(57)【要約】  本発明は癌の処置のための併用療法に関し、特にテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌療法剤の組み合わせに関する。本発明の併用療法は、単独で投与された各々の組成物の効果と比較して増強された抗癌治療効果を示す。いくつかの実施形態では、併用療法は相乗的な抗癌効果を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を処置するための方法であって、それを必要とする対象に対して（ａ）有効量のテルピネン−４−オールおよび（ｂ）有効量の少なくとも１種の追加の抗癌剤を投与して、テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤を各々単独で投与した効果と比較して増強された効果を有する併用療法を提供することを包含する、方法。
【請求項２】
前記併用療法が相乗的治療効果を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記癌が、固形腫瘍および非固形腫瘍からなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
テルピネン−４−オールが０．１ｍｇ／Ｋｇ体重〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重の量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記癌が、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌および前立腺癌からなる群より選択される固形腫瘍である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が化学療法剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記化学療法剤が、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、メクロレタミン、イホスファミド、ブスルファン、ロムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、ダカルバジン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、プロカルバジン、ウラムスチン、メトトレキサート、ペメトレキセド、フルダラビン、シタラビン、フルオロウラシル、フロキシウリジン、ゲムシタビン、カペシタビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、エトポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ヒドロキシウレア、トポテカン、イリノテカン、アムサクリン、テニポシド、塩酸エルロチニブおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が生物学的製剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記生物学的製剤が、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、抗ＣＤ２４抗体およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される抗体である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、前記癌を処置するのに有効であると公知である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記癌が消化管癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記癌が膵臓癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記癌が前立腺癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、単一の組成物中で投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の各々が、別々の組成物中で投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、連続して投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、一斉に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
癌細胞増殖を阻害するための方法であって、テルネピン−４−オールと少なくとも１種の追加の抗癌剤とを組み合わせて癌細胞に接触させることを包含し、該組み合わせが、テルネピン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤を各々単独で投与した効果と比較して増強された抗癌効果を提供する、方法。
【請求項２１】
癌を処置するための組成物であって、有効量のテルピネン−４−オールからなる第一の成分と、有効量の少なくとも１種の追加の抗癌剤を含む第二の成分と、を含む組成物。
【請求項２２】
テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の総体量が増強された治療的抗癌効果を提供する、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の総体量が相乗的な治療的抗癌効果を提供する、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記癌が、固形腫瘍および非固形腫瘍からなる群より選択される、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２５】
前記癌が、結腸直腸癌、胃癌、結腸直腸癌、膵臓癌および前立腺癌からなる群より選択される固形腫瘍である、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が化学療法剤である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２７】
前記化学療法剤が、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、メクロレタミン、イホスファミド、ブスルファン、ロムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、ダカルバジン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、プロカルバジン、ウラムスチン、メトトレキサート、ペメトレキセド、フルダラビン、シタラビン、フルオロウラシル、フロキシウリジン、ゲムシタビン、カペシタビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、エトポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ヒドロキシウレア、トポテカン、イリノテカン、アムサクリン、テニポシド，塩酸エルロチニブおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が生物学的製剤である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２９】
前記生物学的製剤が、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、抗ＣＤ２４抗体およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される抗体である、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記第二の成分が、特定の癌を処置するのに有効であると公知の抗癌剤である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項３１】
前記癌が、消化管癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記癌が膵臓癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３３】
前記癌が前立腺癌であり、かつ前記少なくとも１種の追加の抗癌剤が、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、前記組成物の総容積に対して０．０１％〜９９％の濃度範囲でテルピネン−４−オールを含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、前記組成物の総容積に対して０．１％〜７０％の濃度範囲でテルピネン−４−オールを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の濃度が、前記癌を処置するために用いられると公知の濃度である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項３７】
前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の濃度が、前記癌を処置するために用いられると公知の濃度と比較して低い、請求項２１に記載の組成物。
【請求項３８】
少なくとも１種の追加の抗癌剤と組み合わせて投与される癌を処置するための医薬品の調製のための有効量のテルピネン−４−オールの使用であって、それによりテルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤を含む医薬品の各々の効果と比較して抗癌性の治療効果を増強する、使用。
【請求項３９】
前記医薬品が、単独の活性薬剤としてのテルピネン−４−オールからなる、請求項３８に記載の使用。
【請求項４０】
テルピネン−４−オールを含む前記医薬品が、前記少なくとも１種の追加の抗癌剤と同時に投与される、請求項３８に記載の使用。
【請求項４１】
テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤を含む医薬品が、連続して投与される、請求項３８に記載の使用。
【請求項４２】
テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤を含む医薬品が、一斉に投与される、請求項３８に記載の使用。
【請求項４３】
癌を処置するための医薬品の調製のための有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量の少なくとも１種の追加の抗癌剤の使用であって、テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の総体量が治療的抗癌効果の増強を提供する、使用。
【請求項４４】
テルピネン−４−オールおよび前記少なくとも１種の追加の抗癌剤の総体量が相乗的な治療的抗癌効果を提供する、請求項４３に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌の処置のための併用療法に関し、特にテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌療法剤の組み合わせに関し、ここで、併用療法は抗癌効果の増強を示す。
【背景技術】
【０００２】
モノテルペン類は、生物ストレスに対する植物の防御機構に関連することが公知である、植物中に存在する主な二次代謝物である。モノテルペン類は２つのイソプレン単位からなり、精油類の中にかなりの量で見出される。さらに、多数のモノテルペン類が、強力な抗腫瘍作用を発揮すると提唱されており、いくつかは腫瘍モデル系における種々の癌の予防および処置において期待される結果を示している。とりわけ、２つの天然に存在するモノテルペン類である、ペリリルアルコール（ＰＯＨ）およびリモネン（ＬＩＭ）は、現在、その治療効果を評価するために臨床試験を実施中である。
【０００３】
テルピネン−４−オールは、Ｍｅｌａｌｅｕｃａ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ（ティーツリー油）、種々のＥｕｃａｌｙｐｔｕｓおよびＡｌｐｉｎｉａ  ｚｅｒｕｍｂｅｔ（キフゲットウ）を含む多くの芳香性植物の精油中に見出される天然に存在するモノテルペンである。テルピネン−４−オールは抗炎症剤および抗酸化剤として用いられ（例えば、Ｃａｒｓｏｎ  Ｃ  Ｆら、２００６．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １９（１）：５０〜６２）、抗ウイルス性、抗菌性、抗真菌性、および殺虫性の効果を有することが示されている。
【０００４】
テルピネン−４−オールはまた、ヒトＭ１４黒色腫細胞の増殖を損なうことも示されている。それは原形質膜で高レベルのＰ糖タンパク質を発現している薬物（アドリアマイシン）耐性の細胞株（ＡＤＲ）に対してさらに効果的であると考えられ、Ｐ糖タンパク質陽性の腫瘍細胞によって発揮されるカスパーゼ依存性アポトーシスに対する耐性を克服する（Ｃａｌｃａｂｒｉｎｉ  Ａら，２００４．Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２２：３４９〜３６０）。近年の報告では、この化合物はまた、マウスＡＥ１７内皮腫およびＢ１６黒色腫腫瘍細胞株に対して有意な抗増殖性効果を示すことが示されている。テルピネン−４−オールは、これらの進行性腫瘍細胞の原発性の壊死性細胞死および細胞周期停止を生じさせことが示されている（Ｇｒｅａｙ  Ｓ  Ｊら、２０１０．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ６５：８７７：８８８）。
【０００５】
米国特許出願公開第２００２／０１４１９５２号は、哺乳動物のメラニン形成細胞のメラニン含量を調節するため；哺乳動物の皮膚、毛髪、ウールまたは毛皮中の色素沈着を調節するため；種々の皮膚および増殖性の障害を処置または予防するための組成物および方法で用いられる、アルコール類、ジオール類および／またはトリオール類ならびにそれらのアナログを含む種々の化合物を開示しており、テルピネン−４−オールは、多くの中の１つの化合物である。
【０００６】
米国特許出願公開第２００８／００１５２４９号は、哺乳動物における軟部組織の癌の予防および処置のための、天然もしくは合成の植物精油、またはその混合物もしくは誘導体を含む薬学的組成物を開示しており、テルピネン−４−オールはそれらのうちの１つである。
【０００７】
国際公開ＷＯ２０１０／００６３７６は、癌の処置および／または予防のための組成物を開示しており、Ｍｅｌａｌｅｕｃａ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ由来の治療上有効な量のティーツリー油、またはその誘導体を含んでおり、テルピネン−４−オールを含む。癌の処置および／または予防のための、特に基底細胞癌、扁平上皮細胞癌および／または黒色腫の処置および予防ための方法もまた記載されている。
【０００８】
国際公開ＷＯ２０１２／１０４５６９は、癌の処置のためのモノテルペノイド類の組成物を開示している。開示されたモノテルペノイドは、α−テルピネオール、β−テルピネオール、γ−テルピネオール、テルピネン−４−オール、メントール、チモール、カルバクロール、カルベオール、ペリリルアルコール、イソプレゴール、リモネン−１０−オール、およびジヒドロカルベオールである。
【０００９】
癌または新生物は、細胞の制御されない増殖によって特徴づけられる悪性の増殖である。癌細胞は単独の細胞から増殖し、かつ増殖して腫瘍組織へと発達し得る。癌細胞は隣接する組織を侵襲して、血流およびリンパ系を通じて身体の他の部位へ伝播し得る（転移）。ほとんどの癌は処置され得、そして特定の種類、位置、および発達のステージ次第で治癒し得るものもある。一旦診断されれば、癌は通常は、外科手術、化学療法および放射線療法のうちの１つまたは組み合わせで処置される。
【００１０】
外科手術は一般に、初期段階の癌を処置するため、および特定の部位、例えば、乳房、結腸、および皮膚に位置する腫瘍を除去するのにのみ有効である。しかし、外科手術は、外科医がアクセスできない他の領域に位置する腫瘍の処置や、白血病のような播種性の新生物病態の処置には用いることができない。
【００１１】
放射線療法は、初期ステージおよび中期ステージの癌で臨床的に局在する疾患を処置するためにのみ有効であって、転移を伴う後期ステージの癌には有効ではない。通常、放射線を異常な増殖組織を含む被験体の身体の規定の領域に与えて、異常な組織によって吸収される線量を最大化し隣接する正常組織によって吸収される線量は最小化されるようにする。しかし、異常組織に治療用の放射線を選択的に与えることは（不可能ではないにしても）困難である。従って、異常な組織に近位の正常な組織もまた、処置の経過全体にわたって潜在的に障害のある線量の放射線に曝される。
【００１２】
ほとんどの化学療法薬物は、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド）、代謝拮抗剤（例えば、フルオロウラシル）、植物アルカロイド（例えば、パクリタキセル）、トポイソメラーゼ阻害薬（例えば、トポテカン）、および細胞傷害性抗生物質（例えば、ダウノルビシン）に分類できる。これらの薬物の全てが、細胞分裂またはＤＮＡの合成および機能を障害する。しかし、ほとんどの化学療法薬物が望ましくない全身的な影響、例えば、心臓または腎臓の毒性、骨髄形成不全、脱毛症、悪心および嘔吐を生じる。
【００１３】
免疫療法は、現在、種々の癌についての新たな処置手段であって、いくつかの見込みのある処置が既に承認されて、臨床治験で試験されている。抗体は、正常細胞に比較して悪性細胞において高密度で発現される腫瘍関連抗原を認識し得るので癌の治療に有用である。免疫療法は単独の療法として用いられてもよいし、または伝統的な薬物療法と組み合わせて用いられてもよい。過去二十年間に、抗体は、薬学的なタンパク質のうち最も速く増えているクラスである。
【００１４】
現在利用できる癌治療の欠点は、これらの欠点のうち少なくともいくつかに回答し得る併用処置の探索につながってきた。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１０８６２３号は、癌の予防および処置のための、テルピネン−４−オールを含む植物精油化合物またはそれらの混合物もしくは誘導体と、１つ以上のシグナル伝達モジュレーターとを含む薬学的組成物を開示している。薬学的組成物は、従来の癌処置、例えば、タモキシフェンとともに投与されてもよい。
【００１５】
米国特許出願公開第２００４／００９２５８３号は、新生物、特に耐性の新生物および免疫調節不全障害の処置における、インセンスオールおよび／またはフラノゲルマクレン（ｆｕｒａｎｏｇｅｒｍａｃｒｅｎ）、その誘導体、代謝物および前駆体の使用を開示している。それらの化合物（テルピネン−４−オールは、数ある中の１つである）は、単独で、または従来の化学療法剤、抗ウイルス剤、または抗寄生生物剤と組み合わせて、ならびにさらに放射線および／もしくは外科手術と組み合わせて投与されてもよい。
【００１６】
米国特許出願公開第２００８／０１１３０４２号は、従来の抗癌剤およびゼラニウム油またはそれらの化合物の併用に基づく、癌処置のための薬学的組成物および方法を開示する。組成物は、広範な癌の種類で有効であることが開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
癌疾患の重度および広がりのため、転帰の改善を伴う癌処置のための追加の有効な手段および方法の必要性が認識されている。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
発明の要旨
本発明は、様々な種類の癌を処置するための併用療法を提供する。特に、本発明は、テルピネン−４−オールと少なくとも１つの追加の癌の治療とを組み合わせた組成物および方法であって、好ましくは相乗的な効果である、抗癌効果の有意な増強を示す組成物および方法を提供する。
【００１９】
本発明は、テルピネン−４−オールおよび種々の抗癌剤が、種々の癌細胞種の増殖に対して相乗的な阻害効果を示すという予期しない発見に一部は基づく。この現象は、異なる種類の癌を提示する広範な癌細胞株で観察され、さらには結腸直腸癌のインビボモデルで観察された。
【００２０】
なんら特定の理論または作用機序に拘束されるものではないが、この相乗効果は、化学療法薬物ならびに生物学的製剤、特に抗体、を含む公知の抗癌剤の効果をテルピネン−４−オールが有意に増強する能力に起因し得る。従って、このような組み合わせは、広範な癌を処置するために用いられ得る。
【００２１】
併用療法は特に有利である。なぜなら、各々の化合物単独の効果に比較して抗癌性の効果が増強されるだけでなく、併用療法では各々の剤の投薬量が、各々の剤の単独療法と比較して減少可能であり、それでも全体的な抗腫瘍効果はやはり達成されるからである。さらに、相乗効果に起因して、患者に投与される薬物の総量は有利に減少可能であり、これが副作用の減少につながる場合もある。
【００２２】
従って、一態様によれば、本発明は癌を処置するための方法を提供し、この方法は、それを必要とする被験体に（ａ）有効量のテルピネン−４−オールおよび（ｂ）有効量の少なくとも１つの追加の抗癌剤を投与して、各々単独で投与したテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の効果と比較して治療効果が増強された併用療法を供給することを包含する。特定の例示的な実施形態によれば、併用療法は相乗的治療効果を有する。この実施形態によれば、併用療法は、治療用量で単独で投与された場合に各々の個々の構成要素によって達成される相加的な効果よりも有意にすぐれた抗癌の結果（例えば、細胞増殖停止、アポトーシス、分化の誘導、細胞死など）を生じる。
【００２３】
特定の実施形態によれば、癌は固形腫瘍である。他の実施形態によれば、癌は非固形腫瘍である。
【００２４】
いくつかの実施形態によれば、固形腫瘍癌は、中枢神経系の腫瘍、乳癌、前立腺癌、皮膚癌（基底細胞癌、細胞癌、扁平上皮細胞癌および黒色腫を含む）、子宮頸癌、子宮癌、肺癌、卵巣癌、精巣癌、甲状腺癌、星状細胞腫、神経膠腫、膵臓癌、内皮腫、胃癌、肝臓癌、結腸癌、直腸癌、腎芽細胞腫を含む腎臓癌、膀胱癌、食道癌、喉頭の癌、耳下腺の癌、胆管の癌、子宮内膜癌、腺癌、小細胞癌、神経芽細胞腫、副腎皮質癌、上皮性腫瘍、類腱腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、生殖細胞腫瘍、肝芽腫、肝細胞癌、非横紋筋肉腫  軟部組織肉腫、骨肉腫、末梢性未分化神経外胚葉性腫瘍、網膜芽細胞腫および横紋筋肉腫からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００２５】
他の実施形態によれば、非固形腫瘍は血液の癌であり、例えば、白血病およびリンパ腫が挙げられる。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００２６】
特定の例示的な実施形態によれば、癌は、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌および前立腺癌からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。特定の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は化学療法剤である。適切な化学療法剤としては、限定するものではないが、アルキル化剤、抗生物質製剤、代謝拮抗剤、ホルモン剤、植物由来の剤およびそれらの合成の誘導体、血管新生阻害剤、分化誘導剤、細胞増殖停止誘導剤、アポトーシス誘導剤、細胞傷害性薬、細胞生体エネルギーに影響する剤、すなわち、細胞のＡＴＰレベルおよびこれらのレベルを調節する分子／活性に影響する剤、生物学的製剤、例えば、モノクローナル抗体、キナーゼインヒビターならびに増殖因子およびそれらのレセプターのインヒビター、遺伝子治療剤、細胞療法、例えば、幹細胞、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【００２７】
これらの実施形態によれば、化学療法剤は、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、メクロレタミン、イホスファミド、ブスルファン、ロムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、ダカルバジン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、プロカルバジン、ウラムスチン、メトトレキサート、ペメトレキセド、フルダラビン、シタラビン、フルオロウラシル、フロキシウリジン、ゲムシタビン、カペシタビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、エトポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ヒドロキシウレア、トポテカン、イリノテカン、アムサクリン、テニポシド，塩酸エルロチニブおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００２８】
特定の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の剤は生物学的製剤、特に抗体である。いくつかの実施形態によれば、抗体は、セツキシマブ、抗ＣＤ２４抗体、パニツムマブおよびベバシズマブからなる群より選択される。
【００２９】
特定の実施形態によれば、追加の抗癌剤（ａｎｔｉ−ａｇｅｎｔ  ｃａｎｃｅｒ）は、特定の癌を処置するのに有効であることが公知である。
【００３０】
いくつかの実施形態によれば、癌は消化管癌であり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、イリノテカン、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））、シスプラチン、Ｓ−１（ジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼ（ＤＰＤ）阻害性フルオロピリミジン）およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００３１】
他の実施形態によれば、癌は膵臓癌であり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））、塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））またはＧｅｍＣａｐ（ゲムシタビンおよびカペシタビンの組み合わせ）、ならびにヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００３２】
さらに追加の実施形態によれば、癌は前立腺癌であり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００３３】
本明細書において用いる場合、「併用療法」または「併用される処置」または「組み合わせて（ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」という用語は、少なくとも２つの別個の治療剤を用いる同時のまたは並行した処置の任意の形態を指す。
【００３４】
特定の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は、同じ組成物中で、または別の組成物中で同時に投与される。他の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は連続して投与され、すなわち、テルピネン−４−オールは、追加の抗癌剤の投与の前または後のいずれかに投与される。いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤の投与は同時であり、すなわち、テルピネン−４−オールの投与期間および薬剤の投与期間は、お互いに重複する。いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤の投与は同時ではない。例えば、いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールの投与は追加の剤が投与される前に終わる。いくつかの実施形態では、追加の抗癌剤の投与はテルピネン−４−オールが投与される前に終わる。
【００３５】
特定の典型的な実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤は、単一の治療用組成物内で投与される。いくつかの実施形態によれば、治療用組成物は治療上適用される希釈剤または担体をさらに含む。
【００３６】
特定の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、体重あたり０．１ｍｇ／Ｋｇ〜体重あたり１００ｍｇ／Ｋｇの量で投与される。他の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、体重あたり０．５ｍｇ／Ｋｇ〜体重あたり２０ｍｇ／Ｋｇの量で投与される。追加の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、体重あたり１．０ｍｇ／Ｋｇ〜体重あたり１０ｍｇ／Ｋｇの量で投与される。
【００３７】
特定の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、特定の種類の癌の処置のために用いられることが公知の治療量で投与される。他の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、疾患を処置するために用いられることが公知の治療量より低い量で投与される。
【００３８】
いくつかの実施形態によれば、癌は消化管癌であり、かつ少なくとも１つの追加の抗癌剤は約０．０５μＭ〜１０μＭの濃度範囲で投与されるオキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））；または約０．０７５μＭ〜約１０μＭの濃度範囲で投与されるフルオロウラシル（５−ＦＵ）；または約０．１２５μＭ〜２０μＭの濃度範囲で投与されるセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））である。
【００３９】
他の実施形態によれば、癌は膵臓癌であり、かつ少なくとも１つの追加の抗癌剤は約０．０２５μＭ〜１００ｍＭの濃度範囲で投与されるゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））；または約０．０１２５μＭ〜１００ｍＭの濃度範囲で投与される塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））；または約２０μｇ／ｍｌ〜２ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で投与されるヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体である。
【００４０】
さらに追加の実施形態によれば、癌は前立腺癌であり、かつ少なくとも１つの追加の抗癌剤は約０．１２５μＭ〜１００ｍＭの濃度範囲で投与されるセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））；または約２０μｇ／ｍｌ〜２ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で投与されるヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体である。
【００４１】
本発明は、それを必要とする被験体における腫瘍増殖を抑制するための方法であって、被験体に（ａ）有効量のテルピネン−４−オールおよび（ｂ）有効量の少なくとも１つの追加の抗癌剤を投与して、各々が単独で投与されたテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の効果に比較して、増強された腫瘍抑制効果を有する併用療法を提供することを包含する方法をさらに考慮する。
【００４２】
本発明はまた、癌細胞増殖を阻害するための方法であって、癌細胞をテルピネン−４−オールと少なくとも１つの追加の抗癌剤と組み合わせて接触させることを包含する方法を考慮し、ここで組み合わせが、各々が単独で投与されたテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の効果に比較して増強された抗癌効果を提供する。特定の例示的な実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の組み合わせは相乗効果を有する。
【００４３】
さらに他の実施形態では、本発明は、少なくとも１つの他の抗癌剤と組み合わせたテルピネン−４−オールの使用に関し、ここでテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの他の抗癌剤が増強された治療効果、好ましくは相乗的治療効果をともに提供する。
【００４４】
ある追加の態様によれば、本発明は、少なくとも１つの追加の抗癌剤と組み合わせて投与されるべき癌を処置するための医薬品の調製のための有効量のテルピネン−４−オールの使用を提供し、これによってテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤を含む各々の医薬品の効果に比較して、抗癌効果を増強する。特定の実施形態によれば、抗癌性の効果は相乗的である。
【００４５】
特定の例示的な実施形態によれば、医薬品は、単独の活性薬剤としてテルピネン−４−オールからなる。
【００４６】
特定の実施形態によれば、テルピネン−４−オールを含んでいるか、またはそれからなる医薬品は、少なくとも１つの追加の抗癌剤と同時に投与されるべきである。他の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤を含んでいるか、またはそれらからなる医薬品は、連続的に投与されるべきである。いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤を含んでいるか、またはそれらからなる医薬品は、同時に投与されるべきである。さらに他の実施形態では、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤を含んでいるか、またはそれらからなる医薬品は、同時にではなく投与されるべきである。さらに追加の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は、同じ医薬品中で投与されるべきである。
【００４７】
さらに追加の態様によれば、本発明は、癌を処置するための組成物を提供し、組成物は有効量のテルピネン−４−オールをからなる第一の成分と、有効量の少なくとも１つの追加の抗癌剤を含む第二の成分とを含む。テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の総体量は、増強された治療的抗癌効果を提供する。特定の実施形態によれば、のテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の総体量は、相乗的な治療的抗癌効果を提供する。特定の例示的な実施形態によれば、組成物は、薬学的に許容される希釈剤または担体をさらに含む。
【００４８】
特定の実施形態によれば、組成物は、組成物の総容積に対してテルピネン−４−オールを約０．０１％〜約９９％（ｖ／ｖ）の濃度範囲で含む。特定の例示的な実施形態によれば、テルピネン−４−オールの濃度は、組成物の総容積に対して約０．１％〜８０％または０．１％〜７０％（ｖ／ｖ）である。
【００４９】
特定の実施形態によれば、組成物は、０．１ｍｇ／Ｋｇ体重〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重の量でテルピネン−４−オールを提供するような量で投与される。特定の例示的な実施形態によれば、組成物は、０．５ｍｇ／Ｋｇ体重〜２０ｍｇ／Ｋｇ体重または１．０ｍｇ／Ｋｇ体重〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重の量でテルピネン−４−オールを提供するような量で投与される。
【００５０】
特定の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、処置されるべき種類の癌に対して治療効果を有することが公知である。
【００５１】
特定の実施形態によれば、処置されるべき癌は消化管癌であり、かつ組成物は、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される少なくとも１つの追加の抗癌剤を含む。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００５２】
他の実施形態によれば、処置されるべき癌は膵臓癌であり、かつ組成物は、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される少なくとも１つの追加の抗癌剤を含む。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００５３】
さらに追加の実施形態によれば、処置されるべき癌は前立腺癌であり、かつ組成物は、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される少なくとも１つの追加の抗癌剤を含む。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。
【００５４】
特定の例示的な実施形態によれば、組成物はオキサリプラチンを約０．０５μＭ〜１０μＭの濃度範囲で含む。他の実施形態によれば、組成物はフルオロウラシルを約０．０７５μＭ〜約１０μＭの濃度範囲で含む。さらに追加の実施形態によれば、組成物はゲムシタビンを約０．０２５μＭ〜２０μＭの濃度範囲で含む。さらなる実施形態によれば、組成物は塩酸エルロチニブを約０．０１２５μＭ〜２０μＭの濃度範囲で含む。なおさらなる実施形態によれば、組成物はセツキシマブを約０．１２５μＭ〜２０μＭの濃度範囲で含む。なおさらなる実施形態では、組成物はヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体を約７５μｇ／ｍｌ〜１．５ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で含む。
【００５５】
いくつかの態様によれば、本発明は、癌を処置するための医薬品の調製のための有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量の少なくとも１つの追加の抗癌剤の使用を提供し、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の総体量が増強された治療的抗癌効果を提供する。特定の実施形態によれば、のテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の総体量は、相乗的な治療的抗癌効果を提供する。
【００５６】
本発明の他の目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明および図面から明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１−１】ＤＭＳＯは、テルピネン−４−オールが種々の癌細胞株に対してその細胞傷害性を発揮するのに必ずしも必要でないことを示す。ＤＭＳＯを、０．０１％、０．０５％または０．１０％のテルピネン−４−オールを含有する培地へ０．１％の濃度で添加した。図１Ａ〜図１Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図１Ｃ〜図１Ｅ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＰＡＮＣ−１、ＭＩＡ−ＰＡＣＡおよびＣＯＬＯ  ３５７。図１Ｆ〜図１Ｇ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。
【図１−２】ＤＭＳＯは、テルピネン−４−オールが種々の癌細胞株に対してその細胞傷害性を発揮するのに必ずしも必要でないことを示す。ＤＭＳＯを、０．０１％、０．０５％または０．１０％のテルピネン−４−オールを含有する培地へ０．１％の濃度で添加した。図１Ａ〜図１Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図１Ｃ〜図１Ｅ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＰＡＮＣ−１、ＭＩＡ−ＰＡＣＡおよびＣＯＬＯ  ３５７。図１Ｆ〜図１Ｇ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。
【図１−３】ＤＭＳＯは、テルピネン−４−オールが種々の癌細胞株に対してその細胞傷害性を発揮するのに必ずしも必要でないことを示す。ＤＭＳＯを、０．０１％、０．０５％または０．１０％のテルピネン−４−オールを含有する培地へ０．１％の濃度で添加した。図１Ａ〜図１Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図１Ｃ〜図１Ｅ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＰＡＮＣ−１、ＭＩＡ−ＰＡＣＡおよびＣＯＬＯ  ３５７。図１Ｆ〜図１Ｇ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。
【図２−１】テルピネン−４−オールの濃度依存的活性を示す。図２Ａ〜図２Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図２Ｃ〜図２Ｄ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。図２Ｅ〜図２Ｇ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡ、ＰＡＮＣ−１、およびＣＯＬＯ３５７。
【図２−２】テルピネン−４−オールの濃度依存的活性を示す。図２Ａ〜図２Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図２Ｃ〜図２Ｄ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。図２Ｅ〜図２Ｇ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡ、ＰＡＮＣ−１、およびＣＯＬＯ３５７。
【図２−３】テルピネン−４−オールの濃度依存的活性を示す。図２Ａ〜図２Ｂ：それぞれ、結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１およびＨＴ２９。図２Ｃ〜図２Ｄ：それぞれ、前立腺癌細胞株ＤＵ１４５およびＣＬ−１。図２Ｅ〜図２Ｇ：それぞれ、膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡ、ＰＡＮＣ−１、およびＣＯＬＯ３５７。
【図３−１】テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の化学療法剤の組み合わせは、各々の化合物単独での細胞傷害性と比較して癌細胞に対してより細胞傷害性であることを示す。テルピネン−４−オールを１Ａと命名する。図３Ａ〜図３Ｂ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｃ〜図３Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｅ〜図３Ｇ：膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡに対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｈ〜図３Ｉ：膵臓癌細胞株  ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｊ：膵臓癌細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ｏｘａｌ−オキサリプラチン；Ｇ−ゲムシタビン；Ｔ−Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）。
【図３−２】テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の化学療法剤の組み合わせは、各々の化合物単独での細胞傷害性と比較して癌細胞に対してより細胞傷害性であることを示す。テルピネン−４−オールを１Ａと命名する。図３Ａ〜図３Ｂ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｃ〜図３Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｅ〜図３Ｇ：膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡに対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｈ〜図３Ｉ：膵臓癌細胞株  ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｊ：膵臓癌細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ｏｘａｌ−オキサリプラチン；Ｇ−ゲムシタビン；Ｔ−Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）。
【図３−３】テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の化学療法剤の組み合わせは、各々の化合物単独での細胞傷害性と比較して癌細胞に対してより細胞傷害性であることを示す。テルピネン−４−オールを１Ａと命名する。図３Ａ〜図３Ｂ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｃ〜図３Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｅ〜図３Ｇ：膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡに対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｈ〜図３Ｉ：膵臓癌細胞株  ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｊ：膵臓癌細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ｏｘａｌ−オキサリプラチン；Ｇ−ゲムシタビン；Ｔ−Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）。
【図３−４】テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の化学療法剤の組み合わせは、各々の化合物単独での細胞傷害性と比較して癌細胞に対してより細胞傷害性であることを示す。テルピネン−４−オールを１Ａと命名する。図３Ａ〜図３Ｂ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｃ〜図３Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびオキサリプラチンまたは５−ＦＵ（それぞれ）の効果。図３Ｅ〜図３Ｇ：膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡに対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｈ〜図３Ｉ：膵臓癌細胞株  ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンまたはゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。図３Ｊ：膵臓癌細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびゲムシタビンとＴａｒｃｅｖａ（登録商標）（塩酸エルロチニブ）との併用（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ｏｘａｌ−オキサリプラチン；Ｇ−ゲムシタビン；Ｔ−Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）。
【図４−１】テルピネン−４−オールおよび抗癌抗体の併用が、各々の化合物単独の細胞傷害性と比較して癌細胞に対してさらに細胞傷害性であることを示す。図４Ａ〜図４Ｃ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。図４Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｅ：膵臓細胞株ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｆ：膵臓細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｇ−Ｉ：前立腺癌細胞株ＣＬ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ａｂ：ヒト化抗ＣＤ２４抗体。
【図４−２】テルピネン−４−オールおよび抗癌抗体の併用が、各々の化合物単独の細胞傷害性と比較して癌細胞に対してさらに細胞傷害性であることを示す。図４Ａ〜図４Ｃ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。図４Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｅ：膵臓細胞株ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｆ：膵臓細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｇ−Ｉ：前立腺癌細胞株ＣＬ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ａｂ：ヒト化抗ＣＤ２４抗体。
【図４−３】テルピネン−４−オールおよび抗癌抗体の併用が、各々の化合物単独の細胞傷害性と比較して癌細胞に対してさらに細胞傷害性であることを示す。図４Ａ〜図４Ｃ：結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。図４Ｄ：結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｅ：膵臓細胞株ＰＡＮＣ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｆ：膵臓細胞株ＣＯＬＯ３５７に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体の効果。図４Ｇ−Ｉ：前立腺癌細胞株ＣＬ−１に対するテルピネン−４−オールおよびヒト化抗ＣＤ２４抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）（それぞれ）の効果。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール；Ａｂ：ヒト化抗ＣＤ２４抗体。
【図５】ＤＬＤ−１結腸直腸癌細胞株を保有するヌードマウスの異種移植片モデルにおける、腫瘍発達に対するテルピネン−４−オールの効果を示す。図５Ａは、アッセイの間の種々の時点での腫瘍容積を示し、図５Ｂは、コントロールのマウスと比較した、テルピネン−４−オールで処置したマウスにおけるアッセイの終わりでの腫瘍重量を示す。
【図６】ＤＬＤ−１結腸直腸癌細胞株を保有するヌードマウスの異種移植片モデルにおける、腫瘍発達に対するテルピネン−４−オールおよびセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））の併用療法の効果を示す。容積測定は、テルピネン−４−オールおよびセツキシマブでの連続処置の注射前に特定の日時で行った。略号：Ａ１−テルピネン−４−オール  Ｅｒｂ：Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）。
【発明を実施するための形態】
【００５８】
発明の詳細な説明
本発明は、癌を処置するための植物由来の抗癌物質および化学療法または生物学的製剤の組み合わせの使用に関する。本発明の併用療法は種々の癌を処置するのに非常に有効であり、かつ単独で投与された成分の各々の活性に比較して、または各々の化合物の相加的な活性に比較して増強された効果を示す（相乗効果）。
【００５９】
定義
「テルピネン−４−オール」という用語は、当該分野で公知のその意味に従って本明細書において用いる。このモノテルペンはティーツリー油の主成分の１つであり、かつまた他の植物種中にも存在する。同義語としては、１−イソプロピル−４−メチル−シクロヘクス−３−エノール；１−メチル−４−イソプロピル−１−シクロヘキセン−４−オール；１−メチル−４−イソプロピル−１−シクロヘキセン−４−オール（４−テルピネオール）；１−パラ−メンテン−４−オール；４−メチル−１−（１−メチルエチル）−３−シクロヘキセン−１−オール；４−メチル−１−（１−メチルエチル）−３−シクロヘキセン−１−オール；４−メチル−１−（メチルエチル）−３−シクロヘキセン−１−オール；４−メチル−１−イソプロピル−３−シクロヘキセン−１−オールが挙げられる。「テルピネン−４−オール」という用語は、その異性体、幾何異性体、光学異性体、ジアステレオマーおよびそれらの薬学的な塩の全てを含む。
【００６０】
本明細書において用いる場合、「癌」という用語は全ての癌および癌転移を含み、肉腫、癌腫ならびに他の固形および非固形の腫瘍癌が挙げられる。固形の癌としては、限定するものではないが、中枢神経系の腫瘍、乳癌、前立腺癌、皮膚癌（基底細胞癌  細胞癌、扁平上皮細胞癌および黒色腫を含む）、子宮頸癌、子宮癌、肺癌、卵巣癌、精巣癌、甲状腺癌、星状細胞腫、神経膠腫、膵臓癌、胃癌、肝臓癌、結腸癌、腎臓癌、膀胱癌、食道癌、喉頭の癌、耳下腺の癌、胆管の癌、直腸癌、子宮内膜癌、腺癌、小細胞癌、神経芽細胞腫、中皮腫、副腎皮質癌、上皮性腫瘍、類腱腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、生殖細胞腫瘍、肝芽腫、肝細胞癌、非横紋筋肉腫  軟部組織肉腫、骨肉腫、末梢性未分化神経外胚葉性腫瘍、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍などが挙げられる。本発明の特定の実施形態によれば、癌は、消化管の癌、膵臓癌および前立腺癌からなる群より選択される。各々の可能性は、本発明の別々の実施形態に相当する。いくつかの実施形態によれば、消化管の癌は、結腸直腸癌および胃癌からなる群より選択される。特定の実施形態によれば、「癌」という用語は前癌病変をさらに包含する。
【００６１】
「被験体、被験者、対象」という用語は、本明細書において用いる場合、処置を要する癌を有している任意の哺乳動物を指す。通常、哺乳動物はヒトである。しかし、哺乳動物はまた、愛玩動物、例えば、イヌまたはネコであってもよいことがはっきりと理解されるべきである。
【００６２】
「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」などの用語は、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得るために被験体、組織または細胞に影響することを意味して本明細書で用いられる。効果は、癌の部分的または完全な治癒に関して治療的であり得る。「処置すること」とは、本明細書において用いる場合、被験体における癌の任意の処置；癌を阻害すること、すなわち、その発達を停止すること；または癌の影響を救済もしくは緩和すること、すなわち、腫瘍または癌の影響の退縮を生じさせることを含む。
【００６３】
「抗癌」という用語は、本明細書において用いる場合、「抗癌剤」、「抗癌治療効果」、「抗癌性効果」などを指しており、当該分野で公知のようなその広義の範囲で意味しており、細胞増殖の停止、アポトーシスの誘導、分化の誘導、細胞死などの活性を包含する。
【００６４】
本明細書において用いる場合、「有効量」という用語は、本明細書において上記されるような癌を処置するのに有効である、本発明の教示によるテルピネン−４−オールまたは別の抗癌剤の量を指す。具体的なの「有効量」は、被験体の処置されている特定の状態、身体的状態および臨床履歴、処置の期間ならびに適用される剤の組み合わせおよびその特定の処方物の性質に応じて変化する。本明細書において用いる場合、「治療上有効な量」という用語は、特定の癌細胞／疾患を処置するのにおいて有効であることが当該分野で公知であるテルピネン−４−オールおよび／または少なくとも１つの追加の抗癌剤の量を指す。特定の実施形態によれば、本発明の教示による「有効量」とは、当該分野で公知のような「治療上有効な量」と比較して低い。
【００６５】
「増強された効果」という用語、およびその種々の文法上のバリエーションは、テルピネン−４−オールと少なくとも１つの他の薬剤との間の相互作用を指すのに本明細書において用いられ、薬物が一緒に存在する条件下で観察される効果（例えば、細胞傷害性）は、別々に投与される個々の各薬物の効果（例えば、細胞傷害性）よりも有意に高い。一実施形態では、観察される薬物の組み合わされた効果は、個々の効果のそれぞれよりも有意に高い。特定の実施形態では、有意なという用語は、ｐ＜０．０５が観察されたことを意味する。
【００６６】
「相乗的」という用語およびその種々の文法上のバリエーションは、テルピネン−４−オールと少なくとも１つの他の薬剤との間の相互作用を指すのに本明細書において用いられ、薬物が一緒に存在する条件で観察される効果（例えば、細胞傷害性）が、別々に投与される各薬物の個々の効果（例えば、細胞傷害性）の合計よりも高い。一実施形態では、観察される薬物の組み合わされた効果は、個々の効果の合計よりも有意に高い。特定の実施形態では、有意なという用語は、ｐ＜０．０５が観察されたことを意味する。
【００６７】
本明細書において用いる場合、「オキサリプラチン」（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）という商標である）という用語は、分子式Ｃ８Ｈ１４Ｎ２Ｏ４Ｐｔおよびシス−［（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−シクロヘキサンジアミン−Ｎ，Ｎ’］［オキサラト（２）−Ｏ，Ｏ’］プラチナという化学名を有する抗新生物剤を指す。オキサリプラチンは有機白金錯体であって、白金原子が１，２−ジアミノシクロヘキサン（ＤＡＣＨ）と、および脱離基としてのシュウ酸エステルリガンドと錯化されている。
【００６８】
「フルオロウラシル」または「５−ＦＵ」という用語は、本明細書において用いる場合、ＤＮＡおよびＲＮＡ合成の阻害ならびに細胞死をもたらす、チミジル酸生成酵素を阻害するピリミジンアナログを指す。
【００６９】
本明細書において用いる場合、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標）という商標である）という用語は、活性成分である塩酸ゲムシタビン（化学式Ｃ９Ｈ１１Ｆ２Ｎ３Ｏ４ＨＣｌ）ならびに不活性成分であるマンニトールおよび酢酸ナトリウムを含有する化学療法薬物を指す。それはヌクレオシドアナログであり代謝拮抗剤として分類される。
【００７０】
本明細書において用いる場合、塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）という登録商標である）という用語は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に作用する、可逆性のチロシンキナーゼインヒビターを指す。
【００７１】
「セツキシマブ」（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）という登録商標である）という用語は、頭頸部癌ならびに特定の種類の結腸直腸癌を処置するために用いられる免疫療法薬物を指し、これはヒト化モノクローナル抗体である、活性成分セツキシマブを含む。セツキシマブは癌細胞の表面上の上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）タンパク質を特異的に認識して結合する。この結合はレセプターを遮断し、成長因子がレセプターに結合して、細胞の増殖および増大を刺激することを妨げる。それはまた、免疫系が癌細胞を攻撃することも誘発する。
【００７２】
「ベバシズマブ」（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）という商標である）という用語は本明細書において用いる場合、ヒト血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）に結合してその生物学的活性を阻害する、組み換えヒト化モノクローナルＩｇＧ１抗体を指す。ベバシヅマブは、ヒトフレームワーク領域、およびマウス抗体の相補性決定領域（ＶＥＧＦに結合する）を含む。Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）は約１４９ｋＤの分子量を有する。
【００７３】
本明細書において用いる場合、「ヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体」という用語は、細胞表面ＣＤ２４タンパク質に結合する非成熟ヒト化ＩｇＧ１抗体を指す。これは、マウスＳＷＡ１１モノクローナル抗体から生成された市販でない抗体である。
【００７４】
一態様によれば、本発明は癌を処置するための方法を提供し、この方法は、それを必要とする被験体に（ａ）有効量のテルピネン−４−オールおよび（ｂ）有効量の少なくとも１つの抗癌剤を投与して、各々単独で投与したテルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の効果と比較して抗癌効果が増強された併用療法を提供することを包含する。特定の例示的な実施形態によれば、併用療法は、相乗的治療効果を有する。
【００７５】
テルピネン−４−オールは合成で生成されてもよく、またはティーツリー油および他の植物から当業者に周知の方法によって単離されてもよい。特定の典型的な実施形態によれば、テルピネン−４−オールはティーツリー油から単離される。
【００７６】
本明細書における化学療法剤に対する言及は、化学療法剤またはその誘導体に適用し、従って本発明は、これらの実施形態のいずれも考慮して包含する（剤；剤または誘導体（単数または複数））。化学療法剤または他の化学的部分の「誘導体」または「アナログ」としては、限定するものではないが、その化学療法剤もしくは部分に対して構造的に同様であるか、またはその化学療法剤もしくは部分と同じ一般的な化学分類である化合物が挙げられる。化学療法剤または部分の誘導体またはアナログは、その化学療法剤もしくは部分の同様の化学的特性および／または物理的特性（例としては、例えば、官能基）を保持する。
【００７７】
本発明の組み合わせにおける使用のための適切な化学療法剤としては限定するものではないが、アルキル化剤、抗生物質製剤、代謝拮抗剤、ホルモン剤、植物由来の剤、血管新生阻害剤、分化誘導剤、細胞増殖停止誘導剤、アポトーシス誘導剤、細胞傷害性薬、細胞生体エネルギーに影響する剤、生物学的製剤、例えば、モノクローナル抗体、キナーゼインヒビターならびに増殖因子およびそれらのレセプターのインヒビター、遺伝子治療剤、細胞療法、例えば、幹細胞、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【００７８】
アルキル化剤とは、生物学的に重要な分子中でアミノ、カルボキシル、スルフヒドリルおよびリン酸基と共有結合を形成することによって細胞機能を障害する薬物である。アルキル化の最も重要な部位は、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質である。アルキル化剤は、活性については細胞増殖に依存するが、細胞周期の段階に特異的ではない。本発明における使用に適切なアルキル化剤としては、限定するものではないが、ビスクロロエチルアミン類（ナイトロジェンマスタード類、例えば、クロラムブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ウラシルマスタード）、アジリジン類（例えば、チオテパ）、アルキルアルコンスルホネート類（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア類（例えば、ＢＣＮＵ、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン）、未分類のアルキル化剤（例えば、アルトレタミン、ダカルバジンおよびプロカルバジン）、および白金化合物（例えば、カルボプラスチン、オキサリプラチンおよびシスプラチン）が挙げられる。
【００７９】
アドリアマイシンのような抗腫瘍抗生物質は、ＤＮＡをグアニン−シトシンおよびグアニン−チミンの配列でインターカレートし、自然な酸化および遊離の酸素ラジカルの形成を生じ、これが鎖の切断の原因となる。本発明における使用に適切な他の抗生物質製剤としては、限定するものではないが、アントラサイクリン類（例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシンおよびアントラセンジオン）、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、およびプリカトマイシンが挙げられる。
【００８０】
本発明における使用に適切な代謝拮抗剤としては、限定するものではないが、フロキシウリジン、フルオロウラシル、メトトレキセート、ロイコボリン、ヒドロキシウレア、チオグアニン、メルカプトプリン、シタラビン、ペントスタチン、リン酸フルダラビン、クラドリビン、アスパラギナーゼ、およびゲムシタビンが挙げられる。
【００８１】
本発明における使用に適切なホルモン剤としては、限定するものではないが、エストロゲン、プロゲストジェン、抗エストロゲン、アンドロゲン、抗アンドロゲン、ＬＨＲＨアナログ、アロマターゼインヒビター、ジエチルスチベストロール、タモキシフェン、トレミフェン、フルオキシメステロール、ラロキシフェン、ビカルタミド、ニルタミド、フルタミド、アミノグルテチミド、テトラゾール、ケトコナゾール、酢酸ゴセレリン、ロイプロリド，酢酸メゲストロール、およびミフェプリストンが挙げられる。
【００８２】
植物由来の剤としてはタキサン類が挙げられ、これらは、イチイ植物の針葉から抽出される前駆体の半合成の誘導体である。これらの薬物は、新規な１４員の環、タキサンを有する。微小管分解を生じるビンカアルカロイド類と異なり、タキサン類（例えば、タキソール）は、微小管重合および安定性を促進し、従って有糸分裂において細胞周期をブロックする。他の植物由来の剤としては、限定するものではないが、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビンゾリジン、ビノレルビン、エトポシド、テニポシド、およびドセタキセルが挙げられる。
【００８３】
本発明における使用に適切な生物製剤としては、限定するものではないが、免疫調節性タンパク質、腫瘍抗原に対するモノクローナル抗体、腫瘍抑制遺伝子、キナーゼインヒビターならびに増殖因子およびそれらのレセプターのインヒビター、ならびに癌ワクチンが挙げられる。例えば、免疫調節性のタンパク質は、インターロイキン２、インターロイキン４、インターロイキン１２、インターフェロンＥｌ、インターフェロンＤ、インターフェロンα、エリスロポエチン、顆粒球−ＣＳＦ、顆粒球、マクロファージ−ＣＳＦ、カルメット−ゲラン桿菌、レバミゾール、またはオクトレオチドであってもよい。本発明の教示によって用いられ得る生物製剤の例は、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））である。
【００８４】
細胞のＡＴＰレベルおよび／またはこれらのレベルを調節する分子／活性に影響する細胞の生体エネルギーに影響する剤。
【００８５】
近年の開発によって、伝統的な細胞傷害性療法およびホルモン療法に加えて、癌の処置のための追加の療法が導入された。例えば、多くの形態の遺伝子療法が、前臨床または臨床治験中である。さらに、腫瘍血管形成（血管新生）の阻害に基づくアプローチが現在開発中である、この概念の目的は、腫瘍を、新しく構築された腫瘍血管系により提供される栄養および酸素の供給から遮断することである。さらに、癌治療はまた、新生物細胞の最終分化の誘導によっても試みられている。適切な分化剤としては、ヒドロキサム酸、ビタミンＤおよびレチノイン酸の誘導体、ステロイドホルモン、増殖因子、腫瘍プロモーター、およびＤＮＡまたはＲＮＡ合成のインヒビターが挙げられる。また、ヒストンデアセチラーゼインヒビターは、本発明で用いられる適切な化学療法剤である。
【００８６】
特定の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、被験体に影響する種類の癌を処置するのに有効であることが公知である。
【００８７】
いくつかの実施形態によれば、方法は、消化管癌を処置するためである。特定の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のオキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））を投与し、それによって消化管癌を処置することを包含する。他の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のフルオロウラシル（５−ＦＵ）を投与し、それによって消化管癌を処置することを包含する。追加の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量の抗ＣＤ２４抗体を投与し、それによって消化管癌を処置することを包含する。さらなる例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））を投与し、それによって消化管癌を処置することを包含する。なお追加の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））を投与し、それによって消化管癌を処置することを包含する。特定の実施形態によれば、消化管癌は、胃癌および結腸直腸癌からなる群より選択される。
【００８８】
他の実施形態によれば、方法は、膵臓癌を処置するためである。特定の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））を投与し、それによって膵臓癌を処置することを包含する。他の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量の塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））を投与し、それによって膵臓癌を処置することを包含する。追加の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体を投与し、それによって膵臓癌を処置することを包含する。
【００８９】
さらに追加の実施形態によれば、方法は、前立腺癌を処置するためである。特定の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））を投与し、それによって前立腺癌を処置することを包含する。追加の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））を投与し、それによって前立腺癌を処置することを包含する。他の例示的な実施形態によれば、方法は、被験体に対して有効量のテルピネン−４−オールおよび有効量のヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体を投与し、それによって前立腺癌を処置することを包含する。
【００９０】
本発明の任意の態様による処置の投薬量および期間を決定することは、十分に当業者の技術の範囲内である。当業者は、任意の所定の時点で、処置を開始すべきか、継続すべきか、中断すべきか、または再開すべきかを決定するために患者を容易にモニターできる。例えば、化合物の投薬量は、被験体の症状、年齢および性別などを考慮して、個々の症例によって容易に決定される。本発明の薬学的組成物中に組み込まれる化合物の量は、投薬経路、化合物の溶解度、投与経路、投与スキームなどで変化する。特定の患者についての有効量は、処置されている状態、患者の全体的な健康度、ならびに投与の方法、経路および用量などの要因に依存して変化してもよい。当該分野で公知のパラメーターを用いる臨床家は、適切な用量の決定を行う。一般に、用量は、最適用量よりもいくらか少ない量で開始し、その後、所望の効果または最適効果が得られるまで少量ずつ増大される。適切な投薬量は、当該分野で公知の関連の開示をさらに考慮することによって決定され得る。
【００９１】
特定の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、同程度の処置の効果を達成するのに必要な少なくとも１つの追加の抗癌剤の通常の用量を少なくともおよそ５％、１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれを超える％のいずれか、減少させるのに十分な量で投与される。他の実施形態によれば、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、同程度の処置の効果を達成するのに必要な化学療法剤の通常の用量を少なくともおよそ５％、１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれを超える％のいずれか、減少させるのに十分な量で投与される。
【００９２】
特定の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、０．１ｍｇ／Ｋｇ体重〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重の量で投与される。他の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、０．５ｍｇ／Ｋｇ体重〜２０ｍｇ／Ｋｇ体重の量で投与される。追加の実施形態によれば、テルピネン−４−オールは、１．０ｍｇ／Ｋｇ体重〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重の量で投与される。
【００９３】
しかし、組成物中に存在する追加の抗癌剤（単数または複数）、処置される被験体（年齢、性別、体重など）、処置される癌の種類および疾患の段階によって、より低濃度または高濃度のテルピネン−４−オールを用いてもよいことが明確に理解されるべきである。本明細書において以下に例示されるとおり、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の併用は、癌細胞株の生存を有意に減少した。併用の阻害活性は、各々の成分の相加的な阻害活性に比較して有意に高く、従って相乗効果と定義された。
【００９４】
テルピネン−４−オールまたはこれ（「テルピネン−４−オール」）を含む組成物および少なくとも１つの追加の抗癌剤またはこれ（「追加の抗癌剤」）を含む組成物は、同時に投与されても（すなわち、同時投与）および／または連続して投与されても（すなわち、連続投与）よい。
【００９５】
いくつかの実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも追加の抗癌剤が同時に投与される。「同時の投与」という用語は、本明細書において用いる場合、テルピネン−４−オールおよびこの少なくとも追加の抗癌剤が、約１５分以下、例えば、ほぼ１０分、５分または１分のいずれかを超えない時間間隔で投与される。薬物が同時に投与される場合、テルピネン−４−オールおよび少なくとも追加の抗癌剤は、同じ組成物（例えば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも追加の抗癌剤の両方を含んでいる組成物）の中に含まれてもよいし、または別々の組成物（例えば、テルピネン−４−オールが、１つの組成物中に含まれ、および少なくとも追加の抗癌剤が別の組成物中に含まれる）中に含まれてもよい。
【００９６】
他の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は連続して投与される。「連続投与」という用語は、本明細書において用いる場合、テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤が、約１５分を超える時間間隔で、例えば、ほぼ２０、３０、４０、５０、６０分またはそれを超える時間のいずれかより大きい時間間隔で投与される。テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤のいずれが最初に投与されてもよい。テルピネン−４−オールおよび追加の抗癌剤は別々の組成物中に含まれ、それらの組成物は同じパッケージ中に含まれてもまたは異なるパッケージ中に含まれてもよい。
【００９７】
さらに追加の実施形態によれば、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の投与は同時であり、すなわちテルピネン−４−オールの投与期間および少なくとも１つの追加の抗癌剤の投与期間は、お互いに重複する。いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の投与は同時ではない。例えば、いくつかの実施形態では、テルピネン−４−オールの投与は、少なくとも１つの追加の抗癌剤が投与される前に終えられる。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の抗癌剤の投与は、テルピネン−４−オールが投与されるまえに終えられる。これらの同時でない投与の間の時間間隔は、数日間隔〜数週間隔におよんでもよい。
【００９８】
テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の投薬頻度は、投与医師の判定に基づいて、処置の経過にわたって調節されてもよい。別々に投与される場合、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は、種々の投薬頻度または間隔で投与され得る。例えば、テルピネン−４−オールが毎週投与され、一方で少なくとも１つの追加の抗癌剤は、より高頻度でまたはより低頻度で投与されてもよい。いくつかの実施形態では、両方の成分の持続放出性の処方物を用いてもよい。徐放性を達成するための種々の処方物およびデバイスは、当該分野で公知である。さらに、テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤は、同じ投与経路を用いて投与されても、または異なる投与経路を用いて投与されてもよい。
【００９９】
本発明はさらに、本明細書に記載される種々の投与構成の組み合わせを包含することが、明確に理解される。テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの追加の抗癌剤の組み合わせを使用する本明細書に記載の方法は、単独で行われてもよいし、または外科手術、放射線、化学療法、免疫療法、遺伝子治療などを含む別の治療と組み合わせて行われてもよい。
【０１００】
本発明の併用療法の成分は単独で投与されてもよいが、組み合わせの成分は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに含んでいる薬学的組成物中で投与されることが考慮される。各々の成分は別の薬学的組成物中で投与されてもよく、または組み合わせが薬学的組成物中で投与されてもよい。
【０１０１】
従って、追加の態様によれば、本発明は、癌を処置するための組成物を提供し、この組成物は、有効量のテルピネン−４−オールからなる第一の成分と、有効量の少なくとも１つの追加の抗癌剤を含んでいる第二の成分とを含んでいる。テルピネン−４−オールおよび少なくとも１つの他の抗癌剤は、単独で投与された各々の成分の効果に比較して少なくとも増強されている治療的な抗癌効果を一緒になって提供し、一実施形態では、相乗的である。
【０１０２】
特定の例示的な実施形態によれば、本発明の組成物は、薬学的に許容される希釈剤、賦形剤または担体をさらに含んでいる薬学的組成物である。
【０１０３】
特定の実施形態によれば、薬学的組成物は、テルピネン−４−オールを組成物の総容積に対して約０．０１％〜約９９％（ｖ／ｖ）の濃度範囲で含む。特定の例示的な実施形態によれば、テルピネン−４−オールの濃度は組成物の総容積に対して、約０．１％〜９０％、または０．１％〜８０％、または０．１％〜７０％（ｖ／ｖ）である。
【０１０４】
特定の実施形態によれば、薬学的組成物は、０．０１ｍｇ／Ｋｇ体重〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重の量でテルピネン−４−オールを提供するような量で投与される。特定の例示的な実施形態によれば、組成物は、テルピネン−４−オールを０．５ｍｇ／Ｋｇ体重〜２０ｍｇ／Ｋｇ体重、または１．０ｍｇ／Ｋｇ体重〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重の量で提供するような量で投与される。
【０１０５】
本発明の薬学的組成物は、種々の経路による投与のために処方されてもよい。薬学的組成物は、経口的に、非経口に、吸入スプレーによって、局所に、直腸に、経鼻的に、口腔内に、膣内にまたは移植されたリザーバを介して投与されてもよい。固形腫瘍への直接投与は、本発明によって明らかに包含される。薬学的組成物は、任意の従来の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含んでもよい。組成物の非経口投与としては、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、クモ膜下腔内、病変内および頭蓋内の注射または注入技術が挙げられる。通常は、投与経路は、処置されるべき癌の種類および本発明の組成物の処方に応じて適合される。
【０１０６】
本発明の薬学的組成物は、局所的に投与されても、または全身投与されてもよい。全身投与とは、血液中に、または活性成分の投与の経路から離れた部位に、有効な量の活性成分が生じる任意の投与方式または投与経路を意味する。
【０１０７】
薬学的組成物および治療用組成物の調製のための方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡに記載のとおり、当該分野で周知である。
【０１０８】
本発明による薬学的組成物の調製の間、活性成分は通常、固体、半固体または液体の物質であってもよい担体または賦形剤と混合される。組成物は、錠剤、丸剤、カプセル、ペレット、顆粒、粉末、トローチ剤（ｌｏｚｅｎｇｅ）、小袋（ｓａｃｈｅｔ）、カシェー（ｃａｃｈｅｔ）、エリキシル、懸濁物、分散物、エマルジョン、溶液、シロップ、エアロゾル（固体として、または液体媒体中で）、例えば、最大１０重量％までの活性化合物を含んでいる軟膏、軟性および硬性のゼラチンカプセル、坐剤、無菌注射液、および無菌パッケージの粉末の形態であってよい。
【０１０９】
担体は、従来用いられる任意のものであってよく、溶解度および本発明の化合物との反応性の欠如などの化学−物理的考慮によって、ならびに投与の経路によってのみ制限される。担体の選択は、薬学的組成物を投与するために用いられる特定の方法によって決定される。適切な担体のいくつかの例としては、ラクトース、グルコース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水およびメチルセルロースが挙げられる。処方物は、潤滑剤、例えば、滑石、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油；湿潤剤、サーファクタント、乳化剤および懸濁剤；防腐剤、例えば、メチル−ヒドロキシベンゾエートおよびプロピルヒドロキシベンゾエート；甘味料；香料、着色料、緩衝化剤（例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩）、崩壊剤、保湿剤、抗菌剤、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム）、キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）、および張度調節剤、例えば、塩化ナトリウムを追加で含んでもよい。他の薬学的な担体は、水およびオイルなどの無菌液であってもよく、例えば、ピーナツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物または合成由来のもの、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成の溶媒が挙げられる。水は、薬学的組成物が静脈内に投与される場合の好ましい担体である。生理食塩水溶液および水性デキストロースおよびグリセロール溶液もまた、特に注射用液のための液体担体として使用されてよい。
【０１１０】
一実施形態では、薬学的組成物中において、活性成分は任意の許容できる液体担体中（例えば、脂肪酸、例えば、ミセルまたはリポソームを形成するためのオイル）に溶解される。
【０１１１】
錠剤などの固形組成物を調製するために、主な活性成分（単数または複数）を薬学的な賦形剤と混合して、本発明の化合物の均一な混合物を含む固形の予備処方組成物を形成する。これらの予備処方組成物を均一という場合、活性成分が組成物全体にわたって均一に分散され、その結果組成物が、錠剤、丸剤およびカプセルのような均等に有効な単位剤形へと容易に小分割され得ることを意味する。次いでこの固体予備処方物は、所望の量の活性化合物を含有している上記の種類の単位剤形に小分割される。
【０１１２】
薬学的組成物を調製するには任意の方法を用いてよい。固体剤形は、湿式造粒法、乾式造粒法、直接圧縮法などによって調製されてよい。本発明の固体剤形は、長時間作用の利点をもたらす剤形を提供するためにコーティングされてもよいし、そうでなければ配合されてもよい。例えば、錠剤または丸剤は内側調剤および外側調剤の成分を備えてもよく、外側調剤の成分は、内側調剤の成分の上を覆うエンベロープの形態である。２つの成分は腸溶性の層によって隔てられてもよく、腸溶性の層は胃での消化に耐えるように機能して内側成分を十二指腸へと無傷のまま通過させるかまたは内側成分の放出を遅らせる。種々の材料をこのような腸溶性の層またはコーティングに用いてもよく、このような物質としては、多数のポリマー酸およびポリマー酸とセラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースなどの物質との混合物が挙げられる。
【０１１３】
経口投与または注射による投与のための、本発明の組成物が組み込まれ得る液体型としては、水溶液、適切に風味付けされたシロップ、水性または油性の懸濁物、および綿実油、ゴマ油、ココナッツオイル、またはピーナッツ油のような食用油による風味づけされたエマルジョン、ならびにエリキシルおよび類似の薬学的ビヒクルが挙げられる。
【０１１４】
吸入またはインシュレーションのための組成物としては、薬学的に許容される水性もしくは有機性の溶媒中の溶液および懸濁物、またはそれらの混合物、ならびに粉末が挙げられる。液体または固体の組成物は、上記のような適切な薬学的に許容される賦形剤を含んでもよい。好ましくは、組成物は、局所的または全身的な効果のために口腔または鼻腔の呼吸経路によって投与される。好ましくは薬学的に許容される溶媒中の組成物が不活性ガスの使用によって噴霧されてもよい。噴霧された溶液は噴霧装置から直接呼吸されてもよいし、または噴霧装置がフェイスマスクのテントに連結されるか、または間欠的陽圧呼吸器に連結されてもよい。溶液、懸濁液、または粉末組成物は、好ましくは経口的にまたは経鼻的に、適切な方式で処方物を送達する装置から投与されてもよい。
【０１１５】
本発明の方法で使用される別の処方物は、経皮送達デバイス（「パッチ」）を使用する。このような経皮パッチは、量の制御された、本発明の化合物の連続的なまたは不連続的な注入を提供するために用いられ得る。薬剤の送達のための経皮パッチの構築および使用は、当該分野で周知である。
【０１１６】
さらに別の実施形態では、組成物は、局所投与のために、例えば、軟膏、ゲル、点滴薬またはクリームとして調製される。例えば、クリーム、ゲル、点滴薬、軟膏などを用いる体表への局所投与のために、本発明の化合物は、薬学的担体の有無にかかわらず生理学的に許容される希釈液中に調製されて適用されてもよい。本発明は、癌、例えば、黒色腫を処置するために局所的にまたは経皮的に用いられてもよい。局所またはゲルベースの形態のためのアジュバントとしては、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよびウッドワックス（ｗｏｏｄ  ｗａｘ）アルコールが挙げられる。
【０１１７】
別の処方物としては、当該分野で公知のとおり、経鼻スプレー、リポソーム処方物、徐放性処方物、身体へ薬物を送達するポンプ（機械的ポンプまたは浸透圧ポンプを含む）徐放性処方物などが挙げられる。
【０１１８】
組成物は、好ましくは単位剤形で処方される。「単位剤形」という用語は、ヒト被験体または他の哺乳動物のための単位投薬量として適切な、物理的に別個の単位を指し、各々の単位は、適切な薬学的賦形剤と組み合わせて、所望の治療効果を生じるように算出された所定の量の活性物質を含んでいる。
【０１１９】
処方物の調製においては、他の成分と組み合わせる前に、適切な粒子サイズを提供するために活性成分を粉砕する必要がある場合がある。活性化合物が実質的に不溶性である場合、それは通常２００メッシュ未満の粒子サイズまで粉砕される。活性成分が実質的に水溶性である場合、粒子サイズは一般的に処方物中での実質的に均一な分布を提供するために、粉砕することによって調節される（例えば、約４０メッシュ）。
【０１２０】
本発明の薬学的組成物を処置の必要な領域に局所的に投与することが所望され得る；これは、例えば、限定するものではないが、術中の局所注入、手術の有無にかかわらず供給血管を介した肝臓への注入、局所適用、例えば、術後の創傷被覆と組み合わせて、注射によって、カテーテルによって、坐剤によって、またはインプラント（このインプラントは、多孔性、非多孔性またはゼラチン状物質である）によって達成され得る。いくつかの好ましい実施形態によれば、投与は、例えば、シリンジを介した、腫瘍または新生物または前新生物性の組織の部位での直接注射によってでもよい。
【０１２１】
化合物はまた、任意の都合の良い経路で、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮内層（例えば、口腔粘膜、直腸および腸粘膜など）を通じた吸収によって、投与されてもよく、かつ他の治療活性剤と一緒に投与されてもよい。投与は局部であることが好ましいが、全身であってもよい。さらに、本発明の薬学的組成物を、脳室内およびクモ膜下腔内の注射を含む任意の適切な経路によって中枢神経系へ導入することが所望され得る；脳室内注射は、例えば、リザーバに結合された脳室内カテーテルによって容易に行われてもよい。肺投与がまた、例えば、吸入器またはネブライザー、およびエアロゾル化剤を有する処方物の使用によって、行われてもよい。
【０１２２】
本発明の化合物は、即時放出で送達されてもよいし、または徐放性システムで送達されてもよい。一実施形態では、特定の臓器または腫瘍に対して化学療法剤を送達するために用いられるもののような、インフュージョンポンプが本発明の化合物を投与するのに用いられてもよい（Ｂｕｃｈｗａｌｄら、１９８０，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７；Ｓａｕｄｅｋら、１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４を参照のこと）。好ましい形態では、本発明の化合物は、選択された部位で制御された期間にわたって化合物を放出する、生分解性で、生体適合性のポリマーインプラントと組み合わせて投与される。好ましいポリマー物質の例としては、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリエチレン酢酸ビニル、それらのコポリマーおよび混合物が挙げられる（徐放性の医学的応用（Ｍｅｄｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ），ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編集），１９７４，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．を参照のこと）。さらに別の実施形態では、徐放性のシステムが治療標的の近位に配置されてもよく、したがってわずかな画分の全身用量しか必要としない。
【０１２３】
さらに、時には、薬学的組成物は、非経口投与（皮下、静脈内、動脈内、経皮、腹腔内または筋肉内の注射）のために処方されてもよく、かつ水性および非水性の、等張性の滅菌注射溶液を含んでもよく、それは抗酸化剤、緩衝液、静菌薬、および処方物を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質、ならびに懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、および防腐剤を含む水性および非水性の滅菌の懸濁物を含んでもよい。石油、動物、植物、または合成の油などのオイル、ならびに脂肪アルカリ金属、アンモニウム、およびトリエタノールアミン塩などの石鹸、ならびに適切な界面活性剤もまた、非経口投与のために用いられてもよい。上記の処方物はまた、直接の腫瘍内注射のために用いてもよい。さらに、注射部位での刺激を最小限にするかまたは排除するために、組成物が１つ以上の非イオン性サーファクタントを含んでもよい。適切なサーファクタントとしては、ソルビタンオレイン酸モノエステルなどの、ポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル、およびプロピレンオキシドとプロピレングリコールとの縮合によって形成される、疎水性基部を有するエチレンオキシドの高分子量付加物が挙げられる。
【０１２４】
非経口処方物は、アンプルおよびバイアルのような、単回用量または多数回用量の密閉容器中に存在してもよく、かつ無菌の液体担体の添加しか必要としないフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管されてもよく、例えば、注射用に水が、使用の直前に添加される。即時的な注射溶液および懸濁物は、滅菌の粉末、顆粒、および錠剤（以前に記載されており当該分野で公知の種類）から調製されてもよい。
【０１２５】
あるいは、本発明の組み合わせは、白血球除去療法および他の関連の方法などの血液透析で用いられてもよく、例えば、血液は患者から、カラム／中空線維膜、カートリッジなどを通じた透析などの種々の方法によって取り出され、テルピネン−４−オールおよび化学療法薬物を用いてエキソビボで処理されて、かつ処理後に患者に戻される。このような処置方法は、当該分野で周知でありかつ記載されている。例えば、Ｋｏｌｈｏら、（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｖｉｒｏｌ．１９９３，４０（４）：３１８−２１）；Ｔｉｎｇら、（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１９７８，２５（１）：３１−３）（それらの内容は、その全体が参照によって本明細書に援用される）を参照のこと。
【０１２６】
いくつかの実施形態によれば、本発明の組成物は消化管癌を処置するためであり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、抗ＣＤ２４抗体、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））からなる群より選択される。
【０１２７】
他の実施形態によれば、組成物は膵臓癌を処置するためであり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される。
【０１２８】
さらに追加の実施形態によれば、組成物は前立腺癌を処置するためであり、少なくとも１つの追加の抗癌剤は、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））およびヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体からなる群より選択される。
【０１２９】
以下の実施例は、本発明のいくつかの実施形態をさらに詳細に例示するために示す。しかしそれらが本発明の広範な範囲を限定するとは決して解釈されるべきではない。当業者は、本発明の範囲を逸脱することなく、本明細書に開示される原理の多くのバリエーションおよび改変を容易に考案できる。
【０１３０】
実施例
材料および方法
材料
テルピネン−４−オール：ＣＡＳ番号：５６２−７４−３；分子式：Ｃ１０Ｈ１８Ｏ；分子量：１５４．２５
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）：ＣＡＳ  Ｎｏ．６７−６８−５；分子式：（ＣＨ３）２ＳＯ
オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標））
フルオロウラシル（５−ＦＵ）
ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））
塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））
セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））
ベバシヅマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））
ヒト化抗ＣＤ２４モノクローナル抗体（ｍＡｂ）
用いられる細胞株は、本明細書において下の表１に列挙される。
【０１３１】
【表１】
2016503004.tif 000002
【０１３２】
方法
細胞増殖条件
ヒト結腸腺癌グレードＩＩ細胞、ＨＴ２９；ヒト結腸癌細胞、ＨＣＴ１１６；ヒト結腸癌細胞、ＣＯＬＯ３２０；転移性膵臓腺癌のヒト細胞株、ＣＯＬＯ３５７；ヒト膵臓癌上皮様細胞株，ＰＡＮＣ−１；およびヒト膵臓癌細胞、ＭＩＡ−ＰＡＣＡを、５％熱不活化（ＨＩ）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１％グルタミンおよびストレプトマイシン／ペニシリンを補充した高グルコースダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で増殖した。
【０１３３】
中度の転移能を有するアンドロゲン非依存性の高未分化前立腺癌細胞株、ＤＵ１４５；進行性アンドロゲン非依存性未分化細胞株、ＣＬ−１；および結腸直腸腺癌ＤＬＤ１細胞を、５％のＨＩ−ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中で増殖した。
【０１３４】
細胞傷害性アッセイ
細胞に対するテルピネン−４−オールの細胞傷害性効果を、３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ）アッセイを用いて測定した。細胞を９６ウェルのプレート（１×１０４細胞／ウェル）中に、完全培地で播種した。増殖の１２〜１６時間後、種々の濃度の記載された各々の剤を細胞に三連で添加した。７２時間後、培地を１ｍｇ／ｍｌのＭＴＴを含有する新鮮培地（１ウェルあたり１００μｌ）で置き換え、細胞をさらに２〜４時間インキュベートした。ＭＴＴ−ホルマザン結晶を、１００μｌの抽出緩衝液の添加によって溶解した。５７０ｎｍおよび参照波長の６９０ｎｍでの吸光度を、自動のマイクロプレートリーダーで記録した。同じ条件下で、ただし試験の剤を添加することなく増殖したコントロールの細胞株と比較して生きている細胞の相対数を決定した。
【０１３５】
インビボの抗癌活性のための異種移植片モデル
雄の無胸腺ヌードマウス（６〜８週齢）（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、無菌のケージ中で飼育して、無菌性に注意しながら取り扱った。マウスは自由に給餌させた。テルピネン−４−オールの治療的抗癌活性を単独または追加の抗癌剤と組み合わせて以下のとおり試験した：指数関数的に増殖しているＤＬＤ１癌細胞を回収して、１注射あたりの０．２ｍｌのＰＢＳあたり細胞５×１０６個の最終濃度で再懸濁した。この細胞を、マウスの背中の２つの部位に同時に注射した。腫瘍が触診可能になった場合、マウスを、本明細書の下に記載されるような処置群に無作為に分けた。同じモデルを、本明細書の上記の表１に列挙されるような癌細胞株の追加の種類で用いる。
【０１３６】
アポトーシスアッセイ
細胞を、１２ウェルのプレート（１×１０５細胞／ウェル）中に完全培地で播種する。本明細書の上の「細胞増殖条件」のセクションに記載されるような種々の剤を７２時間にわたって添加する。アネキシンＶの検出は、製造業者のプロトコール（アネキシンＶアポトーシスキット（Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｋｉｔ），ＭＢＬ）に従って行う。細胞をＰＢＳで洗浄し、次いでアネキシンＶ結合タンパク質の溶液中でインキュベートする。ＦＡＣＳ分析の直前に、細胞をヨウ化プロピジウムの溶液中でインキュベートする。
【０１３７】
実施例１：テルピネン−４−オール細胞傷害性活性に対するＤＭＳＯの効果
治療剤として細胞傷害性化合物を用いることの障害の１つは、薬学的に許容される溶液中でのそれらの溶解度の低さおよび／またはそれらが細胞へ浸透する能力の低さである。従って、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の添加が必須であるか、またはそれによってテルピネン−４−オールの細胞傷害性活性が改善されるかを試験した。図１Ａ〜図１Ｇで提示されるとおり、種々の癌細胞に対するテルピネン−４−オールの細胞傷害性活性はＤＭＳＯの存在には依存しない；逆に、いくつかの場合には（例えば、図１Ｂの結腸直腸細胞株ＨＴ２９で）、ＤＭＳＯの存在下でより低い活性が観察された。
【０１３８】
実施例２：癌細胞株に対するテルピネン−４−オールの細胞傷害性活性
次の工程では、テルピネン−４−オールの効果が濃度依存性であるか否かを試験した。アッセイ条件は、本明細書の上の「細胞増殖条件」のセクションに記載のとおりであった。４つの濃度のテルピネン−４−オールを試験した：０．００５％、０．０１％、０．０２％および０．１０％（ｖ／ｖ）。図２に示されるとおり、テルピネン−４−オールの細胞傷害性効果は、試験した全ての癌細胞株で濃度依存性であった。
【０１３９】
実施例３：癌細胞株に対するテルピネン−４−オールと公知の化学療法剤との併用の細胞傷害性効果
テルピネン−４−オールと種々の化学療法剤との併用の癌細胞株に対する細胞傷害性効果を図３に示す。アッセイ条件は、本明細書の上の「細胞増殖条件」のセクションに記載のとおりであった。テルピネン−４−オールは、相乗効果の容易な検出が可能となるように、中程度に効果的であると示された０．０１％の濃度で添加した。試験した組み合わせは以下のとおりであった。
【０１４０】
結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対する効果：オキサリプラチン（０．２μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ａ）；５−ＦＵ（０．３μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｂ）。
【０１４１】
結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対する効果：オキサリプラチン（０．５μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｃ）；５−ＦＵ（０．５μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｄ）。
【０１４２】
膵臓癌細胞株ＭＩＡ−ＰＡＣＡに対する効果：ゲムシタビン（０．１μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）；（図３Ｅ）ゲムシタビン（０．１μＭの濃度で）；塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））（０．１μＭの濃度で）；ならびにテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｆ）；ゲムシタビン（０．１μＭの濃度で）；塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））（０．１μＭの濃度で）；ならびにテルピネン−４−オール（０．０２％の濃度で）（図３Ｇ）。
【０１４３】
膵臓癌細胞株ＰＡＮＣ−１に対する効果：ゲムシタビン（１．０μＭの濃度で）およびテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｈ）；ゲムシタビン（１．０μＭの濃度で）；塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））（０．１μＭの濃度で）；ならびにテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｉ）。
【０１４４】
膵臓癌細胞株ＣＯＬＯ３５７に対する効果：ゲムシタビン（０．０５μＭの濃度で）；塩酸エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））（０．０５μＭの濃度で）；ならびにテルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）（図３Ｊ）。
【０１４５】
試験した癌細胞株に対する有意な細胞傷害性効果を有することが公知である化学療法剤を、この実験では選択した。用いた濃度はまた、当該分野で公知の有効濃度に基づいた。試験した全ての条件で、細胞傷害性の相乗効果が、テルピネン−４−オールと試験した化学療法剤との間で観察された。
【０１４６】
実施例４：癌細胞株に対するテルピネン−４−オールと抗癌抗体との併用の細胞傷害性効果
テルピネン−４−オールと、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））を含む、抗癌剤として臨床で用いられるいくつかの公知の抗体との併用を試験した。現在試験中であるヒト化抗ＣＤ２４抗体（Ｎａｄｉｒ  Ａｒｂｅｒ教授のご厚意で入手）も試験した。試験した組み合わせは以下のとおりであった。
【０１４７】
結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ１に対する効果：テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびヒト化抗ＣＤ２４抗体（１５０μｇ／ｍｌ）（図４Ａ）；テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびセツキシマブ（１μＭの濃度で）（図４Ｂ）；テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびベバシズマブ（５０μＭの濃度で）（図４Ｃ）；
【０１４８】
結腸直腸癌細胞株ＨＴ２９に対する効果：テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびヒト化抗ＣＤ２４抗体（１５０μｇ／ｍｌ）（図４Ｄ）。
【０１４９】
膵臓細胞株ＰＡＮＣ−１に対する効果：テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびヒト化抗ＣＤ２４抗体（７５μｇ／ｍｌ）（図４Ｅ）。
【０１５０】
膵臓細胞株ＣＯＬＯ３５７に対する効果：テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびヒト化抗ＣＤ２４抗体（７５μｇ／ｍｌ）（図４Ｆ）。
【０１５１】
前立腺癌細胞株ＣＬ−１に対する効果：テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびヒト化抗ＣＤ２４抗体（１５０μｇ／ｍｌ）（図４Ｇ）；テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびセツキシマブ（１μＭの濃度で）（図４Ｈ）；テルピネン−４−オール（０．０１％の濃度で）およびベバシズマブ（５０μＭの濃度で）（図４Ｉ）。
【０１５２】
上記の化学療法剤と比較して非常に異なる作用方式を有すると考えられるテルピネン−４−オールと抗癌抗体との組み合わせは、試験した全ての癌細胞株に対して有意な相乗的細胞傷害性効果を示した。
【０１５３】
実施例５：ＤＬＤ−１結腸直腸癌細胞株を保有しているヌードマウスの異種移植片モデルにおけるテルピネン−４−オールの評価
本研究は、テルピネン−４−オール単独のインビボ抗癌活性を検討することを目的とした。本明細書において上の方法のセクションに記載される雄の無胸腺ヌードマウスを用いる異種移植片モデルを用いた。
【０１５４】
細胞注射の９日後にマウスを処置群およびコントロール群に無作為に分けて、処置を腫瘍内注射によって開始した。コントロール群（５匹のマウス）は１％のＤＭＳＯを含む５０μｌのＰＢＳ溶液を投与された；処置群（５匹のマウス）は０．１％（ｖ／ｖ）のテルピネン−４−オール（１Ａ）を含有する１％のＤＭＳＯを含む５０μｌのＰＢＳ溶液を投与された。
【０１５５】
マウスは２日毎に処置した。テルピネン−４−オール／コントロールによる処置の開始から始めて３日毎にマウスを秤量して腫瘍容積を測定した（ノギスを用いて）。腫瘍容積は４／３π・ａ・ｂ２として算出した。実験の終わりに、マウスを麻酔後に頚部脱臼によって屠殺して、腫瘍を切除して容積および体重を測定した。各腫瘍の半分を−８０℃で保存して、もう半分を４％のホルムアルデヒド中で保存した。図５は、１注射につき約１．６５ｍｇ／ｋｇ体重となる、０．１％テルピネン−４−オールを含む５０μｌの溶液の投与が、移植された腫瘍の容積および重量を有意に低下したことを明らかに示す。これらの結果は、テルピネン−４−オールが腫瘍増殖を停止させる能力を示している。
【０１５６】
実施例６：ＤＬＤ−１結腸直腸癌細胞株を保有するヌードマウスの異種移植片モデルにおけるテルピネン−４−オールと免疫療法薬物との併用療法の評価
本研究は、テルピネン−４−オール（１Ａ）単独での、および生物製剤セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｏｘ（登録商標））と併用しての抗癌活性を検討した。
【０１５７】
上の実施例５に記載のようにＤＬＤ−１結腸直腸癌細胞株を保有するヌードマウスの同じ異種移植片モデルを用いた。細胞移植の１１日後に、マウスを無作為に群に分けて処置を開始した。化学療法剤（セツキシマブ、本明細書において以降では商品名Ｅｒｂｉｔｏｘ（登録商標）で呼ぶ）を、テルピネン−４−オールの投与２４時間前に腹腔内（ｉ．ｐ）注射によって投与した。テルピネン−４−オールは腫瘍に直接投与した（腫瘍内注射）。
【０１５８】
処置群は以下のとおりである（１群あたり４匹のマウス）：コントロール−１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ；Ｅｒｂ−１０ｍｇ／Ｋｇ体重のＥｒｂｉｔｕｘ（登録商標）；１Ａ−１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ中に溶解される５０μｌの０．１％テルピネン−４−オール；ならびにＥｒｂ＋１Ａ−１０ｍｇ／Ｋｇ体重のＥｒｂｉｔｕｘと１％ＤＭＳＯ含有のＰＢＳ中に溶解される０．１％テルピネン−４−オールとの組み合わせ。マウスは、２週間にわたって２日毎に処理した。各追加の処置前にマウスを秤量してノギスを用いて腫瘍容積を測定した。腫瘍容積は４／３π・ａ・ｂ２として算出した。
【０１５９】
図６は、処置の２週間後に得られた結果を示す。また図５に示されるとおり、この時点でテルピネン−４−オールの投与は腫瘍増殖に対してわずかな効果しか有さない；しかし、テルピネン−４−オールとＥｒｂｉｔｕｘ（登録商標）との組み合わせは、各処置単独で観察される減少に比較して腫瘍容積の有意な減少を生じた。さらに、併用活性は相乗的であった：テルピネン−４−オールが腫瘍サイズを（コントロールに比較して）約３．７％低下させ、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）が約２３．５％低下させた一方で、併用療法は腫瘍サイズを（コントロールと比較して）約３８．３％低下させた。
【０１６０】
アッセイをさらに４〜７日間継続する。実験の終わりに、マウスを麻酔後に頸部脱臼によって屠殺して、さらなる分析のために腫瘍を摘出する。
【０１６１】
実施例７：テルピネン−４−オールと化学療法／生物製剤との併用療法の評価
本明細書の上の方法のセクションに記載される異種移植片モデルを用いて、テルピネン−４−オールと追加の化学療法または免疫療法薬物とのさらなる組み合わせを試験する。
【０１６２】
癌細胞（本明細書の上の表１において列挙したＩ細胞種から選択）を、マウスの背中に１つの部位または２つの部位で皮下に注射する。腫瘍が触知可能となるとき（約０．３〜０．５ｃｍ３）、マウスを無作為に群に分けて処置を開始する。通常は、テルピネン−４−オールを腫瘍に直接投与し（腫瘍内注射）、追加の抗癌剤は腹腔内（ｉ．ｐ）注射によって投与する。化学療法剤はテルピネン−４−オールの注射の２４時間前に注射する。投与される処置は、本明細書の下の表２に列挙する。
【０１６３】
【表２】
2016503004.tif 000003
【０１６４】
マウスは２〜３週間にわたって一日おきに処理する。テルピネン−４−オール処置の開始から３日ごとにマウスを秤量して腫瘍容積を測定し（ノギスを用いて）、測定結果をプロットする。腫瘍容積は４／３π・ａ・ｂ２として算出する。実験の終わりに、マウスを麻酔後に頚部脱臼によって屠殺し、腫瘍を切除して秤量する。
【０１６５】
特定の実施形態の前述の詳細な説明によって本発明の一般的な性質が十分に明らかになるため、本発明者以外の者は、現在の知識を適用することによって、過度の実験なく、かつ一般的概念から逸脱することなく、このような特定の実施形態を容易に改変するか、および／または種々の適用について適合させることが可能である。従って、そのような適合および改変は、開示される実施形態の等価物の意味および範囲内に包含されるべきであり、かつ包含されるものとする。本明細書に使用される用語または専門用語は、説明の目的のためであって、限定ではないことが理解されるべきでる。種々の開示される機能を行うための手段、材料および工程は、本発明から逸脱することなく種々の別の形態をとってもよい。
【図１−１】
2016503004.tif 000004
【図１−２】
2016503004.tif 000005
【図１−３】
2016503004.tif 000006
【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
2016503004.tif 000009
【図３−１】
2016503004.tif 000010
【図３−２】
2016503004.tif 000011
【図３−３】
2016503004.tif 000012
【図３−４】
2016503004.tif 000013
【図４−１】
2016503004.tif 000014
【図４−２】
2016503004.tif 000015
【図４−３】
2016503004.tif 000016
【図５】
2016503004.tif 000017
【図６】
2016503004.tif 000018
【国際調査報告】
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