(57)【要約】  本発明は、ビタミン類およびカンタキサンチンを含む飼料添加物、および家禽、特に家禽の若雌鶏の能力および健康を改善するためのこのような栄養補助剤の使用に関する。後に定義するような飼料添加組成物が、驚くべきことに若雌鶏の免疫状態、骨および骨格の発育、群れの均一性、成長、および飼料要求率を改善することが分かった。本発明による飼料添加組成物は、カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物の任意選択の混合物とを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
若雌鶏の飼料摂取、体重増加、飼料要求率、および／または骨の発育を改善するために、かつ／または前記動物の免疫系を高めるための、家禽の若雌鶏の飼料において、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミン、セレン、およびチモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物の任意選択の混合物と組み合わせる、カンタキサンチンの使用。
【請求項２】
カンタキサンチンが、ビタミンＣ、ビタミンＥ、セレン、および主成分としてチモールおよびオイゲノールを含む精油の混合物と組み合わされる、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物を含む任意選択の精油の混合物とを含む、若雌鶏用の飼料添加組成物。
【請求項４】
カンタキサンチンと、ビタミンＣと、ビタミンＥと、セレンと、主成分としてチモールおよびオイゲノールを含む精油の混合物とを含む、請求項３に記載の飼料添加組成物。
【請求項５】
請求項３または４に記載の飼料添加組成物を含むプレミックスまたは通常の動物飼料。
【請求項６】
−約２〜１００ｐｐｍ、好ましくは２〜１０ｐｐｍのカンタキサンチンと、
−約２０〜２００ｐｐｍ、好ましくは３０〜１５０ｐｐｍのビタミンＥと、
−約２０〜２００ｐｐｍ、好ましくは５０〜１５０ｐｐｍのビタミンＣと、
−約０．０１〜０．５ｐｐｍ、好ましくは０．０５〜０．２ｐｐｍのセレンと、
−約２０〜２５０ｐｐｍ、好ましくは３０〜１５０ｐｐｍの精油の混合物と
を含む動物飼料。
【請求項７】
−２、４、または６ｐｐｍのカンタキサンチンと、
−３５、７０、または１０５ｐｐｍのビタミンＥと、
−５０、１００、または１５０ｐｐｍのビタミンＣと、
−０．０５、０．１、または０．１５ｐｐｍのセレンと、
−３４、６７、または１０１ｐｐｍの精油の混合物と
を含む、請求項６に記載の動物飼料。
【請求項８】
−２％〜１０％、好ましくは５％のチモールと、
−１０％〜２０％、好ましくは１７％のオイゲノールと、
−０．５％〜５％、好ましくは１％のγ−テルピネンと、
−５％〜１０％、好ましくは７％のバニリンと、
−５５％〜８２．５％の増量剤、担体、および乳化性界面活性剤と
を含む精油の混合物を含む、請求項６または７に記載の動物飼料。
【請求項９】
若雌鶏の飼料摂取、体重増加、飼料要求率、および／または骨の発育を改善するための、かつ／または前記動物の免疫系を高めるための、主成分としてカンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物を含む任意選択の精油の混合物とを含む飼料添加組成物を用いた動物の飼養方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ビタミン類およびカンタキサンチンを含む飼料添加物およびそのような添加物の家禽、特に家禽の若雌鶏（ｐｕｌｌｅｔｅ）の能力および健康の改善のための使用に関する。
【０００２】
標準的な飼料のみを与えられる場合、過酷なストレス、例えば予防接種のストレスにさらされる動物、または高い能力が要求される場合の動物が、疲労、下痢、飼料摂取への抵抗、貧血などに苦しむことが分かっている。このような場合、飼料への添加物すなわち栄養補助剤が必要なことは明らかである。しかしながらその観察された問題の原因が何であるか、したがってどのような添加物を使用すべきかを定めることは一般に困難である。既知の非常に多くの栄養補助剤および飼料添加物が存在するが、どれも上記問題のすべてを解決しないことが分かっている。幾つかの添加物は主に動物の成長を増進させることを意図しており、一方、他の添加物は動物の健康を改善すると主張している。ビタミン類の欠乏が問題の一部である場合もあるが、その一方では飼料が十分な量のビタミン類を含有すると予想される場合でさえ、なぜそれが起こるのかを理解するべきである。
【０００３】
品種を残すための（ｒａｃｉｎｇ）家禽、特に若雌鶏では特別な問題が観察される。１歳を超える雌は、メンドリとして知られ、またより若い雌は若雌鶏として知られる。若雌鶏は１６〜２０週齢で卵を産み始めるときにメンドリになる。
【０００４】
若雌鶏の飼育は、その体重の発育および病気の状態がその群れの産卵能力に強く影響することになるのでその鳥の生涯においてきわめて重要な段階である。若雌鶏は、一般にその生涯のまさしく最初の数週間の間に様々な経路によって約１５種類のワクチンを投与される。この期間を通じての鳥の免疫反応の改善は、個々の鳥によって伝えられる抗体のレベルを高めることになるだけでなく、ワクチン接種された感染症および他の自然のままの感染症と闘うのに役立つ。これは、潜在的により良好な群れの均一性および産卵時により免疫能のある群れにつながる。
【０００５】
ワクチン摂取がニワトリの能力低下を引き起こすことはよく知られている。具体的にはワクチン接種は、飼料摂取および飼料効率の減少を引き起こす。したがってワクチン摂取は、ニワトリの生産者に莫大な経済的影響を与える。
【０００６】
したがって本発明の目的は、特にストレス状態の間の、また高い能力が要求される場合の若雌鶏の健康および能力を向上させることになる新しい飼料添加物に達することである。
【０００７】
ところで、本明細書中で後に定義する飼料添加組成物が、驚くべきことに若雌鶏の
−  免疫状態、
−  骨および骨格の発育、
−  群れの均一性、
−  成長および飼料要求率（ｆｅｅｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ）
を改善することが分かった。
【０００８】
本発明の範囲および独特の特徴は、別添の特許請求の範囲によって規定される。
【０００９】
本発明による飼料添加組成物は、カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物の任意選択の混合物と含む。
【００１０】
本発明者等は、相乗効果をなしてかつ組み合わせて使用されるこれらの有効成分の混合物が、全く予期しないやり方で、消化率、成長、および骨の発育を改善するという、かつ若雌鶏の免疫系を高めるという本発明が追及する効果を示すことを実証することができた。
【００１１】
特定の例では家禽の若雌鶏において、飼料摂取、体重増加、および飼料要求率を、カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥと、セレンと、主成分としてチモールおよびオイゲノールを含む精油の混合物とからなる飼料添加組成物の有効量をその動物に投与することによって改善することができることを見出した。
【００１２】
下記の定義が、本明細書および特許請求の範囲全体を通じて適用され、使用される。
【００１３】
飼料要求率という用語は、本発明による組成物を飼料１ｋｇ当たり適切な濃度で動物試料に加える第一の処理と、この組成物を動物飼料に添加しない第二の処理（対照）とを含む成長試験に基づいて決定される。
【００１４】
一般に知られているように改善されたＦＣＲは、対照のＦＣＲよりも低い。特定の実施形態ではＦＣＲは、対照と比べて少なくとも１．０％または５％改善（すなわち減少）する。
【００１５】
カンタキサンチンならびにビタミンＥおよびＣは市場で入手でき、または当業界でよく知られている工程および方法を使用して当業者が容易に調製することができる。例えばビタミンＥは商標ＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｅ５０で入手でき、ビタミンＣは商標ＲＯＶＩＭＩＸ（登録商標）Ｃで入手でき、またカンタキサンチンは商標ＣＡＲＯＰＨＹＬＬ（登録商標）Ｒｅｄで入手できる（これらすべての化合物はＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄによって供給されている）。
【００１６】
セレンは任意の供給源から得ることができ、またその組成物は都合の良いセレン技術を使用して調製することができる（例えば無機形態のＮａ２ＳｅＯ３で、または有機錯化合物として）。市販製品は、ＭＩＣＲＯＧＲＡＮ（登録商標）ＳｅまたはＳＥＬＳＡＦ（登録商標）２０００である。
【００１７】
本発明による精油の混合物は市場で入手でき（例えば、ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄによって供給されている商標ＣＲＩＮＡ（登録商標）で）、または当業界でよく知られている工程および方法を使用して当業者が容易に調製することができる。精油の混合物は、高度に精製された形態で、あるいは天然で入手できる植物の抽出物または抽出混合物の形態で使用することができる。
【００１８】
本明細書中で使用される用語「抽出物」は、溶媒抽出法（これは「抽出油」としても知られる）、水蒸気蒸留法（これは「精油」としても知られる）、または当業者に知られている他の方法によって得られる組成物を含む。好適な抽出溶媒にはアルコール、例えばエタノールが挙げられる。
【００１９】
表現「天然の」とは、本明細書の脈絡では天然に産出する化合物からなる物質、および天然物から得られる、または合成により得られる物質と理解されたい。その天然の物質は、好ましくは主成分として少なくとも２種類の上記で定義した化合物と、追加として、例えばカプサイシン、タンニン、またはカルバクロールのような他の精油化合物とを含有することができる。
【００２０】
第一の態様において本発明は、若雌鶏の飼料摂取、体重増加、飼料要求率、および／または骨の発育を改善するための、またその動物の免疫系を高めるための、カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物を含む任意選択の精油の混合物との使用に関する。
【００２１】
この態様はまた、主成分としてカンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物を含む任意選択の精油の混合物とを含む飼料添加組成物による動物の飼養方法を含む。
【００２２】
カンタキサンチン、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミン、微量のミネラルのセレン、および精油の混合物は、好適には飼料と一緒に投与される。飼料または飼料組成物という用語は、動物による摂取に適した、または摂取を意図する任意の化合物、調製品、混合物、または組成物を意味する。本明細書中で使用される飼料という用語は、固形および液体飼料と飲用水などの飲用液との両方を含む。
【００２３】
具体的には本発明による成分の配合物は、調合飼料添加組成物として、通常の動物飼料に、あるいは他のミネラル、ビタミン、アミノ酸、および微量の成分を含有するプレミックス（一様な分布を達成するように通常の動物飼料に、また混合により加えられる）に直接加えることができる。
【００２４】
第二の態様によれば、カンタキサンチンと、ビタミンＣおよびビタミンＥからなる群から選択される少なくとも１種類のビタミンと、微量のミネラル、具体的にはセレンと、チモール、オイゲノール、バニリン、およびγ−テルピネンからなる群から選択される少なくとも２種類の化合物を含む任意選択の精油の混合物とを含む飼料添加組成物が提供される。
【００２５】
好ましい飼料添加組成物は、カンタキサンチン、ビタミンＣ、ビタミンＥ、微量のミネラルのセレン、ならびに主成分のチモールおよびオイゲノールを含む精油の混合物を最終飼料中で、
−  約２〜１００ｐｐｍのカンタキサンチン、
−  約２０〜２００ｐｐｍのビタミンＥ、
−  約２０〜２００ｐｐｍのビタミンＣ、
−  約０．０１〜０．５ｐｐｍのセレン、
−  約２０〜２５０ｐｐｍの精油混合物
の濃度に達するのに十分な量で含む。
【００２６】
本発明によればこれは、本発明による飼料添加組成物がまた、ビタミンＡ、ビオチン、銅（例えばＣｕＳＯ４として）、亜鉛（例えばＺｎＳＯ４として）、コバルト（例えばＣｏＳＯ４として）、ヨウ素（例えばＫｌとして）、マンガン（例えばＭｎＳＯ４として）、および／またはカルシウム（例えばＣａＳＯ４として）の成分のうちの１種類または複数種類を含有するならばさらに有利である。
【００２７】
本発明の第三の態様は、本発明による飼料添加組成物を含むプレミックスまたは通常の動物飼料に関する。
【００２８】
本発明による家禽飼料の製造において、
−  約２〜１００ｐｐｍ、好ましくは２〜１０ｐｐｍのカンタキサンチン、
−  約２０〜２００ｐｐｍ、好ましくは３０〜１５０ｐｐｍのビタミンＥ、
−  約２０〜２００ｐｐｍ、好ましくは５０〜１５０ｐｐｍのビタミンＣ、
−  約０．０１〜０．５ｐｐｍ、好ましくは０．０５〜０．２ｐｐｍのセレン、
−  約２０〜２５０ｐｐｍ、好ましくは３０〜１５０ｐｐｍの精油混合物
が通常の家禽飼料に加えられる。
【００２９】
家禽飼養構想の好ましい実施形態では本発明による有効成分は、最終の通常の家禽飼料中で、
−  ２、４、または６ｐｐｍのカンタキサンチン、
−  ３５、７０、または１０５ｐｐｍのビタミンＥ、
−  ５０、１００、または１５０ｐｐｍのビタミンＣ、
−  ０．０５、０．１、または０．１５ｐｐｍのセレン、
−  ３４、６７、または１０１ｐｐｍの精油混合物
の量で使用される。
【００３０】
精油の特に好ましい混合物の例は、
−  ２％〜１０％、好ましくは５％のチモール、
−  １０％〜２０％、好ましくは１７％のオイゲノール、
−  ０．５％〜５％、好ましくは１％のγ−テルピネン、
−  ５％〜１０％、好ましくは７％のバニリン、
−  ５５％〜８２．５％の増量剤、担体、および乳化性界面活性剤
を含む。
【００３１】
精油の混合物は、任意選択で他の化合物、例えば
約１ｍｇまでのプロピリデン、ブチリデン、フタリド、ジンゲロール、ラベンダー油と、
約２ｍｇまでのデカラクトン、ウンデカラクトン、ドデカラクトン、イオノン、イロン、レゾルシノール、ユーカリプトール、メントール、ハッカ油、アルファ−ピネンと、
約３ｍｇまでのリモネン、グアイコール、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチルと、
約４ｍｇまでのカルバクロール、プロピオン酸、酢酸または酪酸、ローズマリー油、丁子油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロールと、
約５ｍｇまでのサリチル酸アミルおよび／またはサリチル酸ベンジル、シンナムアルデヒド、植物性ポリフェノール（タンニン）と、
約５ｍｇまでのターメリックまたはクルクマ抽出物の粉末と
の群から選択される少なくとも１種類の追加の化合物（飼料１ｋｇ当たりとしての量で計算される）を含む。
【００３２】
乳化剤は、有利にはむしろ親水性のもの、例えばエステル化リシノレイン酸などの脂肪酸のポリグリセロールエステルまたは脂肪酸のプロピレングリコールエステル、糖エステルまたは糖グリセリド、ポリエチレングリコール、レシチンなどの中から選択することができる。
【００３３】
家禽飼料への上記本明細書中で実例として示した飼料添加組成物の組込みは、実際には濃縮物またはプレミックスを使用して行われる。プレミックスとは、１種類または複数種類の少量成分の希釈剤および／または担体との望ましくは均一な混合物を指す。プレミックスは、より多量の混合物中への少量成分の均一な分散を容易にするために使用される。プレミックスは、固形物（例えば水溶性粉末として）または液体として飼料成分または飲用水に加えることができる。
【００３４】
さらに、任意選択の飼料添加成分は、芳香化合物、安定剤、抗菌ペプチド、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）、反応性酸素発生化学種、および／またはフィターゼ（ＥＣ  ３．１．３．８または３．１．３．２６）、キシラナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．８）、ガラクタナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．８９）、α−ガラクトシダーゼ（ＥＣ  ３．２．１．２２）、プロテアーゼ（ＥＣ  ３．４．、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ  ３．１．１．３２）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ  ３．１．１．４）、リソホスホリパーゼ（ＥＣ  ３．１．１．５）、ホスホリパーゼＣ（ＥＣ  ３．１．４．３）、ホスホリパーゼＤ（ＥＣ  ３．１．４．４）、アミラーゼ、例えばα−アミラーゼ（ＥＣ  ３．２．１．１）および／またはβ−グルカナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．４またはＥＣ  ３．２．１．６）の中から選択される少なくとも１種類の酵素である。
【００３５】
抗菌ペプチド（ＡＭＰ）の例は、ＣＡＰ１８、ロイコシンＡ、プロテグリン−１、タナチン、デフェンシン、ラクトフェリン、ラクトフェリシン、およびオビスピリン（例えばノビスピリン（Ｒｏｂｅｒｔ  Ｌｅｈｒｅｒ，２０００）、プレクタシン、およびスタチン）である。
【００３６】
多価不飽和脂肪酸の例は、Ｃ１８、Ｃ２０、およびＣ２２多価不飽和脂肪酸、例えばアラキドン酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、およびγ−リノール酸である。
【００３７】
反応性酸素発生化学種の例は、過ホウ酸塩、過硫酸塩、または過炭酸塩などの化学薬品、およびオキシダーゼ、オキシゲナーゼ、またはシンテターゼなどの酵素である。
【００３８】
一般に脂溶性および水溶性ビタミンと微量のミネラルが、飼料への添加を意図したいわゆるプレミックスの一部を形成するのに対し、多量ミネラルは一般には別個に飼料に加えられる。
【００３９】
プレミックスは、例えば家禽飼料１トン当たり、この活性化合物の混合物のプロピレングリコール溶液を５０〜２００ｇ、乳化剤を２０〜１０００ｇ、穀類および副産物を５０〜９００ｇ、タンパク質担持物質（粉乳、カゼインなど）を２０〜１００ｇ、およびミネラル成分（発泡シリカ、飼料用石灰、リン酸二カルシウム（ｂｉ−ｃａｌｃｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）など）を５０〜３００ｇ含有することができる。
【００４０】
開示した本明細書中の特定の実施形態は本発明の幾つかの態様の例示を意図しているので、本明細書中で述べまた特許請求される本発明は、これらの実施形態によって範囲が限定されるべきではない。任意の等価の実施形態は本発明の範囲内にあることを意図している。実際には、本明細書中で示しまた記述したものに加えて、本発明の様々な修正形態が上記の説明から当業者には明らかになるはずである。そのような修正形態もまた別添の特許請求の範囲の範囲内にあることを意図している。
【００４１】
下記実施例に関連して本発明をさらに説明する。
【００４２】
［実施例］
［１．実験の設計］
［全体的設計］
この実験は、若雌鶏２６０羽の４群に関係する。各群は、２６羽の１０回の繰返し試験に分けられる。動物は飼育の間ケージ中に置かれる。
【００４３】
体重測定は、１日齢において、また３、８、１２、および１７週齢において計画される。飼料摂取量もまたこれら同じ齢において計算される。こうして各期間について飼料要求率を決定することができる。免疫状態は６、１２、１５、および１７週齢において評価される。骨および骨格の発育は４、８、および１７週齢の３つの異なる週齢において、調整された脛骨強度測定値により推定する。
【００４４】
［実験群］
４種類の処理、
−  Ａ集団：栄養補助剤を含まない対照、
−  Ｂ集団：飼料中に飼料添加組成物（ＦＳＣ）を含む（用量２ｋｇ／ｔ）、
−  Ｃ集団：飼料中に飼料添加組成物（ＦＳＣ）を含む（用量４ｋｇ／ｔ）、
−  Ｄ集団：飼料中に飼料添加組成物（ＦＳＣ）を含む（用量６ｋｇ／ｔ）
を比較する。
【００４５】
【表１】
2016519948.tif 000002
【００４６】
［２．試験の間の鳥の管理］
［ワクチンプログラム］
ワクチンプログラムはプロトコルに加えられる（付属文書１）。
【００４７】
［飼育］
飼育プログラムは、
−  １日齢から３週齢まで：スターター飼料（ＰＬＤ）
−  ４週齢から１０週齢まで：育成飼料（ＰＬＣ）
−  １１週齢から１７週齢まで：若雌鶏飼料（ＰＬＥ）
の３期に分けられる。
【００４８】
飼育期間中に使用される様々な飼料の完全な記述はプロトコルに加えられる（付属文書２）。
【００４９】
飼料組成物の詳細を下記の表に示す。
【００５０】
【表２】
2016519948.tif 000003
【００５１】
【表３】
2016519948.tif 000004
【００５２】
ＦＳＣは担体として小麦の二級品を用いて生産される。
【００５３】
［３．実験の手順および測定される特性］
［試験のスケジュール表］
データの収集は１日齢から１２３日齢の間行われる。その主な事象を下記に列挙する。
【００５４】
【表４】
2016519948.tif 000005
【００５５】
［骨および骨格の発育］
骨および骨格の発育は、脛骨強度を評価することにより特徴づけられる。
【００５６】
Ｓｙｎｅｒｇｉｅ  ２００  ＭＴＳ圧縮機が、脛骨のスチフネス、最大力、および破砕強度を測定することを可能にする。４、８、および１７週齢の３つの異なる週齢において処理ごとに２０個の左の脛骨を分析する。
【００５７】
［４．試作品の効果を推定する基準］
−  体重：体重（平均および一様性）を、３、８、１２、および１７週齢の４つの異なる週齢で比較する。
−  飼料消費量：飼料摂取量を、３、８、１２、および１７週齢の４つの異なる週齢で比較する。
−  飼料要求率：飼料要求率は飼料摂取量と体重の比である。またこの特性に関して、これら処理を３、８、１２、および１７週齢の４つの異なる週齢で比較することができる。
−  免疫状態：免疫状態を６、１２、１５、および１７週齢の４つの異なる週齢で比較する。
−  骨および骨格の発育：脛骨強度（スチフネスおよび破砕強度）を４、８、および１７週齢の３つの異なる週齢で比較する。
【００５８】
［５．統計分析］
［実験単位／統計単位］
実験単位は、若雌鶏２６羽の繰返し試験である。統計単位は一羽またはケージである。
【００５９】
［初期群の互換性］
１日齢のニワトリを、様々な繰返し試験に無作為に分配する。さらに１日齢の体重測定値は、体重の平均および均一性に関する初期群の互換性について情報を提供する。
【００６０】
［統計的検定］
αリスクは５％である。統計的検定を実行するためにはＳＡＳソフトウェアが使用されることになる。
【００６１】
［−  定量的特性分析］
体重としての定量的特性の場合、数学モデルは、
【数１】
2016519948.tif 000006
である。
上記数学モデルの制約は、
−  各母集団からのデータは正規分布でなければならず、かつ同じ分散にならなければならない、
−  記録は独立であると仮定されなくてはならない
ことである。
【００６２】
特性の正規性は、Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ−Ｓｍｉｒｎｏｖ検定の残差で検定される。分散の均等度は、Ｂａｒｌｅｔｔ検定で検定される。固定効果は、分散分析を使用して検定される。次いでＦｉｓｈｅｒのＬＳＤ（最小有意差検定）を使用してその処理群の平均値を比較する。
【００６３】
［−  定性的特性分析］
比率（例えば死亡率特性）を比較するためにはχ２検定を使用する。
【００６４】
［６．結果］
本発明による飼料添加組成物による動物の飼養は、
−  平均体重：実験処理＞対照処理、
−  飼料要求率：対照処理＞実験処理、
−  脛骨強度：実験処理＞対照処理
に関して顕著な効果を示す。
【００６５】
用量の増加は効果を改善しない。したがって用量Ｂが、体重、飼料要求率、および脛骨強度の改善の面で満足できそうである。
【００６６】
これら栄養補助剤はまた、ニューカッスル病に対する免疫状態でプラス影響を与え、ＣおよびＤ処理の鳥の場合、より良好かつより同質の保護を与える。
【００６７】
【表５】
2016519948.tif 000007
【００６８】
一般的に言えばどの処理でも皆、死亡率はきわめて低い。それは群により１．２％〜２．３％の間で変わる。１７週齢では処理間で統計的有意差はない（χ２：ｐ＝０．６７７）。
【００６９】
１日齢では異なる処理の平均体重は似ている（約３４ｇ）。２２日齢ではＢ群は、その他の３群よりも低い体重を示す。次にその他の３つの日齢（５６、８５、および１２３日）では３つの実験集団（Ｂ、Ｃ、およびＤ）の平均体重は、対照群（Ａ）よりも高い。差は、１７週齢では約４０ｇである（⇔１週間の成長の半分）。
【００７０】
群れの一様性はこれら４群で似ている。したがって分散の均等度を比較するＢａｒｔｌｅｔｔ検定は有意でない。１２３日齢では体重のＣＶは、群により７．１〜７．７％の間で変わる。
【００７１】
【表６】
2016519948.tif 000008
【００７２】
１日の飼料消費量（ＤＦＣ）特性については異なる群間で統計的有意差はない。平均ＤＦＣは、全試料の１２３日齢で５４．０ｇ／羽／日である。
【００７３】
【表７】
2016519948.tif 000009
【００７４】
死んだ鳥の体重（２つの源泉、すなわち死亡あるいは２７または５７日齢での脛骨採取）は、飼料要求率（ＦＣＲ）の計算に含まれる。
【００７５】
１２３日齢では３つの実験群（Ｂ、Ｃ、およびＤ）は、対照群（Ａ）よりも良好なＦＣＲを示す。より若い日齢（２２、５６、および８５日齢）では処理間の差は有意でない。
【００７６】
【表８】
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【００７７】
【表９】
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【００７８】
４０日齢（第一回ＮＤワクチン接種前）では抗体は検出されない。
【００７９】
統計値は力価の対数として流す。この特性の正規性は、いずれの日齢においても認められず、したがって分散分析の結果は提示されない。
【００８０】
Ｂａｒｔｌｅｔｔ検定は、１２３日齢では有意に近い。したがってＡ処理およびＢ処理の力価は、この日齢ではより高いＣＶを示すように思われる。
【００８１】
１２３日齢におけるこれら処理を比較するために力価の２つのカテゴリー、
クラス０：力価の値＜４０９６
クラス１：力価の値≧４０９６
を作り出すように選択する。
【００８２】
χ２検定を使用して各クラス中の鳥の比率を比較する。この場合、群間の差は有意に近い（ｐ＝０．０６９）。より大きなサンプルサイズの場合は、恐らく有意差（ｐ＜０．０５）が得られるはずである。したがってＡおよびＢ処理の鳥の比率は、抗体力価の値が低い方が高い比率を示すはずである。
【００８３】
【表１０】
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【００８４】
免疫状態は、ＩＢＤに関して処理間で統計的に差がない。
【００８５】
【表１１】
2016519948.tif 000013
【００８６】
【表１２】
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【００８７】
【表１３】
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【００８８】
【表１４】
2016519948.tif 000016
【００８９】
【表１５】
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【００９０】
いずれの日齢でも脛骨破砕強度に関して処理間に有意な差はない。
【００９１】
１２３日齢では脛骨の最大力およびスチフネスの差は有意に近く（それぞれｐ＝０．０８０およびｐ＝０．１１７）、この場合、それらは若い日齢（２７および５６日齢）ではない。したがって対照群は、実験集団と比べて弱い脛骨によって特徴づけられる。より大きいサンプルサイズの場合は恐らく有意な差（ｐ＜０．０５）が得られるはずである。これら３つの実験処理のより高い値は、部分的にはこれらの群のより高い体重および脛骨重量によって説明される。したがってこれらの特性を数学モデルに導入することにより、
−  モデル中の共分散として体重のｐ値
・最大力：処理効果のｐ値＝０．２７１
・スチフネス：処理効果のｐ値＝０．３６８
−  モデル中の共分散として脛骨重量のｐ値
・最大力：処理効果のｐ値＝０．２６５
・スチフネス：処理効果のｐ値＝０．４８１
に有意に影響する。
【００９２】
【表１６】
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【００９３】
【表１７】
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【００９４】
【表１８】
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【００９５】
【表１９】
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【国際調査報告】
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