(57)【要約】式Ｉの構造を有する新規化合物［式中：ｎは、１〜５の整数であり；Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；Ｙは、Ｏ、Ｓであり；Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして、Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］、医薬的に許容しうるその塩を開示する。該化合物は、強力な細菌排出ポンプ阻害剤（ＥＰＩ）である。そのような化合物は、ベータ−ラクタム抗生物質およびキノロン抗生物質などの抗微生物性化合物のグラム陰性細菌に対する抗微生物活性を増強するのに有用である。2016518393.tif 000096【選択図】なし
2016518393.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの構造を有する細菌排出阻害剤化合物、または医薬的に許容しうるその塩：
【化１】
2016518393.tif 000074
［式中、
ｎは、１〜５の整数であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物
［式中：
ｎは、１であり；
Ｘは、−ＣＮであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｙは、Ｏであり；
Ｚは、ヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、メチルであり；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項３】
以下からなる群より選択される、式１に記載の化合物：
【化２】
2016518393.tif 000075
【化３】
2016518393.tif 000076
【化４】
2016518393.tif 000077
【化５】
2016518393.tif 000078
【化６】
2016518393.tif 000079
【化７】
2016518393.tif 000080
【化８】
2016518393.tif 000081
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物と、医薬的に許容しうるキャリヤーまたは賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項５】
さらに抗微生物剤を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム(doripenam)、イミペナム(imipenam)、メロペナム(meropenam)またはアズトロナム(aztronam)から選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
細菌の排出ポンプを阻害するための、式ＩＩの化合物または医薬的に許容しうるその塩の使用：
【化９】
2016518393.tif 000082
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項９】
請求項８に記載の使用、これに関し、式ＩＩにおいて、
Ｘは、シアノであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキルまたはアリールオキシアルキルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１、Ａ２は、ＣＨ２であり；そして
Ｙは、酸素である。
【請求項１０】
請求項８に従った使用、これに関し、式ＩＩの化合物は、以下：
【化１０】
2016518393.tif 000083
【化１１】
2016518393.tif 000084
【化１２】
2016518393.tif 000085
【化１３】
2016518393.tif 000086
【化１４】
2016518393.tif 000087
【化１５】
2016518393.tif 000088
【化１６】
2016518393.tif 000089
【化１７】
2016518393.tif 000090
および医薬的に許容しうるその塩からなる群より選択される。
【請求項１１】
前記化合物が式Ｉの構造を有する、請求項８に記載の使用：
【化１８】
2016518393.tif 000091
［式中、
ｎは、１〜５の整数であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項１２】
化合物または医薬的に許容しうるその塩が、抗微生物剤と組み合わせて用いられる、請求項８〜１１のいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム、イミペナム、メロペナムまたはアズトロナムから選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
細菌感染を処置または防止するための、式ＩＩの化合物または医薬的に許容しうるその塩の使用：
【化１９】
2016518393.tif 000092
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項１６】
前記細菌感染が細菌の抗菌耐性株に起因する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
グラム陰性病原体に起因するヒトにおける感染を処置するための、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉまたはＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｒｏｅａｅである、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
グラム陰性病原体に起因する動物における感染を処置するための、請求項１５に記載の使用。
【請求項２０】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐｐ．、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｐｐ．、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、またはＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉである、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
グラム陰性病原体によるコロニー形成がみられる機器および表面を殺菌するための、式ＩＩの化合物またはその塩の使用：
【化２０】
2016518393.tif 000093
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項２２】
前記化合物を、グラム陰性病原体によるコロニー形成または生物膜形成を防止するために医療機器および表面用のコーティングとして用いる、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
個体における細菌感染の処置方法であって、前記個体に、式ＩＩに記載の化合物と医薬的に許容しうるキャリヤーまたは賦形剤とを含む組成物を投与することを含む、前記方法：
【化２１】
2016518393.tif 000094
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項２４】
前記化合物が式Ｉを有する化合物である、請求項２３に記載の方法：
【化２２】
2016518393.tif 000095
［式中、
ｎは、１、２、３、４または５であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項２５】
前記組成物を抗微生物剤と組み合わせて投与する、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム、イミペナム、メロペナムまたはアズトロナムから選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
細菌の抗菌耐性株に起因する細菌感染を処置するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２９】
前記感染がグラム陰性病原体に起因する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉまたはＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｒｏｅａｅである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ベータ−ラクタム抗生物質またはキノロン抗生物質の抗菌活性を増強するための請求項１〜３に記載の化合物の使用であって、前記抗生物質を前記化合物と組み合わせて投与または施用することを含む、前記使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権出願の相互参照
本出願は、２０１３年５月３日提出の米国仮出願第６１／８１９０５４号に対する優先権を主張するものである。該仮特許出願の内容を本明細書中で援用する。
連邦政府資金による研究の記載
本発明は、国立衛生研究所により与えられた助成ＡＩ０７４１１６−０１Ａ２およびＡＩ１００３３２−０２に基づく政府支援によりもたらされた。政府は本発明に特定の権利を有する。
発明の分野
本発明は、抗微生物剤と相乗効果を示すように作用してそれらの効果を高める化合物の分野にある。とりわけ、本発明は、抗生物質の効力を高める排出ポンプ阻害剤として機能する有機化合物を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．およびＳｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｉｐｈｉｌｉａを含むグラム耐性病原体における多剤耐性（ＭＤＲ）は、これらの生物により引き起こされる感染の有効な処置に対し重大な脅威となる（Ｋｉｂｂｅｙ，ｅｔ  ａｌ．：Ａｎ  ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｉｎ  ａ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，ｖｏｌ．９０，ｐｐ．１１６４−１１７５，（２００１）；Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．：Ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ａｎｄ  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｎ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｍｉｃｒｏｂ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．６８−７４，（２００５）；Ｋａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．：Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｔｏ  ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｅｃｉｅｓ．  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｈｏｓｐ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ，ｖｏｌ．２６，ｐｐ．８８−９２，（２００５）；Ｋａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．：Ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｉｌｌｉ：ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｉｎａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ  ｉｎｉｔｉａｌ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｎ  ｏｕｔｃｏｍｅ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４９，ｐｐ．７６０−７６６，（２００５））。新規抗菌剤を発見および開発するための商業的取り組みが最近減少しているため、ＭＤＲの脅威は深刻化している。これに加えて、最近臨床に導入されたか、開発中である抗菌剤、例えば、ダプトマイシン、ゲミフロキサシン、テリスロマイシンおよびテラバイシンは、グラム陰性病原体に対し活性を示さない。グラム陰性細菌に対し活性を示す最近承認された作用物質としては、チゲサイクリンおよびドリペネムが挙げられる。チゲサイクリンは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでテトラサイクリン特異性ポンプを生じさせる細菌に対し活性を示すが、遍在する多剤ポンプにより迅速に押し出され、治療中に耐性は進化する（Ａｎｔｈｏｎｙ，ｅｔ  ａｌ．：Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ｏｆ  ｓｅｒｉｏｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｇｒａｍ−ｎ���ｇａｔｉｖｅ  ｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ．  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ，ｖｏｌ．４６，ｐｐ．５６７−５７０，（２００８））ので、その薬物動態特性により、尿路および血流の感染を処置するためのその使用は制限される（Ｐｅｌｅｇ，ｅｔ  ａｌ．：Ｈｏｓｐｉｔａｌ  ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｄｕｅ  ｔｏ  Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，ｖｏｌ．３６２，ｐｐ．１８０４−１８１３，（２０１０））。明らかに、ＭＤＲグラム陰性病原体により引き起こされる感染を効果的に処置するための新規戦略が緊急に必要とされている。
【０００３】
ＭＤＲ表現型は、獲得性および内因性の両方の耐性機序に起因する。獲得耐性機序は、抗菌剤の標的の親和性を低下させる変異を包含するか、または、標的を修飾するか抗菌剤を不活性化する可動遺伝因子の獲得による。ここ数年、内因性耐性機序がＭＤＲ表現型の発達において果たす役割の重要性が、十分に理解されてきた（Ｎｉｋａｉｄｏ，ｅｔ  ａｌ．：Ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ．  ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．３４０−３６３，（２０１２）；Ｐｏｏｌｅ：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｓｔｒｅｓｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ａｓ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．６７，ｐｐ．２０６９−２０８９，（２０１２））。抗菌剤に対する感受性が変化した変異体に関する細菌の全ゲノムスクリーンにより、Ｅ．ｃｏｌｉ（Ｔａｍａｅ，ｅｔ  ａｌ．：Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ａｍｏｎｇ  ４，０００  ｓｉｎｇｌｅ−ｇｅｎｅ−ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｕｔａｎｔｓ  ｏｆ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．  Ｊ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，ｖｏｌ．１９０，ｐｐ．５９８１−５９８８，（２００８））およびＰ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（Ｂｒｅｉｄｅｎｓｔｅｉｎ，ｅｔ  ａｌ．：Ｃｏｍｐｌｅｘ  ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ｒｅｓｉｓｔｏｍｅ  ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ａ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｍｕｔａｎｔ  ｌｉｂｒａｒｙ  ｆｏｒ  ａｌｔｅｒｅｄ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５２，ｐｐ．４４８６−４４９１，（２００８）；Ｆａｊａｒｄｏ，ｅｔ  ａｌ．：Ｔｈｅ  ｎｅｇｌｅｃｔｅｄ  ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ｒｅｓｉｓｔｏｍｅ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，ｖｏｌ．３，ｐｐ．ｅ１６１９，（２００８）；Ｇａｌｌａｇｈｅｒ，ｅｔ  ａｌ．：ｇｅｎｏｍｅ−ｓｃａｌｅ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｕｓｉｎｇ  Ｔｎ−ｓｅｑ．  ＭＢｉｏ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．ｅ００３１５−００３１０，（２０１２））における内因性耐性において役割果たすいくつかの遺伝子、例えば、熱ショック、ＳＯＳ応答、膜応力応答および排出に関与する遺伝子が同定された。プロテアーゼＦｔｓＨおよび補助タンパク質ＹｃｃＡ、ＨｔｐＸ、ＨｆｌＫ、ＨｓｌＵＶ、およびＨＦｌＣのネットワークは、おそらくミスフォールドしたタンパク質の除去により、アミノグリコシド系トブラマイシンに対する内因性耐性に関与する（Ｈｉｎｚ，ｅｔ  ａｌ．：Ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅａｓｅｓ  ａｎｄ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．  Ｊ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，ｖｏｌ．１９３，ｐｐ．４７９０−４７９７，（２０１１））。これに加えて、ＳＯＳは、キノロン抗生物質に対する内因性耐性に関わっている（Ｐｉｄｄｏｃｋ，ｅｔ  ａｌ．：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｆｉｖｅ  ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ｓｔｒａｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｇｅｎｅｓ  ｅｎｃｏｄｉｎｇ  ｔｈｅ  ＳＯＳ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｒ  ｃｅｌｌ  ｄｉｖｉｓｉｏｎ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．８１９−８２５，（１９９２））。しかしながら、グラム陰性細菌のＲＮＤ排出ポンプは、ＭＤＲにおいて主要な役割を果たす。それらの基質特異性は範囲が広いので、これらの排出ポンプの過剰発現は、広範な抗菌剤および殺生物剤に対する感受性を低下させる（Ｎｉｋａｉｄｏ，ｅｔ  ａｌ．：Ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ．  ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．３４０−３６３，（２０１２））。
【０００４】
Ｅ．ｃｏｌｉの主要な排出ポンプは、典型的な耐性−小結節形成−分裂(resistance-nodulation-division)（ＲＮＤ）ポンプであり、これは、幅広い基質特異性を有する必須膜(integral membrane)排出輸送体、外膜チャネル（ＴｏｌＣ）、およびペリプラズムタンパク質アダプター（ＡｃｒＡ）からなる３部分構造(tripartite sturucture)である。抗生物質は、ポーリンを通るか、脂質二重層を通っての拡散により、ペリプラズム空間に入り、ここでＡｃｒＢの基質結合ポケットと相互作用する。ＡｃｒＢ輸送体は、プロトン駆動力を用いて化合物をＴｏｌＣチャネル中に、そして外部に押し出す。これらのＲＮＤファミリーのポンプは、フルオロキノロン系（ＦＱｓ：例えば、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシン）およびβ−ラクタム系（例えば、ピペラシリン、メロペネム、およびアズトレオナム）を含む抗菌剤に対し内因性レベルの耐性をもたらす（Ｐｉｄｄｏｃｋ：Ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｌｙ  ｅｎｃｏｄｅｄ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  ｂａｃｔｅｒｉａ．  Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．１９，ｐｐ．３８２−４０２，（２００６））だけでなく、過剰に生じた場合はＭＤＲ表現型ももたらす。これに加えて、遺伝子欠失によるか（Ｌｏｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｕｓｅ  ｏｆ  ａ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｅｖａｌｕａｔｅ  ｔｈｅ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４３，ｐｐ．１３４０−１３４６，（１９９９））、強力な排出ポンプ阻害剤（ＥＰＩ）（Ｌｏｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：ｎｏｖｅｌ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０５−１１６，（２００１））でのＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａにおけるＲＮＤポンプの阻害は、レボフロキサシンに対する耐性頻度を低下させ、Ｅ．ｃｏｌｉにおけるＦＱ耐性に関する標的変異の選択にはＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣが必要である（Ｓｉｎｇｈ，  ｅｔ  ａｌ．：Ｔｅｍｐｏｒａｌ  ｉｎｔｅｒｐｌａｙ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ａｎｄ  ｔａｒｇｅｔ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５６，ｐｐ．１６８０−１６８５，（２０１２））。これに加えて、ＲＮＤポンプは、腸内病原菌Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ血清型Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの菌力において役割を果たすことが示されており（Ｎｉｓｈｉｎｏ，ｅｔ  ａｌ．：Ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔ���ｎｃｅ  ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｅｆｆｌｕｘ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ｏｆ  Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ  ｓｅｒｏｖａｒ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ．  Ｍｏｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，ｖｏｌ．５９，ｐｐ．１２６−１４１，（２００６））、ＲＮＤポンプを標的とするＥＰＩは、Ｅ．ｃｏｌｉおよびＫ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅにおける生物膜形成を阻害することが示されている（Ｋｖｉｓｔ，ｅｔ  ａｌ．：Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ａｂｏｌｉｓｈｅｓ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｂｉｏｆｉｌｍ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．  Ａｐｐｌ  Ｅｎｖｉｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，ｖｏｌ．７４，ｐｐ．７３７６−７３８２，（２００８））。したがって、ＥＰＩをＦＱまたはβ−ラクタム抗生物質と一緒に補助的療法として用いて、低抗生物質濃度での抗菌能を改善し、耐性の発生を妨げ、生物膜形成を阻害し、腸内病原菌の菌力を低下させることができる。
【０００５】
いくつかの強力な排出ポンプ阻害剤が、文献に記載されているが（Ｔｈｏｒａｒｅｎｓｅｎ，ｅｔ  ａｌ．：３−Ａｒｙｌｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅｓ  ａｓ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｅｘｉｓｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  ａｇｅｎｔｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．１９０３−１９０６，（２００１）；Ｌｏｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃ−−ａ  ｖｉｓｉｏｎ  ｆｏｒ  ａｐｐｌｉｅｄ  ｕｓｅ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，ｖｏｌ．７１，ｐｐ．９１０−９１８，（２００６）；Ｍａｈａｍｏｕｄ，ｅｔ  ａｌ．：Ｑｕｉｎｏｌｉｎｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ａｓ  ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ  ｉｓｏｌａｔｅｓ．  Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ，ｖｏｌ．７，ｐｐ．８４３−８４７，（２００６）；Ｍａｈａｍｏｕｄ，ｅｔ  ａｌ．：Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ：ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｓｔｒａｔｅｇｙ．  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５９，ｐｐ．１２２３−１２２９，（２００７））、臨床開発に達したものはない。ＰＡβＮ（ＭＣ−２０７  １１０）など、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａにおいて排出ポンプの強力な阻害を示すペプチド模倣薬のファミリーが、補助的療法として用いるために開発されている（Ｒｅｎａｕ，ｅｔ  ａｌ．：Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ  ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ．  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．４２，ｐｐ．４９２８−４９３１，（１９９９）；Ｌｅｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：ｎｏｖｅｌ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０５−１１６，（２００１）；Ｒｅｎａｕ，ｅｔ  ａｌ．：Ａｄｄｒｅｓｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｃ−ｃａｐｐｅｄ  ｄｉｐｅｐｔｉｄｅ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｈａｔ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．６６３−６６７，（２００１）；Ｒｅｎａｕ，ｅｔ  ａｌ．：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｈａｔ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１２，ｐｐ．７６３−７６６，（２００２）；Ｒｅｎａｕ，ｅｔ  ａｌ．：Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｌｙ  ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｈａｔ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．２７５５−２７５８，（２００３）；Ｗａｔｋｉｎｓ，ｅｔ  ａｌ．：Ｔｈｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ  ｏｆ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ｄｉａｍｉｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２４１−４２４４，（２００３）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ５：Ｃａｒｂｏｎ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｃ２−ｐｏｓｉｔｉｏｎ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．１９９３−２００４，（２００６）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ６：ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．８５０６−８５１８，（２００６）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ７：ｈｉｇｈｌｙ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ  ａｍｍｏｎｉｕｍ  ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｄ１３−９００１，ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．７０８７−７０９７，（２００７））。これに加えて、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａのＭｅｘＡＢ排出ポンプに特異的なピリドピリミジンＥＰＩは、前臨床段階に進んでいる（Ｎａｋａｙａｍａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  １：ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｅａｒｌｙ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  ｌｅａｄ  ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２０１−４２０４，（２００３）；Ｎａｋａｙａｍａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ２：ａｃｈｉｅｖｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ｓｃａｆｆｏｌｄｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２０５−４２０８，（２００３）；Ｎａｋａｙａｍａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ３：Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｃｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｙｒｉｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏｒｅ  ｍｏｄｅｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．４７５−４７９，（２００４）；Ｎａｋａｙａｍａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ４：Ａｄｒｅｓｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｐｒｏｂｌｅｍ  ｏｆ  ｐｏｏｒ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｄｕｅ  ｔｏ  ｐｈｏｔｏｉｓｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ａｃｒｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｍｏｉｅｔｙ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．２４９３−２４９７，（２００４）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ５：Ｃａｒｂｏｎ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｃ−２  ｐｏｓｉｔｉｏｎ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．１９９３−２００４，（２００６）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ６：ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．８５０６−８５１８，（２００６）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ７：ｈｉｇｈｌｙ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ  ａｍｍｏｎｉｕｍ  ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｄ１３−９００１，ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．７０８７−７０９７，（２００７））。これらの阻害剤のいくつかは、ｉｎ  ｖｉｖｏ感染モデルを用いて実証されている（Ｎａｋａｙａｍａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ２：ａｃｈｉｅｖｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔ���  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  ｓｃａｆｆｏｌｄｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２０５−４２０８，（２００３）；Ｙｏｓｈｉｄａ，ｅｔ  ａｌ．：ＭｅｘＡＢ−ＯｐｒＭ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｐａｒｔ  ７：ｈｉｇｈｌｙ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ  ａｍｍｏｎｉｕｍ  ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｄ１３−９００１，ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ．  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．７０８７−７０９７，（２００７））；しかしながら、それらは、毒性の問題により断念されている（Ｌｏｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｅｆｆｌｕｘ  ｐｕｍｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃ−−ａ  ｖｉｓｉｏｎ  ｆｏｒ  ａｐｐｌｉｅｄ  ｕｓｅ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，ｖｏｌ．７１，ｐｐ．９１０−９１８，（２００６））。
【０００６】
以下の表に、報告されているＥＰＩおよび参考文献を挙げる。
【０００７】
【表１】
2016518393.tif 000003
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，ｖｏｌ．９０，ｐｐ．１１６４−１１７５，（２００１）
【非特許文献２】Ｍｉｃｒｏｂ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．６８−７４，（２００５）
【非特許文献３】Ｉｎｆｅｃｔ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｈｏｓｐ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ，ｖｏｌ．２６，ｐｐ．８８−９２，（２００５）
【非特許文献４】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４９，ｐｐ．７６０−７６６，（２００５）
【非特許文献５】Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，ｖｏｌ．３６２，ｐｐ．１８０４−１８１３，（２０１０）
【非特許文献６】Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ，ｖｏｌ．４６，ｐｐ．５６７−５７０，（２００８）
【非特許文献７】ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．３４０−３６３，（２０１２）
【非特許文献８】Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．６７，ｐｐ．２０６９−２０８９，（２０１２）
【非特許文献９】Ｊ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，ｖｏｌ．１９０，ｐｐ．５９８１−５９８８，（２００８）
【非特許文献１０】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５２，ｐｐ．４４８６−４４９１，（２００８）
【非特許文献１１】ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，ｖｏｌ．３，ｐｐ．ｅ１６１９，（２００８）
【非特許文献１２】ＭＢｉｏ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．ｅ００３１５−００３１０，（２０１２）
【非特許文献１３】Ｊ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，ｖｏｌ．１９３，ｐｐ．４７９０−４７９７，（２０１１）
【非特許文献１４】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．８１９−８２５，（１９９２）
【非特許文献１５】ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．３４０−３６３，（２０１２）
【非特許文献１６】Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．１９，ｐｐ．３８２−４０２，（２００６）
【非特許文献１７】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４３，ｐｐ．１３４０−１３４６，（１９９９）
【非特許文献１８】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０５−１１６，（２００１）
【非特許文献１９】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５６，ｐｐ．１６８０−１６８５，（２０１２）
【非特許文献２０】Ｍｏｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，ｖｏｌ．５９，ｐｐ．１２６−１４１，（２００６）
【非特許文献２１】Ａｐｐｌ  Ｅｎｖｉｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，ｖｏｌ．７４，ｐｐ．７３７６−７３８２，（２００８）
【非特許文献２２】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．１９０３−１９０６，（２００１）
【非特許文献２３】Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，ｖｏｌ．７１，ｐｐ．９１０−９１８，（２００６）
【非特許文献２４】Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ，ｖｏｌ．７，ｐｐ．８４３−８４７，（２００６）
【非特許文献２５】Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．５９，ｐｐ．１２２３−１２２９，（２００７）
【非特許文献２６】Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．４２，ｐｐ．４９２８−４９３１，（１９９９）
【非特許文献２７】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０５−１１６，（２００１）
【非特許文献２８】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１１，ｐｐ．６６３−６６７，（２００１）
【非特許文献２９】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１２，ｐｐ．７６３−７６６，（２００２）
【非特許文献３０】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．２７５５−２７５８，（２００３）
【非特許文献３１】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２４１−４２４４，（２００３）
【非特許文献３２】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．１９９３−２００４，（２００６）
【非特許文献３３】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．８５０６−８５１８，（２００６）
【非特許文献３４】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，ｖｏｌ．１５，ｐｐ．７０８７−７０９７，（２００７）
【非特許文献３５】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２０１−４２０４，（２００３）
【非特許文献３６】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１３，ｐｐ．４２０５−４２０８，（２００３）
【非特許文献３７】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．４７５−４７９，（２００４）
【非特許文献３８】Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，ｖｏｌ．１４，ｐｐ．２４９３−２４９７，（２００４）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
細菌感染に対抗する手段として、より有効な排出ポンプ阻害剤が依然として必要とされている。
したがって、本発明は、細菌において排出ポンプを阻害するのに有効な新規化合物の新規ファミリーを提供する。これらの新規化合物は、抗生物質または抗微生物性増強剤として有効である。これらの化合物の構造は、報告されている他の排出ポンプ阻害剤および抗生物質増強剤とは異なる。
【００１０】
本明細書中に記載する新規化合物で細菌の排出ポンプを阻害するための方法も開示する。他の態様において、本発明は、細菌の排出ポンプを阻害するための、これらの新規化合物の使用を開示する。さらに他の態様において、本発明は、細菌感染を処置または阻害するための、これらの新規化合物の使用を開示する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の新規細菌排出ポンプ阻害化合物は、以下の式Ｉにより表される：
【００１２】
【化１】
2016518393.tif 000004
【００１３】
［式中、
ｎは、１〜５の整数であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【００１４】
好ましい態様において、本発明は、式Ｉの構造を有する新規化合物
［式中：
ｎは、１であり；
Ｘは、−ＣＮであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｙは、Ｏであり；
Ｚは、ヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、メチルであり；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］
を対象とする。
【００１５】
とりわけ好ましい態様において、式Ｉの新規細菌排出阻害剤化合物として、以下が挙げられる：
【００１６】
【化２】
2016518393.tif 000005
【００１７】
【化３】
2016518393.tif 000006
【００１８】
【化４】
2016518393.tif 000007
【００１９】
【化５】
2016518393.tif 000008
【００２０】
【化６】
2016518393.tif 000009
【００２１】
【化７】
2016518393.tif 000010
【００２２】
【化８】
2016518393.tif 000011
【００２３】
本明細書中に記載する増強剤または増強剤の組み合わせは、ヒトまたは他の動物における細菌感染を処置するための支持的または補助的療法として用いることができる。該増強剤を抗菌剤と混ぜ合わせて、または抗菌剤と連続して、または抗菌剤と同時に投与して、より効果的な殺菌または微生物の成長阻害をもたらすことができる。この補助的療法は、以下の利益を提供することができる：より少ない投与量および／またはより短い処置期間につながる抗生物質の効力増大、患者に対する抗生物質の副作用の最小化、ならびに共同体における細菌耐性の発生の低減。
【００２４】
本発明の増強剤と抗微生物剤とを含む抗微生物性組成物も開示する。該組成物の抗微生物性成分は、限定されるものではないが、ベータ−ラクタム抗生物質（ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まない）および／またはキノロン抗生物質であることができる。これらの組成物は、抗微生物剤単独より効果的に細菌を死滅させるか細菌の成長を阻害する。
【００２５】
抗微生物性成分および式Ｉに従った増強剤を含む組成物は、ｉｎ  ｖｉｖｏ感染を処置するため、または、包帯、身体用器具(bodily appliance)、カテーテル、外科用器具、患者用診察台、カウンターなどの機器および表面を殺菌するために、用いることができる。
【００２６】
他の態様において、式Ｉの化合物と構造的類似点を有する追加的化合物の新規有用性を発見した。式Ｉの化合物に取り組んでいたところ、追加的な類似体が細菌排出ポンプ阻害剤として有効であることを発見した。
【００２７】
したがって、本発明の他の観点において、式ＩＩの化合物または医薬的に許容しうるその塩：
【００２８】
【化９】
2016518393.tif 000012
【００２９】
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］
を投与することを含む、細菌感染の処置方法を提供する。    
【００３０】
細菌の排出ポンプを阻害するための、式ＩＩに従った化合物または医薬的に許容しうるその塩の使用も開示する。
本明細書中の方法および使用の他の態様において、式ＩＩの化合物（またはその塩）は、抗微生物剤と組み合わせて用いることができる。そのような抗微生物剤は、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質であることが好ましい。
【００３１】
式ＩＩに従った化合物は、機器および表面を殺菌するために用いることができる。とりわけ、式ＩＩの化合物は、グラム陰性病原体によるコロニー形成がみられる機器または表面の殺菌に用いることができる。
【００３２】
本明細書中に記載する方法および使用の他の態様において、該化合物は、式ＩＩ
［式中：
Ｘは、シアノであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキルまたはアリールオキシアルキルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１、Ａ２は、ＣＨ２であり；
Ｙは、酸素である］
または医薬的に許容しうるその塩の構造を有する。
【００３３】
好ましい態様において、式ＩＩの化合物は、以下：
【００３４】
【化１０】
2016518393.tif 000013
【００３５】
【化１１】
2016518393.tif 000014
【００３６】
【化１２】
2016518393.tif 000015
【００３７】
【化１３】
2016518393.tif 000016
【００３８】
【化１４】
2016518393.tif 000017
【００３９】
【化１５】
2016518393.tif 000018
【００４０】
【化１６】
2016518393.tif 000019
【００４１】
【化１７】
2016518393.tif 000020
【００４２】
およびその塩の構造を有するものである。
本発明は、式Ｉまたは式ＩＩの１以上の化合物と、医薬的に許容しうるキャリヤーまたは賦形剤とを含む、医薬組成物も提供する。細菌の排出ポンプを阻害するための医薬品の調製における、式Ｉまたは式ＩＩの１以上の化合物の使用も開示する。
【００４３】
本明細書中に記載する式Ｉまたは式ＩＩの抗菌性増強剤化合物を含む組成物は、個体（ヒトまたは他の動物）に、さまざまな経路のいずれか、例えば、限定されるものではないが、静脈内、筋肉内、皮下、動脈内、非経口、腹腔内、舌下（舌の下）、口腔内（頬）、経口（嚥下用）、局所（表皮）、経皮（皮膚および皮層下部を通過して、下にある血管系に吸収される）、経鼻（鼻粘膜）、肺内（肺）、子宮内、経膣、頸管内、経直腸、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸腔内、腎臓内、経鼻空腸および十二指腸内投与により投与するために、配合することができる。
【００４４】
これに加えて、本発明は、本明細書中に記載する式Ｉまたは式ＩＩの化合物の塩（特に、医薬的に許容しうる塩）；本明細書中に記載する抗微生物性化合物の溶媒和形態；本明細書中に記載する抗微生物性化合物のマルチマー形態；および本明細書中に記載する抗微生物性化合物のプロドラッグを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図１は、排出ポンプ阻害剤化合物ＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの化学構造を示す。
【図２】図２Ａ〜２Ｄは、時間−死滅アッセイにおけるシプロフロキサシン（ＣＩＰ）の細菌活性に対する排出ポンプ阻害剤ＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの効果を例示するグラフである。パネル（Ａ）：Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７に対する、静菌濃度のＣＩＰ（１×ＭＩＣ、０．０１μｇ／ｍＬ）と組み合わせたさまざまな濃度のＭＢＸ２３１９（０．１９〜３．１３μＭ）の細菌活性。
【図３】図３Ａ〜３Ｄは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７における、ＡｃｒＡＢ排出ポンプ基質である蛍光性ＤＮＡ結合染料Ｈ３３３４２の蓄積に対するＥＰＩのＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの効果を例示するグラフである。パネル（Ａ）：さまざまな濃度（３．１〜５０μＭ）のＭＢＸ２３１９の効果。
【図４】図４Ａ〜４Ｈは、さまざまなグラム陰性生物体におけるＨ３３３４２の蓄積に対するＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの効果を例示するグラフである。パネル（Ａ）：Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７に対する効果。
【図５】図５は、２５μＭ  ＭＢＸ２３１９の非存在下および存在下における、２６菌株のＥ．ｃｏｌｉのパネルに対するレボフロキサシンおよびピペラシリンの累積ＭＩＣを示すグラフである。
【図６】図６は、Ｈ３３３４２蓄積アッセイを用いた、ＭＢＸ２３１９および本発明のいくつかの追加的阻害剤化合物（以下の実施例１．４参照）による、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７における排出ポンプ活性の阻害を評価する一連のグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
定義
本発明をより明瞭に理解することができるように、以下の用語および略語を、以下に定義するように用いる。
【００４７】
特記しない限り、“約”および“およそ”を量、数または値との組み合わせで用いる場合、その組み合わせは、列挙する量、数または値単独、ならびにその量、数または値のプラスまたはマイナス１０％の量、数または値について記載している。例として、“約４０％”および“およそ４０％”というフレーズは、“４０％”と“数値を含む、３６％〜４４％”の両方を開示している。
【００４８】
“アルキル”は、式ＣｎＨ２ｎ＋１の直鎖または分枝鎖状の一価の炭化水素基を意味する。アルキル基の例としては、限定されるものではないが、メチル（“Ｍｅ”と略す）、エチル（“Ｅｔ”）、プロピル（“Ｐｒ”）、イソプロピル（“ｉＰｒ”）、ブチル（“Ｂｕ”）、イソブチル（“ｉＢｕ”）、ｓｅｃ−ブチル（ｓＢｕ）、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔＢｕ）などが挙げられる。
【００４９】
“アルケニル”は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝状の一価の炭化水素基、例えば、エテニル、３−ブテン−１−イル、３−ヘキセン−１−イル、シクロペント−１−エン−３−イルなどを意味する。
【００５０】
“アルキニル”は、少なくとも１つの三重結合を有する直鎖または分枝状の一価の炭化水素基、例えば、エチニル、３−ブチン−１−イル、２−ブチン−１−イル、３−ペンチン−１−イルなどを意味する。
【００５１】
“シクロアルキル”は、非芳香族の一価の単環式または多環式炭化水素基、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、デカリニルなどを意味する。シクロアルキル基は、１以上のアリール基、ヘテロアリール基またはヘテロシクロアルキル基と縮合していることもできる。同様に、“シクロアルケニル”および“シクロアルキル”は、それぞれ、一価または二価の単環式または多環式のアルケニルおよびアルキニル基をさす。
【００５２】
“ヘテロシクロアルキル”は、炭素および水素原子で構成される非芳香族で一価の単環式または多環式基であって、１以上の炭素原子が、窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）または硫黄（Ｓ）から選択されるヘテロ原子により置換されているもの、例えば、ピロロジニル(pyrrolodinyl)、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、ピペラジニル、オキシラニルなどを意味する。ヘテロシクロアルキル基は、１以上のアリール基、ヘテロアリール基またはヘテロシクロアルキル基と縮合していることもできる。
【００５３】
“アリール”は、芳香環メンバーから誘導される任意の一価または二価の単環式または多環式基、例えば、フェニル、ビフェニル、ナフチル、フェナントリルなどを意味する。アリール基は、それ自体が非置換であるか本明細書中に見いだされる１以上の適した置換基で置換されていてもよい１以上のヘテロアリール基またはヘテロシクロアルキル基と縮合していることもできる。
【００５４】
“ヘテロアリール”は、炭素原子、水素原子、および窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）または硫黄（Ｓ）から選択される１以上のヘテロ原子を含む、一価または二価の単環式または多環式芳香族基、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリジニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、チアゾリル、キノリニル、イミダゾリニル、ベンゾイミダゾリニル、インドリルなどを意味する。ヘテロアリール基は、１以上のアリール基、ヘテロアリール基またはヘテロシクロアルキル基と縮合していることもできる。
【００５５】
“複素環”は、少なくとも１つの原子が炭素原子ではない、閉じた原子の環を意味する。複素環は、芳香族または非芳香族であることができる。
“アミジノ”は、基−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲＲ’Ｒ’’［式中、Ｒ、Ｒ’およびＲ’’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、Ｒ、Ｒ’およびＲ’’は、ヘテロシクロアルキル環を形成することができる］、例えば、カルボキサミド、イミダゾリニル、テトラヒドロピリミジニルを意味する。
【００５６】
“イミノ”は、基−Ｃ（＝ＮＲ）Ｒ’［式中、ＲおよびＲ’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、ＲおよびＲ’は、ヘテロシクロアルキル環を形成することができる］を意味する。
【００５７】
“アミノ”は、基−ＮＲＲ’［式中、ＲおよびＲ’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル、アシルであり、ＲおよびＲ’は、ヘテロシクロアルキル環を形成していてもよい］を意味する。
【００５８】
“グアニジノ”は、基−ＮＨＣ（＝ＮＲ）ＮＲ’Ｒ’’［式中、Ｒ、Ｒ’およびＲ’’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、Ｒ、Ｒ’およびＲ’’は、ヘテロシクロアルキル環を形成していてもよい］を意味する。
【００５９】
“ハロ”または“ハロゲン”は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
“ハロアルキル”は、１以上の水素原子が同一または異なるハロゲン原子により置き換わっているアルキル基、例えば、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＣｌ３、−ＣＨＣｌ−ＣＦ３などを意味する。
【００６０】
“ヒドロキシ”は、基−ＯＨを意味する。
“アルコキシ”は、基−ＯＲ［式中、Ｒはアルキルまたはシクロアルキル基である］を意味する。
【００６１】
“アリールオキシ”は、基−ＯＡｒ［式中、Ａｒはアリール基である］を意味する。
“ヘテロアリールオキシ”は、基−Ｏ（ＨＡｒ）［式中、ＨＡｒはヘテロアリール基である］を意味する。
【００６２】
“アシル”は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ基［式中、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］、例えば、アセチル、ベンゾイルなどを意味する。
【００６３】
“カルボキシ”は、基−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨを意味する。
“アルコキシカルボニル”は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ基［式中、Ｒはアルキルまたはシクロアルキルである］を意味する。
【００６４】
“アリールオキシカルボニル”は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ基［式中、Ｒはアリールまたはヘテロアリールである］を意味する。
“アシルアミノ”は、基−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ［式中、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］、例えば、アセチルアミノ、ベンゾイルアミノなどを意味する。
【００６５】
“アミド”は、基−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＲ’［式中、ＲおよびＲ’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］を意味する。
【００６６】
“スルホニルアミノ”は、基−ＮＨＳＯ２Ｒ［式中、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］を意味する。
【００６７】
“メルカプト”は、基−ＳＨを意味する。
“アルキルチオ”は、基−ＳＲ［式中、Ｒは、アルキルまたはシクロアルキル基である］を意味する。
【００６８】
“アリールチオ”は、基−ＳＡｒ［式中、Ａｒはアリール基である］を意味する。
“ヒドロキサメート”は、基−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＲ［式中、Ｒは、アルキルまたはシクロアルキル基である］を意味する。
【００６９】
“チオアシル”は、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ基［式中、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］を意味する。
【００７０】
“アルキルスルホニル”は、基−ＳＯ２Ｒ［式中、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］を意味する。
【００７１】
“アミノスルホニル”は、基−ＳＯ２ＮＲＲ’［式中、ＲおよびＲ’は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルである］を意味する。
【００７２】
本明細書中に記載するように、本発明の化合物のさまざまな構造式に明記する部分または官能基が、１以上の適した“置換基”により“置換されていてもよい”と記載されている場合、“置換基”または“適した置換基”という用語は、当業者が例えば日常試験を通して認識または選択することができる任意の適した置換基または適した有機部分を意味する。“適した置換基”の実例的な例は、本明細書中に記載する代表的化合物に見いだされるもの、例えば、限定されるものではないが、ハロゲン；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルケニル；Ｃ１−６アルキニル；ヒドロキシル；Ｃ１−６アルコキシ；ニトロ；チオール；チオエーテル；イミン；シアノ；アミド；ホスホナト；ホスフィン；カルボキシル；カルボニル；アミノカルボニル；チオカルボニル；スルホニル；スルホンアミン；スルホンアミド；ケトン；アルデヒド；エステル；酸素（＝Ｏ）；ハロアルキル（例えばトリフルオロメチル）；単環式または縮合もしくは非縮合多環式アルキルであることができる炭素環式シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）、あるいは単環式または縮合もしくは非縮合多環式であることができるヘテロシクロアルキル（例えば、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニルまたはチアジニル）；炭素環式または複素環式の単環式または縮合もしくは非縮合多環式アリール（例えば、フェニル、ナフチル、ピロリル、インドリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニル、アクリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、またはベンゾフラニル）；アミノ（第一級、第二級または第三級）；ニトロ；チオール；チオエーテル；アリールオキシ（−ＯＡｒ）；アラルキル（−ＲＡｒ［式中、Ｒはアルカンジイルである］）；などである。そのような部分はまた、縮合環構造または橋かけ、例えば−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−により置換されていてもよい。これらの置換基はすべて、ヒドロキシル基、ハロゲン、オキソ基、アルキル基、アシル基、スルホニル基、メルカプト基、アルキルチオ基、アルキルオキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、カルボキシル基、アミノ基、置換アミノ基、二置換アミノ基、カルバモイル基、アリールオキシル基、ヘテロアリールオキシル基、アリールチオ基、ヘテロアリールチオ基などのような基から選択される置換基で、さらに置換されていてもよい。
【００７３】
“置換されていてもよい”という用語は、特定の基が、非置換または１以上の適した置換基により置換されていてもよいことを、はっきりと示すことを意図するものである。ただし、所望による置換基がはっきりと明記されている場合は別で、この場合、該用語は、該基が非置換であるか特定の置換基で置換されていることを示す。先に定義したように、さまざまな基は、本明細書中で特記しない限り（例えば、特定の基が非置換であることを示すことにより）、非置換であるか置換されていることができる（すなわち、それらは置換されていてもよい）。
発明の詳細な説明
本発明は、細菌排出ポンプ阻害剤として有効な新規クラスの有機化合物について記載するものである。一態様において、新規化合物を抗微生物剤と組み合わせて使用または投与して、接触する細菌の成長阻害またはそのような細菌の死滅におけるそれらの効力を増大させることができる。したがって、本発明の化合物は、“抗微生物性増強剤”化合物、すなわち、１以上の抗微生物性化合物と組み合わせてその投与前、投与中または投与後に投与することができ、該抗微生物性化合物の効果を増大または補足する化合物としてみなされる。本明細書中に記載する抗微生物性増強剤化合物は、病原性微生物種に感染しているか、そのような感染のリスクがあるか、またはそのような微生物種に感染していることが疑われる個体（ヒトまたは他の哺乳類）を処置するための組成物および方法に、用いることができる。本明細書中に記載する抗微生物性増強剤化合物はまた、病原性微生物種の細胞により汚染されているか、そのような汚染が疑われる機器、固体表面、または液体、固体もしくは半固体であることができる材料組成物を処理または殺菌するための抗微生物剤と組み合わせて、用いることができる。
【００７４】
本発明の新規細菌排出ポンプ阻害化合物は、以下の式Ｉ：
【００７５】
【化１８】
2016518393.tif 000021
【００７６】
［式中、
ｎは、１、２、３、４または５であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］
および医薬的に許容しうるその塩により表される。
【００７７】
とりわけ好ましい態様において、式Ｉの新規細菌排出阻害剤化合物として、以下が挙げられる：
【００７８】
【化１９】
2016518393.tif 000022
【００７９】
【化２０】
2016518393.tif 000023
【００８０】
【化２１】
2016518393.tif 000024
【００８１】
【化２２】
2016518393.tif 000025
【００８２】
【化２３】
2016518393.tif 000026
【００８３】
【化２４】
2016518393.tif 000027
【００８４】
本明細書中に記載する増強剤または増強剤の組み合わせは、ヒトまたは他の動物における細菌感染を処置するための支持的または補助的療法として用いることができる。該増強剤を抗菌剤と混ぜ合わせて、または抗菌剤と連続して、または抗菌剤と同時に投与して、より効果的な殺菌または微生物の成長阻害をもたらすことができる。この補助的療法は、以下の利益を提供することができる：より少ない投与量および／またはより短い処置期間につながる抗生物質の効力増大、患者に対する抗生物質の副作用の最小化、ならびに共同体における細菌耐性の発生の低減。
【００８５】
本発明の増強剤と抗微生物剤とを含む抗微生物性組成物も開示する。該組成物の抗微生物性成分は、限定されるものではないが、ベータ−ラクタム抗生物質（ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まない）および／またはキノロン抗生物質であることができる。これらの組成物は、抗微生物剤単独より効果的に細菌を死滅させるか細菌の成長を阻害する。
【００８６】
抗微生物性成分および式Ｉに従った増強剤を含む組成物は、ｉｎ  ｖｉｖｏ感染を処置するため、または、包帯、身体用器具、カテーテル、外科用器具、患者用診察台、カウンターなどの機器および表面を殺菌するために、用いることができる。
【００８７】
細菌排出ポンプ阻害剤として機能することが発見および見いだされた式Ｉの化合物に加え、追加的に類似体を試験し、同様に細菌排出ポンプ阻害剤として有用であることを見いだした。そのような類似体も抗微生物性増強剤化合物として有用であろう。したがって、以下の式ＩＩを有する化合物：
【００８８】
【化２５】
2016518393.tif 000028
【００８９】
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であるか、存在せず；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］
および医薬的に許容しうるその塩の使用および方法を、本明細書中に記載する。
【００９０】
他の態様において、本発明の抗微生物性増強剤化合物は、式ＩＩ
［式中：
Ｘは、シアノであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキルまたはアリールオキシアルキルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１、Ａ２は、ＣＨ２であり；
Ｙは、酸素である］
および医薬的に許容しうるその塩の構造を有する。
【００９１】
本発明に従った式ＩＩの化合物のとりわけ好ましい態様は、以下：
【００９２】
【化２６】
2016518393.tif 000029
【００９３】
【化２７】
2016518393.tif 000030
【００９４】
【化２８】
2016518393.tif 000031
【００９５】
【化２９】
2016518393.tif 000032
【００９６】
【化３０】
2016518393.tif 000033
【００９７】
【化３１】
2016518393.tif 000034
【００９８】
【化３２】
2016518393.tif 000035
【００９９】
【化３３】
2016518393.tif 000036
【０１００】
【化３４】
2016518393.tif 000037
【０１０１】
およびその塩の構造を有する。
本明細書中に記載する増強剤化合物を含む組成物は、個体（ヒトまたは他の動物）に、さまざまな経路のいずれか、例えば、限定されるものではないが、静脈内、筋肉内、皮下、動脈内、非経口、腹腔内、舌下（舌の下）、口腔内（頬）、経口（嚥下用）、局所（表皮）、経皮（皮膚および皮層下部を通過して、下にある血管系に吸収される）、経鼻（鼻粘膜）、肺内（肺）、子宮内、経膣、頸管内、経直腸、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸腔内、腎臓内、経鼻空腸および十二指腸内投与により投与するために、配合することができる。
【０１０２】
これに加えて、本発明は、本明細書中に記載する化合物の塩（特に、医薬的に許容しうる塩）；本明細書中に記載する抗微生物性化合物の溶媒和形態；本明細書中に記載する抗微生物性化合物のマルチマー形態；および本明細書中に記載する抗微生物性化合物のプロドラッグを提供する。
【０１０３】
本明細書中に記載する阻害剤化合物の構造は、該化合物の溶媒和形態を包含することを理解する。本発明の化合物の溶媒和形態の例としては、溶媒の溶媒分子との錯体における溶質としての化合物が挙げられる。これに関し、溶媒としては、限定されるものではないが、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミンおよびアセトンが挙げられる。
【０１０４】
本明細書中の一般的構造式の化合物は互変異性現象を示すことができるが、本明細書中の構造式は、考えうる互変異性形態の１つだけを明示的に図示していることを理解する。したがって、本明細書中の構造式は、図示した化合物の任意の互変異性形態を表すことを意図しており、同構造式により図示した複数の考えうる形態の１つに限定されるものではないことを、理解すべきである。
【０１０５】
本明細書中に記載する化合物の化学式は、図示した化合物の任意の立体配置形態を表すことを意図しており、構造式により図示した化合物形態の特定の立体配置に限定されるものではないことも理解する。本発明の化合物のいくつかは、それらが、絶対配置がわかっているか相対配置がわかっているかにかかわらず、カーン−インゴールド−プレローグ則に従ってＲまたはＳにより示される１以上の立体中心を含有する場合、単一の立体異性体（すなわち、他の立体異性体を実質的に含まない）、ラセミ混合物、またはエナンチオマー、ジアステレオマーもしくは両方の混合物として存在することができる。所定の化合物のそのような立体配置形態はすべて、本明細書中に記載する式に包含される。
【０１０６】
本発明の化合物のいくつかは、ステレオジェニック(stereogenic)な二重結合を含有する結果、幾何異性体として存在することができる。そのような場合、それらは、純粋なものとして、あるいは、シスもしくはトランス幾何異性体の混合物、またはカーン−インゴールド−プレローグ則に従って（Ｅ）もしくは（Ｚ）と呼ばれる形態の混合物として存在することができ、電気的非局在化の結果として二重結合立体配置を受け入れる化合物を包含することができる。
【０１０７】
当業者なら一般に理解しているように、１以上のキラル中心（すなわち、特有の四面体配置をもたらす１つの不斉原子）を有する光学的に純粋な化合物は、実質的に２つの考えうるエナンチオマーのうち１つからなるものであり（すなわち、エナンチオマー的に純粋である）、１より多くのキラル中心を有する光学的に純粋な化合物は、ジアステレオマー的に純粋で、エナンチオマー的にも純粋であるものである。本発明の化合物を合成により作製する場合、それらは、少なくとも９０％の光学純度を示す形態、すなわち、少なくとも９０％の単一異性体（８０％エナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）またはジアステレオマー過剰率（ｄ．ｅ．）、より好ましくは少なくとも９５％（９０％  ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、さらにより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％  ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、もっとも好ましくは少なくとも９９％（９８％  ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）の単一異性体を含む形態で用いることができる。
【０１０８】
上記のように、本発明の化合物は、本発明の化合物の活性な互変異性形態および立体異性形態を包含し、これらは、当分野で公知の技術を用いて容易に得ることができる。例えば、光学的に活性な（Ｒ）および（Ｓ）異性体は、例えばキラルシントンおよびキラル試薬を用いる立体特異的合成を介して調製することができ、あるいは、ラセミ混合物を、従来の技術、例えば、化学的方法（塩の形成が実行可能である場合はキラル塩形態を用いて）または超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）などのクロマトグラフ法を用いて、分割することができる。
【０１０９】
本発明の化合物が塩基である場合、該化合物の望ましい塩は、当分野で利用可能な任意の適した方法、例えば、遊離塩基を無機酸または有機酸および適した対イオンと一緒に処理することにより、調製することができる。本発明の化合物の塩を形成するために用いることができる無機酸としては、限定されるものではないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸が挙げられる。本発明の化合物の塩を形成するために用いることができる有機酸としては、限定されるものではないが、酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル(pyranosidyl)酸（グルクロン酸またはガラクツロン酸など）、アルファ−ヒドロキシ酸（クエン酸または酒石酸など）、アミノ酸（アスパラギン酸またはグルタミン酸など）、芳香族酸（安息香酸またはケイ皮酸など）およびスルホン酸（ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸など）が挙げられる。
【０１１０】
本発明の化合物が酸である場合、望ましい塩形態は、任意の適した方法、例えば、遊離酸を無機または有機塩基と処理することにより、調製することができる。本発明の化合物の塩を形成するために用いることができる塩基の例としては、限定されるものではないが、アミン（第一級、第二級または第三級）、アルカリ金属の水酸化物、およびアルカリ土類金属の水酸化物が挙げられる。本発明の化合物の適した塩の例示的な例としては、限定されるものではないが、塩基性アミノ酸（リシンおよびアルギニン、アンモニア、第一級、第二級および第三級アミンなど）および環状アミン（ピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなど）から誘導される有機塩、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムから誘導される無機塩が挙げられる。
【０１１１】
本発明の化合物の塩は、該化合物の医薬的に許容しうる塩を包含する。本明細書中で理解され用いられる“化合物の医薬的に許容しうる塩”という用語は、当分野で医薬組成物に適合すると認識されている無機または有機の酸または塩基から誘導される、本発明の任意の化合物の塩を意味する。便宜上、“医薬的”および“医薬的に許容しうる”という用語はまた、獣医医療も含む医療業務に関し許容しうる化合物を包含すると理解する。本明細書中に記載する化合物の医薬的に許容しうる塩は、医薬的用途のみに限定されるわけではないことを理解する。本発明の抗微生物性化合物の医薬的に許容しうる塩に適した酸の例としては、限定されるものではないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、マロン酸、グルタミン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、p-トルエンスルホン酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、酢酸、フェニル酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ステアリン酸、酒石酸、酢酸、メタンスルホン酸、ギ酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、エタンジスルホン酸、およびスルファニル酸が挙げられる。シュウ酸またはイセチオン酸など他の酸の塩は医薬的に許容されることができないが、本発明の化合物の抗微生物活性の利益を医薬組成物ではない溶液、半固体または固体組成物に提供するために用いられるさまざまな組成物および方法において、用途を見いだすことができる。適した塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例えばマグネシウム）、アンモニウムおよびＮＲ４＋（式中、ＲはＣ１−４アルキルである）塩などが挙げられる。ここでの本発明に従った化合物（または同等の用語）への言及は、その医薬的に許容しうる塩を含む、任意およびすべての対応する塩を包含することを理解する。
【０１１２】
“マルチマー”という用語は、本発明の抗微生物性化合物を増強する化合物の多価またはマルチマー形態をさす。そのような“マルチマー”は、本明細書中に記載する活性化合物（すなわち、抗微生物性化合物の増強活性を持つもの）の多数のコピーを、例えばキャリヤー部分によりもたらされる足場(scaffold)を用いて互いにごく接近して連結または置くことにより、作製することができる。さまざまな大きさのマルチマー（すなわち、さまざまなコピー数の活性化合物を持つ）を試験して、結合部位の相互作用に関し最適な大きさのマルチマーに達することができる。活性化合物のそのような多価形態の提供は、結合部位の相互作用を強化することができる。例えば、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ，２３：４２５５（１９８４）参照。当業者なら、適したキャリヤー部分またはリンカー単位を選択することにより、多価数(multivalency)および間隔を制御することができる。有用な部分としては、本発明の活性化合物に関連する官能基と反応することができる多数官能基を含む分子支持体(molecular support)が挙げられる。さまざまなキャリヤー部分を用いて、高活性マルチマー、例えば、限定されるものではないが、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）などのタンパク質；官能性側鎖を有する、ペンタペプチド、デカペプチド、ペンタデカペプチドなどのようなペプチド（例えば、リジン側鎖を含有するε−アミノ）；ならびに、標的微生物細胞の内部または上部における吸収性、輸送または残存性に対する有益な効果のために選択される非生物学的化合物を、構築することができる。キャリヤー部分上の官能基、例えば、アミノ、スルフヒドリル、ヒドロキシ、および置換アミノ基は、本発明の化合物への安定な連結、固定化化合物間の最適な間隔、および最適な生物学的特性が得られるように、選択することができる。
【０１１３】
“医薬的に許容しうる”は、生物学的、化学的または他の任意の形において身体の化学作用および代謝に不適合ではなく、また、本発明の化合物の望ましい効果的な抗微生物性増強活性、あるいは、抗微生物性化合物と本明細書中に記載する増強剤化合物とを含み、個体に感染する微生物病原体を効果的に死滅させるかその細胞成長を効果的に阻害するために個体に投与することができる組成物の任意の他の成分の活性に、著しい悪影響を及ぼさない、任意の化合物または混合物を意味する。
【０１１４】
“経口”、“経口的に”、“経腸”、“経腸的に”、“非経口”、“非経口的に”などの用語は、有効量の本明細書中に記載する抗微生物性増強化合物、またはその組成物を、個体の消化管に沿ったどこかで個体に投与するための経路または方法をさす。そのような“経腸”投与経路の例としては、制限なく、口から、例えば、固体（例えば、丸剤、錠剤、カプセル）または液体（例えば、シロップ、エリキシル）組成物の嚥下；経鼻空腸または胃瘻チューブ（胃内への）；十二指腸内投与；および、経直腸（例えば、消化管の下部腸管における化合物または組成物の放出および吸収のための座剤を用いる）が挙げられる。本発明では、１以上の経腸投与経路を採用することができる。したがって、本明細書中に記載する特定タイプの“経口”配合物が文脈により明記または示されていない限り、“経口”配合物は、“経腸”配合物と同一であり、口から嚥下することができる配合物、ならびに本発明の抗微生物性化合物を消化管に沿ったどこかに投与することを可能にする配合物を広く包含する。この解説の目的では、本発明の抗微生物性化合物の舌下（舌の下での吸収）および口腔内（頬内側を通しての吸収）投与も、経口投与経路とみなすことができる。
【０１１５】
“非経口”および“非経口的に”という用語は、本発明の抗微生物性増強化合物またはその組成物を、消化管に沿った経路以外で個体に投与する経路または方法をさす。非経口投与経路の例としては、制限なく、静脈内（ｉ．ｖ．）、筋肉内（ｉ．ｍ．）、動脈内、（ｉ．ａ．）、腹腔内（ｉ．ｐ．）、皮下（ｓ．ｃ．）、経皮（皮膚および皮層を介する吸収）、経鼻または肺内（例えば、呼吸器粘膜または肺を介する吸収のための吸入または噴霧による）、関節内、体腔もしくは体器官内への直接的な注射または注入のほか、個体の体内への本明細書中に記載する抗微生物性化合物の能動的または受動的放出を可能にする、さまざまな機器のいずれかの体内への埋め込みによる経路が挙げられる。
【０１１６】
“プロドラッグ”は、生理学的条件下または加溶媒分解により、特定の化合物またはそのような化合物の塩、または対象とする薬力学的効果に関し生物学的に活性な化合物に、変換することができる。“代謝産物”は、特定化合物またはその塩の体内での代謝により生じる薬理学的に活性な生成物を意味する。プロドラッグおよび化合物の活性代謝産物は、当分野で公知の日常的技術を用いて同定することができる。例えば、Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４０：２０１１−２０１６（１９９７）；Ｓｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，８６（７）：７６５−７６７（１９９７）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．，３４：２２０−２３０（１９９５）；Ｂｏｄｏｒ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，１３：２２４−３３１（１９８４）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５）；およびＬａｒｓｅｎ，Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，編集，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９１）参照。
【０１１７】
本発明の化合物が固体形態で存在する場合、当業者なら、該化合物およびその塩がさまざまな結晶または多形形態で存在することができ、そのすべてが、本発明および特定の構造式の範囲内にあると意図していることを、理解するであろう。
【０１１８】
“患者”および“個体”および“被験者”という用語は、特記しない限り同義であり、哺乳類、例えば、制限なく、抗微生物性化合物および／もしくは本明細書中に記載する抗微生物性増強剤化合物またはその組成物を、受け入れる、または受け入れる候補であることができる、ヒトを意味する。したがって、本明細書で用いる場合、“患者”は、微生物疾患のはっきりとした症状を示していても示していなくてもよく、単に、例えば微生物病原体の細胞源への暴露に起因して、疾患を引き起こす可能性がある病原性微生物種の細胞による感染のリスクがあるに過ぎなくてもよい。
【０１１９】
本明細書中で規定する“有効量”は、陰性対照と比較して細菌成長を低減、防止または阻害するのに十分な化合物の量を意味する。本発明の抗微生物性増強剤を含む抗微生物性組成物の“治療的有効量”は、個体に投与した場合、微生物病原体を死滅させるかその細胞成長を阻害するのに十分な分量である。本発明の化合物の治療的有効量は、熟練のヘルスケア提供者により知られ理解されているように、または、微生物病原体に感染していない個人などの対照と比較して、個体において微生物感染に付随する所定の臨床状態または疾患症状を防止、阻害、抑制、排除または低減する量である。本明細書中で定義する本発明の化合物の治療的有効量は、当業者なら当分野で公知の日常的方法により容易に決定することができる。
【０１２０】
本明細書中で理解して用いられる“治療”および“治療的”は、微生物感染または微生物感染に起因する疾患に対する患者の処置をさす。便宜上、該用語は、本発明の化合物の予防的または警戒的な使用または投与を包含することも理解する。そのような警戒的または予防的使用は、免疫障害を持つまたは免疫不全の患者を感染から保護するために当該患者に；微生物感染を有すると疑われるが証明されていない患者に；あるいは、例えば開放創における、病原性微生物種の細胞で汚染された水、食物、体液、死体または屠体との接触によるか；感染者、または病原性微生物種の細胞を含有する感染者の体液との接触または他の暴露により；病原性種の細胞の感染により引き起こされる疾患に罹っていると疑われる患者に；抗生物質を投与することにより、例示される。
【０１２１】
本明細書中に記載する抗微生物性化合物の治療的使用の文脈において、“処置”、“処置する”または“処置すること”という用語は、病原性微生物種の細胞の成長を抑制もしくは阻害するか、そのような細胞を死滅させることを考慮または意図した、抗微生物性化合物の任意の使用をさす。したがって、個人の処置は、考えうる細菌性、真菌性または原虫感染を示すあらゆる診断の後、すなわち、特定の微生物による感染が確認されているのか、微生物または微生物により感染している他の個人への暴露後に感染の可能性が疑われるだけなのかの診断の後に、実施することができる。
【０１２２】
１以上の指定の要素または段階を“含む”と本明細書中に記載される組成物または方法は、非限定的であり、指定の要素または段階は必須であるが、他の要素または段階を該組成物または方法の範囲内に加えることができることを意味する。手短に言うと、１以上の指定の要素または段階を“含む(comprising)”（または“含む(comprises)”）と記載される任意の組成物または方法は、同じ指定の要素または段階から“実質的になる(consisting essentially of)”（または“実質的になる(consists essentially of)”）、対応する、より限定された組成物または方法についても説明しており、該組成物または方法が、指定の必須の要素または段階を包含し、該組成物または方法の基本的な新規特性（１以上）に実質的に影響を及ぼさない追加的な要素または段階を包含することもできることを意味することも、理解する。１以上の指定の要素もしくは段階を“含む”または該要素もしくは段階から“実質的になる”と本明細書中に記載する任意の組成物または方法は、他のあらゆる不特定の要素または段階を除いて指定の要素または段階から“なる(consisting of)”（“なる(consits of)”）、対応する、より限定的で制限的な組成物または方法についても説明していることも、理解する。
【０１２３】
要素もしくは段階のリスト“からなる群より選択される”、または該リストに列挙されているものから選択される、要素または段階は、特記しない限り、これに続くリスト中の要素または段階の１以上を、リストに挙げられた任意の２以上の要素または段階の組み合わせを含めて、さすことも理解する。
【０１２４】
他の用語の意味は、有機化学、薬理学、薬学および微生物学の分野を含む分野の技術者なら、文脈から理解するであろう。
化合物の合成
これらの化合物の一般的合成方法を、以下のスキーム１に示す。関連する手順は以下の論文に記載されている：Ｐａｒｏｎｉｋｙａｎ，Ｅ．Ｇ．；Ｎｏｒａｖｙａｎ，Ａ．Ｓ．“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｆｕｓｅｄ  Ｔｈｉｏｐｙｒａｎｓ  ａｎｄ  Ｐｙｒｉｄｉｎｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｂａｓｅ  ｏｆ  Ｓｉｘ−Ｍｅｍｂｅｒｅｄ  Ｓａｔｕｒａｔｅｄ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，”Ｃｈｅｍ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｏｍｐ．３５：７９９−８０３（１９９９）；ならびに、Ｈｕｎｔ，Ｊ．Ｃ．，Ｅ．Ｄ．Ｃｌａｒｋｅ，およびＷ．Ｇ．Ｗｈｉｔｔｉｎｇｈａｍ．“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ＳＡＲ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ  １，２，３−ｔｒｉａｚｉｎｅｓ，”Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１７：５２２２−５２２６（２００７）；ならびに、それらに引用されている参考文献。
【０１２５】
【化３５】
2016518393.tif 000038
【０１２６】
使用および組成物
本発明の化合物は、細菌排出ポンプ阻害活性を持つ。したがって、本明細書中に記載する化合物は、排出ポンプ阻害剤として有用である。それらは、グラム陰性病原体、例えば、限定されるものではないが、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉおよびＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｒｏｅａｅに対する排出ポンプ阻害剤として用いることができる。
【０１２７】
本発明の化合物を細菌と接触させると、該細菌は抗微生物剤の影響をより受けやすくなる。したがって、それらは抗微生物性増強剤として用いることができる。作用機序に関する任意の特定の理論に限定しようとするものではないが、本明細書中に開示する化合物の抗微生物性増強効果は、該化合物の排出ポンプ阻害活性に関連することができる。増強効果は、抗微生物剤の最小阻害濃度（ＭＩＣ）の低下によるか、静菌濃度における抗微生物剤の殺菌活性の殺菌活性の向上により、測定することができる。
【０１２８】
本発明の化合物は、排出ポンプの過剰発現に起因して多数の抗微生物剤に耐性を示す細菌株に対する抗微生物剤の効力を増大させることができる。例えば、われわれは、ＭＢＸ２３１９とした式Ｉの化合物（図１参照）が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）株３３１、２８５および２８７に対するフルオロキノロン抗生物質のシプロフロキサシンおよびレボフロキサシンの活性を、排出ポンプ阻害により増強することを示した（表２および５参照）。
【０１２９】
本明細書中に記載する化合物または化合物の組み合わせは、ヒトまたは他の動物における細菌感染を処置するための支持的または補助的療法として用いることができる。該増強剤を抗菌剤と混ぜ合わせて、または抗菌剤と連続して、または抗菌剤と同時に投与して、より効果的な殺菌または微生物の成長阻害をもたらすことができる。この補助的療法は、以下の利益を提供することができる：より少ない投与量および／またはより短い処置期間につながる抗生物質の効力増大、患者に対する抗生物質の副作用の最小化、ならびに共同体における細菌耐性の発生の低減。
【０１３０】
本発明はまた、抗微生物性（殺菌性または静菌性）作用物質と本発明の１以上の化合物とを含む抗微生物性組成物を提供する。特に、組成物は、キノロン抗生物質またはベータ−ラクタム抗生物質と、本発明の１以上の化合物とを含む。これらの組成物は、微生物作用物質(microbial agent)単独より効果的な殺菌または微生物成長阻害をもたらす。
【０１３１】
本発明の化合物により増強することができる好ましい抗生物質は、以下である：ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、レボフロキサシン、ガチフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、アズロシリン、ピペラシリン、メズロシリン、セファゾリン、セファセトリル、セファドロキシル、セファレキシン、セファログリシン、セファロニウム、セファロリジン、セファロチン、セファピリン、セファトリジン、セファゼドン、セファザフル、セフラジン、セフロキサジン、セフテゾール、セファクロル、セファマンドール、セフミノクス、セフォニシド、セフォラニド、セフォチアム、セフプロジル、セフブペラゾン、セフロキシム、セフゾナム、セフォキシチン、セフォテタン、セフメタゾール、セフィキシム、セフトリアキソン、セフタジジム、セフォペラゾン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフォジジム、セフォタキシム、セフピミゾール、セフピラミド、セフポドキシム、セフスロジン、セフテラム、セフチブテン、セフチオレン、セフチゾキシム、セフェピム、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、セフトビプロール、ビアペネム、エルタペネム、ドリペネム、イミペネム、メロペネム、パニペネム、アズトレオナム、チゲモナム、カルモナム、テトラサイクリンおよびミノサイクリン。
【０１３２】
個体の体の内部または上部に感染が確立した時点で発生する可能性があるさまざまな疾患の病原因子として、さまざまな病原性の微生物種および微生物菌株が公知である。場合によっては、微生物種は、日和見微生物病原体であってもよい、すなわち、特定の条件下でのみ疾患を引き起こすものであってもよい。例えば、日和見病原性微生物種の細胞は、通常は病原性ではないか、あるいは、侵入している微生物細胞を免疫系が効果的に識別し、効果的な応答を開始して、該細胞を不活性化し、および／または個体の体から該細胞を除去することができるような健康な個体の場合は、ほんの軽度に病原性であることができる。しかしながら、同じ微生物種の細胞はまた、感染を確立することができ、免疫系が弱っているか、さもなければ抑圧されているような個体において顕著な病状をもたらす可能性がある。弱っているか欠陥がある免疫系は、さまざまな条件、例えば、限定されるものではないが、事前（原）疾患、免疫系の癌、毒素への暴露、放射線への暴露、化学療法薬への暴露、および免疫抑制薬の使用に起因する可能性がある。そのような個体としては、制限なく、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の患者、放射線療法を受けている癌患者、免疫抑制化学療法薬を受けている癌または臓器移植患者のほか、１以上のサイトカインの活性を阻害または抑制するように設計されている薬剤を、例えば、リウマチ様関節炎、乾癬およびクローン病など活性が過剰なサイトカインに関連づけられる疾患を処置するために摂取している個人が挙げられる。
【０１３３】
本明細書中に記載する増強剤化合物は、別個の投与または上記のような予め形成した抗微生物性組成物において抗微生物剤と一緒に用いられる場合、さらに１種の細菌の細胞を死滅させるかそのような細胞の成長を阻害するのに有用であることができる。このように有利に処置することができる細菌細胞としては、限定されるものではないが、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ（例えば、Ａ．ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ（例えば、Ｂ．ｍａｌｌｅｉ、Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、およびＢ．ｃｅｐａｃｉａ）、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ（例えば、Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ（例えば、Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＣ．ｐｉｔｔａｉａｃｉ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ（例えば、Ｅ．ａｅｒｏｇｅｎｅｓおよびＥ．ｃｌｏａｃａｅ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｈａｅｍａｐｈｉｌｕｓ（例えば、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ（例えば、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ（例えば、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ（例えば、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ（例えば、Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（例えば、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｐｒｏｔｅｕｓ（例えば、Ｐ．ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（例えば、Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍおよびＳ．ｔｙｐｈｉ）、Ｐｒｏｔｅｕｓ（例えば、Ｐ．ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（例えば、Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍおよびＳ．ｔｙｐｈｉ）、Ｓｈｉｇｅｌｌａ（例えば、Ｓ．ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ（例えば、Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、Ｖｉｂｒｉｏ（例えば、Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）およびＹｅｒｓｉｎｉａ（例えば、Ｙ．ｐｅｓｔｉｓ）が挙げられる。
【０１３４】
医薬的および非医薬的用途のために、本明細書中に記載する増強剤化合物および抗微生物性組成物を配合することができる。
医薬的用途において、増強剤化合物または増強剤を含有する抗微生物性組成物は、さまざまな疾患、例えば、病原因子による薬剤耐性が問題である疾患のための、新規処置法を提供することができる。
【０１３５】
非医薬的用途に関し、本明細書中に記載する増強剤化合物または増強剤を含有する抗微生物性組成物は、カテーテル、ロック溶液、ポンプ（心肺バイパスポンプ、埋め込み可能な患者用ポンプ）、埋め込み可能ではない（外部の）患者用ポンプ（例えば、薬物またはホルモン送達用のもの）、および工業用ポンプを含む）、透析装置、水道管、配管設備、燃料ライン、空気ダクト、ガスライン（空気ライン、酸素ライン、人工呼吸器を含む）、化粧品（美容のための皮膚用製品、美容のための毛髪用製品を含む）、食品、眼用製品（点眼薬、コンタクトレンズ、埋め込み可能なレンズ）、耳用製品（例えば、点耳薬、補聴器）、口腔用製品（例えば、洗口剤、練り歯磨き、歯科用インプラントなど）、鼻用製品（例えば、点鼻薬、鼻用ゲル、鼻用綿球）、膣用製品、医療用および獣医用装身具（例えば、顔用マスク、キャップ、ガウン、手袋、履き物、手袋、エプロン）、ガスマスク、接着剤、石けん、洗剤、ならびに塗料に、施用することができる。
【０１３６】
本明細書中に記載する化合物または抗微生物性組成物は、溶液、懸濁液、乾燥混合物、軟膏、クリーム、ゲル、ゼリー、ローション、ペースト、練り歯磨き、石油製品、多孔質膜、多孔質フィルター、微粒子、微小球体、リポソーム、ミセル、脂質二重層、樹脂粒子、プラスチック、塗料、のり、接着剤、セルロース製品、生地（繊維、毛糸または布）、ならびにナノ粒子中に、配合することができる。
【０１３７】
本明細書中に記載する化合物または抗微生物性組成物はまた、微細な固体粒子のエーロゾルまたはガスと混合した液滴状で表面に送達するための標準的方法により、配合することができる。
【０１３８】
本明細書中に記載する化合物または抗微生物性組成物は、固体表面上に存在することができる１以上の微生物病原体の生存細胞を保持および／または伝達することができるさまざまな材料のいずれかで構成されるか、これを含む固体表面に、接触させることができる。そのような材料としては、限定されるものではないが、エナメル、プラスチック、ガラス、シリコン、ゴム、金属、石、セメント、ナイロン、セルロース、ポリマー樹脂（さまざまなセルロースおよびアガロース樹脂を含む）、複合体、リン酸カルシウム（例えば、限定されるものではないが、ヒドロキシアパタイトおよび骨中にあるものなど）、ケラチン（例えば、限定されるものではないが、皮膚、毛髪、毛皮、羊毛、爪、かぎ爪、蹄、鱗、くちばし、および羽毛中にあるものなど）、コラーゲン（例えば、限定されるものではないが、動物の皮革、腱および靱帯中にあるものなど）、キチン（例えば、限定されるものではないが、外骨格および真菌細胞壁中にあるものなど）、皮膚、歯、およびそれらの組み合わせが挙げられる。それらは、有機化合物を特定の表面に施用するために当分野で利用可能なさまざまな方法のいずれかにより、固体表面に施用することができる。そのような方法としては、表面の“処理”方法が挙げられる。これに関し、化合物または組成物を表面と組み合わせるこの文脈において、“処理する”、“処理すること”および“処理”という用語は、疾患に関する個体の医療的処置とは異なることを、理解する。本明細書中に記載する化合物または組成物での表面のそのような処理方法としては、限定されるものではないが、表面への化合物または組成物の接触、コーティング、吸収、吸着、表面への化合物の共有結合的接合、化合物または抗微生物性組成物の溶液の表面への施用などが挙げられる。
【０１３９】
いくつかの用途では、キャリヤーが必要である可能性がある。キャリヤーは、本明細書中に記載する増強剤化合物を用いるための媒体を提供する任意の化合物である。キャリヤーは、液体、固体または半固体であることができる。実用性を保持するために、キャリヤー（および組成物の任意の他の成分）は、本発明の化合物の活性を著しく中和、阻害または妨害しないことが必要である。適したキャリヤーとしては、限定されるものではないが、有機溶媒、水性緩衝剤、水、乳化剤、および固体分散剤が挙げられる。本明細書中に記載する抗微生物性増強剤化合物を含む溶液および懸濁液は、適した有機溶媒または乳化剤を用いて調製することもできる。好ましい有機溶媒は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）である。本明細書中に記載する化合物または組成物を含むＤＭＳＯに基づく溶液は、さまざまな組成物、アッセイ（成長アッセイを含む）および手順において、化合物の必要とされる濃度をもたらすのにとりわけ有用である。他の有機溶媒、例えば、限定されるものではないが、アルコール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）を用いることもできる。ほとんどのｉｎ  ｖｉｔｒｏの目的では、ＤＭＳＯが好ましい。本明細書中に記載する化合物のための溶媒としてアルコールを用いるための一般的な指針として、エタノールはイソプロパノールより好ましく、イソプロパノールはブタノールまたはアリールアルコールより好ましく、ブタノールまたはアリールアルコールはメタノールより好ましい。
【０１４０】
固体組成物の場合、従来の固体キャリヤーが好ましく、そのようなキャリヤーとしては、例えば、限定されるものではないが、マンニトール、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、タルク、セルロース、ブドウ糖、ショ糖、炭酸マグネシウムなどが挙げられる。
【０１４１】
本明細書中に記載する化合物を含む組成物は、分散剤を含むこともできる。分散剤は、化合物を組成物中により均一に分散させるために、および／または本明細書中に記載する抗微生物性化合物を含有する組成物を施用する表面上での該組成物の分散性を高めるために、採用することができる。分散剤は、固体または液体であることができる。固体分散剤としては、制限なく、タルク、デンプン、セルロース、金属酸化物（例えば、酸化亜鉛、酸化チタン）、グラファイト、およびそれらの組み合わせを挙げることができる。液体組成物のための好ましい分散剤は界面活性剤であり、これは、アニオン性、カチオン性、両性または非イオン性界面活性剤であることができる。例えば、米国特許公報第６９２１７４５号参照。界面活性剤は、組成物全体にわたる抗微生物性化合物の最適な分散または表面上での組成物の最適な分散をもたらす、最低濃度で採用することが好ましい。
【０１４２】
本明細書中に記載する組成物および方法に有用な好ましいアニオン性界面活性剤としては、制限なく、線状アルキルベンゼンスルホン酸；アルキル硫酸塩；１〜１０モルのエチレンオキシドを有するポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩１０；１〜１０モルのエチレンオキシドを有するポリオキシエチレンアルキルエーテルカルボン酸；１〜１０モルのエチレンオキシドを有するポリオキシエチレンアルキルアミドエーテルカルボン酸または脂肪酸；および、それらのカリウム、マグネシウムまたはアルカノールアミン塩が挙げられる。アニオン性界面活性剤中のアルキル基および脂肪族基は、独立して、好ましくは８〜２２個の炭素原子、より好ましくは１０〜１８個の炭素原子のものである。
【０１４３】
本明細書中に記載する組成物および方法に有用な非イオン性界面活性剤は、非イオン性ポリオキシエチレンエーテル、例えば、限定されるものではないが、８〜２２個の炭素原子、より好ましくは１０〜１８個の炭素原子を含有するアルキル鎖を有し、１〜１０モル、より好ましくは４〜２０モルのエチレンオキシドを有する、ポリオキシエチレンアルキルエーテル；１〜３０モル、より好ましくは１〜２０モルのエチレンオキシドを有し、１〜１０モル、より好ましくは１〜５モルのポリプロピレンオキシドを有する、ポリオキシエチレンオキシプロピレンアルキルエーテル；１〜３モルのエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドが付加していてもよい、８〜２２個の炭素原子、より好ましくは１０〜１８個の炭素原子を含有する脂肪酸アルカノールアミド；ならびに、８〜２２個の炭素原子、より好ましくは１０〜１８個の炭素原子を含有するアルキル鎖を有し、好ましくは１〜１０個の糖類、より好ましくは１または２個の糖類が縮合している、アルキルポリグリコシドである。本明細書中に記載する組成物および方法に有用な非イオン性界面活性剤の好ましい種は、ｔ−オクチルフェノキシポリエトキシエタノール（例えば、商標名ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００非イオン性界面活性剤、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、米国ミズーリ州セントルイス）である。
【０１４４】
本明細書中に記載する組成物および方法に有用な他の非イオン性界面活性剤は、８〜２２個の炭素原子、より好ましくは１０〜１８個の炭素原子を含有する脂肪酸と、２〜１０個の炭素原子および２〜８個のヒドロキシ基を含有する炭化水素基を有する多価アルコールとの間のエステルであることができる。より好ましくは、該エステルは、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、またはプロピレングリコール脂肪酸エステルである。
【０１４５】
本明細書中に記載する組成物および方法における使用を見いだすことができる両性界面活性剤としては、制限なく、８〜２２個の炭素原子を含有するアルキル基を有するもの、例えば、アルキルアミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル酢酸ベタイン（Ｎ−アルカノイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムカルボベタイン）、アルキルアミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−ヒドロキシプロピルスルホベタイン（Ｎ−アルカノイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アンモニウムスルホベタイン）、アルキル−Ｎ，Ｎ−ジメチル酢酸ベタイン（Ｎ−アルキル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムカルボベタイン）、アルキルアミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−プロピルスルホベタイン（Ｎ−アルカノイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−スルホプロピル）アンモニウムスルホベタイン）、ラウリル−Ｎ，Ｎ−ジメチルヒドロキシプロピルスルホベタイン（Ｎ−ラウリル−５Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アンモニウムスルホベタイン）、およびアルキルアミンオキシドが挙げられる。これらのうち、好ましい種としては、ラウリン酸アミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル酢酸ベタイン（Ｎ−ラウロイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムカルボベタイン）、ミリスチン酸アミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル酢酸ベタイン（Ｎ−ミリスチロイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムカルボベタイン）、コカミドアミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル酢酸ベタイン（Ｎ−ココナッツ組成物(coconut composition)アルカノイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムカルボベタイン）、ラウリル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−ヒドロキシプロピルスルホベタイン（Ｎ−ラウリル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アンモニウムスルホベタイン）、ラウリン酸アミドプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２３−ヒドロキシプロピルベタイン（Ｎ−ラウロイルアミノプロピル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アンモニウムスルホベタイン）、ならびに、２個以下の炭素原子を含有する２個のアルキル基と、アミド結合を有していてもよい８〜２２個の炭素原子を含有する１個の長鎖アルキル基とを有する、アルキルアミンオキシドが挙げられる。  
【０１４６】
本明細書中に記載する組成物および方法に用いることができるカチオン性界面活性剤としては、限定されるものではないが、６〜２４個の炭素原子、好ましくは６〜１８個の炭素原子を含有し、アミドまたはエステル結合で遮断されていてもよいアルキル長鎖を有する、長鎖ジアルキルジメチルアンモニウム塩、長鎖モノアルキルモノベンジルジメチルアンモニウム塩、およびモノアルキルトリメチルアンモニウム塩が挙げられる。そのようなカチオン性種の対イオンは、ハロゲンイオン、硫酸イオンまたは１〜３個の炭素原子を含有するアルキルスルフェートであることが好ましい。本明細書中に記載する組成物および方法に有用なアミンタイプのカチオン性界面活性剤としては、８〜２４個の炭素原子を含有し、アミドまたはエステル結合で遮断されていてもよいアルキル長鎖を有する、長鎖ジアルキルモノメチルアミン塩が挙げられる。そのような種の好ましい対イオンとしては、それらの塩酸塩、硫酸塩およびリン酸塩が挙げられる。本発明の医薬組成物は、本明細書中に記載する少なくとも１つの抗微生物性化合物を含み、望ましい投与モードに適した単位剤形に調製することができる。
【０１４７】
本発明の化合物を含有する任意の組成物を医薬組成物として用いる場合、それらは、任意の適した経路、例えば、限定されるものではないが、経口、口腔内、舌下、直腸内、経粘膜（粘膜）、経鼻、局所、経皮、経膣、および非経口（例えば、限定されるものではないが、皮下、筋肉内、静脈内および皮内）投与により、治療（予防的治療を含む）のために投与することができる。好ましい経路は、医薬組成物を受領する個体の状態および年齢、処置される状態の性質、標的とする微生物病原体、および採用される本発明の選ばれた抗微生物性化合物によって異なることは、理解されるであろう。本発明の医薬組成物に用いられる医薬的に許容しうるキャリヤーは、該組成物の他の作用物質および成分に適合し、該医薬組成物を投与する患者に対しあまり有害ではないという意味において、“許容しうる”ものでなければならない。
【０１４８】
本発明の増強剤化合物または抗微生物性組成物は、単独で投与することができるが、一般に投与に適した医薬配合物として投与される。本発明の医薬配合物は、治療的有効量の少なくとも１つの本発明の化合物と、医薬的に許容しうる（化粧品的に許容しうる、を含む）不活性なキャリヤーまたは賦形剤とを含む。本明細書中で用いる場合、“医薬的に許容しうるキャリヤー”という用語は、それぞれ医薬的または化粧品的投与に適合する、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗微生物剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤(absorption delaying agent)などを包含すると意図される。任意の従来の媒体または作用物質が本発明の抗微生物性組成物に適合しない場合を除き、それらの該配合物における使用は企図される。
【０１４９】
適した医薬的に許容しうるキャリヤー、配合物、およびそれらの選択に関与する要因についての解説は、当業者にはよく知られており、容易に入手することができるさまざまな情報源、例えば、本明細書中で参考として援用するＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ペンシルベニア州Ｅａｓｔｏｎ、１９８５）に、見いだすことができる。
【０１５０】
好ましい医薬組成物は、医薬的に許容しうるキャリヤーと組み合わせた、本明細書中に記載する有効量の１以上の抗微生物性化合物と、所望により、１以上の他の活性作用物質、希釈剤、増量剤または賦形剤とを含む。賦形剤は、組成物の望ましい物理的性質を改善するか、組成物に望ましい物理的性質を提供する化合物である。本明細書中に記載する化合物に有用な賦形剤としては、限定されるものではないが、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、承認されている染料および着色剤；分散剤、共溶媒、ゲル化剤および乾燥剤が挙げられる。
【０１５１】
治療で用いる場合、本発明の化合物は未処理の化学物質として投与することが可能であるが、該化合物は、医薬組成物中の活性成分として存在することが好ましい。したがって、本発明はさらに、本明細書中に記載する化合物または医薬的に許容しうるその塩を、１以上の医薬的に許容しうるキャリヤー、および所望により、当分野で公知の治療的または有益な１以上の他の作用物質、例えば、抗生物質、抗真菌薬、抗原虫薬、抗ウイルス性化合物、抗癌性化合物、ビタミン、微量金属サプリメント、または、血液もしくは他の組織において適切なイオン平衡を回復もしくは維持するためのイオンサプリメントと一緒に含む、医薬組成物を提供する。本発明の増強剤化合物と組み合わせて用いることができる適した治療薬の他の例としては、制限なく、ペニシリンおよび他のベータラクタマーゼ阻害剤、カルバペネム、セファロスポリン、マクロライド（エリスロマイシンおよびケトライドを含む）、スルホンアミド、キノロン（フルオロキノロンを含む）、オキサゾリジノン、テトラサイクリン、アンコマイシン(ancomycin)、エリスロマイシン、ラクトフェリン、およびカチオン性ペプチドが挙げられる。そのような作用物質は、本発明の化合物を含む同一の医薬組成物中において、または別個の組成物において、個体に投与することができる。
【０１５２】
本発明の化合物を含む組成物はさらに、1以上の抗生物質、例えば、限定されるものではないが、ペニシリン、セファロスポリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、アンピシリン、アモキシシリン、バカンピシリン、アズロシリン、カルベニシリン、メズロシリン、ピペラシリン、チカルシリン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、クリンダマイシン、エリスロマイシン、リンコマイシン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、キノロン、シノキサシン、ナリジクス酸、フルオロキノロン、シプロフロキサシン、エノキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン、バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ、スルホンアミド、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、コアモキシクスラブ(co-amoxyxlav)、セファロチン、セフロキシム、セフトリアキソン、クロラムフェニコール、ニトロフラントイン、コトリモキサゾール、リファンピシン、イソニアジド、ピラジンアミド、キロマイシン、チオストレプトン、ミクロコクシン(micrococcin)、フシジン酸、チオラクトマイシン、ホスミドマイシンなどを含むことができる。
【０１５３】
追加的な併用療法も、本発明の化合物を包含することができる。明らかに、本明細書中に記載する併用療法は代表的なものに過ぎず、他の併用処置または同時投与レジメンを除外することを意図したものではない。
【０１５４】
本発明に従った医薬組成物は、任意の医学的に許容しうる経路、例えば、限定されるものではないが、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、耳介内（耳）、眼内、関節内、気管支内、腹腔内、嚢内、軟骨内、体腔内(intracavitary)、腔内(intracelial)、小脳内、脳室内、頸管内、胃内、肝臓内、心筋内、骨内、骨盤内、腹腔内、胸膜腔内、前立腺内、肺内（例えば、吸入または吹送による）、直腸内、腎臓内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸腔内、子宮内、膀胱内、ボーラス、経膣、経口、経直腸、口腔内、舌下、鼻腔内および経皮経路により、個体に投与するのに適したものを包含する。
【０１５５】
経口投与に適した医薬組成物は、所定量の本発明の化合物を粉末もしくは顆粒形態、溶液形態、懸濁液形態でそれぞれ含有するカプセル、カシェ剤または錠剤のような別個の単位として、あるいはエマルションとして、好都合に存在することができる。本発明の化合物は、ボーラス、舐剤またはペーストとして存在することもできる。経口投与用の錠剤およびカプセルは、従来の賦形剤、例えば、結合剤、増量剤、潤滑剤、崩壊剤または湿潤剤を含有することができる。錠剤は、当分野で周知の方法に従ってコーティングすることができる。
【０１５６】
経口液体製剤は、例えば、水性または油性の懸濁液、溶液、エマルション、シロップ、またはエリキシルの形態にあることができ、あるいは、使用前に水または他の適したビヒクルと一緒に構成するための乾燥製品として存在することができる。そのような液体製剤は、従来の添加剤、例えば、懸濁化剤、乳化剤、非水性ビヒクル（食用油を包含することができる）または防腐剤を含有することができる。
【０１５７】
本発明に従った化合物はまた、非経口投与（例えば、ボーラス注射または連続注入による）用に配合することができ、アンプル、予備充填シリンジ、小容量注入、または防腐剤を加えてある複数回用量容器での単位剤形で存在することができる。該組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルションのような形態をとることができ、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤などの配合剤を含有することができる。あるいは、活性成分は、適したビヒクル、例えば、発熱性物質を含まない滅菌水または医薬的に許容しうる緩衝剤と一緒に使用前に構成するために、滅菌固体の無菌単離または溶液からの凍結乾燥により得られる粉末形態にあってもよい。
【０１５８】
表皮への局所投与の場合、本発明に従った抗微生物性化合物を、軟膏、クリーム、ゲル、ゼリーまたはローションとして配合することができる。本発明の化合物は、経皮パッチ中に組み込むこともできる。そのような経皮パッチは、リナロオール、カルバクロール、チモール、シトラール、メントール、ｔ−アネトールなどの浸透促進剤を含有することができる。例えば、軟膏およびクリームは、１以上の適した増粘剤および／またはゲル化剤を含む水性または油性基剤と一緒に配合することができる。ローションは水性または油性基剤と一緒に配合することができ、一般に、１以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤または着色剤も含有する。本発明の抗微生物性化合物の口での局所投与に適した組成物としては、所望により風味のある基剤、通常ショ糖およびアカシアまたはトラガカント中の化合物を含む、トローチ剤；ゼラチンおよびグリセリンまたはショ糖およびアカシアなどの不活性基剤中の化合物を含む、パステル剤；ならびに、適した液体キャリヤー中の活性成分を含む洗口剤が挙げられる。
【０１５９】
経直腸投与に適した医薬組成物は、キャリヤーが固体である場合、単位用量の座剤として与えられる。適したキャリヤーとしては、ココアバターおよび当分野で一般に用いられている他の材料が挙げられ、座剤は、本発明の化合物を、軟化または溶解したキャリヤー（１以上）と混ぜ合わせた後、冷却し、型で付形することにより、好都合に形成することができる。
【０１６０】
経膣投与に適した医薬組成物は、本発明の化合物に加えて当分野で適していることが公知のキャリヤーを含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレーとして与えることができる。
【０１６１】
経鼻投与の場合、本発明の化合物は、液体スプレーもしくは分散性粉末として、または滴剤の形態で、用いることができる。滴剤は、１以上の分散剤、可溶化剤または懸濁化剤も含む水性または非水性基剤と一緒に配合することができる。液体スプレーは、加圧パックから送達することができると好都合である。
【０１６２】
吸入による投与の場合、本発明に従った化合物は、吹送器(insufflator)、ネブライザー、加圧パック、またはエアゾール噴霧を送達する他の好都合な手段から、好都合に送達することができる。加圧パックは、適した噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適したガスを含むことができる。加圧エアゾールの場合、測定量を送達する弁を提供することにより、用量単位を決定することができる。あるいは、吸入または吹送による投与の場合、本発明に従った化合物は、乾燥粉末組成物、例えば、本発明の化合物と乳糖またはデンプンなどの適した粉末基剤との粉末ミックスの形態をとることができる。粉末組成物は、例えば、カプセルもしくはカートリッジの状態で、または、粉末を吸入器または吹送器を活用して投与することができる例えばゼラチンもしくはブリスター包装の状態で、単位剤形で与えることができる。
【０１６３】
本発明の化合物を含む抗微生物性組成物は、眼または耳の感染症を処置するための医薬組成物中に配合することもできる。本発明の抗微生物性化合物を患者に投与することにより処置することができる眼疾患としては、限定されるものではないが、細菌性角膜炎、伝染性角結膜炎、細菌性結膜炎、眼結核および化膿性ブドウ膜炎が挙げられる。
【０１６４】
望ましい場合、当分野で利用可能な持続的または遅延形式のいずれかを用いて、本発明の化合物の持続的または遅延放出がもたらされるように、上記組成物を適合させてもよい。
【０１６５】
本発明の化合物または医薬的に許容しうるその塩を抗微生物剤と組み合わせて用いる場合、各化合物の用量は、化合物を単独で用いる場合の用量と同じか、異なっていることができる。当業者なら、適切な用量を容易に算出するであろう。当業者なら、本発明の化合物と、患者に同時投与するための第２の治療的化合物との適切な比率を、容易に決定するであろう。例えば、約５０：１〜約１：５０（重量基準）の範囲にある本発明の化合物：抗微生物剤の比率を用いることができる。追加的態様において、本発明の化合物を第２の治療的化合物と同時投与するための組成物の調製に用いることができる比率範囲としては、限定されるものではないが、約３０：１〜約１：３０（重量基準）、約２０：１〜約１：２０（重量基準）、約１５：１〜約１：１５（重量基準）、約１０：１〜約１：１０（重量基準）、約５：１〜約１：５（重量基準）、および約３：１〜約１：３（重量基準）の本発明の化合物：抗微生物剤が挙げられる。さらに他の治療的化合物（１以上）を加える場合、それに応じて比率を調整する。
【０１６６】
本発明の増強剤化合物を含有する抗微生物性組成物は、上記さまざまな形態のいずれかで、例えば、無菌の水または緩衝剤と一緒に再構成するための粉末または凍結乾燥状態で、好都合な投与のための単位用量で、１以上の医薬的に許容しうる緩衝剤または塩と一緒に、および／または微生物病原体による感染症を処置するための抗生物質として包装された化合物を用いるための使用説明書と一緒に、提供し包装することができる。
【０１６７】
そのような化合物の毒性および治療効力は、細胞培養または実験動物において例えばＬＤ５０（母集団の５０％が死に至る用量）およびＥＤ５０（母集団の５０％に治療的に有効な用量）を決定するための標準的な薬学的手順により、決定することができる。毒性効果と治療的効果の用量比は治療指数であり、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表すことができる。より大きな治療指数を示す化合物が好ましい。毒性副作用を示す化合物を用いてもよいが、個体の非感染細胞への考えうる損傷を最小限に抑えるために、そのような化合物を罹患組織部位に方向付ける送達システムを設計し、これにより望ましくない副作用を減少させるように、注意を払うべきである。
【０１６８】
細胞培養アッセイおよび動物試験から得られるデータを、ヒトで用いるための投与量範囲で配合をたてるのに用いることができる。そのような化合物の投与量は、ほとんどまたはまったく毒性を示さないＥＤ５０値を包含する血中濃度範囲内にあることが好ましい。投与量は、採用した剤形および利用した投与経路に応じて、この範囲内で変動させることができる。本発明の方法で用いられる任意の化合物の場合、治療的に有効な用量を、細胞培養アッセイから最初に見積もることができる。動物モデルにおいて、ＩＣ５０（すなわち、微生物成長の半数阻害を達成する抗微生物性試験化合物の濃度）を包含する循環血漿濃度範囲が達成されるような用量を配合してもよい。そのような情報は、ヒトに有用な用量をより正確に決定するために用いることができる。血漿中レベルは、例えば高速液体クロマトグラフィーにより測定することができる。
【０１６９】
以下の実施例を、本発明のさまざまな態様を例示するために提供する。これらは、本発明を十分に開示しているものとして本発明の範囲を限定するものとみなすべきではない。
【実施例】
【０１７０】
実施例１．代表的抗微生物性増強剤化合物の合成。
特定化合物を、スキーム１の合成に従って調製した：
【０１７１】
【化３６】
2016518393.tif 000039
【０１７２】
１．１．  化合物２（スキーム１中）の合成手順：
メタノール（８ｍＬ）中の化合物１（３．２ｇ、２５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、マロノニトリル（１．６５ｇ、２５ｍｍｏｌ）、続いて二硫化炭素（３ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）を加えた。トリエチルアミン（１．５ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応は発熱反応であった。２４時間攪拌後、形成した固体を濾過し、ジエチルエーテルですすぎ、減圧乾燥して、化合物２（２．７ｇ、４３％）を橙色固体として得た。
1H NMR (DMSO-d6): 8.91 (br s, 2H), 4.46 (s, 2H), 2.57 (s, 2H), 1.19 (s, 6H).
(ESI) MS: 253.0 [M+1]
１．２．  化合物３（スキーム１中）の一般的合成手順：
エタノール（５ｍＬ）中の化合物２（１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、アミンＲ１Ｒ２ＮＨ（１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を窒素下で１８〜５０時間加熱還流した（反応の進行はＬＣＭＳにより分析することができた）。反応混合物を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物３を得た。
１．３．  化合物４（スキーム１中）の一般的合成手順：
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の化合物３（１ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（２ｍｍｏｌ）、続いて臭化物（Ｒ３Ｂｒ）（１．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を４０〜４５℃で１６時間加熱した。反応混合物を水（３ｍＬ）に注ぎ入れ、生成物を酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出した。組み合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４またはＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーまたは逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣにより精製して、化合物４を得た。
１．４．  化合物の特性決定：
【０１７３】
【表２】
2016518393.tif 000040
【０１７４】
【表３】
2016518393.tif 000041
【０１７５】
【表４】
2016518393.tif 000042
【０１７６】
【表５】
2016518393.tif 000043
【０１７７】
【表６】
2016518393.tif 000044
【０１７８】
【表７】
2016518393.tif 000045
【０１７９】
【表８】
2016518393.tif 000046
【０１８０】
【表９】
2016518393.tif 000047
【０１８１】
【表１０】
2016518393.tif 000048
【０１８２】
【表１１】
2016518393.tif 000049
【０１８３】
【表１２】
2016518393.tif 000050
【０１８４】
【表１３】
2016518393.tif 000051
【０１８５】
【表１４】
2016518393.tif 000052
【０１８６】
【表１５】
2016518393.tif 000053
【０１８７】
【表１６】
2016518393.tif 000054
【０１８８】
【表１７】
2016518393.tif 000055
【０１８９】
【表１８】
2016518393.tif 000056
【０１９０】
【表１９】
2016518393.tif 000057
【０１９１】
【表２０】
2016518393.tif 000058
【０１９２】
【表２１】
2016518393.tif 000059
【０１９３】
【表２２】
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【０１９４】
【表２３】
2016518393.tif 000061
【０１９５】
実施例２．選択した化合物の排出ポンプ阻害効果および抗微生物性増強効果の決定
菌株および試薬。本試験に用いた細菌株を表１に挙げる。以下の菌株をＫｅｉｏコレクションから得た（Ｂａｂａ，ｅｔ  ａｌ．：Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｋ−１２  ｉｎ−ｆｒａｍｅ，ｓｉｎｇｌｅ−ｇｅｎｅ  ｋｎｏｃｋｏｕｔ  ｍｕｔａｎｔｓ：ｔｈｅ  Ｋｅｉｏ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ．  Ｍｏｌ  Ｓｙｓｔ  Ｂｉｏｌ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．２００６  ２００８，（２００６））：ＪＷ０４５１（ΔａｃｒＢ：：ｋａｎ）、ＪＷ５５０３（ΔｔｏｌＣ：：ｋａｎ）、ＪＷ３２３４（ΔａｃｒＦ：：ｋａｎ）、ＪＷ２６６１（ΔｅｍｒＢ：：ｋａｎ）、ＪＷ０８６３（ΔｍａｃＢ：：ｋａｎ）。これらの各菌株の欠失変異体を、Ｐ１ファージ形質導入を用いてＡＢ１１５７に移した（表１参照）。ハイスループットスクリーニングに用いたＥ．ｃｏｌｉ細胞に基づくレポーター菌株の構築は、補足情報に詳細に記載されている。シプロフロキサシンは、ＩＣＮ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ（オハイオ州Ａｕｒｏｒａ）から購入した。イルガサンは、Ｃｉｂａ  Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（ノースカロライナ州Ｈｉｇｈ  Ｐｏｉｎｔ）からの惜しみない寄贈品であった。Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｈ３３３４２）は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ）から購入した。以下の試薬は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）から購入した：フェニル−アルギニン−β−ナフチルアミド（ＰＡβＮ）、シアニド−ｍ−クロロフェニルヒドラゾン（ＣＣＣＰ）、レボフロキサシン、ノルフロキサシン、ナラジクス酸(Naladixic acid)、ピペラシリン、クロキサシリン、オキサシリン、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、エチジウムブロミド、ゲンタマイシン、クリスタルバイオレット、セファレキシン、アモキサシリン、リファピシン、およびセフォタキシム。ルリアブロス（Ｍｉｌｌｅｒ）および寒天は、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ（ニュージャージー州Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ）から調製済みの無水媒体として購入した。ハイスループットスクリーンに用いた化合物ライブラリーは、Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ（カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）、ＣｈｅｍＤｉｖ（カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）、およびＴｉｍＴｅｃ（デラウェア州Ｎｅｗａｒｋ）から購入した。ＭＢＸ２３１９は、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔｉｘ，Ｉｎｃにより合成した。
抗菌活性アッセイ。抗微生物剤および抗生物質の最小阻害濃度（ＭＩＣ）は、以下の点を除き、実質的にＣＬＳＩプロトコルＭ７−Ａ７（ＣＬＳＩ：Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｆｏｒ  ｂａｃｔｅｒａ  ｔｈａｔ  ｇｒｏｗ  ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ；Ａｐｐｒｏｖｅｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ−ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ７−Ａ７．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ７−Ａ７，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ペンシルベニア州Ｗａｙｎｅ（２００６））に記載されているようなマイクロブロス希釈法を用いて決定した。ＭＨＢの代わりにＬＢ培地を用いた。試験化合物の一連の２倍希釈物を、最終濃度より５０倍高い濃度でＤＭＳＯ中で作製した：希釈化合物をアッセイプレートに加え、１００μＬの接種物を各ウェルに加えた。各アッセイにおけるＤＭＳＯの最終濃度は２％であった。示されている場合、ＭＩＣアッセイを、最終濃度２５μＭの排出ポンプ阻害剤（ＥＰＩ）の存在下で実施した。ＭＩＣアッセイを３回繰り返して実施し、幾何平均値を算出した。ＥＰＩおよび抗菌剤を用いたチェッカーボード(checkerboard)ＭＩＣアッセイを、上記ＭＩＣアッセイに用いたものと同じ変更点を用いて、実質的に記載されているように実施した（Ｐｉｌｌａｉ，ｅｔ  ａｌ．：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖ．Ｌｏｒｉａｎ編集，ｐｐ．３６５−４４０，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，ペンシルベニア州Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（２００５））。
時間−死滅アッセイ。死滅曲線アッセイは、実質的に記載されているように実施した（Ｐｉｌｌａｉ，ｅｔ  ａｌ．：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖ．Ｌｏｒｉａｎ編集，ｐｐ．３６５−４４０，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，ペンシルベニア州Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（２００５））。ＬＢ中で指数関数的に成長させた細菌培養物を、ＬＢ中で約１×１０７の細胞密度に希釈した後、ＣＩＰおよび／またはＥＰＩを加えた。生理食塩水中の一連の希釈物を作製し、５μＬの各希釈物をＬＢ寒天プレートの表面上に３回繰り返してスポットすることにより、生存力を２〜４時間にわたりモニタリングした。プレートを３７℃で１６〜１８時間インキュベートした後、コロニーを計数し、１ｍＬあたりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）を計算し、３回の反復試験での平均および標準偏差を決定した。ＣＦＵ／ｍＬがスポットプレーティング法の検出限界未満に減少する処理の場合、１００μＬの試料を５ｍＬのＬＢ上層寒天中に希釈し、ＬＢ寒天プレート上に注ぎ入れ、３７℃で１８時間インキュベートした。各試料に関する対照の割合(fraction)を計算するために、被処理試料の平均ＣＦＵ／ｍＬ値を、同試料の０時間目（時間＝０）からの値で割った。各実験を少なくとも３回繰り返した。代表的実験を示す。
Ｈ３３３４２蓄積アッセイ。さまざまな細菌排出ポンプの基質である蛍光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｈ３３３４２）（ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｅｒｇ  ｖａｎ  Ｓａｐａｒｏｅａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．４４，ｐｐ．１６９３１−１６９３８，（２００５））の蓄積速度を用いて、Ｅ．ｃｏｌｉおよび他の多くの細菌種における主要な排出ポンプの活性を評価することができる。Ｈ３３３４２蓄積アッセイを用いて、実質的に記載されているように（Ｃｏｌｄｈａｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．６５，ｐｐ．１６５５−１６６３，（２０１０））いくつかの細菌種におけるＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣ排出ポンプの活性に対するＥＰＩの効果を評価した。手短に言うと、細菌培養物を３７℃において通気しつつＬＢ（Ｍｉｌｌｅｒ）中で一晩成長させ、これを、通気しつつＬＢ（Ｍｉｌｌｅｒ）中で成長させた未処理の培養物（１：１００希釈）に、６００ｎｍでの光学濃度（ＯＤ６００）が０．４〜０．６に達するまで接種した。細菌細胞を遠心分離により採取し、細胞ペレットを、培養物の最初の体積と同等の体積のＰＢＳＭ＋Ｇ（１ｍＭのＭｇＳＯ４および２０ｍＭのブドウ糖を含有するＰＢＳ）で洗浄した。遠心分離後、細胞ペレットをＰＢＳＭ＋Ｇに再懸濁させ、各懸濁液のＯＤ６００を０．２に調整した。１９０μＬのアリコートを９６ウェルアッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３５１５，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ニューヨーク州；平底、黒色プレート）のウェルに移した。ＤＭＳＯに溶解したさまざまな濃度の試験化合物または同等の体積の溶媒単独を、各試験条件に関し合計８個のアッセイウェル（ウェルの１列）に加えた。すべてのアッセイにおいてＤＭＳＯの最終濃度は２％であった。アッセイプレートを３７℃で１５分間インキュベートし、ＰＢＳＭ＋Ｇ中の５０μＭ  Ｈ３３３４２の溶液１０μＬを各アッセイウェルに加えて、最終染料濃度を２．５Ｍにした。各ウェルの蛍光（それぞれ３５５および４６０ｎｍの励起および発光フィルター）を、Ｖｉｃｔｏｒ２  Ｖ  １４２０  Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ  ＨＴＳ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，マサチューセッツ州Ｗａｌｔｈａｍ）を用いて３７℃で５分毎に３０分間測定した。各条件につき８回の反復試験に関する平均値および標準偏差を、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌを用いて計算した。核実験を少なくとも３回繰り返した。代表的実験を示す。
２．２．  ＭＢＸ２３１９は、Ｅ．ｃｏｌｉに対するフルオロキノロンおよびβ−ラクタム抗生物質の抗菌活性を増強する。
【０１９６】
われわれは、ＭＢＸ２３１９が、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７に対する２つのフルオロキノロン、すなわちシプロフロキサシン（ＣＩＰ）およびレボフロキサシン（ＬＥＶ）、ならびにβ−ラクタム、すなわちピペラシリン（ＰＩＰ）の活性を増強するか否かを決定するために、チェッカーボードアッセイを利用した。表２に示すデータは、ＭＢＸ２３１９が、ＣＩＰ、ＬＥＶおよびＰＩＰのＭＩＣをそれぞれ２、４および８低下させることを示している。ＭＢＸ２３１９単独は抗菌活性を示さなかった（ＭＩＣ≧１００μＭ）。これに加えて、ＭＢＸ２３１９は、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７に対し静菌性を示す０．０１６μｇ／ｍＬ  ＣＩＰ（１×ＭＩＣ）の殺菌活性を、用量依存的に増大させた（図２Ａ）。最高濃度のＭＢＸ２３１９（３．１３μＭ）は、１×ＭＩＣＰのＣＩＰ単独と比較して、４時間暴露後に生存力（ＣＦＵ／ｍＬ）を１００００倍低下させた。対照的に、５０μＭ以下の濃度のＭＢＸ２３１９単独は、成長に影響を及ぼさなかった。比較として、われわれは、時間死滅アッセイにおいて、０．０１６μｇ／ｍＬのＣＩＰと組み合わせた、さまざまな濃度の公知のＥＰＩであるフェニル−アルギニン−β−ナフチルアミド（ＰＡβＮ）（Ｌｏｍｏｖｓｋａｙａ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０５−１１６，（２００１））の効果を測定した。アッセイの結果を図２Ｂに示す。結果は、１００μＭもの濃度のＰＡβＮが０．０１６μｇ／ｍＬのＣＩＰの殺菌活性を増大させなかったことを示している。
２．３．  ＭＢＸ２３１９は排出ポンプ阻害剤（ＥＰＩ）である。
【０１９７】
ＭＢＸ２３１９がフルオロキノロンおよびβ−ラクタムの抗菌活性を増強する機序が排出阻害であることを立証するために、われわれは、ＭＢＸ２３１９がＥ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７の排出不全変異体のパネルに対するＣＩＰ、ＬＥＶおよびＰＩＰの抗菌活性を増強するか否かを決定した。われわれは、ＭＢＸ２３１９の標的に欠く変異体の抗生物質感受性は、化合物による影響を受けないと推論した。表２に示すチェッカーボードアッセイの結果は、ΔｔｏｌＣおよびΔａｃｒＢ変異体のＭＩＣはＭＢＸ２３１９による影響を受けなかったが、ＴｏｌＣと相互作用する他のポンプが不完全である変異体、例えば、ＡｃｒＦ（表２）、ＭａｃＢ、およびＥｍｒＢ（データは示していない）は、ＷＴに似たＭＩＣのシフトを示したことを示している。同様に、ＭＢＸ２３１９は、ΔａｃｒＦ菌株に対するＣＩＰの殺菌活性を増強したが、ΔｔｏｌＣおよびΔａｃｒＢ菌株に対する殺菌活性は増強しなかった（図２Ｃ）。最後に、ＭＢＸ２３１９は、Ｅ．ｃｏｌｉ菌株２８５および２８７（表２）に対するＣＩＰ、ＬＥＶおよびＰＩＰの抗菌活性を４〜８倍増強した（表２）。これらの菌株は、ＣＩＰの阻害濃度以下の濃度(subinhibitory concentration)における連続継代中に選択されたＥ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７のＣＩＰＲ変異体であり、増大した排出活性を示す（補足データ参照）。これらの所見は、Ｅ．ｃｏｌｉの主要排出ポンプであるＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣ排出ポンプが（Ｏｋｕｓｕ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，ｖｏｌ．１７８，ｐｐ．３０６−３０８，（１９９６））ＭＢＸ２３１９の標的であることを示している。
【０１９８】
ＭＢＸ２３１９が排出を直接阻害することを確認するために、われわれは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７におけるＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣポンプの基質である蛍光性ＤＮＡ結合染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２（Ｈ３３３４２）の蓄積を測定するアッセイを用いた。このアッセイは、Ｅ．ｃｏｌｉおよびＳ．ｅｎｔｅｒｉｃａにおける排出活性を評価するために用いられてきた（Ｃｏｌｄｈａｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，ｖｏｌ．６５，ｐｐ．１６５５−１６６３，（２０１０））。Ｈ３３３４２は、細胞に入ると、主要でないＤＮＡに結合して蛍光性になり、蛍光プレートリーダー（Ｅｘ３５５、Ｅｍ４６０）を用いて検出することができる。排出能力のある細胞はＨ３３３４２を押し出し、比較的遅い速度で染料を蓄積して、低レベルの蛍光をもたらす。反対に、排出不全細胞は細胞内レベルのＨ３３３４２を蓄積して、より高レベルの蛍光をもたらす。Ｈ３３３４２蓄積アッセイの結果を図３ＡおよびＢに示す。ΔａｃｒＢ菌株を、Ｈ３３３４２蓄積の生じうる最高レベルを示す陽性対照として用いた。ＭＢＸ２３１９（図３Ａ）およびＰＡβＮ（図３Ｂ）は、未処理対照と比較して、用量依存的にＨ３３３４２の蓄積を増大させた。しかしながら、ＭＢＸ２３１９の用量反応は、おそらくリン酸緩衝液中での該化合物の低い溶解度（溶解限度１５〜２０μＭ）に起因して、より高濃度（２５〜５０μＭ）では比例しなかった。２５μＭの濃度において、ＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮは、Ｈ３３３４２蓄積を、それぞれΔａｃｒＢ菌株の約４５％および５２％のレベルに増大させた。このアッセイにおいて、ＭＢＸ２３１９は、より低い濃度（３．１〜１２．５μＭ）においてＰＡβＮより効果的であった。両方の化合物とも、過剰排出(hyper-efflux)菌株２８５および２８７においてＨ３３３４２蓄積を増大させた（図３Ｄ参照）。
２．４．  ＭＢＸ２３１９は、多数の抗生物質および殺生物剤の活性を増強する。
【０１９９】
排出ポンプ阻害剤は、さまざまな群の抗生物質および殺生物剤の抗菌活性を増大させることが公知である（Ｎｉｋａｉｄｏ，ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｒｅｖ，ｖｏｌ．３６，ｐｐ．３４０−３６３，（２０１２））。この予想を試験するために、われわれは、広域スペクトルの抗生物質および殺生物剤に対するＥ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７の感受性を増大させる、ＭＢＸ２３１９の能力を測定した。表３に示すデータは、ＭＢＸ２３１９が、いくつかの公知のＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣ基質、例えば、ＣＩＰ、ＬＥＶ、ナリジクス酸、ＰＩＰ、オキサシリン、およびクロラムフェニカル(chloramphenical)に対する感受性を増大させたが、基質ではないゲンタマイシンおよびセファレキシンに対する感受性は増大させなかったことを示している。一般に、ＭＢＸ２３１９によりもたらされるＭＩＣシフトは、ΔａｃｒＢのシフトより小さかったが、フルオロキノロンおよびβ−ラクタム抗生物質に関しＰＡβＮによりもたらされるシフトと同様であった。
２．５．  活性スペクトルの決定
ＭＢＸ２３１９が他のグラム陰性病原体のＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣオルソログを阻害するか否かを決定するために、われわれは、２つのアッセイを用いて、いくつかの抗生物質と組み合わせたＭＢＸ２３１９の抗菌活性を測定した。最初に、われわれは、いくつかの抗生物質のＭＩＣを、単独または２５μＭの濃度のＭＢＸ２３１９またはＰＡβＮと組み合わせて、いくつかのグラム陰性病原体に対して測定した。データを表５に示す。Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａを除くすべての試験種に関し、ＭＢＳ２３１９はフルオロキノロンのＣＩＰおよびＬＥＶの活性を著しく増大させたが、ＰＡβＮは試験濃度（２５μＭ）においてＭＩＣに顕著な影響を及ぼさなかった。ＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮは、試験生物体の大部分に対するＰＩＰおよびＣＥＦの活性を増大させた；しかしながら、ＭＢＸ２３１９はＰＡβＮより多くの生物体に対し活性を示した。これに加えて、ＭＢＸ２３１９は、フルオロキノロンに耐性を示すＥ．ｃｏｌｉ  ３３１に対するＣＩＰおよびＬＥＶの活性を増大させた。興味深いことに、ＭＢＸ２３１９はＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対するＣＥＦの活性を増大させた。
【０２００】
時間死滅アッセイを用いて、グラム陰性病原体に対する２５μＭのＭＢＸ２３１９の増強活性を立証した（図２Ｄ）。ＭＢＸ２３１９と静菌濃度のＣＩＰ（０．５または１×ＭＩＣ）の組み合わせは、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓおよびＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅの生存力を、ＣＩＰ単独と比較して１００〜１０００倍低下させた。対照的に、２５μＭのＰＡβＮは、このアッセイで試験した菌株のいずれに対しても効果を示さなかった。Ｈ３３３４２蓄積アッセイを用いて、ＭＢＸ２３１９が他のグラム陰性病原体において排出を阻害することを立証した。このアッセイの結果を図４Ａ〜Ｈに示す。ＭＢＸ２３１９（２５μＭ）は、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ、Ｅ．ｃｌｏａｃａｅ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓを含む試験生物体の大部分においてＨ３３３４２蓄積を増大させ、Ｅ．ｃｏｌｉ  ３３１（ＣＩＰＲ）およびＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対し弱い活性を示した。
２．６．  ＭＢＸ２３１９は、Ｅ．ｃｏｌｉ菌株のさまざまなパネルに対するレボフロキサシンおよびピペラシリンの抗菌活性を増大させた。
【０２０１】
ＭＢＸ２３１９が、Ｅ．ｃｏｌｉ菌株のさまざまなパネルに対するＬＥＶおよびＰＩＰの抗菌活性を増大させるか否かを決定するために、われわれは、２５μＭの化合物の非存在下および存在下でＬＥＶおよびＰＩＰのＭＩＣを測定した。２４菌株のパネル（表５参照）は、公的に入手可能な臨床分離株であった菌株から構成される；しかしながら、高レベルのフルオロキノロンに対し耐性を示した菌株はなかった。ＭＢＸ２３１９は、ＬＥＶのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値（それぞれ５０％および９０％の菌株の成長を阻害するＬＥＶ濃度）を４倍低下させた（図５）。対照的に、ＭＢＸ２３１９は、ＰＩＰのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値に対し著しい効果を有していなかった。これは、おそらく、感受性を示したものの累積％の平坦域が約８０％にあることにより証明されるように、約２０％の菌株がＰＩＰに対し耐性を示したと思われるためであろう。この観察結果のもっとも考えうる原因は、これらの菌株が、ベータ−ラクタム抗生物質の有効性を低減または排除することができるベータ−ラクタマーゼ酵素を発現させることである。
２．７．  ＭＩＣ低下により決定した、選択した化合物の抗微生物性増強効果。
【０２０２】
レボフロキサシン（ＬＥＶ）およびピペラシリン（ＰＩＰ）の活性を増強する各類似体の能力を、上記チェッカーボードＭＩＣアッセイを用いて測定した。ＭＩＣをｎ倍（ｎ＝２、４または８倍）低下させる化合物の最小濃度である最小増強濃度（ＭＰＣｎ）を、各化合物について決定した。表６に示すデータは、類似体がＬＥＶおよびＰＩＰに関しさまざまなＭＰＣ値を示したことを、示している。
２．８．  Ｈ３３３４２蓄積における増大パーセントにより決定した、選択した化合物の抗微生物性増強効果。
【０２０３】
ＬＥＶまたはＰＩＰに関するＭＰＣ４値が≦２５μＭである化合物を、上記Ｈ３３３４２蓄積アッセイで試験した。これらの各化合物のデータを図６に示す。ΔａｃｒＢ菌株と比較してのＨ３３３４２蓄積における増大パーセントを、２５μＭの濃度の各化合物について計算した。この分析からのデータを表７に示す。
【０２０４】
【表２４】
2016518393.tif 000062
【０２０５】
【表２５】
2016518393.tif 000063
【０２０６】
＃ＡＴＣＣ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ
＊シプロフロキサシンの阻害レベル以下のレベル(subinhibitory level)における連続継代中に、シプロフロキサシン耐性変異体として単離した
【０２０７】
【表２６】
2016518393.tif 000064
【０２０８】
ａ：ＭＩＣ（化合物なし）／ＭＩＣ（ＭＩＣ（ＭＢＸ２３１９））の最大比
ｂ：ＥＰＩの非存在下におけるＭＩＣ（ＷＴ）／ＭＩＣ（変異体）
略語：ＣＩＰ、シプロフロキサシン；ＬＥＶ、レボフロキサシン；ＰＩＰ、ピペラシリン；ＣＥＦ、セフォタキシム。
【０２０９】
【表２７】
2016518393.tif 000065
【０２１０】
＊：少なくとも３回の反復実験からのＭＩＣの幾何平均。‡：ＥＰＩのＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの最終濃度は２５μＭであった。ａ：ＭＩＣ化合物なし／ＭＩＣ＋２５μＭ  ＭＢＸ２３１９。ｂ：ＭＩＣ化合物なし／ＭＩＣ＋２５μＭ  ＰＡβＮ。ｃ：ＭＩＣ  ＷＴ／ＭＩＣ  ΔａｃｒＢ
【０２１１】
【表２８】
2016518393.tif 000066
【０２１２】
【表２９】
2016518393.tif 000067
【０２１３】
＊：少なくとも３回の反復実験からのＭＩＣの幾何平均。‡：ＥＰＩのＭＢＸ２３１９およびＰＡβＮの最終濃度は２５μＭであった。ａ：ＭＩＣ化合物なし／ＭＩＣ＋２５μＭ  ＭＢＸ２３１９。ｂ：ＭＩＣ化合物なし／ＭＩＣ＋２５μＭ  ＰＡβＮ。
略語：ＣＩＰ、シプロフロキサシン；ＬＥＶ、レボフロキサシン；ＰＩＰ、ピペラシリン；ＣＥＦ、セフォタキシム。
【０２１４】
【表３０】
2016518393.tif 000068
【０２１５】
【表３１】
2016518393.tif 000069
【０２１６】
ＵＴＩ：尿路感染
ＡＴＣＣ：Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ
ＥＣＯＲ：参考文献
ＢＥＩ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ：以下の試薬は、Ｈｕｍａｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔの一部としてＢＥＩ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ、ＮＩＡＩＤ、ＮＩＨから得た：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、菌株ＭＳ  １１０３、ＨＭ−３４３。
【０２１７】
【表３２】
2016518393.tif 000070
【０２１８】
【表３３】
2016518393.tif 000071
【０２１９】
【表３４】
2016518393.tif 000072
【０２２０】
＊、最小増強濃度（ＭＰＣ）は、抗菌剤のＭＩＣを２倍（ＭＰＣ２）、４倍（ＭＰＣ４）または８倍（ＭＰＣ８）低下させる試験化合物の最小濃度である。
Ｅ．ｃｏｌｉ  ＡＢ１１５７に対するレボフロキサシンおよびピペラシリンのＭＩＣは、それぞれ０．０６μｇ／ｍＬおよび４μｇ／ｍＬである。
【０２２１】
【表３５】
2016518393.tif 000073
【０２２２】
＊、ΔａｃｒＢ菌株の割合は、ΔａｃｒＢ菌株におけるＨ３３３４２蓄積と比較した、２５μＭの化合物の存在下で３０分後のＨ３３３４２蓄積の相対レベルである（ＡｃｒＡＢ−ＴｏｌＣの完全喪失）。
ΔａｃｒＢの割合は、以下のように計算した：蛍光(Fluor)（＋化合物）−蛍光（−化合物）／蛍光（ΔａｃｒＢ）−蛍光（−化合物）。
【０２２３】
本明細書中で引用するすべての出版物、特許出願、特許および他の文書を、全体として参考として援用する。本明細書中に提供する実施例は例示に過ぎず、制限することを意図したものではない。
【０２２４】
本発明の開示化合物および代替的態様の明らかな変形は、前記開示を考慮して、当業者には明らかになるであろう。そのような明らかな変形および代替物は、本明細書中に記載するように本発明の範囲内にあるとみなす。
【図１】
2016518393.tif 000097
【図２】
2016518393.tif 000098
【図３】
2016518393.tif 000099
【図４】
2016518393.tif 000100
【図５】
2016518393.tif 000101
【図６】
2016518393.tif 000102
【手続補正書】
【提出日】平成28年1月5日(2016.1.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの構造を有する細菌排出阻害剤化合物、または医薬的に許容しうるその塩：
【化１】
2016518393.tif 000103
［式中、
ｎは、１〜５の整数であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物
［式中：
ｎは、１であり；
Ｘは、−ＣＮであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｙは、Ｏであり；
Ｚは、ヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、メチルであり；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項３】
以下からなる群より選択される、式１に記載の化合物：
【化２】
2016518393.tif 000104
【化３】
2016518393.tif 000105
【化４】
2016518393.tif 000106
【化５】
2016518393.tif 000107
【化６】
2016518393.tif 000108
【化７】
2016518393.tif 000109
【化８】
2016518393.tif 000110
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物と、医薬的に許容しうるキャリヤーまたは賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項５】
さらに抗微生物剤を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム(doripenam)、イミペナム(imipenam)、メロペナム(meropenam)またはアズトロナム(aztronam)から選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
細菌の排出ポンプを阻害するための、式ＩＩの化合物または医薬的に許容しうるその塩の使用：
【化９】
2016518393.tif 000111
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項９】
請求項８に記載の使用、これに関し、式ＩＩにおいて、
Ｘは、シアノであり；
Ｗは、Ｓであり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキルまたはアリールオキシアルキルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１、Ａ２は、ＣＨ２であり；そして
Ｙは、酸素である。
【請求項１０】
請求項８に従った使用、これに関し、式ＩＩの化合物は、以下：
【化１０】
2016518393.tif 000112
【化１１】
2016518393.tif 000113
【化１２】
2016518393.tif 000114
【化１３】
2016518393.tif 000115
【化１４】
2016518393.tif 000116
【化１５】
2016518393.tif 000117
【化１６】
2016518393.tif 000118
【化１７】
2016518393.tif 000119
および医薬的に許容しうるその塩からなる群より選択される。
【請求項１１】
前記化合物が式Ｉの構造を有する、請求項８に記載の使用：
【化１８】
2016518393.tif 000120
［式中、
ｎは、１〜５の整数であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項１２】
化合物または医薬的に許容しうるその塩が、抗微生物剤と組み合わせて用いられる、請求項８〜１１のいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、
アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム、イミペナム、メロペナムまたはアズトロナムから選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
細菌感染を処置または防止するための、式ＩＩの化合物または医薬的に許容しうるその塩の使用：
【化１９】
2016518393.tif 000121
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項１６】
前記細菌感染が細菌の抗菌耐性株に起因する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
グラム陰性病原体に起因するヒトにおける感染を処置するための、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏ
ｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉまたはＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｒｏｅａｅである、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
グラム陰性病原体に起因する動物における感染を処置するための、請求項１５に記載の使用。
【請求項２０】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐｐ．、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｐｐ．、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、またはＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉである、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
グラム陰性病原体によるコロニー形成がみられる機器および表面を殺菌するための、式ＩＩの化合物またはその塩の使用：
【化２０】
2016518393.tif 000122
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項２２】
前記化合物を、グラム陰性病原体によるコロニー形成または生物膜形成を防止するために医療機器および表面用のコーティングとして用いる、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
個体における細菌感染の処置方法であって、前記個体に、式ＩＩに記載の化合物と医薬的に許容しうるキャリヤーまたは賦形剤とを含む組成物を投与することを含む、前記方法：
【化２１】
2016518393.tif 000123
［式中：
Ｘは、シアノ、アミド、スルホンアミド、イミノ、アミジノ、アシル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、ハロまたはニトロであり；
Ｗは、硫黄、ＳＯ（スルホキシド）、ＳＯ２（スルホン）、酸素、窒素またはアルキル置換窒素であり；
Ｒ６は、置換されていてもよいアラルキル、アルキル、アリールオキシアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ａ１およびＡ２は、独立して、炭素または置換されていてもよい炭素であり；
Ｙは、酸素、硫黄または置換されていてもよい窒素であり；
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよい］。
【請求項２４】
前記化合物が式Ｉを有する化合物である、請求項２３に記載の方法：
【化２２】
2016518393.tif 000124
［式中、
ｎは、１、２、３、４または５であり；
Ｘは、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２であり；
Ｗは、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、Ｏ、ＮＨまたはＮＲ５であり；
Ｒ５は、アルキル、アラルキル、アルケニルまたはアルキニルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓであり；
Ｚは、ＮＲ１Ｒ２またはヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１、Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル
またはシクロアルキルであり、所望によりハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはニトリル基で置換されていてもよく、一緒に環状構造を形成していてもよく；そして
Ａｒは、一、二または三置換のフェニルまたはヘテロアリールである］。
【請求項２５】
前記組成物を抗微生物剤と組み合わせて投与する、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記抗微生物剤が、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むもしくは含まないベータ−ラクタム抗生物質、またはキノロン抗生物質である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗微生物剤が、アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、アズロシリン、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフォベシン、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、エルタペネム、ドリペナム、イミペナム、メロペナムまたはアズトロナムから選択される、ベータ−ラクタマーゼ阻害剤を含むまたは含まないベータ−ラクタム抗生物質であるか；あるいは、前記抗微生物剤が、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、バロフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、トスフロキサシン、クリナフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシンまたはプルリフロキサシンから選択されるキノロン抗生物質である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
細菌の抗菌耐性株に起因する細菌感染を処置するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２９】
前記感染がグラム陰性病原体に起因する、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記病原体が、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｉｉまたはＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｒｏｅａｅである、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
ベータ−ラクタム抗生物質またはキノロン抗生物質の抗菌活性を増強するための請求項１〜３に記載の化合物の使用であって、前記抗生物質を前記化合物と組み合わせて投与または施用することを含む、前記使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
【化９】
2016518393.tif 000125
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
【化２５】
2016518393.tif 000126
【国際調査報告】
2016518393.tif 000127
2016518393.tif 000128
2016518393.tif 000129