(57)【要約】【課題】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む薬学組成物又は食品組成物を提供する。【解決手段】本発明の組成物は、せん妄、認知症又は健忘症などの認知機能障害疾患、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を効果的に治療又は予防する作用効果を示す。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表示されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の神経精神疾患の予防又は治療用薬学組成物。
【化１】
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（式中、ＲはＨ又はＣ１〜Ｃ６のアルキルを示し、Ｒ１はＨ又はＯＨを示す。）
【請求項２】
前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体が、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、スウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）及びこれらの混合物よりなる群から選ばれたものである、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項３】
前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体がスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）である、請求項２に記載の薬学組成物。
【請求項４】
前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体が、Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell. (Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd. (Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L.  (Passifloraceae)、Commelina communis L.  (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)、およびAquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)よりなる群から選ばれた少なくとも１種の生薬抽出物から得られるものである、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項５】
前記認知機能障害が脳卒中、中風、せん妄、認知症又は健忘症に起因する、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項６】
前記認知症が、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、注意欠陥・多動性障害（Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ  ｄｅｆｉｃｉｔ  ｈｙｐｅｒａｃｔｉｏｎ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、その他アルコール依存症、外傷又はパーキンソン病の後遺症による認知症である、請求項５に記載の薬学組成物。
【請求項７】
前記認知症が、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）である、請求項６に記載の薬学組成物。
【請求項８】
前記脳卒中又は中風が脳梗塞又は脳虚血による認知症である、請求項５に記載の薬学組成物。
【請求項９】
前記脳卒中又は中風が脳梗塞又は脳虚血による脳神経細胞の損傷である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項１０】
前記不安障害がパニック障害、強迫性障害又は心的外傷後ストレス障害である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項１１】
前記睡眠障害が過眠症である、請求項１に記載の薬学組成物。
【請求項１２】
請求項１のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する、覚醒剤用薬学組成物。
【請求項１３】
請求項１のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する、Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell. (Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd. (Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L.  (Passifloraceae)、Commelina communis L.  (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)およびAquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)よりなる群から選ばれた少なくとも１種の生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物。
【請求項１４】
前記抽出物はセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の全草から得られるものである、請求項１３に記載の薬学組成物。
【請求項１５】
前記抽出物はムラサキセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｐｓｅｕｄｏｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）の全草から得られるものである、請求項１３に記載の薬学組成物。
【請求項１６】
請求項１のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物。
【請求項１７】
請求項１のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する、Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell. (Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd. (Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L.  (Passifloraceae)、Commelina communis L.  (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)およびAquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)よりなる群から選ばれた少なくとも１種の生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１５のいずれか一項による薬学組成物、又は請求項１６及び請求項１７のいずれか一項による食品組成物を、これを必要とする対象体に投与することにより、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療する方法。
【請求項１９】
認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療する薬剤の製造のための請求項１〜１５のいずれか一項による薬学組成物、又は請求項１６及び請求項１７のいずれか一項による食品組成物の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む、神経精神疾患の予防又は治療のための薬学組成物に関する。
また、本発明は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む、神経精神疾患の予防又は改善のための食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
認知症は、脳の機能が損傷し、記憶力、言語能力、判断力、思考力などの知的機能が持続的に低下して、日常生活が困難な病的状態をいう。認知機能障害の代表的な疾患である認知症は、正常な老化とは区分すべき病的な現象であり、その原因によって、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、その他アルコール依存症による認知症、外傷による認知症、パーキンソン病の後遺症として現れる認知症に区別される。認知症を誘発する疾患は、アルツハイマー病が５０〜７０％を占めており、血管性認知症が二番目に高い頻度を示していることが知られている。韓国でも認知症患者の割合が急増しており、この傾向はさらに加速するだろうと思われる。これにより、認知症を始めとする認知機能障害の予防及び治療が可能な機能性物質や食品などの開発への要求が高まっている。
【０００３】
アルツハイマー型認知症の場合は、中枢神経系のアセチルコリン機能の減少が最も共通して現れるので、その治療のために、アセチルコリンの前駆体を投与したり、アセチルコリンの分解を阻害する薬物を投与したりして、脳のアセチルコリン濃度を高める治療方法が用いられてきた。したがって、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤単独で、又は既存のコリンエステラーゼ阻害剤と併用した薬物がその治療薬として使われており、代表的な薬物としては、タクリン（ｔａｃｒｉｎｅ）、ドネペジル（ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ）、リバスティグミン（ｒｉｖａｓｔｉｇｍｉｎｅ）、ガランタミン（ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ）などがある。
【０００４】
脳卒中や中風により発生する血管性認知症は、ほとんどが脳血管の動脈硬化により脳の様々な箇所への血液供給が足りなくなって、脳細胞が損傷を受けることにより発生する。血管性認知症の治療においても、血栓により発生するおそれのある脳血管疾患の再発を防止するため、血小板凝集阻害剤であるアスピリン（ａｓｐｉｒｉｎ）、及びワルファリン（ｗａｒｆａｒｉｎ）などの抗凝固剤などが使用されている。
【０００５】
アルツハイマー型認知症或いは血管性認知症に使用される薬物は、いずれも病気の進行を遅らせるだけであって、直接的な治療にはあまり効果がないうえ、治療の範囲は発症初期に限られている。よって、認知症の根本的な原因を治療する薬を開発しようとする努力が行われてきた。血管性認知症と前記アルツハイマー型認知症は、発症原因は異なるが、結果的に記憶力に損傷が発生するという点においては同じである(Terry and Buccafusco, 2003; Kar et al., 2004; Akhondzadeh et al., 2008; Cummings et al., 2008; Voss et al., 2008)。
【０００６】
一方、不安症状は、通常、環境の変化に適応する過程での正常な反応と看做されるが、過度な不安状態が６ヶ月以上続くとき、これを不安障害と判断することができる。病的な不安は、本人だけでなく、家族などの周囲の人々にも深刻な苦痛をきたすおそれがあり、このような不安障害は、神経構造の異常によるものであることが知られている。不安障害の治療には、心理的な治療に加えて薬物治療も並行され、様々な経路の作用機序を持つ薬物が使用される。しかし、臨床的に有効な抗不安薬物の場合、抗不安効果だけでなく、禁断現象や鎮静現象などの副作用のため、使用に慎重を期さなければならず、それゆえ、副作用のない天然素材の抗不安薬物の探索が、重要な当面の課題として浮上しつつある。
【０００７】
過眠とは、正常よりも睡眠が多いことを意味するもので、十分な睡眠をとっても特別な理由がないのに常に睡眠不足を自覚して疲労を感じ、集中力に問題が生じる状態を意味する。集中力は、学習または判断において非常に重要に作用し、集中の維持は、一連の仕事を行うにあたり、瞬間的な選択と判断を行って、最も効率的な行動へと導く重要な因子である。ところが、様々な外的要因によって集中力を長時間維持することは非常に難しく、この維持時間を延長させることが可能な覚醒効果のある物質の探求が行われてきた。短時間で集中力を向上させるためのグルコースの摂取や、運動時の精神集中を高めるカフェインなどの物質が知られている。しかし、グルコースの場合は、一時的な血糖値の上昇効果をもたらすが、持続性がなく、カフェインの場合は、効果持続時間は比較的長いが、過剰摂取の際に中毒症状が現れると報告されている。中毒性がなく、効果が長く持続する新しい薬物の必要性が増加している。
【０００８】
そこで、本発明者らは、認知症などの認知機能障害疾患を予防又は治療するための効果的な治療薬を開発すべく研究している中で、記憶力及び学習能力を効果的に増進させることが可能な生薬抽出物及びその有効成分を見出し、これを様々な精神神経系に関連する疾患に適用すれば、記憶力だけでなく、集中力、抗不安効果及び覚醒効果にも優れることを確認し、本発明を完成した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体を有効成分として含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物を提供することにある。
本発明の他の目的は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体を含有する生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物を提供することにある。
本発明の別の目的は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体を含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物を提供することにある。
本発明の別の目的は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）誘導体を含有する生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物を提供することにある。
本発明の別の目的は、上述した薬学組成物又は食品組成物を、これを必要とする対象体に投与することにより、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療する方法を提供することにある。
本発明の別の目的は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療するための薬剤の製造のための、上述した薬学組成物又は食品組成物の用途を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
薬学組成物
フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する組成物
本発明は、フラボン−６−Ｃ−グルコース（ｆｌａｖｏｎｅ−６−Ｃ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）を有効成分として含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物を提供する。
【００１１】
前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、下記化学式１で表示される化合物である。
【００１２】
【化１】
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【００１３】
［式中、ＲはＨ又はＣ１〜Ｃ６のアルキルを示し、
Ｒ１はＨ又はＯＨを示す。］
【００１４】
本発明の前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、下記表１のスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、スウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）及びこれらの混合物よりなる群から選択でき、最も好ましくはスウェルチシンである。
【００１５】
【表１】
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【００１６】
前記化学式１で表示されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、様々な種類の生薬から得られる。例えば、前記スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、又はスウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）は、Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell.(Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd.(Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L. (Passifloraceae)、Commelina communis L. (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)、Aquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)、又はこれらの混合物から得られる。
【００１７】
具体的には、フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、前記生薬の抽出物から得られる。例えば、化学式（１）で表されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）は、センブリ(Swertia japonica)の全草又はムラサキセンブリ(Swertia pseudochinensis)の全草から得られる。
前記生薬抽出物の抽出溶媒としては、水、アルコール、ヘキサン又はこれらの混合物を使用することができる。前記アルコールとしては、Ｃ１〜Ｃ４の低級アルコールを使用することが好ましく、メタノール又はエタノールを使用することがさらに好ましい。抽出方法としては、振とう抽出、ソックスレー（Ｓｏｘｈｌｅｔ）抽出又は還流抽出方法を用いることができるが、これらに限定されない。抽出温度は４０〜１００℃であることが好ましく、６０〜８０℃であることがさらに好ましい。また、抽出時間は２〜２４時間であることが好ましく、抽出回数は１〜５回であることが好ましい。
【００１８】
また、前記化学式１で表示されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体のうち、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）又はスウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）は、市販のものを購入して使用することができ、或いは有機合成によっても得ることができる。
【００１９】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する薬学組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療のために使用することができる。
本発明において、前記認知機能障害疾患は、記憶力、空間知覚力、集中力、判断力、執行機能、言語能力などの機能低下から発生する神経精神疾患を意味し、脳卒中、中風、せん妄（ｄｅｌｉｒｉｕｍ）、認知症（ｄｅｍｅｎｔｉａ）又は健忘症（ａｍｎｅｓｉａ）であり得る。また、前記認知症は、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、注意欠陥・多動性障害（Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ  ｄｅｆｉｃｉｔ  ｈｙｐｅｒａｃｔｉｏｎ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、その他、アルコール依存症による認知症、外傷による認知症、パーキンソン病の後遺症として現れる認知症など、様々な原因に起因する認知症であってもよく、好ましくはアルツハイマー型認知症又は血管性認知症である。
【００２０】
具体的には、本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する薬学組成物は、スコポラミン（ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ）又は脳卒中により誘導された記憶力損傷動物モデルにおける学習増進、空間知覚能、記憶力及び集中力を高いレベルに向上させる作用効果を示すので、認知機能障害又は集中力障害の予防又は治療用に使用できる。
【００２１】
本発明において、前記脳卒中又は中風は、主に脳血管の異常により脳神経細胞の損傷が発生して、脳機能の一部又は全体に急速に発生した障害が相当期間以上持続することを意味する。
具体的には、本発明の薬学組成物は、脳卒中又は中風による脳神経細胞の損傷において顕著な保護効果を示すので、脳卒中又は中風の予防又は治療用に使用できる。
【００２２】
本発明において、前記不安障害は、正常な情緒反応を超えて様々な形態の非正常的、病的な不安及び恐怖により、日常生活に障害を起こす神経精神疾患を意味し、パニック障害、強迫性障害、又は心的外傷後ストレス障害であり得る。
具体的には、本発明の薬学組成物は、抗不安活性において顕著な効果を示すので、不安障害の予防又は治療用に使用できる。
【００２３】
本発明において、前記睡眠障害は、睡眠が量的、質的に障害を受ける神経精神疾患を意味し、特に過眠症であり得る。前記過眠症（ｈｙｐｅｒｓｏｍｎｉａｓ）は、昼間にあまりにも眠くなり、目覚めていても突然眠くなって目を覚ましていられず、瞬時に眠りに落ちるなどの現象をいう。
具体的には、本発明の薬学組成物は、覚醒において顕著な効果を示すので、睡眠障害、特に過眠症の予防又は治療用に使用できる。
【００２４】
また、本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する薬学組成物は、スコポラミン又は脳卒中による認知症モデルマウスの記憶力減退及び集中力低下や、正常なマウスでの不安症状及び過眠症状を少量でも効果的に抑制することができる。
さらに、本発明の薬学組成物の前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、上述した生薬に含まれる成分であって、副作用なしに認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を効果的に治療することができる。
したがって、本発明の薬学組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用途として有用に使用できる。
【００２５】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、本発明の薬学組成物の総重量に対して、０．１〜５０重量％含まれることが好ましい。しかし、前記含有量は、必ずしもこれに限定されるものではなく、患者の状態及び疾患の種類及び進行程度に応じて変化させることができる。
【００２６】
本発明の薬学組成物において、前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、それぞれ成人を基準にして、１日約１ｍｇ〜１２０ｍｇの用量で単回ないし数回投与が可能であり、好ましくは３０ｍｇ〜１２０ｍｇの用量で単回ないし数回投与が可能である。ところが、前記化合物の投与量は、患者の重症度、年齢、性別、体重などの患者の状態と薬物の剤形、投与経路及び投与期間に応じて適切に調節できる。
【００２７】
生薬抽出物を含む薬学組成物
また、本発明は、前記化学式１のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物を提供する。
【００２８】
前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体は、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、スウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）及びこれらの混合物よりなる群から選択することができ、最も好ましくはスウェルチシンである。
また、前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する生薬抽出物は、Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell. (Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd. (Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L.  (Passifloraceae)、Commelina communis L. (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)、Aquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)、又はこれらの混合物から抽出することができる。
【００２９】
前記Swertia japonica、Swertia pseudochinensis、Enicostemma hyssopifolium、Swertia mussotii Franch.、Enicostemma hyssopifolium、Swertia franchetiana、Gentianella austriaca (Gentianaceae)、Machaerium hirtum Vell. (Fabaceae)、Aleurites moluccana L. Willd. (Euforbiaceae)、Zizyphus spinosa (Rhamnaceae)、Belamcanda chinensis (Iridaceae)、Wilbrandia ebracteata、Cayaponia tayuya (Cucurbitaceae)、Passiflora incarnata L. (Passifloraceae)、Commelina communis L. (Commelinaceae)、Oxalis corniculata (Oxalidaceae)、Aquilegia oxysepala Trautv. et Mey (Ranunculoideae)は、前記化学式１で表されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体のうち、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）、イソビテキシン（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）またはスウェルチアジャポニン（ｓｗｅｒｔｉａｊａｐｏｎｉｎ）を含むので、上述した生薬の抽出物を含む薬学組成物は、フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体中のスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）のように、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防又は治療することができる。また、生薬抽出物なので、副作用なしに認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は過剰睡眠を予防又は治療することができる。
本発明の薬学組成物は、センブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊｏｐｏｎｉｃａ）又はムラサキセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｐｓｅｕｄｏｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）の抽出物を含むことができ、好ましくはセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の全草のヘキサン、エタノール又はこれらの混合物の抽出物を含むことができる。
【００３０】
前記生薬抽出物の抽出溶媒としては、水、アルコール、ヘキサン又はこれらの混合物を使用することができる。前記アルコールとしては、Ｃ１〜Ｃ４の低級アルコールを使用することが好ましく、メタノール又はエタノールを使用することがさらに好ましい。抽出方法としては、振とう抽出、ソックスレー（Ｓｏｘｈｌｅｔ）抽出又は還流抽出方法を用いることができるが、これらに限定されない。抽出温度は４０〜１００℃であることが好ましく、６０〜８０℃であることがさらに好ましい。また、抽出時間は２〜２４時間であることが好ましく、抽出回数は１〜５回であることが好ましい。
【００３１】
本発明の生薬抽出物を有効成分として含む薬学組成物は、前記生薬抽出物を、組成物の総重量に対して０．１〜５０重量％含むことができる。しかし、前記含有量は、必ずしもこれに限定されるものではなく、患者の状態と疾患の種類及び進行程度に応じて変化させることができる。
本発明の生薬抽出物を有効成分として含む薬学組成物において、前記生薬抽出物は、大人を基準にして、１日約１０ｍｇ〜１２００ｍｇの用量で単回ないし数回投与が可能であり、好ましくは３００ｍｇ〜１２００ｍｇの用量で単回ないし数回投与が可能である。ところが、前記生薬抽出物の投与量は、患者の重症度、年齢、性別、体重などの患者の状態と薬物の剤形、投与経路及び投与期間に応じて適切に調節できる。
【００３２】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体、又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、毒性及び副作用がないため、予防又は治療のために長期服用の際にも安心して使用することができる。
【００３３】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体、又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、本発明の効果を害しない範囲内で、薬学的に許容可能な希釈剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、ｐＨ調節剤、酸化防止剤、溶解補助剤などの添加剤を含むことができる。
【００３４】
希釈剤としては、ショ糖、澱粉、微結晶セルロース、乳糖（乳糖水和物）、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、アルギン酸塩、アルカリ土金属類塩、クレイ、ポリエチレングリコール、無水リン酸水素カルシウム、又はこれらの混合物などを使用することができる。
結合剤としては、澱粉、微結晶セルロース、高分散性シリカ、マンニトール、Ｄ−マンニトール、ショ糖、乳糖水和物、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、ポリビニルピロリドン共重合体（コポビドン）、ヒプロメロース、ヒドロキシプロピルセルロース、天然ガム、合成ガム、コポビドン、ゼラチン、又はこれらの混合物などを使用することができる。
崩壊剤としては、デンプングリコール酸ナトリウム、トウモロコシ澱粉、ジャガイモ澱粉又は前糊化澱粉などの澱粉又は変性澱粉；ベントナイト、モンモリロナイト又はビーガム（ｖｅｅｇｕｍ）などのクレイ；微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース又はカルボキシメチルセルロースなどのセルロース類；アルギン酸ナトリウム又はアルギン酸などのアルギン類；クロスカルメロース（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ）ナトリウムなどの架橋セルロース類；グアーガム、キサンタンガムなどのガム類；架橋ポリビニルピロリドン（クロスポビドン（ｃｒｏｓｐｏｖｉｄｏｎｅ））などの架橋重合体；重炭酸ナトリウム、クエン酸などの沸騰性製剤、又はこれらの混合物を使用することができる。
潤滑剤としては、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、水素化植物油、安息香酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、一ステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、コロイド性二酸化ケイ素又はこれらの混合物などを使用することができる。
ｐＨ調節剤としては、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、エーテル酸ナトリウム、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、クエン酸などの酸性化剤や、沈降炭酸カルシウム、アンモニア水、メグルミン、炭酸ナトリウム、酸化マグネシウム、炭酸マグネシウム、クエン酸ナトリウム、三塩基性リン酸カルシウムなどの塩基性化剤などを使用することができる。
酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、酢酸トコフェロール、トコフェロール、没食子酸プロピル、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウムなどを使用することができる。 溶解補助剤は、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベートなどのポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ドキュセートナトリウム、ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）などを使用することができる。  
【００３５】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体、又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、経口投与のために錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などの固形製剤に製剤化することができ、このような固形製剤は、前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物と、少なくとも１種の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ  ｃａｒｂｏｎａｔｅ）、ショ糖（ｓｕｃｒｏｓｅ）又はラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）、ゼラチンなどを混ぜて製造することができる。また、賦形剤単独の他、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの潤滑剤も一緒に使用することができる。また、前記薬学組成物は、経口のための懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などの液状製剤に製剤化することができ、水、流動パラフィン以外に様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などを用いて、液状製剤に製剤化することができる。
【００３６】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、非経口投与のために製剤化するため、滅菌水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤を含むことができる。非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブオイルなどの植物油、オレイン酸エチルなどの注射可能なエステルなどを使用することができる。坐剤の基剤としては、ウィテップゾール（Ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどを使用することができる。
【００３７】
本発明において、用語「投与」は、いずれかの適切な方法で、患者に本発明の認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物を導入することを意味し、本発明の認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は治療用薬学組成物の投与経路は、目的組織に到達することができる限り、いずれの一般的な経路であってもよい。一例として、経口投与、腹腔内投与、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、皮内投与、鼻内投与、肺内投与、直腸内投与、腔内投与、腹腔内投与、頚膜内投与が挙げられるが、これらに制限されない。例えば、経口、直腸又は静脈、筋肉、皮下、子宮内頸膜又は脳室内（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）注射によって投与できる。
【００３８】
本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、単回投与されてもよく、一定の時間間隔をおいて数回に分けて投与されてもよい。
【００３９】
本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の治療効果を持つ他の活性成分をさらに含むことができる。
【００４０】
本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を含む薬学組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防又は治療するために、単独で、又はホルモン療法、薬物治療などの様々な方法と併用して使用できる。
【００４１】
食品組成物
本発明は、前記化学式１で表示されるフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物を提供する。
また、本発明は、前記フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する生薬抽出物を有効成分として含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善用食品組成物を提供する。
【００４２】
本発明に係る前記食品組成物は、フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体、又はこれを含有する生薬抽出物をそのまま添加するか、或いは他の食品組成物、健康機能食品又は飲料において、通常添加剤などをさらに含むことができる。
【００４３】
例えば、本発明の食品組成物は、白糖、結晶果糖、ブドウ糖、Ｄ−ソルビトール、マンニトール、イソマルトオリゴ糖、ステビオシド、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、スクラロースなどの甘味剤、無水クエン酸、ＤＬ−リンゴ酸、コハク酸及びその塩などの酸味剤、安息香酸及びその誘導体などの保存剤、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び増進剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含有することができる。また、本発明の食品組成物は、天然果実ジュース及び野菜飲料の製造のための果肉を含有することができる。このような添加剤の割合は、本発明の食品組成物１００重量部当たり約２０重量部以下の範囲である。
【００４４】
本発明の食品組成物が飲料である場合、飲料に通常含まれる香味剤又は天然炭水化物をさらに含有することができる。前記天然炭水化物は、ブドウ糖、果糖などの単糖類、マルトース、スクロースなどの二糖類、デキストリン、シクロデキストリンなどの多糖類、又はキシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールであってもよい。また、前記香味剤としては、タウマチン、ステビア抽出物（レバウジオシドＡ、グリシルヒジンなど）の天然香味剤、又はサッカリン、アスパルテームなどの合成香味剤であってもよい。前記食品組成物が飲料である場合、天然炭水化物は、組成物１００ｍＬあたり、通常約１〜２０ｇ、好ましくは約５〜１２ｇ含有され得る。
【００４５】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む食品組成物は、粉末、顆粒、錠剤、カプセル又は飲料として製造され、食品類、飲料、ガム、茶、ビタミン複合剤、健康補助食品類として利用することができる。
【００４６】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む食品組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防又は改善するための薬剤、食品及び飲料などに添加することができる。例えば、本発明の食品組成物は食品、飲料、ガム、茶、ビタミン複合剤、健康補助食品などに添加することができる。
【００４７】
本発明のフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む食品組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防又は改善のために、食品又は飲料に添加することができる。本発明の組成物は、食品の全重量の１〜５重量％添加することができ、飲料１００ｍＬに０．０２ｇ〜１０ｇ、好ましくは０．３ｇ〜１ｇの割合で添加することができる。
【００４８】
認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防、改善又は治療方法
また、本発明は、上述した薬学組成物又は食品組成物を、これを必要とする対象体に投与する段階を含む、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療する方法を提供する。また、本発明において、前記対象体は哺乳類、特にヒトを含む。
【００４９】
本発明において、前記認知機能障害疾患は、記憶力、空間知覚力、集中力、判断力、執行機能、言語能力などの機能低下から発生する神経精神疾患を意味し、脳卒中、中風、せん妄（ｄｅｌｉｒｉｕｍ）、認知症（ｄｅｍｅｎｔｉａ）又は健忘症（ａｍｎｅｓｉａ）であってもよい。また、前記認知症は、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、注意欠陥・多動性障害（Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ  ｄｅｆｉｃｉｔ  ｈｙｐｅｒａｃｔｉｏｎ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、その他、アルコール依存症による認知症、外傷による認知症、パーキンソン病の後遺症として現れる認知症など、様々な原因に起因する認知症であってもよく、好ましくはアルツハイマー型認知症又は血管性認知症である。
【００５０】
認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の予防、改善又は治療方法
また、本発明は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を予防、改善又は治療するための薬剤の製造のための上述した薬学組成物又は食品組成物の用途を提供する。
【００５１】
本発明において、前記認知機能障害疾患は、記憶力、空間知覚力、集中力、判断力、執行機能、言語能力などの機能低下から発生する神経精神疾患を意味し、脳卒中、中風、せん妄（ｄｅｌｉｒｉｕｍ）、認知症（ｄｅｍｅｎｔｉａ）又は健忘症（ａｍｎｅｓｉａ）であってもよい。また、前記認知症は、アルツハイマー型認知症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、血管性認知症（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、注意欠陥・多動性障害（Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ  ｄｅｆｉｃｉｔ  ｈｙｐｅｒａｃｔｉｏｎ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、その他アルコール依存症による認知症、外傷による認知症、パーキンソン病の後遺症として現れる認知症など、様々な原因に起因する認知症であってもよく、好ましくはアルツハイマー型認知症又は血管性認知症である。
【発明の効果】
【００５２】
本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む薬学組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を効果的に予防又は治療することができる。
また、本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体又はこれを含有する生薬抽出物を有効成分として含む食品組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害を効果的に予防又は改善することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体としてスウェルチシンを含有する本発明に係る薬学組成物の、アルツハイマー型認知症における記憶及び学習能力向上効果を示すグラフである。
【図２】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体として、イソオリエンチンを含有する本発明に係る薬学組成物の、アルツハイマー型認知症における記憶及び学習能力向上効果を示すグラフである。
【図３】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含むセンブリ抽出物を含有する本発明に係る薬学組成物の、アルツハイマー型認知症における記憶及び学習能力向上効果を示すグラフである。
【図４】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含むムラサキセンブリ抽出物を含有する本発明に係る薬学組成物の、アルツハイマー型認知症における記憶及び学習能力向上効果を示すグラフである。
【図５−６】本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体であるスウェルチシンの、アルツハイマー型認知症における記憶及び学習能力向上効果を示すグラフである。
【図７−８】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含むセンブリ抽出物を含有する本発明に係る薬学組成物の、血管性認知症における記憶及び学習能力向上効果を示す図である。
【図９】フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含むセンブリ抽出物を含有する本発明に係る薬学組成物の、脳卒中、中風における神経細胞保護効果を示す図である。
【図１０−１１】本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体であるスウェルチシンの、神血管性認知症における記憶及び学習能力向上効果を示す図である。
【図１２】本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体であるスウェルチシンの、脳卒中、中風における神経細胞保護効果を示す図である。
【図１３】本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体であるスウェルチシンの、抗不安効果を示す図である。
【図１４】本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体であるスウェルチシンの、覚醒効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
以下、本発明の理解を助けるために、好適な実施例及び実験例を提示する。しかし、これらの実施例及び実験例は、本発明をより容易に理解するために提供されるものに過ぎず、本発明の範囲を限定するものではない。
また、以下に記載された試薬及び溶媒は特別な言及がない限り、Ｓｉｇｍａ社から購入したものであり、旋光度はＪＡＳＣＯ  Ｐ−１０２０旋光計（ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ）を用いて測定した。ＵＶはＨｉｔａｃｈｉ  ＪＰ／Ｕ３０１０、ＩＲはＪＡＳＣＯ  ＦＴ／ＩＲ−５３００装置で測定し、ＮＭＲはＢｒｕｋｅｒ社のＡｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ）で測定し、ＦＡＢ質量スペクトルはＪＥＯＬ  ＪＭＳ−７００  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒを用いて測定した。
【実施例】
【００５５】
実施例１．フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する、センブリの７０％エタノール抽出物の製造
センブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）４０ｇを粉砕機で粉砕した後、抽出瓶に分けて入れ、残渣に検体表面以上となるまで７０％エタノールを加えて、６０℃で２時間２回抽出した後、濾過して減圧濃縮した。
【００５６】
実施例２．フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を含有する、ムラサキセンブリの７０％エタノール抽出物の製造 
ムラサキセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｐｓｅｕｄｏｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）４０ｇを使用した以外は、実施例１と同様にして抽出物を製造した。
【００５７】
実施例３．スウェルチシン及びイソオリエンチンの分離及び精製
実施例１で製造されたセンブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の７０％エタノール抽出物（１０．６６ｇ）に対して、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏの混合溶媒（９：１：０．１→８．５：１．５：０．１→４：１：０．１、ｖ／ｖ、最終１００％ＭｅＯＨ）を移動相、シリカゲル（７０〜２３０ｍｅｓｈ）を固定相としたカラムクロマトグラフィー（ｃｏｌｕｍｎ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）（φ６．５×３４．９ｃｍ）を実施し、合計１２個の小分画物に分けた。小分画物９（８６０ｍｇ）に対してＭＰＬＣ（Ｃ１８カラム１３０ｇ、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏグラジエント（ｇｒａｄｉｅｎｔ））を実施して、化合物１（１００ｍｇ）を分離した。分画物１０（５６０ｍｇ）は、１００％ＭｅＯＨ溶媒を用いて、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムクロマトグラフィー（φ３．４×３８．５ｃｍ）により５つの小分画物に分けた。小分画物１０−４（１８０ｍｇ）に対してＭＰＬＣ（Ｃ１８、４８ｇ、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏグラジエント）を実施して、化合物１（５０ｍｇ）をさらに分離した。小分画物１２（４．１９ｇ）を、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ混合溶媒（４：１、ｖ／ｖ）を用いてＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムクロマトグラフィー（φ３．４×３３．５ｃｍ）により、５つの小分画物に分けた。小分画物１２−４（８０ｍｇ）に対して、ＭＰＬＣ（Ｃ１８、２６ｇ、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏグラジエント）を実施して、化合物２（３０ｍｇ）を分離した。化合物１と２の構造は、１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータ分析、並びに既存の文献に収録された資料との比較分析を通じて、それぞれスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）およびイソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）と同定した。
[G. Cheng, Y. Bai, Y. Zhao, J. Tao, Y. Liu, G. Tu, L. Ma, N. Liao and X. Xu. Flavonoids from Ziziphus jujuba Mill var. spinosa. Tetrahedron  2000, 56, 8915-8920.]
[Y. Li, Y. Suo, Z. Liao, L. Ding, The glycosides from Lomatogonium rotatum. Natural Product Research  2008, 22-3, 198-202.]
Swertisin: Yellow powder. 1H-NMR (400 MHz DMSO-d6), (splitting caused by rotational isomerism): 7.97 (2H, d, J = 8.4 Hz, 2′, 6′-H); 6.93 (2H, d, J = 8.0 Hz, 3′, 5′-H); 6.88, 6.86 (1H, s, 8-H); 6.85, 6.84 (1H, s, 3-H), 4.61(1H, d, J = 8.0 Hz, Glc 1″-H), 3.87 (3H, s, OCH3). 13C-NMR (100 MHz DMSO-d6), (splitting caused by rotational isomerism): Table
Isoorientin: Yellow needle. 1H-NMR (500 MHz DMSO-d6), (splitting caused by rotational isomerism): 7.43 (1H, d, J = 8.5 Hz,  6′-H); 7.41 (1H, s, 2′-H); 6.91(1H, d, J=8.0Hz, 5'-H) 6.67 (1H, s, 3-H) 6.48 (1H, s, 8-H), 4.60(1H, d, J = 10.0 Hz, Glc 1"-H).13C-NMR (100 MHz DMSO-d6), (splitting caused by rotational isomerism): Table
13C-NMR Spectral Data for 1 and 2 (in DMSO-d6)
【００５８】
【表１−２】
2016531909.tif 000005
【００５９】
実験例１：アルツハイマー型認知症における記憶力改善効能の確認
実施例１〜３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）又はイソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、これらを含有するセンブリ抽出物又はムラサキセンブリ抽出物の認知症治療効能を確認するために、スポコラミンにより誘導された記憶力減退モデルを用いた実験を行った。その具体的な実験方法は次のとおりである。
１）実験動物の準備
約２６ｇ〜２８ｇの６週齢のＩＣＲ系マウス（（株）オリエント、韓国）を、水と飼料を自由に摂取させながら、温度約２３±１℃、湿度約６０±１０％及び明暗周期１２時間の環境下にて５日間適応させて飼育（慶煕大学校薬学大学の動物実験）した後、実験に使用した。
２）統計処理
すべての実験結果は、ＡＮＯＶＡ（ｏｎｅ−ｗａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ）を用いて統計処理し、有意性が認められる場合、Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ  Ｔｅｓｔを用いて、ｐ＜０．０５レベル以下で有意性検定を行った。
【００６０】
３）実験例１−１：受動的回避実験（ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）１
実験のために、受動的回避反応測定装置を準備した。前記受動的回避反応測定装置は、第１空間及び第２空間の２つの空間に分離され、２つの空間の間にギロチンドアが設けられており、前記ドアを介して前記第１空間と第２空間とが連結される。前記第１空間は照明を使って明るく維持し、前記第２空間は暗く維持した。暗く維持される第２空間の床には格子が設置されており、実験動物が暗い空間へ移動する場合、床の格子を通じて０．５ｍＡの電気ショックが３秒間流れるようにした。
約３０分経過後、蒸留水に溶解させたスコポラミンを１ｍｇ／ｋｇの用量で前記薬物投与群１〜４、対照群１及び対照群２に腹腔内投与(Ebert, U. et al., Eur. J. Clin. Invest., 28, pp944-949, 1998)し、対照群３には０．９％の生理食塩水（サリン（ｓａｌｉｎｅ）溶液）を腹腔内投与し、３０分経過後、前記薬物投与群１〜４及び対照群１〜３に、受動的回避反応測定装置についての学習を行わせた。具体的には、前記マウスを明るく維持される第１空間に置き、約２０秒の探索時間の経過後に、ギロチンドアを開いて前記マウスが暗く維持される第２空間へ移動する時間（ｌａｔｅｎｃｙ  ｔｉｍｅ、遅延時間）を測定した。ギロチンドアの開放後６０秒が経過するまで、暗く維持される第２空間へ移動しないマウスは実験から除外した。
学習終了２４時間後に、前記薬物投与群１〜４及び対照群１〜３のそれぞれについて、本実験を行った。前記各群のマウスが、１０秒の探索時間後に開いたギロチンドアを介して、暗いところへ４つの足が全部入るまでの時間（ｌａｔｅｎｃｙ  ｔｉｍｅ：遅延時間）を３００秒まで測定した。所要時間が長ければ長いほど、受動的回避の学習及び記憶が良いことを示す。
実施例３で製造されたフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を、１０％のツイン８０に溶解させて１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で薬物投与群１〜４に投与した以外は前記実験方法と同様にして、薬物投与群１〜４及び対照群１〜３に対して受動的回避実験を行った。
学習時及び本実験における各群のマウスの平均遅延時間を、下記表２及び図１に示した。    
【００６１】
【表２】
2016531909.tif 000006
【００６２】
前記表２及び図１から分かるように、実施例３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１〜４では、スコポラミンを投与した対照群２に比べて、第２空間へ移動する時間たる遅延時間が著しく増加した。具体的には、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を１．２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群１では、対照群２に比べて約２倍程度遅延時間が増加し、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を２．５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群２では、対照群２に比べて約２．５倍程度遅延時間が増加した。また、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群３では、対照群２に比べて約３倍程度遅延時間が増加し、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群４では、対照群２に比べて約３倍程度遅延時間が増加した。
このことから、実施例３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）が、認知症などの認知機能障害疾患を効果的に予防又は治療することができることが分かる。
【００６３】
４）実験例１−２：受動的回避実験（ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）２
実施例３で製造されたフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるイソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）を、１０％のツイン８０に溶解させて１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で薬物投与群１〜４に投与した以外は実験例１−１と同様にして、薬物投与群１〜４及び対照群１〜３について受動的回避実験を行った。
学習時及び本実験における各群のマウスの平均遅延時間を、下記表３及び図２に示した。    
【００６４】
【表３】
2016531909.tif 000007
【００６５】
前記表３及び図２から分かるように、実施例３で製造されたイソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）を投与した薬物投与群１〜４では、スコポラミンを投与した対照群２に比べて、第２空間へ移動する時間たる遅延時間が著しく増加した。具体的には、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）を２．５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群２では、対照群２に比べて約２倍程度遅延時間が増加した。また、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）を５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群３では、対照群２に比べて約３倍程度遅延時間が増加し、イソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群４では、対照群２に比べて約２．５倍程度遅延時間が増加した。
このことから、実施例３で製造されたイソオリエンチン（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）が、認知症などの認知機能障害疾患を効果的に予防又は治療することが分かった。
【００６６】
５）実験例１−３：受動的回避実験（ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）３
実施例１で製造されたセンブリの７０％エタノール抽出物を、１０％のツイン８０に溶解させ、１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ及び４００ｍｇ／ｋｇの用量で薬物投与群１〜３に投与した以外は実験例１−１と同様にして、薬物投与群１〜３及び対照群１〜３について受動的回避実験を行った。  
前記実験結果は下記表４及び図３に示した。  
【００６７】
【表４】
2016531909.tif 000008
【００６８】
前記表４及び図３から分かるように、実施例１で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ抽出物を投与した薬物投与群１〜３では、スコポラミンを投与した対照群２に比べて、第２空間へ移動する時間たる遅延時間が著しく増加した。具体的には、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ抽出物を１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群１では、対照群２に比べて約２倍程度遅延時間が増加した。また、センブリ抽出物を２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群２では、対照群２に比べて約３倍程度遅延時間が増加し、センブリ抽出物を４００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群３では、対照群２に比べて約２．５倍程度遅延時間が増加した。
このことから、実施例１で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ抽出物は、認知症などの認知機能障害疾患を効果的に予防又は治療することができることが分かった。  
【００６９】
６）実験例１−４：受動的回避実験（ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）４
実施例２で製造されたムラサキセンブリの７０％エタノール抽出物を、１０％のツイン８０に溶解させ、１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ及び４００ｍｇ／ｋｇの用量で薬物投与群１〜３に投与した以外は実験例１−１と同様にして、薬物投与群１〜３及び対照群１〜３について受動的回避実験を行った。  
前記実験の結果は下記表５及び図４に示した。  
【００７０】
【表５】
2016531909.tif 000009
【００７１】
前記表５及び図４から分かるように、実施例２で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するムラサキセンブリ抽出物を投与した薬物投与群１〜３では、スコポラミンを投与した対照群２に比べて、第２空間へ移動する時間たる遅延時間が著しく増加した。具体的には、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するムラサキセンブリ抽出物を１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群１では、対照群２に比べて約２倍程度遅延時間が増加した。また、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するムラサキセンブリ抽出物を２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群２では、対照群２に比べて約３倍程度遅延時間が増加し、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するムラサキセンブリ抽出物を４００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した薬物投与群３では、対照群２に比べて約２倍程度遅延時間が増加した。
このことから、実施例２で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するムラサキセンブリ抽出物は、認知症などの認知機能障害疾患を効果的に予防又は治療することができることが分かった。    
【００７２】
７）実験例１−５：Ｙ字迷路試験
実験のためにＹ字迷路を準備した。Ｙ字迷路は３本のアームを持っており、各アームは４２ｃｍの長さ、３ｃｍの幅及び１２ｃｍの高さを有し、３本のアームがなす角度は１２０度であり、黒色のポリビニル樹脂で製造された。
前記１）で準備したマウスを、薬物投与群１、２及び対照群１〜３の５つの群（１群当たり１０匹）とした。  
実施例３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）８ｍｇを１０％ツイン８０（Ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｓｏｒｂｉｔａｎ  ｍｏｎｏｏｌｅａｔｅ：Ｓｉｇｍａ、ＵＳＡ）４ｍＬに溶解させた後、前記薬物投与群１及び２に、５ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与した。一方、対照群１にはドネペジルを５ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、対照群２及び３には１０％ツイン８０をそれぞれ０．１５ｍＬ投与した。  
約３０分経過後、蒸留水に溶解させたスコポラミンを、１ｍｇ／ｋｇの用量で前記薬物投与群１、２、対照群１及び２に腹腔内投与(Ebert, U. et al., Eur. J. Clin. Invest., 28, pp944-949, 1998)し、対照群３には０．９％の生理食塩水（サリン（ｓａｌｉｎｅ）溶液）を腹腔内投与した。
３０分経過後、前記薬物投与群１、２及び対照群１〜３について、それぞれＡ、Ｂ、Ｃに区分されたＹ字迷路の３本のアームのうち、１本のアームにマウスを丁寧に置き、８分間自由に動けるようにした後、マウスが入ったアームを記録した。このとき、尾まで完全に入った場合に限り、実験動物が入ったアームとして記録したとともに、入ったことのあるアームに再び進入した場合にも記録した。
３本の異なるアームに順番に入った場合、１点（実際変更、ａｃｔｕａｌ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｏｎ）ずつ付与した。 変更行動力（ａｌｔｅｒｎａｔｉｏｎ  ｂｅｈａｖｉｏｒ）は、３本のアームに全て順番に入ったものと定義され、下記数式１によって％に換算した (Sarter, M. et al., Psychopharmacology., 94, pp491-495, 1998)。
【００７３】
【数１】
2016531909.tif 000010
【００７４】
前記数式１によって換算された変更行動力を下記表６及び図５に示し、各区域に進入する総回数を示す総進入回数（ｔｏｔａｌ  ｅｎｔｒｙ）を表７及び図６に示した。
【００７５】
【表６】
2016531909.tif 000011
【００７６】
【表７】
2016531909.tif 000012
【００７７】
前記表６及び図５から分かるように、実施例３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１及び２では、スコポラミンを投与した対照群２に比べて変更行動力が増加し、特に薬物投与群２では、ドネペジルを投与した対照群１に類似する程度の変更行動力を示した。  
【００７８】
また、表７及び図６から明らかなように、薬物投与群１、２及び対照群１〜３の総進入回数は、すべて類似した数値を示している。したがって、変更行動力の増加がマウスの活動性の変化によるものではないことが分かるため、薬物投与群１及び２のマウスの学習及び記憶力と集中力が、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）によって著しく向上したことが分かった。
このことから、実施例２で製造されたフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）は、アルツハイマー型認知症などの認知機能障害疾患と集中力障害疾患を効果的に予防又は治療することができることが分かった。
【００７９】
実験例２：血管性認知症における記憶力改善効能、及び脳卒中、中風における脳神経細胞保護効果の確認
１）実験動物の準備
約３０ｇ〜３５ｇの７週齢ＩＣＲ系マウス（（株）オリエント、韓国）を、水と飼料を自由に摂取するようにしながら、温度約２３±１℃、湿度約６０±１０％及び明暗周期１２時間の環境下において５日間適応させて飼育（慶煕大学校薬学大学の動物実験）した後、実験に使用した。
２）統計処理
すべての実験結果は、ＡＮＯＶＡ（ｏｎｅ−ｗａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ）を用いて統計処理した。有意性が認められる場合、Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ  Ｔｅｓｔを用いて、ｐ＜０．０５レベル以下で有意性の検定を行った。
３）脳卒中モデルマウスの作製
前記１）の実験動物を手術室に置き、６０分間適応させた後、麻酔ガス（亜酸化窒素：７０％、酸素：３０％、イソフルラン：２．０％）が出てくる空間に入れて麻酔した。麻酔が十分に誘導されたかを苦痛反射によって確認し、実験動物を手術台にまっすぐに寝かせて上肢と頭を固定した。その後、上肢と中央線とが交わる点から上方に約１．５ｃｍ皮膚を切開し、組織が損傷しないようにピンセットで両側総頸動脈を露出させた。露出した頸動脈に付いている組織及び神経を分離した後、動脈結紮クリップで結紮した。１５分後、クリップを取り除いて再灌流させた後、切開部位を縫合糸で縫合した。縫合後、すぐに実験動物を回復室（３２〜３３℃、Ｏ２  ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）に置き、麻酔から覚めるまで維持した。手術後４日間、１日１回体重測定及び状態観察を行った。
【００８０】
４）実験例２−１：Ｙ字迷路試験
前記１）で準備したマウスに、３）の手術後すぐに実施例１で製造したセンブリ抽出物を投与し始め、７日間同じ時間に投与した。実施例１で製造したセンブリ抽出物が投与される薬物投与群１、２、３、及び対照群１〜２の５つの群（１群あたり５匹）を準備した。薬物投与群１、２及び３に、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ及び２００ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与し、対照群１及び２には、１０％ツイン８０をそれぞれ０．１５ｍＬ投与した。投薬後７日目に、実験例１−５と同様の方法で、薬物投与群１〜３と対照群１及び２についてＹ字迷路試験を行った。
投薬６０分経過後、前記薬物投与群１〜３と対照群１及び２について、それぞれＡ、Ｂ、Ｃに区分されたＹ字迷路の３本のアームのうちのいずれか一つにマウスを丁寧に置き、８分間自由に動けるようにした後、マウスが入ったアームを記録した。このとき、尾まで完全に入った場合に限り、実験動物が入ったアームとして記録し、入ったことのあるアームに再び入った場合にも記録した。これを前記数式１によって％に換算した。
前記数式１によって換算された変更行動力を下記図７及び表８に示し、各区域に進入する総回数を示す総進入回数（ｔｏｔａｌ  ｅｎｔｒｙ）を図８及び表９に示した。
【００８１】
【表８】
2016531909.tif 000013
【００８２】
【表９】
2016531909.tif 000014
【００８３】
前記表８及び図７から分かるように、実施例１で製造したセンブリ抽出物を投与した薬物投与群１〜３では、脳卒中を誘発した対照群１に比べて変更行動力が増加し、特に薬物投与群３では、正常群である対照群２に類似する程度の変更行動力を示した。
また、表９及び図８から分かるように、薬物投与群１〜３と対照群１及び２の総進入回数は、すべて類似する数値を示している。したがって、変更行動力の増加がマウスの活動性の変化によるものではないことが分かるため、薬物投与群１〜３の脳卒中モデルマウスの学習及び記憶力が、センブリ抽出物によって著しく向上したことが分かった。
【００８４】
一方、Ｙ字迷路試験の終了後、前記薬物投与群１〜３及び対照群２を４％パラホルムアルデヒド（ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ）で灌流固定し、脳を摘出した。灌流固定した脳のサンプルを洗浄後、厚さ３０μｍの切片を作製し、脳細胞の正常状態である未変性領域の染色が可能なニッスル（Ｎｉｓｓｌ）染色を実施し、実施例１で製造したセンブリ抽出物を投与した薬物投与群１〜３と対照群１及び２の海馬領域における脳細胞の損傷に対して、神経学的スコア（ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｃｏｒｅ）を与えて評価した。評価基準としては、海馬領域の脳細胞が損傷していない場合には０点、０〜３０％損傷した場合には１点、３０〜６０％損傷した場合には２点、６０〜１００％損傷した場合には３点をそれぞれ与えた。薬物投与群及び対照群について全く知識のない３名が測定した値の平均で、損傷の程度を計算した。評価基準に基づく神経学的スコアを図９及び表１０に示した。
【００８５】
【表１０】
2016531909.tif 000015
【００８６】
前記表１０及び図９から分かるように、実施例１で製造したセンブリ抽出物を投与した薬物投与群１〜３では、脳卒中を誘発した対照群１に比べて神経学的スコアが減少し、特に薬物投与群３では、脳卒中群に比べて有意な結果を示した。神経学的スコアが、脳の海馬領域の損傷神経細胞を反映することからみて、薬物投与群１〜３では、脳卒中モデルマウスの損傷脳細胞が、センブリ抽出物によって著しく保護されたことが分かった。
【００８７】
５）実験例２−２：Ｙ字迷路試験
前記１）で準備したマウスに、３）の手術後すぐに実施例３のスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投薬し始め、７日間同じ時間に投与した。実施例３で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）が投与される薬物投与群１〜３と、対照群１及び２の５つの群（一群当たり５匹）を準備した。薬物投与群１、２及び３に、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ及び２００ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与し、対照群１及び２には１０％ツイン８０をそれぞれ０．１５ｍＬ投与した。投薬後７日目に、実験例１と同様の方法で、薬物投与群１〜３と対照群１及び２についてＹ字迷路試験を行った。  
投薬６０分経過後、前記薬物投与群１〜３と対照群１及び２について、それぞれＡ、Ｂ、Ｃに区分されたＹ字迷路の３本のアームのうちのいずれか一つにマウスを丁寧に置き、８分間自由に動けるようにした後、マウスが入ったアームを記録した。このとき、尾まで完全に入った場合に限り、実験動物が入ったアームとして記録したとともに、入ったことのあるアームに再び入った場合にも記録した。これを前記数式１によって％に換算した。
前記数式１によって換算された変更行動力を下記図１０及び表１１に示し、各区域に進入する総回数を示す総進入回数（ｔｏｔａｌ  ｅｎｔｒｙ）を図１１及び表１２に示した。
【００８８】
【表１１】
2016531909.tif 000016
【００８９】
【表１２】
2016531909.tif 000017
前記表１１及び図１０から分かるように、実施例３で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１〜３では、脳卒中を誘発した対照群２に比べて変更行動力が増加し、特に薬物投与群３では、正常群である対照群２に類似する程度の変更行動力を示した。  
また、表１２及び図１１から分かるように、薬物投与群１〜３と対照群１及び２の総進入回数は、すべて類似する数値を示している。したがって、変更行動力の増加がマウスの活動性変化によるものではないことが分かるため、薬物投与群１〜３の脳卒中モデルマウスの学習及び記憶力が、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）によって著しく向上したことが分かった。
【００９０】
Ｙ字迷路試験の終了後、前記薬物投与群１〜３と対照群２を屠殺し、前記脳切片を作製した後、ニッスル（Ｎｉｓｓｌ）染色を実施し、実施例３で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１〜３と、対照群１及び２の海馬領域における脳細胞の損傷に対して、神経学的スコア（ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｃｏｒｅ）を与えて評価した。評価基準に基づく神経学的スコアを図１２及び表１３に示した。
【００９１】
【表１３】
2016531909.tif 000018
【００９２】
前記表１３及び図１２から分かるように、実施例３で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１〜３では、脳卒中を誘発した対照群１に比べて、神経学的スコアが減少し、特に薬物投与群３は、脳卒中群に比べて有意な結果を示した。神経学的スコアが、脳の海馬領域の損傷神経細胞を反映することからみて、薬物投与群１〜３の脳卒中モデルマウスの損傷脳細胞が、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）によって著しく保護されたことが分かった。
【００９３】
実験例３：不安症状における緩和効能の確認
１）実験動物の準備
約２６ｇ〜２８ｇの６週齢のＩＣＲ系マウス（（株）オリエント、韓国）を、水と飼料を自由に摂取させながら、温度約２３±１℃、湿度約６０±１０％及び明暗周期１２時間の環境下において５日間適応させて飼育（慶煕大学校薬学大学の動物実験）した後、実験に使用した。
２）統計処理
すべての実験結果は、ＡＮＯＶＡ（ｏｎｅ−ｗａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ）を用いて統計処理し、有意性が認められた場合、Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ  Ｔｅｓｔを用いて、ｐ＜０．０５レベル以下で有意性検定を実施した。
【００９４】
３）実験例３−１：ガラス玉覆い隠し試験
正常状態での不安症状の緩和を測定する方法で、マウスが不安を感じたら土を掘る習性を利用して、ガラス玉覆い隠し試験を行った。４０ｃｍ×２７ｃｍ×１８ｃｍのケージに４ｃｍの高さで床敷きを敷き詰め、同じ柄の２５個のガラス玉を３ｃｍの間隔で配置した。実施例３で製造したフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）が投与される薬物投与群１、及び対照群１の２つの群（一群当たり１０匹）を準備した。薬物投与群１に１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、対照群１には１０％ツイン８０を０．１５ｍＬ投与した。
投薬６０分経過後、前記薬物投与群１と対照群１をガラス玉入りのケージに丁寧に置き、３０分間自由に動けるようにして、３０分経過後、床敷きの下に覆い隠されたたガラス玉の数を測定した。このとき、ガラス玉が完全に床敷きに覆い隠されて見えない場合には１、完全に覆い隠されずに半分だけ覆い隠された場合には０．５とそれぞれ計算した。覆い隠されているガラス玉の数が多いほど、実験動物が不安を感じると判断した(Broekkamp, CL. et al., Eur J Pharmacol., 126, pp223-229, 1986)。
前記実験の結果を下記表１４及び図１３に示した。
【００９５】
【表１４】
2016531909.tif 000019
【００９６】
前記表１４及び図１３から分かるように、実施例３で製造されたスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１では、対照群１に比べて、覆い隠されたガラス玉の数が減少した。したがって、正常状態の対照群１が感じる不安症状が、薬物投与群１では、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）によって著しく減少したことが分かった。
【００９７】
実験例４：過眠症状における覚醒効能の確認
１）実験動物の準備
約２６ｇ〜２８ｇの６週齢のＩＣＲ系マウス（（株）オリエント、韓国）を、水と飼料を自由に摂取させながら、温度約２３±１℃、湿度約６０±１０％及び明暗周期１２時間の環境下において５日間適応させて飼育（慶煕大学校薬学大学の動物実験）した後、実験に使用した。実験動物は実験２４時間前から絶食させた。
２）統計処理
すべての実験結果はＡＮＯＶＡ（ｏｎｅ−ｗａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｖａｒｉａｎｃｅ）を用いて統計処理し、有意性が認められる場合、Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ  Ｔｅｓｔを用いて、ｐ＜０．０５レベル以下で有意性検定を行った。
【００９８】
３）実験例４−１：睡眠誘導試験
前記１）で準備したマウスを、スウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）が投与されるべき薬物投与群１と、対照群１の２つの群（一群当たり１０匹）とした。前記薬物投与群１に対しては、実施例３のスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を１０％ツイン８０（Ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｓｏｒｂｉｔａｎ  ｍｏｎｏｏｌｅａｔｅ：Ｓｉｇｍａ、ＵＳＡ）に溶解させた後、１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。一方、対照群１には、１０％ツイン８０を０．１５ｍＬ投与した。
薬物投与１時間後に、ペントバルビタール（ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ）を生理食塩水に溶解させた後、６０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内投与し、マウスをケージに入れた。このとき、ケージには床に床敷を敷き詰め、１つのケージ当たり１匹のマウスを入れて観察した。ペントバルビタール（ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ）投与後、マウスを背位にしたときに、直ちに伏位に起き直る正向反射が起こらなくなるまでにかかった時間を、睡眠誘導にかかった時間とみなした。その後、正向反射がさらに現れて、マウスが伏位に起き直るときに覚醒したとみなして、睡眠の持続時間を計算した。
前記実験結果は下記表１５及び図１４に示した。
【００９９】
【表１５】
2016531909.tif 000020
【０１００】
前記表１５及び図１４から分かるように、実施例３で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を投与した薬物投与群１では、総睡眠時間が対照群１に比べて著しく減少した。したがって、フラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体の一つであるスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）の投与には、正常状態で覚醒効果があることを観察することができた。
【０１０１】
製剤及び食品組成物の製造
散剤の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物２０ｍｇ、乳糖１００ｍｇ及びタルク１０ｍｇを混合し、気密布に充填して散剤を製造した。  
【０１０２】
錠剤の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表１６に記載の成分を用いて錠剤を製造した。  
【０１０３】
【表１６】
2016531909.tif 000021
【０１０４】
上記の成分を混合し、通常の錠剤の製造方法によって打錠して、錠剤を製造した。
【０１０５】
カプセル剤の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表１７に記載の成分を用いて、カプセル剤を製造した。  
【０１０６】
【表１７】
2016531909.tif 000022
【０１０７】
通常のカプセル剤の製造方法によって上記の成分を混合し、ゼラチンカプセルに充填して、カプセル剤を製造した。  
【０１０８】
注射剤の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表１８に記載の成分を用いて、注射剤を製造した。  
【０１０９】
【表１８】
2016531909.tif 000023
【０１１０】
上記の成分を混合し、通常の方法で溶液を製造した後、容量２ｍＬのアンプルに充填し、滅菌して注射剤を製造した。  
【０１１１】
液剤の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表１９に記載の成分を用いて、液剤を製造した。
【０１１２】
【表１９】
2016531909.tif 000024
【０１１３】
通常の液剤製造方法によって、精製水に前記表１９の各成分を加えて溶解させ、レモンの香りを適量加えた後、精製水をさらに追加して１００ｍＬの溶液を製造した後、褐色瓶に充填し、滅菌して液剤を製造した。  
【０１１４】
健康食品組成物の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表２０に記載の成分を用いて、健康食品組成物を製造した。  
【０１１５】
【表２０】
2016531909.tif 000025
【０１１６】
通常の健康食品製造方法によって上記の成分を混合した後、顆粒を製造し、通常の方法によって健康食品組成物を製造した。  
【０１１７】
健康飲料の製造
実施例１又は２で製造したスウェルチシン（ｓｗｅｒｔｉｓｉｎ）を含有するセンブリ又はムラサキセンブリ抽出物、及び下記表２１に記載の成分を用いて、健康飲料を製造した。  
【０１１８】
【表２１】
2016531909.tif 000026
【０１１９】
通常の健康飲料製造方法によって前記表２１の成分を精製水に溶解させ、総９００ｍＬの溶液を製造した後、約１時間８５℃で攪拌し、加熱した。その後、前記溶液を濾過し、滅菌された２Ｌの容器中に得て密封滅菌し、冷蔵保管した後、健康飲料を製造した。
【産業上の利用可能性】
【０１２０】
本発明に係るフラボン−６−Ｃ−グルコース誘導体を有効成分として含有する組成物は、認知機能障害、脳卒中、中風、集中力障害、不安障害又は睡眠障害の神経精神疾患を予防、改善又は治療することができる。
【図１】
2016531909.tif 000028
【図２】
2016531909.tif 000029
【図３】
2016531909.tif 000030
【図４】
2016531909.tif 000031
【図５】
2016531909.tif 000032
【図６】
2016531909.tif 000033
【図７】
2016531909.tif 000034
【図８】
2016531909.tif 000035
【図９】
2016531909.tif 000036
【図１０】
2016531909.tif 000037
【図１１】
2016531909.tif 000038
【図１２】
2016531909.tif 000039
【図１３】
2016531909.tif 000040
【図１４】
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【国際調査報告】
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