(57)【要約】  本発明は、構造式IまたはIIで表されるプロトパナキサジオール誘導体、その製造方法及び応用を提供する。本発明は、プロトパナキサジオールの構造を修飾して、ユニークな構造を持つ複数の新規化合物を得た。生体内の薬理実験によって、これらの化合物は、より強い抗うつ活性を有し、うつ型の精神疾患を予防または治療するための薬物の活性成分として用いられ、広い用途及び開発の見通しを有することが認められた。  【化１】2016508489.tif 000015【選択図】図１
2016508489.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造が下記の構造式IまたはII： 
【化１】
2016508489.tif 000012
(式中、R1は-OH、=NOHまたは-NH2であり、R2は-OH、=NOHまたは-NH2であり、且つR1及びR2が同時に-OHであることはない。) 
で表されることを特徴とするプロトパナキサジオール誘導体。
【請求項２】
R1が-OHである場合、R2は=NOHまたは-NH2であり、
R2が-OHである場合、R1は=NOHまたは-NH2であることを特徴とする、
請求項1に記載のプロトパナキサジオール誘導体。
【請求項３】
R1及びR2が同時に-OHであるか、または同時に-OHであることはなく、R1及びR2が同時に=NOHまたは-NH2であることが好ましく、或いは、R1が-OHであり、R2が=NOHまたは-NH2であることが好ましいことを特徴とする、
請求項1に記載のプロトパナキサジオール誘導体。
【請求項４】
1)プロトパナキサジオールまたはダンマル-20S-24(R、S)-エポキシ-3β,12β,25-トリオールを酸化反応させ、それぞれ一酸化誘導体または二酸化誘導体を得るステップと、
2)ステップ1)に得られた一酸化誘導体または二酸化誘導体とヒドロキシルアミンとを付加反応させること、または更に還元反応させることにより式(I)または(II)で表される化合物を得るステップと、
を含む製造方法であって、前記二酸化誘導体は、
【化２】
2016508489.tif 000013
であり、前記一酸化誘導体は
【化３】
2016508489.tif 000014
であることを特徴とする、
請求項1-3のいずれか一項に記載のプロトパナキサジオール誘導体の製造方法。
【請求項５】
ステップ1)における前記酸化反応に使用された酸化剤は、二酸化マンガン、過マンガン酸カリウム、Dess-Martin試薬（デス−マーチン試薬）、PCC、PDC、及びJones試薬（ジョーンズ試薬）からなる群から選ばれた1種類または数種類であることを特徴とする、請求項4に記載の方法。
【請求項６】
ステップ2)における前記還元反応に使用された還元剤は、NaBH4、LiAlH4、Na/n-プロピルアルコール、及びZn/AcOH試薬からなる群から選ばれた1種類または数種類であることを特徴とする、請求項4に記載の方法。
【請求項７】
請求項1-3のいずれか一項に記載の構造式IまたはIIで表されるプロトパナキサジオール誘導体を含むことを特徴とする医薬製剤。
【請求項８】
前記医薬製剤が経口剤または注射剤であり、前記経口剤はカプセル剤、錠剤、丸剤または顆粒剤であることが好ましいことを特徴とする、請求項7に記載の医薬製剤。
【請求項９】
請求項1-3のいずれか一項に記載のプロトパナキサジオール誘導体、または請求項7若しくは8に記載の医薬製剤の、うつ型の精神疾患を予防または治療するための薬物の製造における応用。
【請求項１０】
前記うつ型の精神疾患は、抑うつエピソード、並びに再発性うつ病性障害、双極性気分障害及び持続性気分障害を含むことを特徴とする、請求項9に記載の応用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パナキサジオール系化合物、具体的には、プロトパナキサジオール誘導体、その製造方法及びその医薬分野における応用に関し、医薬技術分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
抑鬱症は、気分の抑鬱を主要な表現とする疾病であり、精神疾患における情感の精神障害の範囲に属する。抑鬱症が発作する表現は、「3低」、つまり、気分が落ち込むこと、考えが遅緩であること、意気消沈することに概括することができる。その核心の症状は、気分が落ち込むことであり、心理の症状は、焦慮、自責の念、罪悪感、妄想または幻覚、注意力及び記憶力の低下、自殺傾向などであり、身体の症状は、睡眠障害、食欲減退、体重減少、性欲減退、精神疲労及び脱力感などである。抑鬱症は人の健康を脅かす通常性疾患及び多発性疾患であり、中国では、情動精神病の罹病率が0.76%である。抑鬱症の罹病率が非常に高い一方、目下、その罹病の原因がまだ分からない。伝統的観点によれば、抑鬱症の病因は、5-ヒドロキシトリプタミン、アセチルコリン、並びにノルエピネフリン及びアドレナリンなどのカテコールアミン系を含む脳内のモノアミン系神経伝達物質の異常に関連する。
【０００３】
20世紀の50年代に、初めて開発された抗うつ薬はモノアミン酸化酵素阻害剤であるが、重大な毒性副反応を有するために、三環系抗うつ薬に代えられ、後者は50年代から 80年代にかけて世界範囲における抑鬱症を治療するための第一線薬物である。近年、選択的5-ヒドロキシトリプタミン再取り込み阻害剤(SSRI)の発展が注目され、それは薬物動態学的及び薬力学的特性が優れ、並びに治療効果が良好で、毒性及び副作用が小さく、服用が簡単であるため、発展のスピードが速い。これらの薬物はほとんど自身の特徴のため作用されているが、中枢神経系及び自律神経系において、ある程度の副作用を有する上で、胃腸管の反応も伴っている。
【０００４】
20(S)-プロトパナキサジオールはジオール系ギンセノシド（protopanaxadiol-type ginsenoside）の最も重要なアグリコンの一つであり、ZL200610027507.1には、抗うつにおける20(S)-プロトパナキサジオールの応用が開示された。しかし、その効果はまだ改善の余地がある。薬理実験の結果としてより強い抗うつ薬理活性を示し、ユニークな構造を有する改良型プロトパナキサジオール誘導体が開発されると、うつ精神疾患を予防または治療するための薬物の製造において、広い開発及び応用の見通しを有するようになる。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の目的は、ユニークな構造を有する改良型プロトパナキサジオール誘導体を提供することである。
【０００６】
本発明のもう一つの目的は、プロトパナキサジオール誘導体の製造方法を提供することである。
【０００７】
本発明のもう一つの目的は、うつ精神疾患を予防または治療するための薬物の製造におけるプロトパナキサジオール誘導体の応用を提供することである。
【０００８】
本発明の目的を達成するために、本発明は下記の構造式IまたはIIで表されるプロトパナキサジオール誘導体を提供する。
【０００９】
【化１】
2016508489.tif 000003
【００１０】
（式中、R1は-OH、=NOHまたは-NH2であり、R2は-OH、=NOHまたは-NH2であり、且つR1及びR2が同時に-OHであることはない。）
また、R1が-OHである場合、R2は=NOHまたは-NH2であり、R2が-OHである場合、R1は=NOHまたは-NH2であることが好ましい。
【００１１】
また、R1及びR2が同時に=NOHまたは-NH2であるか、またはR1及びR2が同時に=NOHまたは-NH2であることはないことが好ましい。
【００１２】
また、R1及びR2が同時に=NOHまたは-NH2であることが最も好ましい。
【００１３】
また、R1が-OHであり、R2が=NOHまたは-NH2であることが最も好ましい。
【００１４】
本発明に記載の構造式 IまたはII のプロトパナキサジオール誘導体は、下記のステップを含む方法により製造される。具体的には、
1)プロトパナキサジオールまたはダンマラ-20S-24(R、S)-エポキシ-3β,12β,25-トリオールを酸化反応させ、それぞれ一酸化誘導体または二酸化誘導体を得るステップと、
2)ステップ1)に得られた一酸化誘導体または二酸化誘導体と塩酸ヒドロキシルアミンとを付加反応させること、または更に還元反応させることにより、式(I)または(II)で表される化合物を得るステップとを含む。
【００１５】
前記二酸化誘導体は、
【００１６】
【化２】
2016508489.tif 000004
【００１７】
であり、前記の一酸化誘導体は、
【００１８】
【化３】
2016508489.tif 000005
【００１９】
である。
【００２０】
ステップ1)に記載の前記の酸化反応に使用された酸化剤は、二酸化マンガン、過マンガン酸カリウム、Dess-Martin試薬（デス−マーチン試薬）、PCC（クロロクロム酸ピリジニウム）、PDC（クロロジクロム酸ピリジニウム）、Jones試薬（ジョーンズ試薬）からなる群から選ばれた1種類または数種類である。
【００２１】
ステップ2)における前記の還元反応に使用された還元剤は、NaBH4、LiAlH4、Na/n-プロピルアルコール、Zn/AcOH 試薬からなる群から選ばれた1種類または数種類である。
【００２２】
実験により、本発明に記載の構造式 Iまたは IIのプロトパナキサジオール誘導体は、プロトパナキサジオールより強い抗うつ活性を有し、抗うつ薬物の活性成分として用いられることができると認められた。
【００２３】
本発明は、うつ型の精神疾患を予防または治療する薬物の製造における化合物 Iまたは化合物IIの構造を有するプロトパナキサジオール誘導体の応用に関する。
【００２４】
前記のうつ型の精神疾患には、抑うつエピソード、並びに再発性うつ病性障害、双極性気分障害及び持続性気分障害が含まれる。
【００２５】
前記のうつ型の精神疾患は、病症発作によって、軽度、中等度及び重度という３つの類型に分けられる。
【００２６】
前記の構造式 Iまたは IIのプロトパナキサジオール誘導体から選ばれた1種類または数種類を活性成分として、薬学分野の一般的な方法に従って、1種類または数種類の薬学的に許可される担体とともに医薬製剤を製造する。
【００２７】
前記の医薬製剤は当該分野のいずれかの製剤、例えば、経口剤または注射剤であってもよい。
【００２８】
前記の経口剤は、カプセル剤、錠剤、丸剤または顆粒剤であってもよい。カプセル剤であることが好ましい。
【００２９】
使用量に基づいて前記の医薬製剤における活性成分としてのプロトパナキサジオール誘導体の含有量を確定することができる。
【００３０】
前記の担体には、薬学分野における一般的な安定剤、充填剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、吸収促進剤、界面活性剤、懸濁剤、湿潤剤、溶媒または矯味薬などが含まれる。
【００３１】
前記の安定剤は、メチルパラベン、エチルパラベンまたはプロピルパラベンなどのp-ヒドロキシ安息香酸エステル；クロロブタノール、ベンジルアルコールまたはフェニルエチルアルコールなどのアルコール系；塩化ベンザルコニウム；フェノールまたはクレゾールなどのフェノール系；チメロサール；無水酢酸；またはソルビン酸などから選ばれる。
【００３２】
前記の充填剤は、デンプン、ショ糖、乳糖、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、結晶性セルロースまたはブドウ糖などから選ばれる。
【００３３】
前記の結合剤は、セルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどから選ばれる。
【００３４】
前記の潤滑剤は、ステアリン酸、ポリエチレングリコール、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、微粉シリカゲル、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどから選ばれる。
【００３５】
前記の崩壊剤は、結晶性セルロース、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムなどから選ばれる。
【００３６】
前記の界面活性剤は、ドデカンスルホン酸ナトリウム、ステアリン酸、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、脂肪酸ソルビタンまたはポリソルベート（トウェイン、TWEEN）などから選ばれる。
【００３７】
前記の懸濁剤は、微粉シリカゲル、ミツロウ、セルロースまたは固体ポリエチレングリコールなどから選ばれる。
【００３８】
前記の湿潤剤は、グリセリン、トウェイン−80、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油またはレシチンなどから選ばれる。
【００３９】
前記の溶媒は、エタノール、液体ポリエチレングリコール、イソプロピルアルコール、トウェイン−80、グリセリン、プロピレングリコールまたは植物油から選ばれ、前記の植物油は、大豆油、ヒマシ油、落花生油またはブレンド油などから選ばれる。
【００４０】
前記の矯味薬は、アスパルテーム、スクラロース、エッセンス、クエン酸またはサッカリンナトリウムなどから選ばれる。
【００４１】
また、本発明はまた、うつ型の精神疾患を予防または治療するための薬物の製造における上記の構造式IまたはIIを有するプロトパナキサジオール誘導体を含む医薬製剤の応用に関する。
【００４２】
前記のうつ型の精神疾患は、抑うつエピソード、並びに再発性うつ病性障害、双極性気分障害及び持続性気分障害を含む。
【００４３】
前記のうつ型の精神疾患は、病症発作によって、軽度、中等度及び重度という３つの類型に分けられる。
【００４４】
本発明では、薬理実験の研究に示されるように、構造式IまたはIIのプロトパナキサジオール誘導体は、抑鬱症クラシックモデルとしての「マウス尾懸垂試験」において、マウスの尾が懸垂される無動時間を明らかに短縮でき、「マウス強制水泳モデル試験」において、マウスの水泳無動時間を明らかに短縮でき、CUMS試験において、ラットの糖水摂取量を明らかに向上させることがわかった。これにより、本発明に記載のプロトパナキサジオール誘導体は、顕著な抗うつ活性を持ち、うつ型の精神系疾患の治療に潜在的な薬用価値を有することが示された。
【００４５】
従って、本発明において、プロトパナキサジオールの構造を修飾することにより、ユニークな構造を有する複数の新規化合物が得られる。生体内の薬理実験によって、これらの化合物は、陽性対照薬物に対して低い薬物投与量の場合に、より強い抗うつ活性を示し、うつ型の精神疾患を予防または治療するための薬物の活性成分として用いられ、広い用途及び開発の見通しを有すると認められた。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１−８】図1-8はそれぞれ、本発明の実験例1のプロトパナキサジオール誘導体がマウス強制水泳試験に対する影響を示す。ここで、1はブランク溶媒グループであり、2はベンラファキシン（Venlafaxine） グループ（32mg/kg）であり、3はプロトパナキサジオールグループ（0.75mg/kg）であり、4は実施例1-8（0.15mg/kg）であり、5は実施例1-8（0.375mg/kg）であり、6は実施例1-8（0.75mg/kg）であり、7は実施例1-8（1.5mg/kg）であり、8は実施例1-8（3mg/kg）である。ブランク溶媒グループと比べて、*P<0.05、**P<0.01。
【図９−１６】図9-16はそれぞれ、本発明の実験例2のプロトパナキサジオール誘導体がマウス尾懸垂試験に対する影響を示す。ここで、1はブランク溶媒グループであり、2はベンラファキシングループ（32mg/kg）であり、3はプロトパナキサジオールグループ（0.75mg/kg）であり、4は実施例1-8（0.15mg/kg）であり、5は実施例1-8（0.375mg/kg）であり、6は実施例1-8（0.75mg/kg）であり、7は実施例1-8（1.5mg/kg）であり、8は実施例1-8（3mg/kg）である。ブランク溶媒グループと比べて、*P<0.05、**P<0.01。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
以下、実施例は本発明を説明するために挙げられたのであり、本発明はそれらに限定されない。
【００４８】
本発明に使用された材料はいずれも市販の一般的な材料であり、説明されていない操作方法も当該分野の一般的な方法である。
【００４９】
実施例1
構造式が式 (I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が=NOHである）の製造
20(S)-プロトパナキサジオール（上海中薬創新研究センター）10gを精密に称量し無水ジクロロメタン250mlに溶解させて、撹拌しながらPDC（クロロジクロム酸ピリジニウム）20gを加えた。室温で24時間攪拌して反応が終了した後、珪藻土で反応液をろ過し、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤として酢酸エチルと石油エーテルとを1:10-1:5（体積比）用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物III 6.4gを得た（純度95%）。
【００５０】
【化４】
2016508489.tif 000006
【００５１】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(III)化合物の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００５２】
ESI-MS m/z:457.4(M+H)-   1H NMR (300 MHz, CDC13)：δ 0.85(s, 3H)、0.90(s, 3 H)、0.97(s, 3 H)、0.98(s, 3 H)、1.10(s, 3 H)、1.27(s, 3 H)、1.28(s,3 H)、l.30-2.61(m, 24H)、2.85-2.95(m, 1H)、5.10-5.14(m, 1H)。
【００５３】
化合物III 5gを精密に称量し無水メタノール100mlに溶解させて、撹拌しながらトリエチルアミン2.77g、及び塩酸ヒドロキシルアミン1.9gを加えた。室温で24時間攪拌すると固体が析出し、反応が終了した後、濾紙で反応液をろ過し、乾燥し、化合物(I)（R1、R2が=NOHである）4.8gを得た（純度 95%）。
【００５４】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1、R2が=NOHである）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００５５】
ESI-MS m/z:487.4(M+H)- 1H NMR (300 MHz, CDC13)：δ 0.85(s, 3H)、0.90(s, 3H)、0.97(s, 3 H)、0.98(s, 3H)、1.10(s, 3H)、1.27(s, 3H)、1.28(s: 3H)、1.30-2.61(m,23H)、2.85-2.95(m, 2H)、5.10-5.14(m, 1H)。
【００５６】
実施例2
構造式が式 (I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が-NH2である）の製造
実施例 1の化合物I（R1、R2が=NOHである）3gを精密に称量し無水テトラヒドロフラン50mlに溶解させて、撹拌しながら水素化リチウムアルミニウム0.5gを加え、80℃で攪拌して3時間反応させた。TLCに反応終了が示された後、珪藻土で反応液をろ過して、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤としてジクロロメタンとメタノールとを20:1-5:1（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物I（R1、R2が-NH2である）1.2gを得た（純度95%）。
【００５７】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1、R2が-NH2である）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００５８】
ESI-MS m/z:459.3(M+H)- 1H NMR (300MHz、CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,25H)、3.09(m,1H)、3.39(m,1H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００５９】
実施例3
構造式が式(I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1が-OHであり、R2が=NOHである）の製造
20(S)-プロトパナキサジオール（上海中薬創新研究センター）10gを精密に称量し無水ジクロロメタン250mlに溶解させて、撹拌しながらPDC（クロロジクロム酸ピリジニウム）10gを加えた。室温で24時間攪拌して反応が終了した後、珪藻土で反応液をろ過し、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤として酢酸エチルと石油エーテルとを1:10-1:5（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物V 3.4gを得た（純度95%）。
【００６０】
【化５】
2016508489.tif 000007
【００６１】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(V)化合物の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００６２】
ESI-MS m/z:459.4(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、l.30-2.61(m,23H)、2.85-2.95(m,2H)、3.59(m,1H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００６３】
化合物V 3gを精密に称量し無水メタノール100mlに溶解させて、撹拌しながらトリエチルアミン0.77g、塩酸ヒドロキシルアミン0.5gを加えた。混合物を室温で24時間攪拌すると固体が析出し、反応が終了した後、濾紙で反応液をろ過し、乾燥して、化合物(I)（R1が-OHであり、R2が=NOHである）1.8gを得た（純度95%）。
【００６４】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1が-OHであり、R2が=NOHである）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００６５】
ESI-MS m/z:474(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,24H)、2.05-2.10(m,1H)、3.59(m,1H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００６６】
実施例4
構造が式(I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1が-OHであり、R2が-NH2である）の製造
実施例3の化合物I（R1が-OHであり、R2が=NOHである）3gを精密に称量し無水テトラヒドロフラン50mlに溶解させて、攪拌しながら水素化リチウムアルミニウム0.25gを加え、80℃で攪拌して3時間反応させた。TLCに反応終了が示された後、珪藻土で反応液をろ過して、乾燥するまで有機相を濃縮し、溶離剤としてジクロロメタンとメタノールとを20:1-5:1（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物I（R1が-OHであり、R2が-NH2である）1.2gを得た（純度95%）。
【００６７】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1が-OHであり、R2が-NH2である）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００６８】
ESI-MS m/z:460.3(M+H)- 1H NMR (300MHz、CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,25H)、2.51-2.55(m,1H)、3.59(m,1H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００６９】
実施例5
構造式が式(II)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が=NOHである）の製造
ダンマル-20S-24(R、S)-エポキシ-3β,12β,25-トリオール（上海中薬創新研究センター）10gを精密に称量し無水ジクロロメタン250mlに溶解させて、撹拌しながらPDC 20gを加えた。室温で24時間攪拌し、反応が終了した後、珪藻土で反応液をろ過して、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤として酢酸エチルと石油エーテルとを1:10-1:5（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物IV 6gを得た（純度95%）。
【００７０】
【化６】
2016508489.tif 000008
【００７１】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(IV)化合物の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００７２】
ESI-MS m/z:473.47(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.23(m,23H)、2.85-2.95(m,2H)、3.84(m,1H)。
【００７３】
化合物IV 5gを精密に称量し無水メタノール100mlに溶解させて、撹拌しながらトリエチルアミン2.8g、塩酸ヒドロキシルアミン2.0gを加えた。室温で24時間攪拌すると固体が析出し、反応が終了した後、濾紙で反応液をろ過して、乾燥し、化合物II（R1、R2が=NOHである）5.0g（純度95%）を得た。
【００７４】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(II)化合物（R1、R2が=NOHである）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００７５】
ESI-MS m/z:503.35(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.23(m,23H)、3.01-3.09(d,2H)、3.84(m,1H)。
【００７６】
実施例6
構造式が式(II)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が-NH2である）の製造
実施例5の化合物II（R1、R2が=NOH) 3gを精密に称量し無水テトラヒドロフラン50mlに溶解させて、攪拌しながら水素化リチウムアルミニウム0.5gを加え、80℃で攪拌して3時間反応させた。TLCに反応終了が示された後、珪藻土で反応液をろ過し、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤としてジクロロメタンとメタノールとを20:1-5:1（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物II（R1、R2が-NH2である）1.3gを得た（純度95%）。
【００７７】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(II)化合物（R1、R2が-NH2である）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００７８】
ESI-MS m/z:475.47(M+H)- 1H NMR (300MHz,CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.23(m,22H)、3.40(d,1H)、3.52(m,1H)、3.84(d,1H)。
【００７９】
実施例7
構造式が式(II)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1が-OHであり、R2が=NOHである）の製造
ダンマル-20S-24(R、S)-エポキシ-3β,12β,25-トリオール（上海中薬創新研究センター）10gを精密に称量し無水ジクロロメタン250mlに溶解させて、撹拌しながらPDC 10gを加えた。室温で24時間攪拌し、反応が終了した後、珪藻土で反応液をろ過して、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤として酢酸エチルと石油エーテルとを1:10-1:5（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物VI 4gを得た（純度95%）。
【００８０】
【化７】
2016508489.tif 000009
【００８１】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(VI)化合物の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００８２】
ESI-MS m/z:475.47(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.23(m,25H)、3.59(m,1H)、3.84(m,1H)。
【００８３】
化合物VI 5gを精密に称量し無水メタノール100mlに溶解させて、撹拌しながらトリエチルアミン1.4g、塩酸ヒドロキシルアミンl.0gを加えた。室温で24時間攪拌すると、固体が析出し、反応が終了した後、濾紙で反応液をろ過し、乾燥し、化合物II（R1が-OHであり、R2が=NOHである）4.0gを得た（純度95%）。
【００８４】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(II)化合物（R1が-OHであり、R2が=NOHである）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００８５】
ESI-MS m/z:490.02(M+H)- 1H NMR(300MHz,CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,23H)、3.15-3.17(m,1H)、3.84(m,1H)。
【００８６】
実施例8
構造式が式(II)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1が-OHであり、R2が-NH2である）の製造
実施例7の化合物II（R1が-OHであり、R2が=NOHである）3gを精密に称量し無水テトラヒドロフラン50mlに溶解させて、攪拌しながら水素化リチウムアルミニウム0.25gを加え、80℃で攪拌して3時間反応させた。TLCに反応終了が示された後、珪藻土で反応液をろ過して、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤としてジクロロメタンとメタノールとを20:1-5:1（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物II（R1が-OHであり、R2が-NH2である）0.82gを得た（純度95%）。
【００８７】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(II)化合物（R1が-OHであり、R2が-NH2である）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００８８】
ESI-MS m/z:475.47(M+H)- 1H NMR(300MHz,CDC13)：δ 0.77(s,3H)、0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.23(m,22H)、2.52(m、1H)、3.38(d,1H)、3.52(m,1H)、3.84(d,1H)。
【００８９】
実施例9
構造式が式(I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が=NOHである）の製造
20(S)-プロトパナキサジオール（上海中薬創新研究センター）10gを精密に称量し無水ジクロロメタン250mlに溶解させて、攪拌しながらDess-Martin試薬（デス−マーチン試薬）20gを加えた。室温で24時間攪拌し、反応が終了した後、水で反応液をクエンチして、乾くまで有機相を濃縮し、溶離剤として酢酸エチルと石油エーテルとを1:10-1:5（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物III 5.2gを得た（純度97%）。
【００９０】
【化８】
2016508489.tif 000010
【００９１】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(III)化合物の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００９２】
ESI-MS m/z:457.4(M+H)- 1H NMR(300 MHz, CDC13)：δ 0.85(s, 3H)、0.90(s, 3H)、0.97(s, 3 H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、l.30-2.61(m,24H)、2.85-2.95(m,1H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００９３】
化合物III 5gを精密に称量し無水メタノール100mlに溶解させて、撹拌しながらトリエチルアミン2.77g、塩酸ヒドロキシルアミンl.9gを加えた。室温で24時間攪拌すると、固体が析出し、反応が終了した後、濾紙で反応液をろ過して、乾燥し、化合物I（R1、R2が=NOHである）4.8gを得た（純度95%）。
【００９４】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1、R2が=NOHである）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００９５】
ESI-MS m/z:487.4(M+H)- 1H NMR (300MHz,CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,23H)、2.85-2.95(m,2H)、5.10-5.14(m,1H)。
【００９６】
実施例10
構造式が式(I)であるプロトパナキサジオール誘導体（R1、R2が-NH2である）の製造
実施例1の化合物I（R1、R2が=NOHである）3gを精密に称量しn-プロパノール50mlに溶解させて、攪拌しながらナトリウム1.7gを加え、100℃で3時間攪拌して反応させた。TLCに反応終了が示された後、反応をクエンチし、乾くまで有機相を濃縮させ、溶離剤としてジクロロメタンとメタノールとを20:1-5:1（体積比）で用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、化合物I（R1、R2が-NH2である）1.5gを得た（純度96%）。
【００９７】
ESI-MS及びNMRにて構造を測定し、式(I)化合物（R1、R2が-NH2である）の測定された物理化学データは下記の通りであった。
【００９８】
ESI-MS m/z:459.3(M+H)- 1H NMR(300MHz、CDC13)：δ 0.85(s,3H)、0.90(s,3H)、0.97(s,3H)、0.98(s,3H)、1.10(s,3H)、1.27(s,3H)、1.28(s,3H)、1.30-2.61(m,25H)、3.09(m,lH)、3.39(m,lH)、5.10-5.14(m,1H)。
【００９９】
実施例11
化合物I（上記実施例1〜4、9及び10から得られたいずれか一つの化合物I)10gに適量の乳糖を加えて均一に混合させた。70%のエタノールを接着剤として、粒子に成型し、得られた粒子をカプセルに充填した。各カプセルは化合物Iを20mg含んでいる。
【０１００】
実施例12
化合物I（上記実施例1〜4、9及び10から得られたいずれか一つの化合物I)10gに適量の乳糖を加えて均一に混合させた。70%のエタノールを接着剤として、粒子に成型して乾燥させ、適量のステアリン酸マグネシウムを加えて、錠剤化させて錠剤を得た。各錠剤は化合物Iを50mg含んでいる。
【０１０１】
実施例13
適量の乳化剤（トウェインまたはスパンなど）を水に溶解させ、化合物I（上記実施例1〜4、9及び10から得られたいずれか一つの化合物I）を加え、研磨することで初期の乳剤を作成し、1000mlになるように水を加え、経口液を得た。
【０１０２】
実施例14
適量の乳化剤（トウェインまたはスパンなど）を注射用水に溶解させ、化合物I（上記実施例1〜4、9及び10から得られたいずれか一つの化合物I）を加えて、ろ過し、滅菌してポッティングを行うことで注射液を得た。
【０１０３】
化合物IIが含まれた相応の製剤の製造方法は、実施例11〜14と同様であった。
【０１０４】
本実験例は、本発明に係るプロトパナキサジオール誘導体の抗うつ活性を検討することを目的とした。
【０１０５】
実験例1
マウス強制水泳法後天性絶望うつモデル試験
（1）実験動物：
品種：クリーンレベル昆明マウス；性別：オス；体重：18-22g。
由来：上海斯莱克実験動物有限責任公司、ライセンス番号：SCXK(滬)2007-0005。
【０１０６】
（2）薬品
20(S)-プロトパナキサジオール、化合物I、II（それぞれ実施例1-8の化合物である）、塩酸ベンラファキシン。
【０１０７】
調製：粉末状薬品をブランク溶媒に溶解させ、超音波にて溶解促進した。
【０１０８】
（3）実験方法及び結果
すべてのマウスを事前に選別せずにランダムにグループに分けた。図1〜8に示された薬品及び使用量に応じて（図1〜8がそれぞれ実施例1〜8から得られた薬品と対応し、ベンラファキシンのグループと20(S)-プロトパナキサジオールのグループとは剤型が同じである）、注射により薬品を4日間投与した後、強制水泳実験を行った。水泳モデルの持続時間が6分間であり、最後の4分間内の停止無動時間を計測し、その結果を図1〜8に示した。
【０１０９】
（4）結論
「後天性絶望」試験における強制水泳モデルを採用して検討したことによれば、誘導体I及びIIでは、異なる使用量の場合、いずれもマウスの水泳無動時間を明らかに短縮でき、また、使用量が陽性対照ベンラファキシンより遥かに低く、且つ同じ使用量（0.75mg/kg）の場合、活性が20(S)-プロトパナキサジオールより明らかに強いことが分かった。
【０１１０】
実験例2
マウス尾懸垂法後天性絶望うつモデル試験
（1）実験動物：
品種：クリーンレベルICRマウス；性別：オス；体重：22-24g。
由来：上海斯莱克公司、合格証書番号：SCXK(滬)2007-0005
【０１１１】
（2）実験薬品及び機器
20(S)-プロトパナキサジオール、化合物I、II（それぞれ実施例1-8の化合物である）、塩酸ベンラファキシン。
【０１１２】
上海移数信息科技有限公司から提供されたZH-XWT型尾懸垂実験動画解析システム。
【０１１３】
（3）実験方法及び結果
すべてのマウスを事前に選別せずにランダムにグループに分けた。図9〜16に示された薬品及び使用量に応じて（図9〜16がそれぞれ実施例1〜8から得られた薬品と対応し、ベンラファキシンのグループと20(S)-プロトパナキサジオールとのグループは剤型が同じである）、注射により薬品を4日間投与した後、尾懸垂実験を行った。
【０１１４】
具体的には、マウスの尾部の先端から1cmのところを、マウスの尾部を曲げないように直径1cmのPVC管にテープで貼り付けた後、PVC管を架空し、頭部が台面から5cm離れるようにマウスを倒懸させ、互いに妨害できないように隔板で2匹ずつ離され、各動物の6分間内の累積無動時間を観測した（無動の指標とは、呼吸以外、すべての肢体が無動であることを意味する）。最初の1分間又は2分間にマウスを適応させ、マウスの最後の5分間内の累積無動時間、絶対無動時間、あがき時間を機器で記測し、且つ騒音の妨害を受けないように静かな観察環境を維持した。その結果を図9〜16に示した。
【０１１５】
（4）結論
「後天性絶望」試験における尾懸垂モデルを採用して検討したことによれば、誘導体I、IIでは、異なる用量の場合、いずれもマウスの尾懸垂無動時間を明らかに短縮でき、また、使用量が陽性対照ベンラファキシンより遥かに低く、且つ同じ使用量（0.75mg/kg）の場合、活性が20(S)-プロトパナキサジオールより明らかに強いことが分かった。
【０１１６】
実施例3
ラットの慢性的な予測不可能な軽度のストレスうつモデル (CUMS)試験
（1）実験動物
品種：Wistarラット；性別：オス；体重：200g。
由来：上海斯莱克公司より提供；合格証書番号：SCXK(滬)2012-0002。
【０１１７】
（2）実験薬品及び機器
化合物I、II（それぞれ実施例1及び実施例5から得られた化合物である）、塩酸ベンラファキシン。
【０１１８】
（3）実験方法及び結果
実験方法：ラットに対して一週間の適応性飼育を行った後、CUMSプロセスを進行する。
【０１１９】
1）糖水の偏愛実験：始めからの24時間内に、すべての動物に1％のショ糖水を投与した；次の24時間において、1％のショ糖水と一般的な飲用水とを同時に投与し、次に、23時間断食及び断水した後、糖水の偏愛実験を行った：動物に1％のショ糖水と一般的な飲用水とを同時に投与し、飲水瓶の重量を称量することにより1時間内に動物がショ糖水と一般的な飲用水とを飲んだ量を測定した。動物の体重、液体の消耗量及び糖水消耗量に基づいて動物を均一にグループに分け、慢性的な予測不可能な軽度のストレス刺激を行った。
【０１２０】
2）CUMS実験：毎週10種類以上のストレス刺激因子をラットへ交互に投与し、ストレスとして因子の刺激持続時間及び次に投与される刺激を予測できないようにさせた。刺激の要素には、フラッシュ刺激、騒音刺激、ケージの傾き、及び不慣れな匂いの環境下での飼育、断食、断水が含まれる。
【０１２１】
3）検測方法：毎週に21時間断食及び断水した後、液体の消耗量を測定し、各動物の体重、液体総摂取量、水摂取量及び糖水摂取量を計測した。各ラットの糖水偏愛率［偏愛＝(糖水摂取量/液体総摂取量)×100％］及び体重1gあたりの糖水消耗量を算出した。
【０１２２】
結果を下記の表に示す。
【０１２３】
【表１】
2016508489.tif 000011
【０１２４】
（4）結論
表1から分かるように、モデルグループのラットの糖水偏愛程度（摂取量）は漸進的な低下を示した。
【０１２５】
20mg/kgのベンラファキシンは、4週目からCUMSラットの糖水摂取量を向上させることができ、5週目までに、モデルグループと比べて統計学的に有意な差が現れた（P<0.01）。
【０１２６】
1.5mg/kg及び0.75mg/kgの化合物I、化合物IIは、4週目から、CUMSラットの糖水摂取量は向上の傾向があり、5週目から、モデルグループと比べて統計学的に有意な差が現れた（P<0.01または0.05）。0.375mg/kgの化合物は効果が明らかではなかった。当該モデルの有効な使用量も同様に陽性対照としてのベンラファキシンの使用量より低かった。
【０１２７】
前記のように、一般的な説明及び具体的な実施形態によって本発明を詳細に説明したが、本発明を基づいて、本発明に対して補正または改良をすることができることは、当業者にとって自明である。従って、本発明の主旨を逸れないような補正または改良も、すべて本発明の保護しようとする範囲に属する。
【産業上の利用可能性】
【０１２８】
本発明は、プロトパナキサジオールの構造を修飾して、ユニークな構造を持つ複数の新規化合物を得た。生体内の薬理実験によって、これらの化合物は、より強い抗うつ活性を有し、うつ型の精神疾患を予防または治療するための薬物の活性成分として用いられ、広い用途及び開発の見通しを有することが認められた。
【図１】
2016508489.tif 000016
【図２】
2016508489.tif 000017
【図３】
2016508489.tif 000018
【図４】
2016508489.tif 000019
【図５】
2016508489.tif 000020
【図６】
2016508489.tif 000021
【図７】
2016508489.tif 000022
【図８】
2016508489.tif 000023
【図９】
2016508489.tif 000024
【図１０】
2016508489.tif 000025
【図１１】
2016508489.tif 000026
【図１２】
2016508489.tif 000027
【図１３】
2016508489.tif 000028
【図１４】
2016508489.tif 000029
【図１５】
2016508489.tif 000030
【図１６】
2016508489.tif 000031
【国際調査報告】
2016508489.tif 000032
2016508489.tif 000033
2016508489.tif 000034
2016508489.tif 000035
2016508489.tif 000036
2016508489.tif 000037