(57)【要約】  ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料とドセタキセルとを含み、ドセタキセルはキャリア材料に内包され、ドセタキセルとキャリア材料との質量比は０．０１〜０．１５であり、前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体はＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルとが開環重合して形成されたブロック共重合体であり、ポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドとの質量比は１：０．５５〜０．６５または１：０．７３〜０．８９または１：０．９１〜０．９９である、ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤。ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリラクチドブロック共重合体におけるポリエステルとポリエーテルとの質量割合を最適化にし、さらにドセタキセルとキャリアとの質量比を最適化にすることにより調製されたドセタキセルミセルは、水で再溶解された後、封入率が９０％よりも大きい時間は１２時間以上に達することが可能であり、臨床での薬品応用の実状に合致しているため、臨床の要求を満たすものである。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料とドセタキセルとを含み、ドセタキセルはキャリア材料に内包され、ドセタキセルとキャリア材料との質量比は０．０１〜０．１５であり、前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体はＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルとが開環重合して形成されたブロック共重合体であり、ポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドとの質量比は１：０．５５〜０．６５または１：０．７３〜０．８９または１：０．９１〜０．９９であることを特徴とする、ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤。
【請求項２】
前記ドセタキセルとキャリア材料との質量比は０．０２〜０．０９であることを特徴とする、請求項１に記載のドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤。
【請求項３】
前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテルの分子量は１０００〜２００００であることを特徴とする、請求項１に記載のドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤。
【請求項４】
（１）ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料共重合体のキャリア材料を合成する工程と、
（２）配合量のドセタキセルと工程（１）で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料を有機溶媒に溶解させ、混合して均一にし、回転蒸発により有機溶媒を除去し、薬物とキャリア材料のゲル状薬膜が得られた後、薬膜に水を加えて前記薬膜を溶解分散させて、ミセル溶液にする、フィルム再水和法を用いて薬物送達ミセル水溶液を調製する工程と、
（３）工程（２）で調製されたミセル溶液を濾過除菌し、冷凍結乾燥後ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤が得られる工程と、
を備えることを特徴とする、請求項１に記載のドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の調製方法。
【請求項５】
前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料は、配合量のＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルを秤量しておき、配合量のポリエチレングリコールモノメチルエーテルを６０〜１３０℃で反応器の中で２〜８ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、配合量のＤ，Ｌ−ラクチドを入れ、さらに触媒である、質量がＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルの全質量の０．０５ｗｔ％〜０．５ｗｔ％を占めるスタナスオクトエートを投入し、次に、真空引きをし、反応温度を６０〜１３０℃に維持し、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉しまたは窒素で保護した後、１２５〜１５０℃まで昇温させ、６〜２０ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られることと、前記淡黄色の透明、粘稠な液体に有機溶媒を加えて溶解させ、３０〜５０ｍｉｎ撹拌した後、続いて無水エーテルを入れて２０〜４０ｍｉｎ撹拌し、０〜５℃で１２〜２４ｈ静置した後、吸引濾過後真空乾燥させることにより、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られることとを備える方法により調製されることを特徴とする、請求項４に記載の調製方法。
【請求項６】
前記有機溶媒は、アセトニトリル、メタノール、アセトン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトン、短鎖脂肪族アルコールと酢酸エチルの中のいずれか一種または複数種であり、有機溶媒の使用量は、１ｇあたりの淡黄色の透明、粘稠な液体に有機溶媒を０．２〜１ｍｌ加えることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
１ｇあたりの淡黄色の透明、粘稠な液体に無水エーテルを５〜１０ｍｌ加えることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
工程（２）で述べられた有機溶媒は、アセトニトリル、メタノール、アセトン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトン、短鎖脂肪族アルコール、酢酸エチルから選ばれるいずれか一種または複数種であり、有機溶媒の使用量は１ｇあたりのポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料に有機溶媒を０．５〜２ｍｌ加えることを特徴とする、請求項４に記載の調製方法。
【請求項９】
工程（２）では、薬膜に水を加える使用量は、１ｇあたりのポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料に水を２〜４０ｍｌ加えることを特徴とする、請求項４に記載の調製方法。
【請求項１０】
工程（２）では、回転蒸発による有機溶媒除去の条件は、回転数１０〜１５０ｒｐｍ、温度２０〜８０℃、時間１〜４ｈであることを特徴とする、請求項４に記載の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬技術分野に属し、具体的には、ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤及びその調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ、ＤＴＸ）は、タキソテールとも呼ばれ、分子式がＣ４３Ｈ５３ＮＯ１４であり、分子量が８０７．８８であり、パクリタキセル類の抗腫瘍薬であり、遊離のチューブリンと結合して、チューブリンが安定した微小管に組付けられることを促進できるとともに、その解重合を抑制して、正常な機能がなくなった微小管束の生成と微小管の固定につながることにより、細胞の有糸分裂を抑制し、抗腫瘍効果を発揮する。臨床において乳癌、非小細胞性肺癌、膵癌、軟部組織肉腫、頭頚部癌、胃癌、卵巣癌と前立腺癌等に用いられ、単独で薬剤投与しても組み合わせて薬剤投与しても著しい治療効果がある。
【０００３】
しかし、ドセタキセルは同時に水溶性が悪いこと、半減期が短いこと、及び毒性が大きいこと等のディメリットを有するものであり、これにより、臨床での応用が制限される。現在、国内及び国外で市販されているドセタキセル注射液はドセタキセルをＴｗｅｅｎ−８０中に溶解し、臨床応用において、専用の注射用溶媒を厳格に使用して、それを希釈しなければならず、操作要求が厳格になり、且つ使用方法が繁雑になる。そして、製剤には多くのＴｗｅｅｎが含まれて、溶血及びエネルギー等の不良反応になりやすく、予めデキサメタゾン等の薬物を服用しておき予防及び治療する必要があり、臨床で薬剤投与しにくく、薬剤投与の安全性が低い。今まで、この問題はよく解決されていない。
【０００４】
ナノポリマーミセルは近年来開発されてきた、難溶性薬物向けの薬物送達システムであり、コア・シェル状構造を有し、中でもコアは疎水性部分であり、シェルは親水性部分である。ポリマーミセルは難溶性薬物をコア部分に内包してそれを可溶化させることができる。一般的に用いられる可溶化剤と潜伏性溶剤に比べて、ポリマーミセル薬物送達システムは生分解性材料を材料として選択するので、その安全性が高い。このため、難溶性薬物の被包補助材料として、良好な応用展望を有する。いくつかの技術では、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーとドセタキセルをミセルに調製して、この難題の解決を試み、例えば、中国特許出願第２０１１１０１０５５４０号には、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーとドセタキセルから調製されたミセルが開示されており、ドセタキセルの可溶化問題を解決した。
【０００５】
しかしながら、従来のポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーとドセタキセルから調製されたミセルは、水で分散させた後の安定性が悪く、短時間で薬物漏れが発生したことにより、臨床応用時に、その物理的安定性が高くないため、さらなる普及と確実な応用ができない。この問題を解決するために、中国特許出願第２０１０１０１１４２８９号には、ポリマーミセルにアミノ酸を添加する方法でミセル再溶解後の安定性を向上する技術が開示されているが、添加された物質の工業的生産に対する要求が高い上に、添加された安定剤により製剤工程の繁雑性が高くなるとともに、添加されたアミノ酸等は主薬に対して分解効果があるので、大規模な生産には適さない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従来技術に存在する技術問題を解決するために、本発明は、水で分散させた後、封入率が９０％よりも大きくなる時間は１２時間以上に達することが可能である、ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤を提供することを目的とする。
【０００７】
本発明の解決しようとするもう一つの技術問題は、上記ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の調製方法及びその応用を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記技術の目的を図るために、本発明は以下の技術方案を採用する。
【０００９】
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料とドセタキセルとを含み、ドセタキセルはキャリア材料に内包され、ドセタキセルとキャリア材料との質量比は０．０１〜０．１５であり、前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体はＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルとが開環重合して形成されたブロック共重合体であり、ポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドとの質量比は１：０．５５〜０．６５または１：０．７３〜０．８９または１：０．９１〜０．９９である、ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤。前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドとの質量比は、合成後のブロック共重合体がミセルを形成した後で、水で再溶解した後の封入率に大きな影響をもたらすので、ポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドの使用量を厳格に制御しなければならない。
【００１０】
好ましくは、前記ドセタキセルとキャリア材料との質量比は０．０２〜０．０９である。
【００１１】
前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテルの分子量は１０００〜２００００であり、好ましくは、ポリエチレングリコールモノメチルエーテルの分子量は２０００または５０００である。
【００１２】
本発明は、さらに、以下の工程を備える上記ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の調製方法を提供することを目的とする。
（１）ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料を合成する工程。
（２）フィルム再水和法を用いて薬物送達ミセル水溶液を調製する工程：配合量のドセタキセルと工程（１）で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料を有機溶媒に溶解させ、混合して均一にし、回転蒸発により有機溶媒を除去し、薬物とキャリア材料のゲル状薬膜が得られた後、薬膜に水を加えて前記薬膜を溶解分散させて、ミセル溶液にする。なかでも、前記有機溶媒は、アセトニトリル、メタノール、アセトン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトン、短鎖脂肪族アルコールと酢酸エチルの中のいずれか一種または複数種であり、有機溶媒の使用量は、１ｇあたりのポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料に有機溶媒を０．５〜２ｍｌ加え、好ましくは、前記有機溶媒はジクロロメタン、メタノール、アセトンまたは酢酸エチルの中のいずれか一種類である。
（３）工程（２）で調製されたミセル溶液を濾過除菌し、冷凍結乾燥後ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤が得られる工程。
【００１３】
具体的には、前記ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料は下記の方法により調製された。配合量のＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルを秤量しておき、配合量のポリエチレングリコールモノメチルエーテルを６０〜１３０℃で反応器の中で２〜８ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、配合量のＤ，Ｌ−ラクチドを入れ、さらに触媒である、質量がＤ，Ｌ−ラクチドとポリエチレングリコールモノメチルエーテルの全質量の０．０５ｗｔ％〜０．５ｗｔ％を占めるスタナスオクトエートを投入する。次に、真空引きをし、反応温度を６０〜１３０℃に維持し、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉しまたは窒素で保護した後、１２５〜１５０℃まで昇温させ、６〜２０ｈ反応させる。反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。前記淡黄色の透明、粘稠な液体に有機溶媒を加えて溶解させ、３０〜５０ｍｉｎ撹拌した後、続いて無水エーテルを入れて２０〜４０ｍｉｎ撹拌し、０〜５℃で１２〜２４ｈ静置した後、吸引濾過後真空乾燥させることにより、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られた。中でも、前記有機溶媒は、アセトニトリル、メタノール、アセトン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトン、短鎖脂肪族アルコールと酢酸エチルの中のいずれか一種または複数種であり、有機溶媒の使用量は、１ｇあたりの淡黄色の透明、粘稠な液体に有機溶媒を０．２〜１ｍｌ加え、好ましくは、前記有機溶媒は、アセトニトリル、メタノール、アセトンまたは酢酸エチルの中のいずれか一種類である。中でも、無水エーテルの使用量について、１ｇあたりの淡黄色の透明、粘稠な液体に無水エーテルを５〜１０ｍｌ加える。
【００１４】
好ましくは、薬膜に水を加える使用量は、１ｇあたりのポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料に水を２〜４０ｍｌ加え、より好ましくは１ｇあたりのポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のキャリア材料に水を５〜２５ｍｌ加える。
【００１５】
好ましくは、工程（２）では、回転蒸発による有機溶媒除去の条件は、回転数１０〜１５０ｒｐｍ、温度２０〜８０℃、時間は１〜４ｈである。
【００１６】
（作用効果）
本発明は適当な質量比のポリエチレングリコールモノメチルエーテルとＤ，Ｌ−ラクチドから調製されたブロック共重合体をキャリア材料に用いることにより、また、適切な薬物とキャリア材料との割合を選択することにより、調製されたドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤は水分散後、封入率が９０％よりも大きい時間は１２時間以上に達することが可能であり、普通の凍結乾燥製剤に比べて遥かに優れた効果があり、臨床での薬品応用の実状に合致しているため、臨床の要求を満たすものである。ミセルの分子量と薬物送達量を最適化にすることにより、ドセタキセルがより良好にキャリアに内包され、安定性が向上された。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】ポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のＣＤＣｌ３  １ＨＮＭＲスペクトルである。
【図２】ポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のＧＰＣスペクトルである。
【図３】ドセタキセルポリマーミセルの凍結乾燥製剤のＣＤＣｌ３  １ＨＮＭＲスペクトルである。
【図４】ドセタキセルポリマーミセルの凍結乾燥製剤のＤ２Ｏ  １ＨＮＭＲスペクトルである。
【図５】ポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のＣＤＣｌ３  １ＨＮＭＲスペクトルである。
【図６】ポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体の赤外スペクトルである。
【図７】ドセタキセルの赤外スペクトルである。
【図８】ドセタキセルポリマーミセルの赤外スペクトルである。
【図９】ドセタキセルのＤＳＣスペクトルである。
【図１０】ポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のＤＳＣスペクトルである。
【図１１】ドセタキセルポリマーミセルのＤＳＣスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、試験例の形により、本発明の上記内容についてさらに詳しく説明するが、本発明の上記主旨の範囲が以下の実施例のみに限定されると理解すべきではなく、本発明の上記内容に基づき実現された技術はいずれも本発明の範囲に属するものである。
【００１９】
（実施例１）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）５１．０７ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと０．５７ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１００℃で７ｈ真空乾燥させ、窒素置換し、Ｄ，Ｌ−ラクチドを入れ、触媒であるスタナスオクトエートを０．２ｇ投入し、真空度が０．０９６Ｍｐａになるまで真空引きをし、密閉して、反応温度を１００℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回行い、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、１４０℃まで昇温させ、１２ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを加え、２５ｍｌのジクロロメタンを入れ、３０ｍｉｎ撹拌した。その後５１０ｍｌの無水エーテルを入れ、３０ｍｉｎ撹拌した。その後０℃で１２ｈ静置し、吸引濾過して真空乾燥させ、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約７５％であった。得られたポリマーは核磁気共鳴とゲルパーミエーションクロマトグラフィーにより同定を行ったところ、図１と図２の通りであった。図１はポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体における種々な水素の同定であり、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が合成できたことが裏付けられた。図２の検出結果は以下の通りであった：Ｍｐ：６３３０、Ｍｎ：５８８７、Ｍｗ：６３７４、Ｍｚ：６８７３、Ｍｚ＋１：７３９３、Ｍｖ：６３０１、ＰＤＩ：１．０８２７２。
【００２０】
（実施例２）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４８．７７ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５１．２７ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１２０℃で５ｈ真空乾燥させ、窒素置換し、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入した後、触媒であるスタナスオクトエートを０．０４８ｇ投入し、真空度が０．０９５Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１２０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回行い、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、窒素で保護した後、１４０℃まで昇温させ、１４ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色透明の液体が得られた。
（２）上記淡黄色透明液体に２９ｍｌのジクロロメタンを加えて溶解させ、撹拌溶解した。その後５８６ｍｌの無水エーテルを入れ、３０ｍｉｎ撹拌した。５℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させた。上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８５％であった。
【００２１】
（実施例３）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４７．５３ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５２．１７ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１３０℃で７ｈ真空乾燥させ、窒素置換し、触媒であるスタナスオクトエートを０．３ｇ投入した後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、真空度が０．０９３Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１３０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回行い、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉した後、１５０℃まで昇温させ、６ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色透明の液体が得られた。
（２）工程（１）中の淡黄色透明の液体にジクロロメタンを４５ｍｌ加え、撹拌溶解した。その後無水エーテルを５０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させた。上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８０％であった。
【００２２】
（実施例４）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４７．１１ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５２．８５ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１２０℃で４ｈ真空乾燥させた後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．４ｇ入れ、真空度が０．０９３Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１２０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、１３０℃まで昇温させ、１８ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明粘稠液体にジクロロメタンを４０ｍｌ加えて溶解させ、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを５００ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８０％であった。
【００２３】
（実施例５）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４５．９１ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５４．０６ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１２０℃で３ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．２５ｇ投入し、真空引きをし、反応温度を１２０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、窒素置換を３回行い、反応器中が負圧であるように保証し、密閉して、１４０℃まで昇温させ、１２ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを５０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを５００ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約７５％であった。
【００２４】
（実施例６）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４４．４５ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５５．６８ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１１０℃で５ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．３６ｇ投入し、真空度が０．０９Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１１０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、１４０℃まで昇温させるように制御し、１４ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを６０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを６６０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８０％であった。
【００２５】
（実施例７）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）３９．５１ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと６１．７７ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１００℃で６ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．０８ｇ投入し、真空度が０．０９８Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１００℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、１４０℃まで昇温させるように制御し、１２ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを５０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを５４０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約７０％であった。
【００２６】
（実施例８）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）４２．１７ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと５７．８９ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１００℃で８ｈ真空乾燥させ、窒素置換し、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．４５ｇ投入し、真空度が０．０９５Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１００℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、制御１３０℃まで昇温させ、１０ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを７５ｍｌ加えて溶解させ、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを７２０ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８０％であった。
【００２７】
（実施例９）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）３７．５３ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと６２．７１ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１１０℃で６ｈ真空乾燥させ、窒素置換後、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．１ｇ投入し、真空度が０．０８５Ｍｐａになるまで真空引きをし、反応温度を１１０℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、反応器中が負圧であることを保証するように、さらに真空引きをし、密閉して、１４０℃まで昇温させるように制御し、６ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体にジクロロメタンを４０ｍｌ加えて、３０ｍｉｎ撹拌した。その後無水エーテルを５５６ｍｌ加え、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８０％であった。
【００２８】
（実施例１０）
ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーの調製。
（１）３５．５４ｇのＤ，Ｌ−ラクチドと６４．６８ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００とを秤量しておき、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル２０００を１００℃で７ｈ真空乾燥させ、窒素置換し、Ｄ，Ｌ−ラクチドを投入し、さらに触媒であるスタナスオクトエートを０．０８ｇ投入し、真空度が０．０９８Ｍｐａになるまで真空引きをし、窒素置換し、反応温度を１００℃に保持させ、Ｄ，Ｌ−ラクチドがすべて溶融した後、さらに真空引きをし、窒素で保護し、１４０℃まで昇温させるように制御し、１２ｈ反応させ、反応完了後、淡黄色の透明、粘稠な液体が得られた。
（２）工程（１）で得られた淡黄色の透明、粘稠な液体に３５ｍｌのジクロロメタンを加えて溶解させ、３０ｍｉｎ撹拌した。その後、無水エーテルの体積と淡黄色の透明、粘稠な液体生成物の重量との比（即ちｍｌ／ｇ）が５：１となるように無水エーテルを入れて析出を行い、３０ｍｉｎ撹拌した。０℃で１２ｈ静置した後、吸引濾過して真空乾燥させ、上記操作手順に従い、純化を３回行い、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロック共重合体が得られ、総収率は約８５％であった。
【００２９】
（実施例１１）
ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の調製。
（１）ドセタキセル２０ｇ、実施例１で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマー４００ｇ（ｍＰＥＧ２０００：ＰＬＡ＝１：０．９９）、水４０００ｍｌ、有機溶媒のアセトニトリル４００ｍｌを取っておいた。
（２）取っておいたドセタキセルに１０００ｍｌのアセトニトリルを加え、超音波溶解を行った。その後４００ｇのポリエチレングリコールモノメチルエーテル−ポリ乳酸ブロックポリマーを入れ、続いて溶解させ、無菌濾過させた。その後５０℃、８０ｒ／ｍｉｎの回転数で２ｈ回転蒸発させ、アセトニトリルを留去してドセタキセルポリマーゲルフィルムが得られ、迅速に５０℃の水を４０００ｇ入れてボルテックス水和を行い、完全に水和された後ミセル溶液の温度を迅速に５℃まで下げ、ミセル溶液が得られた後、無菌濾過し、分割充填し、凍結乾燥させた。
【００３０】
（実施例１２〜４０）
ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の調製。
実施例１１の調製方法を参照して、表１における使用量によりドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤を調製し、中でも、回転数は１０〜１５０ｒｐｍの間に制御され、温度は２０〜８０℃の間にあり、時間は１〜４ｈであった。
【００３１】
【表１】
2016528187.tif 000003
【００３２】
（実施例４１）
ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤の同定。
（１）図３は実施例１１で調製されたドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤のＣＤＣｌ３  １ＨＮＭＲスペクトルであり、図４は実施例１１で調製されたドセタキセルポリマーミセルの凍結乾燥製剤のＤ２Ｏ  １ＨＮＭＲスペクトルであり、図５は実施例１で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸ブロック共重合体のＣＤＣｌ３  １ＨＮＭＲスペクトルである。その結果から、ドセタキセルがミセルのコアに内包されることが明らかであり、ミセルの１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、ドセタキセルの特徴的吸収ピークが見られなかった。
（２）僅かな量の実施例１１で調製されたドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤、ドセタキセルと実施例１で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸を取り、フーリエ変換赤外スペクトル走査を行った結果、図６、図７と図８に示されるように、ドセタキセルがミセルのコアに内包されることが裏付けられ、ミセルの赤外スペクトルにおいて、ドセタキセルの特徴的吸収ピークが見られなかった。
（３）僅かな量の実施例１１で調製されたドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤、ドセタキセルと実施例１で調製されたポリエチレングリコールモノメチルエーテルポリ乳酸を取り、ＤＳＣ走査を行った結果、図９、図１０と図１１に示されるように、ドセタキセルがミセルのコアに内包されることが裏付けられ、ミセルのＤＳＣスペクトルにおいて、ドセタキセルの特徴的吸収ピークが見られなかった。
【００３３】
（実施例４２）
ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤再溶解後の異なる時間における封入率の検出結果。
中国特許出願第２０１１１０１０５５４０．２号に開示されている実施例１中の処方１７（ポリエチレングリコールとポリ乳酸との質量比は１：１．２、薬物送達量は６％）に従いコントロール薬を調製した。本発明の実施例１１に従いドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤を調製し、実験群とし、実験群は並列実験を三つ行い、実施例１１−１、実施例１１−２と実施例１１−３と記された。コントロール群と実験群の製剤をそれぞれ取り、生理食塩水を入れて濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるまで（ドセタキセルで）溶解させ、室温（２５±２℃）で放置し、異なる時間でその封入率を検出した。結果は表２に示される。
【００３４】
高速遠心法（１００００ｒ／ｍｉｎ、１０ｍｉｎ）によるミセルの封入率について、封入率＝（１−遊離薬物／総薬物）×１００％であった。ＨＰＬＣによりドセタキセルポリマーミセルの封入率を測定する際に用いられるクロマトグラフ条件は、ＯＤＳを充填剤とし、０．０４３ｍｏｌ／Ｌ醋酸アンモニウム水溶液−アセトニトリル（４５：５５）を移動相とし、検出波長は２３０ｎｍであった。理論段数はドセタキセルピークで計算すると、２０００よりも低くないものであるべきである。
【００３５】
ドセタキセルのナノポリマーミセルの凍結乾燥製剤再溶解後の異なる時間における封入率の検出結果
【表２】
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【００３６】
表２に示されるように、実験群薬物は１２ｈの場合、その封入率がまだ９０％を超えており、コントロール群薬物は０．５ｈの場合、バースト放出を発生した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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