(57)【要約】  本開示は、治療有効量のミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子、例えばミオスタチン抗体またはＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子、ビマグルマブ抗体などのＡｃｔＲＩＩ受容体抗体を利用する新規なレジメンを用いた、孤発性封入体筋炎および他の筋消耗性疾患の治療に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２】
前記ミオスタチンアンタゴニストが、それを必要とする患者に約１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項３】
前記ミオスタチンアンタゴニストが、約１、約３または約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で投与される、請求項１または２に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項４】
前記ミオスタチンアンタゴニストが静脈内投与される、請求項１から３に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項５】
前記ミオスタチンアンタゴニストが４週間毎に投与される、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項６】
前記患者が歩行可能である、請求項１から５のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項７】
孤発性封入体筋炎の治療が、疾患の進行の遅延または身体機能および運動性の改善を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項８】
孤発性封入体筋炎の治療が、嚥下障害または嚥下困難の改善を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項９】
孤発性封入体筋炎の治療が、上肢筋力の改善を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１０】
孤発性封入体筋炎の治療が、転倒発生率の低減または転倒の予防を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１１】
ミオスタチン受容体結合分子である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１２】
ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストである、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１３】
抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１４】
前記抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体がビマグルマブである、請求項１から１３のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１５】
配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である、請求項１３から１４のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１６】
前記抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むまたはこれらからなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１７】
前記抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が、
ａ）（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、
およびｂ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体からなる群から選択され、前記抗体が約２ｐＭのＫＤを有する、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１８】
前記抗体が、ＡｃｔＲＩＩＡと結合する１０倍以上のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項１９】
前記抗体が、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１３から１８のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２０】
前記抗体が、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、または
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１３から１９のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２１】
前記抗体が、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含む、請求項１３から２０のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２２】
前記抗体が、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項１３から２１のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２３】
前記抗体が、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列と配列番号８５の可変軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列と配列番号８６の可変軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列と配列番号８７の可変軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列と配列番号８８の可変軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列と配列番号８９の可変軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列と配列番号９０の可変軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列と配列番号９１の可変軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列と配列番号９２の可変軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列と配列番号９３の可変軽鎖配列、
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列と配列番号９４の可変軽鎖配列、
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列と配列番号９５の可変軽鎖配列、
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列と配列番号９６の可変軽鎖配列、
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列と配列番号９７の可変軽鎖配列、または
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列と配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、請求項１３から２２のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２４】
前記抗体が、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列と配列番号１４１の軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列と配列番号１４２の軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列と配列番号１４３の軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列と配列番号１４４の軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列と配列番号１４５の軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列と配列番号１５１の軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列と配列番号１５２の軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列と配列番号１５３の軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列と配列番号１５４の軽鎖配列、または
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列と配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、請求項１３から２３のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２５】
前記組成物中に含まれる抗体が、請求項１０の少なくとも１つの抗体とＡｃｔＲＩＩＢの結合を交差反応遮断する、またはＡｃｔＲＩＩＢとの結合を請求項１０の少なくとも１つの抗体によって交差反応遮断される、請求項１３から２４のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２６】
前記組成物中に含まれる抗体が、Ｆｃ領域の突然変異によって改変されたエフェクター機能を有する、請求項１３から２５のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２７】
前記組成物中に含まれる抗体が、請求項１５から１７に記載の抗体によって認識されるエピトープと結合する、請求項１３から２６のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２８】
前記抗体が、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）またはｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、請求項１３から２７のいずれか一項に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【請求項２９】
約１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【請求項３０】
約１ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【請求項３１】
約３ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【請求項３２】
約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【請求項３３】
治療有効量のミオスタチンアンタゴニストを、それを必要とする患者に投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３４】
前記ミオスタチンアンタゴニストを約１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む、請求項３３に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３５】
約１、約３または約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で投与することを含む、請求項３３から３４のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３６】
前記ミオスタチンアンタゴニストを静脈内投与することを含む、請求項３３から３５のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３７】
前記ミオスタチンアンタゴニストを４週毎に投与することを含む、請求項３３から３６のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３８】
前記患者が歩行可能である、請求項３３から３７のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項３９】
孤発性封入体筋炎の治療が疾患の進行の遅延または身体機能および運動性の改善を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４０】
孤発性封入体筋炎の治療が嚥下障害／嚥下困難の改善を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４１】
孤発性封入体筋炎の治療が上肢筋力の改善を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４２】
孤発性封入体筋炎の治療が転倒発生率の低減または転倒の予防を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４３】
前記ミオスタチンアンタゴニストがミオスタチン受容体結合分子である、請求項３３から４２のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４４】
前記ミオスタチンアンタゴニストがＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストである、請求項３３から４３のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４５】
前記ミオスタチンアンタゴニストが抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、請求項３３から４４のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４６】
前記抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体がビマグルマブである、請求項３３から４５のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４７】
前記ミオスタチンアンタゴニストが、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である、請求項４５または４６のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４８】
前記抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むまたはこれらからなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する、請求項４５から４７のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項４９】
前記抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が、
ａ）（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、
およびｂ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体からなる群から選択され、前記抗体が約２ｐＭのＫＤを有する、請求項４５から４８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５０】
前記抗体が、ＡｃｔＲＩＩＡと結合する１０倍以上のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する、請求項４５から４９のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５１】
前記抗体が、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項４５から５０のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５２】
前記抗体が、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、または
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項４５から５１のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５３】
前記抗体が、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含む、請求項４５から５２のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５４】
前記抗体が、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項４５から５３のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５５】
前記抗体が、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列と配列番号８５の可変軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列と配列番号８６の可変軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列と配列番号８７の可変軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列と配列番号８８の可変軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列と配列番号８９の可変軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列と配列番号９０の可変軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列と配列番号９１の可変軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列と配列番号９２の可変軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列と配列番号９３の可変軽鎖配列、
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列と配列番号９４の可変軽鎖配列、
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列と配列番号９５の可変軽鎖配列、
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列と配列番号９６の可変軽鎖配列、
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列と配列番号９７の可変軽鎖配列、または
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列と配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、請求項４５から５４のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５６】
前記抗体が、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列と配列番号１４１の軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列と配列番号１４２の軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列と配列番号１４３の軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列と配列番号１４４の軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列と配列番号１４５の軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列と配列番号１５１の軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列と配列番号１５２の軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列と配列番号１５３の軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列と配列番号１５４の軽鎖配列、または
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列と配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、請求項４５から５５のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５７】
前記組成物中に含まれる抗体が、態様１０の少なくとも１つの抗体とＡｃｔＲＩＩＢの結合を交差反応遮断する、またはＡｃｔＲＩＩＢとの結合を態様１０の少なくとも１つの抗体によって交差反応遮断される、請求項４５から５６のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５８】
前記組成物中に含まれる抗体が、Ｆｃ領域の突然変異によって改変されたエフェクター機能を有する、請求項４５から５７のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項５９】
前記組成物中に含まれる抗体が、請求項４６から４８に記載の抗体によって認識されるエピトープと結合する、請求項４５から５８のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項６０】
前記抗体が、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）またはｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、請求項４５から５９のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項６１】
ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【請求項６２】
ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【請求項６３】
ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【請求項６４】
ビマグルマブを投与することを含む孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約３ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【請求項６５】
ビマグルマブを投与することを含む孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【請求項６６】
孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【請求項６７】
孤発性封入体筋炎を治療する方法において使用するための、１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む組成物。
【請求項６８】
１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む単位剤形。
【請求項６９】
溶液で希釈した１つまたは複数のバイアル由来の適量のビマグルマブを含む注入用バッグ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、その開示の全容が参照により本明細書に組み込まれている、２０１３年８月１４日に出願された米国仮特許出願第６１／８６５８６１号と２０１４年４月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／９８３５６７号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本開示は、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはアクチビン受容体ＩＩ（ＡｃｔＲＩＩ）結合分子、例えばミオスタチンまたはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばＢＹＭ３３８の分野におけるものである。詳細には本開示は、孤発性封入体筋炎（sporadic inclusion body myositis）（ｓＩＢＭ）の治療、および治療有効量のＡｃｔＲＩＩアンタゴニスト、例えばアクチビン受容体ＩＩ（ＡｃｔＲＩＩ）結合分子、例えば（「ビマグルマブ」としても知られる）ＢＹＭ３３８抗体などの抗アクチビン受容体ＩＩ（ＡｃｔＲＩＩ）抗体を利用する、それを治療するための新規な用量レジメンに関する。
【背景技術】
【０００３】
孤発性封入体筋炎（ｓＩＢＭ）は非常に稀な疾患である。現代の診断基準に基づいたこの疾患の罹患に関する疫学文献の数は限られているが、それは孤発性であり、全ての年代に関して百万人当たり１５〜７１人、および５０才を超えると百万人当たり５１人の罹患が推定される。約２：１で男性は女性より罹患することが多い。遺伝的要因と環境要因の両方と関係し得る、罹患率の顕著な地域差が存在する。おそらく二次的な変性および炎症特徴の痕跡にもかかわらず、ｓＩＢＭの根底にある主な病因は知られておらず、任意の既知の治療に対して残念ながら抵抗力がある（Hohlfeld 2011）。
【０００４】
稀な疾患ではあるが、ｓＩＢＭは５０才を超える年齢の人が罹患する突発性炎症性ミオパチー（idiopathic inflammatory myopathies）の最も一般的な型を表し（Dimachkie and Barohn2013、Griqqs 2006、Peng et al 2000）、全ての炎症性ミオパチーの合計３０％を占める。この疾患は近位と遠位の衰弱の潜伏的および非対称的発症によって臨床上特徴付けられ、５０才を超える年齢後に一般に発症し経時的に進行する（Needham et al 2008）。主に疾患の遅い進行および微妙な初期症状の認識の困難、および筋生検材料異常に関する専門知識の必要性を含めた複雑な診断基準のため、症状の発症後５〜８年まで診断が行われないことが多い。下肢の不調は、椅子、および階上または階下への歩行が原因の障害の型で典型的に現れる。疾患が進行すると、下肢の衰弱は傷害の可能性を有する頻繁な転倒につながる可能性がある。ｓＩＢＭ患者の転倒は近位の筋衰弱の結果として起こり得るが、遠位の下肢衰弱（下垂足）でも起こり、このような転倒に対する原因となる役割を果たす可能性がある。さらに、手と指の衰弱の初期発症があり、日常生活の活動（例えば、筆記、食事、入浴、着替え、歯磨き）における自立を保つ能力を最終的に害する。他の重要な症状では、食道および咽頭筋の関与が原因で、少なくとも４０％の患者において嚥下障害（dysphagia）が生じる。これが体重減少または誤嚥とその結果生じる肺炎につながる可能性がある（Amato & Barohn 2009、Oh et al 2008）。疾患の進行は比較的遅いが和らぐことがなく、ｓＩＢＭを有するほぼ全ての患者が、数年以内にステッキまたは歩行器、および発症約１０年までに車椅子などの補助デバイスを必要とする（Griqqs et al 1995、Dalakas 2006）。ｓＩＢＭの回復不能な罹患状態は臨床医および患者のコミュニティーによって充分認識されている（Hohlfeld 2011）。
【０００５】
比較的多数のｓＩＢＭ患者に関する長期のフォローアップ試験はｓＩＢＭの重度に衰弱した性質を確認した（Benveniste et al 2011、Cox et al 2011）。ｓＩＢＭの非常に衰弱した性質は、ｓＩＢＭに関する筋力、機能状態および平均余命の進行的低減に焦点を当て、１０〜１３年の期間にわたり実施されオランダにおいて実施された６４患者の全国的疫学試験によって確認された（Cox et al 2011）。正式な予測記載ではないが、平均余命は８１才で正常であったが、日常生活の活動は明らかに制限されたことを著者は報告した。フォローアップ時に、さらなるフォローアップに同意した全１５人の生存患者が車椅子を使用していることが分かり、そのうちの７人（４７％）は完全に車椅子依存状態であった。２０年の平均疾患期間の後、３人の患者がナーシングホームで生活しており、１２人は適応しながら自宅で生活していた（階段昇降機、敷居なし、スタンダップチェア）。ほぼ全ての患者が日常生活の活動に、彼らのパートナーまたは他の世話人から相当な手助けを必要とし、患者の４０％が完全または重度に従属状態であり（バーセル指数１０未満）、患者の２０％は適度に従属状態であった（バーセル指数１０〜１５）。３人の患者（６．５％）において、「広範囲の衰弱による耐え難い苦痛および重度な生活の質の低下」のため安楽死がリクエストされ、別の３人の患者（６．５％）は、非常に不自由な嚥下障害、カヘキシーのため連続的で充分な沈静を求め、脱水が認められた。これらオランダ人患者の６人（１３％）において末期段階のケア介入が報告された事実は、この疾患の末期段階における重度の不自由さと生活の質の低下を反映する。
【０００６】
ｓＩＢＭの治療に関して承認されている薬剤は存在しない。いかなる治療もｓＩＢＭにおける筋衰弱の進行を遅延または逆行させることが分かっていないからである（Greenberg 2009, Aggarwal and Oddis 2012）。さらに、ｓＩＢＭを有する患者は、コルチコステロイド、メトトレキサート、アザチオプリン、またはシクロホスファミドを含めた炎症性ミオパチーの治療に伝統的に使用される作用物質に対して臨床上意味のある応答を示していない（Griqqs 2006、Mann and Vencovsky 2011、Needham and Mastaglia 2007、Solorzano and Phillips 2011）。幾つかの医療センターにおいて静注用免疫グロブリンはオフラベルで使用されるが、この状態でのその長期有効性を支持する証拠はない。抗Ｔリンパ球阻害剤、抗ＴＮＦ薬（エタネルセプト）およびβ−インターフェロン１Ａなどの異なる免疫療法剤の有効性に関して同様の全体的結論を引き出すことができる。オキサンドロロンは依然として調査研究段階であり、その考えられる利点に関する結論に達するまで、さらなるデータが必要とされる。したがって現在、ｓＩＢＭを有する患者の治療において明らかなアンメットメディカルニーズがある。
【０００７】
異なる方法およびスコアに基づくと筋力の平均低下率は１年当たり３．５〜５．４％であり、考えられる進行率は個々の患者に関して相当速い（Hohlfeld 2011, Cox et al 2011）。ｓＩＢＭは劇的な骨格筋萎縮を引き起こすので、ビマグルマブのような筋肉における萎縮経路を標的化する治療剤が、この疾患において有効であり得る。
【０００８】
Ｂｒｉｇｈａｍ  ＆  Ｗｏｍｅｎ’ｓ  ＨｏｓｐｉｔａｌにおけるＳｔｅｖｅｎ  Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ博士の研究室からの予備データは、ＡｃｔＲＩＩＢおよび他の受容体下流のシグナル伝達経路はｓＩＢＭにおいて不適切に活性化される可能性があることを示唆し、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害がｓＩＢＭ患者を助長し得るという仮説をさらに支持する。多発性筋炎または皮膚筋炎を有する１２人の患者および５人の正常対照と比較した１７人のｓＩＢＭ患者からのデータに基づくと、ｓＩＢＭ患者は、（ＡｃｔＲＩＩＢ受容体の下流に存在しＴＧＦβシグナル伝達に関する第二のメッセンジャーとして働く）顕著なリン酸化ＳＭＡＤ（ｐＳＭＡＤ）シグナル伝達を有しており、正常対照と比較して平均２７倍の増加があった（Greenberg et al 2013）。
【０００９】
これに基づくと、仮説は、ＴＧＦβ経路を介した不適切なシグナル伝達がｓＩＢＭの病因に寄与しているということである。このＴＧＦβ上方制御がＡｃｔＲＩＩＢ受容体または別のＴＧＦβ受容体を介して起こるかどうかは知られていないが、ビマグルマブによるＡｃｔＲＩＩＢ阻害が筋萎縮シグナル伝達経路に介入することができ、ｓＩＢＭ患者によって経験される衰弱症状を標的化することができるかどうか試験することは妥当であるようであった。
【００１０】
さらに、Ｗｏｊｃｉｋらによる試験は１２人のｓＩＢＭ患者由来の生検材料の分析を含んでおり、ミオスタチン／ミオスタチン前駆体は単独、またはアミロイド−βと結合した状態で、ｓＩＢＭの病因において役割を果たし得ることを示唆する（Wojcik et al 2005）。
【００１１】
ビマグルマブ（ＢＹＭ３３８）は、ミオスタチンまたはアクチビン、その天然物リガンドより高いアフィニティーで、ＩＩ型アクチビン受容体（ＡｃｔＲＩＩ）と競合的に結合するように開発されたモノクローナル抗体である。ビマグルマブはＡｃｔＲＩＩのリガンド結合ドメインと結合する完全ヒト抗体（修飾ＩｇＧ１、２３４−２３５−Ａｌａ−Ａｌａ、λ２）であり、それによってその１つがミオスタチンおよびアクチビンであるそのリガンドの結合とその後のシグナル伝達を妨げる。ミオスタチン、形質転換増殖因子β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーの１メンバーは、動物およびヒトにおいて骨格筋塊をネガティブに制御する分泌型タンパク質である。ミオスタチンシグナル伝達はＡｃｔＲＩＩで起こり、その示される作用機構はＳｍａｄ２／３経路を介してタンパク質合成および筋細胞の分化と増殖を阻害する。ミオスタチンの阻害または遺伝子切除によって筋肉塊および筋力が増大する（Lee et al 2005;Lee and McPherron 2001;Whittemore et al 2003）。
【００１２】
ＢＹＭ３３８はヒトおよびマウスＡｃｔＲＩＩＢと交差反応性があり、ヒト、カニクイザル、マウスおよびラット骨格筋細胞に有効である。ＢＹＭ３３８は静脈内（ｉ．ｖ．）投与と皮下（ｓ．ｃ．）投与の両方用に製剤化されている。
【００１３】
１４人のｓＩＢＭ患者（１１有効成分、３プラセボ）に関する試験ＣＢＹＭ３３８Ｘ２２０５からのデータは、３０ｍｇ／１ｋｇのＢＹＭ３３８を一回用量静脈内投与した後の、筋体積と除脂肪体重の両方に関してプラセボと比較し統計学的に有意なＢＹＭ３３８の増大を示した。投与後８週間で、ベースラインからの主要大腿筋体積（ＴＭＶ）の平均変化はＢＹＭ３３８よりの値であった（＋６．５％；Ｐ＝０．０２４）。（ＤＸＡにより測定した）非主要ＴＭＶおよび全身除脂肪体重もＢＹＭ３３８よりの値であった（それぞれ＋７．６％と＋５．７％；Ｐ＝０．００９とＰ＝０．０１４）。患者は一回投与後２４週間フォローアップし、定量的筋力試験（ＱＭＴ）と徒手筋力検査法の両方により測定して、幾つかの筋群において筋力の数値の増大を示した。データは、プラセボと比較した６分間歩行距離試験（６ＭＷＤ）における１４．６％の統計学的に有意な増大（ｐ＝０．００８）によって示されるように、一回のＢＹＭ３３８投与後１６週間で身体機能および運動性の利点も示唆した。
【００１４】
孤発性封入体筋炎、進行性筋肉変性疾患を有する患者からのデータによって例示されるように、ビマグルマブの一回注射（３０ｍｇ／ｋｇ）によって誘導された（ベースラインから５％を超える）除脂肪体重の急速な増加は身体性能の有意な増大を誘発し得る（図１）。重要なことに、筋量増大後の機能の改善には、完全に成熟状態になり増大した収縮活動をする準備ができる前の骨格筋の構造／機能再構築をおそらく反映する、一定期間のタイムラグが必要である。
【００１５】
本開示は、これらの好ましい事前一回投与の発見をさらに試験し、異なる用量のビマグルマブを用いた長期の治療が、歩行可能な（ambulatory）ｓＩＢＭ患者における筋量、筋力、身体機能、および運動性の変化にどの程度影響を与えるか調べる。
【００１６】
ミオスタチン、ＡｃｔＲＩＩＢ受容体およびＡｃｔＲＩＩＢ受容体抗体
ＢＹＭ３３８としても知られるビマグルマブは、ミオスタチン、その主要天然物リガンドより高いアフィニティーで、ＩＩ型アクチビン受容体Ｂ（ＡｃｔＲＩＩＢ）と競合的に結合するように開発されたヒトモノクローナル抗体である。ビマグルマブは、その全容が参照により本明細書に組み込まれているＷＯ２０１０／１２５００３中に開示される。ミオスタチン、形質転換増殖因子β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーの１メンバーは、ライフサイクルを通じて、動物およびヒトにおいて骨格筋塊をネガティブに制御する分泌型タンパク質である。ミオスタチンシグナル伝達はＡｃｔＲＩＩＢで起こり、その示される作用機構はＳｍａｄ２／３経路を介してタンパク質合成および筋細胞の分化と増殖を阻害する。発生段階の動物およびヒトにおけるミオスタチンの不在は、多くの数と大きさの筋繊維を伴う筋肉亢進表現型をもたらす。産後のミオスタチンレベルの低下は、既存筋繊維の大きさの増大による骨格筋の肥大をもたらす。成人では、ミオスタチンは骨格筋中で産生され、一部が潜在的不活性複合体として血液中を循環する。
【００１７】
骨格筋塊の内在性阻害剤としてのミオスタチンの役割と一致して、ＢＹＭ３３８は、不使用とステロイド誘導性萎縮の前臨床ネズミモデル、および健常カニクイザルに関する毒性試験において骨格筋塊を劇的に増大させた。さらに、マウスとラットにおける骨格筋塊の増大は対応する筋力の増大（力の発生）をもたらした。マウスおよびカニクイザルへの静脈内および皮下投与の後、ビマグルマブは標的介在性の薬物消失（ＴＭＤＤ）を伴う一貫したＩｇＧ１薬物動態（ＰＫ）プロファイルを示し充分許容された。
【００１８】
最初にヒトにおける６用量レベルの分析、一回漸増用量試験は、０．１、０．３、１、３、１０および３０ｍｇ／ｋｇのビマグルマブの一回静脈内投与は安全であり、充分許容され、モデル化した前臨床データから予測可能なＰＫプロファイルを与えることを示唆する。３〜３０ｍｇ／ｋｇの４週間投与で、プラセボに対してベースラインから２．７〜５．２％の大腿筋体積の測定可能な増大をもたらす。
【００１９】
ビマグルマブの考えられる臨床用途は、筋消耗を伴う状態における用途である。特に顕著なのは、不使用、カヘキシー、コルチコステロイド使用、およびサルコペニアが原因の萎縮状態からの筋量の回復を必要とする臨床シナリオである。孤発性封入体筋炎（ｓＩＢＭ）は、これら全ての要素が役割を果たし得る臨床状態である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
孤発性封入体筋炎（ｓＩＢＭ）を有する患者集団における介入は非常に革新的となり、高度なアンメットメディカルニーズを満たし得る。実際、現在ｓＩＢＭを治療するための治療オプションは存在しない。この目的は本開示内で提供する使用、方法および用量レジメンによって達成される。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
したがって本開示の第一の主題は、ミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子であってよいミオスタチンアンタゴニストを含む組成物の、ｓＩＢＭを治療するための方法または使用に関する。ミオスタチン結合分子は、例えばミオスタチンに対するアンタゴニスト抗体であってよい。ＡｃｔＲＩＩ結合分子は、例えばＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばＢＹＭ３３８としても知られるビマグルマブであってよい。
【００２２】
本明細書中で使用する「ミオスタチンアンタゴニスト」は、（例えば、ミオスタチンとミオスタチン受容体、すなわちＡｃｔＲＩＩＢの結合を遮断することによって）ミオスタチン機能、発現および／またはシグナル伝達をアンタゴナイズする（例えば低減する、阻害する、低下させる、遅延させる）ことができる分子を指す。アンタゴニストの非制限的な例には、ミオスタチン結合分子およびＡｃｔＲＩＩＢ受容体結合分子がある。本開示の方法、レジメン、キット、プロセス、使用および組成物の幾つかの実施形態では、ミオスタチンアンタゴニストを利用する。
【００２３】
「ミオスタチン結合分子」によって、単独または他の分子との会合状態のいずれかで、ヒトミオスタチン抗原と結合することができる任意の分子を意味する。結合反応は、例えば、その受容体とミオスタチンの結合の阻害を決定するための結合アッセイ、競合アッセイもしくはバイオアッセイ、または無関連な特異性、ただし理想的には同じアイソタイプの抗体、例えば抗ＣＤ２５抗体を使用した陰性対照試験を参照する任意の種類の結合アッセイを含めた、標準的な方法（定性的アッセイ）によって示すことができる。ミオスタチン結合分子の非制限的な例には、小分子、ミオスタチン受容体デコイ、およびＢ細胞もしくはハイブリドーマによって産生されるミオスタチンと結合する抗体、およびキメラ、ＣＤＲ移植もしくはヒト抗体またはそれらの任意の断片、例えばＦ（ａｂ’）２およびＦａｂ断片、ならびに単鎖または単ドメイン抗体がある。ミオスタチン結合分子は、ミオスタチン機能、発現および／またはシグナル伝達をアンタゴナイズする（例えば低減する、阻害する、低下させる、遅延させる）ことが好ましい。本開示の方法、レジメン、キット、プロセス、使用および組成物の幾つかの実施形態では、ミオスタチン結合分子を利用する。
【００２４】
「ＡｃｔＲＩＩ結合分子」によって、単独または他の分子との会合状態のいずれかで、ヒトＡｃｔＲＩＩ受容体（ＡｃｔＲＩＩＡおよび／またはＡｃｔＲＩＩＢ）と結合することができる任意の分子を意味する。結合反応は、例えば、ＡｃｔＲＩＩ受容体とミオスタチンの結合の阻害を決定するための結合アッセイ、競合アッセイもしくはバイオアッセイ、または無関連な特異性、ただし理想的には同じアイソタイプの抗体、例えば抗ＣＤ２５抗体を使用した陰性対照試験を参照する任意の種類の結合アッセイを含めた、標準的な方法（定性的アッセイ）によって示すことができる。ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子の非制限的な例には、小分子、ミオスタチンデコイ、およびＢ細胞またはハイブリドーマによって産生されるＡｃｔＲＩＩ受容体に対する抗体、およびキメラ、ＣＤＲ移植もしくはヒト抗体またはそれらの任意の断片、例えばＦ（ａｂ’）２およびＦａｂ断片、ならびに単鎖または単ドメイン抗体がある。ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子は、ミオスタチン機能、発現および／またはシグナル伝達をアンタゴナイズする（例えば低減する、阻害する、低下させる、遅延させる）ことが好ましい。本開示の方法、レジメン、キット、プロセス、使用および組成物の幾つかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ受容体結合分子を利用する。
【００２５】
別の実施形態では、組成物は、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなる結合ドメイン、または（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；もしくは（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）を含むもしくはこれらからなるエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む。
【００２６】
他のさらなる代替実施形態では、前述の組成物は、ＡｃｔＲＩＩＡと結合する１０倍以上のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む。
【００２７】
さらに本開示は、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む組成物に関する。
【００２８】
ある特定の実施形態では、本開示は、抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、または（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む組成物を提供する。
【００２９】
さらに別の実施形態では、前述の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体は、（ｉ）配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列、（ｉｉ）配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列、または（ｉｉｉ）（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列および配列番号８５の可変軽鎖配列、（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列および配列番号８６の可変軽鎖配列、（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列および配列番号８７の可変軽鎖配列、（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列および配列番号８８の可変軽鎖配列、（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列および配列番号８９の可変軽鎖配列、（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列および配列番号９０の可変軽鎖配列、（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列および配列番号９１の可変軽鎖配列、（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列および配列番号９２の可変軽鎖配列、（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列および配列番号９３の可変軽鎖配列、（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列および配列番号９４の可変軽鎖配列、（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列および配列番号９５の可変軽鎖配列、（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列および配列番号９６の可変軽鎖配列、（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列および配列番号９７の可変軽鎖配列、もしくは（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列および配列番号９８の可変軽鎖配列を含む。
【００３０】
ある特定の態様では、本開示は、前に記載した組成物であって、含まれる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が（ａ）配列番号１４６の重鎖配列および配列番号１４１の軽鎖配列、（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列および配列番号１４２の軽鎖配列、（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列および配列番号１４３の軽鎖配列、（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列および配列番号１４４の軽鎖配列、（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列および配列番号１４５の軽鎖配列、（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列および配列番号１５１の軽鎖配列、（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列および配列番号１５２の軽鎖配列、（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列および配列番号１５３の軽鎖配列、（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列および配列番号１５４の軽鎖配列、または（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列および配列番号１５５の軽鎖配列を含む組成物に関する。
【００３１】
本開示の別の主題は、（ｉ）抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が、前に記載した抗体の１つを交差遮断する、もしくはそれによって交差遮断される、（ｉｉ）Ｆｃ領域の突然変異により改変されたエフェクター機能を有する、および／または（ｉｉｉ）前に記載した抗体の１つによって認識されるエピトープと結合する組成物に関する。
【００３２】
さらに別の実施形態では、開示する組成物は、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）またはｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】孤発性封入体筋炎患者においてベースラインからビマグルマブで誘導した除脂肪体重（ＬＢＭ）、大腿四頭筋筋力（ＱＭＴ）および６分間歩行距離（６ＭＷＤ）の変化の図である。ＬＢＭの増大（第８週目から第１６週目）と第１６週で始まる筋力および身体性能の有意な増大の間のタイムラグを記す。
【図２】試験設計の図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
定義
本開示のさらに容易な理解を可能にするために、ある特定の用語を最初に定義する。さらなる定義は詳細な説明を通じて述べる。
【００３５】
用語「含む（comprising）」は「含む（including）」を意味する。例えば、Ｘを「含む」組成物（a composition "comprising" X）はＸのみからなっても、追加の何か、例えばＸおよびＹを含んでもよい。
【００３６】
数値ｘに関する用語「約」は、例えばｘ±１０％を意味する。
【００３７】
以下の記載は、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブを用いた治療の考えられる影響を評価するための、考えられる前臨床治療レジメンを例示する。
【００３８】
カニクイザルを使用することによって治療を例示するが、記載する実験はサルに限られず、当業者は、他種、特にヒトに適した実験または用量レジメンの設定の仕方を知っている。静脈内注射によりオスとメスのカニクイザルに、３カ月間週に１回ＡｃｔＲＩＩ抗体、例えばビマグルマブを投与することができる。３２匹のカニクイザル（１６匹／各性別）を４治療群の１つに割り当てることができ（３〜５匹の動物／各性別／群）、１３週間にわたり週に１回１０、３０、または１００ｍｇ／ｋｇで、賦形薬またはＡｃｔＲＩＩＢ抗体、例えばＢＹＭ３３８のいずれかを静脈内注射により投与することができる（合計１４投与；投与はサルにおける筋肥大活性に基づいて選択されるものとする）。
【００３９】
用語「ＡｃｔＲＩＩ」「ＡｃｔＲＩＩＡ」および「ＡｃｔＲＩＩＢ」はアクチビン受容体を指す。アクチビンは、少なくとも２つのＩ型（ＩとＩＢ）および２つのＩＩ型「ＡｃｔＲＩＩ」（ＩＩＡとＩＩＢ、ａｋａＡＣＶＲ２ＡとＡＣＶＲ２Ｂ）受容体を含む受容体セリンキナーゼのヘテロ二量体複合体を介してシグナル伝達を行う。これらの受容体はいずれも、システイン多量領域を有するリガンド結合細胞外ドメイン、膜貫通型ドメイン、および予想されるセリン／スレオニン特異性を有する細胞質ドメインで構成される膜貫通型タンパク質である。Ｉ型受容体はシグナル伝達に必須であり、一方ＩＩ型受容体はリガンド結合およびＩ型受容体の発現／動員に必要とされる。Ｉ型受容体とＩＩ型受容体はリガンド結合後に安定した複合体を形成し、ＩＩ型受容体によるＩ型受容体のリン酸化をもたらす。アクチビン受容体ＩＩ（ＡｃｔＲＩＩ）はミオスタチンの受容体である。ＩＩ型アクチビン受容体Ｂ（ＡｃｔＲＩＩＢ）はミオスタチンの受容体である。ＩＩ型アクチビン受容体Ａ（ＡｃｔＲＩＩＡ）もミオスタチンの受容体である。用語ＡｃｔＲＩＩＢまたはＡｃｔＩＩＢ受容体は、配列番号１８１（ＡＡＣ６４５１５．１、ＧＩ：３７６９４４３）において定義されるヒトＡｃｔＲＩＩＢを指す。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（登録商標）、ＭＮ、ＵＳＡによって作製された抗体などの、研究段階のポリクローナルおよびモノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が当技術分野で知られている。当然ながら、他種からＡｃｔＲＩＩＢに対する抗体を産生することが可能であり、抗体を使用してこれらの種における病状を治療することが可能である。
【００４０】
用語「免疫応答」は、侵襲病原体、病原体に感染した細胞もしくは組織、癌細胞、または自己免疫もしくは病的炎症の場合、正常なヒト細胞もしくは組織の選択的損傷、破壊、またはそれらのヒト身体からの除去をもたらす、例えばリンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球、および前述の細胞もしくは肝臓によって生成する可溶性マクロ分子（例えば抗体、サイトカイン、および補体）の作用を指す。
【００４１】
「シグナル伝達活性」は、受容体と増殖因子の結合などのタンパク質−タンパク質相互作用によって一般に開始され、細胞の一部分から細胞の別部分へのシグナル伝達をもたらす生化学上の因果関係を指す。一般に伝達は、シグナル変換を引き起こす一連の反応中の１つまたは複数のタンパク質における１つまたは複数のチロシン、セリン、またはスレオニン残基の特異的リン酸化を含む。最後から二番目のプロセスは、遺伝子発現の変化をもたらす核の事象を典型的に含む。
【００４２】
本明細書で使用する用語「抗体」は、完全抗体および任意の抗原結合断片（すなわち、「抗原結合部分」）またはそれらの単鎖を含む。天然に存在する「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互結合した少なくとも２つの重鎖（Ｈ）と２つの軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質である。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（本明細書では略してＶＨ）と重鎖定常領域で構成される。重鎖定常領域は、３ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３で構成される。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書では略してＶＬ）と軽鎖定常領域で構成される。軽鎖定常領域は１ドメイン、ＣＬで構成される。ＶＨ領域とＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存的である領域が散在した、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細かく分けることができる。それぞれのＶＨとＶＬは、以下の順：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配置された３つのＣＤＲおよび４つのＦＲで構成される。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体系の第一成分（Ｃｌｑ）を含めた、宿主組織または因子と免疫グロブリンの結合を媒介することができる。
【００４３】
本明細書で使用する用語、抗体の「抗原結合部分」（または単に「抗原部分」）は、抗原（例えば、ＡｃｔＲＩＩＢの一部分）と特異的に結合する能力を保持する、抗体の完全長または１つもしくは複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片によって実施され得ることが示されている。用語、抗体の「抗原結合部分」内に包含される結合断片の例には、Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片、Ｆ（ａｂ）２断片、その各々が同じ抗原と結合しヒンジ領域でジスルフィド架橋によって結合した２つのＦａｂ断片を含む二価断片、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、抗体の１アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ward et al., 1989 Nature 341:544-546）、および単離相補性決定領域（ＣＤＲ）がある。
【００４４】
さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によってコードされているが、組換え法を使用して、ＶＬ領域とＶＨ領域が対になり一価分子を形成する１つのタンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）としても知られる；例えば、Bird et al., 1988 Science 242:423-426;およびHuston et al., 1988 Proc.Natl.Acad.Sci.85:5879-5883参照）としてそれらを作製することができる合成リンカーによって、それらを連結することが可能である。このような単鎖抗体も、用語、抗体の「抗原結合領域」内に包含されるものとする。これらの抗体断片は当業者に知られている従来の技法を使用して得られ、完全抗体と同じ方法で、これらの断片を有用性に関してスクリーニングする。
【００４５】
本明細書で使用する用語「単離抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指す（例えば、ＡｃｔＲＩＩＢと特異的に結合する単離抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢ以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、ＡｃｔＲＩＩＢと特異的に結合する単離抗体は、他種由来のＡｃｔＲＩＩＢ分子などの他の抗原と交差反応性を有する可能性がある。さらに単離抗体は、他の細胞性物質および／または化学物質を実質的に含まない可能性がある。
【００４６】
用語「交差遮断する」、「交差遮断された」および「交差遮断」は本明細書中で互換的に使用され、標準競合結合アッセイにおけるＡｃｔＲＩＩＢ、特にリガンド結合ドメインと他の抗体または結合剤の結合に干渉する、抗体または他の結合剤の能力を意味する。
【００４７】
本明細書で使用する用語「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」は、１分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定エピトープに対して１つの結合特異性とアフィニティーを示す。
【００４８】
本明細書で使用する用語「ヒト抗体」は、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト起源の配列に由来する可変領域を有する抗体を含むものとする。さらに、抗体が定常領域を含有する場合、その定常領域も、このようなヒト配列、例えばヒト生殖細胞系列配列、または突然変異型のヒト生殖細胞系列配列、または例えばKnappik, et al.(2000.J Mol Biol 296, 57-86)中に記載されたようなヒトフレームワーク配列分析に由来するコンセンサスフレームワーク配列を含有する抗体に由来する。本開示のヒト抗体は、ヒト配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏランダムもしくは部位特異的突然変異誘発またはｉｎ  ｖｉｖｏ体細胞突然変異によって導入された突然変異体）を含み得る。しかしながら、本明細書で使用する用語「ヒト抗体」は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列由来のＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体は含まないものとする。
【００４９】
用語「ヒトモノクローナル抗体」は、１つの結合特異性を示し、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト配列に由来する可変領域を有する抗体を指す。一実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞と融合したヒト重鎖導入遺伝子と軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得たＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【００５０】
本明細書で使用する用語「組換えヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックもしくはトランスクロモソーマルである動物（例えばマウス）から単離された抗体またはそこから調製したハイブリドーマ、ヒト抗体を発現するよう形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、組換え、コンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体、および他のＤＮＡ配列とヒト免疫グロブリン遺伝子配列の全部または一部のスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製、発現、作製または単離された抗体などの、組換え手段によって調製、発現、作製または単離された全てのヒト抗体を含む。このような組換えヒト抗体は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかしながらある特定の実施形態では、このような組換えヒト抗体に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ突然変異誘発（または、ヒトＩｇ配列に関してトランスジェニックな動物を使用するときは、ｉｎ  ｖｉｖｏ体細胞突然変異誘発）を施すことができ、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列ＶＨおよびＶＬ配列に由来しそれらと関連する一方で、ｉｎ  ｖｉｖｏでヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内に本来存在し得ない配列である。
【００５１】
本明細書で使用する「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によって与えられる抗体クラス（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２などのＩｇＧ）を指す。
【００５２】
語句「抗原を認識する抗体」および「抗原に特異的な抗体」は、本明細書において用語「抗原と特異的に結合する抗体」と互換的に使用される。
【００５３】
本明細書で使用する、「ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドと特異的に結合する」抗体は、約１００ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下のＫＤでヒトＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドと結合する抗体を指すものとする。「ＡｃｔＲＩＩＢ以外の抗原と交差反応する」抗体は、約１０×１０−９Ｍ以下、約５×１０−９Ｍ以下、または約２×１０−９Ｍ以下のＫＤでその抗原と結合する抗体を指すものとする。「特定抗原と交差反応しない」抗体は、約１．５×１０−８Ｍ以上のＫＤ、または約５〜１０×１０−８Ｍ、もしくは約１×１０−７Ｍ以上のＫＤでその抗原と結合する抗体を指すものとする。ある特定の実施形態では、抗原と交差反応しないこのような抗体は、標準的結合アッセイにおいて、これらのタンパク質に対してほぼ検出不能な結合を示す。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）システムなどのバイオセンサーシステム、または溶液平衡滴定を使用してＫＤを決定することができる。
【００５４】
本明細書で使用する用語「アンタゴニスト抗体」は、ミオスタチンまたはアクチビンもしくはＧＤＦ−１１などの他のＡｃｔＲＩＩＢリガンドの存在下でＡｃｔＲＩＩＢ誘導シグナル伝達活性を阻害する抗体、および／またはミオスタチンまたはアクチビンもしくはＧＤＦ−１１などの他のＡｃｔＲＩＩＡリガンドの存在下でＡｃｔＲＩＩＡ誘導シグナル伝達活性を阻害する抗体を指すものとする。これを検出するためのアッセイの例には、（例えばＳｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイによる）ミオスタチン誘導型シグナル伝達の阻害、ミオスタチン誘導型Ｓｍａｄリン酸化の阻害（Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）、および（例えばクレアチンキナーゼアッセイによる）骨格筋細胞分化のミオスタチン誘導型阻害の阻害がある。
【００５５】
幾つかの実施形態では、抗体は、Ｓｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイで測定して、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下、または約１００ｐＭ以下のＩＣ５０で、ミオスタチン誘導型シグナル伝達を阻害する。
【００５６】
本明細書で使用する「アゴニスト活性がない」抗体は、（例えばＳｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイによる）ミオスタチン誘導型シグナル伝達の阻害、ミオスタチン誘導型Ｓｍａｄリン酸化の阻害（Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）、および（例えばクレアチンキナーゼアッセイによる）骨格筋細胞分化のミオスタチン誘導型阻害の阻害などの細胞ベースのアッセイで、ミオスタチンの不在下においてＡｃｔＲＩＩＢ媒介シグナル伝達活性を有意に増大しない抗体を指すものとする。このようなアッセイは、以下の実施例中にさらに詳細に記載する。
【００５７】
本明細書で使用する用語「Ｋａｓｓｏｃ」または「Ｋａ」は、特定の抗体−抗原相互作用の会合速度を指すものとし、一方本明細書で使用する用語「Ｋｄｉｓ」または「Ｋｄ」は、特定の抗体−抗原相互作用の解離速度を指すものとする。本明細書で使用する用語「ＫＤ」は、ＫｄとＫａの比（すなわちＫｄ／Ｋａ）から得てモル濃度（Ｍ）として表す、解離定数を指すものとする。当技術分野で十分確立した方法を使用して、抗体に関するＫＤ値を決定することができる。抗体のＫＤを決定するための方法は、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）のバイオセンサーシステムなどの表面プラズモン共鳴、または溶液平衡滴定（ＳＥＴ）を使用することによる方法である（Friguet B et al.(1985)J.Immunol Methods;77(2):305-319、およびHanel C et al.(2005)Anal Biochem;339(1):182-184参照）。
【００５８】
本明細書で使用する用語「アフィニティー」は、１つの抗原部位における抗体と抗原の間の相互作用強度を指す。それぞれの抗原部位内では、抗体「アーム」の可変領域が、わずかな非共有結合的力を介して、多数の部位で抗原と相互作用する。相互作用が増すほど、アフィニティーは強くなる。
【００５９】
本明細書で使用する用語「アビディティー」は、抗体−抗原複合体の全体的な安定性または強度の有益な指標を指す。それは３つの主な要因、抗体エピトープのアフィニティー、抗原と抗体両方の結合価、および相互作用部分の構造配置によって制御される。最終的にこれらの要因が、抗体の特異性、すなわち特定の抗体が正確な抗原エピトープと結合する可能性を定義する。
【００６０】
本明細書で使用する用語「ＡＤＣＣ」または「抗体依存性細胞傷害作用」活性は、ヒトＢ細胞枯渇活性を指す。当技術分野で知られているヒトＢ細胞枯渇アッセイによって、ＡＤＣＣ活性を測定することができる。
【００６１】
高アビディティープローブを得るため、二量体コンジュゲート（ＦＡＣＳマーカーと結合した２分子の抗体タンパク質）を構築することができ、これによってＦＡＣＳにより一層容易に検出される（生殖細胞系列抗体などとの）低アフィニティー相互作用を可能にする。さらに、抗原結合のアビディティーを増大させるための別の手段は、本明細書に記載する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の任意の構築物の二量体、三量体または多量体の生成を含む。このような多量体は、例えば天然Ｃ末端とＮ末端の結合を模倣することによって、またはそれらの定常領域を介して一緒に保たれる抗体二量体を模倣することによって、個々の分子間の共有結合を介して生成することができる。Ｆｃ／Ｆｃ界面に操作処理される結合は、共有結合または非共有結合であってよい。さらに、Ｆｃ以外の二量体化または多量体化パートナーをＡｃｔＲＩＩＢハイブリッドにおいて使用して、このような高次構造を作製することができる。例えば、ＷＯ２００４／０３９８４１中に記載された三量体化ドメインまたはＷＯ９８／１８９４３中に記載された五量体化ドメインなどの、多量体化ドメインを使用することができる。
【００６２】
本明細書で使用する用語、抗体に対する「選択性」は、ある特定の標的ポリペプチドと結合するが、近縁のポリペプチドには結合しない抗体を指す。
【００６３】
本明細書で使用する用語、抗体に対する「高アフィニティー」は、標的抗原に対して１ｎＭ以下のＫＤを有する抗体を指す。本明細書で使用する用語「対象」は、任意のヒトまたは非ヒト動物を含む。
【００６４】
用語「非ヒト動物」は、全ての脊椎動物、例えば哺乳動物および非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類などを含む。
【００６５】
本明細書で使用する用語「最適化」は、生産細胞または生物、一般に真核生物細胞、例えばピキア酵母（Pichia）の細胞、トリコデルマ属（Trichoderma）の細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）またはヒト細胞において好ましいコドンを使用して、ヌクレオチド配列がアミノ酸配列をコードするように改変されていることを意味する。最適化ヌクレオチド配列を操作処理して、「親」配列としても知られる開始ヌクレオチドによって本来コードされるアミノ酸配列を、完全にまたは可能な限り多く保持する。本明細書の最適化配列はＣＨＯ哺乳動物細胞において好ましいコドンを有するように操作処理しているが、しかしながら、他の真核生物細胞におけるこれらの配列の最適化発現も本明細書では想定する。最適化ヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列も、最適化状態であると言える。
【００６６】
ＡｃｔＲＩＩ受容体を対象とする抗体、例えばビマグルマブは、ミオスタチンがその受容体と結合するのを妨げ、それによってｓＩＢＭ患者を治療することができることが発見されている。
【００６７】
したがって一態様では、本開示は、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくは抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、例えばビマグルマブ、または使用する前記抗体の抗原結合部分を含む機能性タンパク質を含む組成物を提供する。一実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢはヒトＡｃｔＲＩＩＢである。ヒトＡｃｔＲＩＩＢのポリペプチド配列は配列番号１８１（ＡＡＣ６４５１５．１、ＧＩ：３７６９４４３）に示す。一実施形態では、抗体または機能性タンパク質は、ヒトまたはラクダなどの起源を有する哺乳動物に由来する。したがって、開示する組成物中に含まれる抗体はキメラ、ヒトまたはヒト化抗体であってよい。特定の実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、標的タンパク質ＡｃｔＲＩＩＢに特異的でありＡｃｔＲＩＩＢまたはＡｃｔＲＩＩＢの断片と結合する、抗原結合領域を有することを特徴とする。
【００６８】
本開示の組成物およびレジメンは、加齢運動機能障害、癌性カヘキシー、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および関節置換、例えば膝関節障害または臀部関節障害、または臀部骨折の治療において使用するのにも適している。
【００６９】
一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、アゴニスト活性がゼロであるかまたは低いＡｃｔＲＩＩアンタゴニストである。別の実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体または機能性断片は標的タンパク質ＡｃｔＲＩＩと結合し、ミオスタチンとＡｃｔＲＩＩの結合を基礎レベルまで低下させる。この実施形態のさらなる態様では、開示する組成物中に含まれる抗体または機能性断片は、ＡｃｔＲＩＩとの結合からミオスタチンを完全に妨げる。さらなる実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体または機能性断片はＳｍａｄ活性化を阻害する。さらなる実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体または機能性断片は、Ｓｍａｄ依存性経路を介して骨格分化のアクチビン受容体ＩＩＢ型媒介ミオスタチン誘導型阻害を阻害する。
【００７０】
抗体によるアンタゴニズムまたはアゴニズムのいずれかである活性を測定するために使用することができる１つまたは複数のアッセイによって、結合を決定することができる。アッセイは、ＥＬＩＳＡによるＡｃｔＲＩＩＢとのミオスタチン結合の阻害、（例えばＳｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイによる）ミオスタチン誘導型シグナル伝達の阻害、ミオスタチン誘導型Ｓｍａｄリン酸化の阻害（Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）および（例えばクレアチンキナーゼアッセイによる）骨格筋細胞分化のミオスタチン誘導型阻害の阻害を含めたＡｃｔＲＩＩＢに対する抗体の影響の少なくとも１つを測定することが好ましい。
【００７１】
一実施形態では本開示は、ＡｃｔＲＩＩＢのミオスタチン結合領域（すなわち、リガンド結合ドメイン）と特異的に結合する抗体を含む組成物を提供する。このリガンド結合ドメインは配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなり、本明細書では配列番号１８２を割り当てている。リガンド結合ドメインは、幾つかの以下に記載するエピトープを含む。
【００７２】
一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、約１００ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下のＫＤでＡｃｔＲＩＩＢと結合する。開示する組成物中に含まれる抗体は、１００ｐＭ以下（すなわち約１００ｐＭ、約５０ｐＭ、約１０ｐＭ、約２ｐＭ、約１ｐＭ以下）のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合することが好ましい。一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、約１ｐＭと約１０ｐＭの間のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する。
【００７３】
一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体はＡｃｔＲＩＩＢ関連タンパク質と交差反応しない、特にヒトＡｃｔＲＩＩＡ（ＮＰ＿００１６０７．１、ＧＩ：４５０１８９７）と交差反応しない。別の実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体はＡｃｔＲＩＩＡと交差反応し、それらがＡｃｔＲＩＩＡと結合するのと同等のアフィニティー、または約１、２、３、４または５倍高いアフィニティー、より好ましくは約１０倍、さらにより好ましくは約２０、３０、４０または５０倍、さらにより好ましくは約１００倍のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する。
【００７４】
一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、１００ｐＭ以上（すなわち約２５０ｐＭ、約５００ｐＭ、約１ｎＭ、約５ｎＭ以上）のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＡと結合する。
【００７５】
一実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体はＩｇＧ２アイソタイプの抗体である。
【００７６】
別の実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体はＩｇＧ１アイソタイプの抗体である。さらなる実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体はＩｇＧ１アイソタイプの抗体であり、Ｆｃ領域の突然変異により改変されたエフェクター機能を有する。前記改変されたエフェクター機能は、低下したＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性であり得る。一実施形態では、前記改変されたエフェクター機能は、抑制されたＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性である。
【００７７】
別の関連実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）活性またはＣＤＣ活性がない完全ヒトまたはヒト化ＩｇＧ１抗体であり、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなるＡｃｔＲＩＩＢの領域と結合する。
【００７８】
別の関連実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）活性またはＣＤＣ活性が低下した完全ヒトまたはヒト化ＩｇＧ１抗体であり、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなるＡｃｔＲＩＩＢの領域と結合する。
【００７９】
本開示は、機械的換気から引き離せない集中治療室患者において機械的換気からの解放時間を短縮するために使用する、ヒトまたはヒト化抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を含む組成物に関する。
【００８０】
ある特定の実施形態では、開示する組成物中に含まれる抗体は特定重鎖および軽鎖配列に由来する、および／または特定アミノ酸配列を含むＣＤＲ領域などの特定構造特徴を含む。本開示は、単離ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、このような抗体の作製法、このような抗体を含むイムノコンジュゲートおよび多価または多重特異性分子、および抗体、イムノコンジュゲートまたは二重特異性分子を含有する医薬組成物を提供する。
【００８１】
別の実施形態では、本開示は、以下の態様に従う使用のためのミオスタチンアンタゴニストを含む組成物に関する：
【００８２】
１．孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８３】
２．前記ミオスタチンアンタゴニストが、それを必要とする患者に約１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、態様１に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８４】
３．前記ミオスタチンアンタゴニストが、約１、約３または約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で投与される、態様１または２に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８５】
４．前記ミオスタチンアンタゴニストが静脈内投与される、態様１から３に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８６】
５．前記ミオスタチンアンタゴニストが４週間毎に投与される、態様１から４のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８７】
６．前記患者が歩行可能である、態様１から５のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８８】
７．孤発性封入体筋炎の治療が、疾患の進行の遅延または身体機能および運動性の改善を含む、態様１から６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００８９】
８．孤発性封入体筋炎の治療が、嚥下障害または嚥下困難（swallowing difficulties）の改善を含む、態様１から６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９０】
９．孤発性封入体筋炎の治療が、上肢筋力（upper extremity strength）の改善を含む、態様１から６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９１】
１０．孤発性封入体筋炎の治療が、転倒発生率の低減または転倒の予防を含む、態様１から６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９２】
１１．ミオスタチン受容体結合分子である、態様１から１０のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９３】
１２．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストである、態様１から１１のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９４】
１３．抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、態様１から１２のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９５】
１４．抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体がビマグルマブである、態様１から１３のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９６】
１５．配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である、態様１３から１４のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９７】
１６．抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むまたはこれらからなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する、態様１３から１５のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９８】
１７．抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が、
ａ）（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、
およびｂ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体からなる群から選択され、抗体が約２ｐＭのＫＤを有する、態様１３から１６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【００９９】
１８．抗体が、ＡｃｔＲＩＩＡと結合する１０倍以上のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する、態様１３から１７のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１００】
１９．抗体が、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、態様１３から１８のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０１】
２０．抗体が、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、または
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、態様１３から１９のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０２】
２１．抗体が、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含む、態様１３から２０のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０３】
２２．抗体が、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、態様１３から２１のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０４】
２３．抗体が、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列と配列番号８５の可変軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列と配列番号８６の可変軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列と配列番号８７の可変軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列と配列番号８８の可変軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列と配列番号８９の可変軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列と配列番号９０の可変軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列と配列番号９１の可変軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列と配列番号９２の可変軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列と配列番号９３の可変軽鎖配列、
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列と配列番号９４の可変軽鎖配列、
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列と配列番号９５の可変軽鎖配列、
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列と配列番号９６の可変軽鎖配列、
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列と配列番号９７の可変軽鎖配列、または
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列と配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、態様１３から２２のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０５】
２４．抗体が、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列と配列番号１４１の軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列と配列番号１４２の軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列と配列番号１４３の軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列と配列番号１４４の軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列と配列番号１４５の軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列と配列番号１５１の軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列と配列番号１５２の軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列と配列番号１５３の軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列と配列番号１５４の軽鎖配列、または
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列と配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、態様１３から２３のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０６】
２５．前記組成物中に含まれる抗体が、請求項１０の少なくとも１つの抗体とＡｃｔＲＩＩＢの結合を交差反応遮断する、またはＡｃｔＲＩＩＢとの結合を請求項１０の少なくとも１つの抗体によって交差反応遮断される、態様１３から２４のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０７】
２６．前記組成物中に含まれる抗体が、Ｆｃ領域の突然変異によって改変されたエフェクター機能を有する、態様１３から２５のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０８】
２７．前記組成物中に含まれる抗体が、態様１５から１７に記載の抗体によって認識されるエピトープと結合する、態様１３から２６のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１０９】
２８．抗体が、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）またはｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、態様１３から２７のいずれか一態様に記載の使用のためのミオスタチンアンタゴニスト。
【０１１０】
２９．約１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【０１１１】
３０．約１ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【０１１２】
３１．約３ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【０１１３】
３２．約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【０１１４】
３３．それを必要とする患者に治療有効量のミオスタチンアンタゴニストを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１１５】
３４．前記ミオスタチンアンタゴニストを約１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む、請求項３３に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１１６】
３５．約１、約３または約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で投与することを含む、態様３３から３４のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１１７】
３６．前記ミオスタチンアンタゴニストを静脈内投与することを含む、態様３３から３５のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１１８】
３７．前記ミオスタチンアンタゴニストを４週毎に投与することを含む、態様３３から３６のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１１９】
３８．前記患者が歩行可能である、態様３３から３７のいずれか一項に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２０】
３９．孤発性封入体筋炎の治療が、疾患の進行の遅延または身体機能および運動性の改善を含む、態様３３から３８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２１】
４０．孤発性封入体筋炎の治療が、嚥下障害または嚥下困難の改善を含む、態様３３から３８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２２】
４１．孤発性封入体筋炎の治療が、上肢筋力の改善を含む、態様３３から３８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２３】
４２．孤発性封入体筋炎の治療が、転倒発生率の低減または転倒の予防を含む、態様３３から３８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２４】
４３．ミオスタチンアンタゴニストがミオスタチン受容体結合分子である、態様３３から４２のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２５】
４４．ミオスタチンアンタゴニストがＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストである、態様３３から４３のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２６】
４５．ミオスタチンアンタゴニストが抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、態様３３から４４のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２７】
４６．抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体がビマグルマブである、態様３３から４５のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２８】
４７．ミオスタチンアンタゴニストが配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である、態様４５または４６のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１２９】
４８．抗ＡｃｔＲＩＩ抗体が、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むまたはこれらからなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する、態様４５から４７のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３０】
４９．抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が、
ａ）（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、
およびｂ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体からなる群から選択され、抗体が約２ｐＭのＫＤを有する、態様４５から４８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３１】
５０．抗体が、ＡｃｔＲＩＩＡと結合する１０倍以上のアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＢと結合する、態様４５から４９のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３２】
５１．抗体が、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、態様４５から５０のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３３】
５２．抗体が、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、または
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、態様４５から５１のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３４】
５３．抗体が、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含む、態様４５から５２のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３５】
５４．抗体が、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、態様４５から５３のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３６】
５５．抗体が、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列と配列番号８５の可変軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列と配列番号８６の可変軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列と配列番号８７の可変軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列と配列番号８８の可変軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列と配列番号８９の可変軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列と配列番号９０の可変軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列と配列番号９１の可変軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列と配列番号９２の可変軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列と配列番号９３の可変軽鎖配列、
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列と配列番号９４の可変軽鎖配列、
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列と配列番号９５の可変軽鎖配列、
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列と配列番号９６の可変軽鎖配列、
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列と配列番号９７の可変軽鎖配列、または
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列と配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、態様４５から５４のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３７】
５６．抗体が、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列と配列番号１４１の軽鎖配列、
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列と配列番号１４２の軽鎖配列、
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列と配列番号１４３の軽鎖配列、
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列と配列番号１４４の軽鎖配列、
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列と配列番号１４５の軽鎖配列、
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列と配列番号１５１の軽鎖配列、
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列と配列番号１５２の軽鎖配列、
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列と配列番号１５３の軽鎖配列、
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列と配列番号１５４の軽鎖配列、または
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列と配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、態様４５から５５のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３８】
５７．前記組成物中に含まれる抗体が、態様１０の少なくとも１つの抗体とＡｃｔＲＩＩＢの結合を交差反応遮断する、またはＡｃｔＲＩＩＢとの結合を態様１０の少なくとも１つの抗体によって交差反応遮断される、態様４５から５６のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１３９】
５８．前記組成物中に含まれる抗体が、Ｆｃ領域の突然変異によって改変されたエフェクター機能を有する、態様４５から５７のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１４０】
５９．前記組成物中に含まれる抗体が、態様４６から４８に記載の抗体によって認識されるエピトープと結合する、態様４５から５８のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１４１】
６０．抗体が、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）またはｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、態様４５から５９のいずれか一態様に記載の孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１４２】
６１．ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法。
【０１４３】
６２．ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【０１４４】
６３．ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【０１４５】
６４．ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約３ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【０１４６】
６５．ビマグルマブを投与することを含む、孤発性封入体筋炎を治療する方法であって、ビマグルマブが約１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で４週毎に静脈内投与される、方法。
【０１４７】
６６．孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのビマグルマブ。
【０１４８】
６７．孤発性封入体筋炎を治療する方法において使用するための、１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む組成物。
【０１４９】
６８．１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む単位剤形。
【０１５０】
さらなる態様では、単位剤形、すなわちバイアルは、１００〜２００ｍｇ／ｍｌのビマグルマブ、好ましくは１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む。
【０１５１】
６９．溶液で希釈した１つまたは複数のバイアル由来の適量のビマグルマブを含む注入用バッグ。
【０１５２】
溶液はデキストロース溶液であることが好ましい。
【０１５３】
幾つかのさらなる実施形態では、ミオスタチンアンタゴニスト、好ましくはＡｃＲＩＩアンタゴニストまたはビマグルマブなどの抗ＡｃＲＩＩ抗体を、約１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０ｍｇ／体重１ｋｇの用量で投与する。
【０１５４】
本開示の様々な態様を、以下の小区分においてさらに詳細に記載する。例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロットおよびＲＩＡを含めた、様々な種のＡｃｔＲＩＩに対する抗体の結合能力を評価するための標準的アッセイが当技術分野で知られている。適切なアッセイは実施例中に詳細に記載する。抗体の結合アフィニティーも、Ｂｉａｃｏｒｅ分析または溶液平衡滴定などにより、当技術分野で知られている標準的アッセイによって評価することができる。Ｂｉａｃｏｒｅなどの表面プラズモン共鳴ベースの技法は、結合アフィニティーの計算を可能にする結合キネティクスを決定することができる。ＡｃｔＲＩＩＢの機能性（例えば、受容体結合、ヒトＢ細胞増殖またはＩｇＧ産生の予防または誘導）に対する抗体の影響を評価するためのアッセイは、実施例中にさらに詳細に記載する。
【０１５５】
したがって、当技術分野で知られており本明細書中に記載する方法に従い決定される１つまたは複数のこれらのＡｃｔＲＩＩ機能性（例えば、生化学的、免疫化学的、細胞学的、生理学的または他の生物学的活性など）を「阻害する」抗体は、抗体の不在下（例えば、または無関係な特異性の対照抗体の存在時）において見られるそれと比較した、特定活性の統計学上有意な低下と関連があることは理解されよう。ＡｃｔＲＩＩ活性を阻害する抗体は、測定パラメータの少なくとも１０％、少なくとも５０％、８０％または９０％このような統計学上有意な低下に影響を与え、ある特定の実施形態では、本開示の抗体は９５％、９８％または９９％を超えるＡｃｔＲＩＩＢの機能活性を阻害することができる。
【０１５６】
抗体または他の結合剤がＡｃｔＲＩＩと別の抗体または結合分子の結合に干渉することができる能力または程度、したがって本開示に従いそれを交差遮断と言うことができるかどうかは、標準的競合結合アッセイを使用して決定することができる。１つの適切なアッセイは、表面プラズモン共鳴技術を使用して相互作用の程度を測定することができる、（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ、Ｕｐｐｓａｌａ、スウェーデン）の使用による）Ｂｉａｃｏｒｅ技術の使用を含む。交差遮断を測定するための別のアッセイは、ＥＬＩＳＡベースの手法を使用する。さらなるアッセイは、（実施例中に記載するように）ＡｃｔＲＩＩＢ発現細胞との結合に関する様々な抗体の競合を試験する、ＦＡＣＳ分析を使用する。
【０１５７】
本開示によれば、本開示による交差遮断抗体または他の結合剤は、抗体または結合剤の組合せ（混合物）の記録する結合値が、組み合わせた２つの抗体または結合剤の（前に定義した）、理論上の最大結合の８０％と０．１％の間（例えば、８０％〜４％）、具体的には理論上の最大結合の７５％と０．１％の間（例えば、７５％〜４％）、およびより具体的には理論上の最大結合の７０％と０．１％の間（例えば、７０％〜４％）、およびより具体的には理論上の最大結合の６５％と０．１％の間（例えば、６５％〜４％）であるように、記載するＢＩＡｃｏｒｅ交差遮断アッセイにおいてＡｃｔＲＩＩと結合する。
【０１５８】
陽性対照ウエル（すなわち、同じ抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体およびＡｃｔＲＩＩＢ、ただし「試験」交差遮断抗体なし）と比較して、試験抗体が６０％と１００％の間、具体的には７０％と１００％の間、およびより具体的には８０％と１００％の間のＡｃｔＲＩＩＢと抗ＡｃｔＲＩＩ抗体の結合の低減を引き起こすことができる場合、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を交差遮断するとして抗体を定義する。本明細書に引用する交差遮断抗体の例は、ＭＯＲ０８１５９およびＭＯＲ０８２１３（ＷＯ２０１０／１２５００３に開示されている）である。したがって本開示は、ＡｃｔＲＩＩＢとの結合に関してＭＯＲ０８１５９またはＭＯＲ０８２１３を交差遮断する抗体を含む組成物を提供する。
【０１５９】
組換え抗体
本開示内で使用する組成物中に含まれる抗体、例えばビマグルマブなどのＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体は、実施例中に記載したように単離し構造的に特徴付けたヒト組換え抗体を含む。本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＨアミノ酸配列は、配列番号９９〜１１２で示す。本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＬアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８５〜９８で示す。本発明の組成物中に含まれる抗体の好ましい完全長重鎖アミノ酸配列の例は、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０で示す。本発明の組成物中に含まれる抗体の好ましい完全長軽鎖アミノ酸配列の例は、それぞれ配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５で示す。本発明の組成物中に含まれる他の抗体は、アミノ酸欠失、挿入または置換によって突然変異しており、前に記載した配列中に示すＣＤＲ領域と少なくとも６０、７０、８０、９０、９５、９７または９９％のＣＤＲ領域の同一性を依然として有するアミノ酸を含む。幾つかの実施形態では、それは、前に記載した配列中に示すＣＤＲ領域と比較したとき、ＣＤＲ領域中の１、２、３、４または５個を超えないアミノ酸がアミノ酸欠失、挿入または置換によって突然変異している、突然変異型アミノ酸配列を含む。
【０１６０】
さらに、可変重鎖親ヌクレオチド配列は配列番号１２７〜１４０で示す。可変軽鎖親ヌクレオチド配列は配列番号１１３〜１２６で示す。哺乳動物細胞中での発現に最適化した完全長軽鎖ヌクレオチド配列は、配列番号１６１〜１６５および１７１〜１７５で示す。哺乳動物細胞中での発現に最適化した完全長重鎖ヌクレオチド配列は、配列番号１６６〜１７０および１７６〜１８０で示す。本発明の組成物中に含まれる他の抗体は、突然変異しており前に記載した配列と少なくとも６０％以上（すなわち８０、９０、９５、９７、９９％以上）の同一性を依然として有するアミノ酸を含むか、そのような核酸によってコードされている。幾つかの実施形態では、それは、前に記載した配列中に示す可変領域と比較したとき、可変領域中の１、２、３、４または５個を超えないアミノ酸がアミノ酸欠失、挿入または置換によって突然変異している、突然変異型アミノ酸配列を含む。
【０１６１】
これらの抗体の各々は同じエピトープと結合し、同じ親抗体からの子孫であるので、ＶＨ、ＶＬ、完全長軽鎖、および完全長重鎖配列（ヌクレオチド配列とアミノ酸配列）を「混合および合致」させて、本開示の他の抗ＡｃｔＲＩＩＢ結合分子を作製することができる。このような「混合および合致」抗体のＡｃｔＲＩＩＢ結合は、前および実施例中に記載した結合アッセイ（例えばＥＬＩＳＡ）を使用して試験することができる。これらの鎖を混合および合致させるとき、特定ＶＨ／ＶＬ対からのＶＨ配列は構造上類似したＶＨ配列で置換しなければならない。同様に、特定完全長重鎖／完全長軽鎖対からの完全長重鎖配列は、構造上類似した完全長重鎖配列で置換しなければならない。同様に、特定ＶＨ／ＶＬ対からのＶＬ配列は、構造上類似したＶＬ配列で置換しなければならない。同様に、特定完全長重鎖／完全長軽鎖対からの完全長軽鎖配列は、構造上類似した完全長軽鎖配列で置換しなければならない。したがって一態様では、本開示は、配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体またはその抗原結合領域を含む組成物を提供する。
【０１６２】
別の態様では、本開示は、
（ｉ）配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む完全長重鎖、および配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む完全長軽鎖を有する単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、または
（ｉｉ）その抗原結合部分を含む機能性タンパク質
を含む組成物を提供する。
【０１６３】
別の態様では、本開示は、
（ｉ）配列番号１２７〜１４０からなる群から選択される哺乳動物細胞中での発現に最適化したヌクレオチド配列によってコードされる完全長重鎖、および配列番号１１３〜１２６からなる群から選択される哺乳動物細胞中での発現に最適化したヌクレオチド配列によってコードされる完全長軽鎖を有する単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、または
（ｉｉ）その抗原結合部分を含む機能性タンパク質
を含む組成物を提供する。
【０１６４】
本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＨＣＤＲ１のアミノ酸配列の例は、配列番号１〜１４で示す。抗体のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列は配列番号１５〜２８で示す。抗体のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列は配列番号２９〜４２で示す。抗体のＶＬＣＤＲ１のアミノ酸配列は配列番号４３〜５６で示す。抗体のＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列は配列番号５７〜７０で示す。抗体のＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列は配列番号７１〜８４で示す。ＣＤＲ領域はＫａｂａｔのシステム（Kabat, E.A., et al., 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S.Department of Health and Human Services, NIH Publication No.91-3242）を使用して示す。ＣＤＲ領域を決定する別の方法は、Ｃｈｏｔｈｉａ（Chothia et al.1989, Nature, 342:877-883）によって考案された方法を使用する。Ｃｈｏｔｈｉａの定義は構造ループ領域の位置に基づく。しかしながら、Ｃｈｏｔｈｉａにより使用されたナンバリングシステムの変更が原因で（例えば、http://www.biochem.ucl.ac.uk/~martin/abs/GeneralInfo.htmlおよびhttp://www.bioinf.org.uk/abs/参照）、このシステムは現在あまり一般的には使用されていない。ＣＤＲを定義するための他のシステムが存在し、この２つのウエブサイト中でも言及されている。
【０１６５】
これらの抗体の各々がＡｃｔＲＩＩと結合可能であること、および抗原結合特異性が主にＣＤＲ１、２および３領域によって与えられることを仮定すると、ＶＨＣＤＲ１、２および３配列とＶＬＣＤＲ１、２および３配列を「混合および合致」させることが可能である（すなわち、異なる抗体由来のＣＤＲを混合および合致させることが可能であり、ＶＨＣＤＲ１、２および３ならびにＶＬＣＤＲ１、２および３を含有する各々の抗体が本開示の他の抗ＡｃｔＲＩＩ結合分子を形成する）。このような「混合および合致」型抗体のＡｃｔＲＩＩＢ結合は、前および実施例中に記載した結合アッセイ（例えばＥＬＩＳＡ）を使用して試験することができる。ＶＨＣＤＲ配列を混合および合致させるとき、特定のＶＨ配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３配列は、構造上類似したＣＤＲ配列（複数可）で置換しなければならない。同様に、ＶＬＣＤＲ配列を混合および合致させるとき、特定のＶＬ配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３配列は、構造上類似したＣＤＲ配列（複数可）で置換しなければならない。モノクローナル抗体に関して本明細書に示すＣＤＲ配列由来の構造上類似した配列で１つまたは複数のＶＨおよび／またはＶＬＣＤＲ領域配列を置換することによって、新規なＶＨおよびＶＬ配列を作製することができることは、当業者には容易に明らかとなる。
【０１６６】
本開示の組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、またはその抗原結合領域は、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を有する。
【０１６７】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１６８】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１６９】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７０】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７１】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７２】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７３】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７４】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７５】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７６】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７７】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７８】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１７９】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１８０】
一実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１８１】
一実施形態では、本開示は、（ａ）配列番号８５の可変重鎖配列および配列番号９９の可変軽鎖配列、（ｂ）配列番号８６の可変重鎖配列および配列番号１００の可変軽鎖配列、（ｃ）配列番号８７の可変重鎖配列および配列番号１０１の可変軽鎖配列、（ｄ）配列番号８８の可変重鎖配列および配列番号１０２の可変軽鎖配列、（ｅ）配列番号８９の可変重鎖配列および配列番号１０３の可変軽鎖配列、（ｆ）配列番号９０の可変重鎖配列および配列番号１０４の可変軽鎖配列、（ｇ）配列番号９１の可変重鎖配列および配列番号１０５の可変軽鎖配列、（ｈ）配列番号９２の可変重鎖配列および配列番号１０６の可変軽鎖配列、（ｉ）配列番号９３の可変重鎖配列および配列番号１０７の可変軽鎖配列、（ｊ）配列番号９４の可変重鎖配列および配列番号１０８の可変軽鎖配列、（ｋ）配列番号９５の可変重鎖配列および配列番号１０９の可変軽鎖配列、（ｌ）配列番号９６の可変重鎖配列および配列番号１１０の可変軽鎖配列、（ｍ）配列番号９７の可変重鎖配列および配列番号１１１の可変軽鎖配列、または（ｎ）配列番号９８の可変重鎖配列および配列番号１１２の可変軽鎖配列を含む抗体を含む組成物を提供する。
【０１８２】
一実施形態では、本開示は、（ａ）配列番号１４６の重鎖配列および配列番号１４１の軽鎖配列、（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列および配列番号１４２の軽鎖配列、（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列および配列番号１４３の軽鎖配列、（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列および配列番号１４４の軽鎖配列、（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列および配列番号１４５の軽鎖配列、（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列および配列番号１５１の軽鎖配列、（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列および配列番号１５２の軽鎖配列、（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列および配列番号１５３の軽鎖配列、（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列および配列番号１５４の軽鎖配列、または（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列および配列番号１５５の軽鎖配列を含む抗体を含む組成物を提供する。
【０１８３】
本明細書で使用するように、ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子を使用するシステムから抗体の可変領域または完全長鎖を得る場合、特定生殖細胞系列配列の「産物」であるかまたはそれに「由来する」重鎖もしくは軽鎖可変領域または完全長の重鎖もしくは軽鎖を含む。このようなシステムは、対象とする抗原を用いたヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスの免疫処置、または対象とする抗原を用いたファージ上に提示されるヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリーのスクリーニングを含む。ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列の「産物」であるかまたはそれに「由来する」ヒト抗体は、ヒト抗体のアミノ酸配列とヒト生殖細胞系列免疫グロブリンのアミノ酸配列の比較、およびヒト抗体の配列と配列が最も類似した（すなわち、同一性％が最大の）ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列の選択などによって同定することができる。特定のヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列の「産物」であるかまたはそれに「由来する」ヒト抗体は、例えば天然に存在する体細胞突然変異または意図的な部位特異的突然変異の導入により、生殖細胞系列配列との比較におけるアミノ酸差異を含有し得る。しかしながら、選択するヒト抗体は、典型的には、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であり、他種の生殖細胞系列免疫グロブリンアミノ酸配列（例えば、マウス生殖細胞系列配列）と比較したとき、ヒトのものとしてヒト抗体を同定するアミノ酸残基を含有する。ある特定の場合、ヒト抗体は生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とアミノ酸配列が少なくとも８０％、９０％、または少なくとも９５％、またはさらに少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％同一であってよい。典型的には、特定ヒト生殖細胞系列配列に由来するヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と、１０個を超えないアミノ酸差異を示す。ある特定の場合、ヒト抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と、５個を超えない、またはさらに４、３、２、または１個を超えないアミノ酸差異を示し得る。
【０１８４】
一実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体は、（それぞれ寄託番号ＤＳＭ２２８７３およびＤＳＭ２２８７４の下、２００９年８月１８日にＤＳＭＺ、Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ、Ｄ−３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツにおいて寄託された）ｐＢＷ５２２またはｐＢＷ５２４によってコードされる抗体である。
【０１８５】
相同抗体
さらに別の実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、完全長重鎖および軽鎖アミノ酸配列、完全長重鎖および軽鎖ヌクレオチド配列、可変領域重鎖および軽鎖ヌクレオチド配列、または本明細書に記載する抗体のアミノ酸およびヌクレオチド配列と相同的な可変領域重鎖および軽鎖アミノ酸配列を有し、これらの抗体は本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の望ましい機能性を保持する。
【０１８６】
例えば、本開示は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含む組成物を提供し、重鎖可変領域は配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるアミノ酸配列を含み、あるいは組成物は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含み、重鎖可変領域は配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、軽鎖可変領域は配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、抗体は、以下の機能性：（ｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでのミオスタチン結合の阻害、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を介した筋肉分化の阻害の低下、および／または（ｉｉｉ）血液学的変化を誘導しないこと、特にＲＢＣの変化がないことの少なくとも１つを示す。本文脈において、用語「変化」は挿入、欠失および／または置換を指す。
【０１８７】
さらなる例では、本開示は、完全長重鎖および完全長軽鎖を含む、単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含む組成物を提供し、完全長重鎖は配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるアミノ酸配列を含み、完全長軽鎖は、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるアミノ酸配列を含み、あるいは組成物は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含み、重鎖可変領域は配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、軽鎖可変領域は配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、抗体は、以下の機能性：（ｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでのミオスタチン結合の阻害、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を介した筋肉分化の阻害の低下、および／または（ｉｉｉ）血液学的変化を誘導しないこと、特にＲＢＣの変化がないことの少なくとも１つを示す。このような抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢおよび／またはＡｃｔＲＩＩＡのリガンド結合ドメインと結合することが好ましい。本文脈において、用語「変化」は挿入、欠失および／または置換を指す。
【０１８８】
別の例では、本開示は、完全長重鎖および完全長軽鎖を含む、単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含む組成物を提供し、完全長重鎖は、配列番号１６６〜１７０および１７６〜１８０からなる群から選択されるヌクレオチド配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるヌクレオチド配列によってコードされ、完全長軽鎖は、配列番号１６１〜１６５および１７１〜１７５からなる群から選択されるヌクレオチド配列と少なくとも８０％、または少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７または９９％）同一であるヌクレオチド配列によってコードされる。あるいは組成物は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、（またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質）を含み、重鎖可変領域は配列番号１６６〜１７０および１７６〜１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、軽鎖可変領域は配列番号１６１〜１６５および１７１〜１７５からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して、５個を超えないアミノ酸、または４個を超えないアミノ酸、または３個を超えないアミノ酸、または２個を超えないアミノ酸、または１個を超えないアミノ酸変化を含み、抗体は、以下の機能性：（ｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでのミオスタチン結合の阻害、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を介した筋肉分化の阻害の低下、および／または（ｉｉｉ）血液学的変化を誘導しないこと、特にＲＢＣの変化がないことの少なくとも１つを示す。このような抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢのリガンド結合ドメインと結合することが好ましい。本文脈において、用語「変化」は挿入、欠失および／または置換を指す。
【０１８９】
様々な実施形態において、本発明の組成物中に含まれる抗体は、１つまたは複数の、２つ以上の、または３つの前に論じた機能性を示し得る。抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体であってよい。抗体は、完全ヒトＩｇＧ１抗体であることが好ましい。
【０１９０】
他の実施形態では、ＶＨおよび／またはＶＬアミノ酸配列は、前述の配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であってよい。他の実施形態では、ＶＨおよび／またはＶＬアミノ酸配列は、１、２、３、４または５を超えないアミノ酸位置におけるアミノ酸置換以外は同一であってよい。それぞれ配列番号９９〜１１２および配列番号８５〜９８のＶＨおよびＶＬ領域と高い（すなわち、８０％以上の）同一性を有するＶＨおよびＶＬ領域を有する抗体は、それぞれ配列番号１２７〜１４０および１１３〜１２６の核酸分子の突然変異誘発（例えば、部位特異的またはＰＣＲ媒介突然変異誘発）、次に本明細書に記載する機能アッセイを使用して、保持される機能（すなわち、前述の機能）に関するコード改変抗体の試験によって得ることができる。
【０１９１】
他の実施形態では、完全長重鎖および／または完全長軽鎖アミノ酸配列は、前述の配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であってよく、または１、２、３、４または５を超えないアミノ酸位置におけるアミノ酸変化以外は同一であってよい。それぞれ配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０のいずれかの完全長重鎖および配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５のいずれかの完全長軽鎖と高い（すなわち、少なくとも８０％以上の）同一性を有する完全長重鎖および完全長軽鎖を有する抗体は、それぞれ核酸分子配列番号１６６〜１７０および１７６〜１８０ならびに配列番号１６１〜１６５および１７１〜１７５の突然変異誘発（例えば、部位特異的またはＰＣＲ媒介突然変異誘発）、次に本明細書に記載する機能アッセイを使用して、保持される機能（すなわち、前述の機能）に関するコード改変抗体の試験によって得ることができる。
【０１９２】
他の実施形態では、完全長重鎖および／または完全長軽鎖ヌクレオチド配列は、前述の配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であってよい。
【０１９３】
他の実施形態では、重鎖および／または軽鎖ヌクレオチド配列の可変領域は前述の配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であってよく、または１、２、３、４または５を超えないアミノ酸位置におけるアミノ酸変化以外は同一であってよい。
【０１９４】
本明細書で使用するように、２配列間の同一率は、２配列の最適アラインメントのために導入する必要がある、ギャップの数、および各ギャップの長さを考慮に入れた、それらの配列によって共有される同一位置の数の関数（すなわち、同一率＝同一位置の数／位置の合計数×１００）である。２配列間の配列の比較と同一率の決定は、以下に記載するように数学的アルゴリズムを使用して実施することができる。
【０１９５】
２アミノ酸配列間の同一率は、ＰＡＭ１２０重み付き残基テーブル（weight residue table）、１２のギャップ長ペナルティーおよび４のギャップペナルティーを使用するＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれた、E.Meyers and W.Miller(Comput.Appl.Biosci., 4:11-17, 1988)のアルゴリズムを使用して決定することができる。さらに、２アミノ酸配列間の同一率は、Ｂｌｏｓｓｏｍ６２マトリクスまたはＰＡＭ２５０マトリクスの一方、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ加重、および１、２、３、４、５、または６の長さ加重を使用するＧＣＧソフトウェアパッケージ（http://www.gcg.comで利用可能）内のＧＡＰプログラムに組み込まれた、Needleman and Wunsch(J.Mol, Biol.48:444-453, 1970)のアルゴリズムを使用して決定することができる。
【０１９６】
保存的修飾を有する抗体
ある特定の実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を有し、１つまたは複数のこれらのＣＤＲ配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化またはその保存的修飾を含む、本明細書に記載する抗体に基づく指定アミノ酸配列またはその変異体配列を有し、抗体は本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の望ましい機能性を保持する。したがって本開示は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域からなる、単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質を含む組成物を提供し、重鎖可変領域ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号１〜１４またはその変異体配列からなる群から選択される。重鎖可変領域ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号１５〜２８またはその変異体配列からなる群から選択される。重鎖可変領域ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号２９〜４２またはその変異体配列からなる群から選択される。軽鎖可変領域ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号４３〜５６またはその変異体配列からなる群から選択される。軽鎖可変領域ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号５７〜７０またはその変異体配列からなる群から選択される。軽鎖可変領域ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む配列番号７１〜８４またはその変異体配列からなる群から選択される。抗体は、以下の機能性：（ｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでのミオスタチン結合の阻害、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を介した筋肉分化の阻害の低下、および／または（ｉｉｉ）血液学的変化を誘導しないこと、特にＲＢＣの変化がないことの少なくとも１つを示すことが好ましい。
【０１９７】
様々な実施形態において、抗体は前述の機能性の一方または両方を示し得る。このような抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体であってよい。
【０１９８】
他の実施形態では、哺乳動物細胞中での発現に最適化した、本発明の組成物中に含まれる抗体は、完全長重鎖配列および完全長軽鎖配列を有し、１つまたは複数のこれらの配列は、本明細書に記載する抗体に基づく指定アミノ酸配列またはその保存的修飾を有し、抗体は本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の望ましい機能性を保持する。したがって本開示は、完全長重鎖および完全長軽鎖からなる、哺乳動物細胞中での発現に最適化した単離モノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む組成物を提供し、完全長重鎖は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む、配列番号１４６〜１５０および１５６〜１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列、またはその変異体配列を有し、完全長軽鎖は、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸変化、およびその保存的修飾を含む、配列番号１４１〜１４５および１５１〜１５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、またはその変異体配列を有し、抗体は、以下の機能性：（ｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでのミオスタチン結合の阻害、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を介した筋肉分化の阻害の低下、および／または（ｉｉｉ）血液学的変化を誘導しないこと、特にＲＢＣの変化がないことの少なくとも１つを示す。
【０１９９】
様々な実施形態において、抗体は前述の機能性の一方または両方を示し得る。このような抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体であってよい。
【０２００】
本明細書で使用する用語「保存的配列修飾」は、アミノ酸配列を含有する抗体の結合特性に著しく影響を与えないまたはそれらを改変しない、アミノ酸修飾を指すものとする。このような保存的修飾には、アミノ酸置換、付加および欠失がある。部位特異的突然変異誘発およびＰＣＲ媒介突然変異誘発などの、当技術分野で知られている標準的技法によって、本開示の抗体に修飾を導入することができる。
【０２０１】
保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置換された置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野で定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非電荷極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β−分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）がある。したがって、本開示の抗体のＣＤＲ領域内の１つまたは複数のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリー由来の他のアミノ酸残基に置換することができ、本明細書に記載する機能アッセイを使用して、保持される機能に関して改変抗体を試験することができる。
【０２０２】
本開示の組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体と同じエピトープに結合する抗体
別の実施形態では、本開示は、本明細書に記載する様々な特異的抗ＡｃｔＲＩＩ抗体と同じエピトープに結合する抗体を含む組成物を提供する。ＡｃｔＲＩＩＡおよびＡｃｔＲＩＩＢとのミオスタチン結合を遮断することができる実施例中に記載する全ての抗体は、高いアフィニティーでＡｃｔＲＩＩＡおよびＡｃｔＲＩＩＢ中のエピトープの１つと結合し、前記エピトープは配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４の間に含まれる。
【０２０３】
したがって、標準的ＡｃｔＲＩＩＢ結合アッセイにおいて、本開示の他の抗体と交差競合する（例えば、統計学的に有意な様式で結合を競合的に阻害する）それらの能力に基づいて、さらなる抗体を同定することができる。ヒトＡｃｔＲＩＩＢと本発明の組成物中に含まれる抗体の結合を阻害する試験抗体の能力は、その試験抗体がヒトＡｃｔＲＩＩＢとの結合に関して前記抗体と競合することができ、非制限的な理論に従い、このような抗体は、それが競合する抗体と同じヒトＡｃｔＲＩＩＢ上の同じまたは関連（例えば、構造上類似または空間的に隣接した）エピトープと結合することができることを実証する。ある特定の実施形態では、本発明の組成物中に含まれる抗体と同じヒトＡｃｔＲＩＩＡおよびＡｃｔＲＩＩＡ上のエピトープに結合する抗体は、ヒト組換え抗体である。このようなヒト組換え抗体は、実施例中に記載するように調製および単離することができる。したがって本開示は、配列番号８５に示す可変重鎖配列、および配列番号９９に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるおよび／または抗体との結合に関して競合するエピトープと結合する抗体を含む、組成物を提供する。
【０２０４】
したがって本開示は、配列番号８６に示す可変重鎖配列、および配列番号１００に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。したがって本開示は、配列番号８７に示す可変重鎖配列、および配列番号１０１に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。したがって本開示は、配列番号８８に示す可変重鎖配列、および配列番号１０２に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。したがって本開示は、配列番号８９に示す可変重鎖配列、および配列番号１０３に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２０５】
したがって本開示は、配列番号９０に示す可変重鎖配列、および配列番号１０４に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２０６】
したがって本開示は、配列番号９１に示す可変重鎖配列、および配列番号１０５に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２０７】
したがって本開示は、配列番号９２に示す可変重鎖配列、および配列番号１０６に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２０８】
したがって本開示は、配列番号９３に示す可変重鎖配列、および配列番号１０７に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２０９】
したがって本開示は、配列番号９４に示す可変重鎖配列、および配列番号１０８に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２１０】
したがって本開示は、配列番号９５に示す可変重鎖配列、および配列番号１０９に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２１１】
したがって本開示は、配列番号９６に示す可変重鎖配列、および配列番号１１０に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２１２】
したがって本開示は、配列番号９７に示す可変重鎖配列、および配列番号１１１に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２１３】
したがって本開示は、配列番号９８に示す可変重鎖配列、および配列番号１１２に示す可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。
【０２１４】
より詳細なエピトープマッピング実験の後、本発明の組成物の好ましい抗体の結合領域がより明確に定義された。
【０２１５】
したがって本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）を含むエピトープと結合する抗体を含む組成物を提供する。本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）を含むエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２１６】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）を含むエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２１７】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）を含むエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。本開示は、配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）を含むエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２１８】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）を含むまたはこれらからなるエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２１９】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）を含むまたはこれらからなるエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２２０】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）を含むまたはこれらからなるエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２２１】
本開示は、これらの配列からなるエピトープ、またはこれらのエピトープ領域の組合せを含むエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２２２】
したがって本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）を含むまたはこれらからなるエピトープと結合する抗体を含む組成物も提供する。
【０２２３】
操作処理および修飾した抗体
開始物質として本明細書に示す１つまたは複数のＶＨおよび／またはＶＬ配列を有する抗体を使用して、開始抗体から改変された性質を有し得る修飾抗体を操作処理することによって、本発明の組成物中に含まれる抗体をさらに調製することができる。１つまたは２つの可変領域（すなわち、ＶＨおよび／またはＶＬ）内、例えば１つまたは複数のＣＤＲ領域内、および／または１つまたは複数のフレームワーク領域内の１つまたは複数の残基を修飾することによって、抗体を操作処理することができる。追加的または代替的に、定常領域（複数可）内の残基を修飾し、例えば抗体のエフェクター機能（複数可）を改変することによって、抗体を操作処理することができる。
【０２２４】
実施することができる１タイプの可変領域の操作処理はＣＤＲ移植である。主に６つの重鎖および軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）内に位置するアミノ酸残基を介して、抗体は標的抗原と相互作用する。この理由で、ＣＤＲ内のアミノ酸配列は、ＣＤＲ外の配列より個々の抗体間でさらに多様である。ＣＤＲ配列は大部分の抗体−抗原相互作用を担うので、異なる性質を有する異なる抗体由来のフレームワーク配列に移植した特異的天然抗体由来のＣＤＲ配列を含む発現ベクターの構築によって、特異的天然抗体の性質を模倣した組換え抗体を発現させることが可能である（例えば、Riechmann, L.et al., 1998 Nature332:323-327;Jones, P.et al., 1986 Nature321:522-525;Queen, C.et al., 1989 Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.86:10029-10033、Winterへの米国特許第５，２２５，５３９号、ならびにQueen et alへの米国特許第５，５３０，１０１号、同第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６２号および同第６，１８０，３７０号を参照）。
【０２２５】
したがって、本開示の別の実施形態は、それぞれ配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ１配列、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ２配列、配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、ならびにそれぞれ配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ１配列、配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ２配列、および配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ３配列を有する軽鎖可変領域を含む、モノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質を含む組成物に関するものである。したがって、このような抗体はモノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬＣＤＲ配列を含有し、これらの抗体と異なるフレームワーク配列を依然含有し得る。
【０２２６】
このようなフレームワーク配列は、生殖細胞系列抗体遺伝子配列を含む、公共のＤＮＡデータベースまたは公開済みの参照文献から得ることができる。例えば、ヒト重鎖および軽鎖可変領域遺伝子に関する生殖細胞系列ＤＮＡ配列は、（www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbaseにおいてインターネットで利用可能な）「ＶＢａｓｅ」ヒト生殖細胞系列配列データベース中、ならびにKabat, E.A., et al., ［上記］;Tomlinson, I.M., et al., 1992 J.fol.Biol.227:776-798;およびCox, J.P.L.et al., 1994 Eur.J Immunol.24:827-836中で見ることができる。本開示の抗体中で使用するためのフレームワーク配列の一例は、本開示の選択抗体によって使用されるフレームワーク配列、例えば本開示のモノクローナル抗体によって使用されるコンセンサス配列および／またはフレームワーク配列と構造上類似した配列である。ＶＨのＣＤＲ１、２および３配列、ならびにＶＬのＣＤＲ１、２および３配列は、フレームワーク配列が由来する生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子で見られるのと同一の配列を有するフレームワーク領域に移植することができ、またはＣＤＲ配列は、生殖細胞系列配列と比較して１つまたは複数の突然変異を含有するフレームワーク領域に移植することができる。例えば幾つかの場合、フレームワーク領域内の残基を突然変異させて、抗体の抗原結合能力を維持または増大させることが有益であることが分かっている（例えば、Queen et alへの米国特許第５，５３０，１０１号、同第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６２号および同第６，１８０，３７０号を参照）。
【０２２７】
別タイプの可変領域の修飾は、ＶＨおよび／またはＶＬのＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３領域内のアミノ酸残基を突然変異させ、それによって「アフィニティー成熟」として知られる、対象とする抗体の１つまたは複数の結合性（例えば、アフィニティー）を改善することである。部位特異的突然変異誘発またはＰＣＲ媒介突然変異誘発を実施して突然変異（複数可）を導入することができ、対象とする抗体結合、または他の機能性に対する影響を、本明細書に記載し実施例中に提供するｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイにおいて評価することができる。（前に論じたような）保存的修飾を導入することができる。突然変異は、アミノ酸の置換、付加または欠失であってよい。さらに典型的には、ＣＤＲ領域内の１、２、３、４または５個を超えない残基を改変する。
【０２２８】
したがって、別の実施形態において本開示は、配列番号１〜１４を有する群から選択されるアミノ酸配列または配列番号１〜１４と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列からなるＶＨＣＤＲ１領域、配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号１５〜２８と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ２領域を有する重鎖可変領域からなる、単離抗ＡｃｔＲＩＩモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分を含む機能性タンパク質を提供する。配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号２９〜４２と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ３領域、配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号４３〜５６と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１領域、配列番号５２〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号５２〜７０と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ２領域、配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号７１〜８４と比較して１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸置換、欠失もしくは付加を有するアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ３領域
【０２２９】
ラクダ抗体
ラマ種（ラマ・パコス（Lama paccos）、ラマ・グラマ（Lama glama）およびラマ・ビクーニャ（Lama vicugna））などの新世界のメンバーを含めた、ラクダおよびヒトコブラクダ科のメンバー（キャメルス・バクトリアノス（Camelus bactrianus）およびキャメルス・ドロマデリウス（Camelus dromaderius））から得た抗体タンパク質は、大きさ、構造の複雑性およびヒト対象に対する抗原性に関して特徴付けられている。天然で見られるこの哺乳動物科由来のある特定のＩｇＧ抗体は軽鎖を欠いており、したがって他動物由来の抗体に関する２本の重鎖と２本の軽鎖を有する典型的な４本鎖４次構造とは構造的に異なる（ＷＯ９４／０４６７８参照）。
【０２３０】
ＶＨＨとして同定した低分子単鎖可変ドメインであるラクダ抗体の領域を遺伝子操作処理によって得て、標的に対する高アフィニティーを有する低分子タンパク質を生成することができ、「ラクダナノボディ」として知られる低分子量抗体由来タンパク質をもたらすことができる（米国特許第５，７５９，８０８号、Stijlemans, B.et al., 2004 J Biol Chem 279:1256-1261;Dumoulin, M.et al., 2003 Nature424:783-788;Pleschberger, M.et al.2003 Bioconjugate Chem14:440-448;Cortez-Retamozo, V.et al.2002 Int J Cancer89:456-62;およびLauwereys, M.et al.1998 EMBO J17:3512-3520参照）。ラクダ抗体および抗体断片の遺伝子操作処理済みライブラリーは、例えばＡｂｌｙｎｘ、Ｇｈｅｎｔ、ベルギーから市販されている。非ヒト起源の他の抗体と同様に、ラクダ抗体のアミノ酸配列を組換えにより改変して、ヒト配列とよりよく似た配列を得ることができる。すなわちナノボディは「ヒト化」することができる。したがって、ヒトに対するラクダ抗体の天然で低い抗原性をさらに低減することができる。
【０２３１】
ラクダナノボディはヒトＩｇＧ分子の約１０分の１の分子量を有し、このタンパク質はわずか数ナノメートルの物理的直径を有する。大きさが小さいことの１つの結果は、より高分子の抗体タンパク質には機能的に不可視の抗原部位と結合するラクダナノボディの能力である。すなわちラクダナノボディは、古典的な免疫学的技法を使用する他の場合には隠れている抗原を検出する試薬として、および潜在的治療剤として有用である。したがって、大きさが小さいことのさらに別の結果は、標的タンパク質の溝または狭い割れ目中の特異的部位との結合の結果として、ラクダナノボディは阻害することができ、したがって、古典的抗体のそれより古典的低分子量薬剤の機能によく似た能力で働くことができることである。
【０２３２】
低分子量とコンパクトな大きさは、非常に熱耐性があり、極値ｐＨおよびタンパク質分解消化に対して安定状態であり、抗原性が低いラクダナノボディをさらにもたらす。別の結果は、ラクダナノボディは循環系から組織中に容易に移動し、さらに血液脳関門さえ越えて、神経組織に影響を与える障害を治療することができることである。さらにナノボディは、血液脳関門を越える薬剤輸送を容易にすることができる（ＵＳ２００４／０１６１７３８参照）。ヒトに対する低い抗原性と組み合わせたこれらの特徴は、多大な治療の可能性を示す。さらにこれらの分子は、大腸菌（E.coli）などの原核生物細胞において完全に発現させることが可能であり、バクテリオファージとの融合タンパク質として発現され機能的である。
【０２３３】
したがって一実施形態では、本発明は、ＡｃｔＲＩＩＢに対して高いアフィニティーを有するラクダ抗体またはナノボディを含む組成物に関した。本明細書のある特定の実施形態では、ラクダ抗体またはナノボディはラクダ科動物において自然に産生される、すなわち、他の抗体に関して本明細書に記載する技法を使用して、ＡｃｔＲＩＩＢまたはそのペプチド断片を用いた免疫処置に従い、ラクダ科の動物によって産生される。あるいは、抗ＡｃｔＲＩＩＢラクダナノボディを操作処理する、すなわち、本明細書の実施例中に記載するように標的としてＡｃｔＲＩＩＢを用いるパンニング手順を使用して、例えばファージディスプレイし適切に突然変異誘発したラクダナノボディタンパク質のライブラリーからの選択によって産生する。レシピエント対象において４５分〜２週間の半減期を有するように遺伝子操作処理によって、操作処理したナノボディをさらに調整することができる。具体的実施形態では、例えばＷＯ９４／０４６７８中に記載されたように、本開示のヒト抗体の重鎖または軽鎖ＣＤＲ配列をナノボディまたはシングルドメイン抗体フレームワーク配列に移植することによって、ラクダ抗体またはナノボディが得られる。
【０２３４】
非抗体足場
知られている非免疫グロブリンフレームワークまたは足場には、アドネクチン（フィブロネクチン）（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、アンキリン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ  ＡＧ、チューリッヒ、スイス）、ドメイン抗体（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｌｔｄ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）およびＡｂｌｙｎｘ  ｎｖ（Ｚｗｉｊｎａａｒｄｅ、ベルギー））、リポカリン（Ａｎｔｉｃａｌｉｎ）（Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｒｏｔｅｏｌａｂ  ＡＧ，Ｆｒｅｉｓｉｎｇ、ドイツ）、低分子免疫製剤（Ｔｒｕｂｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）、マキシボディ（Ａｖｉｄｉａ，Ｉｎｃ．（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ））、プロテインＡ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ  ＡＧ、スウェーデン）およびアフィリン（γクリスタリンまたはユビキチン）（Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ＧｍｂＨ，Ｈａｌｌｅ、ドイツ）、タンパク質エピトープ模倣体（Ｐｏｌｙｐｈｏｒ  Ｌｔｄ，Ａｌｌｓｃｈｗｉｌ、スイス）があるが、これらだけには限られない。
【０２３５】
（ｉ）フィブロネクチン足場
フィブロネクチン足場は、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型の第１０モジュール（１０Ｆｎ３ドメイン））をベースとすることが好ましい。フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインは２βシート間に分布した７または８のβ鎖を有し、それら自体は互いに密着したタンパク質のコアを形成し、β鎖を互いに連結する、溶媒に露出した（ＣＤＲと類似の）ループをさらに含有する。βシートサンドウィッチの各縁には少なくとも３個のこのようなループが存在し、ここで、縁はβ鎖の方向と垂直にあるタンパク質の境界である（米国特許第６，８１８，４１８号）。
【０２３６】
これらのフィブロネクチンベースの足場は免疫グロブリンではないが、全体的なフォールディングは、最小機能性抗体断片、ラクダおよびラマＩｇＧの抗原認識単位全体を含む重鎖の可変領域のそれと密接に関連している。この構造のため、非免疫グロブリン抗体は、これらの抗体と本来類似した抗原結合性およびアフィニティーが似ている。ループランダム化、およびｉｎ  ｖｉｖｏでの抗体のアフィニティー成熟のプロセスと類似したｉｎ  ｖｉｔｒｏシャッフリング戦略において、これらの足場を使用することができる。これらのフィブロネクチンベースの分子は足場として使用することができ、分子のループ領域は、標準的なクローニング技法を使用して本発明のＣＤＲで置換することができる。
【０２３７】
（ｉｉ）アンキリン−Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ
この技術は、異なる標的との結合に使用可能である可変領域を支持するための足場としてアンキリン由来反復モジュールを含む、タンパク質の使用に基づく。アンキリン反復モジュールは、２つのアンチパラレルα−ヘリックスとβ−ターンからなる３３アミノ酸ポリペプチドである。可変領域の結合は、リボソームディスプレイを使用して大部分は最適化される。
【０２３８】
（ｉｉｉ）マキシボディ／アヴィマー−Ａｖｉｄｉａ
アヴィマーは、ＬＲＰ−１などのタンパク質を含有する天然Ａ−ドメインに由来する。これらのドメインは本来タンパク質−タンパク質相互作用に使用され、ヒト中では２５０を超えるタンパク質がＡ−ドメインに構造上基づく。アヴィマーは、アミノ酸リンカーを介して結合した数個の異なる「Ａ−ドメイン」モノマー（２〜１０）からなる。例えばＵＳ２００４／０１７５７５６、ＵＳ２００５／００５３９７３、ＵＳ２００５／００４８５１２、およびＵＳ２００６／０００８８４４中に記載された方法を使用して、標的抗原と結合することができるアヴィマーを作製することができる。
【０２３９】
（ｖｉ）プロテインＡ−Ａｆｆｉｂｏｄｙ
Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）アフィニティーリガンドは、プロテインＡのＩｇＧ結合ドメインの１つの足場をベースとする３本ヘリックスバンドルで構成される、低分子の、単純なタンパク質である。プロテインＡは、細菌、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）由来の表面タンパク質である。この足場ドメインは５８個のアミノ酸からなり、その１３個をランダム処理して多数のリガンド変異体を含むＡｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）ライブラリーを作製する（例えば、米国特許第５，８３１，０１２号参照）。Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）分子は抗体と似ており、１５０ｋＤａである抗体の分子量と比較して、それらは６ｋＤａの分子量を有する。その大きさは小さいにもかかわらず、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）分子の結合部位は抗体のそれと類似している。
【０２４０】
（ｖ）Ａｎｔｉｃａｌｉｎ−Ｐｉｅｒｉｓ
Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（登録商標）は、Ｐｉｅｒｉｓ  ＰｒｏｔｅｏＬａｂ  ＡＧ社によって開発された製品である。それらはリポカリン、化学的感受性または不溶性化合物の生理的輸送または貯蔵に通常関与する低分子で強固なタンパク質の広汎な一群に由来する。幾つかの天然リポカリンは、ヒトの組織または体液中に存在する。このタンパク質の構造は、剛直なフレームワークの上部に超可変ループを有する免疫グロブリンを暗示する。しかしながら、抗体またはそれらの組換え断片とは対照的に、リポカリンは１６０〜１８０個のアミノ酸残基を含む１ポリペプチド鎖で構成され、１免疫グロブリンドメインよりごくわずかに大きい。
【０２４１】
結合ポケットを構成する４ループのセットは顕著な構造可塑性を示し、様々な側鎖を許容する。したがって、結合部位は、専有のプロセスで再形成され、異なる形状の所定の標的分子を、高いアフィニティーおよび特異性で認識することができる。
【０２４２】
リポカリンファミリーの１タンパク質、ピエリス・ブラシカエ（Pieris brassicae）のビリン結合タンパク質（ＢＢＰ）を使用して、それらの４ループのセットを突然変異誘発することによって、Ａｎｔｉｃａｌｉｎが開発された。「Ａｎｔｉｃａｌｉｎ」について記載する特許出願の一例はＷＯ１９９９／１６８７３である。
【０２４３】
（ｖｉ）アフィリン−Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ
ＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、タンパク質および小分子に対する特異的アフィニティーのため設計された低分子の非免疫グロブリンタンパク質である。新たなＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、その各々が異なるヒト由来足場タンパク質に基づく２つのライブラリーから、非常に迅速に選択することができる。
【０２４４】
ＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、免疫グロブリンタンパク質とはいかなる構造相同性も示さない。Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓは２つのＡＦＦＩＬＩＮ（商標）足場を利用し、その１つはγクリスタリン、ヒトの目のレンズ構造タンパク質であり、もう１つは「ユビキチン」スーパーファミリータンパク質である。いずれのヒト足場も非常に小さく、高温安定性を示し、ｐＨ変化および変性剤に対して大部分は耐性がある。この高い安定性は、主にタンパク質の膨張したβシート構造によるものである。γクリスタリン由来タンパク質の例はＷＯ２００１／００４１４４中に記載されており、「ユビキチン様」タンパク質の例はＷＯ２００４／１０６３６８中に記載されている。
【０２４５】
（ｖｉｉ）タンパク質エピトープ模倣体（ＰＥＭ）
ＰＥＭは、タンパク質のβ−ヘアピン二次構造、タンパク質−タンパク質相互作用に関与する主要二次構造を模倣した、中程度の大きさの、環状、ペプチド様分子（ＭＷ、１〜２ｋＤａ）である。
【０２４６】
別のフレームワークまたは足場への抗原結合ドメインの移植
生成するポリペプチドがＡｃｔＲＩＩＢと特異的に結合する少なくとも１つの結合領域を含む限り、広く様々な抗体／免疫グロブリンフレームワークまたは足場を利用することができる。このようなフレームワークまたは足場は、（本明細書の他の箇所で開示するような）５つの主要イディオタイプのヒト免疫グロブリン、またはそれらの断片を含み、好ましくはヒト化態様を有する他の動物種の免疫グロブリンを含む。ラクダにおいて同定された抗体などの単鎖重鎖抗体はこの点で特に興味深い。新規なフレームワーク、足場および断片は、当業者により発見および開発され続けている。
【０２４７】
一態様では、本開示の組成物は、開示する抗体のＣＤＲをその上に移植することができる非免疫グロブリン足場を使用して、非免疫グロブリンベースの抗体を含むことができる。それらが配列番号１８１の標的タンパク質（好ましくは、配列番号１８２で示すそのリガンド結合ドメイン）に特異的な結合領域を含む限り、既知または将来の非免疫グロブリンフレームワークおよび足場を利用することができる。このような化合物は、「標的特異的結合領域を含むポリペプチド」として本明細書では知られている。非免疫グロブリンフレームワークの例は、以下のセクション（ラクダ抗体および非抗体足場）中でさらに記載する。
【０２４８】
フレームワークまたはＦｃ操作処理
本開示の組成物中に含まれる操作処理抗体には、ＶＨおよび／またはＶＬ内のフレームワーク残基に、例えば抗体の性質を改善するための修飾が施された抗体がある。典型的には、このようなフレームワーク修飾を施して抗体の免疫原性を低下させる。例えば、１つの手法は、１つまたは複数のフレームワーク残基を対応する生殖細胞系列配列に「復帰突然変異させる」ことである。より詳細には、体細胞突然変異を経た抗体は、その抗体が由来する生殖細胞系列配列と異なるフレームワーク残基を含有し得る。抗体フレームワーク配列とその抗体が由来する生殖細胞系列配列を比較することによって、このような残基を同定することができる。フレームワーク領域配列をそれらの生殖細胞系列配置に戻すため、体細胞突然変異は、例えば部位特異的突然変異誘発またはＰＣＲ媒介突然変異誘発による、生殖細胞系列配列への「復帰突然変異」であってよい。このような「復帰突然変異」抗体も本開示の組成物中に含まれ得る。
【０２４９】
別型のフレームワーク修飾は、フレームワーク領域内、またはさらに１つまたは複数のＣＤＲ領域内の１つまたは複数の残基を突然変異させて、Ｔ細胞エピトープを除去し、それによって抗体の潜在的免疫原性を低下させることに関する。この手法は「免疫除去」とも呼ばれ、ＵＳ２００３／０１５３０４３中にさらに詳細に記載される。
【０２５０】
フレームワークまたはＣＤＲ領域内に施される修飾以外またはそれらの代替で、本開示の抗体を操作処理してＦｃ領域内に修飾を含めることができ、典型的には、血清中半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合、および／または抗原依存性細胞傷害作用などの、抗体の１つまたは複数の機能性を改変することができる。さらに、本開示の組成物中に含まれる抗体を化学的に修飾することができ（例えば、１つまたは複数の化学成分を抗体に付けることが可能であり）、または修飾してそのグリコシル化を改変することができ、抗体の１つまたは複数の機能性を再度改変することができる。これらの実施形態の各々は、以下でさらに詳細に記載する。Ｆｃ領域中の残基のナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスのナンバリングである。
【０２５１】
一実施形態では、ＣＨ１のヒンジ領域を、ヒンジ領域中のシステイン残基の数が変わる、例えば増大または減少するように修飾する。この手法は米国特許第５，６７７，４２５号中にさらに記載される。ＣＨ１のヒンジ領域中のシステイン残基の数を変えて、例えば軽鎖および重鎖の構築を容易にする、または抗体の安定性を増大もしくは減少させる。
【０２５２】
別の実施形態では、抗体のＦｃヒンジ領域を突然変異させて、抗体の生物学的半減期を低下させる。より具体的には、天然ＦｃヒンジドメインのスタフィロコッカスプロテインＡ（ＳｐＡ）結合と比較して、その抗体のＳｐＡ結合が損なわれるように、Ｆｃヒンジ断片のＣＨ２−ＣＨ３ドメイン界面領域中に１つまたは複数のアミノ酸突然変異を導入する。この手法は米国特許第６，１６５，７４５号中でさらに詳細に記載される。
【０２５３】
別の実施形態では、抗体を修飾してその生物学的半減期を増大させる。様々な手法が考えられる。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号中に記載されたように、１つまたは複数の以下の突然変異、Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、Ｔ２５６Ｆを導入することができる。あるいは、生物学的半減期を増大させるため、米国特許第５，８６９，０４６号および米国特許第６，１２１，０２２号中に記載されたように、ＣＨ１またはＣＬ領域内で抗体を改変して、ＩｇＧのＦｃ領域ＣＨ２ドメインの２ループから得たサルベージ受容体結合エピトープを含有することができる。
【０２５４】
さらに他の実施形態では、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置換して抗体のエフェクター機能を変えることにより、Ｆｃ領域を改変する。例えば、抗体はエフェクターリガンドに対して改変されたアフィニティーを有するが親抗体の抗原結合能力を保持するように、１つまたは複数のアミノ酸を異なるアミノ酸残基で置換することができる。アフィニティーが変わるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体または補体のＣ１要素であってよい。この手法は、いずれもWinter et al.による米国特許第５，６２４，８２１号および米国特許第５，６４８，２６０号中でさらに詳細に記載される。特に、残基２３４および２３５を突然変異させることが可能である。特に、これらの突然変異はアラニンへの突然変異であってよい。したがって一実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体は、アミノ酸２３４および２３５の一方または両方でＦｃ領域の突然変異を有する。別の実施形態では、アミノ酸２３４および２３５の一方または両方をアラニンに置換することができる。アミノ酸２３４と２３５の両方のアラニンへの置換は、ＡＤＣＣ活性の低下をもたらす。
【０２５５】
別の実施形態では、記載する抗体のアミノ酸残基から選択される１つまたは複数のアミノ酸は、抗体が改変されたＣ１ｑ結合および／または低下したもしくは無効化された補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）を有するように、異なるアミノ酸残基で置換することができる。この手法は米国特許第６，１９４，５５１号中でさらに詳細に記載される。
【０２５６】
別の実施形態では、記載する抗体の１つまたは複数のアミノ酸残基を改変し、それによって補体と結合する抗体の能力を変える。この手法はＷＯ９４／２９３５１中でさらに記載される。
【０２５７】
さらに別の実施形態では、記載する抗体のＦｃ領域を修飾して、抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）を媒介する抗体の能力を増大させる、および／または１つまたは複数のアミノ酸の修飾によってＦｃγ受容体に対する抗体のアフィニティーを増大させる。この手法はＷＯ００／４２０７２中でさらに記載される。さらに、ＦｃγＲｌ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩおよびＦｃＲｎに関するヒトＩｇＧ１における結合部位はマッピングされており、結合が改善された変異体が記載されている（Shields, R.L.et al., 2001 J.Biol.Chen.276:6591-6604参照）。
【０２５８】
さらに別の実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体のグリコシル化を修飾する。例えば、脱グリコシル化抗体を作製することができる（すなわち、その抗体はグリコシル化がない）。グリコシル化を改変して、例えば抗原に対する抗体のアフィニティーを増大させることができる。このような炭水化物の修飾は、例えば抗体配列内の１つまたは複数のグリコシル化部位を改変することによって実施することができる。例えば、１つまたは複数の可変領域フレームワークグリコシル化部位を除去して、それによってその部位におけるグリコシル化の除去をもたらす、１つまたは複数のアミノ酸置換を施すことができる。このような脱グリコシル化は、抗原に対する抗体のアフィニティーを増大させることができる。このような手法は、Co et al.による米国特許第５，７１４，３５０号および米国特許第６，３５０，８６１号中でさらに詳細に記載される。
【０２５９】
追加的または代替的に、少量のフコシル残基を有する低フコシル化抗体、または増大した二分ＧｌｃＮａｃ構造を有する抗体などの、改変型のグリコシル化を有する抗体を使用することができる。このような改変型グリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を増大させることが実証されている。このような炭水化物修飾は、例えば、改変型グリコシル化機構を有する宿主細胞中で抗体を発現させることによって実施することができる。改変型グリコシル化機構を有する細胞は当技術分野で記載されており、その中で開示する組換え抗体を発現させ、それによって改変型グリコシル化を有する抗体を産生する宿主細胞として使用することができる。例えば、Hang et al.によるＥＰ１，１７６，１９５は、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞系を記載し、したがって、このような細胞系中で発現される抗体は低フコシル化を示す。したがって一実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体は、低フコシル化パターンを示す細胞系、例えば、フコシルトランスフェラーゼをコードするＦＵＴ８遺伝子の発現に欠陥がある哺乳動物細胞系中での組換え発現によって産生する。ＷＯ０３／０３５８３５は、フコースをＡｓｎ（２９７）連結炭水化物に付ける能力が低下し、さらにその宿主細胞中で発現される抗体の低フコシル化をもたらす、変異体ＣＨＯ細胞系、Ｌｅｃｌ３細胞を記載する（Shields, R.L.et al., 2002 J.Biol.Chem.277:26733-26740も参照）。ＷＯ９９／５４３４２は、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、β（１，４）−ＮアセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作処理した細胞系を記載し、したがって、その操作処理した細胞系において発現される抗体は、抗体のＡＤＣＣ活性の増大をもたらす増大した二分ＧｌｃＮａｃ構造を示す（Umana et al., 1999 Nat.Biotech.17:176-180も参照）。あるいは、本開示の組成物中に含まれる抗体は、哺乳動物に似たグリコシル化パターンに操作処理し、グリコシル化パターンとしてフコースを欠く抗体を産生することができる、酵母または繊維状真菌において産生することができる（例えば、ＥＰ１２９７１７２Ｂ１参照）。
【０２６０】
本開示によって企図される本明細書における抗体の別の修飾は、ペグ化である。抗体をペグ化して、例えば抗体の生物学的（例えば血清中）半減期を増大させることができる。抗体をペグ化するため、典型的には抗体、またはその断片を、１つまたは複数のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基が抗体または抗体断片に付いている状態になる条件下で、反応性エステルまたはＰＥＧのアルデヒド誘導体などのＰＥＧと反応させる。反応性ＰＥＧ分子（または類似の反応性がある水溶性ポリマー）とのアシル化反応またはアルキル化反応によって、ペグ化を実施することができる。本明細書で使用する用語「ポリエチレングリコール」は、モノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ−またはアリールオキシ−ポリエチレングリコールまたはポリエチレングリコール−マレイミドなどの、他のタンパク質を誘導体化するために使用されている任意の型のＰＥＧを包含するものとする。ある特定の実施形態では、ペグ化するために使用する抗体は脱グリコシル化抗体である。タンパク質をペグ化するための方法は当技術分野で知られており、開示する抗体に適用することができる（例えば、ＥＰ０１５４３１６およびＥＰ０４０１３８４参照）。
【０２６１】
本開示によって企図される抗体の別の修飾は、生成する分子の半減期を増大させるための、ヒト血清アルブミンまたはその断片などの血清タンパク質と、本開示の組成物中に含まれる抗体の少なくとも抗原結合領域との結合またはタンパク質融合である（例えば、ＥＰ０３２２０９４参照）。
【０２６２】
別の可能性は、生成する分子の半減期を増大させるための、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質と結合可能なタンパク質と、本開示の組成物中に含まれる抗体の少なくとも抗原結合領域との融合である（例えば、ＥＰ０４８６５２５参照）。
【０２６３】
改変型抗体を操作処理する方法
前に論じたように、本明細書に示すＣＤＲ配列、ＶＨおよびＶＬ配列、または完全長重鎖および軽鎖配列を有する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を使用して、ＣＤＲ配列、完全長重鎖および／もしくは軽鎖配列、ＶＨおよび／もしくはＶＬ配列、またはそれらと結合した定常領域（複数可）を修飾することによって、新たな抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製することができる。したがって、本開示の別の態様では、本開示の組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の構造特徴を使用して、ヒトＡｃｔＲＩＩＢとの結合などの本開示の組成物中に含まれる抗体の少なくとも１つの機能性を保持するだけでなく、ＡｃｔＲＩＩＢの１つまたは複数の機能性も阻害する（例えば、Ｓｍａｄ活性化の阻害）、構造上関連した抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製する。
【０２６４】
例えば、本開示の組成物中に含まれる抗体の１つまたは複数のＣＤＲ領域、またはその突然変異体を、前に論じたように、知られているフレームワーク領域および／または他のＣＤＲと組換えにより組み合わせて、本開示の組成物中に含まれる別の組換え操作処理型抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製することができる。他のタイプの修飾には前のセクションで記載した修飾がある。操作処理法の出発材料は、本明細書で提供する１つもしくは複数のＶＨおよび／もしくはＶＬ配列、またはその１つもしくは複数のＣＤＲ領域である。操作処理型抗体を作製するために、本明細書で提供する１つもしくは複数のＶＨおよび／もしくはＶＬ配列、またはその１つもしくは複数のＣＤＲ領域を有する抗体を実際調製する（すなわち、タンパク質として発現させる）ことは必ずしも必要ではない。そうではなく、出発材料として配列（複数可）中に含有される情報を使用して、原型配列（複数可）由来の「第二世代の」配列（複数可）を作製し、次いで「第二世代の」配列（複数可）を調製しタンパク質として発現させる。
【０２６５】
改変型抗体配列は、配列番号２９〜４２および配列番号７１〜８４、またはＵＳ２００５／０２５５５５２中に記載された最小必須結合抗原決定基からなる群から選択される固定ＣＤＲ３配列、ならびにＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列における多様性を有する抗体ライブラリーのスクリーニングによって調製することもできる。ファージディスプレイ技術などの、抗体ライブラリー由来の抗体のスクリーニングに適した任意のスクリーニング技術に従い、スクリーニングを実施することができる。
【０２６６】
標準的な分子生物学の技法を使用して、改変型抗体配列を調製し発現させることが可能である。改変型抗体配列（複数可）によってコードされる抗体は、本明細書に記載する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の機能性の１個、数個または全てを保持する抗体であり、それらの機能性には、ヒトＡｃｔＲＩＩＢへの特異的結合およびＳｍａｄ活性化の阻害があるが、これらだけには限られない。
【０２６７】
改変型抗体は、１つまたは複数、２つ以上、または３つ以上の前に論じた機能性を示し得る。
【０２６８】
改変型抗体の機能性は、実施例中に述べるアッセイ（例えばＥＬＩＳＡ）などの、当技術分野で利用可能なおよび／または本明細書に記載する標準的なアッセイを使用して評価することができる。
【０２６９】
突然変異は抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体コード配列の全体または一部分に沿ってランダムまたは選択的に導入することができ、生成する修飾型抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、結合活性および／または本明細書に記載する他の機能性に関してスクリーニングすることができる。突然変異の方法は当技術分野で記載されている。例えばＷＯ０２／０９２７８０は、飽和突然変異誘発、合成連結構築体、またはこれらの組合せを使用した、抗体の突然変異を作製およびスクリーニングするための方法を記載する。あるいはＷＯ０３／０７４６７９は、コンピュータによるスクリーニング法を使用して、抗体の物理化学的性質を最適化するための方法を記載する。
【０２７０】
本開示の組成物中に含まれる抗体をコードする核酸分子
哺乳動物細胞中での発現に最適化した完全長軽鎖ヌクレオチド配列の例は、配列番号１６１〜１６５および１７１〜１７５で示す。哺乳動物細胞中での発現に最適化した完全長重鎖ヌクレオチド配列の例は、配列番号１６６〜１７０および１７６〜１８０で示す。
【０２７１】
核酸は完全細胞中、細胞溶解物中に存在する可能性があり、または部分的に精製されたもしくは実質的に純粋な形の核酸であってよい。アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動および他の当技術分野でよく知られている技法を含めた、標準的な技法によって、他の細胞要素または他の汚染物質、例えば、他の細胞核酸またはタンパク質から精製除去したとき、核酸は「単離状態」または「実質的に純粋な状態」である。F. Ausubel, et al., ed.1987 Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York参照。標準的な分子生物学の技法を使用して核酸を得ることができる。ハイブリドーマ（例えば、以下でさらに記載するヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスから調製したハイブリドーマ）によって発現される抗体用に、ハイブリドーマによって作製した抗体の軽鎖および重鎖をコードするｃＤＮＡは、標準的なＰＣＲ増幅またはｃＤＮＡクローニング技法によって得ることができる。（例えば、ファージディスプレイ技法を使用して）免疫グロブリン遺伝子ライブラリーから得た抗体に関して、抗体をコードする核酸を、ライブラリーのメンバーである様々なファージクローンから回収することができる。
【０２７２】
ＶＨおよびＶＬセグメントをコードするＤＮＡ断片を得た後、これらのＤＮＡ断片を標準的な組換えＤＮＡ技法によりさらに操作して、例えば可変領域遺伝子を完全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子またはｓｃＦｖ遺伝子に転換することができる。これらの操作では、ＶＬまたはＶＨコードＤＮＡ断片を、別のＤＮＡ分子、または抗体定常領域などの別のタンパク質をコードする断片、または柔軟なリンカーに作動可能に連結させる。本文脈中で使用する用語「〜に作動可能に連結した」は、２つのＤＮＡ断片が、例えばその２つのＤＮＡ断片によってコードされるアミノ酸配列がインフレーム状態に保たれるように、または望ましいプロモーターの調節下でタンパク質が発現されるように、機能的に接合したことを意味するものとする。
【０２７３】
ＶＨ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＶＨコードＤＮＡを重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結させることによって、完全長重鎖遺伝子に転換することができる。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は当技術分野で知られており（例えば、Kabat, E.A., et al.［上記］参照）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤ定常領域であってよい。重鎖定常領域はＩｇＧ１アイソタイプ間で選択することができる。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子用に、ＶＨコードＤＮＡを、重鎖ＣＨ１定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結させることが可能である。
【０２７４】
ＶＬ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＶＬコードＤＮＡを軽鎖定常領域、ＣＬをコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結させることによって、完全長軽鎖遺伝子に（およびＦａｂ軽鎖遺伝子に）転換することができる。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は当技術分野で知られており（例えば、Kabat, E.A., et al.［上記］参照）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域はカッパまたはラムダ定常領域であってよい。
【０２７５】
ｓｃＦｖ遺伝子を作製するため、ＶＨおよびＶＬコードＤＮＡ断片を、ＶＨ配列とＶＬ配列を隣接単鎖タンパク質として発現することができ、ＶＬ領域とＶＨ領域が柔軟なリンカーによって接合するように、柔軟なリンカーをコードする、例えばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードする別の断片に作動可能に連結させる（例えば、Bird et al., 1988 Science242:423-426;Huston et al., 1988 Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883;McCafferty et al., 1990 Nature348:552-554参照）。
【０２７６】
モノクローナル抗体の作製
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、従来のモノクローナル抗体法、例えば、Kohler and Milstein (1975 Nature256:495)の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技法を含めた様々な技法によって産生することができる。モノクローナル抗体を産生するための多くの技法、例えばＢリンパ球のウイルスまたは癌遺伝子形質転換を利用することができる。
【０２７７】
ハイブリドーマを調製するための動物系はマウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は十分確立した手順である。融合用に免疫処置脾臓細胞を単離するための免疫処置プロトコールおよび技法は、当技術分野で知られている。融合パートナー（例えば、マウスミエローマ細胞）および融合手順も知られている。
【０２７８】
本開示の組成物中に含まれるキメラまたはヒト化抗体は、前に記載したように調製したマウスモノクローナル抗体の配列に基づいて調製することができる。重鎖および軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは対象とするマウスハイブリドーマから得ることが可能であり、標準的な分子生物学の技法を使用し、これらを操作処理して非マウス（例えばヒト）免疫グロブリン配列を含有させることが可能である。例えば、キメラ抗体を作製するため、当技術分野で知られている方法を使用して、マウス可変領域をヒト定常領域と連結させることが可能である（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号参照）。ヒト化抗体を作製するため、当技術分野で知られている方法を使用して、マウスＣＤＲ領域をヒトフレームワークに挿入することができる（例えば、米国特許第５２２５５３９号、同第５５３０１０１号、同第５５８５０８９号、同第５６９３７６２号、および同第６１８０３７０号参照）。
【０２７９】
ある特定の実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体はヒトモノクローナル抗体である。ＡｃｔＲＩＩＢに対するこのようなヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫系の一部分を有する、トランスジェニックまたは染色体導入マウスを使用して作製することができる。これらのトランスジェニックおよび染色体導入マウスには、それぞれＨｕＭＡｂマウスおよびＫＭマウスと本明細書で呼ぶマウスがあり、本明細書では集合的に「ヒトＩｇマウス」と呼ぶ。
【０２８０】
ＨｕＭＡｂマウス（登録商標）（Ｍｅｄａｒｅｘ、Ｉｎｃ．）は、内生μおよびκ鎖遺伝子座を不活性化する標的突然変異と一緒に、非再編成ヒト重鎖（μおよびγ）およびκ軽鎖免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子のミニ遺伝子座を含有する（例えば、Lonberg, et al., 1994 Nature368(6474):856-859参照）。したがって、このマウスはマウスＩｇＭまたはκの発現の低下を示し、免疫処置に応答して、導入したヒト重鎖および軽鎖導入遺伝子がクラススイッチおよび体細胞突然変異を経て、高アフィニティーヒトＩｇＧκモノクローナル抗体が生じる（Lonberg, N.et al., 1994［上記］; Lonberg, N., 1994 Handbook of Experimental Pharmacology 113:49-101中に総説された、Lonberg, N.and Huszar, D., 1995 Intern.Rev.Immunol.13:65-93、およびHarding, F.and Lonberg, N., 1995 Ann.N.Y.Acad.Sci.764:536-546）。ＨｕＭＡｂマウスの調製および使用、ならびこのようなマウスによって実施されるゲノム修飾は、Taylor, L.et al., 1992 Nucleic Acids Research20:6287-6295;Chen, J.et al., 1993 International Immunology5:647-656;Tuaillon et al., 1993 Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:3720-3724;Choi et al., 1993 Nature Genetics4:117-123;Chen, J.et al., 1993 EMBO J.12:821-830;Tuaillon et al., 1994 J.Immunol.152:2912-2920;Taylor, L.et al., 1994 International Immunology 579-591;およびFishwild, D.et al., 1996 Nature Biotechnology14:845-851中でさらに詳細に記載され、これら全ての参照文献の内容はその全容が参照として本明細書に具体的に組み込まれる。さらに、米国特許第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、同第５，７８９，６５０号、同第５，８７７，３９７号、同第５，６６１，０１６号、同第５，８１４，３１８号、同第５，８７４，２９９号、同第５，７７０，４２９号、および同第５，５４５，８０７号、ならびにＷＯ９２／１０３９１８、ＷＯ９３／１２２２７、ＷＯ９４／２５５８５、ＷＯ９７／１１３８５２、ＷＯ９８／２４８８４、ＷＯ９９／４５９６２、およびＷＯ０１／１４４２４を参照。
【０２８１】
別の実施形態では、本開示の組成物中に含まれるヒト抗体は、ヒト重鎖導入遺伝子およびヒト軽鎖導入染色体を有するマウスなどの、導入遺伝子および導入染色体においてヒト免疫グロブリン配列を有するマウスを使用して産生することができる。「ＫＭマウス」と本明細書で呼ぶこのようなマウスは、ＷＯ０２／４３４７８中で詳細に記載される。
【０２８２】
ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する、他のさらなる、別のトランスジェニック動物系は当技術分野で入手可能であり、これらを使用して本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を産生することができる。例えば、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ、Ｉｎｃ．）と呼ばれる別のトランスジェニック系を使用することができる。このようなマウスは、例えば米国特許第５，９３９，５９８号、同第６，０７５，１８１号、同第６，１１４，５９８号、同第６，１５０，５８４号、および同第６，１６２，９６３号中で記載される。
【０２８３】
さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する、別の導入染色体動物系が当技術分野で入手可能であり、これらを使用して本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を産生することができる。例えば、「ＴＣマウス」と呼ばれるヒト重鎖導入染色体とヒト軽鎖導入染色体との両方を有するマウスを使用することができ、このようなマウスはTomizuka et al., 2000 Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:722-727中で記載される。さらに、ヒト重鎖および軽鎖導入染色体を有するウシが当技術分野で記載されており（Kuroiwa et al., 2002 Nature Biotechnology20:889-894）、これらを使用して抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を産生することができる。
【０２８４】
本開示の組成物中に含まれるヒト組換え抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子のライブラリーをスクリーニングするためのファージディスプレイ法を使用して調製することもできる。ヒト抗体を単離するためのこのようなファージディスプレイ法は当技術分野で確立しており、または以下の実施例中で記載する。例えば、米国特許第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５７１，６９８号、同第５，４２７，９０８号、同第５，５８０，７１７号、同第５，９６９，１０８号、同第６，１７２，１９７号、同第５，８８５，７９３号、同第６，５２１，４０４号、同第６，５４４，７３１号、同第６，５５５，３１３号、同第６，５８２，９１５号および同第６，５９３，０８１号参照。
【０２８５】
本開示の組成物中に含まれるヒトモノクローナル抗体は、免疫処置によってヒト抗体応答が生じ得るように、ヒト免疫細胞が再構築されたＳＣＩＤマウスを使用して調製することもできる。このようなマウスは、例えば米国特許第５，４７６，９９６号および米国特許第５，６９８，７６７号中で記載される。
【０２８６】
ヒトモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの作製
本開示の組成物中に含まれるヒトモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを作製するため、免疫処置マウスから脾臓細胞および／またはリンパ節細胞を単離し、マウスミエローマ細胞系などの適切な不死化細胞系と融合させることが可能である。生成するハイブリドーマは、抗原特異的抗体の産生に関してスクリーニングすることができる。例えば、免疫処置マウス由来の脾臓細胞リンパ球の単細胞懸濁物は、５０％ＰＥＧで６分の１の数のＰ３Ｘ６３−Ａｇ８．６５３非分泌マウスミエローマ細胞（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ１５８０）と融合させることが可能である。細胞は平底マイクロタイタープレート中に約２×１４５でプレーティングし、次に２週間、２０％胎児クローン血清、１８％「６５３」条件付け培地、５％オリゲン（origen）（ＩＧＥＮ）、４ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、５ｍＭのＨＥＰＥＳ、０：０５５ｍＭの２−メルカプトエタノール、５０単位／ｍｌのペニシリン、５０ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５０ｍｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび１Ｘ  ＨＡＴ（Ｓｉｇｍａ；ＨＡＴは融合後２４時間で加える）を含有する選択培地中でインキュベートする。約２週間後、ＨＡＴをＨＴに置換した培地中で細胞を培養することができる。次いで個々のウエルを、ＥＬＩＳＡによりヒトモノクローナルＩｇＭおよびＩｇＧ抗体に関してスクリーニングすることができる。広範囲のハイブリドーマ増殖が起こった後、通常１０〜１４日後に培地を観察することができる。抗体分泌ハイブリドーマは再度平板培養し、再度スクリーニングすることができ、ヒトＩｇＧに対して依然陽性である場合、モノクローナル抗体は限界希釈によって少なくとも２回サブクローニングすることができる。次いで安定したサブクローンをｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養して、特徴付け用の組織培養培地中で少量の抗体を生成することができる。ヒトモノクローナル抗体を精製するため、選択したハイブリドーマを、モノクローナル抗体精製用の２リットルのスピナーフラスコ中で増殖することができる。上清は濾過し、プロテインＡ−セファロース（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）によるアフィニティークロマトグラフィーの前に濃縮することができる。溶出したＩｇＧはゲル電気泳動および高速液体クロマトグラフィーによって調べ、純度を保証することができる。バッファー溶液はＰＢＳに交換することができ、１．４３の消衰係数を使用しＯＤ２８０によって濃度を決定することができる。モノクローナル抗体は等分し、−８０℃で保存することができる。
【０２８７】
モノクローナル抗体を産生するトランスフェクトーマの作製
本開示の組成物中に含まれる抗体は、当技術分野でよく知られているように（例えば、Morrison, S.(1985)Science 229:1202）、例えば組換えＤＮＡ技法と遺伝子トランスフェクション法の組合せを使用して、宿主細胞トランスフェクトーマ中で産生することもできる。
【０２８８】
例えば、抗体、またはその抗体断片を発現するため、部分的または完全長軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡを、標準的な分子生物学の技法（例えば、対象とする抗体を発現するハイブリドーマを使用するＰＣＲ増幅またはｃＤＮＡクローニング）によって得ることができ、遺伝子が転写および翻訳調節配列に作動可能に連結するように、ＤＮＡを発現ベクターに挿入することができる。本文脈では、用語「〜に作動可能に連結した」は、ベクター内の転写および翻訳調節配列が、抗体遺伝子の転写および翻訳を制御するそれらの目的とする機能を果たすように、抗体遺伝子がベクター中に連結することを意味するものとする。発現ベクターおよび発現調節配列は、使用する発現宿主細胞と適合性があるように選択する。抗体の軽鎖遺伝子と抗体の重鎖遺伝子は別々のベクターに挿入することができ、またはより典型的には、両方の遺伝子を同じ発現ベクターに挿入する。標準的な方法（例えば、抗体遺伝子断片上の相補的制限部位とベクターの連結、または制限部位が存在しない場合は平滑末端連結）によって、抗体の遺伝子を発現ベクターに挿入する。本明細書に記載する抗体の軽鎖および重鎖可変領域を使用して、ＶＨセグメントがベクター内のＣＨセグメント（複数可）に作動可能に連結しＶＬセグメントがベクター内のＣＬセグメントに作動可能に連結するように、望ましいアイソタイプの重鎖定常領域と軽鎖定常領域を既にコードする発現ベクターにそれらを挿入することによって、任意の抗体アイソタイプの完全長抗体遺伝子を作製することができる。追加的または代替的に、組換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を容易にするシグナルペプチドをコードすることができる。シグナルペプチドが抗体鎖遺伝子のアミノ末端とインフレームで連結するように、抗体鎖遺伝子をベクターにクローニングすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドまたは異種シグナルペプチド（すなわち、非免疫グロブリンタンパク質由来のシグナルペプチド）であってよい。抗体鎖遺伝子以外に、本開示の組換え発現ベクターは、宿主細胞中で抗体鎖遺伝子の発現を調節する制御配列を有する。用語「制御配列」は、抗体鎖遺伝子の転写または翻訳を調節する、プロモーター、エンハンサーおよび他の発現調節エレメント（例えば、ポリアデニル化シグナル）を含むものとする。このような制御配列は、例えばGoeddel(Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA1990)中に記載されている。制御配列の選択を含めた発現ベクターの設計は、例えば形質転換する宿主細胞の選択、望ましいタンパク質の発現レベルなどの要因に依存し得ることは当業者によって理解される。哺乳動物宿主細胞発現に関する制御配列には、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、サルウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス後期主要プロモーター（ＡｄＭＬＰ））、およびポリオーマ由来のプロモーターおよび／またはエンハンサーなどの、哺乳動物細胞中で高レベルのタンパク質発現を誘導するウイルスエレメントがある。あるいは、ユビキチンプロモーターまたはＰ−グロビンプロモーターなどの、非ウイルス制御配列を使用することができる。他にさらに、ＳＶ４０��期プロモーター由来の配列とヒトＴ細胞白血病ウイルス１型の長鎖末端反復単位を含有するＳＲａプロモーター系などの、異なる供給源由来の配列で構成される制御エレメント（Takebe, Y.et al., 1988 Mol.Cell.Biol.8:466-472）。
【０２８９】
抗体鎖遺伝子および制御配列以外に、組換え発現ベクターは、宿主細胞中のベクターの複製を制御する配列（例えば、複製起点）などの別の配列、および選択マーカー遺伝子を有することができる。選択マーカー遺伝子は、その中にベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，６３４，６６５号および同第５，１７９，０１７号参照）。例えば典型的には、選択マーカー遺伝子は、その中にベクターが導入された宿主細胞において、Ｇ４１８、ヒグロマイシンまたはメトトレキサートなどの薬剤に対する耐性をもたらす。選択マーカー遺伝子には、（メトトレキサート選択／増幅でｄｈｆｒ−宿主細胞において使用するための）ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子および（Ｇ４１８選択に関する）ｎｅｏ遺伝子がある。
【０２９０】
軽鎖および重鎖の発現用に、重鎖および軽鎖をコードする発現ベクター（複数可）を、標準的な技法によって宿主細胞にトランスフェクトする。様々な型の用語「トランスフェクション」は、例えばエレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿法、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションなどの、原核生物または真核生物宿主細胞中への外来ＤＮＡの導入のために一般に使用される広く様々な技法を包含するものとする。原核生物または真核生物宿主細胞中のいずれかにおいて、本開示の抗体を発現させることが理論上可能である。真核生物細胞中、特に哺乳動物宿主細胞中での抗体の発現を論じる。このような真核生物細胞、および特に哺乳動物細胞は、適切にフォールディングされ免疫学的活性がある抗体を構築し分泌する可能性が原核生物細胞より高いからである。原核生物における抗体遺伝子の発現は、高収率の活性抗体の産生に関して無効であることが報告されている（Boss, M.A. and Wood, C.R., 1985 Immunology Today6:12-13）。
【０２９１】
本開示の組成物中に含まれる組換え抗体を発現させるための哺乳動物宿主細胞には、（例えばR.J.Kaufman and P.A.Sharp, 1982 Mol.Biol.159:601-621中に記載されたようなＤＨ  ＦＲ選択マーカーを使用する、Urlaub and Chasin, 1980 Proc. Natl. Acad. Sci. USA77:4216-4220に記載されたｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含めた）チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）、ＮＳＯミエローマ細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞がある。一実施形態では、宿主細胞はＣＨＯ  Ｋ１ＰＤ細胞である。特に、ＮＳＯミエローマ細胞を用いる使用に関しては、別の発現系は、ＷＯ８７／０４４６２、ＷＯ８９／０１０３６およびＥＰ３３８，８４１中に示されたＧＳ遺伝子発現系である。本開示の組成物中に含まれる組換え抗体を発現させるための哺乳動物宿主細胞は、例えばＵＳ６，９４６，２９２Ｂ２中に記載されたような、ＦＵＴ８遺伝子発現に欠陥がある哺乳動物細胞系を含む。抗体遺伝子をコードする組換え発現ベクターを哺乳動物宿主細胞に導入するとき、宿主細胞中での抗体の発現、または宿主細胞が増殖する培養培地中への抗体の分泌を可能にするのに十分な時間の間、宿主細胞を培養することによって抗体が産生される。標準的なタンパク質精製法を使用して、培養培地から抗体を回収することができる。
【０２９２】
イムノコンジュゲート
別の態様では本開示は、細胞毒素、薬剤（例えば、免疫抑制剤）または放射性毒素などの治療成分とコンジュゲートした、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、またはその断片を含む組成物を特徴とする。このようなコンジュゲートを本明細書では「イムノコンジュゲート」と呼ぶ。１つまたは複数の細胞毒素を含むイムノコンジュゲートは「イムノトキシン」と呼ぶ。細胞毒素または細胞毒性物質は、細胞に有害な（例えば殺傷する）任意の作用物質を含む。
【０２９３】
当技術分野で利用可能なリンカー技術を使用して、細胞毒素を本開示の抗体にコンジュゲートさせることが可能である。抗体に細胞毒素をコンジュゲートさせるために使用されているリンカータイプの例には、ヒドラゾン、チオエーテル、エステル、ジスルフィド、およびペプチド含有リンカーがあるが、これらだけには限られない。例えばリソソーム区画内の低いｐＨによる切断の影響を受けやすい、または例えばカテプシン（例えば、カテプシンＢ、Ｃ、Ｄ）などの腫瘍組織内で優先的に発現されるプロテアーゼなどの、プロテアーゼによる切断の影響を受けやすい、リンカーを選択することができる。
【０２９４】
細胞毒素、リンカーの型、および抗体と治療剤を結合させるための方法のさらなる考察に関しては、Saito, G.et al., 2003 Adv. Drug Deliv. Rev. 55:199-215; Trail, P.A. et al., 2003 Cancer Immunol.Immunother.52:328-337; Payne, G. 2003 Cancer Cell 3:207-212;Allen, T.M., 2002 Nat.Rev.Cancer2:750-763;Pastan, I.and Kreitman, R.J., 2002 Curr.Opin.Investig.Drugs3:1089-1091;Senter, P.D.およびSpringer, C.J., 2001 Adv.Drug Deliv.Rev.53:247-264も参照。
【０２９５】
本開示の組成物中に含まれる抗体を放射性同位体とコンジュゲートさせて、ラジオイムノコンジュゲートとも呼ばれる細胞毒性放射性製剤を生成することも可能である。診断または治療に使用するために抗体とコンジュゲートさせることが可能な放射性同位体の例には、ヨウ素１３１、インジウム１１１、イットリウム９０、およびルテチウム１７７があるが、これらだけには限られない。ラジオイムノコンジュゲートを調製するための方法は当技術分野で確立している。Ｚｅｖａｌｉｎ（商標）（ＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）およびＢｅｘｘａｒ（商標）（Ｃｏｒｉｘａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含めた、数例のラジオイムノコンジュゲートが市販されており、本開示の抗体を使用して、類似の方法を使用してラジオイムノコンジュゲートを調製することができる。
【０２９６】
本開示の組成物中に含まれる抗体コンジュゲートを使用して所与の生物反応を修飾することができ、薬剤成分は古典的な化学治療剤に限られるとは解釈すべきでない。例えば薬剤成分は、望ましい生物活性を有するタンパク質またはポリペプチドであってよい。このようなタンパク質は、例えばアブリン、リシンＡ、シュードモナスエキソトキシン、またはジフテリア毒素などの酵素活性毒素、またはその活性断片、腫瘍壊死因子もしくはインターフェロン−γなどのタンパク質、または、例えば、リンホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳＦ」）、もしくは他の増殖因子などの生物反応修飾物質を含むことができる。
【０２９７】
抗体とこのような治療成分をコンジュゲートさせるための技法はよく知られており、例えば、Amon et al., 「Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy」、Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al.(eds.), pp.243-56(Alan R. Liss, Inc.1985)中、Hellstrom et al., 「Antibodies For Drug Delivery」、Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987)中、Thorpe, 「Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review」、Monoclonal Antibodies '84:Biological And Clinical Applications, Pinchera et al.(eds.), pp.475-506(1985)中、「Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy」、Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al.(eds.), pp.303-16(Academic Press 1985)中、およびThorpe et al., 「The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates」、Inmunol. Rev., 62:119-58(1982)を参照。
【０２９８】
二重特異性分子
別の態様において本開示は、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、またはその断片を含む、二重特異性または多重特異性分子を含む組成物を特徴とする。本開示の組成物中に含まれる抗体、またはその抗原結合領域を誘導体化、または別の機能性分子、例えば別のペプチドもしくはタンパク質（例えば、受容体に対する別の抗体もしくはリガンド）と連結させて、少なくとも２つの異なる結合部位もしくは標的分子と結合する二重特異性分子を作製することが可能である。実際、本開示の抗体を誘導体化、または２つ以上の他の機能性分子と連結させて、３つ以上の異なる結合部位および／または標的分子と結合する多重特異性分子を作製することが可能であり、このような多重特異性分子も、本明細書で使用する用語「二重特異性分子」によって包含されるものとする。本開示の二重特異性分子を作製するため、本開示の抗体を、別の抗体、抗体断片、ペプチドまたは結合模倣体などの１つまたは複数の他の結合分子と（例えば、化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合またはその他によって）機能的に連結させることが可能であり、したがって二重特異性分子が生成する。
【０２９９】
したがって本開示は、ＡｃｔＲＩＩＢに対する少なくとも１つの第一結合特異性および第二標的エピトープに対する第二結合特異性を含む、二重特異性分子を含む組成物を含む。例えば第二標的エピトープは、第一標的エピトープと異なるＡｃｔＲＩＩＢの別のエピトープであってよい。
【０３００】
さらに、二重特異性分子が多重特異的である組成物に関しては、分子は第一および第二標的エピトープ以外に、第三結合特異性をさらに含むことができる。
【０３０１】
一実施形態では、開示する組成物の二重特異性分子は、結合特異性として、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは単鎖Ｆｖを含めた、少なくとも１つの抗体、またはその抗体断片を含む。抗体は、軽鎖もしくは重鎖二量体、またはＦｖなどのそれらの任意の最小断片、またはその全容が参照として本明細書に明確に組み込まれるLadner et al.の米国特許第４，９４６，７７８号中に記載された単鎖構築物であってもよい。
【０３０２】
二重特異性分子において利用することができる他の抗体は、マウス、キメラおよびヒト化モノクローナル抗体である。
【０３０３】
本開示の組成物中に含まれる二重特異性分子は、当技術分野で知られている方法を使用して、構成成分の結合特異性をコンジュゲートすることによって調製することができる。例えば、各々の結合特異性の二重特異性分子を別々に生成させ、次いで互いにコンジュゲートさせることが可能である。結合特異性がタンパク質またはペプチドであるとき、様々なカップリングまたは架橋剤を共有結合に使用することができる。架橋剤の例には、プロテインＡ、カルボジイミド、Ｎ−スクシンイミジル−Ｓ−アセチル−チオアセテート（ＳＡＴＡ）、５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴＮＢ）、ｏ−フェニレンジマレイミド（ｏＰＤＭ）、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、およびスルホスクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−ｌ−カルボキシレート（スルホ−ＳＭＣＣ）がある（例えば、Karpovsky et al., 1984 J.Exp.Med.160:1686;Liu, MA et al., 1985 Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:8648参照）。他の方法には、Paulus, 1985 Behring Ins.Mitt.No.78, 118-132;Brennan et al., 1985 Science229:81-83)、およびGlennie et al., 1987 J.Immunol.139:2367-2375)中に記載された方法がある。コンジュゲーティング剤は、いずれもＰｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）から入手可能なＳＡＴＡとスルホ−ＳＭＣＣである。
【０３０４】
結合特異性が抗体であるとき、２つの重鎖のＣ末端ヒンジ領域のスルフヒドリル結合によって、それらをコンジュゲートさせることが可能である。特定の実施形態では、コンジュゲーション前に、奇数、例えば１個のスルフヒドリル残基を含有するようにヒンジ領域を修飾する。
【０３０５】
あるいは、両方の結合特異性が同じベクターでコードされ、同じ宿主細胞で発現および構築される可能性がある。二重特異性分子がｍＡｂ×ｍＡｂ、ｍＡｂ×Ｆａｂ、Ｆａｂ×Ｆ（ａｂ’）２またはリガンド×Ｆａｂ融合タンパク質である場合、この方法は特に有用である。本開示の組成物中に含まれる二重特異性分子は、１つの単鎖抗体と結合決定基を含む単鎖分子、または２つの結合決定基を含む単鎖二重特異性分子であってよい。二重特異性分子は、少なくとも２つの単鎖分子を含むことができる。二重特異性分子を調製するための方法は、例えば米国特許第５，２６０，２０３号、同第５，４５５，０３０号、同第４，８８１，１７５号、同第５，１３２，４０５号、同第５，０９１，５１３号、同第５，４７６，７８６号、同第５，０１３，６５３号、同第５，２５８，４９８号、および同第５，４８２，８５８号中で記載されている。
【０３０６】
二重特異性分子とそれらの特異的標的との結合は、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＦＡＣＳ分析、バイオアッセイ（例えば、増殖阻害）、またはウエスタンブロットアッセイによって確認することができる。これらのアッセイの各々は、対象とする特定の複合体に特異的な標識試薬（例えば抗体）を利用することによって、対象とするタンパク質−抗体複合体の存在を一般に検出する。
【０３０７】
多価抗体
別の態様において本開示は、ＡｃｔＲＩＩＢと結合する開示する抗体の少なくとも２つの同一または異なる抗原結合部分を含む、多価抗体を含む組成物に関する。一実施形態では多価抗体は、少なくとも２つ、３つまたは４つの抗体の抗原結合部分をもたらす。抗原結合部分は、タンパク質融合または共有結合または非共有結合を介して１つに連結させることが可能である。あるいは、二重特異性分子に関する連結法が記載されている。様々な実施形態において、組成物は、（例えば、１個、２個または数個の抗原と結合することができる）一価、二価、もしくは多価、および／または（例えば、１個、２個または数個の異なる抗原と結合することができる結合領域（複数可）を有する）一種、二種、もしくは多種特異的であってよい。組成物は、これらの任意の組合せ、例えば（１個の抗原もしくはエピトープと結合する１個の結合領域を有する）一価と一種特異的、または（そのそれぞれが異なる抗原もしくはエピトープと結合する２個の結合領域を有する）二価と二種特異的、または（そのそれぞれが同じ抗原もしくはエピトープと結合する２個の結合領域を有する）二価と一種特異的、または（全てが同じ抗原もしくはエピトープと結合する数個の結合領域を有する）多価と一種特異的、または（数個の異なる抗原もしくはエピトープと結合する数個の結合領域を有する）多価と多種特異的であってよい。
【０３０８】
医薬組成物
別の態様において本開示は、薬学的に許容される担体と共に製剤化した、前に記載した抗体／モノクローナル抗体、またはその抗原結合部分（複数可）の１つまたは組合せを含有する、組成物、例えば医薬組成物を提供する。このような組成物は、（例えば、２つ以上の異なる）記載した抗体、またはイムノコンジュゲートもしくは二重特異性分子の１つまたは組合せを含むことができる。例えば、本開示の医薬組成物は、標的抗原において異なるエピトープと結合する抗体、または相補的活性を有する抗体の組合せを含むことができる。
【０３０９】
本開示の医薬組成物は、併用療法において、すなわち他の作用物質と併用して投与することもできる。例えば併用療法は、少なくとも１つの他の筋肉重量／強度増強剤、例えばＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、またはＩＧＦ−１もしくはＩＧＦ−２の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢと結合するがそれを活性化しないミオスタチン擬似タンパク質、β２アゴニスト、Ｇｈｒｅｌｉｎアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／模倣体またはフォリスタチンと併用する、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含むことができる。併用療法において使用することができる治療剤の例は、本開示の抗体の使用に関するセクションで、以下にさらに詳細に記載する。
【０３１０】
本明細書で使用する「薬学的に許容される担体」は、生理的に適合性がある、任意および全ての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。担体は、（例えば注射または注入による）静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄または上皮投与、好ましくは静脈内注射または注入に適していなければならない。投与の経路に応じて、活性化合物、すなわち抗体、イムノコンジュゲート、または二重特異性分子を材料でコーティングして、化合物を不活性化し得る酸の作用および他の天然条件から化合物を保護することができる。
【０３１１】
本開示の医薬組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容される塩を含むことができる。「薬学的に許容される塩」は、親化合物の望ましい生物活性を保持し、いかなる望ましくない毒性効果をも与えない塩を指す（例えば、Berge, S.M., et al., 1977 J.Pharm.Sci.66:1-19参照）。このような塩の例には、酸付加塩および塩基付加塩がある。酸付加塩には、例えば塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、亜リン酸などの無毒な無機酸由来、ならびに例えば脂肪族モノ−およびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸などの無毒な有機酸由来の塩がある。塩基付加塩には、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなどのアルカリ土類金属由来、ならびに例えばＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカインなどの無毒な有機アミン由来の塩がある。
【０３１２】
本開示の医薬組成物は、薬学的に許容される抗酸化剤を含むこともできる。薬学的に許容される抗酸化剤の例には、例えばアスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤、および例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート剤がある。
【０３１３】
本開示の医薬組成物において利用することができる適切な水性および非水性担体の例には、水、エタノール、（例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの）ポリオール、およびこれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルがある。例えばレシチンなどのコーティング物質の使用によって、分散剤の場合は必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、適切な流動性を維持することができる。
【０３１４】
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などの補助剤を含有することもできる。微生物の存在の予防は、前述の滅菌手順と、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの、様々な抗菌剤および抗真菌剤の封入の両方によって確実にすることができる。例えば糖、塩化ナトリウムなどの等張剤を組成物中に含めることが望ましい可能性もある。さらに、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延する作用物質の封入によって、注射用剤形の長期の吸収をもたらすことができる。薬学的に許容される担体には、滅菌水溶液または分散剤、および滅菌注射溶液または分散剤の即時調製物用の滅菌粉末がある。薬学的活性物質用のこのような媒体および作用物質の使用は、当技術分野で知られている。いかなる従来の媒体または作用物質も活性化合物と不適合である場合を除いて、本開示の医薬組成物におけるその使用が企図される。補助活性化合物を組成物中に取り込むこともできる。
【０３１５】
典型的には治療用組成物は、製造および保存の条件下において滅菌および安定状態でなければならない。組成物は、高い薬剤濃度に適した溶液、マイクロエマルジョン、リポソーム、または他の規則的構造として製剤化することができる。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、および液状ポリエチレングリコールなど）、ならびにこれらの適切な混合物を含有する溶媒または分散媒であってよい。例えばレシチンなどのコーティングの使用によって、分散剤の場合は必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、適切な流動性を維持することができる。多くの場合、等張剤、例えば糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムを組成物中に含めることができる。吸収を遅延する作用物質、例えばモノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物中に封入することによって、注射用組成物の長期の吸収をもたらすことができる。
【０３１６】
滅菌注射溶液は、必要量の活性化合物を、必要に応じて前に列挙した作用物質の１つまたは組合せを含む適切な溶媒中に取り込み、次に滅菌精密濾過によって調製することができる。一般に、基礎分散媒および前に列挙した作用物質由来の他の必要な作用物質を含有する滅菌ビヒクル中に活性化合物を取り込むことによって、分散剤を調製する。滅菌注射溶液の調製物用の滅菌粉末の場合、調製の方法は、事前に滅菌濾過したその溶液から活性剤および任意の他の望ましい作用物質の粉末を生成する、真空乾燥および凍結−乾燥（凍結乾燥法）である。
【０３１７】
担体物質と併用して単一剤形をもたらすことができる活性剤の量は、治療する対象、および個々の投与形式に応じて変わり得る。担体物質と併用して単一剤形をもたらすことができる活性剤の量は、一般に治療効果をもたらす組成物の量である。一般に１００パーセント中で、この量は、薬学的に許容される担体と併用して、約０．０１パーセント〜約９９パーセントの活性剤、約０．１パーセント〜約７０パーセント、または約１パーセント〜約３０パーセントの活性剤の範囲であり得る。
【０３１８】
投与レジメンを調整して、最適な望ましい応答（例えば、治療応答）をもたらす。例えば、単回ボーラスを投与することができ、数回の分割用量を経時的に投与することができ、または治療状況の緊急性によって示されるとき、用量を比例的に低下または増大することができる。投与のしやすさおよび用量の均一性のため、単位剤形で非経口組成物を製剤化することは非常に有利である。本明細書で使用する単位剤形は、治療する対象に関する単回用量として適した物理的に別個の単位を指し、それぞれの単位は、必要な医薬担体と共に望ましい治療効果をもたらすと計算された所定量の活性化合物を含有する。本開示の単位剤形に関する仕様は、活性化合物の独自の特性および得られる特定の治療効果、ならびに個体の感受性を治療するような活性化合物の配合の分野における固有の制約によって示され、これらに直接依存する。
【０３１９】
本開示に従い使用するための抗体を含む組成物の投与に関して、抗体用量は、約０．０００１〜約１００ｍｇ／宿主体重１ｋｇ、およびさらに通常は約０．０１〜約３０ｍｇ／宿主体重１ｋｇの範囲である。例えば用量は、約１ｍｇ／体重１ｋｇ、約３ｍｇ／体重１ｋｇ、約５ｍｇ／体重１ｋｇまたは約１０ｍｇ／体重１ｋｇ、約１〜１０ｍｇ／体重１ｋｇの範囲内、例えば約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０ｍｇ／体重１ｋｇを、好ましくは４週毎に一回である。このような投与は静脈内に実施することが好ましい。あるいは、皮下に投与を実施する。
【０３２０】
本開示の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、例えばビマグルマブに関する投与レジメンは、約１ｍｇ／体重１ｋｇまたは約３ｍｇ／体重１ｋｇまたは約１０ｍｇ／体重１ｋｇで４週毎に一回の静脈内投与を含む。
【０３２１】
好ましいことに、本開示の組成物は孤発性封入体筋炎の治療において使用するためのものである。
【０３２２】
具体的な一実施形態では、孤発性封入体筋炎に罹患した患者の身体機能および運動性が改善される。
【０３２３】
具体的な一実施形態では、孤発性封入体筋炎に罹患した患者の嚥下困難または嚥下障害が改善される。
【０３２４】
具体的な一実施形態では、孤発性封入体筋炎に罹患した患者の上肢筋力が改善される。
【０３２５】
具体的な一実施形態では、孤発性封入体筋炎に罹患した患者の転倒発生率または転倒のリスクが低減される。
【０３２６】
幾つかの方法では、異なる結合特異性を有する２つ以上のモノクローナル抗体が本開示の組成物中に含まれ、したがって同時に投与すると、その場合、投与するそれぞれの抗体の用量は示す範囲内にある。抗体は通常複数回投与する。１回投与間の間隔は、例えば週に１回、１カ月に１回、３カ月毎、６カ月毎または１年に１回であってよい。患者における標的抗原に対する抗体の血中レベルの測定によって示されるように、間隔は不定期であってもよい。用量を調整して幾つかの方法では約１〜約１０００μｇ／ｍｌ、および幾つかの方法では約２５〜約３００μｇ／ｍｌの血漿中抗体濃度を得る。例えば、本開示のＡｃｔＲＩＩ抗体は抗ミオスタチン抗体と同時投与することが可能である。
【０３２７】
用量および頻度は、患者における抗体の半減期に応じて変わる。一般に、ヒト抗体が最も、次にヒト化抗体、キメラ抗体、および非ヒト抗体が長い半減期を示す。投与の用量および頻度は、治療が予防的または療法的であるかどうかに応じて変えることができる。予防用途では、比較的少ない用量を、長時間にわたり比較的低頻度の間隔で投与する。一部の患者には、その生涯の残り期間にわたり治療を施し続ける。療法用途では、疾患の進行が低減もしくは終了するまで、または患者が疾患症状の部分的もしくは完全な改善を示すまで、比較的短い間隔での比較的高用量が時折必要とされる。その後、患者に予防的レジメを施すことができる。
【０３２８】
「治療有効量」の本開示の組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体の投与は、疾患症状の重症度の低下、無疾患症状期の頻度および期間の増大、または疾患の苦痛が原因の欠陥もしくは身体障害の予防、すなわち、筋肉重量および／もしくは強度の増大をもたらすことができる。
【０３２９】
急速な放出に対して化合物を保護する担体を用いて、インプラント、経皮パッチ、およびマイクロカプセル化送達系を含めた徐放性製剤などの、活性化合物を調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの、生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。このような製剤を調製するための多くの方法が特許されており、または当業者には一般に知られている。例えば、Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R.Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978参照。
【０３３０】
治療用組成物は、当技術分野で知られる医療用デバイスを用いて投与することができる。
【０３３１】
本開示の使用および方法
本開示の組成物および開示する抗体には治療上の有用性がある。それらは孤発性封入体筋炎の治療、または孤発性封入体筋炎に冒された患者の状態の改善、または孤発性封入体筋炎と関連した症状の低減に対して影響があるからである。
【０３３２】
本明細書で使用する、用語「対象」または「個体」はヒトおよび非ヒト動物を含むものとする。非ヒト動物は、全ての脊椎動物、例えば哺乳動物および非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ニワトリ、両生類、および爬虫類などを含む。
【０３３３】
したがって、本開示はさらに、本開示の組成物および開示するミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対する抗体、例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８が、ＡｃｔＲＩＩの機能を阻害、すなわちアンタゴナイズし、それによって孤発性封入体筋炎の緩和をもたらす治療法に関する。本開示は、治療有効量のミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体、例えばＢＹＭ３３８、または本開示の組成物を患者に投与することを含む、孤発性封入体筋炎に罹患した患者を治療する方法を提供する。
【０３３４】
本開示の治療方法において使用することができる、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８の例は、前で詳細に開示または記載したものである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ抗体（例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８）が本明細書で開示する本発明の組成物中に含まれる。
【０３３５】
本開示はさらに、孤発性封入体筋炎を治療するための医薬品の製造における、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばＢＹＭ３３８の使用に関する。
【０３３６】
さらなる実施形態では、患者は以前の治療に応答性がなかった患者であってよい。例えば患者は、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、またはＩＧＦ−１もしくはＩＧＦ−２の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢと結合するがそれを活性化しないミオスタチン擬似タンパク質、β２アゴニスト、Ｇｈｒｅｌｉｎアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／模倣体またはフォリスタチンを用いた治療に応答性がなかった可能性がある。治療に対する患者の応答性を測定する簡潔な方法は、患者が既知の高さの階段を上るのに要する時間を計測し、治療前後でその結果を比較することであり得る。
【０３３７】
ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８は、単一活性剤として、例えばアジュバントとして、または他の薬剤、例えばＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、またはＩＧＦ−１もしくはＩＧＦ−２の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢと結合するがそれを活性化しないミオスタチンデコイタンパク質、β２アゴニスト、Ｇｈｒｅｌｉｎアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／模倣体もしくはフォリスタチンと組合せて、またはそれらと併用して投与することができる。例えば、本開示のアンタゴニストは、ＷＯ２００７／１４６６８９中に開示されたようにＩＧＦ−１模倣体と併用して使用することができる。
【０３３８】
前述の記載に従い、他のさらなる態様では、本開示は、治療有効量のミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩもしくは結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８、およびＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、またはＩＧＦ−１もしくはＩＧＦ−２の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩと結合するがそれを活性化しないミオスタチンデコイタンパク質、β２アゴニスト、Ｇｈｒｅｌｉｎアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／模倣体もしくはフォリスタチンである少なくとも１つの第二の薬剤物質を例えば同時にまたは順次に共投与することを含む、前に定義した方法または使用を提供する。
【０３３９】
キット
本発明は、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子（例えば、ミオスタチン抗体またはその抗原結合断片、例えばビマグルマブまたはＢＹＭ３３８）またはミオスタチン受容体（すなわち、ＡｃｔＲＩＩＢ受容体）結合分子（例えば、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体またはその抗原結合断片）（例えば、液体もしくは凍結乾燥型）、または（前に記載した）ミオスタチンアンタゴニストを含む医薬組成物を含み得るキットも包含する。さらに、このようなキットは、ミオスタチンアンタゴニストを投与するための手段（例えば、シリンジおよびバイアル、予め充填したシリンジ、予め充填したペン）および使用説明書を含み得る。これらのキットは、例えば封入ミオスタチンアンタゴニスト、例えばＢＹＭ３３８と併用して送達するための（前に記載した）他の治療剤を含有することができる。
【０３４０】
語句「投与するための手段」を使用して、予め充填したシリンジ、バイアルおよびシリンジ、インジェクションペン、オートインジェクター、静脈内点滴用装置およびバッグ、ポンプなどだけには限られないが、これらを含めた、患者に薬剤を全身投与するための任意の利用可能な道具を示す。このようなアイテムを用いて、患者は薬剤を自己投与（すなわち、彼ら自身で薬剤を投与する）することができ、または医師が薬剤を投与することができる。通常キットの各構成成分は個別の容器内に封入されており、全ての様々な容器は使用説明書と共に単一のパッケージ内に存在する。
配列
【０３４１】
【表１−１】
2016528247.tif 000002
【０３４２】
【表１−２】
2016528247.tif 000003
【０３４３】
【表１−３】
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【０３４４】
【表１−４】
2016528247.tif 000005
【０３４５】
【表１−５】
2016528247.tif 000006
【０３４６】
【表１−６】
2016528247.tif 000007
【０３４７】
【表１−７】
2016528247.tif 000008
【０３４８】
【表１−８】
2016528247.tif 000009
【０３４９】
【表１−９】
2016528247.tif 000010
【０３５０】
【表１−１０】
2016528247.tif 000011
【０３５１】
【表１−１１】
2016528247.tif 000012
【０３５２】
【表１−１２】
2016528247.tif 000013
【０３５３】
【表１−１３】
2016528247.tif 000014
【０３５４】
【表１−１４】
2016528247.tif 000015
【０３５５】
【表１−１５】
2016528247.tif 000016
【０３５６】
【表１−１６】
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【０３５７】
【表１−１７】
2016528247.tif 000018
【０３５８】
【表１−１８】
2016528247.tif 000019
【０３５９】
開示する方法、治療、レジメン、使用およびキットの幾つかの実施形態は、ミオスタチンアンタゴニスト、例えばミオスタチン結合分子またはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子を利用する。さらなる実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ結合分子はＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体である。
【０３６０】
開示する方法、治療、レジメン、使用およびキットの幾つかの実施形態では、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、
ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、
およびｂ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）、
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）、
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）、
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）、
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）、
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）、
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）、または
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）および配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープと結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体からなる群から選択され、抗体は約２ｐＭのＫＤを有する。
【０３６１】
開示する方法、治療、レジメン、使用およびキットの幾つかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体はヒト抗体である。
【０３６２】
開示する方法、治療、レジメン、使用およびキットの幾つかの実施形態では、抗体はビマグルマブまたはＢＹＭ３３８である。
【０３６３】
本開示の１つまたは複数の実施形態の詳細は前に添付した記載事項中に言及する。本明細書中に記載したものと類似または同等の任意の方法および材料を本開示の実践または試験において使用することはできるが、好ましい方法および材料はここで記載する。本開示の他の特徴、目的、および利点は記載事項から、および特許請求の範囲から明らかとなる。明細書および添付の特許請求の範囲内では、文脈が明らかに他のことを示さない限り単数形は複数形を含む。他に定義しない限り、本明細書中で使用する全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者により一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書中で引用した全ての特許および刊行物は参照により組み込まれている。本開示の好ましい実施形態をより完全に例示するため以下の実施例を示す。これらの実施例は、添付の特許請求の範囲によって定義する、開示する特許の主題の範囲を制限するものとは決して解釈すべきでない。
【実施例】
【０３６４】
一般的な方法
ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、（ｉ）機能アッセイ、（ｉｉ）レポーター遺伝子アッセイ（ＲＧＡ）、（ｉｉｉ）ＨＥＫ２９３Ｔ／１７細胞系の培養、（ｉｖ）ミオスタチン誘導型ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイ、（ｖ）特異性ＥＬＩＳＡ、（ｖｉ）ＡｃｔＲＩＩＢ／Ｆｃ−ミオスタチン結合相互作用ＥＬＩＳＡ、（ｖｉｉ）ｈＡｃｔＲＩＩＢおよびｈＡｃｔＲＩＩＡ発現細胞におけるＦＡＣＳ滴定、（ｖｉｉｉ）初代ヒト骨格筋細胞との結合、（ｉｘ）表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）を使用する選択した抗ヒトＡｃｔＲＩＩＢＦａｂのアフィニティー決定、（ｘ）ＣＫアッセイ、（ｘｉ）動物モデル、（ｘｉｉ）処置プロトコール、（ｘｉｉｉ）統計解析、（ｘｉｉｉｉ）パンニング、（ｘｖ）抗体の同定および特徴付け、（ｘｖｉ）第一回アフィニティー成熟由来の抗体の最適化、（ｘｖｉｉ）アフィニティー成熟Ｆａｂ（第一回成熟）のＩｇＧ２転換、（ｘｖｉｉｉｉ）第二回アフィニティー成熟、（ｘｘ）ＩｇＧ２転換およびＩｇＧ２（第二回成熟）の特徴付け、（ｘｘｉ）ｉｎ  ｖｉｖｏマウス試験における抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の特徴付け、（ｘｘｉｉ）ＳＥＴによるアフィニティーの確認、（ｘｘｉｉｉ）交差遮断試験および（ｘｘｉｖ）ＷＯ２０１０／１２５００３中に記載されたエピトープマッピングの詳述および技術のような、それらの特徴付けおよびそれらに関連する方法。
【０３６５】
試験設計
これは多数の医療センターでの、ランダムな、二重盲検、プラセボ対照、中枢４群用量のフェーズＩＩｂ／ＩＩＩ臨床試験の所見である。孤発性封入体筋炎（ｓＩＢＭ）を有する合計約２４０の対象を１：１：１：１の比で４つの臨床試験群（Ａ、Ｂ、Ｃ、またはＤ）の１つに無作為に分ける（図２）。
【０３６６】
４００メートル以上のベースライン６分間歩行距離があった患者の最大２０％を無作為に分ける。
【０３６７】
それぞれの対象に関して、試験は、最大５日間のベースライン往診を含む最大２８日間のスクリーニング期間、５２週間の治療期間、不定の０〜５２週間の治療維持期間、および２８日間の無治療フォローアップ期間からなる。
【０３６８】
この試験は４つの試験期間を含む：
１．スクリーニング期間、最大２８日間（第−２８日〜第−１日）、その間試験適性を確認し、適切な場合、未承認の投薬法は対象に施さない。スクリーニング期間は、スクリーニング往診とベースライン往診からなる。この期間中、対象には如何なる試験投薬も施さない。
【０３６９】
スクリーニング往診、往診は無作為化前に２８〜６日行うことができる（第−２８日〜第−６日）。何らかの具体的試験手順を実行する前にインフォームドコンセントを得なければならない。組み入れ基準／除外基準に見合う対象に、身体検査、ＥＣＧ、バイタルサイン、標準的臨床検査評価（血液病学、血液化学、尿検査）を含めた安全性アセスメントを行う。
【０３７０】
ベースライン往診、試験薬剤の投与開始前に必要とされる全てのアセスメントは、この５日間の時間枠（第−５日〜第−１日）中に実施する。スクリーニング往診時に安全性要件および組み入れ基準／除外基準に見合う対象には、ベースラインアセスメントのため現場に戻るよう依頼する。（６ＭＷＤを含めた）ベースライン評価項目をチェックした後、患者が試験に適していることを再度確認し、第１日に無作為化のため患者に現場に戻るよう依頼する。
【０３７１】
２．治療期間、（一定用量投与前に）治療期間を第１日〜第５２週と定義する。第１日の往診時に、４つの平行治療群の１つに対象を無作為に分ける：
治療群Ａ、ＢＹＭ３３８を１０ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入
治療群Ｂ、ＢＹＭ３３８を３ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入
治療群Ｃ、ＢＹＭ３３８を１ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入
治療群Ｄ、プラセボを４週毎に静脈内注入として投与
【０３７２】
試験群に応じて、対象には４週毎に、１３用量のＢＹＭ３３８を施す、または静脈内注入として適合プラセボを投与する。最初の試験薬剤投与は第１日に行い、全てのベースライン安全性評価の結果は投薬前に入手しなければならない。第５２週を含めた全ての後の往診用に、全ての評価は薬剤投与前に実施しなければならない。この治療期間の最終用量投与は第４８週の往診時に行う。安全性、薬力学、薬物動態、バイオマーカーおよび有効性評価のため、４週毎に対象を現場に戻す。
【０３７３】
全ての対象に、この治療期間が続く最終対象がその第４８週投与を終了するまで、第５２週にその最終治療評価を実施し、次いで治療維持期間に移行する。
【０３７４】
この治療期間が続く最終対象がその第４８週投与を終了した後、他の対象には試験薬剤を施さず、かつ
●この治療期間を依然として終了していない対象は、その最終試験薬剤投与後に約２８日間の最終治療（ＥＯＴ）往診を終了しなければならない。
●ＥＯＴ往診を終了した後、これらの対象は直接無治療フォローアップ期間に入る（これらの対象は治療維持期間に入るのに適していない）。
●既に維持期間に入っている対象に関しては、以下参照。
【０３７５】
３．治療維持期間、この期間は患者登録の期間によって定義されるが、（登録期間が５２週を超える場合）最大５２週の期間に限られる。したがって、０〜５２週までの変動期間で、一定用量投与後５２週〜最大１０４週までとして治療維持期間を定義する。
【０３７６】
この治療維持期間中、対象は無作為化で割り当てた治療群に存在し続ける。第５２週で与える投与は治療維持期間の初回投与であり、ＢＹＭ３３８またはプラセボの第１００週まで４週毎の投与が続く。安全性および有効性評価のため４週毎に対象を現場に戻す。
【０３７７】
第１０４週の往診は最終治療維持（ＥＯＭＴ）往診である。全ての往診評価が終了し往診結果をＩｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＩＲＴ）に記録したとき、ＥＯＭＴ往診は終了と考える。
【０３７８】
第５２週を超えた全ての対象に関する治療期間は、治療期間が続く最後の対象がその第４８週投与を施す日によって決定されるが、５２週までに限られる（すなわち、試験における最大合計治療期間は２年）。
【０３７９】
最後の対象がその第４８週投与を施した後、他の対象には試験薬剤を施さず、かつ
●治療維持期間中の全ての対象は、その最後の試験薬剤投与後約２８日で最終治療維持（ＥＯＭＴ）往診を終了しなければならない。
●ＥＯＭＴ往診が終了した後、全ての対象は無治療フォローアップ期間に入る。
【０３８０】
４．治療後フォローアップ期間、２８日の期間で、この期間中、対象には如何なる試験投薬も施さない。最終フォローアップ（ＥＯＦ）往診は各対象の治療期間（治療期間または維持期間）の終了後４週間、および最終試験薬剤投与後８週間で行う。対象が予定通り全試験を終了しているかまたは時期尚早に中断したかどうかとは無関係に、全ての対象に関してＥＯＦ往診を終了しなければならない。この試験を終了した対象は、ｓＩＢＭ患者におけるＢＹＭ３３８の他の長期有効性および安全性データを回収するための、オープンラベル試験に入るのに適している可能性がある。
【０３８１】
試験設計の概略は図３−１中に示し、一方治療維持期間、不定治療期間は図３−２中に表す。詳細な往診および評価スケジュールは表６−１および表６−２中に見ることができる。
【０３８２】
試験設計の原理
ｓＩＢＭ患者における３０ｍｇ／ｋｇのＢＹＭ３３８の一回用量投与に関する、予備臨床データが利用可能である。複数回用量のデータ、および他のＢＹＭ３３８用量に関するデータは、ｓＩＢＭ患者において依然として利用可能ではない。標的患者集団における有効性、薬力学、薬物動態、および主要安全性データに基づき異なるＢＹＭ３３８用量を試験するための一定用量範囲の試験が提案される。この試験の設計はこれらのニーズを満たし、対象の安全性、ならびに除脂肪体重、筋力、筋機能、および運動性に対するＢＹＭ３３８の影響に特に焦点を当てる。この試験の主要評価項目は、第５２週での６分間歩行距離により身体機能および運動性の変化を測定する。
【０３８３】
この二重盲検、プラセボ対照試験は、４週毎に投与される１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｋｇのＢＹＭ３３８の用量間での用量範囲評価を可能にするよう設計する。現在、ｓＩＢＭに関して承認されている治療はない。さらに、ｓＩＢＭ患者が疾患進行の定常過程を逆行するのを手助けし得る利用可能な薬理学的療法は存在しない（Greenberg 2009,Aquarwal and Oddis 2012）。
【０３８４】
ｐＳＭＡＤを介したＴＧＦβシグナル伝達活性の高発現の発見は、ミオスタチンの過剰発現がｓＩＢＭの病状の重要な一部であり得ること、およびしたがってＢＹＭ３３８がこの疾患において有用であり得ることを示唆する。
【０３８５】
ｓＩＢＭの治療に承認されている薬剤および現在のケア標準が存在しないことを考慮して、プラセボ−対照が提案される。プラセボ対照試験は、薬剤によって引き起こされる悪影響と疾患根底または「バックグラウンドノイズ」から生じる悪影響を区別する最大能力となる。プラセボ対照試験は、治験療法の有効性を実証するため、用量反応関係を実証するための最適設定も提供し、対象が原因の改善量の減少または研究者の予想により真の薬剤効果を検出する試験の能力を高めることができる。ｓＩＢＭ患者におけるＢＹＭ３３８の悪影響プロファイルを区別できることは特に重要である。ｓＩＢＭはＢＹＭ３３８に関する最初の徴候であり、今日までＢＹＭ３３８を用いたごく限られたヒトデータが利用されているからである。
【０３８６】
３つの非プラセボ治療群のいずれかに無作為に分けた対象に、少なくとも１３用量のＢＹＭ３３８を４週毎に与える。５２週を超える試験薬剤治療期間は対象毎に変わり、この試験における最小合計治療期間は５２週であり、最大１０４週であり、全ての症例で４週間の無治療フォローアップ期間を続け、この集団内の長期有効性および安全性の評価を可能にする。この試験を設計して、６分間歩行試験により測定した治療効果の発生に関するデータを集める。この試験は、ｓＩＢＭから生じ得る嚥下困難を含めた生活の質に対する、この疾患の影響の測定も含む。
【０３８７】
データベースが信頼できる有効性および安全性対策を保証することが確実になるまで盲検を維持する。標準的運動プログラムが全ての対象によって実施され、様々なＢＹＭ３３８用量の有効性の評価における変動を回避することが理想的である。ｓＩＢＭ集団内の身体機能の広い変動（すなわち非対称性神経筋疾患）のため、資格のある医療セラピストにより各往診時に対象の能力と衰弱の重度を評価するカスタマイズされた、対象特異的な運動の勧めを対象に提供する。対象には、現場の医療セラピストにより対象に安全であると決定された身体活動に従事するよう奨励する。提案された家庭向け運動プログラムを記載したビデオが、対象への運動の勧めの進展をアシストするため医療セラピストに提供される。医療セラピストは、それが対象によって使用されるのが適していると彼／彼女が判断する場合、対象向けビデオのコピーを選択して提供することができる。プラセボ群における運動プログラム自体の影響は依然定義されておらず、有効薬剤を与えた群と相乗作用し得る。
【０３８８】
試験集団は、スクリーニング時の（提案されたＭｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ基準−付録１参照から適合させた）ｓＩＢＭ診断基準を満たす歩行可能なｓＩＢＭ患者からなる。適性対象は、ｓＩＢＭ診断基準（Hilton-Jones et al 2010から適合させたHohlfeld 2011）に従い病理学的に定義または臨床的に定義されたｓＩＢＭ診断結果を有することが必要とされる。
【０３８９】
多くの刊行物が、様々な疾患状態下での健常ボランティアおよび患者における正常未満の身体機能および運動性のマーカーとして、４００ｍの閾値を論じているように、ベースラインで４００ｍ以上の６分間歩行距離があった患者は試験サンプルサイズの２０％を超えない患者を表す（Chetta et al 2006、Troosters et al 1999、Simonsick et al 2008、Chang et al 2004、Enright et al 2003、Enright et al 1998、Kruis et al 2010、Morley et al 2011、Kommuri et al 2010、Villalba et al 2007）。
【０３９０】
３．３  用量／レジメン、投与経路および治療期間の原理
示した用量は、進行中の試験ＣＢＹＭ３３８Ｘ２２０５から近年入手した治療時の結果の考慮を含めて、利用可能な臨床データから作製した推定値に基づいて選択した。
【０３９１】
１４患者（１１有効成分、３プラセボ）に関する試験ＣＢＹＭ３３８Ｘ２２０５からのデータは、一回用量３０ｍｇ／ｋｇのＢＹＭ３３８の静脈内投与が、プラセボと比較して、ＭＲＩによる大腿筋体積（ＴＭＶ）およびＤＸＡによる全身と四肢ＬＢＭのベースラインからの有意な増大を示したことを実証した。さらにこの用量は、薬剤投与後１６週での定量的筋力試験と６分間歩行距離試験に従うと、持続的強度および機能性および運動性向上も誘導した。３０ｍｇ／ｋｇの一回用量は少なくとも８週間の間の効果を示し、１０ｍｇ／ｋｇを用いた反復治療は同様の効果を得る可能性がある。したがって、１０ｍｇ／ｋｇをこの試験における最高用量として選択した。しかしながら、最小有効用量は依然確認されていない。
【０３９２】
この試験では、ＢＹＭ３３８の用量反応関係を理解する目的で長期反復投与の有効性を調べる。この試験で選択した全用量（１０、３、および１ｍｇ／ｋｇ、静脈内）のＢＹＭ３３８を試験し、正常健常ボランティアにおいて充分許容されたことが分かった。
【０３９３】
これらの用量の目的は、１０、３、または１ｍｇ／ｋｇ、静脈内の反復用量が患者に追加的な筋構造および機能的利点をもたらすことができるかどうか、およびアクネまたは不随意筋収縮などの副作用が少ない状態で、低用量がそれが可能かどうか評価することである。
【０３９４】
健常ボランティア（ＣＢＹＭ３３８Ｘ２１０１とＣＢＹＭ３３８Ｘ２１０２）において、大腿筋ＭＲＩ体積は１０ｍｇ／ｋｇと３０ｍｇ／ｋｇの一回用量に関して同等に増大したが、３０ｍｇ／ｋｇの効果は長く続いた。月一投与のＢＹＭ３３８の３反復で、１０ｍｇ／ｋｇの約半分の期間３ｍｇ／ｋｇが完全な受容体占有を引き起こすと考えられるが、健常成人において３ｍｇ／ｋｇと１０ｍｇ／ｋｇでＴＭＶの同等な増大があった。それが３０ｍｇ／ｋｇの用量より頻繁に与えられる場合でさえ、おそらく低いＣｍａｘのため、１０ｍｇ／ｋｇが３０ｍｇ／ｋｇより少ない悪影響を有し得るかどうかは依然として明らかでない。
【０３９５】
要約すると、４週間毎の３ｍｇ／ｋｇと１０ｍｇ／ｋｇは健常ボランティアにおけるＴＭＶを増大する際に有効だったので、したがってｓＩＢＭ患者においても有効であると予想される。
【０３９６】
１ｍｇ／ｋｇの低用量は、一回用量を健常ボランティアに投与した後、２週間を超えるＴＭＶの持続的増大を実証しなかった。しかしながらそれは、ｓＩＢＭ患者はＢＹＭ３３８に対して高い感受性を有する可能性があり、複数回投与するとこの用量は有効性を証明し得るという前提で試験されている。
【０３９７】
２０１０年に神経筋疾患の国際的専門家の会議から生じたコンセンサスペーパーは、疾患に対する治療の影響を適切に評価するため、ｓＩＢＭにおける治療試験は６カ月の長さを超えなければならないことを勧めている（Hilton-Jones et al 2010）。ＥＭＡとＦＤＡの両方が、ｓＩＢＭ試験に関して１２カ月の期間が適切であり、したがって全ての対象に少なくとも５２週の治療を施すことに賛成した。この集団における長期安全性と有効性を評価するため、無作為化から最大３年までの追加データを作成中である。
【０３９８】
可能な限り短期間対象にプラセボ効果を維持することが好ましいが、ｓＩＢＭに関して承認されている治療、およびケア標準は現在存在しない。さらに、ｓＩＢＭがＢＹＭ３３８を用いた記録で予想される最初の指標であることを考慮し、かつｓＩＢＭは慢性的な治療を必要とすると予想されるので、充分な長期安全性データを含む確固たるデータベースを開発することが重要である。したがって、１年間のプラセボ対照試験および追加的維持期間を実施することが妥当である（最大２年間の合計治療期間）。疾患活動性の定期的アセスメントによって、治療群のいずれかにおいて疾患の悪化を経験している対象を、彼ら自身の意思または研究者のアドバイスに基づいて、何時でも試験から除外できることが確実になる。試験の結果に基づいて有効性と安全性を決定した後、有効薬剤を用いた個別のオープンラベル長期試験に関与するよう全ての対象に依頼することを記さなければならない。したがって、５２週で安全性と有効性を決定した後、対象にプラセボ効果はない。現在利用可能なデータはｓＩＢＭ集団におけるＢＹＭ３３８の確かな有効性を実証するには不十分であるが、この試験は、このデータを集めて、試験終了時にｓＩＢＭ集団におけるＢＹＭ３３８の有効性と安全性の両方を伝えるよう設計されている。
【０３９９】
コンパレーターの選択に関する原理
ｓＩＢＭの治療に承認されている薬剤が存在しないことを考慮して、プラセボ−対照が提案される。プラセボ対照試験は、薬剤によって引き起こされる悪影響と疾患根底または「バックグラウンドノイズ」から生じる悪影響を区別する最大能力も提供する。プラセボ対照試験は、治験療法の有効性を実証するため、および用量反応関係を実証するための最適設定も提供し、対象が原因の改善量の減少または研究者の予想により真の薬剤効果を検出する試験の能力を高めることができる。
【０４００】
リスクとベネフィット
終了したフェーズＩ試験からの安全性データは、何らかの特異的安全性リスクまたは懸念または主要事象群の何らかの特定パターンに焦点を当てるわけではない。全体的リスクベネフィットアセスメントの観点から、ＢＹＭ３３８を用いたこの試験設計およびその試験関連リスク（注入、採血、イメージング中の照射への露出）は正当化される。
【０４０１】
今日まで、２１３人の患者と健常ボランティアがビマグルマブを用いた試験に登録されており、静脈内に０．１〜３０ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で一回および複数回１５０人に有効薬剤を与えている。初期臨床データは、健常ボランティアと患者におけるＢＹＭ３３８に関する好ましいベネフィット−リスクプロファイルを支持する。
【０４０２】
健常ボランティアと老齢患者における初回試験からの予備データは、顔面上およびあまり頻繁ではないが背面と胸部上の広汎性アクネが、３０ｍｇ／ｋｇの一回用量を与えた数人の成人において存在し得るという観察結果を示す。ＢＹＭ３３８と皮膚反応性の間の考えられる機械的関連は依然明らかではない。
【０４０３】
３０ｍｇ／ｋｇの静脈内一回用量のＢＹＭ３３８で治療した正常健常ボランティアとｓＩＢＭ患者の約２０％〜４８％において、「筋収縮」と呼ばれる不随意筋収縮が報告された。報告された筋肉の筋収縮は強度が中程度、一過性、短時間、自己限定性であり、医療処置を必要としなかった。収縮は加齢および萎縮筋において理論上より顕著であり得るが、これは７８才まで年齢のｓＩＢＭ患者において観察されなかった。収縮の生物学的解釈は、内部と外部両方のリソースを使用してＢＹＭ３３８プロジェクトチームによって研究されている。
【０４０４】
ラットにおける前臨床試験によって、骨格筋塊の実質的増大の代償と思われる顕著な心肥大を実証した。サルの試験ではあまり見られないが、メスザルにおける左心室チャンバーの大きさ、および重要なことに左心室全体の収縮機能に対して如何なる影響もない心室筋塊の観察された増大は、ＢＹＭ３３８の直接効果より代償効果をさらに支持する。骨格筋塊のわずかな増大がある患者において、ＢＹＭ３３８治療で心肥大が起こり得るかどうかは明らかでない。心エコー検査およびＥＫＧ  Ｈｏｌｔｅｒのモニタリングデータは、最大３０ｍｇ／ｋｇを含めた一回および複数回投与後にプラセボと比較して、後壁の厚さ、心室中隔の厚さ、左心室拡張末期径、左心室塊または心臓刺激伝導の有意な変化の証拠は示さなかった。ＥＣＧおよび心電図検査を試験ＣＢＹＭ３３８Ｂ２２０３において実施して、この潜在的リスクをモニタリングする。
【０４０５】
４週および１３週毒性試験における１、１０および１００ｍｇ／ｋｇのＢＹＭ３３８の週一回投与は、ラットの子宮、膣および卵巣、ならびにより低い程度でカニクイザルの卵巣の可逆的変化をもたらした。週一回与えた１００ｍｇ／ｋｇで、ＢＹＭ３３８はラットにおいて催奇性の痕跡と共に発生段階で毒性があることが示された。これらの発見は、ＢＹＭ３３８の薬理学および器官形成におけるアクチビンの役割に基づくと予想外ではない（Xia and Schnever 2009）。ＢＹＭ３３８の用量を増大して、出産の可能性がない閉経後および閉経前の女性におけるＦＳＨレベルの抑制を確認し、進行中および将来の試験で緻密にデータをモニタリングするよう適所で計画する。閉経後女性における低いＦＳＨの臨床的意義は知られておらず、閉経前の女性では、このような低下は月経周期、生殖能力に干渉し、身体における低エストロゲン症状（例えば顔面紅潮、膣乾燥症、加速的な骨消失）をおそらく引き起こし得ると予想され、これらは追加的治療を必要とし得る。出産の可能性がない女性のみを全ての健常ボランティア試験に動員した。閉経前である対象に関して、この試験は、同意文書を与えた日から最終試験薬剤投与後６カ月の間２つの型の非常に有効な避妊薬の使用に同意する、出産の可能性がある女性（ＷＯＣＢＰ）を登録するものとする。妊娠試験薬はスクリーニング時、試験期間中、および最終往診後３０日投与する。
【０４０６】
ＢＹＭ３３８治療で体重は増大し得るが、増大するのは主にＬＢＭであり、体脂肪塊は安定状態または減少すると予想される。
【０４０７】
薬剤を中和しその効果を弱めることができる、ＢＹＭ３３８に対する抗薬剤抗体を開発することができると考えられる。しかしながら、ＩＢバージョン４．０の公開日で、一用量試験から評価したサンプルにおいて中和抗体は観察されていない。複数用量試験と他の一用量試験に関する分析が予定される。
【０４０８】
注入関連反応はモノクローナル抗体で起こり得る。過敏反応は、発熱、悪寒、蕁麻疹、呼吸困難、頭痛、筋肉痛および／または低血圧として現れる可能性がある。アナフィラキシーをもたらす重大な注入反応は、モノクローナル抗体療法では稀な事象である。重度の過敏反応が起こる場合、ＢＹＭ３３８の投与を中断し適切な療法を開始しなければならない。
【０４０９】
任意の他の治験薬と同様に、重大で予知できない可能性があるＢＹＭ３３８に対する未知のリスクが存在する。
【０４１０】
集団
試験集団は、２０１０年のＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ  Ｃｅｎｔｅｒの定義に従い病理学的に定義または臨床学的に定義されたｓＩＢＭの診断結果を有する、歩行可能な（すなわち、スクリーニングおよびベースライン時に車椅子状態または寝たきりではない）男性および女性患者からなる。それは約３０の世界中の医療センターで合計２４０の患者を無作為に分けることを目的とする。
【０４１１】
組み入れ基準
この試験における組み入れに適した患者は、スクリーニングおよびベースライン往診時に以下の基準の全てを満たしていなければならない：
【０４１２】
３５才〜８５才の（両方を含めた）年齢の男性および女性患者。
【０４１３】
病状レポートの評価を含めて、（提案された２０１０ＭＲＣ基準から適合させた）ｓＩＢＭ診断基準に従い病理学的に定義または臨床学的に定義された孤発性封入体筋炎と診断されていること。
【０４１４】
１メートルを超える６分間歩行距離スコアによって定義され、スクリーニング往診時とベースライン往診時の両方で車椅子状態であってはならない（車椅子の断続的な使用は許容される）。
【０４１５】
研究者と充分コミュニケーションをとることができる。
【０４１６】
試験要件および手順に従うことを義務付けた試験の全期間に関与する意思がある。
【０４１７】
除外基準
スクリーニングおよびベースライン往診時に以下の基準のいずれかを満たす患者は、この試験中に組み入れるのに適していない。
【０４１８】
１．登録時、または登録３０日もしくは５半減期以内のいずれか長い方、または現地の規制に基づく治験試験での任意の他の関与制約によって要求される場合はさらに長期の他の治験薬の使用。この試験中における別の臨床試験への現在または将来的関与。関連薬剤療法が許されていない観察または登録試験への関与。
【０４１９】
２．試験薬に対するアレルギー反応もしくはアナフィラキシー反応の病歴、または試験薬の何らかの成分に対する過敏症の病歴。生物学的製剤に対する過敏症の病歴。
【０４２０】
３．少なくとも０．８ｇタンパク質／ｋｇ／１日として定義されるタンパク質の適切な摂取を排除する理由、および／または炎症性腸疾患、セリアック病、短腸症候群、膵機能不全などの、胃腸管からのタンパク質もしくはエネルギーの吸収不良を引き起こすことが知られている疾患がある場合。
【０４２１】
４．多発性筋炎または皮膚筋炎、多筋痛、リウマチ、筋線維痛、重大な痴呆／アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、脳血管発作、脳性小児麻痺、てんかん、多発性硬化症、脊髄損傷、筋ジストロフィー、重症筋無力症、および脊椎の変形性関節症と関連した衰弱を含めた、運動性を著しく制限する重大な下肢筋肉または関節痛または筋衰弱を引き起こす、何らかの非ｓＩＢＭ状態または他の神経性（先天性もしくは後天性）または神経筋疾患。注釈、これらの以前の誤診は除外しない。彼らのその痛みが試験手順を実施するのを制限しない限り、骨関節炎などの状態がある患者は参加することができる。
【０４２２】
５．重度の慢性閉塞性肺疾患（予想５０％未満のＦＥＶ１またはＭｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ  Ｄｙｓｐｎｅａ  Ｓｃａｌｅにおいてグレード３以上の呼吸機能困難）、進行した臓器不全、慢性腎臓病（ＭＤＲＤ等式を使用して３０ｍＬ／分未満の推定ＧＦＲ）、甲状腺機能亢進症、リウマチ様関節炎を含めた、呼吸機能の結果として運動性を制限するカヘキシーまたは筋萎縮と関連した何らかの進行中の慢性非ｓＩＢＭ状態。
【０４２３】
６．制御不能な甲状腺機能亢進症。スクリーニング前過去６週間中にそのホルモン補充療法の用量が変化した甲状腺機能低下患者は試験に適していない。
【０４２４】
７．制御不能な糖尿病（すなわち、ＨｂＡ１Ｃが９．０ｍｍｏｌ／ｌ以上）および／または何らかの他の制御不能な内分泌疾患。
【０４２５】
８．最近過去６０日間中に献血した、または過去２週間中に血漿を提供した可能性がある対象。
【０４２６】
９．最近６カ月中に臀部骨折の病歴がある、または最近６カ月中に臀部もしくは膝プロテーゼ手術を受けている。
【０４２７】
１０．スクリーニング（スクリーニング往診）前３０日以内に、研究者の意見で、下肢機能または試験に関与する患者の能力に影響を与える急性疾患を経験している。
【０４２８】
１１．過去６カ月中にその観念が生じた場合、Ｃｏｌｕｍｂｉａ  Ｓｕｉｃｉｄｅ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ（ＣＳＳＲＳ）の自殺観念セクションの項目４または項目５に「はい」を記録すること、または過去２年中にその行動が生じた場合、（自殺行動セクション中にも含まれる項目）「非自殺的自傷行動」以外の自殺行動セクションのいずれかの項目に「はい」を記録すること。
【０４２９】
１２．妊娠または授乳（乳汁分泌）状態の女性、ｈＣＧ実験試験の陽性結果により確認した、受胎後または在胎の最後までの女性の状態として妊娠を定義する。
【０４３０】
１３．全ての女性が生理学上妊娠状態になり得ると定義し、彼女達がＢＹＭ３３８投与中および最終ＢＹＭ３３８投与後６カ月間非常に有効な避妊法を使用していない限り、出産の可能性がある女性。
【０４３１】
非常に有効な避妊法は以下のものを含む：
１．完全な禁欲（これが対象の好ましい通常のライフスタイルと一致する場合）。周期的禁欲（例えばカレンダー法、排卵法、症状体温法、排卵後法）および膣外射精は許容される避妊法ではない。
２．試験治療を行う前に少なくとも６週間の、（子宮摘出有りまたは無しで手術により両側卵巣摘出または卵管結さつを施した）女性の不妊手術。卵巣摘出のみの場合、フォローアップホルモンレベル評価によって女性の生殖状態を確認したときのみ、彼女は出産の可能性がないと考える。
【０４３２】
（スクリーニング前少なくとも６カ月間の）男性の不妊手術。この試験における女性対象に関しては、精管切除した男性パートナーがその対象の唯一のパートナーでなければならない。
【０４３３】
４．以下の方法のいずれか２つの組合せ（ａ＋ｂまたはａ＋ｃまたはｂ＋ｃ）：
ａ．経口、注入またはインプラントホルモン剤避妊法、または同等の有効性を有する他の型のホルモン剤避妊法、例えばホルモン剤、膣リングまたは経皮ホルモン剤による避妊法の使用（失敗率１％未満）。
ｂ．子宮内デバイス（ＩＵＤ）または子宮内システム（ＩＵＳ）の配置。
ｃ．バリア方式避妊法。コンドームまたは閉塞式キャップ（避妊ペッサリーまたは頸管キャップ／円盤状キャップ）および殺精子薬／ジェル／フィルム／クリーム／膣座薬。
【０４３４】
経口避妊薬を使用する場合、試験治療を行う前に少なくとも３カ月、女性は同じピルで安定状態でなければならない。
【０４３５】
女性が１２カ月の自然（自然発生）無月経および適切な臨床プロファイル（例えば年齢相応の、血管運動性障害の病歴）である、または少なくとも６週間前の（子宮摘出有りまたは無しで）手術による両側卵巣摘出もしくは卵管結さつを施された場合、女性は閉経後であり出産の可能性がないと考えられる。卵巣摘出のみの場合、フォローアップホルモンレベル評価によって女性の生殖状態を確認したときのみ、彼女は出産の可能性がないと考える。
【０４３６】
１４．無作為化後１２カ月以内の何らかの予想される計画的な入院患者の手術。
【０４３７】
１５．スクリーニング時に９．２ｎｇ／ｍＬ未満または２３ｎｍｏｌ／ｍＬ未満の２５−ＯＨ−ビタミンＤレベルとして定義される重度のビタミンＤ不足。
【０４３８】
１６．有効性アセスメントのいずれかに影響を与え得る、重大な精神障害、臨床上明らかな末梢血管疾患もしくは障害、または全身性障害（例えば、糖尿病性ニューロパチー、慢性疲労症候群、統合失調症、双極性障害、重度のうつ病、間欠性跛行）。
【０４３９】
１７．末梢静脈にアクセスできない。
【０４４０】
１８．ニューヨーク心臓協会のクラスＩＩＩおよびＩＶとして分類される周知の心不全、または慢性低血圧症の病歴（収縮期血圧１００ｍｍＨｇ未満）。
【０４４１】
１９．スクリーニング時に収縮期血圧１８０ｍｍＨｇ超もしくは９０ｍｍＨｇ未満または拡張期血圧１００ｍｍＨｇ超もしくは５０ｍｍＨｇ未満、または悪性高血圧症。
【０４４２】
２０．スクリーニングの１８０日以内の、不安定狭心症、心筋梗塞、冠動脈バイパス移植手術、または経皮的冠動脈インターベンション（アンギオプラスティーまたはステント配置など）の病歴。
【０４４３】
２１．反復アセスメントでのスクリーニングまたはベースラインで、長期ＱＴ症候群または男性に関して４５０ｍｓｅｃ超および女性に関して４７０ｍｓｅｃ超のＱＴｃＦ（フリデリシア法補正式）。
【０４４４】
２２．医学的療法もしくはデバイス療法でさえ休息時に、制御不能な心室応答での何らかの電気的上室性不整脈（１分間当たり１００拍［ｂｐｍ］を超える平均心拍数）を含めた臨床上重大な異常を示すＥＣＧ、または医学的療法もしくはデバイス療法でさえ自然発生もしくは誘導型持続的心室性頻拍（３０秒間１００ｂｐｍを超える心拍数）の何らかの病歴、または心拍動停止を蘇生した、もしくは自動植込み型除細動器−除細動薬が存在した何らかの病歴。
【０４４５】
２３．重大な凝固障害、７５，０００／ｍｍ３未満の血小板、１１．０ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン。
【０４４６】
２４．ＳＧＯＴ（ＡＳＴ）、ＳＧＰＴ（ＡＬＴ）、アルカリホスファターゼ、または血清中ビリルビンなどの異常な肝機能試験値によって示される肝臓疾患または肝臓障害（ジルベール病は除く）。
【０４４７】
研究対象者は以下の基準によってガイドされなければならない：
●如何なる個々のトランスアミナーゼも正常値上限（ＵＬＮ）の３倍を超えてはならない。最大３×ＵＬＮまで上昇した個々のパラメーターは、全ての場合少なくとも無作為化の前に可能な限り早く再チェックして、如何なる実験エラーも除外しなければならない。
●総ビリルビン濃度が１．５×ＵＬＮを超えて増大する場合、総ビリルビンは直接反応ビリルビンと間接反応ビリルビンに区別しなければならない。いずれの場合も、血清中ビリルビンは１．６ｍｇ／ｄＬ（２７μｍｏｌ／Ｌ）の値を超えてはならない。
【０４４８】
１４．重度の急性もしくは慢性肝臓疾患（代償性もしくは代償不全性）、周知の胆嚢もしくは胆管疾患、急性もしくは慢性膵炎、腎不全、または肝臓毒性能力がある薬を用いた常習的治療の周知の病歴または存在。
【０４４９】
１５．局所再発または転移の痕跡があるかどうかとは無関係に、過去５年以内に治療または未治療の、（明らかに治療されている皮膚の局所基底細胞癌または扁平上皮癌以外の）何らかの臓器系の悪性腫瘍の病歴。スクリーニングの１年より前に明らかに治療された子宮頸部のｉｎ  ｓｉｔｕに癌がある参加者は試験に参加することができる。
【０４５０】
１６．無作為化前過去６カ月以内のＶＥＧＦ阻害薬（ベバシズマブ）を含めた禁止されている全身治療薬、または無作為化前過去３カ月以内の（ＯＴＣＤＨＥＡを含む）アンドロゲンサプリメント、ＧｎＲＨアナログ、抗アンドロゲン剤、抗エストロゲン剤（タモキシフェン）、周知のアンドロゲン成分を含むプロゲスチン（例えばＮＥＴＡ）、組換えヒト成長ホルモン剤、経口βアゴニスト、インスリン、酢酸メゲストロール、またはドロナビノールを含めた筋肉塊に影響を与えることが知られている任意の療法剤の使用。
【０４５１】
１７．１０ｍｇプレドニゾン当量以上の１日当たりの用量での、進行中の常習的コルチコステロイド使用または無作為化前に少なくとも９０日間の全身性コルチコステロイドを使用した病歴。
【０４５２】
１８．進行中の免疫抑制療法、または無作為化前過去６カ月以内の抗体免疫抑制療法剤（リツキシマブまたは静注用免疫グロブリン、ＴＮＦ−α阻害薬）、または無作為化前過去３カ月（９０日）以内の自己免疫疾患用の非抗体療法剤（例えば、シクロスポリン、メトトレキサート、タクロリムス、シクロホスファミド、アザチオプリン）。
【０４５３】
１９．現在進行中のアルコールもしくは薬物乱用、または無作為化前過去２４週以内のアルコールもしくは薬物乱用の常習歴。
【０４５４】
２０．（爪床の真菌感染を除いた）何らかの種類の周知の進行中感染、または入院を必要とする何らかの主要感染症状発現、または無作為化前８週以内の静脈内用抗感染薬を用いた治療。
【０４５５】
２１．何らかの常習的な進行中感染（例えば、ＨＩＶ、Ｂ型またはＣ型肝炎、結核など）。潜在性結核感染症のための化学的予防法を施した患者は試験に適している。
【０４５６】
２２．研究者の意見で、ＢＹＭ３３８を投与したときに参加を妨げる、結果を混乱させる、または患者を何らかの他のリスクに曝す可能性がある、スクリーニング中の何らかの医学的状態または実験による発見が患者にある。
【０４５７】
２３．４００メートル以上のベースライン６分間歩行距離があった患者の最大２０％を無作為に分ける。
【０４５８】
試験集団が全ての適正患者を表すことを確実にするため、研究者により他の除外基準は施すことができない。
【０４５９】
治療
プロトコールリクエスト型治療
１．治験治療薬
ノバルティスは以下の治験薬を供給する：
●ＢＹＭ３３８、バイアル中に１５０ｍｇ液状、ラバーストッパーおよびアルミニウム製フリップオフキャップを備えた無色のガラス製バイアル中に提供される。
●プラセボ、ラバーストッパーおよびアルミニウム製フリップオフキャップを備えた無色のガラス製バイアル中に提供される。
【０４６０】
注釈、盲検を維持するため、オープンラベル治験治療薬は非盲検状態の薬剤師／設計者によって調製し、盲検状態の試験担当者によってのみ投与する。
【０４６１】
２．他の試験治療薬
治験治療薬以外の他の治療薬はこの試験に必要とされない。
【０４６２】
しかしながら対象は、現場のガイドラインに従い治療医の支持の下、充分なカルシウム元素およびビタミンＤ治療薬を得ることができる。
【０４６３】
治療群
これは４治療群の試験である。ｓＩＢＭを有する２４０の対象を第１日に１：１：１：１の比で以下の４治療群の１つに無作為に分ける。
●治療群Ａ、ＢＹＭ３３８を１０ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入（ｎ＝６０）
●治療群Ｂ、ＢＹＭ３３８を３ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入（ｎ＝６０）
●治療群Ｃ、ＢＹＭ３３８を１ｍｇ／ｋｇ、４週毎に静脈内注入（ｎ＝６０）
●治療群Ｄ、プラセボを４週毎に静脈内注入として投与（ｎ＝６０）
【０４６４】
試験治療群に応じて、対象には４週毎に、少なくとも１３用量のＢＹＭ３３８を施す、または静脈内注入として適合プラセボを投与する。初回投与は第１日に行い、治療期間中の最終用量投与は第４８週往診時に行い、５２週の最短治療期間を定義する。治療維持期間に入った対象には、その第１日の治療群無作為化割り当てに従い、ＢＹＭ３３８または適合プラセボを４週毎に静脈内注入で与え続ける。最終対象が第４８週治療用量に達するまで全ての対象に試験薬を与え続けるので、最終試験薬剤投与は変動的である。しかしながら、この試験中の個々の対象に関する最大合計治療期間は２年（１０４週）までに限られ、この最大治療期間の症例では、最終試験薬剤投与は第１００週の往診時に行うものとする。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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