(57)【要約】【課題】マイクロカプセル化した酸素放出反応物質を提供する。【解決手段】互いに接触したとき酸素を放出する、マイクロカプセル化された過酸化物及びマイクロカプセル化された触媒を有する酸素の供給のための組成物が提供される。前記組成物は、使用時まで別々に保存されても、一緒に保存されてもよい。混合すると、酸素が放出される。前記組成物は、肌の弾力向上を助け、老化の影響を遅らせるために皮膚に酸素を供給する化粧料用途または創傷治癒の用途のために用いることができる。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
互いに接触したとき酸素を放出する、マイクロカプセル化された過酸化物とマイクロカプセル化された触媒とを含む酸素の供給のための組成物。
【請求項２】
前記過酸化物及び／または前記触媒が、ノズルからスプレーされる溶媒の存在下でのＰＬＧＡでマイクロカプセル化されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記マイクロカプセル化された過酸化物及び／または前記マイクロカプセル化された触媒は、２μｍ〜１ｍｍのサイズを有することを特徴とする請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記マイクロカプセル化された過酸化物及び／または前記マイクロカプセル化された触媒は、５０μｍ〜１００μｍのサイズを有することを特徴とする請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記マイクロカプセル化された過酸化物及び前記マイクロカプセル化された触媒は、使用時まで別々に保存されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記マイクロカプセル化された過酸化物及び前記マイクロカプセル化された触媒は、使用時まで一緒に保存されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記過酸化物は、過酸化水素であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記触媒は、カタラーゼ、二酸化マンガン、及び塩基からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
天然または合成ポリマー、保湿剤、粘度調整剤、皮膚軟化剤、触感改善剤、紫外線遮断剤、着色剤、顔料、ヒュームド・シリカ、二酸化チタン、天然及び合成クレイのいずれかを含むセラミック、酸化防止剤、香料のいずれか、またはこれらの組み合わせを更に含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国特許仮出願第６１／８０６０７５号を基礎とする優先権を主張するものであり、その内容を本明細書の一部とする。本発明は、化粧料及び創傷治癒製剤において利用するための酸素の供給に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸素不足、即ち低酸素症は、高齢化により四肢における血液循環の悪化した者や、糖尿病等の病気の患者が通常経験する。研究結果によれば、高齢者の皮膚においては、正常より低い、低酸素ストレスがあることも示されている。これは、皮膚の健康状態の悪化や、皺、乾燥、及び皮膚弾力の低下等が過剰に見られる状態をもたらす。長きにわたって、化粧料製造者は、このような老化関連の影響の現れを遅らせ、かつ皮膚の健康を維持するための、皮膚軟化剤、エクスフォリエーター（角質・毛穴汚れ除去剤）、保湿剤等の種々の成分を有する皮膚用製剤を提供してきた。低酸素の問題に直接的に取り組むことは一般的には行われてこなかった。
【０００３】
酸素は極めて反応性が高く不安定であるため、家庭等における一般的利用のための皮膚への酸素供給は技術的に困難を伴う。高濃度の酸素は、この不安定さのために、一般人の利用に供することができなかった。しかし、Ｌａｄｉｚｉｎｓｋｙの米国特許出願公開第２００６／０１２１１０１号明細書（特許文献１）によれば、酸素を、過酸化物及び過酸化物分解触媒の形で提供することが可能である。この文献には、皮膚上に適用される包帯剤の使用による、損傷のない皮膚へのそのような酸素供給処置が開示されている。この包帯剤は、水性過酸化水素組成物と過酸化物分解触媒を有するヒドロゲル層とを含む、破ることが可能なリザーバを有するものである。不都合なことに、過酸化水素の酸素への触媒分解は極めて短時間で生ずるため、この包帯剤はその外部に酸素に対して不透過性の層を設け、最大限可能な時間にわたって酸素が皮膚に対して保持されるように構成している。また、この包帯剤は皮膚上の小さい領域に対して有用であるが、皮膚上の大きな領域や不規則な形状を有する領域では利用できないことは明らかである。
【０００４】
或いは、Ｄｅｖｉｌｌｅｚ（米国特許第５７３６５８２号明細書）（特許文献２）には、過酸化水素の溶剤も含む皮膚処置用組成物において、過酸化ベンゾイルの代わりに過酸化水素を使用することも提示されている。これにより、過酸化水素を、皮膚に損傷を与えるレベルより低く維持し、かつより高濃度で溶液に含めておくことが可能となる。
【０００５】
ここには、水とともにジメチルイソソルビド等を含む溶剤が、効果的であることが記載されている。また、過酸化物を分解する触媒は存在していない。残念ながら、この文献には酸素濃度や酸素発生量に関するデータは示されておらず、酸素放出に必要な時間も示されていない。この方法は、非酸素含有組成物より進歩したものであるとみられるが、データが示されていないので、この方式の全体的な効果を客観的に判定することが困難である。しかし、過酸化物の濃度を考慮すると、十分な量の酸素が生成されているとは考えにくい。
【０００６】
酸素供給のための他の提案では、一方に過酸化物が含まれ、他方に触媒が含まれた２つの区画を有するボトルを利用する。過酸化物を触媒は、ボトルから分注されるときに混合され、その時に酸素が発生する。そのようなシステムは、効果的であると考えられるが、製造コストが高くなり得る。加えて、両区画の成分が、輸送中の漏れやその他の形で接触し、酸素が使用前に放出されてしまうリスクが残っている。
【０００７】
酸素を皮膚または創傷に適用する利用しやすい方法の必要性が存在する。そのような方法及び／又は製品は、特殊な包帯剤、ボトルの必要や他の面倒な要求がなく、比較的少ない数の構成要素を有し、かつ使用方法を直感的に理解できるものとすべきである。また、既存の製品に類する方式で使用され得る製品が、消費者にとって最も受け入れやすいものとなろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００６／０１２１１０１号明細書
【特許文献２】米国特許第５７３６５８２号明細書
【特許文献３】米国特許第５４９６７２８号明細書
【特許文献４】国際公開第２００６／００３５８１号
【特許文献５】米国特許第８３１３６７６号明細書
【特許文献６】米国特許第６６６９９６１号明細書
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｂｏｈｍｅｒら（２００６）（Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  ａｎｄ  Ｓｕｒｆａｃｅｓ  ２８９，９６−１０４）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明では、上記の問題に対して大きな程度の解決を見いだし、過酸化物と、過酸化物の水と酸素への分解を触媒する触媒とを別々にカプセル化する方法を開示している。過酸化物と触媒とが接触すると酸素が放出すなわち「遊離」される。その方法で製造される組成物は、互いに接触したとき酸素を放出する、マイクロカプセル化された過酸化物及びマイクロカプセル化された触媒を有する前記組成物は、使用時まで別々に保存されても、一緒に保存されてもよい。混合すると、酸素が放出される。前記組成物は、肌の弾力向上を助け、老化の影響を遅らせるために皮膚に酸素を供給する化粧料用途または創傷治癒の用途のために用いることができる。
【００１１】
化粧料として望ましい他の特性を与えるために、構成成分の組成物は他の成分を含んでいてもよい。そのような他の成分として、例えば、天然又は合成ポリマー、保湿液、保湿剤、粘度調整剤、皮膚軟化剤、テクスチャーエンハンサ（触感改善剤）、紫外線遮断剤、着色剤、顔料、セラミック（ヒュームド・シリカ、二酸化チタン、天然及び合成クレイ（粘土））、酸化防止剤、香料等が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、製剤Ａのカタラーゼの４つの例すなわち「適用例（iterations）」の活性を示すグラフである。Ｕ／ｍｇを単位として表される活性はＹ軸（縦軸）に、日数を単位として表される時間はＸ軸（横軸）に示されている。
【図２】図２は、０．９％のＨ２Ｏ２水溶液中の製剤Ｂのマイクロカプセル化されたカタラーゼによる酸素放出の経時的な変化を示すグラフである。ｐｐｍを単位として表される溶解した酸素量はＹ軸に、０〜１時間の時間はＸ軸に示されている。
【図３】図３は、カタラーゼと過酸化水素微小球とが１：３の比率で混合された混合物の場合の、ｐｐｍを単位として表される溶解した酸素量の経時的な変化を示すグラフである。溶解酸素量はＹ軸に、時を単位とする時間はＸ軸に示されている。対照ライン（水）は、低い側のラインである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の１つ以上の実施形態、実施例、図示した実施例について以下詳細に説明する。各実施形態及び実施例は本発明の例示のために提示されるものであり、本発明の限定を意図するものではない。例えば、一実施形態の一部として例示又は記載された特徴を他の実施形態に組み合わせて用いて、更に別の実施形態を作り出してもよい。上記の及び他の改変形態や変更形態も本発明の範囲内に含むものとする。
【００１４】
酸素の皮膚への適用は、皮膚の健康状態の悪化や、皺、乾燥、及び皮膚弾力の低下等が過剰に見られる状態等の老化によってもたらされる多くの問題を軽減するのを助けることができる。皮膚に適用された酸素は、これらの老化関連の影響を遅らせ、皮膚の健康を向上、維持する助けとなり得る。同様に、創傷に適用された酸素は、治癒の速度を速め、傷あとを減らすことができる。しかし、創傷に酸素を供給する際には、皮膚に適用される酸素より長い時間にわたって酸素の放出がなされるのが望ましい。
【００１５】
液体または泡状の組成物の適用による酸素の局所的適用は、上記の望ましい利益を提供する便利で簡便な方法である。二分型製剤は、酸素を使用のために利用可能とするのを確実にするのを助け、保管中に消失することがないが、２つの成分を分離した状態に維持し、適切なタイミングでそれらを混合する必要があることから製造者に難題を課すものであり得る。
【００１６】
「オンデマンド」で生成される酸素の放出は、混入型（entrapped）ケミストリを利用することによって達成することができる。そのような成分またはケミストリの例としては、残されるか、または皮膚に吸収される成分の残留物がない（または実質的にない）ような形で触媒及び過酸化水素を含むものが挙げられる。
【００１７】
マイクロカプセル化材料を製造する一方法が、Ｈａｒｄｙら（米国特許第５，４９６，７２８号明細書）（特許文献３）に開示されており、この方法では、漂白活性化剤を微生物でカプセル化する。この方法は、初めに無傷の微生物細胞を過酸化物漂白で消臭し、次にその細胞を、細胞がカプセル化する液体の漂白活性化剤に接触させる。
【００１８】
国際公開第２００６／００３５８１号（特許文献４）には、ある周波数を好ましくは補助圧力と組み合わせて適用する水中ノズルを用いて、既知のものより小さい粒子を生成することが記載されている。噴射されるエマルジョン液滴を注意深く収縮させることにより、２μｍもの小さいサイズの粒子が生成された。Ｂｏｈｍｅｒら（非特許文献１）にも記載のように、単分散カプセルを得ることもできる。ここに記載されたシステムでは、補助圧力が高速噴射を可能にするのみならず、装置のノズルの詰まりを防止できる。追加の圧力を用いない場合には、ポリ乳酸等のポリマーが、噴射される液体と連続層との間の界面で固化してしまう。
【００１９】
生分解性ポリマーに由来する非常によく規定された粒子を得るための別の方法では、Ｂｏｈｍｅｒら（米国特許第８，３１３，６７６号明細書）（特許文献５）に記載のように、ポリマーの微粒子を、その微粒子を液体（受容液）内に滴下させることによって硬化させるインクジェット技術を用いる。受容液は、バッファー化され得る水溶液であって、塩、界面活性剤安定化剤、最大２％、１０％、または２０％の有機化合物、またはその他の添加物等の追加の化合物を含み得る。この初期の膨張及び／または硬化の間、受容液は、例えば粒子が相互に衝突することによって生ずる機械的な損傷を回避するために一般的には撹拌されない。受容器の適切な高さを選択することによって、エマルジョン液滴が重量によって特定の距離だけ落ちて、一定程度まで硬化することを確実にでき、その後それらを受容器から取り出して、更に硬化させるために撹拌することができる。一実施形態では、ノズルから放出されたエマルジョン液滴が、下向きに傾斜した表面に受容液内で接触し、この表面を転がるか滑りながら膨張及び／または硬化を開始する。望ましくは、傾斜した表面は次第に傾斜が変化するものであるのが好ましい。エマルジョン液滴を、重力で下に落とすのでなく、受容液内で次第に傾斜が変わる表面を転がるか滑り落ちることできるようにすることによって、液滴が所定の時間にわたって受容液内に存在し続け、均一性の一層向上した単分散粒子が得られることが判明したからである。
【００２０】
マイクロカプセル化材料を製造する別の方法は、Ｋｉｍら（米国特許第６，６６９，９６１号明細書）（特許文献６）に記載のような、米国カンサス州カンサスシティのＯｒｂｉｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（www.orbisbio.com）によって使用されている方法であって、精密粒子製造（ＰＰＦ）技術と称されるものである。前記ウェブサイトによれば、ＰＰＦでは、粒子サイズ、組成、被覆、及び材料等の重要な属性について精密な制御を行う連続流高体積ノズル技術を使用する。２μｍ〜１ｍｍの制御された直径を有する粒子を製造し、小さい親水性または疎水性の分子から高分子、ポリマー、核酸、及びタンパク質にわたる殆どの活性成分を包入させることができる。
【００２１】
特許文献６の方法では、カプセル化されるべき成分（コア）が、カプセル（シェルを構成することが望ましいノズルから供給される物質で外囲される。波形発生器（または他の手段）によって駆動される圧電変換器を用いて、流体コア／シェルの流れを、それがノズルから放出されるときに振動させ、流れを遮断して液滴すなわち粒子にする。この振動はまた、望ましくは、流体を押し出す圧力によって生成される速度より速い速度まで流体の（下向き）速度を高める。ノズル出口は、望ましくは水性浴の表面の下に配置され、従って粒子が液体表面へ衝突することが避けられる。ノズルは、コア排出内側ノズルと、コアを外囲するシェル排出外側ノズルとを備える二重オリフィスノズルでもよい。
【００２２】
本発明の実施では、以下、ＰＬＧＡと称する乳酸・グリコール酸コポリマーをシェルとして使用し、過酸化水素及びカタラーゼを（別々に）コアとして用いる。ＰＬＧＡは、インビボ用途について連邦食品医薬品局（ＦＤＡ）の承認を得た生分解性ポリマーである。
【００２３】
マイクロカプセル化過酸化物及びマイクロカプセル化カタラーゼが効果的であることを調べるために、上述のＰＰＦ法に従って各種サンプルを調整した。検査は、（Ａ）長期作用性３日製剤、及び（Ｂ）短期作用性１時間製剤の各々の種類の小球について２つの放出時間に焦点を当てて行った。以下の実施例は、成功した方法と不成功に終わった方法を含む検査結果が概略である。
【００２４】
【表１】
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【００２５】
［製剤］
製剤Ａ−長期作用性、７２時間放出（７５〜１００μｍ）
・カタラーゼ製剤：４適用例（ＰＬＧＡ）
・過酸化水素製剤：２適用例（ワックス、次いでＰＬＧＡ）
製剤Ｂ−短期作用性、１時間放出（３０〜５０μｍ）
・カタラーゼ製剤：２適用例（ＰＥＧ、次いでＰＬＧＡ）
・過酸化水素製剤：１適用例（ＰＬＧＡ）
【００２６】
製剤Ａ：長期作用型（７２時間）放出：カタラーゼ
生分解性ポリマー（ＰＬＧＡ等）からのタンパク質の製剤化及び送達は、長期放出用途のためによく特性化された手法である。目指すべきことは、小球における最終濃度５重量％のカタラーゼのための７５〜１００μｍ微小球内にカタラーゼを分散してカプセル化し、一旦水和環境に曝されると７２時間にわたるカタラーゼ放出を有するものとすることであった。
【００２７】
長期作用型カタラーゼ製剤は４つの適用例を作製することとし、各適用例につき目標の７２時間に等しいタンパク質すなわちカタラーゼの放出達成の有無を検査する方法をとった。これらの微小球の生成する基本的なプロセスは、初めにカタラーゼ富化水相を生成し、それを有機ポリマー油相で乳化し、最後にＰＰＦプロセスにおいてジクロロメタン（塩化メチレン）とともにＰＬＧＡを用いて微小球を作成するというものであった。
【００２８】
選択されたＰＬＧＡは、推定劣化時間が１〜２週の低分子量バージョン（上記の表参照）のものであった。７２時間にわたって十分な量のカタラーゼが利用可能であることを確実にするために、各適用例は、水和環境における放出を調整するべく種々の製剤パラメータ（カタラーゼ負荷、水相：油相比、賦形剤）を用いた。
・適用例１：水中にカタラーゼ、ＰＬＧＡ中で水相：油相比１：９で乳化
・適用例２：水中にカタラーゼ、ＰＬＧＡ中で水相：油相比１：４で乳化
・適用例３：水：ＰＥＧ３００比５０：５０にカタラーゼ、ＰＬＧＡ中で水相：油相比１：９で乳化
・適用例４：水：ＰＥＧ３００比５０：５０にカタラーゼ、ＰＬＧＡ中で水相：油相比１：４で乳化
【００２９】
作製後、分散されたカタラーゼを含む微小球を収集し、凍結乾燥して粉末にし、必要時まで−８０℃で保存した。次に、各製剤について放出の試験を行い、時間の関数としての微小球の質量当たり活性を決定した。微小球の重量を計量し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を充填した微小遠心分離管に７日間入れた。２４時間毎にサンプルを取り出し、バイオアッセイ（カリフォルニア州サンディエゴのＣｅｌｌＢｉｏｌａｂｓ，Ｉｎｃ．（www.cellbiolabs.com）製）によって活性を測定した。
【００３０】
得られたデータから、カタラーゼの最速の放出は、水相がＰＬＧＡ／有機相に対して高い体積比で乳化されたＰＥＧを含むときに生じることが立証された。この結果は、ＰＬＧＡマトリックス内に孔を早く形成し、その後のカタラーゼの放出を可能としたＰＥＧの水膨張性に起因するものであったと考えられる。この効果は、有機相に対する水相の体積の割合をより大きく（１：４ｖｓ１：９）とすることによってより強化された。従って、適用例４が最も高い活性を有していた。
【００３１】
上述の製剤（適用例４）を、インビトロでの酸素発生について試験した。カタラーゼ微小球を、０．９％Ｈ２Ｏ２中の閉じた系の中に置き、溶解酸素の量を７２時間にわたってモニタリングした。酸素の発生は７２時間にわたってみられ、このことによりカタラーゼが長期間にわたって連続して放出されたことが確認できた。
【００３２】
製剤Ａ：長期作用型（７２時間）放出：過酸化水素
液体のマイクロカプセル化は、特に液体が極度に親水性である場合には歴史的に困難であった。過酸化水素の場合がそのような場合である。分散された水相すなわちＨ２Ｏ２を有する安定な微粒子製剤の作製における重要な問題は、使用前における水相の放散を軽減することである。カプセル化マトリックスは、望ましくは、疎水性材料から構成されたものでるか、または水相の安定的な乳化を促進する物理的または化学的ネットワークを含むものであるべきである。これにより、カタラーゼ製剤の場合と同様に７２時間放出を提供するような７５〜１００μｍの微小球に高濃度液のＨ２Ｏ２をカプセル化することを目指した。
【００３３】
長期作用型Ｈ２Ｏ２製剤は、２つの実施例すなわち「適用例」を作製することとし、各処理物につき、目標の７２時間に等しいＨ２Ｏ２の放出および混入状態の達成の有無を検査する方法をとった。第１の適用例は、セレシンワックスをベースにした製剤を用いた。これは、カプセル化ワックス材料の疎水性のために理想的なものであった。上述のカタラーゼの実施例において使用したようなＰＬＧＡ溶液ベースの系に類似したＰＰＦも、シェルマトリックス材料を溶解し、それがノズルから出た後に空気にさらされて急激に冷却されるようにすることによって、溶剤を不要とするような方式で用いることも可能である。最終産物は即座に乾燥状態となる。第１の適用例の場合には、水性Ｈ２Ｏ２相は、Ｈ２Ｏ２：ワックスの体積比が１：１９となるように溶融したセレシンワックスとともに、高いｒｐｍで継続的に撹拌し、混合容器及びノズルを通して放出させてワックスの液滴を生成した。
【００３４】
しかし、更なる調査のときには、ワックスにおけるＨ２Ｏ２の混入はほぼ無視できるものであったことは明らかであった。このことは、混合容器内にＨ２Ｏ２の大部分が残っていること、製造中に生成物ストリームが非連続になること、及び粒子を破砕したときにＨ２Ｏ２放出がないことによって裏付けられた。従って、Ｈ２Ｏ２粒子の製造のためのワックスは失敗であったと考えられた。
【００３５】
第２の適用例は、ＰＬＧＡ及び溶剤を用いたカタラーゼ粒子に対して行ったように、水−油エマルジョンのより伝統的な方法に移した。この適用例とカタラーゼ適用例との主な差異は、水相がカタラーゼを含んでいなかったが、１重量％のポロキサマー１８８とともに、Ｈ２Ｏ２：油比が１：９の高濃度Ｈ２Ｏ２溶液を含んでいた点である。有機Ｈ２Ｏ２エマルジョンは、溶解ワックス溶液より高周波音分解処理の後に維持するのが容易であったが、最終産物は乾燥状態でなく、凍結乾燥によってそうすると、水とＨ２Ｏ２が昇華されることになろう。従って、最終粒子を収集し、更なる使用のときまで−８０℃で凍結した。この温度はＨ２Ｏ２が安定な温度である。
【００３６】
次に放出の試験を行い、時間の関数としての微小球の質量当たりＨ２Ｏ２放出量を決定した。非乾燥の粒子の重量を計量し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を充填した微小遠心分離管に３日間入れた。２４時間毎にサンプルを取り出し、バイオアッセイ（イリノイ州ロックフォードのＰｉｅｒｃｅ−Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（www.piercenet.com）製）によって測定した。残念ながら、アッセイの結果は、アッセイの検出方法とＰＬＧＡ分解副産物との不適合の可能性を示した。このことで結果は信頼できないものとなった。製剤を、インビトロでの酸素発生について試験した。Ｈ２Ｏ２粒子を、水溶液中の０．３％カタラーゼの閉じた系の中に置き、溶解酸素の量を２時間にわたってモニタリングした。
【００３７】
ＰＬＧＡ中マトリックス内にＨ２Ｏ２微小泡の初期混入があると思われるにも関わらず、処理後の残留は僅かであった。溶解酸素濃度は、（完結的な装置のノイズはあるが）平らなラインのプロファイルを示した。このことが製剤における改善を保証している。
【００３８】
製剤Ｂ：短期作用型（１時間）放出：カタラーゼ
製剤Ａの試行の間に得られた知見をもって、ローションベースの用途のためのより小さい粒子の製造についての関心を満たすことを目指した。目指すべきことは、表面に拡がったあとに１時間以内の時間にわたって利用可能となるカタラーゼ（及びその後の酸素発生）を作り出すための５０μｍ以下、好ましくは３０μｍ以下の粒子とすることである。
【００３９】
カタラーゼの迅速な利用可能性を確実にするために、第１の適用例を、低分子量（３００Ｍｎ）ＰＥＧを用いて試した。ＰＥＧは室温で固体であり、表面に拡がったとき変形すると考えられる。しかし、粒子を製造するために、溶解状態にあるＰＥＧが必要となった。これは一般的には単分散サイズ限度が１００μｍ以上のものとなる。サイズを小さくしてゆくと、幅広いサイズ分布が形成されることになる。
【００４０】
粒子を製造するために、高濃度カタラーゼ溶液を溶解したＰＥＧで乳化して、カタラーゼの全重量比率が１％となるようにした。次にこの溶液を冷凍し凍結乾燥して、水性成分のない細かく分散したカタラーゼ相を形成した。次に、この固体を再溶解し、製剤ＡのＰＬＧＡまたは溶剤のないＨ２Ｏ２／ワックス素材の場合に行ったように、ＰＰＦを用いてノズルを通して噴射した。しかし、ＰＥＧカタラーゼ粒子を連続的に作製する能力は、加熱状態下ではカタラーゼが凝集しノズルを詰まらせてしまうので困難なものとなってくる。うまく作製された粒子は完全には冷却されず、カタラーゼの不均一な分布を示した。従って、カタラーゼ粒子の製造のためのＰＥＧは、失敗したと考えられた。
【００４１】
第２のカタラーゼ適用例は、製剤Ａで成功したＰＬＧＡ及び溶剤をシェルとして使用する方式に戻した。所望の粒子サイズが大幅に小さくなったため、カタラーゼの放出速度は、前の７２時間製剤と比較して速くなると考えられた。加えて、放出速度を速めるために水膨張性成分であるゼラチンが高濃度カタラーゼ相に０．５ｗ／ｖ％で含められ、即ち５ｍｇ／ｍＬのゼラチン水溶液を、１００ｍｇ／ｍＬのカタラーゼと共に用い、ＰＬＧＡ及びジクロロメタンを用いて水：油比１：９で乳化し、ノズルからスプレーした。製造後、粒子に対して、前に行ったのと同様に（即ち０．９％Ｈ２Ｏ２水溶液中で）放出試験を行い、アッセイして、水のみの場合と異なり、ローション中で２時間経過後に第１の製剤の活性の少なくとも１０倍の活性があることを立証した（図２）。
【００４２】
第２のカタラーゼ適用例製剤に対して、リアルタイム酸素発生試験を行ったが、より短いタイムスケールにおいて、第１の製剤にみられたのと同様の傾向及び溶解酸素量を示した。
【００４３】
製剤Ｂ：短期作用型（１時間）放出：過酸化水素
製剤ＢのＨ２Ｏ２適用例は、０．１ｗ／ｖ％のキサンタンガム及び０．５１ｗ／ｖ％のゼラチンを添加することによってゲル化された３％過酸化物を用いた。次にＰＬＧＡ／ジクロロメタンシェルが形成されるように、ゲル相を水：油比１：９で乳化し、ノズルからスプレーした。粒子は、製造後に安定性を維持するために−８０℃で凍結した。
【００４４】
製剤Ｂのカタラーゼ（第２適用例）及び製剤ＢのＨ２Ｏ２粒子に対し、別々に補完的な成分の希釈溶液中で試験を行った。具体的には、カタラーゼ粒子を０．９％Ｈ２Ｏ２溶液中で評価し、Ｈ２Ｏ２粒子を０．３％カタラーゼ用益中で評価した。試験結果は、各粒子タイプは、所望のように制御された環境において酸素を生成することができ、酸素濃度は２つの製剤間で類似したものであることを示している。
【００４５】
個別の試験に続けて、製剤Ｂの粒子同士を、水の閉じた系のなかでカタラーゼ（第２適用例）：過酸化物比１：３で混合し、溶解酸素量をモニタリングした。酸素量を、陰性対照群（水）と比較した。その結果は、図３に図示されているように、これらの粒子が、水のなかで一緒に試験された場合、個々に試験された場合の類似の経時的酸素量プロファイルを生成することができることを示していた。
【００４６】
本発明の特定の実施形態について詳細に説明したが、本発明の範囲を逸脱することなく、種々の代替形態や改変形態で、及び他の変更を加えて本発明を実施することも可能であることは当業者には理解されよう。従って、特許請求の範囲の請求項の記載の技術範囲に包含される全ての改変形態、代替形態、及び他の変更も本発明の範囲に含まれる。
【図１】
2016515569.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
2016515569.tif 000007
2016515569.tif 000008