(57)【要約】  本発明は、再生可能固体原料から不鹸化性画分を抽出する方法であって、少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下で、前記再生可能固体原料から脂肪を固液抽出して、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂質が富化された極性有機相と、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基をまったくまたはほとんど含有しない脂質が富化された非極性有機相と、の取得をもたらす工程と、次いで、有機相を濃縮する工程と、を含む、方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂肪とくに脂質を含む再生可能固体原料から不鹸化性画分を抽出する方法であって、以下の工程、すなわち、
ａ）少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下で、任意選択で脱水されたおよび／または任意選択で調整された前記再生可能固体原料から前記脂肪を固液抽出して、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂質が富化された極性有機相の形成をもたらす工程と、
ｂ）不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために前記極性有機相を濃縮する工程と、
を含み、
かつ任意選択で、以下の工程、すなわち、
ｃ）不鹸化性画分が富化された前記混合物を鹸化する工程と、
ｄ）前記鹸化された混合物から前記不鹸化性画分を抽出する工程と、
を含み、
前記再生可能原料が、任意選択で、工程ａ）の後、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で熱処理を受ける、方法。
【請求項２】
脂肪を含有する再生可能固体原料から不鹸化性画分を抽出する方法であって、以下の工程、すなわち、
ａ）少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下で、任意選択で脱水されたおよび／または任意選択で調整された前記再生可能固体原料から前記脂肪を固液抽出して、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基をまったくまたはほとんど含有しない脂質が富化された非極性有機相の形成をもたらす工程と、
ｂ）不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために前記非極性有機相を濃縮する工程と、
を含み、
かつ任意選択で、以下の工程、すなわち、
ｃ）不鹸化性画分が富化された前記混合物を鹸化する工程と、
ｄ）前記鹸化された混合物から不鹸化性画分を抽出する工程と、
を含み、
前記再生可能原料が、任意選択で、工程ａ）の前、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で熱処理を受ける、方法。
【請求項３】
前記再生可能原料が、アボカドの果実、核、葉、およびそれらの混合物から選択され、かつ前記熱処理が行われることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記再生可能原料が、アボカドの果実、核、葉、およびそれらの混合物から選択され、かつ前記熱処理が行われ、かつ工程ａ）が、８０℃以下、好ましくは７５℃以下の温度で行われることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記再生可能原料が、前記脱水工程の終了時に取得される前記原料の重量と比較して１０重量％以下の残留湿分を達成するように工程ａ）の前に脱水されていることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記再生可能原料が工程ａ）の前に脱水されており、かつ前記熱処理が前記脱水工程に同時に行われることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記極性有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、エチル−２−ヘキサノール、およびそれらの異性体から選択される軽質アルコールであることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記非極性共溶媒がアルカンまたはアルカンの混合物であることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記抽出工程ａ）が触媒を用いずに行われることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記油濃縮が分子蒸留により行われることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法が工程ｃ）およびｄ）を含み、前記鹸化された混合物から前記不鹸化性画分を抽出する工程が、少なくとも１種の有機溶媒を用いて液液抽出により行われることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、油化学分野に関する。より特定的には、本発明は、再生可能脂質原料から、特定的には、油糧果実とくにアボカドから、油糧種子から、あるいは動物、藻類、菌類、もしくは酵母または微生物に由来する原料から、不鹸化性物質を抽出する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書で用いられる場合、脂質とは、非極性溶媒に可溶な生物起源の物質を意味することが意図される。脂質は、鹸化性であってもよいし（たとえば、トリグリセリド）、鹸化性でなくてもよい（たとえば、ステロイド型骨格で構成された分子）。
【０００３】
本明細書で用いられる場合、不鹸化性物質とは、脂肪の完全鹸化後、すなわち、アルカリ塩基の持続作用下で、水に不溶な状態を維持しかつ可溶な有機溶媒により抽出されうるすべての化合物を含むことが意図される。不鹸化性物質は、一般的には、脂肪中の副画分に相当する。
【０００４】
植物脂肪に由来する不鹸化性物質のほとんどに、５つの主要物質群、すなわち、飽和または不飽和の炭化水素と、脂肪族またはテルペンのアルコールと、ステロールと、トコフェロールおよびトコトリエノールと、カロテノイド色素とくにキサントフィルと、が存在する。
【０００５】
再生可能脂質原料は、きわめて多様な割合で不鹸化性化合物を含む。さまざまな公知の方法に従って種々の植物油を抽出することにより取得される不鹸化性画分の含有率は、不鹸化性物質の重量換算でアボカド油では１〜７％の範囲内であるのに対して、ヤシ油では０．５％およびダイズ油またはオリーブ油では１％である。
【０００６】
現在、不鹸化性物質の伝統的抽出方法では、脂質原料として植物油およびその誘導体ならびに脂質抽出産業（植物油、動物脂肪、海産油脂、植物含油樹脂）で精製および処理から生じる共生成物が一般に使用される。ほとんどの場合、粗植物油もしくは半精製植物油もしくは精製植物油から、または分子蒸留を介してもしくは超臨界流体を用いた抽出を介して取得される精製油由来の不鹸化性物質の濃縮物から、不鹸化性物質を抽出することが必要である。また、ステロール、スクアレン、トコフェロール、トコトリエノールなどのいくつかの不鹸化性画分は、植物油の化学精製または物理精製から生じる豊富な共生成物である植物油脱臭排出物から取得される。しかしながら、油の脱色に使用された漂白土、すなわち、脱蝋ユニットから取り出された漂白土により保持された酸含有油、石鹸ペースト、脂質もまた、脂質の精製から生じる他の共生成物として挙げられる。さらに、油糧種子または油糧果実の粉砕から生じる共生成物、たとえば、油粕、種子外皮または種子核、糖蜜、黒液もまた、使用されうる。
【０００７】
不鹸化性物質またはその画分を抽出するために、脂質処理の共生成物、たとえば、バイオディーゼル製造プラントで動物脂肪または植物脂肪の加水分解プロセスまたは鹸化プロセスから生じる粗グリセリン、動物脂肪加工産業からの油脂含有水、脂肪酸アルキルエステルスチルボトムもまた、使用されうる。
【０００８】
同様に、不鹸化性画分とくにステロールは、パルプ製造でトール油と呼ばれるような産業共生成物から生成される。産業醸造所、ラム蒸留所、麦芽製造プラントなどで飲料の抽出プロセスから生じる共生成物の不鹸化性画分もまた、挙げられる。
【０００９】
原料（不鹸化性物質源）として、植物漿液（たとえば、トマト、柑橘果実の漿液）、種子、外皮、油糧もしくは非油糧の果実の含油樹脂、野菜、花、または葉をさらに利用することが可能である。
【００１０】
不鹸化性物質の抽出方法は、ほとんどの場合、プレス処理により取得される脂肪のエステル交換もしくはエステル化の工程および／または脂肪の鹸化の工程、それに続く有機溶媒を利用した液液抽出の工程を含む。
【００１１】
不鹸化性画分の選択的抽出方法は、多くはない。
【００１２】
国際公開第２０１１／０４８３３９号パンフレットには、ａ）再生可能原料の脱水および調整、ｂ）軽質アルコールおよび触媒の存在下での調整済み脂質原料の反応粉砕によるエステル交換、ｃ）軽質アルコールの蒸発、ｄ）脂肪酸アルキルエステルに希釈された不鹸化性画分を含む濃縮物を取得するための液相の濃縮、ｅ）不鹸化性濃縮物の鹸化、ｆ）鹸化混合物からの不鹸化性画分の抽出、を含む、再生可能原料からの不鹸化性画分の抽出方法が記載されている。
【００１３】
アボカドは、その不鹸化性画分含有率が高いので、非常に特別な関心を払って検討されているはずである。次式：
【化１】
2016527336.tif 000002
を有するＨ７と記されるリノレイックフランを主要成分とするフラン型の特定の脂質は、公知の方式で利用可能である。
【００１４】
本明細書で用いられる場合、アボカド由来フラン脂質とは、次式：
【化２】
2016527336.tif 000003
を有する成分を意味することが意図される。式中、Ｒは、飽和であるかまたは１つ以上のエチレン不飽和もしくはアセチレン不飽和を含むＣ１１〜Ｃ１９、好ましくはＣ１３〜Ｃ１７の線状炭化水素鎖である。これらのアボカド由来フラン脂質は、とくに、Ｆａｒｉｎｅｓ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ，１９９５，Ｊ．Ａｍ．Ｏｉｌ  Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７２，４７３に記載されている。通例、アボカド由来フラン脂質は、植物界に特有で、かつそれらに薬理学的性質、化粧的性質、および栄養的性質があるため、さらにはバイオ殺有害生物剤として、とりわけ需要の多い化合物である。
【００１５】
アボカド由来フラン脂質は、最初は果実および葉に存在し、熱の作用により脱水および環化してフラン誘導体になる前駆体化合物の代謝物である。一例として、リノレイックフランＨ７は、Ｐ１Ｈ７と記される以下のケト−ヒドロキシル前駆体：
【化３】
2016527336.tif 000004
の熱変換から生じる。
【００１６】
大気圧下では、前駆体Ｐ１Ｈ７は、典型的には、８０〜１２０℃の範囲内の温度でリノレイックフランＨ７に変換される。
【００１７】
アボカドの葉または果実（核を含む）中のこれらのフラン化合物前駆体の存在が、品種に依存するだけではなく（ハス（Ｈａｓｓ）種およびフエルテ（Ｆｕｅｒｔｅ）種はそのような化合物が最も豊富である）、アボカドの油または他の植物抽出物（アボカドの葉からのヘキサン抽出物もしくはエタノール抽出物）の製造方法にも依存することは、今日では十分に認識されている。
【００１８】
さらに、最初はアボカドの果実および葉に存在するいくつかの化合物は、ポリヒドロキシル化脂肪アルコール形、ほとんどの場合、非アセチル化形、たとえば、以下の化合物：
【化４】
2016527336.tif 000005
で存在しうる。
【００１９】
本明細書で用いられる場合、アボカド由来ポリヒドロキシル化脂肪アルコールとは、飽和であるかまたは１つ以上のエチレン不飽和もしくはアセチレン不飽和を含みかつ少なくとも２個のヒドロキシル基を含むＣ１７〜Ｃ２１直線状炭化水素主鎖形のポリオールを意味することが意図される。ただし、前記ヒドロキシル基は、一般的には、主鎖の一部分、好ましくは、主鎖の一方または両方の末端の方向に位置し、したがって、他の部分は、ポリオールの脂肪鎖（疎水部分）を形成する。
【００２０】
果実中のポリヒドロキシル化脂肪アルコール含有率は、主に、天候条件、土壌の質、季節、および収穫時の果実の成熟に依存する。
【００２１】
結合組織に対して、とくに、関節症、歯周炎、強皮症などの炎症性疾患に対して、有益な治癒効果があるため、フラン脂質が豊富なアボカド不鹸化物の治療的関心を考慮すると、さらには、一般に高コストであることを考慮すると、フラン脂質が豊富であろうアボカド油由来不鹸化性画分をできるかぎり最良の収率で調製する強い必要性が存在する。同様に、プロセスのグローバル費用効果を向上させるために、果実を全体として最大収率で積極的に使用することに真の関心が存在する。
【００２２】
アボカド果実から、またはアボカド果実から抽出された油から、これらのフラン化合物または特定のポリオールを製造する公知の方法では、多くの他のアボカド由来不鹸化性化合物と組み合わされた場合のみ、これらの化合物を取得可能であるにすぎない。
【００２３】
仏国特許第２６７８６３２号明細書には、実際上前述のフラン脂質に対応する画分Ｈと呼ばれる一画分が富化されたアボカド油からアボカド不鹸化性画分を製造する方法が記載されている。含有率が３０〜６０％で変化しうるそのようなフラン脂質リッチ不鹸化性物質の調製は、あらかじめ薄くスライスされた新鮮果実を８０〜１２０℃の範囲内の温度で一定時間にわたり、好ましくは２４〜４８時間の選択された時間にわたり制御加熱することに本質的に依存する。この熱処理は、抽出後、フラン脂質リッチアボカド油の取得を可能にする。最後に、この油から出発して有機溶媒を用いた液液抽出工程で終了する伝統的鹸化方法に従って、不鹸化性画分が取得される。
【００２４】
国際公開第０１／２１６０５号パンフレットには、少なくとも８０℃の温度での果実の熱処理（制御乾燥）と、コールドプレス処理による油の抽出と、冷結晶化または液液抽出または分子蒸留による不鹸化性物質の富化と、エタノールカリ媒介鹸化と、有機溶媒を用いた向流カラムでの不鹸化物抽出と、続いて、濾過、洗浄、溶媒除去、脱臭、および最終分子蒸留の工程と、を含む、アボカドからフラン脂質化合物およびポリヒドロキシル化脂肪アルコールを抽出する方法が記載されている。この方法は、主にアボカドフラン脂質を含む留出物または主にアボカドフラン脂質およびポリヒドロキシル化脂肪アルコールを含む留出物のいずれかの取得を可能にする。しかしながら、そのような方法は、果実の小部分を利用可能であるにすぎない。
【００２５】
実際に、このタイプのプロセスでは、分子蒸留による不鹸化性物質の濃縮工程から生じるボトムを形成する油、すなわち、果実から抽出される油の約９０％は、積極的に再使用することがほとんどできない。この強着色油は、実際には高温蒸留による熱処理を受けたものなので、クロロフィル色素さらにはリン脂質の自動的かつ非可逆的な破壊をもたらし、蒸留粗油の将来的精製に非常に有害な影響を及ぼす。最良のシナリオで、この油のきわめて先端的な精製によってのみ、比較的許容可能な色に戻すことが可能である。精製は、エネルギー入力（たとえば、漂白土）の大量消費を必要とし、しかも依然として不飽和脂肪酸（異性化）には非常に厳しい状態のままである。最後に、この精製油を商業上許容される期間にわたり保存するために、外因性抗酸化剤を添加しなければならない。したがって、結果として、精製油は、ヒト栄養のためにも専門家による医薬用途でも、絶対に再使用できない。
【００２６】
この方法のさらなる欠点は、動物飼養に適さない油粕が生成されることである。後者は、実際に、抗栄養化合物（バイオ殺有害生物剤として使用される毒性Ｈ前駆体フラン脂質）と、空気乾燥果実の機械プレス処理による抽出時に高分解（実際には高酸化）された消化率が非常に低いという問題を抱えるタンパク質と、を含有する。結果として、油粕またはそのタンパク質は、動物飼養に使用することができず、果実の果肉をヒトが普通に摂取するとしても（果実が直接摂取されるワカモレ）、ヒト栄養に使用できないことは言うまでもない。
【００２７】
同様に、医薬的性質、化粧的性質、および栄養的性質（たとえば、肝機能の向上）が実証されている植物界に特有の糖であるペルセイトールやナノヘプツロースなどの果実中の貴重な多糖は、乾燥果実の機械的圧力により誘導されるメイラード反応および／もしくはカラメル化プロセスにより部分的に破壊されるか、または繊維およびタンパク質含有マトリックスとの過剰な相互作用に起因して抽出が非常に困難になる。
【００２８】
結論として、このタイプの方法は、１５％未満であると推定可能な果実の不十分な再使用を可能にするにすぎない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２９】
結果として、アボカドからフラン脂質および／またはポリヒドロキシル化脂肪アルコールを抽出する方法の収率さらには選択率を向上させることが依然として必要である。
【００３０】
したがって、より良好な将来的再使用のために果実の完全性を保持しつつ脂肪から不鹸化性物質を選択的に抽出する方法の必要性が依然として存在する。これが実現されれば、経済的であるうえに、遊離脂肪酸よりも付加価値の高いグリセリドまたは良好な栄養品質を有するタンパク質および多糖の共生成物を回収することが可能になろう。さらに、画分の極性に応じて不鹸化性物質を高収率で抽出する方法を開発することが望ましいであろう。実際に、果実の他の興味深い画分または部分を害することなく予想画分を選択的に生成するロバストな方法を提供することが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【００３１】
それに応じて、本発明の目的は、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂肪とくに脂質を含む再生可能固体原料から不鹸化性画分を抽出する方法であって、以下の工程、すなわち、
ａ）少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下で、任意選択で脱水されたおよび／または任意選択で調整された前記再生可能固体原料から脂肪を固液抽出して、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂質が富化された極性有機相の形成をもたらす工程と、
ｂ）不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために極性有機相を濃縮する工程と、
を含み、
かつ任意選択で、以下の工程、すなわち、
ｃ）不鹸化性画分が富化された混合物を鹸化する工程と、
ｄ）鹸化された混合物から不鹸化性画分を抽出する工程と、
を含み、
前記再生可能原料が、任意選択で、工程ａ）の後、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で熱処理を受ける、方法を提供することである。
【００３２】
本発明はさらに、再生可能固体脂肪含有原料から不鹸化性画分を抽出する方法であって、以下の工程、すなわち、
ａ）少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下で、任意選択で脱水されたおよび／または任意選択で調整された前記再生可能固体原料から脂肪を固液抽出して、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基をまったくまたはほとんど含有しない脂質が富化された非極性有機相の形成をもたらす工程と、
ｂ）不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために非極性有機相を濃縮する工程と、
を含み、
かつ任意選択で、以下の工程、すなわち、
ｃ）不鹸化性画分が富化された混合物を鹸化する工程と、
ｄ）鹸化された混合物から不鹸化性画分を抽出する工程と、
を含み、
前記再生可能原料が、任意選択で、工程ａ）の前、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で熱処理を受ける、方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明に係る両方法は、第１の方法が極性相（すなわち、そのような相には前駆体が可溶である）に可溶な不鹸化性画分の回収をめざし、第２の方法が非極性有機相（すなわち、そのような相には代謝物が可溶である）に可溶な不鹸化性画分の回収をめざすという点で、まさに異なる。しかしながら、アボカドの場合、両方法は、多くの工程が異なるが、積極的に再使用可能な非常に高品質の共生成物、すなわち、アボカド油の蒸留アルキルエステル、完全追跡アボカドグリセリン、抗栄養化合物が除去された油粕（タンパク質源、オリゴペプチド源、ペルセイトール源、およびナノヘプツロース源として潜在的に使用可能である）、アボカド繊維の生成を可能にしつつ、不鹸化性画分からフラン脂質を高収率で選択的に回収可能にするので、両方とも同様に有用である。
【００３４】
アボカドの特定の場合、第１の方法では、原料は、とくに、最初に高温で加熱されないが（固液抽出工程の後で初めて加熱される）、第２の方法では、熱処理されたアボカドのフラン化合物特性をより初期に生成するように固液抽出工程の前に加熱される。第１の方法の場合、固液抽出工程は、アボカドを用いて実行されるが、そのような熱処理を受けなかったので、この段階では、まさにフラン脂質前駆体を含有する。
【００３５】
したがって、本発明は、一般的には植物または動物、好ましくは植物に由来する固体形態の再生可能脂質原料から不鹸化性画分を抽出することをめざす。この原料は、とくに、油糧果実、油糧種子、油糧タンパク質種子、種子外皮、油糧アーモンド、萌芽、果実核、およびクチクラ、動物、藻類、菌類、もしくは酵母または微生物に由来する原料から選択され、しかも脂質が豊富である。
【００３６】
第１の実施形態では、実際に利用される固体原料は、油糧果実であり、限定されるものではないが、オリーブ、シア、アマランス、パーム、ブリチ、ツクマン、カボチャ、セレノア・レペンス（Ｓｅｒｅｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓ）、アフリカパーム、またはアボカドでありうる。
【００３７】
第２の実施形態では、固体原料は、ナタネ、ダイズ、ヒマワリ、ワタ、コムギ、トウモロコシ、コメ、ブドウ（種子）、クルミ、ヘーゼルナッツ、ホホバ、ルピナス、カメリナ、アマ、ココヤシ、サフラワー、ハマナ、コプラ、ラッカセイ、ジャトロファ、トウゴマ、ニーム、アサ、クフェア、レスクエレラ、インカインチ、シソ、エキウム、マツヨイグサ、ボラージ、クロフサスグリ、チョウセンマツ、シナキリ、ワタ、ケシ（種子）、ゴマ、アマランス、コーヒー、エンバク、トマト、マスティック、マリーゴールド、カランジャ、コメヌカ、ブラジルナッツ、アンジローバ、シザンドラ、ウクフバ、クプアス、ムルムル、ペキ、レモン種子、マンダリン種子、オレンジ種子、スイカ種子、ククルビタ・ペポ（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ  ｐｅｐｏ）種子、およびトマト種子から選択される植物原料の種子、子実、萌芽、クチクラ、または核である。脂質原料はまた、動物、藻類、菌類、または酵母に由来する原料でありうる。好ましい動物原料として挙げられるのは、魚の肝臓および皮膚、とりわけ、サメ、タラ、およびギンザメのもの、さらには食肉産業からの固体廃棄物（脳、腱、羊毛脂…）である。
【００３８】
不鹸化性物質が豊富な含油樹脂を含有する他の植物原料は、トマト、マリーゴールド、パプリカ、ローズマリーである。
【００３９】
興味深い不鹸化性化合物を含有する藻類の好適な例として挙げられるのは、微細藻類デュナリエラ・サリナ（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ  ｓａｌｉｎａ）（β−カロテンが豊富である）およびヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）（アスタキサンチンが豊富である）である。興味深い不鹸化性化合物を含有する微生物とくに細菌の好適な例は、任意の菌糸体もしくは他のカビおよび菌類（エルゴステロールの産生）、ファフィア属（Ｐｈａｆｆｉａ）の種（アスタキサンチンの産生）、ブラケスレア・トリスポラ（Ｂｌａｋｅｓｌｅａ  ｔｒｉｓｐｏｒａ）（リコペンおよびフィトエンの産生）、ムリエロプシス属（Ｍｕｒｉｅｌｌｏｐｓｉｓ）の種（ルテインの産生）を含むか、またはとくに、国際公開第２０１２／１５９９８０号パンフレット（スクアレンの産生に適合化された微細藻株）、米国特許第７６５９０９７号明細書（とくにファルネソールおよびファルネセンを産生する細菌）、出版物Ｐｕｒｅ  ＆  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．６９，Ｎｏ．１０，ｐｐ．２１６９−２１７３，１９９７（カロテノイドの産生）、もしくはＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２；２０１２：６０７３２９，ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１２／６０７３２９（補酵素Ｑ１０のバイオテクノロジー産生）に挙げられている。
【００４０】
本発明に係る方法に使用される原料は、３ｍｇＫＯＨ／ｇ未満の酸性度を有することが望ましい。実際に、これらの原料中の遊離脂肪酸の含有率が高くなると、塩基性媒体中で石鹸の形成を引き起こすであろう。本明細書で用いられる場合、脂肪酸とは、いくつかの特定の有機官能基（ヒドロキシル、エポキシの官能基…）を含んでいてもよい飽和、モノ不飽和、またはポリ不飽和の線状または分岐状の環式または非環式のＣ４〜Ｃ２８モノ、ジ、またはトリカルボン酸の脂肪族酸を意味することが意図される。
【００４１】
次に、本発明に係る第１の方法を詳細に提示する。
【００４２】
本発明に係る第１の方法に実際に利用される原料は、（好ましくは脂肪族の）ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の極性官能基により官能基化された脂質成分を含み、例としては、アボカド、カランジャ、ジャトロファ、アンジローバ、ニーム、シザンドラ、ルピナス外皮、カシューナッツ、ゴマ、コメヌカ、ワタ、またはフィトステロールが豊富な油産生原料、たとえば、トウモロコシ、ダイズ、ヒマワリ、ナタネであり、これらはすべて、そのような化合物が非常に豊富である。
【００４３】
この方法は、再生可能原料の任意選択の脱水および／または任意選択の調整の第１の工程を含む。脱水および調整は、８０℃以下、好ましくは７５℃以下の温度で行われる場合、制御されると言われる（これはアボカドに必要とされる）。前記温度は、好ましくは−５０℃以上である。他の実施形態によれば（アボカドには適用可能でない）、温度は、５０〜１２０℃、より好ましくは７５〜１２０℃でさまざまに設定される。脱水は、とくに、温度上昇時に酸化されるおそれのある壊れやすい化合物を含有する原料の場合、不活性雰囲気下に行われうる。好ましくは、大気圧下で行われる。
【００４４】
アボカド（本出願で用いられる場合、アボカドの果実、核、葉、またはそれらの混合物を意味することが意図される）の場合、７５または８０℃を超えて温度が上昇しないようにすることにより、フラン脂質前駆体からフラン脂質への変換を防止する。
【００４５】
脱水は、（所要により）調整の前または後、実現されうる。好ましくは、アボカドのような油糧果実は、調整前に脱水されるが、それとは対照的に、油糧種子は、脱水前に最初に調整される。
【００４６】
本明細書で用いられる場合、脱水とは、原料からの水の完全除去または部分除去を可能にする当業者に公知のすべての技術を含むことが意図される。これらの技術中で挙げられるのは、限定されるものではないが、流動床乾燥、熱気流下もしくは不活性雰囲気（たとえば、窒素）下での乾燥、充填床乾燥、大気圧下もしくは真空下での乾燥、厚層乾燥もしくは薄層乾燥、連続ベルト乾燥機中もしくは回転ファン付き熱風乾燥機中での乾燥、またはマイクロ波乾燥、スプレー乾燥、凍結乾燥、および溶液中（直接浸透）もしくは固相中（たとえば、浸透圧バッグ中での乾燥）での浸透圧脱水、ゼオライトやモレキュラーシーブなどの固体吸収剤を用いた乾燥である。
【００４７】
より好ましくは、乾燥時間および乾燥温度は、残留湿気が、脱水工程の終了時に取得される脂質原料の重量と比較して、１０重量％以下、好ましくは３重量％以下、より好ましくは２重量％以下になるように選択される。原料の残留湿気は、熱重量測定により決定されうる。この乾燥工程は、とくに、原料の細胞を破裂させ、かつこの原料中に存在する水中油型エマルジョンを破壊するので、脂質成分の抽出をより効率的にするであろう。さらに、原料の調整、とくに、破砕操作またはミル処理操作を促進しうるので、溶媒の接触表面が奏効して、溶媒媒介抽出をより効率的にするであろう。
【００４８】
本方法の枠内では、産業的実現を促進するためにおよびコストの理由で、薄層かつ熱気流下の温度調節されたベント付き乾燥機（乾燥オーブン）中での乾燥が好ましい。温度は、好ましくは７０〜７５℃の範囲内であり、かつ脱水は、好ましくは８〜３６時間持続される。
【００４９】
原料の任意選択の調整の目的は、とくに、単純なパーコレーション現象を介して、抽出溶媒および触媒が脂肪に最もアクセス可能になるようにすることである。調整はまた、これらの反応剤に接触する原料の比表面積および多孔度を増加させうる。原料の調整は、脂肪抽出をなんらもたらさない。
【００５０】
好ましくは、再生可能原料は、粉末の形態でフラット処理、フロック処理、ブロー処理、またはグラインド処理により調整される。一例として、原料は、トースト処理、またはフロック処理、または蒸発、スプレー、機械粉砕、凍結粉砕、デハリング、フラッシュ緩和（真空生成および急速減圧による急速乾燥）による調整処理および／または乾燥処理、パルス電磁場、反応押出しまたは非反応押出し、平滑ローラーまたはコルゲートローラーを備えたメカニカルフラットナーを利用したフラット化、熱風供給または過熱蒸気供給を介するブローイングによる調整処理が行われうる。アボカドの場合、主に、カットされたアボカド果実が使用され、その後、制御脱水工程に付され、そして最後に、一般的には新鮮な果肉を粉砕することにより、乾燥果実が調整されるであろう。
【００５１】
任意選択で脱水および／または調整された再生可能固体原料は、少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下でのその脂肪の固液抽出の工程ａ）に付されて、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基により官能基化された不鹸化性または鹸化性の極性脂質成分が富化された極性有機画分と、非極性または弱極性の脂質成分、とくに、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基を含有しない（またはごくわずかに含有する）成分が富化された画分と、の単離をもたらす。
【００５２】
工程ａ）は、固体原料からの脂肪すなわちトリグリセリドおよび他の脂質成分の抽出を可能にするのに十分な温度および持続条件下で行われ、油粕および液体二相混合物の形成をもたらす。固液抽出は、最初の抽出がエステル交換触媒をなんら用いることなく行われるという点で反応粉砕とは異なる。
【００５３】
工程ａ）は、室温で行われうるが、一般的には、好ましくは少なくとも４０℃、好ましくは８０℃以下、さらにより好ましくは７５℃以下の温度で加熱プロセスを実行することにより行われる。とくにアボカドの場合、工程ａ）は、８０℃以下、さらにより好ましくは７５℃以下の温度で行われるべきであり、そのような温度制御を行えば、フラン脂質前駆体からフラン脂質への変換を回避することが可能になる。したがって、これらは、果実抽出時、依然としてそれらのヒドロキシル化形で存在する（すなわち、フランに環化されない）。
【００５４】
他の場合、工程ａ）は、温度に関して限定されることなく行われうる。すなわち、７５または８０℃を超えて温度を設定しうる。したがって、原料がアボカドに由来しない場合、工程ｂ）は、４０〜１００℃の範囲内の温度で加熱プロセスを実行することにより行われうる。
【００５５】
固液抽出時に２種の溶媒を使用すると、組成に関して互いと非常に異なる２つの有機相を有する二相媒体の形成が引き起こされる。一方では、１個以上の極性官能基により官能基化されていない（または多くはされていない）脂質成分が、好ましくは、非極性相に見いだされるであろう。他方では、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、またはアミンの官能基により官能基化された脂質成分が、好ましくは、極性相に見いだされるであろう。
【００５６】
この工程は、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、またはアミンの官能基、好ましくは、それらのいくつかにより官能基化された脂質成分（不鹸化性または鹸化性）の選択的抽出を可能し、それらは、濃縮工程の終了時、媒体中に存在するそのような官能基を含まない（またはほとんど含まない）脂質成分混合物（とくにトリグリセリド）から分離される。使用される原料のタイプに依存して、これらの官能基化脂質成分は、限定されるものではないが、アボカド中に存在するフラン脂質前駆体（とくに、リノレイックフランＨ７の前駆体であるすでに述べた化合物Ｐ１Ｈ７）であるポリヒドロキシル化脂肪アルコールおよびケト−ヒドロキシル化化合物、非エステル化ステロール、または次の脂肪酸、すなわち、リシノール酸（１２−ヒドロキシｃｉｓ９−オクタデセン酸）、とくに、ヒマシ油に存在するもの、レスクエロール酸（１４−ヒドロキシ−１１−エイコサン酸）、デンシポリン酸（１２−ヒドロキシ−９，１５−オクタデカジエン酸）、およびアウリコール酸（１４−ヒドロキシ−１１，１７−エイコサジエン酸）、とくに、３つともすべてレスクエレラ属（Ｌｅｓｑｕｅｒｒｅｌｌａ）属の種に存在するもの、コリオール酸（１３−ヒドロキシ−９，１１−オクタデカジエン酸）、カムロレン酸（１８−ヒドロキシ−９，１１，１３−オクタデカテン酸）、とくに、カマラツリーの種子から抽出された油に存在するもの、コロナル酸（９，１０−エポキシ−ｃｉｓ−オクタデク−１２−エン酸）、とくに、ヒマワリ油に存在するもの、ベルノール酸（ｃｉｓ−１２，１３−エポキシオレイン酸）、とくに、ユーフォルビア・ラガスカエ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ  ｌａｇａｓｃａｅ）の種子からまたはベルノニア属（Ｖｅｒｎｏｎｉａ）の植物から抽出された油に存在するもの、のエステルでありうる。
【００５７】
無水またはそうでない溶媒および共溶媒、好ましくは、蒸留を可能にするのに十分な程度に低い沸点を有する溶媒を使用することが可能である。この工程は、好ましくは、触媒をなんら用いることなく、特定的には、塩基触媒を用いることなく、行われる。
【００５８】
極性有機溶媒は、特定的には、軽質アルコール、エーテル（特定的には、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチル第３級ブチルエーテル、メチルテトラヒドロフラン、２−エトキシ−２−メチルプロパン）、ケトン（特定的には、メチルイソブチルケトン、２−ヘプタノン）、プロピオネート（特定的には、エチルプロピオネート、ｎ−ブチルプロピオネート、イソアミルプロピオネート）などのエステル、ジアセトンアルコールなどのケトアルコール、３−メトキシ−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）などのエーテルアルコール、フェノール、アミン、アルデヒド、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルイソソルビド（ＤＭＩ）、水、およびそれらの組合せから選択される合成有機溶媒でありうる。
【００５９】
極性有機溶媒は、好ましくは、少なくとも１種の軽質アルコールを含む。本明細書で用いられる場合、軽質アルコールとは、分子量が１５０ｇ／ｍｏｌ以下である線状または分岐状の好ましくはＣ１〜Ｃ６、より好ましくはＣ１〜Ｃ４のアルコール（１個以上のヒドロキシル官能基を含む）を意味することが意図される。好ましくは、軽質アルコールは、モノアルコールである。好ましくは、脂肪族アルコール、最も好ましくは、脂肪族モノアルコール、好ましくは、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、ｎ−ペンタノール、ｎ−ヘキサノール、エチル−２−ヘキサノール、およびそれらの異性体から選択されるものである。
【００６０】
（固液抽出条件で）極性溶媒と混和しない非極性共溶媒は、好ましくは、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、またはアミンの官能基により官能基化された、抽出される脂質成分が、この共溶媒に可溶でないように、選択される。それらの化学的性質を考慮すると、これらの官能基化脂質成分は、必然的に、あまり可溶でない（好ましくは可溶でない）非極性溶媒相よりも極性相と強い親和性を有するであろう。
【００６１】
非極性共溶媒とは、とくに、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、ビシクロヘキシル、シクロヘキサン、植物起源のパラフィンアルカン（天然アルコール（もしくはそのゲルベ同族体）の脱水により、または脂質もしくはバイオマスの水素化処理（水添液化方法）により、または脂肪酸の脱カルボキシル化により取得される）、デカリン、デカン、ケロシン、ケルダン（ヘキサンよりも重い可燃性炭化水素カット）、ガス油、ランプ油、メチルシクロヘキサン、テトラデカン、超臨界ＣＯ２、加圧プロパンもしくはブタン、天然非極性溶媒、たとえば、テルペン（リモネン、αおよびβ−ピネンなど）でありうる有機溶媒のことである。好ましくは、アルカンまたはアルカンの混合物、好ましくはヘキサンであろう。
【００６２】
好ましい極性溶媒／非極性共溶媒対は、メタノール／ヘキサン対である。
【００６３】
さらに、高極性化合物とくにヒドロキシル化化合物をとりわけより効率的に抽出するために、二成分溶媒混合物に水を添加することが可能である。この場合、組み込まれる水の量は、好ましくは、溶媒混合物の０．１〜２０重量％、好ましくは０．５〜５重量％を占める。
【００６４】
固液抽出は、連続方式で、特定的には、押出し機を利用して、またはソックスレー抽出器型の連続抽出器を利用して、さらにはさまざまな方法で溶媒系の再循環を実行することにより、行われうる。第１の場合、固体原料は、抽出を行うために還流下に溶媒を設定することにより、加熱時に溶媒系に接触される。固液抽出はまた、バッチ単位の不連続方式で行われうる。極性相と非極性相との間で種々の脂質成分の分離を最適化するために、たとえば、カスケード方式でいくつかの反応器を実現することにより、抽出プロセスを数回繰り返しうる。
【００６５】
ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基から選択される１個以上の官能基により官能基化された脂質、たとえば、ポリヒドロキシル化脂肪アルコールおよびフラン脂質前駆体（アボカドの場合）がとくに可溶である（好ましくはアルコール性の）極性相は、非極性相から分離される。前記極性相は、使用される原料のタイプに依存して、トリグリセリド、可溶性多糖、フェノール化合物、グルコシノレート、イソシアネート、極性アルカロイド、極性テルペンをさらに含みうる。溶媒含有油粕は、溶媒系で洗浄した後、乾燥され、次いで、とくに動物飼養に直接使用されうる。
【００６６】
極性溶媒（一般的には軽質アルコール）は、特定的には減圧下で、任意選択で加熱プロセスを実現することにより、極性相から蒸発される。アボカドの場合、蒸発温度が高いと（とくに、約８０℃以上であると）、この初期段階でフラン脂質前駆体からフラン脂質への環化がすでに行われるおそれがある。取得された脂質生成物は、水からの残留石鹸の分離を可能にするデカンテーション工程もしくは遠心分離工程ならびに／または濾過工程および／もしくは洗浄工程に付されうる。次いで、残留脂質相は、水で洗浄され、真空下で乾燥されうる。
【００６７】
積極的に再使用するために、非極性溶媒相は、真空下および好適な温度で行われる溶媒蒸発工程に付されうる。次いで、蒸発溶媒は、リサイクルのために凝縮される。次いで、主にグリセリドおよび非極性不鹸化性（または鹸化性）化合物で構成される混合物は、エステル交換工程に組み込まれ、次いで、一方では精製エステル（留出物中）、他方では非極性副次化合物が富化された蒸留残渣を取得するために分子蒸留に組み込まれる。これらの本質的に不鹸化性の化合物の抽出は、当業者に公知の方法に従って行われる。たとえば、次のシーケンス、すなわち、１）アルキルエステルの鹸化、２）石鹸からの不鹸化性化合物の分離を可能にする液液抽出、３）不鹸化性物質が富化された溶媒相の溶媒除去、および４）不鹸化性物質の最終精製が行われる。
【００６８】
再生可能原料は、任意選択で、固液抽出工程ａ）の後、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で熱処理に付される（とくに、アボカド）。
【００６９】
アボカドの場合、７５〜８０℃またはそれ以上での原料の熱処理工程は、必須である。それは、フラン脂質前駆体からフラン脂質への環化を効果的にすることが意図される。そのような処理の持続時間は、使用される加熱方法に依存して、一般的には０．５〜５時間の範囲内である。処理のために設定される温度は、一般的には１５０℃以下、好ましくは１２０℃以下である。温度および反応時間は、フラン脂質前駆体の環化の促進である熱処理の予想結果に関して、互いに強く依存する２つのパラメーターであることを、当然ながら理解すべきである。
【００７０】
有利には、この熱処理は、不活性雰囲気下で、とくに窒素連続フロー下で行われる。好ましくは、大気圧下で行われる。
【００７１】
この工程は、後述される鹸化工程ｃ）（仮に行うのであれば）の前または後、好ましくは前に、行われうる。なぜなら、さもなければ、鹸化によりフラン脂質前駆体がそれほど興味深くない修飾された不鹸化性誘導体（すなわち、フラン化合物とは異なる）に変換されるおそれがあるからである。
【００７２】
工程ａ）の後に行われるいくつかの部分熱処理はまた、完全熱処理をもたらして、フラン脂質前駆体からフラン脂質への完全変換を生じうる。
【００７３】
熱処理工程は、酸触媒の存在下または不在下で実現されうる。本明細書で用いられる場合、酸触媒とは、均一であると言われる鉱質触媒および有機触媒、たとえば、塩酸、硫酸、酢酸、またはパラトルエンスルホン酸だけでなく、好ましくは、不均一固体触媒、たとえば、シリカ、アルミナ、シリカアルミナ、ジルコニア、ゼオライト、酸性樹脂をも意味することが意図される。高い比面積、すなわち、少なくとも２００ｍ２／ｇに等しい比面積を有する酸性アルミナが、とくに選択されるであろう。本発明に係る方法を実現するのに好ましいのは、酸性アルミナ型の触媒である。
【００７４】
得られた脂質相は、任意選択で、濃縮工程ｂ）の前または後、好ましくは前に、少なくとも１種の軽質アルコール、たとえば、以上に定義されたものを含む少なくとも１種の極性有機溶媒と少なくとも１種の触媒との存在下で、エステル交換工程に付されうる。いずれにせよ、エステル交換は、鹸化工程ｃ）の前に行われなければならない。
【００７５】
この任意選択の工程は、グリセリドを脂肪酸エステルに変換し、トリグリセリドの場合、グリセロールを放出する。好ましくは、脂肪酸モノエステルを生成するモノアルコール、より好ましくは、脂肪酸アルキルモノエステルを生成するアルキルモノアルコールが使用される。
【００７６】
好ましくは、触媒は、好ましくは、アルコールソーダ、固体ソーダ、アルコールカリ、固体カリ、アルカリアルコラート、たとえば、リチウム、ナトリウム、もしくはカリウムのメチラート、エチラート、ｎ−プロピラート、イソプロピラート、ｎ−ブチラート、ｉ−ブチラート、もしくはｔ−ブチラート、アミン、およびポリアミンから選択される塩基触媒、または好ましくは、硫酸、硝酸、パラトルエンスルホン酸、塩酸、およびルイス酸から選択される酸触媒である。酸触媒は、より特定的には、脂肪の遊離酸性度が４ｍｇＫＯＨ／ｇよりも高い極限状況で使用されるであろう。この工程は、遊離脂肪酸のエステル化をもたらし、本方法では、続いて、塩基触媒エステル交換反応が継続される。
【００７７】
エステル交換工程は、とくに、撹拌床付きバッチ反応器または連続抽出器型の可動ベルト付き連続反応器で行われうる。好ましい実施形態では、工程ａ）から生じる有機溶媒および有機油は、互いに向流で反応器内に導入される。モノ、ジ、およびトリグリセリドから脂肪酸（アルキル）（モノ）エステルへの変換を最適化するために、たとえば、カスケード方式のいくつかの反応器および中間取出しシステムを実現することにより、反応を数回繰り返しうる。
【００７８】
最も好ましくは、エステル交換工程から生じる混合物は、モノ、ジ、またはトリグリセリドをより低い含有率で含む。グリセリドは、全体として、一般的には混合物の全重量の３重量％未満、好ましくは１重量％未満を占める。
【００７９】
得られた脂質相（エステル交換が行われた場合、極性不鹸化性化合物が富化されたグリセリドまたはおそらく遊離脂肪酸の脂肪酸エステルで主に構成される）は、次いで、不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために濃縮工程ｂ）に付される。濃縮は、熱処理（仮に行うのであれば）の前または後に実現されうるか、または濃縮が好適な温度での加熱プロセスを必要とする場合、これらの２つ工程は、同時に行われうる。濃縮は、好ましくは、熱処理を行う前に行われる。
【００８０】
不鹸化物に対する油の予備濃縮により、可能な後続の鹸化工程時に組み込まれる物質の量、したがって、抽出される量を低減することが可能である。
【００８１】
濃縮工程ｂ）は、特定的には蒸留または結晶化、とくに冷結晶化もしくは真空下での蒸発を介する結晶化により行われうる。本明細書で用いられる場合、蒸留とは、当業者に公知の任意の方法、とくに、分子蒸留、大気圧下または真空下での蒸留、逐次多段蒸留（とくに、ワイプトフィルム蒸発器または流下膜式蒸発器によるもの）、共沸蒸留、水蒸留、水蒸気蒸留、脱臭、とくにスチーム注入または不活性ガス注入（窒素、二酸化炭素）を用いたまたは用いない真空下での薄層脱臭器によるものを意味することが意図される。
【００８２】
最も好ましい方法は、高真空下かつ高温下での、ただし、感熱分子の変性を防止または制限する非常に短い接触時間での分別蒸留を意味することが意図される分子蒸留である。
【００８３】
この工程の分子蒸留さらには本発明に係る方法で実施可能なすべての他の分子蒸留は、ショートパス蒸留ユニット、好ましくは、遠心分離型の分子蒸留デバイスおよびワイプトフィルム型の分子デバイスから選択されるデバイスを用いて行われる。
【００８４】
遠心分離型の分子蒸留デバイスは、当業者に公知である。たとえば、欧州特許第０４９３１４４号明細書には、この型の分子蒸留デバイスが記載されている。一般的に言えば、蒸留される生成物は、高速度で回転するコニカルローターの加熱表面（熱表面）上に薄層で展延される。蒸留チャンバーは、真空下に配置される。これらの条件では、不鹸化性成分の蒸発は、沸騰ではなく、熱表面から行われるので、壊れやすい生成物が蒸発時に分解されないという利点がある。
【００８５】
ワイプトフィルム型の分子蒸留デバイスもまた、当業者に公知であり、蒸発表面（熱表面）上への蒸留される生成物の連続展延を可能にする回転スクレーパーを備えた蒸留チャンバーを含む。生成物の蒸気は、蒸留チャンバーの中央に配置されたコールドフィンガーを利用して凝縮される。外部パワーおよび真空供給システムは、遠心分離型の蒸留ユニットのものに非常に類似している（供給ポンプ、スライドベーンおよび油拡散を備えた真空ポンプなど）。ガラスフラスコ中の残渣および留出物の回収は、重力フローにより行われる。
【００８６】
分子蒸留は、好ましくは、圧力を１０−３〜１０−２ｍｍＨｇの範囲内、好ましくは約１０−３ｍｍＨｇに保持することにより１００〜２６０℃の範囲内の温度で行われる。
【００８７】
留出物中の不鹸化性物質の濃縮は、４０重量％を達成しうる。アボカドの場合、化合物と加熱領域との接触時間が非常に短くても（数ミリ秒〜１秒）、いくつかのフラン脂質前駆体は、この段階でフラン脂質に環化される可能性がある。しかしながら、この現象は、依然としてわずかである。また、伝統的蒸留を行うことも可能であり、これにより、ボカドの場合、７５℃以上、好ましくは８０℃以上での加熱プロセスを介してフラン脂質前駆体の完全環化（すでに行われていない場合）が可能になろう。
【００８８】
蒸留は、一般的には、主にグリセリド（主にトリグリセリド）ならびにそれほどでもないが遊離脂肪酸、天然軽質パラフィン、テルペンを含む軽質画分（第１の留出物）と、グリセリド（主にトリグリセリド）に希釈された不鹸化性画分を含む少なくとも１種のより重質の画分（第２の留出物または残渣）と、の取得を可能にする。エステル交換が行われた場合、高純度の脂肪酸エステルを含む軽質画分が取得され、かつ残留脂肪酸エステルに希釈された不鹸化性画分を含む少なくとも１種のより重質の画分が取得されよう。
【００８９】
アボカドの場合、７５℃または８０℃以上の温度で熱処理工程が濃縮工程ｂ）の前に行われたかまたはこの工程時に行われたのであれば、不鹸化性画分が富化された（かつ場合によりトリグリセリドおよび脂肪酸エステルが枯渇した）しかもこの段階でフラン脂質（トリグリセリドよりも揮発性が高いが、脂肪酸モノエステルよりも揮発性が低い）を典型的には約１０〜１５重量％の量で含有する濃縮物が単離される。前記熱処理が工程ｂ）の後に行われるかまたは工程ｂ）の後に終了するのであれば、この段階でフラン脂質前駆体およびすでに形成されたフラン脂質を含有する、不鹸化性画分が富化された（かつ場合によりトリグリセリドまたはエステル交換から生じる脂肪酸エステルが枯渇した）濃縮物が単離される。
【００９０】
任意選択で熱処理に付された、不鹸化性画分が富化された混合物は、次いで、使用された原料のタイプに依存して、鹸化工程ｃ）および鹸化された混合物から不鹸化性画分を抽出する工程ｄ）に付されうる。アボカドの場合、とくに、工程ｃ）およびｄ）は、グリセリド（または場合によりエステル交換から生じる脂肪酸エステル）を分離するために行われる。他の場合、工程ｃ）およびｄ）は、省略可能であり、グリセリド（または場合により脂肪酸エステル）とくにトリグリセリドなどの他の化合物と一緒に不鹸化性画分を含有する油が単離されうる。エステル交換が行われなかった場合、この油は、特定的には、塩基性媒体の影響を受けやすい鹸化性または不鹸化性の極性化合物を含みうる。
【００９１】
鹸化は、エステルを水溶性カルボキシレートイオンおよびアルコールに変換する化学反応である。本件では、エステル交換が行われた場合、鹸化は、とくに、脂肪酸エステル（たとえばをトリグリセリド）を脂肪酸およびアルコールに変換し、放出されるアルコールは、主にグリセロールまたは軽質アルコールである。
【００９２】
鹸化工程は、アルコール媒体中、好ましくはエタノール中でカリまたはソーダの存在下で実現されうる。典型的な実験条件は、エタノールの還流下、１２Ｎカリの存在下での４時間にわたる反応を含む。この段階では、任意選択で、とくに、反応速度を向上させるためにまたは塩基性ｐＨ値の影響を受けやすい不鹸化性化合物を保護するために、有利には共溶媒を使用しうる。この共溶媒は、特定的には、テルペン（リモネン、αおよびβ−ピネンなど）、アルカン、とくにパラフィンから選択されうる。
【００９３】
一般的出版物、たとえば、Ｂａｉｌｅｙ’ｓ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｏｉｌ  ａｎｄ  Ｆａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５），Ｆｅｒｅｉｄｏｏｎ  Ｓｈａｈｉｄｉ  Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．およびＭａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１），Ｍ．Ｂ．Ｓｍｉｔｈ，Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅには、鹸化工程さらには任意選択のエステル交換工程の条件がさらに詳細に記載されている。
【００９４】
その後、不鹸化性画分は、鹸化された混合物から１回以上抽出される。この工程は、好ましくは、少なくとも１種の好適な有機溶媒、すなわち、鹸化から生じるアルコール性溶液または水性アルコール性溶液と混和しない有機溶媒を利用した液液抽出により行われる。それにより、不鹸化性画分の鹸化プロセス時に形成された脂肪酸塩（石鹸）を分離することが可能である。
【００９５】
有機溶媒は、特定的には、任意選択でハロゲン化されたアルカン（とくに、石油エーテルまたはジクロロメタン）、芳香族溶媒（とくに、トリフルオロトルエン、ヘキサフルオロベンゼン）、ハロゲノアルカン、エーテル（とくに、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチル第３級ブチルエーテル、メチルテトラヒドロフラン、２−エトキシ−２−メチルプロパン）、ケトン（とくに、メチルイソブチルケトン、２−ヘプタノン）、プロピオネート（とくに、エチルプロピオネート、ｎ−ブチルプロピオネート、イソアミルプロピオネート）、ヘキサメチルジシロキサン、テトラメチルシラン、ジアセトンアルコール、１−ブトキシメトキシブタン、３−メトキシ−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）、またはテルペンから選択される天然有機溶媒、たとえば、リモネン、αピネン、βピネン、ミルセン、リナロール、シトロネロール、ゲラニオール、メントール、シトラール、シトロネロール、または天然起源の酸素化有機誘導体、とくに、エーテル、アルデヒド、アルコール、およびエステル、たとえば、フルフラールおよびフルフロールなどから選択される合成有機溶媒でありうる。好ましくは、テルペンが選択されよう。抽出は、並流または向流の抽出カラムで、または一連のミキサー−セトラー、抽出カラム、もしくは遠心抽出器を利用して行われうる。
【００９６】
工業スケールに適合化させるために、連続抽出は、連続液液抽出用のデバイス、たとえば、パルスカラム、ミキサー−セトラー、または等価物で提供可能である。
【００９７】
抽出後、不鹸化性画分は、好ましくは、とくに、デカンテーションおよび／または遠心分離（トリグリセリド鹸化の場合のグリセロール除去）、溶媒除去、洗浄、乾燥、濾過、および／または真空下での脱臭により精製される。より精密には、精製工程は、とくに、次のサブ工程、すなわち、
・残留石鹸を抽出するための溶媒相の遠心分離、次いで、濾過、
・アルカリ性残留痕跡物を除去するための水による、任意選択で塩化ナトリウムで飽和された水による溶媒相の洗浄、
・真空下での蒸留、水蒸留、または共沸蒸留を介する抽出溶媒の蒸発による乾燥、
・脱臭条件で、いずれの残留汚染物質も、とくに、抽出溶媒、殺有害生物剤、多環式芳香族炭化水素を抽出するための真空下での不鹸化性画分の脱臭、
の１つ以上を実現することにより行われうる。
【００９８】
本発明に係る第１の方法は、極性化合物（アボカドの場合のフラン脂質は例外で、これは特別であり、極性化合物の選択的抽出工程の後に極性前駆体からｉｎ  ｓｉｔｕで形成されたものであり、弱極性であるので、本発明に係る第１の方法により単離された不鹸化性画分中に存在する）が富化された高純度不鹸化性画分の取得を可能にする。網羅的ではないが、本方法の実現の終了時に取得される最終的に単離された画分中の不鹸化性化合物は、使用される原料の性質に依存して、任意選択でポリヒドロキシル化された脂肪アルコール、フラン脂質（アボカドの場合）、非エステル化（遊離）または非グリコシル化ステロールおよびトリテルペンアルコール、遊離およびグリコシル化ポリフェノール、遊離または硫酸化コレステロール、リグナン、ホルボールエステル、トリテルペン酸（たとえば、ウルソール酸）、極性テルペン（アルコール官能基を有するモノ、ジ、およびセスキテルペン）、アルカロイド、ポリコサノール、リモノイド、遊離形のキサントフィル（ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン）、ゴシポール、カランジン、シザンドリン、アザジラクチン、補酵素Ｑ１０、アフラトキシンとくにＢ１およびＢ２、イソフラボン、カフェイン、テオブロミン、ヨヒンビン、シリマリン、ルペオール、アラントインでありうる。
【００９９】
一般的には、これらのさまざまな工程（なかでもとくに工程ｃ）およびｄ））の後で得られるアボカド不鹸化物の平均組成は、不鹸化物の全重量を基準にした重量パーセントで表した場合、以下のようになる。
・フラン脂質  ５０〜７５％
・ポリヒドロキシル化脂肪アルコール  ５〜３０％
・スクアレン  ０．１〜５％
・ステロール  ０．１〜５％
・その他  ０〜１５％
【０１００】
本発明によれば、記載したように取得された不鹸化性物質は、次いで、それらの純度をさらに向上させるために、蒸留の（第２の）工程、好ましくは分子蒸留、好ましくは１００〜１６０℃、より好ましくは１００〜１４０℃の範囲内の温度で、好ましくは１０−３〜５・１０−２ｍｍＨｇの範囲内の圧力下で行われる分子蒸留に付されうる。他の実施形態によれば、設定温度は、１３０〜１６０℃でさまざまに設定される。
【０１０１】
この蒸留のために選択される温度および圧力は、回収される留出物の形成に影響を及ぼす。たとえば、この（第２の）蒸留は、アボカドの場合、主にアボカドフラン脂質を含む留出物の取得を可能にしうるとともに、その純度は、蒸留温度を１００〜１４０℃でさまざまに設定した場合、９０重量％超でありうる。蒸留温度が１３０〜１６０℃でさまざまに設定される場合、一般的には、主にアボカドフラン脂質およびそれほどでもないがアボカド由来ポリヒドロキシル化脂肪アルコールを含む留出物が取得され、その合計は、９０重量％を超えうる。
【０１０２】
したがって、本発明に係るこの第１の方法は、アボカドフラン脂質だけでなく、所望により、アボカドポリヒドロキシル化脂肪アルコールの選択的抽出の提供も可能にする。
【０１０３】
さらに、本方法の実現の終了時に取得される非極性溶媒相から単離された画分中の不鹸化性化合物は、使用される原料の性質に依存して、最終的に、ステロールエステル、エステル化トリテルペンアルコール、コレステロールエステル、トコフェロール（および対応するトコトリエノール）、セサモリン、セサミン、ステレン、スクアレン、パラフィン炭化水素、弱極性〜非極性テルペン（アルデヒドおよび／またはケトン官能基を有するモノ、ジ、およびセスキテルペン）、エステル化キサントフィル（ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン）、カロテノイド型顔料（β−カロテン、リコペン）、ワックス、カルシフェロール、コレカルシフェロール、ポンガモールでありうる。
【０１０４】
次に、本発明に係る第１の方法と比較して差異を本質的に説明することにより、本発明に係る第２の方法を提示する。本発明に係る第１の方法の説明は、両方の方法に共通するすべての他の特性に関して、参照可能であることに留意すべきである。
【０１０５】
本発明に係る第２の方法で使用される再生可能原料は、とくに限定されるものではなく、任意選択で、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、またはアミンの官能基により官能基化された脂質成分を含む。それらは、必然的に、以上に挙げた官能基のいずれかにより（または少数のこれら官能基により）官能基化されていない脂質成分を含み、これらの成分は、自然界で最も一般的に遭遇するものである。
【０１０６】
この方法は、任意選択で、再生可能原料の脱水および任意選択の調整の第１の工程を含む。脱水および調整は、必ずしも８０℃または７５℃以下の温度で行われるとはかぎらない。前記温度は、好ましくは−５０℃以上である。加熱プロセスが提供される場合、温度は、一般的には５０〜１２０℃、より好ましくは７５〜１２０℃でさまざまに設定される。第１の方法に関しては、脱水は、調整（仮に行うのであれば）の前または後で実現されうる。それは、好ましくは、８〜３６時間継続する。
【０１０７】
再生可能原料は、任意選択で、これ以降に記載の固液抽出工程ａ）の前に、７５℃以上、好ましくは８０℃以上の温度で、とくに仏国特許第２６７８６３２号明細書に記載の熱処理に付される（このことは、とくにアボカドの場合にあてはまる）。最も好ましくは、原料の熱処理および脱水（仮に行うのであれば）は、同時に行われ、単一工程を形成する。
【０１０８】
アボカドの場合、あらかじめ調整および／または脱水が行われたまたは行われていない７５℃以上での原料のこの熱処理工程は、必須である。記載の第１の方法に関しては、それは、フラン脂質前駆体からフラン脂質への環化を促進することが意図される。そのような処理の持続時間は、使用される加熱方法に依存して、一般的には８〜３６時間でさまざまに設定される。処理のために設定される温度は、一般的には１５０℃以下、好ましくは１２０℃以下である。有利には、そのような熱処理は、不活性雰囲気下で、とくに窒素連続フロー下で行われる。好ましくは、大気圧下で行われる。
【０１０９】
任意選択で脱水および／または調整されて熱処理に付された再生可能固体原料は、次いで、少なくとも１種の極性有機溶媒および前記極性有機溶媒と混和しない少なくとも１種の非極性共溶媒の存在下でその脂肪の固液抽出工程ａ）に付される。
【０１１０】
第１の方法と同様に、これらの溶媒および共溶媒は、無水であってもそうでなくてもよく、抽出溶媒混合物に水を添加してもよい。
【０１１１】
工程ａ）は、室温で行われうるが、一般的には、（第１の方法とは対照的に）温度に関して制限されることなく、加熱プロセスを実現することにより行われ、いずれにせよ、前記温度は、とくに、４０〜１００℃でさまざまに設定される。
【０１１２】
この工程は、非極性（または弱極性）脂質成分が富化された、すなわち、不鹸化性か否かにかかわらず、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基を少しも（または多く）含有しない有機画分と、さらには極性脂質成分、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基により官能基化された成分が富化された画分と、の単離を可能にする。
【０１１３】
この工程は、１個以上のこれら官能基、好ましくは多くのこれら官能基（たとえば、ポリオール）を含む脂質成分の分離を本質的に可能にする。それは、好ましくは、触媒を用いずに、とくに、塩基触媒を用いずに、行われる。
【０１１４】
使用される原料のタイプに依存して、工程ａ）で単離された非極性またはわずかに弱極性のこれらの脂質成分は、限定されるものではないが、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基を少しも含有しないグリセリド、フラン脂質（アボカドの場合、フラン脂質前駆体は、固液抽出工程の開始前にすでにフラン脂質に変換され、これらのフラン脂質は、ヒドロキシル化されていない）、弱極性アルコール、たとえば、トコフェロール、スクアレン、キサントフィル、およびエステル化ステロールでありうる。
【０１１５】
（固液抽出条件で）極性溶媒と混和しない非極性共溶媒は、好ましくは、とくに、１個以上のヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、またはアミンの官能基により官能基化された、抽出されない脂質成分が、そのような共溶媒に可溶でないように、選択される。それらの化学的性質を考慮すると、これらの官能基化脂質成分は、必然的に、あまり可溶でない（好ましくは可溶でない）非極性溶媒相よりも極性相と強い親和性を有するであろう。
【０１１６】
非極性共溶媒は、ヒドロキシル、エポキシド、ケトン、チオール、アルデヒド、エーテル、およびアミンの官能基を少しも含有しない（またはほとんど含有しない）（不鹸化性または鹸化性）脂質が富化された非極性相から、溶媒を蒸発させるために任意選択で使用される加熱プロセスに関して特別な対策を施すことなく、とくに減圧下で、蒸発される。取得された脂質生成物は、好ましくは酸を介して、中和工程に付され（非極性共溶媒の蒸発の前または後、好ましくは前）、次いで、デカンテーションまたは遠心分離の工程および／または濾過の工程に付されうる。次いで、残留脂質相は、水で洗浄され、真空下で乾燥されうる。
【０１１７】
得られた脂質相は、任意選択で、濃縮工程ｂ）の前または後、好ましくは前に、少なくとも１種の軽質アルコール、たとえば、以上に定義されたものを含む少なくとも１種の極性有機溶媒と少なくとも１種の触媒との存在下で、エステル交換工程に付されうる。いずれにせよ、エステル交換は、鹸化工程ｃ）の前に行われなければならない。
【０１１８】
得られた脂質相（エステル交換が行われた場合、主に、非極性不鹸化性化合物が富化されたグリセリドまたはおそらく遊離脂肪酸の脂肪酸エステルで構成される）は、次いで、不鹸化性画分が富化された混合物を取得するために、濃縮工程ｂ）に付される。
【０１１９】
第１の方法に関しては、好ましい濃縮方法は、分子蒸留である。伝統的蒸留を行うことも可能である。
【０１２０】
蒸留は、一般的には、主にグリセリド（主にトリグリセリド）ならびにそれほどでもないが遊離脂肪酸、天然軽質パラフィン、テルペンを含む軽質画分（第１の留出物）と、グリセリド（主にトリグリセリド）に希釈された不鹸化性画分を含む少なくとも１種のより重質の画分（第２の留出物または残渣）と、の取得を可能にする。エステル交換が行われた場合、高純度の脂肪酸エステルを含む軽質画分が取得され、かつ残留脂肪酸エステルに希釈された不鹸化性画分を含む少なくとも１種のより重質の画分が取得されよう。
【０１２１】
アボカドの場合、エステル交換が行われなかった場合、不鹸化性画分が富化された（かつトリグリセリドが枯渇した）しかもこの段階でフラン脂質（トリグリセリドよりも揮発性の高い）を典型的には約１０〜１５重量％の量で含有する濃縮物が、単離される。
【０１２２】
次いで、不鹸化性画分が富化された混合物は、任意選択で、鹸化工程ｃ）および鹸化された混合物からの不鹸化性画分の抽出工程ｄ）に付される。抽出後、不鹸化性画分は、好ましくは、本発明に係る第１の方法に記載のものと同一の手順を用いて精製される。
【０１２３】
本発明に係る第２の方法は、弱極性〜非極性の化合物が富化された非常に純粋な不鹸化性画分の取得を可能にする。網羅的ではないが、そのような方法の実現の終了時に取得される最終的に単離された画分中の不鹸化性化合物は、使用される原料の性質に依存して、フラン脂質（アボカドの場合）、ステロールエステル、エステル化トリテルペンアルコール、コレステロールエステル、トコフェロール（および対応するトコトリエノール）、セサモリン、セサミン、ステレン、スクアレン、パラフィン炭化水素、弱極性〜非極性テルペン（アルデヒドおよび／またはケトン官能基を有するモノ、ジ、およびセスキテルペン）、エステル化キサントフィル（ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン）、カロテノイド型顔料（β−カロテン、リコペン）、ワックス、カルシフェロール、コレカルシフェロール、ポンガモールでありうる。
【０１２４】
一般的には、これらのさまざまな工程（なかでもとくに工程ｃ）およびｄ））の後で得られるアボカド不鹸化物の平均組成は、不鹸化物の全重量を基準にした重量パーセントで表した場合、以下のように与えられる。
・フラン脂質  ６０〜８０％
・スクアレン  １〜７％
・その他  ５〜２０％（炭化水素、トコフェロール、脂肪ケトン、重質色素…）
・ポリヒドロキシル化脂肪アルコール  ０．１〜１０％。
【０１２５】
本発明によれば、記載したように取得された不鹸化性物質は、次いで、それらの純度をさらに向上させるために、蒸留の（第２の）工程、好ましくは分子蒸留、好ましくは１００〜１６０℃、より好ましくは１００〜１４０℃の範囲内の温度で、好ましくは１０−３〜５・１０−２ｍｍＨｇの範囲内の圧力下で行われる分子蒸留に付されうる。この（第２の）蒸留は、アボカドの場合、主にアボカドフラン脂質を含む留出物の取得を可能にするとともに、その純度は、９０重量％超でありうる。
【０１２６】
したがって、本発明に係るこの第２の方法は、固液抽出工程時に極性相に抽出されたアボカド由来ポリヒドロキシル化脂肪アルコールを除いて、アボカドフラン脂質の選択的抽出の達成を可能にする。
【０１２７】
さらに、そのような方法の実現の終了時に取得される極性溶媒相から単離された画分中の不鹸化性化合物は、使用される原料の性質に依存して、最終的に、任意選択でポリヒドロキシル化された脂肪アルコール、フラン脂質（アボカドの場合）、非エステル化（遊離）または非グリコシル化トリテルペンアルコールおよびステロール、遊離およびグリコシル化ポリフェノール、遊離または硫酸化コレステロール、リグナン、ホルボールエステル、トリテルペン酸（たとえば、ウルソール酸）、極性テルペン（アルコール官能基を有するモノ、ジ、およびセスキテルペン）、アルカロイド、ポリコサノール、リモノイド、遊離形のキサントフィル（ルテイン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン）、ゴシポール、カランジン、シザンドリン、アザジラクチン、補酵素Ｑ１０、アフラトキシンとくにＢ１およびＢ２、イソフラボン、カフェイン、テオブロミン、ヨヒンビン、シリマリン、ルペオール、アラントインでありうる。
【０１２８】
本発明は、油または脱臭排出物からの抽出に使用される伝統的な既存の方法と比較して、多くの長所を有する。まず最初に、本発明に係る方法は、伝統的方法の実質的投資を必要としないので、経済的である。投資に関して、本発明に係る方法は、精製ツール（粘液除去、中和）の使用を回避可能である。
【０１２９】
それに加えて、本発明は、本発明に係る方法の実現により高付加価値の共生成物、たとえば、
・任意選択で初期バイオマス中に存在する毒性化合物または抗栄養化合物が除去されたかつ動物飼養またはヒト栄養に直接利用可能な油粕、または興味深いオリゴペプチドおよび／またはオリゴ糖の供給源の油粕、
・化粧品、医薬品、ならびに動物飼養およびヒト栄養に利用可能な多糖およびポリフェノール、
がもたらされるので、共利用に関して非常に興味深い。
【０１３０】
経済および環境の観点から、本発明に係る方法は、現在の方法とは対照的に、果実のほぼ１００％の再使用、したがって、バイオマスさらには耕作地の節約を可能にするだけでなく、上流の農業者から下流のユーザーまでの前記不鹸化性物質の全価値連鎖の向上も可能にする。最後に、それらは、多くの用途で、とくに、エネルギー目的および産業目的で開発されつつある今日のバイオリファイナリーモデルの基本原理を重視している。
【０１３１】
本発明に係る方法により取得される不鹸化性画分は、処理前に原料中に存在する不鹸化物に近いさらには類似した組成を共有する。
【０１３２】
有利には、本発明に係るこれらの不鹸化性画分およびこれらの共生成物は、残留毒性溶媒を少しも含んでいないので、伝統的方法から得られる生成物と比較して、かなり良好な規制上の安全性および許容性を有する。これらの特定の特徴があるため、本発明に係る方法により取得される不鹸化性画分および／または提供される共生成物は、ヒトおよび／または動物のための化粧品、薬剤、食品組成物、または食品サプリメントもしくは添加物における使用をより適合化させることが可能である。
【０１３３】
同様に、本発明に係る方法によれば、植物または動物のバイオマス中に存在しうる汚染物質、すなわち、多環式芳香族炭化水素（ＰＡＨ）、殺有害生物剤、ポリクロロビフェニル、ジオキシン、臭素化遅炎剤、医薬品など（ＰＣＢ）を、それらの極性に依存して、分離および／または濃縮することが可能になろう。
【０１３４】
本発明に係る方法により取得されるアボカド不鹸化性画分は、たとえば、関節疾患、より特定的には骨関節炎を治療するためのおよび関節炎（すなわち、関節リウマチ、乾癬性関節炎、ライム病、および／または任意の他のタイプの関節炎）を治療するための薬剤を調製するためにとくに使用されうる。こうして調製された薬剤は、歯周病の治療、とくに歯周炎の治療が意図されうる。この薬剤はさらに、骨粗鬆症の治療にも好適でありうる。さらに、この薬剤は、ＮＧＦ（神経成長因子）により誘導される神経細胞分化をモジュレートすることが意図されうる。最後に、この薬剤は、特定的には外皮適用の枠内で、組織とくに皮膚組織を修復することが意図されうる。
【０１３５】
本発明に係る方法から得られるアボカド不鹸化性画分はまた、賦形剤および／または化粧上許容可能な媒体の存在下で、皮膚、近接粘膜、および／または角質化皮膚付属器（老化、瘢痕…）の、毛髪繊維または毛乳頭の化粧処理を行うための化粧組成物とくに皮膚化粧品でも利用されうる。
【０１３６】
同様に、本方法の共生成物、たとえば、タンパク質および炭水化物は、それらの性質に依存して、そのまままたは変換後、医薬品、化粧品、およびヒト栄養または動物飼養の用途に使用するための活性成分または賦形剤の生成をもたらしうる。
【０１３７】
本発明は、油または脱臭排出物からの抽出に使用される伝統的な既存の方法と比較して、多くの長所を有する。まず最初に、本発明に係る方法は、伝統的方法の実質的投資を必要としないので、経済的である。投資に関して、本発明に係る方法は、スクリュープレスやヘキサン抽出器のような機械粉砕ツールおよび精製ツール（粘液除去、中和）の回避を可能にする。さらに、機械粉砕またはヘキサンを用いた蒸発粉砕および精製とは対照的に、本発明に係る固液抽出は、高エネルギー消費を必要としない。さらに、それは、粗油の精製操作よりも低い淡水消費を必要とする。
【０１３８】
それに加えて、本発明は、本発明に係る方法の実現により高付加価値の共生成物、たとえば、
・任意選択で初期バイオマス中に存在する毒性化合物または抗栄養化合物が除去されたかつ動物飼養またはヒト栄養に直接利用可能な油粕、または興味深いオリゴペプチドおよび／またはオリゴ糖の供給源の油粕、
・化粧品、医薬品、ならびに動物飼養およびヒト栄養に利用可能な多糖およびポリフェノール
がもたらされるので、共利用に関して非常に興味深い。
【０１３９】
経済および環境の観点から、本発明に係る方法は、現在の方法とは対照的に、果実のほぼ１００％の再使用、したがって、バイオマスさらには耕作地の節約を可能にするだけでなく、上流の農業者から下流のユーザーまでの前記不鹸化性物質の全価値連鎖の向上も可能にする。最後に、それらは、多くの用途で、とくに、エネルギー目的および産業目的で開発されつつある今日のバイオリファイナリーモデルの基本原理を重視している。
【０１４０】
本発明に係る方法により取得される不鹸化性画分は、処理前に原料中に存在する不鹸化物に近いさらには類似した組成を共有する。
【０１４１】
有利には、本発明に係るこれらの不鹸化性画分およびこれらの共生成物は、残留毒性溶媒を少しも含んでいないので、伝統的方法から得られる生成物と比較して、かなり良好な規制上の安全性および許容性を有する。これらの特定の特徴があるため、本発明に係る方法により取得される不鹸化性画分および／または提供される共生成物は、ヒトおよび／または動物のための化粧品、薬剤、食品組成物、または食品サプリメントもしくは添加物における使用をより適合化させることが可能である。
【０１４２】
同様に、本発明に係る方法によれば、植物または動物のバイオマス中に存在しうる汚染物質、すなわち、多環式芳香族炭化水素（ＰＡＨ）、殺有害生物剤、ポリクロロビフェニル（ＰＣＢ）、ジオキシン、臭素化遅炎剤、医薬品などを、それらの極性に依存して、分離および／または濃縮することが可能になろう。
【０１４３】
本発明に係る方法により取得されるアボカド不鹸化性画分は、たとえば、関節疾患、より特定的には骨関節炎を治療するためのおよび関節炎（すなわち、関節リウマチ、乾癬性関節炎、ライム病、および／または任意の他のタイプの関節炎）を治療するための薬剤を調製するためにとくに使用されうる。こうして調製された薬剤は、歯周病の治療、とくに歯周炎の治療が意図されうる。この薬剤はさらに、骨粗鬆症の治療にも好適でありうる。さらに、この薬剤は、ＮＧＦ（神経成長因子）により誘導される神経細胞分化をモジュレートすることが意図されうる。最後に、この薬剤は、特定的には外皮適用の枠内で、組織とくに皮膚組織を修復することが意図されうる。
【０１４４】
本発明に係る方法から得られるアボカド不鹸化性画分はまた、賦形剤および／または化粧上許容可能な媒体の存在下で、皮膚、近接粘膜、および／または角質化皮膚付属器（老化、瘢痕…）の、毛髪繊維または毛乳頭の化粧処理を行うための化粧組成物とくに皮膚化粧品でも利用されうる。
【０１４５】
同様に、本方法の共生成物、たとえば、タンパク質および炭水化物は、それらの性質に依存して、そのまままたは変換後、医薬品、化粧品、およびヒト栄養または動物飼養の用途に使用するための活性成分または賦形剤の生成をもたらしうる。
【実施例】
【０１４６】
カランジャ種子からのポンガモールおよびカランジン（極性不鹸化物）の選択的抽出
脱殻されていない湿潤状態のままのインド原産ポンガミア・グラブラ（Ｐｏｎｇａｍｉａ  ｇｌａｂｒａ）カランジャ種子は、Ｂｉｏｓｙｎｔｈｉｓ社（Ｆｒａｎｃｅ）により提供される。種子中の脂質含有率（ソックスレー抽出器Ｖ０３−９０８）およびタンパク質含有率（ケルダール法）の分析は、それぞれ、全脂質の３５．２％および全タンパク質の２９．２％の値を与える。ＩＳＯ方法ＮＦ  Ｔ６０−２０４に準拠して測定された脂質の酸指数は、１．３ｍｇＫＯＨ／ｇである。
【０１４７】
次いで、ポンガモールおよびカランジンの含有率を決定するために、Ｖ．Ｋ．Ｇｏｒｅ  ｅｔ  ｃｏｌｌ．（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３３（２），３３７−３４６（２０００））による記載のプロセスに従って、粉砕により取得された粉末として種子を分析する。結果は、ポンガモールに対して０．１６％およびカランジンに対して１．２９％を与える。
【０１４８】
混和しない極性溶媒と非極性共溶媒との混合物を用いたカランジャ種子からの不鹸化性化合物の連続抽出プロセス
非滲出種子フレーク（フレークからの油の滲出がない）を取得するために、良好な機械的性状（接触時に崩壊しない）を有する平滑ローラーおよび間隔調整可能距離を有するフラットナーを用いて、８．２４３ｋｇのカランジャ種子をフラット処理する。８．０７２ｋｇのフレークが回収される。
【０１４９】
また、ただちに、１００℃の通気乾燥オーブン内でフレークを１２時間乾燥させる。乾燥後の種子の残留湿分は、１０５℃で熱重量測定により決定した場合、１．７％である。
【０１５０】
次いで、こうして調製されたフレークを有孔充填床（グリッド）パーコレーションカラム内に導入する。カラムを５０℃に温度調節する。ポンプにより共溶媒混合物をカラムに供給することが可能である。入力供給は、カラムヘッドレベルで行われる。次いで、液相は、フレーク床を介してパーコレートしてから、フレーク床の後、カラムの下流に位置するステーションで取り出される。
【０１５１】
ポンプ操作により、次いで、液相は、床ヘッドに戻され、再びフレーク床中を拡散する。混合物の再循環サイクルの持続時間は、３０分間である。サイクルの終了時、液体供給は停止される。次いで、浸漬されたフレーク中に依然として残留する液体の部分は、ドリッピング（１５分間）により単純に回収される。
【０１５２】
第２の工程では、フレークの抽出および洗浄が行われる。その目的で、カラムに共溶媒混合物が供給される。この混合物は、１回だけ、すなわち、その後は再循環を行わずに、パーコレーションによりフレーク床中を再び拡散する。
【０１５３】
溶媒量は、５分間注入される。次いで、フレーク床を１５分間ドリップ乾燥させる。取得されたフレークは、脂質をまったく含まないので脱脂されたと言われるが、依然として共溶媒で含浸されている。このため、次いで、それを１２０℃の通気オーブン内で４時間乾燥させる。
【０１５４】
使用されるパーコレーションカラムは、並流抽出（または向流抽出）のシミュレーションを可能にし、たとえば、Ｄｅ  Ｓｍｅｔ型またはＣｒｏｗｎ  Ｉｒｏｎ型の連続産業抽出器内に配置される。
【０１５５】
操作プロセスは、以下のとおりである。
１．フラット処理の直後、種子フレークを充填床パーコレーションカラムに導入する。
２．次いで、二相溶媒混合物エタノール／ヘキサン（５０／５０、ｍ／ｍ）を４０℃のフレーク床に３０分間送る。
３．次いで、二相ミセラ（液固抽出から生じる溶媒相）を取り出す。次いで、４０℃のエタノール／ヘキサン混合物を用いた５回の逐次洗浄操作を介してフレーク床を洗浄する（５分間／洗浄）。
４．次いで、エタノール相とヘキサン相とを分離するために、二相ミセラを遠心分離する。次いで、２つの回収された有機相を２０ｍｂａｒの真空下９０℃で５分間蒸発させる。
５．不溶性ガム（プロセス時にフレークから抽出された油不溶性生成物）を伴ってまたは伴わずにそれらのそれぞれの溶媒（エタノールまたはヘキサン）の蒸発後に得られた脂質を、熱水添加および遠心分離により中性になるまで洗浄する。最後に、２０ｍｂａｒの真空下９０℃で５分間乾燥させる。次いで、２つの脂質抽出物の組成を評価する。
【０１５６】
【表１】
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【０１５７】
表１に与えられた結果から以下の点が実証される。
・本方法は、抽出脂質の有意な収率（９５％超）を与える。
・出力時のフレークは、比較的良好に使用される（残留脂肪＜３％）。
・使用される方法は、カランジャ油からの不鹸化性化合物の分離に関してきわめて選択的であり、ポンガモールおよびカランジンの非常に高い濃縮係数を伴って標的不鹸化性化合物の高い抽出収率が得られる。
・富化目的で、標的化合物カランジンまたはポンガモールの高濃縮を達成するために、たとえば、分子蒸留により、ヘキサン相またはエタノール相から生じる油を取り出しうる。蒸留共生成物（蒸留残渣）は、不鹸化性物質（それ自体は、ポンガモールやカランジンなどの抗栄養化合物で構成される）が取り除かれた油であるので、動物飼養で積極的に再使用可能である。
・プロセスの終了時のフレークは、タンパク質（＞４０％）が大幅に富化されている。したがって、動物飼養で積極的に再使用可能である。残留抗栄養化合物（カランジンおよびポンガモール）中のその含有率は、劇的に低減された。
【０１５８】
次いで、エタノール相およびヘキサン相から取得された脂質抽出物を、１０−３ｍｍＨｇの真空下２００℃で、ＫＤＬ４型のワイプトフィルム蒸留デバイス内での分子蒸留により濃縮する。以下の蒸留結果が得られる。
・抽出エタノール相脂質抽出物の蒸留から生じる留出物：蒸留プロセスに組み込まれた量と比較して３２．５重量％。
・抽出ヘキサン相脂質抽出物の蒸留から生じる留出物：蒸留プロセスに組み込まれた量と比較して４．７重量％。
【０１５９】
分析後、カランジンおよびポンガモールのそれぞれの含有率は、以下のとおりである。
・抽出ヘキサン相留出物のポンガモール含有率＝７．６重量％
・抽出ヘキサン相留出物のカランジン含有率＝５．１重量％
・抽出エタノール相留出物のカランジン含有率＝４８．６重量％
・抽出エタノール相留出物のポンガモール含有率＝２．１重量％
【０１６０】
本方法により、ポンガモールおよびカランジンがそれぞれ富化された２つの抽出物を個別に取得可能になった。
【国際調査報告】
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