(57)【要約】  本発明は、メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を用いることによって高純度かつ高収率にメロペネム三水和物を製造する方法を提供する。本発明の製造方法は、得られた生成物中の残留溶媒の含量を顕著に低下させることができ、それにより高純度のメロペネム三水和物を得ることができる。
2016504371.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１で表される化合物の三水和物の製造方法であって、
（ａ）式１で表される化合物の乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解して、溶液を得る工程
【化１】
2016504371.tif 000010
（ｂ）工程（ａ）で得られた溶液に貧溶媒を加えて、沈殿物を生成させる工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で得られた混合物から沈殿物を単離する工程
を含む方法。
【請求項２】
前記式１の化合物の乾燥したメタノール溶媒和物が２θ＝８．６２、９．７６、１２．１７、１２．５６、１２．９９、１５．２３、１６．２０、１７．２０、１８．３３、１９．７９、２０．２４、２１．３４、２２．０３、２３．６９、２４．５４、２５．１９、および２６．３１°（±０．２°）にピークを含む粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形である、請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記式１の化合物の乾燥したメタノール溶媒和物が図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形である、請求項２に記載の製造方法。
【請求項４】
前記式１の化合物の乾燥したメタノール溶媒和物が
（i）式１の化合物またはその水和物をメタノール中でスラリー化して、そのメタノール溶媒和物とする工程；および
（ii）工程（i）で得られたスラリーを濾過した後、得られたメタノール溶媒和物を乾燥する工程
を含む方法によって得られる、請求項１に記載の製造方法。
【請求項５】
前記スラリー化が−２０℃〜２０℃で行われる、請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
前記メタノールが前記式１の化合物またはその水和物の１ｇに対して１ｍｌ〜１０ｍｌの割合で使用される、請求項４に記載の製造方法。
【請求項７】
工程（ａ）での前記溶解が０℃〜２０℃で行われる、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
工程（ａ）での前記溶解が５℃〜１５℃で行われる、請求項７に記載の製造方法。
【請求項９】
工程（ｂ）を行う前に工程（ａ）で得られた溶液にメロペネム三水和物をシーディングすることをさらに含む、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１０】
工程（ｂ）での前記貧溶媒がイソプロピルアルコール、アセトン、テトラヒドロフラン、またはエタノールである、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
工程（ｂ）での前記貧溶媒がイソプロピルアルコールである、請求項１０に記載の製造方法。
【請求項１２】
工程（ｂ）が−２０℃〜２０℃で行われる、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
工程（ｂ）が−１０℃〜５℃で行われる、請求項１２に記載の製造方法。
【請求項１４】
工程（ｂ）が２回以上繰り返される、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１５】
式１の化合物：
【化２】
2016504371.tif 000011
のメタノール溶媒和物。
【請求項１６】
２θ＝８．６２、９．７６、１２．１７、１２．５６、１２．９９、１５．２３、１６．２０、１７．２０、１８．３３、１９．７９、２０．２４、２１．３４、２２．０３、２３．６９、２４．５４、２５．１９、および２６．３１°（±０．２°）にピークを含む粉末Ｘ線回折スペクトルを有する、請求項１５に記載の式１の化合物のメタノール溶媒和物。
【請求項１７】
図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形である、請求項１５に記載の式１の化合物のメタノール溶媒和物。
【請求項１８】
図４の赤外線スペクトルを有する、請求項１５に記載の式１の化合物のメタノール溶媒和物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メロペネム三水和物の製造方法に関し、さらに詳細には、メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を用いることによって、高純度かつ高収率にメロペネム三水和物を製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
メロペネムは、カルバペネム系抗生物質の１つであり、下記式１の構造を有し、また、その化学名は、（４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−３−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（ジメチルカルバモイル）ピロリジン−３−イルチオ）−６−（（Ｒ）−１−ヒドロキシエチル）−４−メチル−７−オキソ−１−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタ−２−エン−２−カルボン酸である。メロペネムは、三水和物の形態、すなわちメロペネム三水和物（メロペネム・３Ｈ２Ｏ）において、臨床的に使用される。
【化１】
2016504371.tif 000003
【０００３】
ＵＳ４，８８８，３４４には、非結晶性メロペネムを３０℃の水に溶解する工程；前記溶液を水浴中で冷却する工程（この時、少量の結晶が沈殿する）；および前記混合物にアセトンを加えて沈殿物を生成させる工程を含む、結晶性メロペネム三水和物の製造方法が開示されている。改良された製造方法として、ＷＯ２００７／０３１８５８には、アンモニアなどの塩基の存在下、メロペネムまたはその水和物を水に溶解させる工程；任意にミクロンフィルターを通して濾過する工程；ギ酸などの酸を使用してｐＨを４．０〜７．０に調節する工程；および溶媒（貧溶媒）を添加してメロペネム三水和物を得る工程を含む、メロペネム三水和物の製造方法が開示されている。しかし、ＵＳ４，８８８，３４４に開示されている製造方法は、溶解工程において加温を含むことによって分解産物の生成を引き起こし、その結果、生成物すなわちメロペネム三水和物の純度は不十分なものとなり、収率も低くなる。また、ＷＯ２００７／０３１８５８に開示されている製造方法は、塩基を使用した後に酸でｐＨを調節するさらなる工程を含み、複雑な方法となっている。さらに、ＷＯ２００７／０３１８５８に開示されている方法では、生成物中に望ましくない残留物質（例えば、酸−塩基反応により生じる塩類、ｐＨ調節時の微細粉塵、金属性異物など）の生じるおそれがある。
【０００４】
さらに、ＷＯ２０１１／１４１８４７には、非無菌性メロペネム三水和物を低温のメタノールに溶解して透明な溶液を得た後、任意にカーボンによる処理および／またはミクロンフィルターによる濾過を行い、これに貧溶媒を加えることを含むメロペネム三水和物の製造方法が開示されている。しかし、透明な低温メタノール溶液を得るためには、過剰量のメタノールの使用が必要となる。すなわち、メロペネムを低温（約０℃）のメタノールに完全に溶解させるためには、メロペネムの重量に対して、少なくとも８倍のメタノール（例えば、１０ｇのメロペネムに対して８０ｍｌのメタノール）の使用が必要となる。過剰量のメタノールの使用を避けるために加温を行うと、メロペネムの分解産物が生じ、生成物の純度が低下する。さらに、過剰量のメタノールを使用すると、貧溶媒の使用量も大幅に増加するため、この方法を産業的大規模生産に適用することは困難である。特に、メタノールと貧溶媒とをいずれも過剰量で使用することは、生成物すなわちメロペネム三水和物中に含まれる残留溶媒が多量になるという問題を引き起こす。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者らは、高収率をもたらすとともに分解産物および望ましくない異物の生成を最小限に抑えることができるメロペネム三水和物の製造方法を開発するために、多様な研究を行った。そして、本発明者らは、メロペネムまたはその水和物（例えば、粗水和物）の変換により得られた、固体形態で単離されたメタノール溶媒和物が、メロペネムやその水和物と比べて水への溶解性が顕著に高く、したがって低温でも容易に水に溶解しうることを見出した。また、これに続く（メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解した後の）貧溶媒の使用を通じてメロペネム三水和物を生成させる工程を低温で行うことができ、結果として分解産物および望ましくない異物の生成を最小限に抑えることができ、それによって生成物の高純度（特に、低い残留溶媒レベル）および高収率を達成できることを見出した。
【０００６】
したがって、本発明の目的は、メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を用いることによるメロペネム三水和物の製造方法を提供することである。
【０００７】
本発明の別の目的は、メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一態様において、
（ａ）式１の化合物（すなわち、メロペネム）：
【化２】
2016504371.tif 000004
の乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解して、溶液を得る工程；
（ｂ）工程（ａ）で得られた溶液に貧溶媒を加えて、沈殿物を生成させる工程；および
（ｃ）工程（ｂ）で得られた混合物から沈殿物を単離する工程
を含む、式１の化合物の三水和物の製造方法が提供される。
【０００９】
本発明の一実施形態において、前記メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物は、２θ＝８．６２、９．７６、１２．１７、１２．５６、１２．９９、１５．２３、１６．２０、１７．２０、１８．３３、１９．７９、２０．２４、２１．３４、２２．０３、２３．６９、２４．５４、２５．１９、および２６．３１°（±０．２°）にピークを含む粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形態であってもよく、具体的には、図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形態であってもよい。
【００１０】
前記メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物は、（i）式１の化合物またはその水和物をメタノール中でスラリー化して、そのメタノール溶媒和物とする工程；および（ii）工程（i）で得られたスラリーを濾過した後、得られたメタノール溶媒和物を乾燥する工程を含む製造方法によって得られてもよい。
【００１１】
本発明の別の態様において、式１の化合物：
【化３】
2016504371.tif 000005
のメタノール溶媒和物が提供される。
【発明の効果】
【００１２】
固体形態で単離されたメタノール溶媒和物が、メロペネムやその水和物と比べて顕著に高い水への溶解性を示し、したがって、低温（例えば、−２０℃〜２０℃）でも容易に水に溶解しうることが、本発明によって新たに見出された。また、これに続く（メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解した後の）貧溶媒の使用を通じてメロペネム三水和物を生成させる工程を低温すなわち−２０℃〜２０℃、好ましくは−１０℃〜５℃の範囲の温度で行うことができることが、本発明によって新たに見出された。したがって、本発明の製造方法は、分解産物および望ましくない異物の生成を最小限に抑えることができ、また高収率を達成することができるため、産業的大規模生産に好適に適用することができる。特に、本発明の方法によれば、残留溶媒が最小限に抑えられ、高純度のメロペネム三水和物を製造することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】実施例１で得られた結晶性メロペネムメタノール溶媒和物の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す。
【図２】結晶性メロペネムの粉末Ｘ線回折スペクトルを示す。
【図３】図１および図２の粉末Ｘ線回折スペクトルを比較して示す。
【図４】実施例１で得られた結晶性メロペネムのメタノール溶媒和物の赤外線（ＩＲ）スペクトルを示す。
【図５】結晶性メロペネムの赤外線（ＩＲ）スペクトルを示す。
【図６】図４および図５の赤外線（ＩＲ）スペクトルを比較して示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明は、メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物（すなわち、固体形態で単離されたメロペネムメタノール溶媒和物）を出発物質として使用する、メロペネム三水和物の製造方法を提供する。すなわち、本発明は、（ａ）式１の化合物：
【化４】
2016504371.tif 000006
の乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解して溶液を得る工程；（ｂ）工程（ａ）で得られた溶液に貧溶媒を加えて、沈殿物を生成させる工程；および（ｃ）工程（ｂ）で得られた混合物から沈殿物を単離する工程を含む、式１の化合物の三水和物（すなわち、メロペネム・３Ｈ２Ｏ）の製造方法を提供する。
【００１５】
固体形態で単離されたメタノール溶媒和物の水への溶解性が、メロペネムやその水和物と比べて顕著に高く、したがって低温（例えば、−２０℃〜２０℃）でも容易に水に溶解しうることが本発明によって新たに見出された。また、これに続く（メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物を水に溶解した後の）貧溶媒の使用を通じてメロペネム三水和物を生成させる工程を低温すなわち−２０℃〜２０℃、好ましくは−１０℃〜５℃の範囲の温度で行うことができることが、本発明によって新たに見出された。したがって、本発明の製造方法は、分解産物および望ましくない異物の生成を最小限に抑えることができ、また高収率を達成することができる。
【００１６】
本発明の製造方法において出発物質として使用される、前記メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物は、結晶形態、好ましくは２θ＝８．６２、９．７６、１２．１７、１２．５６、１２．９９、１５．２３、１６．２０、１７．２０、１８．３３、１９．７９、２０．２４、２１．３４、２２．０３、２３．６９、２４．５４、２５．１９、および２６．３１°（±０．２°）にピークを含む粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形態であってもよい。一実施形態において、前記メロペネムのメタノール溶媒和物は、図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形態である。前記メロペネムのメタノール溶媒和物は、図２で示した結晶性メロペネムの粉末Ｘ線回折スペクトルと比べ、２θ＝９．７６および１８．３３°（±０．２°）に特徴的なピークを有する。また、図６で示したように、前記メロペネムのメタノール溶媒和物は、メロペネムの非溶媒和物形態とは異なる赤外線（ＩＲ）スペクトルを有する。特に、前記メロペネムのメタノール溶媒和物は１０３４ｃｍ−１に特徴的なピークを有するが、メロペネムの非溶媒和物形態は、このピークを有さない。さらに、前記メロペネムのメタノール溶媒和物とメロペネムの非溶媒和物形態とでは、それぞれのＴＧＡｓ（熱重量分析）、ＤＳＣ（示差走査熱量測定）、およびＭＰｓ（融点）において差異がある。また、（下記表１の解析条件下の）ヘッドスペースガスクロマトグラフィーを用いた分析の結果、前記メロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物のメタノール含量は、４０，０００〜５０，０００ｐｐｍ（４〜５％）であった。また、カールフィッシャー法による水分分析の結果、前記メロペネムのメタノール溶媒和物の有する水分は約１％であることが確認された。この水分を無水メロペネムに対するモル比で計算すると、前記メロペネムのメタノール溶媒和物は、当量比０．５〜０．６のメタノールを有する結晶形態である。
【００１７】
前記メロペネムのメタノール溶媒和物は、（i）メロペネムまたはその水和物をメタノール中でスラリー化して、そのメタノール溶媒和物とする工程；および（ii）工程（i）で得られたスラリーを濾過した後、得られたメタノール溶媒和物を乾燥する工程を含む方法によって製造されてもよい。
【００１８】
前記メロペネムのメタノール溶媒和物の製造方法において出発物質として用いられる前記メロペネムまたはその水和物は、通常の方法によって得られてもよい。前記メロペネムは、結晶形態および／または無定形形態（例えば、ＥＰ１２６５８７によって製造された無定形メロペネム）であってもよい。前記メロペネム水和物は、ＷＯ２０１０／１０４３３６によって製造された粗メロペネムの水和物形態（例えば、粗メロペネム三水和物）であってもよい。ＥＰ１２６５８７およびＷＯ２０１０／１０４３３６は、参照によりその全体が本発明に援用される。
【００１９】
前記メロペネムのメタノール溶媒和物の製造方法において、スラリー化（例えば、メタノール中での撹拌）は、好ましくは低温で行われ、典型的には低温のメタノールを用いて行われる。例えば、前記スラリー化は、好ましくは−２０℃〜２０℃で、より好ましくは−１０℃〜５℃で行われてもよい。メタノールは、メロペネムまたはその水和物１ｇに対して、１ｍｌ〜１０ｍｌ、好ましくは２ｍｌ〜６ｍｌ、より好ましくは３ｍｌ〜４ｍｌの割合で使用されてもよいが、これらに限定はされない。前記スラリー化は、典型的には１分間〜３時間行われてもよい。必要に応じて、前記工程（i）は、メロペネムのメタノール溶媒和物の形成を容易にするために、該溶媒和物をシーディングすることをさらに含んでもよい。
【００２０】
本発明によるメロペネム三水和物の製造方法において、工程（ａ）での前記溶解は、好ましくは低温で行われ、典型的には冷水を用いて行われる。例えば、前記溶解は、好ましくは０℃〜２０℃で、より好ましくは５℃〜１５℃で行われてもよい。水（例えば、注射用水）は、メロペネムのメタノール溶媒和物１ｇに対して、１０ｍｌ〜５０ｍｌ、好ましくは１５ｍｌ〜３０ｍｌの割合で使用してもよいが、これらに限定はされない。好ましくは、得られた溶液は、無菌フィルターを用いた無菌濾過に供する。必要に応じて、無菌濾過により得られた固体を水（例えば、注射用水）で洗浄した後、使用後の洗浄液を前記溶液（すなわち、無菌濾過により得られた溶液）と混合し、その後、次の工程を行う。
【００２１】
工程（ｂ）で使用する貧溶媒は、メロペネム三水和物が溶解しない溶媒であってもよい。例えば、工程（ｂ）で使用する貧溶媒は、イソプロピルアルコール、アセトン、テトラヒドロフラン、またはエタノールであってもよく、好ましくはイソプロピルアルコールである。また、工程（ｂ）は、好ましくは低温で行われ、典型的には低温の貧溶媒を用いて行われる。例えば、工程（ｂ）は、好ましくは−２０℃〜２０℃で、より好ましくは−１０℃〜５℃で、さらに好ましくは−５℃〜５℃で行われてもよい。
【００２２】
工程（ｂ）は、２回以上繰り返されてもよい。必要に応じて、工程（ｂ）を行う前に、工程（ａ）で得られた溶液にメロペネム三水和物をシーディングすることをさらに行ってもよい。工程（ｂ）は、前記貧溶媒を繰り返し添加し、得られた結晶を熟成させることによって行われてもよく、そのようにすることが好ましい。
【００２３】
前記得られた沈殿物、すなわち、工程（ｂ）で形成された沈殿物は、通常の濾過および乾燥の方法によって単離されてもよい。必要に応じて、前記単離された沈殿物（すなわち、メロペネム三水和物）は、低温（例えば、０℃〜５℃）のイソプロピルアルコール溶液で洗浄してもよい。一実施形態において、前記工程（ｃ）は、工程（ｂ）で得られた混合物を濾過し、得られた固体をイソプロピルアルコールと水との２：１（ｖ／ｖ）混合溶媒で洗浄した後、室温で真空乾燥することによって行われてもよい。
【００２４】
さらに、本発明は、メロペネム三水和物の製造方法において出発物質として用いられた前記メロペネムのメタノール溶媒和物を提供する。すなわち、本発明は、式１の化合物：
【化５】
2016504371.tif 000007
のメタノール溶媒和物を提供する。
【００２５】
前記式１の化合物のメタノール溶媒和物は、２θ＝８．６２、９．７６、１２．１７、１２．５６、１２．９９、１５．２３、１６．２０、１７．２０、１８．３３、１９．７９、２０．２４、２１．３４、２２．０３、２３．６９、２４．５４、２５．１９、および２６．３１°（±０．２°）にピークを含む粉末Ｘ線回折スペクトルを有してもよい。一実施形態において、前記式１の化合物のメタノール溶媒和物は、図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶形態である。別の一実施形態において、前記式１の化合物のメタノール溶媒和物は、図４の赤外線（ＩＲ）スペクトルを有する。
【００２６】
以下、実施例により本発明についてさらに詳細に説明する。しかし、これらの実施例は、本発明を例示的に説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【実施例】
【００２７】
実施例１：メロペネムのメタノール溶媒和物の製造および評価
粗メロペネム三水和物（１０ｇ、ＷＯ２０１０／１０４３３６に従って製造）に低温（０℃）のメタノール（４０ｍｌ）を加えた。この混合物を、温度を−５〜０℃に維持しながら、２時間撹拌した。スラリーを濾過した後、得られた固体を室温で真空乾燥して、メロペネムのメタノール溶媒和物（９．８ｇ、９８．０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）  δ  ５．５（１Ｈ）、５．２０（２Ｈ）、４．７５（１Ｈ）、４．２６（２Ｈ）、３．４〜３．８（４Ｈ）、３．３（２Ｈ）、３．０（６Ｈ）、２．６２（１Ｈ）、１．２〜１．３（８Ｈ）
【００２８】
上記のようにして得られたメロペネムのメタノール溶媒和物およびメロペネム三水和物の水への溶解度を２６℃で測定した。その結果、メロペネム三水和物の水への溶解度が１６．４ｍｇ／ｍｌであったのに対し、前記メロペネムのメタノール溶媒和物の溶解度は５７．６ｍｇ／ｍｌであった。
【００２９】
上記のようにして得られたメロペネムのメタノール溶媒和物は結晶形態であり、図１の粉末Ｘ線回折スペクトルを示した。このスペクトルは、加速電圧４０ｋＶ、フィラメント放出電流３０ｍＡの条件下、Ｘ線回折計（モデル：Ｅｍｐｙｒｅａｎ、パナリティカル社製）により、放射線源としてＣｕＫα線を用いて測定したものである。比較のために、結晶性メロペネムの粉末Ｘ線回折スペクトル（上記と同様の方法および条件にて測定）を、図２に示した。また、図１および図２の粉末Ｘ線回折スペクトルを、比較のために図３に示した。
【００３０】
上記のようにして得られたメロペネムのメタノール溶媒和物は、さらに、図４の赤外線（ＩＲ）スペクトルを示した。このスペクトルは、中赤外線ＥｖｅｒＧｌｏ光源を用いたＩＲ分光計（モデル：ＩＳ１０、サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）により、ＫＢｒペレットを用いて測定したものである。比較のために、結晶性メロペネムの赤外線（ＩＲ）スペクトル（上記と同様の方法および条件にて測定）を、図５に示した。また、図４および図５の粉末赤外線（ＩＲ）スペクトルを、比較のために図６に示した。
【００３１】
実施例２：メロペネムのメタノール溶媒和物の製造および評価
粗メロペネム三水和物（１０ｇ、ＷＯ２０１０／１０４３３６に従って製造）に低温（０℃）のメタノール（４０ｍｌ）を加えた。この混合物にシード（メロペネムのメタノール溶媒和物、１ｇ）を加え、温度を−５〜０℃に維持しながら、１時間撹拌した。スラリーを濾過した後、得られた固体を室温で真空乾燥して、メロペネムのメタノール溶媒和物（９．８ｇ、９８．０％）を得た。前記生成量（および収率）は、シードの量を差し引いた量である。
【００３２】
実施例３：メロペネム三水和物の製造
低温（１０℃）の注射用水（１８０ｍｌ）を、実施例１または２で製造されたメロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物（９．８ｇ）に加えた。この混合物を２分間撹拌して溶液（すなわち、少量の未溶解固体を含有する溶液Ａ）を得た後、無菌フィルター（ザルトリウス社製、５１８２５０７Ｔ１−ＬＧ）で濾過した。単離された少量の未溶解固体を、注射用水（２０ｍｌ）で洗浄した。使用後の洗浄液を前記溶液Ａと混合した後、１０℃以下に冷却した。この溶液にシード（メロペネム三水和物、０．３ｇ）を加えた後、０〜５℃で１時間撹拌した。この混合物に低温（０℃）のイソプロピルアルコール（３０ｍｌ）を加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のイソプロピルアルコール（２０ｍｌ）をさらに加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のイソプロピルアルコール（２５０ｍｌ）をさらに加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のイソプロピルアルコール（３００ｍｌ）をさらに加えた後、２時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物を濾過した後、得られた固体をイソプロピルアルコールと水との２：１（ｖ／ｖ）混合溶媒（２９．４ｍｌ）で洗浄した後、室温で真空乾燥して、メロペネム三水和物（９．３ｇ、９４．９％）を得た。（ＨＰＬＣ純度：≧９９％）
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）  δ  ５．５（１Ｈ）、５．２０（２Ｈ）、４．７５（１Ｈ）、４．２６（２Ｈ）、３．４〜３．８（４Ｈ）、３．３（２Ｈ）、３．０（６Ｈ）、２．６２（１Ｈ）、１．２〜１．３（８Ｈ）
【００３３】
実施例４：メロペネム三水和物の製造
低温（１０℃）の注射用水（１８０ｍｌ）を、実施例１または２で製造されたメロペネムの乾燥したメタノール溶媒和物（９．８ｇ）に加えた。この混合物を２分間撹拌して溶液（すなわち、少量の未溶解固体を含有する溶液Ａ）を得た後、無菌フィルター（ザルトリウス社製、５１８２５０７Ｔ１−ＬＧ）で濾過した。単離された少量の未溶解固体を、注射用水（２０ｍｌ）で洗浄した。使用後の洗浄液を前記溶液Ａと混合した後、１０℃以下に冷却した。この溶液にシード（メロペネム三水和物、０．３ｇ）を加えた後、０〜５℃で１時間撹拌した。この混合物に低温（０℃）のアセトン（３０ｍｌ）を加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のアセトン（２０ｍｌ）をさらに加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のアセトン（２５０ｍｌ）をにさらに加えた後、１時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物に低温（０℃）のアセトン（３００ｍｌ）をさらに加えた後、２時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物を濾過した後、得られた固体をアセトンと水との２：１（ｖ／ｖ）混合溶媒（２９．４ｍｌ）で洗浄した後、室温で真空乾燥して、メロペネム三水和物（９．２ｇ、９４．５％）を得た。（ＨＰＬＣ純度：≧９９％）
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）  δ  ５．５（１Ｈ）、５．２０（２Ｈ）、４．７５（１Ｈ）、４．２６（２Ｈ）、３．４〜３．８（４Ｈ）、３．３（２Ｈ）、３．０（６Ｈ）、２．６２（１Ｈ）、１．２〜１．３（８Ｈ）
【００３４】
比較例１：メロペネム三水和物の製造
粗メロペネム三水和物（１０．０ｇ）を、低温の（０℃）メタノール（８０ｍｌ）に完全に溶解した。得られた溶液に、ＥＤＴＡ（５０ｍｇ）、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（１００ｍｇ）、およびＥＮＯカーボン（５００ｍｇ）を加えた。この混合物を濾過してカーボンを分離した後、低温（０℃）のメタノール（５ｍｌ）で洗浄した。使用後の洗浄液を前記濾液と混合し、得られた溶液を０．２μｍフィルター（ザルトリウス社製、５１８２５０７Ｔ１−ＬＧ）で濾過した。得られた濾液を１０℃〜１３℃に冷却した後、Ｈ２Ｏ（１３５ｍｌ）を加えた。この混合物にアセトン（６００ｍｌ）を加えた後、２時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物を濾過した後、得られた結晶をアセトンと水との３：１（ｖ／ｖ）混合溶媒（４０．０ｍｌ）で洗浄した後、乾燥して、メロペネム三水和物（８．９ｇ、８９．０％）を得た。（ＨＰＬＣ純度：≧９９％）
【００３５】
比較例２：メロペネム三水和物の製造
粗メロペネム三水和物（１０．０ｇ）を、低温（０℃）のメタノール（８０ｍｌ）に完全に溶解した。得られた溶液に、ＥＤＴＡ（５０ｍｇ）、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（１００ｍｇ）、およびＥＮＯカーボン（５００ｍｇ）を加えた。この混合物を濾過してカーボンを分離した後、低温（０℃）のメタノール（５ｍｌ）で洗浄した。使用後の洗浄液を前記濾液と混合し、得られた溶液を０．２μｍフィルター（ザルトリウス社製、５１８２５０７Ｔ１−ＬＧ）で濾過した。得られた濾液を１０℃〜１３℃に冷却した後、Ｈ２Ｏ（１３５ｍｌ）を加えた。この混合物にイソプロピルアルコール（６００ｍｌ）を加えた後、２時間撹拌して結晶を熟成させた。この混合物を濾過した後、得られた結晶をイソプロピルアルコールと水との３：１（ｖ／ｖ）混合溶媒（４０．０ｍｌ）で洗浄した後、乾燥して、メロペネム三水和物（８．９５ｇ、８９．５％）を得た。（ＨＰＬＣ純度：≧９９％）
【００３６】
実験例：残留溶媒の分析
実施例３および４ならびに比較例１および２で製造した各メロペネム三水和物中の残留溶媒を、下記表１の条件下、ヘッドスペースガスクロマトグラフィーを用いて分析した。結果を下記表２に示す。
【００３７】
【表１】
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【００３８】
【表２】
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【００３９】
表２に示すように、本発明によって製造された三水和物形態のメロペネムは、従来の方法によって製造されたものと比べて残留溶媒レベルが顕著に低い。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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