(57)【要約】  本開示の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の両方を複合製剤として又は別個の製剤として投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する組成物及び方法が提供される。本開示の側面によれば、がん治療を必要とする患者のがんを治療する方法が提供され、この患者が野生型ＫＲＡＳを特徴とするがんを有し、この方法が、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個の製剤として投与することを含み、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せの投与が相乗的な抗がん効果を有してこのがんを治療する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
セツキシマブ及びＩＳＣ−４；又は
セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグ
を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記ＩＳＣ−４プロドラッグが、以下の構造式：
【化１】
2016503063.tif 000016
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
セツキシマブ及びＩＳＣ−４；又は
セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグを含む市販用セット。
【請求項４】
前記ＩＳＣ−４プロドラッグが、以下の構造式：
【化２】
2016503063.tif 000017
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、請求項３の市販用セット。
【請求項５】
前記セツキシマブ及びＩＳＣ−４が単一の医薬製剤として提供される、請求項３の市販用セット。
【請求項６】
前記セツキシマブ及びＩＳＣ−４が別個の医薬製剤として提供される、請求項３の市販用セット。
【請求項７】
前記セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグが単一の医薬製剤として提供される、請求項３又は４の市販用セット。
【請求項８】
前記セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグが別個の医薬製剤として提供される、請求項３又は４の市販用セット。
【請求項９】
以下の構造式：
【化３】
2016503063.tif 000018
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む組成物。
【請求項１０】
セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法。
【請求項１１】
前記組合せの投与が相乗効果を提供する、請求項１０の方法。
【請求項１２】
前記がんが、野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項１０又は１１のがんを治療する方法。
【請求項１３】
前記がんが、野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、請求項１０〜１２のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１４】
更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；
セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及び
アポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項１０〜１３のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１５】
更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；
セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及び
リン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項１０〜１４のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１６】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４を同時に投与する、請求項１０〜１５いずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１７】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４を逐次的に投与する、請求項１０〜１５のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１８】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４を、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、請求項１０〜１５及び１７のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項１９】
セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法。
【請求項２０】
前記組合せの投与が相乗効果を提供する、請求項１９のがんを治療する方法。
【請求項２１】
前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項１９又は２０のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２２】
前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、請求項１９〜２１のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２３】
更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；
セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及び
アポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項１９〜２２のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２４】
更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；
セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及び
リン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項１９〜２３のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２５】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを同時に投与する、請求項１９〜２４いずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２６】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを逐次的に投与する、請求項１９〜２４のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２７】
前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、請求項１９〜２４及び２６のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２８】
前記ＩＳＣ−４プロドラッグが、以下の構造式：
【化４】
2016503063.tif 000019
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、請求項１９〜２７のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項２９】
前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性である、請求項１０〜２８のいずれか1項に記載のがんを治療する方法。
【請求項３０】
前記がんが、５−フルオロウラシルに抵抗性であり、かつ野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項１０〜２９のいずれのがんを治療する方法。
【請求項３１】
前記がんが、５−フルオロウラシルに抵抗性であり、かつ前記野生型ＫＲＡＳがヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項１０〜３０のいずれのがんを治療する方法。
【請求項３２】
前記がんが、５−フルオロウラシルに抵抗性であり、かつ前記野生型ＫＲＡＳがヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項１０〜３１のいずれのがんを治療する方法。
【請求項３３】
がんの治療に使用される
セツキシマブ及びＩＳＣ−４、又は
セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグ。
【請求項３４】
医薬として使用するための
セツキシマブ及びＩＳＣ−４、又は
セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグ、の組合せ。
【請求項３５】
実質的に本明細書に記載されている被験体のがんを治療する方法。
【請求項３６】
実質的に本明細書に記載されている医薬組成物。
【請求項３７】
実質的に本明細書に記載されている市販用セット。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、２０１２年１２月２０日に出願された米国仮特許出願第６１／７４０，１２６号の優先権を主張し、その内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【政府支援】
【０００２】
本発明は、国立衛生研究所によって授与された助成金番号ＣＡ１４３９９９の下で、政府支援で行われた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【技術分野】
【０００３】
本発明の一般的側面によれば、がん治療を必要とする被験体のがんを治療するための方法及び組成物が提供される。本発明の一般的側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の両方を、複合製剤として又は別個の製剤として投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療するための方法及び組成物が提供される。
【背景技術】
【０００４】
がん治療を必要とする被験体のがんを治療するための方法及び組成物は求められ続けている。本発明によれば、そのような方法及び組成物が提供される。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の両方を、複合製剤として又は別個の製剤として投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法が提供される。
【０００６】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【０００７】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【０００８】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【０００９】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００１０】
本発明によって、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００１１】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体の大腸がんを治療する方法であって、前記大腸がんが活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００１２】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００１３】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００１４】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、第１の試料に比較して第２の試料におけるアポトーシスの増加は、セツキシマブ及びＩＳＣ−４の治療活性を示し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与することの有効性を監視する、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。
【００１５】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを、複合製剤として又は別個に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、第１の試料との比較での第２の試料におけるリン酸化Ａｋｔの減少は、セツキシマブ及びＩＳＣ−４の治療活性を示し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与することの有効性を監視する、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。
【００１６】
本発明のがんを治療する方法の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４を同時に又は逐次的に投与する。非限定的な例において、セツキシマブとＩＳＣ−４を、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する。
【００１７】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の両方を含む医薬組成物が提供される。
【００１８】
本発明の側面によれば、セツキシマブ及びＩＳＣ−４は単一の医薬製剤として又は別個の医薬製剤として提供される、セツキシマブとＩＳＣ−４の両方を含む市販用セットが提供される。
【００１９】
本発明によって、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法が提供される。
【００２０】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００２１】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００２２】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３、又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００２３】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、がんを治療する方法が提供される。
【００２４】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体の大腸がんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００２５】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体の大腸がんを治療する方法であって、前記大腸がんが活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、大腸がんを治療する方法が提供される。
【００２６】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグ組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００２７】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんがヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、がんを治療する方法が提供される。
【００２８】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの1種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、第１の試料に比較して第２の試料におけるアポトーシスの増加は、セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグの治療活性を示し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与することの有効性を監視する、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。
【００２９】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、第１の試料との比較での第２の試料におけるリン酸化Ａｋｔの減少は、セツキシマブ及びＩＳＣ−４プロドラッグの治療活性を示し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与することの有効性を監視する、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、大腸がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、大腸がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、大腸がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。
【００３０】
本発明のがんを治療する方法の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを同時に又は逐次的に投与する。非限定的な例において、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する。
【００３１】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記ＩＳＣ−４プロドラッグがＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、がんを治療する方法が提供される。前記ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグは、以下の構造式を有する。
【化１】
2016503063.tif 000002
【００３２】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴付けられ、ＩＳＣ−４プロドラッグがＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。
【００３３】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を組合せてあるいは別々に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんであり、ＩＳＣ−４プロドラッグがＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、がんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、大腸がんは活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、大腸がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、大腸がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。
【００３４】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩であるＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の両方を組合せてあるいは別々に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを投与することの有効性を監視することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。
【００３５】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩であるＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の両方を組合せてあるいは別々に投与すること；セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを投与することの有効性を監視することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法が提供される。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする。そのような方法の側面によれば、がんは、活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。そのような方法の側面によれば、がんは、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである。
【００３６】
本発明のがんを治療する方法の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを、同時に又は逐次的に投与する。
【００３７】
非限定的な例において、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する。
【００３８】
本発明の側面による医薬組成物は、セツキシマブ及びＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００３９】
本発明の側面による市販用セットは、セツキシマブ及びＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００４０】
本発明の側面による市販用セットは、セツキシマブ及びＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の両方を含む単一の医薬製剤を含む。
【００４１】
本発明の側面による市販用セットは、セツキシマブ及びＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含み、前記セツキシマブは第１の医薬製剤として提供され、ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩は市販用セット中の別個の第２の医薬製剤として提供される。
【００４２】
本発明の側面による組成物は、以下の構造式：
【化２】
2016503063.tif 000003
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００４３】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４を一緒に又は別々に投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４を投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析すること、及び／又はリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がんの治療の有効性を評価する方法であって、アポトーシスの１種以上のマーカーの増加及びリン酸化Ａｋｔの減少が、組合せて、一緒に、又は別々に、セツキシマブ及びＩＳＣ−４の両方を投与する治療活性の指標であって、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを投与することの有効性を監視する、がんの治療の有効性を評価する方法が提供される。
【００４４】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４を一緒に又は別々に投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析すること、及び／又はリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がんの治療の有効性を評価する方法であって、アポトーシスの１種以上のマーカーの増加及びリン酸化Ａｋｔの減少が、組合せて、一緒に、又は別々に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの両方を投与する治療活性の指標であって、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与することの有効性を監視する、がんの治療の有効性を評価する方法が提供される。
【００４５】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を一緒に又は別々に投与する前に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を投与した後に被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて第１及び第２の試料を分析すること、及び／又はリン酸化Ａｋｔについて第１及び第２の試料を分析することを含む、がんの治療の有効性を評価する方法であって、アポトーシスの１種以上のマーカーの増加及びリン酸化Ａｋｔの減少が、複合化して、一緒に、又は別々に、セツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の両方を投与する治療活性の指標であって、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩の組合せを投与することの有効性を監視する、がんの治療の有効性を評価する方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１Ａ】図１Ａは、ＩＳＣ−４又はＤＭＳＯで処理した、表示された細胞株の細胞生存率試験の結果及び算出したＥＣ５０値を示すグラフである。
【００４７】
【図１Ｂ】図１Ｂは、同期及び非同期ＨＣＴ１１６細胞の細胞周期プロファイルに対するＩＳＣ−４処理の効果を示すグラフである。
【００４８】
【図１Ｃ】図１Ｃは、同期及び非同期ＨＴ−２９細胞の細胞周期プロファイルに対するＩＳＣ−４処理の効果を示すグラフである。
【００４９】
【図１Ｄ】図１Ｄは、０、１、２、４、８、又は１６μＭのＩＳＣ−４によるＩＳＣ−４処理後の表示された大腸がんのｓｕｂ−Ｇ１含有量を示すグラフである。
【００５０】
【図２】図２は、ＩＳＣ−４（１、２、又は４μＭ）及び表示された治療法の推定ＥＣ１２．５、ＥＣ２５、及びＥＣ５０で、単独及び組合せで処理した大腸がん細胞株ＳＷ４８０及びＲＫＯにおける細胞生存率分析の結果を示す。
【００５１】
【図３Ａ】図３Ａは、表示の用量のＩＳＣ−４及びセツキシマブで７２時間処理されたヒト大腸がん細胞株ＨＴ−２９の細胞生存率分析の結果を示す。
【００５２】
【図３Ｂ】図３Ｂは、表示の用量のＩＳＣ−４セツキシマブで７２時間処理されたヒト大腸がん細胞株ＲＫＯの細胞生存率分析の結果を示す。
【００５３】
【図３Ｃ】図３Ｃは、表示の用量のＩＳＣ−４及びセツキシマブで７２時間処理されたヒト大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６の細胞生存率分析の結果を示す。
【００５４】
【図３Ｄ】図３Ｄは、表示の用量のＩＳＣ−４及びセツキシマブで７２時間処理されたヒト大腸がん細胞株ＤＬＤ−１の細胞生存率分析の結果を示す。
【００５５】
【図３Ｅ】図３Ｅは、２４時間、表示のように５−ＦＵで処理した野生型ＲＫＯ細胞及び５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ細胞の細胞生存率試験の結果を示すグラフである。
【００５６】
【図３Ｆ】図３Ｆは、２４時間、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍｌ）で処理した５−ＦＵ耐性ＲＫＯ細胞の結果を示すグラフである。
【００５７】
【図４Ａ】図４Ａは、表示の期間、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍｌ）を単独又は組合せで処理したＲＫＯ細胞の結果を示している。
【００５８】
【図４Ｂ】図４Ｂは、１２時間、図４Ａと同様にして処理したＲＫＯ細胞のＤＡＰＩ染色の結果を示している。
【００５９】
【図４Ｃ】図４Ｃは、１２時間、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍｌ）を単独又は組合せで処理したＲＫＯ細胞のｓｕｂ−Ｇ１含有量を示している。
【００６０】
【図４Ｄ】図４Ｄは、処理後２４時間での、セツキシマブ（０、０．２５、０．５、又は１ｇ／ｍＬ）と組み合わせたＩＳＣ−４（２μＭ）で処理したＲＫＯ細胞のカスパーゼグロ分析の結果（上図）、及びＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の定量化の結果（下図）を示している。
【００６１】
【図５Ａ】図５Ａは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／１ｍＬ）を単独又は組み合わせて２４時間処理したＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析の結果を示している。
【００６２】
【図５Ｂ】図５Ｂは、表示の期間、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／１ｍＬ）を単独又は組み合わせて処理したＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析の結果を示す図である。
【００６３】
【図５Ｃ】図５Ｃは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の組合せ（Ｒｘ）で８時間処理した後の、表示のヒト大腸がん細胞のウェスタンブロット分析の結果である。対照との比較で＊Ｐ＜０．０５である。
【００６４】
【図６Ａ】図６Ａは、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はそれらの組合せ（「コンボ」）の単回投与で治療後４日での、５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ異種移植片の相対的な腫瘍サイズを示すグラフである。
【００６５】
【図６Ｂ】図６Ｂは、治療後２４時間に採取した異種移植片腫瘍のヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色並びにＴＵＮＥＬ染色の結果である。
【００６６】
【図６Ｃ】図６Ｃは、定着ＨＴ−２９異種移植腫瘍を有する無胸腺雌ヌードマウスを、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、その組合せ、又はセツキシマブ及び５−ＦＵ（２５ｍｇ／ｋｇ、静脈内）で、１週間に１回の０日目から始まる治療の結果である。
【００６７】
【図７Ａ】図７Ａは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて１２時間処理したＲＫＯ細胞の位相差顕微鏡像である。
【００６８】
【図７Ｂ】図７Ｂは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて処理したＲＫＯ細胞におけるＫｉ−６７発現の流動細胞計画法（flow cytometry）解析の結果である。
【００６９】
【図７Ｃ】図７Ｃは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて処理したＲＫＯ細胞におけるＫｉ−６７発現のウェスタンブロット分析である。
【００７０】
【図７Ｄ】図７Ｄは、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）で２４時間処理されたＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析結果をある。
【００７１】
【図８Ａ】図８Ａは、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はこれらの組合せ（ｎ≧５）を週２回、２週間にわたって投与したマウスの体重変化を示すグラフである。
【００７２】
【図８Ｂ】図８Ｂは、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はこれらの組合せでの治療後２４時間にマウスから採取された肝臓組織のＨ＆Ｅ染色の結果である。
【００７３】
【図８Ｃ】図８Ｃは、図６Ｃに記載のＨＴ−２９異種移植片の最終の腫瘍体積及び腫瘍重量を示すグラフである。
【００７４】
【図８Ｄ】図８Ｄは、最終投与３日後の終点でのマウスの体重である（ｎ≧８）。誤差バーは繰り返しの標準誤差を示している。
【発明の詳細な説明】
【００７５】
本明細書中で使用される科学用語及び専門用語は、当業者が通常理解している意味を有すると意図されている。そのような用語は、様々な標準的な参考文献中の文脈において定義され、使用されており、その参考文献としては、例えば、J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual（分子クローニング：実験便覧）, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 3rd Ed., 2001; F.M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols（分子生物学における簡易プロトコル、最新プロトコル）, 5th Ed., 2002；B. Albertsら, Molecular Biology of the Cell（細胞の分子生物学）, 4th Ed., Garland, 2002；D.L. Nelson and M.M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry（レーニンジャーの生化学の原理）, 4th Ed., W.H. Freeman & Company, 2004；Engelke, D.R., RNA Interference (RNAi): Nuts and Bolts of RNAi Technology（RNA干渉（RNAi）：RNAi技術の基本）, DNA Press LLC, Eagleville, PA, 2003；Herdewijn, P. (Ed.), Oligonucleotide Synthesis: Methods and Applications, Methods in Molecular Biology（オリゴヌクレオチド合成：方法と応用、分子生物学の方法）, Humana Press, 2004；A. Nagy, M. Gertsenstein, K. Vintersten, R. Behringer, Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual（マウス胚の操作：実験便覧）, 3rd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, December 15, 2002, ISBN-10: 0879695919；及びKursad Turksen (Ed.), Embryonic stem cells: methods and protocols in Methods Mol Biol.（胚性幹細胞：方法及びプロトコル（分子生物学の方法）） 2002, 185, Humana Press；Current Protocols in Stem Cell Biology（幹細胞生物学における最新プロトコル）, ISBN: 9780470151808が挙げられる。
【００７６】
単数形の用語「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、限定的であると意図されておらず、単数であることが明示的に述べられていない限り、あるいは文脈が明らかに単数であることを示していない限り、複数の指示対象を含む。
【００７７】
ＩＳＣ−４とセツキシマブの投与を含む組合せ処置の相乗効果は、本明細書に記載のように予想外に見出されものである。
【００７８】
本発明によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記組合せの投与が相乗作用を提供する、がんを治療する方法が提供される。
【００７９】
用語「ＩＳＣ−４」は構造式：
【化３】
2016503063.tif 000004
を有する化合物を指す。
【００８０】
化合物ＩＳＣ−４は、例えば Sharma, A.K., et al, J. of Med. Chem., 2008, 51(24):7820-7826等の標準的化学合成法を用いて合成することができる。
【００８１】
本明細書に記載される方法及び組成物を用いて治療されるがんは、限定されないが、前新生物過増殖、その場のがん（cancer in-situ）、新生物及び転移がんを含む異常な細胞増殖を特徴とする。
【００８２】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、野生型ＫＲＡＳを特徴とするがんを患う又は患うリスクがある被験体を治療する方法であって、前記組合せの投与が相乗作用を提供する、被験体を治療する方法が提供される。
【００８３】
ＫＲＡＳ（GTPアーゼKRas又はV-Ki-ras2 Kirstenラット肉腫ウイルスがん遺伝子相同体としても知られる）は、過剰活性化ＫＲＡＳ及びがんに関連したＫＲＡＳの変異と共に、当技術分野でよく知られている（S.M. Anderson, Expert Review of Molecular Diagnostics, 2011, ll(6):635-642; Schimanski et al, Cancer Res, 1999, 59:5169-5175; Chang et al, BMC Cancer 9: 179, 2009; 及び Jancikら, Clinical Relevance of KRAS in Human Cancers, Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2010, Article ID 150960, Epub Jun 7, 2010を参照）。
【００８４】
活性化ＫＲＡＳ変異は、よく知られており、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２及び１３、及びコドン６１のものが含まれるが、限定されるものではない。周知の活性化ＫＲＡＳ変異の例としては、限定されるものではないが、ヒトＫＲＡＳを基準として、Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ及びＧ１３Ｄが挙げられる。これら及び他の周知の活性化ＫＲＡＳ変異は、S.M. Anderson, Expert Review of Molecular Diagnostics, 201 1, 11(6):635-642; Schimanski et al, Cancer Res, 1999, 59:5169-5175; Chang et al, BMC Cancer 9: 179, 2009; and Jancik et al, Clinical Relevance of KRAS in Human Cancers, Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2010, Article ID 150960, Epub Jun 7, 2010に記載されている。
【００８５】
ＫＲＡＳの変異状態は、被験体から得られる試験試料において分析することができる。
【００８６】
試験試料は、がん細胞又はがん細胞由来の循環ＤＮＡを含む又は含む疑いのある、被験体のいかなる体液、細胞、又は組織であってもよく、例えば、血液、血漿、血清、尿、唾液、腹水、脳脊髄液、脳室液、胸水、肺及び気管支洗浄試料、粘液、汗、涙、精液、膀胱洗浄試料、羊水、リンパ液、腹水、滑液、骨髄穿刺液、腫瘍細胞又は組織、生検材料等の臓器の細胞又は組織等が挙げられる。
【００８７】
ＫＲＡＳの変異状態は、限定されるものではないが、タンパク質又はペプチドの配列決定、核酸分析、及び免疫測定を含む様々な方法のいずれによっても分析することができる。ＫＲＡＳの変異状態を決定する方法の例は、S.M. Anderson, Expert Review of Molecular Diagnostics, 2011, l l(6):635-642; Schimanskiら、Cancer Res, 1999, 59:5169-5175; Chang et al, BMC Cancer 9: 179, 2009; and Jancikら、Clinical Relevance of KRAS in Human Cancers, Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2010, Article ID 150960, Epub Jun 7, 2010に記載されている。
【００８８】
ＫＲＡＳ核酸、特にｍＲＮＡ又はｃＤＮＡを検出するための分析は、配列決定、ＲＴ−ＰＣＲ等のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ドットブロット、その場ハイブリッド形成（in situ hybridization）、ノーザンブロット、及びＲＮアーゼ保護が挙げられるが、それらに限定されるものではない。
【００８９】
酵素結合免疫吸着分析（ELISA）、酵素結合免疫濾過分析（ELIFA）、フローサイトメトリー、免疫ブロット、免疫沈降、免疫組織化学、免疫細胞化学、発光免疫測定（LIA）、蛍光免疫測定（FLA）、及び放射免疫測定等の免疫測定法が試料のＫＲＡＳ変異の状態を分析するのに使用されるが、これらに限定されない。
【００９０】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、５−フルオロウラシルに対する耐性を特徴とするがんを患う又は患うリスクがある被験体を治療する方法であって、前記組合せの投与が相乗作用を提供する、被験体を治療する方法が提供される。
【００９１】
本発明の側面によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんを患う又は患うリスクがある被験体を治療する方法であって、前記組合せの投与が相乗作用を提供する、被験体を治療する方法が提供される。
【００９２】
本発明の方法又は組成物は、がんの徴候及び／又は症状の予防並びに改善のために使用することができる。被験体の治療を指すために使用される用語「治療」及び「処置」は、がんの進行を遅らせる、及び／又はがんの徴候又は症状を軽減又は改善する等の被験体のがんを予防、抑制、又は改善することを含む。
【００９３】
本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療有効量は、治療される被験体において有益な効果を有する量である。限定されないが、前新生物過増殖、その場のがん、新生物、転移がん、腫瘍、良性増殖、又は本発明の組成物に応答する疾患を含む異常な細胞増殖を特徴とする疾患等のがんを患う又は患うリスクがある被験体において、本発明の組成物の治療有効量は、疾患の１つ以上の徴候及び／又は症状を改善又は予防するのに有効である。
【００９４】
本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療有効量は、がんのアポトーシス及び／又は細胞増殖を検出可能なレベルに増加させるのに有効である。本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療有効量は、がんの細胞中のリン酸化Ａｋｔを減少させるのに有効である。
【００９５】
本発明の方法に従って及び本発明の組成物を用いて治療される被験体は、哺乳動物又は非哺乳動物であってもよい。哺乳動物被験体は、任意の哺乳動物であってよく、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類（例えば、マウス、ラット又はモルモット）；飼い慣らされたペット（例えば、ネコ又はイヌ）；ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ又はウサギが挙げられるがこれらに限定されない。非哺乳動物被験体は、任意の非哺乳動物であってよく、鳥類（例えば、アヒル、ガチョウ、ニワトリ又はシチメンチョウ）が挙げられるがこれらに限定されない。被験体の性別及び年齢は問わない。本発明の医薬組成物を被験体に投与することを含む方法の側面において、その被験体は、ヒトである。用語「被験体」及び「患者」は、本明細書中で交換可能に使用される。
【００９６】
本発明の側面によれば、セツキシマブ、ＩＳＣ−４及び１つ以上の追加の治療薬の組合せを投与する。
【００９７】
用語「追加の治療薬」は本明細書で使用され、化学物質、化学物質の混合物、生物学的高分子（例えば、核酸、抗体、タンパク質又はその一部、例えば、ペプチド）、又は被験体において局所的もしくは全身的に作用する生物学的、生理的もしくは薬理学的に活性な１種以上の物質である生物学的材料（例えば、細菌、植物、真菌又は動物（特に哺乳動物）の細胞もしくは組織）から調製される抽出物のことを指す。
【００９８】
本発明の方法及び組成物の側面によれば、追加の治療薬としては、抗生物質、抗ウイルス薬、抗新生物剤、鎮痛薬、解熱薬、抗うつ薬、抗精神病薬、抗癌剤、抗ヒスタミン剤、抗骨粗鬆症剤、抗骨壊死剤、抗炎症剤、抗不安薬、化学療法剤、利尿薬、成長因子、ホルモン、非ステロイド系抗炎症剤、ステロイド剤及び血管作用薬が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９９】
ＩＳＣ−４とセツキシマブを含む組合せ療法は相乗効果を示す。
【０１００】
本発明の側面によれば、組合せ療法は、（１）単一医薬組成物として共に製剤化するＩＳＣ−４とセツキシマブを含む医薬複合組成物を含む医薬組成物；及び／又は（２）ＩＳＣ−４とセツキシマブの共投与（ここでＩＳＣ−４とセツキシマブは、同一組成物中に製剤化されていない）を含む。別個に製剤を用いる時には、ＩＳＣ−４は、セツキシマブに対して、同時に、断続的に、時差的に、セツキシマブの投与前に、セツキシマブの投与後に、又はそれらを組み合わせて投与してもよい。
【０１０１】
本発明の側面によれば、組合せ療法は、（１）単一医薬組成物として、１種以上の追加の治療薬と共に製剤化するＩＳＣ−４とセツキシマブを含む医薬複合組成物を含む医薬組成物；（２）ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬の共投与（ここで、ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬を同一組成物に製剤化していない）；及び／又は（３）ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬の共投与（ここで、ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬（但し、ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬の全てではない）は、同一組成物に製剤化している）を含む。別個に製剤を用いる時には、ＩＳＣ−４、セツキシマブと１種以上の追加の医薬の各々は、その他の各成分に対して、同時に、断続に、時間をずらして、その他の各成分の投与前に、その他の各成分の投与後に、又はそれらを組み合わせて投与してもよい。
【０１０２】
組合せ治療により、ＩＳＣ−４とセツキシマブを含む医薬組成物の有効投与量を減少させ、治療指数を増加させることができる。
【０１０３】
本発明の側面によれば、追加の医薬は抗がん剤である。
【０１０４】
抗がん剤は、例えば、Goodmanら、Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics（グッドマンとギルマンの治療薬の薬理学的基礎）, 8th Ed., Macmillan Publishing Co., 1990に記載されている。
【０１０５】
抗がん剤の例としては、アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール、アクロニン、アドゼレシン、アルデスロイキン、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アンボマイシン、アメタントロン、アミホスチン、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アントラマイシン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アザシチジン、アゼテパ、アゾトマイシン、バチマスタット、ベンゾデパ、ベバシズマブ、ビカルタミド、ビサントレン、ビスナフィドジメシラート、ビゼレシン、ブレオマイシン、ブレキナル、ブロピリミン、ブスルファン、カクチノマイシン、カルステロン、カペシタビン、カラセミド、カルベチマー、カルボプラチン、カルムスチン、カルビシン、カルゼレシン、セデフィンゴール、セレコキシブ、クロラムブシル、シロレマイシン、シスプラチン、クラドリビン、メシル酸クリスナトール、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デシタビン、デキソルマプラチン、デザグアニン、メシル酸デザグアニン、ジアジコン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロロキシフェン、ドロモスタノロン、ズアゾマイシン、エダトレキセート、エフロミチン、エルサミトルシン、エンロプラチン、エンプロメート、エピプロピジン、エピルビシン、エルブロゾール、エソルビシン、エストラムスチン、エタニダゾール、エトポシド、エトプリン、ファドロゾール、ファザラビン、フェンレチニド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルロシタビン、ホスキドン、ホストリエシン、フルベストラント、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イルモホシン、インターロイキンＩＩ（組換えインターロイキンＩＩ又はｒＩＬ２を含むＩＬ−２）、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、インターフェロンアルファ−ｎ１、インターフェロンアルファ−ｎ３、インターフェロンベータ−Ｉａ、インターフェロンガンマ−Ｉｂ、イプロプラチン、イリノテカン、ランレオチド、レトロゾール、ロイプロリド、リアロゾール、ロメトレキソール、ロムスチン、ロソキサントロン、マソプロコール、メイタンシン、塩酸メクロレタミン、メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトプリン、メツレデパ、ミチンドミド、ミトカルシン、ミトクロミン、ミトギリン、ミトマルシン、マイトマイシン、ミトスペル、ミトタン、ミトキサントロン、ミコフェノール酸、ネララビン、ノコダゾール、ノガラマイシン、オルムナプラチン、オキシスラン、パクリタキセル、ペガスパルガーゼ、ペリオマイシン、ペンタムスチン、ペプロマイシン、ペルホスファミド、ピポブロマン、ピポスルファン、ピロキサントロン塩酸塩、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマー、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ピューロマイシン、ピラゾフリン、リボプリン、ログレチミド、サフィンゴール、セムスチン、シムトラゼン、スパルホセート、スパルソマイシン、スピロゲルマニウム、スピロムスチン、スピロプラチン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、スロフェヌル、タリソマイシン、タモキシフェン、テコガラン、テガフール、テロキサントロン、テモポルフィン、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、チアミプリン、チオグアニン、チオテパ、チアゾフリン、チラパザミン、トポテカン、トレミフェン、トレストロン、トリシリビン、トリメトレキサート、トリプトレリン、ツブロゾール、ウラシルマスタード、ウレデパ、バプレオチド、ベルテポルフィン、ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、ビネピジン、ビングリシナート、ビンロイロシン、ビノレルビン、ビンロシジン、ビンゾリジン、ボロゾール、ゼニプラチン、ジノスタチン、ゾレドロネート及びゾルビシンが挙げられる。
【０１０６】
本発明の側面によれば、がん治療を必要とする被験体のがんを治療するための本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療活性の１種以上の相関性バイオマーカーを分析し、被験体のガンの治療を評価する。従って、例えば、リン酸化Ａｋｔのレベルは、がん治療を必要とする被験体を治療する本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療活性の相関性バイオマーカーであり、がん細胞のリン酸化ＡＫｔの減少は、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の有効性の指標である。リン酸化Ａｋｔのレベルは、例えば、本明細書に記載の、標準的な方法に従って測定される。アポトーシスのバイオマーカーは、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の治療活性の相関性バイオマーカーであり、がん細胞のアポトーシス１種以上のバイオマーカーの増加は、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する本発明の組合せ治療として投与するセツキシマブとＩＳＣ−４の有効性の指標である。アポトーシスのバイオマーカーとしては、ＤＮＡ断片化、壊死とは区別される特徴的な形態学的変化、及びカスパーゼ３の活性化が挙げられるが、これらに限定されない。アポトーシスのバイオマーカーは、例えば、本明細書に記載の、標準的な方法に従って測定される。
【０１０７】
本発明の側面によれば、被験体の監視には、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せ治療の効果についての分析が用いられる。従って、例えば、試験試料は、治療の有効性を評価するために、本発明の方法による治療の前に、並びに治療中及び／又は治療後に１回以上、被験体から採取される。更なる例では、試験試料は、疾患の経過もしくは進行又は治癒を評価するために、様々な時点において被験体から採取される。
【０１０８】
特定の側面によれば、１種以上のバイオマーカーを、被験体から採取された試験試料で分析し、本発明の医薬組成物による治療の監視を助ける。例えば、１種以上のリン酸化Ａｋｔ及び／又はがん細胞のアポトーシスの検出を、被験体から採取された試験試料で分析し、本発明の医薬組成物による治療の監視を助ける。
【０１０９】
所望により、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法は、補助的な抗がん治療を更に含む。補助的な抗がん治療は、被験体又は被験体の身体の患部の放射線治療であってもよい。
【０１１０】
セツキシマブ、ＩＳＣ−４及び任意の所望の追加治療薬の投与量は、限定されないが、例えば、投与経路；組成物が投与する被験体の年齢、健康状態、性別、及び体重；被験体に症状があれば、その性質及び程度；並びに所望の効果等の要因に依って変動する。投与量は治療が短期間か長期間であるかに応じて調節してもよい。当業者は、医療行為に特有のこれら及び他の考慮すべき点に照らして薬学的有効量を決定できる。
【０１１１】
一般に、セツキシマブ、ＩＳＣ−４及び任意の所望の追加治療薬の１日投与量は、被験体の体重１Ｋｇあたり約０．００１〜１００ｍｇの範囲であるものとする。１日投与量は所望の効果を得るために２回以上の分割用量として投与されてもよい。セツキシマブ、ＩＳＣ−４及び任意の所望の追加治療薬を１種以上含む医薬組成物は、所望の結果を得るためにまた徐放用に製剤化してもよい。
【０１１２】
本発明の方法の特定の側面において、補助的な抗がん治療量及び／又は投与する抗がん剤量は、ＩＳＣ−４とセツキシマブの投与を含む本発明の組合せ治療をせずに投与する場合に治療効果を達成するのに必要な補助的な抗がん治療量及び／又は投与する抗がん剤量より少ない。従って、本発明の特定の側面において、抗がん治療量及び／又は投与する抗がん剤量は、ＩＳＣ−４とセツキシマブの投与を含む本発明の組合せ治療をせずに投与する場合に治療効果を達成するのに必要な補助的な抗がん治療量及び／又は抗がん剤量より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％または少なくとも９０％である。
【０１１３】
本発明の方法は、経口、直腸、鼻、肺、硬膜外、眼球、耳、動脈内、心臓内、脳室内、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内、骨内、髄腔内、膀胱内、皮下、局所的、経皮的及び経粘膜的（例えば、舌下、頬側、膣及び吸入）の投与経路を含むがこれらに限定されない投与経路による本発明の医薬組成物の投与を包含する。
【０１１４】
プロドラッグ
【０１１５】
本発明の側面によれば、ＩＳＣ−４の１つ以上のプロドラッグは、セツキシマブとの組合せで投与され、セツキシマブとの組合せでのＩＳＣ−４投与の利点を達成する。ＩＳＣ−４プロドラッグは、所望により、ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せで投与する。ＩＳＣ−４プロドラッグは、本明細書に記載の治療の方法又は組成物において、ＩＳＣ−４に置き換える、あるいは、本明細書に記載の治療の方法又は組成物において、ＩＳＣ−４に追加して用いてもよい。
【０１１６】
ＩＳＣ−４プロドラッグは、ＩＳＣ−４プロドラッグから放出され、ＩＳＣ−４を生成する１つ以上の部分に共有結合したＩＳＣ−４の一形態である。プロドラッグの形態の例は、Sloan, K. B., Prodrugs, M. Dekker, New York, 1992; 及び Testa, B. and Mayer, J. M., Hydrolysis in drug and prodrug metabolism: chemistry, biochemistry, 及び enzymology（薬物及びプロドラッグ代謝の加水分解：化学、生化学、及び酵素学）, Wiley-VCH, Zurich, 2003に記載されている。
【０１１７】
特定のＩＳＣ−４プロドラッグは、ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグである。ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグは、以下の反応図式に概説されるように合成される。ＩＳＣ−４のこのグルコシノラートプロドラッグは、生体外で（in vitro）、又は生体内で（in vivo）ミロシナーゼ酵素と相互作用すると、活性なＩＳＣ−４を放出する。ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグは水溶性であることが予想される。
【化４】
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【０１１８】
本発明の側面によれば、ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ（Ｉ）は、セツキシマブとの組合せで投与され、セツキシマブとの組合せでのＩＳＣ−４投与の利点を達成する。ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ（Ｉ）は、所望により、ＩＳＣ−４及びセツキシマブと組み合わせて投与する。
【０１１９】
（Ｉ）によるＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグは、所望により薬学的に許容される塩として提供される。
【化５】
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【０１２０】
構造（Ｉ）のＩＳＣ−４プロドラッグの薬学的に許容される塩の製剤は、一般に、目的の受容体に対して非毒性で、かつ組成物に含まれる構造式（Ｉ）のＩＳＣ−４プロドラッグ及び他の活性薬剤の活性を阻害しなければ、構造式（Ｉ）のＩＳＣ−４プロドラッグの任意の塩の形態をとることができる。例えば、構造式（Ｉ）のＩＳＣ−４プロドラッグのカリウム塩の形態は、上記の合成反応図式に示されている。
【０１２１】
複合医薬組成物
【０１２２】
本発明によれば、ＩＳＣ−４とセツキシマブの両方を含む複合医薬組成物は、一般に約０．１〜９９％のＩＳＣ−４、約０．１〜９９％のセツキシマブ、及び薬学的に許容される担体を含む。
【０１２３】
本発明によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４及び／又はＩＳＣ−４のプロドラッグを含む複合医薬組成物は、一般に約０．１〜９９％のＩＳＣ−４及び／又は約０．１〜９９％のＩＳＣ−４のプロドラッグ、約０．１〜９９％のセツキシマブ、及び薬学的に許容される担体を含む。
【０１２４】
本発明によれば、セツキシマブとＩＳＣ−４及び／又はＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ（Ｉ）を含む複合医薬組成物は、一般に約０．１〜９９％のＩＳＣ−４及び／又は約０．１〜９９％のＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ（Ｉ）、約０．１〜９９％のセツキシマブ、及び薬学的に許容される担体を含む。
【０１２５】
本発明の医薬組成物は、被験体への投与に適した任意の剤形でよく、例えば、錠剤、カプセル、散剤、顆粒剤、坐剤、丸剤、溶液、懸濁液、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ペースト、噴霧剤及びエアロゾル等の固体、半固体及び液体の剤形が含まれる。リポソーム及びエマルジョンは、医薬品、特に疎水性医薬品を送達するために使用できるよく知られた種類の医薬製剤である。本発明の医薬組成物は、一般に、薬学的に許容される担体（例えば、賦形剤、希釈剤及び／又は媒体）を含む。組成物の遅延放出製剤及び遅延放出システム（例えば、固体疎水性高分子の半透性マトリックス）が使用できる。
【０１２６】
本発明の組成物の医薬製剤は、薬学的に許容される担体を含むことができる。用語「薬学的に許容される担体」とは、被験体に対する不当な毒性又は刺激を伴うことなく被験体に使用するのに適しており、医薬組成物中に含まれている他の成分と適合性である、担体のことを指す。
【０１２７】
薬学的に許容される担体、医薬組成物及び様々な剤形を調製するための方法、並びに投与の様式は、例えば、Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets（医薬品剤形：錠剤）, eds. H. A. Liebermanら、New York: Marcel Dekker, Inc., 1989；L.V. Allen, Jr.ら、Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems（アンセルの医薬品剤形及びドラッグ送達システム）, 8th Ed., Philadelphia, PA: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004；A. R. Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy（薬学の科学と実践）, Lippincott Williams & Wilkins, 21st ed., 2005, 特に chapter 89；及び J. G. Hardmanら、Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics（グッドマンとギルマンの治療薬の薬理学的基礎 ）, McGraw-Hill Professional, 10th ed., 2001に詳述されているように当技術分野で周知である。
【０１２８】
投与用の固体剤形又は投与前に液体で懸濁するための固体剤形の例としては、カプセル、錠剤、散剤及び顆粒剤が挙げられる。そのような固体の剤形において、１種以上の活性薬剤は、少なくとも１つの担体（例えば、緩衝剤（クエン酸ナトリウム又はアルカリ金属リン酸塩（例えば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム及びリン酸カルシウム）等）；充填剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及びケイ酸等）；結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及びアカシア等）；吸湿剤（例えば、グリセロール等）；崩壊剤（例えば、寒天、炭酸カルシウム、植物デンプン（ジャガイモ又はタピオカデンプン等）、アルギン酸、ある特定の複合珪酸塩及び炭酸ナトリウム等）；溶解遅延剤（例えば、パラフィン等）；吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物等）；湿潤剤（例えば、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセロール及びグリコール等）；吸着剤（例えば、カオリン及びベントナイト等）；滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール又はラウリル硫酸ナトリウム等）；保存剤（例えば、抗菌剤及び抗真菌剤（例えば、ソルビン酸、ゲンタマイシン及びフェノール）等）；及び安定剤（例えば、スクロース、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ及び酸化防止剤等）と混和される。
【０１２９】
固体の剤形は、所望により、腸溶性被膜等の被膜を含む。腸溶性被膜は、代表的には、高分子材料である。好ましい腸溶性被膜材料は、生体内分解性、徐々に加水分解される、及び／又は徐々に水に溶解する高分子であるという特徴を有する。固体の投薬に使用される被膜材料の量は、一般に、摂取と薬物放出との間の時間間隔を決定する。被膜全体が、胃酸に関連する３未満のｐＨの胃腸液に溶解しないが、小腸の環境のｐＨ３超では溶解するような厚さを有する被膜が用いられる。ｐＨ依存性の溶解性プロファイルを示す任意のアニオン性高分子は、下部消化管に活性薬剤を送達するために本発明の実施において、腸溶性被膜として容易に使用されることが予想される。特定の腸溶性被膜材料の選択は、例えば、胃での崩壊に対する抵抗性；胃液に対する不透過性及び胃に存在する間の活性薬剤の拡散；標的の腸部位において放散する能力；保管中の物理的及び化学安定性；無毒性；並び使用の容易さ等の特性によって決まる。
【０１３０】
適切な腸溶性被膜材料の例としては、セルロース高分子（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、トリメリト酸酢酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、ヒドロキシプロピルメチルセルローススクシナート及びカルボキシメチルセルロースナトリウム等）；アクリル酸重合体及びアクリル酸共重合体（好ましくは、アクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸メチル、メタクリル酸アンモニウム、アクリル酸エチル、メタクリル酸メチル及び／又はエチルから形成されるもの）；ビニル重合体及びビニル共重合体（例えば、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアセテートフタラート、酢酸ビニルクロトン酸共重合体及びエチレン−酢酸ビニル共重合体等）；シェラック；並びにそれらの組合せが挙げられる。特定の腸溶性被膜材料としては、例えば、米国特許第６，１３６，３４５号に記載されているアクリル酸重合体及びアクリル酸共重合体が挙げられる。
【０１３１】
腸溶性被膜は、所望により、胃液が固体の剤形の中に侵入することを可能にする細孔及び亀裂の形成を防止する可塑剤を含む。適切な可塑剤としては、例えば、クエン酸トリエチル（Citroflex 2）、トリアセチン（三酢酸グリセリル）、クエン酸アセチルトリエチル（Citroflec A2）、Carbowax 400（ポリエチレングリコール４００）、フタル酸ジエチル、クエン酸トリブチル、アセチル化モノグリセリド、グリセロール、脂肪酸エステル、プロピレングリコール及びフタル酸ジブチルが挙げられる。特に、アニオン性カルボキシアクリル重合体からなる被膜は、典型的には、約１０重量％〜２５重量％の可塑剤、特に、フタル酸ジブチル、ポリエチレングリコール、クエン酸トリエチル及びトリアセチンを含む。被膜は、被膜材料を可溶化するため又は分散するために、また被膜性能及び被覆された生成物を改善するために、他の被覆賦形剤、例えば、粘着防止剤、消泡剤、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）及び安定剤（ヒドロキシプロピルセルロース、酸又は塩基等）も含むことができる。
【０１３２】
経口投与用の液体剤形は、乳化物、溶液、懸濁液、シロップ剤又はエリキシル剤として製剤化する１種以上の活性薬剤及び薬学的に許容される担体を含む。本発明の組成物の液体の剤形は、着色剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、香味料又は芳香剤を含んでもよい。
【０１３３】
例えば、非経口投与用の組成物を注射可能な液体として製剤化してもよい。適切な水性及び非水性の担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール等）、それらの適切な混合物；植物油（オリーブ油等）；及びオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等の被膜を使用することによって、分散液の場合は望ましい粒径を維持することによって、及び／又はラウリル硫酸ナトリウム等の界面活性剤を使用することによって維持することができる。所望により、例えば、スクロース、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ及び酸化防止剤等の安定剤が含められる。
【０１３４】
局所投与のため、組成物を、局所的効果等のため皮膚への投与用に、かつ／又は経皮送達用の「パッチ」製剤として製剤化することができる。局所投与に適した医薬製剤としては、例えば、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ペースト、噴霧剤及び粉末が挙げられる。軟膏、ローション、クリーム、ゲル及びペーストは、１種以上の活性薬剤に加えて、更に基剤（例えば、吸収基剤、水で除去可能な基剤、水溶性基剤又は油性基剤）及び賦形剤（例えば、増粘剤、ゲル化剤、着色剤、安定剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、香味料又は芳香剤）を含むことができる。
【０１３５】
経皮製剤は、経皮吸収促進剤（例えば、アセトン、アゾン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、エタノール、オレイン酸、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール及びラウリル硫酸ナトリウム）を含むことができる。イオン導入及び／又は超音波導入を使用して、経皮送達を促進することができる。
【０１３６】
１種以上の活性薬剤の局所的投与用の粉末及び噴霧剤は、賦形剤（例えば、タルク、ラクトース及び１種以上のケイ酸）を含むことができる。噴霧剤は、薬学的噴射剤（例えば、フッ素化炭化水素噴射剤、二酸化炭素又は適切な気体）を含むことができる。あるいは、噴霧剤は、噴射剤を必要としないポンプ式噴霧装置から送達してもよい。噴霧装置は、例えば、送達量調節用バルブを使用して、その中に含まれている組成物の計量用量を送達する。
【０１３７】
１種以上の活性薬剤の眼科用製剤は、保存剤、緩衝剤及び増粘剤等の成分を含むことができる。
【０１３８】
本発明の医薬組成物において薬学的に許容される担体又は賦形剤として有用な適切な界面活性剤としては、良好な乳化、分散及び／又は湿潤特性を有する非イオン性、陽イオン性及び／又陰イオン性界面活性剤が挙げられる。適切なアニオン性界面活性剤としては、水溶性石鹸及び水溶性合成界面活性剤の両方が挙げられる。適切な石鹸は、高級脂肪酸（Ｃ１０〜Ｃ２２）のアルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩、非置換もしくは置換アンモニウム塩、例えば、オレイン酸もしくはステアリン酸のナトリウム塩もしくはカリウム塩、又はやし油もしくはタロー油から得られる天然脂肪酸混合物のナトリウム塩もしくはカリウム塩である。合成界面活性剤としては、ポリアクリル酸のナトリウム塩又はカルシウム塩；脂肪スルホン酸塩及び硫酸塩；スルホン化ベンズイミダゾール誘導体及びアルキルアリールスルホン酸塩が挙げられる。脂肪スルホン酸塩及び硫酸塩は、通常、アルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、非置換アンモニウム塩、又は８〜２２個の炭素原子を有するアルキルもしくはアシル基で置換されたアンモニウム塩、例えば、リグノスルホン酸もしくはドデシルスルホン酸のナトリウム塩もしくはカルシウム塩、または天然の脂肪酸から得られる脂肪アルコール硫酸塩の混合物、硫酸エステルもしくはスルホン酸エステルのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）及び脂肪アルコール／エチレンオキシド付加物のスルホン酸の形態である。適切なスルホン化ベンズイミダゾール誘導体は、好ましくは、８〜２２個の炭素原子を含む。アルキルアリールスルホン酸塩の例は、ドデシルベンゼンスルホン酸またはジブチル−ナフタレンスルホン酸またはナフタレン−スルホン酸／ホルムアルデヒド縮合物のナトリウム塩、カルシウム塩またはアルカノールアミン塩である。また、対応するリン酸塩、例えば、リン酸エステルの塩、並びにｐ−ノニルフェノールとエチレン及び／もしくはプロピレンオキシドとの付加物又はリン脂質も好適である。この目的のための適切なリン脂質は、天然の（動物又は植物細胞を起源とする）リン脂質又はケファリンもしくはレシチンタイプの合成のリン脂質（例えば、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセリン、リゾレシチン、カルジオリピン、ジオクタニルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジル−コリン及びそれらの混合物）である。
【０１３９】
本発明の医薬組成物において薬学的に許容される担体又は賦形剤として有用な適切な非イオン性界面活性剤としては、アルキルフェノール、脂肪アルコール、脂肪酸、分子内に少なくとも１２個の炭素原子を含む脂肪族アミン又はアミド、アルキルアレーンスルホン酸塩及びジアルキルスルホコハク酸塩のポリエトキシ化及びポリプロポキシ化された誘導体（例えば、脂肪族及び脂環式アルコール、飽和及び不飽和脂肪酸並びにアルキルフェノールのポリグリコールエーテル誘導体）（前記誘導体は、好ましくは、（脂肪族）炭化水素部分に３〜１０個のグリコールエーテル基及び８〜２０個の炭素原子並びにアルキルフェノールのアルキル部分に６〜１８個の炭素原子を含む）が挙げられる。更に適切な非イオン性界面活性剤は、ポリエチレンオキシドと、ポリプロピレングリコール、アルキル鎖に１〜１０個の炭素原子を含むエチレンジアミノポリプロピレングリコールとの水溶性付加物（それらの付加物は、２０〜２５０個のエチレングリコールエーテル基及び／又は１０〜１００個のプロピレングリコールエーテル基を含む）である。そのような化合物は、通常、プロピレングリコール１単位あたり１〜５個のエチレングリコール単位を含む。非イオン性界面活性剤の代表的な例は、ノニルフェノール−ポリエトキシエタノール、ひまし油ポリグリコールエーテル類、ポリプロピレン／ポリエチレンオキシド付加物、トリブチルフェノキシポリエトキシエタノール、ポリエチレングリコール及びオクチルフェノキシポリエトキシエタノールである。ポリエチレンソルビタンの脂肪酸エステル（例えば、トリオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）、グリセロール、ソルビタン、スクロース及びペンタエリトリトールもまた、適切な非イオン性界面活性剤である。
【０１４０】
本発明の医薬組成物において薬学的に許容される担体又は賦形剤として有用な適切な陽イオン性界面活性剤としては、第四アンモニウム塩、好ましくは、所望によりハロ、フェニル、置換フェニル又はヒドロキシで置換される４個の炭化水素基を有するハロゲン化物；例えば、Ｎ−置換基として少なくとも１つのＣ８〜Ｃ２２アルキル基（例えば、セチル、ラウリル、パルミチル、ミリスチル、オレイル等）、及び更なる置換基として、非置換又はハロゲン化低級アルキル基、ベンジル基、及び／又はヒドロキシ−低級アルキル基を含む第四アンモニウム塩が挙げられる。
【０１４１】
この目的に適した表面活性剤のより詳細な説明は、例えば、“McCutcheon’s Detergents and Emulsifiers Annual（マカッチャンの洗剤及び乳化剤年鑑）”(MC Publishing Corp., Ridgewood, New Jersey, 1981)、“Tensid-Taschenbuch（界面活性剤手引き書）”, 2nd ed. (Hanser Verlag, Vienna, 1981)、及び“Encyclopaedia of Surfactants（界面活性剤百科事典）”(Chemical  Publishing Co., New York, 1981)に見られる。
【０１４２】
構造形成剤、増粘剤又はゲル形成剤を、本発明の医薬組成物及び組合せ調剤に含めてもよい。適切なそのような薬剤は、具体的には、高度に分散されたケイ酸（例えば、商品名Aerosilとして市販されている製品）、ベントナイト、モンモリロナイトのテトラアルキルアンモニウム塩（例えば、商品名Bentoneとして市販されている製品）（アルキル基の各々は、１〜２０個の炭素原子を含んでもよい）、セトステアリルアルコール、及び加工ひまし油生成物（例えば、商品名Antisettleとして市販されている製品）である。
【０１４３】
特定の側面において、薬学的に許容される担体は、粒状の担体であり、例えば、リポソーム、ミセル、単層もしくは多層小胞等の脂質粒子；重合体粒子（例えば、ヒドロゲル粒子、ポリグリコール酸粒子又はポリ乳酸粒子）；無機粒子（例えば、米国特許第５，６４８，０９７号に記載されているような、例えば、リン酸カルシウム粒子）；及び無機／有機の粒状担体（例えば、米国特許第６，６３０，４８６号に記載されているようなもの）等である。
【０１４４】
粒状の薬学的に許容される担体は、脂質粒子、ポリマー粒子、無機粒子、及び無機／有機粒子の中から選択することができる。粒子タイプの混合物もまた、粒状の薬学的に許容される担体として含めることができる。
【０１４５】
粒状の担体は、典型的には、粒子が約１ｎｍ〜１０μｍの範囲の平均粒径を有するように製剤化する。特定の側面において、粒状の担体は、粒子が約１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲の平均粒径を有するように製剤化する。
【０１４６】
剤形を調製するための通例の材料、機器及びプロセスに関する詳細な情報は、Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets（医薬品剤形：錠剤）, H. A. Liebermanら編、New York: Marcel Dekker, Inc., 1989；L.V. Allen, Jr.ら、Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems（アンセルの医薬品剤形とドラッグ送達システム）, 8th Ed., Philadelphia, PA: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004；A. R. Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy（薬学の科学と実践）, Lippincott Williams & Wilkins, 21st ed., 2005, 特に chapter 89；及び J. G. Hardmanら、Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics（グッドマンとギルマンの治療薬の薬理学的基礎 ）, McGraw-Hill Professional, 10th ed., 2001に見られる。
【０１４７】
本発明の側面による市販用セットは、組み合わされて、又は別々に製剤化された、セツキシマブとＩＳＣ−４を含む。本発明の側面によると、セツキシマブとＩＳＣ−４を投与するための指示書を含める。１種以上の補助的な構成要素（例えば、緩衝剤又は希釈剤）を、所望により本発明の市販用セットに含める。
【０１４８】
本発明の組成物及び方法の側面を、以下の実施例において説明する。これらの実施例は、説明目的のために提供されるものであり、本発明の組成物及び方法の範囲に対して限定とは見なされない。
【０１４９】
実施例
【０１５０】
細胞培養、細胞生存率分析、及び試薬
【０１５１】
細胞株をＡＴＣＣから入手し、３７℃の５％ＣＯ２の加湿培養器中のＡＴＣＣ推奨培地で培養した。細胞生存率分析のために、細胞を新鮮培地に１×１０５／ｍＬ濃度、１ウェルあたり１００μＬの体積で９６ウェル黒色壁プレートに播種する。細胞を一晩付着させ、指示通りに翌日処理をする。終点で、CellTiter-Glo（Promega）分析を製造業者の手順書に従って実施し、生物発光の読み取りをIVIS画像化装置（Xenogen）に記録する。セル同期のために、細胞を処理前に１６時間、２００ｎｇ／ｍＬのノコダゾールと共に恒温放置した。クロロキンをSigma社から入手する。zVAD-fmkをPromega社から入手し、２５μＭの作用濃度で使用する。ＩＳＣ−４を、Sharma, A.K.,ら、J. of Med. Chem., 2008, 51(24):7820-7826の記載に従って合成する。
【０１５２】
流動細胞計画法
【０１５３】
ｓｕｂ−Ｇ１のＤＮＡ含量分析のため、細胞を指示されている時点でトリプシン処理し、最低３０分間、４℃の８０％エタノールで固定する。固定した細胞は、次いでＲＮアーゼの存在下、ヨウ化プロピジウムで染色し、Epics Elite 流動細胞計測器（flow cytometer）（Beckman Coulter）で分析する。Ｋｉ−６７の発現のために、上記の通り、細胞をエタノール固定し、３０分間、１：５００希釈の抗Ｋｉ−６７抗体（Sigma）で免疫染色する。次いで、細胞を３０分間、ＰＢＳに１：５００希釈のAlexafluor４８８結合抗体と共に恒温放置し、分析のためにＰＢＳに再懸濁する。
【０１５４】
ウェスタンブロット分析
【０１５５】
細胞を対数繁殖期に処理し、細胞掻き取りによって回収し、遠心分離し、次いで細胞溶解緩衝液で２時間、氷表面で溶解させた。上清を遠心分離後に収集し、次いでタンパク質濃度をBio-Radタンパク質分析（Bio-Rad Laboratories）を用いて決定する。試料を、還元条件下、NuPAGE4-12%Bis-Trisゲル（Invitrogen）で電気泳動にかけ、ＰＶＤＦ膜に移し、１時間、１０％脱脂乳含有ＴＢＳＴ中でブロッキングした。次いで膜を、２％無脂肪乳を含有するＴＢＳＴ中に細胞シグナル伝達から得られた一次抗体（１：１０００希釈）と共に、４℃で一晩恒温保存する。膜をＴＢＳＴで洗浄し、１時間、適切なＨＲＰ結合二次抗体（Thermo-Scientific）と共に恒温保存し、ＴＢＳＴで洗浄し、ECL-Plus（Amersham）及びＸ線フィルム（Thermo-Scientific）を用いて可視化する。
【０１５６】
生体内（in vivo）研究
【０１５７】
無胸腺雌ヌードマウス（Charles River Laboratories）の各後部脇腹に、１×１０６個の５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ又はＨＴ−２９細胞をMatrigel（ＢＤ）：ＰＢＳ（１：１）の２００μＬ懸濁液として接種する。腫瘍が約１６５０ｍｍ３の平均体積に到達すると、処置を開始し、ＤＭＳＯに含有させ総体積２００μＬで腹腔内又は静脈内注射で投与する。組織分析のため、組織を安楽死させたマウスから採取し、ＰＢＳ中で４８時間、４％パラホルムアルデヒドで固定する。組織をパラフィン包理し、切断する。Ｈ＆Ｅ染色（Daiko）及びTUNEL染色（Millipore）を製造者の手順書に従って実施する。血清化学分析のために、麻酔したマウスから１ｍＬの血液を左心室の末端心臓穿刺により採取する。血清化学のために、５００μΕを微量遠心管に入れ、室温で３０分間凝固させ、続いて、遠心分離する。血清を除去し、再び遠心分離して分析前に全ての新たな残屑を除去する。
【０１５８】
統計
【０１５９】
一対比較は、マイクロソフトのエクセルでのスチューデントの両側ｔ検定によって評価する。組合せ指数（Combination index）は、Chou, T.C., Pharmacological Reviews, 2006, 58(3):621-681に記載されたChou-Talalay法を用いて、CalcuSynソフトウエア（BioSoft）によって計算する。
【０１６０】
ＩＳＣ−４生体外（in vitro）活性プロファイルの定義
【０１６１】
ＩＳＣ−４の生体外（in vitro）活性を、ヒトがん細胞株パネルで試験を行い、その抗菌スペクトルを決定する。
【０１６２】
図１Ａは、ＩＳＣ−４又はＤＭＳＯで処理（７２時間、ｎ＝３）された、表示の細胞株の細胞生存率分析及びＥＣ５０の計算値を示す。図１Ａに示すように、ＥＣ５０値の観点では、試験した細胞株の中で、ヒトリンパ腫細胞株ダウディ及びグランタが最も感受性が高く、ヒト前立腺がん細胞株ＰＣ３及びＤＵ１４５が最も感受性が低い。ＨＴ−２９を除いては、ヒト大腸がん細胞株はＩＳＣ−４処理に適度に感受性である。同質遺伝子ＨＣＴ１１６細胞株は、ＩＳＣ−４活性がｐ５３非依存性及びＢａｘ非依存性である可能性が高いことを示している。
【０１６３】
同期及び非同期のＨＣＴ１１６（図１Ｂ）及びＨＴ−２９（図１Ｃ）の細胞株の細胞周期プロファイルに対するＩＳＣ−４処理の効果を示す。図１Ｂに示すように、ＩＳＣ−４処理した同期されたＨＣＴ１１６及びＨＴ−２９ヒト大腸がん細胞株の細胞周期分析から、ｓｕｂ−Ｇ１含有量の軽度の増加及び細胞周期進行の速度低下が明らかである。図１Ｃに示すように、ＩＳＣ−４によって誘導されるｓｕｂ−Ｇ１含有量は用量依存性であり、一般に、＞８μＭで明確になる。従って、ＩＳＣ−４は、細胞死及び増殖減少を引き起こし、ヒト大腸がん細胞に対する適度な単剤活性を有する。０、１、２、４、８、又は１６μＭのＩＳＣ−４によるＩＳＣ−４処理後の、表示の大腸がん細胞株のｓｕｂ−Ｇ１含有量を図１Ｄに示す。
【０１６４】
相乗的な薬物組合せの同定
【０１６５】
ＳＷ４８０及びＲＫＯヒト大腸がん細胞株は、それらの異種の発がん遺伝子変質に基づいて初期のプロファイル作成のために使用される。ＳＷ４８０は、変異ｐ５３、変異ＫＲＡＳ、及び野生型ＢＲＡＦを有し、一方、ＲＫＯは、野生型ｐ５３、野生型ＫＲＡＳ、及び変異ＢＲＡＦの遺伝子を持っている。（Ikediobi, O.N.ら、Molecular Cancer Therapeutics, 2006, 5(11):2606-2612を参照）。図２に、推定ＥＣ１２．５、ＥＣ２５、及びＥＣ５０で、ＩＳＣ−４（１、２、又は４μＭ）及び表示の治療法の単独及び組合せによって処理されたＳＷ４８０及びＲＫＯ大腸がん細胞株の細胞生存率分析結果（ｎ＝３）を示す。使用された用量を表Ｉに示す。図２、表Ｉ及び表ＩＩに示されるように、化学療法及び標的薬の試験パネルの中で、ＩＳＣ−４をソラフェニブ、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、シスプラチン、ボルテゾミブ、イマチニブ、又はセツキシマブと組み合わせた場合、組合せ活性が少なくとも１つの細胞株で観察される。
【０１６６】
表Ｉ：ＩＳＣ−４と組み合わされる認可済抗がん剤の選択用量。ＥＣ１２．５値、ＥＣ２５値及びＥＣ５０値は、文献から推定され、用量を図２に結果を示した実験に用いた。
【表１】
2016503063.tif 000007
【０１６７】
表ＩＩは、ＩＳＣ−４の認可済抗がん剤との組合せの効果をまとめたものである。ＩＳＣ−４及び記載されている各々の薬剤の組合せ効果を、細胞生存率分析によって各薬剤単独の単剤活性と比較し、非共同的（−）、共同的（＋）、相乗的（＊）、又は不明瞭（？）であるかを決定する。少なくとも１つの細胞株でＩＳＣ−４と共同的活性を示す薬剤の組合せは、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、シスプラチン、ボルテゾミブ、イマチニブであり、一方、セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せは、相乗効果を示している。
【表２】
2016503063.tif 000008
【０１６８】
ＩＳＣ−４とセツキシマブとの組合せは、試験した条件下で観察された唯一の相乗的組合せの治療である。更に、この相乗効果は、ＲＫＯ（野生型ＫＲＡＳを保有する）で観察され、ＫＲＡＳＧ１２Ｖを保有するＳＷ４８０では観察されない。この観察は、Lievre, A.ら、Cancer Res, 2006, 66(8):3992-3995；及びKarapetis, C.S.ら、New England Journal of Medicine, 2008, 359(17): 1757-1765に記載されている大腸がんにおけるセツキシマブの臨床的有効性に対する野生型ＫＲＡＳの要件に一致する。
【０１６９】
ＩＳＣ−４とセツキシマブは相乗的に、野生型ＫＲＡＳ腫瘍細胞の増殖を阻害する。
【０１７０】
本実施例では、ＩＳＣ−４とセツキシマブの相乗活性を、いくつかのヒト大腸がん細胞株において評価する。ＩＳＣ−４とセツキシマブが、５−ＦＵ感受性とは独立に、野生型ＫＲＡＳ遺伝子を有するヒト大腸がん細胞において相乗効果を示すことを図３Ａ〜３Ｄ、３Ｅ及び３Ｆに示す。ＩＳＣ−４とセツキシマブによって、７２時間、表示の用量で処理されたヒト大腸がん細胞株の細胞生存率分析の結果（ｎ＝３）を図３Ａ〜３Ｄに示す。
【０１７１】
図３Ａ〜３Ｄ、及び表ＩＩＩに示すように、相乗活性は、野生型ＫＲＡＳ遺伝子を有するＨＴ−２９及びＲＫＯ細胞株で観察され、変異ＫＲＡＳ遺伝子を有するＨＣＴ１１６、ＤＬＤ−１及び他の大腸がん細胞株では観察されない。
【０１７２】
表ＩＩＩ：野生型ＫＲＡＳヒト大腸がん細胞株におけるＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ指標。定量化して図３Ａ〜３Ｄに示したＲＫＯ細胞株及びＨＴ−２９細胞株での組合せ活性をChou-Talalay法によって評価し、結果を表ＩＩＩに示す。
【表３】
2016503063.tif 000009
【０１７３】
臨床的に関連する設定の一種でこの組合せ活性を評価するために、ＩＳＣ−４とセツキシマブの相乗効果を、５−ＦＵに対して進化した耐性を有するＲＫＯクローンで試験する。図３Ｅ及び図３Ｆに示すように、大腸がん細胞の後天性５−ＦＵ耐性にも関わらず、ＩＳＣ−４とセツキシマブの相乗活性は保持される。示されているように、５−ＦＵで２４時間処理された野生型及び５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ細胞の細胞生存率分析の結果を図３Ｅに示す（ｎ＝３）。ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）で２４時間処理された５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ細胞の結果を図３Ｆに示す。
【０１７４】
ＩＳＣ−４とセツキシマブの処理の相乗効果の速度論が決定され、その活性は、図４Ａに示すように、処理後８時間で早くも見られ、１２時間でより大きな相乗効果が見られる。表示時間期間、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の単独又は組合せで処理したＲＫＯ細胞の細胞生存率分析の結果を図４Ａに示す（ｎ＝３）。この観察結果は、ＩＳＣ−４とセツキシマブの相乗活性が、おそらく細胞増殖抑制性ではなく、細胞障害性であることを示唆している。図４Ｂ及び図７Ａに示すように、処理済のがん細胞の細胞形態の変化及びＤＮＡの蛍光標識から、ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ処理が、明らかなＤＮＡ断片化を引き起こすことが分かる。図４Ｂには、図４Ａの場合と同様にして１２時間処理されたＲＫＯ細胞のＤＡＰＩ染色の結果を示す。白い矢印は、断片化ＤＮＡを有する細胞を示す。図７Ａには、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて１２時間処理したＲＫＯ細胞の位相差顕微鏡像を示す。
【０１７５】
更なる解析から、ＩＳＣ−４とセツキシマブを組合せると、ＩＳＣ−４単独又はセツキシマブ単独と比較してｓｕｂ−Ｇ１含有量を共同的に有意に増加させるが、組合せによるｓｕｂ−Ｇ１含有量は、図４Ｃに示す観察された相乗効果を完全に説明するには十分ではない。図４Ｃに、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の単独又は組合せで１２時間処理されたＲＫＯ細胞のｓｕｂ−Ｇ１含有量を示す（ｎ＝３）。スチューデントの両側ｔ検定による全ての処理群との比較で＊Ｐ＜０．０５である。ＩＳＣ−４によって誘導されるｓｕｂ−Ｇ１含有量は、汎カスパーゼ阻害剤ｚＶＡＤ−ｆｍｋと共に共恒温保存することによって有意に抑制され、ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せが、カスパーゼ依存性アポトーシスを誘導することを示唆している。この観察を支持して、図４Ｄに示すように、ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せは、相乗的にカスパーゼ−３活性化を誘導する。図４Ｄに、セツキシマブ（０、０．２５、０．５、又は１μｇ／ｍＬ）と組み合わせてＩＳＣ−４（２μＭ）で処理したＲＫＯ細胞のカスパーゼ−グロ分析の処理後２４時間の結果を示す。図４Ｄの下の図は、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の定量化を示す（ｎ＝３）。
【０１７６】
ウェスタンブロット分析により、図５Ａから、ＩＳＣ−４はセツキシマブと共同して、処理後２４時間でのリン酸化ＡＫｔレベルを低下させる（しかし、リン酸化ＥＲＫは低下させない）ことは明らかである。図５Ａには、２４時間、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の単独又は組合せで処理されたＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析の結果を示す。図５Ｂに示すように、経時的分析から、処理後４時間には、その組み合わせは、共同的にリン酸化Ａｋｔレベルを無くすことが分かる。図５Ｂに、表示の期間、ＩＳＣ−４（２μＭ）及びセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の単独又は組合せで処理されたＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析の結果を示す。Ｒａｎを負荷対照として示す。図５Ｃに示すように、ＩＳＣ−４及びセツキシマブに対して相乗的応答を示すヒト大腸がん細胞株は、またリン酸化Ａｋｔの有意な減少で応答する。図５Ｃに、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）の組合せ（Ｒｘ）で処理後８時間での、表示のヒト大腸がん細胞のウェスタンブロット分析の結果を示す。対照との比較で＊Ｐ＜０．０５である。
【０１７７】
組合せ療法に相乗的に応答しなかった変異ＫＲＡＳを有するヒト大腸がん細胞株は、また処理に応答するリン酸化Ａｋｔレベルの変化も示さなかった。このように、リン酸化Ａｋｔレベルは、ＩＳＣ−４及びセツキシマブの抗腫瘍応答と相関する。
【０１７８】
図７Ｂ、７Ｃ、及び７Ｄに示すように、Ｋｉ−６７発現又はＬＣ３Ｂ切断、即ち自食作用（autophagy）のマーカーに対する影響は観察されなかった。図７Ｂに、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて処理したＲＫＯ細胞におけるＫｉ−６７発現の流動細胞計画法解析の結果を示す。図７Ｃに、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）を単独又は組合せて処理したＲＫＯ細胞におけるＫｉ−６７発現のウェスタンブロット分析を示す。図７Ｄに、ＩＳＣ−４（２μＭ）とセツキシマブ（１μｇ／ｍＬ）で２４時間処理されたＲＫＯ細胞のウェスタンブロット分析結果を示す。クロロキン（Ｃ；１０μΜ）が、自食作用のための陽性対照として含まれている。β−アクチンを負荷対照として示している。
【０１７９】
これらの観察は、ＩＳＣ−４をセツキシマブと組み合わせることがアポトーシスの増加を伴うリン酸化Ａｋｔ及び細胞生存率を共同的に減少させることを示している。
【０１８０】
ＩＳＣ−４とセツキシマブは、生体内で毒性を示すことなく相乗的な抗腫瘍効果を発揮する。
【０１８１】
この例では、ＩＳＣ−４の抗腫瘍効果を、セツキシマブと組み合わせて、進行した５−ＦＵ耐性ＲＫＯ皮下異種移植片において試験する。ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ療法は、図６Ａに示すように、腫瘍進行に対して初期に相乗効果を示し、治療の最初の週に腫瘍静止状態を引き起こす。図６Ａに、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はそれらの組合せ（「コンボ」）の単回投与で治療後４日における、５−ＦＵ−耐性ＲＫＯ異種移植片の相対的な腫瘍サイズを示す（ｎ≧５）。個々の腫瘍を０日目に測定した基準サイズに正規化し、スチューデントの両側ｔ検定によって、全ての処置群との比較で、＊Ｐ＜０．０５であった。図６Ｂに示すようにＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ療法を受けた異種移植片は、ＩＳＣ−４単独又はセツキシマブ単独のいずれかを投与された異種移植片よりも、組織学による壊死及びＴＵＮＥＬ染色によるアポトーシスが高いレベルにあることが組織分析により明らかである。図６Ｂに、処置２４時間後に採取した異種移植片腫瘍のヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色並びにＴＵＮＥＬ染色の結果を示す。図８Ａ及び図８Ｂに示すように、これらの研究に用いられる治療投与計画は忍容性が良好であり、マウスの体重、或いは肝組織像の変化等を変えない。図８Ａに、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はこれらの組合せ（ｎ≧５）を週２回、２週間にわたって投与されたマウスの体重変化を示す。体重変化は、０日目の治療前の各個別のマウスの体重に対して表される（ｎ≧３）。図８Ｂに、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はこれらの組合せでの治療後２４時間にマウスから採取された肝臓組織のＨ＆Ｅ染色の結果を示す。
【０１８２】
マウスのＨＴ−２９異種移植片におけるＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せを、ＩＳＣ−４単独、セツキシマブ単独、及びセツキシマブと５−ＦＵの組合せと比較して調べる。図６Ｃ及び図８Ｃに示すように、ＩＳＣ−４単独又はセツキシマブ単独とは異なり、ＩＳＣ−４とセツキシマブを組合せた治療は、毎週、静脈内投与で与えられた場合には、腫瘍体積と腫瘍重量の測定によって極めてはっきり分かるように、腫瘍進行を著しく抑制する。図６Ｃに、定着ＨＴ−２９異種移植腫瘍を有する無胸腺雌ヌードマウスを、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、その組み合わせ、又はセツキシマブと５−ＦＵ（２５ｍｇ／ｋｇ、静脈内）で、０日目から始まる１週間に１回の治療の結果を示す（ｎ≧８）。誤差バーは、繰り返しの標準誤差を示し、対照との比較で＊Ｐ＜０．０５である。図８Ｃは、図６Ｃに記載のＨＴ−２９異種移植片の最終の腫瘍体積及び腫瘍重量を示す。処置群（cohort）には、ＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、その組み合わせ、又はセツキシマブと５−ＦＵ（２５ｍｇ／ｋｇ、静脈内）の１週間に一回の投与が含まれた（ｎ≧８）。
【０１８３】
ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せは、５−ＦＵとセツキシマブの組合せと比較して、優れた抗腫瘍活性を示す。ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ治療は、図８Ｄに示すように忍容性が良好である。図８Ｄに、最終投与３日後の終点でのマウスの体重を示す（ｎ≧８）。誤差バーは、繰り返しの標準誤差を示す。表ＩＶに示すように、血清化学分析は、慢性投与に伴う腎毒性又は心毒性に関連する、電解質、肝機能、又はその他のマーカーの有意な変化を示していない。
【０１８４】
表ＩＶに、ＩＳＣ−４とセツキシマブの組合せ療法を受けたマウスの血清活性化学プロファイルを示す。８週齢の無胸腺雌ヌードマウスをＩＳＣ−４（３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、セツキシマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、又はその組み合わせ（ｎ≧５）を１週間に２回、２週間投与された。血清は、最終投与後２日目に収集した。
【表４】
2016503063.tif 000010
T.BIL（全ピルビン）；BUN（血中尿素窒素）；Alk.Phos.（アルカリフォスターゼ）；LDH（乳酸脱水素酵素）；AST(アスパラギン酸トランスアミナーゼ)；ALT（アラニントランスアミナーゼ）
【０１８５】
この明細書において言及されたいずれの特許又は刊行物も、あたかも各個別の刊行物が参照により組み込まれると明確かつ個別に示されたかのように、同程度に本明細書中に参照により組み込まれる。
【０１８６】
特徴事項一覧１
【０１８７】
特徴事項１：セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法であって、前記組合せの投与が相乗作用を提供する、被験体を治療する方法
【０１８８】
特徴事項２：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、特徴事項１の癌を治療する方法。
【０１８９】
特徴事項３：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、特徴事項１又は特徴事項２のがんを治療する方法。
【０１９０】
特徴事項４：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、特徴事項１〜３のいずれかのがんを治療する方法。
【０１９１】
特徴事項５：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、特徴事項１〜３のいずれかのがんを治療する方法。
【０１９２】
特徴事項６：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を同時に投与する、特徴事項１〜５のいずれかのがんを治療する方法。
【０１９３】
特徴事項７：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を逐次的に投与する、特徴事項１〜５のいずれかのがんを治療する方法。
【０１９４】
特徴事項８：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、特徴事項７のがんを治療する方法。
【０１９５】
特徴事項９：セツキシマブとＩＳＣ−４を含む医薬組成物。
【０１９６】
特徴事項１０：セツキシマブとＩＳＣ−４を含む市販用セット。
【０１９７】
特徴事項１１：前記セツキシマブとＩＳＣ−４が単一の医薬製剤として提供される、特徴事項１０の市販用セット。
【０１９８】
特徴事項１２：前記セツキシマブとＩＳＣ−４が別個の医薬製剤として提供される、特徴事項１０の市販用セット。
【０１９９】
特徴事項１３：実質的に本明細書に記載されている被験体のがんを治療する方法。
【０２００】
特徴事項１４：実質的に本明細書に記載されている医薬組成物。
【０２０１】
特徴事項１５：実質的に本明細書に記載されている市販用セット。
【０２０２】
特徴事項１６：セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを、複合製剤として又は別個に投与することを含み、前記組合せの投与が相乗的効果を提供する、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法。
【０２０３】
特徴事項１７：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、特徴事項１６のがんを治療する方法。
【０２０４】
特徴事項１８：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、特徴事項１６又は１７のがんを治療する方法。
【０２０５】
特徴事項１９：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、特徴事項１６〜１８のいずれかのがんを治療する方法。
【０２０６】
特徴事項２０：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、特徴事項１６〜１８のいずれかのがんを治療する方法。
【０２０７】
特徴事項２１：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを同時に投与する、特徴事項１６〜２０のいずれかのがんを治療する方法。
【０２０８】
特徴事項２２：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを逐次的に投与する、特徴事項１６〜２０のいずれかのがんを治療する方法。
【０２０９】
特徴事項２３：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、特徴事項２２のがんを治療する方法。
【０２１０】
特徴事項２４：前記ＩＳＣ−４プロドラッグが、以下の構造式：
【化６】
2016503063.tif 000011
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、特徴事項１６〜２３のいずれかのがんを治療する方法。
【０２１１】
特徴事項２５：セツキシマブ及び以下の構造式：
【化７】
2016503063.tif 000012
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【０２１２】
特徴事項２６：セツキシマブ及び以下の構造式：
【化８】
2016503063.tif 000013
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む市販用セット。
【０２１３】
特徴事項２７：前記セツキシマブ及び前記ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩が、単一の医薬製剤として提供される、特徴事項２６の市販用セット。
【０２１４】
特徴事項２８：前記セツキシマブ及び前記ＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩が、別個の医薬製剤として提供される、特徴事項２７の市販用セット。
【０２１５】
特徴事項２９：以下の構造式：
【化９】
2016503063.tif 000014
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩を含む組成物。
【０２１６】
特徴事項一覧２
【０２１７】
特徴事項３０：セツキシマブとＩＳＣ−４の組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法。
【０２１８】
特徴事項３１：前記組合せの投与が相乗効果を提供する、請求項３０の方法。
【０２１９】
特徴事項３２：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項３０又は３１のがんを治療する方法。
【０２２０】
特徴事項３３：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、請求項３０〜３２のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２１】
特徴事項３４：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項３０〜３３のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２２】
特徴事項３５：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４の前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項３０〜３４のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２３】
特徴事項３６：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を同時に投与する、請求項３０〜３５いずれかのがんを治療する方法。
【０２２４】
特徴事項３７：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を逐次的に投与する、請求項３０〜３５のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２５】
特徴事項３８：前記セツキシマブとＩＳＣ−４を、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、請求項３０〜３５及び３７のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２６】
特徴事項３９：セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの組合せを複合製剤として又は別個に投与することを含む、がん治療を必要とする被験体のがんを治療する方法。
【０２２７】
特徴事項４０：前記組合せの投与が相乗効果を提供する、請求項３９のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２８】
特徴事項４１：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項３９又は４０のいずれかのがんを治療する方法。
【０２２９】
特徴事項４２：前記がんが野生型ＫＲＡＳを特徴とする大腸がんである、請求項３９〜４１のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３０】
特徴事項４３：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びアポトーシスの１種以上のマーカーについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項３９〜４２のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３１】
特徴事項４４：更に、セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与する前に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第１の試料を得ること；セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与した後に前記被験体からがん細胞を含有する又は含有する疑いのある第２の試料を得ること；及びリン酸化Ａｋｔについて前記第１及び第２の試料を分析し、それによってセツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグの前記組合せを投与することの有効性を監視する、請求項３９〜４３のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３２】
特徴事項４５：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを同時に投与する、請求項３９〜４４いずれかのがんを治療する方法。
【０２３３】
特徴事項４６：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを逐次的に投与する、請求項３９〜４４のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３４】
特徴事項４７：前記セツキシマブとＩＳＣ−４プロドラッグを、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、及び２４時間から選択される時間内で逐次的に投与する、請求項３９〜４４及び４６のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３５】
特徴事項４８：前記ＩＳＣ−４プロドラッグが、以下の構造式：
【化１０】
2016503063.tif 000015
を有するＩＳＣ−４のグルコシノラートプロドラッグ又はその薬学的に許容される塩である、請求項３９〜４７のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３６】
特徴事項４９：前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性である、請求項３０〜４８のいずれかのがんを治療する方法。
【０２３７】
特徴事項５０：前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性である大腸がんである、請求項３０〜４９のいずれのがんを治療する方法。
【０２３８】
特徴事項５１：前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性であり、かつ野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項３０〜５０のいずれのがんを治療する方法。
【０２３９】
特徴事項５２：前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性であり、前記野生型ＫＲＡＳが、ヒトＫＲＡＳを基準として、コドン１２、１３又は６１に活性化ＫＲＡＳ変異を有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項３０〜５１のいずれのがんを治療する方法。
【０２４０】
特徴事項５３：前記がんが５−フルオロウラシルに抵抗性であり、前記野生型ＫＲＡＳが、ヒトＫＲＡＳを基準として、活性化ＫＲＡＳ変異Ｑ６１Ｈ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ａ又はＧ１３Ｄを有さない野生型ＫＲＡＳを特徴とする、請求項３０〜５２のいずれのがんを治療する方法。
【０２４１】
本明細書中に記載される組成物及び方法は、現在のところ好ましい態様の典型的なもので、例示的であり、本発明の範囲に対する限定として意図されていない。当業者は本明細書における変更や他の使用を思い付くであろう。そのような変更や他の使用は、請求項に記載される本発明の範囲から逸脱することなく行うことができる。
【図１Ａ】
2016503063.tif 000020
【図１Ｂ】
2016503063.tif 000021
【図１Ｃ】
2016503063.tif 000022
【図１Ｄ】
2016503063.tif 000023
【図２】
2016503063.tif 000024
【図３Ａ】
2016503063.tif 000025
【図３Ｂ】
2016503063.tif 000026
【図３Ｃ】
2016503063.tif 000027
【図３Ｄ】
2016503063.tif 000028
【図３Ｅ】
2016503063.tif 000029
【図３Ｆ】
2016503063.tif 000030
【図４Ａ】
2016503063.tif 000031
【図４Ｂ】
2016503063.tif 000032
【図４Ｃ】
2016503063.tif 000033
【図４Ｄ】
2016503063.tif 000034
【図５Ａ】
2016503063.tif 000035
【図５Ｂ】
2016503063.tif 000036
【図５Ｃ】
2016503063.tif 000037
【図６Ａ】
2016503063.tif 000038
【図６Ｂ】
2016503063.tif 000039
【図６Ｃ】
2016503063.tif 000040
【図７Ａ】
2016503063.tif 000041
【図７Ｂ】
2016503063.tif 000042
【図７Ｃ】
2016503063.tif 000043
【図７Ｄ】
2016503063.tif 000044
【図８Ａ】
2016503063.tif 000045
【図８Ｂ】
2016503063.tif 000046
【図８Ｃ】
2016503063.tif 000047
【図８Ｄ】
2016503063.tif 000048
【国際調査報告】
2016503063.tif 000049
2016503063.tif 000050
2016503063.tif 000051
2016503063.tif 000052