(57)【要約】【課題】  本発明がタンパク質として乳タンパク質の加水分解物および発酵乳タンパク質、脂質としてオレイン酸を含有する油脂、ならびに乳リン脂質および／または大豆レシチン、糖質としてイソマルチュロースを含む、腫瘍患者に適した栄養組成物を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質として乳タンパク質の加水分解物および発酵乳タンパク質、脂質としてオレイン酸を含有する油脂、ならびに乳リン脂質および／または大豆レシチン、糖質としてイソマルチュロースを含む、腫瘍患者に適した栄養組成物。
【請求項２】
前記乳タンパク質が、カゼイン、乳タンパク質濃縮物（MPC）、ホエイタンパク質濃縮物（WPC）、ホエイタンパク質分離物（WPI）、α-ラクトアルブミン、β-ラクトグロブリンおよびラクトフェリンからなる群より選択されることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項３】
前記栄養組成物100mlあたり乳タンパク質の加水分解物が0.9〜5.0g含まれることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項４】
前記乳タンパク質の加水分解物が、ホエイタンパク質分離物（WPI）をバシラス・リシェニフォルムス（Bacillus licheniformus）由来のアルカラーゼで加水分解およびブタ膵臓由来のトリプシンで加水分解して得られうることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項５】
前記乳タンパク質の加水分解物が、分画分子量10,000の限外濾過膜で処理して得られる透過画分（パーミエイト）であることを特徴とする請求項４に記載の栄養組成物。
【請求項６】
前記発酵乳タンパク質がチーズに由来することを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項７】
前記チーズがクワルクであることを特徴とする請求項６に記載の栄養組成物。
【請求項８】
前記栄養組成物100mlあたり前記発酵乳タンパク質が0.5-6g含まれることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項９】
前記栄養組成物100mlあたりイソマルチュロースが4-15g含まれることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項１０】
前記脂質にオレイン酸が全脂肪酸組成の30%以上で含まれることを特徴とする請求項１に記載の栄養組成物。
【請求項１１】
タンパク質として乳タンパク質の加水分解物および発酵乳タンパク質脂、質としてオレイン酸を含有する油脂、ならびに乳リン脂質および／または大豆レシチン、糖質としてイソマルチュロースを含む、腫瘍患者に適した栄養組成物を投与するステップを含むことを特徴とする腫瘍の成長を阻止する方法。
【請求項１２】
当該腫瘍患者が結腸固形腫瘍患者であることを特徴とする請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
当該栄養組成物が経口もしくはチューブによる食物摂取（経腸）栄養組成物であることを特徴とする請求項11に記載の方法。
【請求項１４】
タンパク質として乳タンパク質の加水分解物および発酵乳タンパク質脂、質としてオレイン酸を含有する油脂、ならびに乳リン脂質および／または大豆レシチン、糖質としてイソマルチュロースを含む、腫瘍患者に適した栄養組成物を投与するステップを含むことを特徴とする腫瘍を治療し、または縮小させる方法。
【請求項１５】
当該腫瘍が結腸固形腫瘍であることを特徴とする請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
当該栄養組成物が経口栄養剤であることを特徴とする請求項14に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益の栄養組成物に関する。本発明は、特に、結腸固形腫瘍の患者の治療の有益な栄養組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、栄養組成物を用いて腫瘍患者を治療することが報告されている。例えば、中国特許出願第CN20061054681公開公報では、豆乳、野菜ジュース、米粉および小麦等が報告されている。
【０００３】
大豆イソフラボンが白血病、結腸がん、肺がんおよび胃がん等成長の抑制効果を有することが知られている。
【０００４】
中国特許公開広報第CN20081006602号において、短ペプチドおよびバクテリアを含む特殊な栄養食品処方が開示されている。
【０００５】
当該食品処方に従って用意した食品が、免疫料を増強し、腸の機能促進し、便秘を予防する。
【０００６】
第WO2004002238号国際公開広報において、癌の危険性を低下させることができる、栄養組成物であり、これらの栄養組成物は、プレバイオティック源と、哺乳動物中で酵素活性を誘導することができる植物化学物質の付加的効果を組み合わせて、癌の発生率を低下させることが開示されている。
【０００７】
第WO2007107295号国際公開広報において、ヒトおよび動物に対して、イソマルツロース、ラクロス、トレハルロース、ツラノース等の血糖指数の低い炭水化物源を含む低GI食が悪性腫瘍疾患に効果のある発明が開示されている。
【０００８】
日本特開平10-203994において、牛乳、大豆、酵母由来の蛋白質の何れか１種又は２種以上に蛋白分解酵素を作用させて得られる分子量500-5,000のペプチドを有効成分とし、飲食品組成物や化粧料組成物に応用する発明が公開されている。
【０００９】
これらの特許および特許出願が、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益の栄養組成物に関するが、当分野タイプの流動食タイプの栄養組成物は存在しない。つまり、タンパク質、脂質、ならびに所定のエネルギー消費量を供給する可溶性繊維およびイヌリンまたはその加水分解物を含む組成物が存在していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】CN20061054681
【特許文献２】CN20081006602
【特許文献３】WO2004002238 A1
【特許文献４】WO2007107295 A1
【特許文献５】JP10-203994
【特許文献６】JP2001-181303
【特許文献７】WO01049308
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的の１つが、腫瘍特に結腸固形腫瘍の成長を阻止する栄養組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、腫瘍の重量および腫瘍の容積を減らし、そして組織病理学検査において滑らかのエッジおよび高い細胞成長密度が得られるように腫瘍の成長を阻碍する栄養組成物に関する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明は、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益な栄養組成物を提供する。例えば、流動食、経腸栄養、経口・経管栄養、飲料、ゲル状食品等として、がん患者の栄養管理に用いることができる。特に長期療養の患者の安全な栄養管理に適する。
【００１４】
本発明の栄養組成物は、栄養を補給すると同時に、癌の成長を抑制することができる。例えば、流動食、経口・経腸・経管栄養などに用いて、それを摂取した者の癌の成長を抑制することができる。また、本発明の組成物は、安全に摂取できるので、長期療養における栄養管理に適している。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
図1が、S-180型腫瘍を持ったマウスの生存率カーブを示したグラフである。
【００１６】
図２が、C26型腫瘍を持ったマウスの餌摂取量を示したグラフである。
【００１７】
図３が、C26型腫瘍を持ったマウスの体重を示したグラフである。
【００１８】
図４が、解剖された、C26型腫瘍を持ったマウスの腫瘍の写真である。
【００１９】
図５が、C26型腫瘍を持ったマウスの腫瘍容積を示したグラフである。る。
【００２０】
図６が、C26型腫瘍を持ったマウスの組織の病理写真である(Hematoxylin-Eosin Stain, ×100)。
発明を実施するための形態
【００２１】
以下、本発明を詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施態
様に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更できるものである。
【００２２】
1．タンパク質
1-1  乳タンパク質の加水分解物
原料の乳タンパク質として、カゼイン、ホエイタンパク質（ホエイタンパク質濃縮物（WPC）、ホエイタンパク質分離物（WPI）、α-ラクトアルブミン（α-La）、β-ラクトグロブリン（β-Lg））、乳タンパク質濃縮物（MPC、総乳タンパク質(TMP)ともいう）などを用いることができる。
【００２３】
ホエイタンパク質の加水分解を例にとると、ホエイタンパク質の加水分解に用いる酵素として通常、ペプシン、トリプシンおよびキモトリプシンがあるが、植物由来のパパイン、バクテリアや菌類由来のプロテアーゼを用いた研究報告（Food Technol., 48: 68-71, 1994；Trends Food Sci. Technol., 7: 120-125, 1996；Food Proteins and Their Applications, pp. 443-472, 1997）もある。ホエイタンパク質を加水分解する酵素の活性は、その種類により大きく変動する。ペプシンはα-Laおよび変性したα-Laを分解するが、未変性の（native）β-Lgを分解しない（Neth. Milk dairy J., 47: 15-22, 1993 ）。トリプシンはα-Laをゆっくりと分解するが、β-Lgをほとんど未分解のままとする（Neth. Milk dairy J., 45: 225-240, 1991）。
【００２４】
キモトリプシンはα-Laを速く分解するが、β-Lgをゆっくりと分解する。
【００２５】
パパインはウシ血清アルブミン（BSA）およびβ-Lgを分解するが、α-Laを分解しにくく、α-Laには抵抗性がある（Int. Dairy Journal 6: 13-31, 1996a）。しかしながら、パパインはCaを結合していないα-Laを酸性のpHで完全に分解する（J. Dairy Sci., 76: 311-320, 1993）。
【００２６】
乳タンパク質の加水分解の程度をコントロールして、乳タンパク質を修飾することにより、広範囲のpHおよびプロセッシングの条件に亘って、乳タンパク質の機能的な特性を変更することができる（Enzyme and Chemical Modification of proteins in Food proteins and their Applications, pp. 393-423, 1997, Marcel Dekker, Inc., New York, 1997 ；Food Technol., 48: 68-71, 1994）。
【００２７】
ペプチド結合の加水分解では、荷電基数および疎水性の増加、低分子量化、ならびに分子の立体配置の修飾をもたらす（J. Dairy Sci., 76: 311-320, 1993）。 乳タンパク質の機能的な特性の変化は加水分解度に大きく依存する。
【００２８】
例えば、ホエイタンパク質の機能性に共通して見られる最大の変化は溶解性の増加と粘度の低下である。ホエイタンパク質の加水分解度が高い場合、その加水分解物では、しばしば、加熱しても沈澱せず、pH が3.5〜4.0において溶解性が高くなる。また、その加水分解物では、無処置（intact）のタンパク質よりも、はるかに粘度が低くなる。これらの差異は特に、タンパク質の濃度が高い場合に顕著である。その他の影響では、ゲル特性の変化、熱安定性の向上、乳化性および起泡安定性の低下などがある（Int. Dairy journal, 6: 13-31, 1996a；Dairy Chemistry 4, pp. 347-376, 1989；J. Dairy Sci., 79: 782-790, 1996）。
【００２９】
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である（特開昭62-059220号公報）。
【００３０】
例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である（特開昭62-059220号公報）。
【００３１】
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である。また、ラクトフェリンの加水分解物が癌の抗体療法における抗体医薬の細胞障害活性を増強することも知られている。
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である。また、ラクトフェリンの加水分解物が癌の抗体療法における抗体医薬の細胞障害活性を増強することも知られている。
【００３２】
一方、乳タンパク質の加水分解物では、上記に例示した学術文献に加えて、数多くの調製方法などについて特許文献（公開特許公報および特許公報）が存在する。例えば、カゼインとホエイタンパク質を別々に加水分解してから、疎水性部分を吸着・除去した後に、両者を所定割合で混合する方法（日本特許第2,986,764号）、ホエイタンパク質をバチルス属由来のプロテアーゼと放線菌由来のプロテアーゼにより加水分解した後に、酵素と不溶性の加水分解物を除去する方法（日本特許第3,222,638号）、β-ラクトグロブリンを酵素で分解して、分岐鎖アミノ酸／芳香族アミノ酸のモル比が10重量%以上、芳香族アミノ酸が2.0重量%未満、平均分子量が数百〜数千のペプチドの混合物を得る方法（日本特許第3,183,945号）、ホエイタンパク質中のβ-ラクトグロブリンを選択的に酵素分解する方法（日本特許第2,794,305号）、あるいはホエイタンパク質をバシラス・リシェニフォルムス（B. licheniformis）由来のプロテアーゼおよび／または枯草菌（B. subtilis）由来のプロテアーゼにより、非−pH−スタット法を用いて、15〜30%の加水分解度（DE）まで加水分解し、カットオフ値10,000を超える限外濾過膜の透過液を得る方法（日本特許第3167723号）などを挙げることができるが、本発明の乳タンパク質加水分解物では、これらの特許文献以外の方法や技術で調製されたものも包含することとする。
【００３３】
ホエイタンパク質の加水分解物では、下記（１）〜（５）の工程からなる調製方法を挙げることができる。
【００３４】
（１）乾燥物としてタンパク質の含量が約90 %（w/w）のホエイタンパク質の分離物（WPI、ダビスコ社）を、タンパク質の濃度が8 %（w/v）となるように蒸留水に溶解して、タンパク質の水溶液を得た。
【００３５】
（２）この水溶液を85℃、2分間で加熱処理して、タンパク質を変性させた。この加熱処理後の水溶液のpHは約7.5であった。
【００３６】
（３）その後に、アルカラーゼ2.4L（酵素、ノボザイムス社）を、タンパク質（基質）の濃度に対して2.0 %（w/w）で添加し、その水溶液を55℃、3時間で保持して加水分解した。
【００３７】
（４）次に、豚由来のトリプシンである PTN 6.0S（酵素、ノボザイムズジャパン社）を、タンパク質（基質）の濃度に対して3.0 %（w/w）で添加し、その水溶液を55℃、3時間で保持して加水分解した。つまり、加水分解の時間は全部で6時間であった。これらの加水分解の反応終了時の水溶液のpHは約7.0であった。
【００３８】
（５）ホエイタンパク質の加水分解物は、遠心処理（20,000×g、10分間）した後に、分画分子量が10,000の限外濾過（UF）膜（ミリポア社ウルトラフリー-MC）で処理した。
【００３９】
タンパク質の加水分解物の調製方法では、例えば、余熱、酵素基質(E/S)、pH、加水分解温度・時間等を考慮すべきである。具体的では、余熱が65-90 °C, E/S: 0. 01-0.2 , 加水分解温度: 30-65 °C, 加水分解時間: 3時間以上20時間以下である。
【００４０】
タンパク質の加水分解物の調製に使用する酵素として、例えば、ノボノルディスク社の次のものを挙げることができる。
1) エンド型プロテアーゼ
バシラス・リシェニフォルムス由来：アルカラーゼ（Alcalase）
B. レントゥス（B. lentus）由来：エスペラーゼ
枯草菌由来：ニュートラーゼ（Neutrase）
バクテリア由来：プロタメックス
豚膵臓由来：PTN（トリプシン）
2) エキソ型プロテアーゼ
アスペルギルス・オリゼ（Aspergillus oryzae）由来：フレーバーザイム
豚あるいはウシ内臓由来：カルボキシペプチダーゼ
【００４１】
上記酵素の他に、動物由来のパンクレアチン、ペプシン、植物由来のパパイン、ブロメライン、微生物由来（例えば、乳酸菌、酵母、カビ、放線菌など）のエンドプロテアーゼおよびエキソプロテアーゼ、これらの粗精製物、菌体破砕物等を例示することができる。また、酵素の混合物として、バシラス・リシェニフォルムス由来のアルカラーゼと豚膵臓由来のPTN（トリプシン）の組み合わせがよく用いられる。
【００４２】
本発明のタンパク質の加水分解物では、タンパク質の酵素加水分解物そのもの、限外濾過膜で処理した保持液（リテンテイト）あるいは透過液（パーミエイト）、さらに、本発明で必要とされる同様の活性が有る市販の乳タンパク質の加水分解物を包含することとする。例えば、本発明のタンパク質加水分解物として、分画分子量が10,000の限外濾過膜の保持液を用いることができる。例えば、本発明のタンパク質加水分解物として、分画分子量が10,000の限外濾過膜の保持液を用いることができる。
【００４３】
栄養組成物の乳タンパク質の加水分解物の配合量は、他の成分（発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、腫瘍患者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、乳タンパク質の加水分解物の配合量として、栄養組成物100 mL当たり0.9〜5.0g 、好ましくは0.9〜3.0g、より好ましくは1.0〜2.5g、さらに好ましくは1.2〜2.0gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００４４】
1-2  発酵乳タンパク質
本発明の発酵乳タンパク質の由来として、発酵乳（牛乳、水牛乳、ヤギ乳、羊乳、馬乳などの家畜乳および／または、これらの部分脱脂乳、脱脂乳、還元全乳、還元脱脂乳、還元部分脱脂乳、バター、クリームなどの乳原料を１種または２種以上で組み合わせて調製した液状乳を、乳酸菌などのスターターを用いて発酵させたもの全般）を用いることができる。 例えば、フレッシュチーズ、ナチュラルチーズ、ヨーグルト、ホエイチーズは、本発明の発酵乳に包含することとする。また、本発明のチーズとは、乳、バターミルクもしくはクリームを乳酸菌で発酵させ、または乳、バターミルクもしくはクリームに酵素を加えてできた凝乳からホエイ（乳清）を除去したものをいい、固形化や熟成の有無について問わないこととする。発酵乳を製造するスターターとして、Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilusを主に用いることができるが、これらに限られず、例えば、Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococcus diacetilactis, Enterococcus faecium, Enterococcus fecalis, Lactobacillus casei, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus murinus, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus brevis, Lactobacillus gasseri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breveなどの乳酸菌やビフィズス菌を用いることができる。その他、プロピオニバクテリウム属菌（Propionibacterium）などの発酵乳を製造する際に用いられる微生物を併用することができる。本発明の栄養組成物は、いずれの発酵乳を用いて調製してもよいが、好ましくは、フレッシュチーズまたはヨーグルト、より好ましくは、クワルク（quark）またはヨーグルトを用いて調製する。
【００４５】
フレッシュチーズには、カッテージ、クワルク、ストリング、ヌーシャテル、クリームチーズ、モツァレラ、リコッタ、マスカルポーネなどの数多くの種類がある。 クワルクは非熟成型（フレッシュ）チーズの一種であり、脂肪含量が低く、爽やかなフレーバーと酸味が特徴である。クワルクの一般的な製造法を以下に説明する。まずは脱脂乳を殺菌してから、乳酸菌のスターター（主にLactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus）を0.5〜5 ％（w/w）で接種して発酵させる。その溶液のpHが4.6に達すると、カードが形成されるので、クワルクセパレーターを用いて、ホエイを遠心分離してから、その得られたカードを冷却する。本発明のクワルクの組成の一例として、例えば、全固形分が17〜19 ％（w/w）、タンパク質が11〜13 ％（w/w）、脂肪が1 ％（w/w）未満、炭水化物が2〜8 ％（w/w）、乳糖が2 ％（w/w）未満を挙げることができる。その他、レンネットを用いて凝固させたものも、本発明のクワルクに包含することとする。また、ラクトコッカスに属するラクチス菌、クレモリス菌とロイコノストック属の菌種の混合培養液を脱脂乳に添加して培養し、ホエイを除去して得られたものも、本発明のクワルクに包含することとする。また、上記方法と同様にして得られたカードをカッターで切断した後に、その溶液を加温しながらホエイを分離して得られたものも、本発明のフレッシュチーズに包含することとする。
【００４６】
乳酸菌やその培養上清に免疫調整機能があることは知られている。例えば、Lactococcus lactis subsp. cremorisやその培養上清に由来する多糖類は、形質転換細胞（腫瘍・がん細胞等）に対し選択的に毒性を有することが知られている（特開2009-256312号公報）。
【００４７】
発酵乳タンパク質の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、オレイン酸を含有する油脂含有油脂、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、発酵乳タンパク質の配合量として、タンパク質に換算して栄養組成物100 mL当たり0.5〜6g、好ましくは2〜6 g、より好ましくは2.5〜4.5 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００４８】
日本国の乳及び乳製品の成分規格等に関する省令（昭和26年12月27日厚生省令第52号）では、乳等一般の成分規格及び製造の方法の基準として「分べん後５日以内の牛、山羊又はめん羊から乳を搾取してはならない」旨が定められている。つまり、この省令では初乳の乳製品への使用が制限されている。
【００４９】
本発明において乳タンパク質の加水分解物や発酵乳タンパク質の調製に使用する乳は、常乳（normal milk、あるいは成熟乳（mature milk）ともいう）を用いるのがより好ましい。乳の由来は、ウシ、水牛、ヤギ、ヒツジ、ウマ、ヒトなど、いずれの動物であってもよい。
【００５０】
２．脂質
2-1 リン脂質
リン脂質として乳リン脂質と大豆由来レシチンあるいは卵黄レシチンの組み合わせを用いる。乳リン脂質単独でもよい。レシチンという用語は、生化学、医学、薬学などの分野ではホスファチジルコリンだけに使用しているが、商業的あるいは工業的には、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸および他のリン脂質の混合物の総称として使われている。食品添加物公定書第7版（1999）では、レシチンは、「油糧種子又は動物原料から得られたもので、その主成分は、リン脂質である」、と定義されている。
【００５１】
乳リン脂質は、スフィンゴミエリン(SM)、ホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン（PE）、ホスファチジルイノシトール（PI）、ホスファチジルセリン（PS）、リゾホスファチジルコリン（LPC）からなり、乳脂肪球皮膜（MFGM）のみに局在している。乳脂肪球皮膜（MFGM）のリン脂質画分が表１に示されている(Bulletin of Japan Dairy Technical Association, Vol. 50, pp. 58-91, 2000)。
【００５２】
表１で示すように、ミクルレシチンが特に大量なSMを含んでいるが、豆乳レシチンを含んでいない。
【００５３】
【表１】
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【００５４】
大豆レシチン
大豆レシチンは天然の食品添加物として、食品分野で広く使われる一方、ポリエンホスファチジルコリンは医薬品（適応：慢性肝疾患における肝機能の改善、脂肪肝、高脂質血症）としても使われている。
【００５５】
いわゆる「天然系」の一連のリン脂質製品に関しては、通常、製品中のPC含量によって序列されている。リン脂質の用途に応じてグレートアップした各種のリン脂質が製造されている。大豆レシチンの精製、分画による主なPC含量の違いにより、大豆レシチン製品は便宜的に表２のように分類されている（藤川琢馬、油化学第40巻(10), pp.951-p58, 1991）。
【００５６】
【表２】
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【００５７】
本発明において、乳リン脂質と大豆レシチンはそれぞれ単独で使用してもよく、また組み合わせて使用してもよい。乳リン脂質および／または大豆レシチンの配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、乳リン脂質および／または大豆レシチンの配合量として、栄養組成物100 mL当たり合計0.01〜0.5 g、0.05〜0.5 g、0.1〜0.5 g、0.2〜0.3 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００５８】
2-2  その他の脂質
本発明において、脂質としてオレイン酸を含有する油脂を使用することができる。厚生労働省では、飽和脂肪酸（SFA：パルミチン酸、ステアリン酸など）：一価不飽和脂肪酸（MUFA：オレイン酸など）：多価不飽和脂肪酸（PUFA：リノール酸、リノレン酸など）の望ましい摂取比率を従来の1：1.5：1〜3：4：3となるよう、また、n-6系脂肪酸：n-3系脂肪酸の比率が4：1となるよう勧告している。わが国において、MUFAの摂取比を1.5倍まで高めた食生活の実施は難しいということが勧告の理由の一つである。そこで、望ましい脂肪酸摂取比率（SMP比）を実現するために、脂質の脂肪酸組成中一価不飽和脂肪酸（MUFA）の含量を高めることが考えられる。そのために、一価不飽和脂肪酸であるオレイン酸を本発明の栄養組成物に含有せしめることができる。オレイン酸を多く含む脂質源としては、例えば、高オレイン酸のハイオレイックヒマワリ油、ナタネ油、オリーブ油、高オレイン酸ベニバナ油、大豆油、コーン油、パーム油などが挙げられる。またオレイン酸を含む脂質源として栄養調製油脂（日本油脂(株)）が挙げられる。ヒマワリ油、ナタネ油、オリーブ油、およびオリーブ油との混合物も用いることができる。
【００５９】
オレイン酸の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、オレイン酸の配合量として、本発明の栄養組成物の脂肪酸組成中25％以上、好ましくは30%以上、より好ましくは30〜50%を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。さらに、DHA、EPA、アラキドン酸などの多価不飽和脂肪酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸などの中鎖脂肪酸を加えて、飽和脂肪酸：一価不飽和脂肪酸：多価不飽和脂肪酸の比率を3：4：3に近くなるように調整することができる。
【００６０】
オレイン酸の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、オレイン酸の配合量として、本発明の栄養組成物の脂肪酸組成中25％以上、好ましくは30%以上、より好ましくは30〜50%を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。さらに、DHA、EPA、アラキドン酸などの多価不飽和脂肪酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸などの中鎖脂肪酸を加えて、飽和脂肪酸：一価不飽和脂肪酸：多価不飽和脂肪酸の比率を3：4：3に近くなるように調整することができる。
【００６１】
３．３  糖質および食物繊維としては、主にイソマルチュロースを使用することができる。その他の糖質としては、糖アルコール（ソルビトール、キシリトール、マルチトールなど）、ハチミツ、グラニュー糖、ブドウ糖、果糖、転化糖などがあげられる。
イソマルチュロースは、ブドウ糖と果糖が１分子ずつα−１，６結合した二糖類で、ショ糖の構造異性体であり、６‐Ｏ‐（α‐Ｄ‐Ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）‐Ｄ‐ｆｒｕｃｔｏｓｅあるいはイソマルツロース、パラチノース、ともいう。分子量342.297、Cas. No. 13718-94-0で、甘味料などに用いられている。イソマルチュロースは蜂蜜やサトウキビなどに非常に少量含まれている。
【００６２】
また、スクロースにプロタミノバクター・ルブラム（Protaminobacter rubrum）起源の α-グルコシルトランスフェラーゼなどを作用させて、α−１，２結合をα−１，６結合に転移させて、イソマルチュロースを製造することもできる。イソマルチュロースの甘味はスクロースに似ているが、甘味度はスクロースの約半分である。経口的に摂取されたイソマルチュロースは、消化管内でイソマルターゼによって分解を受け、ショ糖と同様にグルコースとフルクトースに消化されて吸収される（合田敏尚ら、日本栄養・食糧学会誌, Vol. 36(3): 169-173, 1983）。他にイソマルターゼで消化を受けるイソマルトース、パノース、イソマルトトリオースなどは、イソマルチュロースの消化と競合するため、イソマルチュロースの摂取によって消化吸収が抑制されると言われている（日本栄養・食糧学会誌、36(3)、pp.169-173(1983)）。イソマルチュロースのカロリーは4kcal/gである。本発明において、イソマルチュロースは、パラチノースシロップ、還元パラチノースあるいはパラチノース水飴などを含む。パラチノース水飴は、イソマルチュロースの脱水縮合によって生じる四糖、六糖、八糖などのオリゴ糖を主成分とする水飴状の液状物である。
【００６３】
イソマルチュロースについては、イソマルチュロース等を含有する低グリセミック食品組成物を悪性腫瘍疾患の治療・予防に用いることが知られている（特表2009-530326号公報）。
【００６４】
イソマルチュロースの配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、乳リン脂質、大豆レシチンなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、イソマルチュロースの配合量として、栄養組成物100 mL当たり4〜15g好ましくは5〜7 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない(特表2009-530326号公報)。
【００６５】
本発明の栄養組成物は、適当にタンパク質、脂質、糖質を加えることにより、その熱量を調節することができる。本発明の栄養組成物の熱量は、栄養組成物100mlあたり50〜150 kcal、好ましくは、80〜120 kcalを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００６６】
また、本発明の栄養組成物における、タンパク質、脂質および糖質の栄養組成物全体に対するエネルギー比率は、第六次改定日本人の栄養所要量にほぼ準ずる。具体的に、タンパク質15〜25%、脂質20〜30%、糖質45〜65 %を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００６７】
本発明の栄養組成物は、食物繊維を含むこともできる。食物繊維は、ヒトの消化酵素によって水解されない食物中の物質を指し、水に対する親和性から、水溶性食物繊維および不溶性食物繊維に分類される。水溶性食物繊維として、難消化性オリゴ糖のラクツロース、ラクチトール、あるいはラフィノースなどを用いることができる。難消化性オリゴ糖の生理機能としては、未消化物のまま大腸に到達し、腸内ビフィズス菌の活性化および増殖に寄与し、腸内環境の改善すなわち整腸効果を有することが知られている。
【００６８】
さらに、水溶性食物繊維の候補として、高分子水溶性食物繊維では、大豆増粘多糖類、こんにゃくグルコマンナン、アルギン酸、低分子アルギン酸、サイリウム、アラビアガム、海藻多糖類（セルロース、リグニン様物質、寒天、カラギーナン、アルギン酸、フコダイン、ラミナリン）、微生物ガム（ウエランガム、カードラン、キサンタンガム、ジェランガム、デキストラン、プルラン、ラムザンガム）、その他のガム（種子由来のローカストビーンガム、タマリンドガム、タラガム、樹液由来のカラヤガム、トラガントガム）など、低分子水溶性食物繊維のポリデキストロース、難消化性デキストリン、パインファイバー、マルチトールなどを用いることができる。
【００６９】
不溶性食物繊維は、大腸での不消化物のカサを増やし、通過時間を短縮する。その結果排便回数が増し、便量の増加をもたらす。不溶性食物繊維の候補として、セルロース、ヘミセルロース、リグニン、キチン、キトサン、大豆ふすま、小麦ふすま、大麦ふすま、パインファイバー、コーンファイバー、ビートファイバー、オート麦ふすま、ライ麦ふすま、ハトムギふすま、米糠、キビ、アワ、ヒエ、モロコシなどの雑穀ふすま、菽穀（マメ科）ふすま、ソバなどの擬穀ふすま、ゴマふすま、おからなどがあげられる。オート麦ふすま、ライ麦ふすま、ハトムギふすま、米糠、キビ、アワ、ヒエ、モロコシなどの雑穀ふすま、菽穀（マメ科）ふすま、ソバなどの擬穀ふすま、ゴマふすま、おからなどがあげられる。
【００７０】
本発明の栄養組成物は、前記のタンパク質、脂質、糖質、食物繊維の他に、水、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類、乳化剤、増粘剤、安定化剤などを使用することができる。タンパク質としては、例えば全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、ホエイ粉、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質加水分解物、α―カゼイン、β―カゼイン、κ−カゼイン、β―ラクトグロブリン、α―ラクトアルブミン、ラクトフェリン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質などの動植物性タンパク質、これらの分解物；バター、ホエイ（乳清）ミネラル、クリーム、ホエイ、非タンパク態窒素、シアル酸、リン脂質、乳糖などの各種乳由来成分などが挙げられる。カゼインホスホペプチド、リジンなどのペプチドやアミノ酸を含んでいてもよい。糖質としては、例えば、糖類、加工澱粉（テキストリンのほか、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテルなど）、食物繊維などが挙げられる。脂質としては、例えば、ラード、魚油など、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油などの動物性油脂；パーム油、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油などの植物性油脂などが挙げられる。ビタミン類としては、例えば、ビタミンA、カロチン類、ビタミンB群、ビタミンC、ビタミンD群、ビタミンE、ビタミンK群、ビタミンP、ビタミンQ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸などが挙げられ、ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレンなどが挙げられる。有機酸としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、エリソルビン酸などが挙げられる。また、便臭低減効果のある素材（例えば、シャンピニオンエキスを5 mg〜500 mg(0.005%〜0.5%)）、カロチノイド製剤（例えば、α-カロチン、 β-カロチン、リコピン、ルテインなどを含む製剤を10μg〜200μg (0.00001%〜0.0002%)）、抗酸化剤（カテキン、ポリフェノールなど）を含ませることもできる。これらの成分は、２種以上を組み合わせて使用することができ、合成品および／またはこれらを多く含む食品を用いてもよい。食品の形態としては、固体、液体、ゲル状などいずれの形態であってもかまわない。
【００７１】
本発明の栄養組成物の製造は、当業界において公知の方法で実施できる。前記原材料を一部または全てを調合した後に、必要に応じて均質化を行う。均質化とは、調合した各成分を十分混合することにより均質にし、また、脂肪球や他成分の粗大粒子を機械的に微細化して脂肪などの浮上・凝集を防止するとともに、栄養組成物を均一な乳化状態にすることをいう。
【００７２】
本発明の栄養組成物の製造においては加熱処理または加熱殺菌を行う。加熱殺菌条件は、一般的な食品の殺菌条件を用いることができ、慣用の装置を用いて加熱殺菌を行うことができる。例えば、62〜65℃×30分、72℃以上×15秒以上、72℃以上×15分以上若しくは120〜150℃×1〜5秒の殺菌、または121〜124℃×5〜20分、105〜140℃の滅菌、レトルト（加圧加熱）殺菌、高圧蒸気滅菌などを使用することができるが、これらの例に限定されない。加熱殺菌は、好ましくは加圧下で行うことができる。
【００７３】
また、液状の栄養組成物を予め加熱滅菌した後、無菌的に容器に充填する方法（例えば、UHT滅菌法とアセプティック包装法を併用した方法）、液状の栄養組成物を容器に充填した後、容器とともに加熱滅菌する方法（例えば、オートクレーブ法）、缶容器や流動食や経口・経管栄養に用いる各種容器（いわゆるソフトバッグ、栄養バックなど）に充填しレトルト殺菌（例えば115〜145℃で5〜10秒）を行う方法、缶容器や流動食や経口・経管栄養に用いる各種容器（いわゆるソフトバッグ、栄養バックなど）に充填しレトルト殺菌した後に約140〜145℃で約5〜8秒間加熱殺菌後、冷却し、無菌充填を行う方法を例示することができるが、これらの例に限定されない。
【００７４】
加熱処理または加熱殺菌によって、原料の発酵乳に由来するスターター（乳酸菌、ビフィズス菌、またはプロピオニバクテリウム属菌など）は死滅する。
【００７５】
本発明の組成物は、癌の成長を抑制するために用いることができる。本発明の栄養組成物は、例えば流動食や経口・経管栄養、飲料、ゲル状食品などとして、経口・経腸栄養患者や高齢者、乳幼児などの栄養管理に用いることができる。
【００７６】
本発明の栄養組成物の浸透圧は約500〜1000 mOsm/l、例えば約550〜750 mOsm/lの浸透圧を例示することができる。室温で測定する場合、栄養組成物の粘度は、20〜100 cp（1 cp = 1ｍPa・s）、好ましくは25〜60 cp、より好ましくは30〜50 cpを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
また、本発明の栄養組成物のpHは4.6以下、好ましくは3.0〜4.3、より好ましくは3.8〜4.2に調整することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００７７】
本発明の栄養組成物が腫瘍患者の腫瘍の成長を阻碍することに有益である。特に、結腸腫瘍患者、結腸固形腫瘍患者、肉腫細胞腫瘍患者、肺癌患者、胸腺腫患者、乳癌患者、咽頭癌患者、喉頭癌患者、胃癌患者、食道癌患者、肝細胞癌患者、胆管癌患者、胆嚢癌患者、膵臓癌患者、陰茎癌患者、腎盂および尿管癌患者、腎細胞癌患者、精巣腫瘍患者、前立腺癌患者、膀胱癌患者、外陰癌患者、子宮頸癌患者、子宮内膜癌患者、子宮肉腫患者、腟癌患者、卵巣癌患者、卵巣胚細胞腫瘍患者、もしくは脳腫瘍患者等の腫瘍の成長を阻碍することに有益である。
【００７８】
腫瘍細胞株を移植したマウスを用いたin vivo試験において、本発明の栄養組成物は腫瘍の増殖および腫瘍の周辺組織への浸潤を抑制することが確認された。腫瘍が周辺組織に浸潤すると、腫瘍の転移が起こりやすくなる。また、内臓器官や末梢神経に腫瘍が浸潤すると疼痛が発生する。従って、本発明の組成物は、腫瘍の成長、腫瘍の浸潤・転移または腫瘍による疼痛発生を抑制することができる。
【００７９】
本発明の栄養組成物の医薬品または飲食品における一日当たりの摂取量は摂取対象者の病態、年齢、症状、体重、用途、および本発明の栄養組成物が栄養の唯一のものであるかなどによって異なるため、特に限定されない。具体的には、成人の場合一日当たり400〜1600ml、好ましくは600〜1600ml、より好ましくは800〜1200mlの摂取量を例示することができる。成人の場合、例えば一日当たり3000mlまで摂取してもよい。また、摂取量は、摂取対象者の担当医により決定することもできる。
また、本発明の栄養組成物を従来知られる抗腫瘍作用を有する医薬品や食品と併用して用いてもよい。
【００８０】
本発明の栄養組成物は医薬品または飲食品いずれの形態でも利用することができる。例えば、本発明の栄養組成物を医薬品として直接投与することにより、または特定保健用食品などの特別用途食品、栄養機能食品、栄養補助食品、流動食やサプリメントとして直接摂取ことにより、腸内菌叢を改善することが期待される。また、液状、ペースト状、固形、粉末などの形態を問わず、各種食品（牛乳、清涼飲料、発酵乳、ヨーグルト、チーズ、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、流動食、特別用途食品、病者用食品、栄養食品、冷凍食品、加工食品その他の市販食品など）に添加し、これを摂取してもよい。また、栄養組成物の使用形態が粉末の場合、例えば噴霧乾燥、凍結乾燥などの手段を用いることにより製造することができる。
【００８１】
本発明の栄養組成物を医薬品またはサプリメントとして使用する場合には、種々の形態で投与することができる。その形態として、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤などによる経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主剤に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる、既知の製剤化のための補助剤を用いて製剤化することができる。また、適当量のカルシウムを含んでいてもよい。さらに適当量のビタミン、ミネラル、有機酸、糖類、アミノ酸、ペプチド類などを添加してもよい。
実施例
【００８２】
以下、本発明に関して実施例を挙げて説明するが、本発明は、これにより限定されるものではない。
材料および方法
【００８３】
一般的に使われた２つ癌細胞モデル、マウス肉腫細胞（S180）およびマウスの結腸固形腫瘍細胞(C26)が、腹水腫瘍モデルのS-180および充実性腫瘍モデルのC-26を構築する。半分が雄、半分が雌となるように、マウスはそれぞれランダムに２つのグループに分ける。１４日間不断給餌で本発明の栄養組成物を与えるグループを「本発明の試験組成」とコントロール餌を与えるAIN-93Mとにする。S-180腫瘍を持ったマウスの生存時間を主要指標として記録し、C-26腫瘍を持ったマウスの餌摂取量、体重、腫瘍の重さ、腫瘍の容積を記録した。血清のTNF-aおよびIL-6のレベルが計られ、腫瘍の組織病理も行った。
１．食事試験
【００８４】
本発明の試験組成（黄色い細かい粉末）が表１および表３にしめされた乾燥された流動食の組成物である。液体オレイン酸39重量%、エイコサペンタエン酸1.2重量%、ドコサヘキサエン酸0.8重量%で全体の脂肪酸組成を形成し、AIN- 93M（白い細かい粉末）がオリエンタル酵母工業（日本）製である。AIN- 93M標準に精製された餌で、ラットやマウスを用いた栄養実験によく使用され、その成分が1993年に米国ナショナル栄養研究所（United States National Institute of Nutrition）によって発表された（表４および表５)。
【００８５】
【表３】
2016531114.tif 000005
【００８６】
【表４】
2016531114.tif 000006
【００８７】
【表５】
2016531114.tif 000007
【００８８】
２．移植された腫瘍細胞モデル
S-180細胞は、上海市腫瘍研究所から提供してもらった。
C-26細胞は、上海市腫瘍研究所から提供してもらった。
３．動物
【００８９】
品種: BALB/c mice
出所: 上海Shanghai SIPPR-BK Laboratory Animal Co.Ltd
性別: 半分が雄および半分が雌
年齢: ６-７週間
体重: 18-20ｇ
番号： 76匹(36匹マウスが S-180の実験用、40匹マウスがC26の実験用)
動物製造番号: SCXK (Shanghai) 2008-0016
動物使用許可番号: SYXK (Shanghai) 2008-0027
保管条件: SPF 動物実験ハウス、室温24+1℃, 湿度40~70%、12/12 時間ひると夜のサイクル。
【００９０】
【００９１】
【表６】
2016531114.tif 000008
【００９２】
【表７】
2016531114.tif 000009
【００９３】
【表８】
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【００９４】
【表９】
2016531114.tif 000011
【００９５】
通常に用いられているマウスがんモデルとして、腹水腫瘍モデルのS-180および充実性腫瘍モデルのC-26を用いて本発明の試験組成が腫瘍の成長を阻止することができるか否かを評価する。その結果、本発明の試験組においてS-180腫瘍を持ったマウスの平均生存時間がコントロールマウスに比べ、顕著な差を示さなかった（P>O. 05）。しかし、本発明の試験組では、C-26マウス腫瘍モデルにおいて腫瘍の成長を阻止することができた。
【００９６】
産業上の利用可能性
本発明の栄養組成物は、結腸固形腫瘍の成長を阻止したり、悪性腫瘍の浸潤を減らしたりすることで結腸固形腫瘍患者にとって有益である、
【図１】
2016531114.tif 000012
【図２】
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【図３】
2016531114.tif 000014
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【誤訳訂正書】
【提出日】平成28年6月3日(2016.6.3)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益の栄養組成物に関する。本発明は、特に、結腸固形腫瘍の患者の治療の有益な栄養組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、栄養組成物を用いて腫瘍患者を治療することが報告されている。例えば、中国特許出願第CN20061054681公開公報では、豆乳、野菜ジュース、米粉および小麦等が報告されている。
【０００３】
大豆イソフラボンが白血病、結腸がん、肺がんおよび胃がん等成長の抑制効果を有することが知られている。
【０００４】
中国特許公開広報第CN20081006602号において、短ペプチドおよびバクテリアを含む特殊な栄養食品処方が開示されている。
【０００５】
当該食品処方に従って用意した食品が、免疫料を増強し、腸の機能促進し、便秘を予防する。
【０００６】
第WO2004002238号国際公開広報において、癌の危険性を低下させることができる、栄養組成物であり、これらの栄養組成物は、プレバイオティック源と、哺乳動物中で酵素活性を誘導することができる植物化学物質の付加的効果を組み合わせて、癌の発生率を低下させることが開示されている。
【０００７】
第WO2007107295号国際公開広報において、ヒトおよび動物に対して、イソマルツロース、ラクロス、トレハルロース、ツラノース等の血糖指数の低い炭水化物源を含む低GI食が悪性腫瘍疾患に効果のある発明が開示されている。
【０００８】
日本特開平10-203994において、牛乳、大豆、酵母由来の蛋白質の何れか１種又は２種以上に蛋白分解酵素を作用させて得られる分子量500-5,000のペプチドを有効成分とし、飲食品組成物や化粧料組成物に応用する発明が公開されている。
【０００９】
これらの特許および特許出願が、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益の栄養組成物に関するが、当分野タイプの流動食タイプの栄養組成物は存在しない。つまり、タンパク質、脂質、ならびに所定のエネルギー消費量を供給する可溶性繊維およびイヌリンまたはその加水分解物を含む組成物が存在していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】CN20061054681
【特許文献２】CN20081006602
【特許文献３】WO2004002238 A1
【特許文献４】WO2007107295 A1
【特許文献５】JP10-203994
【特許文献６】JP2001-181303
【特許文献７】WO01049308
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的の１つが、腫瘍特に結腸固形腫瘍の成長を阻止する栄養組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、腫瘍の重量および腫瘍の容積を減らし、そして組織病理学検査において滑らかのエッジおよび高い細胞成長密度が得られるように腫瘍の成長を阻碍する栄養組成物に関する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明は、腫瘍患者の栄養管理および治療に有益な栄養組成物を提供する。例えば、流動食、経腸栄養、経口・経管栄養、飲料、ゲル状食品等として、がん患者の栄養管理に用いることができる。特に長期療養の患者の安全な栄養管理に適する。
【００１４】
本発明の栄養組成物は、栄養を補給すると同時に、癌の成長を抑制することができる。例えば、流動食、経口・経腸・経管栄養などに用いて、それを摂取した者の癌の成長を抑制することができる。また、本発明の組成物は、安全に摂取できるので、長期療養における栄養管理に適している。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
図1が、S-180型腫瘍を持ったマウスの生存率カーブを示したグラフである。
【００１６】
図２が、C26型腫瘍を持ったマウスの餌摂取量を示したグラフである。
【００１７】
図３が、C26型腫瘍を持ったマウスの体重を示したグラフである。
【００１８】
図４が、解剖された、C26型腫瘍を持ったマウスの腫瘍の写真である。
【００１９】
図５が、C26型腫瘍を持ったマウスの腫瘍容積を示したグラフである。る。
【００２０】
図６が、C26型腫瘍を持ったマウスの組織の病理写真である(Hematoxylin-Eosin Stain, ×100)。
発明を実施するための形態
【００２１】
以下、本発明を詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施態
様に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更できるものである。
【００２２】
1．タンパク質
1-1  乳タンパク質の加水分解物
原料の乳タンパク質として、カゼイン、ホエイタンパク質（ホエイタンパク質濃縮物（WPC）、ホエイタンパク質分離物（WPI）、α-ラクトアルブミン（α-La）、β-ラクトグロブリン（β-Lg））、乳タンパク質濃縮物（MPC、総乳タンパク質(TMP)ともいう）などを用いることができる。
【００２３】
ホエイタンパク質の加水分解を例にとると、ホエイタンパク質の加水分解に用いる酵素として通常、ペプシン、トリプシンおよびキモトリプシンがあるが、植物由来のパパイン、バクテリアや菌類由来のプロテアーゼを用いた研究報告（Food Technol., 48: 68-71, 1994；Trends Food Sci. Technol., 7: 120-125, 1996；Food Proteins and Their Applications, pp. 443-472, 1997）もある。ホエイタンパク質を加水分解する酵素の活性は、その種類により大きく変動する。ペプシンはα-Laおよび変性したα-Laを分解するが、未変性の（native）β-Lgを分解しない（Neth. Milk dairy J., 47: 15-22, 1993 ）。トリプシンはα-Laをゆっくりと分解するが、β-Lgをほとんど未分解のままとする（Neth. Milk dairy J., 45: 225-240, 1991）。
【００２４】
キモトリプシンはα-Laを速く分解するが、β-Lgをゆっくりと分解する。
【００２５】
パパインはウシ血清アルブミン（BSA）およびβ-Lgを分解するが、α-Laを分解しにくく、α-Laには抵抗性がある（Int. Dairy Journal 6: 13-31, 1996a）。しかしながら、パパインはCaを結合していないα-Laを酸性のpHで完全に分解する（J. Dairy Sci., 76: 311-320, 1993）。
【００２６】
乳タンパク質の加水分解の程度をコントロールして、乳タンパク質を修飾することにより、広範囲のpHおよびプロセッシングの条件に亘って、乳タンパク質の機能的な特性を変更することができる（Enzyme and Chemical Modification of proteins in Food proteins and their Applications, pp. 393-423, 1997, Marcel Dekker, Inc., New York, 1997 ；Food Technol., 48: 68-71, 1994）。
【００２７】
ペプチド結合の加水分解では、荷電基数および疎水性の増加、低分子量化、ならびに分子の立体配置の修飾をもたらす（J. Dairy Sci., 76: 311-320, 1993）。 乳タンパク質の機能的な特性の変化は加水分解度に大きく依存する。
【００２８】
例えば、ホエイタンパク質の機能性に共通して見られる最大の変化は溶解性の増加と粘度の低下である。ホエイタンパク質の加水分解度が高い場合、その加水分解物では、しばしば、加熱しても沈澱せず、pH が3.5〜4.0において溶解性が高くなる。また、その加水分解物では、無処置（intact）のタンパク質よりも、はるかに粘度が低くなる。これらの差異は特に、タンパク質の濃度が高い場合に顕著である。その他の影響では、ゲル特性の変化、熱安定性の向上、乳化性および起泡安定性の低下などがある（Int. Dairy journal, 6: 13-31, 1996a；Dairy Chemistry 4, pp. 347-376, 1989；J. Dairy Sci., 79: 782-790, 1996）。
【００２９】
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である（特開昭62-059220号公報）。
【００３０】
例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である（特開昭62-059220号公報）。
【００３１】
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である。また、ラクトフェリンの加水分解物が癌の抗体療法における抗体医薬の細胞障害活性を増強することも知られている。
乳タンパク質から派生するさまざまな生理活性ペプチドが知られている。例えば、ペプシン等のタンパク質消化酵素の自己消化物が、癌細胞の血小板凝集惹起活性を介して癌転移抑制することが公知である。また、ラクトフェリンの加水分解物が癌の抗体療法における抗体医薬の細胞障害活性を増強することも知られている。
【００３２】
一方、乳タンパク質の加水分解物では、上記に例示した学術文献に加えて、数多くの調製方法などについて特許文献（公開特許公報および特許公報）が存在する。例えば、カゼインとホエイタンパク質を別々に加水分解してから、疎水性部分を吸着・除去した後に、両者を所定割合で混合する方法（日本特許第2,986,764号）、ホエイタンパク質をバチルス属由来のプロテアーゼと放線菌由来のプロテアーゼにより加水分解した後に、酵素と不溶性の加水分解物を除去する方法（日本特許第3,222,638号）、β-ラクトグロブリンを酵素で分解して、分岐鎖アミノ酸／芳香族アミノ酸のモル比が10重量%以上、芳香族アミノ酸が2.0重量%未満、平均分子量が数百〜数千のペプチドの混合物を得る方法（日本特許第3,183,945号）、ホエイタンパク質中のβ-ラクトグロブリンを選択的に酵素分解する方法（日本特許第2,794,305号）、あるいはホエイタンパク質をバシラス・リシェニフォルムス（B. licheniformis）由来のプロテアーゼおよび／または枯草菌（B. subtilis）由来のプロテアーゼにより、非−pH−スタット法を用いて、15〜30%の加水分解度（DE）まで加水分解し、カットオフ値10,000を超える限外濾過膜の透過液を得る方法（日本特許第3167723号）などを挙げることができるが、本発明の乳タンパク質加水分解物では、これらの特許文献以外の方法や技術で調製されたものも包含することとする。
【００３３】
ホエイタンパク質の加水分解物では、下記（１）〜（５）の工程からなる調製方法を挙げることができる。
【００３４】
（１）乾燥物としてタンパク質の含量が約90 %（w/w）のホエイタンパク質の分離物（WPI、ダビスコ社）を、タンパク質の濃度が8 %（w/v）となるように蒸留水に溶解して、タンパク質の水溶液を得た。
【００３５】
（２）この水溶液を85℃、2分間で加熱処理して、タンパク質を変性させた。この加熱処理後の水溶液のpHは約7.5であった。
【００３６】
（３）その後に、アルカラーゼ2.4L（酵素、ノボザイムス社）を、タンパク質（基質）の濃度に対して2.0 %（w/w）で添加し、その水溶液を55℃、3時間で保持して加水分解した。
【００３７】
（４）次に、豚由来のトリプシンである PTN 6.0S（酵素、ノボザイムズジャパン社）を、タンパク質（基質）の濃度に対して3.0 %（w/w）で添加し、その水溶液を55℃、3時間で保持して加水分解した。つまり、加水分解の時間は全部で6時間であった。これらの加水分解の反応終了時の水溶液のpHは約7.0であった。
【００３８】
（５）ホエイタンパク質の加水分解物は、遠心処理（20,000×g、10分間）した後に、分画分子量が10,000の限外濾過（UF）膜（ミリポア社ウルトラフリー-MC）で処理した。
【００３９】
タンパク質の加水分解物の調製方法では、例えば、余熱、酵素基質(E/S)、pH、加水分解温度・時間等を考慮すべきである。具体的では、余熱が65-90 °C, E/S: 0. 01-0.2 , 加水分解温度: 30-65 °C, 加水分解時間: 3時間以上20時間以下である。
【００４０】
タンパク質の加水分解物の調製に使用する酵素として、例えば、ノボノルディスク社の次のものを挙げることができる。
1) エンド型プロテアーゼ
バシラス・リシェニフォルムス由来：アルカラーゼ（Alcalase）
B. レントゥス（B. lentus）由来：エスペラーゼ
枯草菌由来：ニュートラーゼ（Neutrase）
バクテリア由来：プロタメックス
豚膵臓由来：PTN（トリプシン）
2) エキソ型プロテアーゼ
アスペルギルス・オリゼ（Aspergillus oryzae）由来：フレーバーザイム
豚あるいはウシ内臓由来：カルボキシペプチダーゼ
【００４１】
上記酵素の他に、動物由来のパンクレアチン、ペプシン、植物由来のパパイン、ブロメライン、微生物由来（例えば、乳酸菌、酵母、カビ、放線菌など）のエンドプロテアーゼおよびエキソプロテアーゼ、これらの粗精製物、菌体破砕物等を例示することができる。また、酵素の混合物として、バシラス・リシェニフォルムス由来のアルカラーゼと豚膵臓由来のPTN（トリプシン）の組み合わせがよく用いられる。
【００４２】
本発明のタンパク質の加水分解物では、タンパク質の酵素加水分解物そのもの、限外濾過膜で処理した保持液（リテンテイト）あるいは透過液（パーミエイト）、さらに、本発明で必要とされる同様の活性が有る市販の乳タンパク質の加水分解物を包含することとする。例えば、本発明のタンパク質加水分解物として、分画分子量が10,000の限外濾過膜の保持液を用いることができる。例えば、本発明のタンパク質加水分解物として、分画分子量が10,000の限外濾過膜の保持液を用いることができる。
【００４３】
栄養組成物の乳タンパク質の加水分解物の配合量は、他の成分（発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、腫瘍患者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、乳タンパク質の加水分解物の配合量として、栄養組成物100 mL当たり0.9〜5.0g 、好ましくは0.9〜3.0g、より好ましくは1.0〜2.5g、さらに好ましくは1.2〜2.0gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００４４】
1-2  発酵乳タンパク質
本発明の発酵乳タンパク質の由来として、発酵乳（牛乳、水牛乳、ヤギ乳、羊乳、馬乳などの家畜乳および／または、これらの部分脱脂乳、脱脂乳、還元全乳、還元脱脂乳、還元部分脱脂乳、バター、クリームなどの乳原料を１種または２種以上で組み合わせて調製した液状乳を、乳酸菌などのスターターを用いて発酵させたもの全般）を用いることができる。 例えば、フレッシュチーズ、ナチュラルチーズ、ヨーグルト、ホエイチーズは、本発明の発酵乳に包含することとする。また、本発明のチーズとは、乳、バターミルクもしくはクリームを乳酸菌で発酵させ、または乳、バターミルクもしくはクリームに酵素を加えてできた凝乳からホエイ（乳清）を除去したものをいい、固形化や熟成の有無について問わないこととする。発酵乳を製造するスターターとして、Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilusを主に用いることができるが、これらに限られず、例えば、Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococcus diacetilactis, Enterococcus faecium, Enterococcus fecalis, Lactobacillus casei, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus murinus, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus brevis, Lactobacillus gasseri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breveなどの乳酸菌やビフィズス菌を用いることができる。その他、プロピオニバクテリウム属菌（Propionibacterium）などの発酵乳を製造する際に用いられる微生物を併用することができる。本発明の栄養組成物は、いずれの発酵乳を用いて調製してもよいが、好ましくは、フレッシュチーズまたはヨーグルト、より好ましくは、クワルク（quark）またはヨーグルトを用いて調製する。
【００４５】
フレッシュチーズには、カッテージ、クワルク、ストリング、ヌーシャテル、クリームチーズ、モツァレラ、リコッタ、マスカルポーネなどの数多くの種類がある。 クワルクは非熟成型（フレッシュ）チーズの一種であり、脂肪含量が低く、爽やかなフレーバーと酸味が特徴である。クワルクの一般的な製造法を以下に説明する。まずは脱脂乳を殺菌してから、乳酸菌のスターター（主にLactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus）を0.5〜5 ％（w/w）で接種して発酵させる。その溶液のpHが4.6に達すると、カードが形成されるので、クワルクセパレーターを用いて、ホエイを遠心分離してから、その得られたカードを冷却する。本発明のクワルクの組成の一例として、例えば、全固形分が17〜19 ％（w/w）、タンパク質が11〜13 ％（w/w）、脂肪が1 ％（w/w）未満、炭水化物が2〜8 ％（w/w）、乳糖が2 ％（w/w）未満を挙げることができる。その他、レンネットを用いて凝固させたものも、本発明のクワルクに包含することとする。また、ラクトコッカスに属するラクチス菌、クレモリス菌とロイコノストック属の菌種の混合培養液を脱脂乳に添加して培養し、ホエイを除去して得られたものも、本発明のクワルクに包含することとする。また、上記方法と同様にして得られたカードをカッターで切断した後に、その溶液を加温しながらホエイを分離して得られたものも、本発明のフレッシュチーズに包含することとする。
【００４６】
乳酸菌やその培養上清に免疫調整機能があることは知られている。例えば、Lactococcus lactis subsp. cremorisやその培養上清に由来する多糖類は、形質転換細胞（腫瘍・がん細胞等）に対し選択的に毒性を有することが知られている（特開2009-256312号公報）。
【００４７】
発酵乳タンパク質の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、オレイン酸を含有する油脂含有油脂、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、発酵乳タンパク質の配合量として、タンパク質に換算して栄養組成物100 mL当たり0.5〜6g、好ましくは2〜6 g、より好ましくは2.5〜4.5 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００４８】
日本国の乳及び乳製品の成分規格等に関する省令（昭和26年12月27日厚生省令第52号）では、乳等一般の成分規格及び製造の方法の基準として「分べん後５日以内の牛、山羊又はめん羊から乳を搾取してはならない」旨が定められている。つまり、この省令では初乳の乳製品への使用が制限されている。
【００４９】
本発明において乳タンパク質の加水分解物や発酵乳タンパク質の調製に使用する乳は、常乳（normal milk、あるいは成熟乳（mature milk）ともいう）を用いるのがより好ましい。乳の由来は、ウシ、水牛、ヤギ、ヒツジ、ウマ、ヒトなど、いずれの動物であってもよい。
【００５０】
２．脂質
2-1 リン脂質
リン脂質として乳リン脂質と大豆由来レシチンあるいは卵黄レシチンの組み合わせを用いる。乳リン脂質単独でもよい。レシチンという用語は、生化学、医学、薬学などの分野ではホスファチジルコリンだけに使用しているが、商業的あるいは工業的には、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸および他のリン脂質の混合物の総称として使われている。食品添加物公定書第7版（1999）では、レシチンは、「油糧種子又は動物原料から得られたもので、その主成分は、リン脂質である」、と定義されている。
【００５１】
乳リン脂質は、スフィンゴミエリン(SM)、ホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン（PE）、ホスファチジルイノシトール（PI）、ホスファチジルセリン（PS）、リゾホスファチジルコリン（LPC）からなり、乳脂肪球皮膜（MFGM）のみに局在している。乳脂肪球皮膜（MFGM）のリン脂質画分が表１に示されている(Bulletin of Japan Dairy Technical Association, Vol. 50, pp. 58-91, 2000)。
【００５２】
表１で示すように、ミクルレシチンが特に大量なSMを含んでいるが、豆乳レシチンを含んでいない。
【００５３】
【表１】
2016531114.tif 000018
【００５４】
大豆レシチン
大豆レシチンは天然の食品添加物として、食品分野で広く使われる一方、ポリエンホスファチジルコリンは医薬品（適応：慢性肝疾患における肝機能の改善、脂肪肝、高脂質血症）としても使われている。
【００５５】
いわゆる「天然系」の一連のリン脂質製品に関しては、通常、製品中のPC含量によって序列されている。リン脂質の用途に応じてグレートアップした各種のリン脂質が製造されている。大豆レシチンの精製、分画による主なPC含量の違いにより、大豆レシチン製品は便宜的に表２のように分類されている（藤川琢馬、油化学第40巻(10), pp.951-p58, 1991）。
【００５６】
【表２】
2016531114.tif 000019
【００５７】
本発明において、乳リン脂質と大豆レシチンはそれぞれ単独で使用してもよく、また組み合わせて使用してもよい。乳リン脂質および／または大豆レシチンの配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、乳リン脂質および／または大豆レシチンの配合量として、栄養組成物100 mL当たり合計0.01〜0.5 g、0.05〜0.5 g、0.1〜0.5 g、0.2〜0.3 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００５８】
2-2  その他の脂質
本発明において、脂質としてオレイン酸を含有する油脂を使用することができる。厚生労働省では、飽和脂肪酸（SFA：パルミチン酸、ステアリン酸など）：一価不飽和脂肪酸（MUFA：オレイン酸など）：多価不飽和脂肪酸（PUFA：リノール酸、リノレン酸など）の望ましい摂取比率を従来の1：1.5：1〜3：4：3となるよう、また、n-6系脂肪酸：n-3系脂肪酸の比率が4：1となるよう勧告している。わが国において、MUFAの摂取比を1.5倍まで高めた食生活の実施は難しいということが勧告の理由の一つである。そこで、望ましい脂肪酸摂取比率（SMP比）を実現するために、脂質の脂肪酸組成中一価不飽和脂肪酸（MUFA）の含量を高めることが考えられる。そのために、一価不飽和脂肪酸であるオレイン酸を本発明の栄養組成物に含有せしめることができる。オレイン酸を多く含む脂質源としては、例えば、高オレイン酸のハイオレイックヒマワリ油、ナタネ油、オリーブ油、高オレイン酸ベニバナ油、大豆油、コーン油、パーム油などが挙げられる。またオレイン酸を含む脂質源として栄養調製油脂（日本油脂(株)）が挙げられる。ヒマワリ油、ナタネ油、オリーブ油、およびオリーブ油との混合物も用いることができる。
【００５９】
オレイン酸の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、オレイン酸の配合量として、本発明の栄養組成物の脂肪酸組成中25％以上、好ましくは30%以上、より好ましくは30〜50%を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。さらに、DHA、EPA、アラキドン酸などの多価不飽和脂肪酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸などの中鎖脂肪酸を加えて、飽和脂肪酸：一価不飽和脂肪酸：多価不飽和脂肪酸の比率を3：4：3に近くなるように調整することができる。
【００６０】
オレイン酸の配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、乳リン脂質、大豆レシチン、イソマルチュロースなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、オレイン酸の配合量として、本発明の栄養組成物の脂肪酸組成中25％以上、好ましくは30%以上、より好ましくは30〜50%を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。さらに、DHA、EPA、アラキドン酸などの多価不飽和脂肪酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸などの中鎖脂肪酸を加えて、飽和脂肪酸：一価不飽和脂肪酸：多価不飽和脂肪酸の比率を3：4：3に近くなるように調整することができる。
【００６１】
３．３  糖質および食物繊維としては、主にイソマルチュロースを使用することができる。その他の糖質としては、糖アルコール（ソルビトール、キシリトール、マルチトールなど）、ハチミツ、グラニュー糖、ブドウ糖、果糖、転化糖などがあげられる。
イソマルチュロースは、ブドウ糖と果糖が１分子ずつα−１，６結合した二糖類で、ショ糖の構造異性体であり、６‐Ｏ‐（α‐Ｄ‐Ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）‐Ｄ‐ｆｒｕｃｔｏｓｅあるいはイソマルツロース、パラチノース、ともいう。分子量342.297、Cas. No. 13718-94-0で、甘味料などに用いられている。イソマルチュロースは蜂蜜やサトウキビなどに非常に少量含まれている。
【００６２】
また、スクロースにプロタミノバクター・ルブラム（Protaminobacter rubrum）起源の α-グルコシルトランスフェラーゼなどを作用させて、α−１，２結合をα−１，６結合に転移させて、イソマルチュロースを製造することもできる。イソマルチュロースの甘味はスクロースに似ているが、甘味度はスクロースの約半分である。経口的に摂取されたイソマルチュロースは、消化管内でイソマルターゼによって分解を受け、ショ糖と同様にグルコースとフルクトースに消化されて吸収される（合田敏尚ら、日本栄養・食糧学会誌, Vol. 36(3): 169-173, 1983）。他にイソマルターゼで消化を受けるイソマルトース、パノース、イソマルトトリオースなどは、イソマルチュロースの消化と競合するため、イソマルチュロースの摂取によって消化吸収が抑制されると言われている（日本栄養・食糧学会誌、36(3)、pp.169-173(1983)）。イソマルチュロースのカロリーは4kcal/gである。本発明において、イソマルチュロースは、パラチノースシロップ、還元パラチノースあるいはパラチノース水飴などを含む。パラチノース水飴は、イソマルチュロースの脱水縮合によって生じる四糖、六糖、八糖などのオリゴ糖を主成分とする水飴状の液状物である。
【００６３】
イソマルチュロースについては、イソマルチュロース等を含有する低グリセミック食品組成物を悪性腫瘍疾患の治療・予防に用いることが知られている（特表2009-530326号公報）。
【００６４】
イソマルチュロースの配合量は、他の成分（乳タンパク質加水分解物、発酵乳タンパク質、オレイン酸を含有する油脂、乳リン脂質、大豆レシチンなど）の配合量、摂取対象者の病態、症状、年齢、体重、用途などにより適宜調整することができる。具体的には、イソマルチュロースの配合量として、栄養組成物100 mL当たり4〜15g好ましくは5〜7 gを例示することができるが、これらの範囲に限定されない(特表2009-530326号公報)。
【００６５】
本発明の栄養組成物は、適当にタンパク質、脂質、糖質を加えることにより、その熱量を調節することができる。本発明の栄養組成物の熱量は、栄養組成物100mlあたり50〜150 kcal、好ましくは、80〜120 kcalを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００６６】
また、本発明の栄養組成物における、タンパク質、脂質および糖質の栄養組成物全体に対するエネルギー比率は、第六次改定日本人の栄養所要量にほぼ準ずる。具体的に、タンパク質15〜25%、脂質20〜30%、糖質45〜65 %を例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００６７】
本発明の栄養組成物は、食物繊維を含むこともできる。食物繊維は、ヒトの消化酵素によって水解されない食物中の物質を指し、水に対する親和性から、水溶性食物繊維および不溶性食物繊維に分類される。水溶性食物繊維として、難消化性オリゴ糖のラクツロース、ラクチトール、あるいはラフィノースなどを用いることができる。難消化性オリゴ糖の生理機能としては、未消化物のまま大腸に到達し、腸内ビフィズス菌の活性化および増殖に寄与し、腸内環境の改善すなわち整腸効果を有することが知られている。
【００６８】
さらに、水溶性食物繊維の候補として、高分子水溶性食物繊維では、大豆増粘多糖類、こんにゃくグルコマンナン、アルギン酸、低分子アルギン酸、サイリウム、アラビアガム、海藻多糖類（セルロース、リグニン様物質、寒天、カラギーナン、アルギン酸、フコダイン、ラミナリン）、微生物ガム（ウエランガム、カードラン、キサンタンガム、ジェランガム、デキストラン、プルラン、ラムザンガム）、その他のガム（種子由来のローカストビーンガム、タマリンドガム、タラガム、樹液由来のカラヤガム、トラガントガム）など、低分子水溶性食物繊維のポリデキストロース、難消化性デキストリン、パインファイバー、マルチトールなどを用いることができる。
【００６９】
不溶性食物繊維は、大腸での不消化物のカサを増やし、通過時間を短縮する。その結果排便回数が増し、便量の増加をもたらす。不溶性食物繊維の候補として、セルロース、ヘミセルロース、リグニン、キチン、キトサン、大豆ふすま、小麦ふすま、大麦ふすま、パインファイバー、コーンファイバー、ビートファイバー、オート麦ふすま、ライ麦ふすま、ハトムギふすま、米糠、キビ、アワ、ヒエ、モロコシなどの雑穀ふすま、菽穀（マメ科）ふすま、ソバなどの擬穀ふすま、ゴマふすま、おからなどがあげられる。オート麦ふすま、ライ麦ふすま、ハトムギふすま、米糠、キビ、アワ、ヒエ、モロコシなどの雑穀ふすま、菽穀（マメ科）ふすま、ソバなどの擬穀ふすま、ゴマふすま、おからなどがあげられる。
【００７０】
本発明の栄養組成物は、前記のタンパク質、脂質、糖質、食物繊維の他に、水、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類、乳化剤、増粘剤、安定化剤などを使用することができる。タンパク質としては、例えば全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、ホエイ粉、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質加水分解物、α―カゼイン、β―カゼイン、κ−カゼイン、β―ラクトグロブリン、α―ラクトアルブミン、ラクトフェリン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質などの動植物性タンパク質、これらの分解物；バター、ホエイ（乳清）ミネラル、クリーム、ホエイ、非タンパク態窒素、シアル酸、リン脂質、乳糖などの各種乳由来成分などが挙げられる。カゼインホスホペプチド、リジンなどのペプチドやアミノ酸を含んでいてもよい。糖質としては、例えば、糖類、加工澱粉（テキストリンのほか、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテルなど）、食物繊維などが挙げられる。脂質としては、例えば、ラード、魚油など、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油などの動物性油脂；パーム油、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油などの植物性油脂などが挙げられる。ビタミン類としては、例えば、ビタミンA、カロチン類、ビタミンB群、ビタミンC、ビタミンD群、ビタミンE、ビタミンK群、ビタミンP、ビタミンQ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸などが挙げられ、ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレンなどが挙げられる。有機酸としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、エリソルビン酸などが挙げられる。また、便臭低減効果のある素材（例えば、シャンピニオンエキスを5 mg〜500 mg(0.005%〜0.5%)）、カロチノイド製剤（例えば、α-カロチン、 β-カロチン、リコピン、ルテインなどを含む製剤を10μg〜200μg (0.00001%〜0.0002%)）、抗酸化剤（カテキン、ポリフェノールなど）を含ませることもできる。これらの成分は、２種以上を組み合わせて使用することができ、合成品および／またはこれらを多く含む食品を用いてもよい。食品の形態としては、固体、液体、ゲル状などいずれの形態であってもかまわない。
【００７１】
本発明の栄養組成物の製造は、当業界において公知の方法で実施できる。前記原材料を一部または全てを調合した後に、必要に応じて均質化を行う。均質化とは、調合した各成分を十分混合することにより均質にし、また、脂肪球や他成分の粗大粒子を機械的に微細化して脂肪などの浮上・凝集を防止するとともに、栄養組成物を均一な乳化状態にすることをいう。
【００７２】
本発明の栄養組成物の製造においては加熱処理または加熱殺菌を行う。加熱殺菌条件は、一般的な食品の殺菌条件を用いることができ、慣用の装置を用いて加熱殺菌を行うことができる。例えば、62〜65℃×30分、72℃以上×15秒以上、72℃以上×15分以上若しくは120〜150℃×1〜5秒の殺菌、または121〜124℃×5〜20分、105〜140℃の滅菌、レトルト（加圧加熱）殺菌、高圧蒸気滅菌などを使用することができるが、これらの例に限定されない。加熱殺菌は、好ましくは加圧下で行うことができる。
【００７３】
また、液状の栄養組成物を予め加熱滅菌した後、無菌的に容器に充填する方法（例えば、UHT滅菌法とアセプティック包装法を併用した方法）、液状の栄養組成物を容器に充填した後、容器とともに加熱滅菌する方法（例えば、オートクレーブ法）、缶容器や流動食や経口・経管栄養に用いる各種容器（いわゆるソフトバッグ、栄養バックなど）に充填しレトルト殺菌（例えば115〜145℃で5〜10秒）を行う方法、缶容器や流動食や経口・経管栄養に用いる各種容器（いわゆるソフトバッグ、栄養バックなど）に充填しレトルト殺菌した後に約140〜145℃で約5〜8秒間加熱殺菌後、冷却し、無菌充填を行う方法を例示することができるが、これらの例に限定されない。
【００７４】
加熱処理または加熱殺菌によって、原料の発酵乳に由来するスターター（乳酸菌、ビフィズス菌、またはプロピオニバクテリウム属菌など）は死滅する。
【００７５】
本発明の組成物は、癌の成長を抑制するために用いることができる。本発明の栄養組成物は、例えば流動食や経口・経管栄養、飲料、ゲル状食品などとして、経口・経腸栄養患者や高齢者、乳幼児などの栄養管理に用いることができる。
【００７６】
本発明の栄養組成物の浸透圧は約500〜1000 mOsm/l、例えば約550〜750 mOsm/lの浸透圧を例示することができる。室温で測定する場合、栄養組成物の粘度は、20〜100 cp（1 cp = 1ｍPa・s）、好ましくは25〜60 cp、より好ましくは30〜50 cpを例示することができるが、これらの範囲に限定されない。
また、本発明の栄養組成物のpHは4.6以下、好ましくは3.0〜4.3、より好ましくは3.8〜4.2に調整することができるが、これらの範囲に限定されない。
【００７７】
本発明の栄養組成物が腫瘍患者の腫瘍の成長を阻碍することに有益である。特に、結腸腫瘍患者、結腸固形腫瘍患者、肉腫細胞腫瘍患者、肺癌患者、胸腺腫患者、乳癌患者、咽頭癌患者、喉頭癌患者、胃癌患者、食道癌患者、肝細胞癌患者、胆管癌患者、胆嚢癌患者、膵臓癌患者、陰茎癌患者、腎盂および尿管癌患者、腎細胞癌患者、精巣腫瘍患者、前立腺癌患者、膀胱癌患者、外陰癌患者、子宮頸癌患者、子宮内膜癌患者、子宮肉腫患者、腟癌患者、卵巣癌患者、卵巣胚細胞腫瘍患者、もしくは脳腫瘍患者等の腫瘍の成長を阻碍することに有益である。
【００７８】
腫瘍細胞株を移植したマウスを用いたin vivo試験において、本発明の栄養組成物は腫瘍の増殖および腫瘍の周辺組織への浸潤を抑制することが確認された。腫瘍が周辺組織に浸潤すると、腫瘍の転移が起こりやすくなる。また、内臓器官や末梢神経に腫瘍が浸潤すると疼痛が発生する。従って、本発明の組成物は、腫瘍の成長、腫瘍の浸潤・転移または腫瘍による疼痛発生を抑制することができる。
【００７９】
本発明の栄養組成物の医薬品または飲食品における一日当たりの摂取量は摂取対象者の病態、年齢、症状、体重、用途、および本発明の栄養組成物が栄養の唯一のものであるかなどによって異なるため、特に限定されない。具体的には、成人の場合一日当たり400〜1600ml、好ましくは600〜1600ml、より好ましくは800〜1200mlの摂取量を例示することができる。成人の場合、例えば一日当たり3000mlまで摂取してもよい。また、摂取量は、摂取対象者の担当医により決定することもできる。
また、本発明の栄養組成物を従来知られる抗腫瘍作用を有する医薬品や食品と併用して用いてもよい。
【００８０】
本発明の栄養組成物は医薬品または飲食品いずれの形態でも利用することができる。例えば、本発明の栄養組成物を医薬品として直接投与することにより、または特定保健用食品などの特別用途食品、栄養機能食品、栄養補助食品、流動食やサプリメントとして直接摂取ことにより、腸内菌叢を改善することが期待される。また、液状、ペースト状、固形、粉末などの形態を問わず、各種食品（牛乳、清涼飲料、発酵乳、ヨーグルト、チーズ、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、流動食、特別用途食品、病者用食品、栄養食品、冷凍食品、加工食品その他の市販食品など）に添加し、これを摂取してもよい。また、栄養組成物の使用形態が粉末の場合、例えば噴霧乾燥、凍結乾燥などの手段を用いることにより製造することができる。
【００８１】
本発明の栄養組成物を医薬品またはサプリメントとして使用する場合には、種々の形態で投与することができる。その形態として、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤などによる経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主剤に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる、既知の製剤化のための補助剤を用いて製剤化することができる。また、適当量のカルシウムを含んでいてもよい。さらに適当量のビタミン、ミネラル、有機酸、糖類、アミノ酸、ペプチド類などを添加してもよい。
実施例
【００８２】
以下、本発明に関して実施例を挙げて説明するが、本発明は、これにより限定されるものではない。
材料および方法
【００８３】
一般的に使われた２つ癌細胞モデル、マウス肉腫細胞（S180）およびマウスの結腸固形腫瘍細胞(C26)が、腹水腫瘍モデルのS-180および充実性腫瘍モデルのC-26を構築する。半分が雄、半分が雌となるように、マウスはそれぞれランダムに２つのグループに分ける。１４日間不断給餌で本発明の栄養組成物を与えるグループを「本発明の試験組成」とコントロール餌を与えるAIN-93Mとにする。S-180腫瘍を持ったマウスの生存時間を主要指標として記録し、C-26腫瘍を持ったマウスの餌摂取量、体重、腫瘍の重さ、腫瘍の容積を記録した。血清のTNF-aおよびIL-6のレベルが計られ、腫瘍の組織病理も行った。
１．食事試験
【００８４】
本発明の試験組成（黄色い細かい粉末）が表１および表３にしめされた乾燥された流動食の組成物である。液体オレイン酸39重量%、エイコサペンタエン酸1.2重量%、ドコサヘキサエン酸0.8重量%で全体の脂肪酸組成を形成し、AIN- 93M（白い細かい粉末）がオリエンタル酵母工業（日本）製である。AIN- 93M標準に精製された餌で、ラットやマウスを用いた栄養実験によく使用され、その成分が1993年に米国ナショナル栄養研究所（United States National Institute of Nutrition）によって発表された（表４および表５)。
【００８５】
【表３】
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【００８６】
【表４】
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【００８７】
【表５】
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【００８８】
２．移植された腫瘍細胞モデル
S-180細胞は、上海市腫瘍研究所から提供してもらった。
C-26細胞は、上海市腫瘍研究所から提供してもらった。
３．動物
【００８９】
品種: BALB/c mice
出所: 上海Shanghai SIPPR-BK Laboratory Animal Co.Ltd
性別: 半分が雄および半分が雌
年齢: ６-７週間
体重: 18-20ｇ
番号： 76匹(36匹マウスが S-180の実験用、40匹マウスがC26の実験用)
動物製造番号: SCXK (Shanghai) 2008-0016
動物使用許可番号: SYXK (Shanghai) 2008-0027
保管条件: SPF 動物実験ハウス、室温24+1℃, 湿度40~70%、12/12 時間ひると夜のサイクル。
４．方法
【００９０】
接種の１週間前にS-180細胞株およびC26細胞株を回収。ネズミ腫瘍モデル作成の為にRALB/cハツカネズミを使用。ハツカネズミをつかんで皮膚を消毒、S-180細胞をハツカネズミの腹腔内に接種又はハツカネズミの右後部腋窩近くにC26細胞を皮下接種する。  接種日に動物をAIN-93Mグループと試験組成物グループとに無作為に分け、別々に檻に入れた。
【００９１】
３６匹のハツカネズミ（各グループに１８匹づつ）をS-180腹水症腫瘍研究のために使用した。各々約40gの規定食で満たした２つの特製食餌供給器が置かれた各檻で６匹のハツカネズミを飼育した。ハツカネズミには自由に食べ物を与えた。食物摂取量を１日おきに計量、体重を３日ごとに記録、そして死亡したハツカネズミの数を記録した。
【００９２】
４０匹のハツカネズミ(各グループに２０匹づつ)をC26固形腫瘍研究のために使用した。  各々約40gの規定食で満たした２つの特製食餌供給器が置かれた各檻で５匹のハツカネズミを飼育した。ハツカネズミには自由に食べ物を与えた。  腫瘍容量と食物摂取量を１日おきに計量、体重は3日毎に記録した。接種後１４日、ハツカネズミを頸部脱臼によって犠牲にし、眼の血液を採集した。  腫瘍は解剖して取り出し、腫瘍容量を計測、腫瘍重量も計測し、且つ腫瘍組織を組織病理学検査用に10％ホルマリン内に入れて置いた。
【００９３】
腫瘍容量計算式： V(cm3) ＝ a*b2/2   (a＝長径 (cm)、ｂ＝短径 (cm) )
腫瘍成長抑止率 (％) ＝ (対照実験グループの平均腫瘍容積−試験組成物グループの平均腫瘍容積)×100％／対照実験グループの平均腫瘍容積
又は、
腫瘍成長抑止率 (％) ＝ (対照実験グループの平均腫瘍重量−試験組成物グループの平均腫瘍重量)×100％／対照実験グループの平均腫瘍重量
【００９４】
薬効基準： P<0.05という状況で、２グループの平均腫瘍重量（又は腫瘍容量）の差が統計的に有意であるとする。
５．統計分析  
【００９５】
統計ソフトSPSSバージョン11.5を使ってデータを解析した。S-180腫瘍の研究においては、２グループの平均生存時間と累積生存率を生存解析対数順位検定と比較した。C26腫瘍の研究においては、２グループの平均腫瘍重量と平均腫瘍容積をスチューデントのティ検定を使って比較した。P<0.05で統計的に有意と見なした。
III  結果
１．ネズミのS-180腹水症腫瘍研究
【００９６】
試験組成物グループのハツカネズミの平均生存は13.0±0.3日（平均±SE）であり、AIN-93Mグループのハツカネズミの平均生存は12.4±0.4日であった。２つのグループ間には、平均生存日数および累積生存率のいずれに関しても有意の差は無かった（生存解析の対数順位検定に於いてP>0.05）（表６、表７）。有意の差は認められなかったけれども、生存曲線は次のことを明らかにした。即ち、試験組成物グループのハツカネズミの生存率は対照実験グループに比べて高く、二つの生存曲線は如何なる時点でも交わることは無かった（Fig.1 、Fig.2）。このことは試験組成物グループのハツカネズミ生存時間は対照実験グループのものよりは長い傾向にあったことを意味している。
２．ネズミのC26固形腫瘍研究
２．１  食物摂取と体重
【００９７】
全実験中、試験組成物グループの腫瘍持ちハツカネズミの平均食物摂取量は、一匹のハツカネズミ1日当たり2.60±0.49グラム、対照試験グループの腫瘍持ちハツカネズミの平均食物摂取量は、一匹のハツカネズミ1日当たり3.37±0.45グラムであった (表８)。２つのグループ間には食物摂取に関し有意の差は無かった（P>0.05）（Fig. 2）。体重変化に於いても２つのグループ間には有意の差は無かった（P>0.05）（Fig.3）。
２．２  腫瘍重量および腫瘍容量
【００９８】
表８に示したように、試験組成物グループのハツカネズミの平均腫瘍重量は1.36 ± 0.54グラム、対照試験グループの平均腫瘍重量は1.83±0.89グラムであって、有意の差を呈した（P<0.05）。腫瘍重量によって算出した試験組成物グループの腫瘍成長抑止率は25.59％であった。
【００９９】
同様に、試験組成物グループのハツカネズミの平均腫瘍容量は1.868±0.84グラム、対照試験グループの平均腫瘍容量は2.582±1.055グラムであった。４日、７日、11日に測定した平均腫瘍容積は全て試験組成物グループにおいて対照試験グループよりも有意に大きかった（P<0.05）。腫瘍容量によって算出した試験組成物グループの腫瘍成長抑止率は27.65％であった（表９、Fig.4、Fig.5）。
２．３  腫瘍病状
【０１００】
腫瘍の組織解剖時、試験組成物グループにおける腫瘍の保全性はより良好で、明確な縁返を持っており、剥離がより簡単であることが確認された。これとは対照的に、ALN-93Mグループにおける腫瘍は周囲の組織に侵入してしまっているように見え、剥離が困難であった。
【０１０１】
病理組織学的試験は以下のことを明らかにした。即ち、試験組成物グループにおける腫瘍の輪郭は滑らかであったが、癌細胞および出血性病変が縁辺領域に分布し、中央領域には濃く着色した細胞が密に成長しており（図６A）、これらの癌細胞には濃く着色した核と共に様々な大きさと形があった（図６B）。  AIN-93M対照試験グループにおける腫瘍の輪郭は不明瞭であり、出血が広い領域で見られ（図６C）、癌細胞は拡散され、壊死が明白で、出血に取り囲まれていた（図６D）。
【０１０２】
病理学試験は以下のことを指摘した。即ち、試験組成物グループにおける悪性の腫瘍は、対照試験グループにおけるものよりも浸潤性が少なかった。このことは、試験組成物がある程度の抑止効果を腫瘍に対して及ぼしていることを示唆している。
【０１０３】
A．試験組成物グループ：  試験組成物グループにおける腫瘍の輪郭はすっきりと滑らかであり、癌細胞は散在し、均質なエオシン様物質（即ち出血）が見受けられる。濃く着色した癌細胞が中心領域に見受けられる。
【０１０４】
B．試験組成物グループ：  癌細胞は中心領域で密に成長、細胞は様々な大きさと形状であり、均質なエオシン様物質（即ち出血）が幾つかの狭い領域で見受けられる。（右上、高倍率：様々な形状と大きさの癌細胞、核は濃く着色していた。HEｘ400）
【０１０５】
C．対照試験グループ：  腫瘍縁端部は一様ではなく、均質なエオシン様物質(即ち出血)の広い領域がある。
【０１０６】
D．対照試験グループ：  癌細胞は拡散し、壊死病変が視認でき、均質なエオシン様物質(即ち出血)に囲まれている。
【０１０７】
【表６】
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【０１０８】
【表７】
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【０１０９】
【表８】
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【０１１０】
【表９】
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【０１１１】
通常に用いられているマウスがんモデルとして、腹水腫瘍モデルのS-180および充実性腫瘍モデルのC-26を用いて本発明の試験組成が腫瘍の成長を阻止することができるか否かを評価する。その結果、本発明の試験組においてS-180腫瘍を持ったマウスの平均生存時間がコントロールマウスに比べ、顕著な差を示さなかった（P>O. 05）。しかし、本発明の試験組では、C-26マウス腫瘍モデルにおいて腫瘍の成長を阻止することができた。
【産業上の利用可能性】
【０１１２】
本発明の栄養組成物は、結腸固形腫瘍の成長を阻止したり、悪性腫瘍の浸潤を減らしたりすることで結腸固形腫瘍患者にとって有益である、
【国際調査報告】
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