(57)【要約】本発明は、結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μｍ以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の容積量の５０％以上が１５μｍ以下のサイズを有し；ここで、ａ）前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；ｂ）前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；ｃ）前記混合物中に存在する重金属の量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下の重金属であり；    ｄ）前記混合物中に存在するＭＣＱの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；ｅ）前記混合物中に存在するＭＣＱＣＡの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；ｆ）前記混合物中に存在するＭＣＱＭＥの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下である混合物をて供する。本発明はまた、ある量ラキニモドと、ＢＨ−３−ＨＬＡＱ、ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＮＥＡ、およびＭＣＱＥＥのうちの少なくとも一つを含有する医薬組成物を提供する。本発明はまた、ＢＨ−３−ＨＬＡＱ、ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＮＥＡ、およびＭＣＱＥＥを調製する方法、並びに該方法により調製された化合物を提供する。更に、ラキニモドのサンプルが望ましくない不純物を含有するかどうかを試験するための方法が提供される。更に、ラキニモドを含有するバリデートされた医薬組成物を調製する方法、ラキニモドを含有する医薬組成物を調製する方法、またはラキニモドを含有する医薬組成物のバリデートされたバッチを流通させる方法、ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物のバッチを流通流通のためにバリデートする方法、並びにラキニモドを含有する包装された医薬組成物を調製する方法であって、各々がサンプルまたはバッチの中のＢＨ−３−ＨＬＡＱ、ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＮＥＡ、およびＭＣＱＥＥの少なくとも一つの量を決定することを含んだ方法が提供される。本発明は更に、ラキニモドを含有してなる医薬組成物中の痕跡量の不純物を検出するための参照標準としてのＢＨ−３−ＨＬＡＱ、ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＮＥＡ、ＭＣＱＥＥを提供する。最後に、本発明はラキニモドを含有する医薬組成物中における、ＢＨ−３−ＨＬＡＱ、ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＮＥＡ、またはＭＣＱＥＥの濃度を決定する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０ミクロン以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の容積量の５０％以上が１５ミクロン以下のサイズを有し；ここで、
ａ．前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ．前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ．前記混合物中に存在する重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下の重金属であり；
ｄ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ．前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｉ．前記混合物中に存在するＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量はＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物。
【請求項２】
請求項１に記載の混合物であって、（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０ミクロン未満のサイズを有するか、または（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５ミクロン未満のサイズを有する混合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の混合物であって、前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５ミクロン以下のサイズを有し；また
ａ．前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有するか；または
ｂ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下である混合物。
【請求項４】
結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０ミクロン未満のサイズを有するか、（ｉｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の容積量の５０％以上が１５ミクロン未満のサイズを有するか、または（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全堆積量の１０％以上が５μ未満のサイズを有し；ここで、
ａ．前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ．前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ．前記混合物中に存在する重金属の量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下の重金属であり；
ｄ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ．前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｉ．前記混合物中に存在するＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量はＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物。
【請求項５】
請求項１〜４の何れか１項に記載の混合物であって、単一バッチで調製され、２．５ｋｇ以上のラキニモドナトリウムを含有してなる混合物。
【請求項６】
請求項１〜５の何れか１項に記載の混合物であって、前記ラキニモドナトリウム粒子は前記混合物の未粉砕のサンプルに基づいて決定され、または前記ラキニモドナトリウム粒子のサイズおよび体積量は前記混合物の粉砕されたサンプルに基づいて決定される混合物。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の混合物であって、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度、および／または０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度有する混合物。
【請求項８】
請求項１〜７の何れか１項に記載の混合物であって、
ａ．前記混合物中のアルミニウムの量は、前記ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満または２ｐｐｍ未満であり；
ｂ．前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満または２５ｐｐｍ未満であり；
ｃ．前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２５ｐｐｍ未満であり；
ｄ．前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満または０．６ｐｐｍ未満であり；および／または
ｅ．前記混合物中のア年の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満または４ｐｐｍ未満である混合物。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか１項に記載の混合物であって、前記混合物中の重金属の量は、前記ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下である混合物。
【請求項１０】
請求項１〜９の何れか１項に記載の混合物であって、前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である混合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０の何れか１項に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定したラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｂ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）  の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｃ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｄ．前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；および／または
ｅ．前記混合物中の  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物。
【請求項１２】
請求項１〜１１の何れか１項に記載の混合物であって、前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下である混合物。
【請求項１３】
請求項１〜１２の何れか１項に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定したラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｂ．前記混合物中のＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；および／または
ｃ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＤＥＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物。
【請求項１４】
請求項１〜１３の何れか１項に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｂ．前記混合物中のマロン酸ジメエルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｃ．前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｄ．前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ以下であり；
ｅ．前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により想定されたラキニモドナトリウムの重量に対して１．５重量％以下であり；および／または
ｆ．ナトリウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％〜６．４％である混合物。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れか１項に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｂ．前記混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｃ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｄ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｅ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｆ．前記混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下であり；
ｇ．前記混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｈ．前記混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；および／または
ｉ．前記混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である混合物。
【請求項１６】
請求項１〜１５の何れか１項に記載の混合物、および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の医薬組成物であって：
ａ．該医薬組成物の中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｂ．該医薬組成物の中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して２．００％以下であり；
ｃ．該医薬組成物の中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｄ．該医薬組成物の中の５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｅ．該医薬組成物中の非極性不純物の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｆ．該医薬組成物中のＮ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（メチル（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシル）アミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＭＥＧ−ＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１６または１７に記載の医薬組成物であって：
ａ．該医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの量に対して１．５０％以下であり；
ｂ．該医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８０％以下であり；および／または
ｃ．該医薬組成物は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％〜６．４％の量のナトリウムを含有する医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１６〜１８の何れか１項に記載の医薬組成物であって：
ａ．該医薬組成物の中のエタノールの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｂ．該医薬組成物の中のｎ−ヘプタンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｃ．該医薬組成物の中のｎ−オクタンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｄ．該医薬組成物の中のｎ−オクタンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｅ．該医薬組成物の中のｎ−オクタンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ｆ．該医薬組成物の中のメタノールの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｇ．該医薬組成物の中のアセトンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であり；
ｈ．該医薬組成物の中のジオキサンの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；および／または
ｉ．該医薬組成物の中のジメチルホルムアミドの量が、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である医薬組成物。
【請求項２０】
ある形態の多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ性関節炎、ＢＤＮＦ関連障害、クローン病、ＧＡＢＡ関連障害、カンナビノイド受容体１型（ＣＢ１）媒介性障害、あるいは眼炎性障害に罹患した患者を治療し、またはその症状を緩和する方法であって、前記患者に対して、請求項１〜１５の何れか１項に記載の混合物または請求項１６〜１９の何れか１項に記載の医薬組成物を投与し、それによって前記患者を治療し、または前記患者における症状を緩和することを含んでなる方法。
【請求項２１】
ある形態の多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ性関節炎、ＢＤＮＦ関連障害、クローン病、ＧＡＢＡ関連障害、カンナビノイド受容体１型（ＣＢ１）媒介性障害、あるいは眼炎性障害に罹患した患者を治療、またはその症状の緩和において使用するための、請求項１〜１５の何れか１項に記載の混合物または請求項１６〜１９の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１〜１５の何れか１項に記載の混合物または請求項１６〜１９の何れか１項に記載の医薬組成物の使用であって、ある形態の多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ性関節炎、ＢＤＮＦ関連障害、クローン病、ＧＡＢＡ関連障害、カンナビノイド受容体１型（ＣＢ１）媒介性障害、あるいは眼炎性障害に罹患した患者を治療し、またはその症状を緩和するための医薬の製造のための使用。
【請求項２３】
ラキニモドナトリウムの再結晶化方法であって：
ａ．ある量のラキニモドを水の中に溶解して水溶液を形成すること；
ｂ．該水溶液を濃縮して、ラキニモドナトリウム１グラム当たり約１．７〜１．８ｍＬの水を含有する濃縮溶液を形成すること；
ｃ．工程ｂ）の濃縮溶液にアセトンを加えること；および
ｄ．再結晶化したラキニモドナトリウムを単離すること
を含んでなる方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法であって：
ａ．工程ａ）のラキニモドナトリウムの量は２．５ｋｇ以上であり；
ｂ．工程ａ）は１ｇのラキニモドナトリウム当たり１０〜１２ｍＬの水を用いて行われ、好ましくは、工程ａ）は１ｇのラキニモドナトリウム当たり１１ｍＬの水を用いて行われ；および／または
ｃ，工程ａ）は前記水溶液を５８〜７５℃の温度に加熱することにより行われ、または工程ａ）は前記水溶液を６０〜７３℃の温度に加熱することにより行われる方法。
【請求項２５】
請求項２３または２４に記載の方法であって、前記再結晶化は、工程ａ）の後で且つ工程ｃ）の前に行われ、好ましくは、前記再結晶化は：
ａ．濃縮工程ｂ）の最中または後に迅速撹拌により誘導され；
ｂ．濃縮工程ｂ）の最中または後に種結晶の添加により誘導され；または
ｃ．種結晶の添加なしに生じる方法。
【請求項２６】
請求項２３〜２５の何れか１項に記載の方法であって、
ａ．工程ｂ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり水１．７〜１．８ｍＬの濃度において結晶化を誘導するのに適した条件下で行われ；および／または
ｂ．工程ｂ）は、２８〜４５℃、または３０〜４０℃において行われる方法。
【請求項２７】
請求項２３〜２５の何れか１項に記載の方法であって、
ａ．工程ｃ）は、４０〜５５℃または４５〜５０℃の濃縮溶液でを用いて行われ；
ｂ．工程ｃ）はラキニモドナトリウム１グラム当たり６〜１２ｍＬのアセトンを用いて行われ、好ましくは、工程ｃ）はラキニモドナトリウム１グラム当たり１０ｍＬのアセトンを用いて行われ；
ｃ．工程ｃ）は、１〜４時間の期間または１．２〜２．５時間の期間に亘って行われ；および／または
ｄ．工程ｃ）に続いて前記溶液は−１６℃以上で６℃以下の温度に冷却され、または工程ｃ）に続いて前記溶液は−４℃以上で４℃以下の温度に冷却される方法。
【請求項２８】
請求項２３〜２７の何れか１項に記載の方法であって、前記溶液は３〜５時間の期間に亘って、または３．５〜４．５時間の期間に亘って冷却される方法。
【請求項２９】
請求項２３〜２８の何れか１項に記載の方法であって、
ａ．工程ｄ）は更に、前記再結晶化されたラキニモドナトリウムを工程ａ）で用いた粗製ラキニモドナトリウム１ｇ当たり１〜４ｍＬのアセトンで洗浄することを含んでなり、好ましくは、工程ｄ）は更に、再結晶化されたラキニモドナトリウムを工程あ）で用いた粗製ラキニモドナトリウム１ｇ当たり約３ｍＬのアセトンで洗浄することを含んでなり、
ｂ．工程ｄ）は更に、前記再結晶化されたラキニモドナトリウムを５０ｍｍＨｇ以下の真空下において３０〜４０℃で１時間以上乾燥させることを含んでなり；および／または
ｃ．工程ｄ）において再結晶化され単離されたラキニモドナトリウムは、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の９０％以上が４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の総容積量５０％以上が１５ミクロン以下のサイズを有し、また（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の１０％以上が５μ以下のサイズを有するような、粒子サイズ分布を有する結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物である方法。
【請求項３０】
請求項２３〜２９の何れか１項に記載の方法により調製された、結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物。
【請求項３１】
請求項３０に記載の混合物であって、（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の９０％以上が４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の５０％以上が１５ミクロン以下のサイズを有し、また（ｉｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の１０％以上が５μ以下のサイズを有する混合物。
【請求項３２】
請求項３１に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ．前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ．前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満であり；
ｄ．前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満であり；
ｅ．前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満であり；
ｆ．前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満であり；
ｇ．前記混合物中の重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ未満であり；
ｈ．前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｉ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｊ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｋ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｌ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｍ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｎ．前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｏ．前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｐ．前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｑ．前記混合物中のマロン酸ジメチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｒ．前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｓ．前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１％以下であり；
ｔ．前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの重量に対して１．５重量％以下であり；
ｕ．前記混合物は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％〜６．４％量のナトリウムを含有しており；
ｖ．前記混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｗ．前記混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｘ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｙ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｚ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ａａ．前記混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下であり；
ｂｂ．前記混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｃｃ．前記混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｄｄ．前記混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である混合物。
【請求項３３】
請求項３１に記載の混合物であって：
ａ．前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ．前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ．前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満であり；
ｄ．前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満であり；
ｅ．前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満であり；
ｆ．前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満であり；
ｇ．前記混合物中の重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ未満であり；
ｈ．前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｉ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｊ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｋ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｌ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｍ．前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｎ．前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｏ．前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｐ．前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｑ．前記混合物中のマロン酸ジメチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｒ．前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｓ．前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１％以下であり；
ｔ．前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの重量に対して１．５重量％以下であり；
ｕ．前記混合物は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％〜６．４％量のナトリウムを含有しており；
ｖ．前記混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｗ．前記混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｘ．前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下、２００ｐｐｍ以下、または２０ｐｐｍ以下であり；
ｙ．前記混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下であり；
ｚ．前記混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ａａ．前記混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｂｂ．前記混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であある混合物。
【請求項３４】
請求項３０〜３３の何れか１項に記載の混合物および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物。
【請求項３５】
請求項３４に記載の医薬組成物であって：
ａ．前記医薬組成物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５％以下であり；
ｂ．前記医薬組成物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して２．００％以下であり；
ｃ．前記医薬組成物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｄ．前記医薬組成物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｅ．前記医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８％以下であり；
ｆ．前記医薬組成物は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％〜６．４％の量のナトリウムを含有し；
ｇ．前記医薬組成物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｈ．前記医薬組成物中のｎ-ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｉ．前記医薬組成物中のｎ-オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｊ．前記医薬組成物中のｎ-オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｋ．前記医薬組成物中のｎ-オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ｌ．前記医薬組成物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｍ．前記医薬組成物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であり；
ｎ．前記医薬組成物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｏ．前記医薬組成物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である医薬組成物。
【請求項３６】
請求項３４に記載の医薬組成物であって：
ａ．前記医薬組成物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５％以下であり；
ｂ．前記医薬組成物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して２．０％以下であり；
ｃ．前記医薬組成物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｄ．前記医薬組成物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｅ．前記医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量測定により測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８０％以下であり；
ｆ．前記医薬組成物は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８〜６．４％の量のナトリウムを含有しており；
ｇ．前記医薬組成物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｈ．前記医薬組成物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｉ．前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ、２００ｐｐｍまたは２０ｐｐｍ以下であり；
ｊ．前記医薬組成物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｋ．前記医薬組成物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であり；
ｌ．前記医薬組成物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｌ．前記医薬組成物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である医薬組成物。
【請求項３７】
結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の９０％以上が４０ミクロン以下のサイズを有し、または（ｉｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の５０％以上が１５ミクロン以下のサイズを有し、ここで、
ａ．前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満であり；
ｂ．前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満であり；
ｃ．前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満であり；または
ｄ．前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満である混合物。
【請求項３８】
請求項３７に記載の混合物および医薬的に許容可能な担体を含有してなる医薬組成物。
【請求項３９】
下記の構造を有する単離された化合物、
【化１】
2016514162.tif 000150
またはその塩。
【請求項４０】
下記の構造を有する化合物またはその塩を含有する組成物であって：
【化２】
2016514162.tif 000151
ラキニモドまたはその塩を含まない組成物。
【請求項４１】
ある量のラキニモドと、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つを含有する医薬組成物であって；ここで、
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４２】
請求項４１に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸  （ＭＣＱＣＡ）  は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４３】
請求項４２に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；および／または５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４４】
請求項４１〜４３の何れか１項に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０６％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４５】
請求項４４に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０６％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４６】
請求項４４または４５に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４７】
請求項４６に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４８】
請求項４２に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）  は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項４９】
請求項４８に記載の医薬組成物であって：
ａ．５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、または５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；および／または
ｂ．５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５０】
請求項４８または４９に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）  は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超または０．１０％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超かつ０．１５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０６％超かつ０．１５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超かつ０．１０％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５１】
請求項５０に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５２】
請求項４８または４９に記載の医薬組成物であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超または０．０３％超かつ０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０６％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５３】
請求項５２に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５４】
請求項４１に記載の医薬組成物であって、更に、少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を含有してなる医薬組成物。
【請求項５５】
請求項５４に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の合計量は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下である医薬組成物。
【請求項５６】
請求項５４に記載の医薬組成物であって、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５７】
請求項５５または５６に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸  （ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の合計量は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満である医薬組成物。
【請求項５８】
請求項５７に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項５９】
請求項５７または５８に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｇ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の合計量は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満である医薬組成物。
【請求項６０】
請求項５９に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６１】
請求項５４に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の合計量は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６２】
請求項６１に記載の医薬組成物であって、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６３】
請求項５４に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超かつ１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の合計量は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６４】
請求項５４に記載の医薬組成物であって：
ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し；または
ｇ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６５】
請求項６４に記載の医薬組成物であって、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超の量で前記医薬組成物中に存在し、またはＨＰＬＣ法による測定に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する医薬組成物。
【請求項６６】
請求項４１〜６５の何れか１項に記載の医薬組成物であって、ラキニモドナトリウム塩を含有する医薬組成物。
【請求項６７】
請求項５４〜６６の何れか１項に記載の医薬組成物であって、経口単位用量形態、またはカプセル、錠剤もしくは懸濁液の形態の医薬組成物。
【請求項６８】
請求項６７に記載の医薬組成物であって、前記経口単位用量形態は、０．３ｍｇ超のラキニモド、０．５ｍｇ超のラキニモド、または０．６ｍｇ超のラキニモドを含有してなる医薬組成物。
【請求項６９】
２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）を調製する方法であって：
ａ）５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミドの水中懸濁液に水酸化ナトリウム溶液を添加する工程と；
ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌し、続いて塩酸溶液を添加する工程と；
ｃ）前記水溶液を酢酸エチルで抽出する工程と；
ｄ）この有機相を塩水で洗浄する工程と；
ｅ）該有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥する工程と；
ｆ）懸濁液を濾過する工程と；
ｇ）濾液を蒸発させる工程と；
ｈ）残渣をイソプロピルアルコールからの結晶化により精製する工程と；
ｉ）懸濁液を冷却した後、濾過およびイソプロピルアルコールでの洗浄を行う工程と；
ｊ）得られた白色個体を入手および乾燥する工程
を含んでなる方法。
【請求項７０】
請求項６９の方法により調製された、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）。
【請求項７１】
５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を調製する方法であって：
ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）およびジメチルスルホキシドの混合物を加熱する工程と；
ｂ）工程ａ）の混合物を冷却する工程と；
ｃ）工程ｂ）の混合物を濾過し、得られた濾液を回収する工程
を含んでなる方法。
【請求項７２】
請求項７１の方法により調製された、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）。
【請求項７３】
５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を調製する方法であって：
ａ）酢酸中塩酸溶液中における５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の混合物を加熱する工程と；
ｂ）工程ａ）の混合物を冷却する工程と；
ｃ）工程ｂ）の混合物を２−プロパノールで希釈し、該希釈された混合物を更に冷却する工程と；
ｄ）工程ｃ）から得られる結晶を濾別する工程
を含んでなる方法。
【請求項７４】
請求項７３の方法により調製された、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）。
【請求項７５】
５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を調製する方法であって：
ａ）ジメチルホルムアミド中のマロン酸ジメチルをナトリウムメトキシド溶液と反応させることにより、マロン酸ジメチルナトリウムを形成する工程と；
ｂ）中間体の５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンをマロン酸ジメチルナトリウムと反応させて、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を形成する工程と；
ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を酸性化して、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）にする工程
を含んでなる方法。
【請求項７６】
請求項７５に記載の方法により調製された、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）。
【請求項７７】
５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を調製する方法であって：
ａ）ジメチルホルムアミド中の５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンおよびマロン酸ジエチルの溶液に、水素化ナトリウムを添加する工程と；
ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌しながら加熱する工程と；
ｃ）工程ｂ）の溶液を冷却する工程と；
ｄ）工程ｃ）の反応混合物を急冷する工程と；
ｅ）工程ｄ）の混合物を酸性化する工程と；
ｆ）工程ｅ）の混合物を濾過し、次いで乾燥する工程と；
ｇ）工程ｆ）の粗生成物を、エタノール中に溶解し、続いてゆっくり冷却することにより結晶化させる工程
を含んでなる方法。
【請求項７８】
請求項７７に記載の方法により調製された、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）。
【請求項７９】
ラキニモドのサンプルが望ましくない不純物を含んでいるかどうかを試験するための方法であって、前記サンプルが下記の構造を有する化合物
【化３】
2016514162.tif 000152
を含有するかどうかを決定することを含んでなる方法。
【請求項８０】
ラキニモドを含有するバリデートされた医薬組成物を調製する方法であって：
ａ）ラキニモドのバッチを得ることと；
ｂ）前記バッチの中における５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうちの少なくとも一つの量を、ＨＰＬＣ法を用いて決定することと；
ｃ）下記の場合にのみ、前記バッチから前記医薬組成物を調製することを含んでなる方法：
ｉ）前記バッチは、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を有すると決定されること；または
ｉｉ）前記バッチは、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を有すると決定されること；または
ｉｉｉ）前記バッチは、ラキニモドの濃度に対して０．１５％、０．１２％もしくは０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されること；または
ｉｖ）前記バッチは、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）を有すると決定されること；または
ｖ）前記バッチは、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル  （ＭＣＱＥＥ）を有すると決定されること。
【請求項８１】
請求項８０に記載の方法であって、工程ｃ）において、前記バッチがラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されるときにのみ、前記バッチから前記医薬組成物が調製され、または工程ｃ）において、前記バッチがラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されるときにのみ、前記バッチから前記医薬組成物が調製される方法。
【請求項８２】
ラキニモドを含有する医薬組成物を調製する方法、またはラキニモドを含有する医薬組成物のバリデートされたバッチを流通させる方法であって：
ａ）ラキニモドのバッチまたは前記医薬組成物のバッチを得ることと；
ｂ）前記バッチのサンプルを用いて安全性試験を行うことと；
ｃ）安全性試験後の前記バッチのサンプル中において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの総量を、ＨＰＬＣ法によって決定することと；
ｄ）安定性試験の後のバッチのサンプルが下記を含有するときにのみ、前記バッチの流通または前記バッチからの医薬組成物の調製について前記バッチをバリデートすることを含んでなる方法：
ｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）；または
ｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）；または
ｉｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％、０．１２％もしくは０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）；または
ｉｖ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）0；または
ｖ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル  （ＭＣＱＥＥ）。
【請求項８３】
請求項８２に記載の方法であって、更に、工程ｄ）において前記バッチが流通についてバリデートされたならば、前記バッチを流通させる工程ｅ）を含んでなる方法。
【請求項８４】
請求項８２または８３に記載の方法であって、工程ｄ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を含有するときにのみ、または工程ｄ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を含有するときにのみ、前記バッチが流通についてバリデートされ、または前記医薬組成物が前記バッチから調製される方法。
【請求項８５】
ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬製品のバッチを、流通についてバリデートする方法であって：
ａ）前記バッチのサンプルを、安定性試験に付することと；
ｂ）前記安定性試験の後のバッチのサンプル中において、ＨＰＬＣ法により、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量を決定することと；
ｃ）前記安定性試験の後のバッチのサンプルが下記を含有するときにのみ、前記バッチを流通についてバリデートすること
ｉ）ラキニモドの濃度に対して総計１．０％以下の、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）；または
ｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．５％以下または０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）；または
ｉｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せ
を含んでなる方法。
【請求項８６】
請求項８５に記載の方法であって、前記工程ｃ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）を含有するときにのみ、前記バッチが流通についてバリデートされる方法。
【請求項８７】
ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する包装された医薬組成物を調製する方法であって：
ａ）ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物のバッチを得ることと；
ｂ）前記バッチのサンプルを用いて安定性試験を行うことと；
ｃ）前記安定性試験の後に、前記サンプル中において、ＨＰＬＣ法により、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）  のうち少なくとも一つの量を決定することと；
ｄ）下記の場合にのみ、前記前記医薬組成物を包装することを含んでなる方法：
ｉ）前記サンプル中の２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）の含量が、ラキニモドの濃度に対して１．０％以下であると決定され；または
ｉｉ）前記サンプル中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の含量が、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下または０．１％以下であり；または
ｉｉｉ）合計０．５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せ含量が、ラキニモドの濃度に対して総計で０．５％以下であると決定されたとき。
【請求項８８】
請求項８７に記載の方法であって、工程ｄ）において、前記医薬組成物は、前記サンプル中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の含量がラキニモドの濃度に対して０．１％以下であると決定されたときにのみ包装される方法。
【請求項８９】
請求項６９〜８８の何れか１項に記載の方法であって、前記ラキニモドはラキニモドナトリウム塩である方法。
【請求項９０】
ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有してなる医薬組成物中の痕跡量の不純物を検出するための参照標準として使用するための不純物またはその塩であって、前記不純物は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ），  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）からなる群から選択される不純物またはその塩。
【請求項９１】
ラキニモドを含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、
ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；
ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；
ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；
ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；
ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有する希釈溶液を調製することと；
ｆ）前記希釈溶液および水性アセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；
ｇ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；
ｈ）２４０ｎｍにおける紫外吸収および移動相としての前記希釈溶液を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；
ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；
ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２  ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）、または５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）である方法。
【請求項９２】
ラキニモドを含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、
ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；
ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；
ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；
ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；
ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；
ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；
ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収と、前記緩衝溶液およびアセトニトリルの混合物の移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；
ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；
ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］  （スピロ−ＬＡＱ）、または５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）である方法。
【請求項９３】
ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、
ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；
ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；
ｃ）前記不純物を含有する定量限界（ＱＬ）溶液を調製することと；
ｄ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；
ｅ）リン酸二水素アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたはリン酸を用いてｐＨを７．０±０．１０に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；
ｆ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製することと；
ｇ）前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記ＱＬ溶液、前記標準溶液および前記サンプル溶液をＨＰＬＣの中に注入することと；
ｈ）２１２ｎｍにおける紫外吸収と、前記緩衝溶液、アセトニトリルおよびメタノールの混合物の移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；
ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；
ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、またはＮ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシルアミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＭＥＧ−ＬＡＱ）である方法。
【請求項９４】
ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、
ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；
ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；
ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；
ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；
ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；
ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；
ｇ）２４２ｎｍにおける紫外吸収と、移動相としての前記ブランク溶液を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；
ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；
ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、またはＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２  ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）である方法。
【請求項９５】
ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、
ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；
ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；
ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；
ｄ）メタノールおよびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；
ｅ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；
ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；
ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収と、アセトニトリルおよび前記緩衝溶液を含有する移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；
ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；
ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）、または１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］（スピロ−ＬＡＱ）である方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１３年３月１４日に出願された米国仮特許出願第６１／７８５，５７５号に基づく優先権を主張するものであり、該仮出願の全体の内容を本明細書の一部として本願に援用する。
【０００２】
本出願の全体を通して、多くの刊行物が筆頭著者および発行年によって参照される。それら刊行物の完全な引用は特許請求の範囲の直前の参考文献の節に提供される。本明細書に開示される発明の日付における技術の状態をより完全に記載するために、参考文献の節に参照された出版物における記載の全体を、本明細の一部として援用する。
【発明の背景】
【０００３】
ラキニモドは、急性実験的な自己免疫性脳脊髄炎（ａＥＡＥ）モデルにおいて有効であることが証明されている化合物である（米国特許第６，０７７，８５１号）。それの化学名は、Ｎ−エチル−Ｎ−フェニル−１，２，−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−５−クロロ−１−メチル−２−オキソキノリン−３−カルボキサミドであり、それの化学登録番号は２４８２８１−８４−７である。
【０００４】
ラキニモドは以下の化学構造を持つ小分子である：
【化１】
2016514162.tif 000002
【０００５】
ラキニモドナトリウムは経口での高い生体利用性を有し、多発性硬化症（ＭＳ）の治療ににおける経口の製剤として提案されてきた（Ｐｏｌｍａｎ, Ｃ. ｅｔ ａｌ., （２００５） “Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ ｒｅｄｕｃｅｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ＭＲＩ ｌｅｓｉｏｎｓ ｉｎ ｒｅｌａｐｓｉｎｇ ＭＳ”, Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ. ６４:９８７−９９１; Ｓａｎｄｂｅｒｇ−Ｗｏｌｌｈｅｉｍ Ｍ, ｅｔ ａｌ. （２００５） “４８−ｗｅｅｋ ｏｐｅｎ ｓａｆｅｔｙ ｓｔｕｄｙ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ−ｄｏｓｅ ｏｒａｌ ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ”, Ｍｕｌｔ Ｓｃｌｅｒ. １１:Ｓ１５４）。研究により、ラキニモドがＭＳの再発における活動性ＭＲＩ病変の発達を低減できることが証明された。（Ｐｏｌｍａｎ, Ｃ. ｅｔ ａｌ., （２００５） “Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ ｒｅｄｕｃｅｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ＭＲＩ ｌｅｓｉｏｎｓ ｉｎ ｒｅｌａｐｓｉｎｇ ＭＳ”, Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ. ６４:９８７−９９１）。
【０００６】
薬学的な製剤としてラキニモドを調製するためには、製造方法において、本明細書で開示した不純物が製品内に存在する可能性を考慮する必要がある。ラキニモドの初期合成においては、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチルおよび５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリンのような不純物の混入した生成物が製造された（Ｋ. Ｊａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ., （２００６） “Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ, ａ Ｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ: Ｉｎｔｒａｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｎｏｌ Ｐｒｏｔｏｎ ｔｏ ａ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ａｔｏｍ ａｓ ａ Ｐｌａｕｓｉｂｌｅ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ Ｋｅｔｅｎｅ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ, Ｊ. Ｏｒｇ. Ｃｈｅｍ., ７１, １６５８−１６６７）。幾つかの他の不純物もまた開示されている（米国特許第６，０７７，８５１号；米国特許第６,８７５，８６９号;および米国特許第７，８８４，２０８号）。その内容を本明細書の一部として援用する米国特許出願公開番号２０１２／００１０２３９は、不純物５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを開示してる。その内容を本明細書の一部として援用する米国特許出願公開番号２０１３／０２１７７２４は、不純物Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを開示している。その内容を本明細書の一部として援用する米国特許出願公開番号２０１３／００３４５２５６は、不純物Ｎ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（メチル（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシル）アミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを開示した。その内容を本明細書の一部として援用する米国特許第８，１７８，１２７号は、不純物２−クロロ−６−（１−エチル−Ｎ−メチル−２−オキソインドリン−３−カルボキサミド）安息香酸、１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２,４−ジオン−３，３‘−［１］エチルインドリン−［２］−オンおよび５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル，１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミドを開示している。
【０００７】
ラキニモドの合成方法および、そのナトリウム塩の調製は、米国特許第６，００７，８５１号に開示されている。ラキニモドナトリウムではないが、特定の不純物レベルの低いラキニモド酸の合成の追加的な方法が、米国特許第６，８７５，８６９号に開示されている。米国特許第７，８８４，２０８号は、塩の形成の段階の後に存在する特定の不純物を除去し、それゆえに高い純度の結晶混合物並びに大きな粒子を持ち、タップ密度およびバルク密度が改善された結晶混合物をもたらすようなラキニモドナトリウムの調製のための方法を教示している。ラキニモドナトリウムを含む医薬組成物は、公開番号ＷＯ２００５／０７４８９９のＰＣＴ国際出願に開示されている。
【０００８】
米国特許第６，０７７，８５１号において開示されたラキニモドナトリウムの調製においては、ラキニモド酸はエタノールに懸濁され、５Ｍの水酸化ナトリウム溶液を添加された。撹拌した後、得られた沈殿物が濾過され、エタノールで洗浄され、乾燥された。米国特許第６，０７７，８５１号におけるラキニモドナトリウムを製造するために用いられた方法は、一般的に、スラリー対スラリーの塩形成（ｓｌｕｒｒｙ−ｔｏ−ｓｌｕｒｒｙ ｓａｌｔ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）といわれる。
【０００９】
米国特許第６，０７７，８５１号のスラリー対スラリーの塩形成方法において、ラキニモドナトリウムは溶液中に溶解されない。従って、何れの固体不純物も、ラキニモドナトリウム懸濁液内に存在する場合は、濾過によっては除去されない。
【００１０】
米国特許第６，８７５，８６９号は、主剤のラキニモドを高収率および低不純物レベルで調製する方法を開示している。しかしながら、米国特許第６，８７５，８６９号における方法は主剤（ラキニモド酸）の合成のためだけのものであって、塩ではない。従って、ナトリウム塩を形成するためのスラリー対スラリーの塩形成方法が未だ必要とされるであろう。
【００１１】
米国特許第７，８８４，２０８号は、高純度の結晶であると共に、例えば含まれる重金属が２ｐｐｍ以下であり、またより高いタップ密度の結晶であるような、改善された結晶特性をもたらすラキニモドナトリウムを調製するための方法を教示している。米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１３〜１７に開示された方法において、ラキニモドナトリウムは、水に溶解された水溶液の形態をとっており；前記水溶液は濃縮され；その後、前記濃縮された水溶液に水混和性の抗溶媒が加えられ、ラキニモドナトリウムの結晶が形成される。米国特許第７，８８４，２０８号の方法は、塩形成の後に不純物が取り除かれ、それゆえ米国特許第６，０７７，８５１号の「スラリー対スラリー」の方法から直接製造されるラキニモドナトリウムよりも高純度のラキニモドナトリウムをもたらす。
【発明の概要】
【００１２】
本発明は結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０ミクロン以下のサイズを有し、または（ｉｉ）該ラキニモドナトリウム粒子の容積量の５０％以上が１５ミクロン以下のサイズを有し、ここで：
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ）前記混合物中に存在する重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下の重金属であり；
ｄ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ）前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；または、
ｉ）前記混合物中に存在するＮ−エチル−４,５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物を提供する。
【００１３】
本発明は結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、および（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が、５ミクロン以下のサイズを有し、ここで：
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ）前記混合物中に存在する重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して重金属が２０ｐｐｍ以下であり；
ｄ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ）前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；または、
ｉ）前記混合物中に存在するＮ−エチル−４,５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物を提供する。
【００１４】
本発明は、本明細書に開示した混合物および医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物をも提供する。
【００１５】
本発明は、以下を含むラキニモドナトリウムの再結晶化の方法であって；
ａ）ある量のラキニモドナトリウムを水に溶かして水溶液を作る工程と；
ｂ）前記水溶液を濃縮し、ラキニモドナトリウム１グラム当たり水を約１．７〜１．８ｍＬ含む濃縮された溶液を調製する工程と；
ｃ）工程ｂ）の濃縮された溶液にアセトンを添加する工程と；
ｄ）再結晶化されたラキニモドナトリウムを単離する工程からなる方法も提供する。
【００１６】
本発明はまた、本明細書に開示された方法により調製された結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物、および前記混合物を含む医薬組成物を提供する。
【００１７】
本発明は、結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロンまたはそれ以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、ここで：
ａ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中のアルミニウムの量は５ｐｐｍ以下であり；
ｂ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中のカルシウムの量は６０ｐｐｍ以下であり；
ｃ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中の銅の量は１ｐｐｍ以下であり；または
ｄ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中の亜鉛の量は７ｐｐｍ以下である混合物を提供する。
【００１８】
本発明はまた、本明細書に開示した混合物および医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１９】
本発明はまた、以下の構造を持つ化合物：
【化２】
2016514162.tif 000003
【００２０】
またはその塩を提供する。
【００２１】
本発明はまた、以下の構造を持つ化合物：
【化３】
2016514162.tif 000004
【００２２】
またはその塩を含む組成物を提供し、ここで、前記組成物はラキニモドまたはその塩を含まない。
【００２３】
本発明はまた、ある量のラキニモド、並びに、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つを含む医薬組成物であって、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大でも１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在する医薬組成物を提供する。
【００２４】
本発明はまた、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）を調製するための方法であって：ａ）５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミドの水中懸濁液に水酸化ナトリウム溶液を添加する工程と、ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌し、続いて塩酸溶液を添加する工程と、ｃ）前記水溶液を酢酸エチルで抽出する工程と、ｄ）この有機相を塩水で洗浄する工程と、ｅ）前記有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥する工程と、ｆ）懸濁液を濾過する工程と、ｇ）濾液を蒸発させる工程と、ｈ）残差をイソプロピルアルコールからの結晶化により精製する工程と、ｉ）懸濁液を冷却した後、濾過およびイソプロピルアルコールでの洗浄を行う工程と、ｊ）得られた白色固体を入手および乾燥することを含む方法も提供する。
【００２５】
本発明は、上記の方法で調製された２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）も提供する。
【００２６】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を調製する方法であって：ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）およびジメチルスルホキシドの混合物を加熱し、ｂ）工程ａ）の混合物を冷却し、およびｃ）工程ｂ）の混合物を濾過し、得られた濾液を回収することを含む方法も提供する。
【００２７】
本発明は、上記の方法で調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）も提供する。
【００２８】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を調製する方法であって：ａ）酢酸中の塩酸溶液中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の混合物を加熱する工程と、ｂ）工程ａ）の混合物を冷却する工程と、ｃ）工程ｂ）の混合物を２−プロパノールで希釈し、前記希釈混合物を更に冷却する工程と、ｄ）工程ｃ）で得られた結晶を濾過する工程を含む方法も提供する。
【００２９】
本発明はまた、上記の方法で調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）も提供する。
【００３０】
本発明は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を調製する方法であって：ａ）ジメチルホルムアミド中のジメチルマロン酸と、ナトリウムメトキシド溶液との反応により、ジメチルマロン酸ナトリウムを生成する工程と、ｂ）反応中間体５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンとジメチルマロン酸ナトリウムが反応し、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を生成する工程と、ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）へと酸化する工程を含む方法も提供する。
【００３１】
本発明はまた、上記の方法で調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）も提供する。
【００３２】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を調製する方法であって：ａ）５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンおよびジエチルマロン酸のジメチルホルムアミド溶液に水素化ナトリウムを添加する工程と、ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌しながら加熱する工程と、ｃ）工程ｂ）の溶液を冷却する工程と、ｄ）工程ｃ）の反応混合物をクエンチする工程と、ｅ）工程ｄ）の混合物を酸化する工程と、ｆ）工程ｅ）の混合物を濾過した後乾燥する工程と、ｇ）工程ｆ）の粗製品をエタノールに溶かし、続いてゆっくりと冷却することにより結晶化させる工程を含む方法も提供する。
【００３３】
本発明はまた、上記の方法で調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）も提供する。
【００３４】
本発明はまた、ラキニモドのサンプルが必要のない不純物を含んでいるかどうか検査する方法も提供し、該方法はサンプルが以下の構造を持つ化合物を含んでいるかどうかを決定することを含む：
【化４】
2016514162.tif 000005
【００３５】
本発明はまた、ラキニモドを含む有効な医薬組成物を調製する方法であって：ａ）ラキニモドのバッチを得ること；ｂ）ＨＰＬＣ法によって、用いるバッチにおける５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量を決定すること；およびｃ）次の場合；即ち、
ｉ）前記バッチがラキニモド濃度に対して最大で０．１５％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を有すると決定したとき、または
ｉｉ）前記バッチがラキニモド濃度に対して最大で０．１５％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を有すると決定したとき、または
ｉｉｉ）前記バッチがラキニモド濃度に対して最大で０．１５％、０．１２％、または０．１％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定した場合、または
ｉｖ）前記バッチがラキニモド濃度に対して最大で０．１％のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）を有すると決定したとき、または
ｖ）前記バッチがラキニモド濃度に対して最大で０．１％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を有すると決定したとき
に限り、前記バッチから医薬組成物を調製することを含む方法も提供する。
【００３６】
本発明はまた、ラキニモドを含む医薬組成物を調製するための、または、ラキニモドを含む医薬組成物のバリデートされたバッチを流通させるための方法であって、ａ）ラキニモドまたは前記医薬組成物のバッチを得る工程と、ｂ）バッチのサンプルの安定性検査を行う工程と、ｃ）安定性試験の後、バッチサンプル内の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量をＨＰＬＣ法により決定する工程と、およびｄ）安全性試験の後のバッチサンプルが、
ｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．１５％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、または
ｉｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．１５％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、または
ｉｉｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．１５％、０．１２％、または０．１％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、または
ｉｖ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．１％のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、または
ｖ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．１％の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）
を含む場合に限り、そのバッチを流通させるためにバリデートし、または、そのバッチから医薬組成物を調製する工程を含む方法も提供する。
【００３７】
本発明はまた、ラキニモドを含む医薬製品または、その医薬的に許容され得る塩および医薬的に許容され得る担体の流通のためのバッチをバリデートする方法であってａ）バッチサンプルの安定性試験を行う工程と、ｂ）安定性試験の後、バッチサンプル内の２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量をＨＰＬＣ法により決定する工程と、ｃ）安全性試験の後のバッチサンプルが、
ｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の１．０％の２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）または
ｉｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．５％または０．１％のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、または
ｉｉｉ）ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．５％の混合された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）
を含む場合に限り、そのバッチを流通させるためにバリデートする工程を含む方法も提供する。
【００３８】
本発明はまた、ラキニモドまたはその医薬的に許容され得る塩を含む包装された医薬組成物を調製する方法であって、ａ）ラキニモドを含む医薬組成物またはその医薬的に許容され得る塩のバッチを得る工程と、ｂ）前記バッチのサンプルの安定性試験を行う工程と、ｃ）安定性試験の後、サンプル内の２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量をＨＰＬＣ法により決定する工程と、ｄ）次の場合；即ち、
ｉ）サンプルにおける２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）の含有量がラキニモド濃度に対して最大で１．０％と決定したとき、または
ｉｉ）サンプルにおけるＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の含有量が、ラキニモド濃度に対して最大で０．５％または０．１％と決定したとき、または
ｉｉｉ）サンプルにおける５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の混合含有量が、ラキニモド濃度に対して最大で総量の０．５％と決定したとき
に限り、医薬組成物を包装する工程を含む方法も提供する。
【００３９】
本発明はまた、ラキニモドを含む医薬組成物またはその医薬的に許容され得る塩中の微量の不純物を検出するための参照基準として用いる不純物または、その塩であって、ここで、不純物は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）からなる群から選ばれる不純物またはその塩も提供する。
【００４０】
本発明はまた、ラキニモドを含む医薬組成物における不純物の濃度を決定するための方法であって、ａ）医薬組成物からサンプル溶液を調製することと、ｂ）前記不純物を含む標準溶液を調製することと、ｃ）ラキニモドおよび不純物を含む解像溶液を調製することと、ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、アンモニア水溶液と氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより緩衝溶液を調製することと、ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含む希釈溶液を調製することと、ｆ）前記希釈溶液および水性アセトニトリルを含むブランク溶液を調製することと、ｇ）前記ＨＰＬＣに前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと、ｈ）２４０ｎｍにおける紫外吸収および、移動相としての前記希釈溶液を用いてＨＰＬＣを運転することと、ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、保持時間（ＲＴ）および、不純物のピーク面積を決定することと、ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含む方法も提供する。
【００４１】
ここで、不純物は５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）、または５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）である。
【００４２】
本発明はまた、ラキニモドを含む医薬組成物における不純物の濃度を決定する方法であって、ａ）医薬組成物からサンプル溶液を調製することと、ｂ）前記不純物を含む標準溶液を調製することと、ｃ）ラキニモドおよび不純物を含む解像溶液を調製することと、ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、アンモニア水溶液と氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより緩衝溶液を調製することと、ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含むブランク溶液を調製することと、ｆ）前記ＨＰＬＣに前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと、ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収および、前記緩衝溶液およびアセトニトリルの混合物の移動相を用いてＨＰＬＣを運転することと、ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、保持時間（ＲＴ）および、不純物のピーク面積を決定することと、ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含む方法も提供する。
【００４３】
ここで、不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン−３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］（スピロ−ＬＡＱ）、または５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）である。
【００４４】
本発明はまた、ラキニモドをおよび医薬的に許容され得る担体含む医薬組成物における不純物の濃度を決定する方法であって、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと、ｂ）前記不純物を含む標準溶液を調製することと、ｃ）前記不純物を含む定量限界（ＱＬ）溶液を調製することと、ｄ）ラキニモドと前期不純物を含む解像溶液を調製することと、ｅ）リン酸アンモニウムを水中に溶解し、水性アンモニアまたはリン酸を用いてｐＨを７．０±０．１０に調節することにより緩衝溶液を調製することと、ｆ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含むブランク溶液を調製することと、ｇ）前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記ＱＬ溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液をＨＰＬＣに注入することと、ｈ）２１２ｎｍにおける紫外吸収と、前記緩衝溶液、アセトニトリルおよびメタノールの混合物の移動相を用いてＨＰＬＣを運転することと、ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて保持時間（ＲＴ）および、前記不純物のピーク面積を決定することと、ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うすることを含む方法も提供する。
【００４５】
ここで、不純物は２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）またはＮ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシルアミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＭＥＧ−ＬＡＱ）である。
【００４６】
本発明はまた、ラキニモドおよび医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物における不純物の濃度を決定する方法であって、ａ）医薬組成物からサンプル溶液を調製することと、ｂ）前記不純物を含む標準溶液を調製することと、ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含む解像溶液を調製することと、ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、アンモニア水溶液と氷酢酸を用いてＰＨを７．０±０．０５に調節することにより緩衝溶液を調製することと、ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含むブランク溶液を調製することと、ｆ）前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液をＨＰＬＣに注入することと、ｇ）２４２ｎｍにおける紫外吸収および、移動相としての前記ブランク溶液を用いてＨＰＬＣを運転することと、ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）および、ピーク面積を決定することと、ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うすることを含む方法も提供する。
【００４７】
ここで、不純物は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、またはＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）である。
【００４８】
本発明はまた、ラキニモドおよび医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物における不純物の濃度を決定する方法であって、ａ）医薬組成物からサンプル溶液を調製することと、ｂ）不純物を含む標準溶液を調製することと、ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含む解像溶液を調製することと、ｄ）メタノールおよびアセトニトリルを含むブランク溶液を調製することと、ｅ）酢酸アンモニウムを溶解し、アンモニア水溶液と氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより緩衝溶液を調製することと、ｆ）前記解像溶液、前記ブランク溶液、および前記サンプル溶液をＨＰＬＣに注入することと、ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収並びに、アセトニトリルおよび緩衝溶液を含む移動相を用いてＨＰＬＣを実行することと、ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）および、ピーク面積を決定することと、ｉ）標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うこととを含む方法も提供する。
【００４９】
ここで、不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）、または１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン−３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］（スピロ−ＬＡＱ）である。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】米国特許第７，８８４，２０８号のＦｉｇ．１
【図２】米国特許第７，８８４，２０８号のＦｉｇ．２
【図３】ＨＰＬＣデータ−ラキニモドナトリウムの混合物のクロマトグラムの例
【図４】ＨＰＬＣデータ−純粋なラキニモドナトリウムのクロマトグラム
【図５】一番目の倍率における粗製ラキニモドナトリウムの典型的なバッチの顕微鏡画像
【図６】二番目の倍率における粗製ラキニモドナトリウムの典型的なバッチの顕微鏡画像
【図７】一番目の倍率におけるバッチＣの顕微鏡画像
【図８】二番目の倍率におけるバッチＣの顕微鏡画像
【図９】ＤＭＳＯにおけるＭＣＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図１０】ＤＭＳＯにおけるＭＣＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図１１】ＭＣＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図１２】ＫＢｒにおけるＭＣＱのフーリエ変換遠赤外分析
【図１３】Ｄ２Ｏ＋ＫＯＨにおけるＭＣＱＣＡの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図１４】Ｄ２Ｏ＋ＫＯＨにおけるＭＣＱＣＡの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図１５】ＭＣＱＣＡ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図１６】ＭＣＱＣＡのフーリエ変換遠赤外分析
【図１７】ＣＤＣｌ３.におけるＭＣＱＥＥの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図１８】ＣＤＣｌ３.におけるＭＣＱＥＥの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図１９】ＭＣＱＥＥ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図２０】ＭＣＱＥＥのフーリエ変換遠赤外分析
【図２１】ＤＭＳＯにおける５−ＨＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図２２】ＤＭＳＯにおける５−ＨＬＡＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図２３】５−ＨＬＡＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図２４】５−ＨＬＡＱのフーリエ変換遠赤外分析
【図２５】ＣＤＣｌ３.におけるＤＥＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図２６】ＣＤＣｌ３.におけるＤＥＬＡＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図２７】ＤＥＬＡＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図２８】ＫＢｒにおけるＤＥＬＡＱのフーリエ変換遠赤外分析
【図２９】ＣＤＣｌ３.における３−ＨＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図３０】ＣＤＣｌ３.における３−ＨＬＡＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図３１】３−ＨＬＡＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図３２】３−ＨＬＡＱのフーリエ変換遠赤外分析
【図３３】ＤＭＳＯにおけるスピロ−ＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図３４】ＤＭＳＯにおけるスピロ−ＬＡＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図３５】スピロ−ＬＡＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図３６】スピロ−ＬＡＱのフーリエ変換遠赤外分析
【図３７】ＤＭＳＯにおけるＢＨ−３−ＨＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲ分析
【図３８】ＤＭＳＯにおけるＢＨ−３−ＨＬＡＱの１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【図３９】ＢＨ−３−ＨＬＡＱ（ＥＳ＋モード）の質量分析
【図４０】ＢＨ−３−ＨＬＡＱのＦＴ−ＩＲ分析
【図４１】分解度試験クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによる保持時間に従った同定並びに分析物および極性不純物／分解産物（極性ＩＤＤ）の定量
【図４２】希釈クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによる保持時間に従った同定並びに分析物および極性不純物／分解産物（極性ＩＤＤ）の定量
【図４３】分析物に対する典型的クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによる保持時間に従った同定並びに分析物および極性不純物／分解産物（極性ＩＤＤ）の定量
【図４４】不純物試験に対する典型的クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによる保持時間に従った同定並びに分析物および極性不純物／分解産物（極性ＩＤＤ）の定量
【図４５】分解度試験クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによるＮ−エチルアニリンおよび非極性不純物（非極性ＩＤＤ）の定量
【図４６】希釈クロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによるＮ−エチルアニリンおよび非極性不純物（非極性ＩＤＤ）の定量
【図４７】典型的サンプルクロマトグラム（未粉砕（結晶）および、製剤原料のラキニモドナトリウム）−ＨＰＬＣによるＮ−エチルアニリンおよび非極性不純物（非極性ＩＤＤ）の定量
【図４８】解像溶液１（分離度試験）クロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによる分析物および極性不純物／分解産物の同定および定量
【図４９】解像溶液２クロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによる分析物および極性不純物／分解産物の同定および定量
【図５０】希釈溶液（ブランク）クロマトグラム（ラキニモドカプセル）ＨＰＬＣによる分析物および極性不純物／分解産物の同定および定量
【図５１】分析物に対するサンプルクロマトグラム（ラキニモドカプセル）ＨＰＬＣによる分析物および極性不純物／分解産物の同定および定量
【図５２】不純物／分解産物の定量のためのサンプル溶液クロマトグラム−（ラキニモドカプセル）ＨＰＬＣによる分析物および極性不純物／分解産物の同定および定量
【図５３】分離度試験クロマトグラム（ラキニモドカプセル）非極性不純物／分解産物の定量
【図５４】ブランク（希釈）クロマトグラム（ラキニモドカプセル）非極性不純物／分解産物の定量
【図５５】サンプルクロマトグラム（ラキニモドカプセル）非極性不純物／分解産物の定量
【図５６】解像溶液の典型的クロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの定量
【図５７】ブランク（希釈２）クロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの定量
【図５８】ＱＬ溶液のクロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの定量
【図５９】標準溶液のクロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの定量
【図６０】典型的なサンプルクロマトグラム（ラキニモドカプセル）−ＨＰＬＣによるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの定量
【発明の詳細な説明】
【００５１】
ラキニモドは以下の化学構造を持つ小分子である：
【化５】
2016514162.tif 000006
【００５２】
それは、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症（ＭＳ）の動物モデル、炎症性腸疾患におけるデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘導性大腸炎、Ｉ型糖尿病（ＩＤＤＭ）における非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウス、ギラン−バレー症候群における実験的自己免疫性神経炎（ＥＡＮ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ループス腎炎、ループス関節炎、クローン病、およびリウマチ関節炎のような、多様な実験的炎症性／自己免疫性動物モデルにおいて、治療効果を示す経口の免疫促進剤である。それらのモデルにおけるラキニモドの治療活性は、ケモカイン仲介のＴ細胞接着の調節による標的組織への白血球の導入の減少、サイトカインバランスの調節、抗原提示の変更をもたらすＭＨＣクラスＩＩの負の調節、および樹状細胞の亜種への影響を含む、様々な機構的効果に起因する（公開番号ＷＯ２０１３／１６９７４６のＰＣＴ国際出願）。
【００５３】
ラキニモドの医薬的に許容され得る塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、マンガン、銅、亜鉛、アルミニウム、および鉄を含む。ラキニモドの塩の形態およびそれを調製する方法は、例えば、参照によって本出願に含まれる公開番号２００５／０１９２３１５の米国特許および公開番号ＷＯ２００５／０７４８９９のＰＣＴ国際出願に記載されている。
【００５４】
本発明は結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、ここで：
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ）前記混合物中に存在する重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して重金属が２０ｐｐｍ以下であり；
ｄ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ）前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；または、
ｉ）前記混合物中に存在するＮ−エチル−４,５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物を提供する。
【００５５】
前記混合物の一実施形態において、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有する。
【００５６】
前記混合物の一実施形態において、前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５ミクロン以下のサイズを有し、ここで
ａ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；または、
ｂ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下である。
【００５７】
本発明は結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、および（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量で１０％以上が、５ミクロン以下のサイズを有し、ここで：
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有し；
ｃ）前記混合物中に存在する重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して重金属が２０ｐｐｍ以下であり；
ｄ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｅ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｆ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｇ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｈ）前記混合物中に存在するＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；または、
ｉ）前記混合物中に存在するＮ−エチル−４,５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である混合物を提供する。
【００５８】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物は、２．５ｋｇまたはそれ以上のラキニモドナトリウムを含む単一バッチで調製される。前記混合物の一実施形態において、ラキニモドナトリウム粒子は前記混合物の未粉砕のサンプルに基づいて決定される。前記混合物の一実施形態において、ラキニモドナトリウム粒子のサイズおよび体積量は、前記混合物の粉砕されたサンプルに基づいて決定される。
【００５９】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物は０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有する。前記混合物の一実施形態において、前記混合物は０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有する。
【００６０】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２５ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して０．６ｐｐｍである。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍである。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して４ｐｐｍ未満である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の重金属の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下である。
【００６１】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である。
【００６２】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下である。他の実施形態において、混合物中のＭＣＱＭＥの量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のＮ−エチル−４,５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１,２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＤＥＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。
【００６３】
前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のマロン酸ジメチルの量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定によって測定されたラキニモドナトリウムの量に対して重さで１．５％以下である。前記混合物の一実施形態において、ナトリウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％である。
【００６４】
前記混合物の一実施形態において、混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下である。前記混合物の他の実施形態において、混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下である。前記混合物の他の実施形態において、混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下である。前記混合物の一実施形態において、混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００６５】
前記混合物の一実施形態において、列挙された化合物は、該混合物内に存在する。他の実施形態において、列挙された化合物は少なくとも微量存在する。
【００６６】
本発明は、本発明の混合物および医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物を提供する。
【００６７】
前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して２．００％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−５−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である。
【００６８】
前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のＮ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（メチル（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシル）アミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＭＥＧ−ＬＡＱ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下である。
【００６９】
前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定によって測定されたラキニモドナトリウムの量に対して１．５０％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定によって測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８０％以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、ナトリウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％である。
【００７０】
前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の他の実施形態において、医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の他の実施形態において、医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の他の実施形態において、医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下である。前記医薬組成物の一実施形態において、医薬組成物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００７１】
前記医薬組成物の一実施形態において、列挙された化合物は、医薬組成物中に存在する。他の実施形態において、列挙された化合物は少なくとも微量存在する。
【００７２】
本発明は、多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ関節炎、ＢＤＮＦ−関連疾患、クローン病、ＧＡＢＡ関連疾患、１型カナビノイド受容体（ＣＢ１）介在疾患、または眼炎症疾患の一種を患う被験者の治療方法であって、本発明の混合物または本発明の医薬組成物を、それらによって被験者を治療するために被験者に投与することを含む方法も提供する。
【００７３】
本発明は、多発性硬化症の一種を患う被験者における多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ関節炎、ＢＤＮＦ−関連疾患、クローン病、ＧＡＢＡ関連疾患、１型カナビノイド受容体（ＣＢ１）介在疾患、または眼炎症疾患の症状を和らげるための方法であって、本発明のいずれかの混合物または本発明の医薬組成物を、それらによって被験者における多発性硬化症の症状を緩和するために被験者に投与することを含む方法も提供する。
【００７４】
一つの実施形態において、前記混合物または前記医薬組成物は、一つの形態の多発性硬化症、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ関節炎、ＢＤＮＦ−関連疾患、クローン病、ＧＡＢＡ関連疾患、１型カナビノイド受容体（ＣＢ１）介在疾患、または眼炎症疾患の治療または症状の緩和において用いるためのものである。
【００７５】
本発明は、多発性硬化症、ＧＡＢＡ関連疾患、１型カナビノイド受容体（ＣＢ１）介在疾患、ループス腎炎、ループス関節炎、リウマチ関節炎、ＢＤＮＦ−関連疾患、クローン病、または眼炎症疾患の一種の治療または症状の緩和のための薬剤を製造のための、前記混合物または前記医薬組成物の使用を提供する。
【００７６】
本発明はラキニモドナトリウムの再結晶方法であって：ａ）ある量のラキニモドナトリウムを水に溶解して水溶液を調製する工程と；ｂ）前記水溶液を濃縮してラキニモドナトリウム１グラム当たり約１．７〜１．８ｍＬの水を含む含む濃縮溶液を調製する工程と；ｃ）工程ｂ）の濃縮溶液にアセトンを添加する工程と；ｄ）再結晶化されたラキニモドナトリウムを単離する工程を含む方法を提供する。
【００７７】
前記方法の一実施形態において、工程ａ）のラキニモドナトリウムの量は、２．５ｋｇ以上である。前記方法の一実施形態において、工程ａ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり１０〜１２ｍＬの水を用いて実行される。前記方法の一実施形態において、工程ａ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり約１１ｍＬの水を用いて実行される。前記方法の一実施形態において、工程ａ）は、水溶液を５８〜７５℃の温度に加熱されて実行される。前記方法の一実施形態において、工程ａ）は、水溶液を６０〜７３℃の温度に加熱されて実行される。
【００７８】
前記方法の一実施形態において、前記結晶化は、工程ａ）の後で、且つ工程ｃ）の前に起こる。
【００７９】
前記方法の一実施形態において、前記結晶化は、工程ｂ）の濃縮の間または後の急速な撹拌によって誘導される。前記方法の一実施形態において、結晶化は工程ｂ）の濃縮の間または後に種晶を添加することにより誘導される。前記方法の一実施形態において、結晶化は種晶の添加がなくても起こる。
【００８０】
前記方法の一実施形態において、工程ｂ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり水が約１．７〜１．８ｍＬである濃度で結晶化が誘導されるための適切な条件下において行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｂ）は、２８〜４５℃で行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｂ）は、３０〜４０℃で行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、４０〜５０℃の濃縮溶液において行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、４５〜５０℃の濃縮溶液において行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり６〜１２ｍＬのアセトンを用いて行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、ラキニモドナトリウム１グラム当たり約１０ｍＬのアセトンを用いて行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、１〜４時間にわたって行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）は、１．２〜２．５時間にわたって行われる。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）に続いて、前記溶液は−１４℃以上６℃未満の温度まで冷却される。前記方法の一実施形態において、工程ｃ）に続いて、前記溶液は−４℃以上４℃未満の温度まで冷却される。
【００８１】
前記方法の一実施形態において、前記溶液は、３〜５時間にわたって冷却される。前記方法の一実施形態において、前記溶液は、３．５〜４．５時間にわたって冷却される。
【００８２】
前記方法の一実施形態において、工程ｄ）は更に、再結晶化されたラキニモドナトリウムを工程ａ）で用いた粗製ラキニモドナトリウム１グラム当たり１〜４ｍＬのアセトンで洗浄される工程を含む。前記方法の一実施形態において、工程ｄ）は更に、再結晶化されたラキニモドナトリウムを工程ａ）で用いた粗製ラキニモドナトリウム１グラム当たり約３ｍＬのアセトンで洗浄される工程を含む。前記方法の一実施形態において、工程ｄ）は更に、再結晶化されたラキニモドナトリウムを５０ｍｍＨｇ以下の真空条件下において３０〜４０℃で１時間以上乾燥することも含む。
【００８３】
前記方法の一実施形態において、工程ｄ）における単離された再結晶化ラキニモドナトリウムは結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が、５ミクロン以下サイズを有するような粒子サイズ分布を有する混合物である。
【００８４】
本発明は、本発明の方法によって調製された結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物も提供する。
【００８５】
本発明の方法によって調製された結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物の、一実施形態において、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロン以下のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量ので５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、および（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が、５ミクロン以下のサイズを有する。
【００８６】
前記混合物の一実施形態において、
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度有し；
ｃ）前記混合物中のアルミニウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満であり；
ｄ）前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満であり；
ｅ）前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満であり；
ｆ）前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満であり；
ｇ）前記混合物中の重金属の量は、前記ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ｈ）前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｉ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｊ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｋ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｌ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり
ｍ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｎ）前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｏ）前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣで測定したラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｐ）前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｑ）前記混合物中のマロン酸ジメチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｒ）前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｓ）前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ以下であり；
ｔ）前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの重量に対して１．５％以下であり；
ｕ）前記混合物はラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％の量のナトリウムを含み；
ｖ）前記混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｗ）前記混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｘ）前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｙ）前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｚ）前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ａａ）前記混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下であり；
ｂｂ）前記混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｃｃ）前記混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｄｄ）前記混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００８７】
前記混合物の一実施形態において、
ａ）前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬのバルク密度を有し；
ｂ）前記混合物は、０．４０ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度有し；
ｃ）前記混合物中のアルミニウムの量は、前記ラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満であり；
ｄ）前記混合物中のカルシウムの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して６０ｐｐｍ未満であり；
ｅ）前記混合物中の銅の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ未満であり；
ｆ）前記混合物中の亜鉛の量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して７ｐｐｍ未満であり；
ｇ）前記混合物中の重金属の量は、前記ラキニモドナトリウムの重量に対して０．００２％以下であり；
ｈ）前記混合物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｉ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）の量は、ＨＰＬＣで測定したラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｊ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１５％以下であり；
ｋ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１２％以下であり；
ｌ）前記混合物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり
ｍ）前記混合物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｎ）前記混合物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｏ）前記混合物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｐ）前記混合物中のラキニモド酸の量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｑ）前記混合物中のマロン酸ジメチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｒ）前記混合物中のマロン酸ジエチルの量は、ＨＰＬＣにより測定されたものとして、ラキニモドナトリウムの量に対して０．１０％以下であり；
ｓ）前記混合物中の硫酸ジメチルの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して１ｐｐｍ以下であり；
ｔ）前記混合物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定により測定されたラキニモドナトリウムの重量に対して１．５％以下であり；
ｕ）前記混合物はラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％の量のナトリウムを含み；
ｖ）前記混合物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｗ）前記混合物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｘ）前記混合物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｙ）前記混合物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３０００ｐｐｍ以下であり；
ｚ）前記混合物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ａａ）前記混合物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；および
ｂｂ）前記混合物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００８８】
一つの実施形態において、前記混合物中のｎ−オクタンの量は２００ｐｐｍ以下であり、他の実施形態において前記混合物中のｎ−オクタンの量は２０ｐｐｍ以下である。
【００８９】
前記混合物の一実施形態において、列挙された化合物は、混合物内に存在する。他の実施形態において、列挙された化合物は少なくとも微量存在する。
【００９０】
本発明は、本発明の方法によって調製された結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物および、医薬的に許容され得る単体を含む医薬組成物を提供する。
【００９１】
前記医薬組成物の一実施形態において
ａ）前記医薬組成物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｂ）前記医薬組成物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して２．００％以下であり；
ｃ）前記医薬組成物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｄ）前記医薬組成物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｅ）前記医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定によって測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８０％以下であり；
ｆ）前記医薬組成物はラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％の量のナトリウムを含み；
ｇ）前記医薬組成物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｈ）前記医薬組成物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｉ）前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｊ）前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下であり；
ｋ）前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下であり；
ｌ）前記医薬組成物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｍ）前記医薬組成物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であり；
ｎ）前記医薬組成物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｏ）前記医薬組成物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００９２】
前記医薬組成物の一実施形態において
ａ）前記医薬組成物中の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｂ）前記医薬組成物中の極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して２．００％以下であり；
ｃ）前記医薬組成物中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して０．５０％以下であり；
ｄ）前記医薬組成物中の非極性不純物の総量は、ＨＰＬＣによって測定されたものとしてラキニモドナトリウムの量に対して１．００％以下であり；
ｅ）前記医薬組成物中の水の量は、Ｋ．Ｆ．電量滴定によって測定されたラキニモドナトリウムの量に対して０．８０％以下であり；
ｆ）前記医薬組成物はラキニモドナトリウムの重量に対して５．８％から６．４％の量のナトリウムを含み；
ｇ）前記医薬組成物中のエタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｈ）前記医薬組成物中のｎ−ヘプタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して５０００ｐｐｍ以下であり；
ｉ）前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０００ｐｐｍ以下であり；
ｊ）前記医薬組成物中のメタノールの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；
ｋ）前記医薬組成物中のアセトンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下であり；
ｌ）前記医薬組成物中のジオキサンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して３８０ｐｐｍ以下であり；または
ｍ）前記医薬組成物中のジメチルホルムアミドの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して８８０ｐｐｍ以下である。
【００９３】
一つの実施形態において、前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２００ｐｐｍ以下である。他の実施形態において前記医薬組成物中のｎ−オクタンの量は、ラキニモドナトリウムの重量に対して２０ｐｐｍ以下である。
【００９４】
本発明は結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物であって（ｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、４０ミクロンまたはそれ以下のサイズを有するか、または（ｉｉ）前記ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が、１５ミクロン以下のサイズを有し、ここでａ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中のアルミニウムの量は５ｐｐｍ以下であり；ｂ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中のカルシウムの量は６０ｐｐｍ以下であり；ｃ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中の銅の量は１ｐｐｍ以下であり；またはｄ）ラキニモドナトリウムの重量に対して前記混合物中の亜鉛の量は７ｐｐｍ以下である混合物も提供する。
【００９５】
前記医薬組成物の一実施形態において、列挙された化合物は、医薬組成物内に存在する。他の実施形態において、列挙された化合物は少なくとも微量存在する。
【００９６】
本発明は、本発明の混合物および医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物を提供する。
【００９７】
前記混合物の一実施形態において、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が、１ミクロン以上、２ミクロン以上、３ミクロン以上、または４ミクロン以上のサイズを有する。前記混合物の一実施形態において、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％が、１ミクロン以上、２ミクロン以上、３ミクロン以上、４ミクロン、または５ミクロン以上のサイズを有する。
【００９８】
前記混合物の更なる実施形態において、前記混合物は、０．４ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬ、０.４４ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬ、０．４５ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬ、０．４６ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬまたは０．５ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度を有する。前記混合物の更なる実施形態において、前記混合物は、０．２ｇ／ｍＬ〜０．４ｇ／ｍＬ、０．２ｇ／ｍＬ〜０．３３ｇ／ｍＬ、０．２ｇ／ｍＬ〜０．３１ｇ／ｍＬのバルク密度をる有する。
【００９９】
前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物は、マンニトールを含む。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物は、メグルミンを含む。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物は、フマル酸ステアリルナトリウムを含む。
【０１００】
前記医薬組成物の更なる実施形態において、表示量の少なくとも７０％のラキニモドのが３０分で溶解する。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物のカプセル錠は表示量の９０〜１１０％のラキニモドを含む。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物のカプセル錠は表示量の９５〜１０５％のラキニモドを含む。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物のカプセル錠は表示量の９８．０〜１０２．０％のラキニモドを含む。
【０１０１】
前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物は米国薬局方に従った含量均一性を有する。前記医薬組成物の更なる実施形態において、前記医薬組成物は欧州薬局方に従った含量均一性を有する。
【０１０２】
本発明はまた、以下の構造式を有する単離化合物：
【化６】
2016514162.tif 000007
【０１０３】
またはその塩も提供する。
【０１０４】
本発明はまた、以下の構造式を有する化合物：
【化７】
2016514162.tif 000008
【０１０５】
またはその塩を含む組成物も提供し、ここで前記組成物はラキニモドおよびその塩を含まない。
【０１０６】
本発明はまた、ラキニモド、並びに、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つを含む医薬組成物であって、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大でも１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在し、または、ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して最大で１０％の量で、医薬組成物に存在する医薬組成物も提供する。
【０１０７】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１５％以下のり量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１０８】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１２％以下の量で医薬組成物中に存在する。他の実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１０９】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以下のり量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０６％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１０】
一つの実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１１】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０３％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以下のり量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１２】
一つの実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１３】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．１％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１４】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１２％以下の量で医薬組成物中に存在する。他の実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。更に他の実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０３％以上の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１５】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以上、０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以上、０．１０％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以上、０．１５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０６％以上、０．１０％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以上、０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１６】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１２％以下の量で医薬組成物中に存在する。他の実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．１％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１７】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上または０．０３％以上、および０．１％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．０６％以下の量で医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０２％以上、０．０５％以下の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１８】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づいて、ラキニモド濃度に対して０．０５％以上の量で医薬組成物中に存在する。
【０１１９】
本明細書に開示された前記医薬組成物の一実施形態において、前記組成物は更に、少なくとも一つの医薬的に許容され得る担体を含む。
【０１２０】
ここに記載する一実施形態において、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せは、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２１】
一実施形態において、 Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２２】
ここに記載する一実施形態において, ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、または  ｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｄ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｅ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せは、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２３】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２４】
ここに記載する一実施形態において, ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル  （ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、または ｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｇ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組み合わせた量は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％未満である。
【０１２５】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％未満の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２６】
ここに記載する一実施形態において、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せの量は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．５％以下である。
【０１２７】
一実施形態において、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１２８】
ここに記載する一実施形態において、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０５％超かつ１．０％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｂ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％超かつ０．５％以下の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）前記医薬組成物中に存在する５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組み合わされた量は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％超かつ０．５％以下である。
【０１２９】
ここに記載する一実施形態において、ａ）２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸  （ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｂ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、  またはｄ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｅ）Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｆ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０２％超かつ０．０５％未満の量で前記医薬組成物中に存在し、またはｇ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組み合わせた量は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超かつ０．１％未満である。
【０１３０】
一実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．０３％超の量で前記医薬組成物中に存在する。もう一つの実施形態において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）は、ＨＰＬＣ法による定量に基づき、ラキニモドの濃度に対して０．１％未満の量で前記医薬組成物中に存在する。
【０１３１】
一実施形態において、ここに記載する医薬組成物は、更に、ラキニモドナトリウム塩を含有する。 もう一つの実施形態において、前記 医薬組成物 は経口単位投与量形態である。もう一つの実施形態において、それはカプセル、錠剤、または懸濁液の形態である。もう一つの実施形態において、前記経口単位投与量形態は、０．３ｍｇ超のラキニモドを含有する。もう一つの実施形態において、前記経口単位投与量形態は、０．５ｍｇ超のラキニモドを含有する。更にもう一つの実施形態において、前記経口単位投与量形態は、０．６ｍｇ超のラキニモドを含有する。
【０１３２】
本発明はまた、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）を調製するための方法であって：ａ）５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミドの水中懸濁液に水酸化ナトリウム溶液を添加する工程と；ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌し、続いて塩酸溶液を添加する工程と；ｃ）前記水溶液を酢酸エチルで抽出する工程と；ｄ）この有機相を塩水で洗浄する工程と；ｅ）該有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥する工程と；ｆ）懸濁液を濾過する工程と；ｇ）濾液を蒸発させる工程と；ｈ）残渣をイソプロピルアルコールからの結晶化により精製する工程と；ｉ）懸濁液を冷却した後、濾過およびイソプロピルアルコールでの洗浄を行う工程と；ｊ）得られた白色個体を入手および乾燥する工程を含んでなる方法を提供する。
【０１３３】
本発明はまた、 上記で述べた方法により調製された２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸  （ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）を提供する。
【０１３４】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を調製するための方法であって：ａ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）およびジメチルスルホキシドの混合物を加熱する工程と；ｂ）工程ａ）の混合物を冷却する工程と；ｃ）工程ｂ）の混合物を濾過し、得られた濾液を回収する工程を含んでなる方法を提供する。
【０１３５】
本発明はまた、上記で述べた方法により調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を提供する。
【０１３６】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を調製する方法であって、ａ）酢酸中の塩酸溶液中において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を加熱する工程と；ｂ）工程ａ）の混合物を冷却する工程と；ｃ）工程ｂ）の混合物を２−プロパノールで希釈し、更に該希釈混合物を冷却する工程と；ｄ）工程ｃ）から生じる結晶を濾別する工程を含んでなる方法を提供する。
【０１３７】
本発明はまた、上記で述べた方法により調製された、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を提供する。
【０１３８】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を調製するための方法であって、ａ）ジメチルホルムアミド中のマロン酸ジメチルのナトリウムメトキシド溶液との反応により、ジメチルマロン酸ナトリウムを形成する工程と、ｂ）中間体である５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンをジメチルマロン酸ナトリウムと反応させて、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を形成する工程と、ｃ）５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）ナトリウム塩を酸性化して、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）にする工程を含んでなる方法を提供する。
【０１３９】
本発明はまた、上記で述べた方法により調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を提供する。
【０１４０】
本発明はまた、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を調製する方法であって、ａ）水素化ナトリウムを、５−クロロ−１−メチル−１ｈ−ベンゾ［Ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンおよびマロン酸ジエチルのジメチルホルムアミド中の溶液に加える工程と、ｂ）工程ａ）の混合物を撹拌しながら加熱する工程と、ｃ）工程ｂ）の溶液を冷却する工程と、ｄ）乞うていｃ）の反応混合物を急冷する工程と、ｅ）工程ｄ）の混合物を酸性化する工程と、ｆ）工程ｅ）の混合物を濾過し、次いで乾燥する工程と、ｇ）工程ｆ）の粗生成物をエタノール中に溶解た後徐々に冷却することにより結晶化する工程を含んでなる方法を提供する。
【０１４１】
本発明はまた、上記で述べた方法により調製された５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を提供する。
【０１４２】
本発明はまた、ラキニモドのサンプルが望ましくない不純物を含有するかどうかを試験する方法であって、前記サンプルが下記構造を有する化合物を含有するかどうかを決定することを含んでなる方法を提供する：
【化８】
2016514162.tif 000009
【０１４３】
本発明はまた、ラキニモドを含有するバリデートされた医薬組成物を調製する方法であって：ａ）ラキニモドのバッチを得ることと；ｂ）ＨＰＬＣを用いて、前記バッチの中における５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量を定量することと；ｃ）次の場合；即ち、
ｉ）前記バッチが、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）を有すると決定されたとき、または
ｉｉ）前記バッチが、ラキニモドの濃度に対して０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を有すると決定されたとき、または
ｉｉｉ）前記バッチが、ラキニモドの濃度に対して０．１５％、０．１２％または０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されたとき、または
ｉｖ）前記バッチが、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）を有すると決定されたとき、または
ｖ）前記バッチが、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）を有すると決定されたとき
に限り、前記バッチから前記医薬組成物を調製することを含んでなる方法をて供する。
【０１４４】
一実施形態では、工程ｃ）において、前記バッチがラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されたときにのみ、前記医薬組成物が前記バッチから調製される。もう一つの実施形態では、工程ｃ）において、前記バッチがラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を有すると決定されたときにのみ、前記医薬組成物が前記バッチから調製される。
【０１４５】
本発明はまた、ラキニモドを含有する医薬組成物を調製する方法、またはラキニモドを含有する医薬組成物のバリデートされたバッチを流通させる方法であって：
ａ）ラキニモドのバッチまたは前記医薬組成物のバッチを得ることと；
ｂ）前記バッチのサンプルを用いて安全性試験を行うことと；
ｃ）安全性試験後の前記バッチのサンプル中において、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの総量を、ＨＰＬＣ法によって決定することと；
ｄ）安定性試験の後のバッチのサンプルが下記物質、即ち、
ｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）；または
ｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）；または
ｉｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１５％、０．１２％もしくは０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）；または
ｉｖ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）；または
ｖ）ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）
を含有するときにのみ、前記バッチの流通または前記バッチからの医薬組成物の調製について前記バッチをバリデートすることを含んでなる方法が提供される。
【０１４６】
一つの実施形態において、前記方法は、更に、工程ｄ）において前記バッチが流通についてバリデートされたならば、前記バッチを流通させる工程ｅ）を含んでいる。もう一つの実施形態では、工程ｄ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して０．１２％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を含有するときにのみ、前記バッチが流通についてバリデートされ、または前記医薬組成物が前記バッチから調製される。もう一つの実施形態では、工程ｄ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して０．１％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）を含有するときにのみ、前記バッチが流通についてバリデートされ、または前記医薬組成物が前記バッチから調製される。
【０１４７】
本発明はまた、ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬製品のバッチを、流通についてバリデートする方法であって：ａ）前記バッチのサンプルを、安定性試験に付することと；ｂ）前記安定性試験の後のバッチのサンプル中において、ＨＰＬＣ法により、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）のうち少なくとも一つの量を定量することと；ｃ）前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、
ｉ）ラキニモドの濃度に対して総計１．０％以下の、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）；または
ｉｉ）ラキニモドの濃度に対して総計０．５％以下または０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）；または
ｉｉｉ）ラキニモドの濃度に対して合計０．５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せ
を含有するときにのみ、前記バッチを流通についてバリデートすることを含んでなる方法。
【０１４８】
一実施形態において、工程ｃ）では、前記工程ｃ）において、前記安定性試験の後のバッチのサンプルが、ラキニモドの濃度に対して総計０．１％以下のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）を含有するときにのみ、前記バッチが流通についてバリデートされる。
【０１４９】
本発明はまた、ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する包装された医薬組成物を調製する方法であって：ａ）ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物のバッチを得ることと；ｂ）前記バッチのサンプルを用いて安定性試験を行うことと；ｃ）前記安定性試験の後に、前記サンプル中において、ＨＰＬＣ法により、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−  ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）  のうち少なくとも一つの量を定量することと；ｄ）下記の場合、即ち、
ｉ）前記サンプル中の２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）の含量が、ラキニモドの濃度に対して１．０％以下であると決定され；または
ｉｉ）前記サンプル中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の含量が、ラキニモドの濃度に対して０．５％以下または０．１％以下であり；または
ｉｉｉ）合計０．５％以下の５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン（ＭＣＱ）および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）の組合せ含量が、ラキニモドの濃度に対して総計で０．５％以下であると決定されたとき
にのみ、前記医薬組成物を包装することを含んでなる方法を提供する。
【０１５０】
一つの実施形態では、工程ｄ）において、前記医薬組成物は、前記サンプル中のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）の含量がラキニモドの濃度に対して０．１％以下であると決定されたときにのみ包装される。
【０１５１】
一つの実施形態では、前記ラキニモドはラキニモドナトリウム塩である。
【０１５２】
本発明はまた、ラキニモドまたはその医薬的に許容可能な塩を含有してなる医薬組成物中の痕跡量の不純物を検出するための参照標準として使用するための不純物またはその塩であって、前記不純物は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ），  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、および５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）からなる群から選択される不純物またはその塩を提供する。
【０１５３】
本発明はまた、ラキニモドを含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有する希釈溶液を調製することと；ｆ）前記希釈溶液および水性アセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；ｇ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；ｈ）２４０ｎｍにおける紫外吸収および移動相として前記希釈溶液を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２  ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）、または５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）である方法を提供する。
【０１５４】
本発明はまた、ラキニモドを含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収と、前記緩衝溶液およびアセトニトリルの混合物の移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］  （スピロ−ＬＡＱ）、または５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）である方法を提供する。
【０１５５】
本発明はまた、ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；ｃ）前記不純物を含有する定量限界（ＱＬ）溶液を調製することと；ｄ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；ｅ）リン酸二水素アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたはリン酸を用いてｐＨを７．０±０．１０に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；ｆ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製することと；ｇ）前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記ＱＬ溶液、前記標準溶液および前記サンプル溶液をＨＰＬＣの中に注入することと；ｈ）２１２ｎｍにおける紫外吸収と、前記緩衝溶液、アセトニトリルおよびメタノールの混合物の移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；ｉ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；ｊ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸（ＢＨ−３−ＨＬＡＱ）、またはＮ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシルアミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＭＥＧ−ＬＡＱ）である方法を提供する。
【０１５６】
本発明はまた、ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；ｄ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；ｅ）前記緩衝溶液およびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、前記標準溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；ｇ）２４２ｎｍにおける紫外吸収と、移動相としての前記ブランク溶液を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン  （ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、またはＮ−エチル−４，５−ジヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２  ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（５−ＨＬＡＱ）である方法を提供する。
【０１５７】
本発明はまた、ラキニモドおよび医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物中の不純物の濃度を決定する方法であって：該方法は、ａ）前記医薬組成物からサンプル溶液を調製することと；ｂ）前記不純物を含有する標準溶液を調製することと；ｃ）ラキニモドおよび前記不純物を含有する解像溶液を調製することと；ｄ）メタノールおよびアセトニトリルを含有するブランク溶液を調製する工程と；ｅ）酢酸アンモニウムを水中に溶解し、また水性アンモニアまたは氷酢酸を用いてｐＨを７．０±０．０５に調節することにより、緩衝溶液を調製することと；ｆ）前記ＨＰＣＬの中に前記解像溶液、前記ブランク溶液、および前記サンプル溶液を注入することと；ｇ）２４０ｎｍにおける紫外吸収と、アセトニトリルおよび前記緩衝溶液を含有する移動相を使用して、前記ＨＰＬＣを運転することと；ｈ）前記サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、前記不純物の保持時間（ＲＴ）およびピーク面積を決定することと；ｉ）前記標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、前記不純物の定量を行うことを含んでなり、
前記不純物は、Ｎ−エチルアニリン（ＮＥＡ）、５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミド（３−ＨＬＡＱ）、または１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］（スピロ−ＬＡＱ）である方法を提供する。
【０１５８】
ここに開示した各実施形態は、他の開示された実施形態の各々に適用可能であると想定される。従って、ここに記載した種々の要素の全ての組合せが、本発明の範囲内にあるものである。例えば、ある混合物の要素についての何れかの実施形態は、医薬組成物に適用可能であると思われる。もう一つの例として、０．４６ｇ／ｍＬ〜０．７ｇ／ｍＬのタップ密度に対する実施形態は、混合物中にラキニモドナトリウムの重量に対して５ｐｐｍ未満のアルミニウムの量を有する混合物に適用可能であると思われる。
【０１５９】
＜先行技術に対する比較＞：
出願人は、思いがけず、先行技術のラキニモドナトリウム混合物に対して改善された結晶性ラキニモドナトリウムの混合物を達成した。
【０１６０】
米国特許第７，８８４，２０８号はラキニモドナトリウムを再結晶化する方法を教示しており、これは当時知られていたラキニモドナトリウム結晶に比較して、より大きな結晶、低下した不純物レベルおよび一定の改善された結晶特性を有する結晶性ラキニモドナトリウムの混合物を生じる。
【０１６１】
詳細に言えば、米国特許第７，８８４，２０８号の方法は、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が４０μよりも大きいサイズを有し、且つラキニモドナトリウムる牛の全容積量の５０％以上が１５μより大きいサイズを有する混合物、（ｉｉ）高密度（タップ密度および嵩密度）、（ｉｉｉ）低い重金属含量、および（ｉｖ）一定の極性不純物の低い含量を有する、結晶性ラキニモドナトリウムの混合物を達成する。
【０１６２】
しかしながら、米国特許第７，８８４，２０８号の再結晶化方法（実施例１３〜１７、表１〜４）は、ラキニモドナトリウムの全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、またはラキニモドナトリウムの全容積量の５０%以上が１５μ以下のサイズを有する再結晶化ラキニモドナトリウム粒子の混合物を製造しない。
【０１６３】
同様に、米国特許第７，８８４，２０８号の再結晶化方法は、ラキニモドナトリウムの全容積量の９０％以上が４０μ未満のサイズを有し、またはラキニモドナトリウムの全容積の量の５０％以上が１５μ未満のサイズを融資、赤津ラキニモドナトリウムの全容積量の１０％以上が５μ未満のサイズを有する再結晶化ラキニモドナトリウム粒子の混合物を製造しない。
【０１６４】
米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１４は、ラキニモドナトリウムの全容積量の１０％以上が５μ未満のサイズを有する、再結晶化されたラキニモドナトリウム粒子の混合物を製造した。しかし、この実施例はまた、結晶特性、特にタップ密度の低下した品質を示している。実施例１４により製造された混合物は、許容可能なｄ（０．１）値を有するが、望ましくないタップ密度を有する。
【０１６５】
逆に、米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１３は、高いタップ密度を有する混合物を製造したが、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、またはラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有する結晶を製造しなかった。
【０１６６】
重要なこととして、米国特許第７，８８４，２０８号は、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有するラキニモドナトリウム結晶を製造するが、再結晶化の利点、即ち、より良好な密度および不純物プロファイルを達成できない。
【０１６７】
米国特許第７，８８４，２０８号はまた、実施例１（バッチＡ，ＢおよびＣ）および表１〜３によれば、米国特許第６，０７７，８５１号に開示された方法が、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、または結晶性ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、（ｉｉ）乏しい密度（タップ密度および嵩密度）を有し、（ｉｉｉ）高い重金属含量、および（ｉｖ）高い極性不純物含量の四つ全てを有する結晶性ラキニモドナトリウムの混合物を生じることを教示している。重要なこととして、米国特許第６，０７７，８５１号は、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、またはラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有する混合物を達成するが、許容可能な密度尾または低レベルの不純物を有する結晶を達成しない。
【０１６８】
先行技術は、ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、またはラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、且つ望ましい密度および純度プロファイルをするラキニモドナトリウムを調製する方法の教示を含んでいない。
【０１６９】
本発明は、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、または（ｉｉ）結晶性ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、且つ望ましい密度および純度プロファイル、特に、(i)高密度（タップ密度または密度）、(ii)低い重金属含量、または(iii)低い極性不純物含量を有する再結晶化されたラキニモドナトリウムの混合物を製造できる方法を提供する。
【０１７０】
本発明により提供されるラキニモドナトリウムの混合物は、改良された再結晶化方法によって提供される。
【０１７１】
＜改良された再結晶化方法＞
本発明の再結晶化方法により製造されるラキニモドナトリウムは、米国特許第７，８８４，２０８号に開示されたラキニモドナトリウムを凌駕する改善された純度および望ましい密度プロファイル、並びに米国特許第７，８８４，２０８号を凌駕する改善された結晶特性、特により小さい粒子を有している。
【０１７２】
本発明の改変された再結晶化方法は、予期に反して、米国特許第７，８８４，２０８号に開示された方法により達成されのとは異なる再結晶条件を生じ、従って異なる生成物を生じる。詳細には、水溶液を１．７〜１，８倍に濃縮すると、予期に反して、低下したレベルの不純物、改善された結晶特性を有し、またラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、または結晶性ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、またラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５μ以下のサイズを有する結晶性ラキニモドナトリウム粒子を生じる。
【０１７３】
如何なる特定の理論にも拘束されるものではないが、結晶化に影響する重要な因子は、結晶化溶液の初期濃度である。溶液の濃度の慎重な制御は、濃縮工程の終了に先立って、結晶化の自発的な開始を容易にすることができる。本発明の方法は、アセトンを添加する前に、自発的な結晶化を開始することができる。
【０１７４】
水溶液を濃縮して、ラキニモドナトリウム１ｇ当たり約１．７〜１．８ｍＬの水を含有する濃縮溶液を形成することが、本発明の重要な側面である。
【０１７５】
＜結晶性ラキニモドナトリウムの改良された混合物＞
米国特許第７，８８４，２０８号は、大きな粒子に伴う利点を教示している。詳細に言えば、米国特許第７，８８４，２０８号は、ラキニモドナトリウムのより大きな粒子は、医薬組成物を製造するときには「より加工性が良く」、またより小さな粒子は、加工を妨害し得る粉塵様の性質を伴うことが多く、また時には製造を妨げる可能性のある流動性の問題が伴う。更に、米国特許第７，８８４，２０８号は、化学的安定性は、より小さい粒子サイズから生じる表面積の増大によって減少することを示している（Felmeister, A. Chpt 88, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Edition, Mack Publishing Company, Easton, PA (1975)）。
【０１７６】
しかし、本発明は予期に反して、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、（ｉｉ）結晶性ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５μ以下のサイズを有する、ラキニモドナトリウムの改善された混合物を達成した。
【０１７７】
ラキニモドは高度に強力なＡＰＩとして等級付けされており、特別な注意、並びに材料が作業者および環境と接触するのを回避することが要求されている。ラキニモドは最も高い効力比を有するものとして格付けさており、これは８時間の時間加重平均（ＴＷＡ）として、０．０１ｍｇ／日または＜１μｇ／ｍ３ 未満の操作および製造の際に推奨される許容可能な一日摂取量（ＡＤＩ）に対応している。効力の高い化合物には、工学、管理および手順の何れかに関連した制御が伴い、これは望ましいレベルの作業者保護を与える。例えば、効力の高い化合物は、ヒトの介入または手動操作を必要としないかもしれない（Bruce D. Naumann, Control Banding In The Pharmaceutical Industry, http://www.aioh.org.au/downloads/documents/ControlBandingBNaumann.pdf）。
【０１７８】
重要なことは、本発明の混合物が粉砕されたものでも未粉砕のものであってもよいが、本発明は粉砕走査の必要なく達成されることである。
【０１７９】
本発明のラキニモドナトリウムの混合物は、大きな粒子を有する混合物に付随する潜在的な問題を克服する。処理および製造に関して、本発明の小さいサイズのラキニモドナトリウム粒子は、臼挽きおよび粉砕の工程を省略する可能性がある。米国特許第７，８８４，２０８号は、医薬組成物中の小さい粒子に伴う問題があるという当該技術における理解を反映したが、しかし本発明のラキニモドナトリウムは、安定性、処理または製造に関連した問題を有していない。
【０１８０】
粉砕は、追加の薬物処理工程を導入する欠点を越えて、薬物物質に対してそれ自身の一組の問題を導入する。例えば、臼挽きはＡＰＩの結晶構造において、不純物、新たな多形、非晶質区画、粒子形態学に対する他の変化、凝集における差異、増大した可溶性、水分レベルの変化、および圧縮性における変化を導入する可能性がある（Hausner, “The Role of Particle Size in the Development of Generic Products” 2003）。その結果、粉砕は薬物物質の薬効および安全性に影響し得る。粉砕の幾つかの欠点は、マクロ結晶性ニトロフラントインに比較して、微結晶ニトロフラントインから生じる副作用によって示される（Brumfitt, W. and J. M. T. Hamilton-Miller, J. Antimicrobial Chemotherapy 42:363:371 (1998)）。
【０１８１】
従って、臼挽きまたは篩いのような追加のプロセスの非効率を回避するために、大きな粒子を含まない薬剤物質を製造するのが有利である。本発明のラキニモドナトリウムは、臼挽きに関連した安全性の問題および追加の問題を回避する小さい粒子サイズを有するラキニモドナトリウム粒子の混合物を提供する。
【０１８２】
製剤プロセスの際のもう一つの関心事は、薬物含量の均一性を維持することである。ラキニモドの場合、ラキニモドの単位投与量は、薬物製品、例えば錠剤またはカプセルの全重量に比較して極めて低い。例えば、典型的な製剤は、カプセル中に少量、例えば０，３、０，６または１，２ｍｇのラキニモドしか含有せず、総重量は２００ｍｇを超えるかもしれない。このように、流動性、分離、均一性、または乏しい均一な分布によるラキニモドの量における小さな変動が、望ましい量、例えば０．３、０．６または１．２ｍｇからの大きなパーセントの偏位を生じる可能性がある。本発明のラキニモドナトリウムの混合物は、カプセル中のラキニモドの量において、高度に均一な含量および最小の変動を提供する。
【表１】
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【０１８３】
ラキニモド粒子の形状の均一性もまた、形状の均一性欠如は薬物の密度に変動を生じて薬物形成、例えばカプセルまたは錠剤形成の際に問題を生じる可能性があるので、製剤の際の重要な関心事である。臼挽き動作は、粒子形状に変化をもたらし得ることが知られている。
【０１８４】
減少した粒子サイズは、より迅速な溶解プロファイルを生じることが知られている。小さい粒子の溶解速度は、薬物のより大きな表面積が液体媒質と接触するので、通常は大きい粒子の溶解速度よりも早い。溶解速度の低い薬物を製剤するときは、溶解を増大させるために粒子サイズを低下させて、胃腸管内または口腔内での迅速な吸収を促進するのが望ましい。
【０１８５】
薬物が溶解速度に関連して認識された問題をもたない場合、粒子サイズの減少は推奨され得ないし、有害でもあり得る。例えば米国特許第８，１７８，１２７号および第７，９８９，４７３号において述べたように、ラキニモドナトリウムは分解を受けやすい。
【０１８６】
予期に反して、小さい粒子サイズに関連した既知の欠点にも拘わらず、（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０μ以下のサイズを有し、（ｉｉ）結晶性ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ以下のサイズを有し、（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５μ以下のサイズを有する結晶性ラキニモドナトリウム粒子の混合物から、改善された薬剤物質および薬剤製品が得られることが分かった
従って、本発明の再結晶化プロセスの利点は、結晶性ラキニモドナトリウムの得られる混合物は、小さい粒子サイズを有する粒子を有しており、これは高い均一性およびカプセル、錠剤および他の薬剤製品中でのＡＰＩの分布に関する均質性に関連している。小さい粒子サイズを有するラキニモドナトリウム結晶は、追加の臼挽き工程の必要性を省略または低減することができる。本発明のラキニモドナトリウムの小さい粒子サイズは、望ましい純度または密度プロファイルを犠牲にすることなく、または事前の臼挽き走査を櫃よとすることなく達成される。
【０１８７】
本発明のもう一つの利点は、ラキニモドナトリウム結晶が、米国特許第６，０７７，８５１号のスラリー対スラリープロセス（ｓｌｕｒｒｙ ｔｏ ｓｌｕｒｒｙ ｐｒｏｃｅｓｓ）により製造されたラキニモドナトリウム結晶よりも高い密度を有することである。低いタップ密度は、圧縮性、加圧下に容積を減少する粉末の能力、および適合性、一定の強度または硬さの錠剤に圧縮される粉末の能力のような、薬剤物質または薬剤製品における一定の評価された品質に対する呪いである。低いタップ密度を備えた結晶はｍ他、乏しい流動性を有することが知られており、これは完成された投与量形態、特に錠剤における含量の均一性欠如をもたらす（Ｒｕｄｎｉｃ ｅｔ ａｌ． Ｃｈｐｔ． ４５， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ， Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ， ＭＤ．（２０００））。含量の均一性は、強力な薬剤物質、例えばラキニモドナトリウムを含有する医薬組成物にとって特に重要である。
【０１８８】
米国特許第６，０７７，８５１号のスラリー対スラリープロセスに比較して、本発明はまた、粒子の低い凝集を示し、加えて、許容可能な密度および低レベルの不純物を備えた粒子を提供する。図５〜図８に示すように、米国特許第６，０７７，８５１号に記載の方法から得られる粗製ラキニモドは、本発明（図７および図８）の低率の凝集物に比較して高率の凝集物を有する（図５および図６）。
【０１８９】
本発明のもう一つの利点は、本発明の方法が、望ましい結晶特性を犠牲にすることなく、環境に優しいことである。詳細には、主要な溶媒としての水の使用により、本発明は環境に対する優しさ、および特に粒子サイズ分布に関して、米国特許第７，８８４，２０８号を凌駕する改善された結晶特性の両方を達成する。
【０１９０】
＜用語＞
ここで用いるとき、下記の用語の各々は、別途述べない限り以下に記載の定義を有する。
【０１９１】
ここで用いるとき、「ラキニモド」とは、ラキニモド酸、またはラキニモドナトリウムを含むその医薬的に許容可能な塩を意味する。
【０１９２】
ここで用いるとき、「ラキニモド酸」とは、Ｎ−エチル−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−５−クロロ−１−メチル−２−オキソキノリン−３−カルボキサミドであり、その化学登録番号は２４８２８１−８４−７である。「ラキニモドナトリウム」とは、ラキニモド酸のナトリウム塩である。
【０１９３】
ここで用いるとき、Ｄ（０．１）は、ミクロン単位での粒子サイズであり、それ以下において粒子集団の１０容量％の分布が見られる粒子サイズである。
【０１９４】
ここで用いるとき、Ｄ（０．５）は、ミクロン単位での粒子サイズであり、それ以下において粒子集団の５０容量％の分布が見られる粒子サイズである。
【０１９５】
ここで用いるとき、Ｄ（０．９）は、ミクロン単位での粒子サイズであり、それ以下において粒子集団の９０容量％の分布が見られる粒子サイズである。
【０１９６】
ここで用いるとき、「結晶特性」には、粒子サイズ分布、バルク密度およびタップ密度が含まれる。
【０１９７】
ここで用いるとき「薬剤物質」とは、薬剤製品中の、または薬剤製品中で使用するための活性成分を意味し、これは病気の診断、治癒、緩和、治療、または予防において薬理学的活性または他の直接的な影響を与え、または人間もしくは動物の身体における構造もしくは何らかの機能に影響するものである。
【０１９８】
ここで用いるとき、「薬剤製品」とは、薬剤物質並びに少なくとも一つの医薬的に許容可能な担体を含有する製剤化または完成された剤形を言う。
【０１９９】
ここで用いるとき、化学的成分「フリー」の組成物とは、該組成物が、前記化学的成分を前記組成物から分離することにより前記組成物を精製しようとする積極的行動の後に、（たとえ含んでいるとしても）避けられない量の化学的成分のみを含んでいることを意味する。
【０２００】
例えば、アルカリ化剤「フリー」の組成物とは、アルカリ化剤が、存在しているとしても、重量で該組成物のマイナー成分であることを意味する。好ましくは、組成物はある成分が「フリー」であると言うとき、該組成物は、０．１重量％、０．０５重量％、０．０２重量％、または０．０１重量％未満の当該成分を含んでいる。
【０２０１】
ここで用いるとき、「単離された」化合物とは、単離の積極的行為に従って粗製反応混合物から単離された化合物である。単離の行為には、粗製反応混合物の他の既知成分から、幾らかの不純物、未知の副生成物、および残存するのが許容された前記粗製反応混合物の他の既知成分の残留量と共に、当該化合物を分離することが含まれる。精製は、単離の積極的行為の一例である。
【０２０２】
ここで用いるとき、「安定性試験」とは、薬剤製品がその指定された貯蔵寿命期間に亘ってどの程度劣化するかを見るために、特定の時間隔および種々の環境条件（例えば温度および湿度）で行われる試験を言う。この試験の特定の条件および時間は、前記薬物がその貯蔵寿命期間に亘って遭遇すると思われる条件を促進させるようなものである。例えば、完成された医薬のための安定性試験の詳細な要件は、その全体の内容を本明細書の一部として援用する２１Ｃ．Ｆ．Ｒ§２１１．１６６に成文化されている。
【０２０３】
ここで用いるとき、「溶解速度」は、米国薬局方＜７１１＞に指示されるように、３０分で溶解される薬剤物質の量に基づいて決定される。
【０２０４】
ここで用いるとき、「大気圧」とは、約１気圧の圧力を言う。
【０２０５】
ここで用いるとき、「周囲温度」とは、約２０℃〜約３０℃の温度を言う。
【０２０６】
ここで用いるとき、数値またはその範囲に関して「約」とは、記載または権利請求された数値または範囲の±１０％を意味する。
【０２０７】
ここで用いるとき。数値またはその範囲に関して「ほぼ」とは、記載または権利請求された数値または範囲の±５％を意味する。
【０２０８】
ここで用いるとき、本発明による組成物に関して「安定な医薬組成物」の用語は、貯蔵の際に、活性な医薬成分の物理的安定性／一体性および／または化学的安定性／一体性を保存する組成物を言う。更に、「安定な医薬組成物」は、時間ゼロにおける分解生成物のレベルに比較して、その分解生成物のレベルが４０℃／７５％ＲＨで６月後に５％を超えない、または５５℃／７５％ＲＨで２週間後に３％を超えないことを特徴とする。
【０２０９】
ここで用いるとき、「治療する」および「治療」とは、例えば、疾患、障害もしくは状態のの阻害、退行または静止を誘導すること、または疾患、障害もしくは状態の症状を「寛解させ」もしくは「緩和する」ことを包含するものである。ここで用いる状況もしくは状態を「寛解させ」もしくは「緩和する」とは、当該状況もしくは状態の症状を軽減または減少させることを意味するべきである。ここで用いるとき、被験者における疾患の進行または疾患の合併の「阻害」とは、被験者における疾患の進行および／または疾患の合併を防止または低減することを意味する。
【０２１０】
「被験者に投与する」とは、状態、例えば病理学的状態に関連した徴候を解除、治癒または低減するために、患者に対して医薬、薬物または治療薬を与え、投薬し、または塗布することを意味する。
【０２１１】
本発明の薬剤物質、例えばラキニモドナトリウムは、従来の医薬実務に一致して、意図した投与形態に関して適切に選択された適切な医薬的希釈液、増量剤、賦形剤、または担体（ここでは医薬的に許容可能な担体と総称する）との混合物で投与されてよい。この単位は、経口投与、直腸内投与、局所的投与、静脈内投与、または直接注射もしくは非経口投与に適した形態であろう。当該化合物は、単独で、または医薬的に許容可能な担体と混合して投与することができる。
【０２１２】
この担体は固体もしくは液体であることができ、また担体のタイプは、一般には使用される投与のタイプに基づいて選択される。活性な薬剤は、錠剤またはカプセル、リポソームの形態で、凝集した粉末として、または液状形態で同時投与することができる。適切な固体担体の例には、乳糖、蔗糖、ゼラチン、および寒天が含まれる。カプセルまたは錠剤は、容易に製剤化することができ、また飲み込みまたは咀嚼が容易になように製造できる；他の固体形態には顆粒、およびバルク粉末が含まれる。
【０２１３】
カプセルまたは錠剤は、適切なバインダ、滑沢剤、崩壊剤、希釈液、着色剤、香味料、流動性誘導剤、および溶融剤を含有してよい。例えば、錠剤またはカプセルの単位投与量形態での経口投与のために、活性薬物成分は、経口で非毒性の医薬的に許容可能な不活性担体、例えば乳糖、ゼラチン、寒天、澱粉蔗糖、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、およびソルビトール等と組み合わせることができる。
【０２１４】
適切なバインダには、澱粉、ゼラチン、天然の糖（例えばグルコースまたはβ−ラクトース）、コーン甘味料、天然および合成のガム（例えばアカシア、トラガカンス、またはアルギン酸ナトリウム）、ポビドン、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、およびワックス等が含まれる。
【０２１５】
これら投与量形態に使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ステアリン酸、ステアリルフマル酸ナトリウム、およびタルク等が含まれる。
【０２１６】
崩壊剤には、限定するものではないが、澱粉、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム、クロスカルメロースナトリウム、およびグリコール酸澱粉ナトリウム等が含まれる。
【０２１７】
本発明の経口投与形態を製剤化するために使用してよい技術、医薬的に許容可能な担体および賦形剤の特的の例が、例えば米国特許出願公開第２００５／０１９２３１５号、  ＰＣＴ国際出願公開第ＷＯ・２００５／０７４８９９号、第ＷＯ・２００７／０４７８６３号、および第ＷＯ・２００７／１４６２４８号、並びに米国特許第７，５８９，２０８号に記載されている。例えば、本発明の経口投与形態は、アルカリ反応性成分を含有してよく、該成分の量は、８を超えるｐＨを維持するために、好ましくは当該製剤の約１〜２０重量％である。
【０２１８】
本発明において有用な投与量形態を製造するための技術および組成物は、以下の参照文献に記載されている：７現代の薬学第９章および第１０章（Ｂａｎｋｅｒ  ＆  Ｒｈｏｄｅｓ，Ｅｄｉｔｏｒｓ，１９７９）；医薬の剤形：錠剤（Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１）；  Ａｎｓｅｌ，医薬剤形への案内、第２版（１９７６）；レミングトンの薬学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）第１７版（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５）；薬学における進歩（Ｄａｖｉｄ  Ｇａｎｄｅｒｔｏｎ，Ｔｒｅｖｏｒ  Ｊｏｎｅｓ編，１９９２）；薬学における進歩（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）第７巻（Ｄａｖｉｄ  Ｇａｎｄｅｒｔｏｎ，Ｔｒｅｖｏｒ  Ｊｏｎｅｓ，Ｊａｍｅｓ  ＭｃＧｉｎｉｔｙ編，１９９５）；医薬剤形のための水性ポリマーコーティング（薬物および薬学，シリーズ３６（Ｊａｍｅｓ  ＭｃＧｉｎｉｔｙ編，１９８９）；医薬の粒状担体：治療適用：薬物および薬学、第６１巻（Ａｌａｉｎ  Ｒｏｌｌａｎｄ編，１９９３）；胃腸管への薬物送達（生物学におけるエリスホーウッドブック。医薬技術におけるシリーズ；Ｊ．Ｇ  Ｈａｒｄｙ，  Ｓ．Ｓ．Ｄａｖｉｓ，Ｃｌｉｖｅ  Ｇ．Ｗｉｌｓｏｎ編）；現代の薬物および薬学，第４０巻（Ｇｉｌｂｅｒｔ  Ｓ．Ｂａｎｋｅｒ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｔ．Ｒｈｏｄｅｓ編）。上記刊行物の全てを、本明細書の一部として本願に援用する。適切な液体剤形の例には、水、医薬的に許容可能な脂肪および油、アルコールまたは他の有機溶媒（エステルを含む）中の溶液または懸濁液、エマルジョン、シロップもしくはエリキシール、懸濁液、非発泡性顆粒から再構成された溶液および／または懸濁液、およびは峰性顆粒から再構成された発泡性製剤が含まれる。このような液体剤形は、例えば、適切な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁剤、希釈液、甘味剤、増粘剤、および溶融剤が含まれてよい。
【０２１９】
経口剤形は任意に、香味料、および着色剤を含んでいる。非経口剤形および静脈内剤形はまた、それらを注射または選択された送達システムのタイプに適合させるために、ミネラルおよび他の材料を含有してよい。
【０２２０】
本発明の方法に用いられる化合物は、小さな単層小胞、大きな単層小胞、および多層小胞のようなリポソーム送達系で投与されてもよい。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンのような種々のリン脂質から形成することができる。
【０２２１】
本発明の方法で使用される化合物はまた、ターゲッティング可能な薬物担体またはプロドラッグとしての可溶性ポリマーに結合されてよい。このようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシルプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミド−フェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジンが含まれる。更に、該化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマー類、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸およびポリグリコール酸の共重合体、ポリε−カルロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリ汗タール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロック共重合体に結合されてよい。
【０２２２】
液体剤形での経口投与のために、経口薬物成分は、何れかの経口で非毒性の医薬的に許容可能な不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、および水等と組み合わされる。適切な液体剤形の例には、水、医薬的に許容可能な脂肪および油、アルコールまたは他の有機溶媒（エステルを含む）中の溶液または懸濁液、エマルジョン、シロップもしくはエリキシール、懸濁液、非発泡性顆粒から再構成された溶液および／または懸濁液、および発泡性顆粒から再構成された発泡性製剤が含まれる。このような液体剤形は、例えば、適切な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁剤、希釈液、甘味剤、増粘剤、および溶融剤が含まれてよい。
【０２２３】
経口投与のための液体剤形は、患者の許容性を増大させるために着色剤および香味料を含有することができる。一般に、水、適切な油、塩水、水性デキストロース（グルコース）、および関連の糖溶液、およびグリコール（例えばプロピレングリコールまたはポリエチレングリコール）は、非経口溶液のための適切な担体である。非経口投与のための溶液は、好ましくは活性成分の水溶性塩、適切な安定剤、および必要であれば緩衝剤物質を含有している。亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、またはアスコルビン酸のような抗酸化剤は、単独または組み合わせにおいて適切な安定化剤である。また、クエン酸およびその塩、並びにＥＤＴＡナトリウムも使用される。加えて、非経口溶液は、塩化ベンザルコニウム、メチル−もしくはプロピル−パラベン、およびクロロブタノールのような保存剤を含有することができる。適切な医薬担体は、この分野の標準的な参照テキストであるレミングトンの薬学（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）に記載されている。
【０２２４】
本発明の薬剤物質、例えばラキニモドナトリウムは、ここに詳述するものを含む種々の形態で投与されてよい。該化合物での治療は、併用療法または補助療法の成分であってもよい。即ち、該薬物を必要とする被験者または患者は、１以上の当該化合物と組み合わせて病気のためのもう一つの薬物で治療され、または該薬物が与えられる。この併用療法は逐次的療法であることができ、ここでは患者が最初に一つの薬物で治療され、次いで他の薬物または二つの薬物が同時に与えられる。用いる剤形に応じて、これらは同じ経路で独立に投与することができ、または２以上の異な投与経路で投与することができる。
【０２２５】
ゼラチンカプセルは、活性成分化合物、並びに乳糖、澱粉、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸等のような粉末担体を含有してよい。圧縮錠剤を製造するために、同様の希釈液を使用することができる。錠剤およびカプセルの両方が即時放出製品として製造でき、または数時間にわたる医薬の連続的放出を与える持続放出製品として製造できる。圧縮された錠剤は、不快な味覚をマスクし、また大気から錠剤を保護するために、糖衣コーティングまたはフィルムコーティングされ、または胃腸管内での選択的な崩壊のためにエンテリックコートされる。
【０２２６】
本発明の方法で使用される化合物は、適切な鼻内媒体の使用を介して鼻内形態で投与されてよく、または当業者に周知の経皮スキンパッチ形態のものを使用して経皮経路を介して投与されてもよい。経皮送達系の形態で投与するために、適量投与は、療法の全体を通して一般的に間欠的ではなく、連続的である。
【０２２７】
非経口および静脈内の剤形はまた、それを選択された注射または送達系のタイプに適合させるために、ミネラルおよび他の材料を含有してよい。
【０２２８】
本発明の方法で用いる化合物の投与量単位は、単一の化合物またはその追加の抗菌剤との混合物であってよい。当該化合物は、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、顆粒、エリキシール、チンキ、懸濁液、シロップ、およびエマルジョンのような経口剤形として投与することができる。該化合物はまた、静脈内（ボーラスまたは輸液）、腹腔内、皮下、または筋肉内の形態で投与されてよく、または例えば注射、局所塗布または他の方法により、全て医薬分野の当業者に周知の投与形態を用いて、感染部位に直接導入されてよい。
【０２２９】
ミリグラムで測定されるラキニモドの「用量」または「投与量単位」とは、製剤の形態にかかわらず、製剤中に存在するラキニモド酸のミリグラム数を言う。投与量単位は、単一の化合物またはその化合物の混合物を含んでよい。投与量単位は、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、および顆粒のような経口剤形のために調製することができる。例えば、ラキニモドの「投与量」または「投与量単位」は、０．３、０．６、または１．２ｍｇであってよい。
【０２３０】
ここで用いるとき、「医薬的に許容可能」な成分とは、過度に有害な副作用（毒性、刺激、およびアレルギー反応）を伴うことなく、合理的な利益／リスク比に釣り合った、ヒトおよび／または動物と共に使用するために適したものである。
【０２３１】
ここで用いるとき、「医薬的に許容可能な担体」とは、過度に有害な副作用（毒性、刺激、およびアレルギー反応）を伴うことなく、合理的な利益／リスク比に釣り合った、ヒトおよび／または動物について使用するために適した担体または賦形剤を言う。それは、本化合物を被験者に送達するための、医薬的に許容可能な溶媒、懸濁剤、または媒体であることができる。該担体は液体または固体であってよく、計画された投与方法を念頭において選択される。「医薬的に許容可能な担体」には「充填剤」が含まれ、これは錠剤またはカプセルのサイズを充填し、製造を実際的にし、消費者が使用するのを便利にする。充填剤は、バルク容積を増大することによって、最終製品が患者の取扱いに適した容積を有することを可能にする。「医薬的に許容可能なキャリア」は「滑沢剤」をも含むものであり、これは成分が一緒に凝集するのを防止し、また成分が打錠機またはカプセル充填機に粘着するのを防止する。滑沢剤はまた、固体と型壁の間に低い摩擦を伴って、錠剤を形成および排出できることを保証する。「医薬的に許容可能な担体」にはまた、乳糖、ゼラチン、寒天、澱粉、メチルセルロース、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトール、および微結晶セルロース等が含まれる。リポソームもまた、医薬的に許容可能な担体である。
【０２３２】
パラメータ範囲が与えらえた場合は、該範囲内の全ての整数、およびその１０分の１および１００分の１もまた、本発明によって与えられるものである。例えば、「０．１５〜０．３５％」は、０．１５％、０．１６％、０．１７％等々、０．３５％までを含むものである。
【０２３３】
本発明はまた、不純物を含めて、ここに開示される化合物に現れる原子の全ての同位体を含むものである。同位体には、同じ原子番号を有するが異なる質量数を有する原子が含まれる。限定するものではなく一般的な例として、水素の同位体には、三重水素および重水素が含まれる。炭素の同位体には、Ｃ−１３およびＣ−１４が含まれる。
【０２３４】
ここで用いるとき、サンプル中の化合物の存在についてのスクリーニングまたは試験に用いる分析方法について、「検出限界」とは、それより下では、使用する分析方法によってサンプル中の当該化合物が検出できない閾値である。ラキニモドを含有するサンプル中の不純物を検出するための所定のＨＰＬＣ方法の検出限界は、当該方法および検出される１以上の不純物に基づいて変化する可能性がある。例えば、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＭＣＱＣＡ）を検出するための典型的なＨＰＬＣ法の検出限界は０．０３％であり、また５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル（ＭＣＱＭＥ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン（ＭＣＱ）、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（ＭＣＱＥＥ）および未知の不純物を検出するための所定方法の検出限界は０．０２％である。
【０２３５】
ここで用いるとき、サンプル中の化合物の存在についてのスクリーニングおよび試験で使用する分析方法について、「定量限界」とは、それよりも下ではサンプル中の当該化合物を、使用する分析方法によっては定量できない閾値である。ラキニモドを含有するサンプル中の不従物を検出するための所定のＨＰＬＣ法の定量限界は、検出される１以上の不純物に基づいて変化する可能性がある。
【０２３６】
ここで用いるとき、「密度」は、単位体積当たりの物質の質量として定義される測定値である。
【０２３７】
ここで用いるとき、「バルク密度」または「ＢＤ」とは、圧縮されていない疎な物質の密度測定値を言い、ここでの物質の体積は粒子の間にトラップされた空気を含んでいる。
【０２３８】
ここで用いるとき、「タップ密度」または「ＴＤ」とは、タッピングまたは振動させて粒子の間にトラップされる空気を除去または最小化することにより、物質の体積を最小化した物質の密度測定値を言う。
【０２３９】
ここで用いるとき、「急速撹拌」とは、容器の壁上に溶媒を跳ね掛ける撹拌を言う。
【０２４０】
ここで用いるとき、「ブレンド均一性」とは、薬剤製品をカプセル化、錠剤化、または他の最終仕上げの前の、ラキニモドナトリウム粒子を含むブレンドまたは顆粒化の均一性を言い、一つのサンプルまたは２以上のサンプルの平均を表すことができる。ブレンド均一性は、例えば、最終ブレンドの各バッチの上層、中層、および下層を代表する１０個のサンプルを取り、ＨＰＬＣ試験を行ってこれらサンプル中における活性成分の量を測定し、各サンプル中の活性成分の量をラベル表示された活性成分の量と比較することにより測定されてよい。標準偏差および相対的標準偏差は、各サンプルにおいて、薬剤物質のラベル表示された量のパーセンテージとして表された、試験されたサンプルの個々の量に基づいて決定することができる。
【０２４１】
ここで用いるとき、「含量均一性」とは、製剤化後の投与量形態、例えばカプセルまたはタブレットの間でのラキニモドナトリウム含量の均一性を言う。ここに記載した医薬組成物の含量均一性による投与量単位の均一性は、Ｕ．Ｓ．薬局方＜９０５＞許容値および範囲（特定されたものとして）；Ｌ１＝１５．０およびＬ２＝２５．０を満たす。含量均一性は、例えば、米国薬局方によって示されるようにして測定されてよく、これには、１）１０個の錠剤（または他の薬剤製品の投与量形態）を試験して、活性含量の相対的標準偏差（ＡＳＤ）が０．６％以下であり、また８５〜１１５％の外にある値は存在しないことを確かめること；および２）更に２０個以上の錠剤（または薬剤製品の他の投与量形態）を試験して、全ての３０個の全てについてのＲＳＤが７．８％以下であり、１つ以下の値が８５〜１１５％の外にあり、また述べられた含量の７５〜１２５％の外にある値は存在しないことを確かめることが含まれる。
【０２４２】
ここで用いるとき、「残留溶媒」には、エタノール、ｎ−ヘプタン、ｎ−オクタン、メタノール、アセトン、ジオキサン、およびジメチルホルムアミドが含まれる。残留溶媒は、例えば、活性成分／賦形剤における残留溶媒レベルの製造業者の陳述、およびＵ．Ｓ．薬局方＜４６７＞オプション２の通りの計算に基づいて決定されてよく、製品はＵＳＰ＜４７６＞残留溶媒限界基準に合致している。試験は必ずしも必要とされない。
【０２４３】
ここで用いる「ＮＭＴ」は、以下を意味する
ここで用いる「ＬＴ」は、未満を意味する。
【０２４４】
ここで用いる「ＭＣＱＭＥ」は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチルを意味する。ＭＣＱＭＥは、Ｕ．Ｓ．特許番号７，５６０，５５７、およびＯｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，７１，１６５８〜１６６７に開示されており、その内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＭＣＱＭＥは下記の構造を有する：
【化９】
2016514162.tif 000011
【０２４５】
ここで用いるとき、「ＭＣＱＥＥ」は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチルを意味する。ＭＣＱＥＥは、Ｕ．Ｓ．特許番号７，５６０，５５７に開示されており、その内容を、本明細書の一部として本願に援用する。ＭＣＱＥＥは下記の構造を有する：
【化１０】
2016514162.tif 000012
【０２４６】
ここで用いるとき、「ＭＣＱ」は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オンを意味する。ＭＣＱは米国特許番号７，５６０，５５７、およびＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６７１，１６５８〜１６６７に開示されており、その内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＭＣＱは下記の構造を有する：
【化１１】
2016514162.tif 000013
【０２４７】
ここで用いる「ＭＣＱＣＡ」は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸を意味する。ＭＣＱＣＡは、Ｕ．Ｓ．特許番号７，５６０，５５７、およびＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，７１，１６５８〜１６６７に開示されており、その内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＭＱＣＡは下記の構造を有する：
【化１２】
2016514162.tif 000014
【０２４８】
ここで用いる「ＮＥＡ」は、Ｎ−エチルアニリンを意味する。ＮＥＡは、Ｕ．Ｓ．特許番号７，５６０，５５７に開示されており、その内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＮＥＡは下記の構造を有する：
【化１３】
2016514162.tif 000015
【０２４９】
ここで用いるとき、「５−ＨＬＡＱ」は、Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを意味する。５−ＨＬＡＱは、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１３／２６４７６、およびＵ．Ｓ．出願公開番号２０１３／０２１７７２４ Ａ１に開示されており、それらの内容を本明細書の一部として本願に援用する。５−ＨＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１４】
2016514162.tif 000016
【０２５０】
ここで用いる「３−ＨＬＡＱ」は、５−クロロ−Ｎ−エチル−３−ヒドロキシ−１−メチル−２，４−ジオキソＮ−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−３−カルボキサミドを意味する。３−ＨＬＡＱは、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１３８９０、およびＵ．Ｓ．特許番号８，１７８，１２７ Ｂ２に開示されており、それらの内容を本明細書の一部として本願に援用する。３−ＨＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１５】
2016514162.tif 000017
【０２５１】
ここで用いる「ＭＥＧ−ＬＡＱ」は、Ｎ−エチル−４−ヒドロキシ−１−メチル−５−（メチル（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキシル）アミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを意味する。ＭＥＧ−ＬＡＱは、Ｕ．Ｓ．出願公開番号ＵＳ ２０１３／０３４５２５６ Ａ１に開示されており、それらの内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＭＥＧ−ＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１６】
2016514162.tif 000018
【０２５２】
ここで用いる「ＤＥＬＡＱ」は、５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドを意味する。ＤＥＬＡＱは、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３３９１、およびＵ．Ｓ．出願公開番号ＵＳ ２０１２／００１０２３９ Ａ１に開示されており、それらの内容を本明細書の一部として本願に援用する。ＤＥＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１７】
2016514162.tif 000019
【０２５３】
ここで用いる「スピロ−ＬＡＱ」は、１Ｈ，３Ｈ−スピロ［５−クロロ−１−メチルキノリン−２，４−ジオン−３，３’−［１］エチルインドリン−［２］−オン］を意味する。スピロ−ＬＡＱは、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１３８９０、およびＵ．Ｓ．特許番号８，１７８，１２７ Ｂ２に開示されており、それらの内容を本明細書の一部として本願に援用する。スピロ−ＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１８】
2016514162.tif 000020
【０２５４】
ここで用いる「ＢＨ−３−ＨＬＡＱ」は、２−クロロ−６−（３−（エチル（フェニル）アミノ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソプロパンアミド）安息香酸を意味する。ＢＨ−３−ＨＬＡＱは下記の構造を有する：
【化１９】
2016514162.tif 000021
【０２５５】
ここで用いるとき、「ＤＭＭ」はマロン酸ジメチルを意味する。ＤＭＭは合成試薬であり、下記の構造を有する： 
【化２０】
2016514162.tif 000022
【０２５６】
ここで用いる「ＤＭＳ」は硫酸ジメチルを意味する。ＤＭＳは合成試薬である。
【０２５７】
ここで用いる「ＭＣＩＡ」は、５−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンを意味する。ＭＣＩＡは下記の構造を有する：
【化２１】
2016514162.tif 000023
【０２５８】
ここで用いる「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
【０２５９】
ここで用いる「ＬＯＤ」は、乾燥時のロスを意味する。
【０２６０】
以下の商業的に入手可能な適切な品質の溶媒はまた、薬剤物質の試験のための分析標準としても使用される：エタノール、ｎ−ヘプタン、ｎ−オクタン、メタノール、アセトン、１，４−ジオキサンおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）。マロン酸ジメチルのための分析標準のＩＤ番号および供給源は、Ｓ４６９５５９９（Ｍｅｒｃｋ社）であり、メチル硫酸ナトリウムはＡ０２９４７７７（Ａｒｃｏｓ社）、および１３Ｃ２−硫酸ジメチルはＰ−５０５２（Ｈｏｌｌａｎｄ Ｍｏｒａｎ社）である。
【０２６１】
ここに開示する何れかの範囲によって、該範囲内の全ての１００分の１、１０分の１および整数の単位量は、本発明の一部として特に開示されることを意味している。従って、例えば０．０１ｍｇ〜５０ｍｇの記載は、０．０２、０．０３…０．０９；０．１、０．２…０．９；および１，２…４９ｍｇの単位量が本発明の実施形態として含まれることを意味する。
【０２６２】
不純物は、別途特定しない限り通常の薬局方の方法により測定される。
【０２６３】
ここで用いるとき、「アンチ溶媒」とは、室温（２０〜２５℃）において、ラキニモドナトリウムがその中で僅かに可溶性であるに過ぎず、非常に僅かにしか可溶性でなく、実際には不溶性であり、または不溶性である溶媒を言う。溶解度の用語は、米国薬局方ＸＸＶに従って以下に定義される。
【表２】
2016514162.tif 000024
【０２６４】
純粋でない結晶性化合物の生成は、通常は適切な溶媒または溶媒混合物からの再結晶化によって達成される（Ｖｏｇｅｌの実際的有機化学の教科書、第５版、Ｌｏｎｇｍａｎ・Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ，１９８９）。この再結晶化プロセスは、一般には次の工程を含んでいる：ａ）純粋でない結晶性物質を、沸点近傍の適切な溶媒中に溶解させる；ｂ）該熱溶液を、不溶性物質およびダストの粒子から濾過する；ｃ）前記熱容積を冷却して、前記溶解された物質を晶出させる；ｄ）該結晶を上清溶液から分離する（Ｉｄ）。しかしながら、標準の再結晶が技術には、Ｕ．Ｓ．特許番号７，８８４，２０８に教示されたようにラキニモドに適用したときは、低い収量が伴うか、または収量が得られない。Ｕ．Ｓ．特許番号７，８８４，２０８の実施例２〜７に示されるように、標準の再結晶化プロセスを使用してラキニモドナトリウムを再結晶化しようとする試みは、収量が得られたとしても低い収量しかもたらさなかった。Ｕ．Ｓ．特許番号７，８８４，２０８のプロセスは、ラキニモドナトリウムが実際的に不溶性であるアンチ溶媒を使用することにより、ラキニモドナトリウムを再結晶化させることに伴う困難を克服するものである。加えて、Ｕ．Ｓ．特許番号７，８８４，２０８のプロセスは、アンチ溶媒を添加する前に、ラキニモドナトリウム水溶液を濃縮する。本発明のプロセスは、Ｕ．Ｓ．特許番号７，８８４，２０８のプロセスに対する改良である。
【０２６５】
本発明は、以下の実験の詳細および実施例を参照することによってより良く理解されるであろうが、当業者は、詳述された特定の実験が、後述する特許請求の範囲においてより完全に記述される本発明の単なる例示であることを容易に理解するであろう。
【実験の詳細】
【０２６６】
＜粉末密度の決定＞
・バルク密度
１．粉末を混合する；
２．０．０１ｇ感度の天秤上で、５０ｍＬの空のシリンダの風袋を秤量する；
３．前記粉末を、圧縮することなく、約４５°の角度で保持されている前記シリンダに移し、４０〜５０ｍＬのタッピングしない見かけの体積を達成する；
４．前記体積を読取りのために平坦にするために、前記サインプルを含んだシリンダを鋭い動きにより垂直位置に移動させる；
５．見かけの体積（Ｖａ）を、最も近い目盛付きユニットで読む；
６．サンプルと共にシリンダを秤量する（天秤はサンプル重量Ｍを与える）；
７．以下の式：ＢＤ＝Ｍ／Ｖａに従って、ｇ／ｍＬでのバルク密度を計算する；
８．工程１〜７を再度実行し、２回の平均を報告する。
【０２６７】
・タップ密度
１．バルク密度を計算するために用いた同じシリンダを、カンタクロム社製デュアル自動タップ計測器（Ｑｕａｎｔａｃｈｒｏｍｅ Ｄｕａｌ Ａｕｔｏｔａｐ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）の中に配置する；
２．１２５０回のタッピングを行う；
３．タッピングされた容積（Ｖｆ）を、最も近い目盛付ユニットで読み取る；
４．ｇ／ｍＬでんタップ密度を次式に従って計算する：ＴＤ＝Ｍ／Ｖｆ；
５．工程１〜４を再度実施して、２回の平均データを報告する。
【０２６８】
＜粒子サイズの決定＞：
粒子サイズ分布は、マスターサイザーＳモデル（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｌａｓｅｒ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ）を用いて、マルバーンレーザ回折（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｌａｓｅｒ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ）により測定された。レーザ回折は、光の回折角度が粒子サイズに逆比例するとの事実に依拠している。粒子の特性は、球の測定として測定され、解釈される（球は、一つの独特な数字によって記述できる唯一の形状である）。加えて、レーザ回折は、略体積に基づく粒子サイズ分布を計算して、粒子サイズの決定から粒子カウントを排除する。前記マスターサイズＳモデルは、単一の技術および単一の範囲設定を用いて粒子を測定する。Ｄ（０．１）は、その下方に集団の１０容量％の分布が見られるミクロン単位での粒子サイズである。Ｄ（０．５）は、その下方に集団の５０容量％の分布が見られるミクロン単位での粒子サイズである。Ｄ（０．９）は、その下方に集団の９０容量％の分布が見られるミクロン単位での粒子サイズである。
【０２６９】
＜重金属の定量＞
金属含量は、スペクトロ社（クレーベ、ドイツ国）により製造された誘導結合プラズマ原子発光スペクトル分析（「ＩＣＰ−ＡＥＳ」）システムを用いて測定された。６５％の硝酸中でサンプルの温浸が行われ、使用された内部標準はスカンジウムであった。
【０２７０】
注：  以下の例では、使用した溶媒の容積はラキニモドナトリウムの出発重量に対して計算された。収率は重量パーセントで計算された。
【０２７１】
＜純度の決定−アッセイの同定および定量のための例示的ＨＰＬＣ法、およびラキニモドカプセル中の極性不純物／分解生成物の同定および定量＞
ラキニモドナトリウムおよび極性不純物／分解生成物が、ＯＤＳ−３Ｖカラムと、ｐＨ７．０の酢酸アンモニウム緩衝（８０％）およびアセトニトリル（２０％）の混合物で構成された移動相を用いた均一溶媒の逆相高速液体クロマトグラフィー（ＰＲ−ＨＰＬＣ）によって定量された。検出技術は、２４０ｎｍでの紫外線吸収であった。
【０２７２】
特別なＨＰＬＣ条件
・カラム＆パッキング：  イナートシル（Inertsil）ＯＤＳ−３Ｖ、５μｍ、
４．６×２５０ｍｍ、ＧＬサンエンシズＩｎｃ．
・ガードカラム：  Ｏｐｔｉ−Ｇｕａｒｄ Ｃ１８、１×１０ｍｍ
・移動相：  アセトニトリル：緩衝液ｐＨ７．０  …  ２０：８０（ｖ／ｖ）
混合および脱ガスする。
【０２７３】
・緩衝液ｐＨ７．０の調製：  ７．７ｇの酢酸アンモニウムを２０００ｍＬの水中に溶解し、水性アンモニアまたは氷酢酸でｐＨを７．０±０．０５に調節する。０．４５μｍの膜フィルタを通して濾過する。
【０２７４】
・流速：  １．５ｍＬ／ｍｉｎ
・検出：  ２４０ｎｍでのＵＶ
・注入容積：  ５０μＬ
・希釈液Ａ：  アセトニトリル／水  …  ５０：５０（ｖ／ｖ）
・希釈液Ｂ（およびブランク）：  移動相
・カラム温度：  ４０℃
・自動サンプラー温度：５℃
・ラン時間：  ４０分
＜典型的なＨＰＬＣ手順＞：
１．標準溶液調製
１．１  ラキニモド標準ストック溶液（溶液Ｓ）
約１５ｍｇのラキニモドナトリウム標準を二連で、５０ｍＬ容量のフラスコの中に正確に秤量する。前記容量の２／３以下の希釈液Ａで希釈し、冷超音波処理浴中で２分間超音波処理し、希釈液Ａで規定容量まで希釈する。
【０２７５】
標準ストック溶液の濃度は約３００μｇ／ｍＬラキニモドナトリウムである。標準ストック溶液は、２℃〜８℃の冷蔵庫内に保存したときには１月間使用してよい。
【０２７６】
１．２  アッセイ用のラキニモド標準作業溶液
３ｍＬの標準ストック溶液を、希釈液Ｂを用いて１０ｍＬに希釈する（希釈倍率３．３３）。
【０２７７】
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。ラキニモド（酸）として表される濃度は約８５μｇ／ｍＬである。
【０２７８】
標準作業溶液Ａは、冷蔵庫（２℃〜８℃）に保存されたときには７日間使用してよい。
【０２７９】
１．３  ＭＣＱＣＡ標準ストック溶液
約１８ｍｇのＭＣＱＣＡ標準を１００ｍＬ容量のフラスコの中に正確に秤量する。前記用量の２／３以下の希釈液Ａで希釈し、冷超音波処理浴中で２分間超音波処理し、希釈液Ａで規定容量まで希釈する。アセトニトリルで規定容量にまで希釈し、物質が完全に溶解するまで超音波処理（冷超音波浴中で）する…ストックＭＣＱＣＡ溶液。
【０２８０】
ＭＣＱＣＡの濃度は約１８０μｇ／ｍＬである。
【０２８１】
ＭＣＱＣＡストック標準溶液は新鮮に調製されるべきであろう。
【０２８２】
１．４  不純物の定量のための標準溶液（溶液Ｉ）
標準溶液Ａの中のラキニモドの作業濃度に対して、０．２％の濃度のラキニモドおよび０．１％濃度のＭＣＱＣＡを含有する希釈液Ｂの中の溶液を調製する。一例として、以下の方法を適用する。
【０２８３】
アッセイ用の４．０ｍＬのラキニモドナトリウム標準溶液（溶液Ａ）および１．０ｍＬのＭＣＱＣＡストック標準溶液を、１００ｍＬ容積のフラスコに移し、希釈液Ｂで規定容積にまで希釈する（中間希釈）。
【０２８４】
２．５ｍＬのこの中間希釈を５０ｍＬ容量のフラスコ内に入れ、希釈液Ｂで規定容量にする。
【０２８５】
ラキニモド標準についての総希釈倍率は１６６６．６７であり、ＭＣＱＣＡについては２０００である。
【０２８６】
ラキニモドナトリウムの濃度は約０．１８μｇ／ｍＬ（０．２％）である。
【０２８７】
ＭＣＱＣＡの濃度は約０．０９μｇ／ｍＬ（０．１％、ＱＬレベル）である。
【０２８８】
標準溶液Ｉは、冷蔵庫内で保存したときには２４時間使用してよい。
【０２８９】
２．解像溶液調製
２．１  混合溶液
希釈液Ａを溶媒に用いて、以下の潜在的不純物標準（マーカー）を含有する溶液を調製する。
【０２９０】
２．解像溶液調製
２．１  混合溶液
希釈液Ａを溶媒に用いて、以下の潜在的不純物標準（マーカー）を含有する溶液を調製する。
【０２９１】
混合溶液：
ＭＣＱ：  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチルキノリン−２（１Ｈ）−オン
ＭＣＱＣＡ：  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
ＭＣＱＭＡ：  ５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸メチル
５−ＨＬＡＱ：  Ｎ−エチル−４，５−ジヒドロキシ１−メチル−２−オキソ−Ｎ−フェニル−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド
混合溶液は次のようにして調製すればよい：
約３ｍｇの各不純物標準／マーカーを、１００ｍＬ容積のフラスコ中に秤量し、溶解し（超音波処理が許容され得る）、希釈液Ａで規定容量にまで希釈する。
【０２９２】
混合溶液中の各不純物の濃度は約３０μ／ｍＬである。混合溶液は約―２０℃で凍結保存したときは、４月まで使用してよい。この目的のために、新鮮に調製された混合溶液をアリコットに分割し、直ちに凍結して−２０℃で保存すべきである。解凍後は、アリコットを十分に混合すべきであり、再凍結はすべきでない。
【０２９３】
２．２  追加の不純物のストック溶液
約３ｍｇのＭＣＱＥＥ（５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル）を、１００ｍＬ容積のフラスコ中に秤量し、溶解し（超音波処理が許容され得る）、希釈液Ａを用いて規定容量にまで希釈する。これはＭＣＱＥＥストック溶液である。
【０２９４】
この溶液は、約−２０℃で凍結保存したときは、４月までは使用してよい。
【０２９５】
この目的のために、新鮮に調製されたＭＣＱＥＥストック溶液はアリコットに分割し、直ちに凍結して−２０℃で保存すべきである。解凍後は、アリコットを十分に混合すべきであり、再凍結はすべきでない。
【０２９６】
約３ｍｇのＭＥＧ−ＬＡＱ（ラキニモドのメグルミン付加物）を、１００ｍＬ容積のフラスコ中に秤量し、溶解し（超音波処理が許容され得る）、希釈液Ａを用いて規定容量にまで希釈する。これはＭＥＧ−ＬＡＱストック溶液である。
【０２９７】
この溶液は、冷蔵庫（２℃〜８℃）の中で保存したときには１週間使用してよい。
【０２９８】
２．３  解像溶液
二つの解像溶液を、前記混合溶液を使用して次のようにして別々に調製する。
【０２９９】
２．３．１  解像溶液１
３ｍＬのラキニモド標準ストック溶液（溶液Ｓ）、０．３ｍＬの混合溶液、および０．３ｍＬのＭＣＱＥＥストック溶液を、１０ｍＬ容積のフラスコに移し、希釈液Ｂを用いて規定容量に希釈する。これは解像溶液１である。
【０３００】
その中のラキニモドナトリウムの濃度は、約９０μｇ／ｍＬである。各不純物の濃度は約０．９μｇ／ｍＬ（ラキニモドの作業濃度に対して約１％）である。
【０３０１】
解像溶液１は、解像試験（システム適性について）のため、および５つの不純物（ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱＥＥ、および５−ＨＬＡＱ）の保持時間（ＲＴ）／相対的保持時間（ＲＲＴ）の決定のために使用される。
【０３０２】
解像溶液１は、冷蔵庫（２℃〜８℃）の中で保存すれば９日間は使用してよい。
【０３０３】
２．３．２  解像溶液２
３ｍＬのラキニモド標準ストック溶液（溶液Ｓ）、０．３ｍＬの混合溶液、および０．３ｍＬのＭＥＧ−ＬＡＱストック溶液を、１０ｍＬ容積のフラスコに移し、希釈液Ｂを用いて規定容量に希釈する。これは解像溶液２である。
【０３０４】
その中のラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。各不純物の濃度は約０．９μｇ／ｍＬ（ラキニモドの作業濃度に対して約１％）である。
【０３０５】
解像溶液２は、ＭＥＧ−ＬＡＱの保持時間の決定のために使用される。
【０３０６】
解像溶液２は、冷蔵庫（２℃〜８℃）の中で保存すれば９日間は使用してよい。
【０３０７】
３．サンプル溶液の調製
２０カプセルを正確に秤量し、それらの内容物を乳鉢の中に完全に空ける。必要なときにはスパチュラを用いて、カプセルの内容物を乳鉢の中に完全に空けるように注意を払う。からのカプセルを秤量する。カプセル内容物の平均重量を計算する。カプセル内容物を乳鉢の中で混合および粉砕し、該粉末を、光から保護され且つ緊密に閉じられた容器の中に保つ。
【０３０８】
７カプセルに対応する量の粉末を、２回に亘って、５０ｍＬ容量のフラスコの中に正確に秤量する。
【０３０９】
希釈液Ｂを前記容量の２／３まで加え、２００回／分で３０分間揺動させる。希釈液Ｂを用いて規定容積まで希釈する。使用する前に、０．４５μｍのＧＨＰ・ＡＣＲＯＤＩＳＣ・ＧＦフィルタまたは均等物を通して濾過し、最初の０．５〜１ｍＬを廃棄する。
【０３１０】
ラキニモドの作業濃度は約８４μｇ／ｍＬである。調製後多たちに、サンプル溶液を冷蔵庫の中に配置し、または５℃の自動サンプラーで５℃に冷却する。該サンプル溶液は、２℃〜８℃の温度に維持されるときは、２４時間に亘って使用してよい。
【０３１１】
４．手順
解像溶液、希釈液Ｂ（ブランク）、アッセイ用標準溶液、並びにＩＤＤおよびサンプル溶液を、標準の走査手順に従って注入する。
【０３１２】
同定およびアッセイのためのサンプルおよび標準溶液のクロマトグラムにおいて、ラキニモドピークの保持時間（ＲＴ）および面積を測定する。
【０３１３】
不純物／分解生成物の含量の計算のために、サンプル溶液のクロマトグラムにおいて、全て既知の不純物および何れか他の不純物のＲＴ、相対的保持時間（ＲＲＴ）およびピーク面積を決定する。
【０３１４】
賦形剤の早期溶出ピークおよびシステムピークを無視する（不純物／分解生成物の定量のためのクロマトグラム参照）。例えば、０とＲＲＴ０．１５の間（約２．５分）の積分阻害を使用する。
【０３１５】
積分パラメータを調節し、標準溶液Ｉ（不純物／分解生成物の定量のため）の注入において、ラキニモドピークの平均応答の１０％未満の面積をもったピークを排除する。
【０３１６】
サンプル注入におけるＭＥＧ−ＬＡＱのピークを無視す（解像溶液２に従って同定される）。
【０３１７】
ＭＥＧ−ＬＡＱの含量が実施例２３によって試験される。
【０３１８】
５．システム適性試験
５．１  解像試験
ラキニモドピークの典型的な保持時間は１５．５±２．０分である。
【０３１９】
ラキニモドピークについてのテーリング因子（ＵＳＰ）は、２．０以下であるべきである。
【０３２０】
全てのピークついについての解像因子は、（ＮＬＴ）２以上であるべきである。
【０３２１】
既知の不純物／分解生成物のピークのＲＲＴは次の通りであるべきである。
【０３２２】
ＭＣＱＭＥ：  ０．３３−０．３８
ＭＣＱ：  ０．４９−０．５８
ＭＣＱＥＥ：  ０．５６−０．６５
ＭＣＱＣＡ：  ０．７１−０．８５
５−ＨＬＡＱ：  １．２−１．４（２３分を超えるべきではない）
ＭＥＧ−ＬＡＱのピークは、近隣のピークと比較して実質的にブロード化される。ＭＥＧ−ＬＡＱの保持時間は可変で、クロマトグラフィー条件（ｐＨ，％アセトニトリル、温度等）の極く僅かな変化に対して非常に敏感であり、従って、解像溶液２のクロマトグラムにおけるそのピークを用いて定義されるべきである。典型的には、そのＲＲＴは約０．６６である。
【０３２３】
５．２  システム精度試験
標準操作手順に従ってシステム精度を試験するために、アッセイおよびＩＤＤについてラキニモド標準を評価する。
【０３２４】
溶液ＩにおけるＭＣＱＣＡを使用して、システムの感度を試験する。Ｓｔｄ１の６つの注入の面積、並びにＳｔｄ１とＳｔｄ２の間の距離のＲＳＤは、（ＮＭＴ）２０％以下であるべきである。
【０３２５】
５．３  ブランク
システムピークを検出するための注入希釈液Ｂ
６．保持時間（ＲＴ）による同定
サンプルクロマトグラムにおいて得られた主要ピークのＲＴは、標準溶液の注入でラキニモドピークについて得られたものに対応するべきであろう。
【０３２６】
７．計算および報告
７．１  アッセイ計算
【数１】
2016514162.tif 000025
【０３２７】
ここで、０．９４はラキニモドナトリウム塩のラキニモド（酸）への変換因子である。
【０３２８】
７．２  不純物／分解生成物の計算および評価
７．２．１  相対的保持時間（ＲＲＴ）の計算
【数２】
2016514162.tif 000026
【０３２９】
７．２．２  不純物の含量／分解生成物の計算
【数３】
2016514162.tif 000027
【０３３０】
面積不純物は、サンプル溶液における不純物／分解生成物（既知または未知）の面積である。
【０３３１】
面積ｓｔｄは、標準溶液Ｉのクロマトグラムにおけるラキニモドピークである。
【０３３２】
０．９４はラキニモドナトリウム塩のラキニモド（酸）への変換因子である。
【０３３３】
ＲＲＦは、比率（ラキニモド回帰直線の勾配／不純物回帰直線）の勾配として計算された、不純物／分解生成物の相対的応答因子である。
【０３３４】
ラキニモドに関する相対的応答因子の値は次の通りである：  ＭＣＱＭＥ：０．７４；  ＭＣＱ：０．６５；  ＭＣＱＥＥ：０．８５；  ＭＣＱＣＡ：０．６２；  および５−ＨＬＡＱ：１．０．
未知の不純物／分解生成物についてのＲＲＦは、１．０とする
７．２．３  不純物／分解生成物の評価および報告
ＭＣＱＭＥ，ＭＣＱ，ＭＣＱＥＥ，５−ＨＬＡＱ，および未知不純物の定量レベル（ＱＬ）は、０．０５％である。ＭＣＱＭＥ，ＭＣＱ，ＭＣＱＥＥ，５−ＨＬＡＱおよび未知不純物の検出レベル（ＤＬ）は０．０２％である。ＭＣＱＣＡのＱＬは０．１％である。  ＭＣＱＣＡの検出レベルＤＬは、０．０３％である。
【０３３５】
サンプルクロマトグラムにおける全てンピークを、実際の対応する保持時間の±５％で、システム安定性クロマトグラムのそれと相関させる。報告データは方２に示す通りである。
【表３】
2016514162.tif 000028
【０３３６】
【表４】
2016514162.tif 000029
【０３３７】
実施例１：  ラキニモドナトリウムの修飾された再結晶化―試験製造、１００倍スケールアップ、（パイロットスケールのバッチＡおよびＢ）
ラキニモドナトリウムの再結晶化は、次のようにパイロットスケール（バッチＡおよびＢ）で行われた。
【０３３８】
パイロットスケールでのラキニモドＮａの再結晶化は、ガラスでライニングされた二つのリアクタ（リアクタＡ、３０リットル容積、およびリアクタＢ、６０リットル）の中で行われる。固体生成物は、２０μメッシュのハロステロイＣ撹拌濾過乾燥機の中で濾過および乾燥される。
【０３３９】
バッチサイズは、２．５ｋｇの出発粗製ラキニモドＮａである。
【０３４０】
粗製ラキニモドＮａ（２．５ｋｇ）のバッチは、１０容量のプロセス水と共にリアクタＡに導入される。該バッチは、固体が完全に溶解するまで、撹拌しながら６０〜７３℃に加熱される。
【０３４１】
リアクタＡの中のホスト溶液は、０．２μｍ濾過システムを通してリアクタＢへと移送される。リアクタＡおよびフィルタは、１．２容量のプロセス水で洗浄され、洗液はリアクタＢへと移送される。
【０３４２】
減圧が形成され、リアクタＢ内の溶液は、残留物の容積が５．４リットル（２．１６容量）に達するまで、Ｐ＜４５ｍｍＨｇおよびジャケット温度Ｔ＜６５℃で排出される。次いで、大気圧とされ、ジャケット温度４０〜５０℃に調節される。該バッチは１０るん以上撹拌され、次いでラキニモドＮａ結晶を播種して再結晶化を開始させる。
【０３４３】
該バッチを４５℃で更に９０分間撹拌し、７．９容量のアセトンを１．５〜２．５時間でリアクタに加える。添加の際のリアクタ温度は４０〜５０℃に維持された。
【０３４４】
得られたスラリーを、３．５〜４．５時間の間０±４℃に冷却し。この温度で１０〜１５時間撹拌する。次いで、該スラリーを濾過乾燥機に搬送し、窒素圧下で固体を濾過する。
【０３４５】
このケーキをアセトンで２回洗浄し（２・２ｋｇ）、次いで減圧下（Ｐ＜５０ｍｍＨｇ）および情報温度（Ｔ＝４０℃）の下で撹拌しながら乾燥する。
【０３４６】
乾燥生成物は排出され、分析のためにサンプリングされ、包装される。
【０３４７】
＜実施例１の考察＞
実施例１  パイロットスケールでのラキニモドナトリウムの再結晶化プロセスは、米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１５に基づいていた。出発物質は、低粒子サイズ（ｄ（０．１）＝１−２μ、ｄ（０．５）＝６−１１μ；ｄ（０．９）＝２０−３５μ）を有する粗製ラキニモドナトリウムであり、凝集した固体のように見えた。米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１５は、米国特許第６，８７５，８６９号のに開示された方法に従って調製された２５．０ｇのラキニモドナトリウム（実験室スケール）を含んでいる。実施例１５において、２５．０ｇのラキニモドナトリウムは、ラキニモドナトリウムの水溶液中に溶解され、次いで撹拌しながら減圧下に蒸発されて容積比２．１４ｖ／ｗの容積を有する濃縮溶液となり、得られた残渣は結晶化を誘導するために種晶を添加され、次いで抗溶媒（アセトン）で処理される。
【０３４８】
該改変されたパイロットスケールのプロセスは、２．５ｋｇのラキニモドナトリウムを用いて行われたが、これは実施例１５からの１００倍のスケールアップである。加えて、該改変されたパイロットスケールのプロセスは、米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１５の実験室スケールのプロセスとは顕著な相違を有していた。詳細に言えば、実験室スケールでの蒸発は、ロータリーエバポレータにおける丸底フラスコの中で撹拌を伴わずに行われたのに対して、パイロットスケールでの蒸発は、リアクタの中で撹拌しながら行われた。パイロットスケールでは、蒸発残渣は激しく撹拌され、リアクタ壁に液体が噴き付けられ、固体の沈殿形成および結晶化は自発的であった。実験室スケールでは、準安定溶液が結晶を起こさない点である２．１〜２．２ｖ／ｗの容積比にまで濃縮され、核形成は種晶の添加により制御された。パイロットスケールにおいて、条件および濃度は、自然な結晶化が起きるようなもの、即ち、種晶の添加なしで結晶化が誘導されるようなものであった。
【０３４９】
驚くべきことに、前記パイロットバッチは、米国特許第７，８８４，２０８号の実施例１５に基づいて予測される粒子サイズ分布を有するラキニモドナトリウム粒子を生じなかった。その代わりに、出願人は予期することなく、前記パイロットバッチが再結晶化されたラキニモドナトリウム粒子の混合物を生じ、ここで（ｉ）ラキニモド粒子の総容積量の９０％以上が４０μ未満のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の５０％以上が１５μ未満のサイズを有し、また（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の総容積量の１０％以上が５μ未満のサイズを有することを見出した。前記二つの異なるプロセスから生じる粒子サイズ分布の比較が表４に示されている。
【表５】
2016514162.tif 000030
【０３５０】
米国特許第７，８８４，２０８号のプロセスおよび上記実施例１のプロセスは、それぞれ異なる生成物を生じ、同等のプロセスではない。米国特許第７，８８４，２０８号のプロセスの出願人のパイロットスケールバージョンは、先行技術とは実質的に異なる条件をもたらし、また表４に示したより小さい粒子サイズを有する実質的に異なった生成物をもたらした。
【０３５１】
ラキニモドＮａは、強力な薬物なので、このＡＰＩのためには小さい粒子サイズが有利である。低下した粒子サイズをもった非凝集ラキニモドナトリウム結晶の形成は、薬剤製品のより良好な均一性を提供でき、また磨砕または破塊の操作を回避できるであろう。該再結晶化生成物は自由流動性の粉末である。小さい粒子の粉末ほど凝集する傾向が強い。スラリー対スラリー再結晶化（即ち、米国特許第６，０７７，８５１号のプロセス）により調製された粗製ラキニモドナトリウムは、低粒子サイズを有し且つ高度に凝集性の粒子を生じる。この改変されたプロセスは、低粒子サイズを有し且つ自由流動性である。
【０３５２】
目的は、実験室スケール、パイロットスケールおよび商業的スケールにおいて、より小さい結晶サイズ、ＰＳＤおよび低い凝集性を与えるスケーラブルな結晶化方法であった。望ましいＰＳＤプロファイルは次ン通りであった：ｄ（０．１）＜５μｍ、ｄ（０．５）＜１５μｍ、およびｄ（０．９）＜４０μｍ。前記方法は、アセトン添加に先立って水相で開始される自発的な結晶化に基づいている。結晶化に影響する重要な因子は、結晶化溶液の初期濃度である。当該新規な結晶化法では、蒸発の最後において低下した水容積比は２．１４ｖ／ｗから１．７〜１．８ｖ／ｗである。溶液のより高い濃度は、自然蒸発操作の最後における自発的な結晶化の開始を確実にし、またより高い過飽和レベルおよびより低い結晶サイズを与える。
【０３５３】
実施例２：  ラキニモドナトリウムの再結晶化―実験室スケール（実験室スケールのバッチＡおよびＢ）
ラキニモドナトリウムの再結晶化が、実験室スケール（バッチＡ）で次のようにして行われた。
【０３５４】
蒸発を含むラキニモドＮａ再結晶化工程の全ての操作は、撹拌機、温度計および加熱および冷却のための循環浴を設けた透明な撹拌されたガラスリアクタ中において、実験室スケールで行われた。
【０３５５】
２５ｇの粗製Ｎａラキニモドおよび２７５ｍＬの脱イオン水を、２５０ｍＬの撹拌されたジャケット付のガラス製リアクタの中に導入する。前記固体が完全に溶解し、該溶液を濾紙を通して濾過した後に、該混合物を撹拌し、７０℃に加熱しする。得られた透明な濾液を、循環浴、撹拌機、温度計および減圧蒸留システムを備えた２５０ｍＬのジャケット付ガラス製リアクタに導入する。
【０３５６】
減圧が適用され、水は撹拌しながら蒸発され、蒸発の際の圧力は３８〜４０ｍｂａｒ、ジャケット温度は５５℃である。
【０３５７】
約２／３容積の蒸発の後、液体レベルより上のリアクタ壁において自発的な結晶化が観察された。
【０３５８】
この蒸留は、残渣容積が４５ｍＬに達するまで継続され、次いで大気圧にされて、該バッチは５０℃で１時間撹拌される。この工程で、激しい結晶化が起きる。
【０３５９】
得られたスラリーに２００ｍＬのアセトンを１時間で添加し、該バッチを５０℃で更に１時間撹拌する。
【０３６０】
該バッチを１時間で０〜５℃にまで冷却し、ブフナーフィルタで濾過する。固体ケーキを７５ｍＬのアセトンで洗浄する。
【０３６１】
生成物（２８．０ｇ）が回収され、減圧下に５０℃のオーブンで一定重量にまで乾燥する。乾燥生成物：２３．８ｇ；  結晶化収率：９５．２％
＜分析＞
顕微鏡観察：  棒状粒子
マルバーンによる粒子サイズ分布
Ｄ（０．１）＝２．３μｍ；  Ｄ（０．５）＝１０．８μｍ；  Ｄ（０．９）＝３２．７μｍ
実施例３：  ラキニモドナトリウムの再結晶化−実験室スケール（実験室スケールバッチＢ）
ラキニモドナトリウムの再結晶化は、実験室スケール（バッチＢ）で次のようにして行われた。
【０３６２】
蒸発を含むラキニモドＮａ再結晶化工程の全ての操作は、撹拌機、温度計および加熱および冷却のための循環浴を装備した透明な撹拌されたガラス製リアクタ中において、実験室スケールで行われた。
【０３６３】
２５ｇの粗製Ｎａラキニモドおよび２７５ｍＬの脱イオン水を、２５０ｍＬの撹拌されたジャケット付きガラス製リアクタの中に導入した。固体の溶解が完了し他後に該混合物を撹拌し、７０℃に加熱し、濾紙を通して溶液を濾過した。得られた透明なろ液を２循環浴、撹拌機、温度計および真空蒸留システムを装備した５０ｍＬのジャケット付きのガラス製リアクタに導入した。減圧を適用して撹拌しながら水を蒸留し、蒸発の間の圧力は３８〜４０ｍｂａｒであり、ジャケット温度は５５℃である。蒸留の際、残留容積が約１２０ｍＬに達したときに、リアクタ壁上で自発的な結晶化が観察される。蒸留は、残留容積が４５ｍＬに達するまで継続され、次いで大気圧とし、該バッチを５０℃で１時間撹拌する。この工程において、激しい結晶化が起きる。
【０３６４】
得られたスラリーに２００ｍＬのアセトンを１時間で添加し、該バッチを５０℃で更に１時間撹拌する。
【０３６５】
該バッチを１時間の間に０〜５℃に冷却し、この温度で更に１時間撹拌して、ブフナーフィルタで濾過する。固体ケーキを７５ｍＬのアセトンで洗浄する。
【０３６６】
生成物（２７．５ｇ）が回収され、減圧下に５０℃のオーブンで一定重量にまで乾燥する。乾燥生成物：２３．６５ｇ；  結晶化収率：９４．６％
＜分析＞
顕微鏡観察：  棒状粒子
マルバーンによる粒子サイズ分布
Ｄ（０．１）＝２．６μｍ；  Ｄ（０．５）＝１２．４μｍ；  Ｄ（０．９）＝３４．３μｍ
【表６】
2016514162.tif 000031
【０３６７】
＜実施例２および実施例３の考察＞
実施例２および実施例３の結果は表５に纏められている。表５は、当該方法が信頼性をもって、再結晶化されたラキニモドナトリウム粒子の混合物を生成することを示しており、ここでは（ｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の９０％以上が４０ミクロン未満のサイズを有し、（ｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の５０％以上が１５μ未満のサイズを有し、また（ｉｉｉ）ラキニモドナトリウム粒子の全容積量の１０％以上が５ミクロン未満のサイズを有している。
【０３６８】
実施例４：  ラキニモドナトリウムの再結晶化…製造スケール（製造スケールバッチＣ，ＤおよびＥ）
ラキニモドナトリウムの再結晶化は、製造スケール（バッチＣ、ＤおよびＥ）で次のように行われた。
【０３６９】
製造スケールでのラキニモドＮａの再結晶化は、ガラスでライニングされた２５０リットルの二つのリアクタ（リアクタＩおよびリアクタＩＩ）の中で行われる。固体生成物は、２０ミクロンメッシュのハロステロイＣ−２２撹拌フィルタ乾燥機の中で濾過および乾燥される。
【０３７０】
バッチサイズは６．５〜７．５ｋｇの乾燥ＡＰＩである。
【０３７１】
粗製ラキニモドＮａのバッチは、１１容量のプロセス水と共にリアクタＩに導入される。該バッチは、固体が完全に溶解するまで撹拌しながら６０〜７３℃に加熱される。
【０３７２】
該リアクタＩの中の熱溶液は、１５〜２０分の間、加熱および撹拌しながら０．２μｍ濾過システムを通して循環される。この循環が完了した後、濾過された溶液は０．２μｍのフィルタを通してリアクタＩＩに移される。リアクタＩおよびフィルタを１．７５容量のプロセス水で洗浄し、その洗浄液をリアクタＩＩに移す。
【０３７３】
減圧を形成し、リアクタＩＩの中の溶液を、残留容積が１４〜１６リットル（約１．７〜１．８ｖ／ｗの水／重量粗製ラキニモドＮａ出発物質）に達するまで、Ｐ＜４５ｍｍＨｇおよびジャケット温度Ｔ＜６５℃で蒸発させる。この工程において、リアクタ壁上では自発的な結晶化が開始される。次いで、大気圧を形成し、ジャケット温度を４０〜５０℃に調節する。該バッチを１０分以上撹拌する。
【０３７４】
該バッチは４５℃で更に９０分撹拌され、７．９容量のアセトンが１．５〜２．５時間でリアクタに添加される。添加の間、リアクタ温度は４０〜５０℃に維持される。
【０３７５】
得られたスラリーを２〜５時間で０±４℃に冷却し、この温度で１０〜１５時間撹拌する。次いで、該スラリーを濾過乾燥機に移し、窒素圧下で固体を濾過する。
【０３７６】
そのケーキをアセトンで２回洗浄し（２×１０リットル）、窒素でパージし、次いで減圧下（Ｐ＜５０ｍｍＨｇ）および上昇温度（Ｔ＝３５±５℃）で撹拌しながら乾燥する。
【０３７７】
乾燥した生成物を取り出し、分析のためにサンプリングし、包装する。
【０３７８】
三つの典型的なＧＭＰ製造バッチについてのデータが、表６に要約されている。表６に提示されたＰＳＤ値は、実施例２および実施例３に提示された実験室スケールの実験結果との良好な一致を示している。
【表７】
2016514162.tif 000032
【０３７９】
バッチＣおよびＤは、低下した不純物レベル（表７）、並びに良好なバルク密度およびタップ密度（表６）を有していた。
【０３８０】
製造スケールで製造されたラキニモドナトリウム（２２の結晶化バッチ）の粉末密度分析は、バルク密度が０．２３７〜０．３６４ｇ／ｍＬの範囲で変化することを示している。タップ密度は０．４３２〜０．６０９ｇ／ｍＬである。
【０３８１】
このバッチＣおよびＤの分析結果は、表７および表８に示されている。
【表８】
2016514162.tif 000033
【０３８２】
【表９】
2016514162.tif 000034
【０３８３】
【表１０】
2016514162.tif 000035
【０３８４】
粗製および再結晶化されたラキニモドＮａの典型的なバッチの顕微鏡写真が、異なる倍率で、図５〜８に提示されている。
【０３８５】
＜実施例４の考察＞
前記改変された結晶化方法は、前記製造スケールにおいて粒子サイズ分布の良好な再現性を示した。比１．７〜１．８ｖ／ｗへの蒸発残留容積の低下および自発的結晶化の開始が、望ましい結晶サイズを与えた。改善された結晶化方法は、ｄ（０．９）＜４０μｍのレベルへの結晶サイズの低下、および製造スケールにおける粒子サイズ分布の良好な再現性を示した。
【０３８６】
低下した結晶サイズの生成物は凝集化する傾向を持たず、均質化のために粉砕または崩壊を必要としない。スラリー対スラリー法により調製された同様のＰＳＤをもった生成物は、凝集し、従って製剤化に問題がある。
【０３８７】
改変された結晶化方法はまた、望ましい密度および純度プロファイルを有するラキニモドをもたらす。
【０３８８】
この改善された結晶化方法はまた、有機不純物、例えばＭＣＱＭＥからの効果的な精製を与える。
【０３８９】
表９に示されたデータは、商業的スケールのラキニモドナトリウムバッチの再結晶化による、ＭＣＱＭＥ不純物の完全な除去を示している。この中間体は遺伝毒性の可能性を有しているので、検出不可のレベルまで精製すべきであろう。該再結晶化法はまた、他の全ての既知有機不純物の検出限界未満のレベルへの精製を提供する。
【０３９０】
粗製ラキニモドナトリウムおよび再結晶化ラキニモドナトリウムの典型的なバッチの、異なる倍率での顕微鏡写真が図５〜図８に提示されており、両生成物の棒状の形態を示している。同時に、図５および図６に提示された粗生成物は、図７および図８の再結晶化された「結晶」生成物よりもはるかに凝集している。
【０３９１】
実施例５：  ラキニモドナトリウムの医薬組成物のラキニモドカプセル
ラキニモドカプセルは、ＰＣＴ国際出願公開番号ＷＯ ２００７／１４６２４８の実施例２に記載された方法に従って製造された。この先行文献の全体を、本明細書の一部として援用する。ＷＯ ２００７／１４６２４８の実施例２の工程が実行される。各カプセルは、０．６ｍｇのラキニモドと等価な０．６４ｍｇのラキニモドナトリウムを含有する。
【０３９２】
該カプセルは、ラキニモドの量に対して、ＨＰＬＣに基づく仕様内の量の不純物を有している。
【０３９３】
該カプセルは、１．５％以下の水含量を有している。
【０３９４】
カプセル化された医薬組成物の溶解プロファイル、含量均一性、および残留溶媒は、画集国薬局方＜７１１＞（溶解）、合衆国薬局方＜９０５＞（均一性）および合衆国薬局方＜４６７＞に準拠している。
【０３９５】
各カプセルは、ラベルに表示された量の９０．０〜１１０．０％を含有している。
【０３９６】
該カプセルは、ＮＭＴ１０３ｃｆｕ／ｇの総計の好気性微生物カウント（ＴＡＭＣ）、ＮＭＴ１０２ｃｆｕ／ｇの総計の酵母／カビ合併カウント（ＴＹＭＣ）を含んでおり、また１ｇの中に大腸菌は存在しない。
【０３９７】
＜実施例５の考察＞
実施例５は、商業的スケールの製造において、ラキニモドの医薬組成物は検出不能レベルまたは低レベルの極性不純物および非極性不純物を伴って調製することができる。
【０３９８】
実施例６：  ラキニモドナトリウム参照標準の調製
ラキニモドナトリウムの一次参照標準バッチは、ラキニモドナトリウムバッチの結晶化と、これに続く水／アセトン混合物（１：４．５ｗ／ｗ）からの結晶化による精製によって調製された。この結晶化は、薬物物質バッチを加熱しながら水中に溶解することによって行われた。この透明な溶液を濾過し、減圧下で既知の残留容積まで濃縮した。アセトンを加え、該溶液を冷却した。得られた結晶を濾過し、洗浄し乾燥した。このバッチのクロマトグラフィー純度は、１００．０％であることが分かった。極性および非極性不純物の総計はＬＴ０．０５％であり、ＤＥＬＡＱの含量はＬＴ０．１％であり、またラキニモド酸含量はＬＴ０．２％であった。
【０３９９】
実施例７：  ＭＣＱの調製
ＭＣＱは白色固体である。ＭＣＱの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化２２】
2016514162.tif 000036
【０４００】
ＭＣＱは次のようにして調製された：ＭＣＱＣＡおよびＤＭＳＯを７５℃で２時間加熱し、次いで室温に冷却した。水を加え、濾過により沈殿を回収し、水で洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４０１】
ＭＣＱは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４０２】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＭＣＱＣＡの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴づけは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置においてＤＭＳＯ中で行われた。ピークの割当てが表１０に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図９および図１０に提示されている。
【表１１】
2016514162.tif 000037
【０４０３】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
ＭＣＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図１１に示したスペクトルはＭＣＱの分子量と一致している。ＭＣＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表１１に提示されている
【表１２】
2016514162.tif 000038
【０４０４】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。ＭＣＱについての結果は表１２に提示されている。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。
【表１３】
2016514162.tif 000039
【０４０５】
＜赤外分光分析＞
ＭＣＱのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図１２に示す。バンド割当ての要約が表１３において提供される。
【表１４】
2016514162.tif 000040
【０４０６】
実施例８：  ＭＣＱＣＡの調製
ＭＣＱＣＡは白色固体である。ＭＣＱＣＡの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化２３】
2016514162.tif 000041
【０４０７】
ＭＣＱＣＡは次のようにして調製された。
【０４０８】
酢酸中２．８Ｍ・ＨＣｌ溶液の中のＭＣＱＥＥ混合物を、還流コンデンサを用いて６５℃で６時間加熱した。この混合物を室温に冷却し、２−プロパノールで希釈し、更に８℃に冷却した。結晶を濾別し、２−プロパノールで洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４０９】
ＭＣＱは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４１０】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＭＣＱの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、Ｄ２Ｏ＋ＫＯＨの中で行われた。ピークの割当てが表１４に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図１３および図１４に提示されている。
【表１５】
2016514162.tif 000042
【０４１１】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
ＭＣＱＣＡＡの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図１５に示したスペクトルはＭＣＱＣＡの分子量と一致している。ＭＣＱＣＡのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表１５に提示されている
【表１６】
2016514162.tif 000043
【０４１２】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。
【０４１３】
ＭＣＱＣＡについての結果は表１６に提示されている。
【表１７】
2016514162.tif 000044
【０４１４】
＜赤外分光分析＞
ＭＣＱＣＡのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図１６に示す。バンド割当ての要約が表１７において提供される。
【表１８】
2016514162.tif 000045
【０４１５】
実施例９：  ＭＣＱＭＥの調製
ＭＣＱＭＥは白色ないし黄色の固体である。ＭＣＱＣＡの分子構造、化学式および分子量が以下に与えられる。
【化２４】
2016514162.tif 000046
【０４１６】
ＭＣＱＭＥはの調製は、ＤＭＦ中のマロン酸ジメチルのナトリウムメトキシド溶液との反応による、ジメチルマロン酸ナトリウムの形成で開始された。次いで、中間体のＭＣＩＡをジメチルマロン酸ナトリウムと反応させて、ＭＣＱＭＥナトリウム塩を形成した。最後に、ＭＣＱＭＥナトリウム塩を酸性化してＭＣＱＭＥとし、これを水で洗浄して乾燥下。以下はＭＣＱＭＥの調製の詳細な説明である。
【化２５】
2016514162.tif 000047
【０４１７】
ＤＭＦ（６６．５ｋｇ［７０．４リットル］）、マロン酸ジメチル（９．６ｋｇ［７２．７モル、８．３リットル］）、およびナトリウムメトキシド（１１．５ｋｇ［６３．９モル］）の３０％メタノール溶液をリアクタに充填した。この反応混合物を撹拌しながら８２℃〜８８℃に加熱し、この温度で１．５〜２．５時間維持して、マロン酸ジメチルナトリウムを形成した。次いで、この混合物を３０〜４０℃に冷却した。減圧を適用し、リアクタジャケット温度を徐々に加熱して、メタノールを蒸発により除去した。メタノールの蒸発の後（１２ｋｇ［１４．５リットル］未満の留出物）、窒素で減圧を解除し、反応混合物を８２℃〜８８℃に加熱した。次いで、ＭＣＩＡ（８．５ｋｇ［４０．１モル］）を反応混合物に徐々に加え、ＤＭＦ（１０ｋｇ［１０．６リットル］）で洗浄した。リアクタの内容物を７５℃未満に冷却し、減圧を適用し、リアクタジャケット温度を徐々に上昇させてメタノールを蒸発させた（１２ｋｇ［１５リットル］の留出物）。減圧を窒素で解除死、反応混合物を１２℃〜３５℃に冷却した。処理水（１１９Ｋｇ）を徐々に添加し、反応混合物温度を１２℃〜３５℃に維持し、次いで反応混合物を４２〜４８℃に加熱した。３２％ＨＣＬ水溶液（１１．１ｋｇ［９７．３モル］）を２〜３時間で加え、供給ラインの中の残留塩酸溶液をＤＭＦで洗い流した。形成されたスラリーを２０℃〜３０℃に冷却し、３０分以上その温度に維持した。
【０４１８】
このスラリーを、濾過乾燥機へと徐々に移送した。該スラリーを加圧することにより母液を除去した。処理水（各サイクルについて２９．８ｋｇ）を前記濾過乾燥機に加え、圧搾下。流出する洗浄液のｐＨがＮＬＴ４になるまで、前記過乾燥機を水で洗浄した。生成物を、減圧下に４０℃〜５０℃（濾過乾燥機のジャケット温度）で乾燥した
減圧乾燥は、濾過乾燥機からのサンプルのＬＯＤが２．０％未満で、且つ水含量（カール・フィッシャー法による）が０．５％以下になるまで行われた。
【０４１９】
次いで、ジャケットを２０℃〜３０℃に冷却し、乾燥ＭＣＱＭＥを排出させた。
【０４２０】
収率は６２％〜８７％であった。
【０４２１】
この乾燥ＭＣＱＭＥの凝集を解除し、分析し、放出した。
【０４２２】
実施例１０：  ＭＣＱＥＥの調製
ＭＣＱＥＥは明るい黄色の固体である。ＭＣＱＥＥの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化２６】
2016514162.tif 000048
【０４２３】
ＭＣＱＥＥは次のようにして調製された。
【０４２４】
ＭＣＩＡおよびマロン酸ジエチルのＤＭＦ中の溶液に水素化ナトリウムを加えた。この混合物を徐々に９５℃まで加熱し、３．５時間撹拌し、次いで３５℃まで冷却した。該反応混合物を水で急冷し、次いで３７％ＨＣｌで酸性化した。８℃で１時間後、該混合物を濾過し、水で洗浄し（母液のｐＨが４．５になるまで）、４０℃の減圧オーブン中で乾燥した。粗製生成物を、８５℃のエタノール中に溶解し、続いて徐々に冷却（氷水浴中で）することにより結晶化させた。得られた結晶を濾過し、エタノールで洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。
【０４２５】
参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４２６】
ＭＣＱＥＥは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４２７】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＭＣＱＥＥの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＣＤＣｌ３の中で行われた。ピークの割当てが表１８に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図１７および図１８に提示されている。
【表１９】
2016514162.tif 000049
【０４２８】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
ＭＣＱＥＥの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図１９に示したスペクトルはＭＣＱＥＥの分子量と一致している。ＭＣＱＣＡのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表１９に提示されている。
【表２０】
2016514162.tif 000050
【０４２９】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。
【０４３０】
ＭＣＱＥＥについての結果は表２０に提示されている。
【表２１】
2016514162.tif 000051
【０４３１】
＜赤外分光分析＞
ＭＣＱＥＥのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図２０に示す。バンド割当ての要約が表２１において提供される。
【表２２】
2016514162.tif 000052
【０４３２】
実施例１１：  ５−ＨＬＡＱの調製
５−ＨＬＡＱは、白色固体である。５−ＨＬＡＱの分子構造、化学式および分子量が下記に与えられる。
【化２７】
2016514162.tif 000053
【０４３３】
５−ＨＬＡＱは、殆どの有機溶媒ならび酸性水媒質中において不安定である。従って、通常用いられる方法による精製は極めて困難である。結局、物質の精製は、二酸誘導体の形成と、それに続く塩基性加水分解、酸による沈殿および迅速な濾過により行われた。
【０４３４】
５−ＨＬＡＱは、以下に記載する多段階法により調製された。
【化２８】
2016514162.tif 000054
【０４３５】
この合成には次のことが含まれる：１）２−アミノ−６−メトキシ安息香酸（化合物１）からの５−ＭｅＯ−ラキニモド（化合物２）の調製；２）５−ＨＬＡＱ（化合物３）の調製；３）二酢酸ラキニモド誘導体（化合物４）を製造するためのフェノール基のアセチル化；４）精製された５−ＨＬＡＱ（化合物５）を製造するための二酢酸誘導体の加水分解。
【０４３６】
５−ＨＬＡＱの調製のための手順を、以下の段落で更に段階的に説明する：
＜５−ＭｅＯ−ラキニモド（化合物２）＞
５−ＭｅＯ−ラキニモドは、２−アミノ−６−メトキシ安息香酸（化合物１）から出発する４段階合成法によって得られた。これらの４段階は、ＡＣＢＡから出発するラキニモドの製造方法と同一である。
【０４３７】
＜粗製５−ＨＬＡＯ（化合物３）＞
５−ＭｅＯ−ラキニモドをジクロロメタン中に溶解し、該溶液を０〜５℃に冷却した。ＡｌＣｌ３を加え、反応混合物を０〜５℃で０．５時間撹拌し、続いて周囲温度で７時間撹拌した。該溶液を３０℃（水浴中）で蒸発乾固し、水を加えた。得られた灰色固体を濾過し、１Ｎ・ＨＣｌで洗浄し、減圧オーブン中において３０℃で乾燥した。
【０４３８】
＜二酢酸ラキニモド（化合物４）＞
無水酢酸を、ピリジン中の粗製５−ＨＬＡＱの溶液に加え、該反応混合物を室温で１時間撹拌した。ピリジンを蒸発乾固させ、油状残渣をジクロロメタン中に溶解させた。この有機溶液を１Ｎ・ＨＣｌで洗浄し、続いて水で洗浄した。この粗生成物２を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン中の１％メタノール）により精製した。
【０４３９】
＜５−ＨＬＡＱ（化合物５）＞
１Ｎ・ＮａＯＨ溶液を、エタノール中の４の懸濁液に加えた。この反応混合物を４０分間撹拌し、エタノールを蒸発させた。残渣を５Ｎ・ＨＣｌでｐＨ１〜２まで酸性化し白色固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥した。５−ＨＬＡＱが、ＨＰＬＣによる純度９９％を持った白色固体として得られた。
【０４４０】
参照標準として使用するために適した十分な純度の物質が得られた。
【０４４１】
５-ＨＬＡＱは、下記に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ-ＩＲによって特徴付けされた。
【０４４２】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＭＣＱＥＥの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＤＭＳＯの中で行われた。ピークの割当てが表２２に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図２１および図２２に提示されている。
【表２３】
2016514162.tif 000055
【０４４３】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
５−ＨＬＡＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。
【０４４４】
図２３に示したスペクトルは５−ＨＬＡＱの分子量と一致している。５−ＨＬＡＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表２３に提示されている。
【表２４】
2016514162.tif 000056
【０４４５】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。５−ＨＬＡＱについての結果が表２４に提示されている。
【表２５】
2016514162.tif 000057
【０４４６】
＜赤外分光分析＞
５−ＨＬＡＱの減衰全反射（ＡＴＲ）ＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図２４に示す。バンド割当ての要約が表２５に提供される。
【表２６】
2016514162.tif 000058
【０４４７】
実施例１２：  ＤＥＬＡＱの調製
ＤＥＬＡＱはオフ―ホワイトないし淡黄色の固体である。ＤＥＬＡＱの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化２９】
2016514162.tif 000059
【０４４８】
ＤＥＬＡＱは次のようにして調製された。
【０４４９】
ＭＣＱＭＥ、ｎ−ヘプタン、ｎ−オクタンおよびアニリンをジャケット付リアクタの中でＴｊ＝１３５℃に加熱し、揮発物を３時間蒸留した。蒸留を停止し、この混合物にｎ−ヘプタンおよびアニリンの追加部分を加えた。蒸留を更に２時間、Ｔｊ＝１３５℃で継続した。該反応混合物を室温に冷却し、ｎ−ヘプタンを加えた。形成された結晶性固体を濾過により回収し、ｎ−ヘプタンで洗浄した。この湿った物質を、５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。
【０４５０】
参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４５１】
ＤＥＬＡＱは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４５２】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＭＣＱＥＥの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＣＤＣｌ３の中で行われた。ピークの割当てが表２６に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図２５および図２６に提示されている。
【表２７】
2016514162.tif 000060
【０４５３】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
ＤＥＬＡＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図２７に示したスペクトルはＤＥＬＡＱの分子量と一致している。ＤＥＬＡＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表２７に提示されている。
【表２８】
2016514162.tif 000061
【０４５４】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。ＤＥＬＡＱについての結果は表２８に提示されている。
【表２９】
2016514162.tif 000062
【０４５５】
＜赤外分光分析＞
ＤＥＬＡＱのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図２８に示す。バンド割当ての要約が表２９において提供される。
【表３０】
2016514162.tif 000063
【０４５６】
実施例１３：  ３−ＨＬＡＱの調製
３−ＨＬＡＱは黄色の固体である。３−ＨＬＡＱの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化３０】
2016514162.tif 000064
【０４５７】
３−ＨＬＡＱは次のようにして調製された。
【０４５８】
水中のラキニモドナトリウムの溶液を、水中のリン酸水素二ナトリウム２水和物およびオキソン（２ＫＨＳＯ５．ＫＨＳＯ４．Ｋ２ＳＯ４）の溶液に滴下により加えた。１０％ＮａＯＨを、ｐＨが８．０二なるまで加えた。この溶液を室温で３０分間混合した。得得られた固体を濾過し、水で洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。この粗製生成物を、酢酸エチルおよびｎ−ヘプタン混合物から２回再結晶させた。それぞれの時点で、混合物を１０℃に冷却し１時間撹拌することにより生成物を単離した。得られた結晶を濾別し、ｎ−ヘプタンで洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥させた。
【０４５９】
参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４６０】
３−ＨＬＡＱは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４６１】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
３−ＨＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＣＤＣｌ３の中で行われた。ピークの割当てが表３０に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図２９および図３０に提示されている。
【表３１】
2016514162.tif 000065
【０４６２】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
３−ＨＬＡＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図３１に示したスペクトルは３−ＨＬＡＱの分子量と一致している。３−ＨＬＡＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表３１に提示されている。
【表３２】
2016514162.tif 000066
【０４６３】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。３−ＨＬＡＱについての結果は表３２に提示されている。
【表３３】
2016514162.tif 000067
【０４６４】
＜赤外分光分析＞
３−ＨＬＡＱのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図３２Ａに示す。バンド割当ての要約が表３３において提供される。
【表３４】
2016514162.tif 000068
【０４６５】
実施例１４：  スピロ−ＬＡＱの調製
スピロ−ＬＡＱは白色の粉末である。スピロ−ＬＡＱの分子構造、化学式および分子量は下記に与えられる。
【化３１】
2016514162.tif 000069
【０４６６】
スピロ−ＬＡＱは次のようにして調製された。
【０４６７】
水中のラキニモド（遊離酸）、硝酸アンモニウムセリウム（ＩＶ）、エタノールおよび酢酸の溶液を、１時間撹拌した。次いで、沈殿を濾別し、水に続いてエタノールで洗浄し、５０℃の減圧オーブン中で乾燥させた。
【０４６８】
参照標準としての使用に適した十分な純度の物質が得られた。
【０４６９】
スピロ−ＬＡＱは、以下に詳述するように、ＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲによって特徴付けされた。
【０４７０】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
スピロ−ＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＤＭＳＯの中で行われた。ピークの割当てが表３４に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図３３および図３４に提示されている。
【表３５】
2016514162.tif 000070
【０４７１】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
スピロ−ＬＡＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。３５Ｃｌおよび３７Ｃｌを含むＮＳ信号間の比は、これら同位体の天然の存在比（約３：１）に対応する。図３５に示したスペクトルはスピロ−ＬＡＱの分子量と一致している。スピロ−ＬＡＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表３５に提示されている。
【表３６】
2016514162.tif 000071
【０４７２】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。スピロ−ＬＡＱについての結果は表３６に提示されている。
【表３７】
2016514162.tif 000072
【０４７３】
＜赤外分光分析＞
スピロ−ＬＡＱのＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。代表的なスペクトルを図３６に示す。バンド割当ての要約が表３７において提供される。
【表３８】
2016514162.tif 000073
【０４７４】
実施例１５：  ＭＥＧ−ＬＡＱの調製
ＭＥＧ−ＬＡＱの分子構造、化学式および分子量は以下の通りであった。
【化３２】
2016514162.tif 000074
【０４７５】
ラキニモドナトリウムおよびメグルミンの水世言う咳を還流し、空気を用いて約１月の間バブリングさせた。得られた溶液を水で二回希釈し、濃塩酸でｐＨ１〜２に酸性化した。該水溶液を濾過し、続いてクロロホルムで抽出した。次いで、この水溶液に、中和されるまで濃縮された水酸化アンモニウム溶液を加えた。該溶液を蒸発させ、得られた茶色のシロップをメタノールで洗浄した。メグルミンが固化し、濾過された後、このメタノール溶液にシリカゲルを加えた。溶媒を蒸発させ、得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した（移動相：ジクロロメタン中の２０％メタノール）。
【０４７６】
この合成および精製は、標準としての使用に適した十分な純度を与えた。
【０４７７】
実施例１６：  ＢＨ−３−ＨＬＡＱの調製
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの分子構造、化学式および分子量が下記に与えられる。
【化３３】
2016514162.tif 000075
【０４７８】
１ＮのＮａＯＨ溶液を、水の中の３−ＨＬＡＱの懸濁液に加えた。黄色の溶液を０．５時間撹拌し、続いて１ＮのＨＣｌ溶液を加えた。白色固体を含有するこのこの水溶液を、酢酸エチルで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。この懸濁液を濾過し、蒸発乾固させ、固体残渣をＩＰＡ：水混合物（１：３．７５ｖ／ｖ）からの結晶化によって精製した。得られた白色の固体を５０℃の減圧オーブン中で乾燥した。
【０４７９】
初期の定性時において、このＢＨ−３−ＨＬＡＱ標準は、ＩＲ，元素分析、ＭＳおよびＮＭＲにより前記分子構造に一致することが示された。更なる試験には、クロマトグラフィー精製および乾燥時のロスが含まれる。
【０４８０】
この合成および精製は、標準としての使用に適した十分な純度の物質を与える。
【０４８１】
構造解明の目的のために、ＢＨ−３−ＨＬＡＱのサンプルを、下記の通りＮＭＲ、ＭＳ、元素分析およびＦＴ−ＩＲにより特徴付けした。
【０４８２】
＜核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光分析＞
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲによる特徴付けは、Ｂｒｕｋｅｒ・３００ＭＨｚ装置において、ＤＭＳＯの中で行われた。ピークの割当てが表３８に要約されている。１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、それぞれ図３７および図３８に提示されている。
【表３９】
2016514162.tif 000076
【０４８３】
＜質量分光分析（ＭＳ）＞
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの質量スペクトルは、電子スプレーイオン化を陽イオンモード（ＥＳ＋）で使用するＱ−ＴＯＦマイクロ−ＴＭ−ＭＩＣＲＯＭＡＳＳ（ＴＯＦ）質量分光分析機上で得られた。図３９に示したスペクトルはＢＨ−３−ＨＬＡＱの分子量と一致している。ＢＨ−３−ＨＬＡＱのＥＳ＋質量スペクトルにおける主信号の属性が表３９に提示されている。
【表４０】
2016514162.tif 000077
【０４８４】
＜ＦＴ−ＩＲ＞
ＢＨ−３−ＨＬＡＱに減衰全反射（ＡＴＲ）ＦＴ−ＩＲスペクトルを、Ｎｉｃｏｌｅｔ６７００「サーモ・サイエンティフィック」ＦＴ−ＩＲ装置で測定した。図４０は典型的なスペクトルを示している。バンド割当ての要約が表４０に示されている。
【表４１】
2016514162.tif 000078
【０４８５】
＜元素分析＞
元素分析のための試験は、パーキン−エルマー２４００シリーズＩＩ・ＣＨＮアナライザーで行われた。Ｃ，ＨおよびＮの重量パーセンテージは正確であり、±０．３％以内で再現可能である。ハロゲンについての精度は±０．５％である。ＢＨ−３−ＨＬＡＱについての結果は表３６に提示されている。
【表４２】
2016514162.tif 000079
【０４８６】
実施例１７：  ラキニモドナトリウム薬剤物質の仕様
【化３４】
2016514162.tif 000080
【０４８７】
ラキニモドナトリウムは、水中で自由に溶解する白色ないしオフホワイトの粉末であり、これは光から保護された壁を閉じた容器内において室温で保存されるべきである。
【０４８８】
ラキニモドナトリウムの仕様は次の通りである。
【表４３】
2016514162.tif 000081
【０４８９】
ＭＣＱＭＥについて、別の仕様はＭＮＴ１０％およびＬＴ１０％である。
【０４９０】
表４３は、放出時および安全性試験の際の薬剤物質中の不純物レベルを決定するために現在使用されている非薬局方的分析法を列挙している。各不純物についての方法番号ならびに検出限界および定量限界も列挙されている。
【表４４】
2016514162.tif 000082
【０４９１】
実施例１８：  ラキニモドナトリウム薬剤製品の仕様
ラキニモド薬剤製品は、ラキニモドナトリウムの０．６ｍｇカプセルとして調製された。ラキニモドナトリウム（０．６ｍｇ）カプセルの仕様は次の通りである。
【表４５】
2016514162.tif 000083
【０４９２】
完成品の安定性プロトコルパッケージサイズは、各市販の容器／クロージャーおよび／またはユニドーズ構成の最大および最小のものであった。
【表４６】
2016514162.tif 000084
【０４９３】
以下の実施例は、放出の時点および安定性試験の際における薬剤製品中の不純物レベル測定のための非薬局方的分析法を記載するものである。方法番号並びに検出限界および定量限界もまた、対応の確認番号と共に列記される。
【表４７】
2016514162.tif 000085
【０４９４】
実施例１９：  ラキニモド薬剤物質サンプル中のＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、５−ＨＬＡＱ、ＭＣＱＭＥおよびＭＣＱＥＥの量を測定する方法
ラキニモドナトリウム薬剤物質をＨＰＬＣにより分析した。ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱＥＥおよび５−ＨＬＡＱの量を、以下のＨＰＬＣ法を用いて測定した。
【０４９５】
１．ＨＰＬＣ条件
【表４８】
2016514162.tif 000086
【０４９６】
全ての調製は、不透明なキャップを備えた茶色のフラスコ中で行われる。調製の直後に、この溶液を冷蔵庫の中、または５℃に冷却された自動サンプラーラックに配置する。
【０４９７】
２．標準溶液の調製
２．１  貯蔵標準溶液（溶液Ｓ）
約１５ｍｇのラキニモドナトリウム標準品を、５０ｍＬ容積のフラスコ内に正確に秤量する。希釈液Ａを用いて前記容積の２／３にまで希釈し、冷超音波処理浴中で約２分間超音波処理し、希釈液Ａを用いて前記容積にまで希釈する。貯蔵標準溶液の濃度は約３００μｇ／ｍＬである。貯蔵標準溶液は、冷蔵庫内で１月保存されてよい。
【０４９８】
２．２  検定のための標準溶液（溶液Ａ）
３ｍＬの貯蔵標準溶液を、希釈液Ｂで１０ｍＬに希釈する（希釈倍率３．３３）。ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。標準溶液Ａは、冷蔵庫内で保存したときは７日間使用してよい。
【０４９９】
２．３  ＭＣＱＣＡ貯蔵標準溶液
１８ｍｇのＭＣＱＣＡ標準を１００ｍＬ容積のフラスコの中に正確に秤量する。アセトニトリルで規定容積まで希釈し、物質が完全に溶解するまで超音波処理する…貯蔵ＭＣＱＣＡ溶液。
【０５００】
ＭＣＱＣＡの濃度は約１８０μｇ／ｍＬである。
【０５０１】
ＭＣＱＣＡ貯蔵標準溶液は、新鮮に調製されるべきである。
【０５０２】
２．４  不純物測定のための標準溶液（溶液Ｉ）
希釈液Ｂの中において、標準溶液Ａにおけるラキニモドの作業濃度に関して、０．２％濃度のラキニモドおよび０．１％濃度のＭＣＱＣＡを含有する溶液を調製する。一例として、以下の方法を適用する。
【０５０３】
４．０ｍＬの検定用ラキニモドナトリウム標準溶液（溶液Ａ）および１．０ｍＬのＭＣＱＣＡ貯蔵世液を、１００ｍＬ容積のフラスコに移し、希釈液Ｂ（中間希釈溶液）を用いて規定の容積にする。
【０５０４】
２．５ｍＬのこの中間希釈液を、５０ｍＬ容積のフラスコに入れ、希釈液Ｂで規定の容積にする。
【０５０５】
ラキニモド標準品についての総希釈倍率は、１６６６．６７倍、ＭＣＱＣＡについては２０００である。
【０５０６】
ラキニモドナトリウムの濃度は約０．１８μｇ／ｍＬ（０．２％）である。
【０５０７】
ＭＣＱＣＡの濃度は約０．９μｇ／ｍＬ（０．１％、ＱＬレベル）である。
【０５０８】
標準溶液Ｉは、冷蔵庫内に保存したときは２４時間使用してよい。
【０５０９】
３．解像溶液の調製
３．１  混合溶液
以下の不純物の希釈液Ａの中の溶液を調製する。
【表４９】
2016514162.tif 000087
【０５１０】
混合溶液は次のように調製してよい：
約３ｍｇの各不純物を１００ｍＬ容積のフラスコ中に秤量し、希釈液Ａを用いて溶解および規定の容積まで希釈する…混合溶液。該混合溶液中の各不純物の濃度は約３０μｇ／ｍＬである。この混合溶液は、既知不純物の正確な保持時間の測定のためだけに使用され、約−２０℃で保存されたときは４月まで使用してよい。
【０５１１】
この目的のために、新鮮に調製された混合溶液は複数のアリコートに分割され、直ちに約−２０℃で保存される。解凍の後は、これらアリコートは再凍結されるべきでない。
【０５１２】
３．２  解像溶液
３ｍＬの貯蔵標準溶液（溶液Ｓ）および０，３ｍＬの混合溶液位を１０ｍＬ容積のフラスコに移し、希釈液Ｂで規定の容積まで希釈する。ラキニモドナトリウム形態の濃度は約９０μｇ／ｍＬである。各不純物の濃度は約０．９μｇ／ｍＬ（ラキニモドナトリウムに対して１％）である。解像溶液は、冷蔵庫内に保存すれば９日間使用してよい。
【０５１３】
４．サンプル調製
約１５ｍｇのラキニモドナトリウム結晶またはＤＳを、５０ｍＬ容積のフラスコの中に正確に秤量する。規定の容積の２／３まで希釈液Ａで希釈し、冷超音波処理浴中で約２分間超音波処理し、希釈液Ａで規定の容積まで希釈する…貯蔵サンプル溶液。
【０５１４】
該貯蔵サンプル溶液３ｍＬを希釈液Ｂで１０ｍＬにまで希釈する…作業サンプル溶液（希釈倍率３．３３）。
【０５１５】
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。
【０５１６】
該サンプルは、調製後２４時間以内またはそれ以前に分析しなければならない。
【０５１７】
５．手順
前記解像溶液、ブランク溶液、検定およびＩＤＤのための標準溶液、関連のＳＯＰに従うラキニモドサンプル溶液を注入する。
【０５１８】
６．システム適性試験
６．１  解像試験
１）ラキニモドピークの典型的な保持時間は、１５．５±２．０分である。
【０５１９】
２）ラキニモドピークについてのテーリング因子は、２．０以下であるべきである。
【０５２０】
３）ピーク間の解像因子ＮＬＴ２が達成されるべきである。
【０５２１】
４）特定の不純物ピークの典型的なＲＲＴは、以下の通りであるべきである。
【表５０】
2016514162.tif 000088
【０５２２】
６．２  システム精度試験
関連のＳＯＰに従ってシステム精度を試験するために、検定およびＩＤＤについてラキニモド標準を評価する。
【０５２３】
溶液Ｉ中のＭＣＱＣＡを用いて、当該システムの感度を試験する。Ｓｔｄの６回の注入の面積のＲＳＤ、並びにＳｔｄ１とＳｔｄｗの間の差は、ＮＭＴ２０％であるべきである。
【０５２４】
７．保持時間（ＲＴ）による同定
サンプルクロマトグラムにおいていられた主ピーク（ラキニモド）のＲＴは、標準溶液について得られたそれに対応すべきである。
【０５２５】
８．計算および報告
８．１  ラキニモドナトリウムについての検定計算
【数４】
2016514162.tif 000089
【０５２６】
ラキニモド酸含量を差し引いた後の乾燥ベースで、当該検定の計算結果を報告する。
【０５２７】
８．２  不純物の評価および計算
希釈されたラキニモドナトリウム標準（溶液Ｉ）に関して、計算が行われる。
【０５２８】
ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱ、ＭＣＱＥＥ、５−ＨＬＡＱおよび未知不純物の定量レベルは、０．０５％である。
【０５２９】
ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱ、ＭＣＱＥＥ、５−ＨＬＡＱおよび未知不純物の検出レベルは、０．０２％である。
【０５３０】
ＭＣＱＣＡの報告レベルは０．１０％である。
【０５３１】
ＭＣＱＣＡの検出レベルは０．０３％である。
【０５３２】
積分パラメータを調節して、面積がラキニモドナトリウム標準（溶液Ｉ）平均面積の１０％未満のピークを排除する。
【０５３３】
既知の不純物ピークを、当該システム適性クロマトグラムにおけるそれと、実際の対応する保持時間の±５％以内で相関させる。
【０５３４】
ラキニモドナトリウムにおける不純物の計算：
【数５】
2016514162.tif 000090
【０５３５】
ＲＲＦ…以下の比率として計算された不純物の相対的応答因子：ラキニモドナトリウム回帰直線の勾配／不純物回帰直線の勾配
ラキニモドナトリウムに関する相対的応答因子（ＲＲＦ）の値は次の通りである：
【表５１】
2016514162.tif 000091
【０５３６】
９．  不純物の報告
不純物は次の通り報告される：
【表５２】
2016514162.tif 000092
【０５３７】
図４１は、上記方法に従う解像試験クロマトグラムを提示している。
【表５３】
2016514162.tif 000093
【０５３８】
図４２は、上記方法に従う希釈溶液クロマトグラムを提示している
図４３は、上記方法に従う検定についての典型的なクロマトグラムを提示している。
【表５４】
2016514162.tif 000094
【０５３９】
図４４は、上記方法に従う不純物試験についての典型的なクロマトグラムを提示している。
【表５５】
2016514162.tif 000095
【０５４０】
実施例２０：  ラキニモド薬剤物質サンプル中のＮＥＡ、３−ＨＬＡＱおよびスピロ−ＬＡＱの量を決定する方法
ラキニモドナトリウム薬剤物質をＨＰＬＣにより分析した。ＮＥＡ、３−ＨＬＡＱおよびスピロ−ＬＡＱの量は、以下のＨＰＬＣ法を用いて決定した。
【０５４１】
１．ＨＰＬＣ条件
【表５６】
2016514162.tif 000096
【０５４２】
全ての準備は、茶色のフラスコ内で行われるべきである。メスフラスコおよびピペットは、使用前にアセトニトリルで洗浄することが推奨される。プラスチック製パスツールピペットの使用は排除されるべきである。
【０５４３】
２．標準溶液調製
２，１  ＮＥＡ標準貯蔵溶液
約２５μＬ（約２５ｍｇ）のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）標準品を５０ｍＬ容量のフラスコ内に秤量する。希釈液Ａで規定の容積まで希釈する。
【０５４４】
貯蔵標準溶液の濃度は約５００μｇ／ｍＬである。
【０５４５】
ＮＥＡ貯蔵標準溶液は、冷蔵庫内に保存したときには３週間使用してよい。
【０５４６】
２．２  ＮＥＡ標準一次希釈溶液
０．５ｍＬのＮＥＡ標準貯蔵溶液を、希釈液Ｂで５０ｍＬまで希釈する。
【０５４７】
Ｎ−エチルアニリンの濃度は約５μｇ／ｍＬである。
【０５４８】
２．３  ＮＥＡ作業標準溶液
０．５ｍＬのＮＥＡ標準貯蔵溶液を、希釈液Ｂで２５ｍＬまで希釈する（総希釈倍率…５０００）。
【０５４９】
Ｎ−エチルアニリンの濃度は約０．１μｇ／ｍＬ（作業濃度の約０．１％）である。
【０５５０】
ＮＥＡ作業標準溶液は、冷蔵庫内に保存したときは４日間使用してよい。
【０５５１】
３．解像溶液調製
３．１  ラキニモドナトリウム貯蔵溶液
１５ｍｇのラキニモドナトリウム標準を５０ｍＬ容積のフラスコの中に正確に秤量する。希釈液Ａで規定容積の２／３にまで希釈し、冷超温和処理浴中で約２分間超音波処理し、希釈塩基Ａで規定容積まで希釈する。
【０５５２】
ラキニモド貯蔵溶液は、冷蔵庫内に保存したときは１月間使用してよい。
【０５５３】
３．２  スピロ−ＬＡＱ貯蔵溶液
約２．５ｍｇのスピロ−ＬＡＱを５０ｍＬのメスフラスコ中に秤量する。９５％アセトニトリル−５％水の混合物を用いて溶解および希釈する。
【０５５４】
３．３  ３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液
約２．５ｍｇの３−ＨＬＡＱを５０ｍＬメスフラスコ中に秤量し、９５％アセトニトリル−５％水の混合物を用いて溶解および規定容積まで希釈する。
【０５５５】
３．４  解像溶液
以下のアリコートを５０ｍＬメスフラスコに移し、希釈液Ｂを用いて規定容積まで希釈する：１５ｍＬのラキニモドナトリウム貯蔵溶液、１．０ｍＬのスピロ−ＬＡＱ貯蔵溶液、１．０ｍＬの３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液、および０．１ｍＬのＮＥＡ標準貯蔵溶液。
【０５５６】
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。
【０５５７】
ＮＥＡ、スピロ−ＬＡＱおよび３−ＨＬＡＱの濃度は、約１ミクロンｇ／ｍＬ（１％）である。
【０５５８】
この解像溶液は、ラキニモド、ＮＥＡ、３−ＨＬＡＱおよびスピロ−ＬＡＱの保持時間の決定のためにのみ使用され、また−２０℃で保存したときには３８日間使用してよい。この目的のために、新鮮に調製された解像溶液は、複数のアリコートに分割して、直ちに−２０℃で保存すべきである。解凍の後、該溶液アリコートは再凍結すべきでない。
【０５５９】
回答後、注入前に、該像溶液を激しく混合する。
【０５６０】
回答後、冷蔵庫内に保存するときは、該解像溶液は４日間使用してよい。
【０５６１】
４．サンプル溶液調製
１５ｍｇのラキニモドナトリウム結晶またはＤＳを、５０ｍＬメスフラスコの中に正確に秤量する。希釈液Ｂを用いて規定容積の２／３まで希釈し、該物質が完全に溶解するまで超音波処理し、希釈液Ｂで規定容積に希釈する…サンプル貯蔵溶液。
【０５６２】
３ｍＬのサンプル貯蔵溶液を、希釈液Ｂで１０ｍＬまで希釈する（希釈倍率３．３３）。
【０５６３】
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。
【０５６４】
注：  調製の特後に、該サンプル溶液を冷蔵庫、または５℃に冷却された自動サンプラーに置く。該サンプルは、調製後１２時間以内に分析しなければならない。
【０５６５】
５．手順
関連のＳＯＰに従って、解像溶液、希釈液Ｂ（２または３倍）、標準溶液およびサンプル溶液を注入する。
【０５６６】
６．システム適性試験
６．１  解像試験
ラキニモドピークについて、典型的な保持時間は２．２±０．５分である。
【０５６７】
ＮＥＡピークについてについて、典型的な保持時間は１２．２±１．５分である。
【０５６８】
特定された不純物ピークのクロマトグラフィーマッピングは、次の順序であろう：３−ＨＬＡＱ、ＮＥＡおよびスピロ−ＬＡＱ。
【０５６９】
６．２  システム精度試験
関連のＳＯＰに従ってシステム精度を試験するために、標準品を評価する。
【０５７０】
２．３  ブランク
希釈液Ｂを注入して、システムピークを検出する。
【０５７１】
７．  評価および計算
ＮＥＡおよび何れか他の不純物についての定量限界は０．０６％である。
【０５７２】
ＮＥＡおよび何れか他の不純物についての検出限界は０．０２％である。
【０５７３】
標準面積の１５％未満の面積を持ったピークを排除するために、積分パラメータを調節する。
【０５７４】
０分からラキニモドのＲＴ＋１分までの間で溶出する全ての不純物ピークを無視する。
【０５７５】
次式に従って非極性不純物の含量を計算する：
【数６】
2016514162.tif 000097
【０５７６】
ＲＲＦが相対的応答因子である場合、不純物に対するＮＥＡの倍率は表に示す通り：
【表５７】
2016514162.tif 000098
【０５７７】
８．報告モード
【表５８】
2016514162.tif 000099
【０５７８】
図４５は、上記方法に従う解像試験クロマトグラムを提示している。
【表５９】
2016514162.tif 000100
【０５７９】
図４６は、上記方法に従う希釈クロマトグラムを提示している。
【表６０】
2016514162.tif 000101
【０５８０】
図４７は、上記方法に従う典型的なサンプルクロマトグラムを提示している。
【表６１】
2016514162.tif 000102
【０５８１】
実施例２１：  ラキニモド薬剤製品のサンプル中におけるＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、５−ＨＬＡＱ、ＭＣＱＭＥおよびＭＣＱＥＥの量を決定する方法
０．６ｍｇのラキニモドを含有するラキニモドカプセルを、ＨＰＬＣにより分析した。ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、５−ＨＬＡＱ、ＭＣＱＭＥおよびＭＣＱＥＥは、以下のＨＰＬＣ方法を用いて測定された。
【０５８２】
１．ＨＰＬＣ条件
【表６２】
2016514162.tif 000103
【０５８３】
全ての製剤は光から保護されるべきである。液体製剤には不透明のキャップを備えた茶色のフラスコを使用する。ガラス製パスツールピペットのみを使用する。標準溶液およびサンプル溶液は、調製後は２〜8℃の冷蔵を維持するべきである。
【０５８４】
２．標準溶液調製
２．１  ラキニモド標準貯蔵溶液（溶液Ｓ）
約１５ｇのラキニモドナトリウム標準を、二つ重複して、５０ｍＬメスフラスコの中に正確に秤量する。希釈液Ａを用いて規定の容積の２／３まで希釈し、冷超音波処理浴中で２分間超音波処理し、希釈液Ａで規定容積まで希釈する。
【０５８５】
標準貯蔵溶液の濃度は、約３００μｇ／ｍＬのラキニモドナトリウムである。
【０５８６】
標準貯蔵溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには１月間使用してよい。
【０５８７】
２，２  検定のためのラキニモド標準作業溶液（溶液Ａ）
３ｍＬの標準貯蔵溶液を、希釈液Ｂを用いて１０ｍＬに希釈する（希釈倍率３．３３）。
【０５８８】
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。ラキニモド（酸）として表される濃度は約８５μｇ／ｍＬである。
【０５８９】
標準作業溶液Ａは、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには７日間使用してよい。
【０５９０】
２．３  ＭＣＱＣＡ標準貯蔵溶液
約１８ｇのＭＣＱＣＡ標準を、１００ｍＬメスフラスコの中に正確に秤量する。アセトニトリルを用いて規定の容積まで希釈し、物質が完全に溶解するまで間超音波処理する（冷超音波処理浴中で）…貯蔵ＭＣＱＣＡ溶液
ＭＱＣＡの濃度は約１８０μｇ／ｍＬである。
【０５９１】
ＭＣＱＣＡ貯蔵標準溶液は、新鮮に調製されるべきである。
【０５９２】
２．４  不純物の測定のための標準溶液（溶液Ｉ）
標準溶液Ａにおけるラキニモドの作業濃度に関して、０．２％の濃度のラキニモドおよび０．１％の濃度のＭＣＱＣＡを含有する希釈液Ｂ中の溶液を調製する。一例として、以下の手順を適用する。
【０５９３】
４．０ｍＬの検定用ラキニモドナトリウム標準溶液（溶液Ａ）および１．０ｍＬのＭＣＱＣＡ貯蔵標準溶液を、１００ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液Ｂを用いて規定容積に希釈する（中間希釈）。
【０５９４】
この中間希釈液２．５ｍＬを５０ｍＬメスフラスコ内に配置し、希釈液Ｂを用いて規定の容積にする。
【０５９５】
ラキニモド標準についての総希釈倍率は１６６６．６７であり、ＭＣＱＣＡについては２０００である。
【０５９６】
ラキニモドナトリウムの濃度は約０．１８μｇ／ｍＬ（０．２％）である。
【０５９７】
ＭＣＱＣＡの濃度は約０．０９μｇ／ｍＬ（０．１％、ＱＬレベル）である。
【０５９８】
標準溶液Ｉは、冷蔵庫内で保存するときは２４時間使用してよい。
【０５９９】
３．解像溶液調製
３．１  混合溶液
溶媒として希釈液Ａを使用して、以下の潜在的な不純物標準（マーカー）を含有する溶液を調製する。
【表６３】
2016514162.tif 000104
【０６００】
上記混合溶液は次のようにして調製すればよい。
【０６０１】
約３ｍｇの各不純物標準／マーカーを、１００ｍＬのメスフラスコの中に秤量し、溶解し（超音波処理は許容可能）、希釈液Ａで規定容積まで希釈する。
【０６０２】
該混合溶液中の各不純物の濃度は、約３０μｇ／ｍＬである。
【０６０３】
混合溶液は、約−２０℃で凍結保存したときは４月までの間は使用してよい。
【０６０４】
この目的のために、新鮮に調製された混合溶液は、複数のアリコートに分割死、直ちに凍結して−２０℃で保存すべきである。解凍の後、当該アリコートは十分に混合すべきであり、また再凍結すべきではない。
【０６０５】
３．２  追加の不純物の貯蔵溶液
約３ｍｇのＭＣＱＥＥ（５−クロロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル）を１００ｍＬのメスフラスコん中に秤量し、溶解し（超音波処理が許容可能）、希釈液Ａで規定容積まで希釈する。これはＭＣＱＥＥ貯蔵溶液である。
【０６０６】
この溶液は、約−２０℃で凍結保存したときは４月間は使用してよい。
【０６０７】
この目的のために、新鮮に調製されたＭＣＱＥＥ貯蔵溶液は複数のアリコートに分割し、直ちに凍結して−２０℃で保存すべきである。解凍の後、該アリコートは十分に混合すべきであり、また再凍結はすべきでない。
【０６０８】
約３ｍｇのＭＥＧ−ＬＡＱ（ラキニモドのメグルミン付加物）を、１００ｍＬのメスフラスコの中に秤量し、溶解し（超音波処理が許容可能である）、希釈液Ａで規定容積にまで希釈する。これがＭＥＧ−ＬＡＱ貯蔵溶液である。
【０６０９】
この溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときは１週間使用してよい。
【０６１０】
３．３  解像溶液
混合された溶液を用いて、次のように別途二つの解像溶液を調製する。
【０６１１】
３．３．１  解像溶液１
３ｍＬのラキニモド標準貯蔵溶液（溶液Ｓ）、０．３ｍＬの混合溶液および０．３ｍＬのＭＣＱＥＥ貯蔵溶液を１０ｍＬのメスフラスコに移送し、希釈液Ｂを用いて規定の容積まで希釈する。これが解像溶液１である。
【０６１２】
その中のラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。各不純物の濃度は、約０．９μｇ／ｍＬ（ラキニモドの作業濃度に関して約１％）である。
【０６１３】
解像溶液１は、解像試験（システム適性について）のため、および５つの既知不純物：ＭＣＱ、ＭＣＱＣＡ、ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱＥＥおよび５−ＨＬＡＱの保持時間（ＲＴ）／相対的保持時間（ＲＲＴ）の決定に使用される。
【０６１４】
解像溶液１は、冷蔵庫（２℃〜８℃）内に保存すれば９日間は使用してよい。
【０６１５】
注：  解像溶液１の代わりに、実施例１９の方法の通りに調製された解像溶液を使用してよい。
【０６１６】
３．３．２  解像溶液２
３ｍＬのラキニモド標準貯蔵溶液（溶液Ｓ）、０．３ｍＬの混合溶液および０．３ｍＬのＭＥＧ−ＬＡＱ貯蔵溶液を、１０ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液Ｂを用いて規定容量にまで希釈する。これが解像溶液２である。
【０６１７】
その中のラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。各不純物の濃度は、約０．９μｇ／ｍＬ（ラキニモドの作業濃度に関して約１％）である。
【０６１８】
解像溶液２は、ＭＥＧ−ＬＡＱの保持時間の決定のために使用される。
【０６１９】
解像溶液２は、冷蔵庫（２℃〜８℃）内に保存されれば１週間は使用してよい。
【０６２０】
４．サンプル溶液調製
２０カプセルを正確に秤量し、それらの内容物を乳鉢の中に完全に空ける。必要なときはスパチュラを用いて、カプセルの内容物を完全に乳鉢の中に空けるように注意する。からのカプセルを秤量する。カプセル内容物の平均重量を計算する。
【０６２１】
入梅地の科のカプセル内容物を混合および粉砕し、この粉末を、光から保護され且つ緊密に閉鎖された容器の中に保持する。
【０６２２】
７カプセルに対応する量の粉末を、二連で正確に、５０ｍＬのメスフラスコの中に秤量する。
【０６２３】
希釈液Ｂを規定容量の２／３になるまで加え、２００回（ｍｏｔ）／分で３０分間振盪する。希釈液Ｂで規定の容積にまで希釈する。十分に混合する。使用前に、０．４５μｍのＧＨＰ・ＡＣＲＯＤＩＳＣ・ＧＦフィルタまたは均等物を通して濾過し、最初の０．５〜１ｍＬを廃棄する。
【０６２４】
ラキニモド（酸）の作業濃度は約８４μｇ／ｍＬである。
【０６２５】
注：  調製の直後にサンプル溶液を冷蔵庫または５℃に冷却された大気中に置く。該サンプル溶液は、２℃〜８℃の温度に維持するときには２４時間使用してよい。
【０６２６】
５．手順
関連のＳＯＰに従って、前記解像溶液、希釈液Ｂ（ブランク）、検定およびＩＤＤのための標準溶液、およびサンプル溶液を注入する。
【０６２７】
同定および検定のために、サンプルおよび標準溶液のクロマトグラムにおけるラキニモドピークの保持時間（ＲＴ）および面積を決定する。
【０６２８】
不純物／分解生成物の含量の計算のために、全ての既知の不純物および何れか他の不純物のクロマトグラムにおけるラキニモドピークの保持時間（ＲＴ）および面積を決定する。
【０６２９】
賦形剤の早期溶出ピークおよびシステムピーク（不純物／分解生成物の決定のためのクロマトグラム参照）を無視する。例えば、０とＲＲＴ０．１５（約２．５分）の間の積分阻害を使用する。
【０６３０】
標準溶液Ｉ（不純物／分解生成物の決定のため）の注入において、ラキニモドピークの平均応答の１０％未満の面積を持ったピークを排除するように、積分パラメータを調節する。
【０６３１】
サンプル注入におけるＭＥＧ−ＬＡＱのピーク（解像溶液２に従って同定される）を無視する。ＭＥＧ−ＬＡＱの含量は、異なる方法により試験されるであろう。
【０６３２】
６．システム適性試験
６．１  解像試験
ラキニモドピークの典型的な保持時間は、１５．５±２．０分である。
【０６３３】
ラキニモドピークについてのテーリング係数（ＵＳＰ）は、２．０以下であるべきである。
【０６３４】
全てのピークついについての解像係数は、ＮＬＴ２であるべきである。
【０６３５】
既知不純物／分解生成物のピークのＲＲＴは、次の通りになる。
【表６４】
2016514162.tif 000105
【０６３６】
ＭＥＧ−ＬＡＱピークは、隣接ピークに比較して実質的に幅広になる。ＭＥＧ−ＬＡＱピークの保持時間は可変であり、クロマトグラフィー条件（ｐＨ，％アセトニトリル、温度等）における極僅かな変化に対して非常に敏感であり、従って解像溶液２のクロマトグラムにおけるそのピークを使用して定義されるべきである。典型的には、そのＲＲＴは約０．６６である。
【０６３７】
６．２  システム精度試験
関連の租ｐに従ってシステム精度を試験するために、検定およびＩＤＤのためのラキニモド標準を評価する。
【０６３８】
溶液Ｉ中のＭＣＱＣＡは、システムの感度を試験するために使用される。Ｓｔｄ１の６回の注入の面積のＲＳＤ、並びにＳｔｄ１とＳｔｄ２の間の差は、ＮＭＴ２０％であるべきであろう。
【０６３９】
６．３  ブランク
希釈液Ｂを注入して、システムピークを検出する。
【０６４０】
７．保持時間（ＲＴ）による同定
サンプルクロマトグラムにおいて得られた主ピークのＲＴは、標準溶液の注入においてラキニモドピークについて得られたものに対応すべきである。
【０６４１】
８．計算および報告
８．１  検定計算
【数７】
2016514162.tif 000106
【０６４２】
ここで、０．９４はラキニモドナトリウム塩のラキニモド（酸）への変換係数
８．２  不純物の計算および評価／分解生成物
８．２．１  相対的保持時間（ＲＲＴ）の計算
【数８】
2016514162.tif 000107
【０６４３】
８．２．２  不純物の含量／分解生成物の計算
【数９】
2016514162.tif 000108
【０６４４】
面積不純物：  不純物の面積／サンプル溶液中の分解生成物（既知または未知）ピーク  
面積ｓｔｄ：  標準溶液Ｉのクロマトグラムにおけるラキニモドピークの面積
０．９４：  ラキニモドナトリウム塩のラキニモド（酸）への変換係数
ＲＲＦ：  ラキニモド回帰直線の勾配／不純物回帰直線の勾配として計算された、不純物の相対的応答因子／不純物回帰直線の勾配
ラキニモドに対する相対的応答因子の値は次の通りである：
【表６５】
2016514162.tif 000109
【０６４５】
未知不純物／分解生成物についてのＲＲＦを１．０とする。
【０６４６】
８．２．３  不純物／分解生成物の評価および報告
ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱ、ＭＣＱＥＥ、５−ＨＬＡＱおよび未知不純物の定量レベル（ＱＬ）は、０．０５％である。
【０６４７】
ＭＣＱＭＥ、ＭＣＱ、ＭＣＱＥＥ、５−ＨＬＡＱおよび未知不純物の検出レベル（ＤＬ）は、０．０５％である。
【０６４８】
ＭＣＱＣＡのＱＬは０．１％である。ＭＣＱＣＡのＤＬは０．０３％である。
【０６４９】
サンプルクロマトグラムにおけるの全てのピークを、実際の対応する保持時間の±４％以内で、システム適性クロマトグラムにおけるピークと相関させる。
【０６５０】
報告は次の通りで：
【表６６】
2016514162.tif 000110
【０６５１】
図４８は、上記方法に従う解像試験（解像溶液１）クロマトグラムを提示している。
【表６７】
2016514162.tif 000111
【０６５２】
図４９は上記方法に従う解像試験（解像溶液２）クロマトグラムを提示している。
【表６８】
2016514162.tif 000112
【０６５３】
図５０は、上記方法に従う希釈ブランククロマトグラムを提示している。
【０６５４】
図５１は、上記方法に従う検定のためのサンプルクロマトグラムを提示している。
【０６５５】
図５２は、上記方法に従う不純物／分解生成物の決定のためのサンプルクロマトグラムを提示している。
【０６５６】
実施例２２：  ラキニモド薬剤製品のサンプルにおいてＮＥＡ、３−ＨＬＡＱおよびスピロ−ＬＡＱの量を決定するための方法
０．６ｍｇのラキニモドを含有するラキニモドカプセルをＨＰＬＣにより分析した。ＮＥＡ、３−ＨＬＡＱおよびスピロ−ＬＡＱの量を、次のＨＰＬＣ法を使用して決定した。
【０６５７】
１．略語
【表６９】
2016514162.tif 000113
【０６５８】
２．ＨＰＬＣ条件
【表７０】
2016514162.tif 000114
【０６５９】
全ての製剤は光から保護されるべきである。液体製剤については、不透明のキャップを備えた茶色のフラスコを使用する。
【０６６０】
ガラス製のパスツールピペットのみを使用する。
【０６６１】
標準溶液およびサンプル溶液は、調製後は２℃〜８℃で冷蔵保存すべきである。
【０６６２】
３．標準溶液の調製
３．１  ＮＥＡ標準貯蔵溶液
約１８μＬ（約１８ｍｇ）のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）標準を、二連で、５０ｍＬメスフラスコの中に正確に秤量する。アセトニトリルで規定の容積にまで希釈する。
【０６６３】
標準貯蔵溶液の濃度は、約３６０μｇ／ｍＬである。
【０６６４】
ＮＥＡ標準貯蔵溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには３週間は使用してよい。
【０６６５】
３．２  ＮＥＡ標準一次希釈溶液
０．５ｍＬのＮＥＡ標準貯蔵溶液を、アセトニトリルを用いて５０ｍＬにまで希釈する。
【０６６６】
標準一次希釈溶液の濃度は、約３．６μｇ／ｍＬである。
【０６６７】
３，３  ＮＥＡ標準作業溶液
０．５ｍＬのＮＥＡ標準一次希釈溶液を２０ｍＬのメスフラスコに移す。４ｍＬの希釈液Ａを加え、アセトニトリルを用いて規定容積にまで希釈する。
【０６６８】
ＮＥＡの濃度は、約０．０９μｇ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の約０．１％）である。
【０６６９】
ＮＥＡ作業標準溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには１週間使用してよい。
【０６７０】
４．解像溶液の調製
実施例２０からの解像溶液が使用されてよい。
【０６７１】
４．１  解像試験のためのラキニモド貯蔵溶液
１５ｍｇのラキニモドナトリウム標準を、５０ｍＬのメスフラスコの中に正確に秤量する。アセトニトリル：水［５０：５０（ｖ／ｖ）］を用いて規定容積の２／３にまで希釈し、冷超音波処理浴中で２分間超音波処理し、アセトニトリル：水［５０：５０（ｖ／ｖ）］を用いて規定の容積にまで希釈する。
【０６７２】
ラキニモド貯蔵溶液の濃度は、約３００μｇ／ｍＬである。
【０６７３】
ラキニモド貯蔵溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには１月は使用してよい。
【０６７４】
４．２  解像試験のためのＮＥＡ貯蔵溶液
約２５μＬ（約２５ｍｇ）のＮ−エチルアニリン（ＮＥＡ）標準を、５０ｍＬのメスフラスコの中に正確に秤量する。アセトニトリル：水［５０：５０（ｖ／ｖ）］を用いて規定容積まで希釈する。
【０６７５】
ＮＥＡ貯蔵溶液の濃度は、約５００μｇ／ｍＬである。
【０６７６】
ＮＥＡ貯蔵溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存すれば３週間は使用してよい。
【０６７７】
４．３  解像試験のためのスピロ−ＬＡＱ貯蔵溶液
約２．５ｍｇのスピロ−ＬＡＱを、５０ｍＬのメスフラスコの中に秤量する。アセトニトリル：水［５０：５０（ｖ／ｖ）］を用いて規定容積まで希釈する。
【０６７８】
スピロ−ＬＡＱ貯蔵溶液の濃度は、約５０μｇ／ｍＬである。
【０６７９】
４．４  解像試験のための３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液
約２．５ｍｇの３−ＨＬＡＱを、５０ｍＬのメスフラスコの中に秤量する。アセトニトリル：水［５０：５０（ｖ／ｖ）］を用いて溶解し、規定容積まで希釈する。
【０６８０】
３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液の濃度は、約５０μｇ／ｍＬである。
【０６８１】
４．５  解像溶液
以下のアリコートを５０ｍＬのメスフラスコに移し、移動相溶液Ｂ［アセトニトリル：バッファーｐＨ７．０（６５：３５ｖ／ｖ）］を用いて規定容積まで希釈する。
【０６８２】
解像試験のための１５ｍＬのラキニモド貯蔵溶液
解像試験のための１．０ｍＬのスピロ−ＬＡＱ貯蔵溶液
解像試験のための１．０ｍＬの３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液
解像試験のための０．１ｍＬのＮＥＡ貯蔵溶液
ラキニモドナトリウムの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。
【０６８３】
ＮＥＡ、スピロ−ＬＡＱおよび３−ＨＬＡＱの濃度は、約１μｇ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の約１％）である。
【０６８４】
解像溶液は、ラキニモドおよび既知の潜在的不純物／分解生成物の保持時間の決定のためにのみ使用され、−２０℃で保存されたときには３８日間使用してよい。この目的のために、新鮮に調製された解像溶液は、複数のアリコートに分割し、直ちに−２０℃で保存すべきである。解凍後じは、該溶液アリコートを激しく混合すべきであり、また再凍結すべきでない。該解像溶液は、冷蔵庫内（２℃〜８℃）に保存したときには４日間は使用してよい。
【０６８５】
５．サンプル溶液の調製
少なくとも１０カプセルを正確に秤量し、内容物を乳鉢の中に空ける。からのカプセルを秤量する。カプセル内容物の平均重量を計算する。
【０６８６】
乳鉢の中のサンプルを粉砕し、その粉末を光から保護された緊密に閉鎖した容器内に維持する。
【０６８７】
３ラキニモドカプセルに対応する粉末の量を、二連で、２０ｍＬのメスフラスコの中に正確に秤量する。
【０６８８】
４〜１０ｍＬの希釈液Ａを加え、２００回／分で１５分間震盪して溶解させる。アセトニトリルを用いて規定の容積にませ希釈する。十分に混合する。使用前に０．４５μｍのＧＨＰアクロディスクＧＦフィルタまたは均等物を通して濾過し、最初の２ｍＬを廃棄する。
【０６８９】
ラキニモドの濃度は約９０μｇ／ｍＬである。
【０６９０】
注：  調製の直後に、サンプル溶液を冷蔵庫または５℃に冷却された自動サンプラーの中に置く。該サンプルは、調製後２４時間以内に分析すべきである。
【０６９１】
６．手順
不純物／分解生成物測定のための関連のＳＯＰに従って、前記解像溶液、ブランク溶液、標準溶液およびサンプル溶液を注入する。
【０６９２】
標準作業溶液中のＮＥＡのピーク面積を決定する。
【０６９３】
解像溶液およびサンプル溶液からのクロマトグラムにおけるラキニモドピークの保持時間（ＲＴ）を決定する。
【０６９４】
サンプル溶液からのクロマトグラムにおける、全ての既知不純物および未知不純物のＲＴ、ラキニモドピークに対する相対的保持時間（ＲＲＴ）、およびピーク面積を決定する。
【０６９５】
０と１．６×ラキニモドピークのＲＴ（システムピークのＲＴ）の間の積分阻害を適用する。
【０６９６】
不純物／分解生成物の含量の計算のために、全ての既知の不純物および何れか他の不純物のクロマトグラムにおけるラキニモドピークの保持時間（ＲＴ）および面積を決定する。
【０６９７】
賦形剤の早期溶出ピークおよびシステムピーク（不純物／分解生成物の決定のためのクロマトグラム参照）を無視する。例えば、０とＲＲＴ０．１５（約２．５分）の間の積分阻害を使用する。
【０６９８】
標準溶液Ｉ（不純物／分解生成物の決定のため）の注入において、ラキニモドピークの平均応答の１０％未満の面積を持ったピークを排除するように、積分パラメータを調節する。
【０６９９】
サンプル注入におけるＭＥＧ−ＬＡＱのピーク（解像溶液２に従って同定される）を無視する。ＭＥＧ−ＬＡＱの含量は、異なる方法により試験されるであろう。
【０７００】
ＮＥＡ標準の２０％未満の面積を持ったピークを除外するように、積分パラメータを調節する。
【０７０１】
７．システム適性試験
７．１  解像試験
ラキニモドについての典型的な保持時間は２．２±０．５分である。
【０７０２】
ＮＥＡについての典型的な保持時間は１２．２±１．５分である。
【０７０３】
ＮＥＡに対する特定の不純物／分解生成物ピークのＲＲＴは、以下の通りであろう。
【表７１】
2016514162.tif 000115
【０７０４】
ＮＥＡピークからの既知不純物／分解生成物の両方ピークについて、ＮＬＴ２の解像因子が達成されるべきである。
【０７０５】
７．２  システム精度試験
不純物／分解生成物決定について、関連のＳＯＰに従ってシステム精度を試験するために標準を評価する。
【０７０６】
７．３  ブランク
システムピークを検出するためにブランクを注入する。
【０７０７】
８．評価、計算および報告
８．１  不純物／分解生成物のＲＲＴ
【数１０】
2016514162.tif 000116
【０７０８】
８．２  不純物／分解生成物の含量の計算
ラキニモドカプセル中の％ＩＤＤを次のようにして計算する：
【数１１】
2016514162.tif 000117
【０７０９】
面積Ｉｍｐ：  サンプル溶液におけるＮＥＡ、３−ＨＬＡＱまたは未知不純物／分解生成物ピークの面積、８．３における注を参照のこと
面積Ｓｔｄ  ＮＥＡ：標準作業溶液におけるＮＥＡの面積
ＲＲＦ：  下記の比率として計算された不純物の相対的応答因子
ＮＥＡ回帰直線の勾配／不純物回帰直線の勾配
注：  未知不純物／分解生成物については、ラキニモド回帰直線の勾配が使用された。
【０７１０】
ＮＥＡに関する相対的応答因子の値は次の通り
【表７２】
2016514162.tif 000118
【０７１１】
８．４  評価および報告
ＮＥＡ、３−ＨＬＡＱ、および何れか他の不純物／分解生成物についての定量限界（ＱＬ）は、ラキニモド作業濃度に対して０．１％である。
【０７１２】
ＮＥＡ、３−ＨＬＡＱ、および何れか他の不純物／分解生成物についての検出限界（ＤＬ）は、ラキニモド作業濃度に対して０．０３％である。
【０７１３】
不純物／分解生成物の報告含量は次の通りである：
【表７３】
2016514162.tif 000119
【０７１４】
注：  スピロ−ＬＡＱのＲＴで（システム適性試験における実際の保持時間の±５％）溶出するピークは、「何れか他の不純物」ピークとして報告する。
【０７１５】
図５３は、上記方法に従う解像試験クロマトグラムを提示している。
【表７４】
2016514162.tif 000120
【０７１６】
図５４は、上記方法に従うブランク（希釈液）クロマトグラムを提示している。
【表７５】
2016514162.tif 000121
【０７１７】
図５５は、上記方法に従うサンプルクロマトグラムを提示している。
【表７６】
2016514162.tif 000122
【０７１８】
実施例２３：  ラキニモド薬剤製品のサンプルにおいてＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの量を決定する方法
【表７７】
2016514162.tif 000123
【０７１９】
０．６ｍｇのラキニモドを含有するラキニモドカプセルを、ＨＰＬＣにより分析した。ＭＥＧ−ＬＡＱおよびＨＢ−３−ＨＬＡＱの量は、以下のＨＰＬＣ法を用いれ決定した。
【０７２０】
１．  クロマトグラフィーシステム
【表７８】
2016514162.tif 000124
【０７２１】
移動相、流量およびカラム温度は、システム適性要件を達成するために変更されてよい。移動相パラメータは下記範囲で変更されてよい：５５％〜６２％（ｖ／ｖ）の溶媒Ａおよび４５％〜３８％（ｖ／ｖ）の溶媒Ｂ。全ての溶媒は、ＨＰＬＣ等級またはこれと均等なものでなければならない。全ての調整剤は、２〜８℃で冷蔵されるべきであり、また光〜保護されるべきである。不透明キャップを備えた茶色のフラスコ（防化学線ガラス）を使用する。超音波浴の加熱を回避する。
【０７２２】
２．略語リスト
【表７９】
2016514162.tif 000125
【０７２３】
３．標準溶液の調製
３．１  ＢＨ−３−ＨＬＡＱの貯蔵溶液
２重に調製する。約１１．５ｍｇのＢＨ−３−ＨＬＡＱを５０ｍＬのメスフラスコの中に正確に秤量し、超音波処理して養鶏し、希釈液１を用いて規定の容積にまで希釈する。
【０７２４】
ＢＨ−３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液の濃度は、約２３０μｇ／ｍＬである。
【０７２５】
ＢＨ−３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液は、冷蔵保存（２℃〜８℃）すれば１週間は使用してよい。
【０７２６】
３．２  ＭＥＧ−ＬＡＱの貯蔵溶液
二連で調製する。約１１．５ｍｇのＭＥＧ−ＬＡＱを５０ｍＬのメスうＦラス子の中に正確に秤量し、超音波処理して世ｙ開始、また希釈液１を用いて規定の容積にまで希釈する。ＭＥＧ−ＬＡＱ貯蔵溶液の濃度は約２３０μｇ／ｍＬである。
【０７２７】
ＭＥＧ−ＬＡＱ貯蔵溶液は、冷蔵保存（２℃〜８℃）すれば１週間は使用してよい。
【０７２８】
注：  ＭＥＧ−ＬＡＱの高い吸湿性に起因して、その空気に対する露出は最小限にすべきである：秤量の直後に標準に従って瓶を閉鎖する；ＭＥＧ−ＬＡＱを制御された低湿度条件下で秤量することが推奨される。
【０７２９】
３．３  ＢＨ−３−ＨＬＡＱの一次希釈溶液
２．０ｍＬのＢＨ−３−ＨＬＡＱ貯蔵溶液を、５０ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液２を用いて規定の容積にまで希釈する。ＢＨ−３−ＨＬＡＱの濃度は約９．２μｇ／ｍＬである。
【０７３０】
３．４  ＭＥＧ−ＬＡＱの一次希釈溶液
２．０ｍＬのＭＥＧ−ＬＡＱ貯蔵溶液を５０ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液２を用いて規定の容積にまで希釈する。ＭＥＧ−ＬＡＱの濃度は約９．２μｇ／ｍＬである。
【０７３１】
３．５  標準溶液
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの１．０ｍＬの一次希釈溶液およびＭＥＧＬＡＱの２．５ｍＬの一次希釈溶液を５０ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液２を用いて規定の容積まで希釈する。
【０７３２】
この標準溶液の総希釈係数は、ＢＨ−３−ＨＬＡＱについては１２５０、ＭＥＧ−ＬＡＱについては５００（貯蔵溶液から）である。
【０７３３】
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの濃度は約０．１８μｇ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の０．２％）であり、ＭＥＧ−ＬＡＱの濃度は約０．４５μ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の０．５％）である。
【０７３４】
標準溶液は、冷蔵保存（２℃〜８℃）すれば１週間は使用してよい。
【０７３５】
３．６  ＱＬ溶液
１回で調製する。ＢＨ−３−ＨＬＡＱの０．５ｍＬの一次希釈溶液およびＭＥＧ・ＬＡＱのおよび２．０ｍＬの維持時希釈溶液（それぞれ二連で調製したうちの一方）を、１００ｍＬのメスフラスコに移し、希釈液２で規定の容積まで希釈する。
【０７３６】
ＢＨ−３−ＨＬＡＱの濃度は約０．０４５μｇ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の０．０５％）であり、ＭＥＧ−ＬＡＱの濃度は約０．１８μ／ｍＬ（ラキニモド作業濃度の０．２％）である。
【０７３７】
４．解像溶液の調製
４．１  ラキニモド貯蔵溶液
１回で調製する。約１５ｍｇのラキニモドナトリウム標準を５０ｍＬのメスフラスコの中に秤量する。希釈液１を用いて規定容積の２／３にまで希釈し、超音波処理浴中で２分間超音波処理し、希釈液１を用いて規定の容積まで希釈する。ラキニモド貯蔵溶液の濃度は、約３００μｇ／ｍＬラキニモドナトリウムであった。
【０７３８】
ラキニモド貯蔵溶液は、冷蔵保存（２℃〜８℃）すれば１月間は使用してよい。
【０７３９】
４．２  解像溶液
３ｍＬのラキニモド貯蔵溶液および１ｍＬの各一次希釈溶液（それぞれ二連で調製したうちの一方）を、１０ｍＬのメスフラスコに移す。希釈液２で規定の容積にまで希釈する。十分に混合する。
【０７４０】
解像溶液中のラキニモドナトリウムの濃度は、約９０μｇ／ｍＬ（ラキニモド−遊離酸として表せば約８５μｇ／ｍＬ）である。各不純物の濃度は約０．９μ／ｍＬ（ラキニモドの作業濃度に対して約１％）である。
【０７４１】
解像溶液は、冷蔵保存（２℃〜８℃）すれば１週間は使用してよい。
【０７４２】
５．サンプル溶液の調製
２０カプセルを正確に秤量し、それらの内容物を乳鉢の中に完全に空ける。必要であればスパチュラを用いて、カプセル内容物を完全に乳鉢の中に空けるように注意する。
【０７４３】
モルタルの中のカプセル内容物を混合および粉砕し、その粉末を、光保護された緊密に閉鎖した容器の中に維持する。
【０７４４】
７カプセルに対応する量の粉末を、二連で、それぞれ別々の５０ｍＬメスフラスコの中に正確に秤量する。
【０７４５】
希釈剤２を規定の容積の２／３まで加え、２００回／分で３０分間震盪する。希釈液２を用いて規定の容積まで希釈する。十分に混合する。使用の前に、０．４５μｍのＡＣＲＯＤＩＳＣ・ＧＨＰ・ＧＦフィルタを通して濾過し、最初の０．５〜１ｍＬを廃棄する。
【０７４６】
調製の直後に、サンプル溶液を冷蔵庫内または５０℃に冷却された大気中に置く。
【０７４７】
ラキニモド（酸）の作業濃度は約８４μｇ／ｍＬである。
【０７４８】
サンプル溶液は、２℃〜８℃の温度に維持されるときは、２４時間使用してよい。
【０７４９】
６．システム適性試験
６．１  解像試験
解像溶液を１回注入する。
【０７５０】
ラキニモドピーク＊の典型的な保持時間は、１２〜１８分の範囲内である。
【０７５１】
解像溶液の注入におけるピークの溶出順序、およびラキニモドピークに対する不純物ピークの典型的なＲＲＴは次の通りである。
【表８０】
2016514162.tif 000126
【０７５２】
容認基準：
・ＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱピークについてのテーリング因子（ＵＳＰ）は、０．８〜１．５の範囲内であるべきである。
【０７５３】
・三つの全てのピーク（ＭＥＧ−ＬＡＱ、ＢＨ−３−ＨＬＡＱおよびラキニモド）の間の解像因子は、１．５以上であるべきである。
【０７５４】
流量、温度および移動相組成（溶液Ａ／溶液Ｂの比）は、要求されるシステム適性パラメータを達成するように調節されてよい。
【０７５５】
６．２  ブランク注入
ブランク（希釈液２）を２回注入して、システムピークを検出する。システムピークを無視する。
【０７５６】
６．３  感度試験
ＱＬ溶液の６回の反復注入から、ＢＨ−３−ＨＬＡＱおよびＭＥＧ−ＬＡＱピークの面積を評価する。
【０７５７】
６回の反復において、各々のピークのＲＳＤは２０％以下であるべきである。
【０７５８】
６．４  システム精度試験
関連のＳＯＰに従ってシステム精度を試験するために、標準品注入のクロマトグラムにおけるＢＨ−３−ＨＬＡＱおよびＭＥＧ−ＬＡＱピークの面積を評価する。
【０７５９】
７．手順
７．１  注入シーケンス
関連のＳＯＰに従って、解像溶液、ブランク−２回、ＱＬ溶液（６回反復）、標準溶液およびサンプル溶液を注入する。
【０７６０】
７．２  クロマトグラムの処理
標準溶液およびサンプル溶液の注入において、ＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱ以外の全てのピークを無視する。
【０７６１】
同定および定量のために、サンプル溶液のクロマトグラムにおけるＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱのピーク保持時間（ＲＴ）および面積を決定する。
【０７６２】
最初の調製の標準溶液の６回連続注入のクロマトグラムにいて、ＢＨ−３−ＨＬＡＱの平均応答の１０％未満の面積を持ったピーク排除するために積分パラメータを調節する。
【０７６３】
これは、ラキニモドの作業濃度に対して０．０２％（ＢＨ−３−ＨＬＡＱのＤＬ）に対応する。
【０７６４】
８．計算および報告
８．１  計算
標準溶液のクロマトグラムにおける対応のピークに関して、各々の不純物（ＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱ）の定量を行う。
【０７６５】
以下の式を使用して、ＭＥＧ−ＬＡＱおよびＢＨ−３−ＨＬＡＱの含量を計算する。
【数１２】
2016514162.tif 000127
【０７６６】
面積Ｓｍｐ：サンプル溶液のクロマトグラムにおける、ＭＥＧ−ＬＡＬＱまたはＢＨ−３−ＨＬＡＱピークの面積
面積Ｓｔｄ：標準溶液のクロマトグラムにおける、それぞれＭＥＧ−ＬＡＬＱピーク（平均）またはＢＨ−３−ＨＬＡＱピーク（平均）の面積
ラベル表示値：０．６ｍｇ
８．２  評価および報告
ＢＨ−３−ＨＬＡＱのＱＬ（定量限界）は０．０５％である；  ＭＥＧ−ＬＡＱのＱＬは０．２％である。
【０７６７】
ＢＨ−３−ＨＬＡＱのＤＬ（検出限界）は０．０２％である；  ＭＥＧ−ＬＡＱのＤＬは０．１％である。
【０７６８】
ＱＬに等しいかまたはそれを超える値については、前記計算された結果を報告する。
【０７６９】
ＱＬ未満であるがＤＬを超える値については、ＢＨ−３−ＨＬＡＱについて「０．０５％（ＱＬ）未満」、およびＭＥＧ−ＬＡＱについて「０．２％（ＱＬ）未満」と報告する。
【０７７０】
ＤＬ未満の値については、ＢＨ−３−ＨＬＡＱについて「０．０２％（ＤＬ）未満」、およびＭＥＧ−ＬＡＱについて「０．１％（ＱＬ）未満」と報告する。
【０７７１】
図５６は、上記方法に従う解像溶液の典型的なクロマトグラムを提示している。
【表８１】
2016514162.tif 000128
【０７７２】
図５７は、上記方法に従うブランク（希釈液２）のクロマトグラムを提示している。
【表８２】
2016514162.tif 000129
【０７７３】
図５８は、上記方法に従うＱＬ溶液のクロマトグラムを提示している。
【表８３】
2016514162.tif 000130
【０７７４】
図５９は、上記方法に従う標準溶液のクロマトグラムを提示している。
【表８４】
2016514162.tif 000131
【０７７５】
図６０は、上記方法に従う典型的なサンプルクロマトグラムを提示している。
【表８５】
2016514162.tif 000132
【０７７６】
実施例２４：ラキニモド薬剤物質および中間体における潜在的な遺伝毒性不純物のコンピュータによる毒物学的評価
ＤＥＲＥＫ予測ソフトウエア（ＤＥＲＥＫ Ｎｅｘｕｓ、バージョン２．０．０，２０１１ｉ、 ＬＨＡＳＡ Ｌｔｄ、Ｌｅｅｄｓ、ＵＫ）を使用して、ＭＣＱおよびＭＣＱＭＥの遺伝毒性能を評価した。コンピュータによる毒物学的評価を表４７に要約する。
【表８６】
2016514162.tif 000133
【０７７７】
構造が毒性である可能性レベルのＤＥＲＥＫ定義は次の通りである：
一応の信頼性あり：証拠の重みが提案を支持する
不確か：提案を支持および反対する証拠が等しい重さで存在する。
【０７７８】
実施例２５：  ラキニモドナトリウム薬剤物質のバッチ分析
種々の製造施設において多数のバッチのラキニモドナトリウムを製造し、続いて分析した。製造および分析の際に、サンプルの充分な光保護が与えられた。薬剤物質の全てンバッチは、実施例１７に与えられた仕様の範囲内であった。
【０７７９】
表４８および表４９は、ラキニモドナトリウム薬剤物質バッチのバッチ分析を示している。表５０はラキニモド酸のバッチ分析を示している。
【表８７】
2016514162.tif 000134
【０７８０】
【表８８】
2016514162.tif 000135
【０７８１】
【表８９】
2016514162.tif 000136
【０７８２】
【表９０】
2016514162.tif 000137
【０７８３】
実施例２６：  ラキニモド薬剤物質のリリース時、並びに長期保存および加速保存の後に観察された不純物
リリース時、並びに長期保存および加速保存の後に、ラキニモドナトリウムバッチの中に、不純物が観察された。
【０７８４】
ラキニモドナトリウムバッチにおいて観察された不純物レベルの範囲が、一次安定性および実証バッチを含めて、表５１に要約されている。
【表９１】
2016514162.tif 000138
【０７８５】
実施例２７：  ラキニモドナトリウム薬剤製品のバッチ分析
多くのバッチのラキニモドナトリウム薬剤製品が種々の製造施設で製造され、続いて分析された。製造および分析に際して、サンプル溶液の充分な光保護が与えられた。
【０７８６】
全てのバッチの薬物製品が、仕様の範囲内であった。
【０７８７】
リリースデータの評価は、全てのバッチが、それらのリリース時点において有効なきかっくの何以内にあったことを示している。更に、商業化のために提案されたラキニモド（例えばラキニモド０．６ｍｇカプセル）の全ての製造されたバッチは、提案された商業化仕様に適合することが示されている。全ての測定されたパラメータについての結果において、バッチ対バッチでの経時的な一貫性が見られた。このバッチ分析結果により、全てのバッチの品質が相互に有意には異ならないこと、また異なる製造サイトでの製造が同じ品質の物質を与えることが示された。
【０７８８】
表５２、表５３、表５４、表５５、表５６および表５７は、ラキニモドナトリウム薬剤製品バッチのバッチ分析に関するものである。
【表９２】
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【０７８９】
【表９３】
2016514162.tif 000140
【０７９０】
【表９４】
2016514162.tif 000141
【０７９１】
【表９５】
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【０７９２】
【表９６】
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【０７９３】
【表９７】
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【０７９４】
【表９８】
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【０７９５】
【表９９】
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【参照文献】
【０７９６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【国際調査報告】
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