(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビニル基を導入した血清アルブミンとエチレン系不飽和単量体を共重合して得られた、血清アルブミンを架橋分子とするハイドロゲル状徐放性製剤用担体。
【請求項２】
サリチル酸、ワルファリン、ジクマロール、フェニルブタゾン、クロフィブラート、インドメタシン、イオパネート、スルファフェナゾール、スルファエチゾール、ジアゼパム、イブプロフェンまたはキナクリンから選ばれる少なくとも１つ以上の薬剤および、請求項１記載の担体を含有してなる徐放性製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は血清アルブミンを利用した徐放性製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
血清アルブミンを医薬用担体として用いることについては各種の総説が出されている。例えば、「医薬品の開発」（広川書店）、「血液免疫腫瘍」６巻１号（２００１年）、「人工血液」９巻４号（２００１年）、特開２００１−１３１２００、同２００１−１５１８００など。
【０００３】
血清アルブミン（特にヒト血清アルブミン、以下ＨＳＡ）はそのままでも医薬用担体として用いることができる（特許２６５４４４５）。また、架橋血清アルブミンを医薬用担体として用いることも知られている。例えば、特公平１−３３４４５（ＨＳＡ小球）は熱処理またはアルデヒド処理で架橋したＨＳＡを、特表平９−５０５０５９（徐放性製剤）は架橋ＨＳＡ／デキストラン硫酸マトリックスを、特開平６−３０６０９５（架橋化蛋白質）は架橋アルブミンを、特許２９６００９８（クロルヘキシジン徐放性製剤）はアルデヒド類で架橋したＨＳＡを、各々開示している。
【０００４】
特開２００２−５０１５６３は医薬用担体（ハイドロゲル複合体）を調製するため、材料（マテリアル）としてビニル基で変性された血清アルブミンおよびアクリルアミドを例示している。しかしながら、両者を組合せた態様についての具体的な開示はない。
【０００５】
ケミカル・アブストラクト１２８巻１６号１９０１１０、同１２８巻８号９７１０８、同１２３巻２５号３３４２９３、同１１９巻１９号１９８９９９にはウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）とＮ−サクシニミジル・アクリレートの複合体（コンジュゲート）を調製することを開示している。このものは固定化担体に結合させて生理活性高分子体の吸着分離のために利用される。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、血清アルブミンにより架橋されたエチレン系ポリマーよりなるハイドロゲルを利用した新規な徐放性製剤用担体、および当該担体を含有する徐放性製剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者は上記の事情を考慮してさらに研究を行った結果、ビニル基を導入した血清アルブミンとエチレン系不飽和単量体を共重合して得られた組成物がハイドロゲルとなることを利用し、これを担体とすることにより、血清アルブミンに対して吸着性または親和性を有する薬物に対して優れた徐放性効果を有することを見出して、本発明を完成した。すなわち、本発明は、１）ビニル基を導入した血清アルブミンとエチレン系不飽和単量体を共重合して得られた、血清アルブミンを架橋分子とするハイドロゲル状徐放性製剤用担体、および、２）血清アルブミンに対して吸着性または親和性を有する薬物、および、前記担体を含有してなる徐放性製剤、に関する。以下に詳細を説明する。
【０００８】
【発明の実施の形態】
徐放性製剤用担体
血清アルブミンは医薬品として通常利用可能なものであれば、特に限定されるものではないが、一般的にはヒト由来、ウシ由来のものなどが利用される。抗原性の問題からヒト由来のものを用いることが好ましい。また、これらは血液、血漿などから調製されるが、医薬品として利用可能な程度に精製されておればよい。また、遺伝子組換え由来品を用いることもできる。
【０００９】
血清アルブミンへのビニル基の導入にはＮ−サクシニミジル・アクリレート等の試薬を用いる。血清アルブミン分子中のリジンやヒスチジン残基側鎖のアミノ基にＮ−サクシニミジル・アクリレートを結合させてビニル基を導入するものである。血清アルブミンと当該試薬の反応条件としては、反応比として血清アルブミン５ｇに対して当該試薬０．１〜１ｇ（モル比で１：１０〜１：１００）程度が例示される。これにより血清アルブミン１分子に対して約３〜５個のビニル基が導入される。また、溶媒として水性溶媒（例えば蒸留水）など、反応条件としてｐＨ６〜８、１０〜２５℃、３０分〜５時間程度が例示される。
【００１０】
上記のビニル基を導入した血清アルブミン分子とエチレン系不飽和単量体とを共重合させ、血清アルブミンを架橋分子とする三次元マトリックス（ゲル構造）を調製する。エチレン系不飽和単量体としては、アクリル酸；アクリルアミド類、例えば、アクリルアミド、Ｎ−アルキルアクリルアミド（例えば、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）など；アクリレート類；メタアクリル酸；メタアクリルアミド類、例えば、メタアクリルアミドなど；メタアクリレート類、例えば、２−ヒドロキシアルキルメタアクリレート（例えば、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、２−ヒドロキシプロピルメタクリレート）など；Ｎ−ビニルピロリジノン、等が例示される。共重合に際しては、重合開始剤として過硫酸アンモン（ＡＰＳ）など、重合促進剤としてＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＥＭＥＤ）などを用いる。
【００１１】
共重合（当該担体の調製）の反応条件としては、混合比（反応比）としてビニル基を導入した血清アルブミン１７ｍｇ に対してエチレン系不飽和単量体（例えば、アクリルアミド）１００〜１０００ｍｇ程度が例示される。モル比では１：１００〜１：１００００、好ましくは１：５００〜１：２０００程度である。また、溶媒として水性溶媒（蒸留水など）、反応条件としてｐＨ６〜８、２０〜２５℃、１〜５時間程度が例示される。
【００１２】
当該担体の性状は以下のとおりである。血清アルブミン１分子当たり、ビニル基が３〜５個程度結合している。また、ハイドロゲル（ヒドロゲル、水を媒質としたゲル）としての性質を有する。（ゲルの）膨潤度としては５〜５０、好ましくは１０〜２０程度が例示される。
【００１３】
徐放性製剤
本発明の薬物としては、血清アルブミンに対して吸着性あるいは親和性を有するものであれば特に限定されるものではない。例えば、サリチル酸、ワルファリン、ジクマロール、フェニルブタゾン、クロフィブラート、インドメタシン、イオパネート、スルファフェナゾール、スルファエチゾール、ジアゼパム、イブプロフェン、キナクリンなどが例示される。
【００１４】
当該製剤の調製は、例えば、前記担体を乾燥させ、薬物含有水溶液中にて膨潤させた後、再度乾燥させることにより行うことができる。当該溶液中の薬物濃度としては１〜１００ｍＭ程度が例示される。当該担体への薬物の担持に際しては、担体１００ｍｇに対して１００〜５００ｍＬ程度の当該溶液と接触処理する。担持条件としてｐＨ６〜８、２〜３０℃、１〜１０日間程度が例示される。具体的には、ｐＨ７の条件下、４℃で３日間次いで２５℃で３日間などの条件が挙げられる。
【００１５】
当該製剤の性状としては、担体１００ｍｇ当たり、薬物１〜１００ｍｇ程度から構成される。また、本発明の製剤中において、薬物と前記担体は共有結合しておらず、遊離もしくは可逆的な結合をした状態で存在している。本発明の製剤は優れた徐放性効果を有するものであり、例えば、薬物としてサリチル酸を用いた場合には、本製剤１００ｍｇをｐＨ７．０、２５℃、蒸留水５０ｍＬに浸漬して、試験開始後４時間で溶出率３０％、８時間で同５０％、４２時間で同９０％程度の溶出挙動を示すものである。
【００１６】
本発明の製剤は上記の特徴を活かして、経皮吸収、皮下投与、局所投与などの態様で使用することができる。
【００１７】
【実施例】
本発明をより詳細に説明するために実施例および実験例を挙げるが、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。
【００１８】
実施例１（担体の調製）
ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン、シグマ社）５ｇとＮ−サクシニミジル・アクリレート０．４ｇ（モル比で１：３０）を蒸留水中において、室温（２５℃）、ｐＨ７の条件下で反応させてＢＳＡにビニル基を導入した。その導入比を反応副生成物であるＮ−ヒドロキシスクシンイミド量の測定と等電点電気泳動より概算した結果、ＢＳＡ１分子当たり３〜４個のビニル基が導入されていた。ビニル基を導入したＢＳＡ  ６５０ｍｇとアクリルアミド３５０ｍｇを９．５ｍＬの蒸留水中で混合し脱気後、ＡＰＳ  ３．６５ｍｇ、ＴＥＭＥＤ  １５．４ｍｇを加えて窒素雰囲気下、室温で３時間反応させ、ハイドロゲルを得た。ハイドロゲルは蒸留水中、４℃で２日間洗浄後、室温にて乾燥した。
【００１９】
実施例２（徐放性製剤の調製）
サリチル酸０．２１ｇを溶媒１５０ｍＬに溶解した溶液（サリチル酸濃度１０ｍＭ）中に、実施例１で得られた乾燥ゲル担体１００ｍｇを浸漬して、４℃で３日間および２５℃で３日間静置して膨潤させた後に、室温で乾燥して徐放性製剤を得た。当該製剤を４℃で保存した。
【００２０】
実験例１（徐放性）
本発明製剤の徐放性効果を確認した。薬物としてサリチル酸を用いた。本発明の徐放性製剤は実施例に準じて調製した。ビニル基を導入したＢＳＡとアクリルアミドの反応比（モル比）は１：５００とし、得られた製剤の膨潤度は１７．０８であった。一方、血清アルブミンを含まないビスアクリルアミド（以下、Ｂｉｓ）にて架橋されたアクリルアミドゲルに、同様な方法でサリチル酸を担持させたものを対照製剤とした。Ｂｉｓとアクリルアミドの反応比は１：２００とし、得られた製剤の膨潤度は１６．５９であった。各製剤をｐＨ７．０、２５℃、蒸留水５０ｍＬに浸漬して約１００時間にわたり溶出挙動を測定した。サリチル酸の溶出量は２９６ｎｍにおける紫外吸収により測定した。結果を図１に示す。
【００２１】
両製剤は同程度の膨潤度であるにもかかわらず、Ｂｉｓを架橋分子とする引例製剤（図１中の−○−）では薬物は速やかに（約１０時間で）溶出してしまうのに対して、ＢＳＡを架橋分子とする本発明製剤（図１中の−●−）では薬物は約１００時間にわたり緩やかに溶出することが判明した。
【００２２】
実験例２（薬物の種類と徐放性の関係）
薬物の種類と本製剤の徐放性の関係を確認した。薬物として、サリチル酸（血清アルブミンに親和性を有する）と安息香酸ナトリウム（血清アルブミンに親和性を有しない）を用いた。実施例に準じて各製剤を調製した後に、実験例１に準じて各製剤の溶出挙動を試験した。安息香酸ナトリウムの溶出量は２２４ｎｍにおける紫外吸収により測定した。結果を図２に示す。
【００２３】
安息香酸ナトリウム含有製剤（図２中の−○−）では薬物は速やかに（約１０時間で）溶出してしまうのに対して、サリチル酸含有製剤（図２中の−●−）では薬物は約１００時間にわたり緩やかに溶出することが判明した。
【００２４】
実験例３（反応比・膨潤度と徐放性の関係）
ビニル基を導入したＢＳＡとアクリルアミドの反応比または得られた製剤の膨潤度と徐放性の関係を確認した。薬物としてサリチル酸を用いた。実施例に準じて各製剤を調製した後に、実験例１に準じて各製剤の溶出挙動を試験した。担体として、ビニル基を導入したＢＳＡとアクリルアミドの反応比（モル比）は１：５００、１：２０００、１：１００００とし、得られた製剤の膨潤度は各々、１７．０８、１９．６５、２８．４３であった。結果を図３に示す。
【００２５】
反応比１：１００００の製剤（図３中の−■−）、同１：２０００の製剤（図３中の−▲−）、同１：５００の製剤（図３中の−●−）の順に薬物の溶出が緩やかであった。ＢＳＡ含量が高くアクリルアミド含量が低い（すなわち膨潤度が低い）ほど、薬物の溶出は緩やかになり、徐放性効果が優れていることが判明した。
【００２６】
また、該反応比と薬物の総放出量の関係を表１に示す。
【００２７】
【表１】
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【００２８】
ＢＳＡ含量が高い（すなわち膨潤度が低い）ほど薬物の総含量（総放出量）も増加した。
【００２９】
【発明の効果】
本発明によれば、血清アルブミンを用いて優れた徐放性効果を有する医薬製剤用担体を臨床の場に供給することができる。また、本発明の担体は血清アルブミンを用いているために生分解性を有しており、生体内に残留しにくいという効果も期待できる。
【００３０】
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明の徐放性製剤、対照製剤（ＨＳＡを含まないＢｉｓ架橋ゲル）における薬物の溶出挙動を示したものである。−○−は対照製剤を、−●−は本発明の製剤を、各々示す。
【図２】  薬物としてサリチル酸または安息香酸ナトリウムを用いた場合の各製剤における薬物の溶出挙動を示したものである。−○−は安息香酸ナトリウム含有製剤を、−●−はサリチル酸含有製剤を、各々示す。
【図３】  ビニル基を導入したＢＳＡとアクリルアミドの反応比（モル比）または得られた製剤の膨潤度、を変動した場合の各製剤における薬物の溶出挙動を示したものである。−●−は当該比１：５００（膨潤度１７．０８）の製剤を、−▲−は当該比１：２０００（膨潤度１９．６５）の製剤を、−■−は当該比１：１００００（膨潤度２８．４３）の製剤を、各々示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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