(57)【要約】  本発明は、極めて低い用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体で有害な脂肪蓄積及び関連する状態を治療する方法に関する。特に、本発明は、極めて低い用量のタクロリムスを投与することによって患者における有害な脂肪蓄積及び/又は筋肉減少症及び/又はメタボリック症候群を治療することに関する。最も特に、本発明は、加齢に関連する脂肪蓄積の治療におけるタクロリムスの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む、それを必要とするヒトにおいて1つ以上の状態を治療する方法であって、該量が、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする量であり、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記方法。
【請求項２】
免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする用量で状態を治療するのに使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記タクロリムス又はその近い構造の類似体。
【請求項３】
状態を治療するための医薬品の製造におけるタクロリムス又はその近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにし、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記使用。
【請求項４】
トラフ全血レベルが少なくとも0.1ng/mLである、請求項1から3のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
トラフ全血レベルが少なくとも0.2ng/mLである、請求項1から3のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
トラフ全血レベルが1.2ng/mL未満である、請求項1から5のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
トラフ全血レベルが1.1ng/mL未満である、請求項1から6のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
タクロリムスが用いられる、請求項1から7のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
ある用量のタクロリムス又は近い構造の類似体を1日1回以下投与することにより、それを必要とするヒトにおいて1つ以上の状態を治療する方法であって、該用量が0.007mg/kgから0.03mg/kgであり、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記方法。
【請求項１０】
0.007mg/kgから0.03mg/kgの用量で1日1回以下投与される、1つ以上の状態を治療するのに使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記タクロリムス又はその近い構造の類似体。
【請求項１１】
1日1回以下投与することによって1つ以上の状態を治療するための医薬品を製造するための、タクロリムス又はその近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が0.007mg/kgから0.03mg/kgを含み、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記使用。
【請求項１２】
0.1mg/kg、0.085mg/kg又は0.007mg/kg以下で用いられる、請求項8から11のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１３】
0.0014mg/kg超又は0.002mg/kg超で用いられる、請求項9から12のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
0.0014mg/kgから0.0085mg/kg、例えば0.002mg/kgから0.007mg/kgで用いられる、請求項9から13のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
タクロリムスである、請求項9から14のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
酸化ストレスの低減をもたらす後成的修飾を達成するのに十分な有効量のタクロリムス又は近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む、それを必要とするヒトにおいて1つ以上の状態を治療する方法であって、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記方法。
【請求項１７】
酸化ストレスの低減をもたらす遺伝子組換えを行う量を1日1回投与することによって、1つ以上の状態を治療するのに使用するためのタクロリムス又は近い構造の類似体であって、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記タクロリムス又は近い構造の類似体。
【請求項１８】
1日1回以下投与することによって1つ以上の状態を治療するための医薬品の製造におけるタクロリムス又は近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が、酸化ストレスの低減をもたらす後成的修飾を達成する量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有し、1つ以上の状態が:
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上である、上記使用。
【請求項１９】
タクロリムスが用いられる、請求項16から18のいずれかに記載の方法、使用のための化合物又は化合物の使用。
【請求項２０】
(i)有害な脂肪蓄積、
(ii)筋肉減少症、
(iii)高血糖又はII型糖尿病、
(iv)高コレステロール、
(v)高トリグリセリド、又は
(vi)メタボリック症候群
の1つ以上の治療に使用するための、0.05mgから0.8mgのタクロリムス又はその近い構造の類似体を含む、単位用量の医薬組成物。
【請求項２１】
0.75mg、0.6mg又は0.5mg以下を含有する、請求項20に記載の単位用量の医薬組成物。
【請求項２２】
0.05mg、0.1mg又は0.15mg以上を含有する、請求項20又は21のいずれかに記載の単位用量の医薬組成物。
【請求項２３】
0.1mgから0.6mgを含有する、請求項20から22のいずれかに記載の単位用量の医薬組成物。
【請求項２４】
タクロリムスを含有する、請求項20から23のいずれかに記載の単位用量の医薬組成物。
【請求項２５】
有害な脂肪蓄積に関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項２６】
高血糖又はII型糖尿病に関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための組成物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項２７】
高コレステロールに関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための組成物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項２８】
高トリグリセリドに関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項２９】
メタボリック症候群に関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３０】
筋肉減少症に関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３１】
状態の2つ、3つ、4つ、5つ又は6つに関する、請求項1から24のいずれかに記載の方法、使用のための組成物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３２】
40才を過ぎた、50才を過ぎた、60才を過ぎた、又は70才を過ぎた患者に関して用いられる請求項1から31のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３３】
肥満度指数が40より大きい患者に使用するための、請求項1から32のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、使用のための組成物。
【請求項３４】
肥満度指数が25から40である患者に使用するための、請求項1から32のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、使用のための組成物。
【請求項３５】
美容目的のための方法に関連する、先行する請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
予防的使用のための、請求項1から34のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３７】
治療的使用のための、請求項1から34のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３８】
脂肪蓄積を低減させ、その後、その脂肪蓄積を維持するための、請求項1から37のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項３９】
有害な脂肪蓄積を有する個体が30才から50才の間の年齢である、請求項1から38のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項４０】
有害な脂肪蓄積を有する個体のBMIが25から35である、請求項1から38のいずれかに記載の方法、使用のための化合物、化合物の使用、又は使用のための組成物。
【請求項４１】
タクロリムスの用量が1日当たり0.1mgから0.6mg、例えば、1日当たり0.2mgから0.45mg、例えば0.3mgである、請求項1から38のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
1日当たり0.05mgから0.65mg、例えば、1日当たり0.1mgから0.6mg、例えば0.2から0.45mg、例えば0.3mgのタクロリムスを投与することを含む、血清トリグリセリド及び/又はコレステロールを低減させる方法。
【請求項４３】
投与が、経口投与及び/又は1日1回の投与である、請求項42に記載の方法。
【請求項４４】
請求項1から37のいずれかに記載の方法とともに行われる、請求項42又は43に記載の方法。
【請求項４５】
1日1回経口投与するための、請求項20から24のいずれかに記載の使用のための単位用量の医薬組成物。
【請求項４６】
錠剤又はカプセル剤である、請求項45に記載の単位用量。
【請求項４７】
0.3mgのタクロリムスを含む、請求項45又は46のいずれかに記載の単位用量。
【請求項４８】
0.5mgのタクロリムスを含む、請求項45又は46のいずれかに記載の単位用量。
【請求項４９】
0.6mgのタクロリムスを含む、請求項45又は46のいずれかに記載の単位用量。
【請求項５０】
有害な脂肪蓄積を治療するための、請求項45から49のいずれかに記載の単位用量。
【請求項５１】
加齢に関連する脂肪蓄積を防止するための、請求項45から49のいずれかに記載の単位用量。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、極めて低い用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体(close structural analogue)で有害な脂肪蓄積及び関連する状態を治療する方法に関する。特に、本発明は、極めて低い用量のタクロリムスを投与することによって患者における有害な脂肪蓄積及び/又は筋肉減少症及び/又はメタボリック症候群を治療することに関する。最も特に、本発明は、加齢に関連する脂肪蓄積の治療におけるタクロリムスの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タクロリムス(フジマイシン又はFK506とも呼ばれる)は、例えば、臓器移植を受けた患者において、また潰瘍性大腸炎又はある種の皮膚状態を治療するために、免疫抑制剤として臨床的に用いられる。タクロリムスは、プログラフ(登録商標)、アドバグラフ(登録商標)及びプロトピック(登録商標)などの商品名で市販されている。市販されるタクロリムスの剤形には、0.5mg、1mg、3mg及び5mgを含有するカプセル剤、及び濃度が0.05%から0.19%である皮膚状態用軟膏剤が含まれる。タクロリムスは、免疫を抑制して移植組織の拒絶反応を防ぐために、最も一般的には1日2回投与される。拒絶反応を防止しようとするとき、臨床的に用いられる用量は一般に、全血トラフ濃度(whole blood trough concentration)が少なくとも4mg/mLとなるように調整される。これは、0.075mg/kg/日から0.2mg/kg/日の範囲内の推奨される初回経口用量(12時間毎に2回の分割用量)を用いることによって実現され、平均70kgの患者の場合、1日に2回で約2.5mgから14mgの用量が必要となる。タクロリムスは関節炎の治療にも一般に1日当たり3mgで用いられている。恐らく、免疫抑制に用いられた最も低い用量は、重症筋無力症の治療の場合に記録されており、1日当たり2〜3mgであったが(Kanshiら, J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 2005、76: 448〜450)、これは1日当たり最大50mgまでのプレドニゾロンと併用されていた(また体重の少ない女性に投与された可能性もある)。
【０００３】
これらの確立されたタクロリムスの臨床的使用は、カルモジュリンを介してカルシニューリンを活性化するように作用することによって、Tリンパ球シグナル伝達とIL-2転写の両方を阻害する機序を介して機能すると考えられる。これらは用量依存的な機序なので、投与されるタクロリムスの量が多いほど免疫が強く抑制される。この機序は本発明に関与しておらず、上述の状態を治療するときに免疫が抑制されることが望ましいのでこれは好都合であるが、それは免疫警戒(immunovigilance)の低減をもたらすので、感染症又はリンパ腫のリスクの増大などの不利な点がないわけではない。
【０００４】
WO 2011/004194は、タクロリムスをある種の障害の治療に使用できることを開示している。しかし、WO 2011/004194は、そのような疾患を治療するために従来の免疫抑制剤の用量とは異なる用量のタクロリムスを用いるべきであるとは開示していない。
【０００５】
WO 00/15208は、ゼラチナーゼ及び/又はコラゲナーゼ疾患によって生じる、マトリックスメタロプロテアーゼ産生インヒビターに媒介される疾患の治療に免疫抑制剤を使用できることを開示している。関節炎から腫瘍増殖まで多くの状態が列挙されているが、脂肪蓄積への言及はなかった。該免疫抑制剤はタクロリムスを含んでおり、すべての状態に対する慢性投与の日用量は0.1から0.3mg/kg/日であった(よって、70kgの人の場合7から21mgであり、これは免疫抑制剤の用量と予想される)。
【０００６】
WO 2000/15208は、タクロリムスをある種の疾患の治療に使用できることを開示しており、慢性使用の場合の日用量は0.1mg/kgから30mg/kgであると述べられているので、70kgの人の場合、日用量は7.5mgから210mgになると予想される。この範囲は、免疫抑制剤としてのタクロリムスの使用に提案される通常の用量範囲と少なくとも同程度に高い。US 2004/007767は、タクロリムスに存在するプロペニル基の代わりにC21においてメチル基を有する修飾タクロリムスの使用に関し、これも慢性使用の場合の日用量が0.1mg/kgから30mg/kgであることを開示している。
【０００７】
US 2010/0081681及びUS 2013/0102569は、TORのインヒビター、例えばラパマイシン及び類似体を加齢に関連する疾患の阻害に使用できることを開示しており、ラパマイシン、シクロスポリンA及びタクロリムスの免疫抑制効果について言及している。実験データはラパマイシンに限られており、療法において免疫抑制剤の用量より少ない用量を用いることができるという示唆は為されなかった。
【０００８】
WO 2010/056754には、加齢に関連する様々な障害に使用することができる、マイクロカプセル化したmTORのインヒビター、とりわけラパマイシンが開示された。0.001mgから100mgの範囲内であるか又はさらに高い個々の用量が開示され、特に5mg/kgから100mg/kgの用量範囲が述べられた。例示されたのはラパマイシンの効果のみであった。ラパマイシンを使用するとグルコース制御及び糖尿病を改善できることは公知である。
【０００９】
出願人によって行われた研究の結果、驚くべきことに、極めて低い用量のタクロリムスが、有害な脂肪蓄積及び免疫抑制に関わるものに関連する状態の治療に有益であり得ることが発見された。これは、こうした極めて低い用量範囲において、タクロリムスは新たに発見されたその有益効果をもたらすために異なる機序を利用するからである。この機序は、用いるタクロリムスの用量が多くなると活用されないことが見受けられる。
【００１０】
出願人によって行われた研究から、タクロリムス及びその近い構造の類似体が本明細書に記載される有益効果を生じるのは、免疫抑制特性をもたらすものに関係するいずれの機序によるものでもないことが示唆されている。研究から、ある特定の濃度のタクロリムス及びその近い構造の類似体は、ある遺伝子を調節することによって作用することが示されている。いかなる作用機序にもとらわれたくはないが、そのような後成的影響が、有害な脂肪蓄積を低減させる、並びに/又は筋肉減少症を治療する、並びに/又はメタボリック症候群及びその構成要素を治療するためにタクロリムスが作用する方法において役割を有すると仮定される。これは、酸化酵素を異なるレベルにするので酸化ストレスを低減させることができると予想される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】WO 2011/004194
【特許文献２】WO 00/15208
【特許文献３】US 2004/007767
【特許文献４】US 2010/0081681
【特許文献５】US 2013/0102569
【特許文献６】WO 2010/056754
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Kanshiら, J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 2005、76: 448〜450
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む、それを必要とするヒトにおいて1つ以上の状態を治療する方法であって、該量が、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする量であり、1つ以上の状態が、(i)有害な脂肪蓄積、(ii)筋肉減少症（sarcopenia）、(iii)高血糖若しくはII型糖尿病、(iv)高コレステロール、(v)高トリグリセリド、又は(vi)メタボリック症候群の1つ以上である方法を提供する。
【００１４】
適切には、本発明は、1日1回、用量が0.0007mg/kgから0.03mg/kgの用量のそのような作用剤を用いる。
【００１５】
本発明は、酸化ストレスの低減及び/又は後成的修飾を達成することができ、それによって蓄積した脂肪の喪失、高コレステロールレベルの低減、トリグリセリドレベル及び/又は上述の他の状態の低減をもたらすことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】タクロリムスを投与した結果、酵母(S. Cerevisiae)の寿命プロファイルが延長したことを示す図である。
【図２】Bus8をバックグラウンドとする虫の寿命がタクロリムスによって延長したことを示す図である。
【図３】線虫(C.elegans)において脂質が最大となる時間がタクロリムスによって遅延したことを示す図である。
【図４】加齢ラットでタクロリムスによる低減が生じたことが明示された、用いたモデルを説明する図である。
【図５】加齢ラットの体重がタクロリムスの投与によって低減したことを示す図である。
【図６】脂肪代謝産物及び種々の生化学的マーカーについてタクロリムスの効果を示すデータを提示する図である。
【図７】タクロリムス及びその近い構造の類似体であるアスコマイシンが虫の寿命に及ぼす効果を示す図である。
【図８】タクロリムス及びその近い構造の類似体であるジヒドロタクロリムスが虫の寿命に及ぼす効果を示す図である。
【図９】Bus8虫の健康寿命及び寿命中位数(median lifespan)についてのタクロリムスの用量反応を示す図である。
【図１０】Bus5虫の健康寿命及び寿命中位数についてのタクロリムスの用量反応を示す図である。
【図１１】若い3カ月齢のラット、対照で処置された24カ月齢のラット、及びRDC5で処置された24カ月齢のラットからの断層画像の代表例を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
したがって、本発明は、有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む、それを必要とするヒトにおいて有害な脂肪蓄積を治療する方法であって、該量が、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする量である、方法を提供する。
【００１８】
同様に、本発明は、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする用量を1日1回以下投与することによって、有害な脂肪蓄積を治療するのに使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００１９】
同様に、本発明は、1日に1回以下投与することによって有害な脂肪蓄積を治療するための医薬品の製造に使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、該医薬品が、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体の全血トラフレベルを少なくとも0.05ng/mLにする、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００２０】
トラフ全血レベルは、適切には少なくとも0.075ng/mL、例えば少なくとも0.2ng/mL、例えば少なくとも0.3ng/mLであってもよい。
【００２１】
免疫抑制を回避するために、トラフ血中レベルは、タクロリムスが免疫抑制剤として使用されるときに免疫抑制剤としてみなされるレベルの3分の1未満になると予想される。一般に、これは、移植の拒絶反応を防止するために用いられる4ng/mLの3分の1未満、すなわち1.3ng/mL以下であることを意味する。
【００２２】
タクロリムス又はその近い構造の類似体によって与えられる治療域から最大の利益を受けるために、全血トラフレベルは、1.2ng/mL未満、例えば1.1ng/mL未満、例えば1.0ng/mLであるべきであると考えられる。
【００２３】
したがって、用いられるタクロリムス又はその近い構造の類似体の用量は、有利には、臓器拒絶反応又は関節炎若しくは重症筋無力症などの疾患を治療するときに、その臨床的な免疫抑制効果を生じるために使用される用量より少ない。
【００２４】
本発明においてタクロリムス又は近い構造の類似体が望ましい効果をそれにもたらす機序は、免疫抑制を実現する機序とは無関係である。実際に、従来の免疫抑制剤の用量で使用すると、最良でも十分に有効ではないと考えられる。タクロリムス及びその近い構造の類似体は、本明細書に開示する状態に関して、従来の免疫抑制剤の用量よりよりはるかに低い上限カットオフ(upper cut off)を有する、顕著な釣鐘型の用量反応曲線を有することが今回見出された。
【００２５】
開示した用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体でこのように治療すると後成的変化が誘導され、それによって酸化ストレスが低減する(恐らくSOD1及びSOD2などの酸化酵素に及ぼす効果による)と考えられる。これによって基礎代謝率を維持する筋細胞の能力が向上するので、脂肪蓄積を低減させることができる。
【００２６】
脂肪を低減させる他の方法、例えばカロリー制限による方法とは異なり、望ましい除脂肪筋肉量が失われることが付随する重大な副作用ではないことが、本発明の利点である。
【００２７】
タクロリムス(又は近い構造の類似体)を本明細書で開示した用量で使用すると、患者における脂肪蓄積をその患者の若い頃を連想させるものに向って有意に初期減少させることができる。その後タクロリムス(又は近い構造の類似体)の継続投与を用いて、その低減した脂肪蓄積を維持又はその維持を支援することができる。
【００２８】
したがって、使用すれば外見をより若々しいシルエットにすることができる。これは、患者のより若々しく見える状態に関係する場合もあるために、除脂肪組織のわずかな喪失を伴うこともある(筋肉減少症に起こるような筋肉の損失ではない)。
【００２９】
故に、本発明は、代謝率が低下した結果として加齢に関連する脂肪蓄積が起こった高齢の患者に適用することが特に適している。故に、本発明は、30才を過ぎた者に特に関連があり、40才を過ぎた者により関連があり、50才を過ぎた者にさらにより関連がある。
【００３０】
さらなる利益は、本発明による治療によって酸化ストレスに対処する筋細胞の能力が向上するので、筋萎縮の防止を助け、再生を促進することができることである。これは、過剰なカロリー摂取を脂肪として貯えるのに必要な細胞を低減させるだけでなく、加齢に関連する筋喪失に対抗する助けとなる。
【００３１】
故に、本発明は筋肉減少症を治療する役割も果たす。
【００３２】
したがって、本発明は、筋肉減少症を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.05ng/mLにする有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む方法を提供する。
【００３３】
同様に、本発明は、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.05ng/mLにする用量で1日1回以下投与される、筋肉減少症を治療するための、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００３４】
同様に、本発明は、筋肉減少症を治療するための医薬品の製造におけるタクロリムス又はその近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が、1日1回投与されたときに免疫抑制を生じることなく少なくとも0.05ng/mLのトラフ全血レベルを達成する量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、使用を提供する。
【００３５】
所望であれば、本発明は、同用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を投与することによって、有害な脂肪蓄積及び筋肉減少症の治療を可能とする。
【００３６】
タクロリムスが免疫抑制を生じるのに十分な用量で使用されると、高血糖及びII型糖尿病をもたらす可能性がある。したがって、それを極めて低い用量で用いると、グルコースレベルを安定化させ、II型糖尿病を治療するのに使用できることは特に驚くべきことである。
【００３７】
したがって、本発明は、II型糖尿病を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.05ng/mLにする有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む方法を提供する。
【００３８】
同様に、本発明は、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.5ng/mLにする量で、II型糖尿病の治療に使用するための、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００３９】
同様に、本発明は、医薬品の製造に使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、該医薬品が、1日1回投与されたときに免疫抑制を生じることなく、少なくとも0.05ng/mLのトラフ全血レベルを有する量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００４０】
II型糖尿病の治療は、有害な脂肪蓄積及び/又は筋肉減少症を治療している患者だけでなく、そうでない患者にも行うことができる。しかし、患者が、有害な脂肪蓄積及び/又は筋肉減少症の治療に使用するのと同一の極めて低い用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体で治療を受けることができることは、本発明の特別な利点である。
【００４１】
極めて低い用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体が、血中脂肪レベル、並びに特にコレステロール及びトリグリセリドの血中レベルに有益な効果を及ぼすことも見出された。
【００４２】
したがって、本発明は、高い血中脂肪レベルを治療する方法であって、それを必要とするヒトに、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.05ng/mLにする有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む方法を提供する。
【００４３】
同様に、本発明は、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.5ng/mLにする量で、高い血中脂肪レベルの治療に使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００４４】
同様に、本発明は、医薬品の製造に使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、該医薬品が、1日1回投与されたときに免疫抑制を生じることなく、少なくとも0.05ng/mLのトラフ全血レベルを有する量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００４５】
適切には、治療すべき血中脂肪はコレステロールである。適切には、治療すべき血中脂肪はトリグリセリドである。適切には、治療すべき血中脂肪はコレステロール及びトリグリセリドである。
【００４６】
高レベルのコレステロール及び/又はトリグリセリドのいずれか又は両方の治療を受けている患者が、有害な脂肪蓄積、筋肉減少症及びII型糖尿病の1つ以上の治療を同時に受けることができることは、本発明のさらなる利点である。
【００４７】
メタボリック症候群は、患者(一般に、有害な脂肪蓄積を有し、多くの場合肥満である人)が、高い血中脂肪レベルを伴うII型糖尿病(又はII型糖尿病に罹りやすいグルコースレベルの不十分な制御)を呈する状態である。この状態は、主要な臨床イベント、例えば、脳卒中、心筋梗塞、動脈硬化症などをもたらす可能性がある。したがって、そのような患者を治療してメタボリック症候群の症状を緩和することが重要である。本明細書に記載される通りの低用量のタクロリムスで治療すれば、脂肪低減、並びにII型糖尿病の制御、並びに上昇したコレステロール及びトリグリセリドレベルの制御を援助することができるので、そのような治療はメタボリック症候群を有する患者を助けるのに適している。
【００４８】
したがって、本発明は、メタボリック症候群を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.05ng/mLにする有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含む方法を提供する。
【００４９】
同様に、本発明は、免疫抑制を生じることなく、タクロリムス又はその近い構造の類似体のトラフ全血レベルを少なくとも0.5ng/mLにする量で、メタボリック症候群の治療に使用するための、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００５０】
同様に、本発明は、メタボリック症候群を治療するための医薬品の製造に使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体であって、該医薬品が、1日1回投与されたときに免疫抑制を生じることなく、少なくとも0.05ng/mLのトラフ全血レベルを有する量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、タクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００５１】
有害な脂肪の蓄積及び本明細書に記載される他の状態は、加齢の一部として起こるものであり得る。よって、本発明のこの方法は、40、50、60又は70才を過ぎた人に有利に適用することができる(しかしそれより年齢の低い者も利益を受けることができる)。
【００５２】
高齢者における健康体重の維持を支援することができるという点で、それは本発明の利点である。
【００５３】
本発明は、体脂肪の低減が臨床的に非常に重要であるとみなされることが多い場合、例えば肥満度指数(BMI)が40より大きい場合、臨床的肥満の治療に特に有用であり得る。
【００５４】
本発明は同様に、患者が過脂肪とみなされる場合、例えば25から40のBMIを有する場合、相当に有用であると予想される。
【００５５】
筋肉を損失することなく有害な脂肪蓄積の低減を生じることは、本発明の方法及び使用の利点である。実際、除脂肪筋肉量は、脂肪が失われると同時に改善し得る。この望ましい効果を援助するために、患者の食事に適当なタンパク質が存在するべきである。抵抗運動も患者にとって追加的に有益となる可能性がある。同様に、患者は、健康体重を維持するために必要なカロリーより多く食べないように奨励されるべきであるが、通常体重を低減させるような食事制限は必要ない。起こり得る除脂肪筋肉の増加には基礎代謝率の増大という利益があり、それが次に有害な脂肪レベルの低減を援助する。
【００５６】
したがって、本発明の方法及び使用は、40才を過ぎた、適切には50才を過ぎた、より適切には60才を過ぎた患者、例えば70才を過ぎた患者に特に有益に適用できることが明らかである。
【００５７】
トラフ全血レベルは、適切には少なくとも0.1ng/mL、例えば少なくとも0.2ng/mLであってもよい。
【００５８】
免疫抑制を回避するために、トラフ血中レベルは、タクロリムスが免疫抑制剤として使用されるときに免疫抑制剤とみなされるレベルの4分の1未満となると予想される。一般に、これは、移植の拒絶反応を防止するために用いられる4ng/mLの3分の1未満、すなわち1.3ng/mL以下であることを意味する。
【００５９】
タクロリムス又はその近い構造の類似体によって与えられる治療域から最大の利益を受けるために、トラフ全血トラフレベルは、1.2ng/mL未満、例えば1.1ng/mL未満であるべきであると考えられる。
【００６０】
本発明の治療は、予防的に使用されても、治療的に使用されてもよい。
【００６１】
現在のところ、本発明ではタクロリムスを用いることが好ましい。しかし、タクロリムスの近い構造の類似体を用いることも適切である。そのような類似体は、タクロリムスのC1〜C17、C19、C20及びC22〜C34までの構造を保持するが、C18及び/又はC21の修飾が許される。そのような修飾には、C18又はC21のいずれかの1つの水素原子をC1〜4アルキル、C2〜4アルケニル、ヒドロキシル又はメトキシ(methyoxyl)基で置換できることが含まれ、C21プロペニル基を水素原子、C1〜6アルキル基、他のC2〜6アルケニル基、ヒドロキシル基又はメトキシル基で置きかえることも含まれる。ある種の適切な化合物には、C21位が修飾された、例えばC21プロペニル基がメチル基、エチル基又はプロピル基で置きかえられた、タクロリムスの類似体が含まれる。他の適切な化合物には、C18水素原子がヒドロキシル基で置きかえられた類似体が含まれる。これらの化合物のあるものは、例えば、C21プロペニル基がメチル基で置きかえられた類似体、又はC18水素がヒドロキシル基で置きかえられた類似体(例えば、ここでは、C21プロペニル基が変わっていない又はメチル、エチル若しくはプロピル基で置きかえられている)は、タクロリムスより弱い免疫抑制剤である。米国特許第5,376,663号は、タクロリムスの類似体を調製する方法を開示している。タクロリムスのC21プロペニル基はまた、フェノール(fenor)C1-6アルキル基、例えば2-フルオロエチル基として、又は異なるプロペニル基、例えば1-メチルエテニル基で置きかえられてもよい。
【００６２】
用語「免疫抑制を生じない」は、免疫抑制の大きな副作用が通常起きないことを示す。これは、用いられるタクロリムス又は近い構造の類似体の用量が、患者においてTNFαレベルを実質的に低下させない用量である結果である。そのような化合物の用量が、70kgの成人において1日当たり1.2mg未満であれば(他の体重の場合は比例計算に従う)、免疫抑制をもたらさないとみなすことができると考えられる。
【００６３】
しかし、本明細書に開示する治療の利益を最大限にするために70kgの患者に用いることとなるタクロリムス又はその近い構造の類似体の最大日用量は、0.9mg以下の用量となり、好都合には70kgの患者に0.75mg以下の用量が(他の体重の場合は比例計算に従う)任意の日に用いられて、所望の効果と副作用の間を広く隔てることになる。
【００６４】
研究から、ある場合には(後成的機序の結果生じる釣鐘型反応曲線のため)、70kgの患者の場合1日当たり0.6mg以下の用量(他の重量の場合は比例計算に従う)、例えば、70kg患者の場合1日当たり0.5mg未満の用量(他の重量の場合は比例計算に従う)のタクロリムス又はその近い構造の類似体を用いることが有利であり得ることが示唆されている。
【００６５】
出願人の研究から、1日当たり0.05mg以上の用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体が適切であると予想され、時には1日当たり0.1mg以上の用量が好都合である場合があり、例えば、1日当たり0.15mg以上の用量が用いられてもよいことが示唆されている。
【００６６】
故に、70kgの患者の適切な日用量(他の重量の用量は比例計算に従う)には、0.05mg、0.075mg、0.1mg、0.125mg、0.15mg、0.175mg、0.2mg、0.225mg、0.25mg、0.275mg、0.3mg、0.325mg、0.35mg、0.375mg、0.4mg、0.425mg、0.45mg、0.475mg、0.5mg、0.525mg、0.55mg、0.575mg及び0.6mgのタクロリムス又はその近い構造の類似体(例えばタクロリムス)が含まれる。
【００６７】
神経細胞内へのタンパク質凝集体の沈着によって特徴付けられる疾患の治療にタクロリムス及びその近い構造の類似体が有益な効果をもたらすのは、その後成的作用機序であることから、有益な結果は、1日1回未満、例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30若しくは31日又はそれより長い日数毎に1回の投薬頻度によって得ることができる。1日1回以外に、患者の使い易さに特に適した間隔には、隔日、1週間に1回、10日に1回、1カ月に3回、2週間に1回、又は1カ月に1回が含まれてもよい。
【００６８】
本発明は、上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療する方法であって、それを必要とするヒトに有効量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を1日1回以下投与することを含み、その用量が0.007mg/kgから0.03mg/kgである方法を提供することが、当業者であれば用量に関する前述の解説から理解されよう。
【００６９】
同様に、本発明は、0.007mg/kgから0.03mg/kgの用量で1日1回以下投与される、上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００７０】
同様に、本発明は、1日1回以下投与することによって上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療するための医薬品の製造におけるタクロリムス又はその近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が、0.007mg/kgから0.03mg/kgのタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、使用を提供する。
【００７１】
一般に、0.1mg/kg以下のタクロリムス又はその近い構造の類似体が用いられると予想され、適切には0.085mg/kg以下、例えば0.007mg/kgが用いられると予想される。
【００７２】
一般に、0.0014mg/kg超、例えば0.002mg/kg超のタクロリムス又はその近い構造の類似体が用いられると予想される。
【００７３】
現在のところ、0.0014mg/kgから0.0085mg/kg、例えば0.002mg/kgから0.007mg/kgのタクロリムス又はその近い構造の類似体を用いるのが特に適していると考えられる。
【００７４】
そのような使用において、タクロリムスを適切に使用することができる。
【００７５】
そのような用量は、免疫抑制をもたらすために患者に用いられる用量とはかなり異なることが理解されよう。
【００７６】
本発明は、上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療する方法であって、それを必要とするヒトに投与することを含み、有効量のタクロリムス又は近い構造の類似体を1日1回以下投与して後成的修飾を達成するによって、例えばSOD1及び/又はSOD2の発現を修飾することによって、酸化ストレスの低減をもたらすことによる方法を提供する。
【００７７】
同様に、本発明は、後成的修飾を達成するによって、例えばSOD1及び/又はSOD2の発現を修飾することによって酸化ストレスの低減をもたらす量を1日1回以下投与することによって、上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療するのに使用するためのタクロリムス又はその近い構造の類似体を提供する。
【００７８】
同様に、本発明は、1日1回以下投与することによって上記で言及した状態の任意の1つ以上を治療するための医薬品の製造におけるタクロリムス又はその近い構造の類似体の使用であって、該医薬品が、後成的修飾を達成するによって、例えばSOD1及び/又はSOD2の発現を修飾することによって酸化ストレスの低減をもたらす量のタクロリムス又はその近い構造の類似体を含有する、使用を提供する。
【００７９】
用いられる用量及び投与計画は上文に示す通りであってもよい。現在のところそのような使用に好ましい化合物はタクロリムスである。
【００８０】
さらなる態様では、本発明は、0.05mgから0.8mgのタクロリムス又はその近い構造の類似体及び医薬として許容されるその担体を含有する、上記で言及した状態の任意の1つ以上の治療(すなわち、有害な脂肪蓄積、並びに/又は筋肉減少症、並びに/又はII型糖尿病、並びに/又は高コレステロール及び/若しくはトリグリセリドレベル、並びに/又はメタボリック症候群の治療)に使用するための、単位用量(unit dose)の医薬組成物を提供する。
【００８１】
使用のための単位用量は、0.75mg以下、例えば、0.6mg以下、例えば0.5mg以下の用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体、好ましくはタクロリムスを含有してもよい。
【００８２】
単位用量は、0.05mg以上、好都合には0.1mg以上、例えば0.15mg以上のタクロリムス又はその近い構造の類似体、好ましくはタクロリムスを含有してもよい。
【００８３】
そのような単位用量は、適切にはタクロリムスを用いる。
【００８４】
故に、そのような使用に好都合な単位用量は、0.1mgから0.6mgのタクロリムス、例えば0.1mgから0.5mgのタクロリムスを含有してもよい。
【００８５】
タクロリムス又はその近い構造の類似体は、溶媒和物、例えば、水和物又はアルコラートとして存在してもよい。適切なタクロリムスは、一水和物などの水和物として用いられる(本明細書で重量が言及されるとき、それらは溶媒和している分子の重量を含まない)。
【００８６】
単位用量は、上記で述べた特定の量のいずれを含有してもよい。
【００８７】
現在のところ、単位用量が、タクロリムスを、例えばタクロリムス一水和物として含有すれば好ましい。
【００８８】
所望であれば、プログラフ(登録商標)などの既存の市販品を購入し、その内容物を分割して所望の用量にしてもよく、次いでそれを経口投与用の硬ゼラチンカプセル内に入れてもよい。
【００８９】
単位用量は、注射による投与に適していてもよいが、単位用量は口を介する投与に適していることが好ましい。単位用量は、液体、例えば、容器中の溶液又は懸濁液であってもよいが、単位用量は非液体が好ましいと考えられる。適した固体の単位剤形には、錠剤及びカプセル剤が含まれ、それらのうちカプセル剤の方が適切である。単位用量の調製のベースとなるタクロリムスを含有する医薬組成物は、熟練した医薬化学者により数十年にわたり研究されている。
【００９０】
場合によって、医薬組成物は経口投与用に製剤化される。場合によって、組成物は化合物の懸濁液を適したビヒクル中に含む。経口投与用のビヒクルの非限定的な例には、リン酸緩衝食塩水(PBS)、5%デキストロース水溶液(D5W)及びシロップが含まれる。組成物は、保管及び投与期間にわたって用量の濃度を安定化させるために製剤化されてもよい。場合によって、組成物は、許容可能な可溶化剤を任意選択で含有する希釈剤、例えば水、生理食塩水、及び緩衝液に溶解した活性化合物の溶液であってもよい。好都合な形態では、組成物は固体剤形を含む。場合によって、固体剤形は、カプセル剤、カプレット、舐剤、小袋(sachet)、又は錠剤を含む。場合によって、固体剤形は、液体を充填した剤形である。場合によって、固体剤形は、固体を充填した剤形である。場合によって、固体剤形は、固体を充填した錠剤、カプセル剤、又はカプレットである。場合によって、固体を充填した剤形は、粉末を充填した剤形である。場合によって、固体剤形は、微粉化粒子、顆粒又はマイクロカプセル化剤の形態の化合物を含む。場合によって、組成物は界面活性剤を含有してもよい乳濁液を含む。場合によって、固体剤形は、ラクトース、ソルビトール、マルチトール、マンニトール、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、医薬として許容可能な賦形剤、色素、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、防腐剤、香味剤、担体、及び結合剤の1種以上を含む。場合によって、固体剤形は、固体剤形又は香味剤の製造、加工又は安定性を容易にする1種以上の材料を含む。
【００９１】
そのような製剤を考慮するとき、当業者であれば、タクロリムスの製剤化及び低用量の薬剤の製剤化全般に関する当技術分野における長年にわたる経験に求めることができよう。
【００９２】
本発明はまた、上記で定めた通りの極めて低い用量のタクロリムス又は近い構造の類似体を用いることを含む、美容的に脂肪を低減させる方法を提供する。本発明はまた、上記で定めた通りの極めて低い用量のタクロリムス又は近い構造を用いることを含む、筋肉の外観を向上させる方法を提供する。一般に、そのような方法は、臨床的には不要であるが対象の幸福感又は自尊心がそのような治療から利益を受けると予想されるときに、適用されてもよい。
【００９３】
上記で示した通りに、タクロリムス又は近い構造の類似体を1日に1回より多く投与しないことが普通であり、非常に好ましい。しかし、はるかに好ましくない態様では、本発明はまた、タクロリムス又は近い構造の類似体が1日に2回投与される(2回の分割用量として)ように改変された、上記で定めた通りの方法及び使用を提供する。
【００９４】
さらなる態様では、本発明は、0.05mgから1.2mgのタクロリムス又はその近い構造の類似体及び医薬として許容される担体を含有し、それによって有害な脂肪蓄積の沈着又は有害なコレステロールレベルによって特徴付けられる疾患の治療に使用するための、単位用量の医薬組成物を提供する。
【００９５】
適切には、経口医薬組成物は、脂肪の有害な蓄積を治療するためのものである。適切には、経口医薬組成物は、有害なコレステロールレベルを治療するためのものである。
【００９６】
単位用量は、0.9mg以下又は0.75mg以下、例えば、0.65mg以下、例えば0.5mg以下又は0.45mg以下の用量のタクロリムス又はその近い構造の類似体、好ましくはタクロリムスを含有してもよい。
【００９７】
そのような単位用量は、本明細書に記載された通りの投与のためのものであってもよく、特に経口投与のためのものであってもよい。
【００９８】
単位用量は、0.05mg以上、好都合には0.1mg以上、例えば0.15mg以上のタクロリムス又はその近い構造の類似体、好ましくはタクロリムスを含有してもよい。
【００９９】
故に、適切には、単位用量は、0.05mgから0.9mg、例えば0.1mgから0.75mg、例えば0.15mgから0.6mg又は0.15mgから0.5若しくは0.45mgのタクロリムスを含有してもよい。そのような単位用量を、例えば錠剤又は好ましくはカプセル剤としての経口投与に適合させてもよい。
【０１００】
現在のところ、有害な脂肪蓄積の治療に好都合なタクロリムスの日用量は、0.05から0.65mg、例えば、0.1mgから0.5mg、例えば0.15mgから0.45mg、例えば0.3mgであると想定される。そのような用量は、適切には経口で、望ましくは1日1回以下、例えば1日1回、本明細書に記載される単位用量を使用して投与される。
【０１０１】
適切には、本発明は皮下の脂肪蓄積を低減させるために用いられる。これは、美容上の向上を求める者、例えば体幹周り、例えば腹部を覆う脂肪の低減を求める者に特に有益であり得る。適切には、本発明は、体腔内の脂肪、例えば、健康に有害な影響をもたらすことが知られる、心臓、肝臓及び腸などの内臓に付随する脂肪を低減させるために用いられる。
【０１０２】
出願人は薬物動態解析を行い、本明細書でのヒトの用量は(実施例で得られたデータを考慮し)、それに基づくものである。
【０１０３】
本明細書における実施例から、タクロリムスの効果が酵母、虫及び哺乳動物に生じることが示され、それらから、酸化ストレスに及ぼすその能力が進化的に保存されることが示される。故に、ヒトの疾患は、マウスを含む他の種と同様に、タクロリムス(及び近い構造の類似体)で治療することができると予想される。
【０１０４】
以下の実施例は、本発明を例示する。本明細書においてRDC5への言及はタクロリムスを指す。
【０１０５】
参考文献
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【実施例】
【０１０６】
[実施例1]
タクロリムスは酵母及び虫の老化を遅延させる
酵母のバイオスクリーン(bioscreen)により、老化酵母培養物の経時寿命プロファイルが測定される。寿命中位数は、所与の個体群の50%が死ぬ時間として定義される。相対生存率(以下の図表で表される)は、培養物の生存率に及ぼす治療の効果を、対照ビヒクルで処理された培養物の割合として比較する。RDC5は、酵母の経時寿命プロファイルを増殖率に影響を及ぼすことなく延長することができることが確認された。
【０１０７】
RDC5で処理された酵母培養物は、対照で処理された培養物より寿命中位数が有意に長かった。よって、RDC5は、老化及び望ましくない脂肪蓄積などの加齢に関連する疾患の発症を遅延させることができると考えられる。寿命に及ぼす影響を図1に示す。
【０１０８】
少なくとも虫80匹の虫培養物を、寿命が持続する間、手作業で毎日評価した。RDC5は、酵母と同様に虫の個体群の健康寿命及び寿命中位数も延長することができる。
【０１０９】
バックグラウンドがBus8である虫の寿命に及ぼすタクロリムスの効果を図2に示す。
【０１１０】
10ug/mlという低用量がBus8虫における健康寿命の延長に最も効力がある。
【０１１１】
[実施例2]
脂質が蓄積した虫に及ぼす効果
タクロリムスは、線虫において加齢に依存する脂肪蓄積の増加を遅延させることができる。線虫は、肥満の汎用モデルである(Zheng及びGreenway, 2012を参照)。
【０１１２】
オイルレッドOは、脂質を染色するために使用される脂溶性染料であり、カラー光学顕微鏡によって定量化される。
【０１１３】
DMSO(対照)で処理された線虫は、1日目から4日目に脂質沈着の上昇を示し、その後9日目までプラトー期を示した。対照的に、RDC5で処理された虫は、7日目をピークとする、より浅い脂質蓄積の上昇を示した。
【０１１４】
RDC5は、成熟後4〜7日目に起こる最大脂肪蓄積の時間を遅延させる。このことから、RDC5が脂肪蓄積を遅らせるように作用すること、及びRDC5が加齢に関連する肥満の治療に有用であると予想されることが明示される。
【０１１５】
結果を図3に示す。
【０１１６】
[実施例3]
ラットにおける肥満に及ぼす効果
このデータは、ラットにおける加齢に依存する脂肪の増加に及ぼすRDC5の効果を表す。加齢ラットは成熟期後期に劇的に体重が増加することが知られている。加齢ラットはRAT_ND_01におけるモデルとして使用され、この試験では、このラットから体重及び組織試料を採取した。ラットは、6カ月の試験の開始時に18カ月齢であった。投与量は図4に見られる。
【０１１７】
RAT_FAT_01の体重データ
この試験を通して(すなわち、18カ月齢から先)、対照で処置された群とRDC5で処置された群の両方について個体の体重を週毎に評価した。(ラットの体重は、4週目から試験の終わりまで統計的に有意に異なる。エラーバーは平均値の標準誤差である)。処置を開始する前の1週目及び2週目のタイムポイントでは、RDC5処置と対照処置の間で有意差は観察できなかった。対照で処置されたラットの体重は、およそ250gから6カ月目のタイムポイントで(24カ月齢で)320gを超えるまで時間とともに増加し続けた。しかし、RDC5で処置されたラットは、加齢に関連する同レベルの体重増加を受けなかった。重量レベルは当初低下したが、健康年齢(およそ230g)より下がらず、試験の残りの期間一定のままであった(+/-20g)。この結果として、RDC5ラットは、対照で処置されたその月齢対応対照より、4週齢を超えてから有意に重さが少なく、試験を終える頃には28%軽かった。結果を図5に示す。
【０１１８】
バイオマーカーデータ
代謝のバイオマーカー
肥満及び代謝障害の血液バイオマーカーのレベルに及ぼすRDC5の効果を決定するための様々な技法が使用されてきた。
検査した代謝のバイオマーカーには以下が含まれる:
- ケトン体 - 動態的、酵素的
- 遊離脂肪酸 - ACS-ACOD酵素的
- グリセリン - 熱量的(Calometric)
- トリグリセリド - GPO-POD
- HDLコレステロール - CHO-PAP
- LDLコレステロール - 酵素的
- 総コレステロール - CHO-PAP
【０１１９】
肥満のマーカーすべてが低減する(しかし、グリセリン、遊離脂肪酸及びケトン体の低減は統計的に有意ではない)。ラットを6カ月RDC5で処置すると、総コレステロール、HDL、LDL、及びトリグリセリドが有意に低減することから、RDC5は、メタボリック症候群のこれらの構成要素の制御に有益な効果があることが示される。
【０１２０】
[実施例4]
当初18カ月齢の50匹の雌のフィッシャーラットを本試験に使用した。動物を、標準温度(22±1℃)で照明を制御した環境(午前7時から午後8時まで点灯)に収容し、食物及び水を自由に摂取させ、17週目に一層軟らかい食物を導入して食物の摂取を奨励した。動物の半分はビヒクル(5ml/kg、皮下)で1週間に6日処置し、半分はRDC5(1mg/kg、皮下)で1週間に6日処置した。個体の体重をベースラインで記録し、その後1週間に1回、試験が終わるまで記録した。
【０１２１】
試験終了時に動物の生存に有意差がなかったことが認められた(RDC5についてのラットがわずかに多く生存した)。
【０１２２】
処置を開始する前の1週目及び2週目のタイムポイントでは、RDC5で処置した群と対照で処置した群の間の有意差は観察できなかった。対照で処置されたラットの体重は、およそ250gから6カ月目のタイムポイントのおよそ320gまで時間とともに増加し続けた。加齢に関連する体重増加は一般に、絶対的な観点と体重に対する割合(%)の観点の両方で体脂肪の増加を示す。
【０１２３】
RDC5で処置したラットは加齢に関連する体重増加を示さなかった。重量レベルは当初低下したが、健康体重(およそ230g)より下がらず、試験の残りの期間ほぼ一定のままであった(±20g)。RDC5で処置されたラットは、対照で処置されたその月齢対応対照より、試験の開始から3週目からその終了時まで有意に重さが少なく、終了時には重さが28%軽かった(およそ320gに対しておよそ230g)。
【０１２４】
死後のMR1スキャンから脂肪:除脂肪の比率が明示された。図11は、若い3カ月齢のラット、対照で処置された24カ月齢のラット、及びRDC5で処置された24カ月齢のラットからの断層画像の代表例を示す。
【０１２５】
加齢ラットは、若いラットと比較して皮下脂肪と内臓脂肪(visceral rat)の両方の増加を示す。しかし、RDC5で処置されたラットは、対照で処置された24カ月齢のラットより皮下脂肪が少なく、内臓脂肪も少ないことが見られる。
【０１２６】
3カ月齢のラットは平均して大体20%の体脂肪を有し、24カ月齢の対照ラットは平均して大体40%の体脂肪を有し、RDC5で処置された24カ月齢のラットは大体30%の体脂肪を有していた。
【０１２７】
図11は、3カ月齢の非処置動物、対照で処置された24カ月齢の動物、及びタクロリムスで処置された24カ月齢の動物を比較するMIRデータを提示する。タクロリムスで処置された24カ月齢の動物は、非処置の3カ月齢の動物と似た皮下脂肪を有し、対照で処置された24カ月齢の動物よりはるかに少ない脂肪を体腔内に有していることが見られる。これは、美容上の改善(皮下脂肪の低減という点で)及び健康上の改善(内臓周りの脂肪の低減という点で)がタクロリムスの処置によってもたらされることと一致する。
【０１２８】
MIR画像には、体内の脂肪領域を示すために印が付されている(領域1)。皮下脂肪の層は薄灰色の外側の輪であり、24カ月齢の非処置の対照だけに容易に見られる。
【０１２９】
[実施例5]
RDC5で処置された動物及び対照で処置された動物の血漿プロファイルを調査終了時に得た。以下のデータは観察されたデータの要約である:
【０１３０】
【表１】
2016525501.tif 000002
【０１３１】
これから、低用量のRDC5で処置すると、総コレステロールが有益に40%低減し、トリグリセリドが有益に低減することが示される。これは、極めて低い用量のRDC5の使用をヒトに用いると、コレステロール及びトリグリセリドに望ましい効果を及ぼすということと一致し、脳卒中及び心臓への有害作用が低減する可能性があるということと一致する。
【０１３２】
乳酸脱水素酵素レベルが50%低減するということは、極めて低い用量を用いると毒性がないということと一致し、それだけでなく極めて高齢での病態(癌又はHIVなど)で起こる可能性がある筋喪失に対する耐性が改善するということにも一致する。
【０１３３】
[実施例6]
タクロリムスの近い構造の類似体の効果
【０１３４】
【化１】
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【０１３５】
図7に示す寿命プロットから、アスコマイシン(21-エチル類似体)がタクロリムスと同程度に有効に虫の寿命を延長させることができることが示される。図Oにおけるこのプロットから、異なる供給源のタクロリムスは、虫における寿命の延長に、恐らく供給源の品質に起因する多様な効力を及ぼすことも示される(Sigma対Evita)。
【０１３６】
【表２】
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【０１３７】
図8に示す寿命プロットから、ジヒドロタクロリムス(21-プロピル類似体)がタクロリムスとほぼ同程度に有効に虫の寿命を延長させることができることが示される。このプロットから、異なる供給源のRDC5は、虫における寿命の延長に多様な効力を及ぼすことも示される(Sigma対Evita)。
【０１３８】
【表３】
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【０１３９】
図7及び8に提示されるこのデータから、極めて低い用量のタクロリムスがその効果を示す機序が、近い構造の類似体、例えばジヒドロタクロリムス及びタクロリムスの21-エチル類似体にも存在することが明示される。
【０１４０】
[実施例7]
単位用量
硬ゼラチンカプセルに以下の組成物を充填した:
【０１４１】
【表４】
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【０１４２】
0.3mgのタクロリムスを含有する上の通りの経口カプセル剤1つを健康なヒトのボランティアの群に投与した。投与の結果として、血中TNF-αレベルに有意な変化は起こらなかった。観察されたタクロリムスの平均トラフレベル(各用量の投与後24時間のレベル)はおよそ220pg/mLであった。観察されたタクロリムスの平均ピークレベルはおよそ3700pg/mLであり、曲線下の平均面積はおよそAUC 0-t = 23500(h*pg/mL)であった。
【０１４３】
上のカプセル剤は、上文に記載された治療を施すために使用することができる。
【０１４４】
そのようなカプセル剤2つを使用して単回用量を0.6mgにすると、トラフレベルが約440pg/mLとなることが予想されよう。
【０１４５】
[実施例8]
タクロリムスの用量の最適化
以下に概説することから、RDC5が虫の寿命延長、骨芽細胞の酸化ストレスに対する反応において釣鐘型の用量反応を生じることが示される。
【０１４６】
これらの用量から、RDC5の有効用量範囲が定められる。
【０１４７】
【表５】
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【０１４８】
1ug/ml及び10ug/mlという低い方の用量が、Bus5虫のCLSの延長に最も効力がある(20ug/mlは汚染されていた)。
【０１４９】
【表６】
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【０１５０】
10ug/mlという低用量が、Bus8虫の健康寿命の延長に最も効力がある。20ug/ml及び40ug/mlという高い方の用量は、寿命中位数及び最大寿命の延長では10ug/mlの効力に匹敵するが、健康寿命では匹敵しない。
【０１５１】
(大腸菌(Coli)食物源及びFUDRは、寿命に影響を及ぼす可能性があるので除外した。)
【０１５２】
図9に示す通り、虫における用量反応、つまり用量の下端における→で示されるCLSの狭い有効域を検査したところ、10ug/mlが健康寿命を改善するのに一様に最も効力のある用量であり、さらに低い用量でも同様に有効な場合があり、40ug/mlという高用量は有効性が常に一番低い。
【０１５３】
Bus8虫では、健康寿命の有効用量範囲が小さく、寿命中位数を考慮するとそれより用量反応の範囲は広いが、10ug/mlのとき健康寿命の延長と寿命中位数の延長の両方で効力のピークとなる。これを図10に示す。
【０１５４】
Bus8虫では、やはり健康寿命の場合は有効用量範囲が小さく、寿命中位数の場合はそれより用量反応の範囲が広い。健康寿命の延長の場合は1ug/mlのときに、寿命中位数の延長の場合は10ug/mlのときに効力のピークとなる。
【０１５５】
さらなる実験において、3日に2回投薬しても対照と比較して寿命の有意な増加が生じ、3日に1回投薬すると有意な寿命の増加が生じる(投薬が寿命の早期に開始されなかったときを除く)ことが判明した。これは、本明細書に記載する所望の治療効果が毎日の投与より少ない投与で実現されることと一致している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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