(57)【要約】  本発明は、以下の式(I)の化合物、及び/又は薬学的に許容されるその付加塩、溶媒和物、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物に関する。したがって、本発明の主題は、式(I)の化合物の調製、及び、特に、例えば、がんや免疫系障害等の数多くの疾患との関連が示唆されているタンパク質キナーゼの阻害におけるその使用も包含する。2016504345.tif 000141
2016504345.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式(I):
【化１】
2016504345.tif 000133
の化合物であって、
-  R1は、C1〜C6アルキル基、ヒドロキシル基、又はNR4R5であり、
-  R4及びR5は、独立に、水素原子及び/又はC1〜C6アルキル基であり、
-  Xは、CH2、C(S)、又はC(O)であり、
-  R2は、水素原子、C1〜C6アルキル基、又はハロゲン原子であり、
-  Yは、HNC(O)、HNC(S)、HNSO2、HNC(O)CH2、HNC(S)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、CH2NHC(O)、C(O)NH及びC(O)NHCH2、CH2NHC(S)からなる群から選択され、好ましくはHNC(O)であり、
-  R3は、
-  以下の基で一置換又は多置換されたアリール、好ましくはフェニル基、
-  ヒドロキシル基、
-  ハロゲン原子、
-  C1〜C6アルキル-アミン基、好ましくは、第二級C1〜C6アルキル-アミン、
-  C1〜C6アルコキシ基、
-  メチルで場合により一置換されているチアゾールやイミダゾール等のヘテロアリールで置換されているアミン、
-  C1〜C6トリフルオロアルコキシ基、好ましくは、トリフルオロメトキシ、
-  C1〜C6アルキル基、好ましくは、メチル又はイソプロピル、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、好ましくは、トリフルオロメチル、
-  メチルで場合により一置換されているチアゾールやイミダゾール等のヘテロアリール基、
-  メチル基、ヒドロキシル基、アミン基、-NHCH3、又は-N(CH3)2で場合により置換されている脂肪族ヘテロ環、
-  メチル基、ヒドロキシル基、アミン基、-NHCH3、又は-N(CH3)2で場合により置換されているヘテロ環で置換されているC1〜C6アルキル、又は
-  以下:
【化２】
2016504345.tif 000134
の断片、
-  C1〜C6アルキル基、C1〜C6トリフルオロアルキル基、ハロゲン原子、及び/又はヒドロキシルで場合により置換されている、ジヒドロベンゾフラン、インドール、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾール、ピリジンからなる群から選択されることが好ましい、ヘテロアリール基、
-  一置換された非芳香族環式基、好ましくは、ヒドロキシル、ハロゲン、C1〜C6アルキル-アミン、C1〜C6アルコキシ、C1〜C6トリフルオロアルコキシ、C1〜C6アルキル、C1〜C6トリフルオロアルキルで一置換されている環式C3〜C10アルキル
からなる群から選択されることを特徴とする、
化合物、及び/又は薬学的に許容されるその付加塩、溶媒和物、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物。
【請求項２】
-  XがCH2であり、
-  R2が、アルキル、好ましくはメチル基、又はハロゲン原子、好ましくはフッ素若しくは塩素原子である
ことを特徴とする、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
-  R1が、C1〜C6アルキル、好ましくは、メチル、又は-NHMeであり、
-  R2が、メチル又は塩素原子であり、
-  Yが、HNC(O)、HNC(O)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、C(O)NH、C(O)NHCH2、又はCH2NHC(O)、好ましくは、HNC(O)であり、
-  R3が、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、C1〜C6トリフルオロアルコキシ基、C1〜C6アルキル基、ハロゲン、又はCF3若しくはメチル基で好ましくは一置換されているチアゾール基で一置換されている、フェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル、C1〜C6アルキル-アミン、及び/又はヒドロキシル基で多置換されている、フェニル基、
-  C1〜C6アルキル又はC1〜C6トリフルオロアルキル、好ましくはメチル及び/又はトリフルオロメチルで場合により置換されている、ピリジン基、
-  C1〜C6アルキル及び/又はC1〜C6トリフルオロアルキルで置換されている環式C3〜C10アルキルのうちから選択される、非芳香族環式基、及び
-  以下:
【化３】
2016504345.tif 000135
からなる群から選択される断片
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項1又は2に記載の化合物。
【請求項４】
-  R1が、メチル基又は-NHMeであり、
-  R2がメチル基であり、
-  Yが、HNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が:
【化４】
2016504345.tif 000136
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項1から3のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
一般式(II):
【化５】
2016504345.tif 000137
で示され、式中、
-  R1がメチル基又は-NHMeであり、
-  XがCH2であり、
-  R2がメチル基であり、
-  Yが、HNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が:
【化６】
2016504345.tif 000138
からなる群から選択され、好ましくは、R3が、
【化７】
2016504345.tif 000139
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
R1が、ヒドロキシル基、それに対応する塩であり、かつ/又はXが、CH2である代わりにC=Oであることを特徴とする、請求項2から5のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
-  R1が、C1〜C6アルキル、好ましくはメチル、又はNR4R5であり、
-  Xが、CH2又はC(O)であり、
-  R2が、水素、アルキル、好ましくはメチル基、又はハロゲン原子、好ましくはフッ素原子であり、
-  Yが、HNC*(O)[C*は、R3に連結している]又はHNC(O)NHであり、
-  R3が、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、C1〜C6アルキル基で一置換されているフェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル及びC1〜C6アルキル-アミンで多置換されているフェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル、好ましくはトリフルオロメチルで場合により置換されているピリジン基、
-  以下:
【化８】
2016504345.tif 000140
からなる群から選択される断片
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項1に記載の化合物。
【請求項８】
請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物の調製方法であって、
a) XがCOである場合、好ましくはNO2基で置換されている芳香族カルボン酸のペプチドカップリング技術によって、好ましくは、カルボジイミド又はウロニウムカップリング剤の使用によって、NH-CO結合を形成し、又はXがCH2である場合、好ましくは無水ホウ素の存在下、好ましくはNO2基で置換されている芳香族アルデヒドによる還元アミノ化を実施して、NH-CH2結合を形成する工程、及び
b)好ましくは、例えば水素雰囲気中のパラジウムチャコール存在下での接触水素化のような水素化によって、NO2基をNH2に場合により還元する工程
の少なくとも一方を含むことを特徴とする、調製方法。
【請求項９】
請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物の調製方法であって、
前記方法が、好ましくは請求項8に記載の方法の工程(a)及び(b)の後に、
c1) YがHNC(O)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソシアネートと反応させることにより、尿素を形成する工程、
c2) YがHNC(S)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソチオシアネートと反応させることにより、チオ尿素を形成する工程、
c3) YがHNSO2である場合、工程b)の後に得られた化合物を、塩化スルホニルや塩化スルファミル等のハロゲンスルファミル又はハロゲンスルホニルと反応させることにより、スルホンアミドを形成する工程、
c4) YがHNCOである場合、好ましくは、工程b)の後に得られた化合物を、塩化アシル等の活性化したカルボン酸と反応させることにより、アミドを形成する工程、又は
c5) YがHNCSである場合、特に、工程c4)の後に得られた化合物をローソン試薬と反応させることにより、チオアミドを形成する工程、
d)得られた生成物を、好ましくはKOHを使用して、場合によりけん化する工程
の少なくとも1つを含むことを特徴とする、調製方法。
【請求項１０】
請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物の調製方法であって、少なくとも、工程c1)〜c5)の後に、
d')場合によりけん化し、続いて種々のアルキルアミンとのカップリング反応を実施する工程
を含むことを特徴とする、調製方法。
【請求項１１】
薬物であることを特徴とする、請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
ヒト又は動物疾患に関与する細胞増殖及び/又は血管形成の阻害に使用するための、請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
腫瘍形成、ヒト免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成、過剰増殖性疾患、がん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎臓がん、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫のような疾患において、タンパク質キナーゼの阻害薬として使用される、請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記疾患が、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、乳がん、前立腺がん、白血病、腎がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、化学療法抵抗性がん、黄斑変性からなる群から選択される、請求項13に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
活性成分としての請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される賦形剤とを含有することを特徴とする、医薬組成物。
【請求項１６】
腫瘍形成、ヒト免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成、過剰増殖性疾患、がん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎臓がん、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫のような疾患において、タンパク質キナーゼの阻害薬として使用するための、請求項15に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記疾患が、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、乳がん、前立腺がん、白血病、腎がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、化学療法抵抗性がん、黄斑変性からなる群から選択される、請求項16に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
がんを示す患者のような必要とする患者が、請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物の少なくとも1種に反応を示す見込みがあるかどうかを予測するin vitroの方法であって、前記方法は、前記患者のサンプルにおいて、タンパク質キナーゼの突然変異型の発現レベル、遺伝子修飾、活性化の状態又は出現を判定することを含み、前記タンパク質キナーゼは、BRAF、EGFR、FGFR2、KDR、PDGFRA、SRC、ABL、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB、ABL2、BLK、BMX、BTK、CSK、EPHA1、EPHA2、EPHA4、EPHB2、EPHB4、HER2、ERBB4、FES、FGR、FLT3、FMS、FRK、FYN、HCK、LCK、LYN、MAPK14、ERK2、PKCθ、RET、VEGFR3、及びYES、好ましくはBRAF、EGFR、EGFR T790M L858R、FGFR2、KDR、PDGFRA、SRC、ABL、ABL T315I、FGFR1、VEGFR1、PDGFRBのキナーゼリストから選択される、方法。
【請求項１９】
がんを示す患者のような必要とする患者に投与するための、請求項1から7のいずれか一項に記載の少なくとも1種の化合物を予測するin vitroの方法であって、
e)前記化合物を、ヒト組織又は細胞のサンプルと接触させる工程と、
f)前記サンプルに対する前記化合物の活性を、例えばIC50及び/又は存在するタンパク質キナーゼとの比活性によって判定する工程であって、ここで存在するタンパク質キナーゼは、例えば、BRAF、EGFR、EGFR T790M L858R、FGFR2、KDR、PDGFRA、SRC、ABL、ABL T315I、FGFR1、VEGFR1、PDGFRBのキナーゼリストから選択されるものでよい、工程と、
g)場合により、前記患者の血液細胞、幹細胞、肝細胞のような健康な細胞で、工程a)と同じ試験を実施して、健康な細胞に対する請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物の毒性を判定する工程と、
h)必要のある患者に投与される、最良の活性、及び/又は結果的に最低の毒性を示す請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物を選択する工程と
を含むことを特徴とする、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
序文:
本発明は、タンパク質キナーゼの阻害薬である化合物、その調製方法、及びその治療用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質キナーゼ(PK)の機能不全/調節解除は、腫瘍学的、免疫学的、神経学的、代謝性、及び感染性疾患を含めた多数の病理の原因である。このため、こうした障害を治療するための小分子及び生物学的キナーゼ阻害薬の開発に、かなりの関心が寄せられている。
【０００３】
数多くのPKが、特に、腫瘍形成の過程の際に調節解除される。それゆえに、受容体チロシンキナーゼ(RTK)及びそのリガンドを特異的に標的とするチロシンキナーゼ及びモノクローナル抗体の触媒ドメインへのATP又は基質の結合をブロックするように通常作用する小分子阻害薬等の抗がん薬にとって、タンパク質キナーゼは魅力的なターゲットである。固形悪性腫瘍では、単一のキナーゼ異常が疾患の唯一の原因になることは珍しく、腫瘍が異常に活性化したシグナル伝達経路1つだけに左右される可能性は低い。それよりも、いくつものシグナル伝達経路が調節解除される。更に、単一の分子異常であってもいくつもの下流への影響を及ぼすことがある。いくつかのシグナル伝達経路を同時に標的とする単一分子(MTKI=「多標的キナーゼ阻害薬」)を使用する多標的療法は、単標的療法より有効である。単標的療法は、少数の適応症だけにしか活性を示しておらず、大抵の固形腫瘍は、いくつものシグナル伝達経路の調節解除を示す。例えば、血管内皮成長因子受容体(VEGFR)阻害薬と血小板由来成長因子受容体(PDGFR)阻害薬を組み合わせると、累積的な抗腫瘍効力が生じる(Potapovaら、Mol Cancer Ther 5、1280〜1289、2006)。
【０００４】
腫瘍は、腫瘍細胞からのみ構築されるのではない。重要な部分は、間質細胞で構成される結合組織又は間質と、こうした細胞によって産生される細胞外マトリックスとからなる。間質細胞の例は、線維芽細胞、内皮細胞、及びマクロファージである。間質細胞は、発癌においても重要な役割を果たし、その場合、間質細胞は、成長因子及びその受容体、接着分子、サイトカイン、ケモカイン、並びにタンパク質分解酵素の上方調節又は誘導によって特徴付けられる(Hofmeisterら、Immunotherapy 57、1〜17、2007;Ramanら、Cancer Letters 256、137〜165、2007;Foxら、The Lancet Oncology 2、278〜289、2001)。
【０００５】
内皮細胞及び腫瘍細胞上の受容体関連チロシンキナーゼVEGFRは、血管形成に関与することで、がんの促進において中心的な役割を果たす(Cebe-Suarezら、Cell Mol Life Sci 63、601〜615、2006)。加えて、がん細胞によって分泌された成長因子TGF-β、PDGF、及びFGF2は、正常な線維芽細胞を腫瘍関連線維芽細胞へと変換し、これにより、その受容体は、キナーゼ阻害薬による阻害に適する標的となる(Ramanら、2007)。
【０００６】
その上、ますます多くの証拠から、EGF受容体(EGFR)及びHER2経路とVEGF依存的血管形成の関連が示唆され、前臨床研究では、EGFRシグナル伝達による直接的及び間接的両方の血管形成性の影響が示されている(Pennell及びLynch、The Oncologist 14、399〜411、2009)。腫瘍血管形成促進因子、及びEGFR非依存的な、腫瘍誘発による血管形成の上方調節は、腫瘍細胞がEGFR阻害を克服する可能性がある潜在的な機序として提唱されている。EGFR活性化によって調節される主なシグナル伝達経路は、細胞増殖の増進、血管形成、アポトーシスの阻害、及び細胞周期進行につながる、PI3K、MAPK、及びStat経路である。EGFRは、肺、乳、結腸直腸、頭頸部がん等の多種多様な固形腫瘍において過剰発現される(Cook及びFigg、CA Cancer J Clin 60、222〜243 2010)。更に、EGFRの発現がより高いことは、転移、生存の低下、及び思わしくない予後と関連することが示されている。
【０００７】
膜結合性非受容体チロシンキナーゼであるc-Srcは、いくつかの重要なシグナル伝達経路に関与し、細胞機能に多面的な影響を及ぼす。c-Srcは、EGFR、PDGFR、IGF1R、VEGFR、HER2等の、いくつもの膜貫通型受容体結合性チロシンキナーゼからのシグナル伝達を統合し、調節する。全体として、こうした作用によって、細胞生存、増殖、分化、血管形成、細胞運動性、接着、及び浸潤が変調される(Brunton及びFrame、Curr Opin Pharmacol 8、427〜432、2008)。タンパク質c-Srcの過剰発現並びにその活性の増大は、結腸直腸、消化器系(肝臓、膵臓、胃、及び食道)、乳、卵巣、及び肺を含めたいくつかのタイプのがんにおいて観察されている(Yeatman、Nat Rev Cancer 4、470〜480、2004)。
【０００８】
がんにおいてEGFR又はKRASが活性化すると、Ras依存的なRaf活性化のレベルが著しく高まる。したがって、Raf機能の消去は、EGFR及びKRAS病変から始まった数多くのがんの有効な治療になると予想される(Khazakら、Expert Opin. Ther. Targets 11、1587〜1609、2007)。腫瘍におけるRafシグナル伝達の活性化に加えて、いくつかの研究では、Ras-Raf-MAPKシグナル伝達経路の活性化が、脈管形成及び血管形成における重要なステップとして示唆されている。このような活性化は、VEGFR2やFGFR2等の成長因子受容体によって誘発され、したがって、Raf活性化の阻害は、腫瘍血管形成及び血管新生を変調するための合理的なターゲットとなる。
【０００９】
VEGFR、PDGFR、EGFR、c-Src、及びRafは、腫瘍細胞と腫瘍間質細胞の両方について重要なターゲットであるが、FGFR等の他のキナーゼは、間質細胞においてしか機能せず、他のがん遺伝子は、多くの場合、腫瘍細胞においてしか機能しない。
【００１０】
タンパク質キナーゼは、免疫細胞を始めとする、多様なシグナル伝達経路の基本成分である。その不可欠な機能のおかげで、タンパク質キナーゼは、有効な治療ターゲットとなる。当初、高度な選択性が重大な問題になるであろうと予想されたが、時と共に「多種キナーゼ」阻害薬の使用は拡大しつつある。その上、キナーゼ阻害薬が使用される疾患の範囲も、悪性腫瘍に限らず免疫介在性疾患/炎症性疾患も包含されるように拡大しつつある。多連鎖の免疫認識受容体によるシグナル伝達における第1ステップは、最初にSrcファミリータンパク質チロシンキナーゼを媒介とする。免疫機能に関与するキナーゼを標的とするMTKIは、リウマチ様関節炎、乾癬、及び炎症性腸疾患等の自己免疫疾患のための薬物となる可能性がある (Kontziasら、F1000 Medicine Reports 4、2012)。
【００１１】
これまで言及したタンパク質キナーゼは、神経変性及び神経保護(Chicoら、Nature Reviews Drug Discovery 8、892〜909、2009)、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、及び骨吸収、黄斑変性、病的線維症、嚢胞形成(Cystogenesis)(ヒト常染色体優性多発性嚢胞腎疾患等)等の、他の多くの生理学的及び病理学的機序の主要な構成要素でもある。
【００１２】
WO2010/092489及び関連特許/特許出願において、本発明者らは、このような用途にとって興味深い特性を示すいくつかの化合物を特定した。しかし、本発明者らは、構造の特定の領域を選択的に操作することによって、こうした化合物の一部はその特性を増強させる可能性があることを発見した。しかし、こうした構造によるキナーゼに対する作用の機序は、WO2010/092489の出願時には正確に解明されていなかったことから、本発明者らが、本出願で開示する構造の高い活性を見出したのは予想外であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】WO2010/092489
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Potapovaら、Mol Cancer Ther 5、1280〜1289、2006
【非特許文献２】Hofmeisterら、Immunotherapy 57、1〜17、2007
【非特許文献３】Ramanら、Cancer Letters 256、137〜165、2007
【非特許文献４】Foxら、The Lancet Oncology 2、278〜289、2001
【非特許文献５】Cebe-Suarezら、Cell Mol Life Sci 63、601〜615、2006
【非特許文献６】Pennell及びLynch、The Oncologist 14、399〜411、2009
【非特許文献７】Cook及びFigg、CA Cancer J Clin 60、222〜243 2010
【非特許文献８】Brunton及びFrame、Curr Opin Pharmacol 8、427〜432、2008
【非特許文献９】Yeatman、Nat Rev Cancer 4、470〜480、2004
【非特許文献１０】Khazakら、Expert Opin. Ther. Targets 11、1587〜1609、2007
【非特許文献１１】Kontziasら、F1000 Medicine Reports 4、2012
【非特許文献１２】Chicoら、Nature Reviews Drug Discovery 8、892〜909、2009
【非特許文献１３】Seela, F.、Gumbiowski、R. Heterocycles、1989、29 (4)、795〜805
【非特許文献１４】Wang, Dong Meiら、Journal of Combinatorial Chemistry、2009、11(4)、556〜575
【非特許文献１５】Mouaddib, A.、Joseph, B.ら、Synthesis、2000、(4)、549〜556
【非特許文献１６】Sun, Yeweiら、Bioorganic & Medicinal Chemistry、2008、16(19)、8868〜8874
【非特許文献１７】Rosenら、J Biol Chem.、15;261(29)、13754〜9、1986
【非特許文献１８】Maら、Expert Opin Drug Discov.、3(6)、607〜621、2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明の主題は、腫瘍形成、ヒト免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成等のタンパク質キナーゼの調節解除と関連する病理の治療において治療的に使用することのできる、もとの主鎖を有する新規な多標的キナーゼ阻害薬を提供することである。
【００１６】
本発明の阻害薬は、特に、数多くのがんの治療に使用することができ、より詳細には、血液がん(白血病)等の液性腫瘍、又はこれらに限定されないが、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、星状細胞腫、及び種々のタイプの過剰増殖疾患等の固形腫瘍の症例に使用することができる。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、以下の式(I):
【化１】
2016504345.tif 000003
【００１８】
の化合物であって、
-  R1は、C1〜C6アルキル基、ヒドロキシル基、又はNR4R5であり、
-  R4及びR5は、独立に、水素原子及び/又はC1〜C6アルキル基であり、
-  Xは、CH2、C(S)、又はC(O)であり、
-  R2は、水素原子、C1〜C6アルキル基、又はハロゲン原子であり、
-  Yは、HNC(O)、HNC(S)、HNSO2、HNC(O)CH2、HNC(S)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、CH2NHC(O)、C(O)NH及びC(O)NHCH2、CH2NHC(S)からなる群から選択され、好ましくはHNC(O)であり、
-  R3は、
-  アリール、好ましくはフェニル基であって、
-  ヒドロキシル基、
-  ハロゲン原子、
-  C1〜C6アルキル-アミン基、好ましくは、第二級C1〜C6アルキル-アミン、
-  C1〜C6アルコキシ基、
-  メチルで場合により一置換されているチアゾールやイミダゾール等のヘテロアリールで置換されているアミン、
-  C1〜C6トリフルオロアルコキシ基、好ましくは、トリフルオロメトキシ、
-  C1〜C6アルキル基、好ましくは、メチル又はイソプロピル、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、好ましくは、トリフルオロメチル、
-  メチルで場合により一置換されているチアゾールやイミダゾール等のヘテロアリール基、
-  メチル基、ヒドロキシル基、アミン基、-NHCH3、又は-N(CH3)2で場合により置換されている脂肪族ヘテロ環、
-  メチル基、ヒドロキシル基、アミン基、-NHCH3、又は-N(CH3)2で場合により置換されているヘテロ環で置換されているC1〜C6アルキル、又は
-  以下:
【００１９】
【化２】
2016504345.tif 000004
【００２０】
の断片
で一置換又は多置換されたフェニル基、
-  C1〜C6アルキル基、C1〜C6トリフルオロアルキル基、ハロゲン原子、及び/又はヒドロキシルで場合により置換されている、ジヒドロベンゾフラン、インドール、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾール、ピリジンからなる群から選択されることが好ましい、ヘテロアリール基、
-  一置換された非芳香族環式基、好ましくは、ヒドロキシル、ハロゲン、C1〜C6アルキル-アミン、C1〜C6アルコキシ、C1〜C6トリフルオロアルコキシ、C1〜C6アルキル、C1〜C6トリフルオロアルキルで一置換されている環式C3〜C10アルキル
からなる群から選択されることを特徴とする、化合物、及び/又は薬学的に許容されるその付加塩、溶媒和物、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物に関する。
【００２１】
本発明の別の態様は、本明細書で規定されるような化合物の調製方法であって、
a) XがCOである場合、好ましくはNO2基で置換されている芳香族カルボン酸のペプチドカップリング技術によって、好ましくは、カルボジイミド又はウロニウムカップリング剤の使用によって、NH-CO結合を形成し、又はXがCH2である場合、好ましくは無水ホウ素の存在下、好ましくはNO2基で置換されている芳香族アルデヒドにより場合による還元アミノ化を実施して、NH-CH2結合を形成する工程、及び
b)好ましくは、例えば水素雰囲気中のパラジウムチャコール存在下での接触水素化のような水素化によって、NO2基をNH2に場合により還元する工程
の少なくとも一方を含むことを特徴とする調製方法に関する。
【００２２】
本発明の別の態様は、本明細書で規定されるような化合物の調製方法であって、本方法が、好ましくは上記方法の工程(a)及び/又は(b)の後に、
c1) YがHNC(O)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソシアネートと反応させることにより、尿素を形成する工程、
c2) YがHNC(S)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソチオシアネートと反応させることにより、チオ尿素を形成する工程、
c3) YがHNSO2である場合、工程b)の後に得られた化合物を、塩化スルファミルや塩化スルホニル等のハロゲンスルファミル又はハロゲンスルホニルと反応させることにより、スルホンアミドを形成する工程、
c4) YがHNC(O)である場合、好ましくは、工程b)の後に得られた化合物を、塩化アシル等の活性化したカルボン酸と反応させることにより、アミドを形成する工程、又は
c5) YがHNC(S)である場合、特に、工程c4)の後に得られた化合物をローソン試薬と反応させることにより、チオアミドを形成する工程、及び
d) 得られた生成物を、好ましくはKOHを使用して、場合によりけん化する工程
の少なくとも1つを含むことを特徴とする調製方法に関する。
【００２３】
本発明の別の態様は、本明細書で規定されるような化合物の調製方法であって、好ましくは、上記方法の工程(a)及び/又は(b)の後に、
c1) YがHNC(O)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソシアネートと反応させることにより、尿素を形成する工程、
c2) YがHNC(S)NHである場合、工程b)の後に得られた化合物をイソチオシアネートと反応させることにより、チオ尿素を形成する工程、
c3) YがHNSO2である場合、工程b)の後に得られた化合物を、塩化スルファミルや塩化スルホニル等のハロゲンスルファミル又はハロゲンスルホニルと反応させることにより、スルホンアミドを形成する工程、
c4) YがHNC(O)又はHNC(O)CH2である場合、好ましくは、工程b)の後に得られた化合物を、ペプチドカップリング技術を使用して活性化したカルボン酸又は塩化アシルと反応させることにより、アミドを形成する工程、
c5) YがHNC(S)又はHNC(S)CH2である場合、特に、工程c4)の後に得られた化合物をローソン試薬と反応させることにより、チオアミドを形成する工程、
d1) 得られた生成物を、好ましくはKOHを使用して、場合によりけん化する工程、又は
d2) 工程c1)〜c5)で得られた生成物を場合によりけん化し、続いて種々のアルキルアミンとのカップリング反応を実施する工程
の少なくとも1つを含むことを特徴とする調製方法に関する。
【００２４】
更に本発明はまた、薬物であることを特徴とする、本明細書で規定されるような化合物に関する。
【００２５】
本発明はまた、腫瘍形成、ヒト免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成(cystogenesis)、過剰増殖性疾患、がん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎臓がん、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫のような疾患において、タンパク質キナーゼの阻害薬として使用される、本明細書で規定されるような化合物に関する。
【００２６】
活性成分として、本明細書で規定されるような化合物と、薬学的に許容される賦形剤とを含有することを特徴とする医薬組成物。
【００２７】
定義
一般に、次の定義が使用される:
本発明における表現「ペプチドカップリング」とは、アミド-NH-C(O)-の形成が可能な反応を意味する。しかし、この反応で使用する技術は、ペプチド合成において一般的なものであり、すなわち、アミンがカルボン酸と接触して反応できるようにカルボン酸を活性化させることによってなされる。したがって、本発明ではペプチドは形成されないが、カップリング反応は、ペプチド合成から派生し、本発明の主題にそのまま適用できる。
【００２８】
カップリング反応は、縮合試薬、例えば、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)若しくは1-エチル-3-(3'-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(EDC)、すなわち、水溶性カルボジイミド、O-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、ベンゾトリアゾール-1-イル-オキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、O-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-1,2,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HATU)、O-ベンゾトリアゾール-1-イル-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-ベンゾトリアゾール-1-イル-テトラメチルテトラフルオロボレート(TBTU)、N-ヒドロキシ-5-ノルボルネン-2,3-ジカルボジイミド、又は他のいずれかのカップリング剤を、エーテル、アセトン、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、DMF、テトラヒドロフラン(THF)、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N-メチルピロリジノン(NMP)等の溶媒中にて、氷冷しながら、又は室温で、好ましくは、アシル化触媒、例えば、ジメチルアミノピリジン(DMAP)、ピリジン、N-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(HOAt)、N-ヒドロキシスクシンイミド等の存在下で用いて実施することができる。
【００２９】
用語「C(O)」は、「C=O」に等しい。
【００３０】
用語「C(S)」は、「C=S」に等しい。
【００３１】
本発明における表現「アルキル基」とは、特に指定されない場合、1〜6個の炭素原子を有する、直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族基を意味する。本発明の範囲に含まれるアルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、tert-ブチル、イソプロピル基等である。
【００３２】
本発明における表現「シクロアルキル基」とは、3〜10個の炭素原子を有する環式アルキル基を意味する。本発明の範囲に含まれるアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル等である。
【００３３】
本発明における表現「アリール基」とは、2〜10個の炭素原子を含む環式(単環式又は多環式)芳香族基を意味する。本発明の範囲に含まれるアリール基の例は、フェニル、ナフチル等である。
【００３４】
本発明における表現「ヘテロアリール基」とは、2〜10個の炭素原子と、窒素、酸素、硫黄等の、1〜3個のヘテロ原子とを含む、環式(単環式又は多環式)芳香族基を意味する。本発明の範囲に含まれるヘテロアリール基の例は、ピリジン、チオフェン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、ピロール、キノリン、インドール、ピリダジン、キノキサリン、ジヒドロベンゾフラン、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾールであり、ジヒドロベンゾフラン、インドール、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾール、ピリジンからなる群から選択されることが好ましい。場合により、ヘテロアリール基、特に、好ましいヘテロアリール基の1つは、C1〜C6アルキル基、C1〜C6トリフルオロアルキル基、ハロゲン原子、及び/又はヒドロキシルで置換されている。
【００３５】
本発明における表現「一置換された非芳香族環式基」とは、一置換された非芳香族のヘテロ環式基を意味する。
【００３６】
本発明における表現「ヘテロ環基」とは、2〜10個の炭素原子と、窒素、酸素、硫黄等の1〜3個のヘテロ原子とを含む環式基を意味する。ヘテロ環は、飽和、すなわち脂肪族でも、不飽和でも、芳香族ですらよい。本発明の範囲に含まれるヘテロ環基の例は、ピペラジニル、モルホリル、テトラヒドロフラニル、ピリジル、チアジル、イミダジル、ピラジル、キノキサリン、ジヒドロベンゾフラニル、ピリル、ピリダジニル、ベンズイミダジル、ピリミジニル、1H-ピロロ[2,3-b]ピリジル等である。
【００３７】
表現「脂肪族ヘテロ環」とは、本発明では、モルホリン、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン等の、1つ又はいくつかのヘテロ原子を含む脂肪族環式基を意味する。
【００３８】
本発明における表現「ハロゲン原子」とは、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。
【００３９】
本発明における表現「アルコキシ基」とは、酸素に結合されたアルキル基を意味する。本発明の範囲に含まれるアルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ基等である。
【００４０】
本発明における表現「アリールオキシ基」とは、酸素原子に結合されたアリール基を意味する。本発明の範囲に含まれるアリールオキシ基の例は、フェニルオキシ等である。
【００４１】
本発明における表現「スルホンアミド基」とは、
【００４２】
【化３】
2016504345.tif 000005
【００４３】
を意味する。
【００４４】
本発明における表現「N-メチルスルホンアミド基」とは、
【００４５】
【化４】
2016504345.tif 000006
【００４６】
を意味する。
【００４７】
本発明における表現「メタンスルホンアミド基」とは、
【００４８】
【化５】
2016504345.tif 000007
【００４９】
を意味する。
【００５０】
本発明における表現「アラルキル基」とは、アリール基で置換されているアルキル基:
【００５１】
【化６】
2016504345.tif 000008
【００５２】
を意味する。
【００５３】
本発明における表現「C1〜C6アルキルアミン基」又は「C1〜C6アルキルアミン基」とは、アミン基で置換されているC1〜C6アルキル基:
【００５４】
【化７】
2016504345.tif 000009
【００５５】
を意味する。
【００５６】
「第二級C1〜C6アルキルアミン基」とは、2つのC1〜C6アルキル(同一又は異なる)で置換されているアミンを意味する。
【００５７】
本発明における表現「ヒドロキシル基」とは、OHを意味する。
【００５８】
本発明における表現「アルコキシアルキル基」とは、好ましくはアルコキシ基で置換されているアルキル基:
【００５９】
【化８】
2016504345.tif 000010
【００６０】
を意味する。
【００６１】
本発明における表現「スルファニル基」とは、
【００６２】
【化９】
2016504345.tif 000011
【００６３】
を意味する。
【００６４】
本発明における表現「ウレイド」は、尿素又はチオ尿素についての一般用語として使用される。
【００６５】
本発明における表現「置換フェニル」とは、
-  ハロゲン原子、
-  ニトロ基-(NO2)、
-  シアノ基(CN)、
-  メチルチアジル基:
【００６６】
【化１０】
2016504345.tif 000012
【００６７】
-  アルコキシ基、
-  アリールオキシ基、
-  アルキル基、
-  スルホンアミド基、
-  N-メチルスルホンアミド基、
-  メタンスルホンアミド基、
-  ヘテロアリール基、
-  ヒドロキシル基、
-  第三級アミン基、
-  -CONHアルキル基、
-  -NHCOアルキル基
で一置換又は多置換されているフェニルを意味する。
【００６８】
用語「ピリジル」とは、ピリジンから導かれる基:
【００６９】
【化１１】
2016504345.tif 000013
【００７０】
を意味する。
【００７１】
本発明における用語「チオフェニル」とは、チオフェンから導かれる基:
【００７２】
【化１２】
2016504345.tif 000014
【００７３】
を意味する。
【００７４】
本発明における用語「チアジル」とは、チアゾールから導かれる基:
【００７５】
【化１３】
2016504345.tif 000015
【００７６】
を意味する。
【００７７】
本発明における用語「イミダジル」とは、イミダゾールから導かれる基:
【００７８】
【化１４】
2016504345.tif 000016
【００７９】
を意味する。
【００８０】
本発明における用語「ピラジル」とは、ピラゾールから導かれる基:
【００８１】
【化１５】
2016504345.tif 000017
【００８２】
を意味する。
【００８３】
本発明における用語「キノキサリン」とは、
【００８４】
【化１６】
2016504345.tif 000018
【００８５】
を意味する。
【００８６】
本発明における用語「ジヒドロベンゾフラニル」とは、ジヒドロベンゾフランから導かれる基:
【００８７】
【化１７】
2016504345.tif 000019
【００８８】
を意味する。
【００８９】
本発明における用語「ピリル」とは、ピロールから導かれる基:
【００９０】
【化１８】
2016504345.tif 000020
【００９１】
を意味する。
【００９２】
本発明における用語「インジル」とは、インドールから導かれる基:
【００９３】
【化１９】
2016504345.tif 000021
【００９４】
を意味する。
【００９５】
本発明における用語「ピリダジニル」とは、ピリダジンから導かれる基:
【００９６】
【化２０】
2016504345.tif 000022
【００９７】
を意味する。
【００９８】
本発明における用語「N-モルホリル」とは、モルホリンから導かれる基:
【００９９】
【化２１】
2016504345.tif 000023
【０１００】
を意味する。
【０１０１】
本発明における用語「ベンゾイミダジル」とは、ベンゾイミダゾールから導かれる基:
【０１０２】
【化２２】
2016504345.tif 000024
【０１０３】
を意味する。
【０１０４】
本発明における用語「ピリミジニル」とは、ピリミジンから導かれる基:
【０１０５】
【化２３】
2016504345.tif 000025
【０１０６】
を意味する。
【０１０７】
本発明における表現「1H-ピロロ[2,3-b]ピリジル」とは、1H-ピロロ[2,3-b]ピリジンから導かれる基:
【０１０８】
【化２４】
2016504345.tif 000026
【０１０９】
を意味する。
【０１１０】
本発明における表現「医薬組成物」とは、有効量の本発明の化合物と、少なくとも1種の薬学的に許容される賦形剤とを含む任意の組成物を意味する。前記賦形剤は、医薬品形態及び所望の投与方法に応じて、当業者公知の通例の賦形剤から選択される。
【０１１１】
本発明における表現「薬学的に許容される付加塩」とは、本発明の範囲内に含まれる、本発明による化合物の薬学的に許容されるすべての塩、詳細には、弱酸及び弱塩基の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩を意味する。
【０１１２】
本発明における表現「鏡像異性体の混合物」とは、鏡像異性体の任意の混合物を意味する。混合物は、ラセミであってもよく、すなわち各鏡像異性体が質量(w/w)で50/50%でもよいし、又はラセミでなくてもよく、すなわち鏡像異性体の一方若しくは他方が富化される結果、一方の鏡像異性体を他方と比べたw/w比が50/50%〜75/25%、75/25%〜90/10%、若しくは95%超になってもよい。
【０１１３】
本発明における表現「ジアステレオ異性体の混合物」とは、ジアステレオ異性体のいずれかの割合での任意の混合物を意味する。
【０１１４】
表現「治療」は、すべてのタイプの動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトに向けられるものである。ヒトでない動物の治療の場合では、獣医学的治療と呼ばれる。
【発明を実施するための形態】
【０１１５】
生成物
本発明は、好ましくは、以下の式(I):
【０１１６】
【化２５】
2016504345.tif 000027
【０１１７】
の化合物であって、
-  R1は、C1〜C6アルキル基、ヒドロキシル基、又はNR4R5であり、
-  R4及びR5は、独立に、水素原子及び/又はC1〜C6アルキル基であり、
-  Xは、CH2、C(S)、又はC(O)であり、
-  R2は、水素原子、C1〜C6アルキル基、又はハロゲン原子であり、
-  Yは、HNC(O)、HNC(S)、HNSO2、HNC(O)CH2、HNC(S)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、CH2NHC(O)、C(O)NH及びC(O)NHCH2、CH2NHC(S)からなる群から選択され、好ましくはHNC(O)であり、
-  R3は、
-  アリール、好ましくはフェニル基であって、
-  ヒドロキシル基、
-  ハロゲン原子、
-  C1〜C6アルキル-アミン基、好ましくは、第二級C1〜C6アルキル-アミン、
-  C1〜C6アルコキシ基、
-  C1〜C6トリフルオロアルコキシ基、好ましくは、トリフルオロメトキシ、
-  C1〜C6アルキル基、好ましくは、メチル又はイソプロピル、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、好ましくは、トリフルオロメチル、及び/又は
-  メチルで場合により一置換されているチアゾールやイミダゾール等のヘテロアリール基、
で一置換又は多置換されたフェニル基、
-  C1〜C6アルキル基、C1〜C6トリフルオロアルキル基、ハロゲン原子、及び/又はヒドロキシルで場合により置換されている、ジヒドロベンゾフラン、インドール、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾール、ピリジンからなる群から選択されることが好ましい、ヘテロアリール基、
-  一置換された非芳香族環式基、好ましくは、ヒドロキシル、ハロゲン、C1〜C6アルキル-アミン、C1〜C6アルコキシ、C1〜C6トリフルオロアルコキシ、C1〜C6アルキル、C1〜C6トリフルオロアルキルで一置換されている環式C3〜C10アルキル及び
-  以下:
【０１１８】
【化２６】
2016504345.tif 000028
【０１１９】
からなる群から選択される断片
からなる群から選択されることを特徴とする、化合物、及び/又は薬学的に許容されるその付加塩、溶媒和物、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物に関する。
【０１２０】
有利な場合では、本発明の化合物(I)及び/又は薬学的に許容されるその付加塩、溶媒和物、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物は、
-  R1が、ヒドロキシル基、アルキル基、好ましくはメチル、又は-NR4R5であり、R4及びR5は、水素原子、又は好ましくはC1〜C6であるアルキル基から独立に選択され、
-  Xが、CH2又はC=Oであり、
-  R2が、水素原子、メチル基、又はフッ素や塩素等のハロゲン原子であり、
-  Yが、HNC(O)、HNC(S)、HNSO2、HNC(O)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、C(O)NH、C(O)NHCH2、CH2NHC(O)、及びCH2NHC(S)からなる群から選択され、
-  R3が、
-  フェニル基であって、
-  ヒドロキシル基、
-  ハロゲン原子、
-  C1〜C6アルキル-アミン、好ましくは、第二級C1〜C6アルキル-アミン、
-  C1〜C6アルコキシ、
-  C1〜C6トリフルオロアルコキシ、好ましくは、トリフルオロメトキシ、
-  C1〜C6アルキル、好ましくは、メチル、イソプロピル、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル、好ましくは、トリフルオロメチル、
-  CF3又はメチルで場合により一置換されているチアゾール、イミダゾールからなる群から選択されることが好ましい、ヘテロアリール基
で一置換又は多置換されたフェニル基、
-  C1〜C6アルキル、C1〜C6トリフルオロアルキル、ハロゲン、及び/又はヒドロキシルで場合により置換されているジヒドロベンゾフラン、インドール、ベンゾジオキソール、ベンゾトリアゾール、ピリジンからなる群から選択されるヘテロアリール基、
-  一置換された非芳香族環式基、好ましくは、ヒドロキシル、ハロゲン、C1〜C6アルキル-アミン、C1〜C6アルコキシ、C1〜C6トリフルオロアルコキシ、C1〜C6アルキル、C1〜C6トリフルオロアルキルで一置換されている環式C3〜C10アルキル、
-  以下:
【０１２１】
【化２７】
2016504345.tif 000029
【０１２２】
からなる群から選択される断片
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１２３】
有利な場合では、本発明の化合物(I)は、
-  XがCH2であり、
-  R2が、C1〜C6アルキル、好ましくはメチル基、又はハロゲン原子、好ましくは、フッ素又は塩素原子である
ことを特徴とする。
【０１２４】
より有利な場合では、本発明の化合物(I)は、
-  R1が、C1〜C6アルキル、好ましくはメチル、又は-NHMeであり、
-  R2が、メチル、フッ素、又は塩素原子、好ましくは、メチル又は塩素原子であり、
-  Yが、HNC(O)、HNC(O)CH2、HNC(O)NH、HNC(S)NH、C(O)NH、C(O)NHCH2、又はCH2NHC(O)、好ましくはHNC(O)であり、
-  R3が、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、C1〜C6トリフルオロアルコキシ基、C1〜C6アルキル基、ハロゲン、又はCF3若しくはメチル基で好ましくは一置換されているチアゾール基で一置換されている、フェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル、C1〜C6アルキル-アミン、及び/又はヒドロキシル基で多置換されている、フェニル基、
-  C1〜C6アルキル又はC1〜C6トリフルオロアルキル、好ましくはメチル及び/又はトリフルオロメチルで場合により置換されている、ピリジン基、
-  C1〜C6アルキル及び/又はC1〜C6トリフルオロアルキルで置換されている環式C3〜C10アルキルのうちから選択される、非芳香族環式基、
-  以下:
【０１２５】
【化２８】
2016504345.tif 000030
【０１２６】
からなる群から選択される断片
からなる群から選択される
ことを特徴とする。
【０１２７】
更に有利な場合では、化合物(I)は、
-  R1が、メチル基又は-NHMeであり、
-  R2がメチル基であり、
-  YがHNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が、
【０１２８】
【化２９】
2016504345.tif 000031
【０１２９】
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１３０】
本発明の好ましい実施形態によれば、化合物は、式(II):
【０１３１】
【化３０】
2016504345.tif 000032
【０１３２】
であり、
-  式中、R1、X、R2、Y、及びR3は、上で規定した通りであり、
好ましくは、R3は、以下:
【０１３３】
【化３１】
2016504345.tif 000033
【０１３４】
からなる群から選択される。
【０１３５】
本発明の好ましい実施形態によれば、式(II):
【０１３６】
【化３２】
2016504345.tif 000034
【０１３７】
の化合物は、
-  R1がメチル基又は-NHMeであり、
-  XがCH2であり、
-  R2がメチル基であり、
-  YがHNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が、
【０１３８】
【化３３】
2016504345.tif 000035
【０１３９】
からなる群から選択され、好ましくは、R3が
【０１４０】
【化３４】
2016504345.tif 000036
【０１４１】
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１４２】
本発明の別の実施形態では、本発明の化合物(II)は、
-  R1が、ヒドロキシル基、メチル基、又は-NHMeであり、
-  XがCH2であり、
-  R2がメチル基であり、
-  Yが、HNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が、以下:
【０１４３】
【化３５】
2016504345.tif 000037
【０１４４】
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１４５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物(II)は、
-  R1が、ヒドロキシル基、メチル基、又は-NHMeであり、
-  XがCH2であり、
-  R2がメチル基であり、
-  Yが、HNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が、以下:
【０１４６】
【化３６】
2016504345.tif 000038
【０１４７】
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１４８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物(II)は、
-  R1が、メチル基、又は-NHMeであり、
-  XがCH2であり、
-  R2がメチル基であり、
-  Yが、HNC*(O)であり、C*は、R3に連結しており、
-  R3が、以下:
【０１４９】
【化３７】
2016504345.tif 000039
【０１５０】
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１５１】
本発明の別の実施形態では、上で詳述した詳細な実施形態はすべて、R1が、ヒドロキシル基、それに対応する塩であり、かつ/又はXが、CH2である代わりにC=Oであることを特徴とする場合もある。
【０１５２】
本発明の好ましい実施形態では、上で詳述した詳細な実施形態はすべて、R1が、CH2である代わりにC=Oであることを特徴とする場合もある。
【０１５３】
本発明の好ましい実施形態では、上で詳述した詳細な実施形態はすべて、R1がヒドロキシル基であることを特徴とする場合もある。
【０１５４】
本発明の好ましい実施形態では、上で詳述した詳細な実施形態はすべて、R1が、ヒドロキシル基の該当する塩、好ましくは、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩、又はカルシウム塩であることを特徴とする場合もある。
【０１５５】
本発明の別の実施形態では、本発明の化合物(I)は、
-  R1が、C1〜C6アルキル、好ましくはメチル、又はNR4R5であり、
-  Xが、CH2又はC(O)であり、
-  R2が、水素、アルキル、好ましくはメチル基、又はハロゲン原子、好ましくはフッ素であり、
-  Yが、HNC*(O)[C*は、R3に連結している]又はHNC(O)NHであり、
-  R3が、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル基、C1〜C6アルキル基で一置換されているフェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル及びC1〜C6アルキル-アミンで多置換されているフェニル基、
-  C1〜C6トリフルオロアルキル、好ましくはトリフルオロメチルで場合により置換されているピリジン基、
-  以下:
【０１５６】
【化３８】
2016504345.tif 000040
【０１５７】
からなる群から選択される断片
からなる群から選択されることを特徴とする。
【０１５８】
本明細書で開示する式(I)又は(II)の化合物はすべて、薬学的に許容されるその付加塩、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、並びにこれらの混合物である場合もある。
【０１５９】
本発明による化合物はすべて、溶媒和した形態であってもよいし、溶媒和していない形態であってもよい。
【０１６０】
生成物の合成方法
本発明はまた、たとえば、5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル及び1-(5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル)-エタノンから出発する、化合物の調製方法に関する。
【０１６１】
重要中間体であるメチルアミド化合物の合成は、スキーム1に示される。
【０１６２】
【化３９】
2016504345.tif 000041
【０１６３】
本方法は、少なくとも、
a) 5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステルを、好ましくはMeOH/H2O中でKOHを使用することによりけん化して、そのカルボン酸誘導体を得る段階、
b)ジイソプロピルエチルアミン(DIEA)等の塩基、ジシクロカルボジイミド(DCC)等のカルボジイミドの存在下で2-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HATU)等の少なくとも1種の活性化剤を含むカップリング反応を実施する段階
を含む。
【０１６４】
当業者であれば当然ながら、こうしたタイプの化合物の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想される。
【０１６５】
重要中間体であるアミン化合物の合成は、スキーム2に示される。
【０１６６】
【化４０】
2016504345.tif 000042
【０１６７】
式中、R1は、アルキル、又は予め規定した通りの-NR4R5であり、R2は、予め規定した通りである。
【０１６８】
本方法は、少なくとも、
c)還元:たとえば、得られるニトロ化合物に、水素雰囲気中にてパラジウムチャコールの存在下で接触水素化を行う段階(Seela, F.、Gumbiowski, R. Heterocycles、1989、29 (4)、795〜805)、
d)カップリング反応:たとえば、ジイソプロピルエチルアミン(DIEA)等の塩基、ジシクロカルボジイミド(DCC)等のカルボジイミドの存在下で2-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HATU)等の少なくとも1種の活性化剤を含む段階、
e)還元アミノ化:たとえば、5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステルを、水素化ホウ素の存在下で種々の芳香族アルデヒドと反応させて、対応するベンジル系アミン(benzylic amine)を得る段階(Wang, Dong Meiら、Journal of Combinatorial Chemistry、2009、11(4)、556〜575)
を含む。
【０１６９】
当業者であれば当然ながら、こうしたタイプの化合物の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想される。
【０１７０】
別の実施形態では、方法は、スキーム3によって表される。
【０１７１】
上で開示したウレイド化合物を合成する方法に関して、特に、方法をスキーム3に示す。
【０１７２】
【化４１】
2016504345.tif 000043
【０１７３】
式中、R1、R2、R3、及びXは、上で規定した通りであり、Yは、O又はSである。
【０１７４】
したがって、尿素化合物を合成する好ましい方法は、少なくとも、
f)重要中間体であるアミン化合物を種々のイソシアネート又はチオイソシアネートと反応させる工程
を含む。
【０１７５】
当業者であれば当然ながら、こうしたタイプのウレイド化合物の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想される。
【０１７６】
別の実施形態では、方法は、スキーム4によって表される。
【０１７７】
スルホンアミド化合物を合成する方法に関して、特に、方法をスキーム4に示す。
【０１７８】
【化４２】
2016504345.tif 000044
【０１７９】
式中、R1、R2、R3、及びXは、上で規定した通りである。
【０１８０】
スルホンアミド化合物を合成するこの方法は、少なくとも、
g)重要中間体であるアミン化合物を、種々の塩化スルホニルと反応させる工程
を含む。
【０１８１】
当業者であれば当然ながら、こうしたタイプのスルホンアミド化合物の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想される。
【０１８２】
更に別の実施形態では、方法は、スキーム5に示す。
【０１８３】
アミド化合物を合成する方法に関して、特に、2つの方法をスキーム5に示す。
【０１８４】
【化４３】
2016504345.tif 000045
【０１８５】
式中、R1、R2、R3、及びXは、上で規定した通りである。
【０１８６】
スキーム5の方法は、少なくとも、
h)重要中間体であるアミン化合物を種々の塩化アシル又はカルボン酸と反応させる工程(Mouaddib, A.、Joseph, B.ら、Synthesis、2000、(4)、549〜556)
を含む。
【０１８７】
当業者であれば当然ながら、こうしたタイプのアミド化合物の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想される。
【０１８８】
別の実施形態は、次のスキーム6、スキーム7、スキーム8、及び/又はスキーム9に従って得られる、市販品として入手可能でないカルボン酸を合成する方法に関する。
【０１８９】
4-アミノメチル-3-トリフルオロメチル-安息香酸又は4-アミノメチル-3-フルオロ-安息香酸
本発明において、4-アミノメチル-3-トリフルオロメチル-安息香酸又は3-置換4-アミノメチル-安息香酸の合成に使用した方法は、スキーム6に示す。
【０１９０】
【化４４】
2016504345.tif 000046
【０１９１】
式中、スキーム6のNR6R7は、
【０１９２】
【化４５】
2016504345.tif 000047
【０１９３】
を表す。
【０１９４】
4-アミノメチル-安息香酸を合成する好ましい方法は、
i)3-置換4-メチル-安息香酸誘導体を、好ましくはメタノール中、有利な場合では酸性媒質中でエステル化して、メチル系エステルを得る工程、
j)有利な場合ではラジカル開始剤としてのアゾビスイソブチロニトリル(AIBN)の存在下、好ましくはN-ブロモスクシンイミド(NBS)によって、メチル基のラジカル臭素化を実施する工程(Sun, Yeweiら、Bioorganic & Medicinal Chemistry、2008、16(19)、8868〜8874)、
k)種々の第一級及び第二級アミンによって臭素置換を実施する工程、
l)エステル、好ましくはメチル系エステルをけん化する工程
の少なくとも1つを含む。
【０１９５】
当業者であれば当然ながら、3-置換4-アミノメチル-安息香酸の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程i)、j)、k)、及びl)のいくつか又はなおすべてが方法に含まれることが好ましい。
【０１９６】
3-アミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸
3-アミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸を合成する方法をスキーム7に示す。
【０１９７】
【化４６】
2016504345.tif 000048
【０１９８】
式中、スキーム7のNR6R7は、
【０１９９】
【化４７】
2016504345.tif 000049
【０２００】
を表すことができる。
【０２０１】
3-アミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸を合成する好ましい方法は、
m)種々の第一級及び第二級アミンによってフッ素置換を実施する工程、
n)ニトリル官能基を、対応するカルボン酸に加水分解する工程
の少なくとも1つを含む。
【０２０２】
当業者であれば当然ながら、3-アミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程m)及びn)の両方が方法に含まれることが好ましい。
【０２０３】
3-メチル-5-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-安息香酸
本発明において使用する3-メチル-5-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-安息香酸を合成するために従うことのできる方法を、スキーム8に示す。
【０２０４】
【化４８】
2016504345.tif 000050
【０２０５】
本方法は、
o)ラジカル開始剤としてのアゾビスイソブチロニトリル(AIBN)の存在下、好ましくはN-ブロモスクシンイミド(NBS)によって、メチル基のラジカル臭素化を実施する工程(Sun, Yeweiら、Bioorganic & Medicinal Chemistry、2008、16(19)、8868〜8874)、
p)好ましくはN-メチルピペラジンによって臭素置換を実施する工程、
q)ニトリル官能基を、対応するカルボン酸、例えばジオキサン内のKOHに加水分解する工程
の少なくとも1つを含む。
【０２０６】
当業者であれば当然ながら、3-メチル-5-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-安息香酸の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程o)、p)、及びq)のいくつか又はなおすべてが方法に含まれることが好ましい。
【０２０７】
3-ジメチルアミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸
本発明において使用する3-ジメチルアミノ-5-トリフルオロメチル-安息香酸を合成するために従うことのできる方法を、スキーム9に示す。
【０２０８】
【化４９】
2016504345.tif 000051
【０２０９】
本方法は、
r)酸及びアミン官能基を、好ましくはヨウ化メチルによって、完全にメチル化する工程、
s)得られるエステルをけん化して、対応するカルボン酸を得る工程
の少なくとも1つを含む。
【０２１０】
当業者であれば当然ながら、3-ジメチルアミノ-5-メチル-安息香酸の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程r)及びs)のいくつか又はなおすべてが方法に含まれることが好ましい。
【０２１１】
4-アミノメチル-安息香酸
本発明において4-アミノメチル-安息香酸の合成に使用した方法は、スキーム10に示される。
【０２１２】
【化５０】
2016504345.tif 000052
【０２１３】
式中、NR6R7は、
【０２１４】
【化５１】
2016504345.tif 000053
【０２１５】
を表す場合がある。
【０２１６】
有利な場合では、本方法は、
t)種々の第一級及び第二級アミンによる臭素置換を実施する工程、
u)メチル系エステルをけん化する工程
の少なくとも一方を含む。
【０２１７】
当業者であれば当然ながら、4-アミノメチル-安息香酸の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程t)及びu)のいずれか又はなお両方が方法に含まれることが好ましい。
【０２１８】
別の実施形態は、次のスキーム11に従って得られるチオアミドを合成する方法に関する。
【０２１９】
【化５２】
2016504345.tif 000054
【０２２０】
式中、R1は、アルキル、又は予め規定した通りの-NR4R5であり、R2及びR3は、予め規定した通りである。
【０２２１】
方法は、
v)化合物Aをローソン試薬(LR)で処理して、そのチオアミド誘導体化合物Bを形成する工程
の少なくとも1つを含むことが好ましい。
【０２２２】
当業者であれば当然ながら、化合物Bの取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程v)が方法に含まれることが好ましい。
【０２２３】
別の実施形態は、次のスキーム12に従ってアミドからチオアミドを合成する方法に関する。
【０２２４】
【化５３】
2016504345.tif 000055
【０２２５】
式中、R2及びR3は、予め規定した通りである。
【０２２６】
方法は、
w)出発アミド-アミン誘導体をローソン試薬(LR)で処理して、そのチオアミド誘導体を形成する工程、
x)種々のカルボキシル試薬とのカップリング反応を実施する工程
の少なくとも一方を含むことが好ましい。
【０２２７】
当業者であれば当然ながら、チオアミド-アミド最終誘導体の取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程w)及びx)が方法に含まれることが好ましい。
【０２２８】
別の実施形態は、以下に従って得られる酸誘導体(化合物D)を合成する方法に関する。
【０２２９】
【化５４】
2016504345.tif 000056
【０２３０】
式中、R2、R3、Xは、上で規定した通りである。
【０２３１】
本方法は、少なくとも、
y)メチルエステル化合物Cをけん化して、カルボン酸誘導体、すなわち化合物Dを得る段階
を含む。
【０２３２】
別の実施形態は、以下に従って得られる化合物Eを合成する方法に関する。
【０２３３】
【化５５】
2016504345.tif 000057
【０２３４】
式中、R2、R3、R4、R5、及びXは、上で規定した通りである。
【０２３５】
有利な場合では、方法は、少なくとも、
z)ジイソプロピルエチルアミン(DIEA)等の塩基と、ジシクロカルボジイミド(DCC)やN-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド(EDCI)等のカルボジイミドの存在下で、2-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HATU)や1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBT)等の少なくとも1種の活性化剤、好ましくは、HOBT、EDCI、及びDIEAを含むカップリング反応を実施する工程
を含む。
【０２３６】
当業者であれば当然ながら、化合物Eの取得に、他のあらゆる周知の合成技術を適用すると予想されるが、工程z)が方法に含まれることが好ましい。
【０２３７】
別の実施形態は、以下に従って得られる化合物Fを合成する方法に関する。
【０２３８】
【化５６】
2016504345.tif 000058
【０２３９】
式中、R1は、アルキル、又は上で規定した通りの-NR4R5であり、R3は、予め規定した通りである。
【０２４０】
本方法は、
aa) 3-シアノ-安息香酸及びアミン誘導体とのペプチドカップリング反応を実施する工程、
bb)得られるニトリルを対応するアルデヒドに還元する工程、
cc)重要なアルデヒド化合物を、5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体により還元アミノ化する工程
の少なくとも1つを含むことが好ましい。
【０２４１】
別の実施形態は、以下に従って得られる化合物Gを合成する方法に関する。
【０２４２】
【化５７】
2016504345.tif 000059
【０２４３】
式中、R3は、予め規定した通りであり、Yは、O又はSである。
【０２４４】
本方法は、
dd) 3-アミノメチル-安息香酸メチルエステル及びカルボン酸とのペプチドカップリング反応を実施する工程、
ee)重要中間体であるアミド化合物のローソン試薬との反応を実施する工程、
ff)得られるエステルをけん化して、対応するカルボン酸を得る工程、
gg)重要なカルボン酸化合物及び5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステルとのペプチドカップリング反応を実施する工程
の少なくとも1つを含むことが好ましい。
【０２４５】
使用
本発明はまた、本発明による化合物の、タンパク質キナーゼの阻害薬としての使用に関する。がんのタイプに応じて、1種又はいくつかのキナーゼタンパク質に照準を合わせる。
【０２４６】
一実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼBRAFの阻害薬として使用する。
【０２４７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEGFR (ErbB1)の阻害薬として使用する。
【０２４８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEGFR (ErbB1) T790M L858Rの阻害薬として使用する。
【０２４９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFGFR2の阻害薬として使用する。
【０２５０】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼKDR (VEGFR2)の阻害薬として使用する。
【０２５１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼPDGFRA (PDGFRα)の阻害薬として使用する。
【０２５２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼSRCの阻害薬として使用する。
【０２５３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABLの阻害薬として使用する。
【０２５４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABL T3151の阻害薬として使用する。
【０２５５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFGFR1の阻害薬として使用する。
【０２５６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼVEGFR1の阻害薬として使用する。
【０２５７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼPDGFRB (PDGFRβ)の阻害薬として使用する。
【０２５８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABL E255Kの阻害薬として使用する。
【０２５９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABL G250Eの阻害薬として使用する。
【０２６０】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABL Y253Fの阻害薬として使用する。
【０２６１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼABL2の阻害薬として使用する。
【０２６２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼBLKの阻害薬として使用する。
【０２６３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼBMXの阻害薬として使用する。
【０２６４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼBRAF V600Eの阻害薬として使用する。
【０２６５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼBTKの阻害薬として使用する。
【０２６６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼCSKの阻害薬として使用する。
【０２６７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEPHA1の阻害薬として使用する。
【０２６８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEPHA2の阻害薬として使用する。
【０２６９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEPHA4の阻害薬として使用する。
【０２７０】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEPHB2の阻害薬として使用する。
【０２７１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼEPHB4の阻害薬として使用する。
【０２７２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼHER2の阻害薬として使用する。
【０２７３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼERBB4の阻害薬として使用する。
【０２７４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFESの阻害薬として使用する。
【０２７５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFGRの阻害薬として使用する。
【０２７６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFLT3の阻害薬として使用する。
【０２７７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFMSの阻害薬として使用する。
【０２７８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFRKの阻害薬として使用する。
【０２７９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼFYNの阻害薬として使用する。
【０２８０】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼHCKの阻害薬として使用する。
【０２８１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼLCKの阻害薬として使用する。
【０２８２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼLYNの阻害薬として使用する。
【０２８３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼMAPK14の阻害薬として使用する。
【０２８４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼERK2の阻害薬として使用する。
【０２８５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼPKCθの阻害薬として使用する。
【０２８６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼRETの阻害薬として使用する。
【０２８７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼVEGFR3の阻害薬として使用する。
【０２８８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、タンパク質キナーゼYESの阻害薬として使用する。
【０２８９】
本発明による化合物は、BRAF、EGFR (ErbB1)、EGFR (ErbB1) T790M L858R、FGFR2、KDR (VEGFR2)、PDGFRA (PDGFRα)、SRC、ABL、ABL T315I、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB (PDGFRβ)からなる群から選択されるタンパク質キナーゼのいずれか1つ又はいくつかの阻害薬として使用することが好ましい。
【０２９０】
本発明による化合物は、BRAF、EGFR (ErbB1)、EGFR (ErbB1) T790M L858R、FGFR2、KDR (VEGFR2)、PDGFRA (PDGFRα)、SRCからなる群から選択されるタンパク質キナーゼのいずれか1つ又はいくつかの阻害薬として使用することがより好ましい。
【０２９１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、A549がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HepG2がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HuCCT1がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HuH6クローン5がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HuH7がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、PC-3がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、Caki-2がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、MDA-MB-231がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０２９９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HT29がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０３００】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BxPC-3がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０３０１】
別の実施形態では、本発明による化合物を、H1975がん細胞系の増殖の阻害薬として使用する。
【０３０２】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 WTの増殖の阻害薬として使用する。
【０３０３】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 T3151の増殖の阻害薬として使用する。
【０３０４】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 G250Aの増殖の阻害薬として使用する。
【０３０５】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 G250Eの増殖の阻害薬として使用する。
【０３０６】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 G250A + E279Nの増殖の阻害薬として使用する。
【０３０７】
別の実施形態では、本発明による化合物を、BaF3 E255K + M351Tの増殖の阻害薬として使用する。
【０３０８】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HeLaがん細胞系の増殖及び遊走の阻害薬として使用する。
【０３０９】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HUVEC初代細胞の増殖及び遊走の阻害薬として使用する。
【０３１０】
別の実施形態では、本発明による化合物を、HRMEC初代細胞の増殖及び遊走の阻害薬として使用する。
【０３１１】
本発明による化合物は、A549、HepG2、HuCCT1、HuH6 Clone 5、HuH7、HT29、BxPC3、H1975、PC3、Caki-2、MDA-MB-231、Helaからなる群において選択されるがん細胞系の少なくとも1つの増殖、及び/又はHUVEC及びHRMECの中の初代細胞の少なくとも1つの増殖を阻害しうることが好ましい。
【０３１２】
本発明の化合物、及び当然のことながら、そのような化合物を含む医薬組成物は、タンパク質キナーゼの調節解除と関連する病理の治療において、すなわち、
-  免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成、過剰増殖疾患の症例において、
-  すべてのがん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫の症例において、
-  ある特定の白血病等の慢性又は急性骨髄増殖性障害の症例において、
-  肝臓、肺、前立腺、腎臓、乳、膵臓、結腸直腸、及び胃腸がんの症例において、
使用することができる。
【０３１３】
有利なことに、本発明の化合物、及び当然のことながら、そのような化合物を含む医薬組成物は、タンパク質キナーゼの調節解除と関連する病理の治療において、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、乳がん、前立腺がん、白血病、腎がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、化学療法抵抗性がん、及び黄斑変性からなる群から選択される疾患の症例で使用することができる。
【０３１４】
別の態様によれば、本発明は、本発明による化合物を活性成分として含む医薬品に関する。したがって、本発明による化合物は、タンパク質キナーゼの調節解除と関連する病理の治療において、すなわち、
-  免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成、過剰増殖疾患の症例において、
-  すべてのがん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫の症例において、
-  ある特定の白血病等の慢性又は急性骨髄増殖性障害の症例において、
-  肝臓、肺、前立腺、腎臓、乳、膵臓、結腸直腸、及び胃腸がんの症例において、
医薬品として使用することができる。
【０３１５】
本発明による組成物は、タンパク質キナーゼの調節解除と関連する病理の治療において、すなわち、
-  免疫障害、炎症性疾患、血栓性疾患、神経変性疾患、骨疾患、黄斑変性、線維症、嚢胞形成、過剰増殖疾患の症例において、
-  すべてのがん、より詳細には、液性腫瘍、例えば、白血病、慢性若しくは急性骨髄増殖性障害等の血液がん、又は固形腫瘍、例えば、扁平細胞がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫や神経線維腫症等の膠細胞腫瘍、子宮頚がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、乳がん、黒色腫、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肉腫、及び/若しくは星状細胞腫の症例において、
-  ある特定の白血病等の慢性又は急性骨髄増殖性障害の症例において、
-  肝臓、肺、前立腺、腎臓、乳、膵臓、結腸直腸、及び胃腸がんの症例において、
使用することができる。
【０３１６】
その上、有利な形では、本発明による化合物を使用して、ヒト又は動物疾患に関与する細胞増殖及び/又は血管形成を阻害することができる。
【０３１７】
同じように、本発明による組成物を使用して、ヒト又は動物疾患に関与する細胞増殖及び/又は血管形成を阻害することができる。
【０３１８】
本発明の別の態様は、本発明による化合物の安全かつ有効な使用に不可欠である情報を提供するためのin vitroの方法(in vitro診断装置又は画像処理ツール)に関する。一例として、本方法は、がんを示す患者のような必要とする患者が、本発明による化合物の少なくとも1種に反応を示す見込みがあるかどうかの予測を可能にするものであり、本方法は、前記患者のサンプルにおいて、少なくとも1種のタンパク質キナーゼの、タンパク質の突然変異型の発現レベル、遺伝子修飾(増幅、突然変異)、活性化の状態又は出現を判定することを含み、前記タンパク質キナーゼは、BRAF、EGFR、FGFR2、KDR、PDGFRA、SRC、ABL、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB (PDGFRβ)、ABL2、BLK、BMX、BTK、CSK、EPHA1、EPHA2、EPHA4、EPHB2、EPHB4、HER2、ERBB4、FES、FGR、FLT3、FMS、FRK、FYN、HCK、LCK、LYN、MAPK14、ERK2、PKCθ、RET、VEGFR3、及びYES、好ましくはBRAF、EGFR (ErbB1)、EGFR (ErbB1) T790M L858R、FGFR2、KDR (VEGFR2)、PDGFRA (PDGFRα)、SRC、ABL、ABL T3151、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB (PDGFRβ)のキナーゼリストから選択される。
【０３１９】
タンパク質キナーゼの突然変異型の発現レベル、遺伝子修飾(増幅、突然変異)、活性化の状態又は出現は、リアルタイムPCR、免疫組織化学、ELISA、蛍光インサイチュハイブリダイゼーション(FISH)、発色性インサイチュハイブリダイゼーション(CISH)等の、一般的に公知の方法(例えば、FDAによって認可されている医療機器のin vitro及び画像処理ツール:http://www.fda.gov/MedicalDevices/ProductsandMedicalProcedures/InVitroDiagnostics/ucm301431.htmを参照のこと)によって伝統的に判定される。
【０３２０】
本発明の別の態様は、がんを示す患者のような必要とする患者に投与するための、本発明による少なくとも1種の化合物を予測するin vitroの方法であって、
a)前記化合物を、ヒト組織又は細胞のサンプルと接触させる工程と、
b)前記サンプルに対する前記化合物の活性を、例えばIC50及び/又は存在するタンパク質キナーゼとの比活性によって判定する工程であって、ここで存在するタンパク質キナーゼは、例えば、BRAF、EGFR、EGFR T790M L858R、FGFR2、KDR、PDGFRA、SRC、ABL、ABL T315I、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB、ABL E255K、ABL G250E、ABL Y253F、ABL2、BLK、BMX、BRAF V600E、BTK、CSK、EPHA1、EPHA2、EPHA4、EPHB2、EPHB4、HER2、ERBB4、FES、FGR、FLT3、FMS、FRK、FYN、HCK、LCK、LYN、MAPK14、ERK2、PKCθ、RET、VEGFR3、及びYES、好ましくはBRAF、EGFR (ErbB1)、EGFR (ErbB1) T790M L858R、FGFR2、KDR (VEGFR2)、PDGFRA (PDGFRα)、SRC、ABL、ABL T3151、FGFR1、VEGFR1、PDGFRB (PDGFRβ)のキナーゼリストから選択されるものでよい、工程と、
c)場合により、前記患者の血液細胞、幹細胞、肝細胞のような健康な細胞で、工程a)と同じ試験を実施して、健康な細胞(すなわち、いかなる病的な様相/性質も示さない)に対する本発明による化合物の毒性を判定する工程と、
d)必要のある患者に投与するための、最良の活性、及び/又は結果的に最低の毒性を示す本発明による化合物を選択する工程と
を含むことを特徴とする方法に関する。
【０３２１】
タンパク質キナーゼの活性を判定する方法は、古典的に公知である(Rosenら、J Biol Chem.、15;261(29)、13754〜9、1986;Maら、Expert Opin Drug Discov.、3(6)、607〜621、2008において報告されている通り)。
【図面の簡単な説明】
【０３２２】
【図１】一部の化合物のA549細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図２】一部の化合物のHepG2細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図３】一部の化合物のHuCCT1細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図４】一部の化合物のHuH6クローン5細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図５】一部の化合物のHuH7細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図６】一部の化合物のHT29細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図７】一部の化合物のBxPC-3細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図８】一部の化合物のH1975細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図９】一部の化合物のHUVEC細胞に対する抗増殖活性を表すグラフである。
【図１０】化合物OR0720と、B-Rafのその結晶構造(PDB id=1UWH)に従うキナーゼドメイン活性部位のアミノ酸との相互作用(疎水性接触、水素結合、及び芳香族ステーキング(aromatic staking))を示す略図である。
【図１１】化合物OR0720と、VEGFR2のその結晶構造(PDB id=4ASD)に従うキナーゼドメイン活性部位のアミノ酸との相互作用(疎水性接触、水素結合、及び芳香族ステーキング)を示す略図である。
【図１２】化合物OR0720と、FGFRの、このキナーゼの相同性モデルに従うキナーゼドメイン活性部位のアミノ酸との相互作用(疎水性接触、水素結合、及び芳香族ステーキング)を示す略図である。
【図１３】化合物OR0720と、FGFR2の、このキナーゼの相同性モデルに従うキナーゼドメイン活性部位のアミノ酸との相互作用(疎水性接触、水素結合、及び芳香族ステーキング)を示す略図である。
【実施例】
【０３２３】
本発明は、以下の実施例を読むことでより十分に理解される。
【０３２４】
本発明の化合物は、5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル及び1-(5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル)-エタノン(OriBase Pharma社から市販品として入手可能)から、必要ならパラレル合成装置(「Synthesis 1」、Heidolph社)を用いて、多段階合成で取得した。以下、種々の合成プロトコールを、得られた7-アザインドール型の化合物の物理化学的特性と共に詳述する。
【０３２５】
合成及び分析は、次の条件で実施した。
-  1H及び13C核磁気共鳴:
機器:Bruker Avance 400 (400MHz)、Bruker Avance 300 (300MHz)、Bruker DPX 200 (200MHz)
使用条件:室温(RT)、百万分率(ppm)で示す化学シフト、ヘルツで示す結合定数(J)、内部基準トリメチルシラン(TMS)、小文字で示すシグナルの多重度(一重線s、ブロード一重線bs、二重線d、三重線t、四重線q、多重m)、重水素化溶媒としてのジメチルスルホキシドd6、メタノールd4、クロロホルムd1
【０３２６】
-  高速液体クロマトグラフィー(HPLC):
機器:Agilent Technology 1260 Infinity
使用条件:Zorbax SB-C18、2.1×50mm、1.8μm;温度:30℃、水/アセトニトリル/ギ酸溶離勾配(90%/10%/0.1%〜0%/100%/0.1%)
【０３２７】
-  質量分析(MS):
機器:Quadripole Agilent Technologies 6120
使用条件:ポジティブ及び/又はネガティブモードでのエレクトロスプレー(ESI)
【０３２８】
-  秤量:
機器:Denver Instrument TP214(精度0.1mg)
使用条件:秤量は、最も近いミリグラム数にする。
【０３２９】
-  パラレル合成:
機器: Heidolph Synthesis 1 (16個の反応器)
使用条件:並行する室温又は4つの加熱帯における多段蒸発での16の反応。
【０３３０】
-  圧力下での反応:
機器: Parr 300mLオートクレーブ
使用条件:10〜35barの水素中での水素化
【０３３１】
合成
(実施例AA)
出発構成単位5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミドの合成
スキーム17は、構成単位5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミドを合成する一般法を表す。
【０３３２】
【化５８】
2016504345.tif 000060
【０３３３】
工程1: 5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸調製のための一般プロトコール
5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル(6g、27.1mmol)をメタノール/水混合物(1/1)に溶解させた。水酸化カリウム(3当量)を加え、混合物を終夜還流加熱した。冷却した後、混合物を3N塩酸でpH=3になるまで酸性化した。沈殿を濾別し、水、次いでジエチルエーテルで洗浄し、真空乾燥した。褐色がかった固体、5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸が得られる(5.47g)。収率=98%。ESI-MS: m/z 208 ([M+H]+)。HPLC純度: 100%
【０３３４】
工程2: 5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミド調製のための一般プロトコール
5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸(1.3g、6.5mmol)、HATU (1.2当量)、及びDIEA (5当量)を、アルゴン中にて無水DMFに溶解させた。室温で15分間撹拌した後、メチルアミン塩酸塩(3当量)を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、炭酸ナトリウムの飽和溶液で洗浄した。沈殿を濾別し、水及びジエチルエーテルで洗浄して、褐色がかった固体(1.1g、5mmol)を得た。収率=77%。ESI-MS: m/z 221 ([M+H]+)。HPLC純度: 98%。
【０３３５】
(実施例A)
実施例Aの合成
スキーム18は、実施例Aを合成する一般法を表す。
【０３３６】
【化５９】
2016504345.tif 000061
【０３３７】
工程1: 5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体をメタノールに溶解させ、10%Pd/Cを含有する反応器に導入し、35barの水素中で16時間撹拌した。次いで反応混合物をセライトで濾過し、濃縮して、所望の化合物を得た。
1-(5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル)-エタノン:
収率=95%. ESI-MS: m/z 176 ([M+H]+). HPLC純度: 96%.
5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル:
収率=86%. ESI-MS: m/z 192 ([M+H]+). HPLC純度: 97%.
5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミド:
収率=87%. ESI-MS: m/z 191 ([M+H]+). HPLC純度: 96%.
【０３３８】
工程2: 5-(ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体及びニトロベンズアルデヒド誘導体(1当量)を、MeOH中10%AcOH中で2時間撹拌した。次いで、NaBH3CN (2当量)をゆっくりと加え、混合物をアルゴン中にて48時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、中性になるまでNaHCO3の飽和溶液を加えた。生成した固体を濾過し、PET/EtOAc 5/5で洗浄した。
1-[5-(3-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=90%. ESI-MS: m/z 311 ([M+H]+). HPLC純度: 88%
1-[5-(2-フルオロ-5-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
ESI-MS: m/z 329 ([M+H]+).
1-[5-(4-フルオロ-3-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=85%. ESI-MS: m/z 329 ([M+H]+). HPLC純度: >99%
1-[5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=89%. ESI-MS: m/z 325 ([M+H]+). HPLC純度: 84%
5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル:
収率=82%. ESI-MS: m/z 341 ([M+H]+). HPLC純度: 80%
5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミド:
収率=99%. ESI-MS: m/z 340 ([M+H]+). HPLC純度: 97%
【０３３９】
工程3: 5-(アミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
5-(ニトロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体、メタノール(300mL)、7.2mLの12N HCl、及び10%パラジウムチャコール(10%w/w)を、30barの水素で満たしたオートクレーブに投入し、48時間撹拌した。混合物をセライトで濾過し、メタノールで洗浄した。溶媒を蒸発させ、次いでNaHCO3(水溶液)を加えた。得られた固体を濾過し、水で洗浄して、褐色がかった固体を得た。
1-[5-(3-アミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=87%. ESI-MS: m/z 281 ([M+H]+). HPLC純度: 97%
1-[5-(5-アミノ-2-フルオロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=77%. ESI-MS: m/z 299 ([M+H]+). HPLC純度: 95%
1-[5-(3-アミノ-4-フルオロ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=75%. ESI-MS: m/z 299 ([M+H]+). HPLC純度: 95%
1-[5-(5-アミノ-2-メチル-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=70%. ESI-MS: m/z 295 ([M+H]+). HPLC純度: 94%
5-(5-アミノ-2-メチル-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル:
収率=96%.
【０３４０】
【数１】
2016504345.tif 000062
【０３４１】
5-(5-アミノ-2-メチル-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルアミド:
収率=83%。ESI-MS: m/z 310.2 ([M+H]+)。HPLC純度: 99.5%
【０３４２】
工程4: 5-(5-ベンゾイルアミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
選択肢1: 5-(5-ベンゾイルアミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体の、塩化アシルの反応による合成
5-(5-アミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体(40mg、0.13mmol)の無水DMF溶液に、55μLのトリエチルアミン(3当量)及び1.5当量の塩化アシルを加える。反応混合物を終夜室温で撹拌する。DMFを蒸発させ、固体を酢酸エチルに移し入れる。有機層を飽和NaHCO3溶液で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、減圧下で蒸発させて、黄色の固体を得る。
【０３４３】
Table 1(表1)に、上述の合成スキーム18に従い、選択肢1 (すなわち、塩化アシルの反応)で合成した化合物を示す。
【０３４４】
【表１】
2016504345.tif 000063
【０３４５】
選択肢2: 5-(5-ベンゾイルアミノ-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体の、カルボン酸の反応による合成
この合成に必要となるカルボン酸はいずれも市販品として入手できない。まず、こうした必要なカルボン酸の合成について述べる。
【０３４６】
4-アミノメチル-安息香酸の合成
スキーム19は、4-アミノメチル-安息香酸を合成する一般法を表す。
【０３４７】
【化６０】
2016504345.tif 000064
【０３４８】
ブロモメチルに対する求核置換の一般手順:
K2CO3 (1.5当量)及びアミン誘導体(1.05当量)を含有するアセトニトリル(5mL)中の4-(ブロモメチル)-安息香酸アルキルエステル(200mg)を撹拌し、アルゴン中で終夜加熱還流した。アセトニトリルを蒸発させ、水(30mL)を加え、生成物をAcOEtで抽出した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって更に精製して、予想通りの生成物を得た。
4-((4-メチルピペラジン-1-イル)メチル)-安息香酸メチルエステル:
収率=60% (15.7g)。ESI-MS: [M+H]+=263.1Da。
4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-安息香酸エチルエステル
収率=64%。ESI-MS: [M+H]+=277Da。
【０３４９】
けん化の一般手順:
エステル誘導体をTHF (0.8mol/L)に溶解させ、LiOHの水溶液(3当量)を加えた。混合物を4時間加熱還流した。THFを蒸発させ、不純物をpH=12でEtOAcで抽出した。水層をNaCl(塩)で飽和させ、6N HClでpH=3になるまで酸性化した。生成物をブタン-1-オールで抽出した。ブタン-1-オールを蒸発させ、得られた固体をEtOAcで洗浄して、塩及び不純物を除去した。白色の固体が得られた。
4-((4-メチルピペラジン-1-イル)メチル)-安息香酸:
収率  定量的。ESI-MS: [M+H]+=235.1Da。
4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-安息香酸:
収率  定量的。ESI-MS: [M+H]+=249Da。
【０３５０】
4-アミノメチル-3-トリフルオロメチル-安息香酸の合成
スキーム20は、4-アミノメチル-3-トリフルオロメチル-安息香酸を合成する一般法を表す。
【０３５１】
【化６１】
2016504345.tif 000065
【０３５２】
4-(ブロモメチル)-3-(トリフルオロメチル)安息香酸の合成:
NBS (3.9g、22mmol)及び水25%を加えた過酸化ベンゾイル(0.55g、1.7mmol)を含有するCCl4 (40mL)中の4-メチル-3-(トリフルオロメチル)安息香酸メチルエステル(3.73g、18.3mmol)を撹拌し、6時間加熱還流した。溶媒を蒸発させ、K2CO3の水溶液を加え、生成物をEtOAcで抽出して、淡黄色の固体(7.64g、25.7mmol)を得る。収率=140% (未精製)。
【０３５３】
ブロモメチルに対する求核置換の一般手順:
K2CO3 (1.5当量)及びアミン誘導体(1.05当量)を含有するアセトニトリル(5mL)中の4-(ブロモメチル)-3-(トリフルオロメチル)安息香酸(200mg)を撹拌し、アルゴン中で終夜加熱還流した。アセトニトリルを蒸発させ、水(30mL)を加え、不純物をpH=12でEtOAcで抽出した。水層をNaCl(塩)で飽和させ、6N HClでpH=3になるまで酸性化した。生成物をブタン-1-オールで抽出した。ブタン-1-オールを蒸発させ、得られた固体をEtOAcで洗浄して、塩及び不純物を除去した。白色の固体が得られた。
4-((4-メチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)安息香酸:
収率=89%。
【０３５４】
【数２】
2016504345.tif 000066
【０３５５】
4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-安息香酸
収率: 83%。HPLC: 92% ESI-MS: [M+H]+=317Da。
【０３５６】
4-アミノメチル-3-フルオロ-安息香酸の合成
スキーム21は、4-アミノメチル-3-置換-安息香酸を合成する一般法を表す。
【０３５７】
【化６２】
2016504345.tif 000067
【０３５８】
エステル化の手順:
H2SO4(0.260mL、4.8mmol)を含有するメタノール(50mL)中の4-メチル-3-フルオロ-置換安息香酸(24mmol)を撹拌し、一晩加熱還流する。メタノールを蒸発させ、生成物をpH=7でEtOAcで抽出する。
4-メチル-3-フルオロ-安息香酸メチルエステル
収率=83% (4.0g)、HPLC: 98%、ESI-MS: [M+H]+=169Da。
【０３５９】
臭素化の手順:
NBS(3.9g、22mmol)及び水25%含有過酸化ベンゾイル(0.55g、1.7mmole)を含有するCCl4 (40mL)中の4-メチル-3-フルオロ-置換安息香酸メチルエステル(18.3mmol)を撹拌し、6時間加熱還流する。溶媒を蒸発させ、K2CO3の水溶液を加え、生成物をEtOAcで抽出して、淡黄色の固体を得る。
4-(ブロモメチル)-3-フルオロ安息香酸メチルエステル
収率=定量的(5.9g)、ESI-MS: [M+H]+=247Da。
【０３６０】
ブロモメチルに対する求核置換の一般手順:
K2CO3(1.5当量)及びアミン誘導体(1.05当量)を含有するアセトニトリル(5mL)中の4-(ブロモメチル)-3-フルオロ-置換安息香酸メチルエステル(200mg)を撹拌し、アルゴン中で終夜加熱還流した。アセトニトリルを蒸発させ、水(30mL)を加え、生成物をAcOEtで抽出した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって更に精製して、予想どおりの生成物を得た。
3-フルオロ-4-(4-メチルピペラジン-1-イルメチル)-安息香酸メチルエステル:
収率=49%(1.48g)。HPLC:88%、ESI-MS:[M+H]+=267Da。
4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-3-フルオロ-安息香酸メチルエステル
収率:60%(2g)。HPLC:85% ESI-MS:[M+H]+=281Da。
【０３６１】
けん化の一般手順:
エステル誘導体をTHF(0.8mol/L)に溶解させ、LiOH(3当量)の水溶液を加えた。混合物を4時間加熱還流した。THFを蒸発させ、不純物をpH=12でEtOAcで抽出した。水層をNaCl(塩)で飽和させ、6N HClでpH=3になるまで酸性化した。生成物をブタン-1-オールで抽出した。ブタン-1-オールを蒸発させ、得られた固体をEtOAcで洗浄して塩及び不純物を除去した。白色の固体を得た。
3-フルオロ-4-(4-メチルピペラジン-1-イルメチル)-安息香酸:
収率=65%(0.91g)。HPLC:>99%、ESI-MS:[M+H]+=253Da。
4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-3-フルオロ-安息香酸
収率:36%(687mg)。ESI-MS:[M+H]+=267Da。
【０３６２】
5-トリフルオロメチル-安息香酸3-置換誘導体の合成
スキーム22は、5-トリフルオロメチル-安息香酸3-置換誘導体を合成する一般法を表す。
【０３６３】
【化６３】
2016504345.tif 000068
【０３６４】
求核置換の一般手順:
3-フルオロ-5-トリフルオロメチル-ベンゾニトリル(1当量)及び対応するアミン(3当量)のDMA溶液を、145℃で3時間撹拌した。NaCl(水溶液)を加えた。生成物を酢酸エチルに移し入れた。有機層を水で2回洗浄し、次いでNa2SO4で乾燥させ、減圧下で蒸発させて、白色の固体を得た。
3-(4-メチル-イミダゾール-1-イル)-5-トリフルオロメチル-ベンゾニトリル
収率: 74%。HPLC: 100% ESI-MS: [M+H]+=252Da。
3-(4-メチル-ピペラジン-1-イル)-5-トリフルオロメチル-ベンゾニトリル
収率:定量的。HPLC: 94% ESI-MS: [M+H]+=270Da。
【０３６５】
ニトリルを加水分解する一般手順:
ニトリル誘導体のジオキサン溶液(0.13M)に、NaOH(10当量、1g/L)H2O溶液を加えた。混合物を終夜還流加熱した。ジオキサンを蒸発させた後、水層をAcOEtで洗浄し、次いで2N HClで酸性化し、AcOEtで抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。
3-(4-メチル-イミダゾール-1-イル)-5-トリフルオロメチル-安息香酸
収率: 99%。HPLC: 100% ESI-MS: [M+H]+=271Da。
3-(4-メチル-ピペラジン-1-イル)-5-トリフルオロメチル-安息香酸
収率:60%。HPLC:100%。ESI-MS:[M+H]+=289Da。
【０３６６】
5-(5,2-置換-ベンジルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
酸誘導体を、DIEA (5当量)及びHATU (2当量)を含有する無水DMF (0.06mol/L)に溶解させる。15分後、5-{2-置換-5-アミノ-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換中間体をゆっくりと加え、混合物を室温で12時間撹拌する。DMFを蒸発させ、NaHCO3(水溶液)を加える。生成物をEtOAcで抽出し、乾燥させ、濾過し、蒸発させて、暗色の混合物を得る。MeOH若しくはEtOAcでの洗浄、又はシリカカラムによって精製した後、予想どおりの生成物が、かすかに黄色又は橙色の粉末として得られる。
【０３６７】
Table 2(表2)に、上述の合成スキーム22に従って合成した化合物を示す。
【表２Ａ】
2016504345.tif 000069
【０３６８】
【表２Ｂ】
2016504345.tif 000070
【０３６９】
【表２Ｃ】
2016504345.tif 000071
【０３７０】
【表２Ｄ】
2016504345.tif 000072
【０３７１】
【表２Ｅ】
2016504345.tif 000073
【０３７２】
【表２Ｆ】
2016504345.tif 000074
【０３７３】
【表２Ｇ】
2016504345.tif 000075
【０３７４】
【表２Ｈ】
2016504345.tif 000076
【０３７５】
【表２Ｉ】
2016504345.tif 000077
【０３７６】
【表２Ｊ】
2016504345.tif 000078
【０３７７】
【表２Ｋ】
2016504345.tif 000079
【０３７８】
【表２Ｌ】
2016504345.tif 000080
【０３７９】
【表２Ｍ】
2016504345.tif 000081
【０３８０】
【表２Ｎ】
2016504345.tif 000082
【０３８１】
【表２Ｏ】
2016504345.tif 000083
【０３８２】
【表２Ｐ】
2016504345.tif 000084
【０３８３】
(実施例B)
5-(5-ベンゾイルアミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体の合成
スキーム23は、5-(5-ベンゾイルアミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体を合成する一般法を表す。
【０３８４】
【化６４】
2016504345.tif 000085
【０３８５】
工程1: 5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体、2-メチル-5-ニトロベンジル酸(1当量)、HATU (1当量)、DIEA (5当量)を無水DMFに溶解させ、室温で48時間撹拌した。DMFを蒸発させ、NaHCO3(水溶液)を加え、沈殿が生じ、濾過し、水及び石油エーテル/Et2Oで洗浄した。
1-[5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率=69%. ESI-MS: m/z 339 ([M+H]+). HPLC純度: 100%
5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル:
収率=93%。
【０３８６】
【数３】
2016504345.tif 000086
【０３８７】
工程2: 5-(5-アミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体の調製についての一般プロトコール
5-(2-メチル-5-ニトロ-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体(9.8g、27.7mmol)、メタノール、及び10%パラジウムチャコール(10% w/w)を、30barの水素で満たしたオートクレーブに投入し、24時間撹拌した。混合物をセライトで濾過し、メタノールで洗浄した。溶媒を蒸発させて、固体を得た。
1-[5-(5-アミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル]-エタノン:
収率= 99%. ESI-MS: m/z 309 ([M+H]+). HPLC純度: 92%
5-(5-アミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル:
収率=81%。
【０３８８】
【数４】
2016504345.tif 000087
工程3: 5-(5-ベンゾイルアミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体調製のための一般プロトコール
酸誘導体を、DIEA (5当量)及びHATU (2当量)を含有する無水DMF (0.06mol/L)に溶解させた。15分後、5-{2-メチル-5-[3-アミノ]-ベンゾイルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-置換誘導体をゆっくりと加え、混合物を室温で12時間撹拌する。DMFを蒸発させ、NaHCO3(水溶液)を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、乾燥させ、濾過し、蒸発させて、暗色の混合物を得た。MeOH若しくはEtOAcでの洗浄、又はシリカカラムによって精製した後、予想通りの生成物を、かすかに黄色又は橙色の粉末として得た。
【０３８９】
Table 3(表3)に、上述の合成スキーム23に従って合成した化合物を示す。
【０３９０】
【表３Ａ】
2016504345.tif 000088
【０３９１】
【表３Ｂ】
2016504345.tif 000089
【０３９２】
(実施例C)
ウレイド誘導体の合成
ウレイド誘導体を合成する一般法は、スキーム24に示される。
【０３９３】
【化６５】
2016504345.tif 000090
【０３９４】
ウレイド誘導体調製のための一般プロトコール
アミノ誘導体の溶液に、イソシアネート又はイソチオシアネート誘導体(1当量)を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。溶媒を除去し、粗生成物を、逆相クロマトグラフィーによって精製した。
【０３９５】
Table 4(表4)に、スキーム24で上述した合成に従って合成した化合物を示す。
【０３９６】
【表４Ａ】
2016504345.tif 000091
【０３９７】
【表４Ｂ】
2016504345.tif 000092
【０３９８】
(実施例D)
ベンゼンスルホンアミド誘導体の合成
ベンゼンスルホンアミド誘導体を合成する一般法は、スキーム25によって表される。
【０３９９】
【化６６】
2016504345.tif 000093
【０４００】
N-{3-[(2-アセチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イルアミノ)-メチル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンゼンスルホンアミドの合成:
アミン前駆体(100mg)をピリジンに溶解させ、塩化スルホニル(1.5当量)を加えた。混合物をアルゴン中にて室温で終夜撹拌した。粗生成物を濃縮し、NaHCO3溶液で洗浄した。有機層をEtOAcで抽出した。蒸発させた後、粗生成物を逆相クロマトグラフィーで精製した。
【０４０１】
Table 5(表5)に、スキーム25で上述した合成に従って合成した化合物を示す。
【０４０２】
【表５】
2016504345.tif 000094
【０４０３】
(実施例E)
実施例Eからの化合物の合成
実施例Eから化合物を合成する一般法は、スキーム26によって表される。
【０４０４】
【化６７】
2016504345.tif 000095
【０４０５】
工程1: 3-シアノ-ベンズアミド中間体の調製についての一般プロトコール
3-シアノ-安息香酸(1.2当量)、アミン誘導体(1当量)、HOBt (1.2当量)、DIEA (1.2当量)、及びEDCI.HCl (1.2当量)を、アルゴン中で無水DMFに溶解させた(0.15M)。混合物を室温で終夜撹拌した。DMFを蒸発させ、飽和NaHCO3溶液を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を逆相(H2O 1%TFA/MeCN 1%TFA 100/0、0/100)で精製した。MeCNを蒸発させた。生成物をH2Oに懸濁させ、飽和NaHCO3溶液でpH=8〜9になるまで塩基性化した。水層をAcOEtで3回抽出した。有機層を蒸発させて、最終化合物を得た。
3-シアノ-N-ピリジン-3-イル-ベンズアミド
褐色粉末。収率:47%(563mg)。HPLC:>99%。MS:224(M+1)。
3-シアノ-N-(3-トリフルオロメチル-ベンジル)-ベンズアミド
白色の粉末。収率: 76% (333mg)。HPLC: >99%。MS: 305 (M+1)。
【０４０６】
工程2: 3-ホルミル-3-イル-ベンズアミド誘導体の調製についての一般プロトコール
アルゴン中にて、3-シアノ-ベンズアミド先駆体(1当量)を、ピリジン/水/酢酸の混合物(2/1/1、0.01M)に溶解させた。水(約0.03体積)中のラネーNiを加え、混合物を大気圧の水素中にて室温で終夜撹拌した。次いで、混合物をセライトベッドで濾過し、メタノールで洗浄した。溶媒を蒸発させた。飽和NaHCO3溶液を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、最終化合物を得た。
3-ホルミル-N-ピリジン-3-イル-ベンズアミド
黄色の油状物。収率:66%(166mg)。HPLC:>99%。MS:227(M+1)。
3-ホルミル-N-(3-トリフルオロメチル-ベンジル)-ベンズアミド
黄色の油状物。収率: 83% (42mg)。HPLC: 94%。MS: 308 (M+1)。
【０４０７】
工程3: 3-[(2-アセチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-5-イルアミノ)-メチル]-N-ピリジン-3-イル-ベンズアミド(OR0917)調製のための一般プロトコール
1-(5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-イル)-エタノン(1当量)及び3-ホルミル-N-ピリジン-3-イル-ベンズアミド(1.1当量)を、MeOH/AcOHの混合物(10/1、0.06M)中で2時間撹拌した。次いで、NaBH3CN(1.2当量)をゆっくりと加え、混合物をアルゴン中にて室温で終夜撹拌した。中性になるまで飽和NaHCO3溶液を加えて反応を失活させた。MeOH及び酢酸を蒸発させた。粗生成物を濾過し、水及びEt2Oで洗浄した後、逆相(H2O 1%TFA/MeCN 1%TFA 100/0、0/100)で精製した。MeCNを蒸発させた。生成物をH2Oに懸濁させ、飽和NaHCO3溶液でpH=8〜9になるまで塩基性化した。水層をAcOEtで3回抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して、予想どおりの生成物を得た。
【０４０８】
Table 6(表6)に、スキーム26で上述した合成に従って合成した化合物を示す。
【０４０９】
【表６】
2016504345.tif 000096
【０４１０】
(実施例F)
実施例F誘導体からの化合物の合成
実施例F誘導体から化合物を合成する一般法は、スキーム27によって表される。
【０４１１】
【化６８】
2016504345.tif 000097
【０４１２】
工程1.  安息香酸メチルエステルのアミド誘導体調製のための一般プロトコール
3-アミノ-安息香酸メチルエステル塩酸塩又は3-アミノメチル-安息香酸メチルエステル塩酸塩(1当量)、HOBt (1.2当量)、DIEA (1.2当量)、及びEDCI.HCl (1.2当量)を無水DMF (0.17M)に溶解させ、アルゴン中にて室温で30分間撹拌した。アミン誘導体(1当量)を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。DMFを蒸発させ、飽和NaHCO3溶液を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を逆相クロマトグラフィーで精製して、溶媒を蒸発させた後、予想通りの生成物を得た。
3-(3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ)-安息香酸メチルエステル
無色の油状物。収率: 62% (660mg)。HPLC: 100%。MS: 324 (M+1)。
3-[2-(3-トリフルオロメチル-フェニル)-アセチルアミノ]-安息香酸メチルエステル
無色の油状物。収率: 92% (827mg)。HPLC: 98%。MS: 338 (M+1)。
3-[(3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ)-メチル]-安息香酸メチルエステル
白色の粉末。収率: 45% (528mg)。HPLC: 93%。MS: 338 (M+1)。
3-{[4-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-メチル}-安息香酸メチルエステル
黒色の粉末。収率:定量的(1.55g)。HPLC: 91%。MS: 450 (M+1)。
【０４１３】
工程2.  チオアミド誘導体調製のための一般プロトコール
安息香酸メチルエステルのアミド誘導体(528mg)及びローソン試薬(スキーム23における「LR」) (1.8当量)を26mLのトルエンに懸濁させた懸濁液を、110℃で3時間加熱した。溶媒を蒸発させ、粗生成物に飽和NaHCO3溶液を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。未精製油状物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、溶媒を蒸発させた後、予想通りの生成物を得た。
3-(3-トリフルオロメチル-チオベンゾイルアミノ)-安息香酸メチルエステル
黄色の油状物。収率: 66% (460mg)。HPLC: 99%。MS: 340 (M+1)。
3-[2-(3-トリフルオロメチル-フェニル)-チオアセチルアミノ]-安息香酸メチルエステル
白色の固体  収率: 49% (428mg)。HPLC: 99%。MS: 354 (M+1)。
3-[(3-トリフルオロメチル-チオベンゾイルアミノ)-メチル]-安息香酸メチルエステル
白色の粉末。収率: 45% (528mg)。HPLC: 93%。MS: 338 (M+1)。
【０４１４】
工程3.  メチルエステルのけん化についての一般プロトコール
メチルエステル(1当量)を溶媒の混合物(1/1のTHF/水又はMeOH/水)に懸濁させた。アルカリ性塩基(LiOH又はKOH、3当量)を加え、反応が完了するまで(TLC制御)混合物を還流加熱した。有機溶媒を蒸発させ、混合物を中和し、生成物を有機溶媒で抽出した。
3-(3-トリフルオロメチル-チオベンゾイルアミノ)-安息香酸
黄色の固体。収率: 91% (401mg)。HPLC: 93%。MS: 326 (M+1)。
3-[2-(3-トリフルオロメチル-フェニル)-チオアセチルアミノ]-安息香酸
収率: 51% (208mg)。HPLC: 95%。MS: 340 (M+1)。
3-[(3-トリフルオロメチル-チオベンゾイルアミノ)-メチル]-安息香酸
黄色の粉末。収率: 88% (438mg)。HPLC: 98%。MS: 340 (M+1)。
3-{[4-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-メチル}-安息香酸
収率: 54% (792mg)。HPLC: 93%。MS: 436 (M+1)。
【０４１５】
工程4.  ペプチド様カップリング反応についての一般プロトコール
酸誘導体及びHATU (2当量)を無水DMF (0.1〜0.2mol/L)に溶解させた。30分後、5-アミノ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル(1当量)及びDIEA (3〜4当量)を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。DMFを蒸発させ、飽和NaHCO3溶液を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を逆相(H2O 1%TFA/MeCN 1%TFA 100/0、0/100)で精製した。MeCNを蒸発させた。生成物をH2Oに懸濁させ、飽和NaHCO3溶液でpH=8〜9になるまで塩基性化した。水層をAcOEtで3回抽出した。有機層を蒸発させて、最終化合物を得た。
【０４１６】
Table 7(表7)に、スキーム27で上述した合成に従って合成した化合物を示す。
【０４１７】
【表７Ａ】
2016504345.tif 000098
【０４１８】
【表７Ｂ】
2016504345.tif 000099
【０４１９】
(実施例G)
5-置換-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸の合成
5-置換-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸を合成する一般法は、スキーム28によって表される。
【０４２０】
【化６９】
2016504345.tif 000100
【０４２１】
工程1: 5-(5-アミノ-2-メチル-チオベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル調製のためのプロトコール
特許WO2010092489に従って取得した5-(5-アミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル(1当量)をクロロベンゼンに懸濁させた(0.06M)。ローソン試薬(2当量)を加え、混合物を130℃で2時間30分加熱した。混合物を濃縮し、逆相クロマトグラフィーで精製して、予想通りの生成物を得た。
黄色の粉末、収率: 11%、ESI-MS: m/z 341 ([M+H]+)。HPLC純度: 98%。
【０４２２】
工程2:アミド誘導体の調製についての一般プロトコール
酸誘導体を、DIEA (5当量)及びHATU (2当量)を含有する無水DMF (0.06mol/L)を溶解させた。15分後、(特許WO2010092489又は上述の工程1に従って取得した)アミン誘導体をゆっくりと加え、混合物を室温で12時間撹拌した。DMFを蒸発させ、NaHCO3(水溶液)を加えた。生成物をEtOAcで抽出し、乾燥させ、濾過し、蒸発させて、暗色の混合物を得た。MeOH若しくはEtOAcでの洗浄、又はシリカカラムによって精製した後、予想通りの生成物をかすかに黄色又は橙色の粉末として得た。
5-{2-メチル-5-[4-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-ベンゾイルアミノ]-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=8%. ESI-MS: m/z 541.4 ([M+H]+). HPLC純度: 95%
5-{2-メチル-5-[4-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=16%. ESI-MS: m/z 595.2 ([M+H]+). HPLC純度: 94%
5-{2-メチル-5-[4-(4-メチル-ピペラジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-ベンゾイルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=30%. ESI-MS: m/z 609.3 ([M+H]+). HPLC純度: 99%
5-{5-[4-(3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-2-メチル-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=28%. ESI-MS: m/z 609.2 ([M+H]+). HPLC純度: 95 %
5-{5-[4-((S)-3-ジメチルアミノ-ピロリジン-1-イルメチル)-3-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-2-メチル-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=45%. ESI-MS: m/z 609 ([M+H]+). HPLC純度: 99 %
5-{2-メチル-5-[3-(4-メチル-イミダゾール-1-イル)-5-トリフルオロメチル-ベンゾイルアミノ]-ベンジルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル
収率=29%. ESI-MS: m/z 563.2 ([M+H]+). HPLC純度: 94.8 %
5-{2-メチル-5-[(5-トリフルオロメチル-ピリジン-3-カルボニル)-アミノ]-チオベンゾイルアミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸メチルエステル。
収率: 48%, ESI-MS: m/z 514 ([M+H]+). HPLC純度: 96%.
【０４２３】
工程3: 5-(5-ベンゾイルアミノ-2-メチル-ベンゾイルアミノ)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸誘導体調製のための一般プロトコール
メチルエステル誘導体及び水酸化カリウム(5当量)を水とメタノールの混合物(50/50)に懸濁させた懸濁液を、65℃で18時間加熱した。メタノールを蒸発させ、6N HClによってpHをpH7に中和した。溶媒を蒸発させた後、未精製残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(水/アセトニトリル)によって精製して、褐色の固体を得た。
【０４２４】
Table 8(表8)に、上述の合成スキーム28に従って合成した化合物を示す。
【０４２５】
【表８Ａ】
2016504345.tif 000101
【０４２６】
【表８Ｂ】
2016504345.tif 000102
【０４２７】
【表８Ｃ】
2016504345.tif 000103
【０４２８】
(実施例H)
5-置換-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸の合成
5-置換-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-2-カルボン酸を合成する一般法は、スキーム29によって表される。
【０４２９】
【化７０】
2016504345.tif 000104
【０４３０】
アミド化工程の一般プロトコール:
酸誘導体(1当量)を、アルキルアミン(5当量)、DIEA (3当量)、HOBt (1.2当量)、及びEDCI.HCl (1.2当量)を含有するDMF (0.1M)に溶解させた。混合物をマイクロ波照射によって140℃で5分間加熱した。混合物を濃縮し、NaHCO3飽和溶液で洗浄した。沈殿を濾過した。粗生成物を逆相で精製して、最終生成物を得た。
【０４３１】
Table 9(表9)に、上述の合成に従って合成した化合物を示す。
【０４３２】
【表９】
2016504345.tif 000105
材料及び方法:
1) in vitroキナーゼ検定(Table 10から21(表10から21))
BRAF、EGFR (ErbB1)、EGFR (ErbB1) T790M L858R、FGFR2、KDR (VEGFR2)、PDGFRA (PDGFRα)、SRC他を始めとするいくつかのキナーゼに対する化合物の阻害活性を、Invitrogenによって、Z'-LYTE(登録商標)技術を使用して評価した。簡潔に述べると、Z'-LYTE(登録商標)生化学検定は、蛍光を主体とする結合型酵素フォーマットを用いており、リン酸化されたペプチドとリン酸化されていないペプチドのタンパク質分解作用による切断への感度の差に基づくものである。ペプチド基質を、FRET対を構成する、各末端に1つずつの2つの蛍光体で標識する。供与体蛍光体を400nmで励起させた後の供与体発光の受容体発光に対する比(発光比)を算出する、比測定法(ratiometric method)を使用して、反応の進行を定量化する。
【０４３３】
化合物は、ウェルにおいて、1% DMSO (最終)中でスクリーニングする。10点滴定のために、出発濃度から3倍段階希釈を行う。ペプチド/キナーゼ混合物はすべて、適切なキナーゼ緩衝液中に2倍の作業濃度に希釈する。ATP溶液はすべて、キナーゼ緩衝液(50mM HEPES pH7.5、0.01% BRIJ-35、10mM MgCl2、1mM EGTA)中に4倍の作業濃度に希釈する。見かけのATP Kmを、Z'-LYTE(登録商標)検定を使用して事前に判定する。
【０４３４】
各化合物は、(化合物を10μMの濃度でインキュベートしたABL及びABL T315Iに対する活性の試験を除いて)100nMの濃度でインキュベートし、Table 10から21(表10から21)に、得られた結果を要約し、化合物の阻害力を示す。
【０４３５】
2) in vitro細胞増殖検定(Table 22から35(表22から35))
がん細胞系(ウェルあたり5×103細胞)、HUVEC (ウェルあたり1×104細胞)、又はHRMEC (ウェルあたり1×104細胞)を96ウェルプレートに分配し、漸増濃度(10nM〜3μM)の化合物と共に72時間二通りにインキュベートした。MTT (3[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド)を使用して、細胞増殖を測定した。Graph-Pad Software社のPrism 5.0 (GraphPad Software社、米国カリフォルニア州La Jolla)を利用して、シグモイド用量反応曲線からEC50値を算出し、値は、DMSO処理対照ウェル(0%)及び1% SDS対照ウェル(100%)の値に対して正規化した。
【０４３６】
3) in vivo調査(Table 36(表36))
無胸腺雄ヌードマウス(HSD、6〜7週齢)の右側腹部にHepG2細胞(滅菌PBS中1×107細胞/mL)を皮下移植することにより、ヒト肝細胞癌マウスモデルを準備した。腫瘍体積がおよそ200mm3に達したとき、マウスを、媒体単独又はORB化合物処置群のいずれか(1群あたり6匹のマウス)にランダムに割り振った。マウスを媒体(PEG400)又はOR0720、OR0721、OR0811のいずれかで処置した(1日4回20mg/kg、連続する15日間経口)。
【０４３７】
mm3での腫瘍体積を、1週間に3回、デジタルキャリパーで測定し、以下の式:腫瘍体積(mm3)=長さ(mm)×幅(mm)×幅(mm)×1/2を使用して算出した。体重を1週間に3回測定し、起こりうる毒性を検出するために、マウスを毎日観察してストレスの徴候をモニターした。統計的な比較に一方向ANOVAを使用した。データは、Prism 5.0b (GraphPad Software社)を用い、一方向ANOVAとBonferroni post hocによって分析した。腫瘍成長阻害(TGI)を、媒体単独処置群と比べた、ORB化合物治療群における、研究終盤の腫瘍成長の低減パーセントとして算出する。
【０４３８】
生物学的結果:
in vitroキナーゼ検定によって、いくつかのキナーゼ阻害性分子構造が明らかになる。15種を越える化合物が、試験したキナーゼの少なくとも4種を阻害しうる(IC50は、100nMの濃度で阻害パーセントが50%より良好であるので、IC50が10μM未満になると予想されるABL及びABL T315Iを除き、こうしたキナーゼのそれぞれについて100nM未満になると予想される)。こうした化合物は、導入部において展開されるような腫瘍の進行(血管形成、遊走、転移、腫瘍成長...)においていくつもの経路に関与する別種で遠縁のキナーゼファミリー(セリン/トレオニン又はチロシンキナーゼ)に相当するキナーゼに対して阻害活性を示すことを留意すべきである。こうした化合物は、スペクトルの広い多標的キナーゼ阻害薬である。得られた結果をTable 10(表10)からTable 21(表21)に示す。
【０４３９】
化合物の抗増殖効力を、悪性がん細胞系、又は血管形成過程を模倣する初代内皮細胞のいずれかで評価した。細胞成長を50%のレベルで阻害する化合物の濃度に相当する、EC50を求めた。得られた結果をTable 22から35(表22から35)に示す。
【０４４０】
本発明者らは、これらの実験において、3μMより上位のEC50を示す化合物は、試験した細胞型に対して不活性であるとみなす。肝細胞癌治療のために現在売り出されているソラフェニブが、4種の肝臓がん細胞系(HepG2、HuH7、HuCCT1、及びHuH6クローン5)に対して1μM〜3μMのEC50をここで示すので、EC50が1μM〜3μMである化合物を活性があるとみなす。いくつかの化合物は、試験した各細胞型において、細胞成長の非常に強力な阻害薬であり、HUVECに対して抗血管形成特性を示す。他のすべてのがん細胞系については、いくつかの化合物によって、細胞成長が大いに阻害される。まとめると、これらの結果から、本発明の化合物が、腫瘍成長の少なくとも2つの経路(上皮細胞増殖及び血管形成)をブロックしうることが示唆される。
【０４４１】
in vivoで、ヒト肝細胞癌腫瘍を有する異種移植マウスにおいて、OR0720、OR0721、及びOR0811が、腫瘍成長の低減を有意に誘発した。得られた結果をTable 36(表36)に示す。
【０４４２】
【表１０】
2016504345.tif 000106
【０４４３】
【表１１】
2016504345.tif 000107
【０４４４】
【表１２】
2016504345.tif 000108
【０４４５】
【表１３】
2016504345.tif 000109
【０４４６】
【表１４】
2016504345.tif 000110
【０４４７】
【表１５】
2016504345.tif 000111
【０４４８】
【表１６】
2016504345.tif 000112
【０４４９】
【表１７】
2016504345.tif 000113
【０４５０】
【表１８】
2016504345.tif 000114
【０４５１】
【表１９】
2016504345.tif 000115
【０４５２】
【表２０】
2016504345.tif 000116
【０４５３】
【表２１】
2016504345.tif 000117
【０４５４】
【表２２】
2016504345.tif 000118
【０４５５】
【表２３】
2016504345.tif 000119
【０４５６】
【表２４】
2016504345.tif 000120
【０４５７】
【表２５】
2016504345.tif 000121
【０４５８】
【表２６】
2016504345.tif 000122
【０４５９】
【表２７】
2016504345.tif 000123
【０４６０】
【表２８】
2016504345.tif 000124
【０４６１】
【表２９】
2016504345.tif 000125
【０４６２】
【表３０】
2016504345.tif 000126
【０４６３】
【表３１】
2016504345.tif 000127
【０４６４】
【表３２】
2016504345.tif 000128
【０４６５】
【表３３】
2016504345.tif 000129
【０４６６】
【表３４】
2016504345.tif 000130
【０４６７】
【表３５】
2016504345.tif 000131
【０４６８】
【表３６】
2016504345.tif 000132
【図１】
2016504345.tif 000142
【図２】
2016504345.tif 000143
【図３】
2016504345.tif 000144
【図４】
2016504345.tif 000145
【図５】
2016504345.tif 000146
【図６】
2016504345.tif 000147
【図７】
2016504345.tif 000148
【図８】
2016504345.tif 000149
【図９】
2016504345.tif 000150
【図１０】
2016504345.tif 000151
【図１１】
2016504345.tif 000152
【図１２】
2016504345.tif 000153
【図１３】
2016504345.tif 000154
【国際調査報告】
2016504345.tif 000155
2016504345.tif 000156
2016504345.tif 000157
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