(57)【要約】本発明は、リガンド−治療薬コンジュゲート化合物、そのコンジュゲート化合物のためのケイ素リンカー、組成物、それらを製造する方法、およびそのコンジュゲート化合物を使用して癌を処置する方法に関する。本明細書に記載のケイ素ベースのリンカーは、所望の治療薬を、リガンドによってターゲティングされた特定の細胞または組織種に送達するために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のコンジュゲート化合物：
2016514157.tif 000097
式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であるが、ただし、Ｔは、ＣＡＳ登録番号１１５８３４−２３−６（ＳＦ２４４６Ａ１）またはその誘導体もしくは類似体ではないことを条件とし；
Ｊは、リンカー基であり；
Ｘは、次の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）Ｏ；
（３）
2016514157.tif 000098
これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である；および
（４）
2016514157.tif 000099
これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である；
Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２ＣＨ２−であり；
Ｒ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６、または−Ｎ（ＣＯＲ２）Ｒ７であり；
Ｒ２は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ３は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、または−ＣＯＲ４であり；
Ｒ４は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルまたはＣ３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ５は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ６は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであるか；あるいは
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、またはＯＲ９であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；あるいは
Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＲ３であり；
ｎは、１〜５であり；かつ
ｍは、１〜８である。
【請求項２】
Ｊが、−Ｚ−Ｙ２−Ｃ（Ｏ）−Ｙ１−であり；
Ｚが、
2016514157.tif 000100
であり、式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ２との結合点であり；
Ｙ１が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２）ｌ−であり；
Ｙ２が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（ＣＨ２ＣＨ２（Ｘ３））ｑ−であり；
Ｘ２が、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｘ３が、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｒ１１が、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１２が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
ｋが、１〜３であり；
ｌが、１〜１０であり；かつ
ｑが、１〜１０である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項３】
Ｊが、−Ｚ−Ｙ３−であり；
Ｚが、
2016514157.tif 000101
であり、式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ３との結合点であり；
Ｙ３が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレン、Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、Ｏ（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、Ｏ（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８カルボシクリル）、−（Ｃ３〜８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−、および−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（Ｘ７）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−からなる群から選択され；
Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、およびＸ７が、それぞれ、結合、（ＣＨ２）ｋ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、ＮＲ１９、Ｃ（Ｏ）Ｏ、およびＣ（Ｏ）ＮＲ１９からなる群から独立に選択され；
Ｒ１１が、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１９が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
各ｒが、０〜１６であり；かつ
ｓが、１〜１０である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項４】
Ｑが−（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎが１〜５である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項５】
Ｊが、チオール含有スペーサーをさらに含む、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項６】
Ｌがタンパク質、ペプチド、アミノ酸、受容体リガンド、ホルモン、または成長因子である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項７】
Ｌが、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ミニボディ、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、葉酸、ボンベシン、ＥＤＧ、トランスフェリン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来成長因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＦＧ−アルファ、ＴＦＧ−ベータ、ＶＧＦ、インスリン、ならびにインスリン様成長因子ＩおよびＩＩからなる群から選択される、請求項６に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項８】
Ｌが、次の（１）〜（３５）から選択される１種または複数種の腫瘍関連抗原または細胞表面受容体に結合する抗体である、請求項６に記載のコンジュゲート化合物：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体タイプＩＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮性抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質輸送体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、タイプＩＩナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂＨｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（タイプ１およびタイプ１様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンタイプＢ受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮定タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮性抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来成長因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン−バールウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２  Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）Ｅｐｈｂ２Ｒ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７７．１）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ−００１７６２．１）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α、Ｉｇβと共有結合的に相互作用し(ＣＤ７９Ｂ)、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関係するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染ならびに、おそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発生において役割を果たすＧタンパク質共役受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球に対してそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子(Ｉａ抗原)のβサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（細胞外ＡＴＰによってゲートされるイオンチャネルであるプリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（ロイシンリッチリピート(ＬＲＲ)ファミリーのタイプＩ膜タンパク質であるリンパ球抗原６４(ＲＰ１０５)は、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、その機能の欠損は、全身性エリテマトーデスの患者における疾患活性の増大に関連する、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｃ２タイプＩｇ様およびＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体であるＦｃ受容体様タンパク質１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；ならびに
（３５）ＩＲＴＡ２（Ｂ細胞発生およびリンパ腫発生において役割を有し得る推定免疫受容体である免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２；一部のＢ細胞悪性腫瘍において、転座による遺伝子の調節解除が生じる；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１２５７１．１）。
【請求項９】
Ｌが葉酸である、請求項６に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１０】
Ｌが表皮成長因子である、請求項６に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１１】
Ｔがヒドロキシル含有薬物部分である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１２】
Ｔが、Ｎ８−アセチルスペルミジン、アクチノマイシン、９−アミノカンプトテシン、アミノプテリン、アングイジン、アントラサイクリン、オーリスタチン、ブレオマイシン、カリチアマイシン、カンプトテシン、カルミノマイシン、ＣＣ−１０６５、クロファリビン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、シクロプロパベンゾインドール−４−オン（ＣＢＩ）、シタラビン、シトシンアラビノシド、ダウノルビシン、ジクロロメトトレキサート、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、ジフルオロヌクレオシド、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エピルビシン、エスペラミシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、イリノテカン、ロイロシデイン、ロイロシン、メイタンシン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトプテリン、メトトレキサート、マイトマイシンＡ、マイトマイシンＣ、モルホリン−ドキソルビシン、酪酸、シスプラチン、ジアセトキシペンチルドキソルビシン、マイタンシノール、カペシタビン、ロイプロリド、ビカルタミド、ゴセレリン、１７−ＡＡＧ、１７−ＤＭＡＧ、デス−アセチルビンブラスチン、ネモルビシン、ポドフィロトキシン、ポドフィロトキシン誘導体、レチノイン酸、サポリン、タリソマイシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキサン、タキソール、パクリタキセル、タキソテール、ドセタキセル、タキソテールレチノイン酸、ならびにこれらの異性体、塩形態、類似体、および誘導体からなる群から選択される抗癌薬である、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１３】
下記式：
2016514157.tif 000102
を有する、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１４】
下記式：
2016514157.tif 000103
を有する、請求項１に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項１５】
薬学的に許容される担体および請求項１に記載のコンジュゲート化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１６】
処置を必要とする癌対象を選択する工程、および
選択された対象に、治療的に許容される量の請求項１に記載のコンジュゲート化合物を投与する工程
を含む、それを必要とする患者において癌を処置する方法。
【請求項１７】
前記癌が、膀胱、乳房、子宮頸、結腸、子宮内膜、腎臓、肺、食道、卵巣、前立腺、膵臓、肝臓、皮膚、胃、および睾丸の癌からなる群から選択される、請求項１６に記載の癌を処置する方法。
【請求項１８】
式（ＩＩＩ）のコンジュゲート化合物：
2016514157.tif 000104
式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であるが、ただし、Ｔは、ＣＡＳ登録番号１１５８３４−２３−６（ＳＦ２４４６Ａ１）またはその誘導体もしくは類似体ではないことを条件とし；
Ｊは、リンカー基であるが、ただし、Ｘが結合である場合、Ｊは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ３、Ｓ、またはカルボキシルでケイ素原子に直接結合することはできず、ケイ素原子と共に加水分解的に安定な炭素結合を形成していることを条件とし；
Ｘは、次の（１）〜（３）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）
2016514157.tif 000105
これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である；および
（３）
2016514157.tif 000106
これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である；
Ｒ１３およびＲ１４は、それぞれＲ１６で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立に選択され；
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、オキソ、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ１７、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、またはＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８であり；
Ｒ１６は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１７、ＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、−ＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１７は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１８は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；あるいは
Ｒ１７およびＲ１８は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；かつ
ｖは、１〜８である。
【請求項１９】
Ｊが、−Ｚ−Ｙ２−Ｃ（Ｏ）−Ｙ１−であり；
Ｚが、
2016514157.tif 000107
であり、式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ２との結合点であり；
Ｙ１が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２）ｌ−であり；
Ｙ２が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（ＣＨ２ＣＨ２（Ｘ３））ｑ−であり；
Ｘ２が、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｘ３が、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｒ１１が、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１２が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
ｋが、１〜３であり；
ｌが、１〜１０であり；かつ
ｑが、１〜１０である、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２０】
Ｊが、−Ｚ−Ｙ３−であり；
Ｚが、
2016514157.tif 000108
であり、式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ３との結合点であり；
Ｙ３が、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレン、Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、Ｏ（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、Ｏ（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８カルボシクリル）、−（Ｃ３〜８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−、および−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（Ｘ７）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−からなる群から選択され；
Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、およびＸ７が、それぞれ、結合、（ＣＨ２）ｋ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、ＮＲ１９、Ｃ（Ｏ）Ｏ、およびＣ（Ｏ）ＮＲ１９からなる群から独立に選択され；
Ｒ１１が、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１９が、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
各ｒが、０〜１６であり；かつ
ｓが、１〜１０である、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２１】
Ｒ１３およびＲ１４が、それぞれ、Ｃ１〜６アルキルまたはフェニルである、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２２】
Ｊが、チオール含有スペーサーをさらに含む、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２３】
Ｌがタンパク質、ペプチド、アミノ酸、受容体リガンド、ホルモン、または成長因子である、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２４】
Ｌが、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ミニボディ、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、葉酸、ボンベシン、ＥＤＧ、トランスフェリン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来成長因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＦＧ−アルファ、ＴＦＧ−ベータ、ＶＧＦ、インスリン、ならびにインスリン様成長因子ＩおよびＩＩからなる群から選択される、請求項２３に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２５】
Ｌが、次の（１）〜（３５）から選択される１種または複数種の腫瘍関連抗原または細胞表面受容体に結合する抗体である、請求項２３に記載のコンジュゲート化合物：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体タイプＩＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮性抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質輸送体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、タイプＩＩナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂＨｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（タイプ１およびタイプ１様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンタイプＢ受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮定タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮性抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来成長因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン−バールウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２  Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）Ｅｐｈｂ２Ｒ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７７．１）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ−００１７６２．１）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α、Ｉｇβと共有結合的に相互作用し(ＣＤ７９Ｂ)、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関係するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染ならびに、おそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発生において役割を果たすＧタンパク質共役受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球に対してそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子(Ｉａ抗原)のβサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（細胞外ＡＴＰによってゲートされるイオンチャネルであるプリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（ロイシンリッチリピート(ＬＲＲ)ファミリーのタイプＩ膜タンパク質であるリンパ球抗原６４(ＲＰ１０５)は、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、その機能の欠損は、全身性エリテマトーデスの患者における疾患活性の増大に関連する、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｃ２タイプＩｇ様およびＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体であるＦｃ受容体様タンパク質１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；ならびに
（３５）ＩＲＴＡ２（Ｂ細胞発生およびリンパ腫発生において役割を有し得る推定免疫受容体である免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２；一部のＢ細胞悪性腫瘍において、転座による遺伝子の調節解除が生じる；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１２５７１．１）。
【請求項２６】
Ｌが葉酸である、請求項２３に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２７】
Ｌが表皮成長因子である、請求項２３に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２８】
Ｔがヒドロキシル含有薬物部分である、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項２９】
Ｔが、Ｎ８−アセチルスペルミジン、アクチノマイシン、９−アミノカンプトテシン、アミノプテリン、アングイジン、アントラサイクリン、オーリスタチン、ブレオマイシン、カリチアマイシン、カンプトテシン、カルミノマイシン、ＣＣ−１０６５、クロファリビン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、シクロプロパベンゾインドール−４−オン（ＣＢＩ）、シタラビン、シトシンアラビノシド、ダウノルビシン、ジクロロメトトレキサート、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、ジフルオロヌクレオシド、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エピルビシン、エスペラミシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、イリノテカン、ロイロシデイン、ロイロシン、メイタンシン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトプテリン、メトトレキサート、マイトマイシンＡ、マイトマイシンＣ、モルホリン−ドキソルビシン、酪酸、シスプラチン、ジアセトキシペンチルドキソルビシン、マイタンシノール、カペシタビン、ロイプロリド、ビカルタミド、ゴセレリン、１７−ＡＡＧ、１７−ＤＭＡＧ、デス−アセチルビンブラスチン、ネモルビシン、ポドフィロトキシン、ポドフィロトキシン誘導体、レチノイン酸、サポリン、タリソマイシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキサン、タキソール、パクリタキセル、タキソテール、ドセタキセル、タキソテールレチノイン酸、ならびにこれらの異性体、塩形態、類似体、および誘導体からなる群から選択される抗癌薬である、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項３０】
下記式：
2016514157.tif 000109
を有する、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項３１】
下記式：
2016514157.tif 000110
を有する、請求項１８に記載のコンジュゲート化合物。
【請求項３２】
薬学的に許容される担体および請求項１８に記載のコンジュゲート化合物を含む、医薬組成物。
【請求項３３】
処置を必要とする癌対象を選択する工程、および
選択された対象に、治療的に許容される量の請求項１８に記載のコンジュゲート化合物を投与する工程
を含む、それを必要とする患者において癌を処置する方法。
【請求項３４】
前記癌が、膀胱、乳房、子宮頸、結腸、子宮内膜、腎臓、肺、食道、卵巣、前立腺、膵臓、肝臓、皮膚、胃、および睾丸の癌からなる群から選択される、請求項３３に記載の癌を処置する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる２０１３年３月１４日出願の米国特許仮出願第６１／７８４，９０６号の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、コンジュゲート化合物、ケイ素リンカー化合物、組成物、それらを製造する方法、およびそのコンジュゲート化合物を使用して疾患を処置する方法に関する。特に、本発明は、新規のケイ素リンカーを含むそのような化合物、組成物、および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
薬物送達技術は、所望のターゲットに薬剤を送達することを目的として多年にわたって広範に使用されている。様々な投与方法および投与経路が、小分子薬物および他の生物学的に活性な化合物（例えば、ペプチド、ホルモン、タンパク質、および酵素）などの医薬品を送達するために開発されている。様々な薬物送達方法の例が、例えば、ＷＯ２０１２／０３７３５８（特許文献1）、ＷＯ２００９／１３２２６５（特許文献2）、ＷＯ２００５／０８２０２３（特許文献3）、ＷＯ２０１２／１１３８４７（特許文献4）、ＷＯ２０１２／１３１５２７（特許文献5）、Ｃｈｉｕら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，  ａｎｄ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎ−  ａｎｄ  Ｏ−  Ｔｒｉｏｇａｎｏｓｉｌｙａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｓ  Ｎｅｗ  Ｔｙｐｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、７１（５）：５４２〜５５１（１９８２）（非特許文献1）、Ｍｉｌｌｅｒｓｈｉｐら、「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  Ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ  Ｏｒｇａｎｏｓｉｌｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ：  Ａｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  Ａｎｄｒｏｇｅｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｓｉｌｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ」、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、７７（２）：１１６〜１１９（１９８８）（非特許文献2）、Ｐａｒｒｏｔｔら、「Ｔｕｎａｂｌｅ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｓｉｌｙｌ  Ｅｔｈｅｒ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｅｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ａｃｉｄ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ」、Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ、１３２：１７９２８〜１７９３２（２０１０）（非特許文献3）、およびＬｅａｍｏｎら、「Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｉｎｔｏ  Ｌｉｖｉｎｇ  Ｃｅｌｌｓ：  Ａ  Ｍｅｔｈｏｄ  Ｔｈａｔ  Ｅｘｐｌｏｉｔｓ  Ｆｏｌａｔｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ」、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．  ８８（１３）：５５７２〜５５７６（１９９１）（非特許文献4）に開示されている。薬物送達技術には、リポソームおよびナノまたはマイクロ粒子が含まれる。
【０００４】
最近では、抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）が、抗体療法の有効性を増強するために考案されている。ＡＤＣは、ターゲティング抗体、細胞傷害性薬物（弾頭または治療薬）、およびその２つを結合させるリンカーシステムからなる。この送達方法を用いる場合、薬物がその所望の作用を誘発するために、通常、遊離の薬物の放出が必要である。細胞傷害性薬物を放出する一般的な技術には、ヒドラゾン加水分解、ペプチドの酵素的開裂（例えば、ｐ−アミノベンジルアルコール放出技術、ＷＯ２００５／０８２０２３（特許文献3））、および二硫化物の還元が含まれる。エステルなどのある種の他の機能性部分が使用されているが、エステルは、インタクトなコンジュゲートで望ましい長期の血漿内半減期を達成するためには不安定でありすぎることが多い。
【０００５】
シリルエーテルは、アルコキシ基に共有結合しているケイ素原子を含有する化合物群である。一般構造式は、Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｓｉ−Ｏ−Ｒ４であり、ここで、Ｒ４は、アルキル基またはアリール基である。シリルエーテルは、有機合成の間に、アルコール官能基の保護基として一般に使用される（Ｗｕｔｓら、「Ｇｒｅｅｎｅ'ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第４版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．  Ｈｏｂｏｋｅｎ、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（２００７）（非特許文献5））。Ｒ１Ｒ２Ｒ３置換基を幅広く変化させることで、特異な特性を有し得る大きな一群のシリルエーテルにアクセスすることができる。この特徴により、シリルエーテルは、合成有機化学において、選択的な保護および脱保護スキームにおいて適用するために魅力的なものとなっている。この置換基の立体的なかさ、および電子特性、さらには、超原子価種を可能にするケイ素の能力によって、シリルエーテル基の形成および脱保護の間に、広範な選択的化学作用が許容される。シリルエーテルは、加水分解によって切断され得るので、インビボ環境で遊離薬物を放出する手段を提供する。ヒドラゾンなどの酸不安定性トリガーは、ＡＤＣ分野において公知である（Ｆｌｙｇａｒｅら、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．、８１：１１３〜１２１  （２０１３）（非特許文献6））。全身循環（ｐＨ７．４〜７．５）と比較してエンドソーム（ｐＨ５．５〜６．２）およびリソソーム（ｐＨ４．５〜５．０）の高い酸性環境では、活性薬物が放出されると考えられる。シリルエーテル加水分解速度は、Ｒ１Ｒ２Ｒ３置換基を変えることによって変動させることができる。
【０００６】
したがって、該当部位への所望の化合物の送達および放出を促進するために有用な化合物および方法が、当技術分野で必要とされている。
【０００７】
本発明は、当技術分野におけるこれらの不足および他の不足を克服することを対象とする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】ＷＯ２０１２／０３７３５８
【特許文献２】ＷＯ２００９／１３２２６５
【特許文献３】ＷＯ２００５／０８２０２３
【特許文献４】ＷＯ２０１２／１１３８４７
【特許文献５】ＷＯ２０１２／１３１５２７
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｃｈｉｕら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，  ａｎｄ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎ−  ａｎｄ  Ｏ−  Ｔｒｉｏｇａｎｏｓｉｌｙａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｓ  Ｎｅｗ  Ｔｙｐｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、７１（５）：５４２〜５５１（１９８２）
【非特許文献２】Ｍｉｌｌｅｒｓｈｉｐら、「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  Ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ  Ｏｒｇａｎｏｓｉｌｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ：  Ａｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  Ａｎｄｒｏｇｅｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｓｉｌｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ」、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．、７７（２）：１１６〜１１９（１９８８）
【非特許文献３】Ｐａｒｒｏｔｔら、「Ｔｕｎａｂｌｅ  Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｓｉｌｙｌ  Ｅｔｈｅｒ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｅｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ａｃｉｄ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ」、Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ、１３２：１７９２８〜１７９３２（２０１０）
【非特許文献４】Ｌｅａｍｏｎら、「Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｉｎｔｏ  Ｌｉｖｉｎｇ  Ｃｅｌｌｓ：  Ａ  Ｍｅｔｈｏｄ  Ｔｈａｔ  Ｅｘｐｌｏｉｔｓ  Ｆｏｌａｔｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ」、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．  ８８（１３）：５５７２〜５５７６（１９９１）
【非特許文献５】Ｗｕｔｓら、「Ｇｒｅｅｎｅ'ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第４版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．  Ｈｏｂｏｋｅｎ、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（２００７）
【非特許文献６】Ｆｌｙｇａｒｅら、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．、８１：１１３〜１２１  （２０１３）
【発明の概要】
【００１０】
本発明は、次の構造を有する式（Ｉ）：
2016514157.tif 000002
によって表されるコンジュゲート化合物に関する
［式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であり；
Ｊは、リンカー基であり；
Ｘは、次の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）Ｏ；
（３）
2016514157.tif 000003
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（４）
2016514157.tif 000004
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２ＣＨ２−であり；
Ｒ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６、または−Ｎ（ＣＯＲ２）Ｒ７であり；
Ｒ２は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ３は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、または−ＣＯＲ４であり；
Ｒ４は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、またはＣ３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ５は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ６は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであるか；または
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、またはＯＲ９であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＲ３であり；
ｎは、１〜５であり；かつ
ｍは、１〜８である］。
【００１１】
本発明はまた、次の構造を有する式（ＩＩ）：
2016514157.tif 000005
によって表される化合物に関する
［式中、
波線は、結合点の部位を示し：
Ｊは、リンカー基であり；
Ｘは、次の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）Ｏ；
（３）
2016514157.tif 000006
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（４）
2016514157.tif 000007
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２ＣＨ２−であり；
Ｒ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６、または−Ｎ（ＣＯＲ２）Ｒ７であり；
Ｒ２は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ３は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、または−ＣＯＲ４であり；
Ｒ４は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、またはＣ３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ５は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ６は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであるか；または
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、またはＯＲ９であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＲ３であり；かつ
ｎは、１〜５である］。
【００１２】
本発明のさらなる態様は、次の構造を有する式（ＩＩＩ）：
2016514157.tif 000008
によって表されるコンジュゲート化合物に関する
［式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であり；
Ｊは、リンカー基であるが、ただし、Ｘが結合である場合、Ｊは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ３、Ｓ、またはカルボキシルで、ケイ素原子に直接結合することはできず、ケイ素原子と共に加水分解的に安定な炭素結合を形成していることを条件とし；
Ｘは、次の（１）〜（３）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）
2016514157.tif 000009
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（３）
2016514157.tif 000010
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｒ１３およびＲ１４は、それぞれＲ１６で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立に選択され；
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、オキソ、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ１７、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、またはＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８であり；
Ｒ１６は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１７、ＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、−ＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１７は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１８は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ１７およびＲ１８は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
ｖは、１〜８である］。
【００１３】
本発明の別の態様は、次の構造を有する式（ＩＶ）：
2016514157.tif 000011
によって表される化合物に関する
［式中、
波線は、結合点の部位を示し；
Ｊは、リンカー基であるが、ただし、Ｘが結合である場合、Ｊは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ３、Ｓ、またはカルボキシルで、ケイ素原子に直接結合することはできず、ケイ素原子と共に加水分解的に安定な炭素結合を形成していることを条件とし；
Ｘは、次の（１）〜（３）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）
2016514157.tif 000012
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（３）
2016514157.tif 000013
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｒ１３およびＲ１４は、それぞれＲ１６で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立に選択され；
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、オキソ、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ１７、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、またはＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８であり；
Ｒ１６は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１７、ＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、−ＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１７は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１８は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ１７およびＲ１８は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよい］。
【００１４】
本発明は、また、本明細書に記載のコンジュゲート化合物および医薬組成物を使用して、癌などの疾患を処置する医薬組成物および方法に関する。
【００１５】
本発明では、放出基の安定性と不安定性との間の正確なバランスを、リガンド−治療薬コンジュゲートにおいて有用なリンカーについて達成する。一般的な放出技術を使用するためには、治療薬は、特定の官能基を必要とすることがあるか、または薬物の効力に影響を及ぼすことなく、所望の基を付加されている必要がある。例えば、ＰＡＢ技術は通常、アミンを有する薬物を使用する。薬物部分を放出するための代替方法を、本明細書において提供する。ヒドロキシル基などの一般的な官能基を介しての治療薬の結合が理想であり、それというのも、そのような基は、天然産物または天然産物ベースの細胞傷害薬上に存在することが多いためである。有機合成において中間体として一般に使用されているが、本発明において見出されたシリルエーテル化合物を、免疫毒素（すなわち、抗体薬物複合体）の分野において放出部分として、またはより広く、フォレートコンジュゲートなどのターゲティング化薬物送達のために使用することによって、薬物送達の分野における上記の限界を克服することができる。本明細書におけるリガンド−治療薬コンジュゲートでは、治療薬は、リガンドによってターゲティングされた特定の細胞または組織種で、優先的に切断される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】ｐＨ４．５で２４時間にわたってＨＰＬＣによってモニターした場合の、酸性媒体中でのベンジルエステル誘導体から脱シリル化親ビンカへの変換パーセントを示すグラフである。
【図２】実施例１９の化合物と、実施例１１の対応する化合物との加水分解速度比較を示すグラフである（ステップＡ）。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明は、次の構造を有する式（Ｉ）：
2016514157.tif 000014
によって表されるコンジュゲート化合物に関する
［式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であり；
Ｊは、リンカー基であり；
Ｘは、次の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）Ｏ；
（３）
2016514157.tif 000015
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（４）
2016514157.tif 000016
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２ＣＨ２−であり；
Ｒ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６、または−Ｎ（ＣＯＲ２）Ｒ７であり；
Ｒ２は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ３は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、または−ＣＯＲ４であり；
Ｒ４は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、またはＣ３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ５は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ６は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであるか；または
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、またはＯＲ９であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＲ３であり；
ｎは、１〜５であり；かつ
ｍは、１〜８である］。
【００１８】
上記で使用したとおり、また、本発明の記載を通じて、次の用語は、別段に示さない限り、次の意味を有すると理解されたい。本明細書において別段に定義されていなければ、本明細書において使用する専門用語および科学用語はすべて、本発明が属する分野の当業者が一般に理解する意味と同じ意味を有する。本明細書において１つの用語について複数の定義が存在する場合には、別段に述べられていない限り、このセクションの定義が優先される。
【００１９】
用語「アルキル」は、直鎖でも分枝でもよい脂肪族炭化水素基を意味する。別段に限定されていない場合、この用語は、２０個以下の炭素のアルキルを指す。低級アルキルは、鎖中に約１〜約６個の炭素原子を有するアルキル基を指す。分枝は、メチル、エチル、またはプロピルなどの１個または複数個の低級アルキル基が、直鎖アルキル鎖に結合していることを意味する。代表的なアルキル基には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−ペンチルなどが含まれる。
【００２０】
用語「ハロアルキル」は、１個または複数個のハロゲンで置換されている分枝および直鎖の両方のアルキルを意味し、ここで、そのアルキル基は、本明細書において記載されているとおりである。
【００２１】
アルキルが、ハロゲンで１〜３回置換されている場合、その置換された基には、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ２Ｈなどが含まれる。
【００２２】
用語「シクロアルキル」は、約３〜約７個の炭素原子、好ましくは約５〜約７個の炭素原子を有し、少なくとも１個の二重結合を含んでよい非芳香族単環式または多環式環系を意味する。例示的なシクロアルキル基には、限定ではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロフェニル、ａｎｔｉ−ビシクロプロパン、およびｓｙｎ−トリシクロプロパンが含まれる。
【００２３】
用語「シクロアルキルアルキル」は、シクロアルキルおよびアルキルが本明細書において定義されるとおりであるシクロアルキル−アルキル基を意味する。代表的なシクロアルキルアルキル基には、シクロプロピルメチルおよびシクロペンチルメチルが含まれる。アルキルラジカルおよびシクロアルキルラジカルは、本明細書において定義するとおりに置換されていてもよい。
【００２４】
用語「アリール」は、６〜約１９個の炭素原子、好ましくは６〜約１０個の炭素原子の芳香族単環式または多環式（ポリ環式）環系（縮合、架橋、またはスピロ環系を含む）を意味し、これには、アリールアルキル基が含まれる。多環式環系の場合、「アリール」と定義される環系では、環のうちの１個のみが芳香族であればよい。アリール基の環系は、置換されていてもよい。本発明の代表的なアリール基には、これらだけに限定されないが、フェニル、ナフチル、アズレニル、フェナントレニル、アントラセニル、フルオレニル、ピレニル、トリフェニルエニル、クリセニル、およびナフタセニルなどの基が含まれる。
【００２５】
用語「ヘテロアリール」は、５〜約１９個の環原子、好ましくは５〜約１０個の環原子を有し、その環系中の原子のうちの１個または複数個が炭素以外の元素（複数可）、例えば、窒素、酸素、または硫黄である芳香族単環式または多環式環系（縮合、架橋、またはスピロ環系を含む）を意味する。多環式環系の場合、「ヘテロアリール」と定義される環系では、環のうちの１個のみが芳香族であればよい。ヘテロアリール環中の窒素、炭素、または硫黄原子は、酸化されていてもよく、窒素は、四級化されていてもよい。代表的なヘテロアリール基には、ピリジニル、ピリジル、２−オキソ−ピリジン−１（２Ｈ）−イル、ピリミジニル、ピリダジニル、６−オキソピリダジン−１（６Ｈ）−イル、ピラジニル、トリアジニル、ピラニル、フラニル、ピロリル、チオフェニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、インドリニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シノリニル、プタラジニル（ｐｔｈａｌａｚｉｎｙｌ）、キノキサリニル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、ベンゾ［１，２，３］トリアジニル、ベンゾ［１，２，４］トリアジニル、４Ｈ−クロメニル、インドリジニル、キノリジニル、６ａＨ−チエノ［２，３−ｄ］イミダゾリル、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジニル、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、チエノ［２，３−ｂ］フラニル、チエノ［２，３−ｂ］ピリジニル、チエノ［３，２−ｂ］ピリジニル、フロ［２，３−ｂ］ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］ピリジニル、チエノ［３，２−ｄ］ピリミジニル、フロ［３，２−ｄ］ピリミジニル、チエノ［２，３−ｂ］ピラジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピラジニル、５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピラジニル、６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［５，１−ｃ］［１，４］オキサジニル、２−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｄ］オキサゾリル、３，３−ジメチル−２−オキソインドリニル、２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾリル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾリル、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジニル、５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジニル、３−オキソ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−２（３Ｈ）−イル、および３−チオ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−２（３Ｈ）−イルなどが含まれる。
【００２６】
ヘテロアリールには、特に、［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル、７−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−６−イル、３−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−６−イル、３−（トリフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−６−イル、３−オキソ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−２（３Ｈ）−イル、２−オキソ−ピリジン−１−イル、６−アミノピリダジン−３−イル、６−（メトキシ）ピリダジン−３−イル、６−（ヒドロキシ）ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、６−（トリフルオロメチル）ピリダジン−３−イル、６−（ジフルオロメトキシ）ピリダジン−３−イル、６−（ヒドロキシ）ピリダジン−３−イル、４−シアノフェニル、３−シアノフェニル、４−（メチルスルホニル）フェニル、２−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｄ］オキサゾール−６−イル、ピリミジン−５−イル、ピラジニル、５−アミノピラジニル、キノキサリン−２−イル、５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル、４−（エチルスルホニル）ピペラジン−１−イル、６−（トリフルオロメチル）ピリダジン−３−イルオキシ、ピラジン−２−イルオキシ、５−アミノ−ピラジン−２−イルオキシ、３−（ピリジン−４−イル）プロポキシ、３−（ピリジン−３−イル）プロポキシ、５−（メチルスルホニル）ピリミジン−２−イル、６−（メチルカルバモイル）ピリダジン−３−イル、および６−カルバモイルピリダジン−３−イルが含まれ得る。
【００２７】
用語「複素環」または「複素環式」は、炭素原子と、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子とからなる安定な３〜１８員環（ラジカル）を指す。本出願では、複素環は、単環式またはポリ環式環系であってよく、これらには、縮合、架橋、またはスピロ環系が含まれ得、複素環中の窒素、炭素、または硫黄原子は、酸化されていてもよく、窒素原子は、四級化されていてもよく、環は、部分的に、または完全に飽和されていてよい。そのような複素環の例には、限定ではないが、アゼピニル、アゾカニル、ピラニル、ジオキサニル、ジチアニル、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロフリル、ジヒドロピロリジニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリジニル、オキシラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロピラニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、およびチアモルホリニルスルホンが含まれる。さらなる複素環およびヘテロアリールは、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＫａｔｒｉｔｚｋｙら編、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｔｈｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｖｏｌ．  １〜８、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．（１９８４）に記載されている。
【００２８】
用語「アルコキシ」は、酸素を介して親構造に結合している直鎖、分枝、もしくは環式配置またはその組み合わせの１〜８個の炭素原子を含む基を意味する。例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロヘキシルオキシ、ヘプトキシなどが含まれる。低級アルコキシは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。本特許出願では、アルコキシにはまた、環を形成するように、各酸素原子が、メチレンジオキシまたはエチレンジオキシ基が結合している原子、鎖、または環に結合しているメチレンジオキシおよびエチレンジオキシが含まれる。したがって、例えば、アルコキシによって置換されているフェニルは、例えば、
2016514157.tif 000017
であってよい。
【００２９】
「アルコキシ」のアルキル基がハロゲンで１〜３回置換されている場合、その「アルコキシ」基には、ＯＣＦ３、ＯＣＦ２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＦ３、ＯＣＨ２ＣＦ２Ｈなどが含まれる。
【００３０】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを意味する。
【００３１】
用語「置換された」または原子の「置換」は、指定の原子の正常原子価を超えないことを条件として、指定された原子の上の１個または複数個の水素が、示されている群からの選択肢で置き換えられていることを意味する。「非置換」原子は、その原子価によって規定される水素原子をすべて持っている。置換基がケトまたはオキソ（すなわち、＝Ｏ）である場合、その原子上の２個の水素が置き換えられている。置換基および／または変項の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容され、「安定な化合物」または「安定な構造」とは、反応混合物から有用な純度までの単離、および有効な治療薬への製剤化に耐えるために十分に強固である化合物を意味する。本明細書で使用する場合、原子または基が複数回置換されていてもよい場合、そのような置換はそれぞれ、独立に選択される。
【００３２】
用語「本発明の化合物」および同等の表現は、本明細書において上記で記載したとおりの一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物を包含することが意味されている。また、内容が許容する場合には、薬学的に許容される塩および溶媒和物、例えば、水和物、さらには、任意の立体異性体型、または任意の比でのその化合物の任意のそのような形態の混合物が企図されている。同様に、中間体についての言及は、それら自体が請求されているかどうかにかかわらず、内容が許容する場合には、それらの塩および溶媒和物を包含することが意図されている。明確であることを目的として、内容が許容する特定の事例が、時に、文中で示されるが、これらの事例は、純粋に実例であって、内容が許容する他の事例を排除することは意図されていない。
【００３３】
用語「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の相対的に非毒性の無機酸および有機酸付加塩、ならびに塩基付加塩を意味する。これらの塩は、化合物の最終の単離および精製の間にその場で調製することができる。特に、酸付加塩は、別に、その遊離塩基形態の精製化合物を適切な有機酸または無機酸と反応させ、そうして形成された塩を単離することによって調製することができる。代表的な酸付加塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプト酸塩、ラクチオビオン酸塩（ｌａｃｔｉｏｂｉｏｎａｔｅ）、スルファミン酸塩、マロン酸塩、サリチル酸塩、プロピオン酸塩、メチレン−ビス−ｂ−ヒドロキシナフトエ酸塩、ゲンチジン酸塩、イセチオン酸塩、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸塩、メタン−スルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、およびキナ酸塩、ラウリルスルホン酸塩などが含まれる（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＢｅｒｇｅら、Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ、６６：１−ｓｕｐ．１９（１９７７）およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、１４１８頁、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９８５）を参照されたい）。塩基付加塩は、別に、その酸形態の精製化合物を適切な有機塩基または無機塩基と反応させ、そうして形成した塩を単離することによっても調製することができる。塩基付加塩には、薬学的に許容される金属およびアミン塩が含まれる。適切な金属塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、バリウム、亜鉛、マグネシウム、およびアルミニウム塩が含まれる。ナトリウムおよびカリウム塩が好ましい。適切な無機塩基付加塩は、金属塩基から調製され、その金属塩基には、水素化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウム、水酸化リチウム、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛が含まれる。適切なアミン塩基付加塩は、安定な塩を形成するために十分な塩基性度を有するアミンから調製され、それには好ましくは、医学的使用についてのその低い毒性および許容性によって、医薬品化学で頻繁に使用される次のアミンが含まれる：アンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、リシン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、水酸化テトラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、ジベンジルアミン、エフェナミン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、ベンジルアミン、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、塩基性アミノ酸、例���ば、リシンおよびアルギニン、ならびにジシクロヘキシルアミンなど。
【００３４】
用語「治療有効量」は、所望の治療効果を生じさせる際に有効な本発明の化合物の量を記載することが意味されている。そのような量は一般に、決定および説明のために本明細書において示された記載を得た当業者の理解の十分に範囲内であるいくつかの因子によって変動する。これらには、限定ではないが：特定の対象、さらには、その年齢、体重、身長、全身の身体状態、および病歴、使用される特定の化合物、さらには、その中で製剤化される担体およびそのために選択される投与経路；ならびに処置される状態の性質および重症度が含まれる。
【００３５】
用語「医薬組成物」は、式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物と、投与様式の性質および剤形に応じて、防腐剤、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤、および分配剤などの薬学的に許容される担体、希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを含む群から選択される少なくとも１種の成分とを含む組成物を意味する。懸濁化剤の例には、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、およびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、およびトラガカント、またはこれらの物質の混合物が含まれる。微生物の作用の予防は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などによって保障され得る。また、等張化剤、例えば、糖、塩化ナトリウムなどを含むことが望ましいことがある。注射可能な医薬形態の持続性吸収は、吸収を遅延させる作用物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを使用することによって、もたらすことができる。適切な担体、希釈剤、溶媒、またはビヒクルの例には、水、エタノール、ポリオール、適切なその混合物、植物油（オリーブ油など）、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが含まれる。賦形剤の例には、ラクトース、乳糖、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、およびリン酸二カルシウムが含まれる。崩壊剤の例には、デンプン、アルギン酸、およびある種の複合ケイ酸塩が含まれる。滑沢剤の例には、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、さらには、高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。
【００３６】
用語「薬学的に許容される」は、正当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などを伴うことなく、ヒトおよび下級動物の細胞と接触させて使用するために適していて、合理的なベネフィット／リスク比で適合することを意味する。
【００３７】
用語「薬学的に許容される剤形」は、本発明の化合物の剤形を意味し、これには、例えば、錠剤、糖剤、散剤、エリキシル剤、シロップ剤、懸濁剤を含めた液状製剤、噴霧剤、吸入剤、錠剤、ロゼンジ剤、乳剤、液剤、顆粒剤、カプセル剤、および坐剤、さらにはリポソーム製剤を含めた注射用の液状製剤が含まれる。技術および配合は、一般に、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ  （１９８５）において見出すことができる。
【００３８】
本明細書において使用する用語「単環式」は、1個の環を有する分子構造を示す。本明細書で使用する用語「ポリ環式」または「多環式」は、これだけに限定されないが、縮合、架橋、またはスピロ環を含めた２個以上の環を有する分子構造を示す。
【００３９】
「保護する」、「脱保護する」、および「保護された」官能基に関連する専門用語が、本出願を通じて現れる。そのような専門用語は、当業者には十分に理解され、一連の試薬での連続する処理を伴うプロセスの状況において使用される。その状況では、保護基は、そうしないと官能基が反応してしまうが、反応が望ましくないプロセスステップの間に、その官能基をマスキングするために使用される基を指す。保護基は、そのステップでは反応を防止するが、後で、元の官能基を露出させるために、除去され得る。この除去または「脱保護」は、その官能基が干渉するであろう１つまたは複数の反応が完了した後に行われる。したがって、本明細書に記載のプロセスにおいてのように、試薬の順番が規定されている場合、当業者であれば、「保護基」として適しているであろう基を容易に想像することができる。この目的に適した基は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＧｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９１）などの化学の分野における標準的な教科書において検討されている。
【００４０】
用語「溶媒和物」は、適切な溶媒の分子が結晶格子中に組み込まれている固体状態の化合物を指す。治療投与に適した溶媒は、投与される投薬量で、生理学的に許容される。治療投与に適した溶媒の例は、エタノールおよび水である。水が溶媒であるとき、溶媒和物は、水和物と称される。一般に、溶媒和物は、化合物を適切な溶媒に溶かし、冷却または逆溶媒の使用によって溶媒和物を単離することによって形成される。溶媒和物を典型的には乾燥させるか、または周囲条件下で共沸させる。
【００４１】
用語「処置する方法」は、本明細書に記載の障害に関連した症状および／または作用からの寛解または解放を意味する。本明細書で使用する場合、患者の「処置」についての言及は、予防を含むことが意図されている。
【００４２】
この技術は、また、本明細書において開示する化合物の任意の塩基性窒素含有基の「四級化」を構想している。塩基性窒素は、例えば、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物などの低級アルキルハロゲン化物；ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルの硫酸エステルを含めたジアルキル硫酸エステル；デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステアリルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物などの長鎖ハロゲン化物；ならびにベンジルおよびフェネチルの臭化物を含めたアラルキルハロゲン化物を含めた当業者に公知の任意の作用物質で四級化することができる。そのような四級化によって、水溶性もしくは水分散性または油溶性もしくは油分散性の生成物を得ることができる。
【００４３】
置換基の一部の特性決定では、いくつかの置換基が組み合わさって、環を形成していてよいことが言及される。別段に述べないかぎり、そのような環は、様々な不飽和度（完全飽和から完全不飽和まで）を示してよく、ヘテロ原子を含んでよく、低級アルキルまたはアルコキシで置換されていてよいことが意図されている。
【００４４】
用語「リガンド」は、所望の領域または組織をターゲティングするために使用することができる分子を指す。リガンドは、リガンドおよびターゲットの固有の特性に基づき、所望の組織について親和性を有する。本明細書で使用する場合、「細胞ターゲティングリガンド」は、生体のある領域または組織内の特定の所望の細胞をターゲティングする。
【００４５】
用語「リンカー基」は、原子および２個以上の化学的官能基の鎖を有する化学的部分を指す。官能基は、生物学的ターゲットとの相互作用を担う断片を接続（または「連結」）させるために使用することができる。
【００４６】
用語「スペーサー」は、少なくとも二価である予め決定された長さの接続基を指す。本明細書に記載のコンジュゲート化合物中のスペーサーの長さは、治療薬について最大の放出プロファイルが達成されるように選択され、親水性および立体の問題の両方によって規定される。
【００４７】
本発明では、本発明の化合物は、リンカー基Ｊを含む。このリンカー基は、ＬをＸに連結させ得る任意の適切な化学的部分を含み得る。一実施形態では、Ｊは、長さ１〜約５０個の原子の飽和または不飽和の分枝または非分枝炭素鎖であり、これは、鎖のいずれの位置で置換されていてもよく、鎖中に１〜２５個のヘテロ原子を含んでよい。適切な場合による置換基には、これらだけに限定されないが、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、およびＯＲ９が含まれる。適切なヘテロ原子には、これらだけに限定されないが、Ｏ、Ｓ、およびＮが含まれる。ヘテロ原子は、存在する場合、Ｘに直接結合していてもよいし、炭素鎖内にあってもよい。
【００４８】
一実施形態では、Ｊは、−Ｚ−Ｙ２−Ｃ（Ｏ）−Ｙ１−であり；
Ｚは、
2016514157.tif 000018
であり［式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ２との結合点である］；
Ｙ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（Ｘ２−ＣＨ２−ＣＨ２）ｌ−であり；
Ｙ２は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレンまたは−（ＣＨ２ＣＨ２（Ｘ３））ｑ−であり；
Ｘ２は、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｘ３は、下記の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）（ＣＨ２）ｋ；
（３）Ｏ；および
（４）ＮＲ１２；
Ｒ１１は、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、もしくはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
ｋは、１〜３であり；
ｌは、１〜１０であり；かつ
ｑは、１〜１０である。
【００４９】
さらなる一実施形態では、Ｊは、−Ｚ−Ｙ３−であり、ここで、
Ｚは、
2016514157.tif 000019
であり［式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ３との結合点である］；
Ｙ３は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキレン、Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、Ｏ（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、Ｏ（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８カルボシクリル）、−（Ｃ３〜８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３〜８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−、および−（（Ｘ４）（Ｘ５）（ＣＨ２）ｒ（Ｘ６）（Ｘ７）（ＣＨ２）ｒ）ｓ−からなる群から選択され；
Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、およびＸ７は、それぞれ、結合、（ＣＨ２）ｋ、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、ＮＲ１９、Ｃ（Ｏ）Ｏ、およびＣ（Ｏ）ＮＲ１９からなる群から独立に選択され；
Ｒ１１は、Ｈか、それぞれハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、もしくはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、またはＣ１〜６ヒドロキシアルキルであり；
各ｒは、０〜１６であり；かつ
ｓは、１〜１０である。
【００５０】
別の実施形態では、Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎは、１〜５である。
【００５１】
また別の実施形態では、Ｊは、チオール含有スペーサーをさらに含む。チオール含有スペーサーの適切な例は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＡｌｌｅｙら、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  ｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ、１４：５２９〜５３７（２０１０）に記載されている。
【００５２】
さらなる一実施形態では、Ｌは、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、受容体リガンド、ホルモン、または成長因子である。特に、Ｌは、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ミニボディ、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、葉酸、ボンベシン、ＥＤＧ、トランスフェリン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来成長因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＦＧ−アルファ、ＴＦＧ−ベータ、ＶＧＦ、インスリン、ならびにインスリン様成長因子ＩおよびＩＩからなる群から選択され得る。Ｌについての一般的な結合方法は、例えば、アミン、チオール、リシン、およびカルボン酸を利用する。
【００５３】
本明細書における用語「抗体」は、最も広い意味において使用され、所望の生物学的活性を示すモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体断片に及ぶ。抗体は、マウス、ヒト、ヒト化、キメラ抗体であるか、または他の種に由来してよい。
【００５４】
抗体は、特異的な抗原を認識し、抗原に結合することができる、免疫系によって産生されるタンパク質である（その全体が参照により本明細書に組み込まれるＪａｎｅｗａｙら、「Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ＮＹ（２００１））。ターゲット抗原は一般に、複数の抗体上の相補性決定領域（ＣＤＲ）によって認識される、エピトープとも呼ばれる多数の結合部位を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は、異なる構造を有する。したがって、１つの抗原は、１つより多い対応する抗体を有することがある。
【００５５】
用語「抗体」はまた、全長免疫グロブリン分子、または全長免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、該当するターゲットの抗原またはその一部に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子を指し、そのようなターゲットには、これだけに限定されないが、癌細胞、または自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を産生する細胞が含まれる。本明細書において開示する免疫グロブリンは、免疫グロブリン分子の任意のタイプ(例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＡ)、クラス(例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２)、またはサブクラスであってよい。免疫グロブリンは、任意の種に由来してよい。一態様では、免疫グロブリンはヒト、マウス、またはウサギ起源のものである。
【００５６】
「抗体断片」は、全長抗体の一部、一般には、その抗原結合領域または可変領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ(ａｂ')２、およびＦｖ断片；ダイアボディ；線状抗体：Ｆａｂ発現ライブラリーによって生産される断片、抗イディオタイプ(抗Ｉｄ)抗体、ＣＤＲ、ＥＣＤ（細胞外ドメイン）、および癌細胞抗原、ウイルス抗原、または微生物抗原に免疫特異的に結合する上記のいずれかのエピトープ結合断片；単鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体が含まれる。
【００５７】
特定の一実施形態では、Ｌは、次の（１）〜（３５）から選択される１種または複数種の腫瘍関連抗原または細胞表面受容体に結合する抗体である：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体タイプＩＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮性抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質輸送体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、タイプＩＩナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂＨｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（タイプ１およびタイプ１様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンタイプＢ受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮定タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮性抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来成長因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン−バールウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２  Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）Ｅｐｈｂ２Ｒ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７７．１）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ−００１７６２．１）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α、Ｉｇβと共有結合的に相互作用し(ＣＤ７９Ｂ)、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関係するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染ならびに、おそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発生において役割を果たすＧタンパク質共役受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球に対してそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子(Ｉａ抗原)のβサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（細胞外ＡＴＰによってゲートされるイオンチャネルであるプリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５は、シナプス伝達および神経発生に関係し得、その欠損は、特発性の排尿筋不安定性の病態生理の一因となり得る、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（ロイシンリッチリピート(ＬＲＲ)ファミリーのタイプＩ膜タンパク質であるリンパ球抗原６４(ＲＰ１０５)は、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、その機能の欠損は、全身性エリテマトーデスの患者における疾患活性の増大に関連する、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｃ２タイプＩｇ様およびＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体であるＦｃ受容体様タンパク質１は、Ｂリンパ球分化において役割を有し得る、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；および
（３５）ＩＲＴＡ２（Ｂ細胞発生およびリンパ腫発生において役割を有し得る推定免疫受容体である免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２；一部のＢ細胞悪性腫瘍において、転座による当該遺伝子の調節解除が生じる、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１２５７１．１）。
【００５８】
他の適切な抗体は、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００５／０８２０２３に記載されている。
【００５９】
さらなる一実施形態では、Ｌは葉酸である。また別の実施形態では、Ｌは表皮成長因子である。
【００６０】
一実施形態では、Ｔは、ヒドロキシル含有薬物部分である。本明細書で使用する場合、用語「薬物」または「治療薬」は、その薬学的に許容される塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、およびサッカリン酸塩）を含み、さらには、無水形態、水和物形態、および溶媒和物形態、プロドラッグの形態、およびＡＰＩの個々に光学的に活性な鏡像異性体、さらには、ＡＰＩの多形での任意の医薬品活性成分（「ＡＰＩ」）を意味する。実際には、あらゆる薬物または治療薬を、本明細書に記載のコンジュゲート化合物へと形成することができる。一実施形態では、Ｔは、ＣＡＳ登録番号１１５８３４−２３−６（ＳＦ２４４６Ａ１）またはその誘導体もしくは類似体ではない。
【００６１】
別の実施形態では、薬物部分は、抗癌薬である。抗癌薬の適切な例には、これらだけに限定されないが、Ｎ８−アセチルスペルミジン、アクチノマイシン、９−アミノカンプトテシン、アミノプテリン、アングイジン、アントラサイクリン、オーリスタチン、ブレオマイシン、カリチアマイシン、カンプトテシン（ラクトンまたはラクトンの開環形態）、カルミノマイシン、ＣＣ−１０６５、クロファリビン（ｃｌｏｆａｒｉｂｉｎｅ）、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、シクロプロパベンゾインドール−４−オン（ＣＢＩ）、シタラビン、シトシンアラビノシド、ダウノルビシン、ジクロロメトトレキサート、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、ジフルオロヌクレオシド、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エピルビシン、エスペラミシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、イリノテカン、ロイロシデイン（ｌｅｕｒｏｓｉｄｅｉｎｅ）、ロイロシン、メイタンシン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトプテリン、メトトレキサート、マイトマイシンＡ、マイトマイシンＣ、モルホリン−ドキソルビシン、酪酸、シスプラチン、ジアセトキシペンチルドキソルビシン、マイタンシノール、カペシタビン、ロイプロリド、ビカルタミド、ゴセレリン、１７−ＡＡＧ、１７−ＤＭＡＧ、デス−アセチルビンブラスチン、ネモルビシン、ポドフィロトキシン、およびエトポシドまたはリン酸エトポシドなどのポドフィロトキシン誘導体、レチノイン酸、サポリン、タリソマイシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソールまたはパクリタキセルなどのタキサン、タキソテールまたはドセタキセル、およびタキソテールレチノイン酸、ならびにこれらの異性体、塩形態、および類似体、および誘導体が含まれる。
【００６２】
一実施形態では、薬物部分は、アングイジン、アントラサイクリン、モノメチルオーリスタチンＥなどのオーリスタチン誘導体、ブレオマイシン、カリチアマイシン、カンプトテシン（ラクトンまたはラクトンの開環形態）、カルミノマイシン、ＣＣ−１０６５、クロファリビン、シタラビン、シトシンアラビノシド、ダウノルビシン、ジフルオロヌクレオシド、エピルビシン、エスペラミシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、イリノテカン、ロイロシン、メイタンシン、マイタンシノール、カペシタビン、ロイプロリド、ビカルタミド、アルファ−アマニチン（またはアマトキシンファミリーメンバー）、ゴセレリン、１７−ＡＡＧ、１７−ＤＭＡＧ、デス−アセチルビンブラスチン、デス−アセチルビノレルビン、デス−アセチルビンフルニン、ネモルビシン、ポドフィロトキシン、およびエトポシドなどのポドフィロトキシン誘導体、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソールまたはパクリタキセルなどのタキサン、タキソテールまたはドセタキセル、およびタキソテールレチノイン酸、ならびにそれらの異性体、塩形態、および類似体、および誘導体からなる群から選択されるヒドロキシル含有抗癌薬である。
【００６３】
Ｔを構成し得る薬物部分の非限定的例には、抗うつ薬（例えば、セルトラリン、ベンラファキシン、パロキセチン、ブプロピオン、シタロプラム、フルオキセチン、ミルタザピン、エスシタロプラムなど）、抗統合失調症薬（例えば、オラナザピン（ｏｌａｎａｚａｐｉｎｅ）、リスペリドン、クエチアピン、アリピプラゾール、ジプラシドンなど）、および注意欠陥障害（ＡＤＤ）または注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）を処置するための薬剤（例えば、メチルフェニデート、アトモキセチン、アンフェタミン、デキストロアンフェタミンなど）などの精神治療薬；抗コレステロール薬（例えば、アトルバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、エゼチミベ、ロスバスタチン、フェノフィブラート  フルバスタチンなど）；心臓血管薬（例えば、アムロジピン、バルサルタン、ロサルタン、ヒドロクロロチアジド、メトプロロール、カンデサルタン、ラミプリル、イルベサルタン、アムロジピン、ベナゼプリル、ニフェジピン、カルベジロール、エナラプリル、テレミサルタン（ｔｅｌｅｍｉｓａｒｔａｎ）、キナプリル、メシル酸ドキサゾシン、フェロジピン、リシノプリルなど）；血液調節剤（ｂｌｏｏｄ  ｍｏｄｉｆｉｅｒ）（例えば、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、クロピドグレル、ペグフィルグラスチム、フィルグラスチム、エノキサパリン、因子ＶＩＩＡ、抗血友病因子、免疫グロブリンなど）；抗菌薬（例えば、アジスロマイシン、アモキシシリン、クラブラン酸、レボフロキサシン、クラリスロマイシン、セフトリアキソン、シプロフロキサシン、ピペラシリン、タゾバクタムナトリウム、イミペネム、シラスタチン、リネゾリド、メロペネム、セフロキシム、モキシフロキサシンなど）、抗ウイルス薬（例えば、ラミブジン、ジドブジン、バラシクロビル、ペグインターフェロン、ロピナビル、リトナビル、テノフォビル、エファビレンツ、アバカビル、ラミブジン、ジドブジン、アタザナビルなど）、および抗真菌薬（例えば、テルビナフィン、フルコナゾール、イトラコナゾール、酢酸カスポファンギンなど）などの抗感染薬；胃腸障害を処置するための薬物（例えば、エソメプラゾール、ランソプラゾール、オメプラゾール、アントプラゾール（ａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ）、ラベプラゾール、ラニチジン、オンダンセトロンなど）；呼吸薬（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ）（例えば、フルチカゾン、サルメテロール、モンテルカスト、ブデソニド、ホルモテロール、フェキソフェナジン、セチリジン、デスロラタジン、フロ酸モメタゾン、チオトロピウム、アルブテロール、イプラトロピウム、パリビズマブなど）；抗関節炎薬（例えば、セレコキシブ、インフリキシマブ、エタネルセプト、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、アダリムマブ、メロキシカム、ジクロフェナク、フェンタニールなど）；抗癌薬（例えば、ナイトロジェンマスタード、シスプラチン、ドキソルビシン、ドセタキセル、アナストロゾール、トラスツズマブ、カペシタビン、レトロゾール、ロイプロリド、ビカルタミド、ゴセレリン、リツキシマブ、オキサリプラチン、ベバシズマブ、イリノテカン、パクリタキセル、カルボプラチン、イマチニブ、ゲムシタビン、テモゾロミド、ゲフィチニブなど）；糖尿病薬（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、インスリン、グリメピリド、ボグリボースなど）；抗痙攣薬（例えば、ガバペンチン、トピラマート、オキスカルバゼピン、カルバマゼピン、ラモトリジン、ジバルプロエクス、レベチラセタムなど）；骨代謝調節薬（例えば、アレンドロネート、ラロキシフェン、リセドロン酸、ゾレドロニック（ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ）など）；多発性硬化症薬（例えば、インターフェロン、グラチラマー、コポリマー−１など）；ホルモン（例えば、ソマトロピン、ノルエルゲストロミン、ノルエチンドロン、デソゲストレル、プロゲスチン、エストロゲン、オクトレオチド、レボチロキシン、テストステロン、ヒト成長ホルモンなど）；尿路薬（例えば、タムスロシン、フィナステリド、トルテロジンなど）；免疫抑制薬（例えば、ミコフェノール酸モフェチル、シクロスポリン、タクロリムスなど）；眼用製品（例えば、ラタノプロスト、ドルゾラミド、ボツリヌス菌、ベルテポルフィンなど）；ワクチン（例えば、肺炎球菌、肝炎、インフルエンザ、ジフテリアなど）；鎮静薬（例えば、ゾルピデム、ザレプロン、エスゾピクロンなど）；アルツハイマー病治療薬（例えば、ドネペキシル（ｄｏｎｅｐｅｘｉｌ）、リバスチグミン、タクリンなど）；性機能障害治療薬（例えば、イルデナフィル（ｉｌｄｅｎａｆｉｌ）、タダラフィル、アルプロスタジル、レボチロキシンなど）；麻酔薬（例えば、セボフルラン、プロポフォール、メピバカイン、ブピバカイン、ロピバカイン、リドカイン、ネサカイン、エチドカインなど）；片頭痛薬（例えば、スマトリプタン、アルモトリプタン、リザトリプタン、ナラトリプタンなど）；不妊薬（例えば、フォリトロピン、コリオゴナドトロピン、メノトロピン、瀘胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）など）；体重管理用製品（例えば、オルリスタット、デクスフェンフルラミン、シブトラミンなど）；ならびに上記で列挙した薬物の組み合わせが含まれる。他の実施形態では、Ｔは、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＰｈｙｓｉｃｉａｎ'ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，  Ｔｈｏｍｓｏｎ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、第５９  Ｂｋ＆Ｃｒ版（２００４）において見出される１種または複数種の他の薬物を含んでよい。
【００６４】
また、本発明のコンジュゲートを調製することを目的として、その化合物の反応をより簡便にするために、治療薬を化学的に修飾することができることは理解される。例えば、官能基を、治療薬の活性または他の特性に対して軽微か、または許容される作用を有する位置で治療薬に結合させてよい。
【００６５】
薬物部分のすべての立体異性体、すなわち、薬物部分のキラル炭素でのＲおよびＳ立体配置の任意の組み合わせが、本発明の化合物について企図されている。
【００６６】
さらなる一実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲート化合物は、構造：
2016514157.tif 000020
を有する。
【００６７】
別の実施形態では、式（Ｉ）のコンジュゲート化合物は、構造：
2016514157.tif 000021
を有する。
【００６８】
本発明の別の実施形態は、下記式：
2016514157.tif 000022
を有する化合物に関する
［式中、
波線は、結合点の部位を示し：
Ｊは、リンカー基であり；
Ｘは、次の（１）〜（４）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）Ｏ；
（３）
2016514157.tif 000023
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（４）
2016514157.tif 000024
（これは、独立に、Ｒ８で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｑは、−（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＲ１ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１ＣＨ２ＣＨ２−であり；
Ｒ１は、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６、または−Ｎ（ＣＯＲ２）Ｒ７であり；
Ｒ２は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ３は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、または−ＣＯＲ４であり；
Ｒ４は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、またはＣ３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ５は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ６は、Ｈか、またはＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであるか；または
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｒ７は、Ｈか、それぞれＲ８で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ８は、Ｈ、ＮＯ２、ＣＮ、ハロゲン、オキソ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ＣＯＯＲ９、ＣＯＲ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、ＣＯＯＮＲ９Ｒ１０、ＳＯ２Ｒ９、ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０、またはＯＲ９であり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１０は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＲ３であり；かつ
ｎは、１〜５である］。
【００６９】
本発明のまた別の実施形態は、式（ＩＩＩ）：
2016514157.tif 000025
のコンジュゲート化合物に関する
［式中、
Ｌは、細胞ターゲティングリガンドであり；
Ｔは、治療薬であり；
Ｊは、リンカー基であるが、ただし、Ｘが結合である場合、Ｊは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ３、Ｓ、またはカルボキシルで、ケイ素原子に直接結合することはできず、ケイ素原子と共に加水分解的に安定な炭素結合を形成していることを条件とし；
Ｘは、次の（１）〜（３）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）
2016514157.tif 000026
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（３）
2016514157.tif 000027
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｒ１３およびＲ１４は、それぞれＲ１６で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールからなる群から独立に選択され；
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、オキソ、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ１７、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、またはＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８であり；
Ｒ１６は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１７、ＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、−ＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１７は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１８は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ１７およびＲ１８は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよく；
ｖは、１〜８である］。
【００７０】
一実施形態では、Ｘは、結合であり、Ｊは、Ｓｉと共に加水分解的に安定な炭素結合を形成する。本明細書で使用する場合、加水分解的に安定な炭素結合は、細胞内で、特に、低ｐＨで加水分解されることはない。
【００７１】
一実施形態では、Ｒ１３およびＲ１４はそれぞれ、Ｃ１〜６アルキルまたはフェニルである。
【００７２】
別の実施形態では、式（ＩＩＩ）のコンジュゲート化合物は、構造：
2016514157.tif 000028
を有する。
【００７３】
さらなる一実施形態では、式（ＩＩＩ）のコンジュゲート化合物は、構造：
2016514157.tif 000029
を有する。
【００７４】
本発明の別の態様は、下記式：
2016514157.tif 000030
を有する化合物に関する
［式中、
波線は、結合点の部位を示し；
Ｊは、リンカー基であるが、ただし、Ｘが結合である場合、Ｊは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−ＣＨ３、Ｓ、またはカルボキシルで、ケイ素原子に直接結合することはできず、ケイ素原子と共に加水分解的に安定な炭素結合を形成していることを条件とし；
Ｘは、次の（１）〜（３）からなる群から独立に選択され：
（１）結合；
（２）
2016514157.tif 000031
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；および
（３）
2016514157.tif 000032
（これは、独立に、Ｒ１５で１〜２回置換されていてもよく、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｊとの結合点であり、＊＊は、Ｓｉとの結合点である）；
Ｒ１３およびＲ１４は、それぞれＲ１６で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立に選択され；
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、オキソ、アリール、ヘテロアリール、ＯＲ１７、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、またはＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８であり；
Ｒ１６は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルアルキル、ＣＮ、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１７、ＮＲ１７Ｒ１８、ＣＯＯＲ１７、ＣＯＲ１７、ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、ＳＯ２Ｒ１７、−ＳＯ２ＮＲ１７Ｒ１８、アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ１７は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよく；
Ｒ１８は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり、上記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ４アルコキシで１〜３回置換されていてもよいか；または
Ｒ１７およびＲ１８は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜７員複素環を形成しており、これは、飽和でも不飽和でもよく、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含み、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、オキソ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ４アルコキシからなる群から、その出現毎に独立に選択される置換基で１〜４回置換されていてもよい］。
【００７５】
これらの実施形態の範囲内では、Ｒ１〜Ｒ１９、Ｌ、Ｔ、Ｊ、Ｘ、Ｘ１〜Ｘ７、Ｑ、Ｚ、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３のいずれか１個における特定の好ましい置換基の選択が、Ｒ１〜Ｒ１９、Ｌ、Ｔ、Ｊ、Ｘ、Ｘ１〜Ｘ７、Ｑ、Ｚ、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３の他のいずれかにおける置換基の選択に影響を及ぼすことはない。すなわち、本明細書において提供する好ましい化合物は、任意の好ましい置換基を任意の位置に有する。
【００７６】
一実施形態は、本明細書に記載の式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物のいずれかの薬学的に許容される塩、または非塩形態に関する。一実施形態では、塩は、ＨＣｌ塩である。
【００７７】
本発明の化合物は、定義された条件下では安定であるが、例えば、生理学的温度（例えば、約３７℃）または酸性条件などの既定の条件下では分解され得る。一実施形態では、当該化合物は、細胞外では安定であるが；しかしながら、細胞に侵入すると、分解して、その非誘導体化形態または薬理学的に活性な形態の治療薬の放出が生じる。したがって、当該コンジュゲート化合物またはその医薬組成物は、コンジュゲート化合物の分解によって、治療薬の送達および放出をもたらす。用語「分解可能な」および「不安定な」は、１つまたは複数の定義された条件下では、本発明の化合物は安定であるが、１つまたは複数の異なる規定条件下では、その化合物は化学的変換（例えば、開裂）を受けるという、その化合物の性質を説明するために単に使用されている。この変換は、化合物の断片化の原因となる化合物内の１個または複数個の結合の破断によって例示され得る。変換はまた、規定条件下での化合物の部分的か、または完全な可溶化によって例示され得る。したがって、用語「分解可能な」または「不安定な」は、様々な方法によって変換される化合物を意味することができ、本説明を検討した当業者であれば、本発明の化合物を本明細書に記載の様々な使用に従って分解し得る様々な方法を構想することができ、そのような方法はすべて本発明に包含される。様々な実施形態では、この分解は、次の条件の１つまたは複数に依存し得る：酵素的開裂；ｐＨ；放射線；イオン強度；酸化；還元；温度；交番磁界；交番電界；それらの組み合わせなど。
【００７８】
一実施形態では、本発明の化合物は、「ｐＨ不安定性化合物」または「酸不安定性化合物」と記載され得る。ｐＨ不安定性化合物は、ｐＨの変化に関係して（上記のとおり）化学的に変換され得る化合物を意味すると理解される。したがって、あるｐＨ不安定性化合物は、特定の値未満のｐＨでは優れて安定であり得るが、ｐＨがその特定の値を超えて上昇すると分解し得る。同様に、あるｐＨ不安定性化合物は、特定の値を超えるｐＨでは優れて安定であり得るが、ｐＨがその特定の値未満に低下すると分解し得る。特定の一実施形態では、酸不安定性化合物は、７．９、７．８、７．７、７．６、７．５、７．４、７．３、７．２、７．１、または７．０のｐＨを超えると優れて安定であるが、この規定の値未満では分解する。他の実施形態では、酸不安定性化合物は、約７．５超、約７超、または約６．５超のｐＨでは優れて安定であるが、この値未満では分解する化合物を含み得る。
【００７９】
特定の実施形態では、本発明によるｐＨ不安定性化合物は、細胞ｐＨ条件で分解可能であると記載することができる。例えば、一部の実施形態では、本発明の化合物（および当該化合物を含む組成物）を特に、細胞エンドソームまたはリソソームにおいて典型的に見出されるｐＨ条件下で分解するように設計することができる。
【００８０】
本発明では、コンジュゲート化合物中のリガンドは、炭素、アミド、アミン、またはチオエーテル結合によって、Ｊに連結させることができる。治療薬は、治療薬に結合している化学的反応性官能基によって、コンジュゲート化合物の酸素に接続する。
【００８１】
この技術はまた、原子、例えば、ＣまたはＨの１個または複数個が、その原子の対応する放射性同位体（例えば、１４Ｃによって置き換えられたＣ、および３Ｈによって置き換えられたＨ）、またはその原子の安定同位体（例えば、１３Ｃによって置き換えられたＣ、または２Ｈによって置き換えられたＨ）によって置き換えられている式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物を含む。水素、炭素、リン、フッ素、ヨウ素、および塩素の放射性同位体には、それぞれ、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、１８Ｆ、３２Ｐ、３３Ｐ、１２５Ｉ、および３６Ｃｌが含まれる。これらの放射性同位体および／または他の原子の他の放射性同位体を含有する化合物は、本発明の範囲内である。放射標識された本明細書に記載の化合物およびそのプロドラッグは、一般に、当業者に周知の方法によって調製することができる。好都合には、そのような放射標識された化合物は、放射標識されていない試薬の代わりに、容易に入手可能な放射標識された試薬を使用することによって、実施例およびスキームにおいて開示する手順を実施することによって調製することができる。そのような化合物は、様々な有望な使用法を、例えば、特定のタンパク質に結合する有望な医薬の能力を決定する際の標準および試薬としての使用法を有する。加えて、安定同位体の場合には、そのような化合物は、式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物の生物学的特性、例えば、薬理学的および／または薬物動態特性を有利に変更する可能性を有し得る。化合物に放射性同位体を組み込むために適した部位の選択に関する詳細は、当業者に公知である。
【００８２】
別の実施形態は、治療有効量の式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物および薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物に関する。
【００８３】
この技術の別の態様は、癌を処置する方法に関する。この方法は、そのような処置を必要とする患者に、治療有効量の式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与することを伴う。
【００８４】
一実施形態では、患者は哺乳動物である。本明細書で使用する場合、用語「哺乳動物」は、ヒト、さらには、すべての他の哺乳動物を指す。さらに本明細書で使用する場合、用語「哺乳動物」には、「対象」または「患者」が含まれ、これは、温血動物を指す。さらなる一実施形態では、患者は、非ヒト哺乳動物である。
【００８５】
本明細書で使用する場合、用語「癌」および「癌性」は、未制御の細胞成長によって典型的に特徴づけられる哺乳動物における生理学的状態を指すか、またはそれを記載する。癌の例には、これらだけに限定されないが、黒色腫、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病、またはリンパ系腫瘍が含まれる。癌のより詳細な例には、扁平上皮細胞癌（例えば、上皮性扁平上皮細胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、および肺の扁平上皮癌を含めた肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含めた胃癌、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、さらには、頭頚部癌が含まれる。
【００８６】
一実施形態では、この方法は、５Ｔ４陽性癌の処置に関する。５Ｔ４陽性癌を処置するために本明細書に記載のコンジュゲートにおいて使用するために適した細胞ターゲティングリガンドおよび治療薬は、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２０１２／１３１５２７に記載されている。
【００８７】
本明細書で使用する場合、用語「治療有効」および「有効量」は、疾患または状態を処置する際に少なくとも多少の作用をもたらす医薬組成物の量と定義される。例えば、有効量は、インビボで新生物の細胞の成長を阻害するために必要な量である。新生物（例えば、癌）の治療的処置について本発明を実施するために使用される活性化合物（複数可）の有効量は、投与方法、対象の年齢、体重、および全身健康に応じて変化する。主治医または獣医師が適切な量および投与計画を決定することは、当技術分野の技量の範囲内である。そのような量は、「有効」量と称されることもある。
【００８８】
本発明のコンジュゲートに関連した「薬物部分」は、薬物（またはその活性化もしくは化学的に修飾された形態）が本発明のコンジュゲート化合物の残りの部分に共有結合することから生じる共有連結までの、未修飾の親活性薬剤の部分または残基を指す。薬物部分とコンジュゲート化合物の残りの部分との間の連結が加水分解されると、活性薬剤自体が放出される。
【００８９】
別の実施形態では、本発明の式（Ｉ）または（ＩＩＩ）のコンジュゲート化合物は、上記の治療薬で処置可能な任意の障害について、処置を必要とする患者に投与することができる。そのような障害には、これらだけに限定されないが、炎症性障害、抑うつ障害、アレルギー、貧血、自己免疫疾患、頸背部損傷、先天性欠損、血液障害、骨疾患、癌、循環疾患、歯の状態、糖尿病、消化および栄養障害、解離性障害、耳の状態、摂食障害、眼の状態、飲食起因の疾病、胃腸疾患、遺伝的障害、心疾患、熱および日光に関連した状態、ホルモン障害、衝動制御障害、感染症、昆虫刺傷および刺創、てんかん、通風、高血圧、マラリア、片頭痛、勃起機能不全、不安障害、腎臓疾患、白質ジストロフィー、肝臓疾患、精神衛生障害、代謝性疾患、気分障害、神経学的障害、人格障害、恐怖症、妊娠合併症、プリオン病、前立腺疾患、呼吸器疾患、性障害、性行為感染症、皮膚の状態、睡眠障害、言語障害、スポーツ損傷、甲状腺疾患、熱帯病、前庭障害、水系感染性疾病、および他の疾患が含まれる。
【００９０】
組み合わせ薬物または固定用量の組み合わせ（ｆｉｘｅｄ−ｄｏｓｅ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ：ＦＤＣ）は、特定の固定用量で利用可能な、単一の剤形に組み合わせた２種以上の活性成分の製剤である。固定用量の組み合わせ薬物製品は、患者の不快な負担（ｐｉｌｌ  ｂｕｒｄｅｎ）の低減、さらには、併用療法のあらゆる通常の優位性によって、服薬遵守を改善し得る。
【００９１】
本明細書に記載のとおりの複数の薬物部分を、例えば、ｍまたはｖが１を超える場合には、本発明のコンジュゲート化合物を使用して、または１種より多いコンジュゲート化合物を投与することによって、同時送達することができる。例えば、シスプラチンなどのＤＮＡ損傷を惹起する化学療法薬を、ｃｄｋ阻害薬療法などのＤＮＡ修復遮断薬と共に送達することで、化学療法薬の有効性を改善することができる。別の実施例では、これらの薬物の放出を、同時か、またはずらした時間での放出に個別に合わせることができるので、抗悪心薬または抗疼痛薬を化学療法薬と共に同時送達することで、利益を得ることができるであろう。
【００９２】
本発明の一部の実施形態では、ターゲット生体系または位置で利用可能な薬物濃度が、本発明のコンジュゲートの使用によって上昇する。そのような実施形態では、本発明は、制御送達のための系を提供する。
【００９３】
本発明の別の態様は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の生成化合物を調製するためのプロセスであって、式Ｖの第１の中間体：
2016514157.tif 000033
を、式（Ｉ）または（ＩＩ）の生成化合物を形成するために有効な条件下で処理することを含むプロセスに関する。
【００９４】
一実施形態では、第１の中間体（Ｖ）を、式（Ｉ）の生成化合物を形成するために有効な条件下で、ヒドロキシル基を有する治療薬（Ｔ）、リンカー基（Ｊ）、および細胞ターゲティングリガンド（Ｌ）と反応させる。
【００９５】
本発明のまた別の態様は、式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の生成化合物を調製するためのプロセスであって、式ＶＩの第１の中間体化合物：
2016514157.tif 000034
を、式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の生成化合物を形成するために有効な条件下で処理することを含むプロセスに関する。
【００９６】
一実施形態では、第１の中間体（ＶＩ）を、式（Ｉ）の生成化合物を形成するために有効な条件下で、ヒドロキシル基を有する治療薬（Ｔ）、リンカー基（Ｊ）、および細胞ターゲティングリガンド（Ｌ）と反応させる。
【００９７】
明確にするために、別々の実施形態の文脈において記載する本発明のいくつかの特徴を、単一の実施形態に組み合わせて提供することもできることは認められるであろう。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈において記載する本発明の様々な特徴を、別々に、または任意の適切な部分的組み合わせで提供することもできる。
【００９８】
本発明による化合物、例えば、出発物質、中間体、または生成物を、本明細書に記載のとおりに、または従来使用されてきたか、もしくは文献において記載されている方法を意味する公知の方法の適用もしくは適合によって調製する。
【００９９】
本発明による有用な化合物は、従来使用されてきたか、または文献、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＬａｒｏｃｋによって記載された文献、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、第２版、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）において記載されている方法を意味する公知の方法の適用または適合によって調製することができる。
【０１００】
本発明に記載の試薬および反応条件は、代替の試薬ならびに温度、濃度、および溶媒の選択などの反応条件を決して限定するものではない。当業者であれば、本発明の化合物に必要な化学的変換を達成するために、文献、例えば、Ｌａｒｏｃｋによって記載された文献、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、第２版、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）によって教示される代替試薬および変更反応条件を使用することができる。
【０１０１】
１個または複数個の窒素環原子を含有する基を含む式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物は、その基の１個または複数個の窒素環原子が、好ましくは、酢酸またはｍ−クロロペルオキシ安息香酸中、ジクロロメタンなどの不活性な溶媒中、ほぼ室温から還流までの温度、好ましくは、高温で、過酸、例えば、過酢酸と反応させることによって、Ｎ−オキシドに酸化されている対応する化合物に変換することができる。
【０１０２】
本明細書において以下に記載する反応では、反応への望ましくない関与を回避するために、最終生成物においては望ましい反応性官能基、例えば、ヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオ、カルボキシ、または他の基を保護する必要があることがある。従来の保護基を、標準的な実施に従って使用することができる（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＷｕｔｓら、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（第４版）、Ｗｉｌｅｙ（２００６）およびＭｃＯｍｉｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ（１９７３））。
【０１０３】
以下の化合物におけるＮ保護基の除去は、チオフェノール、および炭酸カリウムなどの塩基での処理によって達成することができる。
【０１０４】
置換基が水素である下記の化合物は、アルキル化、還元的アミノ化、または他の方法によって、置換基がアルキルなどである他の化合物に多様化させることができる。
【０１０５】
化合物は、当業者に周知のとおりのキラル塩と共に結晶化させることによって、鏡像異性的に純粋な（Ｒ）および（Ｓ）形態で得ることができるか、または別法では、市販のキラルカラムを使用するキラルＨＰＬＣによって単離することができる。
【０１０６】
式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物は、その塩形態に変換することができる。
【０１０７】
中間体（Ｖ）は、以下に概説する一般スキーム（スキーム１および２）によって調製することができる。
2016514157.tif 000035
【０１０８】
ジクロロシレタン中間体１を、ＬｉＡｌＨ４などの還元剤を用いて、シレタン中間２に変換する。次いで、シレタン中間体２を、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＤｏｋｌａｄｙ、Ａｋａｄｅｍｉｉ  Ｎａｕｋ  ＳＳＳＲ、１９８（１）：１１２〜１１４（１９７１）に開示されている技術に従ってＳｎＣｌ４を使用するか、またはその全体が参照により本明細書に組み込まれるＨａｒｔｈｃｏｃｋら、Ｊ．  Ｐｈｙｓ．  Ｃｈｅｍ．、８６（２２）：４３３５〜４３４２（１９８２）に開示されている技術に従ってＡｇＣｌを使用して、中間体３に変換することができる。
【０１０９】
次いで、スキーム２において以下に示すとおり、中間体３を、６０℃でＫａｒｓｔｅｄｔ触媒（Ｐｔ０）を使用して処理すると、クロロシラン中間体（Ｖ）を得ることができる。
2016514157.tif 000036
【０１１０】
別法では、中間体（Ｖ）は、以下に概説する一般スキーム（スキーム３）によって調製することができる。
2016514157.tif 000037
【０１１１】
化合物４は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．  ＬＬＣ、Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯから市販されている（ｎ＝１、カタログ番号１４０８０５；ｎ＝２、カタログ番号１２８００７）。化合物３は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＷｅｓｔ、Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．、７６：６０１２（１９５４）によって報告された方法によって得ることができる。ヒドロシリル化のための一般手順は、次を含む：ベンジルペンタ−４−エノエート（１当量）および環式塩化シリルＢの混合物に、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒（ＣＡＳ  番号：６８４７８−９２−２）溶液（キシレン中；約２％Ｐｔ）を添加する。反応容器を密封し、混合物を６０℃に加熱する。粗製の液体を、精製することなく使用する。
【０１１２】
中間体（ＶＩ）は、以下に概説する一般スキーム（スキーム４）によって調製することができる。
2016514157.tif 000038
【０１１３】
ペンタ−４−エン酸５を、室温でアセトンの存在下で、（ブロモメチル）ベンゼンおよび炭酸カリウムで処理して、中間体６を得る。次いで、中間体６を、６０℃でＫａｒｓｔｅｄｔ触媒（Ｐｔ０）の存在下で、７と反応させて、クロロシラン中間体（ＶＩ）を得る。Ｒ１３＝Ｒ１４＝ＣＨ３またはＲ１３＝Ｒ１４＝ＰｈまたはＲ１３＝Ｐｈ、Ｒ１４＝ＣＨ３である化合物７は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．  ＬＬＣ、Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯから市販されている（Ｒ１３＝Ｒ１４＝ＣＨ３、カタログ番号１４４２０７；Ｒ１３＝Ｒ１４＝Ｐｈ、カタログ番号６７３９３５；Ｒ１３＝Ｐｈ、Ｒ１４＝ＣＨ３、カタログ番号６８６４５）。中間体（ＶＩ）は、スキーム３に関して上記したヒドロシリル化手順に従って得ることができる。
【０１１４】
塩化シリルＶまたはＶＩは、スキーム６に記載されているとおりに、アルコール基とカップリングさせることができるか、または初めに、酸もしくは塩基の水溶液を使用して、シラノールに変換することができる。次いで、その結果生じたシラノールを引き続いて、様々な文献方法のいずれかによって活性化させることで、アルコール基とさらに反応させてシリルエーテル生成物を得ることができるケイ素試薬を得ることができる。トリフリン酸シリル、トリクロロアセトイミド酸シリル、シアン化シリルが、シリルエーテルの調製に有効であることが公知であるそのような活性化シリル試薬の例である。Ｇｒｅｅｎｅら、ＰＧＭ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版（１９９９）およびそこに記載の参照文献は、シリルエーテルの製造に有用なケイ素試薬および方法を記載しており、その全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１５】
中間体（ＶＩＩ）は、下記で概説する一般スキーム（スキーム５）によって調製することができる。
2016514157.tif 000039
【０１１６】
中間体（ＶＩＩ）は、Ｇｅｌｅｓｔ、Ｉｎｃ．、Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ、ＰＡから市販されている（ｎ＝１、カタログ番号ＳＩＣ２５２４．０；ｎ＝２、カタログ番号ＳＩＣ２５６４．０）。または、スキーム５においてのとおり、ＴＨＦ中のジクロロシラン１の氷冷溶液に、尿素およびグリコール酸ベンジルを添加する。室温で１〜４時間にわたって撹拌した後に、混合物を濃縮し、次いで、クロロホルムで希釈する。乾燥剤を添加し、混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮する。
【０１１７】
式（Ｉ）の化合物は、下記で概説する一般スキーム（スキーム６）によって調製することができる。
2016514157.tif 000040
【０１１８】
スキーム６に従って、ヒドロキシル基を有する治療薬Ｔ（８）を、溶媒（ジメチルホルムアミド）中、室温で、中間体（Ｖ）およびイミダゾールと反応させると、中間体９を生じさせることができる。治療薬Ｔの一例は、４−デスアセチルビンブラスチンであり、これは、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ公報ＷＯ２００８／１２００９８に報告されている方法によって得ることができる。スキーム６に示されているとおり、ＤＭＦ中の治療薬Ｔおよびイミダゾールの混合物に、粗製の塩化シリル中間体（Ｖ）または（ＶＩ）を添加した。水性後処理の後に、物質を、シリカゲルまたはＣ１８クロマトグラフィーのいずれかによって精製することができる。生成物構造を、質量分析および１Ｈ  ＮＭＲによって確認する。次いで、中間体９を、触媒（１０％Ｐｄ／Ｃ）の存在下で、水素化に供して、中間体１０を生じさせる。特に、酢酸エチル中の中間体９の溶液に、炭素上のパラジウムを添加する。反応混合物を、水素雰囲気下で約１〜５時間にわたって撹拌し、その後、濾過および濃縮する。粗製の残渣を、さらに精製することなく使用する。中間体１０を、中間体１１と反応させて、中間体１２を生じさせるが、これは、Ｘが結合であり、Ｊが−Ｚ−Ｙ２−Ｃ（Ｏ）−Ｙ１−であり、Ｚが
2016514157.tif 000041
である式（Ｉ）に対応する［式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ２との結合点であり；Ｙ１は、Ｃ１〜６アルキレンであり、Ｙ２は、−（ＣＨ２ＣＨ２（Ｘ３））２−であり、Ｘ３は、独立に、ＯおよびＮＲ１２であり、Ｒ１２はＨである］。特に、アミン塩のカップリングでは、アミド結合を用意するために、酸１０を、塩化メチレン中で過剰の塩基（Ｎ−メチルモルホリン）、ＥＤＣＩ、および１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１１）のＴＦＡ塩と混合する。１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンのＴＦＡ塩は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＷｅｂｅｒら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、１：４３１（１９９０）によって報告された方法によって、かつ、スキーム６において記載したとおりに得ることができる。別法では、酸１０の活性化エステルを調製し、次いで、適切な溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＣＨ２Ｃｌ２）中でアミンと反応させることができる。酸１０を、ＥＤＣＩ、触媒量のＤＭＡＰ、および塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）、ならびに適切なＲＯＨ部分（例えば、ペンタフルオロフェノール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはｐ−ニトロフェノール）で処理して、活性化エステルを得る。式（Ｉ）の化合物を生じさせるために、中間体１２のマレミド（ｍａｌｅｍｉｄｅ）部分を、所望の細胞ターゲティングリガンドＬと反応させる。マレイミドを捕捉し、１３を生じさせるために、アセトニトリル：０．０１ＭのＰＢＳ緩衝剤（２：１）中の１２の混合物に、過剰のメチル−３−メルカプトプロピオナートを添加する。１０分間にわたって撹拌した後に、反応混合物を濃縮し、水性後処理に供する。その結果生じた粗製の残渣を、Ｃ１８クロマトグラフィーによって精製する。生成物の構造を、質量分析および１Ｈ  ＮＭＲによって確認する。
【０１１９】
式（ＩＩＩ）の化合物は、下記で概説する一般スキーム（スキーム７）によって、かつスキーム６に関して詳細に記載したとおりに調製することができる。
2016514157.tif 000042
【０１２０】
スキーム７に従って、ヒドロキシル基を有する治療薬Ｔ（８）を、溶媒（ジメチルホルムアミド）中、室温で、中間体（ＶＩ）およびイミダゾールと反応させると、中間体１６を生じさせることができる。次いで、中間体１６を、触媒（１０％Ｐｄ／Ｃ）の存在下で水素化に供して、中間体１７を生じさせる。中間体１７を中間体１１と反応させて、中間体１８を生じさせるが、これは、Ｘが結合であり、Ｊが−Ｚ−Ｙ２−Ｃ（Ｏ）−Ｙ１−であり、Ｚが
2016514157.tif 000043
である式（ＩＩＩ）に対応する［式中、波線は、結合点の部位を示し、＊は、Ｌとの結合点であり、＊＊は、Ｙ２との結合点であり；Ｙ１は、Ｃ１〜６アルキレンであり、Ｙ２は、−（ＣＨ２ＣＨ２（Ｘ３））２−であり、Ｘ３は、独立に、ＯおよびＮＲ１２であり、Ｒ１２はＨである］。式（ＩＩＩ）の化合物を生じさせるためには、中間体１８のマレミド部分を、所望の細胞ターゲティングリガンドＬと反応させる。
【０１２１】
以下のスキーム８に示すとおり：
2016514157.tif 000044
Ｏ−シリル化のために、ＤＭＦ中の１９およびイミダゾールの混合物に、塩化シリル（Ｖ）、（ＶＩ）、または（ＶＩＩ）を添加する。濃縮または水性後処理のいずれかの後に、物質を、シリカゲルまたはＣ１８クロマトグラフィーのいずれかによって精製する。生成物の構造を、質量分析および１Ｈ  ＮＭＲによって確認する。スキーム８によるＯ−シリル化の例を、以下のスキーム９において示す：
2016514157.tif 000045
スキーム８および９は、中間体ＶＩに基づくＷを示しているが（簡潔にするために）、中間体ＶまたはＶＩＩも使用することができるであろう。
【０１２２】
式（ＩＩＩ）の化合物を製造するためのスキームの例を、以下のスキーム１０において示す。
2016514157.tif 000046
【０１２３】
カルボン酸２１を、溶媒（ＤＭＦ）中、室温で、アミド合成のためのカップリング剤（例えば、２−（２−ピリドン−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート：ＴＰＴＵ）で活性化させ、必要な塩基（例えばトリエチルアミン）と共に（Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブチル１−メチル２−アミノペンタンジオアートヒドロクロリドで処理することができる。水性後処理の後に、物質を、シリカゲルまたはＣ１８クロマトグラフィーのいずれかによって精製する。生成物の構造を、質量分析および１Ｈ  ＮＭＲによって確認する。エステル２２は、溶媒（ＣＨ２Ｃｌ２）中、室温で、酸（トリフルオロ酢酸）で処理することによって、脱保護することができる。水性後処理の後に、物質をシリカゲルまたはＣ１８クロマトグラフィーのいずれかによって精製する。生成物の構造を、質量分析および１Ｈ  ＮＭＲによって確認する。カルボン酸２３を、溶媒（ＤＭＦ）中、室温で、アミド合成用のカップリング剤（例えば、２−（２−ピリドン−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート）で活性化させ、モノ保護されたジアミン（例えば、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチル）カルバマート）で、必要な塩基（Ｅｔ３Ｎ）と共に処理することができる。次いで、アミン保護基を、酸（例えば、ＨＣｌ水溶液）で切断する。アミン塩のカップリングについてスキーム６に関して記載した方法を使用して、酸１０または１７の活性化エステル（スキーム１０は、酸１７の活性化エステルを示している）を、溶媒（例えば、ＤＭＦ）および塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ）中のアミン２４とカップリングさせると、生成物２５を得ることができる。
【０１２４】
本発明による化合物が不斉中心を含有することがあることは認められるであろう。これらの不斉中心は、独立に、ＲまたはＳ立体配置のいずれかにあってよく、そのような化合物は、偏光計において偏光面を回転させ得る。上記偏光面が、その化合物によって反時計回り方向に回転する場合、その化合物は、化合物の（−）立体異性体であると述べられる。上記偏光面が、その化合物によって時計回り方向に回転する場合、その化合物は、化合物の（＋）立体異性体であると述べられる。本発明による有用な特定の化合物は幾何異性も示し得ることは、当業者には明らかであろう。本発明は、本明細書において上記した式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物の個別の幾何異性体および立体異性体、ならびにラセミ混合物を含めたそれらの混合物を含むことを理解されたい。そのような異性体は、公知の方法、例えば、クロマトグラフィー技術および再結晶化技術の適用または適合によって、それらの混合物から分離することができるか、またはそれらは、それらの中間体の適切な異性体から別々に調製される。
【０１２５】
放射標識された本発明の化合物は、当業者に周知のいくつかの技術によって、例えば、１個または複数個の放射性同位体を組み込まれた出発物質を使用することによって合成される。炭素−１４、トリチウム、ヨウ素−１２１、または別の放射性同位体などの安定な放射性同位体が合成によって導入されている本発明の化合物は、有用な診断薬である。
【０１２６】
本発明は、特に、治療有効量の化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を含めた、本明細書に記載の化合物を含有する組成物を提供する。
【０１２７】
本発明の新規の併用療法を実施するために、一緒に有効に利用することができる複数の活性成分を（担体を伴うか、または伴わずに）有するキットを提供することは、本発明のさらなる目的である。
【０１２８】
本発明によって利用することができる複数の活性成分を含むことから、有益な併用療法において利用するためにそれ自体で単独で有効な新規の医薬組成物を提供することは、本発明の別の目的である。
【０１２９】
本発明はまた、疾患の処置において有用な２種以上の活性成分を組み合わせているキットまたは単一パッケージを提供する。キットは、（単独で、または薬学的に許容される希釈剤または担体との組み合わせで）式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物および追加の活性成分を提供することができる。
【０１３０】
実際問題として、本発明の化合物は、一般に、非経口、静脈内、皮下、筋肉内、結腸、経鼻、腹腔内、直腸、または経口で投与することができる。
【０１３１】
本発明による生成物は、最も適切な経路による投与を可能にする形態で提供することができ、本発明はまた、ヒト医学または獣医学での使用に適した、少なくとも１種の本発明による生成物を含有する医薬組成物に関する。これらの組成物は、１種または複数種の薬学的に許容されるアジュバントまたは賦形剤を使用して、慣用の方法によって調製することができる。アジュバントは、特に、希釈剤、滅菌水性媒体、および様々な非毒性有機溶媒を含む。この組成物は、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、水性液剤もしくは懸濁剤、注射用液剤、エリキシル剤、またはシロップ剤の形態で提供することができ、薬学的に許容される製剤を得るために、甘味剤、香味剤、着色剤、または安定剤を含む群から選択される１種または複数種の薬剤を含有し得る。
【０１３２】
ビヒクルおよびビヒクル中での活性物質の含有率の選択は、一般に、生成物の溶解度および化学的特性、特定の投与様式、ならびに薬務で観察される条件に従って決定される。例えば、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムなどの賦形剤、およびデンプン、アルギン酸、および特定の複合ケイ酸塩などの崩壊剤を、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルクなどの滑沢剤と組み合わせて、錠剤を調製するために使用することができる。カプセル剤を調製するためには、ラクトースおよび高分子量ポリエチレングリコールを使用することが有利である。水性懸濁剤を使用する場合には、これは、乳化剤、または懸濁を促進する薬剤を含有することができる。スクロース、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、およびクロロホルム、またはそれらの混合物などの希釈剤も、使用することができる。
【０１３３】
非経口投与では、植物油、例えば、ゴマ油、落花生油、もしくはオリーブ油、または水およびプロピレングリコールなどの水性有機溶液、オレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステル、さらには、薬学的に許容される塩の滅菌水溶液中の本発明による生成物の乳剤、懸濁剤、または液剤を使用する。本発明による生成物の塩の溶液は、筋肉内または皮下注射による投与に特に有用である。純粋な蒸留水中の塩の溶液を含む水溶液も、静脈内投与のために使用することができるが、ただし、そのｐＨが適切に調整されていて、それらが、十分な量のグルコースまたは塩化ナトリウムで適正に緩衝され、等張性にされており、かつそれらが、加熱、照射、または精密濾過によって滅菌されていることを条件とする。
【０１３４】
本発明の化合物を含有する適切な組成物は、慣用の手段によって調製することができる。例えば、本発明の化合物は、噴霧器、または懸濁液もしくは溶液エアロゾルにおいて使用するために適した担体中に溶解または懸濁させることができるか、または乾燥粉末吸入器において使用するために適した固体担体上に吸収また吸着させることができる。
【０１３５】
直腸投与のための固体組成物には、公知の方法によって製剤化され、少なくとも１種の式（Ｉ）〜（ＩＶ）の化合物を含有する坐剤が含まれる。
【０１３６】
本発明の組成物中での活性成分の百分率は様々であってよく、適切な投薬量が得られるような割合を占めていることが必要である。明確には、複数の単位剤形を、ほぼ同時に投与することができる。使用される用量は、医師によって決定され、所望の治療効果、投与経路、および処置期間、ならびに患者の状態に左右される。成人では、その用量は、一般に、吸入では１日当たり約０．０１〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは、約０．０１〜約１０ｍｇ／体重ｋｇ、経口投与では１日当たり約０．０１〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは、０．１〜７０ｍｇ／体重ｋｇ、特には、０．５〜１０ｍｇ／体重ｋｇ、および静脈内投与では１日当たり約０．０１〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは、０．０１〜１０ｍｇ／体重ｋｇである。それぞれ個別の場合で、用量は、年齢、体重、全身の健康状態、および医薬生成物の有効性に影響を及ぼし得る他の特徴などの処置される対象に特有の因子によって決定される。
【０１３７】
本発明による生成物は、所望の治療効果を得るために必要なだけ頻繁に投与することができる。一部の患者は、より多いか、または少ない用量に迅速に応答することがあり、かなり少ない維持用量が適正であることもある。他の患者では、特定の患者それぞれの生理学的要求に従って、１日当たり１〜４用量程度での長期処置を行うことが必要なこともある。一般に、活性生成物を、１日当たり１〜４回、経口投与することができる。言うまでもなく、他の患者では、１日当たり１または２用量以下を処方することが必要であろう。
【実施例】
【０１３８】
次の実施例を、本発明の実施形態を例示するために提供するが、これらは、本発明の範囲を限定することを意図したものでは決してない。本発明は、実施例において見出される化合物に限定されることはなく、本発明の範囲内に該当する多くの他の化合物も、上記の合成スキームにおいて述べた手順を使用して調製することができる。これらの方法を使用して、追加の本発明の化合物を調製することは、化学分野の当業者には明らかであろう。
【０１３９】
実施例１、一般手順
別段に述べない限り、試薬および溶媒は、市場供給者から受け取ったままで使用した。陽子核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ分光計で３００または５００ＭＨｚで得た。スペクトルは、ｐｐｍ（δ）で示され、結合定数Ｊは、ヘルツで報告される。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内標準として使用した。質量スペクトルを、Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱ検出器シングル四重極質量分析計（ＥＳＩ）を使用して収集した。標準的な溶媒勾配プログラムの方法Ａまたは方法Ｂを使用し、２５４ｎｍでのＵＶ検出で、Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２５０×４．６ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）を使用して、高性能液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）分析を得た：
方法Ａ：
2016514157.tif 000047
Ａ＝０．１％トリフルオロ酢酸を含有する水
Ｂ＝０．１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリル
方法Ｂ：
2016514157.tif 000048
Ａ＝０．１％トリフルオロ酢酸を含有する水
Ｂ＝０．１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリル
【０１４０】
実施例２、ベンジル５−（クロロジメチルシリル）ペンタノアートの調製
2016514157.tif 000049
クロロジメチルシラン（０．７３０ｇ；６．５７ｍｍｏｌ）およびベンジルペンタ−４−エノアート（１．２５ｇ；６．５７ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下で、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒溶液（キシレン中；約２％Ｐｔ）１滴を添加した。反応容器を密封し、混合物を６０℃に１３．５時間にわたって加熱した。粗製の液体を、精製することなく使用した。
【０１４１】
実施例３、ベンジル５−（クロロジフェニルシリル）ペンタノアートの調製
2016514157.tif 000050
クロロジフェニルシラン（０．４９ｇ；２．５８ｍｍｏｌ）およびベンジルペンタ−４−エノアート（０．５０ｇ；２．５８ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下で、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒溶液（キシレン中；約２％Ｐｔ）２滴を添加した。反応容器を密封し、混合物を６０℃に１５時間にわたって加熱した。粗製の液体を、精製することなく使用した。
【０１４２】
実施例４、ベンジル５−（１−クロロシリナン（ｓｉｌｉｎａｎ）−１−イル）ペンタノアートの調製
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粗製の１−クロロシリナン（０．３５ｇ）およびベンジルペンタ−４−エノアート（０．５０ｇ；２．６３ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下で、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒溶液（キシレン中；約２％Ｐｔ）２滴を添加した。反応容器を密封し、混合物を６０℃に１６時間にわたって加熱した。粗製の液体を、精製することなく使用した。
【０１４３】
実施例５、ベンジル５−（１−クロロシロラン（ｓｉｌｏｌａｎ）−１−イル）ペンタノアートの調製
2016514157.tif 000052
粗製の１−クロロシロラン（０．３１７ｇ）およびベンジルペンタ−４−エノアート（０．５０ｇ；２．６３ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下で、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒溶液（キシレン中；約２％Ｐｔ）２滴を添加した。反応容器を密封し、混合物を６０℃に１８時間にわたって加熱した。粗製の液体を、精製することなく使用した。
【０１４４】
実施例６、ベンジル２−（（１−クロロシリナン−１−イル）オキシ）アセテートの調製
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無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のシクロペンタメチレンジクロロシラン（０．５ｍＬ；３．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、尿素（０．２４６ｇ；４．１０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を０℃に冷却し、グリコール酸ベンジル（０．４８ｍＬ；３．４２ｍｍｏｌ）を、１５分間かけて滴下で添加した。次いで、混合物を、氷浴から外し、室温で４０分間にわたって撹拌した。次いで、混合物を高真空下で濃縮し、クロロホルムで希釈した。水層を過剰のＮａ２ＳＯ４で吸収し、混合物を濾過した。濾液を薄黄色の粗製の液体に濃縮し、これを、さらに精製することなく使用した。
【０１４５】
実施例７、ベンジル２−（（１−クロロシロラン−１−イル）オキシ）アセテートの調製
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無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のシクロテトラメチレンジクロロシラン（０．５ｍＬ；３．８２  ｍＭｏｌ）の溶液に、尿素（０．２７５ｇ；４．５８ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を０℃に冷却し、次いで、グリコール酸ベンジル（０．５４ｍＬ；３．８２ｍｍｏｌ）を、７分間かけて滴下で添加した。次いで、混合物を氷浴から外し、室温で１時間にわたって撹拌した。次いで、二相の混合物を高真空下で濃縮し、クロロホルムで希釈した。次いで、水層を過剰のＮａ２ＳＯ４で吸収し、混合物を濾過した。濾液を、薄黄色の粗製の液体に濃縮し、これを、さらに精製することなく使用した。
【０１４６】
実施例８、１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオントリフルオロアセテートの調製
2016514157.tif 000055
その全体が、参照により本明細書に組み込まれるＷｅｂｅｒらによりＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、１：４３１（１９９０）および米国特許第５，０５３，５０３号において報告された方法によって、１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオントリフルオロアセテートを作製。
【０１４７】
実施例９、（Ｓ）−２−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルアミノ）−５−オキソペンタン酸の調製
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ステップＡ。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中のプテロイン酸ジヒドロクロリド（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブチル１−メチル２−アミノペンタンジオアートヒドロクロリド（１６２ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）に、２−（２−ピリドン−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（１９０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を１ポーションで添加した。反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を半分取ＨＰＬＣ（２５分かけて１：４〜０：１００のＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製して、（Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブチル１−メチル２−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）ペンタンジオアート（５５ｍｇ、３４％）を黄色の固体として得た。
2016514157.tif 000057
【０１４８】
ステップＢ。０℃に冷却した塩化メチレン（１０ｍＬ）中の（Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブチル１−メチル２−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）ペンタンジオアート（２３０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加した。反応物を周囲温度に徐々に加温し、１８時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を減圧下で濃縮して、粗製の（Ｓ）−４−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−５−メトキシ−５−オキソペンタン酸（２４２ｍｇ、＞１００％）を茶色のオイルとして得、これを、さらに精製することなく、次のステップで使用した：ＭＭ−ＡＰＣＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ＝４５６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４９】
ステップＣ。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−メトキシ−５−オキソペンタン酸（２４０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ、粗製）、トリエチルアミン（０．３ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）、およびｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルカルバマート（１５０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）に、２−（２−ピリドン−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（２６１ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を１ポーションで添加した。反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、生成物をジエチルエーテルで破砕し、吸引濾過によって収集した。固体を塩化メチレン（３０ｍＬ）で洗浄して、粗製の（Ｓ）−メチル１８−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−２，２−ジメチル−４，１５−ジオキソ−３，８，１１−トリオキサ−５，１４−ジアザノナデカン−１９−オアート（２２５ｍｇ、６２％）をオレンジ色から茶色の固体として得、これを、さらに精製することなく、次のステップで使用した：ＭＭ−ＡＰＣＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ＝６８４［Ｍ−Ｈ］−。
【０１５０】
ステップＤ。６Ｍ塩酸水溶液（２０ｍＬ）中の（Ｓ）−メチル１８−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−２，２−ジメチル−４，１５−ジオキソ−３，８，１１−トリオキサ−５，１４−ジアザノナデカン−１９−オアート（２２５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、粗製）を周囲温度で２時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を半分取ＨＰＬＣ（２５分かけて、０．０５％ＴＦＡを含有する０〜７０％Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製して、所望の酸およびメチルエステル（１９０ｍｇ）の混合物を黄色の固体として得た。この混合物に、水酸化リチウム（３０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を１：１のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物（６ｍＬ）と共に添加した。この混合物を周囲温度で２時間にわたって撹拌した。この時間の後に、ＴＨＦを減圧下で除去し、反応物を半分取ＨＰＬＣ（２５分かけて、０．０５％ＴＦＡを含有する０〜７０％Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製して、（Ｓ）−２−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチルアミノ）−５−オキソペンタン酸（１８５ｍｇ、１００％）を黄色の固体として得たが、これは、凍結乾燥から得た。
2016514157.tif 000058
【０１５１】
実施例１０、（Ｓ）−１−アミノ−１６−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘプタデカン−１７−オイック酸の調製
2016514157.tif 000059
ステップＡ。０℃に冷却した１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）中の（Ｓ）−４−アミノ−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸（１．５０ｇ、７．３８ｍｍｏｌ）に、水（２０ｍＬ）中の炭酸ナトリウム（１９６ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を、続いて、Ｆｍｏｃ塩化物（２．１１ｇ、８．１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、周囲温度に徐々に加温し、周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を、２Ｍ塩酸でやや酸性（ｐＨ＝６）にし、ｐＨを、１Ｍクエン酸（約８０ｍＬ）で約３に調整した。その結果生じた混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、ヘキサンから３：２の酢酸エチル／ヘキサン混合物で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸（３．１０ｇ、９９％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000060
【０１５２】
ステップＢ。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸（７２１ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチルカルバマート（５９５ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．９ｍＬ、５．２ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'−テトラメチル−Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスファート（１．２９ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を１ポーションで添加した。反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物をシリカ上に乾式装填し、ヘキサンから酢酸エチルで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−２４，２４−ジメチル−３，８，２２−トリオキソ−２，１２，１５，１８，２３−ペンタオキサ−４，９，２１−トリアザペンタコサン−５−カルボキシラート（１．１７ｇ、９９％）をオフホワイト色の固体として得た。
2016514157.tif 000061
【０１５３】
ステップＣ。０℃に冷却した１，４−ジオキサン（４５ｍＬ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−２４，２４−ジメチル−３，８，２２−トリオキソ−２，１２，１５，１８，２３−ペンタオキサ−４，９，２１−トリアザペンタコサン−５−カルボキシラート（１．１８ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）に、濃水酸化アンモニア（９．５ｍＬ、１３３ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下で添加した。反応物を０℃で２時間にわたって、次いで、周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物をシリカ上に乾式装填し、塩化メチレンから３：１７のメタノール／塩化メチレンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２１−アミノ−２，２−ジメチル−４，１８−ジオキソ−３，８，１１，１４−テトラオキサ−５，１７−ジアザドコサン−２２−オアート（８０２ｍｇ、９９％）をオフホワイト色の固体として得た。
2016514157.tif 000062
【０１５４】
ステップＤ。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のプテロイン酸ジヒドロクロリド（４２４ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．７５ｍＬ、５．５０ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中のプロパンホスホン酸無水物５０％溶液（１．３０ｍＬ、２．２３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を周囲温度で４５分間にわたって撹拌した後に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２１−アミノ−２，２−ジメチル−４，１８−ジオキソ−３，８，１１，１４−テトラオキサ−５，１７−ジアザドコサン−２２−オアート（８０２ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、濾過して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２１−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−２，２−ジメチル−４，１８−ジオキソ−３，８，１１，１４−テトラオキサ−５，１７−ジアザドコサン−２２−オアート（８４９ｍｇ、プテロイン酸との１：１混合物として得られた、５０％）を、茶色固体として得、これを、さらに精製することなく、次のステップで使用した：ＭＭ−ＡＰＣＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ＝７９４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１５５】
ステップＥ。（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２１−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−２，２−ジメチル−４，１８−ジオキソ−３，８，１１，１４−テトラオキサ−５，１７−ジアザドコサン−２２−オアート（４２５ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）に、６Ｍ塩酸水溶液（１０ｍＬ）を添加した。反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応は完了しなかった。反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶かした。その結果生じた混合物に、ＴＦＡ（７ｍＬ）を添加し、反応混合物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を６Ｍ塩酸水溶液（５０ｍＬ）で希釈し、珪藻土で濾過した。濾過ケークをメタノール（４０ｍＬ）ですすぎ、得られた濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を半分取ＨＰＬＣ（２５分かけて、０．０５％ＴＦＡを含有する１００：０〜３：７のＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製した。半分取ＨＰＬＣ（２５分かけて、０．０５％ＴＦＡを含有する１００：０〜３：７のＨ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によるさらなる精製が、純粋な（Ｓ）−１−アミノ−１６−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘプタデカン−１７−オイック酸（１２１ｍｇ、３６％）を黄色の固体として得るためには必要であり、これを、凍結乾燥によって得た。
2016514157.tif 000063
【０１５６】
実施例１１、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000064
ステップＡ。無水ＤＭＦ０．７ｍＬ中の４−デスアセチルビンブラスチン（１００ｍｇ；０．１３０ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１１１ｍｇ；１．６２５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のベンジル５−（１−クロロシリナン−１−イル）ペンタノアートの粗製の試料を添加した。合計２３３ｍｇの粗製の塩化シリルを、３時間かけて３ポーションで添加した。さらに１．５時間にわたって撹拌した後に、反応物をＨ２Ｏでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８、水中の１０〜１００％アセトニトリル、３５分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデカイノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート５４ｍｇ（３９％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000065
【０１５７】
ステップＢ。酢酸エチル７ｍＬ中の（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（９０ｍｇ；０．０８５ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌しながら過剰の炭素上の１０％パラジウム（９０ｍｇ）を添加した。懸濁液を水素雰囲気（バルーン圧力）下で２時間にわたって撹拌し、その後、セライトプラグで濾過した。セライトプラグを酢酸エチルで、次いで、メタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、その結果生じた粗製の５−（１−（（（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）ペンタン酸（７２ｍｇ；粗収率８８％）を、さらに精製することなく続行した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９６７．５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５８】
ステップＣ。ＣＨ２Ｃｌ２９ｍＬ中の粗製の５−（１−（（（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）ペンタン酸（３９ｍｇ；推定０．０４０ｍｍｏｌ）の氷冷溶液に、撹拌しながら４−メチルモルホリン（０．４４３ｍＬ；４．０３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、ＥＤＣＩ−ＨＣｌ（３１ｍｇ；０．１６１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（２２ｍｇ；０．１６１ｍｍｏｌ）を連続して添加した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２４ｍＬ中の粗製の１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオントリフルオロアセテート（１２０ｍｇ）の溶液を、混合物に滴下で添加した。添加の後に、混合物を室温に加温し、次いで。１８時間にわたって撹拌し、その後、Ｈ２Ｏでクエンチした。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。その結果生じた残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｃ１８、水中の１０〜１００％アセトニトリル、４０分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート２１ｍｇ（３７％、２ステップ）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000066
【０１５９】
実施例１２、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）シロラン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000067
無水ＤＭＦ０．７ｍＬ中の４−デスアセチルビンブラスチン（１００ｍｇ；０．１３０ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１１１ｍｇ；１．６２５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のベンジル５−（１−クロロシロラン−１−イル）ペンタノアートの粗製の試料を添加した。合計２００ｍｇの粗製の塩化シリルを、４時間かけて２ポーションで添加した。室温でさらに１．５時間にわたって撹拌した後に、反応物をＨ２Ｏでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８、水中１０〜１００％アセトニトリル、５５分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）シロラン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート２５ｍｇ（１８  ％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000068
【０１６０】
実施例１３、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）ジフェニルシリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000069
無水ＤＭＦ０．５ｍＬ中の４−デスアセチルビンブラスチン（７１ｍｇ；０．０９２ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（７８ｍｇ；１．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のベンジル５−（クロロジフェニルシリル）ペンタノアートの粗製の試料（１１３ｍｇ；０．２７７ｍＭｏｌ）を添加した。Ｎ２下で、室温で２時間にわたって撹拌した後に、反応物をＨ２Ｏでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８、水中の１０〜１００％アセトニトリル、５５分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）ジフェニルシリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート７７ｍｇ（７３％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000070
【０１６１】
実施例１４、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（（２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）（メチル）（フェニル）シリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（ジアステレオマーの混合物）の調製
2016514157.tif 000071
ステップＡ。無水ＤＭＦ０．６ｍＬ中の４−デスアセチルビンブラスチン（４５ｍｇ；０．０５８ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（５０ｍｇ；０．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のラセミのベンジル５−（クロロ（メチル）（フェニル）シリル）ペンタノアートの粗製の試料を添加した。合計１８１ｍｇの粗製の塩化シリルを、４．５時間かけて３ポーションで添加した。室温でさらに１．５時間にわたって撹拌した後に、反応物をＨ２Ｏでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、塩化メチレン中の０〜１０％メタノール、３０分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）（メチル）（フェニル）シリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートのジアステレオマー混合物５２ｍｇ（８２％）を黄色の固体として得た。ＬＣＭＳによって、この試料は、両方の立体異性体の１：１混合物であることが示された。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）重要な共鳴：  δ  ５．７６（ｄｄ、Ｊ＝１０．２、４．２Ｈｚ、１Ｈ；ジアステレオマー「ａ」での二置換オレフィン）、５．６６（ｄｄ、Ｊ＝１０．２、４．３Ｈｚ、１Ｈ；ジアステレオマー「ｂ」での二置換オレフィン）、５．４２（ｄｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ、１Ｈ；ジアステレオマー「ａ」での二置換オレフィン）、５．２０（ｄｄ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ；ジアステレオマー「ｂ」での二置換オレフィン）  ５．０８（ｓ、２×２Ｈ；ベンジルメチレンＣＨ２、両方のジアステレオマーで重複）、４．２８（ｓ、１Ｈ；ジアステレオマー「ａ」でのＨ４）、４．２３（ｓ、１Ｈ；ジアステレオマー「ｂ」でのＨ４）、ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １０７９．９（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ８８．９％（ＡＵＣ）、保持時間１０．２６分（方法Ｂ）。
【０１６２】
ステップＢ。ＥｔＯＡｃ８ｍＬ中の（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）（メチル）（フェニル）シリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートのジアステレオマー混合物（３４ｍｇ；０．０３１５ｍＭｏｌ）の溶液に、撹拌しながら１０％Ｐｄ／Ｃ（２５ｍｇ）を添加した。反応容器雰囲気をアルゴンガスでパージし、その後、Ｈ２でのパージを続けた。Ｈ２雰囲気を、バルーン装着によって維持し、混合物を室温において撹拌した。５時間の後に、反応容器雰囲気をアルゴンでパージし、その後、空気に曝露し、混合物をセライトプラグで濾過した。プラグをＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮して、５−（（（（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）（メチル）（フェニル）シリル）ペンタン酸（２５ｍｇ；粗収率８０％）を粗製の固体として得た。
【０１６３】
ステップＣ。粗製の５−（（（（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）（メチル）（フェニル）シリル）ペンタン酸（２５ｍｇ、推定０．０２５ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（９ｍＬ）に溶かし、０℃に冷却した。この溶液に、撹拌しながら４−メチルモルホリン（０．２７７ｍＬ；２．５２ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（１９ｍｇ；０．１０１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１４ｍｇ；０．１０１ｍｍｏｌ）を連続して添加した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２２ｍＬ中の粗製の１−（２−（２−アミノエトキシ）エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオントリフルオロアセテート（７５ｍｇ）の溶液を、混合物に滴下で添加した。添加の後に、反応混合物を室温に加温し、１６時間にわたって撹拌し、その後、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。その結果生じた残渣を、シリカクロマトグラフィーに供して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（（２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）（メチル）（フェニル）シリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートのジアステレオマー混合物１５．５ｍｇを、光沢のある黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）重要な共鳴：  δ  ６．６９（ｓ、２Ｈ、ジアステレオマー「ａ」でのマレイミドオレフィン）、６．６８（ｓ、２Ｈ、ジアステレオマー「ｂ」でのマレイミドオレフィン）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １１５５．５（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ  ６７．７％（ＡＵＣ）、保持時間８．３２／８．４０分（方法Ｂ）。
【０１６４】
実施例１５、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）ジメチルシリル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000072
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中の４−デスアセチルビンブラスチン（８０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、イミダゾール（１７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、およびベンジル５−（クロロジメチルシリル）ペンタノアート（３３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で１７．５時間にわたって撹拌した。反応混合物を、水（２ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×４ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（１２ｇＧｏｌｄカラム；ＣＨ２Ｃｌ２中の０〜１０％ＭｅＯＨの勾配）によって精製して、表題化合物を白色の固体（５６ｍｇ、５３％）として得た。
2016514157.tif 000073
【０１６５】
実施例１６、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４−（（１−（２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ）シロラン−１−イル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテートの調製
2016514157.tif 000074
無水ＤＭＦ０．３５ｍＬ中のパクリタキセル（３６ｍｇ；０．０４２ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（３４ｍｇ；０．５０５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のベンジル  ２−（（１−クロロシロラン−１−イル）オキシ）アセテートの粗製の試料を添加した。合計１０３ｍｇの粗製の塩化シリルを、３時間かけて２ポーションで添加した。室温でのさらに３時間の後に、反応物をＨ２Ｏでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４−（（１−（２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ）シロラン−１−イル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテート３３ｍｇ（７１％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000075
【０１６６】
実施例１７、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−（（１−（２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ）シリナン−１−イル）オキシ）−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４，１１−ジヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテートの調製
2016514157.tif 000076
無水ＤＭＦ０．３ｍＬ中のパクリタキセル（３８ｍｇ；０．０４４ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（３８ｍｇ；０．０５５６ｍＭｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量のベンジル２−（（１−クロロシリナン−１−イル）オキシ）アセテートの粗製の試料を添加した。合計１３５ｍｇの粗製の塩化シリルを３ポーションで、２１時間かけて添加した。さらに１時間にわたって撹拌した後に、反応物を減圧下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーによってそのまま精製して、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−（（１−（２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ）シリナン−１−イル）オキシ）−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４，１１−ジヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテート３２．８ｍｇ（６６％）を、光沢のある無色の固体として得た。
2016514157.tif 000077
【０１６７】
実施例１８、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）ジメチルシリル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテートの調製
2016514157.tif 000078
無水ＤＭＦ０．２５ｍＬ中のパクリタキセル（５２．５ｍｇ；０．０６１ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（４０．１ｍｇ；０．５９０ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、未決定の滴定量の粗製のベンジル５−（クロロジメチルシリル）ペンタノアートを添加した。合計１９７ｍｇの粗製の塩化シリルを４ポーションで、追加の１２ｍｇポーションのイミダゾールと共に２９時間かけて添加した。さらに１２時間にわたって撹拌した後に、反応混合物を減圧下で濃縮し、その結果生じた粗製物質を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中０〜５０％酢酸エチル、４０分での勾配）によって精製して、（２ａＲ，４Ｓ，４ａＳ，６Ｒ，９Ｓ，１１Ｓ，１２Ｓ，１２ｂＳ）−９−（（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ベンズアミド−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノイル）オキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−４−（（（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）ジメチルシリル）オキシ）−１１−ヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−１Ｈ−７，１１−メタノシクロデカ［３，４］ベンゾ［１，２−ｂ］オキセテ−６，１２ｂ−ジイルジアセテート３３ｍｇ（２７％）を、ろう状の白色の固体として得た。
2016514157.tif 000079
【０１６８】
実施例１９、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−４−（（１−（５−（（２−（２−（３−（（３−メトキシ−３−オキソプロピル）チオ）−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000080
アセトニトリル：０．０１Ｍ  ＰＢＳ緩衝液（２：１）中の（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（０．０１９ｍｇ；０．０１６７ｍｍｏｌ）の混合物に、撹拌しながらメチル−３−メルカプトプロピオナート（０．０３６ｍＬ；０．３３５ｍｍｏｌ）を添加した。２時間にわたって撹拌した後に、反応混合物を減圧下で濃縮し、その後、酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。その結果生じた残渣を、カラムクロマトグラフィー（Ｃ１８、水中の１０〜１００％アセトニトリル、５０分での勾配）によって精製して、（３ａＲ，３ａ１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，１０ｂＲ）−メチル３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−４−（（１−（５−（（２−（２−（３−（（３−メトキシ−３−オキソプロピル）チオ）−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート０．０１５ｍｇ（７２％）を白色の固体として得た。
2016514157.tif 000081
【０１６９】
実施例２０、（２Ｓ）−２−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−２０−（１−（（（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）−５，１６−ジオキソ−９，１２−ジオキサ−６，１５−ジアザイコサン−１−オイック酸の調製
2016514157.tif 000082
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−４−（（１−（５−オキソ−５−（ペルフルオロフェノキシ）ペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（２５ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１２ｍＬ、０．０７ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−５−（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンタン酸（２５ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１２ｍＬ、０．０７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温に加温し、窒素下で５時間にわたって撹拌した。Ｃ１８固体支持体を、反応物に添加し、溶媒を真空中で除去した。混合物を、逆相シリカゲルクロマトグラフィー（それぞれ０．０５％ＴＥＡを含有する５〜１００％アセトニトリル／水）によって精製した。生成物を、画分の直接凍結乾燥によって単離して、表題化合物を黄色の固体として得た。
2016514157.tif 000083
【０１７０】
実施例２１、（２Ｒ）−２−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−２３−（１−（（（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）−５，１９−ジオキソ−９，１２，１５−トリオキサ−６，１８−ジアザトリコサン−１−オイック酸の調製
2016514157.tif 000084
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（２５ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−１−アミノ−１６−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘプタデカン−１７−オイック酸（１４ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（約１ｍｇ）を添加した。５分後に、冷却浴を外し、反応物を室温でさらに４８時間にわたって撹拌した。反応物をＣ１８シリカゲルカラム上に直接装填し、これを、５〜１００％アセトニトリル／水（それぞれ０．０５％ＴＥＡを含有）で溶離した。生成物を、画分の直接凍結乾燥によって単離して、実施例２１を黄色の固体として得た。
2016514157.tif 000085
【０１７１】
実施例２２、（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−４−（（１−（５−オキソ−５−（ペルフルオロフェノキシ）ペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
2016514157.tif 000086
ステップＡ。酢酸エチル（１８ｍＬ）中の（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（１００ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間にわたってパージした。炭素上のパラジウム（７５ｍｇ、１０％Ｐｄ／Ｃ、５０％水）を添加し、混合物をさらに２分間にわたってパージした。反応物を水素バルーンでキャップし、室温で２．５時間にわたって撹拌した。反応物を窒素でパージし、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）を添加した。混合物をセライトで濾過し、濾過ケークを酢酸エチルおよびメタノールですすいだ。濾液を真空中で濃縮して、５−（１−（（（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）ペンタン酸（９４ｍｇ、収率１００％）を淡褐色の固体として得た。
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【０１７２】
ステップＢ。塩化メチレン（１ｍＬ）中の５−（１−（（（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）ペンタン酸（３５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０３１ｍＬ、０．１８ｍｍｏＬ）、ＤＭＡＰ（約１ｍｇ）、ペンタフルオロフェノール（１３ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温に加温し、１８時間にわたって撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム、およびブラインで連続的に洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗製の（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−４−（（１−（５−オキソ−５−（ペルフルオロフェノキシ）ペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（６０ｍｇ、理論収率の１５０％）を得、これをそのまま、次のステップで使用した。
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【０１７３】
実施例２３、（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラートの調製
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塩化メチレン（２ｍＬ）中の５−（１−（（（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−５−（メトキシカルボニル）−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−４−イル）オキシ）シリナン−１−イル）ペンタン酸（１００ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０９ｍＬ、０．５ｍｍｏＬ）、ＤＭＡＰ（約１ｍｇ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温に加温し、１７時間にわたって撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム、およびブラインで連続的に洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗製の（３ａＲ，４Ｒ，５Ｓ，５ａＲ，１０ｂＲ）−メチル４−（（１−（５−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−５−オキソペンチル）シリナン−１−イル）オキシ）−３ａ−エチル−９−（（５Ｓ，７Ｒ，９Ｓ）−５−エチル−５−ヒドロキシ−９−（メトキシカルボニル）−２，４，５，６，７，８，９，１０−オクタヒドロ−１Ｈ−３，７−メタノ［１］アザシクロウンデシノ［５，４−ｂ］インドール−９−イル）−５−ヒドロキシ−８−メトキシ−６−メチル−３ａ，３ａ１，４，５，５ａ，６，１１，１２−オクタヒドロ−１Ｈ−インドリジノ［８，１−ｃｄ］カルバゾール−５−カルボキシラート（１４６ｍｇ、理論の１４０％）を得、これをそのまま、次のステップで使用した。
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【０１７４】
実施例２４、シリルコンジュゲートでの開裂研究
シリルコンジュゲートの放出特性を研究するために、このコンジュゲートを、血液およびエンドソーム／リソソーム環境をそれぞれシミュレートするｐＨ７．４およびｐＨ４．５の両方で加水分解条件に供した。
【０１７５】
実施例１１（ステップＡ）、実施例１２、実施例１３、実施例１４（ステップＡ）、および実施例１５からのベンジルエステル中間体をそれぞれ、ＴＨＦ：０．０５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）の１：１混合物に溶かし、撹拌しながら３７℃に加熱した。混合物を、方法Ｂ（実施例１の一般手順を参照されたい）によってＴ＝１、２、３、４、５、７、および２４時間目にＨＰＬＣで分析した。アリコットを１：１のアセトニトリル：トリエチルアミン溶媒混合物中でクエンチし、加水分解反応を止め、ＨＰＬＣ分析の前に４８時間耐えさせた。１：１のアセトニトリル：トリエチルアミン中の実施例１２からのベンジルエステル中間体での制御安定性研究は、４８時間にわたって、加水分解の証拠を示さず、これによって、このトリエチルアミンクエンチが、分析期間の間、加水分解反応の停止において有効であることが実証された。一連の異なる加水分解速度が、様々な誘導体で２４時間にわたって観察され、これによって、ケイ素エーテルベースのリンカー技術のチューナビリティが実証された（図１を参照されたい）。
【０１７６】
実施例１２および実施例１５を、ＴＨＦ：０．０１Ｍ  ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中に溶かし、撹拌しながら２０時間超にわたって３７℃に加熱した。加水分解の証拠（例えば、親ビンカ）は観察されず、これによって、ｐＨ７．４でのこのコンジュゲートの良好な安定性が予言された。加えて、実施例１１を、メチル−３−メルカプトプロピオナートで捕捉して、バイオコンジュゲートに近づけた。その結果生じた化合物である実施例１９を加水分解条件に供すと、実施例１１からの対応するベンジルエステルに匹敵する速度で、親ビンカを放出することが見出され（ステップＡ）（図２を参照されたい）、これによって、各ベンジルエステル断片での加水分解速度が、対応するモデルバイオコンジュゲートの加水分解速度に近づき得ていることが裏付けられた。
【０１７７】
実施例１９をｐＨ７．４で処理すると（実施例１２および１５について上記のとおり）、２４時間後に、脱シリル化は観察されなかった。
【０１７８】
実施例２５、細胞増殖研究
細胞系および維持
葉酸受容体（ＦＲ）陽性ＫＢ細胞（ヒト）（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ（ＥＣＡＣＣ）［カタログ番号９４０５０４０８］から）またはＦＲ陰性ヒト肺癌Ａ５４９細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）［カタログ番号ＣＣＬ−１８５］から）を、Ｔ７５フラスコ内で、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号１６１４０−０７１）およびペニシリン／ストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号１５１４０−１２２）を含有する葉酸非含有ＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号２７０１６０２１）中、３７℃、５％ＣＯ２で維持した。
【０１７９】
細胞増殖アッセイ
細胞を、その維持培養から採取し、葉酸非含有ＲＰＭＩ１６４０培地１００μＬ中、１ウェル当たり１００００細胞の密度で、９６ウェルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２で２０〜２４時間にわたってインキュベートした。化合物で処理する３０分前に、使用済み培地を除去し、そのままか、葉酸１００μｍｏｌ／Ｌを補充されているかのいずれかの新鮮な葉酸非含有ＲＰＭＩ１６４０培地１００μＬに取り換えた。試験化合物を、そのＤＭＳＯストックから、培養培地中で３倍までその所望の最終濃度に希釈した。次いで、培地中の化合物溶液５０マイクロリットルまたは培地中のＤＭＳＯのみをウェルに添加し、細胞を３７℃で２時間にわたってインキュベートした。化合物での処理の後に、細胞を培地１００μＬで３回洗浄し、新鮮な培地１８０μＬと共に７２時間にわたってインキュベートした。細胞生存率を評価するために、ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ａ−１３２６１）２０μＬをウェルに添加し、プレートを３７℃で１時間にわたってさらにインキュベートした。ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試薬は、細胞浸透性色素であるレザズリンを含有し、これは青色で、事実上、非蛍光である。細胞に添加されると、これは、生細胞中のミトコンドリア酵素によって還元されて、高度に蛍光性の赤色のレゾルフィンになる。レザズリンの還元は、代謝活性な細胞の数に比例し、したがって、定量的に測定され得る。１時間にわたってＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試薬と共にインキュベーションした後に、レゾルフィン色素に対応する蛍光を、Ｓｙｎｅｒｇｙ４マルチモードマイクロプレートリーダー（Ｂｉｏｔｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）で、それぞれ５４０ｎｍおよび５９０ｎｍに設定された励起および発光波長を用いて読み取った。そのデータを、ＸＬＦｉｔを使用して解析し、細胞増殖の阻害百分率を計算した。
【０１８０】
対照化合物Ｚ−（Ｓ）−２−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−２０−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）−５，１６−ジオキソ−９，１２−ジオキサ−６，１５−ジアザイコサン−１−オイック酸トリエチルアンモニウム塩の調製
以下のスキーム１１に示されているとおりに、細胞アッセイにおける対照化合物として、化合物Ｚである加水分解開裂生成物を調製した：
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ステップＡ。粗製のベンジル５−（１−クロロシリナン−１−イル）ペンタノアート（４００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）に、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．３ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）を添加し、内容物を、１０分間にわたって音波処理した。この時間の後に、反応物を水（１ｍＬ）で希釈し、５分間音波処理した。この時間の後に、反応混合物を、水（１０ｍＬ）および酢酸エチル（２５ｍＬ）でさらに希釈した。有機層を水層から分離し、水層を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、４０分かけてヘキサンから１：４の酢酸エチル／ヘキサンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、ベンジル５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタノアート（２０９ｍｇ、５５％）を無色のオイルとして得た。
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【０１８１】
ステップＢ。エタノール（６ｍＬ）中のベンジル５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタノアート（２０５ｍｇ、０．６６９ｍｍｏｌ）に、活性炭上のパラジウム（１０％、湿潤、４１ｍｇ）を添加した。反応物を水素（１気圧）下、室温で、１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）によって濾過し、濾過ケークをメタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタン酸（１４０ｍｇ、９７％）を無色のオイルとして得た。
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【０１８２】
ステップＣ。酢酸エチル（５ｍＬ）中の５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタン酸（１３０ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１８６ｍｇ、０．９０１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を窒素下、周囲温度で、３０分間にわたって撹拌した。この時間の後に、４−ニトロフェノール（１００ｍｇ、０．７１９ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を周囲温度で１６時間にわたって撹拌した。この時間の後に、反応物を濾過して、すべての固体を除去し、濾過ケークを酢酸エチルで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、ヘキサンから１：３の酢酸エチル／ヘキサンで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、４−ニトロフェニル５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタノアート（１０６ｍｇ、５２％）を無色のオイルとして得た。
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【０１８３】
ステップＤ。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（４−（（（２−アミノ−４−ヒドロキシプテリジン−６−イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）−５−（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エチル）アミノ）−５−オキソペンタン酸トリフルオロ酢酸塩（３２ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０６ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の４−ニトロフェニル５−（１−ヒドロキシシリナン−１−イル）ペンタノアート（１９ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を周囲温度で７時間にわたって撹拌した。この時間の後に、溶媒を、減圧下での水（４×４ｍＬ）との共沸によって除去した。得られた残渣を水（２ｍＬ）中で希釈し、酢酸エチル（３ｍＬ×３）で抽出した。有機層を除去し、水層を減圧下で濃縮した。その結果生じた固体を水（３×６ｍＬ）で洗浄し、濾過し、次いで、０．１％トリエチルアミンを含有する水（８ｍＬ）に溶かした。その結果生じた溶液を、１５分かけて５：９５のアセトニトリル／水（０．１％トリエチルアミンを含有）からアセトニトリルで溶離する逆相カラムクロマトグラフィーによって精製して、（１０ｍｇ、２４％）を薄黄色の固体として得た。
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【０１８４】
結果
細胞増殖研究からの結果を、以下の表1において示す：
【０１８５】
（表１）ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ法による細胞増殖の阻害ａ
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ａＩＣ５０値はμＭで報告されている。ＩＣ５０値が生じ得なかった被験最高濃度（１０μＭ）での阻害百分率が丸かっこ内に示されている。ｂ６０％最大阻害が達成された。ＦＡ＝葉酸。インキュベーションは、新鮮な培地で４回洗浄する前に、試験物を細胞と共にインキュベートした時間である。
【０１８６】
好ましい実施形態を本明細書において図示および詳説したが、関連分野の当業者には、様々な変更、追加、置換などを、本発明の意図から逸脱することなく行うことができ、したがって、これらは、次の特許請求の範囲において定義するとおりの本発明の範囲内であると判断されることは明らかであろう。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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