(57)【要約】  本発明は、細胞傷害活性を有し、癌、細胞増殖性障害及びウイルス感染のような疾患の治療において有用である新しい官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体（Ｉ）に関する。本発明は、これらの化合物の製造方法、前記化合物を含む医薬組成物、及び前記化合物または前記化合物を含有する医薬組成物を用いる疾患の治療方法をも提供する。本発明は、コンジュゲートの作成における前記官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体の使用にも関する。2016504272.tif 000090
2016504272.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2016504272.tif 000083
（式中、
Ｌは存在しないか、または条件付きで開裂可能な部分であり；
Ｗは存在しないか、または１個以上の自壊性基を含む自壊性系であり；
Ｚは存在しないか、またはペプチドリンカー、非ペプチドリンカーもしくはペプチド及び非ペプチドのハイブリッドリンカーであり；
ＲＭは存在しないか、またはＬ、ＷもしくはＺ基の１個以上に結合し得る反応性部分であり、或いはＬ、Ｗ及びＺの全てが存在しないときにはＲＭは酸素に結合し；
ただし、Ｌ、Ｗ、Ｚ及びＲＭの少なくとも１つは存在する）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
条件付きで開裂可能な部分Ｌは独立して存在しないか、または
【化２】
2016504272.tif 000084
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は各々独立して、存在しないか、または水素であるか、またはヒドロキシであるか、または直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４スルフヒドリルアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アミノアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル及び直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニルから選択される場合により置換されている基であり；
ｎの各々は独立して０〜２の整数であり；
ｎ１は０〜５の整数である）
から選択される基であり；
自壊性系Ｗは独立して存在しないか、または
【化３】
2016504272.tif 000085
（式中、Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり；
Ｒ３は上に規定されている通りであり；
Ｒ４及びＲ５は各々独立してハロゲン、メチル、エチルまたは直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキルであり；
ｍは０〜３の整数であり；
ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、ＣＨ２ＮＨ、ＮＨまたはＮ−Ｒ４であり、ここでＲ４は上に規定されている通りであり；
Ｒ１２及びＲ１３は各々独立して水素、ハロゲン、メチル、エチル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ハロアルキルであるか、またはＲ１２及びＲ１３は一緒に３〜６員炭素環を形成する）
から選択される基であり；
Ｚリンカーは独立して存在しないか、または
Ｚ１
（該Ｚ１は、Ｃ末端を介してＷに、Ｗが存在しないときにはＬに、またはＷ及びＬの両方が存在しないときには酸素に結合したジペプチドまたはトリペプチドである）、
Ｚ２
（該Ｚ２は、
【化４】
2016504272.tif 000086
から選択される基であり、ここでＲ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり、ｐは１〜２０の整数である）、
Ｚ１−Ｚ２
（式中、Ｚ１及びＺ２は上に規定されている通りである）であり；
反応性部分ＲＭは独立して存在しないか、または
【化５】
2016504272.tif 000087
（式中、Ｒ４及びＲ５は上に規定されている通りであり；
Ｒ６はＣ１−Ｃ３アルキル、またはＮＯ２及びＣＮ基を含む電子吸引基であり；
ｒは０〜７の整数である）
から選択される基である；
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項３】
Ｚは、
【化６】
2016504272.tif 000088
2016504272.tif 000089
（式中、Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は請求項２に規定されている通りである）
から選択される基である請求項２に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項４】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルグリシネート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルピペラジン−１−カルボキシレート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［４−（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ[１，２−ｂ]キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］ピペラジン−１−カルボキシレート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルメチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバメート、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［｛２−［（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）（メチル）アミノ］エチル｝（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−アミノ−３，３−ジメチルブタノエート塩酸塩、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−アミノ−４，４−ジフルオロペンタノエート塩酸塩、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］アセテート塩酸塩、
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝カルバモイル）オキシ］メチル｝フェニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、及び
Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
からなる群から選択される請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項５】
治療有効量の請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び少なくとも１つの医薬的に許容され得る賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項６】
更に１つ以上の化学療法剤を含む請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗癌治療において同時に、別々にまたは逐次使用するための組み合わせた製剤としての請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び１つ以上の化学療法剤を含む製品。
【請求項８】
医薬として使用するための請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項９】
癌の治療方法において使用するための請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項１０】
前記癌は癌腫、例えば膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺癌を含めた肺癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌、及び扁平上皮癌を含めた皮膚癌；白血病、急性リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞性リンパ腫及びバーキットリンパ腫を含めたリンパ系の造血器腫瘍；急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び前骨髄球性白血病を含めた骨髄系の造血器腫瘍；線維肉腫及び横紋筋肉腫を含めた間葉起源の腫瘍；星状細胞腫、神経芽腫、グリオーマ及び神経鞘腫を含めた中枢及び末梢神経系の腫瘍；メラノーマ、セミノーマ、奇形癌、骨肉腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫、甲状腺濾胞癌、カポジ肉腫及び中皮腫を含めた他の腫瘍からなる群から選択される請求項９に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
その必要がある哺乳動物に対して有効量の請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む癌の治療方法。
【請求項１２】
前記したその必要がある哺乳動物はヒトである請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
癌の治療用薬剤の製造における請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用。
【請求項１４】
コンジュゲートの作成における請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新しい官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体、これらの製造方法、これらを含む医薬組成物、及びある哺乳動物腫瘍の治療におけるその使用に関する。本発明はコンジュゲートの作成におけるその使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
カンプトテシン及びそのアナログの幾つかは、正常な細胞周期中のＤＮＡ鎖のホスホジエステル骨格の切断及び再結合を触媒することによりＤＮＡ構造の変化をコントロールするモノマー酵素であるトポイソメラーゼＩを阻害することにより強力な抗腫瘍活性を示す細胞傷害剤であり、よって幾つかの重要な細胞機能及び細胞増殖に関与している。カンプトテシン及びその誘導体に対する一般参照のために、例えば、Ｗａｎｉら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８７，３０，１７７４；Ｈｓｉａｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８９，４９，４３８５及びＣａｎ．Ｒｅｓ．，１９８９，４９，１４６５を参照されたい。特に、９−ブロモ−カンプトテシンの合成及び抗腫瘍活性はＣｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９９１，３９（１２），３１８３−３１８８に記載されている。
【０００３】
ヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩ（Ｔｏｐｏ  Ｉ）は、複製及び転写中ＤＮＡスーパーコイル形成を緩和する必須の酵素であり、ヒト癌の治療のための有効な標的であると認識されている。
【０００４】
近年、Ｔｏｐｏ  Ｉは癌化学療法のための一般的な標的になった。Ｔｏｐｏ  Ｉ阻害剤、例えばカンプトテシン及びそのアナログは細胞周期の連結ステップを阻止し、ゲノムの完全性に害を与える一本鎖及び二本鎖切断が生じると考えられている。その後、これらの切断が導入されると、アポトーシス及び細胞死が生ずる（例えば、トポイソメラーゼ阻害剤についての概説のために、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２，７２９６−７３０４を参照されたい）。
【０００５】
トポテカン及びイリノテカンは大腸癌、卵巣癌及び小細胞肺癌、及び骨髄悪性疾患を含めた各種悪性疾患の治療のために承認されている２つのカンプトテシン誘導体である。
【０００６】
しかしながら、カンプトテシン誘導体の臨床上の使用にはある制限がある。これらには、低い溶解度、血中でのラクトン形態への自然不活性化、薬物除去後の捕捉された開裂可能な複合体の迅速な逆戻り、腫瘍中の不十分な蓄積、長い注入時間、膜トランスポーターを過剰発現する癌細胞の耐性、及び下痢や好中球減少症のような用量制限副作用が含まれる。
【０００７】
加えて、低い溶解度のために、カンプトテシンは、不活性であることに加えて、その毒性の一部に関与するとも考えられている開環カルボキシレート塩として処方されなければならない（例えば、Ｃaｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ．，Ｐａｒｔ  １，１９７０，５４，４６１；Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９９２，８１，６７６；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，２００２，１２，２１７を参照されたい）。
【０００８】
よって、処方及び／または薬物動態／薬力学特性を改善するように高い溶解度を有する新しいカンプトテシン誘導体の要望が増えている。
【０００９】
薬物を伝達して、腫瘍標的化を改善することができ、またその薬物動態特性を修飾することができる細胞傷害性薬物の分子への薬物コンジュゲーションは上記した問題を解決するために採用された戦略の１つである。
【００１０】
より良好な標的デリバリー、溶解度の向上、及び幾つかの場合には他の薬物動態特性、例えば薬物の半減期または局所濃度の改善、及び薬物性能の改善を可能にする細胞傷害薬物のタンパク質、ぺプチド、アプタマー、ポリマーまたはナノ粒子とのコンジュゲーションの各種例が報告されている。実際、生じたコンジュゲートは溶解度、細胞への浸透性、インビボ治療ウィンドウ、コントロールされた放出、細胞傷害剤とコンジュゲートされた分子の種類に応じた標的に達する能力等の点で改善された特性を有している。
【００１１】
このために、各種タイプの分子とコンジュゲートするのに適した官能化細胞傷害剤の開発に対する要望が増えている。
【００１２】
本発明の第１の目的は、細胞傷害活性を有する以外に高い溶解度を有し、よって処方及び／または薬物動態／薬物力学特性を改善する官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体を提供することである。更に、これらの官能化９−ブロモ−カンプトテシン誘導体はコンジュゲートするのにも適している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８７，３０，１７７４
【非特許文献２】Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８９，４９，４３８５
【非特許文献３】Ｃａｎ．Ｒｅｓ．，１９８９，４９，１４６５
【非特許文献４】Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９９１，３９（１２），３１８３−３１８８
【非特許文献５】Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００３，２２，７２９６−７３０４
【非特許文献６】Ｃaｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ．，Ｐａｒｔ  １，１９７０，５４，４６１
【非特許文献７】Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９９２，８１，６７６
【非特許文献８】Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，２００２，１２，２１７
【発明の概要】
【００１４】
従って、本発明の第１の目的は、式（Ｉ）
【００１５】
【化１】
2016504272.tif 000003
（式中、
Ｌは存在しないか、または条件付きで開裂可能な部分であり；
Ｗは存在しないか、または１個以上の自壊性基を含む自壊性系であり；
Ｚは存在しないか、またはペプチドリンカー、非ペプチドリンカー、もしくはペプチド及び非ペプチドのハイブリッドリンカーであり；
ＲＭは存在しないか、またはＬ、ＷもしくはＺ基の１個以上に結合し得る反応性部分であり、或いはＬ、Ｗ及びＺの全てが存在しないときにはＲＭは酸素に結合し；
ただし、Ｌ、Ｗ、Ｚ及びＲＭの少なくとも１つは存在する）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を提供することである。
【００１６】
本発明は、標準合成変換からなる方法を介して製造される式（Ｉ）の化合物の合成方法、並びにその異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、複合体、代謝物、プロドラッグ、担体及びＮ−オキシドをも提供する。
【００１７】
本発明は、その必要がある哺乳動物に対して有効量の上に記載の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む癌の治療方法をも提供する。その必要がある哺乳動物は、例えばヒトであり得る。
【００１８】
本発明は、癌、細胞増殖性障害及びウイルス感染の治療方法において使用するための上に規定されている式（Ｉ）の化合物をも提供する。
【００１９】
好ましくは、上に規定されている式（Ｉ）の化合物は特定タイプの癌の治療方法において使用され、前記癌には、癌腫、例えば膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺癌を含めた肺癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌、及び扁平上皮癌を含めた皮膚癌；白血病、急性リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞性リンパ腫及びバーキットリンパ腫を含めたリンパ系の造血器腫瘍；急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び前骨髄球性白血病を含めた骨髄系の造血器腫瘍；線維肉腫及び横紋筋肉腫を含めた間葉起源の腫瘍；星状細胞腫、神経芽腫、グリオーマ及び神経鞘腫を含めた中枢及び末梢神経系の腫瘍；メラノーマ、奇形癌、骨肉腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫、甲状腺濾胞癌、カポジ肉腫及び中皮腫を含めた他の腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。
【００２０】
更に、上に規定されている式（Ｉ）の化合物は特定の細胞増殖性障害、例えば前立腺肥大症、家族性腺種性ポリポーシス（ＦＡＰ）、神経線維腫症、乾癬、アテローム性動脈硬化症に関連する血管平滑筋細胞増殖、肺線維症、関節炎、糸球体腎炎、及び術後狭窄及び再狭窄の治療方法において使用される。
【００２１】
加えて、上に規定されている式（Ｉ）の化合物は、腫瘍血管新生及び転移の抑制方法、及び臓器移植拒絶反応及び移植片対宿主病の治療方法において使用される。
【００２２】
本発明は、治療有効量の上に規定されている式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び少なくとも１つの医薬的に許容され得る賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物をも提供する。
【００２３】
本発明は更に、上に規定されている式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び１つ以上の化学療法剤を含む医薬組成物をも提供する。
【００２４】
本発明は更に、上に規定されている式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を公知の抗癌治療、例えば放射線療法または化学療法レジメンと一緒に、及び／または細胞増殖抑制または細胞傷害剤、抗生物質、アルキル化剤、代謝拮抗物質、ホルモン物質、免疫物質、インターフェロンタイプ物質、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えば、ＣＯＸ−２阻害剤）、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗増殖因子受容体物質、抗ＨＥＲ剤、抗ＥＧＦＲ剤、抗血管新生剤（例えば、血管新生インヒビター）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｒａｓ−ｒａｆシグナル伝達経路インヒビター、細胞周期インヒビター、他のｃｄｋ阻害剤、チューブリン結合剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤等と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【００２５】
加えて、本発明は、抗癌治療において同時に、別々にまたは逐次使用するための組み合わせた製剤としての上に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び１つ以上の化学療法剤を含む製品を提供する。
【００２６】
また１つの態様で、本発明は、医薬として使用するための上に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を提供する。
【００２７】
更に、本発明は、抗癌活性を有する薬剤の製造における上に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用を提供する。
【００２８】
最後に、本発明は、コンジュゲートの作成における上に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】未反応のＭＣＭ２タンパク質のデコンボリューション処理した質量スペクトルを示し、ｘ軸には分子量（ｍ／ｚ）を報告し、ｙ軸にはカウント／秒（ｃｐｓ）で表示した強度を報告する。
【図２】化合物８と反応させたＭＣＭ２タンパク質のデコンボリューション処理した質量スペクトルを示し、ｘ軸には分子量（ｍ／ｚ）を報告し、ｙ軸にはカウント／秒（ｃｐｓ）で表示した強度を報告する。
【図３】コンジュゲートＡ１のＨＰＬＣプロフィールを示し、ｘ軸には時間（分）を報告し、ｙ軸にはＵＶ吸光度（ｍＡＵ）を報告する。
【図３ａ】コンジュゲートＡ１の質量スペクトルを示し、ｘ軸には分子量（ｍ／ｚ）を報告し、ｙ軸にはカウント／秒（ｃｐｓ）で表示した強度を報告する。
【図４】コンジュゲートＡ１をカテプシンで２時間処理した後のＨＰＬＣプロフィールを示し、ｘ軸には時間（分）を報告し、ｙ軸にはＵＶ吸光度（ｍＡＵ）を報告する。
【図４ａ】遊離した化合物１１の質量スペクトルを示し、ｘ軸には分子量（ｍ／ｚ）を報告し、ｙ軸にはカウント／秒（ｃｐｓ）で表示した強度を報告する。
【図５】化合物１１のＨＰＬＣプロフィールを示し、ｘ軸には時間（分）を報告し、ｙ軸にはＵＶ吸光度（ＡＵ）を報告する。
【図５ａ】化合物１１をｐＨ７．４で１時間処理した後のＨＰＬＣプロフィールを示し、ｘ軸には時間（分）を報告し、ｙ軸にはＵＶ吸光度（ＡＵ）を報告する。
【図５ｂ】遊離した９−ブロモ−カンプトテシンの質量スペクトルを示し、ｘ軸には分子量（ｍ／ｚ）を報告し、ｙ軸にはカウント／秒（ｃｐｓ）で表示した強度を報告する。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
別段の記述がない限り、本明細書中で使用されている以下の用語及びフレーズは次の意味を有している。
【００３１】
用語「直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル」に関して、我々は例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルのような基を意図している。
【００３２】
用語「直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル」に関して、我々は例えば２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、３−ヒドロキシブチル、２−ヒドロキシブチルのような基を意図している。
【００３３】
用語「直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルコキシ」に関して、我々は例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等のような基を意図している。
【００３４】
用語「ポリフッ素化アルキル」または「ポリフッ素化アルコキシ」は、２個以上のフッ素原子で置換されている上記直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはアルコキシ基、例えばトリフルオロメチル、トリフルオロエチル、１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロプロピル、トリフルオロメトキシ等を意味する。
【００３５】
用語「ハロゲン」に関して、我々はフッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意図している。
【００３６】
用語「直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アミノアルキル」に関して、我々は例えば２−アミノエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、３−アミノブチル等のような基を意図している。
【００３７】
本明細書中で使用されている用語「直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４スルフヒドリルアルキル」は、上に規定されている直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル基に付属している−ＳＨ基を指す。
【００３８】
本明細書中で使用されている用語「Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル」は、１個の環、または一緒に縮合されている２個以上の環から構成され得る飽和または不飽和の非芳香族全炭素単環式環を指す。例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、１，３−シクロヘキサジエニル、デカリニル及び１，４−シクロヘキサジエニルが含まれるが、これらに限定されない。
【００３９】
本明細書中で使用されている用語「ヘテロシクリル」は、１〜４個の炭素原子が窒素、酸素、硫黄のようなヘテロ原子により置換されており、ヘテロ原子が相互に直接連結されていてもよい１個の環または相互に縮合されている２個以上の環から構成され得る飽和または不飽和の非芳香族Ｃ４−Ｃ８炭素環式環を指す。前記した窒素及び硫黄は場合により酸化されていてもよく、前記窒素は場合により４級化されていてもよい。ヘテロシクリル基の非限定例は、例えばテトラヒドロフラニル、ピロリジニル、ピペリジニル、１，４−ジオキサニル、デカヒ、ピペラジニル、オキサゾリジニル及びモルホリニルである。
【００４０】
本明細書中で使用されている用語「アリール」は、場合により更に単結合により相互に縮合または連結されている１〜４個の環系の単、二または多炭素環式炭化水素を指し、前記炭素環式環の少なくとも１個は芳香族であり、用語「芳香族」は完全にコンジュゲートされているπ−電子結合系を指す。アリール基の非限定例は、例えばフェニル、α−またはβ−ナフチル、またはアントラセニル基である。
【００４１】
本明細書中で使用されている用語「ヘテロアリール」は、酸素、窒素及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有している芳香族ヘテロ環式環、典型的には４〜７員ヘテロ環を指し、前記した窒素及び硫黄は場合により酸化されていてもよく、前記窒素は場合により４級化されていてもよい。ヘテロアリール環は場合により更に１つの環、または一緒に縮合されている２個以上の環、芳香族及び非芳香族炭素環式及びヘテロ環式環に縮合または連結され得る。ヘテ原子が相互に直接連結していてもよい。ヘテロアリール基の例には、ピリジル、ピリミジル、フラニル、ピロリル、トリアゾリル、ピラゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、チエニル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、プリニル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、キノキサリニル、イソキノリル及びキノリルが含まれるが、これらに限定されない。１つの実施形態では、ヘテロアリール基は１〜４個のヘテロ原子を含む。「Ｃ１ヘテロアリール基」はヘテロ芳香族基の環系中に１個の炭素原子しか存在していない（任意の置換基中の炭素原子はカウントされない）ことを指すことに注目すべきである。ヘテロ芳香族基の例はテトラゾリル基である。
【００４２】
用語「活性化部分」は、該活性化部分が結合している化学官能基の化学反応性を改善する官能基を指す。このようにして活性化され得る化学官能基は、例えばアミン及びカルボニルであり得る。活性化アミンの例はアルキルスルホニルオキシアミン、アルキルスルホニルオキシカルバメート、フェニルスルホニルオキシアミン、フェニルスルホニルオキシカルバメートである。活性化カルボニル基の例は、例えば活性化エステルである。
【００４３】
用語「活性化エステル」は、エステル部分のアルコキシ基が良好な離脱基である官能基を指す。アルコキシ基の例には、スクシンイミド−Ｎ−オキシド、ｐ−ニトロフェノキシド、ペンタフルオロフェノキシド、テトラフルオロフェノキシド、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール及び１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール、及び匹敵する離脱能を有する基が含まれるが、これらに限定されない。未置換アルキルをベースとするアルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、イソプロポキシ及びｔｅｒｔ−ブトキシは良好な離脱基として適格でなく、従ってメチル、エチル、イソプロピル及びｔｅｒｔ−ブチルエステルは活性化エステルであると見なされない。
【００４４】
化学官能基の別の基への変換には望ましくない副反応を避けるために該官能基を含有している化合物中の１個以上の反応性中心を保護しなければならないことは当業者に公知である。反応性中心の保護及び合成変換の最後でのその後の脱保護は文献（例えば、Ｇｒｅｅｎ，Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（ＮＹ），１９９９を参照されたい）に記載されている標準手順に従って行われ得る。
【００４５】
従って、用語「保護基」は、化学合成において反応中心を保護するために使用される基、例えばヒドロキシル基（−ＯＨ）、アミノ基（−ＮＨ）、チオール基（−ＳＨ）、カルボニル基（−Ｃ＝Ｏ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）を指す。保護基の例は文献（例えば、上書を参照されたい）に記載されているものである。
【００４６】
用語「求核試薬」は求核基を有している分子を指す。用語「求核基」は、化学反応において求電子基に電子対を与えて化学結合を形成する種を指す。求核基の例には、ハロゲン、アミン、ナイトライト、アジド、アルコール、アルコキシドアニオン、カルボキシレートアニオン、チオール、チオレート等が含まれるが、これらに限定されない。
【００４７】
用語「求電子基」は、化学反応において求核基から電子対を受け取って化学結合を形成する種を指す。求電子基の例には、エステル、アルデヒド、アミド、ケトン等が含まれるが、これらに限定されない。
【００４８】
用語「非天然アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸（Ｌ−立体異性体）のＤ−異性体を指す。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容され得る塩には、無機または有機酸、例えば硝酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、過塩素酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、フマル酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メヌンスルホン酸、イセチオン酸及びサリチル酸との酸付加塩が含まれる。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容され得る塩には、無機または有機塩基、例えばアルカリ金属またはアルカリ土類金属、特にナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウムまたはマグネシウム、水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩、非環状または環状アミンとの塩が含まれる。
【００５１】
立体中心または別の形態の異性体中心が本発明の化合物中に存在しているならば、エナンチオマーやジアステレオマーを含めた異性体の全ての形態が本発明に包含されると意図される。立体中心を含む化合物はラセミ混合物、エナンチオマーを多く含む混合物として使用され得、またラセミ混合物は公知の技術を用いて分離され得、個々のエナンチオマーは単独で使用され得る。化合物が不飽和炭素−炭素二重結合を有している場合には、シス（Ｚ）及びトランス（Ｅ）異性体の両方が本発明の範囲内である。
【００５２】
化合物が互変異性体の形態で存在する場合には、各異性体が均等に存在していても、１つの形態が優勢に存在していても本発明の範囲に含まれると意図される。
【００５３】
条件付きで開裂可能な部分Ｌ
存在するならば、Ｌ部分はある条件中またはある条件下で導かれる化学的、光化学的、物理的、生物学的または酵素的プロセスにより開裂され得る条件付きで開裂可能な基である。これらの条件の１つは、例えば本発明の化合物を水性環境中に導いてＬの加水分解をもたらすこと；本発明の化合物をＬを認識し、開裂する酵素を含む環境中に導くこと；本発明の化合物を還元条件下に導いてＬの還元及び／または除去をもたらすこと；本発明の化合物を酸化条件下に導いてＬの酸化及び除去をもたらすこと；本発明の化合物を放射線、例えばＵＶ光と接触させて開裂をもたらすこと；または本発明の化合物を熱と接触させてＬの開裂をもたらすことであり得る。この条件は、循環中に偏在性酵素が存在するために本発明の化合物を動物、例えばヒトのような哺乳動物に投与した直後に直面し得る。或いは、前記条件は、化合物が例えば内部要因（例えば、標的特異的酵素または低酸素）の存在、または外部要因（例えば、放射線、磁場）の適用により特定の臓器、組織、細胞、細胞内標的、或いは細菌性、ウイルス性または微生物性標的に局在化すると直面し得る。
【００５４】
Ｌの開裂は、式（Ｉ）の化合物中の酸素とＬ間の結合が切れることを意味する。
【００５５】
【化２】
2016504272.tif 000004
【００５６】
１つの実施形態では、Ｌは、身体の他の部分と比較して標的細胞の付近または内部に存在している酵素または加水分解条件により、または標的細胞の付近または内部に存在する酵素または加水分解条件により開裂される部分であり得る。標的部位特異性が単に標的部位でのＬの選択的変換及び／または開裂に基づいてのみ達成されるならば、開裂を引き起こす条件は好ましくは少なくともある程度標的部位特異性でなければならないことを認識することが重要である。
【００５７】
１つの実施形態では、Ｌの開裂は細胞内で起こる。
【００５８】
別の実施形態では、Ｌの開裂は細胞外で起こる。
【００５９】
別の実施形態では、Ｌの開裂は偏在性細胞内酵素により起こり得る。
【００６０】
１つの好ましい実施形態では、Ｌは、循環中に存在する偏在性酵素（例えば、エステラーゼ）または細胞内酵素（例えば、プロテアーゼ及びホスファターゼ）により、またはｐＨ制御加水分解により開裂され得る部分であり得る。従って、Ｌは場合により結合している原子酸素と一緒に、インビボで開裂され得るヒドロキシルアミン、カルバメート、尿素、エステル、エーテル、アセタール、ケタールまたはホスフェート基を形成し得る。
【００６１】
より好ましい実施形態では、Ｌは独立して存在しないか、または
【００６２】
【化３】
2016504272.tif 000005
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は各々独立して、存在しないか、または水素であるか、またはヒドロキシであるか、または直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４スルフヒドリルアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アミノアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル、及び直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニルから選択される場合により置換されている基であり；
ｎの各々は独立し０〜２の整数であり；
ｎ１は０〜５の整数である）
から選択される基である。
＊はここ及び明細書を通じて式（Ｉ）の化合物中の他の部分への結合ポイントを示す。
【００６３】
本発明によれば、別途規定されていない場合には、上記Ｒ１、Ｒ２及びＲ３基は場合によりその自由位置でハロゲン、直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル、ポリフッ素化Ｃ１−Ｃ４アルキル、直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ポリフッ素化Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、直鎖または分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキルアミノ、ジ−Ｃ１−Ｃ４アルキル      アルキルカルボニル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−Ｃ１−Ｃ４アルキル、アリール、アリール−Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ４アルキルから独立して選択される１個以上の基、例えば１〜３個の基で置換され得る。
【００６４】
自壊性系Ｗ
存在するならば、Ｗ基は、式（Ｉ）の化合物中で部分Ｌ（または、Ｌが存在しないならば酸素）を部分Ｚ（または、Ｚが存在しないならばＲＭ）に安定的につなぐ自壊性系である。Ｌ−ＷまたはＯ−Ｗ結合は、上記したようなある条件中またはある条件下で導かれる化学的、光化学的、物理的、生物学的または酵素的プロセスにより活性化されると不安定になり得、場合により対応する部分が遊離する。
【００６５】
【化４】
2016504272.tif 000006
【００６６】
自壊性系は、例えば溶解度を向上させるために、または９−ブロモ−カンプトテシン誘導体と反応性部分間のスベースを改善するために式（Ｉ）の化合物中に取り込まれ得る。加えて、自壊性基は求核試薬に対するＲＭの反応性をモジュレートすることができる。
【００６７】
自壊性系は当業者に公知である。例えばＷＯ  ２００２／０８３１８０及びＷＯ  ２００４／０４３４９３に記載されているもの、またはＴｒａｎｏｙ−Ｏｐａｌｉｎｓｉ，Ａ．ら，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，８，６１８−６３７に記載されているものを参照されたい。自壊性基の他の例には、場合により置換されている４−アミノ酪酸アミド、適当に置換されているビシクロ［２．２．１］及びビシクロ［２．２．２］環系、または２−アミノフェニルプロピオン酸アミド［ＷＯ  ２００５／０７９３９８、ＷＯ  ２００５／１０５１５４及びＷＯ  ２００６／０１２５２７；Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，Ｒ．Ｂ．ら，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，２００３，５５，２１７−２５０；Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙ，Ｗ．Ｄ．ら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８４，２７，１４４７−１４５１を参照されたい］が含まれるが、これらに限定されない。
【００６８】
１つの好ましい実施形態では、Ｗは結合している原子酸素、Ｌ、ＺまたはＲＭと一緒に、活性化されると場合により開裂され得るカーボネート、カルバメート、尿素、エステル、チオアミド、ホスフェート、アミド、ヒドロキシルアミンまたはエーテル結合を形成し得る。
【００６９】
より好ましい実施形態では、Ｗは独立して存在しないか、または
【００７０】
【化５】
2016504272.tif 000007
（式中、
Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり；
Ｒ３は上に規定されている通りであり；
Ｒ４及びＲ５は各々独立してハロゲン、メチル、エチルまたは直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキルであり；
ｍは０〜３の整数であり；
ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、ＣＨ２ＮＨ、ＮＨまたはＮ−Ｒ４であり、ここでＲ４は上に規定されている通りであり；
Ｒ１２及びＲ１３は各々独立して水素、ハロゲン、メチル、エチル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ハロアルキルであるか、またはＲ１２及びＲ１３は一緒に３〜６員炭素環を形成する）
から選択される基である。
【００７１】
別のより好ましい実施形態では、Ｗは独立して存在しないか、または
【００７２】
【化６】
2016504272.tif 000008
（式中、
Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり；
Ｒ４、Ｒ５及びＡは上に規定されている通りである）
から選択される基である。
【００７３】
Ｚリンカー
存在するならば、Ｚリンカーはペプチド（Ｚ１）、非ペプチド（Ｚ２）またはハイブリッド（Ｚ３）であり得、前記ハイブリッドリンカーはペプチド及び非ペフチドである。式（Ｉ）の化合物中で、Ｚリンカーは、上記したようなある条件中またはある条件下で導かれる化学的、光化学的、物理的、生物学的または酵素的プロセスにより左側部分（Ｗ、Ｌまたは酸素）から開裂され得る。
【００７４】
【化７】
2016504272.tif 000009
Ｚリンカーは線状または分岐状であり得る。
【００７５】
Ｚとその左側部分間、またはＺと場合によりＲＭ間の結合はアミド、カーボネート、尿素、エステル、チオアミド、ジスルフィド、ヒドロキシルアミンまたはカルバメート結合であり得る。
【００７６】
１つの実施形態では、Ｚは存在しない。
【００７７】
別の実施形態では、Ｚは蛋白分解酵素、プラスミン、カテプシン、β−グルクロニダーゼ、ガラクトシダーゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ウロキナーゼタイププラスミノーゲンアクチベーター（ｕ−ＰＡ）、またはマトリックスメタロプロテアーゼのファミリーのメンバーにより開裂され得るペプチドリンカーＺ１である。
【００７８】
別の実施形態では、Ｚは１つ以上の非ペプチド水溶性部分を含み得る非ペプチドリンカーＺ２である。この場合、リンカーは式（Ｉ）の化合物の水溶性に寄与する。別の実施形態では、Ｚ２は、式（Ｉ）の化合物の水溶性をも向上させる部分でも、そうでなくてもよい式（Ｉ）の化合物の凝集を低下させる１つ以上の非ペプチド部分を含有し得る非ペプチドリンカーである。
【００７９】
例えば、非ペプチド水溶性Ｚ２リンカーはオリゴエチレングリコールまたはポリエチレングリコール部分、またはその誘導体を含有し得る。
【００８０】
別の実施形態では、Ｚは一般式Ｚ１−Ｚ２のペプチド及び非ペプチド残基の両方を含有し得るハイブリッドリンカーＺ３であり、ここでＺ１及びＺ２は独立してペプチドリンカーまたは非ペプチドリンカーである。ハイブリッドリンカーは式（Ｉ）の化合物の水溶性に寄与し得、及び／または蛋白分解酵素により、例えばマトリックスメタロプロテアーゼのファミリーのメンバーにより開裂され得る基質であり得る。
【００８１】
好ましい実施形態では、Ｚ１は、天然Ｌ−アミノ酸、非天然Ｄ−アミノ酸、合成アミノ酸またはその組合せを含む単一アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチドまたはオリゴペプチド部分であり、Ｃ末端またはＮ末端アミノ酸残基の一方はＷ、Ｌまたは酸素に結合し、他の末端アミノ酸はＣＯＯＨまたはＮＨ２基で終わり、または場合によりＲＭに結合している。
【００８２】
より好ましい実施形態では、Ｚ１はそのＣ末端を介してＷに、Ｗが存在しない場合にはＬに、Ｗ及びＬの両方が存在しない場合には酸素に結合したジペプチドまたはトリペプチドである。
【００８３】
別のより好ましい実施形態では、ジペプチドまたはトリペプチドのＣ末端アミノ酸残基はグリシン、ロイシン、アラニン、アルギニン及びシトルリンから選択され、Ｎ末端アミノ酸残基は天然または非天然アミノ酸から選択される。好ましくは、トリペプチドの場合、中間アミノ酸残基はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン及びプロリンから選択される。
【００８４】
別のより好ましい実施形態では、Ｚ１は、Ｃ末端アミノ酸が天然または非天然アミノ酸から選択され、Ｎ末端アミノ酸残基が６−アミノヘキサン酸であるペンタペプチドからなる。
【００８５】
好ましい実施形態では、Ｚ２はオリゴエチレングリコールまたはポリエチレングリコール部分、またはその誘導体を含有し得る。
【００８６】
より好ましい実施形態では、Ｚ２は
【００８７】
【化８】
2016504272.tif 000010
2016504272.tif 000011
（式中、
Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり；
ｐは１〜２０の整数である）
から選択される基である。
【００８８】
好ましい実施形態では、Ｚ３は、天然Ｌ−アミノ酸及び非天然Ｄ−アミノ酸を含む単一アミノ酸、トリペプチドまたはテトラペプチドであるペプチド部分Ｚ１、及びオリゴエチレングリコールまたはポリエチレングリコール部分、またはその誘導体である非ペプチド部分Ｚ２を含むハイブリッド部分である。
【００８９】
別の好ましい実施形態では、Ｚは
【００９０】
【化９】
2016504272.tif 000012
2016504272.tif 000013
（式中、Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りである）
から選択される基である。
【００９１】
反応性部分ＲＭ
存在するならば、ＲＭ部分は反応性部分を予め官能基化する必要なく、比較的温和な条件下で求核試薬、すなわち求核基を有している分子と反応し得る求電子基であり、反応性部分と求核試薬間の反応は熱、圧力、触媒、酸及び塩基からなる群から選択される１つ以上の因子のみの適用を必要としている。
【００９２】
従って、ＲＭ部分が存在しているとき、式（Ｉ）の化合物は各種タイプの求核試薬とコンジュゲートを形成する。ＲＭが存在していないときには、式（Ｉ）の化合物はＬ、Ｗ及び／またはＺ部分に存在する１個以上の求核基を介して各種タイプの求電子試薬、すなわち求電子基を有する分子とコンジュゲートを形成する。
【００９３】
式（Ｉ）の化合物中、ＲＭ部分はＬ、ＷまたはＺ基の１個以上に、または９−ブロモ−カンプトテシン誘導体の酸素原子に結合し得る。
【００９４】
【化１０】
2016504272.tif 000014
【００９５】
反応性部分の例には、カルバモイルハライド、アシルハライド、活性化エステル、無水物、α−ハロアセチル、α−ハロアセトアミド、マレイミド、イソシアネート、イソチオシアネート、ジスルフィド、チオール、ヒドラジン、ヒドラジド、スルホニルクロリド、アルデヒド、メチルケトン、ビニルスルホン、ハロメチル及びメチルスルホネートが含まれるが、これらに限定されない。
【００９６】
本発明の１つの好ましい実施形態では、ＲＭが反応し得る求核試薬の求核基がＮＨ、ＮＨ２、ＳＨまたはＯＨの場合には、ＲＭは独立して存在しないか、または
【００９７】
【化１１】
2016504272.tif 000015
2016504272.tif 000016
（式中、
Ｒ６はＣ１−Ｃ３アルキル、またはＮＯ２及びＣＮ基を含む電子吸引基であり；
ｒは０〜７の整数であり；
Ｒ４及びＲ５は上に規定されている通りである）
から選択される基である。
【００９８】
本発明の別の好ましい実施形態では、ＲＭが反応し得る求核試薬の求核基がＣＯＯＨの場合には、ＲＭは独立して存在しないか、または
【００９９】
【化１２】
2016504272.tif 000017
から選択される基である。
【０１００】
場合により医薬的に許容され得る塩の形態の本発明の具体的な非限定的好ましい化合物（化合物）を以下に示す：
１）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルグリシネート、
２）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
３）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルピペラジン−１−カルボキシレート、
４）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
５）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［４−（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ[１，２−ｂ]キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
６）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］ピペラジン−１−カルボキシレート、
７）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルメチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバメート、
８）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［｛２−［（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）（メチル）アミノ］エチル｝（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
９）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−アミノ−３，３−ジメチルブタノエート塩酸塩、
１０）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−アミノ−４，４−ジフルオロペンタノエート塩酸塩、
１１）  （４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］アセテート塩酸塩、
１２）  Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１３）  Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１４）  Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝カルバモイル）オキシ］メチル｝フェニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１５）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１６）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１７）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１８）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
１９）  Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
２０）  Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
２１）  Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
２２）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
２３）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド、
２４）  Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
２５）  Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
２６）  Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、及び
２７）  Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド。
【０１０１】
場合により医薬的に許容され得る塩の形態の本発明の式（Ｉ）の具体的化合物を照合するために、実施例の欄及び特許請求の範囲を参照されたい。
【０１０２】
本発明は、当業界で利用可能な技術及び容易に入手し得る出発物質を使用し、下記する反応ルート及び合成スキームを用いることによる上に規定されている式（Ｉ）の化合物の製造方法をも提供する。本発明のある実施形態の製造を以下の実施例に記載するが、当業者は記載されている製造方法を本発明の他の実施形態を製造するために容易に適合し得ることを認識している。例えば、本発明に従う例示されていない化合物の合成は、例えば干渉基を適当に保護することにより、当業界で公知の他の適当な試薬を使用することにより、または反応条件をルーチンに修飾することにより当業者に自明の修飾により実施し得る。或いは、本明細書中で言及されているか、または当業界で公知の他の反応は本発明の他の化合物を製造するための適合性を有すると認識されている。
【０１０３】
上記方法に従って実施される変換が標準の修飾、例えば干渉基の保護、当業界で公知の適当な試薬への交換、または反応条件のルーチンの修飾を必要とすることがあることを全ての当業者が認識している。
【０１０４】
従って、式（Ｉ）の化合物の製造方法を以下のスキーム１に記載する：
【０１０５】
【化１３】
2016504272.tif 000018
【０１０６】
本発明は、上に規定されている式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供し、その方法は以下のステップを含むことを特徴とする：
１）式（ＶＩ）
【０１０７】
【化１４】
2016504272.tif 000019
（式中、Ｒ７は水素である）
の化合物を
１ａ）式（ＶＩＩａ）
Ｒ８−Ｌ          （ＶＩＩａ）
（式中、Ｒ８はＮＨ基の活性化部分、好ましくはトシルであり、Ｌは式−ＮＨＣＯＲ１（ＩＩａ）、−ＮＨＣＯＮＨ−Ｒ１（ＩＩｂ）、−ＮＨＣＯＯ−Ｒ１（ＩＩｅ）、または−ＮＨ−Ｒ１（ＩＩｄ）の基であり、ここでＲ１は上に規定されている通りであるかまたは存在しない）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する、または
１ｂ）式（ＶＩＩｂ）
Ｑ−Ｏ−Ｌ          （ＶＩＩｂ）
（式中、Ｑは水素、またはカルボキシ基の活性化部分、例えば活性化エステルであり、Ｌは式（ＩＩｅ）または（ＩＩｋ）
【０１０８】
【化１５】
2016504272.tif 000020
の基であり、ここでＲ１及びＲ２は上に規定されている通りであるかまたは存在せず、ｎ１は上に規定されている通りである）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する、または
１ｃ）式（ＶＩＩｆ）または（ＶＩＩｇ）
【０１０９】
【化１６】
2016504272.tif 000021
（式中、ｎは上に規定されている通りであり、Ｒ１は上に規定されている通りであるかまたは存在しない）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する、または
１ｄ）式（ＶＩＩｈ）または（ＶＩＩｉ）
【０１１０】
【化１７】
2016504272.tif 000022
（式中、Ｒ１は上に規定されている通りであるかまたは存在せず、ｎは上に規定されている通りである）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する、または
１ｅ）上に規定されている式（ＶＩ）（式中、Ｒ７はイミダゾル−１−イル−カルボニル部分である）の化合物を式（ＶＩＩｊ）または（ＶＩＩｍ）
【０１１１】
【化１８】
2016504272.tif 000023
（式中、Ｒ１は上に規定されている通りであるかまたは存在せず、Ｒ２、Ｒ３及びｎ１は上に規定されている通りである）
の化合物と反応させる；
２）生じた式（ｌａ）
【０１１２】
【化１９】
2016504272.tif 000024
（式中、Ｌは式（ＩＩａ）〜（ＩＩｍ）の基であり、ここでＲ１は水素またはヒドロキシであり、Ｒ２、Ｒ３、ｎおよびｎ１は上に規定されている通りである）
の化合物を
２ａ）式（ＶＩＩＩ）
【０１１３】
【化２０】
2016504272.tif 000025
（式中、Ｒ９は水素、ヒドロキシまたはカルボニル基活性化部分、好ましくは４−ニトロフェニル−オキシであり、Ｗ、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるかまたはいずれも存在しない）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去することにより、上に規定されている式（Ｉ）の化合物に変換させる、または
２ｂ）式（ＩＸ）
【０１１４】
【化２１】
2016504272.tif 000026
（式中、Ｒ９及びＷは上に規定されている通りであり、Ｚは末端アミノ酸がＣＯＯＨまたはＮＨ遊離基を有している基Ｚ１、またはＲ１またはＲ２が水素及びヒドロキシから選択される式（ＩＶａ）−（ＩＶｐ）の基Ｚ２、またはＺ１及びＺ２が上に規定されている通りである基Ｚ３である）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去することにより、式（ｌｂ）
【０１１５】
【化２２】
2016504272.tif 000027
（式中、Ｌ及びＷは上に規定されている通りであり、Ｚは末端アミノ酸がＣＯＯＨまたはＮＨ遊離基を有している基Ｚ１、またはＲ１またはＲ２が水素及びヒドロキシから選択される式（ＩＶａ）−（ＩＶｐ）の基Ｚ２、またはＺ１及びＺ２が上に規定されている通りである基Ｚ３である）
の化合物
に変換させる；
３）次いで、上に規定されている式（ｌｂ）の化合物を式（Ｘ）
【０１１６】
【化２３】
2016504272.tif 000028
（式中、Ｒ１０はハロゲン、ヒドロキシまたはカルボキシル基の活性化部分、例えば活性化エステルである）
の化合物と反応させることにより、上に規定されている式（Ｉ）の化合物に変換させる；
或いは
４）上に規定されている式（ＶＩ）の化合物を
４ａ）式（ＸＩ）
【０１１７】
【化２４】
2016504272.tif 000029
（式中、Ｒ１１は式（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩｂ）、（ＶＩＩｆ）、（ＶＩＩｇ）、（ＶＩＩｈ）または（ＶＩＩｉ）の基であり、ここでＲ１は存在しない）
の化合物と反応させて、式（Ｉ）（式中、Ｗ、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであり、Ｌは上に規定されている通りであるかまたは存在しない）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を得る、または
４ｂ）上に規定されている式（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させて、式（Ｉ）（式中、Ｌは存在せず、Ｗ、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りである）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を得る。
【０１１８】
或いは、式（Ｉ）の化合物は以下に示すスキーム２に従っても製造され得、
【０１１９】
【化２５】
2016504272.tif 000030
その方法は以下のステップを含むことを特徴とする：
５）上に規定されている式（ＶＩ）の化合物を式（ＸＩＩ）
Ｒ９−Ｗ          （ＸＩＩ）
（式中、Ｒ９は上に規定されている通りであり、Ｗは上に規定されている通りであり、ここでＲ１及びＲ２は上に規定されている通りであるかまたは存在しない）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する；
６）次いで、生じた式（ｌｃ）
【０１２０】
【化２６】
2016504272.tif 000031
（式中、Ｗは（ＩＩＩａ）〜（ＩＩＩｅ）の基であり、ここでＲ１及びＲ２は上に規定されている通りであるかまたは存在しない）
の化合物を
６ａ）式（ＸＩＩＩ）
【０１２１】
【化２７】
2016504272.tif 000032
（式中、Ｒ９は上に規定されている通りであり、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるかまたはいずれも存在しない）
の化合物と反応させて、式（Ｉ）（式中、Ｗは上に規定されている通りであるかまたは存在せず、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるかまたは存在しない）の化合物を得る、または
６ｂ）式（ＸＩＶ）
【０１２２】
【化２８】
2016504272.tif 000033
（式中、Ｒ９は上に規定されている通りであり、Ｚは末端アミノ酸がＣＯＯＨまたはＮＨ遊離基を有している基Ｚ１、またはＲ１またはＲ２が水素及びヒドロキシから選択される式（ＩＶａ）−（ＩＶｐ）の基Ｚ２、またはＺ１及びＺ２が上に規定されている通りである基Ｚ３である）
の化合物と反応させた後、存在するならば保護基を除去する；
７）最後に、生じた式（Ｉｄ）
【０１２３】
【化２９】
2016504272.tif 000034
（式中、Ｗは上に規定されている通りであるかまたは存在せず、Ｚは末端アミノ酸がＣＯＯＨまたはＮＨ遊離基を有している基Ｚ１、またはＲ１またはＲ２が水素及びヒドロキシから選択される式（ＩＶａ）−（ＩＶｐ）の基Ｚ２、またはＺ１及びＺ２が上に規定されている通りである基Ｚ３である）
の化合物を式（Ｘ）
【０１２４】
【化３０】
2016504272.tif 000035
（式中、Ｒ１０は上に規定されている通りである）
の化合物と反応させて、式（Ｉ）の化合物（式中、Ｗは上に規定されている通りであるかまたは存在せず、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるが、ＲＭは存在する）
を得る；
８）上に規定されている式（ＶＩ）の化合物を
８ａ）上に規定されている式（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させて、式（Ｉ）
（式中、Ｗ、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるかまたはいずれも存在しない）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を得る、または
８ｂ）上に規定されている式（ＸＩＩＩ）の化合物と反応させて、式（Ｉ）
（式中、Ｗは存在せず、Ｚ及びＲＭは上に規定されている通りであるかまたはいずれも存在しない）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を得る。
【０１２５】
ステップ１ａ）によれば、反応を有機溶媒、好ましくはジエチルエーテル、ジオキサンまたはその混合物中、ＬｉＨＭＤＳを用いて−１０℃〜５０℃の範囲の温度で３０分間〜約２４時間の範囲の時間実施する（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１０，５３，７７３１）。
【０１２６】
ステップ１ｂ）によれば、反応を有機溶媒、好ましくはＤＭＳＯ、ＤＣＭ、ＴＨＦ、ＣＨ３ＣＮまたはＣＣｌ４中、場合により塩基、好ましくはＤＩＰＥＡまたはＤＭＡＰの存在下で−１０℃〜５０℃の範囲の温度で３０分間〜約５日間の範囲の時間実施する。
【０１２７】
ステップ１ｃ）及び１ｄ）によれば、反応を有機溶媒、好ましくはＤＣＭまたはＤＭＦ中、ＰＴＳＡの存在下で２０℃〜還流の範囲の温度で３０分間〜約２４時間の範囲の時間実施する。
【０１２８】
ステップ１ｅ）によれば、カップリング反応を有機溶媒、好ましくはＤＣＭまたはＣＨ３ＣＮ中、場合によりＴＥＡ、ＤＭＡＰのような塩基性条件で、場合によりＤＣＣまたはＥＤＣＩのような縮合剤の存在下で実施する。この反応は０℃〜還流の範囲の温度で３０分間〜約２４時間の範囲の時間実施する。保護基の除去は文献（例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｅｎ，Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓを参照されたい）に報告されている公知手順を用いて実施する。
【０１２９】
ステップ２ａ）、２ｂ）、３）、５）、６ａ）、６ｂ）及び７）によれば、反応を有機溶媒、好ましくはＤＣＭ、ＴＨＦ，ＤＭＳＯまたはＤＭＦ中、場合によりＴＥＡ、ＤＭＡＰのような塩基性条件下で、場合によりＤＣＣ、ＥＤＣＩのような縮合剤の存在下で、場合によりトリフレート塩、好ましくはスカンジウム（ＩＩＩ）トリフレートの存在下で実施する。この反応は０℃〜還流の範囲の温度で３０分間〜約２４時間の範囲の時間実施する。
【０１３０】
ステップ４ａ）によれば、カップリング反応は、用いる試薬の特性に応じてステップ１ａ）〜１ｅ）に上記したように実施する。
【０１３１】
ステップ４ｂ）によれば、カップリング反応を有機溶媒、好ましくはＤＭＳＯ、ＤＣＭ、ＴＨＦ、ＣＨ３ＣＮまたはＤＭＦ中、場合によりＤＣＣ、ＥＤＣのようなカップリング剤の存在下で、場合によりＤＭＡＰを添加して実施する（一般的なカップリング試薬については、例えばＡｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｂｕｉｌｄｉｎｇ  Ｂｌｏｃｋｓ，Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌｕｍｅ  ３；Ａｎｄｒｅｗ  Ｂ．Ｈｕｇｈｅｓ，Ａｙｍａｎ  Ｅｌ−Ｆａｈａｍ，Ｆｅｒｎａｎｄｏ  Ａｌｂｅｒｉｃｉｏを参照されたい）。ステップ４ｂ）に従うカップリング反応を場合により塩基の存在下で、２０℃〜還流の範囲の温度で３０分間〜約２４時間の範囲の時間実施することが好ましい。
【０１３２】
Ｒ７が水素である式（ＶＩ）の化合物は、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９９１，３９（１２），３１８３−３１８８に報告されているように製造され得る。Ｒ７がイミダゾル−１−イル−カルボニル部分である式（ＶＩ）の化合物は実験の欄（以下を参照されたい）に報告されているように製造される。
【０１３３】
式（ＶＩＩ）の化合物は市販されているか、或いは当業者に公知の方法、またはＷＯ  ９２０２２５５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１０，５３（２１），７７３１−７７３８；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１２，５５（２），７６６−７８２に報告されている方法により製造され得る。
【０１３４】
式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）及び（ＸＩＶ）の化合物は市販されているか、或いは当業者に公知の方法、またはＡｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２００８，（８），６１８−６３７、またはＷＯ  ２０１０／００９１２４、ＥＰ  ０６２４３７７またはＥＰ  ２３５７００６に報告されている方法により製造され得る。
【０１３５】
薬理
本発明の化合物は抗癌剤として有用である。
【０１３６】
従って、哺乳動物、例えばヒトまたは動物は、これらに医薬有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法により治療され得る。
【０１３７】
ヒトまたは動物の状態はこの方法で緩和または改善され得る。
【０１３８】
式（Ｉ）の化合物の細胞傷害性の評価は下記するように評価される。
【０１３９】
インビトロ細胞増殖アッセイ
Ａ２７８０ヒト卵巣癌及びＭＣＦ７ヒト乳癌細胞（１２５０細胞／ウェル）を白色の３８４ウェルプレート中の完全培地（ＲＰＭＩ１６４０またはＥＭＥＭ＋１０％  ウシ胎児血清）に接種し、接種から２４時間後０．１％  ＤＭＳＯ中に溶解させた化合物で処理した。細胞を３７℃及び５％  ＣＯ２でインキュベートし、７２時間後プレートをＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて製造業者の指示に従ってプロセッシングした。
【０１４０】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏは、代謝的に活性な細胞の指標である存在するＡＴＰの定量に基づいている均質方法である。ＡＴＰはルシフェラーゼ及び光を発するＤ−ルシフェリンをベースとする系を用いて定量する。発光シグナルは培地中に存在している細胞の数に比例している。
【０１４１】
簡単に説明すると、各ウェルに２５μＬ／ウェルの試薬溶液を添加し、５分間振とう後マイクロプレートをルミノメーターにより調べる。発光シグナルは培地中に存在している細胞の数に比例している。
【０１４２】
本発明の式（Ｉ）の代表的化合物を上記した特定のインビトロ細胞増殖アッセイで試験した。
【０１４３】
試験した全ての化合物がＡ２７８０ヒト卵巣癌細胞において＜１００ｎＭのＩＣ５０値を有している。
【０１４４】
特に、化合物１及び２は＜１０ｎＭのＩＣ５０値を有している。
【０１４５】
【表１】
2016504272.tif 000036
【０１４６】
当業者により認識され得るように、これらの代表的化合物はすべて抗癌治療において特に有利である。
【０１４７】
更に、本発明の式（Ｉ）の官能化化合物はコンジュゲートするのに適している。式（Ｉ）の官能化誘導体のコンジュゲートする能力は、該化合物をＭＣＭ２タンパク質とコンジュゲートすることにより評価した。
【０１４８】
溶解度アッセイ：ハイスループット溶解度
ｐＨ＝７の水性リン酸カリウム緩衝液及びｐＨ＝３の水性クエン酸緩衝液中の名目２００μΜ化合物懸濁液／溶液を“マルチスクリーンＨＴＳ”，０．２μｍフィルタープレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，マサチューセッツ州ビレリカ）を用いて調製した。これらの溶液を１０分間撹拌し、膜フィルターをプレ飽和し、「偽熱力学的溶解度」に達するように室温で２４時間保存した。次いで、プレートを各ウェル中に      ＣＨ３ＣＮを含有している５００μＬの９６マルチウェルプレートに入れ、２０００ｒｐｍで５分間遠心した。次いで、こうして得られた溶液を定量用標準溶液を用いてＨＰＬＣ−ＵＶにより同時に分析した。
【０１４９】
例（Ａ）：ＭＣＭ２コンジュゲートの作成
１．５ｍｇ（０．０４５μｍｏｌ）のＭＣＭ２タンパク質（完全長配列の残基１０〜２９４に相当；Ｉｓｈｉｍｉら，２００１  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２７６，ｐ．４２７４４−４２７５２を参照されたい）を０．５ｍＬのリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．２）中に溶解し、５５μＬの１Ｍ  ＮａＨＣＯ３（ｐＨ８．５）を添加することによりｐＨ値を８．５に調節し、０．５ｍｇの式（Ｉ）の化合物の化合物８を１０ｍｇ／ｍＬ  ＤＭＳＯ溶液から添加した。反応物を室温で１時間インキュベートした後、反応混合物をリン酸緩衝生理食塩液でコンディショニングしたＮＡＰ−１０カラムを用いて脱塩し、タンパク質を含有している画分を収集し、プールした。
【０１５０】
反応したＭＣＭ２をＨＰＬＣ／ＥＳＩ質量分析法により特性評価した。
【０１５１】
逆相ＨＰＬＣ方法（Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ  Ｃ３カラム  ７５×２．１ｍｍ，１１００  Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ計器）を直交ＥＳＩ源を有するＡｇｉｌｅｎｔ  １９４６シングル四重極型質量分析検出器に連結した。
【０１５２】
反応しなかったＭＣＭ２タンパク質は３３０５５Ｄａの分子量を示した（図１）。
【０１５３】
反応したＭＣＭ２タンパク質は３４１９６Ｄａの分子量を示した（図２）。
【０１５４】
タンパク質の分子量の１１３９Ｄａの増加は、ＭＣＭ２タンパク質上の利用可能な１個のシステイン残基に１分子の化合物８が付加されていることを示している。
【０１５５】
例（Ｂ）：システィンコンジュゲートの作成
２ｎｍｏｌのシスティン（Ｃｙｓ，ＭＷ  １２１Ｄａ）を２ｎｍｏｌの式（Ｉ）の官能化化合物の化合物１７（ＭＷ  １０２９Ｄａ）と反応させた。
【０１５６】
反応物を５０ｍＭ  ボレート緩衝液（ｐＨ８）、２ｍＭ  ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）、５０ｍＭ  ＮａＣｌの存在下で２１℃で１時間インキュベートして、コンジュゲートＡ１（ｍ／ｚ＝１１５０）を得た後、逆相ＨＰＬＣ方法（ＰＬＲＰ−Ｓカラム１０００Ａ  ８μΜ  １５０×２．１ｍｍ）を用い、直交ＥＳＩ源を有するＡｇｉｌｅｎｔ  １９４６シングル四重極型質量分析検出器に連結した１１００  Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ計器を用いてＨＰＬＣ／ＥＳＩ−ＭＳにより分析した（図３及び３ａ）。
【０１５７】
【化３１】
2016504272.tif 000037
【０１５８】
コンジュゲートからの薬物部分の遊離
例（Ｃ）：本発明の範囲を限定すると意図しない例として、コンジュゲートからの式（Ｉ）の化合物の遊離を以下に報告するようにカテプシンの存在下で実施した。
【０１５９】
コンジュゲートＡ１を酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．５）及び１ｍ      中の０．２単位のカテプシンＢと４０℃で      インキュベートした。次いで、トリスＨＣｌ緩衝液を添加することによりｐＨを７．４に調節し、室温で１時間維持した。コンジュゲートＡ１の部分消失、並びに対応する式（Ｉ）の化合物の化合物１１及び９−ブロモ−カンプトテシンの遊離から、まずコンジュゲートＡ１からのＺペプチドリンカーの切断（図４及び４ａ）、続く自壊性基Ｗの消失（図５、５ａ及び５ｂ）が確認される。
【０１６０】
本発明の化合物は単剤として、或いは放射線療法または化学療法レジメンのような公知の抗癌治療と組み合わせて、及び／または細胞増殖抑制または細胞傷害剤、抗生物質、アルキル化剤、代謝拮抗物質、ホルモン物質、免疫物質、インターフェロンタイプ物質、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えば、ＣＯＸ−２阻害剤）、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗増殖因子受容体物質、抗ＨＥＲ剤、抗ＥＧＦＲ剤、抗血管新生剤（例えば、血管新生インヒビター）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｒａｓ−ｒａｆシグナル伝達経路インヒビター、細胞周期インヒビター、他のｃｄｋインヒビター、チューブリン結合剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤等と組み合わせて投与され得る。
【０１６１】
固定用量として処方する場合、前記配合剤は以下に記載する用量範囲内の本発明の化合物及び承認されている用量範囲内の他の医薬活性物質を使用する。
【０１６２】
配合処方が不適切の場合には、式（Ｉ）の化合物を公知の抗癌剤と順次使用してもよい。
【０１６３】
哺乳動物（例えば、ヒト）に対して投与するのに適している本発明の式（Ｉ）の化合物は通常のルートにより投与され得、用量レベルは患者の年齢、体重及び状態、及び投与ルートに依存する。
【０１６４】
例えば、式（Ｉ）の化合物を経口投与するために適応される適当な用量は約１〜約３００ｍｇ／投与、１日１〜５回の範囲であり得る。本発明の化合物は各種投与形態で、例えば錠剤、カプセル剤、糖衣錠、フィルムコーティング錠、溶液剤または懸濁液剤の形態で経口的に；座剤の形態で直腸内に；非経口的に、例えば皮下に、筋肉内に、または静脈内及び／または脊髄内及び／または髄腔内注射または注入により投与され得る。
【０１６５】
本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を医薬的に許容され得る賦形剤と一緒に含む医薬組成物をも包含し、前記賦形剤は担体または希釈剤であり得る。
【０１６６】
本発明の化合物を含有している医薬組成物は通常慣用方法に従って製造され、適当な医薬形態で投与される。例えば、固体経口剤は、活性化合物と一緒に希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、トウモロコシ澱粉またはジャガイモ澱粉；滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムまたはカルシウム及び／またはポリエチレングリコール；結合剤、例えば澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルピロリドン；崩壊剤、例えば澱粉、アルギン酸、アルギネートまたはデンプングリコール酸ナトリウム；発泡剤；染料；甘味剤；湿潤剤、例えばレシチン、ポリソルベート、ラウリルスルフェート；並びに、通常医薬製剤中に使用されている非毒性で医薬不活性物質を含有し得る。これらの医薬製剤は公知の方法で、例えば混合、顆粒化、錠剤化、糖コーティングまたはフィルムコーティング方法により製造され得る。
【０１６７】
経口投与用分散液剤は、例えばシロップ剤、エマルジョン剤または懸濁液剤であり得る。シロップ剤は担体としてサッカロース、サッカロースとグリセリン及び／またはマンニトール及びソルビトールを含有し得る。
【０１６８】
懸濁液剤及びエマルジョン剤は、担体の例として天然ガム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルアルコールを含有し得る。筋肉内注射用懸濁液剤または溶液剤は、活性化合物と一緒に医薬的に許容され得る担体、例えば滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、プロピレングリコールのようなグリコール、並びに所望により、適量の塩酸リドカインを含有し得る。静脈内注射または注入用溶液剤は、担体として滅菌水を含有し得、或いは滅菌水性等張性食塩液の形態であり、担体としてプロピレングリコールを含有していることが好ましい。座剤は、活性化合物と一緒に医薬的に許容され得る担体、例えばカカオ脂、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル界面活性剤またはレシチンを含有し得る。
【０１６９】
本発明に限定を加えることなく本発明をより良く説明することを目的として、ここで下記実施例を提示する。
【実施例】
【０１７０】
本発明の式（Ｉ）の幾つかの化合物の合成を以下の実施例に記載する。
【０１７１】
以下の実施例に従って製造した本発明の化合物を１Ｈ−ＮＭＲ及び／または精密質量データＥＳＩ（＋）により特性評価もした。
【０１７２】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、２８℃で４００．５ＭＨｚで操作するＶａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ４００分光計を用いて、２５℃で４９９．８ＭＨｚで操作するＶａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ５００分光計を用いて、及び２８℃で５９９．９ＭＨｚで操作するＶａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ６００分光計を用いて記録した。プロトン化学シフトは残留溶媒シグナル（ＤＭＳＯ−ｄ６：２．５０ｐｐｍ；ＣＨ３ＣＮ−ｄ３：１．９６ｐｐｍ）に対して関係づけた。データは次のように報告している：化学シフト（δ）、多重度（ｓ＝一重項，ｄ＝二重項，ｔ＝三重項，ｑ＝四重項，ｂｒ．ｓ．＝幅広一重項，ｄｄ＝二重の二重項，ｍ＝多重項）、カップリング定数（Ｊ，Ｈｚ）及びプロトンの数。
【０１７３】
ＥＳＩ（＋）質量スペクトルは、既に記載されているように（Ｍ．Ｃｏｌｏｍｂｏ，Ｆ．Ｒｉｃｃａｒｄｉ−Ｓｉｒｔｏｒｉ，Ｖ．Ｒｉｚｚｏ，Ｒａｐｉｄ  Ｃｏｍｍｕｎ．Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．，２００４，１８，５１１−５１７）１１００マイクロ−ＨＰＬＣシステム（Ａｇｉｌｅｎｔ，米国パロアルト）に直接接続したＱ−Ｔｏｆ  Ｕｌｔｉｍａ（Ｗａｔｅｒｓ，英国マンチェスター）を用いて得た。
【０１７４】
以下の実施例及び明細書を通じて、以下の略号は次の意味を有する。規定されていないときには、用語は一般的に認められている意味を有している。
【０１７５】
【表２】
2016504272.tif 000038
【０１７６】
［実施例１］
ステップ１ｂ
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルグリシネート塩酸塩（ｌａ），化合物１［Ｌ＝（ＩＩｋ）；Ｗ，Ｚ，ＲＭ＝存在せず］
【０１７７】
【化３２】
2016504272.tif 000039
９−ブロモ−カンプトテシン（１００ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ（６ｍＬ）中に含む溶液に市販されている４−ニトロフェニル［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］アセテート（１３８．５ｍｇ，０．４６８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（５７ｍｇ，０．４６８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３日間撹拌した後、追加２当量の４−ニトロフェニル［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］アセテート及びＤＭＡＰを添加した。更に２日後、混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ  ７／３）により精製すると、保護中間体が黄色粉末として生じた。これをジオキサン（５ｍＬ）中に溶解し、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で処理した。反応物を室温で２時間撹拌した後、溶媒を真空下で除去した。生じた残渣をＥｔ２Ｏと摩砕して、標記生成物（９０ｍｇ，６９％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ４８４−４８６（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（５９９．９ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），２．１４−２．２４（ｍ，２Ｈ），４．０６−４．１４（ｍ，１Ｈ），４．３０−４．３８（ｍ，１Ｈ），５．３４−５．４２（ｍ，２Ｈ），５．５４−５．５９（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝８．６，７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄｄ，Ｊ＝７．５，０．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），８．９３（ｓ，１Ｈ）。
【０１７８】
［実施例２］
ステップ１ｅ
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉａ），化合物３［Ｌ＝（ＩＩｊ）；Ｗ，Ｚ，ＲＭ＝存在せず］
【０１７９】
【化３３】
2016504272.tif 000040
【０１８０】
９−ブロモ−カンプトテシン（１００ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中に含む溶液にカルボニルジイミダゾール（３０４ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５５℃で５時間撹拌した後、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、希ＨＣｌ（２×３０ｍＬ）及びブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ  １００％）により精製すると、中間体（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート（８４ｍｇ，６９％）が生じた。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５２１−５２３（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  １．０２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，３Ｈ），２．２９−２．３５（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ，２Ｈ），５．５２      ，７．１８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．３，８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄｄ，Ｊ＝７．３，１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ），８．８８（ｓ，１Ｈ）。
【０１８１】
中間体（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシレート（３０ｍｇ，０．０５７５ｍｍｏｌ）の溶液に、無水ＣＨ３ＣＮ（１．５ｍＬ）中のピペラジン（７．５ｍｇ，０．０８６３ｍｍｏｌ）を添加した後、出発物質がもはや検出（ＨＰＬＣ−ＭＳ分析）されなくなるまで室温で１．５時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（２×３０ｍＬ）、次いでブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、標記化合物を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５３９−５４１（ＭＨ＋）。
【０１８２】
同様に、次の化合物を製造した：
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルメチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバメート塩酸塩，化合物７［Ｌ＝（ＩＩｍ）；Ｗ、Ｚ、ＲＭ＝存在せず］
【０１８３】
【化３４】
2016504272.tif 000041
（収率＝８８％）
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５４１−５４３（ＭＨ＋）
【０１８４】
［実施例３］
ステップ２ａ
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［４−（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物５［Ｌ＝（ＩＩｊ）；Ｗ＝（ＩＩＩｅ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０１８５】
【化３５】
2016504272.tif 000042
【０１８６】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルピペラジン−１−カルボキシレート（化合物３）（２４．５ｍｇ，０．０４５７ｍｍｏｌ）、及びＥＰ  ０６２４３７７Ａ２及びＥＰ  ２３５７００６Ａ２に報告されているように製造したＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（ＭＣ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＣ−ＰＮＰ）（３３ｍｇ，０．０４５７ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）中に含む溶液を出発物質がもはや検出（ＨＰＬＣ−ＭＳ分析）されなくなるまで室温で２時間撹拌した。混合物にＥｔ２Ｏを添加し、２相が形成された、上相を除去し、無水固体がフラスコの底に形成されるまでこのシーケンスを繰り返した。固体をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ９０／１０）により精製して、標記化合物（１．５ｍｇ，３％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １１３７−１１３９（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．７７−０．８８（ｍ，６Ｈ），０．９０（２×ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ），１．１２−１．２８（ｍ，２Ｈ），１．３０−１．４０（ｍ，２Ｈ），１．８９−１．５２（ｍ，４Ｈ），１．５３−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．９１−２．０１（ｍ，１Ｈ），２．０６−２．２０（ｍ，４Ｈ），２．８８−３−０６（ｍ，２Ｈ），３．１２−３．７４（ｍ  水シグナルと部分的に重複，１０Ｈ），４．１５−４．２１（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．４１（ｍ，１Ｈ），５．０３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．３４（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．４０−５．５０（ｍ，２Ｈ），５．９４−６．０２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．００（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），７．２５−７．３６（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），７．５２−７．６７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），７．７４−７．８４（ｍ，２Ｈ），８．０５−８．１３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．１４−８．２５（ｍ，１Ｈ），８．９０（ｓ，１Ｈ），１０．０１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。
【０１８７】
同様に、化合物７から出発して、次の化合物を製造した：
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［｛２−［（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）（メチル）アミノ］エチル｝（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ）、化合物８［Ｌ＝（ＩＩｍ）；Ｗ＝（ＩＩＩｃ）；Ｚ＝シトルリナ−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０１８８】
【化３６】
2016504272.tif 000043
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １１３９−１１４１（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，スペクトルは回転異性体の混合物である）  δｐｐｍ  ０．７５−０．８７（ｍ，６Ｈ），０．８７−０．９４（ｍ，３Ｈ），１．１２−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．２９−１．４０（ｍ，２Ｈ），１．４０−１．６３（ｍ，４Ｈ），１．５３−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．８７−２．０２（ｍ，２Ｈ），２．０４−２．２２（ｍ，４Ｈ），２．８８−３．０５（ｍ，２Ｈ），２．７０，２．７２，２．７７，２．８０（４×ｓ，回転異性体，３Ｈ），２．９８，３．０２，３．０９，３．１２（４×ｓ，回転異性体，３Ｈ），３．２４−３．６３（ｍ，水シグナルと部分的に重複，６Ｈ），４．１３−４．２２（ｍ，１Ｈ），４．２８−４．４２（ｍ，１Ｈ），４．８３，５．００，５．０９（３×ｓ，回転異性体，２Ｈ），５．２８−５．５０（ｍ，４Ｈ），５．４１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），６．００（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．０６−７．１１（ｍ，１Ｈ），７．０７，７．２１，７．２３，７．３１，７．４０，７．４２，７．４７，７．５４（８×ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，回転異性体，４Ｈ），７．７４−７．８４（ｍ，２Ｈ），８．０３−８．２３（ｍ，３Ｈ），８．８４，８．８８，８．８９（３×ｓ，回転異性体，１Ｈ），９．９１，９．９４，９．９９６，９．９７（４×ｂｒ．ｓ．，回転異性体，１Ｈ）。
【０１８９】
［実施例４］
ステップ８ｂ
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート（Ｉ），化合物２［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝存在せず；Ｚ＝グリシン−ロイシン−フェニルアラニン；ＲＭ＝存在せず］
【０１９０】
【化３７】
2016504272.tif 000044
【０１９１】
９−ブロモ−カンプトテシン（１００ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中に含む溶液に４−ニトロフェニルＮ−トリチル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート（３２６．６ｍｇ，０．４６８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（５７ｍｇ，０．４６８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１日撹拌した後、追加２当量の４−ニトロフェニルＮ−トリチル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート及びＤＭＡＰを添加した。更に２日後、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×１０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ  ７／３）により精製すると、褐色固体の保護中間体が生じた。この中間体を酢酸−水（７５−２５，１０ｍＬ）の混合物中に溶解し、反応物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、粗生成物をＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解し、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（２×２０ｍＬ）、水及びブラインで洗浄した。生じた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９９／１→９７／３）により精製して、標記化合物（１１０ｍｇ，６３％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ７４４−７４６（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．８１（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．４２−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．４９−１．５５（ｍ，１Ｈ），１．６８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．０８−２．１８（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，８．２Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，４．５Ｈｚ，１Ｈ），３．３８（ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９８−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．３３−４．４１（ｍ，１Ｈ），５．３２（ｓ，２Ｈ），５．５１（ｓ，２Ｈ），７．１１−７．２４（ｍ，６Ｈ），７．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．５０（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），８．８８（ｓ，１Ｈ）。
【０１９２】
［実施例５］
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート（Ｉ），化合物４［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝存在せず；Ｚ＝グリシン−ロイシン−フェニルアラニン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０１９３】
【化３８】
2016504272.tif 000045
【０１９４】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート（化合物２）（５０ｍｇ，０．０６７１ｍｍｏｌ）及び（Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ，１９７５，５８，２，５３１−５４１に報告されているように製造した）Ν−ε−マレイミドカプロイルオキシスクシンイミドエステル（３１ｍｇ，０．１０１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ（１／１  ２ｍＬ）の混合物中に含む溶液を出発物質がもはや検出（ＨＰＬＣ−ＭＳ分析）されなくなるまで室温で１５時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（２×２０ｍＬ）、次いでブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９７／３）により精製して、標記化合物（３４ｍｇ，５５％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９３７−９３９（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＣＨ３ＣＮ−ｄ３）  δｐｐｍ  ０．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ），０．８３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９８（ｔ，Ｊ＝      １．０７−１．１５（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．４８（ｍ，４Ｈ），１．５０−１．５９（ｍ，３Ｈ），２．０２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．０９−２．２５（ｍ，２Ｈ），２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，８．２Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｄｄ，Ｊ＝１７．９，５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝１７．９，６．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２９−４．３５（ｍ，１Ｈ），４．３９−４．４５（ｍ，１Ｈ），５．０９−５．２１（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７１（ｓ，２Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０２−７．０６（ｍ，２Ｈ），７．１４−７．２０（ｍ，３Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ）。
【０１９５】
同様に、化合物３から出発して、次の化合物を製造した：
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ），化合物６［Ｌ＝（ＩＩｊ）；Ｗ＝存在せず；Ｚ＝存在せず；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０１９６】
【化３９】
2016504272.tif 000046
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ７３２−７３４（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＣＨ３ＣＮ−ｄ３）  δｐｐｍ  ０．９７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ），１．２０−１．３４（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．６０（ｍ，４Ｈ），２．１０−２．２２（ｍ，２Ｈ），２．２２−２．３８（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．７４（ｍ，１０Ｈ），５．２１−５．３０（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ，１Ｈ），５．５２（ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ，１Ｈ），６．６８−６．７６（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．８５（ｓ，１Ｈ）。
【０１９７】
［実施例６］
ステップ５、脱保護、ステップ６ｂ、脱保護、ステップ７
ステップ５
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノエート
【０１９８】
【化４０】
2016504272.tif 000047
【０１９９】
９−ブロモ−カンプトテシン（２８ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）中に含む溶液に４−ニトロフェニル４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノエート（３５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１６ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１日撹拌した後、追加１．５当量の４−ニトロフェニル４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノエート及びＤＭＡＰを添加した。３日及び６日後、追加２当量のＤＭＡＰを添加した。混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×１０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生じた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／アセトン  ９５／５）により精製して、標記化合物（１０ｍｇ，２４％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ６４０−６４２（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９１（ｓ，３Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｓ，３Ｈ），１．３３−１．４１（ｍ，９Ｈ），２．１１−２．１９（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．４７（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８７−２．９３（ｍ，２Ｈ），５．３０−５．４０（ｍ，２Ｈ），５．４５−５．５４（ｍ，２Ｈ），６．８９（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），７．７７−７．８３（ｍ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．９０（ｓ，１Ｈ）。
【０２００】
同様に、（ＷＯ  ０３／０１４０６９に報告されているように製造した）４−ニトロフェニル５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジフルオロペンタノエートから出発して、次の化合物を製造した：
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジフルオロペンタノエート
【０２０１】
【化４１】
2016504272.tif 000048
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ６６２−６６４（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．７ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＮ）  δｐｐｍ  ０．９７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３２（ｍ，９Ｈ），２．０７−２．３２（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．８３（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．５２（ｍ，２Ｈ），５．２１−５．２９（ｍ，２Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），７．７０−７．７６（ｍ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．８６（ｓ，１Ｈ）。
【０２０２】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル（１−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキシル）アセテート
【０２０３】
【化４２】
2016504272.tif 000049
【０２０４】
９−ブロモ−カンプトテシン（１０ｍｇ，０．０２３ｍｍｏｌ）、スカンジウムトリフレート（６．８ｍｇ，０．１３８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（８．５ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（８ｍＬ）中に含む懸濁液を０℃まで冷却した後、４−ニトロフェニル（１−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキシル）アセテート（２７ｍｇ，０．０７０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で３０分間、室温で３６時間撹拌した後、濾過し、濾液を０．１Ｎ  塩酸（１０ｍＬ）、０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、蒸留水（２０ｍＬ）で洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルを用いるフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ：アセトン（９５：５  ｖ／ｖ））により精製して、標記化合物（９ｍｇ）（キーゼルゲルプレートを用いるＴＬＣ，溶離液：      （９５：５  ｖ／ｖ），Ｒｆ＝０．２５）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ６８０−６８２（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．７ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．２０−１．５１（ｍ，１０Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），２．０７−２．２１（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５６（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），５．３１−５．４０（ｍ，２Ｈ），５．４６−５．５３（ｍ，２Ｈ），６．７０（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｓ，１Ｈ），７．７９−７．８２（ｍ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．９０（ｓ，１Ｈ）。
【０２０５】
脱保護
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−アミノ−３，３−ジメチルブタノエート塩酸塩（Ｉｃ），化合物９（Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝存在せず；ＲＭ＝存在せず］
【０２０６】
【化４３】
2016504272.tif 000050
【０２０７】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノエート（１０ｍｇ，０．０１６ｍｍｏｌ）をジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（０．５ｍＬ）中に溶解し、反応物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、生じた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９７／３→９３／７）により精製して、標記化合物（１．９ｍｇ，１９％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５４０−５４２（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．００（ｓ，３Ｈ），１．０２（ｓ，３Ｈ），２．１２−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．６０（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．５８−２．７１（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｍ，水シグナルと重複，２Ｈ），５．３０−５．４０（ｍ，２Ｈ），５．４７−５．５５（ｍ，２Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），７．７６−７．８４（ｍ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），８．９１（ｓ，１Ｈ）。
【０２０８】
同様に、次の化合物を製造した：
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−アミノ−４，４−ジフルオロペンタノエート塩酸塩（ｌｃ），化合物１０［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝存在せず；ＲＭ＝存在せず］
【０２０９】
【化４４】
2016504272.tif 000051
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５６２−５６４（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．７ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．１３−２．２１（ｍ，２Ｈ），２．２６−２．３８（ｍ，２      （ｍ，２Ｈ），３．４１−３．５２（ｍ，２Ｈ），５．３２−５．４１（ｍ，２Ｈ），５．４８−５．５５（ｍ，２Ｈ），７．１８（ｓ，１Ｈ），７．７８−７．８４（ｍ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），８．９１（ｓ，１Ｈ）。
【０２１０】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］アセテート塩酸塩（Ｉｃ），化合物１１［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝存在せず；ＲＭ＝存在せず］
【０２１１】
【化４５】
2016504272.tif 000052
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ５８０−５８２（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．２５−１．６６（ｍ，１０Ｈ），２．０９−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．６０（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．７７−２．９７（ｍ，３Ｈ），５．３２−５．４１（ｍ，２Ｈ），５．４７−５．５５（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），７．７９−７．８３（ｍ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．９２（ｓ，１Ｈ）。
【０２１２】
ステップ６ｂ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２１３】
【化４６】
2016504272.tif 000053
【０２１４】
（ＷＯ  ２００５／１１２９１９に報告されているように製造した）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（８．３ｍｇ，０．０１２８ｍｍｏｌ）及び（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−アミノ−４，４−ジフルオロペンタノエート塩酸塩（７ｍｇ，０．０１１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．１５ｍＬ）及び無水ＤＣＭ（１ｍＬ）中に溶解し、ＤＭＡＰ（３．３ｍｇ，０．０２６９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下、室温で１日撹拌した後、水、水性酢酸及びＤＣＭに注いだ。有機相を分離し、水で洗浄した。有機溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルを用いるフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９５：５  ｖ／ｖ）により精製して、標記化合物（キーゼルゲルプレートを用いるＴＬＣ，溶離系ＤＣＭ：ＭｅＯＨ      ０．２５）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０６７−１０６９（ＭＨ＋）。
【０２１５】
同様に、次の化合物を製造し得る：
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２１６】
【化４７】
2016504272.tif 000054
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０４５−１０４７（ＭＨ＋）。
【０２１７】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝カルバモイル）オキシ］メチル｝フェニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２１８】
【化４８】
2016504272.tif 000055
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０８５−１０８７（ＭＨ＋）。
【０２１９】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２２０】
【化４９】
2016504272.tif 000056
（ＷＯ  ２００５／１１２９１９に報告されているように製造した）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン（      ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（２２ｍｇ，０．１０６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１７ｍｇ，０．１０６ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解し、室温で３時間撹拌した。次いで、溶液に（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］アセテート塩酸塩（化合物１１）（４３ｍｇ，０．０７３ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（２３ｍｇ，０．１８８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４０分間撹拌した後、水（２０ｍＬ）を添加した。水溶液をＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出した後、水（１０ｍＬ）で２回洗浄した。有機相を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で除去し、粗な残渣をシリカゲルを用いるフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ  ９８：２→９５：５  ｖ／ｖ）により精製して、標記化合物を白色粉末（４０ｍｇ，収率５８％）として得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９３６−９３８（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＣＨ３ＣＮ−ｄ３）  δｐｐｍ  ０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．２９−１．５８（ｍ，１３Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），１．６８−１．７４（ｍ，１Ｈ），１．９４−２．０２（ｍ，１Ｈ），２．１５−２．２４（ｍ，２Ｈ），２．４４（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，１Ｈ），２．５６（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，１Ｈ），２．９０−２．９８（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．２９（ｍ，２Ｈ），３．３６（ｄｄ，Ｊ＝１３．９，７．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７９−３．８６（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），４．６８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．１７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．２１−５．３１（ｍ，２Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ），５．５０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．８６（ｓ，１Ｈ）。
【０２２１】
同様に、次の化合物を製造し得る：
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２２２】
【化５０】
2016504272.tif 000057
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ８９６−８９８（ＭＨ＋）。
【０２２３】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
【０２２４】
【化５１】
2016504272.tif 000058
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９１８−９２０（ＭＨ＋）。
【０２２５】
脱保護
ステップ６ａで製造した中間体の脱保護を上に報告した類似の条件下で実施して、以下の化合物を得た：
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物１２［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩｊ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２２６】
【化５２】
2016504272.tif 000059
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９６７−９６９（ＭＨ＋）。
【０２２７】
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物１３［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩｊ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２２８】
【化５３】
2016504272.tif 000060
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９４５−９４７（ＭＨ＋）。
【０２２９】
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝カルバモイル）オキシ］メチル｝フェニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物１４［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩｊ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２３０】
【化５４】
2016504272.tif 000061
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９８５−９８４７（ＭＨ＋）。
【０２３１】
Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物２５［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２３２】
【化５５】
2016504272.tif 000062
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９３６−８３８（ＭＨ＋）。
【０２３３】
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物２６［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２３４】
【化５６】
2016504272.tif 000063
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ７９６−７９９（ＭＨ＋）。
【０２３５】
Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉｄ），化合物２７［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝存在せず］
【０２３６】
【化５７】
2016504272.tif 000064
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ８１８−８２０（ＭＨ＋）。
【０２３７】
ステップ７
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド，化合物１７［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２３８】
【化５８】
2016504272.tif 000065
【０２３９】
６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサン酸（１２ｍｇ，０．０５３ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１３．３ｍｇ，０．０６３ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１０ｍｇ，０．０６３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解し、室温で３時間撹拌した。懸濁液を濾過し、ＴＨＦ溶液にＬ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（化合物２５）（１５ｍｇ，０．０１８ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（６．６ｍｇ，０．０５５ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加した。反応物を室温で２０分間撹拌した後、水（２０ｍＬ）を添加した。水溶液をＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出した後、水（１０ｍＬ）で２回洗浄した。有機相を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で除去し、粗な残渣をシリカゲルを用いるフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ  ９７：３→９５：５  ｖ／ｖ）により精製して、標記化合物を白色粉末（１４ｍｇ，収率７８％）として得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０２９−１０３１（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＣＨ３ＣＮ−ｄ３）ｐｐｍ  ０．８３（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．８４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．１９−１．５９（ｍ，１９Ｈ），１．６９−１．７７（ｍ，１Ｈ），１．９９−２．０６（ｍ，１Ｈ），２．１３−２．２４（ｍ，４Ｈ），２．４３（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５７（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９４−３．０１（ｍ，１Ｈ），３．１１−３．２０（ｍ，１Ｈ），３．２４（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，６．７Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝８．０，５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３２−４．４１（ｍ，１Ｈ），４．６８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．１９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），５．２２−５．３２（ｍ，２Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ，１Ｈ），６．５８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｓ，２Ｈ），６．８６（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．８７（ｓ，１Ｈ）。
【０２４０】
同様に、次の化合物を製造し得る：
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物１６［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２４１】
【化５９】
2016504272.tif 000066
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０１１−１０１３（ＭＨ＋）。
【０２４２】
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物１８［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２４３】
【化６０】
2016504272.tif 000067
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９８９−９９１（ＭＨ＋）。
【０２４４】
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物１５［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩｊ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２４５】
【化６１】
2016504272.tif 000068
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １１６２−１１６４（ＭＨ＋）。
【０２４６】
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物１９［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖｎ）］
【０２４７】
【化６２】
2016504272.tif 000069
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９１８−９２０（ＭＨ＋）。
【０２４８】
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物２０［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖｎ）］
【０２４９】
【化６３】
2016504272.tif 000070
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９３６−９３８（ＭＨ＋）。
【０２５０】
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（Ｉ），化合物２１［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝シトルリン−バリン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２５１】
【化６４】
2016504272.tif 000071
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ８９６−８９８（ＭＨ＋）。
【０２５２】
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｌ−ロイシンアミド（Ｉ），化合物２２［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝グリシン−ロイシン−フェニルアラニン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２５３】
【化６５】
2016504272.tif 000072
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０１５−１０１７（ＭＨ＋）。
【０２５４】
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド（Ｉ），化合物２３［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝グリシン−ロイシン−フェニルアラニン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２５５】
【化６６】
2016504272.tif 000073
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １０３３−１２０３５（ＭＨ＋）。
【０２５６】
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｌ−ロイシンアミド（Ｉ），化合物２４［Ｌ＝存在せず；Ｗ＝（ＩＩＩａ）；Ｚ＝グリシン−ロイシン−フェニルアラニン；ＲＭ＝（Ｖａ）］
【０２５７】
【化６７】
2016504272.tif 000074
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ９９３−９９５（ＭＨ＋）。
【０２５８】
中間体の合成
メチル３，３−ジメチル−４−ニトロブタノエート
【０２５９】
【化６８】
2016504272.tif 000075
【０２６０】
３，３−ジメチルアクリル酸エチル（６．１ｍＬ，４６．７ｍｍｏｌ）をニトロメタン（１３．５ｍＬ）中に溶解し、ＤＢＵ（７．６ｍＬ，５０．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２４時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（４０ｍＬ）を添加し、溶液を１Ｍ  ＨＣｌ（２×２０ｍＬ）、次いで水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）により精製して、標記化合物（６．５ｇ，収率７９％）を無色油状物として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  １．０８（ｓ，６Ｈ），２．４４（ｓ，２Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），４．５８（ｓ，２Ｈ）。
【０２６１】
同様に、エチルシクロヘキシリデンアセテートから出発して、次の化合物を製造した：
エチル［１−（ニトロメチル）シクロヘキシル］アセテート
【０２６２】
【化６９】
2016504272.tif 000076
【０２６３】
４−アミノ−３，３−ジメチルブタン酸塩酸塩
【０２６４】
【化７０】
2016504272.tif 000077
【０２６５】
３，３−ジメチル−４−ニトロ−酪酸メチルエステル（１．０ｇ，５．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４０ｍＬ）中に溶解した後、活性炭担持１０％  パラジウム（４００ｍｇ）及びギ酸アンモニウムの溶液（１０ｍＬ，水中２５％  ｗ／ｗ）を添加した。反応混合物を窒素雰囲気下で４８時間撹拌した。パラジウムを濾過により除去し、濾液をＤＣＭ（２×４０ｍＬ）で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で蒸発させると、４，４−ジメチル１−２−ピロリジノン中間体が生じた。この化合物を濃ＨＣｌ（１５ｍＬ）と水（１５ｍＬ）の混合物に添加し、生じた混合物を１１０℃で２０時間還流した。室温まで冷却した後、混合物を蒸発させて、４−アミノ−３，３−ジメチル酪酸塩酸塩（５６０ｍｇ，収率５２％）を褐色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９９（ｓ，６Ｈ），２．２．２６（ｓ，２Ｈ），２．７８（ｑ，２Ｈ）。
【０２６６】
同様に、エチル［１−（ニトロメチル）シクロヘキシル］アセテートから出発して、次の化合物を製造した：
［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］酢酸塩酸塩
【０２６７】
【化７１】
2016504272.tif 000078
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．７ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  １．２５−１．５０（ｍ，１０Ｈ），２．４０（ｓ，２Ｈ），２．９０（ｓ，２Ｈ），７．９９（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ），１２．３６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。
【０２６８】
４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチル酪酸
【０２６９】
【化７２】
2016504272.tif 000079
【０２７０】
４−アミノ−３，３−ジメチル酪酸塩酸塩（４００ｍｇ，２．３８ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチルアルコール（２．４ｍＬ）及び２Ｎ  ＮａＯＨ（２．４ｍＬ）中の混合物にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（６００ｍｇ，２．８５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４時間撹拌し、酢酸（０．１８ｍＬ）を添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した後、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９８．５／１．５）により精製して、標記化合物（１１０ｍｇ，２０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．８９（ｓ，６Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），２．０６（ｓ，２Ｈ），２．８６（ｄ，２Ｈ）。
【０２７１】
同様に、［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］酢酸塩酸塩から出発して、次の化合物を製造した：
（１−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキシル）酢酸
【０２７２】
【化７３】
2016504272.tif 000080
１Ｈ  ＮＭＲ（４００．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  １．２１−１．５３（ｍ，１０Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），２．１５（ｓ，２Ｈ），３．０３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），６．５５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），１１．９６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。
【０２７３】
４−ニトロフェニル４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノエート
【０２７４】
【化７４】
2016504272.tif 000081
【０２７５】
４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３，３−ジメチルブタン酸（９０ｍｇ，０．３８９ｍｍｏｌ）及び４−ニトロフェノール（５４ｍｇ，０．３８９ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中に含む溶液にＤＣＣ（９６．３ｍｇ，０．４６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２時間撹拌した後、形成された白色固体を濾過により除去した。濾液を減圧下で蒸発させ、最後にフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）により精製して、標記化合物（８０ｍｇ，５８％）を得た。
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ３５３（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  ０．９９（ｓ，６Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），２．４９（ＤＭＳＯシグナルと部分的に重複したシグナル，２Ｈ），２．９５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９−７．４９（ｍ，２Ｈ），８．２７−８．３４（ｍ，２Ｈ）。
【０２７６】
同様に、（１−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキシル）酢酸から出発して、次の化合物を製造した：
４−ニトロフェニル（１−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキシル）アセテート
【０２７７】
【化７５】
2016504272.tif 000082
ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ３９３（ＭＨ＋）
１Ｈ  ＮＭＲ（４９９．７ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δｐｐｍ  １．０９−１．５７（ｍ，１０Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），２．５５（ｓ，２Ｈ），３．１０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），８．３０（ｍ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）。
【図１】
2016504272.tif 000091
【図２】
2016504272.tif 000092
【図３】
2016504272.tif 000093
【図３ａ】
2016504272.tif 000094
【図４】
2016504272.tif 000095
【図４ａ】
2016504272.tif 000096
【図５】
2016504272.tif 000097
【図５ａ】
2016504272.tif 000098
【図５ｂ】
2016504272.tif 000099
【手続補正書】
【提出日】平成27年6月30日(2015.6.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2016504272.tif 000100
（式中、
Ｌは存在しないか、または条件付きで開裂可能な部分であり；
Ｗは存在しないか、または１個以上の自壊性基を含む自壊性系であり；
Ｚは存在しないか、またはペプチドリンカー、非ペプチドリンカーもしくはペプチド及び非ペプチドのハイブリッドリンカーであり；
ＲＭは存在しないか、またはＬ、ＷもしくはＺ基の１個以上に結合し得る反応性部分であり、或いはＬ、Ｗ及びＺの全てが存在しないときにはＲＭは酸素に結合し；
ただし、Ｌ、Ｗ、Ｚ及びＲＭの少なくとも１つは存在する）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
条件付きで開裂可能な部分Ｌは独立して存在しないか、または
【化２】
2016504272.tif 000101
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は各々独立して、存在しないか、または水素であるか、またはヒドロキシであるか、または直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４スルフヒドリルアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アミノアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル及び直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニルから選択される場合により置換されている基であり；
ｎの各々は独立して０〜２の整数であり；
ｎ１は０〜５の整数である）
から選択される基であり；
自壊性系Ｗは独立して存在しないか、または
【化３】
2016504272.tif 000102
（式中、Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり；
Ｒ３は上に規定されている通りであり；
Ｒ４及びＲ５は各々独立してハロゲン、メチル、エチルまたは直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキルであり；
ｍは０〜３の整数であり；
ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、ＣＨ２ＮＨ、ＮＨまたはＮ−Ｒ４であり、ここでＲ４は上に規定されている通りであり；
Ｒ１２及びＲ１３は各々独立して水素、ハロゲン、メチル、エチル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、直鎖もしくは分岐状Ｃ１−Ｃ４ハロアルキルであるか、またはＲ１２及びＲ１３は一緒に３〜６員炭素環を形成する）
から選択される基であり；
Ｚリンカーは独立して存在しないか、または
Ｚ１
（該Ｚ１は、Ｃ末端を介してＷに、Ｗが存在しないときにはＬに、またはＷ及びＬの両方が存在しないときには酸素に結合したジペプチドまたはトリペプチドである）、
Ｚ２
（該Ｚ２は、
【化４】
2016504272.tif 000103
から選択される基であり、ここでＲ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は上に規定されている通りであり、ｐは１〜２０の整数である）、
Ｚ１−Ｚ２
（式中、Ｚ１及びＺ２は上に規定されている通りである）であり；
反応性部分ＲＭは独立して存在しないか、または
【化５】
2016504272.tif 000104
（式中、Ｒ４及びＲ５は上に規定されている通りであり；
Ｒ６はＣ１−Ｃ３アルキル、またはＮＯ２及びＣＮ基を含む電子吸引基であり；
ｒは０〜７の整数である）
から選択される基である；
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項３】
Ｚは、
【化６】
2016504272.tif 000105
2016504272.tif 000106
（式中、Ｒ１及びＲ２の一方は存在せず、他方は請求項２に規定されている通りである）
から選択される基である請求項２に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項４】
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルグリシネート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルピペラジン−１−カルボキシレート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ロイシルグリシネート、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［４−（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ[１，２−ｂ]キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］ピペラジン−１−カルボキシレート、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イルメチル［２−（メチルアミノ）エチル］カルバメート、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［｛２−［（｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝カルボニル）（メチル）アミノ］エチル｝（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル４−アミノ−３，３−ジメチルブタノエート塩酸塩、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル５−アミノ−４，４−ジフルオロペンタノエート塩酸塩、
（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］アセテート塩酸塩、
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝カルバモイル）オキシ］メチル｝フェニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｌ−ロイシンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−｛［１−（２−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２−オキソエチル）シクロヘキシル］メチル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、
Ｌ−バリル−Ｎ−（４−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジメチル−４−オキソブチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド、及び
Ｌ−バリル−Ｎ−（５−｛［（４Ｓ）−１０−ブロモ−４−エチル−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−４−イル］オキシ｝−２，２−ジフルオロ−５−オキソペンチル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド
からなる群から選択される請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項５】
治療有効量の請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び少なくとも１つの医薬的に許容され得る賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項６】
更に１つ以上の化学療法剤を含む請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗癌治療において同時に、別々にまたは逐次使用するための組み合わせた製剤としての請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩及び１つ以上の化学療法剤を含む製品。
【請求項８】
医薬として使用するための請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項９】
癌の治療用医薬の製造における請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用。
【請求項１０】
コンジュゲートの調製における請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用。
【国際調査報告】
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2016504272.tif 000108
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