(57)【要約】本書類はポドフィロトキシン由来のゲム-ジふっ化C-グリコシド化合物のクラスの合成物を説明し、それはガンの処置のために腫瘍学において、排他的ではなく、使用することができる。さらに詳しくは、ポドフィロトキシンのゲム-ジふっ化C-グリココンジュゲーテッド誘導体は、優れたコンフォメーションおよび化学的安定性、ならびに薬物耐性ガン細胞系に対して見せる優れた細胞毒性を示す。
2016504394.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I：
【化１】
2016504394.tif 000044
（I）
式中：
Rは、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、アセチル、もしくはベンゾイル基から選ばれる基であり、
R1およびR2は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基、もしくはCR'R''タイプのアセタール基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であり、そこで、R'およびR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アリール、もしくはアルキルアリール基から選ばれる基であり、
R3は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれる基であり、
R4は、OR'''、NGR'GR''、N3、またはフタルイミドを表し、そこで、R'''は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であり、ならびにGR'およびGR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンジオル（benzyol）、アセチル、アルキルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、もしくはベンジルオキシカルボニル基から選ばれる基であり、
R5は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アセチル、ベンジル、PO3H、もしくはPO3Na基から選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
式II：
【化２】
2016504394.tif 000045
（II）
式中：
R4、R5は、請求項1に規定されるようなものであり、
R6は、水素原子かまたはアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、もしくはアルキルヘテロアリール基から選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項３】
式III：
【化３】
2016504394.tif 000046
（III）
式中：
R5は、水素原子か、またはアルキル、-PO3H、もしくは-PO3Naから選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項４】
前記化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである、請求項3の化合物。
【請求項５】
前記化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである、請求項3の化合物。
【請求項６】
式IV：
【化４】
2016504394.tif 000047
式IV
式中、R5は式IからIIIにおいて規定するようなものである化合物、および
式V：
【化５】
2016504394.tif 000048
式V
の化合物または式VI：
【化６】
2016504394.tif 000049
式VI
の化合物で、
式中、
R1、R2、R3、R4は、請求項1において式Iに規定するようなものであり、
RはC1-C12アルキルであり、および
式中、式IVの前記化合物は、エピマー化によって、および次いでポドフィロトキシンまたは脱メチル化されたポドフィロトキシンの位置4においてアルコール官能基を、続いてアミン基にまで還元されるアジド基によって置換することにより得られるものであるもの
の間でのカップリングステップを含む、請求項1から5のいずれか一項に従う化合物を調製するための方法。
【請求項７】
式（VII）または（VIII）：
【化７】
2016504394.tif 000050
(VII)
2016504394.tif 000051
(VIII)
式中、Rは、メチル、エチル、ブチル、またはイソプロピル基から選ばれる基である、化合物。
【請求項８】
ガンの処置のための薬を調製するための請求項1から5のいずれか一項に従う少なくとも一の化合物の使用。
【請求項９】
ガンの処置のための請求項1から5のいずれか一項に従う少なくとも一の化合物の使用。
【請求項１０】
前記使用は放射線療法との組み合わせである、請求項9の使用。
【請求項１１】
前記使用は一またはそれよりも多くの他の抗ガン剤との組み合わせである、請求項9の使用。
【請求項１２】
ガンは、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍から選ばれる、請求項8-11のいずれか一項の使用。
【請求項１３】
ペイシェントに請求項1から5のいずれか一項の化合物の治療上有効な量を施与することを含む、ガンを患うペイシェントを処置する方法。
【請求項１４】
ペイシェントに請求項1から5のいずれか一項の化合物の治療上有効な量を放射線療法と組み合わせて施与することを含む、ガンを患うペイシェントを処置する方法。
【請求項１５】
ペイシェントに請求項1から5のいずれか一項の化合物の治療上有効な量を一またはそれより多くの他の抗ガン剤と組み合わせて施与することを含む、ガンを患うペイシェントを処置する方法。
【請求項１６】
ガンは、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍から選ばれる、請求項13-15のいずれか一項の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は2013年1月14日付け出願の米国仮特許出願第61/752075号の優先権を主張し、その明細はここに参照することにより組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
（a）フィールド
開示される主題は概して、新規な化学的化合物および方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、ポドフィロトキシンのゲム-ジフッ素化（difluoronated）化合物との新規誘導体であり、それは改良されたコンフォメーションおよび化学的安定性をもち、および改善された細胞毒性をもつもの、そしてそのような化合物を合成し、および使用する方法を提供する。好適な化合物は、たとえば、ガンなどのような異常な細胞増殖の処置のために有用である。
【０００３】
（b）関連する先行技術
ポドフィロトキシン1は、二種の植物であるPodophyllum peltatum（ポドフィルム・ペルタトゥム）（北米）およびPodophyllum emodi（ポドフィルム・エモディー）（アジア）の根から分離されるリグナンである。それは、チューブリンの重合を抑制することによって強力な抗有糸分裂活性をもつ。化学療法で使用されるには余りにも毒性であり、構造的修飾後の多くの抗腫瘍化合物をもたらした。それらの中で、グリコシル化された誘導体は、通常、低毒性で、そしてより一層水溶性である化合物であり、実用化されてきている。たとえば、エトポシド2は、小細胞肺ガン、膀胱ガンおよび精巣ガン、リンパ腫、急性白血病、およびカポジ肉腫の処置において使用される。
【化１】
2016504394.tif 000003
【０００４】
たとえば、GL-331 5、NPF 6またはTOP-53 7などのようなポドフィロトキシンの含窒素誘導体もまた非常に興味深い活性を示す。
【化２】
2016504394.tif 000004
【０００５】
たとえば、化合物2、3および4などのようなデメチルエピポドフィロトキシンの構造に由来するこれらの分子は、トポイソメラーゼIIのインヒビター（抑制物質、抑制剤ともいう）であり、二本のDNA鎖のニッキングおよび再構成を触媒する酵素である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ポドフィロトキシンの含窒素化合物は、ゲム-ジふっ化グリコシドで置換されるアミン官能基を有し、米国特許第8236935号明細書において報告されている。これらの化合物は、8および9であり、著しい細胞毒性を有し、そしてグリコシドモイエティ（グリコシド一部分）の存在は、水性媒体においてこれらの化合物の溶解性を改善し、およびゲム-ジフルオロメチレン基は酸素原子を擬態するだけでなく、またコア構造からのグリコシドモイエティの加水分解を防止し、そのようにして、これらの分子の薬理活性が改善される。しかし、このクラスの分子は不安定なコンフォメーション（立体配座）を有するアノマー混合物として存在し、それは開環プロセスによって導かれる劣化に悩まされることがあり、このようにして生物学的活性の損失、および潜在的に貧弱な薬物動態特性がもたらされる。
【化３】
2016504394.tif 000005
【０００７】
したがって、優れたコンフォメーション安定性をもつゲム-ジフッ素化化合物によるポドフィロトキシンの誘導体についての必要性が存在する。
【０００８】
さらに、優れた化学的安定性をもつゲム-ジフッ素化化合物によるポドフィロトキシンの誘導体についての必要性が存在する。
【０００９】
さらに、ガン細胞に対する優れた細胞毒性をもつゲム-ジフッ素化化合物によるポドフィロトキシンの誘導体についての必要性が存在する。
【００１０】
また、ゲム-ジフッ素化化合物によるポドフィロトキシンの誘導体を合成する新規な合成方法およびプロセスについての必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
概要
【００１２】
本発明は、ゲム（gem）-ジフッ素化、および固定グリコシド（配糖体）リングによるポドフィロトキシンの誘導体の新規なクラスを説明する。優れたコンフォメーションおよび化学的安定性に加えて、本発明の化合物の新規なクラスはまた、いくつかのガン細胞系に対して、特に薬剤耐性であるものに対しても、予想外に大幅に改善された細胞毒性を見せる。また、本発明はこれらの新規化合物を合成するために新規な合成方法およびプロセスについて説明し、それらは著作物のある手順を介して以前にアクセスすることはできないものである。そのような化合物は、単独で、またはたとえば、化学療法などのような他の処置に関係してのいずれかで、ガンの異なるタイプの処置において化学療法剤として用いることができる。
【００１３】
実施態様によれば、式I：
【化４】
2016504394.tif 000006
（I）
式中：
Rは、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、アセチル、もしくはベンゾイル基から選ばれる基であることができ、
R1およびR2は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基、もしくはCR'R''タイプのアセタール基から選ばれるヒドロキシル（水酸）基のための保護基であり、そこで、R'およびR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アリール、もしくはアルキルアリール基から選ばれる基であり、
R3は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれる基であることができ、
R4は、OR'''、NGR'GR''、N3、またはフタルイミドを表し、そこで、R'''は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であることができ、ならびにGR'およびGR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンジオル（benzyol）、アセチル、アルキルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、もしくはベンジルオキシカルボニル基から選ばれる基であり、
R5は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アセチル、ベンジル、PO3H、もしくはPO3Na基から選ばれる基であることができる、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する。
【００１４】
別の実施態様によれば、式II：
【化５】
2016504394.tif 000007
（II）
式中：
R4、R5は、上に規定されるようなものであり、
R6は、水素原子かまたはアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、もしくはアルキルヘテロアリール基から選ばれる基であることができる、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する。
【００１５】
別の実施態様によれば、式III：
【化６】
2016504394.tif 000008
（III）
式中：
R5は、水素原子かまたはアルキル、-PO3H、もしくは-PO3Na基から選ばれる基であることができる、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する。
【００１６】
化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである。
【００１７】
化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである。
【００１８】
別の実施態様によれば、式IV：
【化７】
2016504394.tif 000009
式IV
式中、R5は式IからIIIにおいて規定するようなものであることができる化合物、および
式V：
【化８】
2016504394.tif 000010
式V
の化合物または式VI：
【化９】
2016504394.tif 000011
式VI
の化合物で、
式中、
R1、R2、R3、R4は、式Iにおいて規定するようなものであり、
RはC1-C12アルキルであることができ、および
式中、式IVの前記化合物は、エピマー化によって、および次いでポドフィロトキシンまたは脱メチル化されたポドフィロトキシンの位置4においてアルコール官能基を、続いてアミン基にまで還元されるアジド基によって置換することにより得られることができるものであるもの
の間でのカップリングステップを含む、本発明の化合物を調製するための方法を提供する。
【００１９】
別の実施態様によれば、式（VII）または（VIII）：
【化１０】
2016504394.tif 000012
(VII)
2016504394.tif 000013
(VIII)
式中、Rは、メチル、エチル、ブチル、またはイソプロピル基から選ばれる基であることができる、化合物を提供する。
【００２０】
別の実施態様によれば、ガンの処置のための薬を調製するための本発明に従う少なくとも一の化合物の使用を提供する。
【００２１】
別の実施態様によれば、ガンの処置のための本発明に従う少なくとも一の化合物の使用を提供する。
【００２２】
使用は放射線療法との組合せであることができる。
【００２３】
使用は一またはそれよりも多く（一以上）の他の抗ガン剤との組合せであることができる。
【００２４】
ガンは、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍から選ぶことができる。
【００２５】
別の実施態様によれば、ペイシェント（患者などの受動体）に本発明の化合物の治療上有効な量を施与することにより、ガンを患うペイシェントを処置する方法を提供する。
【００２６】
別の実施態様によれば、ペイシェントに本発明の化合物の治療上有効な量を放射線療法と組み合わせて施与することにより、ガンを患うペイシェントを処置する方法を提供する。
【００２７】
別の実施態様によれば、ペイシェントに本発明の化合物の治療上有効な量を一以上の他の抗ガン剤と組み合わせて施与することにより、ガンを患うペイシェントを処置する方法を提供する。
【００２８】
ガンは、膀胱のガン、脳のガン、胸部（乳房）のガン、子宮のガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、およびリンパ性悪性腫瘍から選ぶことができる。
【００２９】
次の用語を以下に規定する。
【００３０】
用語「アルキル」は、それ自体によって、または別の置換基の一部として、特に明記しない限り、線状（すなわち非分枝状）または分枝状の鎖、または環状の炭化水素ラジカル、またはそれらの組合せを意味し、それは、十分に飽和されるか、モノ-またはポリ不飽和であることができ、およびジ-および多価ラジカルで、指定の炭素原子の数を有するもの（すなわち、C1-C10は、一から十個の炭素を意味する）を含むことができる。飽和炭化水素ラジカルの例には、制限されないが、たとえば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、シクロヘキシル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチルや、たとえば、n-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチルの同族体および異性体、およびその他同種類のものが含まれる。不飽和アルキル基は、一以上の二重結合または三重結合を有するものである。不飽和アルキル基の例には、制限されないが、ビニル、2-プロペニル、クロチル、2-イソペンテニル、2-(ブタジエニル)、2,4-ペンタジエニル、3-(1,4-ペンタジエニル)、エチニル、1-および3-プロピニル、3-ブチニル、およびより一層高級な同族体および異性体が含まれる。炭化水素基に制限されるアルキル基は「ホモアルキル」と称される。
【００３１】
用語「フルオロアルキル」は、一以上の水素原子がフッ素原子で置換された、先に規定されたようなアルキルを意味する。
【００３２】
用語「アルキレン」は、それ自体または別の置換基の一部として、アルキルから誘導される二価ラジカルで、制限されないが、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH=CHCH2-、-CH2C≡CCH2-、-CH2CH2CH(CH2CH2CH3)CH2-によって例示されるようなものを意味する。典型的には、アルキル（またはアルキレン）基は、1から24個までの炭素原子を有し、これらの基が10個以下の炭素原子を有するのが本発明において好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、より一層短い鎖のアルキルまたはアルキレン基であり、大抵は8個以下の炭素原子を有する。
【００３３】
用語「アルキニル」は、少なくとも一の炭素-炭素三重結合が含まれる炭素鎖を意味し、そしてこれは線状もしくは分枝状またはそれらの組合せであってもよい。アルキニルの例としては、エチニル、プロパルギル、3-メチル-1-ペンチニル、2-ヘプチニルおよびその他同種類のものが挙げられる。
【００３４】
用語「シクロアルキル」は単環式または二環式飽和炭素環を意味し、それぞれが3から10個までの炭素原子を有する。シクロアルキルの「縮合類似体」は、アリールまたはヘテロアリール基に縮合した単環式環を意味し、そこでは接合の点が非芳香族部分上にある。シクロアルキルおよびその縮合した類似体の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、テトラヒドロナフチル、デカヒドロナフチル、インダニル、およびその他同種類のものが挙げられる。
【００３５】
用語「アルコキシ」は、指定数の炭素原子を有する線状または分枝状鎖のアルコキシ基を意味する。C1-6アルコキシには、たとえば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、およびその他同種類のものが含まれる。
【００３６】
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体によって、または別の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、安定な線状もしくは分枝状鎖、もしくは環状の炭化水素ラジカル、またはそれらの組合せを意味し、少なくとも一の炭素原子およびO、N、P、SiおよびSからなる群より選ばれる少なくとも一のヘテロ原子からなり、およびそこでは、窒素、リン、および硫黄原子は随意に酸化されていてもよく、および窒素ヘテロ原子は随意に四級化されてもよい。ヘテロ原子（群、複数を含む意味）のO、N、PおよびSならびにSiは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置またはアルキル基が分子の残部に結合する位置に配置されてもよい。例としては、制限されないが、-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3、-CH=CH-N(CH3)-CH3、-O-CH3、-O-CH2-CH3、および-CNが挙げられる。二または三個のヘテロ原子までは連続してもよく、たとえば、-CH2-NH-OCH3および-CH2-O-Si(CH3)3などのようなものである。同様に、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体によって、または別の置換基の一部として、ヘテロアルキルから誘導される二価ラジカルを意味し、制限されないが、-CH2-CH2-S-CH2-CH2-および-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-によって例示されるようなものである。ヘテロアルキレン基について、ヘテロ原子はまた、鎖末端のいずれかまたは双方を占めることができる（例は、アルキレンオキソ、アルキレンジオキソ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノ、およびその他同種類のもの）。さらにまた、アルキレンおよびヘテロアルキレン連結基について、連結基の方向は連結基の式が書かれる方向によって暗示されない。たとえば、式-C(O)OR'-は、-C(O)OR'-および-R'OC(O)-の双方を表す。上記のように、ヘテロアルキル基には、ここで使用するように、ヘテロ原子を介して分子の残りに結合されるそれらの基、たとえば、-C(O)R'、-C(O)NR'、-NR'R''、-OR'、-SR'、および/または-SO2R'などのようなものが含まれる。「ヘテロアルキル」が規定され、次いで特定のヘテロアルキル基、たとえば、-NR'R"またはその種の他のものなどのようなものの列挙が続く場合、用語のヘテロアルキルおよび-NR'R''が冗長または相互に排他的ではないことが理解されるであろう。どちらかと言えば、具体的なヘテロアルキル基は明瞭さを加えるために記載される。このように、用語「ヘテロアルキル」は、たとえば、ここでは-NR'Rまたはその種の他のものなどのような具体的なヘテロアルキル基を除外するとして解釈されるべきではない。
【００３７】
用語「シクロアルコキシ」は、たとえば、シクロプロピルオキシのような、酸素原子に結合した上記に規定されるようなシクロアルキルを意味する。
【００３８】
用語「フルオロアルキル」は、一以上の水素原子がフッ素原子で置換される上記に規定するようなアルコキシを意味する。
【００３９】
「アリール」という用語は、炭素原子のみを含む単環式または二環式芳香環を意味する。アリールの「縮合類似体」は、接合の点が芳香族部分にある単環式シクロアルキルまたは単環式ヘテロシクリル基に縮合したアリール基を意味する。アリールおよびその縮合した類似体の例には、フェニル、ナフチル、インダニル、インデニル、テトラヒドロナフチル、2,3-ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾピラニル、1,4-ベンゾジオキサニル、およびその他同種類のものが挙げられる。
【００４０】
「ヘテロアリール」という用語は、N、OおよびSから選ばれる少なくとも一のヘテロ原子を含む単環式または二環式芳香環を意味し、各環が5から6個の原子を含む。ヘテロアリールの「縮合類似体」は、接合の点が芳香族部分にある単環式シクロアルキルまたは単環式ヘテロシクリル基に縮合したヘテロアリール基を意味する。ヘテロアリールの例には、ピロリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フロ（2,3-b）ピリジル、キノリル、インドリル、イソキノリル、およびその他同種類のものが含まれる。
【００４１】
定義において言及される前記アルキル基、シクロアルキル、アルキニル、アルケニル、アリール基およびヘテロアリール基は、非置換であるか、または置換基群からなる群より選ばれる少なくとも一の置換基によって置換される。
【００４２】
前記置換基は、ハロゲン原子、1から4個までの炭素原子を有するアルキル基、1から4個までの炭素原子を有するアルコキシ基、1から4個までの炭素原子を有するハロアルキル基、1から4個までの炭素原子を有するハロアルコキシ基、シアノ基、2から6個までの炭素原子を有するアルキニル基、1から5個までの炭素原子を有するアルカノイル基、3から7個までの環原子を有するシクロアルキル基、ヘテロアリール基、アリール基、7から10個までの炭素原子を有するアラルコキシ基、アリールカルボニル基、二つの隣接-X基で、アルキレンまたは3または4個の炭素原子を有するアルケニレン鎖を形成するために随意に一緒に結合されるもの、アミノカルボニル基、2から5個までの炭素原子を有するアルケニル基、1から4個までの炭素原子を有するアルキルチオ基、アミノスルフィニル基、アミノスルホニル基、ヒドロキシ基、1から4個までの炭素原子を有するヒドロキシアルキル基、ニトロ基、アミノ基、カルボキシ基、2から5個までの炭素原子を有するアルコキシカルボニル基、1から4個までの炭素原子を有するアルコキシアルキル基、1から4個までの炭素原子を有するアルキルスルホニル基、1から4個までの炭素原子を有するアルカノイルアミノ基、1から6個までの炭素原子を有するアルカノイル（アルキル）アミノ基、双方のアルカノイルおよびアルキル部分において1から6個までの炭素原子を有するアルカノイルアミノアルキル基、双方のアルカノイルおよび各アルキル部分において1から6個までの炭素原子を有するアルカノイル（アルキル）アミノアルキル基、1から4個までの炭素原子を有するアルキルスルホニルアミノ基、1から6個までの炭素原子を有するモノ-またはジ-アルキルアミノカルボニル基、1から6個までの炭素原子を有するモノ-またはジ-アルキルアミノスルフィニル基、1から6個までの炭素原子を有するモノ-またはジ-アルキルアミノスルホニル基、1から4個までの炭素原子を有するアミノアルキル基、1から6個までの炭素原子を有するモノ-またはジ-アルキルアミノ基、各アルキル部分において1から6個までの炭素原子を有するモノ-またはジ-アルキルアミノアルキル基、7から10個までの炭素原子を有するアラルキル基、アルキル部分において1から4個までの炭素原子を有するヘテロアリールアルキル基、アルコキシ部分において1から4個までの炭素原子を有するヘテロアリールアルコキシ基および1から4個までの炭素原子を有するアルキルスルホニルアミノ基からなる群より選ばれる。
【００４３】
用語「ヘテロシクリル」は、N、SおよびOから選ばれる少なくとも一のヘテロ原子を含む単環式または二環式飽和環を意味し、前記環のそれぞれが3から10個までの原子を有し、そこでは、接合の点は炭素または窒素とすることができる。ヘテロシクリルの「縮合類似体」は、接合の点が非芳香族部分上にあるアリールまたはヘテロアリール基に縮合する単環式複素環を意味する。「ヘテロシクリル」およびその縮合した類似体の例には、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、2,3-ジヒドロフロ（2,3-b）ピリジル、ベンゾオキサジニル、テトラヒドロヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ジヒドロインドリル、およびその他同種類のものが挙げられる。用語にはまた、芳香族ではない部分的に不飽和な単環式環、たとえば、窒素またはN-置換-(1H,3H)-ピリミジン-2,4-ジオン（N-置換ウラシル）を介して接合する2-または4-ピリドンなどのようなものが含まれる。
【００４４】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、それら自体によって、または別の置換基の一部として、特に指定しない限り、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。さらに加えて、「ハロアルキル」などのような用語は、モノハロアルキルおよびポリハロアルキルを含むことを意味する。たとえば、用語「ハロ（C1-C4）アルキル」は、制限されないが、トリフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチル、4-クロロブチル、3-ブロモプロピル、およびその他同種類のものが含まれることを意味する。
【００４５】
用語「薬学的に許容可能な塩」は、無機または有機塩基および無機または有機酸を含む薬学的に許容可能な非毒性の塩基または酸から調製される塩に言及する。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄〔三価鉄、鉄（III）〕、第一鉄〔二価鉄、鉄（II）〕、リチウム、マグネシウム、マンガン塩、マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛、およびその他同種類のものが含まれる。特に好ましくは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウム塩である。薬学的に許容される有機の非毒性塩基から誘導される塩には、一級、二級、および三級アミンの塩、自然に発生する置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、たとえば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、2-ジエチルアミノエタノール、2-ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、N-エチルモルホリン、N-エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラミン、イソプロピルアミン（isopropyl¬amine）、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン、およびその他同種類のものを含む置換アミンが含まれる。本発明の化合物がアルカリ性であるとき、塩は、無機および有機酸を含め、薬学的に許容可能な非毒性酸から調製することができる。そのような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、p-トルエンスルホン酸、およびその他同種類のものが含まれる。クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、および酒石酸が特に好ましい。
【００４６】
ここでの主題の特徴および利益は、添付の図に示すように、選定される実施態様の以下の詳細な記載に照らしてより一層明らかになるであろう。理解されるように、開示され、および請求される主題は、様々な態様において修飾が可能であり、それらすべてが請求の範囲の視野から離れることがない。したがって、図面および説明は、本質的に例示であるとして、そして制限的ではないようにみなされるべきであり、および主題の十分な範囲は請求の範囲において記載される。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
本開示のさらなる特色および利益は、ここで、添付の図面と組み合わせて行われる以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図１】BSAの不存在下におけるヒトのトポイソメラーゼIIのDNA脱連環の抑制を例示する。
【図２】BSAの存在下でのヒトのトポイソメラーゼIIのDNA脱連環の抑制を例示する。
【図３Ａ】0.4％DMSOで処理するMCF-7/mdrガン細胞の時間依存的増殖を例示する。
【図３Ｂ】エトポシドで処理する際のMCF-7/mdrガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図３Ｃ】例1の化合物で処理する際のMCF-7/mdrガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図３Ｄ】例2の化合物で処理する際のMCF-7/mdrガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図４Ａ】0.4％DMSOで処理するH69ARガン細胞の時間依存的増殖を例示する。
【図４Ｂ】エトポシドで処理する際のH69ARガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図４Ｃ】例1の化合物で処理する際のH69ARガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図５Ａ】0.4％DMSOで処理するMES-SA/Dx5ガン細胞の時間依存的増殖を例示する。
【図５Ｂ】エトポシドで処理する際のMES-SA/Dx5ガン細胞の細胞増殖を例示する。
【図５Ｃ】例1の化合物で処理する際のMES-SA/Dx5ガン細胞の細胞増殖を例示する。  添付の図面全体を通して、類似する特色は同じ参照番号によって識別されることに留意されたい。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
詳細な記載
【００４９】
実施態様において、式I：
【化１１】
2016504394.tif 000014
（I）
の化合物、ならびにその互変異性体および薬学的に許容可能な塩および溶媒和物を開示し、
式中：
Rは、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、アセチル、もしくはベンゾイル基から選ばれる基であり、
R1およびR2は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基、もしくはCR'R''タイプのアセタール基から選ばれるヒドロキシル（水酸）基のための保護基であり、そこで、R'およびR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アリール、もしくはアルキルアリール基から選ばれる基であり、
R3は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれる基であり、
R4は、OR'''、NGR'GR''、N3、またはフタルイミドを表し、そこで、R'''は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であり、ならびにGR'およびGR''は、同じかまたは異なり、およびそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンジオル（benzyol）、アセチル、アルキルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、もしくはベンジルオキシカルボニル基から選ばれる基であり、
R5は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アセチル、ベンジル、PO3H、もしくはPO3Na基から選ばれる基である。
【００５０】
ある実施態様によれば、本発明には、また、塩基の、ミネラルまたは有機酸付加塩もしくは水和物もしくは式（I）の化合物の薬学的に許容可能な溶媒和物の状態において誘導体が含まれる。
【００５１】
別の実施態様によれば、式II：
【化１２】
2016504394.tif 000015
（II）
式中：
R4、R5は、式Iにおいて上記に規定されるようなものであり、
R6は、水素原子かまたはアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、もしくはアルキルヘテロアリール基から選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物が開示される。
【００５２】
ある実施態様によれば、本発明には、また、塩基の、ミネラルまたは有機酸付加塩もしくは水和物もしくは式（II）の化合物の薬学的に許容可能な溶媒和物の状態において誘導体が含まれる。
【００５３】
別の実施態様によれば、式III：
【化１３】
2016504394.tif 000016
（III）
式中：
R5は、水素原子か、またはアルキル、-PO3Hもしくは-PO3Naから選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物が開示される。
【００５４】
別の実施態様によれば、式（III）の化合物を開示し、それは、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである。
【００５５】
別の実施態様によれば、式（III）の化合物を開示し、それは、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである。
【００５６】
式IからIIIにおいて、アルキル基は1から10の炭素原子を有する線状または分枝状アルキル基であることができる。アルキル基は一以上のハロゲン原子（群）アルキルオキシ、アルキルチオ、-OC(O)アルキル-OC(O)Oアルキル、-OC(O)アリールおよびO(O)Oアリールで置換されてもよい。アリール基は炭素原子だけを含む単環または二環式芳香環を意味する。ヘテロアリールはN、OおよびSから選ばれる少なくとも一のヘテロ原子含む単環または二環式芳香環で、各環が5から6の原子を含むものを意味する。
【００５７】
上記に規定するように、一般式IからIIIの化合物は、即ち、塩基の、ミネラルまたは有機酸付加塩の、水和物の、もしくは場合により薬学的に許容可能な溶媒和物の状態においてそれらの誘導体が含まれ、それらの使用、たとえば、注入可能な溶液または懸濁物に適合される異なるガレニック（生薬の）形態として現れることができる。
【００５８】
式Iの化合物は、適切な溶媒、たとえば、MeOHまたはEtOAcまたはそれらの混合物から、たとえば、分別結晶化によって鏡像異性体のジアステレオアイソマー対に分けることができる。このようにして得られるナンチオマーの対は、慣習的な手段によって、たとえば、リゾルビング剤（分離剤）として光学活性アミンまたは酸の使用により、またはキラルHPLCカラム上で、個々の立体異性体に分けることができる。
【００５９】
式IからIIIの化合物においてプロトンの一または一よりも多くは、重水素原子（群）で置換することができ、そのようにして優れた薬理学的活性をもつことができる重水素化類似体が提供される。
【００６０】
別の実施態様によれば、本発明の化合物を用意するための方法が開示される。本方法には、式IV：
【化１４】
2016504394.tif 000017
式IV
式中、R5は式IからIIIにおいて規定するようなものである化合物、および
式V：
【化１５】
2016504394.tif 000018
式V
の化合物または式VI：
【化１６】
2016504394.tif 000019
式VI
の化合物で、
式中、
R1、R2、R3、R4は、式Iにおいて規定されるようなものであり、
RはC1-C12アルキルであり、および
式IVの化合物は、エピマー化によって、および次いでポドフィロトキシンまたは脱メチル化されたポドフィロトキシンの位置4においてアルコール官能基を、続いてアミン基にまで還元されるアジド基によって置換することにより得られるものであるもの
の間でのカップリングのステップが含まれる。
【００６１】
式Vの化合物は、次のスキームを介して得られる。
【化１７】
2016504394.tif 000020
【００６２】
式VIの化合物は次のスキームを介して得られる。
【化１８】
2016504394.tif 000021
【００６３】
その別の態様によれば、本発明は、ガン、たとえば、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍、などのようなものを処置するための薬物/組成物を用意するために、一般式IからIIIの上記に規定するような少なくとも一の化合物の使用に関する。
【００６４】
本発明の別の目的は、上記に規定するような式IからIIIの少なくとも一の化合物を含む組成物に関する。
【００６５】
もちろん、本発明に従う組成物は、上記に規定するような式IからIIIの化合物を、単独でかまたは混合物において、および任意の割合において含むことができる。
【００６６】
本発明に従う製薬組成物において、経口、舌下、吸入、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、局所または直腸経路を介して施与するために、活性成分は、標準の薬学的に許容可能な支持体/担体との混合物において単位施与形態として施与することができる。
【００６７】
適切な単位施与形態には、経口形態で、たとえば、タブレット（錠剤）、ゼラチンカプセル、粉体（散剤）、顆粒（剤）および経口溶液または懸濁液などのようなもの、局所施与形態、インプラント、皮下、筋肉内、静脈内、鼻腔内または眼内施与形態および直腸施与形態が含まれる。
【００６８】
さらに、また非毒性の薬学的に許容可能な賦形剤、たとえば、蒸留水、グルコース（ブドウ糖）、デンプンラクトース、タルク、植物油、エチレングリコール、などのようなものは、添加してもよい。
【００６９】
組成物はまた、保存料を含んでもよい。
【００７０】
他の活性成分を組成物中に添加することができる。
【００７１】
必要に応じて、そのような組成物において本発明に従う化合物の、および他の可能性のある有効成分の量は、ペイシェントの適用、年齢、および体重に応じて変えることができる。
【００７２】
別の実施態様によれば、式（VII）または（VIII）：
【化１９】
2016504394.tif 000022
(VII)
2016504394.tif 000023
(VIII)
式中、Rは、メチル、エチル、ブチル、またはイソプロピル基から選ばれる基である、化合物を開示する。
【００７３】
別の実施態様によれば、ガンの処置のための薬を用意するために本発明の化合物の使用を開示する。
【００７４】
別の実施態様によれば、ガンの処置のために本発明の化合物の使用を開示する。
【００７５】
別の実施形態によれば、ペイシェントに本発明の化合物の治療上有効な量が施与されることによってガンを患うペイシェントを処置する方法が開示される。本方法は、放射線療法、化学療法、および/または一以上の他の抗がん剤と組み合わせて行うことができる。
【００７６】
他の抗がん剤の非制限的な例としては、制限されないが、血管新生インヒビター（「インヒビター」は阻害剤とも言う）、抗増殖剤、他のキナーゼインヒビター、他の受容体チロシンキナーゼインヒビター、オーロラキナーゼインヒビター、ポロ様キナーゼインヒビター、bcr-ablキナーゼインヒビター、増殖因子インヒビター、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、プラチナ（白金）含有剤、成長因子阻害剤、電離放射線、細胞周期インヒビター、トポイソメラーゼインヒビター、生物反応修飾因子（biologic response modifier）、イムノモジュレーター（免疫調節物質）、免疫製剤（immunologicals）、抗体、ホルモン療法、レチノイド/デルトイド植物性アルカロイド、プロテアソームインヒビター、HSP-90インヒビター、ヒストンデアセチラーゼ（ヒストン脱アセチル化酵素）インヒビター（HDAC）インヒビター、プリン類似体、ピリミジン類似体、MEKインヒビター、CDKインヒビター、ErbB2受容体インヒビター、mTORインヒビター、Bclインヒビター、Mclインヒビターおよびそれらの組合せ、ならびに他の抗腫瘍剤が含まれる。
【００７７】
血管新生インヒビターには、制限されないが、EGFR阻害剤、PDGFR阻害剤、VEGFR阻害剤、TIE2阻害剤、IGFlR阻害剤、マトリックスメタロプロテイナーゼ2（MMP-2）阻害剤、マトリックスメタロプロテイナーゼ9（MMP-9）阻害剤、トロンボスポンジン類縁体で、たとえば、トロンボスポンジン1などのようなもの、およびN-Ac-Sar-Gly-Val-D-allolle-Thr-Nva-He-Arg-Pro-NHCH2CH3またはその塩およびN-Ac-Sar-Gly-Val-D-allolle-Thr-Nva-lle-Arg-PrO-NHCH2CH3の類似体で、たとえば、N-Ac-GlyVal-D-alle-Ser-Gln-lle-Arg-ProNHCH2CH3、またはその塩のようなものが含まれる。
【００７８】
EGFRインヒビターの例としては、制限されないが、Iressa（イレッサ）（ゲフィチニブ）、Tarceva（タルセバ）（エルロチニブまたはOSI-774）、Icotinib（イコチニブ）、Erbitux（エルビタックス）（セツキシマブ）、EMD-7200、ABX-EGF、HR3、IgA抗体、TP-38（IVAX）、EGFR融合タンパク質、EGF-ワクチン、抗EGFr免疫リポソームおよびTykerb（タイケルブ）（ラパチニブ）が含まれる。
【００７９】
PDGFRインヒビターの例としては、制限されないが、CP-673451およびCP-868596が含まれる。
【００８０】
VEGFRインヒビターの例としては、限定されないが、Avastin（アバスチン）（ベバシズマブ）、Sutent（スーテント）（スニチニブ、SUL 1248）、Nexavar（ネクサバール）（ソラフェニブ、BAY43-9006）、レゴラフェニブ、CP-547632、アキシチニブ（AG13736）、Apatinib（アパチニブ）、カボザンチニブ、Zactima（ザクティマ）（バンデタニブ、ZD-6474）、AEE788、AZD-2171、VEGFトラップ、Vatalanib（バタラニブ）（PTK-787、ZK-222584）、Macugen（マクジェン）、M862、Pazopanib（パゾパニブ）（GW786034）、BC-00016、ABT-869およびアンジオザイム（angiozyme）が含まれる。
【００８１】
トロンボスポンジン類似体の例としては、制限されないが、ABT-510が含まれる。
【００８２】
BCLインヒビターの例としては、制限されないが、オバトクラックス（obatoclax）およびナビトクラックス（navitoclax）、ABT199が含まれる。
【００８３】
オーロラキナーゼインヒビターの例としては、制限されないが、VX-680、AZD-1152およびMLN-8054が含まれる。ポロ様キナーゼ阻害剤の例としては、制限されないが、BI-2536が含まれる。
【００８４】
bcr-ablキナーゼインヒビターの例としては、制限されないが、Gleevec（グリベック）（イマチニブ）、ポナチニブニロチニブ（ponatinib nilotinib）およびDasatinib（ダサチニブ）（BMS354825）が含まれる。
【００８５】
プラチナ含有剤の例には、制限されないが、シスプラチン、Paraplatin（パラプラチン）（カルボプラチン）、エプタプラチン、ロバプラチン、ネダプラチン、Eloxatin（エロキサチン）（オキサリプラチン）またはサトラプラチンが含まれる。
【００８６】
mTORインヒビターの例としては、制限されないが、CCI-779、ラパマイシン、テムシロリムス、エベロリムス、RAD001、INK-128およびリダフォロリムスが含まれる。
【００８７】
HSP-90インヒビターの例としては、制限されないが、ゲルダナマイシン、ラディシコール、17-AAG、KOS-953、17-DMAG、CNF-101、CNF-1010、17-AAG-nab、NCS-683664、マイコグラブ（Mycograb）、CNF-2024、PU3、PU24FC1、VER49009、IPI-504、SNX-2112およびSTA-9090が含まれる。
【００８８】
ヒストン脱アセチル化酵素インヒビター（HDAC）の例には、制限されないが、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（Suberoylanilide hydroxamic acid）（SAHA）、MS-275、バルプロ酸、TSA、LAQ-824、トラポキシン（Trapoxin）、ツバシン（tubacin）、ツバスタチン（tubastatin）、ACY- 1215およびデプシペプチド（Depsipeptide）が含まれる。
【００８９】
MEKインヒビターの例としては、制限されないが、PD325901、ARRY-142886、ARRY-438162およびPD98059が含まれる。
【００９０】
CDKインヒビターの例としては、制限されないが、フラボピリドール（flavopyridol）、MCS-5A、CVT-2584、セリシクリブ（CYC-202、R-ロスコビチン）、ZK-304709、PHA-690509、BMI-1040 、GPC-286199、BMS-387032、PD0332991およびAZD-5438が含まれる。
【００９１】
ErbB2受容体インヒビターの例（Exambles）には、制限されないが、CP-724-714、CI-1033（カネルチニブ）、Herceptin（ハーセプチン）（トラスツズマブ）、オミターグ（Omitarg、オムニターグ）〔2C4、ペツズマブ（petuzumab、ペルツズマブ）〕、TAK-165、GW-572016イオナファーニブ（Ionafarnib、ロナファーニブ）、GW-282974、EKB-569、PI-166、dHER2（HER2ワクチン）、APC8024（HER2ワクチン）、抗HER/2neu二重特異性抗体、B7.her2IgG3、AS HER2三機能二重特異性（trifunctional bispecfic）抗体、mAB AR -209およびmAB 2B-1が含まれる。
【００９２】
アルキル化剤の例としては、制限されないが、ナイトロジェンマスタードN-オキシド、シクロホスファミド、イホスファミド、トロホスファミド、クロラムブシル（Chlorambucil）、メルファラン、ブスルファン、ミトブロニトール、カルボコン、チオテパ、ラニムスチン、ニムスチン、テモゾロミド、AMD-473、アルトレタミン、AP-5280、アパジコン、ブロスタリシン（brostallicin）、ベンダムスチン、カルムスチン、エストラムスチン、フォテムスチン、グルフォスファミド、KW-2170、マホスファミド、およびミトラクトール、カルムスチン（BCNU）、ロムスチン（CCNU）、ブスルファン（Busulfan）、トレオスルファン（Treosulfan）、デカルバジン（Decarbazine）およびテモゾロミド（Temozolomide）が含まれる。
【００９３】
代謝拮抗剤の例としては、制限されないが、メトトレキサート、6-メルカプトプリンリボシド、メルカプトプリン、ウラシル類似体で、たとえば、5-フルオロウラシル（5-FU）などの単独またはロイコボリンとの組合せのようなもの、テガフール、UFT、ドキシフルリジン、カルモフール、シタラビン、シタラビン、エノシタビン、S-I、アリムタ（Alimta）〔ペメトレキセド（premetrexed）二ナトリウム、LY231514、MTA〕、ジェムザール（Gemzar）（ゲムシタビン）、フルダラビン、5-アザシチジン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、デシタビン、エフロルニチン、エトニルシチジン（ethnylcytidine）、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア、TS-I、メルファラン、ネララビン、ノラトレキシド（nolatrexed）、オクフォセート（ocfosate）、ペメトレックスド（premetrexed）二ナトリウム、ペントスタチン、ペリトレキソール、ラルチトレキセド、トリアピン、トリメトレキサート、ビダラビン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン（Ribavirin）、EICAR、ヒドロキシウレアおよびデフェロキサミンが含まれる。
【００９４】
トポイソメラーゼ阻害性薬剤の例としては、制限されないが、アクラルビシン、アモナフィド、ベロテカン、カンプトテシン、10-ヒドロキシカンプトテシン、9-アミノカンプトテシン、ジフロモテカン、イリノテカンHCL〔Camptosar（カンプトサール）〕、エドテカリン、エピルビシン〔Ellence（エレンス）〕、エトポシド、エキサテカン、ギマテカン、ルートテカン、オラテチン（orathecin）〔Supergen（スーパーゲン）〕、BN-80915、ミトキサントロン、ピラルブシン（pirarbucin）、ピクサントロン、ルビテカン、ソブゾキサン、SN-38、タフルポシド（tafluposide）およびトポテカンからなる群より選ばれる一以上の薬剤が含まれる。
【００９５】
抗体の例としては、制限されないが、リツキシマブ（Rituximab）、セツキシマブ（Cetuximab）、ベバシズマブ（Bevacizumab）、トラスツジマブ（Trastuzimab、トラスツズマブ）、特異的CD40抗体および特異的IGFlR抗体が含まれる。
【００９６】
ホルモン療法の例には、制限されないが、エキセメスタン〔Aromasin（アロマシン）〕、酢酸ロイプロリド、アナストロゾール〔Arimidex（アリミデックス）〕、フォスレリン（fosrelin）〔Zoladex（ゾラデックス）〕、ゴセレリン、ドキセルカルシフェロール、ファドロゾール、フォルメスタン、クエン酸タモキシフェン（タモキシフェン）、カソデックス（Casodex）〕、アバレリックス（Abarelix）、トレルスター（Trelstar）、フィナステリド、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、レトロゾール、フルタミド、ビカルタミド、メゲステロール（megesterol、メゲストロール）、ミフェプリストン、ニルタミド、デキサメタゾン、プレディゾン（predisone、プレドニゾン）および他のグルココルチコイドが含まれる。
【００９７】
レチノイド/デルトイドの例には、制限されないが、セオカルシトール（seocalcitol）（EB 1089、CB 1093）、レクサカルシトロール（lexacalcitrol）（KH 1060）、フェンレチニド、アリレチノイン（Aliretinoin）、ベキサロテン（Bexarotene）およびLGD-1550が含まれる。
【００９８】
植物アルカロイドの例には、制限されないが、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンが含まれる。
【００９９】
プロテアソームインヒビターの例としては、制限されないが、ボルテゾミブ〔Velcade（ベルケイド）〕、MGI 32、NPI-0052およびPR-171が含まれる。
【０１００】
免疫製剤（immunologicals）の例には、制限されないが、インターフェロンおよび多数の他の免疫増強剤が含まれる。インターフェロンには、そのインターフェロンアルファ、インターフェロンアルファ-2a、インターフェロン、アルファ-2b、インターフェロンベータ、インターフェロンガンマ-1a、インターフェロンガンマ1b〔Actimmune（アクティミューン）〕、またはインターフェロンガンマ-nlおよびそれらの組合せが挙げられる。他の薬剤には、フィルグラスチム、レンチナン、シゾフィラン、セラシス（TheraCys）、ウベニメクス、WF-10、アルデスロイキン、アレムツズマブ、BAM-002、デカルバジン、ダクリズマブ、デニロイキン、ゲムツズマブオゾガミシン、イブリツモマブ、イミキモド、レノグラスチム、レンチナン、メラノーマワクチン〔Corixa（コリクサ）〕、モルグラモスチム、OncoVAC-CL（オンコVac-CL）、サルガラモスチム（sargaramostim、サルグラモスチム）タソネルミン、テクロイキン（tecleukin、テセロイキン）、チマラシン（thymalasin）、トシツモマブ、ビルリジン（Virulizin）、Z-100、エプラツズマブ、ミツモマブ（mitumomab）、オレゴボマブ、ペムチモマブ（pemtumomab）（Y-muHMFGl）、プロベンジ（Provenge）〔デンドレオン（Dendreon、デンドロン）〕、CTLA4（細胞傷害性リンパ球抗原4）抗体およびたとえば、MDX-010などのようなCTLA4をブロックすることができる薬剤が含まれる。
【０１０１】
生物学的反応修飾因子の例は、生きている有機体の防御機構または生物学的反応で、たとえば、生存、増殖、または組織細胞の分化などのようなものをそれらが抗腫瘍活性もつように向けるために修飾する薬剤である。そのような薬剤には、クレスチン、レンチナン、シゾフラン（sizofrran、シゾフィラン）、ピシバニールおよびウベニメクスが含まれる。
【０１０２】
ピリミジン類似体の例としては、制限されないが、5-フルオロウラシル（5-Fluorouracil）、フロクスウリジン（Floxuridine）、ドキシフルリジン（Doxifluridine）、ラチトレキセド（Ratitrexed、ラルチトレキセド）、シタラビン(ara C)、シトシンアラビノシド（Cytosine arabinoside）、フルダラビン（Fludarabine）、およびゲムシタビン（Gemcitabine）が含まれる。
【０１０３】
プリン類似体の例としては、制限されないが、メルカプトプリン（Mercaptopurine）およびチオグアニンが含まれる。
【０１０４】
免疫調節物質の例としては、制限されないが、サリドマイドおよびレナリドマイドが含まれる。
【０１０５】
有糸分裂阻害剤の例としては、制限されないが、パクリタキセル、ドセタキセル、ABRAXANE、エポチロンD（KOS-862）およびZK-EPOが含まれる。
【０１０６】
本発明を用いて処置されうるがんの非制限的な例としては、
膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、子宮がん、慢性リンパ性白血病、結腸がん、食道がん、肝臓がん、精巣がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がん、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ悪性腫瘍が含まれる。
【０１０７】
合成
【０１０８】
本発明の化合物は、合成化学プロセスによって作成することができ、ここで以下にそれらの例を示す。プロセスにおけるステップの順序は変動させることができ、試薬、溶媒および反応条件は具体的に言及されたものの代わりに置換されてもよく、そして必要に応じて脆弱部分が保護され、および脱保護されてもよいと理解されるべきことが意図される。
【０１０９】
見られる略語は、例をあげれば次のように規定される。
eq.：当量            g：グラム            Hz：ヘルツ
mg：ミリグラム      MHz：メガヘルツ    min：分
mL：ミリリットル    mmol：ミリモル    μmol：マイクロモル
nmol：ナノモル      app：見かけ
【０１１０】
一重項についてのs、ブロード一重項についてのbs、二重項についてのd、三重項についてのt、四重項についてのq、多重項またはマッシブについてのm、二重項のダブレットにつてのdd。
【０１１１】
DBUは、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンを意味し；DIBALは水素化ジイソブチルアルミニウムを意味し；DIEAはジイソプロピルエチルアミンを意味し；DMAPはN,N-ジメチルアミノピリジンを意味し；DMEは1,2-ジメトキシエタンを意味し；DMFはN,N-ジメチルホルムアミドを意味し；dmpe（DMPE）は、1,2-ビス（ジメチルホスフィノ（ρhosphino））エタンを意味し；DMSOはジメチルスルホキシドを意味し；dppb（DPPB）は、1,4-ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタンを意味し；dppe（DPPE）は、1,2-ビス（ジフェニルホスフィノ）エタンを意味し；dppf（DPPF）は1,1'-ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンを意味し；dppm（DPPM）は、1,1'-ビス（ジフェニルホスフィノ）メタンを意味し；DIADはジイソプロピルアゾジカルボキシレートを意味し；EDCIは1-（3-ジメチルアミノプロピル）-3-エチルカルボジイミドを意味し；HATUは2-（7-アザ1H-ベンゾトリアゾール-1-イル）-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを意味し；HMPAはヘキサメチルホスホラルニド（hexamethylphosphorarnide）を意味し；IPAはイソプロピルアルコールを意味し；LDAはリチウムジイソプロピルアミドを意味し；LHMDSはリチウムビス（ヘキサメチルジシリルアミド）を意味し；LAHは水素化アルミニウムリチウムを意味し；NCSはN-クロロスクシンイミドを意味し；PyBOPはベンゾトリアゾール-1-イルオキシトリメチルホスホニウムヘキサフルオロホスファートを意味し；TDA-Iはトリス（2-（2-メトキシエトキシ）エチル）アミンを意味し；DCMはジクロロメタン（dichloromethame）を意味し；TEAはトリエチルアミンを意味し；TFAはトリフルオロ酢酸を意味し；THFはテトラヒドロフランを意味し；NCSはN-クロロスクシンイミドを意味し；NMMはN-メチルモルホリンを意味し；NMPはN-メチルピロリジンを意味し；PPh3はトリフェニルホスフィンを意味し、RBFは、丸底フラスコを意味する。
【０１１２】
本出願において説明されるすべての化合物の分析を実行するために使用される装置の特性を以下に示す。
【０１１３】
1H、13C、19F NMRスペクトルは、Bruker CorporationTM〔ブルーカー・コーポレーション（商標）〕スペクトロメーターにて記録される。1Hおよび13C NMRでは、テトラメチルシランを内部基準として使用する。19F NMRでは、外部基準はフルオロトリクロロメタンCFCl3である。化学的置換は百万分率（ppm）において表され、結合定数Jはヘルツ（Hz）でのものである。
【０１１４】
本発明は、その範囲を制限するためよりはむしろ本発明を例示するために与えられる以下の例を参照することによってより一層容易に理解されるであろう。
【実施例】
【０１１５】
例1
【０１１６】
(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化２０】
2016504394.tif 000024
（Adva-27afh）
【０１１７】
方法A
【０１１８】
ステップ1
2R,3R,4S,5R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-2-（ベンジルオキシメチル）-6-メトキシテトラヒドロ-2H-ピラン。
【化２１】
2016504394.tif 000025
【０１１９】
(2R,3S,4S,5R)-2-（ヒドロキシメチル）-6-メトキシテトラヒドロ-2H-ピラン-3,4,5-トリオール（10グラム、51.5ミリモル、1.0当量）およびヨウ化テトラブチルアンモニウム（0.95グラム、2.575ミリモル、5モル％）のDMF（無水、500mL）中の溶液に、窒素下0℃で水素化ナトリウム（12.4g、油中60重量％、309ミリモル、6.0当量）を、少しずつ添加する（注意して、添加時間は約2時間である）。NaHを加えた後、混合物を0℃で30分間、および室温で60分間撹拌する。臭化ベンジル（36.75ミリリットル、309ミリモル、6.0当量）を添加漏斗によって加える。次いで、混合物を20時間室温で撹拌する。反応は0℃でゆっくりとMeOH（30mL）を添加することにより（注意して、H2生成する）クエンチする。次に、NH4Cl（200mL）およびH2O（600mL）の飽和溶液を添加する。水性相をエーテル（3×500mL）で抽出する。組み合わせたエーテル性の溶液を、ブライン（200mL）で洗浄し、無水Na2SO4にて乾燥させ、40gの粗(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-2-（ベンジルオキシメチル）-6-メトキシテトラ-2H-ピランを淡黄色の油状物として取得するために濃縮し、それはさらに精製せずに次の反応のために提供する。
【０１２０】
LC-MS：577.3（M +Na+、ESI）
【０１２１】
ステップ2
(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-オール。
【化２２】
2016504394.tif 000026
【０１２２】
粗製の(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-2-（ベンジルオキシメチル）-6-メトキシテトラヒドロ-2H-ピラン（10グラムの粗生成物）のAcOH（100mL）中の溶液に、H2SO4の溶液（3.0M、15ml）を添加する。溶液を110℃にまで加熱し（油浴）、および1.0時間この温度で撹拌する。TLCは、出発物質が消費されることを示した。ヘキサン（60mL）を添加する。淡黄色の混合物を室温に冷却する。溶液を約40-50℃にまで冷却するときに、H2O（50mL）を添加する。白色固体が沈殿し、そしてそれを、室温で30分間撹拌し、次いでろ過し、白色固体として表題化合物の3.28グラム（47％）を与えるように、ヘキサン（30mL）およびH2O（200mL）で溶出する。
【０１２３】
LC-MS：563.3（M+Na+、ESI）。
【０１２４】
ステップ3
(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-オン
【化２３】
2016504394.tif 000027
【０１２５】
(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-オール（18グラム、33.3ミリモル、1.0当量）のDMSO（120mL）中の溶液に、窒素下で、無水酢酸（80mL）を添加する。溶液を室温で一晩（約18時間）撹拌する。TLCにより出発物質が消費されたことが示された後、H2O（200mL）を加え、続いて、慎重に0℃でNa2CO3（20g）およびH2O（200mL）を添加する。水相をエーテル（3×250mL）で抽出する。合わせたエーテル性溶液を、H2O（2×100mL）、飽和NaHCO3（100mL）およびブライン（100mL）で洗浄し、無水Na2SO4にて乾燥させ、残留物を取得するために濃縮し、それをCombiFlash(R)（コンビフラッシュ商標）（120グラムのシリカゲル、EtOAc/Hex=0-30％）によって無色の粘着性の油として表題化合物16.37グラム（91％）を取得するために精製する。
【０１２６】
LC-MS：561.3（M+Na+、ESI）。
【０１２７】
ステップ4
エチル2,2-ジフルオロ-2-（(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）-2-ヒドロキシテトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）アセタート
【化２４】
2016504394.tif 000028
【０１２８】
THF（乾燥、200ミリリットル）中のZn/Cuカップル（16.15グラム、0.247モル、7.0当量）の懸濁物に、(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-オン（19グラム、35.275ミリモル、1.0当量）およびブロモジフルオロ酢酸エチル（14.5mL、0.106モル、3.0当量）のTHF（乾燥、200mL）中の溶液を窒素下の還流で滴下して加える。添加の後、混合物を3時間還流する。LC-MSは、所望の生成物が観察され、そして出発物質が残っていないことを示した。混合物を室温に冷却し、およびHClの溶液（1.0M、400mL）を添加する。DCM（200mL）を添加する。層を分離し、および水性相をDCM（2×150mL）で抽出する。合わせた有機相を、無水Na2SO4にて乾燥させ、残留物を与えるように濃縮し、それをCombiFlash(R)（120グラムのシリカゲル、酢酸エチル/ヘキサン=0-30％）によって精製し、無色の粘着性の油として標題化合物17.8グラム（76％）を取得する。
【０１２９】
LC-MS：685.3（M+Na+、ESI）。
【０１３０】
ステップ5
エチル2,2-ジフルオロ-2-（(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）-2-クロロテトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）アセタート
【化２５】
2016504394.tif 000029
【０１３１】
エチル2,2-ジフルオロ-2-((3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)-2-ヒドロキシテトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)アセタート（13.63グラム、20.567ミリモル、1.0当量）のDCM（乾燥、170mL）中の溶液に、N2下、ピリジン（2.5mL、30.85ミリモル、1.5当量）を加える。溶液を外部の氷浴で0℃に冷却する。塩化チオニル（2.25ミリリットル、30.85ミリモル、1.5当量）を滴下で加え、そして5℃を超えない温度に維持する。添加後、溶液を10分間撹拌し、そして氷浴を除去する。溶液を室温にまで温まるようにする（約20分）。TLCは出発物質が消費されることを示した。HClの溶液（1.0N、150mL）を添加する。DCM（380ミリリットル）を添加する。層を分ける。有機層を、NaHCO3の飽和溶液（150mL）、H2O（150mL）で洗浄し、そして無水Na2SO4で乾燥させ、黄色油状物を与えるように濃縮し、それを、CombiFlash(R)（120gのシリカゲル、酢酸エチル/ヘキサン=0-25％）により精製し、無色の粘着性の油として表題化合物の8.34グラム（59％）を与える。
【０１３２】
LC-MS：703（M+Na+、ESI）
【０１３３】
ステップ6
エチル2,2-ジフルオロ-2-（(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）アセタート
【化２６】
2016504394.tif 000030
【０１３４】
エチル2,2-ジフルオロ-2-((3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)-2-クロロテトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)アセタート（7.21グラム、10.585ミリモル、1.0当量）のトルエン（乾燥、60mL）中の溶液に、N2下、水素化トリブチルスズ（4.27ミリリットル、15.88ミリモル、1.5当量）および(E)-1,1'-（ジアゼン-1,2-ジイル）ジシクロヘキサンカルボニトリル（129ミリグラム、0.529ミリモル、5モル％）を加える。溶液を還流させるために加熱し、および1時間還流する。LC-MSは、出発物質が消費されることを示した。それは、残留物を与えるために濃縮され、それは無色の粘着性の油として表題化合物の6.13グラム（90％）を提供するためにCombiFlash(R)（120グラムのシリカゲル、酢酸エチル/ヘキサン= 0-25％）によって精製する。
【０１３５】
19FNMR（CDCl3、376 MHz）：-115.84（dd、JF-H12.05、JF-F 260.11）、-118.84（dd、JF-H 9.79、JF-F 258.60）
【０１３６】
LC-MS：669.3（M+Na+、ESI）
【０１３７】
ステップ7
2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）酢酸
【化２７】
2016504394.tif 000031
【０１３８】
(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-2-(ベンジルオキシメチル)-6-(2-(エチルペルオキシ)-1,1-ジフルオロエチル)テトラヒドロ-2H-ピラン（5グラム、7.73ミリモル、1.0当量）のエタノール（150mL）中の溶液に、窒素下、室温でLiOH（水酸化リチウム）（2.0M、8.0mL、7.8mL、15.46ミリモル、2.0当量）の溶液を加える。混合物を室温で一晩（18時間）撹拌する。TLCは出発物質が消費されることを示した。混合物は残留物を与えるように濃縮され、それはDCM（100mL）中に溶解させる。HClの溶液（1.0N、50mL）を添加し、および10分間撹拌する。層を分け、および水性相をDCM（3×100mL）で抽出する。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして無色の粘着性の油として表題化合物の4.66グラム（97％）を提供するために濃縮される。
【０１３９】
19FNMR（CDCl3、376MHz）：-115.00（dd、JF-H9.0、JF-F 261.62）、-118.88（dd、JF-H 11.67、JF-F 261.24）
【０１４０】
LC-MS：641.3（M+Na+、ESI）
【０１４１】
ステップ8
2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エタノール
【化２８】
2016504394.tif 000032
【０１４２】
2,2-ジフルオロ-2-((3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)酢酸（1.54グラム、2.49ミリモル、1.0当量）のTHF（乾燥、5mL）中の溶液に、0℃でBH3.SMe2（2.0M、0.6mL、5.0ミリモル、2.0当量）の溶液を添加し、およびそれを撹拌し、一晩RT（室温）に温ませる。TLCは反応しないことを示した。この溶液を3時間還流させるために加熱する。TLCは出発物質が消費されないことを示した。BH3.SMe2（2.0mL）を添加する。溶液を一晩還流する。TLCは出発物質が消費されることを示した。溶液を室温にまで冷却し、およびHCl（塩酸）の溶液（1.0M、10mL）、飽和NH4Cl（塩化アンモニウム）（20mL）、H2O（20mL）を添加することによりクエンチする。混合物を10分間室温で撹拌し、EtOAc（4×50mL）により抽出する。合わせた有機溶液を、ブライン（50mL）を用いて洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、残留物を与えるために濃縮し、それを、無色の油状物として標題の化合物の1.44グラム（95.7％）を提供するようにCombiFlash(R)（40gのシリカゲル、EtOAc/ヘキサン=0-40％）によって精製する。
【０１４３】
LC-MS：627.3（M+Na+、ESI）
【０１４４】
ステップ9
2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エタン-1,1-ジオール
【化２９】
2016504394.tif 000033
【０１４５】
2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタノール（1.44グラム、2.38ミリモル、1.0当量）のDMSO（ドライ、12mL）中の溶液に、IBX（1.39グラム、4.76ミリモル、2.0当量）を加える。混合物を室温で撹拌し、および約30分間撹拌した後、透明な溶液となる。この溶液を室温で24時間撹拌する。TLCは、反応が完了していないが、望ましい生成物が観察されたことを示した。H2O（10mL）を添加する。混合物を室温で20分間撹拌する。H2O（100mL）を加え、そして水性相をEtOAc（4×80mL）により抽出する。合わせた有機溶液を、H2O（2×50mL）、ブライン（50mL）により洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、残留物を与えるために濃縮し、それを、CombiFlash(R)（50gのシリカゲル、EtOAc/ヘキサン=0-50％）によって、表題化合物の560mg（38％）を提供するために精製し、および無色の油として出発物質の267mgを回収する。
【０１４６】
LC-MS：643.3（M+Na+、ESI）
【０１４７】
ステップ10
(5R,5aR,8aS,9S)-9-（（2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エチル）アミノ）-5-（4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル）-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4'：6,7]ナフト[2,3-d] [1,3]ジオキソール-6-(8H) -オン
【化３０】
2016504394.tif 000034
【０１４８】
(5R,5aR,8aS,9S)-9-アミノ-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン（45ミリグラム、0.113ミリモル、1.0当量、米国特許第8236935号に従って調製）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（15mg、0.237ミリモル、2.1当量）のDCM（乾燥、2.0mL）中の懸濁物に、TFA（108μL、1.45ミリモル、12.85当量）を、窒素下0℃でシリンジを滴下することにより添加する。次に、2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタン-1,1-ジオール（140ミリグラム、0.225ミリモル、2.0当量）のDCM（3.0mL）中の溶液を滴下により加える。懸濁物を0℃で撹拌し、そして徐々に室温まで温まらせる。混合物を40時間室温で撹拌する。TLCは出発物質が消費されることを示した。飽和NaHCO3（20mL）の溶液を滴下により加え、そしてH2O（10ml）を続ける。DCM（20mL）を添加する。混合物を室温で30分間撹拌する。層を分ける。水性相をDCM（3×30mL）により抽出する。合わせた有機溶液をcelite(R)のパッドを通過させ、DCM（30mL）で溶出させる。合わせた有機溶液を、無水Na2SO4上で乾燥させ、残留物を与えるように濃縮し、それを、白色固体として表題化合物の56mg（50％）を提供するためにCombiFlash(R)（12グラムのシリカゲル、EtOAc/ヘキサン=0-60％）によって精製する。
【０１４９】
MS：986.0（M++H、EI）
【０１５０】
ステップ11
(5R,5aR,8aS,9S)-9-（（2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エチル）アミノ）-5-（4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル）-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6-(8H)-オン
【化３１】
2016504394.tif 000035
【０１５１】
ステップ10の生成物（88ミリグラム、89マイクロモル、1.0当量）のメタノール（5.0mL）中の溶液に、Pd-C（活性炭上に10％、90mg）を一部分において添加する。混合物を4時間、H2バルーンの下で超音波処理する。LC-MSは、出発物質が消費されないことが示され、そしてPd-C（30mg）が添加される。混合物を別の2時間超音波処理する。混合物は、触媒を除去するためにcelite(R)のパッドを通してろ過され、MeOH（20mL）で溶出される。合わせたメタノール溶液を、粗生成物を与えるために濃縮し、それをCombiFlash(R)（10gのシリカゲルカラム、乾燥負荷、MeOH/DCM=0-20％）によって精製し、白色固形物として表題化合物の32mg（57％）を与える。
【０１５２】
LC-MS：626.3（M++H、ESI）。
【０１５３】
方法B
【０１５４】
ステップ1
1-エトキシ-2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-((ベンジルオキシ)メチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタノール
【化３２】
2016504394.tif 000036
【０１５５】
エチル2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)アセタート（200ミリグラム、0.309ミリモル、1.0当量）のトルエン（ドライ、8mL）中の溶液に、窒素下、-78℃で水素化ジイソブチルアルミニウムの溶液（トルエン中1.0M、0.464mL、0.464ミリモル、1.5当量）を滴下により加える。混合物を1時間この温度で撹拌し、そしてEtOH（無水3.0mL）を-78℃で滴下により加えることによりクエンチする。この溶液を室温まで昇温させ、およびRochelle’s（ロッシェル）溶液（20重量％、20mL）の溶液を添加する。混合物を激しく1時間撹拌する。EtOAc（25mL）を添加する。層を分離する。水性相をEtOAc（3×25mL）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（30mL）で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、無色の粘着性の油として粗製物1-エトキシ-2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタノールの200mg（収率100％）を与えるために濃縮する。それはさらに精製することなく次の反応に採用される。
【０１５６】
MS：671.3（M++Na、ESI）。
【０１５７】
ステップ2
(5R,5aR,8aS,9S)-9-アジド-5-(4-(ベンジルオキシ)-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化３３】
2016504394.tif 000037
【０１５８】
(5R,5aR,8aS,9S)-9-アジド-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン（0.5グラム、1.18ミリモル）、臭化ベンジル（0.26グラム、1.52ミリモル）およびK2CO3（0.42グラム、3.04ミリモル）のMeCNの20ml中の混合物を一晩還流するために加熱する。混合物をEtOAcで希釈し、およびシリカゲルパッドを通してろ過する。溶媒を蒸発させ、および残留物を望ましいもの（0.47グラム、78％）が提供されるようにCombiFlash(R)（0-60％のEtOAc/ヘキサン）によって精製する。
【０１５９】
MS（+ESI）：m/e（M+H+）=516.2。
【０１６０】
ステップ3
(5R,5aR,8aS,9S)-9-アミノ-5-(4-(ベンジルオキシ)-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化３４】
2016504394.tif 000038
【０１６１】
(5R,5aR,8aS,9S)-9-アジド-5-(4-(ベンジルオキシ)-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン（0.47グラム、0.91ミリモル）およびPPh3（0.252グラム、0.96ミリモル）のTHF/水（10：1）の20mL中の混合物を一晩還流するために加熱する。溶媒を蒸発させ、および残留物を所望のもの（0.38グラム、85％）を提供するためにcombiflash(R)（0-60％のEtOAc/ヘキサン）によって精製する。1H NMR（CDCl3、400メガヘルツ）：7.40（d、2H）、7.26-7.36（m、3H）、6.80（s、1H）、6.51（s、1H）、6.31（s、2H）、5.97（d、2H）、4.96（s、2H）、4.57（d、1H）、4.3-4.35（m、2H）、4.21（d、1H）、3.71（s、6H）、3.30（dd、1H）、2.78-2.90（m、1 H）。
【０１６２】
ステップ4
(5R,5aR,8aS,9S)-5-(4-(ベンジルオキシ)-3,5-ジメトキシフェニル)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-((ベンジルオキシ)メチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化３５】
2016504394.tif 000039
【０１６３】
2-ネック-RBF（25mL）はディーン-スタークトラップ（Dean-Stark trap）および窒素下の冷却器を備える。1-エトキシ-2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタノール（200ミリグラム、0.308ミリモル、1.0当量）および(5R,5aR,8aS,9S)-9-アミノ-5-(4-(ベンジルオキシ)-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン（151ミリグラム、0.308ミリモル、1.0当量）および4-メチルベンゼンスルホン酸一水和物（12ミリグラム、0.031ミリモル、20モル％）を添加する。トルエン（乾燥、8.0mL）を加えた後、混合物を18時間還流するために加熱する。次いで、溶媒を除去し、黄色の泡状固形物（MS：1073.5）を与えるために混合物を濃縮する。THF（乾燥、8mL）を添加する。次に、N2下0℃でのAcOH（80μL、1.4ミリモル、4.5当量）およびシアノホウ水素化ナトリウム（sodium cyanoboronhydride）（80ミリグラム、1.27ミリモル、4.1当量）の添加を続ける。クリアーな黄色の溶液を60分間0℃で攪拌し、そして次いで室温で2時間撹拌する。NaHCO3の飽和溶液（20mL）を添加する。混合物をDCM（5×25mL）で抽出する。合わせた有機溶液を、無水Na2SO4上で乾燥し、残留物を与えるように濃縮し、それは白色固形物として表題化合物の190mg（57％）を提供するためにCombiFlash(R)（12グラムのシリカゲル、EtOAc/ヘキサン=0-50％）によって精製される。
【０１６４】
MS：1075.5
【０１６５】
ステップ5
(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化３６】
2016504394.tif 000040
【０１６６】
ステップ2の生成物（190mg、0.177ミリモル、1.0当量）のMeOH（10mL）中での溶液に、Pd-C（105mg、活性炭上に10重量％）を添加する。次いで、混合物を3.5時間、H2バルーン下で超音波処理する。混合物をcelite(R)のパッドを通過させ、そしてMeOH（15mL）で溶出させる。合わせたメタノール溶液を、乾燥状態に濃縮し（concentred）、白色固形物として表題化合物の88mg（79.7％の収率）を提供するためにCombiFlash(R)（12グラムのシリカゲル、MeOH/DCM=0-20％）によって精製する。
【０１６７】
MS：626.3（M++Na、ESI）
【０１６８】
例2
【０１６９】
(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンの調製
【化３７】
2016504394.tif 000041
（Adva-27af）
【０１７０】
ステップ1
（(5R,5aR,8aS,9S)-9-（（2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス（ベンジルオキシ）-6-（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エチル）アミノ）-5-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6-(8H)-オン
【化３８】
2016504394.tif 000042
【０１７１】
RBF（25mL）、冷却器およびDean-Starkトラップをオーブン中で乾燥させ、そして窒素下で室温に冷却する。2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-トリス(ベンジルオキシ)-6-(ベンジルオキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エタン-1,1-ジオール（120ミリグラム、0.193ミリモル、1.0当量）および使用して(5R,5aR,8aS,9S)-9-アミノ-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン（80ミリグラム、0.193ミリモル、1.0当量、米国特許第8236935号に従って調製）および4-メチルベンゼンスルホン酸（5ミリグラム、19μmmol、10モル％）を添加する。トルエン（乾燥、5.0mL）を添加後、一晩（16時間）混合物を還流（油浴130-132℃）するために加熱する。TLCは反応がほとんど完了することを示した（参照としてアルデヒド水和物）。混合物は、溶媒を除去し、黄色の固形物を与えるように濃縮される。THF（ドライ、5mL）を添加する。次いでN2下0℃でAcOH（45μL）およびシアノホウ水素化ナトリウム（45mg、0.716ミリモル。3.7当量）の添加を続ける。クリアー溶液をNaBH3CN添加後に形成し、および45分間0℃で撹拌する。次に、混合物を室温で2時間撹拌する。追加のAcOH（50μL）およびNaBH3CN（50mg）を加える。それを室温にて一晩撹拌する。H2O（30mL）および飽和NaHCO3（20mL）を添加し、そして水性相をDCM（5×25mL）で抽出する。組み合わせた有機溶液を、無水Na2SO4上で乾燥し、残留物を与えるために濃縮し、それを、白色固体として表題化合物の157mg（81％）を提供するためにCombiFlash(R)（12グラムのシリカゲル、EtOAc/ヘキサン=0-50％）によって精製する。
【０１７２】
LC-MS：1000（M++H）、1022（M++Na+）
【０１７３】
ステップ2
(5R,5aR,8aS,9S)-9-（（2,2-ジフルオロ-2-（(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル）エチル）アミノ）-5-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オン
【化３９】
2016504394.tif 000043
【０１７４】
ステップ1の生成物（157mg、157μmmol、1.0当量）のMeOH（メタノール）/THF（6.0/2.0mL）中の溶液に、Pd-C（活性炭上の10％Pd、80MG）を一部分において加える。混合物を40時間のH2バルーン下に室温で撹拌する。LC-MSは望ましい生成物が観察されるが、出発物質が消費されないことを示した。追加のPd-C（パラジウム-炭素）触媒（100mg）を添加する。それを室温で4日間撹拌する。それは、触媒を除去するためにcelite(R)のパッドを通してろ過し、MeOH（10mL）で溶出する。組み合わせたメタノール溶液は、粗生成物を与えるために濃縮し、それを、白色固形物として表題化合物の57.7mg（57％）を与えるためにCombiFlash(R)（12グラムのシリカゲルカラム、MeOH/DCM=0-20％）によって精製する。
【０１７５】
LC-MS：640.3（M++H、ESI）
【０１７６】
例3
【０１７７】
例1＆2の化合物の生化学的評価
【０１７８】
3.1-ヒトトポイソメラーゼIIのDNA脱連環アッセイ
【０１７９】
（1）．アッセイプロトコール
【０１８０】
サンプル調製
【０１８１】
化合物の100mMのストック溶液は、100％DMSO中に固形サンプルを溶解することによって調製される。10mMのストック溶液は、DMSOで100mMの溶液を10倍希釈することにより調製される。2倍連続希釈をV字形の96ウェルプレートにおいて行う。
【０１８２】
サンプルの段階希釈溶液を、アッセイにおいて50×溶液として使用する。アッセイにおいて最終的な化合物の濃度は200μMから0.391μMの範囲にある。
【０１８３】
（2）．BSAの不存在下におけるヒトトポイソメラーゼIIのDNA脱連環アッセイ
【０１８４】
陰性コントロールは20mMのEDTAを伴うアッセイ反応である。陽性コントロールは任意の阻害剤を伴わないアッセイである。化合物の背景蛍光はDNAおよび蛍光染料と同一の化合物濃度を用いて測定される。
【０１８５】
ヒトのトポII DNA脱連環アッセイキット、96ウェルヒトトポII DNA脱連環アッセイキットプラス（96-Well Human Topo II DNA Decatenation Assay Kit Plus）〔MoBiTec(R)、カタログ番号HDD96KEから）が、インヒビションの測定に使用される。
【０１８６】
各反応混合物の合計容量は50μlである。V底アッセイプレートにおいて、阻害剤の1μlおよびプレミックスの24μlが混合される。反応は20mMのMgCl2の25μlを用いて開始される。プレミックスは、H2Oの870μl、10×アッセイ緩衝剤の300μl、20μg/mlの連鎖状DNAの300μl、100mMのATPの30μlおよび10U/μlのヒトトポイソメラーゼIIアルファ酵素（トポII）の1.5μlを混合することによって調製される。反応混合物を60分間室温でインキュベートする。次いで、0.2MのEDTA（5μl）を、反応を停止するために添加する。
【０１８７】
ヒトトポIIアッセイについての最終濃度は、50mMのトリス-HCl、pH8.0、125mMの塩化ナトリウム、0.5mMのEDTA、10mMのMgCl2、2μg/mlの連鎖状DNA、1mMのATPおよび5U/mlのヒトトポIIアルファ酵素である。
【０１８８】
サンプル（50μl）を、減圧マニホールドにてTDDフィルタープレート上に負荷する。次いで溶液がフィルタを通過するまで減圧が適用される（80kPaまたは600mmHg）。フィルタはRinse Buffer（リンス緩衝剤）（10mMのTris-HCl、pH7.5、10mMのNaCl）での150μlですすぐ。最後に、1×蛍光染料（50μl）を添加し、および485nmの励起波長を使用して、535 nmでの蛍光強度を測定する。
【０１８９】
結果：
【０１９０】
アッセイの結果を図1に提示する。化合物：Adva-27afh=例1；Adva-27af=例2。
【０１９１】
（3）．BSAの存在下でのヒトトポイソメラーゼIIのDNA脱連環アッセイ
【０１９２】
陰性コントロールは20mMのEDTAを含むアッセイ反応である。陽性コントロールは任意の阻害剤を含まないアッセイである。化合物のバックグラウンド蛍光はDNAおよび蛍光色素と同一の化合物濃度を用いて測定される。
【０１９３】
ヒトのトポII DNA脱連環アッセイキット、96ウェルヒトトポII DNA脱連環アッセイキットプラス（MoBiTec(R)、カタログ番号HDD96KEから）を、阻害の測定に使用する。
【０１９４】
各反応混合物の総体積は50μlである。V底アッセイプレートでは、阻害剤の1μlおよびプレミックスの24μlが混合される。反応を20mMのMgCl2の25μlで開始する。プレミックスは、H2Oの810μl、10×アッセイ緩衝液の300μl、20μg/mlの連結されたDNAの300μl、100mMのATPの30μlおよび500U/mlのヒトトポイソメラーゼIIアルファ酵素（トポII）の30μlを0.5mg/mlのBSAを含む酵素希釈緩衝液中で混合することによって調製される。反応混合物を室温で40分間インキュベートする。次いで、0.2MのEDTA（5μl）を、反応を停止するために添加する。
【０１９５】
ヒトのトポIIアッセイについての最終濃度は、50mMのトリス-HCl、pH8.0、125mMの塩化ナトリウム、0.5mMのEDTA、10mMのMgCl2、2μg/mlの連結DNA、1mMのATP、5U/mlのヒトトポIIアルファ酵素および5μg/mlのBSAである。
【０１９６】
サンプル（50μl）を真空マニホールドにてTDDフィルタープレート上にロードする。次いで溶液は、フィルタを通過するまで真空が適用される（80キロパスカルまたは600 mmHg）。フィルタは、リンス緩衝液（10mMのTris-HCl、pH7.5、10mMのNaCl）での150μlですすぐ。最後に、1×蛍光色素（50μl）を添加し、485nmの励起波長を使用して、535nmでの蛍光強度を測定する。
【０１９７】
結果：
【０１９８】
アッセイの結果を図2に示す。化合物：Adva-27afh=例1；Adva-27af=例2。
【０１９９】
3.2-多剤耐性を有するヒト乳癌細胞系（MCF-7/mdr）における増殖抑制活性の時間依存性のインビトロ評価
【０２００】
（1）．細胞培養
【０２０１】
多薬剤耐性（MCF-7/mdr）を有するヒト乳癌細胞系はスポンサーから提供される。MCF7/mdr細胞は、10％FBSを伴うRPMI1640培地中で、グルタミン（2ミリモル）、ペニシリン（100I.U.）およびストレプトマイシン（100μg/ml）を添加して、37℃のCO2インキュベーター中で培養し、およびHEPES（10mM）を培地に添加する。細胞を解凍し、および研究の前に一週間、0.8μMのDoxorubicin（ドキソルビシン）〔Sigma-Aldrich（シグマ・アルドリッチ）(R)Canada（カナダ）、カタログ番号D1515からのもの〕において維持する。研究の過程の間、培養培地においてドキソルビシンは含まない。
【０２０２】
（2）．増殖抑制分析。
【０２０３】
MCF-7/mdr細胞はデイ（日）-1に12ウェル組織培養プレートにおいて〜（約）18000細胞/ウェルでプレーティング（平板培養）した。プレーティング後の二十四（24）時間（D0）に、細胞を0.4％DMSO、または、3、6、9、12、および24μMにてテスト物品（例1、例2およびエトポシド）で処理する。DMSOの最終濃度は、テスト物品で処理されたすべてのウェルについて0.4％である。
【０２０４】
処理後0（0日）、24（1日目）、48（2日目）、72（3日目）、96（4日目）および120（5日目）時間で、一方のプレートは回収され、および研究は経時的分析のために終了される。培養培地を穏やかに吸引し、および細胞を2mlの滅菌PBSで1回洗浄する。トリプシン0.25％EDTA（0.4ml）を、プレートから細胞を剥離するために使用し、1mlの培地を、トリプシンを不活性化するために添加する。細胞を1.5mlのEppendorf（エッペンドルフ）(R)チューブに移し、そして細胞ペレットを収集するために2分間2500rpmで遠心する。細胞ペレットをPBSの50μl中に再懸濁する。細胞（20μl）は血球計を用い細胞計数のために0.4％トリパンブルー染色溶液（20μl）と混合する。
【０２０５】
（3）．結果：
【０２０６】
異なる化合物で処理し、またはそうしないMCF-7/mdr癌細胞の時間依存性の増殖を示す結果は図3A-Dで見出される。化合物：Adva-27afh=例1。Adva-27af=例2。
【０２０７】
3.3-多剤耐性を有するヒト肺癌細胞系（H69AR）での増殖抑制活性の時間依存性のインビトロ評価
【０２０８】
（1）．細胞培養
【０２０９】
多薬剤耐性を有するヒト肺癌細胞系（H69AR）はCedarlane（シダーレーン）(R)〔Burlington, Ontario, Canada（バーリントン、オンタリオ州、カナダ）〕をvia(R)（介する）American Tissue Culture Collection（アメリカン・ティッシュ・カルチャー・コレクション）から購入する。H69AR細胞は、20％FBSを含むRPMI1640培地において、グルタミン（2ミリモル）、ペニシリン（100I.U.）およびストレプトマイシン（100μg/ml）の添加を伴い、37℃のCO2インキュベーター中で培養し、およびHEPES（10mM）が培地に添加される。細胞を解凍し、および研究前のおよそ一週間の間、0.1-0.5μMのドキソルビシン〔Sigma-Aldrich(R) Canada、カタログ番号D1515から〕の濃度を高めて維持される。研究の過程の間、培地にはドキソルビシンはない。
【０２１０】
（2）．増殖抑制分析。
【０２１１】
H69AR細胞は、日-1に12ウェル組織培養プレートにおいて〜50000細胞/ウェルでプレーティングされる。プレーティング後二十四（24）時間（D0）に、細胞を0.4％DMSO、または3、6、9、12、および24μMにてテスト物品で処理する（例1およびエトポシド）。DMSOの最終濃度はテスト物品で処理されたすべてのウェルについて0.4％である。
【０２１２】
処理後0（0日）、24（1日目）、48（2日目）、72（3日目）、96（4日目）および120（5日目）時間で、一方のプレートを回収し、そして研究は経時的分析のために終了する。培養培地を穏やかに吸引し、そして細胞を2mlの滅菌PBSで一回洗浄する。トリプシン-0.25％EDTA（0.4ml）はプレートから細胞を剥離するために使用し、そして1mlの培地を、トリプシンを不活性化するために添加する。細胞を1.5mlのEppendorf(R)チューブに移し、そして細胞ペレットを収集するために、2分間2500rpmで遠心する。細胞ペレットをPBSの50μlに再懸濁する。細胞（20μl）は血球計を用いる細胞計数のために0.4％トリパンブルー染色溶液（20μl）と混合する。
【０２１３】
（3）．結果：
【０２１４】
異なる化合物で処理し、またはそうしないH69AR癌細胞の時間依存性増殖を示す結果は図4A-Cに見出される。化合物：Adva-27afh=例1。
【０２１５】
3.4-多剤耐性を有するヒト子宮肉腫がん細胞系（MES-SA/DX5）での増殖抑制活性の時間依存性のインビトロ評価
【０２１６】
（1）．細胞培養
【０２１７】
複数の薬剤耐性を有するヒト子宮肉腫細胞系（MES-SA/Dx5）は、Cedarlane(R)（Burlington、Ontario、Canada）〔cat.（カタログ）、CRL-1977〕を介してAmerican Tissue Culture Collection（アメリカン・ティッシュ・カルチャー・コレクション）(R)から購入する。MES-SA/Dx5細胞は、10％FBSを含むMcCoy（マッコイ）培地において、グルタミン（2mM）、ペニシリン（100I.U.）およびストレプトマイシン（100μg/ml）の添加を伴い、37℃のCO2インキュベーター中で培養する。
【０２１８】
（2）．増殖抑制分析。
【０２１９】
MES-SA/Dx5細胞は、日-1に12ウェル組織培養プレートにおいて〜300000細胞/ウェルでプレーティングする。プレーティング後二十四（24）時間（D0）に、細胞を、0.4％DMSO、または3、6、9、12、および24μMにてテスト物品（例1およびエトポシド）で処理する。DMSOの最終濃度はテスト物品で処理されたすべてのウェルについて0.4％である。
【０２２０】
処理後0（0日）、24（1日目）、48（2日目）、72（3日目）、96（4日目）および120（5日目）時間で、一方のプレートは回収され、および研究は経時的分析のために終了する。培養培地を穏やかに吸引し、および細胞を2mlの滅菌PBSで一回洗浄する。トリプシンの0.25％EDTA（0.4ml）は、プレートから細胞を剥離するために使用し、そして1mlの培地がトリプシンを不活性化するために添加される。細胞を1.5mlのEppendorf(R)チューブに移し、そして細胞ペレットを収集するために、2分間2500rpmで遠心する。細胞ペレットをPBSの50μlにおいて再懸濁する。細胞（20μl）は血球計を用いる細胞計数のために0.4％トリパンブルー染色溶液（20μl）と混合する。
【０２２１】
（3）．結果：
【０２２２】
異なる化合物で処理され、またはそうされないMES-SA/Dx5癌細胞の時間依存性増殖を示す結果は、図5A-Cにおいて見出される。化合物：Adva-27afh=例1。
【０２２３】
好適な実施態様が上記に説明され、および添付図面に例示されるが、本開示から離れることなく修飾がなされうることは、当技術における熟練した者には明らかであろう。そのような改変は、本開示の範囲に含まれる可能性のある変形と考えられる。
【図１】
2016504394.tif 000052
【図２】
2016504394.tif 000053
【図３Ａ】
2016504394.tif 000054
【図３Ｂ】
2016504394.tif 000055
【図３Ｃ】
2016504394.tif 000056
【図３Ｄ】
2016504394.tif 000057
【図４Ａ】
2016504394.tif 000058
【図４Ｂ】
2016504394.tif 000059
【図４Ｃ】
2016504394.tif 000060
【図５Ａ】
2016504394.tif 000061
【図５Ｂ】
2016504394.tif 000062
【図５Ｃ】
2016504394.tif 000063
【手続補正書】
【提出日】平成27年10月6日(2015.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I：
【化１】
2016504394.tif 000064
（I）
式中：
Rは、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、アセチル、もしくはベンゾイル基から選ばれる基であり、
R1およびR2は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基、もしくはCR'R''タイプのアセタール基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であり、そこで、R'およびR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アリール、もしくはアルキルアリール基から選ばれる基であり、
R3は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれる基であり、
R4は、OR'''、NGR'GR''、N3、またはフタルイミドを表し、そこで、R'''は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、もしくはピバロイル基から選ばれるヒドロキシル基のための保護基であり、ならびにGR'およびGR''は、同じかまたは異なり、そしてそれらは水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、ベンジル、ベンゾイル、アセチル、アルキルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、もしくはベンジルオキシカルボニル基から選ばれる基であり、
R5は、水素原子かまたは線状もしくは分枝状のアルキル、アセチル、ベンジル、PO3H、もしくはPO3Na基から選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
式II：
【化２】
2016504394.tif 000065
（II）
式中：
R4、R5は、請求項１に規定されるようなものであり、
R6は、水素原子かまたはアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、もしくはアルキルヘテロアリール基から選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項３】
式III：
【化３】
2016504394.tif 000066
（III）
式中：
R5は、水素原子か、またはアルキル、-PO3H、もしくは-PO3Naから選ばれる基である、
化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項４】
前記化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(4-ヒドロキシ-3,5-ジメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項５】
前記化合物は、(5R,5aR,8aS,9S)-9-((2,2-ジフルオロ-2-((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)エチル)アミノ)-5-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-5,5a,8a,9-テトラヒドロフロ[3',4':6,7]ナフト[2,3-d][1,3]ジオキソール-6(8H)-オンである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項６】
式IV：
【化４】
2016504394.tif 000067
式IV
式中、R5は式IからIIIにおいて規定するようなものである化合物、および
式V：
【化５】
2016504394.tif 000068
式V
の化合物または式VI：
【化６】
2016504394.tif 000069
式VI
の化合物で、
式中、
R1、R2、R3、R4は、請求項１において式Iに規定するようなものであり、
RはC1-C12アルキルであり、および
式中、式IVの前記化合物は、エピマー化によって、および次いでポドフィロトキシンまたは脱メチル化されたポドフィロトキシンの位置4においてアルコール官能基を、続いてアミン基にまで還元されるアジド基によって置換することにより得られるものであるもの
の間でのカップリングステップを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を調製するための方法。
【請求項７】
式（VII）または（VIII）：
【化７】
2016504394.tif 000070
(VII)
2016504394.tif 000071
(VIII)
式中、Rは、メチル、エチル、ブチル、またはイソプロピル基から選ばれる基である、化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項８】
ガンの処置のための薬を調製するための請求項１から５のいずれか一項に記載の少なくとも一の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の使用。
【請求項９】
前記使用は放射線療法との組み合わせである、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記使用は一またはそれよりも多くの他の抗ガン剤との組み合わせである、請求項８に記載の使用。
【請求項１１】
ガンは、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍から選ばれる、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
ペイシェントに化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の治療上有効な量を施与することを含む、ガンを患うペイシェントの処置でのガンの処置における使用のための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１３】
ペイシェントに化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の治療上有効な量を放射線療法と組み合わせて施与することを含む、ガンを患うペイシェントの処置でのガンの処置における使用のための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１４】
ペイシェントに化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物の治療上有効な量を一またはそれより多くの他の抗ガン剤と組み合わせて施与することを含む、ガンを患うペイシェントの処置でのガンの処置における使用のための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１５】
ガンは、膀胱ガン、脳ガン、乳ガン、子宮ガン、慢性リンパ性白血病、結腸ガン、食道ガン、肝臓ガン、精巣ガン、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、黒色腫、悪性ホメオパシー、骨髄腫、卵巣ガン、非小細胞肺ガン、前立腺ガン、小細胞肺ガン、急性白血病、カポジ肉腫、およびリンパ性悪性腫瘍から選ばれる、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【国際調査報告】
2016504394.tif 000072
2016504394.tif 000073
2016504394.tif 000074