(57)【要約】  本発明は、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカン及びジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物の局所的な美容使用に関する。  本発明はまた、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカン及びジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物又はこのような抽出物を含む化粧品組成物を、健康な皮膚及び／又は健康な粘膜及び／又は健康な頭皮の少なくとも１つの関心領域に適用することを含む、美容ケア方法に関する。  本発明は最後に、酒さ、毛細血管拡張症、あかぎれ、及び／又は頬側及び／又は眼の粘膜の障害の処置及び／又は予防において局所使用するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物、又はポリゴヌム・ビストルタ抽出物及び皮膚科学的に許容される賦形剤を含有する皮膚組成物に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、とりわけ真皮表皮接合部におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物の局所的な美容使用。
【請求項２】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、水抽出によって得られる、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、ポリゴヌム・ビストルタの根から抽出することによって得られる、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、とりわけ真皮表皮接合部における、パールカン及び／又はジストログリカンタンパク質の発現を刺激するための、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化、特に時間生物学的及び／又は光生物学的な老化を予防及び／又は阻止するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に表皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又は改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮基底膜、優先的には真皮表皮接合部を強化するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化に特に関連するケラチノサイト増殖及び／又は分化を、特に表皮レベルで改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の血管新生の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又はそれを改善するため、特に皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に皮膚の毛細血管の構造を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の形態形成を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮構造、優先的には、特に老化、特に時間生物学的な老化を受けている皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の表皮構造を修復するため、皮膚及び／又は粘膜の色艶を改善し、とりわけ色艶を均一にするため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さの低減を阻止するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さを増大させるための、請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
紅斑を排除することによって、及び／又は色艶を均一にすることによって、及び／又は明るさ、輝き、健康的及び／又は栄養に満ちた外観、見た目が良い効果及び／又はピンク色がかった輝きを与えることによって、皮膚の色艶を改善するための、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
特に成熟した皮膚及び／又は老化の最初の徴候を示す皮膚の、皺及び／又は小皺を低減又は抑制することによって、皮膚老化、特に時間生物学的な老化を予防及び／又は阻止するための、請求項５に記載の使用。
【請求項８】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又は皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の、特に表皮における恒常性を改善するための、請求項５に記載の使用。
【請求項９】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さを増大させるための、請求項５に記載の使用。
【請求項１０】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するための、請求項５に記載の使用。
【請求項１１】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、特にヒトの、健康な皮膚及び／又は健康な粘膜及び／又は健康な頭皮の、少なくとも１つの関心領域に局所適用される、請求項１〜１０のいずれかに記載の使用。
【請求項１２】
皮膚の関心領域が、顔、首、ネックライン、胸部及び／又は手、並びに非常に具体的には鼻溝及び／又は眼窩周囲領域及び／又は唇の輪郭及び／又は前頭部から選択される、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、美容上許容される賦形剤を含む化粧品組成物中に存在し、有利には組成物の総重量に対して１×１０−４〜１０重量％の含量で存在する、請求項１〜１２のいずれかに記載の使用。
【請求項１４】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、へキシレングリコール、カプリリルグリコール又はこれらの混合物を含む水溶液に可溶化される、請求項１〜１３のいずれかに記載の使用。
【請求項１５】
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１０重量％、特に水溶液の総重量に対して１重量％〜５重量％の含量で可溶化される、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、優先的には皮膚のケラチノサイト及び／又は内皮細胞におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激するための、請求項１〜１５のいずれかに記載の使用。
【請求項１７】
化粧品組成物が、水性又は油性溶液、クリーム又は水性ジェル又は油性ジェル、特にシャワージェル、シャンプー；乳液；特に水中油又は油中水又は複合又はシリコーン系のエマルション、マイクロエマルション又はナノエマルション；マスク；セラム；ローション；液体石けん；皮膚科学的な棒状物；軟膏；泡状物質；パッチ；好ましくは液体、ペースト、又は例えばメーキャップパウダー、ペン型もしくはスティックの形態、特にリップスティックの形態の固体である無水製品から選択される、請求項１〜１６のいずれかに記載の使用。
【請求項１８】
特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、とりわけ真皮表皮接合部におけるパールカン及びジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物又はこのような抽出物を含む化粧品組成物を、健康な皮膚及び／又は健康な粘膜及び／又は健康な頭皮の少なくとも１つの関心領域に適用することを含む、美容ケア方法。
【請求項１９】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化、特に時間生物学的及び／又は光生物学的な老化を予防及び／又は阻止するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に表皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止、及び／又は改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮基底膜、優先的には真皮表皮接合部を強化するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化に特に関連するケラチノサイト増殖及び／又は分化を、特に表皮レベルで改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の血管新生の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又はそれを改善するため、特に皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に皮膚の毛細血管の構造を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の形態形成を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮構造、優先的には、特に老化、特に時間生物学的な老化を受けている皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の表皮構造を修復するため、皮膚及び／又は粘膜の色艶を改善し、とりわけ色艶を均一にするため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さの低減を阻止するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さを増大させるための、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
酒さ、毛細血管拡張症、あかぎれ、並びに／あるいは頬側及び／又は眼の粘膜の病理学的状態の処置及び／又は予防において局所使用するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物、又はポリゴヌム・ビストルタ抽出物及び皮膚科学的に許容される賦形剤を含有する皮膚組成物。
【請求項２１】
請求項２、３及び１４〜１５に定義されている、請求項２０に記載の抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ（Polygonum bistorta）抽出物の局所的な美容又は皮膚科学的な使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
基底層のヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）の中でも、パールカンは、上皮、特に表皮の形態形成においても、特に皮膚のケラチノサイト及び内皮細胞の生存、増殖及び分化においても、主な役割を有している。パールカンは、増殖因子のバイオアベイラビリティを制御することによって、これらの過程を調節する。
【０００３】
ジストログリカンは、パールカンの潜在的な受容体である糖タンパク質である。
【０００４】
パールカン及びジストログリカンは、様々な組織、例えば上皮及び内皮にも、様々な細胞型、例えばケラチノサイト、線維芽細胞及び内皮細胞にも位置する普遍的構造である基底膜上に発現する。パールカン及びジストログリカンは、一緒になって相互作用し、皮膚、粘膜及び頭皮、特に上皮、特に表皮及び真皮の構造の堅牢性及び安定性を確保することに寄与する。偶然にも、老化、特に時間生物学的な老化中に、パールカン及びジストログリカンの発現は劇的に低減される。特に、パールカンの発現は、真皮表皮接合部及び真皮毛細血管のレベルで、年齢に伴って大幅に減少する。こうした減少は、タンパク質の分解ではなく、タンパク質の発現の低減、非常に具体的にはケラチノサイト及び内皮細胞によるタンパク質の転写調節に起因して生じる。さらに、本発明者らは、パールカンの合成の欠如と、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に上皮、優先的には表皮の厚さとの間には、相関があることを指摘した。したがって、パールカン及びジストログリカンの発現は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の恒常性、並びに老化、特に時間生物学的な老化中に分解されるそれらの硬さ及びそれらの密度の維持において、非常に重要である。
【０００５】
驚くべきことに、本発明者らは、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物が、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部における、より具体的には皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮のケラチノサイト及び／又は内皮細胞における、優先的には皮膚における基底層のＨＳＰＧ及び糖タンパク質、より具体的にはパールカン及びジストログリカンの発現を刺激することを発見した。特に皮膚のケラチノサイトと内皮細胞の両方を標的にすることにより、以下の、１）皮膚、粘膜及び／又は頭皮に栄養を与える微小血管経路を改善すること、並びに２）特に明度に関して色艶を改善することの、二重の効果を有することが可能になる。さらに、パールカンだけでなくジストログリカンも標的にすることにより、パールカンの発現及び活性の経路に対して完全に作用することが可能になる。
【０００６】
ポリゴヌム・ビストルタは、地中海領域を除く欧州、アジア及び北米で、高度２４００ｍまでに見出される植物である。ポリゴヌム・ビストルタは、湿潤気候の山岳牧草地に、小川の水際の窒素を豊富に含む土壌に育つ。ポリゴヌム・ビストルタは、鎮静剤及び収斂薬として、腹膜に投与されると鎮痛効果があることが知られており、強力な治癒及び下痢止め強壮薬として説明される。
【０００７】
特許出願である（特許文献１）は、皮下筋肉の収縮を制限することによって、皮膚の小皺及び皺の形成を予防及び／又は阻止することを企図した、レスベラトロール及び／又はある特定のその誘導体を含有する化粧品組成物、医薬組成物及び皮膚美容組成物を記載している。レスベラトロール及び／又はこれらの誘導体を含有し得る数々の植物抽出物の中でも、ポリゴヌム・ビストルタが挙げられる。それにもかかわらず、前記特許文書に記載の効果は、ボツリヌス毒素の使用の代替としての筋弛緩作用に起因する、機械的効果である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】仏国特許第２８６７９７７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明によるパールカン及びジストログリカンの発現に対する作用経路とはかなり異なる作用機序及び結果がもたらされ、それによって、筋阻害剤（myoinhibitor）を用いて観測される皮膚の緩みとは正反対の効果である、硬さ及び密度の増大が生じる。さらに、ジストログリカンは筋収縮にも寄与し、したがってジストログリカンの発現を増大すると、筋阻害に対する逆効果が誘発されることに留意されたい。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
したがって本発明は、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物の局所的な美容又は皮膚科学的な使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】５０歳のドナーの生検において、実施例６に記載の試験に従って培養して０日目（Ｔ０）及び７日目（Ｔ７）の、処置なし（対照）又は処置あり（０．５％抽出物）の培養物で測定したパールカンの発現レベルの変化を表す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
優先的には、本発明による使用は、美容上のものであり、特にヒトの、健康な皮膚及び／又は健康な粘膜及び／又は健康な頭皮の、少なくとも１つの関心領域に局所適用することによって行われる。
【００１３】
優先的には、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、根から得られ、優先的には水抽出によって得られる。
【００１４】
優先的には、ポリゴヌム・ビストルタの使用は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮のケラチノサイト及び／又は内皮細胞、好ましくは皮膚の内皮細胞におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激する。
【００１５】
本発明による植物抽出物は、特に根、茎、樹皮、花、種子、胚芽及び／又は葉、並びにこれらの混合物から選択される、植物全体又は植物の１つ以上の部分から抽出することができる。本発明による植物抽出物は、優先的には根から抽出される。
【００１６】
したがって、抽出物は、当分野で公知の植物抽出方法によって、例えば植物の少なくとも一部を１％〜１０％（ｐ／ｐ）で、好ましくは溶媒又は溶媒混合物、好ましくはプロトン性極性溶媒、有利には水、アルコール、グリコール、ポリオール、又は１００／０〜０／１００（ｖ／ｖ）の水／アルコール、水／グリコールもしくは水／ポリオール混合物（例えば混合物としての、水とエタノール、グリセロール、ブチレングリコール又は他のグリコール、例えばキシリトール等）に浸軟させることによって得ることができる。抽出物は、優先的には水抽出によって得られる。
【００１７】
本発明の目的では、用語「水抽出によって得られたポリゴヌム・ビストルタ抽出物」は、特に水溶液の総重量に対して６０重量％超、有利には少なくとも７０重量％、特に少なくとも８０重量％、より具体的には少なくとも９０重量％、特に少なくとも９５重量％の水を含有し、さらにより有利にはブチレングリコールを含有せず、特にアルコールを含有せず、より具体的には水だけを含有する水溶液で抽出することによって、特に水溶液に浸軟させることによって得られた、任意の抽出物を意味するものとする。
【００１８】
有利な一実施形態によれば、本発明による抽出物は、任意選択で植物の乾燥ステップの後、冷却浸軟によって、優先的には４℃で、又は周囲温度、すなわち１８〜２５℃、優先的には２０℃で得られる。好ましい一態様によれば、本発明による抽出物は、周囲温度、優先的には２０℃で浸軟させることによって得られる。
【００１９】
優先的な一実施形態によれば、本発明による抽出物は、３０分〜２４時間、優先的には１時間〜５時間、より優先的には２時間、浸軟することによって得られる。
【００２０】
次に、得られた抽出物は、活性な可溶性画分を回収するために、好ましくは遠心分離処理され、及び／又は濾過され、及び／又は蒸留される。得られた抽出物は、０．４５μｍ、より優先的には０．２２μｍのカットオフ閾値で、優先的には濾過される。抽出の任意の段階で、当業者に公知の技術に従って、抽出物に追加の退色及び／又は脱臭ステップを行うことができる。
【００２１】
また本発明による抽出物は、その後、溶媒の蒸発によって、例えば凍結乾燥又は噴霧によって、濃縮することができる。
【００２２】
特に有利には、抽出中の植物、好ましくは根の量は、植物／抽出溶媒、優先的には水溶液の混合物の総重量に対して１重量％である。特に植物は、抽出前に粉砕される。有利には、抽出は２時間継続され、周囲温度、特に２０℃で行われる。さらにより有利には、本発明による抽出物は、レスベラトロール及び／又はトランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、及び／又は特にレスベラトロールオリゴマー及び／又はレスベラトロール類似体の形態のレスベラトロール誘導体、例えばラポンチン（rhapontin）（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（deoxyrhapontin）（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、酢酸レスベラトロール、ギ酸エステル及びグルコシド、又は３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）を筋収縮に対して効果を有するには十分でない量、特に本発明による抽出物の０．０１重量％未満、優先的には０．００１重量％未満の量で、ごく微量含有する。優先的には、本発明による抽出物は、レスベラトロール及び／又はトランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、及び／又は特にレスベラトロールオリゴマー及び／又はレスベラトロール類似体の形態のレスベラトロール誘導体、例えばラポンチン（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、酢酸レスベラトロール及びグルコシド、並びに３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）を含有していない。
【００２３】
得られた抽出物は、溶媒、特に極性溶媒、例えば水、アルコール、ポリオール、グリコール又はこれらの混合物、優先的にはグリコールの水性混合物、より優先的にはカプリリルグリコール、へキシレングリコール及びこれらの混合物から選択されるグリコールを含有する混合物において、優先的には可溶性である。
【００２４】
有利には、抽出物は、へキシレングリコール、特に水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１０重量％のへキシレングリコール、より具体的には水溶液の総重量に対して１重量％〜５重量％のへキシレングリコールを含有する水溶液に可溶性である。有利には、抽出物は、カプリリルグリコール、特に水溶液の総重量に対して０．０１重量％〜５重量％のカプリリルグリコール、より具体的には水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１重量％のカプリリルグリコールを含有する水溶液に可溶性である。有利には、水溶液は、ブチレングリコールを含有していない。
【００２５】
本発明の目的では、用語「健康な皮膚」、「健康な粘膜」又は「健康な頭皮」は、本発明による抽出物が適用され、皮膚科医によって「病理学的でない」と呼ばれる、すなわち任意の皮膚感染症、疾患もしくは状態、例えばカンジダ症、膿痂疹、乾癬、湿疹、座瘡もしくは皮膚炎、又は任意の創傷もしくは傷害を呈していない、皮膚、粘膜又は頭皮の領域を意味するものとする。
【００２６】
優先的には、本発明の目的では、用語「美容」は、非治療的使用、すなわち健康な皮膚、健康な粘膜及び／又は健康な頭皮への使用を意味するものとする。
【００２７】
本発明の目的では、用語「局所」は、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物及び／又はこのような抽出物を含有する化粧品組成物を、特にヒトの皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の関心領域表面に、特に直接適用又はスプレーによって適用することを意味するものとする。
【００２８】
本発明の目的では、表現「パールカン及び／又はジストログリカンの発現の刺激」は、それぞれパールカン及び／又はジストログリカンの遺伝子及び／又はタンパク質の発現、優先的にはタンパク質の発現の増大を意味するものとする。この増大は、パールカン及び／又はジストログリカンの発現を呈している少なくとも１つの細胞型、有利には優先的には皮膚のケラチノサイト及び／又は内皮細胞を含む、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物と接触させたモデルで測定することができ、対照モデル、すなわち本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物と接触させていないモデルにおける遺伝子及び／又はタンパク質の発現レベルに対して、パールカン及び／又はジストログリカンのそれぞれの遺伝子及び／又はタンパク質の発現が、１０％以上、有利には２０％以上増大させることを反映する。この発現の増大は、優先的にはタンパク質の発現の増大である。このようなモデルは、実施例に記載されている。
【００２９】
本発明によれば、用語「粘膜」は、特に頬側の粘膜、特に頬側、口唇、鼻、眼、肛門及び／又は泌尿生殖器の粘膜、特に唇粘膜を示す。
【００３０】
有利には、本発明による使用は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化、特に時間生物学的及び／又は光生物学的な老化を予防及び／又は阻止するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又は特に表皮の恒常性を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮基底膜、優先的には真皮表皮接合部を強化するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化に特に関連するケラチノサイト増殖及び／又は分化を、特に表皮レベルで改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の血管新生の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又はそれを改善するため、特に皮膚のクローディン５の発現を増大させることによって、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に皮膚の毛細血管の構造を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の形態形成を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮構造、優先的には、特に老化、特に時間生物学的な老化を受けている皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の表皮構造を修復するため、特に皮膚のクローディン５の発現を増大させることによって、皮膚及び／又は粘膜の色艶を改善し、特に色艶を均一にするため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さの低減を阻止するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さを増大させるためのものである。
【００３１】
特定の一実施形態では、本発明による使用の目的は、有利には紅斑を排除することによって、及び／又は色艶を均一にすることによって、及び／又は明るさ、輝き、健康的な及び／又は栄養に満ちた外観、見た目が良い効果及び／又はピンク色がかった輝きを与えることによって、皮膚の色艶を改善することである。
【００３２】
実際、色艶の輝度は、一般に、皮膚の健康な状態を反映する。数々の内因的又は外因的要因によって、不均一なくすんだ色艶が引き起こされ得る。皮膚の色艶の輝度に影響を及ぼす要因の中でも、ストレス、疲労、ホルモン変化、上皮、優先的には表皮の脱水、汚染物質、並びに時間生物学的及び光生物学的な老化を挙げることができる。これらの要因は、色艶をくすませ、不均一にし、くすませ、ろう状にし、又はさらには病的にする傾向がある。パールカン及びジストログリカンの発現は、微小血管経路に影響を及ぼし、それによって皮膚により多くの栄養を与え、皮膚を解毒し、したがって皮膚に栄養に満ちた健康な外観を与えることを可能にする。さらに皮膚色は、微小循環の影響を受け、光は、微小血管に達すると赤血球と接触し、それによって緑色の範囲を特に吸収する。赤色は、表面で反射し、皮膚にピンク色がかった色相を与え、したがってピンク色がかった輝度を与える。したがって、クローディン５の発現の増大によって、色艶の輝度を改善することが可能になる。また色艶の輝度は、皮膚の反射能力によって決まる。この反射能力は、皮膚の質感の影響を受ける。したがって、より軟らかく、よりしなやかな質感を有する皮膚は、より良好な容貌を有する。したがって、パールカン及び／又はジストログリカンの発現の刺激によって得られる、表皮構造の修復及び上皮、優先的には表皮の形態形成の改善は、やはり皮膚の色艶を改善することを可能にする。
【００３３】
色艶の輝度又は光沢の改善は、特に、客観的手段による方法によって測定することができる。このｉｎ  ｖｉｖｏ測定方法は、ボランティアの顔に試験生成物を適用する前及び適用した後に、４５°において交差偏光を用いて高解像度写真を撮影することにある。これらのデジタル写真に基づいて画像分析することにより、皮膚の色、輝度、均一性及び質感に関する特定のパラメータ（例えば、Ｌ＊、ａ＊、ｂ＊、Ｃ、ｈ°）を抽出し、定量化することが可能になる。
【００３４】
同様に、光沢は、特にこの方法に従って、ボランティアの顔に試験生成物を適用する前及び適用した後に、４５°において交差偏光及び平行偏光を用いて高解像度写真を撮影することに基づいて測定することができる。これらのデジタル写真に基づいて画像分析することにより、光沢、例えば鏡面光沢及びコントラスト光沢に関する特定のパラメータを抽出し、定量化することが可能になる。
【００３５】
別の特定の一実施形態では、本発明による使用の目的は、特に成熟した皮膚及び／又は老化の最初の徴候を示す皮膚の、皺及び／又は小皺を低減又は抑制することによって、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化、特に時間生物学的又は光生物学的な老化を予防及び／又は阻止することである。
【００３６】
本発明の目的では、用語「成熟した皮膚」は、少なくとも５０歳である男性又は女性の皮膚、有利には閉経期の女性の皮膚を意味するものとする。
【００３７】
本発明の目的では、用語「老化の最初の徴候を示す皮膚」は、３０〜４０歳である男性又は女性の皮膚、有利には最初の表情皺を示す皮膚を意味するものとする。
【００３８】
さらに別の特定の実施形態では、本発明による使用の目的は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又は特に表皮の恒常性を改善することである。
【００３９】
恒常性、特に皮膚の恒常性、特に表皮の恒常性は、皮膚の細胞、特にケラチノサイトの増殖過程と分化過程との間の均衡が細かく調節されることによって得られる。これらの増殖過程及び分化過程は、皮膚の再生及び／又は再建に関与し、皮膚の一定の厚さ、特に上皮、優先的には表皮の一定の厚さを維持する。この恒常性は、皮膚、粘膜及び頭皮の機械特性の維持にも関与する。
【００４０】
しかし、この皮膚の恒常性は、ある特定の生理的要因（年齢、閉経、ホルモン、ストレス等）及び外因的要因（汚染物質等）によって損なわれるおそれがある。上皮、特に表皮の潜在的な再建可能性は低くなり、基底層の細胞が活性に分割しなくなり、特に、表皮の再生の緩徐及び／又は低減が生じる。結果的に、細胞の再生は、表面において排除された細胞喪失をもはや相殺せず、上皮、特に表皮の萎縮、及び／又は皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の厚さの低減、及び／又は皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の密度及び／又は硬さの喪失が生じる。この現象は、閉経によって増強され得る。閉経に関連するホルモン欠乏症には、特に代謝活性の低下が伴い、それによって、ケラチノサイトの増殖が低下し、表皮の分化が増大するおそれがある。したがって、本発明による使用は、特に閉経期の女性の、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の厚さを維持及び／又は増大し、したがって皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の機械特性を維持及び／又は改善し、及び／又は皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するために、恒常性を促進することを可能にする。
【００４１】
上皮、優先的には表皮の厚さの増大は、特に、生存条件下の皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮生検モデルで、ｅｘ  ｖｉｖｏで評価することができる。上皮、優先的には表皮は、実験開始時に試験生成物を適用する前と、試験生成物が存在する状態で試験期間の最後に、例えば４日目、優先的には７日目に測定される。上皮、優先的には表皮の厚さは、生成物を適用した後の測定値が、試験期間の最後に５％以上、優先的には１０％以上になる場合に、増大したとされる。
【００４２】
有利には、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物、又はそれを含む化粧品組成物もしくは皮膚組成物が適用される、特にヒトの皮膚の関心領域は、顔、首、ネックライン、胸部及び／又は手、非常に具体的には鼻溝及び／又は眼窩周囲領域、特に目の隈（dark circle）、並びに目尻の小皺及び／又は唇の輪郭及び／又は前頭部から選択される。しかし抽出物は、身体、特に胃、大腿、尻、殿部及び／又は腰に適用することもでき、これらは、硬さ及び／又は密度の喪失を示すおそれがある身体領域である。
【００４３】
本発明によれば、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ植物抽出物は、単独で使用され、又は化粧品組成物もしくは皮膚組成物中に、全組成物の重量に対して１×１０−４〜１０重量％、有利には１×１０−４〜５重量％、より具体的には１×１０−３〜３重量％の濃度で使用される。
【００４４】
有利には、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、本発明による化粧品組成物又は皮膚組成物中に、組成物の総重量に対して１０×１０−４〜１０重量％、優先的には組成物の総重量に対して１０×１０−４〜５重量％、有利には組成物の総重量に対して１０×１０−３〜３重量％、特に組成物の総重量に対して０．００１重量％〜０．１重量％の含量で存在する。
【００４５】
有利には、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、組成物の総重量に対して０．００１重量％未満、優先的には０．０００１重量％未満の量のレスベラトロール及び／又はトランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、及び／又は特にレスベラトロールオリゴマー及び／又はレスベラトロール類似体の形態のレスベラトロール誘導体、例えばラポンチン（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、アセテート、ギ酸エステル、３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）、及び／又はレスベラトロールグルコシドを含有する。
【００４６】
優先的には、本発明による組成物は、組成物の総重量に対して０．００１重量％未満、優先的には０．０００１重量％未満の量のレスベラトロール及び／又はトランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、及び／又は特にレスベラトロールオリゴマー及び／又はレスベラトロール類似体の形態のレスベラトロール誘導体、例えばラポンチン（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、アセテート、ギ酸エステル及び／又は３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）、及び／又はレスベラトロールグルコシドを含有する。さらにより優先的には、本発明による組成物は、レスベラトロール及び／又はトランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、及び／又は特にレスベラトロールオリゴマー及び／又はレスベラトロール類似体の形態のレスベラトロール誘導体、例えばラポンチン（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、アセテート、ギ酸エステル、及び／又は３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）を含有していない。
【００４７】
本発明による一実施形態では、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、酒さ、毛細血管拡張症、あかぎれのケア及び／又は皮膚科学的処置のため、及び／又は頬側及び／又は眼の粘膜の病理学的状態のケア及び／又は処置のため、特に頬側の粘膜のレベルで硬さ及び／又は密度の喪失を伴う頬側の粘膜の病理学的状態のケア及び／又は処置のため、及び／又は頬側の血管構造の改善のため、及び／又は眼の粘膜のレベルで硬さ及び／又は密度の喪失を伴う眼の粘膜の病理学的状態のケア及び／又は処置のため、及び／又は眼の血管構造の改善のための皮膚組成物を生成するために使用される。
【００４８】
本発明による別の実施形態では、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、美容上又は皮膚科学的に許容される賦形剤を含む化粧品組成物又は皮膚組成物中に存在する。
【００４９】
この化粧品組成物又は皮膚組成物は、局所適用を対象としている。
【００５０】
本明細書で使用される用語「美容上又は皮膚科学的に許容される賦形剤」は、組成物又は前記組成物の構成成分が、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー応答又はそれらの等価物なしに、ヒトの皮膚及び／又は粘膜及び／又はヒトの頭皮に接触させて使用するのに適していることを示す。
【００５１】
したがって、本発明による化粧品組成物又は皮膚組成物は、本発明による抽出物に加えて、美容上又は皮膚科学的に許容される賦形剤を含有する。この賦形剤は、例えば、保存剤、皮膚軟化剤、乳化剤、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、調整剤、艶消し剤、安定剤、抗酸化剤、テクスチャリング剤、光沢剤、皮膜形成剤、可溶化剤、顔料、色素、芳香剤及び日焼け止めからなる群から選択される少なくとも１種の化合物である。これらの賦形剤は、好ましくは、アミノ酸及びその誘導体、ポリグリセリン、エステル、セルロースポリマー及び誘導体、ラノリン誘導体、リン脂質、ラクトフェリン、ラクトペルオキシダーゼ、スクロース系安定剤、ビタミンＥ及びその誘導体、天然及び合成ワックス、植物油、トリグリセリド、不けん化化合物、フィトステロール、植物エステル、シリコーン及びその誘導体、タンパク質加水分解物、ホホバ油及びその誘導体、脂溶性／水溶性エステル、ベタイン、アミンオキシド、植物抽出物、スクロースエステル、二酸化チタン、グリシン、並びにパラベンからなる群から選択され、より好ましくはステアレス−２、ステアレス−２１、グリコール−１５ステアリルエーテル、セテアリルアルコール、フェノキシエタノール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、ブチレングリコール、カプリリルグリコール、天然トコフェロール、グリセリン、ジヒドロキシセチルリン酸ナトリウム、イソプロピルヒドロキシセチルエーテル、ステアリン酸グリコール、トリイソノナノイン、オクチルココエート、ポリアクリルアミド、イソパラフィン、ラウレス−７、カルボマー、プロピレングリコール、へキシレングリコール、グリセロール、ビサボロール、ジメチコン、水酸化ナトリウム、ジポリヒドロキシステアリン酸ＰＥＧ３０、カプリン酸／カプリル酸トリグリセリド、オクタン酸セテアリル、アジピン酸ジブチル、ブドウ種子油、ホホバ油、硫酸マグネシウム、ＥＤＴＡ、シクロメチコン、キサンタンガム、クエン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、鉱物性ワックス及び油、イソステアリン酸イソステアリル、プロピレングリコールジペラルゴネート、イソステアリン酸プロピレングリコール、ＰＥＧ８、蜜蝋、水素化パーム核油グリセリド、ラノリン油、ゴマ油、乳酸セチル、ラノリンアルコール、ヒマシ油、二酸化チタン、ラクトース、スクロース、低密度ポリエチレン、並びに等張生理食塩水からなる群から選択される。
【００５２】
本発明による化粧品組成物は、水性又は油性溶液、クリーム又は水性ジェル又は油性ジェル、特にシャワージェル、シャンプー；乳液；特に水中油又は油中水又は複合又はシリコーン系のエマルション、マイクロエマルション又はナノエマルション；マスク；セラム；ローション；液体石けん；皮膚科学的な棒状物；軟膏；泡状物質；パッチ；好ましくは液体、ペースト、又は例えばメーキャップパウダー、ペン型もしくはスティックの形態、特にリップスティックの形態の固体である無水製品から選択することができる。有利には、本発明による化粧品組成物は、クリーム又はセラム、特にアイライナー又はリップライナーである。
【００５３】
本発明による組成物は、より具体的には顔に、優先的には１日１回、優先的には１日１回又は１日２回、優先的には朝及び／又は夕方に適用される。
【００５４】
有利には、本発明による化粧品組成物は、対象となる、特に化粧品の対象となる他の成分、優先的には類似の特性を有する薬剤を含有する。優先的には、これらは、老化防止組成物、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜の密度及び／又は硬さを改善し、及び／又は皮膚の色艶及び／又は皮膚の恒常性を改善する組成物の通常の成分であり、特に充填剤、張力剤、保湿剤、及び細胞外マトリックス分子を刺激する薬剤から選択される成分である。
【００５５】
本発明による化粧品組成物はまた、相補的又は任意選択で相乗的な効果をもたらす化粧品活性成分、例えば保湿活性剤、老化防止活性剤、フリーラジカル捕捉活性剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）保護剤、線維芽細胞の活性及び／又は増殖を刺激する薬剤、及び／又は天然水を含有することができる。したがって、化粧品活性成分は、例えば、皮膚着色剤又は色素沈着促進剤、ＮＯ−シンターゼ阻害剤、脂性皮膚ケア用の抗脂漏剤、真皮もしくは表皮巨大分子、特に細胞外マトリックスの合成を刺激し、及び／又はその分解を防止する、相乗的又は相補的効果のための薬剤、線維芽細胞もしくはケラチノサイトの増殖及び／又はケラチノサイトの分化を刺激する、相乗的又は相補的効果のための薬剤、抗菌剤、張力剤、汚染防止剤又はフリーラジカル捕捉剤、鎮静剤、沈静剤又は弛緩剤、微小循環に作用して、色艶、特に顔の輝度を改善する、相乗的又は相補的効果のための薬剤、光防護剤、治癒剤、痩身化剤、相乗的又は相補的効果のための老化防止剤、あるいは任意選択で保湿剤及び／又は表皮バリアを強化する薬剤であってもよい。
【００５６】
保湿、皮膚軟化又は保水活性剤は、バリア機能を強化し、不感水分喪失を低減し、及び／又は皮膚及び／又は粘膜の含水量を増大し、又は皮脂腺の分泌活性を刺激し、及び／又は細胞内の水の循環を改善するためにアクアポリンの合成を刺激することができる。非限定的な例として、以下の活性剤を挙げることができる。セリン、尿素及びその誘導体、名称Marine Filling Spheres（商標）、Advanced Moisturizing Complex（商標）、Hyaluronic Filling Spheres（商標）、Vegetal filling spheres（商標）、Osmogelline（商標）、Micropatch（商標）で販売されている製品、アルキルセルロース、レシチン、スフィンゴイド系化合物、セラミド、リン脂質、コレステロール及びその誘導体、スフィンゴ糖脂質、フィトステロール（スチグマステロール及びベータ−シトステロール、カンプエステロール）、必須脂肪酸、１，２−ジアシルグリセロール、４−クロマノン、五員環トリテルペン、例えばウルソール酸、ワセリン、ラノリン、糖、特にトレハロース及びその誘導体、ラムノース、フルクトース、マルトース、ラクトース、エリスリトール、マンニトール、Ｄ−キシロース及びグルコース、アデノシン及びその誘導体、ソルビトール、多価アルコール、有利にはＣ２〜Ｃ６、より有利にはＣ３〜Ｃ６多価アルコール、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、ポリグリセリン、及びこれらの混合物、グリセロール及びその誘導体、ポリアクリル酸グリセリル、乳酸ナトリウム、ペンタンジオール、セリン、乳酸、ＡＨＡ、ＢＨＡ、ピドロ酸ナトリウム、キシリトール、乳酸ナトリウム、エクトイン及びその誘導体、キトサン及びその誘導体、コラーゲン、プランクトン、ステロイド系誘導体（ＤＨＥＡ、その７−酸化及び／又は１７−アルキル化誘導体、並びにサポゲニンを含む）、ジヒドロジャスモン酸メチル、ビタミンＤ及びその誘導体、ウスベニアオイ（Malva sylvestres）抽出物又はツボクサ（Centella asiatica）抽出物、アクリル酸ホモポリマー、ベータ−グルカン、特にナトリウムカルボキシメチルベータ−グルカン、Ｃ−グリコシド誘導体、例えば特許出願である国際公開第０２／０５１８２８号に記載のもの、ジャコウバラ油、Vincienceから名称Algualane Zinc（商標）で販売されている、亜鉛が豊富な微細藻類チノリモ（Prophyridium cruentum）の抽出物、アルギニン、Lipotechから名称Diffuporine（商標）で販売されているアセチルヘキサペプチド、Silabから名称Aquaphyline（商標）で販売されているビオラ・トリコロール（Viola tricolor）加水分解物。
【００５７】
また活性剤は、老化防止剤、すなわち皮膚バリアに対して特に再構築効果を有する薬剤、皮膚タンパク質、特に真皮タンパク質、例えばコラーゲンの糖化を防止及び／又は低減する薬剤、細胞のエネルギー代謝を刺激する活性剤、並びにこれらの混合物、全体的な老化防止作用を有する薬剤、特にナイアシンアミド又はビタミンＢ３及び誘導体から選択することができる。皮膚バリアに対して再構築効果を有する薬剤は、酵母抽出物の１つ、例えばBASF Beauty Care Solutions France SAS製のRelipidium（商標）、スフィンゴシン、例えばサリチロイルスフィンゴシン、キシリトール、キシリチルポリグリコシド及びキシリタン（xylitan）の混合物、ナス科（Solanaceae）の抽出物、例えばBASF Beauty Care Solutions France SAS製のLipidessence（商標）、並びにこれらの混合物から選択することができる。また特に、セラミド、スフィンゴイド系化合物、スフィンゴ糖脂質、リン脂質、コレステロール及びその誘導体、フィトステロール、必須脂肪酸、ジアシルグリセロール、４−クロマノン及びクロモン誘導体並びにこれらの混合物、ビタミンＢ５又はパントテン酸及び誘導体を挙げることができる。
【００５８】
細胞のエネルギー代謝を刺激する活性剤は、例えばビオチン、ピロリドンカルボン酸のナトリウム塩、マンガン塩、亜鉛塩及びマグネシウム塩の混合物、グルコン酸亜鉛、グルコン酸銅及びグルコン酸マグネシウムの混合物、並びにこれらの混合物から選択することができる。
【００５９】
本発明による組成物における抗脂漏剤は、５α−還元酵素阻害剤、例えばレチノイド、サルコシン、亜鉛塩、特にグルコン酸亜鉛、サリチル酸亜鉛、アゼライン酸、及び／又はその誘導体、及び／又はこれらの混合物、並びにBASF Beauty Care Solutions France SASから名称MAT XS（商標）brightで販売されているクミクスチン（Orthosiphon stamineus）抽出物であってもよい。
【００６０】
組成物はまた、皮脂吸収剤、特にタルク及び／又は吸収性ポリマー、抗菌剤、特に特許出願である仏国特許第２８６３８９３号に記載の抗菌剤、特にボルド（Boldo）抽出物（このような抽出物は、特に出願人によって名称Betapur（商標）で販売されている）、面皮溶解（comedolytic）剤、特にレチノイン酸又はその誘導体、例えばイソトレチノイン、アダパレン及び／又は１３−ｃｉｓ−レチノイン酸及び過酸化ベンゾイル、局所性抗生物質薬剤、特にエリスロマイシン及び／又はクリンダマイシンリン酸エステル、並びにこれらの混合物を含有することができる。
【００６１】
真皮巨大分子の合成を刺激し、又は真皮巨大分子の分解を防止する活性剤の中でも、以下のものとして作用する活性剤を挙げることができる。
・  フィブロネクチン合成を刺激する薬剤、特にトウモロコシ抽出物（このような抽出物は、特に出願人によって名称Deliner（商標）で販売されている）、及びSederma社から商標Matrixiｌ（商標）で販売されているパルミトイルペンタペプチド、
・  細胞外マトリックス線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ２）を分解及び／又は変性から保護する薬剤、特に出願人の名前で出願した特許出願である仏国特許第０６５４３１６号に記載のヒビスクス・アべルモスクス（Hibiscus abelmoscus）抽出物、及び／又は線維芽細胞増殖を刺激する薬剤、例えば出願人によって販売されており、特許出願である欧州特許第１１１９３４４号（Laboratoires Expanscience）にも記載されている、名称Phytokine（商標）で公知のペプチドを含有する発酵ダイズ抽出物、優先的にはこれらの２種の抽出物の組合せ、
・  ラミニン合成を刺激する薬剤、特にバイオテクノロジーによって改変された麦芽の抽出物（このような抽出物は、特に出願人によって名称Basaline（商標）で販売されている）、
・  ヒアルロナン合成酵素２（ＨＡＳ２）の発現及び／又は活性を刺激する薬剤、例えば特許出願である仏国特許出願公開第２８９３２５２号に記載の植物抽出物、特にガランガ（アルピニア・ガランガ（Alpinia galanga））の水性抽出物、
・  リシルオキシダーゼ様（ＬＯＸＬ）の合成を刺激する薬剤、例えばゲオフィラ・コルディフォリア（Geophila cordifolia）抽出物、及び特許出願である仏国特許第２８５５９６８号に記載の抽出物、特にディル抽出物、
・  細胞内ＡＴＰ合成を刺激する薬剤、特に藻類ラミナリア・ディギタータ（Laminaria digitata）の抽出物、
・  グリコサミノグリカン合成を刺激する活性剤、例えば乳発酵製品、
・  コラーゲン刺激活性剤、例えばレチノール及び／又はビタミンＣ、
・  メタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）、例えばより具体的にはＭＭＰ１、２、３及び９を阻害する活性剤、例えばレチノイド及び誘導体、オリゴペプチド及びリポペプチド、リポアミノ酸、BASF Beauty Care Solutions Franceから商標Collalift（商標）で販売されている麦芽抽出物、BASF Beauty Care Solutions France SASから名称Extracellium（商標）で販売されている加水分解バレイショ抽出物、リコペン、イソフラボン、ケルセチン、ケンフェロール及びアピゲニン。
【００６２】
本発明による組成物において使用できる、ケラチノサイト増殖を刺激する薬剤は、特にレチノイド、例えばレチノール及びパルミチン酸レチニルを含めたそのエステル、並びにフロログルシノールを含む。ケラチノサイト分化を刺激する薬剤は、例えば、ミネラル、例えばカルシウム及びリグナン、例えばセコイソラリシレシノール、並びにBASF Beauty Care Solutions Franceから名称Neurobiox（商標）で販売されているセイヨウオトギリソウ（Achillea millefollium）抽出物を含む。
【００６３】
本発明による組成物において使用できる抗菌剤は、特に２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル（又はトリクロサン）、３，４，４’−トリクロロバニリド、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール、フェノキシイソプロパノール、イセチオン酸ヘキサミジン、メトロニダゾール及びその塩、ミコナゾール及びその塩、イトラコナゾール、テルコナゾール、エコナゾール、ケトコナゾール、サペルコナゾール、フルコナゾール、クロトリマゾール、ブトコナゾール、オキシコナゾール、スルファコナゾール、スルコナゾール、テルビナフィン、ウンデシレン酸及びその塩、過酸化ベンゾイル、３−ヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシ安息香酸、フィチン酸、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン酸、リポ酸、アゼライン酸及びその塩、アラキドン酸、レゾルシノール、オクトキシグリセリン、オクタノイルグリシン、カプリリルグリコール、１０−ヒドロキシ−２−デカン酸、ファルネソール、フィトスフィンゴシン、並びにこれらの混合物から選択することができる。
【００６４】
本発明による組成物において使用できる張力剤の中でも、特に、合成ポリマー、例えばポリウレタンラテックス又はアクリルラテックス、天然由来のポリマー、特にデンプン形態もしくはカラゲニン形態のポリホロシド、アルギネート、寒天、ジェラン、セルロース系ポリマー及びペクチン、ダイズ野菜タンパク質及びタンパク質加水分解物、混合シリケート、ワックス微粒子、例えばシリカ及びシリカ−アルミナ複合物から選択される無機フィラーのコロイド粒子、並びにこれらの混合物を挙げることができる。
【００６５】
組成物は、「抗汚染」剤、特に例えばビタミンＣ及びアスコルビルグルコシドを含めたその誘導体によって代表されるオゾン捕捉剤、フェノール及びポリフェノール、特にタンニン、エラグ酸及びタンニン酸、エピガロカテキン及びエピガロカテキンを含有する天然抽出物、特に緑茶抽出物、アントシアン、フェノール酸、スチルベン、単環式又は多環式芳香族化合物捕捉剤である活性剤、タンニン、例えばエラグ酸、及びインドール誘導体、及び／又は重金属、例えばＥＤＴＡを捕捉する活性剤、フリーラジカル捕捉剤である活性剤、例えばビタミンＥ及びその誘導体、例えばトコフェロール酢酸エステル、バイオフラボノイド、補酵素Ｑ１０又はユビキノンを含むことができる。
【００６６】
本発明による組成物において使用できる鎮静剤として、五員環トリテルペン、ウルソール酸及びその塩、オレアノール酸及びその塩、ベツリン酸及びその塩、サリチル酸塩、特にサリチル酸亜鉛、ビサボロール、アラントイン、不飽和オメガ−３油、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、インドメタシン及びベタメタゾン、抗炎症活性剤、特に特許出願である仏国特許第２８４７２６７号に記載のもの、特にBASF Beauty Care Solutions France SASから名称Inhipase（商標）で販売されているクズ（Pueraria lobata）根抽出物、カカオ（Theobroma cacao）抽出物を挙げることができる。
【００６７】
微小循環に作用する活性成分（血管保護剤又は血管拡張剤）は、フラボノイド、ルスコゲニン、ニコチン酸エステル及びエッセンシャルオイルから選択することができる。
【００６８】
本発明に従って使用できる光防護活性剤又はＵＶＡ及び／又はＵＶＢ遮断剤成分は、特にＵＶＡ及び／又はＵＶＢ範囲において活性な光防護剤、例えばパラ−アミノ安息香酸誘導体、特にBASFから販売されているUvinul P25（商標）、サリチル酸誘導体、特にホモサレート単独又は酸化チタンと連携したもの、ジベンゾイルメタン誘導体、ケイ皮酸誘導体、特にBASFから商標Uvinul N539（商標）で販売されているオクトクリレンを含むアクリル酸ジフェニル誘導体、ベンゾフェノン誘導体、特にBASFから商標Uvinul 400（商標）で販売されているベンゾフェノン−１、ベンジリデンカンファー誘導体、ベンズイミダゾール誘導体、特にBASFから商標Uvinul T150（商標）で販売されているエチルヘキシルトリアゾンを含むトリアジン誘導体、ベンゾトリアゾール誘導体、アントラニル酸誘導体、イミダゾリン誘導体、ベンザルマロネート誘導体、４，４−ジアリールブタジエン誘導体、並びにこれらの混合物である。
【００６９】
健康効果をもたらす活性剤、例えば皮膚のバリア機能を改善するためのベータ−エンドルフィンの効果を模倣する活性剤、例えば米国特許出願公開第２００６／０６９０３２号に列挙されている活性剤、ベータ−エンドルフィンの合成を刺激する活性剤、例えば植物テフロシア・プルプレア（Tephrosia purpurea）の抽出物。
【００７０】
痩身化活性剤は、特に、リポタンパク質リパーゼを阻害する薬剤、例えば米国特許出願公開第２００３／０８６９４９号に記載の薬剤（Coletica）、特にペルビアン・リアナ（Peruvian liana）（キャッツクロー（Uncaria tomentosa））の抽出物、排出活性剤、特にラウリン酸ヘスペリチン（Flavagrum（商標））、又はカプリル酸ケルシチン（quercitin）（Flavenger（商標））、酵素ホスホジエステラーゼ（phosphodiestarase）を阻害する薬剤、アデニル酸シクラーゼ、ｃＡＭＰを活性化する薬剤、及び／又はスペルミン及び／又はスペルミジンを捕捉することができる薬剤から選択することができる。これらの活性剤の例として、コレウス・フォルスコリ（Coleus forskohlii）根抽出物、セクロピア・オブツサ（Cecropia obtusa）抽出物、ウバ・ラクツカ（Uva lactuca）抽出物、カフェイン、フォルスコリン、テオフィリン、テオブロミン、及び／又はそれらの誘導体、BASF Beauty Care Solutions France SASから販売されているSlimexcess（商標）と呼ばれる加水分解カッパーカラゲニン製品、及び／又はこれらの混合物を挙げることができる。
【００７１】
特定の一実施形態では、本発明による化粧品組成物は、いかなる脱色素及び／又は抗チロシナーゼ及び／又はメラニン形成阻害剤も含有していない。
【００７２】
皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の健康及び／又は身体的外観を改善するための数々の化粧品活性成分が、当業者に公知である。当業者には、最良の効果を得るために化粧品組成物を製剤化する方法が知られている。
【００７３】
さらに、本発明に記載の化合物は、互いに組み合わされると相乗効果を有することができる。これらの組合せも、本発明によって包含される。CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition、第2版(1992年)は、特に局所使用に適した、一般に化粧品産業で使用される様々な化粧品及び医薬品成分を記載している。これらのクラスの成分の例として、以下の化合物、研磨剤、吸収剤、審美目的の化合物、例えば芳香剤、顔料、色素、エッセンシャルオイル、収斂薬、例えばクローブ油、メントール、カンファー、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メンチル、ウィッチヘーゼル留出物、抗座瘡剤、抗凝集剤、消泡剤、抗菌剤、例えばブチルカルバミン酸ヨードプロピル、抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、結合剤、生物学的添加剤、緩衝液、膨潤剤、キレート剤、添加剤、殺生物剤、変性剤、増粘剤、及びビタミン、膜形成材料、ポリマー、乳白剤、ｐＨ調節剤、還元剤、調整剤、例えば保水剤、並びにそれらの誘導体又は等価物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７４】
本発明のさらに別の特定の実施形態では、優先的には水抽出によって得られた本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、溶媒、特に極性溶媒、例えば水、アルコール、ポリオール、グリコール、又はこれらの混合物、優先的にはグリコールの水性混合物、より優先的にはカプリリルグリコール、へキシレングリコール及びこれらの混合物から選択されるグリコールを含有する水性混合物に溶解される。
【００７５】
特に有利には、本発明による抽出物は、へキシレングリコール、カプリリルグリコール又はこれらの混合物、有利にはへキシレングリコール及びカプリリルグリコールを含む水溶液に可溶化される。
【００７６】
有利には、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物が可溶化される水溶液は、へキシレングリコール、特に水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１０重量％のへキシレングリコール、より具体的には水溶液の総重量に対して１重量％〜５重量％のへキシレングリコールを含む。
【００７７】
特に、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物が可溶化される水溶液は、カプリリルグリコール、特に水溶液の総重量に対して０．０１重量％〜５重量％のカプリリルグリコール、より具体的には水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１重量％のカプリリルグリコールを含む。
【００７８】
特に有利には、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物が可溶化される水溶液は、へキシレングリコール及びカプリリルグリコールを、特に先に示した割合で含む。
【００７９】
有利には、優先的には水抽出によって得られた本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物は、水溶液に、水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１０重量％、特に水溶液の総重量に対して１重量％〜５重量％の含量で可溶化される。特に、この水溶液は、へキシレングリコール及びカプリリルグリコールを、有利にはこれらの構成成分について先に示した割合で含む。
【００８０】
本発明による抽出物が可溶化される水溶液は、増粘剤及び／又は構造化剤、例えばキサンタンガムを、有利には水溶液の総重量に対して０．０１重量％〜５重量％、特に水溶液の総重量に対して０．１重量％〜１重量％の含量で含むことができる。
【００８１】
本発明はまた、特に細胞外マトリックス及び／又は上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカン及び／又はジストログリカンの発現を刺激するための、ポリゴヌム・ビストルタ抽出物又はこのような抽出物を含む化粧品組成物を、特にヒトの健康な皮膚及び／又は健康な粘膜及び／又は健康な頭皮の少なくとも１つの関心領域に適用することを含む、美容ケア方法に関する。
【００８２】
有利には、この美容ケア方法は、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化、特に時間生物学的及び／又は光生物学的な老化を予防及び／又は阻止するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の恒常性の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又は特に表皮の恒常性を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮基底膜、優先的には真皮表皮接合部を強化するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の老化に特に関連するケラチノサイト増殖及び／又は分化を、特に表皮レベルで改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の血管新生の低下を予防及び／又は阻止し、及び／又はそれを改善するため、特に皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮、特に皮膚の毛細血管の構造を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の形態形成を改善するため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮構造、優先的には、特に老化、特に時間生物学的な老化を受けている皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の表皮構造を修復するため、皮膚及び／又は粘膜の色艶を改善し、特に色艶を均一にするため、皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の硬さ及び／又は密度を改善するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さの低減を阻止するため、並びに／あるいは皮膚及び／又は粘膜及び／又は頭皮の上皮、優先的には表皮の厚さを増大させるためのものである。
【００８３】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、実施例に言及されている説明を読むことによって当業者に明らかとなるが、これらの実施例は、単に例として示されており、いかなる方式でも本発明の範囲を制限しない。
【００８４】
実施例は、本発明の不可欠な一部であり、実施例を含む全体としての説明に基づいて任意の従来技術よりも新規であると思われるいかなる特徴も、その機能及びその全般的な性質に関して、本発明の不可欠な一部である。
【００８５】
したがって、各実施例は、一般的範囲を有する。
【００８６】
さらに実施例では、特に示されない限り、温度は摂氏で表され、圧力は大気圧である。
【実施例】
【００８７】
実施例１：水抽出による本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の調製
【００８８】
ａ）ポリゴヌム・ビストルタの根を粉砕し、次に周囲温度、すなわち１８〜２５℃、この場合およそ２０℃において水に２時間浸軟させる。粉砕したポリゴヌム・ビストルタの根の含量は、植物／水の総重量に対して１重量％である。
【００８９】
不溶性材料を、０．４５μｍで濾過することによって分離し、本発明による水性抽出物を含有する液体を回収する。この抽出物を、以下の実施例２、４、５及び６の最終培養培地中、様々な投与量で試験した。
【００９０】
こうして得られた抽出物は、レスベラトロール、トランス−スチルベン（Ｃ１４Ｈ１２、ＭＷ１８０．２４ｇ／ｍｏｌ）、ラポンチン（式Ｃ２１Ｈ２４Ｏ９、ＭＷ４２０．１４ｇ／ｍｏｌ）、デオキシラポンチン（Ｃ２１Ｈ２４Ｏ８、ＭＷ４０４．１４ｇ／ｍｏｌ）、イプシロン−ビニフェリン、３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン−３−Ｏ−ベータ−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ２０Ｈ２２Ｏ８、ＭＷ３９０．１３ｇ／ｍｏｌ）のいずれも含有していない。
【００９１】
この抽出物はまた、実施例７に提示の通り、化粧品成分の形態に製剤化することができる。
【００９２】
ｂ）ポリゴヌム・ビストルタの根を粉砕し、次に優先的には０〜２０℃、優先的には４℃の温度において水に１％（ｗ／ｗ）で浸軟させる。
【００９３】
浸軟時間は、撹拌しながら有利には３０分〜２４時間、この場合１６時間である。
【００９４】
溶液を、８０００ｒｐｍで優先的には１０分間遠心分離処理し、上清を回収する。上清を、様々なカットオフ閾値、特に０．２２μｍのフィルターで限外濾過する。
【００９５】
こうして得られた抽出物は、液体形態で直接使用することができる。実施例３では、様々な投与量で使用した。
【００９６】
ｃ）ポリゴヌム・ビストルタの根を粉砕し、次に優先的には０〜２０℃、この場合４℃の温度において７５％／２５％の水／ブチレングリコール混合物に浸軟させる。浸軟時間は、撹拌しながら有利には３０分〜２４時間、この場合１０時間である。
【００９７】
溶液を、８０００ｒｐｍで優先的には１０分間遠心分離処理し、上清を回収する。上清を、様々なカットオフ閾値、特に０．４５μｍのフィルターで限外濾過する。
【００９８】
次に、こうして得られた抽出物を、特にマルトデキストリン支持体上で乾燥させ、次に水に１％（ｗ／ｗ）で再可溶化する。
【００９９】
実施例２：ケラチノサイトにおけるパールカンの発現に対する本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の効果
蛍光免疫測定（ＦＩＡ）試験を実施した。この試験は、対象となる抗原、この場合パールカンを蛍光によって明らかにすることにある。この方法は、半定量的であり、感度が高く、再現性があり、対象となるタンパク質を、その環境における天然形態で変性過程を伴わずに検出できるという利点がある。５０歳のドナーの腹部皮膚生検からケラチノサイトを抽出し、１ウェル当たり細胞５０００個の密度でウェルの底部に付着させ、完全培地、すなわちウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含有する培地で３日間増殖させ、次にＦＣＳを含まない規定培地で１６時間増殖させる。次にケラチノサイトを、４８時間かけて、最終培養培地中の重量百分率として様々な投与量で試験される実施例１ａ）で得た抽出物と共に培養し、又は抽出物を伴わずに培養して対照と呼ぶ。次に、細胞をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した後、固定し、透過処理し、アンマスクした。（抗パールカン）一次抗体を９０分間適用する前、細胞を１％のＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で１時間飽和させる。ＰＢＳバッファーで洗浄した後、蛍光色素ＦＩＴＣ（フルオレセインイソチオシアネート）に結合した二次抗体を、２時間インキュベートする。次に、細胞をＰＢＳバッファーで洗浄し、次に２０ｍＭの水酸化アンモニウム及び０．５％の１００％トリトンで可溶化する。次に蛍光を、適切なフィルターを用いて分光蛍光光度計で読み取る。結果を、以下の表１に記載する。実験は、１２回実施する（ｎ＝１２）。表中の値は、未処置対照細胞に対する百分率としての値を表す。値は、様々なバッチの抽出物で行った数回の実験の平均を表す。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＤ」は標準偏差を示す。
【０１００】
【表１】
2016515567.tif 000003
【０１０１】
結論
本発明による抽出物は、ケラチノサイトにおけるパールカンタンパク質発現の有意な増大を誘発する。したがって、本発明による抽出物は、上皮、優先的には表皮の構造的粘着の改善を誘発する。
【０１０２】
実施例３：内皮細胞におけるパールカンの発現に対する本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の効果
この技術は、５０歳又は３０歳又は新生児のドナーの腹部皮膚生検から抽出した内皮細胞で実施することを除き、実施例２と同じである。
【０１０３】
結果を、以下の表２、２ａ、３及び４に記載する。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＤ」は標準偏差を示す。
【０１０４】
【表２】
2016515567.tif 000004
【０１０５】
【表３】
2016515567.tif 000005
【０１０６】
【表４】
2016515567.tif 000006
【０１０７】
結論
本発明による抽出物は、試験用量で内皮細胞におけるパールカンタンパク質の発現を有意に増大し、それによって微小血管の構造的粘着を改善するその特性が証明された。この増大は、ドナーの年齢に関わらず観測される。またこの実施例では、実施例１ａ）による抽出物の有効性がより高いことが実証される。
【０１０８】
実施例４：ケラチノサイトにおけるジストログリカンの発現に対する本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の効果
この技術は、この場合、対象となる抗原がジストログリカンであり、使用した抗体が抗ジストログリカンであることを除き、実施例２と同じである。
【０１０９】
結果を、以下の表５に記載する。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＤ」は標準偏差を示す。
【０１１０】
【表５】
2016515567.tif 000007
【０１１１】
結論
本発明による抽出物は、試験用量でケラチノサイトにおけるジストログリカンタンパク質の発現を有意に増大した。したがって、本発明による抽出物は、上皮、優先的には表皮の構造的粘着の改善を誘発する。
【０１１２】
実施例５：内皮細胞におけるジストログリカンの発現に対する本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の効果
この技術は、この場合、対象となる抗原がジストログリカンであり、使用した抗体が抗ジストログリカンであり、ケラチノサイトではなく内皮細胞で実施することを除き、実施例２と同じである。
【０１１３】
結果を、以下の表６及び７に記載する。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＤ」は標準偏差を示す。
【０１１４】
【表６】
2016515567.tif 000008
【０１１５】
【表７】
2016515567.tif 000009
【０１１６】
結論
本発明による抽出物は、試験用量で内皮細胞におけるジストログリカンタンパク質の発現を有意に増大し、それによって微小血管の構造的粘着を改善するその特性が証明された。
【０１１７】
実施例６：上皮基底膜、特に真皮表皮接合部におけるパールカンの発現に対する本発明によるポリゴヌム・ビストルタ水性抽出物のｅｘ  ｖｉｖｏ評価
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物の有効性を、パールカンを免疫標識した後に５０歳の女性の腹部皮膚生検で評価する。
【０１１８】
生検を、生存条件下で７日間、実施例１ａ）に従って得られたポリゴヌム・ビストルタ抽出物を培養培地中０．５重量％で含有する特定の培地、又は前記抽出物を含有していない培地（対照）に入れた。生検を表面上に現し、すなわち上皮、優先的には表皮を、培地で被覆しない。
【０１１９】
パールカンの免疫蛍光標識化を、共焦点顕微鏡を使用して半定量的画像分析によって観測し、測定する。
【０１２０】
真皮表皮接合部におけるパールカンの発現を反映する蛍光の局在及び蛍光の平均強度を研究し、実験の開始時及び実験の終了時に測定する。真皮表皮接合部が断片化されたら、平均強度の平均を得た。結果は、任意蛍光単位（ＡＦＵ）によって表される。測定は、生検を培養液に入れてすぐ「Ｔ０」、及び培養の７日目「Ｔ７」に行った。実験は１回行った（ｎ＝１）。結果を図１に可視化する。
【０１２１】
図１．ａは、Ｔ０における蛍光の局在及び強度を示す。
【０１２２】
図１．ｂは、Ｔ７における生検の蛍光の局在及び強度を示す（対照）。
【０１２３】
図１．ｃは、Ｔ７における、すなわち抽出物で処置して７日後の生検の蛍光の局在及び強度を示す。
【０１２４】
結論
蛍光は、真皮表皮接合部においてＴ０（図１．ａ）とＴ７（図１．ｂ）の間で低下した。それによって、培養時間にわたって真皮表皮接合部におけるパールカンの発現が低減することが実証される（対照）。他方で、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の存在下では、パールカンタンパク質の発現は、Ｔ７で観測された蛍光（図１．ｃ）によって証明される通り、経時的に維持されている。
【０１２５】
実施例７：化粧品組成物に組み込むことを企図された本発明による抽出物（化粧品成分）を含む組成物
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物を、実施例１ａ）に従って得、以下の製剤のその他の成分と混合する。
【０１２６】
【表８】
2016515567.tif 000010
【０１２７】
実施例８：皮膚の色艶の輝度及び皺予防効果に関する本発明による抽出物を含む組成物の臨床治験
化粧品クリームの総重量に対して１重量％でクリームに含まれている実施例７の組成物を、５０人のコーカサス人種対象で試験し、実施例７の組成物を含有していない以外は同一のクリームからなるプラセボを使用した他の５０人のコーカサス人種対象と比較して、４４人の個体を評価した（半分は４５歳を超えており、半分は２５〜４５歳である）。クリームを、顔全体に１日２回、８週間適用する。結果の評価は、画像化によって、すなわちVisia CR（登録商標）システム（Canfield）を使用して撮影した超接写写真に基づく画像分析によって、皮膚科医が効果を評価し（スコア付け）、消費者が質問票に回答することにより、４週間目に実施した。
【０１２８】
したがって、皮膚科医は、予め定義された尺度に従って、色艶の輝度及び目尻の小皺にスコア付けした。
【０１２９】
Visia CR（登録商標）システム（Canfield）は、ｉｎ  ｖｉｖｏデジタル画像取込みシステムである。さらに、得られた画像の連続的な分析によって、処置の有効性を特徴付けるいくつかのパラメータを決定することが可能になる。
【０１３０】
皮膚質感パラメータを、画像分析によって評価した。質感は、画像の、より具体的には顔画像上の予め定義された対象領域のグレーレベルの分布として説明することができる。エントロピーは、皮膚構造の複雑性を反映している。エントロピーは、皮膚がより均一に、したがって等しくなり、より柔らかくなると、低下する。
【０１３１】
皮膚の均一性は、グレーレベル間のコントラストを測定することによって測定した。前記コントラストは、皮膚のきめと相関し、皮膚のきめが細かくなるほど低下する。
【０１３２】
２つのパラメータを、同時生起行列から算出したHaralick指標を使用して決定した。
【０１３３】
皺の進化を、超接写写真により、画像を撮影した様々な時間の間で画像を空間的に整合した後に評価した。次に、皺を、比色空間への投射を用いて識別する。閾値化した後、皺を識別する。対象となる領域（ＲＯＩ）に対応するマスクを定義する。皺に対応する画素を、対象となる同じ領域において、適用前（Ｔ０）、処置の２週間後（Ｔ２ｗｋ）及び処置の４週間後（Ｔ４ｗｋ）に、同様にして定量化する。
【０１３４】
また、目尻の小皺の見かけの累積的長さを、所与の領域上の皺のすべての長さを加算することによって測定した。長さは、画素の大きさによって決定する（１画素＝０．０３ｍｍ）。また、目尻の小皺の見かけの表面積を、分割した画素（１画素＝０．０３ｍｍ）の数の表面積（ｍｍ２）を算出することによって測定した。
【０１３５】
結果を、以下の表８、９、１０、１１、１２及び１３に提示する。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＥＭ」は平均の標準誤差を示し、「ＶＡＲ」は、変分を対照Ｔ０に対する百分率として示す。Ｔ０と比較した有意性閾値を、各表に言及した統計試験に従って、「有意性」の列に示す。
【０１３６】
【表９】
2016515567.tif 000011
【０１３７】
【表１０】
2016515567.tif 000012
【０１３８】
【表１１】
2016515567.tif 000013
【０１３９】
【表１２】
2016515567.tif 000014
【０１４０】
【表１３】
2016515567.tif 000015
【０１４１】
【表１４】
2016515567.tif 000016
【０１４２】
結論
こうして、本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物の特性がｉｎ  ｖｉｖｏで観測され、実証された。実際、表８から、本発明による抽出物が、適用してちょうど２週間経過した後、色艶の輝度を改善し、この効果が適用の４週間後にさらに改善されると推測される。この効果は、コントラストの低下によって皮膚の均一性及び皮膚のきめの改善を示す表１１の結果でも実証されている。さらに、皮膚の柔らかさは、明らかに改善された（表１０）。さらに、本発明による抽出物は、表９の結果で可視化されている通り、皺を低減し、特に皺の見かけの長さ（表１２）及び皺の見かけの表面積（表１３）を有意に低減する。
【０１４３】
実施例９：コンフルエント前の内皮細胞上の免疫蛍光によるクローディン−５の実証
ポリゴヌム・ビストルタ抽出物の有効性を、５０歳の女性の通常のヒトの皮膚の生検から、内皮細胞（Lonza）の単層培養物で評価し、クローディン−５の免疫蛍光後に実証する。
【０１４４】
細胞を播種し、ＥＧＭ２培地（Lonza）で培養し、１０日間増殖させ、次に１ｃｍ２当たり細胞５００００個で、免疫組織化学的検査プレート（Labteck）上に再び播種し、ＥＧＭ２培養培地（Lonza）中、０．５％の抽出物１ａ）の存在下に４８時間置くか、又は抽出物を含有していない培養培地（対照）と接触させる。
【０１４５】
クローディン−５の免疫蛍光標識化を、共焦点顕微鏡を使用して半定量的画像分析によって観測し、測定する。
【０１４６】
内皮細胞におけるクローディン−５の発現を反映する、蛍光の局在及び蛍光の平均強度を研究し、実験の最後に測定する。結果を、任意の蛍光単位（ＡＦＵ）として表し、以下の表１４に提示する。「Ｍｅａｎ」は平均を示し、「ＳＤ」は標準偏差を示す。
【０１４７】
【表１５】
2016515567.tif 000017
【０１４８】
結論
ｔ−検定（ｐ＜０．０２７）を用いることによって、本発明による抽出物が存在する状態では、蛍光が４８時間で有意に増大したことが実証された。したがって、本発明による抽出物は、上皮細胞のクローディン−５タンパク質の発現を増大させることを可能にする。
【０１４９】
このことによって、本発明による抽出物は、内皮細胞のレベルで密着接合を改善することが実証される。
【０１５０】
実施例１０：本発明によるポリゴヌム・ビストルタ抽出物を含有する組成物
本発明による組成物を調製するための様々な部分Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ又はＦを一緒に混合するために、当業者に公知の方法を実施する。「本発明の生成物」は、好ましくは実施例１ａ）に従って得られたポリゴヌム・ビストルタ抽出物とする。
【０１５１】
本発明の生成物は、５％のダイズレシチンを含有し、以下の実施形態に従って得られた四級化ダイズ溶液を組み込んだリポソームの形態（最終的に６００ｇ）であってもよい。
【０１５２】
ダイズレシチン３０ｇ、四級化ダイズ溶液１２ｇ及び実施例１ａ）に従って調製されたポリゴヌム・ビストルタ抽出物１．５ｇを、試料管に入れ、純粋な実験室用の水４４７ｇで希釈する。
【０１５３】
周囲温度で１０分間、磁気撹拌処理した後、混合物を１０分間激しくホモジナイズし、したがって、リポソームが正確なホモジナイズ条件に応じて１００〜８００ナノメートルの範囲であり得る平均サイズを有するリポソーム溶液を得る。
【０１５４】
次に、懸濁液を穏やかに１時間撹拌する。次に、ブチレングリコール９０ｇ、フェノキシエタノール６ｇ及びヒドロキシエチルセルロース（ゲル化剤）６ｇを添加する。
【０１５５】
【表１６】
2016515567.tif 000018
【０１５６】
【表１７】
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【０１５７】
【表１８】
2016515567.tif 000020
【０１５８】
【表１９】
2016515567.tif 000021
【図１】
2016515567.tif 000022
【国際調査報告】
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