(57)【要約】  本発明は、糖タンパク質IIb／IIIaに結合し、画像診断法、特に血栓の磁気共鳴画像法のために使用することができる化合物を対象とする。開示されている化合物は、十分な緩和能と合わせて、糖タンパク質IIb／IIIa受容体への結合を可能にする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I）
【化１】
2016508507.tif 000089
（式中、
Xは、
【化２】
2016508507.tif 000090
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化３】
2016508507.tif 000091
基を表し、
基中、
R1は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
R2は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
Gは、
【化４】
2016508507.tif 000092
基を表し、
式中、
R3は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
R4は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
Mは、プラセオジム、ネオジム、サマリウム、イッテルビウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウムまたはエルビウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物。
【請求項２】
一般式（I）
【化５】
2016508507.tif 000093
（式中、
Xは、
【化６】
2016508507.tif 000094
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化７】
2016508507.tif 000095
基を表し、
基中、
R1は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
R2は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
Gは、
【化８】
2016508507.tif 000096
基を表し、
式中、
R3は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
R4は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物。
【請求項３】
Xが、
【化９】
2016508507.tif 000097
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化１０】
2016508507.tif 000098
基を表し、
基中、
R1は、水素またはメチルを表し、
R2は、水素またはメチルを表し、
Gは、
【化１１】
2016508507.tif 000099
基を表し、
式中、
R3は、水素またはメチルを表し、
R4は、水素またはメチルを表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す、請求項1または2に記載の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物。
【請求項４】
Xが、
【化１２】
2016508507.tif 000100
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化１３】
2016508507.tif 000101
基を表し、
基中、
R1は水素を表し、
R2は水素を表し、
Gは、
【化１４】
2016508507.tif 000102
基を表し、
式中、
R3はメチルを表し、
R4は水素を表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは1を表す、請求項1から3のいずれか一項に記載の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物。
【請求項５】
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］オキシ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ヘキサアセタート二ガドリニウム；
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ドデカアセタート四ガドリニウム；
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム；
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ブチル）プロパンアミド四ガドリニウム；
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム；および
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウムからなる群から選択される、請求項1から4のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
画像診断法のための請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項７】
診断用薬の製造のための請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
診断用薬の製造のための請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物またはその混合物の使用。
【請求項９】
血栓を画像化するための診断用薬の製造のための請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物またはその混合物の使用。
【請求項１０】
医薬として許容される担体中の有効量の1つまたは複数の請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物を患者に投与するステップと、前記患者にNMR断層撮影を受けさせるステップとを含む、患者の体組織を画像化する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特許請求の範囲において特徴づけられる項目、すなわち、血栓の磁気共鳴画像法に有用な金属キレート、および哺乳類の体内の血栓の画像化のためのその使用に関する。とりわけ、本発明は、常磁性キレートで標識された、血栓の画像化のための高親和性、特異的結合糖タンパク質IIb／IIIaアンタゴニストに関する。
【背景技術】
【０００２】
1．はじめに
心筋梗塞（MI）、脳卒中、一過性脳虚血発作（TIA）および肺塞栓症（PE）が世界的に罹患および死亡の主原因となっている。これらの生命を脅かす臨床イベントはほとんどが血栓によって引き起こされ、この血栓は、全身に広がる様々な血管に位置する可能性があり、また、様々なサイズおよび成分であり得る。脳卒中またはTIAの原因は、例えば、心臓の左心房（LA）内、または頸動脈など、心臓と脳の間の大きな動脈内での血栓であることがある。PEの場合は、しばしば下腿に位置する静脈血栓が原因となることがある。
【０００３】
成長しつつある血栓において、血小板凝集の一般的な最終ステップは、血小板内での架橋につながる、活性化糖タンパク質IIb／IIIa（GPIIb／IIIa）の血中フィブリノゲンへの結合によって特徴づけられる。糖タンパク質IIb／IIIa阻害剤の設計および開発（Scarborough R.M., Gretler D.D., J.Med.Chem.2000, 43, 3453-3473）が、抗血小板および抗血栓活性に関する薬理学的研究において大きな関心事となっている。
【０００４】
しかし、医療専門家は、急性治療の状況において血栓症を防ぐ化合物のみならず、血栓を画像化する満足のいく方法も必要としている。
【０００５】
とりわけ、血栓の画像化は、血栓溶解治療などの臨床応用において非常に重要であり、ここでは、血栓形成部位の同定が、治療法の効果を監視するために必須である。
【０００６】
したがって、血栓の画像化は、不必要な予防的適用を避け、それに伴って危険な抗凝固治療（例えば、凝固能の低下による重度の出血）を避けるのに役立つ。
【０００７】
このような診断手順の恩恵を受ける可能性のある患者集団は大規模である。米国心臓協会の“Heart disease and Stroke Statistics - 2010 Update”によれば、米国内だけで17.6百万人が冠動脈性心疾患を患っていた。毎年、推定785,000人のアメリカ人が新たに冠動脈の発作を起こし、約470,000人で発作が再発する。毎年、約795,000人の患者が新たに脳卒中を経験したり、脳卒中の再発を経験したりする。これらのうち、約610,000人は初めての発作である。すべての脳卒中のうち、87％が虚血性であり、その大部分が血栓塞栓性の原因による（Lloyd-Jones, D.et al., Circulation, 2010, 121(7): p.e46-215）。米国における一過性脳虚血発作（TIA）の発生率は、年間約200,000件から500,000件、集団の有病率は2.3％と推定されており、言い換えると、約5百万人となる（Easton, J.D.et al., Stroke, 2009, 40(6): p.2276-2293）。TIAを起こした人の90日以内の脳卒中のリスクは3.0％から17.3％、10年以内の脳卒中のリスクは18.8％である。10年以内の脳卒中、心筋梗塞または血管性の死亡リスクを合わせると42.8％にもなる（Clark, T.G., M.F.G.Murphy, and P.M.Rothwell, Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry, 2003.74(5): p.577-580）。
【０００８】
画像化は血栓の同定において最先端のものである。現在、血栓の画像化は、血管領域に応じて様々なモダリティに依存する。頸動脈超音波検査を用いて頸動脈血栓を探し、経食道心エコー（TEE）では心臓腔の血塊を探し、超音波では深部静脈血栓を探し、CTはPEの検出において最も基準となるものになっている。
【０００９】
2．従来技術の説明、解決しようとする課題およびその解決策
前述の技術が成功しているものの、血栓の検出および監視のための画像化の解決策が依然として大いに必要とされている。第1に、十分に対応されない特定の血管領域がある。例えば、最善の画像化の努力にもかかわらず、依然として虚血性脳卒中の30％から40％は「特発性」であり、すなわち原因が不明で、言い換えれば、血栓塞栓症の根源は残念ながら依然として特定されていない（Guercini, F.et al., Journal of Thrombosis and Hemostasis, 2008.6(4): p.549-554）。特発性脳卒中の根底にある原因には、大動脈弓または頭蓋内動脈におけるアテローム性動脈硬化が含まれる。大動脈弓または他の主要な血管におけるプラーク破綻は、特に、特発性脳卒中の主因と考えられており、通常の方法での検出が非常に困難である。経食道心エコー（TEE）の研究による最近の臨床試験データによれば、潰瘍化した大動脈弓プラークは特発性脳卒中に関連するが、大動脈弓における肥厚した血管壁の有無は、虚血性脳卒中を予測できるものではないことが明らかになっている。血栓を標的とする特定の画像化手法は、動脈硬化プラークの存在下で血塊を確認できる可能性が大いにある。
【００１０】
さらに、依然として、単一のモダリティを使用して全身の血栓を確認する手法が大いに必要とされている。例えば、TIAまたは脳卒中の経過観察中は、現在、塞栓の源を探すために複数の検査が必要である（Ciesienski, K.L.and P.Caravan, Curr Cardiovasc Imaging Rep., 2010.4(1): p.77-84）。
【００１１】
既に前述の通り、糖タンパク質IIb／IIIa阻害剤の治療応用（Scarborough R.M., Gretler D.D., J.Med.Chem.2000, 43, 3453-3473）が過去において大きな関心事となっている。その一方で、3種類の糖タンパク質IIb／IIIaアンタゴニストが市販されている。すなわち、組換え抗体（アブシキシマブ）、環状ヘプタペプチド（エプチフィバチド）および非ペプチドの合成阻害剤（チロフィバン）である。チロフィバン（ブランド名AGGRASTAT）は、スルホンアミドのクラスに属し、前述の医薬品のなかで唯一の合成小分子である。Dugganら（1994）の米国特許第5292756号明細書には、スルホンアミドフィブリノゲン受容体アンタゴニストが、血栓形成によって引き起こされる疾患の予防および治療のための治療薬として開示されている。
【００１２】
非常に特異的な非ペプチド糖タンパク質IIb／IIIaアンタゴニストが先行技術において記述されている（Damiano et. al., Thrombosis Research 2001 104, 113-126; Hoekstra, W.J., et al., J.Med.Chem., 1999, 42, 5254-5265）。これらの化合物は、抗血小板および抗血栓活性を持つ治療薬として効果的なGPIIb／IIIaアンタゴニストとして知られてきた（国際公開第99／21832号パンフレット、国際公開第97／41102号パンフレット、国際公開第95／08536号パンフレット、国際公開第96／29309号パンフレット、国際公開第97／33869号パンフレット、国際公開第9701／60813号パンフレットおよび米国特許第6515130号明細書参照）。
【００１３】
これまで、糖タンパク質IIb／IIIaに特異的な血栓の画像化のための造影剤について報告している刊行物はわずかしかない。米国特許第5508020号明細書には、Tc-99m結合部を介してテクネチウム−99mで標識された哺乳類の体内の部位を画像化するための放射標識したペプチド、このようなペプチドを作製するための方法およびキットが記述されている。SPECTトレーサーアプチシド（apticide）（AcuTect（登録商標））は、血栓の画像化の必要を満たす手法である。アプチシドはTc-99m標識ペプチドであり、GPIIb／IIIa受容体に特異的に結合する。DeanおよびLister-Jamesは、活性化血小板の表面でGPIIb／IIIa受容体に特異的に結合するペプチドについて記述している（米国特許第5645815号明細書、米国特許第5830856号明細書および米国特許第6028056号明細書）。著者らは、アプチシドを用いる深部静脈血栓の検出について明らかにしている。しかし、テクネチウム標識ペプチドの非特異的な結合および低い信号対雑音比がこの方法の欠点であり、その結果、血栓の画像化の分解能が低くなる米国特許出願第2007／0189970号明細書には、糖タンパク質IIb／IIIaに結合することができる化合物が記述されている。開示されている化合物は、ポジトロン放射同位体または11Cで標識されている。特異的な血栓の画像化のための核医学的手法に加えて、多くの病態、特に心血管、癌関連および炎症性の病態の診断に有用な特定の高緩和能化合物が米国特許出願公開第2006／0239926（A1）号明細書に記述されている。
【００１４】
標的特異的な結合剤（biovector）と常磁性キレートを会合させる原理は、かなり長い間知られているが、特異的なMRI造影剤はいまだ臨床実験において試験されていない。
【００１５】
しかし、ターゲティングによるMRI手法ではいくつかの困難が生じる。主な困難は、MRI技術において感度が比較的低いことに起因する。本質的にMRIの感度が低いことから、検出可能なMR造影を行うために、標的部位での造影剤の濃度を局所的に高くする必要がある。この要件を満たすために、特異的なMRI造影剤は、高親和性および特異性を伴いながら標的を識別しなければならない。しかし、常磁性キレートの立体効果により、用いられた小分子GPIIb／IIIa結合剤と比較して、その標的に対する親和性が低下する可能性がある。MRIによる適切な血栓の画像を得るためには、この問題が解決されなければならない。
【００１６】
今回、本発明の化合物は、驚くべき有利な特性を有することが明らかになり、これは本発明の根源をなす。
【００１７】
特に、本発明の上記化合物は、驚いたことに、血小板特異的糖タンパク質IIb／IIIa受容体に対する高親和性を示すことが明らかになっており、同時に、磁気共鳴画像法に十分な緩和能を有する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】米国特許第5292756号明細書
【特許文献２】国際公開第99／21832号パンフレット
【特許文献３】国際公開第97／41102号パンフレット
【特許文献４】国際公開第95／08536号パンフレット
【特許文献５】国際公開第96／29309号パンフレット
【特許文献６】国際公開第97／33869号パンフレット
【特許文献７】国際公開第9701／60813号パンフレット
【特許文献８】米国特許第6515130号明細書
【特許文献９】米国特許第5508020号明細書
【特許文献１０】米国特許第5645815号明細書
【特許文献１１】米国特許第5830856号明細書
【特許文献１２】米国特許第6028056号明細書
【特許文献１３】米国特許出願第2007／0189970号明細書
【特許文献１４】米国特許出願公開第2006／0239926（A1）号明細書
【非特許文献】
【００１９】
【非特許文献１】Heart disease and Stroke Statistics - 2010 Update
【非特許文献２】Lloyd-Jones, D.et al., Circulation, 2010, 121(7): p.e46-215
【非特許文献３】Easton, J.D.et al., Stroke, 2009, 40(6): p.2276-2293
【非特許文献４】Clark, T.G., M.F.G.Murphy, and P.M.Rothwell, Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry, 2003.74(5): p.577-580
【非特許文献５】Guercini, F.et al., Journal of Thrombosis and Hemostasis, 2008.6(4): p.549-554
【非特許文献６】Ciesienski, K.L.and P.Caravan, Curr Cardiovasc Imaging Rep., 2010.4(1): p.77-84
【非特許文献７】Scarborough R.M., Gretler D.D., J.Med.Chem.2000, 43, 3453-3473
【非特許文献８】Damiano et. al., Thrombosis Research 2001 104, 113-126; Hoekstra, W.J., et al., J.Med.Chem., 1999, 42, 5254-5265
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
本発明は、糖タンパク質IIb／IIIaに結合し、画像診断法、特に血栓の磁気共鳴画像法のために使用することができる化合物を対象とする。開示されている化合物は、十分な緩和能と合わせて、糖タンパク質IIb／IIIa受容体への結合を可能にする。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
第1の態様によれば、本発明は、一般式（I）
【化１】
2016508507.tif 000002
（式中、
Xは、
【化２】
2016508507.tif 000003
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化３】
2016508507.tif 000004
基を表し、
基中、
R1は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
R2は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
Gは、
【化４】
2016508507.tif 000005
基を表し、
式中、
R3は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
R4は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
Mは、プラセオジム、ネオジム、サマリウム、イッテルビウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウムまたはエルビウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物を対象に含む。
【００２２】
本発明の化合物は、所望の各種置換基の位置および特性に応じて、1つまたは複数の不斉中心を含んでもよい。不斉炭素原子は、（R）または（S）配置で存在してもよく、不斉中心が単一の場合はラセミ混合物、不斉中心が複数の場合はジアステレオマー混合物を生じる。特定の例では、所与の結合、例えば、特定の化合物の2つの置換芳香族環を結合する中心結合まわりの回転が制限されることにより、非対称性が存在してもよい。
【００２３】
好ましい化合物は、望ましい生物活性をもたらす化合物である。本発明の化合物の分離された純粋な、または部分的に精製された異性体および立体異性体あるいはラセミ混合物またはジアステレオマー混合物もまた、本発明の範囲内に含まれる。このような物質の精製および分離は、当技術分野において周知の標準的な技術によって実現することができる。
【００２４】
光学異性体は、従来の工程によるラセミ混合物の分割、例えば、光学活性な酸または塩基を用いるジアステレオ異性体塩の形成、あるいは共有結合性ジアステレオマーの形成によって得ることができる。適切な酸の例は、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびカンファースルホン酸である。ジアステレオ異性体の混合物は、それらの物理的および／または化学的な違いに基づいて、当技術分野において周知の方法、例えば、クロマトグラフィーまたは分別再結晶により、それらの個々のジアステレオマーに分離することができる。次いで、光学活性な塩基または酸は、分離されたジアステレオマー塩から遊離される。光学異性体を分離するための異なる工程は、従来の誘導体化あり、またはなしで、エナンチオマーを最大限に分離するために最も適切に選ばれたキラルクロマトグラフィー（例えば、キラルHPLCカラム）を使用するものである。適したキラルHPLCカラムはダイセルにより製造されており、例えば、数あるなかで、Chiracel ODおよびChiracel OJがすべて日常的に選択可能である。酵素分離もまた、誘導体化あり、またはなしで有用である。本発明の光学活性な化合物も同じく、光学活性な出発材料を利用してキラル合成により得ることができる。
【００２５】
異なるタイプの異性体を互いに特定するために、IUPAC規則セクションEを参照する（Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976）。
【００２６】
本発明には、単一の立体異性体として、または上記立体異性体、例えば、任意の比のR−またはS−異性体、あるいはE−またはZ−異性体の任意の混合物として、本発明の化合物のすべての可能な立体異性体が含まれる。本発明の化合物の単一の立体異性体、例えば、単一のエナンチオマーまたは単一のジアステレオマーの単離は、任意の適した最先端の方法、例えば、クロマトグラフィー、特にキラルクロマトグラフィーなどによって実現されてもよい。
【００２７】
さらに、本発明の化合物はN−オキシドとして存在することができて、これは、本発明の化合物の少なくとも1つの窒素が酸化されていると定義される。本発明には、このようなすべての可能なN−オキシドが含まれる。
【００２８】
また、本発明は、代謝産物、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、塩、特に医薬として許容される塩および共沈物など、本明細書に開示されている化合物の有用な形態に関する。
【００２９】
本発明の化合物は、水和物または溶媒和物として存在することができて、ここで、本発明の化合物は、極性溶媒、特に、水、メタノールまたはエタノールを、例えば、化合物の結晶格子の構成要素として含む。極性溶媒、特に水の量は、化学量論比または非化学量論比で存在してもよい。化学量論的な溶媒和物の場合、例えば、水和物、ヘミ−、（セミ−）、モノ−、セスキ−、ジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−などの溶媒和物または水和物がそれぞれ可能である。本発明には、すべてのこのような水和物または溶媒和物が含まれる。
【００３０】
さらに、本発明の化合物は、塩の形態で存在することができる。上記塩は、有機または無機付加塩の任意の塩、特に、通例薬学で使用される、医薬として許容される任意の有機または無機付加塩でもよい。
【００３１】
用語「医薬として許容される塩」は、比較的毒性のない本発明の化合物の無機または有機酸付加塩を指す。例えば、S.M.Berge, et al.“Pharmaceutical Salts," J.Pharm.Sci.1977, 66, 1-19を参照。特に、中性塩の製造は、米国特許第5560903号明細書に記載されている。
【００３２】
本発明の化合物の医薬として許容される適した塩は、例えば、鎖内または環内に窒素原子を有する本発明の化合物の酸付加塩でもよく、例えば、これは、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、二硫酸、リン酸または硝酸など）との酸付加塩、または有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、アセト酢酸、ピルビン酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、酪酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸、安息香酸、サリチル酸、2−（4−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ショウノウ酸、ケイ皮酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、3−ヒドロキシ−2−ナフトエ酸、ニコチン酸、パモ酸、ペクチン酸、過硫酸、3−フェニルプロピオン酸、ピクリン酸、ピバル酸、2−ヒドロキシエタンスルホナート、イタコン酸、スルファミン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、2−ナフタレンスルホン酸、ナフタリンジスルホン酸、カンファースルホン酸、クエン酸、酒石酸、ステアリン酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、アジピン酸、アルギン酸、マレイン酸、フマル酸、D−グルコン酸、マンデル酸、アスコルビン酸、グルコヘプタン酸、グリセロリン酸、アスパラギン酸、スルホサリチル酸、ヘミ硫酸またはチオシアン酸など）との酸付加塩など、十分に塩基性である。
【００３３】
さらに、十分に酸性である、本発明の化合物の医薬として適切に許容される別の塩はアルカリ金属塩であり、例えば、ナトリウム塩またはカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩またはマグネシウム塩、アンモニウム塩、あるいは生理学的に許容される陽イオンを与える有機塩基との塩、例えば、N−メチル−グルカミン、ジメチル−グルカミン、エチル−グルカミン、リシン、ジシクロヘキシルアミン、1，6−ヘキサジアミン、エタノールアミン、グルコサミン、サルコシン、セリノール、トリス−ヒドロキシ−メチル−アミノメタン、アミノプロパンジオール、ソヴァーク塩基（sovak-base）、1−アミノ−2，3，4−ブタントリオールとの塩である。さらに、塩基性の窒素含有基は、低級ハロゲン化アルキル（メチル、エチル、プロピルおよびブチルのクロリド、ブロミドおよびヨージドなど）、ジアルキルスルファート（ジメチル、ジエチルおよびジブチルのスルファートおよびジアミルスルファートなど）、長鎖ハロゲン化物（デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルのクロリド、ブロミドおよびヨージドなど）、アラルキルハロゲン化物（ベンジルおよびフェネチルのブロミドなど）ならびにその他のような薬剤で四級化されてもよい。
【００３４】
さらに、記載された化合物の酸付加塩は、適切な無機酸または有機酸を用いて、いくつかの既知の方法のいずれかを経て化合物を反応させることにより調製されてもよいことを当業者は理解されよう。あるいは、本発明の酸性化合物のアルカリおよびアルカリ土類金属塩は、適切な塩基を用いて、様々な既知の方法を経て本発明の化合物を反応させることにより調製される。
【００３５】
本発明には、本発明の化合物のすべての可能な塩が、単一の塩として、または上記の塩の任意の比の任意の混合物として含まれる。
【００３６】
用語「血栓（thrombus、thrombi）」は、あらゆる種類の血餅（静脈および動脈血栓）を表す。また、用語「血栓（thrombus、thrombi）」には、「血栓の沈着（thrombotic deposits）」および「血栓形成部位」など、語句のあらゆる用語も含まれる。血栓は、通常、鬱血における血液凝固段階の結果として、または血栓性障害など、様々な原因の結果として病理学的に生じる。この検討において、循環血栓（塞栓）はもとより、血管樹内のどこかで詰まる血栓を含むすべての血小板が含まれる。
【００３７】
第2の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化５】
2016508507.tif 000006
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化６】
2016508507.tif 000007
基を表し、
基中、
R1は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
R2は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表し、
Gは、
【化７】
2016508507.tif 000008
基を表し、
式中、
R3は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
R4は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物を対象に含む。
【００３８】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化８】
2016508507.tif 000009
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化９】
2016508507.tif 000010
基を表し、
基中、
R1は、水素またはメチルを表し、
R2は、水素またはメチルを表し、
Gは、
【化１０】
2016508507.tif 000011
基を表し、
式中、
R3は、水素またはメチルを表し、
R4は、水素またはメチルを表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは0または1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物を対象に含む。
【００３９】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１１】
2016508507.tif 000012
基から選択される基を表し、
基中、
Yは、
【化１２】
2016508507.tif 000013
基を表し、
基中、
R1は水素を表し、
R2は水素を表し、
Gは、
【化１３】
2016508507.tif 000014
基を表し、
式中、
R3はメチルを表し、
R4は水素を表し、
Mはガドリニウムを表し、
mは1または2を表し、
nは2、3、4、5または6の整数を表し、
qは1を表す。）の化合物、あるいは、その立体異性体、互変異性体、N−オキシド、水和物、溶媒和物または塩、あるいはそれらの混合物を対象に含む。
【００４０】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１４】
2016508507.tif 000015
基から選択される基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４１】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１５】
2016508507.tif 000016
基から選択される基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４２】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１６】
2016508507.tif 000017
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４３】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１７】
2016508507.tif 000018
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４４】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Xは、
【化１８】
2016508507.tif 000019
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４５】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Yは、
【化１９】
2016508507.tif 000020
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４６】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Yは、
【化２０】
2016508507.tif 000021
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４７】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Yは、
【化２１】
2016508507.tif 000022
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４８】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Yは、
【化２２】
2016508507.tif 000023
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００４９】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Yは、
【化２３】
2016508507.tif 000024
基を表す。）の化合物を対象に含む。
【００５０】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R1は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５１】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R1は、水素またはメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５２】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R1は水素を表す。）の化合物を対象に含む。
【００５３】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R1はメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５４】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R2は、水素、メチル、エチル、プロピルまたはイソ−プロピルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５５】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R2は、水素またはメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５６】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R2は水素を表す。）の化合物を対象に含む。
【００５７】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R2はメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５８】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R3は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００５９】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R3は、水素またはメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６０】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R3は水素を表す。）の化合物を対象に含む。
【００６１】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R3はメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６２】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R4は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピルまたはベンジルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６３】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R4は、水素またはメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６４】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R4は水素を表す。）の化合物を対象に含む。
【００６５】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
R4はメチルを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６６】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Mは、プラセオジム、ネオジム、サマリウム、イッテルビウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウムまたはエルビウムを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６７】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
Mはガドリニウムを表す。）の化合物を対象に含む。
【００６８】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
mは1または2を表す。）の化合物を対象に含む。
【００６９】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
mは1を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７０】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
mは2を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７１】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは2、3、4、5または6の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７２】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは2の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７３】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは3の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７４】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは4の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７５】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは5の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７６】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
nは6の整数を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７７】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
qは0または1を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７８】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
qは0を表す。）の化合物を対象に含む。
【００７９】
別の態様において、本発明は、上述の一般式（I）
（式中、
qは1を表す。）の化合物を対象に含む。
【００８０】
別の態様において、本発明は、以下からなる群から選択される一般式（I）の化合物を対象に含む。
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］オキシ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム；
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ヘキサアセタート二ガドリニウム；
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ドデカアセタート四ガドリニウム；
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム；
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ブチル）プロパンアミド四ガドリニウム；
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム；および
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウム。
【００８１】
本発明の別の態様は、画像診断法のための一般式（I）の化合物の使用である。
【００８２】
好ましくは、診断における本発明の化合物の使用は、磁気共鳴画像法（MRI）を用いて実施される。
【００８３】
また、本発明は、診断用薬の製造のための一般式（I）の化合物を含む。
【００８４】
本発明の別の態様は、診断用薬の製造のための、一般式（I）の化合物またはその混合物の使用である。
【００８５】
本発明の別の態様は、血栓を画像化するための診断用薬の製造のための、一般式（I）の化合物またはその混合物の使用である。
【００８６】
医薬として許容される担体中の有効量の1つまたは複数の一般式（I）の化合物を患者に投与するステップと、患者にNMR断層撮影を受けさせるステップとを含む患者の体組織を画像化する方法。このような方法は、米国特許第5560903号明細書に記載されている。
【００８７】
診断用薬の製造、例えば、被験者または被験動物への投与のために、一般式（I）の化合物または混合物は、医薬担体または賦形剤と共に好都合に処方されるであろう。本発明の造影剤は、医薬配合助剤、例えば、安定剤、酸化防止剤、pH調整剤、香料などを好都合に含んでもよい。また、本発明による診断媒体の製造は、当技術分野において周知の方法で実施される（米国特許第5560903号明細書参照）。 これらは、非経口または経腸投与用あるいは体腔への直接投与用に処方されてもよい。例えば、非経口製剤は、0.0001〜5mmol金属／kg体重、特に0.005〜0.5mmol金属／kg体重の用量の本発明による式（I）の化合物の無菌溶液または懸濁液を含む。したがって、本発明の媒体は、注入用の生理学的に許容される担体媒体中、好ましくは水中の溶液、懸濁液、分散液、シロップなどの従来の医薬配合物中にあってもよい。造影剤が非経口投与のために処方されるとき、これは、好ましくは等張性または高張性で、pH7.4に近くなる。
【００８８】
別の態様において、本発明は、心筋梗塞、肺塞栓、脳卒中および一過性脳虚血発作など、血栓塞栓性疾患のある患者を診断する方法を対象とする。この方法は、a）上記および本明細書に記載の通り、ヒト内の化合物を検出するために、このような診断を必要とするヒトに本発明の化合物を投与するステップと、b）ヒトへの化合物の投与によって生じる信号を、好ましくは磁気共鳴画像法（MRI）によって測定するステップとを含む。
【００８９】
別の態様において、本発明は、大動脈瘤、慢性血栓塞栓性肺高血圧症（CETPH）、心房細動および冠動脈血栓症など、生命を脅かす疾患のある患者を診断する方法を対象とする。この方法は、a）上記および本明細書に記載の通り、ヒト内の化合物を検出するために、このような診断を必要とするヒトに本発明の化合物を投与するステップと、b）ヒトへの化合物の投与によって生じる信号を、好ましくは磁気共鳴画像法（MRI）によって測定するステップとを含む。
【００９０】
別の態様において、本発明は、心血管リスク患者の診断および健康状態の監視の方法を対象とする。この方法は、a）上記および本明細書に記載の通り、ヒト内の化合物を検出するために、このような診断を必要とするヒトに本発明の化合物を投与するステップと、b）ヒトへの化合物の投与によって生じる信号を、好ましくは磁気共鳴画像法（MRI）によって測定するステップとを含む。
【００９１】
一般的な合成
本発明による化合物は、以下のスキーム1から7にしたがって調製することができる。
以下で説明するスキームおよび手順は、本発明の一般式（I）の化合物への合成経路を示しており、限定するためのものではない。スキームに例示した変換の順序を様々に変更できることは当業者には明白である。したがって、スキームに例示した変換の順序は、限定するためのものではない。さらに、置換基R1、R2、R3およびR4のいずれかの相互変換は、例示した変換の前および／または後に実現することができる。これらの変更は、保護基の導入、保護基の切断、保護基の還元または酸化、ハロゲン化、メタル化反応、置換あるいは当業者に周知のその他の反応などにすることができる。これらの変換には、置換基の別の相互変換を可能にする官能基を導入する変換が含まれる。適切な保護基およびその導入および切断は、当業者に周知である（例えば、T.W.Greene and P.G.M.Wuts in Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, Wiley 1999参照）。具体例を以下の段落で説明する。
【００９２】
単独で、または別の基の一部として本明細書において用いられる用語「アミン保護基」は当業者に周知または明白であり、これは、保護基の一クラス、すなわち、カルバメート、アミド、イミド、N−アルキルアミン、N−アリールアミン、イミン、エナミン、ボラン、N-P保護基、N−スルフェニル、N−スルホニルおよびN−シリルから選ばれるが、これらに限定されず、また、これは、教科書Greene and Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, third edition, page.494-653（参照により本明細書に組み込まれる。）に記載されているものから選ばれるが、これらに限定されない。「アミン保護基」は、好ましくは、カルボベンジルオキシ（Cbz）、p−メトキシベンジルカルボニル（MozまたはMeOZ）、tert−ブチルオキシカルボニル（BOC）、9−フルオレニルメチルオキシカルボニル（FMOC）、ベンジル（Bn）、p−メトキシベンジル（PMB）、3，4−ジメトキシベンジル（DMPM）、p−メトキシフェニル（PMP）、トリフェニルメチル（Trityl）、メトキシフェニルジフェニルメチル（MMT）であり、あるいは保護されたアミノ基は、1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル（フタルイミド）またはアジド基である。
【００９３】
単独で、または別の基の一部として本明細書において用いられる用語「カルボキシル保護基」は当業者に周知または明白であり、これは、保護基の一クラス、すなわち、エステル、アミドおよびヒドラジドから選ばれるが、これらに限定されず、また、これは、教科書Greene and Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, third edition, page.369-453（参照により本明細書に組み込まれる。）に記載されているものから選ばれるが、これらに限定されない。「カルボキシル保護基」は、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、tert−ブチル、アリル、ベンジル、4−メトキシベンジルまたは4−メトキシフェニルである。
【００９４】
一般に、GP IIbIIIa結合剤部分の合成は、次の文献に記述されている。
1）J.Med.Chem.1999, 42, 5254-5265
2）Organic Progress Research & Development 2003, 7, 866-872
これらの方法の変更および改良は、実験の部に詳細に記載されている。ピリジニウムブロミドAへの主要な経路をスキーム1に例示する。
【化２４】
2016508507.tif 000025
スキーム1
PG：保護基
スキーム1に概説した合成で得られるピリジニウムブロミドAは、2種類のジアステレオマーの混合物である。通常、s−アミノ酸の合成のための立体選択的な方法が適用できる（M.Liu, M.P.Sibi, Tetrahedron 2002 58, 7991-8035またはE.Juaristi, V.Soloshonok Eds.of Enantioselective Synthesis of Beta-Amino Acids, second edition, Wiley-Interscience, ISBN 0-471-46738-3）。
立体選択的な手法をスキーム2に示してあるが、ここでは、3−ピリジルニトリルBをアリールエナミンCに変換することができて、これは、鏡像異性的に濃縮された3−アミノ−3−アリールプロパン酸tert−ブチルエステルDに立体選択的に還元される（Yi Hsiao et.al. J.Am.Chem.Soc.2004 126, 9918-9919）。このエステルは活性化エステルを経由してピペリジン断片Eに結合され、Fを与える。標準的な保護基の変換により、遊離アミノ酸が得られる。金属錯体に結合したアルキンを用いる臭化物のパラジウム触媒Sonogashira反応により、一般式（I）の化合物が得られる。好ましくは、最終的なカップリング反応は、｛パラジウム［2−（ジメチルアミノメチル）フェニル］［1，3，5−トリアザ−7−ホスファアダマンタン］クロリドなどの水溶性パラジウム錯体（Organometallics 2006, 25, 5768-5773）を使用して、またはパラジウム配位子として3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（Eur.J.Org.Chem.2010, 3678-3683）を使用して、部分的に水性溶媒中で実施される。
【００９５】
【化２５】
2016508507.tif 000026
スキーム2
一般式（I）の所望の金属錯体複合体の単離および精製は、分取HPLCまたはサイズ排除クロマトグラフィーなど、従来のクロマトグラフ法により、ポリガドリニウム錯体の場合は、限外濾過法と組み合わせて実現することができる。
【００９６】
一般式（Ia）の化合物の合成をスキーム3に示す。
【化２６】
2016508507.tif 000027
スキーム3：一般式（Ia）の化合物の調製のための経路。式中、R3、R4、nおよびqは、上述の一般式（I）のために記載された意味を有する。Eは、NHまたはOの意味を有する。
【００９７】
一般式Hのアルキンは、市販されているか、文献に記載されているか、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。
【００９８】
一般式Yのガドリニウム錯体は、一般式Hのアルキンと反応させることにより、一般式Jの化合物に転換することができる。
一般式Jの化合物（式中、EはOの意味を有する。）は、例えば、ジイソプロピルアザジカルボキシラートなどのカップリング試薬を用いて、トリフェニルホスフィンの存在下、例えば、DMFなどの溶媒中で、−30℃〜60℃の温度範囲でそれぞれのアセチレン系アルコールHの反応により得ることができて、好ましくは、反応は0℃で実施される。
【００９９】
一般式Jの化合物（式中、EはNHの意味を有する。）は、同様に、例えば、HATUなどのカップリング試薬を用いて、例えば、N−エチルジイソプロピルアミンなどの適した塩基の存在下、例えば、DMFまたはDMSO、あるいはその混合物などの溶媒中で、−30℃〜80℃の温度範囲でそれぞれのアセチレン系アミンHの反応により得ることができて、好ましくは、反応は20℃で実施される。
【０１００】
一般式Jの化合物は、臭化物Aを用いるパラジウム触媒Sonogashira反応により、適したパラジウム触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）など）およびヨウ化銅（I）を用いて、例えば、ピペリジンなどの適した塩基の存在下、例えば、DMFのような溶媒を用いて、あるいは｛パラジウム［2−（ジメチルアミノメチル）フェニル］［1，3，5−トリアザ−7−ホスファアダマンタン］クロリド（Organometallics 2006, 25, 5768-5773）または3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（Eur.J.Org.Chem.2010, 3678-3683）のような水溶性パラジウム錯体を用いて、部分的に、例えば、アセトニトリルと水の混合物などの水性溶媒中で、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式（Ia）の化合物に転換することができて、好ましくは、反応は80℃〜100℃の温度範囲で実施される。
【０１０１】
一般式（Ib）、（Ic）および（Id）の化合物の合成をスキーム4に示す。
【化２７】
2016508507.tif 000028
スキーム4：一般式（Ib）、（Ic）および（Id）の化合物の調製のための経路。式中、R3、R4、nおよびqは、上述の一般式（I）のために記載された意味を有する。Eは、NHまたはOの意味を有する。
【０１０２】
一般式Kのアルキンは、市販されているか、文献に記載されているか、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。
【０１０３】
一般式Yのガドリニウム錯体は、例えば、スキーム3に示した同様の合成に適した記載のカップリング方法を用いて、一般式Kのフェニルアセチレン誘導体と反応させることにより、一般式Lの化合物に転換することができる。
【０１０４】
一般式Lの化合物は、臭化物Aを用いるパラジウム触媒Sonogashira反応により、適したパラジウム触媒（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）など）およびヨウ化銅（I）を用いて、例えば、ピペリジンなどの適した塩基の存在下、例えば、DMFなどの溶媒を用いて、あるいは｛パラジウム［2−（ジメチルアミノメチル）フェニル］［1，3，5−トリアザ−7−ホスファアダマンタン］クロリド（Organometallics 2006, 25, 5768-5773）または3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（Eur.J.Org.Chem.2010, 3678-3683）のような水溶性パラジウム錯体を用いて、部分的に、例えば、アセトニトリルと水の混合物などの水性溶媒中で、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式（Ib）の化合物に転換することができて、好ましくは、反応は60℃〜80℃の温度範囲で実施される。
【０１０５】
一般式（Ib）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、部分的な水素化により、一般式（Ic）の化合物に転換することができて、または完全な水素化により一般式（Id）の化合物に転換することができる。
【０１０６】
一般式（Ic）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、水素化により、一般式（Id）の化合物に転換することができる。
【０１０７】
一般式（Ie）、（If）および（Ig）の化合物の合成をスキーム5に示す。
【化２８】
2016508507.tif 000029
スキーム5：一般式（Ie）、（If）および（Ig）の化合物の調製のための経路。式中、R3、R4、nおよびqは、上述の一般式（I）のために記載された意味を有し、mは2である。Eは、NHまたはOの意味を有する。
【０１０８】
一般式Mのアルキンは、文献に記載されているか、または、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。
【０１０９】
一般式Yのガドリニウム錯体は、例えば、スキーム3および4に示した同様の合成に適した記載のカップリング方法を用いて、一般式Mのフェニルアセチレン誘導体と反応させることにより、一般式Nの化合物に転換することができる。
【０１１０】
一般式Nの化合物は、臭化物Aを用いるパラジウム触媒Sonogashira反応により、適したパラジウム触媒（例えば、｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカンなど）、および適した塩基（例えば、トリエチルアミンなど）を用いて、部分的に、例えば、アセトニトリルと水の混合物などの水性溶媒を用いて、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式（Ie）の化合物に転換することができて、好ましくは、反応は60℃〜80℃の温度範囲で実施される。
【０１１１】
一般式（Ie）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、部分的な水素化により、一般式（If）の化合物に転換することができて、または完全な水素化により一般式（Ig）の化合物に転換することができる。
【０１１２】
一般式（If）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、水素化により、一般式（Ig）の化合物に転換することができる。
【０１１３】
一般式（Ih）、（Ij）および（Ik）の化合物の合成をスキーム6に示す。
【化２９】
2016508507.tif 000030
スキーム6：一般式（Ih）、（Ij）および（Ik）の化合物の調製のための経路。式中、R1、R3、R4、Gおよびnは、上述の一般式（I）のために記載された意味を有する。
【０１１４】
一般式Pのアルキンおよび一般式QのBoc保護されたアミノ酸は、市販されているか、文献に記載されているか、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。一般式Zのp−ニトロフェニルエステルは、文献に記載されているか、または、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。
【０１１５】
式Pの中間体は、カップリング試薬に、例えば、HATUなどを用いて、例えば、N，N−ジイソプロピルエチルアミンなどの適した塩基の存在下、例えば、DMFなどの溶媒中で、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式Qの保護されたアミノ酸と反応させることにより、一般式Rの保護された化合物に転換することができて、好ましくは、反応は0℃で実施される。
【０１１６】
一般式Rの中間体は、標準的な方法、例えば、塩酸での処理などにより、任意選択で電子レンジ内で反応を行い、例えば、ジオキサンまたはDMF、あるいはその混合物などの溶媒中で、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式Sの化合物に脱保護することができて、好ましくは、反応は80℃で実施される。
【０１１７】
一般式Sの中間体は、例えば、トリエチルアミンなどの適した塩基を用いて、例えば、DMSOまたはピリジンなどの溶媒中で、0℃からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式Zの化合物と反応させることにより、一般式Tの化合物に転換することができて、好ましくは、反応は50℃〜60℃の温度範囲で実施される。
【０１１８】
あるいは、一般式Tの中間体は、例えば、記載の通り、スキーム3および4に示した同様の合成のための、一般式Sの中間体と一般式Yの中間体との反応により得ることができる。
【０１１９】
一般式Tの化合物は、臭化物Aを用いるパラジウム触媒Sonogashira反応により、適したパラジウム触媒（例えば、｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカンなど）、および適した塩基（例えば、トリエチルアミンなど）を用いて、部分的に、例えば、アセトニトリルと水の混合物などの水性溶媒を用いて、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式（Ih）の化合物に転換することができて、好ましくは、反応は60℃〜80℃の温度範囲で実施される。
【０１２０】
一般式（Ih）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、部分的な水素化により、一般式（Ij）の化合物に転換することができて、または完全な水素化により一般式（Ik）の化合物に転換することができる。
【０１２１】
一般式（Ij）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、水素化により、一般式（Ik）の化合物に転換することができる。
【０１２２】
一般式（Im）、（In）および（Io）の化合物の合成をスキーム7に示す。
【化３０】
2016508507.tif 000031
スキーム7：一般式（Im）、（In）および（Io）の化合物の調製のための経路。式中、R1、R2、R3、R4、Gおよびnは、上述の一般式（I）のために記載された意味を有する。
【０１２３】
一般式S−1のトリメチルシリル保護されたアルキンは、スキーム6に示した一般式Sのアルキンの合成と同様に、既知の出発材料から、当業者に周知の標準的な反応を用いて調製することができる。
【０１２４】
式S−1の中間体は、例えば、HATUなどのカップリング試薬を用いて、例えば、N，N−ジイソプロピルエチルアミンなどの適した塩基の存在下、例えば、DMFなどの溶媒中で、−30℃から50℃の温度範囲で一般式Qの保護されたアミノ酸と反応させることにより、一般式Uの保護された化合物に転換することができて、好ましくは、反応は0℃で実施される。
【０１２５】
一般式Uの中間体は、標準的な方法、例えば、塩酸での処理などにより、任意選択で電子レンジ内で反応を行い、例えば、ジオキサンまたはDMF、あるいはその混合物などの溶媒中で、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式Vの化合物に脱保護することができて、好ましくは、反応は80℃で実施される。
【０１２６】
一般式Vの中間体は、例えば、トリエチルアミンなどの適した塩基を用いて、例えば、DMSOまたはピリジンなどの溶媒中で、0℃からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で一般式Zの化合物と反応させることにより、一般式Wの化合物に転換することができて、好ましくは、反応は50℃〜60℃の温度範囲で実施される。
【０１２７】
一般式Wの化合物は、ワンポットの手順を用いて一般式（Im）の化合物に転換することができて、第1のステップは、例えば、トリエチルアミンなどの塩基の存在下でのTBAFまたはテトラメチルアンモニウムフルオリドとの反応による一般式Wの化合物のアセチレンの脱保護であり、第2のステップは、適したパラジウム触媒、例えば、酢酸パラジウム（II）を3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）と加熱することによって調製される触媒などを用いて、臭化物Aを用いるパラジウム触媒Sonogashira反応である。反応は、室温からそれぞれの溶媒の沸点までの温度範囲で実施され、好ましくは、反応は、40℃〜60℃の温度範囲で実施される。
【０１２８】
一般式（Im）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、部分的な水素化により、一般式（In）の化合物に転換することができて、または完全な水素化により一般式（Io）の化合物に転換することができる。
【０１２９】
一般式（In）の化合物は、当業者に周知の水素化触媒および反応条件を用いて、水素化により、一般式（Io）の化合物に転換することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１３０】
【図１】親和性アッセイ：第1のステップで、ヒトGPIIb／IIIaから精製したヒト血小板を96ウェルソリッドプレートに固定した。48時間後、プレートを洗浄し、非特異的結合部位をRoti（登録商標）−Block.2でブロックした。次のステップで、このプレートを、新規化合物（阻害剤）の濃度を高くしながら混合したトリチウム標識した既知のGPIIb／IIIa結合剤（3H）と共に同時にインキュベートした。阻害剤の親和性が高いほど、トリチウム標識した既知のGPIIb／IIIa結合剤（3H）の結合分画は少なくなった。トリチウム標識した化合物（3H）の分画は阻害剤によって置換されることはないが、これをマイクロプレートシンチレーションカウンターで測定した。
【図２】3Dターボスピンエコーシーケンスを用いたインビトロの血小板に富んだ血栓およびインキュベーション溶液（実施例8）の磁気共鳴画像法（1.5 T, Siemens Avanto, small extremity coil, TR 1050ms, TE 9.1 Ms, 0.5×0.5×0.6mm3）を示す。図2aは造影剤を添加していないインビトロの対照の血栓を示す図である。対照の血栓の信号強度は、周囲の培地よりもわずかに強いが、図2bに示す実施例8のインキュベートしたインビトロの血栓の信号よりも明らかに弱い。図2bのインビトロの血栓は、図2cに示す溶液と共にインキュベートしている。20分のインキュベーション期間後、血栓を血漿溶液で3回洗浄した。図2bのインキュベートしたインビトロの血栓の信号強度は、図2aの対照の血栓よりも明らかに強い信号を示している。図2cは実施例8のヒト血漿の最終濃度が10μmol物質／Lのインキュベーション溶液を示す図である。信号強度は、インビトロの血小板に富んだ血栓2a中および2b中の周囲の血漿溶液よりも強い。
【発明を実施するための形態】
【０１３１】
実験の部
【０１３２】
【表１Ａ】
2016508507.tif 000032
【表１Ｂ】
2016508507.tif 000033
【０１３３】
物質および計測装置
合成研究に用いた化学薬品は試薬グレード品質のものであり、入手したままで使用した。
【０１３４】
1H-NMRスペクトルは、CDCl3、D2OまたはDMSO-d6中でそれぞれ測定した（294 K, Bruker DRX Avance 400MHz NMR分光計（B0＝9.40T）、共鳴周波数：400.20MHz（1H用の1H 300MHz分光計について）。化学シフトは、内部標準（δ＝0ppm）の（トリメチルシリル）プロピオン酸ナトリウム−d4（D2O）またはテトラメチルシラン（DMSO-d6）に対するppmで記載している。
【０１３５】
実施例は、特徴的な保持時間および質量スペクトルを測定する以下のHPLCに基づく分析方法により分析して特徴づけた。
【０１３６】
方法1：UPLC（ACN-HCOOH）：
装置：Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001；カラム：Acquity UPLC BEH C18 1.7 50×2.1mm；溶離液A：水＋0.1％ギ酸、溶離液B：アセトニトリル；勾配：0〜1.6分 1〜99％ B、1.6〜2.0分 99％ B；流量：0.8ml／分；温度：60℃；注入：2μL；DADスキャン：210〜400nm；ELSD
【０１３７】
方法2：UPLC（ACN-HCOOH極性）：
装置：Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001；カラム：Acquity UPLC BEH C18 1.7 50×2.1mm；溶離液A：水＋0.1％ギ酸、溶離液B：アセトニトリル；勾配：0〜1.7分 1〜45％ B、1.7〜2.0分 45〜99％ B；流量：0.8ml／分；温度：60℃；注入：2μL；DADスキャン：210〜400nm；ELSD
【実施例】
【０１３８】
実施例1
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］オキシ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
【化３１】
2016508507.tif 000034
【０１３９】
実施例1a
tert−ブチル3−アミノ−3−［5−ブロモピリジン−3−イル］プロパ−2−エノアート
【化３２】
2016508507.tif 000035
ジイソプロピルアミン（9.2mL、65mmol）を0℃でジエチルエーテル中のメチルマグネシウムブロミドの3M溶液（10.9mL、32.7mmol）および別のジエチルエーテル（20mL）に加えた。1時間後、0℃で酢酸tert−ブチル（4.3mL、32.7mmol）を加え、撹拌を30分間続けた。ジエチルエーテル（42mL）中の5−ブロモピリジン−3−カルボニトリル（2.0g、10.9mmol）を0℃で加えた。2時間後、0℃で飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から60％）して、1.12gのtert−ブチル3−アミノ−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）プロパ−2−エノアートを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 1.44 (s, 9 H), 4.77 (s, 1 H), 7.15 (br., 2 H), 8.22 (t, 1 H), 8.75 (d, 1 H), 8.76 (d, 1 H) ppm.
【０１４０】
実施例1b
tert−ブチル（3S）−3−アミノ−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）プロパノアート
【化３３】
2016508507.tif 000036
クロロ（1，5−シクロオクタジエン）ロジウム（I）二量体（39mg、80μmol）および（R）−（−）−1−［（S）−2−ジ−tert．−ブチルホスフィノ）フェロセニル］エチルジ−（4−トリフルオロメチルフェニル）ホスフィン（108mg、160μmol）に、アルゴン雰囲気下、2，2，2−トリフルオロエタノール（5.8mL）を加え、溶液を40分間撹拌した。圧力容器内の脱気した2，2，2−トリフルオロエタノール（11.6mL）中のtert−ブチル3−アミノ−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）プロパ−2−エノアート（1.59g、5.32mmol）に、ロジウム触媒溶液を加え、溶液を11バールの水素圧力下、50℃で22時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、12から100％、続いて、酢酸エチル中のメタノール、0から15％）して、1.16gの鏡像異性的に濃縮されたtert−ブチル（3S）−3−アミノ−3−［5−（ベンジルオキシ）ピリジン−3−イル］プロパノアートを得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.43 (s, 9 H), 2.59 (d, 2 H), 4.42 (t, 1 H), 7.92 (t, 1 H), 8.58 (d, 1 H), 8.53 (d, 1 H) ppm.
α＝−17.6°（c＝1.0g／100mL、CHCl3）。
【０１４１】
実施例1c
tert−ブチル4−｛3−［（3R）−3−｛［（2，5−ジオキソピロリジン−1−イル）オキシ］カルボニル｝ピペリジン−1−イル］−3−オキソ−プロピル｝ピペリジン−1−カルボキシラート
【化３４】
2016508507.tif 000037
1，2−ジメトキシエタン（13.5mL）中の（3R）−1−｛3−［1−（tert−ブトキシカルボニル）ピペリジン−4−イル］プロパノイル｝ピペリジン−3−カルボン酸（1.91g、5.18mmol、Bioorg.Med.Chem.2005, 13, 4343-4352、化合物10）に、N−ヒドロキシスクシンイミド（0.60g、5.18mmol）および1，3−ジシクロヘキシルカルボジイミド（1.18g、5.7mmol）を加えた。沈殿物が生成する間、溶液を室温で4時間撹拌した。次いで、混合物を0℃に冷却して濾過し、固体をジエチルエーテルで洗った。濾液およびジエチルエーテル洗浄液を合わせて濃縮し、2.61gの未処理のtert−ブチル4−｛3−［（3R）−3−｛［（2，5−ジオキソピロリジン−1−イル）オキシ］カルボニル｝ピペリジン−1−イル］−3−オキソプロピル｝ピペリジン−1−カルボキシラートを得た。
UPLC（ACN-HCOOH）：Rt.＝1.13分。
MS（ES＋）：m／e＝466.31（M＋H＋）。
【０１４２】
実施例1d
tert−ブチル4−｛3−［（3R）−3−（｛（1S）−1−［5−ブロモピリジン−3−イル］−3−tert−ブトキシ−3−オキソプロピル｝カルバモイル）ピペリジン−1−イル］−3−オキソプロピル｝ピペリジン−1−カルボキシラート
【化３５】
2016508507.tif 000038
DMF（17mL）中のtert−ブチル（3S）−3−アミノ−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）プロパノアート（1.33g、4.42mmol）に、ジクロロメタン（17mL）中のtert−ブチル4−｛3−［（3R）−3−｛［（2，5−ジオキソピロリジン−1−イル）オキシ］カルボニル｝ピペリジン−1−イル］−3−オキソプロピル｝ピペリジン−1−カルボキシラート（2.54g、4.91mmol）およびトリエチルアミン（1.85mL、13.2mmol）を0℃で加えた。3時間後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えることによって混合物を急冷し、相を分離して水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、12から100％、続いて、酢酸エチル中のメタノール、0から15％）して、2.1gのtert−ブチル4−［3−（（3R）−3−｛［（1S）−1−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−tert−ブトキシ−3−オキソプロピル］カルバモイル｝ピペリジン−1−イル）−3−オキソプロピル］ピペリジン−1−カルボキシラートを得た。
UPLC（ACN-HCOOH）：Rt.＝1.35分。
MS（ES＋）：m／e＝651.4／653.4（M＋H＋）。
【０１４３】
実施例1e
（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸
【化３６】
2016508507.tif 000039
tert−ブチル4−［3−（（3R）−3−｛［（1S）−1−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−tert−ブトキシ−3−オキソプロピル］カルバモイル｝ピペリジン−1−イル）−3−オキソプロピル］ピペリジン−1−カルボキシラート（600mg、0.94mmol）をギ酸に溶解し、100℃まで12分間加熱した。溶媒を真空中で蒸留除去し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-Chromatorex-10μm）して、330mgの（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸を得た。
UPLC（ACN-HCOOH）：Rt.＝0.57分。
MS（ES＋）：m／e＝495.2, 497.2（M＋H＋）。
【０１４４】
実施例1f
2，2’，2’’｛10−［1−（｛2−［（ブタ−3−イン−1−イル）オキシ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
【化３７】
2016508507.tif 000040
トリフェニルホスフィン（833mg、3.18mmol）および10−（4−カルボキシ−1−メチル−2−オキソ−3−アザブチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−三酢酸のガドリニウム錯体（EP0946525の実施例1f、1.0g、1.59mmol）をDMF（17mL）に溶解した。3−ブチン−1−オールおよびジイソプロピルアザジカルボキシラートを0℃で加えた。1日後、0℃で3−ブチン−1−オールおよびジイソプロピルアザジカルボキシラートの添加を繰り返した。3時間後、水と酢酸エチルの混合物を加え、相を分離して、有機相を水で抽出した。水性相を減圧下で濃縮し、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、328mgの2，2’，2’’｛10−［1−（｛2−［（ブタ−3−イン−1−イル）オキシ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.50分。
MS（ES−）：m／e＝680.9（M−H＋）。
【０１４５】
実施例1g
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］オキシ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
DMF（300μL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（45mg、90μmol）、1−アミノブタン（135μL、1.36mmol）、ヨウ化銅（I）（2.6mg、14μmol）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）（10.5mg、9μmol）の脱気した溶液に、DMF（1mL）中の2，2’，2’’｛10−［1−（｛2−［（ブタ−3−イン−1−イル）オキシ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム（115mg、120μmol）を100℃で1時間にわたって加えた。20分後、冷却した反応混合物をDMSO（1ml）で希釈し、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、7.9mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.74分。
MS（ES）：m／e＝1095.8（M−H＋））。
【０１４６】
実施例2
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
【化３８】
2016508507.tif 000041
【０１４７】
実施例2a
2，2’，2’’−｛10−［1−（｛2−［（ブタ−3−イン−1−イル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
【化３９】
2016508507.tif 000042
DMF（5mL）およびDMSO（5mL）中のピリジニウム2，2’，2’’−（10−｛1−［（カルボキシラトメチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（337mg、0.48mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（500μL、2.6mmol）に、DMF（2mL）およびDMSO（2mL）中のブタ−3−イン−1−イルアミン塩酸（200mg、1.9mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（600μL、3.1mmol）の溶液を加えた。HATU（253mg、0.67mmol）を固体で加え、混合物を室温で20時間撹拌した。水と酢酸エチルの混合物を加え、相を分離して、有機相を水で抽出した。水性相を減圧下で濃縮し、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、126mgの2，2’，2’’−｛10−［1−（｛2−［（ブタ−3−イン−1−イル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.48分。
MS（ES)：m／e＝679.8（M−H＋）。
【０１４８】
実施例2b
2，2’，2’’−（10−｛（2S）−1−［（2−｛［4−（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）ブタ−3−イン−1−イル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
DMF（2mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（60mg、120μmol）、ピペリジン（103mg、1.2mmol）、ヨウ化銅（I）（3.4mg、18μmol）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）（21mg、18μmol）の脱気した溶液に、DMF（10mL）中の2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（ブタ−3−イン−1−イルアミノ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（206mg、680μmol）を100℃で2時間にわたって加えた。2時間後、水と酢酸エチルの混合物を加え、相を分離して、有機相を水で抽出した。水性相を減圧下で濃縮し、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から25％）して、7.0mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.66分。
MS（ES）：m／e＝1094.5（M−H＋）。
【０１４９】
実施例3
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
【化４０】
2016508507.tif 000043
【０１５０】
実施例3a
メチル6−（4−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝フェニル）ヘキサノアート
【化４１】
2016508507.tif 000044
ピリジン（5mL）中のメチル6−（4−ヒドロキシフェニル）ヘキサノアート（Chu et al. Bioorg.Med.Chem.Lett.2001, 11, 509-514、1.95g、8.77mmol）に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（1.18mL、10.5mmol）を0℃で加えた。混合物を0℃で2時間、室温で17時間撹拌した。水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を0.1M塩酸で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から30％）して、2.43gのメチル6−（4−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝フェニル）ヘキサノアートを得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.32 - 1.43 (m, 2H), 1.59 - 1.73 (m, 4H), 2.32 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 3.67 (s, 3H), 7.18 (d, 2H), 7.24 (d, 2H) ppm.
【０１５１】
実施例3b
メチル6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサノアート
【化４２】
2016508507.tif 000045
DMF（3.6mL）中のメチル6−（4−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝フェニル）ヘキサノアート（500mg、1.41mmol）、ジクロロパラジウム（II）ビス（トリフェニルホスファン）（92mg、0.13mmol）、ヨウ化銅（25mg、0.13mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（0.86mL、4.9mmol）に、DMF（1.2mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（0.59mL、4.2mmol）を45℃で1時間にわたって加えた。2日後および3日後にエチニル（トリメチル）シラン（0.59mL、4.2mmol）の添加を繰り返しながら、混合物を4日間撹拌した。水とヘキサンの混合物を加え、相を分離し、水性相をヘキサンで抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から20％）して、153mgのメチル6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサノアートを得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 0.25 (s, 9H), 1.22 - 1.40 (m, 2H), 1.57 - 1.71 (m, 4H), 2.30 (t, 2H), 2.60 (t, 2H), 3.67 (s, 3H), 7.10 (d, 2H), 7.38 (d, 2H) ppm.
【０１５２】
実施例3c
6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサナール
【化４３】
2016508507.tif 000046
ジエチルエーテル（47mL）中のメチル6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサノアート（710mg、2.35mmol）に、トルエン中の1.2Mジイソブチルアルミニウムヒドリド溶液（1.88mL、2.82mmol）を−90℃で加えた。溶液を、−90℃で30分間、−70℃で90分間撹拌した。トルエン中の1.2Mジイソブチルアルミニウムヒドリド溶液（0.9mL、1.08mmol）の添加を−80℃で繰り返し、飽和酒石酸水溶液を2.5時間後、−70℃で加えた。激しく撹拌した後、相を分離し、水性相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から30％）して、250mgの6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサナールを得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 0.25 (s, 9H), 1.34 - 1.38 (m, 2H), 1.58 - 1.73 (m, 4H), 2.42 (t, 2H), 2.61 (t, 2H), 7.10 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 9.76 (s, 1H) ppm.
【０１５３】
実施例3d
6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサン−1−アミン
【化４４】
2016508507.tif 000047
メタノール（12mL）中の6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサナール（240mg、0.88mmol）に、酢酸アンモニウム（340mg、4.4mmol）および酢酸（0.1mL、1.76mmol）を加えた。溶液を10分間撹拌し、5−エチル−2−メチルピリジンボラン錯体（66μL、0.44mmol）を加え、撹拌を16時間続けた。溶液を減圧下で濃縮し、残留物をアミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から100％、次いで、酢酸エチル中のメタノール、0から20％）して、800mgの6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサン−1−アミンを得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 0.25 (s, 9H), 1.14 - 1.48 (m, 6H), 1.60 (quin, 2H), 2.59 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 6.96 - 7.16 (m, 2H), 7.31 - 7.51 (m, 2H) ppm.
【０１５４】
実施例3e
2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［6−（4−エチニルフェニル）ヘキシル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
【化４５】
2016508507.tif 000048
DMF（23mL）およびDMSO（23mL）中のピリジニウム2，2’，2’’−（10−｛1−［（カルボキシラトメチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（1.49g、2.11mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（1.5mL、7.8mmol）に、DMF（15mL）およびDMSO（15mL）中の6−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ヘキサン−1−アミン（330mg、1.9mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（1.0mL、5.2mmol）の溶液を加え、混合物を5分間撹拌した。HATU（688mg、1.81mmol）を固体で加え、混合物を室温で17時間撹拌した。水を加え、反応混合物をジエチルエーテルで洗った。水性相を減圧下で濃縮し、残留物を水（50mL）およびギ酸（46μL）に溶解した。2日後、固体が沈殿し、これを濾過して取り出し、濾液を凍結乾燥し、分取HPLCにより精製（C18-Chromatorex-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、15％から55％）して、231mgの2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［6−（4−エチニルフェニル）ヘキシル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH）：Rt.＝0.89分。
MS（ES＋）：m／e＝814.2（M＋H＋）。
MS（ES）：m／e＝812.3（M−H＋）。
【０１５５】
実施例3f
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
水（0.9mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（33mg、70μmol）、トリエチルアミン（70μL、53μmol）および｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（Organometallics 2006, 25, 5768-5773、3.6mg、8μmol）およびアセトニトリル（2.1mL）の脱気した溶液を室温で30分間撹拌し、これに、2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［6−（4−エチニルフェニル）ヘキシル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（60mg、73μmol）を加え、混合物を80℃で5.5時間加熱した。水を加えた後、混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-Chromatorex-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から35％）して、4.4mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.27分。
MS（ES）：m／e＝1226.7（M−H）−。
【０１５６】
実施例4
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
【化４６】
2016508507.tif 000049
エタノール（0.6mL）および水（60μL）中の2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ヘキシル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム（1.93mg、1.6μmol）を水素雰囲気下、チャコール上のパラジウム（10％、0.1mg）の存在下で20時間撹拌した。混合物をエタノールおよび水で希釈し、濾過した。濾液を真空下で濃縮し、1.1mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.10分。
MS（ES）：m／e＝1229.2（M−H）−.
【０１５７】
実施例5
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
【化４７】
2016508507.tif 000050
【０１５８】
実施例5a
2−［4−（3−ヒドロキシフェニル）ブチル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン
【化４８】
2016508507.tif 000051
3，5−ジブロモフェノール（6.0g、23.8mmol）、2−（ブタ−3−エン−1−イル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（9.8g、49mmol）、酢酸パラジウム（II）（53mg、0.24mmol）およびトリス（2−メチルフェニル）ホスファン（145mg、0.48mmol）をアセトニトリル（125mL）およびトリエチルアミン（6.6mL）中、90℃で5時間撹拌した。室温で15時間撹拌および濃縮した後、2−［4−（3−ブロモ−5−ヒドロキシフェニル）ブタ−3−エン−1−イル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンと2，2’−［（5−ヒドロキシベンゼン−1，3−ジイル）ジブタ−1−エン−1，4−ジイル］ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）の混合物を得た。これは、シリカゲルでクロマトグラフィーにより分離（ヘキサン中の酢酸エチル、0から30％）することができて、3.47gのブロモ中間体を得た。2−［4−（3−ブロモ−5−ヒドロキシフェニル）ブタ−3−エン−1−イル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンをメタノール（230mL）、水（18mL）および酢酸エチル（192mL）に溶解し、水素雰囲気下でチャコール上のパラジウム（10％、437mg）の存在下、40℃で2.5時間撹拌した。反応混合物をCeliteに通して濾過し、減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から60％）して、2.41gの2−［4−（3−ヒドロキシフェニル）ブチル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.41 - 1.67 (m, 4H), 2.47 (m, 2H), 3.58 (t, 2H), 6.47 - 6.65 (m, 3H), 6.96 - 7.10 (t, 1H), 7.76 - 7.92 (m, 4H), 9.21 (s, 1H) ppm.
【０１５９】
実施例5b
3−［4−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）ブチル］フェニルトリフルオロメタンスルホナート
【化４９】
2016508507.tif 000052
ピリジン（30mL）中の2−［4−（3−ヒドロキシフェニル）ブチル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（4.24g、14.4mmol）に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（3.2mL、18.7mmol）を0℃で加えた。混合物を0℃で1時間撹拌し、水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を0.5M塩酸で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から70％）して、5.34gの3−［4−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）ブチル］フェニルトリフルオロメタンスルホナートを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.50 - 1.69 (m, 4H), 2.68 (t, 2H), 3.55 - 3.67 (t, 2H), 7.22 - 7.38 (m, 3H), 7.46 (t, 1H), 7.77 - 7.94 (m, 4H) ppm.
【０１６０】
実施例5c
2−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン
【化５０】
2016508507.tif 000053
DMF（20mL）中の3−［4−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）ブチル］フェニルトリフルオロメタンスルホナート（5.3g、12.5mmol）、ジクロロパラジウム（II）ビス（トリフェニルホスファン）（440mg、0.63mmol）、ヨウ化銅（120mg、0.63mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（11mL、63mmol）に、DMF（11mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（8.7mL、63mmol）を50℃で11時間にわたって加えた。DMF（5.6mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（4.4mL、32mmol）の添加を18時間後に繰り返して、混合物を50℃で25時間撹拌した。水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から25％）して、3.86gの2−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 19H), 1.48 - 1.65 (m, 4H), 2.59 (t, 2H), 3.59 (t, 2H), 7.17 - 7.33 (m, 4H), 7.75 - 7.91 (m, 4H) ppm.
【０１６１】
実施例5d
4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミン
【化５１】
2016508507.tif 000054
THF（83mL）中の2−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（3.86g、10.3mmol）に、メチルヒドラジン（8.1mL、15.4mmol）を加え、沈殿物が生成する間、溶液を40℃で41時間撹拌した。反応混合物を40mLの体積まで濃縮し、0℃で濾過した。固体を少量の冷THFで洗い、蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、合わせた濾液を減圧下で濃縮して、2.63gの4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミンを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.26 - 1.41 (m, 2H), 1.47 - 1.64 (m, 2H), 2.52 - 2.62 (m, 4H), 7.10 - 7.33 (m, 4H) ppm.
【０１６２】
実施例5f
2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［4−（3−エチニルフェニル）ブチル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム
【化５２】
2016508507.tif 000055
DMF（19.5mL）およびDMSO（19.5mL）中のピリジニウム2，2’，2’’−（10−｛1−［（カルボキシラトメチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（760mg、1.07mmol）、4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミン（300mg、0.61mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（1.31mL、8.0mmol）に、固体のHATU（348mg、0.92mmol）を加え、混合物を室温で17時間撹拌した。混合物を濃縮してDMF（5mL）に溶解し、TBAF（1M、0.37mL）を用いて22時間処理し、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から55％）して、99mgの2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［4−（3−エチニルフェニル）ブチル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH）：Rt.＝0.77分
MS（ES＋）：m／e＝785.1（M＋H）＋。
【０１６３】
実施例5g
2，2’，2’’−｛10−［（2S）−1−（｛2−［（6−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］−2−オキソエチル｝アミノ）−1−オキソプロパン−2−イル］−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル｝トリアセタートガドリニウム
水（1.0mL）およびアセトニトリル（2.5mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（31mg、62μmol）、トリエチルアミン（70μL、0.5mmol）および｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（2.7mg、6.2μmol）の脱気した溶液を室温で30分間撹拌し、これに、2，2’，2’’−（10−｛1−［（2−｛［4−（3−エチニルフェニル）ブチル］アミノ｝−2−オキソエチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（55mg、70μmol）を加え、混合物を80℃で6.5時間加熱した。水を加えた後、混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、2.8mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.14分。
MS（ES）：m／e＝1198.2（M−H）−。
【０１６４】
実施例6
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ヘキサアセタート二ガドリニウム
【化５３】
2016508507.tif 000056
【０１６５】
実施例6a
2，2’−［（5−ヒドロキシベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−4，1−ジイル］ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）
【化５４】
2016508507.tif 000057
2，2’−［（5−ヒドロキシベンゼン−1，3−ジイル）ジブタ−1−エン−1，4−ジイル］ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）（実施例5a、1.75g、3.55mmol）をメタノール（88mL）、水（19mL）および酢酸エチル（71mL）に溶解し、水素雰囲気下でチャコール上のパラジウム（10％、166mg）の存在下、40℃で3.5時間撹拌した。反応混合物をCeliteに通して濾過し、減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から60％）して、1.0gの2，2’−［（5−ヒドロキシベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−4，1−ジイル］ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）を得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.39 - 1.66 (m, 8H), 2.44 (t, 4H), 3.57 (t, 4H), 6.29 - 6.47 (m, 3H), 7.75 - 7.89 (m, 8H), 9.05 (s, 1H) ppm.
【０１６６】
実施例6b
【化５５】
2016508507.tif 000058
ピリジン（14.6mL）中の2，2’−［（5−ヒドロキシベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−4，1−ジイル］ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）（6.46g、12.9mmol）に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（2.6mL、15.6mmol）を0℃で加えた。混合物を0℃で30分間、室温で3時間撹拌した。さらにトリフルオロメタンスルホン酸無水物（0，52mL）を0℃で加えた後、水とジエチルエーテルの混合物を1.5時間後に加え、相を分離して水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を0.5M塩酸で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から50％）して、7.4gの3，5−ビス［4−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）ブチル］フェニルトリフルオロメタンスルホナートを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.43 - 1.68 (m, 8H), 2.54 - 2.68 (m, 4H), 3.52 - 3.66 (m, 4H), 6.99 - 7.24 (m, 3H), 7.73 - 7.91 (m, 8H) ppm.
【０１６７】
実施例6c
2，2’−（｛5−［（トリメチルシリル）エチニル］ベンゼン−1，3−ジイル｝ジブタン−4，1−ジイル）ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）
【化５６】
2016508507.tif 000059
DMF（30mL）中の3，5−ビス［4−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）ブチル］フェニルトリフルオロメタンスルホナート（7.4g、11.8mmol）、ジクロロパラジウムトリフェニルホスファン（413mg、0.59mmol）、ヨウ化銅（112mg、0.59mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（10.3mL、59mmol）に、DMF（11mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（13.3mL、118mmol）を50℃で15時間にわたって加えた。混合物を50℃で4時間撹拌した。ジクロロパラジウムトリフェニルホスファン（413mg、0.59mmol）およびヨウ化銅（112mg、0.59mmol）を固体で加え、DMF（5.6mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（16.3mL、118mmol）の添加を同様に繰り返した。水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から50％）して、3.18gの2，2’−（｛5−［（トリメチルシリル）エチニル］ベンゼン−1，3−ジイル｝ジブタン−4，1−ジイル）ビス（1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン）を得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.14 - 0.31 (m, 9H), 1.56 (d, 8H), 2.55 (br. s., 3H), 3.57 (t, 4H), 6.94 - 7.13 (m, 3H), 7.70 - 7.93 (m, 9H) ppm.
【０１６８】
実施例6d
4，4’−（5−エチニルベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−1−アミン
【化５７】
2016508507.tif 000060
THF（42mL）中の2，2’−（｛5−［（トリメチルシリル）エチニル］ベンゼン−1，3−ジイル｝ジブタン−4，1−ジイル）ビス（1H−イソインドール−1，3−（2H）−ジオン）（2.0g、3.47mmol）に、メチルヒドラジン（3.65mL、69mmol、3時間後に0.9mL）を加え、沈殿物が生成する間、溶液を40℃で17時間撹拌した。反応混合物を0℃で濾過し、固体を少量の冷THFで洗った。蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、合わせた濾液を減圧下で濃縮し、1.08gの4，4’−（5−エチニルベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−1−アミンを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.35 (br., 4H), 1.56 (br., 4H), 2.55 (br., 4H), 3.11 - 3.54 (br, 4H), 7.01 - 7.14 (m, 3H) ppm.
【０１６９】
実施例6e
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ヘキサアセタート二ガドリニウム
【化５８】
2016508507.tif 000061
DMF（12mL）およびDMSO（12mL）中のピリジニウム2，2’，2’’−（10−｛1−［（カルボキシラトメチル）アミノ］−1−オキソプロパン−2−イル｝−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル）トリアセタートガドリニウム（1015mg、1.43mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（1.0mL、6.0mmol）に、HATU（348mg、0.92mmol）を固体で加え、混合物を室温で4分間撹拌した。次いで、DMF（8mL）およびDMSO（8mL）中の4，4’−（5−エチニルベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−1−アミン（200mg、0.82mmol）およびN−エチルジイソプロピルアミン（0.4mL、2.5mmol）を加え、混合物を6時間撹拌した。混合物を濃縮して残留物を水に溶解し、これをジエチルエーテルで洗い、濃縮した水性相を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、111mgの2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ヘキサアセタート二ガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.03分。
MS（ES）：m／e＝1466.4（M−H）−。
【０１７０】
実施例6f
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ヘキサアセタート二ガドリニウム
水（0.3mL）およびアセトニトリル（0.7mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（13.9mg、28μmol）、トリエチルアミン（30μL、23μmol）および｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（1.2mg、2.7μmol）の脱気した溶液を室温で30分間撹拌し、これに、水（0.3mL）およびアセトニトリル（0.7mL）中の2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（2−オキソエタン−2，1−ジイル）イミノ（1−オキソプロパン−1，2−ジイル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ヘキサアセタート二ガドリニウム（59mg、40μmol）を80℃で2時間にわたって加えた。混合物を80℃でさらに3時間加熱し、室温まで冷却した後、別の｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（2.4mg、5.4μmol）およびN−ジイソプロピルエチルアミン（30μL）を加え、80℃で3時間加熱し続けた。混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-Chromatorex-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、20％から40％）して、3.4mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.97〜1.00分。
MS（ES）：m／e＝1881.2（M−H）−。
【０１７１】
実施例7
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝−ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ドデカアセタート四ガドリニウム
【化５９】
2016508507.tif 000062
【０１７２】
実施例7a
テトラ−tert−ブチル｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（3−オキソプロパン−3，1，2−トリイル）］｝テトラキスカルバマート
【化６０】
2016508507.tif 000063
DMF（3mL）中の4，4’−（5−エチニルベンゼン−1，3−ジイル）ジブタン−1−アミン（340mg、0.97mmol）を、新たに調製した、DMF（9mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（1.04g、2.14mmol）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（1.0mL、5.8mmol）およびHATU（889mg、2.34mmol）の溶液に0℃で加えた。30分間撹拌した後、混合物を濃縮し、アミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から100％）して、340mgのテトラ−tert−ブチル｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（3−オキソプロパン−3，1，2−トリイル）］｝テトラキスカルバマートを得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.35 - 1.53 (m, 36H), 1.49 (quin, 4H) 1.64 (quin, 4H), 1.72 (br, 4H), 2.59 (t, 4H), 3.02 (s, 1H), 3.13 - 3.33 (m, 4H), 3.38 - 3.56 (m, 4H), 4.11 - 4.22 (m, 2H), 5.29 (br., 2H), 5.87 (br., 2H), 6.99 (d, 1H), 7.13 (s, 2H) ppm.
【０１７３】
実施例7b
3，3’−［（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス（ブタン−4，1−ジイルイミノ）］ビス（3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウム）テトラクロリド
【化６１】
2016508507.tif 000064
DMF中のテトラ−tert−ブチル｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルイミノ（3−オキソプロパン−3，1，2−トリイル）］｝テトラキスカルバマート（340mg、0.42mmol）に、ジオキサン（4M、1.3mL）中の塩酸を加えた。反応容器を密封し、マイクロ波反応器内で80℃で18分間照射した。ジオキサン（4M、1.3mL）中の塩酸の添加およびマイクロ波の手順を1回繰り返し、反応混合物を1，4−ジオキサンで希釈した。沈殿物が生成する間、混合物を撹拌し、これを濾過により回収して、194mgの3，3’−［（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス（ブタン−4，1−ジイルイミノ）］ビス（3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウム）テトラクロリドを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.36 - 1.53 (m, 4H), 1.55 - 1.70 (m, 4H), 2.52 - 2.61 (m, 4H), 3.01 - 3.27 (m, 8H), 4.10 (s, 1H), 4.23 (t, 2H), 7.13 (s, 3H), 8.64 (br., 12H), 8.88 (t, 2H) ppm.
【０１７４】
実施例7c
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ドデカアセタート四ガドリニウム
【化６２】
2016508507.tif 000065
DMSO（0.25mL）中の2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（4−ニトロフェノキシ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（国際公開第2001051095（A2）号パンフレット、66.8mg、90μmol）および3，3’−［（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス（ブタン−4，1−ジイルイミノ）］ビス（3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウム）テトラクロリド（20mg、0.02μmol）に、トリエチルアミン（74μL、0.53mmol）を加え、混合物を20時間撹拌した。DMSO（0.2mL）中の別の2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（4−ニトロフェノキシ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（66mg、90μmol）を加え、50℃で20時間撹拌を続けた。混合物を水で希釈し、低分子量成分を限外濾過により分離した（セルロースアセテート膜、最低NMWL1000g／mol、ミリポア）。濃縮水を集め、分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から40％）して、18.5mgの2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ドデカアセタート四ガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.89〜0.91分。
MS（ES）：m／e＝1430.6（M−2H）2−。
【０１７５】
実施例7d
2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−（｛5−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝−ピリジン−3−イル）エチニル］−1，3−フェニレン｝ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］）ドデカアセタート四ガドリニウム
水（0.3mL）およびアセトニトリル（0.7mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（9.3mg、19μmol）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（30μL、150μmol）および｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（1.6mg、3.7μmol）の脱気した溶液を室温で30分間撹拌し、これに、水（0.5mL）およびアセトニトリル（1mL）中の2，2’，2’’，2’’’，2’’’’，2’’’’’，2’’’’’’，2’’’’’’’，2’’’’’’’’，2’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’，2’’’’’’’’’’’−｛（5−エチニル−1，3−フェニレン）ビス［ブタン−4，1−ジイルカルバモイル（3，6，11，14−テトラオキソ−4，7，10，13−テトラアザヘキサデカン−8，2，15−トリイル）ジ−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−10，1，4，7−テトライル］｝ドデカアセタート四ガドリニウム（63mg、22μmol）を80℃で2時間にわたって加えた。混合物を80℃でさらに3時間加熱した。室温まで冷却した後、別の｛2−［（ジメチルアミノ）メチル］フェニル｝パラジウム（I）クロリド−1，3，5−トリアザ−7−ホスファトリシクロ［3.3.1.1］デカン（2.4mg、5.4μmol）およびN−ジイソプロピルエチルアミン（30μL）を加え、80℃で3時間加熱し続けた。混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から25％）して、3.2mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.89〜0.90分。
MS（ES）：m／e＝1637.1（M−2H）2−。
【０１７６】
実施例8
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム
【化６３】
2016508507.tif 000066
【０１７７】
実施例8a
N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）−エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミド
【化６４】
2016508507.tif 000067
DMF（40mL）中の4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミン（2.6g、9.7mmol）を、新たに調製した、DMF（50mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（5.0g、10.2mmol）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（8.2mL、48.7mmol）およびHATU（5.2g、13.6mmol）の溶液に0℃で加えた。1時間撹拌した後、混合物を冷えたまま濾過して、残留する微量のDMFをトルエンの存在下で蒸留しながら濾液を濃縮し、アミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から40％）して、4.25gのN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミドを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.35 - 1.43 (m, 2H), 1.36 (s, 18H), 1.44 - 1.60 (m, 2H), 2.92 - 3.21 (m, 4H), 3.93 (dd, 1H), 6.62 (d, 1H),  6.71 (t, 1H), 7.15 - 7.34 (m, 4H), 7.80 (t, 1H) ppm.
【０１７８】
実施例8b
3−オキソ−3−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリド
【化６５】
2016508507.tif 000068
DMF（18.5mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミド（4.28g、8.0mmol）を、ジオキサン（4M、18mL）中の塩酸に加えた。溶液を2つの圧力容器に分け、これらを密封し、マイクロ波反応器内で80℃で16分間照射した。合わせた反応溶液を1，4−ジオキサン（300mL）で希釈し、50mLの体積まで濃縮して、1，4−ジオキサン（200mL）で再び希釈した。沈殿物が生成する間、混合物を撹拌し、これを濾過により回収して、1.77gの3−オキソ−3−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリドを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.46 (quin, 2H), 1.61 (m, 2H), 2.58 (t, 2H), 3.02 - 3.14 (m, 1H), 3.17 - 3.27 (m, 3H), 4.19 (t, 1H), 7.15 - 7.38 (m, 4H), 8.58 (br., 6H), 8.82 (t, 1H) ppm.
【０１７９】
実施例8c
N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミド
【化６６】
2016508507.tif 000069
DMF（40mL）中の3−オキソ−3−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリド（1.77g、4.38mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（4.4mL）を、新たに調製した、DMF（50mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（4.4g、9.19mmol）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（14mL）およびHATU（4.66g、12.3mmol）の溶液に0℃で加えた。60分間撹拌した後、混合物を濃縮し、アミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から100％）して、3.37gのN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミドを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.23 (s, 9H), 1.39 (s, 36H), 1.46 (quin, 2H), 1.59 (quin, 2H), 2.58 (t, 2H), 3.08 - 3.38 (m, 6H), 3.91 - 4.09 (m, 2H), 4.19 - 4.36 (m, 1H), 6.19 (br, 1H), 6.31 (br, 1H), 6.45 (br, 1H), 7.14 - 7.32 (m, 4H), 7.45 - 7.69 (br, 2H) ppm.
【０１８０】
実施例8d
3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリド
【化６７】
2016508507.tif 000070
DMF（21mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アラニンアミド（4.48g、4.46mmol）に、ジオキサン（4M、33mL）中の塩酸を加えた。反応容器を密封し、マイクロ波反応器内で80℃で10分間照射した。室温まで冷却した後、反応混合物をゆっくりと1，4−ジオキサン（360mL）に撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を濾過により回収して、2.78gの3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリドを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.42 - 1.48 (m, 2H), 1.53 - 1.58 (m , 2H), 2.53 - 2.62 (m, 2H), 3.07 - 3.11(m, 2H), 3.50 (br, 6H), 4.26 (br., 1H), 4.33 (br., 1H), 4.39 - 4.53 (m, 1H), 7.16 - 7.36 (m, 4H), 8.40 - 9.10 (m, 12H) ppm.
【０１８１】
実施例8e
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝−ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム
【化６８】
2016508507.tif 000071
DMSO（9.0mL）中の2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（4−ニトロフェノキシ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（4.62g、6.1mmol）を、DMSO（8.0mL）中の3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリド（500mg、0.77μmol）およびトリエチルアミン（2.6L、18.5mmol）に加えた。混合物を40℃で1時間、60℃で10時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、水酸化ナトリウム水溶液によりpH7に調整した水で希釈して、低分子量成分を限外濾過により分離した（セルロースアセテート膜、最低NMWL1000g／mol、ミリポア）。濃縮水を集め、3.08gのN−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.51分。
MS（ES）：m／e＝1473.9（M−2H）2−。
【０１８２】
実施例8f
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム
水（0.1mL）およびアセトニトリル（0.3mL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（15mg、30μmol）、トリエチルアミン（20μL、150μmol）およびTBAF（60μL）の脱気した溶液に、酢酸パラジウム（II）（3.4mg、15μmol）を3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（39mg、60μmol）と共に水（7mL）中で80℃まで30分間加熱することにより調製した1.4mLの赤色の触媒溶液を加えた。水（1.2mL）およびアセトニトリル（0.8mL）中のN−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル−N−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブチル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニル）アミノ］アラニンアミド四ガドリニウム（208mg、70μmol）を60℃で2時間にわたって加えた。混合物を60℃でさらに22時間加熱し、室温まで冷却した後、混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、15％から55％）した。続いて、限外濾過（セルロースアセテート膜、最低NMWL500g／mol、ミリポア）を行い、濃縮した濃縮水中の9.8mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.96分。
MS（ES）：m／e＝1645.9（M−2H）2−
【０１８３】
実施例9
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチル］フェニル｝ブチル）プロパンアミド四ガドリニウム
【化６９】
2016508507.tif 000072
エタノール（0.11mL）および水（0.68mL）中の2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（4−｛3−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝−ブチル）プロパンアミド四ガドリニウム（25mg、7.6μmol）を水素雰囲気下、チャコール上のパラジウム（10％、3.8mg）の存在下で20時間撹拌した。混合物をエタノールおよび水で希釈し、濾過した。濾液を真空下で濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から25％）して、8.3mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.84分。
MS（ES）：m／e＝1647.8（M−2H）2−。
【０１８４】
実施例10
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム
【化７０】
2016508507.tif 000073
【０１８５】
実施例10a
2−［3−（4−ヒドロキシフェニル）プロピル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン
【化７１】
2016508507.tif 000074
4−ブロモフェノール（4.77g、27.6mmol）、2−（プロパ−2−エン−1−イル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（6.7g、19.7mmol）、酢酸パラジウム（II）（44mg、0.20mmol）およびトリス（2−メチルフェニル）ホスファン（120mg、0.39mmol）をアセトニトリル（104mL）およびトリエチルアミン（5.5mL）中、100℃で20時間撹拌した。E／Z混合物を濃縮した後、2−［3−（4−ヒドロキシフェニル）プロパ−2−エン−1−イル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンの混合物を得た。これをシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、10から80％）して、2.76gのアルケン中間体を得ることができた。2−［3−（4−ヒドロキシフェニル）プロパ−2−エン−1−イル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンをメタノール（246mL）、水（18mL）および酢酸エチル（205mL）に溶解し、水素雰囲気下でチャコール上のパラジウム（10％、287mg）の存在下、40℃で6時間撹拌した。反応混合物をCeliteに通して濾過し、減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から60％）して、1.69gの2−［3−（4−ヒドロキシフェニル）プロピル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.84 (quin, 2H), 2.49 (t, 1H), 3.58 (t, 2H), 6.65 (d, 2H), 7.00 (d, 2H), 7.84 (m, 4H), 9.09 (s, 1H) ppm.
【０１８６】
実施例10b
4−［3−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）プロピル］フェニルトリフルオロメタンスルホナート
【化７２】
2016508507.tif 000075
ピリジン（43mL）中の2−［3−（4−ヒドロキシフェニル）プロピル］−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（5.8g、20.6mmol）に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（4.54mL、26.8mmol）を0℃で加えた。混合物を室温まで加温しながら、混合物を1時間撹拌し、水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機抽出物を0.5M塩酸で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から70％）して、7.61gの4−［3−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）プロピル］フェニルトリフルオロメタンスルホナートを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1.91 (quin, 2H), 2.68 (t, 2H), 3.60 (t, 2H), 7.30 (d, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.77 - 7.90 (m, 4H) ppm.
【０１８７】
実施例10c
2−（4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン
【化７３】
2016508507.tif 000076
DMF（18mL）中の4−［3−（1，3−ジオキソ−1，3−ジヒドロ−2H−イソインドール−2−イル）プロピル］フェニルトリフルオロメタンスルホナート（7.6g、18.4mmol）、ジクロロパラジウム（II）ビス（トリフェニルホスファン）（646mg、0.92mmol）、ヨウ化銅（175mg、0.92mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（16mL、92mmol）に、DMF（16mL）中のエチニル（トリメチル）シラン（15.3mL、110mmol）を50℃で15時間にわたって加えた。50℃でさらに27時間撹拌した後、水とジエチルエーテルの混合物を加え、相を分離し、水性相をジエチルエーテルで抽出した。蒸留の終わりにトルエンを複数回加えながら、合わせた有機抽出物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から100％）して3.43gの2−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオンを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.21 (s, 9H), 1.79 - 1.98 (m, 2H), 2.63 (t, 2H), 3.58 (t, 2H), 7.21 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.68 - 7.94 (m, 4H) ppm.
【０１８８】
実施例10d
4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロパン−1−アミン
【化７４】
2016508507.tif 000077
THF（105mL）中の2−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−1H−イソインドール−1，3（2H）−ジオン（4.68g、13.0mmol）に、メチルヒドラジンを2回に分けて（13.8mL、259mmol、24時間後に追加の7.0mL、130mmol）加え、沈殿物が生成する間、溶液を40℃で41時間撹拌した。反応混合物を40mLの体積まで濃縮し、0℃で濾過した。固体を少量の冷THFで洗い、蒸留が終わる前にトルエンを2回加えながら、合わせた濾液を減圧下で濃縮し、4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミンを定量的に得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.72 (quin, 2H), 2.63 (m, 4H), 4.39 (br. s., 2H), 7.20 (d, 2H), 7.36 (d, 2H) ppm.
【０１８９】
実施例10e
N2−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）−エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミド
【化７５】
2016508507.tif 000078
DMF（6mL）中の4−｛3−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝ブタン−1−アミン（0.6g、2.6mmol）を、新たに調製した、DMF（6mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（0.69g、1.4mmol）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（1.1mL、6.5mmol）およびHATU（0.69g、1.82mmol）の溶液に0℃で加えた。1時間撹拌した後、別のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（0.2g、0.4mmol）およびHATU（0.2g、0.5mmol）を加え、3時間後に混合物を冷えたまま濾過して、残留する微量のDMFをトルエンの存在下で蒸留しながら濾液を濃縮し、アミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から70％）して、0.55gのN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミドを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.34 (s, 9H), 1.37 (s, H), 1.66 (quin, 2H), 2.56 (t, 2H), 2.97 - 3.08 (td, 2H), 3.17 (t, 2H), 3.96 (m, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.71 (t, 1H), 7.20 (d, 2H), 7.35 (d, 2H), 7.85 (t, 1H) ppm.
【０１９０】
実施例10f
3−オキソ−3−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリド
【化７６】
2016508507.tif 000079
DMF（1.5mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミド（0.55g、0.85mmol）を圧力容器内のジオキサン（4M、1.5mL）中の塩酸に加え、この圧力容器を密封して、マイクロ波反応器内で80℃で12分間照射した。残留する微量のDMFをトルエンの存在下で蒸留しながら反応溶液を濃縮した。残留物を1，4−ジオキサン（200mL）、DMF（2mL）およびジオキサン中の塩酸（4M、2mL）で希釈した。沈殿物が生成する間、混合物を撹拌し、これを濾過により回収して、0.32gの3−オキソ−3−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリドを得た。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.75 (quin, 2H), 2.66 (t, 2H), 3.00 - 3.22 (m, 2H), 3.26 (m, 2H), 4.25 (t, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 8.62 (br. s., 6H), 8.97 (t, 1H) ppm.
【０１９１】
実施例10g
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム
【化７７】
2016508507.tif 000080
2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（4−ニトロフェノキシ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（1.74g、1.62mmol）を、DMF（14mL）中の3−オキソ−3−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリド（320mg、0.74μmol）およびトリエチルアミン（1.5mL、18.5mmol）に加えた。混合物を55℃で8時間撹拌した。蒸留の終わりにトルエンを複数回加えながら、混合物を真空下で濃縮し、水酸化ナトリウム水溶液によりpH7に調整した水で希釈して、低分子量成分を限外濾過により分離した（セルロースアセテート膜、最低NMWL1000g／mol、ミリポア）。濃縮水を集め、0.74gのN−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウムを立体異性体の混合物として得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝1.63、1.66、1.68分。
MS（ES）：m／e＝1538.0（M−H）−。
【０１９２】
実施例10g
N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム
水（140μL）およびアセトニトリル（60μL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（20mg、40μmol）、トリエチルアミン（30μL、200μmol）およびテトラメチルアンモニウムフルオリド（7.5mg、80μmol）の溶液に、酢酸パラジウム（II）（1.8mg、8μmol）を3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（21mg、32μmol）と共に水（1.5mL）中でアルゴン下、80℃まで30分間加熱することにより調製した1.5mLの赤色の触媒溶液を加えた。混合物をヘリウムにより脱気し、水（2mL）中のN−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）−3−［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］アラニンアミド二ガドリニウム（90mg、50μmol）を60℃で8時間にわたって加えた。混合物を60℃でさらに12時間加熱し、室温まで冷却した後、混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、15％から65％）して、12.2mgの表題化合物を立体異性体の混合物として得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.96〜0.98分。
MS（ES）：m／e＝1883.2（M−H）−。
【０１９３】
実施例11
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝−ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウム
【化７８】
2016508507.tif 000081
【０１９４】
実施例11a
N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミド
【化７９】
2016508507.tif 000082
DMF（10mL）中の3−オキソ−3−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−1，2−ジアミニウムジクロリド（600mg、1.23mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（1.6mL）を、新たに調製した、DMF（13.7mL）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（2.4mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニンN−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（1.4g、2.95mmol）およびHATU（1.31g、3.44mmol）の溶液に20℃で加えた。2時間撹拌して6℃で18時間保管した後、冷混合物を濾過し、沈殿物を酢酸エチルで洗った。濾液を濃縮してトルエンで共蒸留し、残留物をアミノ相シリカゲルでクロマトグラフィーにより精製（ヘキサン中の酢酸エチル、0から100％）して、0.55gのN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミドを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.21 (m, 9H), 1.36 (s, 36H), 1.69 (t, 2H), 2.56 (t, 2H), 3.04 - 3.26 (m, 8H), 3.96 (br, 2H), 4.22 (br, 1H), 6.40 - 6.57 (m, 1H), 6.67 - 6.83 (m, 3H) 7.19 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 7.72 - 8.01 (m, 2H), 8.11 (t, 1H) ppm.
【０１９５】
実施例11b
3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリド
【化８０】
2016508507.tif 000083
DMF（4mL）中のN−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル−3−（｛N−（tert−ブトキシカルボニル）−3−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］アラニル｝−アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アラニンアミド（0.54g、546μmol）に、ジオキサン（4M、4mL）中の塩酸を加えた。反応容器を密封し、マイクロ波反応器内で80℃で10分間照射した。室温まで冷却した後、反応混合物をゆっくりと1，4−ジオキサンに撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を濾過により回収して、0.20gの3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリドを得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 0.22 (s, 9H), 1.67 - 1.81 (m, 2H), 2.56 - 2.66 (m, 2H), 3.01 - 3.15 (m, 2H), 3.19 - 3.46 (m, 6H), 4.20 - 4.40 (m, 2H), 4.44 - 4.55 (m, 1H), 7.19 - 7.28 (m, 2H), 7.33 - 7.43 (m, 2H), 8.39 - 8.66 (br. m, 7H), 8.77 (br, 6H), 9.00 - 9.18 (m, 2H) ppm.
【０１９６】
実施例11c
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウム
【化８１】
2016508507.tif 000084
2，2’，2’’−［10−（1−｛［2−（4−ニトロフェノキシ）−2−オキソエチル］アミノ｝−1−オキソプロパン−2−イル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1，4，7−トリイル］トリアセタートガドリニウム（1.89g、1.76mmol）を固体でDMSO（6.25mL）中の3−（｛（3−｛［2，3−ジアンモニオプロパノイル］アミノ｝−1−オキソ−1−［（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）アミノ］プロパン−2−イル｝アミノ）−3−オキソプロパン−1，2−ジアミニウムテトラクロリド（200mg、220μmol）およびトリエチルアミン（0.92mL、6.6mmol）に加えた。混合物を60℃で10時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、水酸化ナトリウム水溶液によりpH7に調整した水で希釈して、低分子量成分を限外濾過により分離した（セルロースアセテート膜、最低NMWL1000g／mol、ミリポア）。濃縮水を集め、1.09gの2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウムを得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）： Rt.＝1.41分。
MS（ES)：m／e＝1466.9（M−2H）2−。
【０１９７】
実施例11d
2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（5−｛（1S）−2−カルボキシ−1−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］エチル｝ピリジン−3−イル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウム
水（140μL）およびアセトニトリル（60μL）中の（3S）−3−（5−ブロモピリジン−3−イル）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］プロパン酸（20mg、40μmol）、トリエチルアミン（30μL、200μmol）およびテトラメチルアンモニウムフルオリド（7.5mg、80μmol）の溶液に、酢酸パラジウム（II）（1.8mg、8μmol）を3，3’，3’’−ホスファントリイルトリス（4，6−ジメチルベンゼンスルホナート）三ナトリウム（21mg、32μmol）と共に水（1.5mL）中でアルゴン下、80℃で30分間加熱することにより調製した1.5mLの赤色の触媒溶液を加えた。混合物をヘリウムにより脱気し、水（2.0mL）中の2，3−ビス（｛2，3−ビス［（N−｛2−［4，7，10−トリス（カルボキシラトメチル）−1，4，7，10−テトラアザシクロドデカン−1−イル］プロパノイル｝グリシル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）−N−（3−｛4−［（トリメチルシリル）エチニル］フェニル｝プロピル）プロパンアミド四ガドリニウム（395mg、40μmol）を60℃で8時間にわたって加えた。混合物を60℃でさらに12時間加熱し、室温まで冷却した後、混合物を濃縮し、残留物を分取HPLCにより精製（C18-YMC ODS AQ-10μm、水中のアセトニトリル＋0.1％ギ酸、1％から45％）して、5.1mgの表題化合物を得た。
UPLC（ACN-HCOOH極性）：Rt.＝0.87分。
MS（ES）：m／e＝1638.7（M−2H）2−。
【０１９８】
参照化合物
（3S）−3−［（｛（3R）−1−［3−（ピペリジン−4−イル）プロパノイル］ピペリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−3−｛6−［3H］−ピリジン−3−イル｝プロパン酸
【化８２】
2016508507.tif 000085
（3S）−3−（6−ブロモピリジン−3−イル）−3−｛［（3R）−1−（3−ピペリジン−4−イル−プロパノイル）ピペリジン−3−カルボニル］アミノ｝プロパン酸（1.85mg、3.73μmol）を、DMF（500μL）とトリエチルアミン（25μL）の混合物に溶解した。この溶液に、チャコール上のパラジウム（20％）（6.45mg）を加え、混合物をトリチウムマニホールドに接続し、トリチウムガスを用いて一晩トリチウム標識した。後から、反応混合物をマニホールド内で低温槽により（cryostatically）3回蒸発させた。得られた未精製の生成物を予備分取HPLC（Kromasil 100 C8 5μm（250×4.6mm）、溶離液：35mMアンモニア／メタノール、流量：1mL／分）で精製した。回収した分画は、2061MBqの（S）−3−｛5−3H−ピリジン−3−イル｝−3−｛［（R）−1−（3−ピペリジン−4−イル−プロパノイル）ピペリジン−3−カルボニル］アミノ｝プロパン酸を含んでいた（放射化学的収率：12.6％；放射化学的純度：98％；比放射能：7.81Ci／mmol）。
【０１９９】
実施例12
調査した化合物のヒトGPIIb／IIIa受容体に対する親和性
使用したGPIIb／IIIa親和性アッセイの手順を図1に略図で示した。純化ヒト糖タンパク質IIb／IIIa（20mM トリス−HCl、0.1M NaCl、0.1％ Triton X-100、1mM CaCl2、0.05％ NaN3、50％グリセロール、pH7.4）をEnzyme Research Laboratories Inc.（インディアナ州サウスベンド）から購入した。GPIIb／IIIa受容体を、0.01％ウシ血清アルブミン（ウシ血清由来アルブミン凍結乾燥粉末、≧96％、Sigma）を含むリン酸緩衝食塩水（カルシウムおよびマグネシウムを含むダルベッコのリン酸緩衝食塩水（D-PBS（＋））、GIBCO（登録商標）、Invitrogen）に希釈した。
GPIIb／IIIa受容体を、少なくとも48時間（100μL／ウェル、48時間〜最長96時間）、96ウェルソリッドプレート（Immuno Plate MaxiSorp（商標）、Nunc、ロスキレ、デンマーク）上に277K〜280K、0.1μg／ウェル〜1μg／ウェルの濃度で固定した。陰性対照として、プレートの一列（n＝8）を、2％ウシ血清アルブミンのみでインキュベートした（200μL／ウェル、ウシ血清由来アルブミン凍結乾燥粉末、≧96％、Sigma、D-PBS（＋）に希釈）。
洗浄緩衝液（230μL／ウェル、カルシウムまたはマグネシウムを含まないダルベッコのリン酸緩衝食塩水（D-PBS（−））、GIBCO（登録商標）、Invitrogen）で3回洗浄した後、残りの露出したプラスチックおよび非特異的な結合部位を、2％ウシ血清アルブミン（ウシ血清由来アルブミン凍結乾燥粉末、≧96％、Sigma）を含む特殊なブロッキング溶液（200μL／ウェル、Roti（登録商標）−Block，Car Roth GmbH Co KG、カールスルーエ）を用いてプレートを室温で1時間をインキュベートすることによってブロックした。
洗浄緩衝液で3回洗浄した後、50μLのトリチウム標識した参照化合物（60nM、3H標識化合物）および50μLの新規化合物（阻害剤）を各ウェルに同時に加え、室温で1時間インキュベートした。いくつかの濃度の各新規阻害剤（0.1、1、2、5、10、20、50、100、200、500、1000、2000、5000、10000および20000nM）を調査した。阻害剤の各濃度において、4回の測定を実施した。調査した阻害剤の結果を表1にまとめる。
トリチウム標識した参照化合物の最大値を阻害剤の添加なしで求めた（n＝8）。3H参照化合物の非特異的な結合を排除するために、糖タンパク質受容体のないウェルを陰性対照として使用した（n＝12、GPIIb／IIIa受容体がないだけで、同一に処理した）。
1時間後、プレートをリン酸緩衝食塩水（200μL／ウェル、ダルベッコのリン酸緩衝食塩水（D-PBS（＋））、GIBCO（登録商標）、Invitrogen）で3回洗浄した。続いて、140μLの液体シンチレーションカクテル（MicroScint（商標） 40 aqueous, Perkin Elmer）を各ウェルに加えた。室温で15分後、プレートをマイクロプレートシンチレーションカウンターで測定した（TopCount NXT v2.13, Perkin Elmer, Packard Instrument Company）。
【０２００】
図1にGPIIb／IIIaアッセイの概略図を示す。最初のステップで、ヒト血小板から精製したヒト糖タンパク質IIb／IIIaを96ウェルソリッドプレート上に固定した。少なくとも48時間後、プレートを洗浄し、非特異的結合部位をRoti（登録商標）−Blockを用いてブロックした。次のステップで、プレートを、トリチウム標識した参照化合物および新規小分子化合物（阻害剤）と共に同時にインキュベートした。阻害剤の親和性が高いほど、参照化合物の結合分画は少なくなった。トリチウム標識した参照化合物の分画は阻害剤によって置換されることはないが、これをマイクロプレートシンチレーションカウンターで測定した。阻害剤の親和性が高いほど、トリチウム標識した参照化合物の結合分画は少なくなった。このアッセイにより、親和性（IC50値）を測定することができた。上述の検討は、式（I）の化合物が造影剤として血栓の画像化に有用であることを示す。結果を表1にまとめる。
【０２０１】
【表２】
2016508507.tif 000086
【０２０２】
実施例13
緩和能の測定
緩和能の測定
1.41Tにおける緩和能の測定を、MiniSpec mq60分光計（Bruker Analytik、カールスルーエ）を用い、共鳴周波数60MHz、温度37℃で運転して実施した。T1緩和時間を、標準的な反転回復法を用いて測定した。T2の測定は、Carr-Purcell-Meiboom-Gill（CPMG）パルスシーケンスを用いて行った。すべての測定は、0.05mMから1mMの間の水中および血漿中のGd濃度で行った。
【０２０３】
緩和能ri（式中、i＝1, 2）は、水中および血漿中での測定緩和速度Riに基づいて計算した：Ri＝Ri（0）＋ri［CGd］
（式中、
Ri（0）は、各溶媒の緩和速度を表し、CGdは、ガドリニウムに規格化した化合物の濃度を表す。結果を表2にまとめる。
【０２０４】
【表３】
2016508507.tif 000087
【０２０５】
実施例14
調査した化合物のヒト活性化血小板への結合
各実験のために、新鮮血を、10mLのクエン酸チューブ（Sarstedt S-Monovette 02.1067.001, 10 mL, Citrate 3.13%）を用いてボランティアから採血した。10mLのクエン酸チューブを注意深く10回反転して、血液と抗凝固剤を混合した。チューブを遠心分離（回転および反転装置内蔵のHeraeus miniTherm CTT、反転速度：19反転／分、Heraeus Instruments GmbH、ドイツ／ハーナウ）するまで、37℃の温度のインキュベーター内で保管した。
【０２０６】
血漿の調製のために、チューブの遠心分離を15分間、1811gで室温で実施した（Eppendorf, Centrifuge 5810R）。血液を201gで室温で15分遠心分離して、血小板に富んだ血漿を作製した。チューブを室温で30分間保管して、さらに分離させた。分離した血小板に富んだ血漿を、最後に453gでさらに3分間遠心分離して、残りの赤血球を除去した。血小板に富んだ血漿を、最終濃度が5μMのアデノシン二リン酸（ADP、Sigma）を用いて活性化した。活性化血小板に富んだ血漿を、異なる濃度のガドリニウム標識化合物と共に20分インキュベートし、引き続き1360gで3分遠心分離した。20μLのインキュベーション溶液を採取して濃度を測定した（n＝3）。沈渣を再懸濁して、少なくとも750μLの血漿で2回洗浄し、続いて、750μLの血漿および50μLの塩化カルシウム（50μL、2％）中に再分散した。上清および沈渣のガドリニウム濃度を、誘導結合プラズマ質量分析法（ICP-MS Agilent 7500a）を用いて測定した。
【０２０７】
1μMのガドリニウム標識化合物のインキュベーション濃度に関する結果を表3にまとめる（Gadovist（登録商標）の標準的な用量：100μmol Gd／kg体重と比較）。
【０２０８】
【表４】
2016508507.tif 000088
【０２０９】
実施例15
磁気共鳴画像法
MRI画像化実験を、血小板に富んだ血漿を用いて行った。新鮮血を用いる血小板に富んだ血漿の調製は、LK Jennings et.al. Blood 1986 1, 173-179に記載されているが、遠心分離の手順に関して変更を行った。短時間で、新鮮血を、10mLのクエン酸チューブ（Sarstedt S-Monovette 02.1067.001, 10 mL, Citrate 3.13％）を用いてボランティアから採血した。10mLのクエン酸チューブを注意深く10回反転して、血液と抗凝固剤を混合した。血液サンプルを110g、室温で15分遠心分離した（Eppendorf, Centrifuge 5810R）。チューブを室温で30分間保管して、さらに分離させた。分離した血漿分画を、240gで室温で3分遠心分離して、残りの赤血球を除去した。赤血球沈渣を除去した。上清中の血小板を、最終濃度が5μmol／Lのアデノシン二リン酸（ADP、Sigma）を用いて活性化した。
【０２１０】
活性化血小板に富んだ血漿溶液を、実施例8と共に37℃で20分インキュベートして、10μmol物質／Lの最終濃度を得た。インキュベーション後、サンプルを720gで3分遠心分離した。上清を除去し、繰り返し再分散して、その後に遠心分離することにより、沈渣を750μLのヒト血漿で3回洗浄した。最後の洗浄ステップにおいて、塩化カルシウム（70μL、2％）をヒト血漿に加えて、血小板凝集を誘発させた。40分後、生じるインビトロの血小板に富んだ血栓を2.0mLのチューブ（2.0mLエッペンドルフ微量遠心チューブ）内に固定して、ヒト血漿における磁気共鳴画像法を室温で実施した。
【０２１１】
画像化は、小型末端コイル（small extremity coil）を備えた臨床用1.5Tシステム（Siemens Avanto）を用いて実施した。T1強調3Dターボスピンエコーシーケンス（3D TSE）を、繰り返し時間（TR）1050ms、エコー時間9.1ms、ターボファクター25で使用した。3Dブロックには、それぞれ、スライス厚0.6mmの18スライスが含まれる。3D TSEシーケンスの空間分解能は、画像マトリクス256×172×18ピクセルで、0.5×0.5×0.6mm3であった。信号平均値の数は16で、その結果得られる総取得時間は17分41秒であった。
【０２１２】
磁気共鳴画像法の結果を図2に示す。図2aには、造影剤を添加していないインビトロの血小板に富んだ血栓の対照を示している。図2aのインビトロの血栓の信号強度は、周囲の培地よりもわずかに強いが、図2bに示す実施例8のインキュベートしたインビトロの血栓の信号よりも明らかに弱い。図2cは、実施例8のヒト血漿の最終濃度が10μmol物質／Lのインキュベーション溶液を示す図である。インキュベーション溶液（図2c）の信号強度は、インビトロの血小板に富んだ対照の血栓サンプル2a中およびサンプル2b中の周囲のヒト血漿培地よりも強い。図2bの血栓は、図2cに示す溶液と共に20分インキュベートしている。20分のインキュベーション期間後、図2bの血栓を血漿溶液で3回洗浄した。図2bのインキュベートしたインビトロの血栓の信号強度は、図2aの対照の血栓よりも明らかに強い信号を示している。
【図１】
2016508507.tif 000103
【図２】
2016508507.tif 000104
【国際調査報告】
2016508507.tif 000105
2016508507.tif 000106
2016508507.tif 000107