(57)【要約】肺の状態を処置するために有用な組成物、方法およびキットが本明細書で提供される。このような組成物は、相乗効果を示す量の非特異的ホスホジエステラーゼインヒビター（例えば、メチルキサンチン）を、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物、ならびにレスベラトロールと組み合わせて含み得る。肺の状態を有効にかつ安全に処置し得る低コスト治療法が未だにかなり必要である。本発明は、この必要性に対処し、関連する利点もまた提供する。
2016505023.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
（ｂ）メチルキサンチン；
を含む組成物であって、ここで該組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約１０ｍｇの該１種以上のロイシン代謝産物を含む、
組成物。
【請求項２】
レスベラトロールをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、約２５０〜１５００ｍｇの間のロイシンをを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物は、少なくとも約２００ｍｇのロイシン代謝産物を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物は、約１０〜７５０ｍｇの間のロイシン代謝産物を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記メチルキサンチンは、テオフィリンおよびテオブロミンからなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物は、少なくとも約５ｍｇのテオフィリンを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物は、約１〜１００ｍｇの間もしくは５〜５０ｍｇの間のテオフィリンを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物は、治療量以下の量の前記メチルキサンチンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物は、治療量以下の量のテオフィリンを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物は、約５〜５００ｍｇの間もしくは３０〜２５０ｍｇの間のレスベラトロールを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物は、非分枝状アミノ酸を実質的に含まない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物中のアミノ酸は、非分枝状アミノ酸を実質的に含まない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物中の全アミノ酸に対する非分枝状アミノ酸のパーセントは、約０．１％、１％、もしくは１０％未満である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物は、単位投薬量である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物は、経口投与、吸入もしくは静脈内送達のために製剤化される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記組成物は、少なくとも約４時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたって所望の循環レベルより高い循環レベルをもたらすために、徐放用に製剤化される、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】
前記徐放性製剤は、前記期間にわたって約１μＭより大きな、被験体におけるメチルキサンチンの循環レベルをもたらす、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
（ｂ）メチルキサンチン；
を含む組成物であって、
ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約１５、２５、５０、７５、もしくは１００であり、そして該組成物は、少なくとも約５ｍｇの該メチルキサンチンを含む、
組成物。
【請求項２２】
少なくとも約１０ｍｇのレスベラトロールをさらに含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２３】
前記メチルキサンチンは、テオフィリンもしくはテオブロミンである、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２４】
（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに
（ｂ）メチルキサンチン；
を含む組成物であって、
ここで（ｂ）に対する（ａ）のモル比は、少なくとも約４００、５００、７５０、もしくは１０００であり、そして
該組成物は、少なくとも約０．０５μｇの該メチルキサンチンを含む、
組成物。
【請求項２５】
少なくとも約０．０１μｇのレスベラトロールをさらに含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記メチルキサンチンは、テオフィリンもしくはテオブロミンである、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
前記組成物は、吸入のための単位投薬量として製剤化される、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２８】
前記組成物は、吸入器中にパッケージされる、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記吸入器は、前記組成物の少なくとも約２０単位投薬量、５０単位投薬量、２００単位投薬量、もしくは１０００単位投薬量を含むことができる、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
（ａ）ロイシン；および
（ｂ）メチルキサンチン
を含む組成物であって、
ここで成分（ａ）および（ｂ）は、被験体において約０．３〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．５〜１０μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを達成するために有効な量で存在する、
組成物。
【請求項３１】
（ａ）および（ｂ）の量は、被験体において約０．７〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．７〜３μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを誘発するために選択される、請求項２４に記載の組成物。
【請求項３２】
前記被験体は、ヒト、家畜化された動物、もしくは家畜である、請求項２４に記載の組成物。
【請求項３３】
（ａ）ロイシン；および
（ｂ）メチルキサンチン
を含む組成物であって、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の炎症マーカーの発現レベルおよび分泌を増大させるか、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を低下させることにおいて有効である量で存在する、
組成物。
【請求項３４】
（ｂ）は、約４０μＭの循環レベルを達成するために必要とされる量より低い量で存在する、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
処置の必要な被験体において肺の状態を処置するための方法であって、該方法は、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３６】
ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を増大させるか、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を低下させるための方法であって、該方法は、肺内皮細胞と、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物とを接触させて、該炎症マーカーもしくは該抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌の低下および／もしくは増大をもたらす工程を包含する、方法。
【請求項３７】
前記被験体は、ヒト、家畜化された動物、もしくは家畜である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記組成物は、単位投薬量として製剤化される、請求項２０、２４、もしくは３３に記載の組成物。
【請求項３９】
請求項１、２０、２４、または３３に記載の組成物の単位投薬量の複数日供給物、および複数日の期間にわたって該複数日供給物の投与を指示する説明書を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（参照）
本出願は、２０１３年１月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／７５２，９０９号への優先権の利益を主張し、当該出願は本明細書においてその全体が全ての目的のために援用される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
肺疾患もしくは肺の状態は、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を含む肺関連疾患の範囲に及び、これらには、全世界で数百万人の人々が罹患している。
【０００３】
例えば、全世界で３億人超の人々が喘息に罹患している。その有病数は、次の１０年間で約４億人にまで増大すると推測される。喘息は、繰り返される喘鳴および断続性の気流制限によって同定される慢性気道障害である。喘息は、気道炎症、粘液過剰分泌、および気道過敏性（ＡＨＲ）によって特徴付けられる。これら臨床的徴候が、少なくとも一部は、マスト細胞、Ｂ細胞および好酸球、ならびに多くの炎症性サイトカインおよびケモカインと一緒になって、Ｔ−ヘルパータイプ２（Ｔｈ２）細胞によって媒介される炎症応答であるということが研究で示された。
【０００４】
現在、喘息をコントロールするには３種の抗炎症剤があり、吸入ステロイド、システイニル−ロイコトリエンレセプターアンタゴニストおよびクロモリンを含む。しかし、システイニル−ロイコトリエンレセプターアンタゴニストおよびクロモリンの治療効力は非常に変動しやすく、患者のある種の亜群にとっては制限され得る。さらに、上記喘息患者のうちの５〜１０％は、現在の薬物処置によって十分にコントロールされておらず、彼らは、増悪の間に経口ステロイドを要する。経口ステロイドの使用は、多様な有害効果、最も顕著なことには、食欲亢進、胃潰瘍、睡眠困難（不眠症）、気分および行動の変化、顔面の紅潮（赤くなること）、ならびに水分保持の増大に起因する短期間での体重増加と一般に関連する。長期間摂取すると、ステロイド使用によって、緑内障、白内障、高血圧症、心疾患、糖尿病、肥満、呑酸／ＧＥＲＤ、骨粗鬆症、ミオパチー、ある種の感染症の増大、およびクッシング症候群がもたらされ得る。
【０００５】
ＣＯＰＤは、慢性気管支炎および気腫のうちの一方もしくは両方を含むと一般に考えられる医学的状態である。慢性気管支炎は、細菌感染もしくは癌腫のような医学的に定義された原因に起因しない持続性の（例えば、１年を超える）湿咳によって特徴付けられる。気腫は、空気領域の壁の破壊を含む、異常な永続性の不均一な、終末細気管支より遠位の空気領域の拡大である。ＣＯＰＤは、有毒な粒子もしくはガス（最も一般的には、喫煙に由来する）によって引き起こされ、肺における異常な炎症応答を誘発する。ＣＯＰＤの天然の経過は、急性増悪といわれる症状の時折ある突然の悪化（そのうちの大部分は、感染もしくは大気汚染によって引き起こされる）によって特徴付けられる。
【０００６】
現在、ＣＯＰＤの治療法は存在せず、死亡率を下げることが示されている手段は、禁煙および酸素補充のみである。ＣＯＰＤは、気管支拡張薬（例えば、β２作動薬および／もしくは抗コリン作用薬）で処置される。β２作動薬は、β２レセプターを刺激する一方で、抗コリン作用薬は、コリン作動性神経からの刺激をブロックし、両方とも、気道の周りの平滑筋を弛緩させ、気流を増大させる薬物である。これら薬剤は、ある程度まで特定の症状を改善し得るものの、それらは、ＣＯＰＤの進行を止めるには有効ではない。
【０００７】
メチルキサンチン（キサンチンおよびアルカロイドの誘導体のクラス）は、しばしば、気管支拡張薬として使用されてきた。メチルキサンチンは平滑筋を弛緩させ、中枢神経系を刺激し、心筋を刺激し、腎臓に作用して利尿を促進する。気管支平滑筋の弛緩を促進することにおけるそれらの有用性は、喘息の管理に有益である。
【０００８】
メチルキサンチンであるテオフィリンは、気道の閉塞性疾患の治療のための確立された医薬である。テオフィリンは、ホスホジエステラーゼ（ｃＡＭＰを分解する酵素）のいくつかのタイプの競合性であるが非選択的なインヒビターである。ｃＡＭＰの増大した濃度は、観察される気管支拡張を媒介し得る。他の提唱されるテオフィリンの作用機構としては、細胞内カルシウムの放出の阻害および気管支収縮物質であるアデノシンの競合的拮抗が挙げられる。
【０００９】
テオフィリンは、比較的低コストの処置であり、約１２時間の持続時間を与える徐放性調製物で投与され得る。しかし、テオフィリンは、多くの副作用を有する。テオフィリンの有害な消化管作用としては、悪心、嘔吐、腹痛、差し込み、および下痢が挙げられる。有害な中枢神経系作用としては、不眠症、頭痛、目眩、神経質、および痙攣発作（ｓｅｉｚｕｒｅ）が挙げられ、これらはしばしば、小児においてより重症である。痙攣発作は、いかなる他の前触れとなる徴候も症状もなく、テオフィリン毒性の初期の徴候として起こり得る。患者の利き手における振戦の増大が報告されている。心血管および肺の有害効果としては、頻脈、不整脈、および頻呼吸が挙げられる。これら毒性が原因で、テオフィリンはしばしば、喘息薬物療法における第２選択肢もしくは第３選択肢として使用される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の要旨）
肺の状態を有効にかつ安全に処置し得る低コスト治療法が未だにかなり必要である。本発明は、この必要性に対処し、関連する利点もまた提供する。
【００１１】
本願は、肺の状態（喘息および慢性閉塞性肺疾患が挙げられるが、これらに限定されない）を処置するために有用な組成物、方法、およびキットを提供する。本発明の組成物は、喘息もしくは慢性閉塞性肺疾患の発症の間に誘発される炎症応答と関連する炎症マーカーの発現および／もしくは分泌の低下、または抗炎症マーカーの発現および／もしくは分泌の増大において特に有効である。
【００１２】
本発明の一局面において、本発明の組成物は、ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびにメチルキサンチンを含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／または少なくとも約１００ｍｇの上記１種以上のロイシン代謝産物を含む。本発明の一局面において、本発明の組成物は、ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびにメチルキサンチンを含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／または少なくとも約１０ｍｇもしくは５０ｍｇの上記１種以上のロイシン代謝産物を含む。上記組成物は、レスベラトロールをさらに含み得る。
【００１３】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、少なくとも約５００ｍｇのロイシンを含む。上記組成物は、約２５０〜１５００ｍｇの間のロイシンを含み得る。上記組成物は、少なくとも約２００ｍｇのロイシン代謝産物を含み得る。上記組成物は、約１００〜７５０ｍｇの間のロイシン代謝産物を含み得る。上記組成物は、約１０〜７５０ｍｇの間もしくは５０〜７５０ｍｇの間のロイシン代謝産物を含み得る。
【００１４】
別の実施形態において、上記メチルキサンチンは、テオフィリンおよびテオブロミンからなる群より選択される。上記メチルキサンチンは、治療量以下で存在し得る。上記組成物は、少なくとも約５ｍｇのテオフィリンを含み得る。上記組成物は、約１〜１００ｍｇの間もしくは５〜５０ｍｇの間のテオフィリンを含み得る。上記組成物は、治療量以下のテオフィリンを含み得る。
【００１５】
一実施形態において、上記組成物は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールを含む。上記組成物は、約５〜５００ｍｇの間もしくは３０〜２５０ｍｇの間のレスベラトロールを含み得る。
【００１６】
さらに別の実施形態において、上記組成物は、非分枝状アミノ酸を実質的に含まない。上記組成物中のアミノ酸は、非分枝状アミノ酸を実質的に含まない可能性がある。上記組成物中の全アミノ酸に対する非分枝状アミノ酸のパーセントは、約０．１％、１％、もしくは１０％未満であり得る。
【００１７】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、単位投薬量である。上記組成物は、経口投与、吸入、もしくは静脈内送達のために製剤化され得る。上記組成物は、少なくとも約１時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたる徐放のために製剤化され得る。上記徐放性製剤は、少なくとも約１時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたって、上記組成物の１種以上の成分の所望の循環レベルを維持し得る。上記徐放性製剤は、少なくとも約４時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたって、所望の循環レベルより高い循環レベルをもたらし得る。上記所望の循環レベルは、上記組成物のうちの任意の成分についてであり得る。上記成分は、メチルキサンチン（例えば、テオフィリン）であり得る。いくつかの実施形態において、上記徐放性組成物は、特定の期間にわたって、約１μＭより大きなメチルキサンチンのレベルを維持する。上記徐放性製剤は、上記期間にわたって、約１μＭより高い、被験体におけるメチルキサンチンの循環レベルをもたらし得る。上記徐放性製剤は、上記期間にわたって、約１〜１０μＭ、１〜２０μＭ、１〜３０μＭ、もしくは１〜４０μＭの間である、被験体におけるメチルキサンチンの循環レベルをもたらし得る。
【００１８】
本発明の別の局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約１５、２５、５０、７５、もしくは１００であり、そして上記組成物は、少なくとも約５ｍｇの上記メチルキサンチンを含む。上記組成物は、少なくとも約１０ｍｇのレスベラトロールをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、上記メチルキサンチンは、テオフィリンもしくはテオブロミンである。上記組成物は、単位投薬量として製剤化され得る。
【００１９】
本発明の一局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで（ｂ）に対する（ａ）のモル比は、少なくとも約４００、５００、７５０、もしくは１０００であり、そして上記組成物は、少なくとも約０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、１μｇ、もしくは２μｇの上記メチルキサンチンを含む。上記組成物は、少なくとも約０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、もしくは２ｍｇの上記メチルキサンチンを含み得る。上記組成物は、少なくとも約１５μｇ、３０μｇ、５０μｇ、１００μｇ、もしくは５００μｇのロイシンをさらに含み得る。上記組成物は、少なくとも約５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、もしくは５００ｍｇのロイシンをさらに含み得る。上記組成物は、少なくとも約０．０１μｇ、０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、もしくは１μｇのレスベラトロールをさらに含み得る。上記組成物は、少なくとも約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、もしくは１ｍｇのレスベラトロールをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、上記メチルキサンチンは、テオフィリンもしくはテオブロミンである。上記組成物は、吸入のための単位投薬量として製剤化され得る。上記組成物は、吸入器中にパッケージされ得る。上記吸入器は、上記組成物の少なくとも約２０単位投薬量、５０単位投薬量、２００単位投薬量、もしくは１０００単位投薬量を含み得る。
【００２０】
本発明のさらに別の局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシン；および（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、被験体において約０．３〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．５〜１０μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを達成するために有効な量で存在する。（ａ）および（ｂ）の量は、被験体において約０．７〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．７〜３μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを誘発するように選択され得る。上記被験体は、ヒト、家畜化された動物、もしくは家畜であり得る。
【００２１】
別の局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシン；および（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を低下させるか、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を増大させることによって、肺の状態を改善することにおいて有効な量で存在する。
【００２２】
なお別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシン；および（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌の低下、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌の増大において有効である量で存在する。（ｂ）の量は、治療量以下であり得る。あるいは、（ｂ）の量は、約４０μＭの循環レベルを達成するために必要とされる量未満であり得る。
【００２３】
本発明はまた、処置の必要な被験体において肺の状態を処置するための方法を提供し、上記方法は、上記被験体に、本発明の組成物のうちのいずれか１つの組成物を投与する工程を包含する。
【００２４】
別の局面において、本発明は、ＮＦκＢ，  エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を低下させるか、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を増大させるための方法を提供し、上記方法は、肺内皮細胞と、本明細書に記載される本発明の組成物のうちのいずれか１つの組成物とを接触させて、上記炎症マーカーもしくは上記抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌における上記低下もしくは増大をもたらす工程を包含する。上記被験体は、ヒト、家畜化された動物、もしくは家畜であり得る。
【００２５】
さらに別の局面において、本発明は、本明細書に記載される本発明の組成物の単位投薬量の複数日供給物、および複数日の期間にわたって上記複数日供給物の投与を指示する説明書を含むキットを提供する。
【００２６】
（援用の表示）
本明細書中で言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、各個々の刊行物、特許、もしくは特許出願が、参考として援用されるために具体的かつ個々に示されているかのように、同程度まで本明細書に参考として援用される。
【００２７】
本発明の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲に具体的に示される。本発明の原理が利用される例証となる実施形態を示す以下の詳細な説明および添付の図面を参照することによって、本発明の特徴および利点のよりよい理解が得られる。その添付の図面は、以下のとおりである。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、マウス肺内皮細胞におけるＮＦκＢタンパク質発現に対するテオフィリンと、ロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。コントロールに対して＊ｐ＜０．０２。
【００２９】
【図２】図２は、マウス肺内皮細胞におけるＮＦκＢタンパク質発現に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロール（２００ｎＭ）馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。
【００３０】
【図３】図３は、マウス肺内皮細胞におけるホスホ−ＮＦκＢタンパク質発現に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。
【００３１】
【図４】図４は、マウス肺内皮細胞からのＩＬ１−βに対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＜０．００１。ＴＮＦαを陽性コントロールとして使用して、サイトカインの分泌を刺激した；＊＊は、全ての他の処置に対する有意な増大を示す（ｐ＜０．０１）。
【００３２】
【図５】図５は、マウス肺内皮細胞からのエオタキシン分泌に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＜０．０５。ＴＮＦαを陽性コントロールとして使用して、サイトカインの分泌を刺激した。
【００３３】
【図６】図６は、マウス肺内皮細胞からのエオタキシン分泌に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。
【００３４】
【図７】図７は、マウス肺内皮細胞における細胞のＩＬ  ６含有量に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。コントロールに対して＊ｐ＜０．０２。
【００３５】
【図８】図８は、マウス肺内皮細胞からのＩＬ  ６分泌に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＜０．０００１。ＴＮＦαを陽性コントロールとして使用して、サイトカインの分泌を刺激した；＊＊は、全ての他の処置に対する有意な増大を示す。
【００３６】
【図９】図９は、マウス肺内皮細胞からのＩＬ  ６分泌に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。
【００３７】
【図１０】図１０は、マウス肺内皮細胞におけるアディポネクチンレセプター１タンパク質発現に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。
【００３８】
【図１１】図１１は、マウス肺内皮細胞におけるアディポネクチンレセプター２タンパク質発現に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの相互作用的効果を示す。
【００３９】
【図１２】図１２は、マウス肺内皮細胞におけるアディポネクチンレセプター２タンパク質発現に対するテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＝０．０１８。
【００４０】
【図１３】図１３は、マウス肺内皮細胞におけるアディポネクチンレセプター１タンパク質発現に対するテオブロミンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＝０．０３；全ての他の処置に対して＊＊ｐ＝０．０００５。
【００４１】
【図１４】図１４は、マウス肺内皮細胞におけるアディポネクチンレセプタータンパク質発現に対するテオブロミンとロイシンおよびレスベラトロール馴化脂肪細胞培地との相互作用的効果を示す。全ての他の処置に対して＊ｐ＝０．０００１。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
（発明の詳細な説明）
本発明のいくつかの局面は、例証のために適用例を参照しながら以下に記載される。多くの具体的な詳細、関係、および方法が、本発明の十分な理解を提供するために示されることは理解されるべきである。しかし、関連分野の当業者は、１以上の具体的詳細を伴わずに、または他の方法を用いて本発明が実施され得ることを容易に認識する。別段示されなければ、本発明は、作用もしくは事象の例証された順序によって限定されない。なぜならいくつかの作用は、異なる順序で、および／または他の作用もしくは事象と同時に起こり得るからである。さらに、全ての例証される作用もしくは事象が、本発明に従う方法論を実施するために必要とされるわけではない。開示される組成物中の種々の成分の濃度は、例示であって、記載される濃度それ自体に限定されることを意味しない。
【００４３】
本明細書で使用される場合、用語「被験体」もしくは「個体」は、哺乳動物を含む。哺乳動物の非限定的例としては、ヒトおよびマウス（トランスジェニックマウスおよび非トランスジェニックマウスが挙げられる）が挙げられる。本明細書で記載される方法は、ヒト治療、前臨床、および獣医学的適用のどれにも有用であり得る。いくつかの実施形態において、上記被験体は、哺乳動物であり、いくつかの実施形態において、上記被験体は、ヒトである。他の哺乳動物としては、類人猿、チンパンジー、オランウータン、サル；家畜化された動物（ペット）（例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、マウス、ラット、ウサギ、およびフェレット）；家畜化された家畜（例えば、ウシ、水牛、バイソン、ウマ、ロバ、ブタ、ヒツジ、およびヤギ）；または動物園で典型的には見られるエキゾチックアニマル（例えば、クマ、ライオン、トラ、ヒョウ、ゾウ、カバ、サイ、キリン、レイヨウ、ナマケモノ、ガゼル、シマウマ、ヌー、プレーリードッグ、コアラ、カンガルー、パンダ、ジャイアントパンダ、ハイエナ、アザラシ、アシカ、およびゾウアザラシ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
用語「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ（投与する）」、「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ（投与される）」、「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｓ（投与する）」および「ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ（投与）」とは、当該分野で公知の経路（静脈内、動脈内、経口、鼻、吸入、非経口、口内、局所、経皮、直腸、筋肉内、皮下、骨内、経粘膜、もしくは腹腔内の投与経路が挙げられるが、これらに限定されない）を介して被験体に組成物を提供することとして定義される。本願のある種の実施形態において、組成物の経口投与経路は、好ましいことであり得る。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「薬剤」もしくは「生物学的に活性な薬剤」とは、生物学的、薬学的もしくは化学的な化合物もしくは他の実体をいう。非限定的な例としては、単純なもしくは複雑な有機分子もしくは無機分子、ペプチド、タンパク質、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、オリゴヌクレオチド（例えば、アプタマーおよびポリヌクレオチドが挙げられる）、抗体、抗体誘導体、抗体フラグメント、ビタミン誘導体、炭水化物、毒素、または化学療法的な化合物が挙げられる。種々の化合物が合成され得る（例えば、低分子およびオリゴマー（例えば、オリゴペプチドおよびオリゴヌクレオチド）、ならびに種々のコア構造に基づく合成有機化合物）。さらに、種々の天然供給源が、スクリーニングのための化合物を提供し得る（例えば、植物もしくは動物抽出物など）。当業者は、本発明の薬剤の構造的性質に関して限定はないことを容易に認識し得る。
【００４６】
用語「有効量」もしくは「治療上有効な量」とは、以下で定義されるように、意図される適用（疾患処置が挙げられるが、これに限定されない）をもたらすために十分な、本明細書で記載される化合物の量をいう。治療上有効な量は、意図される適用（インビトロもしくはインビボ）、または処置されている被験体および疾患状態（例えば、被験体の体重および年齢）、疾患状態の重症度、投与様式などに依存して変動し得、それは、当業者によって容易に決定され得る。この用語はまた、標的細胞における特定の応答（例えば、増殖の低下または標的タンパク質の活性のダウンレギュレーション）を誘発する用量にも適用される。具体的な用量は、選択される特定の化合物、従う投与レジメン、それが他の化合物と組み合わせて投与されるか否か、投与のタイミング、それが投与される組織、およびそれが行われる物理的送達系に依存して変動する。
【００４７】
用語「単離された」とは、本発明の組成物の成分（このような成分としては、例えば、メチルキサンチンＰＤＥインヒビター（テオフィリンおよびテオブロミンが挙げられるが、これらに限定されない）、ロイシンおよびロイシン代謝産物（ＨＭＢ、ＫＩＣおよびα−ヒドロキシ−イソカプロン酸が挙げられる）、ならびにレスベラトロールが挙げられる）に適用される場合、物質もしくは類似の物質が天然に存在するかまたは最初に得られる際に存在し得る他の成分のうちの少なくともいくつかを欠いている、上記物質の調製物をいう。ロイシンもしくはその代謝産物は、本発明の組成物において使用される場合、その遊離形態が一般的であり、ポリペプチドもしくは生体分子の一部としてではない。単離された物質は、精製技術を使用して、それを供給源混合物から富化することによって調製され得る。富化は、例えば、溶液の重量／容積のように絶対的に測定され得るか、または供給源混合物中に存在する第２の潜在的妨害物質に対して相対的に測定され得る。本発明の実施形態の富化を増大させることは、ますますより好ましい。従って、例えば、２倍富化は好ましく、１０倍富化はより好ましく、１００倍富化はより好ましく、１０００倍富化はさらにより好ましい。物質はまた、人工アセンブリのプロセスによって（例えば、化学合成によって）単離された状態で提供され得る。
【００４８】
経路の「モジュレーター」とは、同じ特定のシグナル伝達経路にマッピングされる１種以上の細胞タンパク質の活性もしくは発現を調節する物質もしくは薬剤をいう。モジュレーターは、シグナル伝達分子の活性および／または発現レベルもしくは発現パターンを増大もしくは抑制し得る。モジュレーターは、経路中の成分に直接結合することによって上記成分を活性化し得る。モジュレーターはまた、１種以上の関連成分と相互作用することによって、経路中の成分を間接的に活性化し得る。上記経路の出力結果は、タンパク質の発現もしくは活性レベルに関して測定され得る。経路中のタンパク質の発現レベルは、対応するｍＲＮＡもしくは関連する転写因子のレベル、ならびに細胞下位置における上記タンパク質のレベルに反映され得る。例えば、ある種のタンパク質は、特定の細胞下成分（核、ミトコンドリア、エンドソーム、リソソームもしくは細胞の他の膜構造が挙げられるが、これらに限定されない）の中にもしくは外へと転移することによって活性化される。上記経路の出力結果はまた、生理学的効果（例えば、ミトコンドリア生合成、脂肪酸酸化、もしくはグルコース取り込み）に関して測定され得る。
【００４９】
「アクチベーター」とは、経路出力結果を増大させる様式で上記経路に影響を及ぼすモジュレーターをいう。特定の標的の活性化は、直接的（例えば、上記標的との相互作用によって）もしくは間接的（例えば、上記標的を含むシグナル伝達経路において上記標的の上流にあるタンパク質との相互作用によって）であり得る。
【００５０】
「サプレッサー」は、経路出力結果を低下させる様式で経路に影響を及ぼすモジュレーターであり得る。
【００５１】
用語「実質的に含まない」とは、本明細書で使用される場合、約１０％未満、約５％未満、約１％未満、約０．５％未満、０．１％未満もしくはさらにより少ない特定の成分を有する組成物をいう。例えば、非分枝鎖アミノ酸を実質的に含まない組成物は、約１％未満の非分枝鎖アミノ酸であるリジンを有し得る。上記パーセンテージは、全組成物のうちのパーセントとして、または上記組成物の部分集合のパーセントとして決定され得る。例えば、非分枝鎖アミノ酸を実質的に含まない組成物は、全組成物のうちのパーセントとして、または上記組成物中のアミノ酸のパーセントとして、１％未満の非分枝鎖アミノ酸を有し得る。上記パーセンテージは、質量パーセンテージ、モルパーセンテージ、もしくは体積パーセンテージであり得る。
【００５２】
「治療量以下」（sub-therapeutic  amount）の薬剤、アクチベーターもしくは治療は、意図される適用のためのその薬剤、アクチベーターもしくは治療の有効量より少ない量であるが、別の薬剤もしくは治療の有効量もしくは治療量以下の量と組み合わせられた場合に、例えば、有効な効果の達成における、および／もしくは副作用の低下における相乗効果に起因して、所望の結果を生じ得る。
【００５３】
「相乗効果的」もしくは「相乗効果を示す」効果は、組み合わせ組成物の１以上の効果が各成分単独の１以上の効果より大きいか、または組み合わせ組成物の１以上の効果が各成分単独の１以上の効果の合計より大きくあり得るようなものであり得る。上記相乗効果は、上記成分のうちの１つ単独での被験体に対する効果、あるいは個々に投与される場合の上記成分の各々の相加的効果の約１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、１１０％、１２０％、１５０％、２００％、２５０％、３５０％、もしくは５００％であり得るか、またはこれらより大きくすらあり得る。上記効果は、本明細書で記載される測定可能な効果のうちのいずれかであり得る。
【００５４】
（組成物）
【００５５】
本発明の組成物は、（ｉ）非特異的ＰＤＥインヒビター（例えば、メチルキサンチン）、ならびに（ｉｉ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のロイシン代謝産物の組み合わせを含む。上記組成物は、レスベラトロールをさらに含み得る。これらの成分の組み合わせは、肺の状態（喘息および慢性閉塞性肺疾患が挙げられるが、これらに限定されない）を処置するために有用であり得る。上記組み合わせは、喘息もしくは慢性閉塞性肺疾患の発症の間に誘発される炎症応答と関連する炎症マーカーの発現および／もしくは分泌の低下、または抗炎症マーカーの発現および／もしくは分泌の増大において特に有効であり得る。いくつかの実施形態において、上記成分は、相乗効果（上記被験体への副作用の低減および／もしくは処置コストの低減をもたらす投薬量の減少が挙げられるが、これらに限定されない）を提供するように製剤化される。他の実施形態において、上記相乗効果は、任意の他の従来の処置を通じて達成できない結果を可能にし得る。
【００５６】
一実施形態において、本発明の組成物は、ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびにメチルキサンチンを含み、ここで上記組成物は、少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／または少なくとも約１００ｍｇの上記１種以上のロイシン代謝産物を含む。
【００５７】
別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンならびに／もしくはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約１５、２５、５０、７５、もしくは１００であり、そして上記組成物は、少なくとも約５ｍｇの上記メチルキサンチンを含む。本明細書で記載されるように、少なくとも約５ｍｇのメチルキサンチンの投与は、十分な質量比のロイシンもしくはロイシン代謝産物と組み合わせた場合に有効であり得る治療量以下の投与を提供し得る。
【００５８】
本発明の一局面において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシンならびに／あるいはケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、α−ヒドロキシ−イソカプロン酸、およびヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）からなる群より選択される１種以上のロイシン代謝産物；ならびに（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで（ｂ）に対する（ａ）のモル比は、少なくとも約４００、５００、７５０、もしくは１０００であり、そして上記組成物は、少なくとも約０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、１μｇ、もしくは２μｇの上記メチルキサンチンを含む。上記組成物は、少なくとも約０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、もしくは２ｍｇの上記メチルキサンチンを含み得る。上記組成物は、多くて約０．００１ｇ、０．０１ｇ、０．１ｇ、０．５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５ｇ、３ｇ、５ｇ、１０ｇ、もしくは２０ｇのメチルキサンチンを含み得、これは、テオフィリンおよび／もしくはテオブロミンであり得る。上記組成物は、少なくとも約１５μｇ、３０μｇ、５０μｇ、１００μｇ、もしくは５００μｇのロイシンをさらに含み得る。上記組成物は、少なくとも約５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、もしくは５００ｍｇのロイシンをさらに含み得る。上記組成物は、多くて約０．００１ｇ、０．０１ｇ、０．１ｇ、０．５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５ｇ、３ｇ、５ｇ、１０ｇ、もしくは２０ｇのロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を含み得る。上記組成物は、少なくとも約０．０１μｇ、０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、もしくは１μｇのレスベラトロールをさらに含み得る。上記組成物は、少なくとも約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、もしくは１ｍｇのレスベラトロールをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、上記メチルキサンチンは、テオフィリンもしくはテオブロミンである。上記組成物は、吸入のための単位投薬量として製剤化され得る。
【００５９】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、少なくとも約２０単位投薬量、５０単位投薬量、２００単位投薬量、もしくは１０００単位投薬量を保持するように設計された吸入器内に保持される。上記吸入器は、単位用量あたり少なくとも約０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、１μｇ、もしくは２μｇのメチルキサンチンを含み得る。上記吸入器は、単位用量あたり少なくとも約１５、３０、５０、１００、もしくは５００のロイシンを含み得る。上記吸入器は、単位用量あたり少なくとも約０．０１μｇ、０．０５μｇ、０．１μｇ、０．５μｇ、もしくは１μｇのレスベラトロールを含み得る。
【００６０】
さらに別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシン；および（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、被験体において約０．３〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．５〜１０μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを達成するために有効な量で存在する。これら目標の循環レベルは、被験体における肺の状態に対して有益な効果を提供することが示された本明細書で記載される処置濃度（実施例を参照のこと）に相当する。
【００６１】
さらに別の実施形態において、本発明の組成物は、（ａ）ロイシン；および（ｂ）メチルキサンチンを含み、ここで成分（ａ）および（ｂ）は、ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６からなる群より選択される肺内皮細胞における１種以上の炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌の低下、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される１種以上の抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌における増大において有効な量で存在する。（ｂ）の量は、治療量以下であり得る。あるいは、（ｂ）の量は、約４０μＭの循環レベルを達成するために必要とされる量より少なくてもよい。実施例に記載されるように、ロイシンおよびメチルキサンチンの組み合わせは、肺内皮細胞における１種以上の炎症マーカー（例えば、ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６）の発現レベルもしくは分泌の低下、またはアディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２からなる群より選択される１種以上の抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌の増大に対して有益な効果を有する量で組み合わせられ得る。
【００６２】
（ホスホジエステラーゼインヒビター）
【００６３】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）インヒビター（例えば、非選択的ＰＤＥインヒビター）を含み得る。ＰＤＥインヒビターは、天然に存在し得るか、または天然に存在しない可能性があり（例えば、製造されている）、上記ＰＤＥインヒビターを含む天然供給源、もしくはその抽出物（例えば、精製されている）の形態で提供され得る。非選択的ＰＤＥインヒビターの例としては、カフェイン、テオフィリン、テオブロミン、３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、ペントキシフィリン（３，７−ジヒドロ−３，７−ジメチル−１−（５オキソヘキシル）−１Ｈ−プリン−２，６−ジオン）、アミノフィリン、パラキサンチン、ならびにこれらの塩、誘導体、代謝産物、異化生成物、同化生成物、前駆体、およびアナログが挙げられるが、これらに限定されない。ＰＤＥインヒビターの天然供給源の非限定的な例としては、コーヒー、茶、ガラナ、イェルバ・マテ、ココア、およびチョコレート（例えば、ダークチョコレート）が挙げられる。種々の実施形態において、組成物は、以下の成分のうちの１種以上を含まない（もしくは排除する）ように製剤化される：カフェイン、緑茶抽出物またはガラナ種子もしくはガラナ植物体の抽出物。本発明の組成物において使用され得るホスホジエステラーゼインヒビターの例は、米国特許出願第１３／５４９，３８１号（２０１２年７月１３日出願、その全体において本明細書に参考として援用される）に記載される。
【００６４】
上記ＰＤＥインヒビターはまた、メチルキサンチンであり得る。メチルキサンチンの例としては、カフェイン、エフェドリン、オクストリフィリン、アミノフィリン、パラキサンチン、ＩＢＭＸ、ペントキシフィリン、テオブロミン、およびテオフィリンが挙げられる。アミノフィリン製剤の例としては、アミノフィリンＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  ＧｍｂＨ）が挙げられる。エフェドリン製剤の例としては、ｂｒｏｎｋａｉｄ（登録商標）（Ｂａｙｅｒ  ＡＧ）、ｂｒｏｎｃｈｏｌａｔｅ（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、ｐｒｉｍａｔｅｎｅ（登録商標）（Ｗｙｅｔｈ）、ｔｅｄｒａｌ  ＳＡ（登録商標）、およびｍａｒａｘ（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ）が挙げられる。テオフィリン製剤の例としては、ｅｕｐｈｙｌｌｉｎ（Ｎｙｃｏｍｅｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ＧｍｂＨ）、およびｔｈｅｏ−ｄｕｒ（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ，  Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｌｔｄ）が挙げられる。オクストリフィリン製剤の例としては、Ｃｈｏｌｅｄｙｌ  ＳＡ（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ）が挙げられる。
【００６５】
（ロイシンおよびロイシン代謝産物）
【００６６】
本発明は、ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物を含む組成物を提供する。上記ロイシンおよび／もしくはロイシン代謝産物は、遊離形態で使用され得る。用語「遊離」とは、成分を参照して本明細書で使用される場合、上記成分がより大きな分子複合体の中に組みこまれないことを示す。例えば、組成物は、タンパク質の中に組みこまれない遊離ロイシンもしくは遊離ヒドロキシメチルブチレートを含み得る。上記ロイシンは、Ｌ−ロイシンであり得る。
【００６７】
理論に限定されることなく、分枝鎖アミノ酸（例えば、ロイシン）の摂取は、サーチュインシグナル伝達（Ｓｉｒｔ１およびＳｉｒｔ３が挙げられる）、およびＡＭＰＫシグナル伝達（そのうちの１以上が、好都合なことには、炎症性サイトカインパターンを調節し得る）を刺激し得る。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかは、ロイシンの塩、誘導体、代謝産物、異化生成物、同化生成物、前駆体、およびアナログを含み得、例えば、上記代謝産物としては、ヒドロキシメチルブチレート（ＨＭＢ）、ケトイソカプロン酸（ＫＩＣ）、およびケトイソカプロン酸が挙げられ得る。上記ＨＭＢは、種々の形態（カルシウム  ３−ヒドロキシ−３−メチルブチレート  ハイドレートが挙げられる）にあり得る。
【００６８】
本発明のある種の実施形態において、本明細書で開示される組成物のうちのいずれかは、それらが、リジン、グルタミン酸、プロリン、アルギニン、バリン、イソロイシン、アスパラギン酸、アスパラギン、グリシン、スレオニン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン、アラニン、トリプトファン、メチオニン、グルタミン、タウリン、カルニチン、シスチンおよびシステインからなる群より選択される１種以上のアミノ酸を含まない（もしくは排除する）ように製剤化され得る。
【００６９】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、非分枝鎖アミノ酸のうちの１種以上もしくは全てを実質的に含まなくてもよい。例えば、上記組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、および／もしくはチロシンを含まなくてもよい。いくつかの実施形態において、上記組成物は、イソロイシンおよび／もしくはバリンを実質的に含まなくてもよい。上記組成物は、いかなる非分枝鎖アミノ酸をも含まなくてもよい。非分枝鎖アミノ酸の質量もしくはモル量は、上記組成物全体の、または上記組成物中の全アミノ酸の約０．０１％、０．１％、０．５％、１％、２％、５％、もしくは１０％未満であり得る。
【００７０】
（薬学的に活性な薬剤）
【００７１】
本発明の組成物は、メチルキサンチンＰＤＥインヒビター以外の１種以上の薬学的に活性な薬剤をさらに含み得る。治療上活性な薬剤の例としては、イブプロフェン、アルドリル、ならびにゲムフィブロジル（ｇｅｍｆｅｂｒｏｚｉｌ）、ベラパミル、マックスザイド、ジクロフェナクおよびメトプロロール（ｍｅｔｒｏｌｏｌ）、マプロチリン（ｍａｐｒｏｌｔｉｌｉｎｅ）、トリアゾラムおよびミノキシジルが挙げられる。例えば、その組み合わせ組成物は、薬学的に活性な抗糖尿病薬、減量薬（ｗｅｉｇｈｔ  ｌｏｓｓ  ａｇｅｎｔ）、もしくはカルシウム調節剤を含み得る。米国特許第７，１０９，１９８号および米国特許出願第２００９０１４２３３６号は、本明細書で記載される組み合わせ組成物中に含めるのに適した、種々の薬学的に活性な薬剤もしくは治療上活性な薬剤を記載する。抗糖尿病薬の例としては、ビグアニド（例えば、メトホルミン）、チアゾリジンジオン（ｔｈｉａｚｏｌａｄｉｎｅｄｉｏｎｅ）およびメグリチニド（例えば、レパグリニド、ピオグリタゾン、およびロシグリタゾン）、αグルコシダーゼ（ｇｌｕｃｏｓｉｄｅａｓｅ）インヒビター（例えば、アカルボース）、スルホニルウレア（例えば、トルブタミド、アセトヘキサミド、トラザミド、クロルプロパミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド、グリクラジド）、インクレチン、麦角アルカロイド（例えば、ブロモクリプチン）、ならびにＤＰＰインヒビター（例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、リナグリプチン（ｌｉｎｇｌｉｐｔｉｎ）、デュトグリプチン、ジェミグリプチン、アログリプチン、およびベルベリン）が挙げられる。上記抗糖尿病薬は、経口抗糖尿病薬であり得る。上記抗糖尿病薬はまた、注射用の抗糖尿病薬（インスリン、アミリンアナログ（例えば、プラムリンチド）、およびインクレチン（ｉｎｒｅｔｉｎ）摸倣物（例えば、エキセナチドおよびリラグルチド）が挙げられる）であり得る。抗肥満治療薬の例としては、リパーゼインヒビター（例えば、オルリスタット）、ドパミン作用性化合物、ノルアドレナリン作用性化合物、およびセロトニン作動性化合物、カンナビノイドレセプターアンタゴニスト（例えば、リモナバント）、エキセナチド、プラムリンチド、およびＣＮＳ薬剤（例えば、トピラメート（ｔｏｐｉｍｅｒａｔｅ））が挙げられる。これらの例は、考察目的で提供されるのみであり、多様な薬物に対する本発明の適用可能性の広い範囲を示すことが意図される。どのような形であれ、本発明の範囲を限定することが意味されるものではない。
【００７２】
いくつかの実施形態において、メチルキサンチンＰＤＥインヒビターは、薬学的に活性な薬剤の対と以下のように組み合わせられ得る：グリピジドおよびメトホルミン；グリブリドおよびメトホルミン；ピオグリタゾンおよびグリメピリド；ピオグリタゾンおよびメトホルミン；レパグリニドおよびメトホルミン；ロシグリタゾンおよびグリメピリド；ロシグリタゾンおよびメトホルミン；ならびにシタグリプチンリンおよびメトホルミン。
【００７３】
本明細書で記載される組み合わせ組成物において使用される薬学的薬剤、もしくは任意の他の成分の量は、治療量以下で使用され得る。いくつかの実施形態において、治療量以下の薬剤もしくは成分を使用すると、上記薬剤の副作用が低下し得る。治療量以下の使用は、他の薬剤もしくは成分と相乗的に使用される場合に特に、なお有効であり得る。
【００７４】
上記薬剤もしくは成分の治療量以下の量は、治療的であると考えられる、より低い量にされる量であり得る。例えば、ＦＤＡガイドラインは、特定の状態を処置するために特定のレベルの投与を提唱し得、治療量以下の量は、ＦＤＡが提唱した投与レベルより下の任意のレベルである。上記治療量以下の量は、治療的な量であると考えられる量より約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、５０％、７５％、９０％、もしくは９５％低い可能性がある。上記治療的な量は、個々の被験体について、もしくは被験体の群について評価され得る。被験体の群は、全ての可能性のある被験体、または特定の特徴（例えば、年齢、体重、人種、性別、もしくは身体活動レベル）を有する被験体であり得る。
【００７５】
メトホルミンヒドロクロリドの例において、医師が提唱した開始用量は、１日に１０００ｍｇであり、被験体に特異的な投与は、１日に５００ｍｇから最大２５００ｍｇの範囲（メトホルミンヒドロクロリド長期放出錠剤ラベル  ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｌａｂｅｌ／２００８／０２１５７４ｓ０１０ｌｂｌ．ｐｄｆ）を有する。被験体の具体的な投与は、用量を力価測定し、治療応答を測定することによって、臨床医によって決定され得る。上記治療的投与レベルは、絶食時血漿グルコースレベルを測定し、グリコシル化ヘモグロビンを測定することによって決定され得る。治療量以下の量は、メトホルミンの推奨される投与より下である任意のレベルであり得る。例えば、被験体の治療的投与レベルが１日に７００ｍｇであると決定される場合、６００ｍｇの用量は、治療量以下の量である。あるいは、治療量以下の量は、個々の被験体よりむしろ、被験体の群に対して決定され得る。例えば、３００ポンドを超える体重を有する被験体についてのメトホルミンの平均治療的量が、２０００ｍｇである場合、治療量以下の量は、２０００ｍｇ未満の任意の量であり得る。いくつかの実施形態において、上記投与は、ヘルスケア提供者（患者の医師、看護師、栄養学者、薬剤師、もしくは他のヘルスケア専門家が挙げられるが、これらに限定されない）によって推奨され得る。ヘルスケア専門家は、ヘルスケアシステムと関連する個人もしくは企業を含み得る。ヘルスケア専門家の例としては、以下が挙げられ得る：外科医、歯科医、聴覚機能訓練士、言語療法士（ｓｐｅｅｃｈ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｓｔ）、内科医（総合診療医および専門医を含む）、フィジシャンアシスタント、看護師、助産師、調剤助手（ｐｈａｒｍａｃｏｎｏｍｉｓｔ）／薬剤師、栄養士、治療専門家、心理学者、理学療法士、採血者（ｐｈｌｅｂｏｔｏｍｉｓｔ）、作業療法士、検眼士、カイロプラクター、準医師（ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｆｆｉｃｅｒ）、救急救命士、パラメディックス（ｐａｒａｍｅｄｉｃｓ）、臨床検査技師（ｍｅｄｉｃａｌ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｔｅｃｈｎｉｃｉａｎ）、放射線技師、義肢装具士（ｍｅｄｉｃａｌ  ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ  ｔｅｃｈｎｉｃｉａｎｓ）、ソーシャルワーカー、およびいくつかのタイプのヘルスケアサービスを提供するように訓練された多様な他の人的資源。
【００７６】
メチルキサンチンの場合には、上記メチルキサンチンの治療上有効なレベルは、約４４〜１１１μＭの間の循環レベルであり得、これは、約１０〜２０μｇ／ｍＬに相当する。上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）の治療量以下のレベルは、約１１０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、９０μｇ／ｍＬ、８０μｇ／ｍＬ、７０μｇ／ｍＬ、６０μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、４４μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、３５μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、もしくは１μＭまたは１０μｇ／ｍＬ未満の任意の循環レベルであり得る。投与のために製剤化された本発明の組成物中の上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）の治療量以下のレベルは、約１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、もしくは２５０ｍｇ未満の上記メチルキサンチンであり得る。
【００７７】
本明細書で記載される成分（ロイシン、ＨＭＢ、ＫＩＣ、テオフィリン、テオブロミン、およびレスベラトロールが挙げられる）のうちのいずれかは、天然供給源から精製されるか、そして／または合成供給源から精製もしくは調製された精製形態で、本発明の組成物の中で使用され得る。上記天然供給源は、動物供給源もしくは植物供給源であり得る。上記成分は、少なくとも約９５％、９７％、９９％、９９．５％、９９．９％、９９．９９％、もしくは９９．９９９％にまで純粋であり得る。
【００７８】
（投与量）
【００７９】
本発明は、１種以上の供給源から単離された化合物（例えば、ロイシン、ロイシンの代謝産物（例えば、ＨＭＢ）、メチルキサンチン（例えば、テオフィリンおよびテオブロミン）、およびレスベラトロール）の組み合わせである組成物を提供する。本発明は、ロイシン、ロイシンの代謝産物（例えば、ＨＭＢ）、メチルキサンチン（例えば、テオフィリンおよびテオブロミン）、および／またはレスベラトロールが富化されている組成物を提供する。上記成分は、天然供給源から単離され得るか、または合成供給源から作り出され得、次いで、上記成分の純度を高めるために富化され得る。例えば、テオフィリンは、合成供給源から作り出され得、次いで、１以上の精製法によって富化され得る。さらに、ロイシンは、天然供給源から単離され得、次いで、１回以上の分離によって富化され得る。次いで、上記単離されかつ富化された成分（例えば、シルデナフィルおよびロイシン）は、被験体への投与のために組み合わせられ得かつ製剤化され得る。
【００８０】
いくつかの実施形態において、組成物は、ある量のメチルキサンチンもしくはＰＤＥインヒビター（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミンが挙げられるが、これらに限定されない）を含む。上記メチルキサンチンの量は、治療量以下の量、および／または上記組成物中の１種以上の他の化合物と、あるいは上記組成物と同時にもしくは時間的に近接して投与される上記化合物のうちの１種以上と相乗効果的である量であり得る。いくつかの実施形態において、上記メチルキサンチンもしくはＰＤＥインヒビターは、低用量、中用量、もしくは高用量で投与される。このことは、２つの用量間の関係を説明し、一般に、いかなる特定の用量範囲をも定義しない。上記組成物は、被験体が、上記組成物の選択された全１日用量を投与されるように、上記被験体に投与され得る。上記全１日用量は、２４時間にわたって投与される用量の合計によって決定され得る。
【００８１】
用量（これは、単位用量であり得る）は、約２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２５０ｍｇ、もしくはより多く、またはこれらより多く、またはこれら未満のロイシンを含み得る。上記ロイシンは、遊離ロイシンであり得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約１０００ｍｇの遊離ロイシンを含み得る。上記組成物は、約１０〜１２５０ｍｇの間、２００〜１２５０ｍｇの間、もしくは５００〜１２５０ｍｇの間のロイシンを含み得る。用量（これは、単位用量であり得る）は、約５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇもしくはより多く、またはこれらより多く、またはこれら未満のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢもしくはＫＩＣ）を含み得る。上記ロイシン代謝産物は、遊離ロイシン代謝産物であり得る。上記組成物は、約１０〜９００ｍｇ、５０〜７５０ｍｇ、もしくは４００〜６５０ｍｇの間の上記ロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢもしくはＫＩＣ）を含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約４００ｍｇの遊離ＨＭＢを含み得る。
【００８２】
いくつかの実施形態において、ロイシンの１日用量は、約０．５〜３．０ｇ／日（例えば、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多く）であり得るか、またはそれ未満であり得るか、またはそれより多くであり得る。ＨＭＢの１日用量は、約０．２０〜３．０ｇ／日（例えば、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多く）であり得るか、またはそれ未満であり得るか、またはそれより多くであり得る。ＫＩＣの１日用量は、約０．２〜３．０ｇ／日（例えば、０．２ｇ／日、０．４ｇ／日、０．５ｇ／日、０．７５ｇ／日、１ｇ／日、１．２５ｇ／日、１．５ｇ／日、１．７５ｇ／日、２ｇ／日、２．５ｇ／日、３ｇ／日、もしくはより多く）であり得るか、またはそれ未満であり得るか、またはそれより多くであり得る。
【００８３】
用量（これは、単位用量であり得る）は、約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、４００ｍｇ、８００ｍｇ、１０００ｍｇ、もしくは１５００ｍｇの、またはこれらより多くの、またはこれら未満の上記メチルキサンチンＰＤＥインヒビター（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含み得る。上記組成物は、約１〜１００ｍｇの間、５〜５０ｍｇの間、もしくは１０〜２０ｍｇの間の上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約２０ｍｇのテオフィリンもしくはテオブロミンを含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約２０ｍｇのテオフィリンを含み得る。
【００８４】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、テオフィリンおよびテオブロミンの両方を含み、テオフィリンおよびテオブロミンの全量は、約０．０１ｍｇ、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、４００ｍｇ、８００ｍｇ、１０００ｍｇ、もしくは１５００ｍｇであり得るか、またはこれらより多くあり得るか、またはこれら未満であり得る。
【００８５】
他の実施形態において、メチルキサンチンＰＤＥインヒビター（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）の１日用量は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ（メチルキサンチンＰＤＥインヒビターのｍｇ／上記用量を受ける被験体のｋｇ）、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、もしくはより多くであり得るか、またはこれらより多くであり得るか、またはこれら未満であり得る。
【００８６】
用量（これは、単位用量であり得る）は、約１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、３５ｍｇ、５０ｍｇ、５１ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、もしくはより多く、またはこれら未満、またはこれらより多くのレスベラトロールを含み得る。上記組成物は、約５〜５００ｍｇの間、３０〜２５０の間、もしくは３５〜１００ｍｇの間のレスベラトロールを含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールを含み得る。
【００８７】
レスベラトロールの１日の低用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ（レスベラトロールのｍｇ／上記用量を受ける被験体のｋｇ）、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、もしくはより多く、またはこれら未満、またはこれらより多くを含み得る；レスベラトロールの１日の中用量は、約２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、もしくはより多く、またはこれら未満、またはこれらより多くを含み得る；そしてレスベラトロールの１日の高用量は、約１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２２５ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、３５０ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、もしくはより多く、またはこれら未満、またはこれらより多くを含み得る
【００８８】
いくつかの実施形態において、組成物（これは、単位用量として製剤化され得る）は、（ａ）少なくとも約２５０ｍｇのロイシンおよび／もしくは少なくとも約１００ｍｇの上記１種以上のロイシン代謝産物、ならびに（ｂ）少なくとも約５ｍｇのメチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含み得る。上記組成物は、少なくとも約３５ｍｇのレスベラトロールをさらに含み得る。
【００８９】
他の実施形態において、組成物（単位用量として製剤化される）は、（ａ）約２５０〜１５００ｍｇの間のロイシンもしくは１００〜７５０ｍｇの間のロイシン代謝産物、および（ｂ）１〜１００ｍｇのメチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含み得る。他の実施形態において、組成物（単位用量として製剤化される）は、（ａ）約２５０〜１５００ｍｇの間のロイシン、１０〜７５０ｍｇのロイシン代謝産物、および／もしくは５０〜７５０ｍｇのロイシン代謝産物、ならびに（ｂ）１〜１００ｍｇのメチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含み得る。いくつかの実施形態において、上記メチルキサンチンは、テオフィリンであり、上記組成物は、約５〜５０ｍｇの間のテオフィリンを含む。
【００９０】
本発明のいくつかの実施形態において、上記組み合わせ組成物は、メチルキサンチンＰＤＥインヒビターに対して特定の比率のロイシンアミノ酸および／もしくはその代謝産物を有し得る。特定の比率は、肺の状態の有効なおよび／もしくは相乗効果的な処置を提供し得、このことは、例えば、ＮＦκＢタンパク質発現の低下、エオタキシン分泌の低下、ＩＬ１−β分泌の低下、細胞性ＩＬ６含有量もしくは分泌の低下、アディポネクチンレセプター１タンパク質発現の低下、およびアディポネクチンレセプター２タンパク質発現の低下として測定され得る。選択的ＰＤＥインヒビターアクチベーターに対するロイシンアミノ酸および／もしくはその代謝産物の比は、質量比、モル比、もしくは体積比であり得る。
【００９１】
いくつかの実施形態において、組成物は、（ａ）ロイシンおよび／もしくはその代謝産物（ＨＭＢを含む）ならびに（ｂ）メチルキサンチン（テオフィリンおよびテオブロミンを含む）を含み得、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、約０．１、０．５、１、２、５、１０、１５、２５、５０、７５、１００、２００、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、もしくは８００であり得るか、またはこれら未満であり得るか、またはこれらより高くあり得る。いくつかの実施形態において、上記（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、少なくとも約５０である。上記組成物はまた、最低量のメチルキサンチン（例えば、５ｍｇ、１０ｍｇ、もしくは５０ｍｇの上記メチルキサンチン）またはある範囲のメチルキサンチン量（例えば、５〜２５０ｍｇのメチルキサンチン）を含み得る。
【００９２】
他の実施形態において、組成物は、（ａ）メチルキサンチンＰＤＥインヒビター（テオフィリンおよびテオブロミンを含む）ならびに（ｂ）レスベラトロールを含み得、ここで（ｂ）に対する（ａ）の質量比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、２、５、１０、５０、１００、２００、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、もしくは６５０であり得るか、またはこれら未満であり得るか、またはこれらより高くあり得る。
【００９３】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、吸入のために製剤化され得る。吸入のために製剤化される上記組成物は、液体として製剤化され得る。吸入のために製剤化される上記組成物は、吸入器もしくはネブライザー内に収容され得る。上記吸入器もしくはネブライザーは、少なくとも約１０単位用量、２０単位用量、４０単位用量、１００単位用量、５００単位用量、１０００単位用量、もしくは２０００単位用量を保持し得る。本発明の組成物の単位用量は、約もしくは少なくとも約０．１ｍＬ、０．２５ｍＬ、０．５ｍＬ、１ｍＬ、もしくは５ｍＬの体積を有し得る。本発明の組成物の単位用量は、約０．５〜５ｍＬの体積を有し得。これは、約１〜１０回の吸入で投与され得る。
【００９４】
吸入のために製剤化される上記組成物は、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度、もしくは約以下の濃度未満のロイシンを含む液体形態で製剤化され得る：０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭもしくはより高い濃度。
【００９５】
吸入のために製剤化される上記組成物は、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度、もしくは約以下の濃度未満のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）を含む液体形態で製剤化され得る：約０．１μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、０．７５μＭ、１μＭ、１０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、６０μＭもしくはより高い濃度。吸入のために製剤化される上記組成物は、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度、もしくは約以下の濃度未満のＫＩＣを含む液体形態で製剤化され得る：約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭもしくはより高い濃度。
【００９６】
吸入のために製剤化される上記組成物は、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度、もしくは約以下の濃度未満の上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）を含む液体形態で製剤化され得る：約０．１μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、０．７５μＭ、１μＭ、１０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、６０μＭ、８０μＭ、１００μＭ、１２０μＭ、２００μＭ、もしくは４００μＭもしくはより高い濃度。
【００９７】
いくつかの実施形態において、ロイシン、ロイシンの任意の代謝産物、上記ＰＤＥインヒビター（例えば、メチルキサンチン）、およびレスベラトロールの投与は、ロイシン、ロイシンの代謝産物、メチルキサンチンおよび／もしくはレスベラトロールの特定の生理学的濃度もしくは循環レベルを達成するように設計され得る。上記生理学的濃度は、被験体の血流中で測定される循環レベルであり得る。上記被験体は、ヒトもしくは動物であり得る。選択された投与は、上記被験体の特徴（例えば、体重、エネルギー代謝の速度、遺伝的性質、民族性、身長、もしくは任意の他の特徴）に基づいて変更され得る。
【００９８】
いくつかの実施形態において、組成物の選択された用量は、被験体が上記組成物の所望の循環レベルを達成するように、上記被験体に投与され得る。成分の所望の循環レベルは、治療上有効なレベルもしくは治療量以下のレベルのいずれかであり得る。
【００９９】
上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭもしくはより多くのロイシンであり得る。上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度未満、もしくは約以下の濃度より多くのロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）であり得る：約０．１μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、０．７５μＭ、１μＭ、１０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、６０μＭもしくはより高い濃度。上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約０．２５ｍＭ、０．５ｍＭ、０．７５ｍＭ、１ｍＭもしくはより多くのＫＩＣであり得る。
【０１００】
上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度未満、もしくは約以下の濃度より多くの上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）であり得る：約０．１μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、０．７５μＭ、１μＭ、１０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、６０μＭ、８０μＭ、１００μＭ、１２０μＭ、２００μＭ、もしくは４００μＭもしくはより高い濃度。テオフィリンの上記治療上有効なレベルは、４４〜１１１μＭの間であり得、これは、約１０〜２０μｇ／ｍＬに相当する。テオフィリンの治療量以下のレベルは、約１１０μＭ、１００μＭ、９０μＭ、８０μＭ、７０μＭ、６０μＭ、５０μＭ、４４μＭ、４０μＭ、３５μＭ、３０μＭ、２０μＭ、１０μＭ、５μＭ、もしくは１μＭまたは１０μｇ／ｍＬ未満の任意のレベルであり得る。
【０１０１】
上記組成物の所望の循環レベルは、少なくとも約以下の濃度、約以下の濃度未満、もしくは約以下の濃度より多くの上記レスベラトロールであり得る：約４０ｎＭ、６０ｎＭ、８０ｎＭ、１００ｎＭ、１２０ｎＭ、１５０ｎＭ、２００ｎＭ、３００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ、１６００ｎＭ、３０００ｎＭ、もしくは５０００ｎＭもしくはより高い濃度。上記選択される用量は、上記被験体の特徴（例えば、体重、身長、民族性、もしくは遺伝的性質）に基づいて選択され得る。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、組成物は、被験体において約０．３〜２ｍＭ  ロイシンおよび約０．５〜１０μＭ  メチルキサンチンの循環レベルを達成するために有効な量で、ロイシンおよびメチルキサンチンを含む。
【０１０３】
約１，１２５ｍｇ  ロイシンの経口投与は、約０．５ｍＭ  ロイシンである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。約３００ｍｇ  ロイシンの経口投与は、約０．２５ｍＭである、被験体におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。
【０１０４】
約５００ｍｇのＨＭＢの経口投与は、約５μＭ  ＨＭＢである、被験体におけるＨＭＢの循環レベルを達成し得る。約１００ｍｇのＨＭＢの経口投与は、約０．８μＭ  ＨＭＢである、被験体におけるＨＭＢの循環レベルを達成し得る。
【０１０５】
約１０００ｍｇのテオフィリンの経口投与は、約１１０μＭ  テオフィリンである、被験体におけるテオフィリンの循環レベルを達成し得る。約２５〜３０ｍｇのテオフィリンの経口投与は、約１μＭ  テオフィリンである、被験体におけるテオフィリンの循環レベルを達成し得る。
【０１０６】
約１０００ｍｇのテオブロミンの経口投与は、約１１０μＭ  テオブロミンである、被験体におけるテオブロミンの循環レベルを達成し得る。約２５〜３０ｍｇのテオブロミンの経口投与は、約１μＭ  テオブロミンである、被験体におけるテオフィリンの循環レベルを達成し得る。
【０１０７】
約１１００ｍｇのレスベラトロールの経口投与は、約０．５ｍＭ  レスベラトロールである、被験体におけるレスベラトロールの循環レベルを達成し得る。約５０ｍｇのレスベラトロールの経口投与は、約２００ｎＭ  レスベラトロールである、被験体におけるレスベラトロールの循環レベルを達成し得る。
【０１０８】
吸入のために調製される投与（これは、液体形態にあり得る）は、上記所望の循環濃度より約１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、もしくは３倍大きい濃度で調製され得る。例えば、吸入のための製剤は、約０．５ｍＭ、１ｍＭ、もしくは０．５〜１ｍＭ  ロイシンを含み得、これらは、約０．５ｍＭである、被験体の肺組織におけるロイシンの循環レベルを達成し得る。吸入のための製剤は、約２００ｎＭ、４００ｎＭ、もしくは２００〜４００ｎＭ  レスベラトロールを含み得、これらは、約２００ｎＭである、被験体の肺組織におけるレスベラトロールの循環レベルを達成し得る。吸入のための製剤は、約１μＭ、２μＭ、もしくは１〜２μＭ  メチルキサンチンを含み得、これらは、約１μＭである、被験体の肺組織におけるメチルキサンチンの循環レベルを達成し得る。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、被験体に１種以上の組成物を投与した後に達成される所望の循環するモル比もしくは質量比を達成するように製剤化され得る。上記組成物は、本明細書で記載される組み合わせ組成物であり得る。上記モル比は、組み合わせ組成物の１種以上の成分のバイオアベイラビリティー、取り込み、および代謝処理を考慮して調節され得る。例えば、ある成分のバイオアベイラビリティーが低いのであれば、その成分のモル量は、上記組み合わせ組成物中の他の成分に対して増大させられ得る。いくつかの実施形態において、循環するモル比もしくは質量比は、投与後、約０．１時間、０．５時間、０．７５時間、１時間、３時間、５時間、または１０時間、１２時間、２４時間、もしくは４８時間以内に達成される。上記循環するモル比もしくは質量比は、約０．１時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３６時間、４８時間、７２時間、もしくは９６時間またはこれらより長い期間にわたって維持され得る。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、メチルキサンチンに対するロイシンの循環するモル比は、約１、５、１０、５０、１００、５００、１０００、５０００、もしくは１００００であるか、これら未満であるか、またはこれらより高い。いくつかの実施形態において、メチルキサンチンに対するＨＭＢの循環するモル比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、５０、もしくは１００であるか、またはこれらより高いか、もしくはこれら未満である。いくつかの実施形態において、レスベラトロールに対するメチルキサンチンの循環するモル比は、約０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、５０、もしくは１００であるか、またはこれら未満であるか、またはこれらより高い。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、組成物は、（ａ）ＮＦκＢタンパク質発現、（ｂ）エオタキシン、（ｃ）ＩＬ１−β、および（ｄ）細胞性ＩＬ６含有量もしくは分泌、（ｅ）アディポネクチンレセプター１タンパク質発現、および（ｆ）アディポネクチンレセプター２タンパク質発現からなる群より選択される、細胞における１種以上の炎症マーカーもしくは抗炎症マーカーの発現レベルもしくは分泌を改善することにおいて有効である量で、ロイシンおよびメチルキサンチンを含み得る。上記組成物は、約４０μＭの循環レベルを達成するために必要とされる量未満のメチルキサンチンの量を有し得る。上記組成物は、約０．１〜４０μＭの循環レベルを達成するために有効であるメチルキサンチンの量を有し得る。メチルキサンチンの量はまた、少なくとも約５ｍｇより多くであり得る。
【０１１２】
（投与形態）
【０１１３】
本明細書で記載される組成物は、種々の異なる投与形態へと調合され得る。組成物は、錠剤、チュアブル錠、カプレット、カプセル剤、軟質ゼラチンカプセル、ロゼンジもしくは溶液として経口的に使用され得る。あるいは、上記組成物は、吸入のためにもしくは静脈内送達のために製剤化され得る。上記組成物はまた、溶液形態にある場合、鼻スプレーとして、もしくは注射のために製剤化され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、経口摂取に適した液体組成物であり得る。
【０１１４】
吸入のために製剤化される組成物は、当該分野で公知の技術を使用して、吸入器の中にパッケージされ得る。吸入器は、１回の吸入あたり０．２５単位用量、０．５単位用量、もしくは１単位用量を分与するように設計され得る。吸入器は、吸入のために製剤化される本発明の組成物を保持するキャニスター、上記製剤の計量された量が各作動と共に分与されるのを可能にする計量バルブ、およびデバイスが操作されて、本発明の組成物を被験体の肺に指向することを可能にするアクチュエーターもしくはマウスピースを有し得る。上記製剤化された組成物は、液化ガスプロペラント、およびおそらく安定化賦形剤を含み得る。上記アクチュエーターは、キャニスターに接続するはめ込み式の（ｍａｔｉｎｇ）吐き出しノズルおよび上記アクチュエーターの汚染を防止するためのダストカップを有し得る。作動の際に、本発明の組成物は、揮発させられ得、これは、本発明の組成物の液滴の形成を生じる。上記液滴は、迅速に蒸発し得、マイクロメートルサイズの粒子を生じ、次いで、上記被験体によって吸入される。
【０１１５】
吸入を介する処置のプロトコルは、ジェット、超音波、電子、多孔性振動プレート、振動式メッシュネブライザーまたは印加式（ｅｎｅｒｇｉｚｅｄ）ドライパウダー吸入器を使用して、過圧ありもしくはなしで、気道（ｃｏｎｄｕｃｔｉｎｇ）もしくは中央の肺へと主に送達される３〜８μｍの間の所定の空気力学的重量中位径（ＭＭＡＤ）の粒子サイズを有するエアロゾルの調製を含み得る。上記ジェットもしくは電子ネブライザーは、気流制御とさらに組み合わせられ得、上記エアロゾルは、過圧とともに投与され得る。霧状化デバイス（Ｎｅｂｕｌｉｚａｔｉｏｎ  ｄｅｖｉｃｅ）およびシステムは、制御された気流と、および気流過圧条件とともに、送達される体積流量および蒸発したエアロゾルの、種々の状態（炎症性肺疾患が挙げられる）の処置に適した処置プロトコルへの個別化を可能にし得る。
【０１１６】
上記霧状化システムは、吸入の間の陽圧を仮定することによって、呼吸パターンの制御を可能にする特性（ＮＩＰＰＶともいわれる）を累積的に有する、ジェットもしくは電子ネブライザー、コンプレッサーおよび電子制御手段のような構成要素を含み得る。この圧力は、ＣＯＰＤ患者における能動的な呼吸の必要性を低減し得、呼吸困難を有するか、または酸素なしには呼吸できないＣＯＰＤ患者への薬物の組み合わせの遙かにより有効でかつ容易な肺送達を生じる。
【０１１７】
吸入器および吸入のための組成物を製剤化するための方法は、米国特許第５，０６９，２０４号、同第７，８７０，８５６号および米国特許出願第２０１０／０３２４００２号（これらは、それらの全体において本明細書に参考として援用される）に記載される。
【０１１８】
経口投与に適した本発明の組成物は、分離した投与形態（例えば、カプセル剤、カシェ剤、もしくは錠剤）、または液体スプレーもしくはエアロゾルスプレー（各々、粉末としてもしくは顆粒中に所定量の活性成分を含む）、溶液、または水性もしくは非水性の液体中の懸濁液、水中油型エマルジョン、もしくは油中水型液状エマルジョン（液体投与形態（例えば、懸濁液もしくはスラリー）を含む）、ならびに経口固体投与形態（例えば、錠剤もしくはバルク散剤）として提供され得る。経口投与形態は、処置される予定の個体もしくは患者が経口摂取するために、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、エマルジョン、親油性および親水性の懸濁液、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして製剤化され得る。このような投与形態は、製剤化方法のうちのいずれかによって調製され得る。例えば、上記活性成分は、１種以上の必要な成分を構成するキャリアと会合され得る。経口投与に適したカプセル剤は、ゼラチンから作製されるプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールもしくはソルビトール）から作製される軟質シールカプセルが挙げられる。上記プッシュフィットカプセルは、充填剤（例えば、ラクトース）、結合剤（例えば、デンプン）、および／もしくは滑沢剤（例えば、タルクもしくはステアリン酸マグネシウム）、ならびに必要に応じて、安定化剤と混合した状態で上記活性成分を含み得る。必要に応じて、経口使用のための本発明の組成物は、錠剤もしくは糖衣錠コアを得るために、組成物、固体賦形剤を混合し、必要に応じて、得られた混合物をすり潰し、そして所望であれば、適切な補助剤を添加した後に上記顆粒の混合物を加工処理することによって得られ得る。適切な賦形剤は、特に、充填剤、例えば、糖（ラクトース、スクロース、マンニトールもしくはソルビトールが挙げられる）；セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／もしくはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））である。一般に、上記組成物は、上記活性成分と、液体キャリアもしくは微細に分割した固体キャリアまたはその両方と均質にかつ完全に混合し、次いで、必要であれば、上記生成物を所望の体裁に成形することによって、調製される。例えば、錠剤は、必要に応じて、１種以上の補助成分とともに、圧縮もしくは成形によって、調製され得る。圧縮錠剤は、適切な機械の中で、自由に流動する形態（粉末もしくは顆粒）にある上記活性成分を、必要に応じて、賦形剤（例えば、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、および／または界面活性剤もしくは分散剤が挙げられるが、これらに限定されない）と混合して、圧縮することによって、調製され得る。成形された錠剤は、適切な機械の中で、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化化合物の混合物を成形することによって、作製され得る。
【０１１９】
本明細書で開示される製剤が経口投与もしくは注射による投与のために組みこまれ得る液体形態としては、水性溶液、適切に風味付けされたシロップ、水性もしくは油性の懸濁液、および食用油（例えば、綿実油、胡麻油、椰子油、もしくはラッカセイ油）で風味付けされたエマルジョン、ならびにエリキシル剤および類似の薬学的ビヒクルが挙げられる。水性懸濁液のための適切な分散剤もしくは懸濁剤としては、合成および天然のガム（例えば、トラガカント、アカシア、アルギネート、デキストラン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンもしくはゼラチンが挙げられる。
【０１２０】
被験体は、注射用組成物および経口摂取組成物の組み合わせによって処置され得る。
【０１２１】
経口投与のための液体調製物は、例えば、溶液、シロップ、もしくは懸濁液の形態をとり得るか、またはそれらは、使用前に水もしくは他の適切なビヒクルで再構成するための乾燥生成物として提示され得る。このような液体調製物は、薬学的に受容可能な添加剤（例えば、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロースもしくは水素化食用脂）；乳化剤（例えば、レシチンもしくはアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステルもしくはエチルアルコール）；保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルまたはソルビン酸）；および人工もしくは天然の染料ならびに／または甘味剤）とともに従来の手段によって調製され得る。
【０１２２】
本発明の薬学的組成物（経口用製剤もしくは吸入される製剤が挙げられる）の調製は、薬学的調製物の調製のための一般に許容される手順に従って行われ得る。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  （１９９０），  Ｅ．  Ｗ．  Ｍａｒｔｉｎ  ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  ＰＡを参照のこと。意図される使用および投与様式に依存して、薬学的組成物の調製においてマグネシウム対イオン化合物をさらに加工処理することは、望ましいことであり得る。適切な加工処理は、適切な非毒性および非妨害成分と混合すること、安定化すること、用量単位に分けること、そして送達デバイスの中に封入することを包含し得る。
【０１２３】
本発明は、活性成分を含む無水の組成物および投与形態をさらに包含する。なぜなら、水は、いくつかの化合物の分解を促進し得るからである。例えば、水は、貯蔵寿命もしくは経時的な製剤の安定性のような特徴を決定するために、長期保存をシミュレートする手段として、当該技術分野では添加され得る（例えば、５％）。本発明の無水組成物および投与形態は、無水成分もしくは低水分含有成分および低水分および低湿度条件を使用して調製され得る。ラクトースを含む本発明の組成物および投与形態は、製造、パッケージング、および／もしくは貯蔵の間に水分および／もしくは湿度との実質的な接触が予測される場合に、無水にされ得る。無水組成物は、その無水性質が維持されるように、調製および貯蔵され得る。よって、無水組成物は、それらが適切な定式のキットに含まれ得るように、水への曝露を防止することが公知の材料を使用してパッケージされ得る。適切なパッケージの例としては、密閉ホイル、プラスチックなど、単位用量容器、ブリスターパック、およびストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２４】
本明細書で記載される成分は、従来の薬学的調合技術に従って、薬学的キャリアと完全に混合した状態で組み合わせられ得る。上記キャリアは、投与のために所望される調製物の形態に依存して、多様な形態をとり得る。経口投与形態のために上記組成物を調製するにあたって、通常の薬学的媒体のうちのいずれかは、経口液体調製物（例えば、懸濁液、溶液およびエリキシル）もしくはエアロゾルの場合には、例えば、水、グリセロール、油、アルコール、香味剤、保存剤、着色剤などのようなキャリアとして使用され得る；あるいは経口固体調製物の場合は、デンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、および崩壊剤のようなキャリアとして使用され得、いくつかの実施形態では、ラクトースの使用を伴わない。例えば、適切なキャリアとしては、固体経口調製物とともに、散剤、カプセル剤、および錠剤が挙げられる。所望であれば、錠剤は、標準的な水性もしくは非水性技術によって被覆され得る。
【０１２５】
薬学的に受容可能なキャリアとして働き得る物質のいくつかの例としては、以下が挙げられる：（１）糖（例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース）；（２）デンプン（例えば、コーンスターチおよびジャガイモデンプン）；（３）セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース）；（４）粉末化トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤（例えば、カカオバターおよび坐剤用ワックス）；（９）油（例えば、ラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、胡麻油、オリーブ油、コーン油およびダイズ油）；（１０）グリコール（例えば、プロピレングリコール）；（１１）ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール）；（１２）エステル（例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル）；（１３）アガー；（１４）緩衝化剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質非含有の水；（１７）等張性生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；および（２１）薬学的製剤において使用される他の非毒性適合性物質。
【０１２６】
投与形態における使用に適した結合剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：コーンスターチ、ジャガイモデンプン、もしくは他のデンプン、ゼラチン、天然および合成のガム（例えば、アカシア）、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギネート、粉末化トラガカント、グアールガム、セルロースおよびその誘導体（例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、α化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、およびこれらの混合物。
【０１２７】
本発明の組成物および投与形態を形成するために使用され得る滑沢剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ミネラルオイル、軽ミネラルオイル、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素化植物性油（例えば、ラッカセイ油、綿実油、ひまわり油、胡麻油、オリーブ油、コーン油、およびダイズ油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル（ｅｔｈｙｌａｕｒｅａｔｅ）、アガー、またはこれらの混合物。さらなる滑沢剤としては、以下が挙げられる：例えば、サイロイドシリカゲル、合成シリカの凝集エアロゾル、またはこれらの混合物。滑沢剤は、上記組成物の約１重量％未満の量で、必要に応じて添加され得る。
【０１２８】
滑沢剤はまた、組織バリア（ポリサッカリド、ポリグリカン、セプラフィルム、インターシード（ｉｎｔｅｒｃｅｅｄ）およびヒアルロン酸が挙げられるが、これらに限定されない）とともに使用され得る。
【０１２９】
崩壊剤は、水性環境に曝された場合に崩壊する錠剤を提供するために、本発明の組成物において使用され得る。崩壊剤が多すぎると、ボトル中で崩壊し得る錠剤が生じ得る。少なすぎると、崩壊が起こるのには不十分であり得、従って、活性成分を投与形態から放出する速度および程度が変化し得る。従って、上記活性成分の放出を有害に変化させるほど少なすぎもせず多すぎもしない十分量の崩壊剤が、本明細書で開示される化合物の投与形態を形成するために使用され得る。使用される崩壊剤の量は、製剤のタイプおよび投与様式に基づいて変動し得、当業者にとって容易に認識可能であり得る。約０．５〜約１５重量％の崩壊剤、または約１〜約５重量％の崩壊剤が、上記薬学的組成物の中で使用され得る。本発明の組成物および投与形態を形成するために使用され得る崩壊剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アガー−アガー、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモデンプンもしくはタピオカデンプン、他のデンプン、α化デンプン、他のデンプン、クレイ、他のアルギン、他のセルロース、ガムまたはこれらの混合物。
【０１３０】
本明細書で開示される組成物および投与形態における使用に適切な充填剤の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：タルク、炭酸カルシウム（例えば、顆粒もしくは粉末）、微結晶性セルロース、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、α化デンプン、およびこれらの混合物。
【０１３１】
水性懸濁液および／もしくはエリキシルが、経口投与に望ましい場合、その中の活性成分は、種々の甘味剤もしくは香味剤、着色物質もしくは色素と、および所望の場合には、乳化剤および／もしくは懸濁剤と、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンおよびこれらの種々の組み合わせのような希釈剤と一緒に組み合わせられ得る。
【０１３２】
錠剤は、被覆されなくてもよいし、消化管中での崩壊および吸収を遅らせ、それによって、より長期間にわたって持続性の作用を提供するための公知の技術によって被覆されてもよい。例えば、時間遅延物質（例えば、モノステアリン酸グリセリルもしくはジステアリン酸グリセリル）が使用され得る。経口使用のための製剤はまた、硬質ゼラチンカプセル（ここでその活性成分は、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンと混合される）として、または軟質ゼラチンカプセル（ここでその活性成分は、水もしくは油媒体（例えば、ラッカセイ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油）と混合される）として提示され得る。
【０１３３】
一実施形態において、上記組成物は、本発明の化合物の良好な可溶化および／もしくは溶解を確実にするために、ならびに本発明の化合物の沈殿を最小限にするために、可溶化剤を含み得る。これは、非経口用途の組成物、例えば、注射のための組成物にとって特に重要であり得る。可溶化剤はまた、親水性薬物および／もしくは他の成分の溶解性を増大させるために（例えば、界面活性剤）、または上記組成物を、安定もしくは均質な液剤もしくは懸濁液として維持するために、添加され得る。
【０１３４】
上記組成物は、１種以上の薬学的に受容可能な添加剤および賦形剤をさらに含み得る。このような添加剤および賦形剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：粘性低下剤（ｄｅｔａｃｋｉｆｉｅｒ）、消泡剤、緩衝化剤、ポリマー、抗酸化剤、保存剤、キレート剤、粘性調節剤、等張化剤、香味剤（ｆｌａｖｏｒａｎｔ）、着色剤、臭気物質、乳白剤、懸濁剤、結合剤、充填剤、可塑剤、滑沢剤、およびこれらの混合物。賦形剤の例の非網羅的リストとしては、モノグリセリド、ステアリン酸マグネシウム、改変食品デンプン、ゼラチン、微結晶性セルロース、グリセリン、ステアリン酸、シリカ、蜜蝋、レシチン、ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、およびクロスポビドンが挙げられる。
【０１３５】
本明細書で記載される組成物はまた、１種以上の成分が時間を経て放出されるように、長期放出、徐放性もしくは時間放出として製剤化され得る。遅延放出は、上記１種以上の成分を種々の物質のマトリクスの中に製剤化することによって、または微小被包化（ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ）によって達成され得る。上記組成物は、１時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、１６時間、２０時間、２４時間、３６時間、もしくは４８時間の期間にわたって、１種以上の成分を放出するように製剤化され得る。上記１種以上の成分の放出は、一定速度もしくは変化する速度において行われ得る。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、本明細書で記載される本発明の組成物は、本発明の組成物の粒子が水不溶性プラスチックのマトリクス中に埋め込まれ、そしてラクトースの埋め込まれた粒子を含む水不溶性プラスチックの膜によって閉じ込められ、本発明の組成物の血漿レベルを目標治療範囲内で生じかつ維持するマトリクスペレットとして製剤化され得る。他の実施形態において、本発明の組成物は、本発明の組成物から主に構成されるコア顆粒を、疎水性物質およびプラスチック賦形剤から構成され、必要に応じて、腸溶性ポリマー物質を含む被覆フィルムの層で被覆して、被覆された顆粒を形成し、次いで、この被覆された顆粒を崩壊性賦形剤と一緒に圧縮することによって得られる徐放性錠剤として、製剤化され得る。徐放性製剤は、米国特許第４，８０３，０８０号および同第６，４２６，０９１号（これらは、それら全体において本明細書に参考として援用される）に記載される。
【０１３７】
本明細書で提供される徐放性投与形態を使用すると、１種以上の補因子が、同じ量の成分の即時放出製剤について認められるものよりゆっくりとした速度で、その投与形態において放出され得る。いくつかの実施形態において、徐放性製剤に関して投与から最大濃度までの規定された期間にわたる濃度の変化として測定される生物学的サンプルにおける変化の速度は、即時放出製剤の速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％未満である。さらに、いくつかの実施形態において、経時的な濃度変化の速度は、即時放出製剤の速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％未満である。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、経時的な濃度変化の速度は、比較的正比例の様式で、最大濃度までの時間を増大させることによって低減される。例えば、最大濃度までの時間における２倍増加は、濃度変化の速度を約２倍低減し得る。結果として、上記１種以上の補因子は、即時放出投与形態より顕著に低下した速度でその最大濃度に達するように提供され得る。本発明の組成物は、２４時間、１６時間、８時間、４時間、２時間、もしくは少なくとも１時間まで最大濃度の変化を提供するように製剤化され得る。濃度変化の速度の関連した低下は、約０．０５倍、０．１０倍、０．２５倍、０．５倍もしくは少なくとも０．８倍までであり得る。ある種の実施形態において、これは、このような投与の１時間以内に循環へと１種以上の補因子のうちの約３０％、５０％、７５％、９０％、もしくは９５％未満を放出することによって達成され得る。
【０１３９】
必要に応じて、上記徐放性製剤は、同じ補因子の同じ投与量の即時放出製剤についての血漿濃度曲線の７５％、５０％、４０％、３０％、２０％もしくは１０％未満の初期の（例えば、投与２時間後から投与４時間後まで）傾きを有する血漿濃度曲線を示す。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、溶解研究において測定される場合の上記補因子の放出速度は、最初の１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、もしくは１２時間にわたって、同じ補因子の即時放出製剤の速度の約８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、もしくは１０％未満である。
【０１４１】
本明細書で提供される徐放性製剤は、種々の形式をとり得る。いくつかの実施形態において、上記製剤は、経口投与形態（液体投与形態（例えば、懸濁液もしくはスラリー）、および経口固体投与形態（例えば、錠剤もしくはバルク粉末）を含む）にあり、例えば、本明細書に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４２】
本明細書で開示される製剤の徐放性錠剤は、マトリクス、リザーバもしくは浸透性システムのものであり得る。上記３つのシステムのうちのいずれも適切であるが、後者２つのシステムが、比較的大きな質量を封入するために、例えば、固体の遺伝的構成に依存して、多量の単一の補因子を含めるために、もしくは複数の補因子を含めるために、より最適な能力を有し得る。いくつかの実施形態において、上記遅延放出錠剤は、リザーバシステムに基づき、ここで上記１種以上の補因子を含むコアは、水和の際に、上記１種以上の補因子が四方に拡散することを可能にする多孔性膜被覆によって被包される。有効成分の合わせた質量は、一般に、グラム量単位であるので、効率的な送達システムは、最適な結果を提供し得る。
【０１４３】
従って、錠剤もしくは丸剤はまた、被覆され得るか、さもなければ複合されて、長期の作用という利点を与える投与形態を提供し得る。例えば、上記錠剤もしくは丸剤は、内部投薬成分、外部投薬成分を含み得、後者は、前者を覆うエンベロープの形態にある。上記２つの成分は、胃の中での崩壊に耐え、上記内部成分が十二指腸へとそのまま通過することを可能にするか、または放出が遅延されることを可能にするように作用する腸溶性の層によって分離され得る。多くのポリマー酸およびポリマー酸の混合物を含む種々の物質が、このような腸溶性の層もしくは腸溶性のコーティングのために、シェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような物質とともに使用され得る。いくつかの実施形態において、複数の補因子を含む製剤は、種々の速度でもしくは種々の時に放出される種々の補因子を有し得る。例えば、補因子のさらなる層が、腸溶性の層とともに散らばり得る。
【０１４４】
徐放性錠剤を作製するための方法は、当該分野で公知である。例えば、米国特許公開２００６／０５１４１６および同第２００７／００６５５１２、または本明細書で開示される他の参考文献を参照のこと。米国特許第４，６０６，９０９号、同第４，７６９，０２７号、同第４，８９７，２６８号、および同第５，３９５，６２６号に記載されるような方法は、固体の遺伝的構成によって決定される１種以上の補因子の徐放性製剤を調製するために使用され得る。いくつかの実施形態において、上記製剤は、ＯＲＯＳ（登録商標）技術（例えば、米国特許第６，９１９，３７３号、同第６，９２３，８００号、同第６，９２９，８０３号、および同第６，９３９，５５６号に記載される）を使用して調製される。他の方法（例えば、米国特許第６，７９７，２８３号、同第６，７６４，６９７号、および同第６，６３５，２６８号に記載される）はまた、本明細書で開示される製剤を調製するために使用され得る。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、食品組成物に処方され得る。例えば、上記組成物は、食品キャリアありもしくはなしでの飲料もしくは他の液体、固体食品、半固体食品であり得る。例えば、上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充した紅茶を含み得る。上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充した乳製品であり得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、食品組成物に処方され得る。例えば、上記組成物は、飲料、固体食品、半固体食品、もしくは食品キャリアを含み得る。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、液体食品キャリア（例えば、サプリメントジュース（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ｊｕｉｃｅｓ）、コーヒー、茶、ソーダ、フレーバーウォーターなどのような飲料の形態にある）が、使用され得る。例えば、上記飲料は、上記製剤、および従来の飲料中に存在する種々の脱臭剤もしくは天然の炭水化物のような液体成分を含み得る。天然の炭水化物の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：モノサッカリド（例えば、グルコースおよびフルクトース）；ジサッカリド（例えば、マルトースおよびスクロース）；従来の糖（例えば、デキストリンおよびシクロデキストリン）；ならびに糖アルコール（例えば、キシリトールおよびエリスリトール）。天然の脱臭剤（例えば、ソーマチン（ｔａｕｍａｔｉｎ）、ステビア抽出物、レバウディオサイドＡ、グリチルリチン、および合成脱臭剤（例えば、サッカリンおよびアスパルテーム）もまた、使用され得る。香味剤、着色剤などのような薬剤もまた、使用され得る。例えば、ペクチン酸およびその塩、アルギン酸およびその塩、有機酸、保護コロイド接着剤（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  ａｄｈｅｓｉｖｅ）、ｐＨ制御剤、安定化剤、保存剤、グリセリン、アルコール、もしくは炭化剤（ｃａｒｂｏｎｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）もまた、使用され得る。果実および野菜もまた、本明細書で考察される製剤を含む食品もしくは飲料を調製することにおいて使用され得る。
【０１４７】
あるいは、上記組成物は、本明細書で記載される組成物のうちのいずれかを補充したスナックバーであり得る。例えば、上記スナックバーは、チョコレートバー、グラノーラバー、もしくはトレイルミックスバーであり得る。さらに別の実施形態において、本発明の栄養補助食品もしくは食品組成物は、摂取に適したかつ望ましい味、テクスチャ、および粘性を有するように製剤化され得る。任意の適切な食品キャリアが、本発明の食品組成物において使用され得る。本発明の食品キャリアは、実際に任意の食品を含み得る。このような食品キャリアの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：食品バー（グラノーラバー、プロテインバー、キャンディーバーなど）、シリアル製品（オートミール、朝食用シリアル、グラノーラなど）、ベーカリー製品（パン、ドーナツ、クラッカー、ベーグル、ペストリー、ケーキなど）、飲料（ミルクベースの飲料、スポーツドリンク、フルーツジュース、アルコール飲料、およびボトル詰めの水）、パスタ、穀物（米、コーン、オート、ライ、コムギ、小麦粉など）、卵製品、スナック（キャンディー、チップス、ガム、チョコレートなど）、食肉、果実、および野菜。一実施形態において、本明細書で使用される食品キャリアは、望ましくない味（例えば、苦味）をマスクし得る。所望の場合には、本明細書で提示される食品組成物は、本明細書で記載される成分のうちのいずれかのものより望ましいテクスチャおよび香りを示す。例えば、液体食品キャリアは、飲料（例えば、サプリメントジュース、コーヒー、茶など）の形態で本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。他の実施形態において、固体食品キャリアは、代替食（ｍｅａｌ  ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）（例えば、スナックバーサプリメント（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ｓｎａｃｋ  ｂａｒｓ）、パスタ、パンなど）の形態で本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。さらに他の実施形態において、半固体食品キャリアは、ガム、かみ応えのあるキャンディーもしくはスナックなどの形態で本発明の食品組成物を得るために、本発明に従って使用され得る。
【０１４８】
上記組み合わせ組成物の投与は、１日に約１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回の回数か、またはより多くの回数か、またはこれら未満の回数で投与され得る。被験体は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４もしくはより多くの日数、週数もしくは月数の期間にわたって、またはこれら未満の期間にわたって、またはこれらより長い期間にわたって投与を受け得る。単位用量は、１日用量の分割（例えば、１日用量を１日あたりに投与される予定のその単位用量の数で割ったもの）であり得る。単位用量は、１日用量を１日あたりに投与される予定の単位用量の数で割り、投与１回あたりの単位用量の数でさらに割ったもの（例えば、錠剤）である、上記１日用量の分割であり得る。投与１回あたりの単位用量の数は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくはより多くであり得るか、またはこれら未満であり得るか、またはこれらより多くであり得る。１日あたりの用量数は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくはより多くであり得るか、またはこれら未満であり得るか、またはこれらより多くであり得る。１日あたりの単位用量の数は、上記１日用量を上記単位用量で割ることによって決定され得、１日あたり約１単位用量、２単位用量、３単位用量、４単位用量、５単位用量、６単位用量、７単位用量、８単位用量、９単位用量、１０単位用量、１１単位用量、１２単位用量、１３単位用量、１４単位用量、１５単位用量、６単位用量、１７単位用量、１８単位用量、１９単位用量、２０単位用量、もしくはより多くの単位用量であり得るか、またはこれら未満であり得るか、またはこれらより多くであり得る。例えば、単位用量は、約１／２、１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／８、１／９、１／１０であり得る。単位用量は、１日量の約１／３であり得、上記被験体に１日３回投与され得る。単位用量は、１日量の約１／２であり得、上記被験体に１日２回投与され得る。単位用量は、１日量の約１／４であり得、２単位用量が、上記被験体に１日に２回投与され得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、約５０ｍｇ  レスベラトロールを含むか、またはこれ未満を含むか、またはこれより多く含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、約５５０ｍｇ  ロイシンを含むか、またはこれ未満を含むか、またはこれより多く含み得る。いくつかの実施形態において、単位用量は、約２００ｍｇの１種以上のロイシン代謝産物を含むか、またはこれ未満を含むか、またはこれより多く含み得る。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、単位用量（例えば、１種以上のロイシン代謝産物（例えば、ＨＭＢ）を含む単位用量）は、１日あたり２回、１単位用量として投与される。単位用量は、１カプセル剤、１錠剤、１バイアル、もしくは１実体より多くを含み得る。
【０１５０】
本明細書で開示される組成物は、香味剤をさらに含み得、固体、液体、ゲルもしくはエマルジョンであり得る。
【０１５１】
（方法）
【０１５２】
本発明の組成物は、肺の状態の発症の間に誘発される炎症応答を改善するために特に有用である。一実施形態において、本発明は、炎症マーカー（ＮＦκＢ、エオタキシン、ＩＬ１−β、およびＩＬ６が挙げられるが、これらに限定されない）の発現レベルもしくは分泌を低下させるか、または抗炎症マーカー（アディポネクチンレセプター１およびアディポネクチンレセプター２が挙げられるが、これらに限定されない）の発現レベルもしくは分泌を増大させるための方法を提供し、上記方法は、肺内皮細胞と本発明の組成物のうちのいずれかとを接触させる工程を包含する。
【０１５３】
本発明の種々の実施形態において、組成物は、上記被験体の肺の状態を処置するために十分な、相乗効果を示す量の、ロイシンおよび／もしくはその代謝産物、メチルキサンチンＰＤＥインヒビター、ならびに／またはレスベラトロールを送達する量で上記被験体に投与される。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、上記組成物中の上記メチルキサンチン（例えば、テオフィリンもしくはテオブロミン）の量は、被験体に単独で、かつロイシンも、ロイシン代謝産物も、レスベラトロールもなしで投与される場合、上記被験体において治療効果を引き起こさない。さらに、ロイシン、ロイシン代謝産物、もしくはレスベラトロールの量は、上記被験体に上記メチルキサンチンなしで投与される場合、上記被験体に対して治療効果を有しない。しかし、上記メチルキサンチンが、ロイシン、ロイシン代謝産物、もしくはレスベラトロールのいずれかとともに投与される場合、治療効果が認められる。
【０１５５】
よって、本発明は、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のその代謝産物、ならびに（ｂ）治療量以下で存在するメチルキサンチンを含む組成物を投与するための方法を提供し、ここで上記組成物は、成分（ｂ）が単独で使用される場合と比較して、肺の状態の処置を増大することにおいて少なくとも約５倍有効である。上記組成物中のロイシンの量もまた、治療量以下であり得る。
【０１５６】
本発明はまた、（ａ）ロイシンおよび／もしくは１種以上のその代謝産物、（ｂ）治療量以下で存在するメチルキサンチン、ならびに（ｃ）レスベラトロールを含む組成物を投与するための方法を提供し、ここで上記組成物は、成分（ｂ）が単独で使用される場合と比較して、肺の状態の処置を増大することにおいて少なくとも約５倍有効である。
【０１５７】
治療効果を定量すると、（ａ）メチルキサンチンおよび（ｂ）ロイシンもしくはロイシン代謝産物を含む組成物の効果は、（ａ）もしくは（ｂ）を単独で投与する場合の、（ａ）および（ｂ）の単純な相加効果を想定する推定効果より高いことが示され得、従って、その効果は相乗的である。その相乗効果は、上記組成物の成分の推定される単純な相加効果を上回って測定される効果として、定量され得る。例えば、成分（ａ）のみの投与がコントロールと比較して１０％の効果を生じ、成分（ｂ）のみの投与が、コントロールと比較して１５％の効果を生じ、（ａ）および（ｂ）の両方を含む組成物の投与がコントロールと比較して６０％の効果を生じるのであれば、その相乗効果は、６０％−（１５％＋１０％）、すなわち３５％である。
【０１５８】
インビトロレベルでは、上記組成物の有益な効果は、本明細書で記載される組成物の対応する濃度で処置された、培養された肺内皮細胞（例えば、マウス初代肺内皮細胞）で測定され得る。上記細胞の分析は、有益な効果の定量を可能にし得る。例えば、ウェスタンブロットもしくはＥＬＩＳＡアッセイは、本明細書で記載される組成物での処置の結果として、細胞における（ａ）ＮＦκＢタンパク質発現の低下、（ｂ）エオタキシン分泌、（ｃ）ＩＬ１−β分泌の低下、（ｄ）細胞性ＩＬ６含有量もしくは分泌の低下、（ｅ）アディポネクチンレセプター１タンパク質発現の増大、および／または（ｆ）アディポネクチンレセプター２タンパク質発現の増大、の量を測定するために行われ得る。
【０１５９】
よって、本明細書で記載されるマルチ成分組成物（例えば、テオフィリン／ロイシン、テオフィリン／ロイシン／レスベラトロール、テオブロミン／ロイシン、およびテオブロミン／ロイシン／レスベラトロール）は、（ａ）ＮＦκＢタンパク質発現の低下、（ｂ）エオタキシン分泌、（ｃ）ＩＬ１−β分泌の低下、（ｄ）細胞性ＩＬ６含有量もしくは分泌の低下、（ｅ）アディポネクチンレセプター１タンパク質発現の増大、および／または（ｆ）アディポネクチンレセプター２タンパク質発現の増大、に対して、少なくとも約１０％、２０％、５０％、１００％、２００％、もしくは３００％の相乗効果を有し得る。
【０１６０】
被験体において達成される経路の出力結果および有益な効果は、本明細書で開示され、そして／または当該分野で公知の１以上の方法を使用して測定され得る。例えば、ＣＯＰＤおよび喘息の測定は、スパイロメトリー、スパイロメトリーの改善（例えば、ＦＥＶ６および最大呼吸量の測定）；機能的転帰の測定（例えば、呼吸困難指数および運動試験）；ならびに全体的な臨床転帰の測定（例えば、クオリティー・オブ・ライフ問診票、ならびに急性悪化の頻度および重症度の評価）を使用して行われ得る。いくつかの実施形態において、被験体への本明細書で記載される組成物の投与は、上記組成物の投与なしに対して、もしくは上記組成物の投与前に対して、少なくとも約１０％、３０％、５０％、１００％、２００％もしくは３００％高い改善である、上記被験体におけるスパイロメトリー値、肺気量、および機能的転帰測定をもたらし得る。上記効果はまた、少なくとも約１０％、２０％、５０％、１００％、２００％、もしくは３００％の相乗効果であり得る。
【０１６１】
上記組成物は、被験体へと経口的にもしくは任意の他の方法によって投与され得る。経口投与の方法は、栄養補助食品もしくは食料品の形態で摂取され得る液体、固体、もしくは半固体として上記組成物を投与する工程を包含する。
【０１６２】
上記組成物は、定期的に投与され得る。例えば、上記組成物は、１日に１回、２回、３回、４回、またはさらにより多くの頻度で投与され得る。上記被験体は、１日ごと、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごともしくは７日ごとに投与され得る。いくつかの実施形態において、上記組成物は、１日に３回投与される。上記投与は、被験体の食事時間と同時であり得る。処置もしくは栄養補助の期間は、約１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、もしくは９日間、２週間、１〜１１カ月間、もしくは１年間、２年間、５年間もしくはさらにより長くであり得る。本発明のいくつかの実施形態において、被験体に投与される投与量は、処置の期間にわたって変化し得るかもしくは一定のままであり得る。例えば、１日投与量は、上記投与期間にわたって増大もしくは減少し得る。
【０１６３】
上記投与期間の長さおよび／もしくは上記投与量は、医師もしくは任意の他のタイプの臨床医によって決定され得る。上記医師もしくは臨床医は、上記投与される組成物に対する上記被験体の応答を観察し得、そして上記被験体の成績に基づいて投与を調節し得る。例えば、エネルギー調節において低下した効果を示す被験体のための投与は、所望の結果を達成するために増大され得る。
【０１６４】
いくつかの実施形態において、被験体に投与される上記組成物は、所定の被験体に対して最適化され得る。例えば、サーチュイン経路アクチベーターに対する分枝鎖アミノ酸の比もしくは組み合わせ組成物中の特定の成分は、調節され得る。上記比および／もしくは特定の成分は、サーチュイン経路アクチベーターに対する分枝鎖アミノ酸の比を変動させて、または組み合わせ組成物成分を変動させて、１種以上の組成物を投与した後に、上記被験体の評価に鑑みて選択され得る。
【０１６５】
本発明の別の局面は、特定の期間にわたって本明細書で記載される組み合わせ組成物を投与した後に、１以上の被験体において所望の効果を達成することを提供する。例えば、本明細書で記載される組成物の有益な効果は、１週間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、１０週間、１２週間、２４週間、もしくは５２週間にわたって上記被験体への上記組成物の投与後に、観察され得る。
【０１６６】
本発明は、処置に反応しやすい被験体のプールを同定する工程を包含する、被験体を処置するための方法を提供する。上記同定工程は、１以上のスクリーニング試験もしくはアッセイを含み得る。例えば、喘息、糖尿病、あるいは平均ＢＭＩおよび／もしくは体重を上回るかまたは平均ＢＭＩおよび／もしくは体重より有意に高いと同定されている被験体は、処置のために選択され得る。上記同定工程は、上記被験体が処置に反応しやすいことを示唆する１以上の遺伝的改変体を同定する遺伝子試験を含み得る。上記同定された被験体は、次いで、本明細書で記載される１種以上の組成物で処置され得る。例えば、それらは、サーチュイン経路アクチベーターおよび分枝鎖アミノ酸を含む組み合わせ組成物で処置され得る。
【０１６７】
本発明はまた、本明細書で記載される組成物を製造するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書で記載される組成物の製造は、２種以上の成分を混合する工程もしくは組み合わせる工程を包含する。これらの成分は、ＰＤＥインヒビターまたはサーチュインもしくはＡＭＰＫ経路アクチベーター（例えば、ポリフェノールもしくはポリフェノール前駆体様レスベラトロール、またはメチルキサンチン）、およびロイシンもしくはその代謝産物（例えば、ＨＭＢ、もしくはＫＩＣ）を含み得る。上記成分の量もしくは比は、本明細書で記載されるとおりのものであり得る。例えば、レスベラトロールと比較して、ロイシンの質量比は、約８０超であり得る。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、薬学的に活性な薬剤、キャリア、および／もしくは賦形剤と組み合わせられ得るかもしくは混合され得る。このような成分の例は、本明細書で記載される。上記組み合わせ組成物は、錠剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、徐放性錠剤などとして単位用量へと形成され得る。
【０１６９】
いくつかの実施形態において、上記組成物は、上記１種以上の成分の実質的に均一な混合物を含む固体組成物が達成されるように、上記１種以上の成分が、上記組成物全体に一様に分散し、その結果、上記組成物が、等しく有効な単位用量形態（例えば、錠剤、丸剤およびカプセル剤）へと容易にさらに分けられ得るように、調製される。
【０１７０】
（キット）
【０１７１】
本発明はまた、キットを提供する。上記キットは、適切なパッケージ中に本明細書で記載される１種以上の組成物を含み、そして使用説明書、臨床研究の考察、副作用の列挙などを含み得る書面による資料をさらに含み得る。このようなキットは、化学文献参照、パッケージ挿入物資料、臨床試験結果、および／もしくはこれらのまとめなどのような情報も含み得、これら情報は、上記組成物の活性および／もしくは利点を示すかまたは確立し、そして／またはこれら情報は、ヘルスケア提供者に対して有用な服薬、投与、副作用、薬物相互作用もしくは他の情報を記載する。このような情報は、種々の研究（例えば、インビボモデルを要する実験動物を使用する研究およびヒト臨床試験に基づく研究）の結果に基づき得る。キットは、本明細書で記載される１以上の単位用量を含み得る。いくつかの実施形態において、キットは、約１単位用量、２単位用量、３単位用量、４単位用量、５単位用量、６単位用量、７単位用量、８単位用量、９単位用量、１０単位用量、１１単位用量、１２単位用量、１３単位用量、１４単位用量、１５単位用量、１６単位用量、１７単位用量、１８単位用量、１９単位用量、２０単位用量、３０単位用量、３１単位用量、６０単位用量、９０単位用量、１２０単位用量、１５０単位用量、１８０単位用量、２１０単位用量、もしくはより多くの単位用量を含み得るか、またはこれら未満を含み得るか、またはこれらより多くを含み得る。使用説明書は、投与説明書（例えば、１日あたり１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、もしくはより多くの回数、１単位用量、２単位用量、３単位用量、４単位用量、５単位用量、６単位用量、７単位用量、８単位用量、９単位用量、１０単位用量、もしくはより多くの単位用量を服用するとの説明書）を含み得る。例えば、キットは、錠剤として供給される単位用量を含み得、各錠剤は別個にパッケージされるか、複数の錠剤が１回の投与あたりの単位用量の数に従って別個にパッケージされる（例えば、錠剤の対）か、または全ての錠剤が一緒に（例えば、ボトル中に）パッケージされる。さらなる例として、キットは、ボトル入りドリンクとして供給される単位用量を含み得、上記キットは、１本、２本、３本、４本、５本、６本、７本、８本、９本、１０本、１１本、１２本、１３本、１４本、２４本、２８本、３６本、４８本、７２本、もしくはより多くのボトルを含む。
【０１７２】
上記キットは、別の薬剤をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本発明の化合物および上記薬剤は、上記キット内に、別個の容器中の別個の組成物として提供される。いくつかの実施形態において、本発明の化合物および上記薬剤は、上記キット中の容器内に、単一の組成物として提供される。適切なパッケージングおよび使用のためのさらなる物品（例えば、液体調製物のための計量用カップ、空気への曝露を最小限にするホイルでの包装など）は、当該分野で公知であり、上記キット中に含まれ得る。本明細書で記載されるキットは、ヘルスプロバイダー（医師、看護師、薬剤師、調剤職員（ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ｏｆｆｉｃｉａｌｓ）などが挙げられる）に提供、市販および／もしくは販売促進され得る。キットはまた、いくつかの実施形態において、消費者に直接市販され得る。
【実施例】
【０１７３】
実施例１−肺の状態のインジケーターに対するロイシン、テオフィリン、テオブロミンおよびレスベラトロールの効果
【０１７４】
（技術）
【０１７５】
細胞培養：  マウス初代肺内皮細胞（ＭＬＥＣ）を、Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ（Ｃｈｉｃａｇｏ，  ＩＬ）から得た。細胞を、０．２％  ゼラチンで予め被覆されたＴ７５培養フラスコ中でコンフルエントになるまで培養した。細胞を、５％  ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、ヘパリン、ＥＧＦ、ヒドロコルチゾン、Ｌ−グルタミンおよび抗生物質を含めた増殖因子補充物（Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ＃  Ｍ１  １６６）を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で、３７℃で５％  ＣＯ２において増殖させた。
【０１７６】
脂肪細胞馴化培地実験：  ３Ｔ３Ｌ１脂肪細胞（１１〜１３継代）を増殖させ、６ウェルプレート上で分化させ、４８時間にわたって「結果」に示された処理で処理した。次いで、培地を集め、各処置群について一緒にプールした。次いで、プールした培地を、直接処理の代わりに、２４時間にわたってコンフルエントなＭＬＥＣを処理するために使用した。各細胞複製物に由来する上記ＭＬＥＣ培地を集め、アリコートに分け、さらなる実験のために−２０℃で貯蔵した。上記細胞（ＭＬＥＣおよび脂肪細胞）を、氷冷ＨＢＳＳで１回洗浄し、次いで、氷冷ＲＩＰＡ緩衝液＋プロテアーゼおよびホスファターゼインヒビター（Ｓｉｇｍａ）を添加した。次いで、上記細胞抽出物を、氷上で１０分間インキュベートし、掻き取り、新たな微小遠心チューブに移し、５秒間ホモジナイズし、次いで、１０分間、１２，０００×ｇ、４℃で遠心分離した。次いで、各細胞複製物からの清澄な上清をアリコートに分け、以下に示されるさらなる実験のために−２０℃で貯蔵した。
【０１７７】
ウェスタンブロット：  ＮＦκＢおよびホスホ−ＮＦκＢ抗体を、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  （Ｄａｎｖｅｒｓ，  ＭＡ）から得た。細胞を、結果に示されるように処理し、その細胞画分を、標準的な方法を使用して調製した。タンパク質を、ＢＣＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。ウェスタンブロットのために、２μｇ（ＮＦκＢに関して）もしくは４μｇ（ホスホ−ＮＦκＢに関して）の、上記細胞溶解物に由来するタンパク質を、１０％  Ｔｒｉｓ／ＨＣＬ  ポリアクリルアミドゲル（Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ  ｐｒｅｃａｓｔ  ｇｅｌ，  Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）で分離し、ＰＶＤＦ膜に転写し（ＮＦκＢおよびホスホ−ＮＦκＢ）、ブロッキング緩衝液（ＴＢＳ中３％  ＢＳＡ）中でインキュベートし、次いで、一次抗体とともにインキュベートし、洗浄し、二次西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体化抗体とともにインキュベートした。可視化および化学発光検出を、ＢｉｏＲａｄ  ＣｈｅｍｉＤｏｃ機器およびソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して行い、バンド強度を、Ｉｍａｇｅ  Ｌａｂ  ４．０（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を使用して、バックグラウンドおよびローディングコントロールについて較正して評価した。ＮＦκＢを６０ｋＤＡで検出し、ホスホ−ＮＦκＢを５２〜５９ｋＤＡで検出した。
【０１７８】
サイトカイン：  インターロイキン１−β、エオタキシン、およびインターロイキン６を、各サイトカインに対する特異的抗体（Ａｂｃａｍ，  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，  ＭＡ）および西洋ワサビペルオキシダーゼベースの二次抗体検出システムを使用して、酵素結合イムノソルベントアッセイによってマイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ  ＨＴ，  ＢｉｏＴｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，  Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，  ＶＴ）を使用して、４５０ｎｍでの色素生成検出で全て測定した。
【０１７９】
（結果）
【０１８０】
マウス初代肺内皮細胞を、テオフィリン（１μＭ）、テオブロミン（１μＭ）、ロイシン（０．５ｍＭ）、およびレスベラトロール（２００ｎＭ）の組み合わせで処理した。テオフィリン、テオブロミン、ロイシン、およびレスベラトロールの各々は、示された形態でもしくは示された形態の塩で、適切な業者から購入することができる。処理後、ウェスタンブロットもしくはＥＬＩＳＡアッセイを、ＭＬＥＣに対して行って、気道疾患の種々のインジケーター（例えば、ＮＦκＢタンパク質発現、エオタキシン分泌、ＩＬ１−β分泌、細胞性ＩＬ６含有量もしくは分泌、アディポネクチンレセプター１タンパク質発現、およびアディポネクチンレセプター２タンパク質発現）のレベルを決定した。
【０１８１】
０．５ｍＭ  ロイシンでの処理は、約１，１２５ｍｇのロイシンをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。０．２５ｍＭ  ロイシンでの処理は、約３００ｍｇのロイシンをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。
【０１８２】
１１０μＭ  テオフィリンでの処理は、約１０００ｍｇのテオフィリンをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。１μＭ  テオフィリンでの処理は、約２５〜３０ｍｇのテオフィリンをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。
【０１８３】
０．５ｍＭ  レスベラトロールでの処理は、約１１００ｍｇのレスベラトロールをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。２００ｎＭ  レスベラトロールでの処理は、約５０ｍｇのレスベラトロールをヒト被験体に経口投与することによって達成される同じモル濃度の循環レベルに相当する。
【０１８４】
テオフィリンは、コントロールと比較してＮＦκＢタンパク質発現に対して独立した効果を発揮しない（図１）が、テオフィリン／ロイシンおよびテオフィリン／ロイシン／レスベラトロールの組み合わせは、ＮＦκＢにおける有意な低下を生じた（ｐ＜０．０２）；テオフィリン／ロイシン処理とテオフィリン／ロイシン／レスベラトロール処理との間に有意差はなかった。レスベラトロールとロイシンとの組み合わせでのＭＬＥＣの処理は、コントロールと比較してＮＦκＢレベルに対する効果はなかった。ホスホ−ＮＦκＢは、類似の傾向を示した。このデータによって示されるように、テオフィリンとロイシンとの組み合わせ、ならびにテオフィリンとロイシンおよびレスベラトロールとの組み合わせは、相乗効果を有する。なぜなら、（ａ）テオフィリンのみ、またはは（ｂ）ロイシンおよびレスベラトロールでの処理は、ＮＦκＢレベルに対してもホスホ−ＮＦκＢレベルに対しても効果を有しなかったからである。テオフィリンと、ロイシンあるいはロイシンおよびレスベラトロールとの組み合わせの相乗効果は、ベースライン（テオフィリンのみ、またはロイシンおよびレスベラトロールのみでの処理）と比較して少なくとも約２２％の改善であった。
【０１８５】
ＮＦκＢおよびホスホ−ＮＦκＢに対するこれらの効果は、上記馴化培地実験で再現されなかった（図２および図３）。このことは、これらの効果はＭＬＥＣに対する直接的効果であり、脂肪細胞によるサイトカイン分泌の変化によって媒介されないことを示す。上記馴化培地実験は、コントロール、テオフィリン、テオフィリン／ロイシン、レスベラトロール／ロイシン、およびテオフィリン／レスベラトロール／ロイシンの上記に示された濃度で処理した脂肪細胞から調製した培地を利用した。
【０１８６】
対照的に、テオフィリンのこの低濃度は、研究された炎症メディエーターのうちのいずれに対しても有意な独立した効果を発揮しなかったが、上記ロイシン／テオフィリンおよびロイシン／テオフィリン／レスベラトロールの組み合わせは、ＩＬ１−β分泌においてコントロールと比較して顕著な低下（約７０％）（ｐ＜０．００１；図４）を生じ、より小さな低下が、テオフィリンの非存在下での上記ロイシン／レスベラトロールの組み合わせで見出された（ｐ＜０．０１）。ＴＮＦαを、サイトカインの分泌を刺激する陽性コントロールとして使用したところ、ＩＬ１−β分泌の増大は、ＭＬＥＣをＴＮＦαで処理した場合に認められた（ｐ＜０．０１）。
【０１８７】
図４に認められ得るように、テオフィリンと、（ａ）ロイシンあるいは（ｂ）ロイシンおよびレスベラトロールとの組み合わせ処理は、ＩＬ１−β分泌に対して相乗効果を生じた。テオフィリンのみでの処理は、コントロールと比較して効果がなく、ロイシン／レスベラトロールでの処理は、コントロールと比較して約２０％の効果を有した。比較すると、テオフィリンと、（ａ）ロイシンあるいは（ｂ）ロイシンおよびレスベラトロールとの組み合わせ処理は、ベースラインに対して約７０％の改善を有した。この場合、相乗効果は、コントロールと比較して少なくとも約５０％である。
【０１８８】
同様に、上記ロイシン／テオフィリンの組み合わせは、コントロールと比較して、培地へのケモカインであるエオタキシンの分泌において有意な４４％低下を誘発した（ｐ＜０．０５；図５）一方で、他の処理（テオフィリンのみ、テオフィリン／ロイシン／レスベラトロール、ロイシン  レスベラトロール、およびＴＮＦα）は、有意な効果を発揮しなかった。ここで見られるように、テオフィリン／ロイシンの組み合わせ処理は、コントロールと比較して、エオタキシン分泌に対して少なくとも約７０％の相乗効果を有した。
【０１８９】
図５に示される効果は、ＭＬＥＣに対する直接効果である。なぜなら、馴化培地実験は、エオタキシンに対して有意な効果を生じなかったからである（図６）。
【０１９０】
ＩＬ  ６の細胞発現は、テオフィリンによって影響を受けなかったが、テオフィリン／ロイシン処理およびテオフィリン／ロイシン／レスベラトロール処理が、中程度の有意な低下を引き起こした（ｐ＜０．０２；図７）。
【０１９１】
同様に、培地へのＩＬ  ６分泌は、テオフィリン／ロイシン処理およびテオフィリン／ロイシン／レスベラトロール処理の両方によって約５０％低下した（ｐ＜０．０００１；図８）。
【０１９２】
これら直接効果は、馴化培地実験（図９）において再現しなかった。このことは、この抗炎症効果が、脂肪細胞サイトカイン生成の変化によって媒介されないことを示す。
【０１９３】
アディポネクチンレセプター−１（図１０）もしくはアディポネクチンレセプター２（図１１）のいずれかのＭＬＥＣ発現に対して、上記処理のいずれの直接効果もなかった。
【０１９４】
しかし、テオフィリン／ロイシン／レスベラトロールの組み合わせでの脂肪細胞の処理は、ＭＬＥＣに適用した場合にＭＬＥＣにおける抗炎症性アディポネクチン−２レセプターの発現の顕著な増大を誘発する馴化培地を生じた（ｐ＝０．００１８，図１２）。図１２において認められ得るように、テオフィリン／レスベラトロール／ロイシンでの処理のみが、コントロールと比較して改善を生じた。このことは、全３種の成分の間の相乗効果を示唆する。この組み合わせに関しては、その相乗効果は、約１００％であった。
【０１９５】
同様に、テオフィリンをテオブロミン（別のメチルキサンチン／非特異的ＰＤＥインヒビター）で置換した場合に、テオブロミン／ロイシンの組み合わせおよびロイシン／レスベラトロールの組み合わせは、アディポネクチンレセプター１において中程度の有意な増大を刺激した（ｐ＜０．０３，図１３）。テオブロミン／ロイシン／レスベラトロールの組み合わせでは、さらにより強固な増大を刺激した（ｐ＜０．０００５，図１３）。
【０１９６】
上記テオブロミン／ロイシンの組み合わせおよびテオブロミン／ロイシン／レスベラトロールの組み合わせの両方が、アディポネクチンレセプター２発現において強固な増大を刺激した（ｐ＜０．０００１，図１４）。図１４に認められるように、テオブロミンと、ロイシンまたはロイシン／レスベラトロールのいずれかとの組み合わせは、約１００％の相乗効果を生じた。
【０１９７】
これらデータは、気道疾患（喘息が挙げられる）を生じる炎症応答を和らげ、そして抗炎症応答を促進することにおいて、非特異的ＰＤＥインヒビターであるテオフィリンおよびテオブロミンとロイシンとの間の顕著な相乗効果を示す。顕著なことには、これら効果は、組み合わせられなければ治療量以下のテオフィリンの用量（治療上有効なレベルの１〜２％）で達成される。
【０１９８】
特定の実施が例証されかつ記載されてきた一方で、これらに対して種々の改変が行われ得、本明細書で企図されるということは、前述から理解されるべきである。本発明が、本明細書内で提供される具体例によって限定されることもまた意図されない。本発明は、前述の詳述に関して記載されてきた一方で、本明細書中の好ましい実施形態の記載および例証は、限定する意味で解釈されるとは意味されない。さらに、本発明の全ての局面は、種々の条件および変数に依存するものであり、本明細書に示される具体的な描写、構成もしくは相対的特性に限定されないことは、理解されるものとする。本発明の実施形態の形態および詳細における種々の改変は、当業者に明らかである。従って、本発明が任意のこのような改変、バリエーションおよび均等物を網羅することが企図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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