, 2H), 7.89 (s, 8H), 5.84 (d, J=6.7 Hz, 2H), 4.96 (d, J=6.7 Hz, 2H), 4.73 (m, 2H), 3.64 (s, 6H), 1.61 (s, 6H), 1.56 (s, 6H), 1.17 (d, J=6.7 Hz, 6H), 1.12 (d, J=6.7 Hz, 6H).
分析的HPLC MD-A：Rt = 23.35分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 23.79分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 9.31分, λ = 254 nm
分析的HPLC MD-D：Rt = 10.05分, λ = 254 nm
【０１１９】
実施例MD-9
【化３２】
2016527232.tif 000040
48 mL 圧力瓶に、N2下において、MD-7, 工程a(226 mg, 0.352 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(850 mg, 11.03 mmol)および無水トルエン(8 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、110℃で18時間加熱した。上清を、除去して、得られる粗製固体を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：25分かけて30〜80%B、次いで100% Bにて5分間保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、表題化合物(13.1 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ  7.86 (br. s., 3H), 7.71 (br. s., 5H), 7.57 - 7.41 (m, 4H), 5.13 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.87 (br. s., 2H), 2.55 (s, 4H), 1.47 (br. s., 12H).
【０１２０】
実施例MD-10
【化３３】
2016527232.tif 000041
実施例MD-9に記述された反応から単離されたものも、上記に示した化合物(7.4 mg)であった。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 7.84 (d, J=7.7 Hz, 4H), 7.71 (d, J=7.7 Hz, 4H), 7.62 (s, 1H), 7.54 (br. s., 1H), 7.47 (br. s., 1H), 5.13 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.12 - 5.10 (d, J=7.3 Hz,1H), 4.89 (d, J=7.0 Hz, 1H), 4.81 (d, J=7.3 Hz, 1H), 2.55 (s, 2H), 2.51 (br. s., 2H), 1.47 (br. s., 6H), 1.43 (d, 6H).
【０１２１】
実施例MD-11
【化３４】
2016527232.tif 000042
実施例MD-11, 工程a
【化３５】
2016527232.tif 000043
無水アセトニトリル(30 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(1.2 g, 3.03 mmol)、(R)-4-(tert-ブトキシ)-2-メチル-4-オキソブタン酸(J. Org. Chem., V. 64 (1999), issue 17, p. 6411-6417に記述した方法に従って製造した)(1.72 g, 9.14 mmol)の氷冷懸濁液に、ゆっくりとDIEA(1.6 mL， 9.16 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(120 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜100% 酢酸エチル, 11以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(980 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 633,  Rt = 4.42分；1H NMR (400 MHZ, CDCl3) δ  8.03 (d, J=8.3 Hz, 4H), 7.75 (d, J=8.5 Hz, 4H), 5.57 - 5.39 (m, 2H), 5.37 - 5.25 (m, 2H), 3.19 - 2.98 (m, 2H), 2.79 (dd, J=16.4, 7.7 Hz, 2H), 2.43 (dd, J=16.3, 6.5 Hz, 2H), 1.51 - 1.45 (m, 18H), 1.35 (d, J=7.3 Hz, 6H).
【０１２２】
実施例MD-11, 工程b
【化３６】
2016527232.tif 000044
乾燥させた48 mL圧力瓶に、N2下において、MD-11, 工程a(807 mg, 1.321 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(3.06 g, 39.7 mmol)、イミダゾール(540 mg, 7.93 mmol)および無水トルエン(20 mL)を得た。該反応溶液を、N2を用いて十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で5分間攪拌して、次いで110℃の油浴中で18時間加熱した。溶媒を、留去して、穏やかなN2ストリーム下において、60℃まで7時間温めながら攪拌した。残留物を、酢酸エチル(425 mL)および水(50 mL)の混合液に溶解して、有機層を、水(5 x 50 mL)、塩水(1 x 50 mL)で抽出して、Na2SO4で乾燥して、濾過し、溶媒を、真空で除去した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー[24 g Teledyne Isco Silica Flash Column (1% トリエチルアミン/ジクロロメタンにより平衡化した)、100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル, 10以上のカラム体積]により精製して、表題化合物(448 mg)を黄色の固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 571, Rt = 3.15分. 1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  10.15 (br. s., 1H), 9.91 - 9.71 (m, 1H), 7.85 (d, J=6.4 Hz, 3H), 7.72 - 7.45 (m, 6H), 7.25 (br. s., 1H), 3.55 - 3.34 (m, 2H), 2.82 - 2.61 (m, 4H), 1.55 - 1.41 (m, 24H).  
【０１２３】
実施例MD-11, 工程c
【化３７】
2016527232.tif 000045
無水ジクロロメタン(5 mL)中でMD-11, 工程b(141.6 mg, 0.248 mmol)から得た物質を素早く攪拌した溶液に、TFA(8 mL， 104 mmol)を加えた。得られる赤/橙色の溶液を、室温で90分間静置して、次いで揮発性物質を、穏やかなN2ストリーム下において除去した。残留物を、ジクロロメタン(20 mL)に懸濁して、溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去した。残留物を、トルエン(25 mL)に懸濁して、短時間ソニック処理して、溶媒を、真空除去して、表題化合物のTFA塩(182.7 mg)を褐色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 4591,  Rt = 2.35分；1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 8.17 (s, 2H), 8.03 - 7.87 (m, 8H), 3.71 - 3.53 (m, 2H), 2.95 (dd, J=17.1, 8.4 Hz, 2H), 2.87 - 2.77 (m, 2H), 1.41 (d, J=7.0 Hz, 6H).
【０１２４】
実施例MD-11
MD-11, 工程c(15 mg, 0.022 mmol)から得た物質/無水DMF(600 μL)の懸濁液に、イソブチルアミン(25 μL, 0.250 mmol)、DIEA(40 μL, 0.229 mmol)およびHATU(85 mg, 0.224 mmol)を加えた。得られる溶液を、N2を用いて十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で80分間攪拌した。該反応溶液を、DMF(1.4 mL)で希釈して、45μフリットを通して濾過して、10分かけて、20% 溶媒B/80%溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、表題化合物のTFA塩(8.5 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 569,  Rt = 3.02分. 1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.94 - 7.78 (m, 10H), 3.77 - 3.65 (m, 2H), 3.07 - 2.94 (m, 4H), 2.88 - 2.77 (m, 4H), 1.76 (dt, J=13.5, 6.8 Hz, 2H), 1.52 (d, J=7.2 Hz, 6H), 0.90 (dd, J=6.7, 1.8 Hz, 12H).
【０１２５】
実施例MD-12
【化３８】
2016527232.tif 000046
実施例MD-12, 工程a
【化３９】
2016527232.tif 000047
MD-11, 工程a(103 mg, 0.169 mmol)から得た物質/無水ジクロロメタン(4 mL)のすばやく攪拌した溶液に、TFA(5.5 mL，71.4 mmol)を加えた。得られる透明で無色の溶液を、室温で1時間静置して、次いで溶媒を、真空除去した。残留物を、ジクロロメタンに溶解させて、溶媒を真空除去した。残留物を、トルエンに溶解して、溶媒を、真空除去して、表題化合物(84.7 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 521,  Rt = 3.43分.
【０１２６】
実施例MD-12, 工程b
【化４０】
2016527232.tif 000048
MD-12, 工程a(84.7 mg, 0.170 mmol)から得た物質、メチル 2-イソプロピルヒドラジンカルボキシレート(60 mg, 0.454 mmol)およびHOAT(10 mg, 0.073 mmol)のジクロロメタン(2 mL)溶液に、EDC(51 mg, 0.266 mmol)およびDIEA(150 μL, 0.037 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(24 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル, 11以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(136.5 mg)を無色フィルムとして得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 727,  Rt = 3.85分.
【０１２７】
実施例MD-12
乾燥した10〜20 mL マイクロ波用バイアルに、N2下において、MD-12, 工程b(136.5 mg, 0.188 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(455 mg, 5.90 mmol)、イミダゾール(83 mg, 1.219 mmol)および無水トルエン(3.0 mL)を加えた。反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、110℃の油浴中に18時間静置した。粗製反応を、10分かけて25% 溶媒B/75% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて、逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、純粋でない化合物(15.3 mg)のTFA塩を淡黄色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 687,  Rt = 2.83分.
【０１２８】
純粋でない表題化合物を、次いで以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：25分かけて20〜60% B、次いで5分間 100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従う分取LC/MSにより更に精製して、純粋な表題化合物(3.1 mg)を白色フィルムとして得た。1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.89 - 7.56 (m, 8H), 7.32 (d, J=8.2 Hz, 2H), 4.80 - 4.61 (m, 2H), 3.80 (d, J=19.8 Hz, 6H), 3.54 (dt, J=14.0, 6.8 Hz, 2H), 3.00 (dd, J=16.3, 7.9 Hz, 1H), 2.88 (dd, J=16.4, 8.3 Hz, 1H), 2.67 (dd, J=16.4, 5.9 Hz, 1H), 2.54 (dd, J=16.2, 6.7 Hz, 1H), 1.38 (d, J=7.0 Hz, 6H), 1.19 - 0.96 (m, 12H).
【０１２９】
実施例MD-13
【化４１】
2016527232.tif 000049
乾燥したバイアルに、N2下において、MD-11, 工程c(25 mg, 0.036 mmol)から得た物質、4,4-ジフルオロピペリジン、1.00 HCl(50 mg, 0.317 mmol)、HOAT(15 mg, 0.110 mmol)、無水ジクロロメタン(2.5 mL)、EDC(50 mg, 0.261 mmol)およびDIEA(105 μL, 0.601 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2を用いて短時間でフラッシュして、キャップを閉めて、室温で80分間攪拌して、次いでDMAP(19 mg, 0.156 mmol)で処理して、室温で70時間攪拌させた。該反応溶液を、次いで別のEDC(56 mg, 0.292 mmol)およびDIEA(105 μL, 0.601 mmol)で処理して、N2でフラッシュして、室温で24時間攪拌した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において、残留物を、DMF(1.4 mL)で希釈して、45μフリットを通して濾過して、11分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、純粋でない表題化合物のTFA塩(18 mg)を無色フィルムとして得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 665,  Rt = 3.03分.
【０１３０】
純粋でない表題化合物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：30分かけて50〜90% B、次いで7分間100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより更に精製して、純粋な表題化合物(6.0 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ  12.13 (br. s., 1H), 11.86 (br. s., 1H), 8.00 - 7.40 (m, 10H), 3.62 (d, J=7.3 Hz, 10H), 2.99 (dd, J=15.1, 6.9 Hz, 2H), 2.62 (dd, J=15.4, 6.9 Hz, 2H), 2.09 - 1.81 (m, 8H), 1.29 (d, J=6.7 Hz, 6H).
【０１３１】
実施例MD-14
【化４２】
2016527232.tif 000050
実施例MD-14, 工程a
【化４３】
2016527232.tif 000051
ジクロロメタン(8 mL)中の(4R,5R)-5-(エトキシカルボニル)-1,3-ジオキソラン-4-カルボン酸(BOMCL, 2002, vol. 10, # 5, 1567-1580に記述した方法に従って製造した)(200 mg, 1.052 mmol)、2-メチルプロパン-1-アミン(100 mg, 1.367 mmol)、HOAT(40 mg, 0.294 mmol)の溶液に、EDC(250 mg, 1.304 mmol)およびDIEA (220 μL, 1.260 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。この反応溶液を、水で1回、塩水で1回洗い、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、溶媒を、真空除去して、表題化合物(240 mg)を無色油状物として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 246,  Rt = 2.99分.
【０１３２】
実施例MD-14, 工程b
【化４４】
2016527232.tif 000052
ジオキサン(5 mL)および水(3 mL)の混合物中のMD-14, 工程a(240 mg, 0.979 mmol)から得た物質の溶液に、水酸化ナトリウム(45 mg, 1.125 mmol)をゆっくりと加えた。該反応溶液を、室温で80分間攪拌して、-20℃に冷却して、1N HCl水溶液(1.5 mL， 1.50 mmol)でクエンチした。反応溶液を、ジクロロメタン(80 mL)で希釈して、有機層を、水(3 mL)で洗浄した。水層を、別のジクロロメタン(30mL)で逆抽出して、有機層を合わせて、Na2SO4/MgSO4で乾燥して、濾過して、溶媒を、真空除去して、表題化合物(152 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 218,  Rt = 2.33分.  1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  6.84 (br. s., 1H), 5.26 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.62 (d, J=6.7 Hz, 1H), 4.56 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 3.26 - 3.16 (m, 2H), 1.87 (m, 1H), 0.97 (d, J=6.7 Hz, 6H).
【０１３３】
実施例MD-14, 工程c
【化４５】
2016527232.tif 000053
無水アセトニトリル(7 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン) (125 mg, 0.316 mmol)、MD-14, 工程b(152 mg, 0.700 mmol)から得た物質の冷冷懸濁液に、DIEA(180 μL, 1.031 mmol)をゆっくりと加えた。該反応懸濁液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら60時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(40 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル, 9以上のカラム体積)により精製して、表題化合物(173 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 669,  Rt = 3.72分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  8.03 (d, J=8.4 Hz, 4H), 7.77 (d, J=8.4 Hz, 4H), 6.68 (t, J=5.9 Hz, 2H), 5.66 (d, J=16.3 Hz, 2H), 5.43 (d, J=16.3 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 5.08 (d, J=3.5 Hz, 2H), 5.02 (d, J=3.5 Hz, 2H), 3.18 (m, 4H), 1.84 (m, 2H), 0.96 (d, J=6.7 Hz, 12H).
【０１３４】
実施例MD-14
48 mLの圧力瓶に、N2下において、MD-14, 工程cから得た物質(88 mg, 0.132 mmol)、酢酸アンモニウム(350 mg, 4.54 mmol)、イミダゾール(50.8 mg, 0.746 mmol)および無水トルエン(4 mL)を加えた。該反応溶液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、110℃で10時間加熱した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、11分かけて, 30% 溶媒B/70% 溶媒A 〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、表題化合物のTFA塩(6.9 mg)を白色固体として得た。
LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 629,  Rt = 3.14分.  1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  7.95 (s, 2H), 7.89 (m, 8H), 5.54 (d, J=4.9 Hz, 2H), 5.50 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 3.14 (d, J=7.0 Hz, 4H), 2.67 (s, 2H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 0.96 (d, J=6.7 Hz, 12H). 
分析的HPLC MD-A：Rt = 23.22分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 23.62分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 8.49分, λ = 254 nm
分析的HPLC MD-D：Rt = 9.42分, λ = 254 nm
【０１３５】
実施例MD-15
【化４６】
2016527232.tif 000054
実施例MD-15, 工程a
【化４７】
2016527232.tif 000055
無水アセトニトリル(25 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン) (870 mg, 2.197 mmol)、(4R,5R)-5-(エトキシカルボニル)-1,3-ジオキソラン-4-カルボン酸(BOMC, 2002, vol. 10, No.# 5, 1567-1580に記載した方法に従って製造した)(1.25 g, 6.57 mmol)の氷冷懸濁液に、DIEA(1.3 mL， 7.44 mmol)をゆっくりと加えた。反応溶液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜70% 酢酸エチル/ヘキサン, 11以上のカラム体積)により精製して、表題化合物(865 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 637,  Rt = 3.65分.  1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  8.04 (d, J=8.5 Hz, 4H), 7.78 (d, J=8.5 Hz, 4H), 5.62 (d, J=16.3 Hz, 2H), 5.46 (d, J=16.3 Hz, 2H), 5.37 (s, 2H), 5.35 (s, 2H), 5.11 (d, J=3.4 Hz, 2H), 5.00 (d, J=3.4 Hz, 2H), 4.33 (q, J=7.2 Hz, 4H), 1.37 (t, J=7.2 Hz, 6H).
【０１３６】
実施例MD-15
乾燥させた10〜20 mL マイクロ波用バイアルに、N2下において、実施例MD-15, 工程a(100 mg, 0.163 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(365 mg, 4.74 mmol)および無水トルエン(4 mL)を加えた。反応溶液を、N2で十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、60℃で18時間加熱した。反応溶液を、80℃で3時間さらに加熱して、次いで90℃で2.5時間加熱した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、粗生成物を、11分かけて20% 溶媒B/80% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いる逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、純粋でない表題化合物(18 mg)のTFA塩をオフホワイトの固体として得た。純粋でない表題化合物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：20分かけて20〜60% B、次いで5分間100% Bで保持した；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSを介して更に精製して、純粋な表題化合物(5.4 mg)を得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 575,  Rt = 2.76分；1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 12.86 (br. s., 1H), 12.53 (br. s., 1H), 8.09 - 7.56 (m, 10H), 5.33 - 5.02 (m, 8H), 4.21 (d, J=7.0 Hz, 4H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 6H).
【０１３７】
実施例MD-16
【化４８】
2016527232.tif 000056
乾燥10〜20 mL マイクロ波用バイアルに、N2下において、実施例MD-15, 工程a(100 mg, 0.163 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(330 mg, 4.74 mmol)および無水トルエン(4 mL)を加えた。反応溶液を、N2で十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で10分間攪拌して、次いで110℃の油浴中に4.5時間静置した。反応溶液を、EtOAcおよび飽和NaHCO３水溶液の間の層間に分配して、有機層を除去して、蒸発乾固させた。LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 575, [M-H]- 573； Rt = 2.58分.
【０１３８】
得られる残留物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：20分かけて30〜70% B、次いで5分間 100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、表題化合物(1.0 mg)を得た；1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ  12.86 (br. s., 1H), 12.53 (br. s., 1H), 8.09 - 7.56 (m, 10H), 5.33 - 5.02 (m, 8H), 4.21 (d, J=7.0 Hz, 4H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 6H).
【０１３９】
実施例MD-17
【化４９】
2016527232.tif 000057
実施例MD-17, 工程a
【化５０】
2016527232.tif 000058
ジクロロメタン(6 mL)中の(4R,5R)-5-(エトキシカルボニル)-1,3-ジオキソラン-4-カルボン酸(BOMC, 2002, vol. 10, No. 5, 1567-1580に記載した方法に従って製造した)(490 mg, 2.58 mmol)、メチル 2-イソプロピルヒドラジンカルボキシレート(388 mg, 1.139 mmol)、HOAT(80 mg, 0.588 mmol)の溶液に、EDC(600 mg, 3.13 mmol)およびDIEA(600 μL, 3.44 mmol)を加えた。反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において留去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(120 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜80% 酢酸エチル/ヘキサン, 11以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(60 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 327,  Rt = 2.54分.
【０１４０】
実施例MD-17, 工程b
【化５１】
2016527232.tif 000059
ジオキサン(3 mL)および水(1 mL)の混合液中のMD-17, 工程a(60 mg, 0.197 mmol)から得た物質の溶液に、水酸化ナトリウム(11 mg, 0.275 mmol)を加えた。反応溶液を、しっかりとキャップを閉めて、室温で1時間攪拌して、-20℃に冷却して、1N HCl (400 μL)でクエンチした。反応溶液を、ジクロロメタン(70 mL)および水(3 mL)で希釈して、有機層を除去して、Na2SO4/MgSO4上で乾燥して、濾過し、溶媒を真空除去して、表題化合物(52 mg)を無色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 277, [M+Na]+ 299；Rt = 1.96分.
【０１４１】
実施例MD-17, 工程c
【化５２】
2016527232.tif 000060
無水アセトニトリル(3 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(37 mg, 0.093 mmol)、MD-17, 工程b(52 mg, 0.188 mmol)から得た物質の氷冷懸濁液に、ゆっくりとDIEA(60 μL, 0.344 mmol)を加えた。反応溶液を、N2で十分フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(12 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜70% 酢酸エチル/ヘキサン, 10以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(35 mg)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 787, [M+Na]+ 809； Rt = 3.42分.
【０１４２】
実施例MD-17
15 mLの圧力瓶に、N2下において、MD-17, 工程c(35 mg, 0.044 mmol)から得た物質、酢酸アンモニウム(115 mg, 1.492 mmol)および無水トルエン(4 mL)を加えた。反応溶液を、N2でフラッシュして、直ちに79℃の油浴中に置いて、これを101℃まで温度を上げた。反応溶液を、101℃で5時間加熱した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、粗生成物を、11分かけて30% 溶媒B/70% 溶媒A〜100% 溶媒Bのグラジエントを用いて逆相分取HPLCの条件MD-1により精製して、表題化合物(7.0 mg)のTFA塩を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 747, Rt = 2.94分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ  8.03 - 7.76 (m, 10H), 5.77 - 5.08 (m, 8H), 4.77 - 4.66 (m, 2H), 3.81 - 3.53 (m, 6H), 1.29 - 1.07 (m, 12H).
分析的HPLC MD-A：Rt = 20.63分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-B：Rt = 21.73分, λ = 220 nm
分析的HPLC MD-C：Rt = 7.04分, λ = 254 nm
分析的HPLC MD-D：Rt = 7.50分, λ = 254 nm
【０１４３】
実施例MD-18
【化５３】
2016527232.tif 000061
実施例MD-18, 工程a
【化５４】
2016527232.tif 000062
無水アセトニトリル(20 mL)中の1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(750 mg, 1.894 mmol)、(S)-4-(tert-ブトキシ)-2-イソプロピル-4-オキソブタン酸(J. Org. Chem, 1999, 64, 6411-6417に記載した方法に従って製造した)(859 mg, 3.97 mmol)の氷冷懸濁液に、DIEA(1.1 mL， 6.30 mmol)をゆっくりと加えた。該反応懸濁液を、N2を用いて十分にフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温までゆっくりと昇温させながら18時間攪拌した。溶媒を、真空除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ヘキサン〜60% 酢酸エチル/ヘキサン, 10以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(1.23 g)を白色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+Na]+ 666； Rt = 4.76分；1H NMR (500 MHZ, CDCl3) δ  8.04 (d, J=8.4 Hz, 4H), 7.75 (d, J=8.5 Hz, 4H), 5.51 (d, J=16.2 Hz, 2H), 5.30 (d, J=16.3 Hz, 2H), 2.94 - 2.87 (m, 2H), 2.75 (dd, J=16.6, 10.5 Hz, 2H), 2.43 (dd, J=16.6, 4.1 Hz, 2H), 2.24 - 2.14 (m, 2H), 1.47 (s, 18H), 1.08/1.06 (two overlapping doublets, J= 6.8, 7.0 Hz, 12H).
【０１４４】
実施例MD-18, 工程b
【化５５】
2016527232.tif 000063
15 mLの圧力瓶に、N2下において、MD-18, 工程a(232 mg, 0.348 mmol)の物質、酢酸アンモニウム(812 mg, 10.53 mmol)、イミダゾール(141 mg, 2.071 mmol)および無水トルエン(5.5 mL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、78℃の油浴中に静置して、これを120℃として設定した。この反応溶液を、120℃で18時間加熱した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー (24 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜100% 酢酸エチル, 12以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(80.2 mg)を黄色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 627； Rt = 3.42分；1H NMR (500 MHZ, CD3OD) δ 7.89 - 7.63 (m, 8H), 7.34 (br. s., 2H), 3.07 (ddd, J=10.3, 7.8, 5.5 Hz, 2H), 2.87 - 2.69 (m, 4H), 2.61 - 2.46 (m, 2H), 1.99 (dd, J=14.2, 6.9 Hz, 2H), 1.32 (s, 18H), 1.04 (d, J=6.7 Hz, 6H), 0.88 (d, J=6.9 Hz, 6H).
【０１４５】
実施例MD-18, 工程c
【化５６】
2016527232.tif 000064
無水ジクロロメタン(5 mL)中のMD-18, 工程b(80.2 mg, 0.128 mmol)から得た物質の溶液に、激しく攪拌しながらTFA(8 mL)を加えた。得られる溶液を、室温で70分間、次いで揮発性物質を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、表題化合物のTFA塩(134.8 mg)を黄色フィルムとして得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 515； Rt = 2.97分.
【０１４６】
実施例MD-18, 工程d
【化５７】
2016527232.tif 000065
ジクロロメタン(14 mL)中のMD-18, 工程c(460 mg, 0.537 mmol)から得た物質の懸濁液に、DIEA(540 μL, 3.09 mmol)、直後にHATU(877 mg, 2.306 mmol)を加えた。得られる懸濁液を、N2により短時間フラッシュして、キャップを閉めて、短時間のソニック処理を行ない、室温で1.5時間攪拌した。反応溶液を、45μフリットを通して濾過して、フラッシュカラムクロマトグラフィー(80 g Teledyne Isco Silica Flash Column, 100% ジクロロメタン〜50% ジクロロメタン：50% 酢酸エチル, 5以上のカラム容量)により精製して、表題化合物(170 mg)を淡黄色固体として得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 479； Rt = 4.23分；1H NMR (400 MHZ, CDCl3) δ 7.97 - 7.88 (m, 4H), 7.78 - 7.66 (m, 4H), 7.55 (s, 2H), 3.39 (ddd, J=8.2, 5.3, 3.1 Hz, 2H), 3.29 - 3.19 (m, 2H), 2.92 (dd, J=18.6, 3.3 Hz, 2H), 2.38 - 2.24 (m, 2H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.03 (d, J=6.8 Hz, 6H).
【０１４７】
実施例MD-18
0.5〜2.0 mLの乾燥させたマイクロ波バイアルに、N2下において、MD-18, 工程d(20.2 mg, 0.042 mmol)から得た物質、ピバル酸(44 μL, 0.378 mmol)、2,2-ジメチルプロパン-1-アミン(29.2 mg, 0.355 mmol)および無水NMP(700 μL)を入れた。該反応溶液を、N2を用いて短時間フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、10分間75℃の砂浴に静置した。この反応溶液を、次いでマイクロ波加熱装置内において、高出力下にて110℃で1分間加熱した。LC/MS条件MD-1：[M+H]+ 653； Rt = 3.52分。反応溶液を、DMF(700 μL)で希釈して、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：15分かけて40〜100% B、次いで10分間かけて100% Bで保持した；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、表題化合物(22.8 mg)を得た。1H NMR (500 MHZ, DMSO-d6) δ 12.32 - 11.66 (m, 2H), 7.98 - 7.57 (m, 10H), 7.49 (br. s., 2H), 3.21 - 3.09 (m, 2H), 2.88 (dd, J=13.4, 6.7 Hz, 2H), 2.82 - 2.67 (m, 4H), 2.56 (br. s., 2H), 2.00 - 1.88 (m, 2H), 0.87 (dd, J=14.2, 6.6 Hz, 12H), 0.74 (s, 18H).  
【０１４８】
実施例MD-19
【化５８】
2016527232.tif 000066
無水NMP(600 μL)中の実施例MD-18, 工程d(24 mg, 0.050 mmol)から得た物質およびピバル酸(52 μL, 0.450 mmol)の溶液に、(2-クロロフェニル)メタンアミン(54 mg, 0.381 mmol)を加えた。反応溶液を、アルゴンで短時間フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、85℃に3.25時間加熱した。粗製物質を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：15分かけて40〜80% B、次いで5分間100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、純粋な表題化合物(28 mg)を得た。LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 761, 763, [M-H]- 759, 761； Rt= 3.62分. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.12 (br. s., 1H), 11.82 (br. s., 1H), 8.45 (t, J=5.8 Hz, 2H), 7.84 (d, J=8.3 Hz, 3H), 7.78 - 7.56 (m, 5H), 7.50 (s, 1H), 7.41 - 7.24 (m, 2H), 7.19 - 6.98 (m, 2H), 6.96 - 6.77 (m, 3H), 4.46 - 4.21 (m, 2H), 4.06 (dd, J=16.7, 4.9 Hz, 2H), 3.21 - 3.00 (m, 2H), 2.93 - 2.69 (m, 2H), 2.55 (dd, J=14.7, 4.9 Hz, 2H), 2.02 - 1.78 (m, 2H), 0.87/0.83 (2つのオーバーラップするダブレット, J=6.8, 6.8 Hz, 12H).
【０１４９】
実施例MD-20〜MD-32
実施例MD-20〜MD-32を、実施例MD-19に概説された一般的な方法を用いて製造した。以下の実施例において、全てのLC/MSデータを、LC/MS 条件MD-2のもとで得た。
【化５９】
2016527232.tif 000067
【表６−１】
2016527232.tif 000068
【表７−２】
2016527232.tif 000069
【０１５０】
実施例MD-33
【化６０】
2016527232.tif 000070
無水NMP中の実施例MD-19, 工程a(17.0 mg, 0.036 mmol)およびピバル酸(36.4 μL, 0.313 mmol)の溶液に、1-アミノシクロプロパンカルボニトリル/1.0 HCl(35 mg, 0.295 mmol)、続いてDIEA(52 μL, 0.298 mmol)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、75℃の浴中に2時間45分間静置した。反応溶液を、マイクロ波反応器内で高出力下にて100℃で1時間更に加熱した。粗製物質を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：15分かけて20〜60% B、次いで100% Bで5分間保持；流速：20 mL/分、に従って分取HPLCにより精製して、純粋な表題化合物(3.4 mg)を得た。LC/MS 条件MD-2：[M+H]+ 661, [M-H]- 659； Rt= 2.71分.
【０１５１】
実施例MD-34
【化６１】
2016527232.tif 000071
無水CH2Cl2(3 mL)中の(1S,1'S)-1,1'-(5,5'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(1H-イミダゾール-5,2-ジイル))ビス(2,2-ジメチルプロパン-1-アミン)/4.0 HCl (特許出願WO2013106520を参照されたい；110 mg, 0.183 mmol)、実施例MD-6, 工程b(32.4 mg, 0.149 mmol)から得た物質およびHATU(70 mg, 0.184 mmol)の溶液に、DIEA(100 μL, 0.573 mmol)を加えた。該反応溶液を、アルゴンで短時間フラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。粗製物質を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 アセトニトリル：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：15分かけて40〜80% B、次いで5分間 100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、純粋な表題化合物(26.4 mg)を得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 855,  Rt = 3.79分. 1H NMR (600 MHZ, DMSO-d6) δ 12.12 (br. s., 2H), 7.94 - 7.50 (m, 12H), 4.89 (d, J=9.5 Hz, 2H), 4.23 (d, J=6.6 Hz, 2H), 3.64 - 3.48 (m, 4H), 3.03 - 2.77 (m, 4H), 2.50 - 2.29 (m, 4H), 1.66 (dt, J=13.3, 6.6 Hz, 2H), 1.18 (t, J=6.6 Hz, 6H), 0.95 (s, 18H), 0.83 (d, J=6.6 Hz, 12H).
【０１５２】
実施例MD-35
【化６２】
2016527232.tif 000072
ジクロロメタン(4 mL)中の実施例MD-18, 工程c(64 mg, 0.066 mmol)から得た物質の懸濁液に、HOAT(50 mg, 0.367 mmol)、イソブチルアミン(65.2 μL, 0.656 mmol)、EDC(95 mg, 0.496 mmol)およびDIEA(115 μL, 0.658 mmol)を加えた。得られる溶液を、短時間、N2でフラッシュして、キャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。追加のEDC(60 mg, 0.313 mmol)、DIEA(70 μL, 0.401 mmol)およびイソブチルアミン(200 μL, 2.01 mmol)を加えて、反応溶液を、N2を用いて短時間にてフラッシュして、しっかりとキャップを閉めて、室温で18時間攪拌した。溶媒を、穏やかなN2ストリーム下において除去して、粗生成物を、以下の条件：Column：XBridge C18, 19 x 200 mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：30分かけて60〜100% B、次いで5分間100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、表題化合物(4.5 mg)を得た。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 625； Rt = 3.32分.
【０１５３】
実施例MD-36〜MD-40
実施例MD-36〜MD-40を、実施例MD-11, 工程cから得た物質を用いることを除いて、実施例MD-13に概説された一般的な方法を用いて製造した。注：実施例MD-38および実施例MD-40において、溶媒として、THFをジクロロメタンの代わりに使用した。以下の実施例について、全てのLC/MSデータは条件MD-1のもとで得た。
【化６３】
2016527232.tif 000073
【表７】
2016527232.tif 000074
【０１５４】
実施例MD-41〜MD-54
実施例MD-41〜MD-54を、実施例MD-18,工程dから得た物質を用いて、実施例MD-19に概説した一般的な方法を用いて製造した。注：試薬が塩である実施例においては、DIEA(8.3 モル当量)を反応に加えた。以下の実施例について、全てのLC/MSデータは、条件MD-1を用いて得た。
【化６４】
2016527232.tif 000075
【表８−１】
2016527232.tif 000076
【表９−２】
2016527232.tif 000077
【０１５５】
実施例MD-55
【化６５】
2016527232.tif 000078
実施例MD-55, 工程a
【化６６】
2016527232.tif 000079
イミダゾールでの環化の位置化学は決定されなかった
実施例MD-1, 工程Cから得た物質(290 mg, 0.301 mmol)を用いること以外、実施例MD-18, 工程dに記述したとおりの一般的な方法に従って、表題化合物を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.02 - 7.84 (m, 4H), 7.81 - 7.65 (m, 4H), 7.57 (s, 2H), 3.60 - 3.37 (m, 4H), 2.86 (dd, J=17.9, 2.9 Hz, 2H), 2.80 - 2.64 (m, 2H), 2.54 - 2.35 (m, 2H), 2.24 - 2.08 (m, 4H). LC/MS 条件MD-1；[M+H]+ 651.4, Rt = 3.18分.
【０１５６】
実施例55
実施例MD-55を、実施例MD-19に概説した一般的な方法を用いて製造した。LC/MS 条件MD-1；[M+H]+ 761.6, Rt = 3.3.60分.
【０１５７】
実施例MD-56〜MD-57
実施例MD-56を、実施例MD-55, 工程aから得た物質およびN-イソプロピルシクロプロパンアミンを用いることを除いて、実施例MD-19に概説した一般的な方法を用いて製造した。アミン前駆体にイソプロピルアミンが夾雑していたことから、実施例MD-57も単離したことに注目されたい。以下の実施例については、Rtを、LC/MS 条件MD-1を用いて得た。
【化６７】
2016527232.tif 000080
【表９】
2016527232.tif 000081
【０１５８】
実施例MD-58
【化６８】
2016527232.tif 000082
表題化合物を、実施例MD-3に記載された一般的な方法に従って製造した。注：この実施例においては、DIEA(200 μL, 1.15 mmol)を反応に加えた。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 903.5, Rt = 3.22分.
【０１５９】
実施例MD-59〜MD-60
【化６９】
2016527232.tif 000083
乾燥したマイクロ波用バイアルに、N2下において、実施例MD-18, 工程d(20 mg, 0.042 mmol)、ピバル酸(43.1 μL, 0.371 mmol)および無水NMP(700 μL)を加えた。該反応溶液を、N2でフラッシュして、次いでN-(プロパン-2−イル)シクロプロパンアミン(23 μl, 0.169 mmol)で処理した。この反応バイアルにしっかりとキャップを閉めて、75℃の砂浴に10分間静置して、次いでマクロ波装置を用いて、高出力下にて130℃で3時間加熱した。粗製物質を、以下の条件：カラム：XBridge C18, 19 x mm, 5μm 粒子；移動相 A：5：95 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；移動相 B：95：5 メタノール：水(10mM 酢酸アンモニウムを含む)；グラジエント：16分かけて40〜100% B、次いで5分間、100% Bで保持；流速：20 mL/分、に従って分取LC/MSにより精製して、実施例MD-59およびMD-60を得た。最終生成物の元は、出発物質であるアミンが夾雑している可能性があることに注意されたい。
実施例MD-59：LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 597.5, Rt = 3.22分.
実施例MD-60：LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 637.6, Rt = 3.36分.
【０１６０】
実施例MD-61
【化７０】
2016527232.tif 000084
表題化合物を、実施例MD-2に記述したとおりの一般的な方法に従って製造した。LC/MS 条件MD-1：[M+H]+ 789.5, Rt = 3.09分.
【０１６１】
実施例B1
【化７１】
2016527232.tif 000085
実施例B1, 工程a
【化７２】
2016527232.tif 000086
ジエチル 2-(terｔ−ブチル)マロネート(1.5 g, 6.94 mmol)/エタノール(5 mL)の溶液に、KOH(0.389 g, 6.94 mmol)/エタノール(1 mL)の溶液を加えた。該反応混合液を、RTで終夜攪拌した。揮発性成分を、真空除去した。残留物を、水で希釈して、ヘキサンで抽出して、不純物を除去する。水層を、1.5N HClを用いて酸性化して、酢酸エチル(25 mL x 2)中に抽出して、水(15 mL)および塩水(20 mL)で洗浄して、Na2SO4で乾燥し、濾過して、真空で濃縮し、表題化合物(0.9 g)を無色ガム状物質として得た。1HNMR (CDCl3, δ = 7.26 ppm, 400 MHz)：δ 4.26 (q, J = 4.80 Hz, 2H), 3.26 (s, 1H), 1.31 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 1.14 (s, 9H).
【０１６２】
実施例B1, 工程b
【化７３】
2016527232.tif 000087
1,1'-([1,1'-ビフェニル]-4,4'-ジイル)ビス(2-ブロモエタノン)(1.052 g, 2.66 mmol)/DMF(10 mL)の溶液に、実施例B1, 工程a(1 g, 5.31 mmol)およびDIEA(5.57 mL， 31.9 mmol)を加えた。反応混合液を、RTで3時間攪拌した。揮発性成分を、真空除去して、残留物を水で希釈して、DCM(10 mL x 2)で抽出して、Na2SO4で乾燥して、真空で濃縮した。粗製反応混合液を、ISCO(40 g Redisep Silica column, 34% 酢酸エチル/ヘキサン)により精製して、実施例B1, 工程b(1.6 g)を、無色ガム状物質として得た。1HNMR (MeOD, δ = 3.34 ppm, 400 MHz)：δ 8.09 (dd, J = 1.6, 4.8 Hz, 4H), 7.87 (dd, J = 2.00, 6.80 Hz, 4H), 5.43-5.56 (m, 4H), 4.20 (q, J = 7.20 Hz, 4H), 3.47 (s, 2H), 1.28 (t, J = 7.20 Hz, 6H), 1.19 (s, 18H).
【０１６３】
実施例B1, 工程c
【化７４】
2016527232.tif 000088
実施例B1, 工程b(1.6gm, 1.637 mmol)/キシレン(20 mL)の溶液に、酢酸アンモニウム(2.52 g, 32.7 mmol)およびイミダゾール(0.669 g, 9.82 mmol)を加えた。該反応混合液を、アルゴンで30分間パージして、密封管内にて130℃で終夜攪拌した。揮発性成分を、真空除去して、水で希釈して、DCMで抽出して、Na2SO4で乾燥させて、真空で濃縮した。粗製物質を、ISCO(40 g Redisep Silica column, 48% 酢酸エチル/ヘキサン)により精製して、ジエチルの実施例B1, 工程c(0.49 g)を黄色の固体として得た。LC/MS 条件B-12：Rt = 2.54分,  1H NMR (MeOD, δ = 3.34 ppm, 400 MHz)：δ 7.81 (dd, J = 2.00, 6.60 Hz, 4H), 7.70 (dd, J = 2.00, 6.60 Hz, 4H), 7.44 (s, 2 H), 4.33 - 4.16 (m, 4 H), 3.85 (s, 2 H), 1.37 - 1.21 (m, 6 H), 1.11 (s, 18 H), LC/MS：[M+2H]+ C21H21BrN3O2として計算：計算値；570.3；実測値571.0 (M+1).
【０１６４】
実施例B1, 工程d
【化７５】
2016527232.tif 000089
THF(5 mL)およびメタノール(5 mL)混合液中のジエチルの実施例B1, 工程c(0.49 g, 0.859 mmol)の溶液に、KOH(0.482 g, 8.59 mmol)/水(5 mL)を加えた。該反応混合液を、RTで2日間攪拌した。揮発性成分を、真空除去して、水層を、1.5N HClで酸性化して、酢酸エチル(10 mL x 2)で抽出して、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、真空で濃縮し、実施例B1, 工程d(0.35 g)を黄色の固体として得た。LC/MS (条件B-12)：Rt = 1.637 分, 1H NMR (DMSO-d6, δ = 2.50 ppm, 400 MHz)：δ 7.88 - 7.52 (m, 8 H), 7.47 - 7.26 (m, 2 H), 3.28 - 3.14 (m, 2H), 1.09 - 0.89 (m, 18 H)  LC/MS：[M+2H]+ C21H21BrN3O2として計算：計算値：514.2；実測値515.2 (M+1).
【０１６５】
実施例B1
実施例B1, 工程d(0.04 g, 0.063 mmol)/DMF(2 mL)の溶液に、2-メチルプロパン-2-アミン(0.023 g, 0.315 mmol)、DIEA(0.088 mL，0.504 mmol)およびHATU(0.050 g, 0.132 mmol)を加えた。終夜、RTで攪拌した後に、揮発性成分を、真空除去して、残留物を、DCM(5 mLx2)に溶解して、塩水で洗浄して、Na2SO4で乾燥し、真空濃縮した。粗製物質を、逆相HPLC精製に供して、遊離塩基形態にて実施例B1を得て、立体異性体混合物(5.9 mg)として形成させた。LC(条件32および35)：＞98% 均一性指数. LC/MS (条件12)：Rt = 2.717分. LC/MS：[M+H]+ C42H54N10O6Sとして計算値：624.4；実測値625.4. 1H NMR (MeOD, δ = 3.34 ppm, 400 MHz)：δ 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 4 H), 7.71 (d, J = 8.5 Hz, 4 H), 7.42 (s, 2 H), 3.50 (s, 2 H), 1.37 (br. s., 18 H), 1.13 (br. s., 18 H).
【０１６６】
【化７６】
2016527232.tif 000090
【表１０−１】
2016527232.tif 000091
【表１１−２】
2016527232.tif 000092
【０１６７】
(生物学的活性)
試験化合物のNS5A相乗的阻害効果は、様々な量のNS5A標的化化合物を用いて、目的の第2の化合物を滴定することにより、決定され得る。該NS5A標的化化合物および目的の第2の化合物は両者とも、HCV変異体に対して別々に試験した場合は本質的に不活性であるか、または活性が弱いが、しかしHCV変異体に対して組み合わせて試験した場合は、相乗的阻害効力(3倍以上の阻害)を取り戻すことが分かっている。一実施態様では、NS5A標的化化合物としての化合物 BMS-790052を、200nMの固定濃度で一定に保ったうえで、HCVの変異体での試験化合物の滴定を行うことができる。一実施態様では、該HCVの遺伝子型は、NS5Aタンパク質のアミノ酸の30番にグルタミンからグルタミン酸への変化を含む遺伝子型1aであり得る。該試験化合物は、上記の化合物または文献中に記載される他の化合物から選択され得る。当業者であれば、当分野で以前に記載された通りにHCVレプリコン細胞ベースのアッセイにおいて化合物を容易に試験することができ、特定の化合物の50％阻害のために有効な濃度(EC50)を容易に決定することができる。
【０１６８】
実例として、下記に示される化合物P-55を、NS5Aタンパク質において30番目のグルタミンがグルタミン酸に変化した遺伝子型-1a変異体から成るHCVレプリコン細胞ベースのアッセイにおいて滴定することができる。BMS-790052単独の滴定ではEC50値 〜200nMが得られ、一方でP-55単独の滴定ではEC50値 ＞200nMが得られる。200nMの固定量のBMS-790052の存在下におけるP-55の滴定では、P-55についてEC50値 〜2 nMが得られ、このことは組み合わせによる相乗的阻害効果(＞100倍)を示している。同様に、200nMの固定量のP-55の存在下におけるBMS-790052の滴定では、BMS-790052についてEC50値〜2 nMが得られ、このことは組み合わせによる相互の相乗的阻害効果(〜100倍)を示している(2011年7月13日に出願されたPCT/US2011/043785), 表3)。さらなる化合物も同様の方法で試験することができ、相乗化剤活性の順位付けが決定された；遺伝子型1a Q→E変異体についてのこれらの順位付けを、選択された化合物について下表に示す。
【化７７】
2016527232.tif 000093
【０１６９】
出願人共通のWO2012/009394に示されるとおり、該遺伝子型は、遺伝子型1a変異体に限定されず、全てのHCVの遺伝子型の変異体(限定はされないが、1b、2a、3a、4a、5a、6aのHCV変異体を含む)を包含し得ることが理解される。また、該相乗効果はBMS-790052またはP-55の組み合わせに限定されず、単独ではHCV変異体に対する効力が低下しているか効力が無いNS5A標的化化合物の他の組み合わせから得られ得ることも理解される。
【表１１−１】
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【表１２−２】
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【表１２−３】
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【０１７０】
本発明は前述の例示的な実施例に限定されず、そしてその本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態において具体化することができることが当業者には明白であろう。従って該実施例は、あらゆる点で、制限するものではなく例示的なものとしてみなされ、そして、前述の実施例に対してよりもむしろ特許請求の範囲を参照すべきであり、従って、特許請求の範囲と同等の意味および範囲内となる全ての変更を包含すると意図することが望ましい。
【国際調査報告】
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