(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サクラダソウ抽出物、ユキヤナギ抽出物、マーシュ抽出物、ソテツ抽出物、及びハギ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする抗アレルギー剤。
【請求項２】
即時型アレルギー反応抑制効果を有する請求項１記載の抗アレルギー剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗アレルギー剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
抗アレルギー剤のひとつとして、一般に気道粘膜等における肥満細胞からの主としてＩｇＥ依存性の起炎症物質であるヒスタミン等の化学伝達物質の遊離を抑制する薬物が使用されており、例えばトラニラスト、クロモグリク酸ナトリウム、バイカレン等が挙げられる。
【０００３】
又、近年はヒスタミンに対する競合拮抗物質、例えばマレイン酸クロルフェニラミン、ジフェンヒドラミン及びその類縁物質等も抗アレルギー剤として使用されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、これらの抗アレルギー剤は、作用部位に選択的に働いて優れた効果を示すが、眠気、倦怠感、肝障害等の副作用を伴うことが多く、用途や使用条件が厳しく制限されるという問題点があった。
【０００５】
そこで本発明は、抗アレルギー作用をもつと同時に安全性の高い抗アレルギー剤を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らによって初めて、サクラダソウ抽出物、ユキヤナギ抽出物、マーシュ抽出物、ソテツ抽出物、及びハギ抽出物が、優れた抗アレルギー作用、特に即時型アレルギー反応を抑え、皮膚に生じる炎症やかゆみ、さらに花粉症等に伴って起こる鼻アレルギーにおける鼻水の増加を緩和、改善すると同時に生体に対しては安全であることが見出され、本発明が完成された。
【０００７】
即ち本発明の抗アレルギー剤は、サクラダソウ抽出物、ユキヤナギ抽出物、マーシュ抽出物、ソテツ抽出物、及びハギ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする。又、本発明の抗アレルギー剤は即時型アレルギー反応抑制効果を有するものであることが好ましい。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の抗アレルギー剤に使用されるサクラダソウは、キキョウ科Ｐｒａｔｉａ属（銅錘玉帯草属）に属し、匍匐性の多年草の植物である。
サクラダソウ抽出物は、サクラダソウを乾燥し、細切し、水、エタノール等の親水性有機溶剤、又はこれらの混合物に浸漬し、得られた液をろ過して得られる。
アジサイ抽出物、ローズマリー抽出物、ノバラ抽出物、リョクチャ抽出物、ヨクイニン抽出物、サルスベリ抽出物、ユキヤナギ抽出物、ニセアカシア抽出物、エイジツ抽出物、タイム抽出物、マーシュ抽出物、イチゴ抽出物、トウガン抽出物、ソテツ抽出物、ハギ抽出物及びクズ抽出物も、サクラダソウ抽出物と同様にして得ることができる。また、カルノシン酸及びカルノソールはローズマリー抽出物から単離される。
【０００９】
本発明の抗アレルギー剤中のサクラダソウ抽出物、アジサイ抽出物、ローズマリー抽出物、カルノソール、カルノシン酸、ノバラ抽出物、リョクチャ抽出物、ヨクイニン抽出物、サルスベリ抽出物、ユキヤナギ抽出物、ニセアカシア抽出物、エイジツ抽出物、タイム抽出物、マーシュ抽出物、イチゴ抽出物、トウガン抽出物、ソテツ抽出物、ハギ抽出物及びクズ抽出物の配合量は、特に限定されるものではないが、乾燥固形物重量（複数の抽出物を含む場合はその合計量）で、総量を基準として０．０００１〜２０．０重量％が好ましく、更に好ましくは０．０００５〜５．０重量％である。
該配合量が０．０００１重量％未満であると、本発明の効果が充分に得られず、一方２０．０重量％を超えても、その増量に見合った効果の向上は認められない。
【００１０】
本発明の抗アレルギー剤は、皮膚外用剤として、例えば、ローション類、乳液類、クリーム類、軟膏類、パック類等の剤型とすることができる。
【００１１】
本発明の抗アレルギー剤には、色素、防腐剤、界面活性剤、香料、顔料等を適宜配合することができる。
【００１２】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいてさらに詳しく説明する。ただし本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、以下の調製例及び実施例中％とあるのは、特にことわらない限り重量％を示す。
【００１３】
調製例１
（サクラダソウ５０％エタノール抽出物の調製）
サクラダソウは、茎葉培養系により大量増殖させて得た。得られたサクラダソウを自然乾燥し、細切し、５０％エタノール水溶液に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して、抽出液として得た。
【００１４】
実施例１
〔ＰＣＡ（受身皮膚アナフィラキシィー）反応抑制試験−イン・ビボにおけるサクラダソウ抽出物の抗アレルギー作用に関する実験〕
１．目的
ラットにおいて誘発させたＰＣＡ反応を用いて、サクラダソウ５０％エタノール抽出液のＰＣＡ反応に対する抑制効果を検討した。
２．動物
１群５匹ウィスター系ラット雄の６週齢を日本エスエルシー（株）より購入し、２週間の馴化飼育の後試験に使用した。群としては検体投与群（３濃度）、対照として生理食塩水投与群及び無処理群の５群を設定した。
【００１５】
３．試薬の調整
（１）抗オバルブミンラット血清
本ＰＣＡ反応誘発試験に用いる抗オバルブミン血清は以下のようにして作製した。
ｉ．使用動物
５０匹のウィスター系ラット雄の８週齢を日本エスエルシー（株）より購入後すぐに使用した。
ｉｉ．試薬
抗血清作製のためにオバルブミン（シグマ社製）を抗原として用い、０．８５％生理食塩水に４ｍｇ／ｍｌオバルブミンを含む液とフロイント完全アジュバント（シグマ社製）とを１：１の割合で混合乳化したものを抗原液として用いた。ｉｉｉ．抗原の投与
ラットの四肢foot-pad皮下に抗原液を０．２５ｍｌずつ注射した。さらにこの投与から７日後、２８日後に左右大腿筋内に０．２５ｍｌずつ筋肉注射した。
ｉｖ．採血
抗原液を投与した最終日から１週間後、腹部大静脈より採決した。
ｖ．抗血清の分離
採取した血液は室温で３０〜６０分間放置し、２０００×ｇで１０〜１５分間遠沈させ、血清である上清部分を採取した。５６℃、３０分間加温し、これを抗ラットオバルブミン血清とした。
ラット１２週齢５０匹より抗血清が約１８０ｍｌ得られた。これを１．５ｍｌのエッペンチューブに１ｍｌずつ分注し、−２０℃にて凍結保存した。
解凍後、生理食塩水で２０倍に希釈した。
【００１６】
（抗体価の測定）
作製した抗ラットオバルブミン血清中の抗体価を測定し、ＰＣＡ反応に最適な抗血清の希釈倍率を以下のようにして決定した。又、ＰＣＡ反応が抗体や抗原単独の反応でないこと及びオバルブミン以外の抗原では反応が起きないことの確認を以下のようにして行った。
【００１７】
使用動物は、ウィスター系ラット雄（５週齢）を６匹を日本エスエルシー（株）より購入し１週間馴化飼育の後、実験に使用した。
試薬として、抗血清は前記の如く作製したものを、血管透過性の指標として色素である０．５％エバンスブルー（Ｅｖａｎｓ  Ｂｌｕｅ）（シグマ社製）含有生理食塩水を、反応惹起には抗原であるオバルブミンを使用した。
【００１８】
馴化飼育後、ラットの背部を剃毛し、翌日正中線から左右１．５ｃｍの部位で上下２ｃｍ以上離して６ヵ所に抗血清を１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８に生理食塩水にて希釈したものを０．０５ｍｌ皮内投与した。
抗血清を皮内投与してから２４時間後に２ｍｇ／ｍｌオバルブミンを含む０．５％エバンスブルー含有生理食塩水を２．５ｍｌ／ｋｇ尾静脈注射した。
抗原を投与してから３０分後に屠殺し、ノギスにて抗血清を投与した部位に発色した色素の直径（長径と短径）を測定した。
発色した色素の長径と短径の平均値が５ｍｍ以上得られた最高希釈倍率を抗体価とした。
直径約１０ｍｍの色素発色が得られた希釈倍率を最適な抗血清の希釈倍率とした。
【００１９】
ＰＣＡ反応が得られた抗体価は１：３２であった。これ以上の希釈では色素斑は出現しなかった。
従って本ＰＣＡ試験には得られた抗血清を１：２０に希釈して使用することとした。
【００２０】
（２）０．５％エバンスブルー
０．５ｗ／ｖ％となるようにエバンスブルー（シグマ社製）を生理食塩水に溶解し、ろ過した。
（３）２ｍｇ／ｍｌオバルブミン
２ｍｇ／ｍｌになるようにオバルブミンを０．５％エバンスブルーに溶解した。
【００２１】
４．検体の調製
サクラダソウ５０％エタノール抽出物を生理食塩水に０．１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇとなるように溶解し、検体とした。対照は生理食塩水を用いた。
【００２２】
５．抗オバルブミンラット血清の投与
ラットの背部をバリカン及びシェーバで剃毛した。翌日背部正中線から左右１．５ｃｍの所に抗オバルブミンラット血清を０．０５ｍｌ皮内投与した。
【００２３】
６．検体の投与
反応惹起３０分前に、各検体及び対照をラットの体重１００ｇ当たり０．１ｍｌを尾静脈より投与した。
【００２４】
７．反応の惹起
抗オバルブミンラット血清を投与してから２４時間後、０．５％エバンスブルーに溶解した２ｍｇ／ｍｌオバルブミンをラットの体重１００ｇが当り０．２５ｍｌを尾静脈より投与した。
【００２５】
８．色素の抽出
反応惹起３０分後にギロチンで断頭し、水中で脱血後背部皮膚を摘出し、ラップ上に皮膚を広げ、−８０℃で凍結した。凍結後φ１．８ｃｍパンチで抗血清投与部位を打ち抜いた。打ち抜いた皮膚を細片にし、共栓付試験管に入れ、０．３５ｍｌの２Ｎ−ＫＯＨを加え、３７℃で一晩放置して溶解させた。これにアセトン（関東化学(株)製）：１．２Ｎリン酸（和光純薬工業（株）製）（１３：５）混合液４．６５ｍｌを加えて振とうし、色素を抽出した。
【００２６】
９．色素の測定
各色素抽出液をフィルターろ過し、吸光度（６２０ｎｍ）をＤＵ−７０スペクトロフォトメーター（ベックマン社）を用いて測定した。
結果を図１に示す。
【００２７】
図１から明らかなように、サクラダソウ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群（対照）の吸光度は約０．０８２であったが、サクラダソウ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０５に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０４５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、サクラダソウ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００２８】
調製例２
（アジサイ抽出物の調製）
アジサイの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、アジサイ５０％エタノール抽出物を得た。
【００２９】
実施例２
（アジサイ抽出物の抗アレルギー効果）
アジサイ５０％エタノール抽出物を用いて、検体中のアジサイ抽出物濃度を１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇとした以外は実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図２に示す。
【００３０】
図２から明らかなように、アジサイ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０９であったが、アジサイ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０５７に、５ｍｇ／ｋｇ投与群及び１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、アジサイ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００３１】
調製例３
（ローズマリー抽出物の調製）
ローズマリーの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ローズマリー５０％エタノール抽出物を得た。
【００３２】
実施例３
（ローズマリー抽出物の抗アレルギー効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図３に示す。
【００３３】
図３から明らかなように、ローズマリー抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８２、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７５であったが、ローズマリー抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０６５に、５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０４に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ローズマリー抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００３４】
調製例４
（カルノソールの調製）
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出物をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１）に通し、ベンゼンで再結晶を行い、得られた無色粉末を更にメタノールで再結晶し、無色針状晶カルノソールを得た。
【００３５】
実施例４
（カルノソールの抗アレルギー効果）
カルノソールを用いて、実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図４に示す。
【００３６】
図４から明らかなように、カルノソール無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８４であったが、カルノソール抽出物濃度０．１ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０７２に、１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０４５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、カルノソールは抗アレルギー効果を有していた。
【００３７】
調製例５
（カルノシン酸の調製）
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出液をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１））に通し、ベンゼンで再結晶を行うと、無色粉末が析出した。
析出した無色粉末を除いた残りのベンゼン溶液をポリアミド処理後、微量のベンゼンに溶解し、ヘキサンを加えて再結晶を行い、無色針状晶のカルノシン酸を得た。
【００３８】
実施例５
（カルノシン酸の抗アレルギー効果）
カルノシン酸を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図５に示す。
【００３９】
図５から明らかなように、カルノシン酸無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７５であったが、カルノシン酸濃度１ｍｇ／ｋｇ及び５ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０４に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０３４に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、カルノシン酸は抗アレルギー効果を有していた。
【００４０】
調製例６
（ノバラ抽出物の調製）
ノバラの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ノバラ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４１】
実施例６
（ノバラ抽出物の抗アレルギー効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図６に示す。
【００４２】
図６から明らかなように、ノバラ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７５であったが、ノバラ抽出物濃度５ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０５９に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ノバラ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００４３】
調製例７
（リョクチャ抽出物の調製）
リョクチャの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、リョクチャ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４４】
実施例７
（リョクチャ抽出物の抗アレルギー効果）
リョクチャ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図７に示す。
【００４５】
図７から明らかなように、リョクチャ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７４であったが、リョクチャ抽出物濃度５ｍｇ／ｋｇ投与群で吸光度は約０．０６３に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、リョクチャ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００４６】
調製例８
（ヨクイニン抽出物の調製）
ヨクイニンの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ヨクイニン５０％エタノール抽出物を得た。
【００４７】
実施例８
（ヨクイニン抽出物の抗アレルギー効果）
ヨクイニン５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図８に示す。
【００４８】
図８から明らかなように、ヨクイニン抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７７、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８８であったが、ヨクイニン抽出物濃度１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７に低下しており、この投与群の色素量は低下した。即ち、ヨクイニン抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００４９】
調製例９
（サルスベリ抽出物の調製）
サルスベリの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、サルスベリ５０％エタノール抽出物を得た。
【００５０】
実施例９
（サルスベリ抽出物の抗アレルギー効果）
サルスベリ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図９に示す。
【００５１】
図９から明らかなように、サルスベリ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７５であったが、サルスベリ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５７に、５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０３７に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０３４に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、サルスベリ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００５２】
調製例１０
（ユキヤナギ抽出物の調製）
ユキヤナギの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を得た。
【００５３】
実施例１０
（ユキヤナギ抽出物の抗アレルギー効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１０に示す。
【００５４】
図１０から明らかなように、ユキヤナギ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７５であったが、ユキヤナギ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６８に、５ｍｇ／ｋｇ投与群、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ユキヤナギ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００５５】
調製例１１
（ニセアカシア抽出物の調製）
ニセアカシアの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ニセアカシア５０％エタノール抽出物を得た。
【００５６】
実施例１１
（ニセアカシア抽出物の抗アレルギー効果）
ニセアカシア５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１１に示す。
【００５７】
図１１から明らかなように、ニセアカシア抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０６、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７であったが、ニセアカシア抽出物濃度０．１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５に、１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０３７に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群では約０．０３９に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ニセアカシア抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００５８】
調製例１２
（エイジツ抽出物の調製）
エイジツの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、エイジツ５０％エタノール抽出物を得た。
【００５９】
実施例１２
（エイジツ抽出物の抗アレルギー効果）
エイジツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１２に示す。
【００６０】
図１２から明らかなように、エイジツ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７７、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８４であったが、エイジツ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群、５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７３に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群では約０．０６５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、エイジツ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００６１】
調製例１３
（タイム抽出物の調製）
タイムの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、タイム５０％エタノール抽出物を得た。
【００６２】
実施例１３
（タイム抽出物の抗アレルギー効果）
タイム５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１３に示す。
【００６３】
図１３から明らかなように、タイム抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０９であったが、タイム抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７５に、５ｍｇ／ｋｇ投与群で０．０６８に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群では約０．０５２に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、タイム抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００６４】
調製例１４
（マーシュ抽出物の調製）
マーシュの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、マーシュ５０％エタノール抽出物を得た。
【００６５】
実施例１４
（マーシュ抽出物の抗アレルギー効果）
マーシュ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１４に示す。
【００６６】
図１４から明らかなように、マーシュ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０７５、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０７であったが、マーシュ抽出物濃度０．１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６８に、１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６２に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群では約０．０４５に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、マーシュ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００６７】
調製例１５
（イチゴ抽出物の調製）
イチゴの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、イチゴ５０％エタノール抽出物を得た。
【００６８】
実施例１５
（イチゴ抽出物の抗アレルギー効果）
イチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１５に示す。
【００６９】
図１５から明らかなように、イチゴ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８２であったが、イチゴ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７６に、５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群では約０．０６６に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、イチゴ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００７０】
調製例１６
（トウガン抽出物の調製）
トウガンの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、トウガン５０％エタノール抽出物を得た。
【００７１】
実施例１６
（トウガン抽出物の抗アレルギー効果）
トウガン５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１６に示す。
【００７２】
図１６から明らかなように、トウガン抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８４であったが、トウガン抽出物濃度５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７５に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７２に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、トウガン抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００７３】
調製例１７
（ソテツ抽出物の調製）
ソテツの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ソテツ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７４】
実施例１７
（ソテツ抽出物の抗アレルギー効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１７に示す。
【００７５】
図１７から明らかなように、ソテツ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８８であったが、ソテツ抽出物濃度０．１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５に、１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０３５に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０４３に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ソテツ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００７６】
調製例１８
（ハギ抽出物の調製）
ハギの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、ハギ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７７】
実施例１８
（ハギ抽出物の抗アレルギー効果）
ハギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１８に示す。
【００７８】
図１８から明らかなように、ハギ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０８２、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８４であったが、ハギ抽出物濃度１ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０８８に、５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０７５に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０５７に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、ハギ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００７９】
調製例１９
（クズ抽出物の調製）
クズの茎葉部を使用して、調製例１と同様にして、クズ５０％エタノール抽出物を得た。
【００８０】
実施例１９
（クズ抽出物の抗アレルギー効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例２と同様にしてＰＣＡ反応抑制試験を行った。結果を図１９に示す。
【００８１】
図１９から明らかなように、クズ抽出物無投与群の６２０ｎｍにおける吸光度は約０．０９、生理食塩水投与群の吸光度は約０．０８４であったが、クズ抽出物濃度５ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６３に、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で約０．０６８に低下しており、これらの投与群の色素量は低下した。即ち、クズ抽出物は抗アレルギー効果を有していた。
【００８２】
実施例１〜１９の結果から、サクラダソウ抽出物、アジサイ抽出物、ローズマリー抽出物、カルノソール、カルノシン酸、ノバラ抽出物、リョクチャ抽出物、ヨクイニン抽出物、サルスベリ抽出物、ユキヤナギ抽出物、ニセアカシア抽出物、エイジツ抽出物、タイム抽出物、マーシュ抽出物、イチゴ抽出物、トウガン抽出物、ソテツ抽出物、ハギ抽出物及びクズ抽出物は、ＰＣＡ反応に対して有意な効果が認められ、即時型アレルギー反応に対して抑制効果があることが認められた。
【００８３】
実施例２０
（細胞毒性試験）
（１）サクラダソウ抽出物の調製
サクラダソウは、茎葉培養系により大量増殖させて得た。得られたサクラダソウを自然乾燥し、茎葉部、果実部及び毛状根部に分け、それぞれ細切し、５０％エタノール水溶液あるいは水に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して、抽出物として得た。
【００８４】
（２）サクラダソウ抽出物の分画
得られた茎葉部の５０％エタノール抽出物を、エバポレーターにより糊状になるまで濃縮した。この濃縮エキスに水及びヘキサンを同量ずつ加え、分液ロートで分配した。
水層は遠心分離により沈殿と上清とに分け、沈殿物は濃縮乾固後５０％エタノールに溶解又は分散させ、５０％エタノールを溜去後、凍結乾燥した。ヘキサン層はヘキサンを溜去後、５０％エタノールに溶解、エタノール溜去後、凍結乾燥した。
【００８５】
（３）細胞毒性試験
サクラダソウ抽出液の細胞生育への影響を検討するため、アラマーブルー（Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ）Ａｓｓａｙを行った。すなわち培養上清を除去後、１０％アラマーブルーを含む１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）２００μｌを加え、２時間インキュベーションした。上清の５５０ｎｍ及び６３０ｎｍにおける吸光度を測定した。数値は、サクラダソウ抽出液無添加群の吸光度を１００％として示した。
結果を図２０に示す。
なお図２０中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出液、Ｂは茎葉部の水抽出液、Ｃは果実部の５０％エタノール抽出液、Ｄは果実部の水抽出液、Ｅは毛状根部のエタノール抽出液及びＦは毛状根部の水抽出液に関する結果を示す。
【００８６】
図２０から明らかなように、サクラダソウの茎葉部、果実部及び毛状根部の各抽出液も、１〜１００μｇ／ｍｌにおいて細胞毒性及び細胞増殖作用は確認されなかった。
【００８７】
実施例２１
スクワレン、セチルイソオクタノエート及びマイクロクリスタリンワックスを加熱溶解後、粘土鉱物、ＰＯＥグリセロールトリイソステアリン酸エステル（界面活性剤）を加え、７０℃に調整し、均一に分散・溶解して油性ゲルを得た。
次に、所定濃度のサクラダソウ抽出液を精製水に溶解し、７０℃に調整し、油性ゲルの中へ十分に攪拌しながらゆっくりと添加した。
ホモミキサーで均一に混合した後、脱気、ろ過後、３０℃まで冷却し、クリームを得た。各成分の配合比は以下の通りである。
【００８８】
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
サクラダソウ抽出液                          ０．０１
水                                        残量
【００８９】
実施例２２
アジサイ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
アジサイ抽出液                              ０．１
水                                        残量
【００９０】
実施例２３
リョクチャ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
リョクチャ抽出液                            ０．１
水                                        残量
【００９１】
実施例２４
ヨクイニン抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
ヨクイニン抽出液                            ０．１
水                                        残量
【００９２】
実施例２５
サルスベリ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
サルスベリ抽出液                            ０．１
水                                        残量
【００９３】
実施例２６
ニセアカシア抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
ニセアカシア抽出液                          ０．１
水                                        残量
【００９４】
実施例２７
エイジツ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
エイジツ抽出液                              ０．１
水                                        残量
【００９５】
実施例２８
タイム抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
タイム抽出液                                ０．１
水                                        残量
【００９６】
実施例２９
マーシュ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
マーシュ抽出液                              ０．１
水                                        残量
【００９７】
実施例３０
トウガン抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
トウガン抽出液                              ０．１
水                                        残量
【００９８】
実施例３１
ハギ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成                                  配合比（重量％）
スクワレン                                ２０
セチルイソオクタノエート                    ８．５
マイクロクリスタリンワックス                １
粘土鉱物                                    １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル                ０．２
ハギ抽出液                                  ０．１
水                                        残量
【００９９】
【発明の効果】
本発明によれば、抗アレルギー作用をもつと同時に安全な抗アレルギー剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】サクラダソウ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図２】アジサイ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図３】ローズマリー抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図４】カルノソールの抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図５】カルノシン酸の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図６】ノバラ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図７】リョクチャ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図８】ヨクイニン抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図９】サルスベリ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１０】ユキヤナギ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１１】ニセアカシア抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１２】エイジツ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１３】タイム抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１４】マーシュ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１５】イチゴ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１６】トウガン抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１７】ソテツ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１８】ハギ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図１９】クズ抽出物の抗アレルギー効果を示すグラフ。
【図２０】サクラダソウ抽出物のヒト表皮細胞生育へ及ぼす影響を示すグラフ。
【図１】
0004312992.tif 000002
【図２】
0004312992.tif 000003
【図３】
0004312992.tif 000004
【図４】
0004312992.tif 000005
【図５】
0004312992.tif 000006
【図６】
0004312992.tif 000007
【図７】
0004312992.tif 000008
【図８】
0004312992.tif 000009
【図９】
0004312992.tif 000010
【図１０】
0004312992.tif 000011
【図１１】
0004312992.tif 000012
【図１２】
0004312992.tif 000013
【図１３】
0004312992.tif 000014
【図１４】
0004312992.tif 000015
【図１５】
0004312992.tif 000016
【図１６】
0004312992.tif 000017
【図１７】
0004312992.tif 000018
【図１８】
0004312992.tif 000019
【図１９】
0004312992.tif 000020
【図２０】
0004312992.tif 000021