(57)【要約】  本発明は、腫瘍始原細胞の除去に有用な薬剤、その組成物、その使用、及び、その使用方法を提供する。【選択図】図１【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩
【化１】
2016503005.tif 000023
（式中、環Ａ及び環Ｂは、それぞれ独立して、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環であり；
nは０〜４であり；
mは０〜３であり；
pは０〜２であり；
R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、-CN、-NO2、-R、-OR、-SR、-N(R)2、-N(R)C(O)R、-C(O)RN(R)2、-N(R)C(O)N(R)2、-N(R)C(O)OR、-OC(O)N(R)、-N(R)SO2R、-SO2RN(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、-OC(O)R、-C(O)OR、-S(O)R、又は-SO2Rであり；
各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、３〜８員の飽和又は部分的に不飽和な単環式炭素環、フェニル、８〜１０員の二環式芳香族炭素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する４〜８員の飽和又は部分的に不飽和である単環式複素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜５個有する８〜１０員の二環式複素芳香環から選ばれる、任意に置換された基であり；
R2、R2’は、それぞれ独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族であるか、一緒に=O又は=Sを形成し；
Qは-O-、-S-、又は-N(R)-であり；
XはO又はSであり；
Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-、-N(R)-、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)N(R)-、-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)C(O)-、-N(R)C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2N(R)-、-N(R)S(O)2-、-OC(O)-、又は、-C(O)O-で置き換わり；
Gは-O-、-S-又は-N(R)-であり；
R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、-OC(O)R、又は保護水酸基である）
であって、前記化合物は
【化２】
2016503005.tif 000024
ではない、一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記化合物は、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物から選択される化合物又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１に記載の化合物。
【化３】
2016503005.tif 000025
【請求項３】
前記化合物は、下記化合物又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１に記載の化合物。
【化４】
2016503005.tif 000026
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル若しくはエステルの塩と、薬学的に許容可能な担体、補助剤又はビヒクルとを含む、組成物。
【請求項５】
生物学的有効量と最大耐量との間の量の前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル若しくはエステルの塩を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
腫瘍始原細胞を除去して関連する病気、疾患又は病態を治療するための、式Ｉに記載の化合物
【化５】
2016503005.tif 000027
（式中、環Ａ及び環Ｂは、それぞれ独立して、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環であり；
nは０〜４であり；
mは０〜３であり；
pは０〜２であり；
R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、-CN、-NO2、-R、-OR、-SR、-N(R)2、-N(R)C(O)R、-C(O)RN(R)2、-N(R)C(O)N(R)2、-N(R)C(O)OR、-OC(O)N(R)、-N(R)SO2R、-SO2RN(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、-OC(O)R、-C(O)OR、-S(O)R、又は-SO2Rであり；
各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、３〜８員の飽和又は部分的に不飽和な単環式炭素環、フェニル、８〜１０員の二環式芳香族炭素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する４〜８員の飽和又は部分的に不飽和である単環式複素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜５個有する８〜１０員の二環式複素芳香環から選ばれる、任意に置換された基であり；
R2、R2’は、それぞれ独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族であるか、一緒に=O又は=Sを形成し；
Qは-O-、-S-、又は-N(R)-であり；
XはO又はSであり；
Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-、-N(R)-、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)N(R)-、-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)C(O)-、-N(R)C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2N(R)-、-N(R)S(O)2-、-OC(O)-、又は、-C(O)O-で置き換わり；
Gは-O-、-S-又は-N(R)-であり；
R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、-OC(O)R、又は保護水酸基である）、又は、その薬学的に許容可能な塩若しくは組成物の使用であって、
前記組成物は、生物学的有効量と最大耐量との間の量の前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル若しくはエステルの塩を含む、使用。
【請求項７】
前記化合物は、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物から選択される化合物である、請求項６に記載の使用。
【化６】
2016503005.tif 000028
【請求項８】
前記化合物は、I-1、I-2又はI-3から選択される化合物である、請求項６に記載の使用。
【化７】
2016503005.tif 000029
【請求項９】
患者内の腫瘍始原細胞の除去方法であって、
前記患者に、式Iの化合物
【化８】
2016503005.tif 000030
（式中、環Ａ及び環Ｂは、それぞれ独立して、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環であり；
nは０〜４であり；
mは０〜３であり；
pは０〜２であり；
R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、-CN、-NO2、-R、-OR、-SR、-N(R)2、-N(R)C(O)R、-C(O)RN(R)2、-N(R)C(O)N(R)2、-N(R)C(O)OR、-OC(O)N(R)、-N(R)SO2R、-SO2RN(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、-OC(O)R、-C(O)OR、-S(O)R、又は-SO2Rであり；
各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、３〜８員の飽和又は部分的に不飽和な単環式炭素環、フェニル、８〜１０員の二環式芳香族炭素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する４〜８員の飽和又は部分的に不飽和である単環式複素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜５個有する８〜１０員の二環式複素芳香環から選ばれる、任意に置換された基であり；
R2、R2’は、それぞれ独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族であるか、一緒に=O又は=Sを形成し；
Qは-O-、-S-、又は-N(R)-であり；
XはO又はSであり；
Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-、-N(R)-、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)N(R)-、-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)C(O)-、-N(R)C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2N(R)-、-N(R)S(O)2-、-OC(O)-、又は、-C(O)O-で置き換わり；
Gは-O-、-S-又は-N(R)-であり；
R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、-OC(O)R、又は保護水酸基である）、又は、その薬学的に許容可能な塩若しくは組成物を投与する工程を含み、
前記組成物は、生物学的有効量と最大耐量との間の量の前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル若しくはエステルの塩を含む、方法。
【請求項１０】
前記化合物は、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物から選択される化合物である、請求項９に記載の方法。
【化９】
2016503005.tif 000031
【請求項１１】
前記化合物は、I-1、I-2又はI-3から選択される化合物である、請求項９に記載の方法。
【化１０】
2016503005.tif 000032
【請求項１２】
前記癌幹細胞は、
ａ）DU145、PC3、LNCaP、MDA MB 231、MCF7、T47D若しくはHeLaの細胞株；又は、
ｂ）胸、前立腺、脳、血液、骨髄、肝臓、膵臓、皮膚、腎臓、結腸、卵巣、肺、睾丸、陰茎、甲状腺、副甲状腺、脳下垂体、胸腺、網膜、葡萄膜、結膜、脾臓、頭、首、気管、胆嚢、直腸、唾液腺、副腎、喉、食道、リンパ節、汗腺、脂腺、筋肉、心臓若しくは胃を含む組織から得られた癌組織サンプル、
のいずれかで見られるものである、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記除去は癌の寛解につながる、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記癌は、胸、前立腺、脳、血液、骨髄、肝臓、膵臓、皮膚、腎臓、結腸、卵巣、肺、睾丸、陰茎、甲状腺、副甲状腺、脳下垂体、胸腺、網膜、葡萄膜、結膜、脾臓、頭、首、気管、胆嚢、直腸、唾液腺、副腎、喉、食道、リンパ節、汗腺、脂腺、筋肉、心臓又は胃から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、追加の化学療法薬と併用して投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
前記追加の化学療法薬は、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝抵抗物質、チューブリン安定化剤、チューブリン構築阻害剤、ＤＮＡ複製阻害剤、細胞周期阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、細胞毒抗生物質、又は、任意の前記薬剤のナノ粒子コンジュゲート又はタンパク質コンジュゲートから選択される、請求項１５に記載の方法。ある実施形態において、本発明の化合物又は組成物と併用される前記化学療法薬には、限定されないが、イマチニブ、ニロチニブ（nilotinib）、ゲフィチニブ、スニチニブ（sunitinib）、カルフィルゾミブ（carfilzomib）、サリノスポラミドA（salinosporamide A）、レチン酸、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、イホスファミド、アザチオプリン、メルカプトプリン、ドキシフルリジン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、メトトレキサート、チオグアニン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、ポドフィロトキシン、エトポシド、テニポシド、タフルポシド（tafluposide）、パクリタキセル、ドセタキセル、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、アクチノマイシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、バルルビシン（valrubicin）、イダルビシン、エピルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン、ミトザントロン、メルファラン、ブスルファン、カペシタビン、ペメトレキセド（pemetrexed）、エポチロン（epothilone）、13-シス-レチン酸、2-CdA、2-クロロデオキシアデノシン、5-アザシチジン、5-フルオロウラシル、5-FU、6-メルカプトプリン、6-MP、6-TG、6-チオグアニン、アブラキサン（Abraxane）、Accutane（登録商標）、アクチノマイシン-D、Adriamycin（登録商標）、Adrucil（登録商標）、Afinitor（登録商標）、Agrylin（登録商標）、Ala-Cort（登録商標）、アルデスロイキン（Aldesleukin）、アレムツズマブ（Alemtuzumab）、ALIMTA、アリトレチノイン（Alitretinoin）、Alkaban-AQ（登録商標）、Alkeran（登録商標）、オールトランスレチン酸、αインターフェロン、アルトレタミン（Altretamine）、アメトプテリン、アミホスチン、アミノグルテチミド、アナグレリド、Anandron（登録商標）、アナストロゾール、アラビノシルシトシン、Ara-C、Aranesp（登録商標）、Aredia（登録商標）、Arimidex（登録商標）、Aromasin（登録商標）、Arranon（登録商標）、三酸化ヒ素、ArzerraＴＭ、アスパラギナーゼ、ATRA、Avastin（登録商標）、アザシチジン、BCG、BCNU、ベンダムスチン、ベバシツマブ（Bevacizumab）、ベキサロテン（Bexarotene）、BEXXAR（登録商標）、ビカルタミド（Bicalutamide）、BiCNU、Blenoxane（登録商標）、ブレオマイシン、ボルテゾミブ（Bortezomib）、ブスルファン、Busulfex（登録商標）、C225、ロイコボリンカルシウム、Campath（登録商標）、Camptosar（登録商標）、カンプトテシン-11、カペシタビン、CaracＴＭ、カルボプラチン、カルムスチン、カルムスチンウエハ、Casodex（登録商標）、CC-5013、CCI-779、CCNU、CDDP、CeeNU、Cerubidine（登録商標）、セツキシマブ（Cetuximab）、クロラムブシル、シトロボラム因子、クラドリビン（Cladribine）、コルチゾン、Cosmegen（登録商標）、CPT-11、Cytadren（登録商標）、Cytosar-U（登録商標）、Cytoxan（登録商標）、ダカルバジン、ダコゲン（Dacogen）、ダクチノマイシン、ダルベポイエチンα（Darbepoetin Alfa）、ダサチニブ（Dasatinib）、ダウノマイシン、塩酸ダウノルビシン、ダウノルビシンリポソーム、DaunoXome（登録商標）、デカドロン（Decadron）、デシタビン（Decitabine）、Delta-Cortef（登録商標）、Deltasone（登録商標）、デニロイキン（Denileukin）、ジフチトクス（Diftitox）、DepoCytＴＭ、デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸ナトリウムデキサメタゾン、デキサゾン（Dexasone）、デキシラゾキサン（Dexrazoxane）、DHAD、DIC、ジオデクス（Diodex）、ドセタキセル、Doxil（登録商標）、ドキソルビシン、ドキソルビシンリポソーム、DroxiaＴＭ、DTIC、DTIC-Dome（登録商標）、Duralone（登録商標）、Efudex（登録商標）、EligardＴＭ、EllenceＴＭ、EloxatinＴＭ、Elspar（登録商標）、Emcyt（登録商標）、エピルビシン、エポエチンアルファ、エルビツクス（Erbitux）、エルロチニブ（Erlotinib）、Erwinia菌由来のL-アスパラギナーゼ、エストラムチン、エチオール（Ethyol）、Etopophos（登録商標）、エトポシド、リン酸エトポシド、Eulexin（登録商標）、エベロリムス（Everolimus）、Evista（登録商標）、エキセメスタン（Exemestane）、、Fareston（登録商標）、Faslodex（登録商標）、Femara（登録商標）、フィルグラスチム、フロクスウリジン、Fludara（登録商標）、フルダラビン（Fludarabine）、Fluoroplex（登録商標）、フルオロウラシル、フルオロウラシル(クリーム)、フルオキシメステロン、フルタミド、フォリン酸、FUDR（登録商標）、フルベストラント（Fulvestrant）、G-CSF、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ベムツズマブ（Gemtuzumab）、オゾガマイシン（ozogamicin）、Gemzar GleevecＴＭ、Gliadel（登録商標）ウエハ、GM-CSF、ゴセレリン、顆粒球-コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、Halotestin（登録商標）、Herceptin（登録商標）、ヘキサドロール（Hexadrol）、Hexalen（登録商標）、ヘキサメチルメラミン、HMM、Hycamtin（登録商標）、Hydrea（登録商標）、Hydrocort Acetate（登録商標）、ヒドロコルチゾン、リン酸ナトリウムヒドロコルチゾン、コハク酸ナトリウムヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルトン（Hydrocortone Phosphate）、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブ（Ibritumomab）、イブリツモマブ、チウキセタン（Tiuxetan）、Idamycin（登録商標）、Idarubicin Ifex（登録商標）、IFN-α、イホスファミド、IL-11、IL-2、メシル酸イマチニブ、イミダゾールカルボキサミド、インターフェロンα、インターフェロンα-2b(PEGコンジュゲート)、インターロイキン-2、インターロイキン-11、Intron A（登録商標）(インターフェロンα-2b)、Iressa（登録商標）、イリノテカン、イソトレチノイン、イキサベピロン（Ixabepilone）、IxempraＴＭ、Kidrolase（登録商標）、Lanacort（登録商標）、ラパチニブ（Lapatinib）、L-アスパラギナーゼ、LCR、レナリドミド（Lenalidomide）、レトロゾール（Letrozole）、ロイコボリン、ロイケラン（Leukeran）、LeukineＴＭ、ロイプロリド、リューロクリスチン、LeustatinＴＭ、リポソームAra-C、液体Pred（登録商標）、ロムスチン、L-PAM、L-サルコリシン、Lupron（登録商標）、Lupron Depot（登録商標）、Matulane（登録商標）、マキシデクス（Maxidex）、メクロレタミン、塩酸メクロレタミン、Medralone（登録商標）、Medrol（登録商標）、Megace（登録商標）、メゲストロール、酢酸メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ（Mesna）、MesnexＴＭ、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メチルプレドニゾロン、Meticorten（登録商標）、マイトマイシン、マイトマイシン-C、ミトザントロン、M-Prednisol（登録商標）、MTC、MTX、Mustargen（登録商標）、ムスチン、Mutamycin（登録商標）、Myleran（登録商標）、MylocelＴＭ、Mylotarg（登録商標）、Navelbine（登録商標）、ネララビン（Nelarabine）、Neosar（登録商標）、NeulastaＴＭ、Neumega（登録商標）、Neupogen（登録商標）、Nexavar（登録商標）、Nilandron（登録商標）、ニロチニブ、ニルタミド（Nilutamide）、Nipent（登録商標）、ナイトロジェンマスタード、Novaldex（登録商標）、Novantrone（登録商標）、Nplate、オクトレオチド（Octreotide）、酢酸オクトレオチド、、オファツムマブ（Ofatumumab）、Oncospar（登録商標）、Oncovin（登録商標）、Ontak（登録商標）、OnxalＴＭ、オプレルベキン（Oprelvekin）、Orapred（登録商標）、Orasone（登録商標）、オキサリプラチン、パクリタキセル、タンパク質結合パクリタキセル、パミドロネート（Pamidronate）、パニツムマブ（Panitumumab）、Panretin（登録商標）、Paraplatin（登録商標）、パゾパニブ（Pazopanib）、Pediapred（登録商標）、PEGインターフェロン、ペガスパルガセ（Pegaspargase）、ペグフィルグラスチム、PEG-INTRONＴＭ、PEG-L-アスパラギナーゼ、ペメトレキセド（PEMETREXED）、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、Platinol（登録商標）、Platinol-AQ（登録商標）、プレドニゾロン、プレドニゾン、Prelone（登録商標）、プロカルバジン、PROCRIT（登録商標）、ProLeukin（登録商標）、カルムスチンインプラントを有するプロリフェプロスパン20（Prolifeprospan 20）、、Purinethol（登録商標）、ラロキシフェン、Revlimid（登録商標）、Rheumatrex（登録商標）、Rituxan（登録商標）、リタキシマブ、Roferon-A（登録商標）(インターフェロンα-2a)、ロミプロスチム（Romiplostim）、Rubex（登録商標）、塩酸ルビドマイシン、Sandostatin（登録商標）、Sandostatin LAR（登録商標）、サルグラモスチン、Solu-Cortef（登録商標）、Solu-Medrol（登録商標）、ソラフェニブ（Sorafenib）、SPRYCELＴＭ、STI-571、ストレプトゾシン、SU11248、スニチニブ、Sutent（登録商標）、タモキシフェン、Tarceva（登録商標）、Targretin（登録商標）、Tasigna（登録商標）、Taxol（登録商標）、Taxotere（登録商標）、Temodar（登録商標）、テモゾロミド、テムシロリムス（Temsirolimus）、テニポシド、TESPA、サリドマイド、Thalomid（登録商標）、TheraCys（登録商標）、チオグアニン、Thioguanine Tabloid（登録商標）、チオホスファミド、Thioplex（登録商標）、チオテパ、TICE（登録商標）、Toposar（登録商標）、トポテカン、トレミフェン、Torisel（登録商標）、トシツモマブ（Tositumomab）、トラスツズマブ、Treanda（登録商標）、トレチノイン、TrexallＴＭ、Trisenox（登録商標）、TSPA、TYKERB（登録商標）、VCR、VectibixＴＭ、Velban（登録商標）、Velcade（登録商標）、VePesid（登録商標）、Vesanoid（登録商標）、ViadurＴＭ、Vidaza（登録商標）、ビンブラスチン、硫酸ビンブラスチン、Vincasar Pfs（登録商標）、ビンクリスチン、ビノレルビン、酒石酸ビノレルビン、VLB、VM-26、ボリノスタト（Vorinostat）、ボトリエント（Votrient）、VP-16、Vumon（登録商標）、Xeloda（登録商標）、Zanosar（登録商標）、ZevalinＴＭ、Zinecard（登録商標）、Zoladex（登録商標）、ゾレドロン酸、ゾリンザ（Zolinza）、Zometa（登録商標）、又は、これらの組み合わせが含まれる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍始原細胞を除去するための薬剤、及び、腫瘍始原細胞の除去するためのその使用に関する。本発明はまた、腫瘍始原細胞の除去方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年の研究及び知見により、癌は、より一般的には癌幹細胞として知られている腫瘍始原細胞（tumor-initiating cells；TICs）により促進されることが示され、近年、大きな注目を集めている。腫瘍始原細胞は、その起源が未知であるため正しくは癌幹様細胞と呼ばれることがある。それでもなお、腫瘍始原細胞は、血液系悪性腫瘍及び固形悪性腫瘍を治療するための有望かつ新規な細胞ターゲットであると考えられている。また、腫瘍始原細胞は従来の癌治療薬の多くに対して耐性を有しうるものと考えられており、このことは、これらの治療薬によるヒト悪性腫瘍の治療の限界を物語っているものと思われる。
【０００３】
腫瘍内における腫瘍細胞の多くは、増殖能力及び腫瘍塊のバルクを形成する細胞への分化能が制限されている。しかしながら、近年の研究により、腫瘍内の少数の細胞が自己再生し増殖する能力を有することによって腫瘍が維持されることができることが示された。腫瘍始原細胞（tumor-initiating cells；TICs）又は癌幹細胞（cancer stem cells；CSCs）と呼ばれるこれらの細胞は、幹細胞様の表現型や機能などの一定の特性を正常幹細胞と共有することが観察された。この特定の細胞種は、様々な血液系腫瘍及び固形腫瘍において腫瘍成長を開始及び促進することができるものと考えられている。また、これらの細胞は、複製が遅いことや抗腫瘍薬に対する適応力から、従来の癌治療薬の多くに対して耐性を示す。腫瘍始原細胞は、治療後の癌再発に重要な役割を果たしていると考えられるため、転移癌が治療できないことの原因となっていると思われる。近代的な抗腫瘍薬の多くは腫瘍応答、すなわち、多くの腫瘍のバルクを形成する分化細胞数の低下に基づいて認可されているため、腫瘍始原細胞に優先的に作用する薬剤が見逃されている可能性がある。治療により、腫瘍細胞の多くはアポトーシス誘導されて死滅するが、一定の細胞は生き残り、「第１の」治療に対する耐性を獲得した「第２の」腫瘍が生じる。治療に対する耐性の高い「第２の」腫瘍は除去が非常に困難であり、治療が複雑となり予後が非常に悪くなる（非特許文献１）。
【０００４】
したがって、腫瘍始原細胞の除去またはその増殖を防止可能な新規な薬剤が緊急に必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１０／０８９７７８号
【特許文献２】国際公開第２０１３／００１３５２号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Zobalova, et al, InTech “Drugs that Kill Cancer Stem-like Cells” 06-02-2012
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
よって、本発明は、一般的な一態様において、腫瘍始原細胞を除去可能な一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【化１】
2016503005.tif 000002
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一般式Ｉの化合物における各変数は、本明細書中で更に定義・記載する。
【０００９】
更なる一態様において、本発明は、一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む、腫瘍始原細胞を除去するための組成物を提供する。
【００１０】
更なる一態様において、本発明は、腫瘍始原細胞を除去し、それにより関連する病気、疾患又は病状を治療するための、一般式Ｉの化合物若しくはその薬学的に許容可能な塩又はその組成物の使用を提供する。
【００１１】
他の一態様において、本発明は、腫瘍始原細胞の除去方法であって、それを必要とする対象に、一般式Ｉの化合物若しくはその薬学的に許容可能な塩又はそれを含む組成物を投与することによる、腫瘍始原細胞の除去方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】乳癌細胞MDA MB 231に対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-2のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図２】前立腺癌細胞PC3に対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-2のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図３】前立腺癌細胞LNCaPに対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-2のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図４】乳癌細胞T47Dに対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-2のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図５】前立腺癌細胞DU145に対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-2のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図６】乳癌細胞MDA MB 231に対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-3のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【図７】乳癌細胞MCF-7に対するシスプラチン（既知の化学療法薬）及び化合物I-3のin vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの比較結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本明細書において、用語「腫瘍始原細胞」は、血液系腫瘍及び固形腫瘍に関連するか又はこれらの腫瘍内で発見される細胞をいう。用語「腫瘍始原細胞」は、用語「癌幹細胞」と交換可能に使用されうる。当業者は、用語「腫瘍始原細胞」はまた、「癌幹様細胞」をいうことを理解する。
【００１４】
本発明は、腫瘍始原細胞を除去可能な一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１５】
一般式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２】
2016503005.tif 000003
式中、環Ａ及び環Ｂは、それぞれ独立して、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環であり；
nは０〜４であり；
mは０〜３であり；
pは０〜２であり；
R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、-CN、-NO2、-R、-OR、-SR、-N(R)2、-N(R)C(O)R、-C(O)RN(R)2、-N(R)C(O)N(R)2、-N(R)C(O)OR、-OC(O)N(R)、-N(R)SO2R、-SO2RN(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、-OC(O)R、-C(O)OR、-S(O)R、又は-SO2Rであり；
各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、３〜８員の飽和又は部分的に不飽和な単環式炭素環、フェニル、８〜１０員の二環式芳香族炭素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する４〜８員の飽和又は部分的に不飽和である単環式複素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜５個有する８〜１０員の二環式複素芳香環から選ばれる、任意に置換された基であり；
R2、R2’は、それぞれ独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族であるか、一緒に=O又は=Sを形成し；
Qは-O-、-S-、又は-N(R)-であり；
XはO又はSであり；
Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-、-N(R)-、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)N(R)-、-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)C(O)-、-N(R)C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2N(R)-、-N(R)S(O)2-、-OC(O)-、又は、-C(O)O-で置き換わり；
Gは-O-、-S-又は-N(R)-であり；
R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、-OC(O)R、又は保護水酸基である。
【００１６】
上記に一般定義したとおり、環Ａは窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ａは窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する５〜６員の部分不飽和環又は芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ａは窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜３個有する５〜６員の芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ａはピリド又はチオフェノである。いくつかの実施形態において、環Ａはベンゾである。
【００１７】
上記に一般定義したとおり、環Ｂは窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を０〜３個有する４〜８員の部分不飽和環又は芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ｂは窒素又は酸素から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する５〜６員の部分不飽和環又は芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ｂは酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を２個有する５員の部分不飽和環又は芳香環である。いくつかの実施形態において、環Ｂは１，３−ジオキソラノである。
【００１８】
上記に一般定義したとおり、nは０〜４である。ある実施形態において、nは１〜３である。いくつかの実施形態において、nは２である。いくつかの実施形態において、nは０である。
【００１９】
上記に一般定義したとおり、mは０〜３である。ある実施形態において、mは１〜２である。いくつかの実施形態において、mは０である。
【００２０】
上記に一般定義したとおり、pは０〜２である。ある実施形態において、pは０である。いくつかの実施形態において、pは２である。
【００２１】
上記に一般定義したとおり、R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、CN、-NO2、-R、-OR、-SR、-N(R)2、-N(R)C(O)R、-C(O)RN(R)2、-N(R)C(O)N(R)2、-N(R)C(O)OR、-OC(O)N(R)、-N(R)SO2R、-SO2RN(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、-OC(O)R、-C(O)OR、-S(O)R、又は、-SO2Rである。ある実施形態において、R1、R3、R7は、それぞれ独立して、ハロゲン、-CN、-OR、-SR、又は-OC(O)Rである。いくつかの実施形態において、各R1は独立してハロゲン、-OR又は-OC(O)Rである。いくつかの実施形態において、各R1は-ORである。いくつかの実施形態において、各R3は独立してハロゲン又は-ORである。いくつかの実施形態において、各R7は独立してハロゲン、-C(O)OR又は-Rである。いくつかの実施形態において、各R7はハロゲンである。いくつかの実施形態において、各R7は-Rである。いくつかの実施形態において、R1、R3、R7は、それぞれ、水素である。
【００２２】
上記に一般定義したとおり、各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、３〜８員の飽和又は部分的に不飽和な単環式炭素環、フェニル、８〜１０員の二環式芳香族炭素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜２個有する４〜８員の飽和又は部分的に不飽和である単環式複素環、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜５個有する８〜１０員の二環式複素芳香環から選ばれる、任意に置換された基である。ある実施形態において、各Rは、独立して、水素；又は、炭素数１〜６の脂肪族、フェニル、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選ばれるヘテロ原子を１〜４個有する５〜６員の単環式複素芳香環から選択される任意に置換された基である。いくつかの実施形態において、各Rは、独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族基である。いくつかの実施形態において、各Rは、独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜２の脂肪族基である。いくつかの実施形態において、各Rは水素である。いくつかの実施形態において、各Rは任意に置換された炭素数１〜２の脂肪族基である。
【００２３】
上記に一般定義したとおり、R2、R2’は、それぞれ独立して、水素又は任意に置換された炭素数１〜６の脂肪族であるか、一緒に=O又は=Sを形成する。ある実施形態において、R2、R2’は、それぞれ独立して、水素であるか又は一緒に=O又は=Sを形成する。いくつかの実施形態において、R2、R2’はそれぞれ水素である。いくつかの実施形態において、R2、R2’は一緒に=O又は=Sを形成する。
【００２４】
上記に一般定義したとおり、Qは-O-、-S-又は-N(R)-である。ある実施形態において、Qは-O-又は-N(R)-である。いくつかの実施形態において、Qは-N(R)-である。
【００２５】
上記に一般定義したとおり、XはO又はSである。ある実施形態において、XはOである。いくつかの実施形態において、XはSである。
【００２６】
上記に一般定義したとおり、Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-、-N(R)-、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)N(R)-、-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)C(O)-、-N(R)C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2N(R)-、-N(R)S(O)2-、-OC(O)-又は-C(O)O-で置き換わる。ある実施形態において、Lは共有結合又は任意に置換された炭素数１〜６の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-、-S-又は-N(R)-で置き換わる。いくつかの実施形態において、Lは共有結合である。いくつかの実施形態において、Lは任意に置換された炭素数１〜２の二価炭化水素鎖であって、Lのメチレン単位の１つは、任意でかつ独立して、-O-で置き換わる。いくつかの実施形態において、Lは-O-である。
【００２７】
上記に一般定義したとおり、Gは-O-、-S-又は-N(R)-である。ある実施形態において、Gは-O-又は-N(R)-である。いくつかの実施形態において、Gは-O-である。
【００２８】
上記に一般定義したとおり、R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、-OC(O)R、又は、保護水酸基である。ある実施形態において、R4、R5、R6は、それぞれ独立して、-OH、-OR、又は、-OC(O)Rである。いくつかの実施形態において、R4は-OHであり、R5及びR6は-ORである。いくつかの実施形態において、R4はOC(O)Rであり、R5、R6は-ORである。いくつかの実施形態において、R4は保護水酸基であり、R5、R6は-ORである。
【００２９】
水酸基保護基は当該技術分野で周知であり、式IのR4、R5、R6の好適な保護水酸基の例には、エステル、アリルエーテル、エーテル、シリルエーテル、アルキルエーテル、アリールアルキルエーテル、及び、アルコキシアルキルエーテルが含まれる。エステルの例には、ギ酸エステル、酢酸エステル、炭酸エステル、及び、スルホン酸エステルが含まれる。具体的な例には、ホルメート、ベンゾイルホルメート、クロロアセテート、トリフルオロアセテート、メトキシアセテート、トリフェニルメトキシアセテート、ｐ−クロロフェノキシアセテート、３−フェニルプロピオネート、４−オキソペンタノエート、４，４−（エチレンジチオ）ペンタノエート、ピバルオエート（pivaloate）（トリメチルアセチル）、クロトネート、４−メトキシクロトネート、ベンゾエート、ｐ−フェニルベンゾエート、２，４，６−トリメチルベンゾエートや、メチル、９−フルオレニルメチル、エチル、２，２，２，−トリクロロエチル、２−（トリメチルシリル）エチル、２−（フェニルスルホニル）エチル、ビニル、アリル、及び、ｐ−ニトロベンジルなどの炭酸エステルが含まれる。シリルエーテルの例には、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリイソプロピルシリル、及び、他のトリアルキルシリルエステルが含まれる。アルキルエーテルの例には、メチル、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、トリチル、ｔ−ブチル、アリル、及び、アリルオキシカルボニルエステル又は誘導体が含まれる。アルコキシアルキルエーテルの例には、メトキシメチル、メチルチオメチル、（２−メトキシエトキシ）メチル、ベンジルオキシメチル、ベータ−（トリメチルシリル）エトキシメチル、及びテトラヒドロピラニルエーテルのなどのアセタールが含まれる。アリールアルキルエーテルの例には、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル（ＭＰＭ）、３，４−ジメトキシベンジル、Ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ハロベンジル、２，６−ジクロロベンジル、ｐ−シアノベンジル、２−及び４−ピコリルが含まれる。
【００３０】
本発明の化合物は、前述の一般記載したものを含み、更に、本明細書に開示されるクラス、下位クラス及び種により例示される。本発明の化合物を説明するために使用した様々な用語、及び、本明細書において使用する全ての技術・科学用語は、標準的な定義又は意味を意味ないし言うか、化学分野又は技術分野で使用される定義又は意味、又は、本発明が属する技術分野の当業者に知られているか又は一般的に理解される定義又は意味と同じである。
【００３１】
本発明の化合物は「任意に置換された」部分を有してもよい。一般的に、用語「置換された」は、用語「任意に」がその前に記載されていてもいなくても、指定部分における１つ以上の水素が好適な置換基で置き換わっていることを意味する。特段断りのない限り、「任意に置換された」基は、当該基の置換可能な各位置に好適な置換基を有しうり、任意の構造において２以上の位置が特定の群から選ばれる２以上の置換基により置換されうる場合、当該置換基は全ての位置において同じでも異なっていてもよい。本発明で意図する置換基の組み合わせは、安定な又は化学的に実現可能な化合物を形成する組み合わせであることが好ましい。
【００３２】
「任意に置換された」基の置換可能な炭素上の好適な一価の置換基は、独立して、ハロゲン；-(CH2)0-4R°；-(CH2)0-4OR°；-O(CH2)0-4Ro、-O-(CH2)0-4C(O)OR°；-(CH2)0-4CH(OR°)2；-(CH2)0-4SR°；R°で置換されてもよい-(CH2)0-4Ph；R°で置換されてもよい-(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph；R°で置換されてもよい-CH=CHPh；R°で置換されてもよい-(CH2)0-4O(CH2)0-1-ピリジル；-NO2；-CN；-N3；-(CH2)0-4N(R°)2；-(CH2)0-4N(R°)C(O)R°；-N(R°)C(S)R°；-(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2；-N(R°)C(S)NR°2；-(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°；-N(R°)N(R°)C(O)R°；-N(R°)N(R°)C(O)NR°2；-N(R°)N(R°)C(O)OR°；-(CH2)0-4C(O)R°；-C(S)R°；-(CH2)0-4C(O)OR°；-(CH2)0-4C(O)SR°；-(CH2)0-4C(O)OSiR°3；-(CH2)0-4OC(O)R°；-OC(O)(CH2)0-4SR-、SC(S)SR°；-(CH2)0-4SC(O)R°；-(CH2)0-4C(O)NR°2；-C(S)NR°2；-C(S)SR°；-SC(S)SR°、-(CH2)0-4OC(O)NR°2；-C(O)N(OR°)R°；-C(O)C(O)R°；-C(O)CH2C(O)R°；-C(NOR°)R°；-(CH2)0-4SSR°；-(CH2)0-4S(O)2R°；-(CH2)0-4S(O)2OR°；-(CH2)0-4OS(O)2R°；-S(O)2NR°2；-(CH2)0-4S(O)R°；-N(R°)S(O)2NR°2；-N(R°)S(O)2R°；-N(OR°)R°；-C(NH)NR°2；-P(O)2R°；-P(O)R°2；-OP(O)R°2；-OP(O)(OR°)2；SiR°3；-(炭素数１〜４の直鎖又は分岐アルキレン)O-N(R°)2；又は、-(炭素数１〜４の直鎖又は分岐アルキレン)C(O)O-N(R°)2であり、各R°は、下記に定義されるように置換されてもよく、独立して、水素、炭素数１〜６の脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、-CH2-(５〜６員ヘテロアリール環)、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環であるか、上記定義に拘わらず、２つの独立したR°は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、下記定義のとおり置換してもよい、３〜１２員である、単環式又は二環式の飽和環、部分不飽和環又は芳香環を１以上の介在原子と共に形成する。
【００３３】
R°（又は２つの独立したR°が介在原子と共に形成した環）上の好適な一価の置換基は、独立して、ハロゲン、-(CH2)0-2R●、-(ハロR●)、-(CH2)0-2OH、-(CH2)0-2OR●、-(CH2)0-2CH(OR●)2；-O(ハロR●)、-CN、-N3、-(CH2)0-2C(O)R●、-(CH2)0-2C(O)OH、-(CH2)0-2C(O)OR●、-(CH2)0-2SR●、-(CH2)0-2SH、-(CH2)0-2NH2、-(CH2)0-2NHR●、-(CH2)0-2NR●2、-NO2、-SiR●3、-OSiR●3、-C(O)SR●、-(炭素数１〜４の直鎖又は分岐アルキレン)C(O)OR●、又は-SSR●であり、各R●は未置換であるか「ハロ」との記載がある場合は、１つ以上のハロゲンにのみ置換され、独立して、炭素数１〜４の脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環である。R°の飽和炭素原子上の好適な二価の置換基には、=O及び=Sが含まれる。
【００３４】
「任意に置換された」基の飽和炭素原子上の好適な二価の置換基には、=O、=S、=NNR*2、=NNHC(O)R*、=NNHC(O)OR*、=NNHS(O)2R*、=NR*、=NOR*、-O(C(R*2))2-3O-、又は-S(C(R*2))2-3S-が含まれ、各R*は、独立して、水素、下記に定義されるように置換してもよい炭素数１〜６の脂肪族、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、未置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環である。「任意に置換された」基の置換可能な隣接炭素に結合する好適な二価の置換基には-O(CR*2)2-3O-が含まれ、各R*は、独立して、水素、下記に定義されるように置換してもよい炭素数１〜６の脂肪族、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、未置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環である。
【００３５】
R*の脂肪族上の好適な置換基には、ハロゲン、-R●、-(ハロR●)、-OH、-OR●、-O(ハロR●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR●、-NH2、-NHR●、-NR●2、又は-NO2が含まれ、各R●は未置換であるか「ハロ」との記載がある場合は、１つ以上のハロゲンにのみ置換され、独立して、炭素数１〜４の脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環である。
【００３６】
「任意に置換された」基の置換可能な窒素上の好適な置換基には、-R†、-NR†2、-C(O)R†、-C(O)OR†、-C(O)C(O)R†、-C(O)CH2C(O)R†、-S(O)2R†、-S(O)2NR†2、-C(S)NR†2、-C(NH)NR†2、又は、-N(R†)S(O)2R†が含まれ、各R†は、水素、下記に定義されるように置換してもよい炭素数１〜６の脂肪族、未知環の-OPh、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、未置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環であり、上記定義に拘わらず、２つの独立したR†は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、未置換である３〜１２員の単環式又は二環式の飽和環、部分不飽和環又は芳香環を１以上の介在原子と共に形成する。
【００３７】
R†の脂肪族基上の好適な置換基は、独立して、ハロゲン、-R●、-(ハロR●)、-OH、-OR●、-O(ハロR●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR●、-NH2、-NHR●、-NR●2、又は-NO2であり、各R●は未置換であるか「ハロ」との記載がある場合は、１つ以上のハロゲンにのみ置換され、独立して、炭素数１〜４の脂肪族、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、又は、窒素、酸素又は硫黄から独立して選択されるヘテロ原子を０〜４個有する、５〜６員の飽和環、部分不飽和環又は芳香環である。
【００３８】
本明細書において、用語「薬学的に許容可能な塩」とは、適切な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応など発生させずに、ヒトや下等動物の組織と接触させて使用するのに好適な塩であって、合理的なリスク・ベネフィット比に見合ったものをいう。本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩には、好適な無機、有機酸及び無機、有機塩基から誘導されるものが含まれる。薬学的に許容可能である無毒な酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸及び過塩素酸などの無機酸と形成されるか；酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸又はマロン酸のなどの有機酸と形成されるか；又は、イオン交換などの当該技術分野で使用される他の方法により形成される、アミノ基の塩である。例示的な薬学的に許容可能な塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、蟻酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ-エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩塩類などが含まれる。
【００３９】
適切な塩基から誘導される塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、Ｎ＋（炭素数１〜４のアルキル）４塩が含まれる。代表的なアルカリ又はアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。さらに、薬学的に許容可能な塩には、適宜、無毒アンモニウム；第４級アンモニウム；及び、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩及びアリールスルホン酸塩などのカウンターイオンを用いて形成したアミンカチオンが含まれる。
【００４０】
特段断りのない限り、本明細書で図示する構造はまた、各不斉中心に対するＲ体及びＳ体、二重結合異性体（Ｚ体及びＥ体）、配座異性体（Ｚ体及びＥ体）など、当該構造の全ての異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー、幾何（配座）異性体など）を含むことを意図する。したがって、単一の立体化学異性体だけでなく、本発明の化合物のエナンチオマー、ジアステレオマー、幾何（又は配座）異性体の混合物も本発明の範囲内である。特段断りのない限り、本発明の化合物の全ての互換異性体も本発明の範囲内である。さらに、特段断りのない限り、本発明の化合物はまた、１つ以上の同位体濃縮された原子が存在する点でのみ相違する化合物を含むことを意図する。例えば、水素を重水素又は三重水素で置換した構造を有する化合物や、炭素を１３Ｃまたは１４Ｃで濃縮した炭素で置換した構造を有する化合物も本発明の範囲内である。このような化合物は、例えば、生物アッセイのプローブとしての分析ツールとして、又は、本発明に係る治療薬として有用である。ある実施形態において、提供化合物の弾頭部分（warhead moiety）であるR1は１つ以上の重水素原子を含む。
【００４１】
ある実施形態において、本発明は式II〜VIIIのいずれか１つの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。各変数は、式Iの化合物について、上記で定義され、かつ、上述した及び本願明細書において記載したクラス及び下位クラスにおいて定義されたものである。
【化３】
2016503005.tif 000004
【００４２】
ある実施形態において、本発明は式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。各変数は、式Iの化合物について、上記で定義され、かつ、上述した及び本願明細書において記載したクラス及び下位クラスにおいて定義されたものである。
【００４３】
ある実施形態において、本発明は式Iの化合物であってI-1又はI-2から選択されないものを提供する。
【化４】
2016503005.tif 000005
【００４４】
ある実施形態において、本発明は上記に図示した化合物から選択される任意の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００４５】
好適な実施形態において、本発明は式I-3の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【化５】
2016503005.tif 000006
【００４６】
他の実施形態において、本発明は、本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩若しくは誘導体と、薬学的に許容可能な担体（carrier）、補助剤（adjuvant）又はビヒクル（vehicle）とを含む組成物を提供する。
【００４７】
ある実施形態において、本発明の組成物は、一般式Iの化合物、好ましくは化合物I-1、I-2又はI-3、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは誘導体と、薬学的に許容可能な担体、補助剤又はビヒクルとを含む。
【００４８】
ある実施形態において、本発明の組成物は、式II〜VIIIのいずれか１つの化合物又はその薬学的に許容可能な塩若しくは誘導体と、薬学的に許容可能な担体、補助剤又はビヒクルとを含む。
【００４９】
本発明の組成物における化合物の量は、生物サンプル又はTICsの除去又はその増殖の抑制を必要とする対象において、TICsの除去又はその増殖の抑制に有効な量とする。ある実施形態において、本発明の組成物における化合物の量は、生物サンプル又はTICsの除去又はその増殖の抑制を必要とする対象において、TICsを測定可能に除去するのに有効な量とする。ある実施形態において、本組成物は、生物学的有効量と最大耐量との間の量の本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル若しくはエステルの塩を含む。
【００５０】
ある実施形態において、本発明の組成物は、それを必要とする対象への投与用に製剤化される。いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、好ましくは、患者への経口投与用に製剤化される。「対象」は哺乳類、好ましくはヒトであるが、獣医学治療を必要とする動物であってもよい。用語「それを必要とする対象」とは、任意の種類の癌又は癌の再発など、腫瘍始原細胞の増殖に関連する病気、疾患又は病状を患う患者をいう。
【００５１】
用語「薬学的に許容可能な担体、補助剤又はビヒクル」とは、それらと共に製剤化される化合物の薬理活性を損なわない、無毒な担体、補助剤又はビヒクルをいう。
【００５２】
用語「薬学的に許容可能な誘導体」は、本発明の化合物の任意の無毒な塩、エステル、エステルの塩又は他の誘導体であって、投与対象に投与した際に、本発明の化合物又はその阻害可能な活性代謝物若しくは残渣を、直接的に又は間接的に提供することが可能なものを意味する。
【００５３】
本発明の組成物は、経口、非経口、吸入噴霧、局所、経直腸、経鼻、経口腔、経膣による投与又は埋め込みリザーバを介しての投与に好適な剤形に製剤化されうる。本発明の組成物は、液体、固体、半固体などの剤形に製剤化されうる。本願明細書において、用語「非経口」は、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、腸内、鞘内、肝臓内、病変内、及び、頭蓋内の注射又は点滴法を含む。好ましくは、本組成物は経口投与、静脈内投与又は腹腔内投与される。
【００５４】
本発明の組成物の無菌注射剤形は、水性又は油性の懸濁剤でありうる。これらの懸濁剤は、好適な分散剤又は湿潤剤、及び、懸濁剤を使用して、当該技術分野で知られている手法に従って製剤化されうる。本無菌注射製剤はまた、例えば１，３−ブタンジオール溶液として、無毒な非経口に許容可能な希釈剤又は溶媒を使用した無菌注射溶液又は懸濁剤でありうる。使用されうる許容可能なビヒクル及び溶媒には、水、リンガー液、等張塩化ナトリウム溶液が含まれる。
【００５５】
本発明の化合物の効果を延ばすために、多くの場合、皮下又は筋肉注射からの化合物吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性の悪い結晶又はアモルファスの物質の液体懸濁剤を使用することに達成されうる。また、リポソーム又は体内組織と相溶性のあるマイクロエマルジョン内に化合物を閉じ込めて蓄積注射製剤を調製してもよい。
【００５６】
本発明の薬学的に許容可能な組成物は、限定されないが、カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤又は液剤などの任意の経口的に許容可能な剤形で経口投与されうる。
【００５７】
経口投与用の固形剤としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤が含まれる。このような固形剤において、有効成分化合物は、クエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウムなど、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤又は担体、及び／又は、ａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、ケイ酸などの充填剤又は増量剤；ｂ）カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、アカシア・ゴムなどの結合剤；ｃ）グリセロールなどの保湿剤；ｄ）アガー・アガー、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプン又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；ｅ）パラフィンなどの溶液抑制剤（solution retarding agent）；ｆ）第四級アンモニウム化合物等の吸収促進剤；ｇ）セチルアルコール及びグリセロールモノステアレート等の湿潤剤；ｈ）カオリン及びベントナイト等の吸収剤；並びにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑沢剤及びそれらの混合物と混合されうる。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合には、当該製剤は、緩衝薬をも含有し得る。
【００５８】
同様なタイプの固体組成物は、ラクトースすなわち乳糖と高分子量ポリエチレングリコール等の賦形剤を用いる軟充填ゼラチンカプセル及び硬充填ゼラチンカプセルの中の充填剤として使用されうる。固体剤型の錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤は、被覆剤及び外皮、例えば、腸溶性被覆剤や医薬製剤分野でよく知られている別の被覆剤を用いて調製することができる。上記固体剤型は、場合により乳白剤を含有してもよく、また、腸管の一定の場所で活性成分のみを又は活性成分を優先的に、場合により遅延する方法で、放出するような組成物でありうる。使用可能な包埋組成物（embedding composition）の例としては、高分子量物質や蝋を挙げることができる。
【００５９】
経口投与用の液体剤型としては、限定されないが、製薬上許容可能な、乳剤、マイクロ乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤等を挙げることができる。かかる液体剤型は、活性化合物の他に、当該技術分野で一般に使用されている不活性な希釈剤、例えば、水若しくは別の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、はい芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタン脂肪酸エステル並びにこれらの混合物等を含有し得る。上記経口投与用組成物は、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化剤及び懸濁化剤、甘味剤、風味剤及び着香剤等の補助剤を含有しうる。
【００６０】
これらの医薬組成物はまた、特に、治療の対象が眼、皮膚又は下部腸管の病気を含む、局所適用によって容易に到達可能な範囲または器官を含む場合、局所的に投与され得る。好適な局所製剤は、これらの範囲または器官のそれぞれに応じて容易に調製される。
【００６１】
局所適用の場合、提供される薬学的に許容可能な組成物は、１つ以上の担体中に懸濁または溶解された有効成分を含有する好適な軟膏に製剤化されうる。本発明の化合物の局所投与のための担体としては、限定されないが、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ろう、大日、水が挙げられる。あるいは、提供される薬学的に許容可能な組成物は、１つ以上の薬学的に許容可能な担体中に懸濁または溶解された有効成分を含有する、好適なローション又はクリームに製剤化されうる。好適な担体としては、限定されないが、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルろう、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、及び、水が挙げられる。 
【００６２】
本発明の化合物を局所投与又は経皮投与するための剤形には、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、液剤、スプレー剤、吸入剤、又は、貼付剤が含まれる。有効成分は、薬学的に許容可能な担体、及び、必要に応じて任意の保存剤又は緩衝剤と無菌条件で混合される。さらに、本発明は経皮貼付剤の使用を意図しており、これは、体内に化合物を制御して送達できるという更なる利点がある。このような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解又は分散することにより製造可能である。吸収促進剤を使用して、化合物の皮膚通過量を増加することも可能である。速度は、速度制御膜を設けるか化合物をポリマーマトリックス又はゲルに分散させることにより制御することが可能である。
【００６３】
また、眼科用製剤、点耳剤及び点眼剤もまた、本発明の範囲内のものであることが意図される。眼に適用する場合、提供される薬学的に許容可能な組成物は、等張のｐＨ調節した滅菌食塩水中の微粉化懸濁液として、あるいは好ましくは、塩化ベンジルアルコニウム等の保存剤の存在下又は非存在下のいずれかで、等張のｐＨ調節した滅菌食塩水中の液剤として製剤化されうる。あるいは、眼に適用する場合、かかる薬学的に許容可能な組成物は、ワセリン等の軟膏に製剤化されうる。
【００６４】
本発明の薬学的に許容可能な組成物はまた、鼻腔エアロゾル又は吸入によって投与されうる。かかる組成物は、医薬製剤の技術分野で周知な技術に従って調製され、ベンジルアルコールまたは他の好適な保存剤、生物学的利用能を強化するための吸収促進剤、フッ化炭素、及び／又は他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を採用して、食塩水中の溶液として調製されうる。
【００６５】
下部腸管に対する局所適用は、直腸の坐薬形態（上記を参照されたい）又は好適な浣腸製剤で実施されてもよい。局所的な経皮貼付剤も使用されうる。直腸内投与又は膣内投与用の組成物は、本発明の化合物を好適な非刺激性の賦形剤又は担体と混合することによって調製することが可能な坐剤であることが好ましく、かかる賦形剤又は担体は、室温では固体であるが体温では液体であるため直腸内又は膣腔内で溶けて有効成分化合物を放出させる、ココアバター、ポリエチレングリコール又は坐剤用ワックスなどである。
【００６６】
特に好ましくは、本発明の薬学的に許容な組成物は、経口投与用に製剤化される。かかる製剤は、食べ物と一緒に投与されても、食べ物なしで投与されてもよい。
【００６７】
単一剤形を製造するために担体材料と組み合わされうる本発明の化合物の量は、治療対象、特定の投与態様により変わる。提供される組成物は、かかる組成物を投与する対象に対して、本発明の化合物が０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の用量で投与されるように製剤化することが好ましい。ある実施形態において、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るために、１日当たり、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの用量レベル（ｋｇ：対象の体重）で、１日に１回以上、経口又は非経口で投与されうる。
【００６８】
また、任意の特定の患者に対する特定の用量及び治療レジメンは、採用した特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、排泄量、薬剤の組み合わせ、医師の判断、治療している病気の重度など、様々なファクターに依存することを理解されたい。組成物中の本発明の化合物の量はまた、当該組成物中の特定の化合物に依存する。
【００６９】
一実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞を除去して関連する病気、疾患又は病態を治療するための、一般式Iの化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はその組成物の使用を提供する。よって、提供される化合物は、限定されないが、血液癌及び固形腫瘍などの癌の治療に有用である。
【００７０】
ある実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞を除去して関連する病気、疾患又は病態を治療するための、I-1、I-2又はI-3から選択される化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はその組成物の使用を提供する。よって、提供される化合物は、限定されないが、血液癌及び固形腫瘍などの癌の治療に有用である。
【００７１】
ある実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞を除去して関連する病気、疾患又は病態を治療するための、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はその組成物の使用を提供する。よって、提供される化合物は、限定されないが、血液癌及び固形腫瘍などの癌の治療に有用である。
【００７２】
本願明細書において、用語「腫瘍始原細胞を除去する」とは、腫瘍始原細胞の成長、分裂、成熟又は生存を阻害又は抑制することにより腫瘍始原細胞を除去すること、及び／又は、細胞毒性又はアポトーシスの誘発によって腫瘍始原細胞を単独で又は他の腫瘍始原細胞とまとめて死滅させることをいう。当業者は、腫瘍始原細胞が癌細胞であること、及び、その定義により、用語「腫瘍始原細胞を除去する」とはまた、癌細胞の成長、分裂、成熟又は生存を阻害すること、及び／又は、細胞毒性又はアポトーシスの誘発によって癌細胞を単独で又は他の癌細胞とまとめて死滅させることを含むことを理解する。
【００７３】
他の実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞の除去方法であって、それを必要とする対象に、一般式Iの化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はそれを含む組成物を投与することによる、腫瘍始原細胞の除去方法を提供する。
【００７４】
ある実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞の除去方法であって、それを必要とする対象に、I-1、I-2又はI-3から選択される化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はそれを含む組成物を投与することによる、腫瘍始原細胞の除去方法を提供する。
【００７５】
ある実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞の除去方法であって、それを必要とする対象に、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII又は式VIIIの化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はそれを含む組成物を投与することによる、腫瘍始原細胞の除去方法を提供する。
【００７６】
腫瘍始原細胞又は他の癌細胞を除去するための本発明で利用される化合物の活性は、in vitro又はin vivoでアッセイされうる。本発明の化合物の除去活性又は細胞毒活性のin vivo評価は、齧歯類モデル又は霊長類モデルなどの動物モデルを使用して行われうる。細胞アッセイは、腫瘍又は血液由来の癌から単離された細胞株などを使用して行われうる。酵素、構造タンパク質、細胞表面マーカー、ＤＮＡ又はＲＮＡなどの癌細胞株の特定のタンパク質成分又は核酸成分に対する活性を測定する細胞アッセイ又はマイクロアレイも行われうる。さらに、精製タンパク質、ノザンブロッティング、ＲＴ−ＰＣＲなどを使用した転写アッセイなどの生化学的アッセイ又はメカニズムベース・アッセイが行われうる。in vitroアッセイには、細胞形態、生存率、細胞数又は成長阻害、及び／又は、細胞毒性、酵素阻害活性、及び／又は、本発明の化合物で処理した癌細胞の、その後の機能的影響を決定するアッセイが含まれる。代替的なin vitroアッセイは、細胞内のタンパク質分子又は核酸分子に対する本発明の化合物の結合能を定量する。前記アッセイは例示であり、本発明の範囲を限定するものではない。熟練した実務者は、従来のアッセイを改良して同じ結果が得られる均等なアッセイが開発できることを理解する。
【００７７】
本願明細書に記載の化合物及び組成物により阻害され、かつ、本願明細書に記載の方法が有用である癌細胞株の例には、DU145、PC3、LNCaP、MDA MB 231、MCF7、T47D、HeLa、又は、限定されないが、胸、前立腺、結腸、膵臓又は肺などの組織に由来する他の細胞株が含まれる。このような癌細胞及び癌細胞株の阻害を、本願明細書に記載の化合物及び組成物による阻害を示さないか阻害が比較的小さい正常の細胞又は細胞株と比較する。
【００７８】
一実施形態によれば、本発明は、生物サンプル中の腫瘍始原細胞の除去方法であって、前記生物サンプルを本発明の化合物又は当該化合物を含む組成物と接触させる工程を含む方法に関する。ある実施形態において、本発明は、生物サンプルにおける癌細胞又は腫瘍始原細胞を殺す方法であって、前記生物サンプルを本発明の化合物又は当該化合物を含む組成物と接触させる工程を含む方法に関する。
【００７９】
本願明細書において、用語「本発明の化合物」は、一般式Ｉの化合物、又は式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII若しくは式VIIIの化合物、又は、化合物I-1、I-2若しくはI-3、又はその薬学的に許容可能な塩を含む。
【００８０】
本願明細書において、用語「生物サンプル」は、限定されないが、細胞培養物又はその抽出物；哺乳類から得られる生検材料又はその抽出物；及び、血液、唾液、尿、糞、精液、涙などの体液又はその抽出物を含む。
【００８１】
生物サンプル内の腫瘍始原細胞を除去することは、当業者に知られる様々な目的のために有用である。かかる目的の例には、限定されないが、生物学的アッセイ、遺伝子発現の研究、及び、生物ターゲットの同定が含まれる。
【００８２】
１つ以上の実施形態において、本発明は、腫瘍始原細胞に関連する病気、疾患又は病態の治療方法であって、それを必要とする対象に、本発明の化合物又はそれを含む組成物を投与することによる、腫瘍始原細胞に関連する病気、疾患又は病態の治療方法を提供する。ある実施形態によれば、本発明は、患者内の腫瘍始原細胞を除去し、癌の寛解に導く方法であって、前記患者に本発明の化合物又は当該化合物を含む組成物を投与する工程を含む方法に関する。他の実施形態において、本発明は、癌細胞又は腫瘍始原細胞により仲介される疾患の治療を必要とする対象における、癌細胞又は腫瘍始原細胞により仲介される疾患の治療方法であって、前記患者に本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な組成物を投与する工程を含む方法を提供する。このような疾患は本願明細書において詳しく説明される。
【００８３】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物及び組成物は、癌又は他の増殖性疾患の治療方法に使用されうる。いくつかの実施形態において、本発明は、癌又は他の増殖性疾患を患う患者に本発明の化合物又は組成物を投与する工程を含む、癌又は他の増殖性疾患の治療方法を提供する。ある実施形態において、本発明の化合物又は組成物は、哺乳類の癌の治療に使用されうる。ある実施形態において、哺乳類はヒトの患者である。ある実施形態において、本発明の化合物又は組成物はヒトの患者における癌の治療に使用されうり、当該癌は、患者の胸、前立腺、脳、血液、骨髄、肝臓、膵臓、皮膚、腎臓、結腸、卵巣、肺、睾丸、陰茎、甲状腺、副甲状腺、脳下垂体、胸腺、網膜、葡萄膜、結膜、脾臓、頭、首、気管、胆嚢、直腸、唾液腺、副腎、喉、食道、リンパ節、汗腺、脂腺、筋肉、心臓又は胃において発生する。
【００８４】
治療対象の特定の病状つまり病気に応じて、追加の治療薬（当該病状の治療に通常投与されるもの）を本発明の化合物及び組成物と併用して投与してもよい。いくつかの実施形態において、提供される本発明の化合物又はその組成物は、１つ以上の他の化学療法薬と共に投与される。このような化学療法薬の例には、限定されないが、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝抵抗物質（antimetabolite）、チューブリン安定化剤、チューブリン構築阻害剤、ＤＮＡ複製阻害剤、細胞周期阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、細胞毒抗生物質、又は、任意の前記薬剤のナノ粒子コンジュゲート又はタンパク質コンジュゲートが含まれる。
【００８５】
ある実施形態において、２種以上の化学療法薬の組み合わせが本発明の化合物と共に投与されうる。ある実施形態において、３種以上の化学療法薬の組み合わせが本発明の化合物と共に投与されうる。いくつかの実施形態において、化学療法薬はアルキル化剤又は代謝抵抗物質から選択される。
【００８６】
本発明の化合物が組み合わせられうる薬剤の他の例としては、限定されないが、ビタミン及び栄養補助食品；癌ワクチン；好中球減少症などの癌以外の病状、疾患又は病気を治療するための他の薬剤（例えば、G-CSF、フィルグラスチム、レノグラスチム）；血小板減少症のための治療（例えば、輸血、エリスロポイエチン）；制吐剤（例えば、5-HT3受容体アンタゴニスト、ドパミンアンタゴニスト、NK1受容体アンタゴニスト、ヒスタミン受容体アンタゴニスト、カンナビノイド、ベンゾジアゼピン、または抗コリン作用物質）；アルツハイマー病の治療（例えば、Aricept（登録商標）及びExcelon（登録商標））；パーキンソン病の治療（例えば、L-DOPA/カルビドパ、エンタカポン（entacapone）、ロピニロール（ropinrole）、プラミペキソール、ブロモクリプチン、ペルゴリド、トリヘキセフェンジル（trihexephendyl）、及びアマンタジン）；多発性硬化症(MS)を治療するための薬剤（例えば、βインターフェロン（例えば、Avonex（登録商標）及びRebif（登録商標））、Copaxone（登録商標）、ミトザントロン）；喘息の治療（例えば、アルブテロール及びSingulair（登録商標））；統合失調症を治療するための薬剤（例えば、ジプレキサ（zyprexa）、リスペルダル（risperdal）、セロケル（seroquel）、及びハロペリドール）；抗炎症剤（例えば、コルチコステロイド、TNF遮断薬、II-1 RA、アザチオプリン、シクロホスファミド、及びスルファサラジン）；免疫調節剤及び免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン（rapamycin）、ミコフェノール酸モフェチル、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、及びスルファサラジン）；神経栄養因子（例えば、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、MAO阻害剤、インターフェロン、抗痙攣薬、イオンチャネル遮断薬、リルゾール、及び抗パーキンソン症候群剤）；心臓血管疾患のための薬剤（例えば、β-遮断薬、ACE阻害剤、利尿薬、硝酸塩、カルシウムチャネル遮断薬、及びスタチン、フィブレート、コレステロール吸収阻害剤、胆汁酸封鎖剤、及びナイアシン）；肝疾患を治療するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、コレスチラミン、インターフェロン、及び抗ウイルス剤）；血液障害を治療するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、抗白血病剤、成長因子及び増殖因子）；免疫欠損障害を治療するための薬剤（例えば、γグロブリン）が含まれる。
【００８７】
ある実施形態において、本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な組成物は、アンチセンス剤、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはsiRNA治療薬と併用して投与される。
【００８８】
これらの追加の薬剤は、個々の化合物含有化合物とは別に、複数投薬レジメンの一部として投与されうる。あるいは、これらの薬剤は、本発明の化合物と単一の組成物に混合された、単一の剤形の一部でありうる。複数投薬レジメンの一部として投与される場合、これらの２種の活性薬剤は、同時に、順に、又は互いの投与から所定の期間以内（通常、５時間以内）に投与されうる。単一剤形を製造するために担体材料と組み合わせられうる、本発明の化合物と追加の治療薬の両方の（上記のような追加の治療薬を含有する組成物中での）量は、治療対象のホスト、及び特定の投与形態に依存して変わる。好ましくは、本発明の組成物は、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の用量で本発明の化合物が投与されうるように製剤化する。
【００８９】
追加の治療薬を含有する組成物において、当該追加の治療薬及び本発明の化合物は、相乗作用しうる。従って、かかる組成物中の追加の治療薬の量は、当該治療薬のみを利用する単剤療法において必要とされる量より少ない。
【００９０】
本発明の組成物中に存在する追加の治療薬の量は、唯一の活性剤としてその治療薬を含む組成物で通常投与される量以下になる。好ましくは、本開示の組成物中の追加の治療薬の量は、唯一の治療上活性な剤として当該薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％から１００％の範囲である。
【００９１】
化学療法薬への抵抗は、多くの癌及び他の増殖性疾患に対する治療効果を抑制する主要なファクターである。これらの細胞は分裂速度が速いため、現在の第一線の化学療法剤に対する抵抗をもたらすＭＤＲなどのポンプの変異やアップレギュレーションを可能とする。薬剤耐性がより強い態様で癌が再発するという問題は、癌患者治療の新規化学療法薬の開発における致命的な障壁である。
【００９２】
本発明は、腫瘍始原細胞を除去し、それにより関連する病気、疾患又は病状を治療するための、特に、癌の再発問題を回避又は最小化するための本発明の化合物及びその組成物を提供することにより、かかる問題に対処する。
【００９３】
下記実施例に示すとおり、ある例示的な実施形態では、下記一般的な手順に従って化合物が調製される。当該一般的な手順は本発明の所定の化合物の合成を示すものであるが、本願明細書に記載されているとおり、当業者に知られている他の方法も、全ての化合物並びにこれらの化合物の各々の下位クラス及び種に対して適用可能である。
【００９４】
ある実施形態では、スキーム１に概略する手順に従って、L、Q及びXが酸素である式Iの化合物が調製される。
【化６】
2016503005.tif 000007
【００９５】
ある実施形態において、本発明の化合物及びその合成中間体は、本願明細書においてその内容全体を参照により援用する特許文献１，２などに記載されている、当業者に知られている方法に従って調製されうる。
【００９６】
ある実施形態において、本発明の化合物は、in vitro細胞死アッセイ、in vitro軟寒天成長阻害アッセイ、in vitro三次元スフィア形成幹細胞アッセイ、動物におけるin vivo毒性アッセイなどの当該技術分野で知られている方法を使用して、腫瘍始原細胞を除去する化合物としてアッセイされる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物のアッセイ結果は既知の化学療法薬で得られた結果と比較される。いくつかの実施形態において、比較に使用する化学療法薬はシスプラチンである。
【００９７】
以上、本発明を様々な実施形態に基づいて特に図示及び記載したが、本発明の要旨を逸脱しない範囲で、態様及び詳細に様々な変更を加えられうることが当業者により理解される。
【実施例】
【００９８】
本発明を説明するために、本願明細書は下記実施例を含むが、これらの実施例は本発明を限定するものではないことを理解されたい。
【００９９】
実施例１
９−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−４−［（３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ］ナフト−６，７−ジメトキシナフト［２，３−ｃ］フラン−１（３Ｈ）−オンの合成
【０１００】
（２−（１，３−ジオキソラン−２−イル）−４，５−ジメトキシフェニル）（ベンゾ（ｄ）（１，３）ジオキソール−５−イル）−メタノール（０．３０ｇ，０．８３３ｍｍｏｌ）、アセチレンジカルボキシレート（０．１４１ｇ，０．８３３ｍｏｌ）、ジクロロメタン（０．４ｍＬ）、及び、氷酢酸（０．２４２ｍＬ）を封止チューブに投入し、混合物を１４０℃で１時間加熱した。ＴＬＣ（５０：５０，ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で反応完了を確認後、反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈し、５％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄（３×１０ｍＬ）した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過及び濃縮した。粗反応物を、ＥｔＯＡ：ヘキサン（１５：８５）を使用したシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．３ｇ（７５％）のジエチル１−（３’，４’−メチレンジオキシフェニル）−４−ヒドロキシ−６，７−ジメトキシナフタレン−２，３−ジカルボキシレートの白色固体を得た。
【０１０１】
水素化アルミニウムリチウム（０．０３２ｇ，０．８５２ｍｍｏｌ）及び無水テトラヒドロフラン（４ｍＬ）を２口丸底フラスコに投入し、混合物を攪拌しながら０℃に冷却した。この縣濁液に、ジエチル１−（３’，４’−メチレンジオキシフェニル）−４−ヒドロキシ−６，７−ジメトキシナフタレン−２，３−ジカルボキシレート（０．２００ｇ，０．４２６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（４ｍＬ）を滴下し、２時間攪拌を続けた。ＴＬＣ（１：９，ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）で反応完了を確認後、反応混合物を飽和硫酸ナトリウム溶液でクエンチし、ｎ−ブタノールで抽出した（４×２０ｍＬ）。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．０７ｇ（８５％）の９−（３’，４’−メチレンジオキシフェニル）−４−ヒドロキシ−６，７−ジメトキシナフト［２，３−ｃ］フラン−１（３Ｈ）−オンの黄色固体を得た。
【０１０２】
炎で乾燥した３口丸底フラスコ（２５０ｍｌ）に、９−（３’，４’−メチレンジオキシフェニル）−４−ヒドロキシ−６，７−ジメトキシナフト［２，３−ｃ］フラン−１（３Ｈ）−オン化合物（０．３８０ｇ，１ｍｍｏｌ）及びクロロホルム（２０ｍＬ）を添加し、攪拌して完全に溶解させた。次いで、２，３，４オキシトリアセチル−α−Ｄ−ブロモキシロピラノース（０．５０８ｇ，１．５ｍｍｏｌ）、テトラブチル臭化アンモニウム（０．３２２ｇ，１ｍｍｏｌ）、及び、０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（２０ｍＬ）を上記溶液に添加した。反応物を、消化させるために、攪拌下４０℃で６時間維持した。変換をＴＬＣ（ＭｅｏＨ：ＭＤＣ，０５：９．５）によりチェックし、未変換の場合、変換が完了するまで消化を継続した。反応完了後、反応物を１％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。層分離後、クロロホルムを濃縮して、９−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−４−［（３，４，５−トリアセテート−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ］ナフト−６，７−ジメトキシナフト［２，３−ｃ］フラン−１（３Ｈ）−オンの粗固体物０．５１０ｇ（収率：８０％）を得た。
【０１０３】
クライスタチンＡトリアセテート（０．５１０ｇ，０．８ｍｍｏｌ）、触媒量の炭酸カリウム（０．１３８ｇ，１ｍｍｏｌ）、及び、メタノール（２０ｍＬ）を清潔な乾燥３口丸底フラスコに添加し、１時間２５℃でよく攪拌した。反応はＴＬＣ及びＨＰＬＣでモニターした。反応完了後、反応物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出し（２×３０ｍＬ）、最終生成物を得た。酢酸エチルを濃縮してピュアな０．３０７ｇ（収率：６０％）の９−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−４−［（３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ］ナフト−６，７−ジメトキシナフト［２，３−ｃ］フラン−１（３Ｈ）−オンを得た。
【０１０４】
化合物I-3のＮＭＲの詳細は下記のとおりであった。
【０１０５】
1HNMR (CDCl3,300 MHz): 2.1ppm(t)1H -OCH, 2.2ppm(m)1H -OCH, 3.4ppm(m)2H -OCH2, 3.6ppm(m)3H -OCH3, 3.8ppm(q)1H -OCH, 3.9ppm(s)3H -OCH3, 4.7ppm(q)1H -OCHO-,5ppm(d)1H -OH, 5.2ppm(m)1H -OH, 5.4ppm(d)2H Ar -OCH2, 5.9ppm(d)1H -OH, 6.1ppm(s)2H -OCHO-,6.8ppm  1H  Ar-H, 6.91ppm(d) Ar-H, 6.92ppm(d) Ar-H, 6.95ppm(d) Ar-H, 7.01ppm(d) Ar-H.
【０１０６】
実施例２
in vitro比色細胞死アッセイ
本アッセイは、細胞を２次元表面上に成長させた場合の細胞生存率を評価するためのin vitro比色アッセイである。
【０１０７】
本アッセイの例示的な手順は下記の通りである。癌細胞及び正常細胞を所定のコロニー形成率で９６穴プレートに播種した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で２４時間インキュベートし、一連の濃度の化合物I-1、I-2及びI-3並びにシスプラチン（既知の化学療法薬）を個別のウェルに添加し、プレートを更に４８時間５％ＣＯ２雰囲気下でインキュベートした。プレートを３０００ｒｐｍ、３分間の条件で２回遠心し、上清を捨て、０．５ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ溶液を１００μＬ添加し、プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で４時間インキュベートした。次いで、プレートを３０００ｒｐｍ、３分間の条件で２回遠心し、上清を注意深く吸引除去し、ＭＴＴ結晶を可溶化するために２００μｌのＤＭＳＯを各ウェルに添加し、プレートを振盪してよく混和させた。プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で１０分間インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡプレート・リーダーのシェーカーに載せ、５７０ｎｍの吸光度を測定した。次いで、まず、バックグランド吸光度を差し引き、次に薬剤未処理の細胞サンプルの吸光度と比較して、残った生存細胞の割合（％）を測定した。結果をグラフにプロットして化合物とシスプラチンのＩＣ５０値を求めた。
【０１０８】
in vitro比色細胞死アッセイの結果を表１〜３に示す。
【表１】
2016503005.tif 000008
【表２】
2016503005.tif 000009
【表３】
2016503005.tif 000010
【０１０９】
化合物I-1、I-2及びI-3は、癌細胞株においてシスプラチン（既知の化学療法薬）より高い抗癌活性を示した。これらの化合物は正常細胞株に対して活性を示さなかったが、シスプラチンは顕著な抗癌活性を示した。
【０１１０】
実施例３
in vitro軟寒天コロニー形成成長アッセイ
コロニー形成のための軟寒天アッセイは、細胞の悪性形質転換を検出するための最も厳しいアッセイであると考えられている。本アッセイでは、細胞を低寒天含有率の培地中で培養する。
【０１１１】
本アッセイの例示的な手順は下記の通りである。５０μＬの２×培地と５０μＬの１．２％Bacto Agar混合液を９６穴マイクロタイター・アッセイプレートの各ウェルに入れ、１０μＬの（細胞株毎に事前に標準化した特定のコロニー形成率の）細胞を、２０μＬの２×培地、３０μＬの０．８％Bacto Agar、及び、１．６μＬの本発明の化合物及びシスプラチンのそれぞれと、個別のバイアル中で混合し、混合物をプレートの各ウェルの固化寒天上に載せた。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で一週間インキュベートした（３日後に各ウェルに５０μＬの２×培地を添加）。次いで、各ウェルに１６μＬのAlamar Blue（１．５ｍｇ／ｍＬ）を添加し、各ウェルの６３０ｎｍにおける吸光度を測定し、化合物及びシスプラチンを含まない成長対照ウェルの吸光度測定値に対する各ウェルの細胞生存率（％）を計算し、化合物とシスプラチンのＩＣ５０値を求めた。
【０１１２】
in vitro軟寒天アッセイの結果を以下の表に示す。
【表４】
2016503005.tif 000011
【表５】
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【表６】
2016503005.tif 000013
【０１１３】
癌細胞により形成されたコロニーの数は、シスプラチンよりも本発明の化合物の方が著しく少なかった。このように、本発明の化合物はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【０１１４】
実施例４
in vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイ
本アッセイは、癌幹細胞が無血清培地中でスフィアを形成する能力を測定するものであり、懸濁状のスフィアが形成される。本アッセイを通じて、既知の化学療法薬であるシスプラチンと比較した本発明の化合物の癌幹細胞殺傷能力を評価した。
【０１１５】
本アッセイの例示的な手順は下記の通りである。プラスチック製基板上で細胞を３次元に成長させ、無血清培地中に懸濁状態で回収した。サンプル中の細胞をトリプシン処理し、セルストレーナーを通過させて単一細胞縣濁液を形成した。細胞を幹細胞用培地に懸濁して、細胞を研究対象の細胞株のコロニー形成率に応じて希釈した。この縣濁液１００μＬを９６穴懸濁プレートの各ウェルに添加し、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で２４時間インキュベートした後、２μＬの適切な濃度の本発明の化合物及びシスプラチンを、それぞれのウェルに１００μＬの幹細胞用培地と共に添加した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で７２時間インキュベートした。２．５μＬの本発明の化合物及びシスプラチンを、それぞれのウェルに５０μＬの幹細胞用培地と共に添加した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で７２時間インキュベートした。３μＬの適切な濃度の本発明の化合物及びシスプラチンを、それぞれのウェルに５０μＬの幹細胞用培地と共に添加した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で７２時間インキュベートした。次いで、顕微鏡で形成したスフィアを観察して個数を計測し、また、大きさを評価した。
【０１１６】
in vitro３次元スフィア形成幹細胞アッセイの結果を表で示す。各マスの数字は、各濃度の化合物I-2、化合物I-3又はシスプラチンの存在下で形成したスフィアの合計数である。ＧＣは、薬剤又は溶媒（ＤＭＳＯ）の非存在下で行った成長制御（Growth Control）を示す。ＧＣＤは、薬剤非存在下であるがＤＭＳＯの存在下で行った成長制御を示す。
【表７】
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【０１１７】
乳癌細胞（MDA MB 231）の初期スフィアの形成数は、上記表及び図１からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-2の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-2はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表８】
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【０１１８】
前立腺癌細胞PC3の初期スフィアの形成数は、上記表及び図２からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-2の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-2はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表９】
2016503005.tif 000016
【０１１９】
前立腺癌細胞LNCaPの初期スフィアの形成数は、上記表及び図３からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-2の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-2はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表１０】
2016503005.tif 000017
【０１２０】
乳癌細胞T47Dの初期スフィアの形成数は、上記表及び図４からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-2の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-2はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表１１】
2016503005.tif 000018
【０１２１】
前立腺癌DU145の初期スフィアの形成数は、上記表及び図５からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-2の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-2はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表１２】
2016503005.tif 000019
【０１２２】
乳癌細胞MDA MB 231の初期スフィアの形成数は、上記表及び図６からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-3の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-3はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【表１３】
2016503005.tif 000020
【０１２３】
乳癌細胞MCF-7の初期スフィアの形成数は、上記表及び図７からわかるように、シスプラチンよりも化合物I-3の方が顕著に少なかった。このように、化合物I-3はシスプラチン（既知の化学療法薬）よりも高い抗癌活性を示した。
【０１２４】
実施例５
本発明の化合物I-1に対するin vivo最大耐量アッセイ
容認できない毒性無しに所望の効果をもたらす薬剤治療の最大用量を評価するためにin vivo最大耐量（maximum tolerated dose； MTD）アッセイを行った。最大耐量（ＭＴＤ）を投与する目的は、化合物への暴露レベルが短期毒性効果による早死を引き起こすのに十分ではない場合において、化合物への長期の暴露が対象の健康に容認できない悪影響をもたらしうるか否かを決定するためである。
【０１２５】
in vivo最大耐量アッセイの例示の手順は以下の通りである。０日目に、統計的に適切な数の雄マウス及び雌マウスに対して、３０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ又は２．５ｍｇ／ｋｇの化合物I-1を腹腔内注射（i.p.）で単回投与した。１日〜４日後に各用量グループから生存したマウスの個体数を記録し、最大耐量（ＭＴＤ；例えば、４日後に１００％のマウスが生存した用量）を決定した。
【０１２６】
化合物I-1に対するin vivo最大耐量アッセイの結果を表１４に示す。
【表１４】
2016503005.tif 000021
【０１２７】
４日後に１００％のマウスが生存した用量は、マウスの体重１ｋｇに対して約５ｍｇの化合物I-1であり（５ｍｇ／ｋｇ）、これは、化合物I-1のＭＴＤは５〜１０ｍｇ／体重（ｋｇ）の範囲であることを示している。
【０１２８】
実施例６
本発明の化合物I-2に対するin vivo最大耐量アッセイ
容認できない毒性無しに所望の効果をもたらす薬剤治療の最大用量を評価するためにin vivo最大耐量（maximum tolerated dose； MTD）アッセイを行った。最大耐量（ＭＴＤ）を投与する目的は、化合物への暴露レベルが短期毒性効果による早死を引き起こすのに十分ではない場合において、化合物への長期の暴露が対象の健康に容認できない悪影響をもたらしうるか否かを決定するためである。
【０１２９】
in vivo最大耐量アッセイの例示の手順は以下の通りである。統計的に適切な数の雌BALB/cマウスに対して、３種類の用量（３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｇ）の化合物1-2を腹腔内注射した。投与期間及び投与後期間中、全てのマウスの体重と臨床徴候を毎日観察した。
【０１３０】
化合物I-2に対するin vivo最大耐量アッセイの結果を表１５に示す。本発明の化合物I-2をq7dX4（毎週１回、４週間）のスケジュールで注射した雌BALB/cマウスの平均体重（単位：平均±ＳＥＭ）を示す。
【０１３１】
【表１５】
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【０１３２】
表からわかるように、化合物I-2の用量が３ｍｇ／ｋｇであるグループＧ１と、化合物I-2の用量が０．３ｍｇ／ｋｇであるグループＧ３は、最初の処置後に体重が減少し、その後正常な成長パターンを示した。グループＧ３は、グループＧ１と比較して、わずかに体重増加が見られた。化合物I-2の用量が１ｍｇ／ｋｇであるグループＧ２は、実験期間全体にわたって、正常な成長パターンを示した。Ｇ２グループは他のグループと比較して最大の体重増加を示した。第２日目にグループＧ１の百分率体重変化が見られた（すなわち実験期間全体で−３．２％）。また、第３日目にグループＧ３の百分率体重変化が見られた（すなわち実験期間全体で−３．８％）。投与後及び投与後期間中、全てのマウスの死亡と臨床徴候を観察した。３ｍｇ／ｋｇにおいて２匹以上の死亡が観察されたため、当該用量は毒性であることがわかった。しかしながら、１ｍｇ／ｋｇと０．３ｍｇ／ｋｇでは、本治療レジメンでは実験動物に対して安全であることがわかった。したがって、q7dx4のレジメンでは、化合物I-2のＭＴＤは、３ｍｇ／ｋｇ未満かつ１ｍｇ／ｋｇ超であろう。
【０１３３】
以上、本発明を列挙した実施形態と共に説明したが、本発明をこれらの実施形態に限定する意図はないことを理解されたい。逆に、本発明は、特許請求の範囲で定義された本発明の範囲に含まれうる、全ての代替形態、改変形態及び均等物に及ぶことを意図している。よって、上記記載は、本発明の原理を単に例示するためものと見なされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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