(57)【要約】  マンコゼブなどのエチレンビスジチオカルバメート殺菌剤の、エチレンビスイソチオシアネートスルフィド（ＥＢＩＳ）への変換の速度を調節するための新たな組成物および方法が記載される。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エチレンビスジチオカルバメート（ＥＢＤＣ）殺菌剤のエチレンビスイソチオシアネートスルフィド（ＥＢＩＳ）への変換を調節するための殺菌組成物であって、前記組成物は、
ＥＢＤＣ殺菌剤；
ＥＢＩＳ変換調節ポリマー；および
分散剤
から構成され、前記ＥＢＤＣ殺菌剤は、コーティングされていないＥＢＤＣ殺菌剤と比較した場合にＥＢＩＳの放出半減期が少なくとも約２倍増加するように、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーでコーティングされている、殺菌組成物。
【請求項２】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、マンコゼブ、マネブ、ジネブおよびメチラムからなる群より選択される少なくとも１種の化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が固体粒子の形態である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中に分配されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、結晶および／または固体粒子の形態であり、前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーによってコーティングされている、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーが、酸素および／または水に対する障壁を提供する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーが、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミン、ポリビニルスルホネートならびにそれらの混合物およびコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーである、請求項８に記載の組成物。
【請求項８】
前記ラテックスが、標準または改変アクリルラテックス、標準または改変ビニル−アクリルラテックス、およびスチレン−アクリルラテックスからなる群より選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項９】
前記ポリビニルアルコールが、部分加水分解ポリビニルアルコール、および部分加水分解ポリビニルアルコールのコポリマーから選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ポリビニルアルコールの分子量範囲が約１０，０００ｋＤａ〜約５００，０００ｋＤａであり、加水分解度が６０％〜９９．９％である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物中の前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーと前記ＥＢＤＣ殺菌剤との重量比が、約１：２００〜約１：５である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記分散剤が、リグノスルホン酸ナトリウム、リグノスルホン酸カルシウムまたはリグノスルホン酸アンモニウム、アルキルナフタレンスルホン酸塩縮合物、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー、トリスチリルフェノールエトキシレートスチレン−アクリルコポリマー、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸半エステルコポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルピロリドンコポリマーからなる群より選択される分散剤のうち少なくとも１種である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
ＥＢＤＣ殺菌剤と；
マトリックスまたはコーティングと（ここで、前記マトリックスまたはコーティングは、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含み、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーと前記ＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、約１：２００〜約１：５であり、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミンおよびポリビニルスルホネートからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーである）；
分散剤と
を含む、凝集固体粒子。
【請求項１４】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中に分配されている、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項１５】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーによってコーティングされている、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項１６】
約１〜約１００マイクロメートルのサイズである、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項１７】
前記ＥＢＤＣ殺菌剤が、マンコゼブ、マネブ、メチラムおよびジネブからなる群より選択される、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項１８】
前記ラテックスが、標準または改変アクリルラテックス、標準または改変ビニル−アクリルラテックス、およびスチレン−アクリルラテックスからなる群より選択される、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項１９】
前記分散剤が、リグノスルホン酸ナトリウム、アルキルナフタレンスルホン酸塩縮合物、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー、トリスチリルフェノールエトキシレートスチレン−アクリルコポリマー、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸半エステルコポリマーおよびポリビニルピロリドンコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種の分散剤である、請求項１３に記載の凝集固体粒子。
【請求項２０】
植物を処理する方法であって、前記方法は、植物の表面または植物の表面に隣接した表面に、殺菌的有効量の凝集固体粒子の水性懸濁液を適用するステップを含み、前記粒子は、約１〜約１００マイクロメートルのサイズであり、前記粒子は、少なくとも１種のＥＢＤＣ殺菌剤およびマトリックスまたはコーティングを含み、前記マトリックスまたは前記コーティングは、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミンおよびポリビニルスルホネートからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーを含む少なくとも１種のＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含み、前記ＥＢＩＳ変換調節ポリマーと前記ＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、約１：２００〜約１：５である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その全体が参照によって明示的に本明細書に組み込まれる、２０１２年１２月３１日出願の米国仮特許出願第６１／７４７，６６４号の利益を主張する。
【０００２】
分野
本開示は、真菌植物病原体を制御するのに適切な方法および組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
マネブおよびマンコゼブなどのエチレンビスジチオカルバメート（ＥＢＤＣ）殺菌剤は、７０種を超える農作物における４００種よりも多い植物病害の、広範囲の病害制御に使用される重要な植物保護物質である（Ladovica, M., et.al. 2010. Plant Disease 94(9)1076-1087）。マンコゼブは、壊滅的な急速に広がる病害、例えば、ジャガイモ疫病菌（Phytophthora infestans）によって引き起こされるジャガイモ疫病（Late Blight of Potato）、ベンツリア・イナエカリス（Venturia inaequalis）によって引き起こされるリンゴ黒星病（Apple scab）、プラスモパラ・ビチコラ（Plasmopara viticola）によって引き起こされるブドウべと病、およびミコスファエレラ属（Mycosphaerella）の種々の種によって引き起こされるバナナの斑点病を制御するために特に重要である。ジチオカルバメート殺菌剤、特にマンコゼブは、その広範囲の活性、農作物植物による高い耐容性、および真菌中の単一の標的部位に対してのみ活性を有する特定の殺菌剤に対して耐性の真菌性植物病害を制御するための一般的有用性を有することから、病害制御のために特に有用である。
【０００４】
ＥＢＤＣ殺菌剤は広く使用されているが、その多くが実際にはプレ殺菌剤（ｐｒｅ−ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ）であり、より殺菌性が高い物質への変換を受けるまでは顕著な抗菌活性を示さないという事実に一部起因して、制限を有する。例えば、マンコゼブは、水および酸素に曝露されると、エチレンビスイソチオシアネートスルフィド（ＥＢＩＳ）へと迅速に変換されるプロ殺菌剤（ｐｒｏ−ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ）である。ＥＢＤＣ殺菌剤からＥＢＩＳを生成するためには、酸素および水の両方が必要とされる。ＥＢＩＳ生成のために十分な酸素は、大気中に存在する。ＥＢＩＳ生成に十分な水は、雨、露、霧、靄、灌漑、または自由水分によって達成されてもされなくてもよい高湿期の形態の水分によっても提供され得る。ＥＢＤＣ殺菌剤が植物に適用されると、ＥＢＩＳ生成は、不十分な酸素によって制限されない。しかし、ＥＢＤＣのＥＢＩＳへの変換は、不十分な水分によって制限され得る。「変換」とは、本明細書で使用する場合、特記しない限り、ＥＢＤＣと酸素および水との反応による、ＥＢＤＣからのＥＢＩＳの形成を意味する。ＥＢＩＳは、マンコゼブから生成される主要な殺菌性毒物であるが、しばしば２日間未満の半減期で、ほんの短期間の病害制御に有効なレベルで葉表面上に存在し続ける。Newsome（J. Agric. Food Chem. 1976(24), 999）による研究は、マンコゼブのＥＢＩＳへの分解が、トマトの葉への適用の約２日後にピークレベルに達することを報告した。
【０００５】
多くの真菌性病害による植物の感染をもたらす一般的状態もまた、殺菌性ＥＢＩＳの迅速な生成および消散をもたらす。ジチオカルバメートは、植物病害につながる条件下では有効期間が比較的短いために、短い間隔で再適用しなければならない場合が多い。マンコゼブは、他の実際的な使用制限にも直面する。以前、いくつかの欧州の農作物では、１ヘクタール当たり実際のマンコゼブ２．８ｋｇもの高い比率でマンコゼブを使用していた。マンコゼブが欧州において再登録されたとき、最大使用比率は１ヘクタール当たり１．６ｋｇまで低減された。この規則変更は、欧州における農作物に対するマンコゼブの使用を制限してきた。
【０００６】
病害制御のためのジチオカルバメートの有用性を改善するために、化合物の個々の適用の予防効果を増加させる必要もしくは適用間隔を延長させる必要、またはそれら両方の必要がある。葉圏中でのマンコゼブの環境動態の広範なモデリングが、真菌攻撃につながる範囲の条件下での、葉表面上でのマンコゼブからのＥＢＩＳ生成の速度論を特徴付けている（Cryer, et.al.（Computers and Electronics in Agriculture.（概説／出版のために提出））。Ｃｒｙｅｒのモデルは、マンコゼブからのＥＢＩＳの生成の開始を遅延させること、または葉表面上でのマンコゼブからの放出速度を減速させることで、その病害制御の有効性を改善することを示唆した。植物表面上でのプロ病虫害防除剤（ｐｒｏ−ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ）からその活性形態への実際の変換速度を制御することについては、公開文献中に先例がほとんどないようである。
【発明の概要】
【０００７】
本明細書で報告するように、延長された持続時間にわたってＥＢＩＳを制御可能に放出するために、マンコゼブと水および酸素との反応を調節できる組成物は、例えば以下の改善：１）真菌を制御するために必要なマンコゼブの使用比率を低減させること、２）噴霧間隔を延長させること、３）分解副生成物、即ちエチレンチオウレア（ＥＴＵ）を最小化することをもたらす可能性がある。
【０００８】
マンコゼブなどのＥＢＤＣ殺菌剤のＥＢＩＳへの変換の速度を調節するための組成物および方法が、本明細書に開示される。改善された病害制御を提供するのに適切な上記組成物は、農業的有効量のＥＢＤＣ殺菌剤、１種以上のＥＢＩＳ調節ポリマー、１種以上の分散剤、および任意に他の不活性配合成分から構成される。
【０００９】
いくつかの例示的実施形態では、エチレンビスジチオカルバメート（ＥＢＤＣ）殺菌剤のエチレンビスイソチオシアネートスルフィド（ＥＢＩＳ）への変換を調節するための殺菌組成物が提供される。本組成物は以下を含む：ＥＢＤＣ殺菌剤；ＥＢＩＳ変換調節ポリマー；および分散剤。ＥＢＤＣ殺菌剤は、コーティングされていないＥＢＤＣ殺菌剤と比較した場合にＥＢＩＳの放出半減期が少なくとも約２倍増加するように、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーでコーティングされている。
【００１０】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、マンコゼブ、マネブ、ジネブおよびメチラムからなる群より選択される少なくとも１種の化合物である。より特定の一実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤はマンコゼブである。
【００１１】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、固体粒子の形態である。より特定の一実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤はマンコゼブである。
【００１２】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中に分配されている。より特定の一実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤はマンコゼブである。
【００１３】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、結晶および／または固体粒子の形態であり、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーによってコーティングされている。より特定の一実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤はマンコゼブである。
【００１４】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、水および酸素と接触した場合に、エチレンビスイソチオシアネートスルフィド（ＥＢＩＳ）を生成する。
【００１５】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、酸素および／または水に対する障壁を提供する。より特定の一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミン、ポリビニルスルホネートならびにそれらの混合物およびコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーである。さらなるより特定の一実施形態では、ラテックスは、標準または改変アクリルラテックス、標準または改変ビニル−アクリルラテックス、およびスチレン−アクリルラテックスからなる群より選択される。別のより特定の一実施形態では、ポリビニルアルコールは、部分加水分解ポリビニルアルコール、および部分加水分解ポリビニルアルコールのコポリマーから選択される。ポリビニルアルコールの例示的な分子量範囲は約１０，０００ｋＤａ〜約５００，０００ｋＤａであり、例示的な加水分解度は６０％〜９９．９％である。ポリビニルアルコールの別の例示的な分子量範囲は約１４０，０００ｋＤａ〜約５００，０００ｋＤａであり、別の例示的な加水分解度は８７％〜９９．９％である。
【００１６】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、組成物中のＥＢＩＳ変換調節ポリマーとＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、約１：２００〜約１：５である。
【００１７】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーとＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、１：１００〜１：１０である。
【００１８】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、分散剤は、リグノスルホン酸ナトリウム、リグノスルホン酸カルシウムまたはリグノスルホン酸アンモニウム、アルキルナフタレンスルホン酸塩縮合物、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー、トリスチリルフェノールエトキシレートスチレン−アクリルコポリマー、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸半エステルコポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルピロリドンコポリマーからなる群より選択される分散剤のうち少なくとも１種である。
【００１９】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、該化合物は、水和剤の形態である。
【００２０】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、該化合物は顆粒の形態である。
【００２１】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、該化合物は水分散性顆粒の形態である。
【００２２】
殺菌組成物のいくつかの例示的実施形態では、該化合物は、噴霧乾燥プロセスによって生成される。
【００２３】
いくつかの例示的実施形態では、凝集固体粒子が提供される。本凝集固体粒子は、ＥＢＤＣ殺菌剤と；マトリックスまたはコーティングと（ここで、マトリックスまたはコーティングは、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含み、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーとＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、約１：２００〜約１：５であり、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミンおよびポリビニルスルホネートからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーである）；分散剤と、を含む。
【００２４】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中に分配されている。
【００２５】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーによってコーティングされている。
【００２６】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、本粒子は、約１〜約１００マイクロメートルのサイズである。
【００２７】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、マンコゼブ、マネブ、メチラムおよびジネブからなる群より選択される。
【００２８】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、ラテックスは、標準または改変アクリルラテックス、標準または改変ビニル−アクリルラテックス、およびスチレン−アクリルラテックスからなる群より選択される。
【００２９】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、ポリビニルアルコールは、部分加水分解ポリビニルアルコール、および部分加水分解ポリビニルアルコールのコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーである。より特定の一実施形態では、ポリビニルアルコールまたはポリビニルアルコールのコポリマーは、約１０，０００ｋＤａ〜約５００，０００ｋＤａの分子量範囲および約６０％〜約９９．９％の範囲内の加水分解度を有する。別のより特定の一実施形態では、ポリビニルアルコールは、約１４０，０００ｋＤａ〜約５００，０００ｋＤａの分子量範囲および約８７％〜約９９．９％の範囲内の加水分解度を有する。
【００３０】
凝集固体粒子のいくつかの例示的な実施形態では、分散剤は、リグノスルホン酸ナトリウム、アルキルナフタレンスルホン酸塩縮合物、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー、トリスチリルフェノールエトキシレートスチレン−アクリルコポリマー、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸半エステルコポリマーおよびポリビニルピロリドンコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種の分散剤である。
【００３１】
いくつかの例示的実施形態では、植物を処理する方法が提供される。本方法は、植物の表面または植物の表面に隣接した表面に、殺菌的有効量の凝集固体粒子の水性懸濁液を適用するステップを含み、前記粒子は、約１〜約１００マイクロメートルのサイズであり、前記粒子は、少なくとも１種のＥＢＤＣ殺菌剤およびマトリックスまたはコーティングを含み、前記マトリックスまたはコーティングは、ポリビニルアルコール、ラテックス、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアセテート、ポリビニルアミンおよびポリビニルスルホネートからなる群より選択される少なくとも１種のポリマーを含む少なくとも１種のＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含み、ここでＥＢＩＳ変換調節ポリマーとＥＢＤＣ殺菌剤との重量比は、約１：２００〜約１：５である。
【００３２】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤はマンコゼブである。
【００３３】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、水および／または酸素との接触の際に植物表面上でＥＢＩＳを生成する。
【００３４】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、ポリビニルアルコールとしては、部分加水分解ポリビニルアルコールおよびそのコポリマーからなる群より選択される少なくとも１種のポリビニルアルコールが挙げられる。
【００３５】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中に包埋される。
【００３６】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーでコーティングされている。
【００３７】
植物を処理する方法のいくつかの例示的な実施形態では、水性懸濁液は、濃縮形態または希釈形態のいずれかで、非ＥＢＤＣ殺菌剤と混合される。より特定の一実施形態では、非ＥＢＤＣ殺菌剤は、卵菌生物によって引き起こされる病害に対して有効である。
【００３８】
いくつかの例示的実施形態では、高湿度条件下で植物の葉において真菌病害を予防または制御するためのＥＢＤＣ殺菌剤の効力を増加させる方法が提供される。本方法は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーおよびＥＢＤＣ殺菌剤を含む組成物を植物の少なくとも一表面に適用するステップ；ならびに植物の該表面を空気に曝露させるステップを含み、該空気は、約８〜約３３℃の範囲内の温度で、約６０％〜約９５％の相対湿度から構成される。
【００３９】
いくつかの例示的実施形態では、ＥＢＤＣ殺菌剤粒子からのＥＢＩＳ変換の有効半減期を延長させる方法が提供される。本方法は、少なくとも１種のＥＢＤＣ殺菌剤およびＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含む組成物を提供するステップ；ならびにＥＢＤＣ殺菌剤およびＥＢＩＳ変換調節ポリマー組成物を水および／または酸素と接触させるステップを含み、ポリマーコーティングされたＥＢＤＣ殺菌剤の滞留時間の比率は、経時的に生成されるＥＢＩＳの量によって決定した場合、コーティングされていないＥＢＤＣ殺菌剤と比較して少なくとも約１．２倍増加する。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】水と接触した種々のマンコゼブ配合物のＥＢＩＳ放出プロファイルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
本開示の態様は、１種以上の植物において真菌病害または病害類を制御または予防するための、ＥＢＤＣ殺菌剤およびその組成物ならびにそれらの使用に関する。上記方法は、真菌病原体に罹患する危険性のある植物を、農業的有効量のエチレンビスジチオカルバメート（ＥＢＤＣ）殺菌剤、少なくとも１種のＥＢＩＳ変換調節ポリマー、分散剤および任意に他の不活性配合成分を含む組成物と接触させるステップを含む。
【００４２】
さらに、上記組成物は、少なくとも１種のＥＢＩＳ変換調節ポリマー、少なくとも１種のＥＢＤＣ殺菌剤および任意に少なくとも１種の非ＥＢＤＣ殺菌剤から構成され得る。
【００４３】
特記しない限り、または明確に他を示さない限り、用語「約」とは、プラスまたはマイナス１０パーセントの値の範囲を指し、例えば、約１とは、０．９〜１．１の範囲を指す。
【００４４】
いずれの理論に束縛されることも望まないが、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーのマトリックス中にＥＢＤＣ殺菌剤の分子、結晶、固体粒子および／または凝集固体粒子を分散させることは、本組成物の病害制御の有効性を有利に増強し得ると考えられる。「凝集固体粒子」とは、本明細書で使用する場合、互いにより密接に会合または結合したいくつかのより小さい固体粒子および／または結晶から構成される固体粒子を意味する。「分散させる」とは、本明細書で使用する場合、均質または不均質に、連続的または非連続的な分布で、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーと共に、ＥＢＤＣ殺菌剤の分子、結晶、固体粒子および／または凝集固体粒子を配置させることを意味する。本明細書に記載される組成物中では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、マトリックス、コーティングを提供するように機能し、および／または障壁として作用し、それにより、殺菌的に活性な化学実体ＥＢＩＳを生成するための、ＥＢＤＣ殺菌剤と水および酸素との反応の速度が調節され得、それにより、殺菌的に有効なレベルのＥＢＩＳが存在する持続時間を延長させ得る。「マトリックス」とは、本明細書で使用する場合、凝集固体粒子を含む別の材料が捕捉、溶解、分散または他の方法で分配される包囲材料を意味する。ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤などの別の材料が捕捉、溶解、分散または他の方法で分配される包囲材料として作用する場合がある。
【００４５】
従って、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、マトリックス中に均一濃度で存在していてもよいし、または所定の濃度勾配で存在していてもよいことも想定される。ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤の分子、結晶、固体粒子および／または凝集固体粒子を取り囲むコーティングとして配置されてもよい。本明細書に記載される組成物は、噴霧混合物中の上記組成物の個々の構成要素の各々を別々にタンク混合し、次いでこの混合物を植物上に噴霧する場合と比較して、噴霧適用において改善された病害制御を提供し得る。
【００４６】
本発明の組成物および方法において使用され得る適切なＥＢＤＣ殺菌剤としては、マンコゼブ、マネブ、ジネブおよびメチラムが挙げられ、より好ましくはマンコゼブである。本開示は、ＥＢＩＳを最終的に生成する全てのＥＢＤＣ殺菌剤を具体化することが想定される。本開示のＥＢＤＣ殺菌剤は、例えば、これらに限定されるものではないが、ナトリウム、銅、マンガン、鉄、亜鉛、カルシウム、マグネシウムなどの広範な一価および二価のカチオンと、錯体化および／または配位され得ることもまた想定される。
【００４７】
上記組成物中の適切なＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、水および酸素とのその反応を調節することによって、ＥＢＤＣ殺菌剤からのＥＢＩＳ生成の速度を調節する構成要素である。「調節する」とは、本明細書で使用する場合、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーの非存在下でのＥＢＤＣ殺菌剤からのＥＢＩＳ生成の速度と比較した場合に、ＥＢＩＳ生成の速度を低減させることを意味する。例えば、これらに限定されるものではないが、エチレンビスイソチオシアネート（ＥＢＩ）ならびにエチレンチオウレア（ＥＴＵ）などのＥＢＤＣ殺菌剤の他の副生成物および代謝物の生成および／または蓄積の速度もまた、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーの使用によって調節または低減され得ることもさらに期待される。
【００４８】
一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤および不活性成分を互いに密接に会合させる均質な連続的マトリックスを提供するように機能し得る。別の一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、凝集粒子が形成され得るようにＥＢＤＣ殺菌剤および不活性成分の粒子を互いに密接に会合させる均質な連続的マトリックスを提供するように機能し得る。なおさらなる一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、凝集粒子が形成され得るようにＥＢＤＣ殺菌剤および不活性成分の粒子を互いに密接に会合させる不均質な非連続的マトリックスを提供するように機能し得る。別の一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤粒子、分散剤および不活性剤を取り囲む外部コーティングとして機能し得る。なお別の一実施形態では、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤粒子中に均一に、または濃度勾配を有して、分散または分配され得る。
【００４９】
本明細書に記載される組成物および方法において使用される適切なＥＢＩＳ変換調節ポリマーとしては、石油および天然供給源由来のポリマー、人工ラテックス、ゼラチン、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖、リグニン、ゴム、セルロース、キトサン、天然ラテックス、ウッドロジンならびにそれらの改変誘導体および組合せが含まれるがこれらに限定されない。適切なポリマーとしては、以下が挙げられる：ポリアレン、ポリブタジエン、ポリイソプレンおよびポリ（置換ブタジエン）、例えばポリ（２−ｔ−ブチル−１，３−ブタジエン）、ポリ（２−クロロブタジエン）、ポリ（２−クロロメチルブタジエン）、ポリフェニルアセチレン、ポリエチレン、塩素化ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリブテン、ポリイソブテン、ポリシクロペンチルエチレンおよびポリシクロヘキシルエチレン、ポリスチレン、ポリ（アルキルスチレン）、ポリ（置換スチレン）、ポリ（ビフェニルエチレン）、ポリ（１，３−シクロヘキサジエン）、ポリシクロペンタジエン、ポリアルキルアクリレートおよびポリアリールアクリレートを含むポリアクリレート、ポリアクリロニトリル、ポリアクリルアミド、ポリアルキルメタクリレートおよびポリアリールメタクリレートを含むポリメタクリレート、ポリ乳酸、ポリビニルピロリドン、ポリ二置換エステル、例えばポリ（イタコン酸ジ−ｎ−ブチル）、およびポリ（フマル酸アミル）、ポリビニルエーテル、例えばポリ（ブトキシエチレン）およびポリ（ベンジルオキシエチレン）、ポリ（メチルイソプロペニルケトン）、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルカルボン酸エステル、例えばポリプロピオン酸ビニル、ポリ酪酸ビニル、ポリカプリル酸ビニル、ポリラウリン酸ビニル、ポリステアリン酸ビニルおよびポリ安息香酸ビニル、ポリビニルアミン、ポリビニルスルホネート、ポリウレタン、エポキシ樹脂など、ならびにそれらの改変誘導体、組合せおよびコポリマー。ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、水溶液として、または水中の固体もしくは液体粒子分散物として、直接使用され得る。
【００５０】
本明細書に記載される組成物および方法において有用なＥＢＩＳ変換調節ポリマーとしては、ポリビニルアルコールおよびそのコポリマーが挙げられ、ポリビニルアルコールまたはコポリマーの分子量範囲は約１０，０００〜約５００，０００であり、加水分解度は約６０％〜９９．９％である。本明細書に記載される組成物および方法において使用される好ましいポリビニルアルコールおよびコポリマーは、約１４０，０００〜約５００，０００の分子量範囲および約８７％〜約９９．９％の加水分解度を有する。ＥＢＩＳ変換調節ポリマーとして効果的に利用され得る適切な市販のポリビニルアルコールとしては、例えば、積水化学工業株式会社（日本、大阪府）のＣｅｌｖｏｌ  ２０５（８７〜８９％の加水分解度、分子量＜８０Ｋ）、Ｃｅｌｖｏｌ  ５４０（８７〜８９％の加水分解度、分子量＞１４６Ｋ）およびＣｅｌｖｏｌ  ３５０（９８〜９８．８％の加水分解度、分子量＞１４６Ｋ）が挙げられる。
【００５１】
ラテックスは一般に、水性媒体中のポリマー微粒子の安定な分散物と定義される。ラテックスは、天然でもよいし、または合成でもよい。天然に見出されるラテックスは、多くの植物中に含まれる、空気に曝露すると凝固する乳白色の樹液様の流体であり、タンパク質、アルカロイド、デンプン、糖、油、タンニン、樹脂およびゴムがその中に見出される複雑な乳濁物である。人工ラテックスは、水系中で界面活性剤を用いて乳化したモノマーまたはモノマー類を重合させるか、または粉末化ポリマーを水中に分散させることによって製造される。
【００５２】
本明細書に記載される組成物および方法における好ましいＥＢＩＳ変換調節ポリマーであるラテックスとしては、標準または改変アクリルラテックス、標準または改変ビニル−アクリルラテックス、およびスチレン−アクリルラテックスが挙げられる。
【００５３】
本明細書に記載される組成物および方法におけるＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＤＣ殺菌剤組成物の総重量に対して、約０．１重量パーセント（ｗｔ％）〜約１０ｗｔ％を構成し得る。
【００５４】
以下を含むいくつかのパラメーターを調整することによって、マンコゼブのＥＢＩＳへの変換速度または別のプロ病虫害防除剤のその活性成分への変換速度を調整し、さらに最適化することが可能である：１）特定のＥＢＩＳ変換調節ポリマーの選択、２）２種以上のＥＢＩＳ変換調節ポリマーの使用、３）ＥＢＩＳ変換調節ポリマーの濃度の最適化、４）他の補助剤の変更。本発明者らはまた、最適な病害制御を達成するために、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まないＥＢＤＣ殺菌剤の水和剤配合物と、ポリビニルアルコールＥＢＩＳ変換調節ポリマーを利用するＥＢＤＣ殺菌剤の組成物との組合せの使用も想定している。いずれの理論にも機構にも束縛されることを望まないが、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まないＥＢＤＣ殺菌剤の水和剤配合物は、初期適用期間における迅速なＥＢＩＳ生成をもたらすことができる一方で、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを利用するＥＢＤＣ殺菌剤の組成物によって、ＥＢＩＳ生成の延長または遅延によって延長された植物病害制御が達成できる。
【００５５】
ＥＢＩＳを生成するための水および酸素とＥＢＤＣとの反応の速度は、反応分析の当業者に公知の方法を使用して、測定および定量化され得る。変換の速度は、ＥＢＩＳ放出半減期τ（時間）またはＥＢＩＳ放出速度定数ｋによって定量的に記載され得、このτ（時間）は、全てのＥＢＤＣが最終的にＥＢＩＳに変換されると仮定した場合の、ＥＢＩＳの理論的総量の２分の１がＥＢＤＣ粒子から放出されずに残っているときの時間の量であり、ｋ＝ｌｎ２／τである。レベルおよび濃度に依存して、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まない同じ配合物と比較した場合に、約２〜約１０００倍、放出半減期τ（時間）を増加させる。同様に、レベルおよび濃度に依存して、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まない同じ配合物と比較した場合、ＥＢＩＳ放出速度定数ｋを約２分の１〜約１０００分の１に減少させる。ＥＢＤＣ殺菌剤のＥＢＩＳへの変換の速度は、当業者に公知の分析方法を使用して実験的に測定され得る。放出半減期τ（時間）および放出速度定数ｋは、当業者に公知の方法およびモデルを使用して、分析測定値から計算され得る。
【００５６】
ＥＢＤＣ殺菌剤の残留性の有用な指標は、特定のレベルのＥＢＩＳがＥＢＤＣから放出された後に存在する滞留時間（時間）（ＲＴＨ）である。ＲＴＨは、反応分析の分野の当業者に公知の方法を使用して測定および定量化され得る。例えば、ＥＢＩＳの９５％が７０時間のＲＴＨにわたって存在する場合、残留性は短いとみなされ得る。比較として、７０時間を超えたＲＴＨの延長は、残留性の改善（延長）を示す。レベルおよび濃度に依存して、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーは、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まない同じ配合物と比較した場合に、約１．２〜約１０倍、ＲＴＨ（時間）を増加させる。一例として、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まないマンコゼブ配合物のＲＴＨが５０時間のＲＴＨを有し、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含む比較可能なマンコゼブ配合物が１２５時間のＲＴＨを有する場合、滞留時間の改善倍率は、２．５（１２５時間／５０時間）である。
【００５７】
本明細書に記載される組成物および方法において使用される適切な分散剤としては、リグノスルホン酸ナトリウム、アルキルナフタレンスルホン酸塩縮合物、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー、トリスチリルフェノールエトキシレートスチレン−アクリルコポリマーおよびそれらの改変、メチルビニルエーテル−無水マレイン酸半エステルコポリマー、ポリビニルピロリドン、ならびにポリビニルピロリドンコポリマーのうち１種以上が挙げられる。本明細書に記載される組成物および方法において使用される分散剤は、ＥＢＤＣ殺菌剤組成物の総重量に対して、約０．１重量パーセント（ｗｔ％）〜約１０ｗｔ％、好ましくは約０．５ｗｔ％〜約５ｗｔ％を構成し得る。
【００５８】
本明細書に記載される組成物および方法において使用される不活性配合成分としては、１種以上の担体、湿潤剤、アジュバント、分散剤、安定剤、レオロジー添加剤、凝固点降下剤、抗微生物剤、結晶化阻害剤、水および当該分野で公知の他の適切な構成要素が挙げられる。
【００５９】
上記組成物は、上記組成物の構成要素を適切な粒子サイズで水中に適切に分散させ、次いで、得られた分散物を例えば噴霧乾燥によって乾燥させて、乾燥水和剤を提供することによって調製され得る。乾燥は、噴霧乾燥、ドラム乾燥または当業者に公知の他の方法によって達成され得る。乾燥水和剤は、公知の方法を使用して、分散性顆粒（ＤＧ）などの他のタイプの配合物へとさらに加工され得る。
【００６０】
上記組成物は、本明細書に参照によって明示的に組み込まれるLadovica, M., et.al. 2010, “Mancozeb Past, Present and Future,” Plant Disease 94(9) pp1076-1087に列挙されるような多様な農業植物および観賞植物において真菌病原体によって引き起こされる病害を制御するために使用され得る。
【００６１】
植物における病害の発生を制御または予防する際に使用される上記組成物の有効量は、例えば、植物のタイプ、植物の成長の段階、環境条件の過酷さ、真菌病原体および適用条件に依存する場合が多い。典型的には、真菌の防御、制御または排除を必要とする植物を、約１〜４０，０００ｐｐｍ、好ましくは約１０〜２０，０００ｐｐｍの１種以上の殺菌剤を提供するように水などの担体中に希釈された有効量の１種以上の適切な殺菌剤と接触させる。接触は、任意の有効な様式であり得る。
【００６２】
例えば、植物の任意の部分、例えば、葉、花および茎を、有効な比率のＥＢＤＣ殺菌剤および任意に非ＥＢＤＣ殺菌剤との混合物中にＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含む本発明の組成物と接触させることができる。本発明者らは、かかる組成物が植物の葉、花、果実および／または茎に適用され得ることを想定しており、さらに種々の場合において、かかる組成物が、種子、根および／または塊茎に、あるいは植物が成長している根圏全体に適用された場合にも病害制御を改善するのに有効であり得ることを想定している。
【００６３】
本明細書に記載される組成物は、１種以上の非ＥＢＤＣ殺菌剤を任意に含み得る。かかる組成物は、組成物の総重量に対して、１０〜９０重量パーセント（ｗｔ％）の１種以上の非ＥＢＤＣ殺菌剤、１〜２０ｗｔ％の１種以上のＥＢＩＳ変換調節ポリマー、および１〜９０ｗｔ％の１種以上の不活性配合成分、例えば、１種以上の分散剤などを含み得る。
【００６４】
上記組成物での使用のための適切な非ＥＢＤＣ殺菌剤としては、以下が挙げられる：水酸化銅、オキシ塩化銅またはＢｏｒｄｅａｕｘ混合物；フタルイミド殺菌剤、例えばカプタンまたはフォルペット；アミスルブロム；ストロビルリン、例えばアゾキシストロビン、トリフロキシストロビン、ピコキシストロビン、クレソキシムメチル、ピラクロストロビン、フルオキサストロビンなど；ＳＤＨＩ殺菌剤、例えばボスカリド、ビキサフェン、フルオピラム、イソピラザム、ペンチオピラド、フルキサピロキサド、ベンゾビンジフルピル、ペンフルフェン、セダキサンなど；ファモキサドン；フェナミドン（fenamidone）；メタラキシル；メフェノキサム；ベナラキシル；シモキサニル；プロパモカルブ；ジメトモルフ；フルモルフ；マンジプロパミド；イプロバリカルブ；ベンチアバリカルブ−イソプロピル；バリフェナル（valiphenal）、バリフェネート（valiphenate）；ゾキサミド；エタボキサム；シアゾファミド；フルオピコリド；フルアジナム；クロロタロニル；ジチアノン；ホセチル−ＡＬ、亜リン酸；トリルフルアニド、アミノスルホン、例えば４−フルオロフェニル（１Ｓ）−１−（｛［（１Ｒ，Ｓ）−（４−シアノフェニル）エチル］スルホニル｝メチル）−プロピルカルバメート、オキサチアピプロリンまたはトリアゾロピリミジン化合物、例えばアメトクトラジン。これらの非ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＤＣ殺菌剤およびＥＢＩＳ変換調節ポリマーから構成されるマトリックス中に混合され得、あるいは、これらの非ＥＢＤＣ殺菌剤は、ＥＢＤＣ殺菌剤およびＥＢＩＳ変換調節ポリマーとタンク混合することによって希釈噴霧混合物として調製され得るか、または逐次的な噴霧適用において別々に適用され得る。
【００６５】
本明細書に記載される組成物は、植物の葉、または植物に隣接した土壌もしくは領域に適用され得る。さらに、上記組成物は、農業的活性成分、例えば、除草剤、殺虫剤、殺菌剤、抗線虫剤、殺ダニ剤、殺生物剤、シロアリ防除剤（termiticide）、殺鼠剤、軟体動物駆除剤、節足動物駆除剤（arthropodicide）、遊走子誘引物質、肥料、成長調節剤およびフェロモンの任意の組合せと混合されてもよいし、またはそれらと共に適用されてもよい。
【実施例】
【００６６】
代表的組成物の調製
マンコゼブの工業グレード粉末（Ｄｏｗ  ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）をリグノスルホン酸ナトリウムおよびＣｅｌｖｏｌ（登録商標）５４０ポリビニルアルコール（積水化学工業株式会社、日本、大阪府）の水溶液と混合することによって、配合物１、２および３（表１）を調製した。
【００６７】
次いで、得られたスラリー（２０〜４０％固形物含量）を、ＢＵＣＨＩ卓上噴霧乾燥器またはパイロット規模のＮｉｒｏ  Ａｔｏｍｉｚｅｒを使用して噴霧乾燥させて、マンコゼブ粒子がＰＶＯＨでコーティングされた水和剤を作製した。卓上調製については、インレット温度を１４０℃に制御し、流速は３００ｍＬ／時間とした。パイロット規模については、インレット温度を１６０℃に制御し、流速は２〜３Ｌ／とした。
【００６８】
【表１】
2016505607.tif 000002
【００６９】
Ｄｉｔｈａｎｅ（登録商標）ＷＰ市販標準および上に列挙した３つの配合物のＥＢＩＳ放出プロファイルを、それぞれの配合物の懸濁液を調製することによって、水中で決定した。Ｄｉｔｈａｎｅ  ＷＰ（Ｄｏｗ  ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まないことから対照として利用した。等量の各配合物を秤量し、３０分間空気で予め通気した５０ｍｌのＭｉｌｌｉＱ濾過水に添加して、６．６６ｍｇ／ｍＬのマンコゼブ懸濁液濃度を得た。次いで、１．５ｍｌのアリコート（１０ｍｇマンコゼブと同等）を、高速回転透析器（Ｈａｒｖａｒｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ製の１．５ｍｌチャンバ、カタログ番号７４−０５０５）の内部に移し、チャンバを閉口した。最後に、この高速回転透析器を、３０分間空気で予め通気した１リットルの水を含むエルレンマイヤーフラスコ中に配置した。この高速回転透析器を、全実験期間の間、連続的撹拌下においた。１ｍｌのアリコートを経時的に採取し、ＥＢＩＳのＨＰＬＣ分析のためにオートサンプラーバイアルに移した。
【００７０】
ＥＢＩＳの定量を、新たに調製したＥＢＩＳ参照標準を外部標準として使用して、外部標準化法によって実施した。ＥＢＩＳストック標準溶液（６５００ｎｇ／ｍｌ）から、５０〜１６２５ｎｇ／ｍｌの濃度範囲をカバーする４つの作業用標準溶液を、水中での連続希釈によって調製した。これら４つの作業用標準を、ＨＰＬＣによって分析した。
【００７１】
ＨＰＬＣ分析を、ポンプ、紫外線（ＵＶ）検出器およびオートサンプラーを含むＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣクロマトグラフシステム；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ分析カラムＬｕｎａ  Ｃ１８  ４．６×２５０ｍｍ、５μｍ粒子サイズ；カラム温度２５℃；水：アセトニトリル：メタノール（３７：３０：３３  ｖ／ｖ／ｖ）の移動相；注入容量５マイクロリットル；流速１．０ｍｌ／分；波長：２３２ｎｍならびにインテグレーターＡｇｉｌｅｎｔ  ＥＺ  Ｃｈｒｏｍ  Ｅｌｉｔｅデータ取得システムを使用して実施した。
【００７２】
図１に示すように、Ｄｉｔｈａｎｅ（登録商標）ＷＰ（８０ｗｔ％マンコゼブ）対照標準は、ＥＢＩＳを迅速に放出し、１７０時間頃にピークに達し、その後急速に分解した。ＥＢＩＳは３６０時間後には検出できなかった。０．５％Ｃｅｌｖｏｌ  ５４０を含む配合物１は、Ｄｉｔｈａｎｅ（登録商標）ＷＰとほぼ同時にＥＢＩＳ放出を開始した。ＥＢＩＳ放出には遅延はなかったが、ピークＥＢＩＳ濃度には、２７０時間頃まで到達しなかった。配合物１は、対照配合物よりも約１００時間遅れてからＥＢＩＳのピークレベルに達したが、これもまた迅速なＥＢＩＳ生成を示した。ＥＢＩＳは、約４００時間後には検出できなかった。配合物２および３は、それぞれ２％および５％のＣｅｌｖｏｌ  ５４０を含み、かなり遅延したＥＢＩＳ放出を示した。ＥＢＩＳは、１２０時間頃に発生し始めた。水および酸素は、マンコゼブと反応するためにＰＶＡ層を通って拡散する必要があり、生成されたＥＢＩＳは、検出および分解されるためにＰＶＡ層から拡散する必要がある。このバランスは、最大６５０時間まで、プラトーで良好に維持された。図１は、水中の種々のマンコゼブ配合物のＥＢＩＳ放出プロファイルを示すグラフである。
【００７３】
ＥＢＩＳ放出半減期τ（時間）およびＥＢＩＳ放出速度ｋを、実験的測定値から計算し、表２に示す。ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まない対照配合物と比較した場合、試験配合物は、ＥＢＩＳ放出半減期を、０．５％のＥＢＩＳ変換調節ポリマー濃度において４倍増加させ、２．０％のＥＢＩＳ変換調節ポリマー濃度において１４倍増加させ、５．０％のＥＢＩＳ変換調節ポリマー濃度において３９倍増加させた。
【００７４】
【表２】
2016505607.tif 000003
【００７５】
延長されたＥＢＩＳ放出の評価基準として、ＥＢＩＳの理論的最大量の９５％放出をもたらす滞留時間（時間）を、当業者に公知のモデリング方法を使用して計算した。滞留時間を表３に示す。
【００７６】
【表３】
2016505607.tif 000004
【００７７】
ＥＢＩＳ変換調節ポリマーＣｅｌｖｏｌ  ５４０を含むマンコゼブ配合物を用いた以下の実施例を、温室および栽培箱実験において実施して、病害制御を評価した。
【００７８】
２つのマンコゼブ配合物を、最初に高湿度に曝露し、次いで、キュウリべと病の原因病原体シュードペロノスポラ・キュベンシス（Pseudoperonospora cubensis）（ＰＳＰＥＣＵ）を用いてバイオアッセイした。試験したマンコゼブ配合物は、１）Ｄｉｔｈａｎｅ  ＷＰおよび２）配合物２（２％ＥＢＩＳ変換調節ポリマーと共に配合されたマンコゼブ）であった。Ｄｉｔｈａｎｅ  ＷＰ配合物は、ＥＢＩＳ変換調節ポリマーを含まないことから対照として利用した。
【００７９】
キュウリ（キュウリ（Cucumis sativus）、品種ブッシュピックルハイブリッド（Ｂｕｓｈ  Ｐｉｃｋｌｅ  Ｈｙｂｒｉｄ）９０１２６１号）を、ＭｅｔｒｏＭｉｘ（商標）成長培地（Ｓｃｏｔｔｓ、Ｍａｒｙｓｖｉｌｌｅ、ＯＨ）を含む５ｃｍ×５ｃｍポット中で種子から成長させた。植物を、１４時間の光周期で補足的光源を有する温室中で栽培し、２０〜２６℃で維持した。健康な植物の成長を、完全範囲の栄養素を含む希釈液体肥料溶液の通常の適用によって維持した。植物が成長の２〜４本葉展開期にあったときに、均一な成長を有する植物を噴霧適用のために選択し、１枚の本葉を有するようにトリミングした。
【００８０】
２分の１倍連続希釈物を水中で作製して、４００、２００、１００、５０および２５ｐｐｍ  ａｉの濃度を有する噴霧溶液を形成した。希釈噴霧溶液を、４００Ｌ／ｈａが送達されるように調整したＳｐｒａｙｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ８００３Ｅフラットファンノズルを取り付けたトラック噴霧器を用いて、キュウリ表面に適用した。全ての処理を４回反復した。各組合せの比率および配合物のタイプごとに別々のトレイを使用した。噴霧した苗を、種々の湿度事象への曝露および引き続く真菌の接種のために、噴霧適用後に群に分けた。配合物を適用した後、植物を乾燥させ、次いで温室中に移し、４日間高湿度に曝露させた。高い周囲湿度条件を、温室中のカート上の半透明のプラスチックフードの下に試験植物を配置することによって創出した。水を、約１ｃｍの深さになるようにカートに添加して、フードの下に高湿度条件を創出した。１日目の午前中に処理を行い、乾燥させ、次いで、５日目の午前中まで温室中で高湿度に曝露させ、その時点で植物に植菌した。温度および湿度を試験の間に記録した。温室中の温度は、夜間の２０℃から日中の３０℃までの範囲であった。フード下のカート中の相対湿度は、８６〜９８％の範囲であった。日中（午前８：００から午後８：００まで）は、平均相対湿度は８６％であり、夜（午後８：００から午前８：００まで）には、平均湿度は９５％であった。
【００８１】
高湿度下でのインキュベーション後、試験植物に、胞子嚢６０，０００〜８０，０００個／ｍｌの濃度のシュードペロノスポラ・キュベンシス（Pseudoperonospora cubensis）（ＰＳＰＥＣＵ）の胞子嚢を接種した。接種した植物を、２２℃の温度の暗い加湿チャンバに移した。加湿チャンバ中で２２時間経過後、植物を、１４時間の明／暗光周期および２０℃の温度の照明付成長室中でインキュベートした。病害の発生を、５〜６日後に評価し、このとき、未処理の基準植物中の症状は十分に発現していた。パーセント感染葉表面の視覚的評価を行った。結果を表４に示し、表中、各濃度に対する平均としての％病害が示される。
【００８２】
【表４】
2016505607.tif 000005
【００８３】
本発明は、限定数の実施形態に関して記載されてきたが、１つの実施形態の具体的な特徴は、本発明の他の実施形態に起因すると考えるべきではない。本発明の全ての態様を示す単一の実施形態は存在しない。いくつかの実施形態では、組成物または方法は、本明細書で言及していない多くの化合物またはステップを含み得る。他の実施形態では、組成物または方法は、本明細書に列挙されていない任意の化合物もしくはステップを含まないか、または実質的にそれらがない。記載された実施形態からの変形型および改変が存在する。最後に、本明細書に開示された任意の数は、単語「約」または「およそ」がその数を記載する際に使用されているかどうかに関わらず、近似を意味すると解釈すべきである。添付の実施形態および特許請求の範囲は、本発明の範囲内に入る全てのかかる改変および変形型を包含することを意図している。
【図１】
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【国際調査報告】
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