(57)【要約】  本発明は、トリアゾロン、および脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）の活性または機能の調節、特に阻害のためのトリアゾロンに関する。好適には、本発明は、癌の治療におけるトリアゾロンの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；および
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
式（Ｉ）
【化１】
2016504410.tif 000024
を有する化合物（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
式（ＩＩ）
【化２】
2016504410.tif 000025
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
式（ＩＩＩ）
【化３】
2016504410.tif 000026
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
式（ＩＶ）
【化４】
2016504410.tif 000027
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
ヒトＦＡＳに対するＦＡＳ阻害のＩＣ５０が＜２０ｎＭである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
低または中程度のｉｎ  ｖｉｖｏクリアランスを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ラットに静脈投与した場合に３９ｍＬ／分／ｋｇ以下のクリアランスを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
マウスに静脈投与した場合に３０ｍＬ／分／ｋｇ未満のクリアランスを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
齧歯類に経口投与した場合に約１０１ｎｇ・ｈ／ｍＬ／ｍｇ／ｋｇよりも大きいＤＮＡＵＣを達成することができる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物その薬学的に許容可能な塩を含んでなる医薬組成物。
【請求項１２】
必要とするヒトにおいて癌を治療する方法であって、前記ヒトに請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１３】
必要とするヒトにおいて癌を治療する方法であって、前記ヒトに請求項１１に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１４】
前記癌が胃癌、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽細胞腫、結腸癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎臓癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、膀胱癌、胃癌、ならびに骨および甲状腺の巨細胞腫瘍からなる群から選択される、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
必要とする哺乳動物において癌を治療する方法であって、このような哺乳動物に、治療上有効な量の
ａ）請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩；および
ｂ）少なくとも１種類の抗新生物薬
を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１６】
必要とするヒトにおいて癌を治療する方法であって、式（Ｉ）、式（ＩＩ）、式（ＩＩＩ）および／または式ＩＶの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記ヒトに約０．００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で経口投与することを含んでなる、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）の阻害剤である新規なトリアゾロン(triazolones)、それらを含有する医薬組成物、それらの調製方法、および癌の治療のための療法におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂肪酸は、膜の構成要素、膜タンパク質の標的化のためのアンカー、脂質二次メッセンジャーの合成における前駆体、およびエネルギー蓄積のための媒体としてなど、様々な細胞プロセスにおいて不可欠な役割を有している(Menendez JS and Lupu R, Fatty acid synthase and the lipogenic phenotype in cancer pathogenesis, Nature Reviews Cancer, 7: 763-777 (2007))。脂肪酸は、食餌から得るか、または炭水化物前駆体から新たに合成することができる。後者の生合成は、多機能性ホモ二量体ＦＡＳによって触媒される。ＦＡＳは、プライマーとしてアセチル−ＣｏＡおよび二炭素供与体としてマロニルＣｏ−Ａ、ならびに還元性の相当物としてＮＡＤＰＨを用いることによって、長鎖脂肪酸を合成する(Wakil SJ, Lipids, Structure and function of animal fatty acid synthase, 39: 1045-1053 (2004), Asturias FJ et al., Structure and molecular organization of mammalian fatty acid synthase, Nature Struct. Mol. Biol. 12:225-232 (2005), Maier T, et al., Architecture of Mammalian Fatty Acid Synthase at 4.5 Å Resolution, Science 311:1258-1262 (2006))。
【０００３】
新たな脂肪酸合成は、胚発生中、および、脂肪酸が肺界面活性剤の産生に用いられる胎生期の肺で活発である。成人では、ほとんどの正常なヒト組織は、食餌から脂肪酸を優先的に摂取する。従って、新たな脂質生合成および脂質生合成酵素の発現のレベルは低い(Weiss L, et al., Fatty-acid biosynthesis in man, a pathway of minor importance. Purification, optimal assay conditions, and organ distribution of fatty-acid synthase. Biological Chemistry Hoppe-Seyler 367(9):905-912 (1986))。対照的に、多くの腫瘍は、高率の新たな脂肪酸合成を示す(Medes G, et al., Metabolism of Neoplastic Tissue. IV. A Study of Lipid Synthesis in Neoplastic Tissue Slices in Vitro, Can Res, 13:27-29, (1953))。ＦＡＳは、前立腺、卵巣、結腸、子宮内膜  肺、膀胱、胃、および腎臓を含む多くの種類の癌において過剰発現されることが現在示されている(Kuhajda FP, Fatty-acid synthase and human cancer: new perspectives on its role in tumor biology, Nutrition; 16:202-208 (2000))。腫瘍および正常細胞におけるＦＡＳのこの差次的な発現および機能は、多大な治療域の可能性を有する癌療法へのアプローチを提供する。
【０００４】
薬理学的および低分子干渉ＲＮＡを介したＦＡＳの阻害が、癌細胞の増殖を優先的に阻害することが実証されている。加えて、これらの阻害剤は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは癌細胞のアポトーシスを誘発し、ｉｎ  ｖｉｖｏマウス異種移植モデルでは、ヒト腫瘍の増殖を抑制する(Menendez JS and Lupu R, Nature Reviews Cancer, 7: 763-777 (2007))。これらの知見に基づいて、ＦＡＳは、抗新生物介入の主要な潜在標的と考えられる。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；および
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【発明の具体的説明】
【０００６】
本発明はまた、式（Ｉ）
【化１】
2016504410.tif 000002
を有する化合物（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【０００７】
本発明はまた、式（ＩＩ）
【化２】
2016504410.tif 000003
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【０００８】
本発明はまた、式（ＩＩＩ）
【化３】
2016504410.tif 000004
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【０００９】
本発明はまた、式（ＩＶ）
【化４】
2016504410.tif 000005
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００１０】
本発明の一実施態様では、化合物は、ヒトＦＡＳに対するＦＡＳ阻害のＩＣ５０が＜２０ｎＭである。別の実施態様では、本化合物は、低いｉｎ  ｖｉｖｏクリアランスを示す。別の実施態様では、本化合物は、ラットに静脈投与した場合に約１７ｍＬ／分／ｋｇ未満のクリアランスを示す。さらに別の実施態様では、本化合物は、マウスに静脈投与した場合に約３０ｍＬ／分／ｋｇ未満のクリアランスを示す。別の実施態様では、本化合物は、哺乳動物に経口投与した場合に少なくとも約１０１ｎｇ・ｈ／ｍＬ／ｍｇ／ｋｇのＤＮＡＵＣを達成することができる。一面において、哺乳動物は齧歯類である。
【００１１】
当技術分野で理解されているように、血液、血漿および／または他の組織中の化合物濃度などの薬物動態データを収集、測定および評価するために様々な方法が使用できる。これもまた当技術分野で理解されているように、血液および／または血漿および／または他の組織中の、限定されるものではないが、グルコースレベル、ＦＡＳ活性、脂肪酸の合成および他のバイオマーカーレベルなどの様々な薬力学的データを収集、測定および評価するために様々な方法が使用できる。
【００１２】
別の実施態様では、本発明は、本発明の化合物のいずれかに従う化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる医薬組成物に関する。
【００１３】
別の実施態様では、必要とするヒトにおいて癌を治療するための方法であって、前記ヒトに本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法が提供される。一実施態様では、必要とするヒトにおいて癌を治療するための方法であって、前記ヒトに本発明の医薬組成物を投与することを含んでなる方法が提供される。一実施態様では、癌は、胃(gastric)癌、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽細胞腫、結腸癌、頭頸部癌、腎臓(kidney)癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎臓(renal)癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、膀胱癌、胃(stomach)癌、ならびに骨および甲状腺の巨細胞腫瘍からなる群から選択される。
【００１４】
別の実施態様では、必要とする哺乳動物において癌を治療する方法は、このような哺乳動物に治療上有効な量の
少なくとも１種類の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および
少なくとも１種類の抗新生物薬
を投与することを含んでなる。
【００１５】
本発明はまた、実験の節において例示される化合物に関する。絶対的ではないが一般に、本発明の塩は薬学的に許容可能な塩である。「薬学的に許容可能な塩」という用語内に包含される塩は、本発明の化合物の非毒性塩である。本発明の化合物の塩は、酸付加塩を含んでなり得る。一般に、これらの塩は、薬学的に許容可能な無機酸および有機酸から形成される。好適な酸塩のより具体的な例としては、マレイン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、過塩素酸、フミン酸、フマル酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ギ酸、乳酸、アレイック(aleic)アシッド、酒石酸、クエン酸、パルモイック(palmoic)アシッド、マロン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、ナフタレン−２−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ヒドロキシナフトエ酸、ヨウ化水素酸、リンゴ酸、テロイック(teroic)アシッド、タンニン酸などが挙げられる。
【００１６】
他の代表的な塩としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、二酒石酸塩、ホウ酸塩、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エジシル酸塩、エストール酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、マレイン酸一カリウム、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、スバセチン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド、および吉草酸塩が挙げられる。
【００１７】
薬学的に許容可能でない他の塩も、本発明の化合物の作製に有用であり得、これらは、本発明のさらなる面を成すと考えられるべきである。シュウ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩などのこれらの塩は、それら自体は薬学的に許容可能なものではないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩を得る際の中間体として有用な塩の作製において有用であり得る。
【００１８】
限定されるものではないが式（Ｉ）、式（ＩＩ）、式（ＩＩＩ）、および／または式（ＩＶ）を含む本発明の化合物またはその塩は、立体異性形（例えば、それは不斉炭素原子を含有する）で存在し得る。個々の立体異性体（鏡像異性体）およびこれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。本発明はまた、限定されるものではないが式（Ｉ）、式（ＩＩ）、式（ＩＩＩ）、および／または式（ＩＶ）を含む本発明の化合物により表される化合物または塩の個々の異性体を、１以上のキラル中心が反転したそれらの異性体との混合物として包含する。同様に、本発明の化合物または化合物の塩は、式で示される以外の互変異性形で存在してもよく、これらも本発明の範囲内に含まれると理解される。本発明は、本明細書の上記で定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。本発明の範囲は、立体異性体の混合物、ならびに精製された鏡像異性体または鏡像異性体的／ジアステレオマー的に富化された混合物を含む。また、本発明の化合物により表される化合物の個々の異性体、ならびにその完全にまたは部分的に平衡化されたいずれの混合物も、本発明の範囲内に含まれる。本発明はまた、本発明の化合物により表される化合物または塩の個々の異性体、ならびに１以上のキラル中心が反転したそれらの異性体との混合物も含む。本発明は以上に定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。
【００１９】
本発明はまた、本発明の化合物の種々の重水素化形態も含む。炭素に結合した利用可能な水素原子はそれぞれ独立に、重水素原子で置換され得る。当業者ならば、本発明の化合物の重水素化形態を合成する方法を知っている。本発明の化合物の重水素化形態の作製には、市販の重水素化出発物質が使用可能であり、またはそれらは、重水素化試薬（例えば、重水素化リチウムアルミニウム）を用いる従来の技術を用いて合成することができる。
【００２０】
定義
用語は、それらの認知されている意味の範囲内で用いられる。以下の定義は、定義された用語を明らかにすることを意図し、限定するものではない。
【００２１】
本明細書で使用する場合、用語「アルキル」は、好ましくは１〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖炭化水素基を意味し、これらは非置換または置換、飽和または不飽和であってよく、多置換度が本発明の範囲内に含まれる。置換されてよい場合、アルキル基は、非置換であるか、または、ハロゲン、アミノ、置換アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルチオ、アルキルスルホニル、アミノスルホニル、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボキサミド、アミノカルボニル、およびヘテロシクリルからなる群から選択される好適な置換基で置換される。本明細書で使用される「アルキル」の例としては、限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソペンチル、ｎ−ペンチルなど、ならびにこれらの置換型が挙げられる。
【００２２】
本明細書で使用する場合、用語「シクロアルキル」は、非置換または置換、単環式または多環式の飽和非芳香族環を意味する。例示的「シクロアルキル」基としては、限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなど、ならびにそれらの非置換および置換型が挙げられる。
【００２３】
本明細書で使用する場合、用語「アルコキシ」は基−ＯＲａを意味し、ここで、Ｒａは、上記で定義されるＣ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ７シクロアルキルである。用語「Ｃ１−Ｃ４アルコキシ」は、酸素架橋原子を介して結合された少なくとも１個、最大４個の炭素原子を有する直鎖または分岐型の炭化水素基を意味する。本発明において有用な例示的「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ」基としては、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、およびｔ−ブトキシが挙げられる。
【００２４】
「ヘテロシクロアルキル」は、飽和または部分不飽和であり、窒素、酸素、および硫黄から独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を含む３〜１０個の環原子を含有する、非芳香族一価の単環式または二環式基を含む基または部分を表す。本発明において有用なヘテロシクロアルキルの実例としては、限定されるものではないが、アゼチジニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、オキサゾリニル、チアゾリニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、１，３−ジオキソラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホニリル、チオモルホリニル、テトラヒドロピラニル、ジニドロピラニル、１，３−ジオキサニル、１，４−ジオキサニル、１，３−オキサチオラニル、１，３−オキサチアニル、１，３−ジチアニル、ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピニル、アザビシクロ［３．２．１］オクチル、アザビシクロ［３．３．１］ノニル、アザビシクロ［４．３．０］ノニル、オキサビシクロ［２．２．１］ヘプチル、および１，５，９−トリアザシクロドデシルが挙げられる。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロシクリル」は、１以上のヘテロ原子を含有する、非置換もしくは置換型の単環式または多環式環系を意味する。好ましいヘテロ原子としては、窒素、酸素、および硫黄が挙げられ、Ｎ−オキシド、硫黄オキシド、およびジオキシドを含む。ヘテロ環式環は、限定されるものではないが、３〜８員であってよく、完全に飽和されているか、または１以上の不飽和度を有する。本定義内には、多置換度が含まれる。「ヘテロ環式」基の例としては、限定されるものではないが、テトラヒドロフラニル、ピラニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキサニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホニリル、アゼチジニル、ピペラジニル、ピロリジノニル、ピペラジノニル、ピラゾリジニル、およびそれらの種々の互変異性体、ならびにそれらの非置換および置換型が挙げられる。用語「９または１０員のヘテロシクリル」は、窒素、酸素、および硫黄から独立に選択される１〜５個のヘテロ原子を含む９または１０個の環原子を含有する、完全不飽和または部分不飽和の二環式基を表し、この基は、非置換であっても、または本明細書で定義される１以上の置換基によって置換されていてもよい。選択される９または１０員のヘテロシクリル基は、１個の窒素、酸素、または硫黄環ヘテロ原子を含有し、場合により１、２、３、もしくは４個の付加的窒素環原子および／または１個の付加的酸素もしくは硫黄原子を含有してよい。９または１０員のヘテロシクリル基の例としては、限定されるものではないが、ベンゾフラニル、イソベンゾフリル、２，３−ジヒドロベンゾフリル、１，３−ベンゾジオキソリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ベンゾチエニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、ベンズイミダゾリル、ジヒドロベンズイミダゾリル、ベンゾキサゾリル、ジヒドロベンゾキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ジヒドロベンゾイソチアゾリル、インダゾリル、ピロロピリジニル、ピロロピリミジニル、イミダゾピリジニル、イミダゾピリミジニル、ピラゾロピリジニル、ピラゾロピリミジニル、ベンゾキサジアゾリル、ベンズチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、トリアゾロピリジニル、プリニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、１，５−ナフチリジニル、１，６−ナフチリジニル、１，７−ナフチリジニル、１，８−ナフチリジニル、およびプテリジニルが挙げられる。
【００２６】
用語「アリール」は、指定された数の炭素原子、特に６〜１０個の炭素原子を含有する炭素環式芳香族部分（フェニルまたはナフチルなど）を意味する。アリール基の例としては、限定されるものではないが、フェニル、ナフチル、インデニル、アズレニル、フルオレニル、アントラセニル、フェナントレニル、テトラヒドロナフチル、インダニル、フェナントリジニルなどが挙げられる。特に断りのない限り、用語「アリール」はまた、芳香族炭化水素基の可能性のある各位置異性体も含み、例えば、１−ナフチル、２−ナフチル、５−テトラヒドロナフチル、６−テトラヒドロナフチル、１−フェナントリジニル、２−フェナントリジニル、３−フェナントリジニル、４−フェナントリジニル、７−フェナントリジニル、８−フェナントリジニル、９−フェナントリジニル、および１０−フェナントリジニルである。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」は、特に断りのない限り、１または複数の炭素と少なくとも１つのヘテロ原子を含有する芳香族環系を意味する。ヘテロアリールは、単環式または多環式、置換または非置換であってよい。単環式ヘテロアリール基は、環に１〜４個のヘテロ原子を有してよく、多環式ヘテロアリールは、１〜８個のヘテロ原子を含有してよい。多環式ヘテロアリール環は、縮合、スピロ、または架橋型の環接合部を含有してよく、例えば、二環式ヘテロアリールは、多環式ヘテロアリールである。二環式ヘテロアリール環は、８〜１２員の原子を含有してよい。単環式ヘテロアリール環は、５〜８員の原子（炭素およびヘテロ原子）を含有してよい。例示的な５〜６員ヘテロアリールとしては、限定されるものではないが、フラニル、チオフェニル、チエニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル(1,2,4-traizolyl)、オキサゾリル、イソキサゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、テトラゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリミジニル、およびトリアジニルが挙げられる。他の例示的なヘテロアリール基としては、限定されるものではないが、ベンゾフラニル、イソベンゾフリル、２，３−ジヒドロベンゾフリル、１，３−ベンゾジオキソリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ベンゾチエニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、ベンズイミダゾリル、ジヒドロベンズイミダゾリル、ベンゾキサゾリル、ジヒドロベンゾキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ジヒドロベンゾイソチアゾリル、インダゾリル、ピロロピリジニル、ピロロピリミジニル、イミダゾピリジニル、イミダゾピリミジニル、ピラゾロピリジニル、ピラゾロピリミジニル、ベンゾキサジアゾリル、ベンズチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、トリアゾロピリジニル、プリニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、１，５−ナフチリジニル、１，６−ナフチリジニル、１，７−ナフチリジニル、１，８−ナフチリジニル、およびプテリジニルが挙げられる。ヘテロアリールに対する好適な置換基は、「置換されていてよい」の定義中に記載されている。
【００２８】
本明細書で使用する場合、「複素環式」、「複素環(heterocycle)」、「複素環(heterocycl)」基、またはこれらの文法的変形は、「ヘテロアリール」および「ヘテロシクロアルキル」基を含む。
【００２９】
本明細書で使用する場合、用語「シアノ」は−ＣＮ基を意味する。
【００３０】
本明細書で使用する場合、用語「されてよい」は、次に記載される１つまたは複数の事象が、発生しても、または発生しなくてもよいことを意味し、発生する１または複数の事象、および発生しない１または複数の事象の両方を含む。
【００３１】
本明細書で使用する場合、特に断りのない限り、「置換されていてもよい」という語句、またはその文法的変形は、多置換度を含む１以上の置換基による任意選択による置換を示す。この語句は、本明細書に記載および描写される置換の重複として解釈されるべきではない。例示的な任意選択の置換基としては、アシル、アルキル、アルキルスルホニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、シアノ、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシル、オキソ、アミド、スルファミド、尿素、アミノ、置換アミノ、アシルアミノ、フェニルカルボニル、ジアルキルアミノスルホンアミド、モルホリノ、スルホンアミド、チオ尿素、ニトロ、ピロリジニル、ピラゾリル、ピロリル、フェニル、およびテトラゾリルが挙げられ、ここで、ピロリジニル、ピラゾリル、およびテトラゾリルは、１〜３個のＣ１−Ｃ３アルキルでさらに置換されていてもよい。
【００３２】
「鏡像異性体的に富化された」とは、その鏡像体過剰率がゼロよりも大きい生成物を意味する。例えば、鏡像異性体的に富化されたとは、その鏡像体過剰率が約５０％ｅｅより大きい、約７５％ｅｅより大きい、および約９０％ｅｅより大きい生成物を意味する。
【００３３】
「鏡像体過剰率」または「ｅｅ」は、一方の鏡像異性体の他方に対する過剰率であり、パーセントで表される。従って、ラセミ混合物中には両方の鏡像異性体が同量で存在することから、鏡像異性体過剰率はゼロである（０％ｅｅ）。しかし、一方の鏡像異性体が、生成物の９５％を構成するように富化された場合、鏡像異性体過剰率は９０％ｅｅとなる（富化された鏡像異性体の量である９５％から他方の鏡像異性体の量である５％を差し引く）。
【００３４】
「鏡像異性体的に純粋」とは、その鏡像異性体過剰率が１００％ｅｅである生成物を意味する。
【００３５】
「ジアステレオマー」とは、少なくとも２つのキラル中心を有する化合物を意味する。
【００３６】
「ジアステレオマー過剰率」または「ｄｅ」とは、１つのジアステレオマーの他に対する過剰率であり、パーセントで表される。
【００３７】
「ジアステレオマー的に純粋」とは、そのジアステレオマー過剰率が１００％ｄｅである生成物を意味する。
【００３８】
「ハロ」または「ハロゲン」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを意味する。
【００３９】
「ヘテロ原子」とは、窒素、硫黄、または酸素原子を意味する。
【００４０】
「員(member)原子」とは、鎖または環を形成する１または複数の原子を意味する。鎖内および環内に２個以上の員原子が存在する場合、各員原子は、その鎖または環内の隣接する員原子と共有結合している。鎖または環上で置換基を構成する原子は、鎖または環の員原子ではない。
【００４１】
「オキソ」とは、置換基＝Ｏを意味する。
【００４２】
本明細書で使用する場合、用語「生理学的に機能的な誘導体」は、哺乳動物への投与時に本発明の化合物またはその活性代謝物を（直接または間接的に）提供することができる、本発明の化合物の薬学的に許容可能な任意の誘導体、例えば、エステルまたはアミドを意味する。このような誘導体は、過度な実験を行うことなく、および生理学的に機能的な誘導体を教示する範囲で参照により本明細書に組み込まれるBurger’s Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles and Practiceの教示を参照すれば、当業者には自明である。
【００４３】
「薬学的に許容可能な」とは、健全な医学的判断の範囲内で、妥当なベネフィット／リスク比に見合って、過度な毒性、刺激性、またはその他の問題もしくは合併症なくヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適している化合物、材料、組成物、および投与形を意味する。
【００４４】
本明細書で使用する場合、「併用投与」または「併用投与する」とは、同じ患者への２種類以上の化合物の投与を意味する。このような化合物の併用投与は、同時もしくはほぼ同時点（例えば、１時間以内）であってもよいし、または互いに数時間内もしくは数日内であってもよい。例えば、第１の化合物が毎週１回投与され、第２の化合物が毎日併用投与されてよい。
【００４５】
本明細書で使用する場合、「最大血中濃度」または「Ｃｍａｘ」とは、その種にある物質（例えば、式（Ｉ）の化合物）を投与した後の、その種の血中におけるその物質の最高観測濃度を意味する。
【００４６】
本明細書で使用する場合、「曲線下面積」または「ＡＵＣ」とは、時間に対するある物質の血中濃度のプロットにおける曲線の下の面積である。ＡＵＣは、ある時間内の瞬間濃度の積分の指標であり得、単位質量×時間／容量であり、モル濃度×時間、例えば、ｎＭ×日としても表すことができる。ＡＵＣは一般に、台形法（例えば、直線、直線−対数）により計算される。ＡＵＣは通常、ゼロから無限大までの時間範囲で示され、他の時間範囲は表示される（例えば、ＡＵＣ（ｔ１−ｔ２）、ここで、ｔ１およびｔ２は範囲の開始時および終了時である）。従って、本明細書で使用する場合、「ＡＵＣ０-２４ｈ」は２４時間のＡＵＣを意味し、「ＡＵＣ０-４ｈ」は４時間のＡＵＣを意味する。
【００４７】
「用量標準化ＡＵＣ」または「ＤＮＡＵＣ」とは、用量（ｍｇ／ｋｇ）により標準化されたＡＵＣ値を意味する。
【００４８】
本明細書で使用する場合、「信頼区間」または「ＣＩ」とは、ある測定値または試験値が所与の確率ｐに相当して入る範囲であり、ｐは９０％または９５％ＣＩを意味し、算術平均、幾何平均、または最小二乗平均として計算される。本明細書で使用する場合、幾何平均は、自然対数変換値を累乗法により逆変換したものの平均であり、最小二乗平均は、固定効果を用いて分散分析（ＡＮＯＶＡ）モデルから導かれたこと以外は同様の幾何平均であってもなくてもよい。
【００４９】
本明細書で使用する場合、「変動係数（ＣＶ）」は分散の指標であり、平均に対する標準偏差の比と定義される。それは上記の計算値に１００を掛けてパーセンテージ（％）として報告される（％ＣＶ）。
【００５０】
薬物クリアランス（ＣＬ）は、代謝および排泄のプロセスによる、単位時間当たりの、薬物が排除された血管コンパートメント内の血液の体積として定義される。薬物が一次速度論によって消失されるならば、薬物のクリアランスは一定である。薬物は腎排泄または代謝またはその両方によって排除される。多くの場合、クリアランスは治療される哺乳動物の体重によって標準化され、ｍＬ／分／ｋｇの単位で表される。
【００５１】
本発明内の化合物は２つ以上の互変異性形で存在する場合があり、このような互変異性形は総て本発明の範囲内に含まれる。
【００５２】
本発明はさらに、少なくとも１種類の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と１種類以上の賦形剤（製薬分野では担体および／または希釈剤とも呼ばれる）を含んでなる医薬組成物（医薬処方物とも呼ばれる）を提供する。賦形剤は、処方物の他の成分と適合し、そのレシピエント（すなわち、患者）に対して有害ではないという意味で許容される。
【００５３】
本発明の別の面によれば、本発明の化合物またはその塩と少なくとも１種類の賦形剤とを混合（または混入）することを含んでなる、医薬組成物の調製方法が提供される。
【００５４】
医薬組成物
医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形であり得る。このような単位は、式（Ｉ）などの本発明の化合物もしくはその塩の治療上有効な量、または所望の治療上有効な量を達成するために所与の時点で複数の単位投与形が投与され得るような治療上有効な量の画分を含有してよい。好ましい単位用量処方物は、本明細書の上記に挙げたように、有効成分の一日用量もしくは分割用量、またはその適切な画分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、製薬技術分野で周知のいずれの方法によって調製してもよい。
【００５５】
医薬組成物は、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸内、経鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路などの適切ないずれの経路による投与にも適合可能である。このような組成物は、例えば有効成分を１または複数の賦形剤と会合させることにより、製薬分野で公知のいずれの方法によって調製してもよい。
【００５６】
経口投与に適合される場合、医薬組成物は、錠剤またはカプセル剤などの離散単位；散剤または顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液；可食フォームまたはホイップ；水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションであり得る。本発明の化合物もしくはその塩、または本発明の医薬組成物はまた、「速溶性」医薬として投与するために、キャンディ、ウエハース、および／またはタンテープ(tongue tape)処方物中に配合してもよい。
【００５７】
例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合、有効薬物成分は、エタノール、グリセロール、水などの経口用非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせてもよい。散剤または顆粒剤は、化合物を適切な微細サイズに粉砕し、例えばデンプンまたはマンニトールのような可食炭水化物などの医薬担体を同様に粉砕したものと混合することによって調製される。香味剤、保存剤、分散剤、および着色剤も存在してよい。
【００５８】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を作製し、成形されたゼラチンまたは非ゼラチン系の剤皮に充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。寒天−寒天(agar-agar)、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセル剤が摂取された際の医薬の利用度を向上するために添加することができる。
【００５９】
さらに、所望される場合または必要な場合には、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた本混合物に配合することができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類（例えば、グルコースもしくはβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ガム、例えば、アラビアガム、トラガカントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投与形に使用される滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。
【００６０】
錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグを形成し、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することにより調剤される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記の希釈剤または基剤、ならびに場合によりカルボキシメチルセルロース、およびアルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、ならびに／またはベントナイト、カオリン、もしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤とともに混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アカディア糊、またはセルロース系もしくはポリマー材料の溶液などの結合剤を湿らせ、スクリーンに通すことによって造粒することができる。造粒の別法として、粉末混合物を打錠機にかけることができるが、その結果、形成の不完全なスラッグが崩壊して顆粒となる。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加により、錠剤成形鋳型への粘着を防ぐように滑沢化することができる。次に、滑沢化された混合物が打錠される。本発明の化合物または塩は、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッグ化工程を経ずに、直接打錠することもできる。セラックの封止コート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのつや出しコーティングからなる半透明の保護コーティングを提供することができる。異なった用量を識別するために、これらコーティングに色素を添加することができる。
【００６１】
溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液は、所与量が所定量の有効成分を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップ剤は、本発明の化合物またはその塩を、適宜着香した水溶液に溶かすことにより調製することができ、一方、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により調製される。懸濁液は、本発明の化合物または塩を非毒性ビヒクルに分散させることにより処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの着香添加剤、天然甘味剤、サッカリン、または他の人工甘味剤なども添加することができる。
【００６２】
必要に応じて、経口投与のための単位投与処方物をマイクロカプセル化することができる。処方物はまた、放出を延長または持続させるために、例えば、粒子状材料をポリマーまたはワックスなどでコーティングまたは包埋することにより調製することもできる。
【００６３】
本発明においては、錠剤およびカプセル剤が医薬組成物の送達のために好ましい。
【００６４】
本明細書で使用する場合、用語「治療」は、予防を含み、特定の病態を緩和すること、病態の１以上の症状を排除または軽減すること、病態の進行を緩徐化また停止させること、および過去に罹患したまたは診断された患者または対象者における病態の再発を予防または遅延させることを意味する。予防（または疾患発症の回避もしくは遅延）は一般に、疾患または病態を発症した患者に対するものと同一または類似の方法で薬物を投与することにより達成される。
【００６５】
本発明は、本化合物により標的とされる少なくとも１つの病態を有する哺乳動物、特にヒトにおける治療方法を提供する。このような治療は、治療上有効な量の少なくとも１種類の本発明の化合物またはその塩を前記哺乳動物、特にヒトに投与する工程を含んでなる。治療はまた、少なくとも１種類の本発明の化合物またはその塩を含有する治療上有効な量の医薬組成物を前記哺乳動物、特にヒトに投与する工程を含んでなることもできる。
【００６６】
本明細書で使用する場合、用語「有効量」は、例えば、研究者または臨床医により求められる、組織、系、動物、またはヒトの生物学的または医学的応答を惹起する薬物また医薬剤の量を意味する。
【００６７】
用語「治療的有効な量」は、そのような量を受容していない対応する対象者と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療の改善、治癒、予防、もしくは改善、または疾患もしくは障害の進行速度の減少をもたらす任意の量を意味する。この用語はまた、正常な生理学的機能を増進するのに有効な量もその範囲内に含む。療法において使用するために、少なくとも１種類の本発明の化合物ならびにその塩の治療上有効な量は、粗化学物質として投与してもよい。加えて、前記有効成分は医薬組成物として提供してもよい。
【００６８】
療法において使用するために、治療上有効な量の少なくとも１種類の本発明の化合物またはその塩を粗化学物質として提供することも可能であるが、それは一般には医薬組成物または処方物の有効成分として提供される。
【００６９】
本発明の化合物またはその塩の正確な治療上有効量は、限定されるものではないが、治療される対象者（患者）の年齢および体重、治療を要する正確な障害およびその重症度、医薬処方物／組成物の性質、ならびに投与経路を含むいくつかの因子によって決まり、最終的には、担当の医師または獣医の裁量による。一般に、本発明の化合物またはその塩は、治療用には、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエント（患者、哺乳動物）体重／日の範囲で、より通常には、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲で与えられる。許容される一日用量は約１〜約１０００ｍｇ／日、好ましくは、約１〜約１００ｍｇ／日であり得る。この量は、１日当たり単回用量で与えてもよいし、または合計一日用量が同じとなるように１日当たり数回（例えば、２回、３回、４回、５回またはそれを超える回数）の分割用量で与えてもよい。有効量のその塩は、有効量の本発明の化合物自体の比率として決定することができる。治療に関して本明細書に言及される他の病態の治療（予防を含む）にも同等の用量が適当であるはずである。一般に、適当な用量の決定は、医学または薬学分野の熟練者により容易に達成できる。
【００７０】
組合せ
本発明の化合物が癌の処置のために投与される場合、用語「併用投与」およびその文法的変形は、本明細書で使用する場合、本明細書で述べるＦＡＳ阻害化合物、ならびに限定されるものではないが、抗新生物薬を含む化学療法および／または放射線治療を含む癌の治療に有用であることが公知である１もしくは複数のさらなる有効成分の同時投与、またはいずれかの様式の個別逐次投与を意味する。１または複数のさらなる有効成分という用語は、本明細書で使用する場合、癌の治療を必要とする患者に投与された際に有利な特性を示すことが知られているか、または有利な特性の示すいずれの化合物または治療薬も含む。好ましくは、投与が同時でない場合、それらの化合物は、互いに近接した時間内に投与される。さらに、化合物が同じ投与形で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、１つの化合物を局所投与し、別の化合物を経口投与してもよい。
【００７１】
一般に、治療される感受性腫瘍に対して活性を有するいずれの抗新生物薬も、本発明の癌治療において併用投与可能である。このような薬剤の例は、Cancer Principles and Practice f Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (February 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishersに見出すことができる。当業者ならば、関与する薬物および癌の特定の特性に基づいて、薬剤のどの組合せが有用であるかを識別することができる。本発明において有用である典型的な抗新生物薬としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの微小管阻害剤；白金配位錯体；ナイトロジェンマスタード、オキサアザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソ尿素、およびトリアゼンなどのアルキル化剤；アントラサイクリン、アクチノマイシン、およびブレオマイシンなどの抗生物質；エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤；プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗剤；カンプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤；ホルモンおよびホルモン類似体；シグナル伝達経路阻害剤；非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤；免疫治療薬；アポトーシス促進剤；ならびに細胞周期シグナル伝達阻害剤が挙げられる。
【００７２】
本発明のＦＡＳ阻害化合物と組み合わせて使用するための、または併用投与される１または複数のさらなる有効成分の例は、化学療法薬である。
【００７３】
微小管阻害剤または有糸分裂阻害剤は、細胞周期のＭ期、すなわち有糸分裂期の間に腫瘍細胞の微小管に対して活性である細胞周期特異的薬剤である。微小管阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられる。
【００７４】
ジテルペノイドは、天然源に由来し、細胞周期のＧ２／Ｍ期に作用する周期相特異的抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チューブリンサブユニットと結合することによりこのタンパク質を安定化させると考えられている。その後タンパク質の分解が阻害され、有糸分裂が停止し、細胞死をたどると思われる。ジテルペノイドの例としては、限定されるものではないが、パクリタキセルおよびその類似体であるドセタキセルが挙げられる。
【００７５】
パクリタキセル、５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエートの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの１３−エステルは、タイヘイヨウイチイ(Taxus brevifolia)から単離された天然ジテルペン生成物であり、注射液タキソール(TAXOL)（登録商標）として市販されている。パクリタキセルは、テルペンのタキサンファミリーのメンバーである。パクリタキセルは、１９７１年にWaniら(J. Am. Chem, Soc., 93:2325. 1971)によって初めて単離され、化学法およびＸ線結晶学的方法によってその構造が同定された。その活性の１つの機構は、パクリタキセルの、チューブリンと結合し、それにより癌細胞増殖を阻害する能力に関連している。Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277:665-667 (1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981)。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性に関する総説としては、D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, “New trends in Natural Products Chemistry 1986”, Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne編(Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235を参照。
【００７６】
パクリタキセルは、米国における難治性卵巣癌の治療における臨床使用(Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. lntem, Med., 111:273,1989)および乳癌の治療(Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991)に承認されている。パクリタキセルは、皮膚における新生物(Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46)および頭頸部癌(Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990)の治療のための潜在的候補である。またこの化合物は、多発性嚢胞腎疾患(Woo et. al., Nature, 368:750. 1994)、肺癌、およびマラリアの治療にも可能性を示している。パクリタキセルで患者を治療すると、閾値濃度（５０ｎＭ）を超える投与期間に関連して(Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995)、骨髄抑制が起こる（複数の細胞系譜、Ignoff, R.J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998）。
【００７７】
ドセタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの１３−エステルの三水和物は、注射液としてタキソテール(TAXOTERE)（登録商標）として市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に指示される。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針葉から抽出した天然の前駆物質１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを使用して製造された、パクリタキセル（前項参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量制限毒性は好中球減少である。
【００７８】
ビンカアルカロイドは、ニチニチソウ由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。ビンカアルカロイドは、チューブリンと特異的に結合することによって細胞周期のＭ期（有糸分裂）に作用する。その結果、結合されたチューブリン分子は、重合して微小管になることができない。有糸分裂は中期で停止し、細胞死をたどると考えられている。ビンカアルカロイドの例としては、限定されるものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビンが挙げられる。
【００７９】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射液としてベルバン(VELBAN)（登録商標）として市販されている。ビンブラスチンは、種々の固形腫瘍の第二選択療法として指示される可能性があるが、精巣癌、ならびにホジキン病、リンパ球性および組織球性リンパ腫を含む種々のリンパ腫の治療に主として指示される。骨髄抑制がビンブラスチンの用量制限副作用である。
【００８０】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチンの２２−オキソ−硫酸塩は、注射液としてオンコビン(ONCOVIN)（登録商標）として市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に指示されており、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療計画の中でも使用されている。脱毛および神経学的作用がビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、程度は低いが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎作用が生じる。
【００８１】
酒石酸ビノレルビンの注射液（ナベルビン(NAVELBINE)（登録商標））として市販されているビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ＊，Ｒ＊）−２，３−ジヒドロキシブタン二酸（１：２）（塩）］は、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単剤として、またはシスプラチンなどの他の化学療法薬と組み合わせて、種々の固形腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行性乳癌、およびホルモン不応性前立腺癌の治療に指示される。骨髄抑制がビノレルビンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００８２】
白金配位錯体は、非細胞周期特異的抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化を受け、ＤＮＡとの鎖内架橋および鎖間架橋を形成し、腫瘍に対して有害な生物学的作用を引き起こす。白金配位錯体の例としては、限定されるものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンが挙げられる。
【００８３】
シスプラチン、シス−ジアンミンジクロロ白金は、注射液としてプラチノール(PLATINOL)（登録商標）として市販されている。シスプラチンは、主として転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に指示される。シスプラチンの主な用量制限副作用は、腎毒性（水分補給と利尿により管理可能）、および耳毒性である。
【００８４】
カルボプラチン、ジアンミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］白金は、注射液としてパラプラチン(PARAPLATIN)（登録商標）として市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌の第一選択および第二選択治療に指示される。骨髄抑制がカルボプラチンの用量制限毒性である。
【００８５】
アルキル化剤は、非細胞周期特異的抗癌剤(non-phase anti-cancer specific agents)であり、かつ、強力な求電子試薬である。一般に、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核部分を介してＤＮＡと共有結合を形成する。このようなアルキル化によって核酸機能が破壊され細胞死に至る。アルキル化剤の例としては、限定されるものではないが、シクロホスファミド、メルファラン、およびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード；ブスルファンなどのスルホン酸アルキル；カルムスチンなどのニトロ尿素；ならびにダカルバジンなどのトリアゼンが挙げられる。
【００８６】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキシアザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射液または錠剤としてシトキサン(CYTOXAN)（登録商標）として市販されている。シクロホスファミドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、および白血病の治療に指示される。脱毛、悪心、嘔吐および白血球減少がシクロホスファミドの最も一般的な用量制限副作用である。
【００８７】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤としてアルケラン(ALKERAN)（登録商標）として市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および切除不能な卵巣上皮癌の待期療法に指示される。骨髄抑制がメルファランの最も一般的な用量制限副作用である。
【００８８】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ロイケラン(LEUKERAN)（登録商標）錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病、ならびにリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待期療法に指示される。骨髄抑制がクロラムブシルの最も一般的な用量制限副作用である。
【００８９】
ブスルファン、ジメタンスルホン酸１，４−ブタンジオールは、マイレラン(MYLERAN)（登録商標）錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待期療法に指示される。骨髄抑制がブスルファンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９０】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素は、ＢｉＣＮＵ（登録商標）として凍結乾燥物質の単一バイアルとして市販されている。カルムスチンは、脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫用に、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、待期療法に指示される。遅発性骨髄抑制がカルムスチンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９１】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、材料の単一バイアルとしてＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）として市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療、および他の薬剤と組み合わせてホジキン病の第二選択治療に指示される。悪心、嘔吐、および食欲不振がダカルバジンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９２】
抗生物質系抗新生物薬は、非細胞周期特異的薬剤であり、ＤＮＡと結合するかまたはＤＮＡにインターカレートする。一般に、このような作用によって安定なＤＮＡ複合体かまたは鎖の切断が生じ、それにより核酸の通常機能が乱れ、細胞死に至る。抗生物質系抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン；ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントロサイクリン；ならびにブレオマイシンが挙げられる。
【００９３】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、注射液の形態でコスメゲン(COSMEGEN)（登録商標）として市販されている。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に指示される。悪心、嘔吐および食欲不振がダクチノマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９４】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射形態としてダウノキソーム(DAUNOXOME)（登録商標）として、または注射液としてセルビジン(CERUBIDINE)（登録商標）として市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入に指示される。骨髄抑制がダウノルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９５】
ドキソルビシン、（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能な形態としてルベックス(RUBEX)（登録商標）またはアドリアマイシンＲＤＦ(ADRIAMYCIN RDF)（登録商標）として市販されている。ドキソルビシンは、主として急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽球性白血病の治療に指示されるが、いくつかの固形腫瘍およびリンパ腫の治療における有用成分でもある。骨髄抑制がドキソルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９６】
ブレオマイシン、ストレプトミセス・ヴェルチシルス(Streptomyces verticillus)の株から単離された細胞傷害性グリコペプチド系抗生物質の混合物は、ベレノキサン(BLENOXANE)（登録商標）として市販されている。ブレオマイシンは、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮癌、リンパ腫、および精巣癌の待期療法に指示される。肺毒性および皮膚毒性がブレオマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９７】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、限定されるものではないが、エピポドフィロトキシンが挙げられる。
【００９８】
エピポドフィロトキシンは、マンドレイク植物由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。エピポドフィロトキシンは、一般に、トポイソメラーゼＩＩとＤＮＡとの三元複合体を形成してＤＮＡ鎖の切断を引き起こすことによって、細胞周期のＳ期およびＧ２期において細胞に影響を及ぼす。この鎖切断が蓄積し、細胞死をたどる。エピポドフィロトキシンの例としては、限定されるものではないが、エトポシドおよびテニポシドが挙げられる。
【００９９】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液またはカプセル剤としてベプシド(VePESID)（登録商標）として市販されており、一般にＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、精巣癌および非小細胞肺癌の治療に指示される。骨髄抑制がエトポシドの最も一般的な副作用である。白血球減少の発生率の方が、血小板減少症よりも重大となる傾向がある。
【０１００】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液としてブモン(VUMON)（登録商標）として市販されており、一般にＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、小児における急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制がテニポシドの最も一般的な用量制限副作用である。テニポシドは、白血球減少および血小板減少の両方を誘発し得る。
【０１０１】
代謝拮抗性抗新生物薬は、ＤＮＡ合成を阻害すること、またはプリンもしくはピリミジン塩基の合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成を制限することによって細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する、細胞周期特異的抗新生物薬である。その結果、Ｓ期は進行せず、細胞死をたどる。代謝拮抗性抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メカプトプリン(mecaptopurine)、チオグアニン、およびゲムシタビンが挙げられる。
【０１０２】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルを投与すると、チミジル酸合成が阻害され、またＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果は一般に細胞死である。５−フルオロウラシルは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、および膵癌の治療に指示される。骨髄抑制および粘膜炎が５−フルオロウラシルの用量制限副作用である。他のフルオロピリミジン類似体としては、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸が挙げられる。
【０１０３】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、シトサール−Ｕ(CYTOSAR-U)（登録商標）として市販されており、一般にＡｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長中のＤＮＡ鎖へのシタラビンの末端組み込みによってＤＮＡ鎖の伸長を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示すと考えられている。シタラビンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。他のシチジン類似体としては、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）が挙げられる。シタラビンは、白血球減少、血小板減少、および粘膜炎を誘発する。
【０１０４】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、プリントール(PURINETHOL)（登録商標）として市販されている。メルカプトプリンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。メルカプトプリンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制および胃腸粘膜炎が、高用量のメルカプトプリンの副作用と予想される。有用なメルカプトプリン類似体はアザチオプリンである。
【０１０５】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、タブロイド(TABLOID)（登録商標）として市販されている。チオグアニンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。チオグアニンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。白血球減少、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制がチオグアニン投与の最も一般的な用量制限副作用である。しかしながら、消化管副作用も起こり、用量制限となり得る。他のプリン類似体としては、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、リン酸フルダラビン、およびクラドリビンが挙げられる。
【０１０６】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ジェムザール(GEMZAR)（登録商標）として市販されている。ゲムシタビンは、Ｓ期にて、またＧ１／Ｓ境界を通る細胞の進行を遮断することによって、細胞期特異性を示す。ゲムシタビンは、シスプラチンと組み合わせて局所進行性非小細胞肺癌の治療に指示され、また単独で局所進行性膵癌の治療に指示される。白血球減少、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制が、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０７】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジル酸の合成に必要とされるジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を介して、ＤＮＡの合成、修復、および／または複製を阻害することによって、特にＳ期に細胞周期作用を示す。メトトレキサートは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、ならびに乳癌、頭部癌、頸部癌、卵巣癌、および膀胱癌の治療に指示される。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少、および貧血）および粘膜炎が、メトトレキサート投与の予想される副作用である。
【０１０８】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含むカンプトテシン類は、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能または開発中である。カンプトテシン細胞傷害活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられている。カンプトテシンの例としては、限定されるものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態が挙げられる。
【０１０９】
イリノテカンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射液カンプトサール(CAMPTOSAR)（登録商標）として市販されている。
【０１１０】
イリノテカンは、その活性代謝物ＳＮ−３８とともにトポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合する、カンプトテシンの誘導体である。細胞傷害性は、トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリンテカンまたはＳＮ−３８の三元複合体と複製酵素との相互作用により引き起こされる回復不能な二本鎖切断の結果として生じると考えられている。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に指示される。イリノテカンＨＣｌの用量制限副作用は、好中球減少を含む骨髄抑制、および下痢を含むＧＩ作用である。
【０１１１】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射液ハイカムチン(HYCAMTIN)（登録商標）として市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合して、ＤＮＡ分子のねじれ歪みに応答してトポイソメラーゼＩにより引き起こされる一本鎖切断の再連結を妨げるカンプトテシンの誘導体である。トポテカンは、転移性の卵巣癌および小細胞肺癌の第二選択治療に指示される。トポテカンＨＣｌの用量規制副作用は、骨髄抑制、主に好中球減少である。
【０１１２】
また、下式Ａ：
【化５】
2016504410.tif 000006
の、化学名「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ，Ｓ）−カンプトテシン（ラセミ混合物）または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ）カンプトテシン（Ｒ鏡像異性体）または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｓ鏡像異性体）」で知られるラセミ混合物（Ｒ、Ｓ）型ならびにＲおよびＳ鏡像異性体を含む、現在開発中のカンプトテシン誘導体も着目される。このような化合物ならびに関連化合物は、製造方法を含め、米国特許第６，０６３，９２３号；同第５，３４２，９４７号；同第５，５５９，２３５号；同第５，４９１，２３７号および１９９７年１１月２４日に出願された継続米国特許出願第０８／９７７，２１７号に記載されている。
【０１１３】
ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモンと癌の増殖および／または増殖の欠如との間に関係がある癌を治療するのに有用な化合物である。癌治療で有用なホルモンおよびホルモン類似体の例としては、限定されるものではないが、小児の悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用なプレドニゾンおよびプレドニゾロンなどの副腎皮質ステロイド；副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含むホルモン依存性乳癌の治療に有用なアミノグルテチミドおよび他のアロマターゼ阻害剤、例えば、アナストロゾール、レトラゾール(letrazole)、ボラゾール(vorazole)およびエクセメスタン；ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療に有用なプロゲストリン(progestrin)、例えば、酢酸メゲストロール；前立腺癌および良性前立腺肥大の治療に有用なエストロゲン、アンドロゲンおよび抗アンドロゲン、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンおよび５α−レダクターゼ、例えば、フィナステリドおよびデュタステライド；ホルモン依存性乳癌および他の感受性癌の治療に有用な抗エストロゲン作用薬、例えば、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、ならびに選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）、例えば米国特許第５，６８１，８３５号、同第５，８７７，２１９号および同第６，２０７，７１６号に記載のもの；ならびに前立腺癌の治療のための黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）およびその類似体、例えば、ＬＨＲＨ促進剤および拮抗剤、例えば酢酸ゴセレリンおよびルプロリド(luprolide)が挙げられる。
【０１１４】
レトロゾール（商標フェマーラ(Femara)）は、外科手術後のホルモン反応性乳癌の治療のための経口非ステロイド系アロマターゼ阻害剤である。アロマターゼ酵素の活性を通してのアンドロゲンの変換によってエストロゲンが産生される。次に、エストロゲンは、エストロゲン受容体と結合し、これにより、細胞分裂が引き起こされる。レトロゾールは、そのチトクロムＰ４５０ユニットのヘムとの競合的な可逆性結合によって、アロマターゼがエストロゲンを産生できないようにする。この作用は特異的であり、レトロゾールは、ミネラロステロイドまたはコルチコステロイドの産生を低下させない。
【０１１５】
シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内変化を引き起こす化学プロセスを遮断または阻害する阻害剤である。本明細書で使用する場合、この変化は細胞増殖または分化である。本発明において有用なシグナル伝達阻害剤としては、受容体チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤、セリン／トレオニンキナーゼ、ホスホチジルイノシトール(phosphotidyl inositol)−３キナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達およびＲａｓ癌遺伝子の阻害剤が含まれる。
【０１１６】
いくつかのタンパク質チロシンキナーゼは、細胞増殖の調節に関与する様々なタンパク質の特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。このようなタンパク質チロシンキナーゼは、受容体または非受容体型キナーゼとして大別することができる。
【０１１７】
受容体チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、トランスメンブランドメイン、およびチロシンキナーゼドメインを有するトランスメンブランタンパク質である。受容体チロシンキナーゼは細胞増殖の調節に関与し、一般に成長因子受容体と呼ばれている。例えば過剰発現または突然変異による、これら多くのキナーゼの不適当または制御を欠いた活性化、すなわち異常なキナーゼ増殖因子受容体活性は、制御を欠いた細胞増殖をもたらすことが示されている。従って、このようなキナーゼの異常な活性は、悪性組織増殖と関連づけられている。結果として、このようなキナーゼの阻害剤は、癌治療法を提供し得る。増殖因子受容体としては、例えば、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様ドメインと表皮性増殖因子相同ドメインを含むチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン増殖因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体ならびにＲＥＴ癌原遺伝子が挙げられる。増殖受容体のいくつかの阻害剤が開発中であり、リガンド拮抗剤、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドが含まれる。増殖因子受容体および増殖因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818；Shawver et al DDT Vol 2, No. 2 1997年2月；およびLofts, F. J et al, "Growth factor receptors as targets", New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, Workman, Paul and Kerr, David編, CRC press  1994, Londonに記載されている。
【０１１８】
増殖因子受容体キナーゼでないチロシンキナーゼは、非受容体型チロシンキナーゼと呼ばれる。抗癌剤の標的または潜在的標的となる、本発明において有用な非受容体型チロシンキナーゼには、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（接着斑キナーゼ）、ＢｒｕｔｏｎｓチロシンキナーゼおよびＢｃｒ−Ａｂｌが挙げられる。このような非受容体型キナーゼおよび非受容体型チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Sinh, S. and Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465-80；およびBolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404に記載されている。
【０１１９】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤は、ＰＩ３−Ｋ  ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰを含む様々な酵素またはアダプタータンパク質におけるＳＨ２またはＳＨ３ドメイン結合を乱す薬剤である。抗癌剤の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods 34(3) 125-32に述べられている。
【０１２０】
Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ(Mitogen or Extracellular Regulated Kinase)（ＭＥＫ）、および細胞外調節キナーゼ(Extracellular Regulated Kinase)（ＥＲＫ）の遮断剤を含む、ＭＡＰキナーゼカスケード遮断剤を含むセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤；ならびにＰＫＣ（α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ）の遮断剤を含むタンパク質キナーゼＣファミリーメンバー遮断剤、ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ＡＫＴキナーゼファミリーメンバー、ＴＧＦβ受容体キナーゼ。このようなセリン／トレオニンキナーゼおよびそれらの阻害剤は、Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A., and Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P.A., and Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; 米国特許第６，２６８，３９１号；およびMartinez-Iacaci, L., et al, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52に記載されている。
【０１２１】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕの遮断剤を含むホスファチジルイノシトール−３キナーゼファミリーメンバーの阻害剤もまた本発明において有用である。このようなキナーゼは、Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7):935-8;およびZhong, H. et al, Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545に記載されている。
【０１２２】
また、本発明では、ミオイノシトールシグナル伝達阻害剤、例えば、ホスホリパーゼＣ遮断剤およびミオイノシトール類似体も有用である。このようなシグナル伝達阻害剤は、Powis, G., and Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, Paul Workman and David Kerr編, CRC press 1994, Londonに記載されている。
【０１２３】
シグナル伝達経路阻害剤の別の群は、Ｒａｓ癌遺伝子の阻害剤である。このような阻害剤には、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法が含まれる。このような阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含む細胞においてｒａｓの活性化を阻止し、それにより抗増殖薬として作用することが示されている。Ｒａｓ癌遺伝子の阻害は、Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8；Ashby, M.N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99-102；およびBennett, C.F. and Cowsert, L.M. BioChim. Biophys. Acta, (1999) 1489(1):19-30に記載されている。
【０１２４】
上述のように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体拮抗剤もまた、シグナル伝達阻害剤として機能し得る。この群のシグナル伝達経路阻害剤は、受容体チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用を含む。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｃ２２５  ＥＧＦＲ特異的抗体(Green, M.C. et al, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26(4), 269-286参照)；ハーセプチン(Herceptin)（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体(Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor Tyrosine Kniases, Breast cancer Res., 2000, 2(3), 176-183参照)；ならびに２ＣＢ  ＶＥＧＦＲ２特異的抗体(Brekken, R.A. et al, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124参照)。
【０１２５】
非受容体型キナーゼ血管新生阻害剤もまた、本発明において使用を見出すことができる。血管新生関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル伝達阻害剤について上述されている（両受容体とも、受容体型チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤が血管新生、主にＶＥＧＦ発現を阻害することが示されているので、血管新生は一般にｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達と関連する。従って、ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲ阻害剤と血管新生の阻害剤の組合せは意味をなす。よって、非受容体型チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明のＥＧＦＲ／ｅｒｂＢ２阻害剤と組み合わせて使用することができる。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、リガンド；血管新生を阻害するインテグリン（αｖβ３）の小分子阻害剤；エンドスタチンおよびアンギオスタチン（非ＲＴＫ）とは結合する抗ＶＥＧＦ抗体も、開示されたｅｒｂファミリー阻害剤との組合せにおいて有用であると思われる(Bruns CJ et al (2000), Cancer Res., 60: 2926-2935; Schreiber AB, Winkler MEおよびDerynck R. (1986), Science, 232: 1250-1253；Yen L et al. (2000), Oncogene 19: 3460-3469参照）。
【０１２６】
ヴォトリエント(VOTRIENT)（登録商標）として市販されているパゾパニブは、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）である。パゾパニブは、塩酸塩として提供され、その化学名は、５−［［４−［（２，３−ジメチル−２Ｈ−インダゾールー６−イル）メチルアミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］−２−メチルベンゼンスルホンアミド一塩酸塩である。パゾパニブは、進行性腎細胞癌を有する患者の治療用として承認されている。
【０１２７】
アバスチン(AVASTIN)（登録商標）として市販されているベバシズマブ（Bevacisumab）は、ＶＥＧＦ−Ａを遮断するヒト化モノクローナル抗体である。アバスチン（登録商標）は、結腸直腸癌、肺癌、乳癌、腎臓癌、および神経膠芽腫を含む種々の癌の治療用に承認されている。
【０１２８】
ｍＴＯＲ阻害剤としては、限定されるものではないが、ラパマイシン（ＦＫ５０６）およびラパログ、ＲＡＤ００１またはエベロリムス（アフィニトール）、ＣＣＩ−７７９またはテムシロリムス、ＡＰ２３５７３、ＡＺＤ８０５５、ＷＹＥ−３５４、ＷＹＥ−６００、ＷＹＥ−６８７およびＰｐ１２１が挙げられる。
【０１２９】
エベロリムスは、ノバルティス社によりアフィニトール(Afinitor)（登録商標）として販売されており、シロリムスの４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）誘導体であり、シロリムスと同様にｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳動物標的）阻害剤として働く。エベロリムスは、現在、臓器移植の拒絶を防ぐための免疫抑制剤および腎細胞癌の治療薬として使用されている。いくつかの癌において使用するためのエベロリムスおよびその他のｍＴＯＲ阻害剤に対するさらなる研究も行われている。エベロリムスは、下記の化学構造（式Ｂ）および化学名を有する：
【化６】
2016504410.tif 000007
ジヒドロキシ−１２−［（２Ｒ）−１−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ヒドロキシエトキシ）−３−メトキシシクロヘキシル］プロパン−２−イル］−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３，２９，３５−ヘキサメチル−１１，３６−ジオキサ−４−アザトリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４，２６，２８−テトラエン−２，３，１０，１４，２０−ペントン。
【０１３０】
ベキサロテンは、ターグレチン(Targretin)（登録商標）として販売されており、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）を選択的に活性化させるレチノイドのサブクラスのメンバーである。これらのレチノイド受容体は、レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）とは異なる生物活性を有する。化学名は、４−［１−（５，６，７，８−テトラヒドロ−３，５，５，８，８−ペンタメチル−２−ナフタレニル）エテニル］安息香酸である。ベキサロテンは、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ、皮膚癌の一種）の治療のために、その疾患を少なくとも１つの他の薬物では良好に治療することができなかった患者で用いられる。
【０１３１】
ネクサバール(Nexavar)（登録商標）として市販されているソラフェニブは、マルチキナーゼ阻害剤と称される薬物のクラスである。その化学名は、４−［４−［［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイルアミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチル−ピリジン−２−カルボキシアミドである。ソラフェニブは、進行性腎細胞癌（腎臓で発症する癌の一種）の治療に用いられる。ソラフェニブはまた、切除不能肝細胞癌（外科手術で治療することができない肝臓癌の一種）の治療にも用いられる。
【０１３２】
免疫療法計画において使用される薬剤もまた、本発明の化合物との組み合わせにおいて有用であり得る。ｅｒｂＢ２またはＥＧＦＲに対する免疫応答を生じさせる多くの免疫学的戦略が存在する。これらの戦略は一般に、腫瘍ワクチン接種の範囲にある。免疫学的アプローチの有効性は、小分子阻害剤を用いたｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達経路の阻害と組み合わせることにより、大きく向上され得る。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチの考察は、Reilly RT et al. (2000), Cancer Res. 60: 3569-3576；およびChen Y, Hu D, Eling DJ, Robbins J, and Kipps TJ. (1998), Cancer Res. 58: 1965-1971に見出される。
【０１３３】
ｅｒｂＢ阻害剤の例としては、ラパチニブ、エルロチニブ、およびゲフィチニブが挙げられる。ラパチニブ、Ｎ−（３−クロロ−４−｛［（３−フルオロフェニル）メチル］オキシ｝フェニル）−６−［５−（｛［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ｝メチル）−２−フラニル］−４−キナゾリナミン（示されるような式Ｃで表される）は、ｅｒｂＢ−１およびｅｒｂＢ−２（ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２）チロシンキナーゼの強力な経口小分子二重阻害剤であり、ＨＥＲ２陽性転移性乳癌の治療のために、カペシタビンとの併用が承認されている。
【化７】
2016504410.tif 000008
【０１３４】
エルロチニブ、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス｛［２−（メチルオキシ）エチル］オキシ｝−４−キナゾリナミン（商標タルセバ(Tarceva)として市販）は、示されるような式Ｄで表される。
【化８】
2016504410.tif 000009
エルロチニブの遊離塩基およびＨＣｌ塩は、例えば、米国特許第５，７４７，４９８号の実施例２０に従って作製することができる。
【０１３５】
ゲフィチニブ、４−キナゾリナミン，Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−［３−４−モルホリン）プロポキシ］は、示されるような式Ｅで表される。
【化９】
2016504410.tif 000010
商標イレッサ(IRESSA)（登録商標）（Ａｓｔｒａ−Ｚｅｎｅｎｃａ）で市販されているゲフィチニブは、局部進行型または転移性の非小細胞肺癌の患者の、白金系およびドセタキセルによる化学療法がいずれも奏功しなかった後の治療に、単剤療法として指示される。ゲフィチニブの遊離塩基、ＨＣｌ塩、およびジＨＣｌ塩は、１９９６年４月２３日に出願され、１９９６年１０月３１日にＷＯ９６／３３９８０として公開された国際特許出願第ＰＣＴ／ＧＢ９６／００９６１号の手順に従って作製することができる。
【０１３６】
トラスツズマブ（ハーセプチン(HEREPTIN)（登録商標））は、ＨＥＲ２受容体と結合するヒト化モノクローナル抗体である。その元々の適応症は、ＨＥＲ２陽性乳癌である。
【０１３７】
セツキシマブ（アービタックス(ERBITUX)（登録商標））は、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を阻害するキメラマウスヒト抗体である。
【０１３８】
ペルツズマブ（２Ｃ４とも称される、商標オモニターグ(Omnitarg)）は、モノクローナル抗体である。「ＨＥＲ二量体化阻害剤」と称される薬剤系列のそのクラスの最初のものである。それは、ＨＥＲ２と結合することによって、ＨＥＲ２の他のＨＥＲ受容体との二量体化を阻害し、腫瘍増殖の緩徐化がもたらされるとの仮説が立てられている。ペルツズマブは、２００１年１月４日公開のＷＯ０１／００２４５に記載されている。
【０１３９】
リツキシマブは、リツキサン(RITUXAN)（登録商標）およびマブセラ(MABTHERA)（登録商標）として販売されているキメラモノクローナル抗体である。リツキシマブは、Ｂ細胞上のＣＤ２０と結合し、細胞アポトーシスを引き起こす。リツキシマブは、静脈内投与され、関節リウマチおよびＢ細胞非ホジキンリンパ腫の治療用に承認されている。
【０１４０】
オファツムマブは、アーゼラ(ARZERRA)（登録商標）として販売されている完全ヒトモノクローナル抗体である。オファツムマブは、Ｂ細胞上のＣＤ２０と結合し、フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ）およびアレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）による治療に不応の成人における慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ；白血球の癌の一種）を治療するために用いられる。
【０１４１】
アポトーシス誘導療法で用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）もまた、本発明の組合せにおいて使用可能である。Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質のメンバーは、アポトーシスを阻止する。従って、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは、化学療法耐性と関連づけられている。研究によれば、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリーの抗アポトーシスメンバー（すなわち、ｍｃｌ−１）を刺激することが示された。従って、腫瘍においてｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレートするように設計された戦略は、臨床的利益が実証され、現在第ＩＩ／ＩＩＩ相治験にある（すなわち、ジェンタのＧ３１３９ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）。ｂｃｌ−２に対するアンチセンスオリゴヌクレオチド戦略を用いるこのようなアポトーシス誘導戦略は、Water JS et al. (2000), J. Clin. Oncol. 18: 1812-1823；およびKitada S et al. (1994), Antisense Res. Dev. 4: 71-79に述べられている。
【０１４２】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の制御に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるタンパク質キナーゼファミリー、およびそれらのサイクリンと呼ばれるタンパク質ファミリーとの相互作用は、真核生物の細胞周期の進行を制御する。細胞周期の正常な進行には、異なるサイクリン／ＣＤＫ複合体の同調的活性化および不活性化が必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害剤が開発中である。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６を含むサイクリン依存性キナーゼ、およびそれらの阻害剤の例は、例えばRosania et al, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230に記載されている。
【０１４３】
一実施態様では、請求の発明の癌の治療法は、本発明の化合物および／またはその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物、もしくはプロドラッグと、微小管阻害剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤、免疫治療剤、アポトーシス促進剤、ならびに細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択されるものなどの少なくとも１つの抗新生物剤と併用投与することを含む。
【実施例】
【０１４４】
製造
本明細書に記載の誘導体は、引用することによりその全内容が本明細書の一部とされるＷＯ２０１１／１０３５４６Ａ１に概略が示され、下記に詳細に記載される一般法によって製造される。
【０１４５】
実施例１
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１０】
2016504410.tif 000011
ａ）（３Ｓ）−３−［２−（エチルオキシ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
（（３Ｓ）−１−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−３−ピロリジニル）酢酸（９７．０ｇ、４２３ｍｍｏｌ）およびジエチルエーテル（８００ｍＬ）を含有する２Ｌの丸底フラスコに、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（８９．０ｇ、４６５ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（５．１７ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）、およびエタノール（５４．０ｍＬ、９３１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応フラスコにオーバーヘッドスターラーを装着し、この白色反応混合物を一晩室温で撹拌した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応が進行して完了していたことが示された。この反応混合物を２Ｌの分液漏斗に移した。フラスコ内の残留沈殿を１Ｎ  ＮａＨＳＯ４水溶液で溶かし、分液漏斗に加えた。水層を分離し、有機層を１Ｎ  ＮａＨＳＯ４水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、標題化合物を透明な黄色ゲルとして得（９６．６ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 258.0 [M+H]+。
【０１４６】
ｂ）（３Ｓ）−３−（２−ヒドラジノ−２−オキソエチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
粗（３Ｓ）−３−［２−（エチルオキシ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（９６．２ｇ）およびエタノール（７００ｍＬ）を含有する２Ｌの丸底フラスコに、ヒドラジン一水和物（６５重量％、１００ｍＬ）を加えた。この反応フラスコにオーバーヘッドスターラーを装着し、反応混合物を７５℃で一晩撹拌した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、出発材料の目的生成物へのほぼ完全な変換が示された。この溶液を室温まで冷却し、真空濃縮し、エタノール（５００ｍＬ）と共沸させた。得られたゲルをジクロロメタン（５００ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を真空濃縮して標題化合物を無色のゲルとして得（９８．７ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 244.1[M+H]+。
【０１４７】
ｃ）（３Ｓ）−３−［２−（２−｛［（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝ヒドラジノ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
ジクロロメタン（４００ｍＬ）中、粗（３Ｓ）−３−（２−ヒドラジノ−２−オキソエチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（９８．７ｇ）を含有する２Ｌの丸底フラスコに、ジクロロメタン（４００ｍＬ）中、４−ブロモ−２−フルオロ−１−イソシアナトベンゼン（８８．０ｇ、４０６ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この反応フラスコにオーバーヘッドスターラーを装着し、反応混合物を室温で１時間撹拌し、この時点で透明な溶液は乳白色の懸濁液となっていた。固体沈殿を重力濾過により回収し、冷ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、真空炉（５０℃）で一晩乾燥させ、標題化合物を白色の純粋固体として得た（１６７．４ｇ、３工程で８６％）。MS(ES)+ m/e 459.2, 461.1 [M+H]+。
【０１４８】
ｄ）（３Ｓ）−３−｛［４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］メチル｝−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｓ）−３−［２−（２−｛［（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝ヒドラジノ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（２５．０ｇ、５４．４ｍｍｏｌ）を含有する２Ｌの丸底フラスコに、炭酸カリウム（４０．０ｇ、２８９ｍｍｏｌ）、水（１０００ｍＬ）、および１−プロパノール（１００ｍＬ）を加えた。窒素バブラーを備えた還流コンデンサー(condenser)を取り付け、反応混合物を１４０℃で２０時間撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、濾過し、真空濃縮した。残渣を１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（１２５ｍＬ）に取った。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．０ｇ、２８ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で７２時間撹拌した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応は７０％完了まで進行していたことが示された。さらに二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２．０ｇ、９．３ｍｍｏｌ）を追加したところ、反応は＞９５％完了まで進行させることができたが、少量の（＜５％）ビス保護材料（ＭＷ＝５４０）が見られた。この反応物を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液の添加によりｐＨ＝６〜７に調製した。この反応物を分液漏斗に移し、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：ジクロロメタン）により精製し、標題化合物を得た（１２．２ｇ、４８％）。MS(ES)+ m/e 440.8, 442.8 [M+H]+。
【０１４９】
ｅ）４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−５−｛［（３Ｓ）−１−（シクロプロピルカルボニル）−３−ピロリジニル］メチル｝−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン
（３Ｓ）−３−｛［４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］メチル｝−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（２６．５ｇ、６０．１ｍｍｏｌ）を含有する１Ｌの丸底フラスコに、ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ、４００ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した後、真空濃縮した。このフラスコにジクロロメタン（３００ｍＬ）を加え、溶液を氷浴で冷却した。このフラスコにＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４２．０ｍＬ、２４０ｍｍｏｌ）を加えた。次に、このフラスコに塩化ジクロロメタン（５０ｍＬ）中、シクロプロパンカルボニル（５．００ｍＬ、５４．６ｍｍｏｌ）を、添加漏斗を介して加えた。２時間後、ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応は約８０％進行していたことが示された。反応混合物の温度を０℃に維持しながら、ジクロロメタン（２０ｍＬ）中、塩化シクロプロパンカルボニル（１．００ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を、添加漏斗を介して加えた。１時間後、ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応は約９７％進行していたことが示された。ジクロロメタン（５ｍＬ）中、塩化シクロプロパンカルボニル（０．２００ｍＬ、２．１８ｍｍｏｌ）をピペットにより加えた。１時間後、ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応が進行して完了していたことが示された。反応混合物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、分液漏斗に移した。有機層を水、ブライン、および飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：酢酸エチル）により精製し、標題生成物を得た（１６．５ｇ、６７％）。MS(ES)+ m/e 409.0, 410.9 [M+H]+。
【０１５０】
ｆ）７−ブロモ−３−メチルキノリン
エタノール（５０ｍＬ）に溶かしたＫＯＨ（５．６１ｇ、１００ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下、無水エタノール（２００ｍＬ）中、２−アミノ−４−ブロモベンズアルデヒド（６０．６ｇ、３０３ｍｍｏｌ）およびプロピオンアルデヒド（１７．６ｇ、３０３ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。この混合物を還流するまで加熱した後、還流状態で３時間維持した。室温まで冷却した後、反応混合物を濃縮してエタノールを除去し、次に水を加え、この混合物を塩化メチレン（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空濃縮した。粗材料を、ジエチルエーテルを用いて摩砕し、標題生成物（４８．６ｇ、２１９ｍｍｏｌ、収率７２％）を淡褐色固体として得た。MS(ES) m/e 221.9, 223.9 [M+H]+ （臭素パターン）。
【０１５１】
ｇ）（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
マイクロ波照射可能な１０ｍＬのバイアルに、（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（１５０ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１５０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）二ホウ素（１００ｍｇ、０．３９４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（５０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）、および１，４−ジオキサン（４ｍＬ）を充填した。バイアルに蓋をし、窒素でパージし、１００℃で１６時間撹拌した。溶液を室温まで冷却した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、目的のボロン酸エステル（ＭＷ＝４５６）が対応するボロン酸中間体（ＭＷ＝３７４）とともに示された。このバイアルに７−ブロモ−３−メチルキノリン（９０ｍｇ、０．４０５ｍｍｏｌ）および２Ｍ炭酸カリウム水溶液（２．００ｍＬ）を加えた。このバイアルに蓋をし、窒素でパージし、１００℃で撹拌した。１時間後、この溶液を室温まで冷却した。ジオキサン層をピペットによりデカントし、分液漏斗に入れた。有機液を、酢酸エチル（４０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）を用いて抽出した。酢酸エチル層を除去し、水層を酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１ｘ）で洗浄し、硫酸ナトリウムおよびおよそ６０ｍｇのＳｉｌｉｃｙｃｌｅ  Ｓｉ−チオール樹脂で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：ジクロロメタン）により精製し、標題化合物（６１ｍｇ、収率３５％）を得た。MS(ES)+ m/e 472.2 [M+H]+。
【０１５２】
実施例２
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１１】
2016504410.tif 000012
ａ）７−ブロモ−３−クロロキノリン
トルエン（５０ｍＬ）中、２−クロロ−１，１−ジエトキシエタン（４．５０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアルデヒド（３．００ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２８５ｇ、１．５００ｍｍｏｌ）の混合物を、ディーン／スタークトラップを用いて１１０℃で３時間加熱した。次に、溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液とで分液した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出液をシリカゲル上で蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（２０〜５０％ジクロロメタン／ヘキサン）により精製し、標題生成物（１．９７ｇ、８．１２ｍｍｏｌ、収率５４％）を黄色固体として得た。MS (ES+) m/e 241.8/243.8 Brパターン[M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.85 (dd, J=8.84, 2.02 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 8.29 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 8.65 (d, J=2.02 Hz, 1 H) 8.94 (d, J=2.53 Hz, 1 H)。
【０１５３】
ｂ）（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
７−ブロモ−３−クロロキノリン（１．０１当量）を用いて実施例１ｇに記載の手順に従い、標題化合物を得た（５６ｍｇ、３１％）。MS(ES)+ m/e 492.4 [M+H]+。
【０１５４】
実施例３
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１２】
2016504410.tif 000013
ａ）２−（７−ブロモキノリン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン
トルエン（６０ｍＬ）中、２−（２，２−ジエトキシエチル）イソインドリン−１，３−ジオン（３．１６ｇ、１２．００ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアルデヒド（２ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１．９０２ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）の混合物を、ディーン−スターク装置を用いて還流下で一晩加熱した。極暗色／黒色の固体が一晩で沈殿し、これを回収し、トルエンおよびヘキサンで洗浄した後、ＤＭＦで強化したクロロホルムに溶かした。この混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し（２ｘ）、分離中にいずれの沈殿も添加クロロホルム中に確実に溶解させた。有機層を乾燥させ（硫酸ナトリウム）、シリカゲル上で蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン中０〜２％メタノール）により精製し、標題化合物を得た（１．６ｇ、４５％）。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.05 (d, 1 H), 8.57 (d, J = 2.3 Hz, 1 H), 8.35 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.11 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 8.09 - 8.02 (m, 2 H), 8.02 - 7.93 (m, 2 H), 7.87 (dd, J = 1.9, 8.7 Hz, 1 H)。
【０１５５】
ｂ）７−ブロモキノリン−３−アミン
エタノール（２００ｍＬ）中、２−（７−ブロモキノリン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（１０ｇ、２８．３ｍｍｏｌ）の懸濁液をヒドラジン（１．７７７ｍＬ、５６．６ｍｍｏｌ）で処理した後、還流下で１時間加熱した。この混合物を冷却し、沈殿を回収し、少量のエタノールで洗浄し、濾液を蒸発させて灰色の固体を得た。単離された固体を温エタノールに溶かし、シリカゲルに吸着させた。この固体をシリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製し、標題化合物を得た（３．５ｇ、５６％）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 5.83 (s, 2 H) 7.14 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 7.49 (dd, J=8.84, 2.02 Hz, 1 H) 7.54 - 7.65 (m, 1 H) 7.94 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 8.46 (d, J=2.78 Hz, 1 H)。
【０１５６】
ｃ）７−ブロモ−３−フルオロキノリン
クロロベンゼン（２０ｍＬ）中、７−ブロモキノリン−３−アミン（２．００ｇ、８．９７ｍｍｏｌ）の溶液を含有する１００ｍＬの丸底フラスコに、三フッ化ホウ素二水和物（０．９００ｍＬ、１３．６ｍｍｏｌ）を、シリンジを介して滴下した。この溶液を窒素下で、フラスコの温度を５０℃に上げながら撹拌した。この反応混合物に添加漏斗を介して、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１８５ｍＬ、８．９７ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下した（１５分かける）。フラスコの温度を１００℃に上げ、反応混合物を窒素下で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、氷および飽和重炭酸ナトリウム水溶液（約１００ｍＬ）を含有するフラスコに注いだ。この反応フラスコをクロロホルムおよびジクロロメタンで洗浄し、有機洗液（約１００ｍＬ）を、水層とともに分液漏斗に移した。有機層を除去し、水層をクロロホルムで洗浄した（３ｘ）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２０〜５０％ジクロロメタン：ヘキサン）により精製し、標題化合物を得た（７３１ｍｇ、３６％）。MS(ES)+ m/e 227.9 [M+H]+。
【０１５７】
ｄ）（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
７−ブロモ−３−フルオロキノリン（０．９当量）を用いて実施例１ｇに記載の手順に従い、標題化合物を灰白色固体として得た（４０ｍｇ、３４％）。水性後処理の代わりに、デカントしたジオキサン層をそのままシリカゲルパッドに吸着させた。シリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：ジクロロメタン）および逆相ＨＰＬＣ（１０〜８０％アセトニトリル／水＋０．１％ＮＨ４ＯＨ）の両方をこの化合物の精製に用いた。MS(ES)+ m/e 475.8 [M+H]+。
【０１５８】
実施例４
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１３】
2016504410.tif 000014
ａ）（３Ｓ）−３−［２−（エチルオキシ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
１Ｌの丸底フラスコに、（（３Ｓ）−１−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−３−ピロリジニル）酢酸（２０ｇ、８７ｍｍｏｌ）およびジエチルエーテル（２００ｍＬ）を加えた。この溶液を１分間撹拌した後、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１８ｇ、９４ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１．００ｇ、８．１９ｍｍｏｌ）、およびエタノール（１１ｍＬ、１８８ｍｍｏｌ）を加えた。このフラスコに窒素バブラーを取り付け、反応混合物を一晩室温で撹拌した。この混合物にジエチルエーテル（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）を加え、沈殿固体を一度溶解させ、フラスコ内容物を分液漏斗に注いだ。水層を分離し、有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、飽和重炭酸ナトリウム、次いでブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、標題化合物（１９．１ｇ）を得、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 257.8 [M+H]+。
【０１５９】
ｂ）［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］酢酸エチル
（３Ｓ）−３−［２−（エチルオキシ）−２−オキソエチル］−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（１９．１ｇ）を含有する５００ｍＬの丸底フラスコに、ジオキサン中４ＭのＨＣｌ（１００ｍＬ、４００ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。得られた溶液を室温で１時間撹拌した。溶液を真空濃縮してベージュ色の固体を得た。この固体をジクロロメタン（ＤＣＭ）（３００ｍＬ）に懸濁させ、室温で撹拌しながらＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５．９ｍＬ、１４８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた黄色溶液に塩化プロパノイル（６．８７ｇ、７４．２ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応物を室温で３０分間撹拌し、この時点でＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応が進行して完了していたことが示された。この溶液をＤＣＭ（５００ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（４００ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（４００ｍＬ）、およびブライン（４００ｍＬ）で順次洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮乾固し、標題化合物を黄色油状物とし得（１６ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 213.9 [M+H]+。
【０１６０】
ｃ）２−［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］アセトヒドラジド
［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］酢酸エチル（１６ｇ）を含有する１Ｌの丸底フラスコに、エタノール（１００ｍＬ）およびヒドラジン一水和物（７０ｍＬ、９４０ｍｍｏｌ）を加えた。このフラスコに窒素バブラーを備えた還流コンデンサーを取り付けた。このフラスコを油浴に入れ、撹拌しながら一晩８０℃に加熱した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応が進行して完了していたことが示された。この溶液を室温まで冷却し、真空濃縮し、エタノールと共沸させた（５×１００ｍＬ）。得られた油状物をＤＣＭ（３００ｍＬ）で希釈し、硫酸マグネシウムプラグに通した。硫酸マグネシウムをＤＣＭ（３００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空濃縮し、標題化合物を透明油状物として得（１５ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 199.9 [M+H]+。
【０１６１】
ｄ）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−｛［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］アセチル｝ヒドラジンカルボキサミド
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中、粗２−［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］アセトヒドラジド（１５ｇ）を含有する１Ｌの丸底フラスコに、イソシアン酸４−ブロモ−２−フルオロフェニル（１６．２ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）をピペットにより滴下した。さらなるジクロロメタン（６０ｍＬ）を用いて、イソシアン酸塩を含有するバイアルをすすぎ、これも反応フラスコに加えた。溶液は１０分以内に撹拌白色沈殿に変わった。このフラスコを窒素バブラー下に置き、室温で撹拌した。２時間後、白色沈殿が増え、その結果撹拌が困難になった。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、出発ヒドラジドは残留していないことが示された。溶液を真空濃縮した。固体をヘキサン（５００ｍＬ）で洗浄し、濾過し、真空下で４８時間乾燥させ、標題化合物を白色固体として得（３０．５ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 414.9, 416.9 [M+H]+。
【０１６２】
ｅ）４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−５−｛［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］メチル｝−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン
粗Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−｛［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］アセチル｝ヒドラジンカルボキサミド（３０．５ｇ）および炭酸カリウム（５１ｇ、３７０ｍｍｏｌ）を含有する２Ｌの丸底フラスコに、水（１０００ｍＬ）および１−プロパノール（１００ｍＬ）を加えた。窒素バブラーを備えた還流コンデンサーを取り付け、反応混合物を１４０℃で撹拌した。１６時間後、反応混合物を冷却した後、濾過した。濾液を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液の添加によりｐＨ＝６〜７に調整した。目的生成物を水層からジクロロメタンで抽出した（３ｘ）。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：酢酸エチル）により精製し、標題化合物を白色固体として得た（１２ｇ、５工程で３４％）。MS(ES)+ m/e 396.7, 398.9 [M+H]+。
【０１６３】
ｆ）（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
１０ｍＬのマイクロ波照射可能なバイアルに、７−ブロモ−３−フルオロキノリン（２６０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）二ホウ素（３１０ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３９０ｍｇ、３．９７ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（７５ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、および１，４−ジオキサン（６ｍＬ）を加えた。バイアルに蓋をし、窒素でパージし、反応混合物を１００℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、目的のキノリンボロン酸中間体の形成が示された。このバイアルに、（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（４５０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）および２Ｍ炭酸カリウム水溶液（３．００ｍＬ）を加えた。バイアルに蓋をし、窒素でパージし、反応混合物を１００℃で撹拌した。２時間後、この溶液を室温まで冷却し、１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でｐＨ＝６〜７に調整した。この溶液をジクロロメタン（７０ｍＬ）で希釈し、分液漏斗に移した。有機溶液を水（５０ｍＬ）で洗浄し、水層をジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムおよびおよそ１００ｍｇのＳｉｌｉｃｙｃｌｅ  Ｓｉ−チオール樹脂で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：酢酸エチル）により精製し、標題化合物をクリーム色の固体として得た（３９４ｍｇ、収率７４％）。MS(ES)+ m/e 463.8 [M+H]+。
【０１６４】
実施例５
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１４】
2016504410.tif 000015
ａ）７−ブロモ−３−メチルキノリン（１．０５当量）を用いて実施例４ｆに記載の手順に従い、標題化合物をクリーム色の固体として得た（３３５ｍｇ、６２％）。MS(ES)+ m/e 460.5 [M+H]+。
【０１６５】
実施例６
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１５】
2016504410.tif 000016
ａ）７−ブロモ−３−クロロキノリン（１．００当量）を用いて実施例４ｆに記載の手順に従い、標題化合物をクリーム色の個体として得た（１２７ｍｇ、５８％）。MS(ES)+ m/e 480.1 [M+H]+。
【０１６６】
実施例７
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１６】
2016504410.tif 000017
ａ）（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
乾燥した二口１００ｍＬ丸底フラスコを窒素雰囲気下に置き、（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（３．００ｇ、７．５５ｍｍｏｌ）を充填した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（４０ｍＬ）、次いでヨードメタン（０．７００ｍＬ、１１．２ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を氷浴で０℃に冷却した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散物、０．５４ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。この反応混合物を窒素下で維持し、氷浴を室温まで温めながら撹拌した。２時間後、ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、反応が進行して完了していたことが示された。この反応混合物に水（１４ｍＬ）をゆっくり加えた後、酢酸エチル（１００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）を含有する分液漏斗に移した。有機層を分離して取っておいた。水層を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液の添加によりｐＨ＝６に調整した。水層を酢酸エチルで洗浄した（２ｘ）。合わせた有機層を１：１  水：ブライン溶液で洗浄した（５ｘ）。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、標題化合物を白色固体として得（２．９５ｇ）、これを精製せずに次に送った。MS(ES)+ m/e 411.3, 413.3 [M+H]+。
【０１６７】
ｂ）（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
粗（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（２．９５ｇ）を含有する５００ｍＬの丸底フラスコに、ビス（ピナコラト）二ホウ素（２．００ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３．００ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（０．５０ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）、および１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）を加えた。コンデンサーを取り付け、溶液を１００℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、出発材料が消費され、目的のボロン酸中間体が存在していたことが示された。この反応混合物を室温まで冷却し、フラスコに７−ブロモ−３−メチルキノリン（１．６ｇ、７．２ｍｍｏｌ）、および２Ｍ炭酸カリウム水溶液（１５．００ｍＬ）を充填した。この反応混合物を１００℃で１時間撹拌した後、室温まで冷却した。この溶液を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液の添加によりｐＨ＝７に調整した。目的生成物を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムおよびおよそ１ｇのＳｉｌｉｃｙｃｌｅ  Ｓｉ−チオール樹脂で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：ジクロロメタン）、次いで逆相ＨＰＬＣ（３５％アセトニトリル／６５％０．３Ｍギ酸アンモニウム水溶液）により精製し、標題化合物を白色固体として得た（２．３ｇ、２工程で収率６４％）。MS(ES)+ m/e 474.4 [M+H]+。
【０１６８】
実施例８
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１７】
2016504410.tif 000018
ａ）３−クロロ−７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）キノリン
マイクロ波照射可能な５ｍＬのバイアルに、７−ブロモ−３−クロロキノリン（１００ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）二ホウ素（１１０ｍｇ、０．４３３ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１６０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４０ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）、および１，４−ジオキサン（２ｍＬ）を加えた。バイアルに蓋をし、窒素でパージし、１００℃で撹拌した。４時間後、この反応混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈した。溶液をセライトおよび硫酸ナトリウムのプラグで濾過し、このプラグをジクロロメタン（２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空濃縮し、残渣をジクロロメタンに溶かし、水で洗浄した（１ｘ）。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：ジクロロメタン）により精製し、標題化合物を得た（１２０ｍｇ、８９％）。MS(ES)+ m/e 289.8 [M+H]+。
【０１６９】
ｂ）（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
マイクロ波照射可能な５ｍＬのバイアルに、（Ｓ）−４−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（１６５ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）、３−クロロ−７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）キノリン（１０７ｍｇ、０．３７０ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）、および２Ｍ炭酸カリウム水溶液（１．０００ｍＬ）を加えた。バイアルに蓋をし、窒素でパージし、１００℃で撹拌した。２時間後、バイアルを冷却させて相に分けた。ピペットを用いてジオキサン層をデカントし、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈した。この有機層をセライトおよび硫酸ナトリウムのプラグで濾過した。このプラグをジクロロメタン（３０ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１０％メタノール：酢酸エチル）により精製し、標題化合物を得た（９５ｍｇ、４６％）。MS(ES)+ m/e 480.2 [M+H]+。
【０１７０】
ｃ）（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン（１１７ｍｇ、０．２４４ｍｍｏｌ）を含有する１０ｍＬの丸底フラスコに、炭酸カリウム（１００ｍｇ、０．７２４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２ｍＬ）、およびヨードメタン（２０μＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃で１６時間撹拌し、この時点でさらなるヨードメタン（２０μＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を追加した。反応混合物を８０℃で１６時間撹拌した後、ＬＣＭＳによりアリコートを分析したところ、＞９５％完了まで進行していたことが示された。この反応混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、ブラインで洗浄した（５ｘ）。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（２０〜５０％アセトニトリル：０．１％ＴＦＡ含有水）により精製し、回収された生成物を、そのアセトニトリル（２ｍＬ）中の溶液をマクロ孔質固相抽出プラグ（ＰＬ−ＨＣＯ３、１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に通すことにより中和し、標題生成物を、真空濃縮後に白色固体として得た（６１ｍｇ、４６％）。MS(ES)+ m/e 494.1 [M+H]+。
【０１７１】
実施例９
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１８】
2016504410.tif 000019
ａ）（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンを用いて実施例８ｃに記載の手順に従い、標題化合物を淡褐色固体として得た（６０ｍｇ、４９％）。MS(ES)+ m/e 506.0 [M+H]+。
【０１７２】
実施例１０
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
【化１９】
2016504410.tif 000020
ａ）（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンを用いて実施例８ｃに記載の手順に従い、標題化合物を淡褐色固体として得た（４５ｍｇ、３４％）。MS(ES)+ m/e 477.9 [M+H]+。
【０１７３】
生物学的データ
本発明の例示的化合物（実施例１〜１０）は、本明細書に記載の生物学的アッセイのうち少なくとも１つに従って試験し、ＦＡＳの阻害剤であることが判明した。
【０１７４】
ＦＡＳアッセイ
ＦＡＳ活性は、以下の２つのアッセイのうちの１つによって測定した。
【０１７５】
アッセイ＃１：
ＦＡＳ活性の阻害は、ＦＡＳアッセイの反応停止後に残ったＮＡＤＰＨ基質の検出に基づいて測定することができる。このアッセイは、３８４ウェル形式での１０μＬエンドポイントアッセイとして行われ、ここで、反応物は、５０ｍＭリン酸ナトリウム  ｐＨ７．０の中に２０μＭマロニル−ＣｏＡ、２μＭアセチル−ＣｏＡ、３０μＭ  ＮＡＤＰＨ、および４０ｎＭ  ＦＡＳを含有する。このアッセイは、５μＬのマロニル−ＣｏＡ溶液を、次いで酵素溶液（アセチル−ＣｏＡおよびＮＡＤＰＨを含有）を、化合物のＤＭＳＯ溶液１００ｎＬを予め分注しておいた黒色の低容量アッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  ７８４０７６）中に、順次分注することで行われる。この反応物を周囲温度で６０分間インキュベートした後、５０ｍＭリン酸ナトリウム  ｐＨ７．０中、９０μＭレサズリン、０．３ＩＵ／ｍＬジアホラーゼから構成される発色溶液５μＬで反応を停止させる。発色反応物は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＡｎａｌｙｓｔまたはＡｃｑｕｅｓｔ（または同等物）プレートリーダーにて、５３０ｎｍ励起波長フィルター、５８０ｎｍ発光フィルター、および５６１ｎｍダイクロイックフィルターを用いて読み取る。試験化合物は、純ＤＭＳＯ中、１０ｍＭの濃度で調製する。阻害曲線については、化合物を、３倍段階希釈を用いて希釈し、１１種の濃度（例えば、２５μＭ〜０．４２ｎＭ）で試験する。曲線の解析は、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅおよびＸＬｆｉｔを用いて行い、結果は、ｐＩＣ５０値として表す。
【０１７６】
アッセイ＃２：
ＦＡＳの阻害はまた、チオ反応性クマリン色素によるＣｏＡ生成物の検出に基づいて定量することもできる。このアッセイは、３８４ウェル形式での１０μＬエンドポイントアッセイとして行われ、ここで、反応物は、５０ｍＭリン酸ナトリウム  ｐＨ７．０および０．０４％Ｔｗｅｅｎ−２０中、２０μＭマロニル−ＣｏＡ、２０μＭアセチル−ＣｏＡ、４０μＭ  ＮＡＤＰＨ、および２ｎＭ  ＦＡＳを含有する。このアッセイは、５μＬの酵素溶液を、化合物のＤＭＳＯ溶液１００ｎＬを予め分注しておいた黒色低容量アッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  ７８４０７６）に添加することで行われる。３０分後、５μＬの基質を添加し、この反応物を周囲温度でさらに６０分間インキュベートする。次に、５０μＭ  ＣＰＭ（７−ジエチルアミノ−３−（４’−マレイミジルフェニル）−４−メチルクマリンＣＰＭ；チオ反応性色素）を含有する６Ｍグアニジン−ＨＣｌ  １０μＬで反応を停止させ、３０分間インキュベートする。このプレートを、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）または同等のプレートリーダーにて、３８０ｎｍ励起波長フィルターおよび４８６ｎｍ発光フィルターを用いて読み取る。データのフィッティングおよび化合物の調製は上記のとおりに行う。
【０１７７】
脂肪生成アッセイ
培養した一次ヒト脂肪前駆細胞（Ｚｅｎ−Ｂｉｏ、カタログ番号ＡＳＣ０６２８０１）を、０．２％ゼラチン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｇ−６６５０）でコーティングした９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号３５９８）にて、１０％熱失活ウシ胎仔血清（ＩｎｖｉｔｒｏＧｅｎ、カタログ番号１６０００−０４４）を添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２培地（ＩｎｖｉｔｒｏＧｅｎ  カタログ番号１１３３０−０３２）中、コンフルエンス（３×１０４細胞／ウェル）で播種する。翌日（第１日）、種培地を、１０％熱失活ウシ胎仔血清、２００μＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｉ−５８７９）、２０ｎＭデキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｄ−８８９３）、２０ｎＭ  ＧＷ１９２９（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｇ５６６８）、および２０ｎＭインスリン（ＩｎｖｉｔｒｏＧｅｎ、カタログ番号０３−０１１０ＳＡ）を添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２培地から構成される分化培地に置き換えることで細胞分化を誘導する。第７日に、分化培地を、１０％熱失活血清および２０ｎＭインスリンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２からなるリフィード培地(re-feed medium)に置き換える。この時点でこの培地に適切な濃度の試験化合物および対照を添加する。第１２日に、細胞トリグリセリドの相対量を、Ｔｒｉｎｄｅｒキット（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号ＴＲ０１００）を用いて評価する。リフィード培地を吸引し、細胞をＰＢＳ（ＩｎｖｉｔｒｏＧｅｎ、カタログ番号１４１９０−１４４）で洗浄し、キット製造者のプロトコールに従ってアッセイを行う。簡単に述べると、アッセイを行う前に、再構成した溶液ＡおよびＢを、０．０１％ジギトニン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｄ−５６２８）と混合して細胞に添加し、プレートを３７℃で１時間インキュベートする。吸光度を５４０ｎｍで読み取る。データは、まず、下式：１００＊（（ＵＮＫ−対照１）／（対照２−対照１））を用いて標準化し、式中、対照１は、０％応答対照のロバスト平均であり、対照２は、１００％応答対照のロバスト平均である。化合物の複数の希釈物を試験する場合、ｐＸＣ５０を、下式：ｙ＝（ａ−ｄ）／（１＋（ｓ／ｃ）＾ｂ）＋ｄ、および外れ値の重み付けのためのＩＲＬＳ（反復再重み付け最小二乗(Iterative Re-weighted Least Squares)）アルゴリズムを用いた４パラメーター曲線フィッティングを用いた曲線から算出する(Mosteller, F. & Tukey J.W. (1977) Data Analysis and Regression, pp 353-365, Addison-Wesley)。
【０１７８】
ＤＭＰＫアッセイ
マウスおよびラット薬物動態試験は、下記の例外以外は、一般に、Xiang et al. (Preclinical drug metabolism and pharmacokinetic evaluation of GW844520, a novel mitochondrial electron transport inhibitor.  H Xiang, J McSurdy-Freed, G Subbanagounder, E Hugger, R Bambal, C Han, S Ferrar, D Gargallo and CB Davis. (2006)  Journal of Pharmaceutical Sciences, 95:2657-2672)およびDavis et al. (Comparative preclinical drug metabolism and pharmacokinetic evaluation of novel 4-aminoquinoline anti-malarials. CB Davis, R Bambal, GS Moorthy, E Hugger, H Xiang, B Kevin Park, AE Shone, PM O’Neill and SA Ward (2009) Journal of Pharmaceutical Sciences, 98:362-377)に記載のとおりに行った。一部のマウス試験では、混成研究デザインを使用するのではなく、挿管動物を用い、各個体（ｎ＝２／化合物／投与経路）から連続的な血液サンプルを採取した。一部のｉｖラット試験では、薬物を１時間または２時間注入し、単一の血液サンプルを採取して、定常状態条件を仮定するクリアランスを評価した（ｎ＝２／化合物）。このアッセイを、さらなる研究のための化合物の優先順位をつけるための最初のＰＫスクリーンとして用いた。
【０１７９】
生物学的および薬物動態データ
本発明の例示的化合物は、ヒトＦＡＳの有力な阻害剤であることが判明した。本発明の化合物に関する少なくとも１つの試験または複数の試験の平均値から決定されたヒトＦＡＳに対するＩＣ５０値は＜２０ｎＭであった。
【０１８０】
齧歯類薬物動態（ＰＫ）データは、上記の方法に従い、例示的化合物について収集した。これらのデータを表１に示す。ｉｎ  ｖｉｖｏクリアランス（Ｃｌ）データは、１〜２つの試験で１〜４個体の動物の平均値として報告され、次のように分類される。ラットでは、「低」クリアランスは＜１７ｍＬ／分／ｋｇと指定され、「中」クリアランスは１７〜３９ｍＬ／分／ｋｇと指定され、「高」クリアランスは＞３９ｍＬ／分／ｋｇと指定される。マウスでは、「低」クリアランスは＜３０ｍＬ／分／ｋｇと指定され、「中」クリアランスは３０〜７０ｍＬ／分／ｋｇと指定され、「高」クリアランスは＞７０ｍＬ／分／ｋｇと指定される。２〜３個体の動物の試験についての平均用量標準化ＡＵＣ（ＤＮＡＵＣ）として報告されるｉｎ  ｖｉｖｏ経口暴露（ｐｏ）データは、ＤＮＡＵＣ≦１０１ｎｇ・ｈ／ｍＬ／ｍｇ／ｋｇが「不十分」、ＤＮＡＵＣ＞１０１ｎｇ・ｈ／ｍＬ／ｍｇ／ｋｇが「十分」と分類される。異なる条件で複数の試験が行われた場合には、データの全体を考慮した。「不十分」と「十分」の両方の経口暴露が見られた場合には混合型の最適化されていない結果を表すために「混合型(mixed)」の表示が使用される。
【０１８１】
比較のため、引用することによりその全内容が本明細書の一部とされるＷＯ２０１１／１０３５４６Ａ１からの、代表的な関連の２種のトリアゾロン実施例１２４および１９６のＰＫデータを示し、この構造を下記に示す。
【０１８２】
５−｛［（３Ｓ）−１−（シクロプロピルカルボニル）−３−ピロリジニル］メチル｝−４−［２−フルオロ−４−（７−キノリニル）フェニル］−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン
【化２０】
2016504410.tif 000021
【０１８３】
４−［２−フルオロ−４−（７−キノリニル）フェニル］−５−｛［（３Ｓ）−１−プロパノイル−３−ピロリジニル］メチル｝−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン
【化２１】
2016504410.tif 000022
【０１８４】
本明細書の例示的化合物において、キノリンの３位における置換基の組み込みは、ラットおよび／またはマウスＰＫプロファイルに、親参照例に比べて、注目に値する改善（高から中へもしくは中から低へなどのｉｖ  Ｃｌの低減、または不十分から十分へまたは不十分から混合型へなどの経口暴露の改善）をもたらした。下記の表１参照。
【表１】
2016504410.tif 000023
【手続補正書】
【提出日】平成27年9月28日(2015.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；
（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン；および
（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−フルオロキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オン
からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
式（Ｉ）
【化１】
2016504410.tif 000028
を有する化合物（Ｓ）−４−（２−フルオロ−４−（３−メチルキノリン−７−イル）フェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
式（ＩＩ）
【化２】
2016504410.tif 000029
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−１−メチル−３−（（１−プロピオニルピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
式（ＩＩＩ）
【化３】
2016504410.tif 000030
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
式（ＩＶ）
【化４】
2016504410.tif 000031
を有する化合物（Ｓ）−４−（４−（３−クロロキノリン−７−イル）−２−フルオロフェニル）−３−（（１−（シクロプロパンカルボニル）ピロリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５（４Ｈ）−オンまたはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
ラットに静脈投与した場合に３９ｍＬ／分／ｋｇ以下のクリアランスを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
マウスに静脈投与した場合に３０ｍＬ／分／ｋｇ未満のクリアランスを有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
齧歯類に経口投与した場合に約１０１ｎｇ・ｈ／ｍＬ／ｍｇ／ｋｇよりも大きいＤＮＡＵＣを達成することができる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる医薬組成物。
【請求項１０】
癌を治療するための、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
治療上有効な量の
ａ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩；および
ｂ）少なくとも１種類の抗新生物薬
含んでなる、必要とする哺乳動物において癌の治療に使用するための組み合わせ。
【請求項１２】
前記癌が、胃癌、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽細胞腫、結腸癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎臓癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、膀胱癌、胃癌、ならびに骨および甲状腺の巨細胞腫瘍からなる群から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物または請求項１１に記載の使用のための組み合わせ。
【請求項１３】
少なくとも１種類の抗新生物薬と共に癌の治療に使用するための、請求項９に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2016504410.tif 000032
2016504410.tif 000033