(57)【要約】  本発明は、ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物であって、１つ又は複数の成分の各々が、ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基に結合しており、且つ１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、ジスルフィド基に対して近位の１つ又は複数の嵩高い基を含有する、ポリヌクレオチド構築物を特徴とする。本発明はまた、ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物であって、１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基に結合しており、且つ１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、ジスルフィド結合とヌクレオチド間架橋基又は末端基のリン原子との間の鎖内に少なくとも４個の原子を含有し、ここで、鎖は、リン酸塩、アミド、エステル、若しくはアルケニレンを含有しない、ポリヌクレオチド構築物を特徴とする。本発明はさらに、本発明のポリヌクレオチド構築物を用いて、細胞にポリヌクレオチドを送達する方法も特徴とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物であって、前記１つ又は複数の成分の各々が、前記ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基に結合しており、且つ前記１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、前記ジスルフィド基に対して近位の１つ又は複数の嵩高い基を含有し；
前記１つ又は複数の成分（ｉ）が、前記ジスルフィド結合を前記末端基に連結するアルキレン基を含むとき、前記末端基と前記ジスルフィド基との間の原子の数は、２、３、４、若しくは５であり；
前記１つ又は複数の成分（ｉ）は、前記ジスルフィド結合を前記ヌクレオチド間架橋基に連結するアルケニレンを含まない、ポリヌクレオチド構築物。
【請求項２】
ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物であって、前記１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、前記ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基に結合しており、且つ前記１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、前記ジスルフィド結合と前記ヌクレオチド間架橋基又は前記末端基のリン原子との間の鎖内に少なくとも４個の原子を含有し；
前記鎖が、リン酸塩、アミド、エステル、若しくはアルケニレンを含有せず；
前記鎖が、アルキレン基を含むとき、前記末端基と前記ジスルフィド基との間の原子の数は、４又は５である、ポリヌクレオチド構築物。
【請求項３】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、下記構造：
【化１】
2016537027.tif 000244
を含み、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；且つ
各ｑは、独立に、０、１、２、３、又は４である、請求項１又は２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）が各々、独立に、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の構造を有する基を含み、
式中、Ａ1は、１つ又は複数の任意選択で置換されたＮ、Ｏ、−Ｓ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、前記任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳのいずれも、前記ジスルフィドに直接結合されない）を含む結合若しくはリンカーであり；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含む結合部分であり；且つ
Ｒ4は、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
Ａ4は、前記ヌクレオチド間架橋基又は前記末端基に対して近位であり；
Ａ1又はＡ2は、−Ｓ−Ｓ−に対して近位の１つ又は複数の嵩高い基を含有する、請求項１又は２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）が、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の構造を有する基から構成される、請求項４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、又はエンドソームエスケープ部分のうちの１つ又は複数をさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、炭水化物を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８】
前記炭水化物が、Ｎ−アセチルガラクトサミン又はマンノースを含む、請求項７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、中性有機ポリマー又は陽荷電ポリマーを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０】
前記中性有機ポリマーが、１〜２００アルキレンオキシド単位を含む、請求項９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１】
前記アルキレンオキシドが、エチレングリコールである、請求項１０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、ターゲティング部分を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３】
前記ターゲティング部分が、葉酸リガンドである、請求項１２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、ポリペプチドを含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５】
前記ポリペプチドが、タンパク質形質導入ドメインを含む、請求項１４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６】
前記１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つが、エンドソームエスケープ部分を含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１７】
前記ポリヌクレオチド構築物が、２〜１５０個のヌクレオチドを含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１８】
前記ポリヌクレオチド構築物が、５〜５０個のヌクレオチドを含む、請求項１７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１９】
前記ポリヌクレオチド構築物が、８〜４０個のヌクレオチドを含む、請求項１８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２０】
前記ポリヌクレオチド構築物が、１０〜３２個のヌクレオチドを含む、請求項１９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２１】
前記ジスルフィド結合が、ピリジルに結合していない、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２２】
式Ｉ：
【化２】
2016537027.tif 000245
の構造、又はその塩を有するポリヌクレオチド構築物であって、
式中、ｎは、０〜１５０の数であり；
各Ｂ1は、独立に、核酸塩基であり；
各Ｘは、独立に、Ｏ、Ｓ、及び任意選択で置換されたＮからなる群から選択され；
各Ｙは、独立に、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、及び保護ヒドロキシル基からなる群から選択され；
各Ｙ1は、独立に、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルであり；
各Ｚは、独立に、Ｏ又はＳであり；
Ｒ1は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ1は、
【化３】
2016537027.tif 000246
若しくはその塩であり；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、クエンチャー含有基、ホスホチオール、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ2は、
【化４】
2016537027.tif 000247
若しくはその塩であり；
各Ｒ3は、独立に、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又は式ＩＩ：
【化５】
2016537027.tif 000248
の構造を有する基であり、
式中、各Ａ1は、独立に、任意選択で置換されたＮ；Ｏ；Ｓ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、前記任意選択で置換されたＮ、Ｏ、若しくはＳは、ジスルフィドに直接結合されない）のうちの１つ又は複数を含む結合若しくはリンカーであり；且つ各Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
各Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から独立に選択され；
各Ａ4は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
各Ｌは、独立に、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含む共役基であり；
各Ｒ4は、独立に、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
各ｒは、独立に、１〜１０の整数であり；
Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3の少なくとも１つにおいて、Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成し；
少なくとも１つのＲ3は、式（ＩＩ）の前記構造を有するか、又はＲ1及びＲ2の少なくとも１つは、
【化６】
2016537027.tif 000249
又はその塩であり；
Ｒ1又はＲ2が、
【化７】
2016537027.tif 000250
若しくはその塩（ここで、Ａ2、Ａ3、及びＡ4は結合して、アルキレン基を形成する）であるとき、前記アルキレン基は、Ｃ4〜5アルキレンであり；或いは
Ｒ1又はＲ2が、
【化８】
2016537027.tif 000251
若しくはその塩であるとき、前記基−Ａ2−Ａ3−Ａ4−Ｘ−は、アミド、エステル、又はアルケニレンを含有しない、ポリヌクレオチド構築物。
【請求項２３】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−基が、下記の構造：
【化９】
2016537027.tif 000252
を有し、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；且つ
各ｑは、独立に、０、１、２、３、又は４である、請求項２２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２４】
各ＸがＯであり、及び／又は各ＺがＯである、請求項２２又は２３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２５】
ヌクレオシドが、その３’−Ｏ−Ｐ−Ｘ−鎖を介して、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3に連結されるとき、前記ヌクレオシドのＹは、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又はヒドロキシルである、請求項２２〜２４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２６】
少なくとも１つのＹが、Ｆである、請求項２５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２７】
少なくとも１つのＹが、ＯＭｅである、請求項２５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２８】
Ｒ4が、ペリ環状反応；ヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ部分のアルキル化又はアリール化；及びヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ求核剤と求電子剤との反応からなる群から選択される反応によって形成される結合を介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項２９】
前記ペリ環状反応が、環状付加である、請求項２８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３０】
前記ペリ環状反応が、ヒュスゲン環状付加である、請求項２９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３１】
Ｒ4が、アミド結合、スルホンアミド結合、カルボン酸エステル、チオエステル、任意選択で置換されたＣ6〜14アリール、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；イミン；ヒドラゾン；オキシム；又はスクシンイミドを介してＬ、Ａ1、又は前記ジスルフィドに結合される、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３２】
前記親水性官能基及び共役部分の１つ又は複数が、保護基で保護される、請求項２２〜３１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３３】
Ｌが、アルデヒド共役部分との縮合反応により形成されて、イミン、エナミン、オキシム、又はヒドラゾン結合を形成する、請求項２２〜３２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３４】
前記ジスルフィドの最大で９０％が、１つ又は複数の補助部分に連結している、請求項２２〜３３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３５】
前記ジスルフィドの最大で７５％が、１つ又は複数の補助部分に連結している、請求項３４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３６】
前記ジスルフィドの最大で５０％が、１つ又は複数の補助部分に連結している、請求項３５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３７】
前記ジスルフィドの最大で２５％が、１つ又は複数の補助部分に連結している、請求項３６に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３８】
前記ポリヌクレオチド構築物中のヌクレオチドの最大で７５％が、前記ジスルフィドに連結している、請求項２２〜３７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項３９】
前記ポリヌクレオチド構築物中の前記ヌクレオチドの最大で６５％が、前記ジスルフィドに連結している、請求項３８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４０】
前記ポリヌクレオチド構築物中の前記ヌクレオチドの最大で４５％が、前記ジスルフィドに連結している、請求項３９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４１】
前記ポリヌクレオチド構築物中の前記ヌクレオチドの最大で２５％が、前記ジスルフィドに連結している、請求項４０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４２】
前記ポリヌクレオチド構築物が、１〜１００個の式（ＩＩ）の基を含む、請求項２２〜４１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４３】
前記ポリヌクレオチド構築物が、２〜５０個の式（ＩＩ）の基を含む、請求項４２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４４】
前記ポリヌクレオチド構築物が、２〜３０個の式（ＩＩ）の基を含む、請求項４３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４５】
前記ポリヌクレオチド構築物が、２〜１０個の式（ＩＩ）の基を含む、請求項４４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４６】
前記ポリヌクレオチド構築物が、５〜５０個のヌクレオチドを含む、請求項２２〜４５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４７】
前記ポリヌクレオチド構築物が、８〜４０個のヌクレオチドを含む、請求項４６に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４８】
前記ポリヌクレオチド構築物が、１０〜３２個のヌクレオチドを含む、請求項４７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項４９】
少なくとも１つのＲ4が、ターゲティング部分を含む、請求項２２〜４８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５０】
少なくとも１つのＲ4が、炭水化物を含む、請求項２２〜４９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５１】
少なくとも１つのＲ4が、マンノースを含む、請求項２２〜５０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５２】
少なくとも１つのＲ4が、Ｎ−アセチルガラクトサミンを含む、請求項２２〜５１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５３】
少なくとも１つのＲ4が、葉酸リガンドを含む基を含む、請求項２２〜５２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５４】
少なくとも１つのＲ4が、タンパク質形質導入ドメインを含む、請求項２２〜５３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５５】
少なくとも１つのＲ4が、エンドソームエスケープ部分を含む、請求項２２〜５４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５６】
少なくとも１つのＲ4が、前立腺特異膜抗原（ＰＳＭＡ）を含む、請求項２２〜５５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５７】
非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3基との比が、１：１０〜１０：１である、請求項２２〜５６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５８】
非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3基との比が、１：５〜５：１である、請求項５７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項５９】
非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3基との比が、１：３〜３：１である、請求項５８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６０】
非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3基との比が、１：２〜２：１である、請求項５９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６１】
非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の前記構造を有するＲ3基との比が、約１：１である、請求項６０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６２】
Ｌが、１〜５００個のモノマーを含み、前記モノマーの各々が、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；カルボニル；チオカルボニル；イミノ；任意選択で置換されたＮ；Ｏ；又はＳ（Ｏ）m（ここで、ｍは、０、１、若しくは２である）である、請求項２２〜６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６３】
Ｌが、１つ又は複数のＣ1〜6アルキレンオキシ基を含む、請求項２２〜６２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６４】
Ｌが、１００未満のＣ1〜6アルキレンオキシ基を含む、請求項６３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６５】
Ｌが、１つ又は複数のエチレンオキシ基を含む、請求項２２〜６４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６６】
Ｌが、１００未満のエチレンオキシ基を含む、請求項６５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６７】
Ｌが、１つ又は複数のポリ（アルキレンオキシド）を含む、請求項２２〜６４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６８】
前記ポリ（アルキレンオキシド）が、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、ポリ（トリメチレンオキシド）、ポリブチレンオキシド、ポリ（テトラメチレンオキシド）、及びそのジブロック又はトリブロックコポリマーから選択される、請求項６７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項６９】
前記ポリ（アルキレンオキシド）が、ポリエチレンオキシドである、請求項６７又は６８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７０】
Ｌが、１つ又は複数のアミノ酸残基を含む、請求項２２〜６９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７１】
前記アミノ酸残基の少なくとも１つが、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、及びＴｙｒからなる群から選択される、請求項７０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７２】
Ｌが、式（ＩＩＩ）：
【化１０】
2016537027.tif 000253
の構造を有する基を含み、
式中、Ｑ1、Ｑ2、Ｑ3、及びＱ4は各々、独立に、Ｎ又はＣＲ7であり；
Ｘ1は、Ｏ又はＮＲ6であり；
Ｚ1は、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ7は、独立に、Ｈ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；ハロ；ヒドロキシル；−ＣＨＯ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルカノイル；カルボキシル；シアノ；ニトロ；アミノ；チオール；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；並びに任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニルからなる群から選択される、請求項２２〜７１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７３】
Ｑ1が、ＣＲ7である、請求項７２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７４】
Ｑ2が、ＣＲ7である、請求項７２又は７３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７５】
Ｑ3が、ＣＲ7である、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７６】
Ｑ4が、ＣＲ7である、請求項７２〜７５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７７】
各Ｒ7が、独立に、Ｈ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又はハロである、請求項７２〜７６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７８】
Ｒ7が、Ｈである、請求項７７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項７９】
Ｘ1が、ＮＲ6である、請求項７２〜７８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８０】
Ｚ1が、Ｓである、請求項７２〜７９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８１】
Ｌが、式（ＩＶ）：
【化１１】
2016537027.tif 000254
の構造を有する１つ又は複数の基を含み、
式中、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10は各々、独立に、Ｎ、ＣＲ7、又は−Ｘ2若しくは−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つのみが、−Ｘ2に結合したＣであり、且つＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つのみが、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；
Ｘ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたジアザアルケニレン；任意選択で置換された飽和ジアザ；不飽和ジアザ；任意選択で置換されたアザカルボニル；又はオキサカルボニルであり；
Ｘ3は、結合、Ｏ、ＮＲ7、又はＳであり；
Ｘ4は、非存在であるか、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンであり；且つ
Ｚ2は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ7であり；並びに
各Ｒ7は、独立に、Ｈ、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；並びに任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシからなる群から選択され；
Ｘ2及び−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に連結したＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10のうちの２つは、Ｎではない、請求項２２〜８０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８２】
Ｑ5が、Ｎである、請求項８１に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８３】
Ｑ6が、ＣＲ7である、請求項８１又は８２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８４】
Ｑ7が、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣである、請求項８１〜８３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８５】
Ｑ8が、ＣＲ7である、請求項８１〜８４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８６】
Ｑ9が、ＣＲ7である、請求項８１〜８５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８７】
Ｑ10が、Ｘ2に結合したＣである、請求項８１〜８６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８８】
各Ｒ7が、独立に、Ｈ、ハロ、及び任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルからなる群から選択される、請求項８１〜８７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項８９】
Ｒ7が、Ｈである、請求項８８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９０】
Ｘ2が、任意選択で置換されたジアザアルケニレン又は任意選択で置換された飽和ジアザである、請求項８１〜８９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９１】
Ｘ3が、ＮＲ7である、請求項８１〜９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９２】
Ｘ4が、存在しない、請求項８１〜９１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９３】
Ｚ2が、Ｏである、請求項８１〜９２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９４】
Ｌが、式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）：
【化１２】
2016537027.tif 000255
の構造を有する１つ又は複数の基を含み、
式中、Ｑ16、Ｑ17、及びＱ18の各々は、独立に、Ｎ若しくはＣＲ7であり；
Ｒ7の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である、請求項２２〜９３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９５】
Ｑ16が、Ｎである、請求項９４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９６】
Ｑ18が、Ｎである、請求項９４又は９５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９７】
Ｑ17が、ＣＲ7である、請求項９４〜９６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９８】
Ｒ7が、Ｈ、ハロ、又はＣ16アルキルである、請求項９７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項９９】
Ｒ7が、Ｈである、請求項９８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１００】
Ｌが、構造：
【化１３】
2016537027.tif 000256
を有する１つ又は複数の基を含む、請求項２２〜９３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０１】
Ｌが、結合である、請求項２２〜６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０２】
Ａ3が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択される、請求項２２〜１０１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０３】
Ａ3が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；及びＯからなる群から選択される、請求項２２〜１０２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０４】
Ａ3が、式（ＶＩ）：
【化１４】
2016537027.tif 000257
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ4に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ4との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ4との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
Ｑ11及びＱ15の１つのみがＡ2に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ4に結合する、請求項１０３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０５】
Ｑ11が、Ａ2に結合したＣである、請求項１０４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０６】
Ｑ12が、Ａ4に結合したＣである、請求項１０４又は１０５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０７】
Ｑ13が、Ｒ12に結合したＣである、請求項１０４〜１０６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０８】
Ｒ12が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１０７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１０９】
Ｑ14が、Ｏである、請求項１０４〜１０８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１０】
Ｑ14が、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である、請求項１０４〜１０９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１１】
Ｒ14が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１１０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１２】
Ｒ15が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１１０又は１１１に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１３】
Ｑ15が、Ｒ16に結合したＣである、請求項１０４〜１１２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１４】
Ｒ16が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１１３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１５】
Ａ4が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレンである、請求項２２〜１１４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１６】
Ａ1が、構造：
【化１５】
2016537027.tif 000258
を有する基を含む、請求項２２〜１１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１７】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項２２〜１１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１８】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項１１７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１１９】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項１１８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２０】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項１１９に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２１】
Ａ1が、結合である、請求項２２〜１１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２２】
Ａ2が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項２２〜１２１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２３】
Ａ2が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項１２２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２４】
Ａ2が、任意選択で置換された任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項１２３に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２５】
Ａ2が、式（ＶＩ）：
【化１６】
2016537027.tif 000259
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ3に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ3との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ3との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又は前記ジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
Ｑ11及びＱ15の１つのみが前記ジスルフィド結合に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ3に結合する、請求項１２４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２６】
Ｑ11が、前記ジスルフィド結合に結合したＣである、請求項１２５に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２７】
Ｑ12が、Ａ3に結合したＣである、請求項１２５又は１２６に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２８】
Ｑ13が、Ｒ12に結合したＣである、請求項１２５〜１２７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１２９】
Ｒ12が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１２８に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３０】
Ｑ14が、Ｏである、請求項１２５〜１２９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３１】
Ｑ14が、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である、請求項１２５〜１３０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３２】
Ｒ14が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１３１に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３３】
Ｒ15が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１３１又は１３２記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３４】
Ｑ15が、Ｒ16に結合したＣである、請求項１２５〜１３３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３５】
Ｒ16が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１３４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３６】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記アルキレン炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結している、請求項２２〜１３５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３７】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の前記硫黄原子に結合した前記炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記アルキレン炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項２２〜１３６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３８】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルケニレン炭素原子であるとき、前記アルケニレン炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項２２〜１３５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１３９】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキニレン炭素原子ではない、請求項２２〜１３５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４０】
（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結している、請求項２２〜１３９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４１】
（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−基の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項２２〜１３９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４２】
Ａ1及びＡ2が、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する、請求項２２〜１１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４３】
Ａ1及びＡ2が、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜７員環を形成する、請求項１４２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４４】
Ａ1、Ａ2、Ａ3、及びＡ4、又はＡ2、Ａ3、及びＡ4と前記ジスルフィド結合とが結合して：
【化１７】
2016537027.tif 000260
のいずれか１つの構造を有する基を形成し、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；且つ
ｓは、０、１、若しくは２である、請求項２２〜１４１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４５】
Ｒ9が、ハロ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである、請求項１４４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４６】
２つの隣接するＲ9基が、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アリール基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する、請求項１４４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４７】
Ａ2、Ａ3、Ａ4、及び−Ｓ−Ｓ−が結合して、構造：
【化１８】
2016537027.tif 000261
を形成し、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；アルキル；アリール；及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；アリールオキシ；シクロアルコキシ；アリールアルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である、請求項１４４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４８】
Ｒ17が、Ｈ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項１４７に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド構築物。
【請求項１４９】
ｓが、０又は１である、請求項１４４〜１４８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５０】
ｑが、０、１、又は２である、請求項１４４〜１４７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５１】
ｑが、０又は１である、請求項１５０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５２】
Ａ1が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する、請求項２０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５３】
Ａ1が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する、請求項２２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１５４】
Ｒ1が、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項２２〜１５３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５５】
Ｒ2が、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項２２〜１５４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５６】
Ｙ1が、Ｈである、請求項２２〜１５５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５７】
ポリヌクレオチドの１つ又は複数のヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基に結合した式（Ｖ）：
【化１９】
2016537027.tif 000262
の１つ又は複数の基、又はその塩を含み、
式中、
各Ｌは、独立に、結合又は１つ若しくは複数の共役部分を含む共役基であり；
各Ｒ4は、独立に、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
各ｒは、独立に、１〜１０の整数であり；且つ
各Ａ5は、独立に：
【化２０】
2016537027.tif 000263
からなる群から選択され、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
各ｑは、独立に、０、１、２、３、又は４であり；
各ｓは、独立に、０、１、又は２であり；
式（ＩＩＩ）の基が前記ポリヌクレオチドの５’又は３’末端で結合しているとき、Ａ5は、（ｉ）、（ｘｖｉｉｉ）、（ｘｘｖ）、（ｘｘｖｉ）、（ｘｘｖｉｉ）又は（ｘｘｖｉｉｉ）ではない、ポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５８】
Ｒ9が、ハロ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである、請求項１５７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１５９】
２つの隣接するＲ9基が、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アルキル基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する、請求項１５７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６０】
Ａ5が：
【化２１】
2016537027.tif 000264
であり、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である、請求項１５７に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６１】
Ｒ17が、Ｈ又はＣ1〜6アルキルである、請求項１６０に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６２】
ｓが、０又は１である、請求項１５７〜１６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６３】
ｓが、０である、請求項１６２に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６４】
ｑが、０、１又は２である、請求項１５７〜１６３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６５】
ｑが、０又は１である、請求項１６４に記載のポリヌクレオチド構築物。
【請求項１６６】
相補的ポリヌクレオチドにハイブリダイズした請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物を含む、ハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１６７】
前記相補的ポリヌクレオチドが、１つ若しくは複数の成分（ｉ）、１つ若しくは複数の式（ＩＩ）の基、又は１つ若しくは複数の式（Ｖ）の基を含む、請求項１６６に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１６８】
ヌクレオチドの総数の７５％以下が、前記成分（ｉ）、式（ＩＩ）の基、又は式（Ｖ）の基を含む、請求項１６６又は１６７に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１６９】
請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物と前記相補的ポリヌクレオチドとが各々、１０〜３２個のヌクレオチドを有する、請求項１６６〜１６８のいずれか一項に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１７０】
請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物と前記相補的ポリヌクレオチドとが各々、１９〜２５個のヌクレオチドを有する、請求項１６６〜１６９のいずれか一項に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１７１】
請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物が、ガイド鎖であり、及び前記相補的ポリヌクレオチドが、パッセンジャー鎖である、請求項１６６〜１７０のいずれか一項に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１７２】
前記パッセンジャー鎖が、細胞内酵素により切断可能ではない部分を有する１つ又は複数のホスホトリエステルを含む、請求項１７１に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１７３】
前記細胞内酵素により切断可能ではない前記部分が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである、請求項１７２に記載のハイブリダイズポリヌクレオチド。
【請求項１７４】
式（ＶＩＩ）：
【化２２】
2016537027.tif 000265
の構造、又はその塩を有する化合物であって、
式中、
Ｂ1は、核酸塩基であり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、及びＮＲ4からなる群から選択され；
Ｙは、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、及び保護ヒドロキシル基からなる群から選択され；
Ｙ1は、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルであり；
Ｚは、非存在であるか、Ｏ、又はＳであり；
Ｒ1は、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、及び五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択され；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、アミノ、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され；並びに
Ｒ3は、式（ＶＩＩＩ）：
【化２３】
2016537027.tif 000266
の構造を有する基であり、
式中、Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、結合、又は１つ若しくは複数の共役部分を含む共役基であり；
Ｒ4は、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
ｒは、１〜１０の整数であり；
Ａ2、Ａ3、及びＡ4は結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成する、化合物。
【請求項１７５】
ｒが、１〜７である、請求項１７４に記載の化合物。
【請求項１７６】
各Ｘが、Ｏである、請求項１７４又は１７５に記載の化合物。
【請求項１７７】
各Ｚが、Ｏである、請求項１７４〜１７６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７８】
Ｙが、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又はヒドロキシルである、請求項１７４〜１７７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７９】
前記Ｙが、Ｆである、請求項１７８に記載の化合物。
【請求項１８０】
前記Ｙが、ＯＭｅである、請求項１７９に記載の化合物。
【請求項１８１】
Ｒ4が、ペリ環状反応；ヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ部分のアルキル化又はアリール化；及びヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ求核剤と求電子剤との反応からなる群から選択される反応によって形成される結合を介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される、請求項１７４〜１８０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８２】
Ｒ4が、アミド結合、スルホンアミド結合、カルボン酸エステル、チオエステル、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ6〜14アリール若しくはＣ1〜9ヘテロアリール；イミン；ヒドラゾン；オキシム；又はスクシンイミドを介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される、請求項１７４〜１８１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８３】
少なくとも１つのＲ4が、ターゲティング部分である、請求項１７４〜１８２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８４】
少なくとも１つのＲ4が、炭水化物である、請求項１７４〜１８３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８５】
少なくとも１つのＲ4が、マンノースである、請求項１７４〜１８４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８６】
少なくとも１つのＲ4が、Ｎ−アセチルガラクトサミンである、請求項１７４〜１８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８７】
少なくとも１つのＲ4が、葉酸リガンドである、請求項１７４〜１８６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８８】
少なくとも１つのＲ4が、少なくとも１つのタンパク質形質導入ドメインを含む、請求項１７４〜１８７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８９】
少なくとも１つのＲ4が、エンドソームエスケープ部分である、請求項１７４〜１８８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９０】
Ｌが、１〜５００のモノマーを含み、前記モノマーの各々が、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；カルボニル；チオカルボニル；イミノ；任意選択で置換されたＮ；Ｏ；又はＳ（Ｏ）m（ここで、ｍは、０、１、若しくは２である）である、請求項１７４〜１８９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９１】
Ｌが、１つ又は複数のＣ1〜6アルキレンオキシ基を含む、請求項１７４〜１９０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９２】
Ｌが、１００未満のＣ1〜6アルキレンオキシ基を含む、請求項１９１に記載の化合物。
【請求項１９３】
Ｌが、１つ又は複数のエチレンオキシ基を含む、請求項１７４〜１９２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９４】
Ｌが、１００未満のエチレンオキシ基を含む、請求項１７４に記載の化合物。
【請求項１９５】
Ｌが、１つ又は複数のポリ（アルキレンオキシド）を含む、請求項１７４〜１９３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９６】
前記ポリ（アルキレンオキシド）が、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、ポリ（トリメチレンオキシド）、ポリブチレンオキシド、ポリ（テトラメチレンオキシド）、及びそのジブロック又はトリブロックコポリマーから選択される、請求項１９５に記載の化合物。
【請求項１９７】
前記ポリ（アルキレンオキシド）が、ポリエチレンオキシドである、請求項１９５又は１９６に記載の化合物。
【請求項１９８】
Ｌが、１つ又は複数のアミノ酸残基を含む、請求項１７４〜１９７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９９】
前記アミノ酸残基の少なくとも１つが、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、及びＴｙｒからなる群から選択される、請求項１９８に記載の化合物。
【請求項２００】
Ｌが、式（ＩＩＩ）：
【化２４】
2016537027.tif 000267
の構造を有する基を含み、
式中、Ｑ1、Ｑ2、Ｑ3、及びＱ4は各々、独立に、Ｎ又はＣＲ7であり；
Ｘ1は、Ｏ又はＮＲ6であり；
Ｚ1は、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ7は、独立に、Ｈ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；ハロ；ヒドロキシル；−ＣＨＯ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルカノイル；カルボキシル；シアノ；ニトロ；アミノ；チオール；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；並びに任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニルからなる群から選択される、請求項１７４〜１９９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０１】
Ｑ1が、ＣＲ7である、請求項２００に記載の化合物。
【請求項２０２】
Ｑ2が、ＣＲ7である、請求項２００又は２０１に記載の化合物。
【請求項２０３】
Ｑ3が、ＣＲ7である、請求項２００〜２０２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０４】
Ｑ4が、ＣＲ7である、請求項２００〜２０３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０５】
各Ｒ7が、独立に、Ｈ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又はハロである、請求項２００〜２０４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０６】
Ｒ7が、Ｈである、請求項２０５に記載の化合物。
【請求項２０７】
Ｘ1が、ＮＲ6である、請求項２００〜２０６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０８】
Ｚ1が、Ｓである、請求項２００〜２０７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０９】
Ｌが、式（ＩＶ）：
【化２５】
2016537027.tif 000268
の構造を有する１つ又は複数の基を含み、
式中、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10は各々、独立に、Ｎ、ＣＲ7であるか、又は−Ｘ2若しくは−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つのみが、−Ｘ2に結合したＣであり、且つＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つのみが、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；
Ｘ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6シクロアルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたジアザアルケニレン；任意選択で置換された飽和ジアザ；不飽和ジアザ；任意選択で置換されたアザカルボニル；又はオキサカルボニルであり；
Ｘ3は、結合、Ｏ、ＮＲ7、又はＳであり；
Ｘ4は、非存在であるか、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンであり；且つ
Ｚ2は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ7であり；並びに
各Ｒ7は、独立に、Ｈ、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；並びに任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシからなる群から選択され；
Ｘ2及び−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に連結したＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10のうちの２つは、Ｎではない、請求項１７４〜２０８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１０】
Ｑ5が、Ｎである、請求項２０９に記載の化合物。
【請求項２１１】
Ｑ6が、ＣＲ7である、請求項２０９又は２１０に記載の化合物。
【請求項２１２】
Ｑ7が、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣである、請求項２０９〜２１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１３】
Ｑ8が、ＣＲ7である、請求項２０９〜２１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１４】
Ｑ9が、ＣＲ7である、請求項２０９〜２１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１５】
Ｑ10が、Ｘ2に結合したＣである、請求項２０９〜２１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１６】
各Ｒ7が、独立に、Ｈ；ハロ、及び任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルからなる群から選択される、請求項２０９〜２１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１７】
Ｒ7が、Ｈである、請求項２１６に記載の化合物。
【請求項２１８】
Ｘ2が、任意選択で置換されたジアザアルケニレン又は任意選択で置換された飽和ジアザである、請求項２０９〜２１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１９】
Ｘ3が、ＮＲ7である、請求項２０９〜２１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２０】
Ｘ2が、存在しない、請求項２０９〜２１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２１】
Ｚ2が、Ｏである、請求項２０９〜２２０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２２】
Ｌが、構造：
【化２６】
2016537027.tif 000269
を有する１つ又は複数の基を含む、請求項１７４〜２２１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２３】
Ｌが、結合である、請求項１７４〜２２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２４】
Ａ3が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択される、請求項１７４〜２２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２５】
Ａ3が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；及びＯからなる群から選択される、請求項１７４〜２２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２６】
Ａ3が、式（ＶＩ）：
【化２７】
2016537027.tif 000270
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ4に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ4への結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ4への結合）であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
Ｑ11及びＱ15の１つのみがＡ2に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ4に結合する、請求項２２５に記載の化合物。
【請求項２２７】
Ｑ11が、Ａ2に結合したＣである、請求項２２６に記載の化合物。
【請求項２２８】
Ｑ12が、Ａ4に結合したＣである、請求項２２６又は２２７に記載の化合物。
【請求項２２９】
Ｑ13が、Ｒ12に結合したＣである、請求項２２６〜２２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３０】
Ｒ12が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２２９に記載の化合物。
【請求項２３１】
Ｑ14が、Ｏである、請求項２２６〜２３０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３２】
Ｑ14が、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である、請求項２２６〜２３１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３３】
Ｑ14が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２３２に記載の化合物。
【請求項２３４】
Ｒ15が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２３２又は２３３に記載の化合物。
【請求項２３５】
Ｑ15が、Ｒ16に結合したＣである、請求項２２６〜２３４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３６】
Ｒ16が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２３５に記載の化合物。
【請求項２３７】
Ａ4が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレンである、請求項１７４〜２３６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３８】
Ａ1が、構造：
【化２８】
2016537027.tif 000271
を有する基を含む、請求項１７４〜２３７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３９】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項１７４〜２３７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４０】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項２３９に記載の化合物。
【請求項２４１】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項２４０に記載の化合物。
【請求項２４２】
Ａ1が、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含む、請求項２４１に記載の化合物。
【請求項２４３】
Ａ1が、結合である、請求項１７４〜２４２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４４】
Ａ2が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項１７４〜２４３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４５】
Ａ2が、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項２４４に記載の化合物。
【請求項２４６】
Ａ2が、任意選択で置換された任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである、請求項２４５に記載の化合物。
【請求項２４７】
Ａ2が、式（ＶＩ）：
【化２９】
2016537027.tif 000272
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又は前記ジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ3に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ3との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ3との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又は前記ジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
Ｑ11及びＱ15の１つのみが前記ジスルフィド結合に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ3に結合する、請求項２４６に記載の化合物。
【請求項２４８】
Ｑ11が、前記ジスルフィド結合に結合したＣである、請求項２４７に記載の化合物。
【請求項２４９】
Ｑ12が、Ａ3に結合したＣである、請求項２４７又は２４８に記載の化合物。
【請求項２５０】
Ｑ13が、Ｒ12に結合したＣである、請求項２４７〜２４９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５１】
Ｒ12が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２５０に記載の化合物。
【請求項２５２】
Ｑ14が、Ｏである、請求項２４７〜２５１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５３】
Ｑ14が、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である、請求項２４７〜２５２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５４】
Ｒ14が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２５３に記載の化合物。
【請求項２５５】
Ｒ15が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２５３又は２５４に記載の化合物。
【請求項２５６】
Ｑ15が、Ｒ16に結合したＣである、請求項２４７〜２５５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５７】
Ｒ16が、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２５６に記載の化合物。
【請求項２５８】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記アルキレン炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結している、請求項１７４〜２５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５９】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の前記硫黄原子に結合した前記炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記アルキレン炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項１７４〜２５８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６０】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルケニレン炭素原子であるとき、前記アルケニレン炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項１７４〜２５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６１】
−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の前記硫黄原子に結合した前記炭素原子が、アルキニレン炭素原子ではない、請求項１７４〜２６０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６２】
（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結している、請求項１７４〜２６１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６３】
（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、前記炭素原子は、水素原子に連結していない、請求項１７４〜２６２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６４】
Ａ1及びＡ2が、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する、請求項１７４〜２６３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６５】
Ａ1及びＡ2が、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜７員環を形成する、請求項２６４に記載の化合物。
【請求項２６６】
Ａ1が、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する、請求項１７４に記載の化合物。
【請求項２６７】
−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−又は−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−が：
【化３０】
2016537027.tif 000273
であり、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；且つ
ｓは、０、１、若しくは２である、請求項１７４〜２６６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６８】
２つの隣接するＲ9基が、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アルキル基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する、請求項２６７に記載の化合物。
【請求項２６９】
−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−又は−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−が：
【化３１】
2016537027.tif 000274
であり、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である、請求項２６７に記載の化合物。
【請求項２７０】
Ｒ17が、Ｈ、又はＣ1〜6アルキルである、請求項２６９に記載の化合物。
【請求項２７１】
Ｒ9が、ハロ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである、請求項２６７に記載の化合物。
【請求項２７２】
ｓが、０又は１である、請求項２６７〜２７１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７３】
ｓが、０である、請求項２７２に記載の化合物。
【請求項２７４】
ｑが、０、１、又は２である、請求項２６７〜２７３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７５】
ｑが、０又は１である、請求項２７４に記載の化合物。
【請求項２７６】
Ｙ1が、Ｈである、請求項１７４〜２７５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７７】
ポリヌクレオチド構築物を細胞に送達する方法であって、前記細胞を請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物又は請求項１６６〜１７３のいずれか一項に記載のハイブリダイズポリヌクレオチドと接触させるステップを含む、方法。
【請求項２７８】
細胞におけるポリペプチドの発現を低減する方法であって、前記細胞を請求項１〜１６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド構築物又は請求項１６６〜１７３のいずれか一項に記載のハイブリダイズポリヌクレオチドと接触させるステップを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞をトランスフェクトするための組成物及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞への核酸送達は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏのいずれにおいても多様な組換えウイルスベクター、脂質送達系及びエレクトロポレーションを用いて実施されている。こうした技術は、遺伝子発現のノックアウトにより様々な疾患及び障害を治療することを目指して、遺伝子療法のための、又は多様な生物系を研究するための遺伝子構築物を提供してきた。
【０００３】
ポリヌクレオチドなどのポリアニオン性ポリマーは、細胞膜を介して容易に拡散しない。培養細胞についてのこの問題を解決するには、典型的には、取込みを促進するために、カチオン性脂質をアニオン性ポリヌクレオチドと組み合わせる。残念ながら、この複合体は、一般に細胞に対して毒性を有し、これは、生存細胞のトランスフェクションを確実にするために、カチオン性脂質の暴露時間及び濃度を注意深く制御しなければならないことを意味する。
【０００４】
ｍＲＮＡを選択的に分解する細胞機構としてのＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）の発見は、細胞培養物における細胞表現型の標的化操作と、指向性治療薬の開発の潜在性との両方を可能にする（Ｂｅｈｌｋｅ，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１３，６４４−６７０，２００６；Ｘｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  １１，６７−７３，２００６）。しかし、そのサイズ及び陰性（アニオン）荷電性質のために、ｓｉＲＮＡは、細胞に侵入する能力がない巨大分子である。実際に、ｓｉＲＮＡは、膜分散性分子の細胞送達についてのリピンスキーの「ルールオブファイブ（Ｌｉｐｉｎｓｋｉ’ｓ  Ｒｕｌｅ  ｏｆ  ５ｓ）」（概して、サイズを５００Ｄａ未満に限定する）の２５倍過剰である。その結果、送達ビヒクル又はトランスフェクション剤の非存在下で、ネイキッドｓｉＲＮＡは、ミリモル濃度でも細胞に侵入しない（Ｂａｒｑｕｉｎｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．１１  Ｓｕｐｐｌ  １，Ｓ３−９，２００４）。ｓｉＲＮＡ送達の問題を解決するために、ｓｉＲＮＡを濃縮すると共に、細胞膜を穿孔するカチオン性脂質の使用に高い関心が集まっている。広く使用されているが、トランスフェクション試薬は、多くの細胞型、特に初代細胞及び造血細胞系譜（Ｔ及びＢ細胞、マクロファージ）への効率的な送達を達成することができない。さらに、リポフェクション試薬は、腫瘍細胞における軽度から初代細胞における高度まで多様な度合いの細胞傷害を頻繁に引き起こす。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一態様において、本発明は、ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物を提供し、ここで、１つ又は複数の成分の各々は、ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基、例えば、３’末端基に結合しており、且つ１つ又は複数の成分（ｉ）の各々が、ジスルフィド基に対して近位の１つ又は複数の嵩高い基を含有する。特定の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）が、ジスルフィド結合を末端基に連結するアルキレン基を含むとき、末端基とジスルフィド結合との間の最も短い鎖内の原子の数は、２、３、４、若しくは５であり；及び／又は１若しくは複数の成分（ｉ）のジスルフィド結合は、アルケニレンによってヌクレオチド間架橋基に連結していない。
【０００６】
別の態様において、本発明は、ジスルフィド結合を有する１つ又は複数の成分（ｉ）を含むポリヌクレオチド構築物を提供し、ここで、１つ又は複数の成分（ｉ）の各々は、ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基又は末端基、例えば、３’末端基に結合しており、且つ１つ又は複数の成分（ｉ）の各々は、ジスルフィド結合とヌクレオチド間架橋基又は末端基のリン原子との間の鎖内に少なくとも４個の原子を含有し；
鎖は、リン酸塩、アミド、エステル、若しくはアルケニレンを含有せず；
鎖が、アルキレン基を含むとき、末端基とジスルフィド基との間の原子の数は、４又は５である。
【０００７】
一部の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、又はエンドソームエスケープ部分のうちの１つ又は複数をさらに含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、炭水化物（例えば、Ｎ−アセチルガラクトサミン又はマンノース）を含む。特定の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、中性有機ポリマー又は陽荷電ポリマーを含む。他の実施形態では、中性有機ポリマーは、１〜２００のアルキレンオキシド単位（例えば、エチレンオキシド）を含む。また別の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、ターゲティング部分（例えば、葉酸リガンド）を含む。さらに別の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、ポリペプチド、例えば、タンパク質形質導入ドメインを含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）の少なくとも１つは、エンドソームエスケープ部分を含む。
【０００９】
別の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、一本鎖内に２〜１５０個のヌクレオチド、例えば、５〜５０、８〜４０、１０〜３２、１５〜２５、１８〜２５、又は２０〜２５個のヌクレオチドを有する。
【００１０】
任意の態様の特定の実施形態において、ジスルフィド結合は、ピリジル（例えば、２−ピリジル）に結合していない。
【００１１】
一部の実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）は各々、独立に、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の構造を有する基を含有し、
式中、Ａ1は、１つ又は複数の任意選択で置換されたＮ、Ｏ、Ｓ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン（例えば、ピリジルを除く）；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳのいずれも、ジスルフィドに直接結合されない）を含むか、又はこれらである結合若しくはリンカーであり；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらである結合部分であり；且つ
Ｒ4は、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
ｒは、１〜１０の整数であり；
ここで、Ａ4は、ヌクレオチド間架橋基又は末端基に対して近位であり；並びに
ここで、Ａ1又はＡ2は、−Ｓ−Ｓ−に対して近位の１つ又は複数の嵩高い基を含有する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の成分（ｉ）は、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の構造を有する基から構成される。
【００１３】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、式Ｉ：
【化１】
2016537027.tif 000002
の構造、又はその塩を有し、
式中、ｎは、０〜１５０の数であり；
各Ｂ1は、独立に、核酸塩基であり；
各Ｘは、独立に、Ｏ、Ｓ、及び任意選択で置換されたＮからなる群から選択され；
各Ｙは、独立に、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、及び保護ヒドロキシル基からなる群から選択され；
各Ｙ1は、独立に、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル（例えば、メチル）であり；
各Ｚは、独立に、Ｏ又はＳであり；
Ｒ1は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ1は、
【化２】
2016537027.tif 000003
若しくはその塩であり；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、クエンチャー含有基、ホスホチオール、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ2は、
【化３】
2016537027.tif 000004
若しくはその塩であり；且つ
各Ｒ3は、独立に、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又は式ＩＩ：
【化４】
2016537027.tif 000005
の構造を有する基であり、
式中、各Ａ1は、独立に、１つ又は複数の任意選択で置換されたＮ；Ｏ；Ｓ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン（例えば、ピリジルを除く）；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、若しくはＳは、ジスルフィドに直接結合されない）のうちの１つ又は複数を含むか、又はこれらである結合若しくはリンカーである；並びに各Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
各Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から独立に選択され；
各Ａ4は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
各Ｌは、独立に、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらである共役基であり；且つ
各Ｒ4は、独立に、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
各ｒは、独立に、１〜１０の整数であり；
ここで、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3の少なくとも１つにおいて、Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成する。
【００１４】
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ3は、式（ＩＩ）の構造を有する。
【００１５】
一部の実施形態では、Ｒ1及びＲ2の少なくとも１つは、
【化５】
2016537027.tif 000006
又はその塩である。
【００１６】
特定の実施形態において、Ｒ1又はＲ2が、
【化６】
2016537027.tif 000007
若しくはその塩（ここで、Ａ2、Ａ3、及びＡ4は結合して、アルキレン基を形成する）であるとき、このアルキレン基は、Ｃ4〜5アルキレンである。
【００１７】
別の実施形態では、Ｒ1又はＲ2が、
【化７】
2016537027.tif 000008
若しくはその塩であるとき、基−Ａ2−Ａ3−Ａ4−Ｘ−は、リン酸塩、アミド、エステル、又はアルケニレンを含有しない。
【００１８】
特定の実施形態において、Ｙ1は、Ｈである。
【００１９】
いくつかの実施形態では、各Ｘは、Ｏである。特定の実施形態では、各Ｚは、Ｏである。
【００２０】
一部の実施形態では、ヌクレオシドが、その３’−Ｏ−Ｐ−Ｘ鎖を介して、式（ＩＩ）の構造を有するＲ3に連結されるとき、このヌクレオシドのＹは、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又はヒドロキシルであり、例えば、Ｙは、Ｆ若しくはＯＭｅである。
【００２１】
別の実施形態では、Ｒ4は、ペリ環状反応；ヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ部分のアルキル化又はアリール化；及びヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ求核剤と求電子剤との反応からなる群から選択される反応によって形成される結合を介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される。また別の実施形態では、ペリ環状反応は、環状付加である。さらに別の実施形態では、環状付加は、ヒュスゲン環状付加である。
【００２２】
特定の実施形態では、Ｒ4は、アミド結合、スルホンアミド結合、カルボン酸エステル、チオエステル、任意選択で置換されたＣ6〜14アリール、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；イミン；ヒドラゾン；オキシム；又はスクシンイミドを介してＬ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、親水性官能基及び共役部分の１つ又は複数は、保護基で保護される。
【００２４】
一部の実施形態では、Ｌは、アルデヒド共役部分との縮合反応により形成されて、イミン、エナミン、オキシム、又はヒドラゾン結合を形成する。
【００２５】
他の実施形態では、ジスルフィドの最大で９０％が、１つ又は複数の補助部分に連結している。特定の実施形態では、ジスルフィドの最大で７５％が、１つ又は複数の補助部分に連結している。いくつかの実施形態では、ジスルフィドの最大で５０％が、１つ又は複数の補助部分に連結している。一部の実施形態では、ジスルフィドの最大で２５％が、１つ又は複数の補助部分に連結している。特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物中のヌクレオチドの最大で７５％が、ジスルフィドに連結している。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド構築物中のヌクレオチドの最大で６５％が、ジスルフィドに連結している。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物中のヌクレオチドの最大で５５％が、ジスルフィドに連結している。特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物中のヌクレオチドの最大で４５％が、ジスルフィドに連結している。
【００２６】
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、１〜１００個の式（ＩＩ）の基を含有する。別の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、２〜５０個の式（ＩＩ）の基を含有する。また別の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、２〜３０個の式（ＩＩ）の基を含有する。さらに別の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、２〜１０個の式（ＩＩ）の基を含有する。別の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、５〜５０個のヌクレオチドを含有する。特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、８〜４０個のヌクレオチドを含有する。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、１０〜３２個のヌクレオチドを含有する。
【００２７】
特定の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、ターゲティング部分を含むか、又はターゲティング部分である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、炭水化物を含むか、又は炭水化物である。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、マンノースを含むか、又はマンノースである。別の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、Ｎ−アセチルガラクトサミンを含むか、又はＮ−アセチルガラクトサミンである。また別の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、葉酸リガンドを含むか、又は葉酸リガンドである。さらに別の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、タンパク質形質導入ドメインを含むか、又はタンパク質形質導入ドメインである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、エンドソームエスケープ部分を含むか、又はエンドソームエスケープ部分である。特定の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、前立腺特異膜抗原（ＰＳＭＡ）を含むか、又は前立腺特異膜抗原（ＰＳＭＡ）である。
【００２８】
一部の実施形態では、非存在であるか、又はＨであるＲ3基と、式（ＩＩ）の構造を有するＲ3基との比は、１：１０〜１０：１、例えば、１：５〜５：１、１：３〜３：１、１：２〜２：１、又は約１：１である。
【００２９】
他の実施形態では、Ｌは、１〜５００個のモノマーを含むか、これらから構成され、モノマーの各々は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；カルボニル；チオカルボニル；イミノ；任意選択で置換されたＮ；Ｏ；又はＳ（Ｏ）m（ここで、ｍは、０、１、若しくは２である）である。
【００３０】
特定の実施形態では、Ｌは、１つ又は複数のＣ1〜6アルキレンオキシ基、例えば、エチレンオキシを含むか、これらから構成される。いくつかの実施形態では、Ｌは、１００未満のＣ1〜6アルキレンオキシ基、例えば、エチレンオキシを含む。また別の実施形態では、Ｌは、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、ポリ（トリメチレンオキシド）、ポリブチレンオキシド、ポリ（テトラメチレンオキシド）、又はそのジブロック若しくはトリブロックコポリマーを含むか、これらから構成される。特定の実施形態では、Ｌは、ポリエチレンオキシドを含むか、ポリエチレンオキシドから構成される。
【００３１】
一部の実施形態では、Ｌは、１つ又は複数のアミノ酸残基（例えば、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、若しくはＴｙｒ）を含むか、これらから構成される。
【００３２】
別の実施形態では、Ｌは、式（ＩＩＩ）：
【化８】
2016537027.tif 000009
の構造を有する基を含むか、この基であり、
式中、Ｑ1、Ｑ2、Ｑ3、及びＱ4は各々、独立に、Ｎ又はＣＲ7であり；
Ｘ1は、Ｏ又はＮＲ6であり；
Ｚ1は、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ7は、独立に、Ｈ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；ハロ；ヒドロキシル；−ＣＨＯ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルカノイル；カルボキシル；シアノ；ニトロ；アミノ；チオール；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；並びに任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニルからなる群から選択される。
【００３３】
特定の実施形態では、Ｑ1は、ＣＲ7であり；Ｑ2は、ＣＲ7であり；Ｑ3は、ＣＲ7であり；Ｑ4は、ＣＲ7であり；各Ｒ7は、独立に、Ｈ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、若しくはハロであり（例えば、Ｒ7は、Ｈである）；Ｘ1は、ＣＲ7であり；及び／又はＺ1は、Ｓである。
【００３４】
特定の実施形態では、Ｌは、式（ＩＶ）：
【化９】
2016537027.tif 000010
の構造を有する１つ又は複数の基を含むか、これらの基であり、
式中、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10は各々、独立に、Ｎ、ＣＲ7、又は−Ｘ2若しくは−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり、ここで、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つ以下が、−Ｘ2に結合したＣであり、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つ以下が、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；
Ｘ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたジアザアルケニレン；任意選択で置換された飽和ジアザ；不飽和ジアザ；任意選択で置換されたアザカルボニル；又はオキサカルボニルであり；
Ｘ3は、結合、Ｏ、ＮＲ7、又はＳであり；
Ｘ4は、非存在であるか、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンであり；
Ｚ2は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ7であり；
各Ｒ7は、独立に、Ｈ、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；並びに任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシからなる群から選択され；
ここで、Ｘ2及び−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に連結したＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10のうちの２つは、Ｎではない。
【００３５】
一部の実施形態では、Ｑ5は、Ｎであり；Ｑ6は、ＣＲ7であり；Ｑ7は、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；Ｑ8は、ＣＲ7であり；Ｑ9は、ＣＲ7であり；及び／又はＱ10は、Ｘ2に結合したＣである。各Ｒ7は、独立に、Ｈ、ハロ、及び任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルからなる群から選択されてもよい（例えば、Ｒ7は、Ｈである）。別の実施形態では、Ｘ2は、任意選択で置換されたジアザアルケニレン又は任意選択で置換された飽和ジアザである。また別の実施形態では、Ｘ3は、ＮＲ7である。特定の実施形態では、Ｘ2は、存在しない。いくつかの実施形態では、Ｚ4は、Ｏである。
【００３６】
別の実施形態では、Ｌは、式（ＶＩａ）及び（ＶＩｂ）：
【化１０】
2016537027.tif 000011
の構造を有する１つ又は複数の基を含むか、これらの基であり、
式中、Ｑ16、Ｑ17、及びＱ18の各々は、独立に、Ｎ若しくはＣＲ7であり；
Ｒ7の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である。
【００３７】
別の実施形態では、Ｌは、下記の構造：
【化１１】
2016537027.tif 000012
を有する１つ又は複数の基を含むか、これらの基である。
【００３８】
他の実施形態では、Ｌは、結合である。
【００３９】
一部の実施形態では、Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択される。
【００４０】
別の実施形態では、Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；及びＯからなる群から選択される。
【００４１】
いくつかの実施形態では、Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレンである。
【００４２】
特定の実施形態では、Ａ1は、下記の構造：
【化１２】
2016537027.tif 000013
を有する基を含むか、この基である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン（例えば、ピリジルを除く）；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００４４】
特定の実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００４５】
いくつかの実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００４６】
別の実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００４７】
特定の実施形態では、Ａ1は、結合である。
【００４８】
いくつかの実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。
【００４９】
別の実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。また別の実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換された任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。
【００５０】
さらに別の実施形態では、Ａ2は、式（ＶＩ）：
【化１３】
2016537027.tif 000014
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ3に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ3との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ3との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
ここで、Ｑ11及びＱ15の１つのみが、ジスルフィド結合に結合し、並びにＱ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ3に結合する。
【００５１】
特定の実施形態では、Ｑ11は、ジスルフィド結合に結合したＣであり；Ｑ12は、Ａ3に結合したＣであり；Ｑ13は、Ｒ12に結合したＣであり；Ｒ12は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルであり；Ｑ14は、Ｏ又は−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−であり；Ｒ14は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルであり；Ｒ15は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルであり；Ｑ15は、Ｒ16に結合したＣであり；及び／又はＲ16は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。
【００５２】
別の実施形態では、Ａ3は、式（ＶＩ）：
【化１４】
2016537027.tif 000015
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ4に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ4との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ4との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
Ｑ11及びＱ15の１つのみが、Ａ2に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ4に結合する。
【００５３】
いくつかの実施形態では、Ｑ11は、Ａ2に結合したＣである。特定の実施形態では、Ｑ12は、Ａ4に結合したＣである。一部の実施形態では、Ｑ13は、Ｒ12に結合したＣである。他の実施形態では、Ｒ12は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。いくつかの他の実施形態では、Ｒ14は、Ｏである。また別の実施形態では、Ｑ14は、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である。さらに別の実施形態では、Ｑ14は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ15は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。特定の実施形態では、Ｑ15は、Ｒ16に結合したＣである。いくつかの実施形態では、Ｒ16は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。
【００５４】
一部の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、このアルキレン炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結し、例えば、水素原子に連結しない。また別の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルケニレン炭素原子であるとき、アルケニレン炭素原子は、水素原子に連結しない。さらに別の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子は、アルキニレン炭素原子ではない。いくつかの実施形態では、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、この炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結し、例えば、水素原子には連結しない。
【００５５】
いくつかの実施形態では、Ａ1及びＡ2は、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環、例えば、任意選択で置換された５〜７員環を形成する。
【００５６】
特定の実施形態では、Ａ1、Ａ2、Ａ3、及びＡ4、又はＡ2、Ａ3、及びＡ4とジスルフィド結合とが結合して：
【化１５】
2016537027.tif 000016
のいずれか１つの構造を有する基を形成し、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；且つ
ｓは、０、１、若しくは２である。
【００５７】
いくつかの実施形態では、Ｒ9は、ハロ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである。一部の実施形態では、ｓは、０又は１である。また別の実施形態では、ｓは、０である。さらに別の実施形態では、ｑは、０、１、又は２である。さらにまた別の実施形態では、ｑは、０又は１である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アリール基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する。
【００５９】
いくつかの実施形態では、Ａ2、Ａ3、Ａ4、及び−Ｓ−Ｓ−が結合して、構造：
【化１６】
2016537027.tif 000017
を形成し、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価（ｖａｃａｎｔ  ｖａｌｅｎｃｙ）を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である。
【００６０】
一部の実施形態では、Ｒ17は、Ｈ、又はＣ1〜6アルキルである。
【００６１】
特定の実施形態では、Ａ2、Ａ3、Ａ4、及びジスルフィド結合が結合して：
【化１７】
2016537027.tif 000018
のいずれか１つの構造を有する基を形成する。
【００６２】
特定の実施形態では、Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する。いくつかの実施形態では、Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する。
【００６３】
一部の実施形態では、Ｒ1は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
【００６４】
いくつかの実施形態では、Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
【００６５】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、ポリヌクレオチドの１つ又は複数のヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基に結合した式（Ｖ）の１つ又は複数の基：
【化１８】
2016537027.tif 000019
又はその塩を含み、
式中、
各Ｌは、独立に、結合、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらである共役基であり；
各Ｒ4は、独立に、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
各ｒは、独立に、１〜１０の整数であり；且つ
各Ａ5は、独立に：
【化１９】
2016537027.tif 000020
からなる群から選択され、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、又は４であり；
ｓは、０、１、又は２であり；
ここで、式（Ｖ）の基は、ポリヌクレオチドの５’又は３’末端で結合しているとき、Ａ5は、（ｉ）、（ｘｖｉｉｉ）、（ｘｘｖ）、（ｘｘｖｉ）、（ｘｘｖｉｉ）又は（ｘｘｖｉｉｉ）ではない。
【００６６】
一部の実施形態では、Ｒ9は、ハロ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである。特定の実施形態では、ｓは、０又は１である。いくつかの実施形態では、ｓは０である。他の実施形態では、ｑは、０、１、又は２である。また別の実施形態では、ｑは、０又は１である。
【００６７】
特定の実施形態では、２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アルキル基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する。
【００６８】
いくつかの実施形態では、Ａ5は：
【化２０】
2016537027.tif 000021
であり、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である。
【００６９】
一部の実施形態では、Ｒ17は、Ｈ又はＣ1〜6アルキルである。
【００７０】
特定の実施形態では、Ａ5は：
【化２１】
2016537027.tif 000022
のいずれか１つの構造を有する。
【００７１】
また別の実施形態では、本発明は、相補的ポリヌクレオチド、例えば、ｓｉＲＮＡとハイブリダイズした本発明の任意のポリヌクレオチド構築物を含む、ハイブリダイズしたポリヌクレオチドを提供する。
【００７２】
特定の実施形態では、相補的ポリヌクレオチドは、１つ若しくは複数の成分（ｉ）、１つ若しくは複数の式（ＩＩ）の基、又は１つ若しくは複数の式（ＩＩＩ）の基を含有する。特定の実施形態では、ヌクレオチドの総数の７５％以下が、成分（ｉ）、式（ＩＩ）の基、又は式（ＩＩＩ）の基を有さない。一部の実施形態では、前述の態様のポリヌクレオチド構築物及び相補的ヌクレオチドは各々、５〜５０個のヌクレオチドを有する。特定の実施形態では、前述の態様のポリヌクレオチド構築物及び相補的は各々、１０〜３２個のヌクレオチドを有する。特定の実施形態では、前述の態様のポリヌクレオチド構築物及び相補的ヌクレオチドは各々、１９〜２５個のヌクレオチドを有する。別の実施形態では、前述の態様のポリヌクレオチド構築物は、ガイド鎖であり、及び相補的ポリヌクレオチドは、パッセンジャー鎖である。いくつかの実施形態では、パッセンジャー鎖は、細胞内酵素により切断可能ではない部分を有する１つ又は複数のホスホトリエステルを含有する。特定の実施形態では、細胞内酵素により切断可能ではない部分は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである。
【００７３】
また別の態様では、本発明は、式（ＶＩＩ）：
【化２２】
2016537027.tif 000023
の構造、又はその塩を有する化合物を提供し、
式中、
Ｂ1は、核酸塩基であり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、及びＮＲ4からなる群から選択され；
Ｙは、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、及び保護ヒドロキシル基からなる群から選択され；
Ｙ1は、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル（例えば、メチル）であり；
Ｚは、非存在であるか、Ｏ、又はＳであり；
Ｒ1は、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、及び五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択され；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、アミノ、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され；並びに
Ｒ3は、式（ＶＩＩＩ）：
【化２３】
2016537027.tif 000024
の構造を有する基であり、
式中、Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、結合、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらである共役基であり；
Ｒ4は、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
ｒは、１〜１０の整数であり；
ここで、Ａ2、Ａ3、及びＡ4は結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、Ｙ1は、Ｈである。
【００７５】
一部の実施形態では、ｒは、１〜７である。いくつかの実施形態では、各Ｘは、Ｏである。特定の実施形態では、各Ｚは、Ｏである。別の実施形態では、Ｙは、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又はヒドロキシルである。また別の実施形態では、Ｙは、Ｆである。さらに別の実施形態では、Ｙは、ＯＭｅである。
【００７６】
特定の実施形態では、Ｒ4は、ペリ環状反応；ヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ部分のアルキル化又はアリール化；及びヒドロキシル、チオール、若しくはアミノ求核剤と求電子剤との反応からなる群から選択される反応によって形成される結合を介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合される。いくつかの実施形態では、Ｒ4は、アミド結合、スルホンアミド結合、カルボン酸エステル、チオエステル、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ6〜14アリール若しくはＣ1〜9ヘテロアリール；イミン；ヒドラゾン；オキシム；又はスクシンイミドを介して、Ｌ、Ａ1、又はジスルフィドに結合されている。
【００７７】
いくつかの実施形態では、親水性官能基及び共役部分の１つ又は複数は、保護基で保護される。別の実施形態では、Ｌは、アルデヒド共役部分との縮合反応により形成されて、イミン、エナミン又はヒドラゾン結合を形成する。また別の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、ターゲティング部分である。さらに別の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、炭水化物を含むか、又は炭水化物である。特定の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、マンノースである。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、Ｎ−アセチルガラクトサミンである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、葉酸リガンドを含むか、又は葉酸リガンドである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、少なくとも１つのタンパク質形質導入ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ4は、エンドソームエスケープ部分である。
【００７８】
いくつかの実施形態では、Ｌは、１〜５００のモノマーを含むか、これらから構成され、その各々は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；カルボニル；チオカルボニル；イミノ；任意選択で置換されたＮ；Ｏ；又はＳである。一部の実施形態では、Ｌは、１つ又は複数のＣ1〜6アルキレンオキシ基を含むか、これらから構成される。特定の実施形態では、Ｌは、１００未満のＣ1〜6アルキレンオキシ基、例えば、エチレンオキシを含むか、これらから構成される。いくつかの実施形態では、Ｌは、１００未満のエチレンオキシ基を含むか、これらから構成される。一部の実施形態では、Ｌは、１つ又は複数のポリ（アルキレンオキシド）、例えば、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、ポリ（トリメチレンオキシド）、ポリブチレンオキシド、ポリ（テトラメチレンオキシド）、及びそのジブロック又はトリブロックコポリマーを含むか、これらから構成される。
【００７９】
一部の実施形態では、Ｌは、１つ又は複数のアミノ酸残基を含むか、これらから構成される（例えば、アミノ酸残基の少なくとも１つは、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、若しくはＴｙｒからなる群から選択される）。
【００８０】
いくつかの実施形態では、Ｌは、式（ＩＩＩ）：
【化２４】
2016537027.tif 000025
の構造を有する基を含むか、この基であり、
式中、Ｑ1、Ｑ2、Ｑ3、及びＱ4は各々、独立に、Ｎ又はＣＲ7であり；
Ｘ1は、Ｏ又はＮＲ6であり；
Ｚ1は、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ7は、独立に、Ｈ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；ハロ；ヒドロキシル；−ＣＨＯ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルカノイル；カルボキシル；シアノ；ニトロ；アミノ；チオール；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；並びに任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニルからなる群から選択される。
【００８１】
特定の実施形態では、Ｑ1は、ＣＲ7であり；Ｑ2は、ＣＲ7であり；Ｑ3は、ＣＲ7であり；及び／又はＱ4は、ＣＲ7である。いくつかの実施形態では、各Ｒ7は、独立に、Ｈ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又はハロである。特定の実施形態では、Ｒ7は、Ｈである。一部の実施形態では、Ｘ1は、ＣＲ7である。いくつかの実施形態では、Ｚ1は、Ｓである。
【００８２】
特定の実施形態では、Ｌは、式（ＩＶ）：
【化２５】
2016537027.tif 000026
の構造を有する１つ又は複数の基を含むか、これらの基から構成され、
式中、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10は各々、独立に、Ｎ、ＣＲ7であるか、又は−Ｘ2若しくは−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり、ここで、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つ以下が、−Ｘ2に結合したＣであり、また、Ｑ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10の１つ以下が、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；
Ｘ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6シクロアルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたジアザアルケニレン；任意選択で置換された飽和ジアザ；不飽和ジアザ；任意選択で置換されたアザカルボニル；又はオキサカルボニルであり；
Ｘ3は、結合、Ｏ、ＮＲ7、又はＳであり；
Ｘ4は、非存在であるか、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンであり；
Ｚ2は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ7であり；並びに
各Ｒ7は、独立に、Ｈ、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；並びに任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシからなる群から選択され；
ここで、Ｘ2及び−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に連結したＱ5、Ｑ6、Ｑ7、Ｑ8、Ｑ9、及びＱ10のうちの２つは、Ｎではない。
【００８３】
一部の実施形態では、Ｑ5は、Ｎであり；Ｑ6は、ＣＲ7であり；Ｑ7は、−Ｃ（Ｚ2）Ｘ3Ｘ4に結合したＣであり；Ｑ8は、ＣＲ7であり；Ｑ9は、ＣＲ7であり；及びＱ10は、Ｘ2に結合したＣである。
【００８４】
別の実施形態では、各Ｒ7は、独立に、Ｈ；ハロ、及び任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルからなる群から選択される。また別の実施形態では、Ｒ7は、Ｈである。Ｘ2は、任意選択で置換されたジアザアルケニレン又は任意選択で置換された飽和ジアザである。いくつかの別の実施形態では、Ｘ3は、ＮＲ7である。また別の実施形態では、Ｘ4は、存在しない。特定の実施形態では、Ｚ2は、Ｏである。
【００８５】
さらに別の実施形態では、Ｌは、下記の構造：
【化２６】
2016537027.tif 000027
を有する１つ又は複数の基を含むか、又はこれらの基である。
【００８６】
特定の実施形態では、Ｌは、結合である。
【００８７】
いくつかの実施形態では、Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択される。一部の実施形態では、Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；及びＯからなる群から選択される。
【００８８】
別の実施形態では、Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレンである。
【００８９】
また別の実施形態では、Ａ1は、下記の構造：
【化２７】
2016537027.tif 000028
を有する基を含むか、この基である。
【００９０】
さらに別の実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００９１】
特定の実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００９２】
いくつかの実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００９３】
別の実施形態では、Ａ1は、結合であるか、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；任意選択で置換されたＮ；及びＯからなる群から独立に選択される１つ又は複数の基を含有するか、若しくはこれらの基である。
【００９４】
特定の実施形態では、Ａ1は、結合である。
【００９５】
いくつかの実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。
【００９６】
別の実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン、任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。また別の実施形態では、Ａ2は、任意選択で置換された任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン又はＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレンである。さらに別の実施形態では、Ａ2は、式（ＶＩ）：
【化２８】
2016537027.tif 000029
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ3に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ3に結合したＮ若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13若しくはＡ3に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ3との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ3との結合）−であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はジスルフィド結合に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
ここで、Ｑ11及びＱ15の１つのみが、ジスルフィド結合に結合し、Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ3に結合する。
【００９７】
一部の実施形態では、Ｑ13は、Ａ3に結合したＣである。別の実施形態では、Ｑ11は、Ｒ10に結合したＣである。他の実施形態では、Ｑ12は、Ｒ11に結合したＣである。他の実施形態では、Ｑ14は、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である。別の実施形態では、Ｑ15は、ジスルフィド結合に結合している。
【００９８】
いくつかの実施形態では、Ｑ11は、ジスルフィド結合に結合したＣであり；Ｑ12は、Ａ3に結合したＣであり；及び／又はＱ13は、Ｒ12に結合したＣである。Ｒ12は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。特定の実施形態では、Ｑ14は、Ｏである。一部の実施形態では、Ｑ14は、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である。他の実施形態では、Ｒ14は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。また別の実施形態では、Ｒ15は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。さらに別の実施形態では、Ｑ15は、Ｒ16に結合したＣである（例えば、Ｒ16は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである）。
【００９９】
別の実施形態では、Ａ3は、式（ＶＩ）：
【化２９】
2016537027.tif 000030
の構造を有し、
式中、
Ｑ11は、Ｒ10又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ12は、Ｒ11又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ13は、Ｒ12又はＡ4に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｑ14は、Ｒ13又はＡ4に結合したＯ、Ｓ、Ｎ、又は−Ｃ（Ｒ14若しくはＡ4との結合）＝Ｃ（Ｒ15若しくはＡ4との結合）であり；
Ｑ15は、Ｒ16又はＡ2に結合したＮ、若しくはＣであり；
Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、及びＲ16の各々は、独立に、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）であり；
ここで、Ｑ11及びＱ15の１つのみが、Ａ2に結合し、並びに
Ｑ12、Ｑ13、及びＱ14の１つのみがＡ4に結合する。
【０１００】
いくつかの実施形態では、Ｑ11は、Ａ2に結合したＣである。特定の実施形態では、Ｑ12は、Ａ4に結合したＣである。いくつかの実施形態では、Ｑ13は、Ｒ12に結合したＣである。他の実施形態では、Ｒ12は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ14は、Ｏである。また別の実施形態では、Ｑ14は、−Ｃ（Ｒ14）＝Ｃ（Ｒ15）−である。さらに別の実施形態では、Ｑ14は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ15は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。特定の実施形態では、Ｑ15は、Ｒ16に結合したＣである。いくつかの実施形態では、Ｒ16は、Ｈ、ハロ、又はＣ1〜6アルキルである。
【０１０１】
一部の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、このアルキレン炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結し、例えば、水素原子には連結しない。また別の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルケニレン炭素原子であるとき、アルケニレン炭素原子は、水素原子に連結しない。さらに別の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の硫黄原子に結合した炭素原子は、アルキニレン炭素原子ではない。いくつかの実施形態では、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−の硫黄原子に結合した炭素原子が、アルキレン炭素原子であるとき、この炭素原子は、最大で１個の水素原子に連結し、例えば、水素原子に連結しない。
【０１０２】
特定の実施形態では、Ａ1及びＡ2は、これらが結合した−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環、例えば、任意選択で置換された５〜７員環を形成する。
【０１０３】
また別の実施形態では、Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ2〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；並びにＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成する。
【０１０４】
一部の実施形態では、−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−又は−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−は：
【化３０】
2016537027.tif 000031
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；Ｎ、Ｏから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；且つ
ｓは、０、１、若しくは２である。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、Ｒ9は、ハロ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルである。別の実施形態では、ｓは、０又は１である。また別の実施形態では、ｓは０である。また別の実施形態では、ｑは、０、１、又は２である。いくつかの他の実施形態では、ｑは、０又は１である。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、任意選択で１、２、又は３個のＣ1〜6アルキル基で置換されたＣ2〜5ヘテロアリールを形成する。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、Ａ2、Ａ3、Ａ4、及び−Ｓ−Ｓ−は、結合して、構造：
【化３１】
2016537027.tif 000032
を形成し、
式中、点線は、１つのみの二重結合を表し、且つ
Ｒ17は、空原子価を有する窒素原子に結合し、且つ、Ｈ、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；又は−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）である。
【０１０８】
一部の実施形態では、Ｒ17は、Ｈ又はＣ1〜6アルキルである。
【０１０９】
特定の実施形態では、−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−は：
【化３２】
2016537027.tif 000033
のいずれか１つの構造を有する。
【０１１０】
別の態様では、本発明は、ポリヌクレオチド構築物を細胞に送達する方法であって、前記細胞を前述した態様の実施形態のいずれかのポリヌクレオチド構築物又は前述の態様のいずれかの実施形態のハイブリダイズしたポリヌクレオチドと接触させるステップを含む方法を提供する。
【０１１１】
別の態様では、本発明は、ポリヌクレオチド構築物を細胞に送達する方法を提供する。本方法は、前記細胞を本発明のポリヌクレオチド構築物又は本発明のハイブリダイズしたポリヌクレオチドと接触させるステップを含む。
【０１１２】
本発明のいずれかの態様のいくつかの実施形態では、成分（ｉ）、Ｒ4、Ｌ、及びＡ1のいずれも、グアニジニル基を含有しない。別の態様では、前記のいずれについても、ジスルフィド結合又は−Ｓ−Ｓ−基は、チオエステル又は−Ｃ（Ｏ）Ｓ−若しくは−Ｃ（Ｓ）Ｓ−基で置換してもよい。
【０１１３】
定義
本明細書で使用されるとき、用語「約」は、記述される値の±１０％である値を表す。
【０１１４】
本明細書で使用されるとき、用語「活性化カルボニル」は、−Ｃ（Ｏ）ＲA（ＲAは、ハロゲン、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、任意選択で置換されたＣ6〜10アリールオキシ、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロアリールオキシ（例えば、−ＯＢｔ）、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリルオキシ（例えば、−ＯＳｕ）、任意選択で置換されたピリジニウム（例えば、４−ジメチルアミノピリジニウム）、又は−Ｎ（ＯＭｅ）Ｍｅ）の式を有する基を表す。
【０１１５】
本明細書で使用されるとき、用語「活性化リン中心」は、置換基の少なくとも１つが、ハロゲン、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、任意選択で置換されたＣ6〜10アリールオキシ、リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、任意選択で置換されたピリジニウム（例えば、４−ジメチルアミノピリジニウム）、又は任意選択で置換されたアンモニウムである、三価リン（ＩＩＩ）又は五価リン（Ｖ）中心を表す。
【０１１６】
本明細書で使用されるとき、用語「活性化ケイ素中心」は、置換基の少なくとも１つが、ハロゲン、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、アミノである、四置換ケイ素中心を表す。
【０１１７】
本明細書で使用されるとき、用語「活性化硫黄中心」は、置換基の少なくとも１つが、ハロゲン、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、任意選択で置換されたＣ6〜10アリールオキシ、リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、任意選択で置換されたピリジニウム（例えば、４−ジメチルアミノピリジニウム）、又は任意選択で置換されたアンモニウムである、四価硫黄を表す。
【０１１８】
本明細書で使用されるとき、用語「アルカノイル」は、カルボニル基を介して親分子基に結合した水素又はアルキル基（例えば、ハロアルキル基）を表し、例として、ホルミル（すなわち、カルボキシアルデヒド基）、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリルなどが挙げられる。例示的非置換アルカノイル基は、１〜７個の炭素を含む。一部の実施形態では、アルキル基は、本明細書に記載する１、２、３、又は４個の置換基でさらに置換される。
【０１１９】
本明細書で使用されるとき、用語「（Ｃx1〜y1アリール）−Ｃx2〜y2−アルキル」は、ｘ２〜ｙ２個の炭素原子のアルキレン基を介して、親分子基に結合したｘ１〜ｙ１個の炭素原子のアリール基を表す。例示的非置換（Ｃx1〜y1アリール）−Ｃx2〜y2−アルキル基は、炭素数７〜１６である。一部の実施形態では、アルキレン及びアリールは、それぞれの基について本明細書で定義する１、２、３、又は４個の置換基でさらに置換することができる。後ろに「アルキル」が続く別の基は、同様に定義され、「アルキル」は別に注記のない限り、Ｃ1〜6アルキルを指し、結合した化学構造は、本明細書に定義する通りである。
【０１２０】
本明細書で使用されるとき、用語「アルケニル」は、１、２、若しくは３つの炭素−炭素二重結合を含む非環式一価直鎖又は分岐鎖を表す。アルケニル基の非限定的例として、エテニル、プロプ−１−エニル、プロプ−２−エニル、１−メチルエテニル、ブト−１−エニル、ブト−２−エニル、ブト−３−エニル、１−メチルプロプ−１−エニル、２−メチルプロプ−１−エニル、及び１−メチルプロプ−２−エニルが挙げられる。アルケニル基は、独立に、本明細書に定義するアリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）、並びにアルキルについて記載する置換基からなる群から選択される１、２、３、又は４個の置換基で、任意選択で置換してもよい。さらに、アルケニル基が本発明の生体可逆的基（ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｇｒｏｕｐ）に存在するとき、本明細書に定義する共役部分、親水性官能基、又は補助部分に結合するチオエステル又はジスルフィド結合で置換してもよい。
【０１２１】
本明細書で使用されるとき、用語「アルケニニレン」は、１個の水素が除去され、それによって二価になった直鎖又は分岐鎖アルケニル基を指す。アルケニレンの非限定的例として、エテン−１，１−ジイル；エテン−１，２−ジイル；プロプ−１−エン−１，１−ジイル、プロプ−２−エン−１，１−ジイル；プロプ−１−エン−１，２−ジイル、プロプ−１−エン−１，３−ジイル；プロプ−２−エン−１，１−ジイル；プロプ−２−エン−１，２−ジイル；ブト−１−エン−１，１−ジイル；ブト−１−エン−１，２−ジイル；ブト−１−エン−１，３−ジイル；ブト−１−エン−１，４−ジイル；ブト−２−エン−１，１−ジイル；ブト−２−エン−１，２−ジイル；ブト−２−エン−１，３−ジイル；ブト−２−エン−１，４−ジイル；ブト−２−エン−２，３−ジイル；ブト−３−エン−１，１−ジイル；ブト−３−エン−１，２−ジイル；ブト−３−エン−１，３−ジイル；ブト−３−エン−２，３−ジイル；ブタ−１，２−ジエン−１，１−ジイル；ブタ−１，２−ジエン−１，３−ジイル；ブタ−１，２−ジエン−１，４−ジイル；ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル；ブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル；ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル；ブタ−１，３−ジエン−１，４−ジイル；ブタ−１，３−ジエン−２，３−ジイル；ブタ−２，３−ジエン−１，１−ジイル；及びブタ−２，３−ジエン−１，２−ジイルが挙げられる。アルケニレン基は、アルケニル基について記載したように、非置換又は置換（例えば、任意選択で置換されたアルケニレン）のいずれであってもよい。
【０１２２】
本明細書で使用されるとき、用語「アルコキシ」は、別に指定されない限り、式−ＯＲ（Ｒは、Ｃ1〜6アルキルである）の化学置換基を表す。一部の実施形態では、アルキル基は、本明細書に定義する１、２、３、又は４個の置換基でさらに置換することができる。
【０１２３】
本明細書で使用されるとき、用語「アルキル」は、別に指定されない限り、１〜１２個の炭素を有する非環式直鎖又は分岐鎖飽和炭化水素基を指す。アルキル基の例としては、メチル；エチル；ｎ−及びイソ−プロピル；ｎ−、ｓｅｃ−、イソ−及びｔｅｒｔ−ブチル；ネオペンチルなどが挙げられ、アルキル基は、任意選択で、（１）アルコキシ；（２）アルキルスルフィニル；（３）アミノ；（４）アリールアルコキシ；（５）（アリールアルキル）アザ；（６）アジド；（７）ハロ；（８）（ヘテロシクリル）オキシ；（９）（ヘテロシクリル）アザ；（１０）ヒドロキシ；（１１）ニトロ；（１２）オキソ；（１３）アリールオキシ；（１４）スルフィド；（１５）チオアルコキシ；（１６）チオール；（１７）−ＣＯ2ＲA（ＲAは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、（ｃ）水素、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（１８）−Ｃ（Ｏ）ＮＲBＲC（ＲB及びＲCは、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（１９）−ＳＯ2ＲD（ＲDは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、及び（ｃ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２０）−ＳＯ2ＮＲEＲF（ＲE及びＲFの各々は、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２１）シリル；（２２）シアノ；並びに（２３）−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、３個、又は炭素数２以上のアルキル基の場合には４個の置換基で置換してもよい。一部の実施形態では、これらの基の各々は、本明細書に記載するように、さらに置換することができる。いくつかの実施形態では、親分子基に結合するアルキル炭素原子は、オキソ置換されない。
【０１２４】
本明細書で使用されるとき、用語「アルキレン」は、少なくとも２個の水素原子の除去によって直鎖又は分岐鎖飽和炭化水素から得られる飽和二価、三価、又は四価炭化水素基を指す。アルキレンは、任意選択の置換基ではない１つのアザ基に結合している場合に限り、三価であってよく；アルキレンは、任意選択の置換基ではない２つのアザ基に結合している場合に限り、三価又は四価であってよい。本明細書に定義するアルキレンの原子価は、任意選択の置換基を含まない。アルキレン基の非限定的例として、メチレン、エタン−１，２−ジイル、エタン−１，１−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−１，１−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，１−ジイル、及びブタン−２，２−ジイル、ブタン−２，３−ジイルが挙げられる。用語「Ｃx-yアルキレン」は、ｘ〜ｙ個の炭素を有するアルキレン基を表す。ｘの値の例は、１、２、３、４、５、及び６であり、ｙの値の例は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、及び１２である。一部の実施形態では、アルキレンは、アルキル基について本明細書で定義した１、２、３、又は４個の置換基でさらに置換することができる。同様に、接尾辞「エン（ｅｎｅ）」は、本明細書に定義した対応する一価ラジカルの二価ラジカルを示す。例えば、アルケニレン、アルキニレン、アリレン、アリールアルキレン、シクロアルキレン、シクロアルキルアルキレン、シクロアルケニレン、ヘテロアリレン、ヘテロアリールアルキレン、ヘテロシクリレン、及びヘテロシクリルアルキレンは、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、及びヘテロシクリルアルキルの二価形態である。アリールアルキレン、シクロアルキルアルキレン、ヘテロアリールアルキレン、及びヘテロシクリルアルキレンの場合、この基における２つの原子価は、環式部分にのみ位置するか、又は１つは環式部分に１つは非環式部分に位置し得る。さらに、アルキル若しくはアルキレン、アルケニル若しくはアルケニレン、又はアルキニル若しくはアルキニル基が、ヌクレオチド間架橋基又はヌクレオシドに結合した末端リン含有部分に結合した基に存在するとき、これは、エステル、チオエステル、又は共役部分に結合したジスルフィド基、親水性官能基、若しくは本明細書に定義する補助部分で置換してもよい。例えば、アリール−Ｃ1−アルキレン又はヘテロシクリル−Ｃ1−アルキレンのアルキレン基をオキソ基でさらに置換することにより、それぞれアリーロイル及び（ヘテロシクリル）オイル置換基を取得することができる。
【０１２５】
本明細書で使用されるとき、用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する２〜６個の炭素原子の一価直鎖又は分岐鎖炭化水素基を表す。アルキニル基は、任意選択で、本明細書に定義するアリール、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）、並びにアルキルについて本明細書に記載する置換基から独立に選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換してもよい。
【０１２６】
本明細書で使用されるとき、用語「アルキニレン」は、１つ又は２つの炭素−炭素三重結合を含み、非置換の場合にはＣ及びＨのみを含有する直鎖又は分岐鎖二価置換基を指す。アルケニレン基の非限定的例として、エチン−１，２−ジイル；プロプ−１−イン−１，３−ジイル；プロプ−２−イン−１，１−ジイル；ブト−１−イン−１，３−ジイル；ブト−１−イン−１，４−ジイル；ブト−２−イン−１，１−ジイル；ブト−２−イン−１，４−ジイル；ブト−３−イン−１，１−ジイル；ブト−３−イン−１，２−ジイル；ブト−３−イン−２，２−ジイル；及びブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルが挙げられる。アルキニレン基は、アルキニル基について記載したように、非置換又は置換（例えば、任意選択で置換されたアルキニレン）のいずれであってもよい。
【０１２７】
本明細書で使用されるとき、用語「アミノ」は、−Ｎ（ＲN1）2又は−Ｎ（ＲN1）Ｃ（ＮＲN1）Ｎ（ＲN1）2を表し、ここで、各ＲN1は、独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ2、Ｎ（ＲN2）2、ＳＯ2ＯＲN2、ＳＯ2ＲN2、ＳＯＲN2、Ｎ−保護基、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アリール−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）、ヘテロシクリルアルキル（例えば、ヘテロアリールアルキル）であるか、又は２つのＲN1は、結合して、ヘテロシクリルを形成し、また、各ＲN2は、独立に、Ｈ、アルキル、又はアリールである。一実施形態では、アミノは、−ＮＨ2、又は−ＮＨＲN1であり、ここで、ＲN1は、独立に、ＯＨ、ＮＯ2、ＮＨ2、ＮＲN22、ＳＯ2ＯＲN2、ＳＯ2ＲN2、ＳＯＲN2、アルキル、又はアリールであり、また、各ＲN2は、Ｈ、アルキル、又はアリールである。各ＲN1基は、独立に、本明細書に記載するように、非置換又は置換のいずれであってもよい。さらに、アミノ基が本発明の生体可逆的基に存在するとき、これは、共役部分に結合したエステル、チオエステル、若しくはジスルフィド基、親水性官能基、又は本明細書に定義する補助部分で置換してもよい。
【０１２８】
本明細書で使用されるとき、用語「抗体」は、最も広義に用いられ、具体的に、例えば、単一モノクローナル抗体、ポリエピトピック（ｐｏｌｙｅｐｉｔｏｐｉｃ）特異性を有する抗体組成物、一本鎖抗体、及び抗体の断片（例えば、抗体結合断片又はＦｃ領域）を包含する。本明細書で使用されるとき、「抗体」は、それらが、抗原を認識し、及び／又は本明細書に記載する所望のアゴニスト若しくはアンタゴニスト特性を発揮する限りにおいて、インタクトな免疫グロブリン又は抗体分子、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（すなわち、少なくとも２つのインタクトな抗体から形成される二重特異性抗体）及び免疫グロブリン断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）2、又はＦｖ）を含む。抗体又は断片は、ヒト化、ヒト、若しくはキメラ抗体又は断片のいずれであってもよい。
【０１２９】
本明細書で使用されるとき、用語「アリール」は、１つ又は２つの芳香環を有する単環、二環、又は多環式炭素環を表し、例として、フェニル、ナフチル、１，２−ジヒドロナフチル、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、フルオロレニル、インダニル、インデニルなどが挙げられ、これは、任意選択で、（１）アルカノイル（例えば、ホルミル、アセチルなど）；（２）アルキル（例えば、アルコキシアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アミノアルキル、アジドアルキル、アシルアルキル、ハロアルキル（例えば、ペルフルオロアルキル）、ヒドロキシアルキル、ニトロアルキル、又はチオアルコキシアルキル）；（３）アルケニル；（４）アルキニル；（５）アルコキシ（例えば、ペルフルオロアルコキシ）；（６）アルキルスルフィニル；（７）アリール；（８）アミノ；（９）アリールアルキル；（１０）アジド；（１１）シクロアルキル；（１２）シクロアルキルアルキル；（１３）シクロアルケニル；（１４）シクロアルケニルアルキル；（１５）ハロ；（１６）ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）；（１７）（ヘテロシクリル）オキシ；（１８）（ヘテロシクリル）アザ；（１９）ヒドロキシ；（２０）ニトロ；（２１）チオアルコキシ；（２２）−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、（ｃ）水素、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２３）−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２４）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、及び（ｃ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２５）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２６）チオール；（２７）アリールオキシ；（２８）シクロアルコキシ；（２９）アリールアルコキシ；（３０）ヘテロシクリルアルキル（例えば、ヘテロアリールアルキル）；（３１）シリル；（３２）シアノ；並びに（３３）−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）からなる群から独立に選択される１、２、３、又は４個の置換基で置換してもよい。一部の実施形態では、これらの基の各々は、本明細書に記載するように、さらに置換することができる。加えて、アリール基が、本発明の生体可逆的基に存在するとき、これは、共役部分に結合したエステル、チオエステル、若しくはジスルフィド基、親水性官能基、又は本明細書に定義する補助部分で置換してもよい。
【０１３０】
本明細書で使用されるとき、用語「補助部分」は、任意の部分を指し、限定はしないが、小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせを含み、これらは、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に結合することができる。一般に、しかし常にではないが、「補助部分」は、生体可逆的基上に存在する１つ又は複数の共役基との１つ又は複数の共有結合を形成することにより、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に連結又は結合する。しかし、別の実施形態では、「補助部分」は、ヌクレオチド糖分子の２’、３’、若しくは５’位置などの生体可逆的基、又は核酸塩基の任意の部分に存在する共役基以外に、ヌクレオチド構築物の任意の部分に対する１つ又は複数の共有結合を形成することにより、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に連結又は結合してもよい。特定の補助部分の名称は遊離分子を意味する場合もあるが、こうした遊離分子が、ヌクレオチド構築物に結合していることは理解されよう。当業者であれば、ヌクレオチド構築物に対する特定の補助部分の適切な結合点を容易に理解されよう。
【０１３１】
本明細書で使用されるとき、用語「アザ」は、二価−Ｎ（ＲN1）−基又は三価−Ｎ＝基を表す。アザ基は、ＲN1が、Ｈ若しくは非存在である場合、非置換であってもよく、又はＲN1が、「アミノ」について定義されている通りであれば、置換されていてもよい。アザは、また「Ｎ」、例えば、「任意選択で置換されたＮ」と呼ばれることもある。２つのアザ基は、連結して、「ジアザ」を形成し得る。
【０１３２】
本明細書で使用されるとき、用語「アジド」は、Ｎ3基を表す。
【０１３３】
本明細書で使用されるとき、用語「生体可逆的基」は、例えば、１つ又は複数の細胞内酵素（例えば、細胞内レダクターゼ）の作用を介して細胞内で能動的に切断され得るか、又はこの基を細胞内環境若しくは細胞内に存在する条件（例えば、ｐＨ、還元若しくは酸化環境、若しくはグルタチオンなどの細胞内種との反応）に曝露することなどにより、細胞内で受動的に切断され得る官能基を含む部分を表す。例示的生体可逆的基は、ジスルフィドである。
【０１３４】
本明細書で使用されるとき、用語「嵩高い基」は、本明細書に定義する任意の置換基又は置換基の１群を表し、嵩高い基のラジカルは、ラジカルがｓｐ3−ハイブリダイズ炭素である場合には、１個以下の水素原子を担持し、又はラジカルがｓｐ2−ハイブリダイズ炭素である場合には、水素原子を一切担持しない。このラジカルは、ｓｐ−ハイブリダイズ炭素ではない。嵩高い基は、炭素原子を介してのみ別の基に結合する。例えば、「ジスルフィド結合に結合した嵩高い基」、「ジスルフィド結合に結合した嵩高い基」、「ジスルフィド結合に連結した嵩高い基」という表現は、嵩高い基が、炭素ラジカルを介してジスルフィド結合に結合していることを示す。
【０１３５】
本明細書で使用されるとき、用語「カルベン」は、６個の価電子及び構造＝Ｃ：又は−Ｃ（ＲB）：を有する二価炭素種である官能基を表し、上記式中、ＲBは、任意選択で置換されたＣ1〜12アルキル、任意選択で置換されたＣ6〜14アリール、任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜12アルキル、又は任意選択で置換されたカルボニルから選択され；Ｃは、共有結合の一部ではない２つの電子を有する炭素である。２つの電子は、対形成（例えば、一重項カルベン）又は非対形成（例えば、三重項カルベン）のいずれであってもよい。
【０１３６】
本明細書で使用されるとき、用語「炭素環式」は、任意選択で置換されたＣ3〜12単環式、二環式、又は三環式構造を表し、ここで、環（芳香族若しくは非芳香族のいずれであってもよい）が、炭素原子により形成される。炭素環式構造としては、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びアリール基が挙げられる。
【０１３７】
本明細書で使用されるとき、用語「炭水化物」は、少なくとも５個の炭素原子（線状、分岐若しくは環状）を有し、各炭素原子に酸素、窒素若しくは硫黄原子が結合した１つ又は複数の単糖単位を含む化合物を表す。従って、「炭水化物」という用語は、単糖、二糖、三糖、四糖、オリゴ糖、及び多糖を包含する。代表的炭化水素として、糖類（約４〜９の単糖単位を含む単糖、二糖、三糖、及びオリゴ糖）、並びにデンプン、グリコーゲン、セルロース及び多糖ガムなどの多糖類が挙げられる。具体的単糖としては、Ｃ5〜6糖が挙げられ；二糖及び三糖としては、２又は３つの単糖単位（例えば、Ｃ5〜6糖）を有する糖が挙げられる。
【０１３８】
本明細書で使用されるとき、用語「カルボニル」は、Ｃ（Ｏ）基を表す。「カルボニル」を含む官能基の例として、エステル、ケトン、アルデヒド、無水物、塩化アシル、アミド、カルボン酸、及びカルボン酸塩が挙げられる。
【０１３９】
本明細書で使用されるとき、用語「カップリング反応の成分」は、カップリング反応に参加することができる分子種を表す。カップリング反応の成分としては、ヒドリドシラン（ｈｙｄｒｉｄｏｓｉｌａｎｅ）、アルケン、及びアルキンが挙げられる。
【０１４０】
本明細書で使用されるとき、用語「環状付加反応の成分」は、環状付加反応に参加することができる分子種を表す。結合形成が［４ｎ＋２］π電子（ｎは１である）を必要とする環状付加反応では、１つの成分は、２個のπ電子を提供し、もう１つの成分が４個のπ電子を提供する。２個のπ電子を提供する環状付加反応の代表的成分としては、アルケン及びアルキンが挙げられる。４個のπ電子を提供する環状付加反応の代表的成分としては、１，３−ジエン、α，β−不飽和カルボニル、アジドが挙げられる。
【０１４１】
本明細書で使用されるとき、用語「共役基」は、１つ又は複数の部分を含有する二価又はそれより高い原子価の基を表す。共役基は、１つ又は複数の補助部分を生体可逆的基（例えば、ジスルフィド部分を含む基）に連結する。
【０１４２】
本明細書で使用されるとき、用語「共役部分」は、適切な条件下で別の基（例えば、求核剤、求電子剤、環状付加反応での成分、又はカップリング反応での成分）との１つ又は複数の共有結合を形成することができる官能基を表す。この用語はまた、結合反応の残基、例えば、アミド基も指す。このような基の例を本明細書に記載する。
【０１４３】
本明細書で使用されるとき、用語「カップリング反応」は、２つの成分の反応において、１つの成分が、Ｓｉ−Ｈ又はＣ−Ｈなどの非極性σ結合を含み、第２の成分が、アルケン又はアルキンなどのπ結合を含み、Ｃ−Ｈ、Ｓｉ−Ｃ、若しくはＣ−Ｃ結合を形成するπ結合を介したσ結合の正味付加、又は２つの成分同士の単一共有結合の形成のいずれかをもたらす反応を表す。一カップリング反応は、アルケンを介したＳｉ−Ｈの付加（ヒドロシリル化としても知られる）である。他のカップリング反応としては、スティルカップリング、鈴木カップリング、薗頭カップリング、檜山カップリング、及びヘック反応が挙げられる。カップリング反応を促進するために、触媒を用いてもよい。典型的触媒は、Ｆｅ（ＩＩ）、Ｃｕ（Ｉ）、Ｎｉ（０）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｐｄ（０）、Ｐｄ（ＩＩ）、Ｐｄ（ＩＶ）、Ｐｔ（０）、Ｐｔ（ＩＩ）、又はＰｔ（ＩＶ）を含むものである。
【０１４４】
本明細書で使用されるとき、用語「環状付加反応」は、活性化がないか、化学触媒による活性化、又は熱エネルギーを用いた活性化のいずれかがあり、且つ、ｎが、１、２、若しくは３であるとき、［４ｎ＋２］π個の電子が結合形成に関与する、２つの成分の反応を表す。環状付加反応はまた、［４ｎ］π個の電子が関与し、光化学活性化があり、且つ、ｎが、１、２、又は３である、２つの成分の反応でもある。望ましくは、［４ｎ＋２］π個の電子が結合形成に関与し、且つ、ｎ＝１である。代表的環状付加反応としては、１，３−ジエンとアルケンの反応（ディールス・アルダー（Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ）反応）、α，β−不飽和カルボニルとアルケンの反応（ヘテロディールス・アルダー（ｈｅｔｅｒｏ  Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ）反応）、及びアジドとアルケンの反応（ヒュスゲン環状付加）が挙げられる。
【０１４５】
本明細書で使用されるとき、用語「シクロアルケニル」は、別に指定されない限り、３〜１０個の炭素を有する非芳香族炭素環式基（例えば、Ｃ3〜10シクロアルケニル）を表す。シクロアルケニルの非限定的例として、シクロプロプ−１−エニル、シクロプロプ−２−エニル、シクロブト−１−エニル、シクロブト−２−エニル、シクロペント−１−エニル、シクロペント−２−エニル、シクロペント−３−エニル、ノルボルネン−１−イル、ノルボルネン−２−イル、ノルボルネン−５−イル、及びノルボルネン−７−イルが挙げられる。シクロアルケニル基は、シクロアルキルについて記載されるように、非置換又は置換（例えば、任意選択で置換されたシクロアルケニル）のいずれであってもよい。
【０１４６】
本明細書で使用されるとき、用語「シクロアルケニニレン」は、別に明記されない限り、３〜１０個の炭素を有する二価非芳香族基（例えば、Ｃ3〜Ｃ10シクロアルケニレン）を指す。シクロアルケニレンの非限定的例として、シクロプロプ−１−エン−１，２−ジイル；シクロプロプ−２−エン−１，１−ジイル；シクロプロプ−２−エン−１，２−ジイル；シクロブト−１−エン−１，２−ジイル；シクロブト−１−エン−１，３−ジイル；シクロブト−１−エン−１，４−ジイル；シクロブト−２−エン−１，１−ジイル；シクロブト−２−エン−１，４−ジイル；シクロペント−１−エン−１，２−ジイル；シクロペント−１−エン−１，３−ジイル；シクロペント−１−エン−１，４−ジイル；シクロペント−１−エン−１，５−ジイル；シクロペント−２−エン−１，１−ジイル；シクロペント−２−エン−１，４−ジイル；シクロペント−２−エン−１，５−ジイル；シクロペント−３−エン−１，１−ジイル；シクロペント−１，３−ジエン−１，２−ジイル；シクロペント−１，３−ジエン−１，３−ジイル；シクロペント−１，３−ジエン−１，４−ジイル；シクロペント−１，３−ジエン−１，５−ジイル；シクロペント−１，３−ジエン−５，５−ジイル；ノルボルナジエン−１，２−ジイル；ノルボルナジエン−１，３−ジイル；ノルボルナジエン−１，４−ジイル；ノルボルナジエン−１，７−ジイル；ノルボルナジエン−２，３−ジイル；ノルボルナジエン−２，５−ジイル；ノルボルナジエン−２，６−ジイル；ノルボルナジエン−２，７−ジイル；ノルボルナジエン−７，７−ジイルが挙げられる。シクロアルケニレンは、シクロアルキルについて記載したように、非置換又は置換（例えば、任意選択で置換されたシクロアルケニレン）のいずれであってもよい。
【０１４７】
本明細書で使用されるとき、用語「シクロアルキル」は、別に指定されない限り、３〜１０個の炭素を有する環状アルキル基（例えば、Ｃ3〜10シクロアルキル）を指す。シクロアルキル基は、単環式又は二環式であってもよい。二環式シクロアルキルは、ビシクロ［ｐ．ｑ．０］アルキルタイプであってよく、ここで、ｐ及びｑは各々、ｐとｑとの和が、２、３、４、５、６、７、又は８であるという条件で、独立に、１、２、３、４、５、６、又は７である。或いは、二環式シクロアルキル基は、架橋シクロアルキル構造、例えば、ビシクロ［ｐ．ｑ．ｒ］アルキルを含んでもよく、ここで、ｒは、１、２、又は３であり、ｐ及びｑは各々、ｐ、ｑ及びｒの和が、３、４、５、６、７、又は８であるという条件で、独立に、１、２、３、４、５、又は６である。シクロアルキル基は、スピロ環式基、例えば、スピロ［ｐ．ｑ］アルキルであってもよく、ここで、ｐ及びｑは各々、ｐとｑとの和が、４、５、６、７、８、又は９であるという条件で、独立に、２、３、４、５、６、又は７である。シクロアルキルの非限定的例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、１−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、２−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、５−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、７−ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、及びデカリニルが挙げられる。シクロアルキル基は、本明細書に定義するように、非置換又は置換（例えば、任意選択で置換されたシクロアルキル）のいずれであってもよい。本開示のシクロアルキル基は、任意選択で、（１）アルカノイル（例えば、ホルミル、アセチルなど）；（２）アルキル（例えば、アルコキシアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アミノアルキル、アジドアルキル、アシルアルキル、ハロアルキル（例えば、ペルフルオロアルキル）、ヒドロキシアルキル、ニトロアルキル、又はチオアルコキシアルキル）；（３）アルケニル；（４）アルキニル；（５）アルコキシ（例えば、ペルフルオロアルコキシ）；（６）アルキルスルフィニル；（７）アリール；（８）アミノ；（９）アリールアルキル；（１０）アジド；（１１）シクロアルキル；（１２）シクロアルキルアルキル；（１３）シクロアルケニル；（１４）シクロアルケニルアルキル；（１５）ハロ；（１６）ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）；（１７）（ヘテロシクリル）オキシ；（１８）（ヘテロシクリル）アザ；（１９）ヒドロキシ；（２０）ニトロ；（２１）チオアルコキシ；（２２）−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、（ｃ）水素、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２３）−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２４）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、及び（ｃ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２５）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）；（２６）チオール；（２７）アリールオキシ；（２８）シクロアルコキシ；（２９）アリールアルコキシ；（３０）ヘテロシクリルアルキル（例えば、ヘテロアリールアルキル）；（３１）シリル；（３２）シアノ；並びに（３３）−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリールアルキルからなる群から選択される）で置換することができる。一部の実施形態では、これらの基の各々は、本明細書に記載するように、さらに置換することができる。
【０１４８】
本明細書で使用されるとき、用語「シクロアルキルアルキル」は、シクロアルキル基で置換されたアルキル基を表す。シクロアルキル及びアルキル部分は、本明細書に記載するように、個別の基として置換してもよい。
【０１４９】
本明細書で使用されるとき、用語「求電子剤」又は「求電子基」は、電子が豊富な中心に吸引され、１つ又は複数の求電子剤から電子対を受け取ることにより、１つ又は複数の共有結合を形成することができる官能基を表す。求電子剤として、限定はしないが、カチオン；分極中性分子；ニトレン；アジドなどのニトレン前駆体；カルベン；カルベン前駆体；活性化ケイ素中心；活性化カルボニル；ハロゲン化アルキル；擬似ハロゲン化アルキル；エポキシド；電子不足アリール；活性化リン中心；及び活性化硫黄中心が挙げられる。典型的に用いられる求電子剤としては、Ｈ+及びＮＯ+などのカチオン、ＨＣｌなどの分極中性分子、ハロゲン化アルキル、ハロゲン化アシル、アルデヒドなどのカルボニル含有化合物、並びにメシレート、トリフレート及びトシレートなどの優れた脱離基に連結する原子が挙げられる。
【０１５０】
本明細書で使用されるとき、用語「エンドソームエスケープ部分」は、エンドソーム内容物の放出を増強するか、又はエンドソームなどの内部細胞コンパートメントからの分子の逸出を可能にする部分を表す。
【０１５１】
本明細書で使用されるとき、用語「ハロ」は、臭素、塩素、ヨウ素、及びフッ素から選択されるハロゲンを表す。
【０１５２】
本明細書で使用されるとき、用語「ハロアルキル」は、ハロゲン基（すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩ）によって置換された、本明細書に定義する通りのアルキル基を表す。ハロアルキルは、１、２、３個、又は炭素数２以上のアルキル基の場合には、４個のハロゲンで置換してよい。ハロアルキル基は、ペルフルオロアルキルを含む。一部の実施形態では、ハロアルキル基は、アルキル基について本明細書に記載するように、１、２、３、又は４個の置換基でさらに置換することができる。
【０１５３】
本明細書で使用されるとき、用語「ヘテロアリール」は、芳香族である、本明細書に定義する通りのヘテロシクリルのサブセット（すなわち、これらは、単環式又は多環式系内に４ｎ＋２π個の電子を含有する）を表す。一実施形態では、ヘテロアリールは、ヘテロシクリル基について本明細書に定義するように、１、２、３、又は４個の置換基で置換される。
【０１５４】
本明細書で使用されるとき、用語「ヘテロアリールアルキル」は、ヘテロアリール基で置換されたアルキル基を表す。ヘテロアリール及びアルキル部分は、本明細書に記載するように、個別の基として置換してよい。
【０１５５】
本明細書で使用されるとき、用語「ヘテロシクリル」は、別に指定されない限り、窒素、酸素、及び硫黄を含む群から独立に選択される１，２、３、又は４個のヘテロ原子を含有する、５、６、又は７員環を表す。５員環は、０〜２個の二重結合を有し、６及び７員環は、０〜３個の二重結合を有する。いくつかのヘテロシクリル基は、２〜９個の炭素原子を含む。他のこうした基は、最大１２個の炭素原子を含み得る。「ヘテロシクリル」という用語はまた、１個又は複数の炭素及び／若しくはヘテロ原子が、単環式環、例えば、キヌクリジニル基の２つの非隣接メンバーを架橋する架橋多環式構造を有する複素環式化合物も表す。用語「ヘテロシクリル」は、前述した複素環式環のいずれかが、１、２、又は３つの環、例えば、アリール環、シクロヘキサン環、シクロヘキセン環、シクロペンタン環、シクロペンテン環、又は別の単環式複素環式環、例えば、インドリル、キノリル、イソキノリル、テトラヒドロキノリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニルなどに融合している、二環式、三環式、及び四環式基を包含する。融合したヘテロシクリルの例として、トロパン及び１，２，３，５，８，８ａ−ヘキサヒドロインドリジンが挙げられる。複素環式基としては、ピロリル、プロリニル、プロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ホモピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダソリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、チエニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソインダゾイル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサジアゾリル、プリニル、チアジアゾリル（例えば、１，３，４−チアジアゾール）、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロインドリル、テトラヒドロキノリル、テトラヒドロイソキノリル、ピラニル、ジヒドロピラニル、ジチアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニルなどが挙げられる。さらに別のヘテロシクリルとしては、２，３，４，５−テトラヒドロ−２−オキソ−オキサゾリル；２，３−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−イミダゾリル；２，３，４，５−テトラヒドロ−５−オキソ−１Ｈ−ピラゾリル（例えば、２，３，４，５−テトラヒドロ−２−フェニル−５−オキソ−１Ｈ−ピラゾリル）；２，３，４，５−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−１Ｈ−イミダゾリル（例えば、２，３，４，５−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−５−メチル−５−フェニル−１Ｈ−イミダゾリル）；２，３−ジヒドロ−２−チオキソ−１，３，４−オキサジアゾリル（例えば、２，３−ジヒドロ−２−チオキソ−５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾリル）；４，５−ジヒドロ−５−オキソ−１Ｈ−トリアゾリル（例えば、４，５−ジヒドロ−３−メチル−４−アミノ５−オキソ−１Ｈ−トリアゾリル）；１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソピリジニル（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−３，３−ジエチルピリジニル）；２，６−ジオキソ−ピペリジニル（例えば、２，６−ジオキソ−３−エチル−３−フェニルピペリジニル）；１，６−ジヒドロ−６−オキソピリジミニル；１，６−ジヒドロ−４−オキソピリミジニル（例えば、２−（メチルチオ）−１，６−ジヒドロ−４−オキソ−５−メチルピリミジン−１−イル）；１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソピリミジニル（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−３−エチルピリミジニル）；１，６−ジヒドロ−６−オキソ−ピリダジニル（例えば、１，６−ジヒドロ−６−オキソ−３−エチルピリダジニル）；１，６−ジヒドロ−６−オキソ−１，２，４−トリアジニル（例えば、１，６−ジヒドロ−５−イソプロピル−６−オキソ−１，２，４−トリアジニル）；２，３−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−インドリル（例えば、３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−インドリル及び２，３−ジヒドロ−２−オキソ−３，３’−スピロプロパン−１Ｈ−インドール−１−イル）；１，３−ジヒドロ−１−オキソ−２Ｈ−イソ−インドリル；１，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソ−インドリル；１Ｈ−ベンゾピラゾリル（例えば、１−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ベンゾピラゾリル）；２，３−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−ベンゾイミダゾリル（例えば、３−エチル−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−ベンゾイミダゾリル）；２，３−ジヒドロ−２−オキソ−ベンゾオキサゾリル（例えば、５−クロロ−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−ベンゾオキサゾリル）；２，３−ジヒドロ−２−オキソ−ベンゾオキサゾリル；２−オキソ−２Ｈ−ベンゾピラニル；１，４−ベンゾジオキサニル；１，３−ベンゾジオキサニル；２，３−ジヒドロ−３−オキソ，４Ｈ−１，３−ベンゾチアジニル；３，４−ジヒドロ−４−オキソ−３Ｈ−キナゾリニル（例えば、２−メチル−３，４−ジヒドロ−４−オキソ−３Ｈ−キナゾリニル）；１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−３Ｈ−キナゾリニル（例えば、１−エチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−３Ｈ−キナゾリニル）；１，２，３，６−テトラヒドロ−２，６−ジオキソ−７Ｈ−プリニル（例えば、１，２，３，６−テトラヒドロ−１，３−ジメチル−２，６−ジオキソ−７Ｈ−プリニル）；１，２，３，６−テトラヒドロ−２，６−ジオキソ−１Ｈ−プリニル（例えば、１，２，３，６−テトラヒドロ−３，７−ジメチル−２，６−ジオキソ−１Ｈ−プリニル）；２−オキソベンズ［ｃ，ｄ］インドリル；１，１−ジオキソ−２Ｈ−ナフト［１，８−ｃ，ｄ］イソチアゾリル；１，８−ナフチレンジカルボキサミドが挙げられる。複素環式基はまた、式：
【化３３】
2016537027.tif 000034
の基も含み、
式中、
Ｆ’は、−ＣＨ2−、−ＣＨ2Ｏ−、及び−Ｏ−からなる群から選択され、Ｇ’は、−Ｃ（Ｏ）−及び−（Ｃ（Ｒ’）（Ｒ’’））v−からなる群から選択され、ここで、Ｒ’及びＲ’’は、独立に、水素又は炭素原子数１〜４のアルキルからなる群から選択され、ｖは、１〜３であり、このような基として、１，３−ベンゾジオキソリル、１，４−ベンゾジオキサニルなどがある。本明細書に記載するヘテロシクリル基のいずれも、任意選択で、（１）アルカノイル（例えば、ホルミル、アセチルなど）；（２）アルキル（例えば、アルコキシアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アミノアルキル、アジドアルキル、アシルアルキル、ハロアルキル（例えば、ペルフルオロアルキル）、ヒドロキシアルキル、ニトロアルキル、又はチオアルコキシアルキル）；（３）アルケニル；（４）アルキニル；（５）アルコキシ（例えば、ペルフルオロアルコキシ）；（６）アルキルスルフィニル；（７）アリール；（８）アミノ；（９）アリールアルキル；（１０）アジド；（１１）シクロアルキル；（１２）シクロアルキル−アルキル；（１３）シクロアルケニル；（１４）シクロアルケニル−アルキル；（１５）ハロ；（１６）ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）；（１７）（ヘテロシクリル）オキシ；（１８）（ヘテロシクリル）アザ；（１９）ヒドロキシ；（２０）オキソ；（２１）ニトロ；（２２）スルフィド；（２３）チオアルコキシ；（２４）−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、（ｃ）水素、及び（ｄ）アリール−アルキルからなる群から選択される）；（２５）−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリール−アルキルからなる群から選択される）；（２６）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、（ａ）アルキル、（ｂ）アリール、及び（ｃ）アリール−アルキルからなる群から選択される）；（２７）−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリール−アルキルからなる群から選択される）；（２８）チオール；（２９）アリールオキシ；（３０）シクロアルコキシ；（３１）アリールアルコキシ；（３１）ヘテロシクリル−アルキル（例えば、ヘテロアリール−アルキル）；（３２）シリル；（３３）シアノ；並びに（３４）−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、（ａ）水素、（ｂ）アルキル、（ｃ）アリール、及び（ｄ）アリール−アルキルからなる群から選択される）からなる群から独立に選択される１、２、３、４若しくは５個の置換基で置換することができる。一部の実施形態では、これらの基の各々は、本明細書に記載するように、さらに置換することができる。例えば、アリール−Ｃ1−アルキル又はヘテロシクリル−Ｃ1−アルキルのアルキル基は、オキソ基でさらに置換することにより、それぞれアリーロイル及び（ヘテロシクリル）オイル置換基を付与することができる。加えて、ヘテロシクリル基が、本発明の生体可逆的基に存在するとき、これは、共役部分に結合したエステル、チオエステル、若しくはジスルフィド基、親水性官能基、又は本明細書に定義する補助部分で置換してもよい。
【０１５６】
本明細書で使用されるとき、用語「ヘテロシクリルアルキル」は、ヘテロシクリル基で置換されたアルキル基を表す。ヘテロシクリル及びアルキル部分は、本明細書に記載するように、個別の基として置換してもよい。
【０１５７】
本明細書で使用されるとき、用語「親水性官能基」は、水に対する親和性を付与して、アルキル部分の水溶性を高める部分を表す。親水性官能基は、イオン性又は非イオン性のいずれであってもよく、陽荷電、陰荷電している、及び／又は水素結合相互作用に関与することができる部分を含む。例示的親水性官能基として、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、カルボニル、チオール、リン酸塩（例えば、一、二、若しくは三リン酸塩）、ポリアルキレンオキシド（例えば、ポリエチレングリコール）、及びヘテロシクリルが挙げられる。
【０１５８】
用語「ヒドロキシル」及び「ヒドロキシ」は、本明細書で置き換え可能に使用されるとき、−ＯＨ基を表す。
【０１５９】
本明細書で使用されるとき、用語「イミン」は、炭素と窒素との間に二重結合を有する基を表し、これは「Ｃ＝Ｎ」と表示することができる。陽子が、イミン官能基に対してαである特定の実施形態では、イミンは、互変異性エナミンの形態であってもよい。１タイプのイミン結合は、イミン結合の窒素が、三価窒素（例えば、Ｃ＝Ｎ−Ｎ（Ｒ）2）に共有結合しているヒドラゾン結合である。一部の実施形態では、各Ｒは、独立に、Ｈ、ＯＨ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルであってよい。
【０１６０】
本明細書で使用されるとき、用語「ニトレン」は、６個の価電子及び構造＝Ｎ：又は−ＮＲA：を有する一価窒素種を表し、上記式中、ＲAは、任意選択で置換されたＣ1〜12アルキル、任意選択で置換されたＣ6〜12アリール、任意選択で置換された（Ｃ6〜12アリール）−Ｃ1〜12アルキル、又は任意選択で置換されたカルボニルから選択され；Ｎは、４個の価電子を有する窒素であり、そのうちの少なくとも２つは対形成している。残った２つの電子は、対形成（すなわち、一重項カルベン）又は非対形成（すなわち、三重項カルベン）のいずれであってもよい。
【０１６１】
本明細書で使用されるとき、用語「ニトロ」は、−ＮＯ2基を表す。
【０１６２】
「非天然アミノ酸」は、天然に産生されないか、又は哺乳動物においてみいだされないアミノ酸である。
【０１６３】
「非極性σ結合」とは、ポーリング（Ｐａｕｌｉｎｇ）目盛りにより測定され、その差が１．０単位以下である電気陰性度値を有する２つの元素間の共有結合を意味する。非極性σ結合の非限定的例として、Ｃ−Ｃ、Ｃ−Ｈ、Ｓｉ−Ｈ、Ｓｉ−Ｃ、Ｃ−Ｃｌ、Ｃ−Ｉ、Ｃ−Ｂ、及びＣ−Ｓｎ結合が挙げられる。
【０１６４】
本明細書で使用されるとき、用語「核酸塩基」は、ヌクレオチド又はヌクレオシドの糖部分の１’位置にみいだされる窒素含有複素環式環を表す。核酸塩基は、非修飾であっても、修飾されていてもよい。本明細書で使用されるとき、「非修飾」又は「天然」核酸塩基としては、プリン塩基アデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）、並びにピリミジン塩基チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）及びウラシル（Ｕ）が挙げられる。修飾核酸塩基としては、その他の合成及び天然核酸塩基、例えば、５−メチルシトシン（５−ｍｅ−Ｃ又はｍ５ｃ）、５−ヒドロキシメチルシトシン、５−フォルミルシトシン、５−カルボキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、２−アミノアデニン、アデニン及びグアニンの６−メチル及び他のアルキル誘導体、アデニン及びグアニンの２−プロピル及び他のアルキル誘導体、２−チオウラシル、２−チオチミン及び２−チオシトシン、５−ハロウラシル及びシトシン、５−プロピニルウラシル及びシトシン、６−アゾウラシル、シトシン及びチミン、５−ウラシル（擬ウラシル）、４−チオウラシル、８−ハロ、８−アミノ、８−チオール、８−チオアルキル、８−ヒドロキシル並びに他の８−置換アデニン及びグアニン、５−ハロ、特に５−ブロモ、５−トリフルオロメチル並びに他の５−置換ウラシル及びシトシン、７−メチルグアニン及び７−メチルアデニン、８−アザグアニン及び８−アザアデニン、７−デアザグアニン及び７−デアザアデニン並びに３−デアザグアニン及び３−デアザアデニンなどが挙げられる。別の核酸塩基としては、米国特許第３，６８７，８０８号明細書に開示されているもの；Ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｐａｇｅｓ  ８５８−８５９，Ｋｒｏｓｃｈｗｉｔｚ，Ｊ．Ｉ．，ｅｄ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９０に開示されているもの；Ｅｎｇｌｉｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９１，３０，６１３により開示されているもの；並びにＳａｎｇｈｖｉ，Ｙ．Ｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １５，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐａｇｅｓ  ２８９  ３０２，（Ｃｒｏｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９３）により開示されているものがある。いくつかの核酸塩基は、本発明のポリマー化合物の結合親和性を高める上で特に有用であり、こうしたものとして、５−置換ピリミジン、６−アザピリミジン並びにＮ−２、Ｎ−６及びＯ−６置換プリン、例えば、２−アミノプロピルアデニン、５−プロピニルウラシル及び５−プロピニルシトシンが挙げられる。５−メチルシトシン置換は、核酸二重螺旋の安定性を０．６〜１．２℃高めることが立証されている（Ｓａｎｇｈｖｉ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  １９９３，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ｐａｇｅｓ  ２７６−２７８）。これらは、特定の実施形態において、２’−Ｏ−メトキシエチル糖修飾物と組み合わせてもよい。これらの修飾核酸塩基、並びに他の核酸塩基���いくつかの調製を教示する米国特許として、限定はしないが、前述した米国特許第３，６８７，８０８号明細書；同第４，８４５，２０５号明細書；同第５，１３０，３０２号明細書；同第５，１３４，０６６号明細書；同第５，１７５，２７３号明細書；同第５，３６７，０６６号明細書；同第５，４３２，２７２号明細書；同第５，４５７，１８７号明細書；同第５，４５９，２５５号明細書；同第５，４８４，９０８号明細書；同第５，５０２，１７７号明細書；同第５，５２５，７１１号明細書；同第５，５５２，５４０号明細書；同第５，５８７，４６９号明細書；同第５，５９４，１２１号明細書；同第５，５９６，０９１号明細書；同第５，６１４，６１７号明細書；及び同第５，６８１，９４１号明細書が挙げられる。本開示の目的のために、本明細書で使用されるとき、「修飾核酸塩基」は、さらに、本明細書に記載する１つ又は複数の保護基を含む核酸塩基（天然又は非天然）を表す。
【０１６５】
本明細書で使用されるとき、用語「求核剤」は、電子対又はπ結合から電子を放出することにより、共有結合の形成に関与する任意選択で置換された官能基を表す。求核剤は、アルケン、アルキン、アリール、ヘテロアリール、ヒドラジン基、ヒドロキシ基、フェノキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、アニリド基、チオ基、及びチオフェノキシ基から選択され得る。
【０１６６】
本明細書で使用されるとき、用語「ヌクレオシド」は、核酸塩基−糖の組み合わせを表す。本明細書で使用されるとき、用語「ヌクレオチド」は、ヌクレオシドの糖部分に共有結合したヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基（リン酸基など）をさらに含む、ヌクレオシドを指す。ペンタフラノシル糖を含むヌクレオシドの場合、ヌクレオチド間架橋基又は末端基（リン酸基など）は、糖の２’、３’若しくは５’ヒドロキシル部分のいずれに連結することもできる。糖は、天然に存在する糖、例えば、リボース若しくはデオキシリボースであってもよく、又は天然に存在する糖の修飾形態、例えば、２’修飾リボース、５’修飾リボース（例えば、５’−メチルリボース）、又は２’，５’修飾リボース（例えば、２’−アルコキシ−５’−メチルリボース又は２’−フルオロ−５’−メチルリボース）であってもよい。修飾糖の例として、２位糖修飾物が挙げられるが、この場合、２−ＯＨは、Ｈ、ＯＲ、Ｒ、ハロ（例えば、Ｆ）、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲ2、又はＣＮなどの基により置換され、ここで、Ｒは、アルキル部分である。また、修飾糖には、非リボース糖、例えば、マンノース、アラビノース、グルコピラノース、ガラクトピラノース、４−チオリボース、並びに他の糖、複素環、又は炭素環も含まれる。また、ヌクレオチドには、ロックド核酸（ＬＮＡ）、ペプチド核酸、グリセロール核酸、モルホリノ核酸、及びトレオース核酸も含まれる。
【０１６７】
本明細書で使用されるとき、用語「ポリヌクレオチド」は、ヌクレオチド間架橋基により互いに共有結合された２つ以上のヌクレオチド及び／又はヌクレオシドを表す。ポリヌクレオチドは、線状又は環状のいずれであってもよい。さらに、本開示の目的のために、用語「ポリヌクレオチド」は、オリゴヌクレオチドと、より長い配列の両方、並びにヌクレオチドの混合物、例えば、ＤＮＡとＲＮＡの混合物又はＲＮＡと２’修飾ＲＮＡの混合物に関連する。用語「ポリヌクレオチド」は、別に記載のない限り、１つ又は複数の鎖を含むポリヌクレオチドを包含する。
【０１６８】
他の実施形態では、天然糖ホスホロジエステル骨格は、ペプチドが連結した反復Ｎ−（２−アミノエチル）−グリシン単位を有するタンパク質ヌクレオチド（ＰＮＡ）骨格で置換することができる。ヌクレアーゼ分解に対してより耐性であるように設計されたポリヌクレオチドについての他のタイプの修飾は、米国特許第６，９００，５４０号明細書及び同第６，９００，３０１号明細書（参照により本明細書に組み込む）に記載されている。
【０１６９】
本明細書で使用されるとき、用語「ヌクレオチド間架橋基」は、ヌクレオチド及び／又はヌクレオシドを共有結合する基を表す。「末端ヌクレオチド」基は、ヌクレオチドの５’、３’、又は２’末端に位置する。末端ヌクレオチド基は、他のヌクレオシド又はヌクレオシドに連結させることができる、又はできない、のいずれであってもよい。ヌクレオチド間架橋基及び末端ヌクレオチド基の例として、リン酸塩、チオリン酸塩、ホスホン酸塩（例えば、ホスホン酸メチル）、ホスホロアミデート、ボラノリン酸塩、アミド、メチレンメリルイミノ、ホルムアセタール、チオホルムアセタール、スルホニル、グアニジン、及びメチルチオ尿素が挙げられる。他のものは、当技術分野で公知であり、例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．１０，１１５７を参照されたい。ヌクレオチド間架橋基は、２つのヌクレオシドに結合し、末端ヌクレオチド基は、単一ヌクレオシドに、例えば、３’又は５’末端で結合することは理解されよう。
【０１７０】
用語「オキサ」及び「オキシ」は、本明細書で置き換え可能に使用されるとき、２つの基に連結した二価酸素原子を表す（例えば、オキシの構造は、−Ｏ−と表示される場合がある）。
【０１７１】
本明細書で使用されるとき、用語「オキソ」は、１つの基に連結した二価酸素原子を表す（例えば、オキソの構造は、＝Ｏと表示される場合がある）。
【０１７２】
本明細書で使用されるとき、用語「ポリペプチド」は、ペプチド結合により連結された２個以上のアミノ酸残基を表す。さらに、本開示の目的のために、用語「ポリペプチド」及び用語「タンパク質」は、別の記載がない限り、本明細書においてあらゆる文脈（例えば、天然の、又は改変タンパク質）で置き換え可能に用いられる。多様なポリペプチドが、本明細書に記載する方法及び組成物の範囲内で使用され得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、抗体又は抗原結合部位を含有する抗体の断片を含む。合成により作製されたポリペプチドは、ＤＮＡにより天然にコード化されないアミノ酸の置換物（例えば、天然に存在しない、又は非天然アミノ酸）を含み得る。非天然アミノ酸の例として、Ｄアミノ酸、システインの硫黄原子に結合したアセチルアミノメチル基を有するアミノ酸、ペグ化アミノ酸、式ＮＨ2（ＣＨ2）nＣＯＯＨ（ｎは、２〜６である）のオメガアミノ酸、例えば、サルコシン、ｔ−ブチルアラニン、ｔ−ブチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、及びノルロイシンを含む。
【０１７３】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｐｈ」は、フェニルを表す。
【０１７４】
本明細書で使用されるとき、用語「光分解活性化」又は「光分解」は、光との反応の照射による化学反応の促進又は開始を表す。光分解活性化に好適な光の波長は、２００〜５００ｎｍであり、２００〜２６０ｎｍ及び３００〜４６０ｎｍの範囲の波長を含む。他の有用な範囲としては、２００〜２３０ｎｍ、２００〜２５０ｎｍ、２００〜２７５ｎｍ、２００〜３００ｎｍ、２００〜３３０ｎｍ、２００〜３５０ｎｍ、２００〜３７５ｎｍ、２００〜４００ｎｍ、２００〜４３０ｎｍ、２００〜４５０ｎｍ、２００〜４７５ｎｍ、３００〜３３０ｎｍ、３００〜３５０ｎｍ、３００〜３７５ｎｍ、３００〜４００ｍ、３００〜４３０ｍ、３００〜４５０ｍ、３００〜４７５ｍ、及び３００〜５００ｍが挙げられる。
【０１７５】
本明細書で使用されるとき、用語「保護基」は、官能基（例えば、ヒドロキシ、アミノ、若しくはカルボニル）が、化学合成（例えば、ポリヌクレオチド合成）中に１つ又は複数の望ましくない反応に参加することから保護することが意図される基を表す。本明細書で使用されるとき、用語「Ｏ−保護基」は、酸素含有（例えば、フェノール、ヒドロキシル若しくはカルボニル）基が、化学合成中に１つ又は複数の望ましくない反応に参加することから保護することが意図される基を表す。本明細書で使用されるとき、用語「Ｎ−保護基」は、窒素含有（例えば、アミノ又はヒドラジン）基が、化学合成中に１つ又は複数の望ましくない反応に参加することから保護することを意図する基を表す。一般に用いられるＯ−及びＮ−保護基は、Ｇｒｅｅｎｅ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”３rd  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９）（これは、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。例示的Ｏ−及びＮ−保護基としては、アルカノイル、アリーロイル、又はカルバミル基、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、フタリル、ｏ−ニトロフェノキシアセチル、α−クロロブチリル、ベンゾイル、４−クロロベンゾイル、４−ブロモベンゾイル、ｔ−ブチルメチルシリル、トリ−イソ−プロピルシリルオキシメチル、４，４’−ジメトキシトリチル、イソブチリル、フェノキシアセチル、４−イソプロピルペヘノキシアセチル、ジメチルホルムアミジノ、及び４−ニトロベンゾイルが挙げられる。
【０１７６】
カルボニル含有基を保護する例示的Ｏ−保護基として、限定はしないが、アセタール、アシラール、１，３−ジチアン、１，３−ジオキサン、１，３−ジオキサラン、及び１，３−ジチオランがある。
【０１７７】
その他のＯ−保護基として、限定はしないが、置換アルキル、アリール、及びアリール−アルキルエーテル（例えば、トリチル；メチルチオメチル；メトキシメチル；ベンジルオキシメチル；シロキシメチル；２，２，２，−トリクロロエトキシメチル；テトラヒドロピラニル；テトラヒドロフラニル；エトキシエチル；１−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］エチル；２−トリメチルシリルエチル；ｔ−ブチルエーテル；ｐ−クロロフェニル、ｐ−メトキシフェニル、ｐ−ニトロフェニル、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、及びニトロベンジル）；シリルエーテル（例えば、トリメチルシリル；トリエチルシリル；トリイソプロピルシリル；ジメチルイソプロピルシリル；ｔ−ブチルジメチルシリル；ｔ−ブチルジフェニルシリル；トリベンジルシリル；トリフェニルシリル；及びジフェニルメチルシリル）；炭酸塩（例えば、メチル、メトキシメチル、９−フルオレニルメチル；エチル；２，２，２−トリクロロエチル；２−（トリメチルシリル）エチル；ビニル、アリル、ニトロフェニル；ベンジル；メトキシベンジル；３，４−ジメトキシベンジル；及びニトロベンジル）が挙げられる。
【０１７８】
その他のＮ−保護基として、限定はしないが、非保護Ｄ，Ｌ又はＤ，Ｌアミノ酸等のキラル補助基、例えば、アラニン、ロイシン、フェニルアラニンなど；スルホニル含有基、例えば、ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニルなど；カルバメート形成基、例えば、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、１−（ｐ−ビフェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、α、α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドロキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、２，２，２、−トリクロロエトキシカルボニル、フェノキシカルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニルなど、アリール−アルキル基、例えば、ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチルなど、並びにシリル基、例えば、トリメチルシリルなどが挙げられる。有用なＮ−保護基は、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、アラニル、フェニルスルホニル、ベンジル、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、及びベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）が挙げられる。
【０１７９】
本明細書で使用されるとき、用語「立体障害型」は、分子間若しくは分子内求核剤又は求電子剤の存在下で、少なくとも２４時間の半減期を有する化学基を表す。
【０１８０】
本明細書で使用されるとき、用語「被験者」は、ヒト又は非ヒト動物（例えば、哺乳動物）を表す。
【０１８１】
本明細書で使用されるとき、用語「スルフィド」は、二価−Ｓ−又は＝Ｓ基を表す。
【０１８２】
本明細書で使用されるとき、用語「ターゲティング部分」は、受容体又は他の受容性部分と特異的に結合する、又はこれと反応性会合若しくは複合体形成する任意の部分を表す。
【０１８３】
本明細書で使用されるとき、用語「治療有効用量」は、疾患又は障害の症状を改善、治療、又は少なくとも部分的に停止する（例えば、細胞の増殖を阻害する）のに必要な本発明のｓｉＲＮＡ、又はポリヌクレオチドの量を表す。この用途に有効な量は、当然のことながら、疾患の重症度、被験者の体重及び全身状態に応じて変動し得る。典型的に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで用いられる用量は、医薬組成物のｉｎ  ｖｉｖｏ投与に有用な量についての有用な指針を提供すると考えられ、具体的障害の治療に有効な用量を決定するために、動物モデルを用いることができる。
【０１８４】
本明細書で使用されるとき、用語「チオカルボニル」は、Ｃ（Ｓ）基を表す。「チオカルボニル」を含有する官能基の非限定的例として、チオエステル、チオケトン、チオアルデヒド、チオ無水物、塩化チオアシル、チオアミド、チオカルボン酸、及びチオカルボキシレートが挙げられる。
【０１８５】
本明細書で使用されるとき、用語「チオール」は、−ＳＨ基を表す。
【０１８６】
本明細書で使用されるとき、用語「障害」は、用語「疾患」、「症候群」及び「状態」（病状における）と、概して類義であることが意図され、これらと置き換え可能に用いられる。なぜなら、これらは全て、被験者、又はその部分の１つにより呈示され、正常な機能を障害し、典型的には、特徴的な兆候及び症状により発現される異常な状態を表すからである。
【０１８７】
被験者における障害に関して使用されるとき、用語「治療する」は、被験者に治療薬（例えば、本発明のヌクレオチド構築物）を投与することにより、上記障害の少なくとも１つの症状を軽減することを指す。
【０１８８】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるとき、単数形「１つの（ａ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈上明白に他の意味に解釈すべき場合を除いて、複数の指示対象を含む。従って、例えば、「ターゲティング部分」と言うとき、複数のこうしたターゲティング部分を含み、「その細胞」と言うとき、当業者に公知の１つ又は複数の細胞を含むなどである。
【０１８９】
別に定義されていない限り、本明細書で使用する技術及び科学用語は全て、本開示が属する技術分野の当業者に一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似の又は均等な方法及び材料を、開示された方法及び組成物の実施に用いることができるが、例示的方法、装置及び材料は本明細書に記載されている。
【０１９０】
同様に、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、及び「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、置き換え可能に用いられ、限定を意図するものではない。
【０１９１】
さらに、様々な実施形態の説明に、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」を使用する場合、当業者は、一部の具体的例において、この用語に代わり、実施形態が、「〜からほぼ構成される」又は「〜から構成される」という表現を用いて説明され得ることは理解すべきである。
【０１９２】
前文及び本文全体を通して述べた刊行物は、本願の出願日に先立ち、あくまでそれらの開示のために提供されるにすぎない。本明細書のいかなる部分も、以前の開示という理由でこうした開示に本発明者らが先行する資格がないという承認として解釈すべきではない。本開示に引用した刊行物は、それらが開示する全内容について全てが組み込まれる。しかし、本開示の目的のために、刊行物又は当技術分野に提示される任意の用語が、本開示で明瞭に定義したいずれかの用語と同じである場合、本開示に提示される用語の定義が全ての点で優先されるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０１９３】
【図１】図１Ａは２つの鎖を含む本発明のｓｉＲＮＡを示し、ここで、鎖の一方が、本発明のジスルフィド結合を含む。図１Ｂは２つの鎖を含む本発明のｓｉＲＮＡを示し、ここで、両方の鎖が、本発明のジスルフィド結合を含む。
【図２】本発明の代表的ポリヌクレオチド構築物及び同じポリヌクレオチドのＲＰ−ＨＰＬＣトレースを示す。
【図３】本発明のポリヌクレオチドの粗混合物の質量スペクトルを示し、その構造は図２に示す。
【図４】本発明の精製ポリヌクレオチドの質量スペクトルを示し、その構造は図２に示す。
【図５】図５Ａは１つ又は３つのＡＤＳ共役部位を有する本発明の一本鎖ＲＮＡ構築物の構造を示す。図５Ｂは本発明の一本鎖ＲＮＡ構築物のゲル分析の写真を示す。この構築物の構造は、図６Ａ、６Ｂ、及び８に記載する。図５Ｃは本発明の一本鎖ＲＮＡ構築物のゲル分析の写真を示す。この構築物の構造は、図６Ａ、６Ｂ、及び７Ａに記載する。図５Ｄは本発明の一本鎖ＲＮＡ構築物のゲル分析の写真を示す。この構築物の構造は、図６Ａ、６Ｂ、及び７Ｂに記載する。
【図６】図６Ａは本発明の代表的ｓｉＲＮＡ構築物の一般的構造を示す。図６Ｂは図６Ａに示すｓｉＲＮＡ構築物に組み込まれるＡＤＳ共役基を示す。
【図７】図７Ａは代表的共役部分に連結した代表的ターゲティング部分（葉酸塩）の構造を示す。図７Ｂは代表的共役部分に連結した代表的ターゲティング部分（ＧａｌＮＡｃ）の構造を示す。
【図８】代表的共役部分に連結した代表的ターゲティング部分（マンノース）の構造を示す。
【図９】図９ＡはＫＢ細胞に対する本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（（葉酸塩）3−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３）の結合についての用量曲線を示す。図９Ｂは本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（（葉酸塩）3−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３又は（葉酸塩）1−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３）とＫＢ細胞の解離定数（Ｋd）を決定するグラフを示す。
【図１０】図１０ＡはＨｅｐＧ２細胞に対する本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（（ＧａｌＮＡｃ）9−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３）の結合についての用量曲線を示す。図１０Ｂは本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（（ＧａｌＮＡｃ）9−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３又は（ＧａｌＮＡｃ）3−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３）とＨｅｐＧ２細胞の解離定数（Ｋd）を決定するグラフを示す。
【図１１】図１１Ａは初代腹腔マクロファージに対する本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（マンノース）18−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３の結合についての用量曲線を示す。図１１Ｂは本発明のｓｉＲＮＡコンジュゲート（（マンノース）18−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３又は（マンノース）6−ｓｉＲＮＮ−Ｃｙ３）と初代腹腔マクロファージの解離定数（Ｋd）を決定するグラフを示す。
【図１２】腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）の腹腔内投与から４時間後のＮＦκＢ−ＲＥ−Ｌｕｃマウスの画像である。比較は、負の対照に対して実施する。本発明のｓｉＲＮＡで処置したマウスは、負の対照マウスと比較して、低減したレベルのルシフェラーゼを示した。
【図１３】Ｃ５７／ＢＩ６マウスからの初代マウス肝細胞においてＡｐｏＢ遺伝子発現をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する上での、表４に掲載する例示的ｓｉＲＮＡ化合物の効力を示すグラフである。決定されたＩＣ50値を各グラフ下の表に記載する。
【図１４】Ｃ５７／ＢＩ６マウスからの初代マウス肝細胞においてＡｐｏＢ遺伝子発現をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する上での、表４に掲載する例示的ｓｉＲＮＡ化合物の効力を示すグラフである。決定されたＩＣ50値を各グラフ下の表に記載する。
【図１５】Ｃ５７ＢＩ６マウスにおいてＡｐｏＢ遺伝子発現をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害する上での、表４に掲載する例示的ｓｉＲＮＡ化合物の効力を示すグラフである。図１５Ａは、ビヒクルのみの投与に対するｉｎ  ｖｉｖｏでのβ２ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）遺伝子発現に正規化した肝臓ＡｐｏＢ遺伝子発現により測定される７２時間での用量応答関数を示すグラフである。図１５Ｂは、ビヒクルのみの投与に対するｉｎ  ｖｉｖｏでのＢ２Ｍ遺伝子発現に正規化した、ｓｉＲＮＡ（ＳＢ００９７、表４を参照）の投与から９６、７２、４８、及び２４時間後のｉｎ  ｖｉｖｏでの肝臓ＡｐｏＢ遺伝子発現の経過時間を示すグラフである。
【図１６】本発明により包含される一般的構造のイメージである。
【図１７】本発明により包含される一般的構造のイメージである。
【図１８】マウス初代骨髄細胞実験からの結果を示す。図１８Ａは、時間経過によるマクロファージにおけるマンノース受容体発現の正規化された量を示す。図１８Ｂは、表４に記載する例示的ｓｉＲＮＡ化合物での４８時間処理による処置後のＢ２Ｍに正規化したＧＡＰＤＨｍＲＮＡのグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【０１９４】
細胞の内部に特定の生物活性物質を送達する能力は、細胞形質膜の選択的透過性のために問題をはらんでいる。細胞の形質膜はバリアを形成して、分子の細胞内取込みを、十分に非極性で、且つサイズが約５００ダルトン以下のものに限定する。タンパク質の細胞内在化を増強する以前の試みは、受容体リガンドとタンパク質の融合（Ｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：１０７０６−１１，２００２）又はケージ化リポソーム担体へのタンパク質のパッケージングによるもの（Ａｂｕ−Ａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．ＣＨｅｍ．２７６：３０４９９−５０３，２００１）に集中していた。しかし、これらの技術は、乏しい細胞の取込みと、エンドサイトーシス経路への細胞内隔離とを招き得る。それらのアニオン電荷及び約１４，０００ダルトンという大きなサイズのために、ｓｉＲＮＡの送達は、ヒトを含む哺乳動物において、非常に困難な課題である。しかし、カチオン性荷電ペプチド及びタンパク質は、ポリヌクレオチド送達に利点をもたらしている。例えば、ペプチド形質導入ドメイン（ＰＴＤ）を核酸に連結すると、ポリヌクレオチド送達にある程度の利点をもたらした。
【０１９５】
本発明は、１つ又は複数の生体可逆的基（例えば、ジスルフィド）を含むヌクレオチド構築物を提供する。立体障害型ジスルフィドが特に有利である。少なくとも１つの嵩高い基に結合したジスルフィドは、少なくとも１つの嵩高い基に結合していないジスルフィドと比較して、ヌクレオチド構築物合成中に、より大きな安定性を示す。これは、後者が、ヌクレオチド構築物のリン（ＩＩＩ）原子と反応することにより、ジスルフィド結合を切断するためであろう。
【０１９６】
本発明は、比較的大きな部分、例えば、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの組み合わせを、生体可逆的基を細胞内で切断する能力に影響することなく、ヌクレオチド間架橋基に結合した生体可逆的基に連結し得ることを証明する。本発明はまた、疎水性又は親水性官能基を有する生体可逆的基、及び／又は共役部分を含むヌクレオチド構築物も提供し、ここで、これらの共役部分は、ポリペプチド、小分子、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせと、ヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基の結合を可能にする。本発明は、さらに、１つ又は複数の疎水性又は親水性官能基を有する１つ又は複数の生体可逆的基、及び／又は補助部分、例えば、ポリペプチド、小分子、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせと、ヌクレオチド構築物との結合を可能にする１つ又は複数の共役部分を有する１つ又は複数の共役基を含むヌクレオチド構築物も提供する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するヌクレオチド構築物は、構築物の総陰電荷を低減し、これによって、細胞による構築物の取込みを可能にするか、又は促進することができる特定の数の生体可逆的基を含有する。本明細書に記載するヌクレオチド構築物は、ポリヌクレオチド自体、又は結合した補助部分、例えば、小分子、ペプチド、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、若しくはこれらの組み合わせに連結されたポリヌクレオチドの細胞内輸送を可能にするか、又は促進することができる。細胞内酵素（例えば、細胞内タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ、チオレドキシン、若しくはチオエステラーゼ）の作用又は細胞内環境への曝露は、ジスルフィド又はチオエステル結合の切断を招き、これにより補助部分の放出及び／又はポリヌクレオチドのアンマスキングが起こる。続いて、アンマスクされたポリヌクレオチドは、例えば、アンチセンス又はＲＮＡｉ媒介性応答を開始することができる。さらに、本発明のヌクレオチド構築物は、リポソーム、又はカチオン性脂質などの担体を必要とせずに、ポリヌクレオチド、又はジスルフィド若しくはチオエステル結合を介して結合補助部分、例えば、小分子、ペプチド、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、若しくはこれらの組み合わせに連結されたポリヌクレオチドの細胞内送達を可能にするか、又は促進する。好ましくは、補助部分及びポリヌクレオチド間の連結は、ジスルフィド結合を含む。これらの特徴の各々は、本明細書にさらに詳しく説明する。
【０１９７】
本発明はまた、アニオン性荷電ポリヌクレオチドに関連する電荷を低減又は中和し、任意選択で、分子、例えば、カチオン性ペプチド、ターゲティング部分、及び／又はエンドソームエスケープ部分にさらなる官能性を付加することにより、ポリヌクレオチドの細胞の取込みを促進し、改善する方法及び組成物も提供する。特定の実施形態では、本発明の組成物は、カチオン電荷を有するヌクレオチド構築物を生成することによって、ポリヌクレオチドの取込みを促進することができる。
【０１９８】
本発明は、ヒトの障害を選択的に治療する、及び研究を促進する上で有用な配列特異的ポリヌクレオチドの送達のための組成物及び方法を提供する。本発明の組成物及び方法は、既存の核酸送達方法の欠点なしに、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡ、及びＤＮＡなどのポリヌクレオチドを被験者及び細胞に有効に送達する。本発明は、ＲＮＡｉ構築物を細胞に送達しづらくするか、又は構築物を送達不可能にするサイズ及び電荷の制限を解消する組成物及び方法を提供する。核酸（例えば、ｄｓＲＮＡ）のアニオン電荷を可逆的に中和することにより、本発明の生体可逆的基を含むヌクレオチド構築物は、核酸をｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏで細胞に送達することができる。
【０１９９】
本発明は、電荷中和部分（例えば、ヌクレオチド間又は末端基の保護基として用いられる成分（ｉ）又は式（ＩＩ）の基）を含むヌクレオチド構築物を提供する。この構築物は、細胞のトランスフェクション及び細胞の調節に有用な補助部分をさらに含み得る。こうした補助部分は、小分子、ペプチド、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせを含み得る。
【０２００】
本発明は、特定の細胞（例えば、その表面にアシアロ糖タンパク質受容体を有する細胞（例えば、肝細胞）、腫瘍細胞（例えば、その表面に葉酸受容体を有する腫瘍細胞）、マンノース受容体を担持する細胞（例えば、マクロファージ、樹状細胞、及び皮膚細胞（例えば、線維芽細胞又はケラチノサイト）））に対する標的化送達のための１つ又は複数のターゲティング部分を含むヌクレオチド構築物の送達のための組成物及び方法を提供する。マンノース受容体スーパーファミリーの非限定的例として、ＭＲ、Ｅｎｄｏ１８０、ＰＬＡ２Ｒ、ＭＧＬ、及びＤＥＣ２０５が挙げられる。本発明のヌクレオチド構築物の標的化送達は、受容体媒介性内在化を伴い得る。一部の実施形態では、ターゲティング部分は、マンノース、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、又は葉酸リガンドを含み得る。
【０２０１】
本明細書で立証するように、核酸に対する１つ又は複数の除去可能な（例えば、可逆的に結合した）電荷中和部分の付加により、細胞トランスフェクションを促進することができる。配列組成とは関係なく、あらゆる核酸を修飾することができる。従って、本発明は、いずれか特定の配列（すなわち、任意の特定のｓｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ＤＮＡなど）に限定されない。
【０２０２】
本発明は、一部の実施形態では、細胞膜透過と、エキソ−及びエンドヌクレアーゼ分解に対する耐性とを増強する化学及び生物物理学的特性に寄与する１つ又は複数の生体可逆的部分を有するヌクレオチド構築物を提供する。本発明はさらに、本明細書に開示するヌクレオチド構築物の合成のための試薬、例えば、ホスホラミダイト試薬を提供する。さらにまた、これらの生体可逆的基は、合成工程中安定している。
【０２０３】
特定の内在性核酸とハイブリダイズする、及び／又はこれらに対する親和性を持つことができる生物学的に活性のポリヌクレオチドを取得するために、酵素（例えば、チオレダクターゼ活性を有する酵素（例えば、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ若しくはチオレドキシン））の作用、或いは細胞内条件（例えば、酸化若しくは還元環境）又は反応体（例えば、グルタチオン又は他の遊離チオール）への曝露により、細胞内で、生体可逆的部分を除去することができる。
【０２０４】
生体可逆的部分は、特に発現を阻止若しくは下方制御するためにこれらが設計された遺伝子又はｍＲＮＡに属する標的配列に対する相補的配列の合成ＤＮＡ若しくはＲＮＡ又は混合分子のアンチセンスポリヌクレオチドと一緒に用いることができる。これらの阻害性ポリヌクレオチドは、標的ｍＲＮＡ配列、或いは標的ＤＮＡ配列に対して指令されて、これらが相補的な核酸とハイブリダイズすることにより、転写又は翻訳を阻害し得る。従って、本明細書に開示するヌクレオチド構築物は、遺伝子発現を有効に阻止又は下方制御することができる。
【０２０５】
本発明のヌクレオチド構築物は、また、特定のビカテナリー（ｂｉｃａｔｅｎａｒｙ）ＤＮＡ領域（ホモプリン／ホモピリミジン配列、又はプリン／ピリミジンが豊富な配列）に対して指令されて、そのため、三重螺旋を形成するものであってもよい。三重螺旋の、特定の配列における形成は、得られるオリゴヌクレオチドが反応性官能基を有するように作製されている場合には、遺伝子発現を調節若しくはそうでなければ制御する、及び／又は特異的な核酸部位に導入される不可逆的な損傷を促進し得るタンパク質因子の相互作用を阻止することができる。
【０２０６】
ポリヌクレオチド
本発明は、ヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基（５’−若しくは３’−末端基）に結合した１つ又は複数の電荷中和基（例えば、成分（ｉ）、式（ＩＩ）の基、又は式（ＩＩＡ）の基）を有するポリヌクレオチドを含有するヌクレオチド構築物（「ポリヌクレオチド構築物」）を提供する。１つ又は複数の電荷中和基は、生体可逆的基、例えば、ジスルフィド又はチオエステル結合を含有することができる。好ましくは、１つ又は複数の電荷中和基は、ジスルフィド結合を含む。１つ又は複数の電荷中和基は、生体可逆的基（例えば、ジスルフィド又はチオエステル結合；好ましくは、ジスルフィド結合）を介して、ヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基に連結した１つ又は複数の補助部分を含有することができる。こうした補助部分の例として、小分子、共役部分、親水性官能基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。生体可逆的基は、非修飾ヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基を脱離させるために、例えば、分子間で、個別の反応に付すこともできる。本明細書に提供するヌクレオチドの定義に記載するように、様々な糖及び骨格を使用することができるが、ポリヌクレオチドは、典型的に、リボース、デオキシリボース、又はＬＮＡ糖及びリン酸若しくはチオリン酸ヌクレオチド間架橋基を使用する。また、単一ポリヌクレオチドにおけるこれらの糖及び架橋基の混合物も考慮される。
【０２０７】
本明細書に記載するポリヌクレオチド構築物は、細胞内で選択的に切断することができ（例えば、受動的環境、酵素の作用、又は他の反応体への曝露により）、これによって細胞へのポリヌクレオチドの細胞内送達を促進する生体可逆的基を特徴とする。例示的生体可逆的基としては、ジスルフィド結合がある。
【０２０８】
例えば、本明細書に記載するポリヌクレオチド構築物は、チオレダクターゼ活性を有する細胞内酵素により切断することができるジスルフィド結合を含んでよい。細胞中に侵入したところで、核酸をアンマスクするために、これらのジスルフィド結合（例えば、式（ＩＩ）のＡ1基とＡ2基との間に含有されるもの）は、酵素により選択的に切断することができる。本明細書に記載するジスルフィド結合はまた、１つ又は複数の補助部分（例えば、１つ又は複数のターゲティング部分）及び他のコンジュゲートで、又は核酸の物理化学的特性を修飾する基（例えば、ヒドロキシ（−ＯＨ）基などの親水性基）で、核酸を官能性にするための有用な手段も提供し得る。この戦略は、個別の送達物質を用いることなく、標的化細胞送達を可能にするために、構造的及び機能的に多様ないくつかの核酸に対して容易に適用することができる。
【０２０９】
本明細書に記載するポリヌクレオチド構築物は、例えば、１〜４０個の独立した生体可逆的基を含むことができる。例えば、本明細書に開示するポリヌクレオチド構築物は、１〜３０、１〜２５、１〜２０、２〜１５、２〜１０、又は１〜５個の独立した生体可逆的基を含むことができる。特定の実施形態では、構成ヌクレオチドの７５％以下が、生体可逆的基を含む（例えば、わずか５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％が、生体可逆的基を含む）。別の実施形態では、本発明のポリヌクレオチド構築物内のヌクレオチドの最大９０％が生体可逆的基を有し得る。また別の実施形態では、生体可逆的基のわずか半分が、疎水性末端、例えば、アルキル基を含むことになる（例えば、（Ｒ4）r−Ｌ−Ａ1が結合して、疎水基を形成するとき）。本明細書に開示するポリヌクレオチド構築物は、生体可逆的基の任意の組み合わせを特徴とし得るが、これは、例えば、共役部分、親水性官能基、ポリペプチド、小分子、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせを含む。ポリヌクレオチド構築物は、一般に、長さが最大１５０個のヌクレオチドである。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、長さ５〜１００、５〜７５、５〜５０、５〜２５、８〜４０、１０〜３２、１５〜２５、又は２０〜２５個のヌクレオチドから構成される。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド構築物は、１つ又は複数の成分（ｉ）を含み、成分の各々は、独立に、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、又はエンドソームエスケープ部分を含有し；ここで、成分（ｉ）の各々は、ポリヌクレオチド構築物のヌクレオチド間架橋基に対するリンカーを含み、このリンカーは、ジスルフィド又はチオエステル（好ましくは、ジスルフィド）と、ジスルフィド基の近位にあって、ジスルフィド基を立体障害にする１つ又は複数の嵩高い基とを含有する。
【０２１１】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチド構築物内の生体可逆的基の位置は、得られる構築物の安定性を改善するように（例えば、ジスルフィド結合を切断する原因となる試薬（例えば、酸化若しくは還元環境）の非存在下でポリヌクレオチド構築物の半減期を高めるように）選択される。特に、二本鎖ポリヌクレオチドの場合、生体可逆的基の位置は、哺乳動物の生理的温度で安定な二本鎖分子が形成されるようなものにする。
【０２１２】
別の実施形態では、各生体可逆的基の性質は、好ましい溶解度及び送達特性を生み出すように選択することができる。こうした変動は、例えば、ヌクレオチド間架橋基又は末端ヌクレオチド基とジスルフィド基との間、及び／又はジスルフィド基と任意の共役部分、親水性官能基、若しくは補助部分との間のリンカー長さを調節することを含み得る。疎水性生体可逆的基によって生じる溶解度の低下は、ポリヌクレオチドの他所における１つ又は複数の親水性生体可逆的基の使用によって部分的に相殺することができる。特定の実施形態では、生体可逆的基を有するヌクレオチド間架橋基の３’末端の糖は、２’ＯＨ基を含まず、その代わり、例えば、２’Ｆ又はＯＭｅ基を含む。
【０２１３】
例えば、本明細書に記載するポリヌクレオチド構築物のいくつかは、式Ｉ：
【化３４】
2016537027.tif 000035
の構造、又はその塩を有し、
式中、ｎは、０〜１５０の数であり；
各Ｂ1は、独立に、核酸塩基であり；
各Ｘは、独立に、Ｏ、Ｓ、及び任意選択で置換されたＮからなる群から選択され；
各Ｙは、独立に、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、及び保護ヒドロキシル基からなる群から選択され；
各Ｙ1は、独立に、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキルであり；
各Ｚは、独立に、Ｏ又はＳであり；
Ｒ1は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ1は、
【化３５】
2016537027.tif 000036
若しくはその塩であり；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、クエンチャー含有基、ホスホチオール、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるか、又はＲ2は、
【化３６】
2016537027.tif 000037
若しくはその塩であり；
各Ｒ3は、独立に、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、又は式ＩＩ：
【化３７】
2016537027.tif 000038
の構造を有する基であり、
式中、
各Ａ1は、独立に、任意選択で置換されたＮ；Ｏ；Ｓ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、前記任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳは、ジスルフィドに直接結合されない）のうちの１つ又は複数を含むか、又はこれらである結合若しくはリンカーであり；且つ各Ａ2は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
各Ａ3は、独立に、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
各Ａ4は、独立に、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
各Ｌは、独立に、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらから構成される共役基であり；
各Ｒ4は、独立に、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
各ｒは、独立に、１〜１０の整数であり；
Ｒ1、Ｒ2、又はＲ3の少なくとも１つにおいて、Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成し；
少なくとも１つのＲ3は、式（ＩＩ）の構造を有する。
【０２１４】
本発明のポリヌクレオチド及びヌクレオチドにおけるジスルフィド結合は、別の生体可逆的基、例えば、チオエステル部分により置換してもよい。例えば、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＶＩＩＩａ）の基は、式（ＩＩｂ）：
【化３８】
2016537027.tif 000039
の基で置換してもよい。
【０２１５】
当業者は、このようなポリヌクレオチド及びヌクレオチドを調製するために、本明細書に記載の合成方法を改変することができるであろう。従って、チオエステル含有基は、本発明の範囲内にあるとみなされる。
【０２１６】
式（Ｉ）のいくつかの実施形態は、Ｘ及びＺがいずれもＯであるものを含む。一部の実施形態では、本明細書に開示するポリヌクレオチド構築物は、主として式（Ｉ）の構造を含むが、表示した式（Ｉ）のヌクレオチド間架橋基は、本明細書に記載する別のヌクレオチド間架橋基（例えば、修飾ポリヌクレオチド骨格）で置換される。別の実施形態では、本明細書に開示するポリヌクレオチド構築物は、主として式（Ｉ）の構造を含むが、表示した式（Ｉ）の基Ｒ1及び／又はＲ2は、基Ｒ3を有する末端ヌクレオチド基で置換される。本明細書に開示するポリヌクレオチド構築物は、修飾ポリヌクレオチド骨格を有してもよい。修飾ポリヌクレオチド骨格の例として、例えば、以下のものが挙げられる：ホスホロチオエート、キラルホスホロチオエート、ホスオロジチオエート、アミノアルキル−ホスホトリエステル、メチル及び他のアルキルホスホネート（３’−アルキレンホスホネート及びキラルホスホネートなど）、ホスフィネート、ホスホロアミデート（３’−アミノホスホロアミデート及びアミノアルキルホスホロアミデートなど）、チオノホスホロアミデート、チオノアルキルホスホネート、チオノアルキルホスホトリエステル、及び通常の３’−５’結合を有するボラノホスフェート、これらの２’−５’結合類似体、並びに逆転極性を有するもの（ここで、隣接するヌクレオシド対は、３’−５’対５’−３’又は２’−５’対５’−２’結合である）。上記リン含有結合の調製を教示する代表的米国特許として、米国特許第３，６８７，８０８号明細書；同第４，４６９，８６３号明細書；同第４，４７６，３０１号明細書；同第５，０２３，２４３号明細書；同第５，１７７，１９６号明細書；同第５，１８８，８９７号明細書；同第５，２６４，４２３号明細書；同第５，２７６，０１９号明細書；同第５，２７８，３０２号明細書；同第５，２８６，７１７号明細書；同第５，３２１，１３１号明細書；同第５，３９９，６７６号明細書；同第５，４０５，９３９号明細書；同第５，４５３，４９６号明細書；同第５，４５５，２３３号明細書；同第５，４６６，６７７号明細書；同第５，４７６，９２５号明細書；同第５，５１９，１２６号明細書；同第５，５３６，８２１号明細書；同第５，５４１，３０６号明細書；同第５，５５０，１１１号明細書；同第５，５６３，２５３号明細書；同第５，５７１，７９９号明細書；同第５，５８７，３６１号明細書；及び同第５，６２５，０５０号明細書がある。そこにリン原子を含まない修飾ポリヌクレオチド骨格を有する本明細書に開示のヌクレオチド構築物は、短鎖アルキル若しくはシクロアルキルヌクレオチド間架橋基、混合型ヘテロ原子及びアルキル若しくはシクロアルキルヌクレオチド間架橋基、又は１つ若しくは複数の短鎖ヘテロ原子若しくは複素環式ヌクレオチド間架橋基によって形成される骨格を有してもよい。これらは、モルホリノ結合（一部が、ヌクレオシドの糖部分から形成される）；シロキサン骨格；スルフィド、スルホキシド及びスルホン骨格；ホルムアセチル及びチオホルムアセチル骨格；メチレンホルムアセチル及びチオホルムアセチル骨格；アルケン含有骨格；スルファメート骨格；メチレンイミノ及びメチレンヒドラジノ骨格；スルホネート及びスルホンアミド骨格；アミド骨格；並びに混合Ｎ、Ｏ、Ｓ及びＣＨ2成分部分を有する他の骨格を有するものが挙げられる。上記ポリヌクレオチドの調製を教示する代表的米国特許として、米国特許第５，０３４，５０６号明細書；同第５，１６６，３１５号明細書；同第５，１８５，４４４号明細書；同第５，２１４，１３４号明細書；同第５，２１６，１４１号明細書；同第５，２３５，０３３号明細書；同第５，２６４，５６２号明細書；同第５，２６４，５６４号明細書；同第５，４０５，９３８号明細書；同第５，４３４，２５７号明細書；同第５，４６６，６７７号明細書；同第５，４７０，９６７号明細書；同第５，４８９，６７７号明細書；同第５，５４１，３０７号明細書；同第５，５６１，２２５号明細書；同第５，５９６，０８６号明細書；同第５，６０２，２４０号明細書；同第５，６１０，２８９号明細書；同第５，６０２，２４０号明細書；同第５，６０８，０４６号明細書；同第５，６１０，２８９号明細書；同第５，６１８，７０４号明細書；同第５，６２３，０７０号明細書；同第５，６６３，３１２号明細書；同第５，６３３，３６０号明細書；同第５，６７７，４３７号明細書；及び同第５，６７７，４３９号明細書がある。
【０２１７】
例示的−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−又は−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−基は：
【化３９】
2016537027.tif 000040
の通りであり、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；窒素、酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；
ｓは、０、１、若しくは２である。
【０２１８】
本発明は、さらに、本発明のポリヌクレオチド構築物を製造する方法も提供する。ヌクレオチド及びポリヌクレオチドの調製方法は、当技術分野で公知である。例えば、ポリヌクレオチドを調製するためのホスホラミダイト化学の実践は、Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ及びＢｅａｕｃａｇｅ並びにその他の公開論文から公知である。米国特許第４，４５８，０６６号明細書；同第４，５００，７０７号明細書；同第５，１３２，４１８号明細書；同第４，４１５，７３２号明細書；同第４，６６８，７７７号明細書；同第４，９７３，６７９号明細書；同第５，２７８，３０２号明細書；同第５，１５３，３１９号明細書；同第５，２１８，１０３号明細書；同第５，２６８，４６４号明細書；同第５，０００，３０７号明細書；同第５，３１９，０７９号明細書；同第４，６５９，７７４号明細書；同第４，６７２，１１０号明細書；同第４，５１７，３３８号明細書；同第４，７２５，６７７号明細書；及びＲＥ３４，０６９号明細書には、ポリヌクレオチド合成の方法が記載されている。さらに、ホスホラミダイト化学の実践は、Ｂｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８：２２２３−２３１１，１９９２；及びＢｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４９：６１２３−６１９４，１９９３により体系的に論じられている。
【０２１９】
核酸合成装置は、市販されており、その使用は、要望され得る合理的な長さのほぼあらゆるポリヌクレオチドを生成するのに有効なものとして当業者により一般に理解されている。
【０２２０】
ホスホラミダイト化学の実践に際して、有用な５’ＯＨ糖遮断基は、トリチル、モノメトキシトリチル、ジメトキシトリチル及びトリメトキシトリチル、特にジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）である。ホスホラミダイト化学の実践に際して、有用な亜リン酸塩活性化基は、ジアルキル置換窒素基及び窒素複素環である。一手法は、ジイソプロピルアミノ活性化基の使用を含む。
【０２２１】
ポリヌクレオチドは、Ｍｅｒｍａｄｅ−６固相自動化ポリヌクレオチド合成装置又は任意の一般に入手可能な自動化ポリヌクレオチド合成装置によって合成されてよい。トリエステル、ホスホラミダイト、又はリン酸水素カップリング化学（例えば、Ｍ．Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ：Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｐｐ．７−２４，Ｊ．Ｓ．Ｃｏｈｅｎ，ｅｄ．（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，１９８９）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃＨ，Ｅｄ．Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９８４；及びＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｅｄ．Ｆ．Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９９１に記載されている）を上記合成装置で使用することによって、所望のポリヌクレオチドを取得する。例えば、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１１２：１２５３−１２５５，１９９０に記載されているようなビューケージ（Ｂｅａｕｃａｇｅ）試薬、又はＢｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２２：１８５９−１８６２，１９８１に記載されているような元素硫黄をホスホラミダイト又はリン酸水素と一緒に使用することによって、置換ホスホロチオエートポリヌクレオチドを取得する。
【０２２２】
例えば、本明細書に挙げる保護基を含有する試薬を、保護が要望される様々な用途に用いることができる。こうした用途として、限定はしないが、固相及び液相、ポリヌクレオチド合成などが挙げられる。
【０２２３】
例えば、ポリヌクレオチドへの組み込みのためのヌクレオシドのリボース若しくは塩基に、構造基、例えば、リボースの２’−Ｏ位置にメチル、プロピル若しくはアリル基、又は２’−Ｏを置換するフルオロ基、又はリボヌクレオシドにブロモ基を任意選択で付加する。ホスホラミダイト化学での使用のために、多様なホスホラミダイト試薬が市販されており、例えば、２’−デオキシホスホラミダイト、２’−Ｏ−メチルホスホラミダイト及び２’−Ｏ−ヒドロキシルホスホラミダイトがある。こうした合成のいずれか他の方法を使用してもよい。ポリヌクレオチドの実際の合成は、十分に当業者の技能の範囲内である。また、ホスホロチオエート、リン酸メチル及びアルキル化誘導体などの他のポリヌクレオチドを調製する類似技術を用いることもよく知られている。さらに、類似技術並びに市販の修飾ホスホラミダイト及び多孔性ガラス（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ−ｐｏｒｅ  ｇｌａｓｓ）（ＣＰＧ）製品、例えば、ビオチン、Ｃｙ３、蛍光、アクリジン若しくはソラレン修飾ホスホラミダイト及び／又はＣＰＧ（Ｇｌｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｔｅｒｌｉｎｇ  Ｖａ．から入手可能）を使用して、蛍光標識、ビオチン化、又は他の結合ポリヌクレオチドを合成することもよく知られている。
【０２２４】
特定の実施形態では、本発明のポリヌクレオチド構築物を製造する方法は、式（Ｉａ）：
【化４０】
2016537027.tif 000041
、又はその塩を有する１つ又は複数のヌクレオチド構築物の使用を含み、
式中、
Ｂ1は、核酸塩基であり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、及び任意選択で置換されたＮであり；
Ｙは、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又は保護ヒドロキシル基であり；
Ｙ1は、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル（例えば、メチル）であり；
Ｚは、存在せず；
Ｒ1は、保護ヒドロキシル（例えば、４，４’−ジメトキシトリチル基（ＤＭＴ））であり；
Ｒ2は、−Ｎ（Ｒ3）Ｒ4又は−Ｎ（Ｃ1〜6アルキル）2（例えば、−Ｎ（ｉＰｒ）2）であり；
Ｒ3は、式（ＩＩａ）：
【化４１】
2016537027.tif 000042
の構造を有する基であり、
式中、Ａ1は、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、Ｓ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；窒素、酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、アミノ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、前記アミノ、Ｏ、及びＳのいずれも、ジスルフィドに直接結合されない）のうちの１つ又は複数を含むか、又はこれらから構成される結合若しくはリンカーであり；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、結合、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらである共役基であり；
Ｒ5は、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
ｒは、１〜１０の整数であり；
ここで、Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成し；
各Ｒ4及びＲ6は、独立に、水素；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜7アルカノイル；ヒドロキシル；任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ6〜15アリーロイル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ3〜10（ヘテロ環）オイルからなる群から選択される。
【０２２５】
本発明はさらに、本明細書に開示する製造方法を用いることによって合成されるポリヌクレオチド構築物を処理する方法も提供する。例えば、ポリヌクレオチド構築物の合成後、核酸塩基が１つ又は複数の保護基を含有していれば、保護基を除去してもよく；及び／又は保護基によって保護される親水性官能基又は共役部分を含有する任意の−Ｌ−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−の場合には、保護基を除去してよい。
【０２２６】
さらに、ポリヌクレオチド構築物の合成後、小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、及びエンドソームエスケープ部分の１つ又は複数を含有する基を１つ又は複数の生体可逆的基の１つ又は複数の共役部分に連結することができる。
【０２２７】
ヌクレオチド
本発明はさらに、一塩基を含有する化合物（「本発明の化合物」）をさらに提供する。従って、本発明は、式（ＶＩＩ）：
【化４２】
2016537027.tif 000043
の構造、又はその塩を有する化合物を特徴とし、
式中、
Ｂ1は、核酸塩基であり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ4であり；
Ｙは、水素、ヒドロキシル、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、又は保護ヒドロキシル基であり；
Ｙ1は、Ｈ又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル（例えば、メチル）であり；
Ｚは、非存在であるか、Ｏ、又はＳであり；
Ｒ1は、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、及び五リン酸塩、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせであり；
Ｒ2は、Ｈ、ヒドロキシル、任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ、保護ヒドロキシル基、一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、四リン酸塩、五リン酸塩、及びアミノ、５’キャップ、ホスホチオール、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、アミノ含有基、ビオチン含有基、ジゴキシゲニン含有基、コレステロール含有基、色素含有基、クエンチャー含有基、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの任意の組み合わせであり；
Ｒ3は、式（ＶＩＩＩ）：
【化４３】
2016537027.tif 000044
の構造を有する基であり、
式中、
Ａ1は、任意選択で置換されたＮ；Ｏ；Ｓ；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレン（但し、Ａ1が、任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳの１つ又は複数を含むとき、前記任意選択で置換されたＮ、Ｏ、及びＳは、ジスルフィドに直接結合されない）のうちの１つ又は複数を含むか、又はこれらから構成される結合若しくはリンカーであり；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；任意選択で置換されたＮ；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、非存在であるか、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらから構成される共役基であり；且つ
Ｒ5は、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、若しくはこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり、ここで、親水性官能基は、任意選択で、保護基により保護されており；
ｒは、１〜１０の整数であり；
Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−Ａ1−Ｒ5とＸを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成し；
各Ｒ4及びＲ6は、独立に、水素；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜7アルカノイル；ヒドロキシル；任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ6〜15アリーロイル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ3〜10（ヘテロサイクル）オイルからなる群から選択される。
【０２２８】
式（ＶＩＩ）の化合物の別の実施形態は、以下のものを含む：Ｚは存在せず；
Ａ1は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニレン；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；窒素、酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキレンからなる群から選択され；且つＡ2は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；或いはＡ1及びＡ2は、−Ｓ−Ｓ−と一緒に結合して、任意選択で置換された５〜１６員環を形成し；
Ａ3は、結合、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニレン；任意選択で置換されたＣ6〜14アリレン、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリレン；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレン；Ｏ；ＮＲ6；及びＳからなる群から選択され；
Ａ4は、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキレン；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキレン；並びに窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリレンからなる群から選択され；
Ｌは、結合、又は１つ若しくは複数の共役部分を含むか、若しくはこれらから構成される共役基であり；
Ｒ5は、非存在であるか、水素、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル、親水性官能基、又は小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される補助部分を含む基であり；
ｒは、１〜１０の整数であり；
ここで、Ａ2、Ａ3、及びＡ4が結合して、−Ｓ−Ｓ−とＸとを連結する最も短い鎖内に少なくとも３つの原子を有する基を形成し；
各Ｒ4は、独立に、水素；任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜7アルカノイル；ヒドロキシル；任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシ；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換されたＣ6〜15アリーロイル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ2〜9ヘテロシクリル；又は窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ3〜10（ヘテロ環）オイルからなる群から選択される。
【０２２９】
式（ＶＩＩ）の化合物のまた別の実施形態では、−Ａ1−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−又は−Ｓ−Ｓ−Ａ2−Ａ3−Ａ4−基は：
【化４４】
2016537027.tif 000045
の１つであり、
式中、
各Ｒ9は、独立に、ハロ、任意選択で置換されたＣ1〜6アルキル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルケニル；任意選択で置換されたＣ2〜6アルキニル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルキル；任意選択で置換されたＣ3〜8シクロアルケニル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換された（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；任意選択で置換されたＣ6〜14アリール；任意選択で置換された（Ｃ6〜14アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロアリール；窒素、酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されたＣ1〜9ヘテロシクリル；窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換された（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；アミノ；又は任意選択で置換されたＣ1〜6アルコキシであり；或いは２つの隣接するＲ9基は、前記Ｒ9が各々結合した原子と一緒に結合して、Ｃ6アリール、Ｃ2〜5ヘテロシクリル、又はＣ2〜5ヘテロアリールからなる群から選択される環状基を形成し、前記環状基は、任意選択で、Ｃ2〜7アルカノイル；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ2〜6アルケニル；Ｃ2〜6アルキニル；Ｃ1〜6アルキルスルフィニル；Ｃ6〜10アリール；アミノ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルキル；（Ｃ3〜8シクロアルキル）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜8シクロアルケニル；（Ｃ3〜8シクロアルケニル）−Ｃ1〜4−アルキル；ハロ；Ｃ1〜9ヘテロシクリル；Ｃ1〜9ヘテロアリール；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）オキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）アザ；ヒドロキシ；Ｃ1〜6チオアルコキシ；−（ＣＨ2）qＣＯ2ＲA（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つＲAは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＣＯＮＲBＲC（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲB及びＲCは、独立に、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＲD（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲDは、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；−（ＣＨ2）qＳＯ2ＮＲEＲF（ここで、ｑは、０〜４の整数であり、且つここで、ＲE及びＲFの各々は、独立に、水素；Ｃ1〜6アルキル；Ｃ6〜10アリール；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）；チオール；Ｃ6〜10アリールオキシ；Ｃ3〜8シクロアルコキシ；（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルコキシ；（Ｃ1〜9ヘテロシクリル）−Ｃ1〜4−アルキル；（Ｃ1〜9ヘテロアリール）−Ｃ1〜4−アルキル；Ｃ3〜12シリル；シアノ；並びに−Ｓ（Ｏ）ＲH（ここで、ＲHは、水素、Ｃ1〜6アルキル、Ｃ6〜10アリール、及び（Ｃ6〜10アリール）−Ｃ1〜4−アルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
ｑは、０、１、２、３、若しくは４であり；
ｓは、０、１、若しくは２である。
【０２３０】
特定の実施形態では、補助部分は、共役基に存在する共役部分との１つ又は複数の共有結合を形成することにより、ジスルフィド結合を含有する基に結合することができる。
【０２３１】
コンジュゲート
本発明のヌクレオチド構築物は、１つ又は複数の共役部分を有する１つ又は複数の共役基を含んでもよい。共役部分はまた、様々な他の補助部分、例えば、小分子、ポリペプチド、炭水化物、中性有機ポリマー、陽荷電ポリマー、治療薬、ターゲティング部分、エンドソームエスケープ部分、又はこれらの組み合わせをヌクレオチド構築物に結合させるために用いることもできる。いくつかの実施形態では、２種以上の共役部分がヌクレオチド構築物に存在するため、ヌクレオチド構築物に対する補助部分の選択的及び／又は連続的カップリングが可能になる。ポリヌクレオチド構築物における結合位置は、ポリマーの合成における適切なヌクレオチド構築物の使用によって決定される。もう１つの共役部分を含むヌクレオチド構築物は、適切な条件下で、補助部分上の１つ又は複数の対応する共役部分と反応することになる。補助部分は、ペプチド若しくはポリペプチドに、共役部分、例えば、末端若しくはリシンアミン基及びチオール基を内在的に有してもよく、又は共役部分を導入するために、小さな連結基を含むように修飾してもよい。こうした連結基の導入は、当技術分野において公知である。本発明のヌクレオチド構築物に結合した補助部分は、任意の必要な連結基を含むことは理解されよう。
【０２３２】
本明細書に記載するヌクレオチド構築物に補助部分を結合させるために、多様な結合形成方法を用いることができる。例示的反応として、以下のものが挙げられる：トリアゾールを形成するためのアジド及びアルキン同士のヒュスゲン環状付加；ジエノフィル及びジエン／ヘテロ−ジエン同士のディールス・アルダー反応；エン（ｅｎｅ）反応などの他のペリ環状反応を介した結合形成；アミド又はチオアミド結合形成；スルホンアミド結合形成；アルコール又はフェノールアルキル化（例えば、ジアゾ化合物）、オキシム、ヒドラゾン、又はセミカルバジド基を形成する縮合反応；求核剤（例えば、アミン及びチオール）によるコンジュゲート付加反応；ジスルフィド基形成；並びにカルボン酸官能基での求核置換（例えば、アミン、チオール、又はヒドロキシル求核剤による）。結合形成の他の例示的方法は、本明細書に記載されており、当技術分野において公知である。
【０２３３】
求核剤／求電子剤反応
求核剤及び求電子剤は、限定はしないが、Ｃ−Ｈ結合への求電子剤による挿入、Ｏ−Ｈ結合への求電子剤による挿入、Ｎ−Ｈ結合への求電子剤による挿入、アルケンを介した求電子剤の付加、アルキンを介した求電子剤の付加、求電子性カルボニル中心への付加、求電子性カルボニル中心での置換、ケテンへの付加、イソシアネートへの求核付加、イソチオシアネートへの求核付加、活性化ケイ素中心での求核置換、ハロゲン化アルキルの求核置換、擬似ハロゲン化アルキルでの求核置換、活性化カルボニルでの求核付加／排除、α，β−不飽和カルボニルへの求核剤の１，４−コンジュゲート付加、エポキシドの求核開環、電子不足芳香族化合物の求核芳香族置換、活性化リン中心への求核付加、活性化リン中心での求核置換、活性化硫黄中心への求核付加、並びに活性化硫黄中心での求核置換から選択される結合形成反応を行うことができる。
【０２３４】
求核性共役部分は、任意選択で置換されたアルケン、任意選択で選択されたアルキン、任意選択で置換されたアリール、任意選択で置換されたヘテロシクリル、ヒドロキシル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アニリド基、及びチオ基から選択することができる。
【０２３５】
求電子性共役部分は、ニトレン、アジドなどのニトレン前駆体、カルベン、カルベン前駆体、活性化ケイ素中心、活性化カルボニル、無水物、イソシアネート、チオイソシアネート、スクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルエステル、マレイミド、ハロゲン化アルキル、擬似ハロゲン化アルキル、エポキシド、エピスルフィド、アジリジン、電子不足アリール、活性化リン中心、及び活性化硫黄中心から選択することができる。
【０２３６】
例えば、共役は、ヒドラゾン結合である連結を形成する縮合を介して起こり得る。
【０２３７】
アミド結合の形成を介した共役は、カルボキシルベースの共役部分の活性化と、それに続く第一級アミンベースの共役部分との反応により媒介され得る。活性化剤は、下記のような様々なカルボジイミドであってよい：ＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）、ＥＤＡＣ（１−エチル−３（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＣＭＣ（１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリノエチル）カルボジイミド）、ＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）又はウッドワード試薬Ｋ（Ｗｏｏｄｗａｒｄ’ｓ  ｒｅａｇｅｎｔ  Ｋ）（Ｎ−エチル−３−フェニルイソキサゾリウム−３’−スルホネート）。また、活性化ＮＨＳ−エステルベースの共役部分と第一級アミンベースの共役部分の反応によっても、アミド結合の形成が起こる。
【０２３８】
ヌクレオチド構築物は、カルボニルベースの共役部分を含有し得る。第二級アミンの形成による共役は、アミンベースの共役部分をアルデヒドベースの共役部分と反応させた後、シアノ水素化ホウ素ナトリウムのような水素化物源を用いた還元によって達成することができる。アルデヒドベースの共役部分は、例えば、糖部分の酸化又はＳＦＢ（スクシンイミジル−ｐ−ホルミルベンゾエート）若しくはＳＦＰＡ（スクシンイミジル−ｐ−ホルミルフェノキシアセテート）との反応によって導入することができる。
【０２３９】
エーテル形成は、補助部分を本発明のヌクレオチド構築物と共役させるために用いることもできる。エーテル結合による共役は、エポキシドベースの共役部分とヒドロキシベースの共役部分との反応によって媒介することができる。
【０２４０】
チオールもまた、共役部分として用いることができる。例えば、ジスルフィド結合の形成を介した共役は、ピリジルジスルフィド媒介のチオール−ジスルフィド交換によって達成することができる。スルフヒドリルベースの共役部分の導入は、例えば、トラウト試薬（Ｔｒａｕｔ’ｓ  ｒｅａｇｅｎｔ）（２−イミノチオラン）ＳＡＴＡ（Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオアセテート、ＳＡＴＰ（スクシンイミジルアセチルチオプロピオネート）、ＳＰＤＰ（Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート、ＳＭＰＴ（スクシンイミジルオキシカルボニル−α−メチル−α−（２−ピリジルチオ）トルエン）、Ｎ−アセチルホモシステインチオラクトン、ＳＡＭＳＡ（Ｓ−アセチルメルカプトコハク酸無水物）、ＡＭＢＨ（２−アセドアミド−４−メルカプト酪酸ヒドラジド）、及びシスタミン（２，２’−ジチオビス（エチルアミン）により媒介される。
【０２４１】
チオエーテル結合の形成を介した共役は、スルフヒドリルベースの共役部分をマレイミド−若しくはヨードアセチルベースの共役部分と反応させることによって、又はエポキシドベースの共役部分と反応させることによって実施することができる。マレイミドベースの共役部分は、ＳＭＣＣ（スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、スルホ−ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、ＭＢＳ（ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、スルホ−ＭＢＳ（ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−スルホヒドロキシスクシンイミドエステル）、ＳＭＰＢ（スクシンイミジル−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート）、スルホ−ＳＭＰＢ（スルホスクシンイミジル−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート）、ＧＭＢＳ（Ｎ−α−マレイミドブツリル−オキシスクシンイミドエステル）、又はスルホ−ＧＭＢＳ（Ｎ−α−マレイミドブツリル−オキシスクシンイミドエステル）により導入することができる。
【０２４２】
チオールベースの共役部分は、ヨードアセチルベースの共役部分とも反応することができる。ヨードアセチルベースの共役部分は、ＳＩＡＢ（Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート、スルホＳＩＡＢ（スルホ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート）、ＳＩＡＸ（スクシンイミジル６−［（ヨードアセチル）アミノ）］ヘキサノエート）、ＳＩＡＸＸ（スクシンイミジル６−［６−（（（ヨードアセチル）アミノ）−ヘキサノイル）アミノ］ヘキサノエート）、ＳＩＡＣ（スクシンイミジル４−（（（ヨードアセチル）アミノ）メチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、ＳＩＡＣＸ（スクシンイミジル６−（（（（４−（ヨードアセチル）アミノ）メチル）−シクロヘキサン−１−カルボニル）アミノ）ヘキサノエート）、及びＮＰＩＡ（ｐ−ニトロフェニルヨードアセテート）と一緒に挿入することができる。
【０２４３】
カルバメート結合の形成を介した共役は、ヒドロキシベースの共役部分とＣＤＩ（Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール）若しくはＤＳＣ（Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネート）又はＮ−ヒドロキシスクシンイミジルクロロホルメートの反応、及びそれに続くアミンの反応によって実施することができる。
【０２４４】
光溶解性及び熱分解性共役
これに代わり、共役部分は、所望の共有結合を形成するために、光分解又は熱分解活性を使用することができる。アジ化物官能基を含む共役部分がその一例である。このように、結合は、光反応性結合部分の導入により達成することもできる。光反応性共役部分は、アリールアジド、ハロゲン化アリールアジド、ベンゾフェノン、特定のジアゾ化合物及びジアジリン誘導体である。これらは、アミノベースの共役部分、又は活性化水素結合を有する共役部分と反応する。
【０２４５】
アジドベースの共役部分は、ＵＶ不安定性であり、光分解時に、ニトレン求電子剤の形成をもたらすことができ、これは、アリールベースの共役部分又はアルケニルベースの共役部分などの求核性共役部分と反応することができる。或いは、これらのアジド化合物の加熱もまたニトレン形成をもたらすことができる。
【０２４６】
環状付加反応
所望の共有結合を形成するために、環状付加反応を用いることができる。代表的環状付加反応として、限定はしないが、１，３−ジエンベースの共役部分とアルケンベースの共役部分の反応（ディールス・アルダー反応）、α，β−不飽和カルボニルベースの共役部分とアルケンベースの共役部分の反応（ヘテロディールス・アルダー反応）、及びアジドベースの共役部分とアルキンベースの共役部分の反応（ヒュスゲン環状付加）が挙げられる。環状付加反応のための反応体を含む共役部分の、選択される非限定的例は、アルケン、アルキン、１，３−ジエン、α，β−不飽和カルボニル、及びアジドである。例えば、アジドとアルキンとのヒュスゲン環状付加は、多様な生物学的実体の官能基化のために用いられている。
【０２４７】
カップリング反応
共役部分はまた、限定はしないが、ヒドロシリル化、オレフィン交差メタセシス、コンジュゲート付加、スティルカップリング、鈴木カップリング、薗頭カップリング、檜山カップリング、及びヘック反応のための反応体も含む。これらの反応のための共役部分としては、ヒドリドシラン、アルケン（例えば、エノン若しくはエノエートなどの活性化アルケン）、アルキン、ハロゲン化アリール、擬似ハロゲン化アリール（例えば、トリフレート若しくはノナフレート）、ハロゲン化アルキル、擬似ハロゲン化アルキル（例えば、トリフレート、ノナフレート、及びホスフェート）が挙げられる。クロスカップリング反応のための触媒は当技術分野で公知である。こうした触媒は、有機金属錯体又は金属塩（例えば、Ｐｄ（０）、Ｐｄ（ＩＩ）、Ｐｔ（０）、Ｐｔ（ＩＩ）、Ｐｔ（ＩＶ）、Ｃｕ（Ｉ）、又はＲｕ（ＩＩ））であってよい。クロスカップリング反応を促進するために、リガンド（例えば、ＰＰｈ3、ＰＣｙ3、ＢＩＮＡＰ、ｄｐｐｅ、ｄｐｐｆ、ＳＩＭｅｓ、又はＳＩＰｒ）及び金属塩（例えば、ＬｉＣｌ）などの添加剤を添加してもよい。
【０２４８】
共役のための補助部分
様々な補助部分を本発明のヌクレオチド構築物（例えば、ｓｉＲＮＡ）に共役させることができ、補助部分は、任意の数の生物学的又は化学的作用を有してもよい。生物学的作用として、限定はしないが、細胞内在化（ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）の誘導、細胞表面への結合、特定の細胞型のターゲティング、エンドソームエスケープの許容、ｉｎ  ｖｉｖｏでのポリヌクレオチドの半減期の改変、及び治療効果の付与が挙げられる。化学的作用として、限定はしないが、溶解性、電荷、サイズ、及び反応性の変化が挙げられる。
【０２４９】
小分子
小分子ベースの共役部分（例えば、約１０００Ｄａ以下の分子量を有する有機化合物）は、本発明のヌクレオチド構築物に共役させることができる。このような小分子の例として、限定はしないが、置換若しくは非置換アルカン、アルケン、又はアルキン、例えば、これらのヒドロキシ−置換、ＮＨ2−置換、モノ−、ジ−、若しくはトリアルキルアミノ置換、グアニジノ置換、ヘテロシクリル置換、及び保護形態が挙げられる。その他の小分子としては、ステロイド（例えば、コレステロール）、他の脂質、胆汁酸、及びアミノ酸が挙げられる。中性若しくは陽電荷を付与するために、又はポリヌクレオチドの親水性若しくは疎水性を改変するために、小分子をポリヌクレオチドに添加してもよい。
【０２５０】
ポリペプチド
ポリペプチド（融合ポリペプチドを含む）は、モノマーが、アミド結合により互いに連結したアミノ残基である、ポリマーを指す。アミノ酸がαアミノ酸であるとき、Ｌ−光学異性体又はＤ−光学異性体のいずれも用いることができる。ポリペプチドは、アミノ酸配列を包含し、糖タンパク質、レトロ−インベルソ（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）ポリペプチド、Ｄ−アミノ酸などの修飾配列を含む。ポリペプチドは、天然に存在するタンパク質、並びに組換え又は合成により合成されたものを含む。ポリペプチドは、ポリペプチドの特定の断片又は部分に起因し得る機能を有する２つ以上のドメインを含んでもよい。あるドメインは、例えば、少なくとも１つの有用なエピトープ又は機能を呈示するポリペプチドの一部を含む。２つ以上のドメインは、各ドメインが、単一ペプチド又はポリペプチド（例えば、融合ポリペプチド）が依然として含むその機能を保持するように、機能的に連結させてもよい。例えば、ＰＴＤの機能性断片は、形質導入活性を保持する断片を含む。例えば、生物学的に機能性の断片は、抗体分子に結合することができるエピトープほどの小さな断片から、細胞内の表現型変化の特徴的誘導又はプログラム化に参加することができる大型のポリペプチドまで、サイズが変動し得る。
【０２５１】
一部の実施形態では、レトロ−インベルソポリペプチドが用いられる。「レトロ−インベルソ」は、１つ又は複数のアミノ酸におけるアミノ−カルボキシ反転、並びにエナンチオマー変化（すなわち、左旋性（Ｌ）から右旋性（Ｄ）へ）を意味する。本発明のポリペプチドは、例えば、アミノ酸配列のアミノ−カルボキシ反転、１つ又は複数のＤ−アミノ酸を含有するアミノ−カルボキシ反転、及び１つ又は複数のＤ−アミノ酸を含有する非反転配列を包含する。安定し、且つ生体活性を保持するレトロ−インベルソペプチドミメティックは、Ｂｒｕｇｉｄｏｕ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２１４（２）：６８５−６９３，１９９５）及びＣｈｏｒｅｖ  ｅｔ  ａｌ．（Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３（１０）：４３８−４４５，１９９５）によって記載されているように、考案することができる。レトロ−インベルソポリペプチドの全体的な構造の特徴は、親Ｌ−ポリペプチドのそれと類似している。しかし、これら２つの分子は、キラル二次構造要素を共有するため、おおまかに鏡像である。ペプチド結合逆転及びキラリティーの反転に基づく主鎖ペプチドミメティックは、ペプチド及びタンパク質についての重要な構造的変化を示し、生物工学にとって非常に有意義である。抗原性及び免疫原性は、天然の抗原ペプチド及びポリペプチドの全Ｄ−及びレトロ−インベルソ−異性体などの代謝的に安定した抗原によって達成することができる。いくつかのＰＴＤ由来ペプチドミメティックを本明細書に記載する。
【０２５２】
ポリペプチド及び断片は、天然に由来するポリペプチド又はドメインと同じか、又は実質的に同じアミノ酸配列を有してよい。「実質的に同じ」は、アミノ酸配列が、全部ではないが、大部分同じであるが、それが関連する配列の機能的活性を保持していることを意味する。機能的活性の一例は、断片が、形質導入が可能、又はＲＮＡへの結合が可能であるものである。例えば、形質導入活性を有する完全長ＴＡＴの断片が記載されている。一般に、２つのペプチド、ポリペプチド又はドメインは、その配列が、少なくとも８５％、９０％、９５％、９８％若しくは９９％同一であるか、又は配列中に保存的変異がある場合に「実質的に同一である」。ＢＬＡＳＴプログラム（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０）などのコンピュータプログラムを用いて、配列同一性を比較することができる。
【０２５３】
ポリペプチドは、ペプチド結合又は修飾ペプチド結合、すなわちペプチド等電子体により互いに結合されたアミノ酸から構成することができ、２０遺伝子コード化アミノ酸以外のアミノ酸を含有し得る。ポリペプチドは、翻訳後プロセシングなどの天然のプロセス、又は当技術分野で公知の化学修飾技術のいずれにより修飾してもよい。こうした修飾は、基本的教本、より詳細な研究論文、並びに大部の研究文献に十分に記載されている。修飾は、骨格、アミノ酸側鎖及びアミノ又はカルボキシル末端など、ポリペプチドのいずれの箇所で行ってもよい。同じタイプの修飾が、所与のペプチド又はポリペプチドの複数の部位において同じ若しくはまちまちの度合いで存在してもよいことは理解されよう。また、所与のポリペプチドが、様々なタイプの修飾を含んでもよい。ポリペプチドは、例えば、ユビキチン化の結果、分岐していてもよく、分岐を含む又は含まない環状であってもよい。環状、分岐、及び分岐環状ポリペプチドは、翻訳後の天然プロセスにより起こるものであってもよく、又は合成方法によって作製することもできる。修飾としては、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチド若しくはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質若しくは脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイノシトールの共有結合、架橋結合、環状化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成、システインの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、酸化、ペグ化、タンパク質溶解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、タンパク質へのアミノ酸の転移ＲＮＡ媒介性付加（例えば、アルギニル化）、及びユビキチン化が挙げられる。（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ−−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９３）；Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｖａｌｅｎｔ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｇｓ．１−１２（１９８３）；Ｓｅｉｆｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  １８２：６２６−６４６（１９９０）；Ｒａｔｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ６６３：４８−６２（１９９２）を参照）。
【０２５４】
ポリペプチドドメイン又は融合ポリペプチドは、α−アミノ基のｔ−Ｂｏｃ又はＦｍｏｃ保護を含むものなど、一般に用いられる方法により合成することができる。いずれの方法も、ペプチド又はポリペプチドのＣ末端から開始する各ステップで一アミノ酸を付加する段階的合成を含む（Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９１，Ｕｎｉｔ  ９を参照）。また、本発明のポリペプチドは、０．１〜１．０ｍｍｏｌアミン／ｇのポリマーを含有するコポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）を用いて、公知の固相ポリペプチド合成方法、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８５：２１４９，１９６２；及びＳｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｆｒｅｅｍａｎ，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，１９６９，ｐｐ．２７−６２に記載されているものなどによっても合成することができる。化学合成の完了時に、ポリペプチドを脱保護し、０℃で約１／４〜１時間にわたる液体ＨＦ−１０％アニソールを用いた処理によりポリマーから切断することができる。試薬を蒸発させた後、１％酢酸溶液を用いて、ポリペプチドをポリマーから抽出した後、これを凍結乾燥させることにより、粗材料を取得する。ポリペプチドは、溶剤として５％酢酸を用いたＳｅｐＨａｄｅｘ  Ｇ−１５でのゲル濾過などの技術により精製することができる。カラム溶出液の適切な画分の凍結乾燥により、均質なペプチド又はポリペプチドを取得した後、これを、標準的技術、例えば、アミノ酸分析、薄膜クロマトグラフィー、高性能液体クロマトグラフィー、紫外吸収分光法、モル旋光度、又は溶解度測定などにより特性決定することができる。所望であれば、固相エドマン（Ｅｄｍａｎ）分解によってポリペプチドを定量することができる。
【０２５５】
送達ドメイン
本発明は、補助部分として、例えば、送達ドメイン補助部分として本明細書に開示する、ヌクレオチド構築物に結合することができる１つ又は複数の送達ドメイン部分を提供する。送達ドメインは、任意の機構により、細胞への本発明のポリヌクレオチドの輸送を誘導する部分である。典型的に、本発明のヌクレオチド構築物は、マクロピノサイトーシス、食作用、又はエンドサイトーシス（例えば、クラスリン−媒介性エンドサイトーシス、カベオラ媒介性エンドサイトーシス、及び脂質ラフト依存性エンドサイトーシス）により内在化される。例えば、Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．，２０１１，４０，２３３−２４５を参照されたい。送達ドメインは、本明細書に記載するように、ペプチド又はポリペプチド（例えば、ペプチド形質導入ドメイン）、炭水化物（ヒアルロン酸）、並びに陽荷電ポリマー（例えば、ポリ（エチレンイミン））を含んでもよい。
【０２５６】
ペプチド形質導入ドメイン
細胞送達は、ＴＡＴ（配列番号１）又はＡｒｇ8（配列番号２）（Ｓｎｙｄｅｒ  ａｎｄ  Ｄｏｗｄｙ，２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．２，４３−５１）などのカチオン性ペプチド形質導入ドメイン（ＰＴＤ；また、細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）とも呼ばれる）との「カーゴ（ｃａｒｇｏ）」生物剤（この場合、ポリヌクレオチド）の高分子融合によって達成することができる。ＰＴＤは、本明細書に記載のポリヌクレオチドを含む、非常に多様な高分子カーゴを送達するのに用いることができる（Ｓｃｈｗａｒｚｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５，１５６９−１５７２；Ｅｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６，２６２０４−２６２１０；及びＫｏｐｐｅｌｈｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１２，５１−６３）。カチオン性ＰＴＤは、マクロピノサイトーシス、すなわちあらゆる細胞が実施する流体相取込みの特殊化形態により細胞に侵入する。
【０２５７】
モデル小胞体に関する生物物理学的研究から、カーゴは、細胞質へのマクロピノソーム小胞対から逸出することが示唆されるため、ｐＨ低下が必要である（Ｍａｇｚｏｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４４，１４８９０−１４８９７）。ＰＴＤのカチオン電荷は、分子が細胞膜を通過するのに不可欠である。当然のことながら、カチオン性ＰＴＤ（６〜８の陽電荷）とアニオン性ｓｉＲＮＡ（約４０の陰電荷）との共役によって、電荷中和、ひいては、ＰＴＤの不活性化が起こり、ｓｉＲＮＡは細胞に一切侵入しなくなる（Ｔｕｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｌｌｓ  Ｍｏｌ．Ｄｉｓ．，３８（１）：１−７，２００７）。しかし、カチオン性ＰＴＤと本明細書に記載するヌクレオチド構築物（例えば、アニオン性ＲＮＡ又はＤＮＡ）の化学的共役では、ヌクレオチド構築物を細胞により取り込ませることができ、従って、本明細書に開示する新規且つ非自明のヌクレオチド構築物は、他の類似の方法にみられる電荷中和の有害な産物を一切被らない。さらに、これらのＰＴＤの切断は、細胞内で、ポリヌクレオチドを標的細胞に不可逆的に輸送することができる。
【０２５８】
真核生物細胞の形質膜を効率的に通過することができる複数のタンパク質の発見により、ペプチド形質導入ドメインが由来するタンパク質のクラスを同定するに到った。これらのタンパク質のうちの最もよく特性決定されているのは、ショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）ホメオタンパク質であるアンテナペディア転写タンパク質（ＡｎｔＨＤ）（Ｊｏｌｉｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｂｉｏｌ．３：１１２１−３４，１９９１；Ｊｏｌｉｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：１８６４−８，１９９１；Ｌｅ  Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：９１２０−４，１９９３）、単純ヘルペスウイルス構造タンパク質ＶＰ２２（Ｅｌｌｉｏｔｔ  ａｎｄ  Ｏ’Ｈａｒｅ，Ｃｅｌｌ  ８８：２２３−３３，１９９７）、ＨＩＶ−１転写活性化ＴＡＴタンパク質（Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｌｏｅｗｅｎｓｔｅｉｎ，Ｃｅｌｌ  ５５：１１７９−１１８８，１９８８；Ｆｒａｎｋｅｌ  ａｎｄ  Ｐａｂｏ，Ｃｅｌｌ  ５５：１１８９−１１９３，１９８８）、並びにより近年では、プリオンタンパク質のカチオン性Ｎ末端ドメインである。例示的ＰＴＤ配列を表１に記載する。本発明はさらに、補助部分として、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に共役させるための、表１に掲載するＰＴＤ又は当技術分野で公知の他のＰＴＤの１つ又は複数も提供する（例えば、Ｊｏｌｉｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，６（３）：１８９−１９６，２００４を参照されたい）。共役の戦略は、細胞内酵素の作用により切断することができる官能基を含む二官能性リンカーの使用を含む。
【０２５９】
【表１】
2016537027.tif 000046
【０２６０】
本明細書に記載するヌクレオチド構築物のいずれかに共役させることができるＴＡＴペプチドを含む例示的補助部分を表２に掲載する。
【０２６１】
【表２】
2016537027.tif 000047
【０２６２】
特定の実施形態では、表２に記載する補助部分は、Ｎ’末端にＺ’への共有結合を含み、ここで、Ｚ’は、アルデヒドに対するポリペプチドＲZの６−ヒドラジノニコチン酸（ＨｙＮｉｃ）又はアミノ基の共役の残基である。
【０２６３】
別の例示的カチオン性ＰＴＤ（ＣＰＰ）配列を表３に掲載する。
【０２６４】
従って、本発明のヌクレオチド構築物に共役させることができるＰＴＤとして、限定はしないが、ＡｎｔＨＤ、ＴＡＴ、ＶＰ２２、カチオン性プリオンタンパク質ドメイン、及びこれらの機能性断片が挙げられる。これらのペプチドが、形質膜を通過できるだけではなく、酵素β−ガラクトシダーゼなどの他のペプチド若しくはポリペプチドの結合も、これらの複合体の細胞取込みを刺激するのに十分である。こうしたキメラタンパク質は、細胞質及び核内に生物学的に活性の形態で存在する。このプロセスの特性決定から、これらの融合ポリペプチドの取込みが、受容体非依存的に、迅速であり、往々にして数分内に起こることが明らかになった。さらに、これらのタンパク質の形質導入は、細胞型に影響を受けないと思われ、これらのタンパク質は、明らかな毒性なしに、培養中の細胞の約１００％を効率的に形質導入することができる（Ｎａｇａｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４：１４４９−５２，１９９８）。完全長タンパク質以外にも、ペプチド形質導入ドメインを用いて、ＤＮＡ（Ａｂｕ−Ａｍｅｒ、前掲）、アンチセンスポリヌクレオチド（Ａｓｔｒｉａｂ−Ｆｉｓｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ，１９：７４４−５４，２００２）、小分子（Ｐｏｌｙａｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１１：７６２−７１，２０００）並びに無機４０ｎｍ鉄粒子でさえも（Ｄｏｄｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５６：８９−１０５，２００１；Ｗｕｎｄｅｒｂａｌｄｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１３：２６４−８，２００２；Ｌｅｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８：４１０−４，２０００；Ｊｏｓｅｐｈｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．，Ｃｈｅｍ．１０：１８６−９１，１９９９）、その細胞内取込みを誘導するのに成功しており、このことは、このプロセスでは粒度に相当な順応性があることを示唆している。
【０２６５】
従って、特定の実施形態では、本発明は、構築物の標的細胞内への標的化取込み及び／又は放出を促進するために、ＴＡＴ及びポリ−ＡｒｇなどのＰＴＤの使用を、本明細書に開示するヌクレオチド構築物と組み合わせる方法及び組成物を提供する。そのため、本明細書に開示するヌクレオチド構築物は、補助部分として連結される治療又は診断薬を、補助部分として連結される１つ又は複数のＰＴＤをさらに含むヌクレオチド構築物により特定の細胞内に送達するようにターゲティングすることができる方法を提供する。
【０２６６】
本発明のヌクレオチド構築物は、それ自体が治療又は診断利益をもたらすｓｉＲＮＡ又は他の阻害核酸配列であってよい。しかし、一部の例では、治療薬として別の補助部分を結合させるか、又は取込みを促進することが望ましい場合もある。ＰＴＤの場合、ＰＴＤは、追加的な電荷改変部分として機能し、ヌクレオチド構築物上の電荷を中和するか、又は典型的には、ヌクレオチド構築物に若干の正味カチオン電荷を付与することにより、ヌクレオチド構築物の取込みを促進する。さらに、ヌクレオチド構築物が、別の補助部分、例えば、限定はしないが、ターゲティング部分、生物学的に活性の分子、治療薬、小分子（例えば、細胞傷害剤）などを含んでもよいことは理解されよう。このような場合、補助部分を有するヌクレオチド構築物は、補助部分のサイズ及び電荷に応じて、中性荷電又はカチオン性荷電であってよい。補助部分が、アニオン性荷電である場合、カチオン性荷電ペプチド（例えば、ＰＴＤ）の付加によって、電荷を中和するか、又は構築物の正味カチオン電荷を改善することができる。
【０２６７】
一般に、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に連結した送達ドメインは、標的細胞への本明細書に開示する核酸構築物の細胞内送達に役立つほぼ全ての合成又は天然アミノ酸配列であってよい。例えば、トランスフェクションは、本発明のヌクレオチド構築物の共役部分に共有結合したペプチド形質導入ドメイン（ＨＩＶ  ＴＡＴタンパク質又はその断片など）の使用により、本発明に従って達成することができる。或いは、ペプチド形質導入ドメインは、アンテナペディアホメオドメイン又はＨＳＶ  ＶＰ２２配列、プリオンタンパク質のＮ−末端断片又はそれらの好適な形質導入断片（当技術分野で公知のものなど）を含んでもよい。
【０２６８】
ＰＴＤのタイプ及びサイズは、所望のトランスフェクションの程度を含む複数のパラメータによって誘導される。典型的に、ＰＴＤは、細胞の少なくとも約２０％、２５％、５０％、７５％、８０％若しくは９０％、９５％、９８％を、並びに最大約１００％までトランスフェクトすることができる。トランスフェクトした細胞のパーセンテージとして典型的に表されるトランスフェクション効率は、いくつかの従来の方法により決定することができる。
【０２６９】
ＰＴＤは、標的細胞への少なくともピコモル量の本明細書に開示のヌクレオチド構築物に有利な細胞移入及び離脱速度（それぞれ、ｋ1及びｋ2と呼ばれることもある）を呈示する。ＰＴＤ及び任意のカーゴの移入及び脱離速度は、検出可能な標識融合分子を用いて、標準的速度論分析により、容易に決定するか、又は少なくとも概算することができる。典型的に、移入速度と脱離速度との比は、約５〜約１００、最大１０００までの範囲であろう。
【０２７０】
一実施形態では、本発明の方法及び組成物に有用なＰＴＤは、実質的なα−螺旋性を特徴とするポリペプチドを含む。ＰＴＤが有意なα−螺旋性を呈示するとき、トランスフェクションが最適化されることがみいだされている。別の実施形態では、ＰＴＤは、ペプチド又はポリペプチドの少なくとも片面に沿って実質的にアラインメントされる塩基性アミノ酸残基を含有する配列を含む。本発明において有用なＰＴＤドメインは、天然のペプチド若しくはポリペプチド又は合成ペプチド若しくはポリペプチドであってもよい。
【０２７１】
別の実施形態では、ＰＴＤは、螺旋シリンダー（Ｈｅｌｉｃａｌ  ｃｙｌｉｎｄｅｒ）にアルギニン（Ａｒｇ）残基を有する強度のα螺旋構造を含むアミノ酸配列を含む。
【０２７２】
また別の実施形態では、ＰＴＤドメインは、次の一般式：ＢP1−ＸP1−ＸP2−ＸP3−ＢP2−ＸP4−ＸP5−ＢP3により表されるポリペプチドを含み、式中、ＢP1、ＢP2、及びＢP3は各々、独立に、同じ又は異なる塩基性アミノ酸であり；ＸP1、ＸP2、ＸP3、ＸP4、及びＸP5は各々、独立に、同じ又は異なるα螺旋増強アミノ酸である。
【０２７３】
別の実施形態では、ＰＴＤドメインは、次の一般式：ＢP1−ＸP1−ＸP2−ＢP2−ＢP3−ＸP3−ＸP4−ＢP4により表され、式中、ＢP1、ＢP2、ＢP3、及びＢP4は各々、独立に、同じ又は異なる塩基性アミノ酸であり；ＸP1、ＸP2、ＸP3、及びＸP4は各々、独立に、同じ又は異なるα螺旋増強アミノ酸である。
【０２７４】
加えて、ＰＴＤドメインは、塩基性残基、例えば、リシン（Ｌｙｓ）又はアルギニン（Ａｒｇ）を含み、ドメインに「ねじれ（ｋｉｎｋｓ）」を導入するのに十分な少なくとも１つのプロリン（Ｐｒｏ）残基をさらに含むことができる。このようなドメインの例として、プリオンの形質導入ドメインがある。例えば、こうしたポリペプチドは、ＫＫＲＰＫＰＧ（配列番号１５）を含む。
【０２７５】
一実施形態では、ドメインは、次の一般式：ＸP−ＸP−Ｒ−ＸP−（Ｐ／ＸP）−（ＢP／ＸP）−ＢP−（Ｐ／ＸP）−ＸP−ＢP−（ＢP／ＸP）により表されるポリペプチドを含み、式中、Ｘは、アラニンなどのα螺旋促進残基であり；Ｐ／ＸPは、プロリン又は既に定義した通りのＸPのいずれかであり；ＢPは、塩基性アミノ酸残基、例えば、アルギニン（Ａｒｇ）若しくはリシン（Ｌｙｓ）であり；Ｒは、アルギニン（Ａｒｇ）であり、ＢP／ＸPは、上に定義した通りのＢP若しくはＸPのいずれかである。
【０２７６】
別の実施形態では、ＰＴＤは、カチオン性であり、７〜１０個のアミノ酸から構成され、式ＫＸP1ＲＸP2ＸP1を有し、ここで、ＸP1は、Ｒ又はＫであり、ＸP2は任意のアミノ酸である。このようなポリペプチドの一例は、ＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号１）を含む。別の例では、ＰＴＤは、５〜１５アミノ酸にわたって５〜１０個のアルギニン（及び／又はリシン）残基を有するカチオン性ペプチド配列である。
【０２７７】
本開示に従う別の送達ドメインは、少なくともアミノ酸４９〜５６のＴＡＴ（配列番号１）からほぼ完全長ＴＡＴ配列（配列番号１６）までを含むＴＡＴ断片を含む。ＴＡＴ断片は、断片のα螺旋性を増大するのに十分な１つ又は複数のアミノ酸の変化を含んでもよい。一部の例では、導入されたアミノ酸の変化は、認識されるα螺旋増大アミノ酸の付加を伴うことになる。或いは、アミノ酸変化は、α螺旋形成又は安定性を妨害するＴＡＴ断片から１つ又は複数のアミノ酸を除去することを含む。より具体的な実施形態では、ＴＡＴ断片は、α螺旋増強アミノ酸による少なくとも１つのアミノ酸置換を含む。典型的に、ＴＡＴ断片は、標準的ペプチド合成技術により作製されるが、一部の例では、組換えＤＮＡ手法を用いてもよい。一実施形態では、ＴＡＴ断片中の少なくとも２つの塩基性アミノ酸残基が、ＴＡＴ断片の少なくとも片面に沿って実質的にアラインメントされるように、置換を選択する。より具体的な実施形態では、ＴＡＴ４９〜５６配列（配列番号１）中の少なくとも２つの塩基性アミノ酸残基が、配列の少なくとも片面に沿って実質的にアラインメントされるように、置換を選択する。
【０２７８】
本発明の組成物及び方法において使用することができる別の形質導入タンパク質（ＰＴＤ）は、配列中の少なくとも２つの塩基性アミノ酸残基が、ＴＡＴ断片の少なくとも片面に沿って実質的にアラインメントされるように、ＴＡＴ４９〜５６配列が修飾されたＴＡＴ断片を含む。例示的ＴＡＴ断片は、ＴＡＴの少なくともアミノ酸４９〜５６に少なくとも１つの指定されたアミノ酸置換を含み、この置換は、セグメントの少なくとも片面、典型的にはＴＡＴ４９〜５６配列に沿って、４９〜５６配列の塩基性残基をアラインメントする。
【０２７９】
キメラＰＴＤドメインも含まれる。このようなキメラＰＴＤは、少なくとも２つの異なる形質導入タンパク質の一部を含む。例えば、キメラＰＴＤは、２つの異なるＴＡＴ断片、例えば、ＨＩＶ−１（配列番号１６）由来の１つとＨＩＶ−２（配列番号１７）由来のもう１つ、又はプリオンタンパク質（配列番号１８）由来の１つとＨＩＶ由来の１つを融合することにより、形成することができる。
【０２８０】
ＰＴＤは、ヌクレオチド間架橋基、又は３’若しくは５’末端でのホスホロアミデート又はホスホトリエステルリンカーを用いて、本発明のヌクレオチド構築物に、補助部分として連結させることができる。例えば、ＰＴＤにｓｉＲＮＡを連結させるために、３炭素リンカーと共に３’−アミノ基を含むｓｉＲＮＡ構築物を用いることができる。ｓｉＲＮＡ構築物は、ヘテロ二官能性クロスリンカーを介してＰＴＤに共役させることができる。
【０２８１】
ＰＴＤは、生体可逆的基を介し、補助部分としてヌクレオチド構築物に結合させることができ、ここで、生体可逆的基は、例えば、細胞内酵素（例えば、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ、チオレドキシン、若しくはチオエステラーゼ）により、細胞内で切断することができ、これによってポリヌクレオチドを放出する。
【０２８２】
例えば、ＰＴＤを５’及び３’末端との間で共役させる以外にも、ＰＴＤは、遊離チオール基を介して、５’及び／又は３’末端で、本明細書に開示されるヌクレオチド構築物を含むポリヌクレオチド（例えば、ＲＮＡ若しくはＤＮＡ）に直接共役させることができる。例えば、ＰＴＤは、ジスルフィド結合によりポリヌクレオチドに連結させることができる。この手法は、任意のポリヌクレオチド長さに適用することができ、細胞へのポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ）の送達を可能にするであろう。ポリヌクレオチドはまた、例えば、１つ又は複数の送達ドメイン及び／又は塩基性基を含有する保護基も含んでもよい。細胞内に入ると、ポリヌクレオチドは、加水分解又は他の酵素活性（例えば、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ、チオレドキシン、若しくはチオエステラーゼ活性）により、細胞内条件、例えば、還元環境に基づき非保護ポリヌクレオチドに戻る。
【０２８３】
【表３】
2016537027.tif 000048
【０２８４】
【表４】
2016537027.tif 000049
【０２８５】
ターゲティング部分
本発明は、補助部分として、例えば、ターゲティング補助部分として、本明細書に開示されるヌクレオチド構築物に結合することができる１つ又は複数のターゲティング部分を提供する。ターゲティング部分（例えば、細胞外ターゲティング部分）は、選択されたターゲティング部分について対応する結合パートナー（例えば、対応する受容体又はリガンドのいずれか）を発現する所望の、又は選択された細胞集団に本発明の構築物をターゲティングする能力に基づいて選択することができる。例えば、本発明の構築物を、ターゲティング部分として選択された上皮増殖因子（ＥＧＦ）によって、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を発現する細胞にターゲティングさせることができた。或いは、ターゲティング部分（例えば、細胞内ターゲティング部分）は、本発明の構築物を細胞内の所望の部位（例えば、小胞体、ゴルジ体、核、又はミトコンドリア）にターゲティングさせることができる。細胞内ターゲティング部分の非限定的例として、表３の化合物Ｐ３８及びＰ３９並びにそのペプチド断片（すなわち、それぞれ、ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＦＳＳＡＹＳ（配列番号５６）及びＭＩＲＴＬＬＬＳＴＬＶＡＧＡＬＳ（配列番号５７））が挙げられる。
【０２８６】
このように、本発明のポリヌクレオチド構築物は、細胞内ターゲティング部分、細胞外ターゲティング部分、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される１つ又は複数のターゲティング部分を含んでもよい。従って、本発明のポリヌクレオチド構築物に１つ又は複数の細胞外ターゲティング部分（例えば、葉酸塩、マンノース、ガラクトサミン（例えば、Ｎ−アセチルガラクトサミン）、及び前立腺特異膜抗原からなる群から独立に選択される各細胞外ターゲティング部分）、並びに１つ又は複数の細胞内ターゲティング部分（例えば、小胞体、ゴルジ体、核、若しくはミトコンドリアをターゲティングする部分）を含有することにより、特定の細胞集団内の特定の部位に対するポリヌクレオチドの送達を促進することができる。
【０２８７】
本発明の細胞外ターゲティング部分のいくつかを本明細書に記載する。一実施形態では、ターゲティング部分は、受容体結合ドメインである。別の実施形態では、ターゲティング部分は、以下のものを含む群から選択されるタンパク質であるか、又はそれに特異的に結合する：インスリン、インスリン様増殖因子受容体１（ＩＧＦ１Ｒ）、ＩＧＦ２Ｒ、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ；例えば、ＩＧＦ１若しくは２）、上皮間葉転換因子受容体（ｃ−ｍｅｔ；また、肝細胞増殖因子受容体（ＨＧＦＲ）としても知られる）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、ヘレグリン、線維芽増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、血管上皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）、血管上皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、ＴＮＦ−β、葉酸受容体（ＦＯＬＲ）、葉酸塩、トランスフェリン、トランスフェリン受容体（ＴｆＲ）、メソテリン、Ｆｃ受容体、ｃ−ｋｉｔ受容体、ｃ−ｋｉｔ、インテグリン（例えば、α４インテグリン若しくはβ−１インテグリン）、Ｐ−セレクチン、スフィンゴシン−１−リン酸受容体−１（Ｓ１ＰＲ）、ヒアルロン酸受容体、白血球機能抗原−１（ＬＦＡ−１）、ＣＤ４、ＣＤ１１、ＣＤ１８、ＣＤ２０、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８５、ＣＤ９５（Ｆａｓ受容体）、ＣＤ１０６（血管細胞接着分子１（ＶＣＡＭ１）、ＣＤ１６６（活性化白血球接着分子（ＡＬＣＡＭ）、ＣＤ１７８（Ｆａｓリガンド）、ＣＤ２５３（ＴＮＦ−関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ））、ＩＣＯＳリガンド、ＣＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ５、ＣＸＣＬ１２（間質細胞由来因子１（ＳＤＦ−１））、インターロイキン１（ＩＬ−１）、ＩＬ−１ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＣＴＬＡ−４、ＭＡＲＴ−１、ｇｐ１００、ＭＡＧＥ−１、エフリン（ＥｐＨ）受容体、粘膜アドレシン細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ−１）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ルイス（Ｌｅｗｉｓ）Y、ＭＵＣ−１、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、癌抗原１２５（ＣＡ１２５）、前立腺特異膜抗原（ＰＳＭＡ）、ＴＡＧ−７２抗原、並びにこれらの断片。別の実施形態では、ターゲティング部分は、赤芽球性白血病ウイルス性癌遺伝子ホモログ（ＥｒｂＢ）受容体（例えば、ＥｒｂＢ１受容体；ＥｒｂＢ２受容体；ＥｒｂＢ３受容体；及びＥｒｂＢ４受容体）。他の実施形態では、ターゲティング部分は、アシアロ糖タンパク質受容体、マンノ受容体、又は葉酸受容体に選択的に結合し得る。特定の実施形態では、ターゲティング部分は、１つ又は複数のＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、マンノース、又は葉酸リガンドを含有する。いくつかの実施形態では、葉酸リガンドは、構造：
【化４５】
2016537027.tif 000050
を有する。
【０２８８】
ターゲティング部分はまた、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βなどの腫瘍増殖因子（ＴＧＦ）、及びワクシニアウイルス増殖因子（ＶＶＧＦ）から選択することもできる。また、非ペプチジルリガンドも、ターゲティング部分として用いることができ、例えば、ステロイド、炭水化物、ビタミン及びレシチンを含み得る。さらに、ターゲティング部分は、ポリペプチド、例えば、ソマトスタチン（例えば、コア配列シクロ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｓｙｓ］（配列番号８１）を有し、且つ、例えば、ソマトスタチン類似体のＣ−末端が、Ｔｈｒ−ＮＨ2であるソマトスタチン）、ソマトスタチン類似体（例えば、オクトレオチド及びランレオチド）、ボンベシン、ボンベシン類似体、又は抗体、例えば、モノクローナル抗体から選択することができる。
【０２８９】
本発明のヌクレオチド構築物において、ターゲティング補助部分として用いる他のペプチド又はポリペプチドは、ＫｉＳＳペプチド及び類似体、ウロテンシンＩＩペプチド及び類似体、ＧｎＲＨＩ及びＩＩペプチド及び類似体、デプレオチド、バプレオチド、血管作用性腸ペプチド（ＶＩＰ）、コレシストキニン（ＣＣＫ）、ＲＧＤ含有ペプチド、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）ペプチド、ニューロテンシン、カルシトニン、抗腫瘍抗体の相補性決定領域由来のペプチド、グルタチオン、ＹＩＧＳＲ（配列番号８２）（白血球−結合（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ−ａｖｉｄ）ペプチド、例えば、血小板因子−４（ＰＦ−４）のヘパリン結合領域及びリシンリッチ配列を含有するＰ４８３Ｈ）、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、β−アミロイドペプチド、δ−オピオイドアンタゴニスト（ＩＴＩＰＰ（ｐｓｉ）など）、アネキシン−Ｖ、エンドセリン、ロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）、走化性ペプチド（例えば、Ｎ−ホルミル−メチオニル−ロイシル−フェニルアラニン−リシン（ｆＭＬＦＫ）（配列番号８３））、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体アンタゴニスト（例えば、ＤＭＰ４４４）、ヒト好中球エラスターゼ阻害剤（ＥＰＩ−ＨＮＥ−２及びＥＰＩ−ＨＮＥ−４）、プラスミン阻害剤、抗微生物ペプチド、アプチシド（ａｐｔｉｃｉｄｅ）（Ｐ２８０及びＰ２７４）、トロンボスポンジン受容体（ＴＰ−１３００などの類似体を含む）、ビチスタチン（ｂｉｔｉｓｔａｔｉｎ）、下垂体アデニリルシクラーゼＩ型受容体（ＰＡＣ１）、フィブリンα鎖、ファージディスプレイライブラリ由来のペプチド（例えば、配列番号１３及び１４）、並びにこれらの保存的置換物から選択することができる。
【０２９０】
本発明のヌクレオチド構築物において、ターゲティング部分として用いる免疫反応性リガンドには、抗原認識免疫グロブリン（「抗体」とも呼ばれる）、又はその抗原認識断片が含まれる。本明細書で使用されるとき、「免疫グロブリン」とは、任意の認識された免疫グロブリンのクラス又はサブクラス、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、若しくはＩｇＥを指す。ＩｇＧクラスの免疫グロブリンに属する免疫グロブリンが典型的である。免疫グロブリンは、任意の種に由来するものであってよい。しかし、典型的には、免疫グロブリンは、ヒト、マウス、又はウサギ由来のものである。加えて、免疫グロブリンは、ポリクローナル又はモノクローナルのいずれであってもよいが、典型的にはモノクローナルである。
【０２９１】
本発明のターゲティング部分は、抗体認識免疫グロブリン断片を含んでもよい。こうした免疫グロブリン断片は、例えば、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ若しくはＦａｂ断片、単一ドメイン抗体、ＳｃＦｖ、又はその他の抗原認識免疫グロブリン断片を含んでもよい。また、Ｆｃ断片をターゲティング部分として使用してもよい。こうした免疫グロブリン断片は、例えば、タンパク質溶解酵素消化によって、例えば、ペプシン若しくはパパイン消化、還元的アルキル化、又は組換え技術により調製することができる。こうした免疫グロブリン断片を調製するための材料及び方法は、当業者に公知である。Ｐａｒｈａｍ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３１，２８９５，１９８３；Ｌａｍｏｙｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，５６，２３５，１９８３を参照されたい。
【０２９２】
本発明のターゲティング部分は、当技術分野において公知であるが、本開示には具体的な例として記載されていないターゲティング部分を包含する。
【０２９３】
エンドソームエスケープ
本発明は、補助部分として、例えば、エンドソームエスケープ補助部分として、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に結合させることができる１つ又は複数のエンドソームエスケープ部分を提供する。例示的エンドソームエスケープ部分として、化学療法薬（例えば、クロロキンなどのキノロン）；融合性脂質（例えば、ジオレオイルホスファチジル−エタノールアミン（ＤＯＰＥ））；及びポリエチレンイミン（ＰＥＩ）などのポリマー；ポリ（β−アミノエステル）；ポリアルギニン（例えば、オクタアルギニン）及びポリリシン（例えば、オクタリシン）などのペプチド若しくはポリペプチド；プロトンスポンジ、ウイルスキャプシド、並びに本明細書に記載するペプチド形質導入ドメインが挙げられる。例えば、融合性ペプチドは、インフルエンザＡウイルスのＭ２タンパク質；インフルエンザウイルスヘマグルチニンのペプチド類似体；インフルエンザＣウイルスのＨＥＦタンパク質；フィロウイルスの膜貫通糖タンパク質；狂犬病ウイルスの膜貫通糖タンパク質；水疱性口炎ウイルスの膜貫通糖タンパク質（Ｇ）；センダイウイルスの融合タンパク質；セムリキ森林熱ウイルスの膜貫通糖タンパク質；ヒトＲＳウイルス（ＲＳＶ）の融合タンパク質；麻疹ウイルスの融合タンパク質；ニューカッスル病ウイルスの融合タンパク質；ビスナウイルスの融合タンパク質；マウス白血病ウイルスの融合タンパク質；ＨＴＬウイルスの融合タンパク質；サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）の融合タンパク質に由来するものであってよい。エンドソームエスケープを促進するのに使用することができるその他の部分は、Ｄｏｍｉｎｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１２３（８）：１１８３−１１８９，２０１０に記載されている。例示的エンドソームエスケープ部分を表３に掲載する。
【０２９４】
炭水化物
本発明のヌクレオチド構築物に結合することができる炭水化物ベースの補助部分には、単糖、二糖、及び多糖がある。例として、アロース、アルトロース、アラビノース、クラジノース、エリトロース、エリトルロース、フルクトース、Ｄ−フシトール、Ｌ−フシトール、フコサミン、フコース、フクロース、ガラクトサミン、Ｄ−ガラクトサミニトール、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン、ガラクトース、グルコサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、グルコサミニトール、グルコース、グルコース−６−リン酸グロースグリセルアルデヒド、Ｌ−グリセロ−Ｄ−マンノス−ヘプロース、グリセロール、グリセロン、グロースイドース、リキソース、マンノサミン、マンノース、マンノース−６−リン酸、プシコース、キノボース、キノボサミン、ラムニトール、ラムノサミン、ラムノース、リボース、リブロース、セドヘプツロース、ソルボース、タガトース、タロース、酒石酸、トレオース、キシロース及びキシルロースが挙げられる。単糖は、Ｄ−又はＬ−立体配置であってよい。単糖はさらに、デオキシ糖（アルコールのヒドロキシ基が水素により置換されている）、アミノ糖（アルコールのヒドロキシ基がアミノ基により置換されている）、チオ糖（アルコールのヒドロキシ基がチオールにより置換されているか、又はＣ＝ＯがＣ＝Ｓにより置換されているか、又は環状形態の環酸素が硫黄により置換されている）、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖（環炭素が窒素により置換されている）、イミノ糖（環酸素が窒素により置換されている）、ホスファノ糖（環酸素がリンにより置換されている）、ホスファ糖（環炭素がリンにより置換されている）、Ｃ−置換単糖（非末端炭素原子での水素が炭素により置換されている）、不飽和単糖、アルジトール（カルボニル基がＣＨＯＨ基により置換されている）、アルドン酸（アルデヒド基がカルボキシ基により置換されている）、ケトアルドン酸、ウロン酸、アルダル酸などであってもよい。アミノ糖としては、アミノ単糖、例えば、ガラクトサミン、グルコサミン、マンノサミン、フコスミン、キナボサミン、ノイラミン酸、ムラミン酸、ラクトースジアミン、アコサミン、バシロサミン、ダウノサミン、デソサミン、ホロサミン、ガロサミン、カノサミン、カノサミン、ミカミノース、ミオサミン、ペルソサミン、プノイモサミン、プルプロサミン、ロードスミンなどが挙げられる。単糖などをさらに置換することができることは理解される。二糖及び多糖としては、アベクオース、アクラボース、アミセトース、アミロペクチン、アミロース、アピオース、アルカノース、アスカリロース、アスコルビン酸、ボイビノース、セロビオース、セロトリオース、セルロース、チャコトリオース、チャルコース、キチン、コリトース、シクロデキストリン、シマロース、デキストリン、２−デオキシリボース、２−デオキシグルコースジギノース、ジギタロース、ジギトキソース、エバロース、エベミトロース、フルクトオリゴ糖、ガルト−オリゴ糖、ゲンチアノース、ゲニチオビオース、グルカン、グルイコーゲン、グリコーゲン、ハマメロース、ヘパリン、イヌリン、イソレボグルコセノン、イソマルトース、イソマルトトリオース、イソパノース、コジビオース、ラクトース、ラクトサミン、ラクトースジアミン、ラミナラビオース、レボグルコサン、レボグルコセノン、β−マルトース、マルトリオース、マンナン−オリゴ糖、マンニノトリオース、メレジトース、メリビオース、ムラミン酸、ミカロース、ミシノース、ノイラミン酸、ミゲロース、ノジリマイコン、ノビオース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、プリメベロース、ラフィノース、ロドン、ルチノース、オレアンドロース、パノース、パラトース、プランテオース、プリメベロース、ラフィノース、ロジノース、ルチノース、サルメントース、セドヘプツロース、セドヘプツロサン、ソラトリオース、ソフォロース、スタキオース、ストレプトース、スクロース、α，α−トレハロース、トラハロサミン、ツラノース、チベロース、キシロビオース、ウンベリフェロースなどが挙げられる。
【０２９５】
ポリマー
本明細書に記載するヌクレオチド構築物はまた、共有結合した中性又は荷電（例えば、カチオン性）ポリマーベースの補助部分を含んでもよい。陽荷電ポリマーの例として、ポリ（エチレンイミン）（ＰＥＩ）、スペルミン、スペルミジン、及びポリ（アミドアミン）（ＰＡＭＡＭ）が挙げられる。中性ポリマーとして、ポリ（Ｃ1〜6アルキレンオキシド）、例えば、ポリ（エチレングリコール）及びポリ（プロピレングリコール）並びにこれらのコポリマー、例えば、ジ−及びトリブロックコポリマーが挙げられる。その他のポリマーの例として、エステル化ポリ（アクリル酸）、エステル化ポリ（グルタミン酸）、エステル化ポリ（アスパラギン酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレン−コ−ビニルアルコール）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチロキサゾリン）、ポリ（アルキルアクリレート）、ポリ（アクリルアミド）、ポリ（Ｎ−アルキルアクリルアミド）、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（カプロラクトン）、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、ポリホスファジン及びポリ（Ｎ，Ｎ−ジアルキルアクリルアミド）が挙げられる。例示的ポリマー補助部分は、１００、３００、５００、１０００、又は５０００未満の分子量を有してよい。その他のポリマーは当技術分野において公知である。
【０２９６】
治療薬
診断／イメージング剤を含む治療薬を補助部分として、本発明のヌクレオチド構築物に共有結合させるか、又は本明細書に記載するように、同時療法として投与することができる。これらは、天然に存在する化合物、合成有機化合物、又は無機化合物であってよい。例示的治療薬として、限定はしないが、抗生物質、抗増殖剤、ラパマイシンマクロリド、鎮痛剤、麻酔剤、血管新生抑制剤、血管作用剤、抗凝血剤、免疫調節薬、細胞傷害剤、抗ウイルス剤、抗血栓薬、抗体、神経伝達物質、精神作用薬、及びこれらの組み合わせが挙げられる。治療薬の別の例として、限定はしないが、細胞周期制御剤；シクリンタンパク質生成を阻害する薬剤；サイトカイン（限定はしないが、インターロイキン１〜１３及び腫瘍壊死因子など）；抗凝血剤、抗血小板剤；ＴＮＦ受容体ドメインなどが挙げられる。典型的に、治療薬は、中性であるか、又は陽荷電である。治療薬が陰荷電であるいくつかの形態では、別の電荷中和部分（例えば、カチオン性ペプチド）を用いることができる。
【０２９７】
診断アッセイ／イメージングを可能にするために、治療薬部分を、補助部分として、本明細書に開示するヌクレオチド構築物に連結させることができる。こうした部分の例として、限定はしないが、検出可能な標識、例えば、同位体、ラジオイメージング剤、マーカ、トレーサ、蛍光標識（例えば、ローダミン）、及びリポータ分子（例えば、ビオチン）が挙げられる。
【０２９８】
例示的診断薬として、限定はしないが、イメージング剤、例えば、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）、コンピュータ断層撮影（ＣＡＴ）、単一光子放射断層撮影、Ｘ線、蛍光透視法、及び磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）において使用されるものなどが挙げられる。ＭＲＩでの造影剤として用いるのに好適な材料として、限定はしないが、ガドリニウムキレート剤、並びに鉄、マグネシウム、マンガン、銅、及びクロニウムキレート剤が挙げられる。ＣＡＴ及びＸ線に有用な材料の例として、限定はしないが、ヨウ素を基材とする材料がある。
【０２９９】
好適となり得るラジオイメージング剤放射線（検出可能な放射レベル）の例として、インジウム−１１１、テクネチウム−９９、又は低用量ヨウ素−１３１が挙げられる。補助部分として、本発明のヌクレオチド構築物と一緒に用いるか、又はこれに結合させる検出可能な標識、又はマーカは、放射標識、蛍光標識、核磁気共鳴活性標識、発光標識、発色団標識、ＰＥＴスキャナー用の陽電子放出同位体、化学発光標識、又は酵素標識であってよい。蛍光標識として、限定はしないが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、フルオレセイン、及びローダミンが挙げられる。標識は、例えば、医療用同位体、例えば、限定はしないが、テクネチウム−９９、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、タリウム−２０１、ガリウム−６７、フッ素−１８、インジウム−１１１などであってよい。
【０３００】
当技術分野で公知の他の治療薬も同様に、補助部分として、本発明のヌクレオチド構築物と一緒に使用するか、又はこれらに結合させることができる。
【０３０１】
補助部分と生体可逆的基との共役は、ペプチドリンカーを用いて達成することができる。こうしたペプチドリンカーは、典型的に、最大約２０〜３０個のアミノ酸、一般に、最大約１０又は１５個のアミノ酸、より頻繁には、約１〜５個のアミノ酸を含む。リンカー配列は、一般に、融合分子を単一の固定コンホメーションに保持しないように、柔軟である。例えば、ポリペプチド、小分子、炭水化物、エンドソームエスケープ部分、ペプチド形質導入ドメイン、ポリマー、ターゲティング部分、又は治療薬を核酸から隔てるために、リンカー配列を用いることができる。例えば、ペプチドリンカー配列をこれらのドメインのいずれか１つと核酸との間に配置することによって、例えば、分子柔軟性を付与することができる。リンカー分子の長さは、ポリペプチド、小分子、炭水化物、エンドソームエスケープ部分、ペプチド形質導入ドメイン、ポリマー、ターゲティング部分、又は治療薬の生体活性を最適化するように選択して、過度の実験なしに経験的に決定することができる。リンカー部分の例は、−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（配列番号８４）、ＧＧＧＧＳ（配列番号８５）、（ＧＧＧＧＳ）N、ＧＫＳＳＧＳＧＳＥＳＫＳ（配列番号８６）、ＧＳＴＳＧＳＧＫＳＳＥＧＫＧ（配列番号８７）、ＧＳＴＳＧＳＧＫＳＳＥＧＳＧＳＴＫＧ（配列番号８８）、ＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号８９）、又はＥＧＫＳＳＧＳＧＳＥＳＫＥＦ（配列番号９０）である。ペプチド又はポリペプチド連結部分は、例えば、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９，１９８８；Ｗｈｉｔｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ６：９８９，１９９３；及びＮｅｗｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３５：５４５，１９９６に記載されている。他の好適なペプチド又はポリペプチドリンカーは、米国特許第４，７５１，１８０号明細書及び同第４，９３５，２３３号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０３０２】
医薬組成物
本発明のヌクレオチド構築物の送達は、当業者には周知の多様な方法を用いて、細胞を構築物と接触させることにより達成することができる。特定の実施形態では、本発明のヌクレオチド構築物は、本明細書の他所でより詳細に説明するように、様々な担体、分散剤などと一緒に製剤化される。
【０３０３】
本発明の医薬組成物は、担体、賦形剤、及び添加剤又は補助剤を用いて、被験者への投与に好適な形態に、本明細書に開示のヌクレオチド構築物を組み込むように調製することができる。よく使用される担体又は補助剤として、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトール及びその他の糖、タルク、乳タンパク質、ゼラチン、デンプン、ビタミン、セルロース及びその誘導体、動物及び植物油、ポリエチレングリコール及び溶剤、例えば、滅菌水、アルコール、グリセロール、及び多価アルコールなどが挙げられる。静脈内ビヒクルとしては、流体及び栄養補充剤が挙げられる。防腐剤としては、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、及び不活性ガスが挙げられる。その他の薬学的に許容される担体としては、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  Ｅｄ．，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）、及び２０１３年に公開されたＴｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ（ＵＳＰ  ３６  ＮＦ３１）に記載されているように、塩、防腐剤、緩衝剤などを含む水溶液、無毒性賦形剤が挙げられる。医薬組成物の様々な成分のｐＨ及び正確な濃度は、当技術分野で常用的な技術に従って調節する。Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓを参照されたい。
【０３０４】
本発明の医薬組成物は、局所又は全身のいずれで投与してもよい。治療に有効な量は、被験者の感染の程度、個体の年齢、性別及び体重などの要因に応じて変動する。最適な治療応答をもたらすように、投薬計画を調整することができる。例えば、数回に分割された用量を毎日投与するか、又は治療状況の必要性に応じて、用量を比例的に減少させることができる。
【０３０５】
医薬組成物は、注入（例えば、皮下、静脈内、眼窩内など）、経口投与、点眼、吸入、経皮適用、局所適用、又は直腸投与などの好都合な様式で投与することができる。投与経路に応じて、医薬組成物は、酵素、酸、及び医薬組成物を不活化し得る他の天然条件の作用から、医薬組成物を保護する材料でコーティングすることができる。また、医薬組成物は、非経口的又は腹腔内に投与することもできる。分散液を、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、及びその混合物、並びに油中で調製することもできる。保存及び使用の通常の条件下で、これらの調製物は、微生物の増殖を防止するための防腐剤を含んでもよい。
【０３０６】
注射可能な使用に好適な医薬組成物としては、滅菌水溶液（水溶性である場合）又は滅菌注射液若しくは分散液の即時調製のための分散液及び滅菌粉末が挙げられる。組成物は、典型的には、滅菌であり、注射器が容易に使用可能である程度まで液体である。典型的には、組成物は、製造及び貯蔵の条件下で安定であり、細菌及び真菌などの微生物の汚染作用から保護される。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、その好適な混合物、及び植物油を含む溶媒又は分散媒体であってよい。例えば、レシチンなどのコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒度の維持により、及び界面活性剤の使用により、適正な流動性を維持することができる。微生物の作用の防止を、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどにより達成することができる。多くの場合、等張剤、例えば、糖類、多価アルコール、例えば、マンニトール、ソルビトール、又は塩化ナトリウムを、組成物に用いる。組成物中に、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを含有させることにより、注射組成物の吸収延長をもたらすことができる。
【０３０７】
必要量の医薬組成物を、必要に応じて、上記に列挙した成分の１つ又は組み合わせを含む適切な溶媒中に組み込んだ後、滅菌濾過することにより、滅菌注射液を調製することができる。一般的には、塩基性分散媒体と、上記に列挙されたものからの必要な他の成分とを含有する滅菌ビヒクル中に、医薬組成物を組み込むことにより、分散液を調製する。
【０３０８】
医薬組成物は、例えば、不活性希釈剤又は吸収可能な食用担体と共に経口投与することができる。医薬組成物及び他の成分を、硬質若しくは軟質ゼラチンカプセル中に封入し、錠剤に圧縮するか、又は被験者の食事に直接組み込むこともできる。経口治療剤投与の場合、医薬組成物を、賦形剤と一緒に組み込み、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェハースなどの形態で用いることができる。このような組成物及び調製物は、少なくとも１重量％の活性化合物を含有すべきである。組成物及び調製物の割合（％）は、当然のことながら、変動してもよく、好都合には、単位の約５重量％〜約８０重量％であってよい。錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などは、トラガカントゴム、アカシア、トウモロコシデンプン、若しくはゼラチンなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦形剤；トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギニン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；及びスクロース、ラクトース若しくはサッカリンなどの甘味料、又はペパーミント、冬緑油、若しくはチェリー香味料などの香料を含んでもよい。投与単位剤形がカプセル剤である場合、上記の種類の材料に加えて、これは、液体担体を含有してもよい。様々な他の材料が、コーティングとして存在してもよく、或いは他に投与単位の物理形態を改変するために存在してもよい。例えば、錠剤、丸剤、又はカプセル剤を、シェラック、糖、又はその両方を用いてコーティングすることができる。シロップ剤又はエリキシル剤は、薬剤、甘味料としてのスクロース、保存剤としてのメチル及びプロピルパラベン、染料、並びにチェリー若しくはオレンジ香料などの香料を含んでもよい。当然のことながら、任意の投与単位剤形を調製するのに用いられる任意の材料は、薬学的に純粋であり、使用する量では実質的に無毒であるべきである。さらに、医薬組成物を、徐放性調製物及び製剤に組み込むこともできる。
【０３０９】
このように、薬学的に許容される担体は、溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などを含むことを意味する。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野において公知である。任意の従来の媒体又は薬剤が、本医薬組成物と不適合性ではない限り、治療用組成物及び治療方法におけるその使用が考慮される。補助活性化合物を組成物に組み込むこともできる。
【０３１０】
投与しやすさ及び投与量の均一性のために、単位投与剤形中で非経口組成物を製剤化することが特に有利である。本明細書で用いられる単位投与剤形は、治療しようとする被験者について単一用量として適合させた物理的に個別の単位を指し；必要な医薬担体と一緒に所望の治療効果をもたらすように、予定量の医薬組成物を含有する各単位を算出する。本発明の単位投与剤形に関する仕様は、医薬組成物の特徴及び達成しようとする特定の治療効果に関連する。主要な医薬組成物は、許容される投与単位中に、好適な薬学的に許容される担体と一緒に、有効量での好都合且つ効果的な投与のために調合する。補助活性成分を含有する組成物の場合、前記成分の通常の用量及び投与様式を参照して、投薬量を決定する。
【０３１１】
局所用製剤の場合、基剤組成物は、米国食品医薬品局（ＵＳ  Ｆｏｏｄ＆Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）（ＦＤＡ）により一般的に安全とみなされる（ＧＲＡＳ）ものなど、任意の溶媒系と一緒に調製することができる。ＧＲＡＳ溶媒系は、送達ビヒクルとして、局所用途についてＦＤＡに承認された様々な短鎖炭化水素（例えば、ブタン、プロパン、ｎ−ブタン、又はその混合物など）を含む。局所用組成物は、任意の皮膚科学的に許容される担体を用いて製剤化することができる。例示的担体としては、固体担体、例えば、アルミナ、クレイ、微結晶セルロース、シリカ、若しくはタルク；及び／又は液体担体、例えば、アルコール、グリコール、又は水−アルコール／グリコールブレンドが挙げられる。また、化合物は、化合物が皮膚に進入することを可能にするリポソーム製剤により投与してもよい。このようなリポソーム製剤は、米国特許第５，１６９，６３７号明細書；同第５，０００，９５８号明細書；同第５，０４９，３８８号明細書；同第４，９７５，２８２号明細書；同第５，１９４，２６６号明細書；同第５，０２３，０８７号明細書；同第５，６８８，５２５号明細書；同第５，８７４，１０４号明細書；同第５，４０９，７０４号明細書；同第５，５５２，１５５号明細書；同第５，３５６，６３３号明細書；同第５，０３２，５８２号明細書；同第４，９９４，２１３号明細書；及びＰＣＴ公開番号：国際公開第９６／４００６１号パンフレットに記載されている。他の適切なビヒクルの例は、米国特許第４，８７７，８０５号明細書、同第４，９８０，３７８号明細書；同第５，０８２，８６６号明細書；同第６，１１８，０２０号明細書、及び欧州特許公開第０５８６１０６Ａ１号明細書に記載されている。本発明の好適なビヒクルはまた、鉱油、石油、ポリデセン、ステアリン酸、ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸ポリオキシル４０、ステアリルアルコール、又は植物油を含んでもよい。
【０３１２】
局所用組成物は、任意の有用な形態で提供することができる。例えば、本発明の組成物は、組成物を用いることができる皮膚若しくはその他の組織への適用に用いられる溶液、エマルジョン（ミクロエマルジョンを含む）、懸濁液、クリーム剤、フォーム剤、ローション、ゲル、粉末、香油、又はその他の典型的な固体、半固体、若しくは液体組成物として製剤化してよい。こうした組成物は、このような製剤に典型的に用いられる他の成分を含有してもよく、例えば、着色料、香料、増粘剤、抗細菌剤、溶媒、界面活性剤、デタージェント、ゲル化剤、抗酸化剤、充填剤、染料、粘度調節剤、防腐剤、湿潤剤、軟化剤（例えば、天然若しくは合成油、炭化水素油、蝋、又はシリコーン）、水和剤、キレート剤、粘滑剤、可溶化賦形剤、補助剤、分散剤、皮膚浸透促進剤、可塑剤、防腐剤、安定剤、抗乳化剤、湿潤剤（ｗｅｔｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、日焼け止め剤（ｓｕｎｓｃｒｅｅｎ）、乳化剤、保湿剤、アストリンジェント、防臭剤が挙げられ、また任意選択で麻酔薬、痒み止め活性剤、植物抽出物、コンディショニング剤、暗色化若しくは明色化剤、光沢剤、湿潤剤（ｈｕｍｅｃｔａｎｔ）、マイカ、ミネラル、ポリフェノール、シリコーン若しくはその誘導体、日焼け止め剤（ｓｕｎｂｌｏｃｋ）、ビタミン、植物薬などが挙げられる。
【０３１３】
一部の製剤において、組成物は、点眼のために製剤化される。例えば、点眼のための医薬組成物は、生理学的に許容される眼科用担体、例えば、水、緩衝剤、食塩水、グリシン、ヒアルロン酸、マンニトールなどと混合した、例えば、最大９９重量％までの量で本明細書に記載のポリヌクレオチド構築物を含んでよい。眼への送達の場合、本明細書に記載するポリヌクレオチド構築物を眼科用途で許容される防腐剤、共溶媒、界面活性剤、増粘剤、浸透促進剤、緩衝剤、塩化ナトリウム、又は水性、滅菌点眼懸濁液若しくは溶液を形成するための水と組み合わせてもよい。生理学的に許容される等張水性緩衝液中にポリヌクレオチド構築物を溶解させることによって、点眼液製剤を調製することができる。さらに、点眼液は、阻害剤の溶解を補助するために眼科用途で許容される界面活性剤を含有してもよい。化合物の保持を高めるために、粘度上昇剤（ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ  ｂｕｉｌｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、例えば、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどを本発明の組成物に添加してもよい。
【０３１４】
局所用組成物は、例えば、１日１〜４回、又は専門の臨床医の通常の判断に従い、毎日、毎週、隔週、毎月、若しくはより長い間隔などの延長された送達スケジュールで、眼の表面に送達することができる。製剤のｐＨは、約ｐＨ４〜９、又は約ｐＨ４．５〜ｐＨ７．４まで変動し得る。
【０３１５】
本発明のヌクレオチド構築物の場合、好適な薬学的に許容される塩としては、（ｉ）ナトリウム、カリウム、アンモニウム、マグネシウム、カルシウム、スペルミン及びスペルミジン等のポリアミンなどのカチオンにより形成される塩；（ｉｉ）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などにより形成される酸付加塩；（ｉｉｉ）例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸などの有機酸により形成される塩；並びに（ｉｖ）塩素、臭素、及びヨウ素などの元素アニオンから形成される塩が挙げられる。
【０３１６】
本明細書に記載するヌクレオチド構築物は、標的細胞への送達用の担体の使用を必要としない場合もあるが、担体の使用は、一部の実施形態において有利となり得る。従って、標的細胞への送達のために、本発明のヌクレオチド構築物は、担体に非共有結合して、複合体を形成することができる。送達後の生体分布を改変する、取込みを増強する、ポリヌクレオチドの半減期若しくは安定性を増大する（例えば、ヌクレアーゼ耐性を改善する）、及び／又は特定の細胞若しくは組織タイプへのターゲティングを増大するために、担体を使用することができる。
【０３１７】
例示的担体としては、以下のものが挙げられる：縮合剤（例えば、イオン若しくは静電相互作用により核酸を吸引又は核酸に結合することができる物質）；融合誘導剤（例えば、細胞膜に融合する及び／又は細胞膜を通して輸送されることが可能な物質）；特定の細胞若しくは組織タイプをターゲティングするタンパク質（例えば、チロトロピン、メラノトロピン、レクチン、糖タンパク質、サーファクタントタンパク質Ａ、又は任意の他のタンパク質）；脂質；リポ多糖；脂質ミセル若しくはリポソーム（例えば、ホスホチジルコリン、脂肪酸、糖脂質、セラミド、グリセリド、コレステロール、又はこれらの任意の組み合わせなどのリン脂質から形成される）；ナノ粒子（例えば、シリカ、脂質、炭水化物、又はその他の薬学的に許容されるポリマーナノ粒子）；カチオン性ポリマー及びアニオン性薬剤から形成されるポリプレックス（例えば、ＣＲＯ）、ここで、例示的カチオン性ポリマーは、ポリアミン（例えば、ポリシリン、ポリアルギニン、ポリアミドアミン、及びポリエチレンイミン）を含む；コレステロール；デンドリマー（例えば、ポリアミドアミン（ＰＡＭＡＭ）デンドリマー）；血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）又は低密度リポタンパク質（ＬＤＬ））；炭水化物（例えば、デキストラン、プルラン、キチン、キトサン、イヌリン、シクロデキストリン、又はヒアルロン酸）；脂質；合成ポリマー（例えば、ポリリシン（ＰＬＬ）、ポリエチレンイミン、ポリ−Ｌ−アスパラギン酸、ポリ−Ｌ−グルタミン酸、スチレン−無水マレイン酸コポリマー、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−グリコール）コポリマー、ジビニルエーテル−無水マレイン酸コポリマー、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミドコポリマー（ＨＭＰＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリウレタン、ポリ（２−エチルアクリル酸）、Ｎ−イソプロピルアクリルアミドポリマー、擬似ペプチド−ポリアミン、ペプチドミメティックポリアミン、又はポリアミン）；カチオン性部分（例えば、カチオン性脂質、カチオン性ポルフィリン、ポリアミンの第四塩、又はα螺旋ペプチド）；多価糖（例えば、多価ラクトース、多価ガラクトース、Ｎ−アセチル−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−グルコサミン、多価マンノース、又は多価フコース）；ビタミン（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ、葉酸、ビタミンＢ１２、リボフラビン、ビオチン、又はピリドキサール）；補因子；又は細胞の細胞骨格を破壊して、取込みを増加させるための薬剤（例えば、タキソール、ビンクリスチン、サイトカラチン、ノコダゾール、ジャプラキノリド（ｊａｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）、ラトランクリンＡ、ファロイジン、スウィンホリドＡ、インダノシン、又はミオセルビン）。
【０３１８】
本明細書に記載する他の治療薬を、本発明のヌクレオチド構築物と組み合わせて、本発明の医薬組成物に含有させてもよい。
【０３１９】
ヌクレオチド構築物の細胞内活性
本発明は、本明細書に開示するヌクレオチド構築物（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ、修飾塩基を含む核酸、他のアニオン性核酸など）を送達するための組成物及び方法を提供する。従って、本発明は、遺伝子又はタンパク質発現に調節作用を及ぼす非コードヌクレオチド構築物の送達に有用な方法及び組成物を提供する。
【０３２０】
本発明のポリヌクレオチド構築物は、一本鎖又は二本鎖のいずれであってもよい。二本鎖である場合、一方又は両方の鎖が１つ又は複数の生体可逆的基を含んでもよい。ポリヌクレオチドが、ｓｉＲＮＡとして作用する場合、パッセンジャー鎖（ｐａｓｓｅｎｇｅｒ  ｓｔｒａｎｄ）は、ヌクレオチド間架橋基、例えば、Ｃ2〜6アルキルホスホトリエステルに不可逆的に結合される基を含んでもよい。典型的に、このような基は、３’末端からの第１又は第２ヌクレオチドの後に位置する。不可逆的基は、パッセンジャー鎖が、ガイド鎖として作用するのを阻止し、これにより起こり得るオフターゲット効果を阻止又は低減する。
【０３２１】
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）が、抑制しようとする標的遺伝子のそれと同一であるか、又は酷似したヌクレオチド配列を含有する二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）由来の低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）によって分解されるプロセスである。このプロセスは、転写後、翻訳前操作を介して標的遺伝子によりコード化されるタンパク質の産生を阻止する。従って、優性疾患遺伝子又は他の標的遺伝子のサイレンシングを達成することができる。
【０３２２】
ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＲＮＡｉは、ダイサー（Ｄｉｃｅｒ）と呼ばれる酵素、ｄｓＲＮＡエンドリボヌクレアーゼにより、ｄｓＲＮＡが短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）に切断され、（Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１；Ｈａｍｉｌｔｏｎ＆Ｂａｕｌｃｏｍｂｅ，１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８６：９５０；Ｍｅｉｓｔｅｒ  ａｎｄ  Ｔｕｓｃｈｌ，２００４，Ｎａｔｕｒｅ  ４３１，３４３−９）、これによってオリジナルの単一ｄｓＲＮＡから様々な分子を生成するプロセスにより進行する。ｓｉＲＮＡを、多量体ＲＮＡｉサイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）にロードすると、触媒活性化とｍＲＮＡ標的特異性の両方が得られる（Ｈａｎｎｏｎ  ａｎｄ  Ｒｏｓｓｉ，Ｎａｔｕｒｅ  ４３１，３７１−３７８，２００４；Ｎｏｖｉｎａ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，Ｎａｔｕｒｅ  ４３０，１６１−１６４，２００４）。ＲＩＳＣにｓｉＲＮＡをロードする間に、アンチセンス又はガイド鎖は、ｓｉＲＮＡから分離し、アルゴノート−２（Ａｇｏ２）、すなわちＲＩＳＣ触媒サブユニット内にドッキングした（ｄｏｃｋｅｄ）ままになる（Ｌｅｕｓｃｈｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｒｅｐ．７，３１４−３２０，２００６）。いくつかの細胞コンパートメント、例えば、小胞体（ＥＲ）、ゴルジ体、ＥＲ−ゴルジ中間体コンパートメント（ＥＲＧＩＣ）、Ｐボディ（Ｐ−ｂｏｄｉｅｓ）、及び早期エンドソームがＡｇｏ２内で濃縮する。核から細胞質に輸出されたｍＲＮＡは、リボソームの到着前に活性化ＲＩＳＣを通過すると考えられ、これにより、遺伝子発現の指向性転写後、翻訳前調節が可能になる。理論上、各及びそれぞれの細胞ｍＲＮＡは、選択的ＲＮＡｉ応答の誘導によって調製することができる。
【０３２３】
２１〜２３ｂｐのｓｉＲＮＡが、哺乳動物細胞においてＲＮＡｉ応答を効率的に誘導する能力は現在ルーティンである（Ｓｏｎｔｈｅｉｍｅｒ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．６，１２７−１３８，２００５）。ｓｉＲＮＡのＩＣ50値は、１０〜１００ｐＭの範囲であり、ＩＣ50が１〜１０ｎＭの範囲である最良の薬剤を有意に下回る。従って、その優れた選択性のために、ＲＮＡｉは、細胞表現型の指向性操作、遺伝子経路のマッピング、治療薬標的の発見及び確認のための基礎となり、有意な治療能力を有する。
【０３２４】
ＲＮＡｉの態様は、以下の通りである：（１）一本鎖アンチセンスＲＮＡではなく、むしろｄｓＲＮＡが、干渉剤である；（２）このプロセスは、高度に特異的で、顕著に強力である（有効な干渉のために細胞当たり数個のｄｓＲＮＡのみが必要とされる）；（３）干渉活性（及び恐らくｄｓＲＮＡ）は、導入部位から離れて除去された細胞及び組織に緩衝を引き起こすことができる。しかし、ｄｓＲＮＡの有効な送達は困難である。例えば、分子量１３，８６０ダルトンを有する２１ｂｐのｄｓＲＮＡは、ＲＮＡの（１）サイズ及び（２）極めて陰性（酸性）の電荷のために、細胞膜を通過して細胞質に進入することができない。本発明により提供される方法及び組成物は、電荷中和及び取込みの改善によって、ｄｓＲＮＡなどのヌクレオチド構築物の細胞への送達を可能にする。
【０３２５】
標的遺伝子のヌクレオチド配列に相補的なｓｉＲＮＡ配列を含有するｄｓＲＮＡは、任意の数の方法で調製することができる。ｓｉＲＮＡ配列を同定する方法及び技術は、当技術分野で公知である。ｓｉＲＮＡヌクレオチド配列は、国立バイオテクノロジー情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）ウェブサイト（ワールドワイドウェブ：ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖで入手可能）からのアクセッション番号又はＧＩ番号を記入した後、ｓｉＲＮＡ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．（現在、ｈｔｔｐ：［／／］ｊｕｒａ．ｗｉ．ｍｉｔ．ｅｄｕ／ｂｉｏｃ／ｓｉＲＮＡｅｘｔ／から入手可能；ハイパーリンクを除去するために括弧を追加したことに留意されたい）から取得することができる。或いは、適切なｓｉＲＮＡ配列を含むｄｓＲＮＡ配列は、Ｍｉｙａｇｉｓｈｉ及びＴａｉｒａ（２００３）の戦略を用いて確認することができる。また、市販のＲＮＡｉデザイナーアルゴリズムも存在する（ｈｔｔｐ：［／／］ｒｎａｉｄｅｓｉｇｎｅｒ．ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ．ｃｏｍ／ｒｎａｉｅｘｐｒｅｓｓ／）。注文用のＲＮＡの調製物は市販されている。
【０３２６】
本発明のヌクレオチド構築物は、ｍＲＮＡの切断を誘導するように、ｍｉＲＮＡとして作用することもできる。或いは、本発明のヌクレオチド構築物は、アンチセンス剤として作用してｍＲＮＡに結合して、ＲＮａｓｅによる切断を誘導するか、又は翻訳を立体的にブロックするかのいずれかが可能である。
【０３２７】
本発明のヌクレオチド構築物を細胞に輸送することができる例示的方法を本明細書に記載する。
【０３２８】
治療方法
本発明のヌクレオチド構築物を用いて、多様な疾患及び障害を治療することができる。例えば、抗腫瘍ｓｉＲＮＡの送達後に、腫瘍細胞の増殖を阻害、抑制、又は破壊することができる。例えば、抗腫瘍ｓｉＲＮＡは、血管新生を促進するポリペプチドをコード化する遺伝子にターゲティングされるｓｉＲＮＡであってよい。腫瘍増殖を伴う様々な血管新生タンパク質が当技術分野において公知である。従って、本明細書に記載するヌクレオチド構築物は、抗増殖性障害（例えば、癌）、ウイルス感染、及び遺伝病などの疾患の治療に用いることができる。本発明のポリヌクレオチドを用いて治療することができる他の疾患は、加齢性黄斑変性などの眼疾患（例えば、米国特許第７，８７９，８１３号明細書及び米国特許出願公開第２００９／００１２０３０号明細書に記載されている通り）及び乾癬などの局所疾患である。
【０３２９】
有効な量を含有する組成物を予防的又は治療的処置のために投与することができる。予防的用途では、臨床的に決定された素因若しくは癌への高い罹患性、又は本明細書に記載するいずれかの疾患を有する被験者に組成物を投与することができる。本発明の組成物は、臨床的疾患の発症を遅延、軽減、又は予防するのに十分な量で被験者（例えば、ヒト）に投与することができる。治療用途では、疾患（例えば、白血病又は骨髄異形成症候群などの癌）に既に罹患している被験者（例えば、ヒト）に、状態の症状及びその合併症を治癒するか、少なくとも部分的に停止させるのに十分な量で組成物を投与する。
【０３３０】
この用途に有効な量は、疾患又は状態の重症度並びに被験者の体重及び全身状態に応じて変動し得るが、一般に、被験者毎の用量当たりの薬剤の当量の約０．０５μｇ〜１０００μｇ（例えば、０．５〜１００μｇ）であってよい。最初の投与及び追加投与のための好適な計画は、最初の投与に続いて、後の投与による１若しくは数時間毎、毎日、毎週、又は毎月の間隔で反復される用量の投与が典型的である。本発明の組成物中に存在する薬剤の総有効量を単回用量として、ボーラスとして若しくは比較的短時間にわたる注入のいずれかによって哺乳動物に投与することもできるし、又は分割治療プロトコルを用いて投与することができ、分割治療プロトコルでは、多数回用量をより長期間にわたって（例えば、４〜６時間毎、８〜１２時間毎、１４〜１６時間毎、１８〜２４時間毎、２〜４日毎、１〜２週間毎、並びに月１回の用量）投与する。或いは、血液中に治療的に有効な濃度を維持するのに十分な連続的静脈内注入も考慮される。
【０３３１】
本発明の組成物中に存在し、哺乳動物（例えば、ヒト）に適用される本開示の方法で使用される１種又は複数の薬剤の治療有効量は、哺乳動物の年齢、体重、及び状態を考慮して、当業者によって決定することができる。有効な量を含む本発明の組成物の単回又は複数回投与は、治療医師により選択される用量レベル及びパターンと共に実施することができる。用量及び投与スケジュールは、被験者の疾患又は状態の重症度に基づいて決定及び調節することができ、これは、臨床医により一般に実施される方法又は本明細書に記載する方法に従い、治療コース全体を通じてモニターしてよい。
【０３３２】
本発明の１つ又は複数のヌクレオチド構築物は、従来の治療方法若しくは療法のいずれかと組み合わせて用いてもよく、又は従来の治療方法若しくは療法とは別に使用してもよい。
【０３３３】
本発明の１つ又は複数のヌクレオチド構築物を他の薬剤と組み合わせて投与するとき、これらは、個体に連続的又は同時のいずれで投与してもよい。或いは、本発明の医薬組成物は、本発明のヌクレオチド構築物と、本明細書に記載するような薬学的に許容される賦形剤、及び当技術分野で公知の別の治療若しくは予防薬との組み合わせを含んでもよい。
【０３３４】
以下の実施例は、本発明を説明することを意図する。これらは、本発明を何ら限定する意図はない。
【実施例】
【０３３５】
実施例１．本発明のヌクレオチド及びポリヌクレオチドの合成及び精製
一般的合成手順
本発明のポリヌクレオチド構築物は、本明細書に記載する一般的及び特殊な方法及びスキームに従って調製することができる。例えば、チオールを含有する出発材料は、２，２’−ジピリジルジスルフィドとの反応を経て、対応するピリジルスルフィド化合物をもたらし（例えば、スキーム１を参照）、続いて、これをヌクレオシドホスホロジアミダイトとの反応に付すことにより、本発明のヌクレオチド構築物を生成した（例えば、スキーム１を参照）。次に、これらのヌクレオチド構築物を標準的オリゴヌクレオチド合成プロトコルで用いて、ポリヌクレオチド構築物を形成した。次いで、これらのポリヌクレオチド構築物を脱保護してから、ＨＰＬＣを用いて精製した。
【化４６】
2016537027.tif 000051
【０３３６】
本発明のヌクレオチドの具体的合成
本発明のヌクレオチドの例示的合成を以下に説明する。
【０３３７】
前駆体
【化４７】
2016537027.tif 000052
４００ｍＬのエタノール中の４−メカプトール−ブタノール（１０．０ｇ、９４ｍｍｏｌ）及びジチオピリジン（２５．０ｇ、１１３ｍｍｏｌ）の溶液に７．０ｍＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。５００ｍＬの酢酸エチルを粗生成物に添加し、溶液を水性１Ｎ  ＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜４０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として１２．８ｇ（６４％）の生成物Ｓ２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ８．４５（ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｍ，１Ｈ），７．０６（ｍ，１Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．８０（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ）．
【０３３８】
【化４８】
2016537027.tif 000053
３０ｍＬのメタノール中のＳ２（１．３ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及び４−スルファニルペンタン酸（０．６７ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液に３０μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン／２％酢酸溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜７０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として１．１３ｇ（９５％）の生成物Ｓ３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ４．９５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｍ，１Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
【０３３９】
【化４９】
2016537027.tif 000054
２５．０ｍＬのジクロロメタン中のＳ３（１．１３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、ベンジルアミン（０．８４ｍＬ、７．７ｍｍｏｌ）及び３．６ｍＬのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）の溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ、１．５ｇ、７．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜１００％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として１．１７ｇ（７０％）の生成物Ｓ４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．２２−７．３１（ｍ，５Ｈ），６．５５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，４．３５（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．５５（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２５（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．８５（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｍ，１Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，３Ｈ）．
【０３４０】
【化５０】
2016537027.tif 000055
４５．０ｍＬのメタノール中のＳ２（１．８２ｇ、８．４ｍｍｏｌ）及び４−スルファニル−４−メチルペンタン酸（１．０４ｇ、７．０ｍｍｏｌ）の溶液に、３５μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン／２％酢酸溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜７０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．８２ｇ（５０％）の生成物Ｓ５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．２５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．６９（ｍ，２Ｈ），２．４０（ｍ，２Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｓ，６Ｈ）．
【０３４１】
【化５１】
2016537027.tif 000056
２０．０ｍＬのジクロロメタン中のＳ５（０．８２ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）、ベンジルアミン（０．５３ｍＬ、４．８８ｍｍｏｌ）及び２．３ｍＬのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）の溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ、０．９４ｇ、４．８８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜１００％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．８０ｇ（７３％）の生成物Ｓ６を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．２２−７．４０（ｍ，５Ｈ），６．３０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．３７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｍ，２Ｈ），１．８５（ｍ，２Ｈ），１．７５（ｍ，１Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｓ，６Ｈ）．
【０３４２】
【化５２】
2016537027.tif 000057
２０．０ｍＬのメタノール中のＳ２（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）及び２−プロパンチオール（０．５２ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）の溶液に、１５μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。粗生成物を１００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、水性１Ｎ  ＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．４０ｇ（４０％）の生成物Ｓ７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ３．６３（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８９（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．８０（ｓ，１Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，６Ｈ）．
【０３４３】
【化５３】
2016537027.tif 000058
１００ｍＬのメタノール中のＳ２（６．０ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）及び２−メチル−２−プロパンチオール（２．５ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）の溶液に、１００μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。粗生成物を４００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、水性１Ｎ  ＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として３．０ｇ（６０％）の生成物Ｓ８を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ３．６５（ｍ，２Ｈ），２．７５（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ），１．３０（ｓ，９Ｈ）．
【０３４４】
【化５４】
2016537027.tif 000059
２５．０ｍＬのジクロロメタン中の３，４−ジヒドロキシメチルフラン（１．０ｇ、７．８ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（２．３ｇ、８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、四臭化炭素（２．８５ｇ、８．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３５％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として１．０９ｇ（７４％）の生成物Ｓ９を取得し、これを次の反応のためにメタノール中に速やかに溶解させた。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．５０（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．４６（ｓ，２Ｈ）．
【０３４５】
【化５５】
2016537027.tif 000060
１０．０ｍＬのメタノール中のＳ９（１．０９ｇ、５．７ｍｍｏｌ）及びチオ酢酸（０．５２ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨＣＯ3（０．５８ｇ、６．８ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を２００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．８０ｇ（７５％）の生成物Ｓ１０を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３７（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｓ，１Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），１．８８（ｔ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，１Ｈ）．
【０３４６】
【化５６】
2016537027.tif 000061
１５．０ｍＬのメタノール中のＳ１０（０．６０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ2ＣＯ3（０．５３ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で少量ずつ添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を１００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、粗混合物を次の反応に直接使用した。
【０３４７】
【化５７】
2016537027.tif 000062
１２．０ｍＬのエタノール中のＳ１１（０．４６ｇ、３．２ｍｍｏｌ）及びジチオピリジン（０．８５ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に２００μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で４５分間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．４０ｇ（５０％収率）の生成物Ｓ１２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ８．４６（ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｓ，２Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），１．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）．
【０３４８】
【化５８】
2016537027.tif 000063
２０．０ｍＬのメタノール中のＳ１２（０．３９ｇ、１．５ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．２１ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、５０μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で４０時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．３３ｇ（９５％）の生成物Ｓ１３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．４０（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｓ，１Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），１．８４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１．３４（ｓ，９Ｈ）．
【０３４９】
【化５９】
2016537027.tif 000064
４８％臭化水素酸（１５．０ｍＬ）の溶液に、１，２−ベンゼンジメタノール（４．０ｇ、２９．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２時間攪拌した。１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液を反応混合物に添加することにより、溶液をｐＨ７に中和した。得られた混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の固体として２．６ｇ（４５％）の生成物Ｓ１４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３０−７．４５（ｍ，４Ｈ），４．８５（ｓ，２Ｈ），４．６４（ｓ，２Ｈ），１．８１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）．
【０３５０】
【化６０】
2016537027.tif 000065
１０．０ｍＬのメタノール中のＳ１４（１．０ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及びチオ酢酸（０．４６ｇ、６．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨＣＯ3（０．５０ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を２００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．９７ｇ（９９％）の生成物Ｓ１５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．４０（ｍ，２Ｈ），７．２５（ｍ，２Ｈ），４．７３（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｓ，２Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），２．０５（ｔ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，１Ｈ）．
【０３５１】
【化６１】
2016537027.tif 000066
２０．０ｍＬのメタノール中のＳ１５（０．７５ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ2ＣＯ3（０．６４ｇ、４．６ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で少量ずつ添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を１００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、粗混合物を次の反応に直接使用した。
【０３５２】
【化６２】
2016537027.tif 000067
１５．０ｍＬのエタノール中の粗Ｓ１６（０．５２ｇ、３．４ｍｍｏｌ）及びジチオピリジン（０．８９ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、０．３０ｍＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．５２ｇ（５０％）の生成物Ｓ１７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ８．４２（ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．５１（ｍ，７Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），４．１９（ｓ，２Ｈ），３．８５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）．
【０３５３】
【化６３】
2016537027.tif 000068
２０．０ｍＬのメタノール中のＳ１７（０．４２ｇ、１．６ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．２１ｍＬ、１．９ｍｍｏｌ）の溶液に、５０μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で４８時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．３２ｇ（９４％）の生成物Ｓ１８を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．４０（ｍ，１Ｈ），７．２６−３０（ｍ，３Ｈ），４．８０（ｄ，２Ｈ，Ｊ  ４．０Ｈｚ），４．０６（ｓ，２Ｈ），１．９５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ）．
【０３５４】
【化６４】
2016537027.tif 000069
２５．０ｍＬのエタノール中の５−メルカプトブタノール（０．８５ｇ、７．１ｍｍｏｌ）及びジチオピリジン（１．８７ｇ、８．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０．２ｍＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。５０．０ｍＬの酢酸エチルを粗生成物に添加してから、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（５０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜４０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として１．２１ｇ（７５％）の生成物Ｓ１９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ８．４５（ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｍ，１Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７３（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｍ，２Ｈ）．
【０３５５】
【化６５】
2016537027.tif 000070
２０．０ｍＬのジクロロメタン中のＳ１９（１．２ｇ、５．３ｍｍｏｌ）の溶液に、メチルトリフルオロメタンスルホネート（０．８７ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５分間攪拌した後、２−メチル−２−プロパンチオール（１．２ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）及びジイソプロピレタールアミン（ＤＩＥＡ）（２．７ｍＬ、１５．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をさらに１時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として０．６７ｇ（６１％）の生成物Ｓ２０を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ３．６５（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６７（ｍ，２Ｈ），１．５７（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｓ，９Ｈ）．
【０３５６】
【化６６】
2016537027.tif 000071
２５０ｍＬのトルエン中の４−シアノベンズアルデヒド（５．０ｇ、３８．１ｍｍｏｌ）、２，２−ジエチル−１，３−プロパンジオール（５．５ｇ、４１．９ｍｍｏｌ）、及びｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２１ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の懸濁液をディーン・スターク（Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ）装置で１６時間にわたり還流させた。反応混合物を室温まで冷却させ、揮発物を減圧下で除去した。粗混合物を３００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜２０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の固体として８．７ｇ（９４％）の生成物Ｓ２１を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．６６（ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ，２Ｈ），５．４（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６１（ｄ，Ｊ  １２．０Ｈｚ，２Ｈ），１．７９（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．１５（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，３Ｈ），０．８２（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，ｍ，３Ｈ）．
【０３５７】
【化６７】
2016537027.tif 000072
ＴＨＦ中の水素化リチウムアルミニウム（０．９４ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）の懸濁液を０℃に冷却させ、これに２５．０ｍＬのＴＨＦ中のＳ２１（２．０ｇ、８．２ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で少量ずつ添加した。反応混合物を室温まで温めてから、さらに３時間攪拌した。懸濁液を氷浴により０℃に冷却させ、飽和Ｎａ2ＳＯ4溶液でクエンチングした後、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドを介して濾過した。濾過物を減圧下で濃縮させた。粗混合物を１００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることにより、無色の油として粗中間体Ｓ２２を取得し、これをそれ以上精製することなく、次の反応に使用した。
【０３５８】
【化６８】
2016537027.tif 000073
２５．０ｍＬのジクロロメタン中のＳ５（２．８ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２．５ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（７．６ｍＬ、４４．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１０．０ｍＬのジクロロメタン中のＳ２２（２．８４ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、減圧下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜４０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として２．５ｇ（４７％）の生成物Ｓ２３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．４５（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．８５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．３７（ｓ，１Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｍ，４Ｈ），２．６９（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２９（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ），１．１３（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，３Ｈ），０．８１（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，３Ｈ）．
【０３５９】
【化６９】
2016537027.tif 000074
トルエン（２５０ｍＬ）中の４−ホルミル安息香酸（１５．０１ｇ、１００ｍｍｏｌ）及び２，２−ジエチル−１，３−プロパンジオール（１４．５４ｇ、１１０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．５７ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をディーン・スターク（Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ）装置で一晩還流させた。反応混合物を室温まで冷却させると、大量の沈殿物が形成された。固体を濾過し、１００ｍＬの酢酸エチルと共に加熱した後、冷却して、沈殿物を回収し、これを高真空下で乾燥することにより、２０ｇの表題化合物Ｓ２４を得た。濾過物を水及び塩水で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた後、蒸発させることにより、白色の固体を取得し、これを酢酸エチルから再結晶化することによって、さらに１．５ｇのＳ２４（合計２１．５ｇ、８１％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．１２（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．６１（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），５．４５（１Ｈ，ｓ），３．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ），３．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ），１．８３（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１．１６（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８３（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ）．
【０３６０】
【化７０】
2016537027.tif 000075
ジメチルホルムアミド（１５．０ｍＬ）中のＳ２４（１．３２ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及びモノ−ＦｍｏｃエチレンジアミンＨＣｌ塩（１．７５ｇ、５．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（２．２８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．３５ｍＬ、２５．０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を３０分間攪拌した後、高真空下で揮発物を除去することにより、茶色の固体を取得した。この固体を酢酸エチルで３回洗浄することにより、白色の固体として１．９５ｇ（７４％）の純粋な化合物Ｓ２５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．０７（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）、５．４７（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），５．３８（１Ｈ，ｓ），４．４０（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），４．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．９５（２Ｈ，ｄ，１１．５Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ），３．５５−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．４３−３．３５（２Ｈ，ｍ），１．８１（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１．１４（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８２（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ）．
【０３６１】
【化７１】
2016537027.tif 000076
ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）中の化合物Ｓ２５（１．９５ｇ、３．６８ｍｍｏｌ）の溶液に３ｍＬのピペリジンを添加し、混合物を３０分間攪拌した。混合物をヘキサン（２０ｍＬ×２）で洗浄した後、ジメチルホルムアミド層を高真空下で蒸発させることにより、粗化合物Ｓ２６を取得し、これをそれ以上精製することなく、次の反応に使用した。
【０３６２】
【化７２】
2016537027.tif 000077
ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の化合物Ｓ２６及びＳ５（０．８７ｇ、３．４５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（１．６８ｇ、４．４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１時間攪拌した後、高真空下で揮発物を除去することにより、茶色の固体を取得した。この固体を酢酸エチルで数回洗浄してから、高真空下で乾燥することにより、白色の固体として０．９５ｇ（５１％）の表題化合物Ｓ２７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）、６．４２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），５．４２（１Ｈ，ｓ），３．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．０Ｈｚ），３．６４−３．５５（６Ｈ，ｍ），３．５３−３．４７（２Ｈ，ｍ），２．６６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），２．３１−２．２６（２Ｈ，ｍ），２．０５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），１．９０−１．８５（２Ｈ，ｍ），１．８２（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１．７５−１．６６（２Ｈ，ｍ），１．６３−１．５５（２Ｈ，ｍ），１．２５（６Ｈ，ｓ），１．１５（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８２（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ）．
【０３６３】
【化７３】
2016537027.tif 000078
エタノール（３００ｍＬ）中のイソプロピルチオール（７．６ｇ、１００ｍｍｏｌ）の溶液に、ジチオジピリジン（２４．２ｇ、１１０ｍｍｏｌ）及び酢酸（７．０ｍＬ）を添加した。混合物を一晩攪拌した後、蒸発させることにより、残留物を取得し、これを２００ｍＬの酢酸エチルに溶解させた。この溶液を１Ｎ  ＮａＯＨ（５０ｍＬ×３）及び塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過した後、蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１４．４ｇ（７７％）の表題化合物Ｓ２９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ８．０，１．５Ｈｚ），７．０６（１Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｍ），１．３３（６Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ）．
【０３６４】
【化７４】
2016537027.tif 000079
ジメクロロメタン（５．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２９（１．８６ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（１．６４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、ヘキサン（１０ｍＬ×２）で洗浄した。ジクロロメタン層を蒸発させることにより、黄色の油として粗塩（Ｓ３０）を取得し、これを次の反応に直接使用した。
【０３６５】
【化７５】
2016537027.tif 000080
ジクロロメタン中の４−メルカプト−４−メチルブタン−１−オール（０．３６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、粗生成物Ｓ３０（１．２６ｇ、３．６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。混合物を１０分間攪拌した後、真空下で揮発物を除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ装置（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５０ｇ（８５％）の表題化合物Ｓ３１を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｍ），１．７７−１．６７（３Ｈ，ｍ），１．６３−１．５５（１Ｈ，ｍ），１．３２（３Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１．３０（６Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０３６６】
【化７６】
2016537027.tif 000081
ジクロロメタン中の４−メルカプト−４−メチルペンタン−１−オール（０．１９ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、粗生成物Ｓ３０（０．５８ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。混合物を１０分間攪拌した後、真空下で揮発物を除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．２６ｇ（８９％）の表題化合物Ｓ３２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ５．５Ｈｚ），２．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１．７２−１．６０（４Ｈ，ｍ），１．２９（６Ｈ，ｓ），１．２９（６Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０３６７】
【化７７】
2016537027.tif 000082
メタノール（５．０ｍＬ）中の４−メルカプト−４−メチルブタン−１−オール（０．１８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジチオジピリジン（０．３５ｇ、１．６ｍｍｏｌ）及び酢酸（３０μＬ）を添加した。混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝１５％〜７０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．２７ｇ（７８％）の表題化合物Ｓ３３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ），７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ８．０，１．５Ｈｚ），７．０７（１Ｈ，ｍ），３．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．９９（１Ｈ，ｍ），１．８２−１．６０（４Ｈ，ｍ），１．３４（３Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ）．
【０３６８】
【化７８】
2016537027.tif 000083
ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中の化合物Ｓ３３（０．２７ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．１９ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、２−メチル−２−プロパンチオール（０．２１ｇ、２．３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．１９ｇ（７９％）の表題化合物Ｓ３４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｍ），１．７５−１．６５（３Ｈ，ｍ），１．６２−１．５５（１Ｈ，ｍ），１．３２（９Ｈ，ｓ），１．３１（３Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ）．
【０３６９】
【化７９】
2016537027.tif 000084
メタノール（５０．０ｍＬ）中の６−メルカプト−１−ヘキサノール（２．６８ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジチオジピリジン（６．６ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）及び酢酸（１．０ｍＬ）を添加した。混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝１５％〜７０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として４．３７ｇ（９０％）の表題化合物Ｓ３５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ８．０，１．５Ｈｚ），７．０７（１Ｈ，ｍ），３．６３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．８０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．７２（２Ｈ，ｐ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１．６０−１．５３（２Ｈ，ｍ），１．４７−１．４０（２Ｈ，ｍ），１．３９−１．３４（２Ｈ，ｍ）．
【０３７０】
【化８０】
2016537027.tif 000085
ジクロロメタン（１５．０ｍＬ）中の化合物Ｓ３５（１．０ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．６７ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、２−メチル−２−プロパンチオール（０．９ｍＬ、８．２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６１ｇ（６７％）の表題化合物Ｓ３６を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．７０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．７０−１．６４（２Ｈ，ｍ），１．６２−１．５５（２Ｈ，ｍ），１．４５−１．３５（４Ｈ，ｍ），１．３３（９Ｈ，ｓ）．
【０３７１】
【化８１】
2016537027.tif 000086
ジクロロメタン（１０．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２（０．４３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．３３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、シクロヘキサンチオール（０．２３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．３６ｇ（８１％）の表題化合物Ｓ３７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．７４−２．６８（１Ｈ，ｍ），２．７１（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．０５−２．００（２Ｈ，ｍ），１．８１−１．７４（４Ｈ，ｍ），１．７１−１．６５（２Ｈ，ｍ），１．６５−１．５８（１Ｈ，ｍ），１．４０−１．２０（６Ｈ，ｍ）．
【０３７２】
【化８２】
2016537027.tif 000087
ジクロロメタン（１２．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２（０．６５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．４９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、１−シクロヘキシルエタン−１−チオール（０．４２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５８ｇ（７８％）の表題化合物Ｓ３８を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．７５−２．６５（１Ｈ，ｍ），２．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．８２−１．７２（６Ｈ，ｍ），１．７０−１．６３（３Ｈ，ｍ），１．５８−１．５２（１Ｈ，ｍ），１．２８（３Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．３０−１．０５（５Ｈ，ｍ）．
【０３７３】
【化８３】
2016537027.tif 000088
メタノール（５．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２（０．４３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ベンジルエタン−１−チオール（０．２８ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及び酢酸（３０μＬ）を添加した。得られた混合物を一晩攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．２４ｇ（５０％）の表題化合物Ｓ３９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３８−７．３０（４Ｈ，ｍ），７．２７−７．２３（１Ｈ，ｍ），３．５９（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．３０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．６７（３Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．６２−１．５１（４Ｈ，ｍ）．
【０３７４】
【化８４】
2016537027.tif 000089
ジクロロメタン（１５．０ｍＬ）中の２−メルカプト−２−メチルプロパン−１−オール（０．５０ｇ、４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＤＭＳＣＩ（０．７５ｇ、４．９ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（０．４８ｇ、７．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した後、３０分間攪拌すると、大量の白い沈殿物が形成された。白色の固体を濾過してから、１０ｍＬのジクロロメタンで洗浄した。濾過物を蒸発させることにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝０％〜３０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６６ｇ（６４％）の表題化合物Ｓ４０を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．４７（２Ｈ，ｓ），１．３２（６Ｈ，ｓ），０．９２（９Ｈ，ｓ），０．０７（６Ｈ，ｓ）．
【０３７５】
【化８５】
2016537027.tif 000090
ジクロロメタン（１２．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２（０．７８ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．５９ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、Ｓ４０（０．６６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．８０ｇ（８２％）の表題化合物Ｓ４１を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．５８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．４１（２Ｈ，ｓ），２．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．７０−１．６３（２Ｈ，ｍ），１．６２−１．５５（２Ｈ，ｍ），１．１７（６Ｈ，ｓ），０．８１（９Ｈ，ｓ），０．０３（６Ｈ，ｓ）．
【０３７６】
【化８６】
2016537027.tif 000091
ＥｔＯＨ（３０．０ｍＬ）中のチアナフテン−２−ボロン酸（３．０９ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）の溶液に、過酸化水素（３０％、５．６ｍＬ）を滴下しながら添加した。一晩攪拌した後、反応混合物を減圧下で注意深く濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈してから、酢酸エチル（７０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝０％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として２．１７ｇ（８５％）の表題化合物Ｓ４２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３４（１Ｈ、ｄｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３１−７．２８（２Ｈ，ｍ），７．２２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ８．０，１．０Ｈｚ），３．９８（２Ｈ，ｓ）．
【０３７７】
【化８７】
2016537027.tif 000092
ＴＨＦ（４０．０ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ4（１．１ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中の化合物Ｓ４２（２．１６ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を一晩攪拌し、反応混合物を０℃に冷却させながら、注意深く水（２０ｍＬ）でクエンチングした後、５０ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌを添加した。各相を分離した後、水層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄してから、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で濃縮させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝１０％〜５０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６９ｇ（３１％）の表題化合物Ｓ４３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３１（１Ｈ、ｄｄ，Ｊ  ７．５，１．５Ｈｚ），７．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ７．５，１．５Ｈｚ），７．１６−７．０８（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．４１（１Ｈ，ｓ），２．９８（１Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０３７８】
【化８８】
2016537027.tif 000093
ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中の化合物Ｓ４３（０．２３ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジスルフィドピリジニウム塩Ｓ３０（０．７０ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。混合物を１０分間攪拌した後、真空下で揮発物を除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ装置（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜５０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．２９ｇ（８５％）の表題化合物Ｓ４４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．７９（１Ｈ、ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２７−７．２３（１Ｈ，ｍ），７．２１−７．１８（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．１０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．０７−３．０３（１Ｈ，ｍ），１．３０（６Ｈ、ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ）．
【０３７９】
【化８９】
2016537027.tif 000094
イソブチレンスルフィド（０．８８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）とピペリジン（０．８４ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃に加熱し、４時間攪拌した。揮発物を蒸発させることにより、粗生成物Ｓ４８を取得し、これを精製することなく、次のステップに直接使用した。
【０３８０】
【化９０】
2016537027.tif 000095
ジクロロメタン（１２．０ｍＬ）中の化合物Ｓ２（０．６５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．４９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５分間攪拌した後、粗混合物Ｓ４８（０．４９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物をさらに３０分間攪拌した。揮発物の蒸発により、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜６０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５０ｇ（２ステップで５２％）の表題化合物Ｓ４９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．６９（２Ｈ，ｍ），２．７２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．４９（４Ｈ，ｍ），２．３７（２Ｈ，ｓ），１．８０−１．７０（２Ｈ，ｍ），１．７０−１．６２（２Ｈ，ｍ），１．５５−１．４７（４Ｈ，ｍ），１．４０−１．３４（２Ｈ，ｍ），１．２７（６Ｈ，ｓ）．
【０３８１】
【化９１】
2016537027.tif 000096
ＴＨＦ中の水素化リチウムアルミニウム（１．０３ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）の懸濁液を０℃に冷却させ、これに２５ｍＬのＴＨＦ中のＳ５０（２．０ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させてから、さらに３時間攪拌した。懸濁液を氷浴により再度０℃に冷却し、飽和Ｎａ2ＳＯ4溶液でクエンチングした後、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドを介して濾過した。濾過物を減圧下で濃縮させた。粗混合物を１００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０．０ｍＬ）及び塩水（２０．０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることにより、無色の油として中間体Ｓ５１（２．０１ｇ、９９％収率）を取得し、これをそれ以上精製することなく、次のステップに使用した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３４−７．２２（ｍ，４Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），３．８９（ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９６（ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【０３８２】
【化９２】
2016537027.tif 000097
中間体Ｓ５１（４．０ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）に、４８％臭化水素酸（２０．０ｍＬ）の溶液を滴下しながら添加した。反応混合物を室温で３時間攪拌した後、氷水に注ぎ込んだ。得られた混合物をエチルエーテル（２００ｍＬ）で抽出してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０．０ｍＬ）及び塩水（２０．０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることにより、淡い黄色の油として中間体Ｓ５２（４．２ｇ、７２％収率）を取得し、これをそれ以上精製することなく、次のステップに直接使用した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３７〜７．１５（ｍ，４Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），３．９４（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ）．
【０３８３】
【化９３】
2016537027.tif 000098
５０．０ｍＬのメタノール中のＳ５２（５．５ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）及びチオ酢酸（２．２４ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨＣＯ3（２．５８ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を３００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、塩水（５０．０ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させた後、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、淡い黄色の油として生成物Ｓ５３（３．８ｇ、７１％収率）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３０−７．１８（ｍ，４Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９２（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ）．
【０３８４】
【化９４】
2016537027.tif 000099
５０．０ｍＬのメタノール中のＳ５３（３．８ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ2ＣＯ3（３．０ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で少量ずつ添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ７に中和してから、揮発物を真空下で蒸発させた。残留物を２００ｍＬの酢酸エチルで希釈してから、塩水（５０．０ｍＬ）で洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることによって、淡い黄色の油として粗生成物Ｓ５４（２．８ｇ、９３％収率）を取得し、これをそれ以上精製せずに次のステップに直接使用した。
【０３８５】
【化９５】
2016537027.tif 000100
５０．０ｍＬのエタノール中の粗Ｓ５４（２．８ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）及びジチオピリジン（４．４ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液に１．０ｍＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で３時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油としての生成物Ｓ５５（２．５ｇ、６０％収率）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ８．４３（ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５８−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．０７（ｍ，５Ｈ），４．１４（ｓ，２Ｈ），３．９６（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ）．
【０３８６】
【化９６】
2016537027.tif 000101
２５ｍＬのメタノール中のＳ５５（１．１４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（５６０μＬ、４．９ｍｍｏｌ）の溶液に１００μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で４８時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油としての生成物Ｓ５６を得た（０．９０ｇ、９７％収率、０．１４ｇのＳ５５を回収した）。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．２９−７．２０（ｍ，４Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ），３．９２（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ）．
【０３８７】
【化９７】
2016537027.tif 000102
３０．０ｍＬのアセトニトリル中の４−スルファニル−４−メチルペンタン酸（５．０ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（３．５ｍＬ、３７．１ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下で、トリエチルアミン（９．４ｍＬ、６７．４ｍｍｏｌ）及び触媒量のＤＭＡＰを添加した。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、このとき、１５．０ｍＬのアセトニトリル中の中間体Ｓ５７（Ｓ２２と同じ）（１２．６ｇ、５０．５５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、淡い黄色の油として生成物Ｓ５８（６．２ｇ、４９％収率）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３２（ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ，２Ｈ），５．７（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３７（ｓ，１Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３７（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，２Ｈ），１．８１（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｓ，６Ｈ），１．１３（ｑ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，２Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，３Ｈ），０．８１（ｔ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，３Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｓ，６Ｈ）．
【０３８８】
【化９８】
2016537027.tif 000103
１０．０ｍＬのメタノール中のＳ５５（０．５０ｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びＳ５８（０．６８ｇ、１．８ｍモル）の溶液に、１００μＬの酢酸を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、淡い黄色の油としての生成物Ｓ５９（０．６０ｇ、６１％収率）を得た。Ｃ30Ｈ43ＮＯ4Ｓ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値５４５，測定値［Ｍ＋Ｈ］+５４６．1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．４４（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３０−７．１８（ｍ，６Ｈ），５．７８（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３６（Ｓ，１Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０７（ｓ，２Ｈ），３．９３（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５８（ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８６（ｂｒｓ，１Ｈ），２．３４（ｍ，２Ｈ），２．０５（ｍ，２Ｈ），１．８１（ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．１３（ｑ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，２Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，３Ｈ），０．８１（ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，３Ｈ）．
【０３８９】
【化９９】
2016537027.tif 000104
ＥｔＯＨ（１２０ｍＬ）中の化合物Ｓ６０Ａ（３０．０ｇ、１６８．５ｍｍｏｌ）の溶液に、３０％過酸化水素（５０ｍＬ）を滴下しながら４５分かけて添加した（注意：発熱）。反応混合物は、濁って白色の沈殿物を形成した。ＴＬＣが、３時間の時点で反応の完了を示し、このとき、反応混合物を水（３００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２００ｍＬ×３）で注意深く抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することにより、粗生成物を取得した。これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、１５カラム容積について０％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム（２２０ｇ）により精製することにより、淡い黄色の油として２３．５ｇ（９２％）の化合物Ｓ６０Ｂを取得した。これは、室温で静置すると固体になった。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３４（１Ｈ、ｄｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３１−７．２８（２Ｈ，ｍ），７．２２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ  ８．０，１．０Ｈｚ），３．９８（２Ｈ，ｓ）．
【０３９０】
【化１００】
2016537027.tif 000105
ジエチルエーテル（２００ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ4（７．４ｇ、２００．０ｍｍｏｌ）の氷冷溶液に、ジエチルエーテル中の化合物Ｓ６０Ｂ（１５．０ｇ、１００．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら１時間かけて添加した（注意：ガス発生及び発熱）。反応混合物を室温に到達させてから、攪拌を一晩継続した。ＴＬＣが反応の完了を示し、この時点で、ガス発生が停止し、且つ白色の沈殿物の形成が停止するまで、水性硫酸ナトリウムの添加により、反応混合物を注意深くクエンチングした。この混合物に、１００ｍＬの１０％Ｈ2ＳＯ4を注意深く添加して、層を分離させた。水性層を３×７５ｍＬエーテルで抽出し、合わせた有機層を水、塩水で洗浄してから、硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濃縮することにより、無色の油として化合物Ｓ６０Ｃ（１４．６ｇ、９５％）を取得し、これをそれ以上精製せずに、次の反応に使用した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３１（１Ｈ、ｄｄ，Ｊ  ７．５，１．５Ｈｚ），７．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ７．５，１．５Ｈｚ），７．１６−７．０８（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．４１（１Ｈ，ｓ），２．９８（１Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０３９１】
【化１０１】
2016537027.tif 000106
メタノール（２００ｍＬ）中のジチオジピリジン（５２．０ｇ、２３６．３ｍｍｏｌ）及び酢酸（３．０ｍＬ）の溶液に、室温で、メタノール（５０ｍＬ）中の化合物Ｓ６０Ｃ（１４．６ｇ、９４．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られた混合物を一晩攪拌した。揮発物を除去し、残留物に１００ｍＬのジエチルエーテルを添加した。分離した固体を濾過し、ジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で洗浄した。合わせたエーテル洗浄物を濃縮して、粗生成物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ装置（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜５０％）を用いたフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、１４．１ｇ（５７％）の化合物Ｓ６０を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ），７．６５−７．６０（３Ｈ，ｍ），７．２５−７．１８（３Ｈ，ｍ），７．１３−７．１０（１Ｈ，ｍ），３．９６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．１７（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０３９２】
【化１０２】
2016537027.tif 000107
３０．０ｍＬのジクロロメタン中の化合物Ｓ６０（４．５ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＭｅＯＴｆを滴下しながら添加した。反応混合物を１０分間攪拌した後、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（１．９ｍＬ、１７．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（６．０ｍＬ、３４．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温でさらに３０分間攪拌した後、真空下で濃縮させた。酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、無色の油として生成物Ｓ６１（２．５ｇ、６１％収率）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．８４（ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．１３（ｍ，３Ｈ），３．９２（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１２（ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．３０（ｓ，９Ｈ）．
【０３９３】
【化１０３】
2016537027.tif 000108
前述したようにＡｃＯＨ活性剤を用いて、化合物Ｓ５５について記載した手順に従い、化合物Ｓ６２を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４５（１Ｈ，ｓ），７．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．０９−７．０４（１Ｈ，ｍ），２．９０−２．８０（１Ｈ，ｍ），２．０６−１．９８（２Ｈ，ｍ），１．８０−１．７３（２Ｈ，ｍ），１．６３−１．５６（１Ｈ，ｍ），１．４５−１．３５（２Ｈ，ｍ），１．３３−１．１８（３Ｈ，ｍ）．
【０３９４】
【化１０４】
2016537027.tif 000109
前述したようにＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ６３を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３０−７．２３（１Ｈ，ｍ），７．２１−７．１７（２Ｈ，ｍ），３．９０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．０９（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．８２−２．７０（１Ｈ，ｍ），２．０６−１．９８（２Ｈ，ｍ），１．８０−１．７２（２Ｈ，ｍ），１．６３−１．５５（１Ｈ，ｍ），１．４１−１．１８（５Ｈ，ｍ）．
【０３９５】
【化１０５】
2016537027.tif 000110
前述したようにＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ６４を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２６−７．２１（１Ｈ，ｍ），７．１９−７．１３（２Ｈ，ｍ），３．９３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．１３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．３８−２．３４（２Ｈ，ｍ），１．９０−１．８６（２Ｈ，ｍ），１．２７（１Ｈ，ｓ）．
【０３９６】
【化１０６】
2016537027.tif 000111
ＤＭＦ（１２ｍＬ）中の化合物Ｓ５７（１．１３ｇ、４．５４ｍｍｏｌ）及びＳ６４（１．２４ｇ、４．１３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＣＴＵ（２．５６ｇ、６．２０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７６ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１時間攪拌した後、高真空下で揮発物を除去することにより、残留物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、１０％〜７０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１．２８ｇ（５８％）の表題化合物Ｓ６５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．４７（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２１−７．１０（３Ｈ，ｍ），７．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），５．４０（１Ｈ，ｓ），４．９２（１Ｈ，ｓ，ｂｒ），４．２４（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ），３．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ），３．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．６１（２Ｈ，ｄ，Ｊ  １１．５Ｈｚ），２．９７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．１０−２．０２（２Ｈ，ｍ），１．８４（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１．８１−１．７６（２Ｈ，ｍ），１．２９（６Ｈ，ｓ），１．１５（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），０．８２（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．５Ｈｚ）．
【０３９７】
【化１０７】
2016537027.tif 000112
アセトニトリル（１０．０ｍＬ）中の２−メチル−２−メルカプトペンタン酸（０．７４ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（０．５２ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）の混合物に、トリエチルアミン（１．３９ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（５ｍｇ）を添加した。混合物を１時間攪拌した後、ベンジルアミン（１．３７ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、攪拌を一晩継続した。揮発物を真空下で除去することにより、残留物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、１０％〜７０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．７０ｇ（５９％）の表題化合物Ｓ６６を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．３６−７．３２（２Ｈ，ｍ），７．３０−７．２６（３Ｈ，ｍ），５．７３（１Ｈ，ｓ），４．４５（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ６．０Ｈｚ），２．４３−２．３８（２Ｈ，ｍ），１．９８−１．９４（２Ｈ，ｍ），１．３９（６Ｈ，ｓ）．
【０３９８】
【化１０８】
2016537027.tif 000113
前述したようにＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ６７を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３７−７．２６（３Ｈ，ｍ），７．２１−７．１５（３Ｈ，ｍ），７．０８−７．０２（２Ｈ，ｍ），５．１４（１Ｈ，ｓ，ｂｒ），４．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ），３．８９（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．１２−２．０５（２Ｈ，ｍ），１．８７−１．８２（２Ｈ，ｍ），１．２９（６Ｈ，ｓ）．
【０３９９】
【化１０９】
2016537027.tif 000114
アセトニトリル（１０．０ｍＬ）中の２−メチル−２−メルカプトペンタン酸（０．７４ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（０．５２ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）の混合物に、トリエチルアミン（１．３９ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（５ｍｇ）を添加した。混合物を１時間攪拌した後、プロパルギルアミン（０．６９ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、攪拌を一晩継続した。揮発物を真空下で除去することにより、残留物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、５％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、白色の固体として０．７２ｇ（５９％）の表題化合物Ｓ６８を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ５．６６（１Ｈ，ｓ），４．０６（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ５．０，２．５Ｈｚ），２．４１−２．３７（２Ｈ，ｍ），２．２３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ２．５Ｈｚ），１．９５−１．９１（２Ｈ，ｍ），１．３９（６Ｈ，ｓ）．
【０４００】
【化１１０】
2016537027.tif 000115
前述した通りのＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ６９を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３０−７．１６（３Ｈ，ｍ），５．０５（１Ｈ，ｓ），３．９５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．８８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ５．５，２．５Ｈｚ），３．１５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ２．５Ｈｚ），２．１０−２．０４（２Ｈ，ｍ），１．８３−１．７９（２Ｈ，ｍ），１．２８（６Ｈ，ｓ）．
【０４０１】
【化１１１】
2016537027.tif 000116
ジクロロメタン（２５．０ｍＬ）中の２−メルカプト−２−メチルブタン−１−オール（１．２ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＤＭＳＣＩ（１．５８ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（１．０２ｇ、１５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。得られた混合物を３０分間攪拌すると、大量の白色の沈殿物が形成された。この白色の固体を濾過し、３０．０ｍＬのジクロロメタンで洗浄した。濾過物を蒸発させることにより、残留物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜３０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１．６３ｇ（７１％）の表題化合物Ｓ７２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３０−７．１６（３Ｈ，ｍ），５．０５（１Ｈ，ｓ），３．９５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．８８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ５．５，２．５Ｈｚ），３．１５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ２．５Ｈｚ），２．１０−２．０４（２Ｈ，ｍ），１．８３−１．７９（２Ｈ，ｍ），１．２８（６Ｈ，ｓ）．
【０４０２】
【化１１２】
2016537027.tif 000117
前述したようにＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ７３を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．３０−７．１２（３Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．１２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１．８３（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１．２８（６Ｈ，ｓ），０．８７（９Ｈ，ｓ），０．０３（６Ｈ，ｓ）．
【０４０３】
【化１１３】
2016537027.tif 000118
ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中のＴＢＤＭＳＣＩ（６．７ｇ、４４．６ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（６．３ｇ、９２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン（１．５ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を添加した後、１時間攪拌した。混合物を水（１５．０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（３×１５．０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させることにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として４．０ｇ（７０％）のＳ７４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．４８（６Ｈ，ｓ），０．８９（２７Ｈ，ｓ），０．０４（１８Ｈ，ｓ）．
【０４０４】
【化１１４】
2016537027.tif 000119
ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中の化合物Ｓ６４（０．６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＳ７４（１．１６ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（１．１４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１時間攪拌し、このとき、揮発物を高真空下で除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、１０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６０ｇ（４０％）の化合物Ｓ７５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２６−７．１２（３Ｈ，ｍ）、５．４５（１Ｈ，ｓ），３．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．８０（６Ｈ，ｓ），３．１１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．１４−２．１０（２Ｈ，ｍ），１．９０−１．８６（２Ｈ，ｍ），１．２３（６Ｈ，ｓ），０．９０（２７Ｈ，ｓ），０．０４（１８Ｈ，ｓ）．
【０４０５】
【化１１５】
2016537027.tif 000120
ジクロロメタン（５０．０ｍＬ）中のＴＢＤＭＳＣＩ（７．２ｇ、４８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．０ｍＬ、２９ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（５０ｍｇ）の溶液に、２−アミノ−１，３−プロパン−ジオール（２．０ｇ、２２ｍｍｏｌ）を添加した後、混合物を一晩攪拌した。揮発物を高真空下で除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、５０％〜１００％（２％トリエチルアミンを含有））でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１．２ｇ（１７％）の化合物Ｓ７６を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ３．７０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １０．０，５．５Ｈｚ），３．６３（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １０．０，５．５Ｈｚ），３．４０（１Ｈ，ｍ），０．９０（１８Ｈ，ｓ），０．０７（１２Ｈ，ｓ）．
【０４０６】
【化１１６】
2016537027.tif 000121
ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中の化合物Ｓ６４（０．７７ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）及びＳ７６（０．８２ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（１．１７ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８７ｍＬ、５．１２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１時間攪拌し、このとき、揮発物を高真空下で除去することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、１０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５２ｇ（３４％）の表題化合物Ｓ７７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），７．２６−７．１２（３Ｈ，ｍ）、５．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），３．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．９２−３．８２（１Ｈ，ｍ），３．６８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １３．５，４．５Ｈｚ），３．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ９．５，６．５Ｈｚ），３．１２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．１６−２．１０（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．８４（２Ｈ，ｍ），１．２６（６Ｈ，ｓ），０．９０（１８Ｈ，ｓ），０．０７（１２Ｈ，ｓ）．
【０４０７】
【化１１７】
2016537027.tif 000122
前述した通りのＡｃＯＨ活性剤を用いて、化合物Ｓ５５について記載した手順に従い、化合物Ｓ７８を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ），７．７０−７．６０（２Ｈ，ｍ），７．５２（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．３１（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．１０（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．０Ｈｚ），４．６７（２Ｈ，ｓ）．
【０４０８】
【化１１８】
2016537027.tif 000123
前述した通りのＭｅＯＴｆ活性剤を用いて、化合物Ｓ４１について記載した手順に従い、化合物Ｓ７９を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），４．６７（２Ｈ，ｓ），１．３１（９Ｈ，ｓ）．
【０４０９】
【化１１９】
2016537027.tif 000124
上のスキームに概説する手順に従って、化合物Ｓ８３を調製した。
【０４１０】
【化１２０】
2016537027.tif 000125
７−メチルアミンベンゾ［ｂ］チオフェン（０．７４ｇ、５ｍｍｏｌ）をアルゴン下でエーテルに溶解させた後、この溶液を０℃に冷却させた。温度を０〜５℃に維持しながら、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍで２．０ｍｌ、５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で１０分間攪拌した後、室温で４５分間攪拌した。次に、混合物を０℃に冷却させてから、ホウ酸トリブチル（１．４７ｍｌ、５．５ｍｍｏｌ）を滴下しながら添加した。０℃で１時間攪拌した後、混合物を室温まで温めてから、一晩静置させ、このとき、反応物を１Ｍ塩酸塩でクエンチングした。水相をエーテルで抽出した後、エーテル層を水性水酸化ナトリウム（１Ｍ）で抽出した。塩基性水層を濃縮塩酸塩でｐＨ２まで酸性化した後、エーテルで抽出した（２×５０ｍＬ）。合わせた有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることにより、白色の固体として粗化合物Ｓ８４（０．８０ｇ）を取得した。
【０４１１】
【化１２１】
2016537027.tif 000126
ＥｔＯＨ（１０．０ｍＬ）中の粗化合物Ｓ８４（０．８０ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、過酸化水素（３０％、１．４ｍＬ）を滴下しながら添加した。一晩攪拌した後、減圧下で反応混合物を注意深く濃縮し、水（３０ｍＬ）で希釈してから、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５１ｇ（７４％）の化合物Ｓ８５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．１３（３Ｈ，ｓ），４．００（２Ｈ，ｓ），２．３１（３Ｈ，ｓ）．
【０４１２】
【化１２２】
2016537027.tif 000127
ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中のＳ８５（０．５１ｇ、３．１ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＢＨ4（０．５９ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）を一度に添加し、混合物を１５分間還流させてから、室温まで冷却させた。揮発物を蒸発させると、白色のスラリーが得られ、これを水に溶解させてから、１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した。混合物をジクロロメタン（３×２０ｍＬ）で抽出した後、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で濃縮させることにより、無色の油として粗化合物Ｓ８６を取得した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．１１−７．０４（３Ｈ，ｍ），３．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．３０（１Ｈ，ｓ），３．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．３９（３Ｈ，ｓ）．
【０４１３】
【化１２３】
2016537027.tif 000128
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中のジチオジピリジン（１．７ｇ、７．８ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．０３ｍＬ）の溶液に、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の粗化合物Ｓ８６を添加した。反応混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、黄色の残留物を取得し、これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．３８ｇ（４４％）の化合物Ｓ８７を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ），７．６４−７．５８（２Ｈ，ｍ），７．１９（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），７．１３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．５５（３Ｈ，ｓ）．
【０４１４】
【化１２４】
2016537027.tif 000129
１０．０ｍＬのジクロロメタン中の化合物Ｓ８７（０．５７ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．３６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を１０分間攪拌し、このとき、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．２３ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温でさらに３０分間攪拌した後、真空下で濃縮させた。粗混合物をＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜５０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油としての化合物Ｓ８８（０．４６ｇ、８７％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．１７（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），７．１１（ｍ，２Ｈ），３．８９（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．３４（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．６４（３Ｈ，ｓ），１．２７（ｓ，９Ｈ）．
【０４１５】
【化１２５】
2016537027.tif 000130
ＥｔＯＨ（１２．０ｍＬ）中の５−ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン−２−ボロン酸（１．０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、過酸化水素（３０％、１．５ｍｍｏｌ）を滴下しながら添加した。一晩攪拌した後、減圧下で反応混合物を注意深く濃縮し、水（３０ｍＬ）で希釈してから、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜２０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６４ｇ（７２％）の化合物Ｓ８９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．４４（１Ｈ，ｓ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．９６（２Ｈ，ｓ）．
【０４１６】
【化１２６】
2016537027.tif 000131
ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中のＳ８９（０．６４ｇ、２．８ｍｍｏｌ）の還流溶液に、ＮａＢＨ4（０．５３ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を一度に添加した。反応混合物をさらに１５分間還流させてから、室温まで冷却させた後、揮発物を蒸発させると、白色のスラリーが得られ、これを水に溶解させてから、この溶液を１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。水層をジクロロメタン（３×２０ｍＬ）で抽出してから、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で濃縮することにより、白色の固体として粗化合物Ｓ９０を取得した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．９０（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．４２（１Ｈ，ｓ），２．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０４１７】
【化１２７】
2016537027.tif 000132
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中のジチオジピリジン（１．８４ｇ、８．３４ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．０３ｍＬ）の溶液に、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の粗化合物Ｓ９０を添加して、混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、黄色の残留物を取得した。これを、ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン、０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５０ｇ（２ステップで５３％）の化合物Ｓ９１を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ５．０Ｈｚ），７．６４−７．５８（３Ｈ，ｍ），７．３１−７．２６（２Ｈ，ｍ），７．１３（１Ｈ，ｍ），３．９５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．１２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ）．
【０４１８】
【化１２８】
2016537027.tif 000133
１０．０ｍＬのジクロロメタン中の化合物Ｓ９１（０．５０ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．２４ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を１０分間攪拌し、このとき、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．１８ｍＬ、１．６２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温でさらに３０分間攪拌した後、真空下で濃縮させた。ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン溶媒、０％〜５０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製を用いて、粗混合物を精製することにより、無色の油としての化合物Ｓ９２（０．３７ｇ、７８％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），７．３４（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．０７（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１．２９（ｓ，９Ｈ）．
【０４１９】
【化１２９】
2016537027.tif 000134
４−メチルベンゾチオフェン（１．０ｇ、６．７５ｍｍｏｌ）をアルゴン下でエーテルに溶解させた後、この溶液を０℃に冷却させた。温度を０〜５℃に維持しながら、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍで２．７ｍＬ、６．７５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で１０分間、続いて室温で４５分間攪拌して、０℃に再度冷却させた後、ホウ酸トリブチル（１．９９ｍｌ、７．４３ｍｍｏｌ）を滴下しながら添加した。反応混合物を０℃で１時間攪拌した後、室温まで昇温させてから、一晩静置させ、このとき、反応物を１Ｍ塩酸塩でクエンチングした。水相をエーテル（２×３０ｍＬ）で抽出した後、合わせた有機層を水性水酸化ナトリウム（１Ｍ）で洗浄した。塩基性水層を濃縮塩酸でｐＨ２に酸性化した後、エーテル（２×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させることにより、白色の固体として粗生成物Ｓ９３（１．０５ｇ、８１％）を取得し、これをそれ以上精製せずに次のステップで直接使用した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）：δ７．９３（１Ｈ，ｓ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），７．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．６２（３Ｈ，ｓ）．
【０４２０】
【化１３０】
2016537027.tif 000135
ＥｔＯＨ（１０．０ｍＬ）中の粗生成物Ｓ９３（１．０５ｇ、５．５ｍｍｏｌ）の溶液に、過酸化水素（３０％、１．０ｍＬ）を滴下しながら添加した。一晩攪拌した後、減圧下で反応混合物を注意深く濃縮し、水（３０ｍＬ）で希釈してから、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜１５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．８０ｇ（８９％）の表題化合物Ｓ９４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．２３−７．１７（２Ｈ，ｍ），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．８５（２Ｈ，ｓ），２．２８（３Ｈ，ｓ）．
【０４２１】
【化１３１】
2016537027.tif 000136
ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）中のＳ９４（０．６９ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の還流溶液にＮａＢＨ4（０．７９ｇ、２１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物をさらに１５分間還流させてから、室温まで冷却させた。混合物を蒸発させると、白色のスラリーが得られ、これを水に溶解させた。混合物を１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した。混合物をジクロロメタンで抽出した（３×２０ｍＬ）。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．６７ｇ（９５％）の表題化合物Ｓ９５を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．１６（１Ｈ，ｍ），７．００−６．９６（２Ｈ，ｍ），３．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．４４（１Ｈ，ｓ），３．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．３５（３Ｈ，ｓ）．
【０４２２】
【化１３２】
2016537027.tif 000137
ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中のジチオジピリジン（２．６４ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の溶液に、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のＳ９５（０．６６ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、黄色の残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１．０９ｇ（１００％）の表題化合物Ｓ９６を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ），７．６４−７．５８（２Ｈ，ｍ），７．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  ７．０，２．５Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｍ），７．０８−７．０２（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．３８（３Ｈ，ｓ）．
【０４２３】
【化１３３】
2016537027.tif 000138
１０．０ｍＬのジクロロメタン中の化合物Ｓ９６（０．６９ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．４１ｇ、２．５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を１０分間攪拌し、このとき、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．３４ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加した後、室温でさらに３０分間攪拌した。得られた混合物を真空下で濃縮させた。ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン溶媒＝０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製を用いて、粗混合物を精製することにより、無色の油としての化合物Ｓ９７（０．４５ｇ、７０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．２１（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．３７（３Ｈ，ｓ），１．３０（ｓ，９Ｈ）．
【０４２４】
【化１３４】
2016537027.tif 000139
水素化ナトリウム（油中６０％）（１．８０ｇ、４５．０ｍｍｏｌ）及びｔ−ブチルメチルエーテル（１５ｍＬ）を０℃、アルゴン雰囲気下で丸底フラスコに添加した。この混合物に、ｔ−ブチルメチルエーテル（１５ｍＬ）中の２，５−ジメチルベンゼンチオール（４．０７ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌ）の溶液、続いて、ｔ−ブチルメチルエーテル（１０ｍＬ）中の塩化ジメチルカルバモイル（３．０３ｍＬ、３３．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加した。反応混合物を６０℃に加熱し、１．５時間攪拌した後、出発材料の消失を確認した。混合物を氷浴中で冷却させてから、１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）で中和した。水層をエーテル（２×３０ｍＬ）で抽出した後、有機層を合わせ、水性１Ｍ水酸化ナトリウム、水、及び塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を蒸発させることにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜５０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として表題化合物Ｓ９８（５．１５ｇ、８２％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．３０（１Ｈ，ｓ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．１５−３．００（６Ｈ，ｂｒ，ｓ），２．３６（３Ｈ，ｓ），２．３０（３Ｈ，ｓ）．
【０４２５】
【化１３５】
2016537027.tif 000140
ｔ−ブチルメチルエーテル（３５ｍＬ）中のＬＤＡ（１２．５ｍＬ、ＴＨＦ中２Ｍで、２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔ−ブチルメチルエーテル（８ｍＬ）中のジメチル−チオカルバミン酸Ｓ−（２，３−ジメチルフェニル）エステル（Ｓ９８、２．０９ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で滴下しながら添加し、得られた混合物を０℃で３０分間攪拌した。６ｍＬの酢酸の添加、続いて２ｍＬの３７％水性ＨＣｌ溶液及び水の添加により、反応混合物をクエンチングした後、温度をほぼ室温まで上昇させてから、相を分離させた。水性層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて、塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濾過物を減圧下で濃縮することにより、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜２５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、白色の固体として表題化合物Ｓ９９（０．９８ｇ、６０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．１６（２Ｈ，ｓ），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．９２（２Ｈ，ｓ），２．３６（３Ｈ，ｓ）．
【０４２６】
【化１３６】
2016537027.tif 000141
ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中のＳ９９（０．９８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）の還流溶液に、ＮａＢＨ4（１．１３ｇ、３０ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物をさらに１５分間還流させてから、室温まで冷却させた。混合物を蒸発させると、白色のスラリーが得られ、これを水に溶解させてから、１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した。混合物をジクロロメタン（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で濃縮することにより、無色の油として表題の粗化合物Ｓ１００を取得した。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ７．１４（１Ｈ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），６．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．３６（１Ｈ，ｓ），２．９４（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．２８（３Ｈ，ｓ）．
【０４２７】
【化１３７】
2016537027.tif 000142
ＭｅＯＨ（７０ｍＬ）中のジチオジピリジン（４．０ｇ、１８ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の溶液に、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物Ｓ１００を添加した。反応混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させることにより、黄色の残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として１．５５ｇ（２ステップで９３％）の表題化合物Ｓ１０１を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ８．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ４．５Ｈｚ），７．６５−７．６１（２Ｈ，ｍ），７．４５（１Ｈ，ｓ），７．１３−７．１１（２Ｈ，ｍ），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），３．１３（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），２．２５（３Ｈ，ｓ）．
【０４２８】
【化１３８】
2016537027.tif 000143
１０．０ｍＬのジクロロメタン中の化合物Ｓ１０１（０．６９ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＴｆ（０．４１ｇ、２．５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を１０分間攪拌し、このとき、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（０．３４ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加した後、室温でさらに３０分間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮させた。ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン溶媒＝０％〜４０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製を用いて、粗混合物を精製することにより、無色の油としての化合物Ｓ１０２（０．４９ｇ、７７％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）：δ７．６４（１Ｈ，ｓ），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ），３．８９（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），３．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），２．３６（３Ｈ，ｓ），１．３０（ｓ，９Ｈ）．
【０４２９】
ジスルフィド結合に連結したベンズイミダゾールの調製
【化１３９】
2016537027.tif 000144
Ｎ−メチル１−ヒドロキシエチル２−メルカプト４，５−ベンズイミダゾールリンカー（ＢＩＭ９）の調製：
市販の２−クロロ４−ニトロ−トルエン（ＢＩＭ１）を塩基性条件下、パラホルムアルデヒドでホモロゲート（Ｈｏｍｏｌｏｇａｔｅ）することによって、フェネチルアルコール（ＢＩＭ２）を取得することができる。他の塩基として、限定はしないが、ＮａＯＥｔ、ＫＯｔＢｕ、ＤＩＥＡ、ＴＥＡ、ＤＢＵ、及び無機塩基を挙げることができる。４−ニトロ基の水素化及びホルミル化によって、ＢＩＭ４を得ることができる。ＢＩＭ４からＢＩＭ５へのニトロ化の後、Ｎａ2Ｓでの処理によりチオール基を導入して、メルカプタン（ＢＩＭ６）を取得することができる。加熱による還元鉄触媒を用いた５−ニトロの還元は、同時に、２−メルカプトベンズイミダゾール（ＢＩＭ７）をもたらすことができる。チオピリジン（ＢＩＭ８）への転化後、ＭｅＯＴｆを用いた活性化及びｔ−ブチルメルカプタン（Ｒ＝ＨＳ−ｔＢｕ）での処理によって、（ＢＩＭ９）を得ることができる。
【０４３０】
ジスルフィド結合に連結したＰＥＧ鎖の調製
【化１４０】
2016537027.tif 000145
ジスルフィドＰＥＧ側鎖の合成のための一般的手順：室温で、水性ジメチルホルムアミド（５．０ｍＬ）中のカルボン酸Ｓ５（１．９８ｍｍｏｌ）及びｍＰＥＧn−ＮＨ2（１．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（２．９７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．９７ｍｍｏｌ）をこの順に添加し、得られた混合物を２時間攪拌した。ＴＬＣが反応の完了を示した。真空下でジメチルホルムアミドを除去した後、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（１０．０ｍＬ）中に溶解させた。混合物を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄してから、有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、蒸発させることにより、粗化合物を得た。ＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（メタノール／塩化メチレン、０％〜１０％）を用いたシリカゲルカラム精製により、濃いシロップとして所望の化合物を得た。化合物Ｓ４６及び化合物Ｓ４７は、この手順に従って調製した。
【０４３１】
ヌクレオシド
【化１４１】
2016537027.tif 000146
２５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（３．９ｇ、５．６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．１ｍＬ、６．１６ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（１．６４ｇ、６．１６ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。１時間にわたり攪拌を維持しながら、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ８（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（ＤＩＡＴ）（１．０ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を２００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として２．３２ｇ（４８％）の生成物Ｕ１（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ44Ｈ59ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８７２．０５，測定値８７１．０［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．７（ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１５０．０（ｄ，Ｊ  ９．３Ｈｚ）．
【０４３２】
【化１４２】
2016537027.tif 000147
２５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−シチジン（ｎ−ＰＡＣ）（３．８ｇ、５．６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．１ｍＬ、６．１６ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（１．６４ｇ、６．１６ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ８（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（１．０ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を２００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として１．４３ｇ（２６％）の生成物Ｃ１（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ52Ｈ66ＦＮ4Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１００５．２，測定値１００４．０［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．６（ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１５０．０（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ）．
【０４３３】
【化１４３】
2016537027.tif 000148
２５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｏ−メチル−アデノシン（ｎ−ＰＡＣ）（４．０２ｇ、５．６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．１ｍＬ、６．１６ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（１．６４ｇ、６．１６ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ８（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（１．０ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を２００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として１．９９ｇ（３５％）の生成物Ａ１（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ54Ｈ69Ｎ6Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０４１．２６，測定値１０４０．４［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．４，１４９．５．
【０４３４】
【化１４４】
2016537027.tif 000149
２０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｏ−メチル−グアノシン（ｎ−イソプロピル−ＰＡＣ）（３．２ｇ、４．１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．７８ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（１．２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ８（０．７４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．７４ｇ、４．３ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を１００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜１００％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として０．６０ｇ（１３％）の生成物Ｇ１（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ57Ｈ75Ｎ6Ｏ10ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０９９．３４，測定値１０９８．２［Ｍ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．５，１４９．９．
【０４３５】
【化１４５】
2016537027.tif 000150
１０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．３６ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、３．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．１９ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。３．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ１３（０．１５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、３．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１１ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を５０ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として０．１２ｇ（２０％）の生成物Ｕ２（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ46Ｈ57ＦＮ3Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９１０．０，測定値９０９［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５１．３（ｄ，Ｊ  ８．５Ｈｚ），１５１．２（ｄ，Ｊ  １０．５Ｈｚ）．
【０４３６】
【化１４６】
2016537027.tif 000151
１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．７３ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．４５ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．３９ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ１８（０．３２ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、アセトニトリル中のエチルチオテトラゾール（０．２５Ｍ、３．２ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに３時間攪拌した。粗混合物を１００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（４０ｍＬ）及び塩水（４０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として０．１７ｇ（２０％）の生成物Ｕ３（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ48Ｈ59ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９２０．０，測定値９４３．０［Ｍ＋Ｎａ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５６．３（ｄ，Ｊ  ７．３Ｈｚ），１５５．６（ｄ，Ｊ  １１．３Ｈｚ）．
【０４３７】
【化１４７】
2016537027.tif 000152
２０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（１．７７ｇ、３．２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．６２ｍＬ、３．５４ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．９４ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ２０（０．６７ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、アセトニトリル中のエチルチオテトラゾール（０．２５Ｍ、７．７ｍＬ、１．９３ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに３時間攪拌した。粗混合物を１００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として１．４８ｇ（５２％）の生成物Ｕ４（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ45Ｈ61ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８８６．０，測定値８８４．８［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．６（ｄ，Ｊ  ６．８Ｈｚ），１４９．９（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ）．
【０４３８】
【化１４８】
2016537027.tif 000153
１０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．６６ｇ、１．２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２３ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、３．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．３５ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。３．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ２３（０．５８ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、アセトニトリル中のエチルチオテトラゾール（０．２５Ｍ、２．９ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに３時間攪拌した。粗混合物を５０ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜４０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として０．３５ｇ（２７％）の生成物Ｕ５（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ61Ｈ82ＦＮ4Ｏ11ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１１６１．４２，測定値１１６２［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．８７（ｄ，Ｊ  ７．３Ｈｚ），１５４．５３（ｄ，Ｊ  ９．０Ｈｚ）．
【０４３９】
【化１４９】
2016537027.tif 000154
１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｏ−メチル−アデノシン（ｎ−ＰＡＣ）（１．４８ｇ、２．１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４ｍＬ、２．２８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．６１ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ２３（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．３５ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を７５．０ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜６０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として１．０１ｇ（３７％）の生成物Ａ２（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ71Ｈ92Ｎ7Ｏ12ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１３３０．６３，測定値１３３１．３［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．９３＆１５４．２９．
【０４４０】
【化１５０】
2016537027.tif 000155
１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−シチジン（ｎ−ＰＡＣ）（１．４ｇ、２．１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４ｍＬ、２．２８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．６１ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ２３（１．０ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．３５ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を７５ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として０．７５ｇ（２９％）の生成物Ｃ２（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ69Ｈ89ＦＮ5Ｏ12ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１２９４．５７，測定値１２９５．２［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７７（ｄ，Ｊ  ５．６Ｈｚ），１５４．６９（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ）．
【０４４１】
【化１５１】
2016537027.tif 000156
１００．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｏ−メチル−アデノシン（ｎ−Ｂｚ）（１４．２４ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．０ｍＬ、２２．７ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、２０．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（６．０７ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ６１（５．０ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、１０分間攪拌した後、エチルチオテトラゾール（ＥＴＴ）（５０．０ｍＬ、１２．４２ｍｍｏｌ）の０．２５Ｍアセトニトリル溶液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を２００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として８．７ｇ（４０％）の生成物Ａ６（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ57Ｈ67Ｎ6Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０５９．２８，測定値１０５７．９［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．８，１５４．０．
【０４４２】
【化１５２】
2016537027.tif 000157
化合物Ｃ６は、化合物Ａ６について記載したプロトコルを用いて調製することができる。
【０４４３】
【化１５３】
2016537027.tif 000158
１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のブト−３−イン−１−オール（０．５２ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．３５ｍＬ、７．７８ｍｍｏｌ）の−７８℃に冷却した溶液に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（２．０７ｇ、７．７８ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。この溶液を、１５．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｏ−メチル−グアノシン（ｉＢｕ）（２．５ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（１．２８ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）の懸濁液に滴下しながら添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。粗混合物を１５ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１０ｍＬ）及び塩水（１０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ  Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜６０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末として２．１ｇ（６５％）の生成物Ｇ６（ジアステレオマー混合物）を得た。Ｃ46Ｈ57Ｎ6Ｏ9ＰのＥＳＩ  ＭＳ計算値８６８．９５，測定値８６８．０［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．４，１５４．５．
【０４４４】
【化１５４】
2016537027.tif 000159
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ６（０．３４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、得られた混合物を１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１７ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝２０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．５０ｇ（４９％）の化合物Ｕ６を得た。Ｃ53Ｈ68ＦＮ4Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０１８．４，測定値１０１８．１（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．１５（ｄ，Ｊ  ６．９Ｈｚ），１４９．６５（ｄ，Ｊ  ８．７Ｈｚ）．
【０４４５】
【化１５５】
2016537027.tif 000160
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍｌのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４（０．３３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、揮発物を真空下で除去して、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝２０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．１５ｇ（１５％収率）の化合物Ｕ７を得た。Ｃ52Ｈ66ＦＮ4Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１００４．４，測定値１００４．０（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ５０．１６（ｄ，Ｊ  ７．９Ｈｚ），１４９．６５（ｄ，Ｊ  １０．７Ｈｚ）．
【０４４６】
【化１５６】
2016537027.tif 000161
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ７（０．１８ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３０ｇ（３５％）の表題化合物Ｕ８を得た。Ｃ43Ｈ57ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８５７．３，測定値８５６．９（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５０．７６（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５０．０３（ｄ，Ｊ  ９．３Ｈｚ）．
【０４４７】
【化１５７】
2016537027.tif 000162
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。２０．０ｍｌのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ２７（０．５４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ装置（アセトニトリル／ジクロロメタン＝３０％〜９０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．６８ｇ（５６％）の表題化合物Ｕ９を得た。Ｃ63Ｈ85ＦＮ5Ｏ12ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１２１７．５，測定値１２１７．２（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５０．１８（ｄ，Ｊ  ５．７Ｈｚ），１４８．４０（ｄ，Ｊ  １１．１Ｈｚ）．
【０４４８】
【化１５８】
2016537027.tif 000163
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．１６ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．３２ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ２８（０．１８ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１０ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ装置（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．１５ｇ（２６％）の表題化合物Ｕ１０を得た。Ｃ49Ｈ71ＦＮ3Ｏ9ＰＳ2ＳｉのＥＳＩ  ＭＳ計算値９８７．４，測定値９８７．０（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５０．８８（ｓ），１５０．０８（ｄ，Ｊ  ９．３Ｈｚ）．
【０４４９】
【化１５９】
2016537027.tif 000164
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ３１（０．１８ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３８ｇ（４４％）の表題化合物Ｕ１１を得た。Ｃ44Ｈ59ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８７１．３，測定値８７０．８（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５０．８４（ｄ，Ｊ  ７．６Ｈｚ），１５０．７３（ｄ，Ｊ  ７．６Ｈｚ）１５０．０６（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ），１５０．０２（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ）．
【０４５０】
【化１６０】
2016537027.tif 000165
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中のＳ３２（０．１８ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、２−エチルチオテトラゾール（２．４ｍＬ、アセトニトリル中０．２５Ｍ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．４７ｇ（５３％）の表題化合物Ｕ１２を得た。Ｃ45Ｈ61ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８８５．４，測定値８８４．７（Ｍ−１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１５０．８８（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５０．０３（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４５１】
【化１６１】
2016537027.tif 000166
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２６ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中のＳ３４（０．１９ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７ｍＬ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５０ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。続いて、２−エチルチオテトラゾール（２．６ｍＬ、アセトニトリル中０．２５Ｍ、０．６５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．２９ｇ（３６％）の表題化合物Ｕ１３を得た。Ｃ45Ｈ61ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８８５．４，測定値８８５．２（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．９１（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５０．７６（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５０．０７（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ），１５０．０２（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４５２】
【化１６２】
2016537027.tif 000167
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ２Ｃｌ２中のＳ３６（０．２２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３７ｇ（４１％）の表題化合物Ｕ１４を得た。Ｃ46Ｈ63ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８９９．４，測定値９００．７（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．３２（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５４．７２（ｄ，Ｊ  ９．３Ｈｚ）．
【０４５３】
【化１６３】
2016537027.tif 000168
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ３７（０．２２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を反応混合物に少量ずつ添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３４ｇ（３８％）の表題化合物Ｕ１５を得た。Ｃ46Ｈ61ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値８９７．４，測定値８９６．７（Ｍ−１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．７３（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５０．０１（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４５４】
【化１６４】
2016537027.tif 000169
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ３８（０．２５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３８ｇ（４１％）の表題化合物Ｕ１６を得た。Ｃ48Ｈ65ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９２５．４，測定値９２６．５（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．７８（ｄ，Ｊ  ６．９Ｈｚ），１５０．０２（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４５５】
【化１６５】
2016537027.tif 000170
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ３９（０．２４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．２４ｇ（２６％）の表題化合物Ｕ１７を得た。Ｃ48Ｈ59ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９１９．３，測定値９２０．７（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．４１（ｄ，Ｊ  ７．１Ｈｚ），１５４．７３（ｄ，Ｊ  ８．９Ｈｚ）．
【０４５６】
【化１６６】
2016537027.tif 000171
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４１（０．３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．２５ｇ（２５％）の表題化合物Ｕ１８を得た。Ｃ50Ｈ73ＦＮ3Ｏ9ＰＳ2ＳｉのＥＳＩ  ＭＳ計算値１００１．４，測定値１００３．１（Ｍ＋２）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．６７（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５４．８１（ｄ，Ｊ  ９．７Ｈｚ）．
【０４５７】
【化１６７】
2016537027.tif 000172
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４４（０．２３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（（５％メタノールを含む酢酸エチル）／ヘキサン＝１０％〜５５％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．２４ｇ（２７％）の表題化合物Ｕ１９を得た。Ｃ47Ｈ57ＦＮ3Ｏ3ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９０５．３，測定値９０７．０（Ｍ＋２）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７４（ｄ，Ｊ  ８．９Ｈｚ），１５４．５３（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ）．
【０４５８】
【化１６８】
2016537027.tif 000173
ドライＣＨ2Ｃｌ2（２．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．５７ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（１０．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（１．１１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３７ｍＬ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。５．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４５（０．７２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．３７ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（２．５％ＭｅＯＨを含む、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．４５ｇ（２３％）の表題化合物Ｕ２０を得た。31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．１３（ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１４９．１３（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ）．
【０４５９】
【化１６９】
2016537027.tif 000174
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４６（０．４４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（メタノール／ジクロロメタン＝１％〜８％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．３０ｇ（２７％）の表題化合物Ｕ２１を得た。Ｃ55Ｈ80ＦＮ4Ｏ13ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１１１８．５，測定値１１１８．３（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．１５（ｄ，Ｊ  ６．５Ｈｚ），１４９．２３（ｄ，Ｊ  ９．１Ｈｚ）．
【０４６０】
【化１７０】
2016537027.tif 000175
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．３８ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．７４ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４７（０．７５ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、１０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．２４ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（メタノール／ジクロロメタン＝１％〜８％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色の油として０．５６ｇ（３２％）の表題化合物Ｕ２２を得た。Ｃ63Ｈ96ＦＮ4Ｏ17ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１２９４．６，測定値１２９４．４（Ｍ+）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５０．１５（ｄ，Ｊ  ７．１Ｈｚ），１４９．２１（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４６１】
【化１７１】
2016537027.tif 000176
ドライＣＨ2Ｃｌ2（１．０ｍＬ）中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、ドライＣＨ2Ｃｌ2（５．０ｍＬ）中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴下しながら添加した。反応混合物を室温まで昇温させ、１．５時間にわたり攪拌した。１．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のＳ４９（０．３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、１０分間攪拌した。次に、８．０ｍＬのドライＣＨ2Ｃｌ2中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（０．１８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を少量ずつ反応混合物に添加して、得られた混合物を一晩攪拌した。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で希釈してから、飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濾過物を真空下で蒸発させて、残留物を取得し、これをＩＳＣＯ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（酢酸エチル／ヘキサン＝５％〜８０％）でのフラッシュシリカゲルカラム精製に付すことにより、無色のフォームとして０．３４ｇ（３６％）の表題化合物Ｕ２３を得た。Ｃ49Ｈ68ＦＮ4Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９５４．４，測定値９５５．９（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．５４（ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１５４．８０（ｄ，Ｊ  ８．３Ｈｚ）．
【０４６２】
【化１７２】
2016537027.tif 000177
手順１／プロトコル１：２０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（１．９３ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６８０μＬ、３．８７ｍｍｏｌ）の冷却した溶液（−７８℃）に、１０．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（１．０３ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。この混合物に、５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ５６（０．９０ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、５．０ｍＬのジクロロメタン中のジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド（ＤＩＡＴ）（０．６６ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）の懸濁液を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。反応混合物を２００ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（４０．０ｍＬ）及び塩水（４０．０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜３０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末としての生成物Ｕ２４（１．１ｇ、３３％収率）を得た。Ｃ49Ｈ61Ｎ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９３４．１，測定値９３４．９［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５５．３（ｄ，Ｊ  ８．７Ｈｚ），１５４．７（ｄ，Ｊ  ８．９Ｈｚ）．
【０４６３】
【化１７３】
2016537027.tif 000178
手順２／プロトコル２：１０．０ｍＬのドライジクロロメタン中の５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジン（０．６０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２１１μＬ、１．２１ｍｍｏｌ）の冷却した溶液（−７８℃）に、５．０ｍＬのジクロロメタン中のビス−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）−クロロホスフィン（０．３２ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で滴下しながら添加した。攪拌を維持しながら（１時間）、反応混合物を室温まで昇温させた。５．０ｍＬのドライジクロロメタン中のＳ５９（０．６０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下しながら添加し、１０分間攪拌した後、アセトニトリル中のエチルチオテトラゾール（ＥＴＴ）の溶液（０．２５Ｍ、２．６ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応混合物を室温でさらに３時間攪拌した。粗混合物を５０．０ｍＬのジクロロメタンで希釈してから、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２５．０ｍＬ）及び塩水（２５．０ｍＬ）で順次洗浄した後、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を真空下で蒸発させてから、酢酸エチル／ヘキサン溶媒系（Ｃｏｍｂｉ  Ｆｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔで０〜５０％勾配）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗混合物を精製することによって、白色の粉末としての生成物Ｕ２５（０．７７ｇ、５８％収率）を得た。Ｃ66Ｈ84ＦＮ4Ｏ11ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１２２３．５，測定値［Ｍ＋Ｈ］+１２２４．２．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１５４．８（ｄ，Ｊ  ７．０Ｈｚ），１５４．６（ｄ，Ｊ  ９．５Ｈｚ）．
【０４６４】
【化１７４】
2016537027.tif 000179
化合物Ｕ２６は、手順２を使用して、アルキルジスルフィド（化合物Ｓ５９について記載した手順に従い、化合物Ｓ６８及びＳ５５から調製した）及び５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−２’−Ｆ−ウリジンから調製した。
【０４６５】
【化１７５】
2016537027.tif 000180
化合物Ｕ２７は、プロトコル１（化合物Ｕ２４を参照）に従い、化合物Ｓ６１から４１％の収率で調製した。Ｃ48Ｈ59ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９２０．１，測定値９２０．９［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７（ｄ，Ｊ  ８．９Ｈｚ），１５４．５（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ）．
【０４６６】
化合物Ｃ３は、プロトコル１（化合物Ｕ２４を参照）に従い、５９％の収率で調製した。Ｃ56Ｈ66ＦＮ4Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０５３．２，測定値１０５１．５［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．６（ｄ，Ｊ  ５．４５Ｈｚ），１５４．４（ｄ，Ｊ  ８．３Ｈｚ）．
【０４６７】
化合物Ａ３は、プロトコル１（化合物Ｕ２４を参照）に従い、３９％の収率で調製した。Ｃ58Ｈ69ＦＮ6Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０８９．３，測定値１０９０．２［Ｍ＋Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．８（ｓ），１５４．６（ｓ）．
【０４６８】
化合物Ｇ２は、本明細書に記載する方法に従って、例えば、化合物Ｓ６１から調製することができる。
【０４６９】
【化１７６】
2016537027.tif 000181
化合物Ｃ４は、手順２（化合物Ｕ２５を参照）に従い、２２％の収率で調製した。Ｃ61Ｈ71ＦＮ5Ｏ10ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１１４８．３，測定値１１４７．０［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７（ｄ，Ｊ  ５．０５Ｈｚ），１５４．１（ｄ，Ｊ  １０．７Ｈｚ）．
【０４７０】
【化１７７】
2016537027.tif 000182
化合物Ａ４は、手順２（化合物Ｕ２５を参照）に従い、１８％の収率で調製した。Ｃ63Ｈ74Ｎ7Ｏ10ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１１８４．４，測定値１１８３．２［Ｍ−Ｈ］+．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７（ｓ），１５４．１（ｓ）．
【０４７１】
【化１７８】
2016537027.tif 000183
化合物Ｇ３は、手順２（化合物Ｕ２５を参照）に従い調製した。
【０４７２】
【化１７９】
2016537027.tif 000184
化合物Ｕ２８は、手順１（化合物Ｕ２４を参照）に従い調製した。Ｃ53Ｈ64ＦＮ4Ｏ9ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１０１６．２，測定値１０１５．２（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７９（ｄ，Ｊ  ７．５Ｈｚ），１５４．３８（ｄ，Ｊ  １０．５Ｈｚ）．
【０４７３】
【化１８０】
2016537027.tif 000185
化合物Ｕ２９は、手順１（化合物Ｕ２４を参照）に従い調製した。Ｃ50Ｈ61ＦＮ3Ｏ8ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値９４６．１，測定値９４７．６（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７４（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ），１５４．５０（ｄ，Ｊ  ７．７Ｈｚ）．
【０４７４】
【化１８１】
2016537027.tif 000186
化合物Ｕ３０は、手順２（化合物Ｕ２５を参照）に従い調製した。Ｃ65Ｈ82ＦＮ4Ｏ11ＰＳ2のＥＳＩ  ＭＳ計算値１２０９．５，測定値１２１０．６（Ｍ＋１）．31Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ１５４．７４（ｄ，Ｊ  ６．７Ｈｚ），１５４．３４（ｄ，Ｊ  １０．３Ｈｚ）．
【０４７５】
【化１８２】
2016537027.tif 000187
化合物Ｃ５、Ａ５、及びＧ４は、手順２（化合物Ｕ２５を参照）に従い調製する。
【０４７６】
【化１８３】