【手続補正書】
【提出日】平成25年1月17日(2013.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キラーlg様レセプター(KIR)2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の各自に結合し、KIR2DS4には結合せず、KIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3により媒介されたＮＫ細胞毒性の阻害を減少、中和または逆転し、KIR2DS4により媒介されたＮＫ細胞毒性の阻害を減少、中和または逆転しない、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２】
さらにKIR2DS3に結合しない、請求項1記載の単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項３】
請求項1または2記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、少なくとも１つのKIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の、HLA-CクラスI分子への結合をブロックする単離された単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項４】
請求項1〜3の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメント体であって、HLA-Cw4分子のKIR2DL1への結合、およびHLA-Cw3分子の少なくとも１つのKIR2DL2およびKIR2DL3への結合をブロックする単離された単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項５】
請求項1〜4の何れか１項に記載の単離された単離された抗体またはそのフラグメントであって、HLA-CクラスI分子を発現しているヒト標的細胞に対するNK細胞の溶解活性を増強する単離された単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項６】
キラーlg様レセプター(KIR)2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の各自に結合し、KIR2DS4には結合せず、KIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3により媒介されたＮＫ細胞毒性の阻害を減少、中和または逆転し、KIR2DS4により媒介されたＮＫ細胞毒性の阻害を減少、中和または逆転しない、単離された抗体またはそのフラグメントであって、少なくとも１つのKIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3との結合において、配列番号15で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と、配列番号17で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する抗体と競合する単離された単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項７】
請求項6記載の単離された単離された抗体またはそのフラグメントであって、KIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の各々との結合において、配列番号15で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と配列番号17で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する抗体と競合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８】
請求項1〜7の何れか１項記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、KIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の各々との結合において、配列番号15で表されるアミノ酸配列に少なくとも８０％の相同なアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と配列番号17で表されるアミノ酸配列に少なくとも８０％の相同なアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する抗体と競合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項９】
請求項1〜8の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、配列番号15で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域を具備する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１０】
請求項1〜9の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、配列番号17で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域を具備する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１】
以下の(a)〜(c)を含む、請求項1〜10の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメント：
(a)配列番号17の残基31〜35に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR1領域；
(b)配列番号17の残基50〜65に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR2領域；および
(c)配列番号17の残基99〜112に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR3領域。
【請求項１２】
以下の(a)〜(f)を含む、請求項1〜11の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメント：
(a)配列番号17の残基31〜35に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR1領域；
(b)配列番号17の残基50〜65に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR2領域；および
(c)配列番号17の残基99〜112に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る重鎖CDR3領域。
(d)配列番号15の残基24〜34に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る軽鎖CDR1領域；
(e)配列番号15の残基50〜65に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る軽鎖CDR2領域；および
(f)配列番号15の残基89〜97に対応しているアミノ酸配列を有するポリペプチドから成る軽鎖CDR3領域。
【請求項１３】
請求項1〜12の何れか１項に記載の単離された単離された抗体またはそのフラグメントであって、KIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3の少なくとも一つの結合において、配列番号39で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と配列番号41で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する抗体と競合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１４】
請求項1〜13の何れか１項記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、配列番号39で表されるアミノ酸配列に少なくとも８０％の相同なアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と配列番号41で表されるアミノ酸配列に少なくとも８０％の相同なアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５】
請求項1〜14の何れか１項記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、配列番号39で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる軽鎖可変領域と配列番号41で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含んでいる重鎖可変領域とを具備する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６】
請求項1〜15の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、KIR2DL1に対して0.45nM以下の解離定数（Kd）を有する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１７】
請求項1〜16の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、KIR2DL3に対して0.025nM以下のKdを有する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１８】
請求項1〜17の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、アミノ酸残基L38, R41, M44, F45, N46, D47, T48, L49, R50, I52, F64, D72, Y80, P87, およびY88を含んでいるKIR2DL1エピトープと結合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項１９】
請求項1〜18の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、配列番号23で表されるアミノ酸配列を有するKIR2DL1ポリペプチドの細胞外部分の残基M44、F45、およびD72へのHLA-Cw4分子の結合をブロックする単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２０】
請求項1〜19の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体がモノクローナル抗体である単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２１】
請求項1〜20の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体がIgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4抗体である単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２２】
請求項1〜21の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体がIgG4抗体である単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２３】
請求項1〜22の何れか１項に記載の抗体またはそのフラグメントをコード化している単離された核酸。
【請求項２４】
請求項23に記載の核酸を具備しているベクター。
【請求項２５】
請求項24に記載のベクターを具備している細胞。
【請求項２６】
KIR抗体またはそのKIR結合フラグメントを産生する方法であって、前記抗-KIR抗体またはそのフラグメントの発現に適切な条件下で請求項25に記載の細胞を培養することを備える方法。
【請求項２７】
請求項1〜22の何れか１項に記載の単離された抗体またはそのフラグメントの患者におけるNK細胞の細胞毒性を検出可能な程度に増強するために効果的な量、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含んでいる薬学的組成物。
【請求項２８】
ポリソルベート80、スクロース、又はポリソルベート80とスクロース両者を含んでいる、請求項27に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
被験者におけるＮＫ細胞活性を増強するために使用するための請求項27または28に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
前記被験者は癌を罹患している患者である、請求項29に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
請求項30に薬学的組成物であって、癌が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、偏平上皮過形成、白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、有毛細胞リンパ腫、バーキット（Ｂｕｒｋｅｔｔｓ）リンパ腫、間葉起源の腫瘍、繊維肉腫、横紋筋肉腫、黒色腫、精上皮腫、奇形癌、神経芽細胞腫、神経膠腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、神経鞘腫、繊維肉腫、骨肉腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫、膀胱、乳房、大腸、腎臓、肝臓、肺、卵巣、前立腺、膵臓、胃、頚部、甲状腺及び皮膚の癌腫、他のリンパ系の造血系腫瘍、他の骨髄系の造血系腫瘍、他の間葉起源の腫瘍または他の中枢神経系または末梢神経系の腫瘍から選択される薬学的組成物。
【請求項３２】
請求項30に記載の薬学的組成物であって、前記患者が、結腸直腸癌、腎臓癌、卵巣癌、肺癌、乳房癌、および悪性黒色腫から選択される癌を罹患している薬学的組成物。
【請求項３３】
請求項29に記載の薬学的組成物であって、前記被験者は感染症を罹患している患者である薬学的組成物。
【請求項３４】
請求項27〜33の何れか１項に記載の薬学的組成物であって、免疫調節剤、ホルモン剤、化学療法剤、抗血管新生剤、アポトーシス剤、阻害性ＫＩＲに結合する第二の抗体、抗感染剤、標的誘導因子、および補助化合物（adjunct compound）から選択される、治療剤を投与することをさらに備える薬学的組成物。
【請求項３５】
請求項29に記載の薬学的組成物であって、前記患者は、リンパ系の造血系腫瘍を罹患している薬学的組成物。
【請求項３６】
請求項30に記載の薬学的組成物であって、前記腫瘍は、Ｔ前リンパ球性白血病（Ｔ−ＰＬＬ）；小細胞及び脳細胞タイプのＴ−ＰＬＬ；Ｔ細胞タイプの大型顆粒リンパ球白血病（ＬＧＬ）；；セザリー症候群（ＳＳ）；成人Ｔ細胞白血病リンパ腫（ＡＴＬＬ）；ａ／ｄ  Ｔ−ＮＨＬ肝脾リンパ腫；多形性及び免疫芽球性サブタイプの末梢／後胸腺Ｔ細胞リンパ腫；血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫；血管中心性（鼻）Ｔ細胞リンパ腫；未分化（Ｋｉ  １＋）大細胞リンパ腫；腸Ｔ細胞リンパ腫；Ｔリンパ芽球型；及びリンパ腫／白血病（Ｔ−Ｌｂｌｙ／Ｔ−ＡＬＬ）から選ばれる薬学的組成物。
【請求項３７】
請求項29に記載の薬学的組成物であって、前記被験者は、過形成、繊維症、血管形成、乾癬、アテローム性動脈硬化、血管形成術後の狭窄又は再狭窄及び血管中の平滑筋により特徴づけられる他の疾患を罹患している患者である薬学的組成物。
【請求項３８】
請求項29に記載の薬学的組成物であって、前記被験者は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、水痘、アデノウイルス、単純疱疹ウイルスＩ（ＨＳＶ−１）、単純疱疹ウイルス２（ＨＳＶ−１）、牛疫、ライノウイルス、エコーウイルス、ロタウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、パピローマウイルス、パピローマウイルス、サイトメガロウイルス、エキノウイルス、アルボウイルス、ハンタウイルス（ｈｕｎｔａｖｉｒｕｓ）、コクサッキーウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、ヒト免疫不全症候群ウイルスＩ型およびヒト免疫不全症候群ウイルス２型（ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２）から選ばれるウイルスにより引き起こされる感染症を罹患している患者である薬学的組成物。
【請求項３９】
請求項29に記載の薬学的組成物であって、前記被験者は、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）；連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｙｏｇｅｎｅｓを含む）；腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｌ）；棹菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、ラクトバシルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）；リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）；ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）；ガルドネレラ属（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）；ノカルジア菌（Ｎｏｃａｒｄｉａ）；ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）；サーモアクチノミセス・ブルガリス（Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓｖｕｌｇａｒｉｓ）；トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）；カンピロバクター菌（Ｃａｍｐｌｙｏｂａｃｔｅｒ）ラエルジノーザ（Ｒａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）；レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）；ナイセリアゴノロエア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａ）、ナイセリアメニンジチデス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）；フラボバクテリウムメイゴセプチカム（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｅｎｉｎｇｏｓｅｐｔｉｃｕｍ）、フラボバクテリウムオドラターン（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｏｄｏｒａｔｕｒｎ）；ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）；ボルデテラペルツシス（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、ボルデテラブロンチセプチカ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）；エシェリキアコリＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、クレブシエラ菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）；エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）、セラチアマルセセン（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎ）、セラチアリケファシエン（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）；エドワードシエラ属（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ）；プロテウスミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウスバルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）；ストレプトバシラス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）；リケッチアフィケッツフィ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｃｅａ  ｆｉｃｋｅｔｔｓｆｉ）、クラミジアプシタッチ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、クラミジアトラコルナチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｒｎａｔｉｓ）；マイコバクテリウムツベルクロシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリウムイントラセルラレ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、マイコバクテリウムフォルチターン（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｏｌｌｕｉｔｕｒｎ）マイコバクテリウムラプラエ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌａｐｒａｅ）、マイコバクテリウムアビウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ）、マイコバクテリウムボビス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ）、マイコバクテリウムアフリカヌム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｆｒｉｃａｎｕｍ）、マイコバクテリウムカンサッシ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ）、マイコバクテリウムイントラセルラレ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）およびマイコバクテリウムレプラルニウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅｒｎｕｒｉｕｍを含む）、他のブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、他の棹菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、他の棹菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、他のガルドネレラ属（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ）、他のシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、他のナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、他のフラボバクテリウム（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、他のボルデテラ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ）、他のエシェリキア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、他のセラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）、他のプロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、他のリケッチア科（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｃｅａｅ）、他のクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）、他のマイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、リーシュマニア、コクジディオア（ｋｏｋｚｉｄｉｏａ）、トリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｓｏｍｅ）、クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ）および リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）により引き起こされる感染症を罹患している患者である薬学的組成物。
【請求項４０】
異なるKIR2DL遺伝子産物と交叉反応しKIRの阻害活性を減少または中和する単離された抗KIR抗体またはそのフラグメントを産生する方法であって、以下の工程を備える方法；
（ａ）KIR2DLポリペプチド含む免疫原で、ヒト以外の哺乳動物を免疫する工程；
（ｂ）前記免疫された動物から、前記KIR2DLポリペプチドを結合する抗体を調製する工程；
（ｃ）少なくともKIR2DL1、KIR2DL2およびKIR2DL3遺伝子産物と交叉反応する、（ｂ）の抗体を選択する工程と；
（ｄ）ＮＫ細胞を増強する（ｃ）の抗体を選択する工程であって、；選択された抗体は、ヒト抗体レパートリーを発現するように操作された、ヒト以外のトランスジェニック動物である免疫された哺乳動物のヒト抗体である、工程；および
（ｅ）免疫された哺乳動物が、ヒト抗体レパートリーを発現するように操作されたトランスジェニック動物でないならば、工程（ｄ）で選択された前記抗体のキメラ抗体またはヒト化抗体バリアントを産生する工程。
【請求項４１】
請求項40に記載の方法であって、工程（ｃ）と工程（ｄ）の順番を随意に逆にする方法。
【請求項４２】
請求項40に記載の方法であって、工程（ｂ）で調製される抗体が、モノクロナール抗体である方法。
【請求項４３】
請求項40に記載の方法であって、ヒト以外の哺乳動物が、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ又はＨｕＭＡｂ−Ｍｏｕｓｅである方法。