(57)【要約】  本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との混合物の使用に関する。本発明において記載されるように、様々な試験、例えば、ニュージーランド白ウサギを用いることによる腟平滑筋収縮性試験（実験例１）；ペリノメーターを用いることによるボランティアにおける腟収縮性に対する効果（実験例２）；及びボランティアにおける腟乾燥症に対する効果（実験例３）を介して、本発明の組合せは、腟組織の収縮性及び腟乾燥症に対する改善効果を示した。したがって、本発明の組合せは腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防することにおいて有用であることができる。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との組合せの使用。
【請求項２】
前記塩が、溶融塩等の加工塩、又は海塩、岩塩等の未精製塩である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記塩が、２００℃〜２０００℃の範囲の温度で２時間〜７日間の範囲の期間、未精製塩を溶融させることによって調製される溶融塩である、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記糖が単糖又は二糖である、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記糖がグルコースである、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記塩と糖との組合せが、１：１〜３０（重量比）の混合比の塩と糖との組合せである、請求項１に記載の使用。
【請求項７】
有効成分として塩と糖との組合せを、腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに有効な量にて、医薬上許容される担体とともに含む外用組成物。
【請求項８】
洗浄液、ジェル、ゼリー、フォーム、クリーム、軟膏、ローション、バーム、パッチ、ペースト、噴霧溶液、エアロゾル等の局所製剤、又は腟錠、腟カプセル、腟フィルム、腟スポンジ、タンポン、パッド等の挿入製剤である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
腟錠組成物又は洗浄液組成物である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防する方法であって、該哺乳動物に有効量の塩と糖との組合せを、その医薬上許容される担体とともに投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における腟弛緩症（lax vegina syndrome）又は腟乾燥症（colpoxerosis disease）を治療するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との混合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
腟弛緩症は、腟腔及び腟口領域に位置する筋肉が緩み、腟粘液の分泌が減少し、かつ腟筋膜が弛緩することを特徴とする腟症候群と規定され、腟弛緩症はしばしば、加齢及び出産の後に起こり、直腸、子宮及び膀胱等に対して不利益な影響をもたらす可能性があり、また悪化することにより、重篤な問題、例えば、便の漏れ、早産、死産等を起こす可能性がある。
【０００３】
前記疾患の代表的現象は以下：（１）性交の際の空気音（wind sound）、（２）オルガズムを感じる頻度の減少、（３）緩んだ腟の筋肉によりもたらされる性的興奮の減少等であり、これらは骨盤の筋肉を強めるための骨盤筋強化体操としてよく知られているケーゲル体操（Kegel exercise）等の様々な非外科的治療、又はそのような問題を取り除くための腟壁形成手術等の外科手術によって解決される可能性があるが、緩んだ筋肉を外科手術によって取り除いたとしても、筋肉が強化されることはなく、満足感は限られている。
【０００４】
女性の腟粘液は性的に興奮している期間中に以下のようにして増加する：血流量が腟被膜（vaginal tunic）に向かって増加し、それにより血漿が粘膜下（submucus）毛細血管から滲出する。腟乾燥症（colpoxerosis）は、閉経の前又は後の、エストロゲンホルモンのレベルの低下によって起こり、かつ、性的に興奮した期間であるにもかかわらず、腟液がわずかしか分泌せず、かつ白帯下が減少することを特徴とし、夫婦間の性生活における様々な問題、例えば、腟炎（vaginitis）、外陰部又は腟の掻痒、性交疼痛症、腟痙、性交後出血、排尿障害、血尿（hematturia）、オルガズムの最中又は後の子宮収縮によって起こる激痛、下腹部痛、月経困難症の頻発、腟疾患（vaginitidis）を引き起こす。
【０００５】
腟弛緩症又は腟乾燥症を、効果的かつ安全に治療する有効な治療法を開発することがいまだに求められている。
【０００６】
したがって、腟弛緩症又は腟乾燥症を治療する、安全な長期治療活性を示す新規な治療用組成物の開発が求められている。
【０００７】
しかしながら、それらの開示が引用することにより本明細書の一部をなすものとする上記引用文献のいずれにおいても、塩と糖との組合せの腟弛緩症又は腟乾燥症に対する治療効果はなんら報告も開示もされていない。
【０００８】
塩と糖との組合せの腟弛緩症又は腟乾燥症に対する阻害効果を調べるために、本発明の発明者らは、様々な実験、例えば、ニュージーランド白ウサギ（New Zealand White Rabbit）を用いることによる腟平滑筋収縮性試験（実験例１）；ペリノメーター（perinometer）を用いることによるボランティアにおける腟収縮性に対する効果の実験（実験例２）；及び、ボランティアにおける腟乾燥症に対する効果の実験（実験例３）を行い、塩と糖との組合せが、試験において腟組織の収縮性及び腟乾燥症に対する改善効果を示すということを確認することにより、最終的に本発明を完成した。
【０００９】
本発明のこれら及びその他の目的は、以下に提供される本発明の詳細な開示から明らかとなるであろう。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、腟弛緩症又は腟乾燥症の予防及び治療用の、有効成分として塩と糖とを含む皮膚外用組成物、並びにその使用に関する。
【００１１】
哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療するのに用いられる医薬の製造における、塩と糖との混合物の使用である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
したがって、本発明の別の目的は、腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに有効な量にて、有効成分として塩と糖との組合せを、医薬上許容される担体とともに含む外用組成物を提供することである。
【００１３】
本発明の別の目的は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との組合せの使用を提供することである。
【００１４】
本発明の他の目的は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防する方法であって、有効量の塩と糖との組合せをその医薬上許容される担体とともに該哺乳動物に投与することを含む、方法を提供することである。
【００１５】
本発明の１つの実施の形態において、本発明は、腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに有効な量にて、有効成分として塩と糖との組合せを、医薬上許容される担体とともに含む外用組成物を提供する。
【００１６】
さらに、本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との組合せの使用を提供する。
【００１７】
さらに、本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防する方法であって、有効量の塩と糖との組合せをその医薬上許容される担体とともに該哺乳動物に投与することを含む、方法を提供する。
【００１８】
本明細書において定義する「塩」という用語は、溶融塩等の加工塩、又は海塩、岩塩等の未精製塩を含み、好ましくは塩化ナトリウム等の精製塩、又は竹塩等の溶融塩であり、より好ましくは未精製塩を２００℃〜２０００℃の範囲の温度、好ましくは８００℃〜１２００℃の範囲の温度で、２時間〜７日間の範囲の期間、好ましくは１２時間〜４８時間、溶融させることにより調製される溶融塩である。
【００１９】
本明細書において定義する「糖」という用語は、糖類化合物を含み、好ましくはグルコース、フルクトース、マンノース、ガラクトース等の単糖、又はラクトース、マルトース、砂糖等の二糖であり、より好ましくはグルコースであり、より好ましくは結晶グルコースである。
【００２０】
本明細書において定義する「塩と糖との組合せ」という用語は、１：１〜３０（重量比（w/w））、好ましくは１：１〜１０（重量比）、より好ましくは１：１〜５（重量比）、もっとも好ましくは１：１〜３（重量比）の混合比の、塩と糖との組合せを含む。
【００２１】
本発明の組成物は、他の抗生物質、色素、香料等を、組成物の総重量に対して、上記組成物の約０．１重量％〜２０重量％の量で更に含有することができる。
【００２２】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００２３】
塩と糖との組合せを含む本発明の組成物は、詳細には以下の手順によって調製することができる。
【００２４】
例えば、本発明の洗浄用組合せは、以下によって調製することができる：海塩、岩塩等の未精製塩を、２００℃〜２０００℃の範囲の温度、好ましくは８００℃〜１２００℃の範囲の温度で、２時間〜７日間の範囲の期間、好ましくは１２時間〜４８時間、溶融させて第１工程にて溶融塩を得て；溶融塩と、糖化合物、好ましくはグルコース、フルクトース、マンノース、ガラクトース等の単糖、又はラクトース、マルトース、砂糖等の二糖、より好ましくはグルコース、より好ましくは結晶グルコースとを、１：１〜３０（重量比）、好ましくは１：１〜１０（重量比）、より好ましくは１：１〜５（重量比）、もっとも好ましくは１：１〜３（重量比）の混合比で混合して、本発明の組合せを得て；その組合せを、適量の、蒸留水、緩衝液、又は等張液中に、必要であれば、適量の、他の抗生物質、色素、香料等の他の添加剤とともに溶解させて本発明の洗浄組成物を得る。
【００２５】
したがって、本発明の別の実施の形態において、本発明は、以下の工程を含む本発明の洗浄用組合せを調製する方法を提供する：溶融塩等の加工塩、又は海塩、岩塩等の未精製塩を、２００℃〜２０００℃の範囲の温度、好ましくは８００℃〜１２００℃の範囲の温度で、２時間〜７日間の範囲の期間、好ましくは１２時間〜４８時間、溶融させて、第１工程にて溶融塩を得ること；溶融塩と、糖化合物、好ましくはグルコース、フルクトース、マンノース、ガラクトース等の単糖、又はラクトース、マルトース、砂糖等の二糖、より好ましくはグルコース、より好ましくは結晶グルコースとを、１：１〜３０（重量比）、好ましくは１：１〜１０（重量比）、より好ましくは１：１〜５（重量比）、もっとも好ましくは１：１〜３（重量比）の混合比で混合して本発明の組合せを得ること；及びその組合せを、適量の、蒸留水、緩衝液、又は等張液中に、必要であれば、適量の、他の抗生物質、色素、香料等の他の添加剤とともに溶解させて、本発明の洗浄組成物を得ること。
【００２６】
上記の方法により調製される塩と糖との組合せを含む本発明の組成物は、様々な実験、例えば、ニュージーランド白ウサギを用いることによる腟平滑筋収縮性試験（実験例１）；ペリノメーターを用いることによるボランティアにおける腟収縮性に対する効果（実験例２）；及びボランティアにおける腟乾燥症に対する効果（実験例３）を介して、腟組織の収縮性及び腟乾燥症に対する強力な改善効果を示すことが判明した。
【００２７】
したがって、腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防する、上記の方法によって調製される塩と糖との組合せを、医薬上許容される担体とともに含む、本発明の皮膚外用組成物である。
【００２８】
さらに、本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防するのに用いられる医薬の製造における上記の方法によって調製される塩と糖との組合せの使用を提供する。
【００２９】
さらに、本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防する方法であって、該哺乳動物に、上記の方法によって調製される有効量の塩と糖との組合せを、その医薬上許容される担体とともに投与することを含む、方法を提供する。
【００３０】
本明細書において定義する「予防する」という用語は、上記のような疾患に罹患しやすい哺乳動物における上記のような疾患の阻害を意味し、本明細書において使用される「治療する」という用語は、（ａ）疾患若しくは病気の進展の阻害；（ｂ）疾患若しくは病気の軽減；又は（ｃ）疾患若しくは病気の排除を意味する。
【００３１】
本発明の組成物は、使用方法に従って従来の担体、補助剤又は希釈剤を更に含むことができる。該担体は、使用法及び適用法に従って適切な物質として使用するのが好ましいが、限定されるものではない。適切な希釈剤は、教科書、Remington's Pharmaceutical Science (Mack Publishing co, Easton PA)に列挙されている。
【００３２】
以下に記載する、以下の製剤化方法及び賦形剤は、単に例示的なものであり、本発明をいかなるようにも限定するものではない。
【００３３】
本発明による組成物は、医薬上許容される担体、補助剤又は希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアゴム（acacia rubber）、アルギン酸塩（alginate）、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、水、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム及びミネラルオイルを含有する、本発明の皮膚外用組成物として提供することができる。製剤は、充填剤、抗凝集剤（anti-agglutinating agents）、潤滑剤、湿潤剤、着香剤、乳化剤、保存料等を更に含むものとすることができる。本発明の組成物は、当該技術分野において知られているあらゆる手順を用いることにより、患者への本発明の組成物の投与の後に、有効成分の迅速放出、持続性放出又は遅延放出を提供するように製剤化することができる。
【００３４】
例えば、本発明の組成物は、蒸留水、ｐＨ緩衝液、油、プロピレングリコール又は当該技術分野において一般的に使用されている他の溶媒に溶解することができる。担体の好適な例としては、生理食塩水、ポリエチレングリコール、エタノール、植物油、ミリスチン酸イソプロピル等が挙げられるが、これらに限定されない。局所投与には、本発明の化合物は、軟膏及びクリームの形態に製剤化することができる。
【００３５】
本発明の皮膚外用組成物は、あらゆる形態、例えば、洗浄液、ジェル、ゼリー、フォーム、クリーム、軟膏、ローション、バーム、パッチ、ペースト、噴霧溶液、エアロゾル等の局所製剤、又は腟錠、腟カプセル、腟フィルム、腟スポンジ、タンポン、パッド等の挿入製剤、好ましくは腟錠組成物又は洗浄液組成物に調製することができる。
【００３６】
したがって、本発明は、腟疾患を治療又は予防する、塩と糖との組合せを、医薬上許容される担体とともに含む、洗浄液溶液又は腟錠組成物を提供する。
【００３７】
医薬剤形における本発明の組成物は、それらの医薬上許容される塩の形態で使用することができ、また単独で使用することもでき、又は抗菌化合物若しくは当該技術分野において知られた植物、動物若しくは鉱物に由来する抽出物等のその他の医薬として活性な化合物と適切に共同させて、また、その他の医薬として活性な化合物と組み合わせて使用することもできる。
【００３８】
本発明の抽出物の望ましい用量は、対象の状態及び体重、重症度、薬物形態、投与経路及び期間に応じて変動し、当業者が選択することができる。しかしながら、望ましい効果を得るためには、本発明の組合せを０．００１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．０１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲の量で投与することが概して推奨される。用量は１日あたり１回投与することもできるし、１日あたり数回に分割して投与することもできる。組成物に関しては、本発明の組合せは、組成物の総重量に対して、０．０１重量％〜９９．９９重量％、好ましくは０．１重量％〜９９重量％、より好ましくは１重量％〜２０重量％、もっとも好ましくは５重量％〜１０重量％存在すべきである。
【００３９】
本発明の組成物は、様々な経路を介して哺乳動物（ラット、マウス、家畜又はヒト）等の対象動物に投与することができる。あらゆる投与様式が考えられ、例えば、投与は、外用、局所、経口、直腸により行うことができ、又は静脈内、筋肉内、皮下、皮内、髄腔内、硬膜外若しくは脳室内注射により行うことができ、外用若しくは局所により行うのが好ましい。
【００４０】
本発明の趣旨又は範囲から逸脱することなく、様々な改変及び変動を、本発明の組成物、使用及び製剤においてなすことができることが当業者に明らかであろう。
【発明の効果】
【００４１】
本発明に記載するように、様々な試験、例えば、ニュージーランド白ウサギを用いることによる腟平滑筋収縮性試験（実験例１）；ペリノメーターを用いることによるボランティアにおける腟収縮性に対する効果（実験例２）；及びボランティアにおける腟乾燥症に対する効果（実験例３）を介して、本発明の組合せは、腟組織の収縮性及び腟乾燥症に対する改善効果を示した。したがって、本発明の組合せは腟弛緩症又は腟乾燥症を治療又は予防することにおいて有用であることができる。
【００４２】
本発明の上記及びその他の目的、特徴並びにその他の利点は、添付の図面と合わせて以下の詳細な説明からより明白に理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】輪型腟組織と短冊型腟組織との間の各静止張力の比較を示す。
【図２】輪型腟組織及び短冊型腟組織におけるＫ＋クレブスの添加に応答しての収縮性の強度を示す。
【図３】試験サンプルの用量に応じた収縮性の強度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４４】
本発明の趣旨又は範囲から逸脱することなく、様々な改変及び変動を、本発明の組成物、使用及び製剤においてなすことができることが当業者に明らかであろう。
【００４５】
本発明を以下の実施例によってより具体的に説明する。しかしながら、本発明はいかなるようにもこれら実施例に限定されるものではないということが理解されるべきである。
【実施例】
【００４６】
以下の参考例、実施例及び実験例は、本発明の範囲を限定することなく、本発明を更に例証する意図のものである。
【００４７】
［発明の形態］
実施例１．  本発明の組合せの調製。
１−１．  加工塩の準備
９００ｍｇの海塩（新安、韓国、www.nhshinansalt.com）を、加熱器（ＭＳ−Ｅ１０４、TOPS Co. Ltd.）を用いることにより８５０℃〜１０００℃で２４時間溶融させて、４００ｍｇの加工塩を得た。
【００４８】
１−２．  精製塩の準備
４００ｍｇの精製塩（ＮａＣｌ、Ｆ．Ｗ．５８．４４）を従来から利用可能な会社（ＳＰＰＯ−９１７０１、Duksan company、www.duksan.co.kr）から調達した。
【００４９】
１−３．  グルコースの準備
８００ｍｇのグルコース（結晶グルコース）を従来から利用可能な会社（Samyang genex Corp.、www.genex.co.kr）から調達した。
【００５０】
１−４．  組合せ（１）の調製
上記の工程において準備した４００ｍｇの加工塩と８００ｍｇのグルコースとを、一緒にして十分に混合して、１２００ｍｇの本発明の組合せ（以下「ＳＧ１」と称する）を得た。
【００５１】
１−５．  組合せ（２）の調製
上記の工程において準備した４００ｍｇの精製塩と８００ｍｇのグルコースとを、一緒にして十分に混合して、１２００ｍｇの本発明の組合せ（以下「ＳＧ４」と称する）を得た。
【００５２】
組合せを冷蔵庫中において−７５℃で保持し、使用前に蒸留水に溶解することによって以下の実験に用いた。
【００５３】
実施例２．  本発明の腟錠組成物（ＳＧ２）の調製
実施例１において調製した、４００ｍｇの加工塩と８００ｍｇのグルコースとを含む組合せを、２ｍｇのステアリン酸マグネシウムと混合して、打錠（entableting）装置（ＫＴ２０００、Kumsungkigong）を用いることにより、本発明の腟錠組成物組合せ（以下「ＳＧ２」と称する）へと製剤化した。
【００５４】
実施例３．  本発明の腟錠組成物（ＳＧ５）の調製
実施例１において調製した、４００ｍｇの精製塩と８００ｍｇのグルコースとを含む組合せを、２ｍｇのステアリン酸マグネシウムと混合して、打錠装置（ＫＴ２０００、Kumsungkigong）を用いることにより、本発明の腟錠組成物組合せ（以下「ＳＧ５」と称する）へと製剤化した。
【００５５】
実施例４．  本発明の腟洗浄溶液組成物の調製
実施例１において調製した４００ｍｇの精製塩と８００ｍｇのグルコースとを含む組合せ（ＳＧ４）を含む腟洗浄溶液組成物を、表１に示す以下の成分を一緒にして４８時間撹拌しながら混合することにより調製した（以下「ＳＧ３」と称する）。
【００５６】
【表１】
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【００５７】
実験例１．  腟平滑筋収縮性試験
実施例において調製した本発明の組合せ（ＳＧ３）の、ニュージーランド白ウサギにおける腟平滑筋収縮性に対する効果を試験するために、文献（S-J Oh, et al., (2003), Histological and functional aspects of different regions of the rabbit vagina, International Journal of impotence research, 15, pp142-150; N. N. Kim et al., (2004), Effects of ovariectomy and steroid hormones on vaginal smooth muscle contractility, International Journal of Impotence Research, 16, 43-50; A. Giraldi et al., (2001), Joint Award Winning Paper D Jean Francois Ginestie Prize Effects of diabetes on neurotransmission in rat vaginal smooth muscle, International Journal of impotence Research, 13, pp58-66）に開示されている手順に従って器官浴を用いることによって、試験を行った。
【００５８】
１−１．  予備試験
本試験（principal test）に先立って、先の文献を考慮してウサギ腟を搬送した後、試験のタイプを決定するために予備試験を行った。
【００５９】
予備試験によって、短冊型ウサギ腟の形態でのＫ＋（８０ｍＭ）−クレブス溶液の添加に応答した腟平滑筋収縮性は、輪型ウサギ腟の形態でのＫ＋（８０ｍＭ）−クレブス溶液の添加に応答した腟平滑筋収縮性よりも強いことが示され、さらに短冊型ウサギ腟の形態でのフェニレフリンの体積上昇による腟平滑筋収縮性も、輪型ウサギ腟の形態でのフェニレフリンの体積上昇による腟平滑筋収縮性よりも強いことが示されるということが確認された。
【００６０】
結果的に、短冊型ウサギ腟は輪型ウサギ腟よりも実験を試験するためにより適していることが確認された。
【００６１】
１−２．  実験動物
１０匹のウサギ（ニュージーランド白ウサギ、Saeron Bio Inc.、Korea、約２．５ｋｇ〜３．０ｋｇ、１週齢）を、健康状態を調べながら３日間かけて環境に順化させた後、実験に用いた。
【００６２】
すべてのウサギに順化期間中に赤色油性ペンで（左耳介に）印を付け、試験期間中は黒色油性ペンで（右耳介に）印を付けた。飼育ケージは、試験番号、試験対象、試験期間及び動物番号等を記録した個別の識別カードで印を付けた。
【００６３】
試験動物を飼育しておき、試験を、KAMSI（Korea animal medical science Institute、Korea）の動物飼育室中で、温度（２３℃±３℃）、相対湿度（５５％±１５％）、換気回数（１０回／時〜２０回／時）、光サイクル（light cylcle）（０８：００に点灯及び２０：００に消灯）及び照明強度（１５０ルクス〜３００ルクス）を維持した条件下で行った。飼育条件は恒常的かつ定期的に点検した。動物は餌（ＫＳＮ１４０２０３、Cargill Adri Purina Inc.、Korea）と滅菌水とを自由に摂取できるようにしておいた。動物は順化、隔離、投与及び観察期間の間、１つのケージあたり１匹のウサギにてステンレス鋼飼育箱（幅４０５ｍｍ×長さ６０５ｍｍ×高さ３６５ｍｍ）中で飼育しておいた。
【００６４】
１−３．  サンプル処理（器官浴法）
本発明の組成物を文献に開示されている器官浴法に従って以下のようにしてウサギ腟組織に投与した：
粘膜（mucose membrane）を除去しておいた筋肉に囲まれたウサギ腟の短冊（１．５ｍｍ×１０ｍｍ）を、混合ガス（９５％Ｏ２及び５％ＣＯ２ガス）で飽和されたクレブス溶液（１１９ｍＭのＮａＣｌ、４．７ｍＭのＫＣｌ、１．１ｍＭのＭｇＳＯ４、１．２ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、１．５ｍＭのＣａＣｌ２、２５ｍＭのＮａＨＣＯ３、１０ｍＭのＤ−グルコース、Ｇ１００９、Biosesang Corp.、Korea）に３７℃で浸漬した。短冊（trip）の末端を固定し、他方の末端をトランスデューサー（モデルＦＴ０３；Grass instruments、Quincy、MA、USA）に接続して、２０ｍＬのチャンバー（ＦＴ０３、ＧＲＡＳＳ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中でｇｒａｓｓフィジオグラフ（AD instruments、USA）を用いて短冊の等尺性張力を記録した。
【００６５】
１−４．  手順
異なる条件を用いる様々な予備試験により、以下の手順を確立した。ウサギ腟の短冊をクレブス溶液中、１．２ｇの静止張力で３０分間〜６０分間安定化した後、短冊をＫ＋クレブス溶液（４３．７ｍＭのＮａＣｌ、８０ｍＭのＫＣｌ、１１ｍＭのＭｇＳＯ４、１．２ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、１．５ｍＭのＣａＣｌ２、１８ｍＭのＮａＨＣＯ３、１０ｍＭのＤ−グルコース、Biosesang Corp.、Korea）中で１５分間２回収縮させ、溶液で３回洗浄して安定化させ、その収縮性を求めるための比較試験を行った。
【００６６】
腟収縮性の強度を、組織重量あたりのＫ＋クレブス溶液によって起こる収縮性を比較することによって判定し、用量依存的な腟収縮性の強度をＫ＋収縮性の各強度を１００％に設定することにより表した。
【００６７】
１−５．  静止張力の判定
２種類のウサギ腟、即ち、輪型（３ｍｍ）及び短冊型（１．５ｍｍ×１０ｍｍ）のウサギ腟を調製し、腟がもっとも安定であり、かつ、安定化の後のＫ＋クレブス溶液の添加に対する収縮性応答がもっとも明白であった、腟の静止張力を選択した。
【００６８】
図１及び表２にみることができるように、輪型の収縮性は、その静止張力を２．０ｇに設定した場合にＫ＋クレブス溶液中で０．５１ｇであったのに対し、その静止張力を１．５ｇに設定した場合は０．５４ｇへと上昇した。したがって、輪型の試験張力は上記の試験結果と腟組織の安定性とを考慮して１．５ｇに決定した。
【００６９】
短冊型の収縮性は、その静止張力を２．０ｇに設定した場合、Ｋ＋クレブス溶液中で０．３１ｇであり、重篤な痙攣が起こったのに対し、その静止張力を１．２ｇに設定した場合、収縮性は０．４２ｇに上昇した。したがって、短冊型の試験張力は上記の試験結果と腟組織の安定性とを考慮して１．２ｇに決定した。
【００７０】
【表２】
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【００７１】
１−６．  試験結果
結果として、短冊型腟組織は、短冊型腟組織よりもＫ＋（８０ｍＭ）−クレブスに対してより強い収縮性応答を示したので（図２を参照されたい）、短冊型腟組織を、実験における使用のために選択することを確認した。
【００７２】
本発明の組成物（３０ｍｇ／ｍｌ〜３００ｍｇ／ｍｌ）により処理された試験群における収縮性強度は、試験サンプルにより処理されなかった対照群と比較して、用量依存的に上昇することが確認された（対照に対して＊ｐ＜０．０５、図３を参照されたい）。
【００７３】
したがって、本発明の組成物は、３０ｍｇ／ｍｌ〜３００ｍｇ／ｍｌで腟組織の収縮性に対して強力な改善効果を示すことが確認された（Ｐ＜０．００１）。
【００７４】
【表３】
2016515574.tif 000005
【００７５】
実験例１．  短期臨床試験（１）
実施例において調製した腟錠組成物（ＳＧ２）を、韓国に住む２０歳〜５０歳の範囲の、腟弛緩症に罹患している３５名の患者と６５名の正常女性とからなる１００名のボランティアの腟内に１日１回、５日間投与し、本発明の組成物の腟収縮性に対する効果をペリノメーター（ｐｅｒｉｔｒｏ９３００、Laborie Medical Technologies Canada ULC）を用いることによって調査し、求めた。
【００７６】
腟圧を求めるためのペリノメーター（ｐｅｒｉｔｒｏ９３００、Laborie Medical Technologies Canada ULC）は、圧力の変化により変動してサイズが変化し、即ち、０ｃｍＨ２Ｏでは長さ８ｃｍで直径２６ｍｍであり、１００ｃｍＨ２Ｏでは長さ８ｃｍで直径３０．５ｍｍとなる。コンドームで包囲した装置をボランティアの腟に、装置の先端が腟の７ｃｍの深さに達する程度まで挿入した。ボランティアの身体は開脚させることによりリラックスさせ、腟筋肉を弛緩させた。装置を作動させた後、計測器の目盛を正確にゼロに合わせ、値が１００ｃｍＨ２Ｏに達する程度まで空気を挿入することにより、プローブを膨張させた。再度計測器の目盛を正確にゼロに合わせ、注意深く腰又は骨盤が動かないようにさせたボランティアの腟を、強制的に強く収縮させ、５秒間持続させて、腟筋肉の収縮性を求めた。ボランティアには、反復する判定の後少なくとも１分間休息をとることを許可し、１名のボランティアにつき３回判定することにより収縮性の平均値を算出した。
【００７７】
結果として、表４においてみることができるように、本発明の組成物により処理された腟筋肉の内圧は約３８％（３日後）及び約５２％（５日後）まで著しく（remarkedly）上昇することが確認された。
【００７８】
【表４】
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【００７９】
実験例２．  短期臨床試験（２）
実施例において調製した腟挿入錠組成物（ＳＧ５）を、韓国に住む２０歳〜５０歳の範囲の、腟乾燥症に罹患している３５名の患者と、６５名の正常女性とからなる１００名のボランティアに、１日２回、３日間外用投与し、腟乾燥に対する効果を、（Ａ）本発明の組成物による処理前及び（Ｂ）処理後に判定した。調査結果を処理後の腟乾燥に応じて５段階、即ち、（１）白帯下の量の大きな減少、（２）白帯下の量のわずかな減少、（３）白帯下の量に変化なし、（４）白帯下の量のわずかな増加、（２）白帯下の量の大きな増加に分類した。
【００８０】
結果として、白帯下の量は、本発明の組成物による処理後に８３％を超えるボランティアにおいて増加していたことが確認された。
【００８１】
したがって、表５においてみることができるように、本発明の組成物は腟乾燥症の治療に有用であることが確認された。
【００８２】
【表５】
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【００８３】
したがって、本発明の組成物は腟弛緩症又は腟乾燥症の治療において有用であることができることが判明した。
【００８４】
本発明を以上のように記載したが、本発明は様々に変動させることができることが明らかであろう。かかる変動は本発明の趣旨と範囲とを逸脱するものとみなすべきではなく、かかる改変のすべては、当業者に明白であろうように、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるべきことが意図される。
【産業上の利用可能性】
【００８５】
本発明は、哺乳動物における腟弛緩症又は腟乾燥症を治療するのに用いられる医薬の製造における塩と糖との混合物の使用に関する。本発明に記載するように、様々な試験、例えば、ニュージーランド白ウサギを用いることによる腟平滑筋収縮性試験（実験例１）；ペリノメーターを用いることによるボランティアにおける腟収縮性に対する効果（実験例２）；及びボランティアにおける腟乾燥症に対する効果（実験例３）、を介して、本発明の組合せは、腟組織の収縮性及び腟乾燥症に対する改善効果を示した。したがって、本発明の組合せは腟弛緩症又は腟乾燥症の治療又は予防において有用であることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【手続補正書】
【提出日】平成27年9月29日(2015.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として塩と糖との組合せを、膣弛緩症又は膣乾燥症を治療又は予防するのに有効な量にて含む外用組成物。
【請求項２】
前記塩が、加工塩又は未精製塩である、請求項１に記載の外用組成物。
【請求項３】
前記加工塩が、２００℃〜２０００℃の範囲の温度で２時間〜７日間の範囲の期間、未精製塩を溶融させることによって調製される溶融塩である、請求項２に記載の外用組成物。
【請求項４】
前記塩と糖との組合せが、１：１〜１：３０（重量比）の混合比の塩と糖との組合せである、請求項１に記載の外用組成物。
【請求項５】
洗浄液、ジェル、ゼリー、フォーム、クリーム、軟膏、ローション、バーム、パッチ、ペースト、噴霧溶液、及びエアロゾルからなる群から選択される局所製剤、又は腟錠、腟カプセル、腟フィルム、腟スポンジ、タンポン、及びパッドからなる群から選択される挿入製剤である、請求項１に記載の外用組成物。
【請求項６】
腟錠組成物又は洗浄液組成物である、請求項５に記載の外用組成物。
【国際調査報告】
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