(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド及び薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩。
【請求項２】
以下の（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）の工程からなる、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドの製造方法。
（ａ）４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸と３−ピリジニルメチルアミンとを反応させて、部位選択的に対応する３−モノアミド−１−エステルを生成する工程。
（ｂ）アルカリ性溶剤中で該３−モノアミド−１−エステルを加水分解して対応する３−モノアミド−１−カルボン酸を生成する工程。
（ｃ）該３−モノアミド−１−カルボン酸とカップリング剤とシクロヘキシルアミン誘導体とを反応させ、必要であれば得られた化合物を４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドに変換する工程。
【請求項３】
工程（ｃ）において、カップリング剤がカルボニルジイミダゾールである、請求項２の方法。
【請求項４】
工程（ｃ）において、シクロヘキシルアミン誘導体は、トランス−４−ニトロオキシシクロヘキシルアミンであり、それによって４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する、請求項２記載の方法。
【請求項５】
工程（ｃ）において、シクロヘキシルアミン誘導体は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンであり、それによってＮ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する、請求項２記載の方法。
【請求項６】
Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドと硝酸とを反応させることによって、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する、請求項２記載の方法。
【請求項７】
以下（ａ）乃至（ｄ）の工程によって、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを製造する方法。
（ａ）硫酸の存在下マイルドな条件下に４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸とメタノールとを反応させて、部位選択的に対応する３−モノメチルエステル−１−カルボン酸を生成する工程。
（ｂ）該３−モノメチルエステル−１−カルボン酸を対応するアシルクロライドとし、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンと反応させて対応する１−アミド−３−エステルを生成する工程。
（ｃ）得られた１−アミド−３−エステルと３−ピリジニルメチルアミンとを反応させ、Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する工程。
（ｄ）Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドと硝酸とを反応させ、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する工程。
【請求項８】
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドあるいは薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩と薬学的に許容される成分とを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血管疾患治療用の薬学的活性化合物としての４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド（図１の式１）に関する。
【０００２】
さらに詳しく述べると、アテローム動脈硬化−血栓性病状及び他の病状の際に薬学的に活性な化合物として４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド並びに薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩を含む組成物とに関する。治療はトロンボキサンＡ２を阻止しかつ一酸化窒素を薬学的に供給することによって有効とすることができる。
【０００３】
本発明は、さらに４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド並びに薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩を含む組成物の製造方法とに関する。
【０００４】
さらに、本発明は、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドあるいは薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩と薬学的に許容される成分とを含む医薬組成物に関する。
【０００５】
本発明は、また該化合物及び該医薬組成物を前述の病状を治療する際に使用する方法に関する。
【０００６】
【従来の技術】
血管疾患が最初に現れてから人口中多くの者の死亡あるいは身体障害の原因となる劇的な症状と続がる血管系の血栓症およびアテローム動脈硬化の過程で活発な相互作用があるという証拠が増えつつある。これらの病気の主要な原因には、糖尿病、高血圧、タバコの煙及び不健康なダイエット習慣がある。
【０００７】
血液および血管壁は生理学的機能の面で相互に影響を及ぼしあっており、このような影響は、血球（細胞核がないことで他の血球と異なる血小板も含む）と血管内皮細胞および平滑筋細胞とが接触すると付着と浸潤のメカニズムを通しておよび多数の生化学メディエータによって仲介される。
【０００８】
これらの相互作用の大部分のものは、急性血管痙攣症状の発生、閉塞性血栓の形成及びアテローム班の発生等の病状の進展にも関係する。
【０００９】
現在知見が増えてきており、血小板が活性化することによる前血栓症の役割やアテロームの役割は血小板の凝集から始まって血栓の形成が開始されることに限定されず、内皮損傷やアテローム班の場合のように、特に血管壁が病的に変化した場合に、生化学メディエータが血管壁に付着し相互の変化し合うことにも関与していることが指摘されているので、活性化された血小板によって演じられる役割は特別な関連性がある（Ｒ  Ｒｏｓｓ，ＮＥ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４０（１９９９）１１５−１２６；Ｂ  Ｏｓｔｅｒｕｄ，Ｔｈｒｏｍｂ  Ｒｅｓ  ８５（１９９７）１−２２）。
【００１０】
血小板を放出するメディエータは、血管痙攣、種々の虚血性病状の臨界的メカニズム並びに血管平滑筋におけるアテローム硬化工程の本質的ステップにおいて役割を演じる（ＡＡ  Ｗｅｂｅｒ，Ｋ  Ｓｃｈｒｏｒ，Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ  ８０（１９９８）２０７−２０８；Ｔ  Ｇｒｏｓｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ３１９（１９９７）３２７−３３２；Ｒ  Ｐａｋａｌａ  ｅｔ  ａｌ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９６（１９９７）２２８０−２２８６；Ａ  Ｓａｃｈｉｎｉｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ２６（１９９５）７７１−７８０）。アテローム硬化は、血管表面が変化しプラ−クが破壊されることによって、血小板の活性化をもたらし、かつ急性血栓症及び虚血性症に直接的な原因的役割を担う。
【００１１】
血小板によって放出されるメディエータの中で、トロンボキサン、セロトニンおよびＰＤＧＦやＴＧＦ−β１等の成長因子は最も病気と関係がある。
【００１２】
一方、病理的に変化がなければ、血管壁の内皮ライニングはＥＤＲＦ（一酸化窒素ＮＯとして同定される内皮由来の弛緩因子）あるいはプロスタサイクリン等のメディエータが放出されることより活性化された血小板の作用に拮抗する（ＤＡ  Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ、  Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ４８（１９９５）８９０−８９６；ＰＭ  Ｖａｎｈｏｕｔｔｅ、  ＪＶ  Ｍｏｍｂｏｕｌｉ，  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ３９（１９９６）２２９−２３８）。両方とも動脈璧の弛緩を誘起し増殖を低減し、血小板凝集及び付着を防止する（Ｕ  Ｆｏｒｓｔｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｒｅｓ  ６３（１９８８）３０６−３１２；ＭＷ  Ｒａｄｏｍｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ、Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ９２（１９８７）６３９−６４６）。
【００１３】
血小板、血球及び血管細胞の細胞相互作用は、アラキドン酸及びエイコサノイド（ｅｉｃｏｓａｎｏｉｄｓ）の一連の代謝産物の合成と特別な関連性がある（Ｊ  Ｍａｃｌｏｕｆ  ｅｔ．ａｌ、Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ，７９（１９９８）６９１−７０５）．アラキドン酸は、シクロオキシゲナーゼの酵素の作用によってエンドペロオシドＰＧＧ２及びＰＧＨ２に変化する。さらに、これらの代謝産物は、特異的なシンセターゼの酵素的作用によりトロンボキサンＡ２及びプロスタサイクリンＰＧＩ２ならびにＰＧＥ２、ＰＧＤ２及びにプロスタグランジンに変化する。
【００１４】
これらの酵素の細胞の位置が異なっているので、前駆体ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ  ａｃｉｄ（分割された血小板によっても担持されている）、最も重要ではあるが、エンドペロキシドＰＧＧ２及びＰＧＨ２の細胞間での交換により生物学的に活性なエイコ酸ノイド、これらの中で、特に、トロンボキサンＡ２及びプロスタサイクリンを放出することに重大は影響を与え、エンドシクロオキシナーゼ−１の影響下に、血小板及び内皮細胞の中に、かなりの量のエンドペロキシドが形成される。リンパ球（単球―マクロファージタイプも含む）及び血管平滑筋細胞等の他の細胞で生産される量に比較して、通常の状態でこのような量は多くなる。
【００１５】
しかしながら、エンドペロキシドの合成は血小板ではなく上記の細胞全てにおいて大量のシクロオキシダーゼの形成が誘起されることによって病気の場合にエンドペロキシド−２の合成が増大する可能性がある。シクロオキシダーゼの形成は前炎症性刺激を介して誘起され、アテローム動脈硬化により損傷した細胞に傷跡を残す（ＪＡ  Ｒｉｍａｒａｃｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  １４（１９９４）１０２１−１０３１；Ｄ  Ｂｉｓｈｏｐ  Ｂａｉｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ、  前記と同じ、１８（１９９８）１６５５−１６６１）。シクロオキシゲナーゼー１及びシクロオキシナーゼ−２を介してが放出されることは、種々の体の組織の中の循環システム内で励起される役割に加えて、生理的かつ病気の面で重要な役割をもつ。
【００１６】
血小板のそれぞれの生理的役割によれば、内皮がプロスタサイクリンシンセターゼによって付与されるように、血小板はトロンボキサンシンセターゼによって豊富に付与される。
【００１７】
トロンボキサンＡ２は、血小板の不可逆的な凝集の誘起因子として働き、血小板の活性化の増殖シグナルを代表するものであるが、その直接の作用という理由ばかりでなく、血小板によって他の血管麻痺性及び増殖性メディエータの放出が擬態されるという理由及びアテローム動脈硬化プラ−クが進み閉塞性血管症状になるという理由により、トロンボキサンＡ２は血小板−血管壁の相互作用に重要な役割を担う。
【００１８】
トロンボキサンＡ２を阻止することによって作用する薬を臨床上適用することを開発する努力が種々の方法でなされている。第１の治療方法はトロンボキサンＡ２の合成を阻止することに向けられたもので、この方法は、現在ではシクロオキシターゼ−１を選択的かつ不可逆的に阻止することができることが知られているアセチルサリチル酸を使用することに基づいていた。治療上の有用性は、、臨床的には立証されたが、エイコサノイドの合成の第１の共通のステップの阻止が、循環系、生理的に有益なプロスタグランジン、特にプロスタサイクリン、の合成を阻止することおよび灌流および細胞標本を維持することによって胃及び腎臓の組織に保護的役割をするプロスタグランジンの阻止と一緒に生ずる。
【００１９】
従って、この薬理的方法は、好ましくない効果があるため制約がある。さらに、アセチルサルチル酸は、誘起性シクロオキシゲナーゼー２を阻止することができないことが判明し、従って、循環系及び呼吸系の炎症のある組識及び他の体の器官にトロンボキサンを生成することについての方法は分かっていなかった。
【００２０】
第２の薬理的方法は、他のエイコサノイドの合成を妨げることなく、特にプロスタサイクリンにおいて、トロンボキサンシンセターゼを特異的に阻止することによってトロンボキサンーＡ２の合成を抑制することを目的とするものであった（Ｊ Ｎｏｗａｋ，ＧＡ ＦｉｔｚＧｅｒａｌｄ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ８３（１９８９）３８０−３８５）。
【００２１】
さらに、トロンボキサンの合成を阻止することを目的とはせずに、トロンボキサン受容体（ＴＰ受容体）に拮抗的作用を及ぼすことのできる薬剤を用いて血小板及び血管の組識に対する影響を阻止することを狙って第３の方法が開発された。
【００２２】
上記後の２つの方法（Ｊ Ｖｅｒｍｙｌｅｎ，Ｈ Ｄｅｃｋｍｙｍ， Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、６（１９９２）２９−３３）については多数の臨床的研究がされたが、アセチルサルチル酸を使用することに対する有効な代替方法を提供するに至っていない。
【００２３】
凝集する血小板によって生成する多量のトロンボキサンＡ２を十分に拮抗するに十分な競合的拮抗剤とは恐らくなっておらず、一方エンドペロキシドのステージにおいてトロンボキサンシンセターゼが阻止される間に、トロンボキサンレポーターに影響する中間エンドペロキシドの濃度が上昇し、トロンボキサン自身と類似する影響を与えることが理由と考えられた。従って、例えば、ピコタミド（４−メトキシーＮ１，Ｎ３−ビスー（３−ピリジニルメチル）−１、３−ベンゼンジカルボキシアミド）あるいはリドグレル（５−［３−ピリジニルー３（トリフルオロメチル）フェニルメチレンアミノオキシ］ペンタン酸）等の２つの作用を示す単一の薬物においてこれらの２つの薬理方法を組み合わせた場合における可能性のある利点も示唆された（Ｐ Ｇｒｅｓｅｌｅ ｅｔ ａｌ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｃｏｌ Ｓｃｉ １２（１９９１）１５８−１６３）。
【００２４】
結論として、トロンボキサンを直接的に阻止することを目的として提案された薬物は医療の現場では一般に受け入れられるに至っておらず、アセチルサルチル酸のみが、その限定的かつ好ましくない影響にも拘わらず、抗トロンボキサン剤としての使用が確立されたに過ぎない。
【００２５】
ニトログリセリンやイソソルビドモノ及びジ硝酸エステル等の有機硝酸エステルは、臨床上の使用が良好に確立されているが、それらの血管拡張性を発現することに限られている。近年、一酸化窒素ＮＯとしてＥＤＲＦ（内皮由来血管弛緩因子）が同定され、その生理的な役割が明らかになって、血小板及び血管壁のおけるＮＯの種々の前駆体の薬理効果が更に理解されるようになってきた。このような知識は、有機硝酸エステル、並びに硝酸エステルあるいは亜硝酸エステルの機能あるいはＮＯに容易に変化する他の化学的機能を備える新規のＮＯドナー及び内因性ＮＯ，Ｌ−アルギニンのバイオ化学的前駆体にも深まってきた。このような知識に進展があったので、これらの既知の血管拡張作用に加えて、血小板の活性化、血管収縮及び血管細胞において（Ｍ Ｅｍｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ、Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ ８１（１９９９）９６１−９６６；Ｅ Ｂａｓｓｅｎｇｅ， Ｂａｓｉｃ ＲｅｓＣａｒｄｉｏｌ ８６（ｓｕｐｐｌ ２、１９９０）６９−７６）あるいはエイコサノイドの合成を直接調整することによって（Ｄ Ｓａｌｖｅｍｉｎｉ ｅｔ ａｌ、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ９７（１９９６）２５６２−２５６８）、ＮＯドナーはアラキドン酸の代謝物質のカスケードに作用する薬物と相互作用する可能性があることが示唆された。
【００２６】
【課題を解決するための手段】
従って、アテローム動脈硬化−血栓症及び他の病状を予防し治療するためのさらに有効な抗トロンボキサン剤に対する強い医療需要が依然ある。本発明者は、トロンボキサンＡ２の合成を低減することによって更に好ましい治療効果を得ることができるとともに、同時にその作用を阻止し一酸化窒素を薬理的に供給することができることを発見した。
【００２７】
従って、本発明の目的は、血管疾患を治療するために有益な化合物を提供することである。
本発明のさらに別の目的は、アテローム動脈硬化―血栓症病気を治療するのに有益な化合物を提供することにある。
さらに本発明の別の目的は、抗トロンボキサン作用及びＮＯ供与作用のいずれも有する化合物を提供することにある。
さらに、本発明の目的は、上記性質を有する化合物を製造する方法を提供することにある。
【００２８】
さらに、本発明の別の目的は、少なくとも薬学的に許容される成分とをもに活性成分として上記性質を有する化合物を含む医薬組成物を提供することにある。
【００２９】
さらに、本発明の目的は、アテローム動脈硬化−血栓症疾患等の血管病状に罹患している人及びトロンボキサンＡ２を阻止して一酸化窒素を薬理的に供給することによって利益を得ることができる人に対して、上記性質を有する化合物を有効量投与することからなる、治療方法を提供することにある。
【００３０】
本発明の上記及び他の目的は、薬学的に許容される有機あるいは無機酸と式１の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１、３−ベンゼンジカルボキシアミド及びその酸付加塩によって達成される。
【００３１】
本発明者は、式１の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１、３−ベンゼンジカルボキシアミド及び薬学的に許容される有機あるいは無機酸とその酸付加塩が、抗トロンボキサン及びＮＯ供与作用の両方を有することを発見した。
【００３２】
さらに、本発明の化合物は、血管系に影響を与えるアテローム動脈硬化−血栓症状の治療において、及びトロンボキサンＡ２を阻止し一酸化窒素すなわちＮＯを薬理的に供給することによって利益を得ることができる他の疾患の治療において有効かつ有益であることを発見した。
【００３３】
更に詳しく述べると、本発明の化合物は、上記病状の治療に特に適合する薬理的プロフィルであって、かつａ）トロンボキサンＡ２の合成を阻止すること、ｂ）トロンボキサンＡ２によって及び特異的レセプター（ＴＰレセプター）の活性化を通してアラキドン酸の他のいくつかの代謝物によって上記作用が阻止されること、及びｃ）一酸化窒素が放出されることに関連する複数の薬理的作用の組合わせ効果を付与することができるという新奇な薬理的プロフィルを有する。
【００３４】
従って、本発明は、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド及び薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩を提供する。
【００３５】
さらに、本発明は、以下の（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）の工程からなる、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドの製造方法を提供する。
（ａ）４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸と３−ピリジニルメチルアミンとを反応させて、部位選択的に対応する３−モノアミド−１−エステルを生成する工程。
（ｂ）アルカリ性溶剤中で該３−モノアミド−１−エステルを加水分解して対応する３−モノアミド−１−カルボン酸を生成する工程。
（ｃ）該３−モノアミド−１−カルボン酸とカップリング剤とシクロヘキシルアミン誘導体とを反応させ、必要であれば得られた化合物を４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドに変換する工程。
典型的には、工程（ｃ）において、カップリング剤がカルボニルジイミダゾールである。
【００３６】
さらに、工程（ｃ）において、シクロヘキシルアミン誘導体は、トランス−４−ニトロオキシシクロヘキシルアミンであり、それによって４−メトキシ−N１―（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する。
【００３７】
あるいは、工程（ｃ）において、シクロヘキシルアミン誘導体は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンであり、それによってＮ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する。Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドはさらに硝酸と反応し、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドとなる。
【００３８】
本発明は、さらに、以下（ａ）乃至（ｄ）の工程によって、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを製造する方法を提供する。
（ａ）硫酸の存在下マイルドな条件下に４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸とメタノールとを反応させて、部位選択的に対応する３−モノメチルエステル−１−カルボン酸を生成する工程。
（ｂ）該３−モノメチルエステル−１−カルボン酸を対応するアシルクロライドとし、トランスー４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンと反応させて対応する１−アミドー３−エステルを生成する工程。
（ｃ）得られた１−アミド−３−エステルと３−ピリジニルメチルアミンとを反応させ、Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する工程。
（ｄ）Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドと硝酸とを反応させ、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを生成する工程。
【００３９】
本発明は、さらに、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドあるいは薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩と少なくとも１種類の薬学的に許容される成分とを含む医薬組成物に関する。
【００４０】
本発明は、さらにトロンボキサンＡ２を阻止しかつ一酸化窒素を供給することにより利益を得ることができる病状に罹っている人に４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド及び薬学的に許容され得る有機あるいは無機酸とそれとの酸付加塩の有効量を投与する、治療方法に関する。
【００４１】
上記病状には、血管アテローム動脈硬化−血栓症、糖尿病性網膜炎、男性血管性勃起不全、肺高血圧、喘息、慢性閉塞性肺疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病及び慢性ポリープ症が含まれる。
【００４２】
事実、本発明の化合物はアテローム動脈硬化−血栓病状の治療に特に適合する薬理的プロフィルであって、ａ）トロンボキサンＡ２の合成を阻止すること、ｂ）トロンボキサンＡ２によって及び特異的レセプター（ＴＰレセプター）の活性化を通してアラキドン酸の他のいくつかの代謝物によって上記効果が阻止されること、及びｃ）一酸化窒素即ちＮＯが放出されることに関連する複数の薬理的作用の組合わせ効果を付与することができるという新奇な薬理的プロフィルを有する。
【００４３】
従って、本発明の化合物は、心血管系及び他の器官に以下のａ）〜ｃ）の協乗作用を発揮して好ましい効果を付与する。ａ）シクロオキシゲナーゼ−１あるいは−２を与えた細胞において、プロスタサイクリン及び他のプロスタグランジンの合成を妨げることなく、トロンボキサンＡ２の合成を減少させ、逆に中間エンドパーオキシドをこれらのエイコサノイドの合成に利用することを可能とする、ｂ）ＴＰレセプターを刺激することによる残余のトロンボキサンＡ２があればその作用及びエンドペロキシドの作用を阻止する、ｃ）酸化窒素を放出して血小板、循環系及び他の器官に対してプロスタサイクリン及び他のプロスタグランジンの作用を発揮させる。
【００４４】
これらの性質が、アテローム動脈硬化−血栓病状を含む血管疾患に有益な治療用途を見出すことを可能とし、かつトロンボキサンＡ２を阻止し一酸化窒素を薬理的に供給することによって改良する他の病状に適用することを可能とする。他の病状としては、糖尿病の血管形成、糖尿病ネフロパシー、糖尿病網膜症、男性血管性勃起不全、肺高血圧、喘息、慢性閉塞性肺疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病及び慢性ポリープ症等がある。
【００４５】
血小板凝集
少なくとも２週間シクロオキシゲナーゼ阻止剤阻止剤（アセチルサルチル酸、非ステロイド系抗炎症剤）を服用していない健康な人の血液から得た血小板リッチの血漿（ＰＲＰ）に血小板の凝集実験を行った。血液を３．２％のクエン酸ナトリウム溶液（血液の１／１０容積）の入った試験管に集め、直ちに１５分間１５０ｘｇで遠心分離をした。ＰＲＰのサンプルをさらに１２０００ｘｇで遠心分離をし、２重チャネル凝集計の光透過度を検量するのに用いる血小板プア−血漿（ＰＰＰ）を得、ＰＲＰの透過度を１０％とし、ＰＰＰの透過度を９０％とした。各サンプルのＰＲＰの血小板凝集を試験した。透過率の増加パーセントを、アラキドン酸ナトリウムの量を増加させながら３００−９００μＭの濃度で加え、あるいはコーラゲンの量を増加させながら０．５−０．２５μｇ／ｍｌの濃度で加え、あるいはＵ−４６６１９の量を増加させながら０．２−１．６μｇ／ｍｌの濃度で加えて測定した（Ｕ−４６６１９、即ち９、１１−ジデオキシー１１α、９α−エポキシメタノ‐プロスタグランジンＦ２αはトロンボキサンＡ２の活性な合成類縁体であり、天然の化合物とことなり化学的に安定である。したがって、Ｕ−４６６１９は薬理試験において代替品として用いられる）。このように、閾値濃度、即ち、準最大非可逆的凝集が３つの薬剤によって各サンプルについて評価された。
【００４６】
最大濃度に応答をしなかった各試料のＰＲＰサンプルは破棄した。１０分間の培養後１０−７Ｍから１０−３Ｍの範囲の一連の濃度で試験する化合物を加えた後、閾値の濃度を適用して各試験体のＰＲＰのサンプルに凝集を誘起した。４−６の試験体の個々の阻止パーセント値を用いてＩＣ５０を計算した。
【００４７】
４−メトキシーＮ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドのＩＣ５０は、アラキドン酸については１２ｘ１０−６Ｍ、コラーゲンについては２２ｘ１０−６Ｍ、Ｕ−４６６１９については３３ｘ１０−６Ｍであった。これらの試験条件においてアラキドン酸による血小板の凝集に対向する能力は、アセチルサルチル酸等のシクロオキシゲナーゼ阻止剤、オザグレル、即ち（Ｅ）−３−［４−（１Ｈ−イミダゾールーイルメチル）フェニル］−２−プロペン酸（メルクインデックス、第１１編、６９３５）等のトロンボキサンシンセターゼの阻止剤、及びダルトロバン（ｄａｌｔｒｏｂａｎ）、即ちｐ−［２−（ｐ−クロロベンゼンスルホンアミド）エチル］フェニルアセティック（メルクインデックス、第１１編、２８０７）等のＴＰレセプターのアンタゴニストを含め種々の薬剤がともに有する。一方、Ｕ−４６６１９による凝集に対向する能力は、ダルトロバンのみが有し、アセチルサルチル酸やオザグレルは有しない。さらに、１０−３Ｍの濃度までのオザグレルは、コラーゲンで誘起された凝集において何ら重要な阻止活性は示さなかった。
【００４８】
トロンボキサン合成
少なくとも２週間シクロオキシゲナーゼ阻止剤（アセチルサルチル酸、非ステロイド系抗炎症剤）を服用していない健康な人の血液に対して１０−７Ｍから１０−３Ｍまでの一連の濃度で試験化合物を加えた。血液サンプルを３７℃の浴で６０分間凝塊させ、１０分間２５００ｘｇで遠心分離させた。血清を分離し、−２０℃で凍結状態に保ち、放射免疫測定法によってによってＴｘＢ２を決定した。ＴｘＢ２は、トロンボキサンＡ２が急速に変化してなる安定な代謝物である。化合物４−メトキシ−Ｎ１―（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキアミドは、ＩＣ５０が１８ｘ１０−６Ｍでトロンボキサンの合成を阻止することが示された。この測定方法では、ダルトロバン等のトロンボキサンレセプターのアンタゴニストは、アセチルサルチル酸及びオザグレルとは異なり、何ら効果を示さなかった。
【００４９】
プロスタサイクリンの合成
血小板に生成したエンドペロキシドからプロスタサイクリンを細胞間で合成することの影響を、培養したウシ内皮細胞（５ｘ１０５細胞／ウエル）上に上記健康な人の試料から得た血小板リッチ血漿（ＰＲＰ）を置くことによって評価した。内皮細胞を予めサリチル酸アセチル（１０−４Ｍ）で処理し、エンドペルオキサイドが直接合成されるのを阻止し、ダルベッコのリン酸塩緩衝液で二度洗浄した。次に、揺動板上で振動を加えながら、内皮細胞の個々のサンプルに１０−７Ｍから１０−３Ｍまでの種々の濃度の試験化合物で前処理したＰＲＰサンプルを０．５ｍｌ加えた。次に、コラーゲン（０．５μｇ／ｍｌ）を各サンプルに加えた。３７℃で２分間接触させた後、ＰＲＰを取り出し、１２０００ｘｇで遠心分離をし、上澄み液を凍結させ−２０℃に保ち、放射免疫測定法によって６−ケト−プロスタグランジンＦ１αを決定した。
【００５０】
６−ケト−プロスタグランジンＦ１αは、プロスタサイクリンが急速に変化する安定な代謝物質である。４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドは、濃度１０−６Ｍから始めて、プロスタサイクリン代謝物の生成を増大させた。該代謝物の生成は、アセチルサルチル酸処理の細胞では、アセチルサルチル酸によりシクロオキシゲナーゼ阻止に曝されなかった内皮細胞による基礎状態で生成された量の８−１６倍高いレベルの８００−１６００ｐｇ／ｍｌまで阻止された。トロンボキサンの拮抗的アンタゴニストであるダルトロバンは、この試験ではプロスタサイクリンの合成を刺激しなかった。
【００５１】
血管弛緩
一酸化窒素のドナーとして作用することにより血管弛緩を誘起する能力をウサギ大動脈で生体内試験した。大動脈の複数の環を３７℃のクレーブス−ヘンセレート（Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）溶液に入れ、１ｇの張力をかけ、フォーストランスデューサー（ｆｏｒｃｅ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ）に連結した。ノルエピネフリン（１０−６Ｍ）によって組織の収縮を誘起し、試験化合物を１０−８Ｍから１０−３Ｍの範囲で濃度を上げながら添加した。化合物４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドは、１０−４の濃度で大動脈環の完全な弛緩を誘起し、ＥＣ５０の計算値は３．２ｘ１０−６Ｍであった。
【００５２】
一酸化窒素の影響を妨害することが可能な可溶性グアニル酸シクラーゼの阻止剤であるメチレンブルーを濃度が１０−５Ｍで浴に加えた時、化合物は依然大動脈組織を弛緩することができたが、濃度−応答カーブはより高い濃度へと移行したと考えられ、ＥＣ５０の計算値は５５ｘ１０−６Ｍであった。該化合物は、５−ヒドロキシトリプタミン（ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）あるいはＵ−４６６１９で収縮させた大動脈環に弛緩を同様にもたらすことが可能であった。
【００５３】
治療適用
本発明の化合物は、その薬理的性質のため、メインの治療あるいは２次的治療として種々の進展段階において血栓症及びアテローム動脈硬化変化を含め病状において主要治療用途を見出す。主要治療として、該化合物は、栄養過多、アルコール摂取過剰、過剰なタバコの喫煙等の不健康な習慣により高血圧、糖尿病、高脂質血症筒の心血管性の危険の病理兆候及び／またはサインを有するとして評価された患者に投与するこによって、病気の進行及びしばしばシマ生ずる心血管事故及び不全並びに脳血管事故及び不全とを防止することができる。これらの事故及び不全には、血管痙攣及び血栓性動脈閉塞、不安定な狭心症、心筋梗塞、一過性脳虚血症、脳卒中、糖尿病性血管性パシー（ｖａｓｃｕｌｏｐａｔｈｉｅｓ）、末梢血管閉塞、肺血栓性閉塞賞、肺高血圧、糖尿病ネフロパシー、腎不全、糖尿病性網膜炎を含む。２次的治療としては、該化合物を上記事故及び不全に悩む患者に投与して、後遺症を解消し、再発を防止することができる。血栓溶解、バルーン血管形成やステンティング（ｓｔｅｎｔｉｎｇ）及び冠状動脈バイパス等の罹患している器官の灌流の復帰を目的とする医療及び外科的処置中あるいはその後で、該化合物を投与し、該処置の成功確率を高めると共に後の後遺症及び再発を回避することもできる。
【００５４】
本発明の化合物を治療に用いることは、胃をいため、腎臓灌流の減少あるいは喘息発作等の誘発、危険あるいは悪影響となるのでアセチルサルチル酸の使用を回避しなければならない患者にもより利点がありかつ好ましいと考えられる。また、アテローム動脈硬化−血栓症疾患が高血圧、肺疾患性高血圧、慢性閉塞肺疾患及び喘息等の呼吸器系の呼吸器疾患と併存する患者にも好都合である。これらの患者では、プロスタサイクリンの合成を維持しつつ、トロンボキサン作用を抑制し、ＮＯによって誘起された血管の拡張及び気管支の拡張とを有意に他の特定の処置の薬理作用と組合わせることができる。特に、高血圧ＡＣＥ阻止薬によってしばしば誘導されるセキという好ましくない影響を抑制し、抗高血圧治療を持続でき有効なものとすることができることを記載できる。
【００５５】
さらに、本発明の化合物はトロンボキサンを阻止し一酸化窒素を供与することによって利益をえる他の病気に罹っている患者、例えば喘息や慢性閉塞性肺疾患等の呼吸器疾患に罹っている患者や潰瘍性大腸炎、クローン病、慢性ポリープ症等に罹っている患者に投与することができる。
【００５６】
実施目的では、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド及び薬学的に許容される有機あるいは無機酸のそれとの酸付加塩はそのまま投与することができるが、それらは医薬組成物として投与することが好ましいであろう。
【００５７】
これら組成物は、治療量の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド及び同等量の薬学的に許容される有機あるいは無機酸とそれの酸付加塩と液体あるいは固体薬剤担体と一緒に含むであろう。特定の治療に必要であれば、同時に投与することが治療的に有益な他の匹敵するような活性成分を含むことのできる。本発明の医薬組成物の投与形態は、錠剤、糖衣錠、カプセル、粉剤等の固形、クリーム及び軟膏等の半液状、溶液、懸濁液及びエマルジョン等の液状とすることができる。さらに別の投与形態としては、経皮からの移送用ではパッチ、直腸及び結腸からの移送用では座薬及びマイクロ浣腸（ｍｉｃｒｏｅｎｅｍａｓ）、及び気管支からの移送用にはインヘラーがあり、それらは粉末状、懸濁状あるいは溶液状とできる。
【００５８】
これらの投与形態は、経口、口周囲、舌下、経皮、非経口、直腸あるいは気管投与用に調合することができ、さらに活性成分を迅速放出用あるいは持続放出用に調合することができる。
従来の担体に加えて、本発明の組成物は他の適当な医薬品添加物、例えば、保存剤、安定化剤、乳化剤、浸透圧調整用塩類、溶化剤あるいは緩衝剤としての有機あるいは無機化合物、着色剤あるいは芳香剤等を含むことができる。好ましい投与モードとしては、大部分の患者には短期及び長期治療処置の両方で簡単な投与スケジュールによって簡便に適用できるが、口の回りから及び舌下ルートを含む経口ルートとする。好ましい調合形態としては、経口投与には錠剤あるいはカプセル、経口投与で即時懸濁用には顆粒粉末、あるいは舌下投与には錠剤とする。しかしながら、処置すべき患者の状態によって必要とされる他の投与ルート、例えば、経皮ルート、非経口ルート、気管支ルートあるいは直腸ルート等とすることも可能で、好ましくは非経口使用には経皮軟膏、クリーム、ゲル、パッチ、殺菌溶液あるいは懸濁液、気管支吸入用には粉末、懸濁液あるいは溶液、及び直腸投与には座薬あるいはマイクロ浣腸（ｍｉｃｒｏｅｎｅｍａｓ）を調合することができる。
【００５９】
治療目的では、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドの有効量は、必要とされる特定の治療、医薬組成物及び投与形態等の種々の要因によって変えることができる。
【００６０】
好ましくは、一日一回あるいは複数回の投与に適する本発明の投与形態は、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを１０−６００ｍｇあるいはその酸付加物塩を同等の量含む。
【００６１】
好適には、一日の総量は、１０−１８００ｍｇとし、さらに好ましくは５０−６００ｍｇとされよう。
しかしながら、一回の投与及び／または一日の総投与量の最適有効量は、治療及び個々の患者の必要性によって、簡単な従来の手順で調整することができる。
【００６２】
本発明の医薬組成物は当業者に既知の従来の方法、即ち、混合し、顆粒化し、必要な場合圧縮成形し、あるいは所望の成果を得るのに適当な場合には適当な担体とともに活性成分を種々混合あるいは溶解して、調整することができる。
【００６３】
合成例
図１は、４−メトキシ−１、３−ベンゼンジカルボン酸（式２）から出発して、式１の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを合成するいくつかの経路を示し、１−と３−のカルボキシ基に２つの異なったアミド置換基を部位選択的に導入できることが分かった。
【００６４】
式３の上記酸のジメチルエステルは好ましくはそして硫酸の存在下にメタノール中で沸騰させて高収率で式２の酸から容易に得ることができるが、同エステルは３−ピリジニルメチルアミンと反応して部位選択的に式４の３−Ｎ−置換アミド １−モノエステルとすることができる。好ましくは、過剰量のアミンの存在下に５０−８０℃に加熱して反応を行う。過剰量のアミンは用意に除去できる。
【００６５】
さらに、式５の酸−アミドはエステル官能基をアルカリで加水分解することによって従来の方法により式４の化合物から得ることができ、該酸−アミドはカルボキシ官能基を活性化した後トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンと反応させることによって式６のＮ１、Ｎ３−二置換アミドにすることができる。活性化は、カップリング剤、好ましくはカルボニルジイミダゾールあるいはジシクロヘキシルカルボジイミド等のカルボジイミド、あるいはメチルクロロぎ酸エステル等のクロロカルボン酸エステルを加えることによって行う。カルボニルジイミダゾールを用いることによって、非反応性溶媒中室温で反応を行うことができ、所望のジアミドを高収率で簡単に生成することができる。その後ジアミド６は緩慢な条件で硝酸によってエステル化することによって式１の化合物に変換でき、好ましい方法としては硝酸と無水酢酸との反応性混合物との０℃での相互反応によるものである。
【００６６】
あるいは、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンを予め対応する硝酸エステルとし、その後好ましいカップリング剤としてカルボニルジイミダゾールを用いて予め活性化した酸５で該エステルにカップリング反応させ、直接所望の化合物１を得る。
【００６７】
式７の４−メトキシ−１、３−ベンゼンジカルボン酸の３−モノメチルエステルは同酸を室温でメタノール中硫酸でエステル化することによって５０％以上の収率で直接かつ選択的に得ることができるので、式６の主要な中間ジアミドへの第２の部位選択的合成方法を用いることもできる。これは、さらに、式３のジメチルエステルと未反応の４−メトキシ−１、３−ベンゼンジカルボン酸とからなる反応副生成物は生成物から容易に分離され、かつほとんど定量的に回収され以後の使用に供されるためでもある。以前は、４−メトキシ−１、３−ベンゼンジカルボン酸 ３−モノメチルエステルは、対応する１−モノメチルエステルと混合した状態で、あるいは、例えば、４−アミノ−１、３−ベンゼンジカルボン酸３−モノメチルエステルを通る複雑な方法（米国特許Ｎｏ．３７２５４１７）によって得られていた。式７のモノエステルは従来の方法によって塩化物に変換でき、その後トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンと反応させることによって式８のアミドエステルとすることができる。式８のアミドエステルから、３−ピリジニルメチルアミンとの３−カルボン酸エステルの反応性を利用して、式４の生成の際に既に挙げた条件と同様の条件下に、式６のジアミドを再度得ることができる。
【００６８】
上述の試薬のうち１つあるいは２以上の試薬及び反応条件のうち１以上の条件を変え、以下の実施例では当業者に周知の化学技術を用いても、図1に概要を示す本発明の合成方法により、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを製造することができる。さらに、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドは、そのままあるいは医薬的に許容される有機あるいは無機の酸とそれとの酸付加塩とを組合わせて医薬組成物に含ませることができる。
【００６９】
以下の実施例は、本発明をさらに説明することを意図するが、決して本発明を限定するものではない。
実施例１
メチル−４−メトキシ−３−（３−ピリジニルメチルアミノカルボニル）ベンゾエート（式４）
４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸（式２）５０ｇを４００ｍｌのメタノールに溶解し、１８ｍｌの濃硫酸ｄ＝１．８４を加え、混合物を７時間環流沸騰させた。混合物を６００ｍｌの氷水に注ぎこみ、沈殿した４−メトキシ−１、３−ベンゼンジカルボン酸ジメチルエーテル（式３）を集め、炭酸水素ナトリウム溶液、次に水に懸濁させて洗浄し、乾燥することによって、白色固体の融点９６−９７℃の化合物４を５２ｇ（９１％）を得た。該化合物は、ＤＭＳＯ−ｄ６中１Ｈ−ＮＭＲでδ３．８４（ｓ、３Ｈ、ＣＯＯＭｅ）；３．９５（ｓ、３Ｈ，ＰｈＯＭｅ）；３．９６（ｓ、３Ｈ，ＣＯＯＭｅ）；７．２８（ｄ、１Ｈ，Ｈａ）；８．１（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．２（ｄ、１Ｈ，Ｈｃ）のシグナルを示した。
【００７０】
その後、該化合物を１５０ｍｌの３ピリジニルメチルアミンに溶解し、７０℃で４０時間加熱した後、大部分の過剰アミンを真空蒸留によって除去した。残留物を氷水に混ぜ、希塩酸によって酸性にし（ｐＨ５）、クロロホルムで抽出した。抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、残留物を沸点７０−８０℃の軽油で抽出し、４３．８ｇ（６３％）の白色固体のメチル−４−メトキシー３−（３−ピリジニルメチルアミノカルボニル）ベンゾエート（式４）を得た。そのＣＤＣｌ３中での１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、δ３．９１（ｓ、３Ｈ，ＣＯＯＭｅ）、４．０３（ｓ、３Ｈ，ｐＨＯＭｅ）、４．７２（ｄ、２Ｈ，ＰｙＣＨ２）、７．０５（Ｚｄ，１Ｈ，Ｈａ）；７．３１（ｍ、１Ｈ，Ｈｂ、Ｐｙ）；７．７４（ｍ、１Ｈ，Ｈｃ、Ｐｙ）；８．１（ブロードｔ、１Ｈ、ＣＯＮＨ）；８．１９（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．５５（ブロードｍ、１Ｈ，Ｈａ、Ｐｙ）；８．６２（ブロードｍ、１Ｈ，Ｈｄ、Ｐｙ）シグナルを示した。
【００７１】
実施例２
４−メトキシーＮ１−４−トランスーヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド（式６）
４２ｇのメチル  ４−メトキシー３−（３−ピリジニルメチルアミノカルボニル）ベンゾエート（式４）を１５０ｍｌのメタノールに溶解した溶液に対して、攪拌下に２０℃で１０％の水酸化ナトリウム溶液１００ｍｌを加えた。混合物を２０℃で３時間攪拌した後、５０ｍｌの水を加えた。溶液を酢酸エチルで洗浄した後、減圧下に保持し、蒸発によってメタノールを除去した。６Ｎの塩酸を加えてｐＨを６に調節し、沈殿物を集め、乾燥し、クロロホルム中で再結晶し、融点が１９２−１９３℃の対応する酸３６ｇ（９０％）を得た。ＤＭＳＯ−ｄ６で１Ｈ−ＮＭＲスペクトルおいてδ３．９８（ｓ、３Ｈ，ＰｈＯＭｅ），４．５２（ｄ、２Ｈ，ＰｙＣＨ２）；７．２３（ｄ、１Ｈ，Ｈａ）；７．３８（ｍ、１Ｈ，Ｈｂ、Ｐｙ）；７．７２（ｍ、１Ｈ、Ｈｃ、Ｐｙ）；８．０４（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．２７（ｄ、１Ｈ，Ｈｃ）；８．４６（ｍ、１Ｈ，Ｈａ，Ｐｙ）；８．５６（ｍ、１Ｈ，Ｈｄ、Ｐｙ）；８．８７（ブロードｔ、１Ｈ，ＣＯＮＨ）；１２．８６（ブロードｓ、１Ｈ，ＣＯＯＨ）（異なる方法により米国特許４,６９８,３５４に以前に記載されている；物性は報告されていない）のシグナルを示した。
【００７２】
上記酸を２５０ｍｌの純粋な乾燥メチレンクロライドに溶解し、２４ｇのカルボニルジイミダゾールによって処理した。混合物を室温で１時間攪拌し、２２ｇのトランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミンと２０ｍｌのトリエチルアミンを加えた溶液が得られた。混合物を２０時間室温で攪拌し、攪拌下に２％水酸化ナトリウム溶液２００ｍｌを加えた。所望のジアミドが白色沈殿として分離し集められ、水で洗浄した後乾燥した。分離したメチレンクロライド相を蒸発させることによってさらなる量が得られ、それを水で洗浄した後、乾燥した。２つの分画を一緒にして、クロロホルムで再結晶し、融点は１８３−１８４℃の４−メトキシ−Ｎ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド（式６）３６．２ｇ（７５％）を得た。
【００７３】
ＤＭＳＯ−ｄ６における１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、δ１．４（ｍ、４Ｈ）；２．１（ｍ、５Ｈ）；３．６９（ｍ、１Ｈ，ＣＨＯＨ）；４．０（ｍ、４Ｈ，ＰｈＯＭｅ及びＣＨＮＨ）；４．７（ｄ、２Ｈ，ＰｙＣＨ２）；６．１（ブロードｄ、ＣＯＮＨｃｙ）；７．１（ｄ、１Ｈ，Ｈａ）；７．３（ｍ、１Ｈ，Ｈｂ、Ｐｙ）；７．７１（ｍ、１Ｈ，Ｈｃ、Pｙ）；８．１５（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．２５（ブロードｔ、１Ｈ，ＣＯＮＨＰｙ）；８．４８（ｄ、１Ｈ，Ｈｃ）；８．５５及び８．６５（各ｍ、１Ｈ，Ｈａ、Ｐｙ及びＨｄ、Ｐｙ）のシグナルを示した。
【００７４】
実施例３
４−メトキシーＮ１−４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド（式６）
２０℃で攪拌下に１２ｍｌの濃硫酸、ｄ１．８４を５０ｇの４−メトキシイソフタル酸の４００ｍｌのメタノール懸濁液に加えることによって、４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸  ３−モノメチルエステル（式７）を調整した。攪拌を１時間継続した後、混合物を氷水（４００ｍｌ）に注ぎ込んだ。沈殿物を集めて、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液に混ぜた。不溶性残留物（１５ｇ）は、４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸ジメチルエーテルによって構成されていた。ろ過した溶液に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ４．８に調整し、所望のモノエステルを沈殿させ、沈殿物を集めて水で洗い、白色固体２８．１ｇ（５２．５％）を得た。さらに母液を酸性にして、未反応の４−メトキシ−１，３−ベンゼンジカルボン酸（９ｇ）を沈殿させ、集めた。このようにして、酸及びジメチルエステルを回収一緒にしてトータルで４４．２％を回収し、有益な収率９６．７％が実現した。
【００７５】
モノメチルエステルは、ＤＭＳＯ−ｄ６１Ｈ−ＮＭＲにおいてδ３．８（ｓ、３Ｈ，ＣＯＯＭｅ）；３．９１（ｓ、３Ｈ，ＰｈＯＭｅ）；７．２８（ｄ、１Ｈ，Ｈａ）；８．１（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．２３（ｄ、１Ｈ，Ｈｃ）；１２．９（ｓ、ブロード、１Ｈ，ＣＯＯＨ）を示した。
【００７６】
モノエステル（２１ｇ）とチオニルクロライド１００ｍｌを３時間環流下に沸騰させた。過剰チオニルクロライドを蒸発させ、残留物を６０ｍｌのテトラハイドロフランに溶解させ、テトラハイドロフラン１００ｍｌにトリエチルアミン（２０ｍｌ）とトランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミン  ハイドロクロライド（１７ｇ）とを加えた混合物に温度を１５℃に維持しながら攪拌下に徐々に加えた。混合物を室温で一晩攪拌した後、水で希釈し、室温で２時間攪拌した後メチレンクロライドで抽出した。有機相を水で洗浄し、減圧下で蒸発させた。残留物を２５０ｍｌの１Ｎ塩酸に入れ崩し、水で洗浄した後集めて乾燥し、２４．５ｇの粗製メチル２−メトキシ−５−［（トランス−４−ヒドロキシクロヘキシル）アミノカルボニル］ベンゾエート（式８）２４．５ｇを得、該ベンゾエートを１００ｍｌの３−ピリジニルメチルアミンに７０℃に加熱して直接溶解した。攪拌加熱を４０時間継続した。大部分の過剰アミンは、真空中で蒸留によって回収した。残留物を水に入れ、混合物を６Ｎの塩酸でｐＨ６に調整した。水相を破棄し、生成物を５００ｍｌの１Ｎ塩酸に溶解し、溶液を多少の不溶性物質からろ別し、１０％の水酸化ナトリウム溶液でｐＨ９に調整し、クロロホルム／メタノール（９：１）で抽出した。抽出物をシリカゲル上でフラッシュ・クロマトグラフィーにかけた。複数の適切な分画（シリカゲルＦ２５４プレート上でＴＬＣによってチェック、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝８５：１５、ＵＶ光）を一緒にして蒸発させた。残留物をクロロホルム−軽油に入れ、融点が１８２−１８３℃の４−メトキシ−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド１７．３ｇ（４５％）を得た。
【００７７】
実施例４
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミン（式１）
硝酸（ｄ１．４９、２５ｍｌ）を０℃攪拌下に１００ｍｌの無水酢酸に加えた。２〜３分後、３１．５ｇの４−メトキシ−Ｎ１−４−トランスーヒドロキシシクロヘキシル−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを同じ温度で徐々に添加した。終了時に、１０分間攪拌を継続し、その後、ｐＨを中性値に保ちながら、溶液を注意しながら氷水と炭酸水素ナトリウムとの混合物に注ぎ込む。淡黄色の沈殿物を集め、酢酸エチルに溶解した。溶液を炭酸水素ナトリウムの５％の溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に蒸発させた。残留固体を少量の酢酸エチルに入れ、冷却して集めることによって、融点が１５３−１５４℃の４−メトキシ−Ｎ１―（４−トランスーニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド２６．７ｇ（７６％）を得た。ＤＭＳＯ−ｄ６における１Ｈ−ＮＭＲスペクロルは、δ１．５（ｍ、４Ｈ）；２．２（ｍ、４Ｈ）；４．０（ｓ、３Ｈ，ＰｈＯＭｅ＋ｍ、１Ｈ）；４．６５（ｄ、２Ｈ，ＰｙＣＨ２）；４．９（ｍ、１Ｈ，ＣＨＯＮＯ２）；６．４５（ブロードｄ、ＣＯＮＨｃｙ）；７．０５（ｄ、１Ｈ，Ｈａ）；７．１（ｍ、１Ｈ，ＨＰｙ）；７．７（ｍ、１Ｈ，ＨＰｙ）；８．１（ｄｄ、１Ｈ，Ｈｂ）；８．３（ブロードｔ、１Ｈ，ＣＯＮＨＰｙ）；８．５（ｍ、２Ｈ）及び８．６（ｍ、１Ｈ，ＨＰｙ）のシグナルを示した。
【００７８】
実施例５
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランスーニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド（式１）
トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシルアミン（２１ｇ）を−１５℃で徐々に４５ｍｌの硝酸、ｄ１．５１に加えた。混合物を０℃で１．５時間攪拌し、冷却したジエチルエーテル３００ｍｌに注いだ。分離した硝酸塩をエーテルで洗浄し、１５ｇの炭酸カリウム、１５ｍｌの水及び２００ｍｌのメチレンクロライドの混合物に冷却・攪拌下に何度かに分けて加えた。塩相をメチレンクロライドで抽出し、一緒にした有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に蒸発させトランスー４−ニトロオキシシクロヘキシルアミンの溶液からなる残量１００ｍｌとした。
【００７９】
４−メトキシ−３−（３−ピリジニルメチルアミノカルボニル）安息香酸（３６ｇ）を純粋な乾燥メチレンクロライド１８０ｍｌに溶解し、カルボニルジイミダゾール２４ｇで処理した。混合物を室温で１時間攪拌した。得られた溶液に１５ｍｌのトリエチルアミンとトランスー４−ニトロオキシシクロヘキシルアミンとを加えた。混合物を室温で２０時間攪拌した後、５％の炭酸水素ナトリウム溶液２００ｍｌを攪拌下に加えた。有機相を分離し、減圧下に蒸発させ、残留物を冷水で崩し、再度メチレンクロライドに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶剤を減圧下で蒸発させ、生成物を少量の冷却酢酸エチルに入れ、融点が１５２−１５３℃の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド２８．５ｇ（５３％）を得た。
【００８０】
実施例６
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを含有する経口投与用カプセル
１バッチ２００，０００カプセルとして、４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル２０ｋｇとセルロースの微小結晶５ｋｇとを充分に混合する。
ラクト−ス９．６ｋｇとセルロース微小結晶５ｋｇとを混合した後、ポリソルベート８０を０．４ｋｇ攪拌下に加える。２種類の粉末混合物を一緒にして、混合し、２０メッシュのメカニカルふるいを通し、サイズ１のゼラチンカプセルに充填する。
【００８１】
実施例７
４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミドを含有する瞬間懸濁用におい袋
１バッチ１００、０００におい袋として、ポリソルベート８０を０．５００ｋｇをゆっくりと攪拌下にラクトース２４．５ｋｇに加え、混合物を４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１，３−ベンゼンジカルボキシアミド１．５ｋｇと混合した。混合粉末をサッカロース１５９ｋｇとオレンジ香料１ｋｇに加え、充分に混合した。におい袋に２ｇの混合成分を加え、封をする。におい袋は、経口投与のために水の瞬時懸濁液を調整するのに適合する。
【図面の簡単な説明】
【図１】式（１）の４−メトキシ−Ｎ１−（４−トランス−ニトロオキシシクロヘキシル）−Ｎ３−（３−ピリジニルメチル）−１、３−ベンゼンジカルボキシアミドを製造するためのいくつかの合成工程を示す。
【図１】
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