(57)【要約】  本発明は、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含む、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、以下： 
ａ．腫瘍関連抗原および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｂ．腫瘍関連抗原およびフラジェリン；
ｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｄ．腫瘍関連抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；
ｅ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｆ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド； 
ｇ．腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ；Ｃ）；
ｈ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｉ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；
ｊ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｋ．腫瘍関連抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｌ．腫瘍関連抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｍ．腫瘍関連抗原および３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｎ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｏ．腫瘍関連抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；ならびに
ｐ．腫瘍関連抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシン
のいずれかから選ばれる、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含む、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２】
前記非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチドが、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−Ｘ）を含む免疫刺激性オリゴヌクレオチドであり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．腫瘍関連抗原および非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−Ｘ）を含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｂ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｃ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｅ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；ならびに
ｇ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド
のいずれかから選ばれる、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、以下： 
ａ．Ｉｄ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．Ｉｄ抗原およびフラジェリン；
ｃ．Ｉｄ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．Ｉｄ抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；
ｅ．Ｉｄ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．Ｉｄ抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；
ｇ．Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｉ．Ｉｄ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．Ｉｄ抗原およびＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；
ｌ．Ｉｄ抗原および免疫刺激剤；
ｍ．Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．Ｉｄ抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．Ｉｄ抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．Ｉｄ抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．Ｉｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．Ｉｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含む、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４】
前記腫瘍関連抗原が、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびフラジェリン；
ｃ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＩＬ−１５；
ｅ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部および免疫刺激剤；
ｍ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５】
前記腫瘍関連抗原が、Ｍｕｃ１抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．Ｍｕｃ１抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．Ｍｕｃ１抗原およびフラジェリン；
ｃ．Ｍｕｃ１抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．Ｍｕｃ１抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．Ｍｕｃ１抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．Ｍｕｃ１抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．Ｍｕｃ１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．Ｍｕｃ１抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．Ｍｕｃ１抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．Ｍｕｃ１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．Ｍｕｃ１抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．Ｍｕｃ１抗原および免疫刺激剤；
ｍ．Ｍｕｃ１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．Ｍｕｃ１抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．Ｍｕｃ１抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．Ｍｕｃ１抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．Ｍｕｃ１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．Ｍｕｃ１抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．Ｍｕｃ１抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項６】
前記腫瘍関連抗原が、ＣＥＡ抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．ＣＥＡ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ＣＥＡ抗原およびフラジェリン；
ｃ．ＣＥＡ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ＣＥＡ抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ＣＥＡ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ＣＥＡ抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ＣＥＡ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ＣＥＡ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ＣＥＡ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ＣＥＡ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ＣＥＡ抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．ＣＥＡ抗原および免疫刺激剤；
ｍ．ＣＥＡ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．ＣＥＡ抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．ＣＥＡ抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．ＣＥＡ抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．ＣＥＡ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．ＣＥＡ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．ＣＥＡ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項７】
前記腫瘍関連抗原が、ＭＡＧＥ−３抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．ＭＡＧＥ−３抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ＭＡＧＥ−３抗原およびフラジェリン；
ｃ．ＭＡＧＥ−３抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ＭＡＧＥ−３抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ＭＡＧＥ−３抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ＭＡＧＥ−３抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ＭＡＧＥ−３抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ＭＡＧＥ−３抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ＭＡＧＥ−３抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ＭＡＧＥ−３抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ＭＡＧＥ−３抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．ＭＡＧＥ−３抗原および免疫刺激剤；
ｍ．ＭＡＧＥ−３抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．ＭＡＧＥ−３抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．ＭＡＧＥ−３抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．ＭＡＧＥ−３抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．ＭＡＧＥ−３抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．ＭＡＧＥ−３抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．ＭＡＧＥ−３抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８】
前記腫瘍関連抗原が、ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびフラジェリン；
ｃ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原および免疫刺激剤；
ｍ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９】
前記腫瘍関連抗原が、ＣＡ１２５抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．ＣＡ１２５抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ＣＡ１２５抗原およびフラジェリン；
ｃ．ＣＡ１２５抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ＣＡ１２５抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ＣＡ１２５抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ＣＡ１２５抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ＣＡ１２５抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ＣＡ１２５抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ＣＡ１２５抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ＣＡ１２５抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ＣＡ１２５抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．ＣＡ１２５抗原および免疫刺激剤；
ｍ．ＣＡ１２５抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．ＣＡ１２５抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．ＣＡ１２５抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．ＣＡ１２５抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．ＣＡ１２５抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．ＣＡ１２５抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．ＣＡ１２５抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０】
前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＩＬ−１５；
ｂ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｄ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｅ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｈ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｉ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｊ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｋ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｍ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｎ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｏ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＧＭ−ＣＳＦ；
ｐ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｑ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｒ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｓ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｔ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｕ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｖ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＴＬＲアゴニスト；
ｗ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｘ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｙ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；
ｚ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ａａ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびＴＬＲ−アゴニスト；
ｂｂ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｃｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｄｄ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｅｅ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニスト；ならびに
ｆｆ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、請求項２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、以下： 
ａ．ウイルス抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ウイルス抗原およびフラジェリン；
ｃ．ウイルス抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ウイルス抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ウイルス抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ウイルス抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ウイルス抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ウイルス抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ウイルス抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ウイルス抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ウイルス抗原およびＴＬＲアゴニスト；
ｌ．ウイルスウイルス抗原および免疫刺激剤；
ｍ．ウイルス抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．ウイルス抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．ウイルス抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．ウイルス抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．ウイルス抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．ウイルス抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｓ．ウイルス抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
のいずれかから選ばれる、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含む、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２】
前記Ｉｄ抗原が、Ｂ細胞悪性腫瘍により発現されるイムノグロブリンまたはＴ細胞悪性腫瘍により発現されるＴ細胞受容体である、請求項３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３】
前記免疫刺激剤が、Ｎｏｄ様受容体アゴニストである、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４】
前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、急性リンパ球性白血病、リンパ芽球性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着病、Ｈ鎖病）、成人の混合細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞免疫芽球性びまん性侵攻性リンパ腫、成人の小型非切れ込み核細胞性リンパ腫または濾胞性リンパ腫である、請求項１２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１５】
前記Ｔ細胞悪性腫瘍が、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（Ｔガンマリンパ球増殖性疾患）、菌状息肉腫／セザリー症候群、成人のびまん性侵攻性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（混合細胞型および大細胞、免疫芽細胞性）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、血管中心性リンパ腫（リンパ腫様肉芽腫症多型性網膜症）、急性リンパ球性白血病またはリンパ芽球性リンパ腫である、請求項１２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６】
前記腫瘍関連抗原が、乳癌細胞上に認められる、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１７】
乳癌細胞上に認められる前記腫瘍関連抗原が、悪性リンパ腫、グリコスフィンゴリピドＧＤ２およびＥｒｂＢ２のような細胞表面受容体の腫瘍関連抗原から成る群から選ばれる、請求項１６のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１８】
前記腫瘍関連抗原が、１７−１Ａ、７０７−ＡＰ、ＡＦＰ、アネキシンＩＩ、ＡＲＴ−４、ＢＡＧＥ、ＢＡＧＥ−１、ｂ−カテニン、ＢＣＧ、ｂｃｒ／ａｂｌ、Ｂｃｒ／ａｂｌ  ｅｌ４ａ２融合ジャンクション、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、水疱性類天疱瘡抗原−１、ＣＡ  １９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ２１５、ＣＡＧ−３癌ペプチド、ＣＡＭＥＬ腫瘍抗原、癌−精巣抗原、カスパーゼ−８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＤ１６、ＣＤ２０、ＣＤ３、ＣＤ３０、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ−４、ＣＤＲ３、ＣＥＡ、クラスター５、クラスター５Ａ、サイクリン依存性キナーゼ−４、Ｃｙｐ−Ｂ，ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、Ｄｅｋ−ｃａｉｎ、Ｅ７、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖｌＩ  １、ＥＧＰ４０、ＥＬＦ２  Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＦｕｃＧＭ  １、Ｇ２５０、ＧＡ７３３、ＧＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１−８、胃癌関連抗原、ＧＤ２、ＧＤ３、グロボＨ、グリコホリン、ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧｎＴＶ、Ｇｎ−Ｔ−Ｖ、ｇｐ１００、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥ、高分子量関連抗原、高分子量プロテオグリカン（ＩＭＰＧ）、ＨＰＶ−１６  Ｅ６、ＨＰＶ−１６  Ｅ７、ＨＰＶＥ６、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト乳脂肪球（ＨＭＦＧ）、ｉＣＥ、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＫ−ＬＣ−１、ＫＭ−ＨＮ−１、Ｌ６、ＬＡＧＥ−Ｉ、ＬｃＯｓｅ４Ｃｅｒ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｌｅｗｉｓ  Ａ、Ｌｅｗｉｓ  ｖ／ｂ、Ｍタンパク質、ＭＡＧＥ−１、ＭＶＣ、ＭＡＧＥ−Ａ１−１２、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＨＧＥ−３、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＭＣ１Ｒ、ＭＥ４９１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ムチン、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、突然変異ｐ５３、ミオシン、ＭＺ２−Ｅ、Ｎ９ノイラミニダーゼ、ＮＡ８８、ＮＡ８８−Ａ、鼻咽頭癌抗原、ＮＧＡ、ＮＫｌ／ｃ−３、ＢＣＲエクソン１、１３、１４とＡＢＬエクソン４のＮｏｖｅｌ  ｂｃｒ／ａｂｌ融合遺伝子、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−２、ＮＹ−ＥＳＯ−１ｂ、ＯＣ１２５、骨肉腫関連抗原−１、ｐ１５、ｐ１９０マイナーｂｃｒ−ａｂｌ（ｅｌａ２）、ｐ５３、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ、ポリシアル酸、ＰＲＡＭＥ腫瘍抗原、ＰＳＡ、ＰＳＭ、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、シアリルＬｅＡ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−２、ＳＳＸ−４、表面イムノグロブリン、ＴＡＧ−１、ＴＡＧ−２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＰＩ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、ＴＲＰ−２、ＴＲＰ２−ＩＮＴ２、ｈＴＲＴ，腫瘍関連糖タンパク質−７２、（ＴＡＧ−７２）、チロシナーゼ、ｕ−ＰＡ、ＷＴ１およびＸＡＧＥ−ｌｂ、またはその免疫刺激性断片である、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１９】
前記１つまたは複数のＴＬＲアゴニスト（複数可）あるいはＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２、３、４、５、７、８または９アゴニストから成る群から選ばれる、請求項１、３、または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２０】
前記ＶＬＰが、少なくとも１つの第１の非天然アミノ酸を着目の部位に含むように修飾されたウイルスコートポリペプチドを含み、前記２つ以上のディスプレイポリペプチドが、少なくとも１つの第２の非天然アミノ酸を含むように修飾され、ここで、第１の非天然アミノ酸は、第２の非天然アミノ酸と異なり、第２の非天然アミノ酸と反応性である、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２１】
前記ＴＬＲ７アゴニストが、イミキモド（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミンまたは１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）、イサトリビン、８５２Ａおよびチミジンホモポリマー（ＯＤＮ  １７ｍｅｒ）から成る群から選ばれる、請求項１９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２２】
前記ＴＬＲ−４アゴニストが、細菌性リポポリサッカライド（ＬＰＳ）、ＶＳＶ−ＧおよびＨＭＧＢ−１から成る群から選ばれる、請求項１９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２３】
前記ＴＬＲ−５アゴニストが、フラジェリンまたはその一部もしくは誘導体である、請求項１９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２４】
前記ＶＬＰが、アデノウイルス科ウイルス、ピコルナウイルス科ウイルス、ヘルペスウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、レトロウイルス科、オルソミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パピローマウイルス科、ラブドウイルス科、トガウイルス科およびパロウイルス科から成る群から選ばれるウイルス由来のウイルスコートタンパク質を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２５】
前記ＶＬＰが、バクテリオファージ、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、リノウイルス、単純ヘルペスウイルス、バリセラ−ゾスターウイルス、エプシュタイン−バーウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、黄熱病ウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、ＨＩＶ、インフルエンザウイルス、はしかウイルス、ムンプスウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸系発疹ウイルス、ヒトメタニューモウイルス、ヒトパピローマウイルス、狂犬病ウイルス、ルベラウイルス、ヒトボカウイルスまたはパルボウイルスおよびノロウイルスから成る群から選ばれるウイルス由来のウイルスコートタンパク質を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２６】
前記バクテリオファージが、ＭＳ２バクテリオファージ、Ｐ１様ウイルス、Ｐ２様ウイルス、Ｔ４様ウイルス、Ｐ２２様ウイルスおよびラムダ様ウイルスから成る群から選ばれる、請求項２５のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２７】
前記ＶＬＰが、前記第１のＩｄ抗原と異なる第２のＩｄ抗原をさらに含む、請求項３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２８】
前記ＶＬＰが、前記第１および第２のＩｄ抗原と異なる第３のＩｄ抗原をさらに含む、請求項２７のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項２９】
前記ディスプレイポリペプチドが、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原またはＩｄ抗原のいずれかと一緒のディスプレイポリペプチドの組合せ中の特別なディスプレイポリペプチドの存在または不存在に基づいて識別可能な約２５５の可能性のあるＶＬＰを得るために、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原またはＩｄ抗原および以下：ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１５、Ｐａｍ３ＳＫ４、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＬＰＳ、フラジェリン、イミキモドおよびＣｐＧ−Ｘから成る群から選ばれる１つまたは複数のポリペプチドを含む、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３０】
前記抗原が、タンパク質全体またはその断片である、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３１】
前記Ｉｄ抗原が、自己免疫障害に関連する、請求項３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３２】
前記自己免疫障害が、重症筋無力症、原発性胆汁性肝硬変症、拡張型心筋症、心筋炎、１型多腺性自己免疫症候群（ＡＰＳ−１）、嚢胞性線維症血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、グッドパスチャー症候群、自己免疫性肝炎、クローン病、冠状動脈不全、落葉性天疱瘡、尋常性天疱瘡、ギランバレー症候群、１型糖尿病、スティッフマン症候群、ラスムッセン脳炎、自己免疫性委縮性胃炎、アジソン病、１型糖尿病、インスリン低血糖症候群（平田病）、タカントーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療耐性ライム関節炎、多発性神経症、多発性硬化症、脱髄疾患、リウマチ熱、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺機能低下症、ヴィティラーゴ、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性橋本甲状腺炎およびセリアック病から成る群から選ばれる、請求項３１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３３】
前記自己免疫障害が、ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、セントロメア関連タンパク質（全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、慢性特発性蕁麻疹、結合組織症候群、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病および全身性自己免疫疾患から成る群から選ばれる、請求項３１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３４】
前記自己免疫障害が、自己免疫性ＣＩ不全、ＳＬＥ、膜増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）、ＲＡ、全身性硬化症、延長した凝固時間、自己免疫性血小板減少性紫斑病およびアテローム性動脈硬化から成る群から選ばれる、血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害である、請求項３１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３５】
前記Ｉｄ抗原が、神経症、小細胞肺癌、肝細胞癌腫、肝臓癌、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティッフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律神経病、ＳＬＥ、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群およびランバート・イートン筋無力症候群から成る群から選ばれる癌または腫瘍随伴性自己免疫障害に関連する、請求項３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３６】
前記腫瘍関連抗原がＩｄ抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．Ｉｄ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．Ｉｄ抗原およびフラジェリン；
ｃ．Ｉｄ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．Ｉｄ抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；
ｅ．Ｉｄ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｇ．Ｉｄ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｈ．Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｉ．Ｉｄ抗原およびＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；
ｊ．Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｋ．Ｉｄ抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｌ．Ｉｄ抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｍ．Ｉｄ抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｎ．Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｏ．Ｉｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびに
ｐ．Ｉｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ
から成る群から選ばれる、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３７】
前記ウイルス抗原が、以下：
ａ．ポリオウイルス；
ｂ．ＨＩＶ；
ｃ．Ｂ型肝炎ウイルス；
ｄ．Ｃ型肝炎ウイルス；
ｅ．Ｅ型肝炎ウイルス；
ｆ．狂犬病ウイルス；
ｇ．単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）；
ｈ．バリセラ−ゾスターウイルス（ＶＺＶ）；
ｉ．エプシュタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）；
ｊ．インフルエンザウイルス；
ｋ．天然痘；
ｌ．粘液腫；
ｍ．リノウイルス；
ｎ．コロナウイルス；
ｏ．ルベラウイルス；
ｐ．アデノウイルス；
ｑ．パピローマウイルス；および
ｒ．ヒトＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ）
から成る群から選ばれる、請求項１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３８】
前記ウイルス抗原が、ＨｅｐＢ抗原であり、前記２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子が、以下：
ａ．ＨｅｐＢ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．ＨｅｐＢ抗原およびフラジェリン；
ｃ．ＨｅｐＢ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．ＨｅｐＢ抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．ＨｅｐＢ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．ＨｅｐＢ抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．ＨｅｐＢ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．ＨｅｐＢ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．ＨｅｐＢ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．ＨｅｐＢ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．ＨｅｐＢ抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびに
ｌ．ＨｅｐＢ抗原および免疫刺激剤
のいずれかから選ばれる、請求項１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項３９】
前記１つまたは複数の免疫刺激剤が、細菌タンパク質、インターフェロンおよびサイトカインまたはその断片もしくは一部から成る群から選ばれる、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４０】
前記サイトカインが、ＧＭ−ＣＳＦ、インターロイキン−２、−７．−１２および成長因子から成る群から選ばれる、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４１】
前記サイトカインが、主にＴｈ１型である免疫応答を誘導し、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、ＩＬ−２およびＩＬ−１２から成る群から選ばれる、請求項３９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４２】
前記サイトカインが、主にＴｈ２型である免疫応答を誘導し、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６およびＩＬ−１０から成る群から選ばれる、請求項３９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４３】
前記ディスプレイポリペプチドが、ＶＬＰの表面に結合している、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４４】
ＶＬＰ内に含有されるポリペプチドおよび／または核酸をさらに含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４５】
前記ポリペプチドまたは核酸分子が、以下：
ａ．腫瘍関連抗原およびＣｐＧ−Ｘ；
ｂ．腫瘍関連抗原およびフラジェリン；
ｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｄ．腫瘍関連抗原およびＩＬ−１５；
ｅ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；
ｆ．腫瘍関連抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；
ｇ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；
ｈ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；
ｉ．腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；
ｋ．腫瘍関連抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびに
ｌ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数の免疫刺激剤
から成る群から選ばれる、請求項４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４６】
さらにアジュバントを含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４７】
前記アジュバントが、主にＴｈ１型の応答を誘発するためのアジュバントであり、モノホスホリルリピドＡ、好ましくは、アルミニウム塩と一緒の３ｄｅ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ；ＣｐＧ−Ｘ；Ｑｕｉｌ  ＡまたはＱＳ２１およびＱＳ７を含むその誘導体のような、サポニン；エスシン；ジギトニン；ならびにジプソフィラまたはケノポジウムキノアサポニンの組合せから成る群から選ばれる、請求項４６のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４８】
前記アジュバントが、ＧＭ−ＣＳＦ、鉱物塩、ミョウバン、腸炎細菌のモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）と結合したミョウバン、サポニン、ＱＳ−２１，Ｑｕｉｌ−Ａ、ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ（商標）、ＭＦ５９（商標）、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ（商標）ＩＳＡ  ５１、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ（商標）ＩＳＡ  ７２０、ＡＳ０２、リポソームおよびリポソーム製剤、ＡＳ０１、合成もしくは特別に調製したマイクロ粒子およびマイクロキャリアー、キトサン粒子、デポー形成剤、Ｐｌｕｒｏｎｉｃブロックコポリマー、特別に修飾されたもしくは調製されたペプチド、ムラミルジペプチド、アミノアルキルグルコサミニド４−ホスフェート、ＲＣ５２９、細菌トキソイド、毒素断片、Ｔｏｌｌ様受容体２、３、４、５、７、８もしくは９のアゴニスト；アデニン誘導体；免疫刺激性ＤＮＡ；免疫刺激性ＲＮＡ；イミダゾキノリンアミン、イミダゾピリジンアミン、６，７−縮合シクロアルキルイミダゾピリジンアミン、１，２−架橋イミダゾキノリンアミン；イミキモド；レシキモド；ＤＣ表面分子ＣＤ４０のアゴニスト；Ｉ型インターフェロン；ポリＩ：Ｃ；細菌リポポリサッカライド（ＬＰＳ）；ＶＳＶ−Ｇ；ＨＭＧＢ−１；フラジェリンまたはその部分もしくは誘導体；ＣｐＧ−Ｘ；壊死細胞から放出された炎症性刺激；尿酸結晶；補体カスケードの活性化された構成要素；免疫複合体の活性化された構成要素；補体受容体アゴニスト；サイトカイン；サイトカイン受容体アゴニスト；またはオキソアデニンあるいはそれらの組合せである、請求項４６のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項４９】
前記イミダゾキノリンが、レシキモドまたはイミキモドを含む、請求項４８のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５０】
前記ＶＬＰが、着目の治療剤を含有する、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５１】
前記ＶＬＰが、図１に示すアミノ酸の配列を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５２】
前記ＶＬＰが、単離されたＶＬＰまたは精製されたＶＬＰである、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５３】
前記ＶＬＰが、安定な正２０面体ＶＬＰである、請求項１、３，１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項５４】
請求項１、３，１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰをコードする核酸分子。
【請求項５５】
請求項５４のｃＤＮＡ。
【請求項５６】
請求項５４の核酸分子を含む、ベクター。
【請求項５７】
好適な宿主細胞中の請求項５６のベクターを含む、宿主ベクター系。
【請求項５８】
前記好適な宿主細胞が、細菌細胞である、請求項５７の宿主ベクター系。
【請求項５９】
前記好適な宿主細胞が、真核細胞である、請求項５７の宿主ベクター系。
【請求項６０】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰを宿主中で生成するために、好適な培養条件下で請求項５７の宿主ベクター系を培養する工程およびそのようにして生成されたウイルスゲノムを含まないＶＬＰを回収する工程を含む、ウイルスゲノムタンパク質を含まないＶＬＰを生成するための方法。
【請求項６１】
請求項６０の方法によって生成された、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項６２】
免疫有効量の請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰと好適な担体を含む、組成物。
【請求項６３】
対象においてディスプレイポリペプチドに対する免疫応答を誘導するための、請求項６２の組成物を含むワクチン。
【請求項６４】
請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを含む、対象において免疫応答を誘導するための、免疫刺激性組成物。
【請求項６５】
請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを発現するベクターを含む、ＤＮＡ構築物。
【請求項６６】
対象における免疫応答を誘導するための免疫刺激性組成物であって、該ワクチンが、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰおよびアジュバントを含む、前記免疫刺激性組成物。
【請求項６７】
対象における免疫応答を誘導するための免疫刺激性組成物であって、該ワクチンが、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを発現するベクターを含む、前記免疫刺激性組成物。
【請求項６８】
対象における免疫応答を誘導するための免疫刺激性組成物であって、該ワクチンが、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰをコードする核酸配列を送達するためのウイルス遺伝子送達系を含む、前記免疫刺激性組成物。
【請求項６９】
腫瘍細胞を有効量の請求項１または３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰと接触させる工程を含む、腫瘍細胞を阻止する方法。
【請求項７０】
対象における腫瘍を処置し、阻止しまたは進行を予防する方法であって、前記対象に有効量の請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを投与し、それによって、前記対象における腫瘍を処置し、阻止しまたは進行を予防する工程を含む、前記方法。
【請求項７１】
疾患または障害を処置し、阻止しまたは進行を予防する方法であって、前記対象に有効量の請求項６２の組成物を投与し、それによって、前記対象における疾患または障害を処置し、阻止しまたは進行を予防する工程を含む、前記方法。
【請求項７２】
前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰまたは組成物が、静脈内に、筋内に、皮下に、腹腔内に、鼻腔内に、眼内に、皮内に、経粘膜でまたはエアロゾルとして投与される、請求項７０または７１の方法。
【請求項７３】
前記障害が、重症筋無力症、原発性胆汁性肝硬変症、拡張型心筋症、心筋炎、拡張型心筋症、１型多腺性自己免疫症候群（ＡＰＳ−１）、自己免疫性肝炎、嚢胞性線維症血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、グッドパスチャー症候群、クローン病、冠状動脈不全、落葉性天疱瘡、視神経脊髄炎、尋常性天疱瘡、ギランバレー症候群、１型糖尿病、スティッフマン症候群、ラスムッセン脳炎、自己免疫性委縮性胃炎、アジソン病、インスリン低血糖症候群（平田病）、Ｂ型インスリン抵抗性、アカントーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療耐性ライム関節炎、多発性神経症、多発性硬化症、脱髄疾患、リウマチ熱、アトピー性皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変症、グレーブス病、自己免疫性甲状腺機能低下症、ヴィティラーゴ、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性橋本甲状腺炎、セリアック病および転移性黒色腫から成る群から選ばれる自己免疫障害である、請求項７１の方法。
【請求項７４】
前記障害が、ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、水疱性類天疱瘡、妊娠性疱疹、良性粘膜類天疱瘡、慢性特発性蕁麻疹、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、多発性筋炎、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病、内臓リーシュマニア症および全身性自己免疫疾患から成る群から選ばれる全身性自己免疫障害である、請求項７１の方法。
【請求項７５】
前記障害が、神経症、小細胞肺癌、肝細胞癌腫、肝臓癌、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティッフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律神経病、癌、ＳＬＥ、肝細胞癌腫、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群、ランバート・イートン筋無力症候群および腫瘍随伴性小脳変性から成る群から選ばれる癌または腫瘍随伴性自己免疫障害である、請求項７１の方法。
【請求項７６】
前記障害が、血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害である、請求項７１の方法。
【請求項７７】
前記血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害が、自己免疫性ＣＩ不全、ＳＬＥ、膜増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）、ＲＡ、全身性硬化症、自己免疫性血小板減少性紫斑病、免疫不全障害およびアテローム性動脈硬化から成る群から選ばれる、請求項７６の方法。
【請求項７８】
前記障害が、Ｂ細胞悪性腫瘍である、請求項７１の方法。
【請求項７９】
前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性白血病、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着病、重鎖病）および濾胞性リンパ腫（例えば、グレードI、II、IIIまたはIV）である、請求項７８の方法。
【請求項８０】
前記障害が、Ｔ細胞悪性腫瘍である、請求項７１の方法。
【請求項８１】
前記Ｔ細胞悪性腫瘍が、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（Ｔガンマリンパ球増殖性疾患）、菌状息肉腫／セザリー症候群、成人のびまん性侵攻性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（混合細胞型および大細胞、免疫芽細胞性）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、血管中心性リンパ腫（リンパ腫様肉芽腫症多型性網膜症）、急性リンパ球性白血病またはリンパ芽球性リンパ腫である、請求項８０の方法。
【請求項８２】
癌、感染症または自己免疫疾患を阻止するためのキットであって、請求項１、３、１１または１３の組成物を、場合により、試薬および／または使用のための指示とともに含む、前記キット。
【請求項８３】
請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、該ＶＬＰが、以下：
実質的にポリエチレングリコールを含まず、細菌細胞抽出物、ポリペプチドおよび／またはｍＲＮＡ合成機構の構成要素；前記ポリペプチドの翻訳のための転写のテンプレート；前記ポリペプチドの合成のためのモノマー；およびウイルスコートタンパク質がウイルスゲノムを含まない安定な正２０面体ウイルス様粒子に自己集合することを許容する条件下における、少なくとも約２５０μｇ／ｍｌのウイルスコートタンパク質を生成するための翻訳に必要な補因子、酵素および他の試薬；ならびに少なくとも６０の別個のタンパク質を含む、原核細胞を含まないインビトロの翻訳反応において、ウイルスコートタンパク質を合成し、それにより、ウイルスゲノムを含まない正２０面体ウイルス様粒子の集団を生成する工程；
を含む、ウイルスゲノムを含まない正２０面体ウイルス様粒子の集団を、無細胞のインビトロ反応において生成するための方法により生成される、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８４】
前記非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチドが、ＤＮＡ、修飾ＤＮＡ，ＲＮＡ，修飾ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）もしくはペプチド核酸（ＰＮＡ）またはそれらの混合物である、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８５】
前記ＤＮＡ、修飾ＤＮＡ，ＲＮＡ，修飾ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）もしくはペプチド核酸（ＰＮＡ）またはそれらの混合物が、デオキシリボース、リボース、モルホリン、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシン、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロジアミデート結合、ペプチド結合もしくは５−オクタジイニルデオキシウリジンまたはそれらの混合物を含む、請求項８４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８６】
前記ＤＮＡまたは修飾ＤＮＡが、オリゴデオキシヌクレオチドまたは修飾オリゴデオキシヌクレオチドである、請求項８４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８７】
前記オリゴデオキシヌクレオチドまたは修飾オリゴデオキシヌクレオチドが、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合またはその混合物を含むオリゴヌクレオチドである、請求項８４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８８】
前記核酸分子、オリゴヌクレオチドまたはＣｐＧ−Ｘが、配列５’−ＴＧＡＣＴＧＴＧＡＡＣＧＴＴＣＧＡＧＡＴＧＡ−３’を含む、請求項１、３または１１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項８９】
前記配列が、Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊ＣＧ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ、ここで、＊は、ホスホロチオエート結合によるホスホジエステラーゼ結合の置換を表す、中に示すホスホジエステルおよびホスホロチオエート結合の混合物を含む、請求項８８のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９０】
５−オクタジイニルデオキシウリジンまたは修飾デオキシウリジンまたは３’もしくは５’末端におけるリンカーをさらに含む、請求項８４または８８のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９１】
前記Ｉｄ抗原が、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）に由来する、請求項１または３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９２】
前記疾患が感染症である、請求項７１の方法。
【請求項９３】
前記イムノグロブリンが、イムノグロブリン全体またはイムノグロブリン断片である、請求項１２のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９４】
前記断片が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆ（ａｂ’）２断片または一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片である、請求項９３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９５】
前記断片が、細菌免疫タンパク質ＩＭ９に付加されている、請求項９４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９６】
前記細菌免疫タンパク質ＩＭ９に付加された断片が、ＶＬＰ上にポリペプチドとしてディスプレイされる、請求項９５のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９７】
前記断片が、二官能性架橋剤によってＶＬＰに付加される、請求項９６のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９８】
前記ＶＬＰが、カプシドサブユニットあたり、少なくとも１つの非天然アミノ酸を含有する、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項９９】
ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約３分の１が、ディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子を付加するために使用される、請求項９８のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１００】
２４０のウイルスコートタンパク質のうちの最大で１２０が、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子をディスプレイする、請求項９９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０１】
前記ＨｅｐＢコアが、図１に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０２】
前記フラジェリンが、図２に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０３】
前記ＧＭ−ＣＳＦが、ヒトＧＭ−ＣＳＦであり、図３に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０４】
前記ＩＬ−１５が、ヒトＩＬ−１５であり、図４に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０５】
前記ＣｐＧ−Ｘが、図５に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０６】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｉ）（Ａ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０７】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｉ）（Ｂ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０８】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩ）（Ｃ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１０９】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩ）（Ｄ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１０】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩＩ）（Ｅ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１１】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩＩ）（Ｆ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１２】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＶ）（Ｇ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１３】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＶ）（Ｈ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１４】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｖ）（Ｉ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１５】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｖ）（Ｊ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１６】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩ）（Ｋ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１７】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩ）（Ｌ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１８】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩ）（Ｍ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１１９】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩ）（Ｎ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２０】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩＩ）（Ｏ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２１】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩＩ）（Ｐ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２２】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＸ）（Ｑ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２３】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＸ）（Ｒ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２４】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｘ）（Ｓ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２５】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｘ）（Ｔ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２６】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｉ）（Ａ）および図６（Ｉ）（Ｂ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２７】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩ）（Ｃ）および図６（ＩＩ）（Ｄ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２８】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＩＩ）（Ｅ）および図６（ＩＩＩ）（Ｆ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１２９】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＶ）（Ｇ）および図６（ＩＶ）（Ｈ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３０】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｖ）（Ｉ）および図６（Ｖ）（Ｊ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３１】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩ）（Ｋ）および図６（ＶＩ）（Ｌ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３２】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩ）（Ｍ）および図６（ＶＩＩ）（Ｎ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３３】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＶＩＩＩ）（Ｏ）および図６（ＶＩＩＩ）（Ｐ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３４】
前記Ｉｄ抗原が、図６（ＩＸ）（Ｑ）および図６（ＩＸ）（Ｒ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３５】
前記Ｉｄ抗原が、図６（Ｘ）（Ｓ）および図６（Ｘ）（Ｔ）に示す配列またはその一部を含む、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３６】
前記ディスプレイポリペプチドが、図７ａ、図７ｂ、図７ｃ、図７ｄ、図７ｅ、図７ｆ、図７ｇ、図７ｈまたは図７ｉに示す配列のいずれかから選ばれる、請求項１、３、１１または１３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１３７】
ＶＬＰと混合された治療剤をさらに含み、ここで、該治療剤が、レナリドミド、イピリムマブ、リツキシマブ、アレムツズマブ、オファツムマブ、フラボピリドール、アドリアマイシン、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、シスプラチン、ＡＢＴ−１９９、アシビシン；アクラルビシン；アコダゾール塩酸塩、アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン；アメタントロン酢酸塩；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アンスラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；ビスアントレン塩酸塩；ビゼレシン；ブレオマイシン硫酸塩；ブレキナールナトリウム；ブロピリミン；ブルスファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー；カルボプラチン；カルビシン塩酸塩；カルゼレシン；セデフィンゴール；クロラムブシル；シロレマイシン；クラドリビン；クリスナトールメシレート；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダウノルビシン塩酸塩；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；デザグアニンメシレート；ジアジクオン；ドキソルビシン；ドキシルビシン塩酸塩；ドロロキシフェン；ドロロキシフェンクエン酸塩；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン；エダトレキセート；エフロルニチン塩酸塩；エルサミトルシン；エンロプラチン；エンプロマート；エピプロピジン；エピルビシン塩酸塩；エルブロゾール；エソルビシン塩酸塩；エストラムスチン；リン酸エストラムスチンナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；エトポシドリン酸塩；エトプリン；ファドロゾール塩酸塩；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；フルロシタビン、ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビン塩酸塩；ヒドロキシ尿素；イブルチニブ；イデラリシブ；イダルビシン塩酸塩；イフォスファミド；イルモホシン；ＩＮＣＢ−４００９３、ＩＰＩ−１４５、ＩＰＩ−４４３、イプロプラチン；イリノテカン塩酸塩；ランレオチド酢酸塩；レトロゾール；ロイプロリド酢酸塩；リアロゾール塩酸塩；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；メイタンシン；メクロレタミン塩酸塩；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン；ミトクロミン；ミトギリン；マイトマルシン；マイトマイシン；マイトスパー；ミトタン；ミトキサントロン塩酸塩；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オビヌツズマブ；オルマプラチン；オキシスラン；ペグアスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン；ピロキサントロン塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポリフィロマイシン；プレドニムスチン；プロカルバジン塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン；リボプリン；リツキシマブ；ログレチミド；サフィンゴール；サフィンゴール塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン；スパルホサートナトリウム；スパルソマイシン；スピロゲラニウム塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル；タリソマイシン；テコガランナトリウム；テガフール；テロキサントロン塩酸塩；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリンチオグアニン；チオテーパ；チアゾフリン；チラパザミン；トレミフェンクエン酸塩；トレストロン酢酸塩；リン酸トリシリビン；トリメトレキセート；トリメトレキセートグルクロン酸塩；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール；ウラシルマスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸塩；ビンクリスチン硫酸塩；ビンデシン；ビンデシン硫酸塩；ビンピジン硫酸塩；ビングリシナート硫酸塩；硫酸ビンロイロシン；ビノレルビン酒石酸塩；硫酸ビンロシジン；硫酸ビンゾリジン；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；およびゾルビシン塩酸塩から成る群から選ばれる抗癌剤である、請求項６２の組成物。
【請求項１３８】
ＶＬＰと混合された治療剤をさらに含み、ここで、前記治療剤は、ナイトロジェンマスタード（例えば、ベンダムスチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン）、エチレンイミンおよびメチルメラミン（例えば、ヘキサメチルメラミン、チオテーパ）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシン）またはトリアゼン（デカルバジン（decarbazine））から成る群から選ばれるアルキル化剤である、請求項６２の組成物。
【請求項１３９】
前記感染症がウイルス感染症である、請求項９２の方法。
【請求項１４０】
ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約半分が、ディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子を付加するために使用される、請求項９９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４１】
ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約３分の２が、ディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子を付加するために使用される、請求項９９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４２】
ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約５分の４が、ディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子を付加するために使用される、請求項９９のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４３】
Ｉｄ抗原およびＣｐＧ−Ｘから成る、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４４】
Ｉｄ抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）から成る、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４５】
有効量の請求項１４３または１４４のＶＬＰおよび医薬として許容可能な担体、結合剤、希釈剤、アジュバント、賦形剤、および／またはビヒクルを含む、医薬組成物。
【請求項１４６】
前記ＶＬＰが、少なくとも１つの非天然アミノ酸を含有する、請求項１、３、１１、１３、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４７】
前記ＶＬＰが、カプシドサブユニットあたり少なくとも１つの非天然アミノ酸を含有する、請求項１、３、１１、１３、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１４８】
前記ＣｐＧが、ＶＬＰあたり１０〜５０コピー、ＶＬＰあたり４０〜８０コピー、ＶＬＰあたり７０〜１７０コピーまたはＶＬＰあたり１６０〜２４０コピーに等価な平均量で、ＶＬＰに付加される、請求項１４３のＶＬＰ。
【請求項１４９】
前記ＣｐＧが、前記ＣｐＧ対ＶＬＰモノマーの比が、１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４３のＶＬＰ。
【請求項１５０】
前記ＣｐＧが、前記ＣｐＧ対ＶＬＰの重量比が、１：１０００〜１：１００、１：１００〜１：１０、１：１０〜１：４、１：４〜１：２または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４３のＶＬＰ。
【請求項１５１】
前記ＧＭ−ＣＳＦが、ＶＬＰあたり１０〜５０コピー、ＶＬＰあたり４０〜８０コピー、ＶＬＰあたり７０〜１７０コピーまたはＶＬＰあたり１６０〜２４０コピーに等価な平均量で、前記ＶＬＰに付加される、請求項１４４のＶＬＰ。
【請求項１５２】
前記ＧＭ−ＣＳＦが、前記ＧＭ−ＣＳＦ対ＶＬＰモノマーの比が１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４４のＶＬＰ。
【請求項１５３】
前記ＧＭ−ＣＳＦが、前記ＧＭ−ＣＳＦ対ＶＬＰの重量比が、１：１０００〜１：１００、１：１００〜１：１０、１：１０〜１：４、１：４〜１：２または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４４のＶＬＰ。
【請求項１５４】
前記ＣｐＧおよびＩｄ抗原が、前記ＣｐＧ対Ｉｄの比が１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４３のＶＬＰ。
【請求項１５５】
前記ＧＭ−ＣＳＦおよびＩｄ抗原が、前記ＧＭ−ＣＳＦ対Ｉｄの比が１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１に等価であるような量で前記ＶＬＰタンパク質モノマーに付加される、請求項１４４のＶＬＰ。
【請求項１５６】
前記、Ｉｄ抗原が、トリペプチドモチーフ、（ＧまたはＡまたはＳ）−（Ｘ）−Ｉ、式中、Ｘは任意のアミノ酸である、の直前のアミノ酸モチーフ、Ｑ−（ＡまたはＰ）−（ＰまたはＬ）−Ｇ−（ＱまたはＫ）−Ｇ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−（ＭまたはＶまたはＩ）を有するイムノグロブリン可変重（ＶＨ）鎖ドメインまたは配列を含む、請求項１４３または１４４のＶＬＰ。
【請求項１５７】
前記免疫応答が、体液性免疫応答である、請求項６４、６６、６７または６８の組成物。
【請求項１５８】
前記免疫応答が、細胞性免疫応答である、請求項６４、６６、６７または６８の組成物。
【請求項１５９】
前記免疫応答が、体液性免疫応答および細胞性免疫応答の両方である、請求項６４、６６、６７または６８の組成物。
【請求項１６０】
腫瘍関連抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）から成る、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６１】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、以下：
ａ．腫瘍関連抗原および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｂ．腫瘍関連抗原およびフラジェリン；
ｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｄ．腫瘍関連抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；
ｅ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｆ．腫瘍関連抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；
ｇ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｈ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｉ．腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｋ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；
ｌ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数の免疫刺激剤；
ｍ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．腫瘍関連抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．腫瘍関連抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．腫瘍関連抗原および３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；ならびに
ｓ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド
のいずれかから選ばれる、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含み、ここで、前記腫瘍関連抗原が、以下：Ｉｄ抗原、１７−１Ａ、７０７−ＡＰ、ＡＦＰ、アネキシンＩＩ、ＡＲＴ−４、ＢＡＧＥ、ＢＡＧＥ−１、ｂ−カテニン、ＢＣＧ、ｂｃｒ／ａｂｌ、Ｂｃｒ／ａｂｌ  ｅｌ４ａ２融合ジャンクション、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、水疱性類天疱瘡抗原−１、ＣＡ  １９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ２１５、ＣＡＧ−３癌ペプチド、ＣＡＭＥＬ腫瘍抗原、癌−精巣抗原、カスパーゼ−８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＤ１６、ＣＤ２０、ＣＤ３、ＣＤ３０、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ−４、ＣＤＲ３、ＣＥＡ、クラスター５、クラスター５Ａ、サイクリン依存性キナーゼ−４、Ｃｙｐ−Ｂ、ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、Ｄｅｋ−ｃａｉｎ、Ｅ７、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖｌＩ  １、ＥＧＰ４０、ＥＬＦ２  Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＦｕｃＧＭ  １、Ｇ２５０、ＧＡ７３３、ＧＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１−８、胃癌関連抗原、ＧＤ２、ＧＤ３、グロボＨ、グリコホリン、ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧｎＴＶ、Ｇｎ−Ｔ−Ｖ、ｇｐ１００、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥ、高分子量関連抗原、高分子量プロテオグリカン（ＩＭＰＧ）、ＨＰＶ−１６  Ｅ６、ＨＰＶ−１６  Ｅ７、ＨＰＶＥ６、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト乳脂肪球（ＨＭＦＧ）、ｉＣＥ、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＫ−ＬＣ−１、ＫＭ−ＨＮ−１、Ｌ６、ＬＡＧＥ−Ｉ、ＬｃＯｓｅ４Ｃｅｒ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｌｅｗｉｓ  Ａ、Ｌｅｗｉｓ  ｖ／ｂ、Ｍタンパク質、ＭＡＧＥ−１、ＭＶＣ、ＭＡＧＥ−Ａ１−１２、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＨＧＥ−３、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＭＣ１Ｒ、ＭＥ４９１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ムチン、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、突然変異ｐ５３、ミオシン、ＭＺ２−Ｅ、Ｎ９ノイラミニダーゼ、ＮＡ８８、ＮＡ８８−Ａ、鼻咽頭癌抗原、ＮＧＡ、ＮＫｌ／ｃ−３、ＢＣＲエクソン１、１３、１４とＡＢＬエクソン４のＮｏｖｅｌ  ｂｃｒ／ａｂｌ融合遺伝子、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−２、ＮＹ−ＥＳＯ−１ｂ、ＯＣ１２５、骨肉腫関連抗原−１、ｐ１５、ｐ１９０マイナーｂｃｒ−ａｂｌ（ｅｌａ２）、ｐ５３、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ、ポリシアル酸、ＰＲＡＭＥ腫瘍抗原、ＰＳＡ、ＰＳＭ、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、シアリルＬｅＡ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−２、ＳＳＸ−４、表面イムノグロブリン、ＴＡＧ−１、ＴＡＧ−２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＰＩ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、ＴＲＰ−２、ＴＲＰ２−ＩＮＴ２、ｈＴＲＴ，腫瘍関連糖タンパク質−７２、（ＴＡＧ−７２）、チロシナーゼ、ｕ−ＰＡ、ＷＴ１およびＸＡＧＥ−ｌｂ、ならびにその免疫刺激性断片から成る群から選ばれる、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６２】
ウイルスゲノムを含まないＶＬＰであって、以下：
ａ．腫瘍関連抗原および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｂ．腫瘍関連抗原およびフラジェリン；
ｃ．腫瘍関連抗原、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｄ．腫瘍関連抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；
ｅ．腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｆ．腫瘍関連抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；
ｇ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｈ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｉ．腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；
ｊ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；
ｋ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；
ｌ．腫瘍関連抗原および１つまたは複数の免疫刺激剤；
ｍ．腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；
ｎ．腫瘍関連抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；
ｏ．腫瘍関連抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；
ｐ．腫瘍関連抗原および３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；
ｑ．腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；
ｒ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；ならびに
ｓ．腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド
のいずれかから選ばれる、２つ以上のディスプレイポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子あるいはその一部を含み、ここで、前記腫瘍関連抗原が、以下：１７−１Ａ、７０７−ＡＰ、ＡＦＰ、アネキシンＩＩ、ＡＲＴ−４、ＢＡＧＥ、ＢＡＧＥ−１、ｂ−カテニン、ＢＣＧ、ｂｃｒ／ａｂｌ、Ｂｃｒ／ａｂｌ  ｅｌ４ａ２融合ジャンクション、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、水疱性類天疱瘡抗原−１、ＣＡ  １９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ２１５、ＣＡＧ−３癌ペプチド、ＣＡＭＥＬ腫瘍抗原、癌−精巣抗原、カスパーゼ−８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＤ１６、ＣＤ２０、ＣＤ３、ＣＤ３０、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ−４、ＣＤＲ３、ＣＥＡ、クラスター５、クラスター５Ａ、サイクリン依存性キナーゼ−４、Ｃｙｐ−Ｂ、ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、Ｄｅｋ−ｃａｉｎ、Ｅ７、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖｌＩ  １、ＥＧＰ４０、ＥＬＦ２  Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＦｕｃＧＭ  １、Ｇ２５０、ＧＡ７３３、ＧＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１−８、胃癌関連抗原、ＧＤ２、ＧＤ３、グロボＨ、グリコホリン、ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧｎＴＶ、Ｇｎ−Ｔ−Ｖ、ｇｐ１００、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥ、高分子量関連抗原、高分子量プロテオグリカン（ＩＭＰＧ）、ＨＰＶ−１６  Ｅ６、ＨＰＶ−１６  Ｅ７、ＨＰＶＥ６、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト乳脂肪球（ＨＭＦＧ）、ｉＣＥ、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＫ−ＬＣ−１、ＫＭ−ＨＮ−１、Ｌ６、ＬＡＧＥ−Ｉ、ＬｃＯｓｅ４Ｃｅｒ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｌｅｗｉｓ  Ａ、Ｌｅｗｉｓ  ｖ／ｂ、Ｍタンパク質、ＭＡＧＥ−１、ＭＶＣ、ＭＡＧＥ−Ａ１−１２、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＨＧＥ−３、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＭＣ１Ｒ、ＭＥ４９１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ムチン、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、突然変異ｐ５３、ミオシン、ＭＺ２−Ｅ、Ｎ９ノイラミニダーゼ、ＮＡ８８、ＮＡ８８−Ａ、鼻咽頭癌抗原、ＮＧＡ、ＮＫｌ／ｃ−３、ＢＣＲエクソン１、１３、１４とＡＢＬエクソン４のＮｏｖｅｌ  ｂｃｒ／ａｂｌ融合遺伝子、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−２、ＮＹ−ＥＳＯ−１ｂ、ＯＣ１２５、骨肉腫関連抗原−１、ｐ１５、ｐ１９０マイナーｂｃｒ−ａｂｌ（ｅｌａ２）、ｐ５３、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ、ポリシアル酸、ＰＲＡＭＥ腫瘍抗原、ＰＳＡ、ＰＳＭ、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、シアリルＬｅＡ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−２、ＳＳＸ−４、表面イムノグロブリン、ＴＡＧ−１、ＴＡＧ−２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＰＩ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、ＴＲＰ−２、ＴＲＰ２−ＩＮＴ２、ｈＴＲＴ，腫瘍関連糖タンパク質−７２、（ＴＡＧ−７２）、チロシナーゼ、ｕ−ＰＡ、ＷＴ１およびＸＡＧＥ−ｌｂ、ならびにその免疫刺激性断片から成る群から選ばれる、前記ウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６３】
前記腫瘍関連抗原が、Ｉｄ抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）である、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６４】
前記腫瘍関連抗原が、Ｉｄ抗原およびＣｐＧである、請求項１のウイルスゲノムを含まないＶＬＰ。
【請求項１６５】
対象における腫瘍を処置する方法であって、前記対象に有効量の請求項１〜３のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを投与し、それによって、前記対象を処置する工程を含む、前記方法。
【請求項１６６】
疾患または障害に罹っている対象を処置する方法であって、前記対象に有効量の請求項６２の組成物を投与し、それによって、前記対象を処置する工程を含む、前記方法。
【請求項１６７】
対象における腫瘍を阻止する方法であって、前記対象に有効量の請求項１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを投与し、それによって、前記対象における前記腫瘍を阻止する工程を含む、前記方法。
【請求項１６８】
対象における疾患または障害を阻止する方法であって、有効量の請求項１４５の組成物を、それを必要とする前記対象に投与し、それによって、前記対象における前記疾患または障害を阻止する工程を含む、前記方法。
【請求項１６９】
対象における腫瘍の進行を予防する方法であって、前記対象に有効量の請求項１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを投与し、それによって、前記対象における前記腫瘍の進行を予防する工程を含む、前記方法。
【請求項１７０】
対象における疾患または障害の進行を予防する方法であって、前記対象に有効量の請求項１４５の組成物を投与し、それによって、前記対象における前記疾患または障害の進行を予防する工程を含む、前記方法。
【請求項１７１】
前記障害が、重症筋無力症、原発性胆汁性肝硬変症、拡張型心筋症、心筋炎、拡張型心筋症、１型多腺性自己免疫症候群（ＡＰＳ−１）、自己免疫性肝炎、嚢胞性線維症血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、グッドパスチャー症候群、クローン病、冠状動脈不全、落葉性天疱瘡、視神経脊髄炎、尋常性天疱瘡、ギランバレー症候群、１型糖尿病、スティッフマン症候群、ラスムッセン脳炎、自己免疫性委縮性胃炎、アジソン病、インスリン低血糖症候群（平田病）、Ｂ型インスリン抵抗性、アカントーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療耐性ライム関節炎、多発性神経症、多発性硬化症、脱髄疾患、リウマチ熱、アトピー性皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変症、グレーブス病、自己免疫性甲状腺機能低下症、ヴィティラーゴ、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性橋本甲状腺炎、セリアック病および転移性黒色腫から成る群から選ばれる自己免疫障害である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７２】
前記障害が、ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、水疱性類天疱瘡、妊娠性疱疹、良性粘膜類天疱瘡、慢性特発性蕁麻疹、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、多発性筋炎、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病、内臓リーシュマニア症および全身性自己免疫疾患から成る群から選ばれる全身性自己免疫障害である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７３】
前記障害が、神経症、小細胞肺癌、肝細胞癌腫、肝臓癌、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティッフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律神経病、癌、ＳＬＥ、肝細胞癌腫、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群、ランバート・イートン筋無力症候群および腫瘍随伴性小脳変性から成る群から選ばれる、癌または腫瘍随伴性自己免疫障害である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７４】
前記障害が、血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７５】
前記血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害が、自己免疫性ＣＩ不全、ＳＬＥ、膜増殖性糸球体腎炎、ＲＡ、全身性硬化症、自己免疫性血小板減少性紫斑病、免疫不全障害およびアテローム性動脈硬化から成る群から選ばれる、請求項１７４の方法。
【請求項１７６】
前記障害が、Ｂ細胞悪性腫瘍である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７７】
前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性白血病、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着病、重鎖病）および濾胞性リンパ腫（例えば、グレードI、II、IIIまたはIV）である、請求項１７６の方法。
【請求項１７８】
前記障害が、Ｔ細胞悪性腫瘍である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１７９】
前記Ｔ細胞悪性腫瘍が、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（Ｔガンマリンパ球増殖性疾患）、菌状息肉腫／セザリー症候群、成人のびまん性侵攻性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（混合細胞型および大細胞、免疫芽細胞性）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、血管中心性リンパ腫（リンパ腫様肉芽腫症多型性網膜症）、急性リンパ球性白血病またはリンパ芽球性リンパ腫である、請求項１７８の方法。
【請求項１８０】
前記障害が、感染症である、請求項１６６、１６８または１７０の方法。
【請求項１８１】
前記感染症が、ポリオ、ＲＳＶ感染症、ＡＩＤＳ、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｅ型肝炎感染症、狂犬病、ヘルペス、ＨＳＶ、ＥＢＶ、インフルエンザ、天然痘、粘液腫感染症、リノウイルス感染症、コロナウイルス感染症、百日咳、アデノウイルス感染症、パピローマウイルス感染症、またはＨＴＬＶ感染症である、請求項１８０の方法。
【請求項１８２】
前記Ｉｄ抗原が、アミノ酸モチーフＹＹＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＮ、ＹＹＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮ、ＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩ、ＹＴＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩ、ＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩ、ＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＹ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＹ、ＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳ、ＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮ、ＹＹＷＣＷＩＲＱＰＬＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮ、ＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＹまたはＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＩを有するイムノグロブリン可変重（ＶＨ）鎖ドメインまたは配列を含む、請求項１４３または１４４のＶＬＰ。
【請求項１８３】
対象における疾患または障害に関連した腫瘍細胞を阻止するための方法であって、以下：
ａ．前記対象からサンプルを得る工程；
ｂ．前記サンプルからの疾患または障害に関連したＩｄ抗原を同定する工程；
ｃ．組換えＩｄ抗原またはその断片を生成する工程；
ｄ．前記組換えＩｄ抗原またはその断片を含む、請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを作成する工程；および
ｅ．前記腫瘍細胞に対する免疫応答を可能とするために、ステップ（ｄ）からの請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰの有効量を前記対象に投与し、それによって前記腫瘍細胞を阻止する工程
を含む、前記方法。
【請求項１８４】
対象における疾患または障害を阻止するための方法であって、以下：
ａ．前記対象からサンプルを得る工程；
ｂ．前記サンプルからの疾患または障害に関連したＩｄ抗原を同定する工程；
ｃ．組換えＩｄ抗原またはその断片を生成する工程；
ｄ．前記組換えＩｄ抗原またはその断片を含む、請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを作成する工程；および
ｅ．腫瘍細胞に対する免疫応答を可能とするために、ステップ（ｄ）からの請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰの有効量を前記対象に投与し、それによって前記ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、水疱性類天疱瘡、妊娠性疱疹、良性粘膜類天疱瘡、慢性特発性蕁麻疹、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、多発性筋炎、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病、内臓リーシュマニア症および全身性自己免疫疾患または障害を阻止する工程
を含む、前記方法。
【請求項１８５】
疾患または障害に罹っている対象を処置するための方法であって、以下：
ａ．前記対象からサンプルを得る工程；
ｂ．前記サンプルからの疾患または障害に関連したＩｄ抗原を同定する工程；
ｃ．組換えＩｄ抗原またはその断片を生成する工程；
ｄ．前記組換えＩｄ抗原またはその断片を含む、請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを作成する工程；および
ｅ．腫瘍細胞に対する免疫応答を可能とするために、ステップ（ｄ）からの請求項１、３、１１、１４３または１４４のウイルスゲノムを含まないＶＬＰの有効量を前記対象に投与し、それによって疾患または障害を阻止する工程
を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本願全体を通じて、様々な出版物が参照される。これらの出版物の開示は、本発明が関連する技術水準をより完全に記述するために、参照することによりその全体が本願に組み込まれる。
【０００２】
自己免疫疾患、癌および感染症はすべて、良い解決法のない主要な健康上の問題である。ＮＩＨは、２３５０万人の米国人が、これまで記述されてきた８０を超える自己免疫疾患に罹患していると推定する。主要な自己免疫疾患のうちの２９についての最近の出版物は、７．６〜９．４％のさらに高い世界的罹患率を推定する。米国癌学会は、２０１２年に、１，６３８，９１０人超が新たに癌と診断され、５７７，１９０人が癌により死亡したと推定する。慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）および非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）のような多くの癌は、なお、治癒しない不治の病である。患者は、耐え難く、多くの有害イベントを伴う何年もの治療に直面する可能性がある。ＮＨＬ患者の５年相対生存率は、濾胞性リンパ腫の８５％からマントル細胞リンパ腫の５４％にわたる。感染症も、依然として問題であり：２つの例を引用すると、２０１０年には、８９９，０００人の米国人がＨＩＶを抱えて生きており、毎年、インフルエンザ関連死は、平均して３６，０００である。
【０００３】
ワクチンは、水疱瘡およびさらにインフルエンザのような感染症における用途があるため、感染症のためのより有効なワクチンは明らかに価値のあるものであろう。治療用ワクチンは、癌においても非常に優れた潜在能力を有し：シプリューセルＴは、現在承認されている前立腺癌のための樹状細胞ワクチンであり、歴史的なイディオタイプ（Ｉｄ）ワクチンプログラムは、特異的な抗Ｉｄ免疫応答が、無増悪および全生存と強力に相関することを実証した（Ai 2009、Bendandi 2009、Bendandi 1999、Hsu 1997、Inoges 2011、Inoges 2011、Inoges 2009、Inoges 2006、Kwak 1992、Kwak 1996、Levy 2008、McCormick 2008、Schuster 2009）。不運にも、先のワクチンは、強力な免疫応答を一貫して起こすことはなく、シプリューセルＴによる治療は、多くの患者において有効でない煩雑正なプロセスである。抗原特異的なアプローチが自己免疫性状態においても試みられたが、成功は限られたものであった。
【０００４】
本発明は、癌、感染症および自己免疫疾患に対する治療剤として作用するのに十分な免疫応答を誘導する、本発明の多価ＶＬＰ上の免疫刺激剤、病原体関連分子パターン受容体アゴニスト、腫瘍特異抗原、腫瘍関連抗原および化学合成化合物を含むディスプレイポリペプチドの新規な特異的組合せを提供することによって、本分野の課題を解決する。（Basith 2011、Cooper 2009、Fontoura 2005、Hainsworth 2005、Hennessy 2010、Krieg 2006、Krieg 2008、Levy 2008、Lim 2010、Lim 2011、Miller 1982、Mizel 2010、Murata 2008、Siano 2008、Spina 2005、Witzig 2005、Zimmerman 2012、Zimmermann 2008）。
【発明の概要】
【０００５】
以前に利用可能であった既知のコンジュゲートよりも強力な免疫応答を本発明が生じ得るように、本発明の多価ウイルス様粒子（ＶＬＰ）は、既知の病原体の多価の性質を模倣する。ある実施態様において、本発明の組成物は、Ｔｈ１、Ｔｈ２またはＴｈ１／Ｔｈ２型の反応に向かう免疫応答を刺激して、抗腫瘍効果を最大にすることがでる。本発明は、患者の改善された生存および生活の質のために、癌の既存の免疫耐性を克服する一方、優れた耐容性を維持する個別化された治療用ワクチンを提供する。
【０００６】
一実施態様において、本発明の多価ＶＬＰは、複数の特別な免疫刺激剤およびＩｄのコピーを各ＶＬＰに組み込んでいる点で、他のアプローチとは基本的に異なる。多価ＶＬＰは、より強力でより一貫性のある免疫刺激を有するように設計され、１ヶ月などの短期間で製造可能であり、化学療法の前、それとともに、または後などのその使用を可能としている。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】Ｂ型肝炎コア抗原（ＨＢＣ）のアミノ酸およびヌクレオチド配列。Ｍは、ＨｅｐＢコアへのｎｎＡＡの組み込み部位を示す。
【図２】フラジェリン分子のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図３】ヒトＧＭ−ＣＳＦのアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図４】ヒトＩＬ−１５のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図５】ＣｐＧ−Ｘの特別な実施態様のヌクレオチド配列。ＶＬＰに付加可能なＣｐＧの実施態様の１６の異なるヌクレオチド配列が示される。
【図６Ａ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図６Ｂ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図６Ｃ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図６Ｄ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図６Ｅ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図６Ｆ】Ｉｄ抗原の特別な実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。パネルａ〜ｔは、ＣＬＬ患者由来の重鎖および軽鎖可変領域配列を表す。
【図７Ａ】ディスプレイポリペプチドの８つの実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図７Ｂ】ディスプレイポリペプチドの８つの実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図７Ｃ】ディスプレイポリペプチドの８つの実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図７Ｄ】ディスプレイポリペプチドの８つの実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図７Ｅ】ディスプレイポリペプチドの８つの実施態様のアミノ酸およびヌクレオチド配列。
【図８】Ｂ型肝炎コアの精製。左のパネル：ＣＦＰＳ反応中に、ＨＢＣおよび他のタンパク質の間に示差沈殿が観察される。レーン（１）マーカー；（２）ＣＦＰＳ反応の可溶性画分；レーン（３）〜（６）再懸濁された、異なる濃度の硫酸アンモニウムからの沈殿物。右のパネル：バッファー中に再懸濁されたレーン４からの沈殿物に続くサイズ排除クロマトグラフィー（レーン７および８）。示されるのは、マーカーレーン（１’）およびプールされた代表的分画である。収量は、１０ｍｌのＣＦＰＳ反応からの４ｍｇのタンパク質であった。
【図９】ｍｕＧＭ−ＣＳＦおよびフラジェリについての非天然アミノ酸（ｎｎＡＡ）を含む発現の試験。３時間（左）および一夜（右）の反応において試験した、異なるバッファー条件。一夜行った反応２の条件は、２００μｇ／ｍｌのＦＬＡＧエピトープでタグ付けされたｎｎＡＡ含有ｍｕＧＭ−ＣＳＦおよび６５０μｇ／ｍｌ超のＦＬＡＧエピトープでタグ付けされたｎｎＡＡ含有フラジェリンタンパク質を産生した。
【図１０】「クリック」ケミストリーの抗ＦＬＡＧ抗体ウエスタンブロット分析。レーン１／１’：分子量マーカー。レーン２：コンジュゲーションしたｈｕＧＭ−ＣＳＦ（３２ｋＤａに主要バンド）。レーン３：天然のｈｕＧＭ−ＣＳＦ  １５．５ｋＤａ。レーン４：コンジュゲーションしたｍｕＧＭ−ＣＳＦ（３２ｋＤａに主要バンド）。レーン５：天然のｍｕＧＭ−ＣＳＦ  １５ｋＤａ。レーン６：コンジュゲーションしたＳｃＦＶ  Ｉｄ（５４ｋＤａにマイナーバンド）。レーン７：天然のＳｃＦＶ  Ｉｄ  ３７ｋＤａ。レーン２’：コンジュゲーションしたフラジェリン（６４ｋＤａに主要バンド）。レーン３’：天然のフラジェリン  ５２．５ｋＤａ。
【図１１】マウスＩＬ−１５受容体／リガンド相互作用の速度論的分析。ｍｕＩＬ−１５の３つの濃度が、ｍｕＬＩ−１５受容体でコーティングしたＦｏｒｔｅＢｉｏセンサーによって分析された。上の線：２００ｎＭ、中間：１００ｎＭおよび下：５０ｎＭ。センサーのデータおよび１：１（受容体：リガンド）の理論的モデルへのベストフィット（滑らかな曲線）が示される。
【図１２】ＨＥＫ  Ｂｌｕｅ  ｈＴＬＲ−５アッセイ。ヒトＴＬＲ５を発現するＨＥＫ２９３細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ  ｈｋｂ−ｈｔｌｒ５）を、可変濃度の参照フラジェリン（ＡｄｉｐＧｅｎ  ＡＧ−４０Ｂ−００２５）とともに、６（左のバー）または２４時間（右のバー）、アッセイした。このアッセイは、遊離のおよびＶＬＰに付加されたフラジェリンの活性を明らかにするために使用された。
【図１３】アジド活性の分析。アジド修飾ＨＢＣおよび対照タンパク質の蛍光およびクマシー染色した還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥ（reducing SDS-PAGE）ゲル画像。１．サイズマーカー。２．精製ＨＢＣ。３．ＢＳＡ（陰性対照）。４．ＢＳＡ−アジド（陽性対照）。５．沈殿したＨＢＣ。レーン２、４および５において、タンパク質に関連した蛍光により、アジド含有タンパク質によるホスフィン反応が確認される。
【図１４】ワクチン接種、初回腫瘍負荷（移植後（ｐｉ）３４、０日目）および腫瘍再負荷（ｐｉ１３１、９７日目）中のマウスの平均体重。
【図１５】３８Ｃ１３皮下腫瘍の平均腫瘍体積。
【図１６】３８Ｃ１３腫瘍細胞を負荷したマウスの生存（エンドポイントまでの時間、ＴＴＥ）。両パネルに表された、３８Ｃ１３ＩｇＭ−ＫＬＨを有する８群の動物およびブランクＶＬＰに関するカプラン−マイヤー曲線が示される。パネルＡにおいては、オーバーラップを防ぐために、３８Ｃ１３ＩｇＭ−ＫＬＨの曲線は、垂直に−１％微調整されている。パネルＢにおいては、オーバーラップを防ぐために、以下の微調整：ＢＢ−００５（−１％）、ＢＢ−００４（＋１％）、３８Ｃ１３ＩｇＭ−ＫＬＨ（−２％）が使用された。
【図１７】全群についての、イベント状況による免疫応答の結果。抗Ｉｄ免疫応答アッセイから得られる値は、全腫瘍負荷群についてプロットされる。三角は、エンドポイント腫瘍量に達した動物を示す。丸は、試験全体を通じて腫瘍を有さないままであった動物を示す。
【発明の詳細な説明】
【０００８】
定義
本明細書中で使用される「ワクチン」は、投与された場合に、疾患、障害または感染症に罹っている哺乳動物において免疫応答および防御免疫を刺激する、本発明のウイルス様粒子（ＶＬＰ）または組成物を含む製剤である。治療用ワクチンは、癌、ウイルス感染症または自己免疫疾患の発症の間またはその後に投与され得る。予防処置用ワクチンは、癌、ウイルス感染症または自己免疫疾患の発症の前に投与されることができ、癌、ウイルス感染症または自己免疫疾患の発症を予防することを目的とする。
【０００９】
本明細書中で使用される用語「Ｉｄ抗原」は、イディオタイプタンパク質（Ｉｄ）を含む。Ｉｄ抗原は、イムノグロブリン（Ｉｇ）、Ｉｇドメインまたはその断片であり得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、Ｉｇ，Ｉｇフォールド、Ｉｇドメインまたはその断片の一次アミノ酸配列であることができる。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、Ｉｇ、Ｉｇフォールド、Ｉｇドメインもしくはその断片の四次、三次、二次もしくは一次構造、またはＩｇ、Ｉｇフォールド、Ｉｇドメインもしくはその断片の四次、三次、二次もしくは一次構造の組合せであり得る。Ｉｄ抗原は、Ｂリンパ球によって抗体またはイムノグロブリンとして、Ｔリンパ球によってＴ細胞受容体（ＴＣＲ）鎖として、抗原提示のためのクラスＩ主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）タンパク質およびベータ−２ミクログロブリン（β２Ｍ）として、または抗原提示のためのクラスＩＩＭＨＣとして天然に発現されることができる。
【００１０】
例えば、Ｉｄ抗原は、Ｂ細胞悪性腫瘍によって発現される抗原もしくはイムノグロブリンまたはＴ細胞悪性腫瘍によって発現されるＴ細胞受容体（ＴｃＲ）であり得る。イムノグロブリンは、イムノグロブリン全体またはイムノグロブリン断片であり得る。断片は、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆ（ａｂ’）２断片または一本鎖可変断片（single chain variable fragment）（ｓｃＦｖ）を含み得るが、これらに限定されない。好ましい実施態様において、Ｉｄ抗原はｓｃＦｖである。
【００１１】
Ｔ細胞受容体は、Ｉｇフォールドまたはドメインを有するアルファ（α−）およびベータ（β−）鎖を、抗原結合／ＭＨＣ結合可変（Ｖ）領域およびジスルフィド結合形成／鎖間架橋定常（Ｃ）領域中に含み得る。Ｔ細胞受容体は、Ｉｇフォールドまたはドメインを有するガンマ（γ−）およびデルタ（δ−）鎖もＶおよびＣ領域中に含み得る。Ｔ細胞受容体は、Ｔ細胞受容体全体またはＴ細胞受容体断片であり得る。断片は、一本鎖Ｔ細胞受容体であり得る。
【００１２】
イムノグロブリン分子は、重鎖（Ｈ）および軽鎖（Ｌ）から成り、これらは、高度に特異的な可変領域をそれらのアミノ末端に含む。ＨおよびＬ鎖の可変領域（ＶＨおよびＶＬ）は結合されて、イムノグロブリン（Ｉｇ）タンパク質の独特の抗原認識または抗原結合部位を形成する。Ｉｇ分子の可変領域は、抗原またはイディオタイプとして認識されることのできる決定基（すなわち、分子形状）を含有する。
【００１３】
用語「イディオタイプ」は、イムノグロブリン、Ｂ細胞受容体またはＴ細胞受容体の抗原またはエピトープ決定基（すなわち、イディオトープ）の特有の組をさす。
【００１４】
用語「イディオトープ」は、イムノグロブリン分子のＶ領域の一部に沿って位置する単一のイディオタイプエピトープをさす。
【００１５】
用語「抗イディオタイプ抗体」または文法上の等価物は、イディオタイプまたはＩｇタンパク質のＶ領域における１つもしくは複数のイディオトープに対する抗体をさす。
【００１６】
本明細書中で使用されるとおり、用語「抗体」は、無傷の抗体または特異的な結合に関して無傷の抗体と競合するその部分、断片または誘導体をさし、キメラ、ヒト化、完全なヒト抗体および多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を含む。抗体は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体、一本鎖ＦＶ抗体断片（ｓｃＦＶ）、Ｆａｂ断片およびＦ（ａｂ）２断片であり得る。
【００１７】
本明細書中で使用されるとおり、「イムノグロブリン分子の組換え可変領域」は、分子生物学的手段によって作成されるＩｇ分子の可変領域をさす。本明細書において示すとおり、重鎖および軽鎖の可変ドメインは、リンパ腫細胞から分子クローニングされ、（例えば、発現ベクター中に挿入され、続いて、宿主細胞中へ発現ベクターを移入することにより）宿主細胞中で発現されるかまたは無細胞系において発現され；このやり方で発現された可変ドメインは、イムノグロブリン分子の組換え可変領域である。イムノグロブリン分子の組換え可変領域は、適切な定常領域（すなわち、ＣＨまたはＣＬ）（定常領域は、組換え可変領域と天然に関連した定常領域を含み得る）に操作可能に連結された組換え可変領域を含むイムノグロブリン分子として、重鎖および軽鎖の可変ドメイン、軽鎖の定常領域および重鎖の定常領域の一部を含む、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２またはＦａｂ’断片として、（該Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２またはＦａｂ’断片は、組換えイムノグロブリン分子の消化により作り出され得るかまたは分子生物学的手段によって作成され得る）、或いは、一本鎖可変断片融合タンパク質（ｓｃＦｖ）として、発現され得る。
【００１８】
「一本鎖可変断片」または「ｓｃＦｖ」は、短いペプチドリンカーで接続された抗体軽鎖可変ドメインまたは領域（「ＶＬ」）および重鎖可変領域（「ＶＨ」）から成ることができる。ペプチドリンカーは、該構造が抗原に結合可能なコンフォメーションをとることを可能とする（Bird 1988、Huston 1988）。
【００１９】
「リンパ腫細胞由来の組換え可変領域」は、リンパ腫細胞から単離されたＲＮＡから分子クローニングされる可変領域をさす。組換え可変ドメインは、イムノグロブリン分子全体として発現されることができるか、または例えば、ｓｃＦｖ分子を含む、イムノグロブリン分子の断片として発現されることができる。
【００２０】
「免疫増強性サイトカイン」は、該サイトカインがインサイチュで産生されるかまたは対象に投与された場合に、免疫応答を増強することのできるサイトカインである。免疫増強性サイトカインは、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−３（ＩＬ−３）、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）およびインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）を含むが、これらに限定されない。
【００２１】
本明細書中で使用される、「対象」は、ヒトまたは動物を意味する。通常、動物は、霊長目の動物、げっ歯類の動物、家畜または猟獣のような脊椎動物である。本明細書に記載の態様のある実施態様において、対象は、哺乳動物、例えば、霊長目の動物、例えば、ヒトである。用語「患者」および「対象」は、交換可能に使用される。対象は、雄性または雌性であることができる。
【００２２】
好ましくは、対象は哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒトの霊長目の動物、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマまたはウシであることができるが、これらの例に限定されない。ヒト以外の哺乳動物は、癌、自己免疫疾患または炎症などに関連した障害の動物モデルを表す対象として有利に使用されることができる。さらに、本明細書に記載の方法および組成物は、家畜および／またはペットを処置するために使用されることができる。
【００２３】
「アジュバント」は、抗原（複数可）または本発明のワクチンとともに投与された場合に、免疫応答を増強または刺激する化合物である。
本明細書中で使用される用語「構築物」は、所望のコード配列および操作可能に連結されたコード配列の特別な宿主生物中での発現に必要な適切な核酸配列を含有する、組換え核酸分子をさす。原核生物中での発現に必要な核酸配列は、プロモーター、場合によりオペレーター配列、リボソーム結合部位およびおそらく他の配列を含む。真核細胞は、プロモーター、エンハンサーならびに終結およびポリアデニル化シグナルを利用することが知られている。
【００２４】
「Ｂ細胞リンパ腫を有する患者から単離された悪性細胞」は、リンパ腫に特徴的な固形腫瘍（例えば、腫瘍細胞を含有するリンパ節および脾臓）内に認められるまたは白血病性Ｂ細胞リンパ腫の場合に血液サンプル内に認められる悪性または病原性Ｂ細胞をさす。
【００２５】
対象への投与は、筋内注射、静脈内注射、皮下注射、鼻腔内噴霧、および他の粘膜デリバリー（例えば、経粘膜デリバリー）、皮内注射（例えば、エレクトロポーレーションによる）、エレクトロインコーポレーション、超音波、ジェットインジェクターおよび経皮投与（例えば、局所パッチ）を含むが、これらに限定されない、本分野で知られた任意の適切な経路によることができる。投与の代表的様式は、注射、吸入または摂取を含むが、これらに限定されない。注射は、制限なく、静脈内、筋内、動脈内、髄内、眼内、心室内、嚢内、眼窩内、心内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、脳脊髄内および胸骨内注射または輸注を含むがこれらに限定されない。本明細書に記載された態様のいくつかの実施態様において、投与は、静脈内輸注または注射による。
【００２６】
本発明によれば、投与が医薬製剤を含む場合、好ましくは、製剤は、抗原に対する十分に治療的な免疫応答を誘発するために、設定された持続時間にわたって投与される活性成分（すなわち、本発明のＶＬＰまたは組成物）の用量の組または単位、サブ用量の組または適切なその一部である。
【００２７】
本発明の多価ＶＬＰワクチンは、任意の腸管外経路で、医薬として許容可能な剤形の、場合により、無毒性の有機もしくは無機の酸もしくは塩基付加塩の形態の活性成分を含む医薬製剤の形態で投与されることができる。治療される障害および患者並びに投与経路に依存して、組成物は、可変用量で投与され得る。
【００２８】
本明細書に記載のＶＬＰワクチンが対象に与えられている時、当業者は、用量が、対象の体重、疾患およびその進行または腫瘍サイズまたは腫瘍の進行を含むが、これらに限定されない数種の要素に依存することを理解する。処置の持続時間および頻度に関して、処置が治療効果を提供しているかを決定するため、および用量を増大または減少させるか、投与頻度を増大または減少させるか、処置を中断するか、再開するかまたは処置レジメンに他の変更を加えるかを決定するために、対象をモニタリングすることは、熟練した臨床医にとって典型的なことである。
【００２９】
ヒトの治療において、本発明の多価ＶＬＰワクチンは単独で投与されることができるが、一般には、意図する投与経路および標準的な薬務に関して選択された好適な医薬品賦形剤、希釈剤または担体と混合して投与され得る。
【００３０】
本発明のいくつかの実施態様において、本発明のＶＬＰまたは組成物は腸管外に投与され、そのような投与は、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、心室内、胸骨内、頭蓋内、筋内、眼内または皮下であることができるか、それらは、輸注技術によって投与され得る。さらに、本発明のＶＬＰまたは組成物は、溶液を血液と等張にするために十分な塩またはグルコースなどの他の物質を含有し得る、滅菌水溶液の形態で使用され得る。水溶液は、必要に応じて、適切に緩衝化され得る。滅菌条件下での好適な腸管外製剤の調製は、当業者に周知の標準的な調剤技術によって容易に達成される。
【００３１】
腸管外投与に好適な製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性の滅菌注射液；ならびに懸濁剤および増粘剤を含有し得る水性および非水性の懸濁液を含む。製剤は、ユニットドーズまたはマルチドーズの容器、例えば、密封されたアンプルおよびバイアル中に提供されることができ、滅菌液体担体、例えば、注射用水の使用直前の添加のみを必要とする、フリーズドライ（凍結乾燥）した状態で貯蔵され得る。
【００３２】
即時の注射液および懸濁液は、先に記載した種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。
【００３３】
ある実施態様において、本発明のために有用な投与プロトコールは、本発明の多価ＶＬＰワクチンの（例えば、２週間ごとの投与を伴う、例えば、６週間の期間のような）初期間の間の複数回の投与を含む。
【００３４】
本発明の多価ＶＬＰワクチンに関して本明細書中で使用される「有効量」により、癌、ウイルス感染症または自己免疫疾患を阻害するために対象に投与される多価ＶＬＰの、哺乳動物による免疫応答をもたらす量が意味される。さらに、有効量は、そのような量を受容していない対応する対象に比較して、疾患、障害もしくは副作用の改善された処置、癒し、予防もしくは寛解、または疾患もしくは障害の進行速度の減少をもたらす任意の量を含み得る。この用語は、正常な生理機能を増強するための有効量もその範囲内に含む。
【００３５】
本明細書中で使用されるとおり、「腫瘍を阻止すること」は、腫瘍（複数可）の完全な退縮（完全な反応）；腫瘍（複数可）のサイズもしくは体積の低減または先に観察された腫瘍（複数可）の成長の鈍化も、例えば、腫瘍の最長径（ＬＤ）の合計における、ベースラインのＬＤの合計を基準とした少なくとも３０％の減少（部分的な反応）；混合反応（いくつかの腫瘍の退縮または安定化、しかし他はそうでない）；あるいは腫瘍（複数可）の明らかな成長もしくは進行がないか、または処置開始以来の最小のＬＤの合計を参照として、部分的反応とみなすために十分な縮小も進行性の疾患とみなすための十分な増大もないこと（安定した疾患）を含む、本分野で知られ、受け入れられる任意の方法で測定され得る。
【００３６】
腫瘍または癌の状態は、単独でまたは基準に関して、腫瘍または癌細胞の数、濃度または密度に関してサンプリングすることによっても評価され得る。腫瘍または癌の状態は、慢性のリンパ球性白血病におけるＺＡＰ−７０（Rassenti LZ, Huynh L, Toy TL et al: ZAP-70 compared with immunoglobulin heavy chain gene mutation status as a predictor of disease progression in chronic lymphocytic leukemia. N Engl J Med 2004 August 26; 351(9): 893-901；Crespo M, Bosch F, Villamor N, et al: ZAP-70 expression as a surrogate for immunoglobulin-variable-region mutations in chronic lymphocytic leukemia. N Engl J Med 2003 May 1; 348(18): 1764-1765）のような、腫瘍または癌の状態の変化を評価するために経時的に追跡される代替マーカー（複数可）の使用によっても評価され得る。白血病の場合、腫瘍または癌の状態を評価するために、骨髄サンプル、並びに赤血球、白血球および血小板の全血球計算値（ＣＢＣ）が使用され得る。
【００３７】
本明細書中で使用されるとおり、「処置すること」は、疾患もしくは障害または疾患もしくは障害の１つもしくは複数の生物学的徴候を寛解させるために；（ａ）疾患もしくは障害に導くかもしくは関与する生物学的カスケード中の１つもしくは複数のポイントまたは（ｂ）疾患もしくは障害の１つもしくは複数の生物学的徴候を、直接的もしくは間接的に妨害するために；疾患もしくは障害に関連した１つもしくは複数の症状、効果もしくは副作用またはその１つもしくは複数の症状もしくは障害もしくは処置に関連した症状、効果もしくは副作用を緩和するために；あるいは、疾患もしくは障害または疾患もしくは障害の１つもしくは複数の生物学的徴候の進行を遅らせるために、治療法を使用することを意味する。処置は、過剰なレベルの副作用なしに臨床的に重要な反応を引き出すことを含む。処置は、疾患または障害に罹っている対象の生活の質を改善すること（例えば、癌に罹っている対象は、対象が本明細書に記載の本発明の組成物で免役化される場合に、副作用を引き起こす抗癌剤を低用量受容することができる）も含み得る。明細書全体を通じて、本発明の組成物およびそれを使用するための方法が提供され、それを必要とする対象のための好適な処置を提供するために選択される。
【００３８】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載の本発明の組成物による処置は、対象において免疫応答を誘導および／または維持する。免疫応答は、自己免疫応答、適応免疫応答、またはその両方を含む。自己免疫応答は、好中球、マクロファージ、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）および／または樹状細胞により仲介され得る。適応免疫応答は、体液性応答（すなわち、抗体の産生）、細胞性応答（すなわち、Ｔリンパ球の増殖および刺激）またはその両方を含む。細胞性応答の活性化および持続の測定は、例えば、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）アッセイを含む、任意の知られた方法による。体液性応答も、ＩｇＧまたはＩｇＭ抗体画分のような本発明の組成物（例えば、ワクチン）に特異的な抗体力価の単離および定量化を含む、既知の方法により測定される。
【００３９】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載の処置の方法（例えば、免疫療法）は、いかなる他の治療法とも併用しない独立型の治療法として使用される。
【００４０】
いくつかの実施態様において、本明細書に記載の処置の方法（例えば、免疫療法）は、対象のために処方された任意の他の治療法、例えば、癌療法に対する補助療法を提供する。追加の実施態様において、本明細書に記載の治療の方法（例えば、免疫療法）は、放射線療法、化学療法、遺伝子治療または手術と組合せて投与される。組合せは、本明細書に記載の治療の方法（例えば、免疫療法）が、放射線療法、化学療法、遺伝子治療または手術の前、それとともに、または後に投与されるようなものである。
【００４１】
或いは、抗病性または抗障害性処置（例えば、癌治療）の効果は、患者を追跡することにより、例えば、生存時間または疾患進行までの時間（無病生存）を測定し、比較することにより評価され得る。任意の応答の評価が、処置を受容しなかったかもしくはプラセボで処置された個人に対して、または別の処置を受容した個人に対して比較され得る。
【００４２】
本明細書中で使用されるとおり、「予防すること」は、状態もしくはその生物学的徴候の可能性を実質的に低下させるため、またはそのような状態もしくは生物学的徴候の発症を遅らせるための薬物の予防的投与をさす。当業者は、予防が絶対的な用語でないことを理解する。例えば、対象が疾患もしくは障害の強力な家族歴を有する場合または対象が病因物質、例えば、発がん物質に曝露された場合のような、対象が特定の疾患または障害（例えば、癌）にかかるリスクが高いと考えられる場合、予防的治療が適切である。
【００４３】
実施例以外で、または特に指示のない限り、成分または反応条件の量を表す本明細書中で使用されるすべての数は、すべての場合において、用語「約」によって修飾されると理解されなければならない。パーセンテージに関して使用される場合、用語「約」は±１％を意味することができる。
【００４４】
用語「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、明らかに別段の指示のない限り、複数の指示対象を含む。同様に、用語「または」は、明らかに別段の指示のない限り、「および」を含むと意図される。
【００４５】
本発明の組成物
本発明は、２つ以上のディスプレイ剤（display agent）（例えば、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライド、リポペプチド、ペプチドグリカンおよび／または小分子）を含む、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰを提供する。ディスプレイ剤は、ＶＬＰの表面に結合され得る。加えてまたは代わりに、この作用剤は、ＶＬＰ内に含有され得る。一実施態様において、本発明のＶＬＰは、安定な正２０面体ＶＬＰであり得る。本発明の実施に従って、２つ以上のディスプレイ剤は、作用剤全体（例えば、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポポリサッカライドおよび／または小分子の全体）、またはその断片もしくは一部であり得る。
【００４６】
本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰは、アデノウイルス科（Adenoaviridae）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）、ペルペスウイルス科（Herpesviridae）、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）、フラビウイルス科（Flaviviridae）、レトロウイルス科（Retroviridae）、オルソミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）、パピローマウイルス科（Papillomaviridae）、ラブドウイルス科（Rhabdoviridae）、トガウイルス科（Togaviridae）またはパロウイルス科（Paroviridae）のいずれかに由来するウイルスコートポリペプチドを含み得る。
【００４７】
具体的には、ウイルスコートタンパク質が由来するウイルスの例としては、バクテリオファージ、アデノウイルス（adenovirus）、コクサッキーウイルス（coxsackievirus）、Ａ型肝炎ウイルス（Hepatitis A Virus）、ポリオウイルス（poliovirus）、リノウイルス（Rhinovirus）、単純ヘルペスウイルス（Herpes simplex virus）、バリセラ−ゾスターウイルス（Varicella-zoster virus）、エプシュタイン−バーウイルス（Epstein-Barr virus）、ヒトサイトメガロウイルス（Human cytomegalovirus）、ヒトヘルペスウイルス（Human herpes virus）、Ｂ型肝炎ウイルス（Hepatitis B virus）、Ｃ型肝炎ウイルス（Hepatitis C virus）、黄熱病ウイルス（yellow fever virus）、デングウイルス（dengue virus）、西ナイルウイルス（West Nile virus）、ＨＩＶ、インフルエンザウイルス（influenza virus）、はしかウイルス（Measles virus）、ムンプスウイルス（Mumps virus）、パラインフルエンザウイルス（Parainfluenza virus）、呼吸系発疹ウイルス（Respiratory syncytial virus）、ヒトメタニューモウイルス（Human metapneumovirus）、ヒトパピローマウイルス（Human papillomavirus）、狂犬病ウイルス（Rabies virus）、ルベラウイルス（Rubella virus）、ヒトボカウイルス（Human bocavirus）またはパルボウイルス（Parvovirus）およびノロウイルス（Norovirus）が挙げられるが、これらに限定されない。一実施態様において、バクテリオファージは、ＭＳ２バクテリオファージ、Ｐ１様ウイルス、Ｐ２様ウイルス、Ｔ４様ウイルス、Ｐ２２様ウイルスおよびラムダ様ウイルスであり得る。
【００４８】
本発明の実施に従って、ディスプレイポリペプチドは、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原およびＩｄ抗原のいずれかを含む抗原であり得る。さらに、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原およびＩｄ抗原は、タンパク質全体またはその断片であり得る。
【００４９】
腫瘍関連抗原の例としては、Ｉｄ抗原、１７−１Ａ、７０７−ＡＰ、ＡＦＰ、アネキシンＩＩ、ＡＲＴ−４、ＢＡＧＥ、ＢＡＧＥ−１、ｂ−カテニン、ＢＣＧ、ｂｃｒ／ａｂｌ、Ｂｃｒ／ａｂｌ  ｅｌ４ａ２融合ジャンクション、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ２ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、ｂｃｒ−ａｂｌ  ｐ２１０（ｂ３ａ２トランスクリプトの翻訳からのポリペプチド）、水疱性類天疱瘡抗原−１、ＣＡ  １９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ２１５、ＣＡＧ−３癌ペプチド、ＣＡＭＥＬ腫瘍抗原、癌−精巣抗原、カスパーゼ−８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＤ１６、ＣＤ２０、ＣＤ３、ＣＤ３０、ＣＤ５５、ＣＤ６３、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ−４、ＣＤＲ３、ＣＥＡ、クラスター５、クラスター５Ａ、サイクリン依存性キナーゼ−４、Ｃｙｐ−Ｂ，ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、Ｄｅｋ−ｃａｉｎ、Ｅ７、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖｌＩ  １、ＥＧＰ４０、ＥＬＦ２  Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＦｕｃＧＭ  １、Ｇ２５０、ＧＡ７３３、ＧＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１−８、胃癌関連抗原（gastrin cancer associated antigen）、ＧＤ２、ＧＤ３、グロボＨ、グリコホリン、ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧｎＴＶ、Ｇｎ−Ｔ−Ｖ、ｇｐ１００、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥ、高分子量関連抗原、高分子量プロテオグリカン（ＩＭＰＧ）、ＨＰＶ−１６  Ｅ６、ＨＰＶ−１６  Ｅ７、ＨＰＶＥ６、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト乳脂肪球（ＨＭＦＧ）、ｉＣＥ、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＫ−ＬＣ−１、ＫＭ−ＨＮ−１、Ｌ６、ＬＡＧＥ−Ｉ、ＬｃＯｓｅ４Ｃｅｒ、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、Ｌｅｗｉｓ  Ａ、Ｌｅｗｉｓ  ｖ／ｂ、Ｍタンパク質、ＭＡＧＥ−１、ＭＶＣ、ＭＡＧＥ−Ａ１−１２、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＨＧＥ−３、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ＭＣ１Ｒ、ＭＥ４９１、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ムチン、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、突然変異ｐ５３、ミオシン、ＭＺ２−Ｅ、Ｎ９ノイラミニダーゼ、ＮＡ８８、ＮＡ８８−Ａ、鼻咽頭癌抗原、ＮＧＡ、ＮＫｌ／ｃ−３、ＢＣＲエクソン１、１３、１４とＡＢＬエクソン４のＮｏｖｅｌ  ｂｃｒ／ａｂｌ融合遺伝子、ＮＹ−ＥＳＯ−１／ＬＡＧＥ−２、ＮＹ−ＥＳＯ−１ｂ、ＯＣ１２５、骨肉腫関連抗原−１、ｐ１５、ｐ１９０マイナーｂｃｒ−ａｂｌ（ｅｌａ２）、ｐ５３、Ｐｍｌ／ＲＡＲａ、ポリシアル酸、ＰＲＡＭＥ腫瘍抗原、ＰＳＡ、ＰＳＭ、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、シアリルＬｅＡ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−２、ＳＳＸ−４、表面イムノグロブリン、ＴＡＧ−１、ＴＡＧ−２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＰＩ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、ＴＲＰ−２、ＴＲＰ２−ＩＮＴ２、ｈＴＲＴ，腫瘍関連糖タンパク質−７２、（ＴＡＧ−７２）、チロシナーゼ、ｕ−ＰＡ、ＷＴ１およびＸＡＧＥ−ｌｂ、またはその免疫刺激性断片が挙げられる。
【００５０】
腫瘍関連抗原は、乳癌細胞上に見出され得る。単なる例として、腫瘍関連抗原は、悪性リンパ腫、グリコスフィンゴリピドＧＤ２またはＥｒｂＢ２のような細胞表面受容体の腫瘍関連抗原であり得る。
【００５１】
Ｂ細胞悪性腫瘍の例としては、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、急性リンパ球性白血病、リンパ芽球性リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着病、Ｈ鎖病）、成人の混合細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞免疫芽球性びまん性侵攻性リンパ腫、成人の小型非切れ込み核細胞性リンパ腫および濾胞性リンパ腫（例えば、グレードＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ）が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施態様において、Ｉｄ抗原は、ＣＬＬ腫瘍により発現される。別の好ましい実施態様において、Ｉｄ抗原は、ＮＨＬ腫瘍により発現される。
【００５２】
Ｔ細胞悪性腫瘍の例としては、（現在は、Ｔ細胞前リンパ球性白血病と呼ばれる）慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（Ｔガンマリンパ球増殖性疾患（T gamma lymphoproliferative disease））、菌状息肉腫／セザリー症候群、成人のびまん性侵攻性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（混合細胞型および大細胞、免疫芽細胞性）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、血管中心性リンパ腫（リンパ腫様肉芽腫症多型性網膜症）、急性リンパ球性白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫−非特定型（ＰＴＣＬ−ＮＯＳ）、未分化大細胞型リンパ腫、血管免疫芽細胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫およびリンパ芽球性リンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つがウイルス抗原である実施態様も提供する。ウイルス抗原は、ポリオウイルス；ＨＩＶ；Ｂ型肝炎ウイルス；Ｃ型肝炎ウイルス；Ｅ型肝炎ウイルス；狂犬病ウイルス；単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）；バリセラ−ゾスターウイルス（ＶＺＶ）；エプシュタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）；インフルエンザウイルス；天然痘；粘液腫；リノウイルス；コロナウイルス（Coronavirus）；ルベラウイルス；アデノウイルス；パピローマウイルス；またはヒトＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ）のような任意のウイルス由来であり得る。
【００５４】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つがサイトカインである実施態様も提供する。サイトカインの例としては、ＧＭ−ＣＳＦ、インターロイキン−２、−７．−１２、−１５および成長因子が挙げられるが、これらに限定されない。一実施態様において、サイトカインは、主にＴｈ１型の免疫応答を誘導し、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦα、ＩＬ−２および／またはＩＬ−１２であり得る。別の実施態様において、サイトカインは、主にＴｈ２型の免疫応答を誘導し、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６および／またはＩＬ−１０であり得る。さらなる実施態様において、サイト間は、Ｔｈ１／Ｔｈ２型の両方の免疫応答を誘導する。
【００５５】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つがＴＬＲアゴニストである実施態様も提供する。ＴＬＲアゴニストの例としては、ＴＬＲ２、３、４、５、７、８、または９アゴニストが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
ＴＬＲ−４アゴニストの例としては、細菌性リポポリサッカライド（ＬＰＳ）、ＶＳＶ−ＧおよびＨＭＧＢ−１が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
ＴＬＲ−５アゴニストの例としては、フラジェリンまたはその一部もしくは誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
ＴＬＲ−７アゴニストの例としては、イミキモド（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミンまたは１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）、イサトリビン、８５２Ａおよびチミジンホモポリマー（ＯＤＮ  １７マー）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つが、免疫刺激剤である実施態様も提供する。免疫刺激剤は、細菌タンパク質、インターフェロンまたはサイトカインもしくはその断片であり得る。
【００６０】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つが免疫刺激性オリゴヌクレオチドである実施態様も提供する。本発明の一実施態様において、非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチドは、ＤＮＡ、修飾ＤＮＡ，ＲＮＡ，修飾ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）もしくはペプチド核酸（ＰＮＡ）またはそれらの混合物である。ＤＮＡ、修飾ＤＮＡ，ＲＮＡ，修飾ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）もしくはペプチド核酸（ＰＮＡ）またはそれらの混合物は、デオキシリボース、リボース、モルホリン、Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシン、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロジアミデート結合、ペプチド結合もしくは５−オクタジイニルデオキシウリジンまたはそれらの混合物を含み得る。ある実施態様において、ＤＮＡまたは修飾ＤＮＡは、オリゴデオキシヌクレオチドまたは修飾オリゴデオキシヌクレオチドである。別の実施態様において、オリゴヌクレオチドまたは修飾オリゴヌクレオチドは、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合またはその混合物を含むオリゴヌクレオチドである。
【００６１】
本発明のある実施態様において、ＣｐＧは、配列５’−ＴＧＡＣＴＧＴＧＡＡＣＧＴＴＣＧＡＧＡＴＧＡ−３’を含む。核酸分子、オリゴヌクレオチドまたはＣｐＧは、配列Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊ＡＣＧＴ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊ＡまたはＴ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊ＣＧ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊ＡまたはＴ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊Ｃ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ、ここで、＊は、ホスホロチオエート結合によるホスホジエステラーゼ結合の置換を表す、中にホスホジエステルおよびホスホロチオエート結合の混合物を含む、修飾オリゴヌクレオチドであり得る。ＣｐＧのさらに他の実施態様は、例えば、５−オクタジイニルｄＵ｛５−Ｏｃｔ−ｄＵ｝を、例えば、｛５−Ｏｃｔ−ｄＵ｝−Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊ＣＧ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊ＡまたはＴ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊ＣＧ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ−｛５−Ｏｃｔ−ｄＵ｝をそれぞれ、配列の５’または３’末端のいずれかをカップリングすることによって、ＣｐＧが分子中にアルキン官能基を組み入れる。アルキン官能基は、ＶＬＰのカプシドタンパク質中に組み込まれたアジド官能基による（３＋２）型シクロ付加クリック反応に参加し、ＣｐＧに架橋されたＶＬＰを生じることができる。好ましいＣｐＧ−Ｘの実施態様は、Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ｃ＊Ｔ＊Ｇ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ＊Ａ＊ＣＧ＊Ｔ＊Ｔ＊Ｃ＊Ｇ＊Ａ＊Ｇ＊Ａ＊Ｔ＊Ｇ＊Ａ−｛５−Ｏｃｔ−ｄＵ｝を含む。
【００６２】
本発明のある実施態様において、ＶＬＰに付加されたＣｐＧの平均量は、ＶＬＰあたり１０〜５０コピーのＣｐＧ、ＶＬＰあたり４０〜８０コピーのＣｐＧ、ＶＬＰあたり７０〜１７０コピーのＣｐＧに等価であり得る。別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＣｐＧは、ＣｐＧ対ＶＬＰの重量比が、１：１０００〜１：１００、１：１００〜１：１０、１：１０〜１：４、１：４〜１：２または１：２〜１：１であるような量であり得る。さらに別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＣｐＧは、ＣｐＧ対ＶＬＰの重量比が、１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１であるような量であり得る。
【００６３】
ディスプレイ剤のＶＬＰへの付加のために、ＶＬＰのウイルスコートポリペプチドは、少なくとも１つの第１の（本明細書中で非天然（non-natural）アミノ酸または非標準アミノ酸（ｎｎＡＡ）とも呼ばれる）非天然（unnatural）アミノ酸を着目の部位に含むように修飾されることができ、２つ以上のディスプレイポリペプチドは、少なくとも１つの第２の非天然アミノ酸を含むように修飾されることができ、ここで、第１の非天然アミノ酸は、第２の非天然アミノ酸と異なり、第２の非天然アミノ酸と反応性である。第１の非天然アミノ酸の例は、アジドホモアラニンである。第２の非天然アミノ酸の例は、プロパルギルオキシフェニルアラニンである。ＶＬＰのカプシドタンパク質中に組み込まれたアジドホモアラニンのアジド官能基は、ディスプレイ剤中に組み込まれたプロパルギルオキシフェニルアラニンのアルキン官能基との（３＋２）型シクロ付加クリック反応に参加し、ディスプレイ剤に架橋されたＶＬＰを生じることができる。同じＶＬＰ内の他の非天然アミノ酸含有カプシドタンパク質は、同様に（３＋２）型シクロ付加クリック反応に参加して、２つ以上のディスプレイ剤を有するＶＬＰを生成する。別の実施態様において、ＶＬＰは、ポリペプチドおよびＣｐＧをディスプレイし得る。別の実施態様において、ＶＬＰは、ポリペプチドおよび核酸または修飾核酸をディスプレイし得る。別の実施態様において、ＶＬＰは、２つ以上のポリペプチドおよびＣｐＧをディスプレイし得る。別個の実施態様において、ＶＬＰは、２つ以上のポリペプチドおよび核酸または修飾核酸をディスプレイし得る。
【００６４】
例えば、ｓｃＦｖが細菌免疫タンパク質ＩＭ９に融合され得る。別の実施態様において、細菌免疫タンパク質ＩＭ９に融合されたｓｃＦｖは、ポリペプチドとしてＶＬＰ上にディスプレイされる。さらに別の実施態様において、Ｆ（ａｂ’）２断片の断片または還元されたジスルフィド結合が、二官能性架橋剤によってＶＬＰに付加または結合される。
【００６５】
本発明の実施態様において、ＶＬＰは、カプシドモノマーサブユニットあたり、少なくとも１つまたは少なくとも２つの非天然アミノ酸を含有する。例えば、ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の少なくとも２０分の１が、ディスプレイポリペプチドまたは核酸を付加するために使用され得る。別の実施態様において、ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約４分の１が、ディスプレイポリペプチドまたは核酸を付加するために使用され得る。さらなる実施態様において、ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約３分の１が、ディスプレイポリペプチドまたは核酸を付加するために使用され得る。さらに別の実施態様において、ＶＬＰ中の非天然アミノ酸の総数の約半分が、ディスプレイポリペプチドまたは核酸を付加するために使用され得る。
【００６６】
また、本発明のある実施態様において、ＶＬＰにおいて、ウイルスコートタンパク質の少なくとも１０分の１が、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポサッカライドおよび／または小分子をディスプレイし得る。別の実施態様において、ウイルスコートタンパク質の少なくとも５分の１が、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポサッカライドおよび／または小分子をディスプレイし得る。さらに別の実施態様において、ウイルスコートタンパク質の約半分が、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポサッカライドおよび／または小分子をディスプレイし得る。さらなる実施態様において、ウイルスコートタンパク質の約３分の２が、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポサッカライドおよび／または小分子をディスプレイし得る。さらに別の実施態様において、ほとんどすべてのウイルスコートタンパク質が、ポリペプチド、核酸分子、核酸分子のポリマー、リポサッカライドおよび／または小分子をディスプレイし得る。
【００６７】
本発明のさらに別の実施態様において、ディスプレイポリペプチドは、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原またはＩｄ抗原のいずれかと一緒のディスプレイポリペプチドの組合せ中の特別なディスプレイポリペプチドの存在または不存在に基づいて識別可能な約２５５の可能性のあるＶＬＰを得るために、腫瘍関連抗原、ウイルス抗原またはＩｄ抗原および以下の：ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１５、Ｐａｍ３ＳＫ４、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＬＰＳ、フラジェリン、イミキモドおよびＣｐＧ−Ｘから成る群から選ばれる１つまたは複数の作用剤を含み得る。
【００６８】
別の実施態様において、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰは、５−オクタジイニルデオキシウリジンまたは修飾デオキシウリジンまたは３’もしくは５’末端におけるリンカーをさらに含む。ある実施態様において、３’または５’末端におけるリンカーは、アルキン、アジド、カルボニル、アミンまたはスルフヒドリル基を含むがこれらに限定されない組から選ばれる化学官能基を含む。
【００６９】
２つ以上のディスプレイ剤は、腫瘍関連抗原および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原およびフラジェリン；腫瘍関連抗原、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）および非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原および１つまたは複数のＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；腫瘍関連抗原および１つまたは複数の免疫刺激剤；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；腫瘍関連抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；腫瘍関連抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；腫瘍関連抗原および３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；ならびに腫瘍関連抗原、ＣｐＧ−Ｘ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよび非メチル化シトシンを含む免疫刺激性オリゴヌクレオチドのいずれかを含み得るが、これらに限定されない。
【００７０】
本発明のある実施態様において、２つ以上のディスプレイ剤は、以下の：腫瘍関連抗原および非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−Ｘ）を含む免疫刺激性オリゴヌクレオチド；腫瘍関連抗原およびフラジェリン；腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；腫瘍関連抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原およびＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；ならびに腫瘍関連抗原および免疫刺激剤のいずれかを含み得るが。これらに限定されない。一次実施態様において、ＣｐＧ−Ｘは、図５に示される核酸配列またはその一部を有する。
【００７１】
Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＣｐＧ−Ｘ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびフラジェリン；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＩＬ−１５；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＧＭ−ＣＳＦ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびポリ（Ｉ：Ｃ）；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＨｅｒ２／ｎｅｕ抗原またはその一部および免疫刺激剤が挙げられるが、これらのいずれにも限定されない。
【００７２】
Ｍｕｃ１抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、Ｍｕｃ１抗原およびＣｐＧ−Ｘ；Ｍｕｃ１抗原およびフラジェリン；Ｍｕｃ１抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｍｕｃ１抗原およびＩＬ−１５；Ｍｕｃ１抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；Ｍｕｃ１抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；Ｍｕｃ１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｍｕｃ１抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；Ｍｕｃ１抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；Ｍｕｃ１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；Ｍｕｃ１抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＭｕｃ１抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらのいずれにも限定されない。
【００７３】
ＣＥＡ抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、ＣＥＡおよびＣｐＧ−Ｘ；ＣＥＡ抗原およびフラジェリン；ＣＥＡ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ＣＥＡ抗原およびＩＬ−１５；ＣＥＡ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；ＣＥＡ抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ＣＥＡ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ＣＥＡ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ＣＥＡ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ＣＥＡ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ＣＥＡ抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＣＥＡ抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７４】
ＭＡＧＥ−３抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、ＭＡＧＥ−３抗原およびＣｐＧ−Ｘ；ＭＡＧＥ−３抗原およびフラジェリン；ＭＡＧＥ−３抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ＭＡＧＥ−３抗原およびＩＬ−１５；ＭＡＧＥ−３抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；ＭＡＧＥ−３抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ＭＡＧＥ−３抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ＭＡＧＥ−３抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ＭＡＧＥ−３抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ＭＡＧＥ−３抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ＭＡＧＥ−３抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＭＡＧＥ−３抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７５】
ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＣｐＧ−Ｘ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびフラジェリン；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＩＬ−１５；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ＮＹ−ＥＳＯ−１抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＮＹ−ＥＳＯ−１抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７６】
ＣＡ１２５抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、以下の：ＣＡ１２５抗原およびＣｐＧ−Ｘ；ＣＡ１２５抗原およびフラジェリン；ＣＡ１２５抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ＣＡ１２５抗原およびＩＬ−１５；ＣＡ１２５抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；ＣＡ１２５抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ＣＡ１２５抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ＣＡ１２５抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ＣＡ１２５抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ＣＡ１２５抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ＣＡ１２５抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＣＡ１２５抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらのいずれにも限定されない。
【００７７】
別の実施態様において、２つ以上のディスプレイ剤は、腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＩＬ−１５；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５およびＧＭ−ＣＳＦ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５およびＧＭ−ＣＳＦ；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５，ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＧＭ−ＣＳＦ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリンおよびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５およびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５，ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５およびＧＭ−ＣＳＦ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦおよびＴＬＲアゴニスト；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、フラジェリン、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；腫瘍関連抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニスト；ならびに腫瘍関連抗原、ＩＬ−１５、ＧＭ−ＣＳＦ、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＴＬＲアゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ、の組合せを含み得るが、これらのいずれにも限定されない。
本発明は、２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つが、第１のＩｄ抗原を含む実施態様も提供する。一実施態様において、ＶＬＰは、第１のＩｄ抗原と異なる第２のＩｄ抗原をさらに含む。別の実施態様において、ＶＬＰは、第１および第２のＩｄ抗原と異なる第３のＩｄ抗原をさらに含む。
【００７８】
Ｉｄ抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、Ｉｄ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原およびフラジェリン；Ｉｄ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原およびインターロイキン１５（ＩＬ−１５）；Ｉｄ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）；Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；Ｉｄ抗原およびＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト；Ｉｄ抗原および免疫刺激剤；Ｉｄ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−１５；Ｉｄ抗原および（Ｓ）−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２−ＲＳ）−プロピル］−Ｎ−パルミトイル−（Ｒ）−Ｃｙｓ−（Ｓ）−Ｓｅｒ−（Ｓ）−Ｌｙｓ４−ＯＨリポヘキサペプチド（Ｐａｍ３ＣＳＫ４）；Ｉｄ抗原およびリポポリサッカライド（ＬＰＳ）；Ｉｄ抗原および（３−（２−メチルプロピル）−３，５，８−トリアザトリシクロ［７．４．０．０２．６］トリデカ−１（９），２（６），４，７，１０，１２−ヘキサエン−７−アミン（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはイミキモド）；Ｉｄ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびイミキモド；Ｉｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ならびにＩｄ抗原、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、フラジェリン、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘが挙げられ得るが、これらのいずれにも限定されない。
【００７９】
本発明の好ましい実施態様は、Ｉｄ抗原およびＣｐＧ−Ｘから成る、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰである。別の好ましい実施態様は、Ｉｄ抗原および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）から成る、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰである。
【００８０】
本発明のある実施態様において、Ｉｄ抗原は、自己免疫障害に関連する。自己免疫障害の例としては、重症筋無力症、原発性胆汁性肝硬変症、拡張型心筋症、心筋炎、１型多腺性自己免疫症候群（ＡＰＳ−１）、嚢胞性線維症血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、グッドパスチャー症候群、自己免疫性肝炎、クローン病、冠状動脈不全、落葉性天疱瘡、尋常性天疱瘡、ギランバレー症候群、１型糖尿病、スティッフマン症候群、ラスムッセン脳炎、自己免疫性委縮性胃炎、アジソン病、１型糖尿病、インスリン低血糖症候群（平田病）、タカントーシス（tacanthosis）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療耐性ライム関節炎、多発性神経症、多発性硬化症、脱髄疾患、リウマチ熱、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺機能低下症、ヴィティラーゴ（vitilago）、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性橋本甲状腺炎およびセリアック病が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
自己免疫障害は、全身性自己免疫障害であり得る。全身性自己免疫障害の例としては、ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、セントロメア関連タンパク質（全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、慢性特発性蕁麻疹、結合組織症候群、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病および全身性自己免疫疾患が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
自己免疫障害は、血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害であり得る。血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害の例としては、自己免疫性ＣＩ不全、ＳＬＥ、膜増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）、ＲＡ、全身性硬化症、延長した凝固時間、自己免疫性血小板減少性紫斑病およびアテローム性動脈硬化が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８３】
Ｉｄ抗原は、癌または腫瘍随伴性自己免疫障害に関連し得る。癌または腫瘍随伴性自己免疫障害に関連した自己抗原の例としては、神経症、小細胞肺癌、肝細胞癌腫、肝臓癌、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティッフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律神経病、ＳＬＥ、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群およびランバート・イートン筋無力症候群が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８４】
本発明は、２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つがウイルス抗原を含む実施態様も提供する。そのような実施態様において、２つ以上のディスプレイ剤は、以下の：ウイルス抗原およびＣｐＧ−Ｘ；ウイルス抗原およびフラジェリン；ウイルス抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ウイルス抗原およびＩＬ−１５；ウイルス抗原、ＩＬ＾１５およびＣｐＧ−Ｘ；ウイルス抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ウイルス抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ウイルス抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ウイルス抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ウイルス抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ウイルス抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにウイルス抗原および免疫刺激剤のいずれかを含み得る。
【００８５】
本発明の特別な実施態様において、ウイルス抗原は、ＨｅｐＢ抗原である。ＨｅｐＢ抗原を含む２つ以上のディスプレイ剤の例としては、ＨｅｐＢ抗原およびＣｐＧ−Ｘ；ＨｅｐＢ抗原およびフラジェリン；ＨｅｐＢ抗原、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；ＨｅｐＢ抗原およびＩＬ−１５；ＨｅｐＢ抗原、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；ＨｅｐＢ抗原およびＧＭ−ＣＳＦ；ＨｅｐＢ抗原、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；ＨｅｐＢ抗原、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；ＨｅｐＢ抗原およびポリ（Ｉ：Ｃ）；ＨｅｐＢ抗原、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；ＨｅｐＢ抗原およびＴＬＲアゴニスト；ならびにＨｅｐＢ抗原および免疫刺激剤が挙げられるが、これらのいずれにも限定されない。本発明の実施に従って、これらの実施態様は、上記作用剤の一部を包含する。
【００８６】
本発明は、ＶＬＰの２つ以上のディスプレイ剤のうちの１つがＮｏｄ様受容体アゴニストである実施態様も提供する。そのような実施態様において、２つ以上のディスプレイ剤は、以下のＮｏｄ様受容体アゴニストおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｎｏｄ様受容体アゴニストおよびフラジェリン；Ｎｏｄ様受容体アゴニスト、フラジェリンおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｎｏｄ様受容体アゴニストおよびＩＬ−１５；Ｎｏｄ様受容体アゴニスト、ＩＬ−１５およびＣｐＧ−Ｘ；Ｎｏｄ様受容体アゴニストおよびＧＭ−ＣＳＦ；Ｎｏｄ様受容体アゴニスト、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣｐＧ−Ｘ；Ｎｏｄ様受容体アゴニスト、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣｐＧ−Ｘおよびフラジェリン；Ｎｏｄ様受容体アゴニストおよびポリ（Ｉ：Ｃ）；Ｎｏｄ様受容体アゴニスト、ポリ（Ｉ：Ｃ）およびＣｐＧ−Ｘ；Ｎｏｄ様受容体アゴニストおよびＴＬＲアゴニスト；ならびにＮｏｄ様受容体アゴニストおよび免疫刺激剤のいずれかを含む。
【００８７】
本発明の一例において、本発明のＶＬＰは、２つ以上のディスプレイ剤に加えて、アジュバントをさらに含む。一実施態様において、アジュバントは、主にＴｈ１型の応答を誘発するためのアジュバントであり得る。アジュバントの例としては、モノホスホリルリピドＡ、好ましくは、アルミニウム塩と一緒の３ｄｅ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ；ＣｐＧ−Ｘ；Ｑｕｉｌ  ＡまたはＱＳ２１およびＱＳ７のようなその誘導体を含む、サポニン；エスシン；ジギトニン；あるいはジプソフィラ（Gypsophila）またはケノポジウムキノアサポニンのうちの１つまたはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
追加の例において、アジュバントは、ＧＭ−ＣＳＦ、鉱物塩、ミョウバン、腸炎細菌（Enterobacteria）のモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）と結合したミョウバン、サポニン、ＱＳ−２１，Ｑｕｉｌ−Ａ、ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ（商標）、ＭＦ５９（商標）、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ（商標）ＩＳＡ  ５１、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ（商標）ＩＳＡ  ７２０、ＡＳ０２、リポソームおよびリポソーム製剤、ＡＳ０１、合成もしくは特別に調製したマイクロ粒子およびマイクロキャリアー、キトサン粒子、デポー形成剤、Ｐｌｕｒｏｎｉｃブロックコポリマー、特別に修飾されたもしくは調製されたペプチド、ムラミルジペプチド、アミノアルキルグルコサミニド４−ホスフェート、ＲＣ５２９、細菌トキソイド、毒素断片、Ｔｏｌｌ様受容体２、３、４、５、７、８もしくは９のアゴニスト；アデニン誘導体；免疫刺激性ＤＮＡ；免疫刺激性ＲＮＡ；イミダゾキノリンアミン、イミダゾピリジンアミン、６，７−縮合シクロアルキルイミダゾピリジンアミン、１，２−架橋イミダゾキノリンアミン；イミキモド；レシキモド；ＤＣ表面分子ＣＤ４０のアゴニスト；Ｉ型インターフェロン；ポリＩ：Ｃ；細菌リポポリサッカライド（ＬＰＳ）；ＶＳＶ−Ｇ；ＨＭＧＢ−１；フラジェリンまたはその部分もしくは誘導体；ＣｐＧ−Ｘ；壊死細胞から放出された炎症性刺激；尿酸結晶；補体カスケードの活性化された構成要素；免疫複合体の活性化された構成要素；補体受容体アゴニスト；サイトカイン；サイトカイン受容体アゴニスト；またはオキソアデニンあるいはそれらの組合せであり得る。イミダゾキノリンの例としては、レシキモドおよびイミキモドが挙げられる。
【００８９】
本発明において有用なアジュバントのさらなる非限定的な例としては、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウムおよびフロイントの完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイントの不完全アジュバント（ＦＩＡ）、リン酸カルシウム、リポソーム、Ｖｉｒｏｓｏｍｅ（商標）、ＩＳＣＯＭＳ（登録商標）、ミクロスフィア（ＰＬＡ、ＰＬＧ）、ＭＦ−５９エマルジョン、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、ムラミル−１−アナリル−ｄ−イソグルタミン（ＰＡＭＰ；Ｅ．コリ（E.coli）熱耐性エンテロトキシン（ＬＴ）、フラジェリン、サポニンおよび小分子免疫賦活剤（ＳＭＩＰ））が挙げられる。
【００９０】
本発明に従って、ＶＬＰは、その内部に着目の治療剤（上記）を含有し得る。
特別な実施態様において、ＶＬＰは、図１に示すアミノ酸の配列を含み得る。
【００９１】
本発明の一実施態様において、ＨｅｐＢコア配列は、図１またはその一部に示すアミノ酸またはヌクレオチド配列を有する。
【００９２】
本発明のある実施態様において、フラジェリン配列は、図２またはその一部に示すアミノ酸またはヌクレオチド配列を有する。
【００９３】
一例において、ＧＭ−ＣＳＦは、ヒトＧＭ−ＣＳＦである。本発明のある実施態様において、ヒトＧＭ−ＣＳＦ配列は、図３またはその一部に示すアミノ酸またはヌクレオチド配列を有し得る。
【００９４】
別の例において、インターロイキン（ＩＬ）は、ヒトインターロイキンである。本発明のある実施態様において、ヒトＩＬは、図４またはその一部に示すアミノ酸またはヌクレオチド配列を有するヒトＩＬ−１５である。
【００９５】
Ｉｄ抗原は、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）由来であり得る。本発明のある実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｉ）（Ａ）または（Ａ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｉ）（Ｂ）または（Ｂ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩ）（Ｃ）または（Ｃ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。さらに別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩ）（Ｄ）または（Ｄ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩＩ）（Ｅ）または（Ｅ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩＩ）（Ｆ）または（Ｆ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。さらに別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＶ）（Ｇ）または（Ｇ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＶ）（Ｈ）または（Ｈ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｖ）（Ｉ）または（Ｉ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｖ）（Ｊ）または（Ｊ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩ）（Ｋ）または（Ｋ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩ）（Ｌ）または（Ｌ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩ）（Ｍ）または（Ｍ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。さらに別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩ）（Ｎ）または（Ｎ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩＩ）（Ｏ）または（Ｏ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩＩ）（Ｐ）または（Ｐ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＸ）（Ｑ）または（Ｑ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＸ）（Ｒ）または（Ｒ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｘ）（Ｓ）または（Ｓ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。さらに別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｘ）（Ｔ）または（Ｔ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。本発明の実施に従って、これらの実施態様のいずれかは、上記配列のいずれかの全体でなくその一部を含み得る。
【００９６】
別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｉ）（Ａ）または（Ａ’）にそれぞれ、および図６（Ｉ）（Ｂ）または（Ｂ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩ）（Ｃ）または（Ｃ’）にそれぞれ、および図６（ＩＩ）（Ｄ）または（Ｄ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＩＩ）（Ｅ）または（Ｅ’）にそれぞれ、および図６（ＩＩＩ）（Ｆ）または（Ｆ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＶ）（Ｇ）または（Ｇ’）にそれぞれ、および図６（ＩＶ）（Ｈ）または（Ｈ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｖ）（Ｉ）または（Ｉ’）にそれぞれ、および図６（Ｖ）（Ｊ）または（Ｊ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩ）（Ｋ）または（Ｋ’）にそれぞれ、および図６（ＶＩ）（Ｌ）または（Ｌ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。
【００９７】
別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩ）（Ｍ）または（Ｍ’）にそれぞれ、および図６（ＶＩＩ）（Ｎ）または（Ｎ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＶＩＩＩ）（Ｏ）または（Ｏ’）にそれぞれ、および図６（ＶＩＩＩ）（Ｐ）または（Ｐ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（ＩＸ）（Ｑ）または（Ｑ’）にそれぞれ、および図６（ＩＸ）（Ｒ）または（Ｒ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ｘ）（Ｓ）または（Ｓ’）にそれぞれ、および図６（Ｘ）（Ｔ）または（Ｔ’）にそれぞれ示すアミノ酸配列を有し得るかまたはヌクレオチド配列によりコードされ得る。本発明の実施に従って、これらの実施態様のいずれかは、上記配列のいずれかの全体でなくその一部を含み得る。
【００９８】
別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図６（Ａ）から（Ｔ）に提供されるアミノ酸配列のいずれかまたは図６のローマ数字（Ｉ）から（Ｘ）に提供される対のアミノ酸配列のいずれかに由来するｓｃＦｖであり得る。
【００９９】
別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、図７に示されるアミノ酸配列を含有し得る。さらに、本発明のある実施態様において、Ｉｄ抗原は、トリペプチドモチーフ、（ＧまたはＡまたはＳ）−（Ｘ）−Ｉ、式中、Ｘは任意のアミノ酸である、の直前のアミノ酸モチーフ、Ｑ−（ＡまたはＰ）−（ＰまたはＬ）−Ｇ−（ＱまたはＫ）−Ｇ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−（ＭまたはＶまたはＩ）を有するイムノグロブリン可変重（ＶＨ）鎖ドメインまたは配列を含む。併合されたモチーフは、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）のような一定のヒトの癌に関連した、ヒトイムノグロブリンＶＨ鎖のサブセットのフレームワーク２（ＦＲ２）の１３アミノ酸に由来する。例えば、Ｉｄ抗原は、以下の配列：ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ;ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＭＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＶＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＩＧ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；  Ｑ  ＡＰＧＫＧＬＥ  ＷＶＡ（Ｘ）Ｉ  ；  ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ;ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＭＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＶＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＩＡ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；Ｑ  ＡＰＧＫＧＬＥ  ＷＭＳ  （Ｘ）Ｉ  ；  ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；  Ｑ  ＡＬＧＱＧＬＥ  ＷＭＳ  （Ｘ）Ｉ  ；  ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＱＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＡＬＧＫＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＱＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ���  ＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；ＱＰＬＧＱＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＭＳ（Ｘ）Ｉ；  ＱＰＬＧＫＧＬＥＷＶＳ（Ｘ）Ｉ；またはＱＰＬＧＫＧＬＥＷＩＳ（Ｘ）Ｉ、式中、Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、フェニルアラニン（Ｆ）、グリシン（Ｇ）、ヒスチジン（Ｈ）、イソロイシン（Ｉ）、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、バリン（Ｖ）、トリプトファン（Ｗ）またはチロシン（Ｙ））である、のいずれかを含み得る。
【０１００】
本発明の別の実施態様において、Ｉｄ抗原は、以下の：ＹＹＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＮ、ＹＹＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮ、ＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩ、ＹＴＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩ、ＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩ、ＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＹ、ＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＹ、ＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳ、ＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮ、ＹＹＷＣＷＩＲＱＰＬＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮ、ＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＹまたはＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＩのうちの１つのアミノ酸配列を有する可変重鎖ドメインを含む。これらの配列は、ヒト可変領域遺伝子のフレームワークおよび相補性決定領域、ＣＤＲに由来する。
【０１０１】
本発明のある実施態様において、ＶＬＰに付加されたＩｄ抗原の平均量は、ＶＬＰあたり１０〜５０コピーのＩｄ抗原、ＶＬＰあたり４０〜８０コピーのＩｄ抗原、ＶＬＰあたり７０〜１７０コピーのＩｄ抗原、ＶＬＰあたり１６０〜２４０コピーのＩｄ抗原と等価であり得る。別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＩｄ抗原は、Ｉｄ抗原対ＶＬＰの重量比が、１：１０００〜１：１００、１：１００〜１：１０、１：１０〜１：４、１：４〜１：２または１：２〜１：１と等価であるような量であり得る。さらに別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＩｄ抗原は、Ｉｄ抗原対ＶＬＰモノマーの比が、１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１と等価であるような量である。
【０１０２】
本発明のある実施態様において、ＶＬＰに付加されたＧＭ−ＣＳＦの平均量は、ＶＬＰあたり１０〜５０コピーのＧＭ−ＣＳＦ、ＶＬＰあたり４０〜８０コピーのＩｄ抗原、ＶＬＰあたり７０〜１７０コピーのＩｄ抗原またはＶＬＰあたり１６０〜２４０コピーのＩｄ抗原と等価であり得る。別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＧＭ−ＣＳＦは、ＧＭ−ＣＳＦ対ＶＬＰの重量比が、１：１０００〜１：１００、１：１００〜１：１０、１：１０〜１：４、１：４〜１：２または１：２〜１：１と等価であるような量であり得る。さらに別の実施態様において、ＶＬＰタンパク質モノマーに付加されたＧＭ−ＣＳＦは、ＧＭ−ＣＳＦ対ＶＬＰモノマーの比が、１：２４〜１：１２、１：１２〜１：６、１：６〜１：３、１：３〜２：３または１：２〜１：１と等価であるような量である。
【０１０３】
例えばディスプレイポリペプチドは、図７ａまたはａ’にそれぞれ、図７ｂまたはｂ’にそれぞれ、図７ｃまたはｃ’にそれぞれ、図７ｄまたはｄ’にそれぞれ、図７ｅまたはｅ’にそれぞれ、図７ｆまたはｆ’にそれぞれ、図７ｇまたはｇ’にそれぞれ、図７ｈまたはｈ’にそれぞれ、あるいは図７ｉまたはｉ’にそれぞれ示されるアミノ酸配列もしくはその一部を含み得るかまたはヌクレオチド配列もしくはその一部によりコードされ得る。
【０１０４】
ある実施態様において、本発明は、例えば、図１に示される本発明のＶＬＰをコードする核酸分子を提供する。
【０１０５】
本発明の核酸分子は、アルゴリズムのパラメータが、各参照配列の長さ全体にわたる各配列間のマッチが最大となるように選択される、ＢＬＡＳＴアルゴリズムにより比較が行われる場合に、本発明の参照ヌクレオチド配列およびアミノ酸配列（すなわち、本明細書中の例を参照のこと）に対して、少なくとも約７０％同一、好ましくは、少なくとも約８０％同一、より好ましくは、少なくとも約９０％同一、最も好ましくは、少なくとも約９５％同一（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）である、ヌクレオチド配列を含み、ポリペプチド（アミノ酸配列）をコードし得る。アルゴリズムのパラメータが、各参照配列の長さ全体にわたる各配列間のマッチが最大となるように選択される、ＢＬＡＳＴアルゴリズムにより比較が行われる場合に、本発明の参照アミノ酸配列に対して、少なくとも約７０％類似、好ましくは、少なくとも約８０％類似、より好ましくは、少なくとも約９０％類似、最も好ましくは、少なくとも約９５％類似（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）するアミノ酸配列を含むポリペプチドも、本発明に含まれる。
【０１０６】
核酸分子は、本発明のＶＬＰをコードするＤＮＡ分子（例えば、単離されたｃＤＮＡ）であり得る。さらに、核酸分子は、ＲＮＡ（例えば、単離されたｍＲＮＡのような、単離されたＲＮＡ）であり得る。或いは、核酸分子は、ｃＤＮＡとｍＲＮＡのハイブリッドであり得る。例えば、本発明は、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを発現するベクターを含むＤＮＡ構築物を提供する。
【０１０７】
本発明の核酸分子は、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子とは異なる、核酸分子誘導体も含む。誘導体分子は、ペプチド核酸（ＰＮＡ）および一本鎖ＤＮＡまたはＲＮＡに塩基対依存性のやり方で結合するホスホロチオエート、ホスホトリエステル、ホスホロアミデートおよびメチルホスホネート分子を含む非核酸分子を含む（Zamecnik, P.C., et al., 1978 Proc. Natl. Acad. Sci. 75:280284;Goodchild, P.C. et al., 1986 Proc. Natl. Acad. Sci. 83:4143-4146）。ＤＮＡ、ＲＮＡおよびそれらの類似体の合成方法の総説は、例えば：Oligonucleotides and Analogues, eds. F. Eckstein, 1991, IRL Press, New York；Oligonucleotide Synthesis, ed. M.J. Gait, 1984, IRL Press, Oxford, England中に見出されることができる。
【０１０８】
さらに、本発明は、本発明の核酸分子を含むベクターを提供する。用語ベクターは、プラスミド、コスミドおよびファージミドを含むが、これらに限定されない。宿主ベクター系は、好適な宿主細胞中の本発明のベクターを含む。好適な宿主細胞の例としては、細菌細胞および真核細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
一実施態様において、本発明は、免疫有効量の本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰならびに好適な担体、結合剤、希釈剤、アジュバント、賦形剤および／またはビヒクルを含む、組成物（例えば、医薬組成物）を提供する。
【０１１０】
一実施態様において、本発明の組成物は、ＶＬＰと混合された治療剤をさらに含む。治療剤は、レナリドミド、イピリムマブ、リツキシマブ、アレムツズマブ、オファツムマブ、フラボピリドール、アドリアマイシン、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、シスプラチン、ＡＢＴ−１９９、アシビシン；アクラルビシン；アコダゾール塩酸塩、アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン；アメタントロン酢酸塩；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アンスラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；ビスアントレン塩酸塩；ビゼレシン；ブレオマイシン硫酸塩；ブレキナールナトリウム；ブロピリミン；ブルスファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー；カルボプラチン；カルビシン塩酸塩；カルゼレシン；セデフィンゴール；クロラムブシル；シロレマイシン（cirolemycin）；クラドリビン；クリスナトールメシレート；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダウノルビシン塩酸塩；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；デザグアニンメシレート；ジアジクオン；ドキソルビシン；ドキシルビシン塩酸塩；ドロロキシフェン；クエン酸ドロロキシフェン；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン；エダトレキセート；エフロルニチン塩酸塩；エルサミトルシン；エンロプラチン；エンプロマート；エピプロピジン；エピルビシン塩酸塩；エルブロゾール；エソルビシン塩酸塩；エストラムスチン；リン酸エストラムスチンナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；エトポシドリン酸塩；エトプリン；ファドロゾール塩酸塩；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；フルロシタビン、ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビン塩酸塩；ヒドロキシ尿素；イブルチニブ；イデラリシブ；イダルビシン塩酸塩；イフォスファミド；イルモホシン；ＩＮＣＢ−４００９３、ＩＰＩ−１４５、ＩＰＩ−４４３、イプロプラチン；イリノテカン塩酸塩；ランレオチド酢酸塩；レトロゾール；ロイプロリド酢酸塩；リアロゾール塩酸塩；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；メイタンシン；メクロレタミン塩酸塩；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン（mitocarcin）；ミトクロミン(mitocromin)；ミトギリン；マイトマルシン（mitomalcin）；マイトマイシン；マイトスパー（mitosper）；ミトタン；ミトキサントロン塩酸塩；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オビヌツズマブ；オルマプラチン；オキシスラン（oxisuran）；ペグアスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド（perfosfamide）；ピポブロマン；ピポスルファン；ピロキサントロン塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポリフィロマイシン；プレドニムスチン���プロカルバジン塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン；リボプリン；リツキシマブ；ログレチミド；サフィンゴール；サフィンゴール塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン；スパルホサートナトリウム；スパルソマイシン；スピロゲラニウム（spirogerranium）塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル；タリソマイシン；テコガラン（tecogalan）ナトリウム；テガフール；テロキサントロン塩酸塩；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン（teroxirone）；テストラクトン；チアミプリンチオグアニン；チオテーパ；チアゾフリン；チラパザミン；トレミフェンクエン酸塩；トレストロン酢酸塩；トリシリビンホスフェート；トリメトレキセート；トリメトレキセートグルクロン酸塩；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール；ウラシルマスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸塩；ビンクリスチン硫酸塩；ビンデシン；ビンデシン硫酸塩；ビンピジン（vinepidine）硫酸塩；ビングリシナート硫酸塩；硫酸ビンロイロシン；ビノレルビン酒石酸塩；硫酸ビンロシジン；硫酸ビンゾリジン；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；およびゾルビシン塩酸塩であることのできる抗癌剤であり得る。
【０１１１】
別の実施態様において、本発明の組成物は、ＶＬＰと混合された治療剤をさらに含み、治療剤は、ナイトロジェンマスタード（例えば、ベンダムスチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン）、エチレンイミンおよびメチルメラミン（例えば、ヘキサメチルメラミン、チオテーパ）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾシン）またはトリアゼン（デカルバジン（decarbazine））を含むが、これらに限定されない、アルキル化剤であり得る。
【０１１２】
本発明は、対象においてディスプレイポリペプチドに対する免疫応答を誘導するための本発明の組成物を含むワクチンをさらに提供する。
【０１１３】
本発明は、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを含む、対象において免疫応答を誘導するための免疫刺激性組成物も提供する。ある実施態様において、ワクチンは、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰおよびアジュバントを含む。別の実施態様において、ワクチンは、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを発現するＤＮＡベクターを含む。さらに別の実施態様において、ワクチンは、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰをコードする核酸配列を送達するためのウイルス遺伝子送達系を含む。
【０１１４】
本発明の態様のさらなる実施態様において、Ｉｄ抗原は、組換え抗原またはヒト化抗原であり得る。他の実施態様において、Ｉｄ抗原は、単一ドメイン抗体、二重特異性抗体、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖダイマー、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｄｓＦｖ−ｄｓＦｖ’、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’またはＦ（ａｂ’）２断片として発現および／または提示され得る。他の実施態様において、断片は、定常領域に操作可能に付加されることができ、ここで、定常領域は、カッパ軽鎖、ガンマ−１重鎖、ガンマ−２重鎖、ガンマ−３重鎖またはガンマ−４重鎖である。
【０１１５】
別の実施態様において、本発明は、培地から本発明のＶＬＰを回収する工程を含むプロセスを提供する。
【０１１６】
ある実施態様において、本発明は、本発明のワクチン（本発明の多価ＶＬＰ）を投与する工程をさらに含む。投与は、例えば、治療剤への癌の長期の曝露を提供し、それによって、癌の成長を阻止するように、本発明の多価ＶＬＰの先の投与とそれに続く（所定の間隔での）本発明のワクチンの投与を含むが、これに限定されない。
【０１１７】
本発明の実施態様に従って、遺伝暗号の縮重は、本発明の多価ＶＬＰをコードする予測可能な数の核酸配列を提供し、そのコドンは、単離された核酸を（制限なく、インビトロで培養された細菌、酵母、哺乳動物細胞、および（ヒトを含む）哺乳動物の細胞を含む）宿主生物中で最適に発現するために選択され得る。そのような発現は、その後の単離および本発明によるまたは無細胞のインビトロの転写および／または翻訳系における使用のための、宿主生物中での核酸またはポリペプチドの産生のために有用である。
【０１１８】
本発明の製品の実施態様において、製品は、本発明の多価ＶＬＰまたは組成物を含む。
【０１１９】
別の実施態様において、本発明は、容器およびその中に入っている本発明の組成物を含み、該組成物が癌、感染症または自己免疫疾患を処置または阻止するために使用可能であることを示す添付文書をさらに含む、製品を提供する。
【０１２０】
医薬として許容可能な担体は、水性ビヒクル、非水性ビヒクル、抗微生物剤、等張剤、緩衝剤、抗酸化剤、局所麻酔剤、懸濁および分散剤、乳化剤、金属イオン封鎖剤またはキレート剤ならびに他の医薬として許容可能な物質を含む。
【０１２１】
水性ビヒクルの例としては、塩化ナトリウム注射液、リンガー液、等張デキストロース注射液、滅菌注射水、デキストロース乳酸リンガー液が挙げられる。非水性腸管外ビヒクルは、植物由来の固定油、綿花油、コーン油、ゴマ油およびピーナツ油を含む。静菌濃度または静真菌濃度の抗微生物剤が、フェノールまたはクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルおよびプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、チメロサール、塩化ベンザルコニウムおよび塩化ベンゼトニウムを含む複数用量容器中に入った腸管外製剤に添加されなくてはならない。等張剤は、塩化ナトリウムおよびデキストロースを含む。緩衝剤は、リン酸塩およびクエン酸塩を含む。抗酸化剤は、硫酸水素ナトリウムを含む。局所麻酔剤は、塩酸プロカインを含む。懸濁剤および分散剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンを含む。乳化剤は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（商標）８０）を含む。金属イオンの封鎖剤またはキレート剤は、ＥＤＴＡを含む。医薬担体は、水混和性ビヒクルのためのエチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール；ならびにｐＨ調整のための水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸または乳酸も含む。
【０１２２】
好適な賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、グリセロールまたはエタノールである。さらに、所望により、投与される医薬組成物は、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定化剤、溶解促進剤ならびに例えば、酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミンおよびシクロデキストリンなどの他の作用剤のような微量の無毒性の補助剤も含有し得る。
【０１２３】
結合剤の例としては、微結晶セルロース、トラガントゴム、グルコース溶液、アカシアゴム漿、ゼラチン溶液、モラセス、ポリビニルピロリドン、ポビドン、クロスポビドン、シュークロースおよびデンプン糊が挙げられる。希釈剤は、例えば、ラクトース、シュークロース、デンプン、カオリン、塩、マンニトールおよびリン酸二カルシウムを含む。
【０１２４】
本発明のキット
本発明の別の態様に従って、キットが提供される。本発明によるキットは、本発明の組成物を含むパッケージ（複数可）を含む。
【０１２５】
語句「パッケージ」は、本明細書中に表される組成物を含有する任意の容器を意味する。好ましい実施態様において、パッケージは、箱または包装材料であることができる。医薬品の包装に使用するためのパッケージ材料は、当業者に周知である。医薬の包装材料の例としては、ブリスターパック、ボトル、チューブ、吸入器、ポンプ、バッグ、バイアル、容器、（充填済みのシリンジを含む）シリンジ、ボトルおよび選択された製剤および意図される投与および処置の様式に好適な任意の包装材料が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
キットは、パッケージ内に含有されないが、ピペットなどのパッケージの外側に取り付けられる物品も含有することができる。
【０１２７】
キットは、場合により、処置を必要とする状態を有する対象に本発明の組成物を投与するための指示を含有し得る。キットは、本明細書中の組成物の成分の、米国食品医薬品局のような規制当局により認可された使用についての指示も含み得る。キットは、場合により、本組成物のためのラベリングまたは製品挿入物を含有し得る。パッケージ（複数可）および／または任意の製品挿入物（複数可）は、それ自体が規制当局によって認可され得る。キットは、固相または（提供されるバッファーのような）液相の組成物中の組成物をパッケージ中に含むことができる。キットは、方法を実施するために溶液を調製するためのバッファーおよび１つの容器から別の容器へ液体を移すためのピペットも含むことができる。
【０１２８】
キットは、場合により、本明細書に記載の治療法と併せて使用するための１つまたは複数の他の組成物も含有し得る。ある実施態様において、パッケージ（複数可）は、静脈内投与のための容器である。他の実施態様において、組成物は、吸入器中で提供される。さらに他の実施態様において、組成物は、ポリマーマトリックス中またはリポソームの形態で提供される。
【０１２９】
本発明の方法
本発明は、対象における疾患（上記）または障害に関連した腫瘍細胞を阻止するための方法を提供する。方法は、対象からサンプルを得る工程およびサンプルからの疾患または障害に関連したＩｄ抗原を同定する工程を含む。対象からのサンプルは、細胞、（腫瘍のような）組織または（血液のような）体液サンプルであることができる。方法は、組換えＩｄ抗原またはその断片を生成する工程および組換えＩｄ抗原またはその断片を含む、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを作成する工程も含む。さらに、方法は、腫瘍細胞に対する免疫応答を可能とするために、ステップ（ｄ）からの本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰの有効量を対象に投与する工程を含む。
【０１３０】
本発明は、対象における疾患または障害を阻止するための方法をさらに提供する。方法は、対象からサンプルを得る工程およびサンプルからの疾患または障害に関連したＩｄ抗原を同定する工程を含む。方法は、組換えＩｄ抗原またはその断片を生成する工程および組換えＩｄ抗原またはその断片を含む、本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰを作成する工程も含む。さらに、方法は、腫瘍細胞に対する免疫応答を可能とためように、ステップ（ｄ）からの本発明のウイルスゲノムを含まないＶＬＰの有効量を対象に投与する工程を含む。
【０１３１】
別の実施態様において、本発明は、腫瘍細胞を有効量の本発明の組成物と接触させる工程を含む、腫瘍細胞を阻止する方法を提供する。
【０１３２】
本発明は、対象における腫瘍を処置し、阻止しまたは進行を予防する方法も提供し、これは、上記対象に有効量の本発明の多価ＶＬＰまたは組成物を投与する工程を含む。多価ＶＬＰまたは組成物は、静脈内に、筋内に、皮下に、腹腔内に、鼻腔内に、眼内に、皮内に、経粘膜でまたはエアロゾルとして投与され得る。
【０１３３】
本発明は、対象に有効量の本発明の多価ＶＬＰまたは組成物を投与する工程を含む、該対象における疾患または障害を処置し、阻止しまたは進行を予防する方法をさらに提供する。
【０１３４】
一実施態様において、障害は、自己免疫障害であり、重症筋無力症、慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変症、拡張型心筋症、心筋炎、拡張型心筋症、１型多腺性自己免疫症候群（ＡＰＳ−１）、自己免疫性肝炎、嚢胞性線維症血管炎、後天性副甲状腺機能低下症、グッドパスチャー症候群、クローン病、冠状動脈不全、落葉性天疱瘡、尋常性天疱瘡、ギランバレー症候群、１型糖尿病、スティッフマン症候群、ラスムッセン脳炎、自己免疫性委縮性胃炎、アジソン病、インスリン低血糖症候群（平田病）、Ｂ型インスリン抵抗性、アカントーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、悪性貧血、治療耐性ライム関節炎、多発性神経症、多発性硬化症、脱髄疾患、リウマチ熱、アトピー性皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変症、グレーブス病、視神経脊髄炎、自己免疫性甲状腺機能低下症、ヴィティラーゴ、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性橋本甲状腺炎、セリアック病および転移性黒色腫であることができる。好ましい実施態様において、自己免疫障害は、グレーブス病である。別の好ましい実施態様において、自己免疫障害は、重症筋無力症である。さらなる好ましい実施態様において、自己免疫障害は、視神経脊髄炎である。
【０１３５】
別の実施態様において、障害は、全身性自己免疫障害であることができ、ＡＣＴＨ欠損症、筋炎、皮膚筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、ＳＬＥ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、リウマチ関節炎（ＲＡ）、全身性進行性硬化症、全身性硬化症、皮膚筋炎、強皮症、斑状強皮症、原発性脂質抗体症候群、水疱性類天疱瘡、妊娠性疱疹、良性粘膜類天疱瘡、慢性特発性蕁麻疹、壊死性半月体形成性糸球体腎炎（ＮＣＧＮ）、全身性血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群、多発性筋炎、強皮症、レイノー症候群、慢性肝臓病、内臓リーシュマニア症および全身性自己免疫疾患を含み得る。
【０１３６】
さらに別の実施態様において、障害は、癌または腫瘍随伴性自己免疫障害であることができ、これは、神経症、小細胞肺癌、肝細胞癌腫、肝臓癌、腫瘍随伴性天疱瘡、腫瘍随伴性スティッフマン症候群、腫瘍随伴性脳脊髄炎、亜急性自律神経病、癌、ＳＬＥ、肝細胞癌腫、癌関連網膜症、腫瘍随伴性眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、下位運動ニューロン症候群、ランバート・イートン筋無力症候群および腫瘍随伴性小脳変性を含み得る。
【０１３７】
さらに別の実施態様において、障害は、固形腫瘍癌（solid tumor cancer）であることができ、これは、副腎癌、肛門癌、再生不良性貧血、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳ＣＮＳ癌、乳癌、原発不明の癌、キャッスルマン病、頸部癌、結腸／直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、ユーイング腫瘍、眼の癌、胆嚢癌、消化管カルチノイド、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、妊娠性絨毛疾患、ホジキン病、カポシ肉腫、腎臓癌、喉頭部および下咽頭癌、白血病、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、悪性中皮腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、鼻腔および副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、口腔および中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓がん、陰茎癌、下垂体腫瘍、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、皮膚癌、胃癌、精巣腫瘍、胸腺癌、甲状腺癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、ワルデンストレームマクログロブリン血症、ウイルムス腫瘍、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、成人の混合細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞型びまん性侵攻性リンパ腫、成人の大細胞免疫芽球性びまん性侵攻性リンパ腫、成人の小型非切れ込み核細胞性リンパ腫または濾胞性リンパ腫であり得る。
【０１３８】
さらなる実施態様において、癌は、頭部および頸部癌、乳癌、唾液腺、甲状腺、膵臓、胃、膀胱、子宮内膜または子宮の癌腫、子宮頸がん、卵巣、外陰癌、前立腺、結腸、直腸、結腸直腸、肺、非小細胞肺癌、骨肉腫、神経膠芽細胞腫、転移癌のいずれかであり得る。好ましい実施態様において、癌は、（ＣＬＬのような）Ｂ細胞リンパ腫である。別の好ましい実施態様において、癌は、Ｔ細胞リンパ腫である。さらなる好ましい実施態様において、癌は、前立腺癌である。さらなる実施態様において、対象は、ヒト、家畜、ウマ、イヌまたはネコである。
【０１３９】
別の実施態様において、障害は、血漿タンパク質自己免疫障害またはサイトカイン自己免疫障害であり得る。血漿タンパク質自己免疫生障害またはサイトカイン自己免疫障害の例としては、自己免疫性ＣＩ欠損症、ＳＬＥ膜増殖性糸球体腎炎、ＲＡ、全身性硬化症、自己免疫性血小板減少性紫斑病、免疫不全障害およびアテローム性動脈硬化症が挙げられる。
【０１４０】
別の実施態様において、障害は、Ｂ細胞悪性腫瘍であり得る。Ｂ細胞悪性腫瘍の例としては、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫および多発性骨髄腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性白血病、脾臓周辺帯リンパ腫、（リンパ節外または節の）周辺帯リンパ腫、形質細胞腫瘍（例えば、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着病、重鎖病）および濾胞性リンパ腫（例えば、グレードI、II、IIIまたはIV）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４１】
さらに別の実施態様において、障害は、Ｔ細胞悪性腫瘍であり得る。Ｔ細胞悪性腫瘍の例としては、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（Ｔガンマリンパ球増殖性疾患）、菌状息肉腫／セザリー症候群、成人のびまん性侵攻性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（混合細胞型および大細胞、免疫芽細胞性）、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、血管中心性リンパ腫（リンパ腫様肉芽腫症多型性網膜症）、急性リンパ球性白血病またはリンパ芽球性リンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４２】
一実施態様において、ＶＬＰは、ウイルスゲノムを含まない正２０面体ウイルス様粒子の集団を、無細胞のインビトロ反応において生成するための方法により生成される。ウイルスゲノムを含まない正２０面体ウイルス様粒子の集団を、無細胞のインビトロ反応において生成するための方法は、実質的にポリエチレングリコールを含まず、細菌細胞抽出物、ポリペプチドおよび／またはｍＲＮＡ合成機構の構成要素；ポリペプチドの翻訳のための転写のテンプレート；ポリペプチドの合成のためのモノマー；およびウイルスコートタンパク質がウイルスゲノムを含まない安定な正２０面体ウイルス様粒子に自己集合することを許容する条件下における、少なくとも約２５０μｇ／ｍｌのウイルスコートタンパク質を生成するための翻訳に必要な補因子、酵素および他の試薬を含み；ならびに少なくとも６０の別個のタンパク質を含む、原核細胞を含まないインビトロの翻訳反応において、ウイルスコートタンパク質を合成する工程を含む。
【０１４３】
ある実施態様において、本発明は、対象における癌を処置する方法であって、治療的有効量の１つまたは複数の化学療法剤を対象に投与する工程をさらに含む、方法を提供し、ここで、化学療法剤は、以下の：アルキル化剤；チオテーパ；シクロホスファミド；アルキルスルホネート；ブスルファン；インプロスルファン；ピポスルファン；アジリジン；ベンゾドーパ（benzodopa）；カルボクオン；メツレドーパ（meturedopa）；ウレドーパ（uredopa）；エチレンイミン；メチルアメラミン（methylamelamine）；アルトレタミン；トリエチレンメラミン；トリエチレンホスホルアミド；トリエチレンチオホスホルアミド；トリメチルオロメラミン（trimethylolomelamine）；ナイトロジェンマスタード；クロラムブシル；クロルナファジン；コロホスファミド（cholophosphamide）；エストラムスチン；イフォスファミド；メクロレタミン；塩酸メクロレタミン酸化物；メルファラン；ノベンビシン（novembicin）；フェネステリン；プレドニムスチン；トロフォスファミド；ウラシルマスタード；ニトロソウレア；カルムスチン；クロロゾトシン；フォテムスチン；ロムスチン；ニムスチン；ラニムスチン；アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアミシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−L−ノルロイシン、ドキシルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（potfiromycin）、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンのような抗生物質；メトトレキサート；５−フルオロウラシル；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−FU；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオン酸塩、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；フロリン酸（frolinic acid）、アセグラトン；アルドフォスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン（defofamine）；デメコルシン；ジアジクオン；エフロルニチン；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ポリサッカライドＫ（ＰＳＫ）；ラゾキサン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン��ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（gacytosine）；アラビノシド；シクロホスファミド；チオテーパ；パクリタキセル；ドセタキセル；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン；カルボプラチン；ビンブラスチン；プラチナ；エトポシド（ＶＰ―１６）；イフォスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；ＣＰ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤９−ニトロカンプトテシン；ジフルオロメシルオルニチン；レチノイン酸；エスペラマイシン；カペシタビン；タモキシフェン；ラロキシフェン；アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール；４−ヒドロキシタモキシフェン；トリオキシフェン；ケオキシフェン；ＬＹ１１７０１８；オナプリストン；トレミフェン；フルタミド；ニルタミド；ビカルタミド；ロイプロリド；およびゴセレリンのうちの１つまたは複数である。
【０１４４】
さらに別の実施態様において、障害は、感染症であり、ポリオ、呼吸系発疹ウイルス（ＲＳＶ）感染症、ＡＩＤＳ、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｅ型肝炎、狂犬病、ヘルペス、ＨＳＶ、ＥＢＶ、インフルエンザ、天然痘、粘液腫感染症、リノウイルス感染症、コロナウイルス感染症、百日咳（ルベラウイルス感染症）、アデノウイルス感染症、パピローマウイルス感染症、またはヒトＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ）感染症であり得る。好ましい実施態様において、感染症は、ＨＩＶである。別の好ましい実施態様において、感染症は、インフルエンザである。さらなる好ましい実施態様において、感染症は、ＲＳＶ感染症である。
【０１４５】
本発明は、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰを宿主中で生成するために好適な培養条件下で、本発明の宿主ベクター系を培養する工程およびそのようにして生成されたウイルスゲノムを含まないＶＬＰを回収する工程を含む、ウイルスゲノムタンパク質を含まないＶＬＰを生成するための方法も提供する。或いは、本発明のＶＬＰは、無細胞のインビトロの転写および／または翻訳系において生成され得る（Bundy 2008b, Bundy 2011）。
【０１４６】
一実施態様において、ウイルスゲノムを含まないＶＬＰは、本発明の方法により生成され、それをディスプレイポリペプチドにコンジュゲーションするために使用される少なくとも１つの（本明細書中で、非天然アミノ酸またはｎｎＡＡとも呼ばれる）非天然アミノ酸を含有し得る（上記）。
【０１４７】
ディスプレイ剤のＶＬＰへの（本明細書中でコンジュゲーションとも呼ばれる）付加のためには、ＶＬＰのウイルスコートポリペプチドが修飾されて、少なくとも１つの第１の非天然アミノ酸を着目の部位に含み、２つ以上のディスプレイポリペプチドが修飾されて、少なくとも１つの第２の非天然アミノ酸を含むことができ、ここで、第１の非天然アミノ酸は、第２の非天然アミノ酸と異なり、それと反応性である（上記）。１つの第１の非天然アミノ酸の例は、アジドホモアラニンである。第２の非天然アミノ酸の例は、プロパルギルオキシフェニルアラニンである。ＶＬＰのカプシドタンパク質中に組み込まれたアジドホモアラニンのアジド官能基は、ディスプレイ剤中に組み込まれたプロパルギルオキシフェニルアラニンのアルキン官能基との（３＋２）型シクロ付加クリック反応に参加し、ディスプレイ剤に架橋されたＶＬＰを生じ得る。同じＶＬＰ内の他の非天然アミノ酸含有カプシドタンパク質は、同様に、（３＋２）型シクロ付加クリック反応に参加して、２つ以上のディスプレイ剤を含むＶＬＰを生成し得る。別の実施態様において、ＶＬＰは、ポリペプチドおよび核酸または修飾核酸をディスプレイし得る。別の実施態様において、ＶＬＰは、２つ以上のポリペプチドおよびＣｐＧをディスプレイし得る。別個の実施態様において、ＶＬＰは、２つ以上のポリペプチドおよび核酸または修飾核酸をディスプレイし得る。
【０１４８】
以下の実施例は、本発明の態様をさらに例解するために提供される。これらの実施例は、非限定的であり、本発明のいかなる態様も制限するものであると解釈されてはならない。
【実施例】
【０１４９】
実施例１
インビボ試験
癌モデルにおけるＶＬＰワクチンの治療有効性試験のためのモデルとして、３８Ｃ１３を選んだ（Bergman 1977、Betting 2008、Haimovich 1999、Kim 1979）。全１０９頭の雌性Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウス、６週齢をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入し、１２時間の明／暗サイクルの温調ルームに収容し、試験の間ずっと、飼料および水に自由アクセスさせた。すべての動物試験プロトコールは、ＩＡＣＵＣのガイドラインにより承認された。動物および処置群の数を表１に示す。
【０１５０】
【表１Ａ】
2016515538.tif 000002
【０１５１】
【表１Ｂ】
2016515538.tif 000003
【０１５２】
免疫化
実施例２に記載のとおりにワクチンを構築し、アリコートを−８０℃で貯蔵した。投与直前にワクチンを解凍し、２００マイクロリッターのバッファー（０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳ）あたり８１ピコモルのＩｄ重鎖可変領域の最終濃度に希釈した。１０日間隔で全３回（Ｄ１、１０および２０）、各側腹への１００マイクロリッターの皮下注射によりマウスを免疫化した。
【０１５３】
血清採取
１日前（プレブリード（pre-bleed）；Ｄ−１）、２回目および３回目の免疫化の１週間後（Ｄ１７および２７）ならびに試験のエンドポイントにおいて、１群あたり３頭のマウスから免疫血清を採取し、−２０℃で貯蔵した。血清は、試験のエンドポイントにおいても各動物の最終血液から採取した。
【０１５４】
抗Ｉｄ免疫応答のモニタリング
固相ＥＬＩＳＡに基づくアッセイを用いて、抗Ｉｄ体液性免疫応答をマウス血清中で測定した（Milner 2007）。すなわち、動物群を免疫化するために使用した３８Ｃ１３ＩｄまたはＨＢＣによって、マイクロタイタープレートの試験ウエルをコーティングした。血清希釈液を調製し、プレートと相互作用させた。抗マウスＩｇ試薬を検出用に使用した。無処置マウス血清中の急増したマウス抗３８Ｃ１３Ｉｄ抗体から生じたシグナルを参照して、抗Ｉｄ抗体力価を推定した。
【０１５５】
腫瘍負荷
最終ワクチン接種（Ｄ３４）の１４日後、３８Ｃ１３マウスＢ細胞リンパ腫をマウス皮下に負荷した。３８Ｃ１３細胞は、腫瘍負荷の５日前に復活させ、使用前に細胞培養を培養３および４日目に継代した。１００マイクロリッターの不完全ＲＰＭＩ培地中、４００個の細胞を、各動物の右下側腹部に皮下移植した。先に、この細胞数は、およそ４０００立方ミリメーターの腫瘍を、無処置動物において約２０日間以内に作り出すことができると決定している。腫瘍が確立したら、それらを毎日測定し、楕円に関する（ellipsoidal）式：長さ×幅×高さ×０．５２（立方ミリメーター）を用いて腫瘍体積を近似した。動物を安楽死させ、皮下腫瘍が４０００ｍｍ３と測定された場合またはマウスが瀕死に見えるまで、腫瘍を脾臓とともにまたは伴わずに採取した。
【０１５６】
獣医学的観察および体重分析
試験の間、すべての動物において、ワクチン投与または腫瘍負荷のいずれに際しても有害効果はなかった。動物は、移植した腫瘍がエンドポイントに近いサイズとなる寸前まで、毒性が最小で活動的であった。各処置群についての平均体重を図１４に示す。全動物の体重は、ワクチン接種の間または腫瘍負荷後において常に増加した。何頭かの担腫瘍動物における急な体重増加は、それらの腫瘍のサイズの成長とも関連していた。
【０１５７】
エンドポイントにおいて、何頭かの無保護の動物は、様々な程度の腫瘍転移によって急に瀕死の状態となった。何頭かは、化膿した出血性の腹水または胸水、末梢リンパ節または腹腔および胸腔のさまざまな位置における転移があった。少数の動物は、エンドポイント近くになって死んでいた。
【０１５８】
免疫化に関連した腫瘍保護
様々なワクチン構築物を、腫瘍負荷に対する保護の誘導におけるそれらの有効性について比較した。１９頭からなる第３群（対照）を除いて、処置群あたり１０頭のマウスの腫瘍体積から平均（±ＳＥＭ）値を計算した。薬物有効性を、式：１００−（（Ｔ−Ｃ）／Ｃ＊１００）、式中、対照群の平均腫瘍体積がエンドポイントに達した時における、Ｔは処置腫瘍の平均的腫瘍であり、Ｃは、対照群（ＶＬＰ）の平均的腫瘍である、を用いて計算した腫瘍成長阻害パーセンテージ（ＴＧＩ％）として表した。第３群における対照マウス（ＶＬＰの注射）は、いかなる保護も示さず；すべてのマウスはｐｉ１３日以内に皮下腫瘍を発症し、腫瘍体積は、すべての動物についてｐｉ２７日目までにエンドポイントに到達した（図１５）。対照的に、ワクチン構築物で免役化したマウスは、様々な程度で腫瘍の成長を抑制し、対照（ＶＬＰ）群の平均腫瘍体積がエンドポイントの腫瘍体積に達したｐｉ１７日目において、５０〜９６％の腫瘍成長の阻害をもたらした（図１５）。ＶＬＰ対照群（第３群）と比較して、３８Ｃｓ１００−Ｃ２０−ＶＬＰ（第８群）による免疫化は、ｐｉ１７日目において９６％の腫瘍成長の阻害をもたらした。同様に、３８Ｃｓ１００−ｍＧ２０−ＶＬＰ（第７群）は、８０％の腫瘍成長の阻害をもたらした（ｐｉ１７日目）。図１６および表２に見られるように、ワクチン構築物で免役化したマウス由来の腫瘍は、腫瘍を有さない生存者を含む対照群のエンドポイントまでの時間（ＴＴＥ）に比較して、より長いＴＴＥを達成した。ｐｉ３５日目までに、すべてのワクチン構築物は、３０〜７０％の長期の腫瘍を有さない生存者を保護し、ここで、「３８Ｃｓ１００−Ｃ２０−ＶＬＰ」（第８群）は、最大の成功を収め（７０％、マウス１０頭のうち７頭）、「３８Ｃｓ−融合物」（第２群）および「３８Ｃｓ７０−Ｆ１０−Ｃ２０−ｍＧ２０−ＶＬＰ」（第５群）は、最小の完全な保護（３０％、マウス１０頭のうち３頭）を達成した（表２）。各群の腫瘍を有さない生存者のパーセンテージを、マウスに３８Ｃ１３細胞を再負荷するまでｐｉ９７日間、記録した。
【０１５９】
【表２】
2016515538.tif 000004
【０１６０】
免疫応答の結果
抗Ｉｄ免疫応答の結果を図１７に示す。陽性対照群のすべての動物は、１ミリリッターあたり１マイクログラム超の抗Ｉｄ抗体力価を達成した。陰性対照群においては、抗Ｉｄ応答は見られなかった。第４〜８群、Ｉｄおよび他の成分を付加したＶＬＰを与えた動物に関して、抗体力価は変動したが、陽性対照で観察したよりは一般に低かった。
【０１６１】
要約
ＶＬＰ群は、一般に、陽性対照ワクチンよりも性能が優れていたが、一般に、抗Ｉｄ抗体力価に関する免疫応答はより低く、免疫応答の発生はより遅かった。この結果は予想外であり、免疫応答と癌のような複雑な疾患についての治療有効性との複雑な関係を指し示している。
【０１６２】
実施例２−ＶＬＰワクチンの製造
エンジニアリング成分
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨｅｐＢ）は、エンベロープＤＮＡウイルスである。そのカプシド構成Ｂ型肝炎ウイルスコア抗原（ＨＢＣ）の切断型変異体は、適した条件下で自己集合して、２４０ｍｅｒの正２０面体ＶＬＰを形成することが分かっている（Zlotnick 1996）。ＶＬＰは、ＤＮＡを含有せず、非感染性であり、広範囲のｐＨおよび温度にわたって安定である。ＨＢＣ  ＶＬＰの表面は、ワクチン開発における成功した外来抗原および免疫刺激剤ディスプレイのために開発可能な、突き出たアルファへリックスの規則正しい配列で装飾されている（Pumpens 2001）。ＣＦＰＳ中で合成されたＨＢＣ  ＶＬＰの物理的および化学的性質は、透過電子顕微鏡法による大きさ決定を含め、よく特徴づけされており、医薬開発に適している（Bundy  2008、Bundy 2010、Bundy 2011、Kanter 2007、Voloshin 2005、Yang 2004）。
【０１６３】
Ｍｆｏｌｄソフトウエア（Zuker 2003）および発現のための最適化された細菌コドン利用により、全テンプレート配列を設計し、二次構造低減のために最適化した。開発のために、ＨＢＣ以外の全タンパク質を、精製のためにヘキサヒスチジン、Ｓｔｒｅｐ−タグまたはＦＬＡＧ−タグ配列でタグ付けした。これらの精製用タグは、必要に応じて、ヒト試験の前に除去され得る。テンプレートをデノボ合成し、プラスミドベクター（ｐＹ７１またはＰＥＴ）中にクローニングした。各構築物を配列検証した。
【０１６４】
ＨｅｐＢコアタンパク質の生成およびＶＬＰの精製
発明者らは、タンパク質および他の分子をクリックケミストリーなどによってＶＬＰに付加できるように、特定の部位にｎｎＡＡを組み込んだＶＬＰを生成した。Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＶＢ）は、エンベロープＤＮＡウイルスであり；発明者らは、ＣＦＰＳ中で発現されたときに自己集合して２４０ｍｅｒ（Ｔ＝４）の正２０面体ＶＬＰを形成する、そのカプシド構成コア抗原の切断型を使用する（Zlotnick 1996）。ＶＬＰは、非感染性であり、広範囲のｐＨおよび温度にわたって安定である（Bundy 2008）。２０〜４０マイクロリッターの反応で生成したＨＶＢコア抗原は、１ミリリッターあたり４００マイクログラム超を産生し、合成された全ポリペプチドの大部分は可溶性であった。ＨＶＢ  ＶＬＰの表面は、ワクチン開発における成功した外来抗原および免疫刺激剤ディスプレイのために開発可能な、突き出たアルファへリックスの規則正しい配列で装飾されている（Pumpens 2001）。
【０１６５】
アジドホモアラニンの組み込みによるＨｅｐＢコア（ＨＢＣ）の無細胞タンパク質合成（ＣＦＰＳ）反応は、先に記述されている（Bundy 2008b、Bundy 2009、Bundy 2011、Patel 2011）。反応を、２つのＴ７５プレート中、１０ｍｌの反応体積で実施し（各プレートあたり５ｍｌ）、３０℃で１６時間インキュベートした。反応は、８ｍＭ  グルタミン酸マグネシウム、１０ｍＭ  グルタミン酸アンモニウム、１３０ｍＭ  グルタミン酸ナトリウム、３５ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、１．２ｍＭ  ＡＭＰ、０．８６ｍＭ  ＧＭＰ、ＵＭＰおよびＣＭＰのそれぞれ、２ｍＭ  メチオニン以外のアミノ酸、２ｍＭ  アジドホモアラニン（ＭｅｄＣｈｅｍ  Ｃｏ）、４ｍＭ  シュウ酸ナトリウム、１ｍＭ  プトレシン、１．５ｍＭ  スペルミジン、１５ｍＭ  リン酸カリウム、１００ｎＭ  Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼおよび５００μｇのプラスミドＤＮＡテンプレートおよび３ｍｌの無細胞抽出液を含有した。
【０１６６】
インキュベーション後、１５，０００ｇで１５分間、反応生成物を遠心分離して凝集物を除去した。上清を飽和硫酸アンモニウムと併合して、最終的に３０％飽和とした。サンプルをさらに１時間混合し、次いで、サンプルを遠心分離してペレットを沈殿させた。
【０１６７】
Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ６  Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ（ＧＥ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いるサイズ排除法によってＨＢＣ  ＶＬＰを精製した。硫酸アンモニウム沈殿を、１ｍｌの５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５／５００ｍＭ  ＮａＣｌ中に懸濁し、同じバッファーで予め平衡化したＳｅｐｈａｒｏｓｅ  ６  Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗカラム（内径２．５ｃｍ×長さ２５ｃｍ）に添加した。０．５ｍＬ／分の流速でカラムを流した。分画を集め、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。ＨｅｐＢ  ＶＬＰを凝集物およびよりサイズの小さいタンパク質からよく分離した。この実施例における収量は、１０ｍｌの反応体積から４ｍｇであった。代表的な結果を図８に示す。
【０１６８】
成分の生成および精製
翻訳機構を含有し、リボヌクレオチド三リン酸、Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼ、アミノ酸およびＮＡＤのカクテルで富化した無細胞抽出液中で、ＣＦＰＳを用いてタンパク質を合成した。適切なＤＮＡ配列の添加は、高収率のタンパク質合成をもたらした。クリックケミストリー（Ｃｕ（Ｉ）触媒による[３＋２]型シクロ付加）によるタンパク質のアジド含有非誘導体化ＶＬＰへのバイオコンジュゲーションを可能とするために、いずれかのアルキン残基を有するｎｎＡＡが特定の部位に組み込まれる（Bundy 2010、Patel 2011）。各成分タンパク質を、適宜、アフィニティー精製、サイズ分離、イオン交換または精製のための他の方法により精製した（Bundy 2010、Goerke 209、Kanter 2007、Patel 2010、Patel 2011）。
【０１６９】
フラジェリン−Ｔ２４０Ｘの生成
フラジェリン−Ｔ２４０ＸのためのＣＦＰＳ反応を、２つの５００ｍｌ円錐遠心管のそれぞれに５ｍｌずつ分けた１０ｍＬの反応体積中で実施し、ニューテイター（nutator）上、３０℃で１６時間インキュベートした。反応は、８ｍＭ  グルタミン酸マグネシウム、１０ｍＭ  グルタミン酸アンモニウム、１３０ｍＭ  グルタミン酸カリウム、３５ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、１．２ｍＭ  ＡＭＰ、０．８６ｍＭ  ＧＭＰ、ＵＭＰおよびＣＭＰのそれぞれ、２ｍＭ  タンパク質を構成する標準的アミノ酸、２ｍＭ  プロパルギルオキシフェニルアラニン、４ｍＭ  シュウ酸カリウム、１ｍＭ  プトレシン、１．５ｍＭ  スペルミジン、１５ｍＭ  リン酸カリウム、１００μｇ／ｍｌのＴ７  ＲＮＡポリメラーゼ、１５０μｇのフラジェリン−Ｔ２４０ＸプラスミドＤＮＡテンプレート、４．８ｍｇのＭＪＴｙＲＳｐＰａ、６０μｇ  ｏｔＲＮＡおよび３ｍｌの細菌無細胞抽出液を含有した。
【０１７０】
インキュベーション後、反応生成物を１５，０００ｇで１５分間遠心分離して、凝集物を除去した。上清を、抗−ＦＬＡＧ樹脂に添加し、ＴＢＳバッファーで６回洗浄した。生成物を１００μｇ／ｍｌのＦｌａｇ−ペプチドで溶出した。生成物をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル電気泳動により分析し、タンパク質を−８０℃で貯蔵した。代表的な結果を図９に示す。
【０１７１】
ｈｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９５Ｘ、ｍｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９２ｘおよびＩＭ９−Ｓ２７Ｘ−３８Ｃ１３ｓｃＦｖＩｄ融合タンパク質の生成
ｈｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９５Ｘ、ｍｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９２ｘおよびＩＭ９−Ｓ２７Ｘ−３８Ｃ１３ｓｃＦｖＩｄ融合タンパク質のためのＣＦＰＳ反応を、２つの５００ｍｌ円錐遠心管のそれぞれに５ｍｌずつ分けた１０ｍＬの反応体積中で実施し、ニューテイター上、３０℃で１６時間インキュベートした。反応は、８ｍＭ  グルタミン酸マグネシウム、１０ｍＭ  グルタミン酸アンモニウム、１３０ｍＭ  グルタミン酸カリウム、３５ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、１．２ｍＭ  ＡＭＰ、０．８６ｍＭ  ＧＭＰ、ＵＭＰおよびＣＭＰのそれぞれ、２ｍＭ  タンパク質を構成する標準的アミノ酸、２ｍＭ  プロパルギルオキシフェニルアラニン、４ｍＭ  シュウ酸カリウム、１ｍＭ  プトレシン、１．５ｍＭ  スペルミジン、１５ｍＭ  リン酸カリウム、１００μｇ／ｍｌ  Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼ、１ｍＭ  還元グルタチオン、４ｍＭ  酸化グルタチオン、２ｍＭ  Ｅ．コリ（E. coli）ジスルフィドイソメラーゼ  Ｄｓｂｃ、１５０μｇの適切なプラスミドＤＮＡテンプレート、４．８ｍｇのＭｊ−チロシル−ｔＲＮＡ（ＭｊｔＲＮＡ）シンテターゼ（ＭＪＴｙＲＳｐＰａ）、６０μｇのｏｔＲＮＡテンプレートおよび３ｍｌの細菌無細胞抽出液を含有した。混合物に添加する前、無細胞抽出液を５０μＭ  ヨードアセトアミド（ＩＡＡ）で２０分間、室温で処理した。
【０１７２】
インキュベーション後、反応生成物を１５，０００ｇで１５分間遠心分離して、凝集物を除去した。上清を、抗−ＦＬＡＧまたは抗−ＳＴＲＥＰ樹脂に添加し、ＴＢＳバッファーで６回洗浄した。生成物を１００μｇ／ｍｌのＦｌａｇ−またはＳｔｒｅｐ−ペプチドで溶出した。タンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル電気泳動により分析し、−８０℃で貯蔵した。代表的な結果を図９に示す。
【０１７３】
３８Ｃ１３  ＩｇＭおよび３８Ｃ１３  Ｆ（ａｂ’）２の生成
スタンフォード大学のＲｏｎ  Ｌｅｖｙ博士から、３８Ｃ１３  ＩｇＭ産生細胞株を入手した（Bergman 1977、Bergman 1977、Eshhar 1979、Maloney 1985）。標準的な細胞培養条件を用いて細胞を増殖させ、抗体定常領域アフィニティークロマトグラフィーを用いて抗体を精製した。生成物を、純度について分析するために使用した、還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。
【０１７４】
ＩｇＭの部分的還元を用いる部分消化および定常領域の部分消化により、ＩｇＭからＦ（ａｂ’）２を調製した。純度について分析するために、ＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用した。
【０１７５】
ＣｐＧ−Ｘの生成
図５に示すＣｐＧ配列を製造し、質量分析およびＳｉｇｍａ  ＡｌｄｒｉｃｈによるＨＰＬＣによりアッセイした。
ＶＬＰ成分のアセンブリのためのアルキン−アジド「クリック」コンジュゲーション
「クリックケミストリー」（Ｃｕ（Ｉ）触媒による[３＋２]型シクロ付加）によるタンパク質のバイオコンジュゲーションを可能とするために、アルキンまたはアジド残基のいずれかを含む非天然アミノ酸を特定の部位に組み込む（Bundy 2010、Patel 2011）。各成分タンパク質を、適宜、アフィニティー精製、サイズ分離およびイオン交換により精製する（Bundy 2010、Goerke 2009、Kanter 2007、Patel 2010、Patel 2011）。発明者らは、アルキン誘導体化ＣｐＧ配列、ｍｕＧＭ−ＣＳＦ、ｈｕＧＭ−ＣＳＦ、ｓｃＦｖ  Ｉｄ（３８Ｃ１３モデル）およびフラジェリンの付加のためのクリックケミストリーを実証した。
【０１７６】
１ｍＭ  テトラキス（アセトニトリル）−銅（Ｉ）ヘキサフルオロホスフェート触媒（[（ＣＨ３ＣＮ）４Ｃｕ]ＰＦ６）（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）の還元状態を維持した、加湿アルゴン注入反応容器中でアジド−アルキンクリック反応を実施した。反応は、ＶＬＰ−アジドおよび所望の濃度の１つまたは複数のアルキン誘導体化成分を含有した。反応は、０．５ｍＭ  トリス（トリアゾリルメチル）アミンＣｕリガンド（ＴＴＭＡ）エンハンサー（Zhou 2004）、リン酸緩衝食塩水および場合により、２００μＭのアスコルビン酸ナトリウムも含有した。３７度で約１６時間、反応を実施した。構築したＶＬＰを、サイズ排除クロマトグラフィーおよびさらに場合により、構築したＶＬＰの３０％硫酸アンモニウム中での再沈殿およびその後の再懸濁によって精製した。Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４を用いる相分離によってエンドトキシンを除去した。
【０１７７】
具体的には、単一成分のＶＬＰの生成のために、１００μｇのフラジェリン−Ｔ２４０ｘ、ｈｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９５Ｘ、ｍｕＧＭ−ＣＳＦ−Ｔ９２ＸまたはＳｃＦＶ−ＩＭ９−Ｘ、６０μｇ  Ｈｅｐ  ＢコアＶＬＰ、０．５ｍＭ  ＴＴＭＡ、１ｍＭ  テトラキスＣｕ（Ｉ）、２００μＭ  アスコルビン酸ナトリウムを、総体積１３０μｌのリン酸緩衝食塩水中で調製した。３７度で１６時間、加湿アルゴン注入チャンバー中で反応を進行させた。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロットによって、コンジュゲーションに関して生成物を分析した。代表的な結果を図１０に示す。
【０１７８】
ＴＴＭＡおよびテトラキスＣｕ（Ｉ）の添加前に、成分およびＶＬＰを所定の比率で混合することによって、多成分ワクチンを生成した。実施例１に記載のマウス試験のためのワクチンを作るために使用した比率を表３に示す。
【０１７９】
３８Ｃ１３  ＩｇＭおよび３８Ｃ１３  Ｆ（ａｂ’）２をＶＬＰに付加するために、歪んだ構造のアルキンマレイミドリンカー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃ−１０４１３）を使用した。３８Ｃ１３  ＩｇＭ産生細胞株から得たＦ（ａｂ’）２断片を、定常領域の部分消化により調製した。ヒンジ領域ジスルフィドの部分還元について記載したアプローチを使用後、リンカーをＦ（ａｂ’）２またはＩｇＭの遊離のスルフヒドリル、特に、ヒンジ領域中で利用可能としたものに反応させた。次いで、銅触媒およびＴＴＭＡエンハンサーを含むか含まない、上記の「クリック」コンジュゲーションについてのバッファー条件を用いる、ＶＬＰの遊離のアジド基への付加のために、歪んだ構造のアルキンを使用した。
【０１８０】
【表３】
2016515538.tif 000005
【０１８１】
３８Ｃ１３ｓｃＦｖ−ＩＭ９−ＧＭ−ＣＳＦ対照タンパク質の生成
実施例１のマウス試験のための１つの対照タンパク質である、融合タンパク質３８Ｃ１３ＳｃＦｖ−ＩＭ９−ＧＭ−ＣＳＦは、ｎｎＡＡを組み込んでいない。このタンパク質は、公表された方法（Yang 2005）に従い、ＣＦＰＳによって産生された。
【０１８２】
成分の活性を試験するためのアッセイ
各免疫刺激剤成分を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ機器（サイトカインおよび３８Ｃ１３含有）または細胞に基づくレポーター（フラジェリンおよびＣｐＧ配列）を用いる結合アッセイのいずれかにおいて、活性について試験した。代表的なデータは、マウスＩＬ−１５およびフラジェリンアッセイに従う。アジド−ＶＬＰの活性についてのアッセイも、開発された。
【０１８３】
ＦｏｒｔｅＢｉｏ結合アッセイ
精製した組換えｒＭｕＩＬ１５Ｒａ（マウスＩＬ−１５受容体  Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、１ｍｇ／ｍｌの最終濃度で、ＰＢＳに溶解し、ＥＺ−Ｌｉｎｋ  ＮＨＳ−ＬＣ−Ｂｉｏｔｉｎ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によりビオチン化した。室温で２時間、ビオチン化を実施し、次いで、ＰＢＳ中で一夜透析した。ビオチン化した試薬を、０．１ｍｇ／ｍｌの濃度において４℃で貯蔵した。
【０１８４】
ＦｏｒｔｅＢｉｏ  ＳＡ  Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒを、ブラック９６ウエルプレート中、２００μｌの１×カイネティックバッファー中で１０分間、予め水和させた。１ｍｌのビオチン化ｒＭｕＩＬ１５Ｒａ（マウスＩＬ−１５対照）を、１×カイネティックバッファーまたはＰＢＳ中、５μｇ／ｍｌの最終濃度で調製した。ｒＭｕＩＬ１５Ｒａ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、２００ｎＭから開始して、２倍滴定し、それぞれ最終体積２００μｌの３つの追加の希釈液とした。計算したオンレイト（on-rate）定数は、５．５３ｅ−４Ｍ−１秒−１；オフレイト（off-rate）定数は、３．０８ｅ４Ｍ−１秒−１であり、解離定数は、５．５７ｅ−９Ｍである。反応速度曲線を図１１に示す。
【０１８５】
ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＴＬＲ−５およびＴＬＲ−９レポーター細胞アッセイ
フラジェリンおよびＣｐＧ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ  ｈｋｂ−ｈｔｌｒ５、ｈｋｂ−ｍｔｌｒ５、ｈｋｂ−ｈｔｌｒ９およびｈｋｂ−ｍｔｌｒ９）を分析するために市販のＩｎｖｉｖｏＧｅｎ  ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）細胞に基づくアッセイを実施した。ヒトまたはマウスＴＬＲ５またはＴＬＲ９を発現する細胞は、それぞれ、フラジェリンおよびＣｐＧの活性の実証において成功を示した。図１２に示すように、フラジェリンを分析するためにアッセイを実施した。
【０１８６】
アジドＶＬＰ活性アッセイ
精製したＨｅｐＢｃ  ＶＬＰを、ＰＢＳ溶液中でＤｙＬｉｇｈｔ−４８８−ホスフィン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と反応させた。ＢＳＡを４ｍＭアジド−スクシミド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と反応させることにより、ＢＳＡ−アジド対照を調製し、脱塩カラムを使用して精製した。還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥにより反応生成物を分析した。クマシー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による染色の前に、ゲルの蛍光画像を生成した。代表的なデータを図１３に示す。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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