(57)【要約】  本発明は、ヒトの発汗を抑制する組成物であって、ＩＴＰＲ２タンパク質の機能を低下させること、およびＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルおよび／またはＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させることが可能な化合物と、任意の製薬上許容される担体および／または賦形剤とを含む組成物、治療方法、特定のｓｉＲＮＡ分子および治療におけるそれらの分子の使用に関する。【選択図】図４
2016505617.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトの発汗を抑制する組成物であって、
イノシトール１，４，５−三リン酸受容体タイプ２（ＩＴＰＲ２）メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）のレベルを低下させること、ＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させること、ＩＴＰＲ２カルシウムチャネル形成を低下させること、およびＩＴＰＲ２カルシウムチャネル機能を低下させることの少なくとも１つが可能な化合物と、
任意の製薬上許容される担体および／または賦形剤とを含むことを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記組成物は、皮内注射またはイオントフォレーシスのためのものである請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、全身投与のためのものである請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、クリーム、軟膏、スティック、エアロゾル、または液体等による局所投与のためのものである請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物は、パッチ等による前記化合物の経皮送達のためのものである請求項１または４に記載の組成物。
【請求項６】
前記化合物は、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを阻害する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）分子であって、配列識別番号１〜３の分子および配列識別番号４〜１３を標的とするｓｉＲＮＡ分子等を含む、先行する請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記製薬上許容される担体および／または賦形剤は、短い合成ペプチド、カチオン性リポソームおよび脂質基質担体（lipid-based carriers）等の前記ｓｉＲＮＡ分子の経皮送達を促進する化合物、ポリアミドアミン、遺伝子ベクター、または溶解性マイクロニードルを含む請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
個人の発汗を抑制する方法であって、
ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルを低下させること、ＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させること、ＩＴＰＲ２カルシウムチャネル形成を低下させること、およびＩＴＰＲ２カルシウムチャネル機能を低下させることの少なくとも１つが可能な化合物を前記個人に投与することを含み、
前記化合物は、発汗を抑制するのに効果的な量で存在することを特徴とする方法。
【請求項９】
前記個人は多汗症を患っている請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記化合物は、汗腺の分泌部の側底細胞（basolateral cells）に送達される請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜７のいずれかに記載の組成物を前記個人に投与することを含む請求項８〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
配列識別番号１〜３の分子および配列識別番号４〜１３を標的とするｓｉＲＮＡ分子からなる群から選択されるｓｉＲＮＡ分子。
【請求項１３】
治療に用いられる請求項１２に記載のｓｉＲＮＡ分子。
【請求項１４】
多汗症の治療に用いられる請求項１２に記載のｓｉＲＮＡ分子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発汗を抑制または除去し、かつ多汗症等の発汗過多を治療するための方法、化合物および組成物に関する。特に、本発明は、イノシトール１，４，５−三リン酸受容体タイプ２（ＩＴＰＲ２）タンパク質の機能の低下、ならびに汗腺細胞の分泌部におけるＩＴＰＲ２メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）および／またはＩＴＰＲ２タンパク質のレベルの低下により、治療対象者の汗腺機能を低下させることに関する。
【背景技術】
【０００２】
発汗過多により、肉体的にも精神的にもかなりの不快感を引き起こすことがある。
【０００３】
多汗症とは、予測できない過剰な汗をかく病状のことである。過度の発汗が手、足および腋窩で発生する場合、原発性多汗症または限局性多汗症と呼ばれる。一般人口の約２〜３％が原発性多汗症に罹っているが、この症状の患者で医師の診察を受けているのは４０％に満たない。原発性多汗症の大部分の症例において、その原因を見つけることができない。多汗症の最も一般的な形態は掌蹠多汗症であり、手掌、足裏および腋窩から大量に発汗することを特徴とする。
【０００４】
別の病状が原因で発汗過多が起こる場合、二次性多汗症と呼ばれる。発汗が体全体に及ぶ（すなわち、全身化する）こともあれば、ある領域に限定されることもある。
【０００５】
発汗過多を防ぐには、注射によるボツリヌス毒素の投与またはイオントフォレーシス（iontophoresis）に加えて、塩化アルミニウム六水和物を含有する制汗剤も用いることができる。ただし、この制汗剤によって汗管がふさがれるため、皮膚炎を発症する可能性がある。内科療法としては、グリコピロレート等の抗コリン薬および三環系抗うつ薬が挙げられる。グリコピロレートおよび三環系抗うつ薬は、どちらもアセチルコリンがムスカリン受容体に結合するのを阻害し、それに伴って視朦、便秘、口内乾燥、眩暈、頭痛、インポテンス、および排尿障害等の抗コリン作用の副作用をもたらす。発汗過多は、外科手術および交感神経遮断術により治療されることもある。
【０００６】
イノシトール１，４，５−三リン酸受容体タイプ２（ＩＴＰＲ２）は、多くの組織で発現される細胞内Ｃａ2+放出チャネルである。哺乳類では、ＩＴＰＲの少なくとも３つの型が判明し、それぞれタイプ１、タイプ２およびタイプ３に指定されている（Yule, 2010）。ＩＴＰＲ２チャネルは、３つの機能ドメインを有するホモ四量体構造またはヘテロ四量体構造である。３つの機能ドメインとは、すなわち、カルボキシル（ＣＯＯＨ）末端側のＣａ2+チャネル孔を含む膜貫通ドメイン、アミノ末端ＩＰ3結合ドメイン、およびＣａ2+チャネルとＩＰ3結合領域とを結ぶ大きな細胞質ドメインである。Ｃａ2+孔を含む短い膜貫通ドメインを除いて、ＩＴＰＲ２の主要な部分は細胞質に露出しており、いくつかのアクセサリータンパク質およびキナーゼの標的となる。
【０００７】
３つのＩＴＰＲ２遺伝子のいずれかのダウンレギュレーション（down-regulation）または突然変異に関連するとして報告された特定のヒト表現型はない。さらに、ＩＴＰＲ２の標的破壊を含むマウスは、異常な表現型を示さない（Futatsugi, 2005）。しかし、タイプ２（ＩＴＰＲ２）およびタイプ３（ＩＴＰＲ３）の受容体遺伝子を両方とも欠損したマウスモデルは、唾液腺および膵腺の外分泌機能不全を起こす（Futatsugi, 2005）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、被験者の発汗を抑制または除去するために用いられる化合物および組成物を提供することを目的とする。さらに、本発明は、上記化合物および上記組成物を用いて被験者の発汗を抑制または除去する方法を提供することを目的とする。上記被験者は、多汗症を患っている患者でもよい。また、上記被験者は、発汗が正常か、または正常よりも少ないが、もっと発汗を減らすことを望む個人でもよい。
【０００９】
特に、好適な被験者とは多汗症患者である。多汗症は一般人口の約２〜３％が罹患している疾患である（James, 2005）。多汗症の最も一般的な形態は掌蹠多汗症であり、手掌、足裏および腋窩から大量に発汗することを特徴とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の一態様は、汗腺機能を調節し、それによって発汗を調節する経路において、ＩＴＰＲ２が重要な役割を担っているという予期せぬ知見に基づき、発汗を抑制または除去することである。汗腺内のＩＴＰＲ２機能を（部分的または完全に）阻害する、拮抗する、または低下させる分子または試薬ならば、単独でも、組み合わせでも、本発明において有用である。これには、例えば、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡに対するｓｉＲＮＡ等のＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルを低下させる分子および試薬；ＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させる分子および試薬；ＩＴＰＲ２カルシウムチャネル形成を低下させる分子および試薬；ならびにＩＴＰＲ２カルシウムチャネル機能を低下させる分子および試薬が含まれる。
【００１１】
ＩＴＰＲ２タンパク質の間接的な妨害（perturbation）は、ＢＣＬ−２由来またはＩＴＰＲ由来のペプチド（Distelhorst and Bootman, 2011）、タンパク質キナーゼＣ（Arguin et al., 2007）、ＧＩＴ１およびＧＩＴ２等のタンパク質と相互作用するＧタンパク質共役受容体キナーゼ（Zhang et al., 2009）によって媒介されることがある。
【００１２】
本発明の主要な態様は、独立請求項に開示されている。好ましい実施形態は、従属請求項に記載されている。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、非機能性ＩＴＰＲ２に起因する発汗不足または無汗症を示す。ヨード・デンプン試験を行い、４５℃の湿潤環境にさらされた後の健常者（左図）およびホモ接合性ＩＴＰＲ２ミスセンス突然変異ｐ．Ｇ２４９８Ｓの患者（右図）の発汗を分析する。皮膚にヨード液を塗布し、乾燥させた後、該部位にデンプンをふりかける。汗があると、デンプン・ヨード混合物は紺青色になる（左図）。ホモ接合性ＩＴＰＲ２ミスセンス突然変異ｐ．Ｇ２４９８Ｓの患者の場合、呈色反応は観測されない（右図）。
【図２】図２は、汗腺を含む正常な皮膚におけるＩＴＰＲ２の免疫染色を示す（枠で囲んだ部分）。エクリン汗腺のＩＴＰＲ２の発現は茶色の染色に相当し、主として汗腺の分泌（汗の産生）部におけるピラミッド状の「明細胞」（ＣＣ）に局在している（右図）。管腔のいわゆる「暗細胞」（ＤＣ）は染色していない。導管細胞（＊）の管腔膜におけるＩＴＰＲ２染色も矢印で示されている。染色は、ポリクローナルウサギ抗ＩＴＰＲ２（polyclonal Rabbit anti-ITPR2）１：１０００（ミリポア（Millipore））を用いて行う。
【図３】図３は、線維芽細胞における、ｓｉＲＮＡ（ｓ７６３４、ｓ７６３５およびｓ７６３６；アンビオン（Ambion））を用いたＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのダウンレギュレーションを示す。棒グラフは、非導入（non-induced）線維芽細胞（「Ｃ」で表された左の棒）と、ｓ７６３４、ｓ７６３５およびｓ７６３６をそれぞれ用いてｓｉＲＮＡを導入した線維芽細胞とについて、β−２ミクログロブリンｍＲＮＡに標準化されたＩＴＰＲ２ｍＲＮＡの相対的な発現を示している。非導入対照細胞のＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルは、１（ｎ＝４）に設定されている。ｓ７６３４（ｐ＝０．０００６；ｎ＝４）、ｓ７６３５（ｐ＝０．００６；ｎ＝４）およびｓ７６３６（ｐ＝０．０１９；ｎ＝２）による導入後に、ＩＴＰＲ２のダウンレギュレーションが顕著であることが判明した。
【図４】図４は、実施例２に記載されているように、ｓｉＲＮＡ（ｓ７６３５、アンビオン（Ambion））の局所投与によるヒトの発汗量（sweat production）のダウンレギュレーションを示す。Ａ：棒グラフは、ｓｉＲＮＡを投与しない場合（「Ｃ」；対照としての右前腕）と、ｓｉＲＮＡを投与した場合（「ｓｉＲＮＡ」；左前腕）のそれぞれについて、両前腕の相対的な平均発汗量を示している。「＊＊」はｐ＜０．０１（スチューデントのt検定）。この結果は、２人の成人被験者に対して、１日目、９日目および１６日目に行われた６回の測定に基づいている。ｓｉＲＮＡは、０日目、１日目および９日目に、左前腕に投与された。Ｂ：棒グラフは、１人の被験者の相対的な発汗量を示している。対照としての右腕（「Ｃ」）の平均発汗量と、「検査対象」としての左腕の４回の各測定値（１日目、９日目、１６日目および２３日目；「ｓｉＲＮＡ１、９、１６、２３」）とが示されている。さらに、検査対象の腕の４回の測定値の平均値も示されている（「Average」）。「＊＊＊」はｐ＜０．００１（スチューデントのｔ検定）。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明者およびその共同研究者は、ＩＴＰＲ２機能の相対的または絶対的な欠損を予測するＩＴＰＲ２遺伝子に遺伝性突然変異を有する個人を特定した。ＩＴＰＲ２対立遺伝子が両方とも変異している個人は、全身性無汗症（発汗欠如）を呈したが、他の症状は現れなかった（図１）。本発明者らは、真皮および表皮において、ＩＴＰＲ２が主として汗腺の分泌部の側底細胞（basolateral cells）（「明細胞」）に発現することも立証した（図２）。従って、汗腺におけるＩＴＰＲ２ｍＲＮＡおよび／またはＩＴＰＲ２タンパク質のレベルもしくは機能のダウンレギュレーションにより、発汗量が減少することが期待される。
【００１５】
ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡと相互作用する因子は、このｍＲＮＡのダウンレギュレーションを引き起こすことがある。ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを特異的に標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を用いて、これを説明する。すなわち、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを標的とする分子（例えば、核酸およびその誘導体）ならどれでもＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルを低下させ、その結果、ＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させることになる。無汗症と関係があるＩＴＰＲ２突然変異を有するヒトから得た本発明者らの知見に基づけば、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡまたはＩＴＰＲ２タンパク質のダウンレギュレーションを直接的または間接的に適用して、効率的に発汗量を減少させることができる。ｓｉＲＮＡを用いると、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのダウンレギュレーションが可能であることを説明する。
【００１６】
この方法は、標的発現を低減する手段として最近登場したものであり、その手法は、皮膚疾患および筋疾患を含む多様な障害における有望な治療の選択肢につながった（Leachman, 2010; Goemans, 2011; Burnet and Rossi, 2012）。すなわち、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡに対するｓｉＲＮＡの局所投与または全身投与を行うことにより、発汗量を減少させることができる。また、任意の阻害剤および拮抗剤を用いてＩＴＰＲ２ｍＲＮＡまたはＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させることにより、汗腺機能および発汗に同様の影響を及ぼすことができる。さらに、汗腺は体温の調節に重要な役割を果たしている。従って、全身的にＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを阻害することで全身性発汗障害となり、体温を上げることができる。
【００１７】
均質型（homogeneous）宿主ＲＮＡの分解を誘発することによる遺伝子サイレンシングにとって、外因性二本鎖（ｄｓ）ＲＮＡの送達は有効である。遺伝子サイレンシングは、ｄｓＲＮＡが分解されて低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）になることを含む。例えば、ホスホロチオエート骨格または２’−Ｏ−メチル置換基によってｓｉＲＮＡを化学修飾すると、分解を防ぎ、代謝の安定性を向上させる（Burnet and Rossi, 2012）。本発明者らは、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡをダウンレギュレートするために、それぞれ２１のヌクレオチドからなる３つの異なる二本鎖ＲＮＡを用いた。オリゴヌクレオチドは、修飾された骨格を有し、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡの非オーバーラップ（non-overlapping）コード配列と相補的な関係にある。修飾されたｓｉＲＮＡは、単独で、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを４倍にまでダウンレギュレートすることが示された。これは、５’非翻訳領域（５’ＵＴＲ）および３’非翻訳領域（３’ＵＴＲ）を含む、ＩＴＰＲ２転写物のあらゆる部分が好適な標的配列になり得ることを示唆している。ｓｉＲＮＡまたは核酸の誘導体を生体内に送達してＩＴＰＲ２ｍＲＮＡおよびＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させるには、上記例のように、局所投与または全身投与を行えばよい（Leachman, 2010; Goemans, 2011; Burnett and Rossi, 2012）。薬剤の局所投与は、特に、表皮を通じた受動的または能動的な輸送によって表層の汗腺に到達させるのに適している。
【００１８】
本発明の場合、ｓｉＲＮＡまたはＩＴＰＲ２ｍＲＮＡの拮抗剤／阻害剤の投与は、体臭防止剤（例えば、デオドラントスティック（deo-stick）、エアロゾルまたは液体）の使用と同様に行うことができ、またクリームや軟膏等によっても実現できる。短い合成ペプチドと混合した場合（Lin et al., 2012）、またはｓｉＲＮＡと複合したカチオン性リポソームを用いた場合（Felgner et al., 1987; Gindy et al., 2012）、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡに対するｓｉＲＮＡの経皮送達を促進することができる。ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡに対するｓｉＲＮＡの局所投与および送達を促進するさらに別の手段として、ポリアミドアミン等の異なる担体（Arote RB et al., 2012）、およびｓｉＲＮＡを含む溶解性マイクロニードルを備えたパッチ（Lara MF et al., 2012）を用いることが挙げられる。ｓｉＲＮＡは、例えば、LiおよびRossiが検討したような遺伝子ベクター（Methods Mol Biol. 2008; 433: 287-299）により細胞に導入することもできる。その結果、細胞内にｓｉＲＮＡが生成される。
【００１９】
ＩＴＰＲ２機能を低下させる別の手段として、ＩＴＰＲ２の孔形成能またはカルシウムチャネル機能を阻害することが挙げられる。孔形成能は、ＩＴＰＲ２の四量体集合を妨げる化合物を投与することより阻害される。
【００２０】
ＩＴＰＲ２タンパク質のレベルを低下させる別の手段として、ＩＴＰＲ２遺伝子の転写をダウンレギュレートする、または完全に阻害することが挙げられる。これは、好ましくはＩＴＰＲ２遺伝子に特異的な、転写因子を阻害すること、細胞内シグナル伝達を阻害すること、エンハンサーエレメントを阻害すること、転写抑制因子を用いること、および／または転写活性化因子を軽減することによって行われてもよい。
【実施例】
【００２１】
実施例１
ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのインビトロダウンレギュレーション
図３は、ヒト初代線維芽細胞（human primary fibroblast cells）を用いた細胞組織培養系において、特定のｓｉＲＮＡによる効率的なＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのダウンレギュレーションを示す。線維芽細胞は、修飾、脱塩およびＨＰＬＣ精製が施された生体導入用（in vivo ready）ｄｓＲＮＡの存在下で培養された。その際、ＩＴＰＲ２のエクソン９〜１０（ｓ７６３４、アンビオン）、エクソン２６（ｓ７６３５、アンビオン）およびエクソン３０（ｓ７６３６、アンビオン）のそれぞれと相補的な関係にある２１のヌクレオチドからなる複数のｄｓＲＮＡが用いられた（表１）。４８時間後、線維芽細胞培養物から全ＲＮＡを抽出した。非導入細胞を対照とした。定量的リアルタイムＰＣＲによると、ｓｉＲＮＡの導入後、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡのレベルが３〜４倍も低下したことが示されている（図３）。ＩＴＰＲ２の別の配列も、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡの同様のノックダウン実験に適していることが予想された（表１）。
【００２２】
実施例２
ｓｉＲＮＡ局所投与を用いたヒトの発汗量のダウンレギュレーション
本実施例は、イオントフォレーシスによるｓｉＲＮＡ（ｓ７６３５、アンビオン）の局所投与後、ヒト被験者の発汗量が減少したことを示す。イオントフォレーシスおよびｓｉＲＮＡの局所投与後の発汗量について、被験者の左前腕を測定し、同一被験者の右前腕の発汗量は、ｓｉＲＮＡを投与しない場合の対照とした。
【００２３】
実験は、３６歳と５４歳の２人の健康な成人のそれぞれに対して行われた。ウェスコー社製の３７００型ウェブスター汗誘発装置（3700 Webster sweat inducer）およびマクロダクト汗収集システム（Macroduct sweat collecting system）を用いて、メーカーの推奨に従い、両前腕の発汗量が測定された。水５０μｌにｓｉＲＮＡ５０μｇを溶解した溶液を、０日目、１日目および９日目に、検査対象の左腕に投与し、３ｃｍ2のアガロースプラグ（４％アガロース含有リン酸緩衝食塩水）および陰極を用いて覆った後、イオントフォレーシス（１．５ｍＡ、５分）を行った。次に、測定可能な量の汗を得るために、イオントフォレーシスにより、５分間、検査対象の左腕の同じ３ｃｍ2の部位にピロカルピンを投与した。続いて、メーカーの推奨に従い、２５分間、汗を収集した（マクロダクト汗収集システム）。同様に、対照としての右腕にも、２５分間の汗収集を行う直前に、イオントフォレーシスにより、５分間、ピロカルピンを投与した。どちらの被験者も、１日目、９日目および１６日目に発汗量を測定した（図４Ａ）。一方の被験者は、２３日目にも発汗量を測定した（図４Ｂ）。図４Ａにおいて、「Ｃ」で表される棒は、「対照」である右前腕の６回の測定値の平均値であり、１に設定されている。「ｓｉＲＮＡ」で表される棒は、ｓｉＲＮＡ投与後の左前腕の相対的な平均発汗量（検査対象の腕、６回の測定値）である。発汗量が６０％近くも減少したことが確認される。「＊＊」はｐ＜０．０１（スチューデントのt検定）。
【００２４】
図４Ｂは、１人の被験者の相対的な発汗量を、「対照」としての右前腕の平均発汗量（１日目、９日目および１６日目；「Ｃ」）と、検査対象である左前腕の各測定値（１日目、９日目、１６日目および２３日目）とともに示す。「Average」で表されているのは、検査対象の腕の４回の測定値の平均発汗量である。「＊＊＊」はｐ＜０．００１（スチューデントのｔ検定）。発汗量の減少は、ｓｉＲＮＡ投与後１日目に確認され、９日目の最後のｓｉＲＮＡ投与後１４日間維持されている。
【００２５】
実施例３
ＩＴＰＲ２タンパク質のダウンレギュレーション
実施例２で開示された少なくとも１人の被験者に、ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡを標的にするｓｉＲＮＡ分子を投与する。次に、同一被験者の検査部位および対応する対照部位から皮膚生検を採取する。免疫組織化学法により、検査部位および対照部位から採取されたそれぞれの生検に含まれるＩＴＰＲ２タンパク質の量を定量化する。対照部位に比べて、検査部位の汗腺におけるＩＴＰＲ２タンパク質の量が著しく減少したことが判明した。
【００２６】
任意で、検査部位および対照部位から採取された生検に含まれるＩＴＰＲ１タンパク質およびＩＴＰＲ３タンパク質の量も同様に測定する。検査部位から採取された生検と対照部位から採取された生検とでは、ＩＴＰＲ１およびＩＴＰＲ３の量に著しい違いがないことが判明した。
【００２７】
配列
ＩＴＰＲ２ｍＲＮＡノックダウンに有効なｓｉＲＮＡ（５’〜３’）およびｍＲＮＡノックダウンに用いるＩＴＰＲ２遺伝子の予測標的配列の例。
【００２８】
【表１】
2016505617.tif 000003
【００２９】
本発明は、上述した好ましい実施形態に限定されない。さまざまな代替物、改良物および均等物が用いられてもよい。従って、上記実施形態は、添付の各請求項により規定された本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【００３０】
参考文献
Arote RB et al. Degradable poly(amido amine)s as gene delivery carriers. Expert Opin Drug Deliv 8, 1237-1246 (2011) 
Augin G et al. protein kinase C phosphorylates the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 2 and decreases the mobilization of Ca2+ in pancreatoma AR4-2J cells. J Endocrin 192, 659-668 (2007)
Burnett JC and Rossi JJ. RNA-based therapeutics: current progress and future. Chem Biol 19, 60-71 (2012)
Distelhorst CW and Bootman MD. Bcl-2 interaction with the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor: Role in Ca2+ signaling and disease. Cell Calcium 50, 234-241 (2011)
Feigner PL et al. Lipofection: a highly efficient lipid mediated
DNA-transfection procedure. Proc Natl Acad Sci USA 84, 7413-17 (1987)
Gindy ME et al. Challenges in the pharmaceutical development of lipid based short interfering ribonucleic acid therapeutics. Expert Opin Drug Deliv 9, 171-182 (2012) 
Futatsugi A et al. IP3 receptor types 2 and 3 mediate exocrine secretion underlying energy metabolism. Science 309, 2232-2234 (2005)
Goemans NM et al. Systemic administration of PRO051 in Duchenne muscular dystrophy. NEJM 364, 1513-22 (2011)
James, William; Berger, Timothy; Elston, Dirk (eds). Andrews' Diseases of the Skin: Clinical Dermatology. (10th ed.). Saunders. Page 777-8 (2005) 
Lara MF et al. Inhibition of CD44 gene expression in human skin models, using self- delivery short interfering RNA administrated by dissolvable microneedle arrays. Hum Gene Therapy 23, 1-8 (2012) 
Leachman SA et al. First-in-human mutation-targeted siRNA phase lb trial of an inherited skin disorder. Mol Therapy 18, 442-6 (2010)
Lin CM et al. A simple, non-invasive and efficient method for transdermal delivery of siRNA. Arch Dermatol Res 304, 139-144 (2012)
Yule DI et al. Linking structure to function: Recent lessons from inositol
1,4,5- triphosphate receptor mutagenesis. Cell Calcium 47, 469-479 (2010)
Zhang S et al. G-protein-coupled receptor kinase-interacting proteins inhibit apoptosis by Inositol 1,4,5-Trisphosphate Receptor mediated Ca2+ signal regulation. J Biol Chem 284, 29158-29169 (2009)
【図１】
2016505617.tif 000004
【図２】
2016505617.tif 000005
【図３】
2016505617.tif 000006
【図４】
2016505617.tif 000007
【配列表】
2016505617000001.app
【国際調査報告】
2016505617.tif 000008
2016505617.tif 000009
2016505617.tif 000010
2016505617.tif 000011
2016505617.tif 000012