(57)【要約】  本発明は、揮発性抗微生物剤によって分散化された少なくとも１つのクレイを含む飼料の添加剤に関する。そのような添加剤は、成長促進剤として作用し、感染のリスク及びマイコトキシンによる中毒のリスクを抑制するために、特定の動物、特に家禽類及び反芻動物の飼料に添加されることが可能である。キーワード：精油、チモール、スチブンサイト、ベントナイト、分散化されたクレイ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗微生物作用と毒素吸着作用とを示す組成物であり、揮発性抗微生物剤によって分散化された食用クレイを含む分子複合体によって構成される、組成物。
【請求項２】
前記分子複合体は、前記食用クレイの分子構造内における前記揮発性抗微生物剤の分散によって構成される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記揮発性抗微生物剤は、チモール、クレゾール、カルバクロール、オイゲノール、メントール、シンナムアルデヒド、又はそれらを個別に若しくは混合して含む任意の成分、並びにそれらの異性体、誘導体及び混合物から選択される殺菌性芳香族アルコールである、請求項１又は２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成チモール、又はチモールを含有する任意の化合物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成クレゾール、又はクレゾールを含有する任意の化合物である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成カルバクロール、又はカルバクロールを含有する任意の化合物である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成メントール、又はメントールを含有する任意の化合物である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成オイゲノール、又はオイゲノールを含有する任意の化合物である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記揮発性抗微生物剤は、天然若しくは合成シンナムアルデヒド、又はシンナムアルデヒドを含有する任意の化合物である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記揮発性抗微生物剤は、２つ以上の天然若しくは合成抗微生物剤の混合物、又はそれらを含有する任意の化合物によって構成される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記食用クレイは、スチブンサイト、ベントナイト、カオリナイト、スメクタイト、イライト、クロライト、モンモリロナイト、ラポナイト、バイデライト、ノントロナイト、サポナイト、ソーコナイト、ヘクトライト、ハロイサイト、バーミキュライト、若しくはセピオライト、又は非天然若しくは天然のそれらの層間混合物（ｉｎｔｅｒｌａｙｅｒｅｄ  ｍｉｘｔｕｒｅｓ）から選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記食用クレイは、スチブンサイト、又はスチブンサイトを含有する任意の化合物である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記食用クレイは、ベントナイト、又はベントナイトを含有する任意の化合物である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記食用クレイは、一般にガスール若しくはＴｆａｌクレイと呼ばれる又は該種のクレイに一般に用いられる任意の名前で呼ばれる、スチブンサイトを豊富に含有するクレイである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記食用クレイはモロッコ産のガスールである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記食用クレイはモロッコ産のベントナイトである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記食用クレイはモロッコ産のガスールとベントナイトとの混合物である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記モロッコ産のガスールとベントナイトとの混合物は、少なくとも５重量％、好ましくは少なくとも３０重量％、特に少なくとも４０重量％、より好ましくは少なくとも５０重量％のモロッコ産のガスールを含有する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記揮発性抗微生物剤は、前記食用クレイを基準として０．００５〜０．３３の質量比率で存在する、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１９に記載の組成物の製造方法であり、
（ｉ）前記揮発性抗微生物剤を、抗微生物溶液を得るために、有機又は無機溶媒を含む溶液に添加するステップと、
（ｉｉ）得られた前記抗微生物溶液を、前記揮発性抗微生物剤によって分散化された食用クレイを含有する分子複合体によって構成される均質且つ安定した組成物を得ることが可能な温度条件及び撹拌のもと、粉末状又はペレット状の前記食用クレイと混合するステップとを含む、製造方法。
【請求項２１】
前記揮発性抗微生物剤はチモール、クレゾール、カルバクロール、メントール、オイゲノール、シンナムアルデヒド、それらを個別に若しくは混合して含む任意の成分、並びにそれらの異性体、誘導体及び混合物から選択され、前記有機又は無機溶媒は植物性油であり、且つ前記食用クレイはスチブンサイト、ベントナイト、カオリナイト、スメクタイト、イライト、クロライト、モンモリロナイト、ラポナイト、バイデライト、ノントロナイト、サポナイト、ソーコナイト、ヘクトライト、ハロイサイト、バーミキュライト、若しくはセピオライト、又は非天然若しくは天然の層間混合物（ｉｎｔｅｒｌａｙｅｒｅｄ  ｍｉｘｔｕｒｅｓ）から選択される、請求項２０に記載の製造方法。
【請求項２２】
前記抗微生物剤はチモールであり、前記有機溶媒は植物性油であり、且つ前記食用クレイは単独のモロッコ産のガスール又はモロッコ産のベントナイトと混合されたモロッコ産のガスールである、請求項２０又は２１に記載の製造方法。
【請求項２３】
結晶化された前記チモールを、前記抗微生物溶液と呼ばれる均質且つ透明の液体組成物を得るために、前記チモールが溶解可能な温度まで加熱された許容可能な量の前記植物性油を含む溶液に徐々に添加し、
前記抗微生物溶液を、均質且つ安定した粉末としての分子複合体を得るために、許容可能な量の吸着可能な粉末としての前記食用クレイと混合し、
前記均質且つ安定した粉末には、所望の粒度を取得することを可能にするキャリブレーション又はふるい処理がおこなわれる、
請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項２４】
前記チモールを、前記抗微生物溶液と呼ばれる均質且つ透明の液体溶液を得るために、撹拌されて４０℃〜６０℃の範囲の温度に加熱された、前記チモール量の１％〜２０％に相当する前記植物性油量を含む溶液に徐々に添加し、
前記抗微生物溶液量を、ふるいにかけることが可能な粉末を得るために、前記抗微生物溶液量の少なくとも３倍に相当する粉末状の前記食用クレイ量に混合することによって徐々に含有させ、
得られた前記ふるいにかけることが可能な粉末を、所望の粒度を取得するためにふるいによってキャリブレーションする、
請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項２５】
前記揮発性抗微生物剤はチモールとクレゾールとの混合物である、請求項２０〜２４に記載の製造方法。
【請求項２６】
前記揮発性抗微生物剤はチモール、クレゾール及びメントールの混合物である、請求項２０〜２４に記載の製造方法。
【請求項２７】
抗微生物作用、毒素吸着作用、及び免疫賦活作用を組み合わせた薬剤としての、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項２８】
病原性又は毒素原性病原体の発生を抑止、低減、及び抑制し、動物性媒体における毒素の吸着によって抑止、低減、及び抑制するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項２９】
動物用の飼料添加剤としての、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項３０】
前記動物に経口で投与するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項３１】
前記抗微生物作用と毒素吸着作用とを示す組成物又は添加剤は、直接的に又は任意の適切な媒体に添加することによって投与するためのものである、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項３２】
前記媒体は、飼料、飲料水、寝わら、壁、厩舎一帯、飼育設備、又は動物移送用車両を含む、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記動物は哺乳類、魚類、蜂、及び家禽類から選択される、請求項２９又は３０に記載の使用。
【請求項３４】
前記哺乳類はウシ属の動物、ヒツジ属の動物、ウサギ、ブタ、ヤギ属の動物、及びウマから選択される、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
前記家禽類は、ニワトリブロイラー、採卵鶏、養鶏用雄鶏及び雌鶏、ホロホロチョウ、シチメンチョウ、ウズラ、カモ、ガチョウ及びハトから選択される、請求項３３に記載の使用。
【請求項３６】
前記抗微生物作用と毒素吸着作用とを示す組成物は、前記動物の周囲、その消化管、及び／又は屠殺後の枝肉において、細菌、真菌、寄生虫、細菌毒素、及びマイコトキシンの発生を抑止、低減、及び抑制するための組成物である、請求項２９、３０、及び３３〜３５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３７】
前記抗微生物作用と毒素吸着作用とを示す、又は前記添加剤の前記組成物は、細菌、真菌、又は寄生虫感染の発生、並びに細菌毒素及びマイコトキシン、動物内の細菌及び寄生虫によって引き起こされる臨床的及び畜産学的問題の発生を抑止、低減、及び抑制するための組成物である、請求項２７〜３６のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物用飼料の添加剤、該添加剤を含む組成物、該組成物を製造する方法、及び複数の作用（成長促進作用、寄生虫性疾患に対する保護作用、マイコトキシンの吸着作用、並びに免疫賦活、及び腸及び肝胆道の保護作用）を有する添加剤としての該組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、動物に影響を及ぼす病的状態は、複数の要素（細菌、ウィルス、真菌、寄生虫、免疫不全、代謝、生理機能、畜産学的環境、栄養失調、毒素など）が関わる多因子の現象である。畜産者は、それぞれが１つ又は２つの因子のみを処置する様々な製品を通常所持しており、それらの製品の混合物を作成する必要がある。これは過剰又は不足による不適切な処置のリスクを招き、種々の損失をもたらす。これらの処置に最も使用される投与経路は、飼料又は飲料水に添加することによる経口経路である。
【０００３】
牛の飼料は、成長促進剤として用いられる抗生物質、並びにコクシジウム症又はヒストモナス症及びその他の寄生虫性疾患に対する予防的処置などの抗寄生虫剤を特に含む。これらの化学療法剤は、動物由来の食品に生成され得るその毒性、残留性により、そして感染因子に対する耐性の獲得への関与により、動物の健康と社会的な健康医学とにおけるいくつかの問題について疑問が残る（Ｃｈａｆｅｒ-Ｐｅｒｉｃａｓ等によるＦｏｏｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ２２（２０１１年）９９３-９９９）。
【０００４】
これらすべての理由により、これらの薬剤は世界の一部の地域で禁止されている（ＩＰ／０５／１６８７、ブリュッセル、２００５年１２月２２日）。
【０００５】
また、牛の飼料は、牛の飼料に含まれる穀類を汚染するカビに由来する無視できない濃度のマイコトキシンをも含有する。このマイコトキシンは動物の健康に有害な作用があり、動物由来の食品におけるその残留物は消費者の健康に有害である（Ｗａｙｎｅ及びＢｒｙｄｅｎ、Ａｎｉｍａｌ  Ｆｅｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １７３（２０１２年）１３４-１５８）。
【０００６】
このことについて、成長の遅延及び寄生虫性疾患の問題に取り組む牛の飼料の製造者及び畜産者は、飼料における添加剤としては禁止される、成長促進剤として使用される抗生物質や抗寄生虫剤に取って代わる代替物を探すことを余儀なくされている。また、牛の飼料の製造者及び畜産者は、マイコトキシンをもたらすカビの存在やマイコトキシン自体に関わる負の作用に抗するための添加剤を見つける必要もある。（Ｐｌａｃｉｎｔａ等、Ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ  ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｒｅａｌ  ｇｒａｉｎｓ  ａｎｄ  ａｎｉｍａｌ  ｆｅｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｍｙｃｏｔｏｘｉｎｓ、Ａｎｉｍａｌ  Ｆｅｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｖｏｌｕｍｅ、７８、Ｉｓｓｕｅ  １、２１〜３７ページ、１９９９年３月３１日）。
【０００７】
マイコトキシンが血流に入ることを防ぐため、いくつかの方法が用いられている。最も用いられている方法は、水和アルミノケイ酸ナトリウムカルシウム（ＨＳＣＡＳ）、活性炭、酵母壁、層状珪酸塩、コレスチラミン、乳酸菌などの吸着剤の使用である（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ、Ｃｌｅｍｅｎｔ、及びＰａｒｋ、１９９４年、Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｆｌａｔｏｘｉｎｓ  ｉｎ  ｆｏｏｄｓ  ａｎｄ  ｆｅｅｄｓ、Ｄ．Ｌ．  Ｅａｔｏｎ及びＪ．Ｄ．  Ｇｒｏｏｐｍａｎ編、Ｔｈｅ  ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ａｆｌａｔｏｘｉｎｓ-ｈｕｍａｎ  ｈｅａｌｔｈ，  ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  ａｎｄ  ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ、ｐ．３８３、アメリカ合衆国、カリフォルニア、サンディエゴ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）。
【０００８】
酸の添加及び加熱によって活性化されたクレイは、マイコトキシンの吸着剤に含まれる（ＥＰ  １  ３３３  ９１９  Ｂ１、Ｕｓｅ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｌａｙｅｒｅｄ  ｓｉｌｉｃａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｙｃｏｔｏｘｉｎ）。しかし、活性化処理は著しく複雑で高価であり、マイコトキシンの吸着性能における質と再現性とに負の影響をもたらし、特に牛の飼料の場合にクレイの価格が高価になりすぎる。
【０００９】
活性クレイに関する他の問題は、これらのクレイがビタミンのキレート剤として作用し、動物が利用できるビタミン量を減少させ得ることである。これによりビタミン欠乏の問題が生じる。
【００１０】
抗生物質と抗寄生虫剤の代わりに用いられる代替物の中に、精油、及びチモール、カルバクロール、シンナムアルデヒド、オイゲノールなどのその多数の化合物がある（Ａｌｌｅｍａｎ等、Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｏｉｌｓ  ｉｎ  ｐｏｕｌｔｒｙ  ｆｅｅｄ、ＩＮＲＡ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓ  Ａｎｉｍａｌｅｓ、２０１３年、ｎｕｍｂｅｒ  １；Ｂｅｎｔｏ等、Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｏｉｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ａｎｉｍａｌ  ｆｅｅｄｓ  ｆｏｒ  ｍｏｎｏｇａｓｔｒｉｃ  ａｎｉｍａｌｓ、Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｎｉ  Ｍｅｄｉｃｉｎａ、５８、２０１３年、（９）：４４９-４５８；Ｂｒｅｎｅｓ及びＲｏｕｒａ、Ａｎｉｍａｌ  Ｆｅｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１５８、（２０１０年）１-１４）。
【００１１】
しかしながら、これらの物質は揮発性なので飼料の中では不安定である。この不安定性は飼料の製造時に精油を失うもとになる。このため、牛の飼料の製造者は、製造された後も必要とされる量の精油が飼料に含まれるように過剰に大量の精油を添加するか、又は、マイクロカプセル化などの複雑で高価な安定化方法を用いる必要がある（ｄｅ  Ｂａｒｒｏｓ  Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ等、Ｇｕｍ  ａｒａｂｉｃ／ｓｔａｒｃｈ／ｍａｌｔｏｄｅｘｔｒｉｎ／ｉｎｕｌｉｎ  ａｓ  ｗａｌｌ  ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｏｓｅｍａｒｙ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｏｉｌ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  １０１（２０１４年）５２４-５３２）。
【００１２】
この不安定性により、製造後の牛の飼料において必要とされる作用の有効な期限が短縮される。また、精油を添加剤として含む飼料の質において負の影響をもたらし、添加剤の価格の上昇を招いて、抗生物質、抗寄生虫剤及びその他の代替物との競争力が低下する。
【発明の概要】
【００１３】
ゆえに、本発明の目的は、抗生（抗菌）及び抗寄生虫作用、マイコトキシンを分泌する真菌の成長を阻害する抗真菌作用を有すると共に、マイコトキシンを吸着する能力を備える化合物を含有する安定した組成物を発明することから成る。本発明の他の目的は、上述の作用を有する物質より選択することからなり、それらはまた腸及び肝胆道保護並びに免疫賦活作用をも有する。
【００１４】
本発明において、動物の健康に影響を及ぼす多因子の現象である病的状態に対し、複数の作用を有する溶液が提案される。
【００１５】
本発明の対象であり、前述の目的を達成するように意図された組成物は、チモール、クレゾール、カルバクロール、メントール、オイゲノール、シンナムアルデヒドなどの揮発性分子を分散することによる複合体形成からもたらされ、抗菌、抗寄生虫、抗真菌作用、並びにクレイと共に腸、肝胆道保護作用及び免疫賦活作用を有する。クレイは、組成物の安定化賦形剤の作用と共に、マイコトキシン吸着作用、及び腸の保護作用を有する。
【００１６】
用語「分子複合体」は、精油又はそれらの揮発性化合物のうちの１つを任意の食用クレイと混合することによって得られる任意の組成物に関し、その分子は精油及びそれらの揮発性化合物と相互作用をすることが可能である。
【００１７】
用語「精油」は、抽出を可能にする既知の抽出方法のうちの１つによって芳香植物から得られる任意の抽出物に関する。
【００１８】
用語「精油の揮発性化合物」は、精油若しくは他の天然物質から精製、又はその化学合成物、及びその誘導体及び異性体によって得られる任意の揮発性分子に関する
用語「食用クレイ」は、農産食品及び医薬分野において一般に使用される食用クレイの分子構造と同一又は同様の分子構造を有する任意の天然又は合成鉱物に関する。
【００１９】
用語「分散化されたクレイ」は、分散分子がクレイの層間（ｉｎｔｅｒｆｏｌｉａｒ  ｓｐａｃｅｓ）に挿入されることによってクレイの分子と相互作用するようになり、この分散が層間距離の増加によって表される、任意の状態に関する。
【００２０】
用語「抗微生物作用」は、細菌、真菌、寄生虫、又はウィルス性の微生物病原体における任意の阻害又は破壊的作用に関する。
【００２１】
用語「腸及び肝胆道の保護」は、腸の物理的及び生理的健常性を保持し、解毒作用を増大させるために肝機能を刺激することを可能にする任意の作用に関する。
【００２２】
用語「免疫賦活」は、生体の自然又は取得された防御力を強化することを可能にする任意の作用に関する。
【００２３】
用語「毒素の吸着」は、血流への吸収を阻止するために、腸で毒素と結合することができることに関する。
【００２４】
動物の飼育では、畜産学的、感染性、衛生的、衛生学的、免疫性、生理的、及び飼料の順序の多くのリスク因子に直面し、該リスク因子はこれらの因子のうち1つのみでは原因にはならない病態の発症を促す。この理由から、科学者らは任意の疾患の発症が多因子的現象であるという案に同意している（Ｓｊａａｋ  ｄｅ  Ｗｉｔ、Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｐｏｕｌｔｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｍｕｌｔｉｆａｃｔｏｒｉａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ、Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ（Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ）２００８年、ｐ．４９２-５０９）。
【００２５】
故に、疾患の蔓延を阻止し、そのことが引き起こす損害を抑えるために、各因子の影響を個別に研究し、因子のそれぞれに対する根治的又は予防的な療法を提供することは有効である。また多くの療法において、それぞれの療法の費用、用量の問題、そして畜産者の業務を煩雑にする他の多くの問題が起きる。
【００２６】
故に、規制により禁止されている化学療法における抗生物質及び抗寄生虫剤の使用の問題、並びに多数の療法が抱える問題を解決するため、本発明の目的は、チモール、クレゾール、カルバクロール、メントール、オイゲノール、シンナムアルデヒド、又はそれらを個別に若しくは混合して含有する任意の成分、及びその異性体、誘導体、混合物などの、複数の薬理的、抗微生物、免疫賦活、利胆、駆風作用を有する天然分子を含有する分子複合体を含む安定した組成物である。これらの揮発性分子は、スチブンサイト、ベントナイト、カオリナイト、スメクタイト、イライト、クロライト、モンモリロナイト、ラポナイト、バイデライト、ノントロナイト、サポナイト、ソーコナイト、ヘクトライト、ハロイサイト、バーミキュライト、若しくはセピオライト、又はその天然若しくは非天然の層間混合物（ｉｎｔｅｒｌａｙｅｒｅｄ  ｍｉｘｔｕｒｅｓ）などの、毒素吸着、腸保護、及び水和特性を有するクレイの層間に分散化されることによって、結合され安定化される。
【００２７】
特定の実施形態では、組成物は、チモール、クレゾール、カルバクロール、メントール、オイゲノール、シンナムアルデヒド、又はそれらを個別に若しくは混合して含有する任意の成分、並びにその異性体、誘導体、及び混合物から選択される殺菌性芳香族アルコールである揮発性抗微生物剤を含んでもよい。これらの薬剤は、スチブンサイト、ベントナイト、カオリナイト、スメクタイト、イライト、クロライト、モンモリロナイト、ラポナイト、バイデライト、ノントロナイト、サポナイト、ソーコナイト、ヘクトライト、ハロイサイト、バーミキュライト、若しくはセピオライト、又はその天然若しくは非天然の層間混合物から選択される食用クレイに分散化される。
【００２８】
揮発性抗微生物剤は、食用クレイに対して、０．００５〜０．３３の重量比率で組成物内に存在する。
【００２９】
組成物の製造方法は、
（ｉ）揮発性抗微生物剤を、抗微生物溶液を得るために、有機又は無機溶媒を含む溶液に添加するステップと、
（ｉｉ）そのようにして得られた抗微生物溶液を、揮発性抗微生物剤によって分散化された食用クレイを含有する分子複合体によって構成される均質且つ安定した組成物を得ることが可能な温度条件及び撹拌のもと、粉末状又はペレット状の食用クレイと混合するステップと、を含む。
【００３０】
特定の実施形態では、この製造方法は以下に詳細に記載される。
【００３１】
・揮発性抗微生物剤量を、抗微生物溶液と呼ばれる均質且つ透明の液体溶液を得るために、撹拌されて３０〜８０℃の範囲の温度まで加熱された、揮発性抗微生物剤量の１％〜２０％に相当する植物性又は鉱物性油量を含む溶液に徐々に添加する。
【００３２】
・抗微生物溶液量を、ふるいにかけることが可能な粉末を得るために、抗微生物溶液量の少なくとも３倍に相当する粉末状の食用クレイ量に混合することによって徐々に含有させる。
【００３３】
・得られたふるいにかけることが可能な粉末は、所望の粒度を取得するためにふるいによってキャリブレーションされる。
【００３４】
特定の実施形態では、揮発性抗微生物剤はチモール単独か、或いはクレゾール、オイゲノール、カルバクロール、シネオール、メントール、若しくはシンナムアルデヒド、又はそれらを個別に若しくは混合して含有する任意の精油などの他の１つ又は複数の揮発性抗微生物剤と混合されてもよい。食用クレイは、スチブンサイト若しくはベントナイト、又はそれらの混合物、又はそれらを含有する物質の混合物であってよい。
【００３５】
好ましい実施形態では、上記に詳細に記載された製剤は、動物に投与するために牛の飼料内に希釈されることが意図される。この希釈は、メトリックトンの飼料当り製剤を５０ｇからメトリックトンの飼料当り製剤を１０ｋｇの範囲でおこなわれる。
【００３６】
さらに好ましい実施形態では、飼料内に希釈される前の該製剤は、食用クレイに対して０．１〜０．３３の重量比率、好ましくは食用クレイに対して０．１５〜０．２の重量比率で揮発性抗微生物剤を含有してもよい。
【００３７】
本発明の１つの目的は、飼料に添加され経口で摂取される動物用飼料添加剤としての組成物の使用である。
【００３８】
あらゆる場合において、飼料添加剤としての組成物の使用は、物質が含有する特性に由来する多数の作用、即ち、
・病原性又は共生性の腸内細菌を減少させることが可能な揮発性殺菌剤の殺菌特性による成長促進作用、
・特に揮発性抗微生物剤の抗寄生虫作用による抗寄生虫、抗コクシジウム、及び抗ヒストモナス作用、
・マイコトキシン産生の要因である真菌を抑制する可能性のある揮発性抗微生物剤の抗真菌作用による抗真菌作用、
・クレイのキレート特性によるマイコトキシン吸着作用、
・揮発性抗微生物剤の薬理特性による利胆作用、
・揮発性抗微生物剤の薬理特性による免疫賦活作用、
・クレイの腸被覆特性と揮発性抗微生物剤の腸殺菌特性とによる腸保護作用、
を提供することが意図される。
【００３９】
あらゆる場合において、動物の身体における多数の好ましい作用を提供することが意図される飼料添加剤としての組成物の使用により、飼料の添加剤として該組成物を摂取する動物の一般的な健康の維持における陽性の作用と共に、腸、肝胆道、及び免疫の健常性の保持という結果がもたらされる。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
以下の実施例では、本発明の特定の態様を限定することなく表すことが意図される。
【００４１】
発明者は、一方で、種々のタイプの揮発性抗微生物剤及び種々のタイプのクレイで実験をおこなった。結果において、テストをおこなったクレイ、つまりスチブンサイト及びベントナイトの特徴的分子のＸ線回折ピークが、分散前のクレイと比較して、揮発性抗微生物剤によって分散化されたクレイにおける層間距離の増加を示す方向に移動することを示す可能性が提示された。これにより、本発明の方法、目的に従って混合されたときに、クレイにおける揮発性抗微生物剤が完全に安定した結合をすることが理由づけられ説明される。他方で、発明者は、インビトロ及びインビボの条件で、特に効果的な組成物の用量及び比率を有する組成物の効果をテストした。
【００４２】
［実施例１：Ｘ線回折テスト］
１０００ｇの最終重量の製剤を、温度６０℃で２０ｍｌの食用油を伴った本発明の方法の溶液に添加された１５０ｇのチモールで作製した。そこから得られた殺菌溶液を、モロッコ産ガスール８３０ｇ、モロッコ産ベントナイト８３０ｇ、又は５０％／５０％のガスール・ベントナイト混合物８３０ｇと混合した（製剤ａ）。
【００４３】
対照組成物を下記のように調製した。
【００４４】
製剤ｂ：いずれの添加剤も含有しない、同一の純クレイ
製剤ｃ：２０ｍｌの食用油のみを含有する、同一のクレイ
製剤ｄ：結晶化粉末としてのチモールのみを含有する、同一のクレイ
製剤ｅ：６０℃に加熱することによって液体化されたいずれの食用油も含有しないチモールを含有する、同一のクレイ
製剤ａ、ｂ及びｃは、この分析方法においてクレイを扱う際の通常の基準に沿ってＸ線回折テストをおこなった。
【００４５】
得られた結果は、純クレイ（製剤ｂ）及び食用油のみと混合されたクレイ（製剤ｃ）である対照と比較して、本発明の方法の製剤（製剤ａ）の場合に、驚くべき態様で、スペクトルにおけるベントナイト及びスチブンサイトの特定のピークの移動を示す（表１の結果）。また、結晶化粉末としてクレイと混合したチモールを含有する製剤ｄでは、得られた粉末は不均質であり、得られたＸ線回折スペクトルは利用できなかったことを該結果は示している。チモールを加熱により液体化し、植物性油を含有せずにクレイと混合した製剤ｅでは、チモールは再結晶し、硬質のかたまりを形成することが観察される。これにより、得られた混合物は不均質であり、本発明に詳述される条件に見合わない。
【００４６】
これは一方で、本発明において使用される製造方法は、クレイの層間においてチモールが最終的に分散する可能性を実際に提示し、クレイ内でチモールが安定し均質に分散し、クレイの層間距離が増加し、そのため疎水性とクレイが毒素を吸着する能力とが向上されることを示す。
【００４７】
他方で、これらの結果は、結晶化チモール又は過熱による液体化チモールを用いる明らかな方法によるチモールとクレイとの混合物が、本発明に望まれる結果をもたらさないということを示す。
【００４８】
表１はａ、ｂ及びｃの調製方法によるクレイの層間距離を示す。
【００４９】
【表１】
2016511226.tif 000002
【００５０】
［実施例２：インビボテスト］
２５羽の若いブロイラー及び１２羽の若いシチメンチョウの群に、メトリックトンの飼料当り１００ｇ、５００ｇ、１ｋｇ又は２ｋｇの量の本発明の製剤を含有する飼料を与えた。同様のサイズの対照群に、いずれの抗生物質又は抗寄生虫剤も含まない飼料を与えた。その他の同様のサイズの対照群では、ブロイラーに対して飼料メトリックトン当り２００ｇの量のフラボマイシンと飼料メトリックトン当り７０ｇの量のサリノマイシンを含む飼料、若いシチメンチョウに対して飼料メトリックトン当り１００ｇのモネンシンを与えた。５週間の処置の間に、細菌、酵母、真菌、原生動物の卵母細胞、特にニワトリ及びシチメンチョウのコクシジウム症と関連するアイメリア種（Ｅｉｍｅｒｉａ．ｓｐ）の数を評価するために、各群における各対象の糞のサンプルを顕微鏡及び適切な微生物学的分析によって分析した。５週の実験の終わりに対象は犠牲になり、鳥類の病理学における獣医学専門家によって検死がおこなわれた。検死の目的は腸における損傷スコアと肝臓、腎臓、肺、脾臓、及び腸の健常状態とを評価することである。
【００５１】
得られた結果は、いずれの抗生物質又は抗寄生虫剤も含まない飼料を摂取した対照群と比較して、メトリックトン当り１ｋｇ及びメトリックトン当り２ｋｇの用量で本発明の製剤を飼料から摂取した群において、細菌、酵母、真菌、卵母細胞の数が顕著に有意に低減されることを示す。飼料メトリックトン当り１００ｇ及び５００ｇの用量で本発明の製剤を飼料から摂取した群は、対照群と比較していずれの有意な差もなかった。飼料から抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した群は、対照と比較して認識可能だが有意ではない低減が見られた。しかしながら、飼料メトリックトン当り１ｋｇ及び２ｋｇの用量で本発明の製剤を摂取した群における細菌、酵母、真菌、卵母細胞の数は、飼料で抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した群において記録された細菌、酵母、真菌、卵母細胞の数より有意に少ない。これらの結果は、ニワトリ及びシチメンチョウの飼料の添加剤として使用された本発明の製剤が、本テストにおいて用いられた抗生物質及び抗寄生虫剤よりも優位に優れた抗寄生虫（抗コクシジウム）剤及び抗真菌剤として、成長促進（腸内細菌の減少）などの複数の作用を有するということを示す。また検死の結果において、腸損傷、腎臓、肺、脾臓及び肝臓うっ血スコアは、いずれの抗生物質又は抗寄生虫剤も含まない飼料又は抗生物質及び抗寄生虫剤を含む飼料を摂取した群と比較して、本発明の製剤を含む飼料を摂取した群において有意に低い。さらに、これらの結果は、ニワトリ及びシチメンチョウの飼料の添加剤として使用された本発明の製剤が、腸の健常性保護作用、肝胆道保護作用、肺及び腎臓の浄化作用、並びに脾臓保護作用を有することを示す。これらの結果は、本発明の製剤が多因子的疾患であるニワトリ及びシチメンチョウの病的状態に抗する複数の作用を有する溶液であることの確証になる。
【００５２】
生後１日の２５羽のヒヨコの群に、
１群には抗生物質も抗寄生虫剤も含有しない白色「ブロイラー」飼料、
２群には飼料キログラム当り２００ｍｇの量の成長因子抗生物質「フラボマイシン」及びキログラム当り７０ｍｇの量の抗寄生虫剤「サリノマイシン」を含有する飼料、
３群には飼料メトリックトン当り１００ｍｇの量で飼料に本発明の製剤を含有する飼料、
４群には飼料メトリックトン当り５００ｍｇの量で飼料に本発明の製剤を含有する飼料、
５群には飼料メトリックトン当り１ｋｇの量で飼料に本発明の製剤を含有する飼料、
６群には飼料メトリックトン当り２ｋｇの量で飼料に本発明の製剤を含有する飼料、をそれぞれ平均５週間与えた。
【００５３】
表２はインビボテストにおけるブロイラーの畜産学及び微生物学的結果を示す。
【００５４】
【表２】
2016511226.tif 000003
【００５５】
シチメンチョウに対するインビボテストにおいて、ニワトリブロイラーのインビボテストで得られた結果と同様の結果を得た。
【００５６】
［実施例３：フィールドテスト］
ニワトリブロイラーを飼育する農場及びシチメンチョウブロイラーを飼育する農場でフィールドテストがおこなわれた。これらのテストでは、１３，５００のヒヨコの２つの群のそれぞれが、テストの全期間にわたって（ニワトリでは４０日、シチメンチョウでは１３週）本発明の製剤を飼料メトリックトン当り２ｋｇの用量で摂取した。他の２つの１３，５００のヒヨコ群のそれぞれは本発明の製剤を飼料メトリックトン当り１ｋｇの用量で摂取し、その他の２つの１３，５００のヒヨコ群のそれぞれは、ニワトリでは飼料メトリックトン当たり２００ｇの抗生物質フラボマイシンと飼料メトリックトン当たり７０ｇの抗寄生虫剤サリノマイシンとを含む飼料を摂取し、シチメンチョウではモネンシンを含む飼料を摂取した。テストの最後に、畜産学的評価及び損傷スコアがそれぞれの群において測定された。
【００５７】
結果を以下に示す。
【００５８】
死亡率：飼育周期間のニワトリ及びシチメンチョウの死亡率は、飼料メトリックトン当り１ｋｇ又は２ｋｇの本発明の製剤を摂取した群において、ニワトリでは２．９％、シチメンチョウでは２．５％であった。飼料において抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した群では、死亡率がシチメンチョウでは５．２％、ニワトリでは５．９％であった。
【００５９】
平均体重：飼料メトリックトン当り１ｋｇか２ｋｇの本発明の製剤を摂取した両群の平均体重は、ニワトリでは対象あたり２．３ｋｇ、シチメンチョウでは１２．８ｋｇであり、抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した２つの群のうち１つではニワトリでは２．１３５ｋｇ、シチメンチョウでは１１．９ｋｇであった。
【００６０】
消費指数：飼料メトリックトン当り２ｋｇの本発明の製剤を摂取した群では、１．６８であり、飼料メトリックトン当り１ｋｇの本発明の製剤を摂取した群では、１．８２であった。抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した２つの群のうち１つでは約１.９８であった。
【００６１】
使用されたワクチンに関連する抗体の力価：ニューカッスル病のウィルスの抗体と比較した赤血球凝集の阻害力価：飼料メトリックトン当り２ｋｇ及び１ｋｇの量の本発明の製剤を摂取した群では、それぞれ６４、６４、６４、３２、抗生物質及び抗コクシジウム剤を摂取した２つの群では１６及び１６であった。
【００６２】
腸の損傷スコア：腸の損傷スコアは、２ｋｇ及び１ｋｇの量の本発明の製剤を摂取した群で最も低く（１．２２）、一方で、抗生物質及び抗コクシジウム剤を摂取した群では、スコアは約２．７４及び３．１３であった。
【００６３】
臓器の健常性スコア：臓器（肝臓、脾臓、肺、筋肉及び骨）の態様は飼料メトリックトン当り２ｋｇ及び１ｋｇの量の本発明の製剤を摂取した群で明らかにより健康的であり（いずれのうっ血の兆候も示さない）、一方で、裸眼で明らかなうっ血の兆候が、抗生物質及び抗寄生虫剤を摂取した両群で検死されたうちの多数において確認された。
【００６４】
これらの結果は、本発明の製剤が、意図された複数の作用を現場での集約的飼育条件下でも提供することを大いに示す。
【００６５】
［実施例４：飼料及びトウモロコシにおけるマイコトキシンの抑止及び吸着］
トウモロコシ及び配合飼料のサンプルを、飼料メトリックトン当り２ｋｇ、４ｋｇ及び６ｋｇの量の本発明の製剤の種々の量で処理した。これらのサンプルを密封して梱包し、２７．５℃の温度でインキュベートした。４週間後に、５０ｇの一定分量（ａｌｉｑｕｏｔ）をマイコトキシンの量の測定のために取得した。結果は、本発明の製剤で処理されたトウモロコシのサンプルが対照のサンプルよりも優位に低いレベルのＤＯＮ（デオキシニバレノール）、ＺＯＮ（ゼアラレノン）、及びオクラトキシンを含有することを示す。このマイコトキシンにおける抑止及び吸着作用は、本発明の製剤が使用される用量に従って増強される。同様の結果が、及びマイコトキシン、ゼアラレノン（ＺＯＮ）、及びアフラトキシンに対して、未処理のサンプルに対する本発明の製剤によって処理された配合飼料のサンプルについて得られた。
【００６６】
また、これら結果は、本発明の製剤が、疾患の蔓延をもたらし、急性の場合に動物における致死的な中毒を引き起こす重要なリスク因子であるマイコトキシンから飼料及びトウモロコシを保護することが可能であることを示す。
【００６７】
表３は、未処理の対照と比較した、本発明の製剤で処理されたトウモロコシにおけるマイコトキシンの抑制率を示す。
【００６８】
【表３】
2016511226.tif 000004
【００６９】
表４は、未処理の対照に対する、処理済み配合飼料におけるマイコトキシンの抑制率を示す。
【００７０】
【表４】
2016511226.tif 000005
【国際調査報告】
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