(57)【要約】  本発明は、インビボイメージングに影響を及ぼす不純物を特定して抑制した改良18Ｆ標識アルデヒド組成物に関する。また、改良組成物を用いた放射性フッ素化生体ターゲティング分子の調製方法も、放射性医薬組成物と併せて提供される。また、本発明には、かかる放射性医薬組成物を用いたイメージング及び／又は診断方法も包含される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）の18Ｆ標識アルデヒド及び式（ＩＩ）の18Ｆ標識シアン化ビニルを含む18Ｆ標識アルデヒド組成物であって、
（ｉ）Ｉ：ＩＩのモル比が１０：１以上であり、
（ｉｉ）組成物からアセトニトリルが除外されている、
18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【化１】
2016506375.tif 000027
式中、Ｘ1は式（Ｉ）及び式（ＩＩ）で同一であって、Ｃ4-16二価有機基である。
【請求項２】
18Ｆ標識アルデヒドが以下の式（ＩＡ）の18Ｆ標識アルデヒドであり、18Ｆ標識シアン化ビニルが式（ＩＩＡ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである、請求項１記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【化２】
2016506375.tif 000028
式中、
Ｙは独立にＣ又はＮであり、
Ｌ1及びＬ2は独立に−（ＣＨ2）x−、−Ｏ−（ＣＨ2）y−又は−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−から選択されるリンカー基であり、
ｘは独立に０〜３の整数であり、
ｙは独立に２〜４の整数である。
【請求項３】
18Ｆ標識アルデヒドが以下の式（ＩＢ）の18Ｆ標識アルデヒドであり、18Ｆ標識シアン化ビニルが以下の式（ＩＩＢ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである、請求項２記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物
【化３】
2016506375.tif 000029
式中、
Ｌ3は−（ＣＨ2）x−又は−Ｏ−（ＣＨ2）y−であり、ｘ及びｙは、請求項２で定義した通りである。
【請求項４】
18Ｆ標識アルデヒドが以下の式（ＩＣ）の18Ｆ標識アルデヒドであり、18Ｆ標識シアン化ビニルが以下の式（ＩＩＣ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである、請求項３記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【化４】
2016506375.tif 000030
【請求項５】
18Ｆ標識アルデヒドが以下の式（ＩＤ））の18Ｆ標識アルデヒドであり、18Ｆ標識シアン化ビニルが以下の式（ＩＩＤ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである、請求項２記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【化５】
2016506375.tif 000031
式中、ｔは１〜３の整数である。
【請求項６】
水混和性有機溶媒又はその水性混液中で提供される、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【請求項７】
18Ｆ標識アルデヒド組成物を生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含む放射性医薬組成物である、請求項６記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物。
【請求項８】
生体ターゲティング分子を18Ｆ−放射性標識する方法であって、
（ｉ）請求項１記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物を用意する段階と、
（ｉｉ）式ＩＩＩの官能化生体ターゲティング分子を用意する段階と、
Ｙ1−［ＢＴＭ］        （ＩＩＩ）
（式中、Ｙ1は−ＮＨ2又は−Ｏ−ＮＨ2である。）
（ｉｉｉ）段階（ｉ）の組成物と段階（ｉｉ）のＹ1−［ＢＴＭ］を反応させて、以下に示す式ＩＶの18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子を得る段階と
を含む、方法。
【化６】
2016506375.tif 000032
式中、Ｙ2は存在しないか或いは−Ｏ−である。
【請求項９】
18Ｆ標識アルデヒド組成物が、請求項２乃至請求項７のいずれか１項で定義した通りである、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
請求項８又は請求項９記載の方法であって、ＢＴＭが、１個のアミノ酸、３〜１００残基ペプチド、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト、酵素阻害剤又は受容体結合化合物を含む、方法。
【請求項１１】
ＢＴＭがＲＧＤペプチドを含む、請求項８乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
官能化生体ターゲティング分子が、次の式ＩＩＩＡの官能化生体ターゲティング分子である、請求項１１記載の方法。
【化７】
2016506375.tif 000033
【請求項１３】
18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子が次の式（ＩＶＡ）の18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子である、請求項８乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【化８】
2016506375.tif 000034
【請求項１４】
自動合成装置を用いて実施される、請求項８乃至請求項１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子が放射性医薬組成物として得られるように無菌的に実施される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
請求項１乃至請求項５のいずれか１項で定義した式（ＩＩ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＣ）又は（ＩＩＤ）の18Ｆ標識シアン化ビニル。
【請求項１７】
放射性医薬組成物であって、
（ｉ）以下の式ＩＶの18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子と、
（ｉｉ）以下の式（ＩＩ）の18Ｆ標識シアン化ビニルと
を、生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含んでいて、ＩＶ：ＩＩのモル比が１０：１以上である、放射性医薬組成物。
【化９】
2016506375.tif 000035
式中、Ｙ2及びＢＴＭは請求項８で定義した通りであり、Ｘ1は請求項１で定義した通りである。
【請求項１８】
Ｘ1が請求項２乃至請求項５のいずれか１項で定義した通りである、請求項１７記載の放射性医薬組成物。
【請求項１９】
ＢＴＭが請求項１０乃至請求項１３のいずれか１項で定義した通りである、請求項１７又は請求項１８記載の放射性医薬組成物。
【請求項２０】
ヒト又は動物の身体のイメージング方法であって、請求項１７乃至請求項１９のいずれか１項記載の放射性医薬組成物が分布した身体の少なくとも一部分のＰＥＴ画像を生成することを含む方法。
【請求項２１】
薬剤によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニタリングするために繰り返し実施される請求項２０記載の方法であって、前記イメージングが、薬剤による治療の前後、及び任意には薬剤による治療中に実施される、方法。
【請求項２２】
組成物が身体に予め投与されている、請求項２０又は請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
ヒト又は動物の身体の診断方法であって、請求項２０乃至請求項２２のいずれか１項記載のイメージング方法を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インビボイメージングに影響を及ぼす不純物を特定して抑制した改良18Ｆ標識アルデヒド組成物に関する。また、改良組成物を用いた放射性フッ素化生体ターゲティング分子の調製方法も、放射性医薬組成物と併せて提供される。また、本発明には、かかる放射性医薬組成物を用いたイメージング及び／又は診断方法も包含される。
【背景技術】
【０００２】
国際公開第２００４／０８０４９２号には、以下に示す式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物との反応によってそれぞれ以下の式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含むベクターの放射性フッ素化法が開示されている。
【０００３】
【化１】
2016506375.tif 000002
式中、
Ｒ１は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することのできる官能基（例えばジオール又はＮ末端セリン残基）であり、
Ｒ２は、第一アミン、第二アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノオキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド及びチオセミカルバジドから選択される基であって、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノオキシ基であり、
Ｒ３は、第一アミン、第二アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノオキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドから選択される基であって、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノオキシ基であり、
Ｒ４はアルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することのできる官能基（例えばジオール又はＮ末端セリン残基）である。
【０００４】
【化２】
2016506375.tif 000003
式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−であって、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）のリンカー基は以下のものから選択される。
【０００５】
【化３】
2016506375.tif 000004
式中、ｎは０〜２０の整数であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｐは０又は１の整数であり、ＺはＯ又はＳである。
【０００６】
国際公開第２００６／０３０２９１号には、以下に示す式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応によって以下に示す式（ＩＩＩ）の化合物を得ることを含む、放射性フッ素化法が開示されている。
【０００７】
【化４】
2016506375.tif 000005
【０００８】
【化５】
2016506375.tif 000006
式中、
ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは０〜１０の整数であり、
Ｙは水素、Ｃ1-6アルキル又はフェニルである。
【０００９】
【化６】
2016506375.tif 000007
ｍ、ｎ及びＹは、式（ＩＩ）の化合物について定義した通りであり、ベクターは、式（Ｉ）の化合物について定義した通りである。
【００１０】
Ｇｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１９（４），９５１−９５７（２００８）］には、18Ｆ−フルオロベンズアルデヒドを始めとする18Ｆ標識アルデヒドの合成、並びにそれらとアミノオキシ官能化環状ＲＧＤペプチドとの結合について記載されている。
【００１１】
Ｂａｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，５２（３），４２４−４３０（２０１１）］には、［18Ｆ］−フルシクラチドによる抗血管新生療法のモニタリングについて開示されている。
【００１２】
【化７】
2016506375.tif 000008
国際公開第２０１２／０８９５９４号には、放射性フッ素化反応で用いるための18Ｆ標識フッ化物イオン（18Ｆ-）の調製方法であって、18Ｆ標識フッ化物イオンをイオン交換樹脂から溶出させるための改良溶出剤を用いる方法が開示されている。その方法は、
（ｉ）18Ｆ-水溶液をイオン交換カラムで捕捉し、
（ｉｉ）18Ｆ-が吸着されたイオン交換カラムに溶出液を流して18Ｆ-溶出液を得る
ことを含んでおり、
溶出液は、好適な溶媒中のカチオン性対イオンを含んでいるが、溶出液がアセトニトリルを含まないことを条件とする。
【００１３】
国際公開第２０１２／０８９５９４号には、溶出液がアセトニトリルを含んでいると、アセトニトリルが経時的に加水分解されて、アセトアミド及び酢酸アンモニウムを形成し、溶出18Ｆ-を後で18Ｆ放射性標識反応に用いる際に、これらの不純物が放射化学純度の問題を引き起こしかねないと教示されている。
【００１４】
しかし、本発明者らは、18Ｆ標識アルデヒド（例えば18Ｆ−フルオロベンズアルデヒド（ＦＢＡ））と官能化ペプチドとの結合が、放射化学純度及び収率の両面で制限を生じるという予想外の知見を得た。そこで、生体ターゲティング部分を18Ｆ標識するための代替法が依然として必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】国際公開第２０１２／０７６６９７号
【発明の概要】
【００１６】
本発明は、改良18Ｆ標識アルデヒド組成物、並びにその生体ターゲティング部分（ＢＴＭ）の放射性フッ素化での用途を提供する。18Ｆ標識アルデヒドとアミノオキシ−もしくはアミン−官能化ＢＴＭとの結合で得られる改良放射性医薬組成物も提供される。
【００１７】
本発明は、かかるアルデヒド中に存在する様々な化学種の詳細な分析、並びにそれらが如何にして放射性標識ＢＴＭ生成物中に持ち込まれるかについての知見、さらには不純物種を抑制するにはどうするのが最良かについての知見に基づくものである。シアノビニル化合物は、先行技術では認識されていなかったが、アセトニトリルが痕跡量でも存在していると生成するおそれがある。放射化学純度及び収率が高くなるほど、ロバストな臨床用途の製造が促進されるとともに、患者に対する不要な放射線量が抑制される。
【００１８】
さらに、本発明の改良放射性医薬組成物は、調製時間を短縮することができ、そのため使用前の調製及び精製段階での18Ｆ（半減期１０９分）放射能濃度の損失が最小限となる。本発明の組成物は、市販の自動合成装置での自動化に適した方法を用いて得ることができる。これは、先行技術のＨＰＬＣ法（このような自動化はできない）に勝る利点である。自動化は、再現性の向上、並びにオペレータに対する放射線量の低減をもたらす。
【００１９】
さらに、生成物の放射化学的収率及び純度の向上は、同量の放射性生成物を得るために必要な官能化ＢＴＭの使用量が減ることを意味する。非標識ＢＴＭは、インビボで同じ生物学的部位に対して競合するので、官能化ＢＴＭの存在量を低下させることができれば放射性標識生成物の有効性を保つのに役立つ。加えて、ＢＴＭは、例えば高価で入手に時間のかかる複雑なポリペプチド又はタンパク質であることもあるので、時間／材料の効率の点でも重要である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明者らは、18Ｆ−フルオロベンズアルデヒド（ＦＢＡ）の調製に際して、痕跡量のアセトニトリルが存在すると、従前認識されていない問題が起こることを見出した（スキーム１）。
【００２１】
【化８】
2016506375.tif 000009
アセトニトリルは、18Ｆ−ＦＢＡ（目的生成物）及びＴＭＡＢ（前駆体）のいずれとも反応するので、ＴＭＡＢが消尽しても、シアノビニル生成物（１）は生成し続ける。ＦＢＡはアセトニトリルの存在下で生成するので、ＴＭＡＢの放射性フッ素化の速度定数は、ＴＭＡＢからのシアノビニル形成の速度定数よりも高いと考えられる。ＦＢＡの生成速度は、フッ化物の消費（つまりフッ化物濃度の低下）に伴って遅くなる。その逆が、ＦＢＡからの遅いシアノビニル生成であり、ＦＢＡ濃度の増加に伴って速度は増加する。そこで、ある時点でＦＢＡとアセトニトリルとの反応によるシアノビニル生成速度は、フッ素化の速度よりも高くなる。残念ながら、フッ素化速度を増大させる条件もシアノビニル生成に有利であると思われる。シアノビニル生成物（１）の生成が中間体（２）を介しても起こることは、アセトニトリルの悪影響を増大させる。その結果、アセトニトリルの存在に起因して18Ｆ−ＦＢＡの収率が制限され、本発明者らは収率が最大でも約６０％に制限されることを見出した。
【００２２】
さらに複雑な問題は、反応混合物中に存在するＤＭＡＢ（４−ジメチルアミノベンズアルデヒドのような他のベンズアルデヒド種もアセトニトリルと反応してさらにシアノビニル不純物を生じることである。
【００２３】
ＴＭＡＢ放射性フッ素化反応の開始時の19Ｆ−フッ化物含有量（全フッ化物含有量に相当）は１μｇ未満であり、通例０．１〜０．５μｇである。従って、１モル当量のフッ化物に達するには、わずか２μｇ以下のアセトニトリルが存在すればよい。
【００２４】
本発明者らは、18Ｆ標識アルデヒド及びアセトニトリルからシアノビニル付加物が、特に塩基性条件及び室温を超える温度（約５０〜７０℃）で容易に生成することを見出した。18Ｆ標識アルデヒドでは、放射合成及びその後の結合反応のいずれにおいても、このような反応条件が必要とされる。そのため、18Ｆ標識アルデヒドが痕跡量であってもアセトニトリルに触れると、こうしたシアノビニル不純物が生成しかねない。問題は、かかる反応条件が、放射合成及び結合反応の両方で充分な収率を達成するのにまさに必要な反応条件であることである。
【００２５】
上述の問題に対処すべく、第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の18Ｆ標識アルデヒド及び式（ＩＩ）の18Ｆ標識シアン化ビニルを含む18Ｆ標識アルデヒド組成物であって、
（ｉ）Ｉ：ＩＩのモル比が１０：１以上であり、
（ｉｉ）組成物からアセトニトリルが除外されている、
18Ｆ標識アルデヒド組成物を提供する。
【００２６】
【化９】
2016506375.tif 000010
式中、Ｘ1は式（Ｉ）及び式（ＩＩ）で同一であって、Ｃ4-16二価有機基である。
【００２７】
「組成物」という用語は、その通常の意味を有し、式（Ｉ）の放射性フッ素化アルデヒドと式（ＩＩ）の18Ｆ標識シアン化ビニルの混合物をいう。本組成物は、好適には溶液中で存在する。
【００２８】
式ＩＩ、並びに式ＩＩＡ〜ＩＩＤにおいて、波線で示す結合は、Ｃ＝Ｃ二重結合の立体化学が未定であることを示し、シアノ基がＸ1に対してシスであるか或いはトランスであるかに応じて、いずれかのジアステレオマー（Ｅ又はＺ）が存在し得る。本発明は、かかる異性体の混合物、並びにかかるジアステレオマーの一方が濃縮された混合物、並びに純粋なジアステレオマーを包含する。
【００２９】
「18Ｆ標識」という用語は、ＰＥＴ放射性トレーサの分野における通常の意味を有し、フッ素置換基が、通常の同位体存在比に比べて放射性同位体18Ｆのレベルが上昇又は濃縮されていることを意味する。かかる上昇は、通例、放射線量及び放射能濃度が共にインビボイメージングに適したものである。
【００３０】
「Ｃ4-16二価有機基」という用語は、置換又は非置換有機基を意味し、アリーレン環、ヘテロアリーレン環、アルキレン鎖の１以上（又はその組合せ）、及び任意にはＯ、Ｎ及びＳから独立に選択される１〜５個のヘテロ原子を含んでいてもよい。２個以上のヘテロ原子が導入されている場合、二価有機基からは、ヘテロ原子−ヘテロ原子の直接結合は排除される。好ましくは、二価有機基は、１個以上のアリール又はヘテロアリール環、さらに好ましくはかかる環を１個含む。
【００３１】
「アセトニトリルが除外されている」という用語は、組成物が、特に使用される溶媒、放射性フッ素化アルデヒドのインサイツでの調製に使用される反応体／前駆体のいずれも、アセトニトリルを含んでいないことを意味する。［18Ｆ］−フッ化物の乾燥時に、痕跡量のアセトニトリルを除去するため乾燥時間を延ばし、真空度を高めることが特に重要である。さらに、反応体／前駆体で実施された精製及び／又はクロマトグラフィーの結果、残留溶媒として存在する可能性のある痕跡量のアセトニトリルを除去するための特別な段階が好適である。アセトニトリルが放射性フッ素化アルデヒドと反応して式ＩＩのシアン化ビニル化合物を生じる可能性があることが今回本発明者らによって判明したからである。
【００３２】
「含む」又は「含んでいる」という用語は、本願を通してそれらの通常の意味を有し、組成物が、記載された成分を含んでいなければならないが、その他の化合物又は化学種が存在していてもよいことを意味する。従って、この用語の部分集合として、組成物が記載された成分を含んでいて、その他の化合物又は化学種が存在しないことを意味する「から本質的になる」が包含される。
【００３３】
好ましい実施形態
第１の態様では、Ｉ：ＩＩのモル比は、好ましくは２０：１以上、さらに好ましくは３０：１以上、最も好ましくは１００：１以上である。
【００３４】
第１の態様の18Ｆ標識アルデヒド組成物は、好ましくは、18Ｆ標識アルデヒドが式（ＩＡ）の18Ｆ標識アルデヒドであって、18Ｆ標識シアン化ビニルが式（ＩＩＡ）の18Ｆ標識シアン化ビニルであるように選択される。
【００３５】
【化１０】
2016506375.tif 000011
式中、
Ｙは独立にＣ又はＮであり、
Ｌ1及びＬ2は独立に−（ＣＨ2）x−、−Ｏ−（ＣＨ2）y−又は−（ＯＣＨ2ＣＨ2）y−から選択されるリンカー基であり、
ｘは独立に０〜３の整数であり、
ｙは独立に２〜４の整数である。
【００３６】
式ＩＡ及びＩＩＡにおいて、リンカー基Ｌ1及びＬ2は、アリール環の２つの異なる位置に位置する。ＹがＮである場合、Ｌ1及びＬ2は、Ｙ以外の２つの異なる位置に位置する。
【００３７】
式ＩＡ及びＩＩＡにおいて、Ｌ2は好ましくはｘ＝０である−（ＣＨ2）x−であり、ＩＡのアルデヒド基がアリール環に直接結合している。
【００３８】
式ＩＡ及びＩＩＡにおいて、Ｙは好ましくはＣである。かかる好ましい実施形態は、18Ｆ標識アルデヒドが式（ＩＢ）の18Ｆ標識アルデヒドであって、18Ｆ標識シアン化ビニルが式（ＩＩＢ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである場合である。
【００３９】
【化１１】
2016506375.tif 000012
式中、Ｌ3は−（ＣＨ2）x−又は−Ｏ−（ＣＨ2）y−であり、ｘ及びｙはＩＡ及びＩＩＡで定義した通りである。
【００４０】
さらに好ましい実施形態は、18Ｆ標識アルデヒドが式（ＩＣ）の18Ｆ標識アルデヒドであって、18Ｆ標識シアン化ビニルが式（ＩＩＣ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである場合である。
【００４１】
【化１２】
2016506375.tif 000013
式ＩＡ及びＩＩＡにおいて、ＹがＮである場合、かかる好ましい実施形態は、18Ｆ標識アルデヒドが式（ＩＤ）の18Ｆ標識アルデヒドであって、18Ｆ標識シアン化ビニルが式（ＩＩＤ）の18Ｆ標識シアン化ビニルである場合である。
【００４２】
【化１３】
2016506375.tif 000014
式中、ｔは、１〜３の整数である。
【００４３】
第１の態様の18Ｆ標識アルデヒド組成物は、好ましくは水混和性有機溶媒又はその水性混液中の溶液で提供される。「水混和性有機溶媒」は、アセトニトリルは排除され、好ましくは８０℃未満、さらに好ましくは７０℃未満の沸点を有する溶媒から選択される。かかる好適な溶媒は、式（Ｉ）のアルデヒドのアルデヒド基との反応性が最小限となるように設計され、具体例として、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン又はそれらの水性混液が挙げられる。さらに好ましくは、溶媒は、メタノール、エタノール又はそれらの水性混液である。最も好ましくは、溶媒は、エタノール又は水性エタノールである。
【００４４】
好ましい実施形態では、第１の態様の18Ｆ標識アルデヒド組成物は、18Ｆ標識アルデヒド組成物を生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含む放射性医薬組成物として提供される。
【００４５】
「哺乳類への投与に適した形態」という記載は、無菌でパイロジェンフリーであり、毒性又は有害作用を生じる化合物を含まず、生体適合性ｐＨ（約ｐＨ４．０〜１０．５）で製剤化される組成物を意味する。かかる組成物は、インビボで塞栓を生じる危険性のある粒状物質を含んでおらず、しかも体液（例えば、血液）と接触しても沈殿を生じないように製剤化される。かかる組成物は、生物学的に適合性の賦形剤のみを含み、好ましくは等張性である。
【００４６】
「生体適合性担体」とは、イメージング剤を懸濁又は好ましくは溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるようなものである。
生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、パイロジェンフリーの注射用滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性となるように調整するのに都合がよい）、生体適合性緩衝剤を含む水性緩衝液（例えばリン酸緩衝液）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。好ましくは、生体適合性担体はパイロジェンフリーの注射用水又は等張食塩水又はリン酸緩衝液である。
【００４７】
放射性医薬組成物は、無菌健全性及び／又は放射能安全性、さらに適宜ヘッドスペースの不活性ガス（例えば、窒素又はアルゴン）を維持できるとともに、注射器又はカニューレでの溶液の添加及び吸引も行うことのできる密封容器からなる適当なバイアル又は容器に入れた状態で供給される。かかる容器として好ましいのは、気密蓋をオーバーシール（通例アルミニウム製）と共にクリンプオンしたセプタムシールバイアルである。蓋は、無菌健全性を維持したまま皮下注射針で１回又は複数回穿刺するのに適したもの（例えば、クリンプオン式セプタムシール蓋）である。かかる容器は、所望に応じて（例えばヘッドスペースガスの交換又は溶液の脱気のため）真空に蓋が耐えるとともに、酸素や水蒸気のような外部雰囲気ガスを侵入させずに減圧のような圧力変化に耐えるという追加の利点がある。反応容器は好適にはこのような容器及びその好ましい実施形態から選択される。
【００４８】
好ましい多用量用容器は、患者の複数回分の用量を収容した単一バルクバイアルからなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードの注射器に吸引することができる。プレフィルド型注射器は患者の１回分の用量つまり「単位用量」を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨てその他臨床用に適した注射器である。本発明の医薬組成物は、好ましくは、一人の患者に適した用量を有し、上述の好適な注射器又は容器に入れて提供される。
【００４９】
医薬組成物は、抗菌保存剤、ｐＨ調整剤、充填剤、放射線防護剤、可溶化剤又はモル浸透圧濃度調整剤のような追加の添加剤を適宜含んでいてもよい。「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生じる含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元反応のような分解反応を抑制する化合物を意味する。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（つまり４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（つまり２，５−ジヒドロキシ安息香酸）及びそれらの生体適合性陽イオンとの塩から選択される。「生体適合性陽イオン」（Ｂc）という用語は、イオン化した負荷電基と塩を形成する正荷電の対イオンを意味するが、正荷電対イオンも無毒性であって哺乳類の身体（特に人体）への投与に適している。好適な生体適合性陽イオンの具体例としては、アルカリ金属であるナトリウム及びカリウム、アルカリ土類金属であるカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。
【００５０】
「可溶化剤」という用語は、組成物に存在する添加剤であって、溶媒中での溶解度を高める添加剤を意味する。かかる溶媒として好ましいのは水性媒質であり、従って可溶化剤は好ましくは水中での溶解度を高める。かかる可溶化剤として好適なものとしては、Ｃ1-4アルコール、グリセリン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノオレエート、ポリソルベート、ポリ（オキシエチレン）ポリ（オキシプロピレン）ポリ（オキシエチレン）ブロック共重合体（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（商標））、シクロデキストリン（例えば、α−、β−又はγ−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン或いはヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン）及びレシチンが挙げられる。
【００５１】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、使用する用量に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、医薬組成物におけるこのような微生物の増殖を阻止することである。ただし、抗菌保存剤は、投与に先立って組成物の製造に使用されるキットの１種以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。好適な抗菌保存剤には、パラベン類（即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはこれらの混合物）、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールがある。好ましい抗菌保存剤はパラベン類である。
【００５２】
「ｐＨ調整剤」という用語は、組成物のｐＨがヒト又は哺乳類への投与のための許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に確実に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物混合物を意味する。好適なかかるｐＨ調整剤には、トリシン、リン酸塩、クエン酸塩又はＴＲＩＳ［即ち、トリス（ヒドロキシルメチル）アミノメタン］のような薬学的に許容される緩衝剤、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基がある。組成物をキットの形態で使用する場合には、キットのユーザーが多段操作の一部としてｐＨを調整できるように、ｐＨ調整剤を適宜別個のバイアル又は容器に入れて供給してもよい。
【００５３】
「充填剤」という用語は、製造及び凍結乾燥時における材料の取扱いを容易にすることができる薬学的に許容される増量剤を意味する。好適な充填剤には、塩化ナトリウムのような無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースのような水溶性の糖又は糖アルコールがある。
【００５４】
放射性医薬組成物は、所望の滅菌非発熱性生成物が得られるような無菌製造（クリーンルーム）条件下で調製し得る。重要な構成要素、特に関連する試薬並びにイメージング剤と接触する装置の部材（例えばバイアル）は無菌であるのが好ましい。構成要素及び試薬は、無菌濾過、例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は化学的処理（エチレンオキサイド）を用いた最終滅菌を始めとする当技術分野で公知の方法で滅菌することができる。一部の構成要素を予め滅菌しておけば、最小限の操作を実施すればよいので好ましい。ただし、予防策として、医薬品組成物の調製の最終段階として少なくとも無菌濾過段階を含めておくのが好ましい。
【００５５】
第１の態様18Ｆ標識アルデヒド組成物は、以下の（ｉ）〜（ｖ）の１以上によって得ることができる。
（ｉ）アルデヒド放射合成で用いられる18Ｆ−フッ化物に関して、アセトニトリルを除去するため18Ｆ−フッ化物イオンを乾燥する段階を、厳密に及び／又は複数回及び／又は高真空下で実施して、マイクログラム量のアセトニトリルであっても確実に除去すること。
（ｉｉ）18Ｆ標識アルデヒドが調製される、放射性フッ素化反応における１種以上の溶媒として、高純度でアセトニトリル濃度が極めて低いものを使用すること。
（ｉｉｉ）調製済みの18Ｆ標識アルデヒドを、アセトニトリルを除外した好適な水混和性有機溶媒（上記）で製剤化すること。
（ｖ）シアノビニル種が存在する場合にそれを分離するための、アセトニトリル以外の溶媒を用いるＳＰＥ（固相抽出）のようなクロマトグラフィー技術。
【００５６】
第２の態様では、本発明は、生体ターゲティング分子を18Ｆ−放射性標識する方法であって、
（ｉ）請求項１記載の18Ｆ標識アルデヒド組成物を用意する段階と、
（ｉｉ）次の式ＩＩＩの官能化生体ターゲティング分子を用意する段階と、
Ｙ1−［ＢＴＭ］        （ＩＩＩ）
（式中、Ｙ1は−ＮＨ2又は−Ｏ−ＮＨ2である。）
（ｉｉｉ）段階（ｉ）の組成物と段階（ｉｉ）のＹ1−［ＢＴＭ］とを反応させて以下の式ＩＶの18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子を得る段階と
を含む方法を提供する。
【００５７】
【化１４】
2016506375.tif 000015
式中、Ｙ2は存在しないか或いは−Ｏ−である。
【００５８】
第２の態様における18Ｆ標識アルデヒド組成物の好ましい実施形態は、第１の態様（上記）で定義した通りである。
【００５９】
「生体ターゲティング部分」（ＢＴＭ）という用語は、投与後に、インビボで哺乳類の身体の特定の部位に選択的に取り込まれるか或いは局在化する化合物を意味する。かかる部位は、例えば、特定の病態に関係していることもあるし、臓器又は代謝過程がいかに機能しているかの指標となることもある。
【００６０】
「官能化生体ターゲティング分子」という用語は、ＢＴＭが、既にアミン又はアミノオキシ官能基を含んでいるか、或いはアミン又はアミノオキシ官能基と共有結合するように誘導体化されているかのいずれかであることを意味する。「アミノオキシ基」という用語は、ＢＴＭにアミノオキシ官能基が共有結合していることを意味する。かかる基は、式−Ｏ−ＮＨ2、好ましくは−ＣＨ2Ｏ−ＮＨ2の基であり、Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｃ結合をもつオキシムエーテルを形成するアルデヒドとの縮合反応においてアミノオキシ基のアミンのほうがＬｙｓアミン基よりも反応性が高いという利点を有する。そこで、Ｙ1は好ましくは−Ｏ−ＮＨ2である。
【００６１】
式（ＩＶ）の放射性フッ素化ＢＴＭは、好ましくは放射性同位体イメージング剤である。「イメージング剤」という用語は、哺乳類の身体のイメージングに適した化合物を意味する。好ましくは、哺乳類はインタクトな哺乳類の生体であり、さらに好ましくはヒト被験体である。好ましくは、イメージング剤は最小限の侵襲的方法で（つまり、医療専門技術の下で実施したときに哺乳類被験体に対して実質的な健康リスクを伴わずに）哺乳類の身体に投与される。かかる最小限の侵襲的投与は、好ましくは被験体の末梢静脈への静脈内投与であり、局所又は全身麻酔を必要としない。イメージング剤は、哺乳類の身体の状態ができるだけ忠実に表されるように、薬理効果が最小限となる好適な用量で設計され投与される。
【００６２】
本明細書で用いる「インビボイメージング」という用語は、哺乳類被験体の体内の様相の全体又は一部の画像を非侵襲的に生成する技術をいう。かかるイメージング技術として好ましいのは陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）である。
【００６３】
第２の態様の方法は、溶液中で実施するのに適している。
【００６４】
ＢＴＭには、好ましくは、線状又は環状ペプチド又はその組合せのいずれでもよい３〜８０残基ペプチド、ペプチド類似体、ペプトイド又はペプチド模倣体、１個のアミノ酸、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト（部分アゴニストを含む）又は酵素阻害剤、受容体結合化合物（受容体基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は基質を含む）、オリゴヌクレオチド又はオリゴＤＮＡ若しくはオリゴＲＮＡフラグメントがある。
【００６５】
「アミノ酸」という用語は、Ｌ−又はＤ−アミノ酸、アミノ酸類似体（例えば、ナフチルアラニン）を意味し、天然のものでも純粋な合成品であってもよく、光学的に純粋つまり単一の鏡像異性体（したがってキラルなもの）であってもよいし、鏡像異性体の混合物であってもよい。本明細書では、アミノ酸の慣用三文字略語又は一文字略語を用いる。好ましくは、本発明のアミノ酸は光学的に純粋なものである。
【００６６】
「ペプチド」という用語は、ペプチド結合（つまり、あるアミノ酸のアミンと別のアミノ酸のカルボキシルとを連結するアミド結合）で連結した２以上のアミノ酸（以下で定義）を含む化合物を意味する。「ペプチド模倣体」又は「模倣体」という用語は、ペプチド又はタンパク質の生物活性を模倣するが、化学的性状がペプチドでない（つまり、ペプチド結合（アミノ酸間のアミド結合）を含まない）生物活性化合物をいう。ここでは、ペプチド模倣体という用語は広義に用いられ、性状が完全にはペプチドでない分子（例えば、プソイドペプチド、セミペプチド及びペプトイド）を包含する。「ペプチド類似体」という用語は、以下に記載する１種以上のアミノ酸類似体を含むペプチドをいう。“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ”，  Ｍ．  Ｇｏｏｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ  Ｅ２２ｃ，  Ｔｈｉｅｍｅ参照。
【００６７】
「糖」という用語は、単糖、二糖又は三糖を意味する。好適な糖には、グルコース、ガラクトース、マルトース、マンノース及びラクトースがある。適宜、アミノ酸に容易にカップリングできるように糖を官能化してもよい。例えばアミノ酸のグルコサミン誘導体は、ペプチド結合を介して他のアミノ酸にコンジュゲートさせることができる。アスパラギンのグルコサミン誘導体（ＮｏｖａＢｉｏｃｈｅｍ社から市販）はその一例である。
【００６８】
【化１５】
2016506375.tif 000016
「ポリエチレングリコールポリマー」又は「ＰＥＧ」という用語は、例えば“Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ”，１４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，７５６８に記載されているような通常の意味を有し、一般式Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）nＯＨ（ｎは４以上の整数である。）の液体又は固体ポリマーである。本発明のポリエチレングリコールポリマーは線状でも枝分れでもよいが、好ましくは線状である。ポリマーは好ましくは非デンドリマーである。好ましいＰＥＧ含有リンカー基は、式Ｂｉｏ１又はＢｉｏ２の単分散ＰＥＧ様構造のオリゴマー化で得られる単位を含む。
【００６９】
【化１６】
2016506375.tif 000017
式Ｂｉｏ１（式中、ｐは１〜１０の整数である。）の１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸。或いは、式Ｂｉｏ２のプロピオン酸誘導体に基づくＰＥＧ様構造も使用できる。
【００７０】
【化１７】
2016506375.tif 000018
式中、ｐは式Ｂｉｏ１について定義した通りであり、ｑは３〜１５の整数である。式Ｂｉｏ２において、ｐは好ましくは１又は２であり、ｑは好ましくは５〜１２である。
【００７１】
好ましい実施形態
ＢＴＭは、合成したものでも、天然のものでもよいが、好ましくは合成品である。「合成品」という用語とは、その通常の意味を有しており、天然の起源（例えば哺乳類の身体）から単離したものとは対照的に、人工のものを意味する。かかる化合物は、その製造及び不純物プロファイルを十分に制御できるという利点を有する。したがって、天然起源のモノクローナル抗体及びそのフラグメントは、本明細書で用いる「合成品」には属さない。ＢＴＭは、好ましくは非タンパク質性もの、つまりタンパク質を含まないものである。
【００７２】
ＢＴＭの分子量は、好ましくは１５０００ダルトン以下である。さらに好ましくは、分子量は２００〜１２０００ダルトン、最も好ましくは３００〜１００００ダルトンであり、４００〜９０００ダルトンが特に好ましい。ＢＴＭが非ペプチドである場合、ＢＴＭの分子量は好ましくは３０００ダルトン以下であり、さらに好ましくは２００〜２５００ダルトン、最も好ましくは３００〜２０００ダルトンであり、４００〜１５００ダルトンが特に好ましい。
【００７３】
ＢＴＭが、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト、酵素阻害剤又は受容体結合化合物である場合、ＢＴＭは好ましくは非ペプチド、さらに好ましくは合成品である。「非ペプチド」という用語は、ペプチド結合（２つのアミノ酸残基間のアミド結合）を全く含まない化合物を意味する。好適な酵素基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は阻害剤には、グルコース及びグルコース類似体（例えばフルオロデオキシグルコースなど）、脂肪酸、又はエラスターゼ、アンジオテンシンＩＩ又はメタロプロテイナーゼ阻害剤がある。好ましい非ペプチド系アンジオテンシンＩＩアンタゴニストはロサルタンである。好適な合成受容体結合化合物には、エストラジオール、エストロゲン、プロゲスチン、プロゲステロンその他のステロイドホルモン、ドーパミンＤ−１又はＤ−２受容体リガンド、及びトロパンのようなドーパミン輸送体用リガンド、並びにセロトニン受容体用リガンドがある。
【００７４】
ＢＴＭは、最も好ましくは３〜１００残基ペプチド又はペプチド類似体である。ＢＴＭがペプチドである場合、好ましくは４〜３０残基ペプチド、最も好ましくは５〜２８残基ペプチドである。
【００７５】
ＢＴＭがペプチドである場合、好ましいペプチドには以下のものがある。
・ソマトスタチン、オクトレオチド及び類似体。
・ＳＴ受容体に結合するペプチド（ここで、ＳＴとは大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）その他の微生物によって産生される耐熱性毒素をいう。）。
・ボンベシン。
・血管作用性小腸ペプチド。
・ニューロテンシン。
・ラミニンフラグメント、例えば、ＹＩＧＳＲ、ＰＤＳＧＲ、ＩＫＶＡＶ、ＬＲＥ及びＫＣＱＡＧＴＦＡＬＲＧＤＰＱＧ。
・白血球集積部位をターゲティングするためのＮ−ホルミル走化性ペプチド。
・血小板第４因子（ＰＦ４）及びそのフラグメント。
・例えば、血管形成をターゲティングし得るＲＧＤ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）含有ペプチド［Ｒ．Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉ他，Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９７  Ｊｕｎ；１５（６）：５４２−６］、［Ｅ．Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．１９９７  Ｍａｙ；５１（５）：１４１３−７］。
・α2−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのペプチドフラグメント。α2−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのアミノ酸配列は、以下の参考文献に見出すことができる。α2−抗プラスミン前駆体［Ｍ．Ｔｏｎｅ他，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，１０２，１０３３（１９８７）］、β−カゼイン［Ｌ．Ｈａｎｓｓｏｎ他，Ｇｅｎｅ，１３９，１９３（１９９４）］、フィブロネクチン［Ａ．Ｇｕｔｍａｎ他，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，２０７，１４５（１９９６）］、トロンボスポンジン１前駆体［Ｖ．Ｄｉｘｉｔ他，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８３，５４４９（１９８６）］、Ｒ．Ｆ．Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５３，１９５（１９８４）。
・アンジオテンシンＩＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（Ｅ．Ｃ．Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ他，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９７９，Ｖｏｌ  ２２，９，１０３８−１０４４）及び［Ｓａｒ，Ｉｌｅ］アンジオテンシンＩＩ：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ（Ｒ．Ｋ．Ｔｕｒｋｅｒ他，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７２，１７７，１２０３）のようなアンジオテンシンの基質又は阻害剤であるペプチド。
・アンジオテンシンＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ。
・ｃ−Ｍｅｔターゲティングペプチド。
【００７６】
ＢＴＭがペプチドである場合、ペプチドの一端又は両端（好ましくは両端）に代謝阻害基（ＭIG）が結合している。このように両方のペプチド末端を保護することは、インビボイメージング用途で重要である。さもないと、急速な代謝が起こって、ＢＴＭペプチドに対する選択的結合親和性が失われてしまうと予想されるからである。「代謝阻害基（ＭIG）」という用語は、アミノ末端又はカルボキシ末端でのＢＴＭペプチドの酵素（特にカルボキシペプチダーゼのようなペプチダーゼ）代謝を阻害又は抑制する生体適合性基を意味する。かかる基はインビボ適用に特に重要であり、当業者に周知であり、好適には、ペプチドアミン末端に関してはＮ−アシル化基−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＲG（式中、アシル基−（Ｃ＝Ｏ）ＲGはＣ1-6アルキル、Ｃ3-10アリール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックから選択されるＲGを有する。）から選択される。好適なＰＥＧ基については、リンカー基（Ｌ1）に関して上述した。好ましいＰＥＧ基は、式Ｂｉｏ１又はＢｉｏ２（上記）のバイオモディファイアーである。好ましいアミノ末端ＭIG基はアセチル、ベンジルオキシカルボニル又はトリフルオロアセチルであり、最も好ましくはアセチルである。
【００７７】
ペプチドカルボキシル末端に適した代謝阻害基には、カルボキサミド、ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ベンジルエステル、シクロヘキシルエステル、アミノアルコール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックがある。ＢＴＭペプチドのカルボキシ末端アミノ酸残基に適したＭIG基は、アミノ酸残基の末端アミンをＣ1-4アルキル基（好ましくはメチル基）でＮ−アルキル化したものである。好ましいＭIG基はカルボキサミド又はＰＥＧであり、最も好ましい基はカルボキサミドである。
【００７８】
好ましいＢＴＭペプチドは、ＲＧＤペプチド又はｃ−Ｍｅｔターゲティングペプチドである。かかるＲＤＧペプチドとして最も好ましいのは、ＢＴＭが次の式（ＢＴＭ１）のものである。
【００７９】
【化１８】
2016506375.tif 000019
式中、Ｘ1は−ＮＨ2又は次式の基である。
【００８０】
【化１９】
2016506375.tif 000020
式中、ａは１〜１０の整数である。
【００８１】
式ＢＴＭ１において、ａは好ましくは１である。
【００８２】
好ましい官能化生体ターゲティング分子は次の式ＩＩＩＡのものである。
【００８３】
【化２０】
2016506375.tif 000021
好ましい18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子は次の式（ＩＶＡ）の18Ｆ−フルシクラチドである。
【００８４】
【化２１】
2016506375.tif 000022
ｃ−Ｍｅｔ結合ペプチドは好ましくは次の式Ｖの１８〜３０残基環状ペプチドである。
【００８５】
Ｚ1−［ｃＭＢＰ］−Ｚ2  （Ｖ）
式中、
ｃＭＢＰは、次の式ＩＩのものであり、
−（Ａ）j−Ｑ−（Ａ’）k    （ＩＩ）
Ｑは、アミノ酸配列（配列番号１）：−Ｃｙｓa−Ｘ1a−Ｃｙｓc−Ｘ2−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｘ3−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓd−Ｔｒｐ−Ｃｙｓb−Ｔｙｒ−Ｘ4−Ｘ5−Ｘ6−であり、
（式中、Ｘ1aはＡｓｎ、Ｈｉｓ又はＴｙｒであり、Ｘ2はＧｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＡｓｎであり、Ｘ3はＴｈｒ又はＡｒｇであり、Ｘ4はＡｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ又はＳｅｒであり、Ｘ5はＳｅｒ又はＴｈｒであり、Ｘ6はＡｓｐ又はＧｌｕであり、Ｃｙｓa-dの各々はシステイン残基であって、残基ａ及びｂ並びに残基ｃ及びｄは環化して２つの別個のジスルフィド結合を形成している。）
Ａ及びＡ’は、Ａ及びＡ’の少なくとも一方が存在してＬｙｓであることを条件として、独立にＣｙｓ以外のアミノ酸であり、
ｊ及びｋは独立に０〜１３の整数であって、［ｊ＋ｋ］＝１〜１３となるように選択され、
Ｚ1はｃＭＢＰのＮ末端に結合していて、Ｈ又はＭIGであり、
Ｚ2はｃＭＢＰのＣ末端に結合していて、ＯＨ、ＯＢc又はＭIGであり、
Ｂcは生体適合性陽イオンであり、
各ＭIGは独立にｃＭＢＰペプチドのインビボ代謝を阻害又は抑制する生体適合性基である代謝阻害基であり、
ｃＭＢＰは、Ａ又はＡ’基のＬｙｓ残基で18Ｆ標識される。
【００８６】
さらに好ましくは、ｃＭＢＰペプチドは次の式ＶＡのものである。
【００８７】
−（Ａ）j−Ｑ−（Ａ’）z−Ｌｙｓ−                    （ＶＡ）
式中、ｚは０〜１２の整数であって、［ｊ＋ｚ］＝０〜１２であり、ｃＭＢＰはＬｙｓ残基を１個しか含まない。
【００８８】
式ＶＩ及びＶＩＡにおいて、Ｑは好ましくは以下の配列番号２又は配列番号３のアミノ酸配列を含む。
Ｓｅｒ−Ｃｙｓa−Ｘ1a−Ｃｙｓc−Ｘ2−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｘ3−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓd−Ｔｒｐ−Ｃｙｓb−Ｔｙｒ−Ｘ4−Ｘ5−Ｘ6（配列番号２）、
Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓa−Ｘ1a−Ｃｙｓc−Ｘ2−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｘ3−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓd−Ｔｒｐ−Ｃｙｓb−Ｔｙｒ−Ｘ4−Ｘ5−Ｘ6−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（配列番号３）。
【００８９】
式Ｖ及びＶＡにおいて、Ｘ3は好ましくはＡｒｇである。
【００９０】
ｃＭＢＰぺプチドは、最も好ましくは、以下のアミノ酸配列（配列番号７）を有する。
Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓa−Ｔｙｒ−Ｃｙｓc−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓd−Ｔｒｐ−Ｃｙｓb−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ。
【００９１】
第２の態様の方法は、好ましくは、第１の態様（上記）で説明した通り、自動合成装置を用いて実施される。自動合成及び自動合成装置の好ましい態様は、第１の態様（上記）で説明した通りである。
【００９２】
第２の態様の方法は、好ましくは、18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子が放射性医薬組成物として得られるように、無菌的に実施される。放射性医薬組成物は、18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子を「生体適合性担体」（第１の態様で定義）と共に含んでいる。第２の態様における放射性医薬組成物及び生体適合性担体の好ましい態様は、第１の態様（上記）で説明した通りである。
【００９３】
放射性医薬組成物が式（ＩＶＡ）の18Ｆ−フルシクラチドを含んでいる場合、組成物は好ましくは放射線防護剤を含む。好ましくは、放射線防護剤は、４−アミノ安息香酸ナトリウム（Ｎａ−ｐＡＢＡ）である。使用されるＮａ−ｐＡＢＡの好ましい濃度は、１〜３ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１．５〜２．５ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは約２．０ｍｇ／ｍＬである。
【００９４】
第２の態様の方法は、好ましくは、放射性医薬組成物が得られるように、無菌的に実施される。本発明の放射性医薬組成物は、以下の様々な方法で調製することができる。
（ｉ）18Ｆ−放射性標識段階がクリーンルーム環境内で実施される、無菌製造技術、
（ｉｉ）18Ｆ−放射性標識が無菌製造を用いずに実施され、その後、最終段階で滅菌（例えば、ガンマ線照射、オートクレーブ、乾熱又は化学的処理（例えばエチレンオキシド）によって）される最終滅菌、
（ｉｉｉ）好適な前駆体と適宜賦形剤とを含む無菌の非放射性キット製剤を好適な18Ｆ源と反応させるキット法、
（ｉｖ）18Ｆ−放射性標識段階が自動合成装置を用いて実施される無菌製造技術。
【００９５】
方法（ｉｖ）が好ましい。従って、第２の態様の方法は、好ましくは自動合成装置を用いて実施される。
【００９６】
「自動合成装置」という用語は、Ｓａｔｙａｍｕｒｔｈｙ  ｅｔ  ａｌ［Ｃｌｉｎ．Ｐｏｓｉｔｒ．Ｉｍａｇ．，２（５），２３３−２５３（１９９９）］に記載されているような単位操作の原理に基づく自動化モジュールを意味する。「単位操作」という用語は、複雑なプロセスが一連の簡単な操作又は反応に集約されることを意味し、広範な材料に適用できる。かかる自動合成装置は、本発明の方法、特に放射性医薬品生成物が所望される場合の本発明の方法に好ましい。これらは、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、ＣＴＩ社．、Ｉｏｎ  Ｂｅａｍ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ社（ベルギー国、Ｂ−１３４８ルヴァン・ラ・ヌーブ、シュマン・デュ・シクロトロン３）、Ｒａｙｔｅｓｔ社（ドイツ）及びＢｉｏｓｃａｎ社（米国）を始めとする様々な供給業者から市販されている。
【００９７】
市販の自動合成装置は、放射性医薬品の製造の結果生じる液体放射性廃棄物用の適当な容器も提供する。自動合成装置は、適切に設計された放射能作業セル内で使用するように設計されているので、通例、放射線遮蔽が設けられていない。放射能作業セルは、潜在的な放射線量からオペレーターを保護するのに適した放射線遮蔽をもたらすとともに、化学薬品蒸気及び／又は放射性蒸気を除去するための換気装置を与える。自動合成装置は、好ましくはカセットを備える。「カセット」という用語は、合成装置の可動部材の機械的運動がカセットの外側から（即ち、外部から）カセットの動作を制御するように、自動合成装置（以下に定義する）に着脱自在かつ交換可能に装着できるように設計された装置を意味する。好適なカセットは直線状に並んだ弁の列を含み、その各々は倒立セプタムシールバイアルの針穿刺又は気密連結継手によって試薬又はバイアルを装着することができるポートに結合している。各弁は、自動合成装置の対応する可動アームとかみ合うはめ込み型継手を有している。カセットを自動合成装置に装着した場合、アームの外部回転が弁の開閉を制御する。自動合成装置の追加の可動部材は、注射器のプランジャー先端をつかみ、注射器外筒を上昇又は降下させるように設計されている。
【００９８】
カセットは汎用性であり、通例は試薬を装着することができる複数の位置、及び試薬のシリンジバイアル又はクロマトグラフィー用カートリッジ（例えば固相抽出（ＳＰＥ））の装着に適した複数の位置を有している。カセットは常に反応容器を含んでいる。かかる反応容器は好ましくは１〜１０ｍＬ、さらに好ましくは０．５〜５ｍＬ、最も好ましくは０．５〜４ｍＬの容積を有しており、カセットの様々なポートから試薬又は溶媒を移送できるように、カセットの３以上のポートが反応容器に連結されるように構成されている。好ましくは、カセットは直線状に並んだ１５〜４０個の弁、最も好ましくは２０〜３０個の弁を有しており、２５個の弁が特に好ましい。カセットの弁は好ましくは各々同一であり、最も好ましくは三方弁である。カセットは放射性医薬品の製造に適するように設計され、医薬グレードの材料であって理想的には放射線分解にも耐える材料で製造される。
【００９９】
本発明の好ましい自動合成装置は、放射性フッ素化された放射性医薬品の所定バッチの製造を実施するのに必要なすべての試薬、反応容器及び機器を含むディスポーザブルつまり使い捨てカセットを備えている。かかるカセットは、単にカセットを交換するだけで、相互汚染のリスクを最小限に抑えながら各種の放射性ヨウ素標識放射性医薬品を製造できる融通性を自動合成装置が有することを意味する。カセットアプローチには、装置構成の単純化とそれに伴うオペレーターエラーのリスクの低減、ＧＭＰ（Good Manufacturing Practice）コンプライアンスの向上、マルチトレーサー能力、生産作業間の迅速な変更、カセット及び試薬の作業前自動診断検査、実施すべき合成と化学試薬との自動バーコードクロスチェック、試薬のトレーサビリティ、使い捨てであり、そのため相互汚染のリスクがなく、改竄及び誤用を防ぐことができるという利点がある。
【０１００】
第３の態様では、本発明は、第１の態様で定義した式（ＩＩ）、（ＩＩＡ）、（ＩＩＢ）、（ＩＩＣ）又は（ＩＩＤ）の18Ｆ標識シアン化ビニルを提供する。第３の態様の18Ｆ標識シアン化ビニルは、好ましくは式ＩＩＡ又はＩＩＤの18Ｆ標識シアン化ビニル、さらに好ましくは式ＩＩＢの18Ｆ標識シアン化ビニル、最も好ましくは式ＩＩＣの18Ｆ標識シアン化ビニルである。
【０１０１】
第３の態様の18Ｆ標識シアン化ビニルは、塩基性条件下、５０〜８０℃の温度のアセトニトリル中でのアルデヒドの縮合によって得ることができる。
【０１０２】
第４の態様では、本発明は、放射性医薬組成物であって、
（ｉ）以下の式ＩＶの18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング分子と、
（ｉｉ）以下の式（ＩＩ）の18Ｆ標識シアン化ビニルと
を、生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含んでいて、ＩＶ：ＩＩのモル比が１０：１以上である、放射性医薬組成物を提供する。
【０１０３】
【化２２】
2016506375.tif 000023
式中、Ｙ2及びＢＴＭは第２の態様で定義した通りであり、Ｘ1は第１の態様で定義した通りである。
【０１０４】
第３の態様におけるＸ1の好ましい実施形態は、第１の態様（上記）で定義した通りである。第３の態様におけるＢＴＭの好ましい実施形態は、第２の態様（上記）で定義した通りである。
【０１０５】
第４の態様における「生体適合性担体」及びその好ましい実施形態は、第１の態様で定義した通りである。この第４の態様では、生体適合性担体は、適宜アセトニトリルを含んでいてもよい。
【０１０６】
アミノオキシ官能化ペプチドは、Ｐｏｅｔｈｋｏ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４５，８９２−９０２（２００４）］，Ｓｃｈｉｒｒｍａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１８，２０８５−２０８９（２００７）］，Ｓｏｌｂａｋｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ，１６，６１９０−６１９３（２００６）］又はＧｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１９，９５１−９５７（２００８）］の方法によって調製することができる。アミノオキシ基は、適宜２段階で結合させることができる。まず、対応するＮ−保護アミノオキシカルボン酸又はＮ−保護アミノオキシ活性化エステルをペプチドに結合させる。次に、中間体のＮ−保護アミノオキシ官能化ペプチドを脱保護して目的生成物を得る（上掲のＳｏｌｂａｋｋｅｎ及びＧｌａｓｅｒ参照）。Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｏ−ＣＨ2（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ及びＥｅｉ−Ｎ−Ｏ−ＣＨ2（Ｃ＝Ｏ）ＯＨのようなＮ−保護アミノオキシカルボン酸は、例えばＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社及びＩＲＩＳ社から市販されている。
【０１０７】
「保護」とは保護基の使用をいう。「保護基」という用語は、その通常の意味を有し、望ましくない化学反応を阻止又は抑制するが、分子の残部を変質させない程度に温和な条件下で問題の官能基から脱離させるのに十分な反応性をもつように設計された基を意味する。脱保護後には所望の生成物が得られる。アミン保護基は当業者に周知であり、好適にはＢｏｃ（Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｅｅｉ（Ｅｅｉはエトキシエチリデンである。）、Ｆｍｏｃ（Ｆｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［すなわち１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］又はＮｐｙｓ（すなわち３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）から選択される。その他の保護基の使用については、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１）に記載されている。好ましいアミン保護基は、Ｂｏｃ及びＥｅｉであり、最も好ましくはＥｅｉである。
【０１０８】
［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドの前駆体、すなわちＭｅ3Ｎ+−Ｃ6Ｈ4−ＣＨＯ．ＣＦ3ＳＯ3-は、Ｈａｋａ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，２７，８２３−８３３（１９８９）］の方法で得られる。
【０１０９】
18Ｆ−アルデヒド［18Ｆ］−ＦＢＰＡは、Ｃａｒｂｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，２２、６４２−６５３（２０１１）及びＢｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，２１，６９９２−６９９５（２０１１）］の方法で調製することができる。
【０１１０】
【化２３】
2016506375.tif 000024
その他のペプチドは、Ｐ．Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ及びＥ．Ｇｉｒａｌｄ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ及びＰｒｏｔｅｉｎｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９７に記載された固相ペプチド合成で得ることができる。
【０１１１】
第５の態様では、本発明は、ヒト又は動物の身体のイメージング方法であって、第４の態様の放射性医薬組成物が分布した身体の少なくとも一部分のＰＥＴ画像を生成することを含む。
【０１１２】
第５の態様における放射性医薬組成物及び18Ｆ標識ＢＴＭの好ましい態様は、それぞれ、本発明の第４及び第２の態様（上記）で説明した通りである。
【０１１３】
ＢＴＭがインテグリンαvβ3受容体をターゲティングする場合、第５の態様の方法は、好ましくは、身体の一部分が、インテグリンαvβ3受容体の異常発現、特に血管新生が関与する病態である場合に実施される。かかる病態として、関節リウマチ、乾癬、再狭窄、網膜症及び腫瘍増殖が挙げられる。第５の態様のかかる病態として好ましいのは腫瘍増殖である。インテグリンαvβ3発現の陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）イメージングは、Ｂｅｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ，１，４８−５７（２０１１）］に記載されている。
【０１１４】
第５の態様のイメージング方法は、適宜、薬剤によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニタリングするために繰り返し実施され、イメージングは、薬剤による治療の前後、及び任意には薬剤による治療中に実施される。特に注目されるのは、病態が末期になる前に悪性増殖を制御できるようにするための抗血管新生癌治療の効力の早期モニタリングである。かかる治療モニタリング用のイメージングは、Ｂａｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，５２（３），４２４−４３０（２０１１）］及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，５０（１），１１６−１２２（２００９）及びＴｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ，１，１４９−１５３（２０１１）］に記載されている。
【０１１５】
第５の態様の方法は、好ましくは、放射性医薬組成物が哺乳類の身体に予め投与されている場合に実施される。「予め投与されている」とは、臨床医が関与して、イメージング剤が患者に（例えば静脈注射として）投与される段階が、イメージングに先だって既に実施されていることを意味する。
【０１１６】
第６の態様では、本発明は、第５の態様のイメージング方法を含む、ヒト又は動物の身体の診断方法を提供する。
【０１１７】
第６の態様における放射性医薬組成物及び18Ｆ−ＢＴＭの好ましい態様は、第４及び第２の態様（上記）で定義した通りである。
【実施例】
【０１１８】
本発明を、以下の非限定的な実施例で例証する。実施例１は、本発明の前駆体１の合成を示す。実施例２は、［18］Ｆ−ＦＢＡの合成を示し、実施例３は、本発明の組成物を得るための［18Ｆ］−ＦＢＡの精製を示す。実施例４は、本発明の精製［18Ｆ］−ＦＢＡ組成物を用いた本発明の化合物１の合成を示す。実施例５は、非放射性ベンズアルデヒド誘導体との反応並びにそれらの特性決定に関する、穏和な条件下でのシアノビニル種の形成の実験的証拠を示す。実施例６は、［18Ｆ］−ＦＢＡが、シアノビニル種に類似したアセトニトリルと容易に反応することを示す。
【０１１９】
略語
アミノ酸の慣用三文字略語又は一文字略語を用いる。
Ａｃ：アセチル。
ＡＣＮ：アセトニトリル。
ＢＴＭ：生体ターゲティング部分。
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル。
ＤＭＡＢ：４−（ジメチルアミノ）ベンズアルデヒド。
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド。
ＥＯＳ：合成の終了。
ＦＢＡ：４−フルオロベンズアルデヒド。
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル。
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート。
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー。
ＬＣ−ＵＶ：紫外検出を含む液体クロマトグラフィー。
ＭＣＸ  ミックスモードの陽イオン交換カートリッジ
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン（ｍｅｔｈｙｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅ）。
ＮＭＰ：１−メチル−２−ピロリジノン。
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水。
ＰｙＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート。
ＲＡＣ：放射能濃度。
ＲＣＰ：放射化学純度。
ＲＴ：室温。
ＳＰＥ：固相抽出。
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル。
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸。
ＴＦＰ：テトラフルオロフェニル。
ＴＭＡＢ：４−（トリメチルアンモニウム）ベンズアルデヒド。
ＴR：保持時間。
【０１２０】
【表１】
2016506375.tif 000025
実施例１：前駆体１の合成
標準的なペプチド合成法を用いてペプチド１を合成した。
【０１２１】
（ａ）１，１７−ジアジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン
無水ＴＨＦ（１２５ｍＬ）中の無水ヘキサエチレングリコール（２５ｇ、８８ｍｍｏｌ）及びメタンスルホニルクロライド（２２．３ｇ、１９５ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン下で保持し、氷／水浴中で０℃に冷却した。無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のトリエチルアミン（１９．７ｇ、１９５ｍｍｏｌ）の溶液を４５分間滴下した。１時間後、冷却浴を除去し、反応混合物をさらに４時間撹拌した。次に、水（５５ｍＬ）と、次いで炭酸水素ナトリウム（５．３ｇ、ｐＨ８まで）及びアジ化ナトリウム（１２．７ｇ、１９５ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。ＴＨＦを蒸留によって除去し、水溶液を２４時間還流した（２層が形成された）。混合物を冷却し、エーテル（１００ｍＬ）を添加し、水相を塩化ナトリウムで飽和させた。相を分離し、水相をエーテルで抽出した（４×５０ｍＬ）。有機相を一緒にしてブラインで洗浄し（２×５０ｍＬ）、乾燥させた（ＭｇＳＯ4）。溶媒の濾過及び蒸発により、黄色の油状物２６ｇを得た（８９％）。生成物は、それ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１２２】
（ｂ）１７−アジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカンアミン
５％ＨＣｌ（２００ｍＬ）中の１，１７−ジアジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン（２５ｇ、７５ｍｍｏｌ）の激しく撹拌した懸濁液に、エーテル（１５０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１９．２ｇ、７３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で３時間かけて添加した。反応混合物をさらに２４時間撹拌した。相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した（３×４０ｍＬ）。水相を氷／水浴中で冷却し、固体水酸化カリウムの添加によってｐＨを１２に調節した。水相を濃縮し、生成物をジクロロメタンで抽出した（１５０ｍＬ）。有機相を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濃縮して黄色の油状物２２ｇを得た（９５％）。生成物をエレクトロスプレー質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）で同定した（ＭＨ＋計算値：３０７．１９；実測値３０７．４）。この粗製油状物は、それ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１２３】
（ｃ）２３−アジド−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の１７−アジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカンアミン（１５ｇ、５０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジグリコール酸無水物（Ａｃｒｏｓ、６．４ｇ、５５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。反応をＥＳＩ−ＭＳ分析でモニターし、反応を完結に導くためさらに多量の試薬を添加した。溶液を濃縮して黄色残渣を得、それを水（２５０ｍＬ）に溶解した。ジクロロメタンで一晩連続して抽出することによって、生成物を水相から単離した。溶媒を乾燥及び蒸発させて、１８ｇの収率（８５％）を得た。生成物をＥＳＩ−ＭＳ分析で同定した（ＭＨ＋計算値：４２３．２０；実測値４２３．４）。この生成物は、それ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１２４】
（ｄ）２３−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸
２３−アジド−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸（９．０ｇ、２１ｍｍｏｌ）を、水（５０ｍＬ）に溶解し、Ｈ2（ｇ）−Ｐｄ／Ｃ（１０％）を用いて還元した。ＥＳＩ−ＭＳ分析で目的生成物に完全に変換されたことが認められるまで反応を実施した（ＭＨ＋計算値：３９７．２；実測値３９７．６）。この粗生成物は、それ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１２５】
（ｅ）（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸
ジオキサン（２．５ｍＬ）中のジシクロヘキシカルボジイミド（５１５ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液を、ジオキサン（２．５ｍＬ）中の（Ｂｏｃ−アミノオキシ）酢酸（４７７ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２８７ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。反応を室温で１時間撹拌し、濾過した。水（５ｍＬ）中の２３−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸（１．０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（２７８μｌ、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液を含有する反応器に濾液を移した。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＥＳＩ−ＭＳ分析で、目的生成物への完全な変換が認められた（ＭＨ＋計算値：５７０．２８；実測値５７０．６）。この粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ、検出：２１４ｎｍ、勾配：６０分間で０〜５０％のＢ（Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％  ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％  ＴＦＡ）、流量：１０ｍＬ／分）で精製して、５００ｍｇ（３８％）の純粋な生成物を得た。生成物をＨＰＬＣで分析した（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）、５０×２．００ｍｍ、検出：２１４ｎｍ、勾配：１０分間で０〜５０％のＢ（ここで、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％  ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％  ＴＦＡ）、流量：０．７５ｍＬ／分、Ｒｔ＝５．５２分）。ＮＭＲ分析でさらに確認した。
【０１２６】
（ｆ）（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸とペプチド１との結合
（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸（０．１５ｍｍｏｌ、８５ｍｇ）及びＰｙＡＯＰ（０．１３ｍｍｏｌ、６８ｍｇ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。ＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＭＦ（４ｍＬ）中のペプチド１（０．１００ｍｍｏｌ、１２６ｍｇ）及びＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）の溶液を添加し、反応混合物を２５分間撹拌した。追加のＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物をさらに１５分間撹拌した。ＤＭＦを真空蒸発させ、生成物を１０％アセトニトリル−水に溶解し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、勾配：４０分間で５〜５０％のＢ（Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％  ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％  ＴＦＡ）、流量：１０ｍＬ／分）で精製して、１００ｍｇの半純粋な生成物を得た。ＴＦＡをＨＣＯＯＨで置き換える２度目の精製段階（勾配：０〜３０％のＢ、それ以外は上記と同じ条件）によって、８９ｍｇ（５０％）を得た。生成物をＨＰＬＣで分析した（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、勾配：１０分間で０〜３０％のＢ（ここで、Ａ＝Ｈ2Ｏ／０．１％  ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％  ＨＣＯＯＨ）、流量：０．３ｍＬ／分、Ｒt：１０．２１分）。ＥＳＩ−ＭＳを用いてさらに生成物の同定を行った（ＭＨ２２＋計算値：９０５．４、実測値：９０６．０）。
【０１２７】
（ｇ）脱保護
５％水を含有するＴＦＡを１０ｍｇのペプチドに添加することによって脱保護を実施した。
【０１２８】
実施例２：18Ｆ−ベンズアルデヒド（18Ｆ−ＦＢＡ）の放射合成
［18Ｆ］−フッ化物を、ＧＥＭＳ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを用いて、［18Ｏ］（ｐ，ｎ）［18Ｆ］核反応を介した銀標的（ｓｉｌｖｅｒ  ｔａｒｇｅｔ）によって生産した。１．５〜３．５ｍＬの総標的容量を用いた。放射性フッ化物を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（炭酸塩でプレコンディショニングしたもの）でトラップし、フッ化物を、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ2.2.2（４ｍｇ、１０．７μＭ）及び炭酸カリウム（０．５６ｍｇ、４．１μＭ）の水（８０μＬ）及びアセトニトリル（３２０μＬ）溶液で溶出した。窒素を用いて、溶液をＱＭＡカートリッジから反応容器へ追い出した［18Ｆ］−フッ化物を一定の窒素気流及び真空下、１２０℃で９分間乾燥させた。ＤＭＳＯ（１．１ｍＬ）中のトリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート［Ｈａｋａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，２７，８２３−８３３（１９８９）］（３．３ｍｇ、１０．５μＭ）を乾燥［18Ｆ］−フッ化物に添加し、混合物を１０５℃で７分間加熱して４−［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドを生成した。
【０１２９】
実施例３：18Ｆ−フルオロベンズアルデヒド（18Ｆ−ＦＢＡ）の精製
実施例２で得られた粗標識混合物を水酸化アンモニウム溶液で希釈し、（ＦＡＳＴｌａｂシーケエンスの一部として水でプレコンディショニングした）ＭＣＸ＋ＳＰＥカートリッジにロードした。カートリッジを水で洗浄し、窒素ガスで乾燥させてから、４−［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドを溶出して反応容器中のエタノール（１．８ｍＬ）に戻した。合計で２．２ｍＬの体積のエタノールを溶出に使用したが、最初の部分（０．４ｍＬ）は［18Ｆ］−ＦＢＡを含んでいなかったので廃棄した。４〜７％（崩壊補正値）の［18Ｆ］放射能がカートリッジにトラップされたままであった。
【０１３０】
［18Ｆ］−ＦＢＡ標識段階の温度及び時間は、ＦＢＡ収率を損なうシアノビニル種の生成が最小限となるように選択した。アセトニトリルを除去するための［18Ｆ］−フッ化物乾燥段階を最適化する結果として、シアノビニル種形成も最小化された。
【０１３１】
実施例４：［18Ｆ］−フルシクラチド（化合物１）の調製
［18Ｆ］−ＦＢＡと前駆体１（５ｍｇ）との結合は、塩酸アニリンの存在下、エタノール（１．８ｍＬ）及び水（１．８ｍＬ）の溶液中で実施した。反応混合物は６０℃で５分間維持した。
【０１３２】
実施例５：４−（トリメチルアンモニウム）ベンズアルデヒド（ＴＭＡＢ）とアセトニトリル）の反応
２つの実験を行った。
（Ａ）ＴＭＡＢを、ＤＭＳＯ中、ＣＨ3ＣＮ、Ｋ2ＣＯ3及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２と混合した；
（Ｂ）ＴＭＡＢを、ＤＭＳＯ中、ＣＤ3ＣＮ、Ｋ2ＣＯ3及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２と混合した。過剰の19Ｆ−ＦＢＡも添加した。
【０１３３】
実験Ａ及びＢからの反応生成物をＬＣ−ＵＶ／ＭＳを用いて分析した。（Ａ）クロマトグラム中の未知のピークをＭＳによって分析すると、ｍ／ｚ１８７．１にベースピークを有することが示された。（Ｂ）クロマトグラム中の対応するピークは、ＭＳで分析して、ｍ／ｚ１８８．１にベースピークを有した。それは（ＣＤ3ＣＮ反応に関して）示される反応に一致する。
【０１３４】
【化２４】
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実施例６：４−フルオロベンズアルデヒド（ＦＢＡ）とアセトニトリルの反応
19Ｆ−ＦＢＡを使用した。ＦＢＡを、ＤＭＳＯ中、ＣＨ3ＣＮ、Ｋ2ＣＯ3及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２と混合した。ＦＢＡはＭＳ応答がほとんど又は全くなかったので、実施例５のに対応するデータは実現できなかった。しかし、ＬＣ−ＵＶは、ＦＢＡがサンプルに残っていないこと、及び新しい主要ピークがＦＢＡよりも後の溶出時間で生じたことを示した。
【０１３５】
実施例５のシアノビニル付加物は、ＴＭＡＢと比較してより高い波長への約２６ｎｍのλmaxのシフトを示した。同様のシフトが、後に溶出する反応生成物についてここで観察され、そのため、それもシアノビニル種によるものだとされた。
【国際調査報告】
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