(57)【要約】【課題】人と動物の口臭およびそれに関係する口腔衛生の問題、例えば歯肉炎、虫歯、歯周病、歯の過敏症の解消、および口腔内の微生物のバランスの維持について、治療および軽減するために口腔内で使用される組成物を提供する。【解決手段】本発明では、口腔衛生に有効な量のテアフラビン類、有効量の緩衝剤、約４０乃至９９質量％の１種または２種以上の薬学的に許容できる水溶性担体を含む組成物であって、その組成物の全水分含量が約５乃至２０％である。紅茶から抽出することにより本発明の組成物を製造する方法および本発明の組成物の使用方法も開示する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
人と動物の口腔衛生の問題を治療するため口腔内で使用される組成物であって、口腔衛生に有効な量のテアフラビン類、ｐＨ緩衝に有効な量の緩衝剤、約４０乃至９９質量％の薬学的に許容できる水溶性担体を含み、全水分含量が約５乃至２０質量％である組成物。
【請求項２】
紅茶を水で抽出することによりテアフラビン類を約２０乃至６０質量％含む抽出物を得た後、その抽出物に有効量の緩衝剤および薬学的に許容できる水溶性担体を加えることにより請求項１の組成物を製造する方法。
【請求項３】
請求項１の組成物で口腔を洗浄することを含む口臭を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗細菌性および抗菌性の保護機能を口腔内に付与するために有効なポリフェノール類を含むオーラルケア組成物に関する。さらに、本発明の組成物の口腔洗浄液としての使用により、息をさわやかにし、口臭を防止し、虫歯（う食）歯肉炎や歯周病のような歯科材料によって起きる障害を防止することができる。特に本発明の組成物は、紅茶の抽出物と緑茶の抽出物からのカテキン類とテアフラビン類とを有効量で含む。
【背景技術】
【０００２】
中国衛生部が２００９年９月７日に公表した中国住民の口腔内衛生指南によると、国家口腔内衛生調査の結果は、う蝕（一般に虫歯として知られる）と歯周病（歯肉炎および歯周炎を含む）との最も一般的な二種類の疾患が住民の口腔内衛生を脅かしており、それらの治療は非常に困難であり、極めて多くの時間と金銭を必要とすることを報告している。
【０００３】
虫歯は、組織の硬化、変色、変形、組織の変化のような諸問題を示し、ある種の口内細菌による糖発酵に伴う酸が原因となる。虫歯の初期段階は、一般に痛みや不快感を伴わない。虫歯は通常、歯科検診において歯表面の黒点や白班として発見される。さらに虫歯が進むと、う蝕が形成され、酸味のある食物又は甘い食物との接触を感知して痛みが生じ、さらに冷、熱その他の刺激に痛みを感じるようになり、ついには深刻な不快状態になる。治療せずに放置すると、歯のう蝕がさらに進み、歯が失われ、深刻な咀嚼困難になり、各人の全身の健康にまで悪影響が及ぶようになる。
【０００４】
歯周病は、様々な疾患を有する歯の支持器官（セメント質、歯槽骨、歯肉、歯周靱帯）の周囲で起きる。その初期には、赤く腫れて触ると出血しやすい歯肉が認められる。治療せずに放置すると、歯肉の後退、歯槽骨の吸収、歯周ポケットの形成、緩んだ歯の傾き及び／又はぐらつきが生じ、歯周からの膿の漏出や口臭を伴う場合があり、最終的には歯が失われることがある。歯周病は、成人が歯を失う主な原因である。息の悪臭は、口臭と言われ、命を脅かすことはないが、恥ずかしく、きまりが悪いものである。公の場所で接する口臭は、他人にとって受け入れがたいものであり、家族も容認できない場合がある。全身性の疾患もしくは感染症となると口臭が起きる可能性もあるが、多くの場合の口臭は口腔内に原因があり、具体的には歯の表面および舌の裏側に付着している蛋白質、ペプチドまたはアミノ酸の代謝とグラム陰性嫌気性細菌の存在である。その結果、揮発性硫黄化合物（ＶＳＣ）により不快な臭気が生じる。
【０００５】
蛋白質の分解により生じる二種類の含硫アミノ酸、すなわちシステインとメチオニンは、硫化水素（Ｈ2Ｓ）およびメチルメルカプタン（ＣＨ3ＳＨ）、並びにジメチルスルフィド（Ｍｅ2Ｓ）、ジメチルジスルフィド（（ＣＨ3）2Ｓ2）、チオール（−ＳＨ）含有化合物を生成させ、低濃度においても強い悪臭を放つ主要な原因の一つとして機能する可能性がある。代謝過程において、少なくとも数十種類の微生物が、口の中で硫化水素、メチルメルカプタン、脂肪酸を産出する。このような細菌は、フソバクテリウム・ヘモフィルス、ウェイ・ロン球菌類（ベイロネラ）、および歯石を生じるスピロヘータであるトレポーマ・デンティコラを含む。舌の表面積を著しく増加させている舌乳頭の特殊な構造のため、舌の表面における上皮細胞の破片の離脱、食べかす、死んだ白血球細胞や細菌、歯肉下の歯垢および隣接する歯の歯垢、表面の粗さが、嫌気性細菌が生存し増殖するために理想的な環境を提供している。さらに、口臭に関係する多数の有機酸と化合物、例えば、酪酸、プロピオン酸、メチルインドール（スカトール）、カダベリン、およびインドールが存在する。
【０００６】
歯周病の臨床患者は、口臭の問題も抱えている場合が多い。ソダー（Ｓｏｄｅｒ）および他の研究者は、口臭の指標となる患者の歯垢、歯石指数、歯肉の指数および探針深さが、口臭の問題がない人々よりも高い値になることを発見した。ヤエガキおよびサナダは、食事その他の口の使用を禁止したのち、呼気中の揮発性硫黄化合物の濃度を測定している。彼らは、硫化水素およびメチルメルカプタンの濃度が、歯周の健康状態と有意に高く相関することを見いだしている。特に、メチルメルカプタンと硫化水素の濃度は、それぞれ、４４．０ｎｇ／１０ｍｌと２．６ｎｇ／１０ｍｌであった。さらに、彼らは、歯周ポケットおよび出血との高い相関関係も見いだしている。同じ研究によると、健康な歯周では揮発性硫黄化合物の濃度が約５０％少なくなることが判明した。別の研究では、呼気中の揮発性硫黄化合物の濃度と関係なく、探針によるポケットの深さと出血指数が、歯周病、口臭、および舌と歯肉の炎症と高い相関性を示した。これらの口腔疾患は、第一に歯垢と悪臭を放つ物質を産出する細菌の存在によって引き起こされる。従って、歯垢の除去は、個人だけではなく、オーラルヘルスケアの専門家においても、口腔内の健康を維持するために基本的に重要な点である。歯ブラシの使用、口内洗浄、歯と舌の掃除は、口内細菌の数を減少させ、口腔内の揮発性硫黄のレベルを有効に減少させ、それにより口臭が軽減する。歯ブラシを使用して、歯垢、くず、食べかすを除去することにより、良好な口腔内の健康を維持しながら、歯と歯周組織の健康状態を守ることができる。しかしながら、歯ブラシにより歯垢を除去しても、数時間で歯垢は再び歯の表面に堆積する。夜の睡眠中、唾液の分泌が減少し、歯の自己洗浄機能が低下する。そのため、夜の就寝前に歯を磨くことは重要である。
【０００７】
水で口をすすぐことで口の中の食べかすを除くことができるが、それだけでは歯垢を除去するために充分でないことは明らかである。市販の口腔洗浄液は抗細菌性および抗炎症性の物質を供給するため、歯垢の抑制に有効であって、それにより口腔内の健康状態を維持することができる。例えば、フッ化物による口腔洗浄は代表的なフッ化物虫歯予防法であり、フッ化物の存在量が低い部分への適用に有効である。クロルヘキシジンによる口腔洗浄は、唾液中に存在し歯の表面に吸着している細菌を殺菌することができ、歯周病の患者に適している。エッセンシャルオイルを主要な活性成分として用いる口腔洗浄は、多くの菌に対して殺菌作用を持つことから、日常的な使用に適している。口腔洗浄には、口内炎や口唇炎からの回復やうがいに役立つものや、感染の防止や傷の治癒の促進に役立つものもある。
【０００８】
シュガーレスガムを噛むことも、唾液の分泌を刺激し、口腔内の酸性度を緩和し、息をさわやかにして、歯を清掃するために役に立つ。しかし、口腔用練り歯磨き、口腔洗浄溶液、その他の製品は、抗生物質（トリクロサン、フッ化第一スズ、クロルヘキシジン、四級アンモニウム塩、例、クロロフェノール）のような化学物質を含む。これらの物質は、臭気を発生する細菌を殺すことができるが、その効果は短時間で、改善効果は長時間持続しない。また、これらの物質には、味覚の変化のような望ましくない副作用をもたらすこともある。
【０００９】
茶の栽培と消費については、長い歴史がある。茶は、ポリフェノール類、テアフラビン類、テアニン、カフェインのような様々な活性成分を含む。これらの活性成分の研究と利用は、主に食物、飲料、医薬品、健康食品、および栄養補助食品の分野に限られていた。茶に含まれるカテキン系ポリフェノール類は、嫌気性細菌の増殖を抑制することができ、それにより臭気の発生も抑制できる。ハヤカワ外の特許文献１は、口腔内ケアの分野で茶を適用して、少なくとも一種の茶のポリフェノール、フッ化物およびアルミニウム塩を含む組成物により歯の酸抵抗性を高めることができることを記載している。プロクター・アンド・ギャンブル社（中国法人）による特許文献２（２００２年１０月９日国際公開、２０１０）には、有効量のポリフェノール類、緩衝剤、約４０％乃至９９％の一種もしくは二種以上の水溶性担体、および約５％乃至２０％の全水分含量からなるオーラルケア組成物の主成分として、茶のポリフェノール類が使用できることが記載されている。
【００１０】
しかしながら、紅茶の抽出物からのテアフラビン類を口内衛生に使用することについては、ほとんど報告されていない。研究を行った結果、緑茶のカテキン類が、嫌気性細菌の増殖を抑制し、硫化物の生成を低減させ、それにより悪臭、歯垢の形成、虫歯、および歯肉炎や歯周炎を含む歯周病の発生を遅延させることが判明している。しかし、緑茶のカテキン類とは異なり、紅茶中のテアフラビン類は、最も重要な活性物質である。これらは、芳香族類である天然色素の酸化または発酵により形成される重要なポリフェノール系カテキン類（カテキン（Ｃ）、エピガロカテキン（ＧＣ）、エピカテキン（ＥＣ）、３’−没食子酸エピカテキン（ＥＣＧ）、エピガロカテキン・ガロカテキン（ＥＧＣ）およびエピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）など）のいくつかの二量体化により形成される。それらは、ベンゾトロポロン分子構造骨格を含むさらに複雑な茶のポリフェノール類の色素物質である。茶の発酵過程では、テアフラビン類（theaflavins, ＴＦ）およびテアルビジン類（thearubigins, テアルビン類、ＴＲ）が、茶のカテキン類（catechins）の酸化により形成される。伝統的に、この酸化過程は、発酵と呼ばれている。テアフラビン類、テアルビジン類は、茶に特有の色と香りを与える。これらのテアフラビン類は、主にテアフラビン（theaflavin, ＴＦ１）、テアフラビン−３−ガラート（theaflavin-3-gallate, ＴＦ２ａ）、テアフラビン−３’−ガラート（theaflavin-3'-gallate, ＴＦ２ｂ）、およびテアフラビン−３，３’−ジガラート（theaflavin-3,3'-digallate, ＴＦ３）である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第５４７０５６５号
【特許文献２】中国特許出願公開第１３７３６５２号
【発明の概要】
【００１２】
本発明は、口臭および関連する口腔衛生の問題、例えば、歯肉炎、虫歯、歯周病、歯の過敏症の解消、口腔内の微生物バランスの維持について、治療および軽減するために口腔内で使用する組成物に関する。より具体的には、本発明では、口腔衛生に有効な量のテアフラビン類、有効な量の緩衝剤、約４０乃至９９質量％の１種または２種以上の薬学的に許容できる水溶性担体を含む組成物において、口腔用組成物の全水分含量が約５乃至２０％である。本発明は、さらに紅茶を抽出することにより本発明の組成物を得る方法および本発明の組成物を使用する方法も含む。特に本発明の組成物は、人または動物の患者により、または患者のため、この組成物で口をうがいおよび／または洗浄することにより口臭や口腔内疾患を軽減するために使用される。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の組成物に使用される化合物の構造式を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本明細書で使用する「有効な（投与）量」とは、悪臭を放つ細菌の増殖および生殖に対して検知できる程度の抑制をもたらし、それにより口臭を改善しおよび／または口腔内の歯垢の形成を抑制するために充分な投与量を意味する。
【００１５】
本明細書で使用する「茶」は、ツバキ科ツバキ属の多年生の常緑樹に分類される植物（Camellia sinensis (L.) O. Kuntze）の葉を意味し、中国種茶、すなわち小葉（lobular）茶（Camellia sinensis var. Sinensis）およびプーアル茶葉（Camellia sinensis var. assamica）を含む。
【００１６】
本明細書で使用する「テアフラビン類」は、テアフラビン、イソテアフラビン、ネオテアフラビン、３−ガラートテアフラビン類、３’−ガラートテアフラビン類（theaflavin-3'-gallate）、３，３’−ジガラートテアフラビン類（teaflavin-3,3'-digalate）、エピテアフラビン酸（epitheaflavic acid）、３’−エピテアフラビン酸没食子酸エステル（epitheaflavic acid-3'-gallate）、茶のレチノイン酸（theaflavic acid）、茶の３’−レチノイン酸没食子酸エステル（theaflavic acid-3'-gallate）およびそれらの混合物を含むが、それらに限定される訳ではない。本明細書の「テアフラビン類」は、上記物質の塩も含む。
【００１７】
本発明の組成物は、練り歯磨き、歯磨き剤、口腔用スプレー、チューインガム、または持続放出タブレットの形状にすることができる。
【００１８】
別に注釈しない限り、この記載における「歯磨剤」は、軟膏、ゲル状または液状の処方を意味する。
【００１９】
オーラル（口腔用）組成物は、そのオーラルヘルスケアの目的を達成するために、口腔部の表面または口腔内に適用され、実質的に全ての歯の表面および／または口腔組織にそれが到達するために適切な時間内その場に留まる組成物を意味する。本発明のオーラルヘルスケア組成物は、人と動物の双方に対して有効に利用できる。
【００２０】
本明細書で使用する「水担体」は、本発明の組成物に適用するために、安全で有効な任意の水性物質を意味する。これらの物質は、研磨剤、過酸化物材料、重炭酸アルカリ金属塩、増粘剤、抗歯石剤、湿潤剤、水、界面活性剤、二酸化チタン、抗酸化剤、金属イオン、植物亜鉛、着色剤、香味料、キシリトール、エリスリトール、甘味料、ハーブ、保存剤、およびそれらの混合物を含む。
【００２１】
本発明の組成物の活性成分は、茶のポリフェノール系カテキン類（カテキン（Ｃ）、エピガロカテキン（ＧＣ）、エピカテキン、ホルモン（ＥＣ）、３’−没食子酸、エピカテキン（ＥＣＧ）、エピガロカテキン・ガロカテキン（ＥＧＣ）、および３−エピ没食子カテキンガラートガラート（ＥＧＣＧ））から生成するテアフラビン類である。上記カテキン類は、紅茶に含まれ、紅茶の最も重要な活性物質であるベンゾトロポロン構造を有する茶のポリフェノール水酸化物に属する芳香族天然色素の酸化または発酵により得られる。茶の処理工程で、茶のカテキン類は酸化されて、テアフラビン類（theaflavins, ＴＦ）および茶の赤色色素（thearubins, ＴＲ）を生成する。伝統的には、これらの酸化処理を発酵と呼んでいる。テアフラビン類とテアルビン類は、紅茶に色と特有の香りを与えている。テアフラビン類は、テアフラビン（theaflavin, ＴＦ１）、テアフラビン−３−ガラート（theaflavin-3-gallate, ＴＦ２ａ）、テアフラビン−３’−ガラートガラート（theaflavin-3'-gallate, ＴＦ２ｂ）、およびテアフラビン−３，３’−ビス没食子酸エステル（theaflavin-3,3'-digallate, ＴＦ３）を含む。その化学構造を図１に示す。本発明の組成物に用いる活性成分は、米国特許８２８２９７０号に記載の方法を用いて紅茶から抽出される。上記米国特許の内容の全ては、本明細書の記載とされる。
【実施例】
【００２２】
［実施例１］
２０％（ＴＦ２０）、４０％（ＴＦ４０）および６０％（ＴＦ６０）の濃度で、テアフラビンＴＦ１の３種類のサンプルを作製した。ここで、全ての濃度は質量％である。口内を発生源とする悪臭の原因として知られている下記の微生物を選択した：
トレポネーマ・デンティコラ；ポルフィロモナス・ジンジバリス；ポルフィロモナス・ジンジバリスのアエロモナス；黒色プレボテーラ（Black）；プレボテーラ・インテルメディア；バクテロイデス・フォーサイス（Bacteroides forsythus）；およびフソバクテリウム・ヌクレアタム。
歯肉下の歯垢と舌苔を集めて、非選択培地中に接種した。
【００２３】
（実験手順）
茶の抽出物を培地に加えて、サンプル１（ＴＦ２０）の実験群、サンプル２（Ｔ４０）の実験群、およびサンプル３（Ｔ６０）の実験群に分割し、茶の抽出物を含まない対照培地も作製した。微生物をサンプルに加え、混合したものを嫌気性もしくは準嫌気性の条件下で培養した。培養で得られたコロニーを数え、各サンプル中の微生物の増殖の阻害の程度を決定した（単位：ｐｐｍ）。
【００２４】
［実施例２］
（揮発性硫黄化合物（ＶＳＣ）に対するテアフラビン類の効果）
テアフラビン抽出物のサンプルＴＦ２０、ＴＦ４０およびＴＦ６０のそれぞれに、口臭を生じる細菌：ポルフィロモナス・ジンジバリス；アエロモナス；プレボテーラ・インテルメディア；およびフソバクテリウム・ヌクレアタムを加えた。各茶抽出物培地を実験群１（ＴＦ２０）、実験群２（ＴＦ４０）、および実験群３（ＴＦ６０）に分割した。各実験群は、０．２％および１．０％の投与量の群に分割した。０．２％クロルヘキシジン溶液培地からなる陽性対照および抽出物を全く含まない対照も準備した。
【００２５】
各実験群、陽性対照群、およびブランク対照群に、上記の細菌を接種し、嫌気性条件下、３７℃で７時間培養し、揮発性硫黄化合物（ＶＳＣ）のレベルを、呼気測定器（ハリメーター）を用いて測定した。
【００２６】
以下の処方物を作製した（以下の％は全て質量％であり、処方物の全質量に基づく値である）。
【００２７】
処方物１：
リン酸水素２水和物４５％；二酸化ケイ素２％；グリセロール１０％；ソルビトール１０％；カルボキシメチルセルロース；オゴノリ（Gracilaria）０．３；ラウリル硫酸ナトリウム１６．８％；精製水２８．９％；香味料１％；甘味料。
【００２８】
処方物２：
フッ化第一スズ０．２％；ピロリン酸カルシウム３９％；グリセロール１０％；ソルビトール２０；ピロリン酸第一スズ、粘着剤、香味料、および発泡剤４．６％；精製水２５％。
【００２９】
処方物３：
モノフルオロリン酸ナトリウム０．７６％；不溶性メタリン酸ナトリウム４２％；リン酸二カルシウム２水和物；水酸化アルミニウム１％；湿潤剤；アイリッシュモス抽出物１％；二酸化チタン０．４％；ベンゼンナトリウム０．５％；Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム；香味料；１００％とするための精製水。
【００３０】
処方物４：
Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム；ラウリル硫酸ナトリウム０．５％；アルギン酸ナトリウム０．９％；蛋白質分解酵素（ペースト、グラム当たり１５００〜２０００単位）；１００％とするための精製水。
【００３１】
処方物５：
四級アンモニウム塩０．５％；非イオン界面活性剤２％；グリセロール２２％；ＣＭＣ０．８５％；ピロリン酸ナトリウム；サッカリン０．２％；安息香酸ナトリウム０．５％；沈降カルバミン酸カルシウム５％；ＤＣＰ２水和物４６．８％；香味料０．８％；精製水２１．１％。
【００３２】
処方物６：
硝酸カリウム１０％；グリセロール２５％；グリコールセルロースエーテル１．６％；モノラウリン酸ポリオキシメチレン・ソルビタン；シリカ２４％；ハッカ油１％；サッカリン０．２％；１００％とするための精製水。
【００３３】
処方物７：
塩化ナトリウム１５％；ヒドロキシエチルセルロース；コロイド状シリカ２．５％；グリセロール５％；エチレンオキシド％；プロピレンオキシドブロック共重合体０．５％；亜リン酸カルシウム３０％；サッカリン０．３％；１００％とするための精製水。
【００３４】
［実施例３］
（口腔洗浄液の処方）
組成物：
クロルヘキシジン２ｇ；メトロニダゾール２ｇ；ハッカ油０．５ｍｌ；トゥイーン−８０（１ｍｌ）；サッカリンナトリウム；１０００ｍｌとするための蒸留水。
【００３５】
調製方法：
クロルヘキシジンとメトロニダゾールを適量の蒸留水に溶解し、ハッカ油とトゥイーン８０を加え、完全に混合して熱した蒸留水中に溶かし、サッカリンナトリウムを加え、完全に溶解するまで攪拌して濾過した。蒸留水をフィルターに加え、良く攪拌した。
【００３６】
［実施例４］
組成物                    態様Ａ          態様Ｂ
テアフラビン類（ＴＦ６０）        １０ｇ            ５ｇ
トゥイーン−８０                  １ｍｌ          １ｍｌ
ハッカ                        ０．５ｍｌ      ０．５ｍｌ
リン酸緩衝液                    １０ｍｌ        １０ｍｌ
精油                          ０．１ｍｌ      ０．１ｍｌ
着色料                        １００ｍｇ      １００ｍｇ
保存料                          ５０ｍｇ        ５０ｍｇ
脱イオン水                  １０００ｍｌ    １０００ｍｌ
【００３７】
［実施例５］
（チューインガム）
組成物                    態様Ｃ          態様Ｄ
テアフラビン類（ＴＦ６０）        １０ｇ            ５ｇ
トゥイーン−８０                  １ｍｌ          １ｍｌ
ハッカ                        ０．５ｍｌ      ０．５ｍｌ
リン酸緩衝液                    １０ｍｌ        １０ｍｌ
精油                          ０．１ｍｌ      ０．１ｍｌ
着色料                        １００ｍｇ      １００ｍｇ
保存料                          ５０ｍｇ        ５０ｍｇ
脱イオン水                  １０００ｍｌ    １０００ｍｌ
【００３８】
［実施例６］
（多層持続放出バッカル錠剤）
組成物                    態様Ｅ          態様Ｆ
テアフラビン類（ＴＦ６０）        １０ｇ            ５ｇ
トゥイーン−８０                  １ｍｌ          １ｍｌ
ハッカ                        ０．５ｍｌ      ０．５ｍｌ
リン酸緩衝液                    １０ｍｌ        １０ｍｌ
精油                          ０．１ｍｌ      ０．１ｍｌ
着色料                        １００ｍｇ      １００ｍｇ
保存料                          ５０ｍｇ        ５０ｍｇ
脱イオン水                  １０００ｍｌ    １０００ｍｌ
【００３９】
［実施例７］
この例では、ハリメーターを使用し、以下の異常判別基準に従い選択した患者について７種の組成物による健康状態抑制効果を試験した：
ハリメーター値（揮発性硫黄の濃度）≧２００×１０3ｍｌ／ｍ3；
耳鼻咽喉、消化器、呼吸器およびその他の全身性疾患の徴候がないこと；
口内を原因とする健康状態に異常を来す要素が除外されていること；
実験前に口内で抗生物質を使用したことによる深刻な粘膜疾患が存在しないこと；
および
迎合性が低いこと。
チュー・ホアンチョー（Ｚｈｕ  Ｈｕａｎｚｈｅ）は、試験組成物を使用する前の２４時間以内に、芳香性飲料、化粧品、および口内洗浄液の使用を検査し；試験前に、にんにく、ねぎ、にんじんその他の硫黄含有量が高い食物を摂取していないかを検査し；午前７：００〜１２：００の間で、歯を磨き、口をすすぐ前に息を調べ、６時間前から何も食べていないことを確認した。
【００４０】
上記基準に従い１２５名の患者を選別し、それぞれをランダムに５グループに振り分け、０．４％Ｔ２０、０．４％Ｔ４０、０．４％Ｔ６０と呼ぶ練り歯磨きを用いて歯磨き後、消臭剤を用い、特定の練り歯磨きと歯ブラシを用いた。ブラッシング後、被験者を１分間隔離して、呼気測定器（ハリメーター）を気管に向けて約４ｃｍ入れた。鼻呼吸で検出処理を行い、０、１、２、３、４、および５時間後に呼気中の揮発性硫化物濃度のピークを記録した。各患者に関する呼気の試験記録は、洗浄後の値を採用した。二重読み取りを行った。ＳＰＳＳ統計ソフトウェアを実験結果の処理と分析に使用し、二つのグループの間で対にしてテイ（ｔ）試験を行うことにより自己対照とした。
【００４１】
［実施例８］
男性Ｘ例、女性Ｘ例の口を原因とする口臭患者の呼気について、Ｎ例の確認を行った。各患者の条件は、以下の通りである：
１８歳以上；全体として健康であること；非喫煙者であること；少なくとも２０本の本来の歯を持っていること；少なくとも６ヶ月以内に歯周関係の治療を受けていないこと；補助具を取り付けていないこと、顕著に不都合な歯の修復、虫歯および食片圧入がないこと、並びに粘膜疾患がないこと；一ヶ月の期間内で二週間抗生物質を使用せず、三日間以上連続して抗生物質を使用しなかったこと；女性の場合、月経期間、妊娠、授乳のいずれでもないこと。
当該患者は、インフォームドコンセントの書類に署名した。
【００４２】
（実験条件と処理）
試験前の二日間は，たばことアルコールを禁止した。試験前の１日以内では、にんにく、タマネギ、ねぎ、だいこん、その他の食物の摂取と芳香性の高い化粧品の使用も禁止した。朝、被験者を、歯を磨くことなく、食事を取らず、口内洗浄液、チューインガム、コーヒーその他の飲料を使用することのない状態で検査した。試験は、良く換気した無臭の室内で実施した。状態の確認の全ては、経験を積んだ臭覚技術者が行った。
【００４３】
１）口内洗浄液の使用
適切な基準に従いＸＸを伴う患者の呼気の異常の検出を、それぞれランダムに５グループに振り分け、０．４％Ｔ２０、０．４％Ｔ４０、０．４％Ｔ６０と呼ぶ口内洗浄液でうがいをし、１５ｍｌの蒸留水で１分間口内洗浄した。被験者を１分間隔離して、呼気測定器（ハリメーター）を気管に向けて口内に約４ｃｍ入れた。鼻呼吸で検出処理を行い、０、１、２、３、４、５、および６時間後に呼気中の揮発性硫化物濃度のピークを記録した。各患者に関する呼気の試験記録では洗浄後の値を採用し、各時間の値は二重に検出し、いずれも平均値を得た。
【００４４】
［実施例９］
（チューインガム）
上記の適切な基準を用いて呼気の異常の検出を行った。患者は、ランダムに５グループに振り分け、０．４％Ｔ２０、０．４％Ｔ４０、０．４％Ｔ６０と呼ぶチューインガムを５分間噛んだ。ガムを噛んだ後、被験者の口を１分間閉じて、呼気測定器（ハリメーター）を気管に向けて約４ｃｍ入れた。鼻呼吸で検出処理を行い、０、１、２、３、４、５、および６時間後に呼気中の揮発性硫化物濃度のピークを記録した。各患者に関する呼気の試験記録では、洗浄後の値を採用した。二重読み取りを行った。ＳＰＳＳ統計ソフトウェアを実験結果の処理と分析に使用し、二つのグループの間で対にしてテイ（Ｔ）試験することにより自己対照とした。
【００４５】
被験者を１分間隔離して、呼気測定器（ハリメーター）を気管に向けて口内約４ｃｍに入れた。鼻呼吸で検出処理を行い、０、１、２、３、４、５、および６時間後に呼気中の揮発性硫化物濃度のピークを記録した。各患者に関する呼気の試験記録では洗浄後の値を採用し、各時間の値は二重に検出し、いずれも平均値を得た。
【００４６】
［実施例１０］
（多層持続放出バッカル錠剤）
適切な基準に従い患者の呼気の異常の検出を、それぞれランダムに５グループに振り分け、０．４％Ｔ２０、０．４％Ｔ４０、０．４％Ｔ６０として錠剤を投与した。被験者の口を１分間閉じて、呼気測定器（ハリメーター）を気管に向けて約４ｃｍ入れた。鼻呼吸で検出処理を行い、０、１、２、３、４、５、および６時間後に呼気中の揮発性硫化物濃度のピークを記録した。各患者に関する呼気の試験記録では、洗浄後の値を採用した。二重読み取りを行った。ＳＰＳＳ統計ソフトウェアを実験結果の処理と分析に使用し、二つのグループの間で対にしてテイ（ｔ）試験することにより自己対照とした。
【００４７】
（実験結果）
テアフラビン類は、口臭（揮発性硫化物濃度）を生じる細菌の口内での増殖に対して有効である。
【００４８】
１．実験グループ
対照：嫌気性ボックス内での揮発性硫黄化合物（Volatile Sulfur Compound: ＶＳＣ）の気体濃度を培養器環境におけるＶＳＣの背景濃度とみなすことができる。
陰性対照：ＶＳＣを抑制するいずれの物質も使用しない以外は、陽性対照およびサンプル群の菌株と同じである。
陽性対照：クロルヘキシジンを抑制効果の陽性の参照とした。
テアフラビン類：テアフラビン類のサンプルを、２０％、４０％、および６０％の純度に従って含むサンプルである。
実際値：陰性対照、陽性対照およびサンプルのデータから対照の値を引いたものがデータの数値である。
【００４９】
２．使用した実験菌株
口臭を生じる性質を有する細菌（Ｆｎの標準株およびＰｇの標準株）
【００５０】
３．結果
標準菌株ＦｎによるＶＳＣ生成に対する抑制効果
【００５１】
【表１】
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【００５２】
【表２】
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【００５３】
標準菌株ＰｇによるＶＳＣ生成に対する抑制効果
【００５４】
【表３】
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【００５５】
【表４】
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【図１】
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【国際調査報告】
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