(57)【要約】未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法および組成物が提供される。より具体的には、ゴナドトロピン放出ホルモンおよび発情を同期化するためのホルモンを用いて未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法および組成物が提供される。
2016508030.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；および
発情を観察することなく、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に１回のみ未経産ブタを授精する工程
を含む、方法。
【請求項２】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化１】
2016508030.tif 000050
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルから選択される］
またはその溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、請求項２記載の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
授精が、人工授精である、請求項１記載の方法。
【請求項５】
ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、請求項１記載の方法。
【請求項６】
ゴナドトロピン放出ホルモンの投与量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、請求項１記載の方法。
【請求項７】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、請求項１記載の方法。
【請求項８】
未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察し、次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程；および
未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程
を含む、方法。
【請求項９】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化２】
2016508030.tif 000051
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立してアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルから選択される］
またはその溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、請求項９記載の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
授精が、人工授精である、請求項８記載の方法。
【請求項１２】
ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、請求項８記載の方法。
【請求項１３】
ゴナドトロピン放出ホルモンの投与量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、請求項８記載の方法。
【請求項１４】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、請求項８記載の方法。
【請求項１５】
未経産ブタにおける授精の時期を同期化する方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程；および
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、発情を観察することなく１回目および２回目の授精が行われる、工程
を含む、方法。
【請求項１６】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化３】
2016508030.tif 000052
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立してアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルから選択される］
またはその溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、請求項８１記載の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
授精が、人工授精である、請求項１５記載の方法。
【請求項１９】
ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、請求項１５記載の方法。
【請求項２０】
ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、請求項１５記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は、合衆国法典第３５巻第１１９条（ｅ）の規定により、２０１２年１１月２８日に出願された、米国仮特許出願第６１／７３０，７６３号の優先権の利益を主張し、その開示は本明細書によって引用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、未経産ブタ（gilt）における授精の時期を同期化するための方法および組成物に関する。より具体的には、本発明は、ゴナドトロピン放出ホルモンおよび発情を同期化するためのホルモンを用いて未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法および組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ゴナドトロピン放出ホルモンは、１０個のアミノ酸からなるペプチドであり、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）としても既知である。ゴナドトロピン放出ホルモンは視床下部で産生され、下垂体から卵胞刺激ホルモンおよび黄体形成ホルモンの放出に関与している。ゴナドトロピン放出ホルモンは、視床下部のニューロンから放出され、卵胞刺激ホルモンおよび黄体形成ホルモン放出の複合調節に関与する。卵胞刺激ホルモンおよび黄体形成ホルモンは、組み合わせて、睾丸においてテストステロンを産生し、卵巣においてプロゲステロンおよびエストロゲンを産生する生殖腺の機能を調節し、配偶子の産生および成熟を調節する。例えば、卵胞刺激ホルモンは、卵巣における未成熟卵胞の成長および動員を刺激し、黄体形成ホルモンは、排卵を誘発する。
【０００４】
女性と男性の間でゴナドトロピン放出ホルモン分泌には差がある。男性では、ゴナドトロピン放出ホルモンは一定周期でパルス分泌されるが、女性では、パルスの頻度は、発情中に変動し、排卵直前に大量のゴナドトロピン放出ホルモンが存在する。ゴナドトロピン放出ホルモン分泌は、全ての脊椎動物において脈動性であり、的確な生殖機能に必要である。したがって、ゴナドトロピン放出ホルモンは、女性における濾胞性成長、排卵、および黄体保持の複合プロセス、ならびに男性における精子形成を調節する。
【０００５】
ゴナドトロピン放出ホルモンは、単離され、デカペプチドとして特徴付けられている。ゴナドトロピン放出ホルモンの合成型は入手可能であり、ゴナドトロピン放出ホルモンのデカペプチド構造の修飾は、ゴナドトロピンの放出を刺激するかまたは抑制する多発性ゴナドトロピン放出ホルモン類似体、例えば、黄体形成ホルモンおよび卵胞刺激ホルモンを産生している。
【０００６】
ブタ生産をより有益にするために繁殖効率を最大限にすることは商業上のブタ生産に重要なことである。発情の毎日のチェックなどの、労働集約的方法は、現在、ブタ、例えば、未経産ブタおよび雌ブタにおける人工授精の成功の可能性を増大するために必要とされている。毎日の発情検知を必要とする方法を用いることなく、発情を予測すること（すなわち、授精に最も適した時期を予測すること）は困難であるので、発情検知の毎日のチェックに充てる時間、肉体労働および材料費が、現在必要である。したがって、簡単で、労働集約度が低いが、同様に効率的な方法が、未経産ブタおよび雌ブタを含む、ブタの授精の成功を最適化し、人件費、材料費を減らし、ブタ生産の可能性を増大させるのに必要である。
【０００７】
高い雌ブタ置換率は、一貫したブタ生産フローを維持するために置換未経産ブタに相当な圧力をかける。未経産ブタにおける排卵過程に付随する変化は、繁殖成績の最適化に関する非常に重要な問題の１つである。そのため、グループにおける全ての未経産ブタが、発情を観察する毎日のレジメンを必要とすることなく、授精できるように、排卵をより正確に制御する有効な処置が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の概要）
本発明者らは、グループ中の未経産ブタが、発情を観察する毎日のレジメンを必要とすることなく、授精できるように、未経産ブタにおける排卵をより正確に制御する有効な処置法を見出した。本明細書に記載の方法および組成物は、毎日の発情検知よりかなり簡単なものであるが、予想外なことには、限定されるものではないが、産子数および生きて生まれた子ブタの総数を含む、未経産ブタの繁殖成績の最適化において、発情を観察する毎日のレジメンと同程度に有効である。
【０００９】
一つの実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；および３）発情を観察することなく、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に１回のみ未経産ブタを授精する工程を含む。
【００１０】
別の実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情期を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与し、排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、２）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察し、次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程；および３）未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程を含む。
【００１１】
さらに別の実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、２）ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程；および３）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、発情を観察することなく１回目および２回目の授精が行われる、工程を含む。
【００１２】
以下の節に記載の実施態様、またはそれらの任意の組み合わせもまた、本発明の使用にについて考慮されている。
【００１３】
１．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；および
発情を観察することなく、発情を同期化するホルモンの連日投与の最後から６日目に１回のみ未経産ブタを授精する工程
を含む、方法。
【００１４】
２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化１】
2016508030.tif 000003
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節１の方法。
【００１５】
３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、請求項２の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節２の方法。
【００１６】
４．授精が、人工授精である、節１〜３のいずれか一つの方法。
【００１７】
５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節１〜４のいずれか一つの方法。
【００１８】
６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節１〜５のいずれか一つの方法。
【００１９】
７．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節１〜６のいずれか一つの方法。
【００２０】
８．ゴナドトロピン放出ホルモンが約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜７のいずれか一つの方法。
【００２１】
９．ゴナドトロピン放出ホルモンが約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜８のいずれか一つの方法。
【００２２】
１０．ゴナドトロピン放出ホルモンが約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜９のいずれか一つの方法。
【００２３】
１１．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテル(deposition catheter)の使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節１〜１０のいずれか一つの方法。
【００２４】
１２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節１１の方法。
【００２５】
１３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節１１の方法。
【００２６】
１４．ホルモンが、酢酸塩形態である、節１〜１３のいずれか一つの方法。
【００２７】
１５．ホルモンが、ゲルを含む組成物で投与される、節１〜１２または１４のいずれか一つの方法。
【００２８】
１６．ゲルが、セルロース、デキストランおよびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節１５の方法。
【００２９】
１７．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節１６の方法。
【００３０】
１８．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節１７の方法。
【００３１】
１９．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節１８の方法。
【００３２】
２０．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節１５の方法。
【００３３】
２１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、膣内に投与される、節１〜１２または１４〜２０のいずれか一つの方法。
【００３４】
２２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、膣前部(anterior vagina)に投与される、節２１の方法。
【００３５】
２３．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節１〜２２のいずれか一つの方法。
【００３６】
２４．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化２】
2016508030.tif 000004
である、節２〜２３のいずれか一つの方法。
【００３７】
２５．ゴナドトロピン放出ホルモンがトリプトレリンである、節１〜２４のいずれか一つの方法。
【００３８】
２６．発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節１〜２５のいずれか一つの方法。
【００３９】
２７．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節１〜１２または１４〜２６のいずれか一つの方法。
【００４０】
２８.ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節１〜１２または１４〜２７のいずれか一つの方法。
【００４１】
２９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節１〜１２または１４〜２８のいずれか一つの方法。
【００４２】
３０．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節２９の方法。
【００４３】
３１．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節１〜１２または１４〜３０のいずれか一つの方法。
【００４４】
３２．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節３１の方法。
【００４５】
３３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節１〜１４または２１〜２６のいずれか一つの方法。
【００４６】
３４．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節３３の方法。
【００４７】
３５.未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節１〜３４のいずれか一つの方法。
【００４８】
３６．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節１〜３５のいずれか一つの方法。
【００４９】
３７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節１〜３６のいずれか一つの方法。
【００５０】
３８.ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節１〜３６のいずれか一つの方法。
【００５１】
３９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後に授精される、節１〜３８のいずれか一つの方法。
【００５２】
４０．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察し、次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程；および
未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程
を含む、方法。
【００５３】
４１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化３】
2016508030.tif 000005
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節４０の方法。
【００５４】
４２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、節４１の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；およびＲ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節４１の方法。
【００５５】
４３．授精が、人工授精である、節４０〜４２のいずれか一つの方法。
【００５６】
４４．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節４０〜４３のいずれか一つの方法。
【００５７】
４５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節４０〜４４のいずれか一つの方法。
【００５８】
４６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節４０〜４５のいずれか一つの方法。
【００５９】
４７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４６のいずれか一つの方法。
【００６０】
４８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４７のいずれか一つの方法。
【００６１】
４９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４８のいずれか一つの方法。
【００６２】
５０．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節４０〜４９のいずれか一つの方法。
【００６３】
５１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節５０の方法。
【００６４】
５２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節５０の方法。
【００６５】
５３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、酢酸塩形態である、節４０〜５２のいずれか一つの方法。
【００６６】
５４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、ゲルを含む組成物で投与される、節４０〜５１または５３のいずれか一つの方法。
【００６７】
５５．ゲルが、セルロース、デキストラン、およびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節５４の方法。
【００６８】
５６．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節５５の方法。
【００６９】
５７．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節５６の方法。
【００７０】
５８．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節５７の方法。
【００７１】
５９．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節５４の方法
【００７２】
６０．ゴナドトロピン放出ホルモンが膣内に投与される、節４０〜５１または５３〜５９のいずれか一つの方法。
【００７３】
６１．ゴナドトロピン放出ホルモンが前膣部に投与される、節６０の方法。
【００７４】
６２．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節４０〜６１のいずれか一つの方法。
【００７５】
６３．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化４】
2016508030.tif 000006
である、節４１〜６２のいずれか一つの方法。
【００７６】
６４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、節４０〜６３のいずれか一つの方法。
【００７７】
６５.発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節４０〜６４のいずれか一つの方法。
【００７８】
６６．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節４０〜５１または５３〜６５のいずれか一つの方法。
【００７９】
６７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節４０〜５１または５３〜６６のいずれか一つの方法。
【００８０】
６８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節４０〜５１または５３〜６７のいずれか一つの方法。
【００８１】
６９．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節６８の方法。
【００８２】
７０．ゴナドトロピン放出ホルモンが、組成物中に存在し、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節４０〜５１または５３〜６９のいずれか一つの方法。
【００８３】
７１．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節７０の方法。
【００８４】
７２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節４０〜５３または６０〜６５のいずれか一つの方法。
【００８５】
７３．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節７２の方法。
【００８６】
７４．未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節４０〜７３のいずれか一つの方法。
【００８７】
７５．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節４０〜７４のいずれか一つの方法。
【００８８】
７６．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節４０〜７５のいずれか一つの方法。
【００８９】
７７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節４０〜７５のいずれか一つの方法。
【００９０】
７８．未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情している場合に、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与時間の約２時間以内に１回目として授精される、節４０〜７７のいずれか一つの方法。
【００９１】
７９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後、６日目に授精される、節４０〜７８のいずれか一つの方法。
【００９２】
８０．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程；および
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、１回目および２回目の授精が、発情を観察することなく、行われる、工程
を含む、方法。
【００９３】
８１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化５】
2016508030.tif 000007
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節８０の方法。
【００９４】
８２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、節８１の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；およびＲ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節８１の方法。
【００９５】
８３．授精が、人工授精である、節８０〜８２のいずれか一つの方法。
【００９６】
８４．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節８０〜８３のいずれか一つの方法。
【００９７】
８５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節８０〜８４のいずれか一つの方法。
【００９８】
８６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節８０〜８５のいずれか一つの方法。
【００９９】
８７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８６のいずれか一つの方法。
【０１００】
８８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８７のいずれか一つの方法。
【０１０１】
８９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８８のいずれか一つの方法。
【０１０２】
９０．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節８０〜８９のいずれか一つの方法。
【０１０３】
９１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節９０の方法。
【０１０４】
９２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節９０の方法。
【０１０５】
９３．ゴナドトロピン放出ホルモンが酢酸塩形態である、節８０〜９２のいずれか一つの方法。
【０１０６】
９４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、ゲルを含む組成物中に投与される、節８０〜９１または９３のいずれか一つの方法。
【０１０７】
９５．ゲルが、セルロース、デキストラン、およびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節９４の方法。
【０１０８】
９６．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節９５の方法。
【０１０９】
９７．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節９６の方法。
【０１１０】
９８．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節９７の方法。
【０１１１】
９９．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節９４の方法
【０１１２】
１００．ゴナドトロピン放出ホルモンが膣内に投与される、節９０〜９１または９３〜９９のいずれか一つの方法。
【０１１３】
１０１．ゴナドトロピン放出ホルモンが前膣部に投与される、節１００の方法。
【０１１４】
１０２．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節８０〜１０１のいずれか一つの方法。
【０１１５】
１０３．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化６】
2016508030.tif 000008
である、節８１〜１０２のいずれか一つの方法。
【０１１６】
１０４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、節８０〜１０３のいずれか一つの方法。
【０１１７】
１０５．発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節８０〜１０４のいずれか一つの方法。
【０１１８】
１０６．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節８０〜９１または９３〜１０５のいずれか一つの方法。
【０１１９】
１０７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節８０〜９１または９３〜１０６のいずれか一つの方法。
【０１２０】
１０８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節８０〜９１または９３〜１０７のいずれか一つの方法。
【０１２１】
１０９．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節１０８の方法。
【０１２２】
１１０．ゴナドトロピン放出ホルモンが、組成物中に存在し、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節８０〜９１または９３〜１０９のいずれか一つの方法。
【０１２３】
１１１．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節７０の方法。
【０１２４】
１１２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節８０〜９３または１００〜１０５のいずれか一つの方法。
【０１２５】
１１３．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節１１２の方法。
【０１２６】
１１４．未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節８０〜１１３のいずれか一つの方法。
【０１２７】
１１５．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節８０〜１１４のいずれか一つの方法。
【０１２８】
１１６．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節８０〜１１５のいずれか一つの方法。
【０１２９】
１１７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節８０〜１１５のいずれか一つの方法。
【０１３０】
１１８．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約４時間後に１回目として授精される、節８０〜１１７のいずれか一つの方法。
【０１３１】
１１９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後に２回目として授精される、節８０〜１１８のいずれか一つの方法。
【０１３２】
１２０．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約３時間後に１回目として授精される、節８０〜１１９のいずれか一つの方法。
【０１３３】
１２１．未経産ブタの産子数が、毎日の発情検知に基づいて授精した対照未経産ブタの産子数と同様である、節１〜１２０のいずれか一つの方法。
【０１３４】
１２２．未経産ブタに対する生きて生まれた子ブタの総数が、毎日の発情検知に基づいて授精した対照未経産ブタに対する生きて生まれた子ブタの総数と同様である、節１〜１２１のいずれか一つの方法。
【図面の簡単な説明】
【０１３５】
【図１】図１は、レプリケート１における、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から９６時間後のビヒクルゲル（ＶＧ９６）または９６時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ９６）、１２０時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１２０）もしくは１４４時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１４４）の投与後に排卵した、未経産ブタの累積率を示す。
【０１３６】
【図２】図２は、レプリケート２における、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から９６時間後のビヒクルゲル（ＶＧ９６）または９６時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ９６）、１２０時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１２０）もしくは１４４時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１４４）の投与後に排卵した、未経産ブタの累積率を示す。
【０１３７】
【図３】図３は、組み合わせたレプリケート１および２における、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から９６時間後のビヒクルゲル（ＶＧ９６）または９６時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ９６）、１２０時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１２０）もしくは１４４時間後の２００μｇトリプトレリン含有トリプトレリンゲル（ＴＧ１４４）の投与後に排卵した、未経産ブタの累積率を示す。
【０１３８】
【図４】図４は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与から１２０時間後のビヒクルまたは、１００、２００、もしくは４００ｍｃｇのトリプトレリンの投与後に排卵した、未経産ブタの累積率を示す。
【発明を実施するための形態】
【０１３９】
（実施態様の詳細な説明）
本発明者らは、グループ中の未経産ブタが、発情を観察する毎日のレジメンを必要とすることなく授精できるように未経産ブタにおける排卵をより正確に制御するのに有効な処置を提供する本明細書に記載の方法、キットおよび組成物を見出した。本明細書に記載の方法および組成物は、毎日の発情検知よりかなり簡単なものであるが、予想外なことには、限定されるものではないが、産子数および生きて生まれた子ブタの総数を含む、未経産ブタの繁殖成績の最適化において、発情を観察する毎日のレジメンと同程度に有効である。
【０１４０】
一つの実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情期を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；および３）発情期を観察することなく、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に１回のみ未経産ブタを授精する工程を含む。
【０１４１】
別の実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、３）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察し、次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタがゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程、および４）未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合に、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程を含む。
【０１４２】
また別の実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、３）ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程、および４）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、１回目および２回目の授精が、発情を観察することなく、行われる、工程を含む。上記の各実施態様について、本特許出願の実施態様の詳細な説明項に記載の、特徴またはそれらの組み合わせのいずれかが適用可能である。
【０１４３】
例えば、以下の節に記載の実施態様、またはそれらの組み合わせは、本発明の方法および組成物の使用について考慮されている。
【０１４４】
１．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；および
発情を観察することなく、発情を同期化するホルモンの連日投与の最後から６日目に１回のみ未経産ブタを授精する工程
を含む、方法。
【０１４５】
２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化７】
2016508030.tif 000009
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節１の方法。
【０１４６】
３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、請求項２の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節２の方法。
【０１４７】
４．授精が、人工授精である、節１〜３のいずれか一つの方法。
【０１４８】
５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節１〜４のいずれか一つの方法。
【０１４９】
６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節１〜５のいずれか一つの方法。
【０１５０】
７．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節１〜６のいずれか一つの方法。
【０１５１】
８．ゴナドトロピン放出ホルモンが約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜７のいずれか一つの方法。
【０１５２】
９．ゴナドトロピン放出ホルモンが約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜８のいずれか一つの方法。
１０．ゴナドトロピン放出ホルモンが約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節１〜９のいずれか一つの方法。
【０１５３】
１１．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節１〜１０のいずれか一つの方法。
【０１５４】
１２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節１１の方法。
【０１５５】
１３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節１１の方法。
【０１５６】
１４．ホルモンが、酢酸塩形態である、節１〜１３のいずれか一つの方法。
【０１５７】
１５．ホルモンが、ゲルを含む組成物で投与される、節１〜１２または１４のいずれか一つの方法。
【０１５８】
１６．ゲルが、セルロース、デキストランおよびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節１５の方法。
【０１５９】
１７．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節１６の方法。
【０１６０】
１８．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節１７の方法。
【０１６１】
１９．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節１８の方法。
【０１６２】
２０．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節１５の方法。
【０１６３】
２１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、膣内に投与される、節１〜１２または１４〜２０のいずれか一つの方法。
【０１６４】
２２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、膣前部(anterior vagina)に投与される、節２１の方法。
【０１６５】
２３．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節１〜２２のいずれか一つの方法。
【０１６６】
２４．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化８】
2016508030.tif 000010
である、節２〜２３のいずれか一つの方法。
【０１６７】
２５．ゴナドトロピン放出ホルモンがトリプトレリンである、節１〜２４のいずれか一つの方法。
【０１６８】
２６．発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節１〜２５のいずれか一つの方法。
【０１６９】
２７．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節１〜１２または１４〜２６のいずれか一つの方法。
【０１７０】
２８.ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節１〜１２または１４〜２７のいずれか一つの方法。
【０１７１】
２９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節１〜１２または１４〜２８のいずれか一つの方法。
【０１７２】
３０．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節２９の方法。
【０１７３】
３１．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節１〜１２または１４〜３０のいずれか一つの方法。
【０１７４】
３２．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節３１の方法。
【０１７５】
３３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節１〜１４または２１〜２６のいずれか一つの方法。
【０１７６】
３４．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節３３の方法。
【０１７７】
３５.未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節１〜３４のいずれか一つの方法。
【０１７８】
３６．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節１〜３５のいずれか一つの方法。
【０１７９】
３７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節１〜３６のいずれか一つの方法。
【０１８０】
３８.ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節１〜３６のいずれか一つの方法。
【０１８１】
３９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後に授精される、節１〜３８のいずれか一つの方法。
【０１８２】
４０．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察し、次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程；および
未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程
を含む、方法。
【０１８３】
４１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化９】
2016508030.tif 000011
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節４０の方法。
【０１８４】
４２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、節４１の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；およびＲ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節４１の方法。
【０１８５】
４３．授精が、人工授精である、節４０〜４２のいずれか一つの方法。
【０１８６】
４４．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節４０〜４３のいずれか一つの方法。
【０１８７】
４５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節４０〜４４のいずれか一つの方法。
【０１８８】
４６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節４０〜４５のいずれか一つの方法。
【０１８９】
４７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４６のいずれか一つの方法。
【０１９０】
４８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４７のいずれか一つの方法。
【０１９１】
４９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節４０〜４８のいずれか一つの方法。
【０１９２】
５０．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節４０〜４９のいずれか一つの方法。
【０１９３】
５１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節５０の方法。
【０１９４】
５２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節５０の方法。
【０１９５】
５３．ゴナドトロピン放出ホルモンが、酢酸塩形態である、節４０〜５２のいずれか一つの方法。
【０１９６】
５４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、ゲルを含む組成物で投与される、節４０〜５１または５３のいずれか一つの方法。
【０１９７】
５５．ゲルが、セルロース、デキストラン、およびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節５４の方法。
【０１９８】
５６．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節５５の方法。
【０１９９】
５７．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節５６の方法。
【０２００】
５８．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節５７の方法。
【０２０１】
５９．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節５４の方法
【０２０２】
６０．ゴナドトロピン放出ホルモンが膣内に投与される、節４０〜５１または５３〜５９のいずれか一つの方法。
【０２０３】
６１．ゴナドトロピン放出ホルモンが前膣部に投与される、節６０の方法。
【０２０４】
６２．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節４０〜６１のいずれか一つの方法。
【０２０５】
６３．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化１０】
2016508030.tif 000012
である、節４１〜６２のいずれか一つの方法。
【０２０６】
６４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、節４０〜６３のいずれか一つの方法。
【０２０７】
６５.発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節４０〜６４のいずれか一つの方法。
【０２０８】
６６．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節４０〜５１または５３〜６５のいずれか一つの方法。
【０２０９】
６７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節４０〜５１または５３〜６６のいずれか一つの方法。
【０２１０】
６８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節４０〜５１または５３〜６７のいずれか一つの方法。
【０２１１】
６９．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節６８の方法。
【０２１２】
７０．ゴナドトロピン放出ホルモンが、組成物中に存在し、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節４０〜５１または５３〜６９のいずれか一つの方法。
【０２１３】
７１．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節７０の方法。
【０２１４】
７２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節４０〜５３または６０〜６５のいずれか一つの方法。
【０２１５】
７３．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節７２の方法。
【０２１６】
７４．未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節４０〜７３のいずれか一つの方法。
【０２１７】
７５．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節４０〜７４のいずれか一つの方法。
【０２１８】
７６．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節４０〜７５のいずれか一つの方法。
【０２１９】
７７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節４０〜７５のいずれか一つの方法。
【０２２０】
７８．未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情している場合に、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与時間の約２時間以内に１回目として授精される、節４０〜７７のいずれか一つの方法。
【０２２１】
７９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後、６日目に授精される、節４０〜７８のいずれか一つの方法。
【０２２２】
８０．未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法であって、
発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程；
排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程；
ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程；および
発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、１回目および２回目の授精が、発情を観察することなく、行われる、工程
を含む、方法。
【０２２３】
８１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、式：
【化１１】
2016508030.tif 000013
［式中；
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立して、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、所望により置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルからなる群から選択される］
またはそれらの溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩を有する、節８０の方法。
【０２２４】
８２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、節８１の式で示される化合物からなる群から選択され、ここで、
ａ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｂ）Ｒ１は水素、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｃ）Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｄ）Ｒ１は２−メチルプロピル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｅ）Ｒ１は２−ナフチルメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｆ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｇ）Ｒ１はベンジル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｈ）Ｒ１はｔ−ブトキシメチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素であり；
ｉ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素であり；
ｊ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｋ）Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチル、Ｒ２は水素、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｌ）Ｒ１はメチル、Ｒ２は水素、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｍ）Ｒ１は４−アミノブチル、Ｒ２は水素、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲであり；
ｎ）Ｒ１はメチル、Ｒ２はメチル、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；およびＲ５は水素であり；および
ｏ）Ｒ１はエチル、Ｒ２は水素、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の構造はＲである、節８１の方法。
【０２２５】
８３．授精が、人工授精である、節８０〜８２のいずれか一つの方法。
【０２２６】
８４．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１μｇ〜約５００μｇである、節８０〜８３のいずれか一つの方法。
【０２２７】
８５．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約１００μｇ〜約３００μｇである、節８０〜８４のいずれか一つの方法。
【０２２８】
８６．ゴナドトロピン放出ホルモンが有効量で投与され、ゴナドトロピン放出ホルモンの有効量が約２００μｇである、節８０〜８５のいずれか一つの方法。
【０２２９】
８７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８６のいずれか一つの方法。
【０２３０】
８８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８７のいずれか一つの方法。
【０２３１】
８９．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約１００μｇ／ｍＬの濃度である、節８０〜８８のいずれか一つの方法。
【０２３２】
９０．ゴナドトロピン放出ホルモンの用量が、デポジション・カテーテルの使用、手動投与、および注射からなる群から選択される方法を用いて投与される、節８０〜８９のいずれか一つの方法。
【０２３３】
９１．ゴナドトロピン放出ホルモンが、デポジション・カテーテルを用いて投与される、節９０の方法。
【０２３４】
９２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、注射によって投与される、節９０の方法。
【０２３５】
９３．ゴナドトロピン放出ホルモンが酢酸塩形態である、節８０〜９２のいずれか一つの方法。
【０２３６】
９４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、ゲルを含む組成物中に投与される、節８０〜９１または９３のいずれか一つの方法。
【０２３７】
９５．ゲルが、セルロース、デキストラン、およびアルギン酸塩からなる群から選択される多糖である、節９４の方法。
【０２３８】
９６．多糖がセルロースであり、セルロースがメチルセルロースである、節９５の方法。
【０２３９】
９７．ゲルが、約０．５重量％〜約４．０重量％のメチルセルロースを含む、節９６の方法。
【０２４０】
９８．ゲルが、１．２％のメチルセルロースである、節９７の方法。
【０２４１】
９９．ゲルが、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰの粘度を有する、節９４の方法
【０２４２】
１００．ゴナドトロピン放出ホルモンが膣内に投与される、節９０〜９１または９３〜９９のいずれか一つの方法。
【０２４３】
１０１．ゴナドトロピン放出ホルモンが前膣部に投与される、節１００の方法。
【０２４４】
１０２．未経産ブタの生殖能力をもたらす、節８０〜１０１のいずれか一つの方法。
【０２４５】
１０３．式中、ＸがＨ２ＣＣ（Ｏ）ＮＨ２、Ｒ１が水素、およびＲ２が
【化１２】
2016508030.tif 000014
である、節８１〜１０２のいずれか一つの方法。
【０２４６】
１０４．ゴナドトロピン放出ホルモンが、トリプトレリンである、節８０〜１０３のいずれか一つの方法。
【０２４７】
１０５．発情を同期化するためのホルモンが、アルトレノジストである、節８０〜１０４のいずれか一つの方法。
【０２４８】
１０６．ゴナドトロピン放出ホルモンが組成物中にあり、該組成物がＬ−メチオニンである安定剤をさらに含む、節８０〜９１または９３〜１０５のいずれか一つの方法。
【０２４９】
１０７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、約５〜約６のｐＨを有する組成物中である、節８０〜９１または９３〜１０６のいずれか一つの方法。
【０２５０】
１０８．ゴナドトロピン放出ホルモンが、保存剤をさらに含む組成物中にある、節８０〜９１または９３〜１０７のいずれか一つの方法。
【０２５１】
１０９．保存剤が、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選択される、節１０８の方法。
【０２５２】
１１０．ゴナドトロピン放出ホルモンが、組成物中に存在し、該組成物が、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む、節８０〜９１または９３〜１０９のいずれか一つの方法。
【０２５３】
１１１．組成物が、体積当たり約０．０９重量％の量のメチルパラベン、体積当たり約０．０１重量％の量のプロピルパラベン、体積当たり約０．９１重量％の量の塩化ナトリウム、体積当たり約０．１８６重量％の量のクエン酸ナトリウム、体積当たり約０．１重量％の量のＬ−メチオニン、体積当たり約０．０７重量％の量のクエン酸、体積当たり約０．０１％の量のトリプトレリン、および約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を提供する量のメチルセルロースを含む、節７０の方法。
【０２５４】
１１２．ゴナドトロピン放出ホルモンが、緩衝食塩水、液体アルコール、グリコール、グルコース溶液、エステル、アミド、および滅菌水からなる群から選択される賦形剤中にある、節８０〜９３または１００〜１０５のいずれか一つの方法。
【０２５５】
１１３．賦形剤が、酢酸塩緩衝剤、ホウ酸塩緩衝剤、炭酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、およびリン酸水素ニナトリウムからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤を含む、節１１２の方法。
【０２５６】
１１４．未経産ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含む、節８０〜１１３のいずれか一つの方法。
【０２５７】
１１５．発情を同期化するためのホルモンが、給与によって投与される、節８０〜１１４のいずれか一つの方法。
【０２５８】
１１６．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１１８〜約１２４時間後に投与される、節８０〜１１５のいずれか一つの方法。
【０２５９】
１１７．ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から約１２４〜約１３２時間後に投与される、節８０〜１１５のいずれか一つの方法。
【０２６０】
１１８．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約４時間後に１回目として授精される、節８０〜１１７のいずれか一つの方法。
【０２６１】
１１９．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモン投与の約２４〜約２８時間後に２回目として授精される、節８０〜１１８のいずれか一つの方法。
【０２６２】
１２０．未経産ブタが、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約３時間後に１回目として授精される、節８０〜１１９のいずれか一つの方法。
【０２６３】
１２１．未経産ブタの産子数が、毎日の発情検知に基づいて授精した対照未経産ブタの産子数と同様である、節１〜１２０のいずれか一つの方法。
【０２６４】
１２２．未経産ブタに対する生きて生まれた子ブタの総数が、毎日の発情検知に基づいて授精した対照未経産ブタに対する生きて生まれた子ブタの総数と同様である、節１〜１２１のいずれか一つの方法。
【０２６５】
本明細書に用いられる、「毎日の発情検知に基づき授精した対照未経産ブタ」は、授精の最適時期を予測するために２〜８日間またはそれ以上発情を観察する、農場で用いられる標準手順（すなわち、発情を観察するための毎日のレジメン）に基づいて授精した未経産ブタを意味する。下記の全ての具体例、修飾、および別の形態は、実施態様の詳細な説明の前記段落［００１３９］〜［００２６４］に記載の実施態様および発明の概要に記載の実施態様に適用されうる。
【０２６６】
本明細書に記載の未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法には、１回量のゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程が含まれる。一つの実施態様にしたがって、ホルモンは、思春期未経産ブタを含み、性的に成熟している（すなわち、少なくとも１回の発情周期があった）または性的に未成熟である（すなわち、発情周期が全くなかった）未経産ブタを含む、任意のブタ種、例えば、雌ブタまたは未経産ブタ（すなわち、初めての交配前の雌ブタ）に投与される。本明細書に記載の方法は、未経産ブタの生殖能力をもたらしうる。本明細書に記載の方法は、典型的には、限定されるものではないが、産子数および生きて生まれた子ブタの総数を含む、未経産ブタの繁殖成績の最適化において、発情を観察する毎日のレジメンと同程度に有効である。
【０２６７】
一つの実施態様において、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、および３）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に、発情を観察することなく、１回のみ未経産ブタを授精する工程を含む。
【０２６８】
実例として、段落［００２６７］の実施態様において、未経産ブタは、典型的には、発情を同期化するためのホルモン（例えば、アルトレノゲスト）の未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に、排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量のゴナドトロピン放出ホルモンが投与される。本実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目に投与されうる。別の具体例として、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２０時間後または約１２８時間後に投与されうる。本明細書に用いられる、語句「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から４日目」、「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目」、および「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目」は、それぞれ、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後が０日目である、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目、５日目、または６日目を意味する。
【０２６９】
段落［００２６７］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与から約１０５〜約１２０時間後、約１０５〜約１３６時間後、約１１６〜約１２６時間後、約１１７〜約１２５時間後、約１１７〜約１２４時間後、約１１８〜約１２２時間後、約１１９〜約１２１時間後、または約１２０時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１１７、約１１８、約１１９、約１２０、約１２１、約１２２、約１２３、または約１２４時間後に投与されうる。
【０２７０】
段落［００２６７］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２４〜約１３４時間後、約１２５〜約１３３時間後、約１２５〜約１３２時間後、約１２６〜約１３０時間後、約１２７〜約１２９時間後、または約１２８時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２５、約１２６、約１２７、約１２８、約１２９、約１３０、約１３１、または約１３２時間後に投与されうる。
【０２７１】
段落［００２６７］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンでの処置を受けている未経産ブタは、典型的には、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の２０時間（または２０時間±２時間）後、２２時間（または２２時間±２時間）後、２３時間（または２３時間±２時間）後、２４時間（または２４時間±２時間）後、２５時間（または２５時間±２時間）後、２６時間（または２６時間±２時間）後、２７時間（または２７時間±２時間）後、２８時間（または２８時間±２時間）後、２９時間（または２９時間±２時間）後、または３０時間（または３０時間±２時間）後に１回授精される。
【０２７２】
段落［００２６７］の実施態様において、未経産ブタはまた、例えば、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２４〜約２８時間後に１回授精されうる。種々のさらなる具体例として、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２２〜約３０時間後、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約１０〜４０時間、約２３〜約２９時間、約２４〜約２７時間、または約２３〜約３０時間後に授精される。本実施態様において、未経産ブタは、発情を観察することなく授精される。本明細書に用いられる、語句「発情を観察することなく」は、動物が発情しているか否かを検知するための当該分野にて周知の試験を行わないことを意味する。
【０２７３】
未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、３）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情を観察する工程、４）次いで、未経産ブタが発情している場合、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に未経産ブタを授精する工程であって、該未経産ブタがゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精される、工程、および５）未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に発情しているかまたは発情していない場合に、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に未経産ブタを授精する工程であって、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察されていない、工程を含む。
【０２７４】
実例として、段落［００２７３］の実施態様において、未経産ブタは、典型的には、発情を同期化するためのホルモン（例えば、アルトレノゲスト）の未経産ブタへの最後の連日投与後に、排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量のゴナドトロピン放出ホルモンが投与される。実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目に投与されうる。別の具体例として、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２０時間後または約１２８時間後に投与されうる。本実施態様について、語句「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から４日目」、「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目」、および「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目」は、それぞれ、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後が０日目である、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目、５日目、または６日目を意味する。
【０２７５】
段落［００２７３］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、本実施態様では、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から、約１０５〜約１２０時間後、約１０５〜約１３６時間後、約１１６〜約１２６時間後、約１１７〜約１２５時間後、約１１７〜約１２４時間後、約１１８〜約１２２時間後，約１１９〜約１２１時間後、または約１２０時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１１７、約１１８、約１１９、約１２０、約１２１、約１２２、約１２３、または約１２４時間後に投与されうる。
【０２７６】
段落［００２７３］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２４〜約１３４時間後、約１２５〜約１３３時間後、約１２５〜約１３２時間後、約１２６〜約１３０時間後、約１２７〜約１２９時間後、または約１２８時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２５、約１２６、約１２７、約１２８、約１２９、約１３０、約１３１、または約１３２時間後に投与されうる。
【０２７７】
段落［００２７３］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンでの処置を受けている未経産ブタは、１回または２回授精される。未経産ブタは、発情を同期化するためのホルモン（例えば、アルトレノゲスト）の連日投与の最後から５日目に発情している場合、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて授精されうる。本明細書に用いられる、「ゴナドトロピン放出ホルモンの投与と組み合わせて」は、未経産ブタが、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に授精され、ゴナドトロピン放出ホルモンが、同日（すなわち、５日目）に未経産ブタに投与されることを意味する。授精および未経産ブタへのゴナドトロピン放出ホルモンの投与は、任意の順番で行われうる。例えば、未経産ブタは、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目の朝に授精され、その後、ゴナドトロピン放出ホルモンは、５日目の間であればいつでも未経産ブタに投与されうる。本実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、未経産ブタを授精した後の少なくとも２時間で未経産ブタに投与することが好ましい。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、最初に、例えば、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目の朝に未経産ブタに投与されうる。次いで、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンが未経産ブタに投与された後の５日目の間であればその後いつでも授精されうる。本実施態様において、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンを投与した後少なくとも２時間で授精されることが好ましい。種々の他の実施態様において、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンを投与した時から約２時間以内に授精される。例えば、未経産ブタの授精および未経産ブタへのゴナドトロピン放出ホルモンの投与の順番に関わらずゴナドトロピン放出ホルモンの投与時から約１０分以内、約２０分以内、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約７５分以内、または約１２０分以内に授精は行われうる。
【０２７８】
したがって、段落［００２７３］の実施態様において、５日目の授精は、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１０８〜約１２０時間後、約１０８〜約１３２時間後、約１１６〜約１２６時間後、約１１７〜約１２５時間後、約１１７〜約１２４時間後、約１１８〜約１２２時間後、約１１９〜約１２１時間後、または約１２０時間後に行われうる。他の具体例として、５日目の授精は、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２４〜約１３４時間後、約１２５〜約１３３時間後、約１２５〜約１３２時間後、約１２６〜約１３０時間後、約１２７〜約１２９時間後、約１２８時間後に行われうる。
【０２７９】
段落［００２７３］の実施態様において、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与後２２時間（または２２時間±２時間）、２３時間（または２３時間±２時間）、２４時間（または２４時間±２時間）、２５時間（または２５時間±２時間）、２６時間（または２６時間±２時間）、２７時間（または２７時間±２時間）、２８時間（または２８時間±２時間）、２９時間（または２９時間±２時間）、または３０時間（または３０時間±２時間）の６日目に授精される。
【０２８０】
段落［００２７３］の実施態様において、未経産ブタは、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に、例えば、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２４〜約２８時間後に授精されうる。種々のさらなる具体例として、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２２〜約３０時間後、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約１０〜約４０時間後、約２３〜約２９時間後、約２４〜約２７時間後、または約２３〜約３０時間後の発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に授精される。本実施態様において、未経産ブタは、発情している場合（すなわち、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に発情が観察された場合）に、発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目に授精される。未経産ブタは、発情を観察することなく発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に授精される。
【０２８１】
未経産ブタにおける授精の時期を同期化するための方法が提供される。該方法は、１）発情を同期化するためのホルモンを未経産ブタに投与する工程、２）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを未経産ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に投与される、工程、３）ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２〜約７時間後に１回目として未経産ブタを授精する工程、および４）発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から６日目に２回目として未経産ブタを授精する工程であって、１回目および２回目の授精が、発情を観察することなく、行われる、工程を含む。
【０２８２】
実例として、段落［００２８１］の実施態様において、未経産ブタは、典型的には、発情を同期化するためのホルモン（例えば、アルトレノゲスト）の未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に、排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量のゴナドトロピン放出ホルモンが投与される。本実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目に、投与されうる。別の具体例として、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から５日目に、例えば、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２０〜約１２８時間後に投与されうる。本実施態様について、語句「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から４日目」、「発情を同期化するためのホルモンの連日投与の最後から５日目」、および「発情基を同期化するホルモンの連日投与の最後から６日目」は、それぞれ、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後が０日目である、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から４日目、５日目、または６日目を意味する。
【０２８３】
段落［００２８１］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、本実施態様では、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与から、約１０５〜約１２０時間後、約１０５〜約１３６時間後、約１１６〜約１２６時間後、約１１７〜約１２５時間後、約１１７〜約１２４時間後、約１１８〜約１２２時間後，約１１９〜約１２１時間後、または約１２０時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１１７、約１１８、約１１９、約１２０、約１２１、約１２２、約１２３、または約１２４時間後に投与されうる。
【０２８４】
段落［００２８１］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２４〜約１３４時間後、約１２５〜約１３３時間後、約１２５〜約１３２時間後、約１２６〜約１３０時間後、約１２７〜約１２９時間後、または約１２８時間後に投与されうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、発情を同期化するためのホルモンの未経産ブタへの連日投与の最後から約１２５、約１２６、約１２７、約１２８、約１２９、約１３０、約１３１、または約１３２時間後に投与されうる。
【０２８５】
段落［００２８１］の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンでの治療を受けている未経産ブタは、典型的には、２回授精される。未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２時間〜約８時間後またはゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２時間〜約１４時間後に１回目として授精される。他の実施態様において、１回目の授精は、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２時間〜約７時間後、約２時間〜約６時間後、約２時間〜約５時間後、または約２時間〜約４時間後でありうる。
【０２８６】
段落［００２８１］の実施態様において、未経産ブタは、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の２２時間（または２２時間±２時間）、２３時間（または２３時間±２時間）、２４時間（または２４時間±２時間）、２５時間（または２５時間±２時間）、２６時間（または２６時間±２時間）、２７時間（または２７時間±２時間）、２８時間（または２８時間±２時間）、２９時間（または２９時間±２時間）、または３０時間（または３０時間±２時間）後に２回目として授精される。
【０２８７】
段落［００２８１］の実施態様において、未経産ブタはまた、２回目として、例えば、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２４〜約２８時間後に授精されうる。種々のさらなる具体例として、未経産ブタは、２回目としてゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２２〜約３０時間後、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約１０〜約４０時間後、約２３〜約２９時間後、約２４〜約２７時間後、または約２３〜約３０時間後に授精される。本実施態様において、未経産ブタは、発情を観察することなく１回目および２回目として授精される。本明細書に用いられる、語句「発情を観察することなく」は、動物が発情しているか否かを検知するための当該分野にて周知の試験を行わないことを意味する。
【０２８８】
下記の実施態様のいずれかは、上記の実施態様のいずれかに適用できる。ゴナドトロピン放出ホルモン実施態様のいずれかおよび任意の投与方法（例えば、本明細書に記載のゲル組成物における注射または膣内投与）を含む、下記の実施態様のいずれかはまた、実施態様が未経産ブタに特異的に限定される場合を除き、雌ブタにおける授精の時期を同期化するための方法に適用できる。該方法は、１）排卵を同期化するためのその他のホルモンを投与することなく、単回投与量の、排卵を同期化するためのゴナドトロピン放出ホルモンを雌ブタに投与する工程であって、該ゴナドトロピン放出ホルモンが、離乳後４日目に投与される、工程、および３）ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約１８〜約２４時間後、例えば、ゴナドトロピン放出ホルモンの投与の約２０±２時間または約２０±１時間後に１回のみ、発情を観察することなく、雌ブタを授精させる工程を含む。
【０２８９】
動物の繁殖は、人工授精（ＡＩ）を含む、任意の手法によるものでありうるか、または自然繁殖でありうる。本明細書に記載の任意の実施態様において、第２の繁殖またはその後の繁殖（例えば、人工授精）が行われうる。さらに別の実施態様において、ブタが１回のみ人工授精される。別の具体例として、発情検知（すなわち、発情の観察）はない。別の具体例として、本明細書に記載の方法は、人工授精の時期を確定するために観察過程中に未経産ブタまたは雌ブタを雄ブタに触れさせる工程をさらに含みうる。
【０２９０】
本明細書に記載の任意の実施態様において、ブタにおける授精の時期を同期化するための組成物は、ａ）ゴナドトロピン放出ホルモン；およびｂ）約ｐＨ４〜約ｐＨ９の範囲のｐＨを得るための医薬的に許容されるｐＨ緩衝剤を含む。記載される組成物のｐＨは、約４〜約９の範囲に及びうる。他の実施態様において、ｐＨは、約４〜約８、約４〜約７、約４．５〜約６．５、約４．５〜約６．５、約４．５〜約６、または約５〜約６の範囲に及びうる。
【０２９１】
さらに、ゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、剤形に応じて、添加剤、例えば、種々の賦形剤、崩壊剤、結合剤、塩類、滑沢剤、局所麻酔薬（例えば、リドカイン）、希釈剤、保存剤、キレート剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定剤、溶液アジュバント、もしくはそれらの組み合わせと適当に混合するか、その添加剤で適当に希釈するか、またはその添加剤に適当に溶解することによって常法にしたがって製造されうる。
【０２９２】
実例として、ゴナドトロピン放出ホルモンを含む組成物は、ゲル形態でありうる、そして、該組成物は、例えば、約１０ｃＰ（センチポアズ）〜約３００，０００ｃＰの粘度を有しうる。種々の具体例として、組成物の粘度は、約１００ｃＰ〜約１００，０００ｃＰ、約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰ、約３００ｃＰ〜約４００ｃＰ、約５００ｃＰ〜約１００，０００ｃＰ、約７００ｃＰ〜約１００，０００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約２０，０００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約１０，０００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約５，０００ｃＰ、約２００〜約１，０００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約６００ｃＰ、約１００ｃＰ〜約６００ｃＰ、約１００ｃＰ〜約５００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約５００ｃＰ、約２００ｃＰ〜約４５０ｃＰ、または約１００，０００ｃＰ〜約２５０，０００ｃＰでありうる。本明細書に記載の種々の実施態様にしたがって、組成物の粘度は、約２００ｃＰ、約２５０ｃＰ、約３００ｃＰ、約４００ｃＰ、約５００ｃＰ、約１，０００ｃＰ、約１５，０００ｃＰ、約２０，０００ｃＰ、約３０，０００ｃＰ、約４０，０００ｃＰ、約５０，０００ｃＰ、約７５，０００ｃＰ、約１００，０００ｃＰ、約２００，０００ｃＰ、または約３００，０００ｃＰでありうる。溶液の粘度は、当該分野において周知の技術に基づいて、粘度計、例えば血流計を用いて測定されうる。用語ゲルには、固化されていない粘性溶液が含まれる。
【０２９３】
典型的には、本明細書に記載のゲルは、約０．００１〜約３．０％重量／重量（ｗ／ｗ）のゴナドトロピン放出ホルモンまたはその塩、より典型的には、約０．５〜５．０％（ｗ／ｗ）または約０．１〜５．０％（ｗ／ｗ）のゴナドトロピン放出ホルモンまたはその塩、保存剤、ゲル（すなわち、粘度調整剤、例えば、メチルセルロース）、ｐＨを約５〜約６の間に維持するための緩衝剤、および浸透圧を約２００〜約４００ｍＯｓｍ／ｋＧに維持するための等張化剤を含む。
【０２９４】
本明細書に記載の任意の実施態様によれば、組成物は、組成物が、未経産ブタまたは雌ブタに有効量のゴナドトロピン放出ホルモンを輸送するのに十分な時間標的組織（例えば、膣組織）に固着しうる十分な粘性がある。典型的な粘度は、因子、例えば、ゴナドトロピン放出ホルモンの浸透率および適用されるゴナドトロピン放出ホルモンの量などに依存する。適当な粘度調整剤には、限定されるものではないが、イオン性および非イオン性水溶性ポリマー；架橋アクリル酸ポリマー；親水性ポリマー、例えば、酸化ポリエチレン、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、およびポリビニルアルコール；セルロースポリマーおよびセルロースポリマー誘導体、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、およびエーテル化セルロース；ガム、例えば、トラガントおよびキサンタンガム；アルギン酸ナトリウム；ゼラチン、ヒアルロン酸およびそれらの塩、キトサン、ジェランまたは任意のそれらの組み合わせが含まれる。
【０２９５】
粘度調整剤は、ゲル、ペースト、クリーム、軟膏などの形態でありうる。一つの実施態様において、組成物は、ゴナドトロピン放出ホルモンおよび粘度調整剤として（例えば、粘性溶液を形成するための）ゲルを含み、該ゴナドトロピン放出ホルモンは、ゲルを含む組成物に投与される。一つの実施態様において、ゲルは、ヒドロゲル、リポゲル、または粘性ゾルである。別の実施態様において、ゲルは、ヒドロゲルである。ゲルは、当該分野において周知の任意の方法、例えば、米国特許第６，９０８，６２３号および第７，４５６，２０７号（本明細書によって引用される）に記載の方法を用いて調製されうる。
【０２９６】
本明細書に記載の任意の実施態様において、ゲル（すなわち、粘度調整剤）は、多糖を含む。本明細書に記載の方法および組成物によれば、多糖には、例えば、アルギン酸塩およびグルコース、例えば、グリコーゲン、スターチ（例えば、アミロースおよびアミロペクチン）、セルロース、およびデキストランが含まれうる。多糖は、例えば、メチル、エチル、プロピルのセルロースエステル、エーテル、ヒドロキシ−エーテル、ヒドロキシ−アルキル、またはヒドロキシ−エステルでありうる。所望の粘度を達成するために、十分量の１種またはそれ以上の多糖が用いられうる。典型的には、約０．２５〜約１０重量％の多糖（組成物の全重量に基づく）が望ましい。別の実施態様において、多糖の重量％は、約０．２５重量％〜約３．０重量％、約１．０重量％〜約７重量％、約１．０重量％〜約４．０重量％、または約１．０重量％〜約２．０重量％である。他の実施態様において、多糖の重量％は、約０．１％、約０．５％、約０．７５％、約０．８％、約０．９％、約１．０％、約１．１％、約１．２％、約１．４％、約１．８％、約２．０％、約５％、約８％、または約１０％（全て、重量／重量）である。組成物の粘度を増大するために、多糖は、１種またはそれ以上の、当該分野において既知の非多糖増粘剤と共に用いられうる。１種またはそれ以上の多糖と共に用いられうる非多糖増粘剤の例として、キサンタンガム、アルギン酸およびその塩、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、デキストリン、ショ糖およびその誘導体、ならびにそれらの混合物が挙げられる。非多糖増粘剤の量は、存在する場合、所望の粘度に応じて、約０．１重量％〜約１０重量％でありうる。
【０２９７】
本明細書に記載の任意の実施態様において、ゲルは、セルロースを含みうる。本明細書に記載のセルロースの具体例には、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびヒドロキシエチルメチルセルロースが含まれる。セルロースは、セルロース誘導体、好ましくは非イオン性セルロースエステル、エーテル、ヒドロキシ−エーテル、もしくはヒドロキシ−エステル、または非イオン性デンプン誘導体でありうる。典型的には、約０．２５重量％〜約１０重量％のセルロース（組成物の全重量に基づく）が望ましい。別の実施態様において、セルロースの重量％は、約０．２５重量％〜約３．０重量％、約０．５重量％〜約３．０重量％、約０．５重量％〜約４．０重量％、約１．０重量％〜約７重量％、約１．０重量％〜約４．０重量％、または約１．０重量％〜約２．０重量％である。他の実施態様において、セルロースの重量％は、約０．１％、約０．５％、約０．７５％、約０．８％、約０．９％、約１．０％、約１．１％、約１．２％、約１．４％、約１．８％、約２．０％、約５％、約８％、または約１０％（全て、重量／重量）である。均一ゲルが好ましい場合、分散剤、例えば、アルコール、ソルビトール、またはグリセリンを加えうるか、あるいはゲル化剤を、トリチュレーション、機械的混合、もしくは撹拌、またはそれらの組み合わせによって分散されうる。
【０２９８】
本明細書に記載の方法のための組成物に用いられる許容される安定剤には、Ｌ−アミノ酸、例えば、Ｌ−メチオニンが含まれる。他の実施態様において、用いられうる安定剤には、限定されるものではないが、多糖、例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、グアーガムおよびトラガント、ゼラチンならびに合成および半合成ポリマー、例えば、カルボマー樹脂、セルロースエーテル、およびカルボキシメチルキチンが含まれる。安定剤は、一般に、約０．０５〜約１０％、約０．０５〜約５％、約０．０５〜約２．０％、約０．０５〜約１．０％、約０．０５〜約０．５％、約０．０５〜約０．２％、約０．１〜約５％、約０．１〜約１０％、約０．１〜約２０％、約１〜約５％、約１〜約１０％、約１〜約２０％（全て、重量／容量）の量である。一つの実施態様において、本明細書に記載の安定剤の存在下において、組成物の保存期間は、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１８ヶ月、または少なくとも２４ヶ月でありうる。別の実施態様において、組成物は、約２℃〜約８℃の範囲の温度で保存されうる。不活性担体、例えば、乳糖、スターチ、デキストリン、二リン酸カルシウム、および硫酸カルシウムもまた含まれうる。安定剤を含む一つの実施態様において、組成物は、化学的に安定であり、少なくとも３ヶ月間、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の純度、少なくとも９９．５％の純度、または少なくとも９９．７％の純度のままである。
【０２９９】
等張化剤は、非イオン性またはイオン性でありうる。実例として、本明細書に記載の方法のための組成物に用いられる許容される等張化剤には、例えば、イオン性薬剤、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、または平衡塩類溶液が含まれる。一つの実施態様によれば、等張化剤は、約２００〜４００ｍＯｓｍ／ｋＧ、約２２０〜３８０ｍＯｓｍ／ｋＧ、または約２５０〜３４０ｍＯｓｍ／ｋＧの浸透圧を達成する量で存在する。非イオン性等張化剤には、ジオール、例えば、グリセロール、マンニトール、エリトリトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール；および糖、例えば、ショ糖およびデキストロースが含まれる。等張化剤は、一般に、約０．０５〜約１０％、約０．０５〜約５％、約０．０５〜約２．０％、約０．０５〜約１．０％、約０．０５〜約０．５％、約０．０５〜約０．２％、約０．１〜約５％、約０．１〜約１０％、約０．１〜約２０％、０．５〜約２．０％、約０．６〜約２．０％、約０．５〜約１．８％、約０．６〜約１．８％、約１．０〜約５．０％、約１．０〜約１０％、または約１．０〜約２０％（全て、重量／容量）の量である。
【０３００】
本明細書に記載の任意の実施態様において、本明細書に記載の方法のための組成物に用いられるｐＨ緩衝剤は、ｐＨ緩衝剤または組成物であると当業者に周知の物質であり、例えば、酢酸塩、ホウ酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、およびリン酸塩緩衝剤、ならびに種々の生理的緩衝剤、例えば、ＴＡＰＳ、Ｂｉｃｉｎｅ、Ｔｒｉｓ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、ＨＥＰＥＳ、ＴＥＳ、ＭＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、カコジレート（Ｃａｃｏｄｙｌａｔｅ）、およびＭＥＳが含まれる。他のｐＨ緩衝剤には、塩酸、水酸化ナトリウム、酸化マグネシウム、リン酸一カリウム、重炭酸塩、アンモニア、炭酸、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸、リン酸水素二ナトリウム、ホウ砂、ホウ酸などが含まれる。緩衝剤は、一般に、約０．０１〜約１０％、約０．０２〜約１０％、約０．０２〜約５％、約０．０２〜約２．０％、約０．０２〜約１．０％、約０．０２〜約０．５％、約０．０５〜約１０．０％、約０．０５〜約１．０％、約０．０５〜約０．５％、約０．０５〜約０．２％、約０．１〜約５％、約０．１〜約１０％、約０．１〜約２０％、約１〜約５％、約１〜約１０％、約１〜約２０％（全て、重量／容量）の量である。
【０３０１】
本明細書に記載の製剤に用いられるｐＨ緩衝剤は、所望のｐＨ範囲を得るのに必要な任意の濃度で用いられうる。例えば、緩衝剤は、約０．００１Ｍ〜約１Ｍ、約０．００１Ｍ〜約２Ｍ、約０．００１Ｍ〜約５Ｍ、約０．０５Ｍ〜約０．１Ｍ、約０．０５Ｍ〜約０．２Ｍ、約０．０５Ｍ〜約１Ｍ、０．０５Ｍ〜約２Ｍ、約０．０５〜約５Ｍ、約０．１Ｍ〜約１Ｍ、約０．１Ｍ〜約２Ｍ、約０．１Ｍ〜約５Ｍの濃度で用いられうる。所望のｐＨ範囲を得るのに必要な緩衝剤の任意の量は、本明細書に記載の製剤に用いられうる。典型的には、医薬的に許容されるｐＨ緩衝剤は、約ｐＨ４〜約ｐＨ９の範囲のｐＨを得るために用いられうる。本明細書に記載の組成物のｐＨは、約３〜約１０、または約４〜約９の範囲に及びうる。本明細書に記載の任意の実施態様において、ｐＨは、約４〜約８、約４〜約７、約４．５〜約６．５、約４．５〜約６、約５〜約６、約５〜約５．５、約４〜約６、または約４．５〜約５．５の範囲に及びうる。
【０３０２】
任意の実施態様において、本明細書に記載の組成物は、１種またはそれ以上の医薬的に許容される保存剤を含みうる。本明細書に用いられる、用語「保存剤」には、組成物を安定させるか、微生物増殖を抑制するか、またはその両方に有用な物質または物質の組み合わせが含まれる。適当な保存剤の例として、パラベン（例えば、パラヒドロキシ安息香酸のメチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、およびブチルエステル）、没食子酸プロピル、ソルビン酸およびそのナトリウムおよびカリウム塩、プロピオン酸およびそのカルシウムおよびナトリウム塩、「ダイオキシン」（６−アセトキシ−２，４−ジメチル−ｍ−ジオキサン）、「ブロノポール」（２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール）およびサリチルアニリド、例えば、ジブロモサリチルアニリド、トリブロモサリチルアニリド、「Ｃｉｎａｒｙｌ」１００および２００または「Ｄｏｗｉｃｉｌ」１００および２００（１−（３−クロロアリル−３，５，７−トリアザ−１−アゾニアアダマンタン(azanidadamantane)  クロリドのシス異性体）、ヘキサクロロフェン、安息香酸ナトリウム、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸およびそのアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、フェノール性化合物、例えば、クロロ−およびブロモ−クレゾールおよびクロロ−およびブロモ−オキシレノール、塩化ベンズアルコニウムのような第四級アンモニウム化合物、芳香族アルコール、例えば、フェニルエチルアルコール、ベンジルアルコールなど、クロロブタノール、キノリン誘導体、例えば、ヨードクロロヒドロキシキノリンなどが挙げられる。保存剤の全量は、存在する場合、約０．００５重量％〜約２重量％、約０．００１重量％〜１．０重量％、約０．００５重量％〜約０．２５重量％、または約０．０５重量％〜約０．２重量％、典型的には約０．０１重量％〜約０．１重量％（全て、重量／重量）である。
【０３０３】
任意の実施態様において、本明細書に記載の方法の医薬組成物は、キレート剤、例えば、当業者に周知のもの、例えば、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、およびＮ，Ｎ−ビス（カルボキシメチル）グリシン（ＮＴＡ）、またはそれらの塩を含有しうる。組成物は、約０．００３重量％〜約１．０重量％、約０．０２重量％〜約０．２重量％、約０．０１重量％〜約１．０重量％、または約０．０２重量％〜約０．５重量％（全て、重量／容量）のキレート剤を含有しうる。
【０３０４】
本明細書に記載の任意の実施態様において、抗菌剤は、本明細書に記載の方法のための組成物中に含まれうる。該薬剤には、限定されるものではないが、５−クロロ−２−（２，４−ジクロロフェノキシ）−フェノール、８−ヒドロキシキノリン、銅（ＩＩ）化合物、フタル酸、クロルヘキシジン、アレキシジン、ヘキセチジン、サンギナリン、塩化ベンザルコニウム、サリチルアニリド、臭化ドミフェン、塩化セチルピリジニウム、塩化テトラデシルピリジニウム、塩化Ｎ−テトラデシル−４−エチルピリジニウム、オクテニジン、ヨウ素、スルホンアミド、ビスビグアナイド、フェノール成分、デルモピノール、オクタピノール、および他のピペリジノ誘導体、およびニシン製剤、任意の適当な抗生物質、例えば、オウグメンチン、アモキシシリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、メトロニダゾール、ネオマイシン、カナマイシン、およびクリンダマイシン、および適用する場合、これらの化合物のいずれかの任意の塩、ならびにこれらの化合物の任意の組み合わせが含まれる。さらに別の実施態様において、抗真菌化合物は、単独かまたは上記の抗生物質のいずれかと組み合わせて、含まれうる。本明細書に記載の組成物に用いるのに適している抗真菌剤には、限定されるものではないが、ナイスタチン、ミコナゾール、硝酸エコナゾール、クロトリマゾール、およびフルシトシンが含まれる。抗菌剤または抗真菌剤は、約０．０１〜約１０％、約０．０１〜約５％、約０．０１〜約２．０％、約０．０１〜約１．０％、約０．０１〜約０．５％、約０．０１〜約０．２％、約０．０５〜約１０％、約０．０５〜約５％、約０．０５〜約２．０％、約０．０５〜約１．０％、約０．０５〜約０．５％、約０．０５〜約０．２％、約０．１〜約５％、約０．１〜約１０％、約０．１〜約２０％、約１〜約５％、約１〜約１０％、約１〜約２０％（全て、重量／容量）の量で本明細書に記載の製剤に加えられうる。
【０３０５】
本明細書に記載の方法のための組成物の任意の実施態様において、抗酸化剤も加えられうる。例えば、本明細書に用いられる抗酸化剤には、β−カロテン、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＡ、トコフェロール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、第三ブチルヒドロキノン、没食子酸プロピル、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、尿酸、カロテノイド、フラボノイド、メラトニン、およびエトキシキンが含まれうる。抗酸化剤は、約０．０１〜約１０％、約０．０１〜約５％、約０．０１〜約２．０％、約０．０１〜約１．０％、約０．０１〜約０．５％、約０．０１〜約０．２％、０．０５〜約１０％、約０．０５〜約５％、約０．０５〜約２．０％、約０．０５〜約１．０％、約０．０５〜約０．５％、約０．０５〜約０．２％、約０．１〜約５％、約０．１〜約１０％、約０．１〜約２０％、約１〜約５％、約１〜約１０％、約１〜約２０％（全て、重量／容量）の量で本明細書に記載の製剤に加えられうる。
【０３０６】
一つの実施態様において、本明細書に記載の方法に用いられるゴナドトロピン放出ホルモンは組成物中にあり、該組成物はメチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｌ−メチオニン、クエン酸、トリプトレリン、およびメチルセルロースを含む。別の態様において、組成物は、約０．０９％（重量／容量）の量のメチルパラベン、プロピ約０．０１％（重量／容量）の量のプロピルパラベン、約０．９１％（重量／容量）の量の塩化ナトリウム、約０．１８６％（重量／容量）の量のクエン酸ナトリウム、約０．１％（重量／容量）の量のＬ−メチオニン、約０．０７％（重量／容量）の量のクエン酸、約０．０１％（重量／容量）の量のトリプトレリン、および約１．２％（重量／容量）の量の（または約２５０ｃＰ〜約４００ｃＰの粘度を有する）メチルセルロースを含む。
【０３０７】
本明細書に記載の方法のためのゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、本明細書に記載の方法に用いられる場合、未経産ブタにおける授精の時期を同期化するのに有効な量のゴナドトロピン放出ホルモンを含有する。本明細書に用いられる、「ゴナドトロピン放出ホルモン」は、ゴナドトロピン放出ホルモンアナログおよび誘導体、ならびにゴナドトロピン放出ホルモンアゴニストおよびアンタゴニストを含む、任意のゴナドトロピン放出ホルモンを示す。他の実施態様において、黄体形成ホルモンもしくはヒト絨毛性ゴナドトロピン、またはそれらの誘導体もしくはアナログ、およびそれらの組み合わせは、ゴナドトロピン放出ホルモンの代わりに、またはゴナドトロピン放出ホルモンと組み合わせて用いられうる。本明細書に用いられる、「黄体形成ホルモン」は、黄体形成ホルモンアナログおよび誘導体、ならびに黄体形成ホルモンアゴニストおよびアンタゴニストを含む、任意の黄体形成ホルモンを示す。一つの実施態様において、黄体形成ホルモンは、合成物でありうる。別の実施態様において、黄体形成ホルモンは、ＬＨ（例えば、米国特許第５，４４４，１６７号（本明細書によって引用される）を参照のこと）でありうる。本明細書に用いられる、「ヒト絨毛性ゴナドトロピン」は、ヒト絨毛性ゴナドトロピンアナログおよび誘導体、ならびにヒト絨毛性ゴナドトロピンアゴニストおよびアンタゴニストを含む、任意のヒト絨毛性ゴナドトロピンを示す。一つの実施態様において、ヒト絨毛性ゴナドトロピンは、合成物でありうる。別の実施態様において、ヒト絨毛性ゴナドトロピンは、ｈＣＧ（例えば、米国特許第６，４６９，１３９号、第４，４００，３１６号、および第４，８０４，６２６号（本明細書によって引用される）を参照のこと）でありうる。さらに別の実施態様において、ｅＣＧ、ｈＣＧ、およびＬＨは、本明細書に記載の方法において用いられない。
【０３０８】
一つの実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、合成物でありうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、酢酸塩形態でありうる。別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、ＧｎＲＨ（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＧｌｙＮＨ２）（例えば、本明細書によって引用される、米国特許第５，６８８，５０６号を参照のこと）またはトリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）でありうる。
【０３０９】
本明細書に用いられるゴナドトロピン放出ホルモンアゴニストの例として、限定されるものではないが、ロイプロリド、ナファレリン、ブセレリン、［ＤＡｌａ６，ｄｅｓ  Ｇｌｙ−ＮＨ２１０］ＧｎＲＨ、［ＤＬｙｓ６］ＧｎＲＨ、［ＤＡｌａ６］ＧｎＲＨ、［２−Ｍｅ−Ａｌａ６］ＧｎＲＨ、［Ｄ−α−アミノブチロリル６，ｄｅｓ−ＧｌｙＮＨ２１０］ＧｎＲＨ、トリプトレリン、ルトレリン、ゴセレリン、デスロレリン、およびヒストレリンが挙げられる。一般的には、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニストは、典型的には６位および１０位に特異的アミノ酸置換を有する天然のゴナドトロピン放出ホルモンデカペプチドをモデルにする。トリプトレリンは、６位に単一置換のみを有するゴナドトロピン放出ホルモンの一例である。
【０３１０】
ゴナドトロピン放出ホルモンアンタゴニストの例として、Ａｎｔｉｄｅ（式Ｄ−Ａｃ−Ｄ−２−Ｎａｌ１−ＤｐＣｌＰｈｅ２−Ｄ−３−Ｐａｌ３−Ｓｅｒ４−ＮｉＬｙｓ５−Ｄ−ＮｉｃＬｙｓ６−Ｌｅｕ７−ＩＬｙｓ８−Ｐｒｏ９−Ｄ−Ａｌａ１０で示されるデカペプチド）、［Ａｃ−Ｄ４ＣｌＤＰｈｅ１，Ｄ４ＣｌＤＰｈｅ２，ＤＴｒｐ３，ＤＡｒｇ６，ＤＡｌａ１０］ＧｎＲＨ、［Ａｃ−４ＣｌＤＰｈｅ２，Ｄ３Ｐａｌ３，Ａｒｇ５，Ｄ２Ｎａｌ６，ＤＡｌａ１０］ＧｎＲＨ、［Ａｃ−Ｄ２−Ｎａｌ１，４ＣｌＤＰｈｅ２，ＤＴｒｐ３，ＤＡｒｇ６，ＤＡｌａ１０］ＧｎＲＨ、［Ａｃ−Ｄ２  Ｎａｌ１，４ＦＤＰｈｅ２，ＤＴｒｐ３，ＤＡｒｇ６］ＧｎＲＨ、［Ａｃ−Ｄ２Ｎａｌ１，４ＣｌＤＰｈｅ２，ＤＴｒｐ３，ＤｈＡｒｇ（Ｅｔ２）６，ＤＡｌａ１０］ＧｎＲＨ、および［Ａｃ−Ｎａｌ１，ＤＭＥ４ＣｌＰｈｅ２，ＤＰａｌ３，Ｓｅｒ４，Ｔｙｒ５，ＤＡｒｇ６，Ｌｅ７，ＩＬｙｓ８，Ｐｒｏ９，ＤＡｌａ１０］ＧｎＲＨが挙げられる。
【０３１１】
本明細書に記載の任意の実施態様において、式（Ｉ）：
【化１３】
2016508030.tif 000015
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各場合において独立して、水素であるか、または独立してアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、その各々は所望により置換されていてもよく、またはＲ１およびＲ２ならびに結合した炭素が、炭素環または複素環を形成し；
Ｒ５は、水素またはアルキルであり；および
Ｘは水素であるか、またはＸは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、置換されていてもよいアルキレン−カルボキサミド、およびＨＮＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択され、ここで、Ｒ３およびＲ４は、各場合において独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキルおよびハロアルキルから選択される］
ゴナドトロピン放出ホルモンまたはその溶媒和物、水和物、もしくは医薬的に許容される塩が用いられうる。
【０３１２】
別の実施態様において、Ｒ１は、メチレン−アリールである。別の実施態様において、アリールは、フェニルまたは４−ヒドロキシフェニルである。別の実施態様において、Ｒ１は、メチレン−ヘテロアリールである。さらに別の実施態様において、ヘテロアリールは、ピリジル、チアゾリル、ピリダゾリル、ピリミジニル、キノリニル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピロリル、インドリル、ベンゾピラゾリル、およびベンズイミダゾリルからなる群から選択され；および、Ｒ２は、水素またはメチルである。種々の他の実施態様において、Ｒ１は２−メチルプロピルであり、Ｒ１は２−ナフチルメチルであり、Ｒ１はｔ−ブトキシメチルであり、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１は４−アミノブチルであり、Ｒ１はエチルであり、Ｒ１およびＲ２はメチルであり、Ｒ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチルであり、Ｒ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチルであり、またはＲ１はベンジルである。
【０３１３】
さらなる実施態様において、Ｒ２は水素であるか、Ｒ２は水素であって、ゴナドトロピン放出ホルモンはＲ１が結合する炭素でＲ配置を有するか、Ｒ２は水素であって、ゴナドトロピン放出ホルモンはＲ１が結合する炭素でＳ配置を有するか、またはＲ２は水素であって、ゴナドトロピン放出ホルモンはＲ１が結合する炭素でＲ配置およびＲ１が結合する炭素でＳ配置を有する、ゴナドトロピン放出ホルモンの混合物である。
【０３１４】
またさらなる実施態様において、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であるか、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であるか、Ｘはエチルであるか、Ｘは水素であるか、Ｒ５は水素であるか、またはＲ５はメチルである。
【０３１５】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチルであり、Ｒ２は水素であり、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置Ｒである。
【０３１６】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は水素であり、Ｒ２は水素であり、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素である。
【０３１７】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は１Ｈ−１−ベンジル−イミダゾール−４−イル−メチルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素である。
【０３１８】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は２−メチルプロピルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素である。
【０３１９】
さらに別の実施態様において、ＸがＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である前記の実施態様のいずれか一つが提供される。
【０３２０】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は２−ナフチルメチルであり、Ｒ２は水素であり、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素である。
【０３２１】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１はｔ−ブトキシメチルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘはエチルであり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである。
【０３２２】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１はベンジルであり、Ｒ２は水素であり、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである。
【０３２３】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここＲ１はｔ−ブトキシメチルであり、Ｒ２は水素であり、ＸはＨＮ（ＣＯ）ＮＨ２であり；および、Ｒ５は水素である。
【０３２４】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘはエチルであり；および、Ｒ５は水素である。
【０３２５】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１はメチルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘは水素であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである。
【０３２６】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１は１Ｈ−インドール−３−イル−メチルであり、Ｒ２は水素であり、Ｘはエチルであり；Ｒ５はメチルであり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである。
【０３２７】
別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、式Ｉで示されるホルモンであり、ここでＲ１はメチルであり、Ｒ２は水素であり、ＸはＣＨ２（ＣＯ）ＮＨ２であり；Ｒ５は水素であり；および、Ｒ１が結合する炭素の配置はＲである。
【０３２８】
本明細書に用いられる、ゴナドトロピン放出ホルモン、例えば、上式に記載のものは、医薬的に許容される無毒性塩または複合体の形態で投与されうる。塩には、酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、タンニン酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、アルギン酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩などが含まれる。複合体は、例えば、亜鉛、バリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウムなどの金属とのものでありうる。
【０３２９】
本明細書に記載の方法に用いられる許容されるホルモンのさらなる例として、プロスタグランジン、プロゲストロゲン、プロゲステロン、アンドロゲン（angrogen）、テストステロン、エストロゲン、およびエストラジオール、ならびにそれらの誘導体およびアナログ、それらの組み合わせなどが挙げられる。本明細書に記載の方法において、発情を同期化するために用いられるホルモンは、アルトレノゲスト（Intervet， Inc. Summit， New JerseyからのＭＡＴＲＩＸ（登録商標））でありうる。発情を同期化するために用いられるホルモン（例えば、アルトレノゲストまたはその他の適当なプロゲスチン）は、給与によって、例えば、ホルモンを未経産ブタの餌と混合することまたはホルモンを未経産ブタの餌に適用することによって未経産ブタに投与されうる。未経産ブタにアルトレノゲストを給与するための方法は、当該分野において周知である。例えば、一つの実施態様において、０．２２％アルトレノゲスト溶液（またはその他の適当な濃度）は、未経産ブタの餌として１４日間１日１回、１頭の未経産ブタ当たり１５ｍｇのアルトレノゲストを投与するために用いられうる。別の実施態様において、０．２２％アルトレノゲスト溶液（またはその他の適当な濃度）は、未経産ブタの餌として１８日間１日１回、１頭の未経産ブタ当たり２０ｍｇのアルトレノゲストを投与するために用いられうる。アルトレノゲストまたは発情期を同期化する別のホルモン（例えば、その他の適当なプロゲスチン）のその他の適当な投与レジメンは、本発明にしたがって用いられうる。発情を同期化するためのホルモンは、給与を含む、当該分野において周知の任意の適当な方法によって未経産ブタに投与されうる。
【０３３０】
本明細書に記載の方法および組成物にしたがって用いられるゴナドトロピン放出ホルモンの有効量は、ゴナドトロピン放出ホルモンの分子量、その投与経路、およびそれが天然型であるか否かを含む、多数のパラメータによって決まる。本明細書に記載されるように、ホルモンの「有効量」は、本明細書に記載の方法を用いて未経産ブタまたは雌ブタにおいて排卵を同期化するかまたは授精の時期を同期化するのに十分な量である。
【０３３１】
未経産ブタまたは雌ブタに投与されるゴナドトロピン放出ホルモンの有効量は、約１００ｎｇ〜約２０００μｇ、約１００ｎｇ〜約１０００μｇ、約１００ｎｇ〜約５００μｇ、約１μｇ〜約２０００μｇ、約１μｇ〜約５００μｇ、約１μｇ〜約１００μｇ、約１μｇ〜約５０μｇ、約１μｇ〜約１０μｇ、約１０μｇ〜約２０００μｇ、約１０μｇ〜約１０００μｇ、約１０μｇ〜約５００μｇ、約１０μｇ〜約１００μｇ、約１０μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約２０００μｇ、約５０μｇ〜約１０００μｇ、約５０μｇ〜約５００μｇ、約５０μｇ〜約３００μｇ、約５０μｇ〜約２００μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約１００μｇ〜約３００μｇ、約１００μｇ〜約５００μｇ、約１００μｇ〜約１０００μｇ、約２００μｇ〜約２０００μｇ、または約０．０５ｍｇ〜約５０ｍｇの範囲に及びうる。種々の具体例として、ゴナドトロピン放出ホルモンは、約１μｇ、約２μｇ、約５μｇ、約１０μｇ、約２０μｇ、約５０μｇ、約７５μｇ、約１００μｇ、約１５０μｇ、約１８０μｇ、約２００μｇ、約２２５μｇ、約２５０μｇ、約３００μｇ、約４００μｇ、約５００μｇ、約７５０μｇ、約１０００μｇ、約１５００μｇ、または約２０００μｇのゴナドトロピン放出ホルモンの用量で未経産ブタまたは雌ブタに投与されうる。ゴナドトロピン放出ホルモンは、１回量または複数回量で投与されうる。典型的には、ゴナドトロピン放出ホルモンは、排卵を同期化するために任意のさらなるホルモンを伴うことなく投与される。
【０３３２】
本明細書に記載の方法に用いられる組成物中のゴナドトロピン放出ホルモンは、例えば、約０．１μｇ／ｍＬ、約０．５μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約４００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約３００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約１５０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ〜約２５０μｇ／ｍＬ、または約１００μｇ／ｍＬの濃度で投与されうる。具体例として、組成物は、例えば、０．１ｍＬ、０．５ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、または５ｍＬの投与量を含む、種々の容量で投与されうる。任意の適当な投与量は、例えば、動物への投与経路、ホルモンが投与されている動物の大きさ、ホルモンが投与されている動物の種、および当業者に既知の他の因子によって、用いられうる。
【０３３３】
本明細書に記載の任意の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、本明細書に記載の方法にしたがって卵胞排卵を刺激し、排卵を同期化するのに有効な量で投与される。ゴナドトロピン放出ホルモンの用量は、１）デポジション・カテーテルの使用、２）手動投与、３）注射、または医薬組成物を投与するためのその他の当該分野において承認された手法、例えば、医薬組成物、例えば、ホルモンを含有する組成物を膣に投与するためのその他の当該分野において承認された手法からなる群から選択される方法を用いて投与されうる。一つの実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、１匹以上の未経産ブタまたは雌ブタに投与されうる。
【０３３４】
膣投与以外の有効なゴナドトロピン放出ホルモン投与方法の例として、未経産ブタまたは雌ブタへの非経口投与、例えば、皮下投与、筋肉内投与、腹腔内投与、くも膜下腔内投与、もしくは静脈内投与、または許容される担体との組み合わせ投与が挙げられる。非経口投与の適当な手法には、ニードル（マイクロニードルを含む）、注射器、無針注射器、および注入技術が含まれる。本発明にしたがって用いられる非経口組成物は、１回量または複数回量のゴナドトロピン放出ホルモン組成物を含む再構成可能な凍結乾燥物の形態でありうる。非経口剤形の例として、ゴナドトロピン放出ホルモン組成物の周知の許容される液体担体、例えば、液体アルコール、グリコール（例えば、ポリエチレングリコール）、グルコース溶液（例えば、５％）、エステル、アミド、滅菌水、緩衝食塩水（リン酸塩または酢酸塩のような緩衝剤を含む；例えば、等張食塩水）中水性溶液が挙がられる。
【０３３５】
本明細書に記載の任意の実施態様において、本明細書に記載の方法に用いられるゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、局所的に未経産ブタまたは雌ブタに投与されうる。本明細書に用いられる局所投与法の例として、局所投与、膣内投与、および直腸内投与が挙げられる。本実施態様に用いられる剤形の例として、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、ペースト剤、散剤、ローション剤、経皮パッチ剤、子宮内避妊具、膣リング、および膣錠が挙げられる。一つの具体例として、ゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、未経産ブタまたは雌ブタの膣前部に投与される。ゴナドトロピン放出ホルモンはまた、膣または直腸組成物、例えば、通常の坐剤基剤、例えば、ココアバター、カルボワックス、ポリエチレングリコールまたは他のグリセリド（室温で固化されているが、その全ては体温で溶ける）を含有する、坐剤に製剤化されうる。
【０３３６】
ゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、任意の有用な製法および任意の有効投与量によって未経産ブタまたは雌ブタに投与されてもよく、該分野において周知の経口剤形を含む、適当な剤形、例えば、ピル、ペレット、またはカプセルを用いることができ、有効投与量を標準剤形または放出調節剤形中に投与することができる。放出調節製剤には、遅延放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム化製剤が含まれる。
【０３３７】
ゴナドトロピン放出ホルモン組成物はまた、適当な固体またはゲル相担体または賦形剤を含みうる。該担体または賦形剤の例として、限定されるものではないが、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖類、スターチ、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリマー、例えば、ポリエチレングリコールが挙げられる。
【０３３８】
別の具体例として、本明細書に記載の方法に用いられるゴナドトロピン放出ホルモンは、キットの形態でありうる。キットは、本明細書に記載の１回量または複数回量のゴナドトロピン放出ホルモンを含みうる。本実施態様において、キットは、手動投与用塗布器、デポジション・カテーテル、および／またはホルモン組成物を未経産ブタもしくは雌ブタに適用するためのシリンジをさらに含みうる。また別の実施態様において、ゴナドトロピン放出ホルモンは、本明細書に記載のゲルを含む組成物中にある。一つの具体例として、キットは、未経産ブタまたは雌ブタへの投与前に混合するためのゴナドトロピン放出ホルモンおよびゲルを別々に含んでいてもよく、またはそれらは、１の組成物中に一緒に存在しうる。別の実施態様において、キットは、即時投与用容器中に混合されたゴナドトロピン放出ホルモンおよびゲルを含みうる。
【０３３９】
また別の実施態様において、キットは、使用説明書を含有する。説明書は、授精が１回またはそれ以上の人工授精を介して行われることを示しうる。説明者はまた、本明細書に記載の未経産ブタへのゴナドトロピン放出ホルモンおよび発情を同期化するためのホルモンの投与の時期、および人工授精の時期を提供しうる。
【０３４０】
また別の実施態様において、製品が提供される。製品は、本明細書に記載の方法に用いられる本明細書に記載のゴナドトロピン放出ホルモンのいずれかを含みうる。ゴナドトロピン放出ホルモン組成物は、第一の容器、例えば、ガラス製バイアル、例えば、ゴム栓および／またはアルミニウム切り取り式シールを有する琥珀色ガラス製バイアル中にありうる。別の実施態様において、第一の容器はプラスティック製またはアルミニウム製であってもよく、第一の容器は密封されうる。別の実施態様において、第一の容器は、組成物への光をさらに遮るために第二の容器内に含有されうる。第二の容器は、例えば、ボール紙製でありうる。これらの実施態様のいずれかはまた、上記のキット実施態様に適用し、本明細書に記載のゴナドトロピン放出ホルモン組成物実施態様のいずれかは製品に適用しうる。
【実施例】
【０３４１】
実施例１
実験デザインおよび処置
全ての未経産ブタに、１５ｍｇ／未経産ブタ／日の推奨割合で１４日間トップドレス(top-dress)としてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を個別に給与した。未経産ブタは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）（０日目の朝の最後のトップフィード）給与を中止し、処置ごとに割り当てられた。対照は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止（最後のトップドレス）の９６時間後に、トリプトレリンを含まない１．２％メチルセルロースゲル製剤で処置された。残りの未経産ブタに、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止後に何度も膣内に１．２％メチルセルロースゲル製剤中の酢酸塩として２００ｍｃｇトリプトレリンを投与した。４回の処置は、１）ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の９６時間後のビヒクルゲル（ＶＧ）処置、２）ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の９６時間後のトリプトレリンゲル（ＴＧ）処置、３）ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０時間後のＴＧ処置および４）ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１４４時間後のＴＧ処置であった。下記の発情状態および排卵状態について、全ての未経産ブタを観察した。レプリケート１に含まれる未経産ブタは、肥育小屋に住むターミナルライン(terminal line)商業生産未経産ブタから選択された。１またはそれ以上の発情期に示される、成熟期は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の開始前に確認されなかった。レプリケート２に含まれる未経産ブタは、母系未経産ブタ集団から選択された。成熟期は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の開始前に確認および記録された少なくとも１の発情期によって確認された。
【０３４２】
試験物質
トリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）は、Ｂａｃｈｅｍ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡから、酢酸塩型で提供された（Ｉｔｅｍ  Ｈ−４０７５  ＣＧＭＰ  ｇｒａｄｅ）。トリプトレリンゲル（２００μｇ／２ｍＬ）は、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｐｒｅｍｉｕｍ  Ａ４０００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、クエン酸塩緩衝剤（ｐＨ５．５）、ＮａＣｌ、メチオニンおよびＥＤＴＡ（潜在的安定剤として）ならびにメチルパラベンおよびプロピルパラベン（保存剤として）からなるゲル中でＡｒｇｅｎｔａ（Ａｕｃｋｌａｎｄ，ＮＺ）によって製剤化された。５４ミリリットルのトリプトレリンゲル（１００ｍｃｇ  酢酸トリプトレリン／ｍＬ）を、標準アルミニウムシール（ＳＡＳ２０ＮＡＴ）を含む灰色ブチル医薬セラムバイアル栓（７３８２８Ａ−ＳＳ）を有する琥珀色ホウケイ酸セラムバイアル（６１０２０６−５０）に包装した。トリプトレリンゲルビヒクルは、トリプトレリンまたは潜在的安定剤、メチオニンおよびＥＤＴＡを含有しなかったことを除き、トリプトレリンゲルと同一の製剤賦形剤を含有していた。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）は、米国で市販されている形態として提供された。
【０３４３】
発情観察
処置後の発情検知について、未経産ブタを、別々の仕切りで飼育した。雄ブタを、別室で、および／または少なくとも１２ｍ離れて風下で飼育した。発情期の兆候を引き出すために、成熟雄ブタを、未経産ブタの木箱の正面の小道をゆっくりと歩かせて、各試験未経産ブタを最大５分間雄ブタからの視覚、聴覚および嗅覚信号にさらした。営利農場での普通の習慣に合わせて、雄ブタを未経産ブタの木箱の正面に近づけながら、脇をこすりながら背圧を未経産ブタの体の中央部に加える経験豊富なヒトによって発情は試験された。未経産ブタが、声を出すことなく、耳の反射が現れて、堅くなって背圧反応を示した時に、発情を確認した。
【０３４４】
レプリケート１について、５日目〜８日目に１日１回未経産ブタで発情検知を行った。レプリケート２について、０日目〜８日目に１日１回未経産ブタで発情検知を行った。
【０３４５】
排卵観察
全ての未経産ブタの排卵状態を、経直腸的超音波断層法によって観察した。レプリケート１について、５日目に２回、次いで、６日目〜８日目に１日３回排卵を観察した。レプリケート２について、５日目から８日目に１日３回排卵を観察した。このために、直腸への挿入を促進するための固定角ＰＶＣ安定化ロッドに取り付けられた７．５ＭＨｚリニアアレイトランスデューサーを伴うＡｌｏｋａ ５００超音波機器を用いた。トランスデューサーおよびＰＶＣロッドを、婦人科滑沢剤で被覆され、卵巣が一つずつ視覚化されるまで、直腸にそっと挿入された。３つの最大の卵胞の直径を、各々スキャンして（０．１ｍｍ位まで）記録した。未経産ブタは、大きな卵胞（≧６．５ｍｍ）の数が３個未満になった場合に排卵していると認定された。
【０３４６】
投与
１回２ｍＬ量のトリプトレリンゲルまたはビヒクルゲルを、人工授精に用いられるものと同様のカテーテルを用いて頚部より後方約１〜２ｃｍ以内に注入した。該量を、カテーテルに取り付けられた標準的複数回量塗布器を用いて送達した。カテーテルを取り囲む、新しい使い捨て可能なシームを、未経産ブタごとに用いた。
【０３４７】
統計解析
ＳＡＳの混合モデル法を用いて、データを解析した。モデルは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与後の処置時点、レプリケート、およびレプリケート相互作用による処置の主効果を含んでいた。処置間の差を、Ｐ＜０．０５でＴ検定を用いて最小二乗平均推定値で検定した。解析データを、データ正規性を前提として検定した。
【０３４８】
結果
レプリケート１における５頭の未経産ブタおよびレプリケート２における３頭の未経産ブタを、処置に関係しないという理由でデータ解析から除外した。結果を、レプリケート１および２の表１および２に示される表形式データそれぞれを用いる、図１および２に示す。レプリケート２における多数の未経産ブタは、レプリケート１と比べて、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の発情が検知された。
【０３４９】
レプリケート１は、より性的に成熟し、レプリケート２における高度に維持された環境繁殖用施設にいた、ＰＩＣ  Ｃ−２２母系雌に比べて、低レベルの成熟期の交雑  ＰＩＣ  Ｃ−２２  Ｘ系  ３３７ターミナルライン雌を用いて仕上げ研究施設において行われた。レプリケート２に比べてレプリケート１におけるＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与前にそれらの最初の発情を示す未経産ブタの割合は低かった。レプリケート２はレプリケート１とは異なる場所で行われただけでなく、  ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の開始前に全ての未経産ブタにおいて確認された発情周期から明らかなように、レプリケート２における未経産ブタの成熟期は高齢であった。レプリケート１において、発情周期を、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の開始前に全ての未経産ブタにおいては確実に確認することはできなかった。
【０３５０】
最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から排卵の間隔は、処置およびレプリケートに影響された。トリプトレリンゲル処置から排卵の間隔は、処置の４０〜４８時間後に最大になると予測される。そのため、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）から排卵の間隔は、トリプトレリンゲルゲルをＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の９６、１２０または１４４時間後に投与する場合に異なると予測される。これは、表４に示され、図３に示されている。排卵のピークは、各グループについて処置の４８時間後に生じた。しかしながら、ピークは、９６，１２０および１４０時間での処置グループそれぞれについて、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の１４４，１６８および１９２時間後であった。ビヒクル処置グループは、同期排卵ピークを示すのではなくむしろトリプトレリンゲル処置の未経産ブタについて観察されたものと同レベルを達成しなかった排卵率を着実に増加した。
【０３５１】
レプリケートの効果というより重要なことは、成熟期の影響は、表１および表２の比較によって示される。表２に示される未経産ブタは、性的に成熟していることが確認されるのに対し、レプリケートまたは表１におけるものは確認されなかった。その差は、図１および２に見られうる。性的に成熟した未経産ブタ（図２）は、３回の各処置時間についてトリプトレリンゲル処置の４８時間後により大きな排卵効果を証明した。例えば、ＴＧ１２０処置の時間では、レプリケート２の９０％はレプリケート１の６０％と比較された。性的成熟度のレベルがこれらの２グループの未経産ブタの間で異なっていたとしても、一貫した傾向は、図１と図２を比べた場合に明らかであり、データは図３に示した。未成熟（図１）または成熟（図２）および図３における複合プロットが、１４４時間でのトリプトレリンゲル処置が有効に排卵を同期化しなかったことを示唆するかどうかにかかわらず、１４４時間に処置されたビヒクル対照およびトリプトレリンゲルの未経産ブタに対する排卵曲線の時間は、ほぼ同一である。１４４時間の処置時間は、一見したところ多数の未経産ブタにおけるＬＨの内因性放出後であるので、同期化した排卵を誘発するには遅すぎる。しかしながら、１４４時間での処置が、トリプトレリンゲル給与の４０〜４８時間後の未成熟の未経産ブタにおける排卵を促進および同期化したのに対し（図１）、１００％の未経産ブタは、性的に成熟した未経産ブタでは４０時間までにすでに排卵していた（図２）ことに留意することが興味深い。これらのデータは、成熟した未経産ブタに比べて、性的に未熟な未経産ブタでは処置の時間が異なることを助言しうることを示唆している。
【０３５２】
９６時間または１２０時間のいずれかでのトリプトレリンゲル処置は、ビヒクル対照で処置された未経産ブタまたは１４４時間で処置された未経産ブタより同時排卵を促進し、そして、引き起こした。４８時間以内に排卵する未経産ブタの割合および排卵の同期化は、９６時間で処置された未経産ブタ（５４．２％）に比べて１２０時間で処置された未経産ブタ（７２％）について大きかった（表４）。性的に成熟した未経産ブタ（図２および表２）について、ＴＧ１２０およびＴＧ９６それぞれについて４８時間以内に排卵する９０．０％および７７．８％との違いがより顕著であった。これらのデータは、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から１２０時間後が、処置にとってより有効な時間であることを立証している。
【０３５３】
【表１】
2016508030.tif 000016
【０３５４】
【表２】
2016508030.tif 000017
【０３５５】
【表３】
2016508030.tif 000018
【０３５６】
【表４】
2016508030.tif 000019
【０３５７】
実施例２
実験デザインおよび処置
二百九十七（２９７）頭の未経産ブタに、１５ｍｇ／未経産ブタ／日の推奨割合で１４日間トップドレスとしてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。午前５：３０（０日目）に、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。約１００頭の未経産ブタに、以下の各処置を供した。
１．グループ１，対照（ｎ＝１００）；ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）処置したが、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置せずに、通常行われているように、発情中毎日授精した（１頭の未経産ブタ当たり平均１．９回の授精）。
２．グループ２（ｎ＝９８）；５日目の午前６：３０（＋／−１時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、発情を発現している場合、５日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２〜１１時間後に授精した。発情状態に関わらず、全ての未経産ブタを、６日目、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２６時間（＋／−２．５時間）後に１回授精した。
３．グループ３（ｎ＝９９）；５日目の午前６：３０（＋／−１時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、いずれかの日に発情しているかは関係なく、５日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２．５〜９．５時間後に１回授精し、６日目、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２６．５時間（＋／−３時間）後に再度授精した。
【０３５８】
試験物質
トリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）は、Ｂａｃｈｅｍ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡから、酢酸塩型で提供された（Ｉｔｅｍ  Ｈ−４０７５  ＣＧＭＰ  ｇｒａｄｅ）。トリプトレリンゲル（２００ｍｃｇ／２ｍＬ）は、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｐｒｅｍｉｕｍ  Ａ４０００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、および他の不活性製剤賦形剤からなるゲル中でＤＰＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，Ｔｅｘａｓ）によって製剤化された。５４ミリリットルのトリプトレリンゲル（１００ｍｃｇ  酢酸トリプトレリン／ｍＬ）を、標準アルミニウムシール（ＳＡＳ２０ＮＡＴ）を含む灰色ブチル医薬セラムバイアル栓（７３８２８Ａ−ＳＳ）を有する琥珀色ホウケイ酸セラムバイアル（６１０２０６−５０）に包装した。
【０３５９】
発情観察
未経産ブタを、別々の仕切りで飼育した。雄ブタを、少なくとも１２ｍ離れて風下で飼育した。発情の開始および継続期間を測定するために、未経産ブタの発情について、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の４日〜８日後までまたは発情の最後を確認するまでのうちいずれか早い方を毎日観察した。発情の検知を促進するために、成熟雄ブタを、未経産ブタの木箱の正面の小道をゆっくりと歩かせて、各試験未経産ブタを最大５分間雄ブタからの視覚、聴覚および嗅覚信号にさらした。営利農場での普通の習慣に合わせて、雄ブタを未経産ブタの木箱の正面に近づけながら、脇をこすりながら背圧を未経産ブタの体の中央部に加える経験豊富なヒトによって発情は試験された。未経産ブタが、声を出すことなく、耳の反射が現れて、堅くなって背圧反応を示した時に、発情を確認した。
【０３６０】
薬物投与
１回２ｍＬ量のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）を、人工授精に用いられるものと同様のカテーテルを用いて頚部より後方約１〜２ｃｍ以内に注入した。該量を、カテーテルに取り付けられた標準的複数回量塗布器を用いて送達した。カテーテルを取り囲む、新しい使い捨て可能なシームを、未経産ブタごとに用いた。
【０３６１】
統計解析
分娩率および産子数について処置の主作用、レプリケートおよびレプリケート相互作用による処置を決定するためにＳＡＳ（９．２版）のＰＲＯＣ  ＭＩＸ法を用いて、データを分散分析した。処置間の差は、Ｐ＜０．０５でＴ検定を用いて最小二乗平均推定値で検定した。
【０３６２】
結果
二百九十七（２９７）頭の未経産ブタを、処置グループ（グループ１：１００、グループ２：９８、グループ３：９９）に割り当てた。１の対照未経産ブタは、離乳後の発情状態が８日目に終わる前に損傷のために実験から除去されたので、最終データセットから除外された。表５〜８は、全ての未経産ブタの最小二乗平均値および統計分析を示す。未経産ブタを５日目に授精させた場合、レプリケート間に時差があった。レプリケート１の未経産ブタを、５日目、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の７．５〜１１時間後に授精させた。レプリケート２における５日目に授精させた未経産ブタは、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）投与の２．２５〜４．５時間後に繁殖した。該差異のため、妊娠、分娩および生きて生まれたデータに関する最小二乗平均値および統計解析は、表９におけるレプリケートに示される。これらの変数のいずれかについてはレプリケート相互作用による処置はなく（Ｐ＞０．６０）、分娩率のレプリケート効果については傾向のみがあった（Ｐ＜０．０９）。生データおよび未補正平均値は、表１０〜１３に示される。表５に示されるように、授精の３０日後の未経産ブタ妊娠率は、未経産ブタの分娩率のように（Ｐ＞０．７９）、全ての処置について同一であった（Ｐ＞０．９４）。１腹当たりの全ての生まれた子ブタ（Ｐ＞０．７４）および１腹当たりの生きて生まれた子ブタ（Ｐ＞０．４４）は、処置の間で差はなかった。子ブタ指数においても処置の差はなかった（Ｐ＞０．８０）。表６は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の発情の発現の最小二乗平均値を示す。５日目（Ｐ＞０．３５）または６日目（Ｐ＞０．１５）に初めて発情を発現する未経産ブタの割合において処置による差はなかった。
【０３６３】
未経産ブタが初めて発情を発現した場合に基づく妊娠率は、表７に示される。５日目に発情を発現した対照および処置２の未経産ブタは、処置３の未経産ブタよりも３０日目の妊娠率が高かった（Ｐ＜０．０４）。処置２および３の未経産ブタに比べて６日目に発情を発現した対照未経産ブタの間には高い妊娠率の傾向があった（Ｐ＝０．１０）。しかしながら、発情を発現する全ての未経産ブタの全ての妊娠率を比較する場合、処置間に差はなかった（Ｐ＞０．９４）。表８は、初めて発情を発現した場合に基づく未経産ブタの分娩率を示す。処置の間の差は、５日目に発現した未経産ブタについてのみである。処置２における未経産ブタは、対照または処置３の未経産ブタより高い分娩率（Ｐ＜０．０３）を有していた（９４．１％対７６．０および６６．７％）．
【０３６４】
本実験の結果は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）およびＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置後の一定期間に授精させた未経産ブタにおける分娩率および産子数がＭＡＴＲＩＸ（登録商標）処置後に検知された発情時に授精させた未経産ブタと違いがないことを立証している。これらのデータはまた、発情を発現しなかった３０〜６０％の雌ブタまたは未経産ブタが一定期間の授精後に妊娠した離乳雌ブタにおける以前の試験と一致している。５日目および６日目の授精の時期は、実施例１の試験において観察された排卵データの時期と一致する。
【０３６５】
異なる結果を伴う２つの別々の場所でプロトコールを実施した。第１の部位の未経産ブタは全て、最低３回発情を発現し、それらの多くは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与開始前に４回または５回の発情周期を経験していた。第２の部位の未経産ブタは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与開始前に１回確認された発情のみを有していた。対照未経産ブタの分娩率は、他の場所でＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置された未経産ブタのものより高かった。未経産ブタの年齢差は、結果の差に寄与しうる。平均３０．１％の第１の部位の高齢未経産ブタは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の５日目に初めて発情を発現した。７．４％の第２の部位の若齢未経産ブタのみが、５日目に発情を示した。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の７日目までに、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）を投与した１６．２％の高齢対照未経産ブタおよび２％の高齢未経産ブタのみが、初めて発情を発現していた。第２の部位では、若齢未経産ブタのうち、７日目に初めて発情を発現した４１．３％の対照および１８．３％のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）未経産ブタがまだ存在していた。
【０３６６】
性的に成熟した未経産ブタを伴う、第１の部位での結果は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の１２０時間後までに投与され、次いで、６日目の一定期間の授精と合わせた５日目の条件付き授精または５日目および６日目の２回の一定期間の授精のいずれかが行われた、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）が、発情の検知後に授精させた未経産ブタと比べて、同様の分娩率および産子数をもたらすことを立証している。
【０３６７】
【表５】
2016508030.tif 000020
【０３６８】
【表６】
2016508030.tif 000021
【０３６９】
【表７】
2016508030.tif 000022
【０３７０】
【表８】
2016508030.tif 000023
【０３７１】
【表９】
2016508030.tif 000024
【０３７２】
【表１０】
2016508030.tif 000025
【０３７３】
【表１１】
2016508030.tif 000026
【０３７４】
【表１２】
2016508030.tif 000027
【０３７５】
【表１３】
2016508030.tif 000028
【０３７６】
実施例３
実験デザインおよび処置
三百十二（３１２）頭の未経産ブタに、１５ｍｇ／未経産ブタ／日の推奨割合で１４日間トップドレスとしてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。午前６：３０（０日目）に、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。１０４頭の未経産ブタに、以下の各処置を供した。
１．グループ１，対照（ｎ＝１０４）；ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）処置したが、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置せずに、その部位で通常行われているように、発情中毎日授精した（１頭の未経産ブタ当たり平均１．８回の授精）。
２．グループ２（ｎ＝１０４）；５日目の午前７：００（＋／−１．５時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、発情を発現している場合、５日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２〜４時間後に授精した。発情状態に関わらず、全ての未経産ブタを、６日目、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２６時間（＋／−２時間）後に１回授精した。
３．グループ３（ｎ＝１０４）；５日目の午前７：００（＋／−１．５時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、いずれかの日に発情しているかは関係なく、５日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２．５〜９．５時間後に１回授精し、６日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２６時間（＋／−２時間）後に再度授精した。
【０３７７】
試験物質
トリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）は、Ｂａｃｈｅｍ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡから、酢酸塩型で提供された（Ｉｔｅｍ  Ｈ−４０７５  ＣＧＭＰ  ｇｒａｄｅ）。トリプトレリンゲル（２００ｍｃｇ／２ｍＬ）は、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｐｒｅｍｉｕｍ  Ａ４０００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）および他の不活性製剤賦形剤からなるゲル中でＤＰＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，Ｔｅｘａｓ）によって製剤化された。５４ミリリットルのトリプトレリンゲル（１００ｍｃｇ  酢酸トリプトレリン／ｍＬ）を、標準アルミニウムシール（ＳＡＳ２０ＮＡＴ）を含む灰色ブチル医薬セラムバイアル栓（７３８２８Ａ−ＳＳ）を有する琥珀色ホウケイ酸セラムバイアル（６１０２０６−５０）に包装した。
【０３７８】
発情観察
未経産ブタを、別々の仕切りで飼育した。雄ブタを、少なくとも１２ｍ離れて風下で飼育した。発情の開始および継続期間を測定するために、未経産ブタの発情について、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の４日〜８日後までまたは発情の最後を確認するまでのうちいずれか早い方を毎日観察した。発情の検知を促進するために、成熟雄ブタを、未経産ブタの木箱の正面の小道をゆっくりと歩かせて、各試験未経産ブタを最大５分間雄ブタからの視覚、聴覚および嗅覚信号にさらした。営利農場での普通の習慣に合わせて、雄ブタを未経産ブタの木箱の正面に近づけながら、脇をこすりながら背圧を未経産ブタの体の中央部に加える経験豊富なヒトによって発情は試験された。未経産ブタが、声を出すことなく、耳の反射が現れて、堅くなって背圧反応を示した時に、発情を確認した。
【０３７９】
薬物投与
１回２ｍＬ量のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）を、人工授精に用いられるものと同様のカテーテルを用いて頚部より後方約１〜２ｃｍ以内に注入した。該用量を、カテーテルに取り付けられた標準的複数回量塗布器を用いて送達した。カテーテルを取り囲む、新しい使い捨て可能なシームを、未経産ブタごとに用いた。
【０３８０】
統計解析
分娩率および産子数について処置の主作用、レプリケート、部位、部位による処置およびレプリケート相互作用による処置を決定するためにＳＡＳ（９．２版）のＰＲＯＣ  ＭＩＸ法を用いて、データを分散分析した。処置間の差は、Ｐ＜０．０５でＴ検定を用いて最小二乗平均推定値で検定した。
【０３８１】
結果
三百十二（３１２）頭の未経産ブタを、処置グループ（グループ１：１０４，グループ２：１０４，グループ３：１０４）に割り当てた。２つの異なるグループによって農場内の２つの異なる部位でこれらのデータを収集したので、妊娠、分娩、および産子数データは、部位効果および処置相互作用による部位について分析した。生きて生まれた子ブタの数（Ｐ＞０．９４）、３０日での妊娠（Ｐ＞０．７７）または分娩率（Ｐ＞０．６８）についての部位効果はなかった。これらの変数のいずれかについては部位相互作用による処置はなかった（Ｐ＞０．４６）。したがって、表１４〜２１に示されるデータは、両部位からの合わせた結果を示す。表１４〜１７は、全ての未経産ブタに関する最小二乗平均値および統計解析を示す。生データおよび未補正平均値は、表１８〜２１に示される。
【０３８２】
対照グループの表１４における３０日での未経産ブタの妊娠率（９１．３％）は、グループ２または３のもの（各々、７６．９および８２．７％）より大きかった（Ｐ＜０．０２）。対照未経産ブタはまた、グループ２および３における未経産ブタに比べて高い（Ｐ＜０．０１）分娩率を有していた（各々、９０．１％、７２．８％、および８０．８％）。１腹当たりの生きて生まれた子ブタの平均数（Ｐ＞０．２２）および１腹当たりの全ての生まれた子ブタ（Ｐ＞０．２８）は、グループ間で差はなかった。グループ２における未経産ブタ（７７３）またはグループ３のもの（８２２）に比べて、対照グループにおける未経産ブタ（９８９）の子ブタ指数が高かった（Ｐ＜０．０２）。
【０３８３】
表１５は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の発情の発現の最小二乗平均値を示す。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の５日目および６日目に発情を発現した未経産ブタの割合については処置の間で差はなかった（Ｐ＞０．５３）が、グループ２および３（各々、１６．３および２０．２％）より７日目に初めて発情を発現した対照未経産ブタ（４１．３％）は、高い割合を有していた（Ｐ＜０．０００１）。対照（２．９％）よりＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後８日目までに発情を発現しなかったＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置された未経産ブタ（グループ２および３）（各々、２６．０および２３．１％）は、大きな割合を有していた（Ｐ＜０．０００１）。
【０３８４】
未経産ブタが初めて発情を発現した場合に基づく妊娠率は、表１６に示される。５日目および６日目に初めて発情を発現した未経産ブタについては処置の間で妊娠率の差はなかった（Ｐ＞０．１６）。７日目に発情を発現した対照未経産ブタは、グループ２の未経産ブタ（６４．７％）より３０日での妊娠率（９７．７％）が高かった（Ｐ＜０．００３）。
【０３８５】
表１７は、初めて発情を発現した場合に基づく未経産ブタの分娩率を示す。７日目に発情を発現した対照未経産ブタは、グループ２の未経産ブタ（６４．７％）より分娩した割合（９７．７％）は大きかった（Ｐ＜０．００３）。発情を発現しなかったグループ２および３におけるＯｖｕＧｅｌ（登録商標）未経産ブタは、約７８％の分娩率を有していた（発情を発現していない５１頭のうち、４０頭が分娩した）。
【０３８６】
該農場での結果は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与（０日目）の１２０時間後までに投与され、次いで、６日目の一定期間の授精と合わせた５日目の発情依存性条件付き授精または５日目および６日目の２回の一定期間の授精のいずれかが行われた、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）が、発情中に毎日授精させた未経産ブタと比べて、同様の産子数をもたらすことを立証している。
【０３８７】
【表１４】
2016508030.tif 000029
【０３８８】
【表１５】
2016508030.tif 000030
【０３８９】
【表１６】
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【０３９０】
【表１７】
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【０３９１】
【表１８】
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【０３９２】
【表１９】
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【０３９３】
【表２０】
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【０３９４】
【表２１】
2016508030.tif 000036
【０３９５】
実施例４
実験デザインおよび処置
三百（３００）頭の未経産ブタに、１５ｍｇ／未経産ブタ／日の推奨割合で１４日間トップドレスとしてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。午前７：００（０日目）に、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を給与した。１００頭の未経産ブタに、以下の各処置を供した。
１．グループ１，対照（ｎ＝１００）；ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）処置したが、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置せずに、その部位で通常行われているように、発情の検知後毎日授精した（１頭の未経産ブタ当たり平均１．９回の授精）。
２．グループ２（ｎ＝１００）；５日目の午前８：００（＋／−１時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、発情状態に関わらず、５日目のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２〜４時間後に授精した。
３．グループ３（ｎ＝１００）；５日目の午前８：００（＋／−１時間）にＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置し、発情しているかに関係なく、６日目、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置の２５時間（＋／−１時間）後に授精した。
【０３９６】
試験物質
トリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）は、Ｂａｃｈｅｍ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡから、酢酸塩型で提供された（Ｉｔｅｍ  Ｈ−４０７５  ＣＧＭＰ  ｇｒａｄｅ）。トリプトレリンゲル（２００ｍｃｇ／２ｍＬ）は、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｐｒｅｍｉｕｍ  Ａ４０００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、および他の不活性製剤賦形剤からなるゲル中でＤＰＴ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，Ｔｅｘａｓ）によって製剤化された。５４ミリリットルのトリプトレリンゲル（１００ｍｃｇ  酢酸トリプトレリン／ｍＬ）を、標準アルミニウムシール（ＳＡＳ２０ＮＡＴ）を含む灰色ブチル医薬セラムバイアル栓（７３８２８Ａ−ＳＳ）を有する琥珀色ホウケイ酸セラムバイアル（６１０２０６−５０）に包装した。
【０３９７】
発情観察
未経産ブタを、別々の仕切りで飼育した。雄ブタを、少なくとも１２ｍ離れて風下で飼育した。発情の開始および継続期間を測定するために、未経産ブタの発情について、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の４日〜８日後までまたは発情の最後を確認するまでのうちいずれか早い方を毎日観察した。発情の検知を促進するために、成熟雄ブタを、未経産ブタの木箱の正面の小道をゆっくりと歩かせて、各試験未経産ブタを最大５分間雄ブタからの視覚、聴覚および嗅覚信号にさらした。営利農場での普通の習慣に合わせて、雄ブタを未経産ブタの木箱の正面に近づけながら、脇をこすりながら背圧を未経産ブタの体の中央部に加える経験豊富なヒトによって発情は試験された。未経産ブタが、声を出すことなく、耳の反射が現れて、堅くなって背圧反応を示した時に、発情を確認した。
【０３９８】
薬物投与
１回２ｍＬ量のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）を、人工授精に用いられるものと同様のカテーテルを用いて頚部より後方約１〜２ｃｍ以内に注入した。該用量を、カテーテルに取り付けられた標準的複数回量塗布器を用いて送達した。カテーテルを取り囲む、新しい使い捨て可能なシームを、未経産ブタごとに用いた。
【０３９９】
統計解析
分娩率および産子数について処置の主作用、レプリケートおよびレプリケート相互作用による処置を決定するために、ＳＡＳ（９．２版）のＰＲＯＣ  ＭＩＸ法を用いて、データを分散分析した。処置間の差は、Ｐ＜０．０５でＴ検定を用いて最小二乗平均推定値で検定した。
【０４００】
結果
三百（３００）頭の未経産ブタは、治療グループ（グループ１：１００、グループ２：１００、グループ３：１００）に割り当てられた。２つの対照未経産ブタは、損傷によって実験から除外され、最終データセットから除外された。表２２〜２５は、全ての未経産ブタの最小二乗平均値および統計解析を示す。生データおよび未補正平均値は、表２６〜２９に示される。
【０４０１】
表２２に示されるように、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の８日目までに発情を発現した未経産ブタの割合は、グループ２（７２．０％）および３（６５．０％）の未経産ブタに比べて対照未経産ブタ（９０．８％）が大きかった（Ｐ＜０．０００１）。ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）処置された未経産ブタ（および２および３）は、対照未経産ブタ（６．３日）に比べてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）から発情間隔（５．９日）が短かった（Ｐ＜０．０１）。授精の３０日後の未経産ブタの妊娠率は、全ての処置について同一であった（Ｐ＞０．２６）。未経産ブタの分娩率は、処置間で差はなく（Ｐ＞０．１６）、子ブタ指数も差はなかった（Ｐ＞０．１８）が、対照未経産ブタは、グループ２および３より数値的に高い分娩率および子ブタ指数を有していた（各々、７６．５対６７．０および６４．６％、および８８８対７２７および７８９）。対照またはグループ２の未経産ブタよりグループ３の未経産ブタが１腹当たりの多数の生きて生まれた子ブタを有する傾向があった（Ｐ＜０．０９）。１腹当たりの全ての生まれた子ブタは、対照（１２．８）またはグループ２の未経産ブタ（１１．９）よりグループ３の未経産ブタ（１３．５）が高かった（Ｐ＜０．０５）。
【０４０２】
表２３は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の発情の発現の最小二乗平均値を示す。５日目に発情を発現する多数のグループ２の未経産ブタが存在した（Ｐ＜０．０５、２３．０％）が、６日目の処置による差はなかった（Ｐ＞０．４８）。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の７日目に、対照未経産ブタ（Ｐ＜０．００２）に比べて初めて発情を発現する少数のＯｖｕＧｅｌ（登録商標）未経産ブタ（グループ２および３）が存在していた。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後の９日目までに発情を発現しない未経産ブタの割合は、対照に比べてグループ２および３が大きかった（各々、２４．０％、３３．０％、８．２％）（Ｐ＜０．０００１）。
【０４０３】
未経産ブタが初めて発情を発現した場合に基づく妊娠率は、表２４に示される。処置にかかわらず、５日目、６日目および７日目に初めて発情を発現している未経産ブタは、毎日同様の妊娠率を有していた（Ｐ＞０．７３）。
【０４０４】
表２５は、初めて発情を発現した場合に基づく未経産ブタの分娩率を示す。妊娠データから明らかなように、処置にかかわらず、５日目、６日目、または７日目に発情を発現する未経産ブタは、毎日同様の分娩率を有していた。発情を発現しなかったグループ２および３における未経産ブタは、約４９％の分娩率を有していた。
【０４０５】
結果は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与から１２０時間後までに投与され、次いで、５日目に１回の授精または６日目に１回の授精が行われた、ＯｖｕＧｅｌ（登録商標）が、発情の検知後に授精させた未経産ブタに比べて同様の分娩率および産子数を有することを示す。
【０４０６】
【表２２】
2016508030.tif 000037
【０４０７】
【表２３】
2016508030.tif 000038
【０４０８】
【表２４】
2016508030.tif 000039
【０４０９】
【表２５】
2016508030.tif 000040
【０４１０】
【表２６】
2016508030.tif 000041
【０４１１】
【表２７】
2016508030.tif 000042
【０４１２】
【表２８】
2016508030.tif 000043
【０４１３】
【表２９】
2016508030.tif 000044
【０４１４】
実施例５
実験デザインおよび処置
全ての未経産ブタに、１５ｍｇ／未経産ブタ／日の推奨割合で１４日間または１５日間トップドレスとしてとしてＭＡＴＲＩＸ（登録商標）を個別に給与した。未経産ブタは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）（０日目の朝の最後のトップフィード）を中止し、以下の各処置に割り当てられた。対照は、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止（最後のトップドレス）の１２０（＋／−２）時間後に処置されたビヒクルゲル（トリプトレリンを含まないビヒクルゲル）であった。他の未経産ブタは、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０（＋／−２）時間後にメチルセルロースゲル製剤中の酢酸塩として１００、２００または４００ｍｃｇ  トリプトレリンが投与された。４回の処置は以下のとおりであった：
１．ビヒクルゲル（ＶＧ）：ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０（＋／−２）時間後のトリプトレリンを含まないビヒクルゲル．
２．ＴＧ１００：ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０（＋／−２）時間後の１００ｍｃｇ（２ｍＬ  ５０ｍｃｇ／ｍＬ）トリプトレリンゲル．
３．ＴＧ２００：ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０（＋／−２）時間後の２００ｍｃｇ（２ｍＬ  １００ｍｃｇ／ｍＬ）トリプトレリンゲル．
４．ＴＧ４００：ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）中止の１２０（＋／−２）時間後の４００ｍｃｇ（２ｍＬ  ２００ｍｃｇ／ｍＬ）トリプトレリンゲル．
【０４１５】
試験物質
トリプトレリン（ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２）は、Ｂａｃｈｅｍ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡから、酢酸塩型で提供された（Ｉｔｅｍ  Ｈ−４０７５  ＣＧＭＰ  ｇｒａｄｅ）。トリプトレリンゲル（１００〜２００ｍｃｇ／２ｍＬ量）は、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｐｒｅｍｉｕｍ  Ａ４０００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、クエン酸塩緩衝剤（ｐＨ５．５）、ＮａＣｌ、メチオニンならびにメチルパラベンおよびプロピルパラベン（保存剤として）からなるゲル中でＡｒｇｅｎｔａ（Ａｕｃｋｌａｎｄ，ＮＺ）によって製剤化された。５４ミリリットルのトリプトレリンゲル（１００ｍｃｇ  酢酸トリプトレリン／ｍＬ）を、標準アルミニウムシール（ＳＡＳ２０ＮＡＴ）を含む灰色ブチル医薬セラムバイアル栓（７３８２８Ａ−ＳＳ）を有する琥珀色ホウケイ酸セラムバイアル（６１０２０６−５０）に包装した。トリプトレリンゲルビヒクルは、トリプトレリンを含有していなかったことを除き、トリプトレリンゲルと同一の製剤賦形剤を含有していた。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）は、米国で市販されている形態として提供された。
【０４１６】
発情観察
処置後の発情検知について、未経産ブタを、別々の仕切りで飼育した。雄ブタを、別室で、および／または少なくとも１２ｍ離れて風下で飼育した。発情期の兆候を引き出すために、成熟雄ブタを、未経産ブタの木箱の正面の小道をゆっくりと歩かせて、各試験未経産ブタを最大５分間雄ブタからの視覚、聴覚および嗅覚信号にさらした。営利農場での普通の習慣に合わせて、雄ブタを未経産ブタの木箱の正面に近づけながら、脇をこすりながら背圧を未経産ブタの体の中央部に加える経験豊富なヒトによって発情は試験された。未経産ブタが、声を出すことなく、耳の反射が現れて、堅くなって背圧反応を示した時に、発情を確認した。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の中止から最初の３日間（０日目〜２日目）、未経産ブタを雄ブタに触れさせなかった。３日目〜７日目に全てのブタで毎日発情検知を行った。
【０４１７】
排卵観察
５日目に２回（処置の８時間後および１６時間後）および６日目および７日目に８時間ごとにまたは排卵が確認されるまでまたは最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与の１７６時間後に排卵を観察した。全ての未経産ブタの排卵状態を、経直腸的超音波断層法によって観察した。このために、直腸への挿入を促進するための固定角ＰＶＣ安定化ロッドに取り付けられた７．５ＭＨｚリニアアレイトランスデューサーを伴うＡｌｏｋａ ５００超音波機器を用いる。トランスデューサーおよびＰＶＣロッドを、婦人科滑沢剤で被覆され、卵巣が一つずつ視覚化されるまで、直腸にそっと挿入する。３つの最大の卵胞の直径を、各々スキャンして（０．１ｍｍ位まで）記録した。未経産ブタは、大きな卵胞（≧６．５ｍｍ）の数が３個未満になった場合に排卵していると認定された。
【０４１８】
血液採取およびＬＨ分析
カテーテルは、各治療グループ（ビヒクルゲル、ｎ＝８；１００ｍｃｇ トリプトレリン，ｎ＝６；２００ｍｃｇ トリプトレリン，ｎ＝７および４００ｍｃｇ トリプトレリン，ｎ＝６）における未経産ブタの亜集団の頸静脈に非外科的に挿入された（Ｋｒａｅｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．１９８２）。処置の１時間前１５分ごと、処置後（０）および処置の０．５、１、２、４、６、１２、１８、２４、３６および４８時間後すぐに１０ｍＬの血液サンプルを採取した。採取の１２時間以内に１５分間８００ｘｇにて遠心分離するまで、血液サンプルを４℃で保持した。ブタの血清のＬＨを有効な製法を用いて解析するまで、得られた血清を凍結保存した。（Ｋｅｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７およびＫｒａｅｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２）。ＬＨ急増の開始、継続時間、および程度を分析した。ＬＨデータは、ＳＡＳの一般線形モデル法を用いて解析された。処置間の差は、Ｐ＜０．０５でＴ検定を用いて最小二乗平均値推定値で検定された。ＬＨ急増の開始は、血清ＬＨ濃度が処置前の血清ＬＨ濃度の平均値の２つの標準偏差以上の場合である。ＬＨ急増の継続期間は、開始および血清ＬＨ濃度が処置前の血清ＬＨ濃度の平均値の２つの標準偏差以下の場合の間の期間である。ＬＨ急増の程度は、ＬＨ急増の間に達する最大血清ＬＨ濃度である。
【０４１９】
投与
１回２ｍＬ量のトリプトレリンゲルまたはビヒクルゲルを、人工授精に用いられるものと同様のカテーテルを用いて頚部より後方約１〜２ｃｍ以内に注入した。該量を、カテーテルに取り付けられた標準的複数回量塗布器を用いて送達した。カテーテルを取り囲む、新しい使い捨て可能なシームを、未経産ブタごとに用いた。
【０４２０】
結果
本実験では、未経産ブタは、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与時、１７１±７日齢であり、１３０±９ｋｇ体重であった。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与後に発情を発現した未経産ブタの割合（９７％）およびＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与から発情の間隔（１４６±２２時間）は、処置の間で差はなかった。８頭の未経産ブタは、処置に関係しないという理由で最終データセットから除外された。測定されたパラメータの処置相互作用によるレプリケートが検出されなかったので、２つのレプリケートのデータを合わせた。結果を、図４および表３０〜３２に示す。
【０４２１】
全体として、９４％の未経産ブタが、実験期間内に排卵した。多数の未経産ブタは、処置後４８時間までまたは最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与後１６８時間までのビヒクルゲル（ＶＧ）に比べて、トリプトレリンゲル（ＴＧ）処置グループにおいて排卵した（Ｐ＜０．０１）。最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から排卵までの間隔は、処置によって影響を受けず、平均して１６０時間または６．７日であった。ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与から１２８〜１５２時間（処置後３２時間）まで排卵した、未経産ブタの累積率に関して処置の効果はなかった。しかしながら、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与から１６０〜１７６時間（処置後４０〜５６時間）まで排卵した、未経産ブタの累積率に関して処置の有意な効果があった。高い累積率の未経産ブタは、ビヒクルゲルグループより処置グループにおいて１６８時間（処置後４８時間）まで排卵した（表３０）。排卵を検知した時間およびトリプトレリンゲルでの処置後の各超音波観察で排卵した、未経産ブタの割合は、表３０に示される。任意の処置グループの間で排卵がトリプトレリンゲル処置後に検知された平均時間において有意な差はなかった。トリプトレリンゲル処置後４８時間まで排卵した未経産ブタの割合は、対照に比べてトリプトレリンを投与した未経産ブタで大きかったが、トリプトレリン処置グループ間で差はなかった（Ｐ＞０．０５）。
【０４２２】
結果は、１００〜４００ｍｃｇ  トリプトレリンのトリプトレリンゲル量がＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与後１６８時間でビヒクルに比べて排卵を促進し、それは、該用量範囲のトリプトレリンゲルが未経産ブタにおけるＭＡＴＲＩＸ（登録商標）での発情周期同期化後に排卵を同期化するのに有効であることを示唆することを立証している。
【０４２３】
前の実験において、本発明者らは、トリプトレリンゲル中の１００ｍｃｇのトリプトレリンが、エストロゲン刺激した卵巣摘出未経産ブタにおいてＬＨ放出を刺激したことを立証した。ＬＨ急増を示した未経産ブタ数、ＬＨ急増のパラメータ、排卵を検知した時間、および、０、１００、２００または４００ｍｃｇの酢酸トリプトレリンを含有するトリプトレリンゲルでの処置後４８時間まで排卵した未経産ブタの割合は、表３１に示される。処置グループ間で、ＬＨ急増の平均開始、最大血清ＬＨ濃度までの時間またはＬＨ急増の程度において有意な差はなかった。しかしながら、ＬＨ急増の継続時間は、処置された未経産ブタに比べて０ｍｃｇグループで大きかった（Ｐ＝０．０４）。一般に、ＬＨ急増のこれらのパラメータは、トリプトレリンゲル中のトリプトレリンの膣内投与がエストロゲン刺激した卵巣摘出未経産ブタにおいてＬＨのサージ放出を刺激した本発明者らの先の実験のものと同様であった。個々の未経産ブタからのデータを分析した場合、採血期間中にＬＨ急増を示さなかった未経産ブタが、トリプトレリンゲル処置の時点でＬＨ急増を終了していたかまたはトリプトレリンゲル処置前にＬＨ急増をすでにしていたように思えた。統計解析は、ＬＨ急増の開始、最大血清ＬＨ濃度までの時間またはＬＨ急増の程度について処置グループ間で有意な差は明らかにしなかったけれども、これらのパラメータの全３つの平均値は、ＬＨ急増が０ｍｃｇの対照未経産ブタよりトリプトレリン処置された未経産ブタにおいて早期に生じたことを示唆している。さらに、ＬＨ急増の程度は、用量反応パターンに従うように思えた。表３０における全ての未経産ブタについて示されるデータと同様に、トリプトレリンゲル処置後４８時間まで排卵した未経産ブタの割合は、対照よりトリプトレリンを投与している未経産ブタについて大きかった。
【０４２４】
要約すると、最後のＭＡＴＲＩＸ（登録商標）給与から排卵同期化に対するトリプトレリンゲル処置の有用な効果があった。結果はまた、ＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の１２０時間後に投与された、１００〜４００ｍｃｇ  トリプトレリンのトリプトレリンゲル量がＭＡＴＲＩＸ（登録商標）の最後の給与の１６８時間後のビヒクルに比べて排卵を促進し、それは、未経産ブタにおけるＭＡＴＲＩＸ（登録商標）での発情周期同期化後に排卵を同期化するのに有効であることを示唆することを立証している。血清ＬＨデータは、これらの結論と一致する。
【０４２５】
【表３０】
2016508030.tif 000045
【０４２６】
【表３１】
2016508030.tif 000046
【０４２７】
【表３２】
2016508030.tif 000047
【０４２８】
実施例６
トリプトレリン含有組成物の調製
メチルパラベンナトリウム塩およびプロピルパラベンナトリウム塩を、混合しながら精製水に加え、５〜１０分間混合し続けた。次いで、塩化ナトリウムＵＳＰを、さらに１０〜１５分間混合しながら加え、次いで、１０〜１５分間混合しながらＬ−メチオニンを加えた。次いで、さらに１０〜２０分間混合しながらクエン酸ナトリウムＵＳＰも加えた。
個々のミキサーにおいて、クエン酸を精製水に加え、５〜１０分間混合して、クエン酸トリプトレリンを加え、次いで、１０〜２０分間混合し続けた。次いで、パラベン含有組成物を、トリプトレリン含有組成物に加え、１０〜１５分間混合した。次いで、凝集を回避するためにメチルセルロースをゆっくりと加え、さらに３０〜６０分間混合し続けた。次いで、混合物のｐＨをチェックし、精製水中クエン酸を必要に応じて加え、組成物のｐＨを調整した。
【０４２９】
実施例７
実施例製剤
本願に記載の組成物の実施例製剤は、表３３および３４に示される。
【表３３】
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【０４３０】
【表３４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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