(57)【要約】  本発明は、式Ｉの化合物2016512254.tif 000046（式中、Ｘは結合またはＣＨ２であり；ＱはＣＨ２またはＯであり；Ｌは−ＯＣＨ２−および−ＣＨ２Ｏ−からなる群から選択される）またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。本発明の化合物はオートタキシン阻害剤である。【選択図】なし
2016512254.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2016512254.tif 000043
（式中、Ｘは結合またはＣＨ２であり；
ＱはＣＨ２またはＯであり；
Ｌは−ＯＣＨ２−および−ＣＨ２Ｏ−からなる群から選択される）
またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
Ｘが結合である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
ＱがＯである、請求項１または２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
ＱがＣＨ２である、請求項１または２に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｌが−ＯＣＨ２−である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｌが−ＣＨ２Ｏ−である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
ＸがＣＨ２である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項８】
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート：
【化２】
2016512254.tif 000044
である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項９】
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート：
【化３】
2016512254.tif 000045
である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
１種以上の医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
有効量の請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、患者における疼痛を治療する方法。
【請求項１２】
有効量の請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、患者における骨関節炎に関連する疼痛を治療する方法。
【請求項１３】
療法に使用するための請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１４】
疼痛の治療に使用するための請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イミダゾピリジンおよびイミダゾモルホリン化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、ならびにその治療的使用に関する。本発明の化合物はオートタキシン阻害剤である。
【背景技術】
【０００２】
オートタキシンは、その同種受容体、ＬＰＡ１の１つを介して疼痛関連タンパク質を上方制御するリゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）源であると報告されている酵素である。ＬＰＡは多数の生物学的および生化学的プロセスに影響を与える細胞内脂質メディエータである。オートタキシン介在性ＬＰＡ生合成の標的阻害は、神経損傷により誘導される神経因性疼痛を防ぐ新規機構を提供できる。オートタキシンを阻害する化合物は疼痛の治療を必要とする患者に有効な治療選択肢を与えることが望まれる。
【０００３】
骨関節炎（ＯＡ）に関連する疼痛は、ＯＡ患者において手足の能力の低下を導く一次症状であると報告されている。２０００万人を超える米国人がＯＡ、最も一般的には関節症と診断されている。現在、ＯＡ疼痛に承認されている治療は、侵襲性であり、長期間の使用で有効性を失い、全ての患者を治療するのに適していない場合がある。ＯＡに関連している疼痛を患っている患者のためのさらなる治療選択肢が望まれる。オートタキシンを阻害する化合物は、ＯＡに関連している疼痛を患っている患者に別の可能な治療選択肢を表す。
【０００４】
特許文献１（‘８５２）は抗炎症剤として置換二環式ピリミジン誘導体を開示している。
【０００５】
特許文献２はオートタキシン阻害剤としてインドール化合物を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第７，５２４，８５２号
【特許文献２】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４８４７７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
新規のオートタキシン阻害剤についての必要性が存在する。本発明はオートタキシン阻害剤である新規化合物を提供する。本発明はＬＰＡの産生を阻害する特定の新規化合物を提供する。オートタキシン阻害剤化合物は、ＯＡに関連する疼痛などのオートタキシン介在性病態の治療を提供することが望まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式Ｉの化合物
【化１】
2016512254.tif 000003
（式中、Ｘは結合またはＣＨ２であり、
ＱはＣＨ２またはＯであり、
Ｌは−ＯＣＨ２−および−ＣＨ２Ｏ−からなる群から選択される）
またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【０００９】
本発明はまた、患者における疼痛を治療する方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。本発明はまた、患者における骨関節炎に関連する疼痛を治療する方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法を提供する。
【００１０】
本発明は、療法に使用するため、特に疼痛を治療するため、またはＯＡに関連する疼痛を治療するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。なおさらに、本発明は、疼痛を治療するための医薬を製造するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はまた、ＯＡに関連する疼痛を治療するための医薬を製造するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００１１】
本発明はさらに、１種以上の医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を含む、医薬組成物を提供する。本発明はまた、式Ｉの化合物を合成するための新規中間体およびプロセスを包含する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
「医薬的に許容可能な塩」という用語は、臨床的および／または獣医的使用に許容可能であるとみなされる本発明の化合物の塩を指す。医薬的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は当該分野において周知である。例えば、Ｐ．  Ｓｔａｈｌら，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。
【００１３】
本明細書に使用される場合、「治療している」（または「治療する」または「治療」）という用語は、既存の症状、病態、または障害の進行または重症度を抑制、遅延、停止、または反転することを指す。症状、病態、または障害は、「急性」または「慢性」事象として示すことができる。急性事象において、化合物は、症状、病態または障害の開始時に投与され、事象が消失すると中断される。慢性事象は、症状または事象に関連する障害または病態の過程の間、治療され、慢性治療は、症状または事象の特定の発現に依存しない。本発明は急性および慢性治療の両方を意図する。
【００１４】
本発明の化合物はオートタキシンを阻害し、オートタキシンの増加を伴う疾患または病態を治療するのに有用であり得る。本発明の化合物はＬＰＡの産生を阻害し、ＬＰＡの増加を伴う疾患または病態を治療するのに有用であり得る。本発明の化合物は他のＬＰＡ脂質メディエータと比較してオートタキシン介在性ＬＰＡ生合成を阻害できる。本発明の化合物はＬＰＡの増加を伴う疾患または病態を治療するのに有用であり得る。
【００１５】
本明細書に使用される場合、「患者」とは、治療を必要とする動物を指し、好ましくは哺乳動物に限らない。好ましい実施形態は、患者が哺乳動物であり、好ましくはヒトである。別の好ましい実施形態は、患者がイヌ、ネコなどのペット；または家禽である。
【００１６】
本明細書に使用される場合、「有効量」という用語は、患者に単回または複数回投与すると、診断または治療下の患者に所望の効果を与える、本発明の化合物またはその医薬的に許容可能な塩の量または用量を指す。実際に投与される活性剤の量は、治療される病態、選択される投与経路、投与される実際の活性剤、個々の患者の年齢、体重、および反応、ならびに患者の症状の重症度ならびに他の関連する状況を含む、関連する状況を考慮して、医師によって決定されることが理解される。
【００１７】
本発明の化合物は、好ましくは、化合物を生物学的に利用可能にする任意の経路によって投与される医薬組成物として製剤化される。最も好ましくは、このような組成物は経口投与用である。このような医薬組成物およびそれを調製するプロセスは当該分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ，Ｅｄｉｔｏｒ，２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００６）を参照のこと。
【００１８】
式Ｉの化合物は本発明の治療方法に特に有用であるが、特定の基、置換基、および構造が式Ｉの化合物に好ましい。以下の段落はこのような好ましい基、置換基、および構造を記載する。これらの選択は本発明の治療方法および新規化合物の両方に適用可能であることが理解される。
【００１９】
Ｘは、結合またはＣＨ２からなる群から選択されることが好ましい。Ｘは結合であることが特に好ましい。
【００２０】
Ｌは−ＣＨ２Ｏ−であることが好ましい。
【００２１】
Ｘは結合であり、ＱはＯであり、Ｌは−ＣＨ２Ｏ−であることが特に好ましい。
【００２２】
Ｘは結合であり、ＱはＣＨ２であり、Ｌは−ＣＨ２Ｏ−であることがさらに好ましい。
【００２３】
好ましい化合物は以下である：
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート；
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート；
１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン；
１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン；および
それらの医薬的に許容可能な塩である。
【００２４】
好ましい化合物は
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート；
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート；および
それらの医薬的に許容可能な塩である。
【００２５】
特に好ましい化合物は
［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メチル２−（インダン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート、および
その医薬的に許容可能な塩である。
【００２６】
特に好ましい化合物は
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート、および
その医薬的に許容可能な塩である。
【実施例】
【００２７】
調製例および実施例
以下の調製例および実施例は本発明をさらに例示し、本発明の化合物の典型的な合成を表す。調製例および実施例は例示を目的として記載され、限定ではなく、種々の修飾が当業者によりなされてもよいことは理解されるべきである。以下に提示したスキームにおいて、他に指定しない限り、全ての置換基は以前に定義されている。特定の立体化学中心は特定されていないままであり、特定の置換基は明確さの目的のために以下のスキームにおいて排除しており、スキームの教示を限定することを決して意図しているわけではない。さらに、個々の異性体、鏡像異性体またはジアステレオマーは、選択的結晶化技術またはキラルクロマトグラフィーなどの方法によって式Ｉの化合物の合成において任意の簡便な点で当業者により分離または分割されうる（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら，「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１，およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．  Ｗｉｌｅｎ  「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４を参照のこと）。試薬および開始物質は一般に当業者に利用可能である。他のものは、公知の構造的に類似の化合物の合成ならびに任意の新規の手順を含む、以下の調製例および実施例に記載されている手順と同様である有機および複素環化学の標準的な技術によって調製され得る。
【００２８】
反対に示されない限り、本明細書に例示される化合物は、ＡＣＤＬＡＢＳまたはＳｙｍｙｘ  Ｄｒａｗ３．２を使用して命名され、番号付けされる。
【００２９】
概して、Ｘが結合またはＣＨ２である式Ｉの化合物は式ＩＩの化合物から調製され得る。より具体的には、スキームＡにおいて、Ｘが結合またはＣＨ２である式ＩＩの化合物は、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）およびトリエチルアミンなどの塩基の存在下で、ＱがＣＨ２またはＯである式ＶＩＩの化合物とカップリングされて、Ｘが結合またはＣＨ２であり、ＱがＣＨ２またはＯである、式Ｉａの化合物を生じる。反応はジクロロメタンなどの溶媒中で簡便に実施される。
【００３０】
あるいはスキームＡにおいて、Ｘが結合またはＣＨ２であり、ＱがＣＨ２である式Ｉの化合物は式ＩＩＩの化合物から調製され得る。より具体的には、ＱがＣＨ２である式ＩＩＩの化合物は、ジクロロメタンなどの溶媒中でトリフルオロ酢酸などの酸と反応して、対応するカルボン酸を生じる。中間体のカルボン酸は、トリエチルアミンなどの塩基の存在下で、Ｘが結合またはＣＨ２である式ＩＩの化合物および１−プロパンホスホン酸環状無水物と反応して、Ｘが結合またはＣＨ２であり、ＱがＣＨ２である式Ｉｂの化合物を生じる。反応はジメチルホルムアミドなどの溶媒中で簡便に実施される。
【００３１】
ＱがＣＨ２またはＯである式ＶＩＩの化合物またはＱがＣＨ２である式ＩＩＩの化合物は、調製例に記載されるように、または化学分野の当業者に公知の手順により調製され得る。
【化２】
2016512254.tif 000004
【００３２】
スキームＢに示されるように、Ｘが結合またはＣＨ２である式ＩＩの化合物は、Ｐｇがアミン保護基である式Ｖの化合物から調製され得る。より具体的には、Ｘが結合またはＣＨ２であり、Ｐｇがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである式Ｖの化合物は、テトラヒドロフランなどの溶媒中で塩酸などの酸と反応して、Ｘが結合またはＣＨ２である式ＩＩの化合物を生じる。
【化３】
2016512254.tif 000005
【００３３】
スキームＣにおいて、ＸがＣＨ２であり；Ｐｇがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルなどのアミン保護基である式Ｖの化合物は式ＶＩの化合物から調製され得る。より具体的には、保護−４−ピペリドンが、ジメチルホルムアミドなどの溶媒中で（ＣＨ３）２ＮＣＨ（ＯＣＨ３）２と、次いでエタノールなどの共溶媒中で式ＶＩの化合物、炭酸カリウムなどの塩基と連続して反応して、ＸがＣＨ２であり、Ｐｇがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである式Ｖの化合物を生じる。式ＶＩの化合物は、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−アミン塩酸塩を、アセトニトリルなどの溶媒中で１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキシイミダミド塩酸塩およびジイソプロピルエチルアミンなどの塩基と反応することによって調製され得る。
【化４】
2016512254.tif 000006
【００３４】
スキームＤにおいて、Ｘが結合であり、Ｐｇがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルなどのアミン保護基である式Ｖの化合物は、ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートを、１−メチルピロリジン−２−オンなどの溶媒中で、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンなどの塩基の存在下で、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−アミンと反応することによって調製され得る。
【化５】
2016512254.tif 000007
【００３５】
調製例１
１−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）グアニジン塩酸塩の合成
【化６】
2016512254.tif 000008
６２℃にて２時間、アセトニトリル（２Ｌ）中の２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−アミン塩酸塩（１９７ｇ；１．０８当量；１．１６ｍｏｌ）、１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキシイミダミド塩酸塩（１５８ｇ；１．００当量；１．０８ｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４００ｇ；２．８７当量；３．０９ｍｏｌ；５３９．７４ｍＬ）の溶液を撹拌し、その時間の間、白色固体が沈殿する。混合物を２５℃に冷やし、次いで濾過し、３００ｍＬのアセトニトリルおよび３００ｍＬのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄する。生成物を２５℃にて空気中で１時間乾燥させて、白色固体として標題化合物（２００ｇ、８７％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７６（Ｍ＋１）。
【００３６】
調製例２
ｔｅｒｔ−ブチル２−（インダン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロ−５Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの合成
【化７】
2016512254.tif 000009
１０９℃にてＮ２下で４時間、ジメチルホルムアミド（１．２Ｌ）中の１，１−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−メタンアミン（２２４ｇ；２．１５当量；１．８８ｍｏｌ；２５０．９８ｍＬ）およびＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−４−ピペリドン（２５０ｇ；１．４４当量；１．２５ｍｏｌ）の溶液を撹拌する。混合物を２５℃に冷やし、次いでエタノール（７００ｍＬ；１２．０２ｍｏｌ；５５３．９１ｇ）を加える。１−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）グアニジン塩酸塩（１８５ｇ；１．００当量；８７３．９０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（４７５ｇ；３．４４ｍｏｌ）を２５℃にて一度に混合物に加えて白色懸濁液を形成する。混合物を８０〜９０℃にて２４時間撹拌し、次いで２５℃に冷やし、混合物を５Ｌの氷／水に注いで、黄色の懸濁液を得る。酢酸エチル（３×３Ｌ）で抽出し、有機層を１０％塩化リチウム溶液（３Ｌ）、水（３Ｌ）および飽和塩化ナトリウム溶液（３Ｌ）で洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、約３００ｍｌの赤色溶液を得る。シリカゲルプラグ（１０ｃｍ高さ、５ｃｍ直径）で溶液を濾過し、次いで濃縮乾固して、赤色のゲル（３２０ｇ、１００％）として標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３６７（Ｍ＋１）。
【００３７】
調製例３
Ｎ−インダン−２−イル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−アミンの合成
【化８】
2016512254.tif 000010
塩酸（９００ｍＬ；水中に５Ｍ；５．１７当量；４．５０ｍｏｌ；１．０８ｋｇ）を、テトラヒドロフラン（１．５Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（インダン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロ−５Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（３１９ｇ；１．００当量；８７０．４８ｍｍｏｌ）の溶液に少しずつ加える。添加が完了すると、５０℃にて１時間、溶液を撹拌する。混合物を２５℃に冷やし、次いで３Ｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルおよび１Ｌの水を加える。２０℃にて１６時間、溶液を静置させる。相を分離し、水相をジクロロメタン（２Ｌ）で抽出する。有機抽出物を捨て、４Ｍ水酸化ナトリウムを使用して水相をｐＨ１０に調整する。酢酸エチル（３×３Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物を飽和塩化ナトリウム（２Ｌ）で洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、赤色のゲルを得る。物質を５０℃にて酢酸エチル（３００ｍＬ）および石油エーテル（２００ｍＬ）に再び溶解し、２４時間にわたって沈殿させる。濾過し、乾燥させて、標題化合物（８５ｇ、３７％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６７（Ｍ＋１）。
【００３８】
調製例４
ｔｅｒｔ−ブチル−２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの合成
【化９】
2016512254.tif 000011
４５０ｍＬ（２．５８ｍｏｌ）のＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンを、１−メチルピロリジン−２−オン（３．６Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４０ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（２２０ｇ、８６０．３７ｍｍｏｌ）および２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−アミン（１３７．７ｇ、１．０３ｍｏｌ）の１５℃の溶液に入れる。得られた混合物を１６時間８０℃に加熱し、次いで３０℃に冷やし、得られた混合物を２５℃にて５Ｌの水に移す。得られた固体を濾過し、濾過ケーキを水（２×３００ｍＬ）でリンスする。固体を１５℃にて４５分間、酢酸エチル（３５０ｍＬ）中に再びスラリーにする。スラリーを濾過し、１５℃の酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）でリンスし、乾燥させて、オフホワイトの固体として標題化合物（２２６ｇ、７５％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）１．４５（ｓ，９Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２４（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１５．８Ｈｚ，２Ｈ），４．３６（ｄ，１０．４Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，２Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｍ，２Ｈ），７．２０（ｍ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）。
【００３９】
調製例５
Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン二塩酸塩水和物の合成
【化１０】
2016512254.tif 000012
６７０ｍＬの５Ｍ塩酸（３．３５ｍｏｌ）を、１７℃にてテトラヒドロフラン（２．０Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（２２６ｇ、６４１．２５ｍｍｏｌ）の溶液に入れ、添加の間、２６℃未満の内部温度を維持する。得られた溶液を５０℃で１６時間加熱し、２５℃に冷やし、５００ｍＬの水および５００ｍＬのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで希釈する。得られた層を分離し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３×１Ｌ）で抽出する。水相を約２００ｍＬの反応体積まで濃縮し、得られたスラリーを濾過する。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×２００ｍＬ）でケーキをリンスし、乾燥させて、淡褐色の固体として標題化合物（１７７ｇ、８０％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５３．２（Ｍ−２ＨＣｌ−Ｈ２Ｏ＋１）。
【００４０】
調製例６
エチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−カルボキシレート塩酸塩の合成
【化１１】
2016512254.tif 000013
５Ｎ塩酸（１００ｍＬ；５００．００ｍｍｏｌ）およびエタノール（２００ｍＬ）を、メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−カルボキシレート（４．９８ｇ；１．０当量；２８．２７ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素（３．０１ｇ；０．１当量；２．８３ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに加える。反応容器を排気し、窒素（３×）で埋め戻し、次いで再び排気し、反応物を水素（３×）で埋め戻す。反応混合物を６０℃で加熱し、水素雰囲気下で２４時間激しく撹拌し、次いで排気し、窒素（３×）で反応容器を埋め戻し、セライト（商標）で反応混合物を濾過し、濾過ケーキをエタノール（１００ｍＬ）で洗浄する。濾液を濃縮し、トルエン（２００ｍＬ）を加え、濃縮乾固（２回繰り返す）して、白色固体としてエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−カルボキシレート塩酸塩（５．７４ｇ；８８％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１９５（Ｍ＋１）。
【００４１】
調製例７
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメタノールの合成
【化１２】
2016512254.tif 000014
ジクロロメタン（１００ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中でエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−カルボキシレート塩酸塩（５．７４ｇ；１．０当量；２４．８８ｍｍｏｌ）を懸濁し、０℃に冷却する。水素化アルミニウムリチウム（１．７７ｇ；１．８当量；４４．７９ｍｍｏｌ）を１０分にわたって少しずつ加える。さらに５分後、反応混合物を室温まで加温する。１５分後、反応混合物を０℃に冷却し、激しく撹拌しながら、水（１．７７ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウム溶液（１．７７ｍＬ）、および水（５．３１ｍＬ）をゆっくり連続して加える。周囲温度にて１５分間撹拌を継続する。硫酸マグネシウムを加え、次いで反応混合物を濾過し、濾過ケーキを２００ｍＬのジクロロメタンでリンスする。濾液を濃縮して５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメタノール（２．６３ｇ；６９％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５３（Ｍ＋１）。
【００４２】
実施例１
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの合成
【化１３】
2016512254.tif 000015
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中の１，１’−カルボニルジイミダゾール（２．８７ｇ；１．０２当量；１７．６９ｍｍｏｌ）を、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメタノール（２．６４ｇ；１．００当量；１７．３５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、次いで４０℃にて１時間撹拌する。Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン二塩酸塩水和物（６．２５ｇ；１．０５当量；１８．２１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（９．０８ｍＬ；３．０当量；５２．０４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を４０℃にて４時間維持する。ジイソプロピルエチルアミン処理したシリカゲルカラム上に直接溶液を負荷し、カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル中の０〜１５％メタノール）により混合物を精製して、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（３．３２ｇ；４４％）を無色の泡状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００４３】
実施例２および３
異性体１および２へのラサミ体５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの精製
【化１４】
2016512254.tif 000016
ラセミ体５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（３．３２ｇ；１．００当量；７．７１ｍｍｏｌ）をキラル分離によって精製する。上記の試料をメタノール（６３．５ｍＬ）中に溶解し、１００％メタノール（０．２％イソプロピルアミン）、２３５ｎＭ波長を用いて、４００ｍＬ／分にてＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ（２０ｕｍ）８×３５ｃｍカラム上への１０ｍＬ注入により分離する。
【００４４】
実施例２：８．０分における第１の溶出ピーク（１）の単離により、黄褐色の泡状物として５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体１を得る、９９％ｅｅ、（１．１８ｇ；３６％）、ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００４５】
実施例３：１２．０分における第２の溶出ピーク（２）の単離により、黄褐色の泡状物として５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体２を得る、９９％ｅｅ、（１．０３ｇ；３１％）、ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００４６】
実施例４
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体１の合成
【化１５】
2016512254.tif 000017
塩化水素（１Ｎ、０．５３ｍＬ；１．０当量；０．５３ｍｍｏｌ）を、メタノール（０．５ｍＬ）中の５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体１（０．２２８ｇ；１．０当量；０．５３ｍｍｏｌ）の溶液に加える。溶解が起こるまで混合物を回転させ、次いで残渣に濃縮する。水（１ｍＬ）を加え、溶液を−７８℃のドライアイス浴中で凍結し、凍結乾燥して、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体１（０．２３８ｇ；１００％）を黄褐色の粉末として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００４７】
実施例５
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体２の合成
【化１６】
2016512254.tif 000018
塩化水素（１Ｎ、０．６２ｍＬ；１．０５当量；０．６２ｍｍｏｌ）を、イソプロピルアルコール（０．３ｍＬ）中の５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体２（０．２５４ｇ；１．００当量；０．５９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。溶解が起こるまで混合物を回転させ、溶液を−７８℃のドライアイス浴中で凍結し、凍結乾燥させて５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体２（０．２８ｇ；１００％）を茶色の泡状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００４８】
調製例８
１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オールの合成
【化１７】
2016512254.tif 000019
１Ｈ−イミダゾール（１９．７２ｇ；６．２当量；２８９．６７ｍｍｏｌ）、続いてｔｅｒｔ−ブチルクロロジフェニルシラン（１２．００ｍＬ；１．０当量；４６．２８ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（５０ｍＬ）中の新たに蒸留したグリシドール（５．０ｍＬ；１．６２当量；７５．０５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。周囲温度にて３０分間、溶液を撹拌し、次いで加熱して４時間還流する。混合物を周囲温度に冷やし、反応混合物を濃縮し、次いで残渣をジクロロメタン／２Ｍ炭酸水素ナトリウム（１：１、４００ｍＬ）に注ぐ。層を分離し、水層をジクロロメタン（２×）でさらに抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗生成物を得る。カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８．８７ｇ；５０％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８１（Ｍ＋１）。
【００４９】
調製例９
６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オンの合成
【化１８】
2016512254.tif 000020
１０分にわたってトリクロロメチルクロロホルメート（８．７４ｍＬ；２．０当量；７２．８４ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（５００ｍＬ）中の１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オール（１３．８６ｇ；１．０当量；３６．４２ｍｍｏｌ）およびピリジン（２３．５６ｍＬ；８当量；２９１．３６ｍｍｏｌ）の０℃の溶液にゆっくり加える。１時間撹拌し、次いで溶液を１時間にわたって周囲温度に加温する。水（５０ｍＬ）を加え、反応混合物を約７５ｍＬの体積に濃縮する。ジクロロメタン（１００ｍＬ）を加え、得られた溶液を５０％飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）にゆっくり注ぐ。層を分離し、水層をジクロロメタン（３×１５０ｍＬ）でさらに抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０％〜１００％酢酸エチル）により精製して、所望の６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オン（９．４８ｇ；６４％）を薄いピンク色のガム状物として得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０７（Ｍ＋１）。
【００５０】
調製例１０
１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オールの合成
【化１９】
2016512254.tif 000021
ジイソブチルアルミニウム水素化物（３５ｍＬ；ヘキサン中に１Ｍ；１．５当量；３５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２００ｍＬ）中の６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オン（９．４８ｇ；１．０当量；２３．３２ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加える。溶液を１５分間撹拌し、次いでメタノール（１５０ｍＬ）を加える。５分後、水素化ホウ素ナトリウム（０．１７６ｇ；０．２当量；４．６６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃にて１５分間維持する。飽和酒石酸カリウムナトリウム（５０ｍＬ）を加え、溶液を周囲温度にて２０分間撹拌する。溶液を約１００ｍＬに濃縮し、水およびジクロロメタン（各々１００ｍＬ）を加え、層を分離する。さらに水層をジクロロメタン（５×）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、所望の１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オール（９．４０ｇ；９８％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１１（Ｍ＋１）。
【００５１】
調製例１１
ｔｅｒｔ−ブチル−（６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメトキシ）−ジフェニル−シランの合成
【化２０】
2016512254.tif 000022
ヨウ素（６．３９ｇ；１．１当量；２５．１８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（６０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（７．２１ｇ；１．２当量；２７．４７ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加え、１０分間撹拌する。１−メチルイミダゾール（２．１９ｍＬ；１．２当量；２７．４７ｍｍｏｌ）を加え、いくつかの沈殿物を有する橙色の溶液を得る。
【００５２】
別に、ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オール（９．４ｇ；１．０当量；２２．８９ｍｍｏｌ）の−７８℃の溶液を調製する。インサイチュで調製したヨード化試薬をこの溶液に滴下して加えると、橙色がすぐに消えてほぼ無色になる。溶液を−７８℃にて３０分間維持し、次いでそれを０℃に加温し、１０分間維持する。溶液を−７８℃に再び冷やし、テトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）、続いて６０％水素化ナトリウム（２．２０ｇ；２．４当量；５４．９５ｍｍｏｌ）を加える。溶液を３０分にわたって０℃にゆっくり加温し、次いで１時間周囲温度にゆっくり加温する。５０％飽和炭酸水素ナトリウム溶液に混合物をゆっくり注ぎ、ジクロロメタン（４×１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０〜１００％酢酸エチル）により精製して、トリフェニルホスフィン酸化物が混ざった所望の生成物を得る。ＳＣＸイオン交換クロマトグラフィー（ジクロロメタン中の１０％メタノール〜ジクロロメタン中の１０％（メタノール中の４Ｎアンモニア））によりさらに精製して、所望のｔｅｒｔ−ブチル−（６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメトキシ）−ジフェニル−シラン（５．９６ｇ；６６％）を無色のガム状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３（Ｍ＋１）。
【００５３】
調製例１２
６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメタノールの合成
【化２１】
2016512254.tif 000023
テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（テトラヒドロフラン中に１Ｍ；１３．９８ｍＬ；３当量；１３．９８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−（６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメトキシ）−ジフェニル−シラン（６．９６ｇ；１．０当量；１７．７３ｍｍｏｌ）の溶液に加え、１時間撹拌する。ＳＣＸイオン交換カラム上に溶液を直接負荷し、ジクロロメタン中の１５％メタノール、続いて２０％（ジクロロメタン中の（メタノール中の２Ｎアンモニア））で溶出して、（２ｓｃｘイオン交換精製を必要とした）６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメタノール（２．５９ｇ；６１％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５５（Ｍ＋１）。
【００５４】
実施例６
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの合成
【化２２】
2016512254.tif 000024
１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．９２ｇ；１．１当量；１１．８３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（３０ｍＬ）中の６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメタノール（２．５９ｇ；１．０当量；１０．７５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、４０℃で１時間加熱する。Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン二塩酸塩水和物（４．８０ｇ；１．３当量；１３．９８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．５０ｍＬ；３当量；３２．２６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を４０℃にて１時間維持する。シリカゲルカラム上に溶液を直接負荷し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン〜酢酸エチル〜酢酸エチル中の２０％メタノール）により精製して、ＮＭＲにより有意なイミダゾールの存在を有する生成物を得る。粗生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）に溶解し、層を分離し、ジクロロメタン（３×１５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（３．９５ｇ；８５％）を黄褐色の泡状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００５５】
実施例７および８
異性体１および２へのラセミ体５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの精製
【化２３】
2016512254.tif 000025
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（３．９５ｇ）を７５．５ｍＬのメタノールに溶解する。１００％メタノール（０．２％イソプロピルアミン）、２３５ｎＭ波長を用いて、４００ｍＬ／分にてＣｈｉｒａｌｐａｋ（商標）ＡＳ（２０ｕｍ）５０×１５０ｍｍカラム上での１０ｍＬ注入により分離する。
【００５６】
実施例７：８．８分における第１の溶出ピーク（１）の単離により、５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体１を黄褐色の泡状物として得る、９９％ｅｅ、（１．５６ｇ；３３％）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００５７】
実施例８：１２．８分における第２の溶出ピーク（２）の単離により、５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体２を黄褐色の泡状物として得る、９９％ｅｅ、（１．６０ｇ；３４％）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００５８】
実施例９
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体１の合成
【化２４】
2016512254.tif 000026
塩酸（１Ｎ、３．６１ｍＬ；３．６１ｍｍｏｌ）を、メタノール（１ｍＬ）中の５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体１（１．５６ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに加える。この溶液を−７８℃のドライアイス浴中で凍結し、凍結乾燥させて、５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体１（１．６７ｇ）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００５９】
実施例１０
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体２の合成
【化２５】
2016512254.tif 000027
塩酸（１Ｎ、３．７ｍＬ；３．７０ｍｍｏｌ）を、メタノール（１ｍＬ）中の５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート異性体２（１．６０ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を含有するバイアルに加える。この溶液を−７８℃のドライアイス浴中で凍結し、凍結乾燥させて、５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート塩酸塩異性体２（１．６５ｇ）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００６０】
調製例１３
（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オールの合成
【化２６】
2016512254.tif 000028
１Ｈ−イミダゾール（１４．７０ｇ；４当量；２１５．９９ｍｍｏｌ）、続いてｔｅｒｔ−ブチルクロロジフェニルシラン（１４．００ｍＬ；１．０当量；５４．００ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（４０ｍＬ）中の新たに蒸留した（Ｓ）−グリシドール（３．６６ｍＬ；１．０当量；５４．００ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加える。溶液を周囲温度にて３０分間撹拌し、次いで加熱して４時間還流する。混合物を周囲温度に冷やし、反応混合物を濃縮し、次いで残渣をジクロロメタンおよび２Ｍ炭酸水素ナトリウム溶液（１：１、４００ｍＬ）に注ぐ。層を分離し、ジクロロメタン（２×）で水層をさらに抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗生成物を得る。カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オール（９．２５ｇ；４５％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８１（Ｍ＋１）。
【００６１】
調製例１４
（６Ｒ）−６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オンの合成
【化２７】
2016512254.tif 000029
０℃で１５分にわたってトリクロロメチルクロロホルメート（５．８０ｍＬ；２．０当量；４８．３５ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（４５０ｍＬ）中の（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−イミダゾール−１−イル−プロパン−２−オール（９．２ｇ；１．０当量；２４．１７ｍｍｏｌ）およびピリジン（１５．６４ｍＬ；８当量ｌ；１９３．４０ｍｍｏｌ）の溶液にゆっくり加える。１時間撹拌し、次いで溶液を１時間にわたって周囲温度に加温する。水（３０ｍＬ）を加え、反応混合物を濃縮する。ジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、得られた溶液を５０％飽和炭酸ナトリウム（２００ｍＬ）にゆっくり注ぐ。層を分離し、水層をジクロロメタン（３×１５０ｍＬ）でさらに抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０％〜１００％酢酸エチル）により精製して、所望の（６Ｒ）−６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オン（５．５０ｇ；５６％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０７（Ｍ＋１）。
【００６２】
調製例１５
（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オールの合成
【化２８】
2016512254.tif 000030
ジイソブチルアルミニウム水素化物（ヘキサン中に１Ｍ；２１．６５ｍＬ；１．６当量；２１．６５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１３０ｍＬ）中の（６Ｒ）−６−［［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−オン（５．５ｇ；１．０当量；１３．５３ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加える。溶液を１５分間撹拌し、次いでメタノール（１００ｍＬ）を加える。５分後、水素化ホウ素ナトリウム（０．３０７ｇ；０．６当量；８．１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃にて１５分間維持する。飽和酒石酸カリウムナトリウム溶液（８０ｍＬ）を加え、溶液を周囲温度にて１４時間撹拌する。溶液を濾過し、液体層を分離する。水層をジクロロメタン（３×）でさらに抽出する。合わせた有機抽出物を５０％飽和ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、所望の（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オール（５．３０ｇ；９５％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１１（Ｍ＋１）。
【００６３】
調製例１６
ｔｅｒｔ−ブチル−［［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メトキシ］−ジフェニル−シランの合成
【化２９】
2016512254.tif 000031
ヨウ素（３．４４ｇ；１．０５当量；１３．５５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（４．０６ｇ；１．２当量；１５．４９ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加え、１０分間撹拌する。１−メチルイミダゾール（１．２３ｍＬ；１．２当量；１５．４９ｍｍｏｌ）を加え、いくつかの沈殿物を有する橙色の溶液を得る。
【００６４】
別に、ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オール（５．３ｇ；１．０当量；１２．９１ｍｍｏｌ）の−７８℃の溶液を調製する。インサイチュで調製したヨード化試薬を、（２Ｒ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ−３−［２−（ヒドロキシメチル）イミダゾール−１−イル］プロパン−２−オールの溶液に滴下して加え、橙色がすぐに消え、ほぼ無色になる。溶液を−７８℃にて３０分間維持し、次いでそれを０℃に加温し、１０分間維持する。溶液を−７８℃に再び冷却し、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）、続いて６０％水素化ナトリウム（１．１４ｇ；２．２当量；２８．４０ｍｍｏｌ）を加える。３０分にわたって溶液を０℃にゆっくり加温し、次いで１時間周囲温度に加温する。混合物を５０％飽和炭酸ナトリウム溶液にゆっくり注ぎ、ジクロロメタン（４×１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０〜１００％酢酸エチル）により精製して、トリフェニルホスフィン酸化物が混じった所望の生成物を得る。さらに、ＳＣＸイオン交換クロマトグラフィー（ジクロロメタン中の１０％メタノール〜ジクロロメタン中の１０％（メタノール中の４Ｎアンモニア））により精製して、所望のｔｅｒｔ−ブチル−［［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メトキシ］−ジフェニル−シラン（１．８６ｇ；３７％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３（Ｍ＋１）。
【００６５】
調製例１７
［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メタノールの合成
【化３０】
2016512254.tif 000032
フッ化セシウム（１．４２ｇ；２．０当量；９．３２ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（２５ｍＬ）、水（５ｍＬ）、およびジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メタノール（１．８３ｇ；１．０当量；４．６６ｍｍｏｌ）の溶液に加え、３６時間撹拌する。反応は起こらないので、テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（テトラヒドロフラン中１Ｎ；１３．９８ｍＬ；３当量；１３．９８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌する。ＳＣＸイオン交換カラム上に溶液を直接負荷し、ジクロロメタン中の１５％メタノール、続いてジクロロメタン中の２０％（メタノール中の２Ｎアンモニア）で溶出して、アルキルアンモニウム塩のようなものが混じった所望の生成物を得る。カラムクロマトグラフィー（１〜１０％メタノール／クロロホルム）によって粗生成物をさらに精製して、所望の［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メタノール（０．５１５ｇ；７２％）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５５（Ｍ＋１）。
【００６６】
実施例１１
［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メチル２−（インダン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレートの合成
【化３１】
2016512254.tif 000033
１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．４７７ｇ；１．１当量；２．９４ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（１５ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メタノール（０．４１２ｇ；１．０当量；２．６７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。溶液を５０℃で３０分間加熱し、次いでＮ−（２，３−ジヒドロ−１ｈ−インデン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン二塩酸塩水和物（１．０１ｇ；１．１当量；２．９４ｍｍｏｌ）、続いてトリエチルアミン（１．３０ｍＬ；３．５当量；９．３５ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を５０℃にて３時間撹拌する。混合物を５０％飽和炭酸ナトリウムおよびジクロロメタン（各々５０ｍＬ）に注ぐ。層を分離し、水層をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）でさらに抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、赤色の油を得る。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（クロロホルム中の１〜８％メタノール）により精製して、所望の［（６Ｒ）−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イル］メチル２−（インダン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（１．１２ｇ；９７％）を得る。キラルＨＰＬＣ分析（０．４６×１５ｃｍ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（商標）ＡＳ−Ｈカラム、１００％メタノール溶出）によって鏡像異性体過剰率を決定する。単離した生成物は１３分で溶出するのに対して、鏡像異性体は９．１分で溶出し、生成物は９８．３％ｅｅであると実証される。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３３（Ｍ＋１）。
【００６７】
調製例１８
６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成
【化３２】
2016512254.tif 000034
酢酸（４０ｍＬ）を、６−メトキシイミダゾピリジン（１．０ｇ；１．０当量；６．７５ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素（１．０ｇ；１．４当量；９．４０ｍｍｏｌ）の不均一の溶液に加える。反応容器を排気し、窒素（３×）、次いで水素（３×）で埋め戻す。周囲温度にて３時間水素下で反応物を激しく撹拌する。反応混合物をセライトで濾過し、濾過ケーキをジクロロメタンおよびメタノールの１：１混合物で洗浄する。濾液を濃縮し、粗生成物混合物を２０ｍＬメタノールに溶解し、次いでｓｃｘイオン交換カラム上に負荷する。メタノール、続いてメタノール中の２Ｍアンモニアで溶出して、６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（１．００ｇ；９７％）を無色の油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ１．８４−１．９４（ｍ，１Ｈ），２．００−２．０９（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．６８（ｍ，２Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），３．７７−３．８２（ｍ，１Ｈ），３．９２−４．０３（ｍ，２Ｈ），６．７４（ｄ，１Ｈ），６．９１（ｄ，１Ｈ）。
【００６８】
調製例１９
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−オールの合成
【化３３】
2016512254.tif 000035
三臭化ホウ素（１．２４ｍＬ；２．０当量；１３．１４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（４０ｍＬ）中の６−メトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリミジン（１．０ｇ；１．０当量；６．５７ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して加え、周囲温度にて４時間撹拌する。水（１０ｍＬ）を加え、２０分間撹拌し、次いで混合物を濃縮する。メタノール（２０ｍＬ）を加え、ｓｃｘイオン交換カラム上に溶液を負荷する。メタノール、続いてメタノール中の２Ｍアンモニアで溶出することによって生成物を精製して、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−オール（０．９０８ｇ；８０％収率）を得、それを静置させて結晶化する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１３９（Ｍ＋１）。
【００６９】
調製例２０
ｔｅｒｔ−ブチル２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）アセテートの合成
【化３４】
2016512254.tif 000036
ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中の５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−オール（０．３５７ｇ；１．０当量；２．０７ｍｍｏｌ）の懸濁液を４０℃に加温し、完全に溶解させ、次いで０℃に冷却し、水素化ナトリウム（０．０９１ｇ  １．１当量；２．２７ｍｍｏｌ）を加え、３０分間撹拌する。酢酸、ブロモ−１，１−ジメチルエチルエステル（１．１当量；１．１０当量；２．２７ｍｍｏｌ；３４２．４８μＬ）を０℃にて滴下して加え、１時間撹拌する。反応混合物をメタノール（１０ｍＬ）で希釈し、ｓｃｘイオン交換カラム（メタノール〜メタノール中の２Ｍアンモニア）に通して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）アセテート（０．３ｇ；１７％）を黄色のガム状物として得、それを次の工程に直接使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５３（Ｍ＋１）。
【００７０】
実施例１２
１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノンの調製
【化３５】
2016512254.tif 000037
トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を、ジクロロメタン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）アセテート（０．３０ｇ；２．０４当量；１．１９ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに加え、周囲温度にて１時間撹拌する。混合物を濃縮し、トルエン（２×５ｍＬ）を加え、再濃縮する（２×）。メタノール（１０ｍＬ）、続いて５Ｎ塩酸（１ｍＬ）を加え、次いで濃縮する。トルエン（４×５ｍＬ）を加え、再濃縮する（４×）。ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、トリエチルアミン（１５当量；８．７４ｍｍｏｌ；１．２２ｍＬ）、Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン二塩酸塩水和物（０．２０ｇ；１．０当量；０．５８３ｍｍｏｌ）および１−プロパンホスホン酸環状無水物（０．７０ｍＬ；２．０当量；１．１７ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度にて２時間撹拌する。溶液をシリカゲル上に直接負荷し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン〜酢酸エチル〜酢酸エチル中の２０％メタノール）により精製して、不純生成物を得る。逆相クロマトグラフィーにより粗生成物をさらに精製して、１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン（０．０８３ｇ；３３％）を淡黄色の泡状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００７１】
実施例１３および１４
異性体１および２への１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノンの精製
【化３６】
2016512254.tif 000038
１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン（０．０８３ｇ；１．０当量；０．１９３ｍｍｏｌ）を１．０ｍＬのメタノールに懸濁し、イソプロピルアルコールを数滴加えて、それを溶解する。カラム（２．１×２５ｃｍ  Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（商標）ＯＤ−Ｈ、５ミクロン、４０％メタノール（０．２％イソプロピルアミン）／二酸化炭素の移動相で溶出する（流量７０ｍＬ／分。２２５ｎｍ検出））内に０．５ｍＬのシリーズを注入する。
【００７２】
実施例１３：８．０分における第１の溶出ピーク（１）の単離により、１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン異性体１を無色の泡状物として得る、９９％ｅｅ、（０．０３０ｇ；３６％）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００７３】
実施例１４：１１．８分における第２の溶出ピーク（２）の単離により、−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン異性体２を無色の泡状物として得る、９９％ｅｅ、（０．０４２ｇ；５１％）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３１（Ｍ＋１）。
【００７４】
調製例２１
２−クロロ−１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル］エタノンの合成
【化３７】
2016512254.tif 000039
ジクロロメタン（２００ｍＬ）中のＮ−インダン−２−イル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−アミン（１１．０ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（７．４８ｍＬ、５３．７ｍｍｏｌ）に、２−クロロアセチルクロリド（３．６１ｍＬ、５．１３ｇ、４５．４ｍｍｏｌ）を２３℃にて５分にわたって滴下して加える。３０分間撹拌し、１：１の５０％飽和炭酸水素ナトリウム水溶液：ジクロロメタン（７５ｍＬ）内に反応混合物を注ぐ。有機層を水層から分離し、ジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で水層をさらに抽出する。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。残渣をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出：ヘキサン中の２５％酢酸エチル〜１００％酢酸エチル）により精製して標題化合物（９．７５ｇ、６９％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，＊＝少量のアミド回転異性体）δ２．７７＊（ｔ，２Ｈ），２．８４（ｄｄ，２Ｈ），２．８７（ｔ，２Ｈ），３．３５（ｄｄ，２Ｈ），３．７６（ｔ，２Ｈ），３．８５＊（ｔ，２Ｈ），４．１２（ｓ，２Ｈ），４．５２＊（ｓ，２Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），４．７２−４．８２（ｍ，１Ｈ），５．４８−５．６４（ｍ，１Ｈ），７．１２−７．２１（ｍ，４Ｈ），８．０３−８．１０（ｍ，１Ｈ）。
【００７５】
実施例１５
１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノンの合成
【化３８】
2016512254.tif 000040
水素化ナトリウム（０．０５４ｇ；１．８５当量；１．３５ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−オール（０．２５２ｇ；２．０当量；１．４６ｍｍｏｌ）の溶液に加え、室温にて１０分間撹拌する。この混合物を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の２−クロロ−１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル］エタノン（０．２５ｇ；１．０当量；０．７２９ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加える。得られた溶液を０℃にて１時間撹拌し、次いで水を加え、ＳＣＸイオン交換カラム上に負荷する。粗生成物を溶出する（メタノール〜メタノール中の７Ｎアンモニア）。逆相クロマトグラフィーにより生成物をさらに精製して、１−［２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−７，８−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル］−２−（５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルオキシ）エタノン（０．０３５ｇ；１１）を白色の泡状物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４５（Ｍ＋１）。
【００７６】
コリン放出によって測定されるオートタキシンの阻害
このアッセイの目的はコリン放出アッセイを使用してオートタキシン阻害を検出することである。
【００７７】
試験化合物（１００％ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストック）を１００％ＤＭＳＯ中で連続希釈し、半分の面積の９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３９９２）中で１００×阻害剤の１０の濃度を得る。１００％ＤＭＳＯ中のこれらの１０のウェルの各々を、丸底９６ウェルプレート（Ｆｉｓｈｅｒ  １２５６５５０２）中のアッセイ緩衝液中で１：３３．３３に希釈し、３％ＤＭＳＯを含有するウェル中で３×濃度を得る。アッセイ緩衝液は５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ８．０、５ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０１％  ＴＲＩＴＯＮ（商標）Ｘ−１００（Ｓｉｇｍａ  Ｔ９２８４）および０．０１％脂肪酸遊離ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ  Ａ８８０６）である。次いで各々の３×試験化合物の２０μｌアリコートを、シングリケート（ｓｉｎｇｌｉｃａｔｅ）でブラック平底９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３９９１）に加える。次いで２０μｌアリコート／ウェルの３×組換えヒトオートタキシン（２９３Ｅ細胞内でトランスフェクトし、ニッケルキレートおよびサイズ排除クロマトグラフィーにより精製したＣ末端Ｈｉｓタグを有する完全長ヒトオートタキシン）を、酵素のない対照ウェルを除いて、全てのウェルに加える。２０μｌアリコート／ウェルのアッセイ緩衝液を酵素のない対照ウェルに加える。光に露出するのを回避しながら、コリンオキシダーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｃ５８９６）、セイヨウワサビペルオキシダーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｐ８１２５）、アンプレックスウルトラレッド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ａ３６００６）およびオートタキシン基質リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）１６：０（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  ８５５６７５Ｐ）を含有する３×カクテルの２０μｌアリコートを各ウェルに加える。コリンオキシダーゼ、セイヨウワサビペルオキシダーゼ、アンプレックスウルトラレッドおよびＬＰＣ  １６：０のウェルの最終濃度はそれぞれ、０．４単位／ｍｌ、４単位／ｍｌ、４０μＭおよび３０μＭである。次いでプレートをアルミニウム箔シールで密閉し、Ｌａｂｌｉｎｅ  Ｉｍｐｅｒｉａｌ  ＩＩＩインキュベータ内で３７℃にて１時間インキュベートする。このインキュベーションの間、ＬＰＣをオートタキシンによって切断し、リゾホスファチジル酸（ＬＰＡ）１６：０およびコリンを得る。放出されるコリンをコリンオキシダーゼによって酸化し、ベタインおよび過酸化水素を得る。過酸化水素はセイヨウワサビペルオキシダーゼおよびアンプレックスウルトラレッドと反応して、蛍光分子レゾルフィンを形成する。プレート上のレゾルフィンを、ＳｏｆｔＭａｘ  Ｐｒｏ  ４．８ソフトウェアを使用して５３０〜５９０ｎｍの励起−発光波長にてＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  ＥＭ蛍光光度計で測定する。ＩＣ５０を、内部のＬｉｌｌｙソフトウェアＯＬＯ曲線適合ツールを用いて４パラメータ曲線適合を使用して算出する。結果を算術平均＋／−標準偏差；ｎ＝ｘとして表す。本明細書の実施例１〜１５の化合物を本質的に上記のように試験し、オートタキシンについて約１００ｎＭ未満のＩＣ５０を示した。以下の例示した化合物を本質的に上記のように試験し、オートタキシンについて以下の活性を示した：
【００７８】
【表１】
2016512254.tif 000041
【００７９】
表１のデータは、表１の化合物がインビトロでコリン放出アッセイを使用してオートタキシンを阻害することを示す。
【００８０】
ヒト血漿の存在下でのＬＰＡの減少
以下のアッセイはＬＰＡの減少を測定することを意図する。このアッセイは、オートタキシン阻害剤として同定されている化合物を試験するために使用される場合、選択的オートタキシン介在性ＬＰＡ阻害剤化合物を同定するために使用できる手段である。オートタキシンによるＬＰＡ生合成は、ＬＰＡ１介在性神経因性疼痛についてのＬＰＡ源であると考えられる。Ｍａｋｏｔｏ  Ｉｎｏｕｅ，ｅｔ．ａｌ，「Ａｕｔｏｔａｘｉｎ，ａ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｅｎｚｙｍｅ  ｏｆ  ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ  ａｃｉｄ（ＬＰＡ），ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｒｖｅ−ｉｎｊｕｒｅｄ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ｐａｉｎ」，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｎ，２００８，４：６。オートタキシン介在性ＬＰＡ生合成の標的阻害はこのアッセイの結果によって支持される。
【００８１】
ヘパリンナトリウム（Ｌａｍｐｉｒｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）中で収集した健常なヒトの女性のドナー由来の血漿の単位をプールし、アリコートし、−８０℃にて保存する。アッセイの日に、血漿のアリコートを解凍し、遠心分離機で３０００ＲＰＭ、４℃にて１０分間回転させて残渣を除去する。血漿の９０μｌのアリコートを９６ウェル丸底ポリプロピレンプレートの各ウェルに加える。アッセイ緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ８．０、５ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２）中の１０％ＤＭＳＯを含有する１０×試験化合物の１０μＬのアリコートを、試験化合物を含有しない対照ウェルを除いて各ウェルに加える。これは、９０％血漿中の１％ＤＭＳＯの最終濃度でシングリケートにおいて１０の１×濃度の試験化合物を生じる。試験化合物を有さないアッセイ緩衝液中の１０％ＤＭＳＯの１０μｌアリコートを０時間（ｎ＝８）および３時間の試験化合物のない対照（ｎ＝８）ウェルに加える。５００ｍＭのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）の１０μｌのアリコートを、０時間の試験化合物のない対照ウェルの各々に加えて、内因性オートタキシンをキレートする。０時間の試験化合物のない対照ウェルの全内容物を新たな９６ウェル丸底ポリプロピレンプレートに移し、−８０℃で凍結する。血漿＋／−試験化合物を含有するプレート（０時間の阻害剤のない対照ウェルを差し引く）を次いで、１４，０００ＲＰＭで振盪しながら、Ｒｏｂｂｉｎｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標）モデル４００ハイブリダイゼーションインキュベータにおいて３７℃にて３時間インキュベートする。この３時間のインキュベーションの間、血漿中に存在するレシチンコレステロールアクリルトランスフェラーゼは、オートタキシン基質リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）の高い血漿レベルを生じるホスファチジルコリンを切断する。増加した内因性ＬＰＣレベルは内因性リゾホスファチジル酸（ＬＰＡ）の高い血漿濃度を生じる内因性オートタキシンによって切断される（Ｎａｋａｍｕｒａら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４０（２００７），２７４−２７７）。３時間のインキュベーションにおけるＬＰＡのこの増加はオートタキシン阻害剤によって阻害され得る。３時間のインキュベーション後、１０μｌの５００ｍＭ  ＥＤＴＡを残りのウェル（試験化合物を含有するウェルおよび３時間の試験化合物のない対照ウェル）の全てに加えて、内因性オートタキシンをキレートする。次いでこれらのウェルの全内容物を、（０時間の血漿を解凍せずに）以前に−８０℃で保存されていた０時間の試験化合物のない対照血漿を含有するプレートに加える。次いでプレートをアルミニウム箔シールで再び覆い、質量分析のために抽出するまで−８０℃に再び置く。抽出の日に、プレートを氷上で解凍し、各ウェルからの２５μｌの血漿を、２ｍｌのＴｒｕｅＴａｐｅｒ（商標）正方形９６ディープウェルプレート（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｓａｌｅｓおよび製品番号９６８８２０）に移す。ＬＰＡ内部標準（５０ｎｇ／ｍｌのＤ５重水素ＬＰＡ１６：０および５０ｎｇ／ｍｌのＤ５重水素ＬＰＡ１８：０）を含有する４００μｌアリコートの抽出緩衝液（５０％メタノール、４９．９％アセトニ��リル、０．１％酢酸）を各ウェルに加え、各試料中の全ＬＰＡを質量分析によって測定する。ＬＰＡの減少のパーセントを以下の式に従って算出する：
１００−（３時間の血漿＋試験化合物−０時間の血漿の試験化合物のない対照）／（３時間の血漿の試験化合物のない対照−０時間の血漿の試験化合物のない対照）×１００
【００８２】
４パラメータ曲線適合を使用してＩＣ５０値を算出する。結果を算術平均＋／−標準偏差；ｎ＝ｘとして表す。本発明の化合物を使用したこのアッセイの結果は、ＬＰＡの減少が用量依存的であり、統計的に有意であることを示す。
【００８３】
【表２】
2016512254.tif 000042
【００８４】
表２のデータにより、化合物がヒト血漿の存在下でＬＰＡを減少させることが実証される。この結果により、化合物がオートタキシン介在性ＬＰＡ生合成を阻害することが支持される。
【手続補正書】
【提出日】平成27年9月14日(2015.9.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2016512254.tif 000047
（式中、Ｘは結合またはＣＨ２であり；
ＱはＣＨ２またはＯであり；
Ｌは−ＯＣＨ２−および−ＣＨ２Ｏ−からなる群から選択される）
またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
Ｘが結合である、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｌが−ＣＨ２Ｏ−である、請求項１または２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
５，６−ジヒドロ−８Ｈ−イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート：
【化２】
2016512254.tif 000048
である、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イルメチル２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イルアミノ）−５，７−ジヒドロ−６Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート：
【化３】
2016512254.tif 000049
である、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項６】
１種以上の医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。
【国際調査報告】
2016512254.tif 000050
2016512254.tif 000051