(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ１は、ヒドロキシ又はアミノであり；Ｒ２は、sec−ブチル又はイソブチルであり；Ｒ３は、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−（ＣＨ２）３−ＮＨ２又は−ＣＨ２−５員芳香族複素環基であり；Ｒ４は、水素又は低級アルキルであり；Ｒ５は、水素又は低級アルキルであるか；あるいはＲ４及びＲ５は、それらが結合しているＮ及びＣ原子と一緒になって、ヒドロキシ若しくはハロゲンで場合により置換されているピロリジン環、ピペリジン環、又はアゼチジン環を形成し得；Ｒ６は、水素、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、アミノ若しくはヒドロキシで場合により置換されているベンジル、−ＣＨ２−５員芳香族複素環基、インドリル、−ＣＨ２−シクロアルキル、シクロアルキル、−（ＣＨ２）２−Ｓ−低級アルキルであるか、又は−（ＣＨ２）１−４−ＮＨ２であり；Ｒ６’は、水素又は低級アルキルであるか；あるいはＲ６及びＲ６’は、一緒に、シクロアルキルであり；Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨＲ−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｒ／Ｒ’は、互いに独立に、水素又は低級アルキルであり；ｍは、２であり；ｏは、０又は１である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩、ラセミ混合物若しくはその対応するエナンチオマー、及び／又は光学異性体に関する。本化合物が、自閉症、ストレス（外傷後ストレス障害を含む）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒の処置のための、ならびにプラダー・ウィリー症候群の処置のための、オキシトシン受容体アゴニストであることが見出された。
2016503044.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化５８】
2016503044.tif 000071
［式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ又はアミノであり；
Ｒ２は、sec−ブチル又はイソブチルであり；
Ｒ３は、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−（ＣＨ２）３−ＮＨ２又は−ＣＨ２−５員芳香族複素環基であり；
Ｒ４は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ５は、水素又は低級アルキルであるか；あるいは
Ｒ４及びＲ５は、それらが結合しているＮ及びＣ原子と一緒になって、ヒドロキシ若しくはハロゲンで場合により置換されているピロリジン環、ピペリジン環、又はアゼチジン環を形成し得；
Ｒ６は、水素、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、アミノ若しくはヒドロキシで場合により置換されているベンジル、−ＣＨ２−５員芳香族複素環基、インドリル、−ＣＨ２−シクロアルキル、シクロアルキル、−（ＣＨ２）２−Ｓ−低級アルキルであるか、又は−（ＣＨ２）１−４−ＮＨ２であり；
Ｒ６’は、水素又は低級アルキルであるか；あるいは
Ｒ６及びＲ６’は、一緒に、シクロアルキルであり；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨＲ−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ／Ｒ’は、互いに独立に、水素又は低級アルキルであり；
ｍは、２であり；
ｏは、０又は１である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩、ラセミ混合物若しくはその対応するエナンチオマー、及び／又は光学異性体。
【請求項２】
Ｒ２がsec−ブチルである、請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
５員複素環がイミダゾール環である、請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項４】
ｏが０である、請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項５】
化合物が、下記：
【化５９】
2016503044.tif 000072
2016503044.tif 000073
2016503044.tif 000074
2016503044.tif 000075
2016503044.tif 000076
2016503044.tif 000077
2016503044.tif 000078
2016503044.tif 000079
2016503044.tif 000080
2016503044.tif 000081
である、請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物ならびに薬学的に許容し得る担体及び／又は佐剤を含む、医薬組成物。
【請求項７】
自閉症、外傷後ストレス障害を含むストレス、不安障害及びうつ病を含む不安症、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒の処置における使用のための、ならびにプラダー・ウィリー（Prader-Willi）症候群の処置のための、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物ならびに薬学的に許容し得る担体及び／又は佐剤を含む、医薬組成物。
【請求項８】
治療活性物質としての使用のための、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
自閉症、外傷後ストレス障害を含むストレス、不安障害及びうつ病を含む不安症、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒の処置における、ならびにプラダー・ウィリー症候群の処置のための、治療活性物質としての使用のための、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
自閉症、外傷後ストレス障害を含むストレス、不安障害及びうつ病を含む不安症、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒の治療的及び／又は予防的処置用の、ならびにプラダー・ウィリー症候群の処置用の、医薬の製造のための請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項１１】
本明細書に上記のとおりの発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式Ｉ：
【化１】
2016503044.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ又はアミノであり；
Ｒ２は、sec−ブチル又はイソブチルであり；
Ｒ３は、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−（ＣＨ２）３−ＮＨ２又は−ＣＨ２−５員芳香族複素環基であり；
Ｒ４は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ５は、水素又は低級アルキルであるか；あるいは
Ｒ４及びＲ５は、それらが結合しているＮ及びＣ原子と一緒になって、ヒドロキシ若しくはハロゲンで場合により置換されているピロリジン環、ピペリジン環、又はアゼチジン環を形成し得；
Ｒ６は、水素、低級アルキル、ヒドロキシで置換されている低級アルキル、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、アミノ若しくはヒドロキシで場合により置換されているベンジル、−ＣＨ２−５員芳香族複素環基、インドリル、−ＣＨ２−シクロアルキル、シクロアルキル、−（ＣＨ２）２−Ｓ−低級アルキルであるか、又は−（ＣＨ２）１−４−ＮＨ２であり；
Ｒ６’は、水素又は低級アルキルであるか；あるいは
Ｒ６及びＲ６’は、一緒に、シクロアルキルであり；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨＲ−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ／Ｒ’は、互いに独立に、水素又は低級アルキルであり；
ｍは、２であり；
ｏは、０又は１である］で示される化合物、あるいはその薬学的に許容し得る酸付加塩、ラセミ混合物若しくはその対応するエナンチオマー、及び／又は光学異性体に関する。
【０００２】
本発明の化合物はオキシトシン受容体アゴニストであることが見出され、該化合物は、オキシトシン生物活性を保持する類似体オキシトシンである。かかる類似体分子は、オキシトシン受容体に結合することを含め、内因性オキシトシンと同様の方法で作用することができる。オキシトシンの類似体は、完全に新しい分子構造を有している。
【０００３】
オキシトシンは、位置１と位置６との間のジスルフィド架橋を形成する２つのシステイン基を有する９個のアミノ酸からなる環状ペプチドホルモンである。ヒトオキシトシンは、配列Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙを含む。
【０００４】
ペプチドは、従来の低分子医薬品よりも大きな特異性及び効力及び低毒性プロファイルの利点を提供する商業的関連クラスの薬として浮上してきた。ペプチドは、医師及び特許がペプチド系薬をより多く受け入れると同時に、糖尿病、ＨＩＶ、肝炎、癌及び他のような多くの疾患のための有望な処置の選択肢を提供する。本発明は、また天然ホルモンオキシトシン及びカルベトシンも含む、ペプチド性オキシトシン受容体アゴニストに関する。
【０００５】
オキシトシンは、陣痛を誘発するために臨床的に使用される子宮弛緩及び過度の出血を制御するための強力な子宮収縮剤であり、かつ泌乳の開始及び維持を増強することが示されている（Gimpl et al., Physiol. Rev., 81, (2001), 629-683, Ruis et al.,BMJ, 283, (1981), 340-342）。カルベトシン（１−デアミノ−１−カルバ−２−チロシン（Ｏ−メチル）−オキシトシン）も子宮弛緩及び過度の出血の制御のために臨床的に使用される強力な子宮収縮剤である。
【０００６】
ペプチド性オキシトシンアゴニストは、２５，０００に一人の子供に影響を与える稀な遺伝性疾患であるプラダー・ウィリー（Prader-Willi）症候群の処置のために使用し得る。
【０００７】
更なる研究は、オキシトシンアゴニストが、腹痛及び背痛を含む炎症及び疼痛（Yang, Spine, 19, 1994, 867-71）、男性（Lidberg et al., Pharmakopsychiat., 10, 1977, 21-25）及び女性（Anderson-Hunt, et al., BMJ, 309, 1994, 929）の両方の性機能障害、過敏性腸症候群（IBS, Louvel et al., Gut, 39, 1996, 741-47）、便秘症及び胃腸管閉塞（Ohlsson et al., Neurogastroenterol. Motil., 17, 2005, 697-704）、自閉症（Hollander et al., Neuropsychopharm., 28, 2008, 193-98）、ストレス（外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）を含む）（Pitman et al., Psychiatry Research, 48, 107-117）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）（Kirsch et al., J. Neurosci., 25, 49, 11489-93, Waldherr et al., PNAS, 104, 2007, 16681-84）、外科失血又は産後出血の制御（Fujimoto et al., Acta Obstet. Gynecol., 85, 2006, 1310-14）、陣痛誘発及び維持（Flamm et al., Obstet. Gynecol., 70, 1987, 70-12）、創傷治癒及び感染、乳腺炎及び胎盤娩出、ならびに骨粗鬆症の処置のために有用であることを示唆している。加えてオキシトシンアゴニストは、癌及び胎盤機能不全の両方の診断に有用であり得る。
【０００８】
更に、論文"Intranasal Oxytocin blocks alcohol withdrawal in human subjects"（Alcohol Clin Exp Res, Vol, No. 2012）及び"Breaking the loop: Oxytocin as a potential treatment for drug addiction"（Hormones and Behavior, 61, 2012 , 331-339）は、アルコール禁断及び薬物中毒をオキシトシンアゴニストで処置することを提唱している。
【０００９】
オキシトシン及びその受容体は、側坐核及び海馬のような統合失調症の症状に関与する脳の領域に存在する。オキシトシン受容体アゴニストは、自閉症、ストレス（外傷後ストレス障害を含む）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）、統合失調症、アルツハイマー病、精神障害、記憶喪失及び代謝疾患の処置に使用し得る（WO2012/016229）。
【００１０】
本発明の目的は、疾患が、自閉症、ストレス（外傷後ストレス障害を含む）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒であるオキシトシン受容体に関連するＣＮＳ疾患の処置のための、ならびにプラダー・ウィリー症候群の処置のための、式Ｉの新規な化合物ならびに式Ｉの化合物及びその薬学的に許容しうる塩の使用である。
【００１１】
更なる目的は、式Ｉの新規な化合物及びそれを含有する医薬の製造である。
【００１２】
本発明は、自閉症、ストレス（外傷後ストレス障害を含む）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒を含む特定のＣＮＳ疾患の処置における、ならびにプラダー・ウィリー症候群の処置のための、選択性及び／又は改善を与える、選択的で、有効な化合物を提供し得る。
【００１３】
本発明のペプチドは、表に示すように、バソプレッシン受容体のＶ１ａ及びＶ２に対して非常に良好な選択性を有することが示されている。このことは、副作用を回避するための医薬として使用するための大きな利点を有し得る。これらの生理学的効果は、中枢神経の疾患を処置することを目的とする薬の場合には望ましくない副作用であると考えられる場合がある。したがって、オキシトシン受容体対バソプレシン受容体に対する選択性を有する薬を得ることが望ましい。
【００１４】
本明細書で使用する、用語「低級アルキル」は、１〜７個の炭素原子を含有している飽和の直鎖又は分岐鎖基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、２−ブチル、ｔ−ブチルなどを表す。
【００１５】
用語「ヒドロキシで置換されている低級アルキル」は、少なくとも１個の水素原子がヒドロキシ基で置き換えられている、上記に定義されているとおりの低級アルキル基を表す。
【００１６】
用語「シクロアルキル」は、３〜６個の炭素原子を含有している環状アルキル鎖を表す。
【００１７】
本明細書で使用する、用語「５員芳香族複素環基」は、イミダゾリル、チオフェニル、フラニル、ピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル又はイソオキサゾリル基を表す。
【００１８】
用語「薬学的に許容し得る酸付加塩」は、例えば、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタン−スルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などの無機酸及び有機酸との塩を包含する。
【００１９】
好ましい５員複素環は、イミダゾール環である。
【００２０】
好ましいのは、ｏが０であり、そしてｍが２である、式Ｉの化合物である。
【００２１】
以下の具体的な化合物を調製し、オキシトシン受容体に対するそれらのアゴニスト活性について試験した：
【化２】
2016503044.tif 000004
2016503044.tif 000005
2016503044.tif 000006
2016503044.tif 000007
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2016503044.tif 000009
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2016503044.tif 000011
2016503044.tif 000012
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【００２２】
本発明の式Ｉの化合物の調製は、逐次又は収束合成経路で実施し得る。本反応及び得られた生成物の精製を実施するのに必要な技能は、当業者に公知である。
【００２３】
本明細書において化合物は、Ｆｍｏｃ及びＢｏｃの両方の方法論を利用して固相ペプチド化学の標準的方法により合成した。手作業で行う反応は室温で実行し、一方で、マイクロ波利用ペプチド合成は上昇した温度で実施した。
【００２４】
一般的合成の説明：
直鎖状ペプチドは、手作業によるか、又は例えば：Kates and Albericio, Eds., "Solid Phase Synthesis: A practical guide", Marcel Decker, New York, Basel, 2000によって言及されているように最先端の固相合成プロトコル（Ｆｍｏｃ化学）を介するマイクロ波技術を用いるかのいずれかで合成した。固体支持体として、TentaGel-S-RAM 樹脂（０．２４ミリ当量／ｇ）を用いた。ＨＯＢＴ／ＨＢＴＵ １：１（ＤＭＦ中０．５mol／Ｌ）及び４当量のＤＩＰＥＡ（ＮＭＰ中２mol／Ｌ）で活性化した後、全てのＦｍｏｃアミノ酸を１０倍過剰で添加した。Ｆｍｏｃ−切断は、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンを用いて達成した。
【００２５】
アリル／Ａｌｏｃ切断及びラクタム環化：
樹脂をＤＣＭ中の２０当量フェニルシラン及び０．０５当量のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムの溶液で、手作業で室温にて３０分間処理した。この手順を繰り返した。樹脂を、ＤＭＦ中の０．５％ジチオカルバミン酸ナトリウムの溶液で洗浄した。ビーズ上ラクタム形成のために、再び活性化試薬を樹脂に添加し、室温で更に８時間振盪した。環化の完了は、ニンヒドリン（Ninhydrin）テストを介して確認した。粗ペプチドを、ＤＭＦ中の標準的なペプチド活性化試薬で処理した。環化をＨＰＬＣによりモニタリングした。
【００２６】
切断：
トリフルオロ酢酸、トリイソプロピルシラン及び水（９５／２．５／２．５）の切断−カクテルを、樹脂に加え、室温で１時間振盪した。切断されたペプチドを冷エーテル（−１８℃）中で沈殿させた。ペプチドを遠心分離し、残留物を冷エーテルで２回洗浄した。残留物を水／アセトニトリルに溶解し、凍結乾燥した。
【００２７】
精製：
ペプチドを、固定相としてReprospher 100 C18-Tカラム（１００×４．６mm、粒径５ｕ）及び溶離剤として水／アセトニトリル（勾配１〜５０％ＭｅＣＮ、３０分間かけて）を用いる逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用して精製した。画分を回収し、ＬＣ／ＭＳにより分析した。純粋な生成物試料を合わせ、凍結乾燥させた。全てのペプチドを純度＞８５％を有する白色の粉末として得た。生成物同定を、質量分析により得た。
【００２８】
全ての標準アミノ酸はＣＥＭから購入した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＡＰ（Ａｌｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＡＢ（Ａｌｏｃ）−ＯＨ及びＦｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨをＢａｃｈｅｍから購入した。Ｆｍｏｃ−β−ホモプロリンをChem-Impaxから購入した。Ｆｍｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＨ及びモノ−ｔＢｕ−コハク酸をSigma-Aldrichから購入した。
【００２９】
実施例６の合成に関する詳細な説明が、合成条件をさらに説明するために提供される：
【００３０】
ペプチド合成：
ペプチドを、ＣＥＭマイクロ波技術を使用し、上昇した温度（７８℃）にて及び０．２５mmolのスケールで、アミノ酸あたり５分間のカップリング時間で合成した。合成は、固体支持体としてTentalGel-S RAM 樹脂（０．２４ミリ当量／ｇ）を用いて行われる。使用される全てのアミノ酸を、０．２mol濃度までＤＭＦに溶解した。ＨＯＢＴ／ＨＢＴＵ １：１（０．５mol／Ｌ）４当量とＤＩＰＥＡ ４当量との混合物を使用して、アミノ酸を活性化した。Ｆｍｏｃ−切断は、ＤＭＦ中のピペリジン（２０％）を３分間用いて達成した。Ｆｍｏｃ−切断を繰り返した。
【００３１】
Ａｌｏｃ−及びアリル−切断：
樹脂を、ＤＣＭ（５mL）中のフェニルシラン２０当量及びテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム０．０５当量の溶液で室温にて３０分間手作業で処理した。この手順を繰り返した。樹脂をＤＭＦ中の０．５％ジチオカルバミン酸ナトリウムの溶液で２回洗浄した。洗浄工程をＤＣＭで繰り返した。
【００３２】
オン−ビーズ（on-bead）環化：
再び、ＤＭＦ中のカップリング−試薬（ＨＯＢＴ／ＨＢＴＵ（１：１）の０．５mol／Ｌ溶液 ４mL及びＤＩＰＥＡ（４当量）１mL）を樹脂に加えた。スラリーを室温で８時間振盪した。樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで２回洗浄した。環化の完了をニンヒドリン試験で確証した。
【００３３】
樹脂からの切断：
切断−カクテル（ＴＦＡ；ＴＩＳ；水（９５／２．５／２．５））１０mLを樹脂に加え、室温で１時間振盪した。切断されたペプチドを冷エーテル（−１８℃）中で沈殿させた。ペプチドを遠心分離し、沈殿物を冷エーテルで２回洗浄した。沈殿物をＨ２Ｏ／アセトニトリルに溶解し、凍結乾燥させて、白色の粉末２１０mgを生成した。
【００３４】
精製：
粗ペプチドを、Reprospher 100 C18-T カラム（１００×４．６mm、粒径５um）の分取ＨＰＬＣにより精製した。溶離液系として０．１％ＴＦＡ／水／アセトニトリルの混合物を、０〜３０分間以内に０〜５０％のアセトニトリルの勾配で使用した。画分を回収し、分析用ＨＰＬＣにより検査した。純粋な生成物を含有している画分を合わせ、凍結乾燥させた。白色の粉末７．２mgを得た。
【００３５】
以下に列記されている他の全てのペプチドを、適切に合成した。
【００３６】
略語：
Ｆｍｏｃ：                    ９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｇｌｙ：                      グリシン
Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）：            トリチル−保護ヒスチジン
Ｓａｒ：                      サルコシン
Ｇｌｕ：                      グルタミン酸
Ａｓｎ（Ｔｒｔ）：            トリチル−保護アスパラギン
Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）：            トリチル−保護グルタミン
Ｉｌｅ：                      イソロイシン
Ｔｙｒ：                      チロシン
Ｌｅｕ：                      ロイシン
Ｐｒｏ：                      プロリン
Ａｌａ：                      アラニン
Ｏｒｎ：                      オルニチン
Ｔｈｒ：                      トレオニン
Ｖａｌ：                      バリン
Ｄａｂ：                      ジアミノ酪酸
Ｄａｐ：                      ジアミノプロピオン酸
Ｄ−Ｐｒｏ：                  Ｄ−プロリン
ＭｅＬｅｕ：                  α−メチル−ロイシン
Ｃｈａ：                      β−シクロヘキシル−アラニン
Ｎｌｅ：                      ノルロイシン
Ｃｈｇ：                      シクロヘキシルグリシン
ＨｏＬｅｕ：                  ホモロイシン
Ｔｌｅ：                      tert.ブチル−グリシン
Ｈｙｐ：                      trans−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン
ＦｌｕｏｒｏＰｒｏ：          trans−４−フルオロ−Ｌ−プロリン
Ｈｐｒ：                      ホモプロリン
Ａｉｂ：                      アミノイソ酪酸
Ａｚｅ：                      （Ｓ）−Ｎ−アゼチジン−２−カルボン酸
Ｓｅｒ：                      セリン
２ＡＯＣ−ＯＨ：              Ｌ−アミノオクタン酸
２ＡＤＣ−ＯＨ：              Ｌ−アミノデカン酸
ｃｙＬｅｕ：                  シクロロイシン
Ａｌｏｃ：                    アリルオキシカルボニル
ＨＯＢＴ：                    Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＢＴＵ：                    Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−へキサフルオロホスファート
ＤＭＦ：                      Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＮＭＰ：                      Ｎ−メチルピロリドン
ＤＩＰＥＡ：                  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン
ＤＣＭ：                      ジクロロメタン
ＭｅＣＮ：                    アセトニトリル
【００３７】
実施例１
【化３】
2016503044.tif 000014
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＦＭＯＣ−Ｐｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９９４．１；観測値９９４．９
【００３８】
実施例２
【化４】
2016503044.tif 000015
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＦＭＯＣ−Ｐｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４４．１；観測値９４４．４
【００３９】
実施例３
【化５】
2016503044.tif 000016
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８５．１；観測値９８６．３
【００４０】
実施例４
【化６】
2016503044.tif 000017
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−β−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８４．５；観測値９８４．９
【００４１】
実施例５
【化７】
2016503044.tif 000018
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８４．５；観測値９８４．９
【００４２】
実施例６
【化８】
2016503044.tif 000019
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９３１．０；観測値９３２．０
【００４３】
実施例７
【化９】
2016503044.tif 000020
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９１４．９；観測値９１５．９
【００４４】
実施例８
【化１０】
2016503044.tif 000021
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．５
【００４５】
実施例９
【化１１】
2016503044.tif 000022
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８０．１；観測値９８１．５
【００４６】
実施例１０
【化１２】
2016503044.tif 000023
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＦＭＯＣ−Ｐｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７０．１；観測値９７０．８
【００４７】
実施例１１
【化１３】
2016503044.tif 000024
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＦＭＯＣ−Ｐｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値１０２０．０；観測値１０２１．０
【００４８】
実施例１２
【化１４】
2016503044.tif 000025
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８５．１；観測値９８５．４
【００４９】
実施例１３
【化１５】
2016503044.tif 000026
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＳＡＲ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４５．１；観測値９４５．４
【００５０】
実施例１４
【化１６】
2016503044.tif 000027
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．５
【００５１】
実施例１５
【化１７】
2016503044.tif 000028
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．３
【００５２】
実施例１６
【化１８】
2016503044.tif 000029
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９０２．９；観測値９０３．８
【００５３】
実施例１７
【化１９】
2016503044.tif 000030
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４４．５；観測値９４５．０
【００５４】
実施例１８
【化２０】
2016503044.tif 000031
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９２８．９；観測値９２９．７
【００５５】
実施例１９
【化２１】
2016503044.tif 000032
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５７．１；観測値９５７．８
【００５６】
実施例２０
【化２２】
2016503044.tif 000033
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５７．１；観測値９５７．９
【００５７】
実施例２１
【化２３】
2016503044.tif 000034
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８６．１；観測値９８６．９
【００５８】
実施例２２
【化２４】
2016503044.tif 000035
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．５
【００５９】
実施例２３
【化２５】
2016503044.tif 000036
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．５
【００６０】
実施例２４
【化２６】
2016503044.tif 000037
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．８
【００６１】
実施例２５
【化２７】
2016503044.tif 000038
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９３２．９；観測値９３３．６
【００６２】
実施例２６
【化２８】
2016503044.tif 000039
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９３１．０；観測値９３１．６．
【００６３】
実施例２７
【化２９】
2016503044.tif 000040
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７９．０；観測値９７９．５
【００６４】
実施例２８
【化３０】
2016503044.tif 000041
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９１８．９；観測値９１９．７
【００６５】
実施例２９
【化３１】
2016503044.tif 000042
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９６０．９；観測値９６２．１
【００６６】
実施例３０
【化３２】
2016503044.tif 000043
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９３２．０；観測値９３２．６
【００６７】
実施例３１
【化３３】
2016503044.tif 000044
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９６０．０；観測値９６０．９
【００６８】
実施例３２
【化３４】
2016503044.tif 000045
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９９５．０；観測値９９６．０
【００６９】
実施例３３
【化３５】
2016503044.tif 000046
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４５．０；観測値９４５．０
【００７０】
実施例３４
【化３６】
2016503044.tif 000047
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９６９．０；観測値９６９．７
【００７１】
実施例３５
【化３７】
2016503044.tif 000048
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９９５．０；観測値９９６．０
【００７２】
実施例３６
【化３８】
2016503044.tif 000049
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５５．１；観測値９８５．１
【００７３】
実施例３７
【化３９】
2016503044.tif 000050
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値８８８．０；観測値８８８．６
【００７４】
実施例３８
【化４０】
2016503044.tif 000051
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値１０１８．１；観測値１０１８．８
【００７５】
実施例３９
【化４１】
2016503044.tif 000052
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８５．１；観測値９８５．６
【００７６】
実施例４０
【化４２】
2016503044.tif 000053
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４５．０；観測値９４５．５
【００７７】
実施例４１
【化４３】
2016503044.tif 000054
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７１．１；観測値９７１．９
【００７８】
実施例４２
【化４４】
2016503044.tif 000055
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９１８．０；観測値９１８．７
【００７９】
実施例４３
【化４５】
2016503044.tif 000056
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＨｏＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５９．１；観測値９５９．９
【００８０】
実施例４４
【化４６】
2016503044.tif 000057
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４５．０；観測値９４４．７
【００８１】
実施例４５
【化４７】
2016503044.tif 000058
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８７．１；観測値９８８．０
【００８２】
実施例４６
【化４８】
2016503044.tif 000059
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＦｌｕｏｒｏＰｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８９．１；観測値９８９．３
【００８３】
実施例４７
【化４９】
2016503044.tif 000060
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｐｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９８５．１；観測値９８５．１
【００８４】
実施例４８
【化５０】
2016503044.tif 000061
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ｃｙＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９４３．０；観測値９４３．１
【００８５】
実施例４９
【化５１】
2016503044.tif 000062
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９１７．０；観測値９１７．８
【００８６】
実施例５０
【化５２】
2016503044.tif 000063
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｚｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５７．０；観測値９５７．１
【００８７】
実施例５１
【化５３】
2016503044.tif 000064
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９５９．１；観測値９５９．７
【００８８】
実施例５２
【化５４】
2016503044.tif 000065
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９０３．０；観測値９０３．２
【００８９】
実施例５３
【化５５】
2016503044.tif 000066
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−２ＡＯＣ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９７３．０；観測値９７３．５
【００９０】
実施例５４
【化５６】
2016503044.tif 000067
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−２ＡＤＣ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値１００１．１；観測値１０００．５
【００９１】
実施例５５
【化５７】
2016503044.tif 000068
以下のアミノ酸を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ、Ｆｍｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９１６．０；観測値９１７．２
【００９２】
材料及び方法
細胞培養及び安定なクローンの生産
ヒトＶ１ａ、ヒトオキシトシン（ＯＴＲ）又はヒトＶ２受容体のいずれかをコードする発現プラスミドを用いて、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をトランスフェクトし、後に、キメラＧｑｓ５ Ｇタンパク質と組み合わせて、シグナルをカルシウムフラックスにリダイレクト（redirect）した。安定な細胞を、ヒトＶ１ａ、ヒトＶ２＋Ｇｑｓ５又はヒトＯＴＲ受容体のいずれかを発現するモノクローナル細胞株を生成するために限界希釈によってクローニングし、受容体活性化後の細胞内カルシウムフラックスを検出する蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ）で検出された機能的反応に基づいて選択した。安定な細胞株を、３７℃で、１０％ＣＯ２インキュベーター中、９５％湿度にて、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン、１％Ｌ−グルタメート、２００ug／mLジェネテシン（Geneticin）を含有するＦ−１２Ｋ栄養混合物（Kaighn改変培地）中で増殖させた。
【００９３】
蛍光イメージング（蛍光イメージングプレートリーダー、ＦＬＩＰＲ）を用いるカルシウムフラックスアッセイ
アッセイ前の午後に、各ウェルの底から細胞検査及び蛍光測定を可能する透明な底を有する黒色の９６ウェルプレートに、細胞を５０，０００細胞／ウェルの密度で播種した。細胞の密度は、次の日にコンフルエントな単層を生成するのに十分であった。２０mM ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）及び２．５mM プロベネシド（アッセイ緩衝液）を含有し、フェノールレッド不含のハンクス（Hanks）平衡塩溶液を、各実験の度に新たに調製した。化合物希釈液を、Beckman Biomek 2000ラボラトリー・オートメーション・ワークステーションを用いて、１％ＤＭＳＯを含むアッセイ緩衝液中で調製した。ダイ−ローディング(dye-loading）緩衝液は、アッセイ緩衝液中、最終濃度２μM Ｆｌｕｏ−４−ＡＭ（ＤＭＳＯ及びプルロニック酸に溶解した）で構成された。既存の培養液をウェルから除去し、ダイ−ローディング緩衝液１００μLを各ウェルに添加し、３７℃で、５％ＣＯ２ インキュベーター中、９５％湿度にて約６０分間インキュベートした。ダイ−ローディングの時点で、細胞をEmbla細胞洗浄機でアッセイ緩衝液を用いて十分に洗浄して、幾分かの取り込まれていない色素を除去した。厳密にアッセイ緩衝液１００μLを各ウェルに残した。
【００９４】
ダイ−ローディング済み細胞を含有する各９６ウェルプレートを、ＦＬＩＰＲ装置中に配置し、弱い基礎蛍光を検出するためにレーザ強度を適切なレベルに設定した。アゴニストとしての化合物を試験するために、希釈した化合物２５μLを、蛍光測定中にプレートに１０秒間加え、そして蛍光反応を５分間記録した。蛍光データは、最大応答を１００％に及び最小応答を０％に設定して、内因性完全アゴニストの用量応答に対して正規化した。以下のように、各アゴニスト濃度−応答曲線を、Microsoft Excel XL Fitで４パラメーターロジスティック方程式を用いて構築した：Ｙ＝最小値＋（（最大値−最小値）／（１＋１０（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）ｎＨ））［式中、ｙは％正規化された蛍光であり、最小値は最小ｙであり、最大値は最大ｙであり、logＥＣ５０は最大誘起蛍光の５０％を産生するlog１０濃度であり、ｘはアゴニスト化合物濃度のlog１０であり、Ｈは曲線の傾き（ヒル係数）である］。最大値はパーセント表示でアゴニスト試験化合物の有効性を示す。最大反応の半分をもたらしたアゴニストの濃度は、ＥＣ５０値によって表され、その対数がｐＥＣ５０値を与えた。
【００９５】
特定のペプチドについての以下のＥＣ５０（nM）及び有効性（％）は、ｈＶ１ａ及びＨＶ２についての比較データと一緒に提供し得る：
【００９６】
【表１】
2016503044.tif 000069
2016503044.tif 000070
【００９７】
式Ｉの化合物及び式Ｉの化合物の薬学的に許容し得る塩は、医薬として、例えば医薬製剤の剤形で使用することができる。医薬製剤は、好ましくは、経皮、鼻腔内、皮下又は静脈内（iv）に投与することができる。
【００９８】
経皮は、活性成分を全身的分布のために皮膚全体に送達する投与経路である。例には、薬送達のために使用される経皮パッチ、及び医療又は美的目的のために使用される経皮インプラントが含まれる。
【００９９】
経鼻投与は、局所的又は全身的効果のいずれかのために薬物を送達するために使用することができ、局所的効果のための鼻スプレーは非常に一般的である。ペプチド薬物は、経口投与後の薬物の分解を回避するために、鼻スプレーとして投与し得る。
【０１００】
皮下注射はまた、ペプチド薬物の投与のために一般的である。筋肉内注射は、筋肉への直接的な物質の注射である。これは、薬剤の投与のためのいくつかの代替方法の１つである。これは、多くの場合、少量で投与される薬剤の特定の形態のために使用される。注射は皮膚の下に与えられるべきである。
【０１０１】
静脈内経路は、静脈内への直接的な液体物質の注入である。他の投与経路と比較して、静脈内経路は、体全体に流体及び薬剤を送達するための最速の方法である。
【０１０２】
医薬製剤は、更に、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、着香剤、浸透圧を変化させる塩、緩衝剤、マスキング剤又は酸化防止剤を含有することができる。これらはまた、更に他の治療上有用な物質を含むことができる。
【０１０３】
式Ｉの化合物又はその薬学的に許容し得る塩及び治療上不活性な担体を含有する医薬もまた、式Ｉの化合物及び／又は薬学的に許容し得る酸付加塩の１種以上と、所望により、他の治療上有用な物質の１種以上とを、治療上不活性な担体の１種以上と共に生薬投与形態にすることを含む製造プロセスと同様に、本発明の目的である。
【０１０４】
本発明による最も好ましい適応症は、中枢神経系の障害を含むものであり、例えば、自閉症、ストレス（外傷後ストレス障害を含む）、不安症（不安障害及びうつ病を含む）、統合失調症、精神障害及び記憶喪失、アルコール禁断、薬物中毒の治療又は予防であり、ならびにプラダー・ウィリー症候群の治療のためである。
【０１０５】
用量は、広い範囲内で変えることができ、当然、それぞれの特定の症例における個別の要求に適合させなければならない。成人用の用量は、一般式Ｉの化合物の１日当たり約０．０１mg〜約１０００mg、又はその薬学的に許容し得る塩の対応する量で変えることができる。１日量を、１回量として又は分割量として投与してよく、加えて、必要性が示される場合、上限を超えることもできる。
【国際調査報告】
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