(57)【要約】  それらの立体異性体、互変異性体、及び薬学的に許容可能な塩を含み、Ｂｔｋキナーゼの阻害、及びがんやＢｔｋキナーゼによって媒介される炎症などの免疫疾患の治療に有用な、式Ｉのヘテロアリールピリドン及びアザ-ピリドンアミド化合物及び様々な置換基が提供される。哺乳動物細胞におけるそのような障害又は関連する病理状態のインビトロ、インサイツ、及びインビボ診断、及び治療のために式Ｉの化合物を使用する方法が開示される。2016526551.tif 000071【選択図】なし
2016526551.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
2016526551.tif 000065
［上式中、
Ｘ１はＣＲ１又はＮであり；
Ｘ２はＣＲ２又はＮであり；
Ｘ３はＣＲ３又はＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)、Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)、Ｃ１−Ｃ６アルキル、-ＮＨ-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)、Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール、Ｃ６−Ｃ２０アリールであり；
Ｒ６は構造：
2016526551.tif 000066
2016526551.tif 000067
2016526551.tif 000068
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｙ１及びＹ２は、ＣＨ及びＮから独立して選択され；
ここで、アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＮ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ(ＣＨ３)３、-ＣＯＣＨ(ＯＨ)ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-ＮＯ２、=Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＣＦ３、-ＯＣＨＦ２、-ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-Ｓ(Ｏ)２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＳＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、１-メチルアゼチジン-３-イル)オキシ、Ｎ-メチル-Ｎ-オキセタン-３-イルアミノ、アゼチジン-１-イルメチル、ピロリジン-１-イル、及びモルホリノから独立して選択される一又は複数の基で置換されていてもよい。］
から選択される化合物、又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３の一つ又は二つがＮである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ１がＮである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ２がＮである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ３がＮである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ１とＸ３がＮであるか、Ｘ１とＸ２がＮであるか、又はＸ２とＸ３がＮである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ４が-ＣＨ２ＯＨである、請求項１から６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５がＣ３−Ｃ１２カルボシクリルである、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が、一又は複数のＦ及び-ＣＨ３で置換されていてもよいシクロプロピルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５が-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)である、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ５がＣ２−Ｃ２０ヘテロシクリルである、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５が-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)である、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５がＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ５が-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)である、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ５がＣ１−Ｃ２０ヘテロアリールである、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５がＣ６−Ｃ２０アリールである、請求項１から７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ６が
2016526551.tif 000069
である、請求項１から１６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ６が、
2016526551.tif 000070
である、請求項１から１６の何れか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｙ１がＣＨであり、Ｙ２がＮである、請求項１から１８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｙ１がＮであり、Ｙ２がＣＨである、請求項１から１８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｙ１とＹ２がそれぞれＣＨである、請求項１から１８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｙ１とＹ２がそれぞれＣＨであり、Ｒ６がＣＨ３である、請求項１から１８の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロブタンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド； 
２-シクロプロピル-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]オキセタン-３-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-モルホリノ-アセトアミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]プロパンアミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-(３,５-ジメチルピラゾール-１-イル)アセトアミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ピリジン-３-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-メチル-ピラゾール-４-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-１Ｈ-ピラゾール-３-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１,５-ジメチル-ピラゾール-３-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-ピロリジン-１-イル-ピリジン-３-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ベンズアミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]オキサゾール-５-カルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２,２-ジフルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
(１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド； 
(１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド； 
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]プロパンアミド；及び
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド
から選択される、請求項１から２２の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
(１Ｒ,２Ｓ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]チエノ[１,３-ｃ]ピリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｒ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-ヒドロキシ-シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-(４-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロベンゾチオフェノ[２,３-ｄ]ピリダジン-３-イル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド；
(Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド；
Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-エトキシ-シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-[６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-エトキシ-シクロプロパンカルボキサミド；
(Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.３]ヘキサン-２-カルボキサミド；
(Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.３]ヘキサン-２-カルボキサミド；
(２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]テトラヒドロフラン-２-カルボキサミド；
(２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]テトラヒドロフラン-２-カルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[６-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-２-メチル-３-オキソ-ピリダジン-４-イル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-[６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[６-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-４-メチル-３-オキソ-ピラジン-２-イル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[３-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-プロパンアミド；
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メトキシ-アセトアミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メトキシ-アセトアミド；
Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-[１-オキソ-６-(トリフルオロメトキシ)-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
１-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-３-エチル-ウレア；
Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-１-メチル-ベンズイミダゾール-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド；
(Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド；
Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ブタンアミド；
Ｎ-[５-[２-(５-ｔｅｒｔ-ブチル-１-メチル-ベンズイミダゾール-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド；
(Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-２-フルオロ-Ｎ-[５-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｒ,３Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド；
Ｎ２-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-Ｎ１,Ｎ１-ジメチル-シクロプロパン-１,２-ジカルボキサミド；
Ｎ２-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-Ｎ１,Ｎ１-ジメチル-シクロプロパン-１,２-ジカルボキサミド；
(１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロール[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド；
(１Ｓ,３Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド；
(１Ｓ,３Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド；
(１Ｒ,３Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド；及び
(１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロール[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド
から選択される、請求項１から２２の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物と薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤とを含んでなる薬学的組成物。
【請求項２６】
治療剤を更に含む、請求項２５に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物を、薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤と組み合わせることを含む、薬学的組成物の作製方法。
【請求項２８】
免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、かつブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される疾患又は障害を有する患者に、治療有効量の請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、疾患又は障害の治療方法。
【請求項２９】
疾患又は障害が、全身的及び局所的炎症、関節炎、免疫抑制に関連した炎症、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病(ＩＴＰ)、抗好中球細胞質抗体(ＡＮＣＡ)血管炎、慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)、乾癬から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
免疫障害が関節リウマチである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
疾患又は障害が、乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、前立腺がん、精巣がん、尿生殖路がん、食道がん、喉頭がん、膠芽細胞腫がん、神経芽細胞腫、胃がん、皮膚がん、ケラトアカントーマ、肺がん、類表皮がん、大細胞がん、非小細胞肺がん(ＮＳＣＬＣ)、小細胞がん、肺腺がん、骨がん、結腸がん、腺腫、膵臓がん、腺がん、甲状腺がん、濾胞がん、未分化がん、乳頭がん、セミノーマ、黒色腫、肉腫、膀胱がん、肝がん及び胆道がん、腎臓がん、膵臓がん、骨髄障害、リンパ腫、毛様細胞、口腔がん、鼻咽頭、咽頭がん、唇がん、舌がん、口がん、小腸がん、結腸-直腸がん、大腸がん、直腸がん、脳及び中枢神経系のがん、ホジキン病、白血病、気管支がん、甲状腺がん、肝臓及び肝内胆管のがん、肝細胞がん、胃がん、神経膠腫／神経膠芽腫、子宮内膜がん、黒色腫、腎臓及び腎盂のがん、膀胱がん、子宮体がん、子宮頸がん、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病(ＣＬＬ)、骨髄性白血病、口腔及び咽頭のがん、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、及び絨毛結腸腺腫から選択されるがんである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
疾患又は障害が血液悪性腫瘍である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
血液悪性腫瘍が白血病又はリンパ腫である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
抗炎症剤、免疫調節剤、化学療法剤、アポトーシス増強剤、向神経性因子、心血管疾患治療剤、肝疾患治療剤、抗ウイルス剤、血液疾患治療剤、糖尿病治療剤、及び免疫不全疾患治療剤から選択される更なる治療剤を投与することを更に含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】
更なる治療剤が、Ｂｃｌ-２阻害剤又はＪＡＫ阻害剤である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
更なる治療剤がイブルチニブである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
ａ)請求項２５に記載の薬学的組成物と
ｂ)使用のための指示書
を含む、ブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される症状を治療するためのキット。
【請求項３８】
免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、かつブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される疾患又は障害の治療のための、請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物の使用。
【請求項３９】
免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、かつブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される疾患又は障害の治療のための医薬の製造における請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物の使用。
【請求項４０】
治療的に活性な物質として使用するための、請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４１】
免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、かつブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される疾患又は障害の治療に使用するための、請求項１から２４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項４２】
明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願とのクロスリファレンス）
米国特許法施行規則第１．５３（ｂ）条に従って出願されたこの非仮出願は、その内容の全体が出典明示により援用される、２０１３年７月３日出願の米国仮出願第６１／８４２６４８号の米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づく優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、一般に、炎症、免疫疾患、及びがんを含む、ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）によって媒介される疾患を治療するための化合物、より具体的には、Ｂｔｋ活性を阻害する化合物に関する。本発明は、また、哺乳動物細胞、又は関連する病理学的状態のインビトロ、インサイツ及びインビボ診断又は治療のための化合物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヒト酵素の最大のファミリーであるプロテインキナーゼは、５００を遙かに超えるタンパク質を包含する。ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）はチロシンキナーゼのＴｅｃファミリーの一員であり、初期Ｂ細胞発生並びに成熟Ｂ細胞活性化、シグナル伝達及び生存の調節因子である（T. Hunter, Cell 1987 50:823-829）。
【０００４】
Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）を介したＢ細胞シグナル伝達は、広範囲の生物学的結果をもたらし得、これらの結果は順にＢ細胞の発達段階に依存する。ＢＣＲシグナルの大きさと持続時間は正確に調節されなければならない。ＢＣＲ媒介性シグナル伝達の異常は、Ｂ細胞活性化の調節不全及び／又は病原性自己抗体の形成を引き起こし、多数の自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患を生じうる。ヒトにおけるＢｔｋの突然変異はＸ連鎖無ガンマグロブリン血症（ＸＬＡ）を生じさせる。この疾患は、Ｂ細胞の成熟障害、免疫グロブリン産生の減少、Ｔ細胞非依存性免疫応答不全及びＢＣＲ刺激時の持続性カルシウムサインの著しい減衰に関連する。アレルギー性障害及び／又は自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患におけるＢｔｋの役割に関する証拠はＢｔｋ欠損マウスモデルで確認されている。例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の標準マウス前臨床モデルにおいて、Ｂｔｋ欠損は疾患進行の著明改善をもたらすことが示されている。更に、Ｂｔｋ欠損マウスはまたコラーゲン誘導性関節炎の発症に対しても抵抗性である場合があり、ブドウ球菌誘導性関節炎にも罹患しにくい場合がある。多数の証拠が自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患の病因におけるＢ細胞及び体液性免疫系の役割を裏付けている。Ｂ細胞を枯渇させるために開発されたタンパク質に基づく治療法（例えばリツキサン（登録商標），Genentech/Biogen Idec））は、多くの自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患の治療に対する一つのアプローチである。Ｂ細胞活性化におけるＢｔｋの役割のため、Ｂｔｋの阻害剤はＢ細胞媒介性病原性活性（例えば自己抗体産生など）の阻害剤として有用でありうる。Ｂｔｋは、破骨細胞、マスト細胞及び単球においても発現され、これらの細胞の機能にとって重要であることが示されている。例えば、マウスにおけるＢｔｋ欠損はＩｇＥ媒介性マスト細胞活性化の障害（ＴＮＦ-α及び他の炎症性サイトカイン放出の顕著な減少）に関連し、ヒトにおけるＢｔｋ欠損は活性化単球によるＴＮＦ-α産生の大幅な減少に関連する。
【０００５】
よって、Ｂｔｋ活性の阻害は、アレルギー性障害及び／又は自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患、例えばＳＬＥ、関節リウマチ（Whang等(2014) Drug Discovery Today(印刷中)；Kim等(2011) Bioorganic & Med. Chem. Letters 21:6258-6263）、多発性血管炎、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、重症筋無力症、アレルギー性鼻炎、及び喘息など（Di Paolo等(2011) Nature Chem. Biol. 7(1):41-50；Liu (2011) Drug Metab. and Disposition 39(10):1840-1849；Liu等(2011) Jour. of Pharm. and Exper. Ther. 338(1):154-163；Lou等(2012) J. Med. Chem. 55(10):4539-4550；Xu D.等(2012) Jour. Pharm. and Exp. Ther. 341(1):90-103）の治療のために有用でありうる。加えて、Ｂｔｋはアポトーシスにおいてもある役割を果たすことが報告されている（Islam及びSmith Immunol. Rev. 2000 178:49）；従って、Ｂｔｋ活性の阻害は、がん、並びにＢ細胞リンパ腫、白血病、及び他の血液悪性腫瘍の治療のために有用でありうる（米国特許第７５１４４４４号；Feldhahn等 J. Exp. Med. 2005 201:1837）。更に、破骨細胞機能におけるＢｔｋの機能を考慮すると、Ｂｔｋ活性の阻害は骨粗しょう症などの骨障害の治療に有用でありうる。特定のＢｔｋ阻害剤が報告されている（米国特許第７８８４１０８号、国際公開第２０１０／０５６８７５号；米国特許第７４０５２９５号；米国特許第７３９３８４８号；国際公開第２００６／０５３１２１号；米国特許第７９４７８３５号；米国特許出願公開第２００８／０１３９５５７号；米国特許第７８３８５２３号；米国特許出願公開第２０１２／００４０９４９号；米国特許出願公開第２０１２／０２９５８８５号；米国特許出願公開第２０１３／００４５９６５号；米国特許第７６８３０６４号；米国特許第７９０２１９４号；米国特許第７９０６５０９号；米国特許第８１２４６０４号；米国特許出願公開第２００８／０１２５４１７号；米国特許出願公開第２０１１／０１１８２３３号；国際公開第２０１１／１４０４８８号；米国特許出願公開第２０１２／００１０１９１号；国際公開第２０１３／０６７２７４号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２３５号；国際公開第２０１３／０６７２７７号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２４５号；国際公開第２０１３／０６７２６０号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２６２号；国際公開第２０１３／０６７２６４号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２４６号）。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、一般に、式Ｉの構造：
2016526551.tif 000003
を有するブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）調節活性を備え、その立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩を含む、ヘテロアリールピリドン及びアザ-ピリドンアミド化合物に関する。様々な置換基はここで定義される。
【０００７】
本発明の一態様は、式Ｉの化合物と薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤を含んでなる薬学的組成物である。薬学的組成物は第二の治療剤を更に含有していてもよい。
本発明の別の態様は、式Ｉの化合物を薬学的に許容可能な担体と組み合わせることを含む、薬学的組成物の作製方法にある。
【０００８】
本発明は、免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害に罹患している患者に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む、疾患又は障害を治療する方法を含む。
本発明は、ａ）式Ｉの化合物を含有する第一の薬学的組成物と；ｂ）使用のための指示書を含む、ブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される病状を治療するためのキットを含む。
【０００９】
本発明は、医薬として使用するための、また免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害の治療において使用するための式Ｉの化合物を含む。
本発明は、疾患又は障害の治療において更なる治療剤と組み合わせて使用される式Ｉの化合物を含む。
本発明は、免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用を含み、ここで、該医薬はブルトン型チロシンキナーゼを媒介する。
【００１０】
本発明は式Ｉの化合物の作製方法を含む。
本発明は、免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害を治療するための、式Ｉの化合物の使用を含む。
【００１１】
本発明は、免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用を含む。
本発明は、治療的に活性な物質として使用するための式Ｉの何れか一の化合物を含む。
【００１２】
本発明は、免疫障害、がん、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害の治療に使用するための式Ｉの化合物を含む。
本発明は以上に記載の通りである。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】５-オキソピロリジン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１３７ａからの４,４-ジメチルピロリジン-２-カルボン酸１３７ｆの合成を示す。
【図２】３-(１,３-ジオキソイソインドリン-２-イル)プロパン酸１３７ｇからの７,７−ジメチル−２,３,４,６,７,８-ヘキサヒドロ-１Ｈ-ピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-１-オン１３７ｎの合成を示す。
【図３】４-ブロモ-２-フルオロ安息香酸１４４ａからの６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-３,４-ジヒドロイソキノリン-１(２Ｈ)-オン１４４ｊの合成を示す。
【図４】３-(トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド１５８ａからの６-(トリフルオロメトキシ)-３,４-ジヒドロイソキノリン-１(２Ｈ)-オン１５８ｇの合成を示す。
【図５】２-ブロモ-４-クロロニコチンアルデヒド１６０ａからの(２-(６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メタノール１６０ｋ及び(２-(５-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メタノール１６０ｌの合成を示す。
【図６】４-オキソピペリジン-１-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１６５ａからの(Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド１６５及び(Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド１６６の合成を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
その例が添付の構造及び式で示される本発明の所定の実施態様が以下に詳細に参照される。本発明は、列挙された実施態様に関連して記載されるが、これら実施態様に限定することを意図するものではないことは理解される。逆に、本発明は、特許請求の範囲に記載の本発明の範囲内に含まれうるあらゆる代替物、改変物、及び均等物を包含するものである。当業者であれば、本発明の実施に使用され得、ここに記載されたものと類似か均等である多くの方法及び材料が分かるであろう。本発明は、記載された方法及び材料には決して限定されない。援用される文献、特許、及び類似の資料のうちの一又は複数が、限定しないが、定義された用語、用語の使用法、記載された技術などを含む本願と異なるか又は矛盾する場合は、本願が優先する。特段の定義がなされない限り、ここで使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。ここに記載のものと類似するか又は均等である方法や材料を本発明の実施又は試験に使用することができるが、適切な方法及び材料は以下に記載する。ここで言及した刊行物、特許出願、特許、及び他の文献の全てが、その全体が出典明示によりここに援用される。別段の記載がない限り、本出願において使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ系統的命名法に基づく。
【００１５】
（定義）
置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素１個から全水素の置換基による置換までを指す。「置換基」なる用語は親分子上の水素原子と置き換えられる原子又は原子群を示す。「置換される」なる用語は、特定の基が一又は複数の置換基を有していることを意味する。任意の基が複数の置換基を有している場合があり、様々な可能な置換基が提供される場合、置換基は独立して選択され、同じである必要はない。「非置換の」なる用語は、特定された基が置換基を有していないことを意味する。「置換されていてもよい」なる用語は、特定された基が非置換であるか、又は可能な置換基の群から独立して選択される一又は複数の置換基で置換されていることを意味する。置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素１個から全水素の置換基による置換までを指す。
【００１６】
ここで使用される「アルキル」なる用語は、１から１２の炭素原子（Ｃ１−Ｃ１２）の飽和した直鎖状もしくは分枝鎖一価炭化水素基を意味し、ここで、アルキル基は場合によっては以下に記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。他の実施態様では、アルキル基は１から８の炭素原子（Ｃ１−Ｃ８）、又は１から６の炭素原子（Ｃ１−Ｃ６）である。アルキル基の例は、限定しないが、メチル（Ｍｅ、-ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、-ＣＨ２ＣＨ３）、１-プロピル（ｎ-Ｐｒ、ｎ-プロピル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２-プロピル（ｉ-Ｐｒ、ｉ-プロピル、-ＣＨ(ＣＨ３)２）、１-ブチル（ｎ-Ｂｕ、ｎ-ブチル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２-メチル-１-プロピル（ｉ-Ｂｕ、ｉ-ブチル、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２）、２-ブチル（ｓ-Ｂｕ、ｓ-ブチル、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３）、２-メチル-２-プロピル（ｔ-Ｂｕ、ｔ-ブチル、-Ｃ(ＣＨ３)３）、１-ペンチル（ｎ-ペンチル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２-ペンチル（-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３-ペンチル（-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２）、２-メチル-２-ブチル（-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＣＨ３）、３-メチル-２-ブチル（-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２）、３-メチル-１-ブチル（-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２）、２-メチル-１-ブチル（-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３）、１-ヘキシル（-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２-ヘキシル（-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３-ヘキシル（-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)）、２-メチル-２-ペンチル（-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３-メチル-２-ペンチル（-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３）、４-メチル-２-ペンチル（-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２）、３-メチル-３-ペンチル（-Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)２）、２-メチル-３-ペンチル（-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２）、２,３-ジメチル-２-ブチル（-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ(ＣＨ３)２）、３,３-ジメチル-２-ブチル（-ＣＨ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)３）、１-ヘプチル、１-オクチル等を含む。
【００１７】
ここで使用される「アルキレン」なる用語は、１から１２の炭素原子（Ｃ１−Ｃ１２）の飽和した直鎖状又は分岐鎖の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルキレン基は場合によっては以下に記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。他の実施態様では、アルキレン基は１から８の炭素原子（Ｃ１−Ｃ８）、又は１から６の炭素原子（Ｃ１−Ｃ６）である。アルキレン基の例は、限定しないが、メチレン（-ＣＨ２-）、エチレン（-ＣＨ２ＣＨ２-）、プロピレン（-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２-）等を含む。
【００１８】
「アルケニル」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、すなわち、炭素−炭素のｓｐ２二重結合を有する２〜８の炭素原子（Ｃ２−Ｃ８）の直鎖状もしくは分枝鎖の一価炭化水素基を意味し、ここで、アルケニル基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよく、「シス」及び「トランス」配向、あるいは「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、限定しないが、エチレニル又はビニル（-ＣＨ=ＣＨ２）、アリル（-ＣＨ２ＣＨ=ＣＨ２）等を含む。
【００１９】
「アルケニレン」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、つまり炭素−炭素ｓｐ２二重結合を有する２から８の炭素原子（Ｃ２−Ｃ８）の直鎖状もしくは分枝鎖状の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルケニル基は、場合によっては置換されていてもよく、「シス」及び「トランス」配向、又は別に「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、限定されないが、エチレニレン又はビニレン（-ＣＨ=ＣＨ-）、アリル（-ＣＨ２ＣＨ=ＣＨ-）等を含む。
【００２０】
「アルキニル」なる用語とは、少なくとも一の不飽和部位、すなわち、炭素−炭素のｓｐ三重結合を有する２から８の炭素原子（Ｃ２−Ｃ８）の直鎖状もしくは分枝鎖の一価炭化水素基を意味し、ここで、アルキニル基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。例は、限定しないが、エチニル（-Ｃ≡ＣＨ）、プロピニル（プロパルギル、-ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）等を含む。
【００２１】
「アルキニレン」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、つまり炭素−炭素ｓｐ三重結合を有する２から８の炭素原子（Ｃ２−Ｃ８）の直鎖状又は分岐状の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルキニル基は場合によってはでありうる。例は、限定しないが、エチニレン（-Ｃ≡Ｃ-）、プロピニレン（プロパルギレン、-ＣＨ２Ｃ≡Ｃ-）等を含む。
【００２２】
「炭素環」、「カルボシクリル」、「炭素環式環」及び「シクロアルキル」なる用語は、単環式環としては３から１２の炭素原子（Ｃ３−Ｃ１２）、又は二環式環としては７から１２の炭素原子を有する一価の非芳香族の飽和又は部分不飽和環を意味する。７から１２の原子を有する二環式炭素環は、例えばビシクロ[４,５]、ビシクロ[５,５]、ビシクロ[５,６]又はビシクロ[６,６]系として配置され得、９又は１０の環原子を有する二環式炭素環は、ビシクロ[５,６]又はビシクロ[６,６]系として、あるいは架橋系、例えば、ビシクロ[２.２.１]ヘプタン、ビシクロ[２.２.２]オクタン及びビシクロ[３.２.２]ノナンとして配置されうる。スピロカルボシクリル部分もまたこの定義の範囲に含まれる。スピロカルボシクリル部分の例は、[２.２]ペンタニル、[２.３]ヘキサニル、及び[２.４]ヘプタニルを含む。単環式炭素環の例は、限定しないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１-シクロペンタ-１-エニル、１-シクロペンタ-２-エニル、１-シクロペンタ-３-エニル、シクロヘキシル、１-シクロヘキサ-１-エニル、１-シクロヘキサ-２-エニル、１-シクロヘキサ-３-エニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロウンデシル、シクロドデシル等を含む。カルボシクリル基は場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で置換される。
【００２３】
「アリール」は、親芳香族環系の一つの炭素原子から一つの水素原子を除去することにより誘導される６−２０の炭素原子（Ｃ６−Ｃ２０）の一価の芳香族炭化水素基を意味する。幾つかのアリール基は、例示的な構造では、「Ａｒ」と表される。アリールは、飽和環、部分不飽和環、又は芳香族の炭素環式環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリール基は、限定しないが、ベンゼン（フェニル）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル、インデニル、インダニル、１,２-ジヒドロナフタレン、１,２,３,４-テトラヒドロナフチル等から誘導される基を含む。アリール基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換される。
【００２４】
「アリーレン」は、親芳香環系の二つの炭素原子から二つの水素原子を取り除くことによって誘導される６−２０の炭素原子（Ｃ６−Ｃ２０）の二価芳香族炭化水素基を意味する。幾つかのアリール基は、例示的な構造では、「Ａｒ」と表される。アリーレンは、飽和、部分的不飽和環、又は芳香族炭素環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリーレン基は、限定されないが、ベンゼン（フェニレン）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニレン、インデニレン、インダニレン、１,２-ジヒドロナフタレン、１,２,３,４-テトラヒドロナフチル等から誘導される基を含む。アリーレン基は場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で置換される。
【００２５】
「複素環」、「ヘテロシクリル」及び「複素環式環」なる用語は、ここでは交換可能に使用され、３から約２０の環原子の飽和又は部分不飽和の（すなわち、環内に一又は複数の二重結合及び／又は三重結合を有する）炭素環式基を意味し、ここで、少なくとも一つの環原子は、窒素、酸素、リン及び硫黄から選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子はＣであり、一又は複数の環原子は、場合によっては以下に記載される一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。複素環は、３から７の環員（２から６の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、Ｐ、及びＳから選択される１から４のヘテロ原子）を有する単環、又は７から１０の環員（４から９の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、Ｐ、及びＳから選択される１から６のヘテロ原子）を有する二環、例えば、ビシクロ[４,５]、［５,５]、［５,６]、又は［６,６]系でありうる。複素環は、Paquette, Leo A.; “Principles of Modern Heterocyclic Chemistry” (W.A. Benjamin, New York, 1968)、特に、第１章、第３章、第４章、第６章、第７章、及び第９章；“The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs”(John Wiley & Sons, New York, 1950から現在)、特に、第１３巻、第１４巻、第１６巻、第１９巻、及び第２８巻；及びJ. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566に記載されている。「ヘテロシクリル」は、また、複素環基が、飽和環、部分不飽和環、又は芳香族の炭素環式環又は複素環式環に縮合している基を含む。複素環式環の例は、限定しないが、モルホリン-４-イル、ピペリジン-１-イル、ピペラジニル、ピペラジン-４-イル-２-オン、ピペラジン-４-イル-３-オン、ピロリジン-１-イル、チオモルホリン-４-イル、Ｓ-ジオキソチオモルホリン-４-イル、アゾカン-１-イル、アゼチジン-１-イル、オクタヒドロ-ピリド［１,２-ａ］ピラジン-２-イル、［１,４]ジアゼパン-１-イル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジノ、モルホリニノ、チオモルホリノ、チオキサニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、２-ピロリニル、３-ピロリニル、インドリニル、２Ｈ-ピラニル、４Ｈ-ピラニル、ジオキサニル、１,３-ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニルイミダゾリニル、イミダゾリジニル、３-アザビシクロ[３.１.０］ヘキサニル、３-アザビシクロ[４.１.０］ヘプタニル、アザビシクロ[２.２.２］ヘキサニル、３Ｈ-インドリルキノリジニル及びＮ-ピリジルウレアを含む。スピロヘテロシクリル部分もまたこの定義の範囲に含まれる。スピロヘテロシクリル部分の例は、アザスピロ[２.５]オクタニル及びアザスピロ[２.４]ヘプタニルを含む。２個の環原子がオキソ（=Ｏ）部分で置換されている複素環式基の例は、ピリミジノニル及び１,１-ジオキソ-チオモルホリニルである。ここでの複素環式基は、ここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。
【００２６】
「ヘテロアリール」なる用語は、５員環、６員環又は７員環の一価芳香族基を意味し、窒素、酸素、及び硫黄から独立して選択される一又は複数のヘテロ原子を含む５−２０の原子の縮合環系（その環の少なくとも一つが芳香族である）を含む。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル（例えば、２-ヒドロキシピリジニルを含む）、イミダゾリル、イミダゾピリジニル、ピリミジニル（例えば、４-ヒドロキシピリミジニルを含む）、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、及びフロピリジニルである。ヘテロアリール基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換される。
【００２７】
複素環又はヘテロアリール基は、それが可能な場合、炭素（炭素連結）又は窒素（窒素連結）結合でありうる。例を挙げると、限定ではないが、炭素結合複素環又はヘテロアリールは、ピリジンの２、３、４、５、又は６位、ピリダジンの３、４、５、又は６位、ピリミジンの２、４、５、又は６位、ピラジンの２、３、５、又は６位、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロール又はテトラヒドロピロールの２、３、４、又は５位、オキサゾール、イミダゾール又はチアゾールの２、４、又は５位、イソオキサゾール、ピラゾール、又はイソチアゾールの３、４、又は５位、アジリジンの２又は３位、アゼチジンの２、３、又は４位、キノリンの２、３、４、５、６、７、又は８位、あるいはイソキノリンの１、３、４、５、６、７、又は８位で結合する。
【００２８】
例を挙げると、限定ではないが、窒素結合複素環又はヘテロアリールは、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、２-ピロリン、３-ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、２-イミダゾリン、３-イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２-ピラゾリン、３-ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、１Ｈ-インダゾールの１位、イソインドール又はイソインドリンの２位、モルホリンの４位、及びカルバゾール又はβ-カルボリンの９位で結合する。
【００２９】
「治療する」及び「治療」という用語は、目的が関節炎又はがんの発症又は広がりなどの望ましくない生理学的変化又は障害を緩徐化する（軽減する）ことである、治療的処置を指す。本発明の目的のために、有益な又は所望される臨床結果は、検出可能であるか否かに関わらず、症状の緩和、疾患の程度の軽減、疾患の状態の安定化（すなわち悪化しないこと）、疾患進行の遅延又は緩徐化、疾患状態の改善又は緩和、及び寛解（部分的又は完全な）を含むが、これらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けない場合に予想される生存期間と比較して生存期間を延長することも意味しうる。治療を必要とする者は、症状又は障害を有する者を含む。
【００３０】
「治療有効量」という語句は、（ｉ）特定の疾患、病態もしくは障害を治療する、（ｉｉ）特定の疾患、病態もしくは障害の一又は複数の症状を減弱させる、改善するもしくは取り除く、又は（ｉｉｉ）ここに記載される特定の疾患、病態もしくは障害の一又は複数の症状の発症を予防しもしくは遅延させる、本発明の化合物の量を意味する。がんの場合、薬剤の治療有効量は、がん細胞の数を減少させ；腫瘍サイズを低減させ；周辺器官へのがん細胞の浸潤を阻害し（すなわちある程度遅延させ、好ましくは停止させ）；腫瘍の転移を阻害し（すなわちある程度遅延させ、好ましくは停止させ）；腫瘍増殖をある程度阻害し；及び／又はがんに関連する症状の一又は複数をある程度軽減しうる。薬剤が増殖を防止し及び／又は既存のがん細胞を死滅させうる度合いで、治療有効量は細胞増殖抑制性及び／又は細胞傷害性でありうる。がん療法では、効果は、例えば無増悪期間（ＴＴＰ）を評価し及び／又は奏効率（ＲＲ）を決定することによって、測定できる。
【００３１】
ここで使用される「炎症性障害」は、過度の又は調節されない炎症応答が過度の炎症症状、宿主の組織損傷又は組織機能の喪失をもたらす任意の疾患、障害又は症候群を意味しうる。「炎症性障害」はまた白血球の流入及び／又は好中球の化学走性によって媒介される病的状態を指す。
【００３２】
ここで使用される「炎症」は、損傷を与える物質と損傷された組織の双方を破壊し、希釈し又は壁で囲む（隔離する）ように働く、組織の損傷又は破壊によって誘発される局在化された保護反応を指す。炎症は白血球の流入及び／又は好中球の化学走性と顕著に関連する。炎症は、病原性生物及びウイルスによる感染から、また心筋梗塞又は脳卒中後の外傷又は再灌流、外来性抗原に対する免疫応答及び自己免疫応答などの非感染手段から生じうる。従って、式Ｉの化合物で治療可能な炎症性障害は、特異的防御系の反応並びに非特異的防御系の反応に関連する障害を包含する。
【００３３】
「特異的防御系」は、特異的抗原の存在に対して反応する免疫系の成分を指す。特異的防御系の反応から生じる炎症の例には、外来性抗原に対する古典的応答、自己免疫疾患、及びＴ細胞によって媒介される遅発型過敏症反応が含まれる。慢性炎症性疾患、固形移植組織及び器官、例えば腎臓及び骨髄移植の拒絶反応、並びに移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）は、特異的防御系の炎症反応の更なる例である。
【００３４】
ここで使用される「非特異的防御系」という用語は、免疫記憶の能力がない白血球（例えば顆粒球及びマクロファージ）によって媒介される炎症性障害を指す。少なくとも部分的には、非特異的防御系の反応から生じる炎症の例には、成人（急性）呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）又は多発性器官傷害症候群；再灌流傷害；急性糸球体腎炎；反応性関節炎；急性炎症成分による皮膚病；急性化膿性髄膜炎又は脳卒中などの他の中枢神経系炎症性障害；熱傷；炎症性腸疾患；顆粒球輸血関連症候群；及びサイトカイン誘発毒性などの状態に関連する炎症が含まれる。
【００３５】
ここで使用される「自己免疫疾患」は、組織傷害が、身体自体の構成成分への体液性又は細胞媒介性応答に関連する、任意の群の障害を指す。
【００３６】
ここで使用される「アレルギー疾患」は、アレルギーから生じる任意の症状、組織損傷又は組織機能の喪失を指す。ここで使用される「関節炎疾患」は、様々な病因に起因する関節の炎症性病変を特徴とする任意の疾患を指す。ここで使用される「皮膚炎」は、様々な病因に起因する皮膚の炎症を特徴とする皮膚疾患の大きなファミリーの何れかを指す。ここで使用される「移植片拒絶反応」は、移植された組織及び周囲の組織の機能喪失、痛み、腫脹、白血球増加及び血小板減少を特徴とする、器官又は細胞（例えば骨髄）などの移植された組織に対する任意の免疫反応を指す。本発明の治療方法は、炎症細胞活性化に関連する障害の治療のための方法を含む。
【００３７】
「炎症性細胞活性化」は、増殖性細胞応答の刺激（サイトカイン、抗原もしくは自己抗体を含むがこれらに限定されない）による誘導、可溶性メディエーター（サイトカイン、酸素ラジカル、酵素、プロスタノイドもしくは血管作用性アミンを含むがこれらに限定されない）の産生、又は炎症細胞（単球、マクロファージ、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、顆粒球（すなわち好中球、好塩基球及び好酸球などの多形核白血球）、マスト細胞、樹状細胞、ランゲルハンス細胞、及び内皮細胞を含むがこれらに限定されない）における新しい又は増加した数のメディエーター（主要組織適合抗原又は細胞接着分子を含むがこれらに限定されない）の細胞表面発現を指す。これらの細胞におけるこれらの表現型の一つ又は組合せの活性化が炎症性障害の開始、永続化又は増悪に寄与しうることは当業者に認識される。
【００３８】
「ＮＳＡＩＤ」という用語は、「非ステロイド性抗炎症薬（non-steroidal anti-inflammatory drug）」の頭字語であり、鎮痛、解熱（上昇した体温を低下させ、意識を障害することなく痛みを軽減する）及び、高用量では、抗炎症作用（炎症を低減する）を有する治療薬である。「非ステロイド性」という用語は、これらの薬剤を、（広範囲の作用の中でも特に）類似のエイコサノイド抑制性抗炎症作用を有するステロイドから区別するために使用される。鎮痛薬として、ＮＳＡＩＤは、それらが非麻薬性であるという点で独特である。ＮＳＡＩＤはアスピリン、イブプロフェン、及びナプロキセンを含む。ＮＳＡＩＤは、通常、疼痛及び炎症が存在する急性又は慢性状態の治療に適応される。ＮＳＡＩＤは、一般に以下の状態の対症的軽減に適応される：関節リウマチ、変形性関節症、炎症性関節症（例えば強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨痛、頭痛及び片頭痛、術後疼痛、炎症及び組織損傷による軽度から中等度の疼痛、発熱、腸閉塞及び腎疝痛。大部分のＮＳＡＩＤは酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤として作用し、シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）及びシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）イソ酵素の両方を阻害する。シクロオキシゲナーゼは、アラキドン酸（それ自体はホスホリパーゼＡ２によって細胞リン脂質二重層から誘導される）からのプロスタグランジン及びトロンボキサンの形成を触媒する。プロスタグランジンは、（数ある中でも特に）炎症過程におけるメッセンジャー分子として作用する。ＣＯＸ−２阻害剤には、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ及びバルデコキシブが含まれる。
【００３９】
「がん」という用語は、典型的には調節されない細胞増殖を特徴とする、哺乳動物における生理学的状態を指すか又は記述する。「腫瘍」は、一又は複数のがん性細胞を含む。がんの例には、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ系悪性腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。このようながんのより具体的な例には、扁平上皮がん（例えば、上皮の扁平上皮がん）、小細胞肺がん、非小細胞肺がん（「ＮＳＣＬＣ」）、肺の腺がん、及び肺の扁平上皮がんを含めた肺がん、腹膜のがん、肝細胞がん、胃腸がんを含めた胃がん（gastric又はstomach cancer）、膵臓がん、グリア芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝細胞がん、乳がん、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん又は子宮がん、唾液腺がん、腎臓がん又は腎がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝がん、肛門がん、陰茎がん、並びに頭頸部がんが挙げられる。
【００４０】
「血液悪性腫瘍（Hematological malignancies）」（英国の綴りは「Haematological」malignancies）は、血液、骨髄及びリンパ節に影響を及ぼすがんの種類である。これら３つは免疫系を介して密接に関連しているので、３つのうちの１つに影響を及ぼす疾患はしばしばその他にも影響する：リンパ腫はリンパ節の疾患であるが、しばしば骨髄に広がり、血液に影響を及ぼす。血液悪性腫瘍は悪性新生物（「がん」）であり、一般に血液学及び／又は腫瘍学の専門家によって治療される。一部の施設では「血液学／腫瘍学」は内科の一つの下位専門領域であるが、また別の施設ではそれらは別々の部門とみなされる（外科腫瘍医及び放射線腫瘍医も存在する）。必ずしも全ての血液障害が悪性（「がん性」）であるわけではない；これらの他の血液状態も血液専門医によって管理され得る。血液悪性腫瘍は２つの主要な血液細胞系統：骨髄細胞株及びリンパ系細胞株の何れかに由来しうる。骨髄細胞株は通常、顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージ及びマスト細胞を産生し、リンパ系細胞株はＢ、Ｔ、ＮＫ及び形質細胞を産生する。リンパ腫、リンパ性白血病、及び骨髄腫はリンパ球系に由来する一方、急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群並びに骨髄増殖性疾患は骨髄系を起源とする。白血病には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭＯＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）が含まれる。リンパ腫には、ホジキンリンパ腫（４つ全てのサブタイプ）及び非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ，全てのサブタイプ）が含まれる。
【００４１】
「化学療法剤」は、作用機序に関わらず、がんの治療において有用な化合物である。化学療法剤のクラスには、アルキル化剤、代謝拮抗物質、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍性抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、及びキナーゼ阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。化学療法剤には、「標的療法」及び従来の化学療法に使用されている化合物が含まれる。化学療法剤の例には、イブルチニブ（ＰＣＩ−３２７６５，Pharmacyclics Inc.；ＣＡＳ登録番号９３６５６３−９６−１，ＵＳ７５１４４４４）、イデラリシブ（先のＣＡＬ−１０１，ＧＳ１１０１，ＧＳ−１１０１，Gilead Sciences Inc.；ＣＡＳ登録番号１１４６７０２−５４−６）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標），Genentech/OSI Pharm.）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標），Sanofi-Aventis）、５-ＦＵ（フルオロウラシル、５-フルオロウラシル、ＣＡＳ番号５１−２１−８）、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標），Lilly）、ＰＤ-０３２５９０１（ＣＡＳ番号３９１２１０−１０−９，Pfizer)、シスプラチン（シス-ジアミン、ジクロロ白金（ＩＩ）、ＣＡＳ番号１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ番号４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標），Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標），Genentech）、テモゾロミド（４-メチル-５-オキソ-２,３,４,６,８-ペンタアザビシクロ[４.３.０]ノナ-２,７,９-トリエン-９-カルボキシアミド、ＣＡＳ番号８５６２２−９３−１，ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標），ＴＥＭＯＤＡＬ（登録商標），Schering Plough）、タモキシフェン（(Ｚ)-２-[４-(１,２-ジフェニルブタ-１-エニル)フェノキシ]-Ｎ,Ｎ-ジメチルエタンアミド、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標），ＩＳＴＵＢＡＬ（登録商標），ＶＡＬＯＤＥＸ（登録商標）)、及びドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、Ａｋｔｉ-１／２、ＨＰＰＤ、及びラパマイシンが含まれる。
【００４２】
化学療法剤はＢｃｌ-２阻害剤及びＪＡＫ阻害剤を含む。
【００４３】
「化学療法剤」の更なる例には、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標），Sanofi）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標），Millennium Pharm.）、スーテント（ＳＵＮＩＴＩＮＩＢ（登録商標），ＳＵ１１２４８，Pfizer）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標），Novartis）、イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標），Novartis）、ＸＬ-５１８（Ｍｅｋインヒビター、Exelixis, 国際公開第２００７／０４４５１５号)、ＡＲＲＹ-８８６（Ｍｅｋインヒビター、ＡＺＤ６２４４，Array BioPharma, Astra Zeneca)、ＳＦ-１１２６（ＰＩ３Ｋインヒビター、Semafore Pharmaceuticals）、ＢＥＺ-２３５（ＰＩ３Ｋインヒビター、Novartis）、ＸＬ-１４７（ＰＩ３Ｋインヒビター、Exelixis）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Novartis）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標），AstraZeneca）、ロイコボリン（フォリン酸）、ラパマイシン（シロリムス，ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標），Wyeth)、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標），ＧＳＫ５７２０１６，Glaxo Smith Kline）、ロナファーニブ（ＳＡＲＡＳＡＲＴＭ，ＳＣＨ６６３３６，Schering Plough)、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標），ＢＡＹ４３−９００６，Bayer Labs)、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標），AstraZeneca)、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標），ＣＰＴ−１１，Pfizer)、ティピファニブ（ＺＡＲＮＥＳＴＲＡＴＭ，Johnson & Johnson）、アブラキサンＴＭ(クレモフォールフリー)、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤(American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Il)、バンデタニブ（ｒＩＮＮ，ＺＤ６４７４，ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標），AstraZeneca)、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１；Sugen)、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標），Wyeth)、パゾパニブ（GlaxoSmithKline)、カンホスファミド（ＴＥＬＣＹＴＡ（登録商標），Telik)、チオテパ及びシクロスルファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標），ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））；スルホン酸アルキル、例えばブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン、例えばアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン)；カンプトテシン(合成アナログトポテカンを含む)；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ-１０６５(そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成アナログを含む)；クリプトフィシン(特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８)；ドラスタチン；デュオカルマイシン(合成アナログ、ＫＷ-２１８９及びＣＢ１-ＴＭ１を含む)；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロ���スチン、ニムスチン、及びラニムスチン(ranimnustine)；抗生物質、例えばエンジイン抗生物質(例えば、カリチアマイシン、カリチアマイシンガンマ１Ｉ、カリチアマイシンオメガＩ１(Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33：183-186)；ダイネミシン、ダイネミシンＡ；ビスホスホネート、例えばクロドロネート；エスペラミシン；並びにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団)、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン（chromomycinis）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６-ジアゾ-５-オキソ-Ｌ-ノルロイシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、２-ピロリノ-ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン)、エピルビシン、エソルビシン、イダラルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えばマイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えばメトトレキセート及び５-フルオロウラシル（５-ＦＵ）；葉酸アナログ、例えばデノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート；プリンアナログ、例えばフルダラビン、６-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えばアンシタビン、アザシチジン、６-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎薬、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸リプレニッシャー、例えばフロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エフロルニチン（elfornithine）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド、例えばメイタンシン及びアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（mopidanmol）；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２-エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（JHS Natural Products, Eugene, OR）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２,２',２”-トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（Ｔ-２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド(「Ａｒａ-Ｃ」)；シクロホスファミド；チオテパ；６-チオグアニン；メルカプ���プリン；メトトレキセート；シスプラチン及びカルボプラチンのような白金アナログ；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ-１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（NAVELBINE（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（XELODA（登録商標）, Roche）；イバンドロネート；ＣＰＴ-Ｉ１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド類、例えばレチノイン酸；及び上記の何れかの薬学的に許容可能な塩、酸及び誘導体が含まれる。
【００４４】
「化学療法剤」の定義にまた含まれるものは、（ｉ）腫瘍に対するホルモン作用を調節し又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体調節薬（ＳＥＲＭ）、例えばタモキシフェン（例えばＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；タモキシフェンクエン酸塩）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（トレミフェン（toremifine）クエン酸塩）；（ｉｉ）副腎においてエストロゲン生産を調節する、酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４(５)-イミダゾール類、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（メゲストロール酢酸エステル）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Pfizer)、ホルメスタン（formestanie）、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール)、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Novartis)、及びＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；AstraZeneca)；（ｉｉｉ）抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；並びにトロキサシタビン（１,３-ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤、例えばＭＥＫ阻害剤（国際公開第２００７／０４４５１５号）；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に例えばＰＫＣ-α、Ｒａｆ及びＨ-Ｒａｓのような異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えばオブリメルセン（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標），Genta Inc.）；（ｖｉｉ）リボザイム、例えばＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤；（ｖｉｉｉ）ワクチン、例えば遺伝子療法ワクチン、例えばＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、及びＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ-２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えばＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）抗血管新生剤、例えばベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標），Genentech）；及び（ｘ）上記の何れかの薬学的に許容可能な塩、酸及び誘導体である。
【００４５】
また「化学療法剤」の定義に含まれるものは、治療用抗体、例えばアレムツズマブ（Campath）、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標），Genentech）、セツキシマブ（アービタックス（登録商標），Imclone）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標），Amgen）、リツキシマブ（リツキサン（登録商標），Genentech/Biogen Idec）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧＴＭ，２Ｃ４，Genentech）、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標），Genentech）、トシツモマブ（ベキサール，Corixia）、及び抗体薬物コンジュゲートのゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標），Wyeth）である。
【００４６】
本発明のＢｔｋ阻害剤と組み合わせて化学療法剤として治療上の可能性を有するヒト化モノクローナル抗体には、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペルツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、及びビジリズマブが含まれる。
【００４７】
「代謝産物」は、特定される化合物又はその塩の体内での代謝を介して生成される産物である。化合物の代謝産物は、当該分野で知られている常套的技術を用いて同定することができ、その活性はここに記載されるもののような試験を使用して測定される。そのような産物は、例えば投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素切断等から生じうる。従って、本発明は、この発明の式Ｉの化合物を、その代謝産物を生じさせるのに十分な時間、哺乳動物と接触させることを含む方法によって産生される化合物を含む、本発明の化合物の代謝産物を含む。
【００４８】
「パッケージ挿入物」という用語は、治療用製品の市販包装中に慣例的に含まれる指示書であって、そのような治療用製品の適応症、用法、用量、投与、禁忌及び／又は使用に関する警告についての情報を含む指示書を指すために用いられる。
【００４９】
「キラル」という用語は、鏡像パートナーの重ね合わせが不可能な性質を有する分子を指す一方、「アキラル」という用語は、その鏡像パートナーに重ね合わせることができる分子を指す。
【００５０】
「立体異性体」という用語は、同一の化学組成を有するが、空間における原子又は基の配置に関して異なる化合物を指す。
【００５１】
「ジアステレオマー」は、２つ又はそれ以上のキラル中心を有する立体異性体であって、それらの分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物理的性質、例えば融点、沸点、スペクトル特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動及びクロマトグラフィなどの高分解能分析手法の下で分離しうる。
【００５２】
「エナンチオマー」は、互いに重ね合わせ不可能な鏡像である化合物の２つの立体異性体を指す。
【００５３】
ここで使用される立体化学的定義及び慣例は、一般にS. P. Parker編, McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York;及びEliel, E.及びWilen, S., 「Stereochemistry of Organic Compounds」, John Wiley & Sons,Inc., New York, 1994に従う。本発明の化合物は、不斉中心又はキラル中心を含んでいてもよく、従って異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物を含むがこれらに限定されない、本発明の化合物の全ての立体異性体形態が本発明の一部を形成することが意図されている。多くの有機化合物は光学活性な形態で存在し、すなわち平面偏光面を回転させる能力を有する。光学活性な化合物を説明する際に、接頭語Ｄ及びＬ、又はＲ及びＳは、そのキラル中心の周りにある分子の絶対配置を表すために用いられる。接頭語ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光面の回転のサインを示すために用いられ、（−）又は１は、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）又はｄの接頭語を有する化合物は右旋性である。所与の化学構造について、これらの立体異性体は、互いに鏡像であることを除いて同一である。また、特定の立体異性体はエナンチオマーと称されることもあり、そのような異性体の混合物はしばしばエナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と称され、化学反応又は化学過程において立体選択又は立体特異性が存在しない場合に生じ得る。「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」という用語は、光学活性を有さない、２つのエナンチオマー種の等モル混合物を指す。エナンチオマーは、超臨界流体クロマトグラフィ（ＳＦＣ）などのキラル分離法によってラセミ混合物から分離し得る。分離されたエナンチオマーのキラル中心における立体配置の割り当ては暫定的であり得、例示のために表１の構造に示しているが、Ｘ線結晶学データなどの立体化学が断定的に樹立される。
【００５４】
「互変異性体」又は「互変異性体形態」という用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能な、異なるエネルギーを有する構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピック互変異性体としても知られる）は、ケト−エノール異性化及びイミン-エナミン異性化などの、プロトンの移動による相互変換を含む。原子価互変異性体は、幾つかの結合電子の再編成による相互変換を含む。
【００５５】
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、生物学的に又はその他の点で望ましくないものではない塩を表す。薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。「薬学的に許容可能な」という語句は、物質又は組成物が、製剤を構成するその他の成分及び／又はその物質又は組成物で治療される哺乳動物と化学的及び／又は毒性学的に適合性でなければならないことを示す。
【００５６】
「薬学的に許容可能な酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸などの無機酸、並びに脂肪族、脂環式、芳香族、アリール-脂肪族、複素環式、炭素環式及びスルホン酸クラスの有機酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸「メシレート」、エタンスルホン酸、ｐ-トルエンスルホン酸及びサリチル酸などから選択される有機酸で形成される薬学的に許容可能な塩を表す。
【００５７】
「薬学的に許容可能な塩基付加塩」という用語は、有機又は無機塩基で形成される薬学的に許容可能な塩を表す。許容される無機塩基の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウム塩が含まれる。薬学的に許容可能な有機非毒性塩基から誘導される塩には、第一級、第二級及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２-ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ-エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂などの塩が含まれる。
【００５８】
「溶媒和物」は、一又は複数の溶媒分子と本発明の化合物との会合物又は複合体を指す。溶媒和物を形成する溶媒の例には、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、及びエタノールアミンが含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
「ＥＣ５０」という用語は半数最大効果濃度であり、インビボで特定の効果の最大値の５０％を得るために必要な特定の化合物の血漿濃度を表す。
【００６０】
「Ｋｉ」という用語は阻害定数であり、特定の阻害剤の受容体に対する絶対結合親和性を表す。これは競合結合アッセイを使用して測定され、競合リガンド（例えば放射性リガンド）が存在しない場合は、特定の阻害剤が受容体の５０％を占有する濃度に等しい。Ｋｉ値は、より高い値が指数関数的により大きな効力を示す、ｐＫｉ値（−ｌｏｇＫｉ）に対数的に変換することができる。
【００６１】
「ＩＣ５０」という用語は半数最大阻害濃度であり、インビトロで生物学的過程の５０％阻害を得るために必要な特定の化合物の濃度を表す。ＩＣ５０値は、より高い値が指数関数的により大きな効力を示す、ｐＩＣ５０値（−ｌｏｇ ＩＣ５０）に対数的に変換することができる。ＩＣ５０値は絶対値ではなく、実験条件、例えば用いられる濃度に依存し、チェン-プルソフ式（Biohem. Pharmacol.(1973)22:3099）を用いて絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換することができる。ＩＣ７０、ＩＣ９０等のような他のパーセント阻害パラメータも計算しうる。
【００６２】
「この発明の化合物」及び「本発明の化合物」及び「式Ｉの化合物」という用語は、式Ｉの化合物並びにその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物及び薬学的に許容可能な塩及びプロドラッグを含む。
【００６３】
式Ｉの化合物を含む、ここに与えられた任意の式又は構造もまた、水和物、溶媒和物、及びこのような化合物の多形体、並びにこれらの混合物を表すことを意図している。
【００６４】
式Ｉの化合物を含む、ここに与えられる任意の式又は構造は、化合物の非標識形態並びに同位体標識形態を表すことも意図される。同位体標識化合物は、一又は複数の原子が、選択された原子質量又は質量数を有する原子で置き換えられていることを除き、ここに与えられる式によって表される構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体、例えば、限定されないが、２Ｈ（ジュウテリウム、Ｄ）、３Ｈ（トリチウム）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ及び１２５Ｉなどが含まれる。本発明の様々な同位体標識化合物、例えば３Ｈ、１３Ｃ及び１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれているもの。そのような同位体標識化合物は、代謝試験、反応動態試験、薬剤もしくは基質組織分布アッセイを含む、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）もしくは単光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの検出もしくは画像技術において、又は患者の放射線治療において有用でありうる。ジュウテリウムで標識又は置換された本発明の治療用化合物は、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）に関して、改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝及び薬物動態）特性を有し得る。ジュウテリウムなどのより重い同位体による置換は、より高い代謝安定性から生じるある種の治療上の利点、例えばインビボ半減期の延長又は必要投与量の低減をもたらし得る。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ試験のために有用でありうる。この発明の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、一般に、非同位体標識試薬を容易に入手可能な同位体標識試薬に置き換えて、以下に記載されるスキーム又は実施例及び調製例で開示される手順を実施することによって調製できる。更に、より重い同位体、特にジュウテリウム（すなわち２Ｈ又はＤ）による置換は、より高い代謝安定性から生じるある種の治療上の利点、例えばインビボ半減期の延長又は必要投与量の低減又は治療指数の改善をもたらし得る。これに関連してジュウテリウムは式（Ｉ）の化合物における置換基とみなされることが理解される。そのようなより重い同位体、特にジュウテリウムの濃度は、同位体濃縮係数によって定義されうる。この発明の化合物において特定の同位体として特に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定な同位体を表すことが意図されている。特に明記されない限り、ある位置が「Ｈ」又は「水素」と特に指定されている場合、その位置はその天然の豊富な同位体組成で水素を有すると理解される。従って、この発明の化合物において、ジュウテリウム（Ｄ）と特に指定される任意の原子はジュウテリウムを表すことが意図される。
【００６５】
ヘテロアリールピリドン及びアザ-ピリドンアミド化合物
本発明は、Ｂｔｋによって調節される疾患、病態及び／又は障害の治療に潜在的に有用である、式Ｉａ−Ｉｉを含む式Ｉのヘテロアリールピリドン及びアザ-ピリドンアミド化合物、及びその薬学的製剤を提供する。
【００６６】
化合物は、式Ｉ
2016526551.tif 000004
又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩から選択され、上式中、
Ｘ１はＣＲ１又はＮであり；
Ｘ２はＣＲ２又はＮであり；
Ｘ３はＣＲ３又はＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)、Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)、Ｃ１−Ｃ６アルキル、-ＮＨ-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)、Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール、Ｃ６−Ｃ２０アリールであり；
Ｒ６は構造：
2016526551.tif 000005
2016526551.tif 000006
2016526551.tif 000007
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｙ１及びＹ２は、ＣＨ及びＮから独立して選択され；
ここで、アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＮ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ(ＣＨ３)３、-ＣＯＣＨ(ＯＨ)ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-ＮＯ２、=Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＣＦ３、-ＯＣＨＦ２、-ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-Ｓ(Ｏ)２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＳＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、１-メチルアゼチジン-３-イル)オキシ、Ｎ-メチル-Ｎ-オキセタン-３-イルアミノ、アゼチジン-１-イルメチル、ピロリジン-１-イル、及びモルホリノから独立して選択される一又は複数の基で置換されていてもよい。
【００６７】
式Ｉの化合物は、構造：
2016526551.tif 000008
を有し又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩であり、上式中、
Ｘ１はＣＲ１又はＮであり；
Ｘ２はＣＲ２又はＮであり；
Ｘ３はＣＲ３又はＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１-Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)、Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)、Ｃ１−Ｃ６アルキル、-ＮＨ-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)、Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール、Ｃ６−Ｃ２０アリールであり；
Ｒ６は構造：
2016526551.tif 000009
2016526551.tif 000010
2016526551.tif 000011
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｙ１及びＹ２は、ＣＨ及びＮから独立して選択され；
ここで、アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＮ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ(ＣＨ３)３、-ＣＯＣＨ(ＯＨ)ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-ＮＯ２、=Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-Ｓ(Ｏ)２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＳＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、１-メチルアゼチジン-３-イル)オキシ、Ｎ-メチル-Ｎ-オキセタン-３-イルアミノ、アゼチジン-１-イルメチル、ピロリジン-１-イル、及びモルホリノから独立して選択される一又は複数の基で置換されていてもよい。
【００６８】
式Ｉの化合物は、構造：
2016526551.tif 000012
を有し又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩であり、上式中、
Ｘ１はＣＲ１又はＮであり；
Ｘ２はＣＲ２又はＮであり；
Ｘ３はＣＲ３又はＮであり；
ここで、Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３の一つ又は二つはＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)、Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)、Ｃ１−Ｃ６アルキル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)、Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール、Ｃ６−Ｃ２０アリールであり；
Ｒ６は構造：
2016526551.tif 000013
2016526551.tif 000014
2016526551.tif 000015
2016526551.tif 000016
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｙ１及びＹ２は、ＣＨ及びＮから独立して選択され；
ここで、アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＮ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ(ＣＨ３)３、-ＣＯＣＨ(ＯＨ)ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-ＮＯ２、=Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-Ｓ(Ｏ)２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＳＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、１-メチルアゼチジン-３-イル)オキシ、Ｎ-メチル-Ｎ-オキセタン-３-イルアミノ、アゼチジン-１-イルメチル、ピロリジン-１-イル、及びモルホリノから独立して選択される一又は複数の基で置換されていてもよい。
【００６９】
化合物は、式Ｉ
2016526551.tif 000017
又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩から選択され、上式中、
Ｘ１はＣＲ１又はＮであり；
Ｘ２はＣＲ２又はＮであり；
Ｘ３はＣＲ３又はＮであり；
ここで、Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３の一つ又は二つはＮであり；
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ３−Ｃ１２カルボシクリル)、Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ２−Ｃ２０ヘテロシクリル)、Ｃ１−Ｃ６アルキル、-(Ｃ１−Ｃ６アルキル)-(Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール)、Ｃ１−Ｃ２０ヘテロアリール、Ｃ６−Ｃ２０アリールであり；
Ｒ６は、構造：
2016526551.tif 000018
2016526551.tif 000019
2016526551.tif 000020
2016526551.tif 000021
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｙ１及びＹ２は、ＣＨ及びＮから独立して選択され；
ここで、アルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、-ＣＮ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＦ３、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＮ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＮ、-ＣＨ２ＣＮ、-ＣＯ２Ｈ、-ＣＯＣＨ３、-ＣＯ２ＣＨ３、-ＣＯ２Ｃ(ＣＨ３)３、-ＣＯＣＨ(ＯＨ)ＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＮＨＣＨ３、-ＣＯＮ(ＣＨ３)２、-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣＯＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＯＣＨ３、-ＮＨＳ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)２ＣＯＮＨ２、-Ｎ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-ＮＯ２、=Ｏ、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＰ(Ｏ)(ＯＨ)２、-Ｓ(Ｏ)２Ｎ(ＣＨ３)２、-ＳＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)３Ｈ、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、１-メチルアゼチジン-３-イル)オキシ、Ｎ-メチル-Ｎ-オキセタン-３-イルアミノ、アゼチジン-１-イルメチル、ピロリジン-１-イル、及びモルホリノから独立して選択される一又は複数の基で置換されていてもよい。
【００７０】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、式Ｉａ−ｃ：
2016526551.tif 000022
の化合物が含まれる。
【００７１】
式Ｉの化合物の例示的実施態様にはまた式Ｉｄ−ｉ：
2016526551.tif 000023
の化合物が含まれる。
【００７２】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３の一つ又は二つがＮであるものが含まれる。
【００７３】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、式Ｉｃ−Ｉｉに示されるように、Ｘ１がＮであり、Ｘ２がＮであり、Ｘ３がＮであり、Ｘ１とＸ３がＮであり、Ｘ１とＸ２がＮであり、又はＸ２とＸ３がＮであるものが含まれる。
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、表１及び２の化合物が含まれる。
【００７４】
本発明の式Ｉの化合物は、不斉中心又はキラル中心を含んでいてもよく、従って異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物を含むがこれらに限定されない、本発明の化合物の全ての立体異性体形態が本発明の一部を形成することが意図される。
【００７５】
加えて、本発明は、シス−トランス（幾何）異性体及び配座異性体を含む、全てのジアステレオマーを包含する。例えば、式Ｉの化合物が二重結合又は縮合環を組み込んでいる場合、シス形態及びトランス形態、並びにそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。
【００７６】
ここで示す構造において、何れかの特定のキラル原子の立体化学が指定されていない場合は、全ての立体異性体が企図され、本発明の化合物として含まれる。立体化学が特定の立体配置を表す実線の楔形又は破線によって特定されている場合は、その立体異性体はそのように特定され、定義される。
【００７７】
本発明の化合物は、非溶媒和形態並びに水、エタノール等のような薬学的に許容可能な溶媒との溶媒和形態で存在し得、 本発明は溶媒和形態及び非溶媒和形態の双方を包含することが意図される。
【００７８】
本発明の化合物はまた異なる互変異性型で存在する場合があり、全てのそのような形態が本発明の範囲内に包含される。「互変異性体」又は「互変異性形態」なる用語は、低エネルギー障壁を介して相互転換可能な異なったエネルギーの構造異性体を意味する。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られる）は、ケト-エノール及びイミン-エナミン異性化のようなプロトンの移動を介する相互変換を含む。原子価互変異性体は結合電子の幾らかの再構築による相互変換を含む。
【００７９】
生物学的評価
酵素活性（又は他の生物学的活性）の阻害剤としての式Ｉの化合物の相対的効果は、各々の化合物が活性を所定の程度まで阻害する濃度を決定し、ついでその結果を比較することによって、確認することができる。典型的には、好ましい決定は、生化学アッセイで活性の５０％を阻害する濃度、すなわち５０％阻害濃度又は「ＩＣ５０」である。ＩＣ５０値の決定は、当該分野で知られている一般的技術を使用して達成できる。一般に、ＩＣ５０は、ある範囲の濃度の被験阻害剤の存在下で所与の酵素の活性を測定することによって、決定することができる。ついで、実験的に得られた酵素活性の値を、使用した阻害剤濃度に対してプロットする。５０％酵素活性（如何なる阻害剤も存在しない場合の活性と比較）を示す阻害剤の濃度をＩＣ５０値とする。同様に、他の阻害濃度を、活性の適切な測定を介して定義することができる。例えば、幾つかの設定では、９０％阻害濃度、すなわちＩＣ９０等を樹立することが望ましい場合がある。
【００８０】
式Ｉの化合物を標準的な生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイによって試験した（実施例９０１）。
【００８１】
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂｔｋキナーゼアッセイのための一般的な手順は、ラモス細胞Ｂｔｋアッセイ（実施例９０２）である。
【００８２】
標準的なＢ細胞増殖アッセイを、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製したＢ細胞を用いて式Ｉの化合物を試験するために使用できる（実施例９０３）。
【００８３】
標準的なＴ細胞増殖アッセイを、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製したＴ細胞を用いて式Ｉの化合物を試験するために使用できる（実施例９０４）。
【００８４】
ＣＤ８６阻害アッセイを、８〜１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製した全マウス脾細胞を使用して、Ｂ細胞活性の阻害に関して式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０５）。
【００８５】
Ｂ-ＡＬＬ細胞生存アッセイを、培養下の生存可能なＢ-ＡＬＬ細胞の数を測定するために式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０６）。
【００８６】
ＣＤ６９全血アッセイを、表面ＩｇＭをヤギＦ（ａｂ'）２抗ヒトＩｇＭと架橋することによって活性化したヒト全血中のＢリンパ球によるＣＤ６９の産生を阻害する化合物の能力を測定するために式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０７）。ＣＤ６９は、リンパ球の移動及びサイトカイン分泌に関与するＩＩ型Ｃ型レクチンである。ＣＤ６９発現は、白血球活性化の最初期に利用可能な指標の一つであり、その迅速な誘導は転写活性化を介して起こる（Vazquez等(2009) Jour. of Immunology, ２００９年１０月１９日に公開。doi：10.4049/jimmunol.0900839）。選択的Ｂｔｋ阻害剤による抗原受容体刺激の濃度依存的阻害は、リンパ球活性化マーカーであるＣＤ６９の細胞表面発現を誘導する（Honigberg等(2010) Proc. Natl. Acad. Sci. 107(29)：13075-13080）。従って、選択的Ｂｔｋ阻害剤によるＣＤ６９阻害は、所定のＢ細胞障害の治療効果と相関しうる。ＣＤ６９Ｈｕ血液ＦＡＣＳ ＩＣ７０値を、表１及び２において例示的な式Ｉの化合物に対して提示する。
【００８７】
式Ｉの化合物の抗炎症効果はまたマウス又はラットにおけるコラーゲン誘発関節炎 （ＣＩＡ）アッセイ（William RO (2004) Methods of Mol. Med. 98:207-216）によって試験することができる。コラーゲン誘発関節炎は、病因の問題に対処し、治療標的を確証するために広く使用される関節リウマチ（ＲＡ）の動物モデルである。関節炎は、通常は、アジュバント中の自己又は異種性ＩＩ型コラーゲンで免疫化することによってマウス又はラットにおいて誘発される。コラーゲン誘発関節炎に対する感受性は主要組織適合抗原クラスＩＩ遺伝子に強く関連しており、関節炎の発症はＩＩ型コラーゲンに対する強いＴ細胞及びＢ細胞応答を伴う。ＣＩＡの主な病理的特徴は、多形核及び単核細胞の浸潤を伴う増殖性滑膜炎、パンヌス形成、軟骨退化、骨びらん、及び線維症を含む。ＲＡにおけるように、炎症促進性サイトカイン、例えば腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びインターロイキン（ＩＬ）-１βがＣＩＡのマウスの関節炎の関節に豊富に発現され、これら分子の遮断が疾患重篤度の減少をもたらす。試験対象の尾部の基部に式Ｉの化合物の製剤を注射し、関節炎の発症をフロイント不完全アジュバント中のコラーゲンの投与によって同時発生（ブースト）させる。足及び肢関節の炎症を、足の評価を含む採点システムを使用して定量化する。
【００８８】
式Ｉの例示的な化合物の細胞傷害性又は細胞増殖抑制活性は、増殖している哺乳動物腫瘍細胞株を細胞培地中で樹立し、式Ｉの化合物を添加して、細胞を約６時間〜約５日間培養し、細胞生存率を測定することによって測定できる（実施例９０８）。細胞に基づくインビトロアッセイは、生存率、すなわち増殖（ＩＣ５０）、細胞傷害性（ＥＣ５０）及びアポトーシスの誘導（カスパーゼ活性化）を測定するために使用され、血液悪性腫瘍及び固形腫瘍に対する臨床効果を予測する上で有用でありうる。
【００８９】
式Ｉの化合物と化学療法剤との組合せのインビトロ効力は、実施例９０８の細胞増殖アッセイ；Ｐｒｏｍｅｇａ社（Madison,WI）から市販されているＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイによって測定することができる。この均一系アッセイ法は、甲虫類（Coleoptera）ルシフェラーゼの組換え発現に基づき（米国特許第５５８３０２４号；米国特許第５６７４７１３号；米国特許第５７００６７０号）、代謝的に活性な細胞の指標である、存在するＡＴＰの定量化に基づいて培養下の生細胞の数を決定する（Crouch等(1993) J. Immunol. Meth. 160：81-88；米国特許第６６０２６７７号）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを９６又は３８４ウェル形式で実施し、自動ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に適用できるようにした（Cree等(1995）AntiCancer Drugs 6：398-404）。均一系アッセイの手順は、単一の試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を、血清添加培地で培養した細胞に直接添加することを含む。細胞洗浄、培地の除去及び複数のピペット分注工程は必要とされない。該システムは、試薬を添加し、混合した後、１０分で、３８４ウェル形式において僅か１５細胞／ウェルを検出する。
【００９０】
均一な「添加−混合−測定（add-mix-measure）」形式は、細胞溶解と、存在するＡＴＰの量に比例した発光シグナルの生成とをもたらす。ＡＴＰの量は、培養物中に存在する細胞の数に直接比例する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、ルシフェラーゼ反応によって生じる「グロー型」発光シグナルを生成し、これは、使用される細胞型及び培地に依存して、一般に５時間を超える半減期を有する。生細胞は相対発光量（ＲＬＵ）に反映される。基質である甲虫ルシフェリンは、同時のＡＴＰのＡＭＰへの変換及び光子生成を伴って、組換えホタルルシフェラーゼにより酸化的に脱カルボキシル化される。半減期の延長は、試薬注入器を使用する必要性を排除し、複数のプレートの連続又はバッチモード処理に対して柔軟性を提供する。この細胞増殖アッセイは、様々なマルチウェル形式、例えば９６又は３８４ウェル形式で使用することができる。データは、照度計又はＣＣＤカメラ撮影装置によって記録することができる。発光出力は、経時的に測定される、相対発光量（ＲＬＵ）として示される。
【００９１】
式Ｉの例示的な化合物及び化学療法剤との組合せの抗増殖作用は、所定の血液腫瘍細胞株に対するＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）アッセイ（実施例９０８）によって測定される。試験した化合物及び組合せについてＥＣ５０値が確立される。
【００９２】
表１及び２の例示的な式Ｉの化合物を本発明の方法に従って作製し、特徴付けし、Ｂｔｋの阻害に関して試験した。それらは以下の構造及び対応する名称を有する（ChemDraw Ultra, Version9.0.1、及びChewBioDraw, Version11.0, CambridgeSoft Corp., Cambridge MA）。複数の名称が式Ｉの化合物又は中間体に関連している場合は、化学構造が化合物を定義するものとする。
【００９３】
2016526551.tif 000024
2016526551.tif 000025
2016526551.tif 000026
2016526551.tif 000027
2016526551.tif 000028
2016526551.tif 000029
2016526551.tif 000030
【００９４】
2016526551.tif 000031
2016526551.tif 000032
2016526551.tif 000033
2016526551.tif 000034
2016526551.tif 000035
2016526551.tif 000036
2016526551.tif 000037
2016526551.tif 000038
2016526551.tif 000039
2016526551.tif 000040
2016526551.tif 000041
【００９５】
式Ｉの化合物の投与
本発明の化合物は、治療される病態に適した任意の経路によって投与されうる。適切な経路には、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外を含む）、経皮、直腸、経鼻、局所（口腔及び舌下を含む）、膣、腹腔内、肺内及び鼻腔内が含まれる。局所免疫抑制治療に関しては、化合物を、移植前に阻害剤を灌流すること又は移植片を阻害剤と接触等させることを含む、病巣内投与によって、投与しうる。好ましい経路は、例えば受容者の状態によって異なりうることが認識される。化合物を経口投与する場合は、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と共に丸剤、カプセル、錠剤等として製剤化しうる。化合物を非経口投与する場合は、薬学的に許容可能な非経口ビヒクルと共に、また以下で詳述されるように、注射用単位投薬形態で製剤化されうる。
【００９６】
ヒト患者を治療する用量は、式Ｉの化合物約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲でありうる。典型的な用量は、化合物約１００ｍｇ〜約３００ｍｇでありうる。用量は、特定の化合物の吸収、分布、代謝及び排泄を含む薬物動態及び薬力学的性質に依存して、１日１回（ＱＩＤ）、１日２回（ＢＩＤ）、又はそれ以上の頻度で、投与されうる。加えて、毒性因子も投与量及び投与レジメンに影響を及ぼしうる。経口投与される場合、丸剤、カプセル又は錠剤を特定の期間１日１回又はより少ない頻度で摂取しうる。レジメンは、多数の治療サイクルにわたって繰り返されうる。
【００９７】
式Ｉの化合物での治療方法
本発明の式Ｉの化合物は、免疫障害、心血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌障害又は神経障害などのＢｔｋに関連する異常な細胞増殖、機能又は挙動から生じる疾患又は障害に罹患しており、よって上で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療されうる、ヒト又は動物患者を治療するために有用である。がんに罹患しているヒト又は動物患者も、上で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療されうる。患者の病態は、それにより改善又は軽減されうる。
【００９８】
式Ｉの化合物は、全身及び局所炎症、免疫炎症性疾患、例えば関節リウマチ、免疫抑制、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）血管炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬などの、哺乳動物細胞、生物又は関連する病的状態のインビトロ、インサイツ及びインビボ診断又は治療のため、並びに全般的な関節保護作用のために有用でありうる。
【００９９】
本発明の方法は、また、関節炎疾患、例えば関節リウマチ、単関節関節炎、変形性関節症、痛風性関節炎、脊椎炎；ベーチェット病；敗血症、敗血症性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性敗血症、グラム陽性敗血症、及び毒素ショック症候群；敗血症、外傷又は出血に続発する多臓器傷害症候群；眼科障害、例えばアレルギー性結膜炎、春季結膜炎、ブドウ膜炎、及び甲状腺関連眼障害；好酸球性肉芽腫；肺又は呼吸器障害、例えば喘息、慢性気管支炎、アレルギー性鼻炎、ＡＲＤＳ、慢性肺炎症疾患（例えば慢性閉塞性肺疾患）、珪肺症、肺サルコイドーシス、胸膜炎、肺胞炎、血管炎、気腫、肺炎、気管支拡張症、及び肺酸素毒性；心筋、脳又は四肢の再灌流傷害；線維症、例えば嚢胞性線維症；ケロイド形成又は瘢痕組織形成；アテローム性動脈硬化症；自己免疫疾患、例えば全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫性甲状腺炎、多発性硬化症、一部の形態の糖尿病、及びレイノー症候群；及び移植片拒絶障害、例えばＧＶＨＤ及び同種移植拒絶反応；慢性糸球体腎炎；炎症性腸疾患、例えば慢性炎症性腸疾患（ＣＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、及び壊死性腸炎；炎症性皮膚疾患、例えば接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、乾癬、又はじん麻疹；感染に起因する発熱及び筋痛；中枢神経系又は末梢神経系炎症性障害、例えば髄膜炎、脳炎、及び軽微な外傷に起因する脳又は脊髄損傷；シェーグレン症候群；白血球血管外遊出を含む疾患；アルコール性肝炎；細菌性肺炎；抗原抗体複合体媒介性疾患；循環血液量減少性ショック；Ｉ型糖尿病；急性及び遅延型過敏症；白血球悪液質及び転移に起因する疾患状態；熱傷；顆粒球輸血関連症候群；並びにサイトカイン誘発性毒性などの疾患を治療することを含む。
【０１００】
また、本発明の方法は、乳がん、卵巣がん、子宮頸がん、前立腺がん、精巣がん、尿生殖路がん、食道がん、喉頭がん、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃がん、皮膚がん、角化棘細胞腫、肺がん、類表皮がん、大細胞がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、小細胞がん、肺腺がん、骨がん、結腸がん、腺腫、膵臓がん、腺がん、甲状腺がん、濾胞状がん、未分化がん、乳頭状がん、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱がん、肝臓がん及び胆道がん、腎臓がん、膵臓がん、骨髄障害、リンパ腫、へアリーセルがん、口腔がん、鼻咽頭がん、咽頭がん、口唇がん、舌がん、口がん、小腸がん、結腸直腸がん、大腸がん、直腸がん、脳及び中枢神経系のがん、ホジキン病、白血病、気管支がん、甲状腺がん、肝臓及び肝内胆管のがん、肝細胞がん、胃がん、神経膠腫／グリア芽細胞腫、子宮内膜がん、黒色腫、腎臓及び腎盂のがん、膀胱がん、子宮体がん、子宮頸がん、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、骨髄性白血病、口腔及び咽頭のがん、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、並びに絨毛結腸腺腫から選択されるがんを治療することを含む。
【０１０１】
本発明の方法は、再灌流傷害、すなわち組織もしくは器官が虚血期間を経験し、その後再灌流が起こる状況から生じる傷害を有するか又は該傷害を受けうる対象を治療する上で有用性を有しうる。「虚血」という用語は、動脈血の流入の障害に起因する局所的な組織貧血を指す。一過性の虚血とそれに続く再灌流は、特徴として患部の血管の内皮を介した好中球の活性化及び遊出を生じさせる。活性化された好中球の蓄積は、次に、反応性酸素代謝産物の生成をもたらし、これが、関与する組織又は器官の成分を損傷する。この「再灌流傷害」という現象は、一般に血管発作（全虚血及び局所虚血を含む）、出血性ショック、心筋虚血又は心筋梗塞、臓器移植、及び脳血管攣縮などの病態に関連する。例を挙げると、再灌流傷害は、一度血液の受け入れを止められた心臓が再灌流し始める、心臓バイパス手術の終了時又は心停止の間に起こる。Ｂｔｋ活性の阻害は、そのような状況における再灌流傷害の量の低減を生じさせうると期待される。
【０１０２】
薬学的製剤
ヒトを含む哺乳動物の治療処置に本発明の化合物を使用するために、本発明の化合物は通常、標準的な医薬慣例に従って薬学的組成物として製剤化される。本発明のこの態様によれば、この発明の化合物を薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と共に含有する薬学的組成物が提供される。
【０１０３】
典型的な製剤は、本発明の化合物と担体、希釈剤又は賦形剤を混合することによって調製される。適切な担体、希釈剤及び賦形剤は当業者に周知であり、炭水化物、ワックス、水溶性及び／又は膨潤性ポリマー、親水性又は疎水性物質、ゼラチン、油、溶媒、水等の材料を含む。使用される特定の担体、希釈剤又は賦形剤は、本発明の化合物が適用される手段及び目的に依存する。溶媒は一般に、哺乳動物に投与するのに安全であると当業者によって認められた（ＧＲＡＳ）溶媒に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水及び水中で可溶性又は混和性である他の非毒性溶媒などの非毒性水性溶媒である。適切な水性溶媒には、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）等及びそれらの混合物が含まれる。製剤はまた、薬物（すなわち本発明の化合物又はその薬学的組成物）の洗練された体裁を与えるため又は医薬品（すなわち医薬）の製造を助けるために一又は複数の緩衝剤、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁化剤、保存料、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味料、香料、香味料及び他の既知の添加剤も含みうる。
【０１０４】
製剤は、一般的な溶解及び混合手順を使用して調製されうる。例えば、バルク原薬（すなわち、本発明の化合物又は該化合物の安定化形態（例えばシクロデキストリン誘導体又は他の既知の複合体形成剤との複合体）を、上述した賦形剤の一又は複数の存在下で適切な溶媒に溶解する。本発明の化合物は、典型的には医薬剤形に製剤化され、薬物の容易に制御可能な投与量を提供し、患者が処方されたレジメンを順守することを可能にする。
【０１０５】
適用のための薬学的組成物（又は製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に依存して様々な方法で包装されうる。一般に、流通のための製品は、適切な形態の薬学的製剤がその中に収められた容器を含む。適切な容器は当業者に周知であり、ビン（プラスチック及びガラス）、小袋、アンプル、プラスチックバッグ、金属円筒等のような材料を含む。容器はまた、包装の内容物の不注意な開封を防ぐために不正開封防止の仕組みも含みうる。加えて、容器には、容器の内容物を記載するラベルがその表面に貼付される。ラベルはまた適切な警告も含みうる。
【０１０６】
本発明の化合物の薬学的製剤は、様々な投与経路及び投与のタイプに合わせて調製されうる。例えば、所望の程度の純度を有する式Ｉの化合物は、場合により、凍結乾燥製剤、破砕粉末、又は水溶液の形態で、薬学的に許容可能な希釈剤、担体、賦形剤又は安定剤と混合されうる（Remington's Pharmaceutical Sciences(1980)16版, Osol, A編）。製剤化は、適切なｐＨで周囲温度にて、及び所望の純度で、生理学的に許容される担体、すなわち使用される投与量及び濃度で受容者に非毒性である担体と混合することによって、実施されうる。製剤のｐＨは、主として特定の用途及び化合物の濃度に依存するが、約３から約８の範囲でありうる。ｐＨ５の酢酸緩衝液の製剤が適切な実施態様である。
【０１０７】
化合物は通常、固体組成物、凍結乾燥製剤又は水溶液として保存することができる。
【０１０８】
本発明の薬学的組成物は、良質の医療のための原則と一致する方法で、すなわち量、濃度、スケジュール、過程、ビヒクル及び投与経路で製剤化され、用量決定され、投与される。これに関連して考慮する因子には、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与の日程計画、及び医師に知られている他の因子が含まれる。投与される化合物の「治療有効量」はそのような考慮によって決定され、過剰増殖性障害を改善するか又は治療するのに必要な最小量である。
【０１０９】
一般的な提案として、各用量につき非経口投与される阻害剤の初期の薬学的有効量は、約０．０１−１０００ｍｇ／ｋｇの範囲、すなわち１日当たり患者の体重１ｋｇにつき約０．１−２０ｍｇの範囲内であり、使用される化合物の典型的な初期範囲は０．３から１５ｍｇ／ｋｇ／日である。
【０１１０】
許容される希釈剤、担体、賦形剤及び安定剤は、用いられる投与量及び濃度で受容者に非毒性であり、緩衝剤、例えばリン酸、クエン酸及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；保存料（例えば塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルもしくはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチルもしくはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３-ペンタノール；及びｍ-クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリシン；グルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む単糖類、二糖類及び他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属錯体（例えば亜鉛タンパク質錯体）；及び／又は非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＴＭもしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。活性な薬学的成分はまた、例えばコアセルベーション技術によって又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、コロイド状薬物送達システム（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中又はマクロエマルジョン中の、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリ(メタクリル酸メチル)マイクロカプセルに封入しうる。そのような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16版, Osol, A編に開示されている。
【０１１１】
式Ｉの化合物の徐放性調製物が調製されうる。徐放性調製物の適切な例には、式Ｉの化合物を含む固体疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが含まれ、このマトリックスは成形品、例えばフィルム、又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ(２-ヒドロキシエチル-メタクリレート）、又はポリ(ビニルアルコール)）、ポリラクチド（米国特許第３７７３９１９号）、Ｌ-グルタミン酸とγ-エチル-Ｌ-グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン-酢酸ビニル、分解性乳酸-グリコール酸コポリマー、例えばＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴＴＭ（乳酸-グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドからなる注入可能なミクロスフィア）、及びポリ-Ｄ-(-)-３-ヒドロキシ酪酸が含まれる。
【０１１２】
製剤は、ここで詳述する投与経路に適するものを含む。製剤は、単位剤形で簡便に提供することができ、薬学分野で周知の方法の何れかによって調製されうる。技術及び製剤は一般に、Remington's Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Co., Easton, PA）に見出される。そのような方法は、活性成分を、一又は複数の副成分を構成する担体と混合する工程を含む。一般に製剤は、活性成分を液体担体又は微粉化された固体担体又はその両方と均一かつ密接に混合し、ついで、必要な場合は、生成物を成形することによって、調製される。
【０１１３】
経口投与に適する式Ｉの化合物の製剤は、各々が所定量の式Ｉの化合物を含む丸剤、カプセル、カシェ剤又は錠剤などの個別単位として調製されうる。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒などの自由流動形態の活性成分を、場合により結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、保存料、表面活性剤又は分散剤と混合して、適切な機械で圧縮することによって調製されうる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末活性成分の混合物を適切な機械で成形することによって作製されうる。錠剤は、場合により被覆するか又は割線を入れてもよく、また場合により活性成分の持続放出又は制御放出を提供するように製剤化される。錠剤、トローチ剤、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、乳剤、ハードもしくはソフトカプセル、例えばゼラチンカプセル、シロップ剤又はエリキシル剤が経口使用のために調製されうる。経口使用を意図する式Ｉの化合物の製剤は、薬学的組成物の製造のための当該野で知られている任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味料、香味料、着色剤及び保存料を含む一又は複数の作用物質を含みうる。錠剤の製造に適した非毒性の薬学的に許容可能な賦形剤と混合して活性成分を含む錠剤は許容される。これらの賦形剤は、例えば不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤、例えばトウモロコシデンプン又はアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチン又はアカシア；及び潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクでありうる。錠剤は被覆されていなくてもよく、又は消化管での崩壊及び吸着を遅らせ、それにより長期間にわたって持続的な作用を提供するためにマイクロカプセル化を含む既知の技術によって被覆されうる。例えば、時間遅延物質、例えばモノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルを単独で又はワックスと共に用いることができる。
【０１１４】
眼又は他の外部組織、例えば口及び皮膚の治療のために、製剤は、好ましくは、例えば０．０７５−２０％ｗ／ｗの量で活性成分を含む局所軟膏又はクリームとして施用される。軟膏として製剤化する場合は、活性成分をパラフィン系又は水混和性の軟膏基剤と共に使用しうる。あるいは、活性成分を水中油型クリーム基剤を有するクリームに製剤化しうる。所望される場合、クリーム基剤の水性相は、多価アルコール、すなわち２個又はそれ以上のヒドロキシル基を有するアルコール、例えばプロピレングリコール、ブタン１,３-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）、並びにそれらの混合物を含みうる。局所製剤は、望ましくは、皮膚又は他の患部を介した活性成分の吸収又は浸透を促進する化合物を含みうる。そのような皮膚浸透促進剤の例には、ジメチルスルホキシドと関連アナログが含まれる。この発明のエマルジョンの油性相は、既知の成分から既知の方法で構成されうる。該相は単に乳化剤だけを含んでもよいが、望ましくは、少なくとも一種の乳化剤と、脂肪又は油、あるいは脂肪と油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤として働く親油性乳化剤と共に含まれる。油と脂肪の両方を含むことも好ましい。合わせて考慮すると、安定剤を伴うか又は伴わない乳化剤は、いわゆる乳化ワックスを構成し、ワックスは油脂と共に、クリーム製剤の油性分散相を形成する、いわゆる乳化軟膏基剤を構成する。本発明の製剤における使用に適した乳化剤及び乳化安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。
【０１１５】
式Ｉの化合物の水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合せしめられて活性物質を含む。そのような賦形剤には、懸濁剤、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアカシアガム、及び分散又は湿潤剤、例えば天然に生じるホスファチド（例えばレシチン）、脂肪酸とアルキレンオキシドの縮合産物（例えばポリオキシエチレンステアレート）、長鎖脂肪族アルコールとエチレンオキシドとの縮合産物（例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール）、脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとエチレンオキシドとの縮合産物（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）が含まれる。水性懸濁液はまた一又は複数の保存料、例えばエチル又はｎ-プロピルｐ-ヒドロキシ-ベンゾエート、一又は複数の着色剤、一又は複数の香味剤及び一又は複数の甘味料、例えばスクロース又はサッカリンを含みうる。
【０１１６】
式Ｉの化合物の薬学的組成物は、滅菌された注射用調製物の形態、例えば滅菌注射用水性又は油性懸濁液の形態であってもよい。この懸濁液は上に述べた好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤を使用して既知の技術に従って処方することができる。滅菌された注射用調製物はまた１,３-ブタンジオール溶液又は凍結乾燥粉末として調製したもののように、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用溶液又は懸濁液であってもよい。用いることができる許容可能なビヒクル及び溶媒は水、リンガー液及び等張塩化ナトリウム溶液である。また、滅菌固定化油を溶媒又は懸濁媒体として簡便に用いることができる。この目的に対して、合成のモノ-又はジグリセリドを含む任意のブランドの固定化油を用いることができる。また、オレイン酸のような脂肪酸も同様に注射剤の調製に使用することができる。
【０１１７】
単位投薬形態をつくるために担体物質と混合されうる活性成分の量は、処置される宿主と特定の投与形式に応じて変わる。例えば、ヒトへの経口投与のための時間放出製剤は、全組成物の約５から約９５％（重量：重量）と変わりうる適切で簡便な量の担体物質と共に配合されておよそ１から１０００ｍｇの活性物質を含みうる。薬学的組成物は投与のために容易に測定可能な量をもたらすように調製することができる。例えば、静脈点滴のための水溶液は、約３０ｍＬ／ｈｒの割合で適した体積の点滴が生じうるようにするために、溶液１ミリリットル当たり約３から５００μｇの活性成分を含みうる。
【０１１８】
非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤及び意図したレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質を含みうる水性及び非水性滅菌注射用溶液；及び懸濁剤及び増粘剤を含みうる水性及び非水性滅菌懸濁液が含まれる。
【０１１９】
眼への局所投与に適した製剤には、好適な担体、特に活性成分のための水性溶媒に、活性成分が溶解又は懸濁させられた点眼液がまた含まれる。活性成分はそのような製剤中に、好ましくは０．５から２０％ｗ／ｗ、例えば０．５から１０％ｗ／ｗ、特に約１．５％ｗ／ｗの濃度で存在する。
【０１２０】
口への局所投与に適した製剤には、香味基剤、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ；ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアのような不活性基剤に活性成分を含むパスティユ；及び適切な液体担体に活性成分を含むうがい薬が含まれる。
【０１２１】
直腸投与のための製剤は、例えばココアバター又はサリチレートを含む好適な基剤を用いて座薬として提供することができる。
【０１２２】
肺内又は経鼻投与に適した製剤は、例えば０．１から５００ミクロン（例えば０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロン等々のような増分ミクロンで０．１から５００ミクロンの範囲の粒子径を含む）の範囲の粒子径を有し、これが鼻経路を通る迅速な吸入又は肺胞嚢に達するように口からの吸入によって投与される。好適な製剤には、活性成分の水性又は油性溶液が含まれる。エアゾール又は乾燥粉末投与に適した製剤は常法によって調製することができ、以下に記載されるような疾患の治療又は予防にこれまで使用されている化合物のような他の治療剤と共に送達できる。
【０１２３】
膣投与に適した製剤は、活性成分に加えて、当該分野で適切であることが知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤として提供することができる。
【０１２４】
製剤は、単位投薬又は複数投薬容器、例えば密封アンプル及びバイアルに包装することができ、使用直前に注射用の滅菌液体担体、例えば水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保存することができる。即時混合注射溶液及び懸濁液は既に記載された種類の滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製される。好適な単位投薬製剤は、活性成分の、上に記載されたような毎日の投薬又は毎日の部分用量単位、又はその適切な画分を含むものである。
【０１２５】
本発明は更に獣医学的担体と共に上述の少なくとも一の活性成分を含有する獣医学的組成物を提供する。獣医学的担体は組成物を投与する目的に有用な物質であり、不活性な又は獣医学分野で許容され、活性成分と相容性がある固形、液体又は気体物質でありうる。これらの獣医学的組成物は非経口的、経口的又は任意の他の所望の経路によって投与することができる。
【０１２６】
併用療法
式Ｉの化合物は、単独で、又は例えば炎症性又は過剰増殖性疾患（例えば、がん）のようなここに記載の疾患又は障害の治療のための他の治療剤と組み合わせて用いることができる。所定の実施態様では、式Ｉの化合物は、薬学的併用製剤において又は併用療法として投薬レジメンで、抗炎症性又は抗過剰増殖特性を有するか又は炎症性、免疫反応性疾患、又は過剰増殖性疾患（例えば、がん）を治療するのに有用である第二の化合物と組み合わせられる。更なる治療剤はＢｃｌ-２阻害剤、ＪＡＫ阻害剤、抗炎症剤、免疫調節剤、化学療法剤、アポトーシス増強剤、神経栄養因子、心血管疾患治療剤、肝疾患治療剤、抗ウイルス剤、血液障害治療剤、糖尿病治療剤、及び免疫不全疾患治療剤でありうる。第二の治療剤はＮＳＡＩＤ抗炎症剤でありうる。第二の治療剤は化学療法剤でありうる。薬学的併用製剤又は投薬レジメンの第２の化合物は、好ましくは、それらが互いに悪影響を及ぼさないように、式Ｉの化合物に対して相補的な活性を有する。そのような化合物は意図する目的に効果的な量で組合せられて好適に存在する。一実施態様では、この発明の組成物は、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又は薬学的に許容可能な塩、又はプロドラッグを、ＮＳＡＩＤ等の治療剤と組合せて、含有する。
【０１２７】
併用療法は、同時又は逐次レジメンとして投与されうる。逐次的に投与される場合は、組合せを２回又はそれ以上の投与で投与しうる。併用投与には、別々の製剤又は単一薬学的製剤を使用する同時投与、及び何れかの順序での継続投与が含まれ、ここで好ましくは、両方（又は全部）の活性薬剤が同時にそれらの生物学的活性を及ぼす期間が存在する。
【０１２８】
上記同時投与薬剤の何れかについての適切な投与量は、現在使用されている投与量であり、新たに同定された作用物質及び他の治療薬又は処置の組合せ作用（相乗作用）に起因して低減されうる。
【０１２９】
併用療法は、「相乗作用」をもたらす場合があり、「相乗作用性」、すなわち活性成分を一緒に使用した場合に達成される作用が、化合物を別々に使用することから生じる作用の合計よりも大きいと証明される場合がある。相乗作用は、活性成分が、（１）共製剤され、配合単位投与製剤中で同時に投与もしくは送達され；（２）別々の製剤として交互にもしくは並行して送達され；あるいは（３）何らかの他のレジメンによる場合に、達成されうる。交互療法で送達される場合、相乗効果は、化合物が、例えば別々の注射器での異なる注射、別々の丸剤もしくはカプセル、又は別々の注入によって、逐次的に投与又は送達される場合に、達成されうる。一般に、交互療法の間は、各々の活性成分の有効投与量を逐次的に、すなわち連続的に投与するが、併用療法では、２つ又はそれ以上の活性成分の有効投与量を一緒に投与する。
【０１３０】
治療の特定の実施態様では、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグは、ここに記載されるものなどの他の治療薬、ホルモン剤又は抗体薬剤と組み合わせることができ、並びに外科療法及び放射線療法と組み合わせてもよい。本発明による併用療法は、従って、式Ｉの少なくとも一つの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグの投与と、少なくとも一つの他のがん治療法の使用を含む。式Ｉの化合物及びその他の医薬的に活性な治療薬の量並びに投与の相対的なタイミングは、所望の併用治療効果を達成するように選択される。
【０１３１】
式Ｉの化合物の代謝産物
本発明の範囲にまた含まれるものは、ここに記載の式Ｉのインビボ代謝産物である。そのような産物は、例えば投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素切断等から生じうる。従って、本発明は、この発明の化合物を、その代謝産物を生じさせるのに十分な期間、哺乳動物と接触させることを含む方法によって生成される化合物を含む、式Ｉの化合物の代謝産物を含む。
【０１３２】
代謝産物は、典型的には本発明の化合物の放射性標識された（例えば１４Ｃ又は３Ｈ）同位体を調製し、それを検出可能な用量（例えば約０．５ｍｇ／ｋｇを上回る）でラット、マウス、モルモット、サル又はヒトなどの動物に非経口投与して、代謝が起こるのに十分な時間（典型的には約３０秒から３０時間）放置し、その変換産物を尿、血液又は他の生物学的試料から単離することによって、同定される。これらの産物は標識されているので容易に単離される（他は、代謝産物中に残存するエピトープに結合することができる抗体の使用によって単離される）。代謝産物の構造は、一般的な方法で、例えばＭＳ、ＬＣ／ＭＳ又はＮＭＲ分析によって決定される。一般に、代謝産物の分析は、当業者に周知の一般的な薬物代謝試験と同じ方法で行われる。代謝産物は、それらがインビボで他の形で見出されない限り、本発明の化合物の治療投薬のための診断アッセイにおいて有用である。
【０１３３】
製造品
本発明の他の実施態様では、上記で述べた疾患及び障害の治療のために有用な物質を含む製造品又は「キット」が提供される。一実施態様では、キットは、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又は薬学的に許容可能な塩又はプロドラッグを収容した容器を含む。キットは、容器上又は容器に付随してラベル又はパッケージ挿入物を更に含みうる。「パッケージ挿入物」なる用語は、適応症、使用法、用量、投与、禁忌、、及び／又はこのような治療用製品の使用に関する注意についての情報を含む、治療用製品の市販パッケージに常套的に含まれる指示を指すために使用される。好適な容器には、例えば、ビン、バイアル、シリンジ、ブリスターパック等が含まれる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されうる。容器は、病態を治療するのに有効な式Ｉの化合物又はその製剤を収容し得、また無菌のアクセスポートを有しうる（例えば、容器は皮下注射針で貫通可能なストッパーを有するバイアル又は静脈内溶液バッグでありうる）。組成物中の少なくとも一の活性剤は式Ｉの化合物である。ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物ががんのような選択した病態の処置のために使用されることを示している。更に、ラベル又はパッケージ挿入物は、治療される患者が、疾患、例えば過剰増殖性疾患、神経変性、心肥大、疼痛、偏頭痛又は神経外傷性疾患もしくは事象などを有している者であることを示しうる。一実施態様では、ラベル又はパッケージ挿入物は、式Ｉの化合物を含有する組成物が異常細胞増殖に起因する疾患を治療するのに使用できることを示している。また、ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物が他の疾患を治療するのに使用できることも示しうる。あるいは、又は付加的に、製造品は、薬学的に許容可能な緩衝液、例えば注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を含む第２の容器を更に含みうる。更に、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む商業的及び使用者の見地から望ましい他の材料を含んでもよい。
【０１３４】
キットは、式Ｉの化合物と、存在するならば、第２の薬学的製剤の投与のための指示書を更に含みうる。例えば、キットが式Ｉの化合物を含有する第１の組成物と第２の薬学的製剤を含むならば、キットは、それを必要とする患者に、第１及び第２の薬学的組成物を同時、逐次又は別々に投与するための指示書を更に含みうる。
【０１３５】
他の実施態様では、キットは式Ｉの化合物の固体状経口用形態、例えば錠剤又はカプセルの送達に適している。そのようなキットは、好ましくは多くの単位用量を含む。このようなキットには、それらが意図する使用順序に配向された用量を有するカードが含まれうる。このようなキットの例は「ブリスターパック」である。ブリスターパックは包装産業でよく知られており、薬学的単位用量形態に対して幅広く使用されている。所望されるならば、記憶補助を、例えば数、文字、又は他のマークの形態で、もしくは治療スケジュールに所定投与量を投与できる日を指定したカレンダー挿入物を用いて、提供できる。
【０１３６】
一実施態様によれば、キットは、（ａ）そこに式Ｉの化合物を含む第一の容器と；場合によっては（ｂ）そこに第２の薬学的製剤を含む第２の容器とを含み得、ここで第２の薬学的製剤は抗過剰増殖活性を持つ第２の化合物を含有する。代替的に又は付加的に、キットは、薬学的に許容可能な緩衝剤、例えば注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を含む第３の容器を更に含んでもよい。他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む商業的及び使用者の見地から望ましい他の材料を更に含んでもよい。
【０１３７】
キットが式Ｉの組成物と第二の治療剤を含む所定の他の実施態様では、キットは別々の組成物を収容する容器、例えば分割ボトル又は分割ホイルパックを含みうるが、別々の組成物は、単一の未分割容器内に収容されてもよい。典型的には、キットは、別々の成分を投与するための指示書を含む。別々の成分が、異なる投与形態（例えば、経口及び非経口）で好ましく投与される場合、異なる投与間隔で投与される場合、又は組合せ物の個々の成分の用量設定が処方医師に所望される場合、キット形態は特に有利である。
【０１３８】
式Ｉの化合物の調製
式Ｉの化合物は、特にここに含まれる記述に照らして、化学分野でよく知られているもの、及びComprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, 例えば第3巻；Liebigs Annalen der Chemie, (9):1910-16, (1985)；Helvetica Chimica Acta, 41:105２-60, (1958)；Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990)（それぞれが出典明示により援用される）に記載の他の複素環のためのものと類似のプロセスを含む合成経路により合成されうる。出発物質は、例えばＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Milwaukee, WI）等から商業的に入手可能であり、又は当業者によく知られている方法（例えば、Louis F. Fieser 及び Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, 第1-23巻, Wiley, N.Y. (1967-2006版)、又は Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl編 Springer-Verlag, Berlin, 補遺を含む（Beilsteinオンラインデーターベースからも利用可能）を使用して、容易に調製される。
【０１３９】
式Ｉの化合物と必要な試薬及び中間体の合成に有用な合成化学変換及び保護基の方法論（保護及び脱保護）は当該技術分野で知られており、例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)；T. W. Greene 及び P. G .M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版, John Wiley and Sons (1999)；及び L. Paquette編, Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)、及びその後続版に記載されているものが含まれる。
【０１４０】
式Ｉの化合物は、単独で、又は少なくとも２、例えば５〜１０００の化合物、又は１０〜１００の化合物を含む化合物ライブラリーとして調製されうる。式Ｉの化合物のライブラリーは、当業者に知られた方法により、コンビナトリアル「スプリット＆ミックス」アプローチによって、又は液相もしくは固相化学の何れかを使用する複数の平行合成によって調製されうる。よって、本発明の更なる態様によれば、少なくとも２の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩を含む化合物ライブラリーが提供される。
【０１４１】
実施例は、式Ｉの化合物を調製するための例示的な方法を提供する。当業者は、他の合成経路を使用して式Ｉの化合物を合成しうることを認識している。特定の出発物質及び試薬を図面及び実施例において示し、論じるが、様々な誘導体及び／又は反応条件を提供するために他の出発物質及び試薬を容易に代用することができる。加えて、記載される方法によって調製される例示的化合物の多くは、当業者に周知の一般化学を使用して、この開示に照らして更に修飾することができる。
【０１４２】
式Ｉの化合物の調製において、中間体の遠隔官能基（例えば、第１級又は第２級アミン）の保護が必要な場合がある。そのような保護の必要性は、遠隔官能基の性質及び調製法の条件に依存して変化する。適切なアミノ保護基には、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ-ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）及び９-フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が含まれる。そのような保護の必要性は、当業者によって容易に決定される。保護基及びそれらの使用の一般的な説明については、T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991を参照のこと。
【０１４３】
式Ｉの化合物の調製に有用な実験手順、中間体及び試薬は、その全体が出典明示により援用される、国際公開第２０１１／１４０４８８号；米国特許出願公開第２０１２／００１０１９１号；国際公開第２０１３／０６７２７４号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２３５号；国際公開第２０１３／０６７２７７号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２４５号；国際公開第２０１３／０６７２６０号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２６２号；国際公開第２０１３／０６７２６４号；米国特許出願公開第２０１３／０１１６２４６号に見出すことができる。
【０１４４】
図１−６は、次の実施例により充分に記載される式Ｉの化合物１０１−１７６の例示的実施態様の合成を記載しており、他の式Ｉの化合物の調製に対しても有用でありうる。
【０１４５】
一般的な調製手順
2016526551.tif 000042
2016526551.tif 000043
2016526551.tif 000044
鈴木型カップリング反応は、炭素-炭素結合を形成して、例えばＡ-３のように式Ｉの化合物及び中間体の環に結合させるために有用である（Suzuki (1991) Pure Appl. Chem. 63:419-422；Miyaura及びSuzuki (1979) Chem. Reviews 95(7):2457-2483；Suzuki (1999) J. Organometal. Chem. 576:147-168）。鈴木カップリングは、Ａ-１又はＡ-２等のボロン酸エステルとＢ-２又はＢ-４等のヘテロアリールハロゲン化物の、パラジウム媒介性のクロスカップリング反応である。例えば、Ｂ-２は、約１．５当量の４,４,４',４',５,５,５',５'-オクタメチル-２,２'-ビ(１,３,２-ジオキサボロラン)と組み合わせ、水と同量のアセトニトリル中の１モル濃度の溶液としての約３当量の炭酸ナトリウムに溶解させうる。低原子価パラジウム触媒、例えばビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（ＩＩ)ジクロリドを、触媒量、又はそれ以上添加する。幾つかの場合では、水性層のｐＨを調節するために、酢酸カリウムを炭酸ナトリウムの代わりに使用する。次に、反応物を１０から３０分の間、マイクロ波反応器（Biotage AB, Uppsala, Sweden）において加圧下で約１４０−１５０℃に加熱する。内容物を酢酸エチル又は別の有機溶媒で抽出する。有機層の蒸発後、ボロンエステルＡ-１をシリカ又は逆相ＨＰＬＣによって精製しうる。置換基は定義される通りであるか、又はその保護形態もしくは前駆体である。同様に、臭化物中間体Ｂ-４をボロニル化してＡ-２を得ることができる。
【０１４６】
Ｂ-２とＡ-２、又はＡ-１とＢ-４の鈴木カップリングにより、式Ｉの化合物又は中間体Ａ-３が得られる。ボロン酸エステル（又は酸）（１．５当量）Ａ-１又はＡ-２と、パラジウム触媒、例えばビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（０．０５当量）を、アセトニトリル中のハロ中間体（１当量）Ｂ-２又はＢ-４と１Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（アセトニトリルと同量）の混合物に添加する。反応混合物を約１５分間マイクロ波で約１５０℃に加熱する。ＬＣ／ＭＳが、反応が完了したか又は更なる時間もしくは試薬を必要とするかを示す。水を混合物に添加し、沈殿した生成物を濾過し、ＨＰＬＣによって精製し、生成物Ａ-３を得る。置換基は、定義された通りであるか、又は保護形態又はその前駆体である。
【０１４７】
ＰｄＣｌ２{ＰｔＢｕ２(ｐ-Ｒ-Ｐｈ)}２（Guram等(2006) Organic Letters 8(9):1787-1789）、ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２、Ｐｄ(ｔ-Ｂｕ)３、ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ ＣＨ２Ｃｌ２、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、Ｐｄ(ＯＡｃ)２/ＰＰｈ３、Ｃｌ２Ｐｄ[(Ｐｅｔ３)]２、Ｐｄ(ＤＩＰＨＯＳ)２、Ｃｌ２Ｐｄ(Ｂｉｐｙ)、[ＰｄＣｌ(Ｐｈ２ＰＣＨ２ＰＰｈ２)]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(ｏ-トル)３]２、Ｐｄ２(ｄｂａ)３/Ｐ(ｏ-トル)３、Ｐｄ２(ｄｂａ)/Ｐ(フリル)3、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(フリル)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ(ＰＭｅＰｈ２)２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(４-Ｆ-Ｐｈ)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(Ｃ６Ｆ６)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(２-ＣＯＯＨ-Ｐｈ)(Ｐｈ)２]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(４-ＣＯＯＨ-Ｐｈ)(Ｐｈ)２]２、及びカプセル化触媒Ｐｄ ＥｎＣａｔＴＭ３０、Ｐｄ ＥｎＣａｔＴＭＴＰＰ３０、及びＰｄ(ＩＩ)ＥｎＣａｔＴＭＢＩＮＡＰ３０（米国特許出願公開第２００４／０２５４０６６号）を含む、様々な低原子価のＰｄ(ＩＩ)及びＰｄ(０)パラジウム触媒、前触媒、及び配位子を、鈴木又は鈴木／宮浦カップリング工程に使用することができる（Miyaura, N. (2002) Top. Curr. Chem., 219:11-59；Kotha, S.等(2002) Tetrahedron, 58:9633-9695；Bellina, F.等(2004) Synthesis, 15:2419-2440；Hassan, J.等(2002) Chem. Rev. 102:1359-1470；Littke, A. F.等(2002) Angew. Chem., Int. Ed. 41:4176-4211；Barder, T. E.等(2005) J. Am. Chem. Soc., 127:468５-4696；Walker, S. D.等(2004) Angew. Chem., Int. Ed., 43:1871-1876；Yin, J.等(2002) J. Am. Chem. Soc., 124:1162-1163）。
【０１４８】
低原子価のＰｄ(ＩＩ)及びＰｄ(０)パラジウム触媒、前触媒、及び配位子の例示的実施態様は、市販されている２-ジシクロヘキシルホスフィノ-２,４,６-トリイソプロピルビフェニル（Ｘ-Ｐｈｏｓ，ＣＡＳ登録番号５６４４８３-１８-７）及びクロロ(２-ジシクロヘキシルホスフィノ-２',４',６'-トリイソプロピル-１,１'-ビフェニル)[２-(２'-アミノ-１,１'-ビフェニル)]パラジウム(ＩＩ)（Ｘ-Ｐｈｏｓアミノビフェニルパラジウムクロリド前触媒，ＣＡＳ登録番号１３１０５８４-１４-５）（Johnson Matthey, West Deptford, NJ；Sigma-Aldrich Fine Chemicals、及び他の供給者）を含む、「ブッフバルト」触媒、パラダサイクル、及び配位子である。米国特許第７２２３８７９号、米国特許第６３９５９１６号、米国特許第６３０７０８７号を参照のこと。
【０１４９】
分離方法
式Ｉの化合物を調製する方法において、反応生成物を互いに及び／又は出発物質から分離することが有利な場合がある。各工程又は一連の工程の所望生成物を、当該分野で一般的な技術によって所望の程度の均質性まで分離及び／又は精製する。典型的には、そのような分離は、多相抽出、溶媒もしくは溶媒混合物からの結晶化、蒸留、昇華、又はクロマトグラフィーを含む。クロマトグラフィーには、例えば逆相及び順相；サイズ排除；イオン交換；高、中及び低圧液体クロマトグラフィー法及び装置；小規模分析；疑似移動床（ＳＭＢ）及び分取薄層又は厚層クロマトグラフィーを含む多くの方法、並びに小規模薄層及びフラッシュクロマトグラフィーの技術が含まれうる。
【０１５０】
別のクラスの分離方法は、所望生成物、未反応出発物質、反応副産物等に結合するか又はさもなければこれらを分離可能にするように選択された試薬で混合物を処理することを含む。そのような試薬には、吸着剤又は吸収剤、例えば活性炭、分子ふるい、イオン交換体等が含まれる。あるいは、試薬は、塩基性材料の場合は酸、酸性材料の場合は塩基、抗体などの結合試薬、結合タンパク質、クラウンエーテルなどの選択的キレート剤、液／液イオン抽出試薬（ＬＩＸ）等でありうる。適切な分離方法の選択は、関与する物質の性質、例えば蒸留及び昇華における沸点及び分子量、クロマトグラフィーにおける極性官能基の有無、多相抽出における酸性及び塩基性媒質中での物質の安定性等に依存する。
【０１５１】
ジアステレオマー混合物は、当業者に周知の方法、例えばクロマトグラフィー及び／又は分別結晶化によって、それらの物理的化学的相違に基づき、その個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、適切な光学活性化合物（例えばキラルアルコール又はモッシャーの酸塩化物などのキラル助剤）との反応によってエナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離して、個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに変換（例えば加水分解）することによって分離できる。また、本発明の化合物の一部はアトロプ異性体（例えば置換ビアリール）であり得、本発明の一部と考えられる。エナンチオマーはまたキラルＨＰＬＣカラムの使用によって分離することもできる。
【０１５２】
その立体異性体を実質的に含まない単独の立体異性体、例えばエナンチオマーは、光学活性な分割剤を用いたジアステレオマー形成などの方法を使用して、ラセミ混合物の分割により入手しうる（Eliel, E. 及び Wilen, S. 「Stereochemistry of Organic Compounds」 John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994；Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302）。本発明のキラル化合物のラセミ混合物は、（１）キラル化合物とのイオン性ジアステレオマー塩の形成と、分別結晶化又は他の方法による分離、（２）キラル誘導体化試薬を用いたジアステレオマー化合物の形成、ジアステレオマーの分離、及び純粋な立体異性体への変換、並びに（３）キラル条件下での実質的に純粋な又は濃縮された立体異性体の直接の分離を含む、任意の適切な方法によって分離し、単離することができる。「Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology」 Irving W. Wainer編, Marcel Dekker, Inc., New York (1993)を参照のこと。
【０１５３】
方法（１）では、ジアステレオマー塩を、鏡像異性的に純粋なキラル塩基、例えばブルシン、キニーネ、エフェドリン、ストリキニーネ、α-メチル-β-フェニルエチルアミン（アンフェタミン）等と、酸性官能基を担持する不斉化合物、例えばカルボン酸及びスルホン酸との反応によって形成することができる。ジアステレオマー塩を誘導し、分別結晶化又はイオンクロマトグラフィーによって分離しうる。アミノ化合物の光学異性体の分離のために、キラルカルボン酸又はスルホン酸、例えばカンファースルホン酸、酒石酸、マンデル酸又は乳酸の添加により、ジアステレオマー塩の形成をもたらすことができる。
【０１５４】
別法として、方法（２）では、分割される基質をキラル化合物の一エナンチオマーと反応させてジアステレオマー対を形成する（E.及び Wilen, S. 「Stereochemistry of Organic Compounds」, John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322）。ジアステレオマー化合物は、不斉化合物をエナンチオマー的に純粋なキラル誘導体化試薬、例えばメンチル誘導体と反応させた後、ジアステレオマーの分離と加水分解によって、純粋な又は濃縮されたエナンチオマーを生じせしめることによって生成することができる。光学純度を決定する方法は、ラセミ混合体のキラルエステル、例えばメンチルエステル、例えば塩基の存在下で(-)メンチルクロロホルメート、又はＭｏｓｈｅｒエステル、酢酸α-メトキシ-α-(トリフルオロメチル)フェニル（Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165）を製造し、二つのアトロプ異性体エナンチオマー又はジアステレオマーの存在性について１Ｈ ＮＭＲスペクトルを分析することを含む。アトロプ異性体化合物の安定なジアステレオマーは、アトロプ異性体ナフチル-イソキノリンの分離方法に従って、順相及び逆相クロマトグラフィーによって分離し単離することができる（国際公開第９６／１５１１１号）。方法（３）では、二つのエナンチオマーのラセミ混合物を、キラル固定相を使用するクロマトグラフィーによって分離することができる（「Chiral Liquid Chromatography」 (1989) W. J. Lough編, Chapman及びHall, New York；Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:37５-378）。濃縮又は精製したエナンチオマーは、不斉炭素原子を持つ他のキラル分子を区別するために使用される方法、例えば旋光及び円偏光二色性によって区別することができる。
【実施例】
【０１５５】
実施例１  ２,２,２-トリクロロ-1-(４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-イル)エタノン１
2016526551.tif 000045
磁気撹拌機、凝縮器及び窒素入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール（３．００ｇ，２４．８ｍｍｏｌ）、塩化トリクロロアセチル（１３．５ｇ，７４．４ｍｍｏｌ）及び１,２-ジクロロエタン（５０ｍＬ）を入れた。その溶液を８５℃で２時間攪拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して、１００％収率（６．５０ｇ）の２,２,２-トリクロロ-１-(４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-イル)エタノン１を黒色の半固形物として得た：1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.94 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.62 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.47 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.80 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 266.0 (M+H)
【０１５６】
実施例１０２  ４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル２
2016526551.tif 000046
磁気撹拌機及び窒素入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１０１（６．５０ｇ，２４．８ｍｍｏｌ）、ナトリウムエトキシド（１７．０ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）及びエタノール（４０ｍＬ）を入れた。その溶液を室温で１時間攪拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、１００％収率（４．８０ｇ）の４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル２を褐色の固形物として得た： mp 70-72℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.08 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.25 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.65 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.56 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.85 (m, 4H), 1.28 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 194.1 (M+H)
【０１５７】
実施例３  １-(シアノメチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル３
2016526551.tif 000047
磁気撹拌機及び窒素入口を備えた１２５ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、２（５．７６ｇ，２９．８ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５０ｍＬ）を入れた。その溶液を、氷浴を使用して０℃に冷却した。ＮａＨ（鉱油中６０％分散液，１．４３ｇ，３５．８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間攪拌した。その後、ブロモアセトニトリル（１．４３ｇ，３５．８ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を室温で１４時間攪拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と水（４５０ｍＬ）の間で分配した。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、５５％収率（３．８０ｇ）の１-(シアノメチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル３を黄色の半固形物として得た：1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.66 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.28 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.62 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 2.49 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.33 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 233.1 (M+H)
【０１５８】
実施例４  １-(２-アミノエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル４
2016526551.tif 000048
２００ｍＬのＰａｒｒ反応ボトルを窒素でパージし、カーボン担持１０％パラジウム（５０％水分，１．２８ｇ乾燥重量）、３（３．００ｇ，１２．９ｍｍｏｌ）、１２％塩酸（６．５ｍＬ，２５ｍｍｏｌ）、酢酸エチル（６０ｍＬ）及びエタノール（４０ｍＬ）を入れた。そのボトルをＰａｒｒ水素添加装置に取付け、排気し、５０ｐｓｉの圧力まで水素ガスを充填し、６時間振盪した。この後、水素を排気し、窒素をボトルに入れた。珪藻土濾過剤（ＣＥＬＩＴＥ（登録商標），Imerys Minerals California, Inc.）ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）５２１（４．０ｇ）を加え、混合物を、ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）５２１パッドを通して濾過した。濾過ケーキをエタノール（２×２０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と１０％の水性炭酸カリウム（１００ｍＬ）の間で分配した。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をエタノール（５ｍＬ）で粉砕して、７１％収率（１．７１ｇ）の１-(２-アミノエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル４を白色固形物として得た：mp 102-104℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.61 (s, 1H), 6.22 (br, 2H), 4.15 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.59 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 1.70 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.23 (t, 3H, J = 7.0 Hz); MS (APCI+) m/z 237.2 (M+H)
【０１５９】
実施例５  ３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン５
2016526551.tif 000049
磁気撹拌機及び窒素入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、４（１．８０ｇ，７．６３ｍｍｏｌ）、ナトリウムエトキシド（１．５５ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）及びエタノール（５０ｍＬ）を入れた。その混合物を５５℃で５時間攪拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配した。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、４２％収率（６０５ｍｇ）の３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン４を白色固形物として得た：mp 207-209℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.41 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.84 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.42 (m, 2H), 2.51 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.76 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
【０１６０】
実施例６  ３-ブロモ-５-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)イソニコチンアルデヒド６
2016526551.tif 000050
磁気撹拌機と還流凝縮器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、ブッフバルト反応条件（Wolf及びBuchwald (2004) Org. Synth Coll. Vol. 10:423；Paul等(1994) Jour. Amer. Chem. Soc. 116:5969-5970)に従って、５（３００ｍｇ，１．５７ｍｍｏｌ）、３,５-ジブロモイソニコチンアルデヒド（２）（５１７ｍｇ，１．９６ｍｍｏｌ）、４,５-ビス(ジフェニルホスフィノ)-９,９-ジメチルキサンテン（キサントホス，１２０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)（１８０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（６５０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）、及び１,４-ジオキサン（８ｍＬ）を入れた。３サイクルの真空／アルゴンフラッシュ後に、混合物を１００℃で６時間加熱した。それをついで室温まで冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（４０：１から２０：１）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、淡黄色固形物（３５０ｍｇ，４０％）として６を得た。MS: [M+H]+ 374。
【０１６１】
実施例１０１  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロブタンカルボキサミド１０１
工程１：  Ｎ-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)シクロブタンカルボキサミド１０１ａ
2016526551.tif 000051
ＤＣＭ（８ｍＬ）中のシクロブタンカルボン酸（２００ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．１４ｇ，３．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５１６ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ）の混合物に３-アミノ-５-ブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（３３０ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２５℃で５時間攪拌した。得られた混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を、２０：１のＤＣＭ／メタノールで溶出するシリカゲルカラムで精製して１０１ａ（２３０ｍｇ，５４％）を得た。MS-ESI: [M+H]+ 285.1
【０１６２】
工程２：  酢酸[４-(５-シクロブタンアミド-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-３-イル]メチル１０１ｂ
2016526551.tif 000052
磁気撹拌機と還流凝縮器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに１０１ａ（２３０ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）、{３-[(アセチルオキシ)メチル]-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-４-イル}ボロン酸（３２０ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２（４２ｍｇ，０．０５０ｍｍｏｌ）、ＮａＯＡｃ（８２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４・３Ｈ２Ｏ（２６６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、水（５滴）及びアセトニトリル（６ｍＬ）を入れた。３サイクルの真空／アルゴンフラッシュ後、混合物を１００℃で１時間加熱した。それをついで濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。残留物を、２０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、褐色固形物として１０１ｂ（２００ｍｇ，５６％）を得た。MS-ESI: [M+H]+ 558.3
【０１６３】
工程３：  ｉＰｒＯＨ／ＴＨＦ（１：１，４ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１ｍＬ）中の１０１ｂ（２００ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）及びＬｉＯＨ（３４ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で０．５時間攪拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１０１（８０ｍｇ，４５％）を淡黄色の固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 516.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (s, 1H), 8.48-8.47 (m, 2H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.9５-4.94 (m, 1H), 4.44-4.40 (m, 2H), 4.23-4.18 (m, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.57-3.50 (m, 1H), 2.58-2.55 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.20-2.07 (m, 4H), 1.94-1.88 (m, 1H), 1.80-1.77(m, 1H), 1.21 (s, 6H)。
【０１６４】
実施例１０２  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１０２
工程１：  Ｎ-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)シクロプロパンカルボキサミド１０２ａ
2016526551.tif 000053
ＤＣＭ（８ｍＬ）中のシクロプロパンカルボン酸（１８０ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５７０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３９０ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）の混合物に３-アミノ-５-ブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（２３０ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２５℃で５時間攪拌した。得られた混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を、２０：１のＤＣＭ／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、１０２ａ（２２０ｍｇ，７２％）を得た。MS-ESI: [M+H]+ 270.1 
【０１６５】
工程２：  酢酸[４-(５-シクロプロパンアミド-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-３-イル]メチル１０２ｂ
2016526551.tif 000054
磁気撹拌機と還流凝縮器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコに、１０２ａ（２２０ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）、{３-[(アセチルオキシ)メチル]-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-４-イル}ボロン酸１０２ｃ（３２０ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ），
2016526551.tif 000055
Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２（４２ｍｇ，０．０５０ｍｍｏｌ）、ＮａＯＡｃ（８２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４・３Ｈ２Ｏ（２６６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、水（６滴）、及びアセトニトリル（６ｍＬ）を入れた。３サイクルの真空／アルゴンフラッシュ後、混合物を１００℃で１時間加熱した。それをついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を、２０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、１０２ｂ（１５０ｍｇ，３３％）を褐色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 544.3
【０１６６】
工程３：  ｉＰｒＯＨ／ＴＨＦ（１：１，４ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１ｍＬ）中の１０２ｂ（１５０ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）及びＬｉＯＨ（３４ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で０．５時間攪拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１０２（６５ｍｇ，４７％）を淡黄色の固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 502.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94-4.92 (m, 1H), 4.41-4.37 (m, 2H), 4.23-4.17 (m, 3H), 3.8５-3.83 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.58-2.55 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.27-2.25 (m, 1H), 1.27 (s, 6H), 0.78-0.76 (m, 4H)。
【０１６７】
実施例１０３  ２-シクロプロピル-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド１０３
工程１：  酢酸(２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-{５-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル}-ピリジン-３-イル)-エチル１０３ａ
2016526551.tif 000056
磁気撹拌機と還流凝縮器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに５-ブロモ-３-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]-１-メチル-１,２-ジヒドロピリジン-２-オン１０３ｂ（１．０ｇ，２．７０ｍｍｏｌ），
2016526551.tif 000057
{３-[(アセチルオキシ)メチル]-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-４-イル}ボロン酸１０２ｃ（１．２０ｇ，３．００ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１２２ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＯＡｃ（４６０ｍｇ，５．４ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４・３Ｈ２Ｏ（１．２７ｇ，５．４ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）、及びアセトニトリル（３０ｍＬ）を入れた。３サイクルの真空／アルゴンフラッシュ後、混合物を８０℃で１時間加熱した。それをついで濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。残留物を、２０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、１０３ａ（８００ｍｇ，４７％）を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 640.3
【０１６８】
工程２：  酢酸[４-(５-アミノ-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}ピリジン-３-イル]メチル１０３ｃ
2016526551.tif 000058
ＨＣｌ／ジオキサン（２０ｍＬ）中の１０３ａ（８００ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）の混合物を０℃で０．５時間攪拌した。混合物を真空下で蒸発させ、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１０３ｃ（３５０ｍｇ，６０％）を淡黄色の固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+476.1. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.57 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.24-6.22 (m, 1H), 5.13-5.11 (m, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.36 (s, 2H), 4.24-4.20 (m, 1H), 4.14-4.11 (m, 1H), 4.01-3.98 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.5５-2.54 (m, 2H), 2.49 (s, 2H), 1.81 (s, 3H), 1.26 (s, 6H)。
【０１６９】
工程３：  １０-[４-(５-アミノ-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-ピリジン-２-イル]-４,４-ジメチル-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-９-オン１０３ｄ
2016526551.tif 000059
ｉＰｒＯＨ／ＴＨＦ（１：１，１０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２．５ｍＬ）中の１０３ｃ（１．１ｇ，２．３ｍｍｏｌ）及びＬｉＯＨ（４５０ｍｇ，１１．０ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で０．５時間攪拌した。混合物を真空下で蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を、１０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１０３ｄ（３５０ｍｇ，３６％）を淡黄色の固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 434.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.04-5.03(m, 1H), 4.63-4.62 (m, 1H), 4.50-4.48 (m, 1H), 4.30-4.28 (m, 1H), 4.16-4.10 (m, 3H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.57-2.56 (m, 2H), 2.50 (s, 2H), 1.26 (s, 6H)。
【０１７０】
工程４：  中間体１０３ｄを塩化２-シクロプロピルアセチル又は２-シクロプロピル酢酸の活性化エステルでアシル化して、１０３を得た。LC-MS m/z: 516.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.27 (s, 1H), 8.51 - 8.44 (m, 2H), 7.73 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.42 (t, J = 11.4 Hz, 2H), 4.25 - 4.15 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.37 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.08 - 0.96 (m, 1H), 0.56 - 0.46 (m, 2H), 0.26 - 0.17 (m, 2H)。
【０１７１】
実施例１０４  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]オキセタン-３-カルボキサミド１０４
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０４を調製した。LC-MS m/z: 518.3[M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.52 (s, 1H), 8.58 - 8.50 (m, 1H), 8.50 - 8.46 (m, 1H), 7.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.72 - 4.58 (m, 2H), 4.46 - 4.35 (m, 2H), 4.30 - 4.17 (m, 3H), 4.06 (q, J = 5.2 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 3.17 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.58 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７２】
実施例１０５  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-モルホリノ-アセトアミド１０５
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０５を調製した。LC-MS m/z: 561.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.96 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.43 - 4.38 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 4H), 3.60 (s, 3H), 3.27 (s, 2H), 3.17 (s, 2H), 2.61 - 2.51 (m, 4H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７３】
実施例１０６  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-シクロプロパンカルボキサミド１０６
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０６を調製した。LC-MS m/z: 516.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.56 (s, 1H), 8.50 - 8.43 (m, 1H), 8.43 - 8.37 (m, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.33 - 7.25 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.93 - 4.88 (m, 1H), 4.46 - 4.35 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 3.88 - 3.80 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.07 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.03 - 0.90 (m, 2H), 0.66 - 0.57 (m, 1H)。
【０１７４】
実施例１０７  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]プロパンアミド１０７
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０７を調製した。LC-MS m/z: 490.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.26 (s, 1H), 8.52 - 8.43 (m, 2H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.92 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.44 - 4.36 (m, 2H), 4.27 - 4.14 (m, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.49 - 2.44 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.05 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。
【０１７５】
実施例１０８  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-(３,５-ジメチルピラゾール-１-イル)アセトアミド１０８
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０８を調製した。LC-MS m/z: 570.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.54 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.42 - 4.34 (m, 2H), 4.22 - 4.14 (m, 3H), 3.84 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.61 - 2.51 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７６】
実施例１０９  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ピリジン-３-カルボキサミド１０９
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１０９を調製した。LC-MS m/z: 539.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.71 (s, 1H), 9.08 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.77 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 8.54 - 8.47 (m, 2H), 8.33 - 8.25 (m, 1H), 7.86 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.62 - 7.53 (m, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.51 - 4.37 (m, 2H), 4.32 - 4.16 (m, 3H), 3.87 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７７】
実施例１１０  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-メチル-ピラゾール-４-カルボキサミド１１０
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１０を調製した。LC-MS m/z: 542.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.98 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 2H), 4.28 - 4.15 (m, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７８】
実施例１１１  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-１Ｈ-ピラゾール-３-カルボキサミド１１１
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１１を調製した。LC-MS m/z: 542.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.19 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 8.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.95 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 2H), 4.31 - 4.15 (m, 3H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。
【０１７９】
実施例１１２  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１,５-ジメチル-ピラゾール-３-カルボキサミド１１２
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１２を調製した。LC-MS m/z: 556.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.61 (s, 1H), 8.55 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.59 - 6.53 (m, 2H), 4.99 - 4.91 (m, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 2H), 4.28 - 4.15 (m, 3H), 3.88 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８０】
実施例１１３  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-ピロリジン-１-イル-ピリジン-３-カルボキサミド１１３
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１３を調製した。LC-MS m/z: 608.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.20 (s, 1H), 8.66 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.53 - 8.46 (m, 2H), 7.97 (dd, J = 8.9, 2.5 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.59 - 6.50 (m, 2H), 4.96 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 3H), 3.86 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.46 (d, J = 6.7 Hz, 4H), 2.58 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.01 - 1.93 (m, 4H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８１】
実施例１１４  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ベンズアミド １１４
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１４を調製した。LC-MS m/z: 538.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.42 (s, 1H), 8.54 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.83 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 2H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.98 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.24 - 4.17 (m, 3H), 3.87 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８２】
実施例１１５  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]オキサゾール-５-カルボキサミド１１５
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１５を調製した。LC-MS m/z: 529.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.46 - 4.37 (m, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 3H), 3.86 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８３】
実施例１１６  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２,２-ジフルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１１６
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１６を調製した。LC-MS m/z: 538.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.04 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.92 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.44 - 4.35 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 3.85 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.42 - 3.31 (m, 1H), 2.57 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.03 - 1.91 (m, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８４】
実施例１１７  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１１７
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１７を調製した。LC-MS m/z: 520.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94 - 4.87 (m, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.44 - 4.34 (m, 2H), 4.24 - 4.14 (m, 3H), 3.84 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.96 - 2.87 (m, 1H), 2.57 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 2.42 (s, 2H), 1.53 - 1.38 (m, 1H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８５】
実施例１１８  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１１８
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１８を調製した。LC-MS m/z: 520.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.91 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.44 - 4.32 (m, 2H), 4.26 - 4.14 (m, 3H), 3.84 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.57 (d, J = 7.2 Hz, 4H), 2.42 (s, 2H), 1.53 - 1.38 (m, 1H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８６】
実施例１１９  (１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１１９
実施例１０１−１０３及び１２０の手順に従って、１１９を調製した。LC-MS m/z: 520.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 5.04 - 4.71 (m, 1H), 4.45 - 4.36 (m, 2H), 4.25 - 4.15 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.66 - 1.54 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.21 - 1.08 (m, 1H)。
【０１８７】
実施例１２０  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１２０
2016526551.tif 000060
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の酢酸(５-アミノ-２'-(７,７-ジメチル-１-オキソ-３,４,７,８-テトラヒドロ-１Ｈ-シクロペンタ[４,５]ピロロ[１,２-ａ]ピラジン-２(６Ｈ)-イル)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-[３,４'-ビピリジン]-３'-イル)メチル１２０ａ（２５ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ，１．０当量）、(１Ｓ,２Ｓ)-２-フルオロシクロプロパンカルボン酸（７ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ，１．３当量）、ＨＡＴＵ（２８ｍｇ，０．０７５ｍｍｏｌ，１．５当量）及びＮ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（２５ｕＬ，０．１５ｍｍｏｌ，３．０当量）の溶液を５０℃で一晩攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。ＴＨＦ（１ｍＬ）中の粗生成物の溶液を、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中の水酸化ナトリウムの１Ｍ溶液と混合し、５０℃で一晩攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）とＨ２Ｏ中の塩化アンモニウム飽和溶液（２ｍＬ）で一回抽出した。有機相を除去し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、フィルターを通過させた。得られた有機相を真空下で濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ，Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ １９×１５０；移動相，ＣＨ３ＣＮ：ＮＨ４ＣＯ３／Ｈ２Ｏ（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）＝５％−８５％，１０分；検出器，ＵＶ２５４ｎｍ）によって精製して、１４．７ｍｇ（６０％）の１２０をオフホワイト色の固形物として得た。LC-MS m/z: 520.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.70 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.92 (t, J = 5.3 Hz, 3H), 5.01 - 4.76 (m, 1H), 4.48 - 4.36 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.67 - 1.50 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.19 - 1.08 (m, 1H)。
【０１８８】
実施例１２１  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド１２１
実施例１２０の手順に従って、１２１を調製した。LC-MS m/z: 476.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.37 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.92 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.43 - 4.35 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。
【０１８９】
実施例１２２  (１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド１２２
実施例１２３の手順に従って、１２２を調製した。LC-MS m/z: 536.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.73 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 5.05 - 4.70 (m, 1H), 4.44 - 4.36 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.47 - 2.42 (m, 1H), 1.71 - 1.48 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.19 - 1.07 (m, 1H)。
【０１９０】
実施例１２３  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１２３
工程１：  ５-(ジフェニルメチレンアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル-ボロン酸１２３ａ
2016526551.tif 000061
還流凝縮器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコに５-ブロモ-３-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]-１-メチル-１,２-ジヒドロピリジン-２-オン１０３ｂ（３．０ｇ，８．１ｍｍｏｌ）、ＰｉｎＢ２（６．１ｇ，２４．０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２(ｄｂａ)３（２９０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、Ｘ-ｐｈｏｓ（３８５ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（１．６ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）、及び１,４-ジオキサン（３０ｍＬ）を入れた。３サイクルの真空／アルゴンフラッシュ後、混合物を６０℃で３時間加熱した。それをついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物をＰＥで洗浄して、１２３ａ（２．５ｇ，９３％）を褐色油として得、これを更に精製しないで直接使用した。MS-ESI: [M+H]+ 333.1
【０１９１】
工程２：  ６-ｔｅｒｔ-ブチル-２-(４-(５-(ジフェニルメチレンアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-２-イル)-８-フルオロフタラジン-１(２Ｈ)-オン１２３ｂ
2016526551.tif 000062
還流凝縮器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコに１２３ａ（２．０ｇ，６．０ｍｍｏｌ）、６-ｔｅｒｔ-ブチル-２-(４-クロロ-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-２-イル)-８-フルオロフタラジン-１(２Ｈ)-オン１２３ｃ（２．１７ｇ，６．０ｍｍｏｌ），
2016526551.tif 000063
Ｋ３ＰＯ４（２．５４ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、ＮａＯＡｃ（１．０ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２（２４５ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）、及びＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（１５／２ｍＬ）を入れた。その系を３サイクルの真空／アルゴンフラッシュに供し、Ｎ２保護下で１００℃で２時間加熱した。ＬＣＭＳ分析は所望の生成物への完全な転換を示した。反応混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＤＣＭ（２０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）の間で分配した。水層をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。暗色の残留物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５０：１から２０：１）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１２３ｂ（１．６ｇ，４０％）を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 614.3。
【０１９２】
工程３：  ２-(４-(５-アミノ-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-ピリジン-２-イル)-６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロフタラジン-１(２Ｈ)-オン１２３ｄ
2016526551.tif 000064
ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ，１０ｍＬ）中の１２３ｂ（１．６ｇ，２．６ｍｍｏｌ）の混合物を２５℃で１時間攪拌した。混合物を真空下で蒸発させ、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１２３ｄ（５８０ｍｇ，５０％）を淡黄色の固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+450.1。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.53-8.52 (m, 2H), 7.90 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.79-7.76 (m, 1H), 7.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.9５-4.93 (m, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.52 (s, 3H), 1.38 (s, 9H)。
【０１９３】
工程４：  ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の１２３ｄ、(１Ｓ,２Ｓ)-２-フルオロシクロプロパンカルボン酸（１５ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，１．３当量）、ＨＡＴＵ（６５ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ，１．５当量）及びＮ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（６０ｕＬ，０．３３ｍｍｏｌ，３．０当量）の溶液を５０℃で一晩攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ，Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ １９×１５０；移動相，ＣＨ３ＣＮ：ＮＨ４ＣＯ３／Ｈ２Ｏ（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）＝５％−８５％，１０分；検出器，ＵＶ２５４ｎｍ）によって精製して、４３ｍｇ（７３％）の１２３をオフホワイト色の固形物として得た。LC-MS m/z: 536.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.73 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.03 - 4.73 (m, 1H), 4.89 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.43 - 4.36 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.50 - 2.41 (m, 1H), 1.68 - 1.52 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.20 - 1.08 (m, 1H)。
【０１９４】
実施例１２４  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１２４
実施例１２３の手順に従って、１２４を調製した。LC-MS m/z: 536.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.94 - 4.69 (m, 1H), 4.39 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.26 - 1.13 (m, 1H)。
【０１９５】
実施例１２５  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１２５
実施例１２３の手順に従って、１２５を調製した。LC-MS m/z: 518.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.70 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.80 - 7.71 (m, 2H), 7.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.89 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.43 - 4.35 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.31 - 2.20 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 0.85 - 0.72 (m, 4H)。
【０１９６】
実施例１２６  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]プロパンアミド１２６
実施例１２３の手順に従って、１２６を調製した。LC-MS m/z: 506.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.81 - 7.70 (m, 2H), 7.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.92 - 4.87 (m, 1H), 4.42 - 4.37 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.49 - 2.43 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.05 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。
【０１９７】
実施例１２７  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]アセトアミド１２７
実施例１２３の手順に従って、１２７を調製した。LC-MS m/z: 492.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.70 (m, 2H), 7.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.89 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.42 - 4.35 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)。
【０１９８】
実施例１２８  (１Ｒ,２Ｓ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド１２８
実施例１２３の手順に従って、１２８を調製した。
【０１９９】
実施例１２９  Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１２９
実施例１２０の手順に従って、１２９を調製した。
【０２００】
実施例１３０  Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３０
実施例１２０の手順に従って、１３０を調製した。
【０２０１】
実施例１３１  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]チエノ[１,３-ｃ]ピリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３１
ここに記載の手順に従って、１３１を調製した。LC-MS m/z: 519.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.63 (s, 1H), 8.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.87 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.39 - 4.40 (m, 1H), 4.22 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 3.78 - 3.81 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.90 - 2.97 (m, 2H), 2.78 (s, 2H), 2.53 - 2.60 (m, 2H), 1.62 - 1.66 (m, 1H),1.27 (s, 6H), 1.0５-1.07 (m, 2H), 0.87-0.89 (m, 2H)
【０２０２】
実施例１３２  (１Ｓ,２Ｒ)-Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-フルオロシクロプロパンカルボキサミド１３２
実施例１２３の手順に従って、１３２を調製した。LC-MS m/z: 536.21 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (s, 1H), 8.58 - 8.49 (m, 2H), 8.35 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.88 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.94 - 4.72 (m, 1H), 4.38 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.53 - 1.13 (m, 2H)。
【０２０３】
実施例１３３  Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３３
ここに記載の手順に従って、１３３を調製した。LC-MS m/z: 488.2 [M+1]+。1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.65 (s, 1H), 8.54 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 5.10 - 5.07 (m, 1H), 4.65 - 4.62 (m, 1H), 4.46 - 4.39 (m, 1 H), 4.24 - 4.21 (m, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 2.94 - 2.85 (m, 2H), 2.83 - 2.81 (m, 2H), 2.05 - 2.02 (m, 2H), 1.88 - 1.86 (m, 2H), 1.69 - 1.65 (m, 2H), 1.09 (m, 2H), 0.91 - 0.89 (m, 2H)。
【０２０４】
実施例１３４  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１３４
実施例１２０の手順に従って、１３４を調製した。LC-MS m/z: 520.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.24 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 8.8, 5.3 Hz, 2H), 4.30 - 4.15 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.53 (q, J = 5.3, 4.8 Hz, 1H), 1.49 (q, J = 5.3, 4.7 Hz, 1H), 1.34 (td, J = 8.7, 5.3 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０２０５】
実施例１３５  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-１-ヒドロキシ-シクロプロパンカルボキサミド１３５
実施例１２０の手順に従って、１３５を調製した。LC-MS m/z: 518.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.76 (s, 1H), 8.49 - 8.45 (m, 2H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94 - 4.89 (m, 1H), 4.45 - 4.36 (m, 2H), 4.22 - 4.15 (m, 2H), 3.8 9 - 3.82 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 2.43 (s, 2H), 1.24 (s, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.16 (q, J = 3.9, 3.5 Hz, 2H), 1.02 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 1H)。
【０２０６】
実施例１３６  Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-(４-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロベンゾチオフェノ[２,３-ｄ]ピリダジン-３-イル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３６
ここに記載の手順に従って、１３６を調製した。LC-MS m/z: 504.0 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.64 (s, 1H), 8.60 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.40 (br s, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 1.97 - 1.96 (m, 4H), 1.68 - 1.64 (m, 1H), 1.08 (m, 2H), 0.90 - 0.88 (m, 2H)。
【０２０７】
実施例１３７  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３７
工程１：  ＤＣＭ（１Ｌ）中の５-オキソピロリジン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１３７ａ（５０ｇ，２７０ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（５４ｇ，５４０ｍｍｏｌ）、(Ｂｏｃ)２Ｏ（７０ｇ，３２４ｍｍｏｌ）の混合物を２０℃で１６時間攪拌した。反応溶液をブライン（５００ｍＬ×３）で洗浄した。図１を参照のこと。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラム（ＰＥ／ＥＡ＝６／１）によって精製して、７１ｇ（９２％）の５-オキソピロリジン-１,２-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル１３７ｂを白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): d 4.47 - 4.44 (m, 1H), 2.61 - 2.54 (m, 1H), 2.47 - 2.45 (m, 1H), 2.29 - 2.24 (m, 1H), 2.00 - 1.97 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.46 (s, 9H)。
【０２０８】
工程２：  −７８℃のＴＨＦ（１．５Ｌ）中の１３７ｂ（７１ｇ，２５０ｍｍｏｌ）の溶液にＬｉＨＭＤＳ（５００ｍＬ，５００ｍｍｏｌ，ＴＨＦ中１Ｍ）をゆっくりと添加し、反応混合物を−４０℃で１時間攪拌した。図１を参照のこと。ヨウ化メチル（７１ｇ，５００ｍｍｏｌ）を滴下して加え、混合物を雰囲気温度で１６時間攪拌した。反応物を水（２Ｌ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（１Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１Ｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗物質をカラム（ＰＥ／ＥＡ＝６／１）によって精製して、３５ｇ（４４．９％）の４,４-ジメチル-５-オキソピロリジン-１,２-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル１３７ｃを白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): d 4.27 - 4.23 (m, 1H), 2.06 - 2.00 (m, 1H), 1.75 - 1.71 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.33 (s, 9H), 1.05 (s, 6H)。
【０２０９】
工程３：  Ｅｔ３ＢＨＬｉ（１３４ｍＬ，１３４ｍｍｏｌ，ＴＨＦ中１Ｍ）を−７８℃のＴＨＦ（１Ｌ）中の１３７ｃ（３５ｇ，１１２ｍｍｏｌ）の混合物にゆっくりと添加し、２時間攪拌した。図１を参照のこと。重炭酸ナトリウム飽和水溶液（５００ｍＬ）を加え、３０分撹拌し、ついでＤＣＭ（１Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１Ｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、５-ヒドロキシ-４,４-ジメチルピロリジン-１,２-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル１３７ｄを無色の油として得た（３８ｇ，粗物質）。
【０２１０】
工程４：  トリエチルシラン（１４ｇ，１２１ｍｍｏｌ）及びＢＦ３-Ｅｔ２Ｏ（１９ｇ，１３３ｍｍｏｌ）を、−７８℃のＤＣＭ（１Ｌ）中の１３７ｄ（３８ｇ，１２１ｍｍｏｌ）の混合物に加え、３０分撹拌した。図１を参照のこと。更なるバッチのトリエチルシラン（１４ｇ，１２１ｍｍｏｌ）及びＢＦ３-Ｅｔ２Ｏ（１９ｇ，１３３ｍｍｏｌ）を加え、２時間攪拌した。反応を無水硫酸ナトリウムでクエンチし、ＤＣＭ（１Ｌ×２）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１Ｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラム（ＰＥ／ＥＡ＝５／１）によって精製して、４,４-ジメチルピロリジン-１,２-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル１３７ｅを無色の油として得た（２７ｇ，７５％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3): d 4.20 - 4.10 (m, 1H), 3.35 - 3.32 (m, 1H), 3.20 - 3.13 (m, 1H), 2.04 - 1.99 (m, 1H), 1.70 - 1.64 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.42 (s, 9H), 1.09 (s, 3H), 1.08 (s, 3H)。
【０２１１】
工程５：  ＤＣＭ（２００ｍＬ）中の１３７ｅ（２７ｇ，９０ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（１００ｍＬ）の混合物を２０℃で１６時間攪拌した。図１を参照のこと。反応溶液を減圧下で濃縮して、４,４-ジメチルピロリジン-２-カルボン酸１３７ｆを褐色油（２７ｇ，ＴＦＡ塩）として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): d 12.08 (br s, 2H), 9.56 (br s, 1H), 7.77 (br s, 1H), 4.52 (s, 1H), 3.20 (s, 2H), 2.30 - 2.24 (m, 1H), 2.00 - 1.94 (m, 1H), 1.17 (s, 6H)。
【０２１２】
工程６：  イソベンゾフラン-１,３-ジオン（２０ｇ，１３５ｍｍｏｌ）及び３-アミノプロパン酸（１２ｇ，１３５ｍｍｏｌ）の混合物を１７０℃で６時間攪拌した。図２を参照のこと。反応が完了したところで、混合物を水で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、３-(１,３-ジオキソイソインドリン-２-イル)プロパン酸１３７ｇ（２０ｇ，６９％）を白色固形物として得た。
【０２１３】
工程７：  ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中の１３７ｇ（２０．０ｇ，９１ｍｍｏｌ）の溶液に塩化オキサリル（１３．８ｇ，１０９ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（０．１ｍＬ）を加えた。図２を参照のこと。混合物を室温で４時間攪拌した。反応が完了したところで、混合物を濃縮して、塩化３-(１,３-ジオキソイソインドリン-２-イル)プロパノイル１３７ｈ（２０．０ｇ，９２％）を白色固形物として得た。
【０２１４】
工程８：  ＤＭＦ（２５０ｍＬ）中の４,４-ジメチルピロリジン-２-カルボン酸１３７ｆ（１３．０ｇ，７２．５ｍｍｏｌ）の溶液に１３７ｈ（１７．０ｇ，７２．５ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（１４．５ｇ，１４５ｍｍｏｌ）を加えた。図２を参照のこと。混合物を室温で１６時間攪拌した。反応が完了したところで、混合物をブライン（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗１-(３-(１,３-ジオキソイソインドリン-２-イル)プロパノイル)-４,４-ジメチルピロリジン-２-カルボン酸１３７ｉを得、これを精製しないで直接使用した。
【０２１５】
工程９：  １３７ｉ（粗物質，７２．５ｍｍｏｌ）及びＡｃ２Ｏ（１００ｍＬ）の混合物を９０℃で０．５時間撹拌した。ついで、ジメチルブタ-２-インジオエート１３７ｊ（２０．６ｇ，１４５ｍｍｏｌ）を加えた。図２を参照のこと。混合物を１１０℃で２時間撹拌した。反応が完了したところで、混合物を減圧下で濃縮した。粗物質をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５０／１から１／１）によって精製して、５-(２-(１,３-ジオキソイソインドリン-２-イル)エチル)-２,２-ジメチル-２,３-ジヒドロ-１Ｈ-ピロリジン-６,７-ジカルボン酸ジメチル１３７ｋ（１５ｇ，４８％）を得た。
【０２１６】
工程１０：  ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中の１３７ｋ（１５．０ｇ，３５．４ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン水和物（３．５ｇ，７０．８ｍｍｏｌ）を添加した。図２を参照のこと。混合物を９０℃で２時間撹拌した。反応を室温まで冷却した後、得られた沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄した。濾液を濃縮して、粗７,７-ジメチル-１-オキソ-２,３,４,６,７,８-ヘキサヒドロ-１Ｈ-ピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-９-カルボン酸メチル１３７ｌを黄色固形物として得た。
【０２１７】
工程１１：  ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ／１００ｍＬ）中の１３７ｌ（粗物質，３５．４ｍｍｏｌ）の溶液にＬｉＯＨ（４．２６ｇ，１７７ｍｍｏｌ）を加えた。図２を参照のこと。混合物を５０℃で１時間撹拌した。反応が完了したところで、混合物をｐＨ＜６までＨＣｌ（１Ｎ）で酸性化し、濃縮してＴＨＦを除去した。得られた白色固形物を濾過によって集め、冷水で洗浄して、７,７-ジメチル-１-オキソ-２,３,４,６,７,８-ヘキサヒドロ-１Ｈ-ピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-９-カルボン酸１３７ｍ（８ｇ，９１％）を得た。
【０２１８】
工程１２：  マイクロ波バイアルに１３７ｍ（９００ｍｇ，３．６３ｍｍｏｌ）、Ｃｕ２Ｏ（２６ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、フェナントロリン（６６ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、キノリン（３ｇ，２３ｍｍｏｌ）及びＮＭＰ（８ｍＬ）を入れた。反応混合物を２００℃で３時間マイクロ波処理した。図２を参照のこと。水を加え、混合物を１ＮのＨＣｌの添加によりｐＨ７に中和させ、ＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）によって精製して、７,７-ジメチル-２,３,４,６,７,８-ヘキサヒドロ-１Ｈ-ピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-１-オン１３７ｎ（４５０ｍｇ，６１％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.18 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 3.57 (s, 4H), 2.76 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.64 (d, J = 1.1 Hz, 2H), 1.25 (s, 6H); MS-ESI [M+H]+ = 205.1。
【０２１９】
ここに記載の手順に従って、１３７ｎを１３７に転換させた。LC-MS m/z: 502.2 [M+1]+。1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.65 (s, 1H), 8.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.10 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.40 - 4.39 (m, 1H), 4.25 - 4.21 (m, 1H), 3.83 - 3.80 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.68 - 3.61 (m, 2H), 3.04 - 3.03 (m, 1H), 2.91 - 2.87 (m, 1H), 2.68 (s, 2H), 1.67 - 1.65 (m, 1H), 1.30 (s, 6H), 1.09 - 0.99 (m, 2H), 0.91 - 0.80 (m, 2H)。
【０２２０】
実施例１３８  (１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-シクロプロパンカルボキサミド１３８
実施例１２０の手順に従って、１３８を調製した。LC-MS m/z: 516.26 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.58 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.95 - 4.90 (m, 1H), 4.46 - 4.33 (m, 2H), 4.28 - 4.14 (m, 3H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 2.42 (s, 2H), 2.02 (dt, J = 8.3, 4.3 Hz, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.21 - 1.14 (m, 1H), 1.07 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.01 - 0.95 (m, 1H), 0.65 - 0.58 (m, 1H)。
【０２２１】
実施例１３９  Ｎ-[５-[２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１３９
ここに記載の手順に従って、１３９を調製した。LC-MS m/z: 487 [M+1]+。
【０２２２】
実施例１４０  (Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド１４０
実施例１２０の手順に従って、１４０を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離させ、第一ピークとして溶出させた。LC-MS m/z: 528.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 - 4.89 (m, 1H), 4.47 - 4.33 (m, 2H), 4.29 - 4.14(m, 3H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.63 - 2.51 (m, 3H), 2.42 (s, 2H), 1.38 - 1.29 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 0.93 - 0.80 (m, 3H), 0.80 - 0.71 (m, 1H)。
【０２２３】
実施例１４１  (Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド１４１
実施例１２０の手順に従って、１４１を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離させ、第二ピークとして溶出させた。LC-MS m/z: 528.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 - 4.89 (m, 1H), 4.48 - 4.33 (m, 2H), 4.29 - 4.14 (m, 3H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.60 - 2.52 (m, 3H), 2.42 (s, 2H), 1.37 - 1.29 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 0.94 - 0.81 (m, 2H), 0.80 - 0.71 (m, 1H)。
【０２２４】
実施例１４２  Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１４２
実施例１３７の手順に従って、１４２を調製した。
【０２２５】
実施例１４３  (Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド１４３
実施例１２０の手順に従って、１４３を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離させ、第一ピークとして溶出させた。LC-MS m/z: 546.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.81 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.92 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.46 - 4.32 (m, 2H), 4.28 - 4.14 (m, 3H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.57 - 3.50 (m, 2H), 3.47 - 3.41 (m, 2H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.11 (td, J = 6.2, 5.4, 3.6 Hz, 5H)。
【０２２６】
実施例１４４  Ｎ-[５-[２-[６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１４４
工程１：  無水ＤＣＭ（２０００ｍＬ）中の４-ブロモ-２-フルオロ安息香酸１４４ａ（２５０ｇ，１．１４ｍｏｌ）の溶液に室温で塩化オキサリル（４４６ｇ，３．５１ｍｏｌ）とＤＭＦ（１０ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１時間攪拌した。図３を参照のこと。混合物を減圧下で濃縮し、塩化４-ブロモ-２-フルオロベンゾイル１４４ｂ（２７１ｇ，１００％）を黄色固形物として得、これを更に精製しないで次の工程で使用した。
【０２２７】
工程２：  ＤＣＥ（１０００ｍＬ）中の三塩化アルミニウム（１５３ｇ，１．１５ｍｏｌ）の撹拌懸濁液に０℃のＤＣＥ（１０００ｍＬ）中の１４４ｂ（２７１ｇ，１．１４ｍｏｌ）の溶液を加えた。図３を参照のこと。酸塩化物が消費されるまで３時間、暗色の懸濁液にエチレンガスをバブリングした。ついで、反応混合物を室温で一晩撹拌し、０℃に冷却し、４ＭのＨＣｌ（５００ｍＬ）でクエンチした。有機相を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝３０から１０：１）によって精製して、１-(４-ブロモ-２-フルオロフェニル)-３-クロロプロパン-１-オン１４４ｃ（２１０ｇ，６８％）を得た。
【０２２８】
工程３：  塩化ナトリウム（３３３ｇ，５．６９ｍｏｌ）と三塩化アルミニウム（１２７０ｇ，９．５２ｍｏｌ）の混合物を１３０℃で数回に分けて１４４ｃ（２１０ｇ，０．７９ｍｏｌ）に加えた。図３を参照のこと。ついで、ニート反応混合物を１８０℃で撹拌した。５時間後、反応混合物を氷水（１０００ｍＬ）と濃ＨＣｌ（１００ｍＬ）の撹拌溶液中に注いだ。クエンチした反応物を４０分間撹拌した後、ＤＣＭ（４０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａＨＣＯ３飽和溶液（１０００ｍＬ）、ブライン（２０００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５０／１，１０／１）によって精製して、５５．０ｇ（３０．４％）の５-ブロモ-７-フルオロ-２,３-ジヒドロ-１Ｈ-インデン-１-オン１４４ｄを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37 (s, 1H), 7.10-7.12 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.0４-3.10 (m, 2H), 2.50-2.66 (m, 2H)。
【０２２９】
工程４：  ＤＣＭ（７５ｍＬ）中の１４４ｄ（１０．３５ｇ，４５．１９ｍｍｏｌ）の混合物に０℃のメタンスルホン酸（５２．７３ｍＬ，７０．９２ｇ，７３７．９０ｍｍｏｌ）と続いてアジ化ナトリウム（５．８８ｇ，９０．４４ｍｍｏｌ）を数回に分けて加えた。図３を参照のこと。反応混合物を０℃で２時間攪拌し、２０％のＮａＯＨ水溶液（４０ｍＬ）を加えた。反応混合物を３０分撹拌し、水性相をＤＣＭ（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１から２／１）によって精製して、５．２ｇ（４７．１％）の６-ブロモ-８-フルオロ-３,４-ジヒドロイソキノリン-１(２Ｈ)-オン１４４ｅを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.2２-7.25 (d,J=10.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 3.4６-3.53 (m, 2H), 2.88-2.97 (m,2H); MS-ESI [M+H]+ = 243.9 / 245.9。
【０２３０】
工程５：  ＣＨ３ＣＮ（３００ｍＬ）中の１４４ｅ（２４．０ｇ，９８．３ｍｍｏｌ）の混合物に室温で(Ｂｏｃ)２Ｏ（２５．７５ｇ，１１８．０ｍｍｏｌ）とＤＭＡＰ（２４．０ｇ，１９６．７ｍｍｏｌ）を一回で加えた。図３を参照のこと。混合物を室温で１０時間攪拌した。混合物を氷水（ｗ／ｗ＝１／１）（１５０ｍＬ）に注ぎ、２０分撹拌した。水性相をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和クエン酸（１００ｍＬ×２）、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗６-ブロモ-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２(１Ｈ)-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１４４ｆ（３６ｇ，１０６％）を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.2４-7.28 (m, 2H), 3.9４-3.97 (m, 2H), 2.9５-2.99 (m, 2H), 1.59 (s, 9 H)。
【０２３１】
工程６：  ＣＨ３ＣＮ（２００ｍＬ）中の１４４ｆ（２０．０ｇ，５８．１ｍｍｏｌ）、ビス(ピナコラト)ジボロン（１８．６ｇ，７３．２ｍｍｏｌ）、及びＫＯＡｃ（２８．５ｇ，２９０．６ｍｍｏｌ）の混合物にＮ２下、室温でＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２（１０．４ｇ，１４ｍｍｏｌ）を加えた。図３を参照のこと。反応混合物をＮ２下、８０℃で一晩撹拌し、ついで濾過した。濾液を減圧下で濃縮して残留物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４０：１から１０：１）によって精製して、２０．０ｇ（８８．０％）の８-フルオロ-１-オキソ-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)-３,４-ジヒドロイソキノリン-２(１Ｈ)-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１４４ｇを得た。
【０２３２】
工程７：  ＴＨＦ（２００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２００ｍＬ）中の１４４ｇ（１６．０ｇ，４０．９ｍｍｏｌ）の溶液にＮ２下、室温で過ホウ酸ナトリウム（２６．４ｇ，１７１．８ｍｍｏｌ）を一回で加えた。図３を参照のこと。混合物を室温で８時間攪拌した。混合物を濾過し、濾過物をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブライン（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１，５／１）によって精製して、９．５０ｇ（８２．６％）の８-フルオロ-６-ヒドロキシ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２(１Ｈ)-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１４４ｈを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.5６-6.60 (d, J=13.6 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 3.83-3.86 (m, 2H), 2.8２-2.84 (m, 2H), 1.49 (s, 9 H), 1.20 (s, 1H)。
【０２３３】
工程８：  ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の１４４ｈ（３．０ｇ，１０．７ｍｍｏｌ）の混合物にＮ２下、室温で２-クロロ-２,２-ジフルオロ酢酸ナトリウム（４．１ｇ，２６．７ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（４．５ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）を加えた。図３を参照のこと。反応混合物を１２０℃で４時間攪拌した。混合物を室温まで冷却し、氷水（ｗ／ｗ＝１／１）（１５０ｍＬ）中に注ぎ、２０分撹拌した。水性相をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブライン（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１から２０／１）によって精製して、２．０ｇ（５６．６％）の６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２(１Ｈ)-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１４４ｉを得た。
【０２３４】
工程９：  ＥｔＯＡＣ（１０ｍＬ）中の１４４ｉ（２．０ｇ，６．０ｍｍｏｌ）の混合物に室温でＥｔＯＡＣ（２０ｍＬ，４Ｍ）中のＨＣｌを加えた。図３を参照のこと。反応混合物を室温で１時間攪拌し、ついで減圧下で濃縮した。粗残留物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で粉砕して、２．０ｇ（８５．９％）の６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-３,４-ジヒドロイソキノリン-１(２Ｈ)-オン１４４ｊを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.80-6.85 (m, 2H), 6.40-6.76 (m, 1H), 6.19 (s, 1H), 3.51-3.55 (m, 2H), 2.9８-3.01 (m,2H); MS-ESI [M+H]+ = 232.0。
【０２３５】
ここに記載の手順に従って、１４４ｊを１４４に転換させた。LC-MS m/z: 529.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.65 (s, 1H), 8.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.88 - 6.87 (m, 2H), 6.62 (t, J = 72.4 Hz, 1H), 4.72 - 4.64 (m, 2H), 4.32 - 4.26 (m, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.20 (m, 2H), 1.67 (m, 1H), 1.08 (m, 2H), 0.92 - 0.90 (m, 2H)。
【０２３６】
実施例１４５  (１Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-エトキシ-シクロプロパンカルボキサミド１４５
実施例１２０の手順に従って、１４５を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離した。LC-MS m/z: 546.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.81 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94 - 4.89 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 12.9, 5.2 Hz, 2H), 4.23 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.21 - 4.15 (m, 2H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.57 - 3.49 (m, 2H), 3.48 - 3.39 (m, 2H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.11 (td, J = 6.3, 5.5, 3.6 Hz, 5H)。
【０２３７】
実施例１４６  (Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.３]ヘキサン-２-カルボキサミド１４６
実施例１２０の手順に従って、１４６を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離し、第一ピークとして溶出させた。LC-MS m/z: 542.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.53 (s, 1H), 8.48 - 8.45 (m, 1H), 8.45 - 8.40 (m, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.49 - 4.32 (m, 2H), 4.29 - 4.14 (m, 3H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.25 - 2.16 (m, 2H), 2.12 - 2.02 (m, 3H), 2.02 - 1.90 (m, 2H),1.22 (s, 6H), 1.07 - 1.01 (m, 1H), 0.98 - 0.92 (m, 1H)。
【０２３８】
実施例１４７  (Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.３]ヘキサン-２-カルボキサミド１４７
実施例１２０の手順に従って、１４７を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離し、第一ピークとして溶出させた。LC-MS m/z: 542.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.53 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (d, J = ２.３ Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.48 - 4.32 (m, 2H), 4.29 - 4.13 (m, 3H), 3.89 - 3.79 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 2.12 - 2.02 (m, 3H), 2.02 - 1.87 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.07 - 1.01 (m, 1H), 0.98 - 0.92 (m, 1H)。
【０２３９】
実施例１４８  (２Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]テトラヒドロフラン-２-カルボキサミド１４８
実施例１２０の手順に従って、１４８を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離した。LC-MS m/z: 532.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 - 4.92 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 8.4, 5.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.32 (m, 2H), 4.30 - 4.21 (m, 1H), 4.21 - 4.15 (m, 2H), 3.96 (dt, J = 8.0, 6.6 Hz, 1H), 3.92 - 3.81 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.23 (dq, J = 12.1, 7.7 Hz, 1H), 2.03 - 1.93 (m 1H), 1.86 (qt, J = 1２.３, 6.3 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０２４０】
実施例１４９  (２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]テトラヒドロフラン-２-カルボキサミド１４９
実施例１２０の手順に従って、１４９を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から分離した。LC-MS m/z: 532.4 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.47 (dd, J = 8.4, 5.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.33 (m 2H), 4.31 - 4.21 (m, 1H), 4.22 - 4.15 (m, 2H), 3.96 (dt, J = 8.0, 6.6 Hz, 1H), 3.93 - 3.81 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), ２.３0 - 2.18 (m, 1H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.87 (dtt, J = 19.2, 12.4, 6.3 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０２４１】
実施例１５０  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[６-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-２-メチル-３-オキソ-ピリダジン-４-イル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１５０
実施例１２３の手順に従って、１５０を調製した。LC-MS m/z: 537.0 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.69 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 - 7.49 (m, 3H), 4.93 - 4.73 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.63 (br s, 1H), 1.98 - 1.92 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.30 - 1.24 (m, 1H)。
【０２４２】
実施例１５１  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[２-[６-(ジフルオロメトキシ)-８-フルオロ-１-オキソ-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１５１
実施例１４４の手順に従って、１５１を調製した。LC-MS m/z: 547.1 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.69 (s, 1H), 8.59 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.88 - 6.87 (m, 2H), 6.62 (t, J = 72.4 Hz, 1H), 4.94 - 4.76 (m, 1H), 4.73 - 4.65 (m, 2H), 4.39 - 4.26 (m, 2H), 3.78 - 3.66 (m, 4H), 3.27 - 3.15 (m, 2H), 1.94 - 1.89 (m, 2H), 1.25 - 1.17 (m, 1H)。
【０２４３】
実施例１５２  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１５２
実施例１２３の手順に従って、１５２を調製した。
【０２４４】
実施例１５３  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[６-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-４-メチル-３-オキソ-ピラジン-２-イル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１５３
実施例１２３の手順に従って、１５３を調製した。LC-MS m/z: 537.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.14 (s, 1H), 8.61 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.62 - 7.50 (m, 3H), 4.89 - 4.42 (m, 4H), 3.71 (s, 3H), 2.27 (s, 1H), 2.01 - 1.96 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.25 - 1.24 (m, 1H)。
【０２４５】
実施例１５４  (１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[３-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１５４
実施例１２３の手順に従って、１５４を調製した。
【０２４６】
実施例１５５  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メチル-プロパンアミド１５５
実施例１２０の手順に従って、１５５を調製した。LC-MS m/z: 504.26 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.23 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.98 - 4.90 (m, 1H), 4.49 - 4.33 (m, 2H), 4.30 - 4.11 (m, 3H), 3.89 - 3.81 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.60 - 2.56 (m, 2H), 2.44 - 2.40 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.08 (d, J = 6.8 Hz, 6H)。
【０２４７】
実施例１５６  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メトキシ-アセトアミド１５６
実施例１２３の手順に従って、１５６を調製した。LC-MS m/z: 522.21 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 13.2, 2.0 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.92 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.43 (s, 3H), 1.39 (s, 9H)。
【０２４８】
実施例１５７  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-メトキシ-アセトアミド１５７
実施例１２０の手順に従って、１５７を調製した。LC-MS m/z: 506.24 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.26 (s, 1H), 8.52 - 8.42 (m, 2H), 7.77 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 - 4.92 (m, 1H), 4.40 (dd, J = 7.5, 5.4 Hz, 2H), 4.30 - 4.14 (m, 3H), 4.06 (s, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.43 (s, 3H), 2.57 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)。
【０２４９】
実施例１５８  Ｎ-[５-[３-(ヒドロキシメチル)-２-[１-オキソ-６-(トリフルオロメトキシ)-３,４-ジヒドロイソキノリン-２-イル]-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１５８
工程１：  ＤＣＭ（２００ｍＬ）中の３-(トリフルオロメトキシ)ベンズアルデヒド１５８ａ（１０．０ｇ，５２．６ｍｍｏｌ）及び２-(トリフェニルホスホラニリデン)酢酸エチル１５８ｂ（２７．５ｇ，７８．９ｍｍｏｌ）の混合物を１５℃で２時間攪拌した。図４を参照のこと。得られた混合物を減圧下で濃縮し、粗物質をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：８）によって精製して、３-(３-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アクリル酸エチル１５８ｃ（１２．０ｇ，８８％）を黄色油として得た。
【０２５０】
工程２：  メタノール（１００ｍＬ）中の１５８ｃ（１２．０ｇ，４６．１ｍｍｏｌ）の溶液に１０％のＰｄ／Ｃ（１．０ｇ）を加え、反応混合物を水素雰囲気下、１５℃で１６時間攪拌した。図４を参照のこと。得られた混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、３-(３-(トリフルオロメトキシ)フェニル)プロパン酸エチル１５８ｄ（１１．０ｇ，粗物質）を無色の固形物として得た。
【０２５１】
工程３：  エタノール／水（１５０ｍＬ／１００ｍＬ）中の１５８ｄ（１１．０ｇ，４２ｍｍｏｌ）の混合物に水酸化リチウム（８．８ｇ，２１０ｍｍｏｌ）を加えた。図４を参照のこと。得られた混合物を１５℃で２時間攪拌した。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、３-(３-(トリフルオロメトキシ)フェニル)プロパン酸１５８ｅを無色の油として得た。
【０２５２】
工程４：  氷浴で冷却しながら、１５８ｅ（９．０ｇ，３８．５ｍｍｏｌ）を少しずつクロロスルホン酸（１００ｍＬ）に加えた。図４を参照のこと。得られた混合物を０℃で１．５時間攪拌し、氷水（１Ｌ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：３）によって精製して、５-(トリフルオロメトキシ)-２,３-ジヒドロ-１Ｈ-インデン-１-オン１５８ｆ（８００ｍｇ，９．６％）を黄色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.11 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.69 - 2.66 (m, 2H)。
【０２５３】
工程５：  ジクロロメタン（６ｍＬ）及びメタンスルホン酸（３ｍＬ）中の１５８ｆ（６５０ｍｇ，３ｍｍｏｌ）の溶液にアジ化ナトリウム（０．２９３ｍｇ，４．５ｍｍｏｌ）を加えた。図４を参照のこと。反応混合物を２０℃で１６時間攪拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）と水酸化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ，１．０Ｍ）の間で分配した。水性層をＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで逐次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：２）によって精製して、６-(トリフルオロメトキシ)-３,４-ジヒドロイソキノリン-１(２Ｈ)-オン１５８ｇ（３４０ｍｇ，４９％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.21 (br s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 2.89 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.48 - ２.３1 (m, 2H)
【０２５４】
ここに記載の手順に従って、１５８ｇを１５８に転換させた。LC-MS m/z: 529.5 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.66 (s, 1H), 8.55 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.24 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.78 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.44 - 4.38 (m, 1H), 4.31 - 4.29 (m, 1H), 3.81 - 3.78 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.70 - 3.28 (m, 1H), 3.19 - 3.15 (m, 1H), 1.70 - 1.64 (m, 1H), 1.09 (m, 2H), 0.92 - 0.90 (m, 2H)。
【０２５５】
実施例１５９  １-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-３-エチル-ウレア１５９
実施例１２０の手順に従って、１５９を調製した。LC-MS m/z: 505.26 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.23 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.94 - 4.88 (m, 1H), 4.49 - 4.33 (m, 2H), 4.19 (q, J = 6.9, 5.3 Hz, 3H), 3.84 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.08 (qd, J = 7.2, 5.3 Hz, 2H), 2.57 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.03 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
【０２５６】
実施例１６０  Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-１-メチル-ベンズイミダゾール-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１６０
工程１：  １,４-ジオキサン（１５０ｍＬ）中の２-ブロモ-４-クロロニコチンアルデヒド１６０ａ（２０ｇ，９０．４ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ-ジメチルアセトアミド（１５．６ｇ，１８０．８ｍｍｏｌ）及びメタノール（８．８ｇ，２７１ｍｍｏｌ）の溶液に水素化ホウ素ナトリウム（１．７ｇ，４５．２ｍｍｏｌ）を加えた。図５を参照のこと。混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）は、出発材料が完全に消費されたことを示した。混合物を塩化アンモニウム飽和水溶液（３０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）でクエンチさせ、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０：１から１：１の石油エーテル：酢酸エチルで溶出）によって精製して、(２-ブロモ-４-クロロピリジン-３-イル)メタノール１６０ｂ（２０ｇ，９５％）を白色固形物として得た。
【０２５７】
工程２：  Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中の１６０ｂ（２０ｇ，９０．０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ-ブチルジメチルクロロシラン（１７．６ｇ，１１７ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（１２．２ｇ，１８０ｍｍｏｌ）の混合物を１５℃で１２時間攪拌した。図５を参照のこと。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発材料が完全に消費されたことを示した。混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１で溶出）によって精製して、２-ブロモ-３-(((ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-４-クロロピリジン１６０ｃ（３０ｇ，９９％）を無色の油として得た。
【０２５８】
工程３：  メタノール（１５ｍＬ）中の１６０ｃ（３０ｇ，８９ｍｍｏｌ）、１,１'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンパラジウムジクロリド（３．６７ｇ，４．５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１０．８ｇ，１０７ｍｍｏｌ）の混合物を一酸化炭素ＣＯ（３０ｐｓｉ）下、８０℃で２時間、撹拌した。図５を参照のこと。混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１で溶出）によって精製して、３-(((ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-４-クロロピコリン酸メチル１６０ｄ（２５ｇ，８９％）を黄色固形物として得た。
【０２５９】
工程４：  エタノール（２００ｍＬ）及び水（２００ｍＬ）中の１６０ｄ（２５ｇ，７６ｍｍｏｌ）及び水酸化ナトリウム（６．１ｇ，１５２ｍｍｏｌ）の混合物を１９℃で２時間攪拌した。図５を参照のこと。混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（８０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、３-(((ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-４-クロロピコリン酸１６０ｅ（２０ｇ，８７％）を白色固形物として得た。
【０２６０】
工程５：  Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（１０００ｍＬ）中の１６０ｅ（２０ｇ，６６ｍｍｏｌ）、４-(ｔｅｒｔ-ブチル)ベンゼン-１,２-ジアミン１６０ｆ（１０．８ｇ，６６ｍｍｏｌ）、Ｏ-(７-アザベンゾトリアゾール-１-イル)-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３０ｇ，７９ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（１７ｇ，１３２ｍｍｏｌ）の混合物を１９℃で１２時間撹拌した。図５を参照のこと。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）は、出発材料が完全に消費されたことを示した。混合物を水（１０００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１で溶出）によって精製して、Ｎ-(２-アミノ-４-(ｔｅｒｔ-ブチル)フェニル)-３-(((ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-４-クロロピコリンアミド１６０ｇ（２０ｇ，６７％）を黄色固形物として得た。
【０２６１】
工程６：  酢酸（１００ｍＬ）中の１６０ｇ（１０ｇ，２２ｍｍｏｌ）の溶液を１２０℃で５時間攪拌した。図５を参照のこと。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１で溶出）によって精製して、酢酸(２-(６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メチル１６０ｈ（３．５ｇ，４４％）を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 358.2。
【０２６２】
工程７：  炭酸ジメチル（１００ｍＬ）中の１６０ｈ（５００ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）及び１,８-ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデカ-７-エン（２１２ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）の混合物を１４０℃で３時間攪拌した。図５を参照のこと。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発材料が完全に消費されたことを示した。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１で溶出）によって精製して、酢酸(２-(６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メチル１６０ｉ及び酢酸(２-(５-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メチル１６０ｊを位置異性体混合物として得た（４８０ｍｇ，９２％）。 MS-ESI: [M+H]+ 372.1。
【０２６３】
工程８：  エタノール（２０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中の１６０ｉ及び１６０ｊ（４８０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）、及び水酸化ナトリウム（１０４ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）の混合物を１９℃で２時間攪拌した。図５を参照のこと。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、(２-(６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メタノール１６０ｋ及び(２-(５-(ｔｅｒｔ-ブチル)-１-メチル-１Ｈ-ベンゾ[ｄ]イミダゾール-２-イル)-４-クロロピリジン-３-イル)メタノール１６０ｌを位置異性体混合物として得た（４００ｍｇ，９４％）。MS-ESI: [M+H]+ 330.2。
【０２６４】
ここに記載の手順に従って、１６０ｋを１６０に転換させた。LC-MS m/z: 486.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.68 (s, 1H), 8.63 - 8.62 (m, 2H), 7.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.43 (m, 2H), 7.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.96 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.46 (d, J =7.2 Hz, 2H), 4.13 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 1.68 - 1.62 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.09 - 1.07 (m, 2H), 0.92 - 0.89 (m, 2H)。
【０２６５】
実施例１６１  (Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド１６１
実施例１２３の手順に従って、１６１を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から第一ピークとして分離した。LC-MS m/z: 544.1 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.62 - 8.61 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.34 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 3H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.24 - 4.20 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.07 - 2.04 (m, 1H), 1.56 - 1.54 (m, 1H), 1.48 - 1.43 (m, 10H), 0.99 - 0.96 (m, 4H)。
【０２６６】
実施例１６２  (Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]スピロ[２.２]ペンタン-２-カルボキサミド１６２
実施例１２３の手順に従って、１６２を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から第二ピークとして分離した。LC-MS m/z: 544.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.62 - 8.61 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.34 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 3H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.24 - 4.20 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.07 - 2.04 (m, 1H), 1.56 - 1.54 (m, 1H), 1.48 - 1.43 (m, 10H), 0.99 - 0.96 (m, 4H)。
【０２６７】
実施例１６３  Ｎ-[５-[２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]ブタンアミド１６３
実施例１２０の手順に従って、１６３を調製した。LC-MS m/z: 504.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.58 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.46 - 8.43 (m, 2H), 8.15 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.18 - 5.15 (m, 1H), 4.70 - 4.45 (m, 2H), 4.30 - 4.10 (m, 3H), 3.95 - 3.80 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.58 (s, 2H), 2.52 (s, 2H), 2.42 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.77 (m, 2H), 1.28 (s, 6H), 1.06 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
【０２６８】
実施例１６４  Ｎ-[５-[２-(５-ｔｅｒｔ-ブチル-１-メチル-ベンズイミダゾール-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１６４
実施例１６０の手順に従って、１６４を調製した。LC-MS m/z: 486.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, DMSＯ-d6): 9.75 (s, 1H), 8.71 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 - 7.47 (m, 2H), 4.43 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), ２.３2 - 2.26 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 0.78 - 0.76 (m, 4H)。
【０２６９】
実施例１６５  (Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド１６５
工程１：  トルエン（２００ｍＬ)中の４-オキソピペリジン-１-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１６５ａ（１０．０ｇ，５０．２ｍｍｏｌ）及び２-(トリフェニルホスホラニリデン)酢酸エチル（２６．２ｇ，７５．３ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で１時間攪拌した。図６を参照のこと。混合物を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）によって精製して、４-(２-エトキシ-２-オキソエチリデン)ピペリジン-１-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１６５ｂ（１２．６ｇ，９３％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.72 (s, 1H), 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.52 - 3.45 (m, 4H), 2.94 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.28 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.29 (t, J = 7.6 Hz, 3H)。
【０２７０】
工程２：  水素化ナトリウム（鉱油中６０％）（２．０６ｇ，８５．８ｍｍｏｌ）を１５℃でジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）に加え、混合物を１５℃で２０分間撹拌した。図６を参照のこと。ヨウ化トリメチルスルホオキソニウム（１９．０ｇ，８５．８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２時間攪拌した後、１６５ｂ（７．７２ｇ，２８．７ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１５℃で５０時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加え、混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラム（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝２：１）によって精製して、６-アザスピロ[２.５]オクタン-１,６-ジカルボン酸６-ｔｅｒｔ-ブチル１-エチル１６５ｃ（４．４ｇ，５４％）を無色の油として得た。1H NMR (400 MHz, CD3CN): δ 4.06 - 4.04 (m, 2H), 3.40 - 3.18 (m, 4H), 1.92 - 1.90 (m, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 3H), 1.39 - 1.30 (m, 10H), 1.19 - 1.16 (m, 3H), 1.03 - 1.01 (m, 1H), 0.91 - 0.93 (m, 1H)。
【０２７１】
工程３：  エタノール（８ｍＬ）中の１６５ｃ（５００ｍｇ，１．７６ｍｍｏｌ）の溶液に水（４ｍＬ）中の水素化ナトリウム（２１２ｍｇ，５．３ｍｍｏｌ）を加えた。図６を参照のこと。混合物を１５℃で１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。水溶液をｐＨが〜４になるまで氷浴下でゆっくり希塩酸（０．５Ｍ）で酸性化させ、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、６-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)-６-アザスピロ[２.５]オクタン-１-カルボン酸１６５ｄ（３９０ｍｇ，８３％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.52 - 3.42 (m, 3H), 3.38 - 3.35 (m, 1H), 1.75 - 1.72 (m, 2H), 1.58 - 1.56 (m, 1H), 1.46 - 1.43 (m, 11H), 1.23 - 1.21 (m, 1H), 1.02 - 1.01 (m, 1H)。
【０２７２】
工程４：  ＤＣＭ（５ｍＬ）中の１６５ｄ（４００ｍｇ，１．５７ｍｍｏｌ）及びＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（０．１ｍＬ）の混合物に塩化オキサリル（３９７ｍｇ，３．１３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。図６を参照のこと。反応混合物を１５℃で２．５時間撹拌した後、濃縮した。残留物をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解させ、アンモニア水（１０ｍＬ，２８％）に滴下して加えた。混合物を１５℃で４時間攪拌した後、水（１５ｍＬ）で希釈した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、１-カルバモイル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-６-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１６５ｅ（２６０ｍｇ，６５％）を白色固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.58 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.48 - 3.39 (m, 4H), 1.73 - 1.70 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.47 - 1.41 (m, 2H), 1.40 - 1.22 (m, 2H), 0.89 - 0.87 (m, 1H)。
【０２７３】
工程５：  １６５ｅ（１００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）、２-(５-ブロモ-３'-(ヒドロキシメチル)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-[３,４'-ビピリジン]-２'-イル)-６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-８-フルオロフタラジン-１(２Ｈ)-オン １６５ｆ（２０２ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム (０)（１８ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）、４,５-ビス(ジフェニルホスフィノ)-９,９-ジメチルキサンテン（２３ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（３８４ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２下１００℃で１時間攪拌した。図６を参照のこと。雰囲気温度まで冷却した後、混合物を水（１０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、分取ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル：塩化メチレン：メタノール＝５：５：１０：１）によって精製して、１-((２'-(６-(ｔｅｒｔ-ブチル)-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３'-(ヒドロキシメチル)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-[３,４'-ビピリジン]-５-イル)カルバモイル)-６-アザスピロ[２.５]オクタン-６-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル１６５ｇ（１５０ｍｇ，５８％）を白色固形物として得た。
【０２７４】
工程６：  塩化水素メタノール溶液（５ｍＬ）中の１６５ｇ（１２０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）の溶液を１５℃で２０分間撹拌した後、濃縮した。残留物をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解させ、水性重炭酸ナトリウム（１０ｍＬ×３）で洗浄した。図６を参照のこと。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-アザスピロ[２.５]オクタン-１-カルボキサミド１６５ｈ（１００ｍｇ，９８％）を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 587.2。
【０２７５】
工程７：  水性ホルムアルデヒド（３ｍＬ，３７％）を、メタノール（５ｍＬ）中の１６５ｈ（８０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して加えた。図６を参照のこと。１５℃で３０分後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２６ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５℃で更に１時間攪拌した後、減圧下で濃縮した。反応を水（２０ｍＬ）でクエンチした後、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）によって精製して、ラセミ体Ｎ-(５-(２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソフタラジン-２(１Ｈ)-イル)-３-(ヒドロキシメチル)ピリジン-４-イル)-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-アザスピロ[２.５]オクタン-１-カルボキサミド（４０ｍｇ，５０％）を得た。MS-ESI: [M+H]+ 601.3。エナンチオマーをＳＦＣによって分離して１６５及び１６６を得た。
【０２７６】
第一の溶出ピーク１６５ ＳＦＣ ＲＴ＝０．５６１分。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.65 - 8.62 (m, 3H), 8.35 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 3H), 4.49 - 4.24 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), ２.５1 - ２.３0 (m, 7H), 1.82 (br s, 2H), 1.58 - 1.57 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.28 - 1.26 (m, 2H), 0.95 - 0.94 (m, 1H); MS-ESI: [M+H]+ 601.3。
【０２７７】
実施例１６６  (Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-６-メチル-６-アザスピロ[２.５]オクタン-２-カルボキサミド１６６
実施例１６５の手順に従って、ＳＦＣによる分離により、ＲＴ＝０．８９９分に第二の溶出ピーク１６６を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 8.64 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.58 - 7.55 (m, 2H), 7.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.48 - 4.22 (m, 3 H) , 3.73 (s, 3H) , 3.50 (br s, 3H), 2.77 (br s, 6H), 1.67 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.26 (s, 3H); MS-ESI: [M+H]+ 601.3。
【０２７８】
実施例１６７  (１Ｓ,２Ｓ)-２-フルオロ-Ｎ-[５-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２-イル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]シクロプロパンカルボキサミド１６７
ここに記載の手順に従って、１６７を調製した。LC-MS m/z: 524 [M+1]+。
【０２７９】
実施例１６８  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロピリド[３,４-ｂ]ピロリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１６８
実施例１３７の手順に従って、１６８を調製した。LC-MS m/z: 538 [M+1]+。
【０２８０】
実施例１６９  (１Ｒ,３Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド１６９
実施例１２３の手順に従って、１６９を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から第一ピークとして分離した。LC-MS m/z: 587.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.69 (s, 1H), 8.63 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 3H), 4.48 - 4.40 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.90 - 2.83 (m, 2H), 2.75 - 2.67 (m, 2H), ２.４2 (s, 3H), 2.02 - 1.95 (m, 3H), 1.84 - 1.82 (m, 1H), 1.49 - 1.48 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.19 - 1.18 (m, 1H)。
【０２８１】
実施例１７０  Ｎ２-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-Ｎ１,Ｎ１-ジメチル-シクロプロパン-１,２-ジカルボキサミド１７０
実施例１２３の手順に従って、１７０を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から、第二ピークにエナンチオマーの混合物として分離した。LC-MS m/z: 589.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.81 (s, 1H), 8.63 - 8.61 (m, 2H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 3H), 4.60 - 4.30 (m, 2H), 4.30 - 4.15 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 2.19 - 2.15 (m, 2H), 1.88 - 1.86 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.34 - 1.32 (m, 1H)。
【０２８２】
実施例１７１  Ｎ２-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-Ｎ１,Ｎ１-ジメチル-シクロプロパン-１,２-ジカルボキサミド１７１
実施例１２３の手順に従って、１７１を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から、第一ピークにエナンチオマーの混合物として分離した。LC-MS m/z: 589.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.81 (s, 1H), 8.64 - 8.61 (m, 2H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 3H), 4.60 - 4.35 (m, 2H), 4.35 - 4.15 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.97 (s, 3H), 2.19 - 2.15 (m, 2H), 1.89 - 1.84 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.35 - 1.33 (m, 1H)。
【０２８３】
実施例１７２  (１Ｓ,２Ｓ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロール[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１７２
実施例１２０の手順に従って、１７２を調製した。LC-MS m/z: 538 [M+1]+。
【０２８４】
実施例１７３  (１Ｓ,３Ｓ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド１７３
実施例１２３の手順に従って、１７３を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から、第一及び第二ピークにジアステレオマーの混合物として分離した。LC-MS m/z: 587.1 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.73 - 8.61 (m, 2H), 8.34 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 3H), 4.48 - 4.40 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.76 - ２.５0 (m, 5H), ２.３8 (s, 3H), 2.00 - 1.92 (m, 2H), 1.86 - 1.79 (m, 1H), 1.48 - 1.41 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.17 - 1.15 (m, 1H)。
【０２８５】
実施例１７４  (１Ｓ,３Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド１７４
実施例１２３の手順に従って、１７４を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から、第三ピークに単一の立体異性体として分離した。LC-MS m/z: 587.3 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.92 (s, 1H), 8.63 - 8.60 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 3H), 4.49 - 4.39 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.09 - 3.05 (m, 1H), 3.00 - 2.98 (m, 2H), 2.86 - 2.84 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.23 - 2.14 (m, 2H), 2.00 - 1.95 (m, 1H), 1.50 - 1.38 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.94 - 0.88 (m, 1H)。
【０２８６】
実施例１７５  (１Ｓ,３Ｒ)-Ｎ-[５-[２-(６-ｔｅｒｔ-ブチル-８-フルオロ-１-オキソ-フタラジン-２-イル)-３-(ヒドロキシメチル)-４-ピリジル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-５-メチル-５-アザスピロ[２.４]ヘプタン-２-カルボキサミド１７５
実施例１２３の手順に従って、１７５を調製し、キラルＨＰＬＣによってラセミ混合物から、第四ピークにジアステレオマーの混合物として分離した。LC-MS m/z: 587.2 [M+1]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.66 (s, 1H), 8.62 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 3H), 4.49 - 4.40 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.84 - 2.78 (m, 2H), 2.66 - 2.62 (m, 2H), ２.３9 (s, 3H), 1.99 - 1.93 (m, 3H), 1.82 - 1.79 (m, 1H), 1.49 - 1.48 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.18 - 1.16 (m, 1H)。
【０２８７】
実施例１７６  (１Ｒ,２Ｒ)-Ｎ-[５-[３-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロール[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-１-メチル-２-オキソ-３-ピリジル]-２-フルオロ-シクロプロパンカルボキサミド１７６
実施例１２０の手順に従って、１７６を調製した。LC-MS m/z: 538 [M+1]+。
【０２８８】
実施例９０１  生化学的Ｂｔｋアッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイのための一般化された手順は次の通りである。１×の細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液（２５ｍＭのトリス-ＨＣｌ、ｐＨ７．５、５ｍＭのβ-グリセロリン酸、２ｍＭのジチオスレイトール、０．１ｍＭのＮａ３ＶＯ４、１０ｍＭのＭｇＣｌ２）、０．５μＭのプロメガＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、及び０．０１％のＢＳＡを含むマスターミックスマイナスＢｔｋ酵素を調製する。１×の細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液、０．５μＭのＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、０．０１％のＢＳＡ、及び１００ｎｇ／ウェル(０．０６ｍＵ／ウェル)のＢｔｋ酵素を含むマスターミックスプラスＢｔｋ酵素を調製する。Ｂｔｋ酵素を次のように調製する：Ｃ末端にＶ５と６ｘＨｉｓタグを有する全長ヒト野生型Ｂｔｋ（受託番号ＮＭ-００００６１）を、このエピトープタグＢｔｋを担持するバキュロウイルスを作製するためにｐＦａｓｔＢａｃ（登録商標）ベクター（Invitrogen/Life Technologies）にサブクローニングした。バキュロウイルスの作製は、公表プロトコル「Ｂａｃ-ｔｏ-Ｂａｃバキュロウイルス発現系」（Invitrogen/Life Technologies, カタログ番号１０３５９-０１６及び１０６０８-０１６）で詳述されているＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎの指示書に基づいてなされる。第３継代のウイルスを使用してＳｆ９細胞に感染させ、組換えＢｔｋタンパク質を過剰発現させる。ついで、Ｂｔｋタンパク質を、Ｎｉ-ＮＴＡカラムを用いて均質になるまで精製する。最終タンパク質調製物の純度は、高感度Ｓｙｐｒｏ-Ｒｕｂｙ染色に基づき９５％を上回る。２００μＭのＡＴＰの溶液を水中で調製し、１ＮのＮａＯＨでｐＨ７．４に調整する。５％ＤＭＳＯ中１．２５μＬの量の化合物を９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレートに移す。化合物を個別に、１１点の用量-応答曲線で試験する（出発濃度は１０μＭ；１：２希釈である）。１８．７５μＬの量のマスターミックスマイナス酵素（陰性コントロールとして）及びマスターミックスプラス酵素を、９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレート中の適切なウェルに移す。２００μＭのＡＴＰ５μＬを９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレート中のその混合物に添加し、最終ＡＴＰ濃度を４０μＭにする。反応物を室温で１時間インキュベートする。反応を、３０ｍＭのＥＤＴＡ、２０ｎＭのＳＡ-ＡＰＣ、及び１ｎＭのＰＴ６６Ａｂ含むパーキンエルマー１Ｘ検出緩衝剤で停止させる。プレートは励起フィルター３３０ｎｍ、発光フィルター６６５ｎｍ、第２発光フィルター６１５ｎｍを使用する、パーキンエルマーエンビジョンを用い、時間分解蛍光を使用して読み込まれる。続いてＩＣ５０値が計算される。あるいは、ランタスクリーン（Lanthascreen）アッセイを、そのリン酸化ペプチド産物の定量を介してＢｔｋ活性を評価するために使用することができる。ペプチド産物上のフルオレセインと検出抗体上のテルビウムとの間に生じるＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー移動）は、ペプチドのリン酸化を減少させるＢｔｋの阻害剤の添加と共に減少する。２５μＬの最終反応容量中、Ｂｔｋ(ｈ)（０．１ｎｇ／２５μｌ反応）を５０ｍＭのヘペスｐＨ７．５、１０ｍ���のＭｇＣｌ２、２ｍＭのＭｎＣｌ２、２ｍＭのＤＴＴ、０．２ｍＭのＮａＶＯ４、０．０１％のＢＳＡ、及び０．４μＭのフルオレセインポリ-ＧＡＴと共にインキュベートする。反応は、ＡＴＰを２５μＭ（ＡＴＰのＫｍ）まで添加することによって開始する。室温で６０分間インキュベートした後、室温で３０分間、６０ｍＭのＥＤＴＡ中に、最終濃度２ｎＭのＴｂ-ＰＹ２０検出抗体を添加することにより、反応を停止させる。検出は、４９５ｎｍ及び５２０ｎｍ発光、３４０ｎＭ励起のパーキンエルマーエンビジョンで決定される。例示的なＢｔｋ阻害のＩＣ５０値を、表１及び２に示す。
【０２８９】
実施例９０２  ラモス細胞Ｂｔｋのアッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂｔｋキナーゼアッセイのための別の一般化された手順は、次の通りである。ラモス細胞を０．５×１０７細胞／ｍｌの密度で、３７℃で１時間、試験化合物の存在下でインキュベートする。次に、細胞を、１０μｇ／ｍＬの抗ヒトＩｇＭ Ｆ(ａｂ)２と共に３７℃で５分間インキュベートすることによって刺激する。細胞をペレット化し、可溶化し、タンパク質アッセイを透明可溶化物で実施する。等タンパク質量の各試料を、ＳＤＳ-ＰＡＧＥ及びウエスタンブロッティングに供し、抗ホスホＢｔｋ（Ｔｙｒ２２３）抗体（Cell Signaling Technology #3531；Epitomics, カタログ番号2207-1）又はホスホＢｔｋ（Ｔｙｒ５５１）抗体（BD Transduction Labs #558034）の何れかを使用し、Ｂｔｋ自己リン酸化を評価するか、又は抗Ｂｔｋ抗体（BD Transduction Labs #611116）を使用して各可溶化物中のＢｔｋの総量を制御する。
【０２９０】
実施例９０３  Ｂ細胞増殖アッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂ細胞増殖アッセイのための一般化された手順は、次の通りである。Ｂ細胞単離キット（Miltenyi Biotech,カタログ番号130-090-862）を使用し、８−１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓からＢ細胞を精製する。試験化合物を０．２５％のＤＭＳＯで希釈し、最終容量１００μｌで、抗マウスＩｇＭ抗体（Southern Biotechnology Associates カタログ番号1022-01）１０μｇ／ｍｌを添加する前に３０分間、２．５×１０５の精製マウス脾臓Ｂ細胞と共にインキュベートする。２４時間のインキュベーション後、１μＣｉ３Ｈ-チミジンを添加し、ＳＰＡ[３Ｈ]チミジン取り込みアッセイ系（Amersham Biosciences # RPNQ 0130）についての製造者プロトコルを使用し、回収前に更に３６時間、プレートをインキュベートする。ＳＰＡ-ビーズに基づく蛍光を、マイクロベータカウンター（Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer）で計数する。
【０２９１】
実施例９０４  Ｔ細胞増殖アッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的なＴ細胞増殖アッセイのための一般化された手順は、次の通りである。Ｔ細胞を、汎Ｔ細胞単離キット（Miltenyi Biotech, カタログ番号130-090-861）を用い、８−１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する。試験化合物を０．２５％のＤＭＳＯで希釈し、３７℃で９０分、それぞれ１０μｇ／ｍｌの抗ＣＤ３（BD#553057）及び抗ＣＤ２８（BD#553294）抗体でプレコートされた透明平底プレートにおいて、１００μｌの最終容量で、２．５×１０５の精製マウス脾臓Ｔ細胞と共にインキュベートする。２４時間のインキュベーション後、１μＣｉ３Ｈ-チミジンを添加し、ＳＰＡ[３Ｈ]チミジン取り込みアッセイ系（Amersham Biosciences # RPNQ 0130）についての製造者プロトコルを使用し、回収前に更に３６時間、プレートをインキュベートする。ＳＰＡ-ビーズに基づく蛍光を、マイクロベータカウンター（Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer）で計数する。
【０２９２】
実施例９０５  ＣＤ８６阻害アッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができるＢ細胞活性の阻害についての標準的アッセイのための一般化された手順は、次の通りである。総マウス脾細胞を、赤血球溶解により、８〜１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する（BD Pharmingen #555899）。試験化合物を０．５％のＤＭＳＯに希釈し、３７℃で６０分、透明平底プレート（Falcon353072）において、２００μｌの最終容量で、１．２５×１０６の脾細胞と共にインキュベートする。ついで、１５μｇ／ｍＬのＩｇＭ抗体（Jackson ImmunoResearch 115-006-020）を添加して細胞を刺激し、３７℃で２４時間、５％のＣＯ２でインキュベートする。２４時間のインキュベート後、細胞を円錐底の透明な９６ウェルプレートに移し、１２００×ｇ×５分間の遠心分離によってペレット化する。細胞をＣＤ１６／ＣＤ３２（BD Pharmingen #553142）、続いてＣＤ１９-ＦＩＴＣ（BD Pharmingen #553785）、ＣＤ８６-ＰＥ（BD Pharmingen #553692）、及び７ＡＡＤ（BD Pharmingen #51-68981E）でトリプル染色する。細胞を、ＢＤ ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（登録商標）でソートし、ＣＤ１９＋／７ＡＡＤ−集団においてゲートする。ゲート化集団に対するＣＤ８６表面発現のレベルを試験化合物濃度に対して測定する。
【０２９３】
実施例９０６  Ｂ-ＡＬＬ細胞の生存アッセイ
次は、生存細胞の数を測定するためにＸＴＴ読み出しを使用した標準的なＢ-ＡＬＬ(急性リンパ芽球性白血病）細胞生存研究のための手順である。このアッセイは、培養中のＢ-ＡＬＬ細胞の生存を阻害するその能力について式Ｉの化合物を試験するために使用することができる。使用することができるヒトＢ細胞急性リンパ芽球性白血病株は、ＡＴＣＣから入手可能であるＳＵＰ-Ｂ１５、ヒトプレ-Ｂ細胞ＡＬＬ系である。
【０２９４】
ＳＵＰ-Ｂ１５プレ-Ｂ-ＡＬＬ細胞を、１００μｌのイスコフ培地＋２０％ＦＢＳにおいて、５×１０５細胞／ｍｌの濃度で、複数の９６ウェルマイクロタイタープレートに播種する。ついで試験化合物を、０．４％のＤＭＳＯの最終濃度で添加する。細胞を、３７℃、５％のＣＯ２で最大３日間インキュベートする。３日後、細胞を、試験化合物を含む新しい９６ウェルプレートに１：３に分割し、更に３日間まで増殖させる。各２４時間の期間の後、ＸＴＴ溶液５０μｌを複製９６ウェルプレートの一つに添加し、吸光度の読み取りを、製造者の指示に従って２、４及び２０時間で採取する。ついで、線形範囲内（０．５−１．５）のアッセイでは、ＤＭＳＯのみで処理した細胞についてのＯＤを用いた読み取りを行い、また化合物で処理されたウェルにおける生細胞のパーセンテージをＤＭＳＯのみで処理した細胞に対して測定する。
【０２９５】
実施例９０７  ＣＤ６９全血アッセイ
ヒト血液を次の制限を満たす健康な志願者から得る：１週間薬物を非摂取、非喫煙者。血液（８の化合物を試験するために約２０ｍｌ）を、ヘパリンナトリウムを用い、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）（Becton, Dickinson and Co.）チューブに静脈穿刺によって収集する。
【０２９６】
ＤＭＳＯ中に１０ｍＭの式Ｉの化合物の溶液を、１００％ＤＭＳＯで１：１０に希釈し、ついで、１０点用量応答曲線用に、１００％ＤＭＳＯで３倍連続希釈により希釈する。化合物を更にＰＢＳで１：１０に希釈し、ついで、各化合物の５．５μｌのアリコートを２ｍｌの９６ウェルプレートに二組で添加し；ＰＢＳ中の１０％ＤＭＳＯの５．５μｌをコントロール及び無刺激ウェルとして添加する。ヒト全血−ＨＷＢ（１００μｌ）を各ウェルに添加する。混合した後、プレートを３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間インキュベートする。ヤギＦ(ａｂ')２抗ヒトＩｇＭ（５００μｇ／ｍＬの溶液１０μｌ、最終的に５０μｇ／ｍＬ）を混合しながら各ウェルに添加し（無刺激ウェルを除く）、プレートを更に２０時間インキュベートする。２０時間のインキュベーションの終わりに、試料を、３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間、蛍光標識抗体と共にインキュベートする。補償調整と初期電圧設定のため、誘導コントロール、未染色及び単一染色を含める。ついで、試料を製造者の指示に従ってＰｈａｒＭ ＬｙｓｅＴＭ（BD Biosciences Pharmingen）で溶解する。ついで、試料をＬＳＲＩＩマシン上、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社ＨＴＳ９６ウェルシステム上で実行されるのに適した９６ウェルプレートに移す。データが取得され、平均蛍光強度値が、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社ＤＩＶＡソフトウェアを使用して得られた。結果を最初にＦＡＣＳ解析ソフトウェア（Flow Jo）によって分析する。試験化合物の阻害濃度（ＩＣ５０、ＩＣ７０、ＩＣ９０等）は、例えば抗ＩｇＭによって刺激されるＣＤ２０陽性でもある、ＣＤ６９細胞の陽性パーセントが、例えば５０％低減する濃度として定義されている（無刺激バックグラウンドの８ウェルの平均を引いた後の、８つのコントロールウェルの平均）。ＩＣ７０値は、非線形回帰曲線フィットを使用して、Ｐｒｉｓｍバージョン５によって計算され、表１及び表２に示される。
【０２９７】
実施例９０８  インビトロ細胞増殖アッセイ
式Ｉの化合物の有効性を、次のプロトコル（Mendoza等(2002) Cancer Res. 62:5485-5488）を用いる細胞増殖アッセイにより測定する。試薬及びプロトコルを含むＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存アッセイが商業的に入手可能である（Promega Corp., Madison, WI, Technical Bulletin TB288）。該アッセイは、細胞に侵入し、細胞増殖を阻害する化合物の能力を評価する。アッセイ原理は、Ｃｅｌｌ-Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬の添加により細胞溶解とルシフェラーゼ反応を介した発光シグナルの生成が生じる、均一系アッセイ中に存在するＡＴＰを定量することによって、存在する生細胞の数を決定すること基づく。発光シグナルは、存在するＡＴＰの量に比例する。
【０２９８】
Ｂ細胞リンパ腫細胞株のパネル（ＢＪＡＢ、ＳＵＤＨＬ-４、ＴＭＤ８、ＯＣＩ-Ｌｙ１０、ＯＣＩ-Ｌｙ３、ＷＳＵ-ＤＬＣＬ２）を、標準的な増殖培地における３８４ウェルプレートに播種し、連続希釈されたＢｔｋ阻害剤又はＤＭＳＯ単独を各ウェルに添加した。細胞生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ（登録商標）（Promega）により９６時間のインキュベーション後に評価する。データは、ＤＭＳＯ処理されたコントロール細胞に対するＢＴＫ阻害剤で処理された細胞における相対的な細胞生存率として提示されうる。データ点は各用量レベルでの４回の反復の平均である。エラーバーは平均からのＳＤを表す。
【０２９９】
手順：  １日目−プレートへの細胞播種（３８４ウェル黒色、透明底、マイクロクリア、Falcon #353962の蓋付きＴＣプレート）、細胞の回収、３日間のアッセイのために、３８４ウェル細胞プレートにウェル当たり５４μｌ当たり１０００細胞で細胞を播種。細胞培養培地：ＲＰＭＩ又はＤＭＥＭ高グルコース、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのＬ-グルタミン、Ｐ／Ｓ。３７℃、５％ＣＯ２でＯ／Ｎインキュベート。
【０３００】
２日目−細胞への薬剤の添加、化合物の希釈、ＤＭＳＯプレート（９ポイントについて連続１：２）、９６ウェルプレートの２列目に１０ｍＭで２０μＬの化合物を添加。Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎを使用し、全９点についてプレートにわたり連続１：２を実施（１０μｌ＋２０μｌ １００％ＤＭＳＯ）。培地プレート、Ｎｕｎｃの９６ウェル円錐底ポリプロピレンプレート（カタログ番号249946）（１：５０希釈）、全てのウェルに１４７μｌの培地を添加。Ｒａｐｉｄｐｌａｔｅを使用し、ＤＭＳＯプレートの各ウェルから、培地プレートにおける各対応のウェルに、３μｌのＤＭＳＯ＋化合物を移動。
【０３０１】
細胞への薬剤添加、細胞プレート（１：１０希釈）、細胞に直接、６μｌの培地＋化合物を添加（既に細胞には５４μｌの培地）。３７℃、５％ＣＯ２で３日間、頻繁に開くことがないインキュベーター内でインキュベート。
【０３０２】
５日目−プレートの展開、室温でＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏバッファーを解凍。３７℃から細胞プレートを取り外し、約３０分間、室温に平衡化させる。Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ基質にＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏバッファーを添加（ボトルからボトル）。各ウェルの細胞に３０μｌのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Promegaカタログ番号G7572）を添加。約３０分間、プレートシェーカー上に配する。分析用ＨＴプレートリーダー（ウェル当たり０．５秒）での発光を読み取る。
【０３０３】
細胞生存率アッセイ及び組合せアッセイ：  １６時間、３８４ウェルプレートに、１０００−２０００細胞／ウェルで細胞を播種した。２日目、９連続１：２化合物希釈を、９６ウェルプレートにおいてＤＭＳＯで実施する。化合物を更に、Ｒａｐｉｄｐｌａｔｅ（登録商標）ロボット（Zymark Corp., Hopkinton, MA）を使用し、増殖培地に希釈する。ついで希釈された化合物を、３８４ウェル細胞プレート中の四重ウェルに添加し、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。４日後、生存細胞の相対数を、製造者の指示に従っＣｅｌｌ-Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ（Promega）を用いて発光により測定し、Ｗａｌｌａｃ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒ（登録商標）（PerkinElmer, Foster City）で読み取る。ＥＣ５０値を、Ｐｒｉｓｍ（登録商標）４．０ソフトウェア（GraphPad, San Diego）を用いて計算する。全てのアッセイにおいて、式Ｉの化合物及び化学療法剤は同時に又は４時間開けて（他の前では１時間）添加される。
【０３０４】
更なる例示的なインビトロ細胞増殖アッセイは、次の工程を含む：
１．  培地中に約１０４細胞を含む細胞培養物１００μｌのアリコートを３８４ウェルの不透明な壁部のあるプレートの各ウェルに入れる。
２．  培地を含み、細胞を含まないコントロールウェルを調製する。
３．  化合物を実験ウェルに添加し、３〜５日間インキュベートする。
４．  プレートを約３０分間室温に平衡化させる。
５．  各ウェル中に存在する細胞培養培地の容量に等しい容量のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ試薬を添加する。
６．  培養物をオービタルシェーカーで２分間混合し、細胞溶解を誘導する。
７．  プレートを室温で１０分間インキュベートし、発光シグナルを安定化させる。
８．  発光を記録し、ＲＬＵ＝相対発光量としてグラフで報告する。
【０３０５】
前記発明を、理解の明瞭さのために例証と実施例によってある程度詳細に述べたが、その説明及び実施例は発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。従って、全ての適切な変更及び均等物が、次の特許請求の範囲によって定まる発明の範囲に含まれると考えることができる。ここで言及された全ての特許及び科学文献の開示は、それらの全体が出典明示により明白に援用される。
【図１】
2016526551.tif 000072
【図２】
2016526551.tif 000073
【図３】
2016526551.tif 000074
【図４】
2016526551.tif 000075
【図５】
2016526551.tif 000076
【図６】
2016526551.tif 000077
【国際調査報告】
2016526551.tif 000078
2016526551.tif 000079
2016526551.tif 000080
2016526551.tif 000081
2016526551.tif 000082
2016526551.tif 000083
2016526551.tif 000084