(57)【要約】  本発明は、式(I)の化合物を開示する:  【化1】2016528269.tif 000212式中、R1、R2、R3、R4、L、及びXは、本明細書で定義されている通りである。本発明は、化合物、それらの製造方法、当該化合物を含む医薬組成物、並びに、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療、具体的には癌の予防及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。本発明はまた、本発明の化合物を投与することによる、前記疾患の予防及び／又は治療のための前記化合物を使用する治療方法をも開示する。【選択図】  なし
2016528269.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物、又はその医薬として許容し得る塩:
【化１】
2016528269.tif 000209
式中、
Xは、N、又はCHであり；
Lは、-NH(C=O)-、又は-C(=O)NH-であり；
R1は、
−  -CN、
−  ハロ、
−  1つ以上の独立に選択されたR6a基で任意に置換されたC1-4アルキル、
−  1つ以上の独立に選択されたR6b基で任意に置換されたC1-4アルコキシ、
−  C3-4シクロアルキル、
−  フェニル、
−  -SO2C1-4アルキル、又は
−  -NR7aR7b
であり；
R2は、H、シクロプロピル、(1つ以上のハロで任意に置換された) C1-4アルキル、又はC1-4アルコキシであり；
R3は、-CH3、-CH2CH3、又はClであり；
R4は、
−  1つのOHで任意に置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOH、並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOHで任意に置換されたC3-6シクロアルキル
であり；
各R6aは、
−  OH、
−  ハロ、又は
−  C1-4アルコキシ
であり；
各R6bは、
−  OH、
−  ハロ、
−  C1-4アルコキシ、
−  -NR8aR8b、又は
−  1つのC1-4アルキルで任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5〜6員のヘテロシクロアルキル
であり；
各R7a、R7bは、H、及びC1-4アルキルから独立に選択され；並びに
各R8a又はR8bは、H、及びC1-4アルキルから独立に選択される。
【請求項２】
前記化合物が式IIによる、請求項1記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩：
【化２】
2016528269.tif 000210
（式中、R1、R2、R3、R4及びLは、請求項１で定義されたとおりである）。
【請求項３】
式中、R1が-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、OH、F、Cl、-OCH3、又は-OCH2CH3から独立に選択された1つ以上によって置換されている、請求項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項４】
式中、R1が-OCH3、又は-OCH2CH3である、請求項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項５】
式中、R2が-CH3、-CH2CH3、-OCH3、又は-OCH2CH3である、請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項６】
前記化合物が式IIIaによる、請求項1又は2のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩：
【化３】
2016528269.tif 000211
（式中、X、L、R3、及びR4は、請求項１で定義されたとおりである。）
【請求項７】
式中、Lが-NH(C=O)-である、請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項８】
式中、Lが-C(=O)NH-である、請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項９】
式中、R4が1つのOHで置換されたC1-2アルキルである、請求項1〜8のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項１０】
式中、XがCHである、請求項1〜9のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項１１】
式中、XがNである、請求項1〜9のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項１２】
医薬として許容し得る担体及び医薬有効量の請求項1〜11のいずれか一項記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
さらなる治療剤を含む、請求項12記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記さらなる治療剤が、増殖性疾患を治療するための薬剤である、請求項13記載の医薬組成物。
【請求項１５】
医薬における使用のための、請求項1〜11のいずれか一項記載の化合物、又は請求項12〜14のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項１６】
増殖性疾患の予防、及び／又は治療における使用のための、請求項1〜11のいずれか一項記載の化合物、又は請求項12〜14のいずれか一項記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、化合物並びに、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
他の具体的な態様において、本発明の化合物は、受容体タンパク質チロシンキナーゼ（RTKs）の最大の既知のサブファミリーのメンバーであるエフリン（Eph）の阻害剤である。
【０００３】
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法、本発明の化合物を含む医薬組成物、本発明の化合物を投与することによる、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊を含む疾患の予防及び／又は治療方法を提供する。
【背景技術】
【０００４】
発明の背景
エフリン受容体（Eph）スーパーファミリーは、キナーゼ・ドメインにおいて65〜90％の且つ細胞外ドメインにおいて30〜70％の配列相同性を共有している。Ephスーパー・ファミリーの少なくとも15メンバーは、脊椎動物、ショウジョウバエ及びシノラブディス・エレガンスから同定されており、且つ、それは、それ自体が二つのサブグループに分けられている、受容体チロシンキナーゼ（RTKs）の最大のサブファミリーである。第一のグループは、リガンド結合親和性に基づいており、一方、第二のグループは、細胞外ドメインの構造に基づいている。
【０００５】
エフリン・リガンドは、以下において「Ephrin」と呼称され、且つ、以下において「Eph」と呼称されるエフリン受容体に結合する。
【０００６】
EphA（A1〜A9）は、一般的に、グリコシルホスファチジルイノシトールのアンカーを通じて原形質膜に結び付けられているEphrin Aメンバーに結合し、一方、EphB（B1〜B6）受容体は、一般的に、細胞膜を横断するEphrin Bメンバーに結合する。構造的に、Eph受容体は、リガンド結合の原因となる細胞外球状ドメイン、高システイン領域、二つのフィブロネクチンIII型繰返し、細胞膜を貫通している領域、及びチロシン・キナーゼ・ドメインを含む（Tandonらの文献、2011）。
【０００７】
Ephファミリー内において、受容体−リガンド結合は、当該ファミリーの各サブクラス間で区別なしに生じ、例えば、EphA4は高い親和性でEphrinBに結合する（Murai及びPasqualeの文献、2003）。さらに、Ephrinは、これらは膜結合タンパク質であるが、隣接する細胞間で、双方向性のシグナルを仲介する。隣接する細胞上でのEphとEphrinとの間の相互作用は、これらの分子のクラスタリングを促進し、これは、Eph RTKによって仲介されたチロシンリン酸化を伴って、前記シグナルの開始を導き、且つ、次に、様々な細胞内シグナル伝達経路の活性化をもたらす。
【０００８】
Ephrin−Ephシグナル伝達の役割は、CNS、神経回路網の発達の制御、軸索誘導及び神経系の修復において知られている（Pasqualeの文献、2008）。さらに、EphとEphrinの細胞−細胞接触依存性の機能は、正常な胚発生と恒常性の維持の間、しっかりと制御されている。しかしながら、腫瘍形成の間、細胞接触の喪失のために、正常なEphA2−Ephrin A1シグナル伝達は中断され、これがEphA2の過剰発現及び腫瘍形成性シグナル伝達を導く。この無秩序なシグナル伝達は、細胞骨格の変調、細胞接着、移動、転移、増殖及び血管新生を導き、これらすべては、腫瘍形成の顕著な特徴である（Tandonらの文献、2011；Xiらの文献、2012）。
【０００９】
EphA2は、多形成膠芽腫同様、乳房、卵巣、前立腺、膵臓、肺、黒色腫及び結腸直腸の癌を含むいくつかの癌において、過剰発現している。実例中の大きな割合において、EphA2の過剰発現は、進行した段階の疾患又は転移した段階の疾患と、相互に関連付けられている。
【００１０】
乳癌においては、EphA2タンパク質レベルは、非形質転換乳房上皮細胞に対して悪性の乳癌細胞株で増加されており、一方、乳癌細胞におけるEphA2の過剰発現は、上皮成長因子受容体（ER）の発現と、負に相関されている。興味深いことに、EphA2の構成的発現は、ヒト上皮成長因子受容体−2（HER2）を過剰発現している細胞において、トラスツズマブに対する内因性耐性を授けており、それゆえ、トラスツズマブの治療効果を低下させている。これらの発見は、さらに、一方では、低減された総合的且つ無再発の生存率を伴う、高いEphA2発現レベルに相関しており（Brantley-Siedersらの文献、2011）、他方では、HER2陽性乳癌患者の総合的生存を伴うEphA2 mRNAレベルの増加と相関している（Zhuangらの文献、2010）臨床的観察によって支持されている。その結果として、EphA2発現の阻害は、トラスツズマブ耐性を覆すための有望な手段を示し得る。
【００１１】
加えて、EphA2アンチセンス・オリゴヌクレオチドが、トリプル・ネガティブ乳癌細胞株MDA-MB-231の増殖を低減させたことも報告された（Carles-Kinchらの文献、2002）。
【００１２】
乳癌において鍵となる役割を果たすEphA2のほかに、いくつかの他のEphが、それらの腫瘍プロモーターとしての役割について報告されており、及び／又は、それらの発現がEphA4、EphB4、及びEphB6のような不良な予後と関連付けられている。
【００１３】
ニューロンの及び血管由来のパターン化における役割に加え、EphBファミリー・メンバーは、炎症（Ivanovらの文献、2005；Kitamuraらの文献、2008；Zamoraらの文献、2006）、骨代謝（Zhaoらの文献、2006）及び骨関節炎の骨再形成（Kwan Tatらの文献、2008）において役割を有している。
【００１４】
最後に、EphA及びEphrin Aは、ブドウ糖の調節において、より具体的には、膵臓のβ細胞において、ある役割の原因となっている。EphAは、インシュリン産生を負に制御すると報告され、一方、Ephrinリガンドを通じた逆方向シグナル伝達は、インシュリン産生を亢進するであろう。高められたブドウ糖レベルは、脱リン酸化、且つ、それゆえ、受容体キナーゼの不活化をもたらし、並びに、Ephrin逆方向シグナル伝達を引き起こす。したがって、インシュリンの定常状態レベルは、リガンドと受容体との間の相互作用に依存し、且つ受容体の活性状態による（Konstantinovaらの文献、2007）。
【００１５】
現在、２型糖尿病には多数の治療法が存在するけれども、それらには、多かれ少なかれ、重篤な副作用がある（Bolenらの文献、2007）。それゆえ、糖尿病の有効な治療法について、需要が残っている。
【００１６】
それゆえ、これらの疾患の治療及び／又は予防に有効であり得るさらなる化合物を同定することに需要がある。
【００１７】
米国特許公開2010/0113415（Rajapakseらの文献、2010）は、1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル化合物であって、それらのすべては、３位にアミノ基を有していなくてはならないものを開示している。
【００１８】
本発明は、化合物、それらの製造方法、及び本発明の化合物を好適な医薬担体とともに含む医薬組成物を提供し、そのような化合物及び組成物は、これらの疾患の治療及び／又は予防において使用され得る。本発明はまた、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊を含む疾患の治療のため、予防及び／又は治療のための医薬の調製における本発明の化合物の使用を提供する。
【発明の概要】
【００１９】
発明の概要
本発明は、化合物並びに、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。具体的には、本発明の化合物は、EphA2の阻害剤である。
【００２０】
本発明はまた、これらの化合物の製造方法、これらの化合物を含む医薬組成物、並びに本発明の化合物を投与することによる、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び/又は治療方法を提供する。
【００２１】
したがって、本発明の第一の態様において、式(I)を有する本発明の化合物が提供される:
【化１】
2016528269.tif 000003
式中、
XはN、又はCHであり；
Lは-NH(C=O)-、又は-C(=O)NH-であり；
R1は、
−  -CN、
−  ハロ、
−  1つ以上の独立に選択されたR6a基で任意に置換されたC1-4アルキル、
−  1つ以上の独立に選択されたR6b基で任意に置換されたC1-4アルコキシ、
−  C3-4シクロアルキル、
−  フェニル、
−  -SO2C1-4アルキル、又は
−  -NR7aR7b
であり；
R2は、H、シクロプロピル、（1つ以上のハロで任意に置換された）C1-4アルキル、又はC1-4アルコキシであり；
R3は、-CH3、-CH2CH3、又はClであり；
R4は、
−  1つのOHで任意に置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOH並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOHで任意に置換されたC3-6シクロアルキルであり；
各R6aは、
−  OH、
−  ハロ、又は
−  C1-4アルコキシ
であり；
各R6bは、
−  OH、
−  ハロ、
−  C1-4アルコキシ、
−  -NR8aR8b、又は
−  1つのC1-4アルキルで任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5〜6員のヘテロシクロアルキル
であり；
各R7a、R7bは、H、及びC1-4アルキルから独立に選択され；並びに
各R8a又はR8bは、H及びC1-4アルキルから独立に選択される。
【００２２】
具体的な実施態様において、本発明の化合物は、EphA又はEphBの阻害剤である。具体的な実施態様において、本発明の化合物は、EphA2の阻害剤である。
【００２３】
式Iに係る本発明の化合物は、驚くべきことに、従来技術に記載された構造的に類似の化合物と比較して、イン・ビボにおいて改良された曝露を示す。より高い曝露は、化合物の服用レベルの低下を許容し得、且つ、それゆえ、低服用レベルの使用は、薬物−薬物相互作用、副作用、及び／又は毒性の低下において有益であり得る。本発明の化合物はまた、イン・ビボにおいて、具体的には腫瘍性増殖の低減／ブロッキングにおいて活性を示し、且つ、具体的には、癌の予防及び／又は治療において有用であり得る。
【００２４】
本発明の化合物はまた、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び/又は治療における使用のために提供される。
【００２５】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物、及び医薬担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物を提供する。特定の態様において、当該医薬組成物は、本発明の化合物と組み合わせて使用するのに好適なさらなる治療活性成分をさらに含むことができる。より特定の態様において、当該さらなる治療活性成分は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療のための薬剤である。
【００２６】
さらに、本明細書に開示される医薬組成物及び治療方法において有用な本発明の化合物は、調製及び使用されるときに、医薬として許容され得るものである。
【００２７】
本発明のさらなる態様において、本発明は、本明細書に記載されるもの、そして具体的には、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の中から選択される状態から選択される状態にある哺乳動物、特にヒトを治療する方法を提供し、当該方法は、本明細書に記載される本発明の医薬組成物又は化合物の有効量を投与することを含む。
【００２８】
本発明はまた、本発明の化合物、及び医薬において使用するための好適な医薬担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物を提供する。特定の態様において、当該医薬組成物は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療において使用するためのものである。
【００２９】
追加の態様において、本発明は、以後本明細書に開示される代表的な合成プロトコル及び経路を用いて、本発明の化合物を合成する方法を提供する。
【００３０】
他の目的及び利点は、次の詳細な説明の考察から、当業者には明らかとなるであろう。
【００３１】
本発明の化合物が代謝されて、生物活性のある代謝物を生じ得ることが認識されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
図面
【図１】図１は、比較化合物A、パクリタキセル及び本発明の化合物（化合物55）のイン・ビボにおける腫瘍増殖の発生を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
発明の詳細な説明
定義
以下の用語は、それらの用語とともに以下に提示された意味を有することが意図されており、且つ、本発明の説明及び意図される範囲を理解する際に有用である。
【００３４】
化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、並びにそのような化合物及び組成物を使用する方法を含み得る、本発明を説明する場合、以下の用語は、存在するならば、別途指示されない限り、以下の意味を有する。本明細書に記載される場合、以下に定義された部分はいずれも、種々の置換基で置換され得ること、及びそれぞれの定義は、以下に示されるようなその範囲内にそのような置換された部分を含むことが意図されていることも理解されるべきである。別途明記されない限り、「置換された」という用語は、以下に示されるように定義されるものとする。「基」及び「ラジカル」という用語は、本明細書で使用される場合、互換的であるとみなされ得ることがさらに理解されるべきである。
【００３５】
「a」及び「an」という冠詞は、本明細書において、1つ又は複数の（すなわち、少なくとも1つの）、当該冠詞の文法上の対象を指すために使用され得る。例として、「類似体(an analogue)」は、1つの類似体又は複数の類似体を意味する。
【００３６】
「アルキル」は、特定された数の炭素原子を有する直鎖又は分岐状脂肪族炭化水素を意味する。特定のアルキル基は、1〜8個の炭素原子を有する。より特定のものは、1〜6個の炭素原子を有する低級アルキルである。さらに特定の基は、1〜4個の炭素原子を有する。例示的な直鎖基は、メチル、エチル、n-プロピル、及びn-ブチルを含む。分岐状とは、メチル、エチル、プロピル、又はブチルのような1つ以上の低級アルキル基が線状アルキル鎖に結合していることを意味し、例示的な分岐鎖基は、イソプロピル、イソ-ブチル、t-ブチル及びイソアミルを含む。
【００３７】
「アルコキシ」は、基-OR26を指し、ここで、R26は、特定された数の炭素原子を有するアルキルである。特定のアルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、tert-ブトキシ、sec-ブトキシ、n-ペントキシ、n-ヘキソキシ、及び1,2-ジメチルブトキシである。特定のアルコキシ基は、低級アルコキシ、すなわち、1〜6個の炭素原子を有するものである。さらに特定のアルコキシ基は、1〜4個の炭素原子を有する。
【００３８】
「アルキレン」は、直鎖又は分岐状であることができる、特定された数の炭素原子を有する、具体的には、1〜6個の炭素原子、より具体的には、1〜4個の炭素原子を有する二価アルケン・ラジカル基を指す。この用語は、メチレン(-CH2-)、エチレン(-CH2-CH2-)、又は-CH(CH3)-などの基によって例示される。
【００３９】
「アルケニル」は、特定された数の炭素原子を有する一価のオレフィン系(不飽和)炭化水素基を指す。特定のアルケニルは、2〜8個の炭素原子、より具体的には、2〜6個の炭素原子を有し、これは、直鎖又は分岐状であることができ、且つ少なくとも1つ、特に、1つ〜2つのオレフィン性不飽和部位を有する。特定のアルケニル基は、エテニル(-CH=CH2)、n-プロペニル(-CH2CH=CH2)、イソプロペニル(-C(CH3)=CH2)などを含む。
【００４０】
「アミノ」は、基-NH2を指す。
【００４１】
「アリール」は、親芳香環系の単一の炭素原子から1つの水素原子を除去することによって誘導された一価芳香族炭化水素基を指す。具体的には、アリールは、特定された数の環原子を有する、単環式又は多環式の芳香環構造を指す。具体的には、この用語は、6〜10個の環員を含む基を含む。アリール基が単環式環系である場合、それは優先的には6個の炭素原子を含有する。特に、アリール基は、フェニル、ナフチル、インデニル、及びテトラヒドロナフチルを含む。
【００４２】
「シクロアルキル」は、特定の数の環原子を有する、単環式又は多環式の非芳香族ヒドロカルビル環構造を指す。シクロアルキルは、3〜10個の炭素原子、具体的には3〜7個の炭素原子を有し得る。そのようなシクロアルキル基は、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルのような単一の環構造を含む。
【００４３】
「シアノ」は、基-CNを指す。
【００４４】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ(F)、クロロ(Cl)、ブロモ(Br)、及びヨード(I)を指す。特定のハロ基は、フルオロ又はクロロのいずれかである。
【００４５】
「ヘテロ」は、化合物又は化合物上に存在する基を記載するために使用される場合、当該化合物又は基中の1つ以上の炭素原子が、窒素、酸素、又は硫黄ヘテロ原子により置換されていることを意味する。ヘテロは、1〜4個、特には1〜3個のヘテロ原子、より典型的には1個又は2個のヘテロ原子、例えば、単一のヘテロ原子を有するアルキル、例えば、ヘテロアルキル、シクロアルキル、例えば、ヘテロシクロアルキル、アリール、例えば、ヘテロアリールなど、上記のヒドロカルビル基のいずれかに適用され得る。
【００４６】
「ヘテロアリール」は、O、N、及びSから独立に選択された1つ以上のヘテロ原子並びに特定された数の環原子を含む、単環式又は多環式の芳香環構造を意味する。具体的には、当該芳香環構造は、5〜10個の環員を有し得る。ヘテロアリール基は、例えば、5員もしくは6員単環式環、又は縮合5及び6員環、もしくは2つの縮合6員環、もしくはさらなる例として、2つの縮合5員環から形成された二環式構造であることができる。各々の環は、窒素、硫黄、及び酸素から典型的に選択された最大4個のヘテロ原子を含有し得る。典型的には、ヘテロアリール環は、最大4個のヘテロ原子、より典型的には、最大3個のヘテロ原子、より一般的には、最大2個、例えば、単一のヘテロ原子を含有するであろう。一実施態様において、ヘテロアリール環は、少なくとも1つの環窒素原子を含有する。ヘテロアリール環中の窒素原子は、イミダゾールもしくはピリジンの場合のように、塩基性であることができるか、又はインドールもしくはピロール窒素の場合のように、本質的に非塩基性であることができる。一般に、環の任意のアミノ基置換基を含む、ヘテロアリール基中に存在する塩基性窒素原子の数は、5未満であろう。5員単環式ヘテロアリール基の例は、これらに限定されないが、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、フラザン、オキサゾール、オキサジアゾール、オキサトリアゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、ピラゾール、トリアゾール及びテトラゾール基を含む。6員単環式ヘテロアリール基の例は、これらに限定されないが、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン及びトリアジンを含む。別の5員環に縮合した5員環を含有する二環式ヘテロアリール基の特定の例は、、これらに限定されないが、イミダゾチアゾール及びイミダゾイミダゾールを含む。5員環に縮合した6員環を含有する二環式ヘテロアリール基の特定の例は、これらに限定されないが、ベンツフラン(benzfuran)、ベンツチオフェン(benzthiophene)、ベンゾイミダゾール、ベンゾキサゾール、イソベンゾキサゾール、ベンゾイソキサゾール、ベンツチアゾール（benzthiazole）、ベンゾイソチアゾール、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、イソインドロン（isoindolone）、インドリジン、インドリン、イソインドリン、プリン（例えば、アデニン、グアニン）、インダゾール、ピラゾロピリミジン、トリアゾロピリミジン、ベンゾジオキソール及びピラゾロピリジン基を含む。2つの縮合6員環を含有する二環式ヘテロアリール基の特定の例は、これらに限定されないが、キノリン、イソキノリン、クロマン、チオクロマン、クロメン、イソクロメン、クロマン、イソクロマン、ベンゾジオキサン、キノリジン、ベンゾオキサジン、ベンゾジアジン、ピリドピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、フタラジン、ナフチリジン及びプテリジン基を含む。特定のヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンから誘導されたものである。
【００４７】
代表的なヘテロアリールの例は、以下のものを含む:
【化２】
2016528269.tif 000004
式中、各々のYは、>C(=O)、NH、O及びSから選択される。
【００４８】
縮合ヘテロアリール環系は、炭素環式環も含んでいてよく、且つ、1つのヘテロアリール環を含みさえすればよい。ヘテロアリール環の例は、これらに限定されないが、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロインドール、ジヒドロベンゾチオフェン、ジヒドロピリジノフラン、ジヒドロピロロピリジン、ジヒドロチエノピリジン、ジヒドロベンゾジオキシン、ジヒドロベンゾオキサチイン、ジヒドロベンゾオキサジン、ジヒドロベンゾチアジン、ジヒドロジオキシノピリジン、ジヒドロジオキサアザインデンを含む。
【００４９】
そのような代表的なヘテロアリールの例は、以下のものを含む:
【化３】
2016528269.tif 000005
式中、各々のPは、N及びCHから選択され；Yは、NH、O及びSから選択され；且つWは、CH2、NH、O及びSから選択される。
【００５０】
本明細書で使用されるように、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、O、N及びSから独立に選択された1つ以上のヘテロ原子並びに特定された数の環原子を含む、単環式又は多環式の安定な非芳香環構造を意味する。非芳香環構造は、4〜10個の環員、具体的には4〜7個の環員を有し得る。縮合ヘテロ環式環系は、炭素環式環を含んでいてもよく、且つ1つのヘテロ環式環を含みさえすればよい。ヘテロ環式環の例は、これらに限定されないが、モルホリン、ピペリジン（例えば、1-ピペリジニル、2-ピペリジニル、3-ピペリジニル及び4-ピペリジニル）、ピロリジン（例えば、1-ピロリジニル、2-ピロリジニル及び3-ピロリジニル）、ピロリドン、ピラン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ジオキサン、テトラヒドロピラン（例えば、4-テトラヒドロピラニル）、イミダゾリン、イミダゾリジノン、オキサゾリン、チアゾリン、2-ピラゾリン、ピラゾリジン、ピペラジン、及びN-メチルピペラジンのようなN-アルキルピペラジンを含む。さらなる例は、チオモルホリン並びにそのS-オキシド及びS,S-ジオキシド（特に、チオモルホリン）を含む。よりさらなる例は、アゼチジン、ピペリドン、ピペラゾン(piperazone)、及びN-メチルピペリジンのようなN-アルキルピペリジンを含む。ヘテロシクロアルキル基の特定の例は、以下の例示的な例に示されている:
【化４】
2016528269.tif 000006
式中、各々のWは、CH2、NH、O及びSから選択され;かつ各々のYは、NH、O、C(=O)、SO2、及びSから選択される。
【００５１】
本明細書で使用されるように、「ヘテロシクロアルケニル」という用語は、「ヘテロシクロアルキル」であって、環の1つの結合が還元されており、したがって、環が二重結合を含むものを意味する。ヘテロシクロアルケニル基の特定の例は、以下の例示的な例に示されている:
【化５】
2016528269.tif 000007
式中、各々のWは、CH2、NH、O及びSから選択され;且つ各々のYは、NH、O、C(=O)、SO2、及びSから選択される。
【００５２】
「ヒドロキシル」は、基-OHを指す。
【００５３】
「オキソ」は、基=Oを指す。
【００５４】
「置換された」は、1つ以上の水素原子が、各々独立に、同じ又は異なる置換基（複数可）で置換されている基を指す。
【００５５】
「スルホ」又は「スルホン酸」は、-SO3Hのような基を指す。
【００５６】
「チオール」は、基-SHを指す。
【００５７】
本明細書で使用されるように、「1つ以上で置換された」という用語は、1〜4個の置換基を指す。一実施態様において、この用語は、1〜3個の置換基を指す。さらなる実施態様において、この用語は、1個又は2個の置換基を指す。またさらなる実施態様において、この用語は、1個の置換基を指す。
【００５８】
「チオアルコキシ」は、基-SR26を指し、式中、R26は、特定された数の炭素原子を有し、且つ、特にC1-C8アルキルである。特定のチオアルコキシ基は、チオメトキシ、チオエトキシ、n-チオプロポキシ、イソチオプロポキシ、n-チオブトキシ、tert-チオブトキシ、sec-チオブトキシ、n-チオペントキシ、n-チオヘキソキシ、及び1,2-ジメチルチオブトキシである。特定のチオアルコキシ基は、低級チオアルコキシ、すなわち1〜6個の炭素原子を有するものである。さらに特定のアルコキシ基は、1〜4個の炭素原子を有する。
【００５９】
有機合成の分野の当業者は、芳香族であるか、非芳香族であるかに関わらず、安定で、化学的に実現可能なヘテロ環式環中のヘテロ原子の最大数が、環のサイズ、不飽和の度合い及びヘテロ原子の原子価によって決定されることを認識するであろう。一般的に、ヘテロ環式環は、芳香族ヘテロ環が、化学的に実現可能で且つ安定である限り、1〜4個のヘテロ原子を有し得る。
【００６０】
「医薬として許容し得る」とは、動物、より特にはヒトでの使用について、連邦政府もしくは州政府の規制当局又は米国以外の国の対応する規制当局により承認されている又は承認され得ること、或いは米国薬局方又は他の一般に認められた薬局方に収載されていることを意味する。
【００６１】
「医薬として許容し得る塩」は、医薬として許容し得るものであって、且つ親化合物の所望の薬理活性を保有する、本発明の化合物の塩を指す。具体的には、そのような塩は、無毒であり、無機又は有機の酸付加塩及び塩基付加塩であり得る。具体的には、そのような塩は：(1)塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸とともに形成された;又は酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、3-(4-ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2-エタン-ジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、4-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、4-トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、4-メチルビシクロ[2.2.2]-オクト-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、3級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などのような有機酸とともに形成された酸付加塩；或いは(2)親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、もしくはアルミニウムイオンにより置換されているか；又はエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、N-メチルグルカミンなどのような有機塩基と配位するときに形成された塩を含む。塩は、ほんの一例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；及び化合物が塩基性官能基を含有する場合、無毒な有機酸又は無機酸の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などをさらに含む。「医薬として許容し得るカチオン」という用語は、酸性官能基の許容し得るカチオン性対イオンを指す。そのようなカチオンは、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムカチオンなどによって例示される。
【００６２】
「医薬として許容し得るビヒクル」は、それとともに本発明の化合物が投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤又は担体を指す。
【００６３】
「プロドラッグ」は、切断可能な基を有し、且つ加溶媒分解によるか又は生理的条件下で、イン・ビボで医薬として活性がある本発明の化合物になる、本発明の化合物の誘導体を含む、化合物を指す。そのような例は、これらに限定されないが、コリンエステル誘導体及び同類のもの、N-アルキルモルホリンエステル及び同類のものを含む。
【００６４】
「溶媒和物」は、通常は、加溶媒分解反応によって溶媒と結合されている化合物の形態を指す。この物理的関連は、水素結合を含む。従来の溶媒は、水、エタノール、酢酸などを含む。本発明の化合物は、例えば、結晶形態で調製され得、溶媒和又は水和され得る。好適な溶媒和物は、医薬として許容し得る溶媒和物、例えば水和物を含み、且つさらに、化学量論的溶媒和物と非化学量論的溶媒和物の両方を含む。ある例において、溶媒和物は、例えば、1つ以上の溶媒分子が、結晶性固体の結晶格子中に組み込まれている場合、単離され得るであろう。「溶媒和物」は、溶液相と分離可能溶媒和物との両方を包含する。代表的な溶媒和物は、水和物、エタノール和物、及びメタノール和物を含む。
【００６５】
「対象」は、ヒトを含む。「ヒト」、「患者」、及び「対象」という用語は、本明細書において互換的に使用される。
【００６６】
「有効量」は、疾患の治療のために対象に投与されたとき、その疾患にそのような治療をもたらすのに十分である、本発明の化合物の量を意味する。「有効量」は、化合物、疾患及びその重症度、並びに治療されるべき対象の年齢、重量などによって異なり得る。
【００６７】
「予防する」又は「予防」は、疾患又は障害を獲得又は発症するリスクを低下させること（すなわち、疾患の発症前に、疾患を引き起こす原因物質に曝露され得る又は疾患に罹る素因を有し得る対象において、疾患の臨床症状の少なくとも1つを発症させないこと）を指す。
【００６８】
「予防(prophylaxis)」という用語は、「予防(prevention)」に関連し、且つその目的が、疾患を治療又は治癒させるよりはむしろ予防することである対策又は処置を指す。予防対策の非限定的な例は、ワクチンの投与；例えば、動けないことが原因で血栓症のリスクがある入院患者への低分子量ヘパリンの投与；及びマラリアが風土病であるか、又はマラリアに罹るリスクが高い地理的地域への訪問に先立つクロロキンのような抗マラリア剤の投与を含み得る。
【００６９】
任意の疾患もしくは障害を「治療する」又は任意の疾患もしくは障害の「治療」は、一実施態様において、疾患又は障害を改善させること（すなわち、疾患を止めること、又はその臨床症状のうちの少なくとも1つの徴候、範囲、もしくは重症度を低下させること）を指す。他の実施態様において、「治療する」又は「治療」は、対象によって認識されることができない、少なくとも1つの物理的パラメータを改善させることを指す。さらに他の実施態様において、「治療する」又は「治療」は、疾患又は障害を、物理的に調節すること（例えば、認識可能な症状の安定化）、生理的に調節すること（例えば、物理的パラメータの安定化）、又はその両者のいずれかを指す。さらなる実施態様において、「治療する」又は「治療」は、疾患の進行を遅らせることに関する。
【００７０】
本明細書で使用されるように、「炎症状態」という用語は、リウマチ性関節炎、変形性関節症、若年性特発性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患（例えば、クローン病、ウィップル、慢性潰瘍性大腸炎、又は大腸炎）、強直性脊椎炎、並びに短期又は長期において直接又は間接に関節の軟骨のような軟骨に作用する関連する疾患を含む状態の群を指す。特に、この用語は、リウマチ性関節炎、原発性関節炎及び続発性関節炎、及び炎症性腸疾患を指す。
【００７１】
本明細書で使用されるように、「神経及び／又は神経変性疾患」という用語は、脳卒中（虚血性脳卒中を含む）、脊髄損傷（麻痺を含む）、外傷性脳損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び多発性硬化症を含む状態の群を指す。
【００７２】
本明細書で使用されるように、「自己免疫疾患」という用語は、COPDのような状態を含む閉塞性気道疾患、喘息（例えば、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、小児喘息）、特に、慢性又は難治性喘息（例えば、遅発型喘息及び気道過剰応答）、気管支喘息を含む気管支炎、全身エリテマトーデス（SLE）、皮膚エリテマトーデス（erythrematosis）、ループス腎炎、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、多発性硬化症、乾癬、ドライアイ疾患、I型糖尿病及びそれに伴う合併症、アトピー性湿疹（アトピー性皮膚炎）、甲状腺炎（橋本甲状腺炎及び自己免疫甲状腺炎）、接触性皮膚炎及びさらなる湿疹性皮膚炎、炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）、アテローム性動脈硬化症、並びに筋萎縮性側索硬化症を含む疾患群を指す。特に、この用語は、COPD、喘息、全身エリテマトーデス、I型糖尿病、及び炎症性腸疾患を指す。
【００７３】
本明細書で使用されるように、「増殖性疾患」という用語は、癌(例えば、子宮平滑筋肉腫、乳癌もしくは前立腺癌)、骨髄増殖性障害（例えば、真性赤血球増加症、本態性血小板血症及び骨髄線維症）、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性及び慢性リンパ芽球性白血病）、転移性疾患、多発性骨髄腫、乾癬、再狭窄、強皮症又は線維症のような状態を指す。特に、この用語は、癌、白血病、転移性疾患、多発性骨髄腫及び／又は乾癬を指す。
【００７４】
本明細書で使用されるように、「癌」という用語は、皮膚における、又は例えば、しかしこれらに限定されないが、乳房、前立腺、肺、腎臓、膵臓、胃もしくは腸といった身体器官における細胞の悪性又は良性増殖を指す。癌は、隣接組織に浸潤し、且つ、遠隔器官、例えば、骨、肝臓、肺又は脳に拡がる（転移する）傾向がある。本明細書で使用されるように、癌という用語は、転移性腫瘍細胞型（例えば、限定されないが、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、及び肥満細胞腫）と組織癌型（例えば、限定されないが、結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵癌、膀胱癌、腎臓癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌、尿路癌、甲状腺癌、食道癌、並びに子宮平滑筋肉腫）の両者を含む。特に、「癌」という用語は、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、肛門癌、虫垂癌、星細胞腫、非定型奇形腫様／横紋筋肉腫様腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌（骨肉腫及び悪性線維性組織球腫）、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、脳脊髄腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、子宮頸癌、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、皮膚T細胞リンパ腫、胚芽腫、子宮内膜癌、上衣芽細胞腫、上衣腫、食道癌、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、眼癌、網膜芽腫、胆嚢癌、胃（gastric）（胃（stomach））癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（GIST）、消化管間質細胞腫瘍、胚細胞腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部癌、肝細胞（肝臓）癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼内メラノーマ、島細胞腫瘍（内分泌膵臓）、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス細胞組織球増加症、喉頭癌、白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、肝臓癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、バーキットリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、髄芽腫、髄様上皮腫、黒色腫、中皮腫、口腔癌、慢性骨髄性白血病、骨髄性白血病、多発性骨髄腫、鼻咽頭癌（asopharyngeal）、神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、口腔癌、中咽頭癌、骨肉腫、骨の悪性線維性組織球腫、卵巣癌、卵巣上皮癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵癌、乳頭腫症、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、中等度分化型の松果体実質腫瘍、松果体芽腫及びテント上未分化神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍/多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞(腎臓)癌、網膜芽腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、肉腫、カポジ、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮細胞癌、胃（stomach）（胃（gastric））癌、テント上未分化神経外胚葉性腫瘍、T細胞リンパ腫、精巣癌、咽喉癌、胸腺腫及び胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、並びにウィルムス腫瘍を指す。
【００７５】
本明細書で使用されるように、「白血病」という用語は、血液及び造血器官の腫瘍性疾患を指す。そのような疾患は、宿主を極めて感染及び出血しやすい状態にする骨髄及び免疫系の機能障害を引き起こし得る。具体的には、白血病という用語は、急性骨髄性白血病（AML）及び急性リンパ芽球性白血病（ALL）及び慢性リンパ芽球性白血病（CLL）を指す。
【００７６】
本明細書で使用されるように、「転移性疾患」という用語は、通常は血管又はリンパ管を経由する、体内における初発部位から他の1つ以上の部位への病原微生物又は癌性細胞の伝染を含む疾患を指す。具体的には、転移性疾患は、胆管癌、結腸癌、胆嚢癌、悪性黒色腫、粘液腫、神経内分泌腫瘍、乳房のパジェット病、直腸癌、上大静脈症候群、外陰癌を指す。
【００７７】
本明細書で使用されるように、「異常な血管新生に関連する疾患」という用語は、血管新生を媒介する過程の異常調節によって引き起こされる疾患を指す。具体的には、異常な血管新生に関連する疾患は、アテローム性動脈硬化症、高血圧、腫瘍増殖、炎症、関節リウマチ、滲出型黄斑変性症、脈絡膜血管新生、網膜血管新生、及び糖尿病性網膜症を指す。
【００７８】
本明細書で使用されるように、「軟骨の恒常性の低下及び／又は崩壊を含む疾患」という用語は、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎、敗血症性又は感染性関節炎、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、疼痛性ジストロフィー、軟骨形成不全、パジェット病、ティーツェ症候群又は肋軟骨炎、線維筋痛、骨軟骨炎、神経性又は神経障害性関節炎、関節症、サルコイドーシス、アミローシス、関節水腫(hydarthrosis)、周期性疾患、リウマチ様脊椎炎、関節炎様変形性関節症風土病の風土型（endemic forms of arthritis like osteoarthritis deformans endemica）、ムセレニ病及びハンディゴドゥ病、線維筋痛に由来する変性、全身性エリテマトーデス、強皮症及び強直性脊椎炎のような状態を包含する。
【００７９】
「本発明の化合物」、及び等価な表現は、本明細書に記載される式(複数可)の化合物を包含することを意味し、文脈上許容される場合、その表現は、医薬として許容され得る塩、及び溶媒和物、例えば、水和物、並びに医薬として許容され得る塩の溶媒和物を含む。同様に、中間体への言及は、文脈上許容される場合、それら自体が特許請求されているか否かに関わらず、それらの塩、及び溶媒和物を包含することを意味する。
【００８０】
本明細書において範囲が言及される場合（例えば、限定するものではないが、C1-8アルキル）、範囲の引用は、当該範囲の各々のメンバーの表示とみなされるべきである。
【００８１】
本発明の化合物の他の誘導体は、それらの酸及び酸誘導体形態の両者において活性を有するが、酸感受性形態は、多くの場合、溶解性、組織適合性、又は哺乳動物の器官での遅延放出という利点を提供する（Bundgaardの文献、1985）。プロドラッグは、当業者に周知の酸誘導体、例えば、親酸と適切なアルコールとの反応により調製されたエステル、又は親酸化合物と置換もしくは非置換アミンとの反応により調製されたアミド、又は酸無水物、又は混合無水物などを含む。本発明の化合物上の酸性基ペンダントから誘導された単純な脂肪族又は芳香族エステル、アミド、及び無水物は、特に有用なプロドラッグである。場合によっては、（アシルオキシ）アルキルエステル又は（（アルコキシカルボニル）オキシ）アルキルエステルのような二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。特定のそのようなプロドラッグは、本発明の化合物のC1-8アルキル、C2-8アルケニル、C6-10で任意に置換されたアリール、及び（C6-10アリール）−（C1-4アルキル）エステルである。
【００８２】
本明細書で使用されるように、「同位体変種」という用語は、そのような化合物を構成する原子のうちの1つ以上において非天然の同位体比率を含有する化合物を指す。例えば、化合物の「同位体変種」は、例えば、重水素（2H又はD）、炭素-13（13C）、窒素-15（15N）、又は同類のもののような1つ以上の非放射性同位体を含み得る。そのような同位体置換が行なわれる化合物において、以下の原子は、存在する場合、例えば、任意の水素が2H／Dとなり得、任意の炭素が13Cとなり得、又は任意の窒素が15Nとなり得るように、多様となり得るということ、並びにそのような原子の存在及び配置は当業者の能力の範囲内で決定され得るということが理解されるであろう。同様に、本発明は、放射性同位体を用いた同位体変種の調製を含むことができ、その場合、例えば、結果として得られた化合物を薬物及び／又は基質の組織分布研究に使用することができる。放射性同位体トリチウム、すなわち3H、及び炭素-14、すなわち14Cは、それらの取込みが容易であり、かつ検出手段が整っていることを考慮すると、本目的に特に有用である。さらに、11C、18F、15O、及び13Nのような陽電子放出同位体で置換されており、かつ陽電子放出断層撮影(PET)研究において基質受容体占有率を調べるのに有用である化合物が調製され得る。
【００８３】
本明細書において提供される化合物の全ての同位体変種は、放射性であるかどうかに関わらず、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。
【００８４】
同じ分子式を有するが、その原子の結合の性質もしくは配列、又はその原子の空間内での配置が異なる化合物が「異性体」と称されることも理解されるべきである。その原子の空間内での配置が異なる異性体は、「立体異性体」と称される。
【００８５】
互いの鏡像でない立体異性体は「ジアステレオマー」と称され、互いに重ね合わせることのできない鏡像である立体異性体は「エナンチオマー」と称される。化合物が不斉中心を有する場合、例えば、それが4つの異なる基に結合している場合、一対のエナンチオマーが可能である。エナンチオマーは、その不斉中心の絶対配置によって特徴付けられ得、Cahn及びPrelogのR-及びS-順位則によって記述されるか、又は分子が偏光面を回転させる様式によって記述され、且つ右旋性もしくは左旋性として（すなわち、それぞれ(+)又は(-)-異性体として）明示される。キラル化合物は、個々のエナンチオマーとして、又はその混合物としてのいずれかで存在し得る。エナンチオマーを同じ比率で含有する混合物は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。
【００８６】
「互変異性体」は、特定の化合物構造の互換的形態であり、且つ水素原子及び電子の置換の点で異なる化合物を指す。したがって、2つの構造は、π電子及び原子（通常はH）の移動を介して平衡となり得る。例えば、エノールとケトンは、酸又は塩基のいずれかによる処理により速やかに相互変換されるので、互変異性体である。互変異性の他の例は、フェニルニトロメタンのアシ形態及びニトロ形態であり、これらは酸又は塩基による処理により同様に形成される。
【００８７】
互変異性形態は、対象となる化合物の最適な化学反応性及び生物活性の実現に関連し得る。
【００８８】
本発明の化合物は、1つ以上の不斉中心を有することができ；したがって、そのような化合物は、個々の(R)-もしくは(S)-立体異性体として、又はそれらの混合物として製造され得る。
【００８９】
別途示されない限り、本明細書及び特許請求の範囲における特定の化合物の記載又は命名は、個々のエナンチオマーと、ラセミ体かそうでないかは別にして、その混合物との両者を含むことが意図されている。立体化学の決定及び立体異性体の分離のための方法は、当技術分野において周知である。
【００９０】
本発明の化合物が代謝され得て、生物活性のある代謝物を生じることが認識されるであろう。
【００９１】
本発明
本発明は、化合物並びに、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。具体的には、本発明の化合物は、EphA2阻害剤である。
【００９２】
本発明はまた、これらの化合物の製造方法、これらの化合物を含む医薬組成物、並びに本発明の化合物を投与することによる、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び/又は治療方法を提供する。
【００９３】
したがって、本発明の第一の態様において、式(I)を有する本発明の化合物が提供される:
【化６】
2016528269.tif 000008
式中、
Xは、N、又はCHであり；
Lは、-NH(C=O)-、又は-C(=O)NH-であり；
R1は、
−  -CN、
−  ハロ、
−  1つ以上の独立に選択されたR6a基で任意に置換されたC1-4アルキル、
−  1つ以上の独立に選択されたR6b基で任意に置換されたC1-4アルコキシ、
−  C3-4シクロアルキル、
−  フェニル、
−  -SO2C1-4アルキル、又は
−  -NR7aR7b
であり；
R2は、H、シクロプロピル、(1つ以上のハロで任意に置換された) C1-4アルキル、又はC1-4アルコキシであり；
R3は、-CH3、-CH2CH3、又はClであり；
R4は、
−  1つのOHで任意に置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOH、並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員環のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキル、又は
−  1つのOHで任意に置換されたC3-6シクロアルキル
であり；
各R6aは、
−  OH、
−  ハロ、又は
−  C1-4アルコキシ
であり；
各R6bは、
−  OH、
−  ハロ、
−  C1-4アルコキシ、
−  -NR8aR8b、又は
−  1つのC1-4アルキルで任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5〜6員環のヘテロシクロアルキル
であり；
各R7a、R7bは、H及びC1-4アルキルから独立に選択され；及び
各R8a又はR8bは、H及びC1-4アルキルから独立に選択される。
【００９４】
一実施態様において、本発明の化合物は、式IIによるものである：
【化７】
2016528269.tif 000009
式中、R1、R2、R3、R4及びLは、上で定義されたとおりである。
【００９５】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、CN、F、又はClである。
【００９６】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1はC1-4アルキルである。特定の実施態様において、R1は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である。より特定の実施態様において、R1は、-CH3、又は-CH2CH3である。より特定の実施態様において、R1は-CH3である。
【００９７】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、1つ以上の独立に選択されたR6a基で置換されたC1-4アルキルである。他の実施態様において、R1は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、これらの各々は、1つ以上の独立に選択されたR6a基で置換されている。特定の実施態様において、R1は、1つ、2つ、又は3つの独立に選択されたR6a基で置換されたC1-4アルキルである。他の特定の実施態様において、R1は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、これらの各々は、1つ、2つ、又は3つの独立に選択されたR6a基で置換されている。より特定の実施態様において、R1は、1つのR6a基で置換されたC1-4アルキルである。他のより特定の実施態様において、R1は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3であり、これらの各々は、1つのR6a基で置換されている。
【００９８】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R6aは、OH、ハロ、又はC1-4アルコキシである。特定の実施態様において、R6aは、OH、F、又はClである。他の特定の実施態様において、R6aは、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3である。より特定の実施態様において、R6aは、OH、F、Cl、-OCH3、又は-OCH2CH3である。
【００９９】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、-CF3、-CH2CF3、-CH2OH、又は-CH2OCH3である。
【０１００】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、C1-4アルコキシである。特定の実施態様において、R1は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3である。より特定の実施態様において、R1は、-OCH3、又は-OCH2CH3である。より特定の実施態様において、R1は-OCH3である。
【０１０１】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、1つ以上の独立に選択されたR6b基で置換されたC1-4アルコキシである。他の実施態様において、R1は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3であり、これらの各々は、1つ以上の独立に選択されたR6b基で置換されている。特定の実施態様において、R1は、1つ、2つ、又は3つの独立に選択されたR6b基で置換されたC1-4アルコキシである。他の特定の実施態様において、R1は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3であり、これらの各々は、1つ、2つ、又は3つの独立に選択されたR6b基で置換されている。より特定の実施態様において、R1は、1つのR6b基で置換されたC1-4アルコキシである。他のより特定の実施態様において、R1は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3であり、これらの各々は、1つのR6b基で置換されている。
【０１０２】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R6bは、OH、ハロ、又はC1-4アルコキシである。特定の実施態様において、R6bは、OH、F、又はClである。
【０１０３】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R6bは、C1-4アルコキシである。特定の実施態様において、R6bは、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3である。より特定の実施態様において、R6bは、-OCH3、又は-OCH2CH3である。
【０１０４】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R6bは、-NR8aR8bであり、式中、R8a及びR8bは、上記のとおりである。特定の実施態様において、R8a及びR8bの各々は、H、-CH3、及び-CH2CH3から独立に選択される。より特定の実施態様において、R6bは、-N(CH3)2、又は-N(CH3)CH2CH3である。
【０１０５】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R6bは、1つのC1-4アルキルで任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5-6員のヘテロシクロアルキルである。特定の実施態様において、R6bは、ピロリジニル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニルであり、これらの各々は、C1-4アルキルで任意に置換されている。他の特定の実施態様において、R6bは、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3で任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5〜6員のヘテロシクロアルキルである。より特定の実施態様において、R6bは、ピロリジニル、モルホリニル、ピペリジニル、又はピペラジニルであり、これらの各々は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3で任意に置換されている。
【０１０６】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、C3-6シクロアルキルである。特定の実施態様において、R1は、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルである。より特定の実施態様において、R1はシクロプロピルである。
【０１０７】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は、-SO2C1-4アルキルである。特定の実施態様において、R1は、-SO2CH3、-SO2CH2CH3、又は-SO2CH(CH3)2である。より特定の実施態様において、R1は、-SO2CH3、又は-SO2CH2CH3である。最も特定の実施態様において、R1は-SO2CH3である。
【０１０８】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R1は-NR7aR7bであり、式中、各R7a及びR7bは上記のとおりである。特定の実施態様において、R7a及びR7bの各々は、H、-CH3、及び-CH2CH3から独立に選択される。より特定の実施態様において、R1は、-N(CH3)2、又は-N(CH3)CH2CH3である。
【０１０９】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R2はHである。
【０１１０】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R2はシクロプロピルである。
【０１１１】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R2はC1-4アルキルである。特定の実施態様において、R2は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、又は-C(CH3)3である。より特定の実施態様において、R2は、-CH3、又は-CH2CH3である。より特定の実施態様において、R2は-CH3である。
【０１１２】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R2は、1つ以上のハロで置換されたC1-4アルキルである。他の実施態様において、R2は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2又は-C(CH3)3であり、これらの各々は、1つ以上のハロで置換されている。特定の実施態様において、R2は、1つ以上のフルオロで置換されたC1-4アルキルである。他の特定の実施態様において、R2は、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2又は-C(CH3)3であり、これらの各々は、1つ以上のフルオロで置換されている。より特定の実施態様において、R2は-CF3である。
【０１１３】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I又はIIによるものであり、式中、R2はC1-4アルコキシである。特定の実施態様において、R2は、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、又は-OC(CH3)3である。より特定の実施態様において、R2は、-OCH3、又は-OCH2CH3である。より特定の実施態様において、R2は-OCH3である。
【０１１４】
一実施態様において、本発明の化合物は、式IIIa又はIIIbによるものである：
【化８】
2016528269.tif 000010
式中、X、L、R3、及びR4は、先に定義されたとおりである。
【０１１５】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IIIbのいずれかによるものであり、式中、Lは-NH(C=O)-である。
【０１１６】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IIIbのいずれかによるものであり、式中、Lは-C(=O)NH-である。
【０１１７】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IIIbのいずれかによるものであり、式中、R3は-CH3である。
【０１１８】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IIIbのいずれかによるものであり、式中、R3はClである。
【０１１９】
一実施態様において、本発明の化合物は、式IVa又はIVbによるものである：
【化９】
2016528269.tif 000011
式中、X、及びR4は、先に定義されたとおりである。
【０１２０】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4はC1-2アルキルである。特定の実施態様において、R4は、-CH3、又は-CH2CH3である。
【０１２１】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I-IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、1つのOHで置換されたC1-2アルキルである。他の実施態様において、R4は、-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、1つのOHで置換されている。特定の実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、-CH(OH)CH3である。より特定の実施態様において、R4は、
【化１０】
2016528269.tif 000012
である。
【０１２２】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、1つのOH並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキルである。他の実施態様において、R4は、-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、1つのOH並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されている。特定の実施態様において、R4は、1つのOH並びにピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、及びモルホリニルから選択された1つのヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキルである。他の特定の実施態様において、R4は、-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、1つのOH並びにピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、及びモルホリニルから選択された1つのヘテロシクロアルキルで置換されている。一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は：
【化１１】
2016528269.tif 000013
である。
【０１２３】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、C3-6シクロアルキルである。特定の実施態様において、R4は、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルである。より特定の実施態様において、R4はシクロプロピルである。
【０１２４】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、1つのOHで置換されたC3-6シクロアルキルである。他の実施態様において、R4は、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルであり、これらの各々は、1つのOHで置換されている。一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、R4は、
【化１２】
2016528269.tif 000014
である。
【０１２５】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、XはNである。
【０１２６】
一実施態様において、本発明の化合物は、式I〜IVbのいずれかによるものであり、式中、XはCHである。
【０１２７】
一実施態様において、本発明の化合物は、以下のものから選択される:
N-(3-(3-(ヒドロキシメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-N-(3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド、
3-(ジメチルアミノ)-N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメチルベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-(ヒドロキシメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
3,5-ジメトキシ-N-(4-メチル-3-(3-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)フェニル)ベンズアミド、
N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-(ヒドロキシメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメチルベンズアミド、
3,5-ジメトキシ-N-(6-メチル-5-(3-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)ピリジン-3-イル)ベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メトキシ-5-メチルベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メチル-5-(2-モルホリノエトキシ)ベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(2-メトキシエトキシ)-5-メチルベンズアミド、
N-(4-クロロ-3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)フェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(2-ヒドロキシエトキシ)-5-メチルベンズアミド、
3-(2-(ジメチルアミノ)エトキシ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メチルベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メチル-5-(3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロポキシ)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メチル-5-(2-モルホリノエトキシ)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシシクロプロピル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
3-(2-アミノエトキシ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メチルベンズアミド、
3-(3-アミノプロポキシ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メチルベンズアミド、
N-(4-エチル-3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)フェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メトキシ-5-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
3-シクロプロピル-N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-5-メトキシベンズアミド、
3-(2-アミノエトキシ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メトキシベンズアミド、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メトキシ-5-(2-モルホリノエトキシ)ベンズアミド、
N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
3-(2-アミノエトキシ)-N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-5-メトキシベンズアミド、
3-(3-アミノプロポキシ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メトキシベンズアミド、
3-(3-アミノプロポキシ)-N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-5-メトキシベンズアミド、
(S)-N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
(R)-N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3,5-ジメチルベンズアミド、
3-シクロプロピル-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-メトキシベンズアミド、
3,5-ジメチル-N-(6-メチル-5-(3-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)ピリジン-3-イル)ベンズアミド、
N-(6-メチル-5-(3-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)ピリジン-3-イル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメチルベンズアミド、
(S)-N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
(R)-N-(3-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
(N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-モルホリノエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-メチルベンズアミド)、
N-(3-(3-(1-ヒドロキシ-2-(ピロリジン-1-イル)エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメチルベンズアミド、
N-(3-(3-シクロプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(3-(3-(2-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(5-(3-(ヒドロキシメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
N-(5-(3-(1-ヒドロキシエチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(5-(3-(ヒドロキシメチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(5-(3-シクロプロピル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3,5-ジメトキシベンズアミド、
N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3-メトキシ-5-(2-モルホリノエトキシ)ベンズアミド、
N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-3-メトキシ-5-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、
(3-(ジメチルアミノ)-N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-5-(トリフルオロメチル)ベンズアミド)、
N-(3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチルフェニル)-3-(2-モルホリノエトキシ)-5-(トリフルオロメチル)ベンズアミド、及び
3-シクロプロピル-N-(5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチルピリジン-3-イル)-5-(2-モルホリノエトキシ)ベンズアミド。
【０１２８】
一実施態様において、本発明の化合物は、N-{3-[3-((S)-1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドである。
【０１２９】
他の実施態様において、本発明の化合物は、N-{3-[3-((S)-1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドではない。
【０１３０】
一実施態様において、本発明の化合物は、同位体変種ではない。
【０１３１】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つによる本発明の化合物は、遊離塩基として存在する。
【０１３２】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つによる本発明の化合物は、医薬として許容し得る塩である。
【０１３３】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つによる本発明の化合物は、当該化合物の溶媒和物である。
【０１３４】
一態様において、本明細書に記載の実施態様のいずれか1つによる本発明の化合物は、ある化合物の医薬として許容し得る塩の溶媒和物である。
【０１３５】
各々の実施態様についての特定された基は、通常、上で個別に記載されているが、本発明の化合物は、上記の式及び本明細書に提示された他の式におけるいくつかの又は各々の実施態様が、各々の変数についてそれぞれ指定された1つ以上の特定のメンバー又は基から選択される化合物を含む。したがって、本発明は、そのような実施態様の全ての組合せをその範囲内に含むことが意図されている。
【０１３６】
各々の実施態様についての特定された基は、通常、上で個別に記載されているが、本発明の化合物は、1以上の変数(例えば、R基)が、上記の式のいずれかによる1つ以上の実施態様から選択された化合物であり得る。したがって、本発明は、開示された実施態様のいずれかに由来する変数の全ての組合せをその範囲内に含むことが意図されている。
【０１３７】
或いは、ある基もしくはある実施態様、又はそれらの組合せに由来する1つ以上の特定された変数の排除も、本発明によって意図されている。
【０１３８】
ある態様において、本発明は、上記の式による化合物のプロドラッグ及び誘導体を提供する。プロドラッグは、代謝的に切断可能な基を有し、且つ加溶媒分解によるか又は生理的条件下で、イン・ビボで医薬として活性がある本発明の化合物になる、本発明の化合物の誘導体である。そのような例は、これらに限定されないが、コリンエステル誘導体及び同類のもの、N-アルキルモルホリンエステル及び同類のものを含む。
【０１３９】
本発明の化合物の他の誘導体は、それらの酸形態と酸誘導体形態の両方で活性を有するが、酸感受性形態は、多くの場合、溶解性、組織適合性、又は哺乳動物における遅延放出という利点を提供する（Bundgaardの文献、1985）。プロドラッグは、当業者に周知の酸誘導体、例えば、親酸と好適なアルコールとの反応により調製されたエステル、又は親酸化合物と置換もしくは非置換アミンとの反応により調製されたアミド、又は酸無水物、又は混合無水物のようなものを含む。本発明の化合物上の酸性基ペンダントから誘導された単純な脂肪族又は芳香族エステル、アミド、及び無水物は、好ましいプロドラッグである。場合によっては、（アシルオキシ）アルキルエステル又は（（アルコキシカルボニル）オキシ）アルキルエステルのような二重エステル型プロドラッグを調製することが望ましい。特に有用であるのは、本発明の化合物のC1〜C8アルキル、C2〜C8アルケニル、アリール、C7〜C12置換アリール、及びC7〜C12アリールアルキルエステルである。
(条項)
1)  式Iによる化合物：
【化１３】
2016528269.tif 000015
式中、
Xは、N、又はCHであり；
Lは、-NH(C=O)-、又は-C(=O)NH-であり；
R1は、
−  -CN、
−  ハロ、
−  1つ以上の独立に選択されたR6a基で任意に置換されたC1-4アルキル、
−  1つ以上の独立に選択されたR6b基で任意に置換されたC1-4アルコキシ、
−  C3-4シクロアルキル、
−  フェニル、
−  -SO2C1-4アルキル、又は
−  -NR7aR7b
であり；
R2は、H、シクロプロピル、(1つ以上のハロで任意に置換された) C1-4アルキル、又はC1-4アルコキシであり；
R3は、-CH3、-CH2CH3、又はClであり；
R4は、
−  1つのOHで任意に置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOH並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキル、
−  1つのOHで任意に置換されたC3-6シクロアルキル
であり；
各R6aは、
−  OH、
−  ハロ、又は
−  C1-4アルコキシ
であり；
各R6bは、
−  OH、
−  ハロ、
−  C1-4アルコキシ、
−  -NR8aR8b、又は
−  1つのC1-4アルキルで任意に置換された、N、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む5〜6員のヘテロシクロアルキル
であり；
各R7a、R7bは、H、及びC1-4アルキルから独立に選択され；並びに
各R8a又はR8bは、H、及びC1-4アルキルから独立に選択される；
又はその医薬として許容し得る塩。
2)  当該化合物が、式IIによる、条項1記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩：
【化１４】
2016528269.tif 000016
式中、R1、R2、R3、R4及びLは、条項1で定義されたとおりである。
3)   式中、R1が、CN、F、又はClである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
4)   式中、R1がC1-4アルキルである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
5)   式中、R1が、-CH3、又は-CH2CH3である、条項4記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
6)   式中、R1が、1つ以上の独立に選択されたR6a基で置換されたC1-4アルキルである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
7)   式中、各R6aが、OH、F、Cl、-OCH3、又は-OCH2CH3である、条項6記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
8)   式中、R1が、-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、1つ以上の独立に選択されたOH、F、Cl、-OCH3、又は-OCH2CH3で置換されている、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
9)   式中、R1がC1-4アルコキシである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
10)   式中、R1が、-OCH3、又は-OCH2CH3である、条項5記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
11)   式中、R1が、1つ以上の独立に選択されたR6b基で置換されたC1-4アルコキシである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
12)   式中、各R6bが、OH、F、Cl、-OCH3、又は-OCH2CH3である、条項11記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
13)   式中、各R6bが-NR8aR8bである、条項11記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
14)   式中、R8a及びR8bが、-CH3、及び-CH2CH3から独立に選択された条項13記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
15)   式中、各R6bが、ピロリジニル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニルであり、これらの各々は、C1-4アルキルで任意に置換されている、条項11記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
16)   式中、R1が、-OCH3、又は-OCH2CH3であり、これらの各々は、1つ以上の独立に選択されたOH、F、Cl、-OCH3、-OCH2CH3又は-NMe2で置換されている、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
17)   式中、R1が、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
18)   式中、R1が、-SO2CH3、又は-SO2CH2CH3である、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
19)   式中、R1がNR7aR7bである、条項1又は2記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
20)   式中、R7a及びR7bが、-CH3、及び-CH2CH3から独立に選択される、条項19記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
21)   式中、R2が、-CH3、-CH2CH3、-OCH3、又は-OCH2CH3である、条項1〜20のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
22)   式中、R2がHである、条項1〜20のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
23)   条項1又は2のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩であって、当該化合物が、式IIIaによるもの：
【化１５】
2016528269.tif 000017
式中、X、L、R3、及びR4は、条項1において定義されたとおりである。
24)   条項1又は2のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩であって、当該化合物が、式IIIbによるもの：
【化１６】
2016528269.tif 000018
式中、X、L、R3、及びR4は、条項1において定義されたとおりである。
25)   式中、Lが-NH(C=O)-である、条項1〜24のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
26)   式中、Lが-C(=O)NH-である、条項1〜24のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
27)   条項1又は2のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩であって、当該化合物が、式IVaによるもの：
【化１７】
2016528269.tif 000019
式中、X、及びR4は、上記のとおりである。
28)   式中、R4がC1-2アルキルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
29)   式中、R4が、-CH3、又は-CH2CH3である、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
30)   式中、R4が、1つのOHで置換されたC1-2アルキルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
31)   式中、R4が-CH(OH)CH3である、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
32)   式中、R4が：
【化１８】
2016528269.tif 000020
である、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
33)   式中、R4が、1つのOH並びにN、O、及びSから独立に選択された1つ又は2つのヘテロ原子を含む1つの5〜6員のヘテロシクロアルキルで置換されたC1-2アルキルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
34)  他の具体的な実施態様において、R4は、-CH3、又は-CH2CH3であり、これらの各々は、1つのOH並びにピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、及びモルホリニルから選択された1つのヘテロ環で置換されている、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
35)  他の具体的な実施態様において、R4は：
【化１９】
2016528269.tif 000021
である、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
36)   式中、R4がC3-6シクロアルキルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
37)   式中、R4が、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
38)   式中、R4が、1つのOHで置換されたC3-6シクロアルキルである、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
39)   式中、R4が、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルであり、これらの各々が、1つのOHで置換されている、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
40)   式中、R4が
【化２０】
2016528269.tif 000022
である、条項1〜27のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
41)   式中、XがCHである、条項1〜40のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
42)   式中、XがNである、条項1〜40のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩。
43)  医薬として許容し得る担体及び医薬有効量の条項1〜42のいずれか一項記載の化合物を含む医薬組成物。
44)  さらなる治療剤を含む、条項43記載の医薬組成物。
45)  医薬において使用するための、条項1〜42のいずれか一項記載の化合物、又は条項43もしくは44記載の医薬組成物。
46)  増殖性疾患の予防、及び／又は治療において使用するための、条項1〜42のいずれか一項記載の化合物、又は条項43もしくは44記載の医薬組成物。
47)   増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）の予防及び／又は治療のための方法であって、前記治療、又は予防を達成するのに十分な量の、条項1〜42のいずれか一項記載の化合物、又は条項43もしくは44の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
48)  条項1のいずれかの化合物、又は条項2又は3の医薬組成物が、さらなる治療剤と組み合わせて投与される、条項8記載の方法。
49)  さらなる治療剤が増殖性疾患の治療のための薬剤である、条項44記載の医薬組成物、又は条項48記載の方法。
50)  増殖性疾患が乳癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
51)  増殖性疾患が黒色腫である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
52)  増殖性疾患が前立腺癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
53)  増殖性疾患が腎臓癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
54)  増殖性疾患が肉腫である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。 
55)  増殖性疾患が子宮癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
56)  増殖性疾患が肺癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
57)  増殖性疾患が結腸癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
58)  増殖性疾患が胃癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
59)  増殖性疾患が肝臓癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
60)  増殖性疾患が卵巣癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
61)  増殖性疾患が膵臓癌である、条項46記載の使用のための化合物もしくは医薬組成物、又は条項48記載の方法。
【０１４０】
医薬組成物
医薬として利用される場合、本発明の化合物は、通常、医薬組成物の形態で投与される。そのような組成物は、医薬分野で周知の方法で調製され得、且つ少なくとも1つの式Iによる本発明の活性化合物を含む。通常、本発明の化合物は、医薬として有効な量で投与される。実際に投与される本発明の化合物の量は、通常、治療されるべき状態、選択された投与経路、投与される実際の本発明の化合物、個々の患者の年齢、体重、及び応答、患者の症状の重症度などを含む、関連状況を考慮して、医師により決定されるであろう。
【０１４１】
本発明の医薬組成物は、経口、直腸、経皮、皮下、関節内、静脈内、筋肉内、及び鼻腔内を含む、種々の経路により投与され得る。意図される送達経路に応じて、本発明の化合物は、好ましくは、注射用もしくは経口組成物として、又は全て経皮投与用の、軟膏として、ローションとして、もしくはパッチとしてのいずれかで製剤化される。
【０１４２】
経口投与用の組成物は、バルク液体溶液もしくは懸濁液、又はバルク粉末の形態を取り得る。しかしながら、より一般的には、当該組成物は、正確な投与を容易にするために単位剤形で提示される。「単位剤形」という用語は、ヒト対象及び他の哺乳動物用の単位投薬量として好適な物理的に別個の単位を指し、各々の単位は、好適な医薬賦形剤、ビヒクル、又は担体とともに、所望の治療効果を生じるように計算された所定の分量の活性材料を含有する。典型的な単位剤形は、液体組成物が予め充填され、予め測定されたアンプルもしくは注射器、又は固体組成物の場合、丸剤、錠剤、カプセル剤などを含む。そのような組成物において、式Iによる本発明の化合物は、通常、微量成分(約0.1〜約50重量％又は好ましくは約1〜約40重量％)であり、残りは、様々なビヒクル又は担体及び所望の投与形態を形成するのに役立つ加工助剤である。
【０１４３】
経口投与に好適な液体形態は、緩衝剤、懸濁化剤及び分散剤、着色料、香料などとともに、好適な水性又は非水性のビヒクルを含み得る。固体形態は、例えば、以下の成分、或いは類似の性質の本発明の化合物：微結晶性セルロース、トラガカントガム、もしくはゼラチンのような結合剤；デンプンもしくは乳糖のような賦形剤、アルギン酸、プリモゲル、もしくはトウモロコシデンプンのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素のような流動促進剤；ショ糖もしくはサッカリンのような甘味剤；又はペパーミントもしくはオレンジ香料のような着香剤のいずれかを含み得る。
【０１４４】
注射用組成物は、通常、当技術分野で公知の注射用滅菌生理食塩水もしくはリン酸緩衝生理食塩水又は他の注射用担体に基づく。前述のように、そのような組成物中の式Iによる本発明の活性化合物は、通常、微量成分で、多くの場合、約0.05〜10重量％であり、残りは、注射用担体などである。
【０１４５】
経皮組成物は、通常、活性成分(複数可)を、一般的には、約0.01〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約20重量％、好ましくは約0.1〜約10重量％、且つより好ましくは約0.5〜約15重量％の範囲の量で含有する局所軟膏剤又はクリームとして製剤化される。軟膏剤として製剤化される場合、活性成分は、通常、パラフィン性又は水混和性のいずれかの軟膏基剤と組み合わされるであろう。或いは、活性成分は、例えば、水中油型クリーム基剤とともにクリーム中において製剤化され得る。そのような経皮製剤は当技術分野で周知であり、且つ、通常、活性成分又は製剤の皮膚透過性の安定性を高める追加成分を含む。全てのそのような公知の経皮製剤及び成分は、本発明の範囲内に含まれる。
【０１４６】
本発明の化合物は、経皮手段によって投与され得もする。したがって、経皮投与は、貯留槽型もしくは多孔性膜型又は固体マトリクス型のどちらかのパッチを用いて達成され得る。
【０１４７】
経口投与可能な、注射可能な、又は局所投与可能な組成物のための上記の成分は、代表的なものであるに過ぎない。他の材料及び加工技術などは、引用により本明細書中に組み込まれる、レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences), 第17版, 1985, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvaniaのパート8に記載されている（Remingtonの文献、1985）。
【０１４８】
本発明の化合物は、持続放出形態で又は持続放出薬物送達系からも投与され得る。代表的な持続放出材料の説明は、レミントンの医薬科学に見出され得る。
【０１４９】
以下の製剤例は、本発明に従って調製され得る代表的な医薬組成物を例示したものである。しかしながら、本発明は、以下の医薬組成物に限定されない。
【０１５０】
製剤1−錠剤
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、乾燥ゼラチン結合剤と約1：2の重量比で混合され得る。微量のステアリン酸マグネシウムが滑沢剤として添加され得る。当該混合物は、打錠機で240〜270mg錠（1錠当たり80〜90mgの式Iによる本発明の活性化合物）に成形され得る。
【０１５１】
製剤2−カプセル剤
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、デンプン希釈剤と約1：1の重量比で混合され得る。当該混合物は、250mgカプセル（1カプセル当たり125mgの式Iによる本発明の活性化合物）に充填され得る。
【０１５２】
製剤3−液剤
式Iによる本発明の化合物（125mg）は、ショ糖（1.75g）及びキサンタンガム（4mg）と混合され得、結果として得られた混合物はブレンドされ得、No.10メッシュのU.S.篩を通され、その後、予め作製しておいた微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウム（11：89、50mg）の水溶液と混合され得る。安息香酸ナトリウム（10mg）、着香料、及び着色料は水で希釈され得、撹拌しながら添加され得る。その後、十分な水が撹拌しつつ添加され得る。その後、さらに十分な水が添加され得、5mLの総容量を生じさせる。
【０１５３】
製剤4−錠剤
式Iによる本発明の化合物は、乾燥粉末として、乾燥ゼラチン結合剤と約1：2の重量比で混合され得る。微量のステアリン酸マグネシウムが滑沢剤として添加され得る。当該混合物は、打錠機で450〜900mg錠（150〜300mgの式Iによる本発明の活性化合物）に成形され得る。
【０１５４】
製剤5−注射剤
式Iによる本発明の化合物は、緩衝滅菌生理食塩水の注射用水性媒体中に、約5mg／mLの濃度まで溶解又は懸濁され得る。
【０１５５】
製剤6−局所剤
ステアリルアルコール（250g）及び白色ワセリン（250g）は約75℃で融解され得、且つその後、水（約370g）に溶解させた式Iによる本発明の化合物（50g）、メチルパラベン（0.25g）、プロピルパラベン（0.15g）、ラウリル硫酸ナトリウム（10g）、及びプロピレングリコール（120g）の混合物が添加され得、且つ得られた混合物は凝固するまで撹拌され得る。
【０１５６】
治療方法
一実施態様において、本発明は、医薬において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１５７】
別の実施態様において、本発明は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療において使用するための医薬の製造に使用される、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１５８】
特定の実施態様において、本発明は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。
【０１５９】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、当該状態の治療又は予防のために、有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。
【０１６０】
一実施態様において、本発明は、本発明の化合物及び他の治療剤を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、他の治療剤は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊の治療剤であり、治療のためである。
【０１６１】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、炎症状態、２型糖尿病、神経及び／又は神経変性疾患、自己免疫疾患、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）、異常な血管新生に関連する疾患、軟骨の退化、及び／又は軟骨の恒常性の崩壊から選択された状態にある哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、当該状態の治療又は予防のために、有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。
【０１６２】
一実施態様において、本発明は、炎症状態の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、炎症性疾患は、関節リウマチ、変形性関節症、アレルギー性気道疾患（例えば、喘息）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）及び炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）から選択される。より具体的には、炎症性疾患は、関節リウマチ及び慢性閉塞性肺疾患（COPD）から選択される。
【０１６３】
一実施態様において、本発明は、炎症状態の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物をの使用を提供する。特定の実施態様において、炎症性疾患は、関節リウマチ、変形性関節症、アレルギー性気道疾患（例えば、喘息）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）及び炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）から選択される。より具体的には、炎症性疾患は、関節リウマチ、及び慢性閉塞性肺疾患（COPD）から選択される。
【０１６４】
一実施態様において、本発明は、炎症状態の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、炎症性疾患は、関節リウマチ、変形性関節症、アレルギー性気道疾患（例えば、喘息）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）及び炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）から選択される。より具体的には、炎症性疾患は、関節リウマチ、及び慢性閉塞性肺疾患（COPD）から選択される。
【０１６５】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、炎症状態から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記状態の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載された医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、炎症性疾患は、関節リウマチ、変形性関節症、アレルギー性気道疾患(例えば、喘息)、慢性閉塞性肺疾患（COPD）及び炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）から選択される。より具体的には、炎症性疾患は、関節リウマチ、及び慢性閉塞性肺疾患（COPD）から選択される。
【０１６６】
一実施態様において、本発明は、２型糖尿病の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１６７】
一実施態様において、本発明は、２型糖尿病の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。
【０１６８】
一実施態様において、本発明は、２型糖尿病の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。
【０１６９】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、２型糖尿病から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記状態の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。
【０１７０】
一実施態様において、本発明は、神経及び／又は神経変性疾患の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、神経及び／又は神経変性疾患は、脳卒中、脊髄損傷、外傷性脳損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び多発性硬化症から選択される。
【０１７１】
一実施態様において、本発明は、神経及び／又は神経変性疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、神経及び／又は神経変性疾患は、脳卒中、脊髄損傷、外傷性脳損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び多発性硬化症から選択される。
【０１７２】
一実施態様において、本発明は、神経及び／又は神経変性疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、神経及び／又は神経変性疾患は、脳卒中、脊髄損傷、外傷性脳損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び多発性硬化症から選択される。
【０１７３】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、神経及び／又は神経変性疾患から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記疾患の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、神経及び／又は神経変性疾患は、脳卒中、脊髄損傷、外傷性脳損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び多発性硬化症から選択される。
【０１７４】
一実施態様において、本発明は、自己免疫疾患の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、自己免疫疾患は、COPD、喘息、全身エリテマトーデス、I型糖尿病及び炎症性腸疾患から選択される。
【０１７５】
一実施態様において、本発明は、自己免疫疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、自己免疫疾患は、COPD、喘息、全身エリテマトーデス、I型糖尿病及び炎症性腸疾患から選択される。
【０１７６】
一実施態様において、本発明は、自己免疫疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、自己免疫疾患は、COPD、喘息、全身エリテマトーデス、I型糖尿病及び炎症性腸疾患から選択される。
【０１７７】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、自己免疫疾患から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記状態の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、自己免疫疾患は、COPD、喘息、全身エリテマトーデス、I型糖尿病及び炎症性腸疾患から選択される。
【０１７８】
一実施態様において、本発明は、増殖性疾患の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、増殖性疾患は癌である。より特定の実施態様において、癌は、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、肥満細胞腫、結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、腎臓癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌、尿路癌、甲状腺癌、食道癌、悪性神経膠種及び子宮平滑筋肉腫から選択される。より特定の実施態様において、癌は乳癌である。他のより特定の実施態様において、癌は、黒色腫、前立腺癌、腎臓癌、肉腫又は子宮癌である。さらに他のより特定の実施態様において、癌は、肺癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、乳癌、卵巣癌、又は膵臓癌である。
【０１７９】
一実施態様において、本発明は、増殖性疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、増殖性疾患は癌である。より特定の実施態様において、癌は、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、肥満細胞腫、結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、腎臓癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌、尿路癌、甲状腺癌、食道癌、悪性神経膠種及び子宮平滑筋肉腫から選択される。より特定の実施態様において、癌は乳癌である。他のより特定の実施態様において、癌は、黒色腫、前立腺癌、腎臓癌、肉腫又は子宮癌である。さらに他のより特定の実施態様において、癌は、肺癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、乳癌、卵巣癌、又は膵臓癌である。
【０１８０】
一実施態様において、本発明は、増殖性疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、増殖性疾患は癌である。より特定の実施態様において、癌は、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、肥満細胞腫、結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、腎臓癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌、尿路癌、甲状腺癌、食道癌、悪性神経膠種及び子宮平滑筋肉腫から選択される。より特定の実施態様において、癌は乳癌である。他のより特定の実施態様において、癌は、黒色腫、前立腺癌、腎臓癌、肉腫又は子宮癌である。さらに他のより特定の実施態様において、癌は、肺癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、乳癌、卵巣癌、又は膵臓癌である。
【０１８１】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、増殖性疾患（具体的には、転移性疾患、及び／又は癌）から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記疾患の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、増殖性疾患は癌である。より特定の実施態様において、癌は、黒色腫、リンパ腫、白血病、線維肉腫、横紋筋肉腫、肥満細胞腫、結腸直腸癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、膀胱癌、腎臓癌、胃癌、膠芽腫、原発性肝癌、卵巣癌、前立腺癌及び子宮平滑筋肉腫から選択される。より特定の実施態様において、癌は乳癌である。他のより特定の実施態様において、癌は、黒色腫、前立腺癌、腎臓癌、肉腫又は子宮癌である。さらに他のより特定の実施態様において、癌は、肺癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、乳癌、卵巣癌、又は膵臓癌である。
【０１８２】
一実施態様において、本発明は、転移性疾患の予防及び／又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、転移性疾患は、胆管癌、結腸癌、胆嚢癌、悪性黒色腫、粘液腫、神経内分泌腫瘍、胸部のパジェット病、直腸癌、上大静脈症候群、外陰癌である。より特定の実施態様において、転移性疾患は乳癌である。
【０１８３】
一実施態様において、本発明は、転移性疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、転移性疾患は、胆管癌、結腸癌、胆嚢癌、悪性黒色腫、粘液腫、神経内分泌腫瘍、胸部のパジェット病、直腸癌、上大静脈症候群、外陰癌である。より特定の実施態様において、転移性疾患は乳癌である。
【０１８４】
一実施態様において、本発明は、転移性疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、転移性疾患は、胆管癌、結腸癌、胆嚢癌、悪性黒色腫、粘液腫、神経内分泌腫瘍、胸部のパジェット病、直腸癌、上大静脈症候群、外陰癌である。より特定の実施態様において、転移性疾患は乳癌である。
【０１８５】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、転移性疾患から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記状態の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、転移性疾患は、胆管癌、結腸癌、胆嚢癌、悪性黒色腫、粘液腫、神経内分泌腫瘍、胸部のパジェット病、直腸癌、上大静脈症候群、外陰癌である。より特定の実施態様において、転移性疾患は乳癌である。
【０１８６】
一実施態様において、本発明は、異常な血管新生に関連する疾患の予防及び/又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は、アテローム性動脈硬化症、高血圧、腫瘍増殖、炎症、関節リウマチ、滲出型黄斑変性症、脈絡膜血管新生、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、及び多形性膠芽腫（glioblastoma multiforma）から選択される。より特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は腫瘍増殖である。
【０１８７】
一実施態様において、本発明は、異常な血管新生に関連する疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は、アテローム性動脈硬化症、高血圧、腫瘍増殖、炎症、関節リウマチ、滲出型黄斑変性症、脈絡膜血管新生、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、及び多形性膠芽腫（glioblastoma multiforma）から選択される。より特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は腫瘍増殖である。
【０１８８】
他の実施態様において、本発明は、異常な血管新生に関連する疾患の予防及び/又は治療において使用するための医薬の製造に使用される、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は、アテローム性動脈硬化症、高血圧、腫瘍増殖、炎症、関節リウマチ、滲出型黄斑変性症、脈絡膜血管新生、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、及び多形性膠芽腫（glioblastoma multiforma）から選択される。より特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は腫瘍増殖である。
【０１８９】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、異常な血管新生に関連する疾患から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記疾患の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は、アテローム性動脈硬化症、高血圧、腫瘍増殖、炎症、関節リウマチ、滲出型黄斑変性症、脈絡膜血管新生、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、及び多形性膠芽腫（glioblastoma multiforma）から選択される。より特定の実施態様において、異常な血管新生に関連する疾患は腫瘍増殖である。
【０１９０】
一実施態様において、本発明は、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患の予防及び/又は治療において使用するための、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特定の実施態様において、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患は、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎、敗血症性又は感染性関節炎、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、疼痛性ジストロフィー、軟骨形成不全、パジェット病、ティーツェ症候群又は肋軟骨炎、線維筋痛、骨軟骨炎、神経性又は神経障害性関節炎、関節症、関節炎様変形性骨関節炎風土病の風土型（endemic forms of arthritis like osteoarthritis deformans endemica）、ムセレニ病及びハンディゴドゥ病、線維筋痛に由来する変性、全身性エリテマトーデス、強皮症及び強直性脊椎炎から選択される。
【０１９１】
一実施態様において、本発明は、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患の予防及び／又は治療における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患は、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎、敗血症性又は感染性関節炎、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、疼痛性ジストロフィー、軟骨形成不全、パジェット病、ティーツェ症候群又は肋軟骨炎、線維筋痛、骨軟骨炎、神経性又は神経障害性関節炎、関節症、関節炎様変形性骨関節炎風土病の風土型（endemic forms of arthritis like osteoarthritis deformans endemica）、ムセレニ病及びハンディゴドゥ病、線維筋痛に由来する変性、全身性エリテマトーデス、強皮症及び強直性脊椎炎から選択される。
【０１９２】
一実施態様において、本発明は、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物の使用を提供する。特定の実施態様において、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患は、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎、敗血症性又は感染性関節炎、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、疼痛性ジストロフィー、軟骨形成不全、パジェット病、ティーツェ症候群又は肋軟骨炎、線維筋痛、骨軟骨炎、神経性又は神経障害性関節炎、関節症、関節炎様変形性骨関節炎風土病の風土型（endemic forms of arthritis like osteoarthritis deformans endemica）、ムセレニ病及びハンディゴドゥ病、線維筋痛に由来する変性、全身性エリテマトーデス、強皮症及び強直性脊椎炎から選択される。
【０１９３】
治療態様のさらなる方法において、本発明は、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患から選択された状態の哺乳動物の予防及び／又は治療方法を提供し、当該方法は、前記疾患の治療又は予防のための有効量の本発明の化合物又は1つ以上の本明細書に記載の医薬組成物の投与を含む。特定の実施態様において、軟骨の恒常性の退化及び／又は崩壊を含む疾患は、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎、敗血症性又は感染性関節炎、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、疼痛性ジストロフィー、軟骨形成不全、パジェット病、ティーツェ症候群又は肋軟骨炎、線維筋痛、骨軟骨炎、神経性又は神経障害性関節炎、関節症、関節炎様変形性骨関節炎風土病の風土型（endemic forms of arthritis like osteoarthritis deformans endemica）、ムセレニ病及びハンディゴドゥ病、線維筋痛に由来する変性、全身性エリテマトーデス、強皮症及び強直性脊椎炎から選択される。
【０１９４】
注射用量レベルは、約1〜約120時間、特に、24〜96時間全てにおいて、約0.1mg／kg／時〜少なくとも10mg／kg／時の範囲である。適正な定常状態レベルを達成するために、約0.1mg／kg〜約10mg／kg又はそれよりも多くの予充填ボーラスが投与され得る。最大総用量は、40〜80kgのヒト患者の場合、約2g／日を超えることは予期されていない。
【０１９５】
退行性状態のような長期状態の予防及び／又は治療のためには、治療用レジメンは、通常、数カ月又は数年にわたるため、患者の便宜及び忍容性のために経口投与が好ましい。経口投与の場合、1日に1〜4回（1〜4）の常用量、特に、1日に1〜3回（1〜3）の常用量、典型的には、1日に1〜2回（1〜2）の常用量、最も典型的には、1日に1回（1）の常用量が代表的なレジメンである。或いは、長期持続作用型薬物について、経口投与の場合、隔週、1週間に1回、及び1日に1回が代表的なレジメンである。具体的には、投薬レジメンは、1〜14日おき、より特には、1〜10日おき、さらにより特には、1〜7日おき、且つ最も特には、1〜3日おきであることができる。
【０１９６】
これらの投与様式を用いて、各々約100〜約500mg、且つ特には約200〜約300mgを提供するという具体的な用量において、各用量は、約1〜約1000mgの本発明の化合物を提供する。
【０１９７】
経皮用量は、通常、注射用量を用いて達成されるのと同様又はそれよりも低い血液レベルを提供するように選択される。
【０１９８】
状態の発現を妨げるために使用される場合、本発明の化合物は、当該状態を発現するリスクのある患者に、通常、医師の助言に従い、かつその監督下で、上記の投薬量レベルで投与されるであろう。特定の状態を発現するリスクのある患者は、通常、当該状態の家族歴を有する者、又は遺伝子検査もしくはスクリーニングによって当該状態を特に発現しやすいことが確認されている者を含む。
【０１９９】
本発明の化合物は、唯一の活性薬剤として投与され得、又はそれは、同一もしくは同様の治療活性を示し、かつそのような併用投与に安全かつ有効であることが明らかとされている本発明の他の化合物を含む、他の治療剤と組み合わせて投与され得る。具体的な実施態様において、2つ（又はそれより多く）の薬剤の共投与は、顕著により少ない用量で各々を使用し、それにより、認められる副作用を低下させることを可能にする。
【０２００】
一実施態様において、本発明の化合物又は本発明の化合物を含む医薬組成物は、医薬として投与される。具体的な実施態様において、前記医薬組成物は、さらなる活性成分をさらに含む。
【０２０１】
一実施態様において、本発明の化合物は、炎症を伴う疾患の治療及び/又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが、免疫調節剤、例えば、アザチオプリン、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾロン又はデキサメタゾン）、シクロホスファミド、シクロスポリンA、タクロリムス、ミコフェノール酸塩、モフェチル、ムロモナブ−CD3（OKT3、例えば、Orthocolone（登録商標））、ATG、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセン、及びピロキシカムを含む。
【０２０２】
一実施態様において、本発明の化合物は、関節炎（例えば、関節リウマチ）の治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが、鎮痛薬、非ステロイド性抗炎症薬（NSAIDS）、ステロイド、合成DMARDS（例えば、限定するものではないが、メトトレキセート、レフルノミド、スルファサラジン、オーラノフィン、金チオリンゴ酸ナトリウム、ペニシラミン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、トファシチニブ、バリシチニブ、ホスタマチニブ、及びシクロスポリン）、並びに生物学的DMARDS（例えば、限定するものではないが、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、リツキシマブ、及びアバタセプト）を含む。
【０２０３】
一実施態様において、本発明の化合物は、増殖性障害の治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、限定されないが:メトトレキサート、ロイコボリン（leukovorin）、アドリアマイシン、プレドニゾン、ブレオマイシン、シクロホスファミド、5-フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ドキソルビシン、タモキシフェン、トレミフェン、酢酸メゲストロール、アナストロゾール、ゴセレリン、抗HER2モノクローナル抗体（例えば、Herceptin（商標））、カペシタビン、塩酸ラロキシフェン、EGFR阻害剤（例えば、lressa（登録商標）、Tarceva（商標）、Erbitux（商標））、VEGF阻害剤（例えば、Avastin（商標））、プロテアソーム阻害剤（例えば、Velcade（商標））、Glivec（登録商標）、及びhsp90阻害剤（例えば、17-AAG）を含む。さらに、式Iによる本発明の化合物は、限定されないが、放射線療法又は外科手術を含む他の療法と組み合わせて投与され得る。具体的な実施態様において、増殖性障害は、癌、骨髄増殖性疾患及び白血病から選択される。
【０２０４】
一実施態様において、本発明の化合物は、自己免疫疾患の治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが：グルココルチコイド、細胞増殖抑制剤（例えば、プリン類似体）、アルキル化剤（例えば、ナイトロジェン・マスタード（シクロホスファミド）、ニトロソ尿素、本発明の白金化合物、及びその他)、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、アザチオプリン及びメルカプトプリン）、細胞毒性抗生物質（例えば、ダクチノマイシン、アントラサイクリン、マイトマイシンC、ブレオマイシン、及びミトラマイシン）、抗体（例えば、抗CD20、抗CD25又は抗CD3(OTK3)モノクローナル抗体、Atgam（登録商標）、及びThymoglobuline（登録商標））、シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン（シロリムス）、インターフェロン（例えば、IFN-β）、TNF結合タンパク質（例えば、インフリキシマブ、エタネルセプト、又はアダリムマブ）、ミコフェノレート、フィンゴリモド並びにミリオシンを含む。
【０２０５】
一実施態様において、本発明の化合物は、喘息及び／又は鼻炎及び／又はCOPDの治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが：β2-アドレナリン受容体作動薬（例えば、サルブタモール、レバルブテロール、テルブタリン及びビトルテロール）、エピネフリン（吸入又は錠剤）、抗コリン作動薬（例えば、臭化イプラトロピウム）、グルココルチコイド（経口又は吸入）、長時間作用型β2−作動薬（例えば、サルメテロール、ホルモテロール、バンブテロール、及び持続放出性経口アルブテロール）、吸入ステロイドと長時間作用型気管支拡張薬の組合せ（例えば、フルチカゾン/サルメテロール、ブデソニド／ホルモテロール）、ロイコトリエン拮抗薬及び合成阻害剤（例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト及びジロートン）、メディエーター放出阻害剤（例えば、クロモグリケート及びケトチフェン）、IgE応答の生体調節因子（例えば、オマリズマブ）、抗ヒスタミン薬（例えば、セチリジン（ceterizine）、シンナリジン、フェキソフェナジン）並びに血管収縮薬（例えば、オキシメタゾリン、キシロメタゾリン、ナファゾリン及びトラマゾリン）を含む。
【０２０６】
さらに、本発明の化合物は、喘息及び/又はCOPDの緊急治療と組み合わせて投与され得、そのような治療は、酸素又はヘリオックス投与、噴霧型サルブタモール又はテルブタリン（抗コリン作動薬（例えば、イプラトロピウム）と任意に組み合わされる）、全身性ステロイド（経口又は静脈内、例えば、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はヒドロコルチゾン）、静脈内サルブタモール、非特異的β−作動薬、注射又は吸入（例えば、エピネフリン、イソエタリン、イソプロテレノール、メタプロテレノール）、抗コリン作動薬（静脈注射又は噴霧型、例えば、グリコピロレート、アトロピン、イプラトロピウム）、メチルキサンチン（テオフィリン、アミノフィリン、バミフィリン）、気管支拡張作用を有する吸入麻酔薬（例えば、イソフルラン、ハロタン、エンフルラン）、ケタミン及び静脈内硫酸マグネシウムを含む。
【０２０７】
一実施態様において、本発明の化合物は、炎症性腸疾患（IBD）の治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され；特定の薬剤は、これらに限定されないが:グルココルチコイド（例えば、プレドニゾン、ブデソニド）、合成疾患修飾性免疫調整剤（例えば、メトトレキサート、レフルノミド、スルファサラジン、メサラジン、アザチオプリン、6−メルカプトプリン及びシクロスポリン）並びに疾患修飾性生物免疫調整剤（インフリキシマブ、アダリムマブ、リツキシマブ、及びアバタセプト）を含む。
【０２０８】
一実施態様において、本発明の化合物は、SLEの治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが：ヒトモノクローナル抗体（ベリムマブ（Benlysta））、抗マラリア薬（例えば、プラケニル、ヒドロキシクロロキン）、免疫抑制剤（例えば、メトトレキセート及びアザチオプリン）、シクロホスファミド及びミコフェノール酸のような疾患修飾性抗リウマチ薬（DMARD）、非ステロイド性抗炎症薬、オピエート（例えば、デキストロプロポキシフェン及びココダモール）、オピオイド（例えば、ヒドロコドン、オキシコドン、MSコンチン、又はメタドン）及びフェンタニルデュラゲシック経皮パッチのような免疫抑制薬及び鎮痛薬を含む。
【０２０９】
一実施態様において、本発明の化合物は、乾癬の治療及び／又は予防のための他の治療剤と共投与され、特定の薬剤は、これらに限定されないが：コールタール、ジトラノール(アントラリン)、デスオキシメタゾン（Topicort（商標））のようなコルチコステロイド、フルオシノニド、ビタミンD3類似体（例えば、カルシポトリオール）、アルガン油及びレチノイド（エトレチナート、アシトレチン、タザロテン）を含有する浴溶液、保湿剤、薬用クリーム及び軟膏剤のような局所治療薬、メトトレキセート、シクロスポリン、レチノイド、チオグアニン、ヒドロキシウレア、スルファサラジン、ミコフェノール酸モフェチル、アザチオプリン、タクロリムス、フマル酸エステルのような全身治療薬、又はAmevive（商標）、Enbrel（商標）、Humira（商標）、Remicade（商標）、Raptiva（商標）及びウステキヌマブ（IL-12及びIL-23遮断薬）のような生物製剤を含む。さらに、本発明の化合物は、限定されないが、光線療法、又は光化学療法（例えば、ソラレン紫外線A療法（PUVA）)を含む他の療法と組み合わせて投与され得る。
【０２１０】
当業者には明らかであるように、共投与によって、2以上の治療剤を同じ治療レジメンの一部として患者に送達する任意の手段が含まれる。当該2以上の薬剤は、単一の製剤中で、すなわち、単一の医薬組成物として、同時に投与され得るが、これは必須ではない。当該薬剤は、異なる製剤中で且つ異なる時間に投与され得る。
【０２１１】
化学的合成手順
概要
本発明の化合物は、以下の一般的方法及び手順を用いて容易に入手可能な出発材料から調製され得る。典型的な又は好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など）が与えられる場合、別途明記されない限り、他のプロセス条件も使用され得ることが理解されるであろう。最適な反応条件は、使用される特定の反応物又は溶媒によって異なり得るが、そのような条件は、当業者によって、ルーチンの最適化手順により決定され得る。
【０２１２】
さらに、当業者には明らかであるように、特定の官能基が望ましくない反応を受けるのを防ぐために、従来の保護基が必要となる場合がある。特定の官能基のための好適な保護基、並びに保護及び脱保護のための好適な条件の選択は、当技術分野において周知である(Wuts及びGreeneの文献、2012)。
【０２１３】
以下の方法は、本明細書において上で定義されている本発明の化合物及び比較例の調製のために詳細に提示されている。本発明の化合物は、有機合成の分野の当業者によって、公知の又は市販の出発材料及び試薬から調製され得る。
【０２１４】
全ての試薬は商用等級であり、別途明記されない限り、それ以上精製することなく、受け取った状態で使用された。市販の無水溶媒は、不活性雰囲気下で実施される反応に使用された。別途規定されない限り、試薬等級溶媒は、他の全ての場合に使用された。カラム・クロマトグラフィーは、シリカゲル60（35〜70μm）上で実施された。薄層クロマトグラフィーは、予めコーティングされたシリカゲルF-254プレート（0.25mm厚）を用いて実施された。分析キラル・カラム・クロマトグラフィーは、ウォーターズ・アライアンスの分離モジュール2690及びPDA2996検出器（254nM）上で行われた。キラル・カラムは、Chiralpak AD-H（250 x 4.6 mm、5μm）、流速1mL／分、イソクラチック・モード（50％エタノール／50％メタノール）であった。1H NMRスペクトルは、Bruker DPX 400 NMRスペクトロメータ（400MHz）又はBruker Advance 300 NMRスペクトロメータ（300MHz）で記録された。1H NMRスペクトルの化学シフト（δ）は、内部基準としてのテトラメチルシラン（δ0.00）又は適当な残留溶媒ピーク、すなわち、CHCl3（δ7.27）と比べた百万分率（ppm）で報告される。多重度は、一重線（s）、二重線（d）、三重線（t）、四重線（q）、五重線（quin）、多重線（m）、及びブロード（br）として与えられる。エレクトロスプレーMSスペクトルは、WatersプラットフォームLC／MSスペクトロメータ又はWaters Acquity PDA検出器及びSQD質量分析計を備えたWaters Acquity UPLCで得られた。使用されたカラム：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm 2.1×30mmカラム又はAcquity UPLC BEH C18 1.7μm 2.1×50mmカラムを備えたUPLC BEH C18 1.7μm 2.1×5mm VanGuardプレカラム。全ての方法でMeCN/H2O勾配が使用されている。MeCN及びH2Oは、0.1％ギ酸又はNH3（10mM）のいずれかを含有する。分取LCMS：使用されたカラム、Waters XBridge Prep C18 5μm ODB 30mm ID×100mm L（分取カラム）及びWaters XBridge Prep C18 5μm 4.6mm ID×100mm L（分析カラム）。全ての方法でMeOH/H2O勾配又はMeCN/H2O勾配のいずれか使用されている。MeOH、MeCN、及びH2Oは、0.1％ギ酸又は0.1％ジエチルアミンのどちらかを含有する。マイクロ波加熱は、Biotage Initiatorを用いて実施された。
表１．実験セクションにおいて使用される省略形のリスト
【表１】
2016528269.tif 000023
2016528269.tif 000024
本発明の化合物の合成的調製
実施例1.  一般的な合成方法
1.1.  本発明の化合物の調製 
1.1.1.  合成方法の概略1：  中間体Gen-5の合成のための一般的な方法
【化２１】
2016528269.tif 000025
式中  YはI又はBrであり
工程i：方法A
A1：ボロン酸エステルの形成
工程ii：以下の方法のうちの1つからなる
B1：酸を用いるアミド結合形成反応
B2：酸塩化物を用いるアミド結合形成反応
B3：酸塩化物に変換された酸を用いるアミド結合形成反応
工程iii：以下の方法のうちの1つからなる
B1：酸を用いるアミド結合形成反応
K：EDC/HOBtを用い、ペプチド・カップリングによるアミド結合形成
工程iv：以下の方法のうちの1つからなる
A2：ボロン酸エステルの形成
1.1.2.  合成方法の概略2：本発明の化合物の合成のための一般的な方法
【化２２】
2016528269.tif 000026
式中
−  Ryは、H又はMe又はEtであり、
−  Rxは、R4又はCH(OCH3)2又は2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-メチル又は1-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロプロパンであり、
−  Rzは、H又はBocであり、及び
−  Rw は、R4又はCH(OCH3)2であり
工程i：方法C
C：シリル保護
工程ii：方法D
D：ワインレブアミドの形成
工程iii：方法E
E：ケトンの導入
工程iv：方法E
E：ケトンの導入
工程v：以下の方法のうちの1つからなる
F1：中間体Gen-5を用いる鈴木カップリング
F2：ボロン酸のワンポット形成及び中間体Gen-4を用いる鈴木カップリング
工程vi：以下の方法のうちの1つ又はいくつかからなる
G1：ヒドラジンを用いる環化
G2：シリル脱保護
G3：Boc脱保護
工程vii：方法F1
F1：中間体Gen-3又はGen-27を用いる鈴木カップリング
工程viii：方法G1
G1：ヒドラジンを用いる環化
工程ix：方法B1
B1：酸を用いるアミド結合形成反応
L：アルデヒドのアルコールへの還元
1.1.3.  合成方法の概略3：化合物の合成のための一般的な方法
【化２３】
2016528269.tif 000027
工程i：方法H
H：中間体Gen-5を用いる鈴木カップリング
工程ii：方法I
I1：TFAを用いるPMB脱保護
I2：H2SO4を用いるPMB脱保護
工程iii：
H：鈴木カップリング
工程iv：
I1：TFAを用いるPMB脱保護
I2：H2SO4を用いるPMB脱保護
工程v：
B1：酸を用いるアミド結合形成反応
1.1.4.  合成方法の概略4：酸の合成のための一般的な方法
【化２４】
2016528269.tif 000028
式中、ZはBr又はR2であり
工程i：方法P
P：エステルの形成
工程ii：以下の方法のうちの1つからなる
Q：O−アルキル化
工程iii：以下の方法のうちの1つからなる
R1：Gen-9-gを用いる鈴木カップリング
R2：鹸化
【０２１５】
1.2.  本発明の化合物の合成のための一般的方法
1.2.1.  一般的方法A：中間体Gen-3の合成
【化２５】
2016528269.tif 000029
1.2.1.1.  一般的方法A1
窒素バブリングによって予め脱気されたDMSO中の中間体Gen-2（1当量）、中間体Gen-9-a（1.05当量）及び酢酸カリウム（3当量）の懸濁液であって、窒素バブリングによって予め脱気されたものに、PdCl2(dppf).DCM（0.05当量）が添加される。反応混合物は、窒素下、80℃にて一晩加熱される。反応は室温まで冷却され、その後、水と酢酸エチルが添加される。二相性の溶液が、セライトの栓をとおって濾過され（ゆっくり）、且つ、ケーキが酢酸エチルで洗浄される。濾液の二層は分離され、水層は再び酢酸エチルで抽出され、且つ、一緒にされた有機層は水で洗浄される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲル上でクロマトグラフィーによって精製され、中間体Gen-3を提供する。
【０２１６】
1.2.1.2  中間体Gen-3-a：4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)フェニルアミンの例示的合成
【化２６】
2016528269.tif 000030
2時間の窒素バブリングによって予め脱気されたDMSO（2.65L）中の中間体Gen-2-b（300g、1.29mol、1当量）、中間体Gen-9-a（343.2g、1.35mol、1.05当量）及び酢酸カリウム（380g、3.9mol、3当量）の懸濁液であって、1時間の窒素バブリングによって予め脱気されたものに、PdCl2(dppf).DCM（52g、0.06mol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、窒素下、80℃にて一晩撹拌される。反応は室温まで冷却され、その後、水（1.5L）と酢酸エチル（3L）が添加される。二相性の溶液が、セライトの栓をとおって濾過され、且つ、ケーキが酢酸エチル（2L）で洗浄される。濾液の二層は分離され、水層は再び酢酸エチル（3L）で抽出され、且つ、一緒にされた有機層は水（500mL）で洗浄される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲル上でクロマトグラフィー（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：95/5〜70/30）によって精製され、中間体Gen-3-aを提供する。
【０２１７】
【化２７】
2016528269.tif 000031
【０２１８】
1.2.2.  一般的方法B：中間体Gen-5の合成
【化２８】
2016528269.tif 000032
1.2.2.1.  一般的方法B1
【化２９】
2016528269.tif 000033
撹拌された、中間体Gen-1（1〜1.2当量）、及びアミン誘導体（1当量）のDCM又はDMF溶液に、室温にて、アルゴン下で、TBTU又はHATU（1〜1.2当量）と、その後にTEA又はNMM（2〜3当量）が添加され、反応混合物は、室温にて完了まで撹拌される。その後、反応は水でクエンチされ、層が分離される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。代わりに、反応が真空下で濃縮され、残渣は、酢酸エチル又は酢酸エチル／n-ブタノール混合物と、飽和塩化アンモニウム水溶液又は水との間で分配される。層は分離され、有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。その後、残渣は、シリカゲル上でクロマトグラフィーによって精製され、期待された中間体を提供する。
【０２１９】
1.2.2.2.  中間体Gen-5-a：3,5-ジメトキシ-N-[4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-ベンズアミドの例示的合成
【化３０】
2016528269.tif 000034
撹拌された、中間体Gen-1-a（602mg、3mmol、1当量）、及び中間体Gen-3-a（700mg、3mmol、1当量）のDCM（15mL）溶液に、室温にて、アルゴン下で、TBTU（963mg、3mmol、1当量）と、その後にTEA（0.83mL、6mmol、2当量）が添加され、反応混合物は、室温にて5時間撹拌される。その後、反応は水でクエンチされ、層が分離される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲル上でクロマトグラフィー（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：80/20）によって精製され、中間体Gen-5-aを提供する。
【０２２０】
LCMS: MW (計算値): 397; m/z MW (実測値): 398 (M+H)
【０２２１】
1.2.2.3.  一般的方法B2
【化３１】
2016528269.tif 000035
アミン誘導体（1当量）のDCM溶液が、窒素下で3℃まで冷却され、その後、TEA（1.1当量）、続いて対応する塩化ベンゾイル（0.8当量）が滴下される。その後、対応する塩化ベンゾイル（0.05当量）が再び滴下され、且つ、反応は10分間撹拌し続けられる。反応混合物は、水でクエンチされ、且つ、DCMで希釈される。層が分離され、且つ、有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ真空中で蒸発される。溶剤の大半は除去され、且つ、シクロヘキサンが添加され、混合物は、室温にてさらに短時間撹拌され、結果として得られた固体は、濾過によって分離され、シクロヘキサンで洗浄され、且つ乾燥され、期待された中間体を提供する。
【０２２２】
1.2.2.4  中間体Gen-5-b：N-[4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化３２】
2016528269.tif 000036
中間体Gen-3-a（293g、1.26mol、1.0当量）のDCM（3L）溶液が、窒素下で3℃まで冷却され、その後、TEA（193mL、1.38mol、1.1当量）、続いてGen-1-e（150mL、1.0mol、0.8当量）が滴下される。その後、Gen-1-e（9.5mL、0.06mol、0.05当量）が滴下され、且つ、反応は10分間撹拌し続けられる。反応混合物は、水（1.5L）でクエンチされ、且つ、DCM（2L）で希釈される。層が分離され、且つ、有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ真空中で蒸発される。溶剤の大半は除去され、且つ、シクロヘキサン（3.0L）が添加される。混合物は、室温にて数分間撹拌され、結果として得られた固体は、濾過によって分離され、シクロヘキサンで洗浄され、且つ乾燥され、中間体Gen-5-bを提供する。
【０２２３】
LCMS: MW (計算値): 405; m/z MW (実測値): 406 (M+H)。
【０２２４】
1.2.2.5.  一般的方法B3
【化３３】
2016528269.tif 000037
0℃において、撹拌されたGen-1（1.1当量）の溶液に、塩化オキサリル（3当量）が添加される。反応混合物は、この温度にて5分間撹拌され、且つ、1滴のDMFが添加される。反応は、0℃にて再び撹拌され、且つ、その後、室温にて完了まで撹拌される。反応混合物は、真空中で乾燥するまで濃縮される。残渣はDCMに溶解される。溶液は0℃まで冷却され、且つ、アミン誘導体（1当量）及びTEA（5当量）が添加された。反応混合物は、0℃にて30分間及び室温にて一晩撹拌される。その後、反応は水でクエンチされる。DCM及び塩化アンモニウムが添加された。二層が分離された。有機層は、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液及び塩水で順に洗浄される。二層が分離され、且つ、有機層は、DCMで抽出され、その後硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで真空中で濃縮される。得られた固体は、再結晶され、中間体Gen-5を提供する。
【０２２５】
1.2.2.6.  中間体Gen-5-e：N-(3,5-ジメチル-フェニル)-4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-ベンズアミドの例示的合成
【化３４】
2016528269.tif 000038
0℃において、撹拌されたGen-1-b（1.06g、7.08mol、1.1当量）のDCM（35mL）溶液に、塩化オキサリル（1.63mL、19.3mol、3当量）が添加される。反応混合物は、この温度にて5分間撹拌され、且つ、1滴のDMFが添加される。反応は、再び0℃にて45分間且つ室温にて45分間撹拌される。反応混合物は、真空中で乾燥するまで濃縮される。残渣はDCM（30mL）に溶解される。溶液は0℃まで冷却され、且つ、アミン誘導体（1.5g、6.4mol、1当量）及びTEA（3.26g、32.2mol、5当量）が添加された。反応混合物は、0℃にて30分間及び室温にて一晩撹拌される。その後、反応は水（20mL）でクエンチされる。DCM（100mL）及び塩化アンモニウム（100mL）が添加された。二層が分離された。有機層は、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液（100mL）及び塩水（100mL）で順に洗浄される。二層は分離され、且つ、水層は、DCM（100mL）で抽出され、その後硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで真空中で濃縮される。得られた固体は、メタノール（50mL）で再結晶され、中間体Gen-5-eを提供する。
【０２２６】
1.2.2.7.  一般的方法A2
【化３５】
2016528269.tif 000039
中間体Gen 4（1当量）のジオキサン又はDMF溶液に、(BOpin)2（1.1当量）、酢酸カリウム（3当量）が添加され、且つ、混合物は、窒素又はアルゴン下、室温にて10分間撹拌される。その後、Pd(dppf)Cl2（0.05当量）が添加され、且つ、反応混合物に、120℃において140分間マイクロ波が照射され又は80℃にて一晩加熱される。混合物は、次の工程で直接使用されるか又は真空中で濃縮される。残渣は、水及び酢酸エチルと一緒にされる。有機層は、水、塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィー（溶出  エーテル／酢酸エチル：95/5〜75/25）で精製される。
【０２２７】
1.2.2.8.  中間体Gen-5-f：N-[4-クロロ-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-3,5-ジメトキシ-ベンズアミドの例示的合成
【化３６】
2016528269.tif 000040
中間体Gen-4-e（200mg、0.54mmol、1当量）のジオキサン（9.0mL）溶液に、(BOPin)2（150mg、0.59mmol、1.1当量）、酢酸カリウム（257mg、1.62mmol、3当量）が添加され、且つ、混合物は、窒素又はアルゴン下、室温にて10分間撹拌される。その後、Pd(dppf)Cl2（20mg、0.027mmol、0.05当量）が添加され、且つ、反応混合物に、120℃において140分間、マイクロ波が照射され、中間体Gen-5-fが与えられる。混合物は、次の工程で直接使用される。
【０２２８】
LCMS: MW (計算値): 417; MW (実測値): 418 (M+H)。
【０２２９】
1.2.3.  一般的方法C：中間体Gen-15の合成
【化３７】
2016528269.tif 000041
1.2.3.1.  一般的方法C
【化３８】
2016528269.tif 000042
ヒドロキシ誘導体（1当量）のDCM又はDMF溶液に、撹拌下且つ窒素下において、1H-イミダゾール（1.1〜2.4当量）及び中間体Gen-9-b（1.02〜1.2当量）が添加される。反応混合物は、添加の間は冷却され、その後、窒素下、室温にて、完了するまで撹拌される。反応混合物は、IPE又はDCMで希釈され、有機層は1M塩酸水溶液又は10％クエン酸水溶液で1回洗浄され（必要であれば、1M塩酸水溶液と塩水の混合物（1/1）及び塩水での1回の別途の洗浄）、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、期待された中間体を与える。
【０２３０】
1.2.3.2.  中間体Gen-15-b：(S)-2-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-プロピオン酸メチルエステルの例示的合成
【化３９】
2016528269.tif 000043
中間体Gen-14-b（694g、6.67mol、1当量）のDCM（7L）溶液に、撹拌下且つ窒素下において、1H-イミダゾール（500g、7.34mol、1.1当量）及び中間体Gen-9-b（1055g、7.00mol、1.05当量）が添加される。反応混合物は、添加の間は冷却され、その後、窒素下、室温にて、一晩撹拌される。反応混合物は、IPE（5.5L）で希釈され、有機層は1M塩酸水溶液（2.8L）で1回、1M塩酸水溶液と塩水との混合物（1/1）（1.4L/1.4L）で1回及び塩水（2.8L）で1回洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-15-bを与える。
【０２３１】
【化４０】
2016528269.tif 000044
【０２３２】
1.3.  一般的方法D：中間体Gen-7の合成
【化４１】
2016528269.tif 000045
1.3.1  一般的方法D
THF中の中間体Gen-9-c（1.56当量）の懸濁液に、撹拌下且つ窒素下で、-15℃と-10℃との間を含む温度にて、1時間にわたって、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（3.55当量）がゆっくりと添加される。-15℃での50分の撹拌後、-60℃未満で30分間にわたって、中間体Gen-15（1当量）のTHF溶液がアミド溶液に滴下される。その後、反応混合物は、窒素下、-70℃にて2時間、撹拌される。-50℃にて2M塩酸水溶液をゆっくりと加えることにより、反応はクエンチされ、反応に酢酸エチルが添加され且つ混合物は室温まで温められる。層は分離され且つ水層（pH約8〜9）は再び酢酸エチルで抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-7を提供する。
【０２３３】
1.3.2.  中間体Gen-7-d：(S)-2-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-N-メトキシ-N-メチル-プロピオンアミドの例示的合成
【化４２】
2016528269.tif 000046
THF（720mL）中の中間体Gen-9-c（139g、1.42mol、1.56当量）の懸濁液に、撹拌下且つ窒素下で、-15℃と-10℃との間の温度にて、1時間にわたって、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（1.3L、3.25mol、3.55当量）がゆっくりと添加される。-15℃での50分の撹拌後、-60℃未満で30分間にわたって、中間体Gen-15-b（200g、0.92mol、1当量）のTHF（600mL）溶液がアミド溶液に滴下される。その後、反応混合物は、窒素下、-70℃にて2時間、撹拌される。-50℃にて2M塩酸水溶液（600mL）をゆっくりと加えることにより、反応はクエンチされ、反応に酢酸エチル（1L）が添加され且つ混合物は室温まで温められる。層は分離され且つ水層（pH約8〜9）は、再び酢酸エチル（500mL）で抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-7-dを提供する。
【０２３４】
【化４３】
2016528269.tif 000047
【０２３５】
1.4.  一般的方法E：中間体Gen-8の合成
【化４４】
2016528269.tif 000048
1.4.1.  一般的方法E1
【化４５】
2016528269.tif 000049
LDAの溶液が、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（1.1〜1.2当量）を、窒素下、-78℃と-5℃との間を含む温度にて、DIPA（1.07〜1.2当量）のTHF溶液に滴下することによって調製される。反応混合物は、同温度で15分間〜30分間撹拌される。その後、THF中の中間体Gen-6-a（1〜1.2当量）が、-78℃と-60℃との間で滴下され、且つ、反応は、窒素下、-78℃で1時間〜1.33時間撹拌される。その後、温度を監視しながら、中間体Gen-7（1.1〜1.2当量）が滴下又は分割して添加される。混合物は、-78℃と-70℃との間で1.5時間〜3時間撹拌され且つ飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチされる。酢酸エチルが添加され、その後、有機層は、分離され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され、中間体Gen-8を与える。
【０２３６】
1.4.2.  中間体Gen-8-d：(S)-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-1-(6-クロロ-2-フルオロ-ピリジン-3-イル)-プロパン-1-オンの例示的合成
【化４６】
2016528269.tif 000050
LDAの溶液が、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（308mL、0.77mol、1.167当量）を、窒素下、-5℃にて、DIPA（100g、0.98mol、1.07当量）のTHF（540mL）溶液に滴下することによって調製される。反応混合物は、-5℃で30分間撹拌される。その後、THF（650mL）中の中間体Gen-6-a（86.8g、0.66mol、1当量）が、-60℃未満で滴下され、且つ、反応は、窒素下、-78℃で1.33時間撹拌される。その後、温度を監視しながら、中間体Gen-7-d（180g、 0.73mol、1.1当量）が滴下される。混合物は、-70℃で3時間撹拌され且つ飽和塩化アンモニウム水溶液（400mL）でクエンチされる。酢酸エチル（1L）が添加され、その後、有機層は、分離され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのケーキで精製（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：100/0〜95/5）され、中間体Gen-8-dを与える。
【０２３７】
【化４７】
2016528269.tif 000051
【０２３８】
1.4.3.  一般的方法E2
【化４８】
2016528269.tif 000052
LDAの溶液が、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（1.1当量）を、窒素下、-78℃で、DIPA（1.1当量）のTHF溶液に滴下することによって調製される。反応混合物は、-78℃で15分間〜30分間撹拌される。その後、THF中の中間体Gen-6-a（1当量）が滴下され、且つ、反応は、窒素下、-78℃で1時間撹拌される。その後、中間体Gen-15（1.1〜1.2当量）が添加され、混合物は、-78℃で1時間〜2時間撹拌され、その後、反応混合物は飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチされる。酢酸エチルが添加され、有機層は、分離され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され、中間体Gen-8を与える。
【０２３９】
1.4.4.  中間体Gen-8-c：2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-1-(6-クロロ-2-フルオロ-ピリジン-3-イル)-プロパン-1-オンの例示的合成
【化４９】
2016528269.tif 000053
LDAの溶液が、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（8.8mL、22mmol、1.1当量）を、窒素下、-78℃で、DIPA（7.1mL、22mmol、1.1当量）のTHF（40mL）溶液に滴下することによって調製される。反応混合物は、-78℃で20分間撹拌される。その後、THF（20mL）中の中間体Gen-6-a（2.63g、20mmol、1当量）が滴下され、且つ、反応は、窒素下、-78℃で1時間撹拌される。その後、中間体Gen-15-a（4.8g、22mmol、1.2当量）がまとめて添加される。混合物は、-78℃で2時間撹拌され、その後、反応混合物が飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチされる。酢酸エチルが添加され、有機層は、分離され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：95/5）、中間体Gen-8-cを与える。
【０２４０】
LCMS: MW (計算値): 317 (35Cl), 319 (37Cl); m/z MW (実測値): 318 (35Cl M+H), 320 (37Cl M+H)。
【０２４１】
1.5.  一般的方法F：中間体Gen-10の合成
【化５０】
2016528269.tif 000054
1.5.1.  一般的方法F1
【化５１】
2016528269.tif 000055
中間体Gen-8（1当量）、中間体Gen-5（1〜1.1当量）、及び炭酸セシウム（1.5〜2当量）又は炭酸ナトリウム（4当量）が、室温にて、1,4-ジオキサン／水（4/1）混合物に溶解され、溶液は、窒素を用いて脱気される。その後、PdCl2(dppf).DCM又はPd(PPh3)4（0.05〜0.07当量）が添加される。反応混合物は、80℃で1時間〜2時間加熱され、その後、室温まで冷却される。反応混合物に酢酸エチル及び水が添加され、層が分離され、且つ、水層は酢酸エチルで1回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され、中間体Gen-10を提供する。
【０２４２】
1.5.2.  中間体Gen-10-d： N-(3-{5-[2-(S)(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-プロピオニル]-6-フルオロ-ピリジン-2-イル}-4-メチル-フェニル)-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化５２】
2016528269.tif 000056
中間体Gen-8-d（60g、0.189mol、1当量）、中間体Gen-5-b（76.52g、0.19mol、1当量）、及び炭酸セシウム（120g、0.38mol、2当量）が、室温にて、1,4-ジオキサン（1.15L）と水（285mL）との混合物に溶解され、溶液は、窒素を用いて脱気される。その後、PdCl2(dppf).DCM（7.7g、0.009mol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、80℃で1時間加熱され、その後、氷浴を用いて室温まで冷却される。反応混合物に酢酸エチル（1.15L）が添加され、層が分離され、且つ、水層は酢酸エチル（300mL）で1回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水（800mL）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。粗生成物は、シリカゲルのケーキで精製され（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：100/0〜90/10）、中間体Gen-10-dを提供する。
【０２４３】
【化５３】
2016528269.tif 000057
【０２４４】
1.6.  一般的方法F2
【化５４】
2016528269.tif 000058
中間体Gen-4（1当量）、中間体Gen-9-a（1.1当量）、及び酢酸カリウム（3当量）が、室温にて、1,4-ジオキサンに溶解され、溶液は、窒素を用いて脱気される。その後、PdCl2(dppf)（0.07当量）が添加され、且つ、反応混合物は、3.25時間〜3.5時間還流される。その後、反応混合物に、窒素下で、中間体Gen-8（1当量）、炭酸セシウム（3当量）、PdCl2(dppf)（0.07当量）及び水が添加され、且つ、混合物は、0.66時間〜1.5時間還流される。室温まで冷却後、塩化アンモニウム水溶液及び酢酸エチルが添加され、層が分離され、且つ、水層は酢酸エチルで4回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、シリカゲルのパッドで濾過され且つ濾液は乾燥するまで蒸発される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され、中間体Gen-10を提供する。
【０２４５】
1.7.  中間体Gen-10-b： N-(5-アセチル-6-フルオロ-2'-メチル-[2,3']ビピリジニル-5'-イル)-3,5-ジメトキシ-ベンズアミドの例示的合成
【化５５】
2016528269.tif 000059
中間体Gen-4-a（15.07g、43mmol、1当量）、中間体Gen-9-a（12 g、47mmol、1.1当量）、及び酢酸カリウム（12.64g、13mmol、3当量）が、室温にて、1,4-ジオキサン（400mL）に溶解され、溶液は、窒素を用いて脱気される。その後、PdCl2(dppf)（2.2g、3mmol、0.07当量）が添加され、且つ、反応混合物は、3.5時間還流される。その後、反応混合物に、窒素下で、中間体Gen-8-b（7.45g、43mmol、1当量）、炭酸セシウム（41.95g、13 mmol、3当量）、PdCl2(dppf)（2.20g、3mmol、0.07当量）及び水（100mL）が添加され、且つ、混合物は、1.5時間還流される。室温まで冷却した後、塩化アンモニウム水溶液及び酢酸エチルが添加され、層は分離され、且つ、水層は酢酸エチルで4回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、シリカゲルのパッドで濾過され且つ濾液は乾燥するまで蒸発される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：70/30〜0/100）、中間体Gen-10-bを提供する。
【０２４６】
LCMS: MW (計算値): 409; m/z MW (実測値): 410 (M+H)。
【０２４７】
1.8  一般的方法F1：中間体Gen-11の合成
【化５６】
2016528269.tif 000060
中間体Gen-11は、前記した一般的方法F1に従って、中間体Gen-8及びGen-3又はGen-27から調製される。
【０２４８】
1.9.  一般的方法G
1.9.1.  一般的方法G1
【化５７】
2016528269.tif 000061
(2-フルオロ-3-セト-ピリジン-6-イル)誘導体（1当量）のイソプロパノール又はエタノール溶液に、ヒドラジン一水和物（5〜12当量）が添加され、反応混合物は、還流下に、又は、マイクロ波照射下、120℃と130℃との間を含む温度にて、45分間〜3時間加熱される。その後、反応混合物は水でクエンチされ、その後、イソプロパノール又はエタノールは真空中で蒸発される。残渣は酢酸エチルで希釈され、且つ、有機層は、水、塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濾液は乾燥するまで蒸発される。代わりに、反応混合物は、真空中で濃縮される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィー又は結晶化によって得られる。
【０２４９】
1.9.2.  中間体Gen-13-b：3-(3-ジメトキシメチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニルアミンの例示的合成
【化５８】
2016528269.tif 000062
Gen-11-b（758mg、2.5mmol、1当量）のエタノール（30mL）溶液に、ヒドラジン一水和物（1.25mL、14.9mmol、6当量）が添加され、反応混合物は、還流下に2時間加熱される。その後、反応混合物は真空中で濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：100/0〜35/65）、中間体Gen-13-bを提供する。
【０２５０】
LCMS: MW (計算値): 298 ; m/z MW (実測値): 299 (M+H)。
【０２５１】
1.9.3.  一般的方法G2
【化５９】
2016528269.tif 000063
保護されたヒドロキシ誘導体（1当量）のTHF溶液に、1MのTBAFのTHF溶液（1.5〜2当量）が添加され、反応混合物は、50℃にて1.5時間〜3.5時間、加熱される。その後、反応混合物は真空中で濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで、その後沈殿で精製され、期待された化合物を提供する。
【０２５２】
1.9.4.  化合物29：N-{3-[3-(1-ヒドロキシ-シクロプロピル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3,5-ジメトキシ-ベンズアミドの例示的合成
【化６０】
2016528269.tif 000064
中間体Gen-16-d（5.3g、9.5mmol、1当量）のTHF（40mL）溶液に、1MのTBAFのTHF溶液（14.2mL、 14.2mmol、1.5当量）が添加され、反応混合物は、50℃にて1.5時間、加熱される。その後、反応混合物は真空中で濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：97/3〜95/5）、その後、粗生成物は、最少量のDCMに溶解され、且つ、溶液はペンタンの撹拌溶液に添加される。結果として得られた固体は、濾過によって分離され且つ乾燥されて、化合物29を提供する。
【０２５３】
LCMS: MW (計算値): 444 ; m/z MW (実測値): 445 (M+H)。
【０２５４】
1.9.5.  一般的方法G3
【化６１】
2016528269.tif 000065
保護されたアミン誘導体（1当量）のDCM溶液に、TFA（0.7mL）が添加され、反応混合物は、室温にて1.5時間〜7時間、撹拌される。その後、反応混合物は真空中で濃縮される。混合物は炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチされ、且つ、酢酸エチルで抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで（溶出  DCM／メタノール／トリエチルアミン：90:10:2又はDCM／メタノール：80/20）、又は分取LCMSで精製される。
【０２５５】
1.9.6.  化合物39：3-(2-アミノ-エトキシ)-N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリン-6-イル)-4-メチルフェニル]-5-メトキシベンズアミドの例示的合成
【化６２】
2016528269.tif 000066
中間体Gen-47-d（41mg、0.075mmol、1当量）のDCM（3.0mL）溶液に、TFA（0.7mL）が添加され、反応混合物は、室温にて2.5時間、撹拌される。その後、反応混合物は真空中で濃縮される。混合物は炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。粗生成物が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール／トリエチルアミン：90:10:2）、化合物39を与える。
【０２５６】
【化６３】
2016528269.tif 000067
【０２５７】
1.9.7.  一般的方法B1
前記した一般的方法B1に従って、化合物50、19、20、21、25、27又は中間体Gen-17が、中間体Gen-13a、Gen-13-b、Gen-35-a、Gen-41-b、Gen-1-b、Gen-1-c、Gen-54-c、Gen-54-d、Gen-63-a、Gen-61-a及びGen-57-aから調製される。
【０２５８】
1.9.8.  一般的方法L
【化６４】
2016528269.tif 000068
カルボニル誘導体（1当量）のTHF溶液に、窒素下、0℃にて1.4Mの臭化メチルマグネシウムのトルエン／THF溶液（7当量）が滴下される。反応混合物は、室温まで温められ且つ室温で4.5時間撹拌される。反応混合物は、塩化アンモニウム水溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される（溶出  DCM／メタノール：100/0〜95:5）。
【０２５９】
1.9.9.  化合物35：N-{3-[3-(1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化６５】
2016528269.tif 000069
中間体Gen-18-a（25mg、0.06mmol、1当量）のTHF（6mL）溶液に、窒素下、0℃にて1.4Mの臭化メチルマグネシウムのトルエン／THF溶液（295μL、0.41mmol、7当量）が滴下される。反応混合物は、室温まで温められ且つ室温で4.5時間撹拌される。その後、反応は、塩化アンモニウム水溶液でクエンチされ、且つ、酢酸エチルで希釈され、二層は分離され、且つ、水層は再び酢酸エチルで抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：100/0〜96/4）、化合物35を提供する。
【０２６０】
【化６６】
2016528269.tif 000070
【０２６１】
LCMS: MW (計算値): 440 ; m/z MW (実測値): 441 (M+H)。
【０２６２】
1.9.10.  一般的方法H：中間体Gen-25の合成
【化６７】
2016528269.tif 000071
1.9.11.  一般的方法
中間体Gen-24（1当量）、中間体Gen-5（1.2当量）及び炭酸ナトリウム（4当量）の1,4-ジオキサン／水（4/1）溶液に、Pd(PPh3)4（0.05当量）又はPdCl2dppf（0.05当量）が添加される。反応混合物は、アルゴンでパージされ、その後、90℃で一晩加熱される。その後、反応混合物はDCMで希釈され、塩水で洗浄され、有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され且つ濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され、中間体Gen-25を提供する。
【０２６３】
1.9.12.  中間体Gen-25-aの例示的合成
【化６８】
2016528269.tif 000072
中間体Gen-24-a（100mg、0.248mmol、1当量）、中間体Gen-5-c（113mg、0.298mmol、1.2当量）及び炭酸ナトリウム（105mg、0.993mmol、4当量）の1,4-ジオキサン／水（4/1）溶液に、Pd(PPh3)4（14.3mg、0.0124mmol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、アルゴンでパージされ、その後、90℃で一晩加熱される。その後、反応混合物はDCM（25mL）で希釈され、塩水（10mL）で洗浄され、有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され且つ濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：100/0〜96/4）、中間体Gen-25-aを提供する。
【０２６４】
1.10.  一般的方法I：化合物の合成
【化６９】
2016528269.tif 000073
1.10.1  一般的方法I1
中間体Gen-25（1当量）のTFA溶液に、TES、トルエン及び水が添加される。反応は、マイクロ波の下、110℃にて2時間加熱される。反応混合物は、濃縮され、その後DCMで希釈され、且つ炭酸ナトリウム溶液が添加される。二層は分離され、且つ、水層はDCM／メタノール  95:5で3回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される。
【０２６５】
1.10.2.  化合物6の例示的合成
【化７０】
2016528269.tif 000074
中間体Gen-25-a（143mg、0.230mmol、1当量）のTFA（1mL、13mmol、56当量）溶液に、TES（50μL、0.313 mmol、1.5当量）、トルエン（100μL）及び水（50μL）が添加される。反応は、マイクロ波の下、110℃にて2時間加熱される。反応混合物は、濃縮され、その後DCM（25mL）で希釈され且つ炭酸ナトリウム溶液（10mL）が添加される。二層は分離され、且つ、水層はDCM／メタノール  95:5で3回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（DCM／メタノール  100:0〜90:10で溶出）、化合物6を提供する。
【０２６６】
LCMS: MW (計算値): 500 ; m/z MW (実測値): 501 (M+H)。
【０２６７】
【化７１】
2016528269.tif 000075
【０２６８】
1.10.3.  一般的方法I2
0℃に冷却された中間体Gen-25（1当量）に、濃硫酸が添加された。反応フラスコは、0℃にて1時間、撹拌させられた。反応混合物は、その後、破砕氷−水の上に注がれ、飽和炭酸カリウム水溶液でpH10となるよう塩基性化され、且つ、その後、酢酸エチルで抽出された。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空下で濃縮された。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される。
【０２６９】
1.10.4.  化合物54：N-{3-[3-(1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3,5-ジメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化７２】
2016528269.tif 000076
0℃に冷却された中間体Gen-28-c（350mg、0.672mmol、1当量）に、濃硫酸（4mL）が添加された。反応フラスコは、0℃にて1時間、撹拌させられた。反応混合物は、その後、破砕氷−水の上に注がれ、飽和炭酸カリウム水溶液でpHが10に到達するまで塩基性化され、且つ、その後、酢酸エチルで抽出された。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空下で濃縮された。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（酢酸エチル100％での溶出）、化合物54を提供した。
【０２７０】
LCMS: MW (計算値): 400 ; m/z MW (実測値): 401 (M+H)。
【０２７１】
1.10.5  一般的方法K
【化７３】
2016528269.tif 000077
DMF中、アミン誘導体（1当量）、カルボン酸（1.2当量）、EDCI塩酸塩（1.3当量）及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（1.3当量）の懸濁液に、トリエチルアミン（2.6当量）が添加される。反応混合物は、室温で一晩撹拌される。48時間後、水が添加され且つ混合物は酢酸エチルで抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで（溶出  DCM／メタノール：95/5又は90/10）又は分取LCMSで精製される。
【０２７２】
1.10.6.  化合物42： N-[5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチル-ピリジン-3-イル]-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化７４】
2016528269.tif 000078
DMF（2.0mL）中、中間体Gen-13-a（63.3mg、0.25mmol、1当量）、Gen-1-c（57mg、0.30mmol、1.2当量）、EDCI塩酸塩（62.3mg、0.325mmol、1.3当量）及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（44mg、0.325mmol、1.3当量）の懸濁液に、トリエチルアミン（90μL、0.65mmol、2.6当量）が添加される。反応混合物は、室温で一晩撹拌される。48時間後、水が添加され且つ混合物は酢酸エチルで抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。粗生成物が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：95/5）、化合物42を与える。
【０２７３】
LCMS: MW (計算値): 245; MW (実測値): 426 (M+H)。
【０２７４】
【化７５】
2016528269.tif 000079
【０２７５】
1.10.7.  一般的方法M
【化７６】
2016528269.tif 000080
アセタール誘導体（1当量）のTHF溶液に、1M塩酸水溶液（15〜20当量）が添加される。反応混合物は、0℃にて1.5時間〜2時間、撹拌される。その後、反応混合物は、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで2回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で濃縮される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される（溶出  DCM／メタノール：100/0〜90/10）。
【０２７６】
1.10.8.  中間体Gen-18-a：N-[3-(3-ホルミル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの例示的合成
【化７７】
2016528269.tif 000081
中間体Gen-17-a（92mg、0.2mmol、1当量）のTHF（10mL）溶液に、1M塩酸水溶液（2.9mL、2.93mmol、15当量）が添加される。反応混合物は、0℃にて2時間、撹拌される。その後、反応混合物は、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで2回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で濃縮され、中間体Gen-18-aを提供する。粗生成物は、精製することなく、次の工程で直接使用される。
【０２７７】
LCMS: MW (計算値): 424 ; m/z MW (実測値): 425 (M+H)。
【０２７８】
1.11.  一般的方法O
【化７８】
2016528269.tif 000082
カルボニル誘導体（1当量）のエタノール／THF混合物溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（1.2当量）が添加される。反応混合物は、室温で一晩、撹拌される。その後、反応混合物は、DCMで希釈され且つ水でクエンチされる。二層は分離され、且つ、水層はDCM／メタノール95:5で2回抽出される。一緒にされた層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され且つ乾燥するまで濃縮され、中間体アルコール誘導体を提供する。
【０２７９】
1.12.  中間体Gen-28-a：N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3,5-ジメトキシ-ベンズアミドの例示的合成
【化７９】
2016528269.tif 000083
中間体Gen-27-a（143mg、259mmol、1当量）のエタノール／THF（1.5/0.5mL）混合物溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（11.8mg、312mol、1.2当量）が添加される。反応混合物は、室温で一晩、撹拌される。その後、反応混合物は、DCM（20mL）で希釈され且つ水（5mL）でクエンチされる。二層は分離され、且つ、水層は15mLのDCM／メタノール95:5で2回抽出される。一緒にされた層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され且つ乾燥するまで濃縮され、中間体Gen-28-aを提供する。
【０２８０】
【化８０】
2016528269.tif 000084
【０２８１】
1.12.1.  一般的方法P
【化８１】
2016528269.tif 000085
酸誘導体（1当量）のメタノール溶液に、室温で、濃硫酸が添加される。反応混合物は、80℃で一晩、加熱される。その後、メタノールの一部が蒸発され、塩化アンモニウムの飽和溶液及び酢酸エチルが添加される。有機層は分離され、塩化アンモニウム及び塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮され、エステル誘導体を与える。
【０２８２】
1.12.2.   中間体Gen-36-a：3-ブロモ-5-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステルの例示的合成 
【化８２】
2016528269.tif 000086
Gen-1-g（1.74g、8mmol、1当量）のメタノール（50mL）溶液に、室温において濃硫酸（6滴）が添加される。反応混合物は、80℃で一晩、加熱される。その後、メタノールの一部が蒸発され、塩化アンモニウムの飽和溶液及び酢酸エチルが添加される。有機層は分離され、塩化アンモニウム及び塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮され、Gen-36-aを与える。
【０２８３】
1.13.  一般的方法Q
【化８３】
2016528269.tif 000087
フェノール誘導体（1当量）のアセトン又はトルエン又はDMF又はACN溶液に、炭酸カリウム又は炭酸セシウム（2当量〜4当量）、RX（2当量）及びヨウ化カリウムが添加される。反応混合物は、4時間〜72時間、室温において撹拌されるか又は還流される。その後、酢酸エチル及び炭酸水素ナトリウムの飽和溶液が添加される。有機層は分離され、塩化アンモニウムの飽和溶液及び塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空下で濃縮され、O-アルキル化中間体を与える。
【０２８４】
1.13.1.   中間体Gen-37-a：3-ブロモ-5-メトキシ-安息香酸メチルエステルの例示的合成
【化８４】
2016528269.tif 000088
Gen-36-a（230mg、1mmol、1当量）のアセトン（5mL）溶液に、炭酸カリウム（415mg、3mmol、3当量）、ヨウ化メチル（185μL、3mmol、3当量）が添加される。反応混合物は、室温において72時間、撹拌される。その後、酢酸エチル及び炭酸水素ナトリウムの飽和溶液が添加される。有機層は分離され、塩化アンモニウムの飽和溶液及び塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空下で濃縮され、Gen-37-aを与える。
【０２８５】
1.13.2.  一般的方法R1
【化８５】
2016528269.tif 000089
ハロゲン誘導体（1当量）、ボロン酸エステル誘導体（1.1当量）及び炭酸セシウム（2.5当量）の脱気したジオキサン／水の溶液であって撹拌されているものに、Pd(dppf)Cl2（0.07当量）が添加される。反応混合物は、アルゴン下、130℃において3時間、撹拌される。水及び酢酸エチルが添加され且つ層が分離される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：100/0〜25/75）。
【０２８６】
1.13.3.  中間体Gen-38-a：3-シクロプロピル-5-メトキシ-安息香酸メチルエステルの例示的合成 
【化８６】
2016528269.tif 000090
中間体Gen-37-a（230mg、0.94mmol、1当量）、Gen-9-g（173.5mg、1.03mmol、1.1当量）及び炭酸セシウム（766mg、2.35mmol、2.5当量）の脱気したジオキサン／水（8mL/2mL）の溶液であって撹拌されているものに、Pd(dppf)Cl2（48mg、0.066mmol、0.07当量）が添加される。反応混合物は、アルゴン下、130℃において3時間、撹拌される。水及び酢酸エチルが添加され且つ層が分離される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。期待された中間体が、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：80/20）。
【０２８７】
LCMS: MW (計算値): 206; MW (実測値): 207 (M+H)。
【０２８８】
1.13.4.  一般的方法R2
【化８７】
2016528269.tif 000091
メチルエステル誘導体（1当量）のTHF又はTHF／メタノール又はTHF／水の溶液であって撹拌されているものに、1規定水酸化ナトリウム溶液（1〜2当量）又は水酸化リチウム・水（1当量）が添加される。反応混合物は、室温で、一晩〜4日間撹拌される。溶剤は乾燥するまで蒸発され、期待された中間体を与える。又は、反応混合物は乾燥するまで蒸発され、残渣は、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで抽出される。水層は、塩化アンモニウムの飽和溶液及び1規定塩酸で酸性とされ、酢酸エチルで抽出される。有機層は、一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、期待された中間体を与える（中間体は、精製されることなく、次の工程で直接使用される）。
【０２８９】
1.13.5.  中間体Gen-39-b：3-シクロプロピル-5-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)安息香酸の例示的合成
【化８８】
2016528269.tif 000092
中間体Gen-38-b（255mg、0.835mmol、1当量）のTHF（3.5mL）溶液であって撹拌されているものに、1規定水酸化ナトリウム溶液（0.84mL、0.835mol、1当量）が添加される。反応混合物は、室温で一晩撹拌される。溶剤は乾燥するまで蒸発され、期待された中間体Gen-39-bを与える（中間体は、精製されることなく、次の工程で直接使用される）。
【０２９０】
LCMS: MW (計算値): 290; MW (実測値): 291 (M+H)。
【０２９１】
実施例２．  中間体の調製
中間体Gen-4-a：N-(5-ブロモ-6-メチル-ピリジン-3-イル)-3,5-ジメトキシ-ベンズアミド
【化８９】
2016528269.tif 000093
中間体Gen-1-a（1.87g、10mmol、1当量）及び中間体Gen-2-a（1.82g、10mmol、1当量）のDMF（30mL）溶液であって撹拌されているものに、アルゴン下、室温において、HATU（3.75g、 10mmol、1当量）、その後NMM（2.77mL、25mmol、2.5当量）が添加され、反応混合物は、室温にて一晩撹拌される。その後、反応は真空中で濃縮され、残渣は、酢酸エチル／n-ブタノール混合物と水とに分配される。層は分離され、有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。その後、残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：100/0〜0/100）、中間体Gen-4-aを提供する。
【０２９２】
LCMS: MW (計算値): 350 (79Br), 352 (81Br); m/z MW (実測値): 351 (79Br M+H), 353 (81Br M+H)。
【０２９３】
中間体Gen-7-a：N-メトキシ-N-メチル-プロピオンアミド
【化９０】
2016528269.tif 000094
DCM（100mL）中の中間体Gen-9-c（9.53g、98mmol、1当量）の懸濁液に、0℃において、撹拌下且つ窒素下で、TEA（28.7mL、205mol、2.1当量）及び中間体Gen-15-g（12.5mL、98mmol、1当量）がゆっくりと添加される。その後、反応混合物は室温まで温められ、且つ、室温で5時間撹拌される。反応は、塩化アンモニウム水溶液をゆっくりと添加することによってクエンチされ、層は分離され且つ水層は再び酢酸エチルで抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-7-aを提供する。粗生成物は、精製されることなく、次の工程で直接使用される。
【０２９４】
【化９１】
2016528269.tif 000095
【０２９５】
中間体Gen-7-ｃ：シクロプロパンカルボン酸メトキシ-メチル-アミド
【化９２】
2016528269.tif 000096
中間体Gen-9-ｃ（933mg、9.56mmol、1当量）のDCM（10mL）溶液に、0℃において、窒素雰囲気となるまで、TEA（2.8mL、20mol、2.1当量）及びGen 15-h（870μL、9.54mmol、1当量）が添加される。反応混合物は、5時間で室温まで温められる。その後、反応混合物は、塩化アンモニウム溶液でクエンチされ且つ酢酸エチルで抽出される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、Gen-7-cを提供する。
【０２９６】
中間体Gen-7-f：1-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロプロパンカルボン酸メトキシ-メチル-アミド
【化９３】
2016528269.tif 000097
DCM（200mL）中の中間体Gen-9-c（2.38g、24.4mmol、1.2当量）、中間体Gen-15-f（4.4g、20.3mmol、1当量）、EDCI塩酸塩（5.06g、26.4mmol、1.3当量）及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（3.57g、26.4mmol、1.3当量）の懸濁液に、撹拌下で、TEA（10.2mL、73.1mol、3.6当量）が添加される。その後、反応混合物は、室温で一晩撹拌され、反応は、1M塩酸水溶液でクエンチされ、層は分離され且つ水層は再びDCMで抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／酢酸エチル：95/5〜90/10）、中間体Gen-7-fを提供する。
【０２９７】
【化９４】
2016528269.tif 000098
【０２９８】
中間体Gen-13-a：5-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-6-メチル-ピリジン-3-イルアミン
【化９５】
2016528269.tif 000099
中間体Gen-12-a（653mg、1.84mmol、1当量）のエタノール（9mL）溶液に、TFA（0.7mL、9.2mmol、10当量）が添加される。反応混合物は、室温で4時間撹拌される。その後、反応混合物は、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチされ且つDCMで2回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：95/5〜90/10）、中間体Gen-13-aを提供する。
【０２９９】
LCMS: MW (計算値): 253 ; m/z MW (実測値): 254 (M+H)。
【０３００】
中間体Gen-21-a：6-クロロ-3-ヨード-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン
【化９６】
2016528269.tif 000100
工程i：6-クロロ-3-ヨード-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（中間体Gen-20-a）
【化９７】
2016528269.tif 000101
中間体Gen-19-a（5g、32.6mmol、1当量）が、DMF（30mL）に溶解される。I2（16.4g、64.6mol、2当量）及び水酸化カリウム（6.8g、121mmol、3.7当量）が添加される。反応混合物は、室温で3時間、撹拌される。その後、反応は、チオ硫酸ナトリウムの10％溶液でクエンチされる。水層は、50ｍLのジエチルエーテルで4回、DCMで3回且つDCM／メタノール（9:1）で3回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水（50mL）で洗浄された後、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮されて、Gen-20-aを提供する。
【０３０１】
工程ii：6-クロロ-3-ヨード-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（中間体Gen-21-a）
【化９８】
2016528269.tif 000102
中間体Gen-20-a（8.5g、30.5mmol、1当量）が、0℃にてDMF（25mL）に溶解される。水素化ナトリウム（1.47g、36.6mmol、1.2当量）が、分割して添加される。反応混合物は、0℃で30分間、撹拌される。PMBCl（5mL、37mmol、1.2当量）のDMF（5mL）溶液が、5分間にわたって滴下される。混合物は、室温まで温められ、且つ、同温度で4時間撹拌される。その後、反応は、炭酸水素ナトリウムでクエンチされ且つ酢酸エチル（75mL）で3回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水（25mL）で洗浄された後、硫酸ナトリウム上で乾燥される。濾過及び濃縮後、粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（石油エーテル／ジエチルエーテル（90:10〜50:50）での溶出）、Gen-21-aを提供する。
【０３０２】
中間体Gen-22-b：6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-3-メチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン
【化９９】
2016528269.tif 000103
Gen-21-a（400mg、1mmol、1当量）、Pd(PPh3)4（11.6mg、0.01mmol、0.01当量）及び炭酸セシウム（652mg、2mmol、2当量）の脱気したジオキサン／水混合物溶液であって、撹拌されているものに、トリメチルボロキシン（0.1mL、0.7mmol、0.7当量）が添加される。反応混合物は、アルゴン下、110℃で一晩撹拌される。その後、水及び酢酸エチルが添加され、並びに、有機相は硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（ヘプタン／酢酸エチル（80/20）での溶出）、Gen-22-bを提供する。
【０３０３】
LCMS: MW (計算値): 287 ; m/z MW (実測値): 288 (M+H)。
【０３０４】
中間体Gen-23-b：6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-カルバルデヒド
【化１００】
2016528269.tif 000104
中間体Gen-22-a（4g、13.3mmol、1当量）が、DCM（400mL）に溶解される。反応混合物は、オゾン雰囲気下に30分間置かれる。窒素パージ後に、硫化ジメチル（5mL、60mmol、5当量）が添加され且つ反応混合物は1時間で室温まで温められる前に-78℃で15分間撹拌される。反応混合物は、その後、乾燥するまで真空下で濃縮され、Gen-23-bを提供する。
【０３０５】
LCMS: MW (計算値): 300 ; m/z MW (実測値): 301 (M+H)。
【０３０６】
中間体Gen-24-a：1-[6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル]-2-モルホリン-4-イル-エタノール
【化１０１】
2016528269.tif 000105
工程i：6-クロロ-3-ヨード-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン（中間体Gen-22-a）
【化１０２】
2016528269.tif 000106
Gen-21-a（1g、2.50mmol、1当量）のジオキサン（10mL）溶液であって撹拌されているものに、室温でトリブチルビニル錫（(873mg、2.75mmol、1.1当量）が添加された。反応混合物は、アルゴンで脱気される。その後、PdCl2(PPh3)2（88mg、0.125mmol、0.05当量）が添加される。結果として得られた混合物は、3時間30分、還流で加熱され、その後濃縮される。残渣は、酢酸エチルで希釈され、水で2回且つ塩水で1回洗浄される。二層は分離され、そして、有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  石油エーテル／酢酸エチル：95/5〜70/30）、中間体Gen-22-aを提供する。
【０３０７】
LCMS: MW (計算値): 299 (35Cl) 301 (37Cl) ; m/z MW (実測値): 300 (35Cl M+H) 302 (37Cl M+H)。
【０３０８】
工程ii：2-ブロモ-1-[6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル]-エタノール（中間体Gen-23-a）
【化１０３】
2016528269.tif 000107
中間体Gen-22-a（7.46g、24.89mmol、1当量）が、ジオキサン／水／DCM混合物（65/17/17）に溶解される。酢酸（1.42mL、24.89mmol、1当量）が添加され、且つ、反応混合物は0℃で15分間撹拌される。NBS（6.64g、37.33mmol、1.5当量）が、同温度で15分間にわたって添加される。その後、反応混合物は、室温で一晩撹拌される。反応は、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（300mL）でクエンチされる。二層が分離され、且つ、水層はDCM（300mL）で抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（DCM／酢酸エチル（95/5〜75/25）で溶出）、中間体Gen-23-aを与える。
【０３０９】
LCMS: MW (計算値): 395 (79Br 35Cl), 397 (81Br 35Cl, 79Br 37Cl), 399 (81Br 37Cl) ; m/z MW (実測値): 396 (79Br 35Cl M+H), 398 (81Br 35Cl, 79Br 37Cl M+H), 400 (81Br 37Cl M+H)。
【０３１０】
工程iii：1-[6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル]-2-モルホリン-4-イル-エタノール（中間体Gen-24-a）
【化１０４】
2016528269.tif 000108
中間体Gen-23-a（1.3g、3.28mmol、1当量）の溶液に、モルホリン（860μL、9.83mmol、3当量）が添加された。反応混合物は、2時間30分、還流で加熱される。その後、反応は、DCM（50mL）で希釈される。有機層が、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄される。水層は、15mLのDCMで3回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。粗生成物は、シリカゲルで精製され（DCM／メタノール（100/0〜98/2）で溶出）、gen-24-aを与える。
【０３１１】
中間体Gen-29-a：(5-ブロモ-6-メチル-ピリジン-3-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル
【化１０５】
2016528269.tif 000109
中間体Gen-2-a（1.87g、10mmol、1当量）のDMF（20mL）溶液に、TEA（2.1mL、15mmol、1.5当量）、その後Boc2O（3.27g、15mmol、1.5当量）が添加される。反応混合物は、90℃で一晩加熱され、その後、Boc2O（1.09g、5mmol、0.5当量）が添加され、且つ、反応混合物は、90℃で４時間加熱される。その後、水が添加され、且つ、混合物は酢酸エチルで2回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  ヘプタン／エタノール：75/25）、中間体Gen-29-aを提供する。
【０３１２】
LCMS: MW (計算値): 286 (79Br), 288 (81Br); m/z MW (実測値): 287 (79Br M+H), 289 (81Br M+H)。
【０３１３】
中間体Gen-30-a：(5-ボロン酸-6-メチル-ピリジン-3-イル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル
【化１０６】
2016528269.tif 000110
窒素バブリングによって予め脱気された、中間体Gen-29-a（850mg、2.96mmol、1当量）の1,4-ジオキサン（15mL）溶液に、中間体Gen-9-a（827mg、3.26mmol、1.1当量）が、その後に酢酸カリウム（870mg、8.88mmol、3当量）及びPdCl2(dppf)（108mg、0.148mmol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、窒素下で一晩還流される。反応は、室温まで冷却され、その後、水と酢酸エチルが添加される。二層は分離され、水層は、再度酢酸エチルで抽出され、そして、一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-30-aを提供する。粗生成物は、精製されずに、次の工程で直接使用される。
【０３１４】
LCMS: MW (計算値): 252 ; m/z MW (実測値): 253 (M+H)。
【０３１５】
中間体Gen-33-a：N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3-(2-ヒドロキシ-エトキシ)-5-メチル-ベンズアミド
【化１０７】
2016528269.tif 000111
メタノール（100mL）中の、中間体Gen-22-a（5.6g、18.68mmol、1当量）の脱気された懸濁液に、窒素下で酸化白金(IV)（560mg、0.1当量）が添加され、水素でパージされる。反応混合物は、室温、水素（1気圧）中で一晩撹拌される。反応混合物は、セライト上で濾過され、酢酸エチルですすがれ且つ乾燥するまで蒸発されて、中間体Gen-33-aを与える。中間体は、精製されずに、次の工程で直接使用される。
【０３１６】
LCMS: MW (計算値): 301; m/z MW (実測値): 302 (M+H)。
【０３１７】
中間体Gen-75-a：2-[6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル]-エタノール
【化１０８】
2016528269.tif 000112
中間体Gen-75-aは、ヒドロホウ素化の標準的な手順を使用して合成される。（Jensenらの文献、2011）
【０３１８】
中間体Gen-44-a：3-ヒドロキシ-5-メトキシ-安息香酸メチルエステル
【化１０９】
2016528269.tif 000113
工程i：3-アセトキシ-5-ヒドロキシ-安息香酸（中間体Gen-41-a）
【化１１０】
2016528269.tif 000114
懸濁液中の、Gen-40-a（4.12g、26.7mmol、1当量）の水（20mL）の溶液に、水酸化ナトリウム（3.20g、80.2mmol、3当量）が添加される。反応混合物は、0℃まで冷却され且つ無水酢酸（2.50mL、26.7mmol、1当量）がゆっくりと添加される。50分後、pHが1となるまで、6規定塩酸が添加される。その後、混合物は、酢酸エチルで抽出される。有機層は、水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、乾燥するまで濃縮されて、次の工程でそのまま使用されるGen-41-aを与える。
【０３１９】
工程ii：3-アセトキシ-5-メトキシ-安息香酸メチルエステル（中間体Gen-42-a）
【化１１１】
2016528269.tif 000115
Gen-41-a（4.97g、25mmol、1当量）のDMF（25mL）溶液に、0℃で炭酸カリウム（10.50g、76mmol、3当量）及びヨウ化メチル（3.95mL、63mmol、2.5当量）が添加される。反応混合物は、0℃で1時間撹拌され且つ1時間で室温まで温められる。水及び酢酸エチルが添加される。有機層は分離され、0.1水酸化ナトリウム水溶液及び塩水で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（ヘプタン／酢酸エチル（100:0〜80:20）で溶出）、Gen-42-aを提供する。
【０３２０】
LCMS: MW (計算値): 224 ; m/z MW (実測値): 225 (M+H)。
【０３２１】
工程iii：3-ヒドロキシ-5-メトキシ-安息香酸メチルエステル（中間体Gen-44-a）
【化１１２】
2016528269.tif 000116
Gen-42-a（3.77g、16.8mmol、1当量）のメタノール（60mL）溶液に、0.5Mナトリウムメトキシドのメタノール溶液（40.4mL、20.2mmol、1.2当量）が添加される。反応混合物は、室温で40分間撹拌される。その後、メタノールが蒸発される。ジエチルエーテル及び水が添加される。水層がpH2まで酸性化され且つジエチルエーテルで再度抽出される。有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。粗生成物は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（ヘプタン／酢酸エチル（80:20）で溶出）、Gen-44-aを提供する。
【０３２２】
中間体Gen-50-a：3-メトキシ-5-トリフルオロメチル-安息香酸
【化１１３】
2016528269.tif 000117
Gen-40-b（503mg、2.4mmol、1当量）のアセトン（15mL）溶液に、室温にて、炭酸カリウム（1.01g、7.3mmol、3当量）及びヨウ化メチル（455μL、7.3mmol、3当量）が添加される。反応混合物は、還流で2時間、その後室温で一晩加熱される。2規定の水酸化ナトリウム水溶液（12mL、24mmol、10当量）が添加され且つ反応混合物は2時間撹拌される。その後、アセトンが蒸発される。酢酸エチルが添加される。水層はpH1まで酸性化され且つ酢酸エチルで抽出される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。粗生成物は、四級アンモニウム・キャッチ・アンド・リリース（SCE AX）カラムでの濾過によって精製され、中間体Gen-50-aを提供する。
【０３２３】
LCMS: MW (計算値): 220; m/z MW (実測値): 219 (M-H)。
【０３２４】
実施例３.  本発明の化合物の調製
化合物8：N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3,5-ジメトキシ-ベンズアミド
【化１１４】
2016528269.tif 000118
工程i：1-[6-クロロ-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-3-イル]-エタノン（中間体Gen-26-a）
【化１１５】
2016528269.tif 000119
中間体Gen-21-a（3.03g、7.58mmol、1当量）が、トルエン（70mL）に懸濁される。中間体Gen-9-d（3.2mL、9.48mmol、1.25当量）が添加される。反応混合物は、アルゴンでパージされ、且つ、PdCl2(PPh3)2（0.27g、0.38mmol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、100℃で9時間加熱される。その後、反応は、メタノール（70mL）で希釈され且つ1M塩酸（70mL）が添加される。反応混合物は、さらに4時間撹拌される。DCM（90mL）及び炭酸水素ナトリウムの飽和溶液（90mL）が添加される。二層は分離され且つ水層はDCM（150mL）で抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ濃縮される。得られた固体は、メタノール中で再結晶化され、中間体Gen-26-aを与える。
【０３２５】
工程ii：N-{3-[3-アセチル-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3,5-ジメトキシ-ベンズアミド（中間体Gen-27-a）
【化１１６】
2016528269.tif 000120
中間体Gen-26-a及び中間体Gen-5-aの鈴木カップリングが、一般的な方法Hに従って行われ、中間体Gen-27-aを提供する。
【０３２６】
【化１１７】
2016528269.tif 000121
【０３２７】
工程iii：N-{3-[3-(1-ヒドロキシ-エチル)-1-(4-メトキシ-ベンジル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3,5-ジメトキシ-ベンズアミド（中間体Gen-28-a）
【化１１８】
2016528269.tif 000122
中間体Gen-27-aは、一般的な方法Oに従って反応され、Gen-28-aを提供する。
【０３２８】
【化１１９】
2016528269.tif 000123
【０３２９】
工程iv：N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3,5-ジメトキシ-ベンズアミド（化合物8）
【化１２０】
2016528269.tif 000124
水（100μL）及びトルエン（1.0mL）中の中間体Gen-28-a（25mg、45.3mmol、1当量）、TFA（1mL、13mmol、3.5当量）及びTES（100μL、0.626mmol、0.01当量）が、密封チューブ内で、110℃にて6.5時間。反応混合物は、濃縮され、その後DCM（15mL）と炭酸ナトリウム溶液（5mL）で希釈される。二層は分離され、水層は、DCM／メタノール（95:5）で3回抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで濃縮される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：100/0〜96/4）、化合物8を提供する。
【０３３０】
LCMS: MW (計算値): 416; m/z MW (実測値): 417 (M+H)。
【０３３１】
【化１２１】
2016528269.tif 000125
【０３３２】
化合物23：N-[3-(3-エチル-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル)-4-メチル-フェニル]-3-(2-ヒドロキシ-エトキシ)-5-メチル-ベンズアミド
【化１２２】
2016528269.tif 000126
中間体Gen-64-b（40mg、0.078mmol、1当量）のメタノール（3.0mL）及び6規定塩酸（1.0mL）の溶液が、室温で2時間撹拌される。反応混合物は真空中で濃縮され且つ残渣は炭酸水素ナトリウム水溶液及び酢酸エチルで取り出される。層は分離され、有機層は、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄される。水層は、酢酸エチルで抽出され、その後、有機層は一緒にされ、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、化合物23を与える。
【０３３３】
LCMS: MW (計算値): 430; MW (実測値): 431 (M+H)。
【０３３４】
【化１２３】
2016528269.tif 000127
【０３３５】
化合物35：N-{3-[3-(1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド
【化１２４】
2016528269.tif 000128
中間体Gen-18-a（25mg、0.06mmol、1当量）のTHF（6mL）溶液に、窒素下、0℃にて、1.4Mの臭化メチルマグネシウムのトルエン／THF溶液（295μL、0.41mmol、7当量）が滴下される。反応混合物は、室温まで温められ且つ室温で4.5時間撹拌される。その後、反応は、塩化アンモニウム水溶液でクエンチされ、且つ酢酸エチルで希釈され、二層は分離され、且つ水層は酢酸エチルで再度抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製され（溶出  DCM／メタノール：100/0〜96/4）、化合物35を提供する。
【０３３６】
【化１２５】
2016528269.tif 000129
【０３３７】
LCMS: MW (計算値): 440 ; m/z MW (実測値): 441 (M+H)。
【０３３８】
化合物55：N-{3-[3-((S)-1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド
【化１２６】
2016528269.tif 000130
工程i：(S)-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-プロピオン酸メチルエステル（中間体Gen-15-b）
【化１２７】
2016528269.tif 000131
撹拌下且つ窒素下、中間体Gen-14-b（694g、6.67mol、1当量）のDCM（7L）溶液に、1H-イミダゾール（500g、7.34mol、1.1当量）及び中間体Gen-9-b （1055g、7.00mol、1.05当量）が添加される。反応混合物は、添加の間は冷却され、その後、窒素下、室温で一晩撹拌される。反応混合物は、IPE（5.5L）で希釈され、有機層は、1M塩酸水溶液（2.8L）で1回、1M塩酸水溶液と塩水との混合物（1/1）（1.4L/1.4L）で1回且つ塩水（2.8L）で1回洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-15-bを与える。
【０３３９】
【化１２８】
2016528269.tif 000132
【０３４０】
工程ii：(S)-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-N-メトキシ-N-メチル-プロピオンアミド（中間体Gen-7-d）
【化１２９】
2016528269.tif 000133
THF（720mL）中の中間体Gen-9-c（139g、1.42mol、1.56当量）の懸濁液に、撹拌下且つ窒素下、-15℃と-10℃との間を含む温度にて、1時間にわたって、2.5Mのブチルリチウムのヘキサン溶液（1.3L、3.25mol、3.55当量）がゆっくりと添加される。-15℃における50分間の撹拌の後、中間体Gen-15-b（200g、0.91mol、1当量）のTHF（600mL）溶液が、-60℃未満において30分間にわたって、アミド溶液に滴下される。その後、反応混合物は、窒素下、-70℃において2時間撹拌される。反応は、-50℃において2Mの塩酸水溶液（600mL）をゆっくりと添加することによってクエンチされ、反応に酢酸エチル（1L）が添加され且つ混合物は室温まで温められる。層は分離され且つ水層（pH約8〜9）は再度酢酸エチル（500mL）で抽出される。一緒にされた有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-7-dを提供する。
【０３４１】
【化１３０】
2016528269.tif 000134
【０３４２】
工程iii：(S)-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-1-(6-クロロ-2-フルオロ-ピリジン-3-イル)-プロパン-1-オン（中間体Gen-8-d）
【化１３１】
2016528269.tif 000135
LDAの溶液が、窒素下、-5℃にて、2.5Mブチルリチウムのヘキサン溶液（308mL、0.77mol、1.167当量）をDIPA（100g、0.98mol、1.07当量）のTHF（540mL）溶液に滴下することによって調製される。反応混合物は、-5℃で30分間撹拌される。その後、THF（650mL）中の中間体Gen-6-a（86.8g、0.66mol、1当量）が-60℃未満で滴下され、且つ反応は、窒素下、-78℃にて、1.33時間撹拌される。その後、温度を監視することにより、中間体Gen-7-d（180g、0.73mol、1.1当量)が滴下される。混合物は、-70℃で3時間撹拌され且つ塩化アンモニウムの飽和水溶液（400mL）でクエンチされる。酢酸エチル（1L）が添加され、その後、有機層は、分離され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのケーキによって精製され（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：100/0〜95/5）、中間体Gen-8-dを与える。
【０３４３】
【化１３２】
2016528269.tif 000136
【０３４４】
中間体Gen-5-b：N-[4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-3-トリフルオロメチル-ベンズアミドの合成
【化１３３】
2016528269.tif 000137
工程iv：4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニルアミン（中間体Gen-3-a）
【化１３４】
2016528269.tif 000138
【０３４５】
予め窒素バブリングで2時間脱気されたDMSO（2.65L）中の、中間体Gen-2-b（300g、1.29mol、1当量）、中間体Gen-9-a（343.2g、1.35mol、1.05当量）及び酢酸カリウム（380g、3.9mol、3当量）の予め窒素バブリングで1時間脱気された懸濁液に、PdCl2(dppf).DCM（52g、0.06mol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、窒素下、80℃で一晩撹拌される。反応は室温まで冷却され、その後、水（1.5L）及び酢酸エチル（3L）が添加された。二相性の溶液が、セライトの栓をとおって濾過され（ゆっくり）、且つケーキが酢酸エチル（2L）で洗浄される。濾液の二層は分離され、水層は再度酢酸エチル（3L）で抽出され且つ一緒にされた有機層は水（500mL）で洗浄される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製され（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：95/5〜70/30）、中間体Gen-3-aを提供する。
【０３４６】
【化１３５】
2016528269.tif 000139
【０３４７】
工程v：N-[4-メチル-3-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド（中間体Gen-5-b）
【化１３６】
2016528269.tif 000140
中間体Gen-3-a（293g、1.26mol、1.0当量）のDCM（3L）溶液が、窒素下で3℃まで冷却され、その後、TEA（193mL、1.38mol、1.1当量）、そのさらに後に中間体Gen-1-e（150mL、1.0mol、0.8当量）が滴下される。その後、Gen-1-e（9.5mL、0.06mol、0.05当量）が滴下され、且つ、反応は、10分間撹拌され続ける。反応混合物は水（1.5L）でクエンチされ且つDCM（2L）で希釈される。層は分離され且つ有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ真空中で蒸発される。溶剤の大半が除去され且つシクロヘキサン（3.0L）が添加される。混合物は、室温で数分間撹拌され、結果として得られた固体は、濾過によって分離され且つシクロヘキサンで洗浄され且つ乾燥され、中間体Gen-5-bを提供する。
【０３４８】
【化１３７】
2016528269.tif 000141
【０３４９】
工程vi：(S)-N-(3-{5-[2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-プロピオニル]-6-フルオロ-ピリジン-2-イル}-4-メチル-フェニル)-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド（中間体Gen-10-d）
【化１３８】
2016528269.tif 000142
中間体Gen-8-d（60g、0.189mol、1当量）、中間体Gen-5-b（76.52g、0.19mol、1当量）、及び炭酸セシウム（120g、0.38mol、2当量）が、室温にて、1,4-ジオキサン（1.15L）及び水（285mL）の混合物に溶解され、溶液は、窒素で脱気される。その後、PdCl2(dppf).DCM（7.7g、0.009mol、0.05当量）が添加される。反応混合物は、80℃で1時間加熱され、その後、氷浴で室温まで冷却される。反応混合物に酢酸エチル（1.15L）が添加され、層が分離され、且つ水層は酢酸エチル（300mL）で1回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水（800mL）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され、且つ乾燥するまで蒸発される。粗生成物は、シリカゲルのケーキで精製され（溶出  シクロヘキサン／酢酸エチル：100/0〜90/10）、中間体Gen-10-dを提供する。
【０３５０】
【化１３９】
2016528269.tif 000143
【０３５１】
工程vii：(S)-N-(3-{3-[1-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-エチル]-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル}-4-メチル-フェニル)-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド（中間体Gen-16-b）
【化１４０】
2016528269.tif 000144
中間体Gen-10-d（62.3g、0.11mol、1当量）が、イソプロパノール（340mL）で希釈される。反応混合物は、等分に二分割される（2x200mL）。反応混合物が1時間で130℃まで加熱される直前に、ヒドラジン一水和物（62.3mL、1.28mol、11.56当量）（2x31mL）が、反応のそれぞれの部分に添加される。両方の反応混合物は、混合され且つ水（200mL）でクエンチされ、その後、イソプロパノールが真空中で蒸発される。残渣は、酢酸エチル（600mL）で希釈され且つ塩水（200mL）で洗浄される。有機層は、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発され、中間体Gen-16-bを提供する。
【０３５２】
LCMS: MW (計算値): 554 ; m/z MW (実測値): 555 (M+H)。
【０３５３】
工程viii：N-{3-[3-((S)-1-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジン-6-イル]-4-メチル-フェニル}-3-トリフルオロメチル-ベンズアミド（化合物55）
【化１４１】
2016528269.tif 000145
中間体Gen-16-b（61g、0.11mol、1当量）のメタノール（280mL）溶液に、１M塩酸水溶液（220mL）が添加される。懸濁液は、50℃にて1.5時間加熱される。反応は、炭酸ナトリウムの飽和溶液（200mL）（pH約8）の添加によってクエンチされる。真空中でメタノールが除去され且つ混合物は酢酸エチル（200mL）で2回抽出される。一緒にされた有機層は、塩水（100mL）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過され且つ乾燥するまで蒸発される。残渣は、シリカゲルのクロマトグラフィーで精製される。粗生成物は、DCM（100mL）に溶解され、この溶液が、撹拌下、ヘプタンの溶液（500mL）に滴下される。混合物は、室温で激しく撹拌され、結果として得られた固体は、濾過によって分離され且つ乾燥されて、化合物55を提供する。
【０３５４】
【化１４２】
2016528269.tif 000146
【０３５５】
LCMS: MW (計算値): 440 ; m/z MW (実測値): 441 (M+H)。
表II. 本発明の例示化合物の合成中間体
【表２】
2016528269.tif 000147
2016528269.tif 000148
2016528269.tif 000149
2016528269.tif 000150
2016528269.tif 000151
2016528269.tif 000152
2016528269.tif 000153
2016528269.tif 000154
2016528269.tif 000155
2016528269.tif 000156
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2016528269.tif 000158
2016528269.tif 000159
2016528269.tif 000160
2016528269.tif 000161
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2016528269.tif 000170
2016528269.tif 000171
2016528269.tif 000172
表III.  本発明の例示化合物
【表３】
2016528269.tif 000173
2016528269.tif 000174
2016528269.tif 000175
2016528269.tif 000176
2016528269.tif 000177
2016528269.tif 000178
2016528269.tif 000179
2016528269.tif 000180
2016528269.tif 000181
表IV.  本発明の例示化合物のＮＭＲ
【表４】
2016528269.tif 000182
2016528269.tif 000183
2016528269.tif 000184
2016528269.tif 000185
【０３５６】
化合物Aは、米国特許公開2010/0113415における開示に従って調製された。
表V.  比較化合物
【表５】
2016528269.tif 000186
【０３５７】
生物学的実施例
実施例4.  インビトロ・アッセイ
４.1.  EphA2アッセイ
試験化合物によるEphA2（世界タンパク資源（UniProt）レファレンス番号：P29317）の阻害は、市販されている、Reaction Biology所有のナノリットル放射活性HotSpot（サービスマーク）アッセイ（リアクション・バイオロジー（Reaction Biology）、ワン・グレート・バレイ・パークウェイ、スート2、マルヴァーン  ペンシルベニア州、19355、アメリカ合衆国）によって測定される。そのアッセイの原理は、基質が、その酵素によって［33P］-γ-ATP及びATP（10μM）を使用してリン酸化される際に、ポリ［Glu:Tyr］（4:1）（0.2mg/mL）に取り込まれた33Pの測定からなる。
【０３５８】
50％阻害濃度（IC50）を決定するために、10、又は3μM（最高希釈）から始まって、1/3希釈で、化合物の系列希釈物が試験される。
表VI.  本発明の例示化合物のEphA2効力
【表６】
2016528269.tif 000187
表VII.  比較化合物のEphA2効力
【表７】
2016528269.tif 000188
【０３５９】
4.2.  EphA4アッセイ
試験化合物によるEphA4（世界タンパク資源（UniProt）レファレンス番号：P54764）の阻害は、市販されている、Reaction Biology所有のナノリットル放射活性HotSpot（サービスマーク）アッセイ（リアクション・バイオロジー（Reaction Biology）、ワン・グレート・バレイ・パークウェイ、スート2、マルヴァーン  ペンシルベニア州、19355、アメリカ合衆国）によって測定される。そのアッセイの原理は、基質が、その酵素によって［33P］-γ-ATP及びATP（10μM）を使用してリン酸化される際に、ポリ［Glu:Tyr］（4:1）（0.2mg/mL）に取り込まれた33Pの測定からなる。
【０３６０】
50％阻害濃度（IC50）を決定するために、10又は3μM（最高希釈）から始まって、1/3希釈で、化合物の段階希釈物が試験される。
表VIII.   本発明の例示化合物のEphA4効力
【表８】
2016528269.tif 000189
【０３６１】
4.3.  EphA7アッセイ
そのアッセイの原理は、その酵素EphA7によって［33P］-γ-ATP及びATPを使用してリン酸化される際に、基質ポリGTに取り込まれた33Pの測定からなる。取り込まれなかった33Pは、濾過プレート（ハーベスターを使用して、パーキン・エルマー）上に試料を乗せることと、その後の6回の洗浄工程によって除去される。ポリGTに取り込まれた33Pは、濾過プレート（パーキン・エルマー）にミクロシントを添加した後、トップカウント（Topcount）上で測定される。
【０３６２】
組換えEphA7（カルナ（Carna）  カタログ＃08-126、2ng／ウェル）は、ポリプロピレン96穴プレート（グレイナー、V底）中で、総容量25μLにおいて、試験化合物又はビヒクル（DMSO、最終濃度1％）を含む5μLを伴う又は伴わない、キナーゼ反応緩衝液（10mM MOPS pH7.2、5mM DTT、0.01％トリトン-X100、5mM MnCl2、0.5mM Na3VO4、5mM β-グリセリンリン酸）中、0.15μMの非放射性ATP、0.125μCi/25μlの33P-γ-ATP（パーキン・エルマー、カタログ番号NEG602K）の最終濃度で、0.1mg/mLのポリ（Glu、Tyr）ナトリウム塩（4:1）、分子量20,000〜50,000（シグマ  カタログ番号P0275）を用いて、インキュベートされた。30℃に90分後、150mMリン酸を25μL／ウェル添加することにより、反応は停止された。終了されたキナーゼ反応のすべてが、細胞ハーベスター（パーキン・エルマー）を使用して、予め洗浄された（75mMリン酸）96穴濾過プレート（パーキン・エルマー  カタログ番号6005177）に移された。プレートは、75mMリン酸溶液をウェルあたり300μl使用して、6回洗浄され、且つ、プレートの底は封止された。ウェルあたり40μLのミクロシント（Microsint）-20が添加され、プレートの頂上は封止され、且つ、トップカウント（Topcount）（パーキン・エルマー）を使用して読み取りが行われた。試験化合物のキナーゼ活性を阻害する能力は、トップカウントで測定された1分あたりのカウント（cpm）を使用して、次のように決定された。
【数１】
2016528269.tif 000190
【０３６３】
Cpm(化合物)：試験化合物が存在する試料で測定されたcpm
【０３６４】
Cpm(対照)：正の対照阻害剤（10μMスタウロスポリン）を含む試料で測定されたcpm
【０３６５】
Cpm(ビヒクル)：ビヒクル（1％DMSO）の存在下で測定されたcpm
【０３６６】
用量希釈系列は、EphA7アッセイおいて用量−応答効果の試験と、各化合物についてのIC50の計算が可能な化合物について調製された。各化合物は、20μMの濃度で規則通りに試験され、その後、1％DMSOの最終濃度で、1/5の段階希釈物10点が試験された。化合物系列の効力が高かった際には、さらなる希釈物が調製され得及び／又は最高濃度が低下され得る（例えば、5μM、１μM）。
表IX.  本発明の例示化合物のEphA7効力
【表９】
2016528269.tif 000191
表X.  比較化合物のEphA7効力
【表１０】
2016528269.tif 000192
【０３６７】
4.4.  EphB2アッセイ
そのアッセイの原理は、酵素EphB2によって［33P］-γ-ATP及びATPを使用してリン酸化された際に、基質ポリGTに取り込まれた33Pの測定からなる。取り込まれなかった33Pは、濾過プレート（ハーベスターを使用して、パーキン・エルマー）上に試料を乗せることと、その後の6回の洗浄工程によって除去される。ポリGTに取り込まれた33Pは、濾過プレート（パーキン・エルマー）にミクロシントを添加した後、トップカウント（Topcount）上で測定される。
【０３６８】
組換えEphB2（カルナ（Carna）  カタログ＃08-129、0.6ng／ウェル）は、ポリプロピレン96穴プレート（グレイナー、V底）中で、総容量25μLにおいて、試験化合物又はビヒクル（DMSO、最終濃度1％）を含む5μLを伴う又は伴わない、キナーゼ反応緩衝液（10mM MOPS pH7.2、5mM DTT、0.01％トリトン-X100、5mM MnCl2、0.5mM Na3VO4、5mM β-グリセリンリン酸）中、0.5μMの非放射性ATP、0.25μCi/25μlの33P-γ-ATP（パーキン・エルマー、カタログ番号NEG602K）の最終濃度で、0.05mg/mLのポリ（Glu、Tyr）ナトリウム塩（4:1）、分子量20,000〜50,000（シグマ  カタログ番号P0275）を用いてインキュベートされた。30℃に45分後、150mMリン酸を25μL／ウェル添加することにより、反応は停止された。実験は、その後、EphA7について記載されたように行われた。試験化合物のキナーゼ活性を阻害する能力は、トップカウントで測定された1分あたりのカウント（cpm）を使用して、次のように決定された。
【０３６９】
【数２】
2016528269.tif 000193
【０３７０】
Cpm(化合物)：試験化合物が存在する試料で測定されたcpm
【０３７１】
Cpm(対照)：正の対照阻害剤（10μMスタウロスポリン）を含む試料で測定されたcpm
【０３７２】
Cpm(ビヒクル)：ビヒクル（1％DMSO）の存在下で測定されたcpm
【０３７３】
用量希釈系列は、EphB2アッセイおいて用量−応答効果の試験と、各化合物についてのIC50の計算が可能な化合物について調製された。各化合物は、20μMの濃度で規則通りに試験され、その後、1％DMSOの最終濃度で、1/5の段階希釈物10点が試験された。化合物系列の効力が高かった際には、さらなる希釈物が調製され得及び／又は最高濃度が低下され得る（例えば、5μM、１μM）。
表XI.  本発明の例示化合物のEphB2効力
【表１１】
2016528269.tif 000194
表XII.  比較化合物のEphB2効力
【表１２】
2016528269.tif 000195
【０３７４】
4.5.  EphB4アッセイ
試験化合物によるEphB4（世界タンパク資源（UniProt）レファレンス番号：Q541P7）の阻害は、市販されている、Reaction Biology所有のナノリットル放射活性HotSpot（サービスマーク）アッセイ（リアクション・バイオロジー（Reaction Biology）、ワン・グレート・バレイ・パークウェイ、スート2、マルヴァーン  ペンシルベニア州、19355、アメリカ合衆国）によって測定される。そのアッセイの原理は、基質が、その酵素によって［33P］-γ-ATP及びATP（10μM）を使用してリン酸化される際に、ポリ［Glu:Tyr］（4:1）（0.2mg/mL）に取り込まれた33Pの測定からなる。
【０３７５】
50％阻害濃度（IC50）を決定するために、10又は3μM（最高希釈）から始まって、1/3希釈で、化合物の段階希釈物が試験される。
表XIII.  本発明の例示化合物のEphB4効力
【表１３】
2016528269.tif 000196
【０３７６】
実施例5.  細胞アッセイ
5.1.  MDA-MB-231細胞中でのpEPHA2阻害
5.1.1.  大要
MDA-MB-231は、高いEphA2発現レベルを示すヒトのトリプル・ネガティブ乳癌細胞株であり（Zhuangらの文献、2010）、それゆえ、MDA-MB-231細胞中において、試験化合物によるEphA2自己リン酸化の阻害を測定する細胞アッセイが開発されている。
【０３７７】
MDA-MB-231細胞は、異なる濃度（30nM〜30μM）の試験化合物とともに、37℃で2時間インキュベートされる。リン酸化されたEphA2タンパク質レベルは、ウサギp-Ser897 EphA2抗体を使用して、細胞溶解物におけるウェスタン・ブロッティングによって検出され且つβ-アクチン・タンパク質レベルに対して標準化される。IC50値は、ウェスタン・ブロットの定量化バンド強度から導き出される。
【０３７８】
5.1.2.  プロトコル
MDA-MB-231細胞は、加熱不活性化した牛胎仔血清（FBS）を10％含むダルベッコ変法イーグル培地（DMEM）中で、37℃、5％CO2で培養される。
【０３７９】
容量1800μLのDMEM＋10％FBS中の、400,000細胞／6穴が播かれ、且つ、37℃、5％CO2で一晩インキュベートされる。10ｘ濃度において、試験化合物200μLが添加され、且つ、プレートは、37℃、5％CO2で2時間インキュベートされる。培地を除去し、その後PBSで洗浄した後、80μLの溶解緩衝液が細胞に添加される。細胞溶解物が集められ、且つ、10% Bis-Trisゲルに、25μgのタンパク質が乗せられる。タンパク質をPVDF膜に転写した後、その膜は、2％牛乳溶液中で1時間インキュベートされ、その後、ウサギp-Ser897 EphA2抗体（セル  シグナリング（Cell Signaling）、3  トラスク  レーン  ダンバーズ、マサチューセッツ州01923、アメリカ合衆国、カタログ番号6347）とともに、4℃で一晩インキュベートされる。その膜を洗浄し且つ第二抗体（ブタ抗ウサギHRP（ダコ（Dako）、プロダクションズベジュ42、DK-2600 グロストラップ、デンマーク、カタログ番号P039901）、室温にて）とともに1時間インキュベーションした後、その膜は、HRP基質で現像され、且つ、バンド（バンド・ピーク値）はコダック撮像装置で定量化される。p-Ser897 EphA2レベルの定量の後、ブロットは、ヤギ・アクチン抗体（サンタ・クルーズ（Santa Cruz）、10410フィンネル・ストリート、ダラス、テキサス75220、アメリカ合衆国、カタログ番号：sc-1615）とともにインキュベートされ、ブロット上にすべての試料について等しい負荷が存在するか否かを検査する。
【０３８０】
5.1.3  解析
化合物のEC50は、グラフパッド（GraphPad）・ソフトウェアを使用して、p-Ser897 EphA2ウェスタン・ブロット及びアクチン・ウェスタン・ブロットのバンドのピーク値に基づいて決定される。
【０３８１】
p-EphA2値は、負荷を標準化するために、アクチン値によって除される。阻害百分率値（PIN）は、化合物状態の値をビヒクル状態について得られた値で除することによって計算される。EC50は、可変傾斜曲線フィッテイング・パラメータを使用してシグモイド用量を用いて計算され、且つ最高が100％PINで最低が0％と決まっている。
【０３８２】
5.2.  MDA-MB-231細胞における足場非依存性増殖アッセイ
5.2.1.  大要
EphA2アンチセンス・オリゴヌクレオチドは、軟寒天中におけるMDA-MB-231細胞の増殖を阻害する（Carles-Kinchらの文献、2002）。それゆえ、化合物は、軟寒天中における細胞増殖阻害と、ポリプロピレン足場非依存性増殖（AIG）アッセイも評価される。MDA-MB-231細胞は、異なる濃度の試験化合物（10nM〜30μM）とともにインキュベートされ、且つ、細胞の生存能力は、10日後に決定される。
【０３８３】
5.2.2.  プロトコル
MDA-MB-231細胞は、加熱不活性化した牛胎仔血清（FBS）を10％含むダルベッコ変法イーグル培地（DMEM）中で、37℃、5％CO2で培養される。
【０３８４】
5.2.2.1.  軟寒天アッセイ
寒天は、1.2％（w/vol、水中）溶液として調製され、且つ、寒天を溶液となるよう溶かすため及び殺菌のために、オートクレーブ処理される。寒天は、完全に溶解するまでマイクロ波中で加熱され、且つ、水浴中で37℃まで冷却された。軟寒天培地は、DMEM＋10％FBS＋1X P/Sで、1.2％寒天溶液を1/2に希釈することによって調製される。96穴プレート（TC、透明、ポリスチレン）は50μLの軟寒天培地で被覆され、且つ、当該プレートは、4℃に移動され、30分間、当該ベース寒天層が固められる。MDA-MB-231細胞は、各アリコートが培養培地25μLとなるよう、4000 MDA-MB-231細胞として採取され且つ再懸濁され、且つ37℃に維持される。25μLの細胞懸濁液と50μLの軟寒天培地が混合され、且つ、予め固相化されたベース寒天層を含有している96穴平底マイクロプレートの各ウェルに、即座に移される。当該プレートは、4℃に15分間置かれ、細胞寒天層が固化される。各ウェルに、90μLの増殖培地と、10μLの最終濃度よりも22.5倍高い濃度の化合物が添加される（各ウェルの総容量は225μL）。最後に、当該プレートは、37℃、5％CO2で10日間インキュベートされる。
【０３８５】
40μLのアラマー・ブルー試薬（培地中に1:2で希釈）が、各ウェルに添加され、且つ、37℃で5時間インキュベートされる。その後、80μLが黒色96穴プレートに移され、且つ、蛍光が、エンビジョン（Envision）を用いて励起530、発光590で測定される。
【０３８６】
5.2.2.2.  PPアッセイ
黒色ポリプロピレン96穴プレート中に、15μLの、最終濃度よりも10倍高い濃度の化合物又は最終濃度よりも10倍高い濃度のビヒクルが分注される（各ウェルの総容量は150μLである）。当該プレートに、135μL中の2000 MDA-MB-231細胞（完全増殖培地中）が添加され、且つ、当該プレートは、37℃、5％CO2で10日間インキュベートされる。15μLのアラマー・ブルー試薬が、各ウェルに添加され、且つ、当該プレートは、37℃で5時間インキュベートされる。蛍光が、エンビジョン（Envision）を用いて励起530、発光590で測定される。
【０３８７】
5.2.3.  計算及び統計
試験化合物のEC50値は、ビヒクル（0％PIN）及び1μMスタウロスポリン（100％PIN）を使用して計算された阻害百分率値に基づき、グラフパッド（GraphPad）回帰を用いて計算される。
【０３８８】
実施例6.  薬物動態
6.1.  ネズミ
6.1.1.  動物
この研究は、42匹の薬物が投与されていない雄性CD1マウス（18〜20g、4〜5週齢）を使用して行われた。マウスは、フランスのジャンビエール、ル、ジェネスト  サン＝ティスル（Janvier、Le Genest St Isle）から得られる。
【０３８９】
室内において、1時間あたり約15回の空気入れ替え、22±2℃の温度、30〜70％の相対湿度及び12時間明／12時間暗の周期（夜間における終夜灯）という最適条件で、制御された環境が維持された。
【０３９０】
齧歯動物用のペレット化された餌（UAR A04C-10）が使用され、且つ、自由に提供された。経口投与の前に、動物は、化合物投与の前少なくとも12時間及び投与後4時間、絶食させられる。すべての動物は、水道水を自由に摂取した。
【０３９１】
6.1.2.  プロトコル
マウス（n=3／サンプリング時間）には、化合物55が、1mg/kgの服用レベルで、ボーラス注射で尾静脈に静脈内投与され、且つマウスの第二群には、5mg/kgの服用レベルで、単回の強制経口投与で経口投与される。静脈ボーラス投与は、5mL/kgの服用容量で与えられ、且つ、経口投与は、10mL/kgの服用容量で与えられる。実際の服用容量は、10匹の体重の平均に基づいている。
【０３９２】
経口投与のために化合物を製剤化するのに使用されたビヒクルは、メチルセルロース水（水中0.5％）である。
【０３９３】
すべての動物から、ガス麻酔下、心臓内穿刺によって約500μLの血液試料が集められ、且つ、抗凝血剤としてリチウム−ヘパリンを含有するチューブに入れられる。血液試料は、様々な時点（静脈注射：服用の0.05、0.25、0.5、1、3、5及び8時間後；経口投与：服用の0.25、0.5、1、3、5、8及び24時間後）で集められる。各マウスは、1回のみサンプリングされ且つ安楽死させられる。
【０３９４】
血液は、氷上に保持される。サンプリングから1時間以内に、血液は、4℃で、5,000rpmで10分間遠心分離される。遠心分離の直後、結果として得られた血漿試料は、ポリプロピレン・チューブに集められ、且つ、生物解析を待つ間、-20℃で凍結状態に維持される。
【０３９５】
6.2.  ラット
6.2.1.  動物
この研究は、6匹の薬物が投与されていない雄性スプラグ・ドーリー・ラット（180〜200g、6〜8週齢）を使用して行われた。ラットは、フランスのジャンビエール、ル、ジェネスト  サン＝ティスル（Janvier、Le Genest St Isle）から得られる。
【０３９６】
室内において、1時間あたり約15回の空気入れ替え、22±2℃の温度、30〜70％の相対湿度及び12時間明／12時間暗の周期という最適条件で、制御された環境が維持される。
【０３９７】
齧歯動物用のペレット化された餌（UAR A04C-10）が使用され、且つ、自由に提供される。経口投与の前に、動物は、化合物投与の前少なくとも12時間及び投与後4時間、絶食させられる。すべての動物は、水道水を自由に摂取した。
【０３９８】
6.2.2.  プロトコル
服用日の2日前、イソフルランを使用するガス麻酔下で、頸静脈内におけるカテーテルの埋め込みが行われる。
【０３９９】
ラットには、試験化合物が、1mg/kgの服用レベルで、ボーラス注射で尾静脈に静脈内投与される。
【０４００】
3匹の別のラットには、5mg/kg又は30mg/kgの服用レベルで、水中10％（w/v）のヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン（HPβCD）中で製剤化された化合物が、単回の強制経口投与で経口投与される。
【０４０１】
静脈ボーラス投与及び経口投与は、5mL/kgの服用容量で与えられる。
【０４０２】
すべての動物から、カテーテルを通して約200μLの血液試料が集められ、且つ、抗凝血剤としてリチウム−ヘパリンを含有するチューブに入れられる。血液試料は、様々な時点（静脈注射：服用の0.05、0.25、0.5、1、3、5、8及び24時間後；経口投与：服用の0.25、0.5、1、3、5、8及び24時間後）で集められる。
【０４０３】
血液は、氷上に保持される。サンプリングから1時間以内に、血液は、4℃で、5,000rpmで10分間遠心分離される。遠心分離の直後、結果として得られた血漿試料は、ポリプロピレン・チューブに集められ、且つ、生物解析を待つ間、-20℃で凍結状態に維持される。
【０４０４】
6.3.  解析
血漿試料は、LC-MS/MSでアッセイされる。血漿タンパク質は、内部標準を含有する過剰なメタノールで沈殿され、且つ、対応する上清は、C18カラムに注入される。被験物質は、有機移動相の百分率を増加させることにより、HPLC系で溶離される。API4000質量分析機（AB Sciex（商標））が、検出及び定量のために使用される。
【０４０５】
6.4.  計算及び統計
WinNonlin（登録商標）ソフトウェア（ファーサイト（Pharsight）、第5.2版）を使用して、ノンコンパートメント解析により、薬物動態パラメータが計算される。
【０４０６】
6.5.  結果
このプロトコルに供されたとき、次の経口投与後の曝露値が測定される。
表XIV.  ラットにおける本発明の例示化合物への曝露（血中濃度−時間曲線下面積）
【表１４】
2016528269.tif 000197
*：化合物4は、5％メチルセルロース水溶液で製剤化された。
表XV.  比較化合物への曝露
【表１５】
2016528269.tif 000198
表XVI.  マウスにおける本発明の例示化合物への曝露（血中濃度−時間曲線下面積）
【表１６】
2016528269.tif 000199
表XVII.  マウスにおける比較化合物への曝露（血中濃度−時間曲線下面積）
【表１７】
2016528269.tif 000200
【０４０７】
実施例7.  イン・ビボ・アッセイ
7.1.  ヒトのトリプル・ネガティブ乳癌（MDA-MB-231）のマウス・キセノグラフト・モデル
7.1.1.  動物
動物（雌性BALB/cマウス、ハーラン（Harlan）、S1930、18〜20g）に、濾過した水道水と標準食餌が自由摂取で提供され、且つ、当該動物は、22±2℃、55±10％の湿度、12時間明／暗の周期に維持される。
【０４０８】
7.1.2.  化合物調製
正の対照として使用されたパクリタキセルは、市販の溶液（フレゼニウス・カービ（Fresenius Kabi）、871WF014/4）の生理食塩水での1/3希釈物によって製剤化される。
【０４０９】
経口投与のための試験化合物は、0.5％メチルセルロース（VWR、リファレンスAX021233）中で製剤化される。
【０４１０】
7.1.3.  細胞株
MDA-MB-231細胞株は、ATCCコレクションから得られる（リファレンスHTB-26）。細胞は、その後、5％CO2インキュベーター中、37℃において、10％（v/v）ペニシリン／ストレプトマイシン（ギブコ（Gibco）15140-148）及び1％（v/v）L-グルタミン（200mM）（ギブコ（Gibco）25030-024）が供給されたRPMI1640培地中で培養される。
【０４１１】
7.1.4.  腫瘍の植付け
0.1mLの50％マトリゲル（Matrigel）（ビー・ディー・バイオサイエンセス（BD biosciences）、LDEVフリー256235）＋50％ダルベッコ−リン酸緩衝生理食塩水1X（ギブコ14190-086）中、5,000,000 MDA-MB-231細胞／マウスが、120匹のマウスの背中上部において、皮下経路で注入される。植付け前に、0.1mL/10g用量の麻酔薬溶液（18mL NaCl、0.9％ + 0.5mL キシラジン、+ 1.5mL ケタミン）の腹腔内注射によって、マウスは麻酔される。植付け後、腫瘍は、定期的にキャリパーで測定され、且つ、平均腫瘍容積が約200mm3のマウスが無作為に10個体ずつの群に分けられ、且つ、各群は、ビヒクル（経口投与）、対照としてのパクリタキセル（3回／週、20mg/kgの腹腔内）、又は、3、10、30又は100mg/kgの用量の試験化合物（経口投与、1日1回、10mL/kgの投与容量中）で投薬される。
【０４１２】
体重、及び腫瘍増殖が、処置の間、週2回記録される。
【０４１３】
26日後、処置は中止され、各群において、マウスの半分が、組織採取のために安楽死させられ、且つ、別途の半分は、さらに7日間飼育され、その間、体重と腫瘍サイズが測定される。
【０４１４】
屠殺したマウスの、血液と腫瘍が採取され、解析され、且つ試験化合物の影響が対照（ビヒクル及びパクリタキセル）と比較される。
【０４１５】
7.1.5.  結果
7.1.5.1.  26日の処置後の腫瘍増殖阻害
値は、次の計算を使用して得られた。
【０４１６】
相対的な腫瘍容積（RTV）：
【数３】
2016528269.tif 000201
【０４１７】
腫瘍対対照(T/C)
【数４】
2016528269.tif 000202
【０４１８】
腫瘍増殖阻害（TGI）
TGI＝１−T/C
表XVIII.  26日における腫瘍増殖阻害の結果
【表１８】
2016528269.tif 000203
【０４１９】
上表及び図１に示されているように、30mg/kgで投与された化合物55は、腫瘍の増殖の完全な阻害（統計的に有意な）を導いており、一方、30、100又は300mg/kgで投与された比較化合物Aは、その抗腫瘍効果が頭打ちになることを示しており、且つ、腫瘍増殖の阻害に対して同じ効果を達成することができない。
【０４２０】
7.1.5.2.  7日目の曝露
実験の間、以下の表の示されているように、7日目に血漿曝露が測定される。本発明の化合物は、30mg/kg（経口投与）の比較化合物Aよりも、24倍を超えて高い曝露を示している。10倍多い用量（300mg/kg、経口投与）でさえ、比較化合物Aは、化合物55より3.9倍低い曝露にとどまっている。
表XIX.  7日に測定された血漿暴露
【表１９】
2016528269.tif 000204
【０４２１】
7.1.6.結論
報告されたデータは、化合物55が、驚くべきことに、先行技術の近縁の類似体とは対照的に、イン・ビボでより高い活性を示すこと及び30mg/kgの経口投与で腫瘍増殖を阻害することを示している。
【０４２２】
さらに、化合物55は、化合物Aがたとえ10倍高い用量で投与されるとしても、比較化合物Aで達成されたよりも高い曝露を示している。
【０４２３】
7.2.  経口ブドウ糖トレランス試験（OGTT）
経口ブドウ糖トレランス試験は、ブドウ糖吸収速度における化合物の影響を測定するために使用され得、且つ、それゆえ、インスリン分泌の測定に使用され得る。動物（スプラグ・ドーリー・ラット、雄性、250g、1群あたりn=12）は、一晩絶食させられる。ビヒクル、メトホルミン（正の対照、250mg/kg経口投与）及び化合物で処理されたラットは、ブドウ糖負荷（2g/kg、経口投与）を受ける。血中ブドウ糖値が、携帯用ブドウ糖測定器（One Touch Ultra 2（登録商標）、ライフスキャン（Lifescan））で、ブドウ糖負荷の直前（t=0分）並びに15、30、60、90、120及び180分後にラット尾静脈を刺すことによって得られた1滴の血液で測定される。
【０４２４】
7.3.  ラットMNXモデルにおけるイン・ビボ有効性
7.3.1.  薬学的手順
イン・ビボでの有効性は、雌性ルイス半月板切除（Lewis meniscectomised）ラット（MNX）モデルにおいて研究された。MNXラット・モデルは、変形性関節症のよく検証された疾患モデルである（Januszらの文献、2002；Pritzkerらの文献、2006；Bendeleらの文献、2001）。
【０４２５】
7.3.2.  手術及び用量
変形性関節症は、0日(D0)に、内側側副靭帯の離断によって各ラットの右足に膝半月板切除術を行うことによって誘発され、且つ4mmの靭帯が除去される。半月板の内部部分は、二つのフラップとなるよう垂直に離断され、当該フラップは、滑液腔の前及び後ろに押される。偽動物は、麻酔、皮膚及び筋肉の切開とその後の縫合のみが行われる。1日目に、ラットは、均一な分布とするために、それらの体重に従って無作為に治療群（n=20／群）に割り当てられる。2日目〜21日目、ラットは、メチルセルロース（MC）0.5％又はHPβCD10％pH3.0中で製剤化された化合物を、1日1回（qd）又は1日2回（bid）、口から（経口）投与される。
【０４２６】
7.3.3.  定常状態PK測定（ssPK）
処置の少なくとも7日後、定常状態血漿曝露を測定するために、投与後の4つの時点：0、1、3及び6時間に（且つ、24時間は投与前試料と同じであるとみなして）、血液が採取される。
【０４２７】
7.3.4.  組織構造
屠殺する際、組織構造の解析のために、各ラットの右脛骨が集められ且つ処理される。4％ホルムアルデヒド中での48時間の固定の後、脛骨は、オステオソフト（Osteosoft）中で7日間、カルシウム除去がなされ、且つ、パラフィン中に向かい合って埋め込まれる前に、切断されて二分される。5組の切片が、200μmの間隔で切断され、これは、骨の中央部分約1.5mmをカバーしている。スライド1組が、形態的な評価及びOARSI採点法のために、サフラニン・オー（Safranin O）及び薄緑で染色される。スライドの他の組は、軟骨細胞密度測定のために、DAPIを用いて標本にされる。
【０４２８】
脛骨プラトーにおける変形性関節症を反映している軟骨損傷の程度が、軟骨損傷の等級付け及び病期診断に基づいて、OARSI法を用いて評価され且つ採点される（Pritzkerらの文献、2006）。OARSI採点法は、二人の異なる読取者により、盲検法で評価される。各脛骨について、5切片のOARSIスコアの平均として、一つのスコアが与えられる。
【０４２９】
OARSIスコア＝等級ｘ病期（1〜24）
グレード＝軟骨領域への損傷深さ、関節炎の重症度の情報を提供する。
ステージ＝軟骨表面にわたる損傷の広がり、関節炎の広がりの情報を提供する。
【０４３０】
統計上の解析のために、各群の平均値が、階層化されたクラスカル−ワリス検定で、その後、デュネットの多重比較ポストホック検定で比較される。
【０４３１】
有意水準：  *p<0.05； **p<0.01； ***p<0.001  対MNXビヒクル。統計上の解析は、研究のすべての群について行われる。
表XX.  本発明の化合物のMNX研究結果
【表２０】
2016528269.tif 000205
【０４３２】
7.4.  抗炎症測定
抗炎症活性を測定するために使用され得る多くのアッセイが開発され且つ定着していることが、当業者には正しく理解されるであろう（Brandらの文献、2007；Miescherらの文献、1989）。
【０４３３】
7.5.  クローン形成法
このアッセイは、足場非依存性増殖、及び、生体外での半固体培地中における腫瘍細胞のコロニー形成を阻害するための、試験化合物の能力を評価する。この目的を達成するために、試験化合物は、次のような異なる組織型の104腫瘍キセノグラフト由来細胞懸濁液中、半対数増加で、0.001μM〜30μMの範囲の濃度で評価される：黒色腫（10）、胸膜中皮腫（3）、軟部組織の肉腫（3）、及び骨肉腫（1）同様、肛門癌（1）、膀胱（6）、中枢神経系（1）、結腸（13）、アジアの胃癌（8）、白色人種の胃癌（4）、頭頸部（2）、肝臓（1）、非小細胞肺（腺癌14、扁平上皮2、大細胞4）、乳房（6）、卵巣（1）、膵臓（10）、前立腺（3）、腎臓（10）、子宮体癌(1)。
【０４３４】
7.5.1.  細胞株の培養
患者に由来する腫瘍細胞株は、毎週1回又は2回、定期的に継代された。すべての細胞が、37℃、5％CO2を伴う湿気のある環境中、10％（v/v）ウシ胎仔血清及び0.01％（w/v）ゲンタマイシンが補われたRPMI1640培地中で増殖された。生存可能な細胞の百分率が、トリパン・ブルー色素排除法を使用して、ノイバウエル血球計算盤で決定された。
【０４３５】
7.5.2.  ヒト腫瘍キセノグラフトからの単一細胞懸濁液の調製
胸腺―無形成性ヌードマウス（NMRI nu/nu型）において、連続継代で皮下に増殖している固体ヒト腫瘍キセノグラフトが、無菌状況下で除去された。MDA-MB-231キセノグラフトは、無菌状況下で除去され、前以て冷却されたOncostore（登録商標）輸送培地（オンコサイエンス・エー・ジー（Oncoscience AG））に入れられ、且つ、実験を行うために、直ちにクール・パックで輸送された。すべてのキセノグラフト材料は、機械的にバラバラとされ、且つ、その後、コラゲナーゼIV型（41U/mL）、DNase I（125U/mL）、ヒアルロニダーゼ（100U/mL）及びディスパーゼ IIからなる酵素カクテルとともに、RPMI 1640培地中、37℃で45分間、インキュベートされた。細胞は、100μmと40μmのメッシュサイズ（セル・ストレイナー（Cell Strainer）、BD Falcon（商標））を通され、且つ、RPMI 1640培地で2回洗浄された。生存可能な細胞の百分率が、トリパン・ブルー色素排除法を使用して、ノイバウエル血球計算盤で決定された。細胞のアリコートが凍結され、且つ、液体窒素中で貯蔵された。実験の各日に、腫瘍細胞の凍結したアリコートが溶かされ、且つ、アッセイ・プレートの調製のために使用された。
【０４３６】
7.5.3.  クローン形成法の手順
クローン形成法は、改変二層軟寒天アッセイに従って、96穴プレート・フォーマット中で行われた。各試験のために、上記のように腫瘍材料が調製され、且つ、アッセイ・プレートは、次のように調製された：各試験ウェルは、試験化合物を伴って又は伴わずに、等しい容量の三層、半固体培地の二層（底及び頂上の層）と培地上清の一層、を含んでいた。底の層は、0.05mL／ウェルの細胞培養培地（20％（v/v）ウシ胎仔血清、0.01%（w/v）ゲンタマイシン及び0.75%（w/v）寒天が補われた、ピルビン酸塩を伴う又は伴わないIMDM又はRPMI 1640）からなっていた。1.5 103〜1 104細胞が、0.05mLの、0.4%（w/v）で寒天が補われた同じ培養培地に添加され、且つ、底の層の上に平板形成された。試験化合物は、DMSO中での段階希釈の後に添加され、且つ、細胞培養培地中に移され、且つ、実験の継続のため、細胞上に放置された（連続曝露、0.05mLの薬物覆い）。すべてのプレートは、6個の未処理対照ウェルと、10種の濃度の薬物で処理された群（二つずつ）を含んでいた。培地は、37℃且つ湿気のある環境中で7.5％CO2で、8〜13日間インキュベートされ、且つ、倒立顕微鏡を用いて、コロニーの増殖について綿密に監視が行われた。この期間、生体外での腫瘍の増殖は、直径が50μmを超えるコロニーの形成を導いた。コロニー形成が最大の時、自動画像解析システム（BIOREADER 5000-Wα、バイオシス・ゲー・エム・ベー・ハー（Biosys GmbH））でカウントがなされた。評価の48時間前、元気なコロニーは、塩化2-(4-ヨードフェニル)-3-(4-ニトロフェニル)-5-フェニルテトラゾリウムの滅菌水溶液（1mg/mL、100μL／ウェル）で染色された。
【０４３７】
7.5.4.  データ評価
アッセイは、次の品質管理基準が満たされたなら、十分に評価可能であると考えられた：
−  50μmよりも大きいコロニー直径を伴って、対照ウェル中の平均コロニー数は50コロニー超
−  アッセイ・プレート中で計算されたZ’因子は0.5以上
−  増殖対照ウェル中の変動係数が30％以下
−  濃度100μMの正の参照化合物スニチニブは、増殖対照の30％未満まで、シグナルの低減を生じなければならない。
【０４３８】
薬物の影響は、処理されたウェル中の平均信号の、未処理対照の平均信号との比較によって得られた、コロニー形成の百分率で表現された（試験−対−対照値によって表現された、T/C値［％］）：
【数５】
2016528269.tif 000206
【０４３９】
S字型濃度−応答曲線は、4パラメーター非線状曲線フィット（オンコテスト・ウェアハウス・ソフトウェア（Oncotest Warehouse Software））を用いて、各腫瘍モデルについて得られたデータ・ポイントに適合された。IC50値は、相対及び絶対IC50値として報告される。相対IC50値は、S字型濃度−応答曲線の頂上と底のプラトーとの中間（当該曲線の変曲点）における、応答（コロニー形成の阻害）を与える試験化合物の濃度である。絶対IC50値は、濃度影響曲線とT/C＝50％との交点における濃度として決定される。
【０４４０】
ある化合物の総合的な有効性は、すべての個々のIC50値の幾何平均IC50値によって表された。仮に、（化合物が、活性がありすぎるか又は活性が欠けていたために、）IC50値が試験された用量範囲内で決定され得なかったならば、検討された最も低いか又は最も高い濃度が、幾何平均値の計算に使用された。
【０４４１】
7.5.5.  結果
このアッセイに供されたとき、且つ、相対IC50値に基づいて、感度の高い腫瘍モデルが、特に、黒色腫、前立腺、腎臓癌、肉腫、子宮、肺、結腸、胃、肝臓、乳房、及び卵巣癌において見出された。
【０４４２】
一般的な結論
本出願で提供されたデータは、驚くべきことに、式Iの化合物が、先行技術に記載された構造が類似の化合物と比べて改良された曝露を示すことを明示している。より高い曝露は、化合物のより少ない投薬量を導き得、且つ、次に、より少ない投薬量レベルは、薬物−薬物相互作用、副作用、及び／又は化合物の毒性を低減し得る。
【０４４３】
加えて、本発明の化合物は、驚くべきことに、先行技術の極く近い類似体と比べて、より高いイン・ビボ活性をも示し、且つ、腫瘍の増殖を低減及び／又は妨げるために、特に有用であり得る。この改良された曝露及びイン・ビボ活性は、当業者によって予測され得なかった。
【０４４４】
結語
前述の説明は例示的かつ説明的な性質のものであって、本発明及びその好ましい実施態様を説明することが意図されるものであることが当業者に理解されるであろう。ルーチンの実験を通じて、当業者は、本発明の精神を逸脱することなくなされ得る明白な修正及び変更を認識するであろう。添付の特許請求の範囲の範囲内に入る全てそのような修正は、その中に含まれることが意図されている。したがって、本発明は、上記の説明によるだけでなく、以下の特許請求の範囲及びその等価物によっても定義されることが意図されている。
【０４４５】
限定されないが、本明細書中に引用された特許及び特許出願を含む、全ての刊行物は、各々の個々の刊行物が、あたかも完全に示されているように引用により本明細書中に組み込まれていることが具体的にかつ個別的に示されているかのように、引用により本明細書中に組み込まれる。
【０４４６】
様々な化合物の示差的細胞透過能力のような因子が、イン・ビトロの生化学的アッセイ及び細胞アッセイにおける化合物の活性間の相違に寄与し得ることが理解されるべきである。
【０４４７】
本出願で与えられ、記載されている本発明の化合物の化学物質名の少なくとも一部は、市販の化学物質命名ソフトウェアプログラムの使用によって自動的に作り出されたものである場合があり、独立に確認されてはいない。この機能を実施する代表的なプログラムは、Open Eye Software社によって販売されているLexichem命名ツール、及びMDL社によって販売されているAutonom Softwareツールを含む。表示された化学物質名と図示された構造が異なる場合、図示された構造が優先する。
参考文献
【化１４３】
2016528269.tif 000207
2016528269.tif 000208
【図１】
2016528269.tif 000213
【国際調査報告】
2016528269.tif 000214
2016528269.tif 000215