(57)【要約】本発明は、脂肪酸ナイアシン複合体；有効量の脂肪酸ナイアシン複合体を含む医薬組成物；及び有効量の脂肪酸ナイアシン複合体を投与することを含む、代謝疾患を治療または予防する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2016537353.tif 000046
を有する化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項２】
式：
【化２】
2016537353.tif 000047
を有する化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物と、薬学的に許容できる担体とを含む医薬組成物。
【請求項４】
請求項２に記載の化合物と、薬学的に許容できる担体とを含む医薬組成物。
【請求項５】
代謝疾患を治療または予防する方法であって、有効量の請求項１に記載の化合物を、それを必要とする患者に投与して、前記疾患を治療または予防することを含む方法。
【請求項６】
代謝疾患を治療または予防する方法であって、有効量の請求項２に記載の化合物を、それを必要とする患者に投与して、前記疾患を治療または予防することを含む方法。
【請求項７】
前記代謝疾患が、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記代謝疾患が、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記代謝疾患が、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である請求項５または６に記載の方法。
【請求項１０】
前記代謝疾患が高トリグリセリド血症である請求項５または６に記載の方法。
【請求項１１】
前記代謝疾患が高コレステロール血症である請求項５または６に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者がスタチンを用いて治療される請求項５〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記患者がＭＴＰ阻害剤を用いて治療される請求項５〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者がニーマン・ピックタンパク質阻害剤を用いて治療される請求項５〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ニーマン・ピックタンパク質阻害剤がエゼチミミド（ｅｚｅｔｉｍｉｍｉｄｅ）である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
高脂血症及び／または高コレステロール血症に伴う障害を患う対象の治療方法であって、前記方法が、それを必要とする前記対象にＳＲＥＢＰ阻害剤を投与し、前記対象の肝臓組織に有効量の前記ＳＲＥＢＰ阻害剤を与えて前記障害を寛解させることを含み、前記ＳＲＥＢＰ阻害剤が、以下の化合物：
【化３】
2016537353.tif 000048
のうちの１つ、またはその薬学的に許容できる塩である方法。
【請求項１７】
肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分として、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を含む医薬組成物であって、前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、以下の化合物：
【化４】
2016537353.tif 000049
のうちの１つ、またはその薬学的に許容できる塩である医薬組成物。
【請求項１８】
前記成分が肝臓組織に蓄積する請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記成分が耐加水分解性を有する請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記成分が肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
腸組織に蓄積する量よりも多い量の前記成分が肝臓組織に蓄積する請求項１７、１８、または２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記耐加水分解性が、腸での耐加水分解性である請求項１７、１９、または２０に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記成分が、等モル量の下記化合物：
【化５】
2016537353.tif 000050
の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する前記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する請求項１７〜２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化６】
2016537353.tif 000051
またはその薬学的に許容できる塩である請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化７】
2016537353.tif 000052
である請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化８】
2016537353.tif 000053
またはその薬学的に許容できる塩である請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化９】
2016537353.tif 000054
である請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記医薬組成物が代謝疾患治療用である請求項１７〜２７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記代謝疾患が、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記代謝疾患が、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記代謝疾患が高トリグリセリド血症である請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を、肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分とする、代謝疾患治療用医薬組成物の製造における前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の使用であって、前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、以下：
【化１０】
2016537353.tif 000055
のうちの１つか、またはその薬学的に許容できる塩である使用。
【請求項３３】
前記成分が肝臓組織に蓄積する請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
前記成分が耐加水分解性を有する請求項３２に記載の使用。
【請求項３５】
前記成分が肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する請求項３２に記載の使用。
【請求項３６】
腸組織に蓄積する量よりも多い量の前記成分が肝臓組織に蓄積する請求項３２、３３、または３５に記載の使用。
【請求項３７】
前記耐加水分解性が、腸での耐加水分解性である請求項３２、３４、または３５に記載の使用。
【請求項３８】
前記成分が、等モル量の下記化合物：
【化１１】
2016537353.tif 000056
の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する前記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する請求項３２〜３７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３９】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化１２】
2016537353.tif 000057
またはその薬学的に許容できる塩である請求項３２〜３８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４０】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化１３】
2016537353.tif 000058
である請求項３２〜３８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４１】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化１４】
2016537353.tif 000059
またはその薬学的に許容できる塩である請求項３２〜３８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４２】
前記Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体が、
【化１５】
2016537353.tif 000060
である請求項３２〜３８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４３】
前記代謝疾患が、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である請求項３２〜４２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４４】
前記代謝疾患が、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である請求項３２〜４２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４５】
前記代謝疾患が高トリグリセリド血症である請求項３２〜４２のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１３年１１月１５日に出願した米国仮特許出願第６１／９０４，９２９号に対する優先権の利益を主張する。該出願の内容は、参照により援用される。
【０００２】
本発明は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体と、他の組織と比較して肝臓に優先的に蓄積し、且つ前駆タンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）の発現及び／または産生を肝臓組織において優先的に阻害するＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の能力とに関する。本発明は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を投与することを含む、代謝疾患の治療方法または予防方法も提供する。
【背景技術】
【０００３】
最近の研究により、前駆タンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）は、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を低下させるための魅力的な治療標的であることが示されている。バリデーションに関しては、ヒトにおける機能獲得ＰＣＳＫ９変異体または機能欠失ＰＣＳＫ９変異体は、それぞれ高コレステロール血症または低コレステロール血症をもたらすことが示されている。例えば、ＰＣＳＫ９遺伝子における機能獲得変異は、３００ｍｇ/ｄＬ超の高い血清中ＬＤＬ−Ｃ濃度と早発性心臓血管疾患とに関係する（Ａｂｉｆａｄｅｌら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｔ．  ２００３，３４，ｐ．１５４−１５６）。一方、ＰＣＳＫ９遺伝子における機能欠失変異は、１００ｍｇ/ｄＬ以下の低い血清中ＬＤＬ−Ｃ濃度と、心臓血管疾患の減少とに関係する（Ｃｏｈｅｎら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｔ．２００５，３７，ｐ．１６１−１６５）。
【０００４】
ＰＣＳＫ９はセリンプロテアーゼであり、主に肝臓及び腸で作られ、シグナルペプチドと、プロドメインと、触媒ドメインと、ヒスチジンリッチＣ末端ドメインとからなる（Ｐｉｐｅｒら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２００７，１５，ｐ．５４５−５５２）。ＰＣＳＫ９は、肝細胞ＬＤＬ受容体に結合して、エンドサイトーシス後にその受容体が細胞表面に再生することを防ぐことにより、ＬＤＬ−Ｃに影響を及ぼし得ることがデータによって示されている。この経緯により、ＬＤＬ受容体濃度が減少し、ＬＤＬ−Ｃの細胞取込みが減り、血液中のＬＤＬ−Ｃ濃度は高くなる（Ｈｏｒｔｏｎら、Ｊ．Ｌｉｐ．Ｒｅｓ．  ２００９，５０（Ｓｕｐｐｌ．），ｐ．Ｓ１７２−Ｓ１７７）。
【０００５】
ＰＣＳＫ９に対する中和抗体は、マウス及び非ヒト霊長類において、血清ＬＤＬ−Ｃを有意に減少させることが示されている（Ｃｈａｎら、ＰＮＡＳ  ２００９，１０６，ｐ．９８２０−９８２５；Ｌｉａｎｇら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ２０１２，３４０，ｐ．２２８−２３６）。ＲＥＧＮ７２７、ＡＭＧ１４５、ＲＮ３１６、及びＬＧＴ２０９は、高コレステロール血症に対するヒト臨床試験において現在調べられている代表的なモノクローナル抗体である。
【０００６】
低密度リポタンパク質コレステロールは、多数の心血管障害に関係する。さらに、心血管障害の治療において進歩が遂げられているにもかかわらず、大部分の人々が心血管障害を患い続けている。したがって、心血管障害及び関連症状を治療する新しい治療法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体と、そのような複合体を含有する医薬組成物と、そのような複合体及び医薬組成物を使用して医学的障害を治療する方法とを提供する。例示的なＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体としては、以下の化合物及びその薬学的に許容できる塩が挙げられる。
【化１】
2016537353.tif 000002
上記の化合物は、薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物の一部であってもよい。
【０００８】
これらのＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の驚くべき一利点は、他の組織と比較して肝臓に優先的に蓄積する能力と、前駆タンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）の発現及び／または産生を肝臓組織において優先的に阻害する能力である。コレステロール等の脂質は、血漿から肝臓によってより効率的に除去されるため、Ｉ−１５及びＩ−２４等の化合物は、肝臓に優先的に蓄積してＰＣＳＫ９の活性を遮断することにより、二級アミドで結合した他の脂肪酸複合体よりも血漿中コレステロールの低下に効果的である。したがって、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、肝臓においてＰＣＳＫ９を阻害すること、及び血漿中コレステロールを低下させることにおいてより効果的であり、様々な疾患を治療することにおいて優れた利点を提供する。
【０００９】
したがって、本発明は代謝疾患を治療または予防する方法を提供する。この方法は、式Ｉ−１５、Ｉ−２４、またはその薬学的に許容できる塩等の本明細書において記載されるＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の有効量を、それを必要とする患者に投与して、上記の疾患を治療または予防することを含む。治療及び／または予防が企図される例示的な代謝疾患としては、例えばアテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、及びミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の化合物の化学構造、及び実施例において比較用化合物として使用される化合物の化学構造を示す。
【図２】本発明の化合物のナイアシンリンカー付随代謝産物の門脈ＡＵＣ最後に対する親化合物の門脈ＡＵＣ最後の比の比較である。左側の軸はナイアシンリンカーに対する親化合物の比であり、右側の軸は、本発明の各化合物の親化合物及びナイアシンリンカーの門脈ＡＵＣ最後の絶対値（時間×ｎｇ／ｍｌ）である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体、そのような複合体を含有する医薬組成物、及びそのような複合体及び医薬組成物を使用して医学的障害を治療する方法を提供する。本明細書において記載されるＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の驚くべき一利点は、他の組織と比較して肝臓に優先的に蓄積する能力と、前駆タンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）の発現及び／または産生を肝臓組織において優先的に阻害する能力である。コレステロール等の脂質は、血漿から肝臓によってより効率的に除去されるため、Ｉ−１５及びＩ−２４等の本明細書において記載される化合物は、肝臓に優先的に蓄積してＰＣＳＫ９の活性を遮断することにより、二級アミドで結合した他の脂肪酸複合体よりも血漿中コレステロールの低下に効果的である。したがって、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、肝臓においてＰＣＳＫ９を阻害すること、及び血漿中コレステロールを低下させることにおいてより効果的であり、代謝疾患等の様々な疾患を治療することにおいて優れた利点を提供する。
【００１２】
別段の定めがない限り、本発明の実施では、有機化学、薬理学、細胞生物学、及び生化学の従来技術を使用する。このような技術は、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｂ．Ｍ．Ｔｒｏｓｔ及びＩ．Ｆｌｅｍｉｎｇ編、１９９１−１９９２）；「Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ」（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７、及び定期更新）；ならびに「Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１）等の文献において説明されており、当該文献はそれぞれ参照によりその全体が本明細書に援用される。本発明の様々な態様は、以下で節に分けて記載されているが、特定の１節において記載されている本発明の態様は、いずれの特定の節にも限定されるべきものではない。
【００１３】
Ｉ．定義
以下の定義は脂肪酸ナイアシン複合体に関して使用される。
【００１４】
「脂肪酸ナイアシン複合体」という用語は、本明細書において記載される脂肪酸誘導体の、あらゆる可能な異性体、立体異性体、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、薬学的に許容できる塩、水和物、溶媒和物、及びプロドラッグを包含する。
【００１５】
本開示においては、冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、１つまたは１つよりも多い（すなわち少なくとも１つの）、冠詞の文法上の目的語を指すよう使用される。例として、「要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素または１つよりも多い要素を意味する。
【００１６】
別段の定めがない限り、本開示においては、「及び／または」という用語は、「及び」または「または」のいずれかを意味するよう使用される。
【００１７】
「約」という用語は、本開示において値の記載とともに使用される場合、記載される値を意味し、且つその値の＋１０％または−１０％の範囲を含む。例えば、約８０％という句は、８０％と、８０の＋１０％または−１０％とを意味し、すなわち７２％〜８８％を意味する。本明細書において使用される場合、「約０％」と記載される値は、検出可能量が千分の１部未満であることを意味する。
【００１８】
本明細書において使用される場合、「脂肪酸」という用語は、オメガ３脂肪酸と、生体内でオメガ３脂肪酸に代謝される脂肪酸とを意味する。脂肪酸の非限定的な例は、ａｌｌ‐ｃｉｓ‐７，１０，１３‐ヘキサデカトリエン酸、α‐リノレン酸（ＡＬＡもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐９，１２，１５‐オクタデカトリエン酸）、ステアリドン酸（ＳＴＤもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐６，９，１２，１５‐オクタデカテトラエン酸）、エイコサトリエン酸（ＥＴＥもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐１１，１４，１７‐エイコサトリエン酸）、エイコサテトラエン酸（ＥＴＡもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐８，１１，１４，１７‐エイコサテトラエン酸）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐５，８，１１，１４，１７‐エイコサペンタエン酸）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ、クルパノドン酸もしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐７，１０，１３，１６，１９‐ドコサペンタエン酸）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡもしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐４，７，１０，１３，１６，１９‐ドコサヘキサエン酸）、テトラコサペンタエン酸（ａｌｌ‐ｃｉｓ‐９，１２，１５，１８，２１‐ドコサヘキサエン酸）、またはテトラコサヘキサエン酸（ニシン酸もしくはａｌｌ‐ｃｉｓ‐６，９，１２，１５，１８，２１‐テトラコセン酸）である。
【００１９】
本明細書において使用される場合、「ナイアシン」という用語は、ナイアシンとして知られる分子、及びその任意の誘導体を意味する。
【００２０】
本明細書において使用される場合、「生物活性の」という用語は、生物学的活性を有する、フェニルもしくはナフチルを含めたアリール、ヘテロアリール、または複素環誘導体を意味する。
【００２１】
「対象」は、例えばヒト、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、または非ヒト霊長類等の哺乳動物であり、非ヒト霊長類は、例えばサル、チンパンジー、ヒヒまたはアカゲザル等である。「対象」及び「患者」という用語は、本明細書においては互換で使用される。ある特定の実施形態においては、対象はヒトである。
【００２２】
本発明は、有効量の、上記の式Ｉ−１５またはＩ−２４の脂肪酸誘導体、及び薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物も含む。本発明は、薬学的に許容できるプロドラッグ、水和物、薬学的に許容できる塩等の塩、エナンチオマー、立体異性体、またはそれらの混合物として提供される脂肪酸ナイアシン誘導体を含む。
【００２３】
代表的な「薬学的に許容できる塩」としては、例えば水溶性塩及び非水溶性塩が挙げられ、酢酸塩、アムソン酸塩（４，４‐ジアミノスチルベン‐２，２‐ジスルホン酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物塩、酪酸塩、カルシウム塩、エデト酸カルシウム塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩、クエン酸塩、クラブラリン酸塩（ｃｌａｖｕｌａｒｉａｔｅ）、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストール酸塩、エシル酸塩、フィウナル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物塩、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、マグネシウム塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル塩、硝酸メチル塩、硫酸メチル塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ‐メチルグルカミンアンモニウム塩、３‐ヒドロキシ‐２‐ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（１，１‐メテン‐ビス‐２‐ヒドロキシ‐３‐ナフトエ酸塩、エインボン酸塩（ｅｉｎｂｏｎａｔｅ））、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロ酸塩、プロピオン酸塩、ｐ‐トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、スラメート塩（ｓｕｒａｍａｔｅ）、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド塩、及び吉草酸塩等が挙げられる。
【００２４】
本明細書において使用される場合、「代謝疾患」という用語は、高脂血症を伴う障害、疾患及び症候群を指し、代謝障害、代謝疾患及びメタボリックシンドロームという用語は、本明細書において互換で使用される。
【００２５】
「有効量」とは、脂肪酸誘導体に関連して使用される場合、代謝疾患の治療または予防に有効な量である。
【００２６】
本開示において使用される場合、「担体」という用語は、担体、賦形剤、及び希釈剤を包含する。また、「担体」という用語は、一器官または体の一部分から、別の器官または体の他の一部分へと医薬品を輸送または運搬することに関与する、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶剤、またはカプセル化材料といった、材料、組成物または媒体を意味する。
【００２７】
対象に関して「治療すること」という用語は、対象の障害の少なくとも１つの症状を改善することを指す。治療することは、障害を治すこと、改善すること、または少なくとも部分的に寛解させることであり得る。
【００２８】
別段の定めがない限り、本開示においては、「障害」という用語は疾患、症状、または病気を意味するよう使用され、疾患、症状、または病気という用語と互換で使用される。
【００２９】
本開示において使用される場合、「投与する」、「投与すること」、または「投与」という用語は、化合物もしくはその化合物の薬学的に許容できる塩もしくは組成物を対象に直接的に投与すること、または化合物もしくはその化合物の薬学的に許容できる塩もしくは組成物のプロドラッグ誘導体もしくは類似体を被験者に投与することのいずれかを指し、プロドラッグ誘導体または類似体は、対象の体内で等量の活性化合物を形成し得る。
【００３０】
本開示において使用される場合、「プロドラッグ」という用語は、代謝手段（例えば、加水分解等）によって生体内で脂肪酸ナイアシン複合体へ変換可能な化合物を意味する。
【００３１】
本明細書を通し、組成物が特定の要素を有するか、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）か、もしくは含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）として記載される場合、またはプロセス及び方法が特定の工程を有するか、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）か、もしくは含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）として記載される場合、本質的に記載される要素からなるか、または記載される要素からなる本発明の組成物がさらに存在すること、ならびに本質的に記載される処理工程からなるか、または記載される処理工程からなる本発明のプロセス及び方法がさらに存在することが企図される。
【００３２】
ＩＩ．例示的な脂肪酸ナイアシン複合体
本発明の脂肪酸ナイアシン複合体は、血漿中で安定であるよう設計されている。しかしながら、細胞内に運ばれると、細胞内酵素が脂肪酸ナイアシン複合体を個々の成分（すなわち、ナイアシンとオメガ３脂肪酸）に加水分解して脂質経路に相乗効果を生じさせ、この相乗効果は、個々の成分または個々の成分の組合せの単純な投与では再現されない。脂肪酸ナイアシン複合体が相乗的に作用することができる特定の一経路はＰＣＳＫ９系である。ＰＣＳＫ９系は、主に肝臓及び腸において発現し、ＬＤＬ受容体への結合を部分的に担ってＬＤＬ受容体の分解を引き起こし、このようにして血漿中コレステロール濃度に影響を及ぼす。
【００３３】
本発明の一態様は、化学名Ｎ‐（２‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐Ｎ‐メチルイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド）エチル）ニコチンアミド（Ｉ‐１５）を有する以下の化合物：
【化２】
2016537353.tif 000003
及び、化学名Ｎ‐（（Ｓ）‐１‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエノイル）ピロリジン‐３‐イル）ニコチンアミド（Ｉ‐２４）を有する以下の化合物：
【化３】
2016537353.tif 000004
を提供する。本発明は、上記化合物の薬学的に許容できる塩も包含する。
【００３４】
これらの本発明の脂肪酸ナイアシン複合体は、血漿中で安定であるが、標的組織において個々の成分に加水分解される。生体内に投与される場合、化合物Ｉ−１５は、以下の代謝産物と共に、血漿及び組織中に存在することがわかる。
【化４】
2016537353.tif 000005
【００３５】
同様に、生体内に投与される場合、化合物Ｉ−２４は、以下の代謝産物と共に血漿及び組織中に存在することがわかる。
【化５】
2016537353.tif 000006
【００３６】
対応するナイアシン−リンカー代謝産物は、脂肪酸部分とリンカーの一端の間のアミド結合が細胞内酵素によって加水分解された場合に生成することがわかる。対応するリンカー−ＥＰＡ代謝産物は、ナイアシン部分とリンカーの一端の間のアミド結合が細胞内酵素の作用によって加水分解された場合に生成すると考えられる。その結果として、この加水分解はナイアシンも生成させた。ナイアシンが細胞内で生成されると、さらなる複合化を経て、周知のニコチン尿酸代謝産物を得ることができる。
【００３７】
Ｉ−１５及びＩ−２４（四級アミドリンカー）等の化合物は、例えば腸組織における蓄積と比較して、肝臓組織に優先的に蓄積すること、ならびに、コレステロール等の脂質は、血漿から肝臓によってより効率的に除去されるため、Ｉ−１５及びＩ−２４等の化合物は、肝臓に優先的に蓄積してＰＣＳＫ９の活性を遮断することにより、二級アミドで結合した他の脂肪酸複合体よりも血漿中コレステロールの低下に効果的であることは、予想外の一発見である。したがって、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、肝臓においてＰＣＳＫ９を阻害すること、及び血漿中コレステロールを低下させることにおいてより効果的であり、疾患に対する新しい治療法を提供する。
【００３８】
本発明の別の態様は、化学名（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐１‐（４‐ニコチノイルピペラジン‐１‐イル）イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエン‐１‐オン（Ｉ−１３）を有する以下の化合物を提供する。
【化６】
2016537353.tif 000007
本発明は、上記化合物の薬学的に許容できる塩も包含する。
【００３９】
本発明の別の態様は、化学名（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐Ｎ‐（（Ｓ）‐１‐ニコチノイルピロリジン‐３‐イル）イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド（Ｉ−２３）を有する以下の化合物を提供する。
【化７】
2016537353.tif 000008
本発明は、上記化合物の薬学的に許容できる塩も包含する。
【００４０】
全体像のために述べると、米国特許出願公開第２０１１／００５３９９０号は、ＤＨＡまたはＥＰＡ等のオメガ３脂肪酸にナイアシンを直接的または非直接的に共有結合させることによって調製されたある特定の脂肪酸ナイアシン複合体を記載している。米国特許出願公開第２０１１／００５３９９０号からの化合物Ｉ−７及びＩ−８（構造は図１に示す）は、本明細書の実施例１３において、組織分布及び耐加水分解性について分析した。これらの脂肪酸ナイアシン複合体は、様々なジアミノリンカーを使用して、オメガ３脂肪酸にナイアシンを共有結合させることによって調製した。
【００４１】
ＩＩＩ．治療用途
本発明の別の態様は、代謝疾患を治療または予防する方法を提供する。この方法は、式Ｉ−１５、Ｉ−２４、またはその薬学的に許容できる塩等の本明細書において記載されるＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の有効量を、それを必要とする患者に投与して、上記の疾患を治療または予防することを含む。
【００４２】
ある特定の実施形態においては、上記の方法は、代謝疾患を治療することである。他の実施形態においては、上記の方法は、代謝疾患を予防することである。
【００４３】
ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高トリグリセリド血症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高コレステロール血症である。
【００４４】
ある特定の実施形態においては、患者はスタチンを用いて治療する。ある特定の実施形態においては、患者はＭＴＰ阻害剤を用いて治療する。ある特定の実施形態においては、患者はニーマン・ピックタンパク質阻害剤を用いて治療する。ある特定の実施形態においては、ニーマン・ピックタンパク質阻害剤はエゼチミミド（ｅｚｅｔｉｍｉｍｉｄｅ）である。
【００４５】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−１５の化合物またはその薬学的に許容できる塩である。ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−２４の化合物またはその薬学的に許容できる塩である。ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−１３の化合物またはその薬学的に許容できる塩である。ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−２３の化合物またはその薬学的に許容できる塩である。
【００４６】
ある特定の実施形態においては、患者は、成人等のヒトである。
【００４７】
一般的態様
代謝疾患は、対象の代謝を妨げる様々な医学的障害を包含する。代謝は、対象の体が食物をエネルギーに変換するのに使用するプロセスである。代謝疾患を有する対象の代謝は、なんらかの方法で乱されている。脂肪酸ナイアシン複合体は、代謝疾患を治療または予防する能力を有する。脂肪酸ナイアシン複合体は、オメガ３脂肪酸とナイアシンとを、１つの脂肪酸生物活性誘導体へと結合させるよう設計されている。脂肪酸ナイアシン複合体の活性は、脂肪酸生物活性誘導体の個々の成分の合計よりも実質的に大きく、脂肪酸ナイアシン複合体によって誘発される活性に相乗効果があることを示している。
【００４８】
単体で投与されるオメガ３脂肪酸は、トリグリセリドを低下させることができる。実際、オメガ３脂肪酸（ＥＰＡ／ＤＨＡ）は、トリグリセリドを減少させ、心血管系イベントの危険性がある患者の死亡率改善に加え、心不整脈によって引き起こされる突然死の危険性を減らすことが示されている。
【００４９】
前述のことを考慮して、脂肪酸ナイアシン複合体におけるリンカーを変えることにより、生体外細胞試験でＰＣＳＫ９の生成を低下させることにおいてより効率的な複合体がもたらされ得るかどうかを特定するため研究を行った。改良されたこのような脂肪酸ナイアシン複合体は、生体内で投与された場合に、血清中ＰＣＳＫ９濃度を低下させる可能性があるであろう。さらに、肝臓において優先的に蓄積する脂肪酸ナイアシン複合体は、高コレステロール血症、家族性ヘテロ接合性高コレステロール血症、家族性ホモ接合性高コレステロール血症、及びミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤の使用によって誘発される脂肪肝疾患の治療に対し有用であろう。研究結果は、本明細書の実施例において記載されている。本発明の化合物の活性特性に起因して、化合物は、単独療法として、または、スタチンもしくは他のコレステロール低下薬を共に用いた併用療法として、高コレステロール血症、脂質異常症、及び代謝疾患の効果的な治療に有用であるよう企図されている。
【００５０】
代謝疾患の治療方法
本発明の一態様は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、２型糖尿病、高コレステロール、メタボリックシンドローム、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、及びミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患を含めた代謝疾患の治療または予防等の、代謝疾患の治療方法を提供する。この方法は、式Ｉ−１５、Ｉ−２４、またはその薬学的に許容できる塩等の本明細書において記載されるＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の有効量を、それを必要とする患者に投与して、上記の疾患を治療または予防することを含む。
【００５１】
一実施形態においては、上記の方法は、脂肪酸誘導体によるＰＣＳＫ９の阻害を含む。ＰＣＳＫ９の阻害は、ＬＤＬ−Ｃの減少をもたらすであろう。
【００５２】
一実施形態においては、上記の方法は、トリグリセリドまたはＶＬＤＬまたはＬＤＬの放出を減少させるのに十分な量、またはコレステロール逆輸送の増加もしくはＨＤＬ濃度の増加を引き起こすのに十分な量の脂肪酸誘導体と、細胞とを接触させることを含む。
【００５３】
本発明の別の態様は、対象において代謝疾患または代謝疾患の症状を、抑制、予防、または治療する方法を提供する。そのような障害の例としては、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高血圧、心不全、心不整脈、低ＨＤＬ濃度、高ＬＤＬ濃度、突然死、安定狭心症、冠動脈心疾患、急性心筋梗塞、心筋梗塞の再発予防、心筋症、心内膜炎、２型糖尿病、インスリン抵抗性、耐糖能異常、高コレステロール血症、脳卒中、高脂血症、高リポ蛋白血症、慢性腎臓病、間欠性跛行、高リン血症、頚動脈硬化症、末梢動脈疾患、糖尿病性腎症、ＨＩＶ感染における高コレステロール血症、急性冠症候群（ＡＣＳ）、非アルコール性脂肪性肝疾患、動脈閉塞性疾患、脳動脈硬化症、脳血管障害、心筋虚血、及び糖尿病性自律神経ニューロパチーが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００５４】
脂肪酸ナイアシン複合体、及びＰＣＳＫ９阻害剤として使用される他の脂肪酸複合体のコレステロール及びトリグリセリドを低下させる能力に起因して、それらの複合体は、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）等の肝臓の疾患の治療にも使用することができる。
【００５５】
いくつかの実施形態においては、脂肪酸ナイアシン複合体、及びＰＣＳＫ９阻害剤として使用される他の脂肪酸複合体は、家族性高脂血症の治療に使用することができる。高脂血症は、どの種類の脂質が高いかに従って、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、またはその両方の複合型高脂血症に分類される。高い濃度のリポタンパク質も、高脂血症の１種として分類されてもよい。
【００５６】
５種類の高リポタンパク血症（Ｉ型〜Ｖ型）があり、これらは、電気泳動または超遠心でのリポタンパク質のパターンに基づき、Ｆｒｅｄｒｉｋｓｏｎの分類に従ってさらに分類される。Ｉ型高リポタンパク血症は、以下の３つのサブタイプ：Ｉａ型（Ｂｕｅｒｇｅｒ−Ｇｒｕｅｔｚ症候群、または家族性高カイロミクロン血症とも呼ばれる）、Ｉｂ型（家族性アポタンパクＣＩＩ欠乏症とも呼ばれる）、及びＩｃ型を有する。リポタンパク質リパーゼ（ＬＰＬ）の減少、異常ＡｐｏＣ２、または血液中のＬＰＬ阻害剤のうちいずれかの異常に起因し、Ｉ型高リポタンパク血症の３つのサブタイプは全て、同じ特徴のカイロミクロン増加を共有する。Ｉ型高リポタンパク血症の発生頻度は、１，０００，０００につき１であり、これまでの治療は主に食事制限からなっている。食後の脂質に作用する脂肪酸ナイアシン複合体の能力に起因し、脂肪酸ナイアシン複合体は、Ｉ型高リポタンパク血症の治療において特に有用であり得る。
【００５７】
ＩＩ型高リポタンパク血症は、２つのサブタイプを有する。ＩＩａ型（家族性高コレステロール血症とも呼ばれる）は、高濃度の低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）によって特徴づけられ；ＩＩｂ型（家族性複合型高脂血症とも呼ばれる）は、高濃度のＬＤＬ及び超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）によって特徴づけられる。
【００５８】
ＩＩＩ型高リポタンパク血症（家族性異常βリポタンパク血症とも呼ばれる）は、高濃度の中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）によって特徴づけられる。
【００５９】
ＩＶ型高リポタンパク血症（家族性高トリグリセリド血症とも呼ばれる）は、高濃度のＶＬＤＬによって特徴づけられる。
【００６０】
Ｖ型高リポタンパク血症は、高濃度のＶＬＤＬ及びカイロミクロンによって特徴づけられる。Ｖ型高リポタンパク血症の治療はこれまで、ナイアシンまたはフィブラートのみの使用では十分ではなかった。食後の脂質に作用する脂肪酸ナイアシン複合体の能力に起因し、脂肪酸ナイアシン複合体は、Ｖ型高リポタンパク血症の治療において特に有用であり得る。
【００６１】
いくつかの実施形態においては、有効量の脂肪酸ナイアシン複合体を対象に投与する。
【００６２】
ＰＣＳＫ９の阻害方法
本発明の別の態様は、患者においてＰＣＳＫ９の生成を阻害する方法、またはＰＣＳＫ９の血清中濃度を低下させる方法を提供する。この方法は、式Ｉ−１５、Ｉ−２４、またはその薬学的に許容できる塩等の本明細書において記載されるＮ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の有効量を、それを必要とする患者に投与して、ＰＣＳＫ９の生成を阻害するか、またはＰＣＳＫ９の血清中濃度を低下させることを含む。
【００６３】
医学的用途の医薬組成物
本発明の別の態様は、肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分として、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を含む医薬組成物を提供する。Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、以下のうちの１つか、またはその薬学的に許容できる塩である。
【化８】
2016537353.tif 000009
【００６４】
ある特定の実施形態においては、上記の成分は肝臓組織に蓄積する。ある特定の実施形態においては、腸組織よりも肝臓組織により多くの量の上記成分が蓄積する。ある特定の実施形態においては、肝臓組織に蓄積する上記成分の量は、腸組織に蓄積する上記成分の量の２倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍よりも多い（例えばラットにおいて評価した場合）。ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後に肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量で肝臓に蓄積する。
【化９】
2016537353.tif 000010
特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する。
【化１０】
2016537353.tif 000011
【００６５】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、生体内における加水分解等の加水分解に対する耐性を有する。ある特定の実施形態においては、耐加水分解性は、腸での耐加水分解性である。
【００６６】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する。
【００６７】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化１１】
2016537353.tif 000012
またはその薬学的に許容できる塩である。
【００６８】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化１２】
2016537353.tif 000013
である。
【００６９】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化１３】
2016537353.tif 000014
またはその薬学的に許容できる塩である。
【００７０】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化１４】
2016537353.tif 000015
である。
【００７１】
ある特定の実施形態においては、上記の医薬組成物は代謝疾患治療用である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高トリグリセリド血症である。
【００７２】
本発明の別の態様は、肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分として、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を含む医薬組成物を提供する。Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、以下であるか、またはその薬学的に許容できる塩である。
【化１５】
2016537353.tif 000016
【００７３】
ある特定の実施形態においては、上記の成分は肝臓組織に蓄積する。ある特定の実施形態においては、腸組織よりも肝臓組織により多くの量の上記成分が蓄積する。ある特定の実施形態においては、肝臓組織に蓄積する上記成分の量は、腸組織に蓄積する上記成分の量の２倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍よりも多い（例えばラットにおいて評価した場合）。ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後に肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量で肝臓に蓄積する。
【化１６】
2016537353.tif 000017
ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する。
【化１７】
2016537353.tif 000018
【００７４】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、生体内における加水分解等の加水分解に対する耐性を有する。ある特定の実施形態においては、耐加水分解性は、腸での耐加水分解性である。
【００７５】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する。
【００７６】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化１８】
2016537353.tif 000019
である。
【００７７】
ある特定の実施形態においては、上記の医薬組成物は代謝疾患治療用である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高トリグリセリド血症である。
【００７８】
化合物の医薬組成物製造における使用
本発明の別の態様は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を、肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分とする、代謝疾患治療用医薬組成物の製造における、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の使用を提供する。Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、以下のうちの１つか、またはその薬学的に許容できる塩である。
【化１９】
2016537353.tif 000020
【００７９】
ある特定の実施形態においては、上記の成分は肝臓組織に蓄積する。ある特定の実施形態においては、腸組織よりも肝臓組織により多くの量の上記成分が蓄積する。ある特定の実施形態においては、肝臓組織に蓄積する上記成分の量は、腸組織に蓄積する上記成分の量の２倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍よりも多い（例えばラットにおいて評価した場合）。ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後に肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量で肝臓に蓄積する。
【化２０】
2016537353.tif 000021
ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する。
【化２１】
2016537353.tif 000022
【００８０】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、生体内における加水分解等の加水分解に対する耐性を有する。ある特定の実施形態においては、耐加水分解性は、腸での耐加水分解性である。
【００８１】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する。
【００８２】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化２２】
2016537353.tif 000023
またはその薬学的に許容できる塩である。
【００８３】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化２３】
2016537353.tif 000024
である。
【００８４】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化２４】
2016537353.tif 000025
またはその薬学的に許容できる塩である。
【００８５】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化２５】
2016537353.tif 000026
である。
【００８６】
ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高トリグリセリド血症である。
【００８７】
本発明の別の態様は、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体を、肝臓組織における蓄積及び／または耐加水分解性を有する有効成分とする、代謝疾患治療用医薬組成物の製造における、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体の使用を提供する。Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、以下であるか、またはその薬学的に許容できる塩である。
【化２６】
2016537353.tif 000027
【００８８】
ある特定の実施形態においては、上記の成分は肝臓組織に蓄積する。特定の実施形態においては、腸組織よりも肝臓組織により多くの量の上記成分が蓄積する。ある特定の実施形態においては、肝臓組織に蓄積する上記成分の量は、腸組織に蓄積する上記成分の量の２倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍よりも多い（例えばラットにおいて評価した場合）。ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後に肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量で肝臓に蓄積する。
【化２７】
2016537353.tif 000028
ある特定の実施形態においては、上記成分は、等モル量の下記化合物の経口投与後にラットの肝臓に蓄積する下記化合物の量の２０倍よりも多い量でラットの肝臓に蓄積する。
【化２８】
2016537353.tif 000029
【００８９】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、生体内における加水分解等の加水分解に対する耐性を有する。ある特定の実施形態においては、耐加水分解性は、腸での耐加水分解性である。
【００９０】
ある特定の実施形態においては、上記成分は、肝臓組織に蓄積し、且つ耐加水分解性を有する。
【００９１】
ある特定の実施形態においては、Ｎ‐アルキル化脂肪酸ナイアシン複合体は、
【化２９】
2016537353.tif 000030
である。
【００９２】
ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、アテローム性動脈硬化症、脂質異常症、冠動脈心疾患、高コレステロール血症、心血管疾患、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、またはミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤を用いた治療によって誘発される脂肪肝疾患である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または脂質異常症である。ある特定の実施形態においては、代謝疾患は高トリグリセリド血症である。
【００９３】
ＩＶ．医薬組成物
本発明は、薬学的に許容できる担体と、本明細書において記載される脂肪酸ナイアシン複合体とを含む医薬組成物を提供する。この脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−１５、Ｉ−２４、またはその薬学的に許容できる塩等である。ある特定の他の実施形態においては、脂肪酸ナイアシン複合体は、式Ｉ−１３、式Ｉ−２３の化合物、またはその薬学的に許容できる塩である。
【００９４】
本発明は、代謝疾患の治療もしくは予防、または代謝疾患の抑制、またはこれらの活動のうちの２つ以上に有用な医薬組成物も含む。この組成物は、内服に好適であることができ、有効量の脂肪酸誘導体と薬学的に許容できる担体とを含むことができる。脂肪酸誘導体は、それらが非常に低い末梢毒性を示す点、または末梢毒性を示さない点において特に有用である。
【００９５】
意図される投与様式に応じて、上記の組成物は、例えば注射剤、錠剤、坐剤、丸剤、徐放性カプセル剤、エリキシル剤、チンキ剤、乳剤、シロップ、粉末、液体、懸濁液、または同種の物といった、固体、半固体または液体剤形であることができ、場合によっては単位投与量であることができ、従来の薬務に適合することができる。同様に、上記の組成物は、静脈内（ボーラス投与と点滴の両方）、腹腔内、皮下または筋肉内投与の形態でも投与することができ、全ての使用形態は、製薬分野の当業者に周知である。
【００９６】
例示的な医薬組成物は、脂肪酸ナイアシン誘導体と、薬学的に許容できる担体とを含む錠剤及びゼラチンカプセルである。薬学的に許容できる担体は、ａ）精製水、水素添加植物油もしくは部分水素添加植物油もしくはそれらの混合物等のトリグリセリド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ひまわり油、紅花油、ＥＰＡもしくはＤＨＡ等の魚油もしくはそのエステルもしくはトリグリセリドもしくはそれらの混合物、オメガ３脂肪酸もしくはその誘導体、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース、ナトリウム、サッカリン、グルコース及び／もしくはグリシン等の希釈剤；ｂ）シリカ、タルカム、ステアリン酸、ステアリン酸のマグネシウム塩もしくはカルシウム塩、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム及び／もしくはポリエチレングリコール等の潤滑剤；等であり、錠剤では、ｃ）所望であれば、例えばケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプン糊、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、炭酸マグネシウム、グルコースもしくはβ−ラクトース等の天然の糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカントもしくはアルギン酸ナトリウム等の天然及び合成ゴム、ワックス、及び／もしくはポリビニルピロリドン等の結合剤；ｄ）例えばデンプン、寒天、メチルセルロ−ス、ベントナイト、キサンタンガム、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、もしくは発泡性混合物等の崩壊剤；ｅ）吸収剤、着色剤、香味剤及び甘味剤；ｆ）Ｔｗｅｅｎ８０、Ｌａｂｒａｓｏｌ、ＨＰＭＣ、ＤＯＳＳ、Ｃａｐｒｏｙｌ９０９、Ｌａｂｒａｆａｃ、Ｌａｂｒａｆｉｌ、Ｐｅｃｅｏｌ、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ、Ｃａｐｍｕｌ  ＭＣＭ、Ｃａｐｍｕｌ  ＰＧ−１２、Ｃａｐｔｅｘ３５５、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ、ビタミンＥ  ＴＧＰＳもしくは他の許容できる乳化剤等の乳化剤もしくは分散剤；ならびに／またはｇ）シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル‐シクロデキストリン、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ２００等の、化合物の吸収を高める薬剤等でもある。
【００９７】
液体組成物、特に注射液組成物は、例えば溶解、分散等によって調製することができる。例えば、脂肪酸ナイアシン誘導体は、水、生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノール、及び同種の物等の薬学的に許容できる溶媒中に溶解するか、または混合して、それにより注射用等張溶液または懸濁液を作る。アルブミン、カイロミクロン粒子、または血清タンパク質等のタンパク質を使用して、脂肪酸ナイアシン誘導体を可溶化することができる。
【００９８】
脂肪酸ナイアシン複合体は、担体としてプロピレングリコール等のポリアルキレングリコールを使用して、脂肪性の乳剤または懸濁液から調製され得る坐剤として製剤することもできる。
【００９９】
脂肪酸ナイアシン複合体は、小型単一ラメラベシクル、大型単一ラメラベシクル及び多重ラメラベシクル等のリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンを含む様々なリン脂質から形成させることができる。いくつかの実施形態においては、米国特許第５，２６２，５６４号において記載されるように、脂質成分の薄膜を薬物の水溶液で水和して、その薬物をカプセル化する脂質層を形成させる。当該特許の内容は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０１００】
脂肪酸ナイアシン複合体は、脂肪酸誘導体が結合する個々の担体としてモノクローナル抗体を使用することによって送達することもできる。脂肪酸誘導体は、標的可能薬物担体としての可溶性ポリマーと結合することもできる。このようなポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド‐フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパナミドフェノール（ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌａｓｐａｎａｍｉｄｅｐｈｅｎｏｌ）、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを含むことができる。さらに、脂肪酸誘導体は、薬物の放出制御達成に有用な生分解性ポリマーのクラスに結合することができ、例えばポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋共重合体または両親媒性ブロック共重合体等に結合することができる。一実施形態においては、脂肪酸誘導体は、例えばポリカルボン酸ポリマーまたはポリアクリレート等のポリマーに共有結合しない。
【０１０１】
非経口注射剤投与は、概して、皮下、筋肉内または静脈内の注射及び点滴に使用される。注射剤は、液体溶液もしくは懸濁液、または注射前の液体への溶解に好適な固体形態のいずれかとして、従来の形態で調製することができる。
【０１０２】
組成物はそれぞれ、従来の混合方法、顆粒化方法またはコーティング方法に従って調製することができ、本発明の医薬組成物は、重量または体積で約０．１％〜約９０％、約１０％〜約９０％、または約３０％〜約９０％の脂肪酸誘導体を含むことができる。
【０１０３】
Ｖ．例示的投与量及び特徴
脂肪酸ナイアシン複合体は、対象における代謝疾患の治療もしくは予防に十分な量、または代謝疾患の発症の予防に十分な量で、それぞれ投与することができる。
【０１０４】
脂肪酸ナイアシン複合体の投与は、任意の治療薬投与形態で行うことができる。これらの形態としては、経口、経鼻、非経口、経皮、皮下、膣内、口腔内、直腸内または局所投与形態等の全身投与または局所投与が挙げられる。
【０１０５】
脂肪酸誘導体を利用する投薬計画は、患者の類型、種、年齢、体重、性別及び病状を含めた様々な因子；治療する症状の重症度；投与経路；患者の腎機能または肝機能；ならびに使用する特定の脂肪酸ナイアシン誘導体に応じて選択される。当業者の医師または獣医は、症状の進行を予防、阻止または抑止するのに必要とされる薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。
【０１０６】
本発明の有効投与量は、示された効果に対して使用する場合、１日あたり約２０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの範囲の脂肪酸ナイアシン複合体である。生体内または生体外で使用する組成物は、約２０ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、７５０ｍｇ、１，０００ｍｇ、１，２５０ｍｇ、２，５００ｍｇ、３，５００ｍｇもしくは５，０００ｍｇの脂肪酸誘導体を含むことができ、または、上記の列挙からの約１つの値から、約任意の他の値までの、例えば約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇの脂肪酸ナイアシン複合体量を含むことができる。一実施形態においては、組成物は、割れ目を入れることができる錠剤の形態である。
【０１０７】
一実施形態においては、血漿中濃度の測定は当業者に公知であり、例えば標準薬物動態（ＰＫ）パラメータ：Ｃ最大（最大濃度、ｎｇ／ｍＬ単位で測定）及びＡＵＣ最後（曲線下面積、時間にわたり測定）を使用して、血漿中に存在する化合物の量を表してもよい。血液／血漿試料を対象の門脈カテーテルから採取した場合、Ｃ最大及びＡＵＣ最後は、門脈Ｃ最大及び門脈ＡＵＣ最後として表してもよい。血液／血漿試料を対象の頸静脈カテーテルから採取した場合、Ｃ最大及びＡＵＣ最後は、末梢Ｃ最大及び末梢ＡＵＣ最後として表してもよい。
【０１０８】
一実施形態においては、脂肪酸ナイアシン複合体の門脈Ｃ最大血漿中濃度は、約１０００ｎｇ／ｍＬ〜約２００００ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約１００００ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約８０００ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約６０００ｎｇ／ｍＬの範囲であることができる。
【０１０９】
一実施形態においては、脂肪酸ナイアシン複合体の門脈ＡＵＣ最後血漿中濃度は、約１０００時間×ｎｇ／ｍＬ〜約２００００時間×ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約１００００時間×ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約８０００時間×ｎｇ／ｍＬ、または約２０００〜約５０００時間×ｎｇ／ｍＬであってもよい。
【０１１０】
一実施形態においては、脂肪酸ナイアシン複合体の末梢Ｃ最大血漿中濃度は、約５０ｎｇ／ｍＬ〜約１０００ｎｇ／ｍＬ、または約１００〜約１０００ｎｇ／ｍＬ、または約１００〜約５００ｎｇ／ｍＬ、または約２５０〜約５００ｎｇ／ｍＬの範囲であることができる。
【０１１１】
一実施形態においては、末梢ＡＵＣ最後は、約１００時間×ｎｇ／ｍＬ〜約１０００時間×ｎｇ／ｍＬ、または約２００〜約１０００時間×ｎｇ／ｍＬ、または約４００〜約１０００時間×ｎｇ／ｍＬであってもよい。脂肪酸ナイアシン複合体の適切な投与量は、Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｌ．Ｓ．；Ｇｉｌｍａｎ，Ａ．、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第５版；ＭａｃＭｉｌｌａｎ：ニューヨーク、１９７５年、２０１〜２２６頁において記載されているように決定することができる。
【０１１２】
脂肪酸ナイアシン複合体は、１日１回で投与することができ、または１日の総投与量を１日２回、３回もしくは４回の分割投与量で投与することができる。さらに、脂肪酸ナイアシン複合体は、好適な鼻腔内媒体の局所使用による鼻腔内形態で投与するか、または当業者に周知の経皮パッチの形態を使用した経皮経路によって投与することができる。経皮送達系の形態での投与では、投与量は、投薬計画を通して断続的に投与するのではなく、連続的に投与することができる。他の例示的な局所製剤としては、クリーム、軟膏、ローション、エアロゾルスプレー及びジェルが挙げられ、脂肪酸誘導体の濃度は、重量／重量または重量／体積で約０．１％から約１５％の範囲である。
【０１１３】
ＶＩ．例示的な併用療法
脂肪酸ナイアシン複合体は、コレステロール低下薬、フィブラート及び抗高脂血症薬、抗糖尿病薬、ＮＡＳＨ及びＮＡＦＬＤの治療に使用される薬剤、脂質低下薬、ならびに降圧薬等の他の治療薬と共に投与してもよい。
【０１１４】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬はコレステロール低下薬である。コレステロール低下薬の非限定的な例は、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、エゼチミブ、及びエゼチミブ／シンバスタチン（Ｖｙｔｏｒｉｎ（登録商標））の組合せである。スタチン薬物のクラスは、コレステロールを低下させるため診療所において広く使用されている。実際、スタチン治療は、ＰＣＳＫ９の発現とＰＣＳＫ９の分泌を有意に増加させることが示されている（Ｄｕｂｕｃら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．  ２００４，ｐ．１４５３−１４５９）。ＰＣＳＫ９はＬＤＬ受容体を分解し、その結果ＬＤＣ−Ｃの血漿中濃度は高くなることが実証されているため、高い濃度のＰＣＳＫ９は、スタチンの有利な効果のいくつかに対して本質的に反作用し得る。さらに、スタチンの薬物ファミリーはＰＣＳＫ９の血漿中濃度を増加させることが示されているため、ＰＣＳＫ９阻害剤とともにスタチンを同時投与することは、ＬＤＬ−Ｃがより有意に減少する結果となる可能性があり得る。
【０１１５】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、フィブラートまたは抗高脂血症薬である。フィブラートまたは抗高脂血症薬の非限定的な例は、アシフラン、アシピモックス、ベクロブラート、ベザフィブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、コレセベラム、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、メリナミド、及びロナフィブラート（ｒｏｎａｆｉｂｒａｔｅ）である。
【０１１６】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、ＰＣＳＫ９（前駆タンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型）を低下させることができる薬剤である。非限定的な例としては、ＲＥＧＮ７２７、ＡＭＧ１４５、ＲＮ３１６及びＬＧＴ２０９等のＰＣＳＫ９モノクローナル抗体、生物薬剤、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ならびに遺伝子サイレンシングオリゴヌクレオチドが挙げられる。
【０１１７】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、ミクロソームトリグリセリド転移タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤である。ＭＴＰ阻害剤の非限定的な例としては、ロミタピド、インプリタピド、ＣＰ−３４６０８６、ＳＬｘ−４０９０、及びＡＳ１５５２１３３が挙げられる。
【０１１８】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、ＮＡＳＨまたはＮＡＦＬＤの治療に使用することができる治療薬である。ＮＡＳＨまたはＮＡＦＬＤの治療に使用することができる薬剤の非限定的な例としては、システアミン、及びオベチコール酸（胆汁酸類似体）等のＦＸＲ（ファルネソイドＸ受容体）アゴニストが挙げられる。
【０１１９】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、アポリポタンパク質Ｂ合成阻害剤である。アポリポタンパク質Ｂ合成阻害剤の非限定的な例としては、ミポメルセン、生物薬剤、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、及び遺伝子サイレンシングオリゴヌクレオチドが挙げられる。
【０１２０】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、ＣＥＴＰ（コレステリル転移タンパク質）阻害剤である。ＣＥＴＰ阻害剤の非限定的な例としては、ダルセトラピブ、エバセトラピブ、アナセトラピブ、及びトルセトラピブが挙げられる。
【０１２１】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は脂質低下薬である。脂質低下薬の非限定的な例としては、ＡｐｏＡ−Ｉを上昇させる薬剤、ＨＭ７４ａアゴニスト、スクアレンシンテターゼ阻害剤、及びリポタンパク質関連ホスホリパーゼＡ２阻害剤が挙げられる。
【０１２２】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は抗糖尿病薬である。抗糖尿病薬の非限定的な例は、アカルボース、エパルレスタット、エクセナチド、グリメピリド、リラグルチド、メトホルミン、ミグリトール、ミチグリニド、ナテグリニド、ピオグリタゾン、プラムリンチド、レパグリニド、ロシグリタゾン、トルレスタット、トログリタゾン、及びボグリボースである。
【０１２３】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、抗糖尿病薬としてのＤＰＰ−ＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼ−４）阻害剤である。抗糖尿病薬としてのＤＰＰ−ＩＶ阻害剤の非限定的な例は、シタグリプチン、サクサグリプチン、ビルダグリプチン、リナグリプチン、ズトグリプチン、ゲミグリプチン、及びアログリプチンである。
【０１２４】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は降圧薬である。降圧薬の非限定的な例としては、アラセプリル、アルフゾシン、アリスキレン、アムロジピンベシル酸塩、アモスラロール、アラニジピン、アロチノロールＨＣｌ、アゼルニジピン、バルニジピン塩酸塩、ベナゼプリル塩酸塩、ベニジピン塩酸塩、ベタキソロールＨＣｌ、ベバントロールＨＣｌ、ビソプロロールフマル酸塩、ボピンドロール、ボセンタン、ブドララジン、ブナゾシンＨＣｌ、カンデサルタンシレキセチル、カプトプリル、カルベジロール、セリプロロールＨＣｌ、シクレタニン、シラザプリル、シニルジピン（ｃｉｎｉｌｄｉｐｉｎｅ）、クレビジピン、デラプリル、ジレバロール、ドキサゾシンメシル酸塩、エホニジピン、エナラプリルマレイン酸塩、エナラプリラート、エプレレノン、エプロサルタン、フェロジピン、フェノルドパムメシル酸塩、ホシノプリルナトリウム、グアナドレル硫酸塩、イミダプリルＨＣｌ、イルベサルタン、イスラジピン、ケタンセリン、ラシジピン、レルカニジピン、リシノプリル、ロサルタン、マニジピン塩酸塩、メベフラジル（ｍｅｂｅｆｒａｄｉｌ）塩酸塩、モキソニジン、ネビボロール、ニルバジピン、ニプラジロール、ニソルジピン、オルメサルタンメドキソミル、ペリンドプリル、ピナシジル、キナプリル、ラミプリル、リルメジジン（ｒｉｌｍｅｄｉｄｉｎｅ）、スピラプリルＨＣｌ、テルミサルタン、テモカルピル（ｔｅｍｏｃａｒｐｉｌ）、テラゾシンＨＣｌ、テルタトロールＨＣｌ、チアメニジンＨＣｌ、チリソロール塩酸塩、トランドラプリル、トレプロスチニルナトリウム、トリマゾシンＨＣｌ、バルサルタン、及びゾフェノプリルカルシウムが挙げられる。
【０１２５】
脂肪酸ナイアシン複合体は、コレステロール低下薬、フィブラート及び抗高脂血症薬、抗糖尿病薬、抗糖尿病薬、降圧薬、及び抗炎症薬等の他の治療薬とも共に投与してよい。
【０１２６】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬はコレステロール低下薬である。コレステロール低下薬の非限定的な例は、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、エゼチミブ、及びエゼチミブ／シンバスタチン（Ｖｙｔｏｒｉｎ（登録商標））の組合せである。
【０１２７】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、フィブラートまたは抗高脂血症薬である。フィブラートまたは抗高脂血症薬の非限定的な例は、アシフラン、アシピモックス、ベクロブラート、ベザフィブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、コレセベラム、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、メリナミド、ナイアシン、及びロナフィブラート（ｒｏｎａｆｉｂｒａｔｅ）である。
【０１２８】
高投与量のナイアシン（１日当たり１．５〜４グラム）は、肝臓内でアポリポタンパク質Ｂ（「ＡｐｏＢ」）を低下させることによって超低密度リポタンパク質（「ＶＬＤＬ」）濃度を改善し、且つアポリポタンパク質Ａ１（「ＡｐｏＡ１」）を増加させることによって高密度リポタンパク質（「ＨＤＬ」）を上昇させることが示されている。ナイアシンは、ＴＧ合成で重要な酵素であるジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ−２を阻害することもできる（Ｋａｍａｎｎａ，Ｖ．Ｓ．；Ｋａｓｈｙａｐ，Ｍ．Ｌ．、Ａｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．  ２００８，１０１（８Ａ），２０Ｂ−２６Ｂ）。
【０１２９】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は、抗糖尿病薬としてのＤＰＰ−ＩＶ阻害剤である。抗糖尿病薬としてのＤＰＰ−ＩＶ阻害剤の非限定的な例は、シタグリプチン、サクサグリプチン、ビルダグリプチン、リナグリプチン、ズトグリプチン、ゲミグリプチン、及びアログリプチンである。
【０１３０】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は抗糖尿病薬である。抗糖尿病薬の非限定的な例は、アカルボース、エパルレスタット、エクセナチド、グリメピリド、リラグルチド、メトホルミン、ミグリトール、ミチグリニド、ナテグリニド、ピオグリタゾン、プラムリンチド、レパグリニド、ロシグリタゾン、トルレスタット、トログリタゾン、及びボグリボースである。
【０１３１】
いくつかの実施形態においては、他の治療薬は降圧薬である。降圧薬の非限定的な例としては、アラセプリル、アルフゾシン、アリスキレン、アムロジピンベシル酸塩、アモスラロール、アラニジピン、アロチノロールＨＣｌ、アゼルニジピン、バルニジピン塩酸塩、ベナゼプリル塩酸塩、ベニジピン塩酸塩、ベタキソロールＨＣｌ、ベバントロールＨＣｌ、ビソプロロールフマル酸塩、ボピンドロール、ボセンタン、ブドララジン、ブナゾシンＨＣｌ、カンデサルタンシレキセチル、カプトプリル、カルベジロール、セリプロロールＨＣｌ、シクレタニン、シラザプリル、シニルジピン（ｃｉｎｉｌｄｉｐｉｎｅ）、クレビジピン、デラプリル、ジレバロール、ドキサゾシンメシル酸塩、エホニジピン、エナラプリルマレイン酸塩、エナラプリラート、エプレレノン、エプロサルタン、フェロジピン、フェノルドパムメシル酸塩、ホシノプリルナトリウム、グアナドレル硫酸塩、イミダプリルＨＣｌ、イルベサルタン、イスラジピン、ケタンセリン、ラシジピン、レルカニジピン、リシノプリル、ロサルタン、マニジピン塩酸塩、メベフラジル（ｍｅｂｅｆｒａｄｉｌ）塩酸塩、モキソニジン、ネビボロール、ニルバジピン、ニプラジロール、ニソルジピン、オルメサルタンメドキソミル、ペリンドプリル、ピナシジル、キナプリル、ラミプリル、リルメジジン（ｒｉｌｍｅｄｉｄｉｎｅ）、スピラプリルＨＣｌ、テルミサルタン、テモカルピル（ｔｅｍｏｃａｒｐｉｌ）、テラゾシンＨＣｌ、テルタトロールＨＣｌ、チアメニジンＨＣｌ、チリソロール塩酸塩、トランドラプリル、トレプロスチニルナトリウム、トリマゾシンＨＣｌ、バルサルタン、及びゾフェノプリルカルシウムが挙げられる。
【０１３２】
他の実施形態においては、上記の併用療法において使用される好適なアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤としては、エナラプリル、ラミプリル、キナプリル、ペリンドプリル、リシノプリル、イミダプリル、ゾフェノプリル、トランドラプリル、ホシノプリル、及びカプトプリルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【実施例】
【０１３３】
ここに一般的に記載されている発明は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解されるであろう。この実施例は、本発明のある特定の態様及び実施形態を単に例示する目的で含まれており、本発明を限定することを意図するものではない。
【０１３４】
実施例１  Ｎ‐（２‐（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）‐ドコサ‐４，７，１０，１３，１６，１９‐ヘキサエンアミドエチル）ニコチンアミド（Ｉ−７）の調製
【化３０】
2016537353.tif 000031
通常の工程では、ニコチン酸（２．０ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル（１．４ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）と共にＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に入れた。ＤＭＦを数滴加えた後、全ての固体が溶解し全てのガスの発生が停止するまで、反応混合物を室温で撹拌した（１時間）。この新しく調製した酸塩化物溶液を、２‐アミノエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ‐ブチル（２．６ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（３．４ｍＬ、２４．２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）中で含む溶液に０℃で滴下した。得られた反応混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。その後、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、２‐（ニコチンアミド）エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１ｇ、７４％）を得た。
【０１３５】
２‐（ニコチンアミド）エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の２５％  ＴＦＡに入れた。得られた反応混合物を室温で１時間静置した。この時点で多量の沈殿が生成した。透明濾液を除去した。残りの固体を乾燥して、Ｎ‐（２‐アミノエチル）ニコチンアミドのＴＦＡ塩（１．６ｇ）を得た。
【０１３６】
Ｎ‐（２‐アミノエチル）ニコチンアミドのＴＦＡ塩（５．０ｍｍｏｌ）を、（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）‐ドコサ‐４，７，１０，１３，１６，１９‐ヘキサエン酸（５．０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５．５ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（１５ｍｍｏｌ）と共に、ＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）に入れた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、Ｎ‐（２‐（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）‐ドコサ‐４，７，１０，１３，１６，１９‐ヘキサエンアミドエチル）ニコチンアミドを得た。ＭＳ  Ｃ３０Ｈ４１Ｎ３Ｏ２に対する計算値：４７５．３２；実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋４７６。
【０１３７】
実施例２  Ｎ‐（２‐（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐エイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミドエチル）ニコチンアミド（Ｉ−８）の調製
【化３１】
2016537353.tif 000032
Ｎ‐（２‐アミノエチル）ニコチンアミドのＴＦＡ塩（１．６ｇ、５．７ｍｍｏｌ）を、（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐エイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエン酸（１．７ｇ、５．７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．４ｇ、６．３ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（３ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）と共に、ＣＨ３ＣＮ（１５ｍＬ）に入れた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、Ｎ‐（２‐（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐エイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミドエチル）ニコチンアミドを得た（１．６ｇ、６２％）。ＭＳ  Ｃ２８Ｈ３９Ｎ３Ｏ２に対する計算値：４４９．３；実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋４５０。
【０１３８】
実施例３  Ｎ‐（２‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐Ｎ‐メチルイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド）エチル）ニコチンアミド（Ｉ−１５）の調製
【化３２】
2016537353.tif 000033
Ｎ‐（２‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐Ｎ‐メチルイコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド）エチル）ニコチンアミドは、実施例１において略述した手順に従い、ジアミンの代わりに市販の（２‐アミノエチル）（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ‐ブチル、脂肪酸成分の代わりにＥＰＡを使用して調製した。ＭＳ  Ｃ２９Ｈ４１Ｎ３Ｏ２に対する計算値：４６３．３２；実測値：［Ｍ＋Ｈ］＋４６４。
【０１３９】
実施例４  Ｎ‐（（Ｓ）‐１‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエノイル）ピロリジン‐３‐イル）ニコチンアミド（Ｉ−２４）の調製
【化３３】
2016537353.tif 000034
標題化合物は、化合物（Ｉ−１５）について略述した手順と同じ手順に従って、ＢＯＣ保護ジアミン、すなわち３‐アミノピロリジン‐１‐カルボン酸（Ｓ）‐ｔｅｒｔ‐ブチルを使用して調製した。ＭＳ  Ｃ３０Ｈ４１Ｎ３Ｏ２に対する計算値：４７５．３２；実測値：４７６。
【０１４０】
実施例５  （５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐１‐（４‐ニコチノイルピペラジン‐１‐イル）イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエン‐１‐オン（Ｉ‐１３）の調製
標題化合物は、化合物Ｉ−１５について略述した手順と同じ手順に従って、ＢＯＣ保護ジアミンを使用して調製した。
【０１４１】
実施例６  （５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐Ｎ‐（（Ｓ）‐１‐ニコチノイルピロリジン‐３‐イル）イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド（Ｉ‐２３）の調製
標題化合物は、化合物Ｉ−１５について略述した手順と同じ手順に従って、ＢＯＣ保護ジアミンを使用して調製した。
【０１４２】
実施例７  Ｎ‐（（（１Ｒ，４Ｒ）‐４‐（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）‐イコサ‐５，８，１１，１４，１７‐ペンタエンアミド）シクロヘキシル）メチル）ニコチンアミド（Ｉ−４１）の調製
標題化合物は、化合物Ｉ−１５について略述した手順と同じ手順に従って、ＢＯＣ保護ジアミンを使用して調製した。
【０１４３】
実施例８  ＨｅｐＧ２細胞におけるＡｐｏＡ１及びＡｐｏＢ分泌に及ぼす脂肪酸誘導体の効果の分析
化合物が有する、ＨｅｐＧ２細胞におけるＡｐｏＡ１及びＡｐｏＢ分泌に及ぼす効果は、下記の手順を使用して評価することができる。全体像のために述べると、ナイアシンは、生体内でＬＤＬコレステロールに対するＨＤＬの血清中濃度を増加させることが報告されている。同様に、ナイアシンは、ＨｅｐＧ２培養液の培地上澄み中で、ＡｐｏＡ１の分泌を増加させるが（Ｊｉｎ，Ｆ−Ｙ．ら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．１９９７，１７（１０），２０２０−２０２８）、ＡｐｏＢの分泌を阻害する（Ｊｉｎ，Ｆ−Ｙ．ら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．１９９９，１９，１０５１−１０５９）ことが報告されている。それとは独立して、ＤＨＡも、全く別の機構によってＡｐｏＢを低下させることが示されている（Ｐａｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００４，１１３，１２７７−１２８７）。このように、ＨｅｐＧ２細胞からのＡｐｏＡ１及びＡｐｏＢの分泌は、ナイアシン−ＤＨＡ誘導体小分子に対する、細胞に基づく表示器としての有用性を有している。
【０１４４】
ＨｅｐＧ２細胞（ＡＴＣＣ）は、９６ウェルプレートに１ウェル当たり１０，０００細胞で播種する。一晩接着後、増殖培地（ＤＭＥＭ中、１０％ＦＢＳ）を取り除き、０．１％の脂肪酸不含ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ）を含むＤＭＥＭ中で、２４時間、細胞を血清飢餓にする。次に、６種の濃度（１００μＭから開始した２倍希釈）の化合物で細胞を処理する。１．５ｍＭのナイアシンを陽性対照として使用する。全ての処理は、３回繰り返して実施する。
【０１４５】
化合物処理と同時に、モル比５：１の０．１オレイン酸と脂肪酸不含ウシ血清アルブミンの複合体を添加して、ＡｐｏＢ分泌を刺激する。化合物及びオレイン酸と共に、２４時間インキュベーションを行う。培地上澄みを取り除き、ＥＬＩＳＡキット（Ｍａｂｔｅｃｈ  ＡＢ）を使用してＡｐｏＡ１及びＡｐｏＢ濃度を測定する。
【０１４６】
ＡｐｏＡ１は、媒体（０．１％エタノール）処理ウェルに対するパーセント増加として表す。ＡｐｏＢ分泌のパーセント阻害率は、データを媒体処理ウェルに正規化することによって決定する。所定の化合物では、ＩＣ５０（５０％のＡｐｏＢ分泌が阻害される濃度）は、４パラメータフィッティング阻害曲線モデル（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標））を使用することによって決定する。各実験においては、細胞毒性に起因する化合物効果がモニターされ得るよう、ＡＴＰｌｉｔｅ１ステップキット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して細胞生存率を測定する。
【０１４７】
実施例９  ＰＣＳＫ９試験における化合物の効果の分析
化合物が有する、ＰＣＳＫ９活性に及ぼす効果は、下記の試験を使用して評価した。実験手順は第Ｉ部に記載する。結果は第ＩＩ部に記載する。
【０１４８】
第Ｉ部  手順
細胞培養
ＨｅｐＧ２細胞（ＡＴＣＣより、カタログ番号ＨＢ−８０６５）は、１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を追加したＤＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で維持した。ＰＣＳＫ９試験の前日、９６ウェルのコラーゲン被覆プレートに、細胞を２５，０００細胞／ウェルで播種する。
【０１４９】
化合物調製
化合物は、使用するまで−２０℃で保管した。試験化合物を１００％エタノールに溶解し、５０ｍＭの貯蔵液にした。次にこれを１ｍＭの最終濃度となるまでＦＢＳで希釈した。この溶液を３０分間超音波水浴に入れた。その後、等体積のエタノールを追加したＦＢＳで順次希釈を行った。
【０１５０】
ＰＣＳＫ９分泌試験
上記のように、試験の前日、コラーゲン被覆９６ウェルプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、カタログ番号３５−４４０７）にＨｅｐＧ２細胞を播種した。翌日、細胞培地を取り除き、１００μＬの血清不含ＤＭＥＭで１回洗浄して残留ＰＣＳＫ９を全て取り除き、９０μＬの血清不含ＤＭＥＭを代わりに入れた。次に、ＦＢＳ中で調製した各化合物濃度の１０マイクロリットルを加えた。化合物の各濃度は、３回繰り返して試験した。化合物を細胞と共に一晩１６時間インキュベートした。このインキュベーション後、１０μＬのＡｌａｍａｒＢｌｕｅを各ウェルに加え、細胞をさらに２時間インキュベートした。次にプレートを取り出し、ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ蛍光を測定して（５５０ｎｍ励起、及び５９０ｎｍ励起）、細胞生存率を評価した。
【０１５１】
次に、細胞培養液上澄みを、１×ＲＤ５Ｐ標準物質希釈液（Ｃａｌｉｂｒａｔｏｒ  Ｄｉｌｕｅｎｔ）で１：５に希釈し、その後、この希釈試料の５０μＬを用いて、製造業者の説明書に従ってＰＣＳＫ９  ＥＬＩＳＡを行った。ＥＬＩＳＡは、Ｖｉｃｔｏｒ  Ｘ５多重標識プレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で測定し、５５０ｎｍで測定したバックグラウンド補正を用い４５０ｎｍの吸光度で測定した（ＰＣＳＫ９  ＥＬＩＳＡキットは、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍからカタログ番号ＤＰＣ９００で購入することができる）。当業者用に述べるが、６個以上の異なる濃度の試験化合物を使用してこの種の試験を行った際に、ＩＣ５０も得ることができた。
【０１５２】
第ＩＩ部  結果
表１は、ＰＣＳＫ９阻害活性について試験した化合物を記載している。試験の結果、表１の全ての化合物が５０μＭ未満のＩＣ５０値を有することが示された。
【表１】
2016537353.tif 000035
【０１５３】
実施例１０  Ｚｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａラット脂質異常症モデルの血漿中トリグリセリド濃度に及ぼす化合物の効果の分析
化合物が有する、Ｚｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａラット脂質異常症モデルの血漿中トリグリセリド濃度に及ぼす効果は、下記の手順を使用して評価することができる。
【０１５４】
週齢８〜１０週のオスＺｕｃｋｅｒラット（ＨｓｄＨｌｒ：Ｚｕｃｋｅｒ−Ｌｅｐｒ＾ｆａ）はＨａｒｌａｎより購入し、Ｐｕｒｉｎａ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ（５００１）で研究期間中維持する。動物は無作為抽出し、体重及び血漿中トリグリセリド（ＴＧ）濃度に基づき治療群に割り当てる（ｎ＝８）。本研究の試験対象患者基準には、３００グラム超の体重と、８００ｍｇ／ｄＬ超の血漿中摂取ＴＧ濃度が含まれる。投与は第１日に開始し、第５日まで続く。投与は、全治療群に対し強制経口投与（ＰＯ）によって毎日（ｑｄ）行う（例えば、化合物Ｉ−８を、１０、３０、１００及び３００ｍｇ／ｋｇの４つの異なる投与量で経口投与し；さらに、ナイアシン／ＥＰＡの１００／２００ｍｇ／ｋｇの比での組合せを使用してもよい）。体重は、全ラットに対し第１日から第５日にわたり測定する。第４日に、血液試料（摂取）を各ラットから採取し、血漿について処理し、−８０℃で保管する。血液試料中の血漿中トリグリセリド濃度は、市販のキットを使用して、標準プロトコルを利用して測定する。
【０１５５】
実施例１１  ＡｐｏＥ３Ｌｅｉｄｅｎマウスの血漿中のコレステロール及び他の脂質に及ぼす、本発明の化合物とアトルバスタチンの組合せの効果の分析
ＡｐｏＥ３Ｌｅｉｄｅｎマウスの血漿中のコレステロール及び他の脂質に及ぼす、化合物とアトルバスタチンが有する効果は、下記の手順を使用して評価することができる。
【０１５６】
本研究は、メスＡｐｏＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎマウス（それぞれｎ＝１０の群）を使用し、固形飼料での未処理参照対照群を１群（ｎ＝５）使用する。脂質異常症を誘発するため、１％のコレステロール、１５％のカカオバター、４０．５％のスクロース、及び１％のトウモロコシ油（ＷＴＤ）を含む高コレステロール西洋型飼料を、２０週の合計実験期間中（このうち４週が前段階期間である）、マウスに与える。試験化合物の酸化を防ぐため、３０ｍｇ／ｋｇのアルファトコフェロールを高コレステロール飼料に加え、すなわち高コレステロール飼料対照にも加える。
【０１５７】
始めの４週（前段階期間）に、１％のコレステロールを含むアテローム生成飼料を全マウスに与えることによって、高い血漿中コレステロール濃度（約１５〜２０ｍＭ）によって特徴づけられる脂質異常症のアテローム生成促進状態を全マウスにおいて誘発する。次にマウスを、以下に記載されるように、１つの対照群（治療無し）と３つの治療群に分ける。３つの治療群は、以下に記載されるように、ｉ）本発明の化合物、ｉｉ）アトルバスタチン、及びｉｉｉ）本発明の化合物とアトルバスタチンである。脂質異常症マウスは、４時間絶食血液で試験したｔ＝０での血漿中コレステロールに基づきグループ化する。前段階後に低コレステロールであるマウスは除外し、その結果、均一な実験群が得られる。参照マウス群（ｎ＝５）は、全研究期間中、固形飼料のままである（正常脂血症参照マウス）。
【０１５８】
試験化合物の投与量は以下のとおりであってもよい。
−本発明の化合物：飼料中０．７５％  ｗ／ｗ
−アトルバスタチン：飼料中０．００１５％  ｗ／ｗ（血漿中コレステロールで約２０％の減少を達成するため）
−アルファトコフェロール：飼料中０．００３０％  ｗ／ｗ
【０１５９】
治療期間開始（ｔ＝０）前に、手で温め溶解したココアバターに試験化合物を加え、５分間混合することによって、約３ｋｇの飼料に対して十分な試験化合物（すなわち、２５ｇの本発明の化合物）と、アルファトコフェロール（２００ｍｇ超）とを調合する。次に、この混合物を主混合物（残りの成分を含む）に加え、十分に混合する。飼料は、−２０℃にして凍結させる。翌日、飼料を砕いて小さなペレット（１個あたり約５ｇ）にし、凍結乾燥して、使用まで真空包装バッグ（約５００ｇ）内で、−２０℃で保管する。飼料は毎日新しくし、未使用の飼料は廃棄する。
【０１６０】
以下のパラメータを、示された時点において取得する（別段の言及がないかぎり個別に）。
１）−４、０、２、４週に体重
２）０、２、４週に食物摂取量（ｇ／日／マウス）（ケージ毎）
３）−４、０、２、４週に血漿中総コレステロール（個別に）
４）−４、０、２、４週に血漿中トリグリセリド（個別に）
５）０週（全動物のプール）、及び４週にリポタンパク質プロファイル（ＶＬＤＬ、ＬＤＬ及びＨＤＬサイズ粒子にわたるコレステロール分布、群レベルでの分析）。
【０１６１】
ＥＤＴＡ血漿を、−４、０、２、及び４週に採取する。血漿中コレステロール濃度、血漿中トリグリセリド濃度、及びリポタンパク質プロファイルを新鮮血漿中で直ちに試験する。
【０１６２】
実施例１２  頸静脈カテーテル及び門脈カテーテルを用いたオスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットへの経口投与後の脂肪酸ナイアシン複合体の薬物動態の分析
図１に示す好ましい化合物の薬物動態を、オスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットへの経口投与後に評価した。実験手順及び結果を以下に示す。
【０１６３】
第Ｉ部  手順
薬物動態研究は、投与開始時点で約２５０〜３００ｇの体重を有するオスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで行った。全動物に頸静脈カテーテル（ＪＶＣ）及び門脈カテーテル（ＰＶＣ）を装着し、血液採取を容易にした。頸静脈カテーテル及び門脈カテーテルの挿入は、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓにおいて、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂの所内動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルに従って行った（承認ＰＯ  ４１２２０１０）。
【０１６４】
頚静脈カニューレ挿入の手術法
動物は、腹腔内に投与したケタミン及びキシラジン、ならびに皮下に与えたブプレノルフィンを用いて麻酔した。肩甲骨及び右頸静脈の上にある皮膚を剪毛し、皮膚を無菌に準備した。１．１．５ｃｍの頭蓋−尾部切開を行い、その後鈍的切開して頚静脈を露出させ、次にＰＵまたはブレンドカテーテルのいずれかを使用してカテーテルを挿入した。カテーテルを固定後、無菌食塩水で洗い流して開存性を確かめた。次に、カテーテルの遠心端を背面肩甲骨領域へと皮下で通り抜けさせ、背面肩甲骨領域で体外に出した。カテーテルの開存性を再度確かめた。次いでカテーテルを５０％ヘパリン化ブドウ糖溶液でロックした。カテーテルの体外に出ている端部をステンレス鋼栓で封じた。その後、皮膚切開を創傷クリップで閉じた。
【０１６５】
門脈カニューレ挿入の手術法
動物は、腹腔内に投与したケタミン及びキシラジンを用いて麻酔した。腹腔で１〜２ｃｍの正中切開を行い、肝臓付近で門脈を外した。カテーテルを挿入する際、出血を防ぐため、門脈を一時的に結紮した。カテーテル（３．５Ｆｒポリウレタンチューブ、Ａｃｃｅｓｓ（商標）ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）を直ちに挿入し、門脈上で巾着縫合によって固定した。血流再開時間は、血流遮断後約１分であった。このカテーテル挿入方法は、血管の閉塞を防ぐことができる。さらに、トランペット型開口を有するカテーテルを使用し、血流の影響を最小にすることにより、カテーテルが血管から滑り出ることを防いだ。カテーテルのもう一方の端部を背面首裏へと皮下で通した。腹壁切開は、筋肉を閉じるのに４／０絹製縫合糸を用い、皮膚を閉じるのに止血鉗子を用いて、二重で閉じた。
【０１６６】
薬物動態研究
頸静脈カテーテル及び門脈カテーテルを装着したオスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットは、４つの群に分けた。試験化合物は、媒体中の３０ｍｇ／ｋｇの投与量で、強制経口投与によって投与した（投与量濃度は６ｍｇ／ｍＬであり、投与量体積は５ｍＬ／ｋｇであった）。この媒体は、０．２％トコフェロールと共に、Ｔｗｅｅｎ（詳細にはＴｗｅｅｎ８０）と、Ｐｅｃｅｏｌと、ＰＥＧ４００とからなっており（４０：５０：１０の比）、水中、６６：１の水対油比で乳化した。以下の時点において、頸静脈及び門脈の両方で全血（０．３ｍＬ）を採取した。投与後１０分、２０分、４０分、１時間、１．５時間、２時間、及び４時間。血液試料は、ナトリウムヘパリン抗凝血剤を含むチューブに入れた。試料を、５℃±３℃で１０分間、２２００×ｇで遠心分離して分離血漿にすることができるまでは、各全血試料は氷上に置いた。
【０１６７】
次に、血漿試料に存在する様々な代謝産物及び親化合物の量を、ＥＳＩインターフェースを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ６４１０  Ｔｒｉｐｌｅ  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅを使用して、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。使用したカラムは、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ６  Ｐｈｅｎｙｌ  １１０Ａ  ５０×４．６ｍｍ、１．８μＭであった。使用した移動相は、それぞれ０．１％ギ酸を含む水及びメタノールであった。データはＷｉｎＮｏｌｉｎソフトウェアによってさらに解析した。所定の試験化合物では、採取した血漿試料から以下の化合物の量を測定した。１）試験化合物、２）ナイアシンリンカー、３）リンカー−ＥＰＡ、４）ナイアシン、及び５）ニコチン尿酸。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより量を測定した化合物の構造及び量を、表２−８に示す。
【０１６８】
血漿中のこれら各化合物の量を測定するため、適切な内部標準を使用して、ブランク血漿中で標準曲線を作成した（使用した最終濃度範囲は、８３３３ｎｇ／ｍＬ、２０８３ｎｇ／ｍＬ、５２１ｎｇ／ｍＬ、１３０．２ｎｇ／ｍＬ、３２．５ｎｇ／ｍＬ、８．１ｎｇ／ｍＬ、２．０ｎｇ／ｍＬ、及び０．５ｎｇ／ｍＬであった）。
【０１６９】
当業者用に述べると、以下の標準薬物動態（ＰＫ）パラメータを使用して血漿中に存在する化合物の量を示した。Ｃ最大（最大濃度、ｎｇ／ｍＬ単位で測定）及びＡＵＣ最後（曲線下面積、ｔ＝１０分〜４時間で測定）。血液／血漿試料を門脈カテーテルから採取した場合、Ｃ最大及びＡＵＣ最後は、門脈Ｃ最大及び門脈ＡＵＣ最後としてさらに表した。血液／血漿試料を頸静脈カテーテルから採取した場合、Ｃ最大及びＡＵＣ最後は、末梢Ｃ最大及び末梢ＡＵＣ最後としてさらに表した。
【０１７０】
第ＩＩ部  結果
化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、対応する親化合物（すなわち未代謝化合物）が、腸と比較して肝臓において予想外に優先的に蓄積することを示した。この予想外の特性は、対応する親化合物の門脈Ｃ最大及び門脈ＡＵＣ最後に反映されている。化合物Ｉ−１５では、親化合物の門脈Ｃ最大は、４，５２０ｎｇ／ｍＬであり、親化合物の門脈ＡＵＣ最後は、５，０５９時間×ｎｇ／ｍＬであった。化合物Ｉ−２４では、親化合物の門脈Ｃ最大は、５，３１５ｎｇ／ｍＬであり、親化合物の門脈ＡＵＣ最後は、６，６４１時間×ｎｇ／ｍＬであった。門脈Ｃ最大及びＡＵＣ最後は、肝臓に送達されている親化合物の濃度を表し、例えばその濃度を示す。したがって、より大きい門脈Ｃ最大値及びＡＵＣ最後値は、肝臓に送達されている化合物の濃度がより大きいことに相当する。
【０１７１】
化合物Ｉ−１５及びＩ−２４において、親化合物が肝臓で予想外且つ優先的に蓄積することは、化合物Ｉ−８等の代表的な類似体と直接比較した際に明らかであった。エチレンジアミンリンカーを有する化合物Ｉ−８は、有意に低い親化合物の門脈Ｃ最大及びＡＵＣ最後を有した（門脈Ｃ最大＝７５６ｎｇ／ｍＬ、門脈ＡＵＣ最後＝６６２時間×ｎｇ／ｍＬ）。
【０１７２】
さらに、化合物Ｉ−１５とＩ−２４の両方と比較すると、化合物Ｉ−８では代謝産物ナイアシン−リンカー及びニコチン尿酸の濃度が有意に高かった。化合物Ｉ−８では、ナイアシン−リンカー代謝産物の門脈Ｃ最大は、９，２５３ｎｇ／ｍＬであり、ニコチン尿酸の門脈Ｃ最大は、１，０４７ｎｇ／ｍＬであった。これは化合物Ｉ−１５と著しく対照的であり、化合物Ｉ−１５では、ずっと低い濃度の代謝産物ナイアシン−リンカー及びニコチン尿酸が門脈血漿で検出された（Ｉ−１５では、ナイアシン−リンカー部分の門脈Ｃ最大は、ほんの１２ｎｇ／ｍＬであり、ニコチン尿酸の門脈Ｃ最大は、１４ｎｇ／ｍＬであり；同様に、Ｉ−２４では、ナイアシンリンカーの門脈Ｃ最大は、７３ｎｇ／ｍＬであり、ニコチン尿酸の門脈Ｃ最大は、２０ｎｇ／ｍＬであった）。これは、化合物Ｉ−８が有意に腸で加水分解されることを示す。化合物Ｉ−７、Ｉ−１３、Ｉ−２３、及びＩ−４１は全て、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４と比較して、より低い親化合物の門脈濃度を示した。
【０１７３】
ナイアシン−リンカー付随代謝産物の門脈ＡＵＣ最後に対する、各親化合物の門脈ＡＵＣ最後の比を比較することにより、表２−８のデータをさらに解析した。代表的なナイアシン−リンカー代謝産物は、親化合物中の脂肪酸（ＥＰＡまたはＤＨＡ）−リンカーの結合が開裂することにより生成する。図２に示すように、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４では、ナイアシン−リンカー代謝産物に対する親化合物の比はそれぞれ１４９及び４１であるが、化合物Ｉ−７、Ｉ−８、Ｉ−１３、Ｉ−２３、及びＩ−４１ではそれと同じ比が、それぞれ０．３０、０．０６、０．８３、０．１７、及び１．３である。
【０１７４】
より多くの親化合物が肝臓に送達されているので、化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、単独療法として、または他のコレステロール低下薬を共に用いた併用療法として使用されたとき、血漿中コレステロールを低下させることにおいてより効果的である。
表２〜８  頸静脈及び門脈カニューレ装着Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットからのＰＫデータ
表中、
【化３４】
2016537353.tif 000036
【化３５】
2016537353.tif 000037
【表２】
2016537353.tif 000038
【表３】
2016537353.tif 000039
【表４】
2016537353.tif 000040
【表５】
2016537353.tif 000041
【表６】
2016537353.tif 000042
【表７】
2016537353.tif 000043
【表８】
2016537353.tif 000044
【０１７５】
実施例１３  化合物の加水分解及び組織分布の分析
研究を実施して、安定状態にするため試験化合物を３．５日間経口投与した後のラットの肝臓における試験化合物（例えば化合物Ｉ−１５）及びその代謝産物の量を測定した。肝臓における試験化合物及びその代謝産物の量は、ラット内にあるこのような化合物の分布についての情報と、試験化合物の耐加水分解性といった試験化合物の安定性についての情報とを与える。実験手順及び結果を以下に示す。
【０１７６】
第Ｉ部  手順
試験化合物は、オスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの１群に投与した。各群は、６匹の動物を含んだ。試験化合物は、媒体中の１００ｍｇ／ｋｇの投与量で、強制経口投与によって投与した（投与量濃度は２０ｍｇ／ｍＬであり、投与量体積は５ｍＬ／ｋｇであった）。この媒体は、０．２％トコフェロールと共に、Ｔｗｅｅｎ（詳細にはＴｗｅｅｎ８０）と、Ｐｅｃｅｏｌと、ＰＥＧ４００とからなっており（４０：５０：１０の比）、水中、６６：１の水対油比で乳化した。２匹のさらなる動物に、対照として媒体のみを投与した。
【０１７７】
動物には、１２時間おきに３．５日間投与した（合計で７回投与）。研究第３日の午後の投与後、ラットを一晩断食させた。第４日の最終投与４時間後、ラットを安楽死させた。第４日に組織試料を採取する前に、媒体処理ラットも断食させた。最終投与４時間後、肝臓を切除し、洗って、各組織の重量を記録した。肝臓は液体窒素中で急速凍結させ、５０ｍＬのポリプロピレン円錐型遠心管内で、−８０℃で保管した。
【０１７８】
肝臓組織は、組織１グラムあたり２ｍＬの体積のＰＢＳ中で均質化させた。肝臓ホモジェネートに存在する試験化合物、及び試験化合物の様々な代謝産物の量を、前の実施例において行ったようにＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０１７９】
所定の試験化合物では、採取したホモジェネートから以下の化合物の量を測定した。１）試験化合物、２）ナイアシンリンカー、３）リンカー−脂肪酸、４）ナイアシン、及び５）ニコチン尿酸。ホモジェネート中のこれら各化合物の量を測定するため、適切な内部標準を使用して、ブランク肝臓ホモジェネートで標準曲線を作成した。
【０１８０】
第ＩＩ部  結果
研究による結果を表９に示す。「ｎｄ」という記号は、存在する任意の分析物の量がこの試験における検出レベル未満であったため、分析物の量が測定されていないことを意味する。
【表９】
2016537353.tif 000045
【０１８１】
化合物Ｉ−１５及びＩ−２４は、表９で報告された他の化合物よりも有意に多い量の、肝臓に存在する未変化試験化合物を有した。データは、脂肪酸ナイアシン複合体のリンカー成分が、試験化合物の経口投与後に肝臓に存在する未変化試験化合物の量と、試験化合物の経口投与後に肝臓に存在する上記の試験化合物の代謝産物の量とに、極めて大きな影響を及ぼすことを示している。肝臓に存在する未変化試験化合物の量と、その試験化合物の代謝産物の量は、試験対象内にあるその化合物の分布についての情報を与え、且つ試験化合物の加水分解（ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ  ｄｅｇｒｅｄａｔｉｏｎ）（すなわち加水分解（ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ））に対する耐性についての情報を与える。
【０１８２】
特定の理論に束縛されるものではないが、肝臓において未変化試験化合物Ｉ−１５及びＩ−２４が有意により多い量であるのは、少なくとも部分的には、化合物Ｉ−８等の他の試験化合物よりも、門脈循環への未変化化合物の吸収が多い結果であると考えられる。
【０１８３】
参照による援用
本明細書において参照される各特許書類、及び各科学論文の全体開示は、あらゆる目的で、参照により援用される。
【０１８４】
等価物
本発明は、本発明の精神または本質的な特性から逸脱せずに、他の特定形態で実施してもよい。したがって前述の実施形態は、本明細書において記載される発明を限定するものではなく説明するものであると、あらゆる点でみなされる。したがって本発明の範囲は、前述の明細書ではなく、添付の特許請求の範囲によって示される。特許請求の範囲の趣旨内、及び特許請求の範囲の等価範囲内にある全ての変更は、本発明の範囲に包含されるよう意図される。
【図１】
2016537353.tif 000061
【図２】
2016537353.tif 000062
【国際調査報告】
2016537353.tif 000063
2016537353.tif 000064