(57)【要約】本発明は、合成炭水化物および担体分子を含むタンパク質フリーおよびペプチドフリーな複合体を提供し、合成炭水化物は、ストレプトコッカスニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物であり、担体分子は、スフィンゴ糖脂質である。前記複合体およびその医薬組成物は、ストレプトコッカスニューモニエと関連する疾患に対する、より具体的にストレプトコッカスニューモニエ３型と関連する疾患に対する免疫のために有用である。
2016530212.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2016530212.tif 000142
式中、
Ａは、
【化２】
2016530212.tif 000143
であり、
Ｂは、
【化３】
2016530212.tif 000144
であり、
Ｒ１は、
【化４】
2016530212.tif 000145
から選択され、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｚは、−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、または−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−を表し、
Ｘ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−ｓＢｕ、
【化５】
2016530212.tif 000146
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−Ｐｈ、ｓＢｕ、
【化６】
2016530212.tif 000147
から選択され、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−ＣＨ（Ｃ３Ｈ７）−、−ＣＨ（Ｃ４Ｈ９）−、
【化７】
2016530212.tif 000148
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数であり、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−
Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、およびＬ３’’’は互いに独立して−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−ＣＲ９Ｒ１０−、−ＣＲ１１Ｒ１２−、−ＣＲ１３Ｒ１４−、−ＣＲ１５Ｒ１６−、−ＣＲ１７Ｒ１８−、−ＣＲ１９Ｒ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、−ｏ−Ｃ６Ｈ４−、−ｍ−Ｃ６Ｈ４−、−ｐ−Ｃ６Ｈ４−、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−
から選択され、
Ｌ２は、
【化８】
2016530212.tif 000149
から選択され、
Ｅは、
【化９】
2016530212.tif 000150
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ５Ｈ１１、−Ｐｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、および−ＣＦ３から選択され、
Ｒ９〜Ｒ２０は、互いに独立して、−Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ３Ｈ７、シクロ−Ｃ３Ｈ５、シクロ−Ｃ４Ｈ７、シクロ−Ｃ５Ｈ９、シクロ−Ｃ６Ｈ１１、シクロ−Ｃ７Ｈ１３、シクロ−Ｃ８Ｈ１５、−Ｐｈ、−ＣＨ２−Ｐｈ、−ＣＰｈ３、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ４Ｈ９、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ（ＣＨ３）３、−Ｃ５Ｈ１１、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）２、−Ｃ２Ｈ４−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ３Ｈ６−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ４Ｈ９、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ（ＣＨ３）２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（ＣＨ３）３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ６Ｈ４−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＯＣＨ３を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表し、
ｍ、ｎ、ｏ、およびｐは、互いに独立して、１〜１０の整数を表す、
一般式（Ｉ）の複合体、およびエナンチオマー、立体異性体形、エナンチオマーの混合物、アノマー、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、互変異性体、水和物、溶媒和物、および上記化合物のラセミ体、並びにそれらの薬学的に許容できる塩。
【請求項２】
一般式（Ｉ−Ａ）
【化１０】
2016530212.tif 000151
式中、
Ａは、
【化１１】
2016530212.tif 000152
であり、
Ｂは、
【化１２】
2016530212.tif 000153
であり、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｚは、−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｓ−ＣＨ２−、または−ＣＨ２−ＣＨ２−を表し、
Ｘ４は、−Ｈ、または
【化１３】
2016530212.tif 000154
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、または−Ｐｈを表し、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３は、互いに独立して、−ＣＨ２−、
【化１４】
2016530212.tif 000155
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、Ｌ３’’’は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、
から選択され、
Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−、
【化１５】
2016530212.tif 000156
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
ｎおよびｏは、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す、
一般式（Ｉ−Ａ）である請求項１に記載の複合体。
【請求項３】
一般式（Ｉ−Ｂ）
【化１６】
2016530212.tif 000157
式中、
Ａは、
【化１７】
2016530212.tif 000158
であり、
Ｂは、
【化１８】
2016530212.tif 000159
であり、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｘ４は、−Ｈ、または
【化１９】
2016530212.tif 000160
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、または−Ｐｈを表し、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、互いに独立して、−ＣＨ２−、および
【化２０】
2016530212.tif 000161
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、Ｌ３’’’は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、
から選択され、
Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−、
【化２１】
2016530212.tif 000162
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
ｎは、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す、
一般式（Ｉ−Ｂ）である請求項１または請求項２に記載の複合体。
【請求項４】
Ｒ３は−Ｈであり、Ｒ４は−ＯＨである、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項５】
一般式（Ｉ−Ｃ）
【化２２】
2016530212.tif 000163
式中、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｘ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、または、ｓＢｕ、
【化２３】
2016530212.tif 000164
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−Ｐｈ、ｓＢｕから選択され、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３は、互いに独立して、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−ＣＨ（Ｃ３Ｈ７）−、−ＣＨ（Ｃ４Ｈ９）−、
【化２４】
2016530212.tif 000165
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１、ｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、Ｌ３’’’は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−ＣＲ９Ｒ１０−、−ＣＲ１１Ｒ１２−、−ＣＲ１３Ｒ１４−、−ＣＲ１５Ｒ１６−、−ＣＲ１７Ｒ１８−、−ＣＲ１９Ｒ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（
ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、−ｏ−Ｃ６Ｈ４−、−ｍ−Ｃ６Ｈ４−、−ｐ−Ｃ６Ｈ４−、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
Ｒ９〜Ｒ２０は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７を表し、
ｏは、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す、
一般式（Ｉ−Ｃ）である請求項１に記載の複合体。
【請求項６】
Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【化２５】
2016530212.tif 000166
から選択され、およびＲ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択される、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項７】
Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈ、から選択される、請求項１〜請求項６のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項８】
−Ｌ１−および−Ｌ３−は、互いに独立して、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−
、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される、請求項１〜請求項７のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項９】
薬において薬学的活性剤としての使用のための請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１０】
ヒトおよび／または動物宿主における防御免疫反応を高めることに用いるための請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１１】
ストレプトコッカスニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）３型と関連する疾患の予防および／または治療に用いるための請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１２】
ストレプトコッカスニューモニエ３型と関連する前記疾患は、肺炎、髄膜炎、中耳炎、菌血症、並びに、慢性気管支炎、副鼻腔炎、関節炎および結膜炎の急激な悪化から選択される、請求項１１に記載の複合体。
【請求項１３】
少なくとも一つの薬学的に許容できる担体、賦形剤、および／または希釈剤と共に請求項１〜請求項１２のいずれか一項に記載の複合体を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、合成炭水化物および担体分子を含むタンパク質フリーな、およびペプチドフリーな複合体を提供し、合成炭水化物は、ストレプトコッカス  ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物であり、担体分子は、スフィンゴ糖脂質である。前記複合体およびその医薬組成物は、ストレプトコッカス  ニューモニエと関連する疾患の、より具体的にストレプトコッカス  ニューモニエ３型と関連する疾患の予防および／または治療のために有用である。
［発明の背景］
ワクチン接種は、ヒトの健康を改善するための強力なツールである。免疫システムの教育に貢献することによって、ワクチン接種は、細菌のような病原体によって引き起こされる感染症に対する戦いの先駆けとなっている。
【０００２】
ストレプトコッカス  ニューモニエは、グラム陽性細菌であり、侵襲性疾患を引き起こす主な病原体の一つである。ストレプトコッカス  ニューモニエの９０個の血清型が、オリゴサッカライドユニットを繰り返すポリマーからなるストレプトコッカス  ニューモニエのコア莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）構造の違いに基づいて同定されており、コア莢膜ポリサッカライドは、細菌の病原因子である。ストレプトコッカス  ニューモニエ３型（ＳＰ３）は、単離されたＣＰＳからなる現在の肺炎球菌ワクチン（ＰＰＶ−２３価およびＰＣＶ−１３価）の一部である。ＳＰ３の莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）は、［→３）−β−Ｄ−ＧｌｃｐＡ−（１→４）−β−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→］繰り返しユニットからなる。市販の２３−価肺炎球菌ポリサッカライドワクチン（ＰＰＶ）は、２３血清型の精製された莢膜ポリサッカライド（ＣＰＳ）抗原を含む。しかしながら、このワクチンは、乳児および幼児の場合では効果的ではない。ＰＣＶ−１３は、ＣＲＭ１９７のようなタンパク質に共有結合される１３個の異なるＳ．ニューモニエ血清型の精製ポリサッカライドを含む免疫原性複合体を含む。
【０００３】
現在市販されているワクチンは、北アメリカおよびヨーロッパにおいて特定の年齢の個人に効果的である。これらのワクチンの製造過程は、複雑であり結果として高価になる。したがって、ワクチンは、ほとんどの発展途上国には手が届かない。
【０００４】
スフィンゴ糖脂質α−ガラクトシルセラミドは、ＫＲＮ７０００としても知られており、海綿で発見される糖脂質の合成誘導体であり、マウスの全身腫瘍組織量を低下させる免疫活性化剤として同定される。このスフィンゴ糖脂質は、抗原提示細胞（ＡＰＣｓ）によって、タンパク質ＣＤ１ｄにこのスフィンゴ糖脂質をロードすることにより、提示されることが知られている。糖脂質と共にロードされた後、ＣＤ１ｄは、インバリアントナチュラルキラーＴ細胞（ｉＮＫＴ細胞）のインバリアントＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と相互作用し、結果的にｉＮＫＴ細胞の活性化、ｉＮＫＴ細胞集団の拡大、および多量のサイトカイン分泌につながるだろう。ｉＮＫＴ細胞を刺激することが可能な種々のα−ガラクトシルセラミドアナログは、文献に記述された（Ｘ．Ｌｉｅ  ｅｔ  ａｌ．ＰＮＡＳ２０１０，１０７，２９，１３０１０−１３０１５）。また、αＧａｌＣｅｒまたはアナログは、ワクチンアジュバントとしてたくさんの文脈において調査されている（ＵＳ  ７７７１７２６  Ｂ２；ＷＯ２００６０２７６８５  Ａ２）。Ｌ．Ｂａｉ  ｅｔ  ａｌ．ＰＮＡＳ，２０１３，１１０，４０，１６０９７−１６１０２は、ＳＰ１４の肺炎球菌莢膜ポリサッカライドに対するＩｇＭおよびＩｇＧ力価の上昇が、ジアシルグリセロールおよびＮＫＴリガンドＰＢＳ５７に連結されるＳ．ニューモニエ莢膜ポリサッカライド血清型１４のリポ
ソーム共発現テトラサッカライド繰り返しユニットを用いてマウスに免疫性を与えることによって生じることを開示する。ＷＯ２００７／０５１００４  Ａ２は、ガラクトース部分のＣ２位でリンカーを介してｐ−ヒドロキシ−ｍ−ニトロフェニル抗原（ＮＰ−α−ＧａｌＣｅｒ）に共役されるα−ガラクトシルセラミドを含む共役体を提供する。前記共役体を用いてのマウスの免疫付与は、ＮＰ特異的な強い抗体応答を刺激した。我々の知識の限りでは、研究は、定義された長さのサッカライド抗原に共有結合するスフィンゴ糖脂質に重点を置かれていない。
【０００５】
本発明の目的は、スフィンゴ糖脂質に共有結合される定義された長さのストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物を含む一般式（Ｉ）のペプチドフリーおよびタンパク質フリー完全合成複合体、およびその医薬組成物を提供することであり、ストレプトコッカス  ニューモニエと関連する疾患、より具体的にストレプトコッカス  ニューモニエ３型と関連する疾患の予防および／または治療のために有用である。前記複合体およびその組成物は、熱抵抗性または熱安定性である。前記複合体を用いての免疫付与は、ＳＰ３の肺炎球菌莢膜ポリサッカライドに対して抗体の高い力価の産生をもたらす。抗体は、オプソニン化貪食作用および殺菌活性を表す。
【０００６】
本発明の目的は、独立請求項の教示によって解決される。本発明のさらに有利な特徴、態様および詳細は、本出願における独立請求項、明細書、図面および実施例から明らかである。
［発明の説明］
本発明は、下記一般式（Ｉ）
【０００７】
【化１】
2016530212.tif 000003
【０００８】
式中、
Ａは、
【０００９】
【化２】
2016530212.tif 000004
【００１０】
であり、
Ｂは、
【００１１】
【化３】
2016530212.tif 000005
【００１２】
であり、
Ｒ１は、
【００１３】
【化４】
2016530212.tif 000006
【００１４】
から選択され、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｚは、−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、または−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−を表し、
Ｘ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−ｓＢｕ、
【００１５】
【化５】
2016530212.tif 000007
【００１６】
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−Ｐｈ、ｓＢｕ、
【００１７】
【化６】
2016530212.tif 000008
【００１８】
から選択され、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−ＣＨ（Ｃ３Ｈ７）−、−ＣＨ（Ｃ４Ｈ９）−、
【００１９】
【化７】
2016530212.tif 000009
【００２０】
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、およびＬ３’’’は互いに独立して
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−ＣＲ９Ｒ１０−、−ＣＲ１１Ｒ１２−、−ＣＲ１３Ｒ１４−、−ＣＲ１５Ｒ１６−、−ＣＲ１７Ｒ１８−、−ＣＲ１９Ｒ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、−ｏ−Ｃ６Ｈ４−、−ｍ−Ｃ６Ｈ４−、−ｐ−Ｃ６Ｈ４−、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−
から選択され；
Ｌ２は、
【００２１】
【化８】
2016530212.tif 000010
【００２２】
から選択され；
Ｅは、
【００２３】
【化９】
2016530212.tif 000011
【００２４】
から選択され；
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ５Ｈ１１、−Ｐｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＣＦ３から選択され；
Ｒ９〜Ｒ２０は、互いに独立して、−Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣ３Ｈ７、シクロ−Ｃ３Ｈ５、シクロ−Ｃ４Ｈ７、シクロ−Ｃ５Ｈ９、シクロ−Ｃ６Ｈ１１、シクロ−Ｃ７Ｈ１３、シクロ−Ｃ８Ｈ１５、−Ｐｈ、−ＣＨ２−Ｐｈ、−ＣＰｈ３、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ４Ｈ９、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ（ＣＨ３）３、−Ｃ５Ｈ１１、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）２、−Ｃ２Ｈ４−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ６Ｈ１３、−Ｃ３Ｈ６−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ４Ｈ９、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ（ＣＨ３）２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（ＣＨ３）３、−Ｃ７Ｈ１５、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ６Ｈ４−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＯＣＨ３を表し；
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表し；
ｍ、ｎ、ｏ、およびｐは、互いに独立して、１〜１０の整数を表す、
一般式（Ｉ）の完全合成複合体、およびエナンチオマー、立体異性体形、エナンチオマーの混合物、アノマー、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、互変異性体、水和物、溶媒和物、および上記化合物のラセミ体、並びにそれらの薬学的に許容できる塩を提供する。
【００２５】
本発明の化合物は、酸置換基を有し、有機また無機塩基を用いて塩を形成してもよい。
適切な無機塩、または有機塩の例は、例えば、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮＨ４ＯＨ、水酸化テトラアルキルアンモニウム、リジンまたはアルギニン等である。塩は、当技術分野で公知の方法を用いて従来の方法で、例えば、一般式Ｉの複合体を有する溶液を、上述の群から選択される塩基の溶液と処理することによって、調製されてもよい。
【００２６】
一般式（Ｉ）の複合体は、−Ｏ−Ｏ−結合、および、または糖断片のアノマー炭素またはＣ−１炭素を介して、互いに連結されるまたは結合される糖断片（Ａ，Ｂ）を含んでいないということは、炭水化物化学分野の当業者にとって明らかである。
【００２７】
驚くべきことに、スフィンゴ糖脂質の糖部分のＣ−６位における定義された長さのＳＰ３莢膜ポリサッカライド関連炭水化物を表す一般式（Ｉ）の複合体は、ヒトおよび／または宿主動物においてＳＰ３細菌に対する防御免疫応答を提供することができることを明らかにした。ＳＰ３細菌に対する前記防御免疫応答は、スフィンゴ糖脂質の糖部分の２位、３位、または４位におけるＳＰ３莢膜ポリサッカライド関連炭水化物を表す複合体を用いる免疫付与によって引き起こすことはできない。
【００２８】
さらに、一般式（Ｉ）の複合体は、マウス血清においてＩｇＧ応答を引き起こすことができ、同じＳＰ３莢膜ポリサッカライド関連炭水化物を表す対応するＣＲＭ１９７複合体よりも、反応速度に関して、ならびＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ３産生の両方に関して優れている。一般式（Ｉ）の複合体によって引き起こされる抗体は、天然のＳＰ３ポリサッカライドと交差反応するので、これらの抗体の能力は、Ｓ．ニューモニエ血清型３細菌に結合し、肺炎球菌感染に対する防御を与えることを示す。
【００２９】
一般式（Ｉ）の複合体は、完全合成体であり、すなわち、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連の定義された長さの炭水化物およびスフィンゴ糖脂質は共に合成的にアクセスされる。完全合成体ＳＰ３莢膜ポリサッカライド関連山水化物は、ほとんどの免疫原性エピトープの同定およびあるバッチから他のバッチへ抗体応答の再現性を可能にした。これらの達成を、微不均一性問題のために天然源から単離されたＳＰ３莢膜ポリサッカライドを用いることによっては完了することはできない。
【００３０】
本発明に係る好ましい実施形態は、一般式Ｉの複合体に関し、式中、ｎ１は０であり、ｎ３は１である。したがって、下記一般式ＩＶが特に好ましく、
【００３１】
【化１０】
2016530212.tif 000012
【００３２】
式中、
Ａは、
【００３３】
【化１１】
2016530212.tif 000013
【００３４】
であり、
Ｂは、
【００３５】
【化１２】
2016530212.tif 000014
【００３６】
であり、および
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｚ、Ｌ、およびｎ２は、本願で定義される意味を有する。
本発明の他の実施形態は、一般式Ｉの複合体に関し、式中、ｎ１は１であり、ｎ３は０または１である。したがって、下記一般式ＶおよびＶＩの複合体も好ましく、下記一般式ＶおよびＶＩの式中、Ａ、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｚ、およびｎ２は、本願で定義される意味を有する。
【００３７】
【化１３】
2016530212.tif 000015
【００３８】
本発明のさらにより好ましい実施形態は、一般式Ｉの複合体に関し、式中、ｎ１およびｎ３は０である。したがって、本発明の特に好ましい実施形態は、下記一般式ＶＩＩの複合体に関し、下記一般式ＶＩＩの式中、Ａ、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｚ、およびｎ２は、本願で定義される意味を有する。
【００３９】
【化１４】
2016530212.tif 000016
【００４０】
本発明に係る複合体は、スフィンゴ糖脂質に共有結合される、または連結されるストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物を含む。好ましくは、本発明におけるスフィンゴ糖脂質は、糖部分としてα−ガラクトシドを含む。したがって、本発明の更なる実施形態は、下記一般式ＶＩＩＩの複合体に関し、
【００４１】
【化１５】
2016530212.tif 000017
【００４２】
式中、Ａ、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｚ、ｎ１、ｎ２およびｎ３は、本願で定義される意味を有する。
一般式ＩＶ、Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩの複合体が、特に好ましく、式中、Ｒ３は−Ｈ、およびＲ４は−ＯＨである。
【００４３】
更なる実施形態は、一般式Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩおよびＶＩＩの複合体に関し、式中、Ｒ３は−ＯＨ、およびＲ４は−Ｈであり、言い換えるとスフィンゴ糖脂質は、糖部分としてα−グルコシドを表す。
【００４４】
好ましくは、Ｚ残基は、−Ｏ−ＣＨ２−、または−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−から選択され；および
Ｒ１残基は、
【００４５】
【化１６】
2016530212.tif 000018
【００４６】
を表し、式中、
Ｒ５は、本願に定義される意味を有する。
さらに他の好ましい実施形態において、残基Ｚは、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、または−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−を表す。
【００４７】
本発明に係る他の特に好ましい複合体は、下記一般式ＩＸの複合体であり、
【００４８】
【化１７】
2016530212.tif 000019
【００４９】
式中、Ａ、Ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｚ、ｎ１、ｎ２およびｎ３は、本願で定義される意味を有する。
ストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物は、一般式−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−のリンカーＬを介してスフィンゴ糖脂質に連結され、式中、Ｌ２残基は、好ましくは、
【００５０】
【化１８】
2016530212.tif 000020
【００５１】
から選択され、ｍおよびｎは互いに独立して１〜１０の整数である。
好ましくは、Ｘ４残基は、
【００５２】
【化１９】
2016530212.tif 000021
【００５３】
から選択され、
Ｙ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、または−Ｐｈから選択され、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３残基は、互いに独立して、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−ＣＨ（Ｃ３Ｈ７）−、−ＣＨ（Ｃ４Ｈ９）−、
【００５４】
【化２０】
2016530212.tif 000022
【００５５】
から選択され、
式中、置換基Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ５Ｈ１１、−Ｐｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉから選択される。
【００５６】
より好ましくは、置換基Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、および−Ｉから選択される。
好ましくは、一般式（Ｉ）のＲ２における−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−鎖は、最大２５個の炭素原子を含む。したがって、一般式（Ｉ）のＲ２における−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−鎖は、好ましくは、５〜２５個の炭素原子、より好ましくは、７〜２５個の炭素原子、およびさらにより好ましくは９〜２５個の炭素原子を含む。
【００５７】
好ましくは、一般式（Ｉ）のＲ５における鎖−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−は、最大１４個の炭素原子を含む。
本発明の実施形態は、下記一般式（Ｉ−Ａ）である複合体に関し、
【００５８】
【化２１】
2016530212.tif 000023
【００５９】
式中、
Ａは、
【００６０】
【化２２】
2016530212.tif 000024
【００６１】
であり、
Ｂは、
【００６２】
【化２３】
2016530212.tif 000025
【００６３】
であり、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｚは、−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｓ−ＣＨ２−、または−ＣＨ２−ＣＨ２−を表し、
Ｘ４は、−Ｈ、または
【００６４】
【化２４】
2016530212.tif 000026
【００６５】
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、または−Ｐｈを表し、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、
【００６６】
【化２５】
2016530212.tif 000027
【００６７】
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、およびＬ３’’’は互いに独立して
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−から選択され、
Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−，
【００６８】
【化２６】
2016530212.tif 000028
【００６９】
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
ｎおよびｏは、互いに独立して、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す。
【００７０】
好ましくは、一般式（Ｉ−Ａ）のＲ２における−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−鎖は、最大２５個の炭素原子を含み、一般式（Ｉ）のＲ５における−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−鎖は、最大１４個の炭素原子を含む。
【００７１】
下記一般式（Ｉ−Ｂ）である複合体も好ましく、
【００７２】
【化２７】
2016530212.tif 000029
【００７３】
式中、
Ａは、
【００７４】
【化２８】
2016530212.tif 000030
【００７５】
であり、
Ｂは、
【００７６】
【化２９】
2016530212.tif 000031
【００７７】
であり、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ３およびＲ４は、−Ｈおよび−ＯＨから選択され、同時に−Ｈまたは−ＯＨであることはできず、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｘ４は、−Ｈ、または
【００７８】
【化３０】
2016530212.tif 000032
【００７９】
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、または−Ｐｈを表し、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、および
【００８０】
【化３１】
2016530212.tif 000033
【００８１】
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌは、−Ｌ１−ＮＨ−Ｌ２−ＮＨ−Ｌ３−を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、およびＬ３’’’は互いに独立して
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、から選択され、
Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−，
【００８２】
【化３２】
2016530212.tif 000034
【００８３】
から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
ｎは、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す。
【００８４】
好ましくは、残基Ｒ３は、−Ｈを表し、残基Ｒ４は、−ＯＨを表す。したがって、一般式（ＶＩＩＩ）の複合体が好ましい。一般式（Ｉ−Ａ）、または（Ｉ−Ｂ）の複合体も好ましく、式中、Ｒ３は、−Ｈを表し、残基Ｒ４は、−ＯＨを表す。
【００８５】
本発明に係る他の好ましい複合体は、下記一般式（Ｉ−Ｃ）の複合体であり、
【００８６】
【化３３】
2016530212.tif 000035
【００８７】
式中、
Ｒ２は、−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−Ｘ４であり、
Ｒ５は、−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−Ｙ４であり、
Ｘ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−ｓＢｕ、
【００８８】
【化３４】
2016530212.tif 000036
【００８９】
を表し、
Ｙ４は、−Ｈ、−ｉＰｒ、−ｔＢｕ、−ｓＢｕを表し、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ１、Ｙ２、およびＹ３は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）−、−ＣＨ（Ｃ３Ｈ７）−、−ＣＨ（Ｃ４Ｈ９）−、
【００９０】
【化３５】
2016530212.tif 000037
【００９１】
から選択され、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｌ１は、−Ｌ１’−Ｌ１’’−Ｌ１’’’−、または−Ｌ１’−Ｌ１’’’−、または
−Ｌ１’−を表し、および
Ｌ３は、−Ｌ３’−Ｌ３’’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−Ｌ３’’’−、または−Ｌ３’−を表し、および
Ｌ１’、Ｌ１’’、Ｌ１’’’、Ｌ３’、Ｌ３’’、およびＬ３’’’は、互いに独立して、
−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、−Ｃ６Ｈ１２−、−Ｃ７Ｈ１４−、−Ｃ８Ｈ１６−、−Ｃ９Ｈ１８−、−Ｃ１０Ｈ２０−、−ＣＲ９Ｒ１０−、−ＣＲ１１Ｒ１２−、−ＣＲ１３Ｒ１４−、−ＣＲ１５Ｒ１６−、−ＣＲ１７Ｒ１８−、−ＣＲ１９Ｒ２０−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｏ−ＣＨ２−、−ｏ−Ｃ６Ｈ４−、−ｍ−Ｃ６Ｈ４−、−ｐ−Ｃ６Ｈ４−、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−から選択され、
Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
Ｒ９〜Ｒ２０は、互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７を表し、
ｏは、１、２、３、４、５、および６から選択される整数を表し、
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から選択される整数であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３、ｍ１、ｍ２、およびｍ３は、互いに独立して、０〜１０の整数を表す。
【００９２】
好ましくは、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）のＲ２における−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−鎖は、最大２５個の炭素原子を含む。したがって、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）のＲ２における−（Ｘ１）ｐ１−（Ｘ２）ｐ２−（Ｘ３）ｐ３−鎖は、好ましくは、５〜２５個の炭素原子、より好ましくは、７〜２５個の炭素原子、およびさらにより好ましくは９〜２５個の炭素原子を含む。
【００９３】
好ましくは、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）のＲ５における−（Ｙ１）ｍ１−（Ｙ２）ｍ２−（Ｙ３）ｍ３−鎖は、最大１４個の炭素原子を含む。
【００９４】
好ましくは、残基Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【００９５】
【化３６】
2016530212.tif 000038
【００９６】
から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択される。
【００９７】
したがって、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）である複合体が特に好ましく、式中、残基Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【００９８】
【化３７】
2016530212.tif 000039
【００９９】
から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択される。
【０１００】
残基Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈ、から選択されても好ましい。
【０１０１】
したがって、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）である複合体も好ましく、式中、残基Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈから選択される。
【０１０２】
特に好ましくは、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）である複合体であり、式中、残基Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈから選択され、
および残基Ｒ２は、Ｒ６が、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−Ｃ
Ｆ３から選択されることを伴って、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【０１０３】
【化３８】
2016530212.tif 000040
【０１０４】
から選択される。
本発明における特に好ましい複合体は、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される互いに独立した断片−Ｌ１−および−Ｌ３−を有する。したがって、式中、断片−Ｌ１−および−Ｌ３−が、互いに独立して、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される、一般式（Ｉ）、（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）である複合体が特に好ましい。
【０１０５】
特に好ましい複合体は、下記一般式（Ｉ−Ｄ）である複合体であり、
【０１０６】
【化３９】
2016530212.tif 000041
【０１０７】
式中、
ｎ２は、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【０１０８】
【化４０】
2016530212.tif 000042
【０１０９】
から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐ
ｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈから選択され、
−Ｌ１−および−Ｌ３−は、互いに独立して、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される。
【０１１０】
下記一般式（Ｉ−Ｅ）である複合体も好ましく、
【０１１１】
【化４１】
2016530212.tif 000043
【０１１２】
式中、
ｎ２は、１、２、３、および４から選択される整数であり、
ｎ１およびｎ３は、互いに独立して０および１から選択される整数を表し、
Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、
【０１１３】
【化４２】
2016530212.tif 000044
【０１１４】
から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、
Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈから選択され、
−Ｌ１−および−Ｌ３−は、互いに独立して、−ＣＨ２−、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される。
【０１１５】
一般式（Ｉ−Ｅ）において、好ましくは、ｎ２は２を表し、
Ｒ２は、−（ＣＨ２）２４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）２０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３から選択され、
Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３から選択され、
−Ｌ１−は、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−から選択され、
−Ｌ３−は、−Ｃ２Ｈ４−、−Ｃ３Ｈ６−、−Ｃ４Ｈ８−、−Ｃ５Ｈ１０−、および−Ｃ６Ｈ１２−から選択される。
【０１１６】
また、好ましくは、一般式（Ｉ−Ｅ）において、
Ｒ２は、
【０１１７】
【化４３】
2016530212.tif 000045
【０１１８】
から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＯＣＨ３、および−ＣＦ３から選択され、および
Ｒ５は、−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１２−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３、−（ＣＨ２）９−ＣＨ３、−（ＣＨ２）８−ＣＨ３、−（ＣＨ２）７−ＣＨ３、−（ＣＨ２）６−ＣＨ３、−（ＣＨ２）５−ＣＨ３、−（ＣＨ２）４−ＣＨ３から選択される。
【０１１９】
一般式（Ｉ−Ｅ）の式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）２−Ｐｈ、−（ＣＨ２）３−Ｐｈ、−（ＣＨ２）４−Ｐｈ、−（ＣＨ２）５−Ｐｈ、−（ＣＨ２）６−Ｐｈ、−（ＣＨ２）７−Ｐｈ、−（ＣＨ２）８−Ｐｈ、−（ＣＨ２）９−Ｐｈから選択される、一般式（Ｉ−Ｅ）である複合体も好ましい。
【０１２０】
好ましくは、本発明における複合体は、
【０１２１】
【化４４−１】
2016530212.tif 000046
【０１２２】
【化４４−２】
2016530212.tif 000047
【０１２３】
【化４４−３】
2016530212.tif 000048
【０１２４】
【化４４−４】
2016530212.tif 000049
【０１２５】
【化４４−５】
2016530212.tif 000050
【０１２６】
【化４４−６】
2016530212.tif 000051
【０１２７】
【化４４−７】
2016530212.tif 000052
【０１２８】
【化４４−８】
2016530212.tif 000053
【０１２９】
【化４４−９】
2016530212.tif 000054
【０１３０】
【化４４−１０】
2016530212.tif 000055
【０１３１】
【化４４−１１】
2016530212.tif 000056
【０１３２】
【化４４−１２】
2016530212.tif 000057
【０１３３】
【化４４−１３】
2016530212.tif 000058
【０１３４】
【化４４−１４】
2016530212.tif 000059
【０１３５】
【化４４−１５】
2016530212.tif 000060
【０１３６】
【化４４−１６】
2016530212.tif 000061
【０１３７】
から選択される。
本発明の他の態様は、薬として、すなわち薬物において適用できる薬学的な活性剤としての本発明の複合体の使用に関する。
【０１３８】
驚くべきことに、本発明の新規な複合体は、ヒトおよび／または宿主動物において防御免疫応答を高めるためにも適しているので、ストレプトコッカス  ニューモニエ、特にストレプトコッカス  ニューモニエ３型と関連する疾患に対する保護のために適切であるということがわかった。したがって、本願で開示される本発明の複合体は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型と関連する疾患の予防または治療に有用である。当該疾患は、制限されないが、肺炎、髄膜炎、中耳炎、菌血症並びに慢性気管支炎、副鼻腔炎、関節炎および結膜炎の急性憎悪を含む。さらに、本発明の新規複合体を用いての動物の治療は、免疫グロブリンＩｇＧアイソタイプの形成につながることを明らかにし、そのことは生体における記憶Ｂ細胞の発生を証明する。記憶Ｂ細胞の存在は、免疫学的記憶を示す。したがって、本発明の複合体は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型に対して宿主動物における長期間の保護を誘導することができることが明らかにされている。記述される免疫付与は、更なるアジュバントに対してさらに独立しており、任意のタンパク質担体およびワクチンの冷凍を必要としない。
【０１３９】
したがって、本発明に係る複合体は、薬物において適用できる薬理学的な活性剤としての使用、特に、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型に起因するまたは関連する疾患に対するワクチン接種においての使用のために適している。
【０１４０】
本発明の他の態様は、活性成分として少なくとも一つの本発明の複合体を、少なくとも一つの薬学的に許容できる担体、賦形剤および／または希釈剤と共に含む医薬組成物に関する。本発明の医薬組成物は、従来の固体もしくは液体担体、または希釈剤を用いて公知の方法で適切な用量レベルで調製されることができる。好ましい調製物は、経口適用に適している。これらの投与可能形態は、例えば、ピル、錠剤、フィルム錠剤、被覆錠剤、カプセル、粉末および沈殿物を含む。
【０１４１】
さらに、本発明は、皮膚、皮内、胃内、皮内（ｉｎｔｒａｃｕｔａｎ）、血管内、静脈、筋肉内、腹膜内、鼻腔内、膣内、頬内、経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎ）、直腸、皮下、舌下、局所、または経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）適用を含む非経口適用のための医薬調製物も含み、医薬調製物は、典型的なビヒクルおよび／または希釈剤に加えて、活性成分として、本発明に係る少なくとも一つの化合物および／またはその薬学的に許容できる塩を含む。
【０１４２】
活性成分として、本発明に係る少なくとも一つの化合物および／またはその薬学的に許容できる塩を含む本発明に係る医薬組成物を、意図された投与形態、すなわち経口投与のための錠剤、カプセル（固体充填、半固体充填、または液体充填のいずれか）、構成のための粉末、押出成形物、沈殿物、ゲル、エリキシル、粉末顆粒、シロップ、懸濁液などについて選択された適切な担体材料と混合して、従来の薬務と一致して典型的に投与するだろう。例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与のために、活性薬物成分を、ラクトース、デンプン、スクロース、セルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、タルク、マンニトール、エチルアルコール（液体充填カプセル）などのような、任意の経口非毒性の薬学的に許容できる担体と、好ましくは不活性担体と組み合わせてもよい。さらに、適切な結合剤、潤滑剤、崩壊剤、および着色剤を、錠剤またはカプセル中に含んでもよい。粉末および錠剤は、活性成分として、約５〜約９５％のベンゾチオフェン−１，１−ジオキシド由来化合物および／またはその各薬学的に許容できる塩を含んでもよい。
【０１４３】
適切な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖、コーン甘味料、アカシアのような天然および合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチル−セルロース、ポリエチレングルコールおよびワックスを含む。適切な潤滑剤のうち、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを述べられ得る。適切な崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、グアーゴムなどを含む。甘味料および着香料および保存料を、適切な場合に含んでもよい。崩壊剤、希釈剤、潤滑剤、結合剤などは、下記により詳細に論じられる。
【０１４４】
さらに、本発明の医薬組成物は、治療効果を最適化するために任意の一つ以上の構成成分、または活性成分の速度制御された放出を提供するために持続放出形態で製剤化されてもよい。持続放出のための適切な投与形態は、変動する崩壊速度の層、または活性成分をしみ込ませた制御された放出ポリマーマトリックスを有し、および当該しみ込ませた、またはカプセル化されたポーラスポリマーマトリックスを含む錠剤形態、またはカプセルで形成された錠剤を含む。
【０１４５】
液体形態調製物は、溶液、懸濁液、およびエマルションを含む。例として、液体形態調製物としては、水、または非経口注射液のための水／プロピレングリコール溶液、または経口溶液のための甘味料および乳白剤の付加、懸濁液、およびエマルションが挙げられる。。液体形態調製物は、鼻腔内投与のための溶液も含んでもよい。吸入のために適切なエアロゾル調製物は、溶液および粉末形態のための固体を含んでもよく、それらは、例えば、窒素などの不活性圧縮ガスのような薬学的に許容できる担体と組み合わせて存在してもよい。坐薬を調製するために、ココアバターのように脂肪酸グリセリドの混合物のような低融点の脂質またはワックスが最初に溶解され、その後、活性成分は、例えば撹拌などによって、その中で均一に分散される。溶解された均一な混合物を、その後、好都合な大きさの型に注ぎ、冷却させて、それによって凝固させる。
【０１４６】
固体形態調製物も含まれ、使用するすぐ前に、経口または非経口投与のいずれかのために、液体形態調製物に変換されることを意図される。当該液体形態は、溶液、懸濁液、およびエマルションを含む。
【０１４７】
本発明に係る複合体は、経皮的に輸送されてもよい。経皮組成物は、クリーム、ローション、エアロゾル、および／またはエマルションの形態を有してもよく、この目的のために従来の技術であるように、マトリックス型またはリザボア型の経皮パッチに含まれてもよい。
【０１４８】
本願に列挙されるように、用語カプセルは、活性成分を含む組成物を保持し、または含むための、例えばメチルセルロース、ポリビニルアルコール、または変性ゼラチンまたは変性デンプンから作られる特別な容器またはエンクロージャに関する。殻の固いカプセルは、典型的に、骨および豚皮からの比較的高いゲル強度ゼラチンの混合物から作られる。カプセル自体は、少量の染色料、オペーク剤、可塑剤、および／または保存剤を含んでもよい。錠剤において、適切な希釈剤と共に、活性成分を含む圧縮された、または型で作られた固体投与形態であると理解される。錠剤を、当業者によく知られている湿式造粒によって、乾式造粒によって、または圧縮によって得られる混合物または顆粒の圧縮によって調製してもよい。
【０１４９】
経口ゲルは、親水性の半固体マトリックスに分散された、または可溶化された活性成分に関する。構成のための粉末は、活性成分および適切な希釈剤を含む粉末混合物に関し、粉末混合物は例えば水またはジュース中に懸濁されることができる。
【０１５０】
適切な希釈剤は、組成物または投与形態の大部分を通常占める物質である。適切な希釈
剤は、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトールのような糖、小麦、コーンライス、およびポテト由来のデンプン、並びに微結晶性セルロースのようなセルロースを含む。組成における希釈剤の量は、全組成物の約５〜約９５重量％、好ましくは約２５〜約７５重量％、より好ましくは約３０〜約６０重量％の範囲であることができる。
【０１５１】
用語崩壊剤は、粉々にする（崩壊する）、および薬剤における薬学的活性成分を放出することを助けるために組成物に添加される材料に関する。適切な崩壊剤は、デンプン、カルボキシメチルデンプンナトリウムのような「冷水可溶化」修飾デンプン、ローカストビーン、カラヤ、グアー、トラガカント、およびアガーのような天然および合成ガム、メチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウムのようなクロスリンクされた微結晶性セルロース、アルギン酸およびアルギン酸ナトリウムのようなアルギネート、ベントナイトのようなクレイ、並びに発泡性の混合物を含む。組成物における崩壊剤の量は、組成物の約２〜約２０重量％、より好ましくは約５〜約１０重量％の範囲であってもよい。
【０１５２】
結合剤は、粉粒子を共に結合し、または「接着し」、顆粒を形成することによってそれらを凝集させ、製剤において「接着剤」として働く物質である。結合剤は、希釈剤または充填剤において、すでに得られる凝集強度を増大する。適切な結合剤は、スクロースのような糖、小麦、コーンライス、およびポテト由来のデンプン；アカシア、ゼラチン、およびトラガカントのような天然ガム；アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、およびアルギン酸アンモニウムカルシウムのような海藻の誘導体；メチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースナトリウム、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなセルロース材料；ポリビニルピロリドン；ケイ酸アルミニウムマグネシウムのような無機化合物を含む。組成物における結合剤の量は、組成物の約２〜約２０重量％、好ましくは約３〜約１０重量％、より好ましくは組成物の約３〜約６重量％の範囲であってもよい。
【０１５３】
潤滑剤は、圧縮された後、錠剤顆粒などが、摩擦または摩耗を減少させることによって型（ｍｏｌｄ）、または鋳型（ｄｉｅ）から解放できるように投与形態に加えられる物質のクラスに関する。適切な潤滑剤は、ステアリン酸マグネシム、ステアリン酸カルシウム、またはステアリン酸カリウムのようなステアリン酸金属塩；ステアリン酸；高融点ワックス；および塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、およびＤ，Ｌ−ロイシンのような他の水溶性潤滑剤を含む。潤滑剤は、顆粒表面に存在しなければならないので、圧縮前の最後のステップで通常加えられる。組成物における潤滑剤の量は、組成物の約０．２〜約５重量％、好ましくは約０．５〜約２重量％、より好ましくは組成物の約０．３〜約１．５重量％の範囲であってもよい。
【０１５４】
流動促進剤は、医薬組成物における組成物の固化を防ぎ、顆粒の流動特性を改善する材料であるので、流動は滑らかおよび均一になる。適切な流動促進剤は、二酸化ケイ素およびタルクを含む。組成物における流動促進剤の量は、最終組成物の約０．１〜約５重量％、好ましくは約０．５〜約２重量％の範囲であってもよい。
【０１５５】
着色剤は、組成物または投与形態に着色を与える賦形剤である。当該賦形剤は、クレイまたは酸化アルミニウムのような適切な吸着剤に吸着される食品等級染色剤を含むことができる。着色剤の量は、組成物の約０．１〜約５重量％、好ましくは約０．１〜約１重量％に変わってもよい。
【０１５６】
言及される医薬製剤、またはより具体的にワクチンは、それらが一般式Ｉの完全に定義された合成複合体を含むことで特徴づけられる。
一般式Ｉである本発明の複合体は、前記ワクチン製剤において、１０〜１０００μｇ／
ｇの範囲で存在する。本発明の好ましい実施形態において、一般式Ｉである複合体は、前記ワクチン製剤において、１０〜１０００ｎｇ／ｇの範囲で存在する。本発明のより好ましい実施形態において、一般式Ｉである複合体は、前記ワクチン製剤において、１００〜１０００ｐｇ／ｇの範囲で存在する。
【０１５７】
言及されるワクチン製剤は、本発明における化合物のモジュラー組成のために室温で並外れた安定性を示し、前記ワクチン製剤は、再構成の前に、少なくとも３ヶ月の期間、少なくとも２５℃の温度で維持されてもよい。本願に記述されるワクチン製剤における熱的安定性は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型に対して示されるワクチンにわたって特別の利点を構成し、そのことは今に至るまで記述された。本発明の好ましい実施形態において、前記期間は、６か月または少なくとも１２か月を含む。
【０１５８】
インビボで適用される場合、本発明の複合体は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型に対して効果的におよび継続的に免疫を付与することを可能にすることが明らかになった。このことは、本発明の複合体が、インビボ条件において高力価の抗体の産生および長続きする抵抗性を刺激することができので、むしろ有利であり、さらに本発明の複合体は、室温で長期間安定性を示す。したがって、本発明の複合体は、特に熱安定性であるので、冷凍を必要としない。
【０１５９】
一般式（Ｉ）の本発明の複合体は、図１および実施例Ｄ１．１に示されるように効果的にリポソームを形成することが証明された。リポソームを形成するために、一般式（Ｉ）の化合物は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホクロリン）のような添加剤と好ましくは混合される。本発明において、一般式（Ｉ）の本発明の化合物は、両親媒特性を有するので、ナノサイズリポソームを形成することが可能であるということが証明された。前記リポソームの直径は、２００ｎｍ〜２５０ｎｍの範囲である。水性媒体における当該ナノサイズリポソームの形成は、医薬組成物が、経時的に安定であり、通常良い生物学的利用能を示すので、有利である。当該リポソーム形成は、ワクチン製剤にとって技術的利点になる。
【０１６０】
本発明のさらに他の態様は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型に対するヒトおよび／または宿主動物における免疫応答を誘導する方法に関し、一般式（Ｉ）の複合体の治療有効量をヒトおよび／または宿主動物に投与することを含む。
［化学合成］
一般式（Ｉ）の複合体を炭水化物ＩＩから出発して生成することができ、炭水化物ＩＩは、末端アミノ基を有するリンカーＬ１を提示し、スフィンゴ糖脂質ＩＩＩはグリコシド部分のＣ−６位に末端アミノ基と共にリンカーＬ３を提示する。
【０１６１】
【化４５】
2016530212.tif 000062
【０１６２】
［ストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物の合成］
一般式ＩＩの合成炭水化物は、ストレプトコッカス  ニューモニエ３型の莢膜ポリサッカライドに関し、一連の保護基操作反応、およびグルコース構成要素２および３並びにアミノアルコール４から出発してグルコシル化反応を介してアクセスされることができる（スキーム２参照）。
【０１６３】
【化４６】
2016530212.tif 000063
【０１６４】
本発明において使用される一般式ＩＩの合成炭水化物は、末端アミノ基を有するリンカーＬ１を用いて還元末端で官能基化され、スフィンゴ糖脂質へ共役させる。チオグルコシド２は、β−グリコシド結合の形成を確実にするためにＣ−２位にベンゾイル関与保護基、並びにＣ−４位およびＣ−６位にベンジリデンアセタールを有し、続くグルコシル化のためにＣ−４ヒドロキシル基をフリーにするために位置選択的に開かれることができる。グルコースイミダート３は、β−グリコシド結合の形成に有利に働くために、Ｃ−３位にｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリルエーテルを備え、Ｃ−２位に安息香酸エステルを備える。アミノアルコール４におけるアミノ基は、グルコシル化反応中、求核剤として干渉しないように、ベンジルおよびベンジルオキシカルボニル保護基を用いてマスクされる。
【０１６５】
しかしながら、当業者は、前記保護基が、続く組立および脱保護手順の間に使用される条件と適合する限り、アミン保護のために他の適切な保護基を使用するかもしれない。
したがって、アミノアルコール４、完全に保護されたサッカライド８、９、１０、および１１から出発して、それらは一般式ＩＩの炭水化物の前駆体であり、スキーム３に示されるように組み立てられることができる。より正確に、完全に保護されたサッカライド８は、数ステップで、ｎ１が１に等しく、ｎ２が上記に定義され、ｎ３が０に等しい一般式ＩＩの炭水化物に変換されることができ、続く合成経路Ａを組み立てることができる。最初に、アミノアルコール４およびグルコースイミダート３を、活性化剤としてＴＭＳＯＴｆを用いてカップリングさせ、モノサッカライド中間体を提供し（ステップａ）、それはさらにＨＦ／ピリジンを用いて処理することによって脱保護反応を受け、化合物７を与え（ステップｂ）、化合物７は、続くカップリング反応のために求核性を示す。カップリング反応（ステップａ）は、ＢＦ３・ＯＥｔ２、ＰＰＴＳ、ＬｉＣｌＯ４およびＣｕ（ＯＴｆ）２を含む当業者に公知の他の活性化剤によって介在されるかもしれない。さらに、脱保護反応中のｔｅｒｔ−ブチル（ジメチルシリル）エーテルの選択的切断（ステップｂ）は、ＴＢＡＦ、ＨＦ・ピリジン、（Ｍｅ２Ｎ）３Ｓ＋  Ｆ２ＳｉＭｅ３−、およびたくさんの他の試薬によって達成されるかもしれない。リンカーに最初のモノサッカライドを付加した後、標的分子８を、ステップｃおよびｂを含む反応順序の単なる繰り返しによって構成することができる。合成手順を加速させるために、組立中の伸長ユニットとして使用されるジサッカライド構成要素５は、スキーム４に記述される通りに調製された。
【０１６６】
最初にチオグルコシド２は、ＴＦＡの存在下でＴＥＳと処理することによって位置選択的な還元的開環を受け、アルコール６を提供し、アルコール６をＴＭＳＯＴｆの存在下でイミダート３にカップリングさせて伸長ユニット５を提供した。
【０１６７】
【化４７】
2016530212.tif 000064
【０１６８】
【化４８】
2016530212.tif 000065
【０１６９】
手持ちのジサッカライド５を用いて、ステップｃおよびｂを含む一連の反応は、所望の
長さの完全に保護された炭水化物８（ｎ２回）を達成するまで繰り返された。一連の各反応は、カップリング反応からなり、続いて脱保護反応が行われ、ｎ２回の繰り返しの後、伸長するサッカライドの非還元末端で［→３−β−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→４）−β−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→］繰り返しユニットを導入し、完全に保護されたサッカライド８になる。カップリング反応（ステップｃ）は、ＮＩＳ／ＴｆＯＨの存在下で伸長ユニット５を用いてサッカライドを伸長する処理を含む。ＩＤＰＣ、ＮＢＳ−ＬｉＣｌＯ４、Ｐｈ２ＳＯ／Ｔｆ２Ｏ、ＢＳＰ−Ｔｆ２Ｏを含む、他の活性化システムを、グリコシド結合を媒介するためにＮＩＳ／ＴｆＯＨに代わるものとして使用することができる。
【０１７０】
類似の方法において、ｎ１およびｎ３は０に等しく、ｎ２は前に定義された通りである一般式ＩＩの合成炭水化物の前駆体である完全に保護されたサッカライド９を、過程Ｂの後にアクセスすることができる。特に、構成要素２を、ＮＩＳ／ＴｆＯＨの存在下でアルコール４と反応させ（ステップｅ）、対応するβ−グルコシドを提供し、β−グリコシドにおいて、次のグリコシル化反応のための求核性を提供するために、ベンジリデンアセタールを位置選択的開環させる（ステップｆ）。前記求核剤は、グリコシル化反応を受けて（ステップａ）、続いてＴＢＳ保護基の除去が起こり（ステップｂ）、ジサッカライド９’を提供する。ジサッカライド９’に、ステップｃおよびｂを含むｎ２−１回の一連の反応の繰り返しを適用することによって、標的炭水化物９をアクセスすることができる。
【０１７１】
ｎ３が１に等しい一般式ＩＩの炭水化物の前駆体を、完全に保護された炭水化物８および９から出発して得た。この範囲において、構成要素１２をスキーム５に従って調製し、炭水化物１０および１１の非還元末端において糖部分を提供する。
【０１７２】
【化４９】
2016530212.tif 000066
【０１７３】
最後に、完全に保護された炭水化物８および９を、ＮＩＳ／ＴｆＯＨの存在下でチオグルコシド１２と処理し、完全に保護された炭水化物１１および１０を提供する。
ＳＰ３莢膜ポリサッカライドに関連する炭水化物においてカルボキシル基を組み込むために必須な酸化反応の前に、サッカライド８および９の非還元末端におけるグルコース部分のフリーのヒドロキシル基を、ピリジンの存在下で塩化ベンゾイルと処理することによってベンゾエートエステルとして保護した。
【０１７４】
合成を完結するために、上述のようにアクセスされる完全に保護されたサッカライドを一般式ＩＩの炭水化物に変換する（スキーム６参照）。最初に、対応するカルボン酸への酸化の前に、第一級ヒドロキシルを遊離するために、ベンジリデンアセタールを、ｐ−ＴＳＡおよびエタンチオールと処理することによって切断した。その後、酸化剤としてＢＡＩＢおよびＴＥＭＰＯを用いて酸化反応を行った。酸化された炭水化物における安息香酸エステルを、ゼンプレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条件を適用することによって、さらに切断し、結果として生じる中間体は、エステル化およびＰｄ／Ｃでの水素化を受け、一般式ＩＩ
の合成炭水化物を提供する。
【０１７５】
【化５０】
2016530212.tif 000067
【０１７６】
［スフィンゴ糖脂質ＩＩＩの合成］
一般式ＩＩＩのスフィンゴ糖脂質は、一般式Ｉの複合体を得るために適しており、様々な合成経路を介してアクセルされることができる（米国７７７１７２６  Ｂ２；ＷＯ２００６０２７６８５；Ｘ．Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．ＰＮＡＳ２０１０，１０７，２９，１３０１０〜１３０１５）。
【０１７７】
例えば、Ｚが−ＯＣＨ２−であり、Ｒ１が
【０１７８】
【化５１】
2016530212.tif 000068
【０１７９】
である本発明に係るスフィンゴ糖脂質は、下記に記述される合成経路にしたがって、合成されることができる。
市販のＬ−Ｂｏｃセリンを出発物質として選択し、３ステップでアルデヒド１３に変換した（スキーム７参照）。残基Ｒ５は、ウィティッヒ反応を適用することによって分子に導入された。したがって、対応するブロミドＲ５ＣＨ２Ｂｒから調製されたトリフェニルホスホニウムイリド１４を、ｎ−ブチルリチウムの存在下でアルデヒド１３と反応させ、Ｚ−アルケン１５のみを提供した。好都合に、一般式Ｒ５ＣＨ２Ｂｒである種々のブロミ
ドは、市販されており、当業者によって容易にアクセスされることができる。ｐ−ＴＳＡを用いてイソプロピリデン部分の切断、続いてシャープレスジヒドロキシル化、続いてトリフルオロ酢酸の存在下でｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル保護基の除去を行い、トリオール１６を提供した。この段階で、残基Ｒ１は分子に完全に導入された。次のステップにおいて、残基Ｒ２を単純なアミド結合形成によって付加した。活性化されたエステル１７とアミン１６との処理はアミド１８を提供し、アミド１８を２ステップで、グルコースまたはガラクトースの糖部分に共役する状態になっているセラミド１９に変換した。
【０１８０】
【化５２】
2016530212.tif 000069
【０１８１】
セラミド１９と共役する状態になるグルコース構成要素２９およびガラクトース構成要素３０を、それぞれＤ−グルコース２０およびＤ−ガラクトース２１から出発して合成した。スキーム８に描かれた標準的な保護基化学は、Ｃ６位でフリーのアルコールを有する適切に保護されたグルコース２４およびガラクトース２５を提供する。Ｃ６位でのリンカーＬ３の導入は、一般式ＴｓＯ−Ｌ３−Ｎ３であるアジド２６とウィリアムソン（Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ’ｓ）エーテル化を介してこの段階で達成された。一般式ＴｓＯ−Ｌ３−Ｎ３である種々のアジドを、文献に記述される、および当業者に公知の次の経路で調製した。スキーム９は、当該合成経路を記述し、市販のまたは市販の物質の修飾を介してアクセスされるジオール３１から出発して３ステップでアジド２６を提供する。
【０１８２】
【化５３】
2016530212.tif 000070
【０１８３】
Ｃ６にリンカーＬ３を備え、末端アジド基を有する構成要素２７および２９は中間体ラクトールを提供するために、アノマーアリル保護基の異性化、および加水分解をさらに受け、中間体ラクトールは、炭酸セシウムの存在下で２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−フェニルアセトイミドイルクロリドと反応させることによって、グルコシルイミデート２９および３０に変換された。
【０１８４】
【化５４】
2016530212.tif 000071
【０１８５】
【化５５】
2016530212.tif 000072
【０１８６】
手持ちのセラミド１９並びにグリコシル供与体２９および３０を用いて、完全にα−選択性を有するスフィンゴ糖脂質３２および３３を生じさせるために触媒量のＴＭＳＯＴｆの存在下でグリコシル化を行った（スキーム１０参照）。ＴＢＡＦを用いてのシリルエーテル保護基の除去、続くパールマン（Ｐｅａｌｒｍａｎ’ｓ）触媒を用いての水素化分解を行って、標的スフィンゴ糖脂質３４および３５を提供した。
［複合体の合成］
一般式ＩＩの炭水化物および一般式ＩＩＩのスフィンゴ糖脂質を合成したあと、種々の
方法を一般式Ｉの複合体を提供するための共役に用いることができる。アミンと共にカルボン酸の処理に基づかれるペプチド結合形成の方法を、一般式ＩＩの炭水化物および一般式ＩＩＩのスフィンゴ糖脂質を共役させるために成功裏に適用することができ、ここで、カルボン酸はＣＤＩ、ＤＣＣ、ＤＩＣ、またはＥＤＣのような活性化剤を用いてプレ活性化される。さらに、スキーム１１および１２は他の共役方法をまとめる。しかしながら、炭水化物ＩＩおよびスフィンゴ糖脂質ＩＩＩを連結するために、または炭水化物ＩＩをスフィンゴ糖脂質ＩＩＩに共役するために使用することができる方法は、下記に開示される方法に制限されない。
【０１８７】
例えば、スキーム１１は、炭水化物ＩＩを一般式−Ｃ（Ｏ）−Ｗ−Ｃ（Ｏ）−の対称なリンカーＬ２を介してスフィンゴ糖脂質ＩＩＩにどのように連結することができるかを記述する。最初に、末端にアミノ基を提示するリンカーＬ３を伴ってガラクトースまたはグルコース糖部分のＣ６位で官能基化されるスフィンゴ糖脂質ＩＩＩを、活性化されたジエステル３６と反応させて活性化されたモノエステル３７を提供する。この場合において、ジエステルは、４−ニトロフェノール活性化部分を提示する。しかしながら、２，４，５−トリクロロフェニル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル、スクシンイミド、４−オキソ−３，４−ジヒドロベンゾ−トリアジン−３−イル、およびそれらの硫酸化部分のような他の活性化部分を、４−ニトロフェノール活性化部分の代わりのものとして考慮することができる。反応を、弱アルカリ性条件（ｐＨ７．２〜９）で、ＤＭＦ、ピリジン、またはＤＭＳＯのような水溶性溶媒を５〜１０％含む溶媒の混合物中で行う。活性化されたモノエステル３７を得たあと、次のステップは、一般式ＩＩの炭水化物とのカップリングであり、ピリジンの存在下で起こり、標的複合体３８を提供する。
【０１８８】
【化５６】
2016530212.tif 000073
【０１８９】
式中、
【０１９０】
【化５７】
2016530212.tif 000074
【０１９１】
を選択することができるが、次の断片
【０１９２】
【化５８】
2016530212.tif 000075
【０１９３】
の一つに限定されない。
スキーム１１：複合体３８の合成
リンカーＬ２が非対称である場合、スキーム１２によって表される経路のような合成経路が行われ得る。最初に、スフィンゴ糖脂質ＩＩＩを、Ｎ−スクシンイミド活性化エステル３９と反応させ、塩基の存在下でマスクされたチオール基を有するアミド４０を提供する。同様の方法において、炭水化物ＩＩを活性化されたエステル４１と処理し、末端にマレイミドを提示するアミド４２にする。化合物４０において水酸化アンモニウムの存在下でアセテート基の切断は、第一級チオールを遊離させ、中間体を提供し、中間体は化合物４２における末端のマレイミドと反応し複合体４３を提供する。
【０１９４】
【化５９】
2016530212.tif 000076
【０１９５】
明らかに、末端マレイミドは、一般式ＩＩＩのスフィンゴ糖脂質に組み込まれ得り、末端チオール基は、一般式ＩＩの炭水化物に組み込まれ得り、複合体４４を生じる。
【０１９６】
【化６０】
2016530212.tif 000077
【０１９７】
中間体４０から生じる末端チオールは、適切なアルケンパートナーとチオール−エン反応にも関与し得り、
【０１９８】
【化６１】
2016530212.tif 000078
【０１９９】
のような対称なリンカーＬ２、
または、
【０２００】
【化６２】
2016530212.tif 000079
【０２０１】
のような非対称なリンカーＬ２、を有する一般式Ｉの複合体を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０２０２】
【図１】本発明に係る複合体４３＊を含むリポソームの模式図。
【図２】ＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊の特性。（ａ）ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、（ｂ）ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ。
【図３ａ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ａ）記号と共に印刷されたサッカライドの表示
【図３ｂ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ｂ）マイクロアレイ印刷パターン
【図３ｃ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ｃ）複合体４３＊を含むリポソームを用いて免疫性を与えたマウスの免疫応答（期間：０日〜２週間）
【図３ｄ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ｄ）複合体４３＊を含むリポソームおよびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答の比較（両グループ６匹のマウスの平均データ）
【図３ｅ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ｅ）複合体４３＊を含むリポソームおよびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答の比較（両グループ６匹のマウスの平均データ）
【図３ｆ】マウスにおいて、複合体４３＊を含むリポソーム、およびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答：（ｆ）複合体４３＊を含むリポソームおよびＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊に対する一次抗体応答の比較（両グループ６匹のマウスの平均データ）
【発明を実施するための形態】
【０２０３】
次の実施例は、本発明における好ましい実施形態を示すために含まれる。実施例に開示される技術は、当業者によって認識されるべきであり、続いて、本発明の実施においてよく機能するために発明者によって開示される技術を示すのであって、当該実施のための好ましい様式を構成することを考慮されるべきである。しかしながら、当業者は、本発明の開示を考慮して、いくつかの変化が特定の実施形態において作られることができることを
認識するべきであり、それは開示され、本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様または類似の結果を常に得る。
【０２０４】
本発明の種々の態様のさらなる修正および代替的な実施形態は、本願の記述を考慮して当業者に明らかであるだろう。したがって、本願の記述は、例として解釈されるべきであり、本発明を実行する一般的な方法を当業者に教示する目的のためである。本願で示される、および記述される本発明の形態は、実施形態の例として受け入れられるべきであることは理解されるべきである。要素および材料は、本願で例示される、および記述されるものに置換されてもよく、部分および工程は、反転されてもよく、本発明の特定の特徴は、独立して利用されてもよく、全て、当業者には、本発明における本願に記述の利点を有することは明らかであるだろう。変化が、次のクレームに記述されるように本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本願に記述される要素で作られてもよい。
【実施例】
【０２０５】
［化学合成］
［略語］
ＮＩＳ：Ｎ−ヨードスクシンイミド；
ＴｆＯＨ：トリフリン酸；
ｈｒ：時間；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＭＷ：マイクロウェーブ
ｒｔ：室温；
ＲＭ：反応混合物；
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＭＳ：モレキュラーシーブス；
ＴＭＳ：トリメチルシリル；
Ｔｅｍｐｏ：２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ、フリーラジカル；
ＢＡＩＢ：ビス（アセトキシ）ヨードベンゼン；
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール。
［化学合成のための一般的な情報］
市販の試薬を、注記がある場合を除いて更なる精製なしで使用した。溶媒を、通常の方法で使用するより前に乾燥させ再蒸留した。全ての反応を、他に注記されていなければ、不活性雰囲気下、オーブンで乾燥させたガラス製品で行った。分析薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、シリカゲルが０．２５ｍｍの厚さでプレコートされたキーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）６０Ｆ２５４アルミニウムプレートで行った。ＴＬＣプレートを、ハネシアン溶液（含水硫酸中に硫酸セリウムおよびモリブデン酸アンモニウム）、または硫酸−エタノール溶液を用いて染色することによりＵＶライトを用いて可視化した。カラムクロマトグラフィーを、フルカ  キーゼルゲル６０（２３０〜４００メッシュ）で行った。旋光度（ＯＲ）を、シュミット  アンド  ハエンシュ（Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＆  Ｈａｅｎｓｈ）  ＵｎｉＰＯｌ  Ｌ１０００ポラリメーターを用いてｇ／１００ｍＬで表される濃度（ｃ）で測定した。１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを、バリアン（Ｖａｒｉａｎ）４００−ＭＲ、またはバリアン（Ｖａｒｉａｎ）６００スペクトロメーターを用いて、内部標準物質としてＭｅ４Ｓｉを用いて測定した。ＮＭＲ化学シフト（δ）をｐｐｍで記録し、カップリング定数（Ｊ）をＨｚで報告した。高解像度マススペクトル（ＨＲＭＳ）を、アギレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）６２１０  ＥＳＩ−ＴＯＦマススペクトロメーターを用いて、ベルリン自由大学、マススペクトロメトリーコア施設で記録した。
Ａ．ストレプトコッカス  ニューモニエ３型莢膜ポリサッカライド関連炭水化物の合成
実施例Ａ．１：（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−６−（２−（ベンジル（
ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７，８−ジイルジベンゾエート（１＊）の合成
【０２０６】
【化６３】
2016530212.tif 000080
【０２０７】
（２Ｒ，４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−６−（エチルチオ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７，８−ジイルジベンゾエート（６．０ｇ、１１．５３ｍｍｏｌ）およびロータリーエバポレーターでトルエンを用いて共沸して乾燥したベンジルベンジル（２−ヒドロキシエチル）カルバメート（３．９３ｇ、１３．８３ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＣＭ（１００ｍＬ）中に取り、それに５ｇのマイクロフェーブ乾燥４ÅＭＳを加え、１５分室温で撹拌し、その後−１０℃に冷却した。ＮＩＳ（３．８３ｇ、１７．２９ｍｍｏｌ）およびＴｆＯＨ（０．１５ｍＬ、１．７３ｍｍｏｌ）の添加後、反応混合物を撹拌下、１時間−１０℃から−５℃に温めた。ＲＭを、その後１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液（５０ｍＬ）を用いてクエンチし、その後ＥｔＯＡｃ（２５ｍｌ×３）を用いて抽出した。合わせた有機層を、その後ブライン（１０ｍｌ）を用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、淡黄色油性化合物を得た。粗精製物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーでヘキサン中２０〜３０％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製し、淡黄色透明な粘着性液体として所望の生成物１＊（７．６０ｇ、８９％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ，４Ｈ），７．５９−６．９０（ｍ，２１Ｈ），５．９１−５．７１（ｍ，１Ｈ），５．６２−５．４１（ｍ，２Ｈ），５．２２−４．９５（ｍ，２Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，０．５Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，０．５Ｈ），４．５６−４．２２（ｍ，３Ｈ），４．１０−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．５０−３．３３（ｍ，２Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．７，１６５．４，１５６．３５，１５６．２，１３７．９，１３６．９，１３３．４，１３３．２，１２９．９，１２９．５，１２９．３，１２９．１，１２８．７，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．１，１２７．８，１２７．４，１２７．２，１２６．２，１０１．９，１０１．６，７８．９，７２．６，７２．１，６９．１，６８．７，６７．４，６７．２，６６．７，５１．７，４６．９，４５．８．
実施例Ａ．２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（２＊）の合成
【０２０８】
【化６４】
2016530212.tif 000081
【０２０９】
グルコース１＊（７．５０ｇ、１０．０８ｍｍｏｌ）を、１０分間活性化された３ÅＭＳと共に、アルゴン下でＤＣＭ（７５ｍＬ）中に取り、０℃に冷却した。トリエチルシラン（１２．８８ｍＬ、８１．０ｍｍｏｌ）、続いてＴＦＡ（４．６６ｍＬ、６０．５ｍｍｏｌ）を滴下し、ＲＭを１６時間室温で撹拌し、水（１００ｍＬ）を用いてクエンチした
。ＲＭを、ＤＣＭ（３０ｍＬ×３）を用いて抽出し、合わせた有機層を、水（２０ｍＬ×３）、ブライン（２０ｍＬ）を用いて完全に洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で蒸発させ、無色粘着性液体を得た。粗精製物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーでヘキサン中３０％〜１００％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製し、真空中で蒸発後、無色油として所望の化合物（６．１ｇ、８１％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０４−７．８４（ｍ，４Ｈ），７．６０−６．８７（ｍ，２１Ｈ），５．５５−５．３６（ｍ，２Ｈ），５．２２−４．９０（ｍ，２Ｈ），４．７７−４．５３（ｍ，３Ｈ），４．５１−４．３０（ｍ，２Ｈ），４．０６−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８７−３．５３（ｍ，４Ｈ），３．４６−３．２０（ｍ，３Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６７．３，１６５．５，１３８．０，１３７．７，１３３．６，１３０．１，１２９．９，１２８．６，１２８．５，１２８．１，１２７．９，１２７．８，１２７．４，１０１．３，１０１．２，７６．７，７４．７，７３．９，７１．６，７１．５，７１．２，７０．０，６９．０，６７．４，６７．２，５１．７，４６．８，４５．８．
実施例Ａ．３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（３＊）の合成
【０２１０】
【化６５】
2016530212.tif 000082
【０２１１】
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（２．０ｇｍ、２．６８ｍｍｏｌ）を、活性化された４Å酸洗浄ＭＳと共にＤＣＭ（３０ｍＬ）中に取り、３０分間室温で撹拌し、０℃に冷却した。ＴＭＳＯＴｆ（０．４９μＬ、０．２７ｍｍｏｌ）を、その後加え、続いてＤＣＭ（５ｍＬ）中に（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニル−６−（２，２，２−トリクロロ−１−イミノエトキシ）ヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７−イルベンゾエート（２．２０ｇ、３．８９ｍｍｏｌ）を有する溶液を５分にわたって加え、反応混合物を３０分間０℃で撹拌した。ＲＭを、Ｅｔ３Ｎ（１ｍＬ）を用いてクエンチし、ろ過し、溶媒を真空下で除去した。粗精製物を、フラッシュクロマトグラフィーによってヘキサン中ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製し、生成物３＊（３．２ｇ、９８％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｃｄｃｌ３）δ８．１３−６．８８（ｍ，３５Ｈ），５．６７−５．５２（ｍ，１Ｈ），５．４６−５．３１（ｍ，１Ｈ），５．２０（ｓ，１Ｈ），５．１６−４．８９（ｍ，３Ｈ），４．６８（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１．５Ｈ），４．４７−４．２４（ｍ，３．５Ｈ），４．２０−３．８９（ｍ，１．５Ｈ），３．８９−３．１９（ｍ，９．５Ｈ），３．１３（ｔｄ，Ｊ＝９．７，４．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６３（ｔ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ），０．６３（ｓ，９Ｈ），−０．１２（ｓ，３Ｈ），−０．１９（ｓ，３Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．４，１６５．３６，１６４．７，１３８．２，１３７．
１，１３３．４，１３３．２，１２９．９４，１２９．９，１２９．２，１２８．７，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．２，１２８．０，１２７．８，１２７．３，１２６．４，１０１．７，１０１．２，１０１．１，８１．２，７５．５，７５．１，７４．６，７３．７，７３．４，７３．０，６８．９，６８．０，６７．３，６６．１，５１．７，４６．９，２５．６，１８．０，−４．１，−４．８．
実施例Ａ．４：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＳ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−ヒドロキシ−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（４＊）の合成
【０２１２】
【化６６】
2016530212.tif 000083
【０２１３】
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−２−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（１．６ｇ、１．３１７ｍｍｏｌ）を０℃でピリジン（１０ｍＬ）中に取り、ＨＦ−ピリジン（３．５６ｍＬ、３９．５ｍｍｏｌ）と共に処理した。混合物をｒｔで２４時間撹拌した。ＲＭを水を用いて洗浄し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）を用いて抽出した。合わせた有機層を、その後、希ＨＣｌ（５０ｍＬ×２）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗精製物を得て、粗精製物を、シリカカラムクロマトグラフィーを用いてヘキサン中３５％〜４０％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製後、白色泡として標的の化合物（１．３ｇ、９０％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１５−６．９２（ｍ，１Ｈ），５．６５−５．５１（ｍ，１Ｈ），５．４４−５．３０（ｍ，１Ｈ），５．２３（ｓ，１Ｈ），５．１１−５．０４（ｍ，３Ｈ），４．７７−４．４９（ｍ，３Ｈ），４．４９−４．２４（ｍ，４Ｈ），４．２５−３．９１（ｍ，２Ｈ），３．９１−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．５７−３．００（ｍ，７Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．４，１６５．３，１５６．４，１５６．２，１３８．２，１３６．９，１３３．６，１３３．２，１３０．３，１３０．０，１２９．９，１２９．４，１２８．７，１２８．７，１２８．５，１２８．５，１２８．４，１２８．１，１２８．１，１２７．８，１２７．４，１２６．４，１０１．８，１０１．２，１０１．１，８０．６，７５．９，７４．９，７４．７，７３．７，７３．５，７２．６，７２．０，７１．９，６８．９，６７．９，６７．４，６７．２，６６．０，５１．７，４６．９，４５．９．
実施例Ａ．５：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［
１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（５＊）の合成
【０２１４】
【化６７】
2016530212.tif 000084
【０２１５】
アクセプター４＊（１．０ｇ、０．９１ｍｍｏｌ）、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−（エチルチオ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（１２＊）（１．０８ｇ、１．０９１ｍｍｏｌ）、および２０ｇの乾燥４ÅＭＳをＤＣＭ（３０ｍＬ）中に取り、１５分間ｒｔで撹拌し、その後−１０℃に冷却した。その後、ＮＩＳ（０．２４５ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）およびＴｆＯＨ（０．０１６ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１時間−５℃で撹拌した。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−（エチルチオ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（０．４５ｇ、０．４５４ｍｍｏｌ、０．５当量）およびＮＩＳ（０．１０２ｍｇ、０．４５４ｍｍｏｌ、０．５当量）を反応混合物に再び加え、−５℃で１時間撹拌し、その後５℃に温めた。セライト（登録商標）ベッドに通してろ過後、ＲＭを１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液（２５ｍＬ）を用いてクエンチし、その後ＤＣＭ（１５ｍｌ×３）を用いて抽出した。合わせた有機層を、その後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１５ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）を用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、白色のふわふわした固体化合物を得た。粗精製物を、シリカカラムクロマトグラフィーによってヘキサン中３０％〜３５％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製し、ふわふわした白色固体として標的５＊（１．０ｇ、５４％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０５−６．８７（ｍ，６０Ｈ），５．５７−５．４０（ｍ，１Ｈ），５．３９−５．２４（ｍ，２Ｈ），５．２１−４．８６（ｍ，７Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．５４−４．１５（ｍ，９Ｈ），４．０７−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．８１−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．６０（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．４７−３．１４（ｍ，９Ｈ），３．１３−２．９６（ｍ，３Ｈ），２．６４（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），０．５８（ｓ，９Ｈ），−０．１８（ｓ，３Ｈ），−０．２６（ｓ，３Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．４，１６５．１，１６４．９，１６４．５，１６４．０，１５６．４，１５６．２，１３８．４，１３８．１，１３７．１，１３７．０，１３３．２，１３３．０，１３２．６，１３０．３，１３０．１，１３０．０，１２９．９６，１２９．９，１２９．８，１２９．４，１２９．１，１２８．６，１２８．５，１２８．５１，１２８．４，１２８．３，１２８．２，１２８．１５，１２８．１，１２８．０６，
１２８．０，１２７．８，１２７．３，１２６．４，１２６．１，１０１．７，１０１．５，１０１．２，１０１．１８，１０１．０，１００．２，８１．１，７９．５，７７．４，７５．９，７５．６，７５．１，７４．４，７３．７，７３．５，７３．４，７３．２，７２．４，６８．８，６７．９，６７．３，６６．２，６６．０，５１．７，４６．９，４５．９，２１．２，１７．９，−４．１，−４．９．
実施例Ａ．６：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＳ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−ヒドロキシ−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（６＊）の合成
【０２１６】
【化６８】
2016530212.tif 000085
【０２１７】
テトラサッカライド５＊（１．０ｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）を、０℃でピリジン（１０ｍＬ）中に取り、ＨＦ−ピリジン（１．３３ｍＬ、１４．７８ｍｍｏｌ）をそれに加え、ｒｔで３６時間撹拌した。ＲＭを、水を用いて洗浄し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）を用いて抽出した。合わせた有機層を、その後、冷たい希ＨＣｌ（５０ｍＬ×２）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗精製物を得て、粗精製物を、シリカカラムクロマトグラフィーでヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製後、白色泡として標的の化合物（０．７１ｇ、７５％）を生成した。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０７−６．９４（ｍ，６０Ｈ），５．５６−５．４１（ｍ，１Ｈ），５．３７−５．２３（ｍ，２Ｈ），５．２２−５．１４（ｍ，２Ｈ），５．１３−５．０２（ｍ，２Ｈ），５．０２−４．９１（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．５６−４．４８（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４３−４．２４（ｍ，４Ｈ），４．２０（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０９−３．８８（ｍ，３Ｈ），３．８５−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．６１（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，４．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５４−３．３１（ｍ，５Ｈ），３．３１−３．１５（ｍ，５Ｈ），３．１６−２．９７（ｍ，３Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．５６（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．３８（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．３，１６５．２，１６５．０，１６４．９，１６４．７，１６３．９，１３８．２，１３７．９，１３６．８，１３６．８，１３３．４，１３３．０，１３２．５，１３０．０，１２９．９，１２９．８，１２９．７，１２９．６，１２９．５，１２９．２，１２９．０，１２８．５，１２８．４，１２８．３５，１２８．３，１２８．１，１２８．０，１２７．９７，１２７．９，１２７．８，１２７．７，１２７．２，１２６．２，１２６．０，１０１．６，１０１．３，１０１．０，１００．９，１００．８，１００．０，８０．４，７９．３，７８．３，７７．２，７６．６，７６．０，７５．５，７４．８，７
４．３，７３．６，７３．２，７２．３，７２．１，６８．７，６７．６，６７．２，６６．１，６５．７，５１．５，４６．７，４５．７．
実施例Ａ．７：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−８−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−（（（２Ｒ，４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７，８−ビス（ベンゾイルオキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（７＊）の合成
【０２１８】
【化６９】
2016530212.tif 000086
【０２１９】
テトラサッカライド６＊（０．６５ｇ、０．３３９ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）中に取り、ＢｚＣｌ（０．７９ｍＬ、０．６７９ｍｍｏｌ）と処理し、ｒｔで１６時間撹拌した。ＲＭを、水を用いて希釈し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）を用いて抽出した。合わせた有機層を、冷たい希ＨＣｌ（１０ｍＬ×２）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ×２）、水（１０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗精製物を得て、粗生成物をその後、冷ＭｅＯＨ（５ｍＬ×３）を用いて粉末にし、白色固体として標的７＊（０．６５ｇ、９５％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１０−６．９２（ｍ，６５Ｈ），５．５５−５．４１（ｍ，２Ｈ），５．４０−５．１５（ｍ，４Ｈ），５．１３−４．９６（ｍ，４Ｈ），４．９３（ｓ，１Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−４．４７（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４３−４．１６（ｍ，６Ｈ），４．１０−３．８６（ｍ，３Ｈ），３．８４−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．３４（ｍ，６Ｈ），３．３３−３．１５（ｍ，６Ｈ），３．１１−３．０６（ｍ，３Ｈ），２．６７−２．５９（ｍ，２Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．６，１６５．４，１６５．２，１６５．１，１６４．８，１６４．０，１５６．３，１５６．２，１３８．１，１３８．１，１３８．０，１３７．０，１３６．８，１３３．４，１３３．１，１３２．７，１３０．２，１２９．９，１２９．９，１２９．８，１２９．８，１２９．７，１２９．５，１２９．３，１２９．３，１２９．２，１２９．１，１２８．６，１２８．６，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．３５，１２８．３，１２８．２，１２８．１６，１２８．１，１２７．８，１２７．３，１２６．２，１２６．１，１２５．４，１０１．５，１０１．３，１０１．２，１０１．０，１００．１，７９．５，７８．４，７７．４，７６．３，７５．６，７４．３，７３．７，７３．５，７３．４，７３．１，７２．３，７２．３，７２．３，６８．８，６８．０，６７．８，６７．１，６６．２４，６６．２，５１．７，４６．９，４５．８．
実施例Ａ．８：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３−（ベンゾイルオキシ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラ
ン−３−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４−ビス（ベンゾイルオキシ）−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（８＊）の合成
【０２２０】
【化７０】
2016530212.tif 000087
【０２２１】
テトラサッカライド７＊（０．５４ｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中にｒｔで取り、ＰＴＳＡ（１０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）およびＥｔＳＨ（０．２９７ｍＬ、４．０１ｍｍｏｌ）と処理し、４時間撹拌した。ＲＭを、Ｅｔ３Ｎ（１ｍＬ）を用いてクエンチし、真空中で蒸発させ、ヘキサン中に６０％ＥｔＯＡｃを有する溶液を用いて精製し、白色固体生成物として標的８＊（０．４６ｇ、９３％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０２−７．８１（ｍ，１０Ｈ），７．５９−６．９１（ｍ，４５Ｈ），５．５２（ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４７−５．１５（ｍ，５Ｈ），５．１２−４．９０（ｍ，３Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６１−４．５７（ｍ，１Ｈ），４．５２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．４７−４．３６（ｍ，３Ｈ），４．３４−４．１８（ｍ，４Ｈ），４．１３−３．９９（ｍ，２Ｈ），３．９５−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．６９（ｔｄ，Ｊ＝９．１，４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．６１−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．２７（ｍ，１Ｈ），３．１１−２．９５（ｍ，３Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６７．４，１６５．３６，１６５．２３，１６５．２，１６５．２，１６４．９，１６３．８，１５６．３，１５６．２，１３８．１，１３７．３，１３３．７，１３３．６，１３３．３，１３３．０，１３２．７，１３０．１，１３０．０，１２９．９，１２９．８，１２９．７，１２９．６，１２９．５１，１２９．５，１２９．２，１２９．０，１２８．９，１２８．８，１２８．７，１２８．６９，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．１３，１２８．１，１２７．８，１２７．３，１２７．２，１０１．３，１０１．１，１００．８，１００．３，８５．１，７７．４，７７．０，７６．０，７５．８，７４．８，７４．７，７４．４，７３．８，７３．６，７３．３，７２．２，７１．７，７１．７，６９．４，６９．３，６８．９，６７．６，６７．１，６２．５，６１．６，５１．７，４６．９，４５．９．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：Ｃ１０４Ｈ９９ＮＮａＯ３０［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値１８６４．６１，実測値１８６４．７７．
実施例Ａ．９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３−（ベンゾイルオキシ）−２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ビス（ベンゾイルオキシ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−６−カルボキシ−５−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）オキシ）−２−（（ベンゾイルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−３−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（９＊）の合成
【０２２２】
【化７１】
2016530212.tif 000088
【０２２３】
テトラサッカライド８＊（０．１２４ｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ／水混合物（７ｍｌ、５：２）中に取り、０℃に冷却した。ｔｅｍｐｏ（２．１ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）、続いて、ＢＡＩＢ（０．１０９ｇ、０．３３９ｍｍｏｌ）の付加後、ＲＭを０℃で２０分間撹拌し、ゆっくりｒｔまで温め、さらにｒｔで２時間（全体で３時間）撹拌した。ＲＭをＤＣＭ（５ｍＬ）および水（５ｍＬ）を用いて希釈し、層を分離した。水層を、ＤＣＭ（５ｍＬ×４）を用いて抽出した。合わせた有機層を、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空中で濃縮し、粗精製物を得て、粗精製物を、その後、シリカカラムでＤＣＭ中１０〜１５％アセトン＋１〜２％ＡｃＯＨを有する溶液を用いて精製し、蒸発後、黄色っぽい固体として所望の生成物９＊（０．０９ｇ、７１％）を生成した。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．００−６．５２（ｍ，５５Ｈ），５．６１−５．２９（ｍ，３Ｈ），５．２７−５．０５（ｍ，３Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８８−４．８３（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１．５Ｈ），４．４３（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，０．５Ｈ），４．３３−４．０２（ｍ，７Ｈ），３．８７−３．３９（ｍ，１１Ｈ），３．２６−３．０３（ｍ，４Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１７０．４，１７０．３５，１６７．２，１６７．１８，１６６．９，１６６．７，１６６．５，１６６．４，１６５．７，１５８．０，１５７．７，１３９．２，１３８．８，１３８．６，１３４．８，１３４．５，１３４．４，１３４．１，１３４．０，１３１．４，１３０．８，１３０．８，１３０．７，１３０．６，１３０．５，１３０．３，１３０．１，１２９．８，１２９．７，１２９．５３，１２９．５，１２９．４，１２９．３，１２９．２，１２９．１，１２８．８，１２８．６，１２８．２，１０２．２，１０１．９，１０１．８，１０１．７，８４．２，７７．６，７６．７，７６．４，７５．４，７４．６，７４．４，７３．７，７３．５，７３．３，７１．５，７１．１，６９．５，６９．４，６８．５，６８．３１，６８．３，５２．６，５２．５，４７．１０．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：Ｃ１０４Ｈ９５ＮＯ３２［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値１８９２．５７，実測値１８９２．７１．
実施例Ａ．１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（１０＊）の合成
【０２２４】
【化７２】
2016530212.tif 000089
【０２２５】
テトラサッカライド９＊（０．０９ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中に取り、メタノール中に０．５ＭのＮａＯＭｅ溶液を有する溶液（４．８１ｍＬ、２．４０５ｍｍｏｌ）と処理し、ｒｔで２４時間撹拌した。ＲＭを、その後アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）（登録商標）１２０Ｈ＋樹脂を用いて中和し、透明溶液を得て、透明溶液をコットンプラグに通してろ過し、ＭｅＯＨを用いて完全に洗浄し、真空中で蒸発させ、黄色っぽい粘性物質を得た。黄色っぽい粘性物質を、ジエチルＥｔ２Ｏ中に取り、粉末にし、淡い黄色っぽい固体を得た。エーテル層をその後、静かに移した（３×３ｍｌ）。淡い黄色っぽい固体を、ＤＣＭを用いて粉末にし、白色固体を得て、白色固体を真空下乾燥させ、白色粉末として標的１０＊（０．０５ｇ、９１％）を生成した。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．４９−７．０６（ｍ，２０Ｈ），５．１４（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６８−４．５１（ｍ，６Ｈ），４．４７−４．３７（ｍ，３Ｈ），４．２７−４．１７（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．３４（ｍ，２３Ｈ），３．３０−３．１９（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ５５Ｈ６６ＮＯ２５［Ｍ−Ｈ］＋，計算値１１４０．３９，実測値１１４０．２．
実施例Ａ．１１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−アミノエトキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（１１＊）の合成
【０２２６】
【化７３】
2016530212.tif 000090
【０２２７】
ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中にテトラサッカライド１０＊（５０ｍｇ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）の混合物を有する溶液をｒｔで水素下１８時間撹拌した。ＲＭを、その後、ＰＴＦＥ疎水性フィルターに通してろ過し、メタノール、水−メタノールを用いて、後にメタノール中にＮＨ４ＯＨを有する溶液を用いて完全に洗浄した。ろ液を蒸発させ、真空下乾燥させ、白色ガラス状膜として標的１１＊（２３ｍｇ、７１％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．８４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｄｔ，Ｊ＝１１．５，４．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０４−３．９２（ｍ，３Ｈ），３．８９−３．７５（ｍ，５Ｈ），３．７２−３．４９（ｍ，１０Ｈ），３．４３−３．３４（ｍ，３Ｈ），３．２９（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，Ｄ２
Ｏ）δ１７５．４，１７５．２，１０２．３，１０２．２，１０２．０，１０１．８，８２．７，７８．９，７８．６，７５．７，７５．２，７４．８，７４．７，７４．１，７３．１，７２．９，７２．７，７１．６，７０．１，６５．７，６０．０３９．３．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２６Ｈ４４ＮＯ２３［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値７３８．２３，実測値７３８．２７．
テトラサッカライド１１＊ａ〜１１＊ｃを、ベンジルベンジル（３−ヒドロキシプロピル）カルバメート、ベンジルベンジル（４−ヒドロキシブチル）カルバメート、およびベンジルベンジル（５−ヒドロキシペンチル）カルバメートに対して、Ａ．１〜Ａ．１１に記述される手順を適用することによって合成した。
【０２２８】
【化７４】
2016530212.tif 000091
【０２２９】
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２７Ｈ４５ＮＯ２３［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値７５２．２３，実測値７５２．２１．
【０２３０】
【化７５】
2016530212.tif 000092
【０２３１】
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２８Ｈ４７ＮＯ２３［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値７６６．２５，実測値７６６．２１．
【０２３２】
【化７６】
2016530212.tif 000093
【０２３３】
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２９Ｈ４９ＮＯ２３［Ｍ＋Ｈ］＋，計算値７８０．２６，実測値７８０．２４．
実施例Ａ．１２：（２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキ
シ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノフェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−（エチルチオ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルベンゾエート（１２＊）の合成
【０２３４】
【化７７】
2016530212.tif 000094
【０２３５】
ＤＣＭ（１４０ｍＬ）中に（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−（エチルチオ）−５−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジベンゾエート（４．００ｇ、７．６５４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）および（４ａＲ，６Ｒ，７Ｒ，８ａＲ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニル−６−（２，２，２−トリクロロ−１−イミノエトキシ）ヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−７−イルベンゾエート（６．２８ｇ、９．９５ｍｍｏｌ、１．３当量）の混合物を有する溶液を、Ａｒ雰囲気下で３０分間撹拌した。反応混合物を冷却（−２０℃）し、ＴＭＳＯＴｆ（０．１６ｍＬ、０．８８０ｍｍｏｌ、０．１１５当量）を加えた。４５分間撹拌後、反応混合物を、Ｅｔ３Ｎ（１．０ｍＬ）の付加によってクエンチした。有機溶液を真空下で濃縮した。結果として生じる暗黄色油を、シリカゲルでフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１／３、ｖ／ｖ）によって精製し、無色固体として（２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−（（（４ａＲ，６Ｓ，７Ｒ，８Ｓ，８ａＲ）−７−（ベンゾイルオキシ）−８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−フェニルヘキサヒドロピラノフェニルヘキサヒドロピラノ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキシン−６−イル）オキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−（エチルチオ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルベンゾエート（１２＊）（６ｇ、７９％）を得た。
Ｒｆ＝０．５（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、３／７、ｖ／ｖ）．１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ−０．１９（ｓ，３Ｈ），−０．１１（ｓ，３Ｈ），０．６３（ｓ，９Ｈ），１．２０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．６７（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｔｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，４．９Ｈｚ，２Ｈ），３．２８（ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５３−３．３７（ｍ，１Ｈ），３．７４−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３７（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，９．０Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝８．９，８．２Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｓ，１Ｈ），５．４１（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６３（ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２９−７．７２（ｍ，１９Ｈ），７．８８−８．０３（ｍ，６Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６５．２７，１６５．０７，１６４．４５，１３８．１６，１３７．００，１３３．１４，１３３．１０，１３２．９７，１３０．２１，１２９．７９，１２９．７７，１２９．７５，１２９．３４，１２８．９９，１２８．５１，１２８．３８，１２８．２８，１２８．２２，１２８．０５，１２８．０２，１２７．９９，１２６．２１，１０１．５７，１０１．０６，８３．３９，８１．０５，７８．７０，７７．４３，７７．１１，７６．８０，７５．４１，７４．９３，７４．５２，７３．４９，７２．９０，７０．５９，６７．８６，６７．４５，６５．９７，２５．４３，２４．０８，１７．８０，１４．８５，−４．２０，−４．９７．
［Ｂ．スフィンゴ糖脂質の合成］
実施例Ｂ．１：（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メトキシ−２，２，Ｎ−トリメチルオキサゾリジン−４−カルボキサミド（１３＊）の合成
【０２３６】
【化７８】
2016530212.tif 000095
【０２３７】
ＤＣＭ（２４０ｍＬ）中にＬ−Ｂｏｃ−セリン（１２．３３ｇ、６０．１ｍｍｏｌ）を有する溶液に、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（６．０４ｇ、６１．９ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（６．８ｍＬ、６１．９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。この溶液に、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１１．８６ｇ、６１．９ｍｍｏｌ）を２０分の期間にわたって一部ずつ加え、その溶液をさらに１時間撹拌した。その後、水性ＨＣｌ溶液（１．０Ｍ、３０ｍＬ）を加え、水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた有機層を、飽和の水性ＮａＨＣＯ３溶液（３０ｍＬ）を用いて洗浄し、水層を再び、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空内で除去し、白色固体として対応するワインレブアミド（１４．０７ｇ、９４％）を得た。
Ｒｆ＝０．３（ＥｔＯＡｃ）；
１ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．６０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．６６（ｂｒｓ，１Ｈ）．
粗生成物をアセトン（１８０ｍＬ）に溶解し、それに２，２−ジメトキシプロパン（５７ｍＬ）およびＢＦ３Ｅｔ２Ｏ（０．５ｍＬ）を加えた。オレンジ色溶液を９０分間ｒ．ｔ．で撹拌し、その後Ｅｔ３Ｎ（１．２ｍＬ）を用いてクエンチし、溶媒を真空内で除去した。粗生成物を、シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエントＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン＝１：２→１：１）によって精製し、白色固体としてイソプロピリデン保護されたワインレブアミド１３＊（１５．３２ｇ、２ステップで８９％）を生成した。ＮＭＲスペクトルは、回転異性体の存在のため２セットのシグナルからなる。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝−３０．９（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．４５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ２９７６，２９３８，１７０２，１６８２，１３６４，１１６７，１０９８，９９８，８４８，７６８，７１６；１ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．７７（ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７０（ｄｄ，７．５，３．８，Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｄｄ，Ｊ＝７．５，４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｄｄ，Ｊ＝７．８，３．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝９．３，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｄｄ，Ｊ＝９．０，３．５Ｈｚ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．１９（ｓ，６Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），１．６６（ｓ，３Ｈ），１．５４（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．４，１７０．７，１５２．２，１５１．４，９５．１，９４．５，８０．６，８０．０，６６．２，６６．０，６１．３，６１．３，５７．９，５７．８，２８．５，２８．４，２５．８，２５．５，２４．８，２４．６；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ１３Ｈ２４Ｎ２Ｏ５  ［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値：３１１．１５７７  実測値：  ３１１．１５８２．
実施例Ｂ．２：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−４−ホルミル−２，２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート（１４＊）の合成
【０２３８】
【化７９】
2016530212.tif 000096
【０２３９】
０℃でＴＨＦ（１００ｍＬ）中にワインレブアミド１３＊（８．００ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ＬｉＡｌＨ４（ＴＨＦ中に１．０Ｍ、１３．９ｍＬ、１３．９ｍｍｏｌ）を滴下し、溶液を０℃で１時間撹拌し、その溶液を−１０℃に冷却し、ＫＨＳＯ４（１Ｍ、７０ｍＬ）を注意深く加え、その溶液を、Ｅｔ２Ｏ（１７０ｍＬ）を用いて希釈した。混合物をｒ．ｔ．に温めるようにし、３０分間撹拌した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、溶媒を真空内で除去し、淡黄色油としてガーナーアルデヒド１４＊（６．２４ｇ、１ＨＮＭＲによって＞９５％純度）を生成した。ＮＭＲスペクトルは、回転異性体の存在のため２セットのシグナルからなる。１ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．５８（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ），９．５２（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｍ，１Ｈ），４．０６（ｍ，４Ｈ），１．５３−１．６３（ｍ，１２Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）．全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９８，１７０７）とよく一致している。粗生成物を、更なる精製はなしで続く反応において使用した。
実施例Ｂ．３：（４Ｒ，１’Ｚ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２，２−ジメチル−４−（１’−ヘキサデセニル）オキサゾリジン（１５＊）の合成
【０２４０】
【化８０】
2016530212.tif 000097
【０２４１】
ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中に１．６Ｍ、２５．２ｍＬ、４０．３ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２２０ｍＬ）中にペンタデシル−トリフェニルホスホニウムブロミド１６＊（２４．０３ｇ、４３．４ｍｍｏｌ）を有する溶液に、−７８℃で滴下した。結果として生じるオレンジ溶液を、０℃に温めるようにし、さらに３０分間撹拌した。溶液を、その後−７８℃に冷却し、無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）中にガーナーアルデヒド１４＊（６．２３ｇ、２７．２ｍｍｏｌ）を有する溶液をゆっくり加えた。２時間ｒ．ｔ．で撹拌した後、反応物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（３５ｍＬ）を用いて希釈し、層を分離した。水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（３×３５ｍＬ）を用いて抽出し、合わせた有機抽出物を、飽和の水性ＮａＣｌ溶液（５０ｍＬ）を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空内で濃縮した。シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：２）によって精製し、淡黄色油として（Ｚ）−オレフィン１５＊（１１．２７ｇ、７８％）を得た。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋４５．２（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．４０（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：２）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ２９２３，２８５４，１６９９，１４５７，１３８２，１２５１，１１７５，１０９３，１０５６，８５０，７６８ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．２７−５．４０（ｍ，２Ｈ），４．５８（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０２（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６１（ｄｄ，Ｊ＝３．３，８．５Ｈｚ，１Ｈ），１．９６（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２３−１．５６（ｍ，３９Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１５２．１，１３０．９，１３０．４，９４．１，７９．８，６９．２，５４．７，３２．１，２９．９，２９．８，２９．８，２９．８，２９．７，２９．６，２９．５，２９．４，２８．６，２８．６，２７．６，２２．８，１４．２；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ
２６Ｈ４９ＮＯ３［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値４４６．３６０５：実測値４４６．３６１４．全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００４，８４７）とよく一致していた。
【０２４２】
所望の（Ｚ）−オレフィンを、１ＨＮＭＲスペクトルにおけるオレフィンプロトンを考慮すると、生成物の非所望の（Ｅ）−オレフィンから容易に分けることができる：Ｚ−１５＊  １ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．０５（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．６Ｈｚ，ｌＨ），３．６４（ｄｄ，Ｊ＝３．３，８．６Ｈｚ，１Ｈ）ｃｆ．Ｅ−１５＊ １ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．０１（ｄｄ，Ｊ＝６．１，８．７Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝２．１，８．７Ｈｚ，１Ｈ）．
実施例Ｂ．４：ペンタデシルトリフェニルホスホニウムブロミド（１６＊）の合成
ＭｅＣＮ（２００ｍＬ）中に１−ブロモペンタデカン（３０．０ｇ、１０３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２７．０２ｇ、１０３ｍｍｏｌ）を有する溶液を、５日間８０℃で還流した。真空中で溶媒の除去後、Ｅｔ２Ｏ（３０ｍＬ）を加え、結果として生じる白色沈殿物を濾過で除き、Ｅｔ２Ｏを用いて洗浄し、高真空下で２４時間乾燥させ、白色粉末としてペンタデシルトリフェニルホスホニウムブロミド（１６＊）（４９．６６ｇ、８７％）を得た。
実施例Ｂ．５：（２Ｒ，３Ｚ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−３−オクタデセン−１−オル（１７＊）の合成
【０２４３】
【化８１】
2016530212.tif 000098
【０２４４】
パラ−トルエンスルホン酸（３７１ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ／水（全容量５０ｍＬ、比率＝９：１ｖ／ｖ）中に（Ｚ）−オレフィン１５＊（５．００ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を有する撹拌溶液に加え、混合物を６８時間撹拌した。反応混合物を、真空内で濃縮し白色固体を生成し、白色固体をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中で再溶解した。溶液を、ブライン（３０ｍＬ）を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空内で除去した。シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝４：１→２：１）によって精製し、白色固体としてアルコール１７＊（２．７１ｇ、５９％）を得た。全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００４，８４７）とよく一致した。
実施例Ｂ．６．：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１，３，４−オクタデカントリオール（１８＊）の合成
【０２４５】
【化８２】
2016530212.tif 000099
【０２４６】
アルコール１７＊（１．５０ｇ、３．９１ｍｍｏｌ）を、ｔ−ＢｕＯＨ／水（全容量３８ｍＬ、比率１：１）に溶解し、メタンスルホンアミド（３７１ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、０℃に冷却し、ＡＤ−ｍｉｘ−β（５．４８ｇ）を加えた。結果として生じる混合物を、０℃で４１時間撹拌し、ｒ．ｔ．でさらに７時間撹拌し、その後、固体Ｎａ２ＳＯ３（６．０ｇ）の付加によってクエンチ、３０分間撹拌状態にしておいた。ＥｔＯＡｃ（３×４０ｍＬ）を用いて抽出を続いて行った。有機抽出物を、Ｎａ
ＯＨ（１Ｍ、２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）、および飽和ＮａＣｌ水溶液（２０ｍＬ）を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空内で除去した。シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン＝１：１→２：１）によって精製し、白色固体としてトリオール１８＊（１．０５ｇ、６４％）を得た。全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００４，８４７）とよく一致した。
実施例Ｂ．７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アミノオクタデカン−１，３，４−トリオール（１９＊）の合成
【０２４７】
【化８３】
2016530212.tif 000100
【０２４８】
トリオール１８＊（６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（２０：１、０．６ｍＬ）中に溶解し、ｒ．ｔ．で３０分間撹拌した。溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（１．５ｍＬ）を用いて希釈し、その後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を用いて慎重に中性化（ｐＨ〜８に）し、そのことで白色固体の沈殿が起こった。白色固体をろ過によって除去し、水（３×１０ｍＬ）を用いて洗浄し、減圧下で乾燥させた。ＭｅＣＮからの再結晶化により、白色粉末としてフィトスフィンゴシン１９＊（３８ｍｇ、８２％）を生成した。全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００４，８４７）とよく一致した。
実施例Ｂ．８；ヘキサコサノン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（２０＊）の合成
【０２４９】
【化８４】
2016530212.tif 000101
【０２５０】
ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中にヘキサコサノン酸（１２１ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ）を有する溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（０．０５８ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（４２ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、４０℃に加熱し、３時間撹拌し、その後、水（４ｍＬ）を用いてクエンチした。溶液を、Ｅｔ２Ｏ（８ｍＬ）を用いて希釈し、２層を分離した。水層を、Ｅｔ２Ｏ（８ｍＬ）を用いて抽出し、合わせた有機層を、飽和ＮａＣｌ水溶液（５ｍＬ）を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過した。真空内で溶媒を除去後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル２０＊を白色固体（８５ｍｇ、５７％）として得た。
実施例Ｂ．９：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリヒドロキシオクタデカン−２−イル）ヘプタコサンアミド（２１＊）の合成
【０２５１】
【化８５】
2016530212.tif 000102
【０２５２】
無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中にフィトスフィンゴシン１９＊（１５ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）を有する溶液に対して、スクシンイミジルエステル２０＊（３４ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（２４μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、５０℃に加熱し、２０時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）を加え、結果として生じる懸濁液を遠心分離機にかけた（３０分、３０００ｒｐｍ）。白色沈殿物をろ過によって除去し、減圧下で乾燥させ、アミド２１＊（２９ｍｇ、８８％）を生成した。
実施例Ｂ．１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリ−ｔ−ブチル−ジメチルシリルオキシ−２−ヘキサコサノイルアミノ−１−オクタデカン（２２＊）の合成
【０２５３】
【化８６】
2016530212.tif 000103
【０２５４】
ＣＨ２Ｃｌ２（１．２ｍＬ）中にアミド２１＊（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を有する撹拌した懸濁液に対して、ＴＢＳＯＴｆ（４３μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン（６５μＬ、０．０５４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を、ｒ，ｔ．で２時間撹拌した。反応を、ＭｅＯＨ（０．２ｍＬ）を用いてクエンチした。混合物を、Ｅｔ２Ｏ（２ｍＬ）を用いて希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１ｍＬ）を用いて洗浄した。有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン／Ｅｔ２Ｏ＝１５：１）によって精製し、ＴＢＳ保護セラミド２２＊を無色油（２７ｍｇ、７１％）として得た。全てのスペクトルデータは、報告されたデータ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００４，８４７）とよく一致した。
実施例Ｂ．１１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ビス−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−ヘキサコサノイルアミノ−４−オクタデカノール（２３＊）の合成
【０２５５】
【化８７】
2016530212.tif 000104
【０２５６】
ＴＨＦ（２ｍＬ）中にセラミド２２＊（９０ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を有する溶液に対して、水（０．５ｍＬ、２７．８ｍｍｏｌ）中にＴＦＡ（４０μＬ、０．５１９ｍｍｏｌ）を有する溶液を−１０℃で加えた。反応混合物を、２時間にわたって１０℃に温め
た状態にした。その後、反応混合物を、中性ｐＨに達するまで飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加えることによってクエンチした。結果として生じる混合物を、Ｅｔ２Ｏ（１０ｍＬ）を用いて希釈し、水（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空内で除去し、粗生成物をシリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン＝１０：１→５：１）によって精製し、アルコール２３＊（６８ｍｇ、８５％）を無色油として生成した。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝−１１．６（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．３（シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝４：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３２８５，２９２０，２８５１，１６４５，１４６５，１２５３，１０３４，８３５，７７６，７２１，６８０ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．２７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２１（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０６（ｔｄ，Ｊ＝６．５，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｔ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７６（ｔｄ，Ｊ＝６．４，２．６Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝９．０，３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．２０−２．１６（ｍ，２Ｈ），１．６７−１．４７（ｍ，６Ｈ），１．４５−１．１６（ｍ，６８Ｈ），０．９２（ｓ，９Ｈ），０．９０（ｓ，９Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ），０．１１（ｓ，６Ｈ），０．０８（ｓ，６Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７２．６２，７７．４２，７６．３６，６３．６２，５１．３，３６．９３，３４．４２，３１．９２，２９．８０，２９．７０，２９．６３，２９．５３，２９．４８，２９．３７，２６．００，２５．９４，２５．８１，２５．６０，２２．６９，１８．１４，１８．１２，１４．１３，−３．７６，−４．０８，−４．５３，−４．９１；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ５６Ｈ１１７ＮＯ４Ｓｉ２［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値９２４．８５９４  実測値：９２４．８６０４．
アルコール２３＊ａ〜２３＊ｏを、共通のアルデヒド１４＊から出発して実施例１５〜２３に記述される手順にしたがって合成した。
【０２５７】
【化８８−１】
2016530212.tif 000105
【０２５８】
【化８８−２】
2016530212.tif 000106
【０２５９】
【化８８−３】
2016530212.tif 000107
【０２６０】
実施例Ｂ．１２：６−ヒドロキシへキシル４−メチルベンゼンスルホネート（２４＊）の合成
【０２６１】
【化８９】
2016530212.tif 000108
【０２６２】
ＤＣＭ（２００ｍＬ）中にヘキサン−１，６−ジオール（１０．０ｇ、８５ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ピリジン（１００ｍＬ）中に４−メチルベンゼン−１−スルホニルクロリド（１７．８ｇ、９３ｍｍｏｌ）を溶解されている溶液を５℃で１５分間にわたって一部ずつ加えた。反応混合物を、５時間にわたってｒ．ｔ．に温めた。溶媒を真空内で除去し、粗生成物をシリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、モノトシル化ヘキサンジオール２４＊（６．５ｇ、２８％）を無色油として得た。
Ｒｆ＝０．５５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３３８１，２９３５，２８６２，１５９８，１４６１，１３５２，１１７２，９５９，９２１，８１３，６６１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７６−７．７１
（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｄｔ，Ｊ＝４．３，１．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），１．６５−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｓ，１Ｈ），１．５２−１．４１（ｍ，２Ｈ），１．３６−１．１８（ｍ，４Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４４．７，１３３．１，１２９．８，１２７．８，７０．５，６２．６，３２．４，２８．７，２５．１，２５．０，２１．６；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ１３Ｈ２０Ｏ４ｓ［Ｍ＋Ｎａ＋］計算値：２９５．０９７５  実測値：２９５．０９６８．
実施例Ｂ．１３：６−アジドヘキサン−１−オール（２５＊）の合成
【０２６３】
【化９０】
2016530212.tif 000109
【０２６４】
６−ヒドロキシへキシル４−メチルベンゼンスルホネート２４＊（４．３ｇ、１５．７９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２３ｍＬ）に溶解し、アジ化ナトリウム（１．７５ｇ、２６．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、５５℃に加熱し、１６時間後、その混合物を、ｒ．ｔ．に冷却し、水（１５０ｍＬ）を用いて希釈した。混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２を用いて３回抽出し、飽和ＮａＣｌ水溶液を用いて洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空内で除去した。粗生成物を、シリカゲルでシリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、６−アジドヘキサン−１−オール２５＊（２．２ｇ、９７％）を無色油として得た。
Ｒｆ＝０．５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３３２９，２９３５，２８９１，２０９０，１２５６，１３４９，１２５８，１０５５，９１０，７３１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．６３（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６４−１．５１（ｍ，４Ｈ），１．４３−１．３２（ｍ，４Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６２．８，５１．５，３２．６，２８．９，２６．６，２５．４；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ６Ｈ１３Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値１６６．０９５１  実測値：１６６．０９４５．
実施例Ｂ．１４：６−アジドへキシル４−メチルベンゼンスルホネート（２６＊）の合成
【０２６５】
【化９１】
2016530212.tif 000110
【０２６６】
ピリジン（７０ｍＬ）中に６−アジドへキサン−１−オール２５＊（２．７ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）を有する溶液に、４−メチルベンゼン−１−スルホニルクロリド（４．０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、５時間、ｒ．ｔ．で撹拌状態にしておき、その後、溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、ＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカゲルでシリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、アジド２６＊（５．０ｇ、８９％）を無色油として得た。
Ｒｆ＝０．５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝３：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ２９３８，２８６３，２０９２，１５９８，１４５５，１３５６，１２５８，１１７４，１０９７，９５６，９１９，８１３，７２４，６６２ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ；７．８５−７．６７（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，０．６Ｈｚ，２Ｈ），４．０１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），１．７１−１．５７（ｍ，２Ｈ），１．５２（ｄｄ，Ｊ＝９．１，４．９Ｈｚ，２Ｈ），１．３８−１．１２（ｍ，４Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４４．８，１３３．２，１２９．９，１２７．９，７０．４，５１．３，２８．７，２８．７，２６．１，２５．０，２１．７；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ１３
Ｈ１９Ｎ３Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値３２０．１０４５  実測値：３２０．１０５７．
アジド２６＊ａ〜２６＊ｆを、対応する市販のジオールから出発して実施例２４〜２６に記述される手順にしたがって合成した。
【０２６７】
【化９２】
2016530212.tif 000111
【０２６８】
実施例Ｂ．１５：アリル６−Ｏ−トリチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２７＊）の合成
【０２６９】
【化９３】
2016530212.tif 000112
【０２７０】
１−Ｏ−アリル−ガラクトシド（Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２００２，４，４８９）（４ｇ、１８．２ｍｍｏｌ）を、ピリジン（１８ｍＬ）中に溶解した。その溶液に塩化トリチル（
６．５８ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、ｒ．ｔ．で１８時間撹拌し、その後、溶媒を真空内で除去した。粗生成物を、シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝１０：１）によって精製し、ピラノシド２７＊（７．０ｇ、８３％）を無色油として生成した。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋６０．０（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．８（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝５：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３４０２，２９２９，１４９１，１４４９，１２１８，１１５２，１０７０，１０３２，７４６，７０３ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５１−７．１８（ｍ，１５Ｈ），５．９９−５．８８（ｍ，１Ｈ），５．２５（ｄｄｑ，Ｊ＝３５．９，１０．４，１．４Ｈｚ，２Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２５（ｄｄｔ，Ｊ＝１２．８，５．４，１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０５（ｄｄｔ，Ｊ＝１２．８，６．３，１．３Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｓ，１Ｈ），３．８９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４７（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｄｄ，Ｊ＝９．８，６．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３２（ｄｄ，Ｊ＝９．８，５．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．７１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４３．８，１３３．７，１２８．６，１２７．８，１２７．１，１１７．８，９７．５，８６．９，７１．２，６９．８，６９．５，６９．５，６８．５，６３．３；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ２５Ｈ２５Ｏ５［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値４８５．１９３５  実測値：４８５．１９４１．
実施例Ｂ．１６：アリル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−トリチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２８＊）の合成
【０２７１】
【化９４】
2016530212.tif 000113
【０２７２】
ＤＭＦ（３２ｍＬ）中にアリル６−Ｏ−トリチル−α／β−Ｄ−ガラクトピラノシド２７＊（３．７ｇ、８．０ｍｍｏｌ）を有する溶液に、ｒ．ｔ．で、少しずつ水素化ナトリウム（鉱油中に６０％、１．５０ｇ、３６．０ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後ベンジルブロミド（４．２ｍｌ、３５．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、４８時間撹拌状態にしておき、その後、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）の付加によってクエンチした。混合物を、Ｅｔ２Ｏを用いて希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液から２度抽出した。合わせた有機層を、水（３×１００ｍｌ）および飽和ＮａＣｌ水溶液を用いて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカゲルのプラグ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１、シリカゲルを、１％ＮＥｔ３を用いて中性化した）で精製し、ベンジルエーテル２８＊（５．５ｇ）を淡黄色油として生成し、更なる精製なしで続くステップで使用された。実施例Ｂ．１７：アリル６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２９＊）の合成
【０２７３】
【化９５】
2016530212.tif 000114
【０２７４】
ＣＨ２Ｃｌ２（６８ｍＬ）中に２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−トリチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２８＊）（５．００ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（５．４５ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ）を有する溶液を０℃に冷却した。その撹拌溶液にトリフルオロ酢酸（２．６ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を、１５分後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いてクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２を用いて抽出した。粗生成物を、シリカゲルのプラグでろ過し、全てのシランおよびトリチル残基を１０：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いて除去し、生成物を、ＥｔＯＡｃを用いて溶出し、アリル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（３．０ｇ）を淡黄色油として生成し、更なる精製なしで続く反応で使用された。
【０２７５】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中にアリル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（１．０ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）を有する溶液に、０℃で、水素化ナトリウム（鉱油中に６０％、０．１２ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、混合物を、ｒ．ｔ．に温め、さらに１時間撹拌した。その後、６−アジドへキシル４−メチルベンゼンスルホネート（２６＊）（０．９ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加え、ｒ．ｔ．でさらに８時間撹拌し、その後、混合物を、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）の付加によってクエンチした。ＤＣＭを用いて希釈後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加えて、混合物を、ＤＣＭを用いて抽出した。合わせた有機層を、水および飽和ＮａＣｌ水溶液を用いて洗浄した。有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、アジド２９＊（１．０ｇ、３ステップで６８％）を無色油として生成した。［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋２５．４（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．６５（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝４：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ２９３３，２８６３，２０９４，１４９７，１４５４，１３５８，１１７７，１０９８，１０５９，９２６，８１６，７３６，６９７ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９４−７．１６（ｍ，１５Ｈ），５．９５（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１７．１，１０．３，６．６，５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．３１（ｄｑ，Ｊ＝１７．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．３，２．８，１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．０１−４．５８（ｍ，７Ｈ），４．１７（ｄｄｔ，Ｊ＝１３．０，５．２，１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０９−３．９９（ｍ，３Ｈ），３．９８−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．５０−３．１８（ｍ，６Ｈ），１．７２−１．４７（ｍ，４Ｈ），１．４４−１．３０（ｍ，４Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．９，１３８．８，１３８．６，１３４．０，１２９．８，１２８．３，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２７．９，１２７．６，１２７．５，１２７．４，１１７．９，９６．３，７９．１，７６．５，７５．３，７４．７，７３．３，７３．３，７１．３，７０．３，６９．５，６９．４，６８．２，５１．４，５１．２，２９．６，２８．８，２８．７，２８．６，２６．６，２６．１，２５．７，２５．０，２１．６．ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ３６Ｈ４５Ｎ３Ｏ６［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値６３８．３２０１ｆ  実測値：６３８．３２２９．
アジド２９＊ａ〜２９＊ｆを、アリル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシドおよび中間体２６＊ａ〜２６＊ｆから出発して得た。
【０２７６】
【化９６−１】
2016530212.tif 000115
【０２７７】
【化９６−２】
2016530212.tif 000116
【０２７８】
同様な方法において、グルコースシリーズ２９＊＊ａ〜２９＊＊ｆである類似体を、アリル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシドおよび中間体２６＊ａ〜２６＊ｆから出発して得た。
【０２７９】
【化９７】
2016530212.tif 000117
【０２８０】
実施例Ｂ．１８：６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α／β−Ｄ−ガラクトピラノース（３０＊）の合成
【０２８１】
【化９８】
2016530212.tif 000118
【０２８２】
アリル６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２９＊）（１．４ｇ、２．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１６ｍＬ）に溶解し、ＰｄＣｌ２（０．２１ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）をｒ．ｔ．でその溶液に加えた。混合物を４時間撹拌し、その後、混合物をセライトでろ過し、溶媒を真空内で除去した。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、ラクトール３０＊（１．２ｇ、８８％）を無色油として生成した。
Ｒｆ＝０．５０（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３４１４，２９３３，２８６２，２０９３，１４５４，１２５５，１０６０，９１０，７３３，６９６ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４５−７．２０（ｍ，３０Ｈ），５．３３−５．２７（ｍ，１Ｈ），５．０１−４．９０（ｍ，３Ｈ），４．８５−４．７１（ｍ，７Ｈ），４．６６（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．７，１１．５，６．０Ｈｚ，３Ｈ），４．１８−４．０９（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｓ，２Ｈ），３．９３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，Ｊ＝９．６，７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６３−３．５２（ｍ，３Ｈ），３．５２−３．３７（ｍ，５Ｈ），３．３７−３．２８（ｍ，２Ｈ），３．２８−３．２１（ｍ，５Ｈ），１．６５−１．４９（ｍ，８Ｈ），１．４２−１．２４（ｍ，８Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．８，１３８．７，１３８．５，１３８．４，１２８．５，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．３，１２８．３，１２８．３，１２８．１，１２７．９，１２７．７，１２７．７，１２７．７，１２７．６，１２７．６，９７．９，９２．０，８２．３，８０．９，７８．８，７６．７，７５．２，７４．９，７４．８，７４．７，７３．８，７３．７，７３．６，７３．１，７３．１，７１．５，７１．４，６９．６，６９．６，６９．５，５１．５，２９．５，２８．９，２６．６，２５．８；
ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ３３Ｈ４１Ｎ３Ｏ６［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値５９８．２８８３  実測値：５９８．２８６９．
実施例Ｂ．１９：６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｎ−フェニルトリフルオロアセトイミデート（３１＊）の合成
【０２８３】
【化９９】
2016530212.tif 000119
【０２８４】
ＤＣＭ（７ｍＬ）中に６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α／β−Ｄ−ガラクトピラノース３０＊（４００ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を有する溶液に、炭酸セシウム（３４０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−フェニルアセトイミドイルクロリド（２１６ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、ｒ．ｔ．で３．５時間撹拌し、その後、セライトでろ過しＤＣＭを用いて洗浄した。溶媒を真空内で除去した。粗生成物を、シリカゲルでフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１０：１→１：１）によって精製し、イミデート３１＊（４９０ｍｇ、９４％）を無色油として生成した。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋６０．８（ｃ＝０．４、ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．８０（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３０６４，２９３４，２８６５，２０９４，１７１７，１５９８，１４５４，１３２１，１２０７，１０９９，１０２７，９１０，７３４，６９６ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４５−６．６０（ｍ，２０Ｈ），５．５６（ｓ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．７５（ｓ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｓ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，２Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５８−３．３９（ｍ，４Ｈ），３．３４（ｄｔ，Ｊ＝９．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．２３（ｄｔ，Ｊ＝９．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．５２−１．３８（ｍ，４Ｈ），１．３２−１．１６（ｍ，４Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１３８．６，１３８．３，１３８．２，１２８．８，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．４，１２８．３，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２７．７，１２４．３，１１９．４，８２．３，７８．３，７７．４，７７．２，７６．８，７５．７，７４．９，７４．６，７３．４，７３．２，７１．４，６８．７，５１．５，２９．７，２８．９，２６．７，２５．８；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ４１Ｈ４５Ｆ３Ｎ４Ｏ６［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値  ７６９．３１８３  実測値７６９．３２３９．
ヘミアセタール２９＊ａ〜２９＊ｆから出発して、イミデート供与体３１＊ａ〜３１＊ｆを、実施例３０および３１に記述される手順にしたがって合成した。
【０２８５】
【化１００−１】
2016530212.tif 000120
【０２８６】
【化１００−２】
2016530212.tif 000121
【０２８７】
同様な方法において、グルコースシリーズ３１＊＊ａ〜３１＊＊ｆにおけるイミデート供与体を、対応するヘミアセタール２９＊＊ａ〜２９＊＊ｆから出発してアクセスした。
【０２８８】
【化１０１−１】
2016530212.tif 000122
【０２８９】
【化１０１−２】
2016530212.tif 000123
【０２９０】
実施例Ｂ．２０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ビス−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−２−ヘキサコサノイルアミノ−１−（６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル）−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）オクタデカン（３２＊）の合成
【０２９１】
【化１０２】
2016530212.tif 000124
【０２９２】
求核剤２３＊（１５６ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）およびグルコシル化剤３１＊（１８９ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ）を、トルエンを用いて３回共蒸発させ、高真空で３時間乾燥させ、その後、Ｅｔ２Ｏ（２ｍＬ）およびＴＨＦ（０．４ｍＬ）の混合物中に溶解し、−４０℃に冷却した。その混合物にＴＭＳＯＴｆ（９．０μＬ、０．０５１ｍｍｏｌ）を加え、溶液を３時間にわたって−１０℃に温めた。反応をＮＥｔ３（０．０５ｍＬ）の付加によってクエンチし、溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１０：１→４：１）によって精製し、グリコシド３２＊（１８０ｍｇ、７２％α−アノマー）を白色泡として得た。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋１８．９（ｃ＝１、ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．４６（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝６．５：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３３２８，２９２５，２８５４，２０９６，１７３１，１６５６，１４５２，１３４８，１２４６，１１５６，１０９９，１０５８，８３５，７７７，６９６ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３９−７．２７（ｍ，１５Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．８１
−４．５９（ｍ，６Ｈ），４．１１−４．０８（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９６−３．８２（ｍ，６Ｈ），３．６５（ｄｄｄ，Ｊ＝７．０，５．１，１．８５Ｈｚ，１Ｈ），３．５０−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｄｑ，Ｊ＝６．７，４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３３−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．０２−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．６２−１．４９（ｍ，８Ｈ），１．３０−１．２３（ｍ，７２Ｈ），０．９１−０．８７（ｍ，２４Ｈ），０．０７（ｓ，３Ｈ），０．０６（ｓ，３Ｈ），０．０３（ｓ，６Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．１，１３８．８，１３８．７，１３８．６，１２８．３３，１２８．３０，１２８．２，１２８．１，１２７．８，１２７．６，１２７．５０，１２７．４６，１２７．３，１００．２，７９．１，７７．２０，７６．５７，７５．７，７５．６，７４．９，７４．８，７３．４，７２．９，７１．４，６９．７，６９．４，６９．０，５１．８，５１．４，３６．８，３３．２，３１．９，２９．９，２９．７４，２９．７１，２９．６６，２９．６０，２９．５，２９．４，２８．８，２６．６，２６．１４，２６．０９，２５．７，２５．６，２２．７，１８．３，１８．２，１４．１，−３．７，−３．９，−４．６，−４．９；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ８９Ｈ１５６Ｎ４Ｏ９Ｓｉ２［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値１５０５．１３３３  実測値１５０５．１３８８．実施例Ｂ．２１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−１−（６−（６’−アジドヘキシル）−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル）−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）オクタデカン−３，４−ジオール（３３＊）の合成
【０２９３】
【化１０３】
2016530212.tif 000125
【０２９４】
ＴＨＦ（１ｍＬ）中にビス−ＴＢＳエーテル３２＊（１６．０ｍｇ、１０．８μｍｏｌ）を有する溶液に、ＴＢＡＦ溶液（ＴＨＦ中に１Ｍ、０．１５０ｍＬ、０．１５ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。３．５時間後、反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を用いて希釈した。溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（グラジエント  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝１：０→１：１）によって精製し、ジオール３３＊（１０．５ｍｇ、７８％）を無色オイルとして得た。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋１２１．９（ｃ＝０．２、ＣＨＣｌ３）；Ｒｆ＝０．４０（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１）；ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３３２９，２９１９，２８５１，２０９６，１６４０，１５４３，１４６７，１４５５，１３５０，１０９４，１０４６，９０７，７３０，６９６ｃｍ−１；
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３２−７．１８（ｍ，１５Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ），４．８８−４．５１（ｍ，７Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．９８−３．９６（ｍ，１Ｈ），３．８８−３．７４（ｍ，５Ｈ），３．４１−３．２１（ｍ，６Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１９−２．０８（ｔ，Ｊ＝７．０５Ｈｚ，２Ｈ），１．５３−１．３５（ｍ，８Ｈ），１．３１−１．１８（ｍ，７２Ｈ），０．８１（ｍ，６Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．０，１３８．５，１３８．３，１３７．８，１２８．４４，１２８．３９，１２８．２，１２８．１，１２８．１，１２７．９，１２７．６２，１２７．６０，１２７
．４，９９．１，７９．３，７６．２，７６．０，７４．７，７４．５，７４．２，７３．２，７２．７，７１．４，６９．８，５１．３，４９．５，３６．７，３１．９，２９．７，２９．５，２９．４，２９．４，２９．３，２８．８，２６．５，２５．９，２５．７，２５．７，２２．７，１４．１；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ７７Ｈ１２８Ｎ４Ｏ９［Ｍ＋Ｎａ＋］：計算値  １２７５．９５７４  実測値：１２７５．９５３６．
実施例Ｂ．２２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−（６−（６’−アミノヘキシル）−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−ヘキサコサノイルアミノオクタデカン−３，４−ジオール（３４＊）の合成
【０２９５】
【化１０４】
2016530212.tif 000126
【０２９６】
ＥｔＯＨ（０．５ｍＬ）およびクロロホルム（０．１５ｍＬ）中にジオール３３＊（５５ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を有する溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／炭素（Ｐｄ（ＯＨ）２
ｏｎ  ｃｈａｒｃｏａｌ）（１０％ｗ／ｗ、ウェット３８ｍｇ）を加えた。溶液を、ｒ．ｔ．でＡｒ雰囲気下１５分間撹拌し、その後、Ｈ２ガスを懸濁液中に入れ、混合物を１２時間水素化した。混合物をセライトでろ過し、ＣＨ２Ｃｌ２、ＴＨＦ、およびＭｅＯＨを用いて完全に洗浄した。溶媒を真空内で除去し、粗生成物を、シリカゲルでシリカフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝４：１）によって精製し、リンカーを備えるスフィンゴ糖脂質３４＊（３８ｍｇ、９０％）を淡黄色粉末として得た。
［α］Ｄｒ．ｔ．＝＋６６．１（ｃ＝１．０、ピリジン）；Ｒｆ＝０．４４（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝４：１）；
ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３２９２，２９１８，２８５０，１６４０，１５３９，１４６８，１３０４，１０７３，１０３８，９７０，７２１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ−ｐｙｒ）ｄｅｒｕｔａ８．８８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），５．５４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），５．２４−５．２１（ｍ，１Ｈ），４．６２−４．５５（ｍ，３Ｈ），４．４４−４．３２（ｍ，５Ｈ），４．００−３．９２（ｍ，２Ｈ），３．３１−３．２６（ｍ，２Ｈ），２．５６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２２−２．１８（ｍ，１Ｈ），２．００−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．７８（ｍ，４Ｈ），１．７３−１．６０（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．４７（ｍ，２Ｈ），１．４４−１．２０（ｍ，７０Ｈ），０．８７（ｍ，６Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ｄ−ｐｙｒ）δ１７３．２，１００．４（ＪＣＨ＝１６９Ｈｚ），７６．０，７２．２，７１．０，７０．９，７０．７，７０．６，７０．３，６９．６，６７．５，５０．４，３９．６，３６．５，３３．９，３１．８，３０．１，２９．９，２９．７，２９．６８，２９．６５，２９．６２，２９．５９，２９．５，２９．４８，２９．２８，２７．８，２６．３，２６．１９，２６．１７，２５．６，２２．６，１４．０；ＨＲ  ＥＳＩ  Ｃ５６Ｈ１１２Ｎ２Ｏ９［Ｍ＋Ｈ＋］：計算値９５７．８４４１  実測値：９５７．８４６８．
次のスフィンゴ糖脂質を同様な方法で調製した。
【０２９７】
【化１０５−１】
2016530212.tif 000127
【０２９８】
【化１０５−２】
2016530212.tif 000128
【０２９９】
【化１０５−３】
2016530212.tif 000129
【０３００】
【化１０５−４】
2016530212.tif 000130
【０３０１】
【化１０５−５】
2016530212.tif 000131
【０３０２】
Ｃ．複合体の合成
実施例Ｃ．１：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサンアミド−３，４−ジヒドロキシオクタデシル）オキシ）３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メトキシ）へキシル）アミノ）−５−オキソペンタノエート（３５＊）の合成
【０３０３】
【化１０６】
2016530212.tif 000132
【０３０４】
ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ混合物（１：１：０．１、７ｍｌ）中にスフィンゴ糖
脂質３４＊（１０ｍｇ、１０．４４μｍｏｌ）を有する溶液に、過剰のグルタル酸無水物（１４．９ｍｇ、１３１μｍｏｌ）を一度に加え、ｒ．ｔ．で撹拌状態にしておいた。３日後、反応の完結は、ＬＣＭＳで出発物質質量の消失によって示され、反応混合物を乾燥させるために蒸発させ、結果として得られる残渣を、ジクロロメタンを用いて粉末にし、中間体カルボン酸（８ｍｇ、７１．５％）を白色粉末として得た。
ＩＲ（フィルム）νｍａｘ３３００，２９１８，２８５０，１７１８，１６３７，１５３９，１４６６，１３０４，１０７３，１０３８，９７０，７１９ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ピリジン−ｄ５）δ８．４５−８．３３（ｍ，２Ｈ），５．５３（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２９−５．１８（ｍ，１Ｈ），４．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．０，９．９，４．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４６（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４４−４．２５（ｍ，５Ｈ），４．０２（ｄｄｄ，Ｊ＝３９．８，９．９，６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４６（ｄｑ，Ｊ＝１３．３，６．６Ｈｚ，４Ｈ），２．６６（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３７−２．２１（ｍ，３Ｈ），１．９７−１．７４（ｍ，４Ｈ），１．７５−１．６２（ｍ，１Ｈ），１．６１−１．５０（ｍ，４Ｈ），１．４７−１．０６（ｍ，６５Ｈ），０．８６（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ピリジン）δ１７２．７８，１０１．０７，７６．２８，７２．１４，７１．０８，７０．５９，７０．４４，７０．３６，６９．７９，６８．３３，５０．９０，３９．２６，３６．４３，３５．４９，３３．９４，３１．７６，３０．０３，２９．８０，２９．７４，２９．６８，２９．６４，２９．５５，２９．４７，２９．４２，２９．２５，２６．８０，２６．１４，２６．０４，２５．８３，２２．５７，２１．７３，１３．９１；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（ＴＨＡＰ，ＲＮ）［Ｍ−Ｈ］−  計算値１０６９．８６１，実測値１０６９．６４２
ＤＭＳＯ：ＴＨＦ（１：１、５００μＬ）中に中間体カルボン酸（１．４５ｍｇ、１．３６μｍｏｌ）を有する溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．１８ｍｇ、１．６１μｍｏｌ）を一度に加え、続いて、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１．３ｍｇ、６．７８μｍｏｌ）を加えた。５日後、反応の完結は、ＬＣＭＳで出発物質質量の消失によって示された。その後、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩をクエンチするために、２−メルカプトエタノール（２０μＬ）を、反応混合物に加えた。ＮＨＳエステル活性化カルボン酸（３５＊）を、任意の精製なしで、ＳＰ−３莢膜ポリサッカライド関連サッカライドにカップリングするために使用した。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３５Ｈ１２２Ｎ３Ｏ１４［Ｍ＋Ｈ］＋  計算値  １１６７．８９２１，実測値  １１６８．８９３１．
実施例Ｃ．２：４−ニトロフェニル（６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサンアミド−３，４−ジヒドロキシオクタデシル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メトキシ）へキシル）カルバメート（３６＊）の合成
【０３０５】
【化１０７】
2016530212.tif 000133
【０３０６】
スフィンゴ糖脂質３４＊（３．９ｍｇ、４．１μｍｏｌ）を０．５ｍＬの乾燥ピリジン中に溶解し、その後、その溶液にビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（６．１ｍｇ、２０μｍｏｌ）、続いてＥｔ３Ｎ（２５μｌ、０．１７９ｍｍｏｌ）を加えた。結果として生じる黄色溶液を、ｒ．ｔ．で一晩撹拌し、その後、真空内で濃縮し、シリカゲルでカラムクロマトグラフィーによって、ＤＣＭ中０〜５〜１０〜２０％ＭｅＯＨのグラジエントを用いて精製し、３．６ｍｇ（３．２μｍｏｌ、７９％収率）のスフィンゴ糖脂質３６＊を淡黄色オイルとして生成した。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ピリジン）δ９．０２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．５６（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），４．６７（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．１，１０．０，４．５Ｈｚ，２Ｈ），４．５１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝９．０，５．６Ｈｚ，２Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），４．１０（ｄｄ，Ｊ＝９．８，５．７Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｄｄ，Ｊ＝９．８，６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｔｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．４５（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．３６−２．２３（ｍ，１Ｈ），１．９７−１．７９（ｍ，４Ｈ），１．７４−１．６５（ｍ，３Ｈ），１．６４−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．４１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，５Ｈ），１．３４−１．２２（ｍ，６５Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ピリジン）δ１７１．７０，１５５．９０，１５２．６５，１４３．２２，１２３．９２，１２１．０９，１００．０２，７５．１５，７１．０５，７０．０１，６９．９８，６９．６２，６９．４１，６９．３５，６８．７１，６７．２８，４９．８３，４０．１３，３５．３５，３２．８４，３０．６９，３０．６８，２８．９５，２８．７３，２８．６２，２８．５９，２８．５７，２８．５５，２８．５０，２８．４８，２８．４６，２８．４１，２８．３４，２８．１９，２８．１８，２５．５９，２５．０８，２４．９８，２４．７５，２１．５１，１２．８５．
ＨＲＭＳ：予期された［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１１４４．８３２２，実測値：１４４４．８３７３．
実施例Ｃ．３：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（（（６−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）へキシル）オキシ）メチル）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキシオクタデカン−２−イル）ヘキサコサンアミド（３７＊）の合成
【０３０７】
【化１０８】
2016530212.tif 000134
【０３０８】
ＣＨＣｌ３（１．２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．４ｍＬ）中にスフィンゴ糖脂質３４＊（１１．４ｍｇ、１２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５．３μＬ、３０μｍｏｌ）を有する撹拌溶液に、室温で、Ｎ−スクシンイミジル−３−マレイミドプロピオネート（７．９ｍｇ、３０μｍｏｌ）を加えた。混合物を２時間、その温度で撹拌し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）を用いて粉末化によって精製し、白色固体としてマレイミド３７＊（８．２ｍｇ、７．４μｍｏｌ）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ／ＣＤＣｌ３  １：３）δ６．７０（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１６−４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．８０（ｍ，３Ｈ），３．７９−３．７２（ｍ，３Ｈ），３．７１−３．５７（ｍ，４Ｈ），３．４６（ｍ，４Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．２０−２．１１（ｍ，２Ｈ），１．６６−１．１５（ｍ，８２Ｈ），０．８３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）．
実施例Ｃ．４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−メチル６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−（ベンジル（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−４，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキシ−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（３８＊）の合成
【０３０９】
【化１０９】
2016530212.tif 000135
【０３１０】
テトラサッカライド１０＊（３０．０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）中に取り、それに対してアンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）（登録商標）１２０Ｈ＋（５ｍｇ））で処理し、２４時間加熱還流した。反応混合物を冷却し、コットンプラグに通してろ過し、ＭｅＯＨ（３ｍＬ×４）を用いて完全に洗浄した。合わせた有機物を、真空内で蒸発させ、標的化合物３８＊に相当する淡黄色固体（３０ｍｇ、９８％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ７．５６−６．８６（ｍ，２０Ｈ），５．１４（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，２Ｈ），４．７０−４．３３（ｍ，９Ｈ），４．２２（ｄｄ，Ｊ＝３２．２，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９９−３．７２（ｍ，１１Ｈ），３．７０−３．４０（ｍ，１５Ｈ），３．３９−３．３２（ｍ，２Ｈ），３．２９−３．１５（ｍ，２Ｈ）．
実施例Ｃ．５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−メチル６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−アミノエトキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（３９＊）の合成
【０３１１】
【化１１０】
2016530212.tif 000136
【０３１２】
テトラサッカライド３８＊（３０．０ｍｇ）をメタノール（５ｍＬ）中に取り、１０％Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）を加えて、５０ｐｓｉで２４時間撹拌した。反応混合物を、ＰＴＦＥフィルターに通してろ過し、メタノール（３ｍＬ×３）、および１０％メタノール水溶液（３ｍＬ×３）を用いて完全に洗浄した。合わせたろ液を真空内で蒸発させた。１Ｈ，ＨＳＱＣｎｍｒは、まだ１つのベンジル基が残っていることを示した。そのため、〜１０ｍｇのＰｄ／Ｃをメタノール中の材料に加えて同じ反応条件下に再度さらし、６０ｐｓｉで１６時間水素化した。ＲＭをＰＴＦＥフィルターに通してろ過し、メタノール（３ｍＬ×３）、および１０％メタノール水溶液（３ｍＬ×３）を用いて完全に洗浄した。合わせたろ液を真空内で蒸発させ、標的テトラサッカライド３９＊に相当する白色固体（１８ｍｇ、８９％）を得た。
１ＨＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ４．６５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０５（ｄｔ，Ｊ＝１１．５，４．７Ｈｚ，１Ｈ），４．０２−３．９８（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９４−３．８４（ｍ，４Ｈ），３．８４−３．７６（ｍ，５Ｈ），３．６５（ｄｄ，Ｊ＝５．９，３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５８−３．４４（ｍ，８Ｈ），３．４１（ｔ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３８−３．３２（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．２４（ｍ，２Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）．
実施例Ｃ．５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−メチル６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−６−（２−（６−（４−ニトロフェノキシ）−６−オキソヘキサンアミド）エトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（４０＊）の合成
【０３１３】
【化１１１】
2016530212.tif 000137
【０３１４】
テトラサッカライド３９＊（３．０ｍｇ、３．９２μｍｏｌ）およびビス（４−ニトロフェニル）アジペート（９．８９ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、ピリジン（１ｍＬ）およびＤＣＭ（１ｍＬ）の混合物中に取り、５分間撹拌し、その後、５μＬのＥｔ３Ｎを用いて処理し、２０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去した。過剰のアジピン酸エステルを除去するためにＤＣＭ（３×１ｍＬ）を用いて洗浄し、残存する白色固体を乾燥させて生成物４０＊（３．９ｍｇ、９８％）を得た。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ８．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．０４−３．７４（ｍ，１３Ｈ），３．７０−３．３７（ｍ，１７Ｈ），３．２８−３．１９（ｍ，３Ｈ），２．６９（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），２．２８（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），１．８６−１．６６（ｍ，４Ｈ）．
実施例Ｃ．６：４−ニトロフェニル６−（（６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサンアミド−３，４−ジヒドロキシオクタデシル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メトキシ）へキシル）アミノ）−６−オキソヘキサノエート（４１＊）の合成
【０３１５】
【化１１２】
2016530212.tif 000138
【０３１６】
スフィンゴ糖脂質３４＊（１３．０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）およびビス（４−ニトロフェニル）アジペート（２６．０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を、ピリジン（１ｍＬ）およびＤＣＭ（１ｍＬ）の溶媒混合物中にｒ．ｔ．で取り、１時間撹拌し、その後、５μＬのＥｔ３Ｎを用いて処理し、１５分間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、黄色固体を得た。粗生成物を、溶出液としてＤＣＭおよびＭｅＯＨを用いてフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色固体として化合物４１＊（８．５ｍｇ、５２％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ８．２３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｓ，１Ｈ），３．９４−３．７９（ｍ，３Ｈ），３．７８−３．５３（ｍ，４Ｈ），３．５１−３．３９（ｍ，４Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１６（ｄｔ，Ｊ＝１５．１，７．３Ｈｚ，４Ｈ），１．８２−１．１０（ｍ，８４Ｈ），０．８２（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）．
実施例Ｃ．７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−メチル４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−（６−（（６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサンアミド−３，４−ジヒドロキシオクタデシル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メトキシ）へキシル）アミノ）−６−オキソヘキサンアミド）エトキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（４２＊）の合成
【０３１７】
【化１１３】
2016530212.tif 000139
【０３１８】
テトラサッカライド３９＊（４．６ｍｇ、６．０１μｍｏｌ）、およびスフィンゴ糖脂質４１＊（４．８ｍｇ、３．９８μｍｏｌ）を、ピリジン（１ｍＬ）−ＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）溶媒混合物中に溶解し、１５分間撹拌した。ＨＯＢｔ（０．９２ｍｇ、５．９７μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３０μＬ）を加え、撹拌を１８時間続けた。反応混合物を真空内で乾燥させ、水―ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３溶媒混合物を用いたＣ１８Ｓｅｐ−Ｐａｋカラムによって精製し、白色固体として標的生成物４２＊（３．０ｍｇ、４１％）を得た。
１ＨＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ４．８６（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１８−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．９８−３．７４（ｍ，１２Ｈ），３．７４−３．３６（ｍ，２１Ｈ），３．２９−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．２３−２．０８（ｍ，６Ｈ），１．６６−１．０８（ｍ，９２Ｈ），０．８４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：Ｃ９０Ｈ１６５Ｎ３ＮａＯ３４［Ｍ＋Ｎａ］＋，計算値１８５６，実測値１８５７．
実施例Ｃ．８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２イル）オキシ）−６−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−（２−（６−（（６−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサンアミド−３，４−ジヒドロキシオクタデシル）オキシ）−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メトキシ）へキシル）アミノ）−６−オキソヘキサンアミド）エトキシ）−４，５−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）オキシ）−３，５−ジヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（４３＊）の合成
【０３１９】
【化１１４】
2016530212.tif 000140
【０３２０】
複合体４２＊（０．５５ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（０．５ｍｌ）−ＴＨＦ（０．２５ｍＬ）中にｒ．ｔ．で取り、３０μＬの新たに調製された０．０５Ｍ  ＮａＯＨ水溶液を用いて処理し、ｒ．ｔ．で１．５時間撹拌した。反応混合物を、アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）（登録商標）１２０Ｈ＋を用いて中和し、その後、フィルターシリンジに通してろ過し、ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３溶媒混合物（２ｍＬ×３）を用いて完全に洗浄し、ろ液を真空内で蒸発させ、白色固体得て、白色固体を、ＣＨＣｌ３を用いて洗浄し、液体を別の容器に二度静かに移した。残っている白色固体を、真空内で乾燥させ、所望の生成物４３＊（０．４１ｍｇ、７７％）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ４．８６（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），４．１９−４．１１（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．７６（ｍ，９Ｈ），３．７３−３．３７（ｍ，１９Ｈ），３．１４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．２８−２．０９（ｍ，６Ｈ），１．７９−１．０６（ｍ，９２Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：Ｃ８８Ｈ１６０Ｎ３ＮａＯ３４［Ｍ＋Ｎａ−２Ｈ］＋，計算値１８２６，実測値１８２７．
Ｄ．生物学的評価
実施例Ｄ．１：リポソームの合成（図１参照）
［脂質の混合および貯蔵］
リポソーム前駆体の溶液は、１：４のクロロホルム：メタノールの溶液２．２ｍＬ中で、複合体４３＊（０．２ｍｇ、０．１１１μｍｏｌ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホクロリン（ＤＳＰＣ）（３．３６ｍｇ、４．２５μｍｏｌ）およびコレステロール（１．１ｍｇ、２．８５μｍｏｌ）を
混合することによって作られた。その後、４５ドーズのこのストック溶液を、５ｃｃ容積の５つのガラス製薬瓶に均等に分けて、各溶液を、真空内で蒸発させ、ガラス上に薄膜を形成し、−２０℃でアルゴン下、貯蔵した。各薬瓶は、９ドーズのリポソーム形成体を含むように作られており、９００μＬのリン酸緩衝食塩水にリポソームを水和させることによって再構成されるので、各ドーズは、１００μＬの溶液である。１ドーズ＝４．４μｇ（２．５ｎｍｏｌ）の複合体４３＊であり、１．７μｇのＳＰ３テトラサッカライド抗原に相当する（リンカーを含まない）。
［脂質膜の再水和］
各免疫付与の前日に、一つの冷凍薬瓶を解凍した。脂質膜は、９００μＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）をガラス製の貯蔵薬瓶に加え、６０℃（ＤＳＰＣのＴｍ＝５５℃）で３０分間撹拌することによって再水和され（フラスコを撹拌するためにロータリーエバポレーター、および温度制御のために熱浴を使用した。）、大きい多重膜リポソーム（ｌａｒｇｅ  ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ（ＬＭＶ）から成る少し乳白色の溶液を生成した。
［定義されたリポソームへの脂質押し出し］
脂質膜の再水和後、結果として生じる乳白色溶液を、ガラスシリンジに取り、２つのシリンジ（４００μ）間に適切なトラック−エッチ（ｔｒａｃｋ−ｅｔｃｈ）されたポリカーボネート膜を備える予熱（６０℃に）した脂質ミニ−押出し（ｍｉｎｉ−ｅｘｔｒｕｄｅｒ）システムを通ってゆっくり押し出した。各溶液を、最低で３１回、膜に通した。
ミニ−押出し装置：アバンティポーラーリピッド社（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，ｉｎｃ．）株式会社
ｈｔｔｐ：／／ａｖａｎｔｉｌｉｐｉｄｓ．ｃｏｍ／ｉｎｄｅｘ．ｐｈｐ？ｏｐｔｉｏｎ＝ｃｏｍ＿ｃｏｎｔｅｎｔ＆ｖｉｅｗ＝ａｒｔｉｃｌｅ＆ｉｄ＝１８５＆Ｉｔｅｍｉｄ＝１９３
膜：ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ）、ヌクレオポア（Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ）、製品＃８００２８２（０．４μｍ）
［リポソームの分析］
リポソーム溶液の一定分量を、プラスチックＵＶセルにロードし、動的光散乱法（マルバーン（Ｍａｌｖｅｒｎ）インストルメンツ、ゼータサイザーμＶ）を用いて分析した。分析は、各リポソーム形成体のサイズおよび集団分布を確かめた。２００〜２５０ｎｍの観察された直径を有する均一集団を観察した。
実施例Ｄ．２：ＣＲＭ１９７複合体（４４＊）の合成
【０３２１】
【化１１５】
2016530212.tif 000141
【０３２２】
１００μＬの無水ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解されたテトラサッカライド１１＊（２ｍｇ、２．８ｎｍｏｌ）を、１０μＬのトリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）と２００μＬの無水ＤＭＳＯ中に溶解された１０倍モル過剰のジ−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミジルアジペートエステルを有する撹拌溶液に滴下し、２時間室温で反応した。その後、０．４ｍｌの１００ｍＭ  Ｎａ−リン酸緩衝液、ｐＨ７．４を加え、未反応のジ−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミジルアジペートエステルを、クロロホルムを用いて二回抽出した。水層を回収し、１ｍＬの１００ｍＭ  Ｎａ−リン酸緩衝液、ｐＨ７．４に溶解された１ｍｇのＣＲＭ１９７（フィーネックス社（Ｐｆｅｎｅｘ  Ｉｎｃ．）、米国、カリフォルニア州、サンディエゴ）と室温で１２時間、反応させた。反応生成物を脱塩し、１０ｋＤａ遠心フィルター（ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて濃縮した。タンパク質濃縮物を、製造業者の推奨に従って、マイクロＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｍｉｃｒｏ  ＢＣＡ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ）（ピアス（Ｐｉｅｒｃｅ）社製）を用いて決定した。
［ＳＤＳ−ＰＡＧＥ］
試料を、Ｌａｍｍｌｉ緩衝液（０．１２５Ｍ  トリス、２０％（ｖ／ｖ）グリセロール、４％（ｗ／ｖ）ＳＤＳ、５％（ｖ／ｖ）ベータ−メルカプトエタノール、ブロモフェノ
ールブルー、ｐＨ６．８）に溶解し、９５℃で１０分間沸騰させた。試料を、１０％ポリアクリルアミドゲル中に通し、４０％（ｖ／ｖ）メタノールおよび７％（ｖ／ｖ）酢酸水溶液中に０．０２５％クマシーブリリアントブルーＲ−２５０を有する溶液を用いて染色した。ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により、複合体４４＊の特性は、非共有のＣＲＭ１９７担体タンパク質と比較して、より高い質量に向かって複合糖質の予期されたシフトおよび、ブロードしているバンドを示した（図２ａ参照）。
［ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  質量分析］
ＣＲＭ１９７およびＳＰ３テトラサッカライドＣＲＭ１９７複合体４４＊のＭＡＬＤＩ−ＴＯＦマススペクトルを、オートフレックス  スピード（Ａｕｔｏｆｌｅｘ  Ｓｐｅｅｄ）機器（ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）  ダルトニクス（Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ）社製、ブレーメン、ドイツ）を用いて得た。質量分析は、ポジティブリニアモードで操作された。スペクトルは、３０，０００〜２１０，０００のｍ／ｚ範囲で得られ、データを、機器と共に提供されるフレックスアナリシス（ＦｌｅｘＡｎａｌｙｓｉｓ）ソフトウェアを用いて分析した。２’，４’−ジヒドロキシアセトフェノン（ＤＨＡＰ）を、マトリックスとして使用し、試料をドライドドロップレット（ｄｒｉｅｄ  ｄｒｏｐｌｅｔ）技術を用いてスポットした。ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ機器は、複合体４４＊がＣＲＭ１９７分子につき、平均で〜６．５分子のＳＰ３テトラサッカライドをロードする抗原を表すことを示した（図２ｂ参照）。
実施例Ｄ．３：免疫付与
８週歳の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（チャールスリバー（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）、ドイツから購入）の２つのグループ（各６匹マウス）は、実施例Ｄ．１で得られたＳＰ３テトラサッカライドリポソーム（マウスにつき１．７μｇのＳＰ３テトラサッカライド抗原）、またはアラム（Ａｌｕｍ）アジュバントを有するマウスにつき１．７μｇのＳＰ３テトラサッカライド抗原に相当する実施例Ｄ．２で調製されたＳＰ３テトラサッカライド−ＣＲＭ１９７複合体４４＊を用いて皮下（ｓ．ｃ．）に免疫付与された。複合体４４＊を、アルヒドロゲル（Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ）（Ｂｒｅｎｎｔａｇ社製）（タンパク質μｇにつき１μＬアルヒドロゲル）と混合し、免疫付与の前に少なくとも１２時間４℃でインキュベートした。血液を、尾静脈を介して１週間間隔で採取した。血清を遠心分離によって赤血球から分離した。
実施例Ｄ．４：マイクロアレイの調製
アミンリンカーまたはタンパク質を有するオリゴサッカライドを、コードリンク（Ｃｏｄｅ  Ｌｉｎｋ）  Ｎ−ヒドロキシルスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル活性化ガラススライド（サーモディクス社（ＳｕｒＭｏｄｉｃｓ  Ｉｎｃ．）、エデン  プレイリー，ミネソタ州、米国）上に、圧電点着装置（Ｓ３；サイエニオン（Ｓｃｉｅｎｉｏｎ）社製、ベルリン、ドイツ）を用いて固定化した。マイクロアレイスライドを、湿度室において、２４時間、反応を完結するためにインキュベートし、５０ｍＭアミノエタノール溶液、ｐＨ９を用いて１時間５０℃でクエンチし、脱イオン水を用いて３回洗浄し、使用するまで乾燥させて保存した。
実施例Ｄ．５：マイクロアレイ結合アッセイ
スライドを、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）（ｗ／ｖ）中に１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を有する溶液を用いて室温で１時間ブロッキングし、ＰＢＳを用いて３回洗浄し、遠心分離（３００×ｇ、５分）によって乾燥させた。フレックスウェル（ＦｌｅｘＷｅｌｌ）６４（グレイス（Ｇｒａｃｅ）  バイオ−ラボ（Ｂｉｏ−Ｌａｂｓ）社製、ベンド、オレゴン州、米国）グリッドを、マイクロアレイスライドに適用した。得られる６４ウェルを、６４個の個々の実験に使用した。スライドを血清と共に、室温で１時間、湿度室においてインキュベートし、ＰＢＳ（ｗ／ｖ）中に１％ＢＳＡを有する溶液を用いて１：２００希釈し、ＰＢＳ（ｖ／ｖ）中に０．１％トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）−２０を有する溶液を用いて３回洗浄し、遠心分離（３００×ｇ、５分）によって乾燥させた。スライドを、室温で１時間、湿度室においてＰＢＳ（ｗ／ｖ）中に１％ＢＳＡを有する溶液で希釈さ
れた蛍光標識二次抗体と共にインキュベートし、ＰＢＳ（ｖ／ｖ）中に０．１％トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）−２０を有する溶液を用いて３回洗浄し、脱イオン水を用いて１度リンスし、遠心分離（３００×ｇ、５分）によって乾燥させ、ＧｅｎｅＰｉｘ４３００Ａマイクロアレイスキャナー（モレキュラーデバイスズ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）社製、サニーベール、カリフォルニア州、米国）を用いてスキャンニングした。画像解析を、ＧｅｎｅＰｉｘ  Ｐｒｏ７ソフトウェア（モレキュラーデバイスズ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）社製）を用いて行った。光電子増倍管（ＰＭＴ）電圧を、スキャンが、飽和信号がないように調節した。バックグラウンド除去平均蛍光強度（ＭＦＩ）値を、更なる分析のためにマイクロソフト  エクセルにエクスポートした。使用された二次抗体は、アレクサ  フルオー（Ａｌｅｘ  Ｆｌｕｏｒ）（登録商標）５９４ヤギ抗マウスＩｇＧ（γ１）ライフ  テクノロジーズ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）社製、１：４００希釈、アレクサ  フルオー（登録商標）６４７ヤギ抗マウスＩｇＧ２ａ（γ２ａ）（ライフ  テクノロジーズ社製、１：２００希釈、アレクサ  フルオー（登録商標）４８８ヤギ抗マウスＩｇＧ３（γ３）（ライフ  テクノロジーズ社製）１：２００希釈、であった。
【０３２３】
一次抗体反応を、０週、１週、および２週で回収された血清試料のグリカンマイクロアレイスクリーニングによって評価した。ＳＰ３オリゴサッカライド、天然ＳＰ３ポリサッカライド、およびネガティブコントロールとしてＳ．ニューモニアエ細胞壁ポリサッカライド（ＣＷＰＳ）を、ＮＨＳエステル活性化マイクロアレイスライド上に印刷した（図３ｂ参照）。ＳＰ３リポソームを用いて免疫付与されたマウスの代表的なマイクロアレイスキャンを、図３ｃに示し、ＩｇＧ３抗体が、抗原、ＳＰ３テトラサッカライド、並びにより小さいサブストラクチャー、および天然ＳＰ３ポリサッカライドに対して誘導されたことを示す。ＣＷＰＳに対する抗体は、マウスにおいて検出されず、ＳＰ３−関連抗原に対する免疫応答の特異性を示した。天然ＳＰ３ポリサッカライドに対する交差反応性は、最初の指示を与え、抗体は、保護を促進させるようにＳ．ニューモニエ細菌の表面に結合することが可能である。複合体４３＊を含むＳＰ３リポソームを用いての免疫付与後、全ての免疫付与マウスにおいてＳＰ３テトラサッカライド、および天然ＳＰ３ポリサッカライドに対するＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ３サブタイプの抗体を検出した（図３ｄ、３ｅ、３ｆは、両グループの６匹のマウスの平均データを示す）。ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ３抗体を、複合体４３＊を含むＳＰ３リポソームを用いて免疫付与されたマウスにおいてのみ検出し、ＳＰ３−ＣＲＭ１９７複合体４４＊を用いて免疫付与されたマウスにおいては検出しなかった。ＳＰ３−ＣＲＭ１９７複合体４４＊は、免疫付与後、２週間でＩｇＧ１抗体を誘導した。複合体４３＊を含むＳＰ３リポソームを用いての免疫付与後、抗体応答は、より速く、免疫付与後、１週間ですでに検出可能であった。
【０３２４】
これらのデータは、リポソームとして製剤化された複合体４３＊の免疫原性を示す。マウスにおける血清ＩｇＧ応答は、反応速度に関して、並びにＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ３産生に関してＳＰ３−ＣＲＭ１９７複合体４４＊より優れている。アイソタイプ変換は、Ｔ細胞依存性抗体応答を示す。血清ＩｇＧ抗体は、リポソームとして製剤化された複合体４３＊を用いての最初の免疫付与後、１週間で検出可能であった。天然ＳＰ３ポリサッカライドと交差反応する抗体は、Ｓ．ニューモニアエ細菌に結合し、肺炎球菌感染症に対する保護をもたらす潜在能力を示す。
【図２】
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【図１】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図３ｃ】
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【図３ｄ】
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【図３ｅ】
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【図３ｆ】
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【国際調査報告】
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